RS55147B1 - Terapeutske upotrebe jedinjenja koja imaju kombinovanu sert, 5-ht3 i 5-ht1a aktivnost - Google Patents

Description

Oblast pronalaska

[0001]Ovaj pronalazak odnosi se na terapeutske upotrebe jedinjenja koja imaju kombinovanu SERT, 5-HT3i 5-HTia aktivnost.

Pozadina pronalaska

[0002]Selektivni inhibitori povraćaja serotonina (SSRI) su godinama bili poželjno sredstvo za lečenje mnogih CNS bolest, kao što je depresija i anksioznost zbog njihove efikasnosti i imaju bezbednosni profil koji je poželjan u poređenju sa prethodnim generacijama CNS lekova, to jest takozvanim triciklicima. Međutim, delovanje SSRI je ipak sprečeno kod značajnog broja nereagujućih pacijenata, to jest pacijenata koji ne reaguju ili ne reaguju u potpunosti na tretman. Štaviše, tipično efekti SSRI-a nastaju tek nekoliko nedelja nakon tretmana. Konačno, iako SSRI tipično izaziva manje sporednih efekata od triciklika, administriranie SSRI-a dovodi do nastajanja različitih efekata, kakvi su sporedni efekti seksualne prirode ili poremećaji spavanja. Mnogim pacijentima je teško da žive sa ovim različitim efektima i oni su razlog prestanka lečenja značajnog broja pacijenata koji primaju SSRI-a.

[0003]Poznato je da kombinacija inhibiranja transportera serotonina (SERT) sa aktivnošću na jednom ili više receptora serotonina može biti korisna. Zabeleženo je i da kombinovanje pindolola, koji je 5-HTia parcijalni agonist, sa inhibitorom povraćaja serotonina dovodi do bržeg nastajanja efekata[ Psych. Res.,125, 81-86, 2004]. To bi moglo da ukaže na brže nastajanje efekata povećanih nivoa serotonina kliničkih i povećanje i osnaživanje terapeutskih efekata inhibitora povraćaja serotonina.

[0004]Bolesti povezane sa CNS, kao što su depresija, anksioznost ili šizofrenija su često komorbidne sa drugim poremećajima ili disfunkcionalnostima kao što su kognitivni deficit ili oštećenje[ ScandJ. Psych.,43, 239-251,2002; Am. J. Psych,158, 1722-1725, 2001].

[0005]Pretpostavka je daje nekoliko neurotransmitera uključeno u neuronske događaje koji regulišu kogniciju. Posebno, holinergijski sistem ima važnu ulogu u kogniciji, te su tako jedinjenja koja utiču na holinergijski sistem potencijalno korisna za tretman kognitivnog oštećenja. Poznato je da jedinjenja sa uticajem na 5-HTia receptor i /ili 5-HT3receptor utiču na holinergijski sistem i da kao takva mogu biti korisna u tretmanu kognitivnog oštećenja.

[0006]Iz toga sledi da bi se moglo očekivati da jedinjenja koja pokazuju aktivnosti 5-HTia i/ili 5-HT3receptora mogu da budu korisna u tretmanu kognitivnog oštećenja. Jedinjenje koje štaviše ispoljava i aktivnost SERT-a bi moglo da bude posebno korisno u tretmanu kognitivnog oštećenja kod pacijenata koji isto tako pate od bolesti na koje može blagotvorno uticati (brže) rast nivoa serotonina.

[0007]Međunarodna prijava objavljena pod brojem WO 03/029232 opisuje nekolicinu jedinjenja koja uključuju l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazin (primer le) koja imaju inhibirajuću aktivnost povraćaja serotonina.

[0008]Međunarodna prijava WO 2007/144005 koja je objavljena nakon prioritetnog datuma ove prijave opisuje daje l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazin isto tako i antagonist 5-HT3i parcijalni agonist 5-HTia.

[0009]Am J Psych, 164, 900-909,2007 opisuje da SNRI duloksetin obezbeđuje prekognitivne efekte kod pacijenata sa depresijom.

[0010]Američka patentna prijava objavljena kao US 2006/019938 opisuje da se SSRI fluoksetin može upotrebiti za tretiranje kognitivnih oštećenja kod pacijenata sa depresijom tipa pseudo demencija.

[0011]Br Med J, 331, 321-327, 2005 opisuje da se donepezil inhibitor acetilholin esteraze široko upotrebljava kao lek protiv demencije.

Kratak opis pronalaska

[0012]Pronalazači su sa iznenađenjem pronašli da l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazin ispoljava kombinaciju inhibicije SERT, 5-HT3antagonizma i 5-HTia agonizma. U skladu sa tim, pronalazak obezbeđuje postupak za tretiranje bolesti, gde postupak obuhvata administrirani e terapeutski efektivne količine l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli pacijentu kome je to potrebno.

[0013]U jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na upotrebu l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji leka za tretman bolesti.

[0014]U jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil) fenil]piperazin ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u tretmanu bolesti.

Slike

[0015]

Fig. 1: XRPD kristalne baze

Fig. 2: XRPD alfa oblika soli bromovodonika

Fig. 3: XRPD beta oblika soli bromovodonika

Fig. 4: XRPD gama oblika soli bromovodonika

Fig. 5: XRPD hemihidrata soli bromovodonika

Fig. 6: Promena u HAM-D ocenjivanju stavka 4 (Insomnija Rana) za placebo, 5mg i lOmg jedinjenja I (so Hbr) preko 6 nedelja. U svakoj grupi je u prošeku bilo 100 pacijenata. Fig. 7: Promena u HAM-D ocenjivanju stavka 5 (Insomnija Srednja) za placebo, 5mg i lOmg jedinjenja I (so Hbr) preko 6 nedelja. U svakoj grupi je u prošeku bilo 100 pacijenata. Fig. 8: Promena u HAM-D ocenjivanju stavka 6 (Insomnija Kasna) za placebo, 5mg i lOmg jedinjenja I (so HBr) preko 6 nedelja. U svakoj grupi je u prošeku bilo 100 pacijenata. Fig. 9: Efekat jedinjenja I u intradermalnom formalinskom testu. X-osa prikazuje količinu datog jedinjenja; Y-osa prikazuje količinu vremena (sec) provedenog u lizanju šape. Fig. 9a: Odgovor u periodu 0-5 minuta; Fig. 9b: Odgovor u periodu 20-30 minuta. Fig. 10a: Međućelijski nivoi acetilholina u predfrontalnom korteksu kod slobodno pokretnih pacova nakon administrirani a HBr soli l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil] piperazina. Fig. 10b: Međućelijski nivoi acetilholina u ventralnom hipokampusu kod slobodno pokretnih pacova nakon administrirani a HBr soli l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil] piperazina. Fig. 11: Efekat HBr soli l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazinanauslovljavanje kontekstualnim strahom kod Sprague-Dawley pacova kada je data 60 minuta pre akvizicije. Ponašanje pri smrzavanju je mereno tokom 58-s perioda navikavanja koji prethodi BS davanju šoka na šapicu (akvizicija pre šoka)( bele rešetke).Ponašanjepri smrzavanju je mereno 24h nakon tretiranja (test retencije)( crne rešetke).Fig. 12: HBr soli l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina nauslovljavanje kondicionalnim strahom kod Sprague-Dawley pacova kada se daje lh pre testa retencije. Ponašanje pri smrzavanju je mereno tokom 58-s, pre BS davanja šoka na šapicu (akvizicija)( bele rešetke).Ponašanje pri smrzavanju je mereno 24h nakon tretiranja (test retencije)( crne rešetke).Fig. 13: Efekat HBr soli l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina nauslovljavanje kontekstualnim strahom kod Sprague-Dawley pacova kada se daje odmah nakon akvizicije. Ponašanje pri smrzavanju je mereno tokom 58-s, pre BS davanja šoka na šapicu (akvizicija pre šoka)( bele rešetke).Ponašanje pri smrzavanju je mereno tokom 24h nakon tretiranja pacova (test retencije)( crne rešetke).

Detaljan opis pronalaska

[0016]Ovaj pronalazak se odnosi na upotrebu jedinjenja I, tj.,

1 -[2-(2,4-dimetilfenil-sulfanil)-fenil]piperazina čija je struktura

i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli.

[0017]U jednom ostvarenju, navedene farmaceutski prihvatljive soli su adicione soli kiselina koje nisu toksične. Navedene soli uključuju soli koje se dobijaju od organskih kiselina, kao što su maleinska, fumarna, benzojeva, askorbinska, ćilibarna, oksalna, bis-metilensalicilna, metan sulfokiselina, etandisulfokiselina, sirćetna, propionska, vinska, salicilna, limunska, glukonska, mlečna, jabučna, bademova, cimetna, citrakonska, asparaginska, stearinska, palmitinska, itakonska, glikolna, p-aminobenzojeva, glutaminska, benzosulfokiselina, teofilinske sirćetne kiseline, kao i 8-haloteofilini, na primer, 8-bromoteofilin. Navedene soli se isto tako mogu dobiti i od neorganskih soli, kao što je hlorovodonična, bromovodonična, sulfurna, sulfaminska, fosforna i azotna kiselina. Posebno se pominju soli koje se dobijaju od metan sulfokiseline, jabučne kiseline, fumarne kiseline, mezovinske kiseline, (+)-vinske kiseline, (-)-vinske kiseline, hlorovodonične kiseline, bromovodonične kiseline, sumporne kiseline, fosforne kiseline i azotne kiseline. Posebno se navodi so bromovodonika.

[0018]U jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na upotrebu jedinjenja I, kako je opisano pod uslovom dapomenuto jedinjenje nije slobodna baza l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil) feniljpiperazina u nekristalnom obliku.

[0019]Oblike oralnih doza, a posebno tableta, obično preferiraju pacijenti i medicinsko osoblje usled lakog administranja i kasnijeg boljeg odgovora. U slučaju tableta poželjnije je da su aktivni sastojci kristalni. Prema jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na upotrebu kristalnih jedinjenja. Kristalinitet jedinjenja korišćenih u ovom pronalasku se dokazuje pomoću XRDP prikazanim na Fig. 1-5. WO 2007/144005 opisuje refleksije XRPD ostalih korišćenih soli u ovom pronalasku. Tabela ispod sumira glavne XRPD refleksije nekih jedinjenja korišćenih u ovom pronalasku.

[0020]U jednom ostvarenju, kristali korišćeni prema ovom pronalasku su solvati, to jest, kristali u kojima solventni molekuli čine deo kristalne strukture. Solvat se može formirati od vode, u kom slučaju se solvati nazivaju hidrati. Alternativno, solvati se mogu formirati od drugih rastvarača, kao što su npr., etanol, aceton ili etil acetat. Tačna količina solvata često zavisi od uslova. Na primer, tipično je da hidrati gube vodu sa porastom temperature i sa opadanjem relativne vlažnosti.

[0021] U jednom ostvarenju, jedinjenja prema ovom pronalasku su nesolvatirani kristali.

[0022] Neka jedinjenja su higroskopsna, tj., apsorbuju vodu kada su izložena vlagi. Higroskopnost se obično smatra neželjenom karakteristikom jedinjenja koja se uzimaju za farmaceutske sastave, posebno suve sastave, kao što su tablete. U jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje kristale sa niskom higroskopnošću. Za oblike oralnih doza u kojima se koriste kristalni aktivni sastojci, korisno je da ti kristali budu tačno definisani. U ovom kontekstu, pojam „tačno definisani" određeno znači daje stehiometrija dobro definisana, tj. da je odnos između jona koji čine so odnos između malih celih brojeva, kao što je 1:1, 1:2, 2:1; 1:1:1, itd. U jednom ostvarenju, jedinjenja prema ovom pronalasku su precizno definisani kristali.

[0023] Kristalna jedinjenja koja se koriste prema ovom pronalasku mogu da postoje u više oblika, tj. mogu da postoje u polimorfnim oblicima. Polimorfni oblici postoje ukoliko jedinjenje može da se kristališe u više oblika. Ovaj pronalazak treba da obuhvati sve takve polimorfne oblike ili kao čista jedinjenja ili kao njihove mešavine.

[0024] U jednom ostvarenju, u ovom pronalasku se koriste jedinjenja u prečišćenom obliku. Termin „prečišćeni oblik" treba da indikuje da jedinjenje u osnovi ne sadrži druga jedinjenja ili druge oblike istog jedinjenja, kakav slučaj može biti.

[0025]Kako je prikazano npr. na Fig. 2-5, jedinjenja koja se koriste prema ovom pronalasku,in časuso bromovodonika, mogu da imaju više oblika, tj. da budu polimorfna. Polimorfni oblici imaju različita svojstva, a kako je prikazano u primeru 2. Beta oblik soli bromovodonika je, kako je pokazano, stabilniji pri višoj DSC tački topljenja i nižoj rastvorljivosti. Štaviše, beta oblik ima atraktivnu kombinaciju niske higroskopnosti i rastvorljivosti, što ovo jedinjenje čini posebno pogodnim za pravljenje tableta. Tako, u jednom ostvarenju, ovaj pronalazak opisuje upotrebu soli bromovodonika l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina sa refleksijama XRDP na približno 6,89, 9,73, 13,78 i 14,62 (°20), a posebno sa XRPD kao što je prikazano na Fig. 3.

[0026]Rastvorljivost aktivnog sastojka je isto tako značajna za izbor oblika doziranja jer to može imati direktnog uticaja na bio-raspoloživost. Kod oralnih oblika doziranja, uopšteno se veruje daje bolja rastvorlj ivost aktivnog sastojka korisna, jer povećava bio-raspoloživost.

[0027]Kako je prikazano u primeru 1 Jedinjenja koja se koriste prema ovom pronalasku su snažni inhibitori humanog transportera serotonina, tj., oni inhibiraju povraćaj serotonina. Pored toga, jedinjenja su snažni antagonisti 5-HT3miševa, pacova, zamoraca i pasa. U slučaju humanog 5-HT3receptora, kloniranog u oocite, jedinjenja su se pokazala kao antagonisti pri niskim koncentracijama (IC50približno 20nM), dok pri višim koncentracijama jedinjenja pokazuju agonistička svojstva (ED5o=2,luM). Dalja primena jedinjenja prema ovom pronalasku pri visokoj koncentraciji nije pokazala nikakav agonistički odgovor, što može biti posledica brze desenitizacije ili direktanin vitroantagonizam. Iz toga sledi da pri niskim koncentracijama jedinjenja prema ovom pronalasku pokazuju izražen antagonizam na humanom 5-HT3receptom kako je zabeleženo na 5-HT3receptom drugih vrsta. Podaci isto tako pokazuju da su jedinjenja koja se koriste u ovom pronalasku agonisti na 5-HTia receptom sa K vrednošću od 15nM i 96% intrinzičke aktivnosti (ili efikasnosti). WO 2007/144005 opisuje unekoliko različite vrednosti. Veruje se, međutim, daje ova razlika pitanje stepena i da ne traži značajnu promenu u percepciji jedinjenja.

[0028]Kako je ranije napomenuto, postoje teoretski razlozi zašto se očekuje da će jedinjenja koja su 5-HTia agonisti i/ili 5-HT3antagonisti biti korisna u tretmanu kognitivnih deficita, a to je podržano i kliničkim dokazima. T. Sumivoshiu Am. J. Psyck,158, 1722-1725, 2001, navodi studiju u kojoj su pacijenti primili tipične antipsihotike, kao što je haloperidol, sulprid i pimozid, koji nemaju 5-HTia aktivnost u kombinaciji sa placebom ili tandospironom, koji je 5-HTia agonist. Pacijenti koji primaju tandospiron pored antipsihotika su pokazali poboljšanje u kognitivnim performansama, dok kod pacijenata koji primaju placebo nije došlo do poboljšanja. Slično tome, atipični antipsihotici, kao što je klozapin, koji su isto tako 5-HTia agonisti, poboljšavaju kogniciju kod šizofenih pacijenata, dok je tipični antipsihotici, kao što je haloperidol, koji nemaju 5-HTia aktivnost, ne poboljšavaju [Y. Chung,Brain Res.,1023-54-63, 2004]. U randomiziranoj, unakrsnoj dvostruko slepoj studiji zdravih muških subjekata, ocenjivanja verbalne i spacijalne memorije i zadržavanja pažnje su pokazala da 5-HT3antagonist, skopolamin atenuiran alosetronom je izazvao deficite u verbalnoj i spacijalnoj memoriji [Preston,Recent Advances in the treatment of Neurodegenerative disorders and cognitive function,1994, (eds.) Racagni and Langer, Basel Karger, str. 89-93].

[0029]Kako je pokazano u primeru 5, jedinjenja ovog pronalaska dovode do povećanja međućelijskog nivoa acetilholina u predfrontalnom korteksu i ventralnom hipokampusu kod pacova. Očekuje se da se ovi predklinički nalazi prevedu u klinički efekat u tretmanu kognitivnih oštećenja, upotrebu inhibitora acetilholin esteraze u tretmanu kognitivnih oštećenja, npr., Alchajmerove bolesti. Dalja podrška ovoj poziciji se može pronaći u primeru 6, u kome podaci pokazuju da jedinjenja prema ovom pronalasku poboljšavaju kontekstualnu memoriju kod pacova. Konačno, farmakološki profil jedinjenja prema ovom pronalasku u kombinaciji sa efektima na nivoe acetilholina i memoriju kod pacova snažno ukazuje da su jedinjenja koja se koriste u ovom pronalasku korisna u tretmanu kognitivnog oštećenja ili tretmanu bolesti kod kojih pacijent pati i od kognitivnog oštećenja.

[0030]Kognitivno oštećenje je jedno od uobičajenih karakteristika depresije, kao što je npr., glavni depresivni poremećaj. Kognitivni poremećaji mogu do određenog stepena biti sekundarni depresiji, u smislu da će poboljšanje depresivnog stanja dovesti i do poboljšanja kognitivnog oštećenja. Međutim, postoje i jasni dokazi da su kognitivni poremećaji zapravo nezavisni od depresije. Na primer, studije su pokazale istrajno kognitivno oštećenje nakon izlečenja od depresije[ J. Nervom Mental Disease, 185,748-754, 1997]. Pored toga, diferencijalni efekat antidepresiva na depresiju i kognitivna oštećenja pruža dalju podršku stanovištu da su depresija i kognitivno oštećenje nezavisna, iako često komorbidna stanja. Dok serotonin i noradrenalin lekovi dovode do uporedivih poboljšanja kod depresivnih simptoma, nekoliko studija je pokazalo da modulacija noradrenergičkog sistema ne poboljšava kognitivne funkcije, koliko to čini modulacija serotonina[ Brain Res. Buli,58, 345-350, 2002;Hum Psychpharmacol,8, 41-47, 1993].

[0031]Kognitivne funkcije su često oštećene kod šizofrenih pacijenata i mogu da čine deo takozvanih negativnih simptoma šizofrenije. Kognitivne funkcije su oštećene i kod ADHD pacijenata.

[0032]Kognitivni deficiti ili kognitivno oštećenje uključuju opadanje kognitivinih funkcija ili kognitivnih domena, npr., radne memorije, pažnje i budnosti, verbalnog učenja i memorije, vizuelnog učenja i memorije, rezonovanja i rešavanja problema, npr., izvršna funkcija, brzina obrade i/ili socijalne kognicije. Posebno, kognitivni deficiti ili kognitivno oštećenje mogu da ukazu na deficit pažnje, dezorganizovano razmišljanje, sporo razmišljanje, teškoće u razumevanju, lošu koncentraciju, teškoće u rešavanju problema, lošu memoriju, teškoće u izražavanju misli i/ili teškoće u integrisanju misli, osećanja i ponašanja, ili teškoće u eliminaciji nevažnih misli. Termini „kognitivni deficiti" i „kognitivno oštećenje" imaju isto značenje i koriste se naizmenično.

[0033] Podaci opisani u primeru 4 pokazuju da je jedinjenje I korisno u tretmanu bola i da može da ima i analgetički efekat; dodatne studije na životinjskom modelu neuropatskog bola potvrđuju ovo zapažanje. Odatle sledi da jedinjenje I može biti korisno u tretmanu bola i afektivnih poremećaja, kao i poremećaja raspoloženja, kao što su depresija i anksioznost povezani sa bolom, a posebno hroničnim bolom. Hronična bol uključuje indikacije kao što su fantomska bol u ekstremitetima, neuropatska bol, dijabetska neuropatija, post-herpesna neuralgija (PHN), sindrom karpalnog tunela (CTS), tasos tunel sindrom, uklještenje ulnarnog nerva, spinalna kompresija, HIV neuropatija, sindrom kompleksne regionalne boli (CPRS), trigeminalna neuralgija/trigeminus neuralgia/tic douloureux, hirurška intervencija (npr., post-operativna analgetika), dijabetska vaskulopatija, kapilarna rezistentnost ili dijabetski simptomi povezani sa insulitisom, bol povezana sa anginom, bol povezana sa menstruacijom, bol povezana sa kancerom, zubobolja, glavobolja, migrena, glavobolja tenzionog tipa, trigeminalna neuralgija, sindrom temporomandibularnog zgloba, miofacijalna bol mišićne povrede, sindrom fibromijalgije, bol u kostima i zglobovima (osteoartritis), reumatoidni artritis, reumatoidni artritis i edem koji su posledice traume povezane sa opekotinama, uganućima ili prelomom kostiju, bol usled osteoartritisa, osteoporoze, metastaze kostiju ili iz nepoznatih razloga, gihta, fibrozitisa, miofacijalnog bola, sindromi gornjeg torakalnog otvora, bol u gornjem delu leđa, bol u donjem delu leđa (pri čemu ova bol nastaje kao posledica sistematskog, regionalnog, ili primarnog oboljenja kičme (radikulopatija), bolovi karlice, kardijalna bol u grudima, nekardijalna bol u grudima, bol povezana sa povredama kičmene moždine (SCI), centralna bol koja prati moždani udar, neuropatija kancera, bolovi kod AIDS-a, bol kod srpaste anemije, bol izazvana istezanjem mekog tkiva vrata i gerijatrijska bol.

[0034] Jedinjenje I je testirano u kliničkim ispitivanjima pomoću HAM-D (Hamilton Rating Scale for Depression) kao kliničkog cilja. HAM-D skala se može koristiti pri proceni stepena depresije kod pacijenata pomoću upitnika koji sadrži 24 stavke. Stavke 4, 5 i 6 ove skale se odnose na spavanje pacijenata, tj., da li lako zaspe (insomnija rana), da li se pacijent budi tokom noći (insomnija srednja), i da li se pacijent budi rano ujutru (insomnija kasna). Jedinjenje je testirano sa 5 i 10 mg dnevno na placebo sa približno 100 pacijenata po ruci. Podaci na Fig. 6-8 jasno pokazuju da jedinjenje T dovodi do velikog i poboljšanja u zavisnosti od doze obrasca u spavanju koji je superioran u odnosu na onaj koji daje placebo. Dobro je poznato da su smetnje u spavanju obično sporedan efekat većine antidepresiva. Posebno je zabeleženo da SSRI i jedinjenja koja inhibiraju transportere noradrenalina dovode do problema sa padanjem u san, a zabeleženi su i problemi sa održavanjem sna i problemi sa nesanicom[ Int. Clin. Psychpharm.,21 (supl. 1), S25-S29, 2006]. Drugi beleže da takva jedinjenja dovode do potisnutog REM sna, povećane latentnosti sna, manje efikasnog sna, porast noćnih buđenja i fragmentacije sna[ Hum. Psychopharm. Clin. Exp.,20, 533-559, 2005]. Tako je iznenađujući rezultat da administracija jedinjenja I nije povezana sa sporednim efektima na spavanje, već da pruža poboljšanje obrasca spavanja. Odatle sledi da jedinjenje koje se koristi u ovom pronalasku može biti korisno u tretmanu poremećaja spavanja, kao što su teškoće pri padanju u san, česta noćna buđenja i rana jutarnja buđenja.

[0035]Gore navedena klinička ispitivanja isto tako beleže i sporedne efekte seksualne prirode. Donja tabela pokazuje broj pacijenata koji su prijavili određene tipove sporednih efekata seksualne prirode.

[0036]Dobro je poznata činjenica da tretman antidepresivima generalno, a SSRI-ma posebno, može biti povezan sa seksualnom disfunkcijom što često dovodi do prekida tretmana. Već 30-70% pacijenta na SSRI-ma prijavljuju deficite u seksualnim funkcijama[ J. Clin. Psych., 66,844-848,2005], koji deficiti uključuju smanjeni libido, odložene, umanjene ili nedostatak orgazama, smanjeno uzbuđenje, i erektilne disfunkcije. Gornji rezultati koji pokazuju daje sporedni efekat seksualne prirode jedinjenja I sličan placebu, je otuda mnogo bolji od onoga koji se obično može očekivati od antidepresiva, a posebno od SSRI-ja. Jedinjenja koja se koriste u ovom pronalasku mogu biti korisna u tretmanu seksualnih disfunkcija, kao što je anorgazmija, odložena ejakulacija, erektilna disfunkcija, smanjeni libido, abnormalni orgazam, gubitak libida ili smanjena orgazmička senzacija.

[0037]Sporedni efekti koji remete san i seksualne aktivnosti mogu biti vrlo teški za prihvatanje pacijentima, a posebno pacijentima na dugoročnom, a posebno hroničnom tretmanu, i mogu da dovedu do odustajanja od tretmana. Odsustvo ovih sporednih efekata u tretmanima koji obuhvataju administraciju jedinjenja I čini jedinjenje I posebno korisnim u terapeutskim intervencijama tokom produženog vremenskog perioda, kao stoje npr., prevencija povraćaja depresije.

[0038] Korisni efekti za obrazac spavanja do kojih dovodi jedinjenje I, čine korišćenje jedinjenja I na ovde opisan način posebno atraktivnim u tretmanu pacijenata koji već imaju probleme sa spavanjem ili pate od poremećaja sna ili kod pacijenata sa poremećajima seksualne prirode.

[0039] Jedinjenja koja se koriste u ovom pronalasku isto tako mogu biti korisna kao druga linija tretmana za pacijente koji ne mogu da koriste druge lekove, kao što su anti-depresivi, kao što su selektivni inhibitori povraćaja serotonina (SSRI), selektivni inhibitori povraćaja noradrenalina

(NRI), inhibitori povraćaja noradrenalina/serotonina (SNRI) ili triciklici (TCA) usled sporednih događaja seksualne prirode ili povezanih sa spavanjem. U ovom ostvarenju, pacijent koga treba tretirati je primio drugi lek (ili ga još uvek prima), čije davanje je prekinuto ili smanjeno (ili treba da bude prekinuto ili smanjeno) usled sporednih događaja seksualne prirode ili povezanih sa snom. Tipično, pacijent koji pati od poremećaja raspoloženja, kao što je depresija ili anksioznost, zloupotreba (alkohol, narkotici, itd.) ili poremećaji hronične boli.

[0040] Jedinstven farmakološki profil jedinjenja I kombinovan sa neočekivano pogodnim sigurnosnim profilom čini jedinjenje I korisno u tretiranju npr. poremećaja cirkadijalnog ritma, poremećaja spavanja, poremećaja disanja tokom spavanja; sindroma hipopneje; bola u stomaku; depresije, naročito teške depresije; distimičnog poremećaja; ciklotimije; iscrpne depresije; atipične depresije; poremećaja raspoloženja povezanog sa uopštenim zdravstvenim poremećajem; poremećaja raspoloženja izazvanog nekom supstancom; ponavljajuće depresije, depresije jedne epizode; pedijatrijske depresije; depresije posle moždanog udara; peri-, pre- ili post-menopauzalnog disforičnog poremećaja; epizodnog afektivnog poremećaja (SAD); agresivnosti i uznemirenosti kod demencije, kao što je Alchajmerova bolest; kompulzivnih i poremećaj spektra pažnje kod ADHD, autizma i Aspergerovog sindroma; leukarioze, bolesti malih krvnih sudova, depresije povezane sa zlostavljanjem, razdražljivosti, neprijateljstva, poremećaja spavanja, umora, Hantingtonove bolesti, multipla skleroze, anksioznosti (anksiozne depresije) i bola, posebno bola u gastrointestinalnom traktu, kao što je npr. sindrom nadraženog creva (TBS); opšteg anksioznog poremećaja povezanog sa bolom; bolesti kontrole impulsa; eksplozivnog poremećaja sa prekidima; kleptomanije; piromanije; patološkog kockanja; trihotilomanije; šizofrenije negativnih simptoma; blagog kognitivnog oštećenja; vaskularne demencije; kognitivnog oštećenja povezanog sa Daunovim sindromom, tph genske mutacije, ADHD, epilepsije, traumatske povrede mozga ili Aspergerovog sindroma; kompulsivnog poremećaja i poremećaja spektra pažnje kod ADHD, Aspergerovog sindroma i autizma; agresivnosti i uznemirenosti kod demencije i Alchajmerove bolesti; sindroma hroničnog umora; poremećaja stresa, akutnog stresa; stresa; iznemoglosti; otpornosti na insulin povezane sa HPA-aksis hiperaktivnosti; poremećaja ishrane, kao što je gojaznost, opsesivno prejedanje, anoreksija i bulimija nervoza; poremećaja vladanja; poremećaja ponašanja; poremećaja ponašanja povezanih sa demencijom; straha od letenja; straha od liftova; straha od malih prostorija; i ambliopije. Treiranje ovih bolesti davanjem jedinjenja I posebno je korisno i delotvorno jer se očekuje da nema negativnih efekata u vezi sa spavanjem i seksualnom aktivnošću, a zbog efekta na kognitivna oštećenja, koja su povezana sa mnogim od gore pomenutih oboljenja, takođe se očekuje.

[0041]U ovom kontekstu "teška depresija" je depresija u kojoj je pacijent ocenjen sa iznad 30, kao što je iznad 32 ili iznad 35 na MADRS skali.

[0042]"Terapeutski efektivna količina" jedinjenja kako se ovde koristi označava količinu dovoljnu da izleči, ublaži ili delimično zaustavi kliničke manifestacije date bolesti i njihovih komplikacija u terapeutskoj intervenciji koja obuhvata davanje pomenutog jedinjenja. Količina adekvatna da to postigne definisana je kao " terapeutski efektivna količina". Efektivne količine za svaku svrhu zavisiće od ozbiljnosti bolesti ili povrede kao i težine i opšteg stanja subjekta. Podrazumeva se da se određivanje odgovarajuće doze može postići primenom rutinskog ispitivanja, konstruisanjem matrice vrednosti i testiranjem različitih tačaka u matrici, što je u okviru uobičajenih veština obučenog lekara.

[0043]Termini „tretman" i „tretiranje" kako se ovde koriste znače upravljanje i brigu o pacijentu u cilju suzbijanja stanja, kao što je bolest ili poremećaj. Termin treba da obuhvati veliki raspon tretmana za određeno stanje od koga pacijent pati, kao što je administracija aktivnog jedinjenja radi ublažavanja simptoma ili komplikacija, odlaganja napredovanja bolesti, poremećaja ili stanja, za ublažavanje i oslobađanje simptoma ili komplikacija, i/ili za lečenje ili eliminsanje bolesti, poremećaja ili stanja, kao i za prevenciju stanja gde prevenciju treba razumeti kao upravljanje i brigu za pacijenta u cilju suzbijanja bolesti, stanja ili poremećaja i uključuje administraciju aktivnih jedinjenja u cilju prevencije izbijanja simptoma ili komplikacija. Ipak su profilaktički (preventivni) i terapeutski (kurativni) tretmani dva zasebna aspekta ovog pronalaska. Pacijent koga treba tretirati je poželjno sisar, a posebno čovek.

[0044]Tipično, tretman kakav je ovde opisan obuhvata dnevnu administraciju jedinjenja prema ovom pronalasku. To može da znači administraciju jednom dnevno, ili administraciju dva puta dnevno ili češće.

[0045]U jednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenje I za upotrebu u tretiranju bolesti odabrane između blagog kognitivnog oštećenja; vaskularne demencije; ili kognitivnog oštećenja povezanog sa Daunovim sindromom, tph genskim mutacijama, epilepsijom, traumatskom povredom mozga ili Aspergerovim sindromom. U jednom ostvarenju, jedinjenje I je za upotrebu kod pacijenta koji je prethodno primio (ili još uvek prima) neku drugu terapiju, kao što je neki drugi anti-depresiv, kao što je npr. selektivni inhibitori povraćaja serotonina (SSRI), selektivni inhibitori povraćaja noradrenalina (NRI), inhibitori povraćaja noradrenalina/serotonina (SNRI) ili triciklici (TCA) za tretman navedene bolesti, koje davanje leka je prekinuto ili smanjeno (ili treba da bude prekinuto ili smanjeno) usled sporednih događaja seksualne prirode ili povezanih sa snom.

[0046]Jedinjenje I je prigodno predstavljeno u farmaceutskom sastavu koji može biti pripremljen konvencionalnim postupkom u struci. Posebno se pominju tablete, koje se mogu pripremiti mešanjem aktivnog sastojka sa jednostavnim adjuvansima i/ili rastvaračima, a nakon toga kompresujući smešu u konvencionalnoj mašini za tabletiranje. Primeri adjuvanasa ili rastvarača obuhvataju: anhidrovani kalcijum-hidrogenfosfat, PVP, PVP-VA kopolimeri, mikrokristalna celuloza, natrijum-skrob glikolat, kukuruzni škrob, manitol, krompirov škrob, talk, magnezijum stearat, želatin, laktoza, smola i slično. Mogu se koristiti i svi ostali adjuvansi ili aditivi koji se obično koriste u svrhe kao što je bojenje, aromatizovanje, konzerviranje, itd, pod uslovom da su kompatibilni sa aktivnim sastojcima.

[0047]Rastvori za injekcije se mogu pripremiti rastvaranjem aktivnog sastojka i mogućih aditiva u delu rastvora za injekciju, poželjno sterilnoj vodi, prilagođavanjem rastvora željenoj zapremini, sterilisanjem rastvora i punjenjem rastvora u odgovarajuće ampule i bočice. Mogu se dodati bilo koji aditivi koji se inače konvencionalno koriste, kao što su agensi toniciteta, zaštitna sredstva, antioksidansi, itd.

[0048]Farmaceutski sastavi proizvedeni za upotrebu prema ovom pronalasku se mogu administrirati na bilo koji odgovarajući način, na primer oralno u formi tableta, kapsula, praška, sirupa, itd., ili parenteralno u formi rastvora za injekcije. Za pripremu takvih sastava, mogu se koristiti postupci poznati u struci i bilo koji farmaceutski prihvatljivi nosači, rastvarači, ekscipijenti ili drugi aditivi koji se inače koriste u struci.

[0049]Prigodno se jedinjenje I administrira u jediničnoj formi doze koja sadrži navedeno jedinjenje u količini između 1 do 50mg. Veruje se da se gornja granica postavlja zavisnošću koncentracije od aktivnosti 5-HT3. Ukupna dnevna doza je obično u rasponu od l-20mg, kao što je npr., 1 do 10 mg, oko 5-1 Omg, oko 10-20 mg, ili oko 10-15mg jedinjenja prema ovom pronalasku. Posebno se navode dnevne doze od 2,5, 5, 10, 15 ili 20mg.

[0050]Tablete koje obuhvataju jedinjenje I se mogu prigodno pripremati vlažnom granulacijom. Korišćenjem ovog postupka, suve čvrste čestice (aktivni sastojci, fileri, veziva, itd.), se mešaju i vlaže vodom ili nekim drugim agensom vlaženja (npr. neki alkohol) i aglomerati ili granule se grade od ovlaženih čvrstih čestica. Vlažno umešavanje se nastavlja dok se ne postigne željena veličina homogene čestice, nakon čega se granulisani proizvod suši. Jedinjenje I se tipično meša u mikseru sa velikim smicanjem sa laktoza monohidratom, kukuruznim škrobom i kopovidonom i sa vodom. Nakon formiranja granulata, ovi granulati se mogu prosejati sitom odgovarajuće veličine otvora i sušiti. Rezultujući suvi granulati se zatim mešaju sa mikrokristalnom celulozom, kroskarmeloza natrijumom i magnezijum stearatom, nakon čega se tablete presuju. Alternativno, vlažna granulacija jedinjenja prema ovom pronalasku se može postići pomoću manitola, kukuruznog škroba i kopovidona, koji granulati se zatim mešaju sa mikrokristalnom celulozom, natrijum-skrob glikolatom i magnezijum stearatom pre presovanja tableta. Alternativno, vlažna granulacija jedinjenja I se može postići korišćenjem anhidrovanog kalcijum-hidrogenfosfata, kukuruznog škroba i kopovidona, koji se granulati zatim mešaju sa mikrokristalnom celulozom, natrijum-skrob glikolatom (tip A), talkom i magnezijum stearatom pre presovanja tableta. Kopovidon je PVP-VA kopolimer.

[0051] U jednom ostvarenju, jedinjenje I je so bromovodonične kiseline, npr., u beta obliku i odgovarajuće tablete mogu biti sastavljene od sledećeg - naznačeni procenti su w/w%

[0052]Posebno tablete mogu da se sastoje od sledećeg

Tablete sa različitim količinama aktivnog jedinjenja, kao što je odgovarajućih, npr., 2,5, 5, 10, 20, 25, 30, 40, 50, 60 ili 80mg slobodne baze se mogu dobiti odabirom tačne količine jedinjenja I u kombinaciji sa tabletom odgovarajuće veličine.

[0053]Jedinjenje I se može administrirati nezavisno ili u kombinaciji sa drugim terapeutski aktivnim jedinjenjem, pri čemu dva jedinjenja mogu biti administrirana simultano ili odvojeno. Primeri terapeutski aktivnih jedinjenja koja se mogu pogodno kombinovati sa jedinjenj em I uključuju sedative ili hipnotike, kao što su benzodiazepini; antikonvulzanti, kao što je lamotrigin, valproinska kiselina, topiramat, gabapentin, karbamazepin; stabilizatori raspoloženja kao što je litijum; dopaminergijski lekovi, kao što su dopamin agonisti i L-Dopa; lekovi za tretiranje ADHD, kao što je atomoksetin; psihostimulanti, kao što je modafinil, ketamin, metilfenidat i amfetamin; ostali antidepresivi, kao što je mirtazapin, mianserin i burpropion; hormoni, kao što je T3, estrogen, DHEA i testosteron; atipični antipsihotici, kao što je olanzapin i aripiprazol; tipični antipsihotici, kao što je haloperidol; lekovi za tretiranje Alchajmerove bolesti, kao što su inhibitori holinesteraze i memantin, folat; S-adenozil-metionin; imunomodulatori, kao što su interferoni; opijati, kao što su burprenorfini; antagonisti angiotenzin II receptora I (ATI antagonisti); inhibitori ACE; statini; i alfa 1 adrenergički antagonist, kao stoje prazosin.

[0054]Slobodna baza jedinjenja I se može pripremiti na način opisan u WO 2003/029232 ili WO 2007/144005. Soli koje se koriste u ovom pronalasku se mogu pripremiti rastvaranjem slobodne baze u odgovarajućem rastvaraču, dodavanjem relevantne kiseline, čemu zatim sledi taloženje. Taloženje se može postići ili dodavanjem drugog rastvarača, i/ili isparavanjem, i/ili hlađenjem. Alternativno, slobodna baza koja se koristi u ovom pronalasku može biti sintetisana u reakciji katalizovanoj paladijumom, na način opisan u primerima.

[0055]Upotreba termina „jedan" i „neki" i „taj" i sličnih referenci u kontekstu opisivanja pronalaska treba razumeti tako da se odnose i na jedninu i na množinu, ukoliko nije drugačije naznačeno ili jasno kontradiktorno kontekstu. Na primer, termin „jedinjenje" treba razumeti kao da se odnosi na različita jedinjenja pronalaska ili određeni opisani aspekt, ukoliko nije drugačije naznačeno.

[0056]Ukoliko nije drugačije naznačeno, sve tačne vrednosti ovde navedene su kao reprezentativne za odgovarajuće približne vrednosti (npr.,sve tačne vrednosti primera date u vezi sa određenim faktorom ili merenjem se mogu smatrati da daju i odgovarajuće približno merenje, modifikovano terminom „oko" gde je to odgovarajuće).

[0057]Opis bilo kog aspekta ili aspekta pronalaska pomoću termina kao što su „obuhvata", „ima", „uključuje" ili „sadrži" sa referencom element ili elemente treba da pruži podršku sličnom aspektu ili aspektu pronalaska koji se „sastoji od", ,,u osnovi se sastoji od", ili „sadržajno obuhvata" taj određeni element ili elemente, ukoliko nije drugačije naznačeno ili jasno kontradiktorno kontekstu (npr., sastav ovde opisan da obuhvata određeni element treba shvatiti kako opisuje i sastav koji se sastoji od tog elementa, ukoliko nije drugačije naznačeno ili jasno kontradiktorno kontekstu).

Primeri

Analitički postupci

[0058]Spektar 1 H NMR se beleži na 500,13 MHz na instrumentu Bruker Avance DRX500. Dimetil sulfoksid (99,8%D) se koristi kao rastvarač, a tetrametilsilan (TMS) se koristi kao standard interne reference.

[0059]Tačke topljenja se mere pomoću diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (DSC). Opremu čine TA instrumenti DSC-Q1000 kalibrisani na 57min. kako bi tački topljenja dali početnu vrednost. Oko 2mg uzorka se zagreva na 57min u slobodno pokrivenoj posudi pod protokom azota.

[0060]Termogravimetrijska analiza ( TGA) se koristi za procenu sadržaja rastvarača/vode u suvom materijalu, a obavlja se pomoću TA instrumenata TGA-Q500. l-10mg uzorka se zagreva na lOVmin u otvorenoj posudi pod protokom azota.

[0061]Difraktogrami praha X- zraka su mereni na PANalvtical X'pert PRO X-Ray difraktometru pomoću CuKai zračenja. Uzorci su mereni u reflektivnom modu u 20 rasponu 5-40° pomoću X'celerator detektora. Date vrednosti refleksije su ± 0,1 (°20).

Primer 1 In vitro farmakologija receptora

[0062]_Transporter serotonina pacova: IC505,3nM (blokada povraćaja 5-HT)

Humani transporter serotonina: IC505,4nM (blokada povraćaja 5-HT)

Humani 5-HTia receptor: K; 15nM sa agonizmom (efikasnost ili intrinzička aktivnost 96%) 5-HT3receptor pacova: IC500,2nM (antagonizam u funkcionalnom ogledu)

Humani 5-HT3Areceptor: IC50oko 20nM (antagonizam u funkcionalnom ogled). Pri višoj koncentraciji, jedinjenje ispoljava agonističku aktivnost sa ED50od 2,luM. Jedinjenje prema ovom pronalasku isto tako pokazuje visok afinitet za humani 5-HT3receptor u in vitro ogledu vezivanja (K; 4,5nM).

Primer 2 a Priprema slobodne baze i edinj enj a I

[0063]10 grama bromovodonika l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina je tretirano promešanom mešavinom lOOml 3M NaOH i lOOml etil acetata tokom 10 minuta. Organska faza je razdvojena, isprana sa lOOml 15mas.% NaCl (aq), osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrisana u vakuumu dajući 7,7 grama (98%) baze jedinjenja I u obliku prozirnog bezbojnog ulja.

NMR odgovara strukturi.

Primer 2b Priprema kristalne baze jedinjenja I

[0064]_3,0 grama bezbojnog ulja l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina je tretirano sa 70ml acetonitrila i zagrevano do refluksa. Skoro prozirni rastvor je filtriran i prozirni filtrat je spontano ohlađen nakon čega je taloženje počelo ubrzo nakon filtriranja. Mešavina je mešana na sobnoj temperaturi (22°C) tokom 2 sata, a proizvod je izolovan filtracijom i osušen u vakuumu (40°C) preko noći. Kristalna baza je izolovana kao bela čvsta čestica u 2,7 grama (90%). NMR odgovara strukturi. Elementarna analiza: 72,40%C, 9,28%N, 7,58%H (teorija: 72,26%C, 9,36%N, 7,42%H).

Primer 2c Karakterizacija kristalne baze jedinjenja I

[0065]_Baza, kako je pripremljena u primeru 2b, je kristalna (XRPD) - videti Fig. 1. Baza ima tačku topljenja od~117°C. Ona nije higroskopna i ima rastvorlj ivost od 0,lmg/ml u vodi.

Primer 2d Priprema alfa oblika soli bromovodonika jedinjenja I

[0066]_2,0 grama l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina je rastvoreno u vrelih 30ml etil acetata i dodato im je 0,73ml 48mas.% HBr (aq). Ovaj dodatak je doveo do formiranja gustog mulja, pa je dodato dodatnih lOml etil acetata kako bi se olakšalo mešanje. Mulj je mešan na sobnoj temperaturi sat vremena. Filtracija i sušenje u vakuumu (20°C) preko noći dao je 2,0 grama proizvoda u obliku bele čvrste čestice (80%). NMR odgovara strukturi. Elementarna analiza: 57,05%C, 7,18%N, 6,16%H (Teorija za 1:1 so: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H).

Primer 2e Karakterizacija alfa oblika bromovodonika jedinjenja I

[0067]Alfa oblik bromovodonika, kako je pripremljen u primeru 2d, je kristalni (XRPD) - videti Fig. 2. Oblik ima tačku topljenja na ~-226°C. On apsorbuje oko 0,3% vode kada je izložen visokoj relativnoj vlažnosti i ima rastvorlj ivost od 2mg/ml u vodi.

Primer 2f Priprema beta oblika soli bromovodonika jedinjenja I

[00681_49,5 grama bezbojnog ulja l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina je rastvoreno u 500ml etil acetata i u njih dodato 18,5ml 48mas.% HBr (aq). Ovaj dodatak je izazvao formiranje gustog mulja koji je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Filtracija i sušenje u vakuumu (50°C) preko noći su dali proizvod u 29,6 grama u obliku bele čvrste čestice (47%).

NMR odgovara strukturi. Elementarna analiza: 56,86%C, 7,35%N, 6,24%H (Teorija za 1:1 so: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H).

Primer 2g Karakterizacija beta oblika soli bromovodonika jedinjenja I

[0069]_Beta oblik bromovodonika, kako je pripremljen u primeru 2f, je kristalni (XRPD) videti

Fig. 3. Ovaj oblik ima tačku topljenja~231°C. On apsorbuje oko 0,6% vode kada je izložen visokoj relativnoj vlažnosti i ima rastvorlj ivost od l,2mg/ml u vodi.

Primer 2h Priprema gama oblika soli bromovodonika jedinjenja I

[0070]_1 g bromovodonika 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina, kako je pripremljen u primeru 2d, je dodato 20ml vode i zagrevan je do 85°C. Rastvor je bio skoro proziran. Dodavanje 1 kapi bromovodonika gaje učinilo prozirnim. HBr je dodavan dok nije zabeležena tačka zamućenja. Rastvor je hlađen do sobne temperature i osušen. NMR odgovara strukturi. Elementarna analiza: 56,63%C, 7,18%N, 6,21%H (Teorija za 1:1 so: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H).

Primer 2i Karakterizacija gama oblika bromovodonika jedinjenja I

[0071]Bromovodonik, kako je pripremljen u primeru 2h, je kristalni (XRPD) - videti Fig. 4. DSC kriva prikazuje da se neki termalni događaji na oko 100°C verovatno menjaju u kristalni oblik. Zatim se topi na 220°C. On apsorbuje oko 4,5% vode kada je izložen visokoj relativnoj vlažnosti i pri 30%RH na sobnoj temperaturi apsorbovano je oko 2% vode.

Primer 2j Priprema hidrata bromovodonika i edinj enj a I

[0072]1,4 gramu ulja l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina je dodato 20ml vode, i zagrevano do 60°C. pH je podešena na 1 pomoću 48% HBr. Rastvor je hlađen do sobne temperature i osušen. NMR odgovara strukturi. Elementarna analiza: 55,21%C, 7,16%N, 6,34%H (Teorija za 1:1 so hemihidrata: 55,68%C, 7,21%N, 6,23%H).

Primer 2k Karakterizaci j a hemihidrata bromovodonika i edinj enj a I

[0073]JTidrat, kako je pripremljen u primeru 2j, je kristalni (XRPD) - videti Fig. 5.

Sadržaj vode u velikoj meri zavisi od relativne vlažnosti. Na sobnoj temperaturi i 95%RH sadržaj vode je oko 3,7%. Do dehidratacije dolazi zagrevanjem do oko 100°C.

Primer 3 Priprema jedinjenja I

[0074]

815g NaOBu<1>(8,48mol), 844g piperazina (9,8mol), 6,6g Pd(dba)2(1 l,48mmol) i 13,6g rac-BINAP (21,84mmol) mešanisu 50 min sa 4L toluena. 840g 2-bromo-jodobenzena (2,97mol) je zatim dodato sa 1,5L toluena, a mešanje je nastavljeno 30 min. Na kraju je u 390,8g 2,4-dimetiltiofenola (2,83mol) dodato 1,5L toluena. Suspenzija je zagrevana do refluksa i refluks je nastavljen 5 sati. Reakciona mešavina je ohlađena preko noći. Pre nego što je mešavina filtrirana kroz filtrirajuće sredstvo, dodato je 2L vode i mešano 1 sat. Filtrat je zatim ispran sa 3 x 1L slanog rastvora. Kombinovane vodene faze su zatim ekstrahovane sa 600ml toluena. Kombinovane faze toluena su zatim zagrevane do 70°C, čemu je usledilo dodavanje 329,2ml 48mas.% HBr (aq.) i 164,6ml vode. Mešavina je tokom noći ohlađena do sobne temperature. Finalni proizvod (bromovodonika l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)-fenil]piperazina) je prikupljen filtracijom i osušen u vakuumu (60°C) dajući 895g (prinos 84%).

Referentni primer 4 Efekti boli u intradermalnom formalnin testu kod miševa

[0075]_U ovom modelu, miševi primaju injekciju formalina (4,5%, 20ul) u zadnju levu šapu. Iritacija izazvana injekcijom formalina izaziva karakteristični dvofazni bihevioralni odgovor, što je kvantifikovano vremenom provedenim u lizanju povređene šape. Prva faza (-0-10 minuta) predstavlja direktnu hemijsku iritaciju i nocicepciju, dok se za drugu fazu (--20-30 minuta) veruje da predstavlja bol neuropatskog porekla. Dve faze su razdvojene periodom mirovanja u kome se ponašanje vraća u normalu. Efikasnost jedinjenja testa u smanjivanju bolnog nadražaja se procenjuje brojanjem vremena provedenog u lizanju povređene šape u dve faze.

[0076]Jedinjenje I je pokazalo značajno smanjenje bola u rezultatima druge faze (Fig. 9a), ukazujući na efikasnost protiv bola neuropatskog porekla. Štaviše, jedinjenja prema ovom pronalasku su pokazala značajnu redukciju u rezultatima prve faze (Fig. 9b), ukazujući na veću analgetičku aktivnost pri najvećoj dozi. Ukratko, ovi rezultati ukazuju da će jedinjenja prema ovom pronalasku biti efikasna u tretmanu poremećaja povezanih sa bolom.

Primer 5 Efekti na međućelijske nivoe acetilholina u mozgu slobodno pokretnih pacova

[0077]Životinjama je administrirana so bromovodonika l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil) fenil] piperazina.

Životinje

[0078]Korišćeni su mužjaci Sprague-Dawley pacova koji su u početku težili 275-300g. Životinje su smeštane pod naizmeničnim ciklusom od dvanaestočasovnog svetla i mraka pod kontrolisanim uslovima za regularnu unutrašnju temperaturu (21±2°C) i vlažnost (55±5%) sa hranom i vodom dostupnomad libitum.

Hirurgija i mikrodijalizni eksperimenti

[0079]Pacovi su anestezirani hypnorm/dormicum-om (2ml/kg) i intracerebralne provodne kanile (CMA/12) su stereotaksično implantirane u mozak, sa ciljem pozicioniranja vrha dijalizne sonde u ventralni hipokampus (koordinate: 5,6 mm posle bregme, lateralno -5,0 mm, 7,0mm ventralno od dure) ili u predfrontalnom korteksu (koordinate: 3,2mm pre bregme; lateralno 0,8mm; 4,0mm ventralno do dure). Za fiksaciju provodnih kanila su korišćeni ankerni vijci i akrilni cement. Temperatura tela životinja je praćena rektalnom sondom i održavana na 37°C. Pacovima je omogućen oporavak od operacije u trajanju od dva dana i smeštani su zasebno u kaveze. Na dan eksperimenta sonda za mikrodijalizu (CMA/12, prečnik 0,5 mm, dužina 3mm) je ubačena kroz provodnu kanilu.

[0080]Sonde su povezane putem dvokanalne osovine na mikroinjekcionu pumpu. Prskanje mikrodijalizne sonde filtriranim Ringerovim rastvorom (145mm NaCl, 3mM KC1, lmM MgCh, 1,2 mM CaCb koji sadrži 0,5uM neostigmina) je započeto neposredno pre ubacivanja sonde u mozak i nastavljeno je tokom trajanja eksperimenta pri konstantnoj brzini protoka od 1 ul/min. Nakon 180 min. stabilizacije, započeti su eksperimenti. Dijalizati su skupljani na svakih 20 minuta. Nakon eksperimenata životinje su žrtvovane, mozak im je uklonjen, zamrznut i isečen radi kontrole postavljanja sonde.

[0081]Jedinjenje je rastvoreno u 10% HPbetaCD i injektirano potkožno (2,5-10mg/kg). Doze su izražene kao mg soli/kg telesne težine. Jedinjenje je administrirano u zapremini od 2,5ml/kg.

Analiza dijalizata acetilholina

[0082]Koncentracija acetilholina (Ach) u dijalizatima je analizirana pomoću HPLC sa elektrohemijskom detekcijom korišćenjem mobilne faze koja se sastoji od lOOmM dinatrijum-hidrogenfosfata, 2,0mM oktansulfonske kiseline, 0,5mM tetrametil-amonijumhlorida i 0,005% MB (ESA), pH 8,0. Pretkolonski enzimski reaktor (ESA), koji sadrži imobilisanu holinoksidazu, je eliminisao holin iz injektovanog uzorka (10ul) pre separacije Ach-a na analitičkoj koloni

(ESA ACH-250); brzina protoka 0,35ml/min, temperatura: 35°C. Nakon analitičke kolone, uzorak je prošao postkolonski reaktor čvrste faze (ESA) koji sadrži imobilisanu acetilholinesterazu i holinoksidazu. Ovaj reaktor je konvertovao Ach u holin, a zatim holin u betain i H2O2. Poslednje je registrovano elektrohemijski korišćenjem platinaste elektrode (Analitička ćelija: ESA, model 5040).

Predstavljanje podataka

[0083]U eksperimentima sa jednim ubrizgavanjem, srednja vrednost 3 konsekutivna ACh uzorka koji neposredno prethode administraciji jedinjenja su poslužili kao bazalni nivo za svaki eksperiment, podaci su pretvoreni u procenat bazalnog (srednje bazalne vrednosti pre ubrizgavanja su normalizovane do 100%).

Rezultati

[0084]Jedinjenje je značajno povećalo međućelijske nivoe Ach-a u predfrontalnom korteksu i ventralnom hipokampusu pacova - videti Fig. 10a i 10b.

Primer 6 Uslovljavanje kontekstualnim strahom kod pacova

[0085]Jedinjenje administrirano u ovom eksperimentu je so bromovodonika l-[2-(2,4--dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina.

[0086]Proučavali smo efekat jedinjenja na akviziciju, konsolidaciju i povraćaj uslovljavanja kontekstualnim strahom kod pacova. U paradigmi uslovljavanja strahom, životinje uče da povezuju neutralno okruženje (kontekst, komoru za tretiranje, CS) sa averzivnim iskustvom (električni šok šapice, BS). Tokom ponovnog izlaganja komori za tretiranje, životinje pokazuju ponašanje pri smrzavanju, što je uzeto kao direktna mera memorije povezane sa strahom[ Pavlov J. Biol. Sci.,15,177-182, 1980]. Neuroanatomija uslovljavanja kontekstualnim strahom je detaljno istraživana i nekoliko studija je pokazalo da su hipokampus i amigdala potrebni radi formiranja ove memorije[ Hippocampus,11, 8-17, 2001;Neurosci,19, 1106-1114, 1999;Behav. Neurosci., 106, 274-285,1992].

Životinje i lek

[0087]Korišćeni su odrasli mužjaci Spague-Dawley pacova (koji su težili 250-300g u vreme treniranja) iz Charles River laboratorija i smeštani su po dva u kavez pod naizmeničnim ciklusom od dvanaestočasovnog svetla i mraka. Hrana i voda su bili dostupniad libitum.Pacovi su korišćeni nedelju dana posle dolaska. Jedinjenje je rastvarano u 10% HPbetaCD i injektirano potkožno. Lek je administriran u zapremini 2,5ml/kg.

Aparatura

[0088]Treniranje i testiranje su obavljeni u zvučno izolovanoj komori (30 x 20 x 40cm), smeštenoj u izolovanoj sobi i povezanoj na ventilacioni sistem. Osvetljenje je bilo belo svetio (60W). Pod komore se sa sastojao od metalne rešetke povezane na generator elektro šokova. Pre treniranja i testiranja, komora je očišćena 70% rastvorom etanola. Video kamera je omogućila bihevioralne opservacije i snimanje sesije treniranja za off-line analize.

Akvizicija i test retencije

[0089]Tokom akvizicije životinjama je dozvoljeno slobodno istraživanje novog okruženja tokom 1 minuta perioda navikavanja, tokom kojeg je dat jedan neizbežni šok na šapicu (bezuslovni stimulus, BS) preko elektrifikovane mreže na podu. Šok na šapici je trajao 2s i bio je intenziteta 0,75mA. Životinje su ostale u komori za uslovljavanje još 60s nakon BS. Ponašanje pri smrzavanju je zabeleženo tokom prvih 58s (akvizicija koja prethodi šoku; eksperimentator je nevidljiv grupama) radi utvrđivanja odgovora koji su bazni-pri smrzavanju na kontekst. Na kraju akvizicije životinje su nežno uklonjenje i smeštene u njihove kaveze. Nakon 24h iste životinje su ponovo uvedene u kontekst treniranja (komora za uslovljavanje strahom) i obavljen je 2-minutni test retencije. Tokom ovog perioda nisu davani šokovi.

[0090]Ponašanje pri smrzavanju je beleženo tokom celog perioda testiranja tokom koga je eksperimentator bio nevidljiv grupama i predstavljeno je kao procenat perioda ukupnog trajanja testa.

Rezultati i diskusije

[0091]Efekat jedinjenja na uslovljavanje kontekstualnim strahom kod pacova je proučavano (i) na akviziciji (lek primenjen pre akvizicije, Fig. 11), (ii) na povraćaj memorije (lek primenjen pre testa, Fig. 12) i (iii) na konsolidaciju (lek primenjen odmah nakon akvizicije, Fig. 13). U prvoj grupi eksperimenata, jedinjenje (1, 5 i lOmg/kg) je administrirano lh pre sesije akvizicije. Fig. 11 opisuje akviziciju ponašanja pri smrzavanju tokom tretiranja (58s pre šoka na hranu) i testa retencije 24h kasnije. Zabeleženo je sledeće:

- Jedinjenje ne utiče na osnovno ponašanje pri smrzavanju pre davanja šoka na

šapicu za bilo koju testiranu dozu.

- Jedinjenje u slučaju 5mg/kg ima tendenciju porasta vremena smrzavanja tokom

testa retencije, 24h nakon akvizicije (39,24 ± 13,76%, n=6, vs. 24,30±4,40%,

n=16, kod životinja tretiranih nosačem).

- Jedinjenje u slučaju lOmg/kg značajno povećava vreme smrzavanja tokom testa

retencije, 24h nakon akvizicije (52,15 ± 5,68%, n=10, vs 24,30 ± 4,40%, n=16,

kod životinja tretiranih nosačem, p<0,01).

[0092]Model uslovaljavanja strahom, kako je opisan na Fig. 11, je standardna procedura opisana u literaturi za istraživanje učenja i memorije. U cilju daljeg razjašnjavanja akutnih efekata ovog leka na povraćaj memorije, jedinjenje (5, 10 i 20mg/kg) je primenjeno lh pre testa retencije. Zabeleženo je da jedinjenje inhibira ispoljavanje ponašanja pri smrzavanju sa 5mg/kg tokom testa memorije (12,86 ± 3,57%, n=9, vs. 33,61 ± 4,29%, n=13, kod životinja tretiranih nosačem, p<0,05). (Fig. 13).

[0093]Kako je ranije opisano, samo jedinjenje ne utiče na osnovno ponašanje pri smrzavanju pre početka BS (Fig. 11), tako daje najprihvatljivija hipoteza ta daje efekat zabeležen na Fig. 12 posledica anksiolitičkog efekta. Uslovljenoj memoriji se pristupa preko ponašanja pri smrzavanju, odgovor koji je umanjen jedinjenj ima sa potencijalnim anskiolitičkim efektima. Ovaj eksperiment pokazuje da jedinjenje koje se akutno daje pre povraćaja memorije ima anksiolitičku efikasnost, odatle sledi daje malo verovatno daje povećano smrzavanje prikazano na Fig. 11 posledica anksiogenog efekta jedinjenja.

[0094]U cilju osnaživanja pozicije da jedinjenje nije anksiogeno, već ima prokognitivni potencijal, jedinjenje je administrirano na 5, 10 i 20mg/kg nakon sesije akvizicije. Shodno tome, u ovoj grupi eksperimenata, jedinjenje nije korišćeno ni tokom akvizicije, kao ni tokom testa retencije. U ovom slučaju je zabeleženo da jedinjenje dato na 5mg/kg značajno povećava vreme smrzavanja tokom testa retencije, 24h nakon sesije akvizicije (45,58 ± 4.50%, n=8, vs. 25,26 ± 3,57%, n=19, kod životinja tretiranih nosačem, p<0,05). Procenat vremena smrzavanja tokom ponovnog izlaganja kontekstu je opisan kao mera memorije povezane sa strahom[ Pavlov J. Biol. Sci.,15, 177-182, 1980], koji je poboljšan kod pacova tretiranih jedinjenjem u odnosu na one tretirane nosačem (Fig. 11 i 12). Posmatrano zajedno, podaci pokazuju da jedinjenje poboljšava kontekstualnu memoriju.

Claims (9)

1. Jedinjenje I, koje je l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazin i njegove farmaceutski prihvatljive soli za upotrebu u tretiranju bolesti odabrane između blagog kognitivnog oštećenja; vaskularne demencije; i kognitivnog oštećenja povezanog sa Daunovim sindromom, tph genskim mutacijama, epilepsijom, traumatskom povredom mozga ili Aspergerovim sindromom.

2. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 1, koje je l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazin so bromovodične kiseline.

3. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 2, gde je pomenuta so kristalna.

4. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 3, gde je pomenutaso naznačena time,što ima glavne XRDP pikove na 6,89, 9,73, 13,78 i 14,62 (°20), svi ± 0,1 (°20).

5. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 4, gde je pomenutaso naznačenaXRDP-om kakav je prikazan na Fig. 3.

6. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-5 u jediničnoj dozi za oralnu administraciju od oko 1-50 mg l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli.

7. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 6, gde pomenuta jedinična doza obuhvata između oko 1 i 20 mg l-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazin soli bromovodonične kiseline.

8. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7 pod uslovom da nije slobodna baza 1-[2-(2,4-dimetilfenilsulfanil)fenil]piperazina u ne-kristalnom obliku.

9. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-8 za upotrebu u tretiranju pacijenta koji je ranije primio terapiju za tretiranje pomenute bolesti koja terapija je obustavljena ili umanjena zbog nepovoljnih efekata koje ima na san ili seksulane aktivnosti.