RS55143B1 - Derivati supstituisane 1,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il) sirćetne kiseline korisni u tretmanu autoimunih i upalnih poremećaja - Google Patents

Description

[OOOljOvde su opisani određeni supstituisani 1,2,3,4-tetrahiđrođklopenta [b] indol-3-il) derivati sirćetne kiseline Formule(Ia)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, koji pokazuju korisna farmakološka svojstva, na primer, kao agonisti SIPI receptora. takođe su opisani farmaceutski sastavi koji sadrže ovde opisana jedinjenja. kao i postupke upotrebe jedinjenja i ovde opisanih sastava u lečenju poremećaja povezanih sa SIPI, kao što su na primer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanja transplanata, multipie skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I, akne, mikrobne infekcije ili bolesti i virusne infekcije ili bolesti.

POZADINA

[0002]Ovde su opisana jedinjenja koja su agonisti SIPI receptora i imaju barem imunosupresivnu, piotivupalnu i/ili hemostatsku aktivnosti, npr. putem modulacije saobraćanja leukocita, izolovanja limfocita u srednjim limfnom tkivu, i/ili povećavanje vaskularnog integriteta.

[0003]Ovaj pronalazak je delimično usmeren na rešavanje neostvarenih potreba za imunosupresivnim agensima, koji mogu da se daju oralno i imaju terapeutsku delotvornost barem za autoimune bolesti i poremećaja, upalna oboljenja i poremećaje (npr., akutna i hronična upalna stanja), odbacivanje transplanta, rak, i/ili stanja koja imaju značajne defekte vaskulamog integriteta ili su povezana sa angiogenezom koja može biti patološka (npr., kao što se može desiti kod upala, razvoja tumora i ateroskleroze), sa manje nuspojava, kao što su oštećenja imunih odgovora na sistemske infekcije.

[0004]Receptori 1-5 sfingozin-l-fosfata (S1P) Čine porodicu G proteinom-vezanih receptora sa 7-transmembranskim domenom. Ovi receptori, koji se nazivaju SIPI do S1P5 (prethodno nazvani receptori -1 -5, -3, -6 i -8 endotelnog gena diferencijacije (EDG), respektivno; Chun et al, Pharmacological Reviews, 54:265-269, 2002) aktiviraju se preko vezivanja sfingozin-l-fosfata, koji je proizveden pomoću sfingozin kinazom katalizovane fosforilacije sfingozina. SIPI, S1P4 i S1P5 receptori aktiviraju Gi, ali ne i Gq, dok S1P2 i S1P3 receptori aktiviraju i Gi i Gq. S1P3 receptor, ali ne i SIPI receptor, reaguje na agonistsa povećanjem unutarćelijskog kalcijuma.

[0005]Za agoniste S1P receptora koji imaju agonističku aktivnost na SiPl receptoru pokazalo se da brzo i reverzibilno indukuju limfopeniju (takođe poznatu kao periferno snižavanje limfocita (PLL); Hale et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 14:3351-3355, 2004). To je dovelo do klinički korisnih imunosupresija zahvaljujući izolovanju T- i B-ćelija u sekundarnom limfnom tkivu (limfni čvorovi i Pejerove zakrpe) i na taj način ih razdvaja od mesta upale i organskih graftova (Rosen et al„ Immunol. Rev., 195:160-177. 2003; Schwab et al., Nature Jmmunot., 8:1295-1301, 2007). Za to izolovanje limfocita, npr. u limfnim čvorovima, smatra se da je posljedica istovremenog agonistom uzrokovanog funkcionalnog antagonizma SIPI receptora na T-ćelijama (pri čemu se smanjuje mogućnost da S1P mobiliše T-čelije koje izlaze iz limfnih čvorova) i upornog agonizma SIPI receptora na endotelu limfnih čvorova (tako da se pojačava funkcija barijere suprotnih transmtgracija limfocita) (Matloubian et al., Nature. 427:355-360,2004; Baumruker et al., Expert Opin. Investig. Drugs, 16:283-289, 2007). Objavljeno je da je agonizam SIPI receptora sam dovoljan da se postigne izolovanje limfocita (Sanna et al., J Biol Chem., 279:13839-13848, 2004) i da se to događa bez oštećenja imunog odgovora na sistemske infekcije (Brinkmann et al., Transplantation, 72:764-769, 2001; Brinkmann et al.. Transplant Proc, 33:530-531, 2001).

[0006]Da agonizam endotelnih SIPI receptora ima veću ulogu u promovisanju vaskulamog integriteta podržava rad koji implicira da SIPI receptor u kapilarnom integritetu u koži i plućima miša (Sanna et al, Nar Chem Biol., 2:434-441, 2006). Vaskularni integritet može biti kompromitovan upalnim procesima, na primer, usled sepse, velike povrede i operacije, tako da dovede do akutne plućne povrede ili sindroma respiratornog distresa (Johan Groeneveld. Vascul. Pharmacol., 39:247-256, 2003).

[0007]Primerni agonist S1P receptor koji imaju agonističku aktivnost na SIPI receptoru je FTY720 (fingolimod), imunosupresivni agens trenutno u kliničkim ispitivanjima (Martini et al., Expert Opin. Investig. Drugs, 16:505-518, 2007). FTY720 deluje kao prolek koji se fosforilizujein vivo;fosforiliziran derivat je agonist za S1P l, S1P3, S1P4 i S1P5 receptore (ali ne i S1P2 receptora) (Chiba, Pharmacologv & Therapeutics, 108:308-319, 2005). Za FTY720 se pokazalo da brzo i reverzibilno indukuje limfopeniju (takođe poznatu kao periferno snižavanje limfocita (PLL) Hale et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 14:3351-3355, 2004). To je dovelo do klinički korisnih imunosupresija zahvaljujući izolovanju T- i B-ćelija u sekundarnom limfnom tkivu (limfni čvorovi i Pejerove zakrpe) i na taj način ih razdvaja od mesta upale i organskih graftova (Rosen et al., Immunol. Rev., 195:160-177, 2003; Schvvab et al., Nature Immunol., 8:1295-1301, 2007).

[0008]U kliničkim ispitivanjima FTY720 je izazvao nepovoljan događaj (tj. prolaznu asimptomatsku bradikardiju) zbog agonizma S1P3 receptora (Budde et al., J. Am. Soc. Nephrol.. 13:1073-1083,2002; Sanna cl al, J. BioL Chem., 279:13839-13848, 2004; Ogawa et al., BBRC, 361:621-628, 2007).

[0009]FTY720 je da imaju terapeutsku efikasnost barem kod bolesti poremećaja kao što su: autoimuni miokardiiis u modelu pacova i mišji model za akutni virusnog miokarditisa (Kivabavashi et al., J. Cardiovasc. Pharmacol.. 35:410-416, 2000; Mivamoto et al., J. Am. Coll. Cardiol., 37:1713-1718, 2001): mišji modeli na za upalnu bolest creva uključujući kolitisa (Mizushima et al., Inflamm. Bovvel Dis., 10:182-192, 2004; Deguchi et al., Oncologv Reports, 16:699-703, 2006; Fujii et al., Am. J. Phvsiol. Gastrointest. Liver Phvsiol., 291:G267-G274, 2006; Daniei et al., J. Immunol., 178:2458-2468, 2007); model pacova za progresivni mesangioproliferativni glomerulonefritis (Martini et al., Am. J. Phvsiol. Renal Phvsiol., 292:F1761-F1770, 2007); mišji model za astmu, pretpostavlja se prvenstveno kroz SIPI receptor na osnovu rada koji koristi SIPI receptor agonist SEVV2871 (Idzko et al. j. Clin. Invest., 116:2935-2944, 2006); mišji model upale disajnih puteva i indukciju bronhijalne hiperreaktivnosu" (Sawicka et al., J. Immunol., 171;6206-6214, 2003); mišji model za atopični dermatitis (Kohno et al., Bioi. Pharm. Buli.. 27:1392-1396, 2004); mišji model za ishemijsko-reperl'uzijske povrede (Kaudel et al., Tiansplant. Proc, 39:499-502, 2007); mišji model za sistemski eritemski lupus (SLE) (Okazaki et al, J. Rheumatol.. 29:707-716. 2002; Herzinger et al, Am. J. Clin. Dermatot., 8:329-336, 2007); model pacova za reumatoidni artritis (Matsuura et al., Int. J. Immunopharmacol., 22:323-331,2000: Matsuura et al., inflamm. Res„ 49:404-110,2000); model pacova :;a autoimuni uveitis (Kurose et al., Exp. Eve Res., 70:7-15, 2000); mišji modeli za dijabeteslipa I (Fu et al, Transplantation, 73:1425-1430,2002; Maki et al., Transplantation, 74:1684-1686. 2002; Yang et al., Clinical Immunologv, 107:30-35, 2003; Maki et al, Transplantation, 79:1051-1055. 2005); mišji modeli za aterosklerozu (Noferetal., Circulation, 1 15:501-508, 2007; Keul et al.. Artertosđer. Thromb. Vasc. Biol., 27:607-613, 2007); model pacova za upalne reakcije mozga nakon traumatske povrede mozga (I'BI) (Zhang et al., J. Cell. Mol. Med., 1 1:307-314, 2007); i mišji modeli za graft bolest koronarne arterije i graft-proliv-domaćina bolesti (GVHD) (Hvvang et al., Circulation, 100:1322-1329, 1999; Tavloret al., Blood, 110:3480-3488, 2007). Inviirorezultati upućuju kako FTY720 mogu imati terapeutsku delotvomost za upalne bolesti povezane sa p-amiloidom, uključujući Alchajmerovu bolest (Kaneider et al., FASEB J., 18:309-311, 2004). Za KRF-203, agonist SIP receptora koji ima aktivnost agonista na SIPI receptoru, objavljeno je da ima terapeutsku efikasnost kod modela pacova za autoimuni miokarditis (Ogawa et al., BBRC, 361:621-628, 2007). Pomoću S IPI receptora agonista SEW287l, prikazano je da agonizam endotelnih SIPI receptora sprečava proupalne monocite/interakciju endotela kod tipa I dijabetičnpg vaskularni endotela (VVhetzel et al., Circ. Res., 99:731-739, 2006) i štiti vaskulaturu protiv TNFa-posređovanih monocita/interakcija endotela (Bolick et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 25:976-981, 2005).

[0010]Dalje, za FTY720 je objavljeno da ima terapeutsku efikasnost kod bolesti i poremećaja kao što su eksperimentalni autoimuni eneefalomijelitis (EAE) kod pacova i miševa, model za ljudsku multiple sklerozu (Brinkmann et al., J. Biol. Chem., 277:21453-21457, 2002; Fuj ino et al., J. Pharmacol. Exp. Ther.. 305:70-77, 2003; VVebb et al., J. Neuroimmunol., 153:108-121, 2004; Rausch et al., J. Vlagn. Reson. Imaging, 20:16-24, 2004; Kataoka et al., Cellular & Molecular Immunologv, 2:439-448, 20O5; Brinkmann et al., Pharmacologv & Therapeutics, 115:84-105, 2007; Baumruker et al., Expert Opin. Investig. Drugs, 16:283-289, 2007; Balatoni et al., Brain Research Bulletin, 74:307-316, 2007). Dalje, za FTY720 je otkriveno da ima terapeutsku efikasnost za multiple sklerozu u kliničkim ispitivanja. U Fazi 11 kliničkih ispitivanja za relapsirajuće-remitirajuču multiple sklerozu, za FTY720 je otkriveno da smanjuje broj lezija otkrivenih magnetnom rezonancom (MRI) i kliničku aktivnost bolesti kod pacijenata sa multiple sklerozom (Kappos et al., ?. Engi. J. Med., 355:1124-1140, 2006; Martini et al., Expert Opin. Investig. Drugs, 16:505-518, 2007; Zhang et al., Mini-Revievvs in Medicinal Chemistrv, 7:845-850, 2007; Brinkmann, Pharmacologv & Therapeutics, 113:84-105, 2007). FTY720 je trenutno u Fazi HI ispitivanja za relapsirajuće-remitirajuču multiple sklerozu (Brinkmann, Pharmacologv & Therapeutics, 115:84-105, 2007; Baumruker et al., Expert. Opin. Investig. Drugs, 16:283-289. 2007; Dev et al., Pharmacologv and Therapeutics, 117:77-93, 2008).

[0011]U posljednje vreme, za FTY720 je objavljena anti-virusna aktivnost. Specifični podaci su prikazani kod mišjeg modela virusa limfocitnog zapaljena opni(LCMV), pri čemu su miševi zaraženi sa Armstrongom ili klon ! 3 linijom LCMV (Premenko-Lanier et al., Nature, 454, 8942008).

[0012]Za FTY720 je objavljeno da će narušiti migraciju dendritičkih ćelija zaraženih saFrancisetta tularensisu limfnim čvorovima medijastinuma, čime se smanjuje bakterijska kolonizacija tih čvorova.Francisella tularensis jepovezana sa tularemijom, ulceroglandularnim infekcijama, infekcije disajnog sistema i tifusnih bolesti (E. Bar-Haim etal, PLoS Pathogens, 4(11): e!0002H. doi:10.1371.'journal.ppat.l0002!.l. 2008).

[0013]Takode je nedavno objavljeno da je kratkoročno visoka doza FTY720 brzo smanjila očne infiltrirate kod eksperimentalnog autoimunog uveoretinitisa. Kada se daje u ranim fazama očne upale, FTY720 brzo sprečava oštećenja mrežnjače. Objavljeno je ne samo da sprečava infiltraciju ciljanih organa, nego i smanjuje postojeće infiltracije (Ravenev et al., Arch. Ophthalmol. 126(10). 1390. 2008).

[0014]Objavljeno da je lečenje sa FTY720 olakšava ovariektomijom izazvanu osteoporozu kod miševa smanjivanjem broja zrelih osteokJasta vezanih na površini kosti. Podaci pružaju dokaze da SIP kontrolise migraciono ponašanje osteoklastnih prethodnika, dinamičkim regulisanjem koštane mineralne bomeostaze (Ishii et al., Nature, advance online publication, 8 Februarv 2009, doi: 10.1038/nature07713).

[0015JAgonizam SIPI receptora je impliciran kod povećanja preživljavanja oligodendrocitnih progenkor ćelija. Opstanak oligodendrocita nezrelih ćelija je neophodna komponenta procesa remijelinacije. Remijelinacijom lezija multiple skleroze smatra se promovisanje oporavka od kliničkih relapsa.fMiron et al., Ann. Neurol., 63:61-71, 2008; Coelho et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 323:626-635, 2007: Dev et al., Pharmacologv and Therapeutics, 117:77-93, 2008). takođe je pokazano da SIPI receptor ima bitnu ulogu u faktorom rasta izvedenimizkrvnih pločica (PDGF) indukovane mitogeneze oligodendrocitnih progenkor ćelija (Jung et ai., Glia. 55:1656-1667, 2007).

[0016]Za agonizam SIPI receptora takođe je objavljeno da posreduje migraciju nervnih matičnih ćelija ka povređenim područjima centralnog nervnog sistema (CNS), uključujući i u modelu povrede kičmene moždine pacova (Kimura et al., Stem Cells, 25:115-124, 2007 i.

[0017]Agonizam SIPI receptora je impliciran kod inhibicije proliferacije keratinocita (Saueret al.. J. Biol. Chem., 279:38471-38479, 2004) u skladu sa izveštajima da SIP inhibira proliferaciju keratinocita ((Kim et al., Cell Signal, 16:89-95, 2004). Hiperproliferacija keratinocita na ulazu u folikulu dlake, koji se tada može začepiti, i povezana upala su značajni patogenetski faktori kod akni (Koreck et al.. Dermatoiogv, 206:96-105. 201)3: VVebster, Cutis, 76:4-7, 2005).

[0018]Za FTY720 je objavljeno da ima terapeutsku efikasnost u inhibiciji patološke angiogeneze. kao što se se može dogoditi u razvoju tumora. Za tnhibiđju angiogeneze pomoću FTV720 smatra da uključuje agonizam SIPI receptora (Oo eial., J. Biol. Chem., 282;9082-9089, 2007; Schmid et ai., I. Cell Biochem., 101:259-270, 2007). Za FTY720 je objavljeno da ima terapijsku efikasnost za inhibiciju primarnog i rasta metastatskih tumora u mišjem modelu melanoma (LaMontagne et al., Cancer Res., 66:221-231, 2006). Za FTY720 je objavljeno da ima terapijsku efikasnost u mišjem modelu za metastatski hepatocelularni karcinom (Lee et al., Clin. Cancer Res., 11:84588466, 2005),00000000000

[0019]Ranije je prijavljeno da oralno davanje FTY720 miševima snažno blokira VEGF-indukovanu vaskularnu propusnost, važan proces povezan sa angiogenezom, upalom i patološkim stanjima, kao što su sepsa, hipoksija i rast tvrdog tumora ((T Sanchez et al, J. Biol. Chem., 278(47). 47281-47290, 2003).

[0020]Ciklosporin A i FK506 (inhibitore kaicineurina) su lekovi koji se koriste za prevenciju odbacivanja transplantovanih organa. Iako su delotvorni u odlaganju ili suzbijanju odbacivanja transplanata. za klasične imunosupresive poput ciklosporina A i FK506 se zna da uzrokuju i nekoliko nuspojava, uključujući nefrotoksićnost, neurotoksičnost, toksičnost B-ćelija i gastrointestinalne nelagode. Postoji neostvarena potreba pri transplantaciji organa za imunosupresivima bez ovih nuspojava, koji je delotvorni kao monoterapija ili u kombinaciji sa klasičnim imunosupresivima u inhibiciji migracije od, npr., aloantigen-reakttvnih T-će!ija ka graftovanom tkivu, čime se produžava preživljavanja grafta.

[0021]Za FTY720 se pokazalo da ima terapeutsku efikasnost kod odbacivanja transplanata i kao monoterapija, i u sinergetskoj kombinaciji sa klasičnim imunosupresivima, uključujući ciklosporin A, FK506 i RAD (mTOR inhibitor). Pokazalo se da, za razliku od klasičnih imunosupresiva ciklosporina A, FK506 i RAD, FTV720 je delotvoran kod produženja preživljavanja grafta bez izazivanja opšte imunosupresije. i ta razlika u delovanju leka smatra se relevantnom za sinergiju koja je vidljiva za kombinaciju (Brinkmann et al., Transplam Proc, 33:530-531. 2001; Brinkmann etak, Transplantation, 72:764-769, 2001).

[0022]Za agonizam SIPI receptora je objavljeno da ima terapeutski efekat za produženje preživljavanja alografta u modelu alografta kože miševa i pacova (Lima et al., Transplam Proc, 36:1015-1017. 2004; Van et al.. Bioorg. & Med. Chem. Lett., 16:3679-3683, 2006). Za FTY720 je objavljeno da ima terapijski efekat za produženje preživljavanja alografta u modelu srčanog alografta pacova (Suzuki ef al., Transpl. Immunol., 4:252-255, 1996). Za FTY720 je objavljeno da deluje sinergetski sa ciklosporinom A kod produžavanje preživljavanje alografta kože kod pacova (Yanagawa et al.,i.Immunol., 160:5493-5499, 1998), da deluje sinergetski s ciklosporinom A i FK506 kod produžavanja preživljavanja srčanog alografta kod pacova, i da deluje sinergetski sa ciklosporinom A kod produžavanja prežuvljavanja alografta bubrega kod psa i preživljavanje alografta bubrega kod majmuna (Chiba et al., Cell Mol. Biol., 3:11-19, 2006). Za KRP-203, agonist SIP receptora, je objavljeno da imaju cerapeutski delotvornost za produženje preživljavanjaalografta u modelu alografta kože pacova, kako u monoterapiji, tako i u sinergetskoj kombinaciji sa ciklosporinom A kod modela srčanog alografta pacova (Shimizu et al., Circulation, 111:222-229, 2005). Za KRP-203 je takođe objavljeno da imaju terapeutski efekat u kombinaciji sa mikofenolat mofetilom (MMF, proleka čiji je aktivni metabolit mikofenolna kiselina, inhibitor biosinteze purina) kod produženja preživljavanja alografta u modelu bubrežnog alografta pacova, kao i u modelu srčanog alografta pacova (Suzuki et al., J. Heart Lung Transplam, 25:302-209, 2006; Fujishiro et al., J. Heart Lung Transplam, 25:825-833, 2006). Objavljeno je da agonist SIPI receptoraa, Auk954, u kombinaciji sa ispod-terapijskom dozom RAD001 (Certican/Everolimtis, inhibitor mTOR-a) može produžiti preživljavanje srčanog alografta pacova (Pan et ai., Chemistrv & Biology, 13:1227-1234, 200G). U modelu alografta malog creva pacova, za FTV720 je objavljeno da deluje sinergetski sa ciklosporinom A kod produžavanja preživljavanje alografta malog creva (Sakagavva et al., Transpl. Immunol., 13:161-168, 2004). Za FTY720 je objavljeno da ima terapeutski efekat kod mišjeg modelu ostrvaca alografta (Fu et al.. Transplantation, 73:1425-1430, 2002; Liu et al.. Microsurgerv, 27:300-304; 2007). kao i u ispitivanju koja je koristila ljudske ćelije ostrvca kako bi se dokazalo da nema štetne učinke na funkcionisanje ljudskih ostrvaca (Truong et al., American Journal of Transplantation, 7:2031-2038, 2007).

[0023]Za FTY720 je objavljeno da smanjuje nociceptivno ponašanje u modelu viška nerava za neuropatski bol koji ne zavisi od sinteze prostaglandina (O. Costu et al, Journal of Cellular and Molecular Medicine 12(3), 995-1004, 2008).

[0024]Za FTY720 je objavljeno da narušava inicijaciju mišje kontaktne preosetljivosti (CHS). Adoptivni prenos imunizovanih ćelija limfnog čvora miševa koji su tretirani sa FTY720 tokom faze senzibilizacije je praktično nemoćan da indukuje CHS odgovore kod primaoca (D. Nakashima et al., J. Investigative Dermatoiogv (128(12), 2833-2841,2008).

[0025]Objavljeno je daje profilaktička oralna primena FTY720 (1 mg/kg, tri puta nedeljno) potpuno sprečila razvoj eksperimentalne alergijske miastenije gravis (EAMG) kod C57BL/6 miševa (T. Kohono et at, Biological & Pharmaceutical Bulletin, 28(4), 736-739,2005).

[0026]US 5,830,911 (American Home Products; 03 novembar 1998) opisuje određena jedinjenja naredne formule koja su navodno korisna za tretman artritičnih poremećaja, kolorektalnog kancera, i Alchajmerove bolesti. LI formuli, -X-je -O- ili -C-, i svaki od R<3>, Rfi, R", i R8 su izabrani iz raspona alternativa, uz uslov da, svakom slučaju, barem jedan odR5, R'\ R~, i R<3>je cijano (tj., -CN).

[0027]WO 2006/034337 A2 (VViet; 30 mart 2006) opisuje određena jedinjenja naredne formule koja su navodno korisna za tretman HCV (hepatitis C virus) infekcija. U formuli, promenjiva ,,m-<<>je definisana kao 0 ili 1; Y je definisano da obuhvati -CH2-; i svaki od RitR2, R3, R4, Rs, Rt, Rr, Ra, R». Rio, i Ruje definisan da obuhvati -H. R« je definisan da obuhvati „arilalkoksi od 7 do 12 atoma ugljenika", i ,.aril" ie definisan da obuhvati opciono supstituisan fenil; međutim, opcioni supstituent ne može biti cikloalkil.

[0028]EP 0 468 785 A2 (Merck Frosst Canada Inc.; 29 januar 1992) opisuje određena jedinjenja naredne formule koja navodno inhibiraju biosintezu leukotriena, i navodno su korisni kao anti-astmatici, anti-alergeni. anti-upalni, i citoprotektivni agensi, i u tretmanu dijareje, hipertenzije, angine, agregacije trombocita, cerebralnog spazma. prevremenog porođaja, spontanog pobačaja, dismenoreje i migrene.

[0029]WO 91/06537 A2 (American Home Products Corp.; 16 maj 1991) opisuje opseg jedinjenja veoma opšte formule A(CH2)nO-B, koja navodno ima aktivnosti inhibilora lipoksigenaze, inhibitora fosfolipaze Aj(PLA:), i antagonista leukotriena, i koja su navodno korisna u tretmanu upalnih stanja, reumatoidni artritis, ulcerativni kolitis, psorijaza, i druge reakcije neposredne preosetljivosti; ieukotrienima posredovane nazo-bronhijalna stanja sa opstruktivnim protokom vazduha, kao što su alergijski rinitis i alergijske bronhijalne astme; i želučani citoprotektivni agensi. Među mnogo alternativa za grupu -B u opštoj formuli A(CH >)nO-B je grupa naredne formule, gde Y je -ClI,-ili -O-.

[0030]GB 1 436 893 (Schering Aktiengesellschaft; 26 maj 1976) opisuje određena jedinjenja naredne formule koja navodno imaju svojstva sniženja šećera u krvi, antifungalna svojstva, inhbiciju plodnosti i protivupalna svojstva.

[0031]Sturino et al., J. Med. Chem., 2007, Vol. 50, No. 4, pp. 794-806, opisuje ispitivanja određenog prostaglandin D2 receptor antagonist koji se naziva MK-0524 (pogledati Šemu 2 na strani 796 gore navedenog), kao i strukturno povezana jedinjenja. Šema l (na strani 795 gore navedenog) opisuje sintezu analoga koji se naziva Jedinjenje 7. „Gornji levi" -S(=0)2Me supstituent je prisutan u svim međuproizvodima. Šema 2 (na strani 796 gore navedenog) opisuje sintezu MK-0524. „Gornji levi" -F supstituent je prisutan u svim međuproizvodima.. Slika 2 (na strani 797 gore navedenog) pokazuje, kao Jedinjenje 17, međuproizvod prikazan u Jedinjenju 6 u Šemi 1. Slika 3 (na strani 798 gore navedenog) prikazuje radioobeležene analoge Jedinjenja 6, 7, 11, 12, i 13 prikazane u Šemama 1 i 2.

[0032]WO 2009/078983 Al (Arena Pharmaceuticals, Inc.; 25 jun 2009) opisuje određena jedinjenja naredne formule koja su korisna u tretmanu poremećaja povezanih sa SIPI, kao Što su na primer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanata, multiple skleroza, sistemski entematozni lupus, ulecrozni kolitis, dijabetes tipa I, akne, mikrobiološke infekcija i bolesti i virusne infekcije ili bolesti.

SAŽETAKPRONALASKA

[00331Prvi as<p>ekt ovog pronalaska je jedinjenje izabrano od jedinjenja Formule (Ia) i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata:

gde:

m je 1; nje 1 ili 2;

Y je N ili CR';

Z je N ili CRJ;

R<3>je C3-C7cikloalkil; i

R<1>, R<J>, i R4sti svi nezavisno izabrani iz grupe koju čine H, G-G alkoksi, Ci-Q, alkil, G-G; alkilamino, C - Cg alkilsulfonil, G-Cs alkiltio, karboksamid, cijano, Cj-C: cikloalkoksi, C3-C- cikloalkil, G-Gi haloalkoksi, G-G; haloalkil, halogen, heteroaril, i heterociklil, gde su navedeni Ci-Cr alkil i G-G; alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva stipstituenta izabrana iz grupe koju čine G-C- cikloalkil i halogen.

[0034]U jednom otelotvorenju, n je 1.

[0035]U jednom otelotvorenju, Y je CR<1.>

[0036]U jednom otelotvorenju, R<1>je H ili G-Cs haloalkil.

[0037]U jednom otelotvorenju, R<1>je H ili trifluorometil.

[0038]U jednom otelotvorenju,R1 jeizabran iz grupe koju čine H, cijano G-Ce haloalkoksi. i G-G; haloalkil.

[0039]U jednom otelotvorenju, R2 je izabran iz grupe koju čine II, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil.

[0040]U jednom otelotvorenju, R<3>je izabran iz grupe koju čine ciklobutll, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil.

[0041]U jednom otelotvorenju, R3 je ciklopentil.

[0042]U jednom otelotvorenju, Z je CR<4.>

[00431U jednom otelotvorenju, R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-Ce haloalkoksi, i G-G, haloalkil.

[0044]U jednom otelotvorenju, R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluoormetoksi, i trifluorometil.

[0045]U jednom otelotvorenju, R<:>, R-, i R4 su svi nezavisno izabrani iz grupe koju čine H, G-G, alkoksi, G-G, alkil, G-Cealkilamino, G-G alkilsulfonil, G-Ce alkiltio, karboksamid, cijano, Cj-C- cikloalkoksi, CVC-đkioalkil, G-Ce haloalkoksi, G-Cj haloalkil, halogen, heteroaril, i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i C - C(, alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim C:t-G cikloalkil group.

[0046]U jednom otelotvorenju, R-1 je izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil.

[0047]U jednom otelotvorenju, R3 jeciklopentil.

[00481 U jednom otelotvorenju, R<4;e>izabran iz grupe koju čine H, cijano, i G-G haloalkil.

[0049] U jednom otelotvorenju, R<4>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, i trifluorometil.

[0050] U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od jedinjenja Formule (Ik) i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, sol vata i hidrata:

gde:

Y je N ili CR1;

Z je N ili CR4;

R1 je H ili Ci-Cs haloalkil;

R<2>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-Cs haloalkoksi, i G-Ce, haloalkil;

R^'GHG cikloalkil; i

R<4>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-C* haloalkoksi, i G-G, haloalkil.

[0051] U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od jedinjenja Formule (Ik) i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, sol vata i hidrata:

gde:

YjeN iliCR1;

Z je N ili CR4;

R' je H ili trifluorometil;

R"je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil;

RJ je izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil; i R<4>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil.

[0052] U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od jedinjenja Formule (Ik) i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata:

gde: Y je N ili CR1;

Z je N ili CR4;

R1 je H ili trilfuorometil;

R<2>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil;

R<3>je izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil; i R<J>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, i trifluorometil.

[0053]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od jedinjenja Formule (Im) i njegovih farmaceutski prihvadjivih soli, solvata i hidrata:

gde:

R<J>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-G-, haloalkoksi, i G-G-, haloalkil; i

R<3>je C3-0 cikloalkil.

[0054]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od jedinjenja Formule (Im) i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata:

gde:

R- je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil; i

R3 je izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil.

[0055]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednih jedinjenja i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 2-(7-(4-cikloheksil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopentalb|indol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 2);

(R)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l ,2,3,4-tetrahidrociklopentafb]indol-3-il)sirćelna kiselina (Jedinjenje 3);

(S)-2-(7-(4-ciklopendl-3-(trifluoromeul)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-iI)sii'ćetna kiselina (Jedinjenje 9);

2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indoi-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 12);

2-(7-(3-cijano-4-cikloheksilbenziloksi)-<l>,2,3,4-tetrahidrociklo<p>enta[b|indol-3il|sirćetna kiselina (Jedinjenje 17);

2-(7-((6<iklopentil-5H trifluorometil^ kiselina (Jedinjenje 19);

2-(7-(4-ciklobuti]-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[bIindol-3-il)sirćetna kiselina (Jedi<n>jenje 21); i

2-(7-{4-cikIopropil-3-(trifluorometil)benziloksi)-1,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b iindol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 22).

[0056]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenje i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 2-(7-{4<'ikloheksil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,23.4-tetrahidrociklopentafb]indok3--il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 2).

[0057]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: (R)-2-(7-(4-ciklopenul-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[blindol-3-ii)sirćetna kiselina (Jedinjenje 3).

[0058]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: (S)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 9).

[0059]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 2-(7-(4<iklopentil-3-(trifluorometir)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirčetna kiselina (Jedinjenje 12).

[0060]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvadjivih soli, solvata i hidrata: 2-(7-(3-cijano-4-cikloheksilbenziloksi)-l,2,3,44etrahidrociklopenta[b)indol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 17).

[0061]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 2-(7-((6-cik]opentil-S-(trifluorometil)piridin-^ kiselina.

[0062]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 2-(7-(4-ciklobutil-3-(trifluorometil)benzilok5i)-l,2,3,4-tctrahidrociklopcnta[blindol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 21).

[0063]U jednom otelotvorenju, jedinjenje je izabrano od narednog jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 2-(7-(4-ciklopropii-3-(tnfluorometir)ben7Jloksi)-l,213,4-teT.rahidrociklopenta[b|indol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 22).[00641Jedno otelotvorenje je so izabrana iz grupe koju čine naredne soli i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati i hidrati: Kalcijum so od (R)-2-(7-(4<iklopentil-3-(mfluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenia[b|indol-3-iljsirćetne kiseline.

[0065]Jedno otelotvorenje je so izabranaiz grupe koju čine naredne soli i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati i hidrati: L-arginin so od (/?)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifliiorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3il)sirćetne kiseline.

[0066]Jedno otelotvorenje je hidrac koji je: D-Lizin hidrat soli od (S)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(tiif'liiorometil)benziloksi)-1,2.3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline.

[0067]Jedno otelotvorenje je solvat koji je: (R)-l-Fenetilamin acetonitnl solvat soli od (5)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluoromctil)benziloksi)-l,2,3,4-

tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline.

[0068]Drugi aspekt ovog pronalaska je farmaceutski sastav koji obuhvata jedinjenje, so, hidrat, ili solvat prvog aspekta i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[00691Treći aspekt ovog pronalaska je postupak za pripremu sastava koji obuhvata mešanje jedinjenja, soli, hidrata, ili solvata prvog aspekta i farmaceutski prihvatljivog nosača.

[0070]Četvrti as<p>ekt ovog pronalaska je jedinjenje, so, hidrat, ili solvat prvog aspekta, ili farmaceutski sastav drugog aspekt, za primenu u postupku tretmana ljudskog ili životinjskog tela terapijom.

[0071]U jednom otelotvorenju, tretman je tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

[0072]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je: bolest ili poremećaj posredovana limfocilima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, bilijarna ciroza, kancei, psorijaza, psorijazni artritis, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, upalna bolest creva, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I, ili akne.

[0073]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je bilijarna ciroza.

[0074]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa S IPI receptorom je psorijaza.

[0075]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIP l receptorom je psorijazni artritis.

[0076]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je reumatoidni artritis.

[0077]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je Kronova bolest.

[0078]Lf jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je multiple skleroza.

[0079]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je upalna bolest creva.

[0080]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je ulcerativni kolitis.

[0081]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

[0082]Peti as<p>ekt ovog pronalaska je primena jedinjenja, soli, hidrata, ili solvata prvog aspekta, ili farmaceutskog sastava drugog aspekta, u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

[0083]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, bilijarna ciroza, kancer. psorijaza, psorijazni artritis, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, upalna bolest creva, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I, ili akne.

[0084]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je bilijarna ciroza.

[0085]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je psorijaza.

[0086]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je psorijazni artritis.

[0087]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa S LPl receptorom je reumatoidni artritis.

[0088]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je Kronova bolest.

[0089]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je multiple skleroza

[0090]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIP! receptorom je upalna bolest creva.

[0091]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa S I PI receptorom je ulcerativni kolitis.

[0092]U jednom otelotvorenju, navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom je mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

DETALJAN OPIS

[0093]Ovde su opisana jedinjenja koja su agonisti SIPI receptora koja imaju selektivnost za SI P3 receptor. S1P3 receptor, a ne SIPI receptor, je direktno impliciran u brađikardijai (Sanna et al., J. Biol. Chem., 279:13839-13848. 2004). SIPI receptor agonist selektivan za barem S1P3 receptor ima prednosti u odnosu na postojeće terapije putem poboljšavanja terapeutskog perioda, dopuštajući bolju tolerantnost sa visokim dozama i stoga poboljšavajući efikasnost kao terapija. Ovde su takođe opisana jedinjenja koja su agonisti SIPI receptora i koja ne pokazuju Ili značajno ne pokazuju aktivnost za bradikardiju.

[0094]SIPI receptor agonisti su korisni za tretiranje ili sprečavanje stanja gde je potrebno suzbijanje imunog sistema ili agonizma SIPI receptora, kao što su bolesti i poremećaji posredovani limfocitima, odbacivanje transplanta, autoimune bolesti i poremećaji, upalne bolesti i poremećaji, i stanja koja imaju osnovne nedostatke u vaskularnom integritetu ili koja se odnose na angiogenezu koja može biti patološka.

[0095]Ovde su opisana jedinjenja koja su agonisti SIPI receptora koja imaju dobre ukupne fizičke osobine i biološke aktivnosti i koja imaju delotvornost koja je značajno barem jednaka prethodnom jedinjenju sa aktivnosti na SIPI receptoru.

[0096]Navođenje bilo koje reference kroz ovu prijavu ne treba shvatiti kao priznanje da je ta referenca prethodno stanje u struci ovog pronalaska.

[0097]Ovde su opisana jedinjenja Formule (Ia) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

m je 1 ili 2; nje 1 ili 2;

Y je N ar CR1;

Z je N ili CR4; i

Rl, R2, R3 i R4 su svi nezavisno izabrani iz grupe koju čine H, G-Cs alkoksi, G-G alkil, G-C&alkilamino, G-G; alkilsulfonil, G-Ce alkiltio, karboksamid, cijano, G-C- cikloalkoksi, C3-C- cikloalkil, G-Gihaloalkoksi, G-G; haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-G, alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine G-C- cikloalkil i halogen.

[0098]Ovde su opisana jedinjenja Formule (Ia) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

m je 1 ili 2; n je 1 ili 2;

Y je N ili CR1;

Z je N ili CR4; i

R<!>,R<1>,R- i RJ su svi nezavisno izabrani iz grupe koju čine H, G-G, alkoksi, G-G, alkil, G-Gsalkilamino, G-Cb alkilsulfonil, G-G; alkiltio, karboksamid, cijano, C3-C7 cikloalkoksi, C;-G cikloalkil, G-G, haloalkoksi, G-Ce haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G alkil i G-G, alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim C3-C7cikloalkil group.

[0099]Ovde su opisana jedinjenja koja su SIPI receptor agonisti koja imaju barem imunosupresivnu, protivupalnu i/ili hemostatsku aktivnost, npr. putem modulisanja saobraćanja leukocita, izolovanjem limfocita u sekundardnom limfoidnom tkivu, i/ili poboljšanjem vaskulamog integriteta.

[0100]SIPI receptor agonisti su korisni za tretiranje ili sprečavanje stanja gde potrebni suzbijanje imunog sistema ili agonizma SIPI receptor. kao što su bolesti i poremećaji posredovane limfocitima, odbacivanje transplanta, autoimune bolesti i poremećaji, upalne bolesti i poremećaji(npr.,akutna i hronična upalna stanja), kancer, i stanja koja imaju osnovne nedostatke u vaskularnom integritetu ili koja su povezana sa angiogenezom koja može biti patološka( npr.,kako se može dogoditi pri upali, razvoju tumora i aterosklerozi). Takva stanja gde je potrebno suzbijanje imunog sistema ili agonizma SIPI receptor uključuju bolesti i poremećaje posredovane limfocitima, stanja koja imaju osnovne nedostatke u vaskularnom integritetu, autoimune bolesti i poremećaje, upalne bolesti i poremećaje( npr.,akutna i hronična upalna stanja), akutno ili hronično odbijanje ćelija, tkiva ili grafta čvrstih organa, artritis uključujući psorijazni artritis i reumatoidni artritis, dijabetes uključujući dijabetes tipa 1, demijelinizacijske bolesti uključujući multiple sklerozu, ishemićno-reperfuzijske povrede uključujući bubrežne i srčane ishemično-reperfuzijske povrede, upalnae kožne bolesti uključujući psorijazu, atopični dermatitis i akne, hiperproliferativne kožne bolesti uključujući akne, upalne bolesti creva uključujući Kronovu bolest i ulcerativni kolitis, sistemski eritematozni lupus, astmu, uveitis, miokarditis. alergije, aterosklerozu, upale mozga uključujući Alchajmerovu bolest i upalnu reakciju mozga nakon traumatske povrede mozga, bolesti centralnog nervnog sistema uključujući povrede kičmene moždine ili cerebralni infarkt, patološka angiogenezu uključujući kako se može dogoditi kod metastatskog rasta primarnog tumora, reumatoidni artritis, dijabetičke retinopalije i ateroskleroze, kancer, hroničnu plućnu bolest, akutne povrede pluća, sindrom akutne respiratorne bolesti, sepsu i slično.

[0101]Ovde su opisani farmaceutski sastavi koji obuhvataju ovde opisano jedinjenje i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0102]Ovde su opisani farmaceutski sastavi koji obuhvataju ovde opisano jedinjenje, so, hidrat ili solvat ili kristalni oblik i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0103]Ovde su opisani postupci za tretiranje poremećaja povezanih sa SIPI receptorom kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0104]Ovde su opisani postupci za tretiranje poremećaja povezanih sa SIPI receptorom kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0105]Ovde su opisani postupci za tretiranje poremećaja povezanih sa SIPI receptorom povezanih sa SIPI receptorom kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja, soli, hidrata ili solvata, kristalnog oblika, ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0106]Ovde su opisani postupci za tretiranje poremećaja povezanih sa SIPI receptorom kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava, gde su navedeni poremećaji povezani sa SIPI receptorom izabrani iz grupe koju čine: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest iii poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, kancer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I i akne.

[0107]Ovde su opisani postupci sa tretiranje poremećaja povezanih sa SIPI receptorom kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja, soli, hidrata ili solvata, kristalnog oblika, ili njegovog farmaceutskog sastava, gde su navedeni poremećaji povezani sa SIPI receptorom izabrani iz grupe koju čine: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, kancer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa 1 i akne.

[01081Ovde su opisani postupci za tretiranje bolesti ili poremećaja posredovanih limfocitima kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0109]Ovde su opisani postupci za tretiranje autoimune bolesti ili poremećaja kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0110]Ovde su opisani postupci za tretiranje upalne bolesti ili poremećaja kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava

[01111Ovde su opisani postupci za tretiranje kancera kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0112]Ovde su opisani postupci za tretiranje poremećaja kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava, gde su navedeni poremećaj je izabran iz grupe koju čine psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje

transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni iupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa 1 i akne.

[0113] Ovde su opisani postupci za tretiranje psorijaze kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0114] Ovde su opisani postupci za tretiranje reumatoidnog artritisa kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0115J Ovde su opisani postupci za tretiranje Kronove bolesti kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0116] Ovde su opisani postupci za tretiranje odbacivanja transplanta kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0117] Ovde su opisani postupci za tretiranje multiple skleroze kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0118] Ovde su opisani postupci za tretiranje sistemskog eritematoznog lupusa kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0119] Ovde su opisani postupci za tretiranje ulcerativnog kolitisa kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za dm terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0120] Ovde su opisani postupci za tretiranje dijabetesa tipa I kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0121] Ovde su opisani postupci za tretiranje akni kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0122] Ovde su opisani postupci za tretiranje poremećaja povezanih sa SIPI receptorom kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava, gde su navedeni poremećaji povezani sa SIPI receptorom mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

[0123] Ovde su opisani postupci za tretiranje poremećaja povezanih sa SIPI receptorom koci pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja, soli, hidrata ili solvata, kristalnog oblika, ili njegovog farmaceutskog sastava, gde su navedeni poremećaji povezani sa SIPI receptorom mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

[0124] Ovde su opisani postupci za tretiranje gastritisa kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za dm terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0125] Ovde su opisani postupci za tretiranje polimiozitisa kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za dm terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0126] Ovde su opisani postupci za tretiranje tiroiditisa kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0127] Ovde su opisani postupci za tretiranje vitiliga kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za dm terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0128] Ovde su opisani postupci za tretiranje hepatitisa kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava.

[0129] Ovde su opisani postupci za tretiranje bilijarne ciroze kod pojedinaca koji obuhvataju davanje pojedincu koji ima potrebu za tim terapeutski delotvorne količine ovde opisanog jedinjenja ili njegovog farmaceutskog sastava

[0130] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

[0131] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja. soli, hidrata ili solvata, kristalnog oblika, ili

farmaceutskog sastava u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

[0132] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanih sa SIPI receptorom izabranim iz grupe koju čine: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, kancer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis. dijabetes tipa 1 i akne.

[0133] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja, soli, hidrata ili solvata, kristalnog oblika, ili farmaceutskog sastava u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa S IP 1 receptorom izabranim i/, grupe koju čine: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, kancer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I i akne,

[0134] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman bolesti ili poremećaja posredovan limfocitima.

[0135] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman autoimune bolesti ili poremećaja.

[0136] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji lesa za tretman upalne bolesti ili poremećaja,

[0137] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman kancera.

[0138] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom izabran iz grupe koju čine psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I i akne.

[0139] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman psorijaze.

[0140] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman reumatoidnog artritisa.

[0141] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman Kronove bolesti.

[0142] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman odbacivanja transplanta.

[0143] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman multiple skleroze.

[0144] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman sistemskog eritematoznog lupusa.

[0145] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman ulcerativnog kolitisa.

[0146] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman dijabetesa tipa I.

[0147] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman akni.

[0148] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom gde je poremećaj povezan sa SIPI receptorom mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

[0149]Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja, soli, hidrata ili solvata, kristalnog oblika, ili farmaceutskog sastava u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom gde je poremećaj povezan sa SIPI receptorom mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

[0150] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman gastritisa.

[0151] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman polimioziiisa.

[0152] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman tiroiditisa.

[0153] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman vitiliga.

[0154] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman hepatitisa.

[0155] Ovde je opisana primena ovde opisanog jedinjenja u proizvodnji leka za tretman bilijarne ciroze.

[0156] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman ljudskog ili životinjskog tela terapijom.

[0157] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja, soli. hidrati ili solvati, kristalni oblici, za primenu u postupku za tretman ljudskog ili životinjskog tela terapijom.

[0158]Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

[0159] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja, soli, hidrati ili solvati, kristalni oblici, za primenu u postupku za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

[0160] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tieunan poremećaja povezanog sa SIPI receptorom izabranim iz grupe koju čine: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, kancer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni iupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I i akne.

[0161] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja, soli, hidrati ili solvati, kristalni oblici, za primenu u postupku za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom izabranog iz grupe koju čine: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, kancer, psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa 1 i akne.

[0162] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman bolesti ili poremećaja posredovanih limfocitima.

[0163] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman autoimune bolesti ili poremećaja.

[0164] Ovde su takode opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman upalne bolesti ili poremećaja.

[0165] Ovde su takode opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman kdnceia.

[0166] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom izabrana iz grupe koju čine psorijaza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanta, multiple skleroza, sistemski eritematozni lupus, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I i akne.

[0167] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman psorijaze.

[0168] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman reumatoidnog artritisa.

[0169] Ovde su takode opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman Kronove bolesti.

[0170] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman odbacivanja transplanta.

[0171] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman multiple skleroze.

[0172] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman sistemskog eritematoznog lupusa.

[0173] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman ulcerattvnog kolilisa.

[01741 Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman dijabetesa tipa I.

[0175] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman akni.

[0176] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman poremećaja povezanog sa SI PI receptorom gde je poremećaj povezan sa SIPI receptorom mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

[0177] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja, soli, hidrati ili solvati, kristalni oblici, za primenu u postupku za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom gde je poremećaj povezan sa SIPI receptorom mikrobna infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

[0178] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman gastritisa.

[0179] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman polimiozitisa.

[01801 Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman tiroiditisa.

[0181] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman vitiliga.

[0182] Ovde su takođe opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman hepatitisa.

[0183] Ovde su takode opisana ovde opisana jedinjenja za primenu u postupku za tretman bilijame ciroze.

[0184] Ovde su takođe opisani postupci za pripremu sastava koji obuhvataju mešanje ovde opisanog jedinjenje i

farmaceutski prihvatljivog nosača.

[0185]Ovde su takode opisani postupci za pripremu sastava koji obuhvata mešanje ovde opisanog jedinjenja, soli, hidrata ili solvata, kristalnog oblika i farmaceutski prihvatljivog nosača.

KRATAK OPIS SKICA

[0186] Slika1 pokazuje rezultate eksperimenta koji je merio sposobnost Jedinjenja 7 da smanji apsolutni broj perifernih limfocita kod miševa u poređenju sa nosačem.

Slika2 pokazuje rezultate eksperimenta koji je merio sposobnost Jedinjenja 5 da smanji apsolutni broj perifernih limfocita kod miševa u poređenju sa nosačem.

Slika3 pokazuje opštu šemu sinteze za pripremu derivata l,2,3,4-tetrahidrociklopento[b]indol-3-il)sirćetne kiseline,putemvezivanja aril metil halida ili alkohola sa etil 2-(7-hidroksi-i ,2,3.4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetatom. Naredna hidroliza funkcionalnosti estera omogućava jedinjenja Formule(Ia)gde ,,m" je 1 i ,,n" je 1.

Slika4 pokazuje opštu šemu sinteze za pripremu halogenovanog međuproizvoda 1,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline,putemvezivanja aril metil halida sa etil 2-(?-hidroksil,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetatom. Naredna funkcionalizacija na aromatički halogen i hidroliza funkcionalnosti estera omogućava jedinjenja Formule(Ia)gde "m" je 1 i "n" je 1.

Slika5 pokazuje opštu šemu sinteze za pripremu alkohoi međuproizvoda korišćenih u pripremi jedinjenja Formule (Ia). Šema sinteze pokazuje funkcionalizaciju na aromatički halogen putem metalom katailzovano<g>vezivanja, praćeno konverzijom hidroksil grupe do triflat dela. Naredna zamena triflat sa varijantom funkcionalnih grupa reakcija putem metalom katailzovanog vezivanja i redukcijom ester dela omogućila je alkohol međuproizvod.

Slika6 pokazuje opštu šemu sinteze za pripremu bromid međuproizvoda korišćenih u pripremi jedinjenja Formule (Ia). Šema sinteze pokazuje funkcionalizaciju na aromatički halogen putem metalom katailzovanog vezivanja ili nukleofilnog premeštanja. Naredna brominacija metil grupe omogućava bromid međuproizvoda.Slika7 pokazuje rezultate eksperimenta koji je merio sposobnost drugog enantiomera jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom ti Primeru 1.29) da smanji apsolutni broj perifernih limfocita kod miševa u poređenju sa nosačem.

Slika8 pokazuje rezultate eksperimenta koji je merio sposobnost drugog enantiomera jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29) da smanji apsolutni broj perifernih limfocita kod pacova u poređenju sa nosačem.

Slika9 pokazuje rezultate eksperimenta koji je merio sposobnost tri različite doze drugog enantiomera jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29) da smanji srednji prećnik članka kod pacova u poređenju sa nosačem.Slika 10pokazuje rezultate eksperimenta koji je merio sposobnost tri različite doze drugog enantiomera jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29) da bude delotvorno kod eksperimentalnog autoimunog encefalomielitisa (EAE) u poređenju sa nosačem.

Slika11 pokazuje rezultate eksperimenta gde redukcija otkucaja srca pacova nije ispoljena ili je ispoljena beznačajno malo kao odgovor na tretman pacova sa drugim enantiomerom jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29) u comparison sa nosačem.

Slika 12prikazuje obrazac difrakcije rendgenskih zraka na prasku (PKRD) za kristalni oblik drugog enantiomera jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29).

Slika13 prikazuje termogram diferencijalne skenirajuče kalorimetrije (DSC) ilermogram termogravimetrijske analize (TGA) za drugi enantiomer jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29).

Slika 14prikazuje analizu sorpcije vlage za drugi enantiomer jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29).Slika15 prikazuje obrazac difrakcije rendgenskih zraka na prašku (PXRD) za kristalni oblik soli Ca drugog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.32).

Slika 16 prikazuje termogram diferencijalne skenirajuće kalorimeuije (DSC) Ca soli drugog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.32).

Slika 17 prikazuje termogram termogravimetrijske analize (TGA) Ca soli drugog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.32).

Slika 18 prikazuje obrazac difrakcije rendgenskih zraka na prašku (PXRD) za kristalni oblik soli D-Lizina prvog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.34).

Slika 19 prikazuje termogram diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (DSC) soli D-Lizina prvog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.34).

Slika 20 prikazuje termogram termogravimetrijske analize (TGA) soli D-Lizina prvog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.34).

Slika 21 prikazuje pregled molekula za koje se čini da su prvi enantiomer jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja 12 sa HPLC sa vremenom zadržavanja od 9,1 minuta po stanju navedenom u Primeru 1.29).

Slika 22 pokazuje opštu šemu sinteze za pripremu derivata l,2,3,4-tetrahiđrociklopenta[b|inđol-3-il)sircetne kiseline,putemFišerove sinteze indola. Naredna hidroliza i dekarboksilation omogućava jedinjenja Formule (Ia) gde ,,m" je 1 i ,,n" je 1.

Slika 23 prikazuje obrazac difrakcije rendgenskih zraka na prašku (PXRD) za kristalni oblik soli L-arginina drugog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.33).

Slika 24 prikazuje termogram diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (DSC) soli L-arginina drugog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.33).

Slika 25 prikazuje termogram termogravimetrijske analize (TGA) soli L-arginina drugog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeai 1.33).

Slika 26 prikazuje analizu sorpcije vlage soli L-arginina drugog enantiomera jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.33).

DEFINICIJE

[0187] Zarad jasnoće i konzistentnosti, naredne definicije će se koristiti kroz ovu patentnu prijavu.

[0188] Izraz „agonist" je namenjen da oznaci deo koji imerakuje sa i aktivira receptor vezan za G-protein, kao što je SIPI receptor, koji time može da inicira fiziološki ili farmakološki odgovor karakterističan za taj receptor. Na primer, agonist aktivira medućelijski odgovor nakon vezivanja za receptor, ili poboljšava GTP vezivanje za membranu. Agonist opisan ovde može biti SIPI receptor agonist koji je sposoban da olakša održvanu S IP t receptor internalizacijau (pogledatinpr.,Matloubian et al., Nature, 427,355, 2004).

[0189] Izraz „antagonist" je namenjen da označi deo koji se kompetitivno vezuje za receptor na istom mesiu kao agonist (na primer, endogeni ligand), ali koji ne aktivira medućelijski odgovor iniciran aktivnim oblikom receptora i stoga može da inhibira medućelijske odgovore putem agonista ili delimičnog agonista. Antagonist ne smanjuje osnovni medućelijski odgovor u odsustvu agonista ili delimičnog agonista.

[0190] Izraz „hidrat" kako se koristi ovde označava ovde opisano jedinjenje ili njegovu so, koje dalje uključuje stehiometrijsku ili ne-stehiometrijsku količinu vode vezanu nekovalenmim medumolekulskim silama.

[0191] Izraz „solvat" kako se koristi ovde označava ovde opisano jedinjenje ili njegovu so, koje dalje uključuje stehiometrijsku ili ne-stehiometrijsku količinu solventa vezanu nekovaientnim medumolekulskim silama. Poželjni solventi su volatilni, ne-toksČni, i/ili prihvatljivi za davanje ljudima u malim količinama.

[0192] Izraz ,,u potrebi za tretmanom" i izraz ,,u potrebi" kada se odnose na tretman su korišćeni međusobno zamenjivo da označe odluku donesenu od strane pružaoca nege (npr. lekara, medicinskesestre itd. U slučaju ljudi; veterinara u slučaju životinja, uključujući ne-humane sisare) koja pojedincu ili životinji treba, ili če imati koristi od tretmana. Ova odluka se donosi na osnovu više faktora koji su u okviru lekarove stručnosti, ali koje uključuju znanje da su pojedinac ili životinja bolesni, da će postati bolesni, kao rezultat bolesti, stanja ili poremećaja koji mogu đa se leče ovde opisanim jedinjenjem.

[0193] U skladu sa tim, ovde opisanog jedinjenje može da se koristi u zaštitne ili preventivne svrhe; ili ovde opisano

jedinjenje može da se koristi to ublaži, inhibira ili spreči bolest, stanje iii poremećaj.

[0194]Izraz,„pojedinac"je namenjen da označi bilo koju životinju, uključujući sisare, poželjno miševe, pacove, druge glodare, zečeve, pse, mačke, svinje, stoku, ovce, konje ili primate, najpoželjnije ljude.

[0195]Izraz„inverzni agonist"je namenjen da označi deo koji se vezuje za endogeni oblik receptora ili za konstitutivno aktiviran oblik receptora i koji inhibira osnovni medućelijski odgovor iniciran aktivnim oblikom receptora ispod normalnog osnovnog nivoa aktivnosti koji je primećen u odsustvu agonista ili delimičnog agonista, ili smanjuje GTP vezivanje za membranu. U nekim oteiotvorenjima, osnovni medućelijski odgovor je inhibiran u prisustvu inverznog agonista za barem 30%. Osnovni medućelijski odgovor može biti inhibiran u prisustvu inverznog agonista za barem 50%. Osnovni medućelijski odgovor može biti inhibiran u prisustvu inverznog agonista za barem 75%, u poređenju sa osnovnim odgovorom u odsustvu inverznog agonista.

[0196] Izraz„modulacija ili modulisanje"je namenjen da označi povećanje ili smanjenje količine, kvaliteta, odgovor ili efekta određene aktivnosti, funkcije ili molekula.

[0197]Izraz„farmaceutski sastav"je namenjen da označi sastav koji obuhvata barem jedan aktivan sastojak; uključujući ali ne ograničavajući se na, soli, solvate i hidrate ovde opisanog Jedinjenja 1, gde je sastav odgovoran za ispitivanje specifičnog, delotvornog ishoda kod sisara (na primer, bez ograničenja, čovek). Prosečni stručnjaci u oblasti će razumeti i ceniti tehnike prikladne za određivanje da li aktivan sastojak ima željen delotvorni ishod u skladu sa potrebama stručnjaka.

[0198] Izraz„terapeutski delotvorna količina"je namenjen da označi količinu aktivnog jedinjenja iii farmaceutskog agensa koja izaziva biološki ili medicinski odgovor u tkivu, sistemu, životinji, pojedincu ili čoveku koji se traci od sirane ispitivača, veterinara, doktora medicine, lekara ili pojedinca, koji uključuje jedno ili više od narednog: (1) sprečavanje bolesti, na primer, sprečavanje bolesti, stanja ili poremećaja kod pojedinca koji može biti predisponiran za bolest, stanje ili poremećaj ali još uvek ne doživljava ili ne pokazuje patologije ili simptomatologije bolesti;

(2) inhibiranje bolesti, na primer, inhibiranje bolesti, stanje ili poremećaj kod pojedinca koji doživljava ili

pokazuje patologije ili simptomatologije bolesti, stanja ili poremećaja ((/., zadržavanje daljeg razvoja patologije i/ili simptomatologije); i

(3) Ublažavanje bolest, na primer, ublažavanje bolesti, stanja ili poremećaja kod pojedinaca koji doživljava

ili pokazuje patologije ili simptomatologije bolesti, stanja ili poremeća ((/., obrtanje patologije i/ili simptomatologije).

HEMIJSKA GRUPA, DEOILIRADIKAL

[0199]Izraz „Ci-Csalkoksi"je namenjen da označi G-C& alkil radikal. kako je definisano ovde, vezan direktno atom kiseonika. Neka otelotvorenja su 1 do 5 ugljenika, neka otelotvorenja su 1 do 4 ugljenika, neka otelotvorenja su l do 3 ugljenika i neka otelotvorenja su 1 ili 2 ugljenika. Primeri uključuju metoksi. etoksi, »i-propoksi, izopropoksi, n-butoksi, rerr4jutoksi, izobutoksi, sek-butoksi i slično.

[0200]Izraz „Ci-Cgalkil"je namenjen da označi ravan ili razgranat ugljenik radikal koji sadrži I do 6 ugljenika. Neka otelotvorenja su 1 do 5 ugljenika, neka otelotvorenja su l do 4 ugljenika, neka otelotvorenja su 1 do 3 ugljenika i neka otelotvorenja su 1 ili 2 ugljenika. Primeri alkila uključuju, ali se ne ograničavaju na, metil, etil, n-propil, izopropil, fi-butil, sek-butil, izobutil, tert-butil, pentil. izopentil, rerf-pentil, nco-penul, 1-metilbuul[(}.,- CH(CH3)CH:CH2CH31, 2-metilbutil [£/., -CH2CH(CH3)CH2CH3], n-heksil i slično.

[0201]Izraz „Ci-Csalkilamino"je namenjen da označi jedan alkil radikal vezan za -NH- radikal gde aikil radikal ima isto značenje kako je opisano ovde. Neki primeri uključuju, ali se ne ograničavaju na, metilamino, etilamino, n-propilamino, izopropilamino, n-butilamino, sek-butilamino, izobutilamino, rerr-butilamino i slično.

[0202] Izraz „G-C6alkilsulfonil" jenamenjen da označi G-Csalkil radikal vezan za sumpor of sulfon radikal koji imaju formulu: -S(0>2- gde alkil radikal ima istu definiciju kako je opisano ovde. Primeri uključuju, ali se ne ograničavaju na, metilsulfonil, etiisulfonil, n-propilsulfonil, izo-propilsuifonil. ji-butilsulfonil, sek-butilsulfonil, izo-butilsulfonil, rerr-butilsulfonil i slično.

[0203]Izraz„karboksamid"je namenjen da označi grupu -C ONU..

[0204]Izraz„karboksi" ili „karboksil"je namenjen da označi grupu -CO;>H; takode se naziva i karboksilna kiselina grupa.

[0205]Izraz„cijano" jenamenjen da označi grupu -CN.

[0206]Izraz „G3-C7cikloalkoksi"je namenjen da označi saturisan prsten radikal koji sadrži 3 to 7 ugljenika direktno vezana na atom kiseonika. Neki primeri uključuju ciklopropil-O-, ciklobutil-O-, ciklopentil-O-, cikloheksil-O- i slično.

[0207]Izraz „C3-C7cikloalkil"je namenjen da označi saturisan prsten radikal koji sadrži 3 to 7 ugljenika. Neka otelotvorenja sadrže 3 to 6 ugljenika. Neka otelotvorenja sadrže 3 to 5 ugljenika. Neka otelotvorenja sadrže 5 to 7 ugljenika. Neka otelotvorenja sadrže 3 to 4 ugljenika. Primeri uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i slično.

[0208]Izraz „C1-C6haloalkoksi"je namenjen da označi G-G, haloalkil, kako je definisano ovde, koji je direktno vezan za atom kiseonika. Primeri uključuju, ali se ne ograničavaju na. difluorometoksi, trifluorometoksi, 2,2,2-trifluoroetoksi, pentafluoroetoksi i slično.

[0209]Izraz ,,G-C6haloalkil"je namenjen da označi G-G, alkil grupu, definisanu ovde ovde, gde je alkil supstituisan sa između jednog halogen do potpuno supstituisanog gde potpuno supstituisan G-G, haloalkil može da se predstavi sa formulom GLjn+igde je L halogen i ,,n" je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6. Kada je više od jednog halogena prisutno, halogeni mogu biti isti ili različiti i izabrani iz grupe koju čine fluoro, hloro. bromo ili jodo, poželjno fluoro. Neka otelotvorenja su 1 do 5 ugljenika, neka otelotvorenja su 1 do 4 ugljenika, neka otelotvorenja su 1 do 3 ugljenika i neka otelotvorenja su 1 ili 2 ugljenika. Primeri haloalkil grupe uključuju, ali se ne ograničavaju na, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, hlorodifluorometil, 2.2,2-trifluoroeti 1, pentalluoroetil i slično.

[0210]Izraz„halogen"ili„halo"je namenjen da označi fluoro, hloro, bromo ili jodo grupu.

[0211]Izraz„heteroaril"je namenjen da označi aromatički prsten sistem koji sadrži 5 to 14 aiomatićkih atoma prstena koji može biti jedan prsten, dva fuzionisana prstena ili tri fuzionisana prstena, gde je barem jedan aromatički atom prstena heteroatom izabran od, na primer, ali ne ograničavajući se na, grupu koja se sastoji od O, S i N gde N mož.e opciono biti supstituisan sa H, G-Ci acilom ili G-G alkilom. Neka otelotvorenja sadrže 5 to 6 atoma prstena, na primer, furanil, tienil, pirolil, imidazolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, pirazolil, izotiazolil, oksadiazolil, triazolil, tiadiazolil, piridinil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil i triazinil i slično. Neka otelotvorenja sadrže 8 to !4 atoma prstena, na primer, hinolizinil, hinolinil, izohinolinil, cinolinil, ftalazinil, hinazoiinil, hinoksalinii, triazinil, indolil, izoindolil, indazolil, indolizinil, purinil, naftiridinil, pteridinil, karbazolil, acridinil, fenazinil, fenotiazinil, fenoksazinil, benzoksazolil, benzotiazolil, lH-benzimidazolil, imidazopiridinil, benzotienil, benzofuranil, i izobenzofuran i slično.

[0212]Izraz„heterociklično"ili„heterociklil"je namenjen da označi ne-aromatički prsten koji sadrži 3 tn 8 atoma prstena gde su jedan, dva ili tri atoma prstena heteroatomi izabrani od. na primer, grupe koja se sastoji od O, S, S(-0), S(-O):i NH, gde je N opciono supstituisan kako je opisano ovde. U nekim otelotvorenjima, azot je opciono supstituisani sa G-Ci acil ili G-Cj alkil. U nekim otelotvorenjima, ugljenik atomi prstena su opciono supsliiuisaiii sa okso čime se formira karbonil grupa. U nekim otelotvorenjima, sumpor atomi prstena su opciono supstituisani sa okso atomima čime se formira tiokarbonil grupa. Heterociklična grupa može biti vezana na to bilo koji dostupan atom prstena, na primer, ugljenik prstena, azot prstena i slično. U nekim otelotvorenjima heterociklična grupa je 3-, 4-, 5-, 5- ili 7-očlani prsten. Primeri heterociklične grupa uključuju, ali se ne ograničavaju na, aziridin-l-il, azn idin-2-il, azetidin-lil, azetidin-2-il, azetidin-3-il, piperidin-I-il, piperidin-2-il, piperidin-3-il, piperidin-4-il. morfolin-2-il, morfolin-3-il, morfolin-4-il, piperzin-l-il, piperzin-2-il, piperzin-3-il, piperzin-4-il, pirolidin-l-il, pirolidin-2-il, pirolidin-3-il, [l,3]-dioksolan-2-il, tiomorfolin-4-il, [l,4]oksazepan-4-il, l,l-dioksotiomorfolin-4-il, azepan-l-il. azepan-2-il, azepan-3-il, azepan-4-il, tetrahidrofuran-2-il, tetrahidrofuran-3-il i slično.

JEDINJENJA:

[0213]Ovde su opisana određena jedinjenja Formule(Ia)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrat i:

gde:

m. n, R<:>, R<J>, Y i Z imaju iste definicije kako je opisano ovde ,supraiinfra.

[0214] Ovde su opisana jedinjenja, solvati i/ili hidrati jedinjenja, farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja, i solvati i/ili hidrati farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja, gde su jedinjenja kako je opisano ovde.

[0215] Treba imati na umu da određene osobine opisane ovde, koja su, zbog jasnoće, opisane u kontekstu različitih otelotvorenja, mogu takođe biti date u kombinaciji u jednom otelotvorenju. Suprotno, različite osobine opisane ovde, koja su, zarad sažetosti, opisane u kontekstu jednog otelotvorenja, mogu takođe biti date odvojeno ili u bilo kojoj odgovarajućoj potkombinaciji. Sve kombinacije otelotvorenja koje se odnose na hemijske grupe predstavljene promenjivim (npr., m, n, R', R<J>, R<3>, Y i Z) sadržane unutar generičkih hemijskih formula opisanih ovde, na primer, (Ia), (Ic), (Ie), (Ig), (li), (Ik), (Im) su specifično opisane ovde kao da je svaka kombinacija pojedinačno eksplicitno navedena, u meri u kojoj takve kombinacije prihvataju stabilna jedinjenja ((/., jedinjenja koja mogu biti izolovana, karakterisana i testirana za biološke aktivnost). Dodatno, sve potkombinacije hemijskih grupa navedene u otelotvorenjima koja opisuju takve promenjive, kao i sve potkombinacije primena i medicinskih indikacija opisanih ovde, su takođe specifično opisane ovde kao da je svaka potkombinacija hemijske grupe i potkombinacija primena i medicinskih indikacija pojedinačno i eksplicitno navedena ovde.

[0216] Kad se koristi ovde, pojam „supstituisan"označava da je bar jedan atom vodonika hemijske grupe zamenjen sa ne-vodoničnim supstituentom ili grupom. Ne-vodonični supstituent ili grupa mogu biti monovalentni ili divalentni. Kada su supstituent ili grupa divalenti, tada se smatra da je ta grupa dalje supstituisana sa drugim supstituentom ili grupom. Kada je hemijska grupa ovde „supstituisana" ona može imati do pune valencije supstitucije, na primer, metil grupa može biti supstituisana sa l, 2, ili 3 supstituenta. metilen grupa može biti supstituisana sa 1 ili 2 supstituenta, fenil grupa može biti supstituisana sa l, 2. 3, 4, ili 5 supstituenta, na li:I grupa može biti supstituisana sa 1, 2, 3, 4, 5, 6, ili 7 supstituenta i slično. Isto tako, „supstituisan sa jednim ili više supstituenta" odnosi se na supstituciju grupe sa jednim supstituentom do ukupnog broja supstituenata koji su fizički dopušteni od strane grupe. Dalje, kada je grupa supstituisana sa više od jednog supstituenta. supstituenti mogu biti identični ili mogu biti različiti.

[0217] Ovde opisana jedinjenja takođe uključuju tautomerne oblike, kao što su kcto-enol rauiomeri i slično. Tautomerni oblici mogu biti u ravnoteži ili prostorno zaključani u jedan oblik odgovarajućom supstitucijom. Smatra se da su različiti tautomerni oblici unutar opsega ovde opisanih jedinjenja.

[0218] Ovde opisana jedinjenja takođe uključuju sve izotope atoma koji se javljaju u međuproizvodima i/ili konačnom jedinjenju. Izotopi uključuju one atome koja imaju isti atomski broj ali drugačiji maseni broj. Na primer, izotopi vodonika uključuju deuterijum i tritijum.

[0219] Smatra se da jedinjenja Formule (Ia) i formula povezanih sa njom mogu da imaju jedan ili više hiralnih centara i stoga mogu da postoje kao enantiomeri i/ili diastereomeri. Ovde opisana jedinjenja obuhvataju i to i prihvataju sve takve enantiomere. diastereomere i njihove mešavine, uključujući ali ne ograničavajući se na racemate. Smatra se da su Formuli (Ia) i formule korišćene kroz ovaj dokument namenjene da predstavljaju sve pojedinačne enantiomere i njihove mešavine, ukoliko nije navedeno ili pokazano drugačije.

Promenjiva " n"

[0220] U nekim otelotvorenjima, nje 1.

[0221] U nekim otelotvorenjima, ovde opisana jedinjenja su predstavljena Formulom (Ic) kako je ilustrnvano u nastavku:

gde svaka promenjiva u Formuli (Ic) ima isto značenje kako je opisano ovde,supraiinfra.

[0222] U nekim otelotvorenjima, nje 2.

[0223] U nekim otelotvorenjima, ovde opisana jedinjenja su predstavljena Formulom (Ie) kako je ilustrovano u nastavku:

gde svaka promenjiva u Formuli (Ie) ima isto značenje kako je opisano ovde,supraiinfra.

Promeniiva " m"

[0224]U nekim otelotvorenjima, m je 1.

[0225] U nekim otelotvorenjima, ovde opisana jedinjenja su predstavljena Formulom (Ig) kako je iiustrovano u nastavku:

gde svaka promenjiva u Formuli(Ig)ima isto značenje kako je opisano ovde,supraiinfra.

[0226]U nekim otelotvorenjima, m je 2.

[0227]U nekim otelotvorenjima, ovde opisana jedinjenja su predstavljena Formulom(li)kako je iiustrovano u nastavku:

gde svaka promenjiva u Formuli(li)ima isto značenje kako je opisano ovde,supraiinfra.

Promenjive Y i Z

[0228]U nekim otelotvorenjima, Y je N ili CR<1>i Z je N ili CR<J.>

[0229]U nekim otelotvorenjima, Y je N i Z je N.

[0230]U nekim otelotvorenjima, Y je N i Z je CR<J.>

[0231]U nekim otelotvorenjima Y je CR<1>i Z je N.

[0232]U nekim otelotvorenjima, Y je CR<1>i Z je CR<J.>

[0233]U nekim otelotvorenjima, Y je N.

[0234]U nekim otelotvorenjima, Y je CR<1.>

[0235]U nekim otelotvorenjima, Z je N.

[0236]U nekim otelotvorenjima, Z je CR<J.>

Grupa R<1>

[0237]U nekim otelotvorenjima, R<1>je izabran iz grupe koju čine H, G-C6 alkoksi, G-Gs alkil, G-G; alkilamino, Ci-Ccalkilsulfonil, G-Q,alkiluo, karboksamid, cijano, C;-C- cikloalkoksi, G-C-cikloalkil, G-C« haloalkoksi, G-G, haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-G, alkoksi svi opciono supstituisani

sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine Cj-C- cikloalkil i halogen,

[0238]U nekim otelotvorenjima, R<1>je izabran iz grupe koju čine H, CrG, alkoksi. G-G, alkil, G-G, alkilamino, G-Ct alkilsulfonil, G-Cs alkiltio, karboksamid, cijano, Gt-C- cikloalkoksi, Gi-C- cikloalkil, G-G, haloalkoksi, G-Cs haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-G alkoksi svi opciono supstituisani sa jednom C3-C- cikloalkil grupom.

[0239]U nekim otelotvorenjima, R<1>je H ili G-Cshaloalkil.

[0240]U nekim otelotvorenjima,R1je H.

[02411U nekim otelotvorenjima, R' je trifluorometil.

Grupa R<2>

[0242]U nekim otelotvorenjima, R<J>je izabran iz grupe koju čine H, G-G, alkoksi, G-G, alkil, G-C«, alkilamino, G-G, alkilsulfonil, G-Ce alkiltio, karboksamid, cijano, G.-Ct cikloalkoksi, G-C • cikloalkil, G-G, haloalkoksi, G-Gj haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-C« alkil i G-G alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine Cj-C- cikloalkil i halogen.

[0243]U nekim otelotvorenjima, R- je izabran iz grupe koju čine H, G-G, alkoksi, G-G, alkil, G-G, alkilamino, Ct-Cs alkilsulfonil, G-G; alkiltio, karboksamid, cijano, C3-C- cikloalkoksi, C3-C- cikloalkil, O-Cshaloalkoksi, G-G, haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-G: alkoksi svi opciono supstituisani sa jednomm Gt-C?cikloalkil grupom.

[0244]U nekim otelotvorenjima, R<2>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-G5haloalkoksi i G-G, haloalkil.

[0245]U nekim otelotvorenjima, R<2>je izabran iz grupe koju čine I I, cijano, trifluorometoksi i trifluorometil.

[0246]U nekim otelotvorenjima, R<J>je H.

[0247]U nekim otelotvorenjima, R- je cijano.

[0248]U nekim otelotvorenjima, R- je trifluorometoksi.

[0249]U nekim otelotvorenjima, R<2>je trifluorometil.

GrupaR<3>

[0250]U nekim otelotvorenjima, je izabran iz grupe koju čine H, G-Cs alkoksi, G-G, alkil, G-G, alkilamino, G-Ce alkilsulfonil, G-Cs alkiltio, karboksamid, cijano, C3-C- cikloalkoksi, G-G cikloalkil, G-C6haloalkoksi, G-Cfi haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-Csalkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine Cn-C ■ cikloalkil i halogen.

[0251]U nekim otelotvorenjima, R<3>je izabran iz grupe koju čine H, CrG; alkoksi, G-Cs alkil, G-G-, alkilamino, G-Cg alkilsulfonil, karboksamid, cijano, G-G cikloalkoksi, Cj-C- cikloalkil, G-G> haloalkoksi, G-G, haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-G, alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine C>,- C~ cikloalkil i halogen.

[0252]U nekim otelotvorenjima, R<*>je izabran iz grupe koju čine H, G-Cg alkoksi, G-G, alkil, G-Cs alkilamino, G-G,alkilsulfonil, G-G; alkiltio, karboksamid, cijano, G-C7 cikloalkoksi, Cj-C- cikloalkil, G-G; haloalkoksi, G-Cbhaloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G alkil i G-G, alkoksi svi opciono supstituisani sa jednom G;-C- cikloalkil grupom.

[0253]U nekim otelotvorenjima, R<J>je izabran iz grupe koju čine H, G-G, alkoksi, G-G, alkil, Gi-C- cikloalkil, G-C« haloalkoksi, G-G, haloalkil, halogen i heterociklil.

[0254]U nekim otelotvorenjima, R1 je izabran iz grupe koju čine izabran iz grupe koju čine H, karboksamid, hloro, cijano, ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, ciklopentiloksi, ciklopropil, ciklopropilmetoksi, cikloheksilmetii, 3,3-difluoropirolidin-1-il,etilamino, izobutil, izopropoksi, metilsulfonil, neopentil, propil, pirolidinl-il, 1,2,3-tiadiazol-4-il, trifluorometoksi i trifluorometil.

[02551U nekim otelotvorenjima, R<3>je izabran iz grupe koju čine H, hloro, ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, ciklopropil, 3,3-difluoropirolidin-l-il, izobutil, izopropoksi, neopentil, propil, pirolidin-l-il, trifluorometoksi i uifluorometil.

[0256]U nekim otelotvorenjima, R<3>je H.

[0257]U nekim otelotvorenjima, R<!>je hloro.

[0258]U nekim otelotvorenjima, R<3>je ciklobutil.

[0259]U nekim otelotvorenjima, R<3>je cikloheksil.

[0260]U nekim otelotvorenjima, R<3>je ciklopentil.

[0261]U nekim otelotvorenjima, R<1>je ciklopropil.

[0262]U nekim otelotvorenjima, R<3>je 3,3-difluoropirolidin-1-il.

[0263]U nekim otelotvorenjima, R<3>je izobutil.

[0264]U nekim otelotvorenjima, R<3>je izopropoksi.

[0265]U nekim otelotvorenjima, R3 je neopentil.

[0266]U nekim otelotvorenjima, R3 je propil.

[0267]U nekim otelotvorenjima, R<3>je pirolidin-l-il.

[0268]U nekim otelotvorenjima, R3 je trifluorometoksi.

[0269]U nekim otelotvorenjima, R<3>je trifluorometil.

[0270]U nekim otelotvorenjima, RJ je karboksamid.

10271]U nekim otelotvorenjima, R3 je cijano.

[0272]U nekim otelotvorenjima, R<3>je ciklopentiloksi.

[0273]U nekim otelotvorenjima, R3 je cikiopropilmeroksi.

[0274]LJ nekim otelotvorenjima, R<!>je cikloheksilmetil.

[02751U nekim otelotvorenjima, R* je etiiamino.

[0276JU nekim otelotvorenjima, R3 je metilsulfonil.

[0277]U nekim otelotvorenjima, R3 je l,2,3-tiadiazol-4-il.

Grupa R<4>

[0278]U nekim otelotvorenjima, R4 je izabran iz grupe koju čine H, G-G, alkoksi, G-G, alkil, G-G, alkilamino, G-Cs alkilsulfonil, G-Gs alkiltio, karboksamid, cijano, C3-C7cikloalkoksi, G-G cikloalkil, G-G; haloalkoksi, G-Cs haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-G-, alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine CrG cikloalkil i halogen.

[0279]U nekim otelotvorenjima, R4 je izabran iz grupe koju čine H, G-Ce alkoksi, G-G alkil, G-C alkilamino, G-Cs alkilsulfonil, G-Cs alkiltio, karboksamid, cijano, G-C- cikloalkoksi, Cj-C- cikloalkil. G-G; haloalkoksi, G-Cs haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G, alkil i G-G, alkoksi svi opciono supstituisani sa jednom C rC- cikloalkil grupom.

[0280]U nekim otelotvorenjima, R<4>je izabran iz grupe koju čine H, cijano. G-Cs haloalkoksi i G-G; haloalkil.

[0281]U nekim otelotvorenjima, R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano i G-G, haloalkil.

[0282]U nekim otelotvorenjima,R<4>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi i trifluorometil.

[0283]U nekim otelotvorenjima, R<4>je izabran iz grupe koju čine H, cijano i trifluorometil.

[0284]U nekim otelotvorenjima, R<4>je H.

[0285]U nekim otelotvorenjima, R4 je cijano.

[0286]U nekim otelotvorenjima, R4 je trifluorometil.

[0287]U nekim otelotvorenjima, R4 je trifluorometoksi.

Određene kombinacije

[0288]Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule(Ia)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati, gde: m je 1 ili 2; n je 1 ili 2;

Y jcN ili CR';

Z je N ili CR4;

R1 je H ili G-Cb haloalkil;

R<2>je izabran iz grupe koju Čine H, cijano, C-C haloalkoksi, i G-G: haloalkil;

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, G-C« alkoksi, G-G alkil, G-C- cikloalkil, G-C« haloalkoksi, G-C;

haloalkil, halogen i heterociklil; i

R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano i G-Cs haloalkil.

[0289] Meka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule (Ia) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati, gde: m je 1 ili 2;

n je 1 ili 2;

Y je N ili CR';

Z je N ili CR4;

R<1>je H ili trifluorometil;

R<2>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi i trifluorometil:

R<3>je izabran iz grupe koju Čine H, hloro, ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, ciklopropil, 3,3-difluoropirolidin-l-il, izobutil, izopropoksi, neopentil, propil, pirolidin-l-il, trifluorometoksi i trifluorometil; i R4 ie izabran iz grupe koju čine H, cijano i trifluorometil.

[0290] Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule (Ik) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

YjeN iliCR';

Z je N ili CR4;

R1 je H ili C-C. haloalkil;

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-Cs haloalkoksi i G-Ce haloalkil;

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, G-Cs alkoksi, C-C alkil, G-C alkilamino, G-G, alkilsulfonil, karboksamid, cijano, C3-C7cikloalkoksi, C-C cikloalkil, C-G haloalkoksi, G-Cs haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni G-G5 alkil i G-Cs alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine C-C- cikloalkil i halogen; i

R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano, C-G, haloalkoksi i G-C haloalkil.

[0291]Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule(Ik)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

YjeN iliCR1;

Z je N ili CRJ;

R1 je H ili Ci-Gi haloalkil;

R<2>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, Ci-C(, haloalkoksi i G-Ce haloalkil;

R! je izabran iz grupe koju čine H, Ci-Cs alkoksi, G-Cs alkil, C3-C- cikloalkil, G-C« haloalkoksi, G-Cs haloalkil, halogen i heterociklil; i

RJ je izabran iz grupe koju čine H, cijano i G-C« haloalkil.

[0292]Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule (Ik) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

Y je N ili CR1;

Z je N ili CRJ;

R1 je H ili trifluorometil;

R- je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi i trifluorometil;

R<J>je izabran iz grupe koju čine H, karboksamid, hloro, cijano, ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, ciklopentiloksi, ciklopropil, ciklopropilmetoksi, cikloheksilmetil, 3,3-difluoropirolidin-l-il, etilamino, izobutil, izopropoksi, metilsulfonil, neopentil, propil, pirolidin-l-il. 1.2.3-tiadiazol-4-il, trifluorometoksi i trifluorometil; i

RJ je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi i trifluorometil.

[0293]Neka otelotvorenja opisana ovde se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule(Ik)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati, gde: Y je N ili CR1;

Z je N ili CRJ;

R1 je H ili trifluorometil;

R<2>je izabran iz grupe koju čine H. cijano. trifluorometoksi i trifluorometil:

R4 je izabran iz grupe koju čine H, hloro, ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, ciklopropil. 3,3-difluoropirolidin-l-il, izobutil, izopropoksi, neopentil, propil, pirolidin-l-il, trifluorometoksi i trifluorometil;

i R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano i trifluorometil.

[0294]Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule (Im) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-Ce haloalkoksi i G-Gshaloalkil; i

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, G-G; alkoksi, G-Cs alkil, G-Csalkilamino, G-Cs alkilsulfonil, karboksamid, cijano, G-C cikloalkoksi, G-G cikloalkil, G-G, haloalkoksi, G-Cs haloalkil, halogen, heteroaril i heterociklil, gde su navedeni C1-G5alkil i G-Cs alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine G-C- cikloalkil i halogen.

[0295]Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule(Im)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-Cs haloalkoksi i G-G, haloalkil; i

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, G-G alkoksi, G-G alkil, G-C- cikloalkil, G-Cs haloalkoksi, G-C, haloalkil, halogen i heterociklil.

[0296]Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule(Im)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati:

gde:

R' je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi i trifluorometil; i

R<3>je izabran iz grupe koju čine H, karboksamid, hloro, cijano, ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, ciklopentiloksi, ciklopropil, ciklopropilmetoksi, cikloheksilmetil, 3,3-difluoropirolidin-l-il, etilamino, izobutil, izopropoksi, metilsulfonil, neopentil, propil, pirolidin-l-il. 1,2,3-tiadiazol-4-il, trifluorometoksi i trifluorometil.

[0297]Neka otelotvorenja opisana ovde odnose se na jedinjenja izabrana iz grupe koju čine jedinjenja Formule(Im)i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati, gde:

R<2>je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi i trifluorometil; i

R' je izabran iz grupe koju čine H, hloro, ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, ciklopropil, 3,3-difluoropirolidin-l-il, izobutil, izopropoksi, neopentil, propil, pirolidin-l-il, trifluorometoksi i trifluorometil.

Esteri i prolekovi

[0298JOvde su takode opisana jedinjenja Formule(Ila)kao sintetic međuproizvoda korisni u pripremi jedinjenja Formule (Ia) i/ili prolekovi korisni za isporuku jedinjenja Formule (Ia):

m, n, R<:>, R<J>, Y, Z i W imaju istu definicije kako je opisano ovde,supraiinfra,i R6 je G-C, alkil.

[0299]U nekim otelotvorenjima, R!> je etil.

[0300]U nekim otelotvorenjima, R<J>je rerf-butil.

[0301]Zarad sažetosti, smatra se da se sva ovde opisana otelotvorenja, supra iinfra,koja se odnose na zajedničke promenjive deljene između jedinjenja Formula(Ia)i(Ha)poimence, m, n, R-, R<!>. Y, Z i W, odnose na jedinjenja Formule(Ila)isto kao da su sve pojedinačno obelodanjene ovde sa posebnim naglaskom na Formulu(Ha).

[0302]Ovde su takođe opisana jedinjenja Formule(Ila)kao sintetički međuproizvodi korisni u pripremi jedinjenja Formule(Ia).

[0303]Ovde su takođe opisana jedinjenja Formule(Ha)kao esteri jedinjenja, opisana i prikazana ovde, kao što su jedinjenja u Tabeli A, gde R<3>je etil.

[0304]Ovde su takođe opisana jedinjenja Formule(Ila)kao esteri jedinjenja, opisana i prikazana ovde, kao što su jedinjenja u Tabeli A, gde R<;>je tm-butik

[0305]Ovde su takođe opisana jedinjenja Formule(Ha)kao prolekovi korisni za isporuku jedinjenja Formule(Ia).

[0306]Ovde su takođe opisana jedinjenja Formule(Ila)korisna kao prolekovi jedinjenja Formule(Ia).

[0307]Ovde je takođe opisana svaka kombinacija jednog iii više jedinjenja izabranih iz grupe koju čine naredne grupe prikazane uTabeliA.

[0308]U narednoj tabeli, asterisk (<*>) označava reference jedinjenje.

[03091Dodatno, ovde opisana pojedinačna jedinjenja i hemijski rodovi, na primer, ona jedinjenja koja se nalaze uTabeliA uključujući njihove diastereomere i enantiomere, obuhvataju sve njihove farmaceutski prihvatljivi soli, solvate i hidrate.

[0310]Ovde je takođe opisan svaki diastereomer, svaki enantiomer i njihove mešavine svakog ovde obeiodanjenog jedinjenja i generičke formule isto kao da su svi pojedinačno obelodanjeni sa specifičnom stereohemijskom oznakom za svaki hiralni ugljenik. Razdvajanje pojedinačnih izomera ( kao što je, hiralnom HPLC, rekristalizacijom diastereomernih mešavina i slično) ili selektivna sinteza (kao Što je, putem enantiomerna selektivna sinteza i slično) pojedinačnih izomera se postiže primenom različitih postupaka koji su dobro poznati stručnjacima u oblasti.

[0311]Ovde opisana jedinjenja Formule (Ia) mogu biti pripremljena u skladu sa postupcima iz relevantne objavljene literature koje bi koristio stručnjak u oblasti. Primerni reagensi i postupci za te reakcije pojavljuju se ovde u nastavku u radnim primerima. Protekcija i đeportekcija mogu se sprovesti postupcima opŠte poznatim u struci (pogledati, na primer, Greene, T. W. and Wuts, P. G. M„ Protecting Groups in Organic Svnthesis, 3rd Edition, 1999 [VVilevj).

[0312]Ovde opisana otelotvorenja uključuju svaku kombinaciju jedne ili više soli izabrane iz grupe koju čine naredne grupe i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati i hidrati: kalcijum so od (R)-2-(7-(4<iklopentil-3-(trifluorometii)benziloksi)-l,2,314-tetrahidrociklopenta[b!indol-3-iljsirćetne kiseline; i L-arginin so od (R)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(tr:fluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3il)sirćetne kiseline.

FARMACEUTSKI SASTAVI

[0313]Ovde su takođe opisani farmaceutski sastavi koji sadrže jedno ili više jedinjenja kao što je ovde opisano, i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Neki oblici se odnose na farmaceutske sastave koji sadrže jedinjenje koje je ovde opisano i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0314]Ovde su takođe opisani postupci za proizvodnju farmaceutskog sastava koji sadrži barem jedno jedinjenje prema bilo kojem ovde opisanom otelotvorenju jedinjenja i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0315]Formulacije mogu biti pripremljene bilo kojim prikladnim postupkom, uobičajeno je uniformno miješanje aktivnog jedinjenja sa tečnim ili fino usitnjenim čvrstim nosačima, ili oboje, u određenim proporcijama, a zatim, ako je potrebno, oblikovanje dobijene smese u željeni oblik.

[0316]Uobičajeni ekscipijensi, poput veznika, punjača, prihvatljivih agenasaza vlaženje, lubrikanata i agensa za pomaganje razgradnje mogu se koristiti u tabletama ili kapsulama za oralnu primenu. tečni sastavi za oralnu primenu mogu biti u obliku rastvora, emulzija, vodenih ili uljnih suspenzija i sirupa. Alternativno, oralni sastavi mogu biti u obliku suvog praška koji se može rekonstruisati vodom ili nekim drugim prikladnim tečnim nosačem pre upotrebe. Dodatni aditivi poput agenasa za suspenzovanje ili emulgovanje, ne-vodeni nosači (uključujući jestiva ulja), konzervansi i arome i boje mogu se dodati tečnim sastavima. Parenieralni oblici doziranja mogu se pripremiti otapanjem jedinjenja kao što je ovde opisano u prikladnom tekućem nosaču i filter sterilizacijom rastvora pre punjenja i zatvaranja odgovarajuće bočice ili ampule. To su samo neki od primera od mnogih odgovarajućih postupaka koji su dobro poznate u struci za pripremu oblika doziranja.

[0317]Ovde opisano jedinjenje može se formulisati u farmaceutske sastave upotrebom tehnika dobro poznatih stručnjacima u oblasti. Prikladni farmaceutski prihvatljivi nosači, osim onih koji su navedeni ovde, poznati su uMiuci. na primer, poledati Remington, The Science and Practice of Pharmacv. 20th Edition. 2000, Lippincott VVilliams & Wilkins, (urednici: Gennaro etal.)

[0318]Iako je moguće da, za upotrebu u profilaksi ili lečenju, jedinjenje koje je ovde opisano može,Kao alternativni način upotrebe, biti primenjeno kao sirova ili čista hemijska supstanca. ipak je poželjno prikazati jedinjenje ili aktivni sastojak kao farmaceutsku formulaciju ili sastav koji dalje sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0319]Takode su opisane farmaceutske formulacije koje sadrže jedinjenje koje je nvde opisano ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat ili derivat, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili profilaktičkim sastojcima. Nosači moraju biti „prihvatljivi" u smislu da su kompatibilni sa drugim sastojcima formulacije i da ne deluje štetno na primaoca formulacije.

[0320]Farmaceutski sastavi uključuju one prikladne za oralno, tektalno, nazalno, površinsko (uključujući buklano i sublingvalno), vaginalno ili parenteralno (uključujući intramuskularno, potkožno i intravensko) davanje ili u obliku pogodnom za primenu inhalacijom, insuflacijom ili sa transdermalnim flasterima. Transdermalni flasteri otpuštaju lek kontrolisanom brzinom pružajući lek za apsorpciju na detotvoran način sa minimalnom razgradnjom leka. Tipično, transdermalni flasteri sadrže nepropustan stražnji sloj, sloj lepljiv jednim pritiskom i zaštitni sloj koji se može odstraniti sa prvim slojem. Osoba sa uobičajenim poznavanjem struke će razumeti i ceniti tehnike koje su odgovarajuće za izradu željenih, delotvomih transdermalnih flastera prema potrebama stručnjaka.

[0321] Ovde opisana jedinjenja, zajedno sa uobičajenim katalizatorom, nosačem ili razredivačem, mogu se staviti u oblik farmaceutske formulacije i njene jedinične doze, a u tom obliku se mogu koristiti kao čvrsta tela, kao što su

tablete ili napunjene kapsule, ili tečnosti kao što su rastvori, suspenzije, emulzije, eliksiri, gelovi ili kapsule napunjene istim, sve za oralnu upotrebu; u obliku supozitorijuma za rektalnu primenu; iii u obliku sterilnih injekcijskih rastvora za parenteralnu (uključujući potkožnu) upotrebu. Takvi farmaceutski sastavi i njihovi jedinični oblici doziranja mogu sadržati uobičajene sastojke u uobičajenim razmerama. sa ili bez dodatnih aktivnih jedinjenja ili principa i takvi jedinični dozirajući oblici mogu sadržati bilo koju odgovarajuću delotvornu količinu aktivnog sastojka srazmemu sa određenim rasponom dnevne doze koji se koriste

[0322] Za oralnu primenu, farmaceutski sastav može biti u obliku, npr., tablete, kapsule, suspenzije iii tečnosti. Poželjno je da se farmaceutska formulacija pravi u obliku jedinične doze koja sadrži određenu količinu aktivnog sastojka. Primeri takvih jedinica doziranja su kapsule, tablete, prašci, granule ili suspenzije, sa uobičajenim dodacima kao što su laktoza, manitol, kukuruzni škrob ili krompirov škrob; sa veznicima poput kristaline celuloze, derivata celuloze, akacije, kukuruznog škroba ili želatine; sa agensima za razgradnju poput kukuruznog škroba, krompirovog škroba ili natrijum karboksimetil celuloze; i sa lubrikantima kao što su talk ili magnezijum stearat. Aktivni sastojak se takođe može primijeniti injekcijom kao sastav u kojem se, na primer, rastvor soli, dekstroza ili voda mogu koristiti kao odgovarajućim farmaceutski prihvatljivi nosači.

[0323] Ovde opisana jedinjenja, ili njihove soli, soivate, hidrate ili fiziološki funkcionalni derivati mogu se koristiti kao aktivni sastojci u farmaceutskim sastavima, specifično kao moduiatori SIPI receptora. Izraz „aktivni sastojak" je definisan u kontekstu „farmaceutskog sastava" i treba da označi sastojak farmaceutskog sastava koji osigurava primami farmakološki efekat, za razliku od „neaktivnog sastojka" koji bi bio opste prepoznat po tome Što ne pruža ni jednu farmaceutsku korist.

[0324] Doza kada se koriste ovde opisana jedinjenja može varirati u širokim granicama, i kao Što je uobičajeno i poznato lekarima, ona se odmerava prema pojedinačnim uslovima u svakom pojedinačnom slučaju. To zavist, na primer, od prirode i jačine bolesti koja se leči, od stanja pacijenta, od korišćenog jedinjenja i od toga da li se akutno ili hronično bolesno stanje tretira ili se sprovodi profilaksa ili da li se dalja aktivna jedinjenja daju kao dodatak jedinjenjima koja su ovde opisana. Tipične ovde opisane doze uključuju, ali nisu ograničene na, oko 0,001 mg do oko 5000 mg, oko 0,001 mg do oko 2500 mg, oko 0,001 mg do oko 1000 mg, 0,001 mg do oko 500 mg, 0,001 mg đo oko 250 mg, oko 0,001 mg do oko 100 mg, oko 0,001 mg do oko 50 mg i oko 0,001 mg do oko 25 mg. Višestruke doze mogu se dati tokom dana, posebno kad se smatraju da su relativno veliki iznosi potrebno, na primer, 2, 3 ili 4 doze. U zavisnosti od pojedinca i kako je procenjeno da je odgovarajuće od strane lekara, može biti potrebno odstupiti na više ili na niže od ovde opisanih doza

[0325] Količina aktivnog sastojka ili njegove aktivne so, solvat ili hidrata derivata, potrebna za upotrebu u ovom tretmanu variraće ne samo sa odabranom određenom soli, nego će zavisiti i od načina primene, prirodi stanja koje se tretira i starosti i stanja pacijenta, i u krajnjoj liniji je odluka lekara. Uglavnom, stručnjak u oblasti će znati kako da ekstrapolirati podatke dobijenein vivou jednom modelu, obično na životinjskom modelu, u drugi, kao što je čovek. U nekim okolnostima, te ekstrapolacije mogu biti uglavnom zasnovane na težini životinjskog modela u poređenju sa drugim, kao što je sisar, poželjno čovek, međutim, češće, tc ekstrapolacije nisu jednostavno zasnovane na težini već je potrebno uračunati različite faktore. Tipični faktori uključuju tip, starost, težinu, pol, prehranu i zdravstveno stanje pacijenta, ozbiljnost bolesti, način davanja, farmakološka razmatranja kao što su aktivnost, efikasnost, farmakokinetički i tokskološki profili određenog upoirebljenog jedinjenja, da U se koristi sistem oslobađanja leka, da li se radi o akutnom ili hroničnom statusu bolesti koja se tretira ili se provodi profilaksa, i da li se dalja aktivna jedinjenja daju dodatno sa jedinjenjima koja su ovde opisana i kao deo kombinovanog leka. Režim doziranja za lečenje bolesnog stanja sa jedinjenjima i/ili sastavima koji su ovde opisani je odabran u skladu sa različitim faktorima uključujući i prethodno navedene. Dakle, stvarni režim doziranja koji se koristi može široko varirati i stoga može odstupati od poželjnog režima doziranja, a onaj ko je vešt u struci će prepoznati dase doziranje i režimi doziranja izvan ovih tipičnih mogu ispitati i, ako je potrebno, mogu se koristiti u postupcima koji su ovde opisani.

[0326] Željena doza može prikladno biti u jednoj dozi ili kao podeljene doze primenjene u odgovarajućim intervalima, na primer, kao 2,3,4 ili više pod-doze dnevno. Te manje doze mogu dalje biti podeljene, na primer u određeni broj odvojenih slobodno raspoređenih davanja. Dnevna doza može biti podijeljena, posebno kad se primenjuju relativno velike količine kao odgovarajuće, u nekoliko, na primer 2, 3 ili 4 delimična davanja. Ako je prikladno, u zavisnosti od pojedinačnog ponašanja, može biti potrebno odstupiti na više ili na niže od navedene dnevne doze.

[0327] Za priprtransplantovanihemu farmaceutskih sastava od jedinjenja koja su ovde opisana, prikladan farmaceutski prihvatljiva nosač može biti čvrsto telo, tečnost ili smesa obadva. Čvrsti oblici sastava uključuju praškove, tablete, pilule, kapsule, kasete, čepiće i disperzivne granule. Čvrsti nosač može biti jedna ili više susptanci koje takođe mogu delovati kao razređivači, agensi za poboljšanje ukusa, rastvaraČu, lubrikanti, sredstva za stispenzovanje, veznici, konzervansi, agensi za razgradnju tableta, ili materijali za kapsule.

[0328] U slučaju praškova, nosač je fino usitnjena čvrsta materija koja je u smesi sa fino usitnjenom aktivnom komponentom.

[0329] U slučaju tableta, aktivna komponenta je pomiješana sa nosačem koji ima potreban kapacitet vezanja u prikladnim proporcijama i zatim zbijen u željeni oblik i veličinu.

[0330] Praškovi i tablete mogu sadržati različite udele aktivnog jedinjenja. Tipična količina u prašku iii tableti može biti od 0,5 do oko 90 posto aktivnog jedinjenja. Međutim, stručnjak će znati kad su potrebne količine izvan tog raspona. Prikladni nosači za prašak i tablete su magnezijum karbonat, magnezijum stearat, talk, šećer, laktoza, pektin, dekstrin, škrob, želatin, tragakant, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza, vosak niske tačke topljenja, kakao maslac i slično. Pojam „sastav" uključuje formulaciju aktivnog jedinjenja sa materijalom za kapsuliranje kao nosačem, koji daje kapsulu u kojoj je aktivna komponenta, sa ili bez nosača, okružena nosačem, koji je tako povezan s njom. Slično, uključene su vrećice pastile. Tablete, prašci, kapsule, pilule, vrećice i pastile se mogu koristiti kao čvrsti oblici pogodni za oralnu primenu.

[0331] Za dobivanje supozitorijma, vosak niske tačke topljenja, kao što je smesa glicerida masnih kiselina ili kakao maslac, prvo se topi i aktivna komponenta se u njemu homogeno disperzuje (na primer, miješanjem). Zatim se istpoljena homogena smesa premešta u pogodne kalupe, i ostavlja da se ohladi pri čemu oćvrsne.

[0332] Formulacije prikladne za vaginalnu primenu mogu biti predstavljene kao pesari, tamponi, kreme, gelovi, paste, pene ili sprejevi koji kao dodatak aktivnom sastojku sadrže i takve nosače koji su poznati u struci kao prikladni.

[0333] Sastavi tečnog oblika uključuju rastvore, suspenzije i emulzije, na primer, vodene ili voda-propilen glikol rastvore. Na primer, parenteralni injekcijski tečni sastavi mogu se formulisati kao rastvori u vodenom rastvoru polietilen glikola. Injektibilni sastavi, na primer sterilne injekcijske vodene iii uljane suspenzije, mogu biti formulisane prema poznatom načinu korišćenjem pogodnog disperznog ili agensa za vlaženje i agensa za suspenzovanje. Sterilni injekcijski sastav može takode biti sterilni injekcijski rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom razređivaču ili rastvaraČu. na primer kao rastvoru 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji se mogu koristiti su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Osim toga, sterilna, fiksna ulja uobičajeno se koriste kao medijumi za rastvaranje ili suspenzovanje. U tu svrhu može se koristiti bilo koje blago fiksirano ulje uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Pored toga. masne kiseline kao što je oleinska kiselina nalaze primenu u pripremi injekcija.

[0334] Ovde opisana jedinjenja mogu se tako formulisati za parenteralno davanje (npr. injekcijom, na primer bolus injekcijom ili neprekidnom infuzijom) i mogu se nalaziti u jediničnom obliku doziranja u ampulama, već napunjenim špricevima, infuzijama male zapremine ili u posudi za više doza sa sa dodatkom konzervansa. Farmaceutski sastavi mogu biti u obliku suspenzija, rastvora, ili emulzija u uljnim ili vodenim nosačima, a mogu sadržati agense za formulisanje poput agense za suspenzovanje. stabilizovanje i/ili disperzovanje. Alternativno, aktivni sastojak može biti u obliku praška, dobijen aseptičkom izolacijom sterilne čvrste materije ili liofifizacijom iz rastvora, za konstituisanje sa pogodnim tečnim nosačem, npr. sterilnom voda bez pirogena, pre upotrebe.

[0335] Vodene formulacije prikladne za oralnu upotrebu se mogu pripremiti rastvaranjem ili suspenzovanjem aktivnog sastojka u vodi i dodavanjem prikladne boje, ukusa, stabilizatora i agensa za zgušnjavanje, po želji.

[0336] Vodene suspenzije pogodne za oralnu upotrebu se mogu pripremiti disperzijom fino usitnjene aktivne komponente u vodi sa viskoznim materijalom, kao što su prirodne ili sintetičke gume, smole, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza, ili drugi dobro poznati agensi za suspenzovanje.

[0337] Takođe su uključeni čvrsti oblici sastava kojima je namena da budu pretvoreni, neposredno pre upotrebe, u tekuće oblike sastava za oralnu primenu. Takvi tečni oblici uključuju rastvore, suspenzije i emulzije. Ovi sastavi mogu sadržati, uz aktivnu komponentu, boje, arome, stabilizatore, pufere, veštačke i prirodne zaslađivače. disperzijske agense, agense za zgušnjavanje, agense za pospešivanje rastvaranja i slično.

[0338] Za lokalnu primenu na epidermu, jedinjenja koja su ovde opisana mogu se formulisati kao masti, kreme ili losioni, ili kao transdermalni flaster.

[0339] Masti i kreme mogu, npr., biti formulisane sa vodenom ili uljanom bazom sa dodatkom prikladnog agensa za zgušnjavanje i/ili agensa za formiranje gela. Losioni mogu biti formulisani sa vodenom ili uljnom bazom i uglavnom će takođe sadržad jedan ili više agens za emulzičnost, stabilizatore, disperzijske agense, agense za suspenzovanje, agense za zgušnjavanje, ili agense za boju. [03401Formulacije prikladne za lokalnu primenu u ustima uključuju pastile koje sadrže aktivni sastojak na bazi poboljšivača ukusa, koji je uobičajeno saharoza, akacija ili tragakant; pastile koje sadrže aktivni sastojak na inertnoj osnovi kao Što su želatina i glicerin ili saharoza i akacija; i sredstva za ispiranje usta koja sadrže aktivni sastojak u pogodnom tekućem nosaču.

[0341]Rastvori ili suspenzije se primenjuju direktno u nosnu šupljinu uobičajenim načinima, npr, sa kapaljkom, pipetom ili sprejem. Formulacije mogu biti u jediničnim ili sistemima za više doza. U potonjem slučajukapaljke ili pipete, to se može postići davanjem pacijentu odgovarajuće, prethodno određene zapremine rastvora ili suspenzije. U slučaju spreja, to se može postići npr. pomoću raspršivača sa odmernom pumpicom.

[0342]Primena na respiratorni trakt se takođe može postići formulacijom aerosola u kom je aktivni sastojak u pakovanju pod pritiskom sa prikladnim pogonskim gasom. Ako se jedinjenja koja su ovde opisana, ili farmaceutski sastavi koji ih sadrže, primenjuju kao aerosoli (npr., nazalne aerosoii, inhalacijom), to se može sprovesti, na primer, upotrebom spreja, raspršivača, raspršivača sa pumpicom, aparata za inhalaciju, odmernog inhalatora ili inhalatora suvog praška. Farmaceutski oblici za primenu jedinjenja koja su ovde opisana kao aerosoli mogu se pripremiti postupcima koji su dobro poznati stručnjaku u oblasti. Rastvori ili disperzije jedinjenja opisanih u tekstu tli farmaceutski prihvatljive soli, solvati, hidrati ili njihovi derivati u vodi, smesi vode i alkohola ili u prikladnim rastvorima soli, na primer, mogu se upotrebiri sa uobičajenim dodacima (npr., benzil alkohol ili drugi pogodni konzervansi), agensima za pojačavanje apsorpcije za povećanje biološke raspoloživosti, agensima za pospešivanje rastvaranja, disperzantima i drugim i, ako je potrebno, sa uobičajenim postisnim sredstvima (npr., ugljen dioksid, CFC, kao što su dihlorodifluorometan, trihlorofluorometan, dihlorotetrafluoroetan i slično). Aetosol može prikladno takođe sadržati tenzid kao Što je lecitin. Doza leka se može kontrolirati pomoću odmernog ventila.

[0343]U formulacijama za primenu u respiratornom traktu, uključujući intranazalne formulacije, jedinjenje će uglavnom imati malu veličinu čestica, na primer reda veličine od 10 mikrona ili manje. Takva veličina čestica može se dobiti načinima koji su poznati u struci, na primer mihronizacijom. Kada se tako želi, formulacije prilagođene za postupno otpuštanje aktivnog sastojka mogu se koristiti.

[0344]Alternativno, aktivni sastojci se mogu dobiti u obliku suvog praška (npr. mešavina praška jedinjenja u odgovarajućoj bazi u praška kao što su laktoza, škrob, derivati škroba kao što je hidroksipropilmetilceluloza i polivinilpirolidon (PVP)). Pogodno je da praškasti nosač formira gel u nosnoj šupljini. Sastav u praška može se nalaziti u jediničnom obliku doze (npr., kapsule, kasete) kao i za želatine ili blister pakovanja, iz kojih se prašak može davati pomoću inhalatora.

[0345]Farmaceutski sastavi su poželjno u jediničnim oblicima doziranja. U takvom obliku, sastav je podijeljen u jedinične doze koje sadrže odgovarajuće količine aktivne komponente. Oblik jedinične doze može biti pakovani sastav, pri čemu pakovanje sadrži diskretne količine sastava, poput pakovanih tableta, kapsula i praška u bočicama ili ampulama. takođe, jedinični oblik doziranja može biti sama kapsula, tableta, vrećica ili pastila, ili to može biti odgovarajući broj bilo čega od navedenog u zapakovanom obliku.

[0346]U nekim otelotvorenjima, ovi sastavi su tablete ili kapsule za oralnu primenu.

[0347]U nekim otelotvorenjima, ovi sastavi su tečnosti za inlravensku primenu.

[0348]Jedinjenja koja su opisani ovde mogu po izboru biti kao farmaceutki prihvatljive soli uključujući farmaceutski prihvatljive adicijske soli pripremljene iz farmaceutski prihvatljivih neotoksičnih kiselina, uključujući neorganske i organske kiseline. Primeri takvih kiselina uključuju, ali nisu ograničeni na, sirćetnu, benzensulfonsku, benzojevu, kamforsulfonsku, limunsku, etensulfonsku, dihlorsirćetnu, mravlju, fumarnu, glukonsku, giutaminsku, hipurinsku, bromovodičnu, hlorovodičnu, izetionsku, mlečnu, maleinsku. jabučnu, bademovu, melansulfonsku. mucinsku, azotku, oksalnu, pantotensku, fosfornu, sukcinsku, sumpornu, vinsku, oksalnu, p-toluensulfonsku i slično, kao što su one farmaceutski prihvatljive soli navedene kod Berge et al., Journal of Pharmaceutical Sciences. 66:1-19(1977).

[0349]Kiselinske adicijske soli mogu se dobiti kao direktni proizvodi sinteze jedinjenja. Alternativno, slobodne baze se mogu rastvoriti u prikladnom rastvaraČu koji sadrži odgovarajuću kiselinu i so se izoluje isparavanjem rastvarača ili nekim drugim postupkom odvajanja soli i rastvarača. Ovde opisana jedinjenja mogu formirati solvate sa standardnim rastvaračima malih molekularnih težina postupcima koji su poznati u struci.

[0350]Jedinjenja koja su ovde opisani mogu se pretvoriti u „prolekove". Izraz „prolekovi" se odnosi na jedinjenja koji su modifikovana sa specifičnim hemijskim grupama poznatim u struci i koja kad se daju pojedincu podležu biotransformaciji dajući osnovno polazno jedinjenje. Prolekovi se tako mogu gledati kao jedinjenja opisana ovde koja sadrži jedan ili više posebnih netoksičnih zaštitnih grupa upotrebijenih na privremen način, tako da promijene ili da uklone svojstvo jedinjenja. Pristup „proleka" može se koristiti za olakšavanje oralne apsorpcije. Iscrpna diskusija je prikazana kod T. Fliguchi and V. Stella, Pro-drugs as Nove! Deliverv Svstems Vol. 14 of the A.C.S. Svmposium Series; and in Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edvvard B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

[0351|U nekim ovde opisanim otelotvorenjima uključen je postupak proizvodnje farmaceutskog sastava za „kombinovanu terapiju" koji sadrži mešavinu najmanje jednog ovde obelodanjenog otelotvorenja jedin jenja zajedno sa barem jednim poznatim farmaceutskim agensom kao što je ovde opisano i farmaceutski prihvatljivim nosačem.

[0352]Poznato je da kada se agonisti SIPI receptora koriste kao aktivni sastojci u farmaceutskom sastavu, njihova namena nije upotreba isključivo kod ljudi već isto tako i kod svih ostalih sisara. Naravno, nedavna dostignuća u području zdravlja životinja nalažu zaštite koji se uzimaju u obzir za upotrebu aktivnih agenasa, kao Što su agonisti SIPI receptora, za lečenje bolesti ili poremećaja povezanih sa S IP 1 receptorima kod kućnih ljubimaca (npr., mačke, psi, itd), i kod stoke (npr. krava, pilići, ribe i slično). Stručnjaku u ovoj oblasti lako je da razume upotrebu takvih jedinjenja u takvim uslovima.

Hidrati i solvati

[0353]Smatra se da kada se izraz „farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati" koristi da označi određenu formulu, namera je da obuhvatiti solvate t/ili hidrate jedinjenja određene formule, farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja određene formule, kao solvate i/ili hidrate farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja određene formule. Osoba prosečne veštine u struci takođe razume da su hidrati podgrupa solvata.

[0354]Ovde opisana jedinjenja mogu se primeniti u širokom rasponu oralnih i parenteralnih oblika doziranja. Biće jasno stručnjacima u oblasti da naredni oblici doziranja mogu sadržati, kao aktivnu komponentu, ili jedinjenje opisano ovde, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat ili hidrat. Osim toga, različiti hidrati i solvati jedinjenja koja su ovde opisana i njihove soli će se koristiti kao međuproizvodi u proizvodnji farmaceutskih sastava. Uobičajeni postupak za pripremanje i identifikovanje prikladnih hidrate i solvate, osim onih koji su spomenuti ovde, dobro su poznati u struci; pogledati, na primer, stranice 202-209 kod K.J. Guillorv, "Generation of Polvmorphs, Hvdrates, Solvates, and Amorphous Solids," in; Polvmorphism in Pharmaceutical Solids, ed. Harrv G. Brittan. Vol. 95, Marcei Dekker, Inc., New York, 1999.

[0355]Ovde su takode opisani hidrati i solvati ovde opisanih jedinjenja r ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, kako je ovde opisano, koji mogu biti izolovani i karakterisani postupcima koji su poznati u struci, kao što j, termogravimetrijska analiza (TGA), TGA-masena spektroskopija, TGA-infracrvena, đifrakcija rendgenskih zrakova na prašku (PXRD), Karl Fišer titracije, visoke rezolucije spektroskopija rendgenskih zrakova na prašku. Postoji nekoliko kompanija koji pružaju brze i efikasne usluge za identifikovanje solvata i hidrata na rutinskoj osnovi. Primeri kompanija koje nude ove usluge uključuju Wilmington PharmaTech (VVilmington, DE), Avantium Technologies (Amsterdam) i Aptuit (Greemvich, CT).

[0356]Ovde opisana otelotvorenja uključuju svaku kombinaciju jednog ili više solvata ili hidrata izabranog iz naredne grupe;

D-lizin so (5)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta|b]indol-3-iljsirćetna kiselina hidrata; i

(R)-l-fenetilamine so (S)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l ,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline acetonitril solvata.

[0357]U nekim otelotvorenjima, kristalni oblik je (S)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-1,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetna kiselina hidrat.

[0358]U nekim otelotvorenjima, kristalni oblik (5)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometii)benziloksi(-1,2,3,4-tetrahidi'ociklopenta[b]indol-3-il)sirćetna kiselina hidrat ima obrazac difrakcije rendgenskih zraka na prašku značajno kako je prikazano na Slici 12, gde se pod „značajno" smatra da objavljeni vrhovi mogu da variraju otprilike ±0.2°2tf.

[0359]U nekim otelotvorenjima, kristalni oblik (S)-2-(7-{4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il) sirćetna kiselina hidrata ima diferencijalno skeniranje termograma kalorimetrije značajno kako je prikazano na Slici 13, gde se pod „značajno" smatra da objavljene DSC osobine mogu da variraju otprilike + 4 °C.

[0360]U nekim otelotvorenjima, kristalni oblik (S)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il) sirćetna kiselina hidrata ima termogram termogravimetrijske analize značajno kako je prikazano na Slici 13.

[0361]U nekim otelotvorenjima, kristalni oblik (5)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziioksi(-1,2,3.4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetna kiselina hidrat ima analizu sorpcije vlage značajno kako je prikazano na Slici 14, gde se pod „značajno" smatra da objavljene osobine analize sorpcije vlag mogu da variraju otprilike + 5% relativne vlažnosti.

OSTALE KORISTI

[0362] Ovde su takođe opisana radioaktivno obeležena ovde opisana jedinjenja, koja su korisna ne samo za radiološko prikazivanje već takođe u ispitivanjimain vi ero i in vivo,za lokalizovanje i kvantitikovanje SIPI receptora u uzorcima tkiva, uključujući ljudsko tkivo i za identifikovanje SIPI receptor liganada inhibicijom vezivanja radioaktivno obeleženog jedinjenja.

[0363] Takođe su opisani novi testovi SIP I receptora koji obuhvataju takva radioaktivno obeležena jedinjenja.

[0364J Ovde su takođe opisana izotopski obeležena jedinjenja, Izotopski ili radioaktivno obeležena jedinjenja su koja su identična ovde opisanim jedinjenjima, ali uz činjenicu da su jedan ili više atoma zamijenjeni ili supstituisani sa atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se najčešće nalazi u prirodi. Prikladni radlonuklidi koji se mogu ugraditi u ovde opisana jedinjenja uključuju, ali nisu ograničeni na,<j>H (takođe se piše kao D za deuterijum),<3>H (takođe se piše kao T za tricijum), "C. liC, "C, °N,<IS>N,<1>'0,<r>O,<1R>0,,<H>F, 35S,<iS>Cl, "Br,<7l5>Br, "Br, 82Br,<ir>,I,<l24>I, |<:>'T i ?'1. Radionuklid koji se ugrađuje u, na primer, radioaktivno obeleženo jedinjenja će zavisiti od specifične primene tog radioaktivno obeleženog jedinjenja. Na primer, zain vkroobeležavanje i kompetitivno ispitivanje SIPI receptora, jedinjenja koji sadrže<3>H,,<4>C,<82>Br. '-"I, "'I ili '"S ce uglavnom biti najkorisnija. Za rediološku primenu, "C.<1B>F, ] 2r, l.<1:3>1,<l24>I.<M>'l,"Br,<b>Br ili Br će uglavnom biti najkorisniji.

[0365] Podrazumeva se daje „radioaktivno obeleženo" ili „obeleženo jedinjenje" jedinjenje Formule (Ia), (Ic), (Ie), (Ig), (li), (Ik) ili (Im) koje sadrži najmanje jedan radionuklid. U nekim otelotvorenjima radionuklid je odabran iz grupe koju čine Hl, 14C, l25l,<35>S i<S>2Br.

[0366] Određena ovde opisana izotopski obeležena jedinjenja su korisna u testovima raspodele jedinjenja i/ili u tkivima. U nekim otelotvorenjima radionuklid<3>H i/ili<l4>C izotopi su korisni u navedenim ispitivanjima. Dalje, supstitucija sa težim izotopima kao što je deuterijum (tj.,<2>H) može dati određene terapeutske prednosti koje proizlaze iz veće metaboličke stabilnosti (tj. povećanog invivopotu-života ili smanjenja potrebnih doza), te stoga može biti poželjna u nekim okolnostima. Ovde opisana izotopski obeležena jedinjenja mogu se uglavnom proizvesti postupcima analognim onima koji su opisani na Slikama 3 do 6, i primerimainfra,supstitucijom izotopski označenog reagensa sa ne-izotopski označenim reagensom. Ostali postupci sinteze koji su korisni su raspravljaniinfra.Dalje, treba shvatiti da svi atomi prikazani u ovde opisanim jedinjenjima mogu biti ili izotop koji se najčešće pojavljuje od tih atoma ili redi radiološki izotop ili neradioaktivni izotop.

[0367] Postupci sinteze za ugradnju radio-izotopa u organska jedinjenja su primenjivi na ovde opisana jedinjenja, i dobro su poznati u struci. Neki postupci sinteze, na primer. za ugradnju nivoa aktivnosti tricijuma u ciljane molekule, su kako sledi: A. Katalitička redukcija sa tricijum gasom: Ovaj postupak obično daje visoku specifičnu aktivnost proizvoda i zahteva halogenzovane ili nesaturisane prekursore. B. Redukcija sa natrijum borohidridom 1311 jr Ovaj postupak je veoma jeftin i zahteva prekursore koji sadrže funkcionalne grupe koje se mogu smanjiti kao što su aldehidi, ketoni, laktoni, esteri i slično. C. Redukcija sa litijum aluminijum hidridom [<3>Hj: Ovaj postupak daje proizvode maltene teoretske specifične aktivnosti. Takode zahteva prekursore koji sadrže funkcionalne grupe koje se mogu smanjiti kao što su aldehidi, ketoni, laktoni, esteri i slično. D. Obeležavanje izlaganjem tricijum gasu: Ovaj postupak uključujuće izlaganje prekursora koji sadrže razmenjive protone tricijum gasu u prisustvuof odgovarajućeg katalizaora. E. iV-metilacija koristeći metil jodid [<3>H]: Ovaj postupak se obično primenjuje za pripremu O-metil iliN-metil [<3>H] proizvoda tretiranjem odgovarajućih prekursora sa metil jodidom [<3>Hj visoke specifične aktivnosti. Ovaj postupak uglavnom omogućava višu specifičnu aktivnost, kao što je na primer, oko 70-90 Ci/mmol.

[0368] Sintetički postupci ugrađivanja nivoa aktivnosti od<l25>I u ciljane molekule uključuju: A. Sendmajer i slične reakcije: Ovaj postupak u/ansformiše aril amin ili heteroaril amin u diazonijum so, kao Što je diazonijum tetrafluoroborat so, i u posledično u<!2I>,J obeleženo jedinjenje koristeći Na<123>T. Reprezentativni postupak je objavljen od strane Zhu, G-D. i kolega u J. Org. Chem.. 2002, 67, 943-948.

B. Orto<l>2<5>Jodinacija fenols: Ovaj postupak omogućava ugradnju<l23>I na orto položaj fenola kako je

objavljeno od strane Colher, T. L. i kolega u J. Labelled Compd. Radiopharm., 1999,42, S264-S266.

C. Razmena aril i heteroaril bromida sa<l25>I: ovaj postupak uobičajeno ima dva koraka. Prvi korak je oknverzija arila ili heteroaril bromida za odgovarajući tri-alkiltin meduproizvod koriteći, na primer, Pd katalizovanu reakciju [tj. Pd(PtvjP)j] ili kroz aril ili heteroaril litijum, u prisustvu tri-alkiltinhalida ili heksaalkildiiina [npr., (CHsjsSnSnfCHjji]. Reprezentativni postupak je objavljen od strane Le Bas, M.-D. i kolega u J. Labelled Compd. Radiopharm. 2001, 44, S280-S282.

[0369] Radioaktivno obeleženo SIPI receptor jedinjenje Formule (la) može se koristiti u ispitivanju kako bi se identifikvala/evaluirala jedinjenja. Uglavnom, novo sintetizovano ili identifikovano jedinjenje (tj. test jedinjenje) se može oceniti u pogledu svoje sposobnosti da smanji vezivanje „radioaktivno obeleženog jedinjenja Formule (Ia)" za SIPI receptor. S tim u skladu, sposobnost ispitivanog jedinjenja da se nadmeće sa „radioaktivno obeleženim jedinjenjem Formule (Ia)" za vezivanje na SIPI receptor u direktnoj je korelaciji sa njegovim afinitetom vezivanja.

[0370] Ovde opisana obeležena jedinjenja vezuju se na SIPI receptor. U jednom obliku obeleženo jedinjenje ima ICsu manje od oko 500 pM, u drugom obliku obeleženo jedinjenje ima 1C>,0manje od oko 100 uM, u još jednom obliku obeleženo jedinjenje ima ICai manje od oko 10 uM, u još jednom otelovroenju obeleženo jedinjenje ima IC:,« manje od oko 1 pm i u još jednom otelotvorenju obeleženo jedinjenje ima ICsn manje od oko 0,1 uM.

[0371] Druge upotrebe opisanih receptora i postupaka bit će jasne stručnjacima u oblasti, između ostalog, pregledom ovog obelodanjivanja.

[0372] Kao što će se prepoznati, koraci ovde opisanih postupaka ne moraju da se izvode neki određeni broj puta ili nekim određenim redom. Dodatni predmeti, prednosti i nove osobine koje su ovde opisane, biće očigledne stručnjacima u oblasti nakon ispitivanja narednih primera, koji su namijenjeni da budu ilustrativni i nije im namena da budu ograničavajući.

PRIMERI

Primer 1: Sinteze jedinjenja.

[0373] Ilustrovane sinteze za ovde opisana jedinjenja su prikazane na Slikama 3 do 6 gde pramenjive imaju iste definicije kako se koristi kroz ovu patentnu prijavu.

[0374] Ovde opisana jedinjenja i njihove sinteze su dalje ilustrovani narednim primerima. Ovde opisana jedinjenja,supraiinfra,su nazvana prema AuloNom Version 2,2, CS ChemDravv U lira Version 9.0.7. U određenim slučajevima uobičajena imena su korišćena i smatra se da će ta uobičajena imena biti prepoznata od sirane stručnjaka u oblasti.

[0375] Hernija: Spektri protonske nuklearne magnetne rezonance ('H NMR) su zabeleženi na Bruker Avance-400 opremljenim sa QNP (Quad Nucleus Probe) ili BBI (Broad Band Invei se) i z-gradijentom. Spektri proton nuklearne magnetne rezonance (IH NMR) su takođe zabeleženi na Bruker Avance-500 opremljenim sa BBI (Broad Band Inverse) i z-gradijentom. Hemijske promene su date u delovima miliona (ppm) gde se rezidualni signal rastvarača koristi kao referenca. NMR skraćenice su korišćene kako sledi: s = singlet, d - dublet, dd - dublet dubleta, t - triplet, q = kvartet, m = multiplet, bs = širok singlet. Mikrotalasno zračenje se sprovedena koristeći Smith Svnthesizer™ ili Emris Optimizer™ (Biotage). Hromatografija tankog sloja (TLC) je obavljena na silika gelu 60 F;5j (Merck), pripremna hromatografija tankog sloja (pripremna TLC) je obavljena na PK6F silika gel 60 A 1 mm pločama (VVhatman) i kolona hromatografija je sprovedena na silika gel koloni koristeći Kieselgel 60, 0,063-0,200 mm (Merck). Isparavanje je obavljeno pod smanjenim pritiskom na Buchi rotacionom isparivaču. Celite* 545 je korišćen za filtraciju paladijuma.

[0376] LCMS specifikacije: HPLC-pumpe: LC-10AD VP, Shimadzu Inc. ; HPLC sistemski kontroler: SCL-I0A VP. Shimadzu Ine; UV-Detektor: SPD-10A VP, Shimadzu Ine; Autosampler: CTC IITS, PAL, Leap Scientific; Maseni spektrometar: API 150Eks sa Turbo Ion Spra i izvorom, AB/MDS Sciex; Software; Anal vst 1.2.

Ref. Primer 1.1: Priprema 2-(7-(3-cijano-5-(trifluorometoksi)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidro-ciklapenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 4).

Korak A: Priprema etil l-(2-etoksi-2-oksoetil)-2-oksociklopentankarboksUata.

[0377[ Rastvoru etil 2-oksociklopentankarboksilata (93,27 g, 597 mmol) i etil 2-bromoacetata (144,64 g, 866 mmol) u acetonu (1,2 L) dodat je K2CO3(165 g, 1194 mmol). Smesa je zagrejana na 56<U>C tokom 24 sata. Čvrsta materija je isfiltrirana i filter kolač je ispran sa acetonom (3 x 100 mL). Filtrat je koncentrisan i rezultujuća tečnost je pročišćena silika gel slojem kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio žuta tečnost (54,7 g). LCMSm/z= 243,3 [M+H]' ; 'H NMR) (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1.23(1, J= 7,14 Hz, 3H), 1,24 (t, J = 7,14 Hz", 3H), 1,95-2,03 (m, IH), 2,06-2,15 (m, 2H), 2,35-2,50 (m, 2H), 2,55-2,60 (m, IH), 2,80(dd, J= 15,2. 2,09 Hz, IH), 2,95 (dd,J=

15,2, 2,09 Hz, IH), 4,09 (q,J= 7,14 Hz, 2H), 4,12 (q,J =7,14Hz, 2H).

Korak B: Priprema 2-{2-oksociklopentil)sirćetne kiseline.

[0378] Rastvor etil l-(2-etoksi-2-oksoetil)-2-oksociklopentankarboksilata (50,0 g, 206 mmol) u HOAc (500 mLi i 6 M HC1 (250 mL) je zagrejan na 100 °C tokom 6 sata. Rastvarao je uklonjen pod smanjenim pritiskom i ostatak je podeljen između EtOAc (500 mL) i H>0 (200 mL). Vodeni sloj je uklonjen i ekstrakovan sa EtOAc (2 x 250 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa H20 (300 mL), slanim rastvorom (300 mL), osušeni preko NajSCu, proceđeni i koncentrisani to iield title jedinjenje kao bela čvrsta materija (22 g).<!>H NMR (400 MHz. CDCh) 6 ppm 1,59-1.72 (m, IH), 1,75-1,90 (m, IH), 2,03-2,10 (m, IH). 2,20 (dd, i = 10,9, 3,9 Hz, IH), 2.30-2,40 (m, 2H), 2.40-2,50 (m. 2H), 2,80 (dd, 7= 15,7, 7,2 Hz, IH), 11,5 (s. IH).

Korak C: Priprema etil 2-(2-oksociklopentil)acetata.

[0379] Rastvoru 2-(2-oksociklopentil)sirćetne kiseline (23.6 g, 166 mmol) u apsolutnom etanolu (400 mL) dodat je !1:>S04(16,28 g, 166 mmol). Rezultujuči rastvor je zagrejan pod refluksom tokom noći. Reakciona smesa je koncentrisana i tečni ostatak je dodat u ledenu vodu (200 mL). Vodena smesa je ekstrakovana sa DCM (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa H.;0 (300 mL), slanim rastvorom (300 mL), osušeni preko NajSO-u proceđeni, koncentrisani i osušeni pod vakuumom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio žuta tečnost (27,2 g). LCMS m/z = 171,3 [M+H]'; 'NMR (400 MHz, CDCh) 6 ppm 1,19 (t,J- 7,14 Hz, 3 H), 1,50-1,62 (m, 1 H), 1,65-1,80 (m, IH), 1,92-2.02 (m, IH), 2,12 (dd,J= 16.7, 8,86 Hz. I H), 2,19-2,29 (m, 2 sata), 2,30-2,44 (m, 2 sata), 2,65 (dd, J = 15,12.2,6 Hz, IH), 4,07 (q,J= 7.14 Hz, 2H).

Korak D: Priprema etil 2-(7-Hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-iI)acetata.

[0380] 2-jodo-4-metoksianilin (2,0 g, 8,03 mmol) i etil 2-(2-oksociklopentil)acetat (2,05 g, 12,1 mmol) su rastvoreni u DMF (30 mL) i tetraetil ortosilikat (2,12 g, .10,4 mmol) i piridinurnp-toluenesulfonat (PPTS) (0,081 g, 0,321 mmol) su dodati. Reakciona smesa je zagrejana i mcšana na 135°C tokom 4 sata. Nakon hlađenja do 120 °C, DIEA (3,11 g, 24,09 mmol) i paladijum (II) acetat (0,054 g, 0,24.1 mmol) su dodati. Reakciona smesa je mešana tokom 3 sata i zatim podeljena između etil acetata i vode. Vodeni sloj je ekstrakovan dva puta sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrati su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Rezultujuči rastvor je razređen sa 50% etil acetatom u heksanima i filtriran kroz sloj silika gela. Filtrat je koncentrisan i pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo 1,9 g etil 2-(7-metoksi-l,2,3,4tetrahidrociklopenta[b!indol-3-il)acetat containing residual etil 2-(2-oksocikIopentil)acetata. Smesa je rastvorena u DCM (80 mL) i ohlađena do 0 °C. Boron tribromid (21,0 mL, 21,0 mmol, 1,0 M u DCM) je dodat i reakcija je mešana tokom 1.5 sata. Ledena voda je dodat i reakcionoj smesi je dopušteno da dostigne sobnu temperaturu. Vodena smesa je ekstrakovana tri puta sa DCM. Kombinovana organska materija je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (650 mg). LCMSm/z =260,3 [M+HT; 'H NMR (400 MHz, CDClj) 5 ppm 1,29(t, J = 7,2Hz, 3H), 2,05-2,14 (m, IH), 2,50 (dd,J= 16,8, 11,2 Hz, IH). 2,68-2,86 (m, 4H), 3,48-3,58 (m, 111), 4,36-4,24 (m, 2H). 6.66 (dd,J =8,6, 2,4 Hz, IH), 6,85 (d, J = 2,4 Hz, IH), 7,15(d. J =8,7 Hz, IH), 8,4 (s, IH).

Korak E: Priprema 3-cijano-5-(trifluorometoksi)benzoil hlorida.

[0381] Oksalil hlorid (2,0 M u DCM, 0,636 mL, 1,272 mmol) dodat je finoj 3-cijano-5-(trifluorometoksi)benzojevoj kiselini (98 mg, 0,424 mmol) ijedna kap DMF je dodata. Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta i zatim koncenuisana pod smanjenim pritiskom.

Korak F: Priprema 3-(hidrozimetil)5-(trifluorometoksi)benzonitrila.

[0382] 3-cijano-5-(trifluorometoksi)benzoil hlorid (844 mg, 3.38 mmol) je rastvoren u (F (10 mL) i ohlađen do 0 °C. Natrijum borohidrid (320 mg, 8,45 mmol) je dodat, praćen metanolom (2 mL) i reakcija je mešana tokom 20 minuta na 0 °C pre nego što joj je dopušteno da se zagreje do sobne temperature. Nakon 2 sata, reakciona smesa je zakišeljena do pH 3 sa 1,0 M HC1. Vodena smesa je ekstrakovana sa etil acetatom i kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncenuisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (440 mg). LCMSm\ z =218,3 [M+H]'.

Korak G: Priprema 2-(7-(3-cijano-5-(trifluorometoksi)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]tndol-3il)sirćetne kiseline.

[0383] Etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-teirahidrociklopenta[bjindol-3-il)acetat (100 mg. 0,386 mmol) i 3-(hidroksimetil)-5-(trifluorometoksi)benzonitril (84 mg, 0,386 mmol) su rastvoreni u tF (3,0 mL) i ohlađeni do 0 °G Tiifenilfosfin (202 mg, 0,771 mmol) i diizopropilazodikarboksilat (D1AD) (0,15 mL, 0.771 mmol) su dodati. Smesa je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom I sata. Dodatni D1AD (0,15 mL. 0,77.1 mmol) i trifenilfosfin (202 mg, 0,77] mmol) su dodati i reakciona smesa je mešana tokom 1 sata. Reakciona smesa je razređena sa vodom i ekstrakovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovana organska materija je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćena silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo 50,8 mg nečistog etil 2-(7-(3-cijano-5-(trifluorometoksi)benziloksij4,2,3,4-tetiahidrociklopenta[bjindol-3-il)acetata. Materijal je rastvoren u dioksanu (1,3 mL) i 1,0 M vodeni LiOH (0,33 mL. 0,33 mmol) je dodat. Reakcija je posmatrana sa HPLC dok nije procenjena završenom i zatim zakišeljena do pH2sa 1,0 M HCL. Vodena smesa je ekstrakovana tri puta sa etil acetatom. Kombinovana organska materija je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom praćenom sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,1 mg).LCMS m/z - 431,2 [M+H]'; >H NMR)(400MHz, CDjOD) 6 ppm 2,11-2,20 (m, IH), 2,50 (dd, J - 15,8, 8,0 Hz, IH). 2,66-2,84 (m. 4H), 3,51-3,60 (m, IH), 5,18 (s, 2H), 6,78 (dd,J= 8,8, 2,5 Hz, IH). 6,95 (d.J =2,4 Hz. IH), 7,20(d. J= 8.9 Hz. IH), 7.64 (s. IH). 7,73 (s. III), 7.84 (s, IH).

Ref. Primer 1.2: Priprema 2-(7-(3,5-Bis(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta{bJindol3-iljsirćetne kiseline (Jedinjenje 10).

Korak A: Priprema etil 2-(7-(3,5-Bis(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[blindol-3il)acetata.

[0384] Etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta!b]indol-3-il)aceiat (61mg, 0,235 mmol) je rastvoreni u DMF (1,0 mL) i cezijum karbonat (77 mg, 0,235 mmol) i t-(bvomometil)-3,5-bis(trifluorometil)benzen (72 mg, 0,235 mmol) su dodati. Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati i zatim filtrirana kroz sloj od CeliteS1. Filtrat je razređen sa vodom i ekstrakovan tri puta sa etil acetatom. Kombinovana organska materija je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (28,6 mg). LCMSm/z =486,4 [M+H]'.

KorakB: Priprema 2-(7-(3,5-Bis(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-iI)sirćetna kiselina

[0385] Etil 2-(7-(3,5-bis(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetat (28,6 mg, 0,059 mmol) je rastvoren u dioksanu (1,0 mL) i 1,0 M vodcnai LIOH (0,166 mL, 0,166 mmol) je dodat. Rastvor je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre nego što je zakišeljena do pH 3 sa 1,0 M HC1 i ekstrakovan dva puta sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23 mg). LCMSmlz= 458.3 [M+H]"; 'H NMR (400 MHz. CDCb) 5 ppm 2,12-2,24 (m, IH), 2,61( dd, J =17,0,10,7 Hz, IH), 2,73-2,89 (m, 4H), 3,53-3,63 (m, IH), 5,19 (s, 2H), 6,86(dd, J = 8,5, 2,5 Hz, IH), 7,0 (d, J= 2,5 Hz,IH), 7,24 ( d, J = 8,8Hz, IH). 7,82 (s, IH), 7,94 (s, 2H), 8,33 (S, IH).

Ref. Primer 1.3: Priprema 2-(7-(3-cijano-4-izopropoksibenziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indoI3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 5).

Korak A: Priprema 5-(hidroksimetil)2-izopropoksibenzonitriIa.

[0386] Od 3-cijano-4-izopropoksibenzojeve kiseline, na način sličan onom opisanom u Primeru 1.1, Koraci E i F, dobijeno je jedinjenje iz naslova. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,40 (d, _/ = 6,2 Hz, 6H), 1,72 (t../ - 5,6 Hz. IH), 4,6-4,69 (m. 3H), 6,95 (d,J= 8.8 Hz, !H), 7.50 (dd.J- 8,6, 2,0 Hz. IH), 7.55 (d,J* 2.3 Hz. IH).

KorakB: Priprema 5-(hlorometil)-2-izopropoksibenzonitrila.

[0387] 5-(hidroksimetil)-2-izopropoksibenzonitril (5,96 g, 31,2 mmol) je rastvoren u toulenu (90 mL) i tionil hlorid (13,65 mL, 187 mmol) je dodat. Reakciona smesa je zagrejana do 75 °C i mešana tokom 20 minuta. Reakciona smesa je razređena sa heksanima i oprana sa vodom i saturisanim vodenim natrijum bikarbonatom. Heksan rastvor je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrisan pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5,6 g). IH NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm1,41 (d, J =6,1Hz, 6H), 4,52 (s, 2H), 4,66 (septet, J - 6.1Hz. IH), 6,95 (d,J= 8-6 Hz, IH), 7,51 (dd,J =8.7. 2,4 Hz, IH), 7.57 (d,J2.3 Hz, IH).

Korak C: Priprema etil 2-(7-(3-cijano-4-izopropoksibenzi!oksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3il]acetata.

[0388] Etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetat (1,237 g, 4,77 mmol) je rastvoren u DMF (12 mL) i cezijum karbonat (1,554 g, 4,77 mmol) je dodat. Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta i 5-(hlorometil)-2-izopropoksibenzonitril (1,0 g, 4,77 mmol) je dodat. Reakciona smesa je mešana na 40°C tokom 2 sata pre nego što je ohlađena do sobne temperature. Heterogena smesa je filtrirana kroz Celite" i filtrat je koncentrisan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,32 g). LCMSm/z= 433,5 [M+H]";<!>H NMR (400 MHz, CDCb, 6 ppm 1,29 (t.J- 7, 2 Hz, 3H), 1,40( d, J =6,1 Hz, 6H), 2,05-2,16 (m, IH), 2,50( dd, J= 16,7, 11,1 Hz, IH), 2,69-2,88 (m, 4H). 3,50-3,59 (m, IH), 4,16-4,26 (m, 2H), 4,65 (septet,J= 6,1 Hz, IH), 5,00 (s, 2H), 6,80 (dd,J- 8.7. 2,5 Hz, IH), 6,94-6,97 (m, 2H), 7,20 (d,J =8,8 Hz, IH), 7,58 (dd,J =8,7, 2,3 Hz, IH), 7,64 (d,J =2,0 Hz, IH), 8,45 (s, IH).KorakD: Priprema 2-(7-(3-cijano-4-izopropoksibenzUoksi)-l,23,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-tljsirćetne kiseline.

[03891 Etil 2-(7-(3-cijano-4-izopropoksibenziloksi)-l.,2,3,4-tetrahidrociklopenta[bjindol-3-il)acetat (1.32 g, 3,05 mmol) je rastvoren u dioksanu (34 mL) i 1,0 M vodeni LiOH (9,16 mL, 9.16 mmol) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 6 sati i zatim zagrejana do 35 SC i mešana tokom jednog dodatnog sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je zakišeljena do pH 3 sa 1,0 M HCI i podeljena između vode i etil acetata. Organska materija je uklonjena i vodeni sloj je ekstrakovan dva puta sa etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,23 g). LCMS m/z = 405,61 M+H 1' ; 'H NMR (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 1,32 (d,J-= 5,9 Hz, 6H), 2,03-2,13 (m, IH), 2,35 (dd,J= 15,9, 9,0 Hz, IH), 2,58-2,77 (m, 4H), 3,41-3,51 (m, IH), 4,79 (septet,J= 5-9 Hz, IH), 5,01 (s. 2H), 6,69 (dd,J =8,8, 2,4 Hz, 1 H), 6,91 (d, J = 2,4 Hz, IH), 7,19 (d, i = 8,6 Hz, IH). 7,28 (d. J = 8,8 Hz, IH), 7,70(dd, J= 8,8, 2,3 Hz, IH), 7,76 (d,./ = 2,1 Hz. IH), 10,45 (s, IH), 12,1 (bs, IH).

Razlaganje puteni ruralne HPLC.

[0390] Kolona : normalna faza pripremne ChiralCel OD, SOksSOOmm ID. 20 pm veličina čestica Agens za ispiranje: 75% heksan/25% izopropanol, sa 0,05% trifluorosirćetna kiselinom

Gradijent: izokratski

Protok: 60 mL/minuta

Detektor: 254 nm

Vremena zadržavanja: prvi enantiomer: 33 minuta; drugi enanuomer: 40 minuta.

Primer 1.4: Priprema 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifliiorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 12).

Korak A: Priprema Metil 4-hloro-3-(trifluorometil)benzoata.

[0391] Rastvoru 4-hloro-3-(trifluoromeul)benzojeve kiseline (10,37 g, 46,2 mmol) u metanolu (100 mL) dodala je koncentrisana sumporna kiselina (0,51 mL, 9,24 mmol). Smesa je zagrejana pod reiluksom tokom noći. Smesi je dopušteno da se ohladi do sobne temperature i koncentrisana je pod smanjenim pritiskom kako bi se formirala čvrsta materija. Čvrsta materija je filtrirana i oprana sa vodom. Čvrsta materija je zatim mešana sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvor kako bi se uklonili svi ostaci sumporne kiseline, filtrirani i osušeni pod vakuumom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (10,18 g).lH NMR (400 MHz, CDCb) 6' ppm 3,96 (s, 3H), 7,60 (d,i= 8,34 Hz, IH), 8,14 (dd,J =8,34, 2,02 Hz, IH), 8.37(d, J= 2,02 Hz, I H).

Korak B: Priprema Metil 4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benzoata.

[0392] Cink(II) hloridu (0,5 M rastvor u tetrahidrofuranu, 88,0 mL, 44,0 mmol) dodat je ciklopentilmagnezijum hlorid (2 M rastvor u eteru, 20,5 mL, 41,1 mmol). Rezultujuća suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Gore navedenoj suspenziji dodat je metil 4-h)oro-3-(trifluorometil)benzoat (7,00 g, 29,3 mmol) i bis(tri-terfbutilfosfinejpalađijum (1,35 g, 2,64 mmol) na sobnoj temperaturi. Smesa je zagrejana pod refluksom tokom 2 sata. Smesi je dopušteno da se ohladi do sobne temperature, ugašena je sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvorom i filtrirania. Filtrat je eksuakovan sa etil acetatom. Organski sloj je osušen preko nevodenog natrijum sulfata, koncentrisan pod smanjenim pritiskom i pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje (7,64 g). LCMSm/z= 273,2 IM+H |'; 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,57-1,66 (m, 2H), 1,68-1,82 (m, 2H), 1,82-1,94 (m, 2H), 2,04-2,21 (m, 2H), 3,33-3,49 (m, IH), 3,93 (s, 3H), 7.54 (d,J =8,21 Hz, IH), 8,1.3 (dd.J ~8,34, 1,77 Hz, IH), 8,27 (s, IH).

Korak C: Priprema (4-ciklopenitl-3-(trifluorometil)fenil)metanol.

[0393] Rastvoru metil 4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benzoata (8,16 g, 30,0 mmol) u 1,4-dioksanu (200 mL.) dodat je litijum borohidrid rastvor (2 M u tetrahidrofuranu, 30,0 mL, 59,9 mmol). Smesa je zagrejana pod refluksom tokom 2,5 sata. Smesi je dopušteno da se ohladi do sobne temperature i pažljivo je ugašena sa 1 N vodenim HCI rastvorom do pH 5. Organski sloj je uklonjen i vodeni sloj je ekstrakovan sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko nevodenog natrijum sulfata, koncentrisani pod smanjenim pritiskom i pročišćeni silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (1,21. g),!H NMR (400 MHz. CDCb) 6 ppm 1,56-1,63 (m, 2H), 1,66-1,77 (m, 2H), 1,81-1,91 (m, 2H). 2,03-2.15 (m, 2H), 3,37 (kvintet, i = 8,00 Hz, IH), 4,71 (d,J= 4,29 Hz, 2H), 7,45-7,47 (m, IH), 7,49( d. J= 1,14 Hz, IH), 7,60 (s, IH).

Korak D: Priprema 4-(hlorometil)-l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzena.

[0394](4-ciklopentil-3-(trifluorometil)fenil)metanolu (1,21 g, 4,95 mmol) dodat je tionil hlorid (5,5 mL, 74,2 mmol). Smesa je zagrejana na 50°C tokom 2 sata pre nego što joj je dopušteno da se ohladi do sobne temperature i mešana je na sobnoj temperaturi tokom noći. Smesa je sipana u led i mešana tokom 5 minuta pre nego što je ekstrakovana sa dihlorometanom. Organski ekstrakt je ispran sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvorom, osušen preko nevodenog natrijum sulfata i koncentrisani pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje (1,16 g),lH NMR (400 MHz, CDCb)bppm 1,55-1,63 (m, 2H), 1,69-1,77 (m, 2H), 1,82-1,90 (m, 2H), 2,05-2,13 (m, 2H), 3,37(kvintet, J =3,59 Hz, IH). 4.58 is, 2H), 7,46 (d, i = 8,00 Hz, IH), 7.52 (d,./ = 8,00 Hz, IH), 7,61 (d, i = 1,52 Hz, IH).

Korak E: Priprema etil 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometi])benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b ]indol-3-il)acetata.

[0395]Rastvoru etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-teirahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (50,0 mg, 0,193 mmol) i 4-(hlorometi!)-l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzena (152,0 mg, 0,578 mmol) u DMF (3 mL) dodat je cezijum karbonat (75,0 mg, 0,231 mmol). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći, filtrirana kroz Celite'?;, i koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćena sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio roze ulje (38,7 mg). LCMSm/ z- 486,5 [M+H]'.

KorakF:Priprema 2-(7-(4-ciUopentil-3-(trifluorometii)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol3-

il)sirćetne kiseline.

[0396]Rastvoru etil 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[bjindol-3il)acetat (38,7 mg, 0,080 mmol) u mešanom rastvaraČu meta no la (1,5 mL), tetrahidrofurana (0.5 mL). i vode (0,5 mL) dodat je LiOH hidrat (11,7 mg, 0,279 mmol). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći pre nego što je smesa zakišeljena do pH 4 sa 1 N vodenim HCI rastvorom i ekstrakovanim sa etil acetatom. Organski sloj je osušen preko nevodenog natrijum sulfat, koncentrisan pod smanjenim pritiskom i osušen pod vakuumom. Pena je zdrobljena sa vodom kako bi se dobila čvrsta materija. Čvrsta materija je filtrirana kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio roze čvrsta materija (25,7 mg). LCMSm/ z =458,4 [M+H]"; 'H NMR (400 MHz, DMSO-db) 6 ppm 1,56-1,70 (m, 4H), 1,80-1,87 (m, 2H), 1,95-2,11 (m, 3IT), 2,34 (dd, J = 16,04,8,97 Hz, IH), 2,59-2,74 (m, 411). 3,21-3,25 (m, IH), 3,41-3,49 (m, IH), 5,1.1 (s, 2H), 6,70 (dd,J= 8,72, 2,40 Hz, IH), 6,92 (d,J =2,27 Hz, IH), 7,19 (d,J= 8,72 Hz, IH), 7,61 (d,J= 8,00 Hz, IH), 7,68(d, J- 8,00 Hz, IH), 7,70 (s, IH), 10,45 (s. IH), 12,18 (bs,

IH).

Razlaganje putem hiralne HPLC.

[0397]Kolona: normalna faza pripremne ChiralCel OD, 50 x 500mm ID, 20 pm veličina čestica Agens za ispiranje: IPA containing 0,05% TFA/heksani containing 0,05% TFA (8/92)

Gradijent: izokratski

Protok: 60 mL/minuta

Detektor: 220 nm

Vremena zadržavanja: prvi enantiomer: 38,9 minuta; drugi enantiomer: 48,4 minuta.

Ref. Primer1.5:Priprema 2-(7-((5-izopropoksipirazin-2-il)metoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-

iljsirćetne kiseline (Jedinjenje11).

Korak A: Priprema 2-izopropoksi-5-metilpirazina.

[0398]Rastvoru 2-bromo-S-metiIpirazina (3 g, 17,34 mmol) u 2-propanolu (14 mL) dodat je natrijum propan2-olatc (3,56 g, 43,3 mmol) i zagrejan je pod mikrotalasnim zračenjem na 115 °C tokom 1,1 sata. Organski rastvarač je isparen pre nego što je voda dodata ostatku. Smesa je ekstrakovana sa dihlorometanom (2 x 75 mL). Organska faza je osušena preko nauijum sulfata, filtrirana i koncentrisana. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon ulje (1,0 g). LCMSm/z =153,4 [M+H]<*>; 1II NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm1,27 (d, J=6,19 Hz, 6H), 2,39 (s, 3H), 5,10-5,20 (m, IH), 7.84 (s, IH), 7,99(s, IH).

KorakB: Priprema 2-izopropoksi-5-metilpirazina.

[0399]Smesa 2-izopropoksi-5-metilpirazina (0,250 g, 1,65 mmol), NBS (0,293 g, 1,65 mmol) i AIBN 0,270 g, 1.65 mmol) u toulenu (5mL) je refluksovana tokom i sata nakon čega je 1,0 ekv, NBS-a dodato. Reakciona smesa je zagrejana pod refluksom tokom 20 minuta pre nego što je ohlađena do sobne temperature. Čvrsta materija je uklonjena filtracijom i filtrat je koncentrisan pod vakuumom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon ulje (35 mg).KorakC: Priprema 2-(7-((5-izopropoksipirazin-2-il)metoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-iljsirćetne kiseline.

[0400] Etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklo<p>enta[bJindol-3-il)acetat (0,035 g, 0,135 mmol} i cezijum karbonat (0,048 g, 0,148 mmol) su rastvoreni u DMF (0,5 mL) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 5 minuta. Toj smesi na 0 °C dodat je rastvor 2-(bromometil)-5-izopropoksipirazina (0,034 g, 0,148 mmol) u DMF (0,20mL) i mešana je na sobnoj temperaturi tokom 60 sati. Čvrsta materija je uklonjena filtracijom. Filtrat je pročišćena sa HPLC kako bi se dobio etil 2-(7-((5-izopropoksipirazin-2-il)metoksi)-],2,3.4-tetrahidrociklo<p>entafb]indol-3-il)acetat (11 mg). Esteru rastvorenom u dioksanu (288 mL) dodat je vodeni LiOH (1 N, 72 mL). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati; pre nego što je dodato još vodenog LiOH (IN, 200 mL). Mešanje je nastavljeno tokom i sata. Reakcionoj smesi dodataje voda (1,5 mL) i reakciona smesa je zakišeljena do pH 3 sa 1 N HCI. Smesa je pročišćena sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta materija (7 mg). LCMSm/ z =382,4 [M + H] ; 'H NMR (500 MHz, CDC13) 5 ppm 1,32 (d, J = 6.31 Hz, 6H), 1,95-2,18 (m, IH), 2,28-2,41(m,lH), 2,56-2,79 (m, 4H), 3,36-3,56 (m, IH), 5,09 (s, 2H), 5,15-5,33 (m, IH). 6,71 (d, J = 8.83 Hz. IH). 6,94 (s, IH), 7.20 (d,J =8,83 Hz. IH), 8,20 (s, IH), 8,30 (s, IH), 10,37 (s, IH).

Ref. Primer 1.6: Priprema 2-(7-(3-cijano-4-(tritluorometoksi)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrocikJo-penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 7).

Korak A: Priprema 3-Bromo-4-(trifluorometoksi)benzojeve kiseline.

[0401] 4-(trifIuorometoksi)benzojeva kiselina (2 g, 9,70 mmol) i gvožde(III) hlorid (1,574 g. 9,70 mmol) su suspenzovani u nitrometanu (20 mL). Toj smesi dodat je bromin (0,497 mL, 9,70 mmol) na 0 °C. Rastvor je zagrejan pod mikrotalasnim zračenjem na 110 °C tokom 2 sata. Reakciona smesa dodata je hladnoj vodi (100 mL) i ekstrakovana sa etilacetatom (2 x 100 mL). Organska faza je isprana sa vodenim rastvorom natrijum tiosulfat pentahiđrata i slanim rastvorom. Organski sloj je koncentrisan i ostatak je pročišćen sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (1,5 g). LCMS m/z = 287,0 [M+H]' ; 'H NMR (400 MHz, DMSO-d,3) 6 ppm 7,67 (d, IH), 8,06 (d, IH), 8,29 (s, IH), 13,47 (s. IH).

KorakB: Priprema 3-cijano-4-(trifluorometoksi)benzojeve kiseline.

[0402] 3-Bromo-4-(trifluorometoksi)benzojeva kiselina (1,4 g, 4,91 mmol) i cijanobakar (0,572 g, 6,39 mmol) su mešani u JV-metil-2-pirolidinonu (NMP) (14 mL). Smesa je zagrejana u mikrotalasnoj rerni na 200°C tokom 2 sata. Reakcija je razređena sa dihlorometanom (150 mL). Celite" dodat je i smesa je mešana žustro tokom 10 minuta. Čvrsta materija je uklonjena filtracijom. Organski sloj je ispran sa vodom (125 mL) i koncentrisan. Ostatak je pročišćen sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta materija (0,979 g). LCMSmiz =232,3 [M+H]+.

Korak C: Priprema 5-(hidroksimetil)-2-(trifluorometoksi)benzonitriIa.

[0403] Od 3-cijano-4-(trifluorometoksi)benzojeve kiseline, na način sličan onom opisanom u Primeru 1.3, Korak A, dobijeno je jedinjenje iz naslova kao bistro ulje. LCMS m/z = 218,2 [M+H]'. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 4,81 (s, 2H), 7,40-7,44 (m, IH), 7,57-7,71 (m, 2H), 7,78 (s, IH).

Korak D: Priprema 5-(hlorometil)-2-(trifluorometoksi)benzonitrila.

[0404] 5-(hidroksimetil)-2-(trifluorometoksi)benzoniirii (0,150 g, 0,691 mmol) je razmućen uloulenu (2 mL.) i tionil hlorid (0,303 mL, 4,14 mmol) je dodat. Smesa je zagrejana na 75 C,C tokom 15 minuta. Voda je dodat i smesa je ekstrakovana sa heksanima (2 x 75 mL). Organska materija je tretirana sa vodenim NaHCOj. Organski sloj je uklonjen, osušen preko magnezijum sulfata, filtriran i koncentrisan kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (120 mg). LCMS m/z = 236,2 [M+H]+. IH NMR (500 MHz, CDCb) 5 ppm 1,98 is, IH), 4,52 (s, 211), 7,32-7,34 (m, IH), 7,59-7,62 (m, IH), 7,68 (s, IH).

Korak E: Priprema 2-(7-(3-cijano-4-(trittuorometoksi)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3il)sirćetne kiseline.

[0405] Etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indoi-3-il)acetat (0,100 g, 0,386 mmol)1cezijum karbonat (0,138 g, 0,424 mmol) su rastvoreni u DMF (1,0 mL), mešani na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta, praćeno sa dodavanjem 5-(hlorometil)-2-(trifluorometoksi)benzonitrila (0,100 g, 0,424 mmol) u DMF (0,300 mL) na 0 °C. Ta smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakciona smesa je ugašena sa vodom i ekstrakovana sa etilacetatom (2 x 50 mL). Organska faza je isprana sa slanim rastvorom i koncentrisana. Ostatak je razmućen u dioksanu (4 mL) pre nego što je vodeni 1 N LiOH (1,3 mL) dodat. Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2,5 sata pre nego što je ugašena sa vodom i zakišeljena do pH 3 koristeći vodeni 3 N HCI. Smesa je pročišćena sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,040 g). LCMSm/ z- 431,2 [M + H|\ 'H NMR (500 MHz, DMSO-da)5 ppm 2,00-2,20 (m, IH), 2,01-2,21 (m, IH), 2,23-2,43 (m. IH), 2.55-2,83 (m, 4H), 3,33-3,57 (m, IH), 5,16 (s.

2H), 6,73 (dd,i= 8.83, 2.52 Hz. IH), 6,94 (s, IH), 7,21 (d,J =8,83 Hz, 1H), 7,69 (dd,J= 8,67, 1,42 Hz, IH), 7,94 (dd, i = 8,67, 2,05 Hz, IH), 8,09 (s, IH), 10,40 (s. IH).

Ref. Primer 1.7: Priprema 2-(7-(2,4-Bis(trifluorometii)benziloksi)-l,2,3,4-tetjrahidrociklopenta(b]indoi3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 8).

Korak A: Priprema etil 2-(7-(2,4-Bis(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrocielopenta(b]indol-3il)acetata.

[04061 Smesi etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-teirahidrociklopenU[blindol-3-il)acetata (0,130 g, 0,5 mmol) i K2CO3(0,069 g, 0,500 mmol) u DMF (tmL) dodat je l-(broniometil)-2,4-bis(trifluorometil)benzen (0,154 g, 0,500 mmol). Smesa je zagrejana na 70 °C tokom noći, razmućena u EtOAc, oprana sa vodom (triput) i slanim rastvorom. Organska materija je osušeni preko MgSOa i koncentrisana. Ostatak je pročišćen siiika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasta čvrsta materija (0,195 g), LCMS m/z = 486,3 [M+Hf.

KorakB: Priprema2-(7-(2,4-Bis(trifiuorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indoI-3-il)sirćetne kiseline.

[0407J Rastvoru etil 2-(7-(2,4-bis(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopentafb|indol-3-il)acetat (0,191 g, 0,393 mmol) u dioksanu (1,312 mL) i vodi (0,656 mL) dodat je NaOH (0,826 mL, 0,826 mmol). Smesa je zagrejana pod refluksom tokom 2 sata, ohlađena do sobne temperature i razređena sa vodom. Nakon pranja sa DCM, vodeni sloj je zakišeljen sa 1 M HCI i ekstrakovan sa EtOAc (triput). Kombinovani ekstrakti su isprani sa slanim rastvorom, osušeni preko MgSO^i i koncentrisani kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao purpurnocrvena čvrsta materija (19,9 mg). LCMSm/z= 458,1 IM+H|", 'H NMR (400 MHz. DMSO-4) <5 ppm 2.03-2,13 (m, IH), 2.35( dd, J =15,98, 9,03 Hz, IH), 2,58-2,78 (m, 4H), 3,41-3,52 (m, IH), 5,31. (s, 2H), 6,72( dd, J= 8,78, 2.46 Hz, IH), 6,92(d, J =2,40 Hz, IH), 7,23( d, J= 8,72 Hz, IH), 7,99-8,19 (m, 3H), 10,52 (s, 1H), 12,19 (s, 1 H).

Primer 1.8: Priprema 2-(7-[4-cikloheksil-3-(trifluorometil)ben2iloksi}-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 2).

Korak A: Priprema l-hloro-4-(hlorametil)-2-(trifluorometil)benzena.

[0408] (4-hloro-3-(trifluorometil)fenil)metanol (5.1 g, 24,22 mmol) dodat je u malim delovima tionil hloridu (20 mL, 275 mmol). Reakciona smesa je mešana na 50 °C tokom 18 sati i zagrejana je pod refluksom tokom 23 sata. Smesa je koncentrisana i osušeni pod visokim vakuumom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna tečnost (5,41 g). IH NMR (400 MHz, CDCb) & ppm 4,58 (s, 2H), 7,50-7,51(m. 2H), 7,71 (s, IH).

Korak B: Priprema etil 2-(7-(4-hloro-3-(tritluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol3-iljacetata.

[0409] Smesa etil 2-(7-hidroksi-i,2,3,4-tetrahidrociklopenta[bjindoll-3-il)acetata (222 mg, 0,856 mmol), lhloro-4-(hlorometil)-2-(trifluorometil)benzena (240 mg, 1,048 mmol), i cezijum karbonata (165 mg, 0,856 mmol) u DMF (5 mL) mešana je na sobnoj temperaturi. Nakon 3 dana, još cezijum karbonat (165 mg, 0,856 mmol) je dodato. Nakon mešanje tokom dodatna 2 dana, smesa je ekstrakovana sa vodom i CHjClj. Organska materija je osušeni preko MgSOj, filtrirana i koncentrisana. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (258 mg).LCMS m/ z =452,1 [M+H]'; 'H NMR) (400 MHz, CDC10 5 ppm 1,29 (t,J= 7,2 Hz, 3H), 2,06-2,14 (m, IH), 2,47-2,54 (m, IH), 2,71-2,86 fm, 4H), 3,51-3,57 (m, IH). 4.17-4,25 (m, 2H), 5,10 (s, 2H), 6,82 (dd,J =8,8,2,5, IH), 6,96(d, J =2,5 Hz. IH), 7,21( dd, J=8,8, 0,32 Hz, IH), 7,49-7,52 (m. IH), 7,58 (dd.i = 8,2, 2,6 Hz, IH), 7,80 (d,J= 1.92 Hz, IH), 8,48 (s, IH).

Korak C: Priprema 2-(7-(4-cikloheksiI-3-(trifluorometi])benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3il)sirćetne kiseline.

[0410] Smesa etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometil)benziloksi)-I.2,3,4-tetrahidrociklopentalb]indol-3-il)acetat (50 mg, 0,111 mmol), 0,5 M cikloheksilcink(II) bromida (0,5 M u tF, 3 mL, 1.5 mmol), i bis(tri-(-butilfosfinejpaladijuma (3 mg, 5,87 mmol) je mešana pod refluksom tokom 18 sati. Smesi je dopušteno da se ohladi do sobne temperature pre nego što su voda (1 mL), MeOH (ImL)1LiOH hidrat (70 mg, 1,668 mmol) dodati. Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Smesa je pročišćena sa HPLC. Fragmenti koji sadrže proizvod su bazifikovani sa i M NaHCOj i delimično koncentrisani. Ostatak je ekstrakovan sa 0,5 M limunskom kiselinom i CH^Cb. Organska materija je osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrisana kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao preplanula lepljiva čvrsta materija (14,4 mg). LCMS m/z = 472,2 [M+H]':<1>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,38-1,50 (m, 4H), 1,76-1,85 (m, 6H), 2,11-2,17 (m, IH), 2,58-2,65 (m, IH), 2,75-2,93 (m, 5H), 3,56-3,60 (m, IH), 5,07 (s, 211), 6,84(dd, J =8,8, 2,5 Hz,IH), 7,00 (d, J= 2,4 Hz,IH). 7.21 (d,J = 8,8Hz, IH).7,46 ( d, J= 8.1 Hz, IH), 7,59 (d,J= 8,1 Hz, IH), 7,70(d, J=1,2 Hz, IH), 8.27 (s, 1 H).

Ref. Primer 1.9: Priprema 2-(7-4-(Pirolidin-l-il)-3-(trit]uorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociclo-

penta[b|indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 13).

KorakA:Priprema etil 2-(7-(4(Pirolidin-l-il)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrocik]o-penta[b]indol-3-il)acetata.

[0411]Smesa etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluororneti])ben7.i)oksi)-1,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (50,9 mg, 0,113 mmol), pirolidina (0,047 mL, 0-563 mmol), diacetoksipaladijuma (1,264 mg, 5,63 mmol), bifenil2-il-di-tert-butilfosfina (3,36 mg, 11,0 mmol) i natrijum 2-metilpropan-2-o!ata (27,1 mg, 0,282 mmol) u dioksanu (3 mL) je zagrejana pod mikrotalasnim zračenjem na 120 °C tokom 2 sata. Smesa je pročišćena sa HPLC. Fragmenti koji sadrže proizvod su bazifikovani sa 1 M NaHCOji koncentrisani. Ostatak je ekstrakovan sa 0,5 M limunskom kiselinom i CH2CI2. Organska materija je osušena preko MgSO^, filtrirana, i koncentrisana kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (17,8 mg). LCMSm/ z= 487.4 [M+H]\

Korak B: Priprema 2-(7-(4-(Pirolidin-l-il)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b lindol-3-il)sirćetnekiseline.

[0412]Rastvoru etil 2-(7-(4-(pirolidin-l-il)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3.4--tetrahidrociklopenta[b|indol-3-il)acetata (1.7,8 mg, 0,037 mmol) u 5 mL (tF/voda/MeOH 3:1:1), dodat je LiOH hidrat (7,68 mg, 0,183 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, smesa je delimično koncentrisana i ostatak je ekstrakovan sa 0,5 M limunskom kiselinom i CH2Cb. Organska materija je osušena preko MgSOi. filtrirana i koncentrisana kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braonkasta lepljiva čvrsta materija (16,3 mg). LCMSm/z= 459,4 [M+H]+ ; IH NMR (400 MHz, CDCb) 8 ppm 1,83-1,95 (m. 4H), 2.09-2,16 (m, IH), 2,57-2,64 (m, IH), 2,73-2,90 (m, 4H|, 3,27-3,35 (m, 4H), 3,53-3,59 (m, IH), 4,99 (s, 2H), 6,82(dd, .!- 8,8, 2.4 Hz, IH), 6,96-7,01 (m, 2H), 7,19 fd,J=8,7 Hz, IH), 7,45 (dd,J =8,6 Hz, 2,0 Hz, IH), 7,66 (d,J =2,0 Hz, IH), 8.27 (s, IH).

Ref. Primer 1,10: Priprema 2-(7-(4-izobutil-3-(trifluorometil)benziloksi]-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 14).

[0413]Etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2.3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetat (200 mg, 0,443 mmol) je rastvoren u tF (7 mL) i izobutiicink(ll) bromid (2,66 mL, 1.328 mmol) i bis(tri-t-butilfosfme)paladijum(O) (0,011 g, 0,022 mmol) su dodati. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati i zagrejana do 50 °C. Nakon mešanje tokom 24 sata, izobutilcink(II) bromid (4 mL) je dodat i smesa je zagrejana do 90°C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, i 1,0 M LiOH (5 ml.) i dioksan (5 mL) su dodati. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 sati i zatim zakišeljena do pH 3 sa 1 M HCI. Vodena smesa je ekstrakovana tri puta sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33 mag). LCMSm/z= 446,7 [M+Hl<*>; 'H NMR (400 MHz, DMSO-aY,) 5 ppm 0,89 (d,J= 6,6 Hz. 6H), 1,87-1,98 (m, IH), 2,03-2,1.3 (m, IH), 2,35 (dd, J- 15,9, 9,0 Hz, IH), 2,60-2,76 (m, 6H), 3,42-3,50 (m, IH), 5,12 (s, 2H). 6,71 (dd, J = 8,6, 2,4 Hz, IH), 6,93 (d, J = 2,4 Hz, IH), 7,20( d, J= 8,7 Hz, IH), 7,47( ci. J= 8.0 Hz, IH), 7,67 (d,J =8,2 Hz, IH), 7,75(d, J =1,4 Hz, IH), 10,47 (bs, IH).

Ref. Primer 1.11: Priprema 2-(7-(4-Neopentil-3-(trifluorometiI)benksiloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b|indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje15).

[0414]Etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometil)benziloksi]-l,2)3,4-tetrahidrt]ciklopenta[bjindol-3-il)acetat (200 mg, 0,443 mmol) je rastvoren u tF (7,0 mL) i neopentilcink(II) jodid (2,66 mL of 0,5 M rastvor u tF) i bis(trit-butilfosfine)paladijum(O) (0,011 g, 0,022 mmol) su dodati. Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati i zatim zagrejana do 50 °C. Nakon mešanja tokom 24 sata. neopentilcink(II) jodid (5,0 mL of 0,5 M rastvor u tF) je dodat i reakciona smesa je zagrejana do 90 °C. Reakciona posuda je ohlađena do sobne temperature pre nego što su dodati 1,0 M LiOH (5 mL) i dioksan (5,0 mL). Nakon mešanja tokom 24 sata, reakcija je zakišeljena sa 1,0 M HCI to pH 3 i ekstrakovana tri puta sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćena sa HPLC. pročišćeni fragmenti su neutralizovani sa natrijum bikarbonatom i zatim zakišeljeni do pH 5 sa 1,0 M limunskom kiselinom. Vodena smesa je ekstrakovana sa EtOAc i organski sloj je ispran dva puta sa vodom. EtOAc sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrisan pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12,3 mg). LCMSm/ z- 460,6 [M+H]1; 'H NMR (400 MHz, CDCb)5 ppm 0,96 (s, 9H), 2,08-2,19 (m, IH), 2,61 (dd, J= 17.0.10,9 Hz. IH). 2,73-2,90 (m, 6H), 3,54-3,63 (m, IH), 5,09 (s, 2H), 6,85(dd, J=8,8, 2.5 Hz, IH), 7,0(d, J = 2. 5Hz, IH). 7,22 (d.

./ = 9,0 Hz, IH), 7,36 (d,J= 8,0 Hz, IH), 7,55 (d,J= 8,1 Hz, IH), 7,74 (d,J= 1,1 Hz, IH), 8,29 (bs, IH).

Ref. Primer 1.12: Priprema 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 16).

[0415]Jedinjenje iz naslova je izolovano kao nusprodukt odPrimer 1.11.LCMSmh- 424,2 [M+H j<1>; 'H NMR)

(400 MHz, CDCb.) 6 ppm 2,09-2,19 (m, IH), 2,61(dd, J= 17.3, 11,0 Hz, IH), 2,72-2,89 fm, 4H), 3,53-3,63 (m, IH), 5,10 (s, 2H), 6,83(dd, J = 8,7, 2,4 Hz, IH), 6,97 (d, J = 2, 4 Hz, IH),7,22(d, J= 8,6 Hz, IH), 7,50 (d, J = 8.2Hz, IH), 7,57 (dd,J= 8,2, 1,6 Hz, IH), 7,80 (d,J= 1,8 Hz, IH), 8,33 (bs. IH).

Primer 1.13: Priprema 2-(7-{3-cijano-4-cikIoheksilbenziIoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta{blidol-3 iljsirćetne kiseline (Jedinjenje 17).

Korak A: Priprema Metil 3-cijano-4-hidroksibenzoata.

[0416) Smesi metil 3-bromo-4-hidroksibenzoata (1,78 g, 7.70 mmol) i bakar(I) cijanida (0,897 g, 10,02 mmol) dodat je NMP (10 mL). Smesa je zagrejana do 200°C tokom 2 sata pod mikrotalasnim zračenjem. Smesa je razređena sa etil acetatom i ugašena sa 1 N vodenim HCI rastvorom. Nakon dodavanja slanog rastvora, organski sloj je uklonjen i vodeni sloj je ekstrakovan sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko nevodenog natrijum sulfata, koncentrisani pod smanjenim pritiskom i pročišćeni silika gel kolona hromatografijom. Kombinovani fragmenti su koncentrisani pod smanjenim pritiskom i zdrobljeni sa hladnom vodom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta materija (0,63 g). LCMSm/z= 178,2 [M-Hj+ ; IH NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 3,92 (s, 3H), 6,55 (bs, IH), 7,04 (d,J= 8,72 Hz, IH). 8,15(dd. J= 8,72, 2,15 Hz, IH). 8,23(d. J= 1,89 Hz, IH).

Korak B: Priprema Metil 3-cijano-4-(trifluorometilsulfoniioksi)benzoata.

[0417J Suspenziji metil 3-cijano-4-hidroksibenzoata (1.24 g, 7,0 mmol) u dihlorometanu (35 mL) dodat je trifluorometansulfonski anhisuvd (1,8 mL, 10,7 mmol), diizopropiletilamin (1,8 mL. 10,3 mmol), iN,N-dimetilaminopiridin (0,21 g, 1,75 mmol) na 0°C. Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je ugašena sa 1 N vodenim HCI rastvorom. Organski sloj je uklonjen i vodeni sloj je ekstrakovan sa dihlorometanom. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko nevodenog magnezijum sulfata, koncentrisani pod smanjenim pritiskom i pročišćeni silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon ulje (1,44 g). 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 3,99 (s. 3H), 7,59 (d,J - -8,84 Hz, IH), 8,37 (dd,J^ 8,84, 2,15 Hz, IH), 8,44 (d, .7=2,02 Hz, IH).

Korak C: Priprema Metil 3-cijano-4-cikloheksilbenzoata.

[04181 Rastvoru metil 3-cijano-4-(irifluorometilsulfoni!oksi)benzoai (0,7 g, 2,26 mmol) u tetrahidrofuranu (30 mL) dodat je 0,5 M cikloheksilcink(ll) bromid rastvor u tetrahidrofuranu (13,6 mL, 6,8 mmol) i bis(tri-terr-butilfosfin)paladijum (0,058 g, 0,113 mmol) na sobnoj temperaturi. Smesa je zagrejan pod refluksom tokom 2 sata. Smesi je dopušteno da se ohladi do sobne temperature, ugašena je sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvorom i filtrirana kroz Celite<*>. Filtrat je ekstrakovan sa etil acetatom, Organski sloj je osušen preko nevodenog natrijum sulfata, koncentrisan pod smanjenim pritiskom i pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje (0,24 g). IH NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,24-1,33 fm," IH), 1,42-1,53 (m, 4H), 1,77-1.84 (m, IH), 1,86-1,95 (m, 4H), 2,99-3,08 (m, IH), 3,93 (s. 3H), 7.45 (d,J=8,34 Hz, IH). 8,17 (dd,J=

8,15, 1,71 Hz, IH), 8,27 ( d, J = 1,52 Hz, IH).

Korak D: Priprema 2-cikloheksil-5-(hidroksimetil)benzonitrila.

[0419] Rastvoru metil 3-cijano-4-cikloheksilbenzoat (299,0 mg, 1,229 mmol) u 1.4-dioksanu (30 mL) dodat je 2 M litijum borohisuvd rastvor u tetrahidrofuranu (1,23 mL, 2,46 mmol). Smesa je zagrejana pod refluksom tokom 2.5 sata. Smesa je ohlađena do 0 °C i ugašena je sa 1 N vodenim HCI rastvorom polako do pH 5. Nakon dodavanja slanog rastvora, smesa je ekstrakovana sa etil acetatom. Organski sloj je osušen preko nevodenog natrijum sulfata, koncentrisan pod smanjenim pritiskom i pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (190,5 mg). LCMS m/z = 216,5 [M-H) ; 'H NMR (400 MHz, CDCb)8ppm 1,23-1,33 (m, IH), 1,41-1,52 (m, 4H), 1,76-1,83 (m, IH), 1,84-1,92 (m, 4H), 2,90-3,05 (m,IH),4.70 (d,J= 5,81 Hz, 2H), 7,36 (d, J = 8,21 Hz, IH), 7,53 (dd, i = 8,27,1,71 Hz, IH), 7,61(cl, J =1,39 Hz, IH).

Korak E: Priprema 5-(hlorometil)-2-cikloheksilbenzonitrila.

[0420] 2-cikloheksil-5-(hidroksimetil)benzonitrilu (190,5 mg, 0,885 mmol) dodat je tionil hlorid (5.0 mL, 68.1 mmol). Smesa je zagrejana na 50 °C tokom 2 sata i zatim držana na sobnoj temperaturi tokom noći. Smesa je sipana u led i mešana tokom 5 minuta. Smesa je ekstrakovan sa dihlorometan. Organski sloj je ispran sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvorom, osušen preko nevodenog natrijum sulfata i koncentrisan pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (184,9 mg). LCMSm/z- 234,1 [M+H', lH NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,23-1,31 (m, 1H), 1,40-1,52 (m, 4H), 1,76-1,82 (m, IH), 1,83-1,92 (m, 4H), 2,93-3,03 (m, IH), 4,55 (s, 2H), 7,37 (d,J= 8,08 Hz. IH), 7.55 (dd,J=8.02, 1,33 Hz, IH), 7,62 (d.J =1,64 Hz,

IH).

Korak F: Priprema etil 2-(7-(3-cijano-4-cikIoheksilbenziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta [b] indol-3-il)acetata.

[0421]Rastvoru etil 2-(7-hidroksi4,23,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (166,0 mg, 0,641 mmol) i 5-(hlorometil)-2-cikloheksilbenzonitrila (147,0 mg, 0,629 mmol) u jV,W-dimetilformamidu (15 mL) dodat je cezijum karbonat (246,0 mg, 0,755 mmol). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4! sata. Smesa je razređena sa etil acetatom, filtrirani kroz Celite®, koncentrisana pod smanjenim pritiskom i pročišćena silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta pena (185,3 mg). LCMSm/z= 457,5 [M+H]": 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,18-1,28 (m, IH), 1,30 (t, i- 7.20 Hz. 3H), 1,41-1,52 (m,4H),1.79 (dd, J =12,82, 1,33 Hz, IH), 1,85-1,93 (m,4H), 2,06-2,15 (m, IH), 2,50 (dd,J=16,80. 11,24 Hz, IH), 2,68-2,86 (m, 4H). 2,94-3,04 (m, IH), 3,49-3,61 (m, I H), 4,16-4,25 (m, 2H), 5,06 (s, 2H), 6,82(dd, J =8,78,2,46 Hz.IH), 6,97 (d, J =2,53 Hz, IH), 7,21 (d,J= 8,72 Hz, IH), 7,37(d, J =8,21 Hz, IH), 7,62(dd, J -8,15, 1,71 Hz. IH), 7,71( d. J =1,52 Hz. IH), 8,47 (bs. IH).

Korak G: Priprema 2-(7-(3-cijano-4-cikloheksilbenziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-iI)sirćetiie

kiseline.

[0422]Rastvoru etil 2-(7-(3-cijano-4-cikloheksilbenziloksi)-l,2,3,4-teU'ahidrociklopenta[b]indol-3-ir)acetata (185,3 mg, 0,406 mmol)u 1,4-dioksanuu (5,0 mL) dodat je 1 M vodeni LiOH rastvor (1,22 mL, 1,22 mmol). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati. Smesa je koncentrisan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoreni u etil acetatu i zatim zakišeljen sa 1 N vodenim HCI kiselim rastvorom do pH 4. Organski sloj je uklonjen, osušen preko nevodenog natrijum sulfata i koncentrisan pod smanjenim pritiskom. Koncetrat je zdrobljen sa dihlorometanom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao roze čvrsta materija (98,9 mg). LCMSm/z- 429,6 [M+H]' ; 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.21-1,31 (m, IH), 1,33-1,54 fm, 4H), 1,68-1,74 (m.lH). 1,74-1,88 (m, 4H), 2,08 (dd,J =4,93, 3,54 Hz, IH), 2,34( dd, J= 16,04, 8,97 Hz, IH), 2,61-2,76 (m, 4H), 2,81-2,89 trn, IH), 3,45 (bs, IH), 5,07 (s, 2H), 6,70 (dd,J =8,78, 2,46 Hz, IH), 5,91 (d,J= 2,40 Hz, IH), 7,19 (d,J =8,72 Hz,IH), 7,52 (d, J = 8,08 Hz, IH), 7,72 ( dd, J - 8,15,1,71 Hz, IH), 7,81 (d, / = 1.52 Hz, IH). 10,46 fs, IH). 12.18 (bs,

IH).

Ref. Primer 1.14: Priprema 2-(7-(4-Propil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b|indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 18).

KorakA:Priprema 2-(7-(4-Propil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3.4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-

iljacetata.

[0423]Rastvoru etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometir)benziloksi)-i,2,3,4-teu-ahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (213,8 mg, 0,473 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) dodat je 0,5 M propilcink bromid rastvor u tetrahidrofuranu (4,7 mL, 2,4 mmol) i fa/s(tri-rert-butilfosfin)palađijum (24.7 mg, 0,047 mmol). Smesa je zagrejana na 90 °C tokom 64 sata. Smesi je dopušteno da se ohladi do sobne temperature, ugašena je sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvorom i filtrirana. Filtrat je ekstrakovan sa etil acetatom. Organski sloj je osušen preko nevodenog natrijum sulfata, koncentrisan pod smanjenim pritiskom i pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta pena (69,1 mg). LCMSm/z= 460,5 [M--H| ".

KorakB: Priprema 2-(7-(3-cijano-4-cikIoheksilbenziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|endol-3-il)sirćetne

kiseline.

[0424]Rastvoru etil 2-(7-(4-propiI-3-(trifluorometiI)henziloksi)-1,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b |indol-3-il)acetata (75,8 mg, 0,165 mmol) u 1,4-dioksanu (2 mL) dodat je 1 M vodeni LiOH rastvor (0,495 mL. 0,495 mmol). Smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati. Smesa je zatim ugašena je sa 1 N vodenim HCI rastvorom do pH 5. Nakon dodavanja slanog rastvora, smesa je ekstrakovana sa etil acetatom, osušena preko nevodenog natrijum sulfata, koncentrisana pod smanjenim pritiskom i pročišćena silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ljubičasta pena (9,7 mg). LCMSm/z= 432.5 ]M-H]7 'H NMR (400 MHz, CDjCN) 6 ppm 0,98 (t,J =7,33 Hz, 3H), 1,57-1,71 (m, 2H), 2,04-2,18 (m, IH). 2.60( d, J- 7.45 Hz. 2H), 2,66-2,83 (m, 5H), 3,46-3,57 (m, IH), 5,10 (s, 2H). 6,76 (dd,J= 8,78, 2,4b Hz, IH), 6,96 (d.J =2.40 Hz, IH), 7,23 (d, J = 8,84 Hz, IH), 7,44(d, J - 7,96 Hz,IH), 7,62 (d,i =7,96 Hz, I H), 7,73 (s, IH), 8,86 (bs, iH).

Primer 1.15: Priprema 2-(7-(4-ciklobutil-3-(trinuorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje21).

[0425]Rastvoru etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (202,8 mg, 0,449 mmol) u tetrahidrofuranu (1 mL) dodat je 0,5 M ciklobutilcink(II) bromid rastvor u tetrahidrofuranu (8,98 mL, 4,49 mmol) i bfs(tri-t-butilfosfin)paladijum (46,8 mg, 0,090 mmol) na sobnoj temperaturi. Smesa je zagrejana na 90 °C tokom 63 sata. Smesa je zaum ugašena je sa 1 N vodenim HCI rastvorom i filtrirana kroz celite®. Filtrat je ekstrakovan sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa slanim rastvorom kako bi se uklonio višak HCI i koncentrisan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen sa HPLC. Kombinovani fragmenti su zdrobljeni sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvorom do baznog rastvora i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i zakišeljena do pH 4. Organski sloj je ispran sa vodom dok vodeni sloj nije postao neutralan. Organski sloj je osušen preko nevodenog natrijum sulfata i koncentrisan pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao roze čvrsta materija (32,3 mg). LCMSm/z444,6 [M+HJ+; IH NMR (400 MHz, DMSO-df,j 5 ppm 1,78-1,87 (m, IH), 1,93-2,02 (m, IH), 2,03-2,12 (m, IH), 2,16-2,28 (m, 4H), 2,34 (dd,J =15,98, 9,03 Hz, IH), 2,60-2.75 (m, 4H), 3.41-3,51 (m, IH), 3,74-3,84 (m, IH), 5,12 (s, 2H). 6,70(dd, J= 8,78, 2.46 Hz, IH). 6,92 (d,J= 2,40 Hz, IH), 7,19 (d. J - 8.84 Hz, IH), 7.66-7,78 (m. 3H), 10,46 (s, IH), 12,20 (bis, IH).

Primer 1.16: Priprema 2-(7-(4-ciklopropil-3-(trifluorometil)beriziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta|b|indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje22).

[0426]Rastvoru etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-ir)acetata (200,5 mg, 0,444 mmol) u tetrahidrofuranu (1 mL) dodat je 0.5 M ciklopropilcink(II) bromid rastvor u tetrahidrofuranu (8,87 mL, 4,44 mmol) i bis(tri-t-butilfosfin)paladijum (46,3 mg, 0,089 mmol) na sobnoj temperaturi. Smesa je zagrejana na 90 °C tokom 63 sata. Smesa je zatim ugašena je sa 1 N vodenim HCI rastvorom i filtrirana kroz celite®. Filtrat je ekstrakovan sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa slanim rastvorom kako bi se uklonio višak HCI i koncentrisan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen sa HPLC. Kombinovani fragmenti su zdrobljeni sa saturisanim vodenim natrijum bikarbonat rastvor do baznog rastvora i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoreni u etil acetatu i zakišeljen do pH 4. Organski sloj je ispran sa vodom dok vodeni sloj nije postao neutralan. Organski sloj je osušeni preko nevodenog natrijum sulfata i koncentrisan pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio braon čvrsta materija (36,6 mg). LCMSm/ z= 430,5 [M+H] ; lH NMR (400 MHz, DMSOđ6) 8 ppm 0,74-0,88 (m, 2H), 0,98-1,07 (m, 2H), 2,02-2,12 (m, 2H), 2.34 (dd,J= 15,98, 9,03 Hz, IH), 2,59-2,75 (m, 4H), 3,39-3,52 (m, IH). 5,10 (s, 2H), 6.59(dd. J= 8.72,2,53 Hz, IH), 6,91(d, J -2,40 Hz, IH), 7,10-7,26 (m, 2H), 7,61 (d,./ = 8,34 Hz. IH), 7.72 (d,J ~-1,14 Hz, IH), 10.45 (s. IH), 12,20 (bs, IH).

Primer 1.17: Priprema 2-(7-((6-ciklopentil-5-(trifluorometil)piridin-3-il)metoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 19).

KorakA:Priprema 2-hloro-5-(hIorometil)-3-(trifluorometiI)piridma.

[0427]Hladnom rastvoru 5-(hlorometil)-2-metoksi-3-(trifluorometil)piridin (0.3 g, 1,33 mmol) u DMF (0.6 mL) dodat je kapanjem POCb (1,02 g, 6,65 mmol). Reakcija je mešana tokom 1 sata na 100 °C u zapečaćenoj cevi. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, i sipana u ledenu vodu (10 mL). Reakcija je ekstrakovana sa DCM (tri puta) i kombinovani organski sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom, osušen sa MgSOa i koncentrisan. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,20 g). LCMSmlz =230,1 [M+Hj-, IH NMR (400 MHz, CDCb) 8 ppm 4,62 (s. 2H), 8,06 (d,J =2,3 Hz, IH), 8,57(d, J =2,3 Hz, IH).

Korak B: Priprema etil 2-[7-{(6-hloro-5-trifluorometil)piridin-3-il}metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b]indol-3-il)acetata.

[0428]Od etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-il)acetat i 2-hloro-5-(hlorometil)-3-(trifluorometil)piridina, na način sličan onom opisanom uPrimeru1.4,Korak E,dobijeno je jedinjenje iz naslova. LCMSm/ z= 453,4 [M+H]'. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,29 (t,J=7,1 Hz, 311), 2,06-2,14 (m, IH), 2,50 (dd,J =16,9, 11,2 Hz, IH), 2,71-2,86 (m, 4H), 3,50-3,58 (m, IH), 4,16-4,24 (m, 2H), 5.14 (s, 2H), 6,81 (dd,J= 8,7 i 2,4 Hz, IH), 6,97(d, J =2,4 Hz, IH), 7,22 (d, J = 8,6 Hz, IH), 8.14(d../=2,1 Hz, IH), 8,52 (bs, IH), 8,63 (d, / = 2,1 Hz, IH).

KorakC:Priprema etil 2-[7-{(6-ciklopentil-5-trifluorometiI)piridin-3-il}metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b]indol-3-il]acetata.

[0429]Od etil 2-[7-{(6-hloro-5-uifluorometii)piridin-3-il}metok5i-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta(fc]indol-3-il| acetata i ciklopentilcink(II) bromida, na način sličan onom opisanom uPrimeru1.8,KorakC, dobijeno je jedinjenje iz naslova. LCMSm/z= 487,4 ]M+H|+,

Korak D: Priprema 2-[7-{(6-ciklopentil-5-trifluorometil)piridin-3-il}metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b]jodol-3-il]sirćetne kiseline.

[0430]Dobijeno je jedinjenje iz naslova od etil 2-[7-{(6-ciklopentil-5-trifluorometil)piridin-3-il)metoksi 1,2,3,4-tetrahidrociklopenta[ojindol-3-il] acetata, na način sličan onom opisanom uPrimeru1.4KorakF. LCMSmlz- 459,5 [M+H]*. !H NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 1,68-1,75 (m, 2H), L,87-1,95 (m, 4H), 1,98-2,05 (m, 2H), 2,10-2,19 (m.IH), 2,62 (dd. J=17,1 i 10,8 Hz, IH), 2,72-2,88 (m, 4H), 3.44-3.50 (m, LH), 3,55-3,62 (m, IH), 5,11 (s,2H). 6,83 (dd,./ = 8,8 i 2,4 Hz. 1 H), 7,01 ( d, . 1 = 2,4 Hz. 1 H). 7,22 (d. / = 8.7 HzIH) 8 00 (d I = 1 8 Hz IH) 8.35 (bs, IH), 8,80( d, J= 1,8 Hz, IH).Ref.Primer 1.18: Priprema 2-(7-((6-(Pirolidin-l-il}-5-(trinuorometii)piridin-3-il)rnetoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[p]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 23).

Korak A: Priprema etil 2-[7-{(6- Pirolidin -l-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il}metoksi-l,2,3,4-tetrahidro-ciklopenta[fc]indol-3-il]acetata.

[0431] Elil 2-[7-{(6-hloro-5-trifluorometil) piridin-3-il}meioksi-l,2,3.4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il] acetat (60 mg, 0,132 mmol), pirolidin (47 mg, 0,66 mmol), EhN (67 mg, 0.66 mmol), i IPA (0,7 mL) u cevi sa debelim zidovima zagrejani su pod mikrotalasnim zračenjem na 180 °C tokom 2 sata. Smesa je pročišćena sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20 mg). LCMSm/ z- 488,5 [M + H]7

Korak B: Priprema 2-[7-{(6-Pirolidin-l-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il}metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[fc]indol-3-illsirćetne kiseline.

[0432] Od etil 2-[7-{(6-pirolidin-l-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il}metoksi4,2,3,4-tetrahidrociklopenta[bJindol-3-il] acetata, na način sličan onom opisanom u Primeru 1.4, Korak F, dobijeno je jedinjenje iz naslova. LCMSm/ z= 460,6 [M+H]'. lH NMR (400 MHz. CDCb) 6 ppm 1,92-1,96 (m, 4H), 2,10-2,17 (m, 1H), 2,60 (dd, J - 17.1, 10,6 Hz, IH), 2,74-2,87 (m, 4H), 3,55-3,62 (m, 5H), 4,97 (s, 2H), 6,80(dd, J-8,7. 2,4 Hz, IH), 7,00 (d,J= 2,4 Hz, IH), 7.19(d, .7 =8,6 Hz, IH), 7,91 (d,J =2,2 Hz, IH), 8,30 (bs, i H), 8,34 (d, J - 2,2 Hz, I H).

Ref. Primer 1.19: Priprema 2-(7-((6-(3,3-difluoropirolidin-l-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)metoksi)l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 20).

Korak A: Priprema etil 2-(7-((6-(3,3-difluoropirolidin-l-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)metoksi)l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata.

[0433] Od etil 2-[7-{(6-hloro-5-trifiuorometil)piridin-3-ii)metoksi-.i,2,3,4-tetrahidrociklopenta[ii]indol-3-ili acetata i 3,3-difluoropirolidin hidrohlorida, na način sličan onom opisanom u Primeru 1.18, Korak A, dobijeno je jedinjenje iz naslova. LCMSm/z- 524,4 [M+H]".

Korak B: Priprema 2-[7-{(6-(3,3-difluoropirolidin-l-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il}metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il]sirćetne kiseline.

[0434] Etil 2-[7-{(6-(3,3-dinuoro<p>irolidin-]-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)meioksi-l,2,3.4-tetrahidrociklopenta[olindol-3-il| acetat je hidrolizovan sa 1 N LiOH na način sličan onom opisanom u Primeru 1.4, Korak F kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS m/z = 496,4 [M+H|+. IH NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm2,09-2,18 (m, IH), 2,35-2,46 (m, 2H), 2,60 (dd, J= 17.1, 10,8 Hz, IH), 2,74-2,88 (m. 4H), 3,54-3.61 (m. IH), 3,84 (t,J=7,3 Hz. 2H), 3,94 (t, J = 1.3,4 Hz, 2H), 5,00 (s. 2H), 6,80 (dd,J =8,6, 2,4 Hz, IH), 6,99(d, J =2,5 Hz, IH), 7,20 (d,J= 8,7 Hz, IH), 7,96 (d,J= 2,2 Hz, IH), 8,32 (bs, IH), 8,39 (d,./ * 2,2 Hz, IH).

Ref. Primer 1.20: Priprema 2-(7-(4-(Metilsulfonil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 30).

Korak A: Priprema etil 2-(7-(4-(Metilsulfonil)benziloksi)-l,2,3,4-5 tetrahidrociklopenta[6]indoI-3-il)acetata.

[0435] Mešanoj smesi etil 2-(7-hidroksi-l,2,3.4-tetrahidrociklopenta[b |indol-3-il)acetata (50 mg, 0,1.9 mmol) i cezijum karbonata (94 mg, 0,29 mmol) u DMF (1,5 mL) dodat je l-(bromomeu'l)-4-(metilsulfonil)benzen (72 mg, 0,29 mmol). Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, čvrsta materija je filuirana. Filtrat je koncentrisan, i ostatak je pročišćen sa pripremnim TLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40 mg) kao prljavo bela čvrsta materija. LCMSm/ z= 428,3 [M+Hf. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 1.30 (t,J= 7,2 Hz. 3H), 2,07-2,15 (m, IH). 2,50 (dd,J=16,7 i i 1,2 Hz, IH), 2,70-2,86 (m, 4H). 3,05 (s, 3H), 3,52-3,58 (m, IH), 4,17-0,25 (m. 2H), 5.20 (s, 2H), 6.84 (dd,J= 8,8 i 2,4 Hz, IH), 6,96 (d, 7 = 2,1 Hz, IH), 7,21(d, J= 8.8 Hz, IH). 7,68 (d. J = 8.1 Hz, 2H). 7,95 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 8.49 (s, IH).

Korak B: Priprema 2-(7-(4-(Metilsulfonil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-iI)sirćetiie kiseline.

[0436] Mešanom rastvoru etil 2-(7-(4-(metilsulfonil)benziloksi)-1.2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (40 mg, 0,094 mmol) u dioksanu dodat je IM LiOH vodeni rastvor (0,47 mL, 0,47 mmol). Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Rastvarač je deiimično uklonjen, razreden sa vodom, i zakišeljen sa HCI rastvorom. Ružičasta čvrsta materija je prikupljena i osušena kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26 mg). LCMSm/z= 400,4 [M+H]'. 'H NMR (400 MHz, DMSC-d6) 5 2,04-2,08 (m. IH), 2.35 (dd,J= 16,0 i 9,0 Hz, IH), 2,63-2,75 (m, 4H), 3,20 (s, 3H), 3,45-3,50 (m. IH), 5,21 (s, 2H), 6,73(dd../=8.7 i 2.4 Hz. IH), 6.92 (d,J=2.4 Hz. IH), 7.20(d. J=8.7 Hz, IH), 7,71 (d,J= 8.3 Hz, 2H), 7,92 (d,J= 8.3 Hz, 2H). 10,47 (s, 1H). 12,18 (s. 1H).

Ref. Primer 1.21: Priprema 2-(7-(4-(cikloheksilmetil)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-

tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje28).

KorakA:Priprema Metil 4-(cikloheksilnietil)-3-(trifluorometil)benzoata.

[0437] Mešanom rastvoru metil 4-hloro-3-(trifluorometil)benzoata (238 mg, 1,0 mmol) i bis(tri-t-butilfosfin)paladijuma (0) (51 mg, 0,10 mmol) u tF (2 mL) dodat je (cikloheksilmetil)cink(ll) bromid (6 mL, 3,00 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa je zagrejana na refluksu tokom 2 sata. ugašena je sa saturisanim NaHCOjrastvorom, filtrirana kroz celit. Filtrat je ekstrakovan sa etil acetatom. Kombinovana organska materija je osušena i koncentrisana, i ostatak je pročišćen sa kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje Iz naslova (280 mg) kao bezbojno ulje. LCMSm/z= 301,4 [M-H<p.>'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 0,96-1.06 (m, 2H), 1.14-1,22 (m, 3H), 1,62-1,72 (m, 6H), 2,71 (d.J= 6,7 Hz, 2H). 3,94 (s, 311),<7>,39 (d.J = 8,1Hz. IH). 8,1.0 (dd,J =8,0 i 1,5 Hz, IH), 8,30 (d,./ = 1,4 Hz, IH).

Korak B; Priprema (4-(cikloheksilmetil)-3-(trifluorometil)fenil)metanola.

[0438]Mešanom rastvoru metil 4-(cikloheksilrnetil)-3-(trifluorometil)benzoata (280 mg, 0,93 mmol) u dioksanu (8 mL) dodat je 2 M litijum borohisuvd u tF rastvoru (0,93 mL, 1,86 mmol). Reakciona smesa je zagrejana na 80 °C tokom 2 sata, ohlađena, sipana u vodu, zakišeljena sa HCI rastvorom do pH 4, i ekstrakovana sa etil acetatom. Kombinovana organska materija je isprana sa saturisanim NaHCO j rastvorom i vodom, osušena i koncentrisana. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (190 mg) kao bezbojno ulje. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 6 0,96-L.06 (m, 2H), 1.14-1,22 (m. 3H), 1,62-1,72 (m. 6H), 2,67 (d,./ = 6,7 Hz, 2H), 4.71 (d. 7 = 5,7 Hz, 2H), 7.29 (d,7= 7,9 Hz. IH). 7,45 (dd,J= 8,0 i 1.6 Hz, 111), 7,62 (d, 7 = 1,6 Hz, IH).

KorakC:Priprema 4-(Bromometil)-l-(cikloheksilmetil)-2-(trifluorometii)benzena.

[0439]Mešanom rastvoru (4-(cikloheksilmetir)-3-(trifluorometil)fenil)metanola (80 mg, 0,29 mmol) u suvom DCM (1 mL) dodat je tribromofosfin (11 mL, 0,12 mmol) na 0<C>C.Reakciona smesa je polako zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 1 sata, sipana u vodu, ekstrakovana sa DCM. Kombinovana organska materija je isprana sa saturisanim NaHCOj rastvorom i slanim rastvorom, osušena i koncentrisana. Ostatak je pročišćen sa kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (80 mg) kao bezbojno ulje. IH NMR (400 MHz. CDCb) 5 0,96-1,06 (m, 2H), 1,14-1,22 (m. 3H), 1,55-1,72 (m, 6H), 2,65 (d,J=6.5 Hz, 2H), 4,49 (s. 2H), 7,28 (d,7= 8,0 Hz, 1 H), 7,47 (dd,7 =8,0 i 1,7 Hz, IH), 7,63( d. J =1,6 Hz, IH).

Korak D: Priprema etil2-(7-(4-(cikloheksilmetil)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b)indo)-3-il)acetata.

[0440]MeŠanoj reakcionoj smesi etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-teuahidrociklopenta[b|indo!-3-il)acetata (40 mg, 0,15 mmol) i cezijum karbonata (75 mg, 0,23 mmol) u DMF (1 mL) dodat je 4-(bromometil)-l-(cikloheksilmetil)2-(trifluoiometil)benzen (78 mg, 0,23 mmol). Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Čvrsta materija je filtrirana i oprana sa etil acetatom. Kombinovani filtrat je koncentrisan, i ostatak je pročišćen sa pripremnim TLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40 mg) kao ulje. LCMSm/z =514,5 [M + H]+. IH NMR (400 MHz, CDCb) 5 0,96-1,06 (m, 2H), 1,14-1,22 (m, 3H), 1,30 (t, 7= 7.2 Hz, 3H), 1,55-1,72 (m. 6HI, 2,07-2,15 (m. IH), 2,50 (dd, J= 16,7 i 11,2 Hz, IH), 2,66 (d. 7 -= 6,8 Hz, 211), 2.70-2,86 (m. 4H), 3,52-3.58 (m. I H), 4,18-4,25 (m, 2H), 5,08 (s, 2H), 6,85 (dd, 7= 8,8 i 2,4 Hz, IH), 7,00 (d,7=2.4 Hz, IH), 7,21(đ, J =8,8 Hz, IH). 7,31(d, J=7,9 Hz i 1,6 Hz,IH), 7,55 (d, 7=7,8 Hz,IH). 7,72 (d../ = 1.6 Hz. IH), 8,46 (s. IH).

KorakE:Priprema2-(7-(4-(cikloheksilmetil)-3-(trifluoromedl)benziloksi)-l,2,3,4-tetr ahidrociklo-penta[b ]indol-3-il)sirćetne kiseline.

[0441]Mešanom rastvoru etil 2-(7-(4-(cik.toheksilmetil)-3-(triliuorometil)benziloksi)-l, 2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (40 mg, 0,078 mmol) u dioksanu dodat je 1 M LiOH vodeni rastvor (0,39 mL, 0,39 mmol). Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati. Rastvarač je delimično uklonjen, zatim razređen sa vodom, zakišeljen sa HCI rastvorom. Ružičasta čvrsta materija je prikupljena i osušena kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (19.5 mg). LCMSm/ z= 486,3 [M+H]*. !H NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 0,96-1,06 (m, 2H), 1,14-1.22 (m, 3H), 1,55-1,70 (m, 6H), 2,05-2,10 (m, IH), 2,40 (dd, i = 16,0 i 9,0 Hz, IH). 2,62-2.75 (m, 6H), 3,42-3,50 (m, IH), 5,12 (s, 2H), 6,72 (dd. 7 = 8,7 i 2,4 Hz, IH), 6,94 (d,7=2,4 Hz, IH), ".21 (d. 7 = 8,8 Hz, IH), 7,45 (d, 7 = 8,0 Hz,IH), 7,66 (d, 7 - 7.8 Hz,IH). 7,75 (s. IH). 10.48 (s, IH), 12.20 (br, IH).

Ref. Primer 1.22: Priprema 2-(7-(4-(Etilamino)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b]indal-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje27).

[0442]Smesi etil 2-(7-(4-hloro-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-il)acetata (50 mg, 0,11 mmol) u dioksanu dodati su 2-dicikloheksilfosfino-2'-(A<r>,;V-dimettlamino)bifenil (4,4 mg, 0,011 mmol), Pdjdba:!(5 mg, 5,5 mmol), 2 M etanamin u tF (0,28 mL, 0,55 mmol) i natrijumfen-butokside (21 mg, 0,22 mmol). Reakciona smesa je zagrejana na 120 °C tokom 2 sata pod mtkrotalasnim zračenjem, ugašena je saturisanim NH4C1 rastvorom i ekstrakovana sa etil acetatom. Kombinovana organska materija je osušena i koncentrisana. Ostatak je pročišćen prvo pripremnim TLC praćenim sa pripremnim IIPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7 mg) kao bela čvrsta materija. LCMSm/z= 433,5 [M+H1+. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 6" 1-30 (t, 7 = 7,1 Hz, 3H), 2,10-2,17 (m, IH), 2,52 fdd,./ = 17,0 i 10,9 Hz, IH), 2,75-2,86 (m, 4H), 3,23 (q, 7 = 7,1 Hz, 2H), 3,54-3,62 (m, IH), 4,96 (s, 2H), 6,73 (d, 7 = 8,6 Hz, IH), 6,83 (dd,7= 8,8 i 2,4 Hz, IH), 7,00( d, J= 2. 4 Hz. IH). 7,19 (d. 7 = 8.8 Hz. IH), 7,46 (dd,7 =8,5 i 1,7 Hz, IH), 7,53 (d,7= 1,7 Hz, IH), 8,28 (s, IH).

Ref. Primer 1.23: Priprema 2-(7-(4-(cikIopropilmetoksi)-3-(trifluoronietil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidro-ciklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 26).

Korak A: Priprema ciklopropilmer.il 4-(ciklopropilmetoksi)-3-(trifluorometil)benzoata.

[0443] Rastvoru 4-hidroksi-3-(trifluorometil)benzojeva kiselina (0,483 g, 2,343 mmol) u DMF (10 mL) dodat je Cs^COi (2,29 g, 7,03 mmol), praćen sa (bromometil)ciklopropanom (0,568 mL, 5,86 mmol). Reakcija je mešana na 80 °C tokom 16 sati. Smesa je filtrirana. Filtrat je koncentrisan pod vakuumom i razmućen u EtOAc. Organski rastvor je ispran sa vodom (tri puta), osušen preko MgSOa i koncentrisan. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje (0,643 g). LCMSmlz -315,3 [M+H]*. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 0,33-0,44 (m, 4H), 0,59-0.69 (m, 4H), 1,21-1,34 (m, 2H), 4,01 (d, 7=6.57 Hz, 2H). 4,15 (d, 7=7,20 Hz, 2H), 6,99 (d, 7=8,84 Hz, IH), 8,18 (dd. 7=8,72. 2,15 Hz. IH). 8.28 (d. 7=2.02 Hz, IH).

Korak B: Priprema 4-(ciklopropilmetoksi)-3-(trifluorometil)benzojeve kiseline.

[0444] Rastvoru ciklopropilmetil 4-(ciklopropilmetoksi)-3-(trifltiorometil)benzoata (0,642 g, 2,043 mmol) u tF:MeOH (1:1, 10 mL) dodat je LiOH (IM, vodeni) (12,26 mmol). Reakcija je mešana tokom noći, ugašena je sa HCI (IM, vodeni) i ekstrakovana sa EtOAc (dva puta). Kombinovani ekstrakti su osušeni preko MgSu. i koncentrisani kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (0,502 g). LCMSm/z =261,1 [M+H"'.

'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 0,39-0,46 (m, 2H), 0.62-0.71 (m, 2H). 1,23-1,38 (m. IH), 4,03 (d. 7=6.57 Hz, 211), 7,02 (d, 7=8,72 Hz, IH), 8,23 (dd, 7=8,72. 2,15 Hz. IH). 8.34 (d. 7-2,02 Hz. III).

Korak C: Priprema (4-(ciklopropilmetoksi)-3-(tritluorometil)fenii)metanola.

[0445] Rastvoru 4-(ciklopropilmetoksi)-3-(lrifluorometil)bcnzojeve kiseline u tF (7 mL) na 0 C'C je polako dodat BH3DMS (2,0 M u tF) (1,592 mL, 3,18 mmol). Nakon mešanje tokom 0.5 sata na 0 °C, reakciji je dopušteno da se vrati do sobne temperature i mešana je tokom noći. Reakciona smesa je polako dodata saturisanom rastvoru NaHC03na 0 °C i ekstrakovana sa EtOAc (tri puta). Kombinovani ekstrakti su osušeni preko MgSO, i pročišćeni silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta materija (0,358 g), 'II NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 0,34-0,43 (m, 2H), 0,57-0.67 (m. 2H), 1,22-1,32 (m. ;H). 3,94 (d, 7=6.57 Hz, 2H). 4,66 (s, 2H), 6,96 (d, 7=8,46 Hz, IH), 7,46 (dd, 7=8.46. 2,02 Hz, IH), 7,57 (s. IH).

Korak D: Priprema 4-(hlorometil)-l-(cikJopropiImetoksi)-2-(trifkiorometil)benzena.

[0446] Rastvoru (4-(ciklopropilmetoksi)-3-(trifluorometil)fenil)metanol (0,258 g, 1,454 mmol) u toulenu (4 mL) dodat je tionil hlorid (0,637 mL, 8,72 mmol). Reakcija je mešana na 75 °C tokom 1,5 sata. Reakciona smesa je sipana u ledenu vodu t ekstrakovana sa heksanima (dva puta). Kombinovani ekstrakti su isprani sa NaHCOj (tri puta), osušeni preko MgSOa i koncentrisani kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (0,275 g). IH NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 0,36-0,43 (m, 2H), 0,59-0,67 (m. 2H). 1,21-1,34 (m, IH), 3,95 (d, 7=6,44 Hz, 2H), 4,56 (s, 2H), 6,95 (d, 7=8,59 Hz, IH). 7,48 (dd, 7=8,53. 2,34 Hz. IH). 7.S8 (d, 7=2,15 Hz, IH).

Korak E: Priprema etil 2-(7-(4-(ciklopropilmetoksi)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetra-hidrocikJopenta[b]indol-3-iI)acelata.

[0447] Rastvoru etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-il)acetat (0,069 g, 0,264 mmol) u DMF (1 mLjdodat je CS2CO3(0,086 g, 0,264 mmol) praćen sa 4-(hiorometil)-l-(ciklopropilmetok5i)-2-(trifluor-oinetiljbenzenom (0,070 g, 0,264 mmol). Reakciona smesa je mešana tokom 16 sati i filtrirana. Filtrat jc koncentrisan pod vakuumom i pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio žuto ulje (0,023 g). LCMSmlz =488,2 [M+Hf.<T>i NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 0,35-0,44 (m, 211), 0,58-0,67 (m, 2H), 1,24-1,34 (m, 4H), 2,04-2,16 (m, IH), 2.51 (dd, 7=16,74, 11,05 Hz, IH), 2,68-2,90 (m, 4H). 3,49-3,61 (m, IH), 3,94 (d, 7=6,44 Hz, 211), 4,15-4,27 (m, 2H), 5,03 (s, 2H), 6,82 (dd, 7=8,72, 2,40 Hz, I H), 6,93-7,02 (m. 2H), 7,20 (d, 7=8,84 Hz, IH), 7,56 (dd, 7=8,53, 1,96 Hz, IH), 7,67 (d, 7=1,89 Hz, IH), 8,45 (bs. IH).

Korak F: Priprema 2-(7-(4-(ciklopropilmetoksi)-3-(trifluorometil)benziIoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline.

[0448] Rastvoru etil 2-(7-(4-(ciklopropi!metoksi)-3-(trifluorometii)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (22,9 mg, 0,047 mmol) u dioksanu dodat je IVI LiOH (0,188 mL, 0,188 mmol). Reakciona smesa je mešana 3 sata, razmućena ti EtOAc i oprana sa 1 M HCI. EtOAc ekstrakt je osušen preko MgSOj i koncentrisan. Ostatak je pročišćen sa pripremnim HPLC, MS kako bi se dobilo jedinjenje tz naslova kao čvrsta materija. LCMSm/z= 460,3 [M+H]'. 'H NMR (400 MHz, DMSO-cU) 6 ppm 0,30-4,38 (m. 2H), 0,52-0,59 (m, 2H), 1,17-1,27 (m, IH), 2,03-2,13 (m, IH), 2,35 (dd. 7=15,98, 8.91 Hz. IH), 2,59-2,76 (m, 4H), 3,99 (d, 7=6,69 Hz, 2H), 5,05 (s, 2H), 6,69 (dd. 7=8,84, 2,40 Hz, I H), 6.91 (d. 1=2,53 Hz, IH), 7,19 (d, 7=8.72 Hz. LH). 7,24 (d, 7=8,46 Hz, III), 7,62-7,71 (m, 2H), 10,45 (s, IH).

Ref. Primer 1.24: Priprema 2-(7-(4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluoromedl)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b)indol-3-iI)sirćetne kiseline (Jedinjenje24).

Korak A: Priprema ciklopentil 4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluorometil)benzoata.

[0449]Od bromociklopropana, jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano uPrimeru 1.23, Korak Akako bi se dobilo ulje. LCMSmlz= 343,4 [M+H]".<!>H NMR (400 MHz. CDCb) 5 ppm 1,58-1.72 (m, 4H), 1,75-1,88 (m, 6H), 1,88-2,02 (m, 6H), 4,87-4,99 (m, IH), 5,32-5,45 (m, IH), 7.00 (d, 7=8,72 Hz, IH), 8,12 (dd, 7=8,72, 2,42 Hz. IH), 8,20 (d, 7" 1,89 Hz, IH).

Korak B: Priprema 4-(ciklo<p>endloksi)-3-(trifluorometil)benzojeve kiseline.

[0450] Od ciklopentil 4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluorometil)benzoata, jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano uPrimeru1.23,Korak Bkako bi se dobila bela čvrsta materija. LCMSmlz =275,4 [M+H]'.

KorakC:Priprema (4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluorometil)fenil)metanoIa.

[0451]Od 4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluorometil)benzojeva kiselina, jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano uPrimeru1.23,KorakC kako bi se dobilo ulje. IH NMR (400 MHz, CDCb) 6 ppm 1,61-1,68 (m, 2H), 1,76-1,86 (m, 2H), 1,86-1,96 (m, 4H). 4,64 (s, 2H), 4,84-4,91 (m, IH), 6,98 (d, 7=8,59 Hz, IH), 7.45 (dd, 7=8,59, 2,15 Hz, IH), 7,55 (d, 7-1,89 Hz, IH).

Korak D: Priprema 4-(hlorometil)-l-(ciklopentiloksi)-2-(trifluoremetil)berizena.

[0452]Od (4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluorometil)fenil)metanola, jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano uPrimeru1.23,Korak Dkako bi se dobilo ulje. 'H NMR (400 MHz, CDCb,) 6 ppm 1,58-1,70 (m, 2H), 1,76-1,86 (m, 2H), 1,86-1,95 (m. 4H), 4,56 (s, 2H), 4,84-4,90 (m. IH), 6.96 (d, 7=8,59 Hz, IH), 7,47 (dd, 7=8,53, 2,34 Hz, IH), 7,57 (d, 7=2,15 Hz. LH).

KorakE:Priprema etil 2-(7-(4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b[indol-3-il)acetata.

[0453] Od 4-{hloromedl)-l-(ciklopentiIoksi)-2-(trifluorometil)benzena, jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano u Primeru 1.23,KorakE kako bi se dobilo ulje. LCMSmlz- 502,4 [M+H]". 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,30 (t.7=7,14Hz, 3H). 1.57-1.69 (m, 2H), 1,76-1,97 (m. 6H), 2,05-2,16 (m, IH), 2,51 (dd, 7=16,74, 11,18 Hz, IH), 2,68-2,89 (m, 4H), 3,49-3,61 (m, IH), 4,14-4.28 (m, 2H). 4,8-4,91 (m, IH), 5,02 (s, 2H), 6,83 (dd, 7=8,78, 2,46 Hz, IH), 6,94-7,04 (m, 2H), 7,21 (d. 7=8,72 Hz, IH), 7,55 (dd, 7=8,59, 2,02 Hz, IH), 7,65 (d, 7=2,02 Hz, IH), 8,45 (bs, IH).

KorakF:Priprema 2-(7-(4-(ciklopentiloksi)-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline.

[0454]Jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano uPrimeru1.23,KorakF kako bi se dobila čvrsta materija. LCMSmlz= 474,4 [M+H]". 'H NMR (400 MHz, DMSO-dt,) 6 ppm 1,53-1,79 (m, 6H), 1,82-1,97 (m, 2H), 2,00-2,15 (m, IH), 2,35 (dd, 7=15,92, 8,97 Hz, IH), 2,58-2,79 (m, 4H), 3,41-3,51 (m. IH), 4,94-5,08 (m, 3H), 6,69 (dd, 7=8,78, 2,46 Hz, IH), 6,92 (d, 7=2,40 Hz, IH), 7,19 (d, 7=8,72 Hz, IH), 7,25 (d, 7=9,22 Hz, IH), 7,61-7,72 (m, 2H), 10,45 (s, IH), 12,18 (bs, III)

Ref. Primer 1.25: Priprema 2-(7-(4-cijano-3-(trifluorometiI)benziIoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-

penta|b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje25).

Korak A: Priprema 4-(hidroksimetil)-2-(trifluorometil)benzonitrila.

[0455]Rastvoru (4-hloro-3-(trifluorometil}fenil)metanola (0,300 g, 1,425 mmol) u DMA dodati su dicijanocink (0,335 g, 2,85 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0) (0.165 g, 0,142 mmol). Reakciona boca je degazirana i napunjena sa azotom, zatim zagrejana na 150 °C tokom 6 sati pod mikrotalasnim zračenjem. Reakciona smesa je sipana u vodu i ekstrakovana sa EtOAc. EtOAc ekstrakt je ispran sa slanim rastvorom, osušen preko MgSOj i pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta materija (0,105

g). LCMSmlz =202,1 [M+HT. 'H NMR (400 MHz, CDC1,) 5 ppm 1,98 (bs, IH), 4,87 (s, 2H), 7,69 (d, 7=0,88 Hz, IH), 7,77-7,88 (m, 2 sata)

Korak B: Priprema 4-(hloromeitl)-2-(trilfuorometil)benzonitril

[0456] Od 4-(hidroksimetiI)-2-(trif]uorometil)benzonitrila, jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano u Primeru 1.23, Korak D kako bi se dobilo ulje. LCMSmlz =220,2 1M+H|\ 'H NMR (400 MHz, DMSO-dti) 5 ppm 4,65 (s, 2H), 7,73 (d, 7=l.39Hz. IH), 7.84 (d, 7=7,71 Hz, 2 sata).

Korak C: Priprema etil 2-(7-(4-cijano-3-(trifluorometil)benziIoksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indof3-il)acetata.

[0457] Od 4-(hlorometil)-2-(trifluorometil)benzonitrii, jedinjenje iz nasiova je pripremljeno koristeći siičan postupak kako je opisano u Primeru 1.23 Korak E kako bi se dobilo ulje. LCMS>n/ z= 443,3 [M+H]'.<l>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,30 (t, 7=7,14 Hz, 3H), 2,03-2,18 (m, LH), 2,50 (dd, 7=16,80. 11.24 Hz, IH), 2,68-2,91 fm, 4H), 3,48-3,63 (m, IH), 4,13-4,28 (m, 211), 5,21 (s, 2H). 6,83 (dd, 7-8,72, 2.53 Hz, Hi), 6,96 (d, 7=2,40 Hz, IH), 7,23 (d, 7=8,72 Hz, IH), 7,73-7,81 (m, IH), 7,81-7,88 (m, IH), 7,91 (s, IH), 8,52 (bs, IH).

Korak D: Priprema 2-(7-(4-cijario-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]iridol-3il)sirćetne kiseline.

[0458] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno koristeći sličan postupak kako je opisano u Primeru 1.23, Korak F kako bi se dobila čvrsta materija. LCMSm/z= 415,4 [M+H]'. 'H NMR (400 MHz, DMSO-d«) 6 ppm 2,01-2.14 (m. IH), 2,35 (dd, 7=15,98, 9,03 Hz, IH), 2,57-2,78 (m, 4H), 3,38-3,53 (m, IH). 5,29 (s, 2H), 6,75 (dd,7=8,78.2.45 Hz, IH), 6,94(d, 7=2,53 Hz, IH), 7.22(d,7=8.72Hz. IH). 7.97(s. IH), 8.07 (s, IH), 8,19(d,7=7,96 Hz, IH), 10,50 (s, I H), 12,18 (bs, I H)

Ref. Primer 1.26: Priprema 2-(7-(karbamoil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 29).

[0459] Rastvoru 2-(7-(4-cijano-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopentajb|indol-3-il)sirćetne kiseline (9,0 mg, 0,022 mmol) u dioksanu (1 mL) dodat je LM LiOH (vodeni) (3,0 mL). Reakcija je mešana na 50 °C tokom 48 sati. IM HCI (vodeni) dodat je da prilagodi pH do 3. Smesa je ekstrakovana sa EtOAc. EtOAc ekstrakt je osušen preko MgSOa i ostatak je pročišćen sa pripremnim HPLC/MS kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta materija (2,1 mg). LCMSmlz= 433,2 [M+H|\ 'H NMR (400 MHz, DMSO-dr,) 6 ppm 2,01-2,14 (m, IH), 2,32-2,42 (m, IH), 2,57-2,78 (m, 4H), 5,20 (s, 2H), 6,72 (d, 7=11,37 Hz, IH), 6,93 (d, 7=2,40 Hz, IH),<7>,20 (d, 7=8,72 Hz, IH). 7,50-7,59 (m, 2H), 7,76 (d, 7=7,58 Hz, LH), 7.82 (s. IH), 7,91 (s, IH), 10,47 (s, IH), 12.17 (bs.

IH).

Ref. Primer 1.27: Priprema 2-(7-(4-(Pirazin-2-il)benksiloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 31).

Korak A: Priprema (4-(Pirazin-2-il)fenil)metanola.

[0460] Smesa 2-hloropirazin (0,230 ml, 2,62 mmol), 4-(hidroksimetil)fenilboronske kiseline (517 mg, 3,41 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma (0) (303 mg, 0,262 mmol) i 2 M vodenog rastvora kalijum fosfata (2,62 ml, 5,24 mmol) u dioksanu (10 mL) je zagrejana na 80 °C tokom noći pod azotom. Smesa je ohlađena, sipana u vodu i ekstrakovana sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni i koncentrisani. Ostatak je pročišćen sa pripremnim HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (350 mg) kao prljavo bela čvrsta materija. LCMSmlz =187,0 [M+HJ'. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 6 4,79 (s, 2H), 7,52 (d, 7 = 8,1 Hz, 2H), 8,42 (d,./ = 8,1 Hz, 2H), 8,51 (d, 7 = 2,5 Hz, IH), 8,63 (dd, 7= 2,4 i 1,6 Hz, IH), 9,03 (d, 7 = 1.6 Hz, IH).

Korak B: Priprema 4-(Pirazin-2-U)benzil metansulfonate.

[0461] Mešanom rastvoru (4-(pirazin-2-il)fenil)metanol (40 mg, 0,22 mmol) i D1EA (56 mL, 0,32 mmoi) u DCM (1 mL) dodat je metansulfonil hlorid (29,5 mg, 0,258 mmol) na 0 °C. Reakciona smesa je mešana na toj temperaturi tokom 1 sata, sipana u vodu, i ekstrakovana sa DCM. Kombinovana organska materija je osušena i koncentrisani kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (50 mg) vvitout dalje purification. LCMSmlz -265,1 [M+H]<*>.

Korak C: Priprema etil 2-(7-(4-(Pirazin-2-il)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indoI-3-il)acetata.

[0462] Smesi etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-i!)acetat (20 mg, 0,077 mmol) i cezijum karbonata (38 mg, 0,12 mmol) u DMF (1 mL) dodat je 4-(pirazin-2-il)benzil metansulfonat (41 mg, 0,15 mmol). Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Čvrsta materija je filtrirana, i filtrat je koncentrisan. Ostatak je pročišćen sa pripremnim TLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15 mg). LCMSmlz= 428,3 [M+H]". 'H NMR (400 MHz, CDCb) 6 1,30 (t, 7= 7,1 Hz. 3H), 2,07-2,14 (m. IH), 2,50 (dd, 7- 16,7 i 11,2 Hz, IH), 2,70-2,87 (m, 4H), 3.50-3,57 (m, IH), 4,18-4,24 (m. 2H), 5,13 (s, 2H), 6,87 (dd.7=8,8 i 2,4 Hz„ IH), 7,01 (d, 7 = 2,3 Hz, IH), 7,21(d, 7 = 8,7 Hz, IH), 7,62 (d, 7 =8,2 Hz, 2H), 8,03( d, 7 - 8,3Hz, 2H), 8,46 (s, I H), 8,51 (cl, ./ = 2,5 Hz, IH), 8,64 (dd, 7= 2,3 i 1,6 Hz, IH), 9.04 (d. 7= 1,4 Hz. IH).

Korak D: Priprema 2-(7-(4-(Pirazin-2-iI)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrocikiopenta[bjindol-3-il)sirćetne kiseline.

[0463] Mešanom rastvoru etil 2-(7-(4-(pirazin-2-il)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[blindol-3-il)acetata (15 mg, 0,035 mmol) u dioksanu (1 mL) dodat je J M iitijum hidroksid rastvor (0.175 mL, 0,175 mmol). Reakciona smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati i zakišeljena sa HCI rastvorom. Smesa je pročišćena sa HPLC kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8 mg) kao ružičasta čvrsta materija, LCMSm/z =400,4 [M>H|\ 'H NMR (400 MHz, DMSO-de) 8 2,04-2,12 (m, IH), 2,35 (dd, 7 = 16,0 i 9,0 Hz, 1H), 2,62-2,75 (m, 4H), 3,44-3,50 (m, IH), 5,17 (s, 2H), 6,74 (dd, 7= 8,7 i 2,4 Hz, IH), 6,95 (d, 7= 2,4 Hz, IH), 7.21 (d, ./ = 8,7 Hz, IH). 7,62 (d, 7 = 8,2 Hz, 2H), 8,15 (d, 7 = 8,3 Hz. 2H), 8,61(d, 7 = 2,5Hz.IH), 8,72 (dd, 7~ 2.3 i 1,6 Hz,IH), 9,26 ( d, J= 1,5 Hz. IH). 10,47 (s, IH), 12,20 (s. IH).

Ref. Primer 1.28: Priprema 2-(7-(4-(l,2J3-tiadiazol-4-il)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b)indol3-iljsirćetne kiseline (Jedinjenje 32).

Korak A: Priprema etil 2-(7-(4-(l,2,3-tiadiazol-4-il)benziloksi]-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b[indol-3il)acetata.

[0464] U 4 mL bocu stavljeni su etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidiociklopenta[b|indol-3-il)acetat (64,8 mg, 0,250 mmol), cezijum karbonat (81 mg, 0,250 mmol), i 4-(4-(bromometil)fenil)-i,2,3-tiadiazol (63,8 mg, 0,250 mmol). DMA (1 mL) je dodat i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Čvrsta materija je uklonjena filtracijom i isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrisan pod smanjenim pritiskom i ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (42,7 mg). LCMS m/z = 434,2 [M+H|'.

KorakB: Priprema 2-(7-(4-(l,2,3-tiadiazol-4-il)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline.

[0465] Rastvoru etil 2-(7-(4-(l,2,3-tiadiazol-4-il)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrocikIopentalb]indol-3-il)acetata (42,7 mg, 0,030 mmol) u dioksanu dodat je IM LiOH (0,394 mL, 0.394 mmol). Reakcija je mešana tokom noći. Reakciona smesa je razmućena u EtOAc i oprana sa 1 M HCI. EtOAc ekstrakt je osušen preko MgSOj i koncentrisani. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta materija. LCMS m/z = 406,4 [M+H|<*>. 'H NMR (400 MHz, DMSO-d«) 6 ppm 2,03-2.12 (m, IH). 2.36 (dd, 7=16,04. 8,97 Hz, IH), 2,58-2,79 (m, 4H), 3,41-3,51 (m, IH), 5,16 (s, 2H), 6,74 (dd, 7=8,78,2,46 Hz, 111), 6,95 (d, 7=2,40 Hz, IH). 7,21 (d, 7=8,72 Hz, IH), 7,63 (d, 7=8,21 Hz. 211), 8,15 (d, 7=8,21 Hz, 2H), 9,61 (s. IH). 10,46 (s, IH), 12,19 (bs, IH).

Primer 1.29: Priprema 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometiI)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahjdrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 12).

Korak A: Priprema Metil 4-hloro-3-(trifluorometil)benzoata.

[0466] Rastvoru 4-hloro-3-(trifluorometil)benzojeve kiselina (200 g, 891 mmol) u MeOH |600 ml, 14,8 mol), sumporna kiselina (27 mL, 445 mmol) je dodata. Smesa je mešana na refluksu tokom 6 sati, dopušteno joj je da se ohladi i rastvarač je isparen pod smanjenim pritiskom. Rezultujuči tečni ostatak (—250 mL) je sipan u ledenu vodu gde se formirala bela suspenzija. Čvrsta materija je filtrirana i oprana sa 0,05 N NaOH (3 x 200 mL) praćenom sa H20 (3 x 200 mL). Čvrsta materija je osušena pod vakuumom tokom 16 sati praćeno sa 4 sata na 40 °C kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta materija (197,0 g). IH NMR (400 MHz, CDC13) 8 ppm, 3.98 (s, 311), 7,62 (d, J = 8,4 Hz, IH), 8,16 (dd, J = 8,8 Hz, 2,0 Hz, III), 8,39 (d, I = 2.0 I Iz, 1II).

Korak B: Priprema Metil 4-ciklopentil-3-(trilfuorometil)benzoata.

[0467] Rastvoru 4-hloro-3-(trifluorometir)benzoat (196,7 g, 824 mmol) u tF (100 mL), ciklopentilcink(h) bromid (1979 mL, 989 mmol) je dodat kapanjem na 7,8 °C. Temperatura na kraju dodavanja porasla je do 22 °C. bis(Tri-t-butilfosfinjpaladijum (21,07 g, 41,2 mmol) dodat je do tamno braon rastvor na tstoj temperaturi, i tezukujuća smesa je mešana na 70 °C tokom 8 sati. Smesa je dodat saturisanom vodenom NaHCOj (100 mL) na 0 °C, mešana na istoj temperaturi tokom 30 minuta i zatim na 22 °C tokom 2 sata. Rezultujuća suspenzija je filtrirana kroz ceiit i filtrat koncentrisani pod vakuumom. Čvrsta materija je isprana sa EtOAc (3 x 300 mL), filtrat je kombinovan sa prethodnim koncetratom i kombinovana organska materija je isprana sa H>0 (2 x 600 mL), slanim rastvorom (2 x 500 mL), osušena (NaiSOj), proceđena i koncentrisani pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasto ulje (227 g) bez daljeg pročišćavanja. LCMSm/ z= 273.4 |M^H|';<]>H NMR (400 MHz, CDCb) 8 ppm 1,71-1,60 (m, 2H), 1,83-1,75 (m, 2H). 1,95-1,87 (m, 2H), 2,21-2,11 (m, 2H), 3,46 (kvintet, 7 = 8,8

Hz, IH), 3,97 (s, 3H), 7,58 (d,i =8,4 Hz, IH), 8,18 fdd,./ = 8,0 Hz, 1,5Hz, IH), 8,31 (d,./ = 1.6 Hz, 1H).

Korak C: Priprema (4-ciklopentiI-3-(trifluorometil)fenil)nietanoIa.

[0468] Rastvoru 4-ciklopendl-3-(a-ifluorornenl)benzoat (224 g, 823 mmol) u 1,4-dioksanu (600 mL), LiBH4(494 mL, 987 mmol, 2 IVI rastvor u tF) je dodat kapanjem na 22 °C. Rezultujuća suspenzija je mešana na 85,5 °C tokom 5.5 sati. Tamno braon rastvor je ohlađena do 0 °C i pH prilagođen do 5 laganim dodavanjem 6 N HCI (130 mL). Slojevi su razdvojeni i dodau vodenoj fazi H^O (250 mL) i NaCl (20 g). Kombinovana voda je ekstrakovana sa EtOAc (2 x 250 mL). EtOAc sloj je dodat prethodno razdvojenoj organskoj fazi i kombinovana organska materija je koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Rezultujuća suspenzija je filtrirani kroz sloj od Celite/NajSOj1čvrsta materija je isprana sa EtOAc (3 x 400 mL). Kombinovana organska materija je rotaciono isparena i tamno braon uljani ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojna tečnost (110 g). LCMS m/z = 243,3 [M - H[+; IH NMR (400 MHz, CDCh) 5 ppm 1.67-1,55 (m, 2H), 1,82-1.69 (m, 2H). 1,95-1,83 (m, 2H), 2,19-2,04(m, 2H). 3,39 (kvintet, J= 8,0 Hz, IH), 4,72 (s, 2H), 7,55-7.46 (m, 2H), 7,62 (s, IH).

Korak D: Priprema 4-(hlorometil)-l-cikIopentiI-2-(trifluorometil)benzena.

[0469] (4-ciklopentil-3-(trifluorometil)fenil)metanolu (110 g . 113 mmol), dodat je tionil hlorid (329 mL, 4,50 mol) kapanjem takvom brzinom da održi unutrašnju temperaturu između 10-25 °C (ohlađeno sa ledenom vodom). Rezultujuća smesa je mešana na 50 °C tokom 3,5 sata, praćeno sa 6 sati na 25 °C. Smesa je koncentrisan pod smanjenim pritiskom i rezultujuća uljani ostatak sipan u ledenu vodu (450 mL) pod energičnim mešanjem. Slojevi su razdvojeni i vodena faza je ekstrakovana sa Cl! Cl 1.; x 400 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa saturisanim NaHCOj (400 mL), slanim rastvorom (2 x 400 mL), osušeni (NazSO-O, filtrirani preko svežeg Na^SOa, i koncentrisani u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bledo žuta ulje (113,3 g). IH NMR (400 MHz, CDCh) 5 ppm 1,67-1,57 (m, 2H), 1,81-1,71 (m, 2H). 1.94-1,84 (m. 2H), 2,16-2,07 (m, 2H), 3,39 (kvintet,J=8.6 Hz, IH), 4,61 (s, 2H), 7,49(d, J =8,4 Hz, IH), 7,54(dd, J =8,4 Hz, 1,6 Hz, IH), 7,63 (d, / =1,6 Hz, IH).

Korak E: Priprema etil2-(7-Metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata.

[0470] Rastvoru 2-jodo-4-metoksianilina (20,0 g, 80 mmol), etil-2-(2-oksociklopentil)acetata (20,5 g, 120 mmol, 1,5 ekv.) i tetraetil ortosilikata (21,7 g, 104 mmol, 1,3 ekv.) u nevodenom DMF (100 mL), dodat je piridinp-toluenesulfonat (0,807 g, 3,21 mmol, 0,04 ekv.). Tamno braon rastvor je mešan na 135 °C tokom 5 sati pod N i, dopušteno mu je da se ohladi do 100 "C i zatim je dodat DIPEA (31,i g, 241 mmol, 3 ekv.) praćen sa Pd(OAc)j(0,541 g, 2.41 mmol, 0,03 ekv.). Rezultujuća smesa je mešana na 120 °C tokom 22 sata pod N?. koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je razmućen u DCM, filtriran kroz silika čep i rastvarač je isparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel kolona hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMSm/ z =274,4 [M+H|'.

Korak F: Priprema etil 2-(7-Hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata.

[0471] DCM (305 mL) je premešten u 1 L bocu sa tri grlića i okruglim dnom i ohlađen do-11<C>C (unutrašnje) (kada sa ledenim acetonom). BBrj(72,0 mL, 761 mmol) je dodat DCM-u sa mešanjem. Rastvor etil 2-(7-metoksi-l,2,3,4tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetata (41,62 g, 152 mmol) u DCM (145 mL) dodat je kapanjem održavajući unutrašnju temperaturu između -5 do 0 "C. Nakon dodavanja reakcija je mešana tokom 1 sata ispod 0 °C. Reakciona smesa je polako sipana u ledenu smesu (400 mL) i saturisan K:>COj(400 mL) i mešana dobro (pH održan na 9-7). Organski sloj je uklonjen, opran sa slanim rastvorom (1 x 100 mL), osušen preko MgSOj, filtrirani i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Preostalo braon ulje je pročišćeno sa slojem silika gela kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8,03 g). LCMS m/z = 260,2.

Korak G: Priprema etil 2-(7-(4-cikJopentil-3-(trifluoroinetil)benziloksi)-l,2,3,4-ietrahidrociklo-penta[b]indol-3-il)acetata.

[0472] U 2L, bocu sa tri grlića i okruglim dnom pod atmosferom azota stavljeni su etil 2-(7-hidroksil,2,3,4tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)acetat (55,85 g, 215 mmol). cezijum karbonat (84,2 g, 258 mmol), 4-(hlorometil)l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzen (68 g, 259 mmol) u DMA (670 mL). Smesa je mešana 15 minuta na sobnoj temperaturi i zagrejana je na 50 °C tokom noći. Smesa je ohlađena do sobne temperature i filtrirana. Filtrat je koncentrisan pod vakuumom. Ostatku su dodati heksani (400 mL) i zagrejan je do 40 °C kako bi se dobio taman rastvor. Rastvor je ohlađena do sobne temperatura preko vikenda. Smesa je koncentrisanau vakuumui osušena pod vakuumom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (129,7 g). LCMS m/z = 486,2.

Korak H: Priprema 2-(7-(4-ciWopentil-3-(trifluorometil)benzi]oksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopentalb]indol3^iljsirćetne kiseline.

[0473] U 3 L, bocu sa tri grlića i okruglim dnom je smešten etil 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b|indol-3-il)aceta( (139,4 g, 287 mmol) u dioksanu (1.8L). Smesi dodat je 2N litijum hidroksid (0,431 L, 861 mmol) i zagrejana je do 45-55 °C tokom 3 sata. Smesa je koncentrisan u vakuumu. Ostataku su dodati M l Hi . \ oda i zakišeljen je sa koncentrisanim HCI (do pH3) održavajući temperaturu ispod 20 °C sa ledenom kadom. Vodeni sloj je uklonjen i ekstrakovan sa MTBE. Kombinovani organski slojevi su isprani nekoliko puta sa vodom do pH3 na kraju ispiranja. Acetonitril i voda su dodati MTBE rastvoru i smesa je koncentrisana uvakuumukako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (130 g) bez daljeg pročišćavanja. LCMS m/z = 458,4.

Razlaganje putem hiralne HPLC (conducted bi Chiral Technologies Iuc)

[0474] Kolona: normalna faza pripremne ChiralCel !• OJH 6

Agens za ispiranje: COVMeOH (75-25%)

Gradijent: izokratski

Protok: 400 mL^minuta

Detektor: 254 nm

Vremena zadržavanja: prvi enantiomer: 9,1 minuta (izgleda da odgovara drugom enantiomeru pročišćenom pod hiralnim HPLC uslovima opisanim u Primeru 1.4); drugi enantiomer: 13,9 minuta (izgleda da odgovara pivom enantiomeru pročišćenom pod hiralnim HPLC uslovima opisanim u Primeru 1.4).

[0475] Nakon hiralnog razlaganja, dobijeni pročišćeni fragmenti su koncentrisani do suvoće.

[0476] Rastvoru prvog enantiomera Jedinjenja 12 kako je opisano u Primeru 1.29 u acetonitrilu i etanolu dodat je (S)-l-feneblamin (1 ekvivalent). Smesa je zagrejana kratko i dozvoljeno joj je da se koncentriše sporim isparavanjem. Precipitatje formiran, filtriran i osušen. Jedinični kristali prvog enantiomera Jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.29) dobijeni su i podvrgnuti analizi rendgenskom kristalografijom. Posmatrani kako su dobijeni na Slici 21.

Primer 1.30: Priprema 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline (Jedinjenje 12).

Korak A: Priprema l-(2-(Trilfuorometil)fenil)ciklopentanola.

[0477] Rastvor l-bromo-2-(trifluorornetil)benzena (0,5 g, 2,222 mmol) u nevodenom tF (10 mL) je ohlađen do -78 °C (IPA kada sa suvim ledom) pod atmosferom argona. BuLi (2,5 M u heksanima, 1,068 mL, 2,67 mmol) je dodat kapanjem sa efikasnim mešanjem. Reakciona smesa je mešana na -78 °C tokom 40 minuta. Rastvor ciklopentanona (0,243 g, 2,89 mmol) u nevodenom tF (1,5 mL) dodat je polako (kapanjem) na -78 °C. Reakciona smesa je mešana na -78 °C tokom 30 minuta, postepeno dovedena do sobne temperature, i mešana tokom i sata. Reakciona smesa je ohlađena ledenom kadom, ugašena je vodom, i zakišeljena do pH 4-5 dodavanjem koncentnsanog HCI. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u metilen hloridu, oprana vodom (2 puta), osušen preko Na^SOj, filtrirani i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen silika gel hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje (250 mg). LCMS m/z - 213, L |.M-HjO+H)'.

Korak B: Priprema l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzena.

[0478] Rastvoru l-(2-(trilfuoromelil)fenil)cikiopentanol (5,1 g. 22,15 mmol) u etanolu (32 mL) dodat je 10% Pd-C (500 mg; Degussa; mokar) i smesa je hidrogenizovana tokom noći sa balonom vodonik. Reakciona smesa je filtrirana kroz celit. Filtrat je sipan u ledenu vodu (100 mL) i ekstrakovan sa C!l < .. • (2 x 70 mL). Kombinovani CHjCl; sloj je ispran vodom (1 x 75 mL), osušeni preko Na^SOa, filtriran i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,3 g). IH NMR (400 MHz, CDClj) 5 ppm 1,58-1,67 (m, 4H), 1,81-1.90 (m, 2H), 2,06-2,15 (m. 2H), 3,32-3,43 (m. IH), 7,22-7.26 (m, IH), 7.45-7,51 (m. 2H), 7,58 (d, J=8 Hz,

IH).

Korak C: Priprema 4-Bromo-l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzena.

10479] Rastvoru l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzen (0,5 g, 2,334 mmol) u sirćetnoj kiselini (2,5 mL) dodat je bromin (1,202 mL, 23,34 mmol). Smesa je dobro mešan, dodat je koncentrisani H>SOj(2.5 mL), i mešana je na 40 °C tokom 1,5 sata. Reakciona smesa je sipana u ledenu vodu i ekstrakovana sa Cl LCL. Cl LCL sloj je ispran vodom, praćeno sa rastvorom natrijum tiosulfata, i zatim vodom. Organski sloj je osušen preko Na^SGj i rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen sa silika gel hromatografijom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (250 mg).<»>H NMR (400 MHz, DMSO-dt;) 5 ppm 1,52-1,75 (m, 4H), 1,78-1,88 (m, 2H), 1,95-2,04 (m, 2H), 3,16-3,26 (m, IH), 7,57 (d, J=8,4Hz, IH), 7,76fd, J=2 Hz, 11 I), 7,81 (dd, J=8,4 Hz, 2 Hz, 1 H).

Korak D: Priprema 4-ciklopentil-3-(triluorometil)benzaldehida.

[0480]U 15 mL bocu sa okruglim dnom stavljeni su 4-bromo-l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzeii (0,186 g, 0,635 mmol) i nevodeni tF (1,86 mL) pod atmosferom argona. Rastvor je mešan dobro i ohlađena do -78 °C (1PA kada sa suvim ledom). BuLi (2,5 M u heksanima, 0,281 mL, 0,703 mmol) je dodat kapanjem (polako) i reakciona smesa je mešana na niskoj temperaturi tokom 25 minuta. Nevodeni DMF (0,1 mL, 0,766 mmol) dodat je kapanjem na -78 °C (polako). Smesa je mešana na -78 °C tokom 20 minuta, a zatim na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakcija je ugašena vodom, zakišeljena sa 2M HCI i ekstrakovana sa EtOAc. EtOAc sloj je ispran vodom, osušen preko NajS04, i koncentrisan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje (60 mg). LCMS m/z = 243,3 [M+H]'. lH NMR (400 MFlz, DMSO-d6) 6 ppm 1,55-1,7 (m, 4H), 1,79-1,94 (m, 2H), 1.95-2.09 (m, 2H), 3,29-3,37 (m, IH), 7,86 (d, J=8 Hz. IH), 8,12 (đ, J=8 Hz, IH), 8,16 (d, J=l,2 Hz, IH), 10,46 (s, IH).

Korak E: Priprema (4-cikJopentil-3-(trifluorometil)fenil)metanola.

[0481J Rastvoru 4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benzaldehid (0,25 g, 1,032 mmol) u etanolu (2.5 mL) dodat je natrijum borohidrid (0,047 g, 1,238 mmol) i smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Smesa je ugašena vodom, zakišeljena sa 6N HCI, razređena sa još vode i ekstrakovana sa Cl-bCb. CILCb sloj je ispran vodom, osušen preko NajSOa, filtrirani i koncentrisani uvakuumukako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,22 g). LCMS m/z = 227,5 [M-H30+H1+. IH NMR (400 MHz, DMSO-dc) 5 ppm 1,54-1,72 (m. 4H), - 1,77-1,89 (m. 2H), 1,93-2.05 (m, 2H), 3.19-3,28 (m, IH), 4,52 (d, J=6 Hz, 2H), 5,28 (t, J=5,6 Hz, IH), 7,52-7,6 (m, 3H).

Korak F: Priprema 4-(hlorometil)-l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzena.

[0482] (4-ciklopentil-3-(trifluorometil)fenil)metanolu (110 g, 113 mmol) kapanjem je dodat tionil hlorid (329 mL, 4,50 mol, 10 ekv.) takvom brzinom da održi unutrašnju temperaturu između 10-25 °C (ohlađeno sa ledenom vodom). Rezultujuća smesa je mešana na 50 °C tokom 3.5 sati praćeno sa 6 sati na 25 °C. Smesa je koncentrisana pod smanjenim pritiskom i rezultujući uljani ostatak je sipan u ledenu vodu (450 mL) pod energičnim mešanjem. Slojevi su razdvojeni i vodena faza je ekstrakovan sa CHjCb (3 x 400 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa saturisanim NaHCOj (400 mL), slanim rastvorom (2 x 400 mL), osušeni (NajS04), filtrirani preko svežeg NajSOj, i koncentrisani u vakuumu kako bi se dobio 4-(hlorometil)-l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzen kao bledo žuto ulje (113,3 g, 96%). IH NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1,67 - 1,57 (m. 2H). 1,81 - 1,71 (m, 211), 1,94 - 1,84 (m, 2H), 2,16 - 2,07 (m, 2H), 3,39 (kvintet,J- 8,6 Hz, IH). 4,61 (s, 2H), 7,49 (d,J» 8,4 Hz, IH), 7,54 (dd,J= 8,4 Hz, 1,6 Hz, IH), 7,63 (d,J= 1,6 Hz, IH).

Korak G; Priprema etil 3-(2-etoksi-2-oksoetiI)-7-metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta [6]indol-3-karboksilata.

[0483] Suspenziji (4-metoksifenil)hidrazin hidrohlorida (379,5 g. 2,17 mol) i etil l-(2-etoksi-2oksoelil)-2-oksociklopentankarboksilata (526 g, 2,17 mol) u EtOH (2,0 L), dodat je AcOH (131 g, 124 mL, 2,17 mol) i smesa je mešana na 75 °C tokom 18 sati pod N:. Finoj tamno braon suspenziji je dopušteno da se ohladi i neutralizovana je sa saturisanim vodenim NaHCOj. Rastvarač je isparen pod smanjenim pritiskom. Braon uljani ostatak je razmućen u EtOAc (2 L), filtriran i organska materija je isprana vodom (3 x 500 mL.) i slanim rastvorom (2 x 500 mL). Kombinovani vodeni slojevi su re-ekstrakovani sa EtOAc. Kombinovana organska materija je osušena (MgSOj) i rastvarač je isparen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova ( 703,4 g) kao gusto tamno braon ulje. LCMSm/z= 346,2 [M+H]' ; 'H NMR (400 MHz, DMSO-dG) (5 ppm 1,15(t, J = 72Hz. 3H), 1,17 (t, I = 7,2 Hz, 3H), 2,48-2,42 (m, IH), 2,81 (d,J= 16,6Hz, LH), 2.82-2,70 (m, 2H), 3,05-2,99 (m, IH), 3,18 (d,J= 16,6 Hz, IH), 3,73 (s, 3H), 4,12-4,00 (m, 4H), 6,67(dd. J-3.8. 2,5 Hz. IH), 6.85 (d.J = 2,4Hz,IH), 7,21 (d../ =8,7 Hz, IH), 10,57 (s, IH).

Korak H: Priprema 3-(karboksimetil)-7-metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[p]itidol-3-karboksilna kiseline.

[0484] Vodeni rastvor NaOH (346 g, 4,32 mol, 4 ekvivalentno) 50% težinskog udela je polako dodat rastvoru etil 3-(2etoksi-2-oksoetil)-7-metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[p|indol-3-karboksdata (373 g, 1,08 mol) u EtOH (2,0 L) i rezultujuća smesa je mešana na 60 °C tokom 18 sati pod Nj. Braon suspenzija je neutralizovana na 0 °C sa 6 N HCI i rastvarač je isparen. Braon ostatak je podeljer, između I-LO (2 L) i EtOAc (1 L) i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je dalje opran sa EtOAc (3 x 500 mL) i pH vodene faze je prilagođen do 3-4 sa 6 N HCI. Precipitat je prikupljen i osušen pod vakuumom na ambijentalnoj temperaturi tokom noći kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (191,4 g) kao braon čvrsta materija. LCMSm/z= 290,4 [M+HT: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d,,) 5 ppm 2,43-2.36 (m, 111),2,68 (d, J =16,9 Hz, IH), 2,82-2,69 (m, 2H), 3,07-3,01 (m, IH), 3,12 (d,J= 16,9 Hz, IH), 3,72 (s, 3H), 6,66 (dd, ./ = 8,7, 2,4 Hz, IH), 6,84 (d,J =2, 4 Hz, IH), 7,20 (d,J= 8,6 Hz, IH), 10,55 (s, IH), 12,30 (s, 2H).

Korak I: Priprema 2-(7-Metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[p]indol-3-il)sirćetne kiseline.

[0485] Rastvor 3-(karboksimetil)-7-metoksi-l,2.3,4-ietrahidrociklopenia[|3]indol-3-karboksilndkiselina (191 g, 0,66 mol) u AcOH (1,0 L) je mešan na 60 °C tokom 4,5 sata pod Nj. Tamno braon rastvor je koncentrisan. Precipitat je prikupljen, opran sa HjO (3 x 500 mL) i osušen na 40 °C pod vakuumom tokom noći kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (126,4 g) kao braon čvrsta materija. LCMSm/z= 246,1 [M+H]<*>; 'H NMR (400 MHz, DMSO-dr,) <5 ppm 2,12-2,04 (m, IH), 2,35(dd, J =16,0, 9,1 Hz, IH), 2,77-2,60 (m, 4H), 3,50-3.43 (m, IH), 3,72 (s. 311), 6.62 (dd,J= 8,8,2.5 Hz, IH), 6,81 (d. 7 = 2,3 Hz,IH), 7,18 (d, 7 = 8,7 Hz,IH), 10.42 (s, IH), 32.16(s, IH).

Korak J: Priprema etil 2-(7-Hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[p]indol-3-il)acetata.

[0486] Rastvoru BBrn (115 g, 43,3 mL, 458 mmol, 3 ekvivalentno) u CHjCL (70 mL) dodata je polako suspenzija 2-(7-metoksi-l,2,3,4-tetrahidrociklo<p>enta(b]iiidol-3-il)sirćetne kiseline (37,44 g, 153 mmol) u CFLCL (300 mL) održavajući reakciju temperature između -5<*>C do 0 -'C. Rezultujuća tamno braon suspenzija je mešana na -5 do 0<Q>C tokom dodatnog 1 sata. EtOH (187 mL) je dodat kapanjem reakcionoj smesi održavajući temperatura između 0 - 10 °C. Rezultujuči rastvor je zagrejana na 40 °C tokom 30 minuta. Rastvor je ohlađen i pH prilagođen do 8 dodavanjem 10 N NaOH (142,9 mL, 1,43 mol) polaku održavajući tempera turu između 0-3<:>'C. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom dok oko 200 mL koncetrata nije preostalo. pH je prilagođen do oko 7 sa koncentrisanim HCI, suspenzija je filtrirana, čvrsta materija je oprana sa ILO (3 x 200 mL)i osušena pod vakuumom na ambijentalnoj temperaturi tokom noći. Svetio braon materijal je rastvoren u EtOAc (200 mL), i filtrirana, ispirajući čvrstu materiju sa EtOAc. Kombinovana organska materija je isprana sa saturisanim vodenim NaHCOj (2 x 200 mL), slanim rastvorom (200 mL), osušena (NajSOi) i rastvarač je rotaciono isparen kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (35,2 g) kao svetio braon čvrsta materija. LCMS m/z = 260.1 [M+H]';<;>H NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm 1,20 (t, 7= 7,1 Hz, 3H), 2,11-2,03 (m, IH), 2,42 (dd, 7 = 15.7, 8,9 Hz, IH), 2,71-2,55 (m, 3H), 2,76 (dd,7=15,7, 5,5 Hz, IH), 3,49-3,42 (m, IH), 4,11 (q, 7 = 7.1I Iz, 211), 6,49 (dd. 7 = 8.6, 2,3I Iz, 111), 6,62 (d,J = 2,1Hz, IH),7,07 (d, 7 = 8,6 Hz,IH), 8,47 (s, IH), 10,25 (s. IH).

Korak K: Priprema etil 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3-il)acetata.

[0487] Rastvoru 4-(hlorometil)-l-ciklopeniil-2-(trifluorometil)benzena (46,2 g, 176 mmol, 1.2 ekv.) u DMF (400 mL) dodat je etil 2-(7-hidroksi-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[p1]indol-3-il)acetat (38,0 g, 147 mmol) iz jednog dela praćen sa CsjCOj (71,6 g, 220 mmol, 1,5 ekv.). Egzoterm je posmatran tokom najpre 15 minuta (temperatura povećana do 72,8 °C) nakon čega je smesa je dalje mešana na 50 °C pod N? tokom 13,5 sati. Reakcionoj smesi je dopušteno da se ohladi, filtrirana je pod sukcijom ispirajući čvrstu materiju sa EtOAc i filtrat je isparen pod smanjenim pritiskom. Tamno braon uljani ostatak je razmućen u EtOAc, opran sa HjO (3 x 300 mL) i vodena faza je re-ekstrakovana sa EtOAc. Kombinovana organska materija je osušena (MgSGi), filtrirana i rotaciono isparena kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (77 g) kao gusto tamno braon ulje koje je korišćeno u narednom koraku bez. daljeg pročišćavanja. LCMSm/z= 486,4 [M + H]"; 'H NMR (400 MHz. DMSO-db) 5 ppm 1,19 (t, 7 = 7,2 Hz. 3H). 1,73 - 1,54 (m, 4H), 1,89 - 1,77 (m, 2H), 2,12 - 1,94 fm, 3H). 2,44 (dd,7=17,2, 8,4 Hz, IH), 2,81 - 2,60 (m, 4H), 3,30 - 3,20 (m, IH), 3,54 - 3,44 (m, IH), 4,12 (q,7=7,2 FIz. 2H), 5.12 (s. 2H), 6,72 (dd. 7 = 8,8, 2,4 Hz. IH), 6,94 (d,7 =2,4 Hz, IH), 7,20 (d, 7 = 8,8 Hz, 1 H), 7,62 (d.7 =7.3 Hz, IH), 7,73 - 7,67 (m, 2H), 10,47 (s, 1H),

Korak L: Priprema 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol3-iljsirćetne kiseline.

[0488] Rastvoru etil 2-{7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-I,2.3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-iljacetata (71,2 g, 147 mmol) u 1,4-dioksanu (400 mL) vodeni rastvor LiOH.H O (220 mL, 2 M, 3 ekv.) je dodat. Rezultujuća smesa u dve faze je mešana na 50 °C pod Nj tokom 5 sati. Reakcionoj smesi je dopušteno da se ohladi i pH je prilagođen do 3-4 sa 6 N HCI. Rastvarač je rotaciono isparen i vodenoj fazi dva/smesi proizvoda je dodat C1LCL. Slojevi su razdvojeni i organska materija je oprana sa HjO ( 2 x 300 mL). Kombinovane vodene faze su re-ekstrakovane sa CH^Cb. Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSOi), filtrirani i rotaciono ispaćeni. Tamno braon uljani ostatak je razmućen u MeOH i rastvarač je isparen pod smanjenim pritiskom. Tamno braon ostatak je razmućen ponovo u minimalnoj količini MeOH i ostavljen u frižideru tokom 16 sati. Precipitat je prikupljen pod sukcijom, ispirajući čvrstu materiju sa heksanima, : osušeni pod visokim vakuumom kako bi se dobio proizvod (34,5 g, 51%) kao prljavo bela čvrsta materija. Filtrat koji sadrži proizvod je koncentrisan do suvoće kako bi se dobila tamno braon mekana čvrsta materija (33,6 g) koje je dalje nezavisno procesuirana. LCMSmlz= 458,2 [M + H]'; 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 1,76-1,57 (m, 4H), 1,93 - 1.81 (m. 2H), 2,16 - 1,97 (m, 3H), 2,38 (dd,7= 15,2, 8,8 Hz, IH), 2,80-2,62 (m, 4H), 3,32 - 3,23 (m, 1 H). 3,54 3.44 (m, 1 H). 5,15 (s, 2H), 6,74 (dd, 7 = 8,8, 2,4 Hz, IH), 6,96 (d, 7 = 2.4 Hz, 1 H), 7,23 (d. 7 = 8,8 Hz, 1 H). 7.65 (d, 7 = 8.4 Hz, IH), 7.76 - 7.70 (m. 2H), 10.48 (s, IH), 12,20(s, IH).

Primer 1.31: Priprema 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3-il)sirćetne kiseline.

Korak A: Priprema l-ciklopentiI-2-(trifluorometil)benzena.

[0489]U 5 L bocu sa tri grlića i okruglim dnom opremljenu sa mehaničkom mešalicom, sondom za temperaturu, ulazom za suv azot, kondenzatorom i levkom za dodavanje je smešten nevodeni tF (750 mL) i magnezijum (40,5 g, 1667 mmol) pod Nj. Mulj je ohlađen do 10" Cu ledenoj kadi Rastvor FeCb (18,02 g, 111 mmol) u nevodenom tF (80 mL) (Note: rastvaranje FeCh u tF je egzotermno) dodat je kapanjem magnezijumskom mulju špricem, Nl,Nl,N2,N2-tetrametiletan-l,2-diamin (201 mL, 1333 mmol) dodat je reakcionoj smesi putem 500 mL levka za dodavanje na 15 °C uzrokujući rast temperature do 22.5<C>C. Reakciona smesa je ohlađenci do 18 °C i mešana na toj temperatura tokom 1 sata i 45 minuta. Zatim je zagrejana do 44-45 °C. mešana tokom 1 sata, ohlađena do 5-10<*>C, i dodat je smesa l-bromo-2-(trifluorometii)benzena (150 mL, 1111 mmol) i bromociklopentaua (143 mL, 1333 mmol) kapanjem održavajući unutrašnju temperaturu ispod 30°C(temperatura je održana između 22 do 30°C). Nakon što je dodavanje završeno, reakciona smesa je ohlađena do 17-18 °C i mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Ova glavna reakciona smesa je ohlađena do 10 °C i dodat je magnezijum (15 g). U međuvremenu, u odvojenu 1 L bocu sa okruglim dnom pod N2, Mg (20 g, 0,5 ekv.) u tF (300 mL) dodat je rastvor FeCL (9 g, 0,5 ekv.) u nevodenom tF (30 mL) kako je opisano iznad. Dobijena smesa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta, zagrejana je do 45 °C tokom 1 sata, ohlađena do sobne temperatura, i dođata kapanjem glavnoj reakcionoj smesi putem levka za dodavanje (preostali magnezijum je premešten lopaticom) održavajući unutrašnju temperaturu ispod 30 °C, Reakcija je nastavljena na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, ohlađena do 5<U>C (ledenom kadom) i ugašena je polako sa saturisanim NILiC! rastvorom (150 ml.) (gašenje je egzotermno saturisan NFLC1 je dodat polako sa efikasnim mešanjem). Celit je dodat nakon reakcije gašenja i dobro mešan. Smesa je filtrirana kroz 3 L sinterovan levak. Filter kolač je ispran sa tF. Filtrat je koncentrisan pod smanjenim pritiskom na 37<g>C (temperatura kade)/ 155 Torr kako bi se dobilo braon ulje. Ulje je ohlađeno ledenom kadom i 6N HCI (500 mL) je sipan njega polako sa efikasnim mešanjem) (dodavanje HCI je inicijalno egzotermno, zatim se eksoterm potiskuje). Smesa je ekstrakovana sa heksanom (2 x 400 mL). Heksan sloj je uklonjen i filtrirani kroz sloj celita. Filtrai (heksan sloj) je ispran vodom (3 x 300 mL), osušen (NajSO^) i dodat je silicijum-dioksid (5S0g); dobro razmućen. Mul j je filtrirani i filtrat (svetio žute boje) je koncentrisan pod smanjenim pritiskom (rotavapor; temperatura kade 37C na 185-188 Torr), kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetio narandžasto ulje (190 g, 91,4% puriti bi LC na 214 nm). 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 1,56-1,71 (m, 4H), 1,80-1,88 fm, 2H), 1.96-2,05 (m, 2H), 3.22-3,29 (m, IH), 7,35-7,40 (m, IH). 7,16-7,65 (m, 2H).

KorakB: Priprema 4-(hlorometil)-l-ciklopentil-2-(trifluorometil)benzena.

[0490] U 1 L, reakcionu bocu sa tri grla opremljenu sa mehaničkom mešalicom, sondom za temperaturu, levkom za dodavanje i ulazom za suv azot smešten je l-ciklopentil-2-( trifluorometil)benzen (50 g, 233 mmol). Materijal je mešan i ohlađena do -12 °C (suv led/IPA kada). Koncentrisana sumporna kiselina (100 mL, 1877 mmol) dodat je kapanjem tako daje temperatura održana između -12 °C do -10 °C. Smesa je ohlađena do -15 °C i s-triuksane (27.3 g, 303 mmol) je dodat u 3 ture (9,lg svaka tura) dok je temperatura održavana na između -15 °C do -10 °C. Smesa je mešana na -10 °C i skoro odmah polako je dodata hlorosumporna kiselina (28,1 mL, 420 mmol) održavajući temperaturu između -10 °C do -5 °C. Smesa je mešana tokom 20 minuta na -5 °C i 3 sata između -2 do -3<6>C. Reakciona smesa je polako sipana (sa efikasnim mešanjem) u ledenu vodu (1 L), MTBE (700 mL) je dodat i smesa je dobro mešana. Celit (300 g) je dodat i dobro mešan. Celitni mulj je filtriran i celitni ležaj su isprani sa MTBE. Vodeni sloj filtrata je uklonjen i ekstrakovan sa MTBE (1 x 700 mL). Kombinovani MTBE sloj je ispran vodom (1 x 500 mL) praćen sa saturisanim NaHCOj(2 x 350 mL). MTBE sloj je zatim oprana vodom (2 x 500 mL), osušen (NajS04) i filtrirani. Filtrat je koncentrisan (at 38 °C, temperatura kade; 200 Ton ) kako bi se dobilo žuto ulje. Ulje je razmućeno u heksanu (500 mL) i filtrirano kroz silika ležaj; zatim je silika ležaj ispran sa heksanom. Filtrat je koncentrisan pod smanjenim pritiskom (38 °C, temperatura kade; na 200 Tor) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svedo žuto ulje (36,2 g; 89% puriti bi LC na 214 nm). 'JI NMR (400 MHz, DMSO-d,.,) 5 1,55-1,72 (m. 4H). 1,78-1,89 (m, 2H), 1,94-2,04 (m, 2H), 3,19-3,28 (m. I H), 4.82 (s, 2H),<7>.62-7,72 (m, 3H).

KorakC:Priprema l-ciklopentil-4-((4-nitrofenoksi)metil)-2-(trifluorometil)benzena.

[0491]U 1 L bocu opremljenu sa mešalicom, termoelektričnoni baterijom, kondenzatorom i ulazom za azot, smešten je nitrofenol (28 g, 201 mmol) u DMA (150 mL) i kalij um karbonat prašak (28.7 g, 207 mmol). 4-(hlorometil)-l-ciklopentil2-(trifluorometil)benzen (45,4 g, 1.73 mmol) je dodat i oprana sa DMA (120 mL). Reakcija je zagrejana na 80 °C (kada, unutrašnja 77 °C) tokom noći. Smesa je ohlađena i sipana u ledenu vodu (l L). Formiranoj čvrstoj materiji je dozvoljeno da se smiri mešanjem tokom 4 sata i prikupljena je filtracijom. Prikupljena čvrsta materija je mešana u rastvoru natrijum bikarbonata (300 mL), f iltrirani, oprana vodom, i osušena vazduhom. Bledo žuti ostatak je ispran sa heksanima (250 mL) i čvrsta materija je osušena u vakuumskoj remi tokom noći kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (41,4 g, -85% čist sa LC). LCMS m/z. = 366,2 [M+H]+.

KorakD:Priprema 4-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)anilinehidrohlorida.

[0492]U 2 L bocu opremljenu sa mešalicom i termoelektričnoni baterijom, smešten je 1-ciklopentil-4-((4-nitrofenoksi)metil)2-(triflttorometil)benzen (40 g, 109 mmol) u ACN (520 mL). Ammonijum hlorid (3M, 520 mL) je dodat i smesa je mešana i ohlađena do 2,5 °C. Cink (35,8 g, 547mmol) je dodat u defovima održavajući temperaturu ispod 5 °C. Nakon što je dodavanje završend, reakcionoj smesi je dopušteno da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom noći. Smesa je filtrirani kroz celitski ležaj (50 g) i filter ležaj je ispran sa ACN (150 mL). Vodeni sloj filtrata je uklonjen i ekstrakovan nazad sa izopropil acetatom (200 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata (50 g), filtrirani i koncentrisani. Ostatak je rastvoreni u etanolu (120 mL), dodat je HCI (1,25 M u EtOH, 140 mL) i mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 2.5 sata. Nakon uklanjanja rastvarača, preostala čvrsta materija je zdrobljena sa ACN (120 mL), filtrirana, oprana sa ACN (2 x 50 mL), i osušena pod vakuumom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29,8 g).

Korak E: Priprema (4-(4-ciklopentil-3-(trifluoromedl)benziloksi)fenil)hidrazin hidrohlorida.

[0493] 4-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)aniline hidrohiorid (30 g, 81 mmol) je suspenzovan u vodi (285 mL), i dodat je koncentrisani HCI (18 mL). Suspenzija je mešana efikasno i ohlađena je u led/IP A kadi do -0 °C. Natrijum nitrit (3,57 g, 81 mmol) u vodi (12 mL) je dodat. Nakon dodavanja, reakci ja je mešana na 2 °C tokom 40 minuta. Neka čvrsta materija na strani je isprani sa ACN (10 mL). Smesa je ohlađena do -1 °C i polako je dodat tin (ll)hlorid (45,9 g, 242 mmol) rastvoreni u koncentrisanom HCI (30 mL. Gust precipitat je formiran i mešanje je nastavljeno tokom 30 minuta. Smesa je zagrejana do sobne temperatura i mešana tokom 3 sata. Smesa je filtrirana, oprana sa HCI (0,1 M) i čvrsta materija je osušena pod vakuumom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40,6 g).

Korak F: Priprema etil 7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-3-(2-etoksi-2-oksoetil)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-karboksilata.

[0494] U 1 L bocu je smešten EtOH (500 mL). Sumporna kiselina (2,4 g, 23,98 mmol) je dodata na 40 °C, praćena sa etil l-(2-etoksi-2-oksoetil)-2-oksociklopentankarboksilatom (15,2g, 62,7 mmol). (4-(4-ciklopenlil-3-(trifluorometil)benziloksi)fenil)hidrazin hidrohiorid (24,0 g, 62,0 mmol) je dodat i rastvor je postao svetio žut i homogen. Reakciona smesa je refluksovana tokom noći sa prikačenim Dean-Starks kondenzatorom. Smesa je ohlađena i ekstrakovana u etil acetatu (3ksl00 mL). Organska materija je isprana vodom (200 mL), natrijum bikarbonat rastvorom (2ks70 mL), vodom (100 mL), osušena preko magnezijum sulfata, i koncentrisana. Ostatak je rastvoreni u heksanima/etil acetatu (80:20, 300 mL), dodat je silika gel (30 g) i mešano je tokom 35 minuta. Mulj je filtriran, opran sa istim eluacionim rastvaračem (100 mL) i filtrat je koncentrisan kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26,7 g). LCMS m/z = 558,5 [M+H]\

Korak G: Priprema natrijum 3-(l^rboksilatometil)-7-(4-ciklopentil-3-(trifluoromeul)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-karboksilata.

[0495] U 500 mL bocu je smešten etil 7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-3-(2-etoksi-2-oksoetil)l,2.3.4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-karboksilat (24,1 g, 43,2 mmol) u izopropanolu (275 mL). Natrijum hidroksid rastvor (20%, 129,5 mL, 130 mmol) je dodat i smesa je zagrejana na 100 °C (kada) tokom 2,5 sata. Smesa je ohlađena, filtrirana, oprana sa izopropanolom, i osušeni tokom noći pod vakuumom na 40 °C kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (17,5 g). LCMS m/z = 502,6 [M-2Na+3H]\

Korak H: Priprema 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometiI)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[blindol3-iljsirćetne kiseline.

[0496] Mešanom rastvoru natrijum 3-(karboksilatometil)-<7->(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4tetrahidrociklopenta[b]indol-3-karboksilata (16,5 g, 30,2 mmol) u vodi na 40 °C dodat je amonijum hlorid rastvor (9,71%, 100 mL). Reakcija je zagrejana na 92 °C (kada) tokom 4,4 sata. Smesa je držana u frižideru tokom noći, proceđena i zdrobljena sa ledeno hladnim 6N HCI (100 mL). Čvrsta materija je prikupljena filtracijom, oprana sa razređenim HCI (100 mL) i osušena tokom noći u vakuumskoj rerni na 40 °C kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8,5 g). LCMSm/z= 458,3 [M+H ]+.

Primer 1.32: Priprema Ca soli drugog enantiomera Jedinjenja 12.

[0497] Pre primene, daigi enantiomer Jedinjenja 12, kako je opisano u Primeru 1.29, je zamućen u acetonitrilu tokom noći, filtriran i osušeni kako bi se proizveo kristalni oblik. Kristalnom obliku (40 mg) dodat je acetonitril (1 mL) i smesa je zagrejana do 60°G Kontrajon je dodat dodavanjem 20 mL rastvora kalcijum acetata (2 M) i 20 mL vode i zatim posejan sa kristalnom solju i dopušteno mu je da se do polako ohladi do sobne temperature. Rezultujuća čvrsta materija je filtrirana i osušena kako bi se dobila bela čvrsta materija

Primer 1.33: Priprema L-arginin soli drugog enantiomera Jedinjenja 12.

[0498] Drugi enantiomer Jedinjenja 12 kako je opisano u Primeru 1.29 (174,7 mg, 0,381 mmol) je rastvoren u 1PA (1,57 mL) i L-arginin (66,4 mg, 0,381 mmol) je dodat kao rastvor u vodu (263 mL). Homogeni rastvor je zagrejan do 40 °G Nakon 15 minuta na toj temperatura, precipitat jc formiran. Reakciona smesa je zagrejana do 70 °C uzrokujući precipitat da se rastvori. Kada za gtejanje je isključena. Precipitat je počeo da se formira na 40 °C i reakcija je dopušteno da se ohladi do 28 °C pre nego što je prikupljena čvrsta materija filtracijom. Čvrsta materija je isprana sa 14% vodom u IPA kako bi se dobila L-arginin so jedinjenja iz naslova (130 mg).

Primer 1.34: Priprema D-lizin soli prvog enantiomera Jedinjenja 12.

[0499]Prvom enantiomeru Jedinjenja 12 kako je opisano u Primeru 1.29 u acetonitrilu sa 3% vode dodat je D-lizin (1 M vodeni rastvor). Nakon mešanje tokom noći na ambijentalnoj temperatura, rezultujuća čvrsta materija je filtrirana i osušena.

Primer1.35:Priprema (Ji)-l-fenetilamin soli acetonitrilsolvatadrugog enantiomera Jedinjenja12.

[0500]Rastvoru drugog enantiomera Jedinjenja 12 kako je opisano u Primeru 1.29 u acetonitrilu dodat je (R)-l-feneđlamin (1 ekvivalent). Smesa je zagrejana kratko i dopušteno joj je da se ohladi. Precipitat je formiran, filtriran i osušen. Kristali (R)-l-feniletanamin soli drugog enantiomera Jedinjenja 12 (kako je opisano u Primeru 1.29) su rekristalizovani sporim isparavanjem acetonitrila i acetona i podvrgnuti rengendskoj kristalografskoj analizi. Acetonitril solvat je posmatran u odnosu od 4 slana dela prema 1 molekulu acetonitrila.

Primer2:Test homogene vremenske fluorescencije (hTRF®) za direktno cAMP merenje.

[05011Jedinjenja su pregledana za agoniste SIPI receptora(tip;.,humani SIPI receptor) koristeći HTRF ? test za direktno cAMP merenje (Gabriel et al., Assav and Drug Development Technologies, 1:291-303, 2003) i rekombinantne CHO-K1 ćelije stabilno transfekovane sa SIPI receptorima. CHO-K1 ćelije dobijeni su od ATCC<*>

(Manassas, VA; Catalog n CCL-61). Agonist SIPI receptora je detektovan u HTRFfe testu za direktno cAMP merenje kao jedinjenje koje smanjuje cAMP koncentraciju. HTRFl!''test takođe je korišćen da odredi ECso vrednosti za SIPI receptor agoniste.

[0502] Princip testa:HTRF<*>test komplet je nabavljen od Cisbio-US, Inc. (Bedford, MA; Catalog #62AM4PEC). riTRF"" test podržan kompletom je kompetitivan imunotest između endogenih cAMP proizvedenih od strane CHO-Kl ćelija i cAMP tragača označenog sa bojom d2. Vezivanje tragača je vizuelizovano monoklonskim anticAMP anđtelom označenim sa Criptatom. Specifični signal( tj.,energetski transfer rezonance fluorescencije, FRET) je obrnuto proporcionalan koncentraciji neoznačenog cAMP u standardu ili uzorku.

[0503] Standardna kriva:odnos fluorescencije (665 nm/620 nm) standarda (0,17 do 712 nM cAMP) uključen u testu je izračunat i korišćen da se dobije cAMP standardna kriva prema instrukcijama proizvođača kompleta. Odnos fluorescencije uzoraka (test jedinjenje ili jedinjenje pufer) je izračunat i korišćen da se utvrde respektivne cAMP koncentracije sa referencom na cAMP standardnu krivu.

[05041 Okolnosti testa:HTRF° test je sprovedena koristeći protokol iz dva koraka u suštini prema intrukcijama proizvođača kompleta, u 20 mL ukupne zapremine po komorici u 384-komoričnom formatu ploča (TroxiPlates; PerkinElmer, Fremont, CA; catalog # 5008280). Svakoj eksperimentalnoj komorici je premešteno 1500 rekombinantnih CHO-K1 ćelija u 5 mL fosfatom puferisanom slanom rastvoru koji sadrži kalcijum hlorid i magnezijum hlorid („PBS+"; Inviuogen, Carlsbad, CA; catalog # 14040) dopunjenom sa IBMks (250 mM) i rolipramom (20 mM) (inhibitori fosfobojomsteraze; Sigma-Alsuvch, St. Louis, MO; catalogti15879 i catalog # R6520, respektivno), praćenom sa test jedinjenjem u 5 mL puferu jedinjenja (PBS+ dopunjeno sa 10 mL NKH477 (derivat forskolina rastvorljiv u vodi; SignaGen Laboratories. Gaitersburg, MD; catalog # PKI-NKH477-010)) ili 5 mL pufera jedinjenja. Ploča je zatim inkubirana na sobnoj temperaturi tokom 1 saia. Svakoj komorici je zatim dodat 5 mL cAMP-d2 konjugat u puferu lize i 5 mL Criptat konjugat u puferu lize prema intrukcijama proizvođača kompleta. Ploča je zatim dalje inkubirana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, nakon čega je test ploča pročitana.

[0505] Čitanje testa:H.TRF* čitanje je postignuto koristeći PHERAstar (BMG LAB I I.Cl i Inc., Durham, NC) ili En Vision™ (PerkinElmer, Fremont CA) čitač microploča.

[0506]Određena ovde opisana jedinjenja i njihove odgovarajuće vrednosti aktivnosti su prikazane uTabeli B.

[0507]Određena draga ovde opisana jedinjenja, imala su vrednosti aktivnosti u rasponu od oko 35 pm do oko 362 nM u ovom testu.

Primer3:Ćelijski/funkcionalniCa<2+>testzaaktivnost agonista naS1P3receptoru.

[0508]Za ovde opisano jedinjenje može da se pokaže da nema ili značajno nema aktivnost agonista na S1P3 receptoru korišćenjem u testu ljudske neuroblastoma ćelijske linije koja endogeno eksprimira S1P3 (dominantno), S1P2 i S1P5 receptore, ali ne SIPI ili S1P4 receptore, na osnovu mRNA analize (Villullas et al., J. Neurosci. Res., 73:215-226, 2003). Od toga, S1P3 i S1P2 receptori odgovaraju agonistima, kao što je SIP. sa medućelijskim rastom kalcijuma. Bez ili značajno bez povećanja međućelijskog kakijuma u odgovoru na test jedinjenje je indikativno da test jedinjenje nema ili značajno nema aktivnost agonista na S1P3 receptoru. Takav test može da se obavi komercijalno,npr.sa Caliper LifeSciences (Hopkinton, MA).

[0509] Test: ljudske neuroblastoma ćelije su isprane i resuspenzovane u fiziološkom puferu. Ćelije su zatim napunjene sa bojom koja meri medućelijski kalcijum. SIP je korišćen kao referentni agonist. Nakon dodavanja SIP ili test jedinjenje, fluorescencija je merena na 485 nm uzbuđenosti/525 nm emisija svake 2 sekunde tokom barem 60 sekundi. Kalcijum jonofor A23187 je zatim dodat kao unutrašnja pozitivna kontrola.

Primer4:Efekat jedinjenja utestu snižavanjaperifernih limfocita (PLL).

[0510]Za ovde opisano jedinjenje može da se pokaže da indukuje snižav anje perifernih limfocita (PLL).

A.Mišji PLL test.

[0511] Životinje:muški BALB/c miševi (Charles River Laboratories. Vvilmington, MA) držani su četiri po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (40 do 60%) i kontrolom temperature (68 do 72 °F) pri 12 sati: 12 sati svetio/tama ciklusu (svetio u 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan Teklad, Orange, CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Miševima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja.

[0512] PLL test:miševi je data oralna doza Jedinjenja 5, Jedinjenja 7 ili nosača doze (0,5% metilceluloza) ukupne zapremine 10 mL/kg. Uzorci periferne krvi su prikupljeni na 5 sati posle doze. Miševi su anestezirani sa izofluranom i krv je prikupljenaputemsrčane punkcije. Ukupan broj ćeija (CI3C), uključujući broj limfocita, dobijen je koristeći CEl-diN® 3700 (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL) instrument. Rezultati su predstavljeni na Slikama 1 i 2, gde je broj limfocita periferne krvi (PBL) prikazan za grupu od 5 sad. Redukcija broja PBL test jedinjcnjem u poređenju sa nosačem ukazuje da test jedinjenje pokazuje aktivnost ili indukuje snižavanje perifernih limfocita. Jasno je posmatranjem Slika 1 i 2 da Jedinjenje 5 i Jedinjenje 7 pokazuje aktivnost za indukovanje PBL snižavanja (limfopenija) kod miševa.

[0513J PLL test:miševima je dato 1,00 mg/kg oralne doze drugog enantiomera Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenja12sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) ili nosača doze (0,5% metilceluloza u sterilnoj vodi) ukupne zapremine 10 mL/kg. Uzorci periferne krvi su prikupljeni na 5 sati posle doze. Miševi su anestezirani sa izofluranom i krv je prikupljenaputemsrčane punkcije. Ukupan broj ćeija (CBC), uključujući broj limfocita. dobijen je koristeći CEl-diN" 3700 (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL) instrument. Rezultati su prikazani na Slici 7, gde je broj limfocita periferne krvi (PBL) prikazan za grupu od 5 sati. Redukcija broja PBL test jedinjenjem u poređenju sa nosačem ukazuje da test jedinjenje pokazuje aktivnost ili indukuje snižavanje perifernih limfocita. Jasno je posmatranjem Slike 7 da drugi enantiomer Jedinjenja 12 (izolovano nakon razlaganja Jedinjenja12sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) pokazuje aktivnost za indukovanje PBL snižavanja (limfopenija) kod miševa.

B. Pacovski PLLtest.

[0514] Životinje:muški Sprague-Davvlev pacovi (7 nedelja stari na početku ispitivanja) (Charles River Laboratories) držani su dva po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (40-60%) i kontrolom temperature (68-72 °F) pri 12 sati: 12 sati svetio/tama ciklusu (svetio u 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan Teklad, Orange, CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Pacovima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja.

[0515] PLL test:pacovima su date 1,00 mg/kg oralne doze drugog enantiomera Jedinjenja 12 (izolovano nakon razlaganja jedinjenje12sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) ili nosača doze (0,5% metilceluloza u sterilnoj vodi) ukupne zapremine 1,00 mL/kg. Uzorci periferne krvi su prikupljeni na 5 sati posle doze. Krv je prikupljenaputemkatetera. Ukupan broj ćeija (CBC). uključujući broj limfocita, dobijen je koristeći CEl-diN' 3700 (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL) instrument. Rezultati su prikazani na Slici 8, gde je broj limfocita periferne krvi (PBL) prikazan za grupu od 5 sati. Redukcija broja PBL test jedinjenjem u poređenju sa nosačem ukazuje da test jedinjenje pokazuje aktivnost ili indukuje snižavanje perifernih limfocita. Jasno je posmatranjem Slike 8 da drugi enantiomer ledinjenja 12 (izolovano nakon razlaganja jedinjenje 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) pokazuju aktivnost za indukovanje PBL snižavanja (limfopenija) kod pacova.

Primer 5: Efekat jedinjenja na eksperimentalni autoimuni encefalomielitis (EAE).

[0516] Za ovde opisano jedinjenje može da se pokaže da ima terapijsku deiotvornost kod multiple skleroze pokazivanjem da ima terapijsku deiotvornost kod eksperimentalnog autoimunog encefalomielitisa (EAE). životinjski model za multiple sklerozu. U određenim primemim dobro poznatim modelima, EAE se indukuje kod glodara injekcijom of mijelin oligodendrocit glikoprotein (MOG) peptida, injekcijom mijelin baznog protein (MBP) ili injekcijom of proteolipid protein (PLP) peptida.

A. MOG-indukovan EAE kod miševa.

[0517] Životinje: ženski C57BL/6 miševi (8 do 10 nedelja stari na početku ispitivanja) (Jackson Laboratorv, Bar Harbor, ME) držani su četiri po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (40-60%) i kontrolom temperature (68-72 °F) pri 12 sati: 12 sati svetio/tama ciklusu (svetio u 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan Teklad, Orange, CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Miševima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja.

[0518] Indukcija EAE: miševi su imunizovani potkožno, sa 50 mL po zadnjem boku. ukupno 100 ug \U K ■ . peptidom emulgovanim 1:1 sa kompletnim Freundovim katalizatorom koji sadrži 4 mg/mL toplotom ubijenihMicobacterium tuberculosis.Miševi su takođe primili 200 ng petruzijskog toksina intraperitonealno na dan imunizacije i 48 sati kasnije.

[0519] Kliničko merenje rezultata: ozbiljnost simptoma bolesti je merena kako sledi (sa rastućim poretkom ozbiljnosti): 0 = normalno; 1 = mlitav rep ili slabost stražnjih udova; 2 -- mlitav rep i slabost jednog uda/slabost2ili više udova; 3 = ozbiljna slabost jednog uda ili paraliza jednog uda; 4 = paraliza 2 ili više udova; 5 = smrt.

[0520] Tretman lekom: miševi su dozirani oralno, sa nosačem ili drugim enaniiomerom Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa FIPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29), jednom dnevno od dana 3 do dana 21. Zapremina doza je 5 mL/kg. Drugi enantiomer Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja jedinjenje 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) je doziran na 0,3 mg/kg, 1 mg/kg i 3 mg/kg. Miševima je merena težina svakog dana. Miševi su posmatrani dnevno od dana 7 pa nadalje za simptome bolesti. Nakon poslednje doze na dan 21, napredovanje bolesti je posmatrano dnevno tokom dodatne 2 nedelje. Redukcija ozbiljnosti simptoma bolesti drugim enantiomerom Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa HPLC. sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) u poređenju sa nosačem ukazuje da test jedinjenje pokazuje terapijsku deiotvornost kod EAE. Jasno je posmatranjem Slike 10 da drugi enantiomer Jedinjenja 12 (i/olovan nakon razlaganja jedinjenje 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) pokazuje aktivnost kod EAE testa kod miševa.

B. PLP-indukovan EAE kod miševa.

[0521] Životinje: ženski sL/J miševi (8 do 10 nedelja stari na početku ispitivanja) (Jackson Laboratorv, Bar Harbor, ME) držani su četiri po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (40-60%) i kontrolom temperature (68-72 °F) pri 12 sati: 1.2 sati svetio/tama ciklusu (svetio u 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan-Teklad VVestern Res, Orange, CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Miševima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja.

[0522] Indukcija EAE: miševi su imunizovani potkožno sa 100 mg PLPim-isi peptidom emulgovanim 1:1 sa kompletnim Freundovim katalizatorom koji sadrži 4 mg/mL toplotom ubijenihMicobacterium tuberculosis. Miševitakođe receive 200 ng petruzijskog toksina intravenousli na dan imunizacije.

[0523] Kliničko merenje rezultata: ozbiljnost simptoma bolesti je merena kako sledi (sa rastućim poretkom ozbiljnosti): 0 = normalno; 1 = mlitav rep ili slabost stražnjih udova; 2 mlitav rep i slabost jednog uda/slabost 2 ili više udova; 3 = ozbiljna slabost jednog uda ili paraliza jednog uda; 4 = paraliza 2 ili više udova; 5 = smrt.

[0524] Tretman lekom: miševi su dozirani oralno, sa nosačem ili test jedinjenje, jednom dnevno od dana 3 do dana 21. Zapremina doza je 5 ml/kg. Test jedinjenje je dozirano na,npr..1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg ili 30 mg/kg. Miševima je merena težina svakog dana. Miševi su posmatrani dnevno od dana 7 pa nadalje za simptome bolesti. Nakon poslednje doze na dan 21, napredovanje bolesti je posmatrano dnevno tokom dodatne dve nedelje.

C. MBP-indukovan EAE u pacovi.

[0525] Životinje: muški Levvis pacovi (325-375 g na početku ispitivanja) (Harlan, San Diego, CA) držani su dva po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (30-70%) i kontrolom temperature (20-22 °C) pri 12 sati.T2 sati svetio/tama ciklusu (svetlos na na 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan-Tekiad VVestern Res., Orange, CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Pacovima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja. During studi, pacovima je merena težina svakog dana pre Kliničko merenje rezultata na 11 am.

[0526] IndukcijaEAE: mijelin bazni protein (MBP; zamorče) je rastvoren u sterilnom slanom rastvoru pri koncentraciji od 1 mg/ml, i zatim emulgovan 1:1 sa kompletnim Freundovim katalizatorom (1 mg/ml). 50 mL ove emulzije je dato intraplantarnom (ipl) injekcijom u obe stražnje šape svakog pacova, sa ukupnom injektiranom zapreminom od 100 ml. po pacovu i ukupnoj dozi od 50 mg of MBP po pacovu.

[0527] Kliničko merenje rezultata:ozbiljnost simptoma bolesti je mereno dnevno nakon merenja telesne težine i pre nego što je lek doziran. Ozbiljnost simptoma bolesti je merena kako sledi (sa rastućim poretkom ozbiljnosti): 0 - normalno; 1 = slabost repa ili jednog uda; 2 = slabost repa i jednog uda; 3 = ozbiljna slabost stražnjih udova ili paraliza jednog uda; 4 = gubitak boje repa i paraliza 2 ili više udova; 5 = smrt.[05281 Tretman lekom:pacovi su doziram oralno, sa nosačem ili test jedinjenjem, I sat pre MBP injekcije na dan 0 i dnevno nakon toga, nakon kliničkog merenja rezultata, tokom trajanja ispitivanja. Zapremina doza je 5 mL/kg. Test jedinjenje je dozirano na, npr., 1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg ili 30 mg/kg. Redukcija ozbiljnosti simptoma bolesti test jedinjenjem u poređenju sa nosačem ukazuje da test jedinjenje pokazuje terapijsku deiotvornost kod

EAE.

Primer 6: Efekat jedinjenja na dijabetes tipa I.

[0529]Za ovde opisano jedinjenje može da se pokaže da ima terapijsku deiotvornost kod dijabetesa tipa 1 koristeći životinjski model za dijabetes tipa I, kao što je ciklofosfamidom-indukovan dijabetes tipa I kod miševa.

[0530] Životinje:početna merenja glukoze u krvi su uzeta od 9-10 nedelja starih ženskih KOD/L TJ miševa (Jackson Laboratorv, Bar Harbor, ME) kako bi se osiguralo da su normoglicemični (glukoza u krvi je 80-120 mg/dl.) pre početka eksperimenta. Glukoza u krvi je merena od uzoraka krv i iz repa koristeći OneTouch'B. Ultra «: merač i trake za testiranje (LifeScan, Milpitas, CA).

[0531] Indukcija dijabetes tipa I cikiofosfamidom:na dan 0 i dan 14, normoglicemičnim NOD miševima je intraperitonealno ubrizgano 4 mg ciklofosfamid monohidrata (200 mg kg) rastvorenog u 0,9% slanom rastvoru. Ako miševi su dijabetičari (glukoza u krvi je>250 mg/dL), nije im đata dodatna doza ciklofosfamida na dan 14.

[0532] Tretman lekom:miševi su dozirani oralno, sa nosačem ili test jedinjenjem, jednom dnevno od dana 0 do dana 25. Jedinjenja su suspenzovana u 0,5% metil celuloza nosaču koristeći sonikator kako bi se osigurala uniformna suspenzija. Miševima je merena telesna težina dva puta nodeljno i dozirani su prema težini. Zapremina doza je 5 mL/kg. Test jedinjenje je dozirano na,npr.,1 mg/kg, 3 mg/kg. 10 mg/kg ili 30 mg/kg. Glukoza u krvi je merena dva puta nedeljno. Nakon što je doziranje završeno na dan 25, miševi su i dalje posmatrani i merenja glukoze u krvi su uzeta jednom nedeljno tokom 3 nedelje. Promovisanje normogliecmije test jedinjenjem u poređenju sa nosačem ukazuje da test jedinjenje pokazuje terapijsku deiotvornost koci dijabetesa tipa I.

Primer 7: Preživljavanje alografta.

[0533]Za ovde opisano jedinjenje može da se pokaže da ima terapijsku deiotvornost kod produžavanja preživljavanja alografta pokazivanjem da ima terapijsku deiotvornost kod produžavanja, npr., preživljavanja kožnog alografta u životinjskom modelu.

[0534] Životinje:ženski Balbc/J miševi (6 do 7 nedelja stari na početku ispitivanja) (Jackson Laboratorv', Bar Harbor, ME) držani su četiri po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (40-60%) i kontrolom temperature (68-72 °F) pri 12 sati: 12 sati svetio/tama ciklusu (svetio u 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan Teklad, Orange, CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Ženski C57BL6 miševi (8 do 10 nedelja stari na početku ispitivanja)

(Jackson Laboratorv, Bar Harbor, ME) su slično držani i održavani. Miševima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja.

[0535] Kožni alograft:Balbc/J i C57BL/6 miševi su korisćeni kao donori i primaoci, respektivno, u modelu transplantacije kožnog alografta. Donorski Balbc/J miševi su anestezirani, i predeli abdominalne kože pune gustine prečnika su hirurški uklonjeni. Kožni graftovi prikupljeni od Balbc/J miševa su prišiveni na dorsum anesteziranih C57BL/6 miševa primaoca. Prišiveni alografti su prekrivei sa V'aseline gazom i Bolster zavojem tokom 7 dana. Alograftovani miševi su podeljeni u 8 grupa od po 8 miševa u svakoj.

[0536] Kliničko merenje rezultata:kožni alograftovi su ispitani i digitalne slike su zabeležene dnevno do odbacivanja, koje je definisano kao prvi dan na kom je više od 80% grafta nekrotično. Histološka analiza odbačenog grafta je sprovedena na sekcij ama obeleženim hematoksilinom i eozinom (h&E). U opcionom povezanom istraživanju, na dan 5 nakon transplantacije izolovani su limfocili iz perakoeralnih limfnih čvorova i slezine i prebrojani su i karakterisani za aktivacione markere(npr.,T-ćelijski aktivacioni markeri) sa protočnom citometrijom. Takođe na dan 5, gradovi su uklonjeni od primaoca transplanata, isečeni na male fragmente, razgrađeni sa kolagenazom i sedimentisani preko Ficol-Paque (Farmacia Biotech, Uppsala, Sweden) kako bi se izolovali limfociti koji infiltriraju graft, koji su prebrojani i karakterisani za aktivacione markere( npr.,T-ćelijski aktivacioni markeri) limfocita. Histološke analize grafta na dan 5 mogu da se sprovedu na sekcijama obeleženim hematoksilinom i eozinom (h&E

[0537] Tretman lekom:miševi su dozirani oralno, sa nosačem ili test jedinjenjem, jednom dnevno od dana transplantacije dok kraja ispitivanja,npr.do dana 14, 21 ili 28. Zapremina doza je 5 mL/kg. Test jedinjenje je dozirano na,npr.,1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg ili 30 mg/kg. Odlaganje vremena odbacivanja kožnog alografta test jedinjenjem u poređenju sa nosačem ukazuje da test jedinjenje pokazuje terapijsku deiotvornost kod produžavanja preživljavanja kožnog alografta,

Primer 8: Efekat jedinjenja na kolitis.

[0538]Za ovde opisano jedinjenje može da se pokaže da ima terapijsku deiotvornost kod kolitisa koristeći životinjski model za kolitis. Odgovarajući životinjski modeli su poznati u struci (Boismenu et al.. J. Leukoc. Biol., 67:267-278, 2000). Prvi primerni životinjski mode) za kolitis je trinitrobenzensulfonska kiselinom (TNBS) indukovan kolitis, koji predstavlja kliničke i histopatološke nalaze koji oslikavaju one kod Kronove bolesti (Neurat etak,.). Eksp. Med., 182:1281-1290, 1995; Boismenu et al., J. Leukoc. Biol., 67:267-278, 2000). Drugi primerni životinjski model za kolitis je dekstran sulfat natrijumom (DSS) indukovan kolitis, koji predstavlja kliničke i histopatološke nalaze koji oslikavaju one kod ulcerauvnog kolitisa (Okayasu et al., Gastroenterologv, 98:694-702, 1990; Boismenu et al., J. Leukoc. Biol., 67:267-278, 2000). Jedinjenja mogu komercijalno da se testiraju/.a efikasnost kod barem DSS-indukovanog kolitisa i TNBS-indukovanog kolitisa, npr. sa Jackson Laboratorv (Bar Harbor, ME).

A. Mišji model za kolitis.

[0539] Životinje:muški BALB/c miševi (6 nedelja stari na početku ispitivanja) (Jackson Laboratorv, Bar Harbor, ME) držani su čeđri po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (40-60%) i kontrolom temperature (68-72 °F) pri 12 sati: 12 sati svetio/tama ciklusu (svetio u 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (HarlanTeklad, Orange CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Miševima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja.

[0540] TNBS indukcija kolitisa:miševima je merena telesna težina za početnu težinu i nije im data hrana kasnije tog dana počevši u 18:15 malo pre gašenja svetla (dan 0). Telesna težina je uzeta ponovo naredno jutro (dan 1) u otprilike 7:30. Miševi su anestezirani sa izofluranom pre indukcije kolitisa. Kolitis se indukuje kod miševa intrakolonskom injekcijom od oko 150 mg/kg TNBS u 50% etanol (u zapremini od 150 mL) koristeći intubacionu iglu (22 g, 1,5 in) umetnutu potpunosti u anus sa repom miša u vertikalnom položaju. Miševi su držani vertikalno tokom 30 dodatnih sekundi kako bi se omogućila potpuna apsorpcija i minimizovalo curenje, nakon čega su miševi vraćeni u svoj kavez. Miševi su zatim nahranjeni, nakon prethodnih otprilike 14 sati bez hrane. Svako jutro nakon toga, miševima je merena telesna težina. U kontrolnim eksperimentima, miševi su primili 50% samog etanola koristeći isti protokol.

[0541] Tretman lekom:tretman lekom počinje na dan 2. Miševi su dozirani oralno, sa nosačem ili testiranim jedinjenjem, jednom dnevno od dana 2 do završetka eksperimenta na,npr.,dan 7, 14 ili 21. Zapremina doza je 5 mL/kg. testirano jedinjenje je doziran na,npr.,1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg ili 30 mg/kg.

[0542] Kliničko merenje rezultata:nakon završetka eksperimenta, debela creva su ekstrakovana i merena. Miševi su eutanazirani sa CO:i debelo crevo je uklonjeno od anusa do siepog creva. Isečeno debelo crevo je mereno duž cele dužine, dužina od anusa do kraja upaljenog predela i dužina upaljenog predela. Nakon merenja, debelo crevo je očišćeno od izmeta sa slanim rastvorom i zatim otvoreno da bi se očistilo temeljnije. Debelo crevo je zatim mereno i sačuvano u neutralnom puferisanom formalinu (NBF; 10%, formalin, pH 6,7-7,0). Tki vo debelog creva je stavljeno u parafin i procesuirano za hematoksilinom i eozinom (h & E) obeležene delove. Ozbiljnost simptoma bolesti je merena histološki od obeleženih delova kako sledi: 0~bez dokaza o upali; 1 = nizak nivo infiltracije leukocita gde je infiltracija primećena kod <10% polja visoke snage i bez strukturalnih pramena; 2 = srednja infiltracija leukocita gde je infiltracija primećena kod 10% do 25% polja visoke snage i produženje kripte i debljanje zida creva se ne šire preko sloja sluzokože i bez ulceracija; 3 - visok nivo infiltracije leukocita primećen kod 25% do 50% polja visoke snage i produženje kripte i infiltracija preko sloja sluzokože i debljanje zida creva i površinske ulceracije; 4 = obeležen stepen transmuralnih infilstracija leukocita primećen kod >50% polja visoke snage i produžene i deformisane kripte i debljanje zida creva i velike ulceracije. Redukcija ozbiljnosti simptoma bolesti testiranim jedinjenjem u poređenju sa nosačem ukazuje da testirano jedinjenje pokazuje terapijsku deiotvornost kod kolitisa.

B.Pacovski model za kolitis.

[0543] Životinje: muški Wisiar pacovi (175-200 g na početku ispitivanja) (Charles River Laboratories. VVilmington, MA) držani su dva po kavezu i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (40-60%) i kontrolom temperature (68-72 °F) pri 12 sati: 12 sad svetio/tama ciklusu (svetio u 6:30) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan Teklad, Orange CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Pacovima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja.

[0544] TNBS indukcija kolitisa: Pacovima je merena telesna težina za početnu težinu i nije im data hrana kasnije tog dana počevši u 18:15 malo pre gašenja svetla (dan 0). Telesna težina je uzeta ponovo naredno jutro (dan 1) u otprilike 7:30. Pacovi su anestezirani sa izofluranom pre indukcije kolitisa. Kolitis se indukuje kod pacova intrakolonskom injekcijom od oko 60 mg/kg TNBS u 50% etanol (u zapremini od 500 mL) koristeći proizvedenu intubacionu iglu (7,5 Fr pupčani kateter i 14 g hub) umetnut 8 cm u anus dok se pacov sa repom u vertikalnom položaju. Pacovi su držani vertikalno tokom 30 dodatnih sekundi kako bi se omogućila potpuna apsorpcija i minimizovalo curenje, nakon čega su pacovi vraćeni u svoj kavez. Pacovi su zatim nahranjeni, nakon prethodnih otprilike 14 sati bez hrane. Svako jutro nakon toga, pacovima je merena telesna težina. U kontrolnim eksperimentima, pacovi su primili 50% samog etanola koristeći isti protokol.

[0545] Tretman lekom: Tretman lekom počinje na dan 2. Pacovi su dozirani oralno, sa nosačem ili testirano jedinjenje, jednom dnevno od dana 2 do završetka eksperimenta na,npr.,dan 7, 14 ili 21. Zapremina doza je 5 mL/kg. testirano jedinjenje je dozirano na, npr., 1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg ili 30 mg/kg.

[0546] Kliničko merenje rezultata: nakon završetka eksperimenta, debela creva su ekstrakovana i merena. Pacovi su eutanazirani sa COi i debelo crevo je uklonjeno od anusa do slepog creva. Isečeno debelo crevo je mereno duž cele dužine, dužina od anusa do kraja upaljenog predela i dužina upaljenog predela. Nakon merenja, debelo crevo je očišćeno od izmeta sa slanim rastvorom i zatim otvoreno da bi se očistilo temeljnije. Debelo crevo je zatim mereno i sačuvano u neutralnom puferisanom formalinu (NBF; 10% formalni, pH 6,7-7,0). Tkivo debelog creva je stavljeno u parafin i procesuirano za hematoksilinom i eozinom (h & E) obeležene delove. Ozbiljnost simptoma bolesti je merena histološki od obeleženih delova kako sledi; 0 = bez dokaza o upali; 1 - nizak nivo infiltracije leukocita gde je infiltracija primećena koci <10% polja visoke snage i bez suukturalnih promena; 2 = srednja infiltracija leukocita gde je infiltracija primećena kod 10% do 25% pol ja visoke snage i produženje kripte i debljanje zida creva se ne šire preko sloja sluzokože i bez ulceracija; 3 - visok nivo infiltracije leukocita primećen kod 25%, do 50% polja visoke snage i produženje kripte i infiltracija preko sloja sluzokože i debljanje zida creva i površinske ulceracije; 4 = obeležen stepen transmuralnih infilstracija leukocita primećen kod >50% polja visoke snage i produžene i deformisane kripte i debljanje zida creva i velike ulceracije. Redukcija ozbiljnosti simptoma bolesti testiranim jedinjenjem u poređenju sa nosačem ukazuje da testirano jedin jenje pokazuje terapijsku deiotvornost kod kolitisa.

Primer 9: Ekefti jedinjenja na srčanu telemetriju kod pacova,

[0547] Životinje: muški Sprague-dawlei pacovi (250-300 g u vreme operacije) su implantirani sa Charles River Laboratories (VVilmington, MA) sa uređajima za srčano transmitovanje (Data Sciences FisioTel C50-PXT) u peritonealnom prostoru, sa kateterom osetljivim na pritisak umetnutim u spuštajući) aortu. Pacovima je dopuštena barem jedna nedelja da se oporave. Pacovi držani su u individualnim kavezima i održavani u prostoriji sa kontrolom vlage (30-70%) i kontrolom temperature (20-22 °C) pri 12 sati:12 sati svetio/tama ciklusu (svetio u 7:00) sa slobodnim pristupom hrani (Harlan-Teklad, Orange, CA, Rodent Diet 8604) i vodi. Pacovima je dopuštena jedna nedelja boravka u prostoriji za životinje pre testiranja,

[05481 Merenje of kardiovaskularnih parametara: implantirani uređaj za transmitovanje je transmitovao neprekidna merenja pritisaka u krvi (sistolnog, sijatoinog, srednjeg arterijskog, pulsa), otkucaja srca, telesne temperature, i motornu aktivnost kod svesnih životinja koje se slobodno kreću. Ovi talasi su transmitovaniputemradiofrekvencije komputeru koji je pakovao podatke u jednominutne prošeke koristeći DataSciences A RT softver. Telemetrija snimanja dešavala su se tokom perioda od 21 sata, počevši od podneva, u trajanju do 9:00 narednog dana. Maksimalno osam pacova je testirano u jednom trenutku su tested na time, i istih osam pacova je korišćeno za sve tretman grupe.

[0549] Tretman lekom: pacovima su oralno injektirani nosač (PEG400) i drugi enantiomer Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) u 13:00. Puno ispitivanje (nosač + 3 doze) zahteva četiri odvojene sesije testiranja, koje se dešavaju na ponedeljak-utorak i četvrtak-petak. Tokom svake sesije testiranja, osam pacova je podeljeno u četiri treatmen grupe tako da svaka grupa obuhvata N = 2 za svaku datu sesiju. Pacovi su ponovo testirani u narednim sesijama testiranja promenjenom dizajnu tako da na kraju četiri sesije, sve životinje su primile sve tretmane u pseudo-nasumičnom redu, i svak grupa je obuhvatala N = 8.

[0550]Primerni bradikardija test: izričito je razmatrano da pacovi mogu da se koriste da pokažu da ovde opisano jedinjenje nema ili značajno nema aktivnost za bradikardiju. U svrhe ilustrovanja a ne ograničavnja, pacovima su dati nosač (PEG 400) i drugi enantiomer Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa HPLC", sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) i otkucaji srca su zatim mereni tokom perioda od 120 minuta. Rezultati su prikazani na Slici 11. fasno je posmatranjem Slike 11 da nema ili značajno nema redukcije otkucaja srca primećene u odgovoru na tretman pacova sa drugim enantiomerom Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) u poređenju sa nosačem. To što nema ili značajno nema redukcije otkucaja srca ukazuje da drugi enantiomer Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) ne pokazuje li značajno ne pokazuje aktivnost za bradikardiju.

Primer 10: Efekat jedinjenja na artritis.

[0551] Ženski Lewis pacovi su korišćeni u ovom ispitivanju. Aklimatizovane životinje su anestezirane sa izofluranom i data im je prva injekcijom kolagena (dan 0). Na dan 6. anestezirani su ponovo za drugu injekciju kolagena. Kolagen je pripremljen pravljenjem 4 mg/mL rastvora u 0,01 N sirćetnoj kiselini. Jednake zapremine kolagena i nekompletnog Freundovog katalizatora su emulgovane mešanjem rukom dok zrnca ovog materijalna nisu održale svoj oblik po smeštanju u vodu. Svaka životinja je primila 300 mL smese svaki put, rašireno preko 3 potkožna mesta na leđima.

[0552] Tretman(p.o., q. d.,5 mL/kg zapremina doza) je počeo na dan 0 i nastavljena tokom dana 16 sa nosačem ili jedinjenjem datim na intervalima od 24 sata. Pacovima je merena telesna težina na dane 0, 3, 6 i 9 do 17 i merenja članaka šestarom su uzeta na dane 9 do 17. Drugi enantiomer Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) je doziran na 0,3, 1 i 3 mg/kg. Rezultati su prikazani na Slici 9. Jasno je posmatranjem Slike 9 da drugi enantiomer Jedinjenja 12 (izolovan nakon razlaganja Jedinjenja 12 sa HPLC, sa vremenom zadržavanja od 13,9 minuta po uslovima objavljenim u Primeru 1.29) pokazuju aktivnost za redukovanje srednjeg prećnika članaka kod pacova.

Primer 11: Difrakcija rendgenskih zraka na prašku (PXRD).

[0553] Podaci difrakcije rendgenskih zraka na prašku (PXRD) su prikupljeni na X'Peit PRO MPD dakofrakciometru za prašak (PANalitical, Inc.) sa Cu izvorom podešenim na 45 kV i 40 mA, Ni-fitler za uklanjanje Cu Kj3 radijacije, i X'Celerator Detecor. Instrument je kalibrisan od strane prodavca koristeći silicon prašak standardNIST 4 640c.Za kalibraciju je otkriveno daje ispravnja kada je testirana sa NIST #675 dakofrakcionim standardom niskog ugla. Uzorci su pripremljeni za PXRD skeniranje stavljanjem nekoliko miiigrama jedinjenja pažljivo u držač za uzorak i izravnjavanje što je više moguće pritiskanjem papira na uzorak. Uzorci su analizirani koristeći fazu okretanja uzorka, Skenovi pokrivaju opseg od 5 do 40<=>26. Neprekidni mod skeniranja je korišćen sa korakom veličine 0,0167° 28. Dakofrakctioni podaci su pregledani i analizirani sa X'Pert Data Viewer Softvvare, Version 1.0a i X'Pert HighScore Softvvare, Version 1.0b.

Primer 12: Diferencijalne skenirajuća kalorimetrija (DSC).

[0554) Diferencijalne skenirajuća kalorimetrija (DSC) je obavljena na TA Instruments, Inc. DSC Q2000 na 10 °C/minuta, od -25 do -210 °C. Instrument je kalibrisan na toj stopi skeniranja od strane proizvođača za temperaturu i energiju koristeći standard tačke topljenja i entalpije fuzije indijuma. Uzorci su pripremljeni bušenjem poklopca posude za uzorak sa špenadlom ili drugim oštrim predmetm i merenjem tog poklopca duž dna posude za uzorak na MettlerToldeo Mks5 vagi. Uzorak je smešten u donju deo izbušene posuđe sa uzorkom. Poklopac posude za uzorak udobno staje na dno posude za uzorak. Uzorak i posuda su ponovo mereni da se dobije težina uzorka. Termogramskldogađaji (temperatura, entalpija fuzije, itd.) su izračunati koristeći Universal Analvsis 2000 softver, Version 4.ID, Build 4.1.0.16.

Primer 13: Termogram termogravimetrijske analize (TGA).

[0555] Termogram termogravimetrijske analize (TGA) je obavljen na TA Instruments, Inc. TGA Q500. Instrument je kalibrisan od strane prodavca na 3.0°C/minut za temperatura koristeći kiri tačku feromagnetnog standarda. Balans je kalibrisan sa standardnom težinom. Skeniranje uzoraka je obav ljeno na lO'C/minuta, od -25 do -250 °C. Uzorak je smešten u otvorenu posudu za uzorak, prehodno izmeren na TGA vagi. Termogramski događaji kao što je gubitak težine su izračunati koristeći Universal Analvsis 2000 softver, Version 4. ID, Build 4.1.0.16.

Primer 14: Analize sorpcije vlage.

[0556] Higroskopnost je merena koristeći dinamički analizer sorpcije vlage, VTt Corporation, SGA-100. Uzorak je smešten kakav je dat u izmeren držač za uzorak na VTI vagi. Korak sušenja je obavljen na 40 °C i 1% RH tokom 20 minuta. Izotermski uslovi su 25 °C sa koracima od 20% RH, od 10% RH i do 90% RH ■ nazad do 10% Rh. Težina je proveravana svakih 5 minuta. Uzastopni % promene težine od •■ 0,01% ili 2 sata, šta god se dogodi prvo, su potrebni pre nastavljanja do narednog koraka.

Claims (60)

1.Jedinjenje izabrano od jedinjenja Formule (Ia) i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: gde: m je i; n je 1 ili 2; Y je N ili CR1; Z je N ili CR4; R:ije C3-C7 cikloalkil; i R'. R<3>, i R<4>su svi nezavisno izabrani iz grupe koju čine H, G-G, alkoksi, CrG, alkil, G-C« alkilamino, G-C« alkilsulfonil, G-G; alkiltio, karboksamid, cijano, G-C- cikloalkoksi, C?-C-cikloalkil,G-Ghaloalkoksi, G-Ce haloalkil, halogen, heteroaril, i heterociklil, gde su navedeni G-Cs alkil i G-Cs alkoksi svi opciono supstituisani sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine C3-C7 cikloalkil i halogen.

2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde n je i.

3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, gde Y je CR<!.>

4. Jedinjenje prema patenmom zahtevu 3, gde R<!>je H ili C < : haloalkil.

5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, gde R<!>je H ili trifluorometil.

6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, gde je R-' izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-Cs haloalkoksi, i G-G, haloalkil.

7. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, gde je R- izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil.

8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, gde je R<J>izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, 1 ciklopropil.

9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, gde je R<1>ciklopentil.

10. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, gde Z je CR<J>.

11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 10, gde je R4 izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-C« haloalkoksi, i G-C<g>haloalkil.

12. Jedinjenje prema patenmom zahtevu 10, gde je R"izabran iz grupe koju čine Fl, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil.

13. Jedinjenje prema patentnim zahtevima 1 iii 2, gde su R', R-, i R4 svi nezavisno izabrani iz grupe koju čine H, G-C<g>alkoksi, G-C<g>alkil, G-G> alkilamino, G-G, alkilsulfonil, G-Cs alkiltio, karboksamid, cijano, C3-C7cikloalkoksi, Cj-C- cikloalkil, G-Cs haloalkoksi, G-Cs haloalkil, halogen, heteroaril, i heterociklil, gde su navedeni C,-G3alkil i G-Ce alkoksi svi opciono supstituisani sa jednom C?-G cikloalkil grupom.

14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2, i 13, gde je R<*>izabran iz grupe koju Čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil,1ciklopropil.

15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1, 2, i 13, gde je R<:;>ciklopentil.

16. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2, 13, 14, i 15, gde je R4 izabran iz grupe koju čine H, cijano, i G-Ce haloalkil.

17. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1, 2, 13, 14, i 15, gde je R<4>izabran iz grupe koju čine H, cijano, i trifluorometil.

18. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano od jedinjenja Formule (Ik) i njegove farmaceutski prihvadjive soli, solvati i hidrati: gde: Y je N ili CR1; Z je N ili CR4; R" jeHiliCi-Ce haloalkil;R2je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-G, haloalkoksi, i G-Cs haloalkil; R<J>je C3-C7cikloalkil; i R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano, G-Cg haloalkoksi, i Ci-Cshaloalkil.

19. Jedinjenje prema patentnom zahtevu l, izabrano od jedinjenja Formule (Ik) i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: gde: Yje NiliCR1; Z je N ili CR4; R<1>je H ili trifluorometil;R2 jeizabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi. i trifluorometil; R1 je izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil; i R4 je izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil.

20. Jedinjenje prema patentnom zahtevu l, izabrano od jedinjenja Formule (Ik) i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: gde: Y je NiliCR1; Z je N ili CR4; R1 je H ili trifluorometil; R- izabran iz grupe koju čine H, cijano. trifluorometoksi, i trifluorometil; R<3>je izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil; iR~je izabran iz grupe koju čine H, cijano, i trifluorometil.

21. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano od jedinjenja Formule(Im)i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: gde: R2 je izabran iz gmpe koju čine li, cijano, G-C haloalkoksi, i G-Cb haloalkil; i R-je C3-C7 cikloalkil.

22. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano od jedinjenja Formule(Im)i njegove farmaceutski prihvadjive soli, solvati i hidrati: gde: je R2 izabran iz grupe koju čine H, cijano, trifluorometoksi, i trifluorometil; i je R3 izabran iz grupe koju čine ciklobutil, cikloheksil, ciklopentil, i ciklopropil.

23. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredna jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: 2-(7-(4-cikioheksil-3-(trifliiorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrocik!openta[b|indol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 2); (R)-2-(7-(4-ciklopentil-3-( trifluorometil Jbenziloksi )-l., 2,3,4-tetrahidrociklopenta[b ] indo 1-3-iljsirćetna kiselina (Jedinjenje 3); (S)-2-(7-(4-ciklopenbl-3-(trifluorometiI)benziloksi)-i,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il)sirćetno kiselina (Jedinjenje 9); 2-(7-(4-ciklopentil-3-(uifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tettahidrocikIopenta[b|indol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 12); 2-(7-(3-cijano-4-cikJohek5ilbenziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta('b]indol-3il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 17); 2-(7-((6-cik]opentil-5-(trifluorometil)piridin-3-il)metoksi)- l.,2,3,4-tetrahidrociklopenta[b]indol-3-il) sirćetna kiselina (Jedinjenje 19); 2-(7-(4-ciklobud]-3-(trifluoromeul)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[bJindol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 21); i 2-(7-(4-ciklopropil-3-(trifluorometil)benziloksi)-1.2,3,4-teirahidiociklopenta[bJindol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 22).

24. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1. izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: 2-(7-(4<ikloheksil-3-{tirfluorometil)benziloksi)-1.2,3,4-tetrahidrociklopenta[blinđo[-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 2).

25. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: (R)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluoromeiil)benziloksi)-l,2,3,4-ietrahidrociklopenta|.b]indol-3-iljsirćetna kiselina (Jedinjenje 3).

26. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvau i hidrati: (S)-2-(7-(4<iklopentil-3-(tTifluoro kiselina (Jedinjenje 9).

27. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: 2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[blindol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 12).

28. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: 2-(7-(3<ijano-4-cikloheksilbenziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrocikIopentafb|indol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 17).

29. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: 2-(7-((5-ciklopentil-5-(trifluorometil)piridin-3-il)metoksij-l,2,3,4-tetrahidrociklopentalb|indol-3-iljsirćetna kiselina.

30. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: 2-(7-(4-ciklobudl-3-(trilfuoromed])benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopenta[bjindol-3-il)sirćetna kiselina (Jedinjenje 21).

31. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, izabrano iz grupe koju čine naredno jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati i hidrati: 2-(7-{4-ciklopropil-3-(tirnuorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopentalblindol-3-il)si[ćetna kiselina (Jedinjenje 22).

32. So prema patentnom zahtevu 1, izabrana iz grupe koju čine naredna so i njeni farmaceutski prihvatljivi solvati i hidrati: Kalcijum so (R)-2-(7-(4-cikiopentil-3-(trifltiorometil)benziloksi)-1.2.3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3il)sirćetne kiseline.

33. So prema patentnom zahtevu 1, izabrana iz grupe koju čine naredna so i njeni farmaceutski prihvatljivi solvati i hidrati: L-arginin so (fi;-2-(7-(4-ciklopentil-3-(tirfluorometil)benziloksi)-1,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b]indol-3il)sirćetne kiseline.

34. Hidrat prema patentnom zahtevu 1, koji je: D-Lizin so fS)-2-(7-(4-ciklopentil-3-(trifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklopentalb|indo!-3il)sirćetna kiselina hidrata.

35. Solvat prema patentnom zahtevu 1, koji je: CR)-l-fenetilamin so (S)-2-(7-(4-ciklo<p>entil-3-(tiifluorometil)benziloksi)-l,2,3,4-tetrahidrociklo-penta[b)indol-3-il)sirćetna kiselina acetonitril solvata.

36. Farmaceutski sastav koji obuhvata jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 31, so prema patentnim zahtevima 32 ili 33, hidrat prema patentnom zahtevu 34, ili solvat prema patentnom zahtevu 35 i farmaceutski prihvatljiv nosač.

37. Postupak za pripremu sastava koji obuhvata mešanje jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 31, soli prema patentnom zahtevu 32 ili 33, hidrata prema patentnom zahtevu 34, ili solvata prema patentnom zahtevu 35 i farmaceutski prihvatljiv nosač.

38. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 31, so prema patentnim zahtevima 32 ili 33, hidrat prema patentnom zahtevu 34, solvat prema patentnom zahtevu 35, ili farmaceutski sastav prema patentnom zahtevu 36 za primenu u postupku tretmana ljudskog ili životinjskog tela terapijom.

39. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 38, u postupku tretmana poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

40. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom: bolest ili poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, bilijarna ciroza, kancer, psorijaza, psorijatični artritis, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanata, multiple skleroza, sistemski lupus eritematosus, upalna bolest creva, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I, ili akne.

41. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom bilijarna ciroza.

42. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom psorijaza.

43. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patenmom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom psorijatični artritis.

44. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom reumatoidni artritis.

45. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom Kronova bolest.

46. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom multiple skleroza.

47. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom upalna bolest creva.

48. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom ulcerativni kolitis.

49. Jedinjenje, so, hidrat, solvat, ili sastav za primenu prema patentnom zahtevu 39, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom mikrobska infekcija ili bolest ili virusna infekcija ili bolest.

50. Primena jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva i do 31. soli prema patentnim zahtevima 32 ili 33, hidrata prema patentnom zahtevu 34, solvata prema patentnom zahtevu 35, ili farmaceutskog sastava prema patentnom zahtevu 36 u proizvodnji leka za tretman poremećaja povezanog sa SIPI receptorom.

51. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom: bolest iii poremećaj posredovan limfocitima, autoimuna bolest ili poremećaj, upalna bolest ili poremećaj, bilijarna ciroza, kancer, psorijaza, psorijatični artritis, reumatoidni artritis, Kronova bolest, odbacivanje transplanata, multiple skleroza, sistemski lupus eritematosus, upalna bolest creva, ulcerativni kolitis, dijabetes tipa I, ili akne.

52. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom bilijarne ciroze.

53. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom psorijaze.

54. Primena prema patenmom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom psorijatičnog artritisa.

55. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom reumatoidnog artritisa.

56. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa S1P1 receptorom Kronove bolesti.

57. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom multiple skleroze.

58. Primena prema patenmom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa SIPI receptorom upalne bolesti creva.

59. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa S1P1 receptorom ulcerativnog kolitisa.

60. Primena prema patentnom zahtevu 50, gde je navedeni poremećaj povezan sa S l P1 receptorom mikrobske infekcije ili bolest ili virusne infexcije ili bolesti.