RS50775B - Novi aromatični derivati fluorglikozida, lekovi koji sadrže ova jedinjenja i njihova primena - Google Patents

Description

Novi aromatični derivati fluorglikozida, lekovi koji sadrže ova

jedinjenja i njihova primena

Pronalazak se odnosi na supstituisane aromatične derivate fluorglikozida, na njihove fiziološki prihvatljive soli, kao i na njihove fiziološki funkcionalne derivate.

U literaturi su već poznate mnoge klase supstanci sa SGLT-dejstvom. Svaka od ovih struktura služila je kao model vodilja prirodne supstance floricina. Od toga su izvedene sledeće klase, koje su opisane i pravno zaštićene u sledećim patentima: propionfenonglikozidi od Tanabe (WO 0280936, WO 0280935, JP

2000080041 i EP 850948)

2-(glukopiranosiloksi)-benzilbenzene od Kissei (WO 0244192, WO

0228872 i WO 0168660)

glukopiranosiloksi-pirazoli od Kissei i Ajinomoto (WO 0268440, WO

0268439, WO 0236602 i WO 0116147)

O-glikozidbenzamid od Bristol-Myers Squibb (WO 017483 5 i WO

0174834)

i C-arilglikozid od Bristol-Myers Squibb (WO 0127128 i US

2002137903).

Sve poznate strukture sadrže glukozu u svojstvu vrlo važnog strukturnog elementa.

Nadalje su iz US 2002/132807 poznata diarilsulfidna jedinjenja za lečenje zapaljenskih i imuno-obolenja. U EP 0 953 357 Al opisuju se uopšteno glikozidna jedinjenja kao nosač bubrežnih lekova i u WO 95/23780 jedinjenja 4-hidroksi-fenoksi-hetero-cikloalkila kao izbeljivača kože.

Osnovni zadatak pronalaska je bio, da se stave na raspolaganje nova jedinjenja, pomoću kojih je moguća prevencija i lečenje dijabetesa tip 1 i tip 2. Mi smo neočekivano pronašli, da aromatični derivati fluorglikozida povećavaju dejstvo na SGLT. Ova jedinjenja zbog toga dolaze u obzir da se koriste za prevenciju i lečenje dijabetesa tip 1 i tip 2.

Pronalazak se stoga odnosi na jedinjenja formule I,

u kojima znače

Rl, R2 OH, F ili H ili Rl i R2 = F, pri čemu su izuzete tri kombinacije Rl = F,

R2 = OH i Rl = OH, R2 = F i Rl, R2 = OH ;

R3 OH ili F, pri čemu najmanje jedan od ostataaka Rl, R2, R3 mora da

bude F;

A O, NH, CH2, S ili jedna veza;

R4, R5, R6 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, N02, CN, COOH, CO(CrC6)-alkil,

COO(CrC6)-alkil, CONH2, CONH(CrC6)-alkil, CON[(C,-C6)-alkil]2, (CrC6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, (CrC6)-alkoksi, HO-(Cr C6)-alkil, (Ci-C6)-alkil-0-(Ci-C6)-alkil, fenil, benzil, pri tome u alkilnim, alkoksilnim, alkenilnim i alkinilnim ostacima jedan, više ili svi atomi vodonika mogu da budu zamenjeni atomom fluora;

S02-NH2, S02NH(CrC6)-alkil, S02N[(CrC6)-alkil]2, S-(C,-C6)-alkil, S-(CH2)0-fenil, SO-(C,-C6)-alkil, SO-(CH2)0-fenil, S02-(C,-C6)-alkil, S02-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6 i fenilni ostatak može da bude do dva puta supstituisan sa F, Cl, Br, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O-(C,-C6)-alkil, (C,-C6)-alkil, NH2;

NH2, NH-(CrC6)-alkil, N((CrC6)-alkil)2, NH(CrC7)-acil, fenil, 0-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6, pri čemu fenilni prsten može da bude jednom do tri puta supstituisan sa F, Cl, Br, J, OH, CF3, N02, CN, OCF3, 0-(CrC6)-alkil, (CrC6)-alkil, NH2, NH(CrC6)-alkil, N((CrC6)-alkil)2, SOrCH3, COOH, COO-(CrC6)-alkil, CONH2;

B (C0-Ci5)-alkandiil, pri tome jedan C-atom ili više C- atoma ostataka alkandiila mogu nezavisno jedan od drugog da budu zamenjeni sa -O-, -(C=0)-, -CH=CH-, -C=C-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF2-, -(S=0)-, -(S02)-, -N((C,-C6)-alkil)-, -N((CrC6)-alkil-fenil)- ili -NH-;

n neki broj od 0 do 4;

Cycl neki 3 do 7 člani zasićeni, delimično zasićeni ili nezaasićeni prsten, pri

tome 1 C-atom može da bude zamenjen sa O, N ili S;

R7, R8, R9 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, N02, CN, COOH, COO(CrC6)alkil,

CO(CrC4)-alkil, CONH2, CONH(CrC6)-alkil, CON[(CrC6)-alkil]2, (Cr C5)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, (CrC8)-alkoksi, (C,-C6)-alkil-OH, (Ci-C6)-alkil-0-(CrC6)-alkil, pri tome u alkilnim ostacima mogu jedan, više ili svi atomi vodonika da budu zamenjeni sa atomom fluora; S02-NH2, S02NH(C,-C6)-alkil, S02N[(CrC6)-alkil]2, S-(C,-C6)-alkil, S-(CH2)0-fenil, SO-(CrC6)-alkil, S0-(CH2)o-fenil, S02-(CrC6)-alkil, S02-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6 i fenilni ostatak može da bude do dva puta supstituisan sa F, Cl, Br, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O-(CrC6)-alkil, (CrC6)-alkil, NH2;

NH2, NH-(C,-C6)-alkil, N((C,-C6)-alkil)2, NH(C,-C7)-acil, fenil, O-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6, pri čemu fenilni prsten može da bude jednom do tri puta supstituisan sa F, Cl, Br, J, OH, CF3, N02, CN, OCF3, (CrC8)-alkoksi, (CrC6)-alkil, NH2, NH(CrC6)-alkil, N((C,-C6)-alkil)2, S02-CH3, COOH, COO-(CrC6)-alkil, CONH2;

ili

R8 i R9 zajedno sa C-atomima, koji njih nose, čine jedan 5 do 7 člani

zasićeni, delimično ili potpuno nezasićeni prsten Cyc2, pri čemu 1 C-atom ili 2 C-atoma tog prstena mogu da budu zamenjeni i sa N, O ili S i Cyc2 u datom slučaju može da bude supstitisan sa (CrC6)-alkil, (C2-C5)-alkenil, (C2- C5)-alkinil, pri čemu uvek jedna CH2-grupa može da bude zamenjena sa O, ili da bude supstituisana sa H, F, Cl, OH, CF3, N02, CN, COO(Cr C4)-alkil, CONH2, CONH(C,-C4)-alkil, OCF3;

isto tako i na njihove soli, koje su farmaceutski prihvatljive.

Tačke povezivanja ostataka R4, R5, R6 i B na fenilni prsten mogu slobodno da se biraju. Sva rezultujuća jedinjenja formule I pripadaju ovom pronalasku. Prednost imaju jedinjenja formule I, u kojima je B-supstituent na fenilnom prstenu smešten u orto-položaj (susedni položaj) u odnosu na A-supstituent.

Prednost imaju jedinjenja formule I, u kojima označavaju

Rl, R2 OH, F ili H ili Rl i R2 = F, pri čemu jedan od ostataka Rl ili R2 mora da bude F i izuzete su kombinacije Rl - F, R2 = OH i Rl = OH, R2 = F i Rl, R2 = OH ;

R3 OH ;

A O ili NH ;

R4, R5, R6 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, CF3, N02, CN, COOH, CO(C,-C6)-alkil,

COO(C,-C6)-alkil, CONH2, CONH(CrC6)-alkil, CON[(C,-C6)-alkil]2, (C,-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, (C,-C6)-alkoksi, HO-(Cr C6)-alkil, (CrC6)-alkil-0-(C,-C6)-alkil, fenil, benzil, SO-(C,-C6)-alkil, pri tome u alkilnim, alkoksilnim, alkenilnim i alkinilnim ostacima jedan, više ili svi atomi vodonika mogu da budu zamenjeni atomom fluora;

B (Co-Ci5)-alkandiil, pri tome jedan C-atom ili više C-atoma od ostataka alkandiila nezavisno jedan od drugog mogu da budu zamenjeni sa -O-, -(C=0)-, -CH=CH-, -C^C-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF2-, -(S=0)-, -(S02)-, -N((CrC6)-alkil)-, -N((CrC6)-alkil-fenil)- ili -NH-;

n neki broj od 0 do 4;

Cycl neki 3 do 7 člani zasićeni, delimično zasićeni ili nezasićeni prsten, pri

tome 1 C-atom može da bude zamenjen sa O, N ili S;

R7, R8, R9 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, CF3, N02, CN, COOH, COO(CrC6)alkil,

CO(CrC4)-alkil, CONH2, CONH(CrC6)-alkil, CON[(CrC6)-alkil]2, (C,-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, (CrC6)-alkoksi, (C,-C6)-alkil-OH, (CrC6)-alkil-0-(Ci-C6)-alkil, pri tome u alkilnim ostacima mogu jedan, više ili svi atomi vodonika da budu zamenjeni sa atomom fluora;

ili

R8 i R9 zajedno sa C-atomima, koji njih nose, čine jedan 5 do 7 člani

zasićeni, delimično ili potpuno nezasićeni prsten Cyc2, pri čemu 1 C-atom ili 2 C-atoma tog prstena mogu da budu zamenjeni i sa N, O ili S i Cyc2 u datom slučaju može da bude supstitisan sa (CrC6)-alkil, (C2-C5)-alkenil, (C2-C5)-alkinil, pri čemu uvek jedna CH2-grupa može da bude zamenjena sa O, ili da bude supstituisana sa H, F, Cl, OH, CF3, N02, CN, COO(C,-C4)-alkil, CONH2, CONH(CrC4)-alkil, OCF3.

Prednost imaju još jedinjenja formule I, u kojima su ostaci šećera beta(p) -povezani i stereohemija u 2-, 3- i 5-položaju ostatka šećera je D-gluko konfigurisana.

Naročitu prednost imaju jedinjenja formule I, u kojima označavaju

Rl, R2 OH, F ili H ili Rl i R2 = F, pri čemu jedan od ostataka Rl ili R2 mora da bude F i izuzete su kombinacije Rl = F, R2 - OH i Rl - OH, R2 = F i Rl, R2 = OH ;

R3 OH;

A O;

R4, R5, R6 vodonik, OH, (C,-C6)-alkil, (C,-C4)-alkoksi, HO-(C,-C4)-alkil, (Cr C4)-alkil-0-(CrC6)-alkil, F, Cl, Br, J, CF3, OCF3, OCH2CF3(CrC4)-alkil-CF2-, fenil, benzil, (C2-C4)-alkenil, (C2-C4)-alkinil, COO(CrC4)-alkil;

B (C0-Ci5)-alkandiil, pri tome jedna CH2-grupa može da bude zamenjena i sa -(C=0)-, -CH(OH)-, -CO-NH-, -CO-N(CrC6)-alkil-, -CHF-, -CF2-, -O-, -NH-;

n jedan broj 2 ili 3;

Cycl neki nezasićeni 5- ili 6- člani prsten, pri tome 1 C-atom može da bude

zamenjen sa O, N ili S;

R7, R8, R9 vodonik, (CrC6)-alkil, (CrC8)-alkoksi, OCF3, OCH2CF3, OH, (C,-C4)-alkil-OH, (Ci-C4)-alkil-0-(CrC4)-alkil, F, Cl, Br ili

R8 i R9 zajedno -CH=CH-0-, -CH2-CH2-0-, -CH=CH-S-, -CH=CH-CH=CH-, -O-(CH2)p-0-, sa p = 1 ili 2 i

R7 metil, etil, OMe, F, Cl, Br ili vodonik.

Sasvim posebnu prednost imaju i jedinjenja formule I, u kojima označavaju

Rl F i R2 H ili

Rl H i R2 F ili

Rl F i R2 F;

R3 OH;

A O;

R4, R5, R6 vodonik, OH, (C,-C4)-alkoksi, CF3, (CrC4)-alkil, F, Cl, Br, J,

B -CH2-, -C2H4- -C3H6, -CH(OH)-, -(C=0)-, -CO-NH-CH2ili -CO-CH2-CH2-, -O-, -NH-;

n jedan broj 2 ili 3

Cycl neki nezasićeni 6- člani prsten, pri čemu 1 C-atom može da bude zamenjen sa N ili neki nezasićeni 5- člani prsten, pri tome može 1 C-atom da bude zamenjen sa S;

R7, R8, R9 vodonik, OH, (C,-C4)-alkil, (C,-C7)-alkoksi, OCF3, halogen ili

R8 i R9 zajedno -CH-CH-O-, -CH2-CH2-0-, -CH=CH-CH=CH-, -0-(CH2)p-0-,

sa p = 1 ili 2 i

R7 metil, etil, metoksi, F, Cl, Br ili vodonik.

Nadalje imaju sasvim poseban prioritet jedinjenja formule Ia

u kojima su

Rl F i R2 H ili

Rl H i R2 F ili

Rl F i R2 F;

R3 OH;

A O;

R4 vodonik, (CrC4)-alkil, (C,-C4)-alkoksi ili OH ;

R5 vodonik, F, metoksi ili etoksi;

R6 vodonik ili OH;

B -CH2-, -CO-NH-CH2-, -O- ili -CO-CH2-CH2-;

Cycl fenil ili tiofen;

R7, R8, R9 vodonik, OH, Cl, OCF3, (C,-C4)-alkil ili (CrC4) -alkoksi; ili R8 i R9 zajedno -CH=CH-0-, -CH=CH-CH=CH- ili -CH2-CH2-0- i R7 vodonik.

Od naročitog prioritetnog značaja su osim toga jedinjenja formule lb

u kojima označavaju

Rl F i R2 H ili

Rl HiR2 Fili

Rl F i R2 F;

R3 OH;

A O;

R4 vodonik, metil, metoksi ili OH ;

R5 vodonik, F ili metoksi;

R6 vodonik ili OH;

B -CH2-, -CO-NH-CH2-; -O- ili -CO-CH2-CH2-;

Cycl fenil;

R7 vodonik;

R8 vodonik, OH, etil, Cl, OCF3ili metoksi;

R9 vodonik; ili

R8 i R9 zajedno -CH=CH-0- ili -CH2-CH2-0-.

Osim toga imaju sasvim poseban prioritet takva jedinjenja formule I, u kojima je Rl = H i R2 = F.

Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja formule I, u obliku njihovih racemata, racematskih smeša i čistih enantiomera kao i na njihove diastereomere i mešavine istih.

Alkilni ostaci u supstituentima R4, R5, R6, R7, R8 i R9 mogu da budu kako linearni tako isto i razgranati. Pod halogen podrazumevaju se F, Cl, Br, J, prvenstveno F i Cl.

Farmaceutski pogodne soli, na osnovu njihove veće rastvorljivosti u vodi u odnosu na polazna odnosno na bazna jedinjenja, naročito su pogodna za primenu u medicini. Ove soli moraju da imaju farmaceutski prihvatljiv anjon ili katjon. Podesne farmaceutski prihvatljive kiselinske adicione soli jedinjenja, koja su definisana prema ovom otkriću, su soli neorganskih kiselina, kao hlorovodonične, bromovodonične, fosforne, metafosforne, azotne i sumporne kiseline, isto tako i soli organskih kiselina, kao na primer sirćetne, benzensulfonske, benzoeve, limunske, etansulfonske, fumarne, glukonske, glikolne, izotionske, mlečne, laktobionske, maleinske, jabučne, metansulfonske, ćilibarne, p-toluensulfonske i vinske kiseline.

Pogodne alkalne soli, koje su farmaceutski prihvatljive, su amonijačne soli, soli alkalnih metala (kao što su natrijumove ili kalijumove soli), soli zemnoalkalnih metala (kao što su magnezijumove i kalcijumove soli) i soli trometamola (2-amino-2- hidroksimetil-1,3- propandiol), dietanolamina, lizina ili etilendiamina.

Soli sa nekim anjonom, koji nije farmaceutski prihvatljiv, kao što je na primer trifluor-acetat, spadaju isto tako u okvire ovog pronalaska kao korisni međuprodukti za proizvodnju ili za prečišćavanje farmaceutski prihvatljivuh soli i/ili za korišćenje u neterapeutskim, na primer, in vitro- primenama.

Ovde primenjeni pojam "fiziološki funkcionalni derivat" označava svaki fiziološko prihvatljiv derivat nekog jedinjenja formule I, koje je definisano prema ovom pronalasku, na primer neki estar, koji kada se dozira sisarima, kao na primer ljudima, je u stanju da pređe (direktno ili indirektno) u jedno jedinjenje formule I ili neki aktivni metabolit.

U fiziološki funkcionalne derivate ubrajaju se i prolekovi onih jedinjenja, koja su definisana prema ovom pronalasku, kako su na primer opisani u H. Okada et al., Chem. Pharm. Buli. !994, 42, 57 - 61. Takvi prolekovi mogu in vivo da pređu putem metabolizma u jedinjenja, koja su obuhvaćena ovim pronalaskom. Ovi prolekovi mogu i sami da budu aktivni, ali ne moraju. Prednost imaju karbonati u 6-položaju šećera (videti WO 0280936 i WO 0244192), naročiti prioritet imaju metil- i etil-karbonat.

Jedinjenja koja su definisana prema ovom pronalasku mogu da se nalaze u različitim polimorfnim oblicima, na primer u amorfnom i u kristaliničnim polimorfnim oblicima. Svi polimorfni oblici jedinjenja, definisanih prema ovom pronalasku, spadaju u okvire pronalaska i predstavljaju još jedan aspekt ovog pronalaska.

U daljem tekstu sva uputstva na "jedinjenje / jedinjenja prema formuli I" odnose se na jedinjenje / jedinjenja formule I kako je predhodno opisano, kao i na njihove soli, solvate i fiziološki funkcionalne derivate, kako je ovde opisano.

Jedinjenje (jedinjenja) formule (I) mogu da budu dozirana i u kombinaciji sa još nekim aktivnim supstancama.

Količina nekog jedinjenja prema formuli I, koja je potrebna, da bi se postigao željeni biološki efekat, zavisi od niza faktora, na primer od izabranog specifičnog jedinjenja, od nameravane upotrebe, od načina doziranja i od kliničkog stanja pacijenta. Uopšteno dnevna doza se nalazi u opsegu od 0,3 mg do 100 mg (uobičajeno od 3 mg do 50 mg) na dan po kilogramu telesne mase, na primer 3-10 mg/kg/dan. Jedna intravenozna doza može da se nalazi na primer u opsegu od 0,3 mg do 1,0 mg/kg, na najpodesniji način u obliku infuzuje može da se dozira od 10 ng do 100 ng po kilogramu po minutu. Pogodni infuzioni rastvori za te svrhe mogu da sadrže na primer od 0,1 ng do 10 mg, uobičajeno od 1 ng do 10 mg po mililitru. Pojedinačne doze mogu da sadrže na primer od 1 mg do 10 g aktivne supstance. Na taj način mogu ampule za injekcije da sadrže primera radi od 1 mg do 100 mg, a pojedinačne doze formulacija za oralnu upotrebu, kao na primer tablete ili kapsule, mogu primera radi da sadrže od 1,0 do 1000 mg, uobičajeno od 10 do 600 mg. U cilju terapije gore navedenih stanja mogu jedinjenja prema formuli I da budu korišćena samostalno u obliku jedinjenja, ali prevashodno se, međutim, nalaze u smeši sa nekim prihvatljivim nosačem u obliku jednog farmaceutskog preparata. Nosač mora, naravno, da bude prihvatljiv u tom smislu, da je kompatibilan sa ostalim sastojcima preparata i da nije štetan po zdravlje pacijenata. Nosač može da bude čvrsta supstanca ili tečnost ili oboje i prevashodno se pravi formulacija sa jedinjenjem u obliku pojedinačne doze, primera radi u obliku tablete, koja može da sadrži od 0,05 % do 95 mas. % aktivne supstance. I druge farmaceutski aktivne supstance mogu isto tako da se nalaze u preparatu, uključujući i druga jedinjenja prema formuli I. Farmaceutski preparati, koji su definisani prema ovom pronalasku, mogu da budu proizvedeni prema nekoj od poznatih farmaceutskih metoda, koja se u osnovi sastoji u tome, što se komponente mešaju sa farmakološki prihvatljivim nosačem i/ ili pomoćnim supstancama. Farmaceutski preparati, koji su u skladu sa ovim pronalaskom, su takvi, da su pogodni da se doziraju oralno, rektalno, topično, peroralno (na primer ispod jezika) i parenteralno (na primer subkutano, intramuskularno, intradermalno ili intravenozno), ali najpogodniji način doziranja za svaki specifičan slučaj zavisi od vrste i težine stanja, koje treba lečiti, i od vrste upotrebi]enog jedinjenja definisanog prema formuli 1.1 formulacije u obliku dražeja, kao i formulacije sa produženim dejstvom u obliku dražeja, spadaju u okvire ovog pronalaska. Prednost imaju formulacije koje su otporne na dejstvo kiselina i želudačni sok. Pogodni omotači za dražeje, koji su rezistentni na želudačni sok, obuhvataju acetatftalat-celuloze, polivinil-acetatftalat, hidroksipropilmetilftalat-celuloze i anjonske polimere metakrilne kiseline i metilestar metakrilne kiseline.

Jedinjenja koja dolaze u obzir da se koriste u farmaciji za oralno doziranje mogu da se nalaze u pojedinačnim jedinicama, kao na primer u obliku kapsule, kapsule koje omotavaju lekove lošeg ukusa, tablete za sisanje ili tablete, koje uvek sadrže određenu količinu jedinjenja prema formuli I; u obliku praška ili granulata; u obliku rastvora ili suspenzije u vodenoj ili nevodenoj tečnosti; ili u obliku emulzija ulja u vodi ili vode u ulju. Ovi preparati mogu, kao što je već napomenuto, da se pripreme primenom bilo koje podesne farmaceutske metode, koja obuhvata jedan stupanj, u kojem se aktivna supstanca i nosač (koji može da se sastoji od jedne ili više dodatnih komponenata) dovode u kontakt. Uopšte se preparati proizvode putem ravnomernog i homogeniziraj ućeg mešanja aktivne supstance sa nekim tečnim i/ili fino dispergovanim čvrstim nosačem, posle čega, ako je potrebno, se produktu daje određeni oblik. Tako može, primera radi, da se napravi tableta, pri čemu se prašak ili granulat jedinjenja presuje ili oblikuje, u tom slučaju sa jednom ili više dodatnih komponenata. Presovane tablete mogu da budu proizvedene u odgovarajućoj mašini tabletiranjem jedinjenja koje se nalazi u slobodnom tečljivom obliku, kao na primer u obliku praha ili granulata, koji je u datom slučaju izmešan sa vezivom, sredstvom za poboljšanje klizavosti, inertnim razblaživačem i/ ili sa jednim (više) površinski aktivnim / dispergujućim sredstvom. Oblikovane tablete mogu da budu proizvedene u odgovarajućoj mašini, pri tome se jedinjenje koje se nalazi u praškastom obliku vlaži sa nekim inertnim tečnim razblaživačem.

Farmaceutski preparati, koji dolaze u obzir da se koriste za peroralno doziranje (ispod jezika), obuhvataju tablete za sisanje, koje sadrže neko jedinjenje prema formuli I zajedno sa nekim sredstvom za poboljšanje ukusa, uobičajeno se koristi saharoza i gumiarabika ili tragant, i pastile, koje sadrže ovo jedinjenje u nekoj inertnoj osnovi, kao što su želatin i glicerin ili saharoza i gumiarabika.

Farmaceutski preparati, koji dolaze u obzir da se koriste za parenteralno doziranje, obuhvataju prvenstveno sterilne vodene formulacije nekog jedinjenja prema formuli I, koje su prvenstveno izotonične sa krvlju predviđenog primaoca. Ove formulacije se daju u obliku injekcije na prvom mestu intravenozno, ali isto tako mogu da se daju i subkutano, intramuskularno ili intradermalno. Ove formulacije mogu da se proizvedu prvenstveno tako, što se jedinjenje pomeša sa vodom i dobijeni rastvor se steriliše i učini da bude izotoničan sa krvlju. Formulacije definisane prema ovom pronalasku, koje mogu da se daju u obliku injekcija, sadrže uopšteno od 0,1 do 5 mas.% aktivnog jedinjenja.

Farmaceutski preparati, koji dolaze u obzir da se daju pacijentima preko rektuma, nalaze se prvenstveno u vidu pojedinačne doze, u obliku čepića (supozitorijumi). Ovi mogu da se proizvedu na taj način što se jedinjenje prema formuli I meša sa jednim ili više uobičajenih dostupnih čvrstih nosača, primera radi sa kakao-buterom, i nastala smeša se oblikuje u čepiće.

Farmaceutski preparati koji dolaze u obzir za topičnu primenu na koži nalaze se prvenstveno u obliku melema, kreme, losiona, paste, spreja, aerosola ili ulja. Kao nosači mogu da se koriste vazelin, lanolin, polietilenglikoli, alkoholi ili kombinacije od dve ili više ovih supstanci. Aktivna supstanca se nalazi uopšteno u koncentraciji od 0,1 do 15 mas.% od preparata, primera radi od 0,5 do 2 mas. %.

Isto tako je moguće i transdermalno korišćenje preparata. Farmaceutski preparati koji su podesni za transdermalne primene mogu da se nalaze u obliku pojedinačnih flastera, koji su pogodni za bliski kontakt sa epiđermom pacijenta u toku dužeg vremenskog perioda. Takvi flasteri sadrže aktivnu supstancu u pogodnom obliku, u datom slučaju u pufernom vodenom rastvoru, rastvorenu i/ili dispergovanu u nekom adhezionom sredstvu ili dispegovanu u nekom polimeru. Pogodna koncentracija aktivne supstance iznosi oko 1 % do 35 %, prvenstveno oko 3 % do 15 %. Jedna specijalna mogućnost je da aktivna supstanca može, kako je primera radi opisano u Pharmaceutical Research, 2(6): 318 (1986), da se oslobađa preko elektroforeze ili ionoforeze.

Predmet ovog pronalaska je nadalje postupak za proizvodnju jedinjenja opšte formule I, koja mogu da se dobiju prema sledećim reakcionim šemama postupaka A do F:

Postupak A:

Postupak B:

Postupak C:

Postupak D:

Postupak E:

Postupak F:

Prikazane šeme postupaka A - F govore same za sebe i stručnjaci mogu takve da ih izvode. Bliže pojedinosti su još navedene u eksperimentalnom delu. Prema postupcima A - F proizvedena su jedinjenja iz primera 1 do 24. Ostala jedinjenja formule I mogu da se proizvedu na odgovarajući način ili prema poznatim postupcima.

Jedinjenje (jedinjenja) formule I mogu da se doziraju i u kombinaciji sa drugim aktivnim supstancama.

U svojstvu druge aktivne supstance za kombinovane preparate pogodni su:

svi antidijabetici, koji su navedeni u crvenoj listi 2001, poglavkje 12. Oni mogu da se kombinuju sa jedinjenjima formule I, definisanim po ovom pronalasku, naročito u cilju sinergističkog poboljšanja dejstva. Doziranje kombinacije aktivnih supstanci može da se odvija odvojenim davanjem aktivnih supstanci pacijentu ili davanjem u obliku kombinovanih preparata, pri tome se više aktivnih supstanci nalazi prisutno u jednom farmaceutskom preparatu. Najveći broj aktivnih supstanci, koje su navedene u daljem tekstu, objavljene su u USP Dicfionarv of USAN and International Drug Names, US Pharmacopeia, Rockville 2001.

Antidijabetici obuhvataju insulin i derivate insulina, kao na primer Lantus<®>(videti www.lantus.com) ili HMR 1964, brzo delujuće insuline (videti US, 6,221,633), GLP-1 - derivate, kao na primer one koje je Novo Nordisk A/S objavio u patentu WO 98/08871, isto tako i hipoglikemijske aktivne supstance za oralno doziranje. Hipoglikemijske aktivne supstance, koje se doziraju oralno, obuhvataju prvenstveno sulfonil-karbamide, bigvanidine, meglitinide, oksadiazolidindione, tiazolidindione, inhibitore glukosidaze, glukagon - antagoniste, GLP-1 - agoniste, otvarače kalijumovog kanala, kao na primer one koje je Novo Nordisk A/S objavio u WO 97/26265 i WO 99/03861, senzibilizatore insulina, inhibitore enzima jetre, koji uzimaju učešće u stimulaciji glukoneogeneze i/ili glikogenolize, modulatore vezivanja glukoze, jedinjenja koja menjaju metabolizam masti, kao što su antihiperlipidemijske aktivne supstnce i antilipidemijske aktivne supstance, jedinjenja koja utiču na smanjenje unosa hrane, PPAR- i PXR - agoniste i aktivne supstance koje deluju na ATP - zavisan kalijumov kanal beta ćelija.

Pri jednom načinu izvođenja ovog pronalaska primenjuju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim inhibitorom HMGCoA-reduktaze, kao što su simvastatin, fluvastatin, pravastatin, lovastatin, atorvastatin, cerivastatin, rosuvastatin.

Pri jednom obliku izvođenja ovog pronalaska doziraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim inhibitorom resorpcije holesterina, kao što su na primer ezetimib, tiquesid, pamaquesid.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska doziraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim PPAR gama agonistom, kao što su na primer roziglitazon, pioglitazon, JTT-501, GI 262570.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska koriste se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim PPAR alfa agonistom, kao što je na primer GW 9578, GW 7647.

Pri jednom načinu izvođenja ovog pronalaska primenjuju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim mešanim PPAR alfa/gama agonistima, kao što su na primer GW 1536, AVE 8042, AVE 8134, AVE 0847, AVE 0897 ili kao što su oni opisani u WO 00/64888, WO 00/64876, WO 03/20269.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska doziraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim fibratom, kao na primer sa fenofibratom, sa clofibratom, sa bezafibratom.

Kod jednog oblika izvođenja ovog pronalaska primenjuju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim MTP - inhibitorom, kao što su na primer implitapid, BMS-201038, R-103757.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska ordiniraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa inhibitorom resorpcije žučne kiseline (videti na primer US 6,245,744 ili US 6,221,897), kao što je na primer HMR 1741.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska doziraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim CETP- inhibitorom, kao na primer sa JTT-705.

Pri jednom obliku izvođenja ovog pronalaska ordiniraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim polimernim adsorbentom žučne kiseline, kao što su na primer holestiramin, colesevelam.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska primenjuju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim LDL- receptorskim induktorom (videti US 6,342,512), kao na primer HMR1171, HMR1586.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska ordiniraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim AC AT- inhibitorom, kao stoje na primer avasimib.

Kod jednog oblika izvođenja ovog pronalaska koriste se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim antioksidantom, kao na primer sa OPC-14117.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska doziiraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim inhibitorom lipoprotein - lipaze, kao na primer sa NO-1886.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska ordiniraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim inhibitorom ATP - citrat- liaze, kao na primer sa SB-204990.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska primenjuju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim inhibitorom sintetaze skvalena, kao na primer sa BMS-188494.

Pri jednom načinu izvođenja ovog pronalaska jedinjenja formule I doziraju se u kombinaciji sa nekim antagonistom lipoproteina, kao na primer što su CI-1027 ili nikotinska kiselina.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska jedinjenja formule I ordiniraju se u kombinaciji sa nekim inhibitorom lipaze, kao na primer što je orlistat.

U jednom obliku izvođenja ovog pronalaska jedinjenja formule I primenjuju se u kombinaciji sa insulinom.

U jednom obliku izvođenja doziraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim sulfonil-karbamidom, kao što su na primer tolbutamid, glibenklamid, glipizid ili glimepirid

Pri jednom načinu izvođenja primenjuju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim bigvanidom, kao što je na primer metformin.

Pri još jednom obliku izvođenja jedinjenja formule I doziraju se u kombinaciji sa nekim meglitinidom, kao na primer sa repaglinidom.

U jednom obliku izvođenja jedinjenja formule I se ordiniraju u kombinaciji sa nekim tiazolidindionom, kao što su na primer troglitazon, ciglitazon, pioglitazon, rosiglitazon ili jedinjenja koja je u patentu WO 97/41097 objavila Dr. Reddv's Research Foundation, naročito jedinjenje 5-[[4-[(3,4-dihidro-3-metil-4-okso-2-hinazolinil-metoksi]fenil]metil]-2,4-tiazolidindion.

U jednom obliku izvođenja ordiniraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekim inhibitorom a-glukozidaze, kao na primer što su miglitol ili acarbose.

Tokom jednog oblika izvođenja ordiniraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa nekom aktivnom supstancom, koja deluje na ATP-zavisan kalijumov kanal beta ćelija, kao što su na primer tolbutamid, glibenclamid, glipizid, glimepirid ili repaglinid.

U jednom obliku izvođenja doziraju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa više od jednog od gore navedenih jedinjenja, na primer u kombinaciji sa nekim sulfonil-karbamidom i metforminom, sa nekim sulfonil-karbamidom i acarbosom, sa repaglinidom i metforminom, sa insulinom i nekim sulfonil-karbamidom, sa insulinom i metforminom, sa insulinom i troglitazonom, sa insulinom i lovastatinom, itd.

U jednom od ostalih oblika izvođenja primenjuju se jedinjenja formule I u kombinaciji sa CART - modulatorima (videti "Cocaine -amphetamine- regulated transcript influences energv metabolism, anxiety and gastric emptving in mice" Asakavva, A. Et al., M: Hormone and Metabolic Research (2001), 33 (9), 554 - 558), NPY- agonistima, na primer naftalin-1-sulfonska kiselina {4-[(4- amino-hinazolin-2-ilamino)- metil]-cikioheksilmetil}-amid; hidro-hlorid (CGP 71683A)), MC4 - agonistima (na primer 1-amino - 1,2,3,4-tetrahidro- naftalin-2- karboksilna kiselina [2-(3a-benzil-2-metil-3-okso-2,3,3a,4,6,7-heksahidro-pirazolo[4,3-c]piridin-5-il)-l-

(4- hloro- fenil)-2-okso- etil]-amid; (WO 01/91752)), oreksin- agonistima (na primer l-(2- metil- benzoksazol-6-il)-3-[l,5]naftiridin-4-il-karbamid; hidro-hlorid (SB-334867-A)), H3 - agonistima (3-cikloheksil-l-(4,4- dimetil-l,4,6,7-tetrahidro-imidazo[4,5]piridin~5-il)- propan-l-on so oksalne kiseline (WO 00 / 63208)); TNF - agonistima, CPvF - agonistima (na primer [2-metiI-9-(2,4,6- trimetil-fenil)-9H-1,3,9-triaza- fluoren-4-il]- dipropil- amin (WO 00 / 66585)), CRF BP - antagonistima (na primer urokortin), urokortin- agonistima,/ B-agonistima (na primer l-(4- hloro-3-metanesulfonilmetil- fenil)-2-[2-(2,3- dimetil-lH- indol-6 -iloksi) -etilamino]-etanol; hidro-hlorid (WO 01 /83451)), MSH (melanocite- stimulizirajući hormon) - agonistima, CCK-A agonistima (na prim. (2-[4-(4-hloro-2,5- dimetoksi-fenil)-5-(2-cikloheksil-etil)- triazol-2-ilkarbamoil]-5,7- dimetil- indol-l-il}-sirćetna kiselina so trifluor-sirćetne kiseline (WO 99 /15525)), inhibitorima ponovnog vezivanja serotonina (na primer deksfenfluramin), mešavinom serotonin- i noradrenostimulizatorskih jedinjenja (na primer WO 00 / 71549), 5HT- agonistima na primer l-(3-etil- benzofuran-7-il)-piperazin so oksalne kiseline (WO 01/09111), bombezin - agonistima, galanin - antagonistima, hormonom rasta (na primer humani hormon rasta), jedinjenja koja oslobođaju hormon rasta (6-benziloksi-l-(2-diizopropilamino-etilkarbamoil)-3,4- dihidro-lH- izohinolin-2-karboksilne kiseline-t-butil-estar (WO 01 / 85595), TRH - agonistima (videti na primer EP 0 462 884), 2-ili 3-modulatorima koji razgrađuju protein, leptin - agonistima (videti na primer Lee, Daniel W.; Leininung, Matthew C; Rozhavskaya-Arena, Marina; Grasso, Patricia: Leptin agonists a potential approach to the treatment of obesity. Drugs of the Future

(2001), 26 (9), 873 - 881),

DA - agonistima (bromokriptin, dopreksin), lipaze/amilaze - inhibitorima (na primer WO 00 /40569 ), PPAR- modulatorima (na primer WO 00 / 78312), RXR-modulatorima ili TR-/?- agonistima.

U jednom izvođenju ovog pronalaska je leptin druga aktivna supstanca; videti na primer "Perspectives in the therapeutic use of leptin", Salvador, Javier; Gomes-

Ambrosi, Javier; Fruhbeck, Gema, Expert Opinion on Pharmacotherapy (2001), 2 (10), 1615- 1622.

Pri jednom izvođenju druga aktivna supstanca je deksamfetamin ili amfetamin.

Pri jednom izvođenju druga aktivna supstanca je fenfluramin ili deksfenfluramin. Pri još jednom obliku izvođenja je sibutramin druga aktivna supstanca.

U jednom obliku izvođenja je orlistat druga aktivna supstanca.

Pri jednom obliku izvođenja je druga aktivna supstanca mazindol ili fentermin.

Pri jednom obliku izvođenja daju se pacijentu jedinjenja formule I u kombinaciji sa balastnim supstancama, prvenstveno sa nerastvornim balastnim supstancama (videti na primer Carob/ Caromax<®>(Zunft H. J.; et al. Carob pulp preparation for treatment of hvpercholesterolemia, ADVANCES IN THERAPY (2001 sep-oct), 18 (5), 230 - 6). Caromax, koji sadrži rogač, je jedan produkt firme Fa. Nutrinova, Nutrition Specialties & Food Ingredients GmbH, Industriepark Hoechst, 65926 Frankfurt/ Main)). Kombinacija sa supstancom Caromax<®>može da bude sačinjena u jednom preparatu, ali može i odvojeno da se doziraju jedinjenja formule I i supstance Caromax<@>. Caromax® može pri tome da se daje u vidu prehranbenih namirnica, kao na primer u pecivima ili u mueslima.

Podrazumeva se, da svaka podesna kombinacija jedinjenja definisanih prema ovom pronalasku, sa jednim ili sa više od gore navedenih jedinjenja i po izboru sa jednom ili sa više drugih farmakološki delotvornih supstanci, spada isto tako u oblast patentne zaštite ovog pronalaska.

Jedinjenja formule I se odlikuju povoljnim dejstvom na metabolizam šećera, ona snižavaju naročito nivo šećera u krvi i dolaze u obzir da se koriste za lečenje tipa 1 i tipa 2 dijabetesa. Ova jedinjenja mogu da se koriste stoga samostalno ili u kombinaciji sa drugim aktivnim supstancama za snižavanje nivoa šećera u krvi (antidijabetici).

Jedinjenja formule I dolaze u obzir nadalje da se koriste za lečenje dijabetskih kasnijih komplikacija, kao na primer nefropatije, retinopatije, neuropatije, isto tako i za lečenje sindroma X, gojaznosti, srčanog infarkta, oboljenja začepljenja perifernih arterija, tromboze, arterioskleroze, zapaljenja, imunoloških bolesti, oboljenja autoimunog sistema, kao na primer AIDS, astme, osteoporoze, raka, psorijaze, alchajmerove bolesti, šizofrenije i infektivnih oboljenja, prednost ima lečenje tipa 1 i tipa 2 dijabetesa, kao i za prevenciju i lečenje diabetskig kasnijih oštećenja, sindroma X i gojaznosti.

Dclotvornost ovih jedinjenja ispitana je na sledeći način:

Preparacija vezikula četkastog ruba membrana iz tankog creva kunića, pacova i svinj<e>

Preparacija vezikula četkastog ruba membrane crevnih ćelija iz tankog creva odvijala se primenom takozvane Mg - precipitacione metode. Sluznica iz tankog creva je sastrugana i napravljena je suspenzija u 60 mL Tris/ HCl-pufer (pH 7,1) /300 mM manita, 5 mM EGTA, koji je ohlađen ledom. Posle razblaživanja na 300 mL primenom destilovane vode, koja je bila hladna kao led, izvršena je homogenizacija pomoću jednog homogenizatora (18-Stab, IKA WERK Staufen, BRD) 2x1 minut pri 75 % od maksimalne snage, uz hlađenje ledom. Posle dodavanja 3 mL rastvora 1 M MgCl2(krajnja koncentracija 10 mM) ostavi se da stoji tačno 15 minuta pri temperaturi od 0 °C. Dodavanjem Mg<2+>dolazi do agregacije ćelijske membrane i precipitacije, izuzimajući četkaste rubove membrana. Posle centrifugiranjapri 3000 x g (5000 opm, SS-34-rotor), koje je trajalo 15 minuta, talog se odbaci i preostali deo, koji sadrži četkaste rubove membrana, se centrifugira u toku 30 min pri 26 700 x g (15 000 opm, SS-34-rotor). Preostali deo se odbaci, i talog se ponovo homogenizuje u 60 mL 12 mM Tris/ HC1-pufer (pH 7,1) /60 mM manita, 5 mM EGTA pomoću jednog Potter Elvejhem homogenizatora (Braun, Melsungen, 900 opm, 10 dizanja). Posle dodavanja od 0,1 mL rastvora 1 M MgCl2i inkubacije u trajanju od 15 minuta pri temperaturi 0 °C ponovo se centrifugira pri 3000 x g. Preostali deo se potom još jednom centrifugira u toku 30 minuta pri 46 000 x g (20 000 opm, SS-34-rotor). Talog se izmeša u 30 mL 20 mM Tris / Hepes-pufera (pH 7,4) / 280 mM manita i ponovo homogeno suspendira primenom 20 dizanja u jednom Potter Elvejhem homogenizatoru pri 1 000 opm. Posle centrifugiranja koje je trajalo 30 minuta pri 48 000 x g (20 000 opm, SS-34-rotor) izmeša se talog u 0,5 do 2 mL Tris/ Hepes-pufer (pH 7,4) / 280 mM manita (krajnja koncentracija 20 mg/mL) i ponovo se napravi suspenzija pomoću jedne tuberkulin štrcaljke sa 27-baždarnih- igala.

Vezikuli su ili neposredno posle preparacije korišćeni za ispitivanja markiranja ili transporta ili su čuvani u porcijama od po 4 mg pri temperaturi -196 °C u tečnom azotu.

U cilju preparacije vezikula od četkastog ruba membrana iz tankog creva pacova usmrćeno je 6 do 10 muških Wistar-pacova (Odgajalište Kastengrund, Aventis Pharma) primenom cervikalne dislokacije, uzeta su tanka creva i isprana su sa hladnim izotoničnim rastvorom kuhinjske soli. Creva su isečena i sluznica je sastrugana. Prerada u cilju izolovanja četkastih rubova membrana odvijala se kako je gore opisano. Da bi se odvojili delovi citoskeleta vezikuli četkastog ruba membrana iz tankog creva pacova obrađeni su sa KSCN.

U cilju preparacije četkastih rubova membrana iz tankog creva kunića kunići su usmrćeni primenom intravenozne injekcije sa 0,5 mL vodenog rastvora koji sadrži 2,5 mg tetrakain-HCl, 100 mg m-butramida i 25 mg mebezonijum-hlorida. Tanka creva su uzeta, isprana su sa fiziološkim rastvorom kuhinjske soli, koji je bio ohlađen kao led, i zamrznuta su u plastičnim kesama u atmosferi azota pri temperaturi -80 °C i čuvana su 4 do 12 nedelja. U cilju preparacije vezikula membrana zamrznuta creva su otopljena pri temperaturi 30 °C u vodenom kupatilu i potom je sastrugana sluznica. Prerada u vezikule membrana odvijala se na način kako je gore opisano.

U cilju preparacije vezikula četkastih rubova membrana iz creva svinje isprani su sa ledeno hladnim izotoničnim rastvorom kuhinjske soli segmenti jejunuma jedne tek zaklane svinje i zamrznuti su u plastičnim kesama pod azotom pri temperaturi -80 °C. Preparacija vezikula membrana odvijala se na način kako je gore opisano.

Preparacija vezikula iz četkastog ruba membrana iz bubrežne kore bubrega pacova

Preparacija vezikula iz četkastog ruba membrana iz bubrežne kore bubrega pacova odvijala se po metodi Bibera et al. Bubrezi od 6 do 8 pacova (200 do 250 g) su izvađeni i od svakog bubrega uzeta je kora u obliku sloja debljine oko 1 mm. Bubrezi su izmešani u 30 mL ohlađenog kao led 12 mM Tris/ HCl-pufera (pH 7,4) / 300 mM manita i uz hlađenje ledom homogenizirani su tokom 4x30 sekundi pomoću jednog ultrahomogenizatora (stupanj 180 V). Posle dodavanja 42 mL kao led hladne vode dodato je 850 pL rastvora 1 M MgCl2. Posle inkubacije, koja je trajala 15 minuta pri temperaturi 0 °C, izvršeno je centrifugiranje tokom 15 min pri 4 500 opm (Sorvall SS-34-rotor). Talog je odbačen, preostali deo je centrifugiran u toku 30 min pri 16 000 opm. Posle ponovnog suspenziranja taloga u 60 mL 6 mM Tris/ HCl-pufera (pH 7,4) /150 mM manita / 2,5 mM EGTA primenom 10 dizanja u jednom Potter-Elvejhem homogenizatoru (900 opm) i posle dodavanja 720 uL rastvora 1 M MgCl2izvršena je inkubacije, koja je trajala 15 minuta pri temperaturi 0 °C. Posle centrifugiranja u trajanju od 15 min pri 4 500 opm (SS-34-rotor) dobijeni preostali deo je centrifugiran u trajanju od 30 min pri 16000 opm. Preostali deo je homogeniziran primenom 10 dizanja u 60 mL 20 nM Tris/ hepes-pufera (pH 7,4) / 280 mM manita i nastala suspenzija je na kraju centrifugirana u toku 30 min pri 20000 opm. Ponovo je napravljena suspenzija ovog taloga pomoću jedne tuberkulin štrcaljke sa 27-baždarnih - igala u 20 mM Tris/ HCl-puferu (pH 7,4)/ 280 nM manita i podešena je na koncentraciju proteina od 20 mg/mL.

Merenja vezivanja glukoze primenom vezikula četkastog ruba membrana

Vezivanje [<14>C]-markirane glukoze u vezikule četkastog ruba membrana mereno je pomoću metode membranske filtracije. 10 uL suspenzije vezikula četkastog ruba membrana u 10 mM Tris/ hepes-pufera (pH 7,4) / 300 mM manitola pri temperaturi 30 °C dodato je u 90 uL jednog rastvora koji sadrži 10 u.M [<14>C]D- glukoze i odgovarajuću koncentraciju određenog inhibitora (5 - 200 uM) u 10 mM Tris/ hepes-pufera (pH 7,4) /100 mM NaCl/100 mM manitola. Posle inkubacije u trajanju od 15 sec zaustavljen je proces transportovanja dodatkom 1 mL kao led hladnog rastvora za zaustavljanje (10 mM Tris/ hepes-pufer (pH 7,4) / 150 mM KC1) i suspenzija vezikula je odmah usisana pri vakuumu od 25 do 35 mbar preko jednog membranskog filtra od celuloze-nitrata (0,45 pm, 25 mm prečnik, Schleicher & Schell). Filter je još opran sa 5 mL ledenog rastvora za zaustavljanje. Svaka merna tačka je urađena u vidu duplog ili trostrukog određivanja. U cilju merenja vezivanja radioaktivno markiranog supstrata rastvoren je membranski filter u 4 mL odgovarajućeg scincilatora (Quickszint 361, Zinsser Analvtik GmbH, Frankfurt am Main) i radioaktivnost je određivana primenom scincionih merenja za tečnosti. Vrednosti merenja u obliku dpm (disintegrations per minute) dobijene su posle baždarenja uređaja pomoću standardnih uzoraka i posle korekcije eventualno postojeće hemiluminiscencije.

Poređenje aktivnosti aktivnih supstanci izvedeno je pomoću podataka za IC50, koji u istraživanjima transporta na vezikulima četkastog ruba membrana tankog creva kunića su dobijeni za izabrane supstance. (Apsolutne vrednosti mogu da zavise od specija i opita)

Nadalje je detaljno opisan postupak proizvodnje različitih primera, ostala jedinjenja formule I dobijena su na sličan način:

Eksperimentalni deo:

Reakciona šema: Sinteza a-bromglikosida l-bromo-4-desoksi-4-fluoro-2,3,6-tri- O-acetil-alfa -D-glukoza 2

Napravi se suspenzija od 5 g (27,5 mmol) 4-deoksi-4-fluoro-D-glukopiranoze 1 (Apollo) u 50 mL piridina (pyr) i 50 mL anhidrida sirćetne kiseline (Ac20). Reakcioni rastvor se meša u toku 4 sata pri 45 °C. Pri tome se dobija jedan bistri reakcioni rastvor, koji se potom ugusti. Dobija se 12 g sirovog produkta. Ovaj sirovi produkt se rastvori u 160 mL rastvora 33 % HBr u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (AcOH) i ostavi da stoji u toku 2 sata pri sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se onda sipa u jednu smešu od 300 g leda i 300 mL etil-acetata. Organska faza se opere još dva puta primenom vodenog rastvora NaCl, profiltrira se preko malo silica gela i ugusti se. Ostatak se razdvoji primenom hromatografije na silika gelu (etil-acetat/ heptan = 1/1). Dobija se 8,19 g (80 % kroz 2 stupnja) jedinjenja 2 u obliku čvrste supstance svetio žute boje.

l-bromo-4-desoksi-4-fluoro-2,3,6-tri- O-acetil-alfa -D-galaktoza 4

100 mg (0,55 mmol) jedinjenja 3 sa 3,5 mL piridina (pyr) i 3,5 mL anhidrida sirćetne kiseline (Ac20) reaguje na isti način kao pri proizvodnji jedinjenja 2. Dobija se 89 mg (44 %) jedinjenja 4 u obliku amorfne čvrste supstance.

l-bromo-3-desoksi-3-fiuoro-2,4,6- tri-O-acetil-alfa -D-glukoza 6

335 mg (1,84 mmol) jedinjenja 5 sa 10 mL piridina (pyr) i 10 mL anhidrida sirćetne kiseline (AczO) reaguje na isti način kao pri proizvodnji jedinjenja 2. Dobija se 628 mg (92 %) jedinjenja 6 u obliku amorfne čvrste supstance.

Analogno su proizvedeni : Primer1 (jedinjenje 9)

Rastvori se 100 mg (0,47 mmol) 2-(4-metoksi - benzil)-fenola 7 i 370 mg (1,17 mmol) bromida 2 u 6 mL metilen-hlorida. U taj rastvor se dodaje jedno za drugim 160 mg Bu3BnNCl (PTK^katalizator za transfer faza), 320 mg K2C03i 0,4 mL vode i potom se meša u toku 20 sati pri sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor se zatim razblaži sa 20 mL etil-acetata i profiltrira preko silika gela. Filtrat se ugusti i ostatak se razdvoji primenom hromatografije na silika gelu (etil-acetat/ heptan = 1/1). Dobija se 72 mg jedinjenja 8 u obliku čvrste bezbojne supstance. Dobijenih 72 mg jedinjenja 8 umeša se u 4 mL metanola i tretira se sa 1 mL 1 N NaOMe/MeOH. Posle jednog sata neutrališe se sa metanolnim rastvorom HC1, ugusti se i ostatak razdvoji primenom hromatografije na silika gelu (metilen-hlorid/ metanol/ konc. amonijak, 30/5/1). Dobija se 29 mg jedinjenja 9 u obliku čvrste bezbojne supstance. C20H23FO6(378,40) MS (ESL): 423,22 (M + CH02").

Primer2 (jedinjenje 10)

100 mg (0,47 mmol) 2-benzil-fenoia i 370 mg (1,17 mmol) bromida 2 reaguje na sličan način kao pri sintezi jedinjenja 9 i dobija se 31 mg jedinjenja 10 u obliku čvrste bezbojne supstance. C19H21F05(348,37) MS (ESF): 393,15 (M + CH02").

Primer3 (jedinjenje 11)

200 mg (0,94 mmol) 2-(4-metoksi-benzil)-fenola 7 i 200 mg (0,63 mmol) bromida 4 reaguju slično kao pri sintezi jedinjenja 9 i dobija se 110 mg jedinjenja 11 u obliku čvrste bezbojne supstance. C20H23FO6(378,40) MS (ESF): 423,22 (M + CH02"). . Na sličan način su proizvedeni: Primer 4(jedinjenje14) 90 mg (0,30 mmol) jedinjenja 3-benzofuran-5-il-l-(2,6-dihidroksi-4-metil-fenil)-propan-l-on 12 i 280 mg (0,76 mmol) bromida 2 reaguju na način kao pri sintezi jedinjenja 8 i dobija se 400 mg jedinjenja 13 u obliku sirovog produkta, kod kojeg se uklanja zaštita direktno pomoću NaOMe/MeOH kao pri sintezi glukozida 9. Dobija se 75 mg jedinjenja 14 (54 % kroz 2 stupnja) u obliku čvrste bezbojne supstance. C24H25F08(460,46) MS (ESI'): 459,03 (M - H<+>).

Primer5 (jedinjenje 15)

100 mg (0,33 mmol) jedinjenja 3-benzofuran-5-il-l-(2,6-dihidroksi-4-metil-fenil)-propan-l-on 12 i 150 mg (0,40 mmol) bromida 4 reaguju na način kao pri sintezi jedinjenja 14 i dobija se 75 mg jedinjenja 15 u obliku čvrste bezbojne supstance. C24H25F08(460,46) MS (ESF): 459,03 (M - H<+>).Primer6 (jedinjenje 16) 150 mg (0,5 mmol) jedinjenja 3-(2,3-dihidroksi-benzofuran-5-il)-l-(2,6-dihidroksi-4-metil-fenil)-propan-l-on i 150 mg (0,40 mmol) bromida 4 konvertuju se kao pri sintezi jedinjenja 14 i dobija se 75 mg jedinjenja 16 u obliku čvrste bezbojne supstance. C24H27F08(462,46) MS (ESF): 461,03 (M - H<+>).

Na sličan načinje proizveden:

Primer7 (jedinjenje 20) 1,0 g (6,0 mmol) l-(2,6-dihidroksi-4 -metil -fenil)-etanona 17 i 1,0 g (2,7 mmol) bromida 2 rastvore se u 30 mL metilen-hlorida. U ovaj rastvor doda se uz snažno mešanje jedno za drugim 800 mg benzil-tributilamonijum-hlorida (PTK), 1,6 g kalijum-karbonata i 1,5 mL vode. Ova suspenzija se meša u toku 18 sati zaštićena od svetlosti (aluminijumska folija) i potom razblaži sa 150 mL estra sirćetne kiseline i 150 mL n-heptana. Čvrsti sastojci se filtriraju preko malo silika gela i ugusti se. Ostatak se razdvoji primenom hromatografije na silika gelu (etil-acetat/heptan=1/2). Dobija se 430 mg jedinjenja 18 (teško se odvaja od jednog sporednog produkta, koji isto protiče, zato je njegova čistoća samo oko 50 %. Sporedni produkat može u toku sledećeg stupnja da se lako odvoji u obliku čvrste svetio žute supstance. C21H25O10F (456,43) MS (ESF): 455,25 (M - H<+>).

Rastvore se 200 mg jedinjenja 18 (oko 50 % čistoće) i 225 mg anisaldehida (Fluka) u 10 mL metanola. Posle dodavanja 5 mL rastvora 1 N NaOMe/MeOH ostavi se reakcioni rastvor da se kuva uz refluks u toku 12 sati. Reakcioni rastvor se potom neutrališe primenom metanolnog HC1, ugusti se i ostatak se razdvoji primenom hromatografije na silika gelu (metilen-hlorid/ metanol/ konc. amonijak, 30/5/1). Dobija se 60 mg jedinjenja 19 u obliku čvrste supstance žute boje.

Napravi se suspenzija od 60 mg (0,13 mmol) halkona 19 i 50 mg Pd/C (10 % Pd) u 15 mL metanola i u atmosferi vodonika od 5 bar vrši se hidriranje u toku 5 h pri sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor se ugusti i ostatak se prečisti primenom flash-hromatografije (metilen-hlorid/ metanol/ konc. amonijak, 30/5/1). Prinos 25 mg (42 %) jedinjenja 20, koje je u obliku bele, amorfne čvrste supstance. C23H27FO8(424,47) MS (ESF): 449,17 (M - H<+>).

Primer8 (jedinjenje 21)

200 mg jedinjenja 18 (čistoće oko 50 %) i 350 mg p-benziloksi-benzaldehida (Fluka) konvertuju se na način korišćen pri sintezi jedinjenja 20. Dobija se 36 mg jedinjenja 21 u obliku čvrste bezbojne supstance. C22H25FO8(436,44) MS (ESF): 481,08 (M + CHO2").

Primer9 (jedinjenje 27)

350 mg bromida 2, 100 mg fenola 22 i 350 mg p-benziloksi-benzaldehida (Fluka) konvertuju se na način korišćen pri sintezi jedinjenja 21. Dobija se 40 mg jedinjenja 27 u obliku čvrste bezbojne supstance. C21H23FO9(438,41) MS (ESI"): 483,15 (M + CH02").

Primer 10 (jedinjenje 28)

110 mg bromida 4, 80 mg fenola 22 i 350 mg p-benziloksi-benzaldehida (Fluka) konvertuju se po postupku korišćenom pri sintezi jedinjenja 21. Dobija se 50 mg jedinjenja 28 u obliku čvrste bezbojne supstance. C2iH23F09(438,41) MS (ESF): 483,15 (M + CHO2'). Primer 11(jedinjenje 30)

200 mg bromida 2 i 300 mg fenola 29 reaguju na način koji je korišćen pri sintezi jedinjenja 14. Dobija se 40 mg jedinjenja 30 u obliku čvrste bezbojne supstance. C21H24FN08(437,43) MS (ESF): 482,15 (M + CHCV).

Primer 12 (jedinjenje 31)

200 mg bromida 4 i 300 mg fenola 29 reaguju na način koji je korišćen pri sintezi jedinjenja 14. Dobija se 115 mg jedinjenja 31 u obliku čvrste bezbojne supstance. C2iH24FN08(437,43) MS (ESI"): 482,15 (M + CH02").

Primer 13(jedinjenje 33)

200 mg bromida 2 i 300 mg fenola 32 reaguju po postupku koji je korišćen pri sintezi jedinjenja 14. Dobija se 80 mg jedinjenja 33 u obliku čvrste bezbojne supstance. C22H26FN08(451,45) MS (ESF): 496,17 (M + CHOV). Primer14(jedinjenje 34) 200 mg bromida 4 i 300 mg fenola 32 reaguju na način koji je korišćen pri sintezi jedinjenja 14. Dobija se 130 mg jedinjenja 34 u obliku čvrste bezbojne supstance. C21H24FN08(451,45) MS (ESF): 496,15 (M + CH02"). l-(2,6-bis-benziIoksi-4-metil-fenil)-etanon 36

Rastvori se 1,62 g (9,75 mmol) l-(2,6-dihidroksi-4-metil-fenil)-etanona (35) u 30 mL dimetilformamida i rastvoru se doda 4,0 mL (33,7 mmol) benzilbromida i 13,8 g (100 mmol) kalijum-karbonata. Reakciona smeša se meša u toku 3 sata pri sobnoj temperaturi. Posle toga se doda voda i dva puta se ekstrahuje primenom etilestra sirćetne kiseline. Objedinjene organske faze se operu pomoću zasićenog rastvora natrijum-hlorida, osuše se pomoću natrijum-sulfata i upare se na rotacionom otparivaču. Dobija se 1,35 g (40 %) jedinjenja36u obliku kristalisanog bezbojnog produkta. C23H22O3(346,2) MS (ESI<+>): 347,15 (M + H<+>).

l-(2,6-bis-benziloksi-4-metil -fenil)-3-(4-metoksi -fenil)-propenon 37

3,46 g (10 mmol) l-(2,6-bis- benzilloksi-4- metil-fenil)-etanona (36) rastvori se u 150 mL etanola i doda se 1,34 mL p-anisaldehida. Posle toga ukapa se 7 mL vodenog rastora kalijum-hidroksida. Reakcija se izvodi uz mešanje u toku 12 sati pri sobnoj temperaturi.

Na rotacionom otparivaču odpari se polovina rastvarača. Uz hlađenje ledom neutrališe se primenom 2 M sone kiseline i potom se smeša tri puta izmućka primenom vode i etilestra sirćetne kiseline. Organske faze se objedine, operu se primenom zasićenog rastvora natrijum-hlorida, osuše se pomoću natrijum-sulfata i upare na roracionom otparivaču. Izdvojeno ulje iskristališe. Kristali se izmešaju u dietiletru, profiltriraju u vakuumu i osuše. Dobija se 4,3 g (92 %) jedinjenja 37 u obliku čvrste bezbojne supstance. C3iH2804(464,2) MS (ESI<+>): 465,10 (M + H+).

l-(2,6-dihidroksi -4- metil- feniI)-3-(4- metoksi- fenil)-propan-l-on 38

Rastvori se 1,50 g (3,23 mmol) l-(2,6-bis-benziloksi-4-metil-fenil)-etanona (37) u 40 mL etilestra sirćetne kiseline i u atmosferi argona doda se 400 mg paladijuma na aktivnom uglju, 10 %. U autoklavu za hidrogenovanje hidrogenuje se u toku 2 sata pri 3 bar i pri sobnoj temperaturi. Potom se katalizator odvoji filtriranjem, opere se etilestrom sirćetne kiseline i dobijeni rastvor se upari na rotacionom otparivaču. Sirovi produkt se prečišćava primenom hromatografije na koloni (Si02, etil-acetat/ n-heptan 1:3). Izoluje se 600 mg produkta 38 (65 %) u obliku čvrste bezbojne supstance. C17Hlg04(286,3) MS (ESI<+>): 287,10 (M + H<+>).

Referentni primer 7 (jedinjenje20)

Rastvori se 174,4 mg (0,61 mmol) jedinjenja 38 u 50 mL toluola i dodaju se 340 mg (0,61 mmol) bromida 60 i 421 mg kadmijum-karbonata (2,44 mmol). Reakciona smeša se u toku 1 sata refluksira uz izdvajanje vode. Kadmijum-karbonat se odvoji fdtriranjem i dobijeni bistri rastvor se ugusti na rotacionom otparivaču. Tada se napravi suspenzija sirovog produkta u 25 mL metanola i tome se doda 5,0 mL jednog metanolnog rastvora 0,5 M NaOMe i meša se u toku 12 h pri sobnpj temperaturi. Reakcioni rastvor se neutrališe dodavanjem metanolnog HC1 i prečisti se primenom flash-hromatografije (Si02, EtOAc/ heptan 1:4 —» 1:1). Dobija se 78,8 mg (29 %) jedinjenja 20 u obliku čvrste bezbojne supstance. C^PL^FOg (450,5) MS (ESI+): 473,15 (M + Na+).

Na sličan način proizvedena su jedinjenja 40 (primer 15), 41 (primer 16), 42 (primer 17) i 43 (primer 18). l-metoksi-4-dezoksi-4,4-difluoro-2,3,6-tri-0-benzil-alfa-D-glukoza 45 Rastvori se 3,69 g (7,9 mmol) l-metoksi-2,3,6-tri-0-benzil-a-glukoze 44 (Tetrahedron Asymmetry 11 (2000) 385 - 387) u 110 mL metilen-hlorida i u atmosferi argona ukapa se 3,6 g (8,5 mmol) Dess-Martin-reagensa (Aldrich). Posle 3 sata pri sobnj temperaturi razblaži se sa 300 mL smeše estar sirćetne kiseline/n-heptan (1:1)1 opere se 1 x primenom rastvora NaHCC>31 1 x korišćenjem rastvora Na2S203. Organska faza se profiltrira preko silica gela I ugusti se. Ostatak se razdvoji primenom hromatografije na silica gelu (etil-acetatat/n-heptan 1:1). Dobija se 2,9 g (79 %) ketona. Ovaj se rastvori u 30 mL metilen-hlorida I pod atmosferom argona ukapa se 4 mL BAST (Aldrich). Posle 20 sati pri sobnoj temperaturi razblaži se primenom 200 mL estra sirćetne kiseline I primenom hladnog rastvora NaHC03pažljivo (jako prska) se opere. Organska faza se profiltrira preko silica gela I ugusti se. Ostatak se razdvoji primenom hromatografije na silica gelu (etil-acetatat/n-heptan 1:1). Dobija se 2,6 g (85 %) jedinjenja 45 u obliku bezbojnog ulja.

4-dezoksi-4,4-difiuoro-l,2,3,6-tetra -O-acetil-alfa-D glukoza 46

Rastvori se 2,3 g (4,7 mmol) jedinjenja 451 2 g Pd/C (10 % Pd) u 150 mL metanola 110 mL sirćetne kiseline I u atmosferi vodonika pri 5 bar hidrira se u toku 16 h pri sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor se ugusti I ostatak se prečisti pomoću flash-hromatografije (metilen-hlorid/metanol/konc. Amonijak, 30/5/1). Prinos 850 mg (83 %) l-metoksi-4-desoksi-4,4-difluoro-alfa-D-glukoze u obliku amorfne čvrste supstance, bele boje. C7H12F205(214,17) MS (DCI) 215,4 (M + H<+>).

Od toga se 700 mg (3,3 mmol) rastvori u 3,5 mL sirćetne kiseline I 6,3 mL anhidrida sirćetne kiseline. Posle dodavanja 0,2 mL konc H2SO4meša se u toku 5 h pri temperaturi 60 °C. Reakcioni rastvor se onda sipa na jednu smešu sastavljenu od 30 g leda I 30 mL etil-acetata. Organska faza se još dva puta opere primenom vodenog rastvora NaCl, profiltrira se preko malo Dilica gela I ugusti se. Ostatak se razdvoji pomoću hromatografije na Dilica gelu (etil-acetat/ n-heptan 1:1). Dobija se 300 mg (25 %) jedinjenja46u obliku smeše anomera. Ci4HigF209(368,29) MS (DCI): 369,3 (M + H<+>).

l-bromo-4-dezoksi-4,4-difluoro-2,3,6-tri-0-acetil-alfa- D-glukoza 47

300 mg (0,8 mmol) tetraacetata46rastvori se u 13 mL 33 % Hbr u glacijalnoj sirćrtnoj kiselini I ostavi se da stoji tokom 6 sati pri sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor se onda sipa na jednu smešu sastavljenu od 10 g leda I 10 mL etil-acetata. Organska faza se još dva puta opere primenom vodenog rastvora NaCl, profiltrira se preko malo silika gela i ugusti se. Ostatak se razdvoji pomoću hromatografije na □ ilica gelu (etil-acetat/ n-heptan 1:1). Dobija se 112 mg (35 %) jedinjenja 47 u obliku čvrste bezbojne supstance. C12H15BrF207(389,15) MS (DCI): 389,2 (M +

H<+>).

Primer 19(jedinjenje 50) 100 mg (0,47 mmol) 2-benzil-fenola (Aldrich) i 40 mg (0,10 mmol) difluor-bromida 47 konvertuje se kao po postupku sinteze jedinjenja 9 i dobija se 21 mg jedinjenja 50 u obliku čvrste bezbojne supstance. C19H20F2O5(366,37) MS (ESI): 411,15 (M + CHOf). (4-Metoksi -feniI)-(2- metoksi- fenii)-metanoI 51

Rastvori se 1,5 g o-anisaldehida u THF i ohladi se na 0 °C. U šaržu se doda 24,2 mL 4-metoksifenil-magnezijum-bromida (0,5 M u THF). Reakciona smeša se meša preko noći pri sobnoj temperaturi, potom se sipa u 20 % rastvor NaCl i ekstrahuje se pomoću etil-acetata. Dobija se 2,63 g produkta, koji bez naknadnog prečišćavanja može da se koristi u reakcijama. Ci5Hi603(244,29) MS (ESI<+>): 227,05 (M - OH)<+>.

(4-Metoksi- feniI)-(2-metoksi -fenil) metanon 52

2.63 g (4-metoksi -fenil)-(2- metoksi- fenil)-metanola 51 rastvori se u dihlormetanu i doda se 5,03 Dess Martin reagensa. Šarža se meša u toku 2 h pri sobnoj temperaturi. Potom se doda rastvvor 20 % Na2SC>3 i NaHC03i smeša se ekstrahuje pomoću dietiletra. Organska faza se ekstrahuje pomoću zasićenog rastvora NaCl i osuši se pomoću natrijum-sulfata. Rastvor se ugusti u vakuumu i prečisti se filtriranjem kroz kolonu. Dobija se 2,61 g jedinjenja 52. C15H14O3(242,28) MS (ESf): 243,04 (M + H<+>).

Alternativno tome može da se odvija oksidacija pomoću Jones-reagenca:

155 mg (4-metoksi -fenil)-(2- metoksi- fenil)-metanola 51 rastvori se u 10 mL acetona i u rastvor se ukapa 2 mL Jones-reagenaca. Posle 2 h pri sobnoj temperaturi u šaržu se doda 50 mL MTB-etra i 30 mL vode. Organska faza se više puta opere pomoću vode, ekstrahuje se potom organska faza pomoću zasićenog rastvora NaCl, osuši se pomoću natrijum-sulfata i ugusti do suva. Tako dobijeni produkt (126 mg) ima u pogledu dalje primene u reakcijama zadovoljavajuću čistoću.

(2-Hidroksi- fenil)-(4-metoksi- fenil)-metanon 53

2,61 g (4-metoksi- fenil)-(2-metoksi -fenil)-metanona 52 rastvori se u dihlormetanu. Šarža se hladi u kupatilu sa ledom i doda se u nju 3,71 g kompleks bor-tribromid-dimetilsulfida. Šarža se zagreje na sobnu temperaturu i ostavi se da se u toku 3 h meša. Na kraju se reakcija prekida sipanjem šarže u ledenu vodu, faza dihlormetana se odvoji i vodena faza se više puta ekstrahuje pomoću etil-acetata. Objedinjena organska faza se opere pomoću vode i rastvora natrijum-hlorida, osuši se pomoću natrijum-sulfata i ugusti. Sirovi produkt se hromatografira preko silika gela pomoću smeše etil-acetat/ heptan. Dobija se 1,26 g produkta. C14HI203(228,25) MS (DCI): 229,2 (M + H<+>). 0,78 g (2-hidroksi- fenil)-(4-metoksi -fenil)-metanona se rastvori u acetonitrilu i ohladi se na 0 °C. U šaržu se potom ukapa 2 mL TMSC1 i onda se doda 1 g natrijum-cijano-bor-hidrida. Šarža se meša u toku 3 h pri sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se razblaži primenom dihlormetana i profiltrira se preko celita. Organska faza se ekstrahuje pomoću vode i zasićenog rastvora natrijum-hlorida, osuši se pomoću natrijum-sulfata i ugusti se pri vakuumu. Sirovi produkt se hromatografira preko silika gela pomoću smeše etilacetat/ heptan (1:2). Dobija se 0,72 g željenog produkta. C14H1402(214,27) MS (ESf): 232,20 (M + NH4<+>)<+>. (4-etil- fenil)-(2- metoksi -feniI)-metanol 54

1,01 g o-anisaidehida se rastvori u THF i ohladi se na temperaturu 0 °C. U šaržu se doda 16,29 mL 4-etilfenil-magnezijum-bromida (0,5 M u THF). Reakcioni rastvor se meša preko noći pri sobnoj temperaturi, na kraju se sipa u rastvor 20 % NH4CI i ekstrahuje se pomoću etil-acetata. Dobija se 1,92 g produkta, koji može bez

naknadnog prečišćavanja da se koristi u novim reakcijama. C16Hi802(242,32) MS (ESI+): 225,15 (M - OH)+.

(4-Etil- fenil)-(2-metoksi -fenil)-metan 55

1,34 g (4-etil- fenil)-(2-metoksi- fenil)-metanola rastvori se u aceto-nitrilu i ohladi se na temperaturu 0 °C. U šaržu se doda 1,50 g natrijum-cijano-bor-hidrida i na kraju se doda 3,00 mL trimetilsilil-hlorida. Šarža se meša preko noći pri sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor se profiltrira preko celita i ekstrahuje se pomoću zasićenog rastvora NaCl. Objedinjena organska faza suši pomoću natrijum-sulfata i ugusti se. Sirovi produkt se hromatografira preko silika gela pomoću smeše etilacctat/ heptan (1/ 12). Dobija se 0,83 g produkta. CI6Hi80 (226,32) MS (DCI): 227,4 (M + H<+>).2-(4-etil- benziI)-fenol 56 0,83 g (4-etil- fenil)-(2-metoksi- fenil)-metan 55 rastvori se u dihlormetanu. U šaržu se ukapa 11,0 mL bor-tribromida (1 M u CH2C12). Šarža se meša u toku 5 sati pri sobnoj temperaturi, potom se doda voda i odvoji se faza dihlormetana. Vodena faza se ekstrahuje primenom etil-acetata. Objedinjenje organske faze operu se pomoću vode i rastvora NaCl, osuše se pomoću natrijum-sulfata i uguste se. Dobija se 0,77 g u obliku sirovog produkta, koji može da se hromatografski prečisti. Ci5Hi60 (212,29) MS (ESI): 235,20 (M + Na<+>). metil-2,3,6-tri-0-benzoiI-4-fluoro-4-dezoksi-a-D-glukopiranozid58 3 g metil- 2,3,6-tri-O-benzoil-a-D-galaktopiranozida 57 (Reist et al., J. Org. Chem. 1965, 30 2312) stavi se u dihlormetan i potom se ohladi na temperaturu -30 °C. Onda se ukapa 3,06 mL [bis(2-metoksietil)amino]sulfur-trifluorid (BAST). Reakcioni rastvor se zagreje na sobnu temperaturu i meša se preko noći. Sarža se tada razblaži pomoću dihlormetana i organska faza se ekstrahuje pomoću H20, rastvora NaHC03i zasićenog rastvora NaCl. Organska faza se osuši preko Na2S04i ugusti se. Sirovi produkt kristališe iz etil-acetata i heptana. Dobija se 1,95 g jedinjenja 58 u vidu čvrste bezbojne supstance. C28H25FOg (508,51) MS (ESI<+>): 526,18 (M + NH4<+>). Alternativno može reakcija da se izvede i uz primenu od 2,8 eq. dietilaminosuliur-fluorida (DAST); pri tome reakcioni rastvor se posle uspešnog dodavanja refluksuje u toku 18 h. Dorada sledi na sličan način kako je gore opisano. l-0-acetil-2,3,6-tri-0- benzoil- 4-fluoro-4-dezoksi-glukoza 59

Napravi se suspenzija od 12 g metil-2,3,6-tri-0-benzoil-4-fluoro-4-dezoksi-a-D-glukopiranozida 58 u 150 mL anhidrida sirćetne kiseline. Pomeša se 8,4 mL konc. sumporne kiseline sa 150 mL glacijalne sirćetne kiseline i uz hlađenje ledom doda se u predhodnu šaržu. Šarža se meša pri sobnoj temperaturi u toku 60 h. Reakciona smeša se onda sipa u rastvor NaHC03 i ovaj rastvor se ekstrahuje primenom dihlormetana. Organska faza se ekstrahuje primenom rastvora NaCl, osuši se pomoću Na2S04i ugusti se. Ostatak se prekristališe iz smeše etil-acetata/ heptana.Dobija se 5,97 g produkta u obliku čvrste bezbojne supstance. C29H25FO9(536,52) MS (ESI+): 554,15 (M + NH4 +).

2,3,6-tri-0-benzoil-4-fluoro-4-dezoksi-glukozil-bromid 60

1,44 g l-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzoil-4-fluoro-4-dezoksi-glukoz se rastvori u 20 mL bromovodonične kiseline u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (33 %) i meša se pri sobnoj temperaturi. Posle 5 sati sipa se šarža na ledenu vodu, vodena faza se tri puta

ekstrahuje primenom dihlormetana. Sakupljena organska faza se ekstrahuje pomoću zasićenog rastvora natrijum-hlorida, osuši se pomoću natrijum-sulfata i ugusti se do suva. Siroviproduktse profiltrira kroz kolonu sa silika gelim pomoću smeše etil-

acetat/ heptan 70:30. Dobija se 1,4 g produkta u obliku čvrste supstance. C27H22BrF07(557,37) MS (ESI<+>): 574,05/576,05 (M + NH4 +). 2,3,6-Tri-O-benzoil- 4-fluoro-4-dezoksi -glukoza 61

1,60 g l-Oacetil-2,3,6-tri-0 benzoil- 4-fIuoro-4-dezoksi-glukoze rastvori se u dihlormetanu. U ovaj rastvor doda se 173 uL hidrazin hidrata. Posle 16 h reakcioni rastvor se raspodeli između dihlormetana i H20. Organska faza se ekstrahuje pomoću zasićenog rastvora NaCl, osuši se primenom natrijum-sulfata i ugusti se do suva. Sirovi produkt se prečisti primenom filtracije kroz kolonu. Dobija se 1,22 g željenog produkta. C27H23F08(494,48) MS (ESf): 512,15 (M + NH4<+>).

Jedinjenje 62

248 mg 2-(4-etil-benzil)-fenola (56), 550 mg 2,3,6-tri-O-benzoil- 4-fmoro-4-dezoksi-glukoze (61) i 335 mg trifenilfosfina ohladi se na temperaturu 0 °C u 2 mL osušenog dihlormetana u atmosferi argona. Polako se ukapa 0,193 mL dietilazodikarboksilata. Rastvor se dovede na sobnu temperaturu i meša se preko noći. Rastvor se zatim razblaži primenom dihlormetana i ekstrahuje pomoću vode, 0,5 M NaOH i zasićenog rastvora NaCl. Organska faza se osuši pomoću natrijum-sulfata i ugusti se pri vakuumu. Ostatak se prečisti hromatografski (heptametil-acetat 3:1) Dobija se 200 mg željenog produkta. C42H37FO8(688,76) MS (ESf): 706,30 (M + NH4)<+.>

Primer 20 (jedinjenje63)

200 mg jedinjenja 62 se izmeša u 10 mL absolutnog metanola i doda se 1 mL rastvora natrijum-metanolata (10 mg natrijum-metanolat po 1 mL metanola). Rastvor se meša u toku 8 h. Natrijum se odstrani dodavanjem amberlista-15 (H<1>- oblik), jonski izmenjivač se udalji filtriranjem i ostatak se detaljno opere. Dobijeni produkt se prečisti pomoću filtriranja kroz silika gel (dihlormetan: metanol 96:4).

Dobija se 56 mg željenog produkta. C2iH25F05(376,43) MS (ESI<+>): 394,25 (M + NH4<+>).

Sledeći primeri su proizvedeni na isti način kao primer 20 uz primenu odgovarajućih aglikona.

Odgovarajući aglikoni mogu primera radi da se dobiju po postupcima opisanim za jedinjenje 7 ili 56. l-[4-(2- metoksi- fenoksi)-fenil]-etanon 69

0,15 mL gvajakola 67, 167 mg 4-fluoracetofenona 68, 335 mg kalijum-karbonata zagreva se u 5 mL dimetil-sulfoksida u jednoj mikrotalasnoj pećnici u toku 10 min na 170 °C. Reakcioni rastvor se sipa u vodu i emulzija se tri puta ekstrahuje pomoću metil t.butiletra. Kombinovana organska faza se ekstrahuje dva puta sa 1 N NaOH ijedan put sa zasićenim rastvorom NaCl, osuši se i pri vakuumu ugusti. Dobija se 240 mg željenog produkta. C15Hi403(242,28) MS (ESI<+>): 215,10 (M +

H<+>).

2-(4- etil- fenoksi)-metoksibenzen 70

960 mg l-[4-(2- metoksi- fenoksi)-fenil]-etanona 69 rastvori se u 20 mL acetonitrila, ohladi se u kupatilu sa ledom, i doda se rastvoru 1,05 g natrijum-cijano-bor-hidrida i 2,01 mL trimetilsilil-hlorida. Posle 1 h razblaži se pomoću dihlormetana, profdtrira se preko celita i organska faza se ekstrahuje pomoću rastvora natrijum-hlorida, osuši se prmenom natrijum-sulfata i ugusti se. Ostatak se prečisti hromatografski (heptan: etil-acetat 7:1). Dobija se 710 mg željenog produkta. C15H1602(228,29) MS (ESf): 246,20 (M + NH4<+>).

2-(4- etil- fenoksi)-fenoi 71

710 mg 2-(4- etil- fenoksi)metoksibenzena 70 rastvori se u 5 mL absolutnog dihlormetana. Ukapa se 0,6 mL bor-tribromida ( 1 M u dihlormetanu) i rastvor se meša u toku 6 h. Doda se još Bbr3i meša se sve dok prema LCMS nije postignuta skoro potpuna konverzija. Rastvorse onda sipa u ledenu vodu, organska faza se odvoji i vodena faza se ekstrahuje tri puta sa dihlormetanom. Objedinjena organska

faza se osuši, ugusti se do suva i prečisti se hromatografski. Dobija se 450 mg željenog produkta. C14H1402(214,27) MS (ESI<+>): 215,10 (M + H<+>).

Jedinjenje 72

Jedinjenje 61 (466 mg) i fenol 71 (242 mg reaguju na isti način kao pri sintezi jedinjenja 62. Dobijeni produkt može da se prečisti primenom hromatografije na koloni (heptan: etil-acetat 4:1). Dobija se 240 mg željenog produkta. C4iH35F09(690,73) MS (ESf): 708,25 (M + NH4<+>).

Primer 24 (Jedinjenje39)

230 mg jedinjenja 72 se analogno raskidanju veza u primeru 20 dovedu u reakciju pomoću natrijum-metanolata. Jedinjenje može da se prečisti primenom

gelhromatografije na silika gelu (dihlormetan: metanol 96:4). Dobija se 119 mg željenog produkta. C20H23FO6(378,40) MS (ESI<+>) 396,15 (M + NH4<+>).

Claims (14)

1.Jedinjenja formule I, naznačena time, što u njima znače Rl, R2 OH, F, ili H ili Rl i R2 = F, pri čemu su izuzete tri kombinacije Rl = F, R2 = OH i Rl = OH, R2 = F i Rl, R2 = OH ; R3 OH ili F, pri čemu najmanje jedan od ostataaka Rl, R2, R3 mora da bude F; A O, NH, CH2, S ili jedna veza; R4, R5, R6 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, N02, CN, COOH, CO(C,-C6)-alkil, COO(CrC6)-alkil, CONH2, CONH(CrC6)-alkil, CON[(C,-C6)-alkil]2, (C,-C6)-alkii, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, (CrC6)-alkoksi, HO-(Cr C6)-alkil, (CrC6)-alkil-0-(C]-C6)-alkil, fenil, benzil, pri tome u alkilnim, alkoksilnim, alkenilnim i alkinilnim ostacima jedan, više ili svi atomi vodonika mogu da budu zamenjeni atomom fluora; S02-NH2, S02NH(CrC6)-alkil, S02N[(C,-C6)-alkil]2, S-(C,-C6)-alkil, S-(CH2)0-fenil, SO-(CrC6)-alkil, SO-(CH2)0-fenil, SOr(C,-C6)-alkil, S02-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6 i fenilni ostatak može da bude do dva puta supstituisan sa F, Cl, Br, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O-(CrC6)-alkil, (CrC6)-alkil, NH2; NH2, NH-(CrC6)-alkil, N((C,-C6)-alkil)2, NH(C,-C7)-acil, fenil, O-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6, pri čemu fenilni prsten može da bude jednom do tri puta supstituisan sa F, Cl, Br, J, OH, CF3, N02, CN, OCF3, 0-(CrC6)-alkil, (C,-C6)-alkil, NH2, NH(C,-C6)-aIkil, N((CrC6)-alkil)2, SOrCH3, COOH, COO-(CrC6)-alkil, CONH2; B (C0-Ci5)-alkandiil, pri tome jedan C-atom ili više C- atoma ostataka alkandiila mogu nezavisno jedan od drugog da budu zamenjeni sa -0-, -(C=0)-, -CH=CH-, -ChC-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF2-, -(SO)-, -(S02)-, -N^Cj-^-alkil)-, -N((CrC6)-alkil-fenil)- ili -NH-; n neki broj od 0 do 4; Cycl neki 3 do 7 člani zasićeni, delimično zasićeni ili nezaasićeni prsten, pri tome 1 C-atom može da bude zamenjen sa O, N ili S; R7, R8, R9 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, N02, CN, COOH, COO(C,-C6)-alkil, CO(C,-C4)-alkil, CONH2, CONH(C,-C6)-alkil, CON[(C,-C6)-alkil]2, (Cr C6)-alkil, (C2-C6)-alkeniI, (C2-C6)-alkinil, (C,-C6)-alkoksi, (C,-C6)-alkil-OH, (CrC6)-alkil-0-(CrC6)-alkil, pri tome u alkilnim ostacima mogu jedan, više ili svi atomi vodonika da budu zamenjeni sa atomom fluora; S02-NH2, S02NH(CrC6)-alkil, S02N[(CrC6)-aikil]2, S-(CrC6)-alkil, S-(CH2)0-fenil, SO-(CrC«)-aIkil, S0-(CH2)0-fenil, S02-(C,-C6)-alkil, S02-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6 i fenilni ostatak može da bude do dva puta supstituisan sa F, Cl, Br, OH, CF3, N02, CN, OCF3, O-(CrC6)-alkil, (CrC6)-alkil, NH2; NH2, NH-(CrC6)-alkil, N((CrC6)-alkil)2, NH(CrC7)-acil, fenil, O-(CH2)0-fenil, pri tome može da bude o = 0 - 6, pri čemu fenilni prsten može da bude jednom do tri puta supstituisan sa F, CI, Br, J, OH, CF3, N02, CN, OCF3, (CrC8)-alkoksi, (C,-C6)-alkil, NH2, NH(CrC6)-alkil, N((C,-C6)-alkil)2, S02-CH3, COOH, COO-(CrC6)-alkil, CONH2; ili R8 i R9 zajedno sa C-atomima, koji njih nose, označavaju jedan 5 do 7 člani zasićeni, delimično ili potpuno nezasićeni prsten Cyc2, pri čemu 1 C-atom ili 2 C-atoma tog prstena mogu da budu zamenjeni i sa N, O ili S i Cyc2 u datom slučaju može da bude supstitisan sa (CrC6)-alkil, (C2-C5)-alkenil, (C2-C5)-alkinil, pri čemu uvek jedna CH2-grupa može da bude zamenjena sa O, ili da bude supstituisana sa H, F, Cl, OH, CF3, N02, CN, COO(C,-C4)-alkil, CONH2, CONH(CrC4)-alkil, OCF3; isto tako i njihove soli, koje su farmaceutski prihvatljive.

2. Jedinjenja formule I definisana prema patentnom zahtevu 1, naznačena time, što je u njima označavaju Rl, R2 OFI, F ili H ili Rl i R2 = F, pri čemu jedan od ostataka Rl ili R2 mora da bude F i izuzete su kombinacije Rl = F, R2 = OH i Rl = OH, R2 = F i Rl, R2 = OH; R3 OH; A O ili NH ; R4, R5, R6 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, CF3, N02, CN, COOH, CO(C,-C6)-alkil, COO(C,-C6)-alkil, CONH2, CONH(C,-C6)-alkil, CON[(CrC6)-alkil]2, (C,-C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, (C,-C6)-alkoksi, HO-(Cr C6)-alkil, (CrC6)-alkil-0-(C,-C6)-alkiI, fenil, benzil, SO-(CrC6)-alkil, pri tome u alkilnim, alkoksilnim, alkenilnim i alkinilnim ostacima jedan, više ili svi atomi vodonika mogu da budu zamenjeni atomom fluora; B (Co-C^-alkandiil, pri tome jedan C-atom ili više C-atoma od ostataka alkandiila nezavisno jedan od drugog mogu da budu zamenjeni sa -O-, -(CO)-, -CH=CH-, -C=C-, -S-, -CH(OH)-, -CHF-, -CF2-, -(S=0>, -(S02)-, -N((CrC6)-alkil)-, -N((CrC6)-alkil-fenil)- ili -NH-; n neki broj od 0 do 4; Cycl neki 3 do 7 člani zasićeni, delimično zasićeni ili nezasićeni prsten, pri tome 1 C-atom može da bude zamenjen sa O, N ili S; R7, R8, R9 vodonik, F, Cl, Br, J, OH, CF3, N02, CN, COOH, COO(C,-C6)alkil, CO(CrC4)-aIkil, CONH2, CONH(C,-C6)-alkil, CON[(CrC6)-alkil]2, (Cr C6)-alkil, (C2-C6)-alkenil, (C2-C6)-alkinil, (CrC6)-alkoksi, (C,-C6)-alkil-OH, (C1-C6)-alkil-0-(Ci-C6)-alkil, pri tome u alkilnim ostacima mogu jedan, više ili svi atomi vodonika da budu zamenjeni sa atomom fluora; ili R8 i R9 zajedno sa C-atomima, koji njih nose, označavaju jedan 5 do 7 člani zasićeni, delimično ili potpuno nezasićeni prsten Cyc2, pri čemu 1 C-atom ili 2 C-atoma tog prstena mogu da budu zamenjeni i sa N, O ili S i Cyc2 u datom slučaju može da bude supstitisan sa (d-C6)-alkil, (C2-C5)-alkenil, (C2-C5)-alkinil, pri čemu uvek jedna CH2-grupa može da bude zamenjena sa O, ili da bude supstituisana sa H, F, Cl, OH, CF3, N02, CN, COO(CrC4)-alkil, CONH2, CONH(C,-C4)-alkil, OCF3.

3. Jedinjenja formule I definisana prema patentnom zahtevu 1 ili 2, naznačena time, što su u njima ostaci šećera beta (P)-spojeni ili takva u kojima je B-supstituent na fenilnom prstenu smešten u orto-položaj u odnosu na A-supstituente.

4. Jedinjenja formule I definisana prema patentnim zahtevima 1 do 3, naznačena time, što u njima označavaju Rl, R2 OH, F ili H ili Rl i R2 = F, pri čemu jedan od ostataka Rl ili R2 mora da bude F i izuzete su tri kombinacije Rl = F, R2 = OH i Rl = OH, R2 = F i Rl,R2 = OH; R3 OH; A O; R4, R5, R6 vodonik, OH, (CrC6)-alkil, (CrC4)-alkoksi, HO-(CrC4)-alkil, (C,- C4)-alkil-0-(C,-C6)-alkil, F, Cl, Br, J, CF3, OCF3, OCH2CF3(CrC4)-alkil-CF2-, fenil, benzil, (C2-C4)-alkenil, (C2-C4)-alkinil, COO(CrC4)-alkil; B (C0-C15)-alkandiil, pri tome jedna CH2-grupa može da bude zamenjena i sa -(C=0)-, -CH(OH)-, -CO-NH-, -CO-N(C,-C6)-alkil-, -CHF-, -CF2-, -O-, -NH-; n jedan broj 2 ili 3; Cycl neki nezasićeni 5- ili 6- člani prsten, pri tome 1 C-atom može da bude zamenjen sa O, N ili S; R7, R8, R9 vodonik, (CrC6)-alkil, (CrC8)-alkoksi, OCF3, OCH2CF3, OH, (Cr C4)-alkil-OH, (CrC4)-alkil-0-(C,-C4)-alkil, F, Cl, Br ili R8 i R9 zajedno -CH=CH-0-, -CH2-CH2-0-, -CH=CH-S-, -CH=CH-CH=CH-, - O- (CH2)p-0-, sa p = 1 ili 2 i R7 metil, etil, OMe, F, Cl, Br ili vodonik.

5. Jedinjenja formule I definisana prema patentnim zahtevima 1 do 4, naznačena time, što u njima označavaju Rl F i R2 H ili Rl H i R2 F ili Rl F i R2 F; R3 OH; A O; R4, R5, R6 vodonik, OH, (CrC4)-alkoksi, CF3, (CrC4)-alkil, F, Cl, Br, J, B -CHr, -C2H4- -C3H6, -CH(OH)-, -(C=0)-, -CO-NH-CH2ili -CO-CH2- CH2-, -O-, -NH-; n jedan broj 2 ili 3 Cycl nezasićeni 6- člani prsten, pri čemu 1 C-atom može da bude zamenjen sa N ili nezasićeni 5- člani prsten, pri tome može 1 C-atom da bude zamenjen sa S; R7, R8, R9 vodonik, OH, (CrC4)-alkil, (CrC7)-alkoksi, OCF3, halogen ili R8 i R9 zajedno -CH=CH-0-, -CH2-CH2-0-, -CH=CH-CH=CH-, -0-(CH2)p-0-, sa p = 1 ili 2 i R7 metil, etil, metoksi, F, Cl, Br ili vodonik.

6. Jedinjenja formule Ia prema patentnim zahtevima 1 do 5, naznačena time što u njima označavaju Rl F i R2 H ili Rl H i R2 F ili Rl F i R2 F; R3 OH; A 0; R4 vodonik, (CrC4)-alkil, (CrC4)-alkoksi ili OH ; R5 vodonik, F, metoksi ili etoksi; R6 vodonik ili OH; B -CH2-, -CO-NH-CH2-, -O- ili -CO-CH2-CH2-; Cycl fenil ili tiofen; R7, R8, R9 vodonik, OH, Cl, OCF3, (C,-C4)-alkil ili (C,-C4) -alkoksi; ili R8 i R9 zajedno -CH=CH-0-, -CH=CH-CH=CH- ili -CH2-CH2-0- i R7 vodonik.

7. Jedinjenja formule lb definisana prema patentnim zahtevima 1 do 6, naznačena time, što u njima označavaju Rl F i R2 H ili Rl H i R2 F ili Rl F i R2 F; R3 OH; A O; R4 vodonik, metil, metoksi ili OH ; R5 vodonik, F ili metoksi; R6 vodonik ili OH; B -CH2-, -CO-NH-CH2-; -O- ili -CO-CH2-CH2-; Cycl fenil; R7 vodonik; R8 vodonik, OH, etil, Cl, OCF3ili metoksi; R9 vodonik; ili R8iR9 zajedno-CH=CH-0- ili-CH2-CH2-0-.

8. Lek, naznačen time, što sadrži jedno ili više jedinjenja definisanih prema jednom ili više patentnih zahteva 1 do 7.

9. Lek, naznačen time, što sadrži jedno ili više jedinjenja definisanih prema jednom ili više patentnih zahteva 1 do 7 i jednu ili više aktivnih supstanci za sniženje sadržaja šećera u krvi.

10. Primena jedinjenja definisanih prema jednom ili više patentnih zahteva 1 do 7 za proizvodnju jednog leka za lečenje tip 1 i tip 2 dijabetesa.

11. Primena jedinjenja definisanih prema jednom ili više patentnih zahteva 1 do 7 za proizvodnju jednog leka za smanjenje nivoa šećera u krvi.

12. Primena jedinjenja definisanih prema jednom ili više patentnih zahteva 1 do 7 u kombinaciji sa najmanje još jednom aktivnom supstancom koja smanjuje šećer u krvi za proizvodnju jednog leka za lečenje tip 1 i tip2 dijabetesa.

13. Primena jedinjenja definisanih prema jednom ili više patentnih zahteva 1 do 7 u kombinaciji sa najmanje još jednom aktivnom supstancom koja smanjuje šećer u krvi za proizvodnju jednog leka za smanjenje nivoa šećera u krvi.

14.Postupak za proizvodnju jednog leka koji sadrži jedno ili više jedinjenja definisanih prema jednom ili više patentnih zahteva 1 do 7, naznačen time, što se meša aktivna supstanca sa nekim farmaceutski prihvatljivim nosačem i ova smeša oblikuje u formu koja je podesna za doziranje leka.