Deprecated: The each() function is deprecated. This message will be suppressed on further calls in /home/zhenxiangba/zhenxiangba.com/public_html/phproxy-improved-master/index.php on line 456
RS56780B1 - Substituisani derivati 2-[2-(fenil) etilamino]alkanamida i njihova upotreba kao modulatora kanala za natrijum i/ili kalcijum - Google Patents
[go: Go Back, main page]

RS56780B1 - Substituisani derivati 2-[2-(fenil) etilamino]alkanamida i njihova upotreba kao modulatora kanala za natrijum i/ili kalcijum - Google Patents

Substituisani derivati 2-[2-(fenil) etilamino]alkanamida i njihova upotreba kao modulatora kanala za natrijum i/ili kalcijum

Info

Publication number
RS56780B1
RS56780B1 RS20180061A RSP20180061A RS56780B1 RS 56780 B1 RS56780 B1 RS 56780B1 RS 20180061 A RS20180061 A RS 20180061A RS P20180061 A RSP20180061 A RS P20180061A RS 56780 B1 RS56780 B1 RS 56780B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
ethylamino
group
butoxyphenyl
alkyl group
dimethylacetamide
Prior art date
Application number
RS20180061A
Other languages
English (en)
Inventor
Piero Melloni
Alessandra Restivo
Emanuela Izzo
Simona Francisconi
Elena Colombo
Cibele Sabido-David
Original Assignee
Newron Pharm Spa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Newron Pharm Spa filed Critical Newron Pharm Spa
Publication of RS56780B1 publication Critical patent/RS56780B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4515—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a butyrophenone group in position 1, e.g. haloperidol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/08—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/20—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/26—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C317/28—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton with sulfone or sulfoxide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C321/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C321/24—Thiols, sulfides, hydropolysulfides, or polysulfides having thio groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C321/26—Thiols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/23—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/24—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/25—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/38—Amides of thiocarboxylic acids
    • C07C327/40—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C327/42—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to hydrogen atoms or to carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/38—Amides of thiocarboxylic acids
    • C07C327/40—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C327/44—Amides of thiocarboxylic acids having carbon atoms of thiocarboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/182—Radicals derived from carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/20—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by nitrogen atoms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Opis pronalaska
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na supstituisane derivate 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamida, njihove farmaceutski prihvatljive soli, farmaceutske preparate koji ih sadrže i njihovu upotrebu kao modulatora kanala za natrijum i/ili kalcijum.
[0002] Derivati, koji su predmet pronalaska, aktivni su kao modulatori kanala za natrijum i/ili kalcijum i stoga se mogu upotrebiti u prevenciji, ublažavanju i lečenju širokog spektra patologija, uključujući, ali ne ograničavajući se na, neurološka, kognitivna, psihijatrijska, inflamatorna, urogenitalna i gastrointestinalna oboljenja kod kojih je pokazano da su prethodno navedeni mehanizmi sa patološkom ulogom.
[0003] Jedinjenja predmetnog pronalaska su u osnovi oslobođena inhibitornog efekta monoamin oksidaze (MAO), pre svega u dozama koje su terapijski efikasne u prevenciji, ublažavanju i/ili lečenju navedenih tegoba.
Stanje tehnike/Tehnički problem
Stanje tehnike - oblast hemije
[0004] Patentni spis GB 586,645 opisuje sintezu derivata aminokiselina sledeće opšte formule
[0005] Preciznije, pronalazak prijavljuje sintezu N-hidroksialkilamida koji deluju stimulativno na glatke mišiće uterusa.
[0006] Patentna prijava WO 90/14334 prijavljuje monosupstituisane derivate N-fenilalkil alfa-amino karboksamida sledeće opšte formule
naznačene time, što
R označava (C1-C8)alkilni, (C3-C8)cikloalkilni, furilni, tienilni, piridilni ili fenilni prsten koji može biti supstituisan sa od 1 do 4 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koju čine halogena, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i trifluorometil grupa; A označava -(CH2)m-, -(CH2)p-X-(CH2)q- grupu, naznačenu time, što m označava celi broj od 1 do 4, jedan od p i q označava nulu, dok drugi označava nulu ili celi broj od 1 do 4; X označava -O-, -S- ili -NR4- grupu u kojoj je R4vodonik ili (C1-C4)alkil grupa; n označava 0 ili 1; svaki od R1i R2nezavisno označava vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; R3označava vodonik ili (C1-C4)alkil grupu koja može biti supstituisana hidroksinom ili fenil grupom, naznačenom time, što ista dalje može biti supstituisana kao što je to prethodno navedeno; R3' označava vodonik ili R3i R3' zajedno čine (C3-C6)cikloalkilni prsten; svaki od R5i R6nezavisno označava vodonik ili (C1-C6)alkil grupu, a pod uslovom da, kada R označava (C1-C8)alkil grupu, A označava -(CH2)p-X-(CH2)q- grupu u kojoj su i p i q nula, dok X označava -O-, -S- ili -NR4- grupu u kojoj je R4vodonik ili C1-C4alkil grupa, a za upotrebu u vidu antiepileptika, lekova za Parkinsonovu bolest, neuroprotektivnih, antidepresivnih, antispazmatičnih i/ili hipnotičkih agenasa.
[0007] Nijedan od derivata čija je sinteza prijavljena predmetnom prijavom nije specifično prijavljen, niti mu je sinteza opisana, u Patentnom spisu WO 90/14334.
[0008] U drugim patentnim prijavama, izabrana jedinjenja opšte formule prikazane u WO 90/14334, prijavljuju se za upotrebu u preparatima čija je aktivnost drugačija, preciznije:
WO 99/35125 Alfa-aminoamidni derivati se upotrebljavaju kao analgetici
WO 03/020273 Farmaceutski preparati koji sadrži gabapentin ili njegov analog i alfa aminoamid se upotrebljavaju kao analgetici
WO 04/062655 Alfa-aminoamidni derivati se upotrebljavaju kao antimigrenozni agensi
WO 05/018627 Alfa-aminoamidni derivati se upotrebljavaju kao anti-inflamatorni agensi
WO 05/070405 Alfa-aminoamidni derivati se upotrebljavaju za tretman poremećaja donjeg urinarnog trakta
WO 05/102300 Alfa-aminoamidni derivati se upotrebljavaju za tretman sindroma nemirnih nogu i srodnih poremećaja
WO 06/027052 (Halobenziloksi)benzilamino-propanamidi se upotreljavaju u proizvodnji lekova koji deluju kao selektivni modulatori kanala za natrijum i/ili kalcijum
Patetna prijava br. α-Aminoamidni derivati se upotrebljavaju za tretman kognitivnih poremećaja.
EP 06012352.8
[0009] U patentnoj prijavi WO 98/35957 opisani su amidni derivati sledeće opšte formule
i prijavljuje se njihov povoljan efekat na gojaznost i poremećaje u ishrani.
[0010] Za nijedno od jedinjenja čija je sinteza prijavljena predmetnom prijavom sinteza zapravo nije opisana, niti je jedinjenje specifično navedeno u patentnom spisu WO 98/35957.
!
[0011] Prijavljuju se i mehanizam blokiranja kanala za natrijum i mnoge farmakološke aktivnosti, a posebno analgetska aktivnost i aktivnosti u tretmanu difunkcije mokraćne bešike.
[0012] Mora se naglasiti da kada X2označava alkilen, to ne može biti -CH2-CH2- već samo -CH2- grupa, a da nijedan od 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamidnih derivata predmetne aplikacije ne bi potpadao pod opštu formula koja je prethodno navedena.
!<Eleonora Ghidini i saradnici, u Bioorganic & Medicinal Chemistry 2006, 14, 3263-3274 prijavljuju jedinjenja sledeće>opšte formule:
[0013] Navedena jedinjenja su ispitivana kao antikonvulzanti.
[0014] Nijedno od jedinjenja koje je opisano i čija je sinteza prijavljena predmetnom patentnom prijavom ne karakteriše opšta formula koja je navedena za prethodnu prijavu.
!<Pridružena aplikacija PCT/EP 2006/011443 (WO 2007/071311), popunjenja 29. novembra 2006. godine, se odnosi na>derivate 2-feniletilamina sledeće opšte formule:
[0015] Nijedno od jedinjenja koja se prijavljuje predmetnim pronalaskom se ne tumači u okviru PCT/EP 2006/011443 (WO 2007/071311).
Stanje tehnike - oblast biologije
[0016] Ćelijski kanali za natrijum su od velike važnosti za nervni sistem (neuronalne mreže) zbog brzog prenosa električnih impulsa kroz ćelije i ćelijske mreže, čime se koordiniraju viši nervni procesi, od kretanja (lokomocije) do kognicije. Navedeni kanali su veliki transmembranski proteini koji mogu zauzimati različite oblike, a da bi se omogućila selektivna propustljivost jona natrijuma. Za navedeni proces je neophodan akcioni potencijal zarad depolarizacije membrane i stoga su ovi kanali voltažno-zavisni. U poslednjih nekoliko godina mnogo se više zna o kanalima za natrijum, a razvijeni su i lekovi koji interaguju sa njima.
Voltažno-zavisni kanali za natrijum su originalno klasifikovani prema njihovoj osetljivosti na tetrodotoksin - od nisko osetljivih, u opsegu nanomolarnih (Tetrodotoksin senzitivni, TTXs) do visoko osetljivih, u opsegu mikromolarnih koncentracija tetrodoksina (Tetrodotoksin rezistentni, TTXr). Do sada je identifikovano 9 različitih α subjedinica kanala za natrijum koje su klasifikovane kao Nav1.1 - Nav1.9.
Nav1.1 do Nan1.4, Nav1.6 i Nav1.7 predstavljaju TTXs, dok su Nan1.5, Nav1.8 i Nav.1.9 TTXr tipa i karakteriše ih različit stepen osetljivosti. Nav1.1 do Nav1.3 i Nav1.6 se prvenstveno eksprimiraju u CNS-u, dok su Nav1.4 i Nav1.5 uglavnom eksprimirani u mišićima (skeletnim i srčanim, tim redom); Nav1.7, Nav1.8 i Nav1.9 su većinom eksprimirani u senzornim neuronima DRG.
Postalo je takođe jasno da veliki broj lekova sa nepoznatim mehanizmom dejstva zapravo deluje modulacijom provodljivosti kanala za natrijum, uključujući tu lokalne anestetike, antiaritmike klase I i antikonvulzive. Blokatori kanala za natrijum na neuronima su postali interesantni i njihovom upotrebom u tretmanu epilepsije (fenitoin i karbamazepin), bipolarnog poremećaja (lamotrigin), prevenciji neurodegeneracije i za smanjenje neuropatskog bola. Razni antiepileptički lekovi koji stabilizuju neuronsku ekscitabilnost su efikasni i za tretman neuropatskog bola (npr karbamazepin).
Pored toga, povećana ekspresija ili aktivnost kanala za natrijum je primećena i kod nekoliko modela inflamatornog bola, što dalje sugeriše na ulogu kanala za natrijum u inflamatornom bolu.
[0017] Kanali za kacijum predstavljaju transmembranske proteine koji se sastoje od više subjedinica, a koji omogućavaju kontrolisan ulazak jona kalcijuma u ćelije iz ekstraćelijske tečnosti. Uobičajeno je da su kanali za kalcijum voltažnozavisni i stoga se nazivaju voltažno-zavisnim kanalima za kalcijum (VGCC od engl. voltage-gated calcium channels). VGCC su prisutni u celom nervnom sistemu sisara gde regulišu unutarćelijski nivo kacijuma od velike važnosti za vijabilnost i funkciju ćelija. Unutarćelijske koncentracije jona kalcijuma su uključene u brojne vitalne procese kod životinja poput oslobađanja neurotransmitera, kontrakcija mišića, ritmične aktivnosti srca i sekrecije hormona. Sve "ekscitabilne" ćelije životinja kao što su neuroni centralnog nervnog sistema (CNS), periferne nervne ćelije i mišićne ćelije, uključujući tu i ćelije skeletnih mišića, srčanih mišića i venskih i arterijskih glatkih mišića, sadrže voltažno-zavisne kanale za kalcijum.
[0018] Kanali za kalcijum predstavljaju veliku familiju proteina sa mnogim podtipovima shodno genetskim, fiziološkim i farmakološki karakteristikama. Na osnovu biofizičkih svojstava struja kalcijuma koje su zabeležene na pojedinačnim neuronima, opisane su dve super-familije kanala: kanali za kalcijum koji se aktiviraju dejstvom visoke voltaže (HVA od engl. High Voltage Activated) i kanali za kalcijum koji se aktiviraju niskom voltažom (LVA od engl. Low Voltage Activated). Kanali za kalcijum označeni kao L-tip, P-tip, Q-tip, N-tip, R-tip predstavljaju HVA kanale dok kanali T-tipa pripadaju LVA familiji kanala za kalcijum. Prema molekulskom profilu, identifikovano je deset različitih podtipova kanala za kalcijum koji su dalje klonirani, eksprimirani i grupisani u tri familije: Cav1 familiju (Cav 1.1, 1.2, 1.3, 1.4) koja je funkcionalno povezana sa strujama karakterištičnim za kanale L-tipa; Cav2 familiju (Cav 2.1, 2.2, 2.3) koja je funkcionalno povezana sa strujama karakterištičnim za kanale P/Q, N, R tipa i Cav3 (Cav 3.1, 3.2, 3.3) familiju koja je funkcionalno povezana sa strujama karakterištičnim za kanale T-tipa. Pretpostavlja se da su kanali za kalcijum od značaja u određenim patološkim stanjima. Smatra se tako da brojna jedinjenja od koristi za tretman raznih kardiovaskularnih bolesti kod sisara, uključujući ljude, ispoljavaju svoje povoljno dejstvo modulacijom funkcije voltažno-zavisnih kanala za kalcijum koji su prisutni u glatkim mišićima srca i/ili krvnih sudova. Jedinjenja koja deluju na smanjenje provodljivosti kanala za kalcijum takođe se smatraju relevantnim za tretman bola. Preciznije, pretpostavlja se da kanali za kalcijum N-tipa (Cav2.2) odgovorni za regulaciju oslobađanja neurotransmitera, imaju značajnu ulogu u nociceptivnoj transmisiji, kako zbog njihove distribucije u tkivima, tako i zbog efekata koji su dobijeni u nekoliko farmakoloških studija. Ustanovljeno je i da su kanali za kalcijum N-tipa povećano eksprimirani u ipsilateralnom dorzalnom rogu kičmene moždine kod modela neuropatskog bola nakog povrede (Cizkova D., Marsala J., Lukacova N., Marsala M., Jergova S., Orendacova J., Yaksh T. L. Exp. Brain Res. (2002) 147: 456-463). Dodatno, pokazano je da su specifični blokatori kanala za kalcijum N-tipa efikasni u snižavanju odgovora na bol u modelu neuropatskog bola (Mattews E. A., Dickenson A. H. Pain (2001) 92: 235-246), u fazi II testa sa formalinom (Diaz A., Dickenson A.H. Pain (1997) 69: 93-100), kao i kod hiperalgezije indukovane upalom zgloba kolena (Nebe J., Vanegas H., Schaible H.G. Exp.Brain Res. (1998) 120: 61-69). Miševi koji su nosioci mutacija, preciznije miševi kod kojih nedostaju kanali za kalcijum N-tipa, takođe imaju smanjen odgovor na trajan bol što se ogleda u smanjenju bolnog odgovora tokom faze II testa sa formalinom (Kim C., Jun K., Lee T., Kim S. S., Mcenery M.W., Chin H., Kim H.L., Park J.M., Kim D.K., Jung S.J., Kim J., Shin H. S. Mol. Cell Neurosci. (2001) 18: 235-245; Hatakeyama S., Wakamori M, Ino M., Miyamoto N., Takahashi E., Yoshinaga T., Sawada K., Imoto K., Tanaka I., Yoshizawa T., Nishizawa Y., Mori Y., Nidome T., Shoji S. Neuroreport (2001) 12: 2423-2427), ali i smanjen odgovor na neuropatski bol što je pokazano smanjenjem mehaničke alodinije i termalne hiperalgezije u modelu neuropatskog bola usled povezivanja spinalnog nerva. Zanimljivo je da su navedni miševi takođe pokazali niži nivo anksioznosti u odnosu na životinje kod kojih nisu prisutne mutacije (Saegusa H., Kurihara T., Zong S., Kazuno A., Matsuda Y. Nonaka T., Han W., Toriyama H., Tanabe T., EMBO J. (2001) 20: 2349-2356). Uključenost kanala za kalcijum N-tipa u bol je dalje potvrđena i u kliničkim ispitivanjima, primenom zikonotida, peptida dobijenog iz otrova morskog puža Conus Magnus. Jedno do ograničenja terapijske primene ovog peptida predstavlja činjenica da se on kod ljudi mora primenjivati intratekalno (Bowersox S. S. i Luther R. Toxicon, (1998) 36: 1651-1658).
[0019] Sve navedene studije ukazuju da jedinjenja koja blokiraju kanale za natrijum i/ili kalcijum imaju visok terapijski potencijal u prevenciji, ublažavanju i lečenju širokog spektra patologija, uključujući tu neurološka, psihijatrijska, urogenitalna i gastrointestinalna oboljenja kod kojih je opisano da su prethodno navedeni mehanizmi sa patološkom ulogom.
[0020] Objavljeno je mnogo radova i patenata koji opisuju modulatore ili antagoniste kanala za natrijum i/ili kalcijum u tretmanu ili modulaciji mnoštva poremećaja, odnosno upotreba istih kao lokalnih anestetika, antimaničnih antidepresiva, agenasa za tretman unipolarne depresije, urinarne inkontinencije, proliva, inflamacije, epilepsije, neurodegenerativnih stanja, smrti nervnih ćelija, neuropatskog bola, migrene, akutne hiperalgezije i upale, bolesti bubrega, alergije, astme, bronhospazma, dismenoreje, spazma jednjaka, glaukoma, poremećaja urinarnog trakta, poremećaja motiliteta gastrointestinalnog trakta.
[0021] Neiscrpan popis navedenih radova i patenata/patentnih prijava koji opisuju blokatore kanala za natrijum i/ili kalcijum, kao i njihovu upotrebu, podrazumeva i reference koje slede:
C. Alchajmer opisuje u Adv. Exp. Med. Biol. 2002, 513, 161-181, kanale za natrijum i kalcijum kao ciljna mesta delovanja neuroprotektivnih supstanci.
Vanegas e Schaible (Pain 2000, 85, 9-18) raspravlja o efektima antagonista kanala za kalcijum na spinalne mehanizme bola, hiperalgezije i alodinije.
WO 03/057219 se odnosi na blokatore kanala za natrijum koji su od koristi kao agensi za tretman ili modulaciju poremećaja centralnog nervnog sistema poput epilepsije, neuropatskog bola, inflamatornog bola i bola asociranog sa inflamacijom.
WO99/14199 prijavljuje supstituisane 1,2,3,4,5,6-heksahidro-2,6-metano-3-benzazocin-10-ole kao potentne blokatore kanala za natrijum koji su od koristi u tretmanu nekoliko oboljenja poput moždanog udara, neurodegenerativnih poremećaja, Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti i kardiovaskularnih poremećaja.
WO01/74779 prijavljuje nove aminopiridinske blokatore kanala za natrijum i njihovu upotrebu kao antikonvulzanata, lokalnih anestarika, antiaritmika, kao i za tretman ili prevenciju neurodegenerativnih stanja poput amiotrofne lateralne skleroze (ALS), ali i za tretman ili prevenciju i akutnog i hroničnog bola i dijabetske neuropatije.
WO04/087125 prijavljuje derivate aminokiselina kao inhibitore kanala za natrijum kod sisara koji su od koristi u tretmanu hroničnog i aktunog bola, tinitusa, poremećaja creva, disfunkcije mokraćne bešike i kod demijelinizacionih bolesti.
SAD patentni spis br.5,051,403 se odnosi na postupak smanjenja neuronalnog oštećenja povezanog sa ishemijskim stanjima poput moždanog udara, i to primenom vezujućeg/inhibitornog omega-konotoksinskog peptide, naznačenog time, što peptid ispoljava specifičnu inhibitornu aktivnost struja voltažno-zavisnog kanala za kalcijum selektivno u neuronalnim tkivima.
SAD patentni spis br.5,587,454 se odnosi na preparate i postupke izazivanja analgezije, a pre svega za treman bola i neuropatskog bola.
SAD patentni spis br. 5,863,952 se odnosi na antagoniste kanala za kalcijum za tretman ishemijskog moždanog udara.
SAD patentni spis br. 6,011,035 se odnosi na blokatore kanala za kalcijum koji su od koristi u tremanu stanja poput moždanog udara i bola.
SAD patentni spis br. 6,117,841 se odnosi na blokatore kanala za kalcijum i njihovu upotrebu u tretmanu moždanog udara, cerebralne ishemije, bola, traume glave ili epilepsije.
SAD patentni spis br. 6,362,174 se odnosi na blokatore kanala za kalcijum N-tipa i tretman moždanog udara, cerebralne ishemije, bola, epilepsije i traume glave.
SAD patentni spis br. 6,420,383 i SAD patentni spis br. 6,472,530 se odnose na nove blokatore kanala za kalcijum, korisne za tretman i prevenciju niza poremećaja kao što su preosetljivost, alergija, astma, bronhospazam, dismenoreja, spazam jednjaka, glaukom, prevremeni porođaj, poremećaji urinarnog trakta, poremećaji motiliteta gastrointestinalnog trakta i kardiovaskularni poremećaji.
SAD patentni spis br.6,458,781 se odnosi na jedinjenja koji deluju na blokiranje kanala za kalcijum i njihovu upotrebu u tretmanu moždanog udara, cerebralne ishemije, bola, traume glave ili epilepsije.
SAD patentni spis br. 6,521,647 se odnosi na upotrebu blokatora kanala za kalcijum u tretmanu bolesti bubrega kod životinja, a posebno u tretmanu hronične bubrežne insuficijencije.
WO 97/10210 se odnosi na triciklične heterociklične derivate i njihovu upotrebu u terapiji, pre svega u vidu agonista kanala za kalcijum, i npr za tretman ishemije, a pre svega ishemijskog moždanog udara.
WO 03/018561 se odnosi na hinolinska jedinjenja kao antagoniste kanala za kalcijum N-tipa i na postupke upotrebe navednih jedinjenja u tremanu i prevenciji bola ili nocicepcije.
[0022] Monoamin oksidaza (MAO) je enzim prisutan u spoljašnjoj membrani mitohondrija neuronalnih i ne-neuronalnih ćelija. Postoje dvije izoforme MAO enzima: MAO-A i MAO-B. MAO enzimi su odgovorni za oksidativnu deaminaciju endogenih i ksenobiotskih amina i međusobno se razlikuju po drugačijem afinitetu za supstrat, specifičnom odgovoru na inhibitore, kao i po različitoj distribuciji u tkivima. Serotonin, noradrenalin i adrenalin su preferencijalni supstrati za MAO-A, dok je hlorgilin selektivni MAO-A inhibitor; MAO-B preferira β-feniletilamin kao supstrat, a inhibira ga selegilin. Dopamin, tiramin i triptamin se oksiduju delovanjem i MAO-A i MAO-B, dok se deaminacija 80% dopamina u mozgu čoveka odvija dejstvom MAO-B.
[0023] MAO inhibicija omogućava akumulaciju endogenih i egzogenih supstrata i stoga može doći, kada je MAO skoro potpuno inhibirana (> 90%), do izmenjene dinamike regularnih monoaminskih transmitera. MAO reguliše koncentracije najvažnijih neurotransmitera u mozgu poput noradrenalina, serotonina i dopamina koji su od značaja za emocije, anksioznosti i kretanje. Pretpostavlja se stoga da je MAO blisko uključena u različite psihijatrijske i neurološke poremećaje poput depresije, anksioznosti i Parkinsonove bolesti (PD).
[0024] Inhibitori MAO-A uglavnom se koriste u psihijatriji za tretman velike, refraktorne i atipične depresije, a upravo zbog njihove sposobnosti da povećavaju nivo serotonina i noradrenalina u mozgu. Nedavno, MAO-A inhibitori su upotrebljeni za tretman bolesnika sa anksioznim poremećajima poput socijalne fobije, poremećaja panike, post-traumatskog stresnog poremećaja i opsesivno-kompulzivnog poremećaja.
[0025] MAO-B inhibitori se u neurologiji upotrebljavaju uglavnom za tretman PD.
[0026] Postoje i skorašnji dokazi i interesi za ulogu MAO-B u drugim patološkim stanjima poput Alchajmerove bolesti (AD). Do sada nisu zabeženi nikakvi dokazi o uključenosti MAO-B u metabolazmu ko-transmitera poput holecistokinina, supstance P, somatostatina i neurotenzina koji su uključeni u modulaciju osećaja bola. Iz tog razloga, ne postoje naučni razlozi za primenu MAO-B inhibitora kod bolnih sindroma. Prijavljene su takođe i nuspojave tokom kliničke primene MAO inhibitora. Prva generacija neselektivnih i ireverzibilnih MAO inhibitora poput tranilcipromina i fenelzina su ispoljile ozbiljne štetne efekte, uključujući hepatotoksičnost, ortostatsku hipotenziju i, najvažnije, hipertenzivnu krizu koja se javljala nakon uzimanja hrane koja sadrži tiramin (Cooper AJ. - Tiramin i nepovratni inhibitori monoamin oksidaze u kliničkoj praksi - Br J Psych Suppl 1989: 38-45),
[0027] Kada se navedeni neselektivni i ireverzibilni inhibitori MAO upotrebljavaju mora se dakle primenjivati i strog dijetalni režim ishrane sa smanjenom količinom tiramina. Fluktuacije u pritisku dejsvom tiramina su se normalizovale nakon 4 nedelje od prestanka terapije tranilciprominom i nakon više od 11 nedelja po prestanku terapije fenelzinom.
[0028] Selegilin, ireverzibilni MAO-B inhibitor, posebno kada se koristi u kombinaciji s levodopom, može uzrokovati anoreksiju/mučninu, suva usta, diskineziju i ortostatsku hipotenziju kod bolesnika sa PD, pri čemu je ortostatska hipotenzija najproblematičnija (Volz H.P. i Gleiter C.H. - Inhibitori monoamin oksidaze. Perspektiva njihove upotrebe kod starijih osoba - Drugs Aging 13 (1998), str.341-355).
[0029] U monoterapiji, anoreksija/mučnina, povrede mišićnog i skeletnog sistema, kao i srčane aritmije su se češće javljale kod bolesnika koji su primali selegilin u odnosu na bolesnike koji su primali placebo. Osim ovih štetnih efekata, utvrđena je i povećana stopa višeg nivoa AST i ALT enzima u serumu.
[0030] Najčešće prijavljeni štetni efekti moklobemida, selektivnog i reverzibilnog MAO-A inhibitora, su poremećaji spavanja, povećanje anksioznosti, nemir i glavobolja.
[0031] Kombinacija selektivnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina (SSRI od engl. selective serotonin reuptake inhibitors) i moklobemida je ispoljila dobru efikasnost kod slučajeva refraktorne depresije, ali je ovakva terapija izazvala polemiku o tome da li su navedeni toksični efekti, poput serotoninskog sindroma, upravo rezultat primene navedene kombinacije (Baumann P. - Farmakokinetičko-farmakodinamički odnos selektivnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina. Clin Pharmacokinet 31 (1996), str. 444-469). Zbog srčanih aritmija i povećanog nivoa jetrenih enzima, elektrokardiogram i laboratorijske vrednosti bi trebale redovno da se proveravaju. Mnoge vrste fizioloških promena koje se javljaju sa starenjem utiču na farmakodinamiku i farmakokinetiku MAO inhibitora. Zaista, farmakokinetičke varijable kod starijih osoba su značajno različite od onih koje su ustavnovljene kod mlađih bolesnika. Navedene varijable, uključujući apsorpciju, distribuciju, metabolizam i izlučivanje, se moraju uzeti u obzir da bi se izbegli ili minimizovali određeni negativni efekti, kao i interakcije lekova. Stariji bolesnici su generalno podložniji neželjenim sporednim efektima od mlađih bolesnika, uključujući tu i neželjene reakcije na lekove. Hipertenzivna kriza se češće javlja kod starijih nego kod mlađih pacijenata obzirom da je kardiovaskularni sistem starijih osoba već ugrožen upravo zbog starosti.
[0032] Upotreba simpatomimetika u kombinaciji s MAO inhibitorima može takođe dovesti do porasta krvnog pritiska. Pored toga, poredeći sa placebo efektom, primena fenelzina je bila praćena znatno većom incidencom pospanosti, tremora, diskinezije, dijareje, poteškoća s mokrenjem, ortostatskog efekta i štetnih dermatoloških efekata. Zanimljivo je napomenuti da se kod starijih osoba tokom tretmana moklobemidom javljala glavobolja s većom učestalošću nego kod mlađih pacijenata (Volz H.P. i Gleiter C.H. - Inhibitori monoamin oksidaze. Perspektiva njihove uporabe kod starijih osoba - Drugs Aging 13 (1998), str.341-355).
[0033] MAO inhibitori (prioritetno MAO-A, ali i neselektivni MAO-A/MAO-B inhibitori) se ponekad propisuju za depresiju. Zbog potencijalnog rizika od samoubistva, štetnih reakcija na lek i toksičnosti usled predoziranja, važno je razmotriti sve faktore rizika prilikom izbora antidepresiva. Dodatno, izgleda da se, kada se MAO inhibitori koriste u visokoj dozi, značajno povećavaju štetni kardiovaskularni efekti; obzirom da se MAO selektivnost gubi pri upotrebi ovako visokih doza, tiramin može izazvati potencijalno opasne hipertenzivne reakcije. Akutno predoziranje MAO inhibitorima uzrokuje agitaciju, halucinacije, hiperpireksiju, hiper-refleksiju i konvulzije. Abnormalni krvni pritisak takođe predstavlja znak toksičnosti i tada je neophodno ispiranje želuca i održavanje kardiopulmonalne funkcije. Predoziranje tradicionalnim neselektivnim i ireverzibilnim MAO inhibitorima je prilično opasno i ponekada smrtnosno (Yamada i Richelson, 1996. Farmakologija antidepresiva kod starih osoba. U: David JR, Snyder L., urednici. Priručnik farmakologije starenja. Boca Raton: CRC Press 1996).
[0034] U tretmanu tegoba, naznačenih time, što mehanizam(mehanizmi) koji uključuje(u) kanale za natrijum i kalcijum imaju patološku ulogu, inhibicija MAO enzima je bez dobrobiti. Štaviše, štetni efekti MAO inhibitora mogu nametnuti najmanje dva tipa negativnih ograničenja:
1)<Režim ishrane: konzumiranje hrane sa visokim sadržajem tiramina može prouzrokovati ozbiljan, čak i životno>ugrožavajući porast sistolinog krvnog pritisaka (tzv. "efekat sira").
2)<Farmakološki tretman: na primer, bol se često tretira kombinacijom lekova poput opioidnih derivata i tricikličnih>antidepresiva. Primenom i MAO inhibitora, ovakva kombinacija postaje opasna i moguće je da dođe do pojave serotoninergičkog sindroma (uznemirenost, tremori, halucinacije, hipertermija i aritmije).
[0035] Dakle, ne može se očekivati da eliminacija ili značajno smanjenje aktivnosti MAO inhibitora u lekovima koji deluju kao modulatori kanala za natrijum i/ili kalcijum, a koji su korisni u prevenciji, ublažavanju i lečenju širokog opsega patologija u kojima su navedeni mehanizami sa patološkom ulogom, uključujući tu neurološka, psihijatrijska, inflamatorna, urogenitalna i gastrointestinalna oboljenja, dovede do značajnog terapijskog poboljšanja u odnosu na jedinjenja slične efikasnosti, ali sa prethodno navedenim štetnim efektima.
[0036] Uzimajući u obzir navedene činjenice koje su utvrđene za MAO inhibitore, a pre svega zbog nedostatka bilo kakvih dokaza o ulozi MAO-B u patološkim tegobama poput bola, migrene, inflamatornih, urogenitalnih i gastrointestinalnih oboljenja, može se pretpostaviti da inhibicija MAO-B ne bi trebala biti suštinski bitna karakteristika jedinjenja koja su indikovana za pretnodno navedene patologije, čime bi se mogli izbeći mogući štetni efekti tokom hroničnih i/ili dugotrajnih tretmana.
[0037] Pogodno rešenje za prethodno navedeni problem bi mogao podrazumevati davanje lekova koji su "selektivno aktivni kao modulatori kanala za natrijum i/ili kalcijum" ili su korisni za "selektivan tretman" tegoba, poremećaja ili oboljenja kod kojih patološki mehanizam podrazumeva učešće kanala za natrijum i/ili kalcijum. Namena lekova koji, kada se primene kod pacijenta kome je to potrebno u količinama koje su efikasne u tretmanu prethodno navedenih tegoba u kojima su prethodno navedeni mehanizami sa patološkom ulogom, jeste da ne ispoljavaju nikakvu MAO inhibitornu aktivnost ili da ispoljavaju značajno smanjenu MAO inhibitornu aktivnost, a što bi omogućilo izostanak štetnih efekata usled akumulacije endogenih i egzogenih monoaminskih transmitera.
[0038] Primarni cilj predmetnog pronalaska je upotreba derivata 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamida za proizvodnju medikamenta koji su aktivni kao modulatori kanala za natrijum i/ili kalcijum za tretman patologija u kojima su navedeni mehanizmi sa patološkom ulogom poput neuroloških, kognitivnih, psihijatrijskih, inflamatornih, urogenitalnih ili gastrointestinalnih poremećaja, pri čemu su navedeni lekovi suštinski oslobođeni inhibitorne aktivnosti MAO i stoga su sa smanjenim potencijalom za neželjene sporedne efekte. Shodno navedenom, glavni cilj predmetnog pronalaska je da se obezbede derivati 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamida za upotrebu u vidu medikamenata za tretman prethodno opisanih patologija, naznačeni time, što su navedeni lekovi u osnovi oslobođeni bilo kakve MAO inhibitorne aktivnosti ili imaju značajno smanjenu aktivnost inhibicije MAO i stoga smanjen potencijal pojave neželjenih sporednih efekata. Navedena upotreba obezbeđuje i mogućnost selektivnog dejstva i prevencije, ublažavanja i/ili tretmana navedenih patoloških tegoba, pre svega kod bolesnika koji su posebno osetljivi na neželjene sporedne efekte usled MAO inhibitorne aktivnosti, a kao što je to predhodno opisano.
[0039] Prethodno navedeni neurološki poremećaji uključuju bol i hroničnog i akutnog tipa, posebno neuropatski i inflamatorni bol, glavobolje, migrene, spazme; neurodegenerativne poremećaje poput Alchajmerove bolesti, Parkinsonove bolesti, epilepsije, sindroma nemirnih nogu, moždanog udara i cerebralne ishemije; kognitivnih poremećaja kao što su blage kognitivne smetnje (MCI od engl. mild cognitive impairment) i psihijatrijski poremećaji, uključujući tu i depresiju, bipolarne poremećaje, maniju, šizofreniju, psihoze, anksioznost i zavisnost. Prethodno navedeni inflamatorni poremećaji podrazumevaju i upalne procese koji utiču na sve sisteme u organizmu, npr upalne procese mišićnoskeletnog sistema, artritična stanja, poremećaje koji se javljaju na koži i srodnim tkivima; poremećaje respiratornog sistema, kao i poremećaje imunskog i endokrinog sistema. Detaljnija objašnjenja prethodno navedenih patologija navedena su u tekstu koji sledi.
Opis pronalaska
[0040] Cilj predmetne prijave je nova klasa derivata 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamida sa visokom potentnošću modulacije kanala za natrijum i/ili kalcijum koji su suštinski oslobođeni bilo kakve MAO inhibitorne aktivnosti ili su sa značajno smanjenom MAO inhibitornom aktivnošću i koje stoga karakteriše potencijalno redukovana pojava sporednih efekata u prevenciji, ublažavanju i lečenju širokog spektra patologija, uključujući, ali ne ograničavajući se na, neurološka, kognitivna, psihijatrijska, inflamatorna, urogenitalna i gastrointestinalna oboljenja za koja je opisano da su prethodno navedani mehanizmi sa patološkom ulogom.
[0041] U opisu i patentnim zahtevima predmetnog pronalaska, izraz "modulator(i) kanala za natrijum i/ili kalcijum" označava jedinjenje(a) koje(a) mogu blokirati struje natrijuma i/ili kalcijuma na voltažno-zavisan način.
[0042] Stoga, predmet ovog pronalaska je jedinjenje opšte formule (I)
naznačeno time, što:
X označava -O-, -S- ili -SO2- grupu;
Y označava vodonik, OH ili O(C1-C4)alkil grupu;
Z označava =O ili =S;
R označava (C3-C10)alkil; ω-trifluoro(C3-C10)alkil grupu;
R1i R nezavisno označavaju vodonik, hidroksi, (C1-C8)alkoksi, (C1-C8)alkiltio, halogenu, trifluorometil ili 2,2,2-trifluoroetil grupu; ili se jedan od R1i R2nalazi u orto položaju u odnosu na R-X- i zajedno sa istim R-X- obrazuje
grupu u kojoj R0označava (C2-C9)alkil grupu;
R3i R’3nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu;
R4i R5nezavisno označavaju vodonik, (C1-C4)alkil grupu; ili R4označava vodonik, dok je R5grupa izabrana iz grupe koju čine -CH2-OH, - CH2-O-(C1-C6)alkil, -CH(CH3)-OH, -(CH2)2-S-CH3, benzil i 4-hidroksibenzil grupa; ili R4i R5, zajedno sa susednim atomom ugljenika, obrazuju (C3-C6)cikloalkilni ostatak;
R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C6)alkil grupu; ili zajedno sa susednim atomom azota obrazuju 5-6-člani monociklički zasićeni heterociklični prsten koji opciono može sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O-, -S- i -NR8- grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C6)alkil grupu;
uz uslov da, kada X označava -S- ili -SO2-, Y nije OH ili O(C1-C4)alkil grupa;
ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0043] Iako pojedina jedinjenja specifično opisana predmetnom prijavom odgovaraju opštoj formuli prijavljenoj u Patentnom spisu WO 90/14334, nijedno od navedenih jedinjenja nije specifično prijavljeno navedenom prijavom. Nijedno od jedinjenja definisano opštom formulom (I) predmetne prijave takođe nije specifično opisano ili pomenuto u WO 90/14334. Zapravo, u prethodno navedenom dokumentu je identifikovano samo nekoliko derivata 2-(2feniletilamino)alkanamida koji, međutim, sadrže benziloksi, benzilamino ili benzil supstituent na položaju 4 fenilnog raikala. Štaviše, izabrane klase jedinjenja formule (I) predmetne prijave koja nisu opšte formule koja je prijavljena u WO 90/14334 su sledeće:
a) jedinjenja u kojima X označava -SO2- grupu;
b) jedinjenja u kojima Y označava OH ili O(C1-C4)alkil grupu;
c) jedinjenja u kojima Z označava =S;
d) jedinjenja u kojima R označava (C9-C10)alkil ili ω-trifluoro(C3-C10)alkil grupu;
e) jedinjenja u kojima su R1i/ili R2različiti od vodonika;
f) jedinjenja u kojima su oba R3i R’3različiti od vodonika;
g) jedinjenja u kojima su oba R4i R5različiti od vodonika, ali i zajedno sa susednim atomom ugljenika ne obrazuju (C3-C6)cikloalkilni ostatak;
h) jedinjenja u kojima R6i R7, zajedno sa susednim atomom azota, obrazuju monociklički 5-6-člani zasićeni heterociklični ostatak koji može sadržavati i jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O-, -S- i -NR8-grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C6)alkil grupu.
[0044] Pojam "alkil" upotrebljen u tekstu opisa i patentnim zahtevima predmetnog pronalaska, a ukoliko nije drugačije naznačeno, označava prav ili razgranati alkilni radikal; primeri navedenih radikala ili struktura uključuju: metil, etil, propil, izopropil, butil, izobutil, pentil, izopentil, heksil, heptil, oktil, nonil, decil radikala i njihove izomere.
Pojam "alkoksi", upotrebljen u tekstu opisa i patentnim zahtevima predmetnog pronalaska, označava prav ili razgranati alkoksi radikal; primeri navedenih radikala uključuju: metoksi, etoksi, propoksi, izopropoksi, butoksi, izobutoksi, tercbutoksi, pentiloksi, izopentiloksi, heksiloksi, izoheksiloksi, heptiloksi, oktiloksi radikale i njihove izomere.
Pojam "(C3-C6)cikloalkil" označava cikloalifatski prsten; primeri navedenih prstenova uključuju: ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil radikale.
Pojam "halogena grupa" označava radikal atoma halogena poput fluora, hlora, broma i joda. Primeri monocikličkih 5- ili 6-članih zasićenih heterocikličnih radikala koji opciono mogu sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O-, -S- ili -NR8- radikal u kome R8označava vodonik ili (C1-C6)alkil grupu su, na primer, pirolidin, pirazolidin, imidazolidin, oksazolidin, izoksazolidin, piperidin, piperazin, N-metilpiperazin, morfolin i tiomorfolin.
Kada jedinjenja predmetnog pronalaska sadrže jedan ili više asimetričnih ugljikovih atoma, odnosno kada jedinjenja mogu biti prisutna u vidu pojedinačnih optičkih izomera ili njihovih smeša, predmetni pronalazak obuhvata i moguće optičke izomere ili njihove smeše, a područje prijave obuhvata sve moguće pojedinačne optičke izomere (npr enantiomere, dijastereoizomere) navedenih jedinjenja u izolovanom obliku, kao i njihove smeše u bilo kojoj od proporcija, uključujući i racemske smeše.
Primeri farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja formule (I) označavaju soli sa organskim i anorganskim kiselinama poput hlorovodonične, bromovodonične, jodovodonične, azotne, sumporne, fosforne, sirćetne, propionske, tartarne, fumarne, limunske, benzojeve, sukcinatne, cinamičke, bademove, salicilne, glikolne, mlečne, oksalne, malične, maleinske, malonske, fumarne, vinske, p-toluensulfonske, metansulfonske, glutarne kiselina i drugih kiselina koje se, na primer, mogu naći navedene u publikaciji: P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth "Priručnik farmaceutskih soli: svojstva, selekcija i upotreba", WILEY-VCH, 2002.
Jedinjenja formule (I) su aktivna kao modulatori kanala za natrijum i/ili kalcijum i stoga su od koristi u prevenciji, ublažavanju i lečenju širokog spektra patologija, uključujući, ali ne ograničavajući se na, neurološka, kognitivna, psihijatrijska, inflamatorna, urološka i gastrointestinalna oboljenja za koja je opisano da su prethodno navedeni mehanizmi sa patološkom ulogom.
[0045] Prioritetna jedinjenja formule (I) predstavljaju jedinjenja, naznačena time, što:
X označava -O-, -S-;
Y označava vodonik, OH ili O(C1-C3)alkil grupu;
Z označava =O ili =S;
R označava (C4-C7)alkil ili ω-trifluoro(C4-C6)alkil grupu;
R1i R2nezavisno označavaju vodonik, (C1-C4)alkoksi, halogenu, trifluorometil ili 2,2,2-trifluoroetil grupu; ili se jedan od R1i R2nalazi u orto položaju u odnosu na R-X- grupu i sa istim R-X- radikalom obrazuje
grupu
R3i R’3označavaju radikale, naznačene time, što R0označava (C2-C5)alkil grupu; ili isti nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu;
R4i R5nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; ili R4označava vodonik, a R5označava grupu izabranu iz grupe koju čine -CH2-OH, -CH2O-(C1-C3)alkil, -(CH2)2-S-CH3, benzil i 4-hidroksibenzil grupa;
R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; ili zajedno sa susednim atomom azota obrazuju 5-6-lani monociklički zasićeni heterociklilni radikal koji opciono može sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O- i -NR8- grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C3)alkil grupu;
uz uslov da, kada X označava -S-, Y nije OH ili O(C1-C3)alkil grupa;
ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i farmaceutski prihvatljive soli navedenog jedinjenja.
[0046] Više prioritetna jedinjenja formule (I) predstavljaju jedinjenja, naznačena time, što:
X označava -O-, -S-;
Y označava vodonik ili O(C1-C3)alkil grupu;
Z označava =O ili =S;
R označava (C4-C7)alkil ili ω-trifluoro(C4-C6)alkil grupu;
R1i R2nezavisno označavaju vodonik, (C1-C4)alkoksi, fluoro, hloro, trifluorometil ili 2,2,2-trifluoroetil grupu; ili se jedan od R1i R2nalazi u orto položaju u odnosu na R-X- grupu i sa istim R-X- obrazuje
grupu u kojoj R0označava (C3-C4)alkil grupu;
R3i R’3nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu;
R4i R5nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; ili R4označava vodonik, dok je R5izabran iz grupe koju čine -CH2-OH, -CH2O-(C1-C3)alkil, benzil i 4-hidroksibenzilna grupa;
R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu; ili zajedno sa susednim atomom azota obrazuju 5-6-člani monociklički zasićeni heterociklni radikal, koji opciono može sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O- i -NR8- grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C3)alkil grupu;
uz uslov da, kada X označava -S-, Y nije O(C1-C3)alkil grupa;
ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i farmaceutski prihvatljive soli navedenog jedinjenja.
[0047] Još više prioritetna jedinjenja formule (I) su jedinjenja, naznačena time, što:
X označava -O-;
Y označava vodonik;
Z označava =O;
R označava (C4-C7)alkil grupu;
R1i R2nezavisno označavaju vodonik ili halogenu, prioritetno fluoro grupu;
R3, R’3, R4i R5označavaju vodonik;
R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu;
[0048] ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može biti prisutno kao pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili u vidu smeše izomera u bilo kojoj proporciji, kao i farmaceutski prihvatljive soli navedenog jedinjenja;
[0049] Najprioritetnije, jedinjene formule (I) predmetnog pronalaska su izbrana iz grupe koju čine:
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-acetamid
2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-acetamid
2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-acetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N-metilacetamid
2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-N-metilacetamid
2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-N-metilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butilsulfonilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-(N'-hidroksi)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-(N'-metoksi)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-(N'-propoksi)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetil-tioacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-2-metilpropilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-{2-[3-(4,4,4-trifluorbutoksi)fenil]-etilamino}-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butiltiofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksi-2-hlorfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksi-2-fluorofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksi-4-metoksi-fenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dietilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dipropilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dibutilacetamid
2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-1-pirolidin-1-il-etan-1-on
2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-1-pirolidin-1-il-etan-1-on
2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-1-pirolidin-1-il-etan-1-on
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-3-hidroksi-N,N-dimetilpropanamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-3-metoksi-N,N-dimetilpropanamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-3-propoksi-N,N-dimetilpropanamid
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid
2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid
2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid
(S)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-propanamid
(S)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N-metilpropanamid
(S)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid
(R)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-propanamid
(R)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N-metilpropanamid
(R)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid
2-[2-(3-butoksi-2-trifluormetilfenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksi-4-trifluormetil-fenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid
2-[2-(3-butoksi-5-trifluormetilfenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid
ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanom obliku ili u vidu smeše izomera u bilo kojoj proporciji, kao i farmaceutski prihvatljive soli navedenih jedinjenja, prioritetno soli s hlorovodičnom ili metansulfonskom kiselinom.
[0050] Jedinjenja predmetnog pronalaska se pripremaju praćenjem uobičajenih procedura koje su detaljnije opisane u eksperimentalnom delu predmetnog pronalaska.
Preciznije, većina jedinjenja formule (I), u kojima X označava -O-, a Y vodonik, a koja su predmet ovog pronalaska, se priprema praćenjem procesa sinteze koji je prikazan u tekstu koji sledi:
Šema I:
naznačena time, što:
R, R1, R2, R3, R’3, R4, R5, R6i R7su sa istim značenjima koja su prethodno definisana za jedinjenja opšte formule (I), dok Ph označava fenilni radikal, a boc terc-butoksikarbonilnu grupu. EWG označava "grupu koja privlači elektron", kao što je, na primer, halogena ili meziloksi ili toziloksi ili trifluorometansulfonatna grupa. Lawesson-ov reagens označava 2,4-bis(4-metoksifenil)-1,3,2,4-ditiafosfetan-2,4-disulfid (Merck Index, 13. izdanje, 5408, stranica 966). Prema prioritetnom primeru primene predmetnog pronalaska, reakcija alkilacije sa R-EWG se izvodi u prisustvu baze, a poželjnije je da je navedena baza izabrana iz grupe koju čine K2CO3, trietilamin i diizopropiletilamin.
[0052] Alternativna metoda za pripremu jedinjenja formule (I) u kome su R, R1, R2, R3, R’3, R4, R5, R6i R7sa istim značenjem kao u formuli (I), a X označava -O-, dok Y označava vodonik, podrazumeva izlaganje aldehida formule
reduktivnoj alkilaciji sa α-aminoalkanamidom formule
[0053] Redukciono sredstvo se može odabrati iz grupe koju čine NaBH4, NaBH3CN i (polistirilmetil)-trimetilamonijum cijanoborohidrid.
Dobijena 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamidna jedinjenja formule (I), naznačena time, što Z označava =O se mogu prevesti u odgovarajuća jedinjenja u kojima Z označava =S, i to dodavanjem zaštitne grupe na -NH- grupu upotrebom boc2O, odnosno reakcijom N-boc derivata sa zaštitnom grupom sa Lawesson-ovim reagensom i potom uklanjanjem zaštitne grupe upotrebom HCl kao što je to pokazano na Šemi I.
[0054] Dalja alternativa navedenog postupka podrazumeva alkilovanje amina formule
reakcijom sa estrom alkanoične kiseline formule
u prisustvu baze (npr trietilamina) i rezultujućih derivata alkanoičnog estra formule
koji dalje reaguje sa aminom formule HNR6R7, opciono u prisustvu amidacionog katalizatora (npr trimetilaluminijuma), a da bi se dobilo jedinjenje formule (I) u kome Y označava vodonik. Jedinjenja formule (I) u kojima R5označava vodonik, opciono se mogu prevesti u odgovarajuća jedinjenja formule (I), naznačena time, što R5označava (C1-C4)alkil, -CH2OH, -CH2O-(C1-C6)alkil, -CH (CH3)-OH, -(CH2)2-S-CH3, benzil ili 4-hidroksibenzilnu grupu, i to podvrgavanjem N-zaštićenog derivata prethodno navedenog jedinjenja formule (I) proceduri C-alkiliranja sa alkilirajućim agensom formule EWGR5, naznačenim time, što EWG ima isto značenje kao što je to prethodno navedeno, dok R5predstavlja jednu od prethodno navedenih grupa. U navedenom slučaju, kada je potrebno da krajnje jedinjenje bude jedinjenje formule (I) u kome R5sadrži hidroksilnu grupu, reagens EWGR5se obično upotrebljava kada je odgovarajuća hidroksilna grupa zaštićena, npr acetilacijom. Sve zaštitne grupe se potom uklanjaju iz dobijenih C-alkiliranih jedinjenja. Ukoliko je to poželjno, kada se jedinjenje formule (I) dobije u obliku slobodne baze, moguće je ovo jedinjenje prevesti u odgovarajuću so (npr sa hlorovodičnom kiselinom) uobičajenim postupcima.
Jedinjenja formule (I), naznačena time, što X označava -S- ili -SO2-, a Y vodonik, pripremaju se praćenjem procesa sinteze koji je prikazan na Šemi II koja sledi:
naznačenoj time, što
R, R1, R2, R3, R’3, R4, R5, R6i R7imaju ista značenja kao što je to prehodno definisano za jedinjenja opšte formule (I), boc označava terc-butoksikarbonilnu grupu, EWG ima isto značenje kao što je prethodno navedeno, dok izraz "okson" označava kalijum peroksimonosulfat. Lawesson-ov reagens označava 2,4-bis(4-metoksifenil)-1,3,2,4-ditiafosfetan-2,4-disulfid.
[0055] Jedinjenja formule (I), naznačena time, što X označava -O- i Y označava OH ili O(C1-C4)alkil grupu, se pripremaju praćenjem procesa sinteze koji je prikazan na Šemi III koja sledi:
naznačenoj time, što
R, R1, R2, R3, R’3, R4, R5, R6i R7imaju ista značenja kao što je to prehodno definisano za jedinjenja opšte formule (I), Ph označava fenilnu grupu, a EWG ima isto značenje kao što je prethodno navedeno. Dress-Martin-ov perjodinan, pogledati: Dess, D.B.; Martin, J.C. J.Am.Chem.Soc., 1991, 113, 7277.
[0056] Intermedijeri upotrebljeni u posupcima prikazanim na Šemama I, II i III su komercijalno dostupni ili se pripremaju od komercijalno dostupnih jedinjenja praćenjem dobro poznatih postupaka.
[0057] Procena potrebe za dodatnom zaštitnom grupom, kao i odabir odgovarajućeg protektivnog agensa, a u zavisnosti od tipa reakcije koja će se sprovesti u pripremi jedinjenja predmentog pronalaska i tipa funkcionalne grupe koju je potrebno zaštiti, uobičajeno su dobro poznate stručnjacima iz oblasti sinteze.
[0058] Uklanjanje dodatnih zaštitnih grupa se sprovodi primenom konvencionalnih tehnika.
[0059] Za opštu upotrebu žaštitnih grupa u organskoj hemiji pogledati: Theodora W. Greene i Peter G.M. Wuts "Zaštitne grupe u organskoj sintezi", John Wiley & Sons, Inc., II izdanje, 1991.
[0060] Priprema soli jedinjenja formule (I) se sprovodi praćenjem poznatih postupaka sinteze.
[0061] Za dobijanje pojedinačnih izomera jedinjenja formule (I) navedeno jedinjenje se može dobiti putem sterički kontrolisane sinteze ili pak upotrebom reagenasa sa odgovarajućom hiralnošću, ili pak razdvajanjem željenih izomera iz njihove enantiomerne smeše i upotrebom konvencionalnih procedura.
Farmakologija
[0062] Jedinjenja predmetnog pronalaska se mogu upotrebiti za proizvodnju medikamenta koji je aktivan kao modulator kanala za natrijum i/ili kalcijum za tretman poremećaja uzrokovanih poremećajima voltažno-zavisnih kanala za natrijum i/ili kalcijum. Ovakva jedinjenja predstavljaju voltažno-zavisne blokatore kanala za natrijum i/ili kalcijum sa potentnošću u niskom mikromolarnom opsegu što je utvrđeno blokadom influksa natrijuma i/ili kalcijuma (analize sa fluorescentnim bojama) i voltažno-zavisnom blokadom odgovarajućih struja (tehnika nametnute voltaže na deliću membrane - engl. patch clamp).
[0063] Aktivnost jedinjenja koja predstavljaju reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska je upoređivana sa aktivnošću jedinjenja koja su poznata iz patentnog spisa WO 90/14334, a koja su zapravo bila klinički razvijana za terapijsku primenu, poput "ralfinamida", (S)-(+)-2-[4-(2-fluorobenziloksi)-benzilamino]-propanamida, i/ili "safinamida", (S)-(+)-2-[4-(3-fluorbenziloksi)-benzilamino]propanamida.
Safinamid (NW-1015, FCE-26743A, PNU-151774E) predstavlja blokator kanala za natrijum, modulator kanala za kalcijum, inhibitor monoamino oksidaze B (MAO-B), inhibitor otpuštanja glutamata i modulator metabolizma dopamina. Safinamid je koristan u tretmanu poremećaja CNS-a, pre svega u tremanu epilepsije, Parkinsonove bolesti, Alchajmerove bolesti, sindroma nemirnih nogu (WO 90/14334, WO 04/089353, WO 05/102300) i kognitivnih poremećaja (Patentna prijava br. EP 06/012352.8).
[0064] Ralfinamid (NW-1029, FCE-26742A, PNU-0154339E) je inhibitor kanala za natrijum i kalcijum i modulator NMDA receptora koristan u tretmanu bolnih stanja, uključujući neuropatski i inflamatorni bol i akutnog i hroničnog tipa, migrene, kao i u tretmanu depresije, kardiovaskularnnih, inflamatornih, urogenitalnih, metaboličkih i gastrointestinalnih poremećaja (WO 99/35125, WO 03/020273, WO 04/062655, WO 05/018627, WO 05/070405, WO 06/02705).
[0065] Modulatorna aktivnost derivata 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamida na kanale za natrijum je određena upotrebom eseja koji su se zasnivali na upotrebi fluorescentnih boja u ND7/23 ćelijskoj liniji (Tabela 1) i putem elektrofiziološke patch-clamp tehnike u kortikalnim neuronima pacova (Tabela 3) i u ND7/23 ćelijskoj liniji (Tabela 4).
Modulatorna aktivnost derivata 2-[2-(fenil)etilamino]alkanamida na kanale za kalcijum je određena upotrebom eseja influksa kalcijuma koji se zasniva na upotrebi fluorescentnih boja (Tabela 2) u AtT20 ćelijskoj liniji.
Aktivnost inhibicije MAO-B za prethodno navedena jedinjenja je određena upotrebom radioenzimatskog testa (Tabela 5) u mitohondrijama mozga pacova.
In vivo analgetska aktivnost prethodno navedenih jedinjenja je procenjena upotrebom "formalinskog testa" kod miševa (Tabela 6) i u "modelu neuropatskog bola usled povezivanja spinalnog nerva" (SNL od engl. spinal nerve ligation model of neuropathic pain) kod pacova (Slika 1). Aktivnost jedinjenja na inflamatorni bol je određena upotrebom "modela sa kompletnim Freundovim adjuvansom" (CFA od engl. complete Freund’s adjuvant) kod pacova.
Aktivnost jedinjenja na visceralni bol je određena upotrebom "modela visceralnog bola indukovanog sirćetnom kiselinom" kod miševa (Slika 2).
Antikonvulzivna aktivnost je određena upotrebom "testa maksimalnog elektrošoka" kod miševa (Tabela 7 i Tabela 8). Antimanična aktivnost je određena upotrebom modela "amfetaminom i hlordiazepoksidom indukovane hiperlokomocije" kod miševa (Slika 3) i "paradoksalnog uskraćivanja sna" kod pacova.
Antiamnezijska aktivnost je procenjena upotrebom " Moriss-ovog testa vodenog lavirinta" u kome je amnezija izazivana upotrebom skopolamina kod pacova, kao i "testom prepoznavanja novog objekta" kod pacova.
Da bi se ispitala antidepresivna aktivnost jedinjenja, koriš
en je "test suspenzije repa" kod miševa.
Anti-šizofrena aktivnost je procijenjena upotrebom "testa kognitivnih poremećaja u šizofreniji" i "testa prepulsne inhibicije grčenja (PPI)" kod miševa i pacova (Slika 4). Test "senzitizacije kokainom-indukovanog ponašanja" kod pacova je upotrebljen za procenu aktivnosti jedinjenja na zavisničko ponašanje.
[0066] "Akutna iritacija mokraćne bešike sirćetnom kiselinom kod pacova" i "umerena iritacija mokraćne bešike ciklofosfamidom kod pacova" su upotrebljavani kao modeli uroloških oboljenja. Antimigrenozna aktivnost je određena upotrebom "testa migrene" kod pacova.
[0067] U elektrofiziološkim patch-clamp studijama, navedene supstance su takođe ispoljavale "zavisnost od vrste i frekvence upotrebe", odnosno poboljšanje blokiranja tokom visokofrekventne stimulacije ukoliko je prisutno veliko nakupljanje kanala u inaktivnom stanju, a kao što je to slučaj u neuronalnim patološkim stanjima. Funkcionalno, blokiranje zavisno od tipa upotrebe je dovelo do depresije neuronske aktivnosti pri visokoj frekvenci akcionih potencijala, kao i do nižeg kapaciteta blokiranja pri normalnoj frekvenci akcionih potencijala, što dalje sugeriše da jedinjenja predmetnog pronalaska mogu selektivno smanjivati abnormalnu aktivnost kanala za natrijum i/ili kalcijum ostavljajući fiziološku aktivnost nepromenjenom, a zapravo imajući ogranićan efekat na depresiju CNS-a (W. A. Catterall, Trends Pharmacol. Sci. (1987) 8: 57-65).
Jedno od najreprezentativnijih jedinjenja predmetnog pronalaska je 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid (NW-3509) za koji je pokazano da je veoma aktivano u skoro svim eksperimentalnim in vitro i in vivo modelima.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su aktivna in vivo nakon oralne, intraperitonealne ili intravenske primene u opsegu od 0,1 do 100 mg/kg, a u različitim životinjskim modelima koji su detaljnije opisani u tekstu specifikacije koji sledi.
Imajući u vdu prethodno opisane mehanizme delovanja, jedinjenja predmetnog pronalaska su korisna u prevenciji ili tretmanu neuropatskog bola. Sindromi neuropatskog bola podrazumevaju, ali nisu ograničeni na: dijabetsku neuropatiju; išijas; nespecifičan bol donjeg dela leđa; bol kod multiple skleroze; fibromijalgiju; neuropatiju povezanu sa infekcijom HIVa; neuralgiju poput postherpetične neuralgije i trigeminalne neuralgije, Mortonovu neuralgiju, kauzalgiju; i bolove koji se javljaju usled fizičke traume, amputacije, kod fantomskog uda, kancera, usled delovanja toksina ili kod hroničnih upalnih stanja; centralni bol poput bola koji se može javiti kod talamičkog sindroma, ali i mešoviti centralni i periferni oblik bola poput sindroma kompleksnog regionalnog bola (CRPS od engl. complex regional pain syndromes) koji se naziva i refleksna simpatička distrofija.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su takođe od koristi za tretman hroničnog bola. Hroničan bol podrazumeva, ali nije ograničena na, hroničan bol uzrokovan inflamacijom ili stanjima srodnim inflamatornim, osteoartritisom, reumatoidnim artritisom, akutnom povredom ili traumom, bolom u gornjem ili donjem delu leđa (koji se može javiti usled sistemskih, regionalnih ili primarnih bolesti kičme poput radikulopatije), bolom kostiju (usled osteoartritisa, osteoporoze, metastaza u kostima ili iz nepoznatih razloga), bolom u pelvisu, bolom asociranim sa povredom kičmene moždine, kardijačnim bolom u grudima, nekardijačnim bolom u grudima, centralnim bolom nakon infarkta, miofacijalnim bolom, bolom kod srpaste anemije, bolom koji prati kancer, Fabrijevu bolest, bolom asociranim sa SIDA-om, gerijatrijskim bolom ili bolom koji je uzrokovan glavoboljom, sindromom bola temporomandibularnog zgloba, bolom usled gihta, fibroze ili sindroma gornje torakalne aperture, a pre svega reumatoidnim artritisom i osteoartritisom.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su korisna i u tretmanu akutnog bola uzrokovanog akutnom povredom, bolešću, sportsko-medicinskim povredama, sindromom karpalnog tunela, čvorugama, mišićno-koštanim uganućima i istegnućima, istezanjem tetiva, sindromom cervikobrahijalnog bola, dispepsijom, čirom želuca, čirom duodenuma, dismenorejom, endometriozom ili hirurškim zahvatom (poput operacija na otvorenom srca ili ugrađivanja bajpasa), ali i kod postoperativnog bola, bola usled kamenčica u bubrezima, bola u žuči, bola usled kamenčica u žuči, bola u grudima ili zubnog bola.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su korisna i u tretmanu glavobolja, migrene, glavobolje tipa napetosti, transformisane migrene ili glavobolje koja se razvija, klasterne glavobolje, kao i sekundarnih glavobolja uzrokovanih poremećajima poput infekcije, metabolačkih poremećaja ili drugih sistemskih bolesti, ali i drugih akutnih glavobolja i paroksizmalnih hemikranija koje se javljaju usled pogoršanja prethodno navedenih primarnih i sekundarnih glavobolja.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su takođe korisna za tretman neuroloških stanja poput epilepsije, uključujući tu i jednostavan parcijalni epileptički napad, kompleksan parcijalni epileptički napad, sekundarni generalizovani epileptički absens napad, mioklonični napad, klonični napad, tonični napad, tonično-klonični napad i tonični napad.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su korisna i za tretman neurodegenerativnih poremećaja različitog porekla, uključujući Alchajmerovu bolest, Parkinsonovu bolest i ostala dementna stanja poput demencije sa Levijevim telima, frontotemporalne demencije i taupatija; korisna su i za tretman amiotrofične lateralne skleroze i drugih sindroma sličnih Parkinsonovoj bolesti; drugih spino-cerebralnih degeneracija i Charcot-Marie-Toot neuropatije, traumatske povrede mozga, moždanog udara i cerebralne ishemije.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su od koristi za tretman i kognitivnih poremećaja i psihijatrijskih poremećaja. Primeri kognitivnih poremećaja su blage kognitivne smetnje (MCI) i poremećaji povezani sa autizmom, disleksijom, hiperaktivnošću udruženom sa nedostatkom pažnje, šizofrenijom, opsesivno-kompulzivnim poremećajima, psihozama, bipolarnim poremećajima, depresijom, Turetovim sindromom i poremećajima učenja kod dece, adolescenata i odraslih, poremećajima memorije asociarnim sa životnom dobi, kognitivnim poremećajima asociranim sa starenjem, Alchajmerovom bolešću, Parkinsonovom bolešću, Daunovim sindromom, traumatskom povredom mozga, Hangtitonovom bolešču, progresivnom supranuklearnom paralizom (PSP), HIV infekcijom, moždanim udarom, vaskularnim oboljenjima, Pikovom ili Krocfeldt-Jakobovom bolešču, muliplom sklerozom (MS) i drugim poremećajima koji zahvataju belu masu, kao i sa kognitivnim pogoršanjima koja su indukovana lekovima. Psihijatrijski poremećaji uključuju, ali nisu ograničeni na, veliku depresiju, apatiju, distimiju, maniju, bipolarni poremećaj (kao što je bipolarni poremećaj tipa I, bipolarni poremećaj tipa II), ciklotimični poremećaj, brzu promenu raspoloženja, izmenu dnevno-noćnog ritma, maniju, hipomaniju, šizofreniju, šizofernoformni poremećaj, šizoafektivni poremećaj, poremećaj liičnosti, poremećaj pažnje sa ili bez hiperaktivnog ponašanja, deluzioni poremećaj, kratkotrajni psihotični poremećaj, podeljeni psihotični poremećaj, psihotični poremećaj usled opšteg medicinskog stanja, psihotični poremećaj indukovan određenom supstancom ili psihotični poremećaj nepoznatog porekla, anksiozni poremećaj poput generalizovanog anksioznog poremećaja, panični poremećaj, posttraumatski stresni poremećaj, poremećaje kontrole impulsa, fobične poremećaje, disocijativna stanja i štaviše zavisnost od cigareta, droga i alkohola. Prioritetno, psihijatrijski poremećaji su bipolarni poremećaji, šizofrenija, psihoza, anksioznost i zavisnost.
Jedinjenja predmetnog pronalaska inhibiraju upalne procese koji utiču na sve sisteme organizma. Stoga, jedinjenja su korisna za tretman inflamatornih procesa mišićno-koštanog sistema - lista primera koja sledi nije sveobuhvatna i ne obuhvata poremećaje svih ciljnih tkiva, ali npr to mogu biti: artritična stanja poput ankilozirajućeg spondilitisa, cervikalni artritis, fibromialgija, giht, juvenilni reumatoidni artritis, lumbosakralni artritis, osteoartritis, osteoporoza, psorijatični artritis, reumatske bolesti; poremećaji koji utiču na kožu i srodna tkiva: ekcem, psorijaza, dermatitis i inflamatorna stanja poput opekotina od sunca; poremećaji respiratornog sistema: astma, alergijski rinitis i sindrom respiratornog distresa, poremećaji rada pluća praćeni upalnim procesima poput astme i bronhitisa; hronična opstruktivna plućna bolest; poremećaji imunološkog i endokrinog sistema: periartritis nodosa, tiroiditis, aplastična anemija, sklerodoma, miastenija gravis, multipla skleroza i drugi demelinizacijski poremećaji, encefalomelitis, sarkoidoza, nefritni sindrom, Beketov sindrom, polimiozitis, gingivitis.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su takođe od koristi u tretmanu poremećaja gastrointestinalnog (GI) trakta poput inflamatornog poremećaja rada creva, uključujući, ali se ne ograničavajući na, ulcerativni kolitis, Kronovu bolest, ileitis, proktitis, celijakijsku bolest, enteropatiju, mikroskopski ili kolagenski kolitis, eozinofilni gastroenteritis, ili infekciju rezervoara koji se hirurški formira nakon proktokolektomije i ileonatalne anastomoze (pouchitis), kao i sindroma iritabilnog creva, uključujući naravno i bilo koje poremećaje povezane s bolovima u stomaku i/ili abdominalnom nelagodom kao što su pilorospazam, nervozna probava, spastičko debelo crevo, spastički kolitis, spastički rad creva, intestinalana neuroza, funkcionalni kolitis, mukozni kolitis, laksativni kolitis i funkcionalna dispepsija; jedinjenja su korisna i za tretman atrofnog gastritisa, gastritisa varialoforme, ulcerativnog kolitisa, peptičke ulceracije, pirezisa i drugih oštećenja GI trakta, na primer, oštećenja nastalih dejstvom Helicobacter pylori, kao i za tretman gastroezofagealne refluksne bolesti, gastropareze kao što je dijabetska gastropareza; korisni su i u tretmanu drugih funkcionalnih poremećaja creva poput neulcerativne dispepsije (NUD); povraćanja, dijareje i visceralne inflamacije.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su od koristi i u tretmanu poremećaja genito-urinarnog trakta poput prekomerno aktivne mokraćne bešike, prostatitisa (hroničnog bakterijskog i hroničnog ne-bakterijskog prostatitisa), prostadinije, intersticijskog cistitisa, urinarne inkontinencije i benigne hiperplazije prostate, aneksitisa, inflamacije pelvisa, bartolinitisa i vaginitisa. Prioritetno, jedinjenja su korisna za tretman prekomerno aktivne mokraćna bešika i urinarne inkontinencije.
[0068] Treba napomenuti da je pogodno da se jedinjenja predmetnog pronalaska upotrebljavaju zajedno sa jednim ili sa više drugih terapijskih agenasa. Primeri pogonih agenasa za adjuvansnu terapiju su modulator serotoninskog receptora uključujući agonistu 5HTIB/ID, kao što je triptan (npr sumatriptan ili naratriptan); agonista adenozinskog receptora A1; antagonista adenozinskog receptora A2; antagonista purinergičkog receptora P2X, npr EP ligand; modulator NMDA receptora poput antagoniste glicinskog receptora; modulator AMPA receptora; antagonista receptora za supstancu P (npr antagonist NK1); kanabinoid; agonista nikotinskog receptora; agonista alfa-1 ili 2 adrenergičkog receptora; acetaminofen ili fenacetin; inhibitor 5-lipoksigenaze; antagonista receptora leukotriena; DMARD (npr metotreksat); gabapentin, pregabalin i srodna jedinjenja; L-dopa i/ili agonisti dopaminskih receptora; inhibitor katehol-O-metiltransferaze; triciklični antidepresiv (npr amitriptilin); antiepileptički lekovi koji vode stabilizaciji neurona; inhibitor preuzimanja monoamina (npr venlafaksin); inhibitor matriksne metaloproteinaze; inhibitor azot oksid sintaze (NOS), kao što je inhibitor iNOS ili nNOS; prikupljač slobodnih radikala; inhibitor agregacije alfa-sinukleina; inhibitor holinestaraze; agens za snižavanje nivoa holestarola; modulator alfa-sekretaze; modulator beta-sekretaze; inhibitor agregacije beta-amiloida; inhibitor otpuštanja ili delovanja faktora nekroze tumora alfa; terapija antitelima, kao što je terapija monoklonskim antitelima; antivirusni agens poput nukleozidnog inhibitora (npr lamivudin) ili modulator imunskog sistema (npr interferon); opioidni analgetik poput morfina; agonist i antagonist vaniloidnog receptora; analgetik, poput inhibitora ciklooksigenaze-1 i/ili ciklooksigenaze-2; lokalni anestetik poput lidokaina i derivata; stimulans, uključujući kofein; H2-antagonist (npr ranitidin); inhibitor protonske pumpe (npr omeprazol); antacid (npr aluminijum ili magenzijum hidroksid; sredstvo protiv nadimanja (npr semetikon); dekongestant (npr fenilefrin, fenilpropanolamin, pseudoefedrin, oksimetazolin, epinefrin, nafazolin, ksilometazolin, propilheksedrin ili levo-dezoksiefedrin, nafazolin, ksilometazolin, propilheksedrin ili levo-dezoksiefedrin), agens protiv kašlja (npr kodein, hidrokodon, karmifen, karbetapentan ili dekstrametorfan); diuretik ili sedirajući ili nesedirajući antihistaminik; antipsihotični agensi, uključujući tipične i atipične antipsihotike (npr haloperidol, risperidon, klozapin); antidepresiv poput selektivnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina, inhibitor ponovnog preuzimanja serotonina i noradrenalina, inhibitor MAO i tricikličnih antidepresiva; stabilizator raspoloženja (npr litijum, lamotrigin, valproat), anksiolitički agens (npr benzodiazepin, buspiron, antagonista beta-adrenergičkih receptora receptora), morfin ili derivat morfina; drugi blokatori kanala za kalcijum ili natrijum.
[0069] Treba napomenuti da oblast predmetnog pronalaska pokriva i upotrebu jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u kombinaciji sa jednim ili sa više terapijskih agenasa.
Jedinjenja predmetnog pronalaska su korisna za pripremu humanih i veterinarskih lekova. Treba takođe napomenuti da, u kontekstu pronalaska, pojmovi "tretman" ili "tretiranje", a kada nisu drugačije izričito napomenuto, podrazumevaju prevenciju, ublažavanje i lečenje patoloških tegoba, preciznije i tretman utvrđenih simptoma i profilaktički tretman. Jedinjenja predmetnog pronalaska će se prioritetno upotrebaljavati za terapijsku ili preventivnu primenu kod prethodno navednih patologija u vidu aktivnih sastojaka u farmaceutskim preparatima.
Shodno navedenom, dalji cilj predmetnog pronalaska su farmaceutski preparati koji sadrže terapijski efikasnu količinu jedinjenja predmetnog pronalaska ili njegovu so u smeši sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
U skladu sa navedenim, namera je izraza "terapijski efikasan", a kada se odnosi na "količinu", "dozu" ili "doznu jedinicu" jedinjenja predmetnog pronalaska, da naznači da je "količina", "doza" ili "dozna jedinica" bilo kog od jedinjenja dovoljna za upotrebu i u tretmanu stanja u kome su prisutni definisani simptomi i u profilaktičkom tretmanu prethodno navedenih patoloških tegoba.
Farmaceutski preparati predmetnog pronalaska se mogu primenjivati u vidu raznih doznih oblika za intermedijerno ili modifikovano otpuštanje, npr za oralnu upotrebu u vidu tableta, pastila, kapsula, šećerom ili filmom obloženih tableta, tečnih rastvora, emulzija ili suspenzija; za rektalnu primenu u obliku supozitorija; za parenteralnu primenu u vidu npr intramuskularnih i/ili depo formulacija; za intravensku primenu u vidu injekcija ili infuzija; za lokalnu i transdermalnu primenu u vidu flastera, gela i krema.
Pogodni materijali farmaceutski prihvatljivih, terapijski inertnih organskih i/ili neorganskih nosača koji se mogu upotrebiti u pripremi navedenih preparata obuhvataju, na primer, vodu, želatin, gumu arabiku, laktozu, skrob, celulozu, magnezijum stearat, talk, biljna ulja, ciklodekstrine i polialkilenglikole.
Preparati koji sadrže feniletilamino derivate formule (I) koji su prethodno definisani, mogu biti sterilisani i mogu dalje sadržavati dobro poznate komponente poput, na primer, konzervanasa, stabilizatora, agenasa za vlaženje ili emulgovanje poput parafinskog ulja, manid monooleata, soli za podešavanje osmotskog pritisaka i pufera.
Na primer, čvrsti oralni oblici mogu sadržavati, zajedno sa aktivnim sastojkom, razređivače, npr laktozu, dekstrozu, saharozu, celulozu, kukuruzni skrob ili krompirov skrob; lubrikante, npr silicijum dioksid, talk, stearinsku kiselinu, magnezijum ili kalcijum stearat i/ili polietilen glikole; agense za povezivanje, npr skrob, gumu arabike, želatin, metilcelulozu, karboksimetilcelulozu ili polivinil pirolidon; sredstva za dezintegraciju, npr skrob, alginsku kiselinu, alginate ili natrijum skrobni glikolat; smeše za obrazovanje šumećih tableta; agense za boju; zaslađivače; agense za vlaženje poput lecitina, polisorbata, laurilsulfata; i, u principu, netoksične i farmakološki neaktivne supstance koje se koriste u pripremi farmaceutskih formulacija. Navedeni farmaceutski priparati se mogu pripremati na poznate načine, na primer, mešanjem, granuliranjem, tabletiranjem, prevlačenjem šećerom ili procesima premazivanja filmom.
Priprema farmaceutskih preparata predmetnog pronalaska se može izvesti praćenjem uobičajenih tehnika pripreme. Preparati za oralnu primenu obuhvataju formulacije koje karakteriše odloženo oslobađanje, a koje se mogu pripremiti na konvencionalne načine, na primer, prevlačenjem tableta i granula enterički-otpornim slojem.
Tečne disperzije za oralnu primenu mogu biti npr sirupi, emulzije ili suspenzije. Sirupi mogu saržavati nosače poput, na primer, saharoze ili saharoze s glicerinom i/ili manitolom i/ili sorbitolom.
Suspenzije i emulzije mogu sadržavati nosače poput, na primer, prirodne gume, agara, natrijum alginata, pektina, metilceluloze, karboksimetilceluloze ili polivinil alkohola. Suspenzije ili rastvori za intramuskularne injekcije mogu sadržavati, zajedno s aktivnim jedinjenjem, farmaceutski prihvatljiv nosač, npr sterilnu vodu, maslinovo ulje, etil oleat, glikole, npr propilen glikol, i, ukoliko je to poželjno, odgovarajuću količinu lidokain hidrohlorida. Rastvori za intravenozne injekcije ili infuziju mogu sadržavati nosače poput, na primer, sterilne vode, a prioriteno oni mogu biti u vidu sterilnih, vodenih, izotoničnih rastvora soli.
Supozitorije mogu sadržavati, zajedno s aktivnim sastojkom, farmaceutski prihvatljiv nosač, npr kakao maslac, polietilen glikol, polioksietilen sorbitanski surfaktant estra masne kiseline ili lecitin.
Farmaceutski preparati koji sadrže feniletilamino derivate formule (I) koji su pretodno definisani sadržavaće, po doznoj jedinici, npr kapsuli, tableti, prahu za injeciranje, kafenoj kašičici i supozitoriji od oko 0,1 do oko 500 mg jednog ili više aktivnih sastojaka, a prioritetno od 1 do 10 mg aktivnog sastojka.
Stručnjaci iz oblasti sinteze mogu lako utvrditi optimalne terapijski efikasne doze za primenu, a koje će suštinski varirati u zavisnosti od jačine preparata, načina pripreme i od kliničke slike stanja ili poremećaja koji se tretira. Pored toga, faktori koji utiču na određivanje doze su karakteristika određenog subjekta koji se tretira, uključujući subjektovu starost, težinu, način ishrane, kao i vreme primene preparata što je dodatni razlog potrebe da se doza prilagodi tako da odgovara terapijski efektivnom nivou.
EKSPERIMENTALNI DEO PRONALASKA
[0070]<1>H-NMR spektri su određeni u rastvoru CDCl3ili DMSO-d6upotrebom Varian Gemini 200 MHz spektrometra. Hemijski pomaci su definisani kao δ vrednosti sa CDCI3ili DMSO-d6i D2O kao endogenim standardom.
[0071] HPLC/MS analize su urađene upotrebom instrumenta tipa Gilson i X-Terra RP 18 kolone (5 µm, 4,6x50 mm) koja je bila povezana sa UV detektorom (220 nm) i Finnigan Aqa masenim spektrometrom (elektronski raspršivač, pozitivni jonizacioni način rada). Uslovi korišćeni za analize: protok: 1,2 ml/min; temperatura kolone: 50°C; gradijent eluiranja A/B (eluent A: 0,1% mravlja kiselina u vodi, eluent B: 0,1% mravlja kiselina u acetonitrilu): 5-95% B od 0 do 8,0 minuta, 95% B od 8,0 do 9,5 minuta.
[0072] Za bolju ilustraciju predmetnog pronalaska, navedeni su primeri u tekstu koji sledi.
Primer 1
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
[0073] Jedinjenje je sintetisano praćenjem postupka prikazanog na Šemi I.
Korak 1: 2-(3-Hidroksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamin - Postupak A
[0074] Suspenziji 2-(3-benziloksifenil)-etilamin hidrohlorida (12,6 g; 47,7 mmol) u H2O (120 ml) i 1M NaOH (95 ml), u kapima je dodat rastvor boc2O (15,6 g; 71,5 mmol) u THF (120 ml), pa je smeša mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 16 sati, organski rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i smeša je ekstrahovana sa CH2Cl2(2× 100 ml). Prikupljene organske faze su osušene upotrebom Na2SO4, rastvor je profiltriran, pa je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Tako je dobijeno sirovo ulje koje je zatim upotrebljeno bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl: δ 7,47 - 7,28 (m, 5H), 7,22 (m, 1H), 6,87 - 6,77 (m, 3H), 5,05 (s, 2H), 4,52 (bs, 1H), 3,38 (dt, J = 6,5 Hz, J = 6,5 Hz, 2H), 2,77 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H).
ESI<+>MS: izračunato za C20H25NO3: 327,43; utvrđeno: 328,1 (MH<+>).
[0075] 2-(3-Benziloksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamin dobijen u Koraku 1 i 10% Pd/C (1,3 g) u MeOH (240 ml) su hidrogenizovani u Parr aparatu tokom 16 sati na 35 psi. Katalizator je uklonjen filtriranjem kroz sloj celita, nakon čega je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Sirovo ulje je iskorišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7,19 (dd, J = 7,8 Hz, J = 7,8 Hz, 1H), 6,82 - 6,66 (m, 3H), 4,56 (bs, 1H), 3,39 (dt, J = 7,0 Hz, J = 6,5, 2H), 2,76 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H).
ESI<+>MS: izračunato za C13H19NO3: 237,30; utvrđeno: 238,2 (MH<+>).
Postupak B
[0076] Rastvor HBr (33%) u sirćetnoj kiselini (150 ml) je ohlađen do 0°C, pa je u porcijama dodat 3- metoksifenetilamin (10,0 g; 66,0 mmolova). Smeše je zatim grejana na 80°C i mešana tokom 16 h. Rastvarač je dalje uparen pod sniženim pritiskom, a ostatak je rastvoren u vodi (160 ml). Dalje je dodat 4 M NaOH (15 ml), potom 2 M NaOH (130 ml) i u kapima boc2O (15,8 g; 72,6 mmol) u THF (160 ml), pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Gornji organski sloj dobijene smeše je izdvojen, dok je vodeni sloj ekstrahovan sa CH2Cl2(3x100 ml). Organski rastvori su spojeni, osušeni upotrebom Na2SO4i profiltrirani, pa je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje iz naslova (16,8 g) je dobijeno u vidu smeđe gumene mase koja je iskorišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
ESI<+>MS: izračunato za C13H19NO3: 237,3; utvrđeno: 182,1 (MH<+>-t-butil, glavni fragment).
Korak 2: 2-(3-Butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamin
[0077] U rastvor 2-(3-hidroksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamina dobijenog u Koraku 1, u acetonu (240 ml), dodati su K2CO3(19,8 g) i 1-brombutan (15 ml). Suspenzija je zatim grejana na temperature refluksa tokom 3 dana, pa je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u H2O (200 ml) i ekstrahovan sa CH2Cl2(2x200 ml). Rastvarač je dalje uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (petrolej etar/EtOAc 85:15). Tako je dobijeno jedinjenje iz naslova (11,3 g; 81% kroz 3 koraka) u vidu bezbojnog ulja.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7,22 (dd, J = 7,6 Hz, J = 7,6 Hz, 1H), 6,81 - 6,72 (m, 3H), 4,55 (bs, 1H), 3,97 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,39 (dt, J = 6,5 Hz, J = 6,5 Hz, 2H), 2,78 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,78 (m, 2H), 1,51 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 0,99 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
ESI+MS: izračunato za C17H27NO3: 293,41; utvrđeno: 294,1 (MH<+>).
[0078] Korak 3: 2-[2-(3-Butoksifenil)-(tertc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid. U suspenziju NaH (60%, 2,0 g; 51 mmol) u suvom DMF (125 ml), ohlađenom na 0°C, je dodat rastvor 2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil) etilamina (7,5 g; 25,5 mmol) u suvom DMF (125 ml). Nakon 1 sata na sobnoj temperaturi, dodat je 2-hloro-N,N-dimetilacetamid (5,2 ml; 51 mmol) i smeša je mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodata H2O (150 ml), pa je rastvor ekstrahovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je potom rastvoren u H2O (150 ml) i ekstrahovan sa CH2Cl2(2x150 ml). Organske faze su prikupljene, osušene upotrebom Na2SO4, profiltrirane i uparene. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (petrolej etar /EtOAc 4:6) i tako je dobijeno jedinjenje iz naslova (7,2 g; 75%) u vidu svetlo žutog ulja.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7,1 (m, 1H), 6,79 - 6,71 (m, 3H), 3,97 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,96 (s, 2H), 3.40 (dd, J = 8,7 Hz, J = 7,2 Hz, 2H), 2,88 (s, 6H), 2,76 (dd, J = 7,9 Hz, J = 6,4 Hz, 2H), 1,76 (m, 2H), 1,46 (m, 2H), 1,37 (s, 9H), 0,95 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C21H34N2O4: 378,52; utvrđeno: 379,0 (MH<+>).
Korak 4: 2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
[0079] Rastvor 2-[2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilacetamida (9,6 g; 25,3 mmol) u HCl/Et2O (127 ml) je mešan tokom 16 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je potom uparen pod sniženim pritiskom, a ostatak je usitnjen sa smešom Et2O/iPr2O 50/50, profiltriran i ispran sa Et2O/iPr2O da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste supstance (1,71 g; prinos 95%).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3: δ 9,63 (br s, 1H), 7,23 (dd, 1H), 6,83 - 6,91 (m, 2H), 6,80 (ddd, 1H), 3,96 (s, 2H), 3,96 (t, 2H), 3,32 - 3,44 (m, 2H), 3,22 - 3,32 (m, 2H), 2,97 (s, 6H), 1,70 - 1,83 (m, 2H), 1,41 - 1,58 (m, 2 H), 0,99 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C16H26N2O2: 278,40; utvrđeno: 279,3 (MH<+>).
[0080] Analogno, polazeći od odgovarajućih međuprodukata, pripremljena su jedinjenja koja slede:
2-{2-[3-(4,4,4-trifluorobutoksi)fenil]-etilamino}-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,00 (br.s, 2H), 7,17 - 7,32 (m, 1H), 6,78 - 6,94 (m, 3H), 4.04 (br s, 2 H), 3,91 - 4,20 (m, 2H), 3,08 - 3,22 (m, 2H), 2,93 - 3,00 (m, 2H), 2,94 (s, 3H) 2,30 - 2,48 (m, 2H), 1,78 - 2,05 (m, 2H). ESI<+>MS: izračunato za C16H23F3N2O2(slobodna baza): 332,27; utvrđeno: 333,25 (MH<+>).
2-[2-(3-pentiloksifenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,03 (br s, 2H), 7,14 - 7,29 (m, 1H), 6,70 - 6,88 (m, 3H), 4,03 (s, 2H, 3,95 (t, 2H), 3,06 - 3,21 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 2,81 - 3,02 (m, 2H), 1,62 - 1,80 (m, 2H), 1,23 - 1,48 (m, 4H), 0,90 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C17H28N2O2(slobodna baza): 292,42; utvrđeno: 293,25 (MH<+>).
2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,01 (br s, 2H), 7,23 (dd, 1H), 6,65 - 6,93 (m, 3H), 4,03 (s, 2H), 3,95 (t, 2H), 3,05 -3,24 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,91 - 3,01 (m, 2H), 2,90 (s, 3H), 1,57 - 1,84 (m, 2H), 1,35 - 1,51 (m, 2H), 1,22 - 1,36 (m, 4H), 0,70 - 1,01 (m, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C18H30N2O2(slobodna baza): 306,45; utvrđeno: 307,32 (MH<+>).
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dipropilacetamid hidrohlorid
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,88 (br s, 2H), 7,15 - 7,30 (m, 1H), 6,68 - 6,88 (m, 3H), 4,02 (s, 2H), 3,96 (t, 2H), 3,23 - 3,28 (m, 2H), 3,09 - 3,22 (m, 4 H), 2,87 - 2,98 (m, 2 H), 1,62 - 1,75 (m, 2 H), 1,35 - 1,62 (m, 6H), 0,94 (t, 3H), 0,85 (dt, 6H).
ESI<+>MS: izračunato za C20H34N2O2(slobodna baza): 334,50; utvrđeno: 335,34 (MH<+>).
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dibutilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6 TFA): δ 8,85 (br s, 2H), 7,19 - 7,28 (m, 1H), 6,62 - 6,88 (m, 3H), 4,01 (m, 2H), 3,96 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,06 - 3.24 (m, 4H), 2,85 - 3,00 (m, 2H), 1,61 - 1,82 (m,2H), 1,40 - 1,55 (m, 6H), 1,20 - 1,38 (m, 4H), 0,94 (t, 6H), 0,89 (t, 3H). ESI<+>MS: izračunato za C20H38N2O2(slobodna baza): 362,55; utvrđeno: 363,35 (MH<+>).
2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-N,N-dipropilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6 Na2CO3): δ 7,50 (br s, 1H), 6,72 - 6,83 (m, 3H), 3,93 (t, 2H), 3,06 - 3,22 (m, 5H), 2,58 - 2,81 (m, 5H), 1,62 - 1,78 (m, 2H), 1,28 - 1,56 (m, 8H), 0,68 - 0,99 (m, 9H).
ESI<+>MS: izračunato za C21H36N2O2(slobodna baza): 348,53; utvrđeno: 349,28 (MH<+>).
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-acetamid hidrohlorid
<1>HNMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,96 (br s, 2H), 7,87 (br s, 1H), 7,54 (br s, 1H), 7,23 (dd, 1H), 6,58 - 6,83 (m, 3H), 3,96 (t, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,04 - 3,18 (m, 2H), 2,82 - 3,01 (m, 2H), 1,57 - 1,80 (m, 2 H), 1,32 - 1,54 (m, 2H), 0,81 -1,04 (m, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C14H22N2O2: 250,34; utvrđeno: 251,1 (MH<+>).
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N-metilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,99 (br s, 2H), 8,39 (q, 1H), 7,08 - 7,37 (m, 1H), 6,65 - 6,95 (m,3H), 3,96 (t, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,04 - 3,25 (m, 2H), 2,79 - 3,04 (m, 2H), 2,67 (d, 3H), 1,57 - 1,82 (m, 2H), 1,44 (sxt, 2H), 0,94 (t, 3H). ESI<+>MS: izračunato za C15H24N2O2: 264,37; utvrđeno: 265,2 (MH<+>).
2-[2-(3-izopropoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,04 (br s, 2H), 7,12 - 7,32 (m, 1H), 6,70 - 6.81 (m, 3H), 4,60 (spt,1H), 4,03 (s, 2H), 3,04 - 3,21 (m, 2 H), 2,94 (s, 3H), 2,91 - 3,01 (m, 2H), 2,90 (s, 3H), 1,26 (d, 6H).
ESI<+>MS: izračunato za C15H24N2O2: 264,37; utvrđeno: 265,2 (MH<+>).
2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dietilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,89 - 8,98 (br s, 2H), 7,24 (dd, 1H), 6,72 - 6,88 (m, 3H), 4,03 (s, 2H), 3,96 (t, 2H), 3,34 (q, 2H), 3,26 (q, 2H), 3,08 - 3,21 (m, 2H), 2,86 - 3,03 (m, 2H), 1,59 - 1,78 (m, 2H), 1,33 - 1,54 (m, 2H), 1,13 (t, 3H), 1,07 (t, 3H), 0,94 (t, 3H). ESI<+>MS: izračunato za C18H30N2O2: 306,45; utvrđeno: 307,2 (MH<+>).
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-1-pirolidin-1-il-etanon
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,94 (s, 2H), 7,14 - 7,33 (m, 1H), 6,64 - 6,93 (m, 3H), 4,00 (t, 2H), 3,88 (s, 2H), 3,33 - 3,45 (m, 4H), 3,19 - 3,29 (m, 2H), 2,96 - 3,05 (m, 2H), 1,78 - 2,00 (m, 4H), 1,65 - 1,78 m, 2H), 1,37 - 1,56 (m, 2H), 0,96 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C18H28N2O2: 304,44; utvrđeno: 305,2 (MH<+>).
2-[2-(3-butoksi-4-fluorofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
<1>HNMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,91 (br s, 2H), 7,15 (dd, 1H), 7,05 (dd, 1H), 6,79 (ddd, 1H), 3,97 - 4,12 (m, 4H), 3,09 - 3.21 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,92 - 2,99 (m, 2H), 2,90 (s, 3H), 1,65 - 1,82 (m, 2H), 1,36 - 1,54 (m, 2H), 0,87 - 1,01 (m, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C16H25FN2O2(slobodna baza): 296,38; utvrđeno: 297,22 (MH<+>).
2-[2-(3-butoksi-4-metoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,97 (br s, 2H), 6,90 (d, 1H), 6,84 (d, 1H), 6,74 (dd, 1H), 4,02 (br s, 2H), 3,94 (t, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,04 - 3,22 (m, 2H), 2,94 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 2,90 (s, 3 H), 2.84 - 2.92 (m, 2 H), 1,57 - 1,84 (m, 2H), 1,44 (sxt, 2H), 0,94 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C17H28N2O3(slobodna baza): 308,42; utvrđeno: 309,21 (MH<+>).
Primer 2
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid hidrohlorid
Korak 1: Etil estar 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-2-metilpropanske kiseline
[0081] U rastvor 2-(3-butoksifenil)-etilamin hidrohlorida (0,27 g; 1,42 mmol, dobijenog od jedinjenja iz Koraka 2 Primera 1 praćenjem standardnog postupka opisanog u Koraku 4 Primera 1) u acetonitrilu (8 ml), dodati su etil estar 2-bromo-2-metilpropionske kiseline (0,27 ml; 1,85 mmol) i trietilamin (0,52 ml; 3,70 mmol), pa je rastvor grejan na 100°C u mikrotalasnoj pećnici tokom 3 sata. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperaturu i preraspodeljena između vode i CH2Cl2. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom vodom, osušen upotrebom Na2SO4i profiltriran, a rastvarač je dalje uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćem fleš hromatografijom (silika gel, CH2Cl2:MeOH od 100:0 do 95:5). Tako je dobijeno jedinjenje iz naslova (0,17 g; prinos 39%) u vidu bezbojnog ulja.
ESI<+>MS: izračunato za C18H29NO3: 307,44; utvrđeno: 308,2 (MH<+>).
Korak 2: 2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid hidrohlorid
[0082] U 2 M rastvor dimetilamina u THF (0,6 ml; 1,1 mmol) u toluenu (3 ml) je dodat 2 M trimetilaluminijum u heksanu (1,4 ml; 2,77 mmol) i smeša je mešana 15 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat etil estar 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-2-metil-propionske kiseline (0,17 g; 0,55 mmol) u suvom toluenu (8 ml), nakon čega je rastvor grejan na 90°C uz mešanje tokom 24h. Smeša je potom ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je preraspodeljen između vode i dietil etera. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom vodom, osušen upotrebom Na2SO4i profiltriran, a rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (prvo prečišćavanje: silika gel, CH2Cl2:MeOH od 100:0 do 97:3; drugo prečišćavanje: silika gel, EtOAc). Tako je dobijeno jedinjenje iz naslova koje je rastvoreno u HCl/Et2O i mešano 20 minuta. Nastala hidrohloridna so je izdvojena filtriranjem, isprana sa iPr2O i osušena na 40°C pod vakuumom. Dobijeno je čisto jedinjenje iz naslova (18,5 mg; prinos 20%) u vidu bele čvrste supstance.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9,39 (bs, 2H), 7,24 (t, 1H), 6,71 - 6,97 (m, 3H), 3,97 (t, 2H), 3,13 - 3,36 (m, 4H), 3,09, 6H), 1,90 (s, 6H), 1,69 - 1,86 (m, 2H), 1,51 (sxt, 2H), 0,99 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C18H30N2O2: 306,45; utvrđeno: 307,32 (MH<+>).
Primer 3
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid hidrohlorid
Korak 1: 2-[2-(3-Butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilpropanamid
[0083] Rastvor 2-[2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilpropanamida (0,410 g; 1,1 mmol; pripremljen praćenjem procedure iz Koraka 3 Primera 1) u suvom THF (5 ml) je ohlađen do -78°C, pa je u kapima dodat LiHMDS (litijum heksametildisilazid) u 1 M THF (1,43 ml; 1,4 mmol). Smeše je mešana tokom 30 minuta i potom je u kapima dodat metil jodid (0.187 g; 1.3 mmol) u suvom THF (1 ml). Smeše je dodatno mešana tokom 2 h što je omogućilo hladnom kupatilu da se zgreje. Rastvarač je zatim uparen pod sniženim pritiskom, a ostatak je rastvoren u EtOAc (15 ml) i ispran vodom (2x15 ml). Organska faza je osušena upotrebom Na2SO4i profiltrirana, dok je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, petrolej etar: EtOAc od 8:2 do 6:4). Tako je dobijeno jedinjenje iz naslova (0,22 g; prinos 52%) u vidu bezbojnog ulja.
ESI<+>MS: izračunato za C22H36N2O4: 392,54; utvrđeno: 393,3 (MH<+>).
Korak 2: 2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid hidrohlorid
[0084] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od 2-[2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilpropanamida praćenjem standardne procedure opisane u Koraku 4 Primera 1. Bela čvrsta supstanca (prinos 47%).
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,16 (br s, 1H), 8,82 (br s, 1H), 7,14 - 7,31 (m, 1H), 6,64 - 6,93 (m, 3H), 4,39 (q, 1H), 3,96 (t, 2H), 3,08 - 3,22 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 2,96 - 3,06 (m, 1H), 2,87 - 2.96 (m, 2 H), 2,90 (s, 3H), 1,59 - 1,82 (m, 2H), 1,37 - 1,53 (m, 2H), 1,38 (d, 3H), 0,94 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C17H28N2O2(slobodna baza): 292,42; utvrđeno: 293,25 (MH<+>).
Primer 4
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-3-hidroksi-N,N-dimetilpropanamid hidrohlorid
Korak 1: 2-[2-(3-Butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-3-acetoksi-N,N-dimetil-propanamid
[0085] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od [2-[2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilacetamida i bromometil estara sirćetne kiseline procedurom opisanom u Koraku iz 1 Primera 3. Bezbojno ulje (prinos 38%).
ESI<+>MS: izračunato za C24H38N2O6(slobodna baza): 450,58; utvrđeno: 451,2 (MH<+>).
Korak 2: 2-[2-(3-Butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-3-hidroksi-N,N-dimetil-propanamid
[0086] 2-[2-(3-Butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-3-acetoksi-N,N-dimetilpropan-amid (0.19 g; 0.42 mmol) je rastvoren u 3% NH4OH/MeOH (15 ml) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 5 sati. Rastvarač je zatim uparen pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, petrolej etar:EtOAc od 7:3 do 3:7). Tako je dobijeno jedinjenje iz naslova (0,13 g; prinos 66%) u vidu bezbojnog ulja.
ESI<+>MS: izračunato za C22H36N2O5: 408,54; utvrđeno: 409,2 (MH<+>).
Korak 3: 2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-3-hidroksi-N,N-dimetilpropanamid hidrohlorid
[0087] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od 2-[2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-3-acetoksi-N,N-dimetilpropanamida praćenjem standardnog postupka opisanog u Koraku 4 iz Primera 1. Dobijena je bela čvrsta supstanca. (prinos 76%).
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,46 - 9,44 (m, 2H) 7,10 - 7,33 (m, 1H), 6,65 - 6,92 (m, 3H), 5,54 (t, 1H), 4,44 (t, 1H), 3,95 (t, 2H), 3,65 - 3,88 (m, 2H), 3,11 - 3,22 (m, 1H), 3,03 - 3,09 (m, 1H), 3,02 (s, 3H), 2,91 - 2,99 (m, 2H), 2,90 (s, 3H), 1,61 - 1,79 (m, 2H), 1,35 - 1,53 (m, 2H), 0,86 - 1,00 (m, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C17H28N2O3(slobodna baza): 308,42; utvrđeno: 309,21 (MH<+>).
Primer 5
2-[2-(3-Butoksi-4-metilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
Korak 1: (3-Hidroksi-4-metilfenil)-acetonitril
[0088] U rastvor 3-metoksi-4-metilfenilacetonitrila (2,0 g; 12,4 mmol) u suvom CH2Cl2(50 ml) ohlađenom do -78°C, u kapima je dodat 1 M BBr3u CH2Cl2(27 ml; 27 mmol). Smeše je zatim mešana preko noći što je dovelo i do zagrevanja hladnog kupatila. Smeša je dalje polako presuta u edenu vodu uz mešanje. Kada se led otopio, vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc, a organska faza je osušena upotrebom Na2SO i profiltrirana, nakon čega je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje iz naslova (1,7 g; prinos 93%) je upotrebljeno u narednom koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 2: (3-Butoksi-4-metilfenil)-acetonitril
[0089] U rastvor (3-hidroksi-4-metilfenil)-acetonitrila (1,7 g; 11,5 mmol) u acetonu (100 ml), su dodati K2CO3(7,9 g; 57,5 mmol) i 1-bromo butan (6,1 ml; 57,5 mmol). Suspenzija je grejana na temperature refluksa tokom 24 sata, pa je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u CH2Cl2, ispran vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen upotrebom Na2SO4i profiltriran, a rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečiščen fleš hromatografijom (petrolej etar:EtOAc 9,5:0,5). Tako je dobijeno jedinjenje iz naslova (1,43 g; prinos 61%) u vidu bezbojnog ulja.
ESI<+>MS: izračunato za C13H17NO: 203,29; utvrđeno: 204,1 (MH<+>).
Korak 3: terc-Butil estar N-[2-(3-butoksi-4-metilfenil)-etil]-karbaminske kiseline
[0090] U rastvor (3-butoksi-4-metilfenil)-acetonitrila (0,94 g; 5,0 mmol) u metanolu (38 ml) su dodati nikl hlorid heksahidrat (0,12 g; 0,5 mmol) i boc2O (2,18 g; 10,0 mmol). Rastvor je zatim ohlađen do 0°C, pa je u porcijama dodavan natrijum borohidrid (1.32 g; 35.0 mmol) tokom 30 minuta i smeše je mešana preko noći čime je omogućeno i da se hladno kupatilo zagreje. Reakcija je zaustavljena dodavanjem dietilentriamina (0,54 ml; 5 mmol). Mešanje smeše je nastavljeno tokom 30 minuta, nakon čega je rastvarač uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak ponovo rastvoren u EtOAc, ispran vodom, osušen upotrebom Na2SO4i profiltriran. Rastvarač je dalje uparen pod sniženim pritiskom, a sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, petrolej etar: EtOAc 90:10) i tako je dobijeno jedinjenje iz naslova u vidu bezbojnog ulja (prinos 80%). ESI<+>MS: izračunato za C18H29NO3: 307,44; utvrđeno: 308,1 (MH<+>).
Korak 4: 2-[2-(3-Butoksi-4-metilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
[0091] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od terc-butil estra [2-(3-butoksi-4-metilfenil)-etil]-karbaminske kiseline praćenjem standardnih postupaka opisanih u Koracima 3 i 4 Primera 1. Tako je dobijena bela čvrsta supstanca.
<1>HNMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,93 (br s, 2H), 7,08 (dd, 1H), 6,79 (d, 1H), 6,69 (dd, 1H), 4,03 (s, H), 3,97 (t, 2H), 3,08 -3,19 (m, 2H), 2,93 (s, 3H), 2,91 - 2,97 (m, 2H), 2,90 (s, 3H), 2,11 (s, 3 H), 1,65 - 1,79 (m, 2H), 1,39 - 1,54 (m, 2H), 0,95 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C17H28N2O2(slobodna baza): 292,42; utvrđeno: 293,25 (MH<+>).
[0092] Analogno, polazeći od (2,6-difluor-3-metoksifenil)-acetonitrila, pripremljeno je sledeće jedinjenje:
2-[2-(3-butoksi-2,6-difluorofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,16 (br s, 2H), 7,07 - 7,18 (m, 1H), 6,96 - 7,07 (m, 1H), 4,07 (s, 2H), 4,02 (t, 2 H), 3,08 (s, 4 H), 2,93 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 1,63 - 1,76 (m, 2H), 1,36 - 1,51 (m,2H), 0,93 (t, 3H).
ESI<+>MS: izračunato za C16H24F2N2O2(slobodna baza): 314,37; utvrđeno: 315,20 (MH<+>).
Primer 6
2-[2-(3-Butoksifenil)-2-metilpropilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
Korak 1: 2-(3-Metoksifenil)-2-metilpropionitril
[0093] U rastvor (3-metoksifenil)-acetonitrila (8,0 g; 0,054 mol) u DMF (25 ml), ohlađen do 0°C, je dodat NaH (1,3 g; 0,054 mol) i reakciona smeša je mešana tokom 30 minuta. Zatim je dodat MeI (3.3 ml; 0.054 mol) i nastavljeno je mešanje smeše tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Nakon tog perioda, reakciona smeše je ponovo ohlađena do 0°C, pa su nakon 30 minuta dodati NaH (1.3 g; 0.054 mol) i MeI (3.3 ml; 0.054 mol) i smeša je dodatno mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je uparen DMF, a sirovi proizvod je razblažen slanom vodom i ekstrahovan sa Et2O. Organska faza je isprana vodom, osušena upotrebom Na2SO4, nakon čega je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom, a ostatak prečišćen fleš hromatografijom (petrolej etar: AcOEt 95:5). Tako je dobijeno jedinjenje iz naslova (4 g; prinos 42%) u vidu bezbojnog ulja. ESI<+>MS: izračunato za C11H13NO: 175,23; utvrđeno: 176,1 (MH )<+>).
Korak 2: 2-[2-(3-Butoksifenil)-2-metilpropilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
[0094] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od 2-(3-metoksifenil)-2-metilpropionitrila praćenjem postupka opisanog u Primeru 5.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,44 (br s, 2H), 7,28 (t, 1H), 6,90 - 7,04 (m, 2H), 6,77 - 6,90 (m,1H), 3,99 (t, 2H), 3,88 (s, 2H), 3,16 (s, 2H), 2,88 (s, 6H), 1,64 - 1,78 (m, 2H), 1,42 - 1,55 (m, 2H), 1,36 - 1,42 (m, 6H), 0,90 - 1,04 (m, 3H). ESI<+>MS: izračunato za C18H30N2O2(slobodna baza): 306,45; utvrđeno: 307,26 (MH<+>).
Primer 7
2-[2-(3-Butiltiofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
Korak 1: (3-Butiltiofenil)-acetonitril
[0095] U rastvor (3-jodofenil)-acetonitrila (2,0 g; 8,2 mmol) i S-butil estra sirćetne kiseline (2,4 ml; 24,6 mmol) u n-BuOH (5 ml) su dodati CuI (0,156 g; 0,8 mmol), etilen glikol (0,96 ml; 1,7 mmol) i K2CO3(24 g; 17,3 mmol), pa je smeša grejana u mikrotalasnoj pećnici na 110°C tokom 1 sata. Reakciona smeše je zatim razblažena sa AcOEt i profiltrirana preko sloja celita. Organska faza je isprana vodom i slanim rastvorom, osušena upotrebom Na2SO4, pa je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (petrolej etar:AcOEt od 10:0 do 9:1). Tako je dobijeno čisto jedinjenje iz naslova u vidu bledo žutog ulja (1,0 g; prinos 64%) koje je upotrebljeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
ESI<+>MS: izračunato za C12H15NS: 205,32, bez mase koja bi bila detektabilna.
Korak 2: 2-[2-(3-Butiltiofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
[0096] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od (3-butiltiofenil)-acetonitrila praćenjem postupka koji je opisan u Primeru 5.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,08 (br s, 2H), 7,23 - 7,36 (m, 1H), 7,15 - 7,23 (m, 2H), 6,95 - 7,11 (m, H), 4,03 (s, 2H), 3,08 - 3,21 (m, 2H), 2,92 - 3,02 (m, 4H), 2,94 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 1,49 - 1,67 (m, 2H), 1,30 - 1,49 (m, 2H), 0,89 (t, 3H). ESI<+>MS: izračunato za C16H26N2OS (slobodna baza): 294,46; utvrđeno: 295.20 (MH<+>).
Primer 8
2-[2-(3-Butilsulfonilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
Korak 1: 2-[2-(3-Butilsulfonilfenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid
[0097] U rastvor 2-[2-(3-butiltiofenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorida (0,25 g; 0,62 mmol, dobijenog od jedinjenja iz Koraka 2 Primera 7, reakcijom s boc2O praćenjem procedure koja je opisana u prvom delu Koraka 1 iz Primera 1) u acetonitrilu (20 ml)/vodi (10 ml) u porcijama je dodata smeša oksona (0,92 g; 1,5 mmola) i NaHCO3(0.2 g; 2.3 mmol) tokom 5 minuta. Smeše je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, pa je preraspodeljena između vode i CH2Cl2. Organski sloj je ispran vodom i slanim rastvorom, osušen upotrebom Na2SO4, nakon čega je rastvarač uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (petrolej etar: AcOEt 3:7) i tako je dobijeno čisto jedinjenje iz naslova u vidu bezbojnog ulja (0,20 g; prinos 75%).
ESI<+>MS: izračunato za C21H34N2O5S: 426,58; utvrđeno: 427,1 (MH<+>).
Korak 2: 2-[2-(3-Butilsulfonilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid
[0098] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od 2-[2-(3-butilsulfonilfenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilacetamida praćenjem standardne procedure opisane u Koraku 4 Primera 1.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6 TFA): δ 8,84 - 9,10 (m, 2H), 7,74 - 7,86 (m, 2H), 7,57 - 7.71 (m, 2H), 4,06 (t, 2H), 3,03 -3,34 (m, 6 H), 2,95 (s, 3 H), 2,91 (s, 3 H), 1,45 - 1,63 (m, 2 H), 1,24 - 1,42 (m, 2 H), 0,84 (s, 3 H).
ESI+MS: izračunato za C16H26N2OS (slobodna baza): 294,46; utvrđeno: 295,20 (MH+).
Primer 9
2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetiltioacetamid hidrohlorid
[0099] Korak 1: 2-[2-(3-Butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetiltioacetamid. U rastvor 2-[2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetilacetamida (0,38 g; 1,0 mmol) u suvom toluenu (20 ml) je dodat Lawesson-ov reagens (0,58 g; 1,2 mmola) i smeša je grejana na temperature refluksa tokom 2 sata uz mešanje. Rastvarač je zatim uparen pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen flash hromatografijom (petrolej etar: AcOEt od 9:1 do 8:2) da bi se dobilo čisto jedinjenje iz naslova u vidu bezbojnog ulja (0.11 g; prinos 28%).
ESI<+>MS: izračunato za C21H34N2O3S: 394,58; utvrđeno: 395,1 (MH<+>).
Korak 2: 2-[2-(3-Butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetiltioacetamid hidrohlorid
[0100] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno polazeći od 2-[2-(3-butoksifenil)-(terc-butoksikarbonil)etilamino]-N,N-dimetiltioacetamida praćenjem standardne procedure opisane u Koraku 4 Primera 1. Dobijena je bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8,88 (s, 2H), 7,16 - 7.34 (m, 1H), 6,73 - 6,88 (m, 3H), 4,17 (s, dd, 2H), 3,96 (dd, 2 H), 3,43 (s, 3H), 3,31 (s, 3H), 3,16 - 3,26 (m, 2H), 2,92 - 3,04 (m, 2H), 1,62 - 1,76 (m, 2H), 1,36 - 1,50 (m, 2H), 0,94 (t, 3H). ESI<+>MS: izračunato za C16H26N2OS (slobodna baza): 294,46; utvrđeno: 295,22 (MH<+>).
Primer 10
2-[2-(3-Butoksifenil)]-(N'-metoksi)etilamino]-N,N-dimetilacetamid
Korak 1: 2-(3-Butoksifenil)-acetaldehid
[0101] U rastvor 2-(3-butoksifenil)-etanola (3,00 g; 15,4 mmol, pripremljenog polazeći od 2-(3-hidroksifenil)-etanola praćenjem procedure opisane u Koraku 2 Primera 1) u CH2Cl2(100 ml) je dodat Dess-Martin-ov perjodinanski reagens (8,5 g; 20,1 mmol), pa je reakciona smeša ostavljena na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je zatim presut u zasićen rastvor NaHCO3koja je sadržavao Na2S2O3(35 g) i smeša je mešana dodatnih 30 minuta. Organski sloj je izdvojen, osušen upotrebom Na2SO4, profiltriran i uparen pod sniženim pritiskom.
[0102] Ostatak koji je sadržavao jedinjenje iz naslova (2,9 g; prinos 99%) je upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 2: 2-(3-Butoksifenil)-(N-metoksi)etilamin
[0103] U suspenziju 2-(3-butoksifenil)-acetaldehida (2,00 g; 10,4 mmol) i O-metoksiamin hidrohlorida (1,12 g; 13,4 mmol) u vodi (13 ml), u kapima je dodat Na2CO3(0,66 g; 6,2 mmol) u vodi (20 ml) uz mešanje na 0°C. Reakciona smeša je zatim ostavljena na sobnoj temperaturi preko noći, pa je ekstrahovana dietileterom. Organski sloj je osušen upotrebom Na2SO4, profiltriran i uparen pod sniženim pritiskom.
[0104] Ostatak koji je sadržavao željeni oksimski intermedijer (2,24 g; 10,2 mmol) je rastvoren u metanolu (60 ml) i dodata je sirćetna kiselina (8,8 ml; 153,0 mmol). Rastvor je zatim ohlađen na 0°C i u porcijama je dodat NaCNBH3. Reakciona smeša je nakon toga mešana na sobnoj temperaturi preko noći, pa je rastvarač uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak je preraspodeljen između 5% rastvora NaHCO3i etil acetata. Organska faza je osušena upotrebom Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana do suvog pod vakuumom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrolej etar:etil acetat 9:1) da bi se obezbedilo 0.88 g (prinos 38%) jedinjenja iz naslova.
Korak 3: 2-[2-(3-Butoksifenil)]-(N'-metoksi)etilamino]-N,N-dimetilacetamid
[0105] 2-(3-Butoksifenil)-(N-metoksi)etilamin (0,5 g; 2,25 mmol), dobijen kao što je to opisano u Koraku 2, je rastvoren u acetonitrilu (15 ml), nakon čega su dodati etildiizopropilamin (1,95 ml; 11,25 mmol) i potom 2-hlor-N,N-dimetilacetamid (1.15 ml; 11.25 mmol). Rastvor je zatim grejan na 130°C u mikrotalasnoj pećnici tokom 6 sati. Smeša je dalje ohlađena do sobne temperature, rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom,a ostatak je preraspodeljen između 5% rastvora NaHCO3i etil acetata. Organska faza je osušena upotrebom Na2SO4, profiltrirana i koncentrovana do suvog pod vakuumom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrolej etar:etil acetat 1:1) da se obezbedilo 0,25 g (prinos 36%) jedinjenja iz naslova.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6 TFA): 7,17 (t, 1H), 6,61 - 6,89 (m, 3H), 3,94 (t, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,47 (s, 3 H), 2,98 (s, 3 H), 2,98 - 2,97 (m, 2H), 2,80 (s, 3H), 2,72 - 2,86 (m, 2H), 1,58 - 1,77 (m, 2H), 1,34 - 1,53 (m, 2H), 0,93 (t, 3H). ESI<+>MS: izračunato za C17H28N2O3(slobodna baza): 308,42; utvrđeno: 309,18 (MH )<+>).
Primer 11: Ispitivanje influksa kroz TTXs kanale za natrijum
[0106] ND7/23 ćelijska linija, izvedena iz gangliona dorzalnog korena kičmene moždine pacova, endogeno eksprimira mešovitu populaciju TTXs kanala za natrijum. Ovim ćelijama nedostaju TTXr kanali za natrijum što je pokazano odsustvom odgovarajućih transkripata.
[0107] ND7/23 ćelije su gajene u DMEM-u sa 10% FBS i 1 mM natrijum piruvatom. Ćelije su zasejane u gustini od 50.000 ćelija/bunariću na mikrotitar ploču sa 96 bunarića obloženu poli-L-lizinom, pa su ćelije pre upotrebe inkubirane još 18-24 sata.
[0108] Za ispitivanje je upotrebljen komercijalni paket za ispitivanje membranskog potencijala (Molecular Devices) koji se zasniva na negativno naelektrisanoj fluorescentnoj boji sposobnoj da ispratiti promene u membranskom potencijalu koje nastaju ulaskom natrijuma usled otvaranja kanala.
[0109] Ćelije su inkubirane s odgovarajućom količinom boje tokom 30 minuta na 25°C. Zatim je dodat 100nM toksin Anemonija sulcata (upotrebljava se kao pojačivač odgovora za supstancu koja otvara kanal), samostalno, ili u prisustvu TTX (referentni standard) ili ispitivanog jedinjenja i inkubacija je nastavljena tokom 15 minuta.
[0110] Fluorescenca (talasna dužina ekscitacije: 530 nm, emisije: 565 nm) je izmerena pre i posle (40-45 s) automatizovanog injeciranja supstance za otvaranje kanala za natrijum - veratridina (100 µM) upotrebom čitača za mikrotitar ploče tipa Victor (Perkin Elmer).
[0111] Krive inhibicije su izračunate na osnovu rezultata dobijenih za 5 koncentracija, svaku u triplikatu, a IC50vrednost je određena upotrebom linearne regresione analize.
[0112] Jedinjenja predmetnog pronalaska inhibiraju TTXs kanale za natrijum sa farmakološki značajnim IC50vrednostima.
[0113] Rezultati dobijeni za neka od jedinjenja koja predstavljaju reprezente za celu klasu jedinjenja predmetnog pronalaska, upoređeni sa standardima ralfinamidom i safinamidom, su prikazani u Tabeli 1.
Tabela 1
Primer 12: Ispitivanje influksa kroz kanale za kalcijum
[0114] Tumorska ćelijska linija hipofize miša AtT20/D16v-F2 prioritetno eksprimira kanale za kalcijum L-tipa.
[0115] AtT20 ćelije su gajene u DMEM-u sa 10% FBS i 4mM glutaminom. Ćelije su zasejane u gustini od 200.000 ćelija/bunariću na mikrotitar ploču sa 96 bunarića obloženu poli-L-lizinom, nakon čega su ćelije pre upotrebe inkubirane još 18-24 sata.
[0116] Za ispitivanje je upotrebljen komercijalni paket za određivanje koncentracije Ca<++>(Molecular Devices) koji se zasniva na negativno naelektrisanoj fluorescentnoj boji sposobnoj da detektuje influks kalcijuma uslovljen depolarizacijom membrane.
[0117] Ćelije su inkubirane s odgovarajućom količinom boje za kalcijum tokom 30 minuta na 37°C. Zatim je dodat ωkonotoksin (1 µM), samostalno, ili u prisustvu nifedipina (referentni standard) ili ispitivanog jedinjenja i inkubacija je nastavljena tokom 15 minuta.
[0118] Fluorescenca (talasna dužina ekscitacije: 485 nm, emisije: 535 nm) je izmerena pre i posle (30-40 s) automatizovanog injeciranja depolarizacionog rastvora (100 mM KCl) upotrebom čitača za mikrotitar ploče tipa Victor (Perkin Elmer).
[0119] Krive inhibicije su izračunate na osnovu rezultata dobijenih za 5 koncentracija, svaku u triplikatu, a IC50vrednost je određena upotrebom linearne regresione analize.
[0120] Rezultati dobijeni za neka od jedinjenja koja predstavljaju reprezente za celu klasu jedinjenja predmetnog pronalaska, upoređeni sa standardima ralfinamidom i safinamidom, su prikazani u Tabeli 2.
Tabela 2
Primer 13: Evaluacija blokade Na<+>struje patch-clamp metodom u kortikalnim neuronima pacova
Priprema ćelija i njihovo gajenje u kulturi
[0121] Procedure koje podrazumevaju upotrebu životinja i brigu o njima sprovedene su praćenjem institutskog vodiča za upotrebu i brigu o životinjama koji je u skladu sa nacionalnim (D.L. n.116, GU, suplement 40, 18. februar 1992. godine) i međunarodnim zakonima i politikama (Direktiva EEC veća 86/609, OJL358. 1, 12. decembar 1987. godine, Vodič za brigu i upotrebu životinja u laboratoriji, US National Research Council, 1996). Kortikalni neuroni su pripremljeni iz embriona pacova Wistar soja (E17-E19). Ženka pacova trudne 17-19 dana su anestezirane i žrtvovane. Fetusi (n = 4-5) su disekovani i prebačeni u ledeno-hladan Hankov rastvor (Hankov rastvor (Life tech.14170-088) glukoza 30% Pen-Strep 100x (Life Tech. 15140-122) 100U-100 µg/ml i Hepes-NaOH 5 mM). Materica i posteljica su izvađeni, a izdvojene glave fetusa koje su prebačene u novi, ledeno-hladan Hankov rastvor.
[0122] Koža glave je uklonjena upotrebom pincete, lobanja je bočno zasečena odpozadi do nivoa očiju i mozak je izdvojen upotrebom zakrivljene pincete.
[0123] Mozak je isečen na dve polovine, tkivo spoljne vezivne ovojnice je uklonjeno pincetom i, držeći mozak okrenutim naopako, pincetom su uklonjeni mali mozak, moždano stablo i međumozak u pokušaju da se očisti što više tkiva sa unutrašnje strane kore velikog mozga (korteksa).
[0124] Svaki korteks je usitnjen upotrebom makaza, nakon čega su delići tkiva prebačeni u tube za centrifugiranje od 15 ml upotrebom pipete od 5 ml. Tkivo je potom isprano Hankovim rastvorom dva puta.
[0125] Većina rastvora je dalje uklonjena (tako da ostane 1-2 ml). Tkivo je najpre disosovano upotrebom pipete od 5 ml, a potom i upotrebom dve vatrostalne Pasterove pipete (srednje veličine i sa malim otvorom). Nakon mehaničke disocijacije, dodato je 5 ml kompletnog DMEM-a (Dulbecco-ov modifikovani Eagle medijum za gajenje ćelija) (Gibco 41966-029) FBS (Hyclone) 10% Glutamin (Life Tech 25030-024) 2 mM Pen-Strep 100U-100 µg/ml, pa je suspenzija ćelija centrifugirana 5 min na 1000 obrtaja/min. Zatim je uklonjen supernatant i dodato je 5 ml kompletnog Neurobasal medijuma (NB medij (Life tech.21103-049) B27 (Life tech.17504-044) 2% Glutamin 2mM Pen-Strep 100U-100 µg/ml).
[0126] Ćelije su prebrojane i razređene u Neurobasal medijumu do koncentracije od 400000 ćelija po Petrijevoj šolji koja je prethodno bila obložena poli-D-lizinom u koncentraciji od 5 µg/ml.
[0127] Kortikalni neuroni su korišteni od 6. do 11. dana nakon zasađivanja, a Neurobasal medijum je menjan jedan put nedeljno.
Patch-clamp snimanja na celokupnoj ćeliji
[0128] Eksperimenti na kortikalnim neuronima su urađeni upotrebom postupka patch-clamp-a na celoj ćeliji (Hamill i saradnici, PFUGHERS ARCH, avg. 1981, 391 (12), 85-100). Membranske struje su snimane i filtrirane na 5 kHz upotrebom Axon Axopatch 200B pojačivača, dok su podaci digitalizovani upotrebom Axon Digidata 1322A (Axon Instruments, CA, USA). Protokoli snimanja i prikupljanje podataka su kontrolisani tokom eksperimenta upotrebom Axon pClamp8 kompjuterskog programa. Merne i referentne elektrode su bile AgCl-Ag elektrode. Za povlačenje patch-clamp pipeta je korišćen Sutter Instrument P-87 Puller aparat (CA, USA), a uz otpor od 2-3 MΩ usled upotrebe Harward-ovih borosilikatnih staklenih cevčica. Ćelije su kontinuirano bile superfundovane vanćelijskim rastvorima, upotrebom aparata za menjanje rasvora tipa Biologic RSC-200.
Protokoli voltaže i analize podataka
[0129] Da bi se ispitao efekat jedinjenja na struje natrijuma u kortikalnim neuronima, konstantan membranski potencijal je podešen na -90 mV, a zatim je upotrebljen protokol sa dva koraka za određivanje voltažne zavisnosti bloka. Struje natrijuma su aktivirane impulsom od 30 ms do -10 mV (probni impuls) od prethodnog prekondicionog potencijala koji je iznostio 110 mV u trajanju od 2000 ms (stanje mirovanja), sa potencijalom od ~ -50 mV (polovina maksimalnog stabilnog ravnotežnog stanja).
[0130] Tonični blok struja u mirovanju i prilikom depolarizacije za datu koncentraciju leka je izračunat kao razlika između maksimuma Na<+>struje u kontrolnom, vanćelijskom rastvoru i maksimuma struja u prisustvu ispitivanog jedinjenje koja je dalje podeljena sa vrednošu kontrolne maksimalne vrednosti.
[0131] Krive zavisnosti koncentracije i stepena inhibicije su dobijene unošenjem vrednosti toničnih blokova u stanju mirovanja i depolarizacije u odnosu na koncentracije leka. Krive zavisnosti odgovora i doze su fitovane u odnosu na vrednosti toničnog bloka, a shodno jednačini: y = A2 (A1-A2)/[1+(x/IC50)p]. A1 i A2 predstavljaju fiksne vrednosti od 0 i 1 koje odgovaraju trenutnoj inhibiciji od 0 i 100%, X označava koncentraciju leka, IC50je koncentracija leka koja dovodi do inhibicije struje od 50%, dok p označava odgovarajući faktor nagiba.
[0132] Očigledan afinitet leka za inaktivirano stanje (Ki) je izračunat prema jednačini 1/Kdep =h/Kr (1-h)/Ki u kojoj Kr označava afinitet leka za stanje mirovanja/status zatvorenog kanala; Kdep ozna
ava IC50u depolarizacionom stanju, dok su h i (1-h) frakcije kanala koji su prisutni prilikom potencijala mirovanja i depolarizacije, tim redom.
Rastvori i lekovi
[0133] Kontrolni rastvor je sadržavao (mM): NaCl 60, holinCl 60, CaCl21,3, MgCl22, KCl 2, CdCl20.4, NiCl20.3, TEACl 20, Hepes 10, glukozu 10.
[0134] Rastvor u unutrašnjosti pipette je sadržavao (mM): CsF 65, CsCl 65, NaCl 10, CaCl21,3, MgCl22, Hepes 10, EGTA 10, MgATP 1.
[0135] Jedinjenja su rastvarana u vidu koncentrovanog rastvora (20 mM) u DMSO-u, pa su razblaživana do finalnih koncentracija u vanćelijskom rastvoru.
Rezultati
[0136] Jedinjenja predmetnog pronalaska su sposobna da blokiraju Na<+>struje u korikalnim neuronima pacova. Rezultati dobijeni za 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid (NW-3509), reprezentativno jedinjenje hemijske klase predmetnog pronalaska, upoređeni sa standardima upotrebljenim u našoj studiji - safinamidom i ralfinamidom, su prikazani u Tabeli 3.
Tabela 3
[0137] Podaci izraženi kao IC50vrednost u µM koncentraciji, kao i afinitet za inaktivirano stanje (Ki), pokazuju da je jedinjenje predmetnog pronalaska vrlo snažan i voltažno-zavisan blokator kanala za natrijum.
Primer 14: Evaluacija blokade Na<+>struje patch-clamp metodom u ND7/23 ćelijskoj liniji
Održavanje ćelijske linije
[0138] ND7/23 (ECACC br. 92090903 firme SIGMA) je hibridna ćelijska linija dobijena iz neonatalnog DRG pacova fuzionisanog sa mišjim neuroblastomom N18Tg2 (Wood i saradnici, Proc. Biol. Sci., 22. sept. 1990, 241 (1302), 187-194). ND7/23 ćelije ispoljavaju karakteristike slične senzornim neuronima i eksprimiraju kanale odgovorne za tetrodotoksin-senzitivne (TTX-s), ali ne i tetrodotoksin-rezistentne (TTX-r) struje (Zhou i saradnici, J. Pharmacol. Exp. Ther., avg.2003, 306 (2), 498-504; John i saradnici, Neuropharmacology, mart 2004, 46 (3), 425-439). Nedostatak TTX-r struja je u skladu sa nedostatkom transkripata za TTX-r kanale u navedenim ćelijama.
[0139] Molekulski identitet kanala odgovornih za TTX-s struje je nepoznat, ali se pretpostavlja da je verojatno da do struje dolazi usled aktivnosti mešane populacije kanala za natrijum. Ćelije se rutinski održavaju u DMEM-u sa 10% FBS, 4 mM glutaminom, 1 mM natrijum piruvatom. Dan pre patch-clamp eksperimenta, ćelije su odvojene od podloge i zasađene u gustini od 100.000 ćelija/35 mm Petrijevoj šolji koja je prethodno bila obložena polilizinom.
Patch-clamp snimanja na celokupnoj ćeliji
[0140] Eksperimenti na ND7/23 ćelijama su urađeni upotrebom standarnog patch-clamp postupka (Hamill i saradnici, PFUGHERS ARCH, avg.1981, 391 (12), 85-100), a kao što je opisano u prethodnom tekstu.
Protokoli voltaže i analize podataka
[0141] Da bi se ispitao efekat jedinjenja na struje natrijuma u ND7/23 ćelijama, konstantan membranski potencijal je podešen na -90 mV, a zatim je upotrebljen protokol sa dva koraka za određivanje voltažne zavisnosti bloka. Struje natrijuma su aktivirane impulsom od 30 ms do -10 mV (probni impuls) od prethodnog prekondicionog potencijala koji je iznosio 110 mV u trajanju od 2000 ms (stanje mirovanja), sa potencijalom od ~ -70 mV (polovina maksimalnog stabilnog ravnotežnog stanja).
[0142] Tonični blok struja u mirovanju i prilikom depolarizacije za datu koncentraciju leka je izračunat kao razlika između maksimuma Na<+>struje u kontrolnom, vanćelijskom rastvoru i maksimuma struja u prisustvu ispitivanog jedinjenje koja je dalje podeljena sa vrednošu kontrolne maksimalne vrednosti.
[0143] Krive zavisnosti koncentracije i stepena inhibicije su dobijene unošenjem vrednosti toničnih blokova u stanju mirovanja i depolariziranom stanju u odnosu na koncentraciju leka. Krive zavisnosti odgovora i doze su fitovane u odnosu na vrednosti toničnog bloka, a shodno jednačini: y = A2 (A1-A2)/[1+(x/IC50)p]. A1 i A2 predstavljaju fiksne vrednosti od 0 i 1 koje odgovaraju 0 i 100% trenutnoj inhibiciji, X označava koncentraciju leka, IC50je koncentracija leka koja dovodi do inhibicije struje od 50%, dok p označava odgovarajući faktor nagiba.
[0144] Očigledan afinitet leka za inaktivirano stanje (Ki) je izračunat prema jednačini 1/Kdep =h/Kr (1-h)/Ki u kojoj Kr označava afinitet leka za stanje mirovanja/status zatvorenog kanala; Kdep ozna
ava IC50u depolarizacionom stanju, dok su h i (1-h) frakcije kanala koje su prisutne prilikom potencijala mirovanja i depolarizacije, tim redom.
Rastvori i lekovi
[0133] Kontrolni rastvor je sadržavao (mM): NaCl 80, holinCl 40, CaCl21,3, MgCl22, KCl 2, CdCl20.4, NiCl20.3, TEACl 20, Hepes 10, glukozu 10.
[0134] Rastvor u unutrašnjosti pipette je sadržavao (mM): CsF 65, CsCl 65, NaCl 10, CaCl21,3, MgCl22, Hepes 10, EGTA 10, MgATP 1.
[0135] Jedinjenja su rastvarana u vidu koncentrovanih rastvora (20 mM) u DMSO-u, pa su razblaživana do finalnih koncentracija u vanćelijskom rastvoru.
Rezultati
[0136] Jedinjenja predmetnog pronalaska su sposobna da blikiraju Na<+>struje u ND7/23 ćelijama. Rezultati dobijeni za 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid (NW-3509), reprezentativno jedinjenje hemijske klase predmetnog pronalaska, upoređeni su sa standardima u našoj studiji - safinamidom i ralfinamidom, su prikazani u Tabeli 4.
Tabela 4
[0149] Podaci izraženi kao IC50vrednost u µM koncentraciji, kao i afinitet za inaktivirano stanje (Ki), pokazuju da je jedinjenje predmetnog pronalaska vrlo snažan i voltažno-zavisan blokator kanala za natrijum.
Primer 15: In vitro ispitivanje aktivnosti MAO-B enzima
Priprema membrana (neprečišćena mitohondrijska frakcija)
[0150] Mužjaci pacova Wistar soja (Harlan, Italija, težine 175-200 g) su žrtvovani pod dejstvom blage anestezije, pa su mozgovi brzo uklonjeni i homogenizovani u 8 volumena ledeno-hladnog 0,32 M saharoznog pufera koji je sadržavao 0,1 M EDTA, pH 7,4. Sirovi homogenat je zatim centrifugiran na 2220 obrtaja/min (rpm) tokom 10 minuta, izdvojen je supernatant, pa je talog homogenizovan i ponovo centrifugiran. Dva supernatanta su spojena i centrifugirana na 9250 rpm tokom 10 minuta na 4°C. Talog je konačno resuspendovan u svežem puferu i centrigiran 11250 rpm tokom 10 minuta na 4°C, a tako dobijeni talog je ostavljen na -80°C.
Ispitivanje in vitro aktivnosti enzima
[0151] Enzimska aktivnost je ispitivana upotrebom radioenzimskog eseja i supstrata<14>C-feniletilamina (PEA) koji je specifičan za MAO-B.
[0152] Talog sa mitohondrijama (500 µg proteina) je resuspendovan u 0,1 M fosfatnom puferu (pH 7,4). Zatim je 200 µl suspenzije prebačeno u 50 µl rastvora jedinjenja koje se ispituje ili pufera i sve je inkubirano 30 min na 37°C (preinkubacija). Dalje je dodat supstrat (50 µl) i inkubacija je produžena još 10 minuta na 37°C (<14>C-PEA, 0,5 µM).
Reakcija je zaustavljena dodavanjem 0,2 ml perhlorne kiseline. Nakon centrifugiranja, deaminirani metaboliti su ekstrahovani sa 3 ml toluena, a radioaktivna organska faza koja je sadržavala neutralne i/ili kisele metabolite nastale usled aktivnosti MAO-B je podrvgnuta merenju upotrebom tečne scincilacione spektrometrije sa efikasnošću od 90%. Aktivnost MAO-B je izražena kao broj nmolova supstrata koji je transformisan/mg proteina/min.
[0153] Reprezentativna jedinjenja cele hemijske klase jedinjenja predmetnog pronalaska nisu ispoljila MAO-B inhibitornu aktivnost u relevantnim koncentracijama, što je prikazano u Tabeli 5 posredstvom IC50vrednosti (koncentracija jedinjenja sposobna da inhibira 50% aktivnosti MAO-B enzima).
Zapravo, značajna inhibicija MAO-B se razmatra kada su IC50vriednosti u sub-mikromolarnom opsegu kao što je to slučaj sa standardima upotrebljenim u našoj studiji, safinamidom i ralfinamidom.
Tabela 5
Primer 16: Test sa formalinom
[0154] Prema izmenjenom protokolu Roslanda i saradnika (Rosland J.H., Tjolsen A., Maehle B., Hole K. Pain (1990) 42: 235-242), miševi su subkutano (s.c.) injecirani u površinu tabana leve stražnje šape sa 20 µl 2.7%-tnog rastvora formalina i potom odmah premešteni u providnu (PVC) komoru za opservaciju (23 x 12 x 13 cm). Ponašanje uslovljeno bolom je kvantifikovano brojanjem kumulativnog vremena do lizanja ubodene šape (s). Merenja su rađena tokom rane faze (0-5 minuta) i kasne faze (20-40 min) po injeciranju formalina (Tjolsen A., Berge O.G., Hunskaar S., Rosland J.H., Hole K. Pain (1992) 51: 5-17).
[0155] Ispitivano jedinjenje je primenjeno p.o. ili s.c.5-45 minuta pre injeciranja formalina u zapremini od 10 ml/kg telesne težine, u grupama od 10 miševa po dozi. Kontrolna grupa je tretirana rastvaračem.
[0156] Utvrđeno je da su oralno i supkutano primenjena jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu.
[0157] Rezultati su izraženi kao ED50 vrednosti dobijene za jedno jedinjenje koje je reprezentativno za celu klasu jedinjenja predmetnog pronalaska, a primenjeno u dozi od 0.6-20 mg/kg p.o. i s.c. Rezultati su prikazani u Tabeli 6 koja ukazuje da navedena jedinjenja ispoljavaju dobru analgetsku aktivnost.
Tabela 6
Primer 17: Model neuropatskog bola usled povezivanja spinalnog nerava
[0158] Dejstvo jedinjenja predmetnog pronalaska na neuropatsku bol je ispitivano u modelu neuropatskog bola izazvanog povezivanjem (ligacijom) spinalnog nerava (SNL) (Kim S. H. i Chung J.M. (Pain (1992) 50: 355-363).
[0159] Životinje: Upotrebljeni su mužjaci pacova Wistar soja telesne težine od 175 do 200 g. Sve životinje su gajene u grupama od 8/10 u sobi sa kontrolisanom temperaturom (22 ± 0,5°C) i relativnom vlažnošću (60-70%), pri režimu ciklusa svetlo/mrak od 12h (svetlo je bilo uključeno između 6 časova ujutru i 6 časova uveče) i sa slobodnim pristupom vodi i standarnoj hrani za glodare.
[0160] Lekovi: Nakon merenja bazalnog praga alodinije, ispitivana jedinjenja su rastvorena u destilovanom vodi i primenjena oralno u dozama od 0,5-100 mg/kg u zapremini od 2 ml/kg. Kontrolni pacovi su tretirani samo destilovanom vodom.
[0161] Ligacija spinalnog nerva: Neuropatija je izazvana modifikovanom procedurom koju su opisali Kim S. H. i Chung J.M. (Pain (1992) 50: 355-363). U kratkim crtama, životinje su anestezirane natrijum tiopentalom u dozi od 35 mg/kg i.p. (uz dodatnu dozu ukoliko je bilo potrebno), pa je disekcijom omogućen pristup dorzalnom delu vratne kičme od L4 do S2, nakon čega su izloženi spinalni nervi, L5 i L6, čvrsto ligirani upotrebom svilenog 4-0 suturnog konca. Rez je zatim zatvoren, a pacovi su ostavljeni da se oporave od operacije oko 5-14 dana pre testiranja.
[0162] Mehanička alodinija: Pragovi mehaničke alodinije određeni su praćenjem postupka Chaplana i saradnika (Chaplan S.R., Bach F.W., Pogrel J.W., Chung J.M. i Yaksh T.L.J. Neurosc. Method. (1994) 53: 55-63). Pacovi su raspoređeni u posebne plastične kutije veličine 24 x 10 x 15 cm sa mrežastom metalnom podlogom i zatim ostavljeni da se prilagode na nov prostor oko 30 minuta pre testiranja. Pragovi povlačenja zadnjih šapa pacova su određeni kao odgovor na probni test u kome je upotrebljeno 8 kalibriranih von Frey-evih filamenata (Stoelting, Wood Dale, IL) sa logaritamskim povećanjem krutosti u rasponu od 0,41 do 15 g (4 do 150 mN). Svako vlakno je primenjivano pod pravim uglom u odnosu na površinu tabana šape pacova koja je bila ligirana. Kao maksimalno odstupanje je uzeta vrednost od 15 g. Pragovi povlačenja šape su dalje određivani uzastopnim povećavanjem i smanjenjem snage podražaja (postupak "gore-dole") što je analizirano upotrebom Dikonovog neparametrijskog testa. Rezultati su izraženi u vidu srednje vrednosti praga povlačenja (Dixon W. J. Am. Stat. Assoc. (1965) 60: 967-978). Prag mehaničke alodinije i kod "lažno operisanih" i kod ligiranih životinja je meren pre (pre leka) i 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360 i 420 min nakon p.o. tretmana. Za oba protokola tretmana je izmeren i prag mehaničke alodinije nakon 24 sata. Ispitivanje je sprovedeno između 9 časova ujutro i 6 časova uveče. Osobe koje su sprovodile analizu nisu bile upućene u eksperimentalne uslove i vrstu tretmana za datu životinju.
[0163] Termalna hiperalgezija: Termička hiperalgezija je ispitivana upotrebom plantarnog testa (Ugo Basile, Varese, Italija). Pacovi su bili smešetni u kućišta od pleksiglasa na čistoj staklenoj ploči. Dok je pacov bio relativno miran, izvor zračenja ispod staklenog poda je bio usmeren na površinu tabana zadnje šape i merena je latenca povlačenja. Pre procene termalne hiperalgezije, intenzitet topline zračenja je podešen tako da se dobije početna latentna vrednost od oko 20 sekundi kod pacova koji nisu izlagani testu (naivni pacovi), a uz gornji prag automatski namešten na 30 s da bi se izbeglo oštećenje tkiva.
[0164] Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu.
[0165] (Slika 1: Efekat 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorida (NW-3509) koji je oralno primenjen u testu termalne hiperalgezije kod SNL pacova - ED50 =10,58 mg/kg (6,7-16,6) - vrednosti predstavljaju srednju vrednost ± SEM za 10 životinja po grupi).
Primer 18: Kompletan Freundov adjuvansni model hroničnog inflamatornog bola
[0166] Monoartritis je indukovan kod pacova (200 g težine težine) ubrizgavanjem u levu zadnju šapu 100 ul kompletnog Freundovog adjuvansa (CFA, Sigma) koji je sadržavao Mycobacterium tubercolosis inaktiviran toplotom i isušen, a u smeši parafinskog ulja i emulgujućeg agensa, manid monooleata. Grupa naivnih pacova upotrebljena je kao kontrola. CFA injekcija je dovela do pojave lokalizovanog edema i upale počevši od nekoliko sati nakon injekcije, uz progresivno smanjenje praga mehaničkog povlačenja.
[0167] Svaka životinja je ostavljenja da se kod nje razvije artritis tokom perioda od 8-9 dana pre testiranja.
[0168] Mehanička alodinija: Pragovi mehaničke alodinije su određeni praćenjem postupka Chaplana i saradnika (Chaplan S.R., Bach F.W., Pogrel J.W., Chung J.M. i Yaksh T.L.J. Neurosc. Method. (1994) 53: 55-63). Pacovi su raspoređeni u posebne plastične kutije veličine 24 x 10 x 15 cm sa mrežastom metalnom podlogom i zatim su ostavljeni da se prilagode na nov prostor oko 30 minuta pre testiranja. Pragovi povlačenja zadnjih šapa pacova su određeni kao odgovor na probni test u kome je upotrebljeno 8 kalibriranih von Frey-evih filamenata (Stoelting, Wood Dale, IL) sa logaritamskim povećanjem krutosti u rasponu od 0,41 do 15 g (4 do 150 mN). Svako vlakno je primenjivano pod pravim uglom u odnosu na površinu tabana povezane šape pacova. Kao maksimalno odstupanje je uzeta vrednost od 15 g. Pragovi povlačenja šape su dalje određivani uzastopnim povećavanjem i smanjenjem snage podražaja (postupak "gore-dole") što je analizirano upotrebom Diksonovog neparametrijskog testa. Rezultati su izraženi u vidu srednje vrednosti praga povlačenja (Dixon W. J. Am. Stat. Assoc. (1965) 60: 967-978). Prag mehaničke alodinije i kod "lažno operisanih" i kod ligiranih životinja je meren pre (pre leka) i 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360 i 420 min nakon p.o. tretmana. Za oba protokola tretmana izmeren je i prag mehaničke alodinije nakon 24 sata. Testiranje je sprovedeno između 9 časova ujutro i 6 časova uveče. Osobe koje su sprovodile analizu nisu bile upućene u eksperimentalne uslove i vrstu tretmana za datu životinju.
[0169] Utvrđeno je da su oralno primenjenja reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu.
Primer 19: Model visceralnog bola indukovan sirećetnom kiselinom kod miševa
[0170] Visceralni bol je i dalje jedan od najčešćih oblika bola koji zahteva medicinsku negu. Uprkos uobičajenom verovanju da je visceralni bol samo varijanta somatskog bola, on se razlikuje u neurološkim mehanizmima i po putevima transmisije. Visceralni bol karakteriše referalna hiperalgezija, a isti nije ni uvek povezan sa povredom tkiva.
[0171] Model visceralnog bola indukovan sirćetnom kiselinom se široko upotrebljava u eksperimentalnim istraživanjima za indukciju abdominalnih kontrakcija (Korster R i saradnici, Fed. Pro. (1959) 18: 412; Friese N i saradnici, Life Sci. (1997) 60: 625-634). Model podrazumeva intraperitonelano (i.p.) injeciranje iritirajućeg agensa koji indukuje sindrom nazvan "grčenje" koji podrazumeva kontrakcije stomaka, uvijanje leđa i ekstenziju zadnjih udova.
[0172] Životinje i procedura: Korišćeni su mužjaci CD1 miševa težine 25-33 g. Svaka tretirana grupa je ostavljena 30 minuta u pojedinačnim polipropilenskim providnim kutijama da bi se životinje navikle na nov prostor. Stepen visceralnog bola je određen brojanjem grčenja tokom 10 minuta nakon i.p. ubrizgavanja 0,6 % sirćetne kiseline (10 ml/kg telesne težine), pa je broj grčenja nakon davanja sirćetne kiseline dalje još evaluiran. Brojana su i kompletna stezanja tela (kompletan grč) ili delimična stezanje leđa sa jasnom kontrekcijom stomaka (parcijalni grč).
[0173] Posebne grupe od po 10 miševa su iskorišćene za oralnu primenu nosača (10 ml/kg) ili različite doze ispitivanog jedinjenja rastvorenog u nosaču (10 ml/kg), a 5 minuta pre injeciranja sirćetne kiseline. Podaci su izraženi kao srednji broj grčenja tokom perioda observacije od 10 minuta.
[0174] Utvrđeno je da su oralno primenjenja reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu i da dovode do smanjenja broja grčenja koja su indukova sirćetnom kiselinom.
[0175] (Slika 2: Efekat 2-[2-(3-butoksifenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorida (NW-3509) oralno primenjenog u dozi od 20 mg/kg p.o. u modelu viseralnog bola indukovanog sirćetnom kiselinom. ***p<0.01 u odnosu na efekat nosača; t-test. Vrednosti predstavljaju srednju vrednost ± SEM za n = 10 životinja po grupi. ***p<0.01 Dunnet-ov test) Primer 20: Test maksimalnog elektrošoka (MES) kod miševa
[0176] Test maksimalnog elektrošoka (MES) se najčešće koristi za brz pregled efekata antiepileptičkih lekova u modelima kod glodara.
[0177] Životinje i aparati: Korišćeni su mužjaci CD1 miševa težine 25 g upotrebom postupka opisanog od strane White-a i saradnika, (White H. S., Woodhead J.H., Franklin M.R., Swinyard E. A. i Wolf H. H. Antiepileptic Drugs (1995) 4. izdanje: 99-110, Raven Press, Ltd., New York). Elektrokonvulzivni generator tipa Ugo Basile (Model ECT UNIT 7801) je upotrebljen za isporuku električnog stimulansa dovoljnog da proizvede odgovor tonusa ekstenzije zadnjih ekstremiteta kod najmanje 97% kontrolnih životinja. Stimulus je puštan miševima intra-auralno kroz klip elektrode (0,7 s šoka od 40 mA s pulsnom frekvencom od 80 Hz i trajanjem impulsa od 0.4 ms). Akutni efekat jedinjenja primenjenih intraperitonealno (i.p.), subkutano (s.c.), intravenozno (i.v.) ili oralno (p.o.) 5-120 minuta pre MES indukcije je ispitivan i upotređen sa efektima kod kontrolne grupe koja je bila tretirana samo rastvaračem. Deset miševa je ispitivano po grupi. Potpuna supresija komponente epileptičkog napada tipa tonične ekstenzije zadnjih udova uzeta je kao dokaz antikonvulzivne aktivnosti jedinjenja.
[0178] Jedinjenja predmetnog pronalaska su primenjivana p.o. ili i.v., u dozama od 0,1-100 mg/kg.
[0179] Rezultati, izraženi kao ED50vrednosti dobijene za pojedina jedinjenja koja predstavljaju reprezente za celokupnu hemijsku klasu jedinjenja predmetnog pronalaska, prikazani su u Tabelama 7 i 8 i ukazuju da su navedena jedinjenja aktivna kao antikonvulzivni lekovi.
Tabela 7
Tabela 8
Primer 21: Amfetaminom i hlordiazepoksidom indukovana hiperlokomocija kod miševa
[0180] U ovom modelu, miševi su tretirani smešom d-amfetamina i anksiolitičke doze benzodiazepina, hlordiazepoksida (Rushton R, Steinberg H. Kombinovani efekti hlordiazepoksida i d-amfetamina na aktivnost pacova u nepoznatom okruženju. Nature 1966; 211: 1312-3;. R. Arban, G. Maraia, K. Brackenborough, L. Winyard, A. Wilson, P. Gerrard, C. Large. Procena efekata lamotrigina, valproata i karbamazepina u modelu manije kod glodara, Behavioral Brain Research, 158: 123-132). Smatra se da model u pojedinim aspektima imitira maniju kod bipolarnog poremećaja. Važno je pak napomenuti da hiperaktivnost indukovana dejstvom smeše d-amfetamina i hlordiazepoksida može biti sprečena prethodnim davanjem dobro okarakterisanog stabilizatora raspoloženja, litijuma, kao i drugih sredstava za stabilizaciju raspoloženja (npr. magnezijum valproata i karbamazepina). Stoga, navedni model karakteriše klinička slika i prediktivna sposobnost koja ga svrstava u dobar model bipolarnog poremećaja usled čega on predstavlja vredno sredstvo za određivanje da li ispitivano jedinjenje može biti potencijalni kandidat lek za stabilizaciju raspoloženja.
[0181] Amphetamin (AMP) (2,5 mg/kg) i hlordiazepoksid hidrohlorid (CDZ) (3 mg/kg/ip) su primenjeni kod mužjaka Albino Swiss miševa (25-32 g) u zapremini od 10 ml/kg. Lokomotorna aktivnost je zabeležena upotrebom Opto-M3 sistema (Columbus Instruments) koji predstavlja višekanalni aparat za praćenje aktivnosti. Opto-M3 sistem sadrži 10 transmitera infracrvenih zraka i odgovarajuću količinu prijemnika (stopa razmaka 0,5") koji su povezani sa PC kompjuterom čime je omogućeno izračunavanje i ambulatorne aktivnosti i stereotipnog kretanja. Sistem dakle razlikuje kretanje unapred (ambulatornu aktivnost) od stereotipnog kretanja (kretanju u mestu, izdizanje i lickanje). Miševi su prethodno tretirani jedinjenjem koje se testira (0,5-20 mg/kg), pa su 10 minuta kasnije, injecirani AMP (2,5 mg/kg) ili AMP zajedno sa CDZ (3 mg/kg). Nakon narednih 30 minuta, miševi su ponovo tretirani istim dozama jedinjenja koje je ispitivano i potom premešteni pojedinačno u kaveze za testiranje motorne aktivnost. Lokomotorna aktivnost (amublatorna i stereotipna) je evaluirana tokom 30 minuta. Svaka grupa je sadržavala od 8-10 miševa.
[0182] Statistička analiza: podaci su obrađeni upotrebom testa analiza varijance (ANOVA), a potom, po potrebi, poređenjem individualnih životinja sa kontrolnim, upotrebom Dunnett-ovog testa.
[0183] Rezultati pokazuju da primena amfetamina i kombinacije amfetamina i hlordiazepoksida (CDZ) dovodi do značajnog porasta u lokomotornoj aktivnosti.
[0184] Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu i da dovode do pada amfetaminom i amfetaminom-hlordiazepoksidom indukovane hiperaktivnosti.
[0185] (Slika 3: Ambalatorna aktivnost tokom 30 min.
a) hlordiazepoksid (3,0 mg/kg ip); b) 2-[2-(3-butoksifenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid (NW-3509) (20,0 mg/kg po); c) amfetamin (2,5 mg/kg i.p.).
[0186] Sam amfetamin, kao i smeša amfetamina sa hlordiazepoksidom, značajno povećavaju lokomotornu aktivnost **p <0,001 Dunnet-ov test u odnosu na kontrolnu grupu.
[0187] 2-[2-(3-Butoksifenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorid (NW-3509) je smanjio hiperaktivnost indukovanu samim amfetaminom, kao i kombinacijom amfetamina i hlordiazepoksida, na statistički značajan način. ##p <0,001 Dunnet-ov test u odnosu na amfetamin ili kombinaciju amfetamina i hlordiazepoksida. Podaci su izraženi kao srednja vrednost ± SEM za n =10 miševa po grupi).
Primer 22: Test Morris-ovog vodenog lavirinta (amnezija kod pacova indukovana skopolaminom)
[0188] Postupak koji detektuje antiamnestičku aktivnost ispitivanih jedinjenja je opisan od strane Morris-a (Learning Motiv., 12, 239-260, 1981). Morris-ov lavirint podrazumeva kružni bazen za vodu (prečnik = 150 cm) ispunjen vodom čija se temperatura održava na 26-28°C. Lavirint sadrži i platform za bekstvo (prečnik = 15 cm) postavljenu 18 cm od centra i uvek u istom položaju, 1,5 cm ispod površine vode. Voda se takođe održava neprozirnom dodavanjem netoksičnog agensa za bojenje (npr mleka u prahu), a da bi se platform učinila nevidljivom.
[0189] Životinje su trenirane 4 puta tokom 4 uzastopna dana (1. dan do 4. dana). Svaka sesija treninga je podrazumevala 4 pokušaja snalaženja u Morris-ovom lavirintu, svaki sa razmakom od po 1 min. Za svaki pokušaj, životinja je smeštana na jednu od 4 polazeće pozicije koje su ravnomerno raspoređene oko lavirinta, pa je životinjama dopuštano da pronalaze platformu za beg. Životinje su ostavljane na platformi oko 60 sekundi pre nego što su vraćane u njihov kavez. Ukoliko životinja ne pronađe platformu u roku od 120 sekundi, eksperimentator je životinju uklanjao iz vode i postavljao je na platformu tokom 60 sekundi, a zatim je vraćao u njen kavez. Tokom 4 pokušaja, životinje su po jedan put polazile sa svake, nasumično odabrane startne pozicije.
[0190] Kretanje je snimano kao video zapis, pa je ponašanje životinja analizirano upotrebom sistema za njihovu analizu (Panlab: SMART). Glavni parameter koji je uziman u obzir je latenca bega u svakom pokušaju. Dodatni paramteri su bili brzina plivanja i pređena distanca.
[0191] Životinje tretirane skopolaminom (0,5 mg/kg i.p., primena 30 minuta pre svake sesije) su ispoljile amneziju u navedenom zadatku na šta je ukazivao neuspeh da se smanji latenca njihovog bijega od pokušaja do pokušaja i od sesije do sesije. Probni test je rađen 5. dana. Platforma je zatim uklonjena iz lavirinta i životinji je dopušteno da slobodno pliva u lavirintu tokom 60 sekundi. Glavni parameter koji je uziman u obzir je vreme provedeno u ciljnom kvadrantu (odnosno kvardantu u kome se platform prethodno nalazila), a što je dalje poređeno sa vremenom provedenim u ostalim kvadrantima i sa vrednošću koja se očekuje po principu slučajnosti (tj. 25% trajanja probnog testa). Dvanaest pacova tretiranih skopolamina je testirano po grupi. Ispitivane supstance su evaluirane u 3 doze, primenjene p.o.5-60 minuta pre svakog treninga i pre probnog pokušaja, odnosno 30 minuta pre skopolamina, nakon čega su dobijeni rezultati upoređeni sa rezultatima dobijenim kod životinja kontrolne grupe koje su tretirane samo rastvaračem. Eksperiment je dakle uključivao 5 grupa životinja.
[0192] Podaci se analizirani poređenjem tretiranih grupa sa kontrolnom grupom za skopolamin, upotrebom nezavisnog Studenat-ovog t testa.
[0193] Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu.
Primer 23: Kognitivni model - test prepoznavanja novog objekta
[0194] Test za prepoznavanje objekta podrazumeva pokušaj familijarizacije i prepoznavanja novog u odnosu na stari objekat koji se životinjama prezentuje sa određenim vremenskim razmakom (ITI od engl. inter-trial interval). Prilikom prve sesije familijarizacije, prezentovana su dva identična objekta. Prilikom faze testiranja, jedan od prethodno postavljenih objekata (označen kao poznati objekat) je zamenjen novim objektom. Pacovi su u stanju da razlikuju poznati objekat i novi objekat kada ITI iznosi 1h ili manje, ali ne i kada ITI iznosti 24 h (Deschaux O, i saradnici, 1997, Neurosci. Lett.222, 159-162; Ennaceur A i saradnici, 1989., Behav. Brain Res. 33, 197-207; Puma C, Bizot JC, 1998, Neurosci. Lett. 248, 183-186). Stoga, zadatak prepoznavanja objekta sa ITI od 1h omogućava detekciju amnestičkog efekta lekova i da li je navedeni amnestički efekat smanjen dejstvom drugog leka. Test prepoznavanja objekta sa ITI od 24 h omogućava detekciju lekom izazvanog poboljšanja memorije. Sprovedene su tako brojne studije da bi se ispitao efekat lekova na memoriju. Na primer, prethodne studije su pokazale da nikotin poboljšava memoriju ukoliko ITI iznosi 24 h, kao i da se amnezija indukovana skopolaminom smanjuje ukoliko ITI iznosi 1h.
[0195] Postupci: Test prepoznavanja objekta je urađen na način koji je opisan u publikaciji Bizot-a JC i saradnika, 2005 Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry.29: 928-935
[0196] Subjekti: Upotrebljeni su naivni mužjaci Wistar soja stari 8 nedelja.
[0197] Aparat: Uređaj za testiranje prepoznavanje novog objekta podrazumeva otvoren boks napravljen od sivog neprozirnog pleksiglasa (40 cm x 40 cm x 40 cm). Predmeti koje je trebalo diskriminisati (dužine 3,5 cm, cisine 6 cm) su se razlikovali po boji i obliku - zvono za vrata bele boje i okruglog oblika i sivo zvono u obliku zvezde. Očigledno je da navedeni predmeti nemaju značaja za pacove i da pacovi nikada nisu bili upućeni na njihovo korišćenje. Da bi se izbegla mogućnost ostavljanja tragova mirisa na predmetima i, dalje, zavisnost kapaciteta prepoznavanja pacova zasnovana na mirisnim tragovima, objekti i pod boksa su prani svežom vodom i sušeni između svakog pokušaja testiranja. Video kamera je bila pričvršćena za plafon iznad boksa i tako je pra
ena aktivnost životinja.
[0198] Eksperimenti su trajali po 2 dana (za skopolaminom indukovanu amneziju) ili po 3 dana (prirodno zaboravljanje). Test se sastojao od 15-tominutne sesije privikavanja/habituacije (1. dan), 3-minutnog prvog izlaganja predmetima (2. dan) i 3-minutne sesije testiranja (2. dan ili 3. dan).
[0199] Ispitivanje amnezije izazvane skopolaminom. Eksperiment je rađen sa pacovima koji su nasumčno podeljeni u različite grupe (n =12/grupi) koje su tretirane na sledeći način:
-<Kontrolna grupa: 1 intraperitonealna (i.p.) injekcija fiziološkog rastvora 30 minuta pre testa (faze familijarizacije)>ili 1 per os (p.o.) injeciranje fiziološkog rastvora 15 min pre testa.
-<Skopolaminska grupa: 1 i.p. injekcija skopolamina (0,1 mg/kg) 30 minuta pre testa i 1 p.o. injeciranje fiziološkog>rastvora 15 minuta pre testa (faze familijarizacije).
-<Skopolamin Nikotinska grupa: 1 i.p. injekcija skopolamina (0,1 mg/kg) 30 minuta pre testa i 1 i.p. injekcija>nikotina (0,4 mg/kg) 20 minuta pre testa (faze familijarizacije).
-<Skopolamin grupe reprezentativnih jedinjenja koja su ispitivane: 1 i.p. injekcija skopolamina (0,1 mg/kg) 30>minuta pre testa (faze familijarizacije) i 1 p.o. injeciranje različitih doza jedinjenja koja su testirana, 15 min pre testa (faze familijarizacije).
[0200] Prvog dana, pacovu je omogućeno da ispita novu sredinu u okviru aparata tokom 15 minuta (pokušaj habituacije). Na dan 2, pacov je smešten u aparat sa dva identična objekta postavljena u dva ugla kutije tokom 3 minuta (faza familijarizacije). Nakon 1 sata pacovi su ponovo stavljeni u aparat, zajedno sa dva objekta; jedan od objekata koji je bio prisutan u fazi familijarizacije (označen kao poznati objekti) je dalje zamenjen novim objektom (faza testiranja).
Ispitivanje stepena prirodnog zaboravljanja: Navedeni eksperiment je izveden tako što su pacovi nasumično raspodeljeni u različite grupe (n = 12/grupi) koje su bile tretirane na sledeći način:
[0201]
-<Kontrolna grupa: 1 intraperitonealna (i.p.) injekcija fiziološkog rastvora 30 minuta pre testa ili 1 per os (p.o.)>injeciranje fiziološkog rastvora 15 min pre testa.
-<Nikotinska grupa: 1 i.p. injekcija nikotina (0,2 mg/kg) 20 minuta pre testa i 1 p.o. injeciranje fiziološkog rastvora>15 minuta pre testa.
-<Grupa za ispitivanje efekta reprezentativnog jedinjenja: 1 i.p. injekcija fiziološkog rastvora 20 minuta pre testa i 1>p.o. injeciranje različitih doza jedinjenja koje se ispituje, 15 min pre testa.
[0202] Prvog dana, pacovu je omogućeno da ispita novu sredinu u okviru aparata tokom 15 minuta (pokušaj habituacije). Na dan 2, pacov je smešten u aparat sa dva identična objekta postavljena u dva ugla kutije tokom 3 minuta (faza familijarizacije). Nakon 24 sata pacovi su ponovo stavljeni u aparat sa dva objekta; jedan od objekata koji je bio pisutan u fazi familijarizacije (označen kao poznati objekat) je dalje zamenjen novim objektom.
[0203] Podaci: Osnovni parametri koji su mereni su vreme koje je pacov proveo u istraživanju objekata tokom faze familijarizacije i tokom faze testiranja. Indikatori uspešnosti testa preopoznavanja objekata uključuju sledeće parametre:
-<Ukupno vreme istraživanja u fazi familijarizacije,>
-<Ukupno vreme istraživanja u fazi testiranja.>
-<Razlika vremena istraživanja između novog objekta i poznatog objekta u fazi testiranja (N-F).>
-<Indeks diskriminacije, odnosno 100 × (N-F) podeljen sa ukupnim vremenom istraživanja u fazi testiranja.>
[0204] Podaci su analizirani ANOVA i Studentovim t-testom.
[0205] Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu i da dovode do smanjenja skopolaminom-indukovane amnezije u izvršavanju zadatka prepoznavanja objekta ukoliko ITI iznosi 1 h (1hr ITI), kao i da dovode do poboljšanja memorije u situacijama prirodnog zaboravljanja, odnosno u izvršavanja zadatka prepoznavanja objekta ukoliko ITI iznosi 24 sata (24hr ITI).
Primer 24: Test depresije: testiranje suspenzije repa kod miša
[0206] Test suspenzije repa kod miša predstavlja jedan od modela "bihevioralnog očaja" i koristi se za skrining antidepresivnih lekova. Zasniva se na uobičajenom fenomenu: normalna životinja koja se podvrgava nerešivoj averzivnoj situaciji menja položaj tela imeđu agitacije i imobilnosti. Razlog za agitaciju je istraživanje, ali je položaj visoko energetski zahtevan, dok je svrha imobilnosti očuvanje energije. Životinje se nakon tretmana antidepresivima bore čak i u očajnoj situaciji, odnosno manje vremena provode nepokretne. Pojedini aspekti neurotske depresije se mogu proučavati upotrebom navedenog modela.
[0207] Postupak upotrebljen za testiranja jedinjenja predmetnog pronalaska i detekciju antidepresivne i anksiolitičke aktivnosti jedinjenja je opisan od strane Stéru-a i saradnika (Psychopharmacology, 85, 367-370, 1985). Glodari, obešeni o rep, brzo postaju nepokretni. Antidepresivi smanjuju trajanje nepokretnosti, dok sredstva za smirivanje povećavaju trajanje nepokretnosti. Ponašanje životinje se automatizovano snima tokom 6 minuta upotrebom kompjuterizovanog uređaja (Itematic-TST) koji je razvio Stéru sa saradnicima (Prog. Neuropsychopharmacol. Exp. Psychiatry, 11, 659-671, 1987). Istovremeno je moguće snimati 6 miševa. Snimaju se dva parametra:
- Trajanje nepokretnosti: navedeni parametar je analogan onome koji se koristi u testu "bihevioralnog očaja" (Arch. Int. Phannacodyn. Ther., 229, 327-336, 1977).
- Snaga kretanja: navedeni parameter se zasniva na energiji koju životinja potroši i nezavisan je od vremena trajanja aktivnosti.
[0208] Po grupi je testirano po 10 miševa. Test se ne izvodi objektivno već se snimanja vrše po nasumičnom rasporedu koji se prethodno određuje od strane Itematic-TST uređaja što osigurava homogenu raspodelu tretmana kako u vremenu tako i u poziciji svake životinje u aparatu. Ispitivana supstaca se procenjuje u 3 doze, primenom p.o., 5-60 minuta pre testa, nakon čega se rezultati porede sa vrednostima kod kontrolne grupe životinja koje primaju samo rastvarač. Kao referentne supstance su korišćeni imipramin (128 mg/kg p.o.) i diazepam (8 mg/kg p.o.), a koji su primenjivani pod istim eksperimentalnim uslovima.
[0209] Eksperiment dakle podrazumeva 6 grupa. Podaci su analizirani upoređivanjem tretiranih grupa sa kontrolnom grupom upotrebom nezavisnog Studentovog t testa.
[0210] Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu.
Primer 25: Postupak kognitivnog poremećaja u šizofreniji
[0211] Kognitivno oštećenje je često povezano sa šizofrenijom, a što je prepoznato kao osnovni element poremećaja i kao bitan faktor za oporavak pacijenata i reintegraciju u društvo.
[0212] Poseban interes je nedavno privukao farmakološki model kognitivnih disfunkcija u šizofreniji koji se bazira na efektima antagoniste glutamatnog NMDA receptora poput fenciklidina (PCP) i ketamina (Javitt i saradnici, Am. J. Psychiatry, 1991 Oct, 148 (10), 1301-1308) koji remete pažnju i povećavaju očuvanje "impulsivnosti" i "kompulsivnosti" kod miševa koji obavljaju složeni zadatak (Greco i saradnici, Psychopharmacology (Berl), 2005 Apr, 179 (1), 68-76). Materijali i metode
[0213] Životinje: Upotrebljavani su mužjaci DBA/2N soja miševa (Charles River, Italija). Miševi su težili 25-30 g na početku eksperimenta i bili su gajeni u uslovima sa kontrolisanim temperaturom (21°C) i pri svetlosnom režimu 12 h svetlost/12 h mrak (svetlo 7:00 - 19:00). Hrana (Rieper, Italija) je bila dostupna ad libitum. Životinje su imale pristup vodi dva sata na kraju svakodnevnog testiranja.
[0214] Aparat za serijskog reakcionog vremena zadtka sa pet odabira: Aparat za testiranje se sastojao od četiri komore veličine 21,6 x 17,8 x 12,7 cm (Med Associates Inc. USA), a kao što je prethodno opisano (Greco i saradnici, Psychopharmacology (Berl), 2005 Apr, 179 (1), 68-76). Stimulusi i snimanja odgovora su kontrolisani upotrebom SmartCtrl™ paketa 8 In/16 Out (Med Associates Inc. USA) i sa dodatnim interfejsom MED-PC za Windows (Med Associates Inc. USA). Program koji je upotrebljavan za 5-CSRT test je bio napisan po porudžbini.
[0215] Procedure ponašanja: navikavanje na zaslađen rastvor i provirivanje nosem kroz rupe. Miševi su uzimani u ruke tokom nedelju dana i beležena je njihova telesna težina. U navedenom momentu, miševi su praktično bili bez vode, odnosno dopuštan im je dvosatni pristup vodi u ranim večernjim satima sve dok se njihova tjelesna težina nije stabilizovala (8 dana). Zatim, tokom sledeća dva dana miševi su navikavani na zaslađen rastvor (10% rastvor saharoze) koji je kasnije korišćen u postupcima testiranja. Sledeća dva dana, miševi su navikavani i na kutije za testiranje u aparatu. Tokom ove faze, 10% rastvor saharoze je bio dostupan u maloj posudi koja je bila smeštena ispod posebnog otvora spremišta na kutiji. Miševi su najpre morali da nauče da je na svakih 5 sekundi tečna nagrada bila dostupna u navednoj maloj posudi. Tokom ovog perioda snimana su isturanja glave. Tokom sledećeg vremenskog perioda, miševi su bili trenirani da isture noseve kroz preostale osvetljene rupe. Neposredno nakon isturanja u posudu za vodu uključivalo se LED svetlo na zadnjoj strani jedne od rupa. Ubadanje nosem u osvetljenu rupu je gasilo svetlosni stimulus i dispenser za tečnost je obezbeđivao 0,01 ml tečne nagrade u rupi spremnika. Bilo kakav odgovor u jednoj od četiri rupa nije imao nikakvu posledicu i nije zabiležen. Svetlosni stimulus je bio prezentovan u svih pet rupa slučajnim redosledom. Miš je prebačen na 5-CSRT zadatak nakon što je završio trening sa najmanje 50 nagrađenih isturanja nosa tokom sesije od 30 minuta.
[0216] Serijsko reakciono vreme zadatka sa pet izbora. Početak sesije je signaliziran osvetljavanjem kutije i isporukom 0,01 ml tečne nagrade. Ubadenjem nosa u otvor spremišta je započinjao prvi pokušaj. Nakon fiksnog latentnog vremena (inter-trial interval, ITI), LED svetlo na zadnjoj strani jedne od rupa je uključivan na kratko vreme. LED stimlus je puštan isti broj puta u svakoj rupi tokom cele sesije, a redosled paljenja je bio nasumičan i određen od strane računara. Dok je svetlo bilo uključeno i kratko nakon toga (ograničeno zadržavanje), tačan odgovor u osvetljenu rupu je rezultirao tečnom nagradom. Odgovori koji su podrazumevali isturanje nosa u otvore koji nisu bili osvetljeni (pogrešni odgovori) ili neuspeh u odgovoru unutar ograničene latence vodili su kratkotrajnom isključivanju svetla u kavezu. Odgovori u rupama tokom isključenog svetla u kavezu su restartovali merenje vremena. Nakon isporuke tečne nagrade, ili na kraju vremena, miš je započinjao sledeći pokušaj isturanja nosa u rupu spremnika. Isturane nosa u rupe nakon pravilnog odgovora (trajni odgovori) ili pre isteka vremena za isturanje nosa u otvor spremnika, dovodio je do perioda pauze. Odgovori u rupama tokom ITI-a (anticipatorni odgovori) takođe su rezultirali pauzom. Nakon anticipatornih odgovora, ubadanje nosem u otvor spremnika ponovno je pokretalo trenutni pokušaj. Svaka dnevna sesija se sastojala od 100 ispitivanja ili 30 minuta testiranja, u zavisnosti od toga šta je bilo pre završeno, nakon čega su sva svetla isključena i odgovori su bili bez efekta. U prvoj sesiji rasporeda ispitivanja, stimulus i vreme držanja su trajali 1 min, pa je u zavisnosti od individualnog ponašanja životinje, vreme progresivno smanjivano do jedne sekunde. Trajanje stimulusa je smanjivano na sledeći način: 60, 30, 10, 5, 2.5, 2, 1,5 i 1 s (osnovna vrednost). ITI i pauza su trajali po 2 sekunde tokom prve sesije, a ITI je podignut na 5 sekundi u sledećim sesijama; vreme pauze nije menjano. Tokom celog perioda testiranja i tokom eksperimenata, svaki miš je provodio jedan sat dnevno izvodeći 5-CSRT zadatak.
[0217] Lekovi i raspored tretmana. Jedinjenja koja su testirana su rastvorena u vodi i primenjena intraperitonealno (i.p.) u dozi od 10 mg/kg. Pet minuta nakon tretmana miševi su injecirani sa rastvaračem (fiziološki rastsvor) ili PCP-om (1,5 mg/kg), a 10 minuta kasnije započeto je testiranje. U svakom eksperimentu je primenjivana različita kombinacija ispitivanog jedinjenja sa fiziološkim rastvorom ili PCP-om, a po principu latinskog kvadrata. Između testiranja različitih jedinjenja pravljena je pauza od najmanje 48 sati. Tokom ovakvih interventnih dana, miševi su testirani u izvršenju 5-CSRT zadatka zarad ponovnog uspostavljanja osnovne performanse i zarad provere rezidualnih efekata lekova.
[0218] Statistička analiza: Glavne zavisne varijable koje su izabrane za analizu su bile: (a) procenat tačnih odgovora (ukupan broj ispravnih odgovora/ukupan broj tačnih netačnih odgovora x 100); (b) procenat netačnih odgovora (ukupan broj neispravnih odgovora/ ukupan broj tačnih netačnih odgovora x 100); (c) broj anticipatornih odgovora u rupama tokom ITI; (d) broj perzervatinih odgovora u rupama nakon ispravnog odgovora. Tačni i netačni odgovori, u procentima, su trasnformisani upotrebom formule: 2arcsin (SQRT (% X/100)) kako bi se normalizovala distribucija rezultata u skladu s ANOVA modelom (Winer, 1971).
[0219] Efekti ispitivanog jedinjenja (n = 12) na deficite indukovane PCP-om u 5-CSRT zadatku analizirani su nezavisno za svaki subjekat 2x2 ANOVA analizom uzimajući kao factor za analizu lek (jedinjenje koje se ispituje) i PCP. Potom su grupe tremana upoređene međusobno upotrebom post-hoc Tukey-Kramer-ovog test. Statistički kompjuterski program (SAS Institute Inc., USA) je upotrebljen za analizu na Micro VAX 3500 računaru (Digital, USA).
[0220] PCP je izazivao značajan efekat na pažnju kod DBA/2N miševa, povećavajući anticipativne i prezervativne odgovore.
[0221] Reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska, primenjena u dozi od 10 mg/kg i.p., preokretala su porast očekivanih i perzervativnih odgovora koji su indukovani PCP-om, podržavajući upotrebu ove vrste jedinjenja u tretmanu psihijatrijskih poremećaja.
Primer 26: Prigušena prepulsne inhibicije kod miševa i pacova.
[0222] Prepulsna inhibicija (PPI) je fenomen prisutan kod različitih vrsta (prisutan je zapravo kod svih sisara počevši od miševa do čoveka), ali je ovaj fenomen relativno odsutan kod šizofrenih pacijenata. Smanjena sposobnost izdvajanja bitnih u okviru nebitnih auditornih stimulacija jedna je od karakteristika koja doprinosi određenim pojavama u okviru navedenih stanja, uključujući tu nepažnju, rasplinutost i kognitivne deficite. Postupak PPI se koristi za evaluaciju sposobnosti subjekta da "selektuje" ili filtrira informacije iz okoline. U akustičnom modelu senzomotorne osetljivosti, slab akustični stimulus (prepuls) smanjuje (prigušuje) refleksni odgovor nastao nakon izlaganja drugom intenzivnom stimulusu (pulsu). Lekovi poput dizocilpina (MK-801) ili amfetamina ometaju PPI i predstavljaju životinjski model šizofrenije. Antipsihotični lekovi mogu sprečiti PPI deficit. Test je vrlo koristan za otkrivanje potencijalnih antipsihotičnih lekova.
[0223] Slično navedenom, neki sojevi miševa kao što su DBA/J ispoljavaju spontano oštećenje PPI što se može revertoti antipsihotičkim lekovima, tako da se i ovi miševi upotrebljavaju kao životinjski model šizofrenije.
[0224] PPI kod pacova: Pacovi Wistar ili Sprague-Dawley soja (težine 200 do 300 g) ili 3 nedelje stari DBA/2J miševi. Uređaj za analizu PPI (San Diego Instruments, CA) se sastojao od 12 providnih plastičnih kaveza, individualno postavljenih u zvučno izolovane ormane opremljene pokretnim podnim platformama za koje je pričvršćen senzor koji snima vertikalna kretanja platforme. Prigušena reakcija je izazivana akustičkim stimulusima koji su puštani upotrebom zvučnika koji se nalazio iznad kaveza i koji je bio povezan sa akustičnim generatorom. Prolazna sila koja je nastajala usled kretanja platforme nakon započinjanja reakcije prigušivanja je snimana posredstvom PC kompjutera tokom vremenskog perioda od 200 ms od početka akustičnog stimulus, a podaci su digitalizovani i sačuvani u kompjuteru za dalju analizu. Kontrolni i tretirani pacovi su pojedinačno stavljani u kaveze za testiranje. Nakon prilagođavanja u trajanju od 5 minuta (pozadinska buka, 65 dB), upotrebljene su dve vrste akustičnih stimuluas po nasumičnom rasporedu: samostalan akustični stimulus [120 dB, 40 ms, (P)] ili stimulus kome je prethodio predpulus [75 dB, 20 ms (PP)] primenjen je 100 ms pre stimulusa. Tokom svake eksperimentalne sesije, izvedeno je 20 ispitivanja svakog tipa sa intervalom pauze od 20 s. Amplitude su usrednjene za svaku pojedinačnu životinju, a posebno za oba tipa ispitivanja (sam stimulus ili stimulus kome je prethodio predpuls). Procenat PPI je izračunat upotrebom sledeće formule: 100-[(srednja prosečna amplituda za prepuls amplituda pulsa/prosečna amplituda prigušenja za samostalan stimulus) x 100] odnosno 100-(PP/P) x 100. Visoka vrednost izračunatog % PPI je ukazala da je predpuls inhibirao odgovor na pulsni stimulus, dok je niska vrednost ukazivala na slabiju inhibiciju predpulsom. Deficiti u senzorimotornoj osetljivosti su indukovani primenom MK-801 (0,2 mg/kg) 5 minuta pre testa ili primenom amfetamina (2,5 mg/kg) koji je divan sc 10 minuta pre testa. Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu i da dovode do reverzije PPI deficita indukovanih primenom MK-801 (Slika 4) ili amfetamina.
[0225] PPI kod DBA miševa: korišćeni su mužjaci miševa DBA/2J i C57BL/6J soja stari 3 nedelje.
[0226] Detekcija odgovora akustičnog prigušivanja i PPI je sprovedena kao što je opisano u publikaciji Bartolato-a i saradnika, Psychopharmacology, okt 2007; 194 (3): 361-9,
[0227] U svakom eksperimentu, miševi su nasumično raspodeljeni u grupe koja je primale bilo jedinjenja predmetnog pronalska bilo fiziološki rastvor, a životinje su dalje testirane u PPI sesijama upotebom specifičnog dizajna testiranja između subjekata.
[0228] Procenat PPI je izračunat upotrebom sledeće formule: 100-[(srednja amplituda prigušivanja predpulsom pulsna amplituda/srednja amplituda prigušivanja za samostalne impulse) x 100] tj. 100-(PP/P) x 100. Veličina reakcije prigušivanja akustičnog stimulusa je izračunata kao prosečan odgovor na sva ispitivanja sa samo jednim pulsom, isključujući prvi i poslednji blok u okviru pet pokušaja ispitivanja.
[0229] Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu i da smanjuju PPI deficit kod BDA/2J miševa.
[0230] (Slika 4: Efekat 2-[2-(3-butoksifenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohlorida (NW-3509) na MK-801 remećenje PPI kod pacova - Podaci su izraženi kao srednja vrednost /- SEM za n = 10 životinja. p<0.01 ukazuje na statistički značajnu razliku između životinja tretiranih fiziološkim rastvorom i MK-801.*p <0.05 i **p <0.01 ukazuju na statistički značajne razlike između životinja tretiranih fiziološkim rastvorom MK-801 i životinja tretiranih sa 2-[2-(3-butoksifenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid hidrohloridom (NW-3509).
[0231] Analiza varijanse - Dunnet-ov test)
Primer 27: Paradoksalno uskraćivanje sna kod pacova.
[0232] Psihopatološke i neurobiološke veze između spavanja i psihotičnih pojava su pokazane brojnim kliničkim opažanjima i u psihološkim publikacijama. Šizofreni pacijenti pate od teške nesanice koju prate brojne stukturalne promene arhitekture sna, poput smanjenja latence i trajanja REM spavanja, kao i vremenskog trajanja sporotalasnog spavanja (SWS od engl. Slow Wave Sleep). Brojne studije su takođe pokazale da dugotrajno uskraćivanje spavanja zaista doprinosi velikom broju prolaznih psiholoških poremećaja, uključujući remećenje verbalne konstrukcije, pojavu neorganizovanih misli, depersonalizaciju i promene u percepciji, a u rasponu od manjih poremećaja i abnormalnih telesnih senzacija do složenih akustičnih i vizuelnih halucinacija. Obično se navedeni poremećaji ne razlikuju od psihotičnih pojava, ali je uobičajeno i da se ovakvi poremećaji povuku nakon produženog okrepljujućeg sna. Nekoliko studija je dokumentovalo da nakon perioda prisilnog lišavanja sna, pacovi neko određeno vreme ispoljavaju niz paradoksalnih promena u ponašanju poput povećanog stereotipnog ponašanja i hiperaktivnosti. Štaviše, uskraćivanje sna kod pacova povećava reakciju prigušivanja i ometa PPI, a taj efekat je zavisan od vremena i može se revertovati primenom antipsihotika (Gessa, GL i saradnici, (1995) European Neuropsychopharmacology 5, 89-93). Navendeni fenomeni se uobičajeno tumače kao relevantni za psihoze, obzirom da do njih dovodi i primena psihotomimetika kod pacova. Model deprivacije sna kod pacova se staga može razmatrati kao model manije.
[0233] Životinje: upotrebljeni su pacovi Sprague-Dawley soja (težine 200 do 300 g).
[0234] Metode: Procedura izazivanja paradoksalne deprivacije sna (SD) kod pacova zasnovana je na metodi platforme (modifikovano iz publikacije Jouvet-a i saradnika (1964) Journal of Physiology (Paris), 56, 381). Pacovi su držani na maloj ploči od pleksiglasa (prečnika 7 cm) unutar duboke posude ispunjene vodom. Svaka platforma je bila okružena vodom do 1 cm ispod površine. Briketi hrane i bočice za vodu su bile postavljene na rešetci na vrhu posude. Tokom celog postupka ispitivanja SD, temperatura eksperimentalne prostorije i vode unutar posude je održavana na 23 ± 1°C. Kontrolni pacovi su takođe bili prebačeni u eksperimentalnu sobu, ali su bili u svojim kavezima ili u posudama ekvivalentnim prethodno navedenim s time što su platform bile prečnika 12 cm, a što je omogućavalo da životinje dosegnu REM spavanje bez pada u vodu. Na kraju razdoblja SD (72 h), pacovi su momentalno sušeni i prebacivani u komore za testiranje ponašanja prigušivanja (merenje PPI) ili u kaveze za testiranje aktivnosti (hiperaktivnost). Voda u posudi je menjana svakodnevno tokom razdoblja SD testa. Kontrolni pacovi su držani takođe u istoj prostoriji kao i pacovi koji su bili lišeni sna tokom trajanja njihovog SD testa. Jedinjenja koja su ispitivana su primenjivana pre PPI ili testova ponašanja.
[0235] Analiza podataka: Za svaku životinju analizirane su prosečna amplituda prigušivanja za prvu i drugu polovinu drugog perioda sesije (blokovi, šest pojedinačnih pulsnih pokušaja) korišćenjem dvo- ili trifaktorske analize varijanse (ANOVA), sa pretretmanom (ukoliko je prisutan) i tretmanom kao faktorima analize između sujekata i blokovima kao ponovljenim merenjima. Procenat PPI je izračunat upotrebom sledeće formule: 100-[(srednja amplituda prigušivanja predpulsom pulsna amplituda/srednja amplituda prigušivanja za samostalne impulse) x 100] tj.100-(PP/P) x 100. što je dalje analizirano multifaktorskom ANOVA-om (specifičan dizajn i poređenja su zapisani ispod za svaki eksperiment), a sa različitim kombinacijama injeciranja za pretretman i tretman kao faktora za analizu razlika između subjekata, dok je tip pokušanja uziman kao ponovak merenja. Post hoc analize su rađene upotrebom Tukey-evog testa. Podaci o lokomotornoj aktivnosti su analizirani upotrebom jedno- i dvofaktorske analize varijanse (ANOVA) za ponovljena merenja, ukoliko je to pogodno, a nakon toga je rađen Tukey test za post-hoc analizu.
[0236] Utvrđeno je da su oralno ili intraperitonealno ili subkutano primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu i da dovode do smanjenja PPI deficita i hiperaktivnosti koja su indukovani uskraćivanjem sna.
Primer 28: Test ponašajne senzitizacije indukovane kokainom
[0237] Zavisnost od droga predstavlja patološko ponašanje koje karakteriše kompulzivno traženje i uzimanje leka. Jedan od životinjskih modela navedenih promena ponašanja predstavlja dugotrajno povećanje lokomotorne aktivnosti koje se indukuje ponovljenom primenom psihostimulanasa kod pacova (Robinson T.E. i Berridge K.C. Brain Res. Brain Res. Rev. (1993) 18, 247-91), a što je dobro poznato kao lekom-indukovana ponašajna senzibilizacija. Efekat ispitivanih jedinjenja je dakle evaluiran i u modelu kokainom-indukovne ponašajne senzibilizacije kod pacova.
[0238] Uređaj za praćenje lokomotorne aktivnosti: upotrebljeni su mužjaci Wistar pacova koji su po dolasku bili teški 200 -250 g.
[0239] Lokomotorna aktivnost je merena u šesnaest identičnih kaveza sa metalnim žicama veličine 36 cm (D) x 25 cm (Š) x 20 cm (V). Svaki kavez je sadržavao dva seta fotoćelija sa infracrvenim transmiterima i detektorima postavljenim duž šire strane kaveza, 1 cm iznad mreže i 8 cm od prednjeg i zadnjeg dela kaveza. Pozadinska buka je bila osigurana delovanjem generatora šuma. Kretanje unutar kaveza je dovodilo do prekida u radu foto
elija, što je automatski snimano posredstvom IBM-kompatibilnog kompjutera.
[0240] Postupak senzitizacije i tretman: Životinje su habituirane na komoru za utvrđivanje lokomotorne aktivnosti tokom 2-3 uzastopna dana pre eksperimenta. Pacovi su primili 5 dnevnih i.p. injekcije kokaina (15 mg/kg) ili fiziološkog rastvora i bilo jedinjenje koje se testira (0,1-100 mg/kg) ili njegov rastvarač, pa je lokomotorna aktivnost snimana tokom 3 h. Deset dana nakon poslednje injekcije kokaina ili fiziološkog rastvora (15. dan), životinjama je aplikovano 15 mg/kg kokaina u odsustvu jedinjenja koje se testira i lokomotorna aktivnost je ponovo praćena tokom 3h.
[0241] Do petog dana tretmana kokainom, kod životinja koje su i.p. pretretirane fiziološkim rastvorom je došlo do povećanja lokomotornog odgovora (za 20% većalokomocija u odnosu na lokomociju prvog dana, p <0,05). Deset dana nakon poslednje injekcije kokaina ili fiziološkog rastvora, životinjama je ubrizgano 15 mg/kg kokaina u odsustvu jedinjenja koja su testirana i lokomotorna aktivnost je još jedan put praćena tokom 3 h. Očekivalo se da pacovi koji su prethodno tretirani kokainom i koji nisu primili jedinjenje predmetnog pronalska ispolje povećanu lokomotornu aktivnost u odgovoru na kokain (povećanje od 30% u odnosu na prvi dan, p <0,05). Ukoliko pacovi koji su prethodno tretirani jedinjenjima čija se aktivnost ispituje tokom tretmana kokainom u trajanju od 5 dana nisu pokazali povećanje lokomotorne aktivnosti, smatralo se da jedinjenje koje se testira ima efekata sprečavanja razvoja bolesti zavisnosti od psihostimulanasa (Koob G. F., Sanna P. P., Bloom F. E. Neuron (1998) 21: 467-476; Robinson T.E., Berridge K.C. Brain Res Brain Res Rev (1993) 18: 247-291).
[0242] Statistička analiza: Podaci (ukupni broj prolazaka preko zraka tokom 3 sata) je analiziran upotrebom dvofaktorske ANOVA-e sa ponovljenim merenjima, a sa četiri eksperimentalne grupe (fiziološki rastvor/nosač, fiziološki rastvor/ispitivano jedinjenje, kokain/nosač i kokain/ispitivano jedinjenje) i dve vremenske tačke (1. i 5. dan), kao faktorima za analizu, nakon čega je urađena jednostavna analiza efekata. Druga dvofaktorska ANOVA-e sa ponovljenim merenjima je urađena tako što je jedan od faktora analize podrazumevao da se upored dan 1 i dan testa, što je dodatno analizirano Newman-Keuls-ovim post hoc testom.
[0243] Utvrđeno je da su oralno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu.
Primer 29: Akutna iritacija mokraćne bešike sirćetnom kiselinom kod pacova
[0244] Eksperimenti su izvedeni na odraslim anesteziranim ženkama pacova Sprague Dawley soja (170-200 g). Kateter (PE-50) je umetnut kroz rez na sredini trbuha, u mokraćnu bešiku kroz svod bešike, a zatim je izmeren intravezikalni pritisak zarad praćenja aktivnosti mokraćne bešike tokom kontinualne infuzije 0,15% sirćetne kiseline. Kontinuirana intravezikalna infuzija sirćetne kiseline je iritirala mokraćnu bešiku i smanjivala interval interkontrakcije (ICI) kod anesteziranih pacova. ICI, maksimalni pritisak kontrakcije, kao i prag pritiska koji indukule refleksne kontrakcije bešike su mereni pre i nakon intravezkalne infuzije sirćetne kiseline kod pacova tretiranih jedinjenjima predmetnog pronalska.
[0245] Utvrđeno je da su intraperitonealno ili intravenozno primenjena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska aktivna u navedenom eksperimentalnom modelu.
Primer 30: Intermedijerna iritacija mokraćne bešike ciklofosfamidom (CYP) kod pacova
[0246] Eksperimenti su izvedeni upotrebom adultnih, i budnih i anesteziranih, ženki pacova Sprague Dawley soja (170 -200 g). Hemijski cistitis je indukovan upotrebom CYP-a, koji se metaboliše u akrolein, iritant koji se dalje eliminiše urinom. CYP (150 mg/kg/i.p.) je primenjen jedan dan pre eksperimenta. Prethodno tretman CYP-om uzrokuje iritaciju mokraćne bešike i vrlo često pražnjenje sa ICI od oko 150-200 sekundi između pražnjenja.
[0247] Intraperitonealna ili intravenska primena reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska je povećala ICI i kod budnih i kod anesteziranih pacova koji su upotrebljeni u ovom eksperimentu.
Primer 31: Test migrene kod pacova
[0248] Životinje i operacija: Mužjaci pacova Wistar soja (250-350 g) su anestezirani upotrebom natrijum pentobarbitala (50 mg/kg i.p.) rastvorenog u fiziološkom rastvoru.
[0249] Traheja i leva femoralna arterija su kanulirane zarad veštačke ventilacije (55 udaraca/min) i za merenje srednjeg krvnog pritisaka (MBP), tim redom. Femoralna vena je kanulirana za intravensku primenu jedinjenja koja su ispitivana.
[0250] Temperatura tela je održavana na 37-38°C automatski, kontolom temperature podloge za grejanje. Životinje su smeštene u stereotaksični okvir i napravljen je uzdužan rez na glavi. U lobanji je izbušena rupica kroz koju je ubačena bipolarna elektroda od nerđajućeg čelika (Plastic One MS 306), a koja je zatim spuštena u levu oftalmičku granu trigeminalnog ganglioona (3,8 mm dorzalno do bregme; 2,5 mm lateralno od središnje linije i 9,5 mm ispod površine dure) i sve je osigurano zubnim cementom. Ispravno postavljanje elektrode je potvrđeno kratkom električnom stimulacijom koja je dovela do pomeranja vilice usled aktivacije trigeminalnog nerva, a nakon uklanjanja mozga, pravilno mesto uboda elektrode u nerv je vizualno proveren na kraju svakog eksperimenta.
[0251] Druga rupica je izbušena ipsilateralno od elektrode (1,5 mm rostralno od bregme i 1,5 mm lateralno od sagitalnog šava), pa je igla probe (vrh prečnika 0,8 mm) laserskog doplerskog merača fiksirana tako da vrh bude u grani srednje cerebralne arterije (MCA od engl. middle cerebral artery) zarad snimanja promena cerebralnog protoka krvi (CBF od engl. Cerebral Blood Flow) tokom eksperimenta PeriFlux 4001 Laser Doppler sistemom.
[0252] Artefakti očitavanja laserskog doplera tokom električne stimulacije trigeminalnog gangliona usled pokretanja mišića su sprečavani bolusnom i.v. injekcijom neuromuskularnog blokatora pankuronijum bromida (0,6 mg/kg i.v.).
[0253] Anestezija i neuromuskularna blokada održavani su tokom celog eksperimenta pomoću infuzije natrijum pentobarbitala i pankuronijuma (12,5 mg/kg/h 2,4 mg/kg/h, tim redom).
[0254] Eksperimentalni protokol: Na kraju operacije, napravljena je pauza od trideset minuta kako bi se parametnri koji su mereni stabilizovali.
[0255] CBF u mirovanju je bio povećan nakon električne stimulacije pulsom pod pravim uglom u vremenskom trajanju od 0,5 ms sledećih karakteristika: 1-10 Hz, 0,5-1 mA tokom perioda od 30 s. Nakon dve usrednjene stimulacije, primenjeni su nosač ili jedinjenje koje se testira.
[0256] Intravenski primenjena reprezentativni jedinjenja predmetnog pronalaska su smanila porast protoka krvi do koga je došlo usled stimulacije trigeminalnog nerva.

Claims (34)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje opšte formule (I):
    naznačeno time, što: X označava -O-, -S- ili -SO2- grupu; Y označava vodonik, OH ili O(C1-C4)alkil grupu; Z označava =O ili =S; Roznačava (C3-C10)alkil; ω-trifluoro(C3-C10)alkil grupu; R1i R nezavisno označavaju vodonik, hidroksi, (C1-C8)alkoksi, (C1-C8)alkiltio, halogenu, trifluorometil ili 2,2,2-trifluoroetil grupu; ili se jedan od R1i R2nalazi u orto položaju u odnosu na R-X- i sa istim R-X- obrazuje
    grupu u kojoj R0označava (C2-C9)alkil grupu; R3i R’3nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; R4i R5nezavisno označavaju vodonik, (C1-C4)alkil grupu; ili R4označava vodonik, dok je R5grupa izabrana iz grupe koju čine -CH2-OH, - CH2-O-(C1-C6)alkil, -CH(CH3)-OH, -(CH2)2-S-CH3, benzil i 4-hidroksibenzil grupa; ili R4i R5, zajedno sa susednim atomom ugljenika, obrazuju (C3-C6)cikloalkilni ostatak; R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C6)alkil grupu; ili zajedno sa susednim atomom azota obrazuju 5-6-člani monociklički zasićeni heterociklični prsten koji opciono može sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O-, -S- i -NR8- grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C6)alkil grupu; uz uslov da, kada X označava -S- ili -SO2-, Y nije OH ili O(C1-C4)alkil grupa; ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što: X označava -O-, -S-; Y označava vodonik, OH ili O(C1-C3)alkil grupu; Z označava =O ili =S; Roznačava (C4-C7)alkil ili ω-trifluoro(C4-C6)alkil grupu; R1i R2nezavisno označavaju vodonik, (C1-C4)alkoksi, halogenu, trifluorometil ili 2,2,2-trifluoroetil grupu; ili se jedan od R1i R2nalazi u orto položaju u odnosu na R-X- grupu i sa istim R-X- radikalom obrazuje
    grupu pri čemu R3i R’3označavaju radikale, naznačene time, što R0označava (C2-C5)alkil grupu; ili isti nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu; R4i R5nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; ili R4označava vodonik, a R5označava grupu izabranu iz grupe koju čine -CH2-OH, -CH2O-(C1-C3)alkil, -(CH2)2-S-CH3, benzil i 4-hidroksibenzil grupa; R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; ili zajedno sa susednim atomom azota obrazuju 5-6-člani monociklički zasićeni heterociklilni radikal koji opciono može sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O- i -NR8- grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C3)alkil grupu; uz uslov da, kada X označava -S-, Y nije OH ili O(C1-C3)alkil grupa; ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što: X označava -O-, -S-; Y označava vodonik ili O(C1-C3)alkil grupu; Z označava =O ili =S; Roznačava (C4-C7)alkil ili ω-trifluoro(C4-C6)alkil grupu; R1i R2nezavisno označavaju vodonik, (C1-C4)alkoksi, fluoro, hloro, trifluorometil ili 2,2,2-trifluoroetil grupu; ili se jedan od R1i R2nalazi u orto položaju u odnosu na R-X- grupu i sa istim R-X- obrazuje
    grupu u kojoj R0označava (C3-C4)alkil grupu; R3i R’3nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu; R4i R5nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C4)alkil grupu; ili R4označava vodonik, dok je R5izabran iz grupe koju čine -CH2-OH, -CH2O-(C1-C3)alkil, benzil i 4-hidroksibenzilna grupa; R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu; ili zajedno sa susednim atomom azota obrazuju 5-6-člani monociklički zasićeni heterociklni radikal, koji opciono može sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O- i -NR8- grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C3)alkil grupu; uz uslov da, kada X označava -S-, Y nije O(C1-C3)alkil grupa; ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što: X označava -O-; Y označava vodonik; Z označava =O; Roznačava (C4-C6)alkil grupu; R1i R2nezavisno označavaju vodonik ili halogenu, prioritetno fluoro grupu; R3, R’3, R4i R5označavaju vodonik; R6i R7nezavisno označavaju vodonik ili (C1-C3)alkil grupu; ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što je izabrano iz grupe koju čine: 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-acetamid 2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-acetamid 2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-acetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N-metilacetamid 2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-N-metilacetamid 2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-N-metilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butilsulfonilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-(N'-hidroksi)etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-(N'-metoksi)etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-(N'-propoksi)etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetil-tioacetamidom 2-[2-(3-butoksifenil)-2-metilpropilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-{2-[3-(4,4,4-trifluorbutoksi)fenil]-etilamino}-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butiltiofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksi-2-hlorfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksi-2-fluorofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksi-4-metoksi-fenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dietilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dipropilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dibutilacetamid 2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-1-pirolidin-1-il-etan-1-on 2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-1-pirolidin-1-il-etan-1-on 2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-1-pirolidin-1-il-etan-1-on 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-3-hidroksi-N,N-dimetilpropanamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-3-metoksi-N,N-dimetilpropanamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-3-propoksi-N,N-dimetilpropanamid 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid 2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid 2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-2,N,N-trimetilpropanamid (S)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-propanamid (S)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N-metilpropanamid (S)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid (R)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-propanamid (R)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N-metilpropanamid (R)-2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilpropanamid 2-[2-(3-butoksi-2-trifluormetilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksi-4-trifluormetilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid 2-[2-(3-butoksi-5-trifluormetilfenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli, poželjno soli hlorovodonične ili metansuporne kiseline.
  6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što označava 2-[2-(3-butoksifenil)etilamino]-N,N-dimetilacetamid, 2-[2-(3-butoksi-2,6-difluorofenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid, 2-[2-(3-pentiloksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid ili 2-[2-(3-heksiloksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid, i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6, naznačeno time, što označava 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 6 i 7, naznačeno time, što farmaceutski prihvatljiva so označava hidrohloridnu ili metansulfonatnu so.
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što: X označava -SO2- grupu; ili Y označava OH ili O(C1-C4)alkil grupu; ili Z označava =S; ili R označava (C9-C10)alkil ili ω-trifluoro(C3-C10)alkil grupu; ili R1i/ili R2su različiti od vodonika; ili oba R3i R’3su različiti od vodonika; ili oba R4i R5su različiti od vodonika, ali ne obrazuju (C3-C6)cikloalkilni ostatak zajedno sa susednim atomom ugljenika; ili R6i R7zajedno sa susednim atomom azota obrazuju monociklički 5-6-člani zasićeni heterociklni radikal koji opciono može sadržavati jedan dodatni heteroatom izabran iz grupe koju čine -O-, -S- i -NR8- grupa u kojoj R8označava vodonik ili (C1-C6)alkil grupu; uz uslov da, kada X označava -S- ili -SO2-, Y nije OH ili O(C1-C4)alkil grupa; ukoliko je navedeno slučaj, jedinjenje može predstavljati pojedinačni optički izomer u izolovanoj fomi ili smešu njegovih izomera u bilo kojoj proporciji, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u vidu medikamenta.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 za upotrebu u vidu medikamenta koji je aktivan kao modulator kanala za natrijum i/ili kalcijum za tretman patoloških stanja kod kojih je navedeni mehanizam(mehanizmi) sa patološkom ulogom)(ulogama), a što označava neurološke, kognitivne, psihijatrijske, inflamatorne, urogenitalne ili gastrointestinalne poremećaje i pri čemu je navedni lek suštinski oslobođen bilo kakve MAO inhibitorne aktivnosti ili ispoljava značajno smanjenu MAO inhibitornu aktivnost.
  12. 12. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 2, 3 i 4 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11.
  13. 13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11.
  14. 14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11.
  15. 15. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 7 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11.
  16. 16. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11, naznačeno time, što poremećaj označava neurološki poremećaj izabran iz grupe koju čine bol i migrena.
  17. 17. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 16, naznačeno time, što bol označava sindrom neuropatskog bola ili sindroma inflamatornog bola.
  18. 18. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 16, naznačeno time, što bol označava akutan ili hroničan bol.
  19. 19. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11, naznačeno time, što poremećaj označava neurološki poremećaj izabran iz grupe koju čine Alchajmerova bolest, Parkinsonova bolest, epilepsija, sindrom nemirnih nogu, moždani udar ili cerebralna ishemija.
  20. 20. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11, naznačeno time, što poremećaj označava inflamatorni proces koji utiče na celokupan organizam i izabran je iz grupe koju čine artritična stanja, poremećaji na koži i srodnim tkivima, poremećaji respiratornog sistema ili poremećaji imunskog i endokrinog sistema.
  21. 21. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11, naznačeno time, što poremećaj označava kognitivni i/ili psihijatrijski poremećaj izabran iz grupe koju čine blage kognitivne smetnje, depresija, bipolarni poremećaj, manija, šizofrenija, psihoza, anksioznost i zavisnost.
  22. 22. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11, naznačeno time, što poremećaj označava urogenitalni poremećaj.
  23. 23. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 11, naznačeno time, što poremećaj označava gastrointestinalni poremećaj.
  24. 24. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 11 i od 16 do 23, naznačeno time, što je navedeno jedinjenje udruženo sa jednim ili sa više drugih terapijskih agenasa.
  25. 25. Farmaceutski preparat koji kao aktivni sastojak sadrži jedinjenje iz bilo kog od patentnih zahteva od 1 do 9 zajedno sa farmaceutski prihvatljivim, terapijski inertnim, organskim ili neorganskim nosećim materijalima.
  26. 26. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 21, naznačeno time, što je navedeno jedinjenje udruženo sa jednim ili sa više drugih terapijskih agenasa u skladu sa patentnim zahtevom 24, i naznačeno time, što drugi terapijski agens označava tipičan ili atipičan antipsihotični agens.
  27. 27. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 26, naznačeno time, što tipičan antipsihotični agens označava haloperidol, dok je atipičan antipsihotični agens izabran između risperidona i klozapina.
  28. 28. Jedinjenje prema zahtevu 26, naznačeno time, što navedeno jedinjenje označava 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, tipičan antipsihotični agens označava haloperidol, dok je atipičan antipsihotični agens izabran između risperidona i klozapina.
  29. 29. Jedinjenje prema zahtevu 26, naznačeno time, što navedeno jedinjenje označava hidrohlorid ili metansulfonat 2-[2-(3-butoksifenil)-etilamino]-N,N-dimetilacetamida, tipičan antipsihotični agens označava haloperidol, dok je atipičan antipsihotični agens izabran između risperidona i klozapina.
  30. 30. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 20, naznačenu time, što poremećaj označava poremećaj imunskog sistema.
  31. 31. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 30, naznačeno time, što poremećaj imunskog sistema označava multiplu sklerozu ili drugi demijelinizacioni poremećaj.
  32. 32. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva od 11 do 24 i od 26 do 31, naznačeno time, što su oboleli pacijenti posebno osetljivi na neželjene sporedne efekte usled MAO inhibitorne aktivnosti.
  33. 33. Upotreba jedinjenja iz bilo kog od patentnih zahteva od 1 do 9 za proizvodnju medikamenata koji su aktivni kao modulatori kanala za natrijum i/ili kalcijum i korisni za tretman patoloških stanja kod kojih je navedeni mehanizam(mehanizmi) sa patološkom ulogom(ulogama), a što označava neurološke, kognitivne, psihijatrijske, inflamatorne, urogenitalne ili gastrointestinalne poremećaje, pri čemu je navedni medikament suštinski oslobođen bilo kakve MAO inhibitorne aktivnosti ili ispoljava značajno smanjenu MAO inhibitornu aktivnost.
  34. 34. Upotreba prema patentnom zahtevu 33, naznačeno time, što je poremećaj kao što je to navedeno u bilo kom od patentnih zahteva od 16 do 23.
RS20180061A 2007-06-15 2008-05-14 Substituisani derivati 2-[2-(fenil) etilamino]alkanamida i njihova upotreba kao modulatora kanala za natrijum i/ili kalcijum RS56780B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP07011766 2007-06-15
PCT/EP2008/003848 WO2008151702A1 (en) 2007-06-15 2008-05-14 Substituted 2- [2- (phenyl) ethylamino] alkaneamide derivatives and their use as sodium and/or calcium channel modulators
EP08749449.8A EP2155663B1 (en) 2007-06-15 2008-05-14 Substituted 2-[2-(phenyl)ethylamino]alkaneamide derivatives and their use as sodium and/or calcium channel modulators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56780B1 true RS56780B1 (sr) 2018-04-30

Family

ID=38658156

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180061A RS56780B1 (sr) 2007-06-15 2008-05-14 Substituisani derivati 2-[2-(fenil) etilamino]alkanamida i njihova upotreba kao modulatora kanala za natrijum i/ili kalcijum

Country Status (27)

Country Link
US (8) US8519000B2 (sr)
EP (1) EP2155663B1 (sr)
JP (1) JP5440496B2 (sr)
KR (1) KR101545124B1 (sr)
CN (1) CN101687773B (sr)
AR (1) AR068976A1 (sr)
AU (1) AU2008261325B2 (sr)
BR (1) BRPI0813363B8 (sr)
CA (1) CA2689561C (sr)
CY (1) CY1119787T1 (sr)
DK (1) DK2155663T3 (sr)
EA (1) EA018195B1 (sr)
ES (1) ES2655704T3 (sr)
HR (1) HRP20180324T8 (sr)
HU (1) HUE038113T2 (sr)
IL (1) IL202235A (sr)
LT (1) LT2155663T (sr)
MX (1) MX2009013119A (sr)
NO (1) NO2155663T3 (sr)
NZ (1) NZ581288A (sr)
PL (1) PL2155663T3 (sr)
PT (1) PT2155663T (sr)
RS (1) RS56780B1 (sr)
SI (1) SI2155663T1 (sr)
TR (1) TR201802576T4 (sr)
TW (1) TWI400071B (sr)
WO (1) WO2008151702A1 (sr)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1658062T3 (da) * 2003-08-25 2010-05-31 Newron Pharm Spa Alfa-aminoamid-derivater anvendelige som anti-inflammatoriske midler
JP5213265B2 (ja) * 2009-10-08 2013-06-19 花王株式会社 Ｌｏｘ−１発現調節剤の評価又は選択方法
PT2723710T (pt) * 2011-06-27 2016-11-14 Newron Pharm Spa Derivados fluorados de arilalquilaminocarboxamida
CN103804341B (zh) * 2012-11-13 2018-04-10 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 酰胺衍生物及其医药用途
CN104761531B (zh) * 2014-01-03 2017-12-01 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 镇痛活性化合物及其医药用途
EP3340988B1 (en) * 2015-11-12 2025-04-09 Afasci, Inc. Ion channel inhibitory compounds, pharmaceutical formulations and uses
CN106316824B (zh) * 2016-08-18 2018-10-19 广州康瑞泰药业有限公司 一种合成2-氟环丙烷甲酸的新方法
CN112041296B (zh) * 2018-04-28 2023-12-29 上海璃道医药科技有限公司 包含苯并含氧脂肪环结构的氨基乙酰胺类化合物及其用途
CN112714670A (zh) * 2018-08-30 2021-04-27 沙特基础工业全球技术公司 具有改良异构化的芳构化催化剂、其制造和使用方法
EP3725769A1 (en) 2019-04-17 2020-10-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Process for the production of substituted 2-[2-(phenyl) ethylamino]alkaneamide derivatives
EP3725768A1 (en) 2019-04-17 2020-10-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Process for the production of substituted 2-[2-(phenyl) ethylamino]alkaneamide derivatives
EP4615820B1 (en) 2023-04-28 2026-02-04 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Crystalline forms of evenamide

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB586645A (en) 1944-07-19 1947-03-26 Burroughs Wellcome Co Improvements relating to the synthesis of amino acid derivatives and salts thereof
GB1254332A (en) * 1969-02-27 1971-11-17 Science Union & Cie Amino acids and their derivatives and processes for preparing them
IL94466A (en) * 1989-05-25 1995-01-24 Erba Carlo Spa Pharmaceutical preparations containing the history of A-amino carboxamide N-phenylalkyl are converted into such new compounds and their preparation
US5051403A (en) * 1989-11-22 1991-09-24 Neurex Corporation Method of treating ischemia-related neuronal damage
WO1993013128A1 (en) * 1991-12-30 1993-07-08 Neurex Corporation Methods of producing analgesia and enhancing opiate analgesia
GB9500691D0 (en) * 1995-01-13 1995-03-08 Smithkline Beecham Plc Compounds
GB9515412D0 (en) 1995-07-27 1995-09-27 Pharmacia Spa 2-(4-substituted)-benzylamino-2-methyl-propanamide derivatives
GB9518572D0 (en) 1995-09-12 1995-11-15 Smithkline Beecham Plc Compounds
US5845454A (en) * 1996-04-23 1998-12-08 Malizia; John T. Drop ceiling hanging system
WO1998035957A1 (en) 1997-02-14 1998-08-20 Bayer Corporation Amide derivatives as selective neuropeptide y receptor antagonists
WO1998054123A1 (en) * 1997-05-30 1998-12-03 Warner-Lambert Company Substituted peptidylamine calcium channel blockers
DE19740110A1 (de) 1997-09-12 1999-03-18 Boehringer Ingelheim Pharma Substituierte 1,2,3,4,5,6-Hexahydro-2,6-methano-3-benzazocin-10-ole, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
GB9727523D0 (en) 1997-12-31 1998-02-25 Pharmacia & Upjohn Spa Alpha-aminoamide derivatives useful as analgesic agents
US6458781B1 (en) * 1998-04-27 2002-10-01 David Thomas Connor Substituted diarylalkyl amides as calcium channel antagonists
US6011035A (en) * 1998-06-30 2000-01-04 Neuromed Technologies Inc. Calcium channel blockers
US6316440B1 (en) * 1998-07-30 2001-11-13 Warner-Lambert Company Reduced dipeptide analogues as calcium channel antagonists
AU7102700A (en) * 1999-09-22 2001-04-24 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Benzo-fused dithiepino[6,5-b]pyridines, and related compositions and methods
WO2001070748A1 (en) * 2000-03-23 2001-09-27 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. THIEPINO [3,2-b] DIHYDROPYRIDINES AND RELATED COMPOSITIONS AND METHODS
AU4961001A (en) 2000-03-31 2001-10-15 Cocensys Inc Aminopyridines and their use as anticonvulsants and sodium channel blockers
US6521647B2 (en) * 2000-04-04 2003-02-18 Pfizer Inc. Treatment of renal disorders
SE0102858D0 (sv) 2001-08-27 2001-08-27 Astrazeneca Ab N-type calcium channel antagonists for the treatment of pain
DK1423168T3 (da) 2001-09-03 2006-05-15 Newron Pharm Spa Farmaceutisk præparat omfattende gabapentin eller en analog deraf og et alfa-aminoamid og dets analgetiske anvendelse
SI1458386T1 (sl) 2001-12-27 2007-08-31 Ortho Mcneil Pharm Inc Aroil pirol heteroeril in metanoli, uporabni za zdravljenje motnje centralnega živčnega sistema
EP1438956A1 (en) 2003-01-16 2004-07-21 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful as antimigraine agents
WO2004087125A1 (en) 2003-04-02 2004-10-14 Ionix Pharmaceuticals Limited Amino acid derivatives as inhibitors of mammalian sodium channels
AR044007A1 (es) * 2003-04-11 2005-08-24 Newron Pharmaceuticals Inc Metodos para el tratamiento de la enfermedad de parkinson
DK1658062T3 (da) * 2003-08-25 2010-05-31 Newron Pharm Spa Alfa-aminoamid-derivater anvendelige som anti-inflammatoriske midler
EP1557166A1 (en) * 2004-01-21 2005-07-27 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of lower urinary tract disorders
EP1588704A1 (en) 2004-04-22 2005-10-26 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of restless legs syndrome and addictive disorders
DK1809271T5 (da) 2004-09-10 2010-12-06 Newron Pharm Spa Anvendelse af (R)-(halogenbenzyloxy)benzylaminopropanamider som natrium- og/eller calciumkanalselektive modulatorer
EP1963280B1 (en) 2005-12-22 2015-10-28 Newron Pharmaceuticals S.p.A. 2-phenylethylamino derivatives as calcium and/or sodium channel modulators
EP1870097A1 (en) 2006-06-15 2007-12-26 Newron Pharmaceuticals S.p.A. Alpha-aminoamide derivatives useful in the treatment of cognitive disorders

Also Published As

Publication number Publication date
NZ581288A (en) 2011-08-26
US9603832B2 (en) 2017-03-28
AU2008261325A2 (en) 2010-04-08
PL2155663T3 (pl) 2018-06-29
AR068976A1 (es) 2009-12-23
PT2155663T (pt) 2018-01-16
EP2155663B1 (en) 2017-11-29
US9474739B2 (en) 2016-10-25
US20150157601A1 (en) 2015-06-11
US9474738B2 (en) 2016-10-25
NO2155663T3 (sr) 2018-04-28
TWI400071B (zh) 2013-07-01
LT2155663T (lt) 2018-02-12
JP5440496B2 (ja) 2014-03-12
KR20100039848A (ko) 2010-04-16
US9051240B2 (en) 2015-06-09
CY1119787T1 (el) 2018-06-27
US9474737B2 (en) 2016-10-25
HRP20180324T8 (hr) 2019-03-08
MX2009013119A (es) 2010-03-04
BRPI0813363B8 (pt) 2021-05-25
HUE038113T2 (hu) 2018-09-28
IL202235A (en) 2015-03-31
JP2010529969A (ja) 2010-09-02
EP2155663A1 (en) 2010-02-24
US20150157598A1 (en) 2015-06-11
HK1138566A1 (en) 2010-08-27
AU2008261325B2 (en) 2012-12-06
KR101545124B1 (ko) 2015-08-18
CN101687773B (zh) 2014-07-30
US20150157600A1 (en) 2015-06-11
US20100210631A1 (en) 2010-08-19
EA201070018A1 (ru) 2010-08-30
BRPI0813363A2 (pt) 2014-12-30
TW200908956A (en) 2009-03-01
WO2008151702A1 (en) 2008-12-18
US9248116B2 (en) 2016-02-02
US8519000B2 (en) 2013-08-27
SI2155663T1 (en) 2018-03-30
CA2689561A1 (en) 2008-12-18
DK2155663T3 (en) 2018-01-22
ES2655704T3 (es) 2018-02-21
US20150157599A1 (en) 2015-06-11
BRPI0813363B1 (pt) 2019-11-12
US9585869B2 (en) 2017-03-07
HRP20180324T1 (hr) 2018-04-06
CA2689561C (en) 2015-11-17
CN101687773A (zh) 2010-03-31
AU2008261325A1 (en) 2008-12-18
US20130289122A1 (en) 2013-10-31
IL202235A0 (en) 2010-06-16
US20150157602A1 (en) 2015-06-11
TR201802576T4 (tr) 2018-03-21
EA018195B1 (ru) 2013-06-28
US20130274249A1 (en) 2013-10-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2155663B1 (en) Substituted 2-[2-(phenyl)ethylamino]alkaneamide derivatives and their use as sodium and/or calcium channel modulators
NO341296B1 (no) 2-fenyletylaminoderivater som kalsium og/eller natrium kanalmodulatorer
CA2833824A1 (en) Fluorinated arylalkylaminocarboxamide derivatives
HK1138566B (en) Substituted 2-[2-(phenyl) ethylamino] alkaneamide derivatives and their use as sodium and/or calcium channel modulators