RS56427B2 - Priprema polilaktidnih-poliglikolidnih mikročestica koje imaju sigmoidalni profil oslobađanja - Google Patents

Description

Opis

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na pripremu biorazgradivih mikročestica koje se obrazuju od poli(D,L laktid-koglikolid)nog (PLGA) polimera i na to kako da se postigne sigmoidalno otpuštanje aktivnih farmaceutskih jedinjenja iz mikročestica. Posebno, predmetni pronalazak se odnosi na emulgaciju unutrašnje/uljane faze sa spoljašnjom/vodenom fazom nakon čega sledi gašenje i jedan korak sušenja za dobijanje mikročestica koje imaju poželjni profil oslobađanja, poželjno baznih/nukleofilnih jedinjenja kao što je risperidon. Alternativno, predmetni pronalazak je takođe pogodan za hidrofobna jedinjenja koja imaju slabu rastvorljivost u vodi i poželjno je visoko punjenje lekom >20% mas/mas. Profil oslobađanja može da se kontroliše podešavanjem stepena zasićenosti spoljne/vodene faze sa organskim rastvaračem koji se koristi u unutrašnjoj/uljanoj fazi, i temperaturom u koraku gašenja. Posebno, početna lag faza i nakon toga sigmoidalni profil oslobađanja postižu se upotrebom spoljašnje vodene faze koja je prekomerno zasićena rastvaračem koji se koristi u unutrašnjoj fazi u koraku emulgovanja, u kombinaciji sa niskom temperaturom u toku gašenja.

STANJE TEHNIKE PRONALASKA

[0002] Pored literature koja je usmerena na značajne izazove sa injekcionim depoima za biomakromolekule, hidrofobna jedinjenja su u izuzetno značajna klasa supstanci lekova i sama po sebi predstavljaju jedinstvene izazove. Procenjeno je da do 40% svih novih hemijskih entiteta pokazuje slabu rastvorljivost. Termin "hidrofobno jedinjenje" grubo opisuje heterogenu grupu malih molekula (manje od 1300) koji ispoljavaju slabu rastvorljivost u vodi ali su obično, ali svakako ne uvek, rastvorljivi u različitim organskim rastvaračima. Često, termini slabo rastvorljiv (1-10mg/ml), veoma slabo rastvorljiv (0,1-1 mg/ml), i praktično nerastvorljiv (<0,1mg/ml) koriste se za kategorizaciju takvih jedinjenja. Dodatno "bazno jedinjenje" znači da kada se jedinjenje rastvori u vodi daje rastvoru sa vodonikovim jonom aktivnost koja je veća u odnosu na čistu vodu i pH koji je veći od 7,0. Bazno jedinjenje takođe može da bude hidrofobno jedinjenje.

[0003] Kontrolisano oslobađanje doznih oblika poboljšava efikasnost terapije lekom povećavanjem terapeutske aktivnosti doze smanjuje intenzitet nepoželjnih sporednih efekata i broj davanja leka koji je neophodan u toku lečenja. Za određene lekove koji imaju (i) širok terapeutski prozor, (ii) zahtevaju nisku dnevnu dozu, i (iii) treba da se koriste za dugotrajno lečenje bolesti, injektabilni depoi sa kontrolisanim oslobađanjem kao što su lekom napunjene biorazgradive mikročestice polimera, može da obezbedi alternativnu strategiju za isporuku, potencijalnim spasavanjem leka koji se na drugačiji način ne može isporučiti.

[0004] Biorazgradive mikročestice (mikrokapsule i mikrosfere) u rasponu prečnika od oko 10 do 125 µm mogu na zadovoljavajući način da služe kao sistemi za isporuku leka sa produženim oslobađanjem.

Mikročestice koje se sastoje od određenih terapeutskih agenasa i pogodnih biorazgradivih matrica mogu da budu suspendovane u viskoznom rastvaraču i injektirane intramuskularno (IM) ili subkutano.

[0005] Različiti biorazgradivi polimeri se koriste za kontrolisano oslobađanje različitih lekova. Odabir i dizajn pogodnog biorazgradivog polimera je prvi korak u izazovu za razvoj parenteralnog sistema za isporuku leka. Predloženo je nekoliko klasa sintetičkih polimera, koji uključuju poli(estre), poli(anhidride), poli(karbonate), poli(aminokiseline), poli(amide), poli(uretane), poli(orto-estre), poli(iminokarbonate), i poli(fosfazene).

[0006] Poznati su različitih postupci pomoću kojih hidrofobna jedinjenja mogu da budu inkapsulirana u obliku mikročestica (Christian Wischke and Steven P. Schwendeman, "Principles of encapsulating hydrophobic compounds in PLA/PLGA microparticles", International Journal of Pharmaceutics 364 (2008) 298-327). Najviše poznate su prikazane ispod:

● o/w tehnika emulgovanja (isparavanje rastvarača i/ili ekstrakcija)

[0007] Kako je značajan broj hidrofobnih jedinjenja rastvorljiv u različitim organskim rastvaračima koji ne mogu da se mešaju sa vodom i, naravno, koji su slabo rastvorljivi u vodi, jedan od najjednostavnijih postupaka da se takvi lekovi inkapsuliraju u biorazgradivim polimerima jeste pomoću tehnike emulgovanja ulja-u-vodi (o/w) / isparavanje rastvarača ili tehnike ekstrakcije. Proces o/w uključuje rastvaranje polimera (u većini slučajeva PLGA) koji se ne meša sa vodom, isparljivim organskim rastvaračem (kao što je dihlorometan (DCM), tetrahidrofuran (THF) i etil acetat) i nakon toga rastvaranje jedinjenja u pripremljenom rastvoru ili alternativno rastvaranje jedinjenja u mešajućem korastvaraču i mešanje. Ko-rastvarači se generalno koriste za lekove koji ne pokazuju visoku rastvorljivost u primarnom organskom rastvaraču. Dobijena organska uljana faza se nakon toga emulguje u vodenom rastvoru (kontinualna faza) koji sadrži odgovarajuće sredstvo za emulgovanje. Sredstva za emulgovanje koja su uključena u vodenu fazu deluju kao stabilizatori za emulziju ulje-u-vodi. Emulzija se zatim podvrgava uklanjanju rastvarača ili pomoću ispravanja ili procesom ekstrakcije da se očvrsnu kapljice ulja. Uopšteno, isparljivi rastvarači mogu da se uklone iz takvih emulzija pomoću isparavanja do gasne faze ili u bilo kom slučaju pomoću ekstrakcije do kontinulane faze. U prvom slučaju, emulzija se održava na redukovanom pritisku ili na atmosferskom pritisku i brzina mešanja je smanjena dok se temperatura povećava da se omogući isparavanje isparljivom rastvaraču. U poslednjem slučaju, emulzija se prebacuje u veliku količinu vode (sa ili bez surfaktanta) ili drugom medijumu za gašenje, u kome je rastvarač koji je povezan sa uljanim kapljicama raspršen. Takođe se primenjuje kombinacija isparavanja rastvarača i ekstrakcija. Čvrste mikrosfere koje se dobijaju na takav način nakon toga se ispiraju i sakupljaju prosejavanjem. Nakon toga se suše pod odgovarajućim uslovima kao što je sušenje u vakuumu ili izlažu liofilizaciji.

- s/o/w tehnika emulgovanja

[0008] Ova tehnika se obično koristi kada lek ne može da se rastvori u rastvaraču nosača ili smeši rastvarača ili kada ne može da se izbegne značajni gubitak leka do kontinualne faze kada se koriste sistemi ko-rastvarača. U ovom postupku supstanca leka koja je raspršena u uljanoj fazi koja se sastoji iz organskog rastvarača ili smeše rastvarača i polimera koji je rastvoren u ovoj fazi. Zbog niske ali različite rastvorljivosti određenih aktivnih agenasa u organskom rastvaraču, određeni deo leka može takođe da se nalazi u rastvoru u s/o/w formulacijama. Postupak s/o/w zahteva veoma malu veličinu čestica leka kako bi se omogućila potpuna inkapsulacija kristala leka. Osim neophodnosti male veličine materijala leka, drugi nedostatak s/o/w tehnike može da bude tendencija leka da pokaže sedimentaciju (veća gustina u odnosu na medijum za suspenziju) ili flotacija (prouzrokovana adhezijom gasnih mehurića na hidrofobnu površinu usled niske vlažnosti) tokom procesa inkapsulacije, u kasnijim fazama razvoja proizvoda, poteškoće takođe mogu da se očekuju tokom skaliraja do velike proizvodnje. Očekuje se da izmene, koje mogu da budu rezlutat promena u sintezi leka, npr., u strukturi kristala leka ili ponašanja prilikom vlaženja, mogu da pogode profil oslobađanja iz s/o/w čestica. Osim toga, razlike u oslobađanju mogu da se pojave u poređenju sa gustim mikrosferama koje se dobijaju pomoću o/w tehnike i pokazuju homogenu distribuciju leka.

- o/o postupak

[0009] Iako se klasifikuju kao hidrofobna jedinjenja, neke aktivne supstance ispoljavaju značajnu rastvorljivost u vodenom medijumu kao spoljašnje vodene faze. Prema tome, očekuje se da o/w postupci dovedu do niskih efikasnosti inkapsulacije zbog fluksa ativnog agensa iz dispergovane faze u veću zapreminu kontinualne faze u toku procesa inkapsulacije. Da bi se ovo pitanje prevazišlo, mogu da se koriste o1/o2 postupci emulzije. Supstanca leka i polimer se rastvaraju u organskom rastvaraču (npr., acetonitrilu) i nakon toga se rastvor emulguje u kontinualnoj fazi koja se sastoji od rastvora sredstva za emulgovanje (HLB obično <8) u ulju, npr., ulje od pamučnog semena ili mineralno ulje. Rastvarač o1-faze (tj., acetonitril) se ekstrahuje u spoljašnjoj uljanoj fazi (rastvorljivost acetonitrila u ulju pamučnog semena 10%) koji ne treba da bude rastvarač i za polimer i za lek. Alternativni postupci koji se tiču s/o/o tehnike kombinuju koncepte s/o/w i o/o metodologija. Međutim, za postupke koji se izvode u ulju uklanjanje kontinualne faze zahteva poseban tretman, npr., ispiranje čestica sa heksanom ili petroleum etrom. Proces emulzifikacije može da se postigne pomoću mehaničkog mešanja, mikserima sa visokim smicanjem i/ili statičnim mikserima.

- Sušenje raspršivanjem

[0010] Mikročestice se dobijaju raspršivanjem rastvora ili suspenzije leka u organski rastvor polimera. Sušenje raspršivanjem se definiše kao transformacija supstance iz tečnog stanja (rastvor, ili disperzija) u osušeni oblik čestica raspšivanjem supstance u vreli gasoviti medijum za sušenje (npr., vrući vazduh). To je kontinuirana operacija za obradu u jednom koraku pri čemu, mogu da se razlikuju četiri faze, odnosno: atomizacija supstance, mešanje spreja i vazduha, isparavanje rastvarača, i razdvajanje proizvoda. Dostupni su različiti sistemi za usitnjavanje, koji mogu da se klasifikuju prema dizajnu mlaznice kao kružno usitnjavanje, usitnjavanje pritiskom, i usitnjavanje sa dve tečnosti. Tehnika sušenja raspršivanjem može da prevaziđe pitanje velikih zapremina vodene faze koja je kontaminirana rastvaračem koja dovodi do emulzije koja se zasniva na postupcima inkapsulacije, međutim suočava se sa problemima skaliranja koji se odnose na tehnologiju transfera od male do proizvodnje na velikoj skali.

[0011] Postoji znatan broj dokaza koji podržava hipotezu da je oslobađanje leka od produženog oslobađanja parenteralnih sistema predominantno kontrolisano karakteristikama sistema za isporuku i uglavnom zavisi od kombinacije difuzije (rana faza) i hidrolitičke erozije (kasna faza) (Cheng-ju Kim, Controlled Release Dosage Form Design, TECHNOMIC publications; Xiaoling Li, Bhaskara R. Jasti, Design of Controlled Release Drug Delivery Systems, McGraw-Hill). Profili oslobađanja su obično ilustrovani kao kumulativno oslobađanje, eksprimirani kao procenat ukupne količine aktivnog agensa koji se nalazi u mikročesticama, u obliku funkcije vremena. Različite kliničke primene, i/ili različiti aktivni agensi, mogu da zahtevaju različite tipove profila oslobađanja. Na primer, jedan tip profila oslobađanja uključuje u osnovi linearni profil oslobađanja tokom vremena. Drugi tip profila oslobađanja je sigmoidalni profil oslobađanja koji se karakteriše početnom lag fazom, strmim intermedijernim profilom oslobađanja, i ravnom krajnjom fazom oslobađanja.

[0012] Pronađeno je da je mehanizam oslobađanja leka iz PLGA mikročestica kombinacija erozije polimera i difuzije leka (N. Faisant et al., "PLGA-based microparticles: elucidation of mechanism and a new, simple mathematical model quantifying drug release", Eur. J. Pharm. Aci., 15 (2002) 355-366). Jedna kritična promenljiva koja ima uticaj na profil oslobađanja biorazgradivog proizvoda mikročestica je molekulska masa polimera ili materijal polimerne matrice u konačnom proizvodu mikročestice. Molekulska masa polimera ima uticaj na brzinu biorazgradnje polimera. Za difuzioni mehanizam oslobađanja aktivnog agensa (kontrolisan difuzijom), polimer treba da ostane intaktan sve dok se celokupni aktivni agens ne oslobodi iz mikročestica, i nakon toga razgradi. Aktivni agens takođe može da se oslobodi iz mikročestica kako materijal polimerne matrice bioerodira (kontrolisan degradacijom). Odgovarajućim odabirom polimernih materijala formulacija mikročestice može da se napravi tako da dobijene mikročestice ispoljavaju i difuziono oslobađanje i svojstva biorazgradivog oslobađanja.

[0013] Oslobađanje leka iz biorazgradivih PLGA mikročestica koje imaju veličinu čestica >10µm kontrolisano je matričnom/krupnom-erozijom i ovi sistemi se biraju kada se zahtevaju sigmoidalni profili oslobađanja (M. Körber, "PLGA Erosion: Solubility- or Diffusion-Controlled?", Pharm Res (2010) 27:2414-2420). Polimerni lanac polimera koji je nerastvorljiv u vodi se deli na manje molekule koji su rastvorljivi u vodi, hidrolizom labilnih estarskih veza u polimernoj osnovi. Nakon toga lek se fizički disperguje u intersticijume matriksa polimera za otpuštanje. Sporedni proizvodi razgradnje polimera su mlečna i glikolna kiselina, koji se uobičajeno nalaze u metaboličkim ciklusima u telu. Očekuje se da oslobađanje leka počne nakon lag vremena kada polimer MM padne ispod kritične vrednosti gde počinje gubitak mase. Poznato je da su različitim tipovima polimera potrebna različita vremena da se završi razgradnja, sa većom molekulskom masom i naročito većim sadržajem laktida, i, u slučaju 1- ili d-PLA, kristalnih umesto amorfnih struktura, pri čemu dolazi do sporije razgradnje i očekivanog sporijeg otpuštanja. Uopšteno, otpuštanje leka iz sistema koji je kontrolisan matriksom ne stvara kinetike nultog reda osim ukoliko se koriste složeni proizvodni procesi u postupku proizvodnje (npr. neuniformirana distribucija koncentracije, modifikacija geometrije, itd).

[0014] Neočekivani rani i/ili skoro linearni profili oslobađanja sa PLGA mikročestica uočeni su za bazne/nukleofilne supstance leka (npr., jedinjenje koje ima trecijarne aminogrupe) (H.V. Maulding et al., "Biodegradable microcapsules: acceleration of polymeric excipient hydrolytic rate by incorporation of a basic medicament", Journal of Controlled Release 3 (1986) 103-117; Y. Chsn and C.G. Pitt, "The acceleration of degradation-controlled drug delivery form polyester microspheres", Journal of Controlled Release 8 (1989) 259-265;). Jako brzo oslobađanje leka (uočeno in vitro i in vivo) pripisuje se hidrolitičkoj razgradnji matriksa polimera (hidrolitičko isecanje estarskih veza polimernog lanca) koje je prouzrokovano baznim supstancama leka (bazno katalizovana hidroliza). Primeri takvih supstanci leka koji indukuju hidrolizu PLGA polimera uključuju ali bez ograničenja tioridazin hidrohlorid, ketotifen, cinarizin, indenorol, klonidin, naltrekson, merepidin, metadon, prometazin i risperidon. Dokazano je da sterna pristupačnost nesolvatnog amina azota jedinjenja definiše njegovu katalitičku efikasnost i stepen ubrzanja isecanja lanca polimera je proporcionalan početnoj koncentraciji baze (% punjenja leka) u matriks polimera. Posebno, tioridazin HCl uključen u PLGA mikrosfere dovodi do skoro momentalnog oslobađanja koje se događa i in vitro i in vivo suprotno u odnosu na rezulate koji se očekuju sa polimerom kao PLGA koji se razgrađuje tokom oko jedne godine i oslobađa lekove tokom nedelja do meseci. Drugi amin, ketotifen, koristi se u dobijanju mikrosfera sa PLGA i analogno su uočeni rezultati in vitro oslobađanja. Pojačane brzine razgradanje u vezi sa brzim oslobađanjem takođe su uočene za mikročestice koje sadrže meredipin, metadon i prometazin.

[0015] Drugo aktivno jedinjenje koje indukuje hidrolizu poliestarskih bočnih lanaca kao što su PLGA polimeri je Risperidon. Risperidon (takođe poznat kao 4-[2-[4-(6-fluorobenzo[dJizoksazol-3-il)- I-piperidil]etil]-3-metil-2,6-diazabiciklo[4.4.0]deka-1 ,3-dien-5-on i prodaje se pod zaštićenim imenom RISPERDAL®) je atipični antipsihotični lek koji je namenjen za lečenje šizofrenije. Risperidon proizvod takođe je dostupan na tržištu sa odloženim oslobađanjem parenteralnog depoa pod zaštićenim imenom RISPERDAL CONSTA. Proizvod Risperdal consta sastoji se iz bočice koja sadrži mikrosfere za suspenziju depoa i napunjen špric koji sadrži pogodni rastvarač za suspenziju. Čvrsti prah mikročestica meša se sa rastvaračem da se dobije suspenzija koja se daje intramuskularno svake dve nedelje. In vivo profil oslobađanja Risperdal consta je kao što sledi: klasični trofazni profil oslobađanja sa slabim efekom rasprskavanja (≤3,5%), latentni period od 4 nedelje bez oslobađanja, i dominantno oslobađanje leka između nedelja 4-6.

[0016] Istraživanja razgradnje PLGA mikročestica koje sadrže risperidon u odnosu na placebo mikročestice (bez risperidona) pokazala su da prisutvo risperidona pojačava brzinu razgradnje PLGA polimera (F. Selmin, P. Blasi and P. P. DeLuca, "Accelerated Polymer Biodegradation of Risperidone Poly(D, L-Lactide-Co-Glycolide) Microspheres, AAPS PharmSciTech, Vol.13, No.4 (2012) 1465-1472). Takođe je uočen hidrolitički efekat risperidona tokom pripreme mikročestica kada su risperidon i PLGA polimer zajedno rastvoreni u organskom ratvaraču da se dobije uljana faza koja se emulguje sa vodenom kontinualnom fazom. Patent EP1282404 obezbeđuje postupak za kontrolu molekulske mase polimera koji obrazuje mikročestice koje sadrže nukleofilno jedinjenje podešavanjem vremena zadržavanja i temperature rastvora nukleofilnog jedinjenja/polimera u toku procesa proizvodnje. Ubrzanje polimernog matriksa mikročestica prisustvom supstance risperidona dovodi do brzog oslobađanja leka i često do nepoželjnih profila linearnog oslobađanja.

[0017] Prema tome, u oblasti tehnike postoji potreba za poboljšanim postupkom kontrole profila oslobađanja u konačnom proizvodu mikročestice koji sadrži bazna/nukleofilna jedinjenja kao što je risperidon. Alternativno, predmetni pronalazak takođe je pogodan za hidrofobna jedinjenja koja su slabo rastvorljiva u vodi i zahtevaju visoko punjenje lekom od >20%mas/mas. Patent EP-B-1140029 predstavlja postupak za dobijanje PLGA mikročestica koje sadrže risperidon sa "s"-oblikom profila oslobađanja podešavanjem stepena sušenja koje se izvodi tokom dobijanja mikročestica. Posebno, patent prikazuje da dodatni intermedijerni koraci sušenja čestica mogu da obezbede sigmoidalni profil oslobađanja. Međutim, ovaj postupak povećava broj koraka prilikom obrade i komplikuje proizvodnju i povećava rizik kada su proizvodi mikročestica namenjeni za humanu upotrebu, prema tome proizvodnja treba da se odvija pod aseptičnim uslovima.

SUŠTINA PRONALASKA

[0018] Predmetni pronalazak se odnosi na dobijanje biorazgradivih mikročestica polimera koji ispoljavaju željene profile oslobađanja Risperidona koji utiče na ubrzanje brzine degradacije matriksa polimera pri čemu uzrokuje nekontrolisano rano i/ili linearno oslobađanje leka. Alternativno, predmetni pronalazak takođe je pogodan kada je neophodno visoko punjenje Risperidonom od >20% mas/mas. Naročito, predmetni pronalazak se odnosi na dobijanje PLGA mikročestica koje sadrže risperidon, koji prati sigmoidalni profil oslobađanja koji se karakteriše početnom lag fazom, strmom intermedijernom fazom oslobađanja, i ravnom finalnom fazom oslobađanja. U jednom aspektu, predmetni pronalazak obuhvata postupak za dobijanje biorazgradivih mikročestica poli(D,L laktid-koglikolid)-nog (PLGA) polimera, koji ima sigmoidalni profil oslobađanja Risperidona, koji se nalazi u okviru mikročestica, koji sadrži sledeće korake:

1. a. dobijanje unutrašnje uljane faze rastvaranjem PLGA polimera i Risperidona u organskom rastvaraču koji je dihlorometan, pri čemu je koncentracija polimera u unutrašnjoj uljanoj fazi u opsegu od 5-8% mas/mas;

2. b. dobijanje spoljašnje vodene faze koja se sastoji iz vode, polivinil alkohola (PVA), opciono vodenog rastvora pufera da se podesi do vrednosti na kojoj se smanjuje rastvorljivost Risperidon, i isti organski rastvarač se koristi u uljanoj fazi, pri čemu je količina organskog rastvarača koji se dodaje u spoljašnju fazu dovoljna za zasićenje spoljašnje faze;

3. c. emulgovanje unutrašnje faze sa spoljašnjom fazom ili mehaničkim mešanjem ili upotrebom homogenizatora sa visokim smicanjem;

4. d. prebacivanje emulzije u medijum za gašenje koji ima temperaturu podešenu na 5°C i koji je pod termostatičkom kontrolom, i poželjno sa zapreminom medijuma za gašenje koja je pod pontrolom od 0,7 do 3 puta, poželjno 1, zapremine koja je neophodna da se rastvori ukupni organski rastvarač iz uljanih mikročestica emulzije;

5. e. odvajanje očvrslih mikročestica i, opciono ispiranje mikročestica, i

6. f. sušenje mikročestica u jednom koraku sušenja, poželjno sušenja vakuumom, bez daljeg koraka ispiranja i/ili sušenja.

[0019] U drugom aspektu, predmetni pronalazak sadrži postupak za dobijanje biorazgradivih mikročestica poli(D,L laktid-ko- glikolid)-nog (PLGA) polimera, koje imaju sigmoidalni profil oslobađanja Risperidona, koji se nalazi u mikročesticama, koji sadrži sledeće korake:

1. a. dobijanje unutrašnje uljane faze koja ima viskozitet od 10-1000 cP, rastvaranjem PLGA polimera i Risperidona u organskom rastvaraču koji je dihlorometan, pri čemu je koncentracija polimera u unutrašnjoj uljanoj fazi 5-40 % mas/mas, poželjno je 5-15% mas/mas čime se obezbeđuje viskozitet rastvora u vrednosti od 10-100 cP;

2. b. dobijanje spoljašnje vodene faze koja se sastoji iz vode, polivinil alkohola (PVA), opciono vodenog rastvora pufera da se podesi do vrednosti na kojoj se smanjuje rastvorljivost Risperidona, i isti organski rastvarač se koristi u uljanoj fazi, pri čemu je količina organskog rastvarača koji se dodaje u spoljašnju fazu dovoljna za zasićenje spoljašnje faze;

3. c. emulgovanje unutrašnje faze sa spoljašnjom fazom ili mehaničkim mešanjem ili upotrebom homogenizatora sa visokim smicanjem;

4. d. prebacivanje emulzije u medijum za gašenje koji ima temperaturu podešenu u opsegu od 30-40°C pod termostatičkom kontrolom, i poželjno sa zapreminom medijuma za gašenje koja je pod kontrolom od 0,7 do 3 puta, poželjno 1, zapremine koja je neophodna da se rastvori ukupni organski rastvarač iz uljanih mikročestica emulzije;

5. e. odvajanje očvrslih mikročestica i, opciono ispiranje mikročestica, i

6. f. sušenje mikročestica u jednom koraku sušenja, poželjno sušenja vakuumom, bez daljeg koraka ispiranja i/ili sušenja.

[0020] U drugom aspektu, predmetni pronalazak sadrži postupak za dobijanje biorazgradivih mikročestica poli(D,L laktid-ko- glikolid)-nog (PLGA) polimera, polimera, koje imaju sigmoidalni profil oslobađanja Risperidona, koji se nalazi u mikročesticama, koji sadrži sledeće korake:

1. a. dobijanje unutrašnje uljane faze koja ima viskozitet od 10-1000 cP ratvaranjem PLGA polimera i Risperidona u organskom rastvaraču koji je dihlorometan, pri čemu je koncentracija polimera u unutrašnjoj uljanoj fazi 5-40 % mas/mas poželjno je 5-15% mas/mas čime se obezbeđuje viskozitet rastvora u vrednosti od 10-100 cP.;

2. b. dobijanje spoljašnje vodene faze koja se sastoji iz vode, polivinil alkohola (PVA), opciono vodenog rastvora pufera da se podesi do vrednosti na kojoj se smanjuje rastvorljivost Risperidona, i isti organski rastvarač se koristi u uljanoj fazi, pri čemu je količina organskog rastvarača koji se dodaje 2-10 puta iznad tačke zasićenja;

3. c. emulgovanje unutrašnje faze sa spoljašnjom fazom ili mehaničkim mešanjem ili upotrebom homogenizatora sa visokim smicanjem;

4. d. prebacivanje emulzije u medijum za gašenje koji ima temperaturu podešenu na 5°C pod termostatičkom kontrolom, i poželjno sa zapreminom medijuma za gašenje koja je pod kontrolom od 0,7 do 3 puta, poželjno 1, zapremine koja je neophodna da se rastvori ukupni organski rastvarač iz uljanih mikročestica emulzije;

5. e. odvajanje očvrslih mikročestica i, opciono ispiranje mikročestica, i

6. f. sušenje mikročestica u jednom koraku sušenja, poželjno sušenja vakuumom, bez daljeg koraka ispiranja i/ili sušenja.

[0021] U specifičnom izvođenju predmetni pronalazak prikazuje postupak pri čemu je sigmoidalno oslobađanje profila in vitro slobađanja koji se karakteriše početnom lag fazom, strmom intermedijernom fazom oslobađanja, i ravnom konačnom fazom oslobađanja kao što se definiše u USP-II aparat koji kao medijum za oslobađanje koristi 1000 ml pufera soli pH vrednosti 7,4 koji sadrži 0,03% natrijum azida i temperatura se kontroliše na 37°C i brzina lopatce je podešena na 100 oum.

[0022] Poželjno pufer je odabran od; fosfata, citrata, acetata i tris-pufera. Vrednost pH pufera podešava se do vrednosti na kojoj risperidon ima manju rastvorljivost. Kontrolisanjem pH, minimalizuje se bilo koje curenje jedinjenja u spoljašnju fazu tokom emulgovanja i/ ekstrakcije rastvarača i procesa isparavanja tokom koraka gašenja.

[0023] Upotrebom termina "sušenje u jednom koraku" označavamo da je neophodan samo jedan korak sušenja u cilju postizanja prednosti pronalaska i nisu potrebni dodatni koraci ispiranja i sušenja.

[0024] Organski rastvarač spoljašnje vodene faze isti je kao i onaj koji se koristi u unutrašnjoh uljanoj fazi. Dodatno, rastvarač se dodaje u spoljašnju fazu pre emulgovanja.

[0025] Karakteristka predmetnog pronalaska je da obezbeđuje mikročestice koje oslobađaju aktivnu supstancu risperidona na kontrolisani način. Predmetni pronalazak obezbeđuje mikročestice koje sadrže risperidon koje oslobađaju risperidon prateći sigmoidalni obrazac oslobađanja. Prednost predmentog pronalaska je u tome što je potreban ograničen broj koraka obrade. Ograničenje koraka obrade je od suštinske važnosti za aseptično dobijanje za parenteralne depoe sa produženim oslobađanjem za humanu upotrebu.

KRATAK OPIS SLIKA

[0026]

SL.1 ilustruje postupak dobijanja

SL.2 ilustruje in vitro profile oslobađanja priprema 1a i 1b

SL.3 ilustruje in vitro profile oslobađanja priprema 2a-2e

SL.4 ilustruje in vitro profile oslobađanja priprema 3

DETALJAN OPIS PREDMETNOG PRONALASKA

[0027] Predmetni pronalazak je usmeren na sisteme za isporuku za kontrolisano oslobađanje Risperidona. Risperidon (takođe poznat kao 4-[2-[4-(6-fluorobenzo[dJisoksazol-3-il)- I-piperidil]etil]-3-metil-2,6-diazabiciklo[4.4.0]deka-1 ,3-dien-5-on) je atipični antipsihotični lek koji je namenjen za lečenje šizofrenije. Hemijska struktura risperidona prikazana je ispod:

Risperidon

[0028] Sistem za isporuku se odnosi na biorazgradive mikročestice koje sadrže PLGA polimer kao materijal koji obrazuje matriks. Pogodni polimeri za upotrebu prema predmetnom pronalasku, koji mogu komercijalno da se dobiju, uključuju ali nisu ograničeni na RESOMER® i LAKESHORE BIOMATERIALS od Evonik Industries AG, LACTEL® od Durect Corp., PURASORB® od PURAC Biochem BV. Polimeri PLGA koji se koriste u predmetnom pronalasku mogu da imaju odnos mlečne kiseline i glikolne kiseline u opsegu od oko 50:50 do oko 85:15 i masu prosečne molekulske mase (MM) u opsegu od 20,000 do 400,000. Poželjno, predmetni pronalazak koristi PLGA sa odnosom monomera od 75:25 i masu prosečne molekulske mase u opsegu od 60,000 do 250,000.

[0029] Termin mikročestice odnosi se na veličinu čestica od 10-250µm, najviše poželjno u opsegu od 20-150 µm. Merenje je u D4,3 vrednosti (prečnik na osnovu zapremine – kao što se meri laserskim rasipanjem svetlosti – upotrebom pogodnog sredstva za dispergovanje).

[0030] Karakteristike kontrolisanog oslobađanja koje se odnose na profil sigmoidalnog oslobađanja koji se karakteriše početnom lag fazom, strmom intermedijernom fazom oslobađanja i ravnom konačnom fazom oslobađanja. Naročito deluje da je, eksperimentalno izmeren profil oslobađanja proizvedenih mikročestica u osnovi "S" oblika i može da se upotpuni sledećom jednačinom:

[0031] Profil oslobađanja se odnosi na kvantitet ili količinu aktivnih sredstava koji se oslobađaju sa mikročestica kao funkcija vremena merena in vitro postupkom sa in vivo značajem. Jedan tip in vitro postupka za oslobađanja koji stimuliše in vivo stanja je ispitivanje rastvaranja na 37°C i vrednosti pH od 7,4.

[0032] Mikročestice napunjene risperionom dobijaju se pomoću jednostavne tehnike emulgovanja isparavanja rastvarača i/ili tehnike ekstrakcije nakon čega sledi sušenje u jednom koraku i željeni profil rastvaranja koji se postiže podešavanjem parametara koji se koriste u postupku dobijanja. Šematski prikaz postupka dobijanja obezbeđen je u SL.1.

[0033] U skladu sa predloženim postupkom, PLGA polimer rastvara se u isparljivom organskom rastvaraču koji je slabo mešljiv sa vodom, koji je dihlorometan, i risperidon se nakon toga rastvara u rastvoru polimera.

[0034] Ova smeša se nakon toga emulguje sa spoljašnjom fazom koja sadrži polivinil alkohol (PVA) kao surfaktant, pri čemu se dobija emulzija ulja-u-vodi (o/w).

[0035] Polivinil alkohol (PVA), poželjno ima masu prosečne molekulske mase od oko 10,000 do oko 150,000 Da koji odgovara opsegu viskoziteta 3-9 cP kada se meri kao 4% vodeni rastvo na 200C, 85-89% stepena hidrolize i broj estara od 130-150. Odabrani PVA nivoi koji se koriste u predmetnom pronalasku uključuju Emprove PVA 4-88 (MM 25,000-30,000; viskozitet 4% u vodi: 3,4-4,6 cPs), PVA 8-88 (MM oko 65,000; viskozitet 4% u vodi 6,8-9,2 cPs) i PVA 18-88 (MM oko 130,000; viskozitet 4% u vodi) dostupno od MerckKGaA. Količina surfaktanta koji se dodaje u vodenu fazu, poželjno je do 5,0% (mas/mas) u odnosu na masu vodenog rastvora. Poželjnije, količina surfaktanta (optimalno PVA količina) je od oko 0,5 do oko 2,5 % mas/mas.

[0036] U predmetnom pronalasku, izuzev surfaktanta, spoljašnja faza takođe sadrži količinu organskog rastvarača, dihlorometana, kao što se koristi za dobijanje unutrašnje faze. Količina organskog rastvarača koji se dodaje,dovoljna je da dovede do ili zasićenja rastvora surfaktanta (tj., rastvorljivost dihlormetana je 1,3-1,8 % mas/mas) ili u obrazovanju odvojene faze (prekomerna saturacija). U

1

poslednjem slučaju količina rastvarača koji se dodaje u spoljašnju fazu je 2-10 puta iznad tačke zasićenja (označava 2-10 puta količine rastvarača koji može da se rastvori u zapremini vodene faze), poželjnije 4-6 puta iznad tačke zasićenja rastvora surfaktanta (uključujući pufer, ako je prisutan). Ekvivalentno prezasićenju spoljašnje faze sa korišćenim rastvaračem koji se nalazi u unutrašnjoj/uljanoj fazi, je dobijanje unutrašnje/uljane faze sa niskom koncentracijom polimera (ispod 10% mas.).

[0037] Posebno, ili prezasićenje spoljašnje faze ili dobijanje unutrašnje/uljane faze sa niskom koncentracijom polmera dovodi do obrazovanja mikročestica koje su napunjene risperidonom koje imaju željenu distribuciju supstance leka risperidona u matriksu polimera. U predmetnom slučaju distribucija željenog leka odnosi se na supstancu leka koji se ne nalazi blizu površine mikročestice polimera. Specifičnije, mikročestice predmetnog pronalaska imaju obogaćenu jezgro supstance leka u odnosu na region koji ne sadrži API osiromašeni region blizu površine. Površina mikročestica nema supstancu leka bilo kojeg oblika (kristalnog ili amorfnog. Uklanjanje API sa površine mikročestica procenjuje se eksperimentalno pomoću ATR analize.

[0038] U predmetnom pronalasku emulgovanje untrašnje faze sa spoljašnjom fazom može da se izvede na jedan od sledećih načina: i) mehaničkim mešanjem, ii) serijskim homogenizatorom iii) linijskim homogenizatorom. Poželjno, postupak emulgovanja se dešava mehaničkim mešanjem upotrebom propelera sa tri oštrice ili rotor-stator homogenizatora sa smicanjem kao što je Ultra-Turrax dostupan od IKA ili linijski homogenizator MT-3000 dostupan od Kinematica.

[0039] Emulzija se nakon toga prebacuje u dovoljnu količinu medijuma za gašenje (voda ili vodeni pufer) u uslovima kontinuiranog mešanja, u kojima je difuzijom raspršen rastvarač koji je povezan sa uljanim kapljicama. Zapremina medijuma za gašenje je reda od 0,7-3 puta medijuma za gašenje koji je neophodan da se u potpunosti rastvori sav organski rastvarač koji se nalazi u unutrašnjoj i spoljašnjoj fazi (zasićena zapremina). Poželjno, medijum za gašenje je od 0,8-puta do 2-puta zasićene zapremine. Pored ekstrakcije, uklanjanje rastvarača može opciono da se olakša isparavanjem pomoću zagravanja do temperature od 40°C.

[0040] Skupljaju se čestice se preko sita nerđajućeg čelika od 45- μm i 250- μm koji su raspoređeni u nizu. Deo koji se sakupi preko sita sa otvorom male veličine ispere se sa vodom i konačno suši u vakuumu.

[0041] Pronalazači su neočekivano otkrili da konačni profil oslobađanja mikročestica može da se kontroliše ili pomoću podešavanja stepena zasićenosti spoljašnje vodene faze sa organskim rastvaračem koji se koristi u unutrašnjoj fazi u kombinaciji sa odgovarajućom temperaturom prilikom gašenja ili dobijanjem unutrašnje/uljane faze sa niskom koncentracijom polimera i spoljašnjom vodenom fazom koja je zasićena organskim rastvaračem u kombinaciji sa odgovarajućom temperaturom prilikom gašenja. Posebno, prezasićena spoljašnja faza ili niska koncentracija polimera unutrašnje/uljane faze emulgovane u zasićenu spoljašnju fazu kombinuje se sa temperaturom od 5°C na koraku gašenja profil oslobađanja dobijenih mikročestica u osnovi će biti sigmoidalni sa početnom lag fazom. Isto može da se postigne kada se zasićena vodena faza kombinuje sa temperaturom u opsegu od 30°C-40°C tokom koraka gašenja. Sve druge kombinacije uključujući prezasićenu spoljašnju fazu sa povećanom temperaturom tokom gašenja (tj., T>5°C) ili zasićenje spoljašnje faze sa visokom koncentracijom polimera u unutrašnjoj/uljanoj fazi sa temperaturom koja je niža od 30°C tokom gašenja dovodi do visokog ranog otpuštanja i skoro linearnih profila oslobađanja.

[0042] Pronalazači veruju da su parametri gore navedenog postupka kritični i da definišu gustinu konačnih mikročestica i distribuciju leka u matriksu polimera. Obe karakteristike kvaliteta utiču na brzinu razlaganja i posledično karakteristike oslobađanja dobijenih mikročestica.

PRIMERI

Primer pronalaska 1a i uporedni primer 1b

[0043] Za dobijanje 1a, 841,5 g 1% poli(vinil alkohol) rastvora (Polivinil alkohol 4-88 EMPROVE® exp, Merck Millipore) meša se zajedno sa 61,2 g dihlorometana, pri čemu se obrazuje prezasićena spoljašnja faza (OP).

[0044] Za dobijanje unutrašnje faze (IP), prvo, 8,1 g visokog svojstvenog viskoziteta (0,76 dl/g) 75:25 poli(D,L laktid-ko-glikolida) (komercijalno dostupan od Purac pod zaštićenim imenom PURASORB PDLG 7507), rastvara se u 81 g dihlorometana, pri čemu se obrazuje 10% (mas/mas) rastvora polimera. Nakon toga, i posle kompletnog rastvaranja polimera, 5,4 g baze risperidona se dodaje u rastvor polimera i meša u cilju dobijanja čistog rastvora. Dve faze se kombiniju zajedno, upotrebom laboratorijskog linijskog homogenizatora (MEGATRON® System MT 3000, Kinematica). IP i OP se upumpavaju istovremeno na 16,7 ml/min i 220 mL/min, redom, u linijski mikser koji je namešten na 800 oum. Izlaz homogenizatora se uvodi direktno u medijum za gašenje, koji se sastoji od 8752 g vode za injekciju, 13,5 g anhidrovanog natrijum karbonata i 10,8 g anhidrovanog natrijum bikarbonata pod uslovima snažnog mešanja (1200 oum) na specifičnoj temperaturi (tj., 5°C ili 20°C). Nakon gašenja od 5 sati, obrazovana disperzija se propušta kroz sito od nerđajućeg čelika koje sadrži kolonu koja se sastoji od otvora veličine 45 i 250 µm. Mikročestice se zadržavaju na situ od 45 μm, pažljivo ispiraju rastvorom od 2000 ml vode za injekciju i 800 ml etanola, da se ukloni baza risperidona koja nije bila inkapsulirana. Na kraju, konačan korak obuhvata sakupljanje i sušenje dobijenih mikročestica, približno 72 časa na na 20<o>C i na 10 mbar.

Uporedni primeri 2a-2c i primeri pronalaska 2d-2e

[0045] 420,75 g od 1% rastvora poli(vinil alkohola) (Polivinil alkohol 4-88 EMPROVE® exp, Merck Millipore) meša se zajedno sa 5,47 g dihlorometanom, pri čemu se obrazuje zasićena spoljašnja faza (OP).

[0046] Za dobijanje unutrašnje faze (IP), prvo, 4,05 g visokog svojstvenog viskoziteta (0.76 dl/g) 75:25 PLGA polimera (komercijalno dostupan od Purac pod zaštićenim imenom PURASORB PDLG 7507), rastvara se u 40,5 g dihlorometanu, pri čemu se obrazuje 10% (mas/mas) rastvor polimera. Nakon toga, i posle kompletnog rastvaranja polimera, 2,7 g baze risperidona se dodaje u rastvor polimera i meša u cilju dobijanja čistog rastvora.

[0047] Dve faze se zajedno kombinuju, ali sporo dodavanje DP u CP pod uslovima mehaničkog mešanja na 1200 oum (IKA mešalica sa gornje strane EUROSTAR 20). Nakon 5 minuta emulgacije, emulzija se polako prebacije u medijum za mešanje, koji sadrži 3278,5 g vode za injekciju, 6,75 g anhidrovanog natrijum karbonata i 5,4 g anhidrovanog natrijum bikarbonata pod uslovima snažnog mešanja (1000 oum) na 5°C, 10°C, 20°C, 30°C, 40°C. Nakon gašenja od 5 sati, obrazovana disperzija se propušta kroz sito od nerđajućeg čelika koje sadrži kolonu koja se sastoji od otvora veličine 45 i 250 μm. Mikročestice se zadržavaju na situ od 45 μm, pažljivo ispiraju rastvorom od 2000 ml vode za injekciju i 800 ml etanola, da se ukloni baza risperidona koja nije bila inkapsulirana.

[0048] Na kraju, konačan korak obuhvata sakupljanje i sušenje dobijenih mikročestica, približno 72 časa na 20<o>C i na 10 mbar.

Inventivni primer 3

[0049] 640,0 g 1% rastvora poli(vinil alkohola) (Polivinil alkohol 4-88 EMPROVE® exp, Merck Millipore) meša se zajedno sa 8,32 g dihlorometanom, pri čemu se obrazuje zasićena spoljašnja faza (OP).

[0050] Za dobijanje unutrašnje faze (IP), prvo, 4,04 g visokog svojstvenog viskoziteta (0,76 dl/g) 75:25 PLGA polimera (komercijalno dostupan od Purac pod zaštićenim imenom PURASORB PDLG 7507), rastvara se u 57,77 g dihlorometanu, pri čemu se obrazuje 10% (mas/mas) rastvor polimera. Nakon toga, i posle kompletnog rastvaranja polimera, 2,7 g baze risperidona se dodaje u rastvor polimera i meša u cilju dobijanja čistog rastvora.

[0051] Dve faze se zajedno kombinuju, upotrebom laboratorijskog linijskog homogenizatora (MEGATRON® System MT 3000, Kinematica). IP i OP se upumpavaju istovremeno na 16,67 ml/min i 220 mL/min, redom, u linijski mikser koji je postavljen na 800 oum. Izlaz homogenizatora se uvodi direktno u medijum za gašenje, koji se sastoji od 3300 g vode za injekciju, 6,79 g anhidrovanog natrijum karbonata i 5,44 g anhidrovanog natrijum bikarbonata pod uslovima snažnog mešanja (1200 oum) na specifičnoj temperaturi (tj., 5°C). Nakon gašenja od 5 sati, obrazovana disperzija se propušta kroz sito od nerđajućeg čelika koje sadrži kolonu koja se sastoji od otvora veličine 45 i 250 μm. Mikročestice se zadržavaju na situ od 45 μm, pažljivo ispiraju rastvorom od 2000 ml vode za injekciju i 800 ml etanola, da se ukloni baza risperidona koja nije bila inkapsulirana. Na kraju, konačan korak obuhvata sakupljanje i sušenje dobijenih mikročestica, približno 72 časa na na 20<o>C i na 10 mbar.

Analiza distribucije veličene čestica (PSD)

[0052] Distribucija veličine čestica se meri difrakcijom lasera upotrebom Malvern Master Sizer 2000 Hydro2000S. Srednja veličina čestica izražena je kao zapremina srednjeg prečnika u mikronima.

Analiza punjenja lekom

[0053] 25mg mikročestice koja sadrži risperidon dodaje se u 50 ml acetonitrila i izlaže ultra zvuku u trajanju od 10min da bi se olakšalo rastvaranje. Rastvor se nakon toga cedi kroz PTFE hidrofilni igleni filter 0,45 μm. Punjenje risperidonom se procenjuje upotrebom opremljenog reverzno-faznog HPLC Shimadzu pod sledećim uslovima: kolona, Xterra RP18µm, 4,6x150mm; mobilna faza, 45/55 acetonitril/fosfatni pufer pH 7,8; temperatura kolone, 30<o>C; brzina protoka, 1 mL/min; zapremina injekcije, 10 μL; detekcija, UV 278 nm; vreme trajanja, 8 min. Standardna kriva kalibracije ima opseg

1

od 20 do 240 μg/mL risperidona rastvorenog u acetonitrilu. Punjenje lekom je izraženo u % mase u odnosu na mikročesticu.

Merenje srednje molekulske mase

[0054] Molekulska masa mikročestca se određuje gel propusnom hromatografijom (GPC) upotrebom Agilent Model GPC 50Plus sistema opremljenog sa 2 kolone PLgel 5 mm Mixed-D 300 X 7,5 mm povezane serijama i detektorom refraktornog indeksa (RI). Mobilna faza je THF sa brzinom protoka 1 ml/min i temperatura kolone je 30<o>C. Za analizu uzoraka, 10-15 mg mikročestica se rastvara u 5 mL THF i rastvor se ostavlja preko noći pod uslovima mešanja. Uzima se 2 ml, cedi kroz 40 mm PTFE filtere i analizira. Zapremina injekcije je 100 μL. Kolekcije podataka i analiza se izvodi upotrebom Cirrus softvera. Standardi polistirena sa MM opsegom između 162 i 371100 se koriste za kalibraciju.

Indeks uklanjanja API

[0055] Za merene indeksa uklanjanja API, srednja infracrvena mikroskopija izvodi se na suvom prahu mikrosfera prema načinu atenuirane ukupne refleksije (ATR) preko opsega talasnog broja od 550 do 4000 cm<-1>na rezoluciji od 4 cm<-1>. Svaki spektar je prosek 100 skeniranja. Fourier transformišući instrument se koristi (Equinox 55 od Bruker Optics) koji je opremljen jednim 45° dijamentom refleksije ATR dodatkom (DuraSampl IR2 by SensIR). Probijanje (prema tome, uzorkovanje) dubine kod ove tehnike je reda 5 μm. Apsorpcioni spektar je korigovan za λ-zavisnost dubine prodiranja i prikazan je u takozvanom ATR apsorpcionom formalizmu. Empirijski indikator u poređenju sa integrisanim intenzitetom trake matriksa polimera (1850-1680 cm<-1>) prema API-povezanim trakama u 1680-1505 cm<-1>opsegu, je razvijen da bi se obezbedila polukvantitativna procena fenomena površinskog uklanjanja.

In vitro postupak osobađanja

[0056] Istraživanja in vitro oslobađanja su izvedena u USP-II aparatu (Distek-ov aparat za rastvaranje) upotrebom kao medijuma za oslobađanje 1000 ml pufera soli pH 7,4 koji sadrži 0,03% natrijum azid. Temperatura se kontoliše na 37<o>C i brzina lopatice je postavljena na 100 oum. Odgovarajuća količina čestica koje sadrže 24 mg supstance leka risperidona prebacuju se u posude koje obezbeđuju uslove usisavanja (rastvorljivost risperidona u fosfatnom puferu pH 7,4 je 0,22 mg/ml). Uzorkovanje se izvodi u specifičnim vremenskim intervalima od 24 časa do 960 časova i % oslobađanja leka meri se RPHPLC analizom da se povuku uzorci korišćenjem istih uslova kao za merenje punjenja lekom.

�

Claims (7)

PATENTNI ZAHTEVI

1. Postupak za dobijanje biorazgradivih mikročestica poli(D,L laktid-ko-glikolid)-nog (PLGA) polimera, koji ima sigmoidalni profil oslobađanja Risperidona, koji se nalazi u mikročesticama, koji obuhvata sledeće korake

a. dobijanje unutrašnje uljane faze rastvaranjem PLGA polimera i Risperidona u organskom rastvaraču koji je dihlorometan, pri čemu je koncentracija polimera u unutrašnjoj uljanoj fazi u opsegu od 5-8% mas/mas;

b. dobijanje spoljašnje vodene faze koja se sastoji iz vode, polivinil alkohola (PVA), opciono vodenog rastvora pufera da bi se podesio pH do vrednosti na kojoj Risperidon ima smanjenu rastvorljivost, i isti organski rastvarač se koristi u uljanoj fazi, pri čemu je količina organskog rastvarača koji se dodaje u spoljašnju fazu dovoljna za zasićenje spoljašnje faze; c. emulgovanje unutrašnje faze sa spoljašnjom fazom ili mehaničkim mešanjem ili upotrebom homogenizatora sa visokim smicanjem;

d. prebacivanje emulzije u medijum za gašenje koji ima temperaturu podešenu na 5°C i koji je pod termostatičkom kontrolom, i

e. odvajanje očvrslih mikročestica i, opciono ispiranja mikročestica, i

f. sušenje mikročestica u jednom koraku sušenja, poželjno sušenja vakuumom, bez daljeg koraka ispiranja i/ili sušenja.

2. Postupak za dobijanje biorazgradivih mikročestica poli(D,L laktid-ko-glikolid)-nog (PLGA) polimera, koji ima sigmoidalni profil oslobađanja Risperidona, koji se nalazi u mikročesticama, koji obuhvata sledeće korake:

a. dobijanje unutrašnje uljane faze koja ima viskozitet od 10-1000 cP, rastvaranjem PLGA polimera i Risperidona u organskom rastvaraču koji je dihlorometan, pri čemu je koncentracija polimera u unutrašnjoj uljanoj fazi u opsegu od 5-40 % mas/mas; b. dobijanje spoljašnje vodene faze koja se sastoji iz vode, polivinil alkohola (PVA), opciono vodenog rastvora pufera da bi se podesio pH do vrednosti na kojoj Risperidon ima smanjenu rastvorljivost, i isti organski rastvarač se koristi u uljanoj fazi, pri čemu je količina organskog rastvarača koji se dodaje u spoljašnju fazu dovoljna za zasićenje spoljašnje faze; c. emulgovanje unutrašnje faze sa spoljašnjom fazom ili mehaničkim mešanjem ili upotrebom homogenizatora sa visokim smicanjem;

d. prebacivanje emulzije u medijum za gašenje koji ima temperaturu podešenu u opsegu od 30-40°C pod termostatičkom kontrolom;

e. odvajanje očvrslih mikročestica i, opciono ispiranje mikročestica, i

f. sušenje mikročestica u jednom koraku sušenja, poželjno sušenja vakuumom, bez daljeg koraka ispiranja i/ili sušenja.

3. Postupak za dobijanje biorazgradivih mikročestica poli(D,L laktid-ko-glikolid)-nog (PLGA) polimera, koji ima sigmoidalni profil oslobađanja Risperidona, koji se nalazi u mikročesticama, koji obuhvata sledeće korake:

a. dobijanje unutrašnje uljane faze koja ima viskozitet od 10-1000 cP ratvaranjem PLGA polimera i Risperidona u organskom rastvaraču koji je dihlorometan, pri čemu je koncentracija polimera u unutrašnjoj uljanoj fazi 5-40 % mas/mas poželjno je 5-15% mas/mas;

b. dobijanje spoljašnje vodene faze koja se sastoji iz vode, polivinil alkohola (PVA), opciono vodenog rastvora pufera da bi se podesio pH do vrednosti na kojoj Risperidon ima smanjenu rastvorljivost, i isti organski rastvarač se koristi u uljanoj fazi, pri čemu je količina organskog rastvarača koji se dodaje 2-10 puta iznad tačke zasićenja;

c. emulgovanje unutrašnje faze sa spoljašnjom fazom ili mehaničkim mešanjem ili upotrebom homogenizatora sa visokim smicanjem;

d. prebacivanje emulzije u medijum za gašenje koji ima temperaturu podešenu na 5°C pod termostatičkom kontrolom;

e. odvajanje očvrslih mikročestica i, opciono ispiranja mikročestica, i

f. sušenje mikročestica u jednom koraku sušenja, poželjno sušenja vakuumom, bez daljeg koraka ispiranja i/ili sušenja.

4. Postupak prema bilo kom od prethodnih zahteva pri čemu je zapremina medijuma za gašenje kontrolisana od 0,7 do 3 puta zapremine koja je potrebna da se rastvore svi organski rastvarači iz emulzije uljanih mikrokapljica.

5. Postupak bilo kom od prethodnih zahteva 2 ili 3, pri čemu je koncentracija PLGA polimera 5-15% pri čemu se obezbeđuje viskozitet rastvora od 10-100 cP.

6. Postupak prema zahtevu 3 pri čemu je količina organskog rastvarača 4 do 6 puta količine rastvarača koji može da se rastvori u zapremini vodene faze.

7. Postupak prema bilo kom prethodnom zahtevu, pri čemu je sigmoidalno oslobađanje in vitro profil oslobađanja koji je naznačen početnom lag fazom, strmom intermedijernom fazom oslobađanja, i ravnom konačnom fazom oslobađanja kao što se definiše u USPII aparatu upotrebom medijuma za oslobađanje 1000 ml pufera soli pH 7,4 koji sadrži 0,03% natrijum azida i sa kontrolisanom temperaturom na 37°C i brzinom lopatice koja je postavljena na 100 oum.

1