Deprecated: The each() function is deprecated. This message will be suppressed on further calls in /home/zhenxiangba/zhenxiangba.com/public_html/phproxy-improved-master/index.php on line 456
RS56795B1 - Pirazolil i pirimidinil triciklični enoni kao antioksidantni modulatori inflamacije - Google Patents
[go: Go Back, main page]

RS56795B1 - Pirazolil i pirimidinil triciklični enoni kao antioksidantni modulatori inflamacije - Google Patents

Pirazolil i pirimidinil triciklični enoni kao antioksidantni modulatori inflamacije

Info

Publication number
RS56795B1
RS56795B1 RS20180025A RSP20180025A RS56795B1 RS 56795 B1 RS56795 B1 RS 56795B1 RS 20180025 A RS20180025 A RS 20180025A RS P20180025 A RSP20180025 A RS P20180025A RS 56795 B1 RS56795 B1 RS 56795B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
hours
room temperature
heteroaryl
aralkyl
Prior art date
Application number
RS20180025A
Other languages
English (en)
Inventor
Eric Anderson
Gary L Bolton
Bradley CAPRATHE
Xin Jiang
Chitase Lee
William H Roark
Melean Visnick
Original Assignee
Reata Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Reata Pharmaceuticals Inc filed Critical Reata Pharmaceuticals Inc
Publication of RS56795B1 publication Critical patent/RS56795B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/45—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C07C255/47—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings to carbon atoms of rings being part of condensed ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Opis
I. Oblast pronalaska
[0001] Predmetni pronalazak se generalno odnosi na oblasti biologije i medicine. Naročito, on se odnosi na jedinjenja, kompozicije i postupke za lečenje i prevenciju bolesti kao što su one povezane sa oksidativnim stresom i inflamacijom.
II. Opis srodnog stanja tehnike
[0002] Anti-inflamatorna i anti-proliferativna aktivnost prirodnog triterpenoida, oleanolinske kiseline, je poboljšana hemijskim modifikacijama. Na primer, razvijena je 2-cijano-3,12-diooksooleana-1,9(11)-dien-28-oinska kiselina (CDDO) i srodna jedinjenja (Honda et al., 1997; Honda et al., 1998; Honda et al., 1999; Honda et al., 2000a; Honda et al., 2000b; Honda, et al., 2002; Suh et al. 1998; Suh et al., 1999; Place et al., 2003; Liby et al., 2005). Metil estar, bardoksolon-metil (CDDO-Me), se trenutno procenjuje u kliničkim ispitivanjima faze II za lečenje dijabetičke nefropatije i hronične bolesti bubrega.
[0003] Takođe je pokazano da su sintetički triterpenoidni analozi oleanolinske kiseline inhibitori ćelijskih inflamatornih procesa, kao što je indukcija pomoću IFN-γ inducibilne azot oksid sintaze (iNOS) i COX-2 u mišjim makrofagama. Videti Honda et al. (2000a); Honda et al. (2000b), i Honda et al. (2002). Takođe je pokazano da sintetički derivati drugog triterpenoida, betulinske kiseline, inhibiraju ćelijske inflamatorne procese, iako su ova jedinjenja manje ekstenzivno okarakterisana (Honda et al., 2006). Farmakologija ovih sintetičkih molekula triterpenoida je složena. Pokazano je da jedinjenja poreklom od oleanolinske kiseline utiču na funkciju višestrukih proteinskih ciljnih mesta i na taj način moduliraju aktivnost nekoliko značajnih ćelijskih puteva prenosa signala povezanih sa oksidativnim stresom, kontrolom ćelijskog ciklusa, i inflamacijom (npr., Dinkova-Kostova et al., 2005; Ahmad et al., 2006; Ahmad et al., 2008; Liby et al., 2007a). Derivati betulinske kiseline, iako oni pokazuju slične anti-inflamatorne osobine, takođe izgleda da imaju značajne razlike u njihovoj farmakologiji u poređenju sa jedinjenjima poreklom od OA (Liby et al., 2007b).
[0004] Uopšteno, nije sigurno da triterpenoidni početni materijali koji su korišćeni do danas imaju optimalne osobine za sve primene u poređenju sa drugim mogućim početnim materijalima. Pored toga, često je neophodno sintetisati triterpenoidne derivate od početnih materijala prirodnih proizvoda. Proizvodnja visoko prečišćenih triterpenoidnih početnih materijala može biti skupa, i biljni materijali koji su konačni izvori ovih jedinjenja mogu da variraju u dostupnosti, uključujući kao posledica štetnih vremenskih uslova, bolesti i drugih sredinskih faktora. Imajući u vidu da profili biološke aktivnosti poznatih triterpenoidnih derivata variraju, i u pogledu širokog niza različitih bolesti koje mogu biti lečene ili sprečene sa jedinjenjima koja imaju potentne antioksidantne i anti-inflamatorne efekte, i visok stepen neispunjene medicinske potrebe predstavljene unutar ovih različitih bolesti, poželjno je sintetisati nova jedinjenja sa različitim strukturama koje mogu da imaju poboljšane profile biološke aktivnosti za lečenje jedne ili više indikacija. Prema tome, dizajn potentnih, selektivnih antioksidativnih/anti-inflamatornih jedinjenja koja mogu biti lako sintetisana od jednostavnih početnih materijala je poželjan cilj.
[0005] WO 2009/146216 A2 opisuje derivate oleanolinske kiseline korisne kao antioksidantne inflamacione modulatore.
REZIME PRONALASKA
[0006] Predmetni opis daje nova jedinjenja, uključujući pirazolil i pirimidinil triciklične enone sa anti-inflamatornim i/ili antioksidantnim osobinama, njihove farmaceutske kompozicije, postupke za njihovu proizvodnju, i postupke za njihovu upotrebu.
[0007] U jednom aspektu predmetnog opisa data su jedinjenja formule:
gde:
atomi obeleženi sa 1 ili 2 su vezani dvogubom vezom ili epoksidizovanom dvogubom vezom; n je 1 ili 2;
m je 0 ili 1;
X je -CN, -CF3, ili -C(O)R<a>, gde R<a>je -OH, alkoksi(C≤6), alkilamino(C≤6), dialkilamino(C≤6), ili -NHS(O)2-alkil(C1-4);
R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili
R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
R<3>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili R<3>je uzet zajedno sa R<4>kao što je dato u daljem tekstu; uz uslov da je R<3>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze;
R<4>je vodonik, hidroksi, amino, halo, cijano, ili okso; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili R<4>je uzet zajedno sa R<3>ili R<5>kao što je dato u daljem tekstu;
R<5>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili R<5>je uzet zajedno sa R<4>kao što je dat u daljem tekstu; uz uslov da je R<5>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; i
R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, cijano, ili okso; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
uz uslov da kada su R<3>i R<4>uzeti zajedno, jedinjenje je dalje definisano formulom Ia:
gde R<7>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili
uz uslov da kada su R<4>i R<5>uzeti zajedno, jedinjenje je dalje definisano formulom Ib:
gde R<8>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
[0008] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su dalje definisana formulom:
gde:
n je 1 ili 2;
X je -CN, -CF3, ili -C(O)R<a>, gde R<a>je -OH, alkoksi(C≤6), alkilamino(C≤6), dialkilamino(C≤6), ili -NHS(O)2-alkil(C1-4);
R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili
R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
R<3>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; uz uslov da je R<3>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze;
R<5>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; uz uslov da je R<5>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; i
R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
[0009] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su dalje definisana formulom:
gde:
R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili
R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
R<3>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; uz uslov da je R<3>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze;
R<5>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; uz uslov da je R<5>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formirao deo dvogube veze; i
R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
[0010] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su dalje definisana formulom:
gde:
R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
R<3>je vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; i
R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
[0011] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su dalje definisana formulom:
gde:
R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili
R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
R<5>je vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; i
R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
[0012] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su dalje definisana formulom:
gde:
R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
R<4>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa;
R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
[0013] U nekim primerima izvođenja, atomi obeleženi sa 1 i 2 su vezani dvogubom vezom. U nekim primerima izvođenja, atomi obeleženi sa 1 i 2 su vezani epoksidizovanom dvogubom vezom. U nekim primerima izvođenja, n je 1. U nekim primerima izvođenja, n je 2. U nekim primerima izvođenja, m je 0. U nekim primerima izvođenja, m je 1. U nekim primerima izvođenja, X je -CN. U nekim primerima izvođenja, X je -CF3. U nekim primerima izvođenja, X je vodonik.
[0014] U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je alkil(C≤8) ili supstituisani alkil(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je alkil(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je metil. U nekim primerima izvođenja, R<1>i R<2>su svaki metil. U nekim primerima izvođenja, R<1>je metil i R<2>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je etil. U nekim primerima izvođenja, R<1>je etil i R<2>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<1>i R<2>su svaki vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su 1,4-butandiil. U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je fenil. U nekim primerima izvođenja, R<1>je fenil i R<2>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je aralkil(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<1>ili R<2>je benzil. U nekim primerima izvođenja, R<1>je benzil i R<2>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<1>i R<2>su svaki benzil.
[0015] U nekim primerima izvođenja, R<3>je odsutan. U nekim primerima izvođenja, R<3>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<3>je alkil(C≤8), aril(C≤8), acil(C≤8), alkoksi(C≤8) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa. U nekim primerima izvođenja, R<3>je alkil(C≤4) ili supstituisani alkil(C≤4). U nekim primerima izvođenja, R<3>je alkil(C≤4). U nekim primerima izvođenja, R<3>je metil. U nekim primerima izvođenja, R<3>je aril(C≤8) ili supstituisani aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<3>je aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<3>je fenil.
[0016] U nekim primerima izvođenja, R<4>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<4>je okso. U nekim primerima izvođenja, R<4>je alkil(C≤8), aril(C≤8), acil(C≤8), alkoksi(C≤8) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa. U nekim primerima izvođenja, R<4>je alkil(C≤6) ili supstituisani alkil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<4>je alkil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<4>je metil, izopropil, t-butil ili ciklopropil. U nekim primerima izvođenja, R<4>je haloalkil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<4>je trifluorometil. U nekim primerima izvođenja, R<4>je alkoksi(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<4>je metoksi ili etoksi. U nekim primerima izvođenja, R<4>je aril(C≤8) ili supstituisani aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<4>je fenil, hlorofenil, metilfenil, ili metoksifenil. U nekim primerima izvođenja, R<4>je heteroaril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<4>je piridinil ili pirimidinil. U nekim primerima izvođenja, R<4>je acil(C≤6) ili supstituisani acil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<4>je etoksikarbonil.
[0017] U nekim primerima izvođenja, R<5>je odsutan. U nekim primerima izvođenja, R<5>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<5>je alkil(C≤8), aril(C≤8), acil(C≤8), alkoksi(C≤8) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa. U nekim primerima izvođenja, R<5>je alkil(C≤6) ili supstituisani alkil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<5>je alkil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<5>je metil, cikloheksil, ili t-butil. U nekim primerima izvođenja, R<5>je supstituisani alkil(C≤4). U nekim primerima izvođenja, R<5>je 2-hidroksietil ili 2,2,2-trifluoroetil. U nekim primerima izvođenja, R<5>je aril(C≤8) ili supstituisani aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<5>je aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<5>je fenil. U nekim primerima izvođenja, R<5>je acil(C≤8) ili supstituisani acil(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<5>je acetil, metoksikarbonil, etoksikarbonil, ili fenilkarbonil.
[0018] U nekim primerima izvođenja, R<6>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<6>je cijano. U nekim primerima izvođenja, R<6>je halo. U nekim primerima izvođenja, R<6>je hloro ili bromo. U nekim primerima izvođenja, R<6>je alkil(C≤6) ili supstituisani alkil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<6>je alkil(C≤6). U nekim primerima izvođenja, R<6>je metil, izopropil ili cikloheksil. U nekim primerima izvođenja, R<6>je aril(C≤8), heteroaril(C≤8) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa. U nekim primerima izvođenja, R<6>je aril(C≤10). U nekim primerima izvođenja, R<6>je fenil, metilfenil ili naftil. U nekim primerima izvođenja, R<6>je supstituisani aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<6>je hlorofenil, fluorofenil ili metoksifenil. U nekim primerima izvođenja, R<6>je heteroaril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<6>je piridinil, pirimidinil, metilpirazolil, dimetilizoksazolil, metiltriazolil, ili metiltetrazolil. U nekim primerima izvođenja, R<6>je aralkil(C≤12) ili supstituisani aralkil(C≤12). U nekim primerima izvođenja, R<6>je benzil. U nekim primerima izvođenja, R<6>je amido(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<6>je fenilkarbonilamino. U nekim primerima izvođenja, R<6>je alkinil(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<6>je etinil. U nekim primerima izvođenja, R<6>je acil(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<6>je aminokarbonil ili dimetilaminokarbonil. U nekim primerima izvođenja, R<6>je alkoksi(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<6>je metoksi. U nekim primerima izvođenja, atom ugljenika 10 je u R konfiguraciji. U nekim primerima izvođenja, atom ugljenika 10 je u S konfiguraciji. U nekim primerima izvođenja, atom ugljenika 5 je u R konfiguraciji. U nekim primerima izvođenja, atom ugljenika 5 je u S konfiguraciji.
[0019] U nekim primerima izvođenja, R<7>ili R<8>je vodonik. U nekim primerima izvođenja, R<7>ili R<8>je halo. U nekim primerima izvođenja, R<7>ili R<8>je bromo. U nekim primerima izvođenja, R<7>ili R<8>je aril(C≤8). U nekim primerima izvođenja, R<7>ili R<8>je fenil.
[0020] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su dalje definisana kao:
[0021] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja su dalje definisana kao:
[0022] U sledećem aspektu, pronalazak daje jedinjenja formula:
[0023] U sledećem aspektu, pronalazak daje jedinjenja formula:
[0024] U sledećem aspektu, pronalazak daje farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje prema bilo kojoj od formula navedenih ovde i ekscipijens. U nekim primerima izvođenja, farmaceutske kompozicije su dalje definisane kao:
a) jedinjenje prema bilo kojoj od formula koje su ovde navedene;
b) optički izomer jedinjenja, gde je optički izomer enantiomer jedinjenja; i
c) ekscipijens.
U nekim primerima izvođenja, odnos količine jedinjenja prema količini optičkog izomera je približno 1:1. U nekim primerima izvođenja, odnos količine jedinjenja prema količini optičkog izomera je približno 5:1. U nekim primerima izvođenja, odnos količine jedinjenja prema količini optičkog izomera je približno 10:1. U nekim primerima izvođenja, odnos količine jedinjenja prema količini optičkog izomera je približno 20:1.
OPIS ILUSTRATIVNIH PRIMERA IZVOĐENJA
[0025] Ovde su navedena nova jedinjenja i kompozicije sa antioksidantnim i/ili antiinflamatornim osobinama, postupci za njihovu proizvodnju, i postupci za njihovu upotrebu, uključujući za lečenje i/ili prevenciju bolesti.
I. Definicije
[0026] Kada je korišćen u kontekstu hemijske grupe, "vodonik" označava -H; "hidroksi" označava -OH; "okso" označava =O; "halo" označava nezavisno -F, -Cl, -Br ili -I; "amino" označava -NH2; "hidroksiamino" označava -NHOH; "nitro" označava -NO2; imino označava =NH; "cijano" označava -CN; "izocijanat" označava -N=C=O; "azido" označava -N3; u monovalentnom kontekstu "fosfat" označava -OP(O)(OH)2ili njegov deprotonovani oblik; u dvovalentnom kontekstu "fosfat" označava -OP(O)(OH)O ili njegov deprotonovani oblik; "merkapto" označava -SH; "tio" označava =S; "sulfonil" označava -S(O)2-; i "sulfinil" označava -S(O)-.
[0027] U kontekstu hemijskih formula, simbol "-" označava jednogubu vezu, "=" označava dvogubu vezu; i "≡" označava trogubu vezu. "Epoksidizovana dvoguba veza" predstavlja grupu:
Simbol "----" predstavlja izbornu vezu, koja ako je prisutna je jednoguba ili dvoguba. Simbol "---" predstavlja jednogubu vezu ili dvogubu vezu. Na taj način, na primer, struktura
obuhvata strukture
Kao što će biti jasno stručnjaku iz date oblasti tehnike, nijedan takav atom prstena ne formira deo više od jedne dvogube veze. Simbol " ", kada je povučen vertikalno preko veze ukazuje na tačku vezivanja grupe. Zabeleženo je da je tačka vezivanja tipično samo identifikovana na ovaj način za veće grupe u cilju pomaganja čitaocu da brzo i nedvosmisleno identifikuje tačku vezivanja. Simbol označava jednogubu vezu gde je grupa vezana za širi kraj trougla "izvan stranice." Simbol označava jednogubu vezu gde je grupa vezana za širi deo trougla "u stranici". Simbol označava jednogubu vezu gde je konformacija (npr., R ili S) ili geometrija nedefinisana (npr., E ili Z).
[0028] Svaka nedefinisana valenca na atomu strukture prikazane u ovoj prijavi implicitno predstavlja atom vodonika vezan za atom. Kada je grupa "R" prikazana kao "plutajuća grupa" na sistemu prstena, na primer, u formuli:
tada R može da zameni bilo koji atom vodonika vezan za bilo koje atome u prstenu, uključujući prikazani, implicirani, ili izričito definisani vodonik, sve dok se formira stabilna struktura. Kada je grupa "R" prikazana kao "plutajuća grupa" na fuzionisanom sistemu prstena, kao na primer u formuli:
tada R može da zameni svaki vodonik vezan za bilo koji od atoma u prstenu bilo kog od fuzionisanih prstenova osim ukoliko nije određen drugačije. Zamenljivi vodonici obuhvataju prikazane vodonike (npr., vodonik vezan za azot u gore navedenoj formuli), implicirane vodonike (npr., vodonik gore navedene formule koji nije prikazan, ali se razume da je prisutan), izričito definisani vodonici, i izborni vodonici čije prisustvo zavisi od identiteta atoma prstena (npr., vodonik vezan za grupu X, kada je X jednako -CH-), sve dok se formira stabilna struktura. U prikazanom primeru, R može da se nalazi na 5-članom ili 6-članom prstenu fuzionisanog sistema prstena. U formuli prikazanoj u prethodnom tekstu, slovo "y" u supskriptu neposredno posle grupe "R" u zagradama, predstavlja numeričku promenljivu. Osim ukoliko nije naznačeno drugačije, ova promenljiva može biti 0, 1, 2, ili bilo koji ceo broj veći od 2, samo ograničena maksimalnim brojem zamenljivih atoma vodonika prstena ili sistema prstena.
[0029] Za grupe i klase navedene u daljem tekstu, sledeći subskripti u zagradama dalje definišu grupu/klasu na sledeći način: "(Cn)" definiše tačan broj (n) atoma ugljenika u grupi/klasi. "(C≤n)" definiše maksimalni broj (n) atoma ugljenika koji mogu biti u grupi/klasu, sa minimalnim brojem koji je što je moguće manji za dotičnu grupu, npr., razume se da je minimalan broj atoma ugljenika u grupi "alkenil(C≤8)" ili klasi "alken(C≤8)" dva. Na primer, "alkoksi(C≤10)" označava one alkoksi grupe koje imaju od 1 do 10 atoma ugljenika (npr., 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ili 10, ili bilo koji opseg koji se može iz toga izvesti (nr., 3 do 10 atoma ugljenika). (Cn-n’) defininiše minimalan (n) i maksimalan broj atoma ugljenika u grupi. Slično, "alkil(C2-10)" označava one alkil grupe koje imaju od 2 do 10 atoma ugljenika (npr., 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ili 10, ili bilo koji opseg koji se može izvesti (npr., 3 do 10 atoma ugljenika)).
[0030] Termin "zasićen" kao što je ovde korišćen označava jedinjenje ili grupu tako modifikovanu da nema ugljenik-ugljenik dvogube i nema ugljenik-ugljenik trogube veze, osim kao što je navedeno u prethodnom tekstu. Ovaj termin ne isključuje ugljenik-heteroatom višestruke veze, na primer ugljenik-kiseonik dvogubu vezu ili ugljenik-azot dvogubu vezu.
Pored toga, ne isključuje ugljenik-ugljenik dvogubu vezu koja može da se javi kao deo ketoenol tautomerizma ili imin/enamin tautomerizma.
[0031] Termin "alifatičan" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava da je jedinjenje/grupa tako modifikovano aciklično ili ciklično, ali nearomatično ugljovodonično jedinjenje ili grupa. U alifatičnim jedinjenjima/grupama, atomi ugljenika mogu biti spojeni zajedno u pravim lancima, granatim lancima ili nearomatičnim prstenovima (alicikličan). Alifatična jedinjenja/grupe mogu biti zasićeni, koji su spojeni dvogubim vezama (alkani/alkil), ili nezasićeni, sa jednom ili više dvogubih veza (alkeni/alkenil) ili sa jednom ili više trogubih veza (alkini/alkinil). Kada je termin "alifatičan" korišćen bez modifikatora "supstituisan" prisutni su samo atomi ugljenika i vodonika. Kada je termin korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2,-C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
[0032] Termin "alkil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava monovalentnu zasićenu alifatičnu grupu sa atomom ugljenika kao tačkom vezivanja, linearnu ili granatu, ciklo, cikličnu ili acikličnu strukuru, i bez atoma osim ugljenika i vodonika. Na taj način, kao što je ovde korišćen cikloalkil je podgrupa alkila. Grupe -CH3(Me), -CH2CH3(Et), -CH2CH2CH3(n-Pr), -CH(CH3)2(izo-Pr), -CH(CH2)2(ciklopropil), -CH2CH2CH2CH3(n-Bu), -CH(CH3)CH2CH3(sek-butil), -CH2CH(CH3)2(izo-butil), -C(CH3)3(terc-butil), -CH2C(CH3)3(neo-pentil), ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i cikloheksilmetil su neograničeni primeri alkil grupa. Termin "alkandiil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava dvovalentnu zasićenu alifatičnu grupu, sa jednim ili dva zasićena atoma ugljenika kao tačkama vezivanja, linearnom ili granatom, ciklo, cikličnom ili acikličnom strukturom, bez ugljenik-ugljenik dvogubih ili trogubih veza, i bez atoma osim ugljenika i vodonika. Grupe, -CH2- (metilen), -CH2CH2-, -CH2C(CH3)2CH2-, -CH2CH2CH2-, i
su neograničavajući primeri alkandiil grupa. Termin "alkiliden" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava dvovalentnu grupu =CRR’ u kojoj su R i R’ nezavisno vodonik, alkil, ili R i R’ su uzeti zajedno tako da predstavljaju alkandiil koji ima najmanje dva atoma ugljenika. Neograničavajući primeri alkiliden grupa obuhvataju: =CH2, =CH(CH2CH3), i =C(CH3)2. Kada je bilo koji od ovih termina korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. Sledeće grupe su neograničavajući primeri supstituisanih alkil grupa: -CH2OH, CH2Cl, -CF3, -CH2CN, -CH2C(O)OH, -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)NH2, -CH2C(O)CH3, -CH2OCH3, -CH2OC(O)CH3, -CH2NH2, -CH2N(CH3)2, i -CH2CH2Cl. Termin "haloalkil" je podgrupa supstituisanog alkila, u kome su jedan ili više vodonika supstituisani sa halo grupom i nisu prisutni drugi atomi osim ugljenika, vodonika i halogena. Grupa -CH2Cl je neograničavajući primer haloalkila. "Alkan" označava jedinjenje H-R, gde R je alkil. Termin "fluoroalkil" je podgrupa supstituisanog alkila, u kome su jedan ili više vodonika supstituisani sa fluoro grupom i nisu prisutni drugi atomi osim ugljenika, vodonika i fluora. Grupa -CH2F, -CF3, i -CH2CF3su neograničavajući primeri fluoroalkil grupa. "Alkan" označava jedinjenje H-R, gde R je alkil.
[0033] Termin "alkenil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava monovalentnu nezasićenu alifatičnu grupu sa atomom ugljenika kao tačkom vezivanja, linearnom ili granatom, ciklo, cikličnom ili acikličnom strukturom, najmanje jednom nearomatičnom ugljenik-ugljenik dvogubom vezom, bez ugljenik-ugljenik trogubih veza i bez atoma osim ugljenika i vodonika. Neograničavajući primeri alkenil grupa obuhvataju: -CH=CH2(vinil), -CH=CHCH3, -CH=CHCH2CH3, -CH2CH=CH2(alil), -CH2CH=CHCH3, i -CH=CH-C6H5. Termin "alkandiil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava dvovalentnu nezasićenu alifatičnu grupu, sa dva atoma ugljenika kao tačkama vezivanja, linearnom ili granatom, ciklo, cikličnom ili acikličnom strukturom, najmanje jednom nearomatičnom ugljenik-ugljenik dvogubom vezom, bez ugljenik-ugljenik trogubih veza, i bez atoma osim ugljenika i vodonika. Grupe -CH=CH-, -CH=C(CH3)CH2-, -CH=CHCH2-, i
su neograničavajući primeri alkandiil grupa. Kada su ovi termini korišćeni sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. Grupe -CH=CHF, -CH=CHCl i -CH=CHBr, su neograničavajući primeri supstituisanih alkenil grupa. "Alken" označava jedinjenje H-R, gde R je alkenil.
[0034] Termin "alkinil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava monovalentnu nezasićenu alifatičnu grupu sa atomom ugljenika kao tačkom vezivanja, linearnom ili granatom, ciklo, cikličnom ili acikličnom strukturom, najmanje jednom ugljenik-ugljenk trogubom vezom, i bez atoma osim ugljenika i vodonika. Kao što je ovde korišćen, termin alkinil ne isključuje prisustvo jedne ili više nearomatičnih ugljenik-ugljenik dvogubih veza. Grupe -C≡CH, -C≡CCH3, i -CH2C≡CCH3, su neograničavajući primeri alkinil grupa. Kada je alkinil korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. "Alkin" označava jedinjenje HR, gde R je alkinil.
[0035] Termin "heteroaril" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava monovalentnu aromatičnu grupu sa aromatičnim atomom ugljenika ili atomom azota kao takom vezivanja, pri čemu navedeni atom ugljenika ili atom azota formiraju deo jedne ili više aromatičnih prstenastih struktura gde je najmanje jedan od atoma u prstenu azot, kiseonik ili sumpor, i gde se heteroaril grupa ne sastoji od atoma različitih od ugljenika, vodonika, aromatičnog azota, aromatičnog kiseonika i aromatičnog sumpora. Kao što je ovde korišćen, ovaj termin ne isključuje prisustvo jedne ili više alkil, aril, i/ili aralkil grupa (kako dozvoljava ograničenje broja ugljenika) vezanih za aromatični prsten ili areomatični sistem prstena. Ako je prisutno više od jednog prstena, prstenovi mogu biti fuzionisani ili nefuzionisani. Neograničavajući primeri heteroaril grupa obuhvataju furanil, imidazolil, indolil, indazolil (Im), izoksazolil, metilpiridinil, fenilpiridinil, oksazolil, pirazolil, piridinil, pirolil, pirimidinil, pirazinil, hinolil, hinazolil, hinoksalinil, triazinil, tetrazolil, tienil i triazolil. Termin "heteroarendiil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava dvovalentnu aromatičnu grupu, sa dva aromatična atoma ugljenika, dva aromatična atoma azota, ili jednim aromatičnim atomom ugljenika i jednim aromatičnim atomom azota kao dve tačke vezivanja, pri čemu navedeni atomi formiraju deo jednog ili više aromatičnih struktura prstena, gde je najmanje jedan od atoma u prstenu azot, kiseonik ili sumpor, i gde se dvovalentna grupa ne sastoji od atoma različitih od ugljenika, vodonika, aromatičnog azota, aromatičnog kiseonika i aromatičnog sumpora. Kao što je ovde korišćen, ovaj termin ne isključuje prisustvo jedne ili više alkil, aril, i/ili aralkil grupa (kako dozvoljava ograničenje broja ugljenika) vezana za aromatičan prsten ili aromatičan sistem prstena. Ako je prisutno više od jednog prstena, prstenovi mogu biti fuzionisnai ili nefuzionisani. Neograničavajući primeri heteroarendiil grupa obuhvataju:
Kada su ovi termini korišćeni sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2,-C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. "Aren" označava jedinjenje H-R, gde R je aril.
[0036] Termin "aralkil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava monovalentnu grupu -alkandiil-aril, u kojoj su svaki od termina alkandiil i aril korišćeni na način u skladu sa definicijama datim u prethodnom tekstu. Neograničavajući primeri aralkila su: fenilmetil (benzil, Bn) i 2-fenil-etil. Kada je ovaj termin korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika formiraju alkandiil i/ili aril su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. Neograničavajući primeri supstituisanih aralkila su: (3-hlorofenil)-metil i 2-hloro-2-fenil-et-1-il.
[0037] Termin "heteroaril" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava monovalentnu aromatičnu grupu sa aromatičnim atomom ugljenika ili atomom azota kao tačkom vezivanja, pri čemu navedeni atom ugljenika ili atom azota koji formira deo jedne ili više aromatičnih struktura prstena gde je najmanje jedan od atroma u prstenu azot, kiseonik ili sumpor, i gde se heteroaril grupa ne sastoji od atoma različitih od grupa ne sastoji od atoma različitih od ugljenika, vodonika, aromatičnog azota, aromatičnog kiseonika i aromatičnog sumpora. Kao što je ovde korišćen, ovaj termin ne isključuje prisustvo jedne ili više alkil, aril, i/ili aralkil grupa (kako dozvoljava ograničenje broja uljenika) vezanih za aromatični prsten ili aromatični sistem prstena. Ako je prisutno više od jednog prstena, prstenovi mogu biti fuzionisani ili nefuzionisani. Neograničavajući primeri heteroaril grupa obuhvataju furanil, imidazolil, indolil, indazolil (Im), izoksazolil, metilpiridinil, oksazolil, fenilpiuridinil, piridinil, pirolil, pirimidinil, pirazinil, hinolil, hinazolil, hinoksalinil, triazinil, tetrazolil, tiazolil, tienil i triazolil. Termin "heteroarendiil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava dvovalentnu aromatičnu grupu, sa dva aromatična atoma ugljenika, dva aromatična atoma azota ili jednim aromatičnim atomom ugljenika i jednim aromatičnim atomom azota kao dve tačke vezivanja, pri čemu navedeni atomi koji formiraju deo jedne ili više aromatičnih struktura prstena gde je najmanje jedan od atoma u prstenu azot, kiseonik ili sumpor, i gde se dvovalentna grupa ne sastoji od atoma različitih od ugljenika, vodonika, aromatičnog azota, aromatičnog kiseonika i aromatičnog sumpora. Kao što je ovde korišćen, ovaj termin ne isključuje prisustvo jedne ili više alkil, aril, i/ili aralkil grupa (kako dozvoljava ograničenje broja ugljenika) vezana za aromatični prsten ili aromatični sistem prstena. Ako je prisutno više od jednog prstena, prstenovi mogu biti fuzionisani ili nefuzionisani. Neograničavajući primeri heteroarendiil grupa obuhvataju:
Kada su ovi termini korišćeni sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2,-C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
[0038] Termin "heterocikloalkil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava monovalentnu nearomatičnu grupu sa atomom ugljenika ili atomom azota kao tačkom vezivanja, pri čemu navedeni atom ugljenika ili atom azota formira deo jedne ili više nearomatičnih struktura prstena gde je najmanje jedan od atoma u prstenu azot, kiseonik ili sumpor, i gde se heterocikloalkil grupa ne sastoji od atoma koji se razlikuju od ugljenika, vodonika, azota, kiseonika i sumpora. Kao što je ovde korišćen, termin ne isključuje prisustvo jedne ili više alkil grupa (kako dozvoljava ograničenje broja ugljenika) vezanih za prsten ili sistem prstena. Ako je prisutvo više od jednog prstena, prstenovi mogu biti fuzionisani ili nefuzionisani. Neograničavajući primeri heterocikloalkil grupa obuhvataju aziridinil, pirolidinil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, tiomorfolinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotiofuranil, tetrahidropiranil i piranil. Kada je termin "heterocikloalkil" korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
[0039] Termin "acil" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava grupu -C(O)R, u kojoj R je vodonik, alkil, aril, aralkil ili heteroaril, kako su ti termini definisani u prethodnom tekstu. Grupe -CHO, -C(O)CH3(acetil, Ac), -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH(CH3)2, -C(O)CH(CH2)2, -C(O)C6H5, -C(O)C6H4CH3, -C(O)CH2C6H5, -C(O)(imidazolil) su neograničavajući primeri acil grupa. "Tioacil" je definisan na analogan način, osim što je atom kiseonika grupe -C(O)R zamenjen atomom sumpora, -C(S)R. Kada je bilo koji od ovih termina korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika (uključujući atom vodonika direktno vezan za karbonil ili tiokarbonil grupu) su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2,-C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. Grupe -C(O)CH2CF3, -CO2H (karboksil), -CO2CH3(metilkarboksil), -CO2CH2CH3, -C(O)NH2(karbamoil), i -CON(CH3)2, su neograničavajući primeri supstituisanih acil grupa.
[0040] Termin "alkoksi" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava grupu -OR, u kojoj R je alkil, kao što je taj termin definisan u prethodnom tekstu. Neograničavajući primeri alkoksi grupa obuhvataju: -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCH(CH2)2, -O-ciklopentil i -O-cikloheksil. Termini "alkeniloksi", "alkiniloksi", "ariloksi", "aralkoksi", "heteroariloksi" i "aciloksi", kada su korišćeni bez modifikatora "supstituisan", označava grupe, definisane kao -OR, u kojima R je alkenil, alkinil, aril, aralkil, heteroaril i acil, respektivno. Termin "alkoksidiil" označava dvovalentnu grupu -O-alkandiil-, -O-alkandiil-O-, ili -alkandiil-O-alkandiil-. Termin "alkiltio" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava grupu -SR, u kojoj R je alkil, kao što je taj termin definisan u prethodnom tekstu. Kada je bilo koji od ovih termina korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. Termin "alkohol" odgovara alkanu, kao što je definisan u prethodnom tekstu, pri čemu je najmanje jedan od atoma vodonika zamenjen sa hidroksi grupom.
[0041] Termin "alkilamino" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava grupu -NHR, u kojoj R je alkil, kao što je taj termin definisan u prethodnom tekstu. Neograničavajući primeri alkilamino grupa obuhvataju: -NHCH3i -NHCH2CH3. Termin "dialkilamino" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava grupu -NRR’, u kojoj R i R’ mogu biti iste ili različite alkil grupe, ili R i R’ mogu biti uzeti zajedno tako da predstavljaju alkandiil. Neograničavajući primeri dialkilamino grupa obuhvataju: -N(CH3)2, -N(CH3)(CH2CH3) i N-pirolidinil. Termini "alkoksiamino", "alkenilamino", "alkinilamino", "arilamino", "aralkilamino", "heteroarilamino" i "alkilsulfonilamino" kada su korišćeni bez modifikatora "supstituisan", označavaju grupe, definisane kao -NHR, u kojima R je alkoksi, alkenil, alkinil, aril, aralkil, heteroaril, i alkilsulfonil, respektivno. Neograničavajući primer arilamino grupe je -NHC6H5. Termin "amido" (acilamino), kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan", označava grupu -NHR, u kojoj R je acil, kao što je taj termin definisan u prethodnom tekstu. Neograničavajući primer amido grupe je -NHC(O)CH3. Termin "alkilimino" kada je korišćen bez modifikatora "supstituisan" označava dvovalentnu grupu =NR, u kojoj R je alkil, kao što je taj termin definisan u prethodnom tekstu. Termin "alkilaminodiil" označava dvovalentnu grupu -NH-alkandiil-, -NH-alkandiil-NH-, ili -alkandiil-NH-alkandiil-. Kada je bilo koji od ovih termina korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2. Grupe -NHC(O)OCH3i -NHC(O)NHCH3su neograničavajući primeri supstituisanih amido grupa.
[0042] Termini "alkilsulfonil" i "alkilsulfinil" kada su korišćeni bez modifikatora "supstituisan" označavaju grupe -S(O)2R i -S(O)R, respektivno, u kojima R je alkil, kao što je taj termin definisan u prethodnom tekstu. Termini "alkenilsulfonil", "alkinilsulfonil", "arilsulfonil", "aralkilsulfonil" i "heteroarilsulfonil", su definisani na analogan način. Kada je bilo koji od ovih termina korišćen sa modifikatorom "supstituisan" jedan ili više atoma vodonika su nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
[0043] Kao što je ovde korišćen, "hiralna pomoćna" označava uklonjivu hiralnu grupu koja je sposobna da utiče na stereoselektivnost reakcije. Stručnjaci iz date oblasti tehnike poznaju takva jedinjenja, i mnoga su komercijalno dostupna.
[0044] Upotreba reči "a" ili "an," zajedno sa terminom "sadrži" u patentnim zahtevima i/ili specifikaciji može da označava "jedan," ali je takođe u skladu sa značenjem "jedan ili više," "najmanje jedan," i "jedan ili više od jedan."
[0045] U ovoj prijavi, termin "oko" je korišćen za označavanje da vrednost obuhvata inherentnu varijaciju greške za uređaj, postupak koji se koristio za određivanje vrednosti, ili varijacije koja postoji među studiranim subjektima.
[0046] Termini "sadrži," "ima" i "obuhvata" su otvoreni vezujući glagoli. Bilo koj oblici ili vremena jednog ili više od ovih glagola, kao što su "sadrži," "koji sadrži," "ima," "koji ima," "obuhvata" i "uključujući," su takođe otvoreni. Na primer, svaki postupak koji "sadrži," "ima" ili "obuhvata" jedan ili više koraka nije ograničen na posedovanje samo onih jednog ili više koraka i trakođe pokriva druge nenavedene korake.
[0047] Termin "efikasan," kao što je taj termin korišćen u specifikaciji i/ili patentnim zahtevima, označava adekvatan za postizanje željenog, očekivanog ili nameravanog rezultata.
[0048] Termin "hidrat" kada je korišćen kao modifikator za jedinjenje označava da jedinjenje ima manje od jednog (npr., hemihidrat), jedan (npr., monohidrat), ili više od jednog (npr., dihidrat) molekula vode povezanih sa svakim molekulom jedinjenja, kao što je u čvrstim oblicima jedinjenja.
[0049] Kao što je ovde korišćen, termin "IC50" označava inhibitornu dozu koja je 50% od maksimalnog dobijenog odgovora. Ova kvantitativna mera ukazuje na to koliko je određenog leka ili druge supstance (inhibitora) potrebno za inhibiciju datog biološkog, biohemijskog ili hemijskog procesa (ili komponente procesa, tj. enzima, ćelije, ćelijskog receptora ili mikroorganizma) za polovinu.
[0050] "Izomer" prvog jedinjenja je posebno jedinjenje u kome svaki molekul sadrži iste gradivne atome kao prvo jedinjenje, ali gde se konfiguracija tih atoma u tri dimenzije razlikuje.
[0051] Kao što je ovde korišćen, termin "pacijent" ili "subjekat" označava živi sisarski organizam, kao što je čovek, majmun, krava, ovca, koza, pas, mačka, miš, pacov, zamorče, ili njihove transgene vrste. U određenim primerima izvođenja, pacijent ili subjekat je primat. Neograničavajući primeri humanih subjekata su odrasli, deca, bebe i fetusi.
[0052] Kao što je genralno korišćen ovde "farmaceutski prihvatljiv" označava ona jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili oblike doze koji su, unutar obima racionalnog medicinskog mišljenja, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima, organima i/ili telesnim tečnostima ljudi i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora, ili drugih problema ili komplikacija u skladu sa razumnim odnosom koristi/rizika.
[0053] "Farmaceutski prihvatljive soli" označavaju soli jedinjenja prema predmetnom pronalasku koje su farmaceutski prihvatljive, kao što su definisane u prethodnom tekstu, i koje poseduju željenu farmakološku aktivnost. Takve soli obuhvataju kisele adicione soli formirane sa neorganskim kiselinama kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina i slično; ili sa organskim kiselinama kao što su 1,2-etandisulfonska kiselina, 2-hidroksietansulfonska kiselina, 2-naftalensulfonska kiselina, 3-fenilpropioninska kiselina, 4,4’-metilenbis(3-hidroksi-2-en-1-karboksilna kiselina), 4-metilbiciklo[2.2.2]okt-2-en-1-karboksilna kiselina, sirćetna kiselina, alifatične mono- i dikarboksilne kiseline, alifatične sumporne kiseline, aromatične sumporne kiseline, benzensulfonska kiselina, benzoeva kiselina, kamforsulfonska kiselina, ugljena kiselina, cimetna kiselina, limunska kiselina, ciklopentanpropionska kiselina, etansulfonska kiselina, fumarna kiselina, glukoheptonska kiselina, glukonska kiselina, glutaminska kiselina, glikolna kiselina, heptanoinska kiselina, heksanoinska kiselina, hidroksinaftoinska kiselina, mlečna kiselina, laurilsumporna kiselina, maleinska kiselina, jabučna kiselina, malonska kiselina, bademova kiselina, metansulfonska kiselina, mukonska kiselina, o-(4-hidroksibenzoil)benzoeva kiselina, oksalna kiselina, p-hlorobenzensulfonska kiselina, fenilsupstituisane alkanske kiseline, propionska kiselina, p-toluensulfonska kiselina, piruvinska kiselina, salicilna kiselina, stearinska kiselina, ćilibarna kiselina, vinska kiselina, tertiaributilsirćetna kiselina, trimetilsirćetna kiselina, i slično. Farmaceutski prihvatljive soli takođe obuhvataju bazne adicione soli koje mogu biti formirane kada su prisutni kiseli protoni sposobni da reaguju sa neorganskim ili organskim bazama. Prihvatljibe neorganske baze obuhvataju natrijum hidroksid, natrijum karbonat, kalijum hidroksid, aluminijum hidroksid i kalcijum hidroksid. Prihvatljive organske baze obuhvataju etanolamin, dietanolamin, trietanolamin, trometamin, N-metilglukamin i slično. Trebalo bi da je jasno da određeni anjon ili katjon koji formira deo bilo koje soli prema ovom pronalasku nije kritičan, sve dok je so, kao celina, farmakološki prihvatljiva. Dodatni primeri farmaceutski prihvatljivih soli i postupci za njihovu pripremu i upotrebu su kao što su predstavljeni u Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (P. H. Stahl & C. G. Wermuth eds., Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002).
[0054] "Prevencija" ili "sprečavanje" obuhvataju: (1) inhibiciju početka bolesti kod subjekta ili pacijenta koji može biti u riziku i/ili predisponiran za bolest, ali još uvek ne oseća ili ispoljava nišsta ili celokupnu patologiju ili simptomatologiju bolesti, i/ili (2) usporavanje početka patologije ili simptomatologije bolesti kod subjekta ili pacijenta koji može biti u riziku i/ili predisponiran za bolest, ali koji još uvek ne oseća ili ispoljava bilo koju ili sve od patologije ili simptomatologije bolesti.
[0055] "Prolek" označava jedinjenje koje se može prevoditi in vivo metabolički u inhibitora prema predmetnom pronalasku. Sam prolek može ili ne mora takođe da ima aktivnost u vezi sa datim ciljnim proteinom. Na primer, jedinjenje koje sadrži hidroksi grupu može biti primenjivano kao estar koji je preveden hidrolizom in vivo u hidroksi jedinjenje. Pogodni estri koji mogu biti prevedeni in vivo u hidroksi jedinjenja su acetati, citrati, laktati, fosfati, tartrati, malonati, oksalati, salicilati, propionati, sukcinati, fumarati, maleati, metilen-bis-βhidroksinaftoat, gentizati, izetionati, di-p-toluoiltartrati, metansulfonati, etansulfonati, benzensulfonati, p-toluensulfonati, cikloheksilsulfamati, hinati, estri aminokiselina. Slično, jedinjenje koje sadrži grupu amina može biti primenjivano kao amid koji je preveden hidrolizom in vivo u jedinjenje amina.
[0056] Termin "zasićen" kada se odnosi na atom označava da je atom povezan sa drugim atomima samo preko jednogubih veza.
[0057] "Stereoizomer" ili "optički izomer" je izomer datog jedinjenja u kome su isti atomi vezani za iste druge atome, ali gde se konfiguracija tih atoma u tri dimenzije razlikuje. "Enantiomeri" su stereoizomeri datog jedinjenja koji su međusobni odrazi u ogledalu, kao leva i desna ruka. "Diastereomeri" su stereoizomeri datog jedinjenja koji nisu enantiomeri. Hiralni molekuli sadrže hiralni centar, takođe označen kao stereocentar ili stereogeni centar, koji je bilo koja tačka, iako ne neophodno atom, u grupama koje nose molekul tako da razmena bilo koje dve grupe dovode do stereoizomera. U organskim jedinjenjima, hiralni centar je tipično atom ugljenika, fosfora ili sumpora, iako je takođe moguće da drugi atomi budu stereocentri u organskim i neorganskim jedinjenjima. Molekul može imati višestruke stereocentre, dajući mnoge stereoizomere. U jednjenjima čiji je stereoizomerizam posledica tetrahedronskih stereogenih centara (npr., tetrahedronski ugljenik), ukupan broj hipotetički mogućih stereoizomera neće preći 2n, gde je n broj tetrahedronskih stereocentara. Molekuli sa simetrijom često imaju manje od maksimalnog mogućeg broja stereoizomera. 50:50 smeša enantiomera je označena kao racemska smeša. Alternativno, smeša enantiomera može biti enantiomerno obogaćena tako da je jedan enantiomer prisutan u količini većoj od 50%. Tipično, enantiomeri i/ili diasteromeri mogu biti razdvojeni ili odvojeni upotrebom tehnika poznatih u stanju tehnike. Razmatrano je da za bilo koji stereocentar ili osu hiralnosti za koju stereohemija nije identifikovana, taj stereocentar ili osa hiralnosti mogu biti prisutni u njegovom R obliku, S obliku ili kao smeša R i S oblika, uključujući racemske i neracemske smeše. Kao što je ovde korišćen, izraz "značajno bez drugih stereoizomera" označava da kompozicija sadrži ≤ 15%, poželjnije ≤ 10%, još poželjnije ≤ 5%, ili najpoželjnije ≤ 1% drugog stereoizomera (drugih stereoizomera).
[0058] "Efikasna količina," "terapeutski efikasna količina " ili "farmaceutski efikasna količina" označavaju količinu koja, kada je primenjena na subjekta ili pacijenta za lečenje bolesti, je dovoljna da postigne takvo lečenje bolesti.
[0059] "Lečenje" ili "tretman" obuhvataju (1) inhibiciju bolesti kod subjekta ili pacijenta koji oseća ili ispoljava patologiju ili simptomatologiju bolesti (npr., zaustavljanje daljeg razvoja patologije i/ili simptomaptologije), (2) poboljšanje bolesti kod subjekta ili pacijenta koji oseća ili ispoljava patologiju ili simptomatologiju bolesti (npr., reverzija patologije i/ili simtomatologije), i/ili (3) postizanje bilo kog merljivog smanjenja bolesti kod subjekta ili pacijenta koji oseća ili ispoljava patologiju ili simptomatologiju bolesti.
[0060] Druge skraćenice korišćene ovde su kao što sledi: DMSO, dimetil sulfoksid; NO, azot oksid; iNOS, inducibilna azot oksid sintaza; COX-2, ciklooksigenaza-2; FBS, fetusni teleći serum; IFNγ ili IFN-γ, interferon-γ; TNFα ili TNF-α, faktor α nekroze tumora; IL-1β, interleukin-1β; HO-1, inducibilna hem oksigenaza.
[0061] Gore navedene definicije imaju prednost u odnosu na konfliktne definicije u bilo kojoj referenci koja je obuhvaćena ovde referencom. Činjenicu da su definisani određeni termini, međutim, ne bi trebalo tumačiti kao indikativnu za to da je bilo koji termin koji je nedefinisan neodređen. Radije, veruje se da svi korišćeni termini opisuju pronalazak tako da stručnjak iz date oblasti tehnike može da razume obim i izvođenje predmetnog pronalaska.
II. Jedinjenja i sintetički postupci
[0062] Jedinjenja obezbeđena predmetnim pronalaskom su prikazana u prethodnom tekstu u rezimeu pronalaska i u patentnim zahtevima u daljem tekstu. Ona mogu biti pripremljena upotrebom postupaka navedenih u delu Primeri. Ovi postupci mogu biti dalje modifikovani i optimizovani upotrebom principa i tehnika organske hemije kao što primenjuje stručnjak iz date oblasti tehnike. Takvi principi i tehnike su navedeni, na primer, u March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure (2007), koji je ovde obuhvaćen referencom.
[0063] Jedinjenja korišćena u postupcima prema pronalasku mogu da sadrže jedan ili više asimetrično-supstituisanih atoma ugljenika ili azota, i mogu biti izolovana u optički aktivnom ili racemskom obliku. Na taj način, svi hiralni, diastereomerni, racemski oblici, epimerni oblik, i svi geometrijski izomerni oblici strukture su određeni da budu obuhvaćeni, osim ukoliko je specifično naveden specifičan stereohemijski ili izomerni oblik. Jedinjenja mogu da se jave kao racemati i racemske smeše, pojedinačni enantiomeri, diastereomerne smeše i pojedinačni diastereomeri. U nekim primerima izvođenja, dobijen je jedan diastereomer. Hiralni centri jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu imati S ili R konfiguraciju, kao što je definisano u IUPAC 1974 Recommendations. Na primer, smeše stereoizomera mogu biti razdvojene upotrebom tehnika koje se navode u delu Primeri u daljem tekstu, kao njihovih modifikacija.
[0064] Atomi koji grade jedinjenja prema predmetnom pronalasku su određeni tako da obuhvataju sve izotopske oblike takvih atoma. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju ona sa jednim ili više atoma koja su izotopski modifikovana ili obogaćena, naročito ona sa farmaceutski prihvatljivim izotopima ili ona korisna za farmaceutsko istraživanje. Izotopi, kao što su ovde korišćeni, obuhvataju one atome koji imaju isti atomski broj, ali različite masene brojeve. Kao opšti primer i bez ograničenja, izotopi vodonika obuhvataju deuterijum i tricijum, i izotopi ugljenika obuhvataju<13>C i<14>C. Slično, razmatrano je da jedan ili više atoma ugljenika jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti zamenjeni atomom (atomima) silicijuma. Pored toga, razmatrano je da jedan ili više atoma kiseonika jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti zamenjeni atomom (atomima) sumpora ili selena.
[0065] Trebalo bi razumeti da određeni anjon ili katjon koji formira deo bilo koje soli ovog pronalaska nije kritičan sve dok je so, kao celina, farmakološki prihvatljiva. Dodatni primeri farmaceutski prihvatljivih soli i postupci njihove pripreme i upotrebe su predstavljeni u Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (2002), koji je ovde obuhvaćen referencom.
[0066] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu imati prednost da mogu biti efikasnija od, manje toksična od, duže delujuća od, potentnija od, proizvode manje sporednih efekata od, lakše se apsorbuju od, i/ili imaju bolji farmakokinetički profil (npr., viša oralna biodostupnost i/ili niži klirens) od, i/ili imaju druge korisne farmakološke, fizičke ili hemijske osobine u odnosu na, jedinjenja poznata u stanju tehnike, bilo za upotrebu u indikacijama navedenim ovde ili inače.
III. Biološka aktivnost
[0067] Rezultati analize za supresiju proizvodnje NO indukovane sa IFNγ su prikazani za nekoliko od jedinjenja prema predmetnom pronalasku u Tabeli 1 u daljem tekstu. U desnoj koloni ove tabele pod zaglavljem RAW264.7, rezultati su upoređivani sa onima od bardoksolon metila (RTA 402). Rezultati analize reporter luciferaze NQO1-ARE prikazani su u poslednjoj koloni. Detalji u vezi sa obe analize su dati u delu Primeri u daljem tekstu. Osim za te formule obeležene "hiralno," svako jedinjenje prikazano u Tabeli 1 je racemsko. Za racemska jedinjenja, prikazana molekularna struktura je formula jednog od dva enantiomera. Za te formule obeležene "hiralno," molekularna formula prikazuje predominantan prisutan stereoizomer.
Tabela 1. proizvodnje NO indukovane sa IFNγ.
IV. Bolesti povezane sa inflamacijom i/ili oksidativnim stresom
[0068] Inflamacija je biološki proces koji daje rezistenciju na infektivne parazitske organizme i popravku oštećenog tkiva. Inflamacija je uobičajeno okarakterisana lokalizovanom vazodilatacijom, crvenilom, otokom i bolom, regrutacijom leukocita do mesta infekcije ili povrede, proizvodnjom inflamatornih citokina kao što su TNF-α i IL-1, i proizvodnjom reaktivnih kiseoničnih ili azotnih vrsta kao što su vodonik peroksid, superoksid i peroksinitrit. U kasnijim stadijumima inflamacije, remodelovanje tkiva, angiogeneza i formiranje ožiljka (fibroza) mogu da se jave kao deo procesa zarastanja rane. Pod normalnim okolnostima, inflamatorni odgovor je regulisan i privremen i otklanja se na orkestrirani način pošto je infekcija ili povreda adekvatno otklonjena. Međutim, akutna inflamacija može da postane prekomerna i životno ugrožavajuća ako regulatorni mehanizmi ne uspeju. Alternativno, inflamacija može da postane hronična i da izazove kumulativno oštećenje tkiva ili sistemske komplikacije. Na bazi najmanje dokaza predstavljenih u prethodnom tekstu, jedinjenja ovog pronalaska mogu biti korišćena u lečenju ili prevenciji inflamacije ili bolesti povezanih sa inflamacijom.
[0069] Mnoge ozbiljne i uporne humane bolesti obuhvataju disregulaciju inflamatornih procesa, uključujući bolesti kao što su kancer, ateroskleroza i dijabetes, koje nisu tradicionalno posmatrane kao inflamatorna stanja. U slučaju kancera, inflamatorni procesi su povezani sa formiranjem, napredovanjem, metastazom tumora i rezistencijom tumora na terapiju. Ateroskleroza, dugo posmatrana kao poremećaj metabolizma lipida, sada se razume da je primarno inflamatorno stanje, sa aktiviranim makrofagama koje imaju važnu ulogu u formiranju i eventualnoj rupturi aterosklerotičnih plakova. Takođe je pokazano da aktivacija inflamatornih puteva prenosa signala ima ulogu u razvoju insulinske rezistencije, kao i u oštećenju perifernog tkiva povezanog sa dijabetičkom hiperglikemijom. Prekomerna proizvodnja reaktivnih kiseoničnih vrsta i reaktivnih azotnih vrsta kao što je superoksid, vodonik peroksid, azot oksid, i peroksinitrit je obeležje inflamatornih stanja. Dokaz disregulisane proizvodnje peroksinitrila je objavljen kod širokog niza različitih bolesti (Szabo et al., 2007; Schulz et al., 2008; Forstermann, 2006; Pall, 2007).
[0070] Autoimune bolesti kao što su reumatoidni artritis, lupus, psorijaza i multipla skleroza obuhvataju neodgovarajuću i hroničnu aktivaciju inflamatornih procesa u pogođenim tkivima, koja nastaje iz disfunkcije auto naspram ne-auto mehanizama prepoznavanja i odgovora u imunom sistemu. Kod neurodegenerativnih bolesti kao što su Alchajmerova i Parkinsonova bolest, neuralno oštećenje je u korelaciji sa aktivacijom mikroglije i povišenim nivoima proinflamatornih proteina kao što je inducibilna azot oksid sintaza (iNOS). Hronična insuficijencija organa kao što je insuficijencija bubrega, insuficijencija srca, insuficijencija jetre i hronična opstruktivna bolest pluća je blisko povezana sa prisustvom hroničnog oksidativnog stresa i inflamacijom, dovodeći do razvoja fibroze i konačnog gubitka funkcije organa. Oksidativni stres u vaskularnim endotelijalnim ćelijama, koje oblažu velike i male krvne sudove, može da dovede do endotelijalne disfunkcije i veruje se da je važan faktor koji doprinosi razvoju sistemske kardiovaskularne bolesti, komplikacija dijabetesa, hronične bolesti bubrega i drugih oblika insuficijencije organa i određenog broja drugih bolesti povezanih sa starenjem uključujući degenerativne bolesti centralnog nervnog sistema i retine.
[0071] Mnogi drugi poremećaji obuhvataju oksidativni stres i inflamaciju u pogođenim tkivima, uključujući inflamatornu bolest creva; inflamatorne bolesti kože; mukozitis povezan sa radijacionom terapijom i hemoterapijom; bolesti oka kao što su uveitis, glaukom, makularna degeneracija i različiti oblici retinopatije; insuficijencija i odbacivanje transplanta; ishemična-reperfuziona povreda; hronični bol; degenerativna stanja kostiju i zglobova uključujući osteoartritis i osteoporozu; astmu i cističnu fibrozu; poremećaje sa konvulzijama; i neuropsihijatrijska stanja uključujući šizofreniju, depresiju, bipolarni poremećaj, posttraumatski stresni poremećaj, poremećaje smanjene pažnje, poremećaje spektra autizma i poremećaje ishrane kao što je anorexia nervosa. Veruje se da je disregulacija inflamatornih puteva prenosa signala glavni faktor u patologiji bolesti slabljenja mišića uključujući mišićnu distrofiju i različite oblike kaheksije.
[0072] Različiti akutni poremećaji opasni po život takođe obuhvataju disregulisani inflamatorni prenos signala, uključujući akutnu insuficijenciju organa uključujući pankreas, bubrege, jetru, ili pluća, infarkt miokarda ili akutni koronarni sindrom, šlog, septički šok, traumu, teške opekotine i anafilaksu.
[0073] Mnoge komplikacije infektivnih bolesti takođe obuhvataju disregulaciju inflamatornih odgovora. Iako inflamatorni odgovor može da ubije invadirajuće patogene, prekomerni inflamatorni odgovor može takođe da bude prilično destruktivan i u nekim slučajevima može biti primarni izvor oštećenja u inficiranim tkivima. Pored toga, prekomerni inflamatorni odgovor takođe može da dovede do sistemskih komplikacija kao posledica prekomerne proizvodnje inflamatornih citokina kao što su TNF-α i IL-1. Veruje se da je ovo faktor u mortalitetu koji se javlja od teškog gripa, teškog akutnog respiratornog sindroma i sepse.
[0074] Aberantna ili prekomerna ekspresija iNOS ili ciklooksigenaze-2 (COX-2) je uključena u patogenezu mnogih procesa bolesti. Na primer, jasno je da je NO potentni mutagen (Tamir and Tannebaum, 1996), i da azot oksid može takođe da aktivira COX-2 (Salvemini et al., 1994). Pored toga, postoji izrazito povećanje u iNOS u tumorima debelog creva pacova indukovanih karcinogenom, azoksimetanom (Takahashi et al., 1997). Pokazano je da je serija sintetičkih triterpenoidnih analoga oleanolinske kiseline snažni inhibitori ćelijskih inflamatornih procesa, kao što su indukcija pomoću IFN-γ inducibilne azot oksid sintaze (iNOS) i COX-2 u mišjim makrofagama. Videti Honda et al. (2000a); Honda et al. (2000b), i Honda et al. (2002). U jednom aspektu, jedinjenja koja su povde navedena su okarakterisana preko njiihove sposobnosti da inhibiraju proizvodnju azot oksida u RAW 264.7 ćelijama poreklom od makrofaga indukovanih izlaganjem γ-interferonu. Ona su dalje okarakterisana preko njihove sposobnosti da indukuju ekspresiju antioksidativnih proteina kao što je NQO1 i redukuju ekspresiju pro-inflamatornih proteina kao što je COX-2 i inducibilne azot oksid sintaze (iNOS). Ove osobine su relevantne za lečenje širokog niza bolesti i poremećaja koje uključuju oksidativni stres i disregulaciju inflamatornih procesa uključujući kancer, komplikacije od lokalizovanog izlaganja ili izlaganja celog tela jonizujućem zračenju, mukozitis koji je rezultat radijacione terapije ili hemoterapije, autoimune bolesti, kardiovaskularne bolesti uključujući aterosklerozu, ishemičnu-reperfuzionu povredu, akutnu i hroničnu insuficijenciju organa uključujući insuficijenciju bubrega i insuficijenciju srca, respiratorne bolesti, dijabetes i komplikacije od dijabetesa, teške alergije, odbacivanje transplanta, bolest transplanta protiv domaćina, neurodegenerativne bolesti, bolesti oka i mrežnjače, akutni i hronični bol, degenerativne bolesti kostiju uključujući osteoartritis i osteoporozu, inflamatorne bolesti creva, dermatitis i druge bolesti kože, sepsu, opekotine, poremećaje sa napadima, i neuropsihijatrijske poremećaje.
[0075] Bez vezivanja za teoriju, veruje se da je aktivacija antioksidativnog/anti-inflamatornog Keapl/Nrf2/ARE puta uključena u anti-inflamatorne i anti-karcinogene osobine jedinjenja koja su ovde navedena.
[0076] U sledećem aspektu, jedinjenja koja su ovde navedena mogu biti korišćena za lečenje subjekta koji ima stanje uzrokovano povišenim nivoima oksidativnog stresa u jednom ili više tkiva. Oksidativni stres je rezultat abnormalno visokih ili produženih nivoa reaktivnih kiseoničnih vrsta kao što su superoksid, vodonik peroksid, azot oksid i peroksinitrit (formiran reakcijom azot oksida i superoksida). Oksidativni stres može biti praćen akutnom ili hroničnom inflamacijom. Oksidativni stres može biti uzrokovan mitohondrijalnom disfunkcijom, preko aktivacije imunih ćelija kao što su makrofage i neutrofili, preko akutnog izlaganja spoljašnjem agensu kao što je jonizujuće zračenje ili citotoksični hemoterapeutski agens (npr., doksorubicin), traumom ili drugom akutnom povredom tkiva, ishemijom/reperfuzijom, slabom cirkulacijom ili anemijom, lokalizovanom ili sistemskom hipoksijom ili hiperoksijom, povišenim nivoima inflamatornih citokina i drugih proteina povezanih sa inflamacijom i/ili drugim abnormalnim fiziološkim stanjima kao što je hiperglikemija ili hipolikemija.
[0077] U životinjskim modelima mnogih takvih stanja, pokazano je da stimulacija ekspresije inducibilne hem oksigenaze (HO-1), ciljnog gena Nrf2 puta, ima značajan terapeutski efekat uključujući modele infarkta miokarda, insuficijencije bubrega, insuficijencije i odbacivanja transplanta, šloga, kardiovaskularne bolesti i autoimune bolesti (npr., Sacerdoti et al., 2005; Abraham & Kappas, 2005; Bach, 2006; Araujo et al., 2003; Liu et al., 2006; Ishikawa et al., 2001; Kruger et al., 2006; Satoh et al., 2006; Zhou et al., 2005; Morse and Choi, 2005; Morse and Choi, 2002). Ovaj enzim razlaže slobodan hem u gvožđe, ugljen monoksid (CO), i biliverdin (koji je zatim preveden u potentni antioksidativni molekul, bilirubin).
[0078] U sledećem aspektu, jedinjenja ovog pronalaska mogu biti korišćena u prevenciji ili lečenju oštećenja organa ili insuficijencije organa, akutne i hronične, koja je rezultat oksidativnog stresa pogoršanog inflamacijom. Primeri bolesti koje spadaju u ovu kategoriju obuhvataju: insuficijenciju srca, insuficijenciju jetre, insuficijenciju i odbacivanje transplanta, insuficijenciju bubrega, pankreatitis, fibrotičke bolesti pluća (cistična fibroza i COPD, pored ostalih), djiabetes (uključujući komplikacije), aterosklerozu, ishemičnu-reperfuzionu povredu, glaukom, šlog, autoimunu bolest, autizam, makularnu degeneraciju i mišićnu distrofiju. Na primer, u slučaju autizma, studije sugerišu da povećani oksidativni stres u centralnom nervnom sistemu može da doprinese razvoju bolesti (Chauhan and Chauhan, 2006).
[0079] Dokazi takođe povezuju oksidativni stres i inflamaciju sa razvojem i patologijom mnogih drugih poremećaja centralnog nervnog sistema, uključujući psihijatrijske poremećaje kao štu su psihoza, velika depresija i bipolarni poremećaj; poremećaji sa konvulzijama kao što je epilepsija; bol i senzorni sindromi kao što je migrena, neuropatski bol ili tinitus; i bihejvioralni sindromi kao što su poremećaji smanjene pažnje. Videti, npr., Dickerson et al., 2007; Hanson et al., 2005; Kendall-Tackett, 2007; Lencz et al., 2007; Dudhgaonkar et al., 2006; Lee et al., 2007; Morris et al., 2002; Ruster et al., 2005; McIver et al., 2005; Sarchielli et al., 2006; Kawakami et al., 2006; Ross et al., 2003, koji su svi obuhvaćeni ovde referencom. Na primer, povišeni nivoi inflamatornih citokina, uključujući TNF, interferon-γ, i IL-6, su povezani sa velikom mentalnom bolešću (Dickerson et al., 2007). Mikroglijalna aktivacija je takođe povezana sa velikom mentalnom bolešću. Prema tome, nishodna regulacija inflamatornih citokina i inhibicija prekomerne aktivacije mikroglije mogla bi biti korisna kod pacijenata sa šizofrenijom, velikom depresijom, bipolarnim poremećajem, poremećajima spektra autizma i drugim neuropsihijatrijskim poremećajima.
[0080] Prema tome, u patologijama koje obuhvataju samo oksidativni stres ili oksidativni stres pogoršan inflamacijom, lečenje može da sadrži primenu na subjekta terapeutski efikasne količine jedinjenja ovog pronalaska, kao što su ona opisana u prethodnom tekstu ili u ovoj specifikaciji. Lečenje se može primenjivati preventivno, pre predviljvog stanja oksidativnog stresa (npr., transplantacije organa ili primene radijacione terapije na pacijenta sa kancerom), ili se može primenjivati terapeutski u postavkama koje obuhvataju ustanovljeni oksidativni stres i inflamaciju.
[0081] Jedinjenja koja su ovde navedena mogu biti generalno primenjena za lečenje inflamatornih stanja, kao što su sepsa, dermatitis, autoimuna bolest i osteoartritis. U jednom aspektu, jedinjenja ovog pronalaska mogu biti korišćena za lečenje inflamatornog bola i/ili neuropatskog bola, na primer, indukcijom Nrf2 i/ili inhibicijom NF-κB.
[0082] U nekim primerima izvođenja, jedinjenja koja su ovde navedena mogu biti korišćena u lečenju i prevenciji bolesti kao što su kancer, inflamacija, Alchajmerova bolest, Parkinsonova bolest, multipla skleroza, autizam, amiotrofna lateralna skleroza, Huntington-ova bolest, autoimune bolesti kao što su reumatoidni artritis, lupus, Crohn-ova bolest i psorijaza, inflamatorna bolest creva, sve druge bolesti za čiju patogenezu se veruje da obuhvata prekomernu proizvodnju azot oksida ili prostaglandina, i patologije koje obuhvataju samo oksidativni stres ili oksidativni stres pogoršan inflamacijom.
[0083] Sledeći aspekt inflamacije je proizvodnja inflamatornih prostaglandina kao što je prostaglandin E. Ovi molekuli stimulišu vazodilataciju, ekstravazaciju plazme, lokalizovani bol, povišenu temperaturu i druge simptome inflamacije. Inducibilni oblik enzima COX-2 je povezan sa njihovom proizvodnjom, i visoki nivoi COX-2 se nalaze u upaljenim tkivima. Posledično, inhibicija COX-2 može da olakša mnoge simptome inflamacije i određeni broj važnih anti-inflamatornih lekova (npr., ibuprofen i celekoksib) deluju preko inhibicije aktivnosti COX-2. Novija istraživanja, međutim, su pokazala da klasa ciklopentenon prostaglandina (cyPGs) (npr., 15-deoksi prostaglandina J2, takođe poznatog kao PGJ2) ima ulogu u stimulaciji orkestriranog otklanjanja inflamacije (npr., Rajakariar et al., 2007). COX-2 je takođe povezan sa proizvodnjom ciklopentenon prostaglandina. Posledično, inhibicija COX-2 može da utiče na potpuno otklanjanje inflamacije, potencijalno stimulišući istrajnost aktiviranih imunih ćelija u tkivima i dovodi do hronične, "tinjajuće" inflamacije. Ovaj efekat može biti odgovoran za povećanu incidencu kardiovaskularne bolesti kod pacijenata upotrebom selektivnih inhibitora COX-2 za duge vremenske periode.
[0084] U jednom aspektu, jedinjenja koja su ovde navedena mogu biti korišćena za kontrolu proizvodnje pro-inflamatornih citokina unutar ćelije selektivnom aktivacijom regulatornih cisteinskih ostataka (RCRs) na proteinima koji regulišu aktivnost redoks-osetljivih transkripcionih faktora. Pokazano je da aktivacija RCRs pomoću cyPGs započinje program pro-otklanjanja u kome je aktivnost antioksidanta i citoprotektivnog transkripcionog faktora Nrf2 potencijalno indukovana i aktivnosti pro-oksidanta i pro-inflamatornih transkripcionih faktora NF-κB i STATs je suprimirana. U nekim primerima izvođenja, ovo povećava proizvodnju antioksidanta i reduktivnih molekula (NQO1, HO-1, SOD1, γ-GCS) i smanjuje oksidativni stres i proizvodnju molekula pro-oksidanta i pro-inflamatornih molekula (iNOS, COX-2, TNF-α). U nekim primerima izvođenja, jedinjenja ovog pronalaska mogu da izazovu da se ćelije koje imaju inflamatorni događaj vrate do neinflamatornog stanja stimulacijom otklanjanja inflamacije i ograničavanjem prekomernog oštećenja tkiva za domaćina.
V. Farmaceutske formulacije i putevi primene
[0085] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti primenjivana pomoću različitih postupaka, npr., oralno ili injekcijom (npr. subkutanom, intravenskom, intraperitonealnom, itd.). U zavisnosti od puta primene, aktivna jedinjenja mogu biti obložena u materijalu da bi se jedinjenje zaštitilo od delovanja kiselina i drugih prirodnih uslova koji mogu da inaktiviraju jedinjenje. Ona mogu takođe biti primenjena kontinuiranom perfuzijom/infuzijom bolesti ili mesta rane.
[0086] Da bi se primenilo terapeutsko jedinjenje drugim putem primene osim parenteralnog, može biti neophodno obložiti jedinjenje sa, ili ko-primeniti jedinjenje sa, materijalom da bi se sprečila njegova inaktivacija. Na primer, teraputsko jedinjenje može biti primenjeno na pacijenta u odgovarajućem nosaču, na primer, lipozomima, ili razblaživaču. Farmaceutski prihvatljivi razblaživači obuhvataju fiziološki rastvor i vodene puferske rastvore. Lipozomi obuhvataju voda-u-ulju-u-vodi CGF emulzije kao i konvencionalne lipozome (Strejan et al., 1984).
[0087] Terapeutsko jedinjenje može takođe biti primenjeno parenteralno, intraperitonealno, intraspinalno, ili intracerebralno. Disperzije mogu biti pripremljene u glicerolu, tečnim polietilen glikolima i njihovim smešama i u uljima. Pod uobičajenim uslovima čuvanja i upotrebe, ovi preparati mogu da sadrže konzervans da bi se sprečio rast mikroorganizama.
[0088] Farmaceutske kompozicije pogodne za injektabilnu upotrebu obuhvataju sterilne vodene rastvore (gde su rastvorljive u vodi) ili disperzije i sterilne prahove za ex tempore pripremu sterilnih injektabilnih rastvora ili disperzije. Videti na primer SAD patentnu prijavu od J. Zhang, entitled "Amorphous Solid Dispersions of CDDO-Me for Delayed Release Oral Dosage Compositions," koja je podneta 13.02.2009., koja je ovde obuhvaćena preko reference. U svim slučajevima, kompozicija mora biti sterilna i mora biti tečna do stepena da postoji laka primena šprica. Mora biti stabilna pod uslovima proizvodnje i čuvanja i mora biti očuvana protiv kontaminirajućeg delovanja mikroorganizama kao što su bakterije i gljive. Nosač može biti rastvarač ili disperzioni medijum koji sadrži, na primer, vodu, etanol, poliol (kao što je, glicerol, propilen glikol i tečni polietilen glikol i slično), njihove pogodne smeše i biljna ulja. Ispravna fluidnost može biti održavana, na primer, upotrebom oblaganja kao što je lecitinom, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzije i upotrebom surfaktanata. Prevencija delovanja mikroorganizama se može postići različitim antibakterijskim i antigljivičnim sredstvima, na primer, parabenima, hlorobutanolom, fenolom, askrobinskom kiselinom, timerosalom, i slično. U mnogim slučajevima, biće poželjno obuhvatati izotonična sredstva, na primer, šećere, natrijum hlorid, ili polialkohole kao što su manitol i sorbitol, u kompoziciji. Produžena apsorpcija injektabilnih kompozicija mogla bi se ostvariti uključenjem u kompoziciju sredstva koji odlaže apsorpciju, na primer, aluminijum monostearata ili želatina.
[0089] Sterilni injektabilni rastvori mogu biti pripremljeni ugradnjom terapeutskog jedinjenja u potrebnoj količini u odgovarajućem rastvaraču sa jednim ili kombinacijom sastojaka nabrojanih u prethodnom tekstu, prema potrebi, praćeno filtracionom sterilizacijom. Generalno, disperzije su pripremljene ugradnjom terapeutskog jedinjenja u sterilnom nosaču koji sadrži bazni disperzioni medijum i potrebne druge sastojke od onih nabrojanih u prethodnom tekstu. U slučaju sterilnih prahova za pripremu sterilnih injektabilnih rastvora, poželjni postupci pripreme su vakuumsko sušenje i sušenje zamrzavanjem koje proizvodi prah aktivnog sastojka (tj., terapeutskog jedinjenja) plus bilo koji dodatni željeni sastojak iz prethodno sterilno filtriranog njegovog rastvora.
[0090] Terpeutsko jedinjenje može biti oralno primenjeno, na primer, sa inertnim razblaživačem ili asimilabilnim jestivim nosačem. Terapeutsko jedinjenje i drugi sastojci takođe mogu biti zatvoreni u tvrdu ili mekanu želatinsku kapsulu, presovani u tablete, ili ugrađeni direktno u hranu subjekta. Za oralnu terapeutsku primenu, terapeutsko jedinjenje može biti ugrađeno sa ekscipijensima i korišćeno u obliku ingestibilnih tableta, bukalnih tableta, dražeja, kapsula, eliksira, suspenzija, sirupa, vafli i slično. Procenat terapeutskog jedinjenja ui kompozicijama i preparatima može, naravno, biti variran. Količina terapeutskog jedinjenja u takvim terapeutski korisnim kompozicijama je takva da će se dobiti pogodna doza.
[0091] Naročito je korisno formulisati parenteralne kompozicije u obliku jedinične doze radi lakoće primene i ujednačenosti doze. Oblik jedinične doze kao što je ovde korišćen označava fizički posebne jedinice pogodne kao jedinične doze za subjekte koji se leče; pri čemu svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu terapeutskog jedinjenja izračunatu da proizvodi željeni terapeutski efekat zajedno sa potrebnim farmaceutskim nosačem. Specifikacija za oblike jedinične doze prema pronalasku je diktirana i direktno zavisna od (a) jedinstvenih karakteristika terapeutskog jedinjenja i određenog terapeutskog efekta koji se postiže, i (b) ograničenja svojstvenih stanju tehnike pripreme jedinjenja kao što je terapeutsko jedinjenje za lečenje izabranog stanja kod pacijenta.
[0092] Terapeutsko jedinjenje takođe može biti primenjeno topikalno na kožu, oko, ili mukozu. Alternativno, ako je lokalna isporuka na pluća poželjna, terapeutsko jedinjenje može biti primenjeno inhalacijom u formulaciji suvog praha ili aerosola.
[0093] Aktivna jedinjenja su primenjena u terapeutski efikasnoj dozi dovoljnoj za lečenje stanja povezanog sa stanjem kod pacijenta. Na primer, efikasnost jedinjenja može biti procenjivana u životinjskom model sistemu koji može biti prediktivan za efikasnost u lečenju bolesti kod ljudi, kao što su model sistemi prikazani u primerima i crtežima.
[0094] Tačna količina doze jedinjenja prema predmetnom pronalasku ili kompozicije jedinjenja prema predmetnom pronalasku primenjena na subjekta može biti određena pomoću fizičkih i fizioloških faktora kao što su starost, pol, telesna težina, težina stanja, tip bolesti koja se leči, prethodne ili istovremene terapeutske intervencije, idiopatija subjekta i put primene. Ove faktore može da odredi stručnjak iz date oblasti tehnike. Stručnjak odgovoran za primenu će tipično odrediti koncentraciju aktivnog sastojka (sastojaka) u kompoziciji i odgovarajuću dozu (doze) za individualnog subjekta. Doza može biti podešena od strane pojedinačnog lekara u slučaju bilo koje komplikacije.
[0095] Efikasna količina će tipično varirati od oko 0.001 mg/kg do oko 1000 mg/kg, od oko 0.01 mg/kg do oko 750 mg/kg, od oko 100 mg/kg do oko 500 mg/kg, od oko 1.0 mg/kg do oko 250 mg/kg, od oko 10.0 mg/kg do oko 150 mg/kg u jednoj ili više primena doze na dan, tokom jednog ili više dana (u zavisnosti od toka režima primene i faktora razmatranih u prethodnom tekstu). Drugi pogodni opsezi doza obuhvataju 1 mg do 10000 mg na dan, 100 mg do 10000 mg na dan, 500 mg do 10000 mg na dan, i 500 mg do 1000 mg na dan. U nekim određenim primerima izvođenja, količina je manja od 10,000 mg na dan sa opsegom od 750 mg do 9000 mg na dan.
[0096] Efikasna količina može biti manja od 1 mg/kg/dan, manja od 500 mg/kg/dan, manja od 250 mg/kg/dan, manja od 100 mg/kg/dan, manja od 50 mg/kg/dan, manja od 25 mg/kg/dan ili manja od 10 mg/kg/dan. Ona može biti alternativno u opsegu od 1 mg/kg/dan do 200 mg/kg/dan. Na primer, u vezi sa lečenjem dijabetičkih pacijenata, jedinična doza može biti količina koja smanjuje glukozu u krvi za najmanje 40% u poređenju sa netretiranim subjektom. U sledećem primeru izvođenja, jedinična doza je količina koja smanjuje glukozu u krvi do nivoa koji je ± 10% od nivoa glukoze u krvi nedijabetičkog subjekta.
[0097] U drugim neograničavajućim primerima, doza takođe može da sadrži od oko 1 mikrograma/kg/telesne težine, oko 5 mikrograma/kg/telesne težine, oko 10 mikrograma/kg/telesne težine, oko 50 mikrograma/kg/telesne težine, oko 100 mikrograma/kg/telesne težine, oko 200 mikrograma/kg/telesne težine, oko 350 mikrograma/kg/telesne težine, oko 500 mikrograma/kg/telesne težine, oko 1 miligram/kg/telesne težine, oko 5 miligrama/kg/telesne težine, oko 10 miligrama/kg/telesne težine, oko 50 miligrama/kg/telesne težine, oko 100 miligrama/kg/telesne težine, oko 200 miligrama/kg/telesne težine, oko 350 miligrama/kg/telesne težine, oko 500 miligrama/kg/telesne težine, do oko 1000 mg/kg/telesne težine ili više po primeni, i bilo koji opseg koji se može iz njih izvesti. U neograničavajućim primerima opsega koji se može izvesti od brojeva navedenih ovde, opseg od oko 5 mg/kg/telesne težine do oko 100 mg/kg/telesne težine, oko 5 mikrograma/kg/telesne težine do oko 500 miligrama/kg/telesne težine, itd., se može primeniti, na osnovu brojeva opisanih u prethodnom tekstu.
[0098] U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija prema predmetnom pronalasku može da sadrži, na primer, najmanje oko 0.1% jedinjenja prema predmetnom pronalasku. U drugim primerima izvođenja, jedinjenje prema predmetnom pronalasku može da sadrži između oko 2% do oko 75% od težine jedinice, ili između oko 25% do oko 60%, na primer, i bilo koji opseg koji se odatle može izvesti.
[0099] Razmatrane su pojedinačne ili višestruke doze sredstava. Željeni vremenski intervali za isporuku višestrukih doza mogu biti određeni od strane stručnjaka iz date oblasti tehnike upotrebom ne više od rutinskog eksperimentisanja. Kao primer, na subjekte mogu biti primenjene dve doze na dan u približno 12-časovnim intervalima. U nekim primerima izvođenja, sredstvo se primenjuje jednom na dan.
[0100] Sredstvo (sredstva) može biti primenjeno u rutinskom rasporedu. Kao što je ovde korišćen rutinski raspored označava unapred određeni naznačeni vremenski period. Rutinski raspored može da obuhvata vremenske periode koji su identični ili koji se razlikuju u dužini, sve dok je raspored unapred određen. Na primer, rutinski raspored može da obuhvata primenu dva puta na dan, svaki dan, svaka dva dana, svaka tri dana, svakih četiri dana, svakih pet dana, svakih šest dana, na nedeljnoj bazi, na mesečnoj bazi ili bilo koja grupa broja dana ili nedelja između njih. Alternativno, unapred određeni rutinski raspored može da obuhvata primenu na bazi dva puta na dan u prvoj nedelji, nakon čega sledi na dnevnoj bazi u trajanju od nekoliko meseci, itd. U drugim primerima izvođenja, pronalazak obezbeđuje da sredstvo (sredstva) mogu da se uzimaju oralno i čije vreme uzimanja je zavisno ili ne od unosa hrane. Na taj način, na primer, sredstvo može biti uzimano svako jutro i/ili svako veče, bez obzira kada je subjekat jeo ili kada će jesti.
VI. Kombinovana terapija
[0101] Pored upotrebe kao monoterapiju, jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe može naći upotrebu u kombinovanim terapijama. Efikasna kombinovana terapija može biti postignuta sa jednom kompozicijom ili farmakološkom formulacijom koja obuhvata oba sredstva, ili sa dve posebne kompozicije ili formulacije, primenjene u isto vreme, pri čemu jedna kompozicija obuhvata jedinjenje prema ovom pronalasku, i druga obuhvata drugo sredstvo (sredstva). Alternativno, terapija može da prethodi ili da prati tretman drugim sredstvom sa intervalima u opsegu od više minuta do više meseci.
[0102] Neograničavajući primeri takve kombinovane terapije obuhvataju kombinaciju jednog ili više jedinjenja prema pronalasku sa drugim anti-inflamatornim sredstvom, hemoterapeutskim sredstvom, radijacionom terapijom, antidepresivom, antipsihotičkim sredstvom, antikonvulzantom, stabilizatorom raspoloženja, anti-infektivnim sredstvom, antihipertenzivnim sredstvom, sredstvom za snižavanje holesterola ili drugim modulatorom lipida u krvi, sredstvom za stimulaciju gubitka telesne težine, antitrombotičkim sredstvom, sredstvom za lečenje ili prevenciju kardiovaskularnih događaja kao što je infarkt miokarda ili šlog, antidijabetičkim sredstvom, sredstvom za smanjenje odbacivanja transplanta ili bolesti transplanta protiv domaćina, anti-artritičkim sredstvom, analgetičkim sredstvom, antiastmatičnim sredstvom ili drugim tretmanom za respiratorne bolesti, ili sredstvom za lečenje ili prevenciju poremećaja kože. Jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa sredstvima namenjenim za poboljšanje imunog odgovora pacijenta na kancer, uključujući (ali bez ograničenja na) vakcine za kancer. Videti Lu et al. (2011), koji je obuhvaćen ovde referencom.
VII. Primeri
[0103] Sledeći primeri su uključeni da bi pokazali poželjne primere izvođenja prema pronalasku. Stručnjacima iz date oblasti tehnike trebalo bi biti jasno da tehnike navedene u primerima koji slede predstavljaju tehnike otkrivene od strane pronalazača tako da dobro funkcionišu u izvođenju pronalaska, i na taj način može se smatrati da čini poželjne načine za njegovo izvođenje. Međutim, stručnjacima iz date oblasti tehnike bi trebalo, u svetlu predmetnog pronalaska, biti jasno da mnoge promene mogu biti napravljene u specifičnim primerima izvođenja koji su navedeni i da se još uvek dobije sličan rezultat bez udaljavanja od smisla i obima pronalaska.
Postupci i materijali
[0104] Proizodnja azot oksida i ćelijska vijabilnost. RAW264.7 mišje makrofage su zasejane u 96-komorne ploče u 30,000 ćelija/komorici u tri ponavljanja u RPMI1640 0.5% FBS i inkubirane na 37°C sa 5% CO2. Sledećeg dana, ćelije su prethodno tretirane sa DMSO ili lekom (0-200nM opseg doza) u trajanju od 2 časa, i zatim tretirane rekombinantnim mišjim IFNγ (R&D Systems) tokom 24 časa. Koncentracija azot oksida u medijumu je određena upotrebom Griess sistema reagensa (Promega). Ćelijska vijabilnost je određena upotrebom WST-1 reagensa (Roche). IC50vrednosti su određene na osnovu supresije proizvodnje azot oksida indukovane sa IFNγ normalizovane prema ćelijskoj vijabilnosti.
[0105] Analiza NQO1-ARE luciferaza reportera. Ova analiza omogućava kvantitativnu procenu endogene aktivnosti Nrf2 transkripcionog faktora u kultivisanim sisarskim ćelijama. Ekspresija luciferaze svica iz NQO1-ARE luciferaza reporter plazmida je kontrolisana vezivanjem Nrf2 za specifičnu pojačivačku sekvencu koja odgovara antioksidativnom elementu odgovora (ARE) koji je identifikovan u promotorskom regionu humanog gena za NADPH:hinon oksidoreduktazu 1 (NQO1) (Xie et al., 1995). Plazmid je konstruisan inseriranjem sekvence:
5’- CAGTCACAGTGACTCAGCAGAATCTG-3’ (SEQ ID NO:1)
koja obuhvata humani NQO1-ARE u pLuc-MCS vektor upotrebom HindIII/XhoI klonirajućih mesta (GenScript Corp., Piscataway, NJ). Analiza je izvedena u HuH7 ćelijama održavanim u DMEM (Invitrogen) dopunjenim sa po 10% FBS i 100U/ml penicilina i streptomicina. Za analizu, ćelije su zasejane u 96-komorne ploče u 17,000 ćelija po komorici. Dvadeset i četiri časa kasnije, ćelije su ko-transficirane sa po 50 ng NQO1-ARE reporter plazmida i pRL-TK plazmida upotrebom Lipofectamine 2000 transfekcionog reagensa (Invitrogen). pRL-TK plazmid konstitutivno eksprimira Renilla luciferazu i korišćen je kao interna kontrola za normalizaciju nivoa transfekcije. Trideset časova posle transfekcije, ćelije su tretirane jedinjenjem (u koncentracijama u opsegu od 0 do 1 µM) u trajanju od osamnaest časova. Aktivnost luciferaze svica i Renilla je analizirana pomoću Dual-Glo Luciferase Assay (Promega Corp., Madison, WI), luminiscentni signal je meren na L-Max II luminometru (Molecular Devices). Aktivnost luciferaze svica je normalizovana prema aktivnosti Renilla, i izračunato je koliko puta je uvećana indukcija u odnosu na kontrolu sa nosačem (DMSO) normalizovane aktivnosti svica. Višestruka indukcija na koncentraciji 62.5 nM je korišćena za poređenje relativnih potencija jedinjenja da indukuje Nrf2 transkripcionu aktivnost. Videti Xie T, Belinsky M, Xu Y, Jaiswal AK. ARE- and TRE-mediated regulation of gene expression. Response to xenobiotics and antioxidants. J Biol Chem. (1995) 270(12): 6894-6900.
Sinteza određenih sintetičkih AIM jedinjenja prema predmetnom pronalasku
[0106]
Šema 1(a)
Šema 1(b)
[0107] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 1(a) i 1(b): (a) Etil vinil keton, Et3N, THF, 81%; (b) (S)-fenilalanin, CSA, DMF, sobna temperatura do 70°C, 5d, 45%; (c) NaBH4, EtOH, 0°C, 1 čas, 90%; (d) MOMCl, i-Pr2NEt, CH2Cl2, 3 d, 90%; (e) (i) Li, t-BuOH, NH3, THF, refluks, 2 časa (ii) MeI, THF, -78°C, 2 časa, 28%; (f) Etilen glikol, 10-CSA, cikloheksan, -H2O, 66%; (g) PDC, 95%; (h) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 90%; (i) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 2 časa, kvantitativan; (j) 3N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 3 časa, 59%; (k) (i) LDA, THF, -78°C, 45 min; (ii) TsCN, -78°C, 45 min, 77%; (1) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 12 časova, 23% TX63342; 9% TX63341.
Šema 2
[0108] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 2: (a) NaBH4, EtOH, 0°C, 92%; (b) MOM-Cl, i-Pr2NEt, sobna temperatura, 78%; (c) KOt-Bu, t-BuOH, MeI, 43%; (d) Etilen glikol, p-TsOH•H2O, toluen, -H2O, 99%; (e) H2, 10% Pd/C, EtOH, 99%; (f) MOM-Cl, i-Pr2NEt, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (g) (i) LDA, THF, -78°C, 30 min; (ii) TsCN, -78°C, 30 min, 66%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 3 časa, 0°C; (ii) piridin, 60°C, 4 časa, 86%; (i) 3 N HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 2 d, 68%.
Šema 3
[0109] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 3: (a) PDC, 93% prinos; (b) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, kvantitativan; (c) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 2 časa, 97%; (d) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 3 časa, 86%; (e) (i) LDA, THF, 78°C, 45 min; (ii) TsCN, -78°C, 45 min, 44%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, 0°C; (ii) piridin, 55°C, TX63432: 29%, TX63445: 4%.
Šema 4
[0110] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 4: (a) Cikloheksilhidrazin-HCl, Et3N, EtOH, 15 min, 36%; (b) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 3 časa, 98% prinos; (c) LDA, TsCN, THF, -78°C, 1.5 čas, 46% prinos; (d) (i)1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 16 časova, 59% prinos.
Šema 5
Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 5: (a) t-BuNHNH2-HCl, Et3N, EtOH, refluks, 5 časova; sobna temperatura, 12 časova, 35% jedinjenje 36; 36% jedinjenje 37; (b) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 90%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, kvantitativan; (e) NaOMe, 55°C, 5.5 časova; sobna temperatura, 12 časova, 59%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, vreme; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 56%.
Šema 6
[0111] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 6: (a) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 86%; (b) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 83%; (c) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, kvantitativan; (d) NaOMe, 55°C, 5.5 časova; sobna temperatura, 12 časova, 80%; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, vreme; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 67%.
Šema 7
[0112] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 7: (a) (2,2,2-trifluoroetil)hidrazin, EtOH, 60°C, 2 časa, 70% (b) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 96%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 93%; (e) NaOMe, 50°C, 6 časova, 52%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 54%.
Šema 8
Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 8: (a) Fenilhidrazin-HCl, NaOAc-3H2O, EtOH, 70°C, 12 časova, 35% jedinjenje 51; 51% jedinjenje 52; (b) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 92%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 97%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 91%; (e) NaOMe, 55°C, 5.5 časova; sobna temperatura, 12 časova, 80%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, vreme; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 3%.
Šema 9
[0113] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 9: (a) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 92%; (b) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 95%; (c) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 76%; (d) NaOMe, 55°C, 5.5 časova; sobna temperatura, 12 časova, 79%; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, vreme; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 24%.
Šema 10
[0114] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 10: (a) hidrazin, EtOH, sobna temperatura, 1 čas; 60°C, 1 čas, 82%; (b) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 99%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 97%; (e) NaOMe, 55°C, 5.5 časova; sobna temperatura, 12 časova, 83%; (f) (i) DDQ, benzen, refluks, 4.5 časa, 43%.
Šema 11
[0115] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 11: (a) AcCl, NaHCO3(vodeni rastvor), THF, 0°C, 1 čas, 16%.
Šema 12:
[0116] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 12: (a) AcCl, NaHCO3(vodeni rastvor), THF, 0°C, 1 čas, 24%.
Šema 13
[0117] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 13: (a) 2-hidraziniletanol, EtOH, 60°C, 2 časa, 93% (b) 3N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 62%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 91%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, kvantitativan; (e) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (f) (i) piridinijum bromid perbromid, dioksan, sobna temperatura, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 5%.
Šema 14
[0118] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 14: (a) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, CH2Cl2, sobna temperatura, 3 časa, 54% (b) fenilboronska kiselina, Pd(OAc)2, PH3P, K3PO4, DME, 85°C, 9 časova, 53%; (c) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 92%; (e) NH2OHHCl, 50°C, 12 časova, 96%; (f) NaOMe, 50°C, 6 časova, 75%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 69%.
Šema 15
[0119] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 15 (a) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 6%.
Šema 16
[0120] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 16: (a) arilboronska kiselina, Pd(OAc)2, PH3P, K3PO4, DME, 85°C, 9 časova, prinosi; (b) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, prinosi; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, prinosi; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, prinosi; (e) NaOMe, 50°C, 6 časova, prinosi; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, prinosi.
Šema 17
[0121] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 17: (a) 3- ili 4-piridinilboronska kiselina, Pd(OAc)2, PH3P, K3PO4, DME, 85°C, 9 časova, 83a: 26%, 83b: 49%; (b) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 84a: 97%, 84b: kvantitativan; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 85a: kvantitativan, 85b: kvantitativan; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 86a: kvantitativan, 86b: kvantitativan; (e) NaOMe, 50°C, 6 časova, 87a: kvantitativan, 87b: kvantitativan; (f) (i) Br2, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, TX63503: 31%, TX63505: 27%.
Šema 18(a)
Šema 18(b)
[0122] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 18(a) & (b): (a) KOt-Bu, t-BuOH, 1,4-dibromobutan, 45°C, 78%; (b) H2, 20% Pd(OH)2, EtOH, 31%; (c) Etilen glikol, p-TsOH•H2O, toluen, -H2O, kvantitativan; (d) PDC, 45°C, 73%; (e) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 99%; (f) MeNHNH2, EtOH, sobna temperatura → 60°C, 75%; (g) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (h) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (i) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 96%; (j) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (k) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 38%.
Šema 19
[0123] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 19: (a) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, CH2Cl2, sobna temperatura, 2 časa, 62%; (b) fenilboronska kiselina, Pd(OAc)2, PH3P, K3PO4, DME, 85°C, 12 časova, 73%; (c) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 47%; (e) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, kvantitativan; (f) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 37%.
Šema 20(a)
Šema 20(b)
[0124] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 20: (a) (i) fenilhidrazin, toluen, 75°C; (ii) TsOH•H2O, toluen, 80°C, 3 d; (b) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 50: 17%, 101: 52%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 89%; (e) NaOMe, 55°C, 6 časova, sobna temperatura, 12 časova, 89%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 30 min; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 28%.
Šema 21(a)
Šema 2
[0125] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 21(a) i (b): (a) (i) NH2OH-HCl, TEA, EtOH, H2O, sobna temperatura, 16 časova; (ii) NaOMe, MeOH, THF, sobna temperatura; (b) MeNHNH2, EtOH" refluks, 16 časova; (c) PhCOCl, TEA, EtOAc; (d) 3 N HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura; (e) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova; (f) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova; (g) NaOMe, 50°C, 6 časova, (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova.
Šema 22(a)
Šema 22
[0126] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 22 (a) & (b): (a) Li, NH3, -78°C, 45 min, 23%; (b) Etilen glikol, p-TsOH•H2O, benzen, H2O, 75%; (c) PDC, MgSO4, CH2Cl2, 2 d, sobna temperatura, 90%; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 96%; (e) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 2 časa, 85%; (f) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, CH2Cl2, sobna temperatura, 3 časa, 64%; (g) fenilboronska kiselina, PPh4, Pd(OAc)2, K3PO4, DME, 85°C, 16 časova, 53%; (h) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 91%; (i) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 96%; (j) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, kvantitativan; (k) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (1) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 28%.
Šema 23(a)
Šema 23(b)
[0127] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 23(a) i (b): (a) (i) Etil vinil keton, Et3N, MeCN, sobna temperatura, 12 časova; (ii) pirolidin, benzen, -H2O, 48 časova, 41%; (b) NaBH4, EtOH, 0°C, 45 min, 56%; (c) Li, NH3, -78°C, 45 min, 28%; (d) etilen glikol, p-TsOH•H2O, benzen, -H2O, 62%; (e) PDC, MgSO4, CH2Cl2, 2 d, sobna temperatura, 92%; (f) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (g) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 2 časa, 79%; (h) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, CH2Cl2, sobna temperatura, 3 časa, 74%; (i) fenilboronska kiselina, PPh4, Pd(OAc)2, K3PO4, DME, 85°C, 16 časova, 63%; (j) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (k) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 95%; (1) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, kvantitativan; (m) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (n) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 33%.
Šema 24
[0128] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 24: (a) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, CH2Cl2, sobna temperatura, 3 časa; (b) (i) fenilboronska kiselina, Pd(OAc)2, PH3P, K3PO4, DME, 85°C, 9 časova; (ii) HCl (vodeni rastvor), MeOH; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 94%; (e) NaOMe, 50°C, 6 časova, 94%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 52%.
Šema 25
[0129] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 25: (a) izopropenil pinakol boronat, Pd(II), 16 časova, 141a: 41%, 141b: 40%; (b) H2, 10% Pd/C, 142a: 99%, 141b: 93%; (c) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 142a: 99%, 141b: 93%; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 144a: kvantitativan, 144b: kvantitativan; (e) NH2OHHCl, 50°C, 12 časova, 145a: kvantitativan, 145b: 87%; (f) NaOMe, 50°C, 6 časova, 146a:
99% 141b: 97%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, TX63547: 15% TX63591: 13%.
Šema 26
[0130] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 26: (a) pinakol estar benzilboronske kiseline, Pd(dppf)Cl2, K2CO3, dioksan, 100°C, 16 časova, 47%; (b) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 90%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 97%; (e) NaOMe, 50°C, 6 časova, 32%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 36%.
Šema 27
[0131] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 27: (a) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (b) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 99%; (c) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 98%; (d) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 38%.
Šema 28(a)
Šema 28(b)
[0132] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 28(a) & (b): (a) akrilamid, Et3N, 85°C, 16 časova, 96% ; (b) AcOH, 160°C (mikrotalasi), 1 čas, 73%; (c) NaH, MeI, DMF, THF, 0°C do sobne temperature, 2 časa, 68%; (d) H2, PtO2, AcOH, H2O, sobna temperatura, 16 časova; (e) TPAP, NMO, 4 Å molekularne rešetke, CH2Cl2, sobna temperatura, 1 čas, 79% 2 koraka; (f) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 3 časa; (g) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 3 časa, 93% 2 koraka; (h) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, CH2Cl2, sobna temperatura, 5 časova, 49%; (i) fenilboronska kiselina, Pd(OAc)2, PH3P, K3PO4, DME, 110°C (mikrotalasi), 2.5 časa, 95%; (j) (i) LDA, THF, -78°C, 30 min; (ii) PhSeCl, -78°C, 1 čas, 45%; (k) H2O2, EtOAc, THF, sobna temperatura, 30 min, 90%; (1) I2, piridin, CCl4, sobna temperatura do 65°C, 41 čas, 60%; (m) Zn(CN)2, Pd(PH3P)4, DMF, 80°C, 20 min, 89%.
Šema 29
[0133] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 29: (a) IBX.
Šema 30
[0134] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 30: (a) PhCOCl, iPr2Net, MgBr2, CH2Cl2, sobna temperatura, 16 časova; (b) NH2NH2, EtOH, 63°C, 1 čas, 38% 2 koraka; (c) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova, kvantitativan; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, 84%; (e) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, 84%; (f) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 28%.
Šema 31
[0135] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 31: (a) supstituisani amidin, piperidin, iPrOH, 85°C, hermetički zatvorena epruveta, 2 d; (b) 3 N HCl (vodeni rastvor); (b) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova; (c) NH2OH-HCl, 50°C, 16 časova; (d) NaOMe, 50°C, 6 časova; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova.
Šema 32(a)
Šema 32(b)
[0136] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 32: (a) (MeO)2CO, NaH, THF, refluks, 3 časa, 87%; (b) acetamidin-HCl, piperidin, i-PrOH, refluks, 2 d, 62%; (c) Tf2O, Et3N, CHCl3, 0°C, 2 časa, 83%; (d) fenilboronska kiselina, PPh4, Pd(OAc)2, K3PO4, DME, 85°C, 16 časova, 83%; (e) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (f) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 12 časova, kvantitativan; (g) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova, kvantitativan; (h) NaOMe, 50°C, 6 časova, kvantitativan; (i) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 67%.
Šema 33
[0137] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 33: (a) (i) urea, dioksan, refluks, 3 d; (ii) MeOH, NaOMe, refluks, 3 d; (b) 1 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 71% 2 koraka; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura do 50°C, 49%; (c) NH2OH-HCl, 50°C, 12 časova; (d) NaOMe, 50°C, 6 časova, 15% 2 koraka; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 12 časova, 31%.
Šema 34
[0138] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 35: (a) acetamidin-HCl, piperidin, i-PrOH, refluks, 2 d, 48%; (b) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 94%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, 90%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 16 časova, 98%; (e) NaOMe, sobna temperatura, 48 časova, 80%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 51%.
Šema 35
Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 35: (a) acetamidin-HCl, piperidin, i-PrOH, 85°C, 4 d, 60%; (b) 3 N HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 95%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, 91%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 16 časova, 89%; (e) NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, kvantitativan; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 36%.
Šema 36
[0139] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 36: (a) (i) BzCl, MgBr2-Et2O, DIPEA, DCM, 16 časova; (ii) PhNHNH2, EtOH, 80°C, 16 časova; (b) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova; (c) NH2OH-HCl, 50°C, 16 časova; (d) NaOMe, MeOH, THF, sobna temperatura, 16 časova; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 36%.
Šema 37
[0140] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 37(a) & (b): (a) KOt-Bu, t-BuOH, MeI, 55%; (b) H2, 10% Pd/C, EtOAc, 12 časova, 99%; (c) (i) etilen glikol, p-TsOH•H2O, toluen, -H2O; (ii) PDC, CH2Cl2, sobna temperatura, 22 časa, 73%; (d) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 1 čas, kvantitativan; (e) MeNHNH2, EtOH, 65°C, 4 časa, 27%; (f) 1 N HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 24 časa, 90%; (g) (i) LDA, THF, -78°C, 30 min; (ii) TsCN, -78°C, 30 min, 80%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 12 časova, 46%.
Šema 38
[0141] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 38: (i) H2, 10% Pd/C, THF, 0°C do sobne temperature, 4 d; (ii) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 12 časova, 42%; (b) etilen glikol, p-TsOH•H2O, toluen, H2O, 100%; (c) TBAF•H2O, THF, sobna temperatura, 3 d, 94%; (d) PDC, CH2Cl2, sobna temperatura, 12 časova, 100%; (e) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 2 časa, 100%; (f) (i) MeNHNH2, EtOH, 65°C, 12 časova, 83%; (ii) 1 N HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 3 d, 83%; (g) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 2 časa, 100%; (h) NH2OH-HCl, 60°C, 12 časova, 100%; (i) NaOMe, 50°C, 6 časova, 100%; (j) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 2 časa, 20%.
Šema 39(a)
Šema 39(b)
[0142] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 39(a) & (b): (a) (i) heksametildisilazan, NaI, TMSCl, MeCN, sobna temperatura, 12 časova; (ii) Pd(OAc)2, MeCN, sobna temperatura, 12 časova, 79%; (b) (i) KHMDS, THF, 0°C, 30 min; (ii) MeI, 0°C, 30 min, 81%; (c) H2, 10% Pd/C, THF, sobna temperatura, 3 časa, 99%; (d) metiletildioksolan, etilen glikol, p-TsOH, CH2Cl2, sobna temperatura, 2 d, 99%; (e) TBAF, THF, sobna temperatura, 4 d, 89%; (f) PDC, CH2Cl2, sobna temperatura, 12 časova, 90%; (g) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 2 časa, kvantitativan; (h) (i) MeNHNH2, EtOH, 65°C, 12 časova; (ii) 1 N HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 2 d, 76%; (i) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 2 časa, 96%; (j) NH2OH-HCl, 60°C, 12 časova, 91%; (k) NaOMe, 50°C, 6 časova, 71%; (1) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 5 časova, 71%.
Šema 40
[0143] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 40: (a) TMS-acetilen, CuI, TEA, dioksan, 80°C, 16 časova, 3%; (b) HCl (vodeni rastvor), THF, 3 dana, 98%; (c) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 2 časa, kvantitativan; (d) NH2OH-HCl, 60°C, 12 časova, kvantitativan; (e) NaOMe, 50°C, 6 časova, 50%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 5 časova, 55%.
Šema 41
[0144] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 41: (a) Zn(CN)2, dppf, NaCO3, Pb(OAc)2, DMAc, 120°C, 16 časova, 80%; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH, 16 časova, 96%; (c) HCO2Et, NaOMe, 0°C do sobne temperature, 16 časova, kvantitativan; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 16 časova, kvantitativan; (e) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 6 časova, 100% kao smeša; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, TX63613: 39%, TX63619: 8%.
Šema 42
[0145] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 42: (a) HCl, MeOH, 60°C, 16 časova, kvantitativan; (b) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, kvantitativan; (c) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, kvantitativan; (d) NaOEt, THF, MeOH, 50°C, 6 časova, 100% kao smeša; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, TX63630: 37%, TX63631: 13%.
Šema 43
[0146] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 43: (a) TMSN3, Bu2SnO, Toluen, 110°C; (b) RX, K2CO3, DMF; (c) HCl, THF; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova; (e) NH2OH-HCl, EtOH, THF, H2O, 50°C; ((f ) NaOMe, THF, MeOH, 50°C; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 16 časova.
Šema 44
[0147] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 44: (a) NH2OH, EtOH, 50°C, 16 časova; (b) Dimetilacetamid dimetilacetal, dioksan, 60°C, 2 časa, 96%; (c) HCl, THF, 2 dana, kvantitativan; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, kvantitativan; (e) NH2OH-HCl, EtOH, THF, H2O, 50°C, 16 časova, 77%; ((f) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 3 Hr, 98%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 4 časa, 78%.
Šema 45
[0148] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 45: (a) Ac2O, Piridin, 110°C, 3 časa; (b) HCl (vodeni rastvor), THF, 2 dana, 34%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, 99%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, THF, H2O, 50°C, 16 časova, 28%; ((e) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 3 časa, 100%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 4 časa, 60%.
Šema 46
[0149] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 46: (a) Dimetilformamid dimetilacetal, 80°C, 16 časova; (b) MeNHNH2, AcOH, dioksan, 80°C, 2 časa; (c) HCl (vodeni rastvor), THF, kvantitativan; (d) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 97%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C do sobne temperature, 16 časova, 79%; (f) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 3 časa, 77%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 4 časa, 84%.
Šema 47
[0150] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 47: (a) KOH, EtOH, H2O, 3 dana, kvantitativan; (b) Dimetilacetamid dimetilacetal, dioksan, 80°C, 2 časa; (c) NH2OH-HCl, TEA, AcOH, dioksan, 80°C, 3 časa, 58%; (d) HCl (vodeni rastvor), THF, kvantitativan; (e) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 97%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, THF, H2O, 50°C, 16 h, 94%; (g) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 3 časa, 79%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 6 časova, 71%
Šema 48
[0151] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 48: (a) R-B(OH)2, K3PO4, Pd(PPH3)4, dimetoksietan, 80°C, 16 časova.
Šema 49
[0152] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 49: (a) PhMgBr, THF, 0°C do sobne temperature, 16 časova; (b) HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 16 časova zatim 60°C, 4 časa, 93%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, 97%; (d) NH2OH-HCl, TEA, AcOH, dioksan, 50°C, 4 časa, 98%; (e) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova, 83%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 90%
Šema 50
[0153] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 50: (a) NCS, DCM, sobna temperatura, 4 dana; (b) HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 3 časa, 76%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, 91%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 16 časova, 50%; (e) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 60%.
Šema 51
[0154] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 51: (a) HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 3 časa; (b) (Boc)2O, DMAP, TEA, dioksan, H2O, sobna temperatura, 16 časova, (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova; (d) NH2OH-HCl, TEA, EtOH, H2O, Py-Ts, 50°C, 4 časa; (e) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova, 78%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 12.5%.
Šema 52
[0155] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 52: (a) BzCl, NaHCO3(vodeni rastvor), THF, 0°C, 47%.
Šema 53
[0156] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 53: (a) BzCl, NaHCO3(vodeni rastvor), THF, 0°C, 47%.
Šema 54
[0157] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 54: (a) (MeO)2CO, NaH, THF, refluks, 3 časa, 87%; (b) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 16 časova, (c) HCl (vodeni rastvor), MeOH, 16 časova, 100%; (d) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 100%; (f) NaOMe, MeOH, 50°C, 9 časova, 99%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 9%.
Šema 55a
Šema 55b
[0158] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 55(a) i (b): (a) MeI, K2CO3, DMF. 16 časova, 64%; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH, 16 časova, 100%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 100%; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 6 časova, 100%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 15%.
Šema 56
[0159] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 56: (a) IBX, DMF, 65°C, 6 časova, 308:
60%, TX63804: 3%.
Šema 57
[0160] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 57: (a) I2, THF, Piridin, 60°C, 16 časova, 100%; (b) FSO2CF2CO2Me, CuI, HMPA, DMF, 70°C, 6 časova, 63%.
Šema 58(a)
Šema 58(b)
[0161] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 58 (a) i (b): (a) 3-aminopirazol, (TsO)2O, toluen, refluks, 16 časova, 310a: 49%, 310b: 6.7%; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH, 311a:
100%, 311b: 90%; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura; (d) NH2OHHCl, EtOH, 50°C; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časa, TX63617: 33%, i TX63627: 17%, TX63615:
24%; (g) PhB(OH)2, Pd(PPH3)4, DME, K3PO4, 90°C, 16 časova, 26%.
Šema 59
[0162] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 59: (a) HCl (vodeni rastvor), MeOH; (b) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura; (c) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; (d) NaOMe, THF/MeOH, 50°C; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, TX63606: 69%, TX63649: 2%.
Šema 60
[0163] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 60: (a) R-B(OH)2, K3PO4, Pd(PPH3)4, DME, 80°C, 16 časova.
Šema 61:
[0164] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 61: (a) R-B(OH)2, K3PO4, PPH3, Pd(OAc)2ili Pd(PPH3)4, DME, 80°C, 16 časova; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH; (c) HCO2Et, NaOMe, sobna temperatura; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova.
Šema 62
[0165] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 62: (a) IBX, DMSO, 65°C, 7 časova, 43%; (b) I2, Piridin, THF, 60°C, 30 časova, 100%; (c) FSO2CF2CO2Me, CuI, HMPA, DMF, 70°C, 6 časova, 42%.
Šema 63
[0166] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 63: (a) Zn(CN)2, dppf, Na2CO3, Pd(OAc)2DMA, 120°C, 16 časova, 90%; (b) HCl (vodeni rastvor), THF, MeOH, 3 dana, 99%; (c) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova; (d) NH2OH-HCl, EtOH, THF, H2O, 50°C, 16 časova, 100%; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 4 časa, 72%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 74%.
Šema 64
[0167] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 64: (a) TMSN3, Bu2SnO, toluen, 130°C, 16 časova, 43%; (b) HCl (vodeni rastvor), THF, 16 časova, 97%; (c) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, THF, 50°C, 16 časova, 90%; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 4 časa, 86%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 70%.
Šema 65
[0168] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 65: (a) Ac2O, Piridin, 110°C, 3 časa; (b) HCl (vodeni rastvor), THF, 3 dana, 20%; (c) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 4 časa, zatim TsOH, benzen, refluks, 7 časova, 47%; (e) NaOMe, THF/EtOH, 50°C, 4 časa, 100%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 46%.
Šema 66
[0169] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 66: (a) KOH, EtOH, H2O, 4 dana, 100%; (b) Dimetilacetamid dimetilacetal, 80°C, 3 časa; (c) NH2OH-HCl, TEA, AcOH, 80°C, 2 časa, 69%; (d) HCl (vodeni rastvor), THF, 4 dana, 97%; (e) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 4 časa, zatim TsOH, benzen, refluks, 7 časova, 100%; (g) NaOMe, THF/EtOH, 50°C, 4 časa, 77%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 79%.
Šema 67
[0170] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 67: (a) Dietil oksalat, NaH, THF, refluks, 16 časova, 100%; (b) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 16 časova, 19%; (c) HCl (vodeni rastvor), THF, 16 časova, 73%; (d) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 100%; (f) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 6 časova, 100%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 55°C, 5 časova, 80%; (h) (COCl)2, THF, sobna temperatura, 3 časa, 35%.
Šema 68
[0171] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 68: (a) n-BuLi, DIPA, BnBr, THF, -78°C do sobne temperature, 45%; (b) H2, Pd/C, THF, 48 časova; (c) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 98%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 100%; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 9 časova, 100%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 39%.
Šema 69
[0172] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 69: (a) KHMDS, THF, BnBr, -60°C do sobne temperature, 15%; (b) H2, Pd/C, THF, 48 časova; (c) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 95%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 100%; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 9 časova, 98%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 28%.
Šema 70
[0173] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 70: (a) DIPA, n-BuLi, THF, PH2ICl, -78°C do sobne temperature, 31%; (b) H2, Pd/C, THF, 48 časova; (c) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova; (e) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 9 časova, 91%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 4 časa, 79%.
Šema 71
[0174] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 71: (a) Dimetil karbonat, NaH, THF, refluks, 16 časova; (b) Acetimidamid hidrohlorid, piperidin, iPrOH, refluks, 48 časova, 42%; (c) POCl3, DMF, 140°C, 3 časa, 100%; (d) NaOMe, MeOH, 50°C, 3 časa, 44%; (e) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 100%; (g) NaOMe, THF/MeOH, 50°C, 9 časova, 100%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 30%.
Šema 72
[0175] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 72: (a) Ciklopropankarboksimidamid hidrohlorid, piperidin, iPrOH, 90°C, 72 časa, 77%; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH, iPrOH, sobna temperatura, 16 časova, 94%; (c) POCl3, DIPEA, benzen, 80°C, 16 časova, 94%; (d) NaOMe, MeOH, 50°C, 2 časa, 100%; (e) HCO2Et, NaOMe, THF, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 2 časa, zatim sobna temperatura, 16 časova, 90%; (g) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 41%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 3 časa, 23%.
Šema 73
[0176] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 73: (a) 2,2-dimetilpropionamidin hidrohlorid, piperidin, nBuOH, 100°C, 72 časa, 60%; (b) POCl3, DIPEA, benzen, 90°C, 2 časa zatim sobna temperatura, 16 časova, 93%; (c) NaOMe, MeOH, 50°C, 2 časa, 100%; (d) HCl (vodeni rastvor), MeOH, iPrOH, sobna temperatura,16 časova, 92%; (e) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 97%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 2 časa, zatim sobna temperatura, 16 časova, 100%; (g) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 50%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 2 časa, 38%.
Šema 74
[0177] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 74: (a) Tiourea, KO-tBu, EtOH, refluks, 16 časova, 87%; (b) MeI, K2CO3, DMF, sobna temperatura, 2 časa, 100%; (c) PhB(OH)2, Pd(PPH3)4, Cu(I) tiofen 2-karboksilat, THF, refluks, 16 časova, 40%; (d) HCl (vodeni rastvor), MeOH, iPrOH, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (e) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 98%; (g) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova, 50%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 62%.
Šema 75(a)
Šema 75(b)
[0178] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 75 (a) i (b): (a) ClCH2COOH, HCl, H2O, 100°C, 6 časova, 93%; (b) POCl3, DIPEA, 90°C, 16 časova, 90%; (c) NaOMe, MeOH, 50°C, 1 čas, 401a: 65%, 401b: 5.5%; (d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 100%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 100%; (f) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 6 časova, 100%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 40%.
Šema 76
[0179] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 76: (a) R-B(OH)2, PPH3, K3PO4, Pd(OAc)2, DMF, DME, 90°C, 16 časova; (b) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (c) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova; (d) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova.
Šema 77
[0180] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 77: (a) Zn(CN)2, dppf, Na2CO3, DMAc, 120°C, 16 časova, 40%; (b) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (c) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 30%; (d) TEA, MeCN, 85°C, 16 časova; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 41%.
Šema 78
[0181] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 78: (a) POCl3, DIPEA, benzen, 90°C, 4 časa; (b) RR’NH, DIPEA, iPrOH, 90°C, 48 časova; (c) HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova (d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (e) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 30%; (f) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova.
Šema 79
[0182] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 79: (a) Na, EtOH, 50°C, 3 časa, 35%; (b) HCO2Et, Na, EtOH, sobna temperatura, 16 časova, 92%; (c) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 30%; (d) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 12%.
Šema 80
[0183] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 80: (a) PhB(OH)2, PPH3, K3PO4, Pd(OAc)2, DMF, DME, 90°C, 16 časova, 67%; (b) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (c) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova; (d) NaOMe, THF, MeOH, 50°C, 16 časova; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 69%.
Šema 81
[0184] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 81: (a) EtONa, EtOH, sobna temperatura, 16 časova; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 84%; (c) HCO2Et, NaOEt, EtOH, Benzen, sobna temperatura, 16 časova, 96%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 2 časa zatim sobna temperatura, 16 časova; (e) NaOEt, EtOH, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 2 časa, 48%.
Šema 82
[0185] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 82: (a) MgBr2-Et2O, DIPEA, DCM, zatim BzCl, sobna temperatura, 16 časova, 27%; (b) NHNH2-H2O, EtOH, 65°C, 1 čas zatim sobna temperatura 5 dana; (c) HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (e) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, sobna temperatura, 16 časova, 34%; (f) NaOMe, MeOH, THF, sobna temperatura, 16 časova; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 3 časa, 43%.
Šema 83
[0186] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 83: (a) Ac2O, NaOAc, sobna temperatura, 3 dana, 31%.
Šema 84
[0187] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 84: (a) Etil hloroformate, NaHCO3, sobna temperatura, 16 časova, 76%.
Šema 85
[0188] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 85: (a) MgBr2-Et2O, DIPEA, DCM, zatim 2-piridin karboksilna kiselina, hlorid hidrohlorid, sobna temperatura, 16 časova; (b) NHNH2-H2O, EtOH, sobna temperatura, 16 časova zatim 70°C, 1 čas; (c) HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 94%; (d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 96%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, sobna temperatura, 16 časova, 85%; (f) NaOMe, MeOH, THF, sobna temperatura, 16 časova, 99%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 60°C, 3 časa, 16%.
Šema 86
[0189] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 86: (a) Accufluor, MeCN, 80°C, 2 časa zatim sobna temperatura, 3 dana, 14%.
Šema 87
[0190] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 87: (a) MeOTf, TEA, DCM, sobna temperatura, 16 časova, 444: 33%, 445: 10%; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 93%; (c) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 72%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 2 časa zatim sobna temperatura, 16 časova; (e) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 31%.
Šema 88
[0191] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 88: (a) HCl (vodeni rastvor), MeOH, THF, sobna temperatura, 16 časova, 89%; (b) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (c) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 16 časova, 85%; (d) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 96%; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 39%.
Šema 89(a)
Šema 89(b)
[0192] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 89 (a) i (b): (a) 2-Metil-1,3-cikloheksandion, 1-heksen-3-on, Et3N, MeCN, sobna temperatura 16 časova; (b) (S)-fenilalanin, CSA, MeCN, sobna temperatura do 70°C, 48 časova, 70%; (c) NaBH4, EtOH, 0°C, 15 min zatim AcOH, sobna temperatura, 1 čas, 96%; (d) 3,4-dihidro-2H-piran, TsOH, CH2Cl2, 0°C do sobne temperature, 16 časova, 46%; (e) Li, NH3, -78°C, 45 min, 68%; (f) piridinijum ptoluensulfonat, EtOH, 70°C, 6 časova zatim sobna temperatura 16 časova; (g) Etilen glikol, TsOH, benzen, refluks, 16 časova; (h) PDC, MgSO4, DCM, sobna temperatura 24 časa, 67%; (i) HCO2Et, Benzen, zatim NaOMe, MeOH, 0°C do sobne temperature, 16 časova, 97%; (j) MeNHNH2, EtOH, 50°C, 16 časova, 78%; (k) HCl (vodeni rastvor), MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (1) HCO2Et, NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 98%; (m) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 16 časova, 93%; (n) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 83%; (o) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 30%.
Šema 90
[0193] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 90: (a) Benzamidin hidrohlorid, piperidin, iPrOH, 85°C, 96 časova; (b) HCl (vodeni rastvor), MeOH, THF, sobna temperatura, 16 časova; (c) HCO2Et, Benzen, zatim NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (d) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 16 časova; (e) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 52%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 h; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 79%.
Šema 91
[0194] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 91: (a) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DCM, sobna temperatura, 30 min, 58%; (b) fenilboronska kiselina, Pd(PPH3)4, K3PO4, DME, 80°C, 16 časova, 41 %; (c) HCl (vodeni rastvor), MeOH, THF, sobna temperatura, 16 časova, 92%; (d) HCO2Et, Benzen, zatim NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (e) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 16 časova; (f) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 16 časova, 30%.
Šema 92
[0195] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 92: (a) N2H4-HCl, TEA, AcOH, dioksan, zatim 276, 70°C, 3 časa, 96%; (b) NaH, DMF, zatim iPrI, 16 časova, 79%; (c) HCl (vodeni rastvor), THF, sobna temperatura, 48 časova, 97%; (d) HCO2Et, THF zatim NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 98%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 3 časa, 100%; (f) NaOMe, MeOH, THF, 50°C, 3 časa, 72%; (g) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1.5 čas; (ii) piridin, 60°C, 4 časa, 69%.
Šema 93
[0196] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šemu 93: (a) H2O2(vodeni rastvor), CH3CN, sobna temperatura, 16 časova, 85%.
Šema 94
[0197] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 94: (a) H2O2, MeCN, sobna temperatura, 16 časova, 10%.
Šema 95
[0198] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 95: (a) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DCM, 0°C, 0.5 časa, 485: 55%, 486: 14%; (b) HCO2Et, benzen zatim NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 78%; (c) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 2 časa zatim sobna temperatura 16 časova; (d) NaOMe, MeOH, THF, sobna temperatura, 16 časova, 81%; (e) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C, 1.0 čas; (ii) piridin, 50°C, 2 časa, 27%.
Šema 96
[0199] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 96: (a) NaOEt, EtOH, 80°C, 48 časova, 92%; (b) HCl (vodeni rastvor), EtOH, sobna temperatura, 16 časova, 99%; (c) HCO2Et, benzen, zatim NaOEt, EtOH, sobna temperatura, 16 časova; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 2 časa, zatim sobna temperatura, 16 časova, 88%; (e) NaOEt, EtOH, sobna temperatura, 72 časa, 96%; (f) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 1 čas; (ii) piridin, 50°C, 2 časa, 31%.
Šema 97
[0200] Reagensi i uslovi koji se odnose na Šeme 97: (a) (i) Dimetil karbonat, NaH, THF, 80°C, 16 časova; (ii) Formamidin acetat, piperidin, iPrOH, 80°C, 48 časova, 16%; (b) POCl3, DMF, DIPEA, 90°C, 2 časa, 86%; (c) NaOMe, MeOH, 60°C, 16 časova, 88%; (d) HCl, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 99%; (e) HCO2Et, NaOMe, benzen, MeOH, sobna temperatura, 48 časova, 82%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 časova, 95%; (g) NaOMe, MeOH, sobna temperatura, 16 časova, 88%; (h) (i) 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin, DMF, 0°C do sobne temperature, 2 časa; (ii) piridin, 50°C, 2 časa, 30%.
Sinteza i karakterizacija sintetičkih AIM derivata
[0201]
Jedinjenje 2: Etil vinil keton (8.0 g, 95 mmol) je apsorbovan u THF (75 mL) i dodati su jedinjenje 1 (10 g, 79 mmol) i trietilamin (8.37 g, 82 mmol). Reakcija je zagrevana na refluksu u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 do 20 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 2 (13.5 g, 81 %) kao ulje. m/z 211 [M+H]<+>.
Jedinjenje 3: Jedinjenje 2 (13.5 g, 64.2 mmol) je apsorbovano u DMF (600 mL), dodati su (S)-fenilalanin (10.63 g, 64 mmol) i D-kamforsulfonska kiselina (735 g, 32 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 4 dana, zatim zagrevana do 70°C u trajanju od 1 d. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, razblažena zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), i ekstrahovana sa etrom, zatim sušena sa Na2SO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 3 (5.51 g, 45%) kao ulje. m/z 193 [M+H]<+>.
Jedinjenje 4: Rastvor NaBH4(0.296 g, 7.8 mmol) u etanolu (40 mL) je dodat u 0°C rastvor jedinjenja 3 (5.51 g, 28.6 mmol) u etanolu (100 mL). Reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa i ugašena sirćetnom kiselinom (2.9 mL). Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 5 min, zatim koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 20 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 4 (5.0 g, 90%) kao ulje. m/z 195 [M+H]<+>.
Jedinjenje 5: Jedinjenje 4 (3.05 g, 15.6 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2, zatim su dodati i-Pr2EtN i MOMCl. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen sa EtOAc, ispran sa 0.1 N HCl i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa Na2SO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 5 (3.35 g, 90%) kao svetlo žuta tečnost: m/z 239 [M+H]<+>.
Jedinjenje 6: Rastvor jedinjenja 5 (3.0 g, 12.6 mmol) i t-BuOH (965 mg, 13 mmol) u THF (10 mL) je dodat u -78°C rastvor litijumske žice (0.44 g, 64 mmol) u tečnom NH3(50 mL). Smeša je mešana na refluksu u trajanju od 2 časa i hlađena do -78°C. Dodat je rastvor metil jodida (9.5 g, 67 mmol) u THF (25 mL). Reakciona smeša je mešana na -78°C u trajanju od 2 časa i ugašena vodom (2 mL), zatim lagano zagrevana do sobne temperature. Smeša je ekstrahovana sa etrom, zatim isprana vodom i fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 15 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 6 (0.90 g, 28%) kao ulje. m/z 255 [M+H]<+>.
Jedinjenje 7: Smeša jedinjenja 6 (0.90 g, 3.5 mmol), etilen glikola i kamforsulfonske kiseline u cikloheksanu je zagrevana do refluksa u trajanju od 16 časova sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, isprana zasićenim NaHCO3i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 20 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 7 (0.59 g, 66%) kao ulje. m/z 255 [M+H]<+>.
Jedinjenje 8: Jedinjenje 7 (190 mg, 0.75 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2i dodati su piridinijum dihromat i MgSO4. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit, eluirana sa EtOAc/CH2Cl2(1/3), i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 8 (180 mg, 95%) kao čvrsta supstanca. m/z 253 [M+H]<+>.
Jedinjenje 9: Jedinjenje 8 (120 mg, 0.48 mmol) je apsorbovano u etil formatu i hlađeno do 0°C, zatim je dodat 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakcija je zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, razblažena sa t-BuOMe i 1 N HCl, i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana vodom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 9 (120 mg, 90%) kao čvrsta supstanca. m/z 281 [M+H]<+>.
Jedinjenja 10 i 11: Smeša 9 (120 mg, 0.43 mmol) i metil hidrazina (35 mg, 0.7 mmol) u etanolu (15 mL) zagrevana je do 60°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je filtriran kroz kratak čep od silike (eluiran sa EtOAc) i koncentrovan da bi se dobilo 10 i 11 (125 mg, kvantitativan) kao ulje. m/z 291 [M+H]<+>.
Jedinjenja 12 i 13: Smeša jedinjenja 10 i 11 (0.40 g, 1.4 mmol) je apsorbovana u metanolu, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3i ekstrahovana sa etrom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 15 % EtOAc u heksanima) da bi se dobila jedinjenja 12 i 13 (0.20 g, 59%) kao čvrsta supstanca. m/z 247 [M+H]<+>.
Jedinjenja 14 i 15: Rastvor jedinjenja 12 i 13 (0.20 g, 0.81 mmol) u THF je dodat u -78°C rastvor LDA (2.0 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 45 min, zatim je dodat rastvor TsCN (1.5 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C dodatnih 45 min, zatim ugašena sa 1 N HCl (vodeni rastvor) i zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etrom, zatim isprana vodom i fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobila jedinjenja 14 i 15 (170 mg, 77%) kao čvrsta supstanca. m/z 272 [M+H]<+>.
Jedinjenja TX63341 i TX63342: Smeša jedinjenja 14 i 15 (170 mg, 0.63 mmol) je rastvorena u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin, i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 55°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa t-BuOMe i isprana vodom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63342 (39 mg, 23%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 8.44 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.69 (dd, 1H, J = 5.6, 15.7 Hz), 2.46 (ddd, 1H, J = 6.9, 11.6, 15.9 Hz), 2.16 (d, 1H, J = 11.6 Hz), 1.82 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 270 [M+H]<+>, i TX63341 (15 mg, 9%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.30 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 4.8, 15.7 Hz), 2.53 (ddd, 1H, J = 6.0, 12.3, 15.6 Hz), 2.27 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 1.95 (dd, 1H, J = 5.6, 13.3 Hz), 1.77 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.31 (s, 6H); m/z 270 [M+H]<+>.
Jedinjenje 17: Jedinjenje 16 (10 g, 56 mmol) je apsorbovano u etanolu, ohlađeno do 0°C, i dodat je rastvor NaBH4u etanolu. Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 2 časa, i ugašena sirćetnom kiselinom. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je filtriran kroz kratak čep od silike (eluirana sa 30 % EtOAc u heksanima) i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 17 (9.3 g, 92%) kao viskozna tečnost.
Jedinjenje 18: Jedinjenje 17 (9.3 g, 52 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2, zatim su dodati i-Pr2EtN i MOMCl. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen sa EtOAc, ispran sa 0.1 N HCl i fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa Na2SO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 18 (9.0 g, 78%) kao svetlo žuta tečnost: m/z 225 [M+H]<+>.
Jedinjenje 19: Jedinjenje 18 (3.5 g, 16 mmol) je apsorbovano u t-BuOH, i dodat je rastvor KOt-Bu u THF. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 min, hlađena do 10°C, i dodat je jodometan. Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature tokom 30 min i ugašena vodom. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa Na2SO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 19 (1.7 g, 43%) kao svetlo žuta tečnost: m/z 253 [M+H]<+>.
Jedinjenje 20: Smeša jedinjenja 19 (4.31 g, 17.1 mmol), etilen glikola, i hidrata ptoluensulfonske kiseline u toluenu zagrevana je do refluksa preko noći sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, razblažena sa EtOAc, isprana zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 20 (4.26 g, 99%) kao čvrsta supstanca. m/z 253 [M+H]<+>.
Jedinjenje 21: Jedinjenje 20 (4.65 g, 18.4 mmol) je apsorbovano u EtOH pod N2i dodat je 10% Pd/C. Bočica je rigorozno prečišćena sa H2i mešana u trajanju od 4 dana na sobnoj temperaturi dodavanjem dodatne porcije 10% Pd/C posle 3 dana. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit, eluirana sa metanolom, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 21 (4.63 g, 99%) kao čvrsta supstanca. m/z 255 [M+H]<+>.
Jedinjenje 22: Jedinjenje 21 (58 mg, 0.28 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2, zatim su dodati i-Pr2EtN i MOMCl. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 22 (72 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 255 [M+H]<+>.
Jedinjenje 23: Rastvor 22 (70 mg, 0.28 mmol) u THF je dodat u -78°C rastvor LDA (3.5 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 30 min, zatim je dodat rastvor TsCN (1.3 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C dodatnih 30 min, zatim ugašena sa zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor) i zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je ekstrahovana with EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 15 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 23 (51 mg, 66%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 280 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63364: Jedinjenje 23 (48 mg, 0.17 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.6 ekviv.), i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 3 časa dodavajući dodatnu porciju 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoina (0.1 ekviv.) posle 2 časa. Zatim, dodat je piridin, i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je mešana na 60°C u trajanju od 4 časa, zatim je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc, isprana sa 1N HCl (vodeni rastvor), zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 15 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63364 (41 mg, 86%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.94 (s, 1H),4.78 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.65 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 3.44 (s, 3H), 3.28 (dd, 1H, J = 4.3, 11.4 Hz), 2.00 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.59 (m, 3H), 1.49 (m, 1H), 1.36 (m, 1H), 1.24 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 278 [M+H]<+>. Jedinjenje TX63363: Jedinjenje TX63364 (28 mg, 0.10 mmol) je apsorbovano u THF, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana 2 dana na sobnoj temperaturi, i ugašena zasićenim NaHCO3. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63363 (16 mg, 68%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 3.45 (dd, 1H, J = 4.3, 11.6 Hz), 1.92 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.61 (m, 3H), 1.44 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 234 [M+H]<+>.
Jedinjenje 25: Jedinjenje 21 (2.56 g, 10.1 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2i piridinijum dihromat je dodavan tokom 10 min. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim zagrevana do 45°C sve dok početni materijal nije potrošen, kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit, eluirana sa CH2Cl2, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 25 (2.36 g, 93%) kao čvrsta supstanca. m/z 253 [M+H]<+>.
Jedinjenje 26: Jedinjenje 25 (2.95 g, 11.7 mmol) je apsorbovano u etil formatu i hlađeno do 0°C, zatim je dodat natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakcija je zagrevana do sobne temperature. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i pH je podešen do 7 sa sirćetnom kiselinom. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom (vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 26 (3.27 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 281 [M+H]<+>.
Jedinjenje 27: Smeša 26 (1.50 g, 5.35 mmol) i metil hidrazina (0.37 g, 8.03 mmol) u etanolu (100 mL) zagrevana je do 60°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje 27 (1.50 g, 97%) kao ulje. m/z 291 [M+H]<+>.
Jedinjenje 28: Jedinjenje 27 (1.50 g, 5.17 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3i ekstrahovana etrom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 28 (1.10 g, 86%) kao čvrsta supstanca. m/z 247 [M+H]<+>.
Jedinjenje 29: Rastvor 28 (1.10 g, 4.47 mmol) u THF je dodat u -78°C rastvor LDA (1.6 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 45 min, zatim je dodat rastvor TsCN (1.2 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C dodatnih 45 min, zatim ugašena sa 1 N HCl (vodeni rastvor) i zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etrom, sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 35 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 29 (0.53 g, 44%) kao čvrsta supstanca. m/z 272 [M+H]<+>.
Jedinjenja TX63432 i TX63445: Jedinjenje 29 (530 mg, 1.95 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 1 čas), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, razblažena vodom, ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63432 (155 mg, 29%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 8.44 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.69 (dd, 1H, J = 5.6, 15.7 Hz), 2.46 (ddd, 1H, J = 6.9, 11.6, 15.9 Hz), 2.16 (d, 1H, J = 11.6 Hz), 1.82 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 270 [M+H]<+>, i jedinjenje TX63445 (28 mg, 4%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.43 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.65 (d, 1H, J = 6.2, 16.1 Hz), 2.44 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.8, 16.3 Hz), 2.15 (dd, 1H, J = 1.6, 12.1 Hz), 1.98 (dd, 1H, J = 7.1, 13.5 Hz), 1.87 (dq, 1H, J = 6.2, 12.0 Hz), 1.49 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 348, 350 (1:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 30: Rastvor cikloheksilhidrazin hidrohlorida (0.245 g, 1.5 ekv.) i trietil amina (165 mg, 1.5ekv.) u EtOH (5 mL) je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 min. Rastvor jedinjenja 26 (0.3 g, 1.07 mmol) u EtOH (5 mL) je lagano dodavan i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min. Reakciona smeša je zatim zagrevana na 60°C 16 časova i zatim koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (5% do 35% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 30 (0.14 g, 36%) kao gumasta čvrsta supstanca; m/z 359 [M+H]<+>.
Jedinjenje 31: Rastvor jedinjenja 30 (0.14 g, 0.39 mmol) u MeOH je tretiran sa 3 N HCl (vodeni rastvor) i mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je ugašena etrom i zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor). Organski sloj je odvojen i sušen sa MgSO4, zatim filtriran kroz kratku kolonu (silika gel, 15% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 31 (0.12 g, 98%) kao čvrsta supstanca. m/z 315 [M+H]<+>.
Jedinjenje 32: Rastvor litijum diizopropilamida (LDA) je pripremljen dodavanjem n-BuLi (1.6 M u heksanu) u diizopropilamin u THF na 0°C, mešanjem u trajanju od 30 min, i zatim hlađenjem reakcije do -78°C. Rastvor jedinjenja 31 (0.12 g, 0.39 mmol) u THF je dodavan ukapavanjem u LDA rastvor. Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 45 min, i zatim je dodat rastvor p-toulensulfonil cijanida u THF. Posle mešanja od 45 min, dodat je 1 N HCl (vodeni rastvor). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etrom, i spojene organske materije su isprane vodom i fiziološkim rastvorom, sušene preko MgSO4, filtrirane i isparavane. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5% do 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 32 (60 mg, 46%) kao čvrsta supstanca; m/z 340 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63444: 1,3-Dibromo-5,5-dimetilhidantoin je dodat u rastvor jedinjenja 32 (60 mg, 0.17 mmol) u DMF na 0°C. Posle mešanja od 2 časa, dodat je piridin, i reakciona smeša je zagrevana do 55°C u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja do sobne temperature, dodat je MTBE i smeša je isprana vodom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5% do 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63444 (35 mg, 59%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.04 (tt, 1H, J = 3.6, 11.7 Hz), 2.79 (dd, 1H, J = 5.2, 16.2 Hz), 2.56 (ddd, 1H, J = 6.9, 11.8, 15.9 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.4, 11.5 Hz), 2.15 (m, 2H), 1.88 (m, 4H), 1.76 (m, 1H), 1.66 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.44 (m, 2H), 1.29 (s, 3H), 1.28 (m, 1H), 1.24 (s, 3H); m/z 338 [M+H]<+>.
Jedinjenja 33 i 34: terc-Butilhidrazin hidrohlorid (0.125 g, 1.0 mmol) je apsorbovan u etanolu (25 mL). Dodat je trietilamin (0.18 mL, 1.3 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od približno 30 min. Dodato je jedinjenje 26 (0.203 g, 0.72 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do refluksa u trajanju od 5 časova i zatim mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom (50 mL) i ispran vodom (20 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobila dva proizvoda, jedinjenje 33 (81 mg, 35%, manje polaran) i jedinjenje 34 (91 mg, 36%, polarnije) kao čvrste supstance. Jedinjenje 33: m/z 333 [M+H]<+>. Jedinjenje 34: m/z 347 [M+H]<+>.
Jedinjenje 35: Jedinjenje 33 (81 mg, 0.24 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom (50 mL) i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 35 (70 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 289 [M+H]<+>.
Jedinjenje 36: Jedinjenje 35 (70 mg, 0.24 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 36 (69 mg, 90%) kao čvrsta supstanca. m/z 317 [M+H]<+>.
Jedinjenje 37: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hirohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 36 (69 mg, 0.218 mmol). Dodata je 9/1 smeša etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 37 (70 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 314 [M+H]<+>.
Jedinjenje 38: Jedinjenje 37 (70 mg, 0.224 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4(vodeni rastvor), i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 38 (41 mg, 59%) kao čvrsta supstanca. m/z 314 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63450: Jedinjenje 38 (41 mg, 0.13 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je dibromodimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok nije potrošen početni materijal (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63450 (23 mg, 56%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.58 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 2.79 (dd, 1H, J = 5.7, 15.7 Hz), 2.56 (ddd, 1H, J = 7.3, 11.5, 15.8 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.6, 11.4 Hz), 1.87 (m, 2H), 1.56 (s, 9H), 1.49 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 312 [M+H]<+>.
Jedinjenje 39: Jedinjenje 34 (91 mg, 0.26 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (50 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 39 (68 mg, 86%) kao čvrsta supstanca. m/z 303 [M+H]<+>.
Jedinjenje 40: Jedinjenje 39 (68 mg, 0.22 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 40 (62 mg, 83%) kao čvrsta supstanca. m/z 331 [M+H]<+>.
Jedinjenje 41: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 40 (62 mg, 0.19 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 41 (66 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 328 [M+H]<+>.
Jedinjenje 42: Jedinjenje 41 je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5 časova i zatim je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 42 (49 mg, 80%) kao čvrsta supstanca. m/z 328 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63451: Jedinjenje 42 je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok nije potrošen početni materijal (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63451 (33 mg, 68%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 3.28 (dd, 1H, J = 3.8, 16.6 Hz), 3.06 (dd, 1H, J = 12.2, 16.5 Hz), 2.58 (dd, 1H, J = 3.7, 12.1 Hz), 1.71 (s, 9H), 1.44 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.32 (s, 3H); m/z 326 [M+H]<+>.
Jedinjenje 43: Smeša 26 (300 mg, 1.07 mmol) i (2,2,2-trifluoroetil)hidrazina (70% čist, 270 mg, 2.4 mmol) u etanolu (25 mL) zagrevana je do 60°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 45 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 43 (270 mg, 70%) kao čvrsta supstanca. m/z 359 [M+H]<+>.
Jedinjenje 44: Jedinjenje 43 (0.27 g, 0.75 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 44 (0.24 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 315 [M+H]<+>.
Jedinjenje 45: Jedinjenje 44 (0.24 g, 0.75 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 45 (0.25 g, 96%) kao čvrsta supstanca. m/z 343 [M+H]<+>.
Jedinjenje 46: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 45 (0.25 g, 0.73 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen sa vodom i ekstrahovan sa etil acetatom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 46 (0.23 g, 93%) kao čvrsta supstanca. m/z 340 [M+H]<+>.
Jedinjenje 47: Jedinjenje 46 (0.23 g, 0.68 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 47 (0.12 g, 52%) kao čvrsta supstanca. m/z 340 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63454: Jedinjenje 47 (0.12 g, 0.35 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 30% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63454 (65 mg, 54%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.47 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.65 (m, 2H), 2.84 (dd, 1H, J = 5.7, 16.2 Hz), 2.59 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.9, 16.1 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.1, 11.9 Hz), 1.90 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 338 [M+H]<+>.
Jedinjenja 48 i 49: Etanol je dodat u smešu jedinjenja 26 (204 mg, 0.73 mmol), fenilhidrazin hidrohlorida (132 mg, 0.92 mmol), i natrijum acetat trihidrata (140 mg, 1.08 mmol) i postepeno je zagrevana do 65°C. Reakciona smeša je zatim mešana na 70°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 48 (91 mg, 35%, manje polarno) i jedinjenje 49 (135 mg, 51%, polarnije) kao čvrste supstance. Jedinjenje 48:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.53 (s, 1H), 7.41 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 7.22 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 3.98 (m, 4H), 2.80 (dd, 1H, J = 5.7, 15.9 Hz), 2.59 (ddd, 1H, J = 6.5, 11.6, 15.8 Hz), 2.36 (m, 1H), 1.99 (m, 2H), 1.77 (m, 4H), 1.37 (s, 3H), 1.09 (3H), 0.98 (s, 3H); m/z 353 [M+H]<+>. Jedinjenje 49:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (s, 1H), 7.56 (m, 4H), 7.46 (m, 1H), 3.93 (m, 4H), 2.98 (dd, 1H, J = 12.2, 16.7 Hz), 2.86 (dd, 1H, J = 4.0, 16.7 Hz), 2.32 (dd, 1H, J = 4.0, 12.2 Hz), 2.01 (m, 1H), 1.91 (m, 2H), 1.68 (m, 1H), 1.28 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 0.90 (s, 3H); m/z 367 [M+H]<+>.
Jedinjenje 50: Jedinjenje 48 (86 mg, 0.24 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodat je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (50 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 50 (69 mg, 92%) kao čvrsta supstanca. m/z 309 [M+H]<+>.
Jedinjenje 51: Jedinjenje 50 (69 mg, 0.22 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 51 (73 mg, 97%) kao čvrsta supstanca. m/z 337 [M+H]<+>.
Jedinjenje 52: Rastvor 0.1 N hidroksilamine hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 51 (73 mg, 0.22 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 52 (66 mg, 91%) kao čvrsta supstanca. m/z 334 [M+H]<+>.
Jedinjenje 53: Jedinjenje 52 (66 mg, 0.20 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5 časa i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 53 (53 mg, 80%) kao čvrsta supstanca. m/z 334 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63455: Jedinjenje 53 (53 mg, 0.16 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću ponovljene hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63455 (1.8 mg, 3%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.63 (s, 1H), 7.66 (m, 3H), 7.48 (m, 3H), 2.92 (dd, 1H, J = 4.8, 15.8 Hz), 2.67 (ddd, 1H, J = 6.5, 11.8, 15.8 Hz), 2.26 (dd, 1H, J = 2.4, 11.4 Hz), 1.97 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.28 (s, 3H); m/z 332 [M+H]<+>.
Jedinjenje 54: Jedinjenje 49 (0.120 g, 0.33 mmol) je apsorbovano u metanolu (20 mL), i dodata je 1N HCl (vodeni, 2 mL). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu (50 mL) i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni, 15 mL), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 54 (97.3 mg, 92%) kao čvrsta supstanca.
Jedinjenje 55: Jedinjenje 54 (0.0973 g, 0.30 mmol) je apsorbovano u etil formatu (5 mL), i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH, 0.4 mL, 7.1 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 55 (100.7 mg, 95%) kao čvrsta supstanca. m/z 351 [M+H]<+>.
Jedinjenje 56: Rastvor 0.1 N hidroksilamine hidrohlorida (vodeni, 3.2 mL, 0.32 mL) je dodat u jedinjenje 55 (100.7 mg, 0.29 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode (2 mL), i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 56 (75.4 mg, 76%) kao čvrsta supstanca. m/z 348 [M+H]<+>.
Jedinjenje 57: Jedinjenje 56 (75.4 mg, 0.22 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF (6 mL), i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH, 0.24 mL, 4.3 mL), i reakciona smeša je mešana na 55°C približno 5.5 časova i zatim je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom (50 mL) i ispran fiziološkim rastvorom (10 mL), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 57 (59.5 mg, 79%) kao čvrsta supstanca. m/z 348 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63456: Jedinjenje 57 (59.5 mg, 0.17 mmol) je rastvoreno u suvom DMF (1 mL), i rastvor je hlađen do 0°C. Ddodat je dibromodimetilhidantoin (31 mg, 0.109 mmol) i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen, kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin (0.13 mL, 1.6 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (60 mL) i isprana fiziološkim rastvorom (10 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobila čvrsta supstanca (29.9 mg). Prečišćeni ostatak je ponovo prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) do čvrste supstance. Čvrsta supstanca je triturisana sa Et2O/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63456 (14.3 mg, 24%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.48-7.68 (m, 5H), 3.18 (dd, 1H, J = 8.0, 16.0 Hz), 3.02 (dd, 1H, J = 4.0, 16.0 Hz), 2.62 (dd, 1H, J = 4.0, 12.0 Hz), 1.56 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); m/z 346 [M+H]<+>.
Jedinjenje 58: Jedinjenje 26 (1.200 g, 4.28 mmol) je apsorbovano u etanolu (100 mL). Dodat je anhidrovani hidrazin (0.36 mL, 11.5 mmol) u etanolu (5 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i zatim 60°C u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je triturisan sa etrom/etil acetatom da bi se dobilo jedinjenje 58 (0.965 g, 82%) kao čvrsta supstanca. m/z 277 [M+H]<+>.
Jedinjenje 59: Jedinjenje 58 (280 mg, 1.01 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 59 (245.2 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 233 [M+H]<+>.
Jedinjenje 60: Jedinjenje 59 (239 mg, 1.03 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 63 (264 mg, 99%): m/z 261 [M+H]<+>.
Jedinjenje 61: Rastvor 0.1 N hidroksilamine hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 60 (260 mg, 1.00 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 61 (248.9 mg, 97%): m/z 258 [M+H]<+>.
Jedinjenje 62: Jedinjenje 61 (245 mg, 0.95 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5 časova i zatim je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 62 (204 mg, 83%) kao čvrsta supstanca. m/z 258 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63467: Smeša jedinjenja 62 (51 mg, 0.198 mmol) i DDQ (59 mg, 0.26 mmol) je apsorbovana u benzenu (11 mL). Smeša je mešana na refluksu u trajanju od 4.5 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni tri puta (silika gel, 1.5% MeOH u CH2Cl2, 2% MeOH u CH2Cl2i EtOAc, respektivno) da bi se dobila čvrsta supstanca. Prečišćeni ostatak je apsorbovan u etil acetatu (40 mL) i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje TX63467 (22 mg, 43%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 12.59 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 2.68-2.77 (m, 1H), 2.45-2.58 (m, 1H), 2.15-2.22 (m, 1H), 1.78-1.92 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); m/z 256 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63462: TX63467 (12 mg, 0.047 mmol) je apsorbovano u smeši zasićenog NaHCO3(vodeni, 0.5 mL) i THF (1.5 mL), i smeša je hlađena do 0°C. Dodat je metil hloroformat (1 kap, višak) i reakciona smeša je mešana 40 min na 0°C i zatim je dodata nova količina metil hloroformata (2 kapi, višak) i reakciona smeša je mešana 20 minuta. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (40 mL) i isprana sa NaCl (vodeni, 10 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo TX63462 (2.3 mg, 16%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.57 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 2.90 (dd, 1H, J = 8.0, 16.0 Hz), 2.58-2.68 (m, 1H), 2.19 (dd, 1H, J = 4.0, 12.0 Hz), 1.85-2.02 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 314 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63463: TX63467 (12 mg, 0.047 mmol) je apsorbovan u smeši zasićenog NaHCO3(vodeni, 0.5 mL) i THF (1.5 mL), i smeša je hlađena do 0°C. Dodat je acetil hlorid (1 kap, višak) i reakciona smeša je mešana 40 min na 0°C. Zatim je dodata nova količina acetil hlorida (2 kapi, višak) i reakciona smeša je mešana dodatnih 20 minuta. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (40 mL) i isprana sa NaCl (vodeni, 10 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63463 (3.3 mg, 24%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.49 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 2.90 (dd, 1H, J = 4.0, 12.0 Hz), 2.69 (s, 3H), 2.57-2.68 (m, 1H), 2.19 (dd, 1H, J = 4.0, 12.0 Hz), 1.85-2.02 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 298 [M+H]<+>.
Jedinjenje 63: Smeša 26 (300 mg, 1.07 mmol) i 2-hidraziniletanola (130 mg, 1.7 mmol) u etanolu (5 mL) zagrevana je do 60°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 1 % MeOH u EtOAc) da bi se dobilo 63 (320 mg, 93%) kao ulje. m/z 321 [M+H]<+>.
Jedinjenje 64: Jedinjenje 63 (0.32 g, 1.0 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 64 (0.17 g, 62%) kao čvrsta supstanca. m/z 277 [M+H]<+>.
Jedinjenje 65: Jedinjenje 64 (0.17 g, 0.62 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor), ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 65 (0.17 g, 91%) kao čvrsta supstanca. m/z 305 [M+H]<+>.
Jedinjenje 66: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 65 (0.17 g, 0.56 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom, ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 66 (0.18 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 302 [M+H]<+>.
Jedinjenje 67: Jedinjenje 66 (0.18 g, 0.56 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 67 (0.18 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 302 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63464: Jedinjenje 67 (0.18 g, 0.56 mmol) je rastvoreno u dioksanu. Dodat je piridinijum bromid perbromid i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin i reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 0 do 2 % MeOH u EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje TX63464 (10 mg, 5%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.21 (m, 2H), 4.01 (d, 1H, J = 5.1 Hz), 4.00 (d, 1H, J = 4.6 Hz), 2.81 (dd, 1H, J = 5.5, 16.1 Hz), 2.57 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.8, 16.0 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.1, 11.7 Hz), 1.91 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 300 [M+H]<+>.
Jedinjenje 68: Jedinjenje 27 (2.6 g, 9.0 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2, i dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (1.7 g, 5.9 mmol). Smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je isprana sa 1N Na2CO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 35 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 68 (1.8 g, 54%) kao gumasta čvrsta supstanca. m/z 369, 371 (1:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 69: Smeša jedinjenja 68 (1.3 g, 3.5 mmol), fenilboronske kiseline (645 mg, 5.3 mmol), PH3P (190 mg, 0.73 mmol), K3PO4(2.24 g, 10.6 mmol) i DME (15 mL) je prskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(80 mg, 0.35 mmol) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakcija je zagrevana do 85°C u trajanju od 9 časova. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 69 (0.69 g, 53%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. m/z 367 [M+H]<+>.
Jedinjenje 70: Jedinjenje 69 (0.69 g, 1.9 mmol) je apsorbovano u metanol, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 70 (0.64 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 323 [M+H]<+>.
Jedinjenje 71: Jedinjenje 70 (0.64 g, 1.9 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor), ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 71 (0.61 g, 92%) kao čvrsta supstanca. m/z 351 [M+H]<+>.
Jedinjenje 72: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 71 (0.61 g, 1.7 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa etil acetatom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 72 (0.58 g, 96%) kao čvrsta supstanca. m/z 348 [M+H]<+>.
Jedinjenje 73: Jedinjenje 72 (0.58 g, 1.7 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 73 (435 mg, 75%) kao čvrsta supstanca. m/z 348 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63465: Jedinjenje 73 (435 mg, 1.25 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63465 (0.3 g, 69%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 8.51 (s, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.44 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 2.55 (m 2H), 2.23 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 1.89 (dd, 1H, J = 5.0, 12.6 Hz), 1.82 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 346 [M+H]<+>.
Tabela 2. Jedinjenja 74a-741 (Šema 16).
[0202] Opšti postupak A: Jedinjenje 68 (1.0 ekv.) je apsorbovano u DME (videti Tabelu 2 za količinu). Dodati su PhB(OH)2(videti Tabelu 2 za količinu), PH3P (0.2 ekv.) i K3PO4(3.0 ekv.) i smeša je barbotirana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(Videti Tabelu 2 za količinu) i smeša je barbotirana sa N2u trajanju od 10 min. Zatim je smeđa mešana na 85°C u trajanju od 9 časova. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 74a: 0.23g, 78%: m/z 401, 403 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 74b: 0.2g, 68%: m/z 401, 403 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 74c: 0.23g, 78%: m/z 401, 403 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 74d: 0.1051g, 74%: m/z 385 [M+H]<+>.
Jedinjenje 74e: 0.0992g, 70%: m/z 385 [M+H]<+>.
Jedinjenje 74f: 0.13g, 64%: m/z 381 [M+H]<+>.
Jedinjenje 74g: 0.2g, 69%: m/z 397 [M+H]<+>.
Jedinjenje 74h: 0.097g, 67%: m/z 381 [M+H]<+>.
Jedinjenje 74i: 0.0872g, 58%: m/z 397 [M+H]<+>.
Jedinjenje 74j: 0.13g, 70%: m/z 381 [M+H]<+>.
Jedinjenje 74k: 0.14g, 48%: m/z 397 [M+H]<+>.
Jedinjenje 741: 0.17g, 71%: m/z 385 [M+H]<+>.
Tabela 3. Jedinjenja 75a-751 (Šema 16).
[0203] Opšti postupak B: Jedinjenje 74 (videti Tabelu 3 za količinu) je apsorbovano u metanol (videti Tabelu 3 za količinu), i dodat je HCl (vodeni, videti Tabelu 3 za količinu). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 75a: 210 mg, kvantitativan: m/z 357, 359 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 75b: 180 mg, kvantitativan: m/z 357, 359 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 75c: 180 mg, kvantitativan: m/z 357, 359 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 75d: 80.3 mg, 87%: m/z 341 [M+H]<+>.
Jedinjenje 75e: 79.7 mg, 83%: m/z 341 [M+H]<+>.
Jedinjenje 75f: 120 mg, kvantitativan: m/z 337 [M+H]<+>.
Jedinjenje 75g: 180 mg, kvantitativan: m/z 353 [M+H]<+>.
Jedinjenje 75h: 82.4 mg, 96%: m/z 337 [M+H]<+>.
Jedinjenje 75i: 71.5 mg, 92%: m/z 353 [M+H]<+>.
Jedinjenje 75j: 120 mg, kvantitativan: m/z 337 [M+H]<+>.
Jedinjenje 75k: 120 mg, 97%: m/z 353 [M+H]<+>.
Jedinjenje 751: 150 mg, kvantitativan: m/z 341 [M+H]<+>.
Tabela 4. Jedinjenja 76a-761 (Šema 16).
[0204] Opšti postupak C: Jedinjenje 75 (videti Tabelu 4 za količinu) je apsorbovano u etil formatu (videti Tabelu 4 za količinu), i dodat je 30% NaOMe u metanolu (videti Tabelu 4 za količinu). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 76a: 220 mg, 97%: m/z 385, 387 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 76b: 180 mg, 94%: m/z 385, 387 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 76c: 180 mg, 94%: m/z 385, 387 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 76d: 93 mg, kvantitativan: m/z 369 [M+H]<+>.
Jedinjenje 76e: 77.8 mg, 91%: m/z 369 [M+H]<+>.
Jedinjenje 76f: 125 mg, 96%: m/z 365 [M+H]<+>.
Jedinjenje 76g: 180 mg, 93%: m/z 381 [M+H]<+>.
Jedinjenje 76h: 90.2 mg, kvantitativan: m/z 365 [M+H]<+>.
Jedinjenje 76i: 75.8 mg, 99.6%: m/z 381 [M+H]<+>.
Jedinjenje 76j: 120 mg, 92%: m/z 365 [M+H]<+>.
Jedinjenje 76k: 125 mg, 97%: m/z 381 [M+H]<+>.
Jedinjenje 761: 150 mg, 92%: m/z 369 [M+H]<+>.
Tabela 5. Jedinjenja 77a-771 (Šema 16).
[0205] Opšti postupak D: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni, videti Tabelu 5 za količinu) je dodat u jedinjenje 76 (videti Tabelu 5 za količinu). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 77a: 220 mg, kvantitativan: m/z 382, 384 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 77b: 180 mg, kvantitativan: m/z 382, 384 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 77c: 180 mg, kvantitativan: m/z 382, 384 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 77d: 84 mg, 92%: m/z 366 [M+H]<+>.
Jedinjenje 77e: 72.1 mg, 94%: m/z 366 [M+H]<+>.
Jedinjenje 77f: 125 mg, kvantitativan: m/z 362 [M+H]<+>.
Jedinjenje 77g: 170 mg, 95%: m/z 378 [M+H]<+>.
Jedinjenje 77h: 84.0 mg, 94%: m/z 362 [M+H]<+>.
Jedinjenje 77i: 66.0 mg, 87%: m/z 378 [M+H]<+>.
Jedinjenje 77j: 125 mg, kvantitativan: m/z 362 [M+H]<+>.
Jedinjenje 77k: 130 mg, kvantitativan: m/z 378 [M+H]<+>.
Jedinjenje 771: 150 mg, kvantitativan: m/z 366 [M+H]<+>.
Tabela 6. Jedinjenja 78a-781 (Šema 16).
[0206] Opšti postupak E: Jedinjenje 77 (videti Tabelu 6 za količinu) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (videti Tabelu 6 za količinu) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran fiziološkim rastvorom, zatim suđen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 78a: 220 mg, kvantitativan: m/z 382, 384 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 78b: 170 mg, 95%: m/z 382, 384 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 78c: 180 mg, kvantitativan: m/z 382, 384 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 78d: 88 mg, kvantitativan: m/z 366 [M+H]<+>.
Jedinjenje 78e: 93.4 mg, kvantitativan: m/z 366 [M+H]<+>.
Jedinjenje 78f: 120 mg, 96%: m/z 362 [M+H]<+>.
Jedinjenje 78g: 170 mg, kvantitativan: m/z 378 [M+H]<+>.
Jedinjenje 78h: 71.5 mg, 86%: m/z 362 [M+H]<+>.
Jedinjenje 78i: 72.0 mg, kvantitativan: m/z 378 [M+H]<+>.
Jedinjenje 78j: 110 mg, 88%: m/z 362 [M+H]<+>.
Jedinjenje 78k: 130 mg, kvantitativan: m/z 378 [M+H]<+>.
Jedinjenje 781: 150 mg, kvantitativan: m/z 366 [M+H]<+>.
Tabela 7. Jedinjenja Šeme 16.
[0207] Opšti postupak F: Jedinjenje 78 (videti Tabelu 7 za količinu) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je dibromodimetilhidantoin (videti Tabelu 7 za količinu) i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin (videti Tabelu 7 za količinu) i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobili odgovarajući derivati:
TX63485: 125 mg, 57%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.20-7.48 (m, 4H), 3.81 (s, 3H), 2.68 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.51-2.61 (m, 1H), 2.24 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.82-1.99 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 380, 382 (3:1) [M+H]<+>.
TX63486: 89 mg, 53%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.48 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.28 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.80 (s, 3H), 2.66 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.50-2.60 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 12.0, 2.0 Hz), 1.82-1.99 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 380, 382 (3:1) [M+H]<+>.
TX63491: 120 mg, 67%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.56 (s, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.45-7.25 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 2.60-2.39 (m, 2H), 2.29-2.20 (m, 1H), 1.91-1.85 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.31 (s, 3H); m/z 380, 382 (3:1) [M+H]<+>.
TX63506: 22.5 mg, 26%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.45-7.52 (m, 1H), 7.10-7.18 (m, 2H), 7.04-7.08 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.69 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.52-2.62 (m, 1H), 2.24 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.83-1.98 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 364 [M+H]<+>.
TX63507: 26.9 mg, 37%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.16-7.28 (m, 2H), 7.28-7.30 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.66 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.49-2.58 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 8.0, 2.0 Hz), 1.82-1.97 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 364 [M+H]<+>.
TX63508: 40 mg, 34%:<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.52 (s, 1H), 7.16-7.45 (m, 4H), 7.06 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 2.45-2.60 (m, 2H), 2.22 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.75-1.93 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 360 [M+H]<+>.
TX63509: 35 mg, 21%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.57 (s, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.23-7.18 (m, 1H), 7.08-7.03 (m, 2H), 3.85 (br s, 3H), 3.69 (s, 3H), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.27 (m, 1H), 1.89 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 376 [M+H]<+>.
TX63512: 22.2 mg, 31%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.38 (t, 1H, J = 4.0 Hz), 7.10-7.31 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 2.68 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.53-2.62 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.25 (dd, 1H, J = 8.0, 2.0 Hz), 1.82-1.96 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 360 [M+H]<+>.
TX63513: 17.1 mg, 24%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.43 (t, 1H, J = 12.0 Hz), 6.85-7.01 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.70 (dd, 1H, J = 12.0, 4.0 Hz), 2.52-2.62 (m, 1H), 2.25 (dd, 1H, J = 12.0, 2.0 Hz), 1.82-1.98 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 376 [M+H]<+>.
TX63514: 60 mg, 55%:<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.50 (s, 1H), 7.29-7.38 (m, 4H), 3.75 (s, 3H), 2.47-2.62 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.23 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 1.76-1.93 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 381 [M+H]<+>.
TX63515: 50 mg, 39%:<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.50 (s, 1H), 7.38 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.06 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 2.45-2.60 (m, 2H), 2.22 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.75-1.93 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 376 [M+H]<+>.
TX63519: 75 mg, 50%:<1>H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 8.51 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.43-7.34 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 2.45 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 1.84 (m, 2H), 1.47 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 364 [M+H]<+>.
Jedinjenje 79a: Smeša jedinjenja 68 (270 mg, 0.73 mmol), 3-piridinilboronske kiseline (1.5 ekviv.), PH3P (0.2 ekviv.), K3PO4(3.0 ekviv.) i DME je poprskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(0.1 ekviv.) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakcija je zagrevana do 85°C u trajanju od 9 časova. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 79a (70 mg, 26%) kao čvrsta supstanca. m/z 368 [M+H]<+>.
Jedinjenje 79b: Jedinjenje 68 (290 mg, 0.79 mmol) je reagovalo sa 4-piridinilboronskom kiselinom upotrebom istog postupka korišćenog za proizvodnju 79a da bi se dobilo jedinjenje 79b (140 mg, 49%) kao čvrsta supstanca. m/z 368 [M+H]<+>.
Jedinjenje 80a: Jedinjenje 79a (70 mg, 0.19 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 80a (60 mg, 97%) kao čvrsta supstanca. m/z 324 [M+H]<+>.
Jedinjenje 80b: Jedinjenje 79b (140 mg, 0.38 mmol) je podvrgnuto istom postupku korišćenom za pripremu 80a da bi se dobilo jedinjenje 80b (130 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 324 [M+H]<+>.
Jedinjenje 81a: Jedinjenje 80a (60 mg, 0.19 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor), ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 25 mL) i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 81a (70 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 352 [M+H]<+>.
Jedinjenje 81b: Jedinjenje 80b (130 mg, 0.38 mmol) je podvrgnuto istom postupku za pripremu 81a da bi se dobilo 81b (135 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 352 [M+H]<+>.
Jedinjenje 82a: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 81a (70 mg, 0.19 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa etil acetatom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 82a (70 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 349 [M+H]<+>.
Jedinjenje 82b: Jedinjenje 81b (135 mg, 0.38 mmol) je podvrgnuto istom postupku korišćenom za pripremu 82a da bi se dobilo 82b (135 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 349 [M+H]<+>.
Jedinjenje 83a: Jedinjenje 82a (70 mg, 0.19 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 83a (70 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 349 [M+H]<+>.
Jedinjenje 83b: Jedinjenje 82b (135 mg, 0.38 mmol) je podvrgnuto istom postupku korišćenom za pripremu 83a da bi se dobilo jedinjenje 83b (135 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 349 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63503: Jedinjenje 83a (65 mg, 0.19 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je Br2i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 35 % EtOAc u heksanima sa 0.5% Et3N) da bi se dobilo jedinjenje TX63503 (20 mg, 31%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.69 (dd, 1H, J = 1.5, 4.8 Hz), 8.64 (d, 1H, J = 1.4 Hz), 8.53 (s, 1H), 7.69 (td, 1H, J = 1.8, 7.9 Hz), 7.46 (dd, 1H, J = 4.9, 7.3 Hz), 3.83 (s, 3H), 2.70 (dd, 1H, J = 4.8, 16.0 Hz), 2.58 (ddd, 1H, J = 6.8, 11.6, 15.9 Hz), 2.25 (dd, 1H, J = 1.9, 11.9 Hz), 1.92 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 347 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63505: Jedinjenje 83b (135 mg, 0.38 mmol) je podvrgnuto istom postupku korišćenom za pripremu TX63503 da bi se dobilo jedinjenje TX63505 (35 mg, 27%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 8.71 (d, 2H, J = 4.6 Hz), 8.51 (s, 1H), 7.51 (d, 2H, J = 4.5 Hz), 3.85 (s, 3H), 2.63 (m, 2H), 2.24 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.86 (m, 2H), 1.46 (s, 3H), 1.23 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 347 [M+H]<+>.
Jedinjenje 84: Jedinjenje 18 (1.04 g, 4.64 mmol) je apsorbovano u t-BuOH i dodato u rastvor KOt-Bu u t-BuOH. Reakcija je mešana 5 min na sobnoj temperaturi i dodat je 1,4-dibromobutan. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 80 min, zatim zagrevana do 45°C sve dok početni materijal nije potrošen, kao što je zableženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Reakciona smeša je koncentrovana, razblažena vodom, i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 10 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 84 (1.006 g, 78%) kao ulje. m/z 279 [M+H]<+>.
Jedinjenje 85: Jedinjenje 84 (1.561 g, 5.61 mmol) je apsorbovano u EtOH pod N2i dodat je 20% Pd(OH)2. Boca Parr mućkalice je snažno poprskana sa H2i napunjena na 54 psi. Boca je mućkana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel 6 do 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 85 (0.493 g, 31%) kao ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.72 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 4.59 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 3.38 (s, 3H), 3.11 (dd, 1H, J = 4.2, 11.6 Hz), 2.76 (dt, 1H, J = 5.9, 15.0 Hz), 2.44 (td, 1H, J = 7.5, 13.0 Hz), 2.32 (td, 1H, J = 3.4, 15.0 Hz), 2.22 (ddd, 1H, J = 2.9, 5.8, 13.8 Hz), 1.87 (m, 2H), 1.79 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.50 (m, 8H), 1.30 (m, 3H), 1.12 (s, 3H).
Jedinjenje 86: Smeša jedinjenja 85 (460 mg, 1.64 mmol), etilen glikola i hidrata ptoluensulfonske kiseline u toluenu zagrevana je do refluksa preko noći sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, razblažena sa EtOAc, isprana zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 86 (497 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 263 (M-H2O+1).
Jedinjenje 87: Jedinjenje 86 (497 mg, 1.64 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2i dodavan je piridinijum dihromat tokom 10 min. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim zagrevana do 45°C sve dok početni materijal nije potrošen, kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit, eluirana sa CH2Cl2, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 87 (359 mg, 73%) kao čvrsta supstanca. m/z 279 [M+H]<+>.
Jedinjenje 88: Jedinjenje 87 (352 mg, 1.26 mmol) je apsorbovano u etil formatu i hlađeno do 0°C, zatim je dodat 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakcija je zagrevana do sobne temperature. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i pH je podešen do 7 sa sirćetnom kiselinom. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 88 (384 mg, 99%) kao čvrsta supstanca. m/z 307 [M+H]<+>.
Jedinjenje 89: Smeša 88 (227 mg, 0.74 mmol) i metil hidrazina (2.7 ekviv.) u etanolu (100 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, zatim zagrevana do 60°C u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je triturisan sa etrom/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje 89 (176 mg, 75%) kao čvrsta supstanca. m/z 317 [M+H]<+>.
Jedinjenje 90: Jedinjenje 89 (93 mg, 0.29 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 90 (83 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 273 [M+H]<+>.
Jedinjenje 91: Jedinjenje 90 (80 mg, 0.29 mmol) je apsorbovano u etil formatu i hlađeno do 0°C, zatim je dodat 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakcija je zagrevana do sobne temperature. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor), ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 91 (89 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 301 [M+H]<+>.
Jedinjenje 92: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 91 (87 mg, 0.29 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 92 (83 mg, 96%) kao čvrsta supstanca. m/z 298 [M+H]<+>.
Jedinjenje 93: Jedinjenje 92 (77 mg, 0.26 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 6 časa i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4(vodeni rastvor), i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 93 (81 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 298 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63487: Jedinjenje 93 (81 mg, 0.26 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen, kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63487 (29 mg, 38%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.78 (dd, 1H, J = 4.8, 14.9 Hz), 2.55 (ddd, 1H, J = 7.5, 11.6, 15.3 Hz), 2.33 (dd, 1H, J = 2.8, 10.9 Hz), 2.27 (m, 1H), 1.83 (m, 5H), 1.63 (m, 3H), 1.44 (s, 3H), 1.27 (m, 1H); m/z 296 [M+H]<+>.
Jedinjenje 94: Jedinjenje 89 (159 mg, 0.50 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2, i dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin. Smeša je mešana 2 časa na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana, razblažena sa EtOAc, isprana zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i fiziološkim rastvorom, zatim sušena preko MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 94 (123 mg,62%) kao čvrsta supstanca. m/z 395, 397 (1:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 95: Smeša jedinjenja 94 (121 mg, 0.31 mmol), fenilboronske kiseline (56 mg, 0.46 mmol), PH3P (18 mg, 0.07 mmol), K3PO4(210 mg, 0.99 mmol) i DME (10 mL) je poprskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(16 mg, 0.07 mmol) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakcija je zagrevana do 85°C u trajanju od 12 časova. Reakciona smeša je filtrirana kroz MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 95 (88 mg, 73%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 393 [M+H]<+>.
Jedinjenje 96: Jedinjenje 95 (84 mg, 0.21 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 96 (79 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 349 [M+H]<+>.
Jedinjenje 97: Jedinjenje 96 (75 mg, 0.21 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 97 (38 mg, 47%) kao čvrsta supstanca. m/z 377 [M+H]<+>.
Jedinjenje 98: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 97 (38 mg, 0.10 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 98 (38 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 374 [M+H]<+>. Jedinjenje 99: Jedinjenje 98 (38 mg, 0.10 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 6 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 99 (40 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 374 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63504: Jedinjenje 99 (40 mg, 0.10 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen, kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63504 (14 mg, 37%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.50 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 7.44 (t, 1H, J = 6.7 Hz), 7.34 (d, 2H, J = 7.0 Hz), 3.82 (s, 3H), 2.67 (d, 1H, J = 6.2 Hz), 2.56 (m, 1H), 2.40 (d, 1H, J = 10.4 Hz), 2.28 (m, 1H), 1.84 (m, 5H), 1.65 (m, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.28 (m, 1H); m/z 372 [M+H]<+>.
Jedinjenje 48 i 100: Jedinjenje 26 (100 mg, 0.36 mmol) je apsorbovano u toluenu (10 ml), poprskano sa N2u trajanju od 5 min, i dodat je fenilhidrazin (38 1,0.38 mmol). Bočica je hermetički zatvorena i reakcija je mešana na 75°C preko noći. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u toluenu (10 mL) i dodat je hidrat p-toluensulfonske kiseline (12 mg, 0.06 mmol), zatim je smeša poprskana sa N2u trajanju od 3 min. Reakcija je mešana na 80°C preko noći, zatim na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se dobila smeša jedinjenja 48 i 100: m/z 353 [M+H]<+>.
Jedinjenja 50 i 101: Smeša jedinjenja 48 i 100 je apsorbovana u metanolu, i dodat je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc (50 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 do 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 50 (19 mg, 17%) i jedinjenje 101 (57.1 mg, 52%) kao čvrste supstance: m/z 309 [M+H]<+>.
Jedinjenje 102: Jedinjenje 101 (50.4 mg, 0.16 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 102 (61.4 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 337 [M+H]<+>.
Jedinjenje 103: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 102 (61.4 mg, 0.16 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 103 (48.5 mg, 89%) kao čvrsta supstanca. m/z 334 [M+H]<+>.
Jedinjenje 104: Jedinjenje 103 (47.5 mg, 0.14 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 6 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 104 (42.5 mg, 89%) kao čvrsta supstanca. m/z 334 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63524: Jedinjenje 104 (42.5 mg, 0.13 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63524 (11.8 mg, 28%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.60 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.45 (m, 2H), 2.86 (ddd, 1H, J = 1.1, 5.7, 15.9 Hz), 2.65 (ddd, 1H, J = 6.7, 12.0, 16.1 Hz), 2.32 (dd, 1H, J = 1.9, 11.9 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); mlz 332 [M+H]<+>.
Jedinjenje 105: Jedinjenje 26 (0.282 g, 1.0 mmol) je apsorbovano u 0.1 M hidroksilamin hidrohloridu u 9:1 EtOH/H2O (11 mL, 1.1 mmol) i dodat je trietilamin (0.15 mL, 1.1 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Reakciona smeša je kratko zagrevana do 45°C i mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrevana do 60°C kratko da bi se osigurala ciklizacija i zatim je koncentrovana, razblažena sa EtOAc, sušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do stakla. m/z [M+H]<+>278.1
U rastvor gore navedenog intermedijera (305 mg, 1.1 mmol) u THF i MeOH (2:1), dodat je 30% NaOMe (8 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa KH2PO4(sat.) i ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 105 (0.297 g). m/z [M+H]<+>278.1. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku.
Jedinjenje 106: Jedinjenje 105 (0.297 g, 1.1 mmol) je apsorbovano u EtOH (20 mL) i ukapavanjem je dodat metilhidrazin (0.15 g, 3.26 mmol) kao rastvor u EtOH (1 mL) na sobnoj temperaturi. Reakcija je zagrevana preko noći i dodatnih šest časova na refluksu. Reakciona smeša je hlađena i koncentrovana. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 18 g) upotrebom 3:1, zatim 1:1, heksana/EtOAc kao eluanta. Jedinjenje 106 (62 mg, 18%) je dobijeno kao staklo. m/z [M+H]<+>306.2.
Jedinjenje 107: Jedinjenje 106 (0.062 g, 0.20 mmol) je rastvoreno u EtOAc (7 mL). Dodat je trietilamin (0.06 mL, 0.4 mmol), a zatim je dodat bezoil hlorid (0.069 g, 0.49 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL), sušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do tamnog ulja da bi se dobilo jedinjenje 107 (0.1145 g) koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. m/z [M+H]<+>410.3.
Jedinjenje 108: Rastvor 107 (114.5 mg, 0.28 mmol) u MeOH (5 mL) je tretiran sa 3N HCl (vodeni rastvor), mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL) i zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor). Organski sloj je sušen sa MgSO4, koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 108 (57 mg, 57%). m/z [M+H]<+>366.2.
Jedinjenje 109: U rastvor 108 (57 mg, 0.16 mmol) u 2 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sa zasićenim rastvorom KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 109 (63 mg) koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. m/z [M+H]<+>394.2.
Jedinjenje 110: U rastvor 109 (0.063 g, 0.16 mmol) u 2 mL EtOH, dodata je NH2OH· HCl so (2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 110 (0.0613 g) koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. m/z [M+H]<+>391.2.
Jedinjenje 111: U rastvor jedinjenja 110 (0.0613 g, 0.16 mmol) u THF i MeOH (2:1), dodat je 30% NaOMe (8 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa KH2PO4(sat.) i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 111 (0.0493 g) koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. m/z [M+H]<+>391.2.
Jedinjenje TX63531: U rastvor 111 (0.0493 g, 0.13 mmol) u 1 mL DMF na 0°C, dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (30 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 2:1 DCM/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63531 (5.8 mg, 11%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 7.88 (d, 2H, J = 4.3 Hz), 7.60 (t, 1H, J = 5.6 Hz), 7.54 (br s, 1H), 7.51 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.60 (m, 1H), 2.44 (m, 1H), 2.14 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 1.79-1.66 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.07 (s, 3H); m/z [M+H]<+>389.2.
Jedinjenje TX63524: Jedinjenje 104 (42.5 mg, 0.13 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63524 (11.8 mg, 28%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.60 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.45 (m, 2H), 2.86 (ddd, 1H, J = 1.1, 5.7, 15.9 Hz), 2.65 (ddd, 1H, J = 6.7, 12.0, 16.1 Hz), 2.32 (dd, 1H, J = 1.9, 11.9 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H). m/z 332 [M+H]<+>.
Jedinjenje 112: Rastvor 17 (6.4 g, 36 mmol) u THF (25 mL) je dodat u -78°C rastvor litijuma (2 ekviv.) u tečnom NH3(10 mL). Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 45 min, ugašena sa NH4Cl (10 g), i zagrevana do sobne temperature. Smeša je razblažena vodom, ekstrahovana sa EtOAc, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 112 (1.5 g, 23%) kao ulje. m/z 183 [M+H]<+>.
Jedinjenje 113: Smeša jedinjenja 112 (1.5 g, 8.2 mmol), etilen glikola i hidrata ptoluensulfonske kiseline u benzenu je zagrevana do refluksa u trajanju od 4 časa sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, isprana vodom, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 113 (1.4 g, 75%) kao ulje. m/z 227 [M+H]<+>.
Jedinjenje 114: Jedinjenje 113 (1.4 g, 6.2 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2(100 mL), zatim su dodati MgSO4(150 mg) i PDC (2 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 dana. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od silike (eluirana sa CH2Cl2) i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 114 (1.25 g, 90%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 225 [M+H]<+>.
Jedinjenje 115: Jedinjenje 114 (1.25 g, 5.57 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana vodom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 115 (1.35 g, 96%) kao čvrsta supstanca. m/z 253 [M+H]<+>.
Jedinjenje 116: Smeša jedinjenja 115 (1.35 g, 5.35 mmol) i metil hidrazina (1.6 ekviv.) u etanolu je zagrevana do 60°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje 116 (1.2 g, 85%) kao čvrsta supstanca. m/z 263 [M+H]<+>.
Jedinjenje 117: Jedinjenje 116 (1.2 g, 4.6 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2i dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.55 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je isprana sa 1 N Na2CO3i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 117 (1.0 g, 64%) kao čvrsta supstanca. m/z 341, 343 (1:1) [M+H]<+>. Jedinjenje 118: Smeša jedinjenja 117 (1.0 g, 2.9 mmol), fenilboronske kiseline (1.25 ekviv.), PH3P (0.3 ekviv.), K3PO4(3 ekviv.) i DME je poprskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(0.15 ekviv.) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakcija je zagrevana do 85°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 118 (0.53 g, 53%) kao ulje. m/z 339 [M+H]<+>.
Jedinjenje 119: Jedinjenje 118 (0.53 g, 1.6 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 119 (0.42 g, 91%) kao čvrsta supstanca. m/z 295 [M+H]<+>.
Jedinjenje 120: Jedinjenje 119 (0.42 g, 1.4 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 120 (0.44 g, 96%) kao čvrsta supstanca. m/z 323 [M+H]<+>.
Jedinjenje 121: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i jedinjenja 120 (0.44 g, 1.4 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa EtOAc, zatim ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 121 (445 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 320 [M+H]<+>.
Jedinjenje 122: Jedinjenje 121 (445 mg, 1.4 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 122 (440 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 320 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63540: Jedinjenje 122 (440 mg, 1.4 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 15 do 35 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63540 (120 mg, 28%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.55 (s, 1H), 7.50 (t, 2H, J = 8.1 Hz), 7.45 (m, 1H), 7.35 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 3.83 (s, 3H), 2.64 (m, 4H), 2.51 (ddt, 1H, J = 1.7, 5.7, 12.3 Hz), 1.89 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 1.48 (s, 3H); m/z 318 [M+H]<+>.
Jedinjenje 123: Jedinjenje 1 (30.0 g, 238 mmol) je suspendovana u acetonitrilu i smeša je hlađena do 0°C. Dodati su etil vinil keton (25 g, 297 mmol) i trietil amin (53 ml, 380 mmol) i reakcija je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc i ispran sa KH2PO4(vodeni rastvor) i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u benzenu (250 mL), dodat je pirolidin (5.0 ml, 60 mmol) i reakcija je zagrevana do refluksa u trajanju od 48 časova sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, ispran zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 20% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo žuto ulje. Ulje je kristalizovano iz hladnog t-BuOMe (50 mL) da bi se dobilo jedinjenje 123 (18.59 g, 41%) kao bela čvrsta supstanca.
Jedinjenje 124: Rastvor NaBH4(0.64 g, 17 mmol) u etanolu (100 mL) je dodat u 0°C rastvor jedinjenja 123 (12.97 g, 67.5 mmol) u etanolu (100 mL). Reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 45 i ugašena sirćetnom kiselinom (7.7 mL, 135 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 1 časa, zatim koncentrovana. Ostatak je razblažen sa 10% NH4OH (vodeni rastvor) i ekstrahovan sa EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 124 (7.28 g, 56%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. m/z 195 [M+H]<+>.
Jedinjenje 125: Rastvor 124 (6.1 g, 31 mmol) u THF (25 mL) je dodat u -78°C rastvor litijuma (2 ekviv.) u tečnom NH3(10 mL). Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 45 min, ugašena sa NH4Cl (10 g), i zagrevana do sobne temperature. Smeša je razblažena vodom, ekstrahovana sa EtOAc, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 125 (1.7 g, 28%) kao ulje. m/z 197 [M+H]<+>.
Jedinjenje 126: Smeša jedinjenja 125 (1.7 g, 8.7 mmol), etilen glikola i hidrata ptoluensulfonske kiseline u benzenu je zagrevana do refluksa u trajanju od 4 časa sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, isprana vodom, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 126 (1.3 g, 62%) kao ulje. m/z 241 [M+H]<+>.
Jedinjenje 127: Jedinjenje 126 (1.3 g, 6.2 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2(100 mL), zatim su dodati MgSO4(150 mg) i PDC (2 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 d. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od silike (eluirana sa CH2Cl2) i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 127 (1.18 g, 92%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 239 [M+H]<+>.
Jedinjenje 128: Jedinjenje 127 (0.67 g, 2.8 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana vodom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 128 (0.75 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 267 [M+H]<+>.
Jedinjenje 129: Smeša jedinjenja 128 (0.75 g, 2.8 mmol) i metil hidrazina (1.6 ekviv.) u etanolu je zagrevana do 60°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje 129 (613 mg, 79%) kao čvrsta supstanca. m/z 277 [M+H]<+>.
Jedinjenje 130: Jedinjenje 129 (0.61 g, 2.2 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2i dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.55 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je isprana sa 1 N Na2CO3i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo 130 (580 mg, 74%) kao čvrsta supstanca. m/z 355, 357 (1:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 131: Smeša jedinjenja 130 (0.58 g, 1.6 mmol), fenilboronske kiseline (1.25 ekviv.), PH3P (0.3 ekviv.), K3PO4(3 ekviv.) i DME je prskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(0.15 ekviv.) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakcija je zagrevana do 85°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 131 (360 mg, 63%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. m/z 353 [M+H]<+>.
Jedinjenje 132: Jedinjenje 131 (0.33 g, 0.94 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 132 (300 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 309 [M+H]<+>.
Jedinjenje 133: Jedinjenje 132 (0.30 g, 0.94 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 133 (300 mg, 95%) kao čvrsta supstanca. m/z 337 [M+H]<+>.
Jedinjenje 134: Smeša hidroksilamine hidrohlorida i 133 (0.30 g, 0.89 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa EtOAc, zatim ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 134 (300 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 334 [M+H]<+>.
Jedinjenje 135: Jedinjenje 134 (0.30 g, 0.89 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 135 (300 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 334 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63541: Jedinjenje 135 (0.30 g, 0.89 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 15 do 35 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63541 (97 mg, 33%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.45 (tt, 1H, J = 2.1, 7.3 Hz), 7.35 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.61 (m, 3H), 2.15 (dt, 1H, J = 2.1, 12.7 Hz), 2.04 (m, 1H), 1.75 (qd, 1H, J = 6.6, 12.7 Hz), 1.50 (s, 3H), 1.33 (s, 3H); m/z 332 [M+H]<+>.
Jedinjenja TX63791 i TX63792: Enantiomeri jedinjenja TX63541 (488.9 mg) su odvojeni upotrebom hiralne HPLC (CHIRALPAK IA, 5µ, 30x250 mm, 2:50:50 EtOH/EtOAc/heksan) da bi se dobila dva dobro razdvojena pika. Jedan je na 3.98 min, koji je dao TX63791 (206.2 mg, 99.6% ee).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.59 (m, 3H), 2.12 (t, 1H, J = 12.6 Hz), 2.01 (m, 1H), 1.73 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.0 Hz). I drugi je na 5.04 min, koji je dao TX63792 (220.7 mg, 99.8% ee).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.59 (m, 3H), 2.12 (t, 1H, J = 12.6 Hz), 2.01 (m, 1H), 1.73 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.0 Hz).
Jedinjenje 136a-b: Jedinjenje 48 (0.360 g, 1.02 mmol) je apsorbovano u DCM (30 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (0.169 g, 0.59 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 24 g) upotrebom 10% EtOAc/heksana da bi se dobilo jedinjenje 136b (0.1057 g), m/z 433.0, [M+H]<+>; i 136a (0.1141 g). m/z 389.0, [M+H]<+>.
Jedinjenje 137: Smeša 136a (105.7 mg) i 136b (114.1 mg) je apsorbovana u DME. Dodati su PhB(OH)2(1.5 ekv.), PH3P (0.2 ekv.) i K3PO4(3.0 ekv.) i smeša je barbotirana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(0.1 ekv.) i smeša je barbotirana sa N2u trajanju od 10 min. Zatim je smeša mešana na 85°C u trajanju od 9 časova. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni da bi se dobili odgovarajući unakrsno spojeni proizvodi kao smeša (a: 81.6 mg, b: 37.4 mg), koja je apsorbovana u MeOH i dodata je HCl (vodeni, 3N). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 137 (108.9 mg). m/z [M+H]<+>385.1.
Jedinjenje 138: Jedinjenje 137 (0.116 g, 0.30 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor), ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL) i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 138 (134.2 mg, 100%). m/z [M+H]<+>413.1.
Jedinjenje 139: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 117 (0.134 g, 0.33 mmol) u EtOH je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 139 (124.9 mg, 94%), m/z [M+H]<+>410.2.
Jedinjenje 140: Jedinjenje 139 (0.1249 g, 0.31 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 MeOH/THF i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 140 (119.5 mg, 94%), m/z [M+H]<+>410.2.
Jedinjenje TX63544: Jedinjenje 140 (0.1195 g, 0.29 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5-30 % EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63544 (60.9 mg, 52%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.60 (s, 1H), 7.31-7.28 (m, 5H), 7.26-7.21 (m, 3H), 7.15-7.13 (m, 2H), 2.80 (dd, 1H, J = 5.1, 16.4 Hz), 2.67-2.60 (m, 1H), 2.28 (dd, 1H, J = 2.1, 11.6 Hz), 1.98-1.86 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); mlz [M+H]<+>408.2.
Jedinjenje 141a: Smeša jedinjenja 68 (0.23 g, 0.62 mmol), izopropenil pinakol boronata (1.25 ekviv.), PH3P (0.3 ekviv.), K3PO4(3 ekviv.) i DME je prskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(0.15 ekviv.) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakcija je zagrevana do 85°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 do 30 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 141a (85 mg, 41%) kao čvrsta supstanca. m/z 331 [M+H]<+>.
Jedinjenje 142a: Jedinjenje 141a (85 mg, 0.26 mmol) je apsorbovano u THF pod N2i dodat je 10% Pd/C. Bočica je snažno prečišćena sa H2i mešana u trajanju od 2 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 142a (85 mg, 99%) kao čvrsta supstanca. m/z 333 [M+H]<+>.
Jedinjenje 143a: Jedinjenje 142a (85 mg, 0.26 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 143a (70 mg, 95%) kao čvrsta supstanca. m/z 289 [M+H]<+>.
Jedinjenje 144a: Jedinjenje 143a (70 mg, 0.24 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 144a (80 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 317 [M+H]<+>.
Jedinjenje 145a: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 144a (80 mg, 0.24 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa EtOAc, zatim ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 145a (80 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 314 [M+H]<+>.
Jedinjenje 146a: Jedinjenje 145a (80 mg, 0.24 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 146a (75 mg, 99%) kao čvrsta supstanca. m/z 314 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63547: Jedinjenje 146a (75 mg, 0.24 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 15 do 35 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63547 (11 mg, 15%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.05 (septet, 1H, J = 7.0 Hz), 2.84 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.7, 15.7 Hz), 2.58 (ddd, 1H, J = 7.0, 11.7, 15.7 Hz), 2.16 (dd, 1H, J = 2.1, 11.9 Hz), 1.88 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.29 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.24 (s, 3H); m/z 312 [M+H]<+>.
Jedinjenje 141b: Jedinjenje 68 (0.371 g, 1.00 mmol), K2CO3(0.417 g, 3.02 mmol), pinakol estar 1-cikloheksenilboronske kiseline (0.269 g, 0.23 mmol) i dioksan (15 mL) su mešani i reakcija je prskana sa N2u trajanju od 2-3 minuta. Dodat je Pd(dppf)Cl2(0.079 g, 0.097 mmol) i reakcija je prskana sa N2oko 5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 100°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(30 mL), slojevi su odvojeni i organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do ulja. Ulje je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 19 g) upotrebom 20% EtOAc/heksana da bi se dobilo jedinjenje 141b (151 mg, 40%) kao staklo/bela čvrsta supstanca. m/z [M+H]<+>371.2.
Jedinjenje 142b: Jedinjenje 141b (0.147 g, 0.40 mmol) je apsorbovano u EtOH (20 mL), i bočica je isprana gasovitim azotom. Dodat je 10% Pd/C (0.035 g) i bočica je ispražnjena i isprana sa H2tri puta i mešana preko noći plus 6 časova pod balonom H2na sobnoj temperaturi. Katalizator je otfiltriran i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 142b (139 mg, 93%) kao bistra pena/staklo, m/z [M+H]<+>373.1.
Jedinjenje 143b: Jedinjenje 142b (0.139 g, 0.37 mmol) je tretirano prema postupku za 37a da bi se dobilo jedinjenje 143b (110.6 mg, 92%) kao staklo/čvrsta supstanca. m/z [M+H]<+>329.1.
Jedinjenje 144b: Jedinjenje 143b (0.1106 g, 0.34 mmol) je tretirano prema postupku za 143a da bi se dobilo jedinjenje 144a (128 mg, kvantitativan). m/z [M+H]<+>357.1.
Jedinjenje 145b: Jedinjenje 144b (0.128 g, 0.36 mmol) je tretirano prema postupku za 144a da bi se dobilo jedinjenje 145a (111.4 mg, 89%) kao pena. m/z [M+H]<+>354.1.
Jedinjenje 146b: Jedinjenje 145b (0.1114 g, 0.32 mmol) je tretirano prema postupku za 145a da bi se dobilo jedinjenje 146a (111.7 mg, 97%). m/z [M+H]<+>354.0.
Jedinjenje TX63591: Jedinjenje 146b (0.111 g, 0.31 mmol) je tretirano prema postupku za 146a da bi se dobilo jedinjenje TX63547 i podvrgnuto je hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 12 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc i podvrgnuto je hromatografiji drugi put na silika gelu (230-400 mreža, 8 g) upotrebom 5% metil terc-butiletra u DCM da bi se dobilo jedinjenje TX63591 (14 mg, 12%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.82 (dd, 1H, J = 15, 5 Hz), 2.51-2.62 (m, 2H), 2.12 (dd, 1H, J=10, 2.5 Hz), 1.74-1.89 (m, 7H), 1.50-1.58 (m, 3H), 1.46 (s, 3H), 1.29-1.37 (m, 2H), 1.25 (s, 3H), 1.23 (s, 3H).
Jedinjenje 147: Jedinjenje 68 (0.151 g, 0.41 mmol), K2CO3(0.176 g, 1.29 mmol), pinakol estar benzilboronske kiseline (0.176 g, 0.8 mmol), Pd(dppf)Cl2(0.038 g, 0.0046 mmol) i dioksan (8 mL) su reagovali pod azotom na 90°C u trajanju od 1.5 časa i zatim preko noći na 100°C. Dodato je još Pd(dppf)Cl2(0.041 g, 0.005 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 120°C preko noći i prečišćena pomoću hromatografije na silika gelu (230-400 mreža, 9.9 g) eluiranjem sa 5:1 heksana/EtOAc, zatim 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje 147 kao smeša sa dehalogenisanim početnim bromopirazolom kao ulje, (0.0736 g), m/z [M+H]<+>381.1.
Jedinjenje 148: Jedinjenje 147 (73.6 mg, 0.19 mmol) je apsorbovano u MeOH, i dodata je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 148 (58.8 mg) kao čvrsta supstanca. m/z 337.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 149: Jedinjenje 148 (58.8 mg, 0.18 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor), ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL) i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 149 (74 mg) kao čvrsta supstanca. Ovo je korišćeno direktno u sledećem koraku.
Jedinjenje 150: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 149 (74 mg, 0.2 mmol) u EtOH je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 150 (71 mg) kao čvrsta supstanca. m/z 362.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 151: Jedinjenje 150 (71 mg, 0.2 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 MeOH/THF i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 11 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje 151 (23 mg) kao čvrsta supstanca. m/z [M+H]<+>362.1.
Jedinjenje TX63550: Jedinjenje 151 (23 mg, 0.063 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je Br2i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (230-400 mreža, 7g) upotrebom 50% heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63550 (8.3 mg).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.28 (dd, 2H, J = 7.3, 7.5 Hz), 7.21 (t, 1H, J = 7.3 Hz), 7.04 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 3.90 (s, 2H), 3.65 (s, 3 H), 2.57 (dd, 1H, J = 5.9, 15.8 Hz), 2.35 (m, 1H), 2.14 (dd, 1H, J = 1.9, 11.8 Hz), 1.90-1.77 (m, 2H), 1.47 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.20 (s, 3H); m/z [M+H]<+>360.1.
Jedinjenje 152: Jedinjenje 130 (355 mg, 1.28 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 152 (305 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 233 [M+H]<+>.
Jedinjenje 153: Jedinjenje 152 (305 mg, 1.28 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 153 (330 mg, 99%) kao čvrsta supstanca. m/z 261 [M+H]<+>.
Jedinjenje 154: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 153 (330 mg, 1.27 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovana sa EtOAc, zatim ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 154 (320 mg, 98%) kao čvrsta supstanca. m/z 258 [M+H]<+>.
Jedinjenje 155: Jedinjenje 154 (320 mg, 1.24 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 155 (320 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 258 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63551: Jedinjenje 155 (320 mg, 1.24 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 15 do 35 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63551 (120 mg, 38%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 6.3, 16.0 Hz), 2.57 (m, 2H), 2.09 (dt, 1H, J = 1.8, 12.4 Hz), 2.02 (dd, 1H, J = 7.1, 13.7 Hz), 1.74 (m, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.31 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z 256 [M+H]<+>.
Jedinjenje 156: Rastvor jedinjenja 1 (2.50 g, 19.8 mmol) i akrilamida (2.15 g, 30.2 mmol) u Et3N (50 mL) zagrevan je na 85°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i braon čvrsta supstanca je izolovana filtracijom. Sirova čvrsta supstanca je triturisana sa EtOAc da bi se dobilo jedinjenje 156 (3.77 g, 96%) kao svetlo braon čvrsta supstanca. m/z 198 [M+H]<+>.
Jedinjenje 157: Jedinjenje 156 (3.75 g, 19.0 mmol) je apsorbovano u HOAc (37.5 mL), podeljeno u 3 iste porcije i hermetički zatvoreno u mikrotalasnim bočicama. Svaka bočica je zagrevana do 160°C u trajanju od 1 časa u mikrotalasnom reaktoru. Reakcione smeše su spojene, razblažene sa EtOH (20 mL), i zagrevane do refluksa u trajanju od 20 min, zatim hlađene do sobne temperature. Smeša je filtrirana i filtrat je ispran sa EtOAc da bi se dobilo 157 (2.48 g, 73%) kao svetlo braon čvrsta supstanca. m/z 180 [M+H]<+>.
Jedinjenje 158: NaH (1.0 ekviv.) je dodat u 0°C rastvor 157 (1.5 g, 8.4 mmol) u DMF/THF (2.3/1, 30 mL) i smeša je mešana 45 min. Dodat je MeI (1.5 ekviv.) i reakcija je zagrevana do sobne temperature. Posle 1.5 časa na sobnoj temperaturi reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahovana sa CH2Cl2, zatim isprana vodom, sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 100 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo 158 (1.1 g, 68%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. m/z 194 [M+H]<+>.
Jedinjenje 159: Jedinjenje 158 (600 mg, 3.1 mmol) je apsorbovano u AcOH/vodi (19/1, 12 mL) pod N2i dodat je PtO2(120 mg). Bočica je snažno prečišćena sa H2i mešana u trajanju od 16 časova na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit, eluirana sa EtOAc, i koncentrovana. Sirovi ostatak je apsorbovan u CH2Cl2, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 159 (864 mg, kvantitativan) kao viskozno ulje. m/z 198 [M+H]<+>.
Jedinjenje 160: TPAP (107 mg, 0.30 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi smeši jedinjenja 159 (864 mg, 3.1 mmol), NMO (770 mg, 6.6 mmol), i 4 Å molekularnih sita (2 g) u CH2Cl2(40 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je filtrirana kroz čep od silike, eluirana sa acetonom/CH2Cl2(1/1, 100 mL) i koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u CH2Cl2, ispran sa 1 N HCl (vodeni rastvor) i vodom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 50 % Acetona u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 160 (480 mg, 79%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 196 [M+H]<+>.
Jedinjenje 161: Jedinjenje 160 (120 mg, 0.61 mmol) je apsorbovano u etil formatu, hlađeno do 0°C, i dodat je 25% natrijum metoksid (25 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana 1 čas na 0°C, zatim zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ugašena sa 12 N HCl (0.55 mL) i ekstrahovana sa CH2Cl2, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo sirovo jedinjenje 161: m/z 224 [M+H]<+>.
Jedinjenje 162: Smeša sirovog jedinjenja 161 i metil hidrazina (52 L, 0.98 mmol) u etanolu (6.1 mL) zagrevana je do 60°C u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 0 do 10 % MeOH u CH2Cl2) da bi se dobilo 162 (134 mg, 93%) kao ulje. m/z 234 [M+H]<+>.
Jedinjenje 163: Rastvor 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoina (107 mg, 0.37 mmol) u CH2Cl2(3 mL) je dodat u rastvor jedinjenja 162 (134 mg, 0.57 mmol) na sobnoj temperaturi u CH2Cl2(3 mL). Reakcija je mešana u trajanju od 5 časova na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je direktno prečišćena uzastopnom hromatografijom na koloni, prvo direktno punjena (silika gel, 0 do 70 % aceton u heksanima), zatim (silika gel, 0 do 5 % MeOH u CH2Cl2) da bi se dobilo 163 (87 mg, 49%) kao ulje. m/z 312, 314 (1:1), [M+H]<+>.
Jedinjenje 164: Smeša jedinjenja 163 (87 mg, 0.28 mmol), 3-fenilboronske kiseline (1.5 ekviv.), PH3P (0.2 ekviv.), K3PO4(3.0 ekviv.) i DME je prskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(0.1 ekviv.) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakciona bočica je hermetički zatvorena i zagrevana do 110°C u trajanju od 2.5 časa u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 65 % acetona u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 164 (82 mg, 95%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 310 [M+H]<+>.
Jedinjenje 165: Rastvor LDA (2.0 ekviv.) u THF je dodat u -78°C rastvor 164 (40 mg, 0.13 mmol) u THF (1.3 mL). Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 30 min, zatim je dodat rastvor PhSeCl (3 ekviv.) u THF (0.4 mL). Reakcija je mešana na -78°C dodatni 1 čas, zatim ugašena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor) i zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana vodom, sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 100 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 165 (27 mg, 45%) kao žuta čvrsta supstanca. m/z 466 [M+H]<+>.
Jedinjenje 166: Jedinjenje 165 (27 mg, 0.058 mmol) je apsorbovano u EtOAc/THF (3/1, 1.2 mL), i dodat je H2O2(30%, 5 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana zasićenim Na2SO3(vodeni rastvor) i vodom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 100 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 166 (16 mg, 90%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 308 [M+H]<+>.
Jedinjenje 167: Jod (2 ekviv.) je dodat u rastvor jedinjenja 166 (14.2 mg, 0.046 mmol) na sobnoj temperaturi u piridinu/CCl4(1/2, 0.69 mL). Reakciona smeša je mešana 5 časova na sobnoj temperaturi, zatim 16 časova na 50°C, i konačno 20 časova na 65°C. Reakcija je hlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc. Smeša je isprana zasićenim Na2SO3(vodeni rastvor), vodom, i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 100 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 167 (12 mg, 60%) kao žuta čvrsta supstanca. m/z 434 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63568: Jedinjenje 167 (11 mg, 0.036 mmol), Zn(CN)2(3 ekviv.) i Pd(PPH3)4(0.2 ekviv.) su apsorbovani u degazirani DMF (0.5 mL). Bočica je prečišćena sa N2, hermetički zatvorena i reakcija je mešana 20 min na 80°C. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 0 do 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63568 (7.5 mg, 89%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.49 (t, 2H, J = 7.0 Hz), 7.43 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 7.32 (d, 2H, J = 6.9 Hz), 3.88 (dd, 1H, J = 2.8, 13.2 Hz), 3.80 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 2.72 (ddd, 1H, J = 1.3, 6.6, 16.4 Hz), 2.63 (ddd, 1H, J = 6.6, 11.4, 16.3 Hz), 2.30 (m, 1H), 2.00 (m, 1H), 1.35 (s, 3H); m/z 333 [M+H]<+>.
Jedinjenje 169: Jedinjenje 25 (0.294 g, 1.17 mmol) je apsorbovano u DCM (50 mL). Dodati su MgBr-Et2O (0.777 g, 3.0 mmol) i iPr2EtN (0.4 mL, 2.3 mmol) uzastopno i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi oko 15 minuta, postepeno prelazeći u narandžastu boju. Ukapavanjem je dodat benzoil hlorid (0.342 g, 2.43 mmol) u DCM (2 mL) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NaHCO3, slojevi su odvojeni i organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do ulja da bi se dobilo sirovo jedinjenje 168. Ostatak je apsorbovan u EtOH (25 mL) i tretiran hidrazin monohidratom (0.63 g, 12.6 mmol) u EtOH i smeša je zagrevana na 63°C oko 1 čas i zatim je koncentrovana do žutog ulja. Ulje je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 15 g) upotrebom 50% EtOAc/heksana da bi se proizvelo jedinjenje 169 (158 mg, 38%) kao skoro bistro ulje. m/z [M+H]<+>353.1.
Jedinjenje 170: Jedinjenje 169 (0.158 g, 0.45 mmol) je apsorbovano u MeOH, i dodat je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 170 (174 mg, kvantitativan) kao ulje. m/z [M+H]<+>309.0.
Jedinjenje 171: Jedinjenje 170 (0.169 g, 0.55 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 171 (154.8 mg, 84%). m/z [M+H]<+>337.0.
Jedinjenje 172: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 171 (0.1548 g, 0.46 mmol). Dodata je 9:1 smeša EtOH/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 172 (128 mg, 83%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. m/z [M+H]<+>334.0.
Jedinjenje 173: Jedinjenje 172 (0.128 g, 0.38 mmol) je rastvoreno u smeši 3:1 MeOH/THF, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje 173 (129 mg, kvantitativan) kao žuto staklo/čvrsta supstanca. m/z [M+H]<+>334.0.
Jedinjenje TX63579: Smeša jedinjenja 173 (0.129 g, 0.39 mmol) i DDQ (1.3 ekv.) je apsorbovana u benzenu. Smeša je mešana na refluksu 4.5 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 11 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63579 (35.47 mg, 27%).<1>H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 13.05 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.61 (d, 2H), 7.47 (dd, 2H, J = 7.4, 7.5 Hz), 7.35 (t, 1H, J = 7.4 Hz), 2.87 (dd, 1H, J = 5.5, 15.8 Hz), 2.76-2.69 (m, 1H), 2.26 (d, 1H), 1.98-1.86 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.15 (s, 3H); m/z [M+H]<+>332.0.
Jedinjenje 174: Rastvor acetamid hidrohlorida (0.68 g, 7.2 mmol) i piperidina (0.60 g, 7.0 mmol) u i-PrOH (10 mL) je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 min, zatim je dodato jedinjenje 26 (0.20 g, 0.71 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na refluksu u trajanju od 3 dana, zatim koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 174 (0.12 g, 56%) kao čvrsta supstanca. m/z 303 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175a: O-Metilizourea hemisulfat (0.946g, 7.7 mmol) i piperidin (0.58 g, 6.8 mmol) su apsorbovani u iPrOH (15 mL), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od približno 15 min. Dodato je jedinjenje 174 (0.212 g, 0.76 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min i zatim zagrevana do refluksa u trajanju od 4 d. iPrOH je zamenjen sa n-BuOH i dodato je još O-metilizourea hemisulfata (0.432 g, 3.5 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do refluksa preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (80 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(15 mL), i fiziološkim rastvorom (15 mL), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 20% EtOAc/heksani) da bi se dobila smeša tri komponente (364 mg): m/z 319.2 [M+H]<+>.
Tabela 8: Jedinjenja 175b-175o (Šema 31).
[0208] Opšti postupak F: Jedinjenje 174 (videti tabelu 8 za količinu), supstituisani amidin (videti tabelu 8 za količinu) i piperidin (videti tabelu 8 za količinu) su apsorbovani u i-PrOH (10 mL), i smeša je mešana na 85°C u trajanju od 48 časova u hermetički zatvorenoj epruveti. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa CHCl3i ispran sa NH4Cl (vodeni, 10%), fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, EtOAc/heksani ili MeOH/CHCl3) da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 175b: 0.12 g, 56%: m/z 303 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175c: 0.2282 g, 63%: m/z 331 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175d: 0.233 g, 75%: m/z 289 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175e: 0.307 g, 75%: m/z 365 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175f: 0.190 g, 52%: m/z 345 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175g: 0.337 g, 88%: m/z 357 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175h: 0.2 g, 40%: m/z 399, 401 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 175i: 1.38 g, >100%: m/z 399/401 (39/14%) [M+H]<+>, 155/157 (100/36%).
Jedinjenje 175j: 0.164 g, 39%: m/z 379 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175k: 0.161 g, 32%: m/z 395 [M+H]<+>.
Jedinjenje 1751: 0.92 g, >100%: m/z 386 (93%) [M+H]<+>, 143 (64%) i 126 (100%).
Jedinjenje 175m: 0.172 g, 44%: m/z 366 [M+H]<+>.
Jedinjenje 175n: 1.05 g, >100%: m/z 366 (83%) [M+H]<+>i 190 (100%).
Jedinjenje 175o: 0.38 g, 95%: m/z 366 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 176a: Jedinjenje 175a (0.364 g) je apsorbovano u MeOH, i dodata je HCl (vodeni rastvor, 1 N). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobila smeša (0.336 g): m/z 275 [M+H]<+>.
Tabela 9: Jedinjenja 176b-176o (Šema 31).
[0209] Opšti postupak G: Jedinjenje 175b-o (videti tabelu 9 za količinu) je apsorbovano u rastvaraču (videti tabelu 9 za količinu), i dodata je HCl (vodeni rastvor) (videti tabelu 9 za količinu). Smeša je mešana pod N2na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je bazifikovan sa NH4OH (vodeni, 10%) do pH~9-10, ekstrahovan sa CHCl3i ispran zasićenim NaCl (vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 176d: 0.184 g, 93%: m/z 245 [M+H]<+>.
Jedinjenje 176e: 0.287 g, kvantitativan: m/z 321 [M+H]<+>.
Jedinjenje 176f: 0.139 g, 84%: m/z 301 [M+H]<+>.
Jedinjenje 176g: 0.191 g, 65%: m/z 313 [M+H]<+>.
Jedinjenje 176h: 0.155 g, 87%: m/z 355, 357 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 176i: 0.32 g, 73%: m/z 355/357 (100/74%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 176j: 0.139 g, 96%: m/z 335 [M+H]<+>.
Jedinjenje 176k: 0.127 g, 88%: m/z 351 [M+H]<+>.
Jedinjenje 1761: 0.37 g, 92%: m/z 342 (100%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 176m: 0.174 g, 100%: m/z 322 [M+H]<+>.
Jedinjenje 176n: 0.27 g, 66%: m/z 322 (100%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 176o: 0.24 g, 72%: m/z 322 (100%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 177a: Jedinjenje 176a (0.336 g, 1.2 mmol) je apsorbovano u etil formatu (20 mL), i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.56 mL, 28.4 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 177a (0.152 g, 66% u 3 koraka): m/z 303 [M+H]<+>.
Tabela 10: Jedinjenja 177b-o (Šema 31).
[0210] Opšti postupak H: Jedinjenje 176b-o (videti tabelu 10 za količinu) i etil format (videti tabelu 10 za količinu) su apsorbovani u benzenu (videti tabelu 10 za količinu), i dodat je 30% NaOMe u MeOH (videti tabelu 10 za količinu). Smeša je mešana pod N2na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran zasićenim KH2PO4(vodeni rastvor), zasićenim NaCl (vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 177b: 0.13 g, 92%: m/z 287 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177c: 0.206 g, kvantitativan: m/z 315 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177d: 0.194 g, 95%: m/z 273 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177e: 0.248 g, 84%: m/z 349 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177f: 0.162 g, kvantitativan: m/z 329 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177g: 0.228 g, kvantitativan: m/z 329 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177h: 0.166 g, 99%: m/z 397, 399 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 177i: 0.32 g, 91%: m/z 383/385 (100/42%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 177j: 0.134 g, 89%: mlz 363 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177k: 0.156 g, kvantitativan: m/z 379 [M+H]<+>.
Jedinjenje 1771: 0.38 g, 94%: m/z 392 (13%) [M+Na]<+>i 370 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 177m: 0.137 g, 83%: m/z 350 [M+H]<+>.
Jedinjenje 177n: 0.35 g, >100%: m/z 350 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 177o: 0.22 g, 82%: m/z 350 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 178a: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (5.5 mL, 0.55 mmol) je dodat u jedinjenje 177a (0.152 g, 0.5 mmol). Dodata je smeša 9/1 etanola/vode i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje 178a (18 mg, 12%): m/z 300 [M+H]<+>.
Tabela 11: Jedinjenje 178b-178o (Šema 31).
[0211] Opšti postupak I: Jedinjenje 177b-o (videti tabelu 11 za količinu) je apsorbovano u EtOH (videti tabelu 11 za količinu), i dodat je hidroksilamin hidrohlorid (videti tabelu 11 za količinu). Smeša je mešana preko noći na 50°C pod N2. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zasićenim NaCl (vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 178b: 0.13 g, kvantitativan: m/z 284 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178c: 0.183 g, 96%: m/z 312 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178d: 0.168 g, 88%: m/z 270 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178e: 0.247 g, kvantitativan: m/z 346 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178f: 0.167 g, kvantitativan: m/z 326 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178g: 0.175 g, 85%: m/z 338 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178h: 0.149 g, 90%: m/z 380, 382 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 178i: 0.31 g, ~100%: m/z 380/382 (100/63%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 178j: 0.152 g, kvantitativan: m/z 360 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178k: 0.146 g, kvantitativan: m/z 376 [M+H]<+>.
Jedinjenje 1781: 0.37 g, ~100%: m/z 367 (100%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 178m: 0.111 g, 82%: m/z 347 [M+H]<+>.
Jedinjenje 178n: 0.24 g, 83%: m/z 347 (100%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 178o: 0.097 g, 45%: m/z 347 (100%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 179a: Jedinjenje 178a (18 mg, 0.06 mmol) je rastvoreno u smeši 3:1 MeOH/THF (1.6 mL), i dodat je 30% natrijum metoksid (0.066 mL, 1.18 mmol). Reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5.5 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 179a (13.3 mg, 74%).
Tabela 12: Jedinjenja 179b-179o (Šema 31).
[0212] Opšti postupak J: Jedinjenje 178b-o (videti tabelu 12 za količinu) je apsorbovano u MeOH (videti tabelu 12 za količinu), i dodat je 30% NaOMe u MeOH (videti tabelu 12 za količinu). Smeša je mešana pod N2na 50°C u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zasićenim NaCl (vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje 179b: 0.13 g, kvantitativan: m/z 284 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179c: 0.141 g, 77%: m/z 312 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179d: 0.128 g, 76%: m/z 270 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179e: 0.225 g, 92%: m/z 346 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179f: 0.123 g, 81%: m/z 326 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179g: 0.140 g, 80%: m/z 338 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179h: 0.137 g, 92%: m/z 380, 382 (3:1) [M+H]<+>.
Jedinjenje 179i: 0.21 g, 68%: m/z 380/382 (100/52%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 179j: 0.119 g, 90%: m/z 360 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179k: 0.123 g, 91%: m/z 376 [M+H]<+>.
Jedinjenje 1791: 0.31 g, 82%: m/z 367 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 179m: 0.080 g, 72%: m/z 347 [M+H]<+>.
Jedinjenje 179n: 0.25 g, >100%: m/z 347 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 179o: 0.063 g, 65%: m/z 347 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63528: Jedinjenje 179a (13.3 mg, 0.044 mmol) je rastvoreno u suvom DMF (0.26 mL), i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je dibromodimetilhidantoin (8.0 mg, 0.028 mmol) i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin (0.034 mL, 0.416 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63528 (6.5 mg, 50%). m/z 298 [M+H]<+>.
Tabela 13: Jedinjenja iz Šeme 31.
[0213] Opšti postupak K: Jedinjenje 179b-o (videti tabelu 13 za količinu) je rastvoreno u suvom DMF (10 mL), i rastvor je hlađen do 0°C pod N2. Dodat je dibromodimetilhidantoin (DBDMH) (videti tabelu 13 za količinu) i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (videti tabelu 13 za količinu) i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zasićenim KH2PO4(vodeni rastvor), zasićenim NaCl (vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobili odgovarajući derivati:
Jedinjenje TX63468: 65 mg g, 51%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.88 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 3.00 (dd, 1H, J = 6.3, 17.2 Hz), 2.85 (ddd, 1H, J = 7.6, 11.4, 17.2 Hz), 2.73 (s, 3H), 2.21 (dd, 1H, J = 2.2, 12.5 Hz), 2.06 (m, 1H), 1.96 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); m/z 282 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63534: 53 mg, 38%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.88 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 3.18-3.27 (m, 1H), 3.00 (dd, 1H, J = 15.0, 10.0 Hz), 2.81-2.91 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 10.0, 5.0 Hz), 2.03-2.09 (m, 1H), 1.90-2.01 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.28 (s, 3H); m/z 310 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63542: 56.8 mg, 54%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.04 (br s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.55 (br s, 1H), 3.02 (dd, 1H, J = 6.1, 17.5 Hz), 2.92-2.84 (m, 1H), 2.20 (dd, 1H, J = 1.8, 12.6 Hz), 2.06-2.02 (m, 1H), 1.93 (dddd, 1H, J = 6.5, 12.0, 12.3, 12.6 Hz), 1.45 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z 268 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63552: 114 mg, 51%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.95 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.43 (m, 2H), 7.50 (m, 3H), 3.03 (dd, 1H, J = 6.1, 17.5 Hz), 2.92-2.85 (m, 1H), 2.25 (d, 1H, J = 12.4 Hz), 2.08-2.01 (m, 1H), 1.99-1.92 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 344 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63561: 54 mg, 44%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 2.95 (dd, 1H, J = 6.0, 17.3 Hz), 2.80 (dddd, 1H, J = 7.3, 8.8, 8.9, 11.4 Hz), 2.20 (dd, 1H, J = 1.9, 12.5 Hz), 2.03-1.99 (m, 1H), 1.91 (dddd, 1H, J = 6.4, 12.3, 12.5, 12.6 Hz), 1.43 (s, 3H), 1.39 (s, 9H), 1.28 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z 324 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63567: 52 mg, 38%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.70 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 3.12 (dd, 1H, J = 6.1, 18.1 Hz), 2.96 (dddd, 1H, J = 7.5, 9.1, 9.3, 10.9 Hz), 2.23 (dd, 1H, J = 2.1, 12.8 Hz), 2.12-2.08 (m, 1H), 1.98 (dddd, 1H, J = 6.6, 12.6, 13.0, 13.3 Hz), 1.49 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 336 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63582: 47 mg, 35%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.90 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.39 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.46 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 3.04 (dd, 1H, J = 5.8, 17.4 Hz), 2.92-2.85 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 1.8, 12.5 Hz), 2.08-2.04 (m, 1H), 2.01-1.93 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 378, 380 (100%:38%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63612: 140 mg, 67%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.88 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 7.79-7.81 (m, 1H), 7.51-7.54 (m, 1H), 7.39-7.42 (m, 2H), 3.08 (dd, 1H, J=20, 5 Hz), 2.90-2.97 (m, 1H), 2.28 (dd, 1H, J=15, 2.5 Hz), 1.95-2.11 (m, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 378/380 (100/39%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63583: 30 mg, 35%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.95 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.23 (br s, 2H), 7.44-7.30 (m, 2H), 3.04-3.01 (m, 1H), 2.91-2.84 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.25 (d, 1H, J = 12.1 Hz), 2.07-1.95 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); m/z 358 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63590: 47 mg, 38%:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.98 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.43 (d, 2H, J = 10.0 Hz), 7.05 (d, 2H, J = 5.0 Hz), 3.92 (s, 3H), 3.05 (dd, 1H, J = 20.0, 5.0 Hz), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.28 (dd, 1H, J = 10.0, 5.0 Hz), 1.94-2.13 (m, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.29 (s, 3H); m/z 374 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63628: 70 mg. 23%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.93 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 3.09 (dd, 1H, J = 6.2, 6.1 Hz), 2.93 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.28 (dd, 1H, J = 1.8, 1.8 Hz), 2.03 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.29 (s, 3H); m/z 365 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63586: 21 mg, 26%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.69 (s, 1H), 8.91 (dt, 1H, J = 1.5, 8.0 Hz), 8.86 (s, 1H), 8.75 (dd, 1H, J = 1.0, 4.8 Hz), 8.63 (s, 1H), 7.62 (dd, 1H, J = 5.0, 7.9 Hz), 3.08 (dd, 1H, J = 6.0, 17.9 Hz), 2.93 (dddd, 1H, J = 7.3, 9.0, 9.0, 11.0 Hz), 2.25 (dd, 1H, J = 2.3, 12.6 Hz), 2.11-2.06 (m, 1H), 2.02-1.94 (dddd, 1H, J = 6.5, 12.5, 12.9, 13.5 Hz), 1.52 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z 345 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63636: 120 mg, 51%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.94 (s, 1H), 8.83 (d, 2H, J = 5.14), 8.68 (s, 1H), 8.32 (d, 2H, J = 5.45), 3.12 (dd, 1H, J = 6.17, 11.64, 6.04 Hz), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.30 (dd, 1H, J = 1.93, 10.6, 2.03), 2.17-1.97 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.31 (s, 3H); m/z 345 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63641: 15 mg, 25%:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.98 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.55 (d, 1H, J = 7.7), 7.92 (t, 1H, 7.2, 7.2), 7.49 (t, 1H, J = 5.25, 5.7), 3.14 (dd, 1H, J = 5.99, 12.01, 5.25 Hz), 3.04-2.91 (m, 1H), 2.31 (d, 1H, J = 11.88), 2.18-1.94 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.31 (s, 3H); m/z 345 (100%), [M+H]<+>.
Jedinjenje 180: Rastvor 25 (1.4 g, 5.5 mmol) u THF (10 mL) je dodat u refluksujuću smešu dimetil karbonata (6 ekviv.) i NaH (višak) u THF (10 mL). Reakcija je mešana na refluksu u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 180 (1.5 g, 87%) kao čvrsta supstanca. m/z 311 [M+H]<+>.
Jedinjenje 181: Rastvor acetamid hidrohlorida (5.3 g, 55 mmol) i piperidina (2.4 g, 28 mmol) u i-PrOH (20 mL) je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 min, zatim je dodato jedinjenje 184 (1.5 g, 4.8 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na refluksu u trajanju od 2 dana, zatim koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 15 do 65 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 181 (0.95 g, 62%) kao čvrsta supstanca. m/z 319 [M+H]<+>.
Jedinjenje 182: Jedinjenje 185 (468 mg, 1.47 mmol) je apsorbovano u CHCl3(15 mL) i rastvor je hlađen do 0°C. Dodati su trietilamin (1.5 ekviv.) i Tf2O (1.1 ekviv.), i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je isprana vodom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 5 do 15 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 182 (548 mg, 83%) kao čvrsta supstanca. m/z 451 [M+H]<+>.
Jedinjenje 183: Smeša jedinjenja 182 (548 mg, 1.22 mmol), fenilboronske kiseline (1.2 ekviv.), PH3P (0.36 ekviv.), K3PO4(3 ekviv.) i DME je prskana sa N2u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(0.18 ekviv.) i prskanje sa N2je nastavljeno u trajanju od 10 min. Reakcija je zagrevana do 85°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 35 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 183 (380 mg, 83%) kao prljavo bela čvrsta supstanca: m/z 379 [M+H]<+>.
Jedinjenje 184: Jedinjenje 183 (0.38 g, 1.0 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 184 (0.36 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 335 [M+H]<+>.
Jedinjenje 185: Jedinjenje 184 (0.36 g, 1.0 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 184 (0.37 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 363 [M+H]<+>.
Jedinjenje 186: Smeša hidroksilamine hidrohlorida i 185 (0.37 g, 1.0 mmol) u etanolu je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa EtOAc, zatim ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 186 (0.37 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 360 [M+H]<+>.
Jedinjenje 187: Jedinjenje 186 (0.37 g, 1.0 mmol) je rastvoreno u smeši 2/1 THF/metanola i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 187 (0.37 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 360 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63529: Jedinjenje 187 (0.37 g, 1.0 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 2 časa), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 25 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63529 (0.24 g, 67%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.86 (s, 1H), 7.55 (m, 2H), 7.50 (s, 3H), 2.88 (m, 1H), 2.76 (dd, 1H, J = 5.8, 17.0 Hz, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.36 (dd, 1H, J = 2.0, 12.4 Hz), 1.92 (m, 1H), 1.83 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.14 (s, 3H); m/z 358 [M+H]<+>. Jedinjenje 188: Smeša jedinjenja 26 (148 mg, 0.53 mmol) i uree (2 ekviv.) u dioksanu je mešana na refluksu u trajanju od 3 dana. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u MeOH, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Reakciona smeša je mešana na refluksu u trajanju od 3 dana, zatim hlađena do sobne temperature, razblažena sirćetnom kiselinom (0.2 mL) i vodom (2 mL), i koncentrovana. Ostatak je razblažen sa 1 N HCl (vodeni rastvor) i ekstrahovan sa EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 188 kao braon ulje. m/z 305 [M+H]<+>.
Jedinjenje 189: Jedinjenje 188 je apsorbovano u MeOH, i dodat je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (50 mL), i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 189 (98 mg, 71%) kao čvrsta supstanca. m/z 261 [M+H]<+>.
Jedinjenje 190: Jedinjenje 189 (98 mg, 0.38 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim je dodata nova količina etil formata (5 mL) i reakcija je zagrevana do 50°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 25-100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje 190 (52.7 mg, 49%) kao čvrsta supstanca. m/z 289 [M+H]<+>.
Jedinjenje 191: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 190 (52.7 mg, 0.18 mmol). Dodata je smeša 9:1 etanola/vode, i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 191 kao čvrsta supstanca. m/z 286 [M+H]<+>.
Jedinjenje 192: Jedinjenje 191 je rastvoreno u smeši 3:1 MeOH/THF, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH), i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 6 časova, zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem HOAc i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 10% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje 192 (7.8 mg, 15%) kao čvrsta supstanca. m/z 286 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63553: Jedinjenje 192 (7.8 mg, 0.027 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Dodat je piridin, i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 8% MeOH/CH2Cl2), zatim pomoću preparativne hromatografije na tankom sloju (silika gel, EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje TX63553 (2.4 mg, 31%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.74 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.23 (br s, 1H), 2.84 (dd, 1H, J = 6.5, 16.6 Hz), 2.71-2.64 (m, 1H), 2.14 (dd, 1H, J = 2.0, 12.5 Hz), 1.94-1.85 (m, 2H), 1.47 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.19 (s, 3H); m/z 284 [M+H]<+>.
Jedinjenje 193: Rastvor jedinjenje 129 (898 mg, 3.37 mmol), acetamid hidrohlorida (3.2 g, 34 mmol), i piperidina (2.0 ml, 20 mmol) u i-PrOH (15 mL) je zagrevan do refluksa u trajanju od 2 dana, zatim koncentrovan. Ostatak je apsorobovan u CHCl3, ispran sa 10% NH4OH (vodeni rastvor) i fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 193 (464 mg, 48%) kao čvrsta supstanca. m/z 289 [M+H]<+>.
Jedinjenje 194: Jedinjenje 193 (464 mg, 1.61 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana 16 časova na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana, razblažena sa 10% NH4OH (vodeni rastvor), i ekstrahovana sa CHCl3, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 193 (371 mg, 94%) kao čvrsta supstanca. m/z 245 [M+H]<+>.
Jedinjenje 195: Jedinjenje 194 (371 mg, 1.52 mmol) je apsorbovano u benzenu (20 mL), zatim su dodati etil format (1.25 mL) i 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana 16 časova na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana. Smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 194 (371 mg, 90%) kao čvrsta supstanca. m/z 273 [M+H]<+>.
Jedinjenje 196: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 195 (371 mg, 1.36 mmol) u etanolu je mešana 16 časova na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovan sa EtOAc, zatim ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 196 (361 mg, 98%) kao čvrsta supstanca. m/z 270 [M+H]<+>.
Jedinjenje 197: Jedinjenje 196 (361 mg, 1.34 mmol) je rastvoreno u metanolu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 48 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i razblažena sa EtOAc, zatim isprana zasićenim KH2PO4i fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 197 (287 mg, 80%) kao čvrsta supstanca. m/z 270 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63554: Jedinjenje 197 (287 mg, 0.80 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 1 čas), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i razblažena sa EtOAc, zatim isprana zasićenim KH2PO4i fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63554 (145 mg, 51%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.89 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 2.96 (dd, 1H, J = 6.8, 17.5 Hz), 2.86 (ddd, 1H, J = 7.0, 10.9, 17.1 Hz), 2.74 (s, 3H), 2.60 (qd, 1H, J = 6.7, 13.1 Hz), 2.15 (m, 2H), 1.82 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.33 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z 268 [M+H]<+>.
Jedinjenje 198: Rastvor jedinjenja 129 (330 mg, 1.24 mmol), acetamid hidrohlorida (1.94 g, 12.4 mmol), i piperidina (0.74 ml, 7.5 mmol) u i-PrOH (10 mL) je zagrevan na 85°C u trajanju od 4 dana, zatim koncentrovan. Ostatak je apsorbovan u CHCl3, ispran sa 10% NH4OH (vodeni rastvor) i fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 20 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo 198 (260 mg, 60%) kao čvrsta supstanca. m/z 351 [M+H]<+>.
Jedinjenje 199: Jedinjenje 198 (260 mg, 0.74 mmol) je apsorbovano u metanolu, i dodata je 3 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana 16 časova na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana, razblažena sa 10% NH4OH (vodeni rastvor), i ekstrahovana sa CHCl3, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 199 (217 mg, 95%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 307 [M+H]<+>.
Jedinjenje 200: Jedinjenje 199 (217 mg, 0.71 mmol) je apsorbovano u benzenu (20 mL), zatim su dodati etil format (1.25 mL) i 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana 16 časova na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana. Smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 200 (216 mg, 91%) kao čvrsta supstanca. m/z 335 [M+H]<+>.
Jedinjenje 201: Smeša hidroksilamin hidrohlorida i 200 (216 mg, 0.65 mmol) u etanolu je mešana 4 časa na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen sa EtOAc, ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 200 (190 mg, 89%) kao čvrsta supstanca. m/z 332 [M+H]<+>.
Jedinjenje 202: Jedinjenje 201 (190 mg, 0.57 mmol) je rastvoreno u metanolu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i razblažena sa EtOAc, zatim isprana zasićenim KH2PO4i fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 201 (228 mg, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 332 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63569: Jedinjenje 202 (228 mg, 0.57 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 1 čas), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i razblažena sa EtOAc, zatim isprana zasićenim KH2PO4i fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63569 (68 mg, 36%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.01 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.49 (m, 2H), 7.55 (m, 3H), 3.04 (dd, 1H, J = 6.5, 17.8 Hz), 2.94 (ddd, 1H, J = 7.3, 11.3, 17.8 Hz), 2.64 (qd, 1H, J = 6.7, 12.7 Hz), 2.22 (m, 2H), 1.88 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.37 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z 330 [M+H]<+>.
Jedinjenje 203: Jedinjenje 25 (0.297 g, 1.18 mmol) je apsorbovano u DCM (50 mL) i dodat je MgBr-Et2O (0.776 g, 3.0 mmol), a zatim i-Pr2NEt (0.42 mL, 2.3 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi oko 40 minuta, tokom kog vremena je reakcija postepeno prešla u narandžastu boju. Ukapavanjem je dodat benzoil hlorid (0.347 g, 2.44 mmol) u DCM (3 mL) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL), slojevi su odvijeni i organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do crvenkastog ulja. Proizvod je bio prisutan prema masenoj spektralnoj analizi, MS: m/z [M+H]<+>357.0. Ovaj sirovi materijal je korišćen direktno u sledećem koraku. Ostatak je apsorbovan u EtOH (16 mL), i gasoviti azot je barbotiran kroz rastvor u trajanju od 5 minuta. Fenilhidrazin (0.5 mL, 5.08 mmol) je dodat pomoću šprica i čvrsto hermetički zatvorena bočica je zagrevana preko noći do 80°C uz mešanje. Posle hlađenja do sobne temperature reakciona smeša je koncentrovana do sušenja, apsorobovana u EtOAc (80 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom KH2PO4(15 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(15 mL), sušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do crvenog ulja. Proizvod je bio prisutan prema masenoj spek., MS: m/z [M+H]<+>429.1. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku. Sirova smeša ketala je apsorbovana u MeOH (20 mL) i dodata je 1N HCl (4 mL). Reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana i ostatak je podeljen između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(20 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do crvenog ulja/čvrste supstance. Ulje/čvrsta supstanca je podvrgnuto hromatografiji 3 uzastopna puta na silika gelu (230-400 mreža, 26 g) upotrebom 20% heksana/EtOAc da bi se dobio polarniji izomer (203, 94.4 mg) sa manjom manje polarnom nečistoćom. MS: m/z [M+H]<+>385.1.
Jedinjenje 204: Jedinjenje 203 (91 mg, 0.237 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 204 (90 mg). m/z [M+H]<+>413.1.
Jedinjenje 205: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 203 (90 mg, 0.22 mmol). Dodata je smeša 9:1 EtOH/t2O i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 10 g) upotrebom 20% heksana/EtOAc kao bledo žuto staklo da bi se dobilo jedinjenje 205 (22.8 mg). m/z [M+H]<+>410.1.
Jedinjenje 206: Jedinjenje 205 (22.8 mg, 0.054 mmol) je rastvoreno u smeši 3:1 MeOH/THF i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 6 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje 206 (22 mg) kao prljavo bela pena. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku.
Jedinjenje TX63605: Jedinjenje 206 (22 mg, 0.038 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin, i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je podvrgnut hromatografiji dva puta na silika gelu upotrebom 3:1 heksana/EtOAc, zatim prečišćen pomoću preparativne hromatografije na tankom sloju upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63605 (4.5 mg) kao staklo.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.73-7.76 (m, 2H), 7.36-7.60 (m, 9H), 3.00-3.08 (m, 1H), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.41-2.44 (m, 1H), 1.92-2.10 (m, 2H), 1.62 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z [M+H]<+>408.1.
Jedinjenje 208: Jedinjenje 207 (4.0 g, 19 mmol) je apsorbovano u t-BuOH, i dodat je rastvor KOt-Bu u t-BuOH. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 min i dodat je jodometan. Reakciona smeša je mešana u trajanju od 45 min na sobnoj temperaturi, ugašena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor), i koncentrovana. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 208 (2.5 g, 55%) kao svetlo žuta tečnost: m/z 177 (M-CH3OCH2OH).
Jedinjenje 209: Jedinjenje 208 (2.5 g, 10 mmol) je apsorbovano u EtOAc pod N2i dodat je 10% Pd/C. Bočica je snažno prečišćena sa H2i mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 209 (2.5 g, 99%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.70 (d, 1H, J = 7 Hz), 4.61 (d, 1H, J = 7 Hz), 3.65 (t, 1H, J = 6 Hz), 3.38 (s, 3H), 2.58 (td, 1H, J = 7, 17 Hz), 2.25 (td, 1H, J = 7, 17 Hz), 1.91 (m, 3H), 1.77 (m, 2H), 1.53 (m, 1H),1.23 (s, 6H), 1.10 (m, 1H), 1.01 (s, 3H).
Jedinjenje 210: Smeša jedinjenja 209 (2.5 g, 10 mmol), etilen glikola i hidrata ptoluensulfonske kiseline u toluenu je zagrevana do refluksa u trajanju od 3 časa sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, isprana zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je apsorbovan u CH2Cl2i dodat je PDC (1.5 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 22 časa. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit (eluirana sa CH2Cl2) i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 210 (1.8 g, 73%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 3.90 (m, 4H), 2.33 (m, 1H), 2.10 (m, 2H), 1.94 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 1.72 (m, 2H), 1.49 (m, 1H), 1.26 (m, 1H), 1.25 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 0.88 (s, 3H).
Jedinjenje 211: Jedinjenje 210 (0.81 g, 3.4 mmol) je apsorbovano u etil formatu (8.2 mL), ohlađeno do 0°C, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH, 9.6 mL).
Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je razblažena sa t-BuOMe, hlađena do 0°C, i ugašena sa koncentrovanom HCl (4.25 mL). Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 211 (0.92 g, kvantitativan) kao viskozno ulje. m/z 267 [M+H]<+>.
Jedinjenje 212: Smeša 211 (0.90 g, 3.4 mmol) i metilhidrazina (0.20 g, 4.4 mmol) u etanolu (20 mL) zagrevana je do 65°C u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 50 do 75 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo 212 (0.25 g, 27%) kao viskozno ulje. m/z 277 [M+H]<+>.
Jedinjenje 213: Jedinjenje 212 (0.25 g, 0.91 mmol) je apsorbovano u THF, i dodat je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana u trajanju od 24 časa na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 213 (0.19 g, 90%) kao čvrsta supstanca. m/z 233 [M+H]<+>.
Jedinjenje 214: Rastvor jedinjenja 213 (0.27 g, 1.2 mmol) u THF je dodat u -78°C rastvor LDA (2.5 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 30 min, zatim je dodat rastvor TsCN (1.3 ekviv.) u THF. Reakcija je mešana na -78°C dodatnih 30 min, zatim je ugašena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor) i zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje 214 (0.24 g, 80%) kao čvrsta supstanca. m/z 258 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63436: Jedinjenje 214 (90 mg, 0.35 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa, zatim zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 1 časa. Zatim, dodat je piridin i reakcija je mešana na 60°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom i isprana sa 1 N HCl (vodeni rastvor), zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je rekristalizovan iz EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63436 (41 mg, 46%) kao kristalna čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.24 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 2.95 (br t, 1H, J = 10 Hz), 2.82 (dd, 1H, J = 8, 15 Hz), 2.18 (dd, 1H, J = 10, 15 Hz), 1.81 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z 256 [M+H]<+>.
Jedinjenje 216: Jedinjenje 215 (2.8 g, 9.5 mmol) je apsorbovano u THF (75 mL) pod N2i dodat je 10% Pd/C (0.25 g). Reakcija je hlađena do 0°C i bočica je snažno prečišćena sa H2. Reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 8 časova, zatim mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Bočica je ponovo hlađena do 0°C i dodata je dodatna porcija 10% Pd/C (0.20 g).
Bočica je snažno prečišćena sa H2i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 8 časova, zatim mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u MeOH (50 mL) i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH, 0.5 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim koncentrovana. Smeša je razblažena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 3 do 5 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 216 (1.18 g, 42%) kao ulje. m/z 297 [M+H]<+>.
Jedinjenje 217: Smeša jedinjenja 216 (0.95 g, 3.2 mmol), etilen glikola i hidrata ptoluensulfonske kiseline u toluenu je zagrevana do refluksa u trajanju od 3 časa sa azeotropnim uklanjanjem vode. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, razblažena zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 217 (1.09 g, kvantitativan) kao ulje. m/z 342 [M+H]<+>.
Jedinjenje 218: Jedinjenje 217 (1.33 g, 3.91 mmol) je apsorbovano u THF, i dodat je TBAF hidrat (1.1 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana, sa dodavanjem dodatnih porcija TBAF hidrata (0.55 ekviv.) posle 8 i 24 časa. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćenhromatografijom na koloni (silika gel, 40 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 218 (0.83 g, 94%) kao čvrsta supstanca. m/z 227 [M+H]<+>.
Jedinjenje 219: Jedinjenje 218 (0.83 g, 3.67 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2i dodat je PDC (1.5 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 12 časova. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit (eluirana sa CH2Cl2) i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 10 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 219 (0.82 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 225 [M+H]<+>.
Jedinjenje 220: Jedinjenje 219 (0.80 g, 3.6 mmol) je apsorbovano u etil formatu, hlađeno do 0°C, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 220 (0.90 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 253 [M+H]<+>.
Jedinjenje 221: Smeša 220 (0.70 g, 2.8 mmol) i metilhidrazina (0.32 g, 6.9 mmol) u etanolu (13 mL) zagrevana je do 65°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80 do 100 % EtOAc u heksanima) da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca. Ostatak je apsorbovan u THF, i dodat je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 221 (0.50 g, 83%) kao čvrsta supstanca. m/z 219 [M+H]<+>.
Jedinjenje 222: Jedinjenje 221 (225 mg, 1.03 mmol) je apsorbovano u etil formatu, hlađeno do 0°C, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 2 časa. Reakciona smeša je ugašena zasićenim KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 222 (0.28 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 247 [M+H]<+>.
Jedinjenje 223: Jedinjenje 222 (0.28 g, 1.03 mmol) je apsorbovano u smeši 9/1 etanola/vode i dodat je hidroksilamin hidrohlorid. Reakciona smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovan sa EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 223 (0.26 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 244 [M+H]<+>.
Jedinjenje 224: Jedinjenje 223 (0.25 g, 1.03 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 224 (0.15 g, 60%) kao čvrsta supstanca. m/z 244 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63533: Jedinjenje 224 (150 mg, 0.62 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa, zatim zagrevana do sobne temperature i mešana 1 čas. Zatim, dodat je piridin i reakciona smeša je zatim mešana na 60°C u trajanju od 2 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa 1 N HCl (vodeni rastvor), zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), i fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Spojene vodene frakcije su ekstrahovane sa CHCl3, koji je sušen sa MgSO4i koncentrovan. Spojeni sirovi proizvod je prečišćen uizastopnom hromatografijom na koloni, prvo (silika gel, 50 % EtOAc u CH2Cl2), zatim (silika gel, 2 % MeOH u CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje TX63533 (30 mg, 20%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.28 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.95 (ddd, 1H, J = 6.2, 10.8, 13.9 Hz), 2.86 (qd, 1H, J = 6.5, 13.7 Hz), 2.73 (dd, 1H, J = 6.1, 13.9 Hz), 2.46 (dd, 1H, J = 10.8, 13.9 Hz), 1.36 (s, 3H), 1.33 (d, 3H, J = 6.6 Hz); m/z 242 [M+H]<+>.
Jedinjenje 225: Jedinjenje 216 (0.61 g, 2.1 mmol) je apsorbovano u MeCN, zatim su dodati heksametildisilazan (10 ekviv.) i NaI (5 ekviv.) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 minuta. Dodat je hlorotrimetilsilan (5 ekviv.) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, filtriran kroz kratak čep od silike (eluiran sa EtOAc), i koncentrovan. Ostatak je apsorbovan u MeCN, dodat je Pd(OAc)2(2 ekviv.) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz kratak čep od silike (eluirana sa EtOAc), isprana zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 10 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 225 (0.48 g, 79%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 295 [M+H]<+>.
Jedinjenje 226: Rastvor jedinjenja 225 (0.47 g, 1.6 mmol) u THF je dodat u 0°C rastvor KHMDS (2 ekviv.) u THF. Rastvor je mešan na 0°C u trajanju od 30 min, zatim je dodat metil jodid (4 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na 0°C u trajanju od 30 min, ugašena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor), i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5 do 10 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 226 (0.40 g, 81%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 309 [M+H]<+>.
Jedinjenje 227: Jedinjenje 226 (0.39 g, 1.3 mmol) je apsorbovano u THF pod N2i dodat je 10% Pd/C. Bočica je snažno prečišćena sa H2i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 227 (0.39 g, 99%) kao ulje. m/z 311 [M+H]<+>.
Jedinjenje 228: Jedinjenje 227 (0.39 g, 1.3 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2(2 ml), zatim je dodat metiletildioksolan (3 ml), etilen glikol (1 drop), i p-toluensulfonska kiselina (kat.). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 dana, ugašen zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), i ekstrahovan sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 228 (0.44 g, 99%) kao ulje. m/z 355 [M+H]<+>.
Jedinjenje 229: Jedinjenje 228 (0.44 g, 1.3 mmol) je apsorbovano u THF, i dodat je rastvor TBAF u THF (1.0 M, 2 ml). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 4 dana, sa dodavanjem porcija TBAF hidrata (0.65 ekviv.) posle 24 i 48 časova. Reakciona smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 40 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 229 (0.27 g, 89%) kao čvrsta supstanca. m/z 241 [M+H]<+>.
Jedinjenje 230: Jedinjenje 229 (0.27 g, 1.1 mmol) je apsorbovano u CH2Cl2i dodat je PDC (1.5 ekviv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 12 časova. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celit (eluiran sa CH2Cl2) i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 20 % EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 230 (0.24 g, 90%) kao čvrsta supstanca. m/z 239 [M+H]<+>.
Jedinjenje 231: Jedinjenje 230 (0.23 g, 0.97 mmol) je apsorbovano u etil formatu, hlađeno do 0°C, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl (vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 231 (0.29 g, kvantitativan) kao čvrsta supstanca. m/z 267 [M+H]<+>.
Jedinjenje 232: Smeša 231 (0.29 g, 0.97 mmol) i metilhidrazina (90 mg, 2.0 mmol) u etanolu (0.5 mL) zagrevana je do 65°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 75 % EtOAc u heksanima) da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ostatak je apsorbovan u THF, i dodat je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana u trajanju od 2 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 232 (0.17 g, 76%) kao čvrsta supstanca. m/z 233 [M+H]<+>.
Jedinjenje 233: Jedinjenje 232 (0.17 g, 0.73 mmol) je apsorbovano u etil formatu, hlađeno do 0°C, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ugašena zasićenim KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 233 (0.19 g, 96%) kao čvrsta supstanca. m/z 261 [M+H]<+>.
Jedinjenje 234: Jedinjenje 233 (0.19 g, 0.73 mmol) je apsorbovano u smeši 8/1 etanola/vode, i dodat je hidroksilamin hidrohlorid. Reakciona smeša je mešana preko noći na 60°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) i ekstrahovan sa EtOAc, zatim ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 234 (0.17 g, 91%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. m/z 258 [M+H]<+>.
Jedinjenje 235: Jedinjenje 234 (0.17 g, 0.66 mmol) je rastvoreno u smeši 1/1 metanola/THF, dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4i ekstrahovana sa EtOAc, zatim isprana fiziološkim rastvorom, sušena sa MgSO4, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje 235 (0.12 g, 71%) kao bela čvrsta supstanca. m/z 258 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63559: Jedinjenje 235 (0.12 g, 0.47 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa, zatim zagrevana do sobne temperature i mešana 1 čas. Zatim, dodat je piridin i reakciona smeša je zatim mešana na 60°C u trajanju od 5 časova. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 50 % EtOAc u CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje TX63559 (85 mg, 71%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.29 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.11 (dd, 1H, J = 6.3, 11.3 Hz), 2.67 (dd, 1H, J = 6.3, 13.8 Hz), 2.60 (dd, 1H, J = 11.4, 13.6 Hz), 1.40 (s, 6H), 1.32 (s, 3H); m/z 256 [M+H]<+>.
Jedinjenje 236: U rastvor 68 (260 mg, 0.70 mmol) u dioksanu (4 mL) je dodat Et3N (0.5 mL) i CuI (6.7 mg, 0.035 mmol). Azot je barbotiran kroz smešu u trajanju od 15 min. Dodati su TMS-acetilen (207 mg, 2.11 mmol) i (PH3P)2PdCl2(14.8 mg, 0.021 mmol) i smeša je zagrevana u hermetički zatvorenoj posudi na 80°C preko noći. Smeša je hlađena i koncentrovana. „Flash“ hromatografija (20% EtOAc/DCM) dala je 9 mg (3%) 236 kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 387.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 237: Jedinjenje 236 (30 mg, 0.077 mmol) je apsorbovano u THF (3 mL) i dodata je 1M HCl (0.5 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 3 dana, zatim razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 26 mg (98%) jedinjenja 237 kao ulje. MS (APCI): m/z 343 [M+H]<+>.
Jedinjenje 238: Rastvor 237 (26 mg, 0.076 mmol) u etil formatu (3 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.2 g, 30 tež.% u MeOH) i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 26 mg (>100%) jedinjenja 238 kao ulje. MS (APCI): m/z 299 [M+H]<+>.
Jedinjenje 239: Jedinjenje 238 (0.076 mmol) je apsorbovano u EtOH (3 mL) i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (5.8 mg, 0.084 mmol) i reakcija je zagrevana na 60°C preko noći. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 27 mg (>100%) jedinjenja 239 kao žuto-mrka čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 296 [M+H]<+>.
Jedinjenje 240: Jedinjenje 239 (0.076 mmol) je apsorbovano u THF (3 mL) i dodat je MeOH (1 mL) i NaOMe (0.1 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(10 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani. „Flash“ hromatografija (1:4 EtOAc/DCM) dala je 11 mg (50%) jedinjenja 240 kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 296 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63651: Jedinjenje 240 (11 mg, 0.0.037 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (6.4 mg, 0.022 mmol) i rastvor je mešan 3 časa na 0°C. Dodat je piridin (0.05 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C preko noći. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan pod vakuumom do braon ulja. „Flash“ hromatografija (25% EtOAc/heksan) dala je 6 mg (55%) jedinjenja TX63651 kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.63 (s, 1H), 2.85-2.78 (dd, 1H, J = 5.9, 11.5, 5.6 Hz), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.18-2.13 (dd, 1H, J = 1.9, 10.26, 1.9), 1.99-1.93 (m, 1H), 1.92-180 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 294 [M+H]<+>.
Jedinjenje 241: Jedinjenje 68 (305 mg, 0.826 mmol) je rastvoreno u DMAc (5 mL). U ovaj rastvor je dodat Zn(CN)2(65 mg, 0.56 mmol), dppf (95 mg, 0.17 mmol) i Na2CO3(90 mg, 0.83 mmol). Azot je barbotiran kroz smešu u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(20 mg, 0.09 mmol) i azot je barbotiran u trajanju od 10 min. Suspenzija je zagrevana do 120°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ugašena sa 25 mL vode i ekstrahovana sa etrom (2x50 mL). Organski ekstrakti su koncentrovani, prečišćeni na koloni silika gela, eluirani sa 5-20% EtOAc/heksanima da bi se dobilo 241 kao prljavo bela čvrsta supstanca (0.21 g, 80% prinos). MS (APCI): [M+H]<+>316.
Jedinjenje 242: Rastvor 241 (145 mg, 0.46 mmol) u MeOH (5 mL) je tretiran sa 3N HCl (vodeni rastvor) (1.5 mL), mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL) i zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) (15 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 241 kao pena (120 mg, 96%). MS (APCI): [M+H]<+>272.
Jedinjenje 243: U rastvor 242 (120 mg, 0.44 mmol) u 5 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (0.5 g, 6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sa zasićenim vodenim rastvorom KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 243 (130 mg, 100% prinos). MS (APCI): [M+H]<+>300.
Jedinjenje 244: U rastvor 243 (130 mg, 0.44 mmol) u 5 mL EtOH, dodata je NH2OH·HCl so (62 mg, 2 ekv.) i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 244 (130 mg, 100%). MS (APCI): [M+H]<+>297.
Jedinjenja 245 i 246: U rastvor 244 (130 mg, 0.44 mmol) u 2 mL THF i 1 mL MeOH, dodat je 30% NaOMe (0.66 g, 8 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa KH2PO4(zasićen, 15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobila smeša 245 i 246 (130 mg, 100% prinos). MS (APCI): 297 [M+H]<+>i 315.
TX63613 i TX63619: U smešu 245 i 246 (130 mg, 0.44 mmol) u 2 mL DMF na 0°C, dodat je DBDMH (72 mg, 0.55 ekv.) i rastvor je mešan 2 časa. Dodat je piridin (1 g, 30 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 10-100% EtOAc/heksanima da bi se sakupio prvi manje polaran dikarbonitril TX63613 kao prljavo bela čvrsta supstanca (50 mg, 39% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 3.98 (s, 3H), 2.90 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.64 (ddd, 1H, J=15, 10, 5 Hz), 2.12 (d, 1H, J=10 Hz), 1.98 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 1.86 (ddd, 1H, J=25, 15, 5 Hz), 1.45 (s, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); MS (APCI): [M+H]<+>295; a zatim drugi manje polaran karboksamid TX63619 kao prljavo bela čvrsta supstanca (10 mg, 8% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.85 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.62-2.66 (m, 1H), 2.15 (d, 1H, J=10 Hz), 1.89-1.92 (m, 1H), 1.71-1.84 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.10 (s, 3H); MS (APCI): [M+H]<+>313.
Jedinjenje 247: Jedinjenje 241 (110 mg, 0.34 mmol) je dodato u 10 mL MeOH zasićenog sa HCl i smeša je zagrevana na 60°C u trajanju od 16 časova u hermetički zatvorenoj boci. Reakciona smeša je koncentrovana, i ugašena sa K2CO3(konc., 25 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x25mL). Ekstrakti su sušeni sa MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 247 kao bela čvrsta supstanca (105 mg, 100% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>305.
Jedinjenje 248: U rastvor 247 (105 mg, 0.36 mmol) u 5 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodavan 30% NaOMe u MeOH (0.2 g, 3ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sa zasićenim vodenim rastvorom KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 247 (110 mg, 88% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>347.
Jedinjenje 249: U rastvor 248 (110 mg, 0.32 mmol) u 5 mL EtOH, dodata je NH2OH·HCl so (50 mg, 2ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 249 (110 mg, 100%). MS (APCI): m/z [M+H]<+>344.
Jedinjenje 250 i 251: U rastvor 248 (110 mg, 0.32 mmol) u 2 mL THF i 1 mL MeOH, dodat je NaOEt (40 mg Na metala u 1 mL EtOH, 5 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa KH2PO4(zasićeni, 15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobila smeša jedinjenja 250 i 251 (110 mg, 100% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>316 i 344.
Jedinjenje TX63630 i TX63631: U smešu 250 i 251 (110 mg, 0.32 mmol) u 2 mL DMF na 0°C, dodat je DBDMH (51 mg, 0.55 ekv.) i rastvor je mešan 2 časa. Dodat je piridin (1 g, 40 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 10-100% EtOAc/heksanima da bi se dobio manje polaran etil estar TX63630 kao prljavo bela čvrsta supstanca (40 mg, 37% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (s, 1H), 4.40-4.34 (q, 2H, J = 7.1, 7.2, 7.1 Hz), 4.15 (s, 3H), 3.10-3.00 (dd, 1H, J = 5.3, 12.32, 5.3 Hz), 2.75-2.63 (m, 1H), 2.18-2.12 (dd, 1H, J = 1.7, 10.49, 1.8), 2.01-1.93 (dd, 1H, J = 6.91, 6.44, 1.93), 1.92-1.81 (m, 1H), 1.48 (s, 3H), 1.44-1.37 (t, 3H, J = 7.13, 7.08), 1.31 (s, 3H), 1.25 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]<+>342. I polarnija kiselina TX63631 je izolovana kao prljavo bela čvrsta supstanca (13 mg, 13% prinos).<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 13.40 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 4.05 (s, 3H), 2.92 (dd, 1H, J = 5.6, 11.8, 5.6 Hz), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.19-2.13 (m, 1H), 1.95-1.88 (m, 1H), 1.88-1.75 (m, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.13 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]<+>314.
Jedinjenje 252: U rastvor 241 (160 mg, 0.51 mmol) u toluenu (5 mL) dodat je trimetilsililazid (0.13 mL, 1.01 mmol), a zatim dibutilkalaj oksid (13 mg, 0.051 mmol). Smeša je zagrevana preko noći u 110°C uljanom kupatilu. Rastvor je hlađen i prebačen u posudu sa debelim zidovima. Dodate su dodatne porcije trimetilsililazida (0.13 mL) i dibutilkalaj oksida (13 mg) i rastvor je zagrevan preko noći u 130°C uljanom kupatilu. Posle hlađenja, dodat je MeOH (5 mL) i rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom da bi se dobilo 0.26 g sirovog jedinjenja 252 kao narandžasta čvrsta supstanca, MS (APCI): m/z 359.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 253a: Jedinjenje 252 je apsorbovano u DMF (5 mL), i dodat je kalijum karbonat (0.35 g, 2.55 mmol), a zatim metil jodid (0.16 mL, 2.55 mmol). Smeša je mešana preko noći, dodata je voda (20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom. „Flash“ hromatografija (50% EtOAc/heksan) dala je 112 mg (59%) jedinjenja 253a kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 373.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 254a: Jedinjenje 253a (108 mg, 0.29 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL) i dodata je 1M HCl (1 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 3 dana, razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 95 mg (100%) jedinjenja 254a kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 329.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 255a: Rastvor 254a (95 mg, 0.29 mmol) u etil formatu (4 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodavan NaOMe (0.5g, 30 tež.% u MeOH), i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog KH2PO4(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 100 mg (97%) jedinjenja 254a kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 357.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 256a: Jedinjenje 255a (100 mg, 0.28 mmol) je apsorbovano u EtOH (2 mL), THF (2 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (21 mg, 0.31 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min, zatim zagrevana na 50°C preko noći. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 97 mg (98%) jedinjenja 256a kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 354.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 257a: Jedinjenje 256a (97 mg, 0.27 mmol) je apsorbovano u THF (3 mL) i MeOH (1 mL) i dodat je NaOMe (0.5 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i mešan preko noći. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani. „Flash“ hromatografija (1:3 EtOAc/DCM) dala je 86 mg (89%) jedinjenja 257a kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 354.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63665: Jedinjenje 256a (86 mg, 0.24 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (42 mg, 0.15 mmol) i rastvor je mešan 2 časa na 0°C. Dodat je piridin (0.3 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 5 časova. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (15% EtOAc/DCM) dala je 64 mg (74%) jedinjenja TX63665 kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.53 (s, 1H), 4.46 (s, 3H), 4.24 (s, 3H), 3.15 (dd, 1H, J = 6.1, 17.1 Hz), 2.78 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 1.87-2.05 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); MS (APCI): m/z 352.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 253b: Jedinjenje 252 (0.41 mmol) je apsorbovano u DMF (3 mL), i dodat je K2CO3(0.28 g, 2.06 mmol), a zatim benzil bromid (0.1 mL, 0.82 mmol). Smeša je mešana preko noći, dodata je voda (20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom. „Flash“ hromatografija (30-50% EtOAc/heksan) dala je 47 mg (26%) jedinjenja 253b kao belu penu. MS (APCI): m/z 449.3 [M+H]<+>.
Jedinjenje 254b: Jedinjenje 253b (44 mg, 0.098 mmol) je apsorbovano u THF (3 mL) i dodata je 1M HCl (0.5 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 2 dana, razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 40 mg (100%) jedinjenja 254b kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 405.3 [M+H]<+>.
Jedinjenje 255b: Rastvor 254b (95 mg, 0.23 mmol) u THF (3 mL) i etil formatu (1 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.4 g, 30 tež.% u MeOH), i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu i ugašena dodavanjem zasićenog vodenog KH2PO4(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 105 mg (>100%) jedinjenja 255b kao bela pena. MS (APCI): m/z 433.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 256b: Jedinjenje 255b (0.23 mmol) je apsorbovano u EtOH (1 mL), THF (3 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (19 mg, 0.28 mmol) i reakcija je zagrevana na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim je hlađena i koncentrovana. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 100 mg (100%) jedinjenja 256b kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 430.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 257b: Jedinjenje 256b (100 mg, 0.23 mmol) je suspendovano u 3:1THF/MeOH (4 mL) i dodat je NaOMe (0.4 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim hlađen i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski esktrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 70 mg (70%) jedinjenja 257b kao bela pena. MS (APCI): m/z 430.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63729: Jedinjenje 257b (70 mg, 0.16 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (28 mg, 0.098 mmol) i rastvor je mešan 90 min na 0°C. Dodat je piridin (0.3 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 3 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (5% EtOAc/DCM) je dala 55 mg (79%) TX63729 kao svetlo žutu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.47 (s, 1H), 7.38 (m, 5H), 5.81 (s, 2H), 4.18 (s, 3H), 3.08 (ddd, 1H, J = 1.6, 6.0, 17.1 Hz), 2.73 (ddd, 1H, J = 7.1, 11.7, 18.7, Hz), 2.18 (dd, 1H, J = 2.1, 12.1 Hz), 1.81-1.99 (m, 2H), 1.48 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); MS (APCI): m/z 428.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 253c: Sirovi 252 (0.41 mmol) je apsorbovan u DMF (3 mL), i dodat je K2CO3(0.28 g, 2.05 mmol), a zatim izopropil jodid (0.2 mL, 2.05 mmol). Smeša je mešana preko noći, dodata je voda (20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.18 g nečistog 253c kao braon ulje. MS (APCI): m/z 401.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 254c: Sirovi 253c (0.18 g) je apsorbovan u THF (3 mL) i dodat je 1M HCl (0.5 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 5 dana, razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 0.15 g sirovog ulja. „Flash“ hromatografija (30% EtOAc/heksan) dala je 111 mg (76%) jedinjenja 254c kao bezbojno ulje. MS (APCI): m/z 357.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 255c: Rastvor 254c (0.11 g, 0.31 mmol) u THF (3 mL) i etil formata (1 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. NaOMe (0.5 g, 30 tež.% in MeOH) je dodat ukapavanjem, i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu i ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 113 mg (95%) jedinjenja 255c kao bela pena. MS (APCI): m/z 385.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 256c: Jedinjenje 255c (113 mg, 0.29 mmol) je apsorbovano u EtOH (1 mL), THF (2 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (25 mg, 0.35 mmol) i reakcija je zagrevana na 50°C u trajanju od 3 časa, zatim hlađena i koncentrovana. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 111 mg (99%) jedinjenja 256c kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): 382.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 257c: Jedinjenje 256c (111 mg, 0.29 mmol) je suspendovano u THF:MeOH (4 mL) i dodat je NaOMe (0.5 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim hlađen i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani, i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 112 mg (100%) jedinjenja 257c kao svetlo žuta pena. MS (APCI): m/z 382.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63734: Jedinjenje 257c (111 mg, 0.29 mmol) je apsorbovano u DMF (3 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (50 mg, 0.17 mmol) i rastvor je mešan 90 min na 0°C. Dodat je piridin (0.5 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 4 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom da bi se dobilo 0.18 g svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (5% EtOAc/DCM) dala je 75 mg (68%) jedinjenja TX63734 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 5.16 (septet, 1H, J = 6.7 Hz), 4.22 (s, 3H), 3.13 (ddd, 1H, J = 1.3, 6.0, 17.1 Hz), 2.77 (ddd, 1H, J = 7.1, 11.7, 17.1 Hz), 2.22 (dd, 1H, J = 2.2, 12.1 Hz), 1.94 (m, 2H), 1.71 (d, 6H, J = 6.7 Hz), 1.52 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 380.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 258: Jedinjenje 241 (115 mg, 0.36 mmol) je suspendovano u EtOH (2 mL) i dodat je hidroksilamin (70 mg, 50% rastvor u vodi). Zagrevano do 50°C preko noći, zatim hlađeno i koncentrovano do bele čvrste supstance da bi se dobilo jedinjenje 258. MS (APCI): m/z 349.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 259: Jedinjenje 258 (0.36 mmol) je suspendovano u dioksanu (1 mL) i dodat je rastvor dimetilacetamid dimetilacetala (146 mg, 1.09 mmol) u dioksanu (1 mL). Smeša je zagrevana na 60°C u trajanju od 2 časa. Smeša je hlađena i koncentrovana do žute čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (20% EtOAc/DCM) dala je 130 mg (96%) jedinjenja 259 kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI) 373.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 260: Jedinjenje 259 (125 mg, 0.34 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL) i dodata je 1M HCl (1 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 2 dana, razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 110 mg (100%) jedinjenja 260 kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 329.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 261: Rastvor 260 (110 mg, 0.33 mmol) u THF (2 mL) i etil formatu (2 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodavan NaOMe (0.6 g, 30 tež.% u MeOH), i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu i ugašena dodavanjem zasićenog vodenog KH2PO4(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 120 mg (100%) jedinjenja 261 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 357.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 262: Jedinjenje 261 (119 mg, 0.33 mmol) je suspendovano u EtOH (2 mL), THF (2 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (28 mg, 0.40 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min, i zatim zagrevana na 50°C preko noći. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani. „Flash“ hromatografija (15% EtOAc/DCM) je dala 90 mg (77%) jedinjenja 262 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 263: Jedinjenje 262 (90 mg, 0.25 mmol) je suspendovano u THF (3 mL) i dodat je MeOH (1 mL) i NaOMe (0.5 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 3 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni KH2PO4(20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 88 mg (98%) jedinjenja 263 kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63723: Jedinjenje 263 (88 mg, 0.25 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (43 mg, 0.15 mmol) i rastvor je mešan 90 min na 0°C. Dodat je piridin (0.4 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 4 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (5% EtOAc/DCM) je dala 68 mg (78%) jedinjenja TX63723 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (s, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.02 (ddd, 1H, J = 1.3, 6.0, 17.3 Hz), 2.64 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.12 (dd, 1H, J = 2.1, 12.1 Hz), 1.75-1.94 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.16 (s, 3H); MS (APCI) m/z 352.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 264: Sirovi 252 (0.41 mmol) je apsorbovan u piridinu (3 mL), i dodat je anhidrid sirćetne kiseline (0.42 mL, 4.44 mmol). Rastvor je zagrevan na 110°C u trajanju od 3 časa, zatim hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.35 g tamno braon ulje. „Flash“ hromatografija (1:1 EtOAc/heksan) dala je 225 mg nečistog 264 kao belu penu. MS (APCI): m/z 373.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 265: Nečisti 264 (0.22 g, 0.59 mmol) je apsorbovan u THF (3 mL) i dodat je 1M HCl (0.5 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 2 dana, razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 0.20 g sirove pene. „Flash“ hromatografija (1:1 EtOAc/heksan) dala je 66 mg (34%) jedinjenja 264 kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 329.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 266: Rastvor 265 (66 mg, 0.20 mmol) u THF (2 mL) i etil formatu (2 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.36 g, 30 tež.% u MeOH) i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu, ugašena dodavanjem zasićenog vodenog KH2PO4(20 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 71 mg (99%) jedinjenja 266 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 357.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 267: Jedinjenje 266 (71 mg, 0.20 mmol) je apsorbovano u EtOH (1 mL), THF (2 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (17 mg, 0.24 mmol) i reakcija je zagrevana preko noći na 50°C, zatim hlađena i koncentrovana. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom. „Flash“ hromatografija (1:1 EtOAc/DCM) je dala 20 mg (28%) jedinjenja 267 kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 354.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 268: Jedinjenje 267 (20 mg, 0.057 mmol) je apsorbovano u 1:1 THF/MeOH (2 mL) i dodat je NaOMe (0.1 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova, zatim hlađen i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(10 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 20 mg (100%) jedinjenja 268 kao bež pena. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63735: Jedinjenje 268 (20 mg, 0.057 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (9.7 mg, 0.034 mmol) i rastvor je mešan 90 min na 0°C. Dodat je piridin (0.1 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 4 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom. „Flash“ hromatografija (10% EtOAc/DCM) dala je 12 mg (60%) jedinjenja TX63735 kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 4.23 (s, 3H), 3.06 (ddd, 1H, J =1.0, 6.0, 11.2 Hz), 2.75 (ddd, 1H, J = 7.2, 11.7, 17.1 Hz), 2.62 (s, 3H), 2.19 (dd, 1H, J = 2.0, 12.1 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 352.1 [M+H]<+>. Jedinjenje 269: U rastvor 241 (0.47 g, 1.49 mmol) u EtOH (6 mL) dodata je voda (3 mL), a zatim KOH (0.42 g, 7.45 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana. Dodat je zasićeni rastvor KH2PO4i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.50 g (100%) jedinjenja 269 kao bela pena. MS (APCI): m/z 334.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 270: DMA-dimetilacetal (2 mL) je dodat u 269 (135 mg, 0.40 mmol) i smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 2 časa. Rastvor je hlađen i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 270 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 403.3 [M+H]<+>.
Jedinjenje 271: Hidroksilamin hidrohlorid (36 mg, 0.52 mmol) je suspendovan u dioksanu (1 mL) i dodat je Et3N (0.073 mL, 0.52 mmol). Smeša je ultrazvučno obrađivana nekoliko minuta. Dodat je rastvor 270 (0.40 mmol) u dioksanu (2 mL), a zatim sirćetna kiselina (50 mg, 0.83 mmol). Smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 1 časa, i zatim je dodat dodatni hidroksilamin hidrohlorid (5 mg), a zatim sirćetna kiselina (100 mg). Smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 3 časa, zatim ostavljena da se hladi do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 150 mg lepljive bele pene. „Flash“ hromatografija (25% EtOAc/heksan) dala je 86 mg (58%) jedinjenja 271 kao bela pena. MS (APCI): m/z 373.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 272: Jedinjenje 271 (83 mg, 0.22 mmol) je apsorbovano u THF (2 mL) i dodata je 1M HCl (0.5 mL). Rastvor je mešan 2 dana, zatim razblažen zasićenim NaHCO3(10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 75 mg (100%) jedinjenja 272 kao bela pena. MS (APCI): m/z 329.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 273: Jedinjenje 272 (73 mg, 0.22 mmol) je apsorbovano u THF (2 mL) i etil formatu (1 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodavan NaOMe (0.4 g, 30 tež.% u MeOH), i rastvor je ostavljen da se zagrevan do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu, ugašena dodavanjem zasićenog vodenog KH2PO4(10 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani, i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 85 mg (>100%) jedinjenja 273 kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 357.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 274: Jedinjenje 273 (0.22 mmol) je apsorbovano u THF (2 mL), EtOH (1 mL) i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (23 mg, 0.33 mmol) i reakcija je zagrevana na 50°C u trajanju od 3 časa. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 80 mg (>100%) jedinjenja 274 kao svetlo žuta pena. MS (APCI): m/z 354.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 275: Jedinjenje 274 (Step 5) (0.22 mmol) je apsorbovano u 2:1 THF/MeOH (3 mL) i dodat je NaOMe (0.4 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 3 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(10 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 78 mg svetlo žute pene. „Flash“ hromatografija (25% EtOAc/heksan) dala je 60 mg (77%) jedinjenja 275 kao bela pena. MS (APCI): m/z 354.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63760: Jedinjenje 275 (59 mg, 0.17 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (29 mg, 0.10 mmol) i rastvor je mešan 90 min na 0°C. Dodat je piridin (0.3 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 4 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (5% EtOAc/DCM) je dala 49 mg (84%) jedinjenja TX63760 kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 4.24 (s, 3H), 3.16 (dd, 1H, J = 5.8, 17.7Hz), 2.80 (ddd, 1H, J = 7.1, 11.6, 17.5 Hz), 2.48 (s, 3H), 2.19 (dd, 1H, J = 1.7, 12.1 Hz), 1.95 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS (APCI): m/z 352.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 276: Jedinjenje 269 (29 mg, 0.087 mmol) je suspendovano u DMF-DMA (2 mL) i zagrevano na 80°C preko noći. Rastvor je hlađen i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 276 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 389.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 277: Jedinjenje 276 (0.087 mmol) je apsorbovano u dioksanu (1 mL) i dodat je HOAc (4 kapi), a zatim metil hidrazin (1 kap). Rastvor je zagrevan na 80°C u trajanju od 2 časa, zatim hlađen i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 277 kao prljavo bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 372.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 278: Jedinjenje 277 (0.087 mmol) je apsorbovano u THF (3 mL) i dodata je 1M HCl (0.5 mL). Rastvor je mešan preko noći, razblažen zasićenim NaHCO3(10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 28 mg (100%) jedinjenja 278 kao svetlo žuto ulje. MS (APCI): m/z 328.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 279: Jedinjenje 278 (28 mg, 0.087 mmol) u etil formatu (2 mL) je hlađeno u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.15 g, 30 tež.% u MeOH), i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 30 mg (97%) jedinjenja 279 kao ulje. MS (APCI): m/z 356.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 280: Jedinjenje 279 (30 mg, 0.084 mmol) je apsorbovano u EtOH (3 mL) i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (9 mg, 0.13 mmol) i reakcija je zagrevana na 60°C preko noći. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 28 mg (94%) jedinjenja 280 kao žuto-mrka pena. MS (APCI): m/z 353.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 281: Jedinjenje 280 (28 mg, 0.079 mmol) je apsorbovano u 4:1 THF/MeOH (2 mL) i dodat je NaOMe (0.15 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i mešan preko noći. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(10 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani. „Flash“ hromatografija (2-5% MeOH/CHCl3) dala je 22 mg (79%) jedinjenja 280 kao providno staklo. MS (APCI): m/z 353.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63714: Jedinjenje 281 (21 mg, 0.060 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (10.2 mg, 0.15 mmol) i rastvor je mešan 2 časa na 0°C. Dodat je piridin (0.1 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 6 časova. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (100% EtOAc) dala je 15 mg (71%) jedinjenja TX63714 kao lepljivu belu penu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 2.60 (m, 1H), 2.48 (ddd, 1H, J = 6.6, 11.4, 16.1 Hz), 2.21 (dd, 1H, J = 2.0, 12.0 Hz), 1.78-1.97 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); MS (APCI): m/z 351.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63587: Jedinjenje TX63445 (0.052 g, 0.14 mmol), K3PO4(0.086 g, 0.40 mmol), 4-fenoksifenilboronska kiselina (0.047 g, 0.22 mmol) i dimetoksietan (6 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 minuta. Dodat je Pd(PPH3)4(0.014 g, 0.012 mmol) i reakcija je prskana još 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 8g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63587 (25.3 mg) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (s, 1H), 7.38 (dd, 2H, J = 7.6, 8.1 Hz), 7.25 (m, 2H), 7.17 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 7.07 (d, 4H, J = 7.5 Hz), 3.83 (s, 3H), 2.65 (dd, 1H, J = 6.0, 16.1 Hz), 2.52 (m, 1H), 2.21 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 1.92 (dd, 1H, J = 6.6, 13.4 Hz), 1.83 (dddd, 1H, J = 6.0, 12.5, 12.8, 12.8 Hz), 1.55 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); m/z [M+H]<+>438.0.
Jedinjenje TX63588: Jedinjenje TX63445 (0.054 g, 0.146 mmol), K3PO4(0.090 g, 0.42 mmol), pinakol estar 1-metil-1H-pirazol-4-boronske kiseline (0.048 g, 0.23 mmol) i dimetoksietan (6 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 minuta. Dodat je Pd(PPH3)4(0.016 g, 0.014 mmol) i reakcija je prskana još 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija je ostavljena da se hladi i koncentrovana je do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 10 g) upotrebom 50-100% EtOAc/heksana da bi se dobilo jedinjenje TX63588 (11.6 mg) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.47 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.68 (ddd, 1H, J = 1.1,6.0, 15.8 Hz), 2.52 (dddd, 1H, J = 6.9, 7.9, 8.0, 11.6 Hz), 2.17 (dd, 1H, J = 1.9, 12.0 Hz), 1.92 (dd, 1H, J = 6.6, 13.5 Hz), 1.86 (m, 1H), 1.49 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); m/z [M+H]<+>350.0.
Jedinjenje TX63600: Jedinjenje TX63445 (0.049 g, 0.141 mmol), K3PO4(0.091 g, 0.43 mmol), naftalen-2-boronska kiselina (0.042 g, 0.28 mmol) i dimetoksietan (7 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 minuta. Dodat je Pd(PPH3)4(0.014 g, 0.012 mmol) i reakcija je prskana još 3-5 minuta. Zatim je bočica čvrsti hermetički zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 10 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63600 (23.2 mg) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.54 (s, 1H), 7.94 (d, 1H, J=5 Hz), 7.86-7.90 (m, 2H), 7.78 (br s, 1H), 7.54-7.56 (m, 1H), 7.42 (br d, 1H, J=10 Hz), 7.25 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.70 (dd, 1H, J=12.5, 5 Hz), 2.56-2.63 (m, 1H), 2.25 (dd, 1H, J=12.5, 2.5 Hz), 1.85-1.95 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z [M+H]<+>396.1.
Jedinjenje TX63603: Jedinjenje TX63445 (0.051 g, 0.146 mmol), K3PO4(0.093 g, 0.44 mmol), naftalen-1-boronska kiselina (0.053 g, 0.35 mmol) i dimetoksietan (7 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 minuta. Dodat je Pd(PPH3)4(0.018 g, 0.016 mmol) i reakcija je prskana još 3-5 minuta. Zatim je bočica čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 10 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63603 (17 mg) kao smeša interkonvertujućih atropizomera kao žuto staklo.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (s, 1H), 7.93-7.96 (m, 2H), 7.35-7.56 (m, 5H), 3.59 (s, 1.5H), 3.58 (s, 1.5H), 2.25-2.48 (m, 3H), 1.85-1.88 (m, 2H), 1.61 (s, 1.5H), 1.58 (s, 1.5H), 1.28 (s, 1.5H), 1.27 (s, 1.5H), 1.23 (s, 3H); m/z [M+H]<+>396.1.
Jedinjenje TX63625: Jedinjenje TX63445 (0.053 g, 0.152 mmol), K3PO4(0.088 g, 0.42 mmol), 3,5-dimetilizoksazol-4-boronska kiselina (0.042 g, 0.30 mmol) i dimetoksietan (6 mL) su mešani i gasoviti azot je barbotiran kroz mešanu smešu u trajanju od 3-5 minuta. Dodat je Pd(PPH3)4(0.014 g, 0.013 mmol) i gasoviti azot je barbotiran kroz mešanu smešu u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 8 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc, nakon čega sledi preparativna hromatografija na tankom sloju upotrebom 3:1 heksani/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63625 (6.6 mg) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.51 (s, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.49 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 2.36, 2.31 (s, s [1.5, 1.5] 3H), 2.25 (m, 1H), 2.20, 2.15 (s, s [1.5, 1.5] 3H), 2.1 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.26 (s, 3H); m/z:
[M+H]<+>365.0.
Jedinjenje TX63637: Jedinjenje TX63445 (0.049 g, 0.141 mmol), K2CO3(0.061 g, 0.44 mmol), metilboronska kiselina (0.037 g, 0.64 mmol) i dioksan (8 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 1-2 minuta. Dodat je Pd(dppf)Cl2(0.0167 g, 0.023 mmol) i reakcija je prskana još 1-2 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 90°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 9 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc i ponovo podvrgnuta hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 4 g) upotrebom dihlorometana/metil-t-butil etra/MeOH, 200/20/1 da bi se dobilo jedinjenje TX63637 (20 mg) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 2.65 (dd, 1H, J = 5.9, 15.6 Hz), 2.44 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.15 (m, 1H), 1.82-1.97 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); m/z: [M+H]<+>384.0.
Jedinjenje 282: Rastvor 241 (175 mg, 0.55 mmol) u THF (5 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Dodat je PhMgBr (1.1 mL, 1.0 M u THF, 1.1 mmol) i rastvor je mešan na 0°C u trajanju od 1 časa, zatim ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Dodato je još PhMgBr (1.1 mL) i posle 6 časova dodata je nova porcija PhMgBr (3.3 mL). Posle mešanja preko noći, dodata je nova porcija PhMgBr (3.3 mL). Posle mešanja preko noći, rastvor je hlađen u ledenom kupatilu i ugašen sporim dodavanjem 1M HCl (5 mL). Smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana 1 čas. Dodata je 6M HCl (2 mL) i smeša je mešana preko noći. Dodato je još THF (5 mL) i smeša je mešana 3 dana. Smeša je koncentrovana, neutralizovana sa zasićenim NaHCO3, i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.40 g ulja. „Flash“ hromatografija (30% EtOAc/heksan) dala je 0.21 g bele pene koja je smeša jedinjenja 282 i 283 MS (APCI): m/z 395, 351 [M+H]<+>.
Jedinjenje 283: Smeša 282 i 283 (0.21 g) je apsorbovana u THF (4 mL) i dodat je 1M HCl (1 mL). Rastvor je mešan preko noći, i zatim zagrevan na 40°C u trajanju od 6 časova. Posle hlađenja, rastvor je neutralizovan sa zsićenim NaHCO3(25 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.18 g (93%) jedinjenja 283 kao bela pena. MS (APCI): m/z 351.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 284: Rastvor 283 (0.18 g, 0.51 mmol) u etil formatu (3 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.9g, 30 tež.% u MeOH), i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu, ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4(25 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 184 mg (97%) jedinjenka 284 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 379.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 285: Jedinjenje 284 (184 mg, 0.49 mmol) je apsorbovano u EtOH (2 mL), THF (5 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (37 mg, 0.53 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min, i zatim zagrevana na 50°C u trajanju od 4 časa. Dodato je još hidroksilamin hidrohlorida (10 mg) i zagrevanje je nastavljeno preko noći. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 180 mg (98%) jedinjenja 285 kao bela pena. MS (APCI): m/z 376.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 286: Jedinjenje 285 (180 mg, 0.48 mmol) je apsorbovano u 5:1 THF/MeOH (6 mL) i dodat je NaOMe (0.9 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i mešan preko noći. Rastvor je koncentrovan, dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(25 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 0.18 g svetlo žute pene. „Flash“ hromatografija (40% EtOAc/hekan) dala je 150 mg (83%) jedinjenja 286 kao belu čvrstu supstancu. MS (APCI): m/z 376.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63667: Jedinjenje 286 (150 mg, 0.40 mmol) je apsorbovano u DMF (3 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (69 mg, 0.24 mmol) i rastvor je mešan 2 časa na 0°C. Dodat je piridin (0.5 mL) i rastvor je zagrevan na 55°C u trajanju od 5 časova. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (25% EtOAc/hksan) je dala 135 mg (90%) jedinjenja TX63667 kao belu penu.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.76 (m, 2H), 7.66 (m, 1H), 7.54 (m, 2H), 4.06 (s, 3H), 2.24-2.38 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 1.69-1.83 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); MS (APCI): m/z 374.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 287: N-Hlorosukcinimid (0.124 g.0.93 mmol) je dodat u mešanu smešu jedinjenja 27 (0.235 g, 0.81 mmol) u dihlorometanu (10 mL) i smeša je mešana 4 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja, i ostatak je apsorboban u EtOAc (80 mL), rastvor je ispran vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL), organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 287 (347.8 mg) kao staklo/čvrsta supstanca. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku. m/z [M+H]<+>325.0, 326.9.
Jedinjenje 288: Jedinjenje 287 (347.8 mg, 1.07 mmol) je apsorbovano u MeOH, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (50 mL) i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 288 (198 mg, 76%), m/z: [M+H]<+>280.9, 282.8.
Jedinjenje 289: Jedinjenje 288 (192 mg, 0.68 mmol) je apsorbovano u MeOH, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (50 mL) i ispran zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor), zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 289 (189.8 mg, 91%). m/z [M+H]<+>308.9.
Jedinjenje 290: Jedinjenje 289 (189.8 mg, 0.61 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana sa KH2PO4(vodeni rastvor), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 12 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje 290 (92.8 mg, 50%) kao bela čvrsta supstanca. m/z: [M+H]<+>305.9.
Jedinjenje 291: Jedinjenje 290 (89 mg, 0.29 mmol) je rastvoreno u smeši 3/1 MeOH/THF i dodat je natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH) i reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 5 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4(vodeni rastvor), i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje 291 (88.6 mg) kao staklo/pena. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku.
Jedinjenje TX63604: Jedinjenje 291 (88.6 mg, 0.29 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je dibromodimetilhidantoin i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63604 (52.5 mg, 60%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.39 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.65 (dd, 1H, J=17.5, 7.5 Hz), 2.39-2.46 (m, 1H), 2.11 (app d, 1H, J=10 Hz), 1.94 (dd, 1H, J=12.5, 7.5 Hz), 1.82 (ddd, 1H, J=25, 12.5, 5 Hz), 1.45 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); m/z [M+H]<+>303.9.
Jedinjenje 292: Rastvor 106 (173 mg, 0.57 mmol) u MeOH je tretiran sa 3N rastvorom HCl, mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL) i zasićenim rastvorom NaHCO3(15 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 292 koje je korišćeno direktno u sledećem koraku. Jedinjenje 293: Jedinjenje 292 (prepostaviti 0.57 mmol iz prethodnog koraka) je apsorbovano u dioksanu (10 mL) i vodi (6 mL) i hlađeno do 0°C. Dodati su trietilamin (0.7 mL, 5 mmol), DMAP (0.013 g, 0.11 mmol) i Boc2O (0.167 g, 0.78 mmol) i reakciona smeša je ostavljena da se lagano zagreva do sobne temperature. Posle 3 časa dodato je još Boc2O (0.48 g, 2.2 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i apsrobovana u MeCN. Dodato je još katalitičkog DMAP i Boc2O (0.21 g, 1.0 mmol) i smeša je zagrevana do 50°C. Smeša je koncentrovana do sušenja. Dodat je EtOAc i nerastvorljivi materijal je uklonjen filtracijom. Filtrat je koncentrovan i resuspendovan u THF (1 mL). Dodato je još Boc2O (0.71 g, 3.3 mmol) i smeša je zagrevana do 55°C preko noći, zatim zagrevana na 65°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i podvrgnuta hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 12 g) upotrebom 50% EtOAc/heksana da bi se dobio proizvod kao smeša jedinjenja 293 i bis-Boc proizvodi, 0.0471 g. MS: m/z [M+H]<+>362.1, 462.2.
Jedinjenje 294: U rastvor 293 (47.1 mg, ∼0.11 mmol) u HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena zasićenim vodenim rastvorom KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 294 (49.8 mg). MS (APCI): [M+H]<+>390.1.
Jedinjenje 295: U rastvor 294 (0.0498 g, 0.128 mmol) u EtOH, dodati su NH2OH·HCl so (neutralizovana sa TEA) i piridinijum para-toluensulfonatni rastvor u MeOH i smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 4 časa. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 295 (91 mg) kao pena (ova ukupna količina reflektuje kombinaciju sa ranijim eksperimentom). m/z [M+H]<+>387.1.
Jedinjenje 296: U rastvor 295 (0.091 g, 0.23 mmol) u THF i MeOH, dodat je 30% NaOMe (8 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa KH2PO4(zasićen, 15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 296 (71 mg, 78%) kao prljavo bela pena. m/z [M+H]<+>387.1 Jedinjenje TX63594: Jedinjenje 296 (0.071 g, 0.18 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je dibromodimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C u trajanju od 2 časa. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63594 (8.7 mg, 12.5%).<1>H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 8.42 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.52-3.55 (m, 1H), 2.31-2.36 (m, 1H), 2.11-2.13 (m, 1H), 1.75-1.86 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.39 (s, 3H), 1.21 (s, 3H), 1.12 (s, 3H); m/z [M+H]<+>385.1.
Jedinjenje TX63642: Jedinjenje TX63467 (0.021 g, 0.082 mmol) je apsorbovano u smeši zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(0.5 mL) i THF (2.0 mL) i je hlađena u ledenom kupatilu. Doadat je rastvor benzoil hlorida u THF i reakciona smeša je mešana na 0°C nekoliko minuta, nakon čega je dodato još rastvora benzoil hlorida i reakciona smeša je mešana još nekoliko minuta. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc (40 mL) i fiziološkog rastvora (2 mL), slojevi su odvojeni, organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do ulja. Ulje je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 8 g) upotrebom 10:1 heksana/EtOAc. Jedinjenje TX63642 (14 mg) je dobijeno kao providno staklo.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (s, 1H), 8.12-8.15 (m, 3H), 7.68 (m, 1H), 7.57 (m, 2H), 2.96 (dd, 1H, J = 5.9, 16.7 Hz), 2.69 (m, 1H), 2.24 (dd, 1H, J = 2.0, 12.0 Hz), 1.89-2.03 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); m/z [M+H]<+>360.0, 255.9 (M-PhCO).
Jedinjenje TX63611: TX63579 (17 mg, 0.051 mmol) je apsorbovano u smeši zasićenog NaHCO3(vodeni rastvor, 0.5 mL) i THF (1.5 mL), i smeša je hlađena do 0°C. Dodat je acetil hlorid (1 kap, višak) i reakciona smeša je mešana 40 min na 0°C. Zatim je dodato još acetil hlorida (2 kapi, višak) i reakciona smeša je mešana dodatnih 20 minuta. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (40 mL) i isprana sa NaCl (vodeni, 10 mL), zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 25% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje TX63611 (2.9 mg, 15%) kao providno staklo.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 7.40-7.46 (m, 3H), 7.26-7.30 (m, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.64-2.73 (m, 1H), 2.46-2.55 (m, 1H), 2.30-2.34 (m, 1H), 1.82-1.95 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z 298 [M+H]<+>.
Jedinjenje 297: Rastvor 25 (1.4 g, 5.5 mmol) u THF (10 mL) je dodat u refluksujuću smešu dimetil karbonata (6 ekviv.) i NaH (višak) u THF (10 mL). Reakcija je mešana na refluksu u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, ugašena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 297 (1.5 g, 87%) kao čvrsta supstanca. m/z 311 [M+H]<+>.
Jedinjenje 298: Smeša 297 (1 g, 3.17 mmol), metil hidrazina (300 mg, 6.5 mmol), i EtOH (15 mL) je zagrevana na 60°C u trajanju od 16 časova. EtOH je uklonjen, i sirovi proizvod je tretiran sa 20 mL dietil etra. Talog je sakupljen filtracijom da bi se dobilo jedinjenje 298 kao bela čvrsta supstanca (450 mg, 46% prinos). MS: m/z [M+H]<+>307.
Jedinjenje 299: Rastvor 298 (190 mg, 1.2 mmol) u MeOH (5 mL) je tretiran sa 3N HCl (vodeni rastvor) (2 mL) i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana pomoću EtOAc (2x25 mL) i isprana zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) (20 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 299 (165 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>263.
Jedinjenje 300: U rastvor 299 (165 mg, 0.62 mmol) u 5 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi je dodat 30% NaOMe u MeOH (1.3 g, 10 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sa KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 300 (180 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>291.
Jedinjenje 301: U rastvor 300 (180 mg, 0.62 mmol) u 10 mL EtOH dodat je NH2OH-HCl (95 mg, 2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 301 kao čvrsta supstanca (178 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>288.
Jedinjenje 302: U rastvor 301 (178 mg, 0.62 mmol) u 2:1 THF/MeOH (3 mL) ukapavanjem je dodat 30% NaOMe (1.2 g, 10 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 9 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(25 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 302 kao prljavo beli čvrsti proizvod (175 mg, 99% prinos). MS: m/z [M+H]<+>288.
Jedinjenje TX63676: U rastvor 302 (175 mg, 0.61 mmol) u 2 mL DMF na 0°C dodat je dibromodimetilhidantoin (100 mg, 0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 20-55% EtOAc/heksanima da bi se sakupila smeša početnog cijanoketona i cijanoenon proizvoda (35 mg). Ova smeša (30 mg) je mešana sa DDQ (30 mg, 0.13 mmol) u 1 mL benzena, i zagrevana do refluksa u trajanju od 16 časova. Dobijena smeša je rastvorena u 10 mL EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3(2x15 mL). Organski sloj je koncentrovan i ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 20-55% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63676 kao prljavo bela čvrsta supstanca (15 mg, 9% prinos).<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.46 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.09 (m, 1H), 1.95 (m, 2H), 1.66 (m, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.39 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.19 (s, 3H); MS: m/z [M+H]<+>286.
Jedinjenje 303a-b: U smešu 298 (670 mg, 2.18 mmol) i K2CO3(910 mg, 6.55 mmol) u 15 mL DMF na sobnoj temperaturi je dodat MeI (625 mg, 4.4 mmol). Smeša je mešana 16 časova. Reakciona smeša je ugašena sa 100 mL vode i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 10-35% EtOAc/heksanima da bi se dobila smeša 303a-b (450 mg). MS: m/z [M+H]<+>321.
Jedinjenje 304a-b: Rastvor 303a-b (450 mg, 1.4 mmol) u MeOH (10 mL) je tretiran sa 3N rastvoom HCl (4 mL), i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana pomoću EtOAc (2325 mL) i isprana zasićenim rastvorom NaHCO3(20 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobila smeša 304a-b kao ulje (390 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>277.
Jedinjenje 305a-b: U rastvor 304a-b (390 mg, 1.4 mmol) u 6 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (1.5 g, 6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim sipana u vodu i zakišeljena sa KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobila smeša 305a-b (425 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>305.
Jedinjenje 306a-b: U rastvor 305a-b (425 mg, 1.4 mmol) u 10 mL EtOH, dodata je NH2OH·HCl so (195 mg, 2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobila smeša 306a-b kao ulje (425 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>302.
Jedinjenje 307a-b: U rastvor 306a-b (425 mg, 1.4 mmol) u 1:1 THF/MeOH (4 mL), dodat je 30% NaOMe (2 g, 8 ekv.). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(25 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani da bi se dobila smeša 307a-b kao ulje (425 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>302.
Jedinjenja TX63691 i TX63692: U rastvor 307a-b (425 mg, 1.4 mmol) u 3 mL DMF na 0°C dodat je dibromodimetilhidantoin (222 mg, 0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (2 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 10-50% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63691 kao prljavo bela čvrsta supstanca. Rf= 0.5 (heksan/EtOAc 1:3) (25 mg, 6% prinos);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 2.84 (ddd, 1H, J = 1.4, 5.9, 15.2 Hz), 2.59 (m, 1H), 2.11 (dd, 1H, J = 2.4, 11.7 Hz), 1.75-1.91 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.19 (s, 3H); MS: m/z [M+H]<+>300. Nastavljeno eluiranje dalo je žutu penu, Rf= 0.25 (heksan/EtOAc 1:3) (260 mg, 62% prinos), MS: m/z [M+H]<+>302. Ovaj materijal (260 mg) je mešan sa DDQ (200 mg, 0.88 mmol) u 10 mL benzena, i zagrevan do refluksa u trajanju od 16 časova. Dobijena smeša je rastvorena u 25 mL EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3(2x25 mL). Organski sloj je koncentrovan, i ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 20-60% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63692 (60 mg, 15% prinos) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.34 (s, 1H), 3.30 (s, 3H), 2.09 (m, 1H), 1.73-1.92 (m, 3H), 1.48 (s, 3H), 1.42 (m, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.21 (s, 6H); MS: m/z [M+H]<+>300.
Jedinjenje 308 i TX63804: Smeša 70 (0.48 g, 1.49 mmol) i IBX (1.67 g, 4 ekv.) u DMF (8 mL) je zagrevana do 65°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je ugašena zasićenim rastvorom NaHCO3(25 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, i sušeni sa MgSO4. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 5-35% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca, 308, Rf= 0.45 (heksan/EtOAc 3:2) (286 mg, 60% prinos), MS: m/z [M+H]<+>321. TX63804 je takođe izolovan kao žuta pena Rf= 0.35 (heksan/EtOAc 3:2) (15 mg, 3% prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.73 (d, 1H, J = 10.4 Hz), 7.39-7.51 (m, 5H), δ 6.08 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 3.75 (s, 3H), 2.63-2.75 (m, 2H), δ 2.54 (q, 1H, J = 13.2 Hz), 1.53 (s, 3H), 1.20 (s, 6H); MS: m/z [M+H]<+>335.
Jedinjenje 309: U rastvor 308 (286 mg, 0.89 mmol) u THF (5 mL) i piridinu (0.22 g, 3 ekv.) dodat je jod (0.46 g, 2 ekv.), i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ugašena zasićenim rastvorom natrijum tiosulfata (25 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x30 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i sušeni sa MgSO4. Posle koncentrovanja in vacuo, jedinjenje 309 je izolovano kao svetlo obojena čvrsta supstanca (395 mg, 100%), MS: m/z [M+H]<+>447.
Jedinjenje TX63803: Smeša 309 (0.2 g, 0.45 mmol) i CuI (0.22g, 2.5 ekv.) u DMF (5 mL) zagrevana je do 70°C. Redom su dodati FSO2CF2CO2Me (1.3 g, 15 ekv.) i HMPA (1.4 g, 17 ekv.) i smeša je zagrevana na 70°C u trajanju od 6 časova. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl (25 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i sušeni sa MgSO4. Posle koncentrovanja in vacuo, hromatogrfija na silika gelu, eluiranjem sa 5-35% EtOAc/heksanima, dala je jedinjenje TX63803 kao belu čvrstu supstancu (110 mg, 63%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.31 (s, 1H), 7.47 (m, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.66 (dd, 1H, J = 5.9, 16.1 Hz), 2.54 (ddd, 1H, J = 6.6, 11.2, 15.9 Hz), 2.21 (d, 1H, J = 11.7 Hz), 1.86 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.24 (s, 3H); MS: m/z [M+H]<+>389.
Jedinjenje 310a-b: Jedinjenje 26 (0.72 g, 2.57 mmol), 3-aminopirazol (0.222 g, 2.67 mmol), hidrat p-toluensulfonske kiseline (0.025 g, 0.12 mmol) i toluen (70 mL) su zagrevani do refluksa sa uklanjanjem vode korišćenjem Dean-Stark zamke. Reakciona smeša je refluksovana preko noći i hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je apsorbovan u EtOAc (80 mL), ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(15 mL), i fiziološkim rastvorom (15 mL), sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do žute čvrste supstance. Čvrsta supstanca je podvrgnuta hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 16 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc. Proizvod(i) je/su dobijeni na sledeći način: 310a (410 mg, 49%) - čist nepolarni izomer kao bela čvrsta supstanca. m/z [M+H]<+>328.0. 310b (56 mg, 6.7%) - čist polarni izomer kao žuto staklo, MS: m/z [M+H]<+>328.0.
Jedinjenje 311a: Jedinjenje 311a (0.326 g, 1.15 mmol) je apsorbovano u MeOH, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc (50 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni da bi se dobilo jedinjenje 311a (303.5 mg, 100%). m/z [M+H]<+>283.9.
Jedinjenje 312a: Jedinjenje 311a (0.326 g, 1.15 mmol) je apsorbovano u etil formatu, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 311a (393 mg). m/z [M+H]<+>312.0.
Jedinjenje 313a: Rastvor 0.1 N hidroksilamie hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 312a (0.393 g, 1.26 mmol). Dodata je smeša 9:1 EtOH/H2O i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan u EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 313a (352 mg) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. m/z [M+H]<+>309.0.
Jedinjenje 314a: Jedinjenje 313a (0.3518 g, 1.14 mmol) je rastvoreno u smeši 3:1 MeOH/THF i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 6 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50% EtOAc/heksani) do jedinjenja 313a (351 mg) kao žute čvrste supstance. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku.
Jedinjenje TX63627 i TX63615: Jedinjenje 314a (0.204 g, 0.66 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija je mešana na 0°C sve dok početni materijal nije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, doat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (230-400 mreža, 18 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63627 (34.1 mg, 17%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.62 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.28 (s, 1H) 3.06 (m, 1H), 2.99 (m, 1H), 2.38 (d, 1H, J = 11.4 Hz), 2.12 (dd, 1H, 6.2, 5.9 Hz), 1.92 (m, 1H), 1.84 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.35 (s, 3H). m/z: [M+H]<+>306.9. TX63615 (59.6 mg, 24%) je takođe izolovan kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.58 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 3.04 (dd, 1H, J=20, 5 Hz), 2.90-2.97 (m, 1H), 2.33 (d, 1H, J=10 Hz), 2.08 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 1.83-1.92 (m, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.32 (s, 3H); m/z [M+H]<+>384.9, 386.8.
Jedinjenje TX63626: Jedinjenje TX63615 (0.0486 g, 0.126 mmol), K3PO4(0.086 g, 0.41 mmol), fenilboronska kiselina (0.024 g, 0.20 mmol) i dimetoksietan (6 mL) su mešani i gasoviti azot je barbotiran kroz mešanu smešu u trajanju od 1-2 minuta. Dodat je Pd(PPH3)4(0.015 g, 0.012 mmol) i gasoviti azot je barbotiran kroz mešanu smešu u trajanju od 1-2 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 90°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 9.7 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc, nakon čega je usledilo drugo prečišćavanje na silika gelu upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63626 (12.8 mg, 26%) kao žućkasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.75 (s, 1H), 8.41 (d, 2H, J = 13.3 HZ), 8.03 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.50 (t, 1H, J = 7.6, 7.6 Hz), 7.33 (t, 1H, J = 7.2, 7.6 Hz), 3.07 (m, 1H), 2.98 (m, 1H), 2.30 (d, 1H, J = 12.4 Hz), 2.11 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.89 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (s, 3H); m/z: [M+H]<+>383.0.
Jedinjenje 311b: Jedinjenje 310b (0.0523 g, 0.16 mmol) je apsorbovano u MeOH, i dodata je 1 N HCl (vodeni rastvor). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim koncentrovana. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc (50 mL) i isprana zasićenim NaHCO3, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni da bi se dobilo jedinjenje 311b (40.7 mg, 90%). m/z [M+H]<+>283.9.
Jedinjenje 312b: Jedinjenje 311b (0.0407 g, 0.144 mmol) je apsorbovano u etil formatu i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa KH2PO4(vodeni rastvor) i ekstrahovana sa EtOAc, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 312b (42.2 mg). m/z [M+H]<+>312.0.
Jedinjenje 313b: Rastvor 0.1 N hidroksilamin hidrohlorida (vodeni rastvor) je dodat u jedinjenje 312b (0.0422 g, 0.136 mmol). Dodata je smeša 9:1 EtOH/H2O, i reakciona smeša je mešana preko noći na 50°C. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je apsorbovan EtOAc, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 313b (43.7 mg) kao žuto staklo. m/z [M+H]<+>309.0.
Jedinjenje 314b: Jedinjenje 313b (0.0437 g, 0.14 mmol) je rastvoreno u smeši 3:1 MeOH/TH, i dodat je 30% natrijum metoksid (30 tež.% rastvor u MeOH). Reakciona smeša je mešana na 55°C u trajanju od 6 časova i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog KH2PO4, i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc i ispran fiziološkim rastvorom, zatim sušen sa MgSO4i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje 314b (44.5 mg). Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku.
Jedinjenje TX63617: Jedinjenje 314b (0.0445 g, 0.14 mmol) je rastvoreno u suvom DMF, i rastvor je hlađen do 0°C. Dodat je 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin i reakcija mešana na 0°C sve dok početni materijal mnije potrošen (približno 30 min), kao što je zabeleženo pomoću hromatografije na tankom sloju. Zatim, dodat je piridin i reakcija je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim mešana na 50°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom, zatim sušena sa MgSO4i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (230-400 mreža, 10 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc, a zatim je usledilo drugo prečišćavanje na silika gelu (230-400 mreža, 8 g) upotrebom 1% metil-tbutiletra/DCM da bi se dobilo jedinjenje TX63617 (18 mg, 33%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.96 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 3.14 (dd, 1H, J=16.4, 6.0 Hz), 2.96-3.03 (m, 1H), 2.27 (dd, 1H, J=11.9, 3.4 Hz), 2.00-2.11 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.23 (s, 3H); m/z: [M+H]<+>384.9, 386.9.
Jedinjenje 316a-b: Rastvor neznatno nečiste smeše 130, 315 i nečistoće X (1.96 g, pretpostavljeno 5.21 mmol, sa 130 kao glavnom frakcijom) i 3N HCl (20 mL, 60 mmol) u 20 mL MeOH je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa koncentrovanim NH4OH do pH ∼10 zatim ekstrahovan sa CHCl3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 1.47 g (91%) neodvojive smeše 316a-b i X kao svetlo žuta penasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje 317a-b i X: U mešajući rastvor neznatno nečiste smeše 316a-b i X (1.47 g, pretpostaviti 4.73 mmol) i etil formata (3.8 mL, 47.0 mmol) u 20 mL benzena ukapavanjem je dodat NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (4.4 mL, 23.4 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 1.51 g (94%) nerazdvojive smeše 317a-b i X kao narandžasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI): m/z 387 (78%) [M+H]<+>i 339/341 (91/100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 318a-b i X: Rastvor neznatno nečiste smeše 317a-b i X (1.51 g, pretpostaviti 4.46 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.47 g, 6.76 mmol) u 20 mL etanola je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan i podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 1.47 g (98%) nerazdvojive smeše 318a-b i X kao tamno braon penasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 384 (79%) [M+H]<+>i 336/338 (90/100%).
Jedinjenje 319a-b i X: U mešajući rastvor neznatno nečiste smeše 318a-b i X (1.47 g pretpostaviti 4.37 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 50 mL MeOH ukapšavanjem je dodat NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (4.1 mL, 21.8 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan i zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovana. Uzorak je podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.81 g (55%) nerazdvojive smeše 319a-b i X kao svetlo žuta penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 336/338 (96/100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63606 i TX63649: U mešajući rastvor na 0°C pod N2smeše 319a-b i X (0.81 g, 2.40 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.38 g, 1.33 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (1.90 mL, 23.49 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim je podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovana. Uzorak je podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.56 g (69%) jedinjenja TX63606 kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 3.82 (s, 3H), 2.49-2.60 (m, 2H), 2.38-2.45 (m, 1H), 2.00-2.06 (m, 2H), 1.66-1.75 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.28 (br d, 3H, J=5 Hz); MS (APCI) m/z 334/336 (95/100%) [M+H]<+>. Sve nečiste frakcije iz gore navedene hromatografije su spojene, koncentrovane i ponovo podvrgnute hromatografiji (silika gel, 25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.019 g (2%) jedinjenja TX63649 kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.21 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 2.51-2.63 (m, 2H), 2.38 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.62 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 334/336 (96/100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63650 i TX63656: Jedinjenje TX63606 (0.102 g, 0.31 mmol), K3PO4(0.190 g, 0.90 mmol), 3- metilfenilboronska kiselina (0.065 g, 0.48 mmol) i dimetoksietan (7 mL) su mešani i rastvor je prskan sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.022 g, 0.019 mmol) i rastvor je ponovo prskan u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija je ostavljena da se hladi i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 10 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63650 (52 mg) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.48 (s, 1H), 7.34 (t, 1H, J = 7.6, 7.3 Hz), 7.22 (d, 1H, 7.7 Hz), 7.11 (d, 2H, 7.8 Hz), 3.77 (s, 3H), 2.53 (m, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J =6.8)); m/z: [M+H]<+>346.1. TX63656 (2.9 mg) je takođe izolovan kao žuto staklo; m/z [M+H]<+>344.0.
Jedinjenje TX63659 i TX63663: Jedinjenje TX63606 (0.141 g, 0.42 mmol), K3PO4(0.27 g, 1.27 mmol), 3-fluorofenilboronska kiselina (0.091 g, 0.65 mmol) i dimetoksietan (10 mL) su mešani i rastvor je prskan sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.027 g, 0.023 mmol) i rastvor je ponovo prskan u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevan na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena, i rastvarač je odliven iz čvrstih supstanci. Tečnost je koncentrovana do ostatka koji je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 14 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63659 (42 mg) kao žuta pena/staklo.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.51 (s, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.14 (m, 2H), 7.06 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.58 (m, 3H), 2.15 (m, 1H), 2.07 (m, 1H), 1.75 (m, 1H), 1.50 (s, 3H), 1.33 (d, 3H); m/z: [M+H]<+>350.0; i TX63663 (6.4 mg) kao žuto staklo.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.32 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H, J = 6.3, 7.79, 7.74), 7.15 (t, 1H, J = 8.49, 8.49), 7.12 (d, 1H, J = 7.67), 7.06-7.02 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.16-3.08 (m, 1H), 2.83-2.75 (m, 1H), 2.68-2.55 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.72 (s, 3H); m/z [M+H]<+>348.0.
Jedinjenje TX63664: Jedinjenje TX63606 (0.1209 g, 0.36 mmol), K3PO4(0.227 g, 1.07 mmol), 3-metoksifenilboronska kiselina (0.083 g, 0.55 mmol) i dimetoksietan (8 mL) su mešani i rastvor je prskan sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.030 g, 0.026 mmol) i rastvor je ponovo prskan u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevan na 80°C preko noći uz mešanje. Reakcija hlađen i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 15 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63664 (34 mg) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 7.42 (t, 1H, J = 7.83, 8.06), 6.96 (d, 1H, J = 8.38), 6.92 (d, 1H, J = 7.58), 6.87 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.67 (dd, 1H, J = 6.46, 9.77, 6.59 Hz), 2.62-2.54 (m, 2H), 2.16 (t, 1H, J = 12.86, 12.75), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.80-1.62 (m, 1H), 1.50 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 6.74); m/z: [M+H]<+>362.1.
Jedinjenje 320a: Jedinjenje 130 (0.450 g, 1.27 mmol), K3PO4(0.86 g, 4.05 mmol), pinakol estar 1-metilpirazol-4-boronske kiseline (0.554 g, 2.65 mmol) i dimetoksietan (20 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.122 g, 0.11 mmol) i reakcija je ponovo prskana u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevan na 95°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaCl (40 mL), i organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Dobijeno ulje je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 18 g) upotrebom EtOAc kao eluanta da bi se dobilo jedinjenje 320a (374.5 mg) kao žuta pena/staklo, m/z [M+H]<+>357.1.
Jedinjenje 321a: Jedinjenje 320a (0.371 g, 1.04 mmol) je apsorbovano u MeOH (15 mL) i 1N HCl (5 mL), i smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio MeOH i zatim podeljena između EtOAc (80 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(15 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do prljavo bele čvrste supstance (321a, 285 mg). m/z: [M+H]<+>313.1.
Jedinjenje 322a: Jedinjenje 321a (0.285 g, 0.91 mmol) je apsorbovano u etil formatu (30 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.1 mL, 5.9 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je podeljen između zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(20 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do stakla (322a, 323 mg). m/z: [M+H]<+>341.0.
Jedinjenje 323a: Rastvor hidroksilamin hidrohlorida (0.105 g, 1.52 mmol) je dodat u 322a (0.323 g, 0.95 mmol) u 10:1 EtOH/H2O (22 mL). Smeša je kratko zagrevana do 50°C i zatim mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja, podeljena između EtOAc (100 mL) i fiziološkog rastvora (20 mL) i organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do pene/čvrste supstance (323a, 289 mg). m/z: [M+H]<+>338.0.
Jedinjenje 324a: Jedinjenje 323a (0.289 g, 0.86 mmol) je apsorbovano u 1:1 MeOH/THF, (20 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.0 mL, 5.4 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je podeljena između zasićenog KH2PO4(20 mL) i EtOAc (100 mL), slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 324a (275 mg) kao staklo/pena. m/z: [M+H]<+>338.0.
Jedinjenje TX63690: Jedinjenje 324a (0.275 g, 0.82 mmol) je apsorbovano u benzenu (30 mL) i dodat je DDQ (0.220 g, 0.969 mmol) i reakciona smeša je kratko zagrevana do 45°C i formiran je taman talog. Dodat je DCM (20 mL) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i zatim razblažena sa EtOAc (80 mL) i isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(2x20 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji dva puta na silika gelu (230-400 mreža) upotrebom 50% EtOAc/DCM da bi se dobilo staklo. Staklo je apsorbovano u etil etru (5 mL) i posle stajanja na sobnoj temperaturi formirana je čvrsta supstanca i sakupljena je filtracijom, isprana etil etrom (1 mL) i sušena u struji vazduha, da bi se dobilo jedinjenje TX63690 (69 mg) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 2.65 (m, 1H), 2.48-2.58 (m, 2H), 1.99-2.12 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); m/z: [M+H]<+>336.0.
Jedinjenje 320b: Jedinjenje 130 (0.455 g, 1.28 mmol), K3PO4(0.877 g, 4.14 mmol), 2-fluorofenilboronska kiselina (0.343 g, 2.48 mmol), dimetoksietan (12 mL) i DMF (6 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.126 g, 0.11 mmol) i reakcija je ponovo prskana u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 95°C u trajanju od 2 dana uz mešanje. Reakcija je ostavljena da se hladi i koncentrovana je do sušenja. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i vode (20 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (20 mL), slojevi su odvojeni, spojeni vodeni slojevi su isprani sa EtOAc (50 mL) i spojeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani, koncentrovani i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 19.7 g) upotrebom 40% EtOAc/heksana kao eluanta da bi se dobilo jedinjenje 320b (134.6 mg) kao providno staklo, m/z: [M+H]<+>371.1.
Jedinjenje 321b: Jedinjenje 320b (0.1346 g, 0.36 mmol) je apsorbovano u MeOH (20 mL) i 1N HCl (3 mL) i smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio MeOH i zatim podeljena između EtOAc (50 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 321b (108 mg) kao pena/staklo. m/z: [M+H]<+>327.1.
Jedinjenje 322b: Jedinjenje 321b (0.108 g, 0.33 mmol) je apsorbovano u etil formatu (10 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (0.4 mL, 2.1 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim podeljena između zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(10 mL) i EtOAc (80 mL). Organski sloj je ekstrahovan fiziološkim rastvorom (10 mL) i sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do stakla (322b, 111 mg). m/z: [M+H]<+>355.1.
Jedinjenje 323b: Rastvor 0.1 M hidroksilamin hidrohlorida u 9:1 EtOH/H2O (6 mL) je dodat u 322b (0.111 g, 0.31 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio etanol, podeljena između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaCl (10 mL) i organski rastvor je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do stakla (323b, 113 mg). m/z: [M+H]<+>352.1
Jedinjenje 324b: Jedinjenje 323b (0.113 g, 0.32 mmol) je apsorbovano u 1:1 MeOH/THF (6 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (0.3 mL, 1.6 mmol). Smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi, zatim podeljena između zasićenog KH2PO4(15 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 324b (110.5 mg) kao pena. m/z: [M+H]<+>352.1.
Jedinjenje TX63721: Jedinjenje 324b (0.1105 g, 0.31 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i smeša je hlađena do 0°C. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (0.051 g, 0.18 mmol) i mešan sve dok početni materijal nije potrošen što je određen pomoću hromatografije na tankom sloju. Dodat je piridin (0.2 mL, 2.4 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature, i zatim je zagrevana na 60°C u trajanju od 2.5 časa. Reakciona smeša je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 16.6 g) upotrebom 3:1 heksana/ EtOAc da bi se dobilo jedinjenje TX63721 (45.7 mg) kao prljavo bela pena.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.48 (s, 1H), 7.26-7.43 (m, 4H), 3.72 (s, 3H), 2.47-2.57 (m, 3H), 2.14 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.70 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.22 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z: [M+H]<+>350.1.
Jedinjenje 320c: Jedinjenje 130 (0.450 g, 1.27 mmol), K3PO4(0.866 g, 4.08 mmol), 4-piridinboronska kiselina (0.310 g, 2.58 mmol), dimetoksietan (12 mL) i DMF (6 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.120 g, 0.10 mmol) i reakcija je ponovo prskana u trajanju od 3-5 minuta. Zatim je bočica čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 95°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i vode (20 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (20 mL), slojevi su odvojeni, i spojeni vodeni slojevi su isprani sa EtOAc (50 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 20 g) upotrebom 3% MeOH/EtOAc kao eluanta da bi se dobilo jedinjenje 320c (404.4 mg) kao bela pena/čvrsta supstanca, m/z: [M+H]<+>354.1.
Jedinjenje 321c: Jedinjenje 320c (0.402 g, 1.14 mmol) je apsorbovano u MeOH (25 mL) i 1N HCl (6 mL) i smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio MeOH i zatim je podeljena između EtOAc (80 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(15 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do pene/stakla (321c, 342 mg). m/z: [M+H]<+>310.0.
Jedinjenje 322c: Jedinjenje 321c (0.310 g, 1.0 mmol) je apsorbovano u etil formatu (30 mL), i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.2 mL, 6.5 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je podeljena između zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(40 mL) i EtOAc (100 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (50 mL) i spojeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani do stakla (322c, 330 mg). m/z: [M+H]<+>338.0.
Jedinjenje 323c: Rastvor 0.1 M hidroksilamin hidrohlorida u 9:1 EtOH/H2O (17.6 mL) je dodat u 322c (0.330 g, 0.98 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio etanol, podeljena između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(20 mL) i organski rastvor je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do pene (323c, 321 mg). m/z: [M+H]<+>335.1.
Jedinjenje 324c: Jedinjenje 323c (0.321 g, 0.96 mmol) je apsorbovano u 1:1 MeOH/THF (20 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.0 mL, 5.4 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, i zatim podeljena između zasićenog KH2PO4(20 mL) i EtOAc (150 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 324c (312 mg) kao pena. m/z: [M+H]<+>335.1.
Jedinjenje TX63720: Jedinjenje 324c (0.312 g, 0.93 mmol) je apsorbovano u DCM (40 mL). Dodat je DDQ (0.252 g, 1.11 mmol) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja, podeljena između EtOAc (150 mL), i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (100 mL), i spojeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 20 g) upotrebom 2% MeOH/DCM kao eluanta da bi se dobilo zelenkasto ulje. Ulje je triturisano sa heksanima/Et2O da bi se dobilo jedinjenje TX63720 (38.5 mg) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.73 (bs, 2H), 8.45 (s, 1H), 7.29 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.50-2.70 (m, 3H), 1.98-2.14 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 1.44 ppm(s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z: [M+H]<+>333.1.
Jedinjenje 320d: Jedinjenje 130 (0.450 g, 1.27 mmol), K3PO4(0.873 g, 4.12 mmol), 3-piridinboronska kiselina (0.313 g, 2.61 mmol), dimetoksietan (12 mL) i DMF (6 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.124 g, 0.11 mmol) i reakcija je ponovo prskana u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 95°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i vode (20 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (20 mL). Spojeni vodeni slojevi su isprani sa EtOAc (50 mL) i spojeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 20 g) upotrebom 3% MeOH/EtOAc kao eluanta da bi se dobilo jedinjenje 320d (416 mg) kao bela pena/staklo, m/z: [M+H]<+>354.1.
Jedinjenje 321d: Jedinjenje 320d (0.413 g, 1.17 mmol) je apsorbovano u MeOH (25 mL) i 1N HCl (6 mL) i smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio MeOH i zatim je podeljena između EtOAc (80 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(15 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do pene/stakla (321d, 338 mg). m/z: [M+H]<+>310.0.
Jedinjenje 322d: Jedinjenje 321d (0.303 g, 0.98 mmol) je apsorbovano u etil formatu (30 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.2 mL, 6.5 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim podeljena između zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(40 mL) i EtOAc (100 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (50 mL) i spojeni organski slojevi su sušeni preko KH2PO4, filtrirani i koncentrovani do stakla (322d, 346 mg). m/z:
[M+H]<+>338.0.
Jedinjenje 323d: Rastvor 0.1 M hidroksilamin hidrohlorida u 9:1 EtOH/H2O (16 mL, 1.6 mmol) je dodat u 322d (0.346 g, 1.03 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio etanol, podeljena između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(20 mL) i organski rastvor je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do pene/čvrste supstance (323d, 299 mg). m/z: [M+H]<+>335.1.
Jedinjenje 324d: Jedinjenje 323d (0.289 g, 0.86 mmol) je apsorbovano u 1:1 MeOH/THF (20 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.0 mL, 5.4 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, i zatim podeljena između zasićenog KH2PO4(20 mL) i EtOAc (150 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 324d (307 mg) kao pena. m/z: [M+H]<+>335.1.
Jedinjenje TX63722: Jedinjenje 324d (0.307 g, 0.92 mmol) je apsorbovano u DCM (40 mL) i dodat je DDQ (0.228 g, 1.004 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 18 g) upotrebom 1.5% MeOH/DCM kao eluanta da bi se dobilo zelenkasto ulje. Ulje je triturisano sa heksanima/ Et2O da bi se dobilo jedinjenje TX63722 (40.3 mg) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.67 (m, 1H), 8.61 (bs, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.49 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.50-2.66 (m, 3H), 1.97-2.14 (m, 2H), 1.73 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); m/z: [M+H]<+>333.1.
Jedinjenje 320e: Jedinjenje 130 (0.453 g, 1.28 mmol), K3PO4(0.882 g, 4.16 mmol), pirimidin-5-boronska kiselina (0.315 g, 2.6 mmol), dimetoksietan (12 mL) i DMF (6 mL) su mešani i smeša je prskana sa N2u trajanju od 3-5 min. Dodat je Pd(PPH3)4(0.118 g, 0.10 mmol) i reakcija je ponovo prskana u trajanju od 3-5 minuta. Bočica je čvrsto hermetički zatvorena i zagrevana na 95°C preko noći uz mešanje. Reakcija je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i fiziološkog rastvora (20 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 18 g) upotrebom 3% MeOH/EtOAc kao eluanta da bi se dobilo jedinjenje 320e (333 mg) kao prljavo bela čvrsta supstanca, m/z: [M+H]<+>355.2.
Jedinjenje 321e: Jedinjenje 320e (0.333 g, 0.94 mmol) je apsorbovano u MeOH (25 mL) i dodata je 1N HCl (6 mL). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana da bi se uklonio MeOH i podeljena između EtOAc (80 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do čvrste supstance (321e, 280.9 mg). m/z: [M+H]<+>311.2.
Jedinjenje 322e: Jedinjenje 321e (0.2809 g, 0.91 mmol) je apsorbovano u etil formatu (34 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.05 mL, 5.7 mmol). Smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi, zatim podeljena između zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(20 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je ekstrahovan fiziološkim rastvorom (10 mL), zatim sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do stakla (322e, 280 mg). m/z: [M+H]<+>339.1.
Jedinjenje 323e: Rastvor hidroksilamin hidrohlorida (0.15 g, 2.2 mmol) u 10:1 EtOH/H2O (22 mL) je dodat u 322e (0.280 g, 0.83 mmol) i smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja, i podeljena između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(10 mL). Organski rastvor je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do stakla koje očvršćuje prilikom stajanja. Čvrsta supstanca je podvrgnuta hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 11 g) upotrebom EtOAc kao eluanta da bi se dobilo jedinjenje 323e (180 mg). m/z: [M+H]<+>336.1.
Jedinjenje 324e: Jedinjenje 323e (0.180 g, 0.54 mmol) je apsorbovano u 1:1 MeOH/THF (10 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (0.6 mL, 3.2 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, zatim podeljena između zasićenog KH2PO4(15 mL) i EtOAc (120 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 324e (189 mg) kao pena. m/z: [M+H]<+>336.1.
Jedinjenje TX63748: Jedinjenje 324e (0.189 g, 0.56 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i smeša je hlađena do 0°C. Dodat je brom (0.092 g, 0.58 mmol) u DMF (0.5 mL) i izvršeno je mešanje sve dok početni materijal nije potrošen što je potvrđeno pomoću hromatografije na tankom sloju. Dodat je piridin (0.45 mL, 5.6 mmol) i reakcija je zagrevana do sobne temperature, i zatim zagrevana na 60°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je hlađena i koncentrovana do sušenja. Ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(50 mL), slojevi su odvojeni, organski sloj sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do žute čvrste supstance. Čvrsta supstanca je triturisana sa etil etrom i jedinjenje TX63748 (108 mg) je sakupljeno filtracijom kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.25 (s, 1H), 8.74 (s, 2H), 8,44 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.59 (m, 3H), 2.08 (m, 2H), 1.75 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); m/z: [M+H]<+>334.1.
Jedinjenje 325: Rastvor 132 (431 mg, 1.4 mmol) i IBX (1.6 g, 5.6 mmol) u DMSO (7 mL) je zagrevan na 65°C u trajanju od 7 časova. Smeša je ugašena sa 50 mL vode i ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). EtOAc ekstrakti su koncentrovani, i prečišćeni pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5-25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje 325 kao bela čvrsta supstanca (189 mg, 43%). MS: m/z [M+H]<+>307.
Jedinjenje 326: Smeša 325 (182 mg, 0.59 mmol), joda (302 mg, 1.2 mmol) i piridina (145 mg, 1.8 mmol) u THF (3 mL) je zagrevana na 60°C u trajanju od 30 časova. Reakciona smeša je ugašena sa natrijum tiosulfatom (25 mL), ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL), isprana vodom, sušena sa MgSO4i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 326 kao svetlo obojena čvrsta supstanca (258 mg, 100%). MS: m/z [M+H]<+>433.
Jedinjenje TX63829: Smeša 326 (254 mg, 0.58 mmol) i CuI (0.28 g, 1.4 mmol) u 5 mL DMF je zagrevana do 70°C. Redom su dodati FSO2CF2CO2Me (1.7 g, 8.8 mmol) i HMPA (1.8 g, 10 mmol), zatim održavana na 70°C u trajanju od 6 časova. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i sirovi proizvod je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (silika gel, 5-25% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63829 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (95 mg, 42%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.27 (s, 1H), 7.35-7.48 (m, 3H), 7.28-7.32 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.49-2.65 (m, 3H), 2.10 (dt, 1H, J = 2.0, 12.8 Hz), 1.95-2.02 (m, 1H), 1.64-1.77 (m, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.26 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]<+>375.
Jedinjenje 327: Jedinjenje 130 (0.54 g, 1.52 mmol) je apsorbovano u DMA (6 mL) i dodati su cink cijanid (120 mg, 1.02 mmol), dppf (169 mg, 0.30 mmol), i natrijum karbonat (161 mg, 1.52 mmol). Azot je barbotiran kroz smešu u trajanju od 10 min, zatim je dodat Pd(OAc)2(34 mg, 0.15 mmol) i barbotiranje azota je nastavljeno još 10 min. Smeša je zatim zagrevana na 120°C u zatvorenoj posudi preko noći. Posle hlađenja, dodata je voda (25 mL) i smeša je ekstrahovana sa etrom (3x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobila braon polu-čvrsta supstanca. „Flash“ hromatografija (10% EtOAc/DCM) je dala 0.41 g (90%) jedinjenja 327 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 302 [M+H]<+>.
Jedinjenje 328: Jedinjenje 327 (108 mg, 0.36 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL) i dodata je 1M HCl (1 mL). Rastvor je mešan u trajanju 3 dana, zatim razblažen sa zasićenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 91 mg (99%) jedinjenja 328 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 257.9 [M+H]<+>.
Jedinjenje 329: Rastvor 328 (90 mg, 0.35 mmol) u THF (2 mL) i etil formatu (2 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukpavanjem je dodat NaOMe (0.6 g, 30 tež.% u MeOH) i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu i ugašena dodavanjem zasićenog vodeni KH2PO4(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 105 mg (>100%) jedinjenja 329 kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 286 [M+H]<+>.
Jedinjenje 330: Jedinjenje 329 (0.35 mmol) je apsorbovano u EtOH (2 mL), THF (2 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (27 mg, 0.38 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min, i zatim zagrevana na 50°C preko noći. Dodata je nova porcija hidroksilamin hidrohlorida (5 mg) i zagrevanje je nastavljeno dodatnih 4 časa na 50°C. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 100 mg (100%) jedinjenja 330 kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 283 [M+H]<+>.
Jedinjenje 331: Jedinjenje 330 (100 mg, 0.35 mmol) je suspendovano u 3:1 THF/MeOH (4 mL) i dodat je NaOMe (0.6 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i mešan preko noći. Rastvor je koncentrovan i dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL) i spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani. „Flash“ hromatografija (10% EtOAc/DCM) je dala 71 mg (72%) jedinjenja 331 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 283.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63725: Jedinjenje 331 (71 mg, 0.25 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (43 mg, 0.15 mmol) i rastvor je mešan 90 min na 0°C. Dodat je piridin (0.4 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 5 časova. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (5-10% EtOAc/DCM) dala je 52 mg (74%) jedinjenja TX63725 kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.28 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.81 (ddd, 1H, J = 1.2, 6.4, 17.2 Hz), 2.60 (m, 1H), 2.48 (m, 1H), 1.92-2.06 (m, 2H), 1,67 (m, 1H), 1.34 (s, 3H), 1.24 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI): m/z 281.1 [M+H]<+>. Jedinjenje 332: Jedinjenje 327 (0.29 g, 0.96 mmol) je apsorbovano u toluenu (5 mL) u posudi sa debelim zidovima. Dodat je trimetilsililazid (0.25 mL, 1.92 mmol), a zatim dibutilkalaj oksid (24 mg, 0.096 mmol). Posuda je hermetički zatvorena i zagrevana preko noći u 130°C uljanom kupatilu. Posle hlađenja, dodat je MeOH (5 mL) i rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom da bi se dobilo 0.45 g žutog stakla. MS (APCI): m/z 345 [M+H]<+>. Ovaj materijal je apsorbovan u DMF (5 mL), i dodat je K2CO3(0.66 g, 4.81 mmol), a zatim metil jodid (0.30 mL, 4.81 mmol). Smeša je mešana preko noći, dodata je voda (25 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.40 g braon ulja. „Flash“ hromatografija (50% EtOAc/heksan) dala je 147 mg (43%) jedinjenja 332 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 373.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 333: Jedinjenje 332 (177 mg, 0.49 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL) i dodata je 1M HCl (1 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 3 dana, razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprana fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 150 mg (97%) jedinjenja 333 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 315 [M+H]<+>.
Jedinjenje 334: Rastvor 333 (95 mg, 0.29 mmol) u THF (2 mL) i etil formata (2 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.85 g, 30 tež.% u MeOH) i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu i ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 165 mg (100%) jedinjenja 334 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 343.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 335: Jedinjenje 334 (163 mg, 0.48 mmol) je suspendovano u EtOH (3 mL), THF (3 mL) i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (37 mg, 0.53 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min, i zatim zagrevana na 50°C preko noći. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 145 mg (90%) jedinjenja 335 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 336: Jedinjenje 335 (145 mg, 0.43 mmol) je suspendovano u THF (4 mL) i dodat je MeOH (1 mL) i NaOMe (0.8 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 148 mg žuto-mrke pene. „Flash“ hromatografija (1:3 EtOAc/DCM) dala je 125 mg (86%) jedinjenja 336 kao prljavo belu čvrstu supstancu. MS (APCI): 340.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63719: Jedinjenje 336 (125 mg, 0.37 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (63 mg, 0.22 mmol) i rastvor je mešan 2 časa na 0°C. Dodat je piridin (0.5 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 3 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. „Flash“ hromatografija (10% EtOAc/DCM) dala je 87 mg (70%) jedinjenja TX63719 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (s, 1H), 4.41 (s, 3H), 4.20 (s, 3H), 3.06 (dd, 1H, J = 6.3, 17.3 Hz), 2.75 (ddd, 1H, J = 7.2, 11.6, 17.6 Hz), 2.55 (m, 1H), 2.01-2.13 (m, 2H), 1.76 (m, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI): 338.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 337: sirovi 332 (1.29 mmol) je apsorbovan u piridinu (5 mL), i dodat je anhidrid sirćetne kiseline (0.25 mL, 2.64 mmol). Rastvor je zagrevan na 110°C u trajanju od 3 časa, zatim hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su ispran fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.40 g jedinjenja 337 kao tamno braon ulje. MS (APCI): m/z 359.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 338: Sirovi 337 (0.40 g, 1.12 mmol) je apsorbovan u THF (5 mL) i dodata je 1M HCl (1 mL). Rastvor je mešan u trajanju od 3 dana, razblažen zasićenim NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4i koncentrovani. „Flash“ hromatografija (75% EtOAc/heksan) dala je 70 mg (20%) jedinjenja 338 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 315.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 339: Rastvor 338 (69 mg, 0.22 mmol) u THF (2 mL) i etil formata (1 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.4 g, 30 tež.% u MeOH) i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu, ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(20 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 75 mg (100%) jedinjenja 339 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 343.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 340: Jedinjenje 339 (75 mg, 0.22 mmol) je apsorbovano u 3:1 THF/EtOH (4 mL). Dodat je hidroksilamin (34 mg, 50 tež.% rastvor u vodi) i reakcija je mešana u trajanju od 1 časa. Dodata je još jedna porcija hidroksilamina (34 mg) i rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, zatim hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 70 mg žuto-mrke pene. Ovaj materijal je suspendovan u benzenu (3 mL) i dodat je p-TsOH (1 mg). Smeša je zagrevana na 70°C u trajanju od 8 časa. Posle hlađenja, rastvor je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 70 mg žuto-mrke pene. “Flash” hromatografija (1:2 EtOAc/DCM do 2:1 EtOAc/DCM)) dala je 35 mg (47%) jedinjenja 340 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 341: Jedinjenje 340 (35 mg, 0.10 mmol) je apsorbovano u THF (2 mL) i MeOH (1 mL) i dodat je NaOMe (0.2 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 5 časova, zatim hlađen i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(10 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 35 mg (100%) jedinjenja 341 kao žuto-mrka čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63857: Jedinjenje 341 (35 mg, 0.10 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađen u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (17.7 mg, 0.062 mmol) i rastvor je mešan 1 čas na 0°C. Dodat je piridin (0.2 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 5 časova. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom. “Flash” hromatografija (20% EtOAc/DCM) dala je 16 mg (46%) jedinjenja TX63857 kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.43 (s, 1H), 4.22 (s, 3H), 3.01 (dd, 1H, J = 6.4, 17.2 Hz), 2.68-2.82 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.49-2.59 (m, 1H), 2.00-2.13 (m, 2H), 1.69-1.84 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI): m/z 338.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 342: Jedinjenje 327 (0.71 g, 2.36 mmol) je suspendovano u EtOH (10 mL), i dodata je voda (5 mL), a zatim KOH (0.66 g, 11.8 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 4 dana, i zatim sipana u zasićeni KH2PO4(50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (25 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.75 g (100%) jedinjenja 342 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 320.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 343: Jedinjenje 342 (380 mg, 1.19 mmol) je dodato u DMAc-DMA (3 mL) i smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 3 časa. Rastvor je hlađen, koncentrovan i sušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje 343 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 389.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 344: Hidroksilamin hidrohlorid (124 mg, 1.78 mmol) je suspendovan u dioksanu (4 mL) i dodat je Et3N (0.25 mL, 1.78 mmol). Smeša je ultrazvučno obrađivana nekoliko minuta. Dodat je rastvor 343 (1.19 mmol) u dioksanu (4 mL), a zatim sirćetna kiselina (0.36 g, 5.94 mmol). Smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 2 časa i ostavljena da se hladi do sobne temperature. Smeša je razblažena zasićenim NaHCO3(25 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (25 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani sušeni pod vakuumom. “Flash” hromatografija (5-20% EtOAc/DCM) dala je 295 mg (69%) jedinjenja 344 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 359.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 345: Jedinjenje 344 (290 mg, 0.81 mmol) je apsorbovano u THF (12 mL) i dodata je 1M HCl (3 mL). Rastvor je mešan 4 dana, zatim razblažen zasićenim NaHCO3(25 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (25 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 246 mg (97%) jedinjenja 345 kao bela pena. MS (APCI): m/z 315.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 346: Jedinjenje 345 (230 mg, 0.73 mmol) je apsorbovano u THF (6 mL) i etil formatu (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (1.3 g, 30 tež.% u MeOH), i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu, ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(30 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (25 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 250 mg (100%) jedinjenja 346 kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 343.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 347: Jedinjenje 346 (250 mg, 0.73 mmol) je suspendovano u THF (6 mL), EtOH (3 mL) i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (76 mg, 1.10 mmol) i smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 3 časa. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(25 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (25 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 250 mg (100%) jedinjenja 347 kao svetlo žuta pena. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 348: Jedinjenje 347 (0.73 mmol) je apsorbovano u 3:1 THF/MeOH (8 mL) i dodat je NaOMe (1.3 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa, zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(40 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (25 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 250 mg svetlo žute pene. “Flash” hromatografija (10-15% EtOAc/DCM) je dala 190 mg (77%) jedinjenja 348 kao bela pena. MS (APCI): m/z 340.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63872: Jedinjenje 348 (190 mg, 0.56 mmol) je apsorbovano u DMF (5 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (96 mg, 0.34 mmol) i rastvor je mešan 2 časa na 0°C. Dodat je piridin (1 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 3 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. “Flash” hromatografija (5% EtOAc/DCM) je dala 150 mg (79%) jedinjenja TX63872 kao svetlo žutu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 4.23 (s, 3H), 3.10 (dd, 1H, J = 6.0, 17.2 Hz), 2.75-2.86 (m, 1H), 2.48-2.60 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.00-2.15 (m, 2H), 1.69-1.83 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI): m/z 338.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 349: Dietil oksalat (5 g, 10ekv.) je dodat u suspenziju NaH (0.51 g, 60% u ulju) u THF (10 mL). Dodat je rastvor 127 (0.8 g, 3.35 mmol) u THF (10 mL). Posle refluksovanja u trajanju od 16 časova, smeša je hlađena, neutralizovana sa zasićenim KH2PO4, i ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). EtOAc je ispran fiziološkim rastvorom i sušen sa MgSO4da bi se dobilo jedinjenje 349 (1.1 g, 100%). MS: m/z [M+H]<+>311.
Jedinjenje 350: Smeša 349 (1.1 g, 3.35 mmol), metil hidrazina (310 mg, 6.7 mmol), i EtOH (15 mL) je zagrevana na 60°C u trajanju od 16 časova. EtOH je uklonjen, i sirovi proizvod je propušten kroz kratku pakovanu kolonu silika gela, eluiran sa 50% EtOAc/heksanima, da bi se dobilo jedinjenje 350 kao bela čvrsta supstanca (220 mg, 19% prinos). MS: m/z [M+H]<+>349.
Jedinjenje 351: Rastvor 350 (0.22 g, 0.63 mmol) u MeOH (5 mL) je tretiran sa 3N HCl (vodeni rastvor) (2 mL), mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL) i isprana sa zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) (25 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 351 kao čvrsta supstanca. (0.14 g, 73% prinos). MS: m/z [M+H]<+>305.
Jedinjenje 352: U rastvor 351 (0.14 g, 0.46 mmol) u 5 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi je ukapavanjem dodat 30% NaOMe u MeOH (0.4 g, 5 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sas zasićenim rastvorom KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 352 (155 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>333.
Jedinjenje 353: U rastvor 352 (155 mg, 0.46 mmol) u 10 mL EtOH dodat je NH2OH-HCl (75 mg, 2ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 353 (155 mg, 100%). MS: m/z [M+H]<+>330.
Jedinjenje 354: U rastvor 353 (155 mg, 0.46 mmol) u 2:1 THF/MeOH (3 mL) dodat je MeOH, 30% NaOMe (0.95 g, 10 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(25 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 354 (140 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>302.
Jedinjenje 355: U rastvor 354 (140 mg, 0.46 mmol) u 2 mL DMF na 0°C dodat je DBDMH (92 mg, 0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (0.4 g, 10 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 25-100% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje 355 kao prljavo bela čvrsta supstanca (110 mg, 80% prinos). MS: m/z [M+H]<+>300.
Jedinjenje TX63655: U rastvor 355 (110 mg, 0.36 mmol) u 5 mL THF na 0°C, dodat je (COCl)2(350 mg, 6 ekv.) i 1 kap DMF, i rastvor je mešan u trajanju od 3 časa na sobnoj temperaturi. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u piridinu (5 mL), dodat je dimetilamin hidrohlorid (450 mg, 10 ekv.) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Posle isparavanja piridina, sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silike, eluiran sa 15-50% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63655 kao prljavo bela čvrsta supstanca (40 mg, 35% prinos).<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.39 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.98 (s, 3H), 2.93 (s, 3H), 2.76-2.67 (m, 1H), 2.46-2.40 (m, 2H), 2.20-2.05 (t, 1H, J = 2.37, 12.3, 12.5), 1.95-1.85 (m, 1H), 1.65-1.60 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.20-1.12 (d, 3H, J = 6.61); MS: m/z [M+H]<+>327.
Jedinjenje 356: n-BuLi (1.6 M u heksanu, 0.6 mL, 0.96 mmol) je dodat u DIPA (110 mg, 1.1 mmol) u THF (2 mL) na 0°C, mešan u trajanju od 30 min, i zatim je reakcija hlađena do -78°C. Jedinjenje TX63570 (0.2g, 0.68 mmol) u 1 mL THF je dodavano ukapavanjem u LDA rastvor. Reakcija je mešana na -78°C u trajanju od 2 časa i dodat je benzil bromid (65 mg, 1.1 ekv.) u 1 mL THF. Posle mešanja od 2 časa na 0°C, smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je 1N HCl (2 mL), reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom i fiziološkim rastvorom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću “flash” hromatografije (silika gel, 5-30% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje 356 kao ulje (115 mg, 45%). MS (APCI): m/z [M+H]<+>383.
Jedinjenje 357: Jedinjenje 356 (115 mg, 0.3 mmol) je rastvoreno u THF (15 mL) sa 10% Pd/C (65 mg) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je tretirana sa vodoničnim balonom i mešana u trajanju od dva dana, filtrirana, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 357, 105 mg. MS (APCI): m/z [M+H]<+>385.
Jedinjenje 358: U rastvor 357 (105 mg, 0.27 mmol) u 5 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (0.5 g, 10 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sa zasićenim vodenim rastvorom KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 358 (110 g, 98% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>413.
Jedinjenje 359: U rastvor 358 (105 mg, 0.26 mmol) u 5 mL EtOH, dodata je NH2OH HCl so (85 mg, 2 ekv.) i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 359 (110 mg, 100%). MS (APCI): m/z [M+H]<+>410.
Jedinjenje 360: U rastvor 359 (110 mg, 0.26 mmol) u 2:1 THF/MeOH (3 mL), dodat je 30% NaOMe (0.5 g, 5 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 9 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa KH2PO4(zasićen, 15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 360 (110 mg, 100% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>410.
Jedinjenje TX63607: U rastvor 360 (110 mg, 0.26 mmol) u 2 mL DMF na 0°C, dodat je DBDMH (42 mg, 0.55 ekv.) i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g, 50 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 5-30% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63607 kao prljavo bela čvrsta supstanca (41 mg, 39% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.37-7.42 (m, 1H), 7.23-7.30 (m, 4H), 7.11-7.19 (m, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.58 (br d, 1H, J=15 Hz), 3.07 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.84 (br d, 1H, J=10 Hz), 2.58 (dd, 1H, J=20, 5 Hz), 2.37-2.44 (m, 1H), 2.16-2.20 (m, 2H), 1.70-1.79 (m, 1H), 1.46 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]<+>408.
Jedinjenje 361: Rastvor KHMDS (658 mg, 3.30 mmol) u THF (6 mL) je hlađen do -60°C. Ukapavanjem je dodat rastvor TX63570 (482 mg, 1.65 mmol) u THF (4 mL). Rastvor je ostavljen da se zagreva lagano do 0°C i mešan 30 min. Rastvor je ponovo hlađen do -60°C, i dodat je benzil bromid (0.30 mL, 2.47 mmol). Rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature tokom 2 časa. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 0.67 g sirove pene. “Flash” hromatografija (10% EtOAc/DCM) je dala 120 mg (15%) jedinjenja 361 kao svetlo žuta pena. MS (APCI): m/z 473.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 362: Jedinjenje 361 (120 mg, 0.25 mmol) je rastvoreno u THF (15 mL) sa 10% Pd/C (65 mg) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je tretirana vodoničnom balonom i mešana u trajanju od dva dana, filtrirana, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 362, 120 mg. MS (APCI): m/z [M+H]<+>475.
Jedinjenje 363: U rastvor 362 (120 mg, 0.25 mmol) u 4 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (0.3 g, 6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena zasićenim vodenim rastvorom KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 363 (120 mg, 95% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>503.
Jedinjenje 364: U rastvor 363 (120 mg, 0.23 mmol) u 5 mL EtOH, dodat je NH2OH-HCl (85 mg, 2 ekv.) i zagrevan je na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 364 (120 mg, 100%). MS (APCI): m/z [M+H]<+>500.
Jedinjenje 365: U rastvor 364 (120 mg, 0.23 mmol) u 2:1 THF/MeOH (3 mL), dodat je 30% NaOMe (0.5 g, 5 ekv.) i smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 12 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa KH2PO4(zasićeni, 15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 365 (115 mg, 98% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>500.
Jedinjenje TX63601: U rastvor 365 (115 mg, 0.23 mmol) u 2 mL na at 0°C, dodat je DBDMH (38 mg, 0.55 ekv.) i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g, 55 ekv.) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela (5-30% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63601 kao prljavo bela čvrsta supstanca (31 mg, 28% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.35 (s, 1H), 7.40-7.48 (m, 3H), 7.25-7.31 (m, 5H), 7.09-7.18 (m, 5H), 6.91 (d, 2H, J=10 Hz), 3.74 (s, 3H), 3.28 (d, 1H, 15 Hz), 3.18 (d, 1H, J=15 Hz), 2.92 (d, 1H, J=15 Hz), 2.62-2.69 (m, 2H), 2.36-2.43 (m, 2H), 2.16 (dd, 1H, J=15, 5 Hz), 2.02-2.08 (m, 1H), 1.65 (s, 3H); MS (APCI): m/z [M+H]<+>498.
Jedinjenje 366: Rastvor diizopropilamina (0.30 mL, 2.15 mmol) u THF (2 mL) je hlađen do -78°C, i ukapavanjem je dodat BuLi (1.6 M u heksanu, 1.35 mL, 2.15 mmol). Rastvor je uklonjen iz kupatila za hlađenje i mešan 15 min. Rastvor je ponovo hlađen do -78°C i ukapavanjem je dodat rastvor TX63570 (0.21 g, 0.72 mmol) u THF (3 mL). Rastvor je mešan 15 min, zatim prebačen u ledeno kupatilo i mešan 30 min. Rastvor je ponovo hlađen do -78°C, i dodata je suspenzija difeniliodonijum hlorida (0.227 g, 0.72 mmol) u DMF (8 mL). Rastvor je mešan 1 čas na -78°C, zatim ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan 3 časa. Rastvor je ugašen zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 0.33 g braon ulja. “Flash” hromatografija (25% EtOAc/DCM) je dala 80 mg (31%) jedinjenja 366 kao bela pena. MS (APCI): m/z 369 [M+H]<+>.
Jedinjenje 367: Jedinjenje 366 (76 mg, 0.019 mmol) je apsorbovano u THF (5 mL) i dodat je 10% Pd/C (20 mg) pod azotom. Smeša je ispražnjena i prečišćena sa H2(33), i mešana pod H2balonom preko noći. Smeša je filtrirana kroz finu fritu, i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo 80 mg (>100%) jedinjenja 367 kao bela pena. MS (APCI): m/z 371.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 368: Rastvor 367 (75 mg, 0.20 mmol) u etil formatu (5 mL) je hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.55 g, 30 tež.% u MeOH) i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 90 mg (>100%) jedinjenja 368 kao žuto-mrka čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 399 [M+H]<+>.
Jedinjenje 369: Jedinjenje 368 (0.20 mmol) je apsorbovano u EtOH (3 mL) i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (15 mg, 0.22 mmol) i reakcija je zagrevana na 60°C u trajanju od 3 časa. Rastvor je hlađen i koncentrovan. Ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 90 mg (>100%) jedinjenja 369 kao žuto-mrka čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 396 [M+H]<+>.
Jedinjenje 370: Jedinjenje 369 (0.20 mmol) je apsorbovano u 2:1 THF:MeOH (3 mL) i dodat je NaOMe (0.3 g, 30 tež.% u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 4 časa, i zatim ostavljen da se hladi do sobne temperature. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(10 mL), i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani. “Flash” hromatografija (1:2 EtOAc/DCM) je dala 72 mg (91%) jedinjenja 370 kao prljavo bela čvrsta supstanca. MS (APCI): m/z 396.1 [M+H]<+>
Jedinjenje TX63629: Jedinjenje 370 (71 mg, 0.18 mmol) je apsorbovano u DMF (2 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (31 mg, 0.11 mmol) i rastvor je mešan 2 časa na 0°C. Dodat je piridin (0.2 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 4 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan pod vakuumom do braon čvrste supstance. “Flash” hromatografija (20% EtOAc/DCM) je dala 56 mg (79%) jedinjenja TX63629 kao svetlo žutu čvrstu supstancu. MS (APCI):<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.65 (s, 1H), 7.52-7.26 (m, 8H), 7.14 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.68 (d, 1H, J = 13.6), 2.72 (m, 1H), 2.54-2.39 (m, 2H), 2.67 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.46 (m, 1H); m/z 394.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 371: Dimetil karbonat (3.1g, 10 ekv.) je dodat u suspenziju NaH (0.51 g, 60% u ulju) u THF (10 mL). Dodat je rastvor 127 (0.8 g, 3.35 mmol) u THF (10 mL). Posle refluksovanja u trajanju od 16 časova, rastvor je hlađen, neutralizovan sa KH2PO4(konc.), i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). EtOAc je ispran fiziološkim rastvorom i sušen sa MgSO4da bi se dobilo sirovo jedinjenje 371 (1 g, 100%). MS: m/z [M+H]<+>297.
Jedinjenje 372: Rastvor acetimidamid hidrohlorida (3.2 g, 10 ekv.) i piperidina (1.45 g, 5 ekv.) u 10 mL i-PrOH je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 min. Lagano je dodavan sirovi 371 (1 g, 3.35 mmol) u 5 mL 2-propanola, i mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min. Reakciona smeša je zagrevana do refluksa u trajanju od dva dana, zatim koncentrovana. Reakciona smeša je mešana sa etrom (50 mL). Proizvod je istaložen, filtriran i ispran vodom, da bi se dobilo jedinjenje 372 kao prljavo bela čvrsta supstanca (425 mg, 42% prinos). MS: m/z [M+H]<+>305.
Jedinjenje 373: U suspenziju 372 (0.4 g, 1.3 mmol) u fosfor oksihloridu (10 mL, 107 mmol) dodate su dve kapi DMF na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na 140°C u trajanju od 3 časa. Smeša je zatim koncentrovana do sušenja, razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa NaHCO3(50 mL) i vodom (50 mL). Organski sloj je odvojen, sušen (MgSO4) i isparavan do sušenja. Jedinjenje 373 je dobijeno kao sirovo žuto ulje (385 mg, 100%) i korišćeno je bez daljeg prečišćavanja.
Jedinjenje 374: 30% NaOMe (1.2 g, 5 ekv.) u MeOH je dodat ukapavanjem u mešajući rastvor 373 u suvom MeOH (10 mL). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 3 časa. Smeša je zatim koncentrovana do sušenja, razblažena sa EtOAc (35 mL) i isprana zasićenim KH2PO4(25 mL), a zatim fiziološkim rastvorom, sušena (MgSO4) i rastvarači su uklonjeni. Prečišćavanje hromatografijom na koloni silika gela upotrebom (gradijenta 5-40% EtOAc/heksana) dalo je jedinjenje 374 kao ulje (155 mg, 44% prinos). MS: m/z [M+H]<+>275.
Jedinjenje 375: U rastvor 374 (155 mg, 0.56 mmol) u 5 mL HCOOEt ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (1 g, 10 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sa zasićenim KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 375. (170 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>303.
Jedinjenje 376: U rastvor 375 (170 mg, 0.56 mmol) u 10 mL EtOH dodata je NH2OH HCl so (80 mg, 2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 376 (170 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>300.
Jedinjenje 377: U rastvor 376 (170 mg, 0.56 mmol) u 2 mL THF i 1 mL MeOH dodat je 30% NaOMe (1 g, 10ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 9 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 377 (170 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>300.
Jedinjenje TX63646: U rastvor 377 (170 mg, 0.56 mmol) u 2 mL DMF na 0°C, dodat je DBDMH (90 mg, 0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 15-40% EtOAc/heksanima da bi se sakupilo jedinjenje TX63646 kao prljavo bela čvrsta supstanca (50 mg, 30% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 2.80 (dd, 1H, J = 6.7, 18.3 Hz), 2.61 (s, 3H), 2.52-2.60 (m, 2H), 2.04-2.16 (m, 2H), 1.73 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.32 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]<+>398.
Jedinjenje 378: U bočicu koja se može hermetički zatvoriti, rastvor neznatno nečistog 371 (sirov iz prethodnog koraka, pretpostaviti 3.36 mmol) u 20 mL i-PrOH je tretiran sa čvrstim ciklopropankarboksimidamid hidrohloridom (4.05 g, 33.59 mmol), a zatim piperidinom (1.7 mL, 17.2 mmol). Uzorak je ispran sa N2, hermetički zatvoren i zagrevan (preko blok grejača) na 90°C u trajanju od 72 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.85 g (77%) jedinjenja 378 kao prljavo bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 331 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 379: Rastvor 378 (0.85 g, 2.58 mmol) u 10 mL MeOH i 3N HCl (10 mL, 30 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~9-10 i ekstrahovan sa CHCl3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.70 g (94%) jedinjenja 379 kao prljavo bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 287 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 380: U mešajući rastvor 379 (0.70 g, 2.43 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (0.47 mL, 2.70 mmol) u 24 mL benzena ukapavanjem je dodavan (preko šprica) fosfor oksihlorid (2.3 mL, 24.6 mmol). Posle dodavanja, uzorak je zagrevan na 80°C pod N2u trajanju od 16 časova, hlađen, koncentrovan, zatim pažljivo podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.69 g (94%) jedinjenja 380 kao prljavo bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 305/307 (100/47%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 381: Rastvor 380 (0.32 g, 1.07 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL THF:MeOH (1:1) je tretiran sa NaOMe, 30 tež.% rastvorom u MeOH (2.0 mL, 10.7 mmol). Uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa, hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.34 g (>100%) neznatno nečistog jedinjenja 381 kao žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 382: U mešajući rastvor neznatno nečistog 381 (0.34 g, pretpostaviti 1.07 mmol) i etil formata (9.0 mL, 111.0 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodavan (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (2.0 mL, 10.7 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.35 g (>100%) neznatno nečistog jedinjenja 382 kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 383: Rastvor neznatno nečistog 382 (0.35 g, pretpostaviti 1.07 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.11 g, 1.58 mmol) u 25 mL EtOH je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan i podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.31 g (90%) neznatno nečistog 383 kao žuto-mrka penasta čvrsta supstanca, koja je korišećna bez prečišćavanja. MS (ES) m/z 326 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 384: U mešajući rastvor neznatno nečistog 383 (0.31 g, 0.96 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 20 mL MeOH ukapavanjem je dodat (prek ošprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (0.90 mL, 4.80 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.13 g (41%) jedinjenja 384 kao prljavo bela penasta čvrsta supstanca.
Jedinjenje TX63761: U mešajući rastvor na 0°C pod N2jedinjenja 384 (0.13 g, 0.40 mmol) u 10 mL DMF je dodat u jednoj porciji 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.057 g, 0.20 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.33 mL, 4.08 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 3 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.030 g (23%) jedinjenja TX63761 kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.88 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 7.0, 18.2 Hz), 2.52 (m, 2H), 2.16 (m, 1H), 2.06 (m, 2H), 1.68 (dq, 1H, J = 6.5, 12.8 Hz), 1.38 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 1.10 (m, 2H), 1.02 (m, 2H); MS (APCI) m/z 324 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 385: U bočicu koja se može hermetički zatvarati, rastvor 371 (sirov iz prethodnog koraka, pretpostaviti 4.20 mmol) u 15 mL n-BuOH je tretiran sa čvrstim 2,2-dimetilpropionamidin hidrohloridom (5.0 g, 36.6 mmol), a zatim piperidinom (2.1 mL, 21.2 mmol). Uzorak je ispran sa N2, hermetički zatvoren i zagrevan (preko blok grejača) na 100°C u trajanju od 72 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.87 g (60%) jedinjenja 385 kao žuto-mrka gumasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 347 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 386: Rastvor 385 (0.87 g, 2.50 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (0.48 mL, 2.76 mmol) u 10 mL benzena je dodavan ukapavanjem (prkeo šprica) fosfor oksihlorida (2.3 mL, 24.7 mmol). Posle dodavanja, uzorak je zagrevan na 90°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan, zatim pažljivo podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.85 g (93%) jedinjenja 386 kao svetlo žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 365/367 (100/38%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 387: Rastvor 386 (0.42 g, 1.16 mmol) u 10 mL MeOH je tretiran sa NaOMe, 30 tež.% rastvorom u MeOH (1.1 mL, 5.9 mmol). Uzorak je ispran sa N2, hermetički zatvoren i zagrevan na 80°C u trajanju od 48 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.42 g (~100%) jedinjenja 387 kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 388: Rastvor 387 (0.42 g, 1.16 mmol) i 3N HCl (10 mL, 30 mmol) u 10 mL MeOH je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.34 g (92%) jedinjenja 388 kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 317 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 389: U mešajući rastvor 388 (0.34 g, 1.07 mmol) i etil formata (10 mL, 124 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (1.0 mL, 5.3 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.36 g (97%) jedinjenja 389 kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 345 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 390: Rastvor 389 (0.36 g, 1.04 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.11 g, 1.58 mmol) u 10 mL EtOH je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan i podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.59 g (>100%) jedinjenja 390 kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 391: U mešajući rastvor neznatno nečistog 390 (sirov iz prethodnog koraka, pretpistaviti 1.04 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL MeOH:THF (1:1) je ukapavanjem dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (0.98 mL, 5.22 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 20% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.18 g (50%) jedinjenje 391 kao svetlo žuto ulje. MS (APCI) m/z 342 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63853: U mešajući rastvor na 0°C pod N2jedinjenja 391 (0.18 g, 0.52 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.075 g, 0.26 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.42 mL, 5.20 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 20% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.068 g (38%) jedinjenja TX63853 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.60 (s, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.76 (dd, 1H, J = 6.4, 18.0 Hz), 2.51-2.60 (m, 2H), 2.00-2.15 (m, 2H), 1.60-1.75 (m, 1H), 1.36 (s, 12H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 340 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 392: KOt-Bu (250 mg, 1ekv.) je rastvoren u anhidrovanom EtOH (20 mL). Tiourea (1.7 g, 10 ekv.) i 371 (950 mg, 3.2 mmol) su dodati u bazni rastvor. Reakciona smeša je refluksovana u trajanju od 16 časova. Rastvarač je koncentrovan pod vakuumom do skoro sušenja i ostatak je ponovo rastvoren u vodi (10 mL). Rastvor je neutralizovan sa 3N HCl, talog je sakupljen, ispran vodom, i sušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje 392 (900 mg, 87% prinos). MS: m/z [M+H]<+>323.
Jedinjenje 393: Jedinjenje 392 (900 mg, 2.79 mmol) je rasvoreno u DMF (10 mL), i dodat je K2CO3(1.2 g, 3ekv.), i smeša je mešana u trajanju od 30 min. Ukapavanjem je dodat MeI (0.8 g, 2 ekv.), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Organski sloj je ispran vodom i fiziološkim rastvorom, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 393 (975 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>351.
Jedinjenje 394: U mešajuću smešu 393 (975 mg, 2.79 mmol) i Pd (PPH3)4(200 mg, 5 mol%) u THF (20 mL) pod azotom, dodati su fenilboronska kiselina (1 g, 3ekv.) i CuTC (1.8 g, 3.5 ekv.). Reakciona smeša je zagrevana na refluksu u trajanju od 16 časova. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela, eluiran sa 10-35% EtOAc/Heksana da bi se dobilo jedinjenje 394 kao čvrsta supstanca (415 mg, 40% prinos). MS: m/z [M+H]<+>381.
Jedinjenje 395: Rastvor 394 (455 mg, 1.2 mmol) u MeOH (10 mL) je tretiran sa 3N HCl (vodeni rastvor) (3 mL), i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL) i isprana zasićenim NaHCO3(vodeni rastvor) (25 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 395 kao ulje (405 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>337.
Jedinjenje 396: U rastvor 395 (405 mg, 1.2 mmol) u 5 mL HCOOEt ukapavanjem je dodavan 30% NaOMe u MeOH (1.3 g, 6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim sipana u vodu i zakišeljena zasićenim KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 396 (435 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>365.
Jedinjenje 397: U rastvor 396 (435 mg, 1.18 mmol) u 20 mL EtOH dodata je NH2OH HCl so (170 mg, 2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 397 (430 mg, 98% prinos). MS: m/z [M+H]<+>362.
Jedinjenje 398: U rastvor 397 (430 mg, 1.18 mmol) u 2 mL THF i 2 mL MeOH dodat je 30% NaOMe (1.7 g, 8 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(25 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani vodom i fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i prečišćeni na silika gel koloni, eluirani sa 15-45% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje 398 kao prljavo bela čvrsta supstanca (215 mg, 50% prinos). MS: m/z [M+H]<+>362.
Jedinjenje TX63666: U rastvor 398 (210 mg, 0.58 mmol) u 2 mL DMF na 0°C dodat je 1,3-dibromo- 5,5-dimetilhidantoin (95 mg, 0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 15-45% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63666 kao prljavo bela čvrsta supstanca (130 mg, 62% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.76 (s, 1H), 7.58 (m, 5H), 3.50 (s, 3H), 2.90 (m, 1H), 2.52-2.61 (m, 2H), 2.05-2.20 (m, 2H), 1.72 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.34 (d, 3H, J = 6.6 Hz); MS: m/z [M+H]<+>360.
Jedinjenje 399: Smeša 392 (2.6g, 8.06 mmol) i 8.1 g hlorosirćetne kiseline (10 ekv.) je zagrevana na 100°C u trajanju od 1 časa, zatim je dodato 10 mL vode i zagrevanje je nastavljeno još 5 časova. Dodata je koncentrovana HCl (0.5 mL) i smeša je zagrevana na 100°C u trajanju od 16 časova. Reakcija je hlađena i dodato je 50 mL ledene vode. Talog je sakupljen filtracijom, i sušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje 399 kao prljavo bela čvrsta supstanca (2.1 g, 93% prinos). MS: m/z [M+H]<+>263.
Jedinjenje 400: Smeša 399 (2.03 g, 7.73 mmol) i diizopropiletilamina (1,01 g, 1 ekv.) u 10 mL POCl3je zagrevana na 90°C u trajanju od 16 časova. Reakcija je ugašena ledom i proizvod je istaložen, filtriran i sušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje 400 kao braon čvrsta supstanca (2.1 g, 90% prinos). MS: m/z 299, 301 (3:2) [M+H]<+>.
Jedinjenje 401a-b: Rastvor 400 (2.05 g, 6.85 mmol), NaOMe (1.85 g, 1.5 ekv., 30% u MeOH) i 25 mL MeOH je zagrevan na 50°C u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (2320 mL), isprana vodom i prečišćena na koloni silika gela, eluiranjem sa 10-15% EtOAc/Heksanima. Prvo dobijeno jedinjenje je 401a (1.3 g, 65% prinos), MS: m/z 295, 297 (3:1) [M+H]<+>. Drugo dobijeno jedinjenje je 401b (110 mg, 5.5% prinos), MS: m/z 291 [M+H]<+>.
Jedinjenje 402: U rastvor 401a (130 mg, 0.44 mmol) u 5 mL HCOOEt ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (0.5 g, 6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim sipana u vodu i zakišeljena sa KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 402 (140 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>319.
Jedinjenje 403: U rastvor 402 (140 mg, 0.44 mmol) u 10 mL EtOH dodata je NH2OH· HCl so (65 mg, 2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 403 (138 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>316.
Jedinjenje 404: U rastvor 403 (138 mg, 0.44 mmol) u 2 mL THF i 1 mL MeOH ukapavanjem je dodat 30% NaOMe (0.63 g, 8 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(15 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 404 (136 mg, 100% prinos). MS: m/z [M+H]<+>316.
Jedinjenje TX63718: U rastvor 404 (136 mg, 0.44 mmol) u 2 mL DMF na 0°C dodat je 1,3-dibromo- 5,5-dimetilhidantoin (70 mg, 0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 5-30% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63718 kao prljavo bela čvrsta supstanca (55 mg, 40% prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.71 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 2.67 (dd, 1H, J= 7.0, 17.5 Hz), 2.37-2.51 (m, 2H), 1.95-2.06 (m, 2H), 1.62 (m, 1H),1.33 (s, 3H), 1.22 (d, 3H, J = 6.5 Hz); MS: m/z [M+H]<+>314.
Jedinjenja TX63793 i TX63794: Enantiomeri jedinjenja TX63718 (32.7 mg) su odvojeni upotrebom hiralne HPLC (CHIRALPAK IA, 5µ, 303250 mm, 2:50:50 EtOH/EtOAc/heksan) da bi se dobila dva dobro razdvojena pika. Jedan na 4.04 min, koji je dao TX63793 (17.6 mg, >99.9% ee).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.79 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 6.4, 18.0 Hz), 2.52 (m, 2H), 2.09 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.7 Hz). I drugi na 4.66 min, koji je dao TX63794 (15.1 mg, 98.8% ee).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.79 (s, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H, J = 6.4, 18.0 Hz), 2.52 (m, 2H), 2.09 (m, 2H), 1.70 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J = 6.7 Hz).
Jedinjenje 405a: Jedinjenje 401b (0.25 g, 0.84 mmol) je rastvoreno u DME (6 mL) i DMF (3 mL). U ovaj rastvor je dodata piridin-3-ilboronska kiselina (125 mg, 1 mmol), PH3P (85 mg, 0.32 mmol) i K3PO4(0.54 g, 2.54 mmol). Azot je barbotiran kroz smešu u trajanju od 10 min. Pd(OAc)2(35 mg, 0.16 mmol) i azot je barbotiran još 10 min. Suspenzija je zagrevana do 90°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana, i prečišćena na koloni silika gela, eluirana sa 5-35% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje 405a kao čvrsta supstanca (0.28 g, 98% prinos). MS: m/z [M+H]<+>338.
Jedinjenje 405b: Piridin-4-ilboronska kiselina (125 mg, 1 mmol) je tretirana prema postupku za jedinjenje 401b da bi se dobilo jedinjenje 405bb (270 mg, 95% prinos). MS: m/z [M+H]<+>338.
Jedinjenje 405c: 2-Metoksifenilboronska kiselina (155 mg, 1 mmol) je tretirana prema postupku za jedinjenje 401b da bi se dobilo jedinjenje 405c (150 mg, 49% prinos). MS: m/z [M+H]<+>367.
Jedinjenje 405d: Fenilboronska kiselina (155 mg, 1 mmol) je tretirana prema postupku za jedinjenje 401b da bi se dobilo jedinjenje 405d (185 mg, 65% prinos). MS: m/z [M+H]<+>337.
Jedinjenje 405e: Pirimidin-5-ilboronska kiselina (140 mg, 1.13 mmol) je tretirana prema postupku za jedinjenje 401b da bi se dobilo jedinjenje 405e (185 mg, 58% prinos). MS: m/z [M+H]<+>339.
Jedinjenje 406a: U rastvor 405a (280 mg, 0.82 mmol) u 10 mL HCOOEt ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim sipana u vodu i zakišeljena sa KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 406a (300 mg). MS: m/z [M+H]<+>366.
Jedinjenje 406b: Jedinjenje 405b (270 mg, 0.82 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 406a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 406b (290 mg). MS: m/z [M+H]<+>366.
Jedinjenje 406c: Jedinjenje 405c (150 mg, 0.4 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 406a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 406c (120 mg). MS: m/z [M+H]<+>395. Jedinjenje 406d: Jedinjenje 405d (185 mg, 0.51 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 406a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 406d (185 mg). MS: m/z [M+H]<+>365. Jedinjenje 406e: Jedinjenje 405e (175 mg, 0.51 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 406a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 406e (185 mg). MS: m/z [M+H]<+>367. Jedinjenje 407a: U rastvor 406a (300 mg, 0.82 mmol) u 20 mL EtOH dodata je NH2OH· HCl so (2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 407a (280 mg). MS: m/z [M+H]<+>363.
Jedinjenje 407b: Jedinjenje 406b (290 mg, 0.79 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 407a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 407b (290 mg). MS: m/z [M+H]<+>363. Jedinjenje 407c: Jedinjenje 406c (120 mg, 0.3 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 407a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 407c (117 mg). MS: m/z [M+H]<+>392. Jedinjenje 407d: Jedinjenje 406d (130 mg, 0.34 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 407a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 407d (120 mg). MS: m/z [M+H]<+>376. Jedinjenje 407e: Jedinjenje 406e (185 mg, 0.5 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 407a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 407e (180 mg). MS: m/z [M+H]<+>364.
Jedinjenje 408a: U rastvor jedinjenja 407a (280 mg, 0.78 mmol) u 4 mL THF i 2 mL MeOH uakapavanjem je dodat 30% NaOMe (8 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim rastvorom KH2PO4(30 mL) i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 408a (220 mg). MS: m/z [M+H]<+>363.
Jedinjenje 408b: Jedinjenje 407b (290 mg, 0.79 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 408a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 408b (280 mg). MS: m/z [M+H]<+>363. Jedinjenje 408c: Jedinjenje 407c (117 mg, 0.3 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 408a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 408c (117 mg). MS: m/z [M+H]<+>392. Jedinjenje 408d: Jedinjenje 407d (120 mg, 0.32 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 408a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 408d (110 mg). MS: m/z [M+H]<+>376. Jedinjenje 408e: Jedinjenje 407e (180 mg, 0.5 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje 408a da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 408e (180 mg). MS: m/z [M+H]<+>364. Jedinjenje TX63724: Jedinjenje 408a (0.19 g, 0.52 mmol) je rastvoreno u 2 mL DMF na 0°C. Dodat je Br2(95 mg, 1.1 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (2 mL), i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 5-45% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63724 kao prljavo bela čvrsta supstanca (45 mg, 24% prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.60 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.77 (m, 1H), 8.67 (m, 1H), 7.48 (dd, 1H, J = 4.9, 7.8 Hz), 4.06 (s, 3H), 2.82 (ddd, 1H, J = 1.1, 6.8, 18.7 Hz), 2.47-2.64 (m, 2H), 2.03-2.13 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.40 (s, 3H), 1.25 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]<+>361.
Jedinjenje TX63728: Jedinjenje 408b (0.28 g, 0.77 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje TX63724 da bi se dobilo jedinjenje TX63728 (25 mg, 9%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.59 (s, 1H), 8.46 (bs, 2H), 8.06 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.56 (dd, 1H, J = 5.9, 18.9 Hz), 2.22-2.35 (m, 2H), 1.75-1.87 (m, 2H), 1.44 (m, 1H), 1.13 (s, 3H), 0.99 (d, 3H, J= 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]<+>361.
Jedinjenje TX63727: U rastvor jedinjenja 408c (0.117 g, 0.3 mmol) u 2 mL DMF na 0°C dodat je 1,3- dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiranjem sa 5-30% EtOAc/heksanima da bi se dobilo 45 (80 mg).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.97 (s, 1H), 7.81 (dd, 1H, J = 1.8, 7.6 Hz), 7.42 (m, 1H), 7.04-7.09 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.85 (ddd, 1H, J = 1.0, 6.7, 18.5 Hz), 2.51-2.66 (m, 2H), 2.07-2.17 (m, 2H), 1.75 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J= 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]<+>390.
Jedinjenje TX63769: Jedinjenje 408d (110 mg, 0.29 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje TX63727 da bi se dobilo jedinjenje TX63769 (75 mg, 69%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.00 (s, 1H), 8.46 (m, 2H), 7.49 (m, 2H), 4.10 (s, 3H), 2.86 (ddd, 1H, J = 1.0, 6.8, 18.4 Hz), 2.59 (m, 2H), 2.13 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 1.31 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]<+>374.
Jedinjenje TX63757: Jedinjenje 408e (180 mg, 0.5 mmol) je tretirano prema postupku za jedinjenje TX63724 da bi se dobilo jedinjenje TX63757 (100 mg).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.70 (s, 2H), 9.33 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 4.13 (s, 3H), 2.90 (ddd, 1H, J = 0.9, 6.6, 18.8 Hz), 2.63 (m, 2H), 2.16 (m, 2H), 1.77 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 1.33 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]<+>362.
Jedinjenje 409: Jedinjenje 401b (515 mg, 1.75 mmol) je rastvoreno u DMAc (10 mL). U ovaj rastvor dodat je Zn(CN)2(135 mg, 1.15 mmol), dppf (200 mg, 0.36 mmol) i Na2CO3(190 mg, 1.75 mmol). Azot je barbotiran kroz smešu u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(40 mg, 0.018 mmol) i azot je barbotiran još 10 min. Suspenzija je zagrevana do 120°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ugašena sa 50 mL vode i ekstrahovana sa etrom (2x50 mL). Organski ekstrakti su koncentrovani, i prečišćeni na silika gel koloni, eluirani sa 5-20% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje 409 kao prljavo bela čvrsta supstanca (0.2 g, 40% prinos). MS (APCI): m/z [M+H]<+>286.
Jedinjenje 410: U rastvor 409 (0.2 g, 0.7 mmol) u 10 mL HCOOEt ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim sipana u vodu i zakišeljen sa KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 410 (220 mg). MS: m/z [M+H]<+>361.
Jedinjenje 411: U rastvor 410 (0.22 g, 0.7 mmol) u 20 mL EtOH dodata je NH2OH· HCl so (2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 411 (60 mg, 30% prinos). MS: m/z [M+H]<+>358.
Jedinjenje 412: Rastvor 411 (60 mg, 0.17 mmol) i 1 mL trietilamina u 2 mL acetonitrila je zagrevan na 85°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je pumpana pod vakuumom do sušenja da bi se dobilo jedinjenje 412 (60 mg). MS: m/z [M+H]<+>358.
Jedinjenje TX63730: U rastvor jedinjenja 412 (60 mg, 0.17 mmol) u 1 mL DMF na 0°C dodat je 1,3- dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 5-30% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63730 (25 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.83 (s, 1H), 4.42 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 2.82 (m, 1H), 2.45-2.63 (m, 2H), 2.10 (m, 1H), 2.02 (dd, 1H, J = 2.7, 12.8 Hz), 1.70 (m, 1H), 1.39 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.37 (s, 3H), 1.25 (d, 3H, J= 6.7 Hz); MS: m/z [M+H]<+>356.
Jedinjenje 413: U rastvor neznatno nečistog 372 (1.39 g, pretpostaviti 4.20 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (0.80 mL, 4.60 mmol) u 20 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) fosfor oksihlorid (4.0 mL, 42.9 mmol). Posle dodavanja, uzorak je zagrevan na 90°C pod N2u trajanju od 4 časa, hlađen, koncentrovan, zatim pažljivo podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.75 g (55%) jedinjenja 413 kao svetlo žuto ulje. MS (APCI) m/z 323/325 [M+H]<+>(100/91%).
Jedinjenje 414a: Rastvor 413 (0.44 g, 1.36 mmol), N,N-diizopropiletilamina (1.00 mL, 5.74 mmol) i morfolina (0.24 mL, 2.75 mmol) u 10 mL i-PrOH je ispran sa N2, hermetički zatvoren i zagrevan na 90°C u trajanju od 48 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.50 g (98%) jedinjenja 414a kao svetlo žuto-mrka penasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI): m/z 374 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 415a: Rastvor 414a (0.50 g, 1.34 mmol) i 3 N HCl (5 mL, 15 mmol) u 5 mL MeOH je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.37 g (84%) jedinjenja 415a kao žuto-mrka čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 330 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 416a: U mešajući rastvor neznatno nečistog 415a (0.37 g, 1.12 mmol) i etil formata (9.0 mL, 111.0 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (1.0 mL, 5.3 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.45 g (>100%) neznatno nečistog 416a kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 417a: Rastvor neznatno nečistog 416a (0.45 g, pretpostaviti 1.12 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.12 g, 1.73 mmol) u 20 mL EtOH je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, hlađen, koncentrovan i podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.47 g (100%) tamno žutog ulja, za koje je pomoću TLC i MS utvrđeno da je smeša željenog 417a i nehidratisanog proizvoda. TLC (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) 2 komponente; Rf= 0.47 i 0.12. MS (ES) m/z 355 (100%) [M+H]<+>. Rastvor gore navedene smeše (cela količina) i prstohvat monohidrata p-toluensulfonske kiseline u 50 mL benzena su zagrevani na 90°C pod N2u trajanju od 2 časa (TLC je pokazala da nije ostalo niže komponente). Uzorak je hlađen i koncentrovan da bi se dobilo 0.77 g (>>100%) jedinjenja 417a kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 418a: U mešajući rastvor neznatno nečistog 417a (cela količina sirove smeše iz prethodnog koraka, pretpostaviti 1.12 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL MeOH ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (1.1 mL, 5.9 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.37 g (94%) jedinjenja 418a kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje TX63758: U mešajući rastvor na 0°C pod N2neznatno nečistog 418a (0.37 g, 1.05 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.15 g, 0.52 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (1.0 mL, 12 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljena između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 40% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.20 g (54%) jedinjenja TX63758 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.84 (s, 1H), 3.84 (ddd, 2H, J= 2.9, 6.4, 11.3 Hz), 3.75 (ddd, 2H, J = 2.8, 6.6, 11.2 Hz), 3.43 (ddd, 2H, J = 2.4, 6.4, 13.1 Hz), 3.22 (ddd, 2H, J = 2.4, 6.5, 13.1 Hz), 2.68 (m, 2H), 2.55 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.11 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI) m/z 353 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 414b: Smeša 413 (0.38 g, 1.17 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0.72 mL, 4.13 mmol) i dimetilamine hidrohlorida (0.11 g, 1.35 mmol) u 10 mL n-BuOH je isprana sa N2, hermetički zatvorena i zagrevana na 90°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.25 g (64%) jedinjenja 414b kao bela voskasta čvsta supstanca. MS (APCI) m/z 332 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 415b: Rastvor 414b (0.25 g, 0.75 mmol) i 3N HCl (6 mL, 18 mmol) u 10 mL MeOH je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.22 g (>100%) neznatno nečistog jedinjenja 415b kao svetlo žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 416b: U mešajući rastvor neznatno nečistog 415b (cela količina iz prethodnog koraka, pretpostaviti 0.75 mmol) i etil formata (6.1 mL, 75.5 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (1.42 mL, 7.57 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.25 g (>100%) neznatno nečistog jedinjenja 416b kao žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 417b: Rastvor neznatno nečistog 416b (cela količina iz prethodnog koraka, pretpostaviti 0.75 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.080 g, 1.15 mmol) u 10 mL EtOH je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan i podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.23 g (98%) žutog ulja, za koje je pomoću TLC i MS utvrđšeno da je smeša željenog jedinjenja 417b i nehidratisanog proizvoda. TLC (silika gel, 40% EtOAc/Heksani) 2 komponente; Rf= 0.38 i 0.06. MS (APCI) m/z 331 (M+19, 70%) i 313 (M+1, 100%). Rastvor gore navedene smeše (cela količina) i prstohvat monohidrata p-toluensulfonske kiseline u 50 mL benzena su zagrevani na 90°C pod N2u trajanju od 2 časa (TLC je pokazala da nije ostalo donje komponente). Uzorak je hlađen i koncentrovana i podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.20 g (83%) jedinjenja 417b kao svetlo žuta penasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje 418b: U mešajući rastvor neznatno nečistog 417b (0.20 g, 0.63 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL MeOH ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (1.2 mL, 6.4 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.20 g (99%) neznatno nečistog jedinjenja 418b kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje TX63774: U mešajući rastvor na 0°C pod N2neznatno nečistog 418b (0.20 g, 0.62 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.088 g, 0.31 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.50 mL, 6.18 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.046 g (24%) jedinjenja TX63774 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.85 (s, 1H), 3.00 (s, 6H), 2.75 (m, 2H), 2.54 (m, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.10 (m, 2H), 1.67 (s, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI) m/z 311 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 414c: Smeša 413 (0.44 g, 1.37 mmol), N,N-diizopropiletilamina (0.26 mL, 1.49 mmol) i n-butilamina (0.70 mL, 7.08 mmol) u 5 mL n-BuOH je isprana sa N2, hermetički zatvorena i zagrevana na 90°C u trajanju od 48 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.59 g (>100%) neznatno nečistog jedinjenja 414c kao žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 360 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 415c: Rastvor neznatno nečistog 414c (cela količina iz prethodnog koraka, pretpostaviti 1.37 mmol) i 3N HCl (5 mL, 15 mmol) u 10 mL MeOH je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa CHCl3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.42 g (98%) neznatno nečistog 415c kao svetlo žuto ulje, koje korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 316 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 416c: U mešajući rastvor neznatno nečistog 415c (0.42 g, 1.34 mmol) i etil formata (10.8 mL, 133.7 mmol) u 20 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (1.25 mL, 6.66 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.60 g (>100%) neznatno nečistog 416c kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 344 [M+H]<+>(100%). Jedinjenje 417c: Rastvor neznatno nečistog 416c (cela količina iz prethodnog koraka, pretpostaviti 1.34 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.24 g, 3.45 mmol) u 10 mL EtOH je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći.
Uzorak je koncentrovan i podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.58 g (>100%) tamno žutog ulja, za koje je pomoću TLC i MS utvrđeno da je smeša željenog jedinjenja 417c i nehidratisanog proizvoda. TLC (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) 2 komponente; Rf= 0.42 i 0.06. MS (APCI) m/z 359 (M+19, 70%) i 341 (M+1, 100%). Rastvor gore navedene smeše (cela količina) i prstohvata monohidrat p-toluensulfonske kiseline u 50 mL benzena je zagrevan na 90°C pod N2u trajanju od 2 časa (TLC je pokazala da nije ostalo donje komponente). Uzorak je hlađen i koncentrovan i podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.46 g (~100%) jedinjenja 417c kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. (APCI) m/z 341 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 418c: U mešajući rastvor neznatno nečistog 417c (0.46 g, pretpostaviti 1.34 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL MeOH uakapavnjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (1.25 mL, 6.66 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.19 g (41%) jedinjenja 418c kao žuto ulje.
Jedinjenje TX63827: U mešajući rastvor na 0°C pod N2jedinjenja 418c (0.19 g, 0.55 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.078 g, 0.27 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.44 mL, 5.44 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.079 g (43%) jedinjenja TX63827 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 4.39 (s, br, 1H), 3.49 (q, 1H, J = 7.2 Hz), 2.45-2.54 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.28-2.44 (m, 2H), 2.08-2.17 (m, 1H), 2.01 (dt, 1H, J = 2.4, 12.8 Hz), 1.68-1.81 (m, 1H), 1.50-1.62 (m, 3H), 1.31-1.45 (m, 2H), 1.37 (s, 3H), 1.26 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.94 (t, 3H, J = 7.6 Hz); MS (APCI) m/z 339 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 414d: Smeša 413 (0.40 g, 1.24 mmol) i metilamina, 2.0 M rastvora u THF (3.1 mL, 12.4 mmol) u 10 mL i-PrOH je isprana sa N2, hermetički zatvorena i zagrevana na 90°C u trajanju od 48 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 100% EtOAc) da bi se dobilo 0.34 g (87%) jedinjenja 414d kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 318 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 415d: Rastvor 414d (0.34 g, 1.08 mmol) i 3N HCl (6 mL, 18 mmol) u 12 mL MeOH:THF (2:1) je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa CHCl3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.26 g (87%) neznatno nečistog jedinjenja 415d kao svetlo žuta penasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje 416d: U mešajući rastvor neznatno nečistog 415d (0.26 g, 0.94 mmol) i etil formata (7.6 mL, 94.1 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (0.88 mL, 4.69 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.20 g (70%) neznatno nečistog jedinjenja 416d kao svetlo žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 302 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 417d: Rastvor neznatno nečistog 416d (0.20 g, 0.65 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.069 g, 0.99 mmol) u 10 mL EtOH je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan i podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.24 g (>100%) žute penaste čvrste supstance, za koju je pomoću TLC i MS utvrđeno da je smeša željenog jedinjenja 417d i nehidratisanog proizvoda. TLC (silika gel, 5% MeOH/CHCl3) 2 komponente; Rf= 0.44 i 0.13. MS (APCI) m/z 317 (M+19, 52%) i 299 (M+1, 100%). Rastvor gore navedene smeše (cela količina) i prstohvata monohidrata p-toluensulfonske kiseline u 50 mL benzena je zagrevan na 90°C pod N2u trajanju od 4 časa (TLC je pokazala da nema preostale donje komponente). Uzorak je hlađen i koncentrovana i podeljen između CHCl3i 10% i vodenog rastvora NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.20 g (>100%) neznatno nečistog jedinjenja 417d kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 299 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 418d: U mešajući rastvor neznatno nečistog jedinjenja 417d (0.20 g, pretpostaviti 0.65 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL MeOH ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe, 30 tež.% rastvor u MeOH (0.61 mL, 3.25 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.17 g (89%) jedinjenja 418d kao svetlo žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje TX63852: U mešajući rastvor 418d (0.17 g, 0.58 mmol) na 0°C pod N2u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.083 g, 0.29 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.47 mL, 5.81 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 75% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.044 g (25%) jedinjenja TX63852 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.93 (s, 1H), 4.48 (s, br, 1H), 3.05 (d, 3H, J = 4.4 Hz), 2.29-2.57 (m, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.09-2.13 (m, 1H), 2.03 (t, 1H, J = 13.2 Hz), 1.68-1.82 (m, 1H), 1.37 (s, 3H), 1.28 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 297 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 419a-b: Rastvor 400 (0.56 g, 1.87 mmol) i Na metala (200 mg, 8.7 mmol) u 15 mL EtOH je zagrevan na 50°C u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je koncentrovana, ekstrahovana sa EtOAc (2x25 mL), isprana vodom, i prečišćena na koloni silika gela. Dva jedinjenja su izolovana eluiranjem sa 10-15% EtOAc/Heksanima. Prvo jedinjenje je 419a (160 mg, 28% prinos), MS: m/z [M+H]<+>309, 311 (3:1). Drugo jedinjenje je 419b (210 mg, 35% prinos). MS: m/z [M+H]<+>319.
Jedinjenje 420: U rastvor 419b (210 mg, 0.66 mmol) u 5 mL HCOOEt na sobnoj temperaturi, ukapavanjem je dodat rastvor Na metala (50 mg, 2.17 mmol) u EtOH (5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, sipana u vodu i zakišeljena sa KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 420 (210 mg, 92% prinos). MS: m/z [M+H]<+>347.
Jedinjenje 421: U rastvor 420 (0.21 g, 0.6 mmol) u 13 mL EtOH dodata je NH2OH· HCl so (2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (2325 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 421 (210 mg). MS: m/z [M+H]<+>344.
Jedinjenje 422: U rastvor 421 (0.21 g, 0.6 mmol) u 3 mL THF i 1.5 mL MeOH ukapavanjem je dodat 30% NaOMe (8 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 422 (200 mg). MS: m/z [M+H]<+>344.
Jedinjenje TX63736: U rastvor 422 (200 mg, 0.58 mmol) u 2 mL DMF na 0°C dodat je 1,3-dibromo- 5,5-dimetilhidantoin (0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g) i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 5-30% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63736 kao prljavo bela čvrsta supstanca (23 mg, 12%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.78 (s, 1H), 4.44 (t, 2H, J = 7.1), 4.42 (t, 2H, J = 7.0), 2.74 (ddd, 1H, J = 0.9, 6.7, 17.9 Hz), 2.51 (m, 2H), 2.08 (m, 2H), 1.69 (m, 1H), 1.45 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.40 (s, 3H), 1.39 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.30 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]<+>342.
Jedinjenje 423: Jedinjenje 419a (0.16 g, 0.51 mmol) je rastvoreno u DME (6 mL) i DMF (3 mL). U ovaj rastvor je dodata fenilboronska kiselina (80 mg, 0.65 mmol), PH3P (85 mg, 0.32 mmol) i K3PO4(0.33 g, 1.56 mmol). Azot je barbotiran kroz smešu u trajanju od 10 min. Dodat je Pd(OAc)2(35 mg, 0.16 mmol) i azot je barbotiran još 10 min. Suspenzija je zagrevana do 90°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana, i prečišćena na koloni silika gela, eluirana sa 5-25% EtOAc/heksani da bi se dobilo jedinjenje 423 kao čvrsta supstanca (120 mg, 67% prinos). MS: m/z [M+H]<+>351.
Jedinjenje 424: U rastvor 423 (120 mg, 0.34 mmol) u 2.5 mL HCOOEt ukapavanjem je dodat 30% NaOMe u MeOH (6 ekv.). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim sipana u vodu i zakišeljena sa KH2PO4. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 424 (130 mg). MS: m/z [M+H]<+>379.
Jedinjenje 425: U rastvor 424 (130 mg, 0.34 mmol) u 6.5 mL EtOH dodata je NH2OH· HCl so (2 ekv.), i smeša je zagrevana na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 425 (120 mg). MS: m/z [M+H]<+>376.
Jedinjenje 426: U rastvor 425 (120 mg, 0.32 mmol) u 1.5 mL THF i 0.75 mL MeOH ukapavanjem je dodat 30% NaOMe (8 ekv.), i rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 6 časova. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je mešan sa zasićenim KH2PO4(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni sa MgSO4, koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje 426 (110 mg). MS: m/z [M+H]<+>376.
Jedinjenje TX63731: U rastvor 426 (110 mg, 0.29 mmol) u 2 mL DMF na 0°C dodat je 1,3-dibromo- 5,5-dimetilhidantoin (0.55 ekv.), i rastvor je mešan u trajanju od 2 časa. Dodat je piridin (1 g), i rastvor je zagrevan na 50°C preko noći. Posle koncentrovanja in vacuo, ostatak je prečišćen na koloni silika gela, eluiran sa 5-30% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje TX63731 (75 mg, 69%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.02 (s, 1H), 8.46 (m, 2H), 7.50 (m, 3H), 4.60 (q, 2H, J = 7.1 Hz), 2.87 (ddd, 1H, J =1.1, 6.8,18.6), 2.61 (m, 2H), 2.14 (m, 2H), 1.76 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.46 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.32 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]<+>374.
Jedinjenje 427: U rastvor 413 (0.38 g, 1.17 mmol) u 20 mL EtOH dodat je (uakapavnjem, preko šprica) natrijum etoksid, 21 tež.% rastvor u EtOH (4.4 mL, 11.8 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova (TLC, silika gel, 30% EtOAc/heksani još uvek je pokazivala neodreagovali početni materijal), zatim zagrevan na 70°C u trajanju od 8 časova. Uzorak je koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.52 g (>100%) neznatno nečistog jedinjenja 427 kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 428: Rastvor neznatno nečistog 427 (0.52 g, pretpostaviti 1.17 mmol) i 3N HCl (4 mL, 12 mmol) u 10 mL MeOH je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo 0.28 g (84%) jedinjenja 428 kao žuto-mrka čvrsta supstanca.
Jedinjenje 429: U mešajući rastvor 428 (0.28 g, 0.98 mmol) i etil formata (9.0 mL, 111.0 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodavan (preko šprica) natrijum etoksid, 21 tež.% rastvor u EtOH (3.7 mL, 9.9 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.30 g (96%) neznatno nečistog 429 kao tamno žuta uljasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje 430: Rastvor 429 (0.30 g, 0.94 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.10 g, 1.44 mmol) u 10 mL EtOH je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan i podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.30 g (>100%) neznatno nečistog 430 kao žuto-mrka penasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje 431: U mešajući rastvor neznatno nečistog 430 (cela količina iz prethodnog koraka, pretpostaviti 0.94 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL MeOH ukapavanjem je dodavan (preko šprica) natrijum etoksid, 21 tež.% rastvor u EtOH (3.5 mL, 9.4 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 0.28 g (95%) neznatno nečistog 431 kao žuto-narandžasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje TX63773: U mešajući rastvor na 0°C pod N2neznatno nečistog 431 (0.28 g, 0.89 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.13 g, 0.45 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.70 mL, 8.65 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/heksani) da bi se dobilo 0.14 g (48%) jedinjenja TX63773 kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.87 (s, 1H), 4.40 (q, 2H, J = 7.1 Hz), 2.75 (dd, 1H, J = 7.0, 18.5 Hz), 2.54 (s, 3H), 2.52 (m, 2H), 2.03 (m, 2H), 1.65 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (t, 3H, J= 7.1 Hz), 1.27 (d, 3H, J = 6.7 Hz); MS (APCI) m/z 312 [M+H]<+>(100%).
Jedinjenje 432: Jedinjenje 127 (0.964 g, 4.04 mmol) je apsorbovano u DCM (100 mL) i dodati su MgBr2-Et2O (2.707 g, 10.5 mmol) i i-Pr2NEt (1.39 mL, 8.0 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od oko 30 min tokom čega je reakciona smeša postepeno dobila narandžastu boju. Zatim, ukapavanjem je dodat benzoil hlorid (1.17 g, 8.3 mmol) u DCM (3 mL) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zagrevana do refluksa i narandžasta boja je postepeno otpuštena. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (100 mL) koja je mešana 1 čas na sobnoj temperaturi. Organski sloj je odvojen i sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do ulja. Ulje je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 42 g) sa 10% EtOAc/heksanima kao eluantom da bi se dobio proizvod 432 kao skoro bistro ulje (0.372 g, 27%). MS: m/z [M+H]<+>343.1.
Jedinjenje 433: Jedinjenje 432 (0.372 g. 1.09 mmol) je apsorbovano u EtOH (40 mL) i dodat je hidrazin monohidrat (0.244 g, 3.8 mmol). Reakciona smeša zagrevana je do 65°C u trajanju od 1 časa i zatim mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 dana. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i preostale isparljive naterije su uklonjene pod vakuumom da bi se dobio proizvod 433 kao ulje/čvrsta supstanca (0.41 g) koja je korišćena direktno u sledećem koraku. MS: m/z [M+H]<+>339.1.
Jedinjenje 434: Jedinjenje 433 (0.41 g, 1.2 mmol) je apsorbovano u MeOH (35 mL) i 1N HCl (3 mL) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio MeOH i zatim je podeljena između EtOAc (60 mL) i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 434 kao ulje/staklo (0.3266 g). m/z [M+H]<+>295.1.
Jedinjenje 435: Jedinjenje 434 (0.3266 g, 1.11 mmol) je apsorbovano u etil formatu (50 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (1.8 mL, 9.7 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim sipana u levak za odvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL) i EtOAc (125 mL). Organski sloj je odvojen i sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do ulja/stakla koje je sadržalo veliku količinu početnog materijala, i ponovo je podvrgnuto etil formatu (30 mL) i 30% NaOMe u MeOH (1.2 mL, 6.48 mmol) preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je obrađena kao pre da bi se dobio proizvod 435 kao žuto staklo (0.247g, 70% u tri koraka). MS: m/z [M+H]<+>323.1.
Jedinjenje 436: Rastvor 0.1 M hidroksilamin hidrohlorida u 9:1 EtOH/vodi (12 mL, 1.2 mmol) dodat je u jedinjenje 435 (0.247 g, 0.77 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Sledećeg jutra smeša je zagrevana do 50°C na rotacionom isparivaču i koncentrovana do sušenja. Sirovi ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarebonata (15 mL) i organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do stakla. Staklo je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 8 g) upotrebom 50% EtOAc/heksana kao eluanta da bi se dobio proizvod 436 kao staklo (0.0844 g, 34%). MS: m/z [M+H]<+>320.1.
Jedinjenje 437: Izoksazol 436 (0.0844 g, 0.26 mmol) je apsorbovan u 1:1 MeOH/THF, (10 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (0.2 mL, 1.08 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim podeljena između zasićenog KH2PO4(15 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je odvojen i sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobio proizvod 437 kao staklo (0.085 g). MS: m/z [M+H]<+>320.1.
Jedinjenje TX63836: Cijanoketon 437 (0.085 g, 0.26 mmol) je apsorbovan u DMF (2.5 mL) i smeša je hlađena do 0°C. Dodat je dibromodimetilhidantoin (0.048 g, 0.17 mmol) i reakcija je mešana u trajanju od 1.75 časa. Dodat je anhidrovani piridin (0.25 mL, 3.1 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 60°C u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i podvrgnuta hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 6 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc kao eluanta da bi se dobio proizvod TX63836 kao prljavo bela čvrsta supstanca (0.0355 g, 43% u dva koraka).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.47 (s, 1H), 7.42-7.50 (m, 5H), 7.33-7.41 (m, 1H), 2.91 (dd, 1H, J = 6.4, 16.4 Hz), 2.70-2.82 (m, 1H), 2.51-2.62 (m, 1H), 2.05-2.18 (m, 2H), 1.69-1.85 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.31 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]<+>318.0.
Jedinjenje TX63850: Jedinjenje TX63836 (0.015 g, 0.047 mmol) je mešano sa Ac2O (2 mL) i anhidrovanim NaOAc (0.013 g, 0.16 mmol). Smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi i zatim je koncentrovana do sušenja i filtrirana kroz silika gel (230-400 mreža, 1 g) upotrebom 4:1 heksana/EtOAc da bi se dobio proizvod TX63850 kao staklo (0.0052 g, 31%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 7.28-7.41 (m, 3H), 7.15-7.27 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.38-2.62 (m, 4H), 1.90-2.10 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.23 (d, 3H, J = 6.4 Hz); MS: m/z [M+H]<+>360.1.
Jedinjenje TX63871: Jedinjenje TX63836 (0.015 g, 0.047 mmol) je mešano sa etilhloroformatom (1 mL) i čvrstim NaHCO3(0.056 g, 6.67 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i podvrgnuta hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 4 g) upotrebom 3:1 heksana/EtOAc da bi se dobio proizvod TX63871 kao prljavo bela čvrsta supstanca (0.014 g, 76%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.72 (s, 1H), 7.65-7.70 (m, 2H), 7.36-7.45 (m, 3H), 4.57 (q, 2H, J = 7.2 Hz), 2.69-2.81 (m, 2H), 2.59-2.68 (m, 1H), 2.18 (dd, 1H, J = 1.2, 12.4 Hz), 2.02-2.10 (m, 1H), 1.62-1.74 (m, 1H), 1.67 (s, 3H), 1.51 (t, 3H, J = 6.8 Hz), 1.34 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]<+>390.1.
Jedinjenje 438: Jedinjenje 127 (0.971 g, 4.1 mmol) je apsorbovano u DCM (50 mL) i dodati su MgBr2-Et2O (2.90 g, 11.2 mmol) i i-Pr2NEt (2.4 mL, 13.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od oko 30 min, tokom kog vremena je smeša postepeno dobila narandžastu boju. Dodat je hidrohlorid hlorid piridin-2-karboksilne kiseline (1.71 g, 9.6 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata u višku. Veoma tamna reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonili DCM i EtOAc (250 mL) i dodat je zasićeni KH2PO4u višku. Organski sloj je odvojen, sušen preko MgSO4, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 438 kao tamno ulje (1.09 g) koje je korišćeno direktno u sledećem koraku. MS: m/z [M+H]<+>344.1.
Jedinjenje 439: Sirovi 438 (1.09 g. 3.2 mmol) je apsorbovan u EtOH (100 mL) i dodat je metilhidrazin (1.306 g, 28.4 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim zagrevana do 70°C, nakon čega je dodato još EtOH i zagrevanje je nastavljeno na 70°C. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i tamno ulje je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 40 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc i zatim EtOAc kao eluanta da bi se dobio proizvod 439 kao žuto ulje/staklo (0.1453 g, 10% u dva koraka). MS: m/z [M+H]<+>354.2.
Jedinjenje 440: Jedinjenje 439 (0.1453 g, 0.41 mmol) je apsorbovano u MeOH (25 mL) i 1N HCl (4 mL) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio MeOH i zatim je podeljena između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski sloj je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 440 kao ulje/staklo (0.1197 g, 94%). m/z [M+H]<+>310.1.
Jedinjenje 441: Jedinjenje 440 (0.1197 g, 0.39 mmol) je apsorbovano u etil formatu (20 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (0.6 mL, 3.24 mmol). Smeša je mešana 3 dana na sobnoj temperaturi i zatim je sipana u levak za odvajanje koji sadrži zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je odvojen i sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 441 kao narandžasto staklo (0.1267 g, 96%). MS: m/z [M+H]<+>338.1.
Jedinjenje 442: Rastvor 0.1 M hidroksilamin hidrohlorida u 9:1 EtOH/vodi (6 mL, 0.6 mmol) dodat je u 441 (0.1267 g, 0.37 mmol) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Po završetku smeša je koncentrovana do sušenja (T = 50°C) i ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (10 mL). Organski rastvor je sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 442 kao žuto staklo (0.1053 g, 85%). MS: m/z [M+H]<+>335.1.
Jedinjenje 443: Jedinjenje 442 (0.1053 g, 0.31 mmol) je apsorbovano u 1:1 MeOH/THF (10 mL) i dodat je 30% NaOMe u MeOH (0.25 mL, 1.35 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim je podeljena između zasićenog KH2PO4(15 mL) i EtOAc (100 mL). Organski sloj je odvojen, sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobio proizvod 443 kao staklo (0.1022 g, 99%). MS: m/z [M+H]<+>335.1.
Jedinjenje TX63851: Jedinjenje 443 (0.1022 g, 0.31 mmol) je apsorbovano u DMF (2.5 mL) i smeša je hlađena do 0°C. Dodat je Br2(0.055 g, 0.34 mmol) u DMF (0.3 mL) i reakcija je mešana u trajanju od 1.75 časova. Dodat je anhidrovani piridin (0.25 mL, 3.1 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 60°C u trajanju od 3 časa. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i podeljena između EtOAc (80 mL) i zasićenog vodengo rastvora natrijum bikarbonata (10 mL). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (10 mL), sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan do braon ulja/stakla. Ulje je podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 8 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc kao eluanta i ponovo podvrgnuto hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 6 g) upotrebom 50% heksana/EtOAc kao eluanta da bi se dobio proizvod TX63851 (0.0163 g, 16%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 8.44 (s, 1H), 7.72 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 7.32 (d, 1H, J= 7.6 Hz), 7.17-7.24 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 2.55-2.75 (m, 2H), 2.44-2.55 (m, 1H), 1.94-2.11 (m, 2H), 1.62-1.75 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.24 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS: m/z [M+H]<+>333.1.
Jedinjenje TX63849: Jedinjenje TX63690 (0.034 g, 0.10 mmol) je apsorbovano u acetonitrilu (1 mL) i dodat je Accufluor (0.042 g, 0.126 mmol (na bazi 3 mmol/g)). Smeša je mešana 2 časa na 80°C i zatim 3 dana na sobnoj temperaturi. Dodato je još Accufluor (0.046 g, 0.138 mmol) i smeša je zagrevana preko noći na 80°C. Reakciona smeša je koncentrovana i podvrgnuta hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 6 g) upotrebom EtOAc i zatim 5% THF/EtOAc kao eluanta. Frakcije koje sadrže proizvod su ponovo podvrgnute hromatografiji na silika gelu (230-400 mreža, 2.8 g) upotrebom 1.2% MeOH /DCM kao eluanta da bi se dobio proizvod TX63849 (0.005 g, 14%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.29 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.32 (s, 3H), 2.72 (d, 1H, J = 14.0 Hz), 2.40-2.51 (m, 1H), 1.45-1.96 (m, 4H), 1.22 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 1.12 (s, 3H); MS: m/z [M+H]<+>352.1.
Jedinjenje 444 and 445: Rastvor 181 (1.663 g, 5.223 mmol) i Et3N (1.0 mL, 5.94 mmol) u CHCl3(50 mL) pod N2je hlađen do 0°C i ukapavanjem je dodat metil trifluorometansulfonat (1.0 mL, 8.8 mmol). Rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature preko noći, zatim ispran zasićenim rastvorom NaHCO3i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan. Hromatografija (silika gel, 70% EtOAc /heksani) dala je jedinjenje 444 (0.786 g, 33%) kao prljavo belu čvrstu supstancu; MS (APCI) m/z 333 (M+1, 100); i jedinjenje 445 (0.247 g, 10%) kao svetlo žuto ulje; MS (APCI) m/z 333 (100) [M+H]<+>.
Jedinjenje 446: Rastvor 444 (0.786 g, 2.365 mmol) i 3N HCl (4 mL, 12 mmol) u 20 mL MeOH:THF (1:1) je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Rastvor je koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i 10% vodenog rastvora NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 446 (0.633 g, 93%) kao penasta bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 289 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 447: U rastvor 446 (1.8 mL, 22.3 mmol) u benzenu (10 mL) ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% u MeOH, 2.0 mL, 10.7 mmol) pod N2. Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, i zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 447 (0.502 g, 72%) kao svetlo braon penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 317 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 448: Rastvor 447 (0.502 g, pretpostaviti 1.585 mmol) u etanolu (10 mL) je tretiran čvrstim hidroksilamin hidrohloridom (0.16 g, 2.30 mmol). Uzorak je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa i zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 448 (0.658 g, >100%) kao svetlo braon penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 449: Rastvor neznatno nečistog 448 (0.658 g, pretpostaviti 1.585 mmol) u MeOH (10 mL) je tretiran sa NaOMe (30 tež.% u MeOH, 1.48 mL, 7.89 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCls, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 449 (0.578 g, >100%) kao žuta penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63584: Dibromodimetilhidantoin (0.272 g, 0.951 mmol) je dodat u mešajući rastvor neznatno nečistog 449 (0.578 g, pretpostaviti 1.585 mmol) u DMF (10 mL) na 0°C pod N2. Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (1.3 mL, 16.1 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina) i zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan. Prečišćavanje pomoću hromatografije (silika gel, 2% MeOH/CHCl3) dalo je jedinjenje TX63584 (0.151 g, 31%) kao svetlo žuta penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.75 (s, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.79 (dd, 1H, J = 6.1, 18.5 Hz), 2.57 (s, 3H), 2.46 (dddd, 1H, J = 7.4, 9.4, 9.4, 11.4 Hz), 2.06 (dd, 1H, J = 2.0, 12.8 Hz), 1.96 (dd, 1H, J = 7.3, 13.3 Hz), 1.76 (m, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 1.20 (s, 3H); MS (APCI) m/z 312 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 450: Rastvor 445 (0.247 g, 0.742 mmol) i 3 N HCl (4 mL, 12 mmol) u 20 mL MeOH:THF (1:1) je mešana na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Rastvor je koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i 10% vodenog NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 450 (0.191 g, 89%) kao svetlo žuto ulje. MS (APCI) m/z 289 (100%) [M+H]<+>. Jedinjenje 451: U mešajući rastvor 450 (0.191 g, 661 mmol) i etil formata (0.53 mL, 6.56 mmol) u benzenu (10 mL) ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% u MeOH, 0.62 mL, 3.30 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 451 (0.211 g, >100%) kao žuto ulje. MS (APCI) m/z 317 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 452: Rastvor neznatno nečistog 451 (0.211 g, pretpostaviti 0.661 mmol) u etanolu (10 mL) je treated sa čvrstim hidroksilamin hidrohloridom (0.069 g, 0.99 mmol). Uzorak je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 16 časova, hlađen do sobne temperature, koncentrovan i podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 452 (0.176 g, 85%) kao žuto ulje. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 453: Rastvor 452 (0.176 g, 0.561 mmol) u MeOH (10 mL) je tretiran sa NaOMe (30 tež.% u MeOH, 0.53 mL, 2.82 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan i zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCls, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 453 (0.170 g, 96%) kao žuta gumasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 314 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63595: Dibromodimetilhidantoin (0.093 g, 0.325 mmol) je dodat u mešajući rastvor 453 (0.170 g, 0.541 mmol) u DMF (10 mL) na 0°C pod N2. Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.44 mL, 5.44 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan. Prečišćavanje pomoću hromatografije (silika gel, 30% EtOAc/Heksani) dalo je jedinjenje TX63595 (0.066 g, 39%) kao prljavo bela penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 8.86 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.80 (dd, 1H, J=17.5, 7.5 Hz), 2.56 (s, 3H), 2.48-2.54 (m, 1H), 2.12 (dd, 1H, J=12.5, 2.5 Hz), 1.98 (app dd, 1H, J=12.5, 7.5 Hz), 1.78-1.87 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.21 (s, 3H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 197.6, 169.1, 167.9, 165.8, 165.0, 114.8, 114.6, 111.5, 53.9, 46.1, 44.8, 42.8, 27.1, 25.6, 25.4, 21.4, 17.9. MS (ES) m/z 312 (M+23, 100%) i 312 (67%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 454: U mešajuću suspenziju na 0°C pod N2jedinjenja 1 (4.67 g, 37.02 mmol) u 70 mL acetonitrila ukapavanjem je dodat 1-heksen-3-on (5 g, 46 mmol, 90+% stabilizovan sa ~ 0.6% 4-metoksifenolom), nakon čega je ukapavanjem dodavan trietilamin (8.25 mL, 59.19 mmol). Sva čvrsta supstanca je u rastvoru ka kraju dodavanja trietilamina. Žuti rastvor je ostavljen da se lagano zagreva do sobne temperature preko noći. Uzorak je koncentrovan, rastvoren u EtOAc, ispran zasićenim rastvorom NaHCO3i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 8.85 g (>100%) sirovog jedinjenja 454 kao žuta tečnost. MS (APCI) m/z 225 (17%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 455: U mešajući rastvor na sobnoj temperaturi pod N2neznatno sirovog 454 (cela količina iz prethodnog teksta, pretpostaviti 37.02 mmol) u 150 mL acetonitrila je dodat čvrsti (R,S)-fenilalanin (6.11 g, 36.99 mmol), a zatim je dodavan čvrsti (1R)-(+)-10-kamforsulfonska kiselina (4.30 g, 18.51 mmol). Uzorak je zagrevan pod N2na 70°C u trajanju od 48 časova, hlađen do sobne temperature, zatim filtriran. Čvrsta supstanca je isprana svežim acetonitrilom, spojeni filtrat je koncentrovan, zatim pažljivo podeljen između zasićenog rastvora NaHCO3i dietil etra. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% CHCl3-10% EtOAc-40% heksani). Odvajanje je slabo, sve frakcije koje sadrže UV vidljivu komponentu (TLC, SiO2[10% EtOAc-40% heksani-50% CHCl3], Rf~ 0.45) su spojeni i koncentrovani da bi se dobilo 5.38 g (70%) nečistog jedinjenja 455 kao svetlo žuta tečnost. (APCI) m/z 207 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 456: U mešajući rastvor na 0°C pod N2nečistog 455 (6.101 g, 29.575 mmol) u 100 mL EtOH ukapavanjem je dodat neznatno mutan rastvor natrijum borohidrida (0.31 g, 8.19 mmol) u 50 mL EtOH. Posle ~ 15 min (pomoću TLC je utvrđeno da nije preostalo početnog materijala), hladan uzorak je ugašen ukapavanjem sirćetne kiseline (3.4 mL, 59.4 mmol), mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, zatim koncentrovan. Dobijena svetlo žuta gumasta čvrsta supstanca je rastvorena u 200 mL EtOAc koji sadrži 5 mL vode, sušena sa viškom čvrste supstance NaHCO3i filtrirana da bi se dobilo 5.92 g (96%) nečistog jedinjenja 456 kao svetlo žuto ulje. MS (APCI) m/z 209 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 457: U mešajući rastvor na 0°C pod N2neznatno nečistog 456 (5.92 g, 28.42 mmol) i 3,4-dihidro-2H-pirana (3.6 mL, 39.6 mmol) u 100 mL CH2Cl2u jednoj porciji je dodat čvrsti monohidrat p-toluen-sulfonske kiseline (0.50 g, 2.63 mmol). Uzorak je odmah potamneo (svetlo žut do braom) i ostavljen je da se lagano zagreva do sobne temperature preko noći. Taman uzorak je koncentrovan, zatim podeljen između heksana i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 20% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo 3.868 g (46%) jedinjenja 457 kao svetlo žuto ulje. MS (APCI) m/z 293 (88%) [M+H]<+>i 191 (100%).
Jedinjenje 458: Tečni amonijak (~5 mL) je kondenzovan u posudi sa dva grlića na -78°C. U malim porcijama je dodata litijumska žica (0.185 g, 26.66 mmol, 2 ekv.). Posle 45 min, litijumska žica je rastvorena, zatim je ukapavanjem dodat rastvor 457 (3.868 g, 13.227 mmol) u 15 mL THF. Reakciona smeša je mešana u trajanju od 45 min na -78°C, zatim je dodat čvrsti amonijum hlorid (5 g, 93 mmol) i amonijak je ostavljen da isparava. Ostatak je rastvoren u 100 mL vode i ekstrahovan sa EtOAc (2x). Spojeni organski sloj je koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 10% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo 2.649 g (68%) jedinjenja 458 kao bezbojno ulje. MS (APCI) m/z 175 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 459: Rastvor 458 (2.649 g, 8.997 mmol) i piridinijum p-toluensulfonata (0.23 g, 0.92 mmol) u 50 mL EtOH je zagrevan na 70°C pod N2u trajanju od 6 časova, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 2.112 g (>100%) neznatno sirovog jedinjenja 459 kao žuto ulje. MS (APCI) m/z 211 (24%) [M+H]<+>i 175 (100%).
Jedinjenje 460: Rastvor pod N2neznatno sirovog 459 (2.112 g, pretpostaviti 8.997 mmol), etilen glikola (5.0 mL, 89.6 mmol) i monohidrata p-toluensulfonske kiseline (0.171 g, 0.899 mmol) u 100 mL benzena je refluksovan pod Dean-Stark uslovima u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 2.388 g (>100%) sirovog jedinjenja 460 kao tamno žuto ulje. MS (APCI) m/z 255 (35%) [M+H]<+>i 175 (100%).
Jedinjenje 461: U mešajući rastvor na sobnoj temperaturi neznatno sirovog 460 (2.388 g, pretpostaviti 8.997 mmol) u 100 mL CH2Cl2dodat je čvrsti MgSO4(1.08 g, 8.97 mmol), a zatim čvrsti piridinijum dihromat (6.77 g, 17.99mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 časa, koncentrovan, suspendovan u 100 mL dietil etra, mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min i filtriran. Filtrat je koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo 1.513 g (67%) jedinjenja 461 kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 253 (79%) [M+H]<+>i 173(100%).
Jedinjenje 462: U mešajući rastvor na 0°C pod N2jedinjenja 461 (1.513 g, 5.995 mmol) i etil formata (5 mL, 62 mmol) u 10 mL benzena dodat je natrijum metoksid, 30 tež.% rastvor u metanolu (6 mL, 32 mmol). Uzorak je ostavljen da se lagano zagreva do sobne temperature preko noći. Uzorak je rastvoren u EtOAc, ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo 1.624 g (97%) jedinjenja 462 kao žuta gumasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 295 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 463: Rastvor 462 (1.206 g, 4.303 mmol) u EtOH (20 mL) je tretiran sa metilhidrazinom (0.46 mL, 8.65 mmol). Uzorak je hermetički zatvoren, zagrevan na 50°C u trajanju od 16 časova, hlađen, koncentrovan i zatim podeljen između CHCl3i 10% vodenog rastvora NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 463 (0.989 g, 78%) kao gumasta bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 291 (100) [M+H]<+>.
Jedinjenje 464: Rastvor 463 (0.320 g, 1.102 mmol) i 3 N HCl (4 mL, 12 mmol) MeOH/THF (1:1, 20 mL) je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Rastvor je koncentrovan i zatim podeljen između CHCl3i 10% vodenog rastvora NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 464 (0.287 g, >100%) kao svetlo žuto ulje. MS (APCI) m/z 247 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 465: U mešajući rastvor na sobnoj temperaturi pod N2neznatno nečistog 464 (0.287 g, pretpostaviti 1.102 mmol) i etil formata (0.89 mL, 11.02 mmol) u benzenu (10 mL) ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% u MeOH, 1.0 mL, 5.5 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 465 (0.296 g, 98%) kao žuto ulje. MS (APCI) m/z 276 (100%) i 275 (90%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 466: Rastvor 465 (0.296 g, pretpostaviti 1.077 mmol) u EtOH (10 mL) tretiran je čvrstim hidroksilamin hidrohloridom (0.12 g, 1.73 mmol). Uzorak je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 16 časova, hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i 10% vodenog rastvora NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 466 (0.273 g, 93%) kao tamno žuto-braon ulje. MS (APCI) m/z 273 (100%) i 272 (86%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 467: Rastvor 466 (0.273 g, 1.006 mmol) u MeOH (10 mL) je tretiran sa NaOMe (30 tež.% u MeOH, 0.94 mL, 5.01 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 467 (0.226 g, 83%) kao tamno žuta penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 273 (M+2, 100%) i 272 (85%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63589: U mešajući rastvor na 0°C pod N2jedinjenja 467 (0.226 g, 0.834 mmol) u DMF (10 mL) u jednoj porciji dodat je čvrsti 1,3-dibromo-5,5-dimetil-hidantoin (0.143 g, 0.500 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.68 mL, 8.41 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je isprana zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan, zatim podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63589 (0.068 g, 30%) kao prljavo bela penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.74 (dd, 1H, J = 15.0, 5.0 Hz), 2.50-2.55 (m, 2H), 2.19-2.31 (m, 2H), 1.95 (app dd, 1H, J= 15.0, 5.0 Hz), 1.62-1.71 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 0.81 (t, 3H, J= 7.5 Hz); MS (APCI) m/z 270 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 468: Smeša 462 (0.412 g, 1.471 mmol), benzamidin hidrohlorida (2.3 g, 16.68 mmol) i piperidina (0.87 mL, 8.80 mmol) u 2-propanolu (10 mL) je zagrevana u hermetički zatvorenoj bočici na 85°C u trajanju od 96 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i 10% vodenog rastvora NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 468 (0.910 g, >100%) kao braon-žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 365 (100) [M+H]<+>.
Jedinjenje 469: Rastvor neznatno nečistog 468 (0.910 g, pretpostaviti 1.471 mmol) i 3 N HCl (10 mL, 30 mmol) u MeOH/THF (1:1, 20 mL) je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Rastvor je koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i 10% vodenog rastvora NH4OH. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 469 (0.778 g, >100%) kao tamno žuta gumasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 321 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 470: U mešajući rastvor na sobnoj temperaturi pod N2neznatno sirovog 469 (0.778 g, pretpostaviti 1.471 mmol) i etil formata (1.20 mL, 14.80 mmol) u benzenu (10 mL) ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% u MeOH, 1.40 mL, 7.46 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 470 (0.684 g, >100%) kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 349 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 471: Rastvor neznatno nečistog 470 (0.684 g, pretpostaviti 1.471 mmol) u EtOH (10 mL) je tretiran čvrstim hidroksilamin hidrohloridom (0.15 g, 2.16 mmol). Uzorak je zagrevan na 50°C pod2u trajanju od 16 časova, hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 471 (0.639 g, >100%) kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 472: Rastvor neznatno nečistog 471 (0.639 g, pretpostaviti 1.471 mmol) u MeOH (20 mL) je tretiran sa NaOMe (30 tež.% rastvor u MeOH (1.38 mL, 7.36 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCls, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje 472 (0.267 g, 52%) kao prljavo bela penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 368 (100%) [M+Na]<+>i 346 (45%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63598: U mešajući rastvor na 0°C pod N2jedinjenja 472 (0.267 g, 0.773 mmol) u DMF (10 mL) u jednoj porciji je dodat čvrsti 1,3-dibromo-5,5-dimetil-hidantoin (0.12 g, 0.42 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.63 mL, 7.79 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63598 (0.209 g, 79%) kao prljavo bela penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.96 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.44-8.46 (m, 2H), 7.48-7.53 (m, 3H), 3.01 (dd, 1H, J = 20.0, 5.0 Hz), 2.87-2.94 (m, 1H), 2.59 (app dt, 1H, J = 12.5, 5.0 Hz), 2.41 (td, 1H, J = 12.5, 3.3 Hz), 2.23-2.31 (m, 1H), 2.11-2.16 (m, 1H), 1.69-1.86 (m, 2H), 1.46 (s, 3H), 0.84 (t, 3H, J = 7.5 Hz); MS (ES) m/z 366 (100%) [M+H]<+>i 344 (37%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 473: U mešajući rastvor 463 (0.661 g, 2.275 mmol) u CH2Cl2(10 L) u jednoj porciji je dodat čvrsti 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.36 g, 1.26 mmol). Rastvor je odmah postao žuto-narandžast i sva čvrsta supstanca je prešla u rastvor. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min (TLC je pokazala da nije ostao početni materijal), koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje 473 (0.490 g, 58%) kao bezbojno ulje. MS (APCI) m/z 369/371 (100/64%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 474: U mešajuću degaziranu smešu jedinjenja 473 (0.490 g, 1.327 mmol), kalijum fosfata (0.85 g, 4.00 mmol) i fenilboronske kiseline (0.24 g, 1.97 mmol) u DME (10 mL) je u jednoj porciji dodat čvrsti tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0) (0.153 g, 0.132 mmol). Uzorak je degaziran, zagrevan na 80°C pod N2u trajanju od 16 časova, hlađen i filtriran kroz čep od Celita. Filtrat je koncentrovan, rastvoren u EtOAc, ispran sa 1N NaOH, zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje 474 (0.201 g, 41%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 367 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 475: Rastvor 474 (0.201 g, 0.548 mmol) i 3N HCl (4 mL, 12 mmol) u MeOH (20 mL) je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, zatim pažljivo podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 475 (0.163 g, 92%) kao prljavo bela penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 323 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 476: U mešajući rastvor 475 (0.163 g, 0.505 mmol) i etil formata (4.1 mL, 50.8 mmol) u benzenu (10 mL) ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% rastvor u MeOH, 0.47 mL, 2.50 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 476 (0.187 g, >100%) kao žuta gumasta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 351 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 477: Rastvor neznatno nečistog 476 (0.187 g, pretpostaviti 0.505 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.53 g, 0.76 mmol) u EtOH (20 mL) je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan i podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 477 (0.181 g, >100%) kao tamno žuto-braon ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 348 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 478: U mešajući rastvor neznatno nečistog 477 (0.181 g, pretpostaviti 0.505 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u MeOH (20 mL) ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% rastvor u MeOH, 0.47 mL, 2.50 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 478 (0.204 g, >100%) kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 348 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63599: U mešajući rastvor na 0°C pod N2neznatno nečistog 478 (0.204 g, pretpostaviti 0.505 mmol) u DMF (10 mL) u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.072 g, 0.252 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.63 mL, 7.79 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom KH2PO4i zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 50% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63599 (0.052 g, 30% u 4 koraka) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.48 (s, 1H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.39-7.42 (m, 1H), 7.31-7.33 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.53-2.65 (m, 3H), 2.35 (t, 1H, J = 12.5 Hz), 2.22-2.25 (m, 1H), 1.95-1.99 (m, 1H), 1.66-1.70 (m, 2H), 1.45 (s, 3H), 0.82 (t, 3H, J = 7.5 Hz); MS (APCI) m/z 346 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 479: Hidrazin hidrohlorid (86 mg, 1.26 mmol) je suspendovan u dioksanu (2 mL) i dodat je trietilamin (0.18 mL, 1.26 mmol), a zatim sirćetna kiselina (0.19 g, 3.15 mmol). Smeša je ultrazvučno obrađivana nekoliko minuta. Dodat je rastvor 276 (0.24 g, 0.63 mmol) u dioksanu (4 mL) i smeša je zagrevana na 70°C u trajanju od 3 časa. Smeša je hlađena, razblažena zasićenim rastvorom NaHCO3(20 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL).
Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 0.215 g (96%) jedinjenja 479 kao bela čvrsta supstanca. APCI MS: m/z 358.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 480: Natrijum hidrid (72 mg, 1.80 mmol) je suspendovan u DMF (2 mL). Dodato je jedinjenje 479 (215 mg, 0.60 mmol) i smeša je mešana 30 min. Dodat je izopropil jodid (0.30 mL, 3.01 mmol) i smeša je mešana preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog NH4Cl (20 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo svetlo žuto ulje. “Flash” hromatografija (EtOAc) je dala 190 mg (79%) jedinjenja 480 kao bela pena. APCI MS: m/z 400.2 [M+H]<+>.
Jedinjenje 481: Jedinjenje 480 (185 mg, 0.46 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL) i dodata je 1M HCl (1 mL). Rastvor je mešan 2 dana, zatim razblažen zasićenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se dobilo 160 mg (97%) jedinjenja 481 kao bela pena. APCI MS: m/z 356.0 [M+H]<+>.
Jedinjenje 482: Jedinjenje 481 (160 mg, 0.45 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL) i etil formatu (1 mL) i hlađen u ledenom kupatilu. Ukapavanjem je dodat NaOMe (0.8 g, 30 tež. % u MeOH) i rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog rastvora KH2PO4(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se dobilo 170 mg (98%) jedinjenja 482 kao bela čvrsta supstanca. APCI MS: m/z 384.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 483: Jedinjenje 482 (170 mg, 0.44 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL), EtOH (2 mL), i vodi (0.5 mL). Dodat je hidroksilamin hidrohlorid (46 mg, 0.66 mmol) i reakcija je zagrevana na 50°C u trajanju od 3 časa, zatim ostavljena da se hladi do sobne temperature i mešana preko noći. Posle koncentrovanja, ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, koncentrovani i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo 170 mg (100%) jedinjenja 483 kao prljavo bela čvrsta supstanca. APCI MS: m/z 381.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje 484: Jedinjenje 483 (170 mg, 0.44 mmol) je apsorbovano u THF (4 mL) i dodat je MeOH (2 mL) i NaOMe (0.8 g, 30 tež. % u MeOH). Rastvor je zagrevan na 50°C u trajanju od 3 časa, zatim hlađen i koncentrovan. Dodat je zasićeni vodeni rastvor KH2PO4(20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani. “Flash” hromatografija (70% EtOAc/DCM) dala je 121 mg (72%) jedinjenja 484 kao bela pena. APCI MS: m/z 381.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63905: Jedinjenje 484 (120 mg, 0.32 mmol) je apsorbovano u DMF (3 mL) i hlađeno u ledenom kupatilu. Dodat je N,N’-dibromodimetilhidantoin (54 mg, 0.19 mmol) i rastvor je mešan 90 min na 0°C. Dodat je piridin (0.5 mL) i rastvor je zagrevan na 60°C u trajanju od 4 časa. Posle hlađenja, rastvor je koncentrovan i sušen pod vakuumom do svetlo braon čvrste supstance. “Flash” hromatografija (3:1 EtOAc/DCM) dala je 82 mg (69%) jedinjenja TX63905 kao svetlo žutu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 4.52-4.63 (m, 1H), 4.17 (s, 3H), 3.08 (dd, 1H, J = 5.2, 17.2 Hz), 2.66-2.77 (m, 1H), 2.20 (dd, 1H, J = 2.0, 11.6 Hz), 1.80-1.99 (m, 2H), 1.58 (d, 6H, J = 6.8 Hz), 1.49 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); APCI MS m/z 379.1 [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63834: Rastvor TX63465 (33 mg, 0.1 mmol) u MeCN (5 mL) je tretiran sa 30% H2O2(0.27 mL), i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (15 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x15 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, i prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 5-25% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63834 kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 85%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.37-7.49 (m, 3H), 7.28-7.34 (m, 2H), 4.77 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.58 (dd, 1H, J = 5.6, 15.6 Hz), 2.36-2.54 (m, 2H), 1.72-1.80 (m, 1H), 1.58-1.70 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.15 (s, 3H); MS: m/z [M+H]<+>362.
Jedinjenje TX63848: Rastvor TX64541 (80 mg, 0.24 mmol) u MeCN (7 mL) je tretiran sa 30% H2O2(0.63 mL), mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (15 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x15 mL). Organski sloj je sušen sa MgSO4, i prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 5-35% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63848 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (8 mg, 10%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.26-7.54 (m, 5H), 4.77 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.45-2.64 (m, 3H), 2.10-2.24 (m, 3H), 1.25-1.35 (m, 3H), 1.30 (s, 3H); MS: m/z [M+H]<+>348.
Jedinjenja 485 i 486: U mešajući rastvor na 0°C jedinjenja 152 (0.37 g, 1.59 mmol) u 20 mL CH2Cl2u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.23 g, 0.80 mmol). Uzorak je mešan u trajanju od 30 min. i dok je još uvek bio hladan, ugašen zasićenim rastvorom NaHCO3(-100 mL). Uzorak je zagrevan do sobne temperature, koncentrovan, zatim ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan. Uzorak je podvrgnut hromatografiji (silika gel, 80% EtOAc/Heksani) da bi se dobilo jedinjenje 485 (0.27 g, 55%) kao bela čvrsta supstanca (MS [APCI] m/z 311/313 (M+1, 91/100%) i 486 (0.080 g, 14%) kao bela čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 359 (100%) [M+H]<+>..
Jedinjenje 487: U mešajući rastvor 486 (0.080 g, 0.22 mmol) i etil formata (1.8 mL, 22.3 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% rastvor u metanolu, 0.42 mL, 2.24 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 487 (0.067 g, 78%) kao žuto-mrka čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 387 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 488: Rastvor neznatno nečistog 487 (0.067 g, 0.17 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.018 g, 0.26 mmol) u 10 mL etanola je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan i podeljen između CHCl3and sat. NaHCO3solution. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 488 (0.067 g, ~100%) kao žuto-mrka čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja.
Jedinjenje 489: U mešajući rastvor neznatno nečistog 488 (0.067 g, pretpostaviti 0.17 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL metanola:THF (1:1) ukapavanjem je dodat (preko šprica) NaOMe (30 tež.% rastvor u metanolu, 0.32 mL, 1.71 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 489 (0.054 g, 81 %) kao žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje TX63776: U mešajući rastvor na 0°C pod N2neznatno nečistog 489 (0.054 g, 0.14 mmol) u 5 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.020 g, 0.070 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.12 mL, 1.48 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 100% EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje TX63776 (0.014 g, 27%) kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.36 (s, 1H), [5.70 (s), 5.65 (s), 1H], [3.63 (s), 3.63 (s), 3H], 2.41 (m, 3H), 2.05 (app.dt, 2.2, 12.8, 1H), 1.93 (m, 1H), 1.65 (m, 1H), [1.53 (s), 1.52 (s), 3H], [1.50 (s), 1.49 (s), 3H], 1.37 (s, 3H), 1.21 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 382 (100%) [M+H]<+>. Jedinjenje 490: Rastvor 386 (0.42 g, 1.16 mmol) u 10 mL etanola tretiran je natrijum etoksidom, 21 tež. % rastvor u etanolu (2.2 mL, 5.9 mmol). Uzorak je ispran sa N2, hermetički zatvoren i zagrevan na 80°C u trajanju od 48 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 490 (0.40 g, ~92%) kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja.
Jedinjenje 491: Rastvor 490 (0.40 g, 1.07 mmol) i 3 N HCl (10 mL, 30 mmol) u 10 mL etanola je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 491 (0.35 g, 99%) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 331 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 492: U mešajući rastvor 491 (0.35 g, 1.06 mmol) i etil formata (10 mL, 124 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) natrijum etoksid, 21 tež.% rastvor u etanolu (2.0 mL, 5.4 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 492 (0.38 g, ~100%) kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 359 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 493: Rastvor 492 (0.38 g, 1.06 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.11 g, 1.58 mmol) u 10 mL etanola je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 2 časa, zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Uzorak je koncentrovan i podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 493 (0.33 g, 88%) kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 378 (100%) i 356 (88%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 494: U mešajući rastvor neznatno nečistog 493 (0.33 g, 0.93 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 20 mL etanola ukapavanjem je dodat (preko šprica) natrijum etoksid, 21 tež.% rastvor u etanolu (1.75 mL, 4.69 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 72 časa, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 494 (0.32 g, 96 %) kao tamno žuta penasta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 356 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63900: U mešajući rastvor na 0°C pod N2jedinjenja 494 (0.32 g, 0.89 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.125 g, 0.44 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.72 mL, 8.90 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan, podvrgnut hromatografiji (silika gel, 20% EtOAc/heksani) zatim kristalizovan iz hladnih heksana da bi se dobilo jedinjenje TX63900 (0.097 g, 31 %) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.85 (s, 1H), 4.42 (q, 2H, J = 6.8 Hz), 2.53 (dd, 1H, J = 6.4, 18.4 Hz), 2.45-2.55 (m, 2H), 1.98-2.10 (m, 2H), 1.60-1.73 (m, 1H), 1.35 (s, 3H), 1.35 (t, 3H, J = 7.2 Hz), 1.33 (s, 9H), 1.26 (d, 3H, J = 6.8 Hz); MS (APCI) m/z 354 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 495: U mešajući rastvor na sobnoj temperaturi pod N2jedinjenja 127 (1.00 g, 4.20 mmol) i dimetil karbonata (7.1 mL, 84.2 mmol) u 10 mL THF u porcijama je dodavan natrijum hidrid, 60% disperzija u mineralnom ulju (0.67 g, 16.75 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, i zatim na 80°C preko noći. Uzorak je hlađen do sobne temperature, koncentrovan, zatim podeljen između Et2O i zasićenog vodenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobio intermedijerni ketoestar (1.69 g, >100 kao tamno žuto ulje. U bočici koja se može hermetički zatvoriti, rastvor intermedijera (pretpostaviti 4.20 mmol) u 10 mL 2-propanola je tretiran čvrstim formamidin acetatom (4.40 g, 42.26 mmol), a zatim piperidinom (2.1 mL, 21.2 mmol). Uzorak je ispran sa N2, hermetički zatvoren i zagrevan (preko blok grejača) na 80°C u trajanju od 72 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan, zatim podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30-50% EtOAc/ heksani) da bi se dobilo jedinjenje 495 (0.189 g, 16 %) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 291 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 496: Rastvor 495 (0.189 g, 0.652 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (0.125 mL, 0.718 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) fosfor oksihlorid (0.61 mL, 6.54 mmol). Posle dodavanja, uzorak je zagrevan na 90°C pod N2u trajanju od 2 časa, hlađen, koncentrovan, zatim pažljivo podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 496 (0.172 g, 86%) kao žuto-mrka čvrsta supstanca. MS (APCI) m/z 309/311 (100/42%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 497: Rastvor 496 (0.172 g, 0.558 mmol) u 10 mL metanola je tretiran natrijum metoksidom, 30 tež.% rastvor u metanolu (0.52 mL, 2.77 mmol). Uzorak je ispran sa N2, hermetički zatvoren i zagrevan na 60°C u trajanju od 16 časova. Uzorak je hlađen, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 497 (0.151 g, 88%) kao žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 305 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 498: Rastvor 497 (0.151 g, 0.496 mmol) i 3 N HCl (4 mL, 12 mmol) u 20 mL metanola je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 16 časova. Uzorak je koncentrovan, hlađen, bazifikovan sa 10% vodenim rastvorom NH4OH do pH ~ 9-10 i ekstrahovan sa EtOAc. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 498 (0.128 g, 99%) kao tamno žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 261 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 499: U mešajući rastvor neznatno nečistog 498 (0.128 g, 0.492 mmol) i etil formata (4.0 mL, 50 mmol) u 10 mL benzena ukapavanjem je dodat (preko šprica) natrijum metoksid, 30 tež.% rastvor u metanolu (0.46 mL, 52.45 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 48 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 499 (0.115 g, 82%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca, koja je korišćena bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 289 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 500: Rastvor neznatno nečistog 499 (0.115 g, pretpostaviti 0.401 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.042 g, 0.604 mmol) u 10 mL etanola je zagrevan na 50°C pod N2u trajanju od 16 časova, hlađen, koncentrovan i podeljen između CHCl3i zasićenog rastvora NaHCO3. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 500 (0.109 g, 95%) kao žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanja. MS (APCI) m/z 286 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje 501: U mešajući rastvor neznatno nečistog 500 (0.109 g, 0.381 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u 10 mL metanola ukapavanjem je dodat (preko šprica) natrijum metoksid, 30 tež.% rastvor u metanolu (0.36 mL, 1.92 mmol). Uzorak je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, koncentrovan, zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 501 (0.096 g, 88%) kao žuto ulje, koje je korišćeno bez prečišćavanje. MS (APCI) m/z 286 (100%) [M+H]<+>.
Jedinjenje TX63874: U mešajući rastvor na 0°C pod N2neznatno nečistog 501 (0.096 g, 0.338 mmol) u 10 mL DMF u jednoj porciji je dodat 1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoin (0.048 g, 0.168 mmol). Posle mešanja na 0°C u trajanju od 1 časa, dodat je piridin (0.27 mL, 3.34 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i uzorak je zagrevan na 50°C u trajanju od 2 časa. Uzorak je hlađen, koncentrovan (da bi se uklonila većina DMF i piridina), zatim podeljen između EtOAc i zasićenog rastvora KH2PO4. Organski ekstrakt je ispran zasićenim rastvorom NaCl, sušen (MgSO4), filtriran, koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika gel, 30% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje TX63874 (0.028 g, 30%) kao žuto-mrka čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 2.81 (dd, 1H, J = 6.4, 18.4 Hz), 2.49-2.64 (m, 2H), 2.00-2.15 (m, 2H), 1.64-1.77 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.29 (d, 3H, J = 8.8 Hz); MS (APCI) m/z 284 (100%) [M+H]<+>.
REFERENCE
[0214]
Abraham and Kappas, Free Radical Biol. Med., 39:1-25, 2005.
Ahmad et al., Cancer Res., 68:2920-2926, 2008.
Ahmad et al., J. Biol. Chem., 281:35764-9, 2006.
Araujo et al., J. Immunol., 171(3):1572-1580, 2003.
Bach, Hum. Immunol., 67(6):430-432, 2006.
Chauhan and Chauhan, Pathophysiology, 13(3):171-1812006.
Dickerson et al., Prog Neuropsychopharmacol Biol. Psychiatry, March 6, 2007.
Dinkova-Kostova et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 102(12):4584-4589, 2005.
Dudhgaonkar et al., Eur. J. Pain, 10(7):573-9, 2006.
Forstermann, Biol. Chem., 387:1521, 2006.
Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use, Stahl and Wermuth Eds.), Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002.
Hanson et al., BMC Medical Genetics, 6(7), 2005.
Honda et al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 12:1027-1030, 2002.
Honda et al., J. Med. Chem., 43:4233-4246, 2000a.
Honda, et al., J. Med. Chem., 43:1866-1877, 2000b.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 7:1623-1628, 1997.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 9(24):3429-3434, 1999.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 8(19):2711-2714, 1998.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 16(24):6306-6309, 2006.
Ishikawa et al., Circulation, 104(15):1831-1836, 2001.
Kawakami et al., Brain Dev., 28(4):243-246, 2006.
Kendall-Tackett, Trauma Violence Abuse, 8(2):117-126, 2007.
Kruger et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 319(3):1144-1152, 2006.
Lee et al., Glia., 55(7):712-22, 2007.
Lencz et al., Mol. Psychiatry, 12(6):572-80, 2007.
Liby et al., Cancer Res., 65(11):4789-4798, 2005.
Liby et al., Nat. Rev. Cancer, 7(5):357-356, 2007a.
Liby et al., Mol. Cancel Ther., 6(7):2113-9, 2007b.
Liby et al., 2007b
Liu et al., FASEB J., 20(2):207-216, 2006.
Lu et al., J. Clin. Invest., 121(10):4015-29, 2011.
March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 2007.
McIver et al., Pain, 120(1-2):161-9, 2005.
Morris et al., J. Mol. Med., 80(2):96-104, 2002.
Morse and Choi, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 172(6):660-670, 2005.
Morse and Choi, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 27(1):8-16, 2002.
Pall, Med. Hypoth., 69:821-825, 2007.
Place et al., Clin. Cancer Res., 9(7):2798-806, 2003.
Rajakariar et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 104(52):20979-84, 2007.
Ross et al., Am. J. Clin. Pathol., 120(Suppl):S53-71, 2003.
Ross et al., Expert Rev. Mol. Diagn., 3(5):573-585, 2003.
Ruster et al., Scand. J. Rheumatol., 34(6):460-3, 2005.
Sacerdoti et al., Curr Neurovasc Res.2(2):103-111, 2005.
Salvemini et al., J. Clin. Invest., 93(5):1940-1947, 1994.
Sarchielli et al., Cephalalgia, 26(9):1071-1079 , 2006.
Satoh et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103(3):768-773, 2006.
Schulz et al., Antioxid. Redox. Sig., 10:115, 2008.
Strejan et al., J. Neuroimmunol., 7:27, 1984.
Suh et al., Cancer Res., 58:717-723, 1998.
Suh et al., Cancer Res., 59(2):336-341, 1999.
Szabo et al., Nature Rev. Drug Disc., 6:662-680, 2007.
Takahashi et al., Cancer Res., 57:1233-1237, 1997.
Tamir and Tannebaum, Biochim. Biophys. Acta, 1288:F31-F36, 1996.
Zhou et al., Am. J. Pathol., 166(1):27-37, 2005.
LISTING SEKVENCI
[0215]
<110> ANDERSON, ERIC BOSTON, GARY L. CAPRATHE, BRADLEY JIANG, XIN LEE, CHITASE ROARK, WILLIAM H. VISNICK, MELEAN
<120> PIRAZOLIL I PIRIMIDINIL TRICIKLIČNI ENONI KAO ANTIOKSIDANTNI MODULATORI INFLAMACIJE
<130> REAT.P0066WO
<140> NEPOZNAT
<141> 2011-12-19
<150> 61/424,601
<151> 2010-12-17
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 26
<212> DNK
<213> Homo sapiens
<400> 1
cagtcacagt gactcagcag aatctg 26

Claims (28)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule:
    u kome: atomi obeleženi sa 1 i 2 su vezani bilo preko dvogube veze ili epoksidizovane dvogube veze; n je 1 ili 2; m je 0 ili 1; X je -CN, -CF3, ili -C(O)R<a>, gde R<a>je -OH, alkoksi(C≤6), alkilamino(C≤6), dialkilamino(C≤6), ili -NHS(O)2-alkil(C1-4); R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroaril-amino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; R<3>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili R<3>je uzet zajedno sa R<4>kao što je dat u daljem tekstu; uz uslov da je R<3>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; R<4>je vodonik, hidroksi, amino, halo, cijano, ili okso; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterociklo-alkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili R<4>je uzet zajedno sa R<3>ili R<5>kao što je dato u daljem tekstu; R<5>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili R<5>je uzet zajedno sa R<4>kao što je dat u daljem tekstu; uz uslov da je R<5>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; i R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, cijano, ili okso; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterociklo-alkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; uz uslov kada su R<3>i R<4>uzeti zajedno, jedinjenje je dalje definisano formulom Ia:
    gde R<7>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralk-oksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkil-amino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zemenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili uz uslov kada su R<4>i R<5>uzeti zajedno, jedinjenje je dalje definisano formulom Ib:
    gde R<8>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralk-oksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkil-amino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje je dalje definisano formulom:
    gde: n je 1 ili 2; X je -CN, -CF3, ili -C(O)R<a>, gde R<a>je -OH, alkoksi(C≤6), alkilamino(C≤6), dialkilamino(C≤6), ili -NHS(O)2-alkil(C1-4); R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroaril-amino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; R<3>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; uz uslov da je R<3>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; R<5>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; uz uslov da je R<5>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; i R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterociklo-alkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), hetero-ariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, dodatno definisano formulom:
    gde: R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroaril-amino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; R<3>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; uz uslov da je R<3>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; R<5>je odsutan, vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; uz uslov da je R<5>odsutan kada i samo kada atom za koji je vezan formira deo dvogube veze; i R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterociklo-alkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), hetero-ariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, dodatno definisano formulom:
    gde: R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12); acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroaril-amino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; R<3>je vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; i R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterociklo-alkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), hetero-ariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3, dodatno definisano formulom:
    gde: R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroaril-amino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili R<1>i R<2>su uzeti zajedno i to su alkandiil(C≤12), alkandiil(C≤12), alkoksidiil(C≤12), alkilaminodiil(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; R<5>je vodonik; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; i R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(c≤12), heteroarilamino(c≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, =F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
  6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, dodatno definisano kao:
    gde: R<1>i R<2>su svaki nezavisno vodonik, hidroksi, halo, ili amino; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; R<4>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; R<6>je vodonik, hidroksi, amino, halo, ili cijano; ili alkil(C≤12), alkenil(C≤12), alkinil(C≤12), aril(C≤12), aralkil(C≤12), heteroaril(C≤12), heterocikloalkil(C≤12), acil(C≤12), alkoksi(C≤12), ariloksi(C≤12), aralkoksi(C≤12), heteroariloksi(C≤12), aciloksi(C≤12), alkilamino(C≤12), dialkilamino(C≤12), arilamino(C≤12), aralkilamino(C≤12), heteroarilamino(C≤12), amido(C≤12), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili tautomer.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što su atomi obeleženi sa 1 i 2 vezani preko dvogube veze.
  8. 8. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1, 2 i 7, naznačeno time što X je -CN.
  9. 9. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-8, naznačeno time što R<1>ili R<2>je alkil(C≤8).
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9, naznačeno time što svaki R<1>i R<2>su metil.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9, naznačeno time što R<1>je metil i R<2>je vodonik.
  12. 12. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-3 i 7-11, naznačeno time što R<3>je odsutan.
  13. 13. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 i 6-12, naznačeno time što R<4>je vodonik.
  14. 14. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 i 7-12, naznačeno time što R<4>je okso.
  15. 15. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1 i 6-12, naznačeno time što R<4>je alkil(C≤8), aril(C≤8), acil(C≤8), alkoksi(C≤8) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
  16. 16. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-3 i 7-15, naznačeno time što R<5>je odsutan.
  17. 17. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-3, 5, i 7-15, naznačeno time što R<5>je vodonik.
  18. 18. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-3, 5, i 7-15, naznačeno time što R<5>je alkil(C≤8), aril(C≤8), acil(C≤8), ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
  19. 19. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-18, naznačeno time što R<6>je vodonik.
  20. 20. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-19, naznačeno time što R<6>je halo.
  21. 21. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-19, naznačeno time što R<6>je alkil(C≤6) ili supstituisani alkil(C≤6) gde su jedan ili više vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
  22. 22. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-21, naznačeno time što R<6>je aril(C≤8), heteroaril(C≤8) ili supstituisana verzija bilo koje od ovih grupa gde su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni sa -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, ili -S(O)2NH2.
  23. 23. Jedinjenje prema jednom od patentnih zahteva 1-18, naznačeno time što R<6>je alkoksi(C≤8).
  24. 24. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, dodatno definisano kao:
    ili
  25. 25. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, dodatno definisano kao:
    ili
  26. 26. Jedinjenje formule:
    ili
  27. 27. Jedinjenje formule:
  28. 28. Farmaceutska kompozicija koja sadrži: a) jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-27; b) optički izomer jedinjenja, gde optički izomer je enantiomer jedinjenja; i c) ekscipijens. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20180025A 2010-12-17 2011-12-19 Pirazolil i pirimidinil triciklični enoni kao antioksidantni modulatori inflamacije RS56795B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201061424601P 2010-12-17 2010-12-17
PCT/US2011/065897 WO2012083306A2 (en) 2010-12-17 2011-12-19 Pyrazolyl and pyrimidinyl tricyclic enones as antioxidant inflammation modulators
EP11807826.0A EP2651902B1 (en) 2010-12-17 2011-12-19 Pyrazolyl and pyrimidinyl tricyclic enones as antioxidant inflammation modulators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56795B1 true RS56795B1 (sr) 2018-04-30

Family

ID=45470714

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180025A RS56795B1 (sr) 2010-12-17 2011-12-19 Pirazolil i pirimidinil triciklični enoni kao antioksidantni modulatori inflamacije

Country Status (32)

Country Link
US (6) US8513436B2 (sr)
EP (1) EP2651902B1 (sr)
JP (1) JP5857068B2 (sr)
KR (1) KR102000301B1 (sr)
CN (1) CN103596929B (sr)
AR (1) AR084353A1 (sr)
AU (1) AU2011343466B2 (sr)
BR (1) BR112013015241B1 (sr)
CA (1) CA2822071C (sr)
CL (1) CL2013001754A1 (sr)
CO (1) CO6910185A2 (sr)
CY (1) CY1120032T1 (sr)
DK (1) DK2651902T3 (sr)
EA (1) EA025568B1 (sr)
ES (1) ES2653717T3 (sr)
HR (1) HRP20171859T1 (sr)
HU (1) HUE038046T2 (sr)
IL (1) IL226923A (sr)
LT (1) LT2651902T (sr)
ME (1) ME02973B (sr)
MX (1) MX2013006902A (sr)
NO (1) NO2651902T3 (sr)
NZ (1) NZ612788A (sr)
PL (1) PL2651902T3 (sr)
PT (1) PT2651902T (sr)
RS (1) RS56795B1 (sr)
SG (1) SG191181A1 (sr)
SI (1) SI2651902T1 (sr)
SM (1) SMT201800069T1 (sr)
TW (1) TWI527788B (sr)
WO (1) WO2012083306A2 (sr)
ZA (1) ZA201305060B (sr)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI0907423A2 (pt) 2008-01-11 2020-10-27 Reata Pharmaceuticals, Inc. composto triterpenoide sintético para uso em um método de melhoria da função renal em um indivíduo, e uso do referido composto
WO2009146218A2 (en) 2008-04-18 2009-12-03 Reata Pharmaceuticals, Inc. Compounds including an anti-inflammatory pharmacore and methods of use
JP5529851B2 (ja) 2008-04-18 2014-06-25 リアタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗酸化炎症モジュレーター：ｃ−１７においてアミノ改変およびその他の改変を加えたオレアノール酸誘導体
CN103596929B (zh) 2010-12-17 2016-10-19 里亚塔医药公司 作为抗氧化发炎调节剂的吡唑及嘧啶三环烯酮
BR112013015000A2 (pt) 2010-12-17 2016-08-09 Novartis Ag formas cristalinas de 5-cloron2-(2-isopropóxi-5-metil-4-piperidin-4-il-fenil)-n4-[2-(propano-2-sulfonil)-fenil]-pirimidina-2,4-diamina
TWI623548B (zh) 2012-04-27 2018-05-11 瑞塔醫藥有限責任公司 齊墩果酸（ｂａｒｄｏｘｏｌｏｎｅ ｍｅｔｈｙｌ）之２，２-二氟基丙醯胺衍生物、多晶型及其使用方法
WO2013188818A1 (en) 2012-06-15 2013-12-19 Reata Pharmaceuticals, Inc. A-ring epoxidized triterpenoid-based anti-inflammation modulators and methods of use thereof
JP6243428B2 (ja) 2012-09-10 2017-12-06 リアタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド オレアノール酸のｃ１７−アルカンジイルおよびアルケンジイル誘導体ならびにその使用方法
WO2014040073A1 (en) 2012-09-10 2014-03-13 Reata Pharmaceuticals, Inc. C13-hydroxy derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof
US9512094B2 (en) 2012-09-10 2016-12-06 Reata Pharmaceuticals, Inc. C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof
AR096046A1 (es) 2013-04-24 2015-12-02 Abbvie Inc Derivados de 2,2-difluoropropanamida de metil bardoxolona, formas polimórficas y métodos de uso
WO2015112792A1 (en) * 2014-01-24 2015-07-30 Abbvie Inc. Aryl and arylalkyl substituted pyrazolyl and pyrimidinyl tricyclic enones as antioxidant inflammation modulators
EP3256451B1 (en) * 2015-02-12 2021-10-20 Reata Pharmaceuticals, Inc. Imidazolyl tricyclic enones as antioxidant inflammation modulators
CN110198718B (zh) 2016-11-08 2023-01-10 里亚塔医药控股有限责任公司 使用甲基巴多索隆或其类似物治疗阿尔波特综合征的方法
TWI831738B (zh) * 2016-12-16 2024-02-11 美商瑞塔醫藥有限責任公司 用於抑制ＲＯＲγ及其他用途的嘧啶三環烯酮衍生物
US11286226B2 (en) 2017-09-21 2022-03-29 Northwestern University Polycyclic carbogenic molecules and uses thereof as anti-cancer agents
US11465963B2 (en) * 2017-11-21 2022-10-11 Biogen Ma Inc. Tetrahydronaphthalene derivatives useful as Nrf2 activators
US11993574B2 (en) * 2018-06-15 2024-05-28 Reata Pharmaceuticals, Inc Pyrazole and imidazole compounds for inhibition of IL-17 and RORgamma
US12060340B2 (en) 2018-06-20 2024-08-13 Reata Pharmaceuticals, Inc Cysteine-dependent inverse agonists of nuclear receptors ROR-gamma/ROR-gamma-t and methods of treating diseases or disorders therewith
US12509438B2 (en) 2020-01-13 2025-12-30 Aptabio Therapeutics Inc. Pyrazole derivative
WO2023092034A1 (en) * 2021-11-17 2023-05-25 Northwestern University Wt-idh1 inhibition using a covalent and brain-penetrant small molecular inhibitor for ferroptosis induction in high-grade glioma
WO2024255851A1 (en) * 2023-06-16 2024-12-19 Nanjing Curegene Technology Co., Ltd. Tumor-specific expression cassette and uses thereof

Family Cites Families (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2875201A (en) 1957-08-28 1959-02-24 Searle & Co Dehydrotigogenone intermediates
US3071577A (en) * 1959-08-13 1963-01-01 Syntex Corp Pyrimidinyl androstanes
US3994935A (en) * 1975-11-24 1976-11-30 E. R. Squibb & Sons, Inc. Steroidal 16β-alkyl[16α,17-b]naphthalenes
NZ191586A (en) 1978-10-10 1981-10-19 Sterling Drug Inc Cyanoketones derived from glycyrrhetinic acid and pharmaceutical compositions
US4395423A (en) 1978-10-10 1983-07-26 Sterling Drug Inc. Polycyclic cyanoketones
CN1013672B (zh) * 1983-10-03 1991-08-28 美国辉瑞有限公司 2-氨基-5-羟基-4-甲基嘧啶衍生物的制备方法
US5064823A (en) 1988-08-24 1991-11-12 Research Triangle Institute Pentacyclic triterpenoid compounds as topoisomerase inhibitors or cell differentiation inducers
DE4014171A1 (de) 1990-05-03 1991-11-07 Basf Ag Cyanochinolinverbindungen
WO1995029912A1 (en) 1994-04-29 1995-11-09 Takeda Chemical Industries, Ltd. Ergoline derivatives as analgesics
JPH08208479A (ja) * 1994-04-29 1996-08-13 Takeda Chem Ind Ltd クラビンアルカロイド誘導体を含有する鎮痛剤
KR100418202B1 (ko) * 1994-09-09 2004-07-05 쇼죠 고야마 분자발현기능의억제방법
US6326507B1 (en) 1998-06-19 2001-12-04 Trustees Of Dartmouth College Therapeutic compounds and methods of use
US6369101B1 (en) 1999-02-26 2002-04-09 Regents Of The University Of Minnesota Therapeutic method to treat herpes virus infection
DE60043400D1 (de) 1999-05-14 2010-01-07 Nereus Pharmaceuticals Inc Interleukin-1 und Tumornekrosefaktor-alpha Modulatoren,Synthese dieser Modulatoren und Methoden zur Anwendung dieser Modulatoren
US6649654B1 (en) 1999-11-23 2003-11-18 The Regents Of The University Of California Methods for identifying and using IKK inhibitors
US6890946B2 (en) 1999-12-23 2005-05-10 Indiana University Research And Technology Corporation Use of parthenolide to inhibit cancer
ATE524170T1 (de) 2000-02-14 2011-09-15 Merck Sharp & Dohme Östrogenrezeptor modulatoren
JP2001240573A (ja) 2000-03-01 2001-09-04 Meiji Seika Kaisha Ltd トリテルペン誘導体及び肝疾患治療剤
WO2002003996A1 (en) 2000-07-12 2002-01-17 RAJKUMAR, Sujatha Use of dammarane-type tritepenoid saporins
US6689767B2 (en) 2000-09-29 2004-02-10 Regents Of The University Of Minnesota Triterpenes having antibacterial activity
US6951847B2 (en) 2000-09-29 2005-10-04 Regents Of The University Of Minnesota Methods of treating fungal infections using lupeol
AU2001294953A1 (en) 2000-09-29 2002-04-08 Regents Of The University Of Minnesota Triterpenes having fungicidal activity against yeast
US6878751B1 (en) 2000-10-19 2005-04-12 Imperial College Of Science Technology And Medicine Administration of resveratrol to treat inflammatory respiratory disorders
WO2002047611A2 (en) 2000-11-28 2002-06-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Cddo-compounds and combination therapies thereof
US7435755B2 (en) 2000-11-28 2008-10-14 The Trustees Of Dartmouth College CDDO-compounds and combination therapies thereof
ATE375345T1 (de) * 2000-12-28 2007-10-15 Ono Pharmaceutical Co Cyclopenta(d)pyrazolo(1,5-a)pyrimidin-verbindun als crf-rezeptor antagonist
AU2002308701A1 (en) 2001-05-14 2002-11-25 University Of Maryland, Baltimore Novel alanine transaminase enzyme and methods of use
WO2003015761A1 (en) 2001-08-13 2003-02-27 Merck & Co., Inc. Selective estrogen receptor modulators
EP1444207A2 (en) 2001-09-19 2004-08-11 Pharmacia Corporation Substituted pyrazolyl-compounds for the treatment of inflammation
US6991814B2 (en) 2001-12-13 2006-01-31 Council Of Scientific And Industrial Research Herbal medicaments for the treatment of neurocerebrovascular disorders
US7176237B2 (en) 2002-01-15 2007-02-13 The Trustees Of Dartmouth College Tricyclic-bis-enone derivatives and methods of use thereof
CA2473799A1 (en) 2002-01-18 2003-07-31 Regents Of The University Of Minnesota Triterpene quaternary salts as biologically active surfactants
WO2003081210A2 (en) 2002-03-21 2003-10-02 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Identification of kinase inhibitors
JP2006515859A (ja) 2002-05-13 2006-06-08 トラスティーズ オブ ダートマス カレッジ 阻害剤およびその使用法
WO2004089357A2 (en) 2003-04-02 2004-10-21 Regents Of The University Of Minnesota Anti-fungal formulation of triterpene and essential oil
EP1660109A4 (en) 2003-09-02 2009-04-08 Unigen Pharmaceuticals Inc FORMULATION OF A MIXTURE OF FREE B-RING FLAVONOIDS AND FLAVANES FOR USE IN THE PREVENTION AND TREATMENT OF COGNITIVE WEAKNESSING AND AGING MEMORY DISORDERS
US20050208151A1 (en) 2003-10-30 2005-09-22 Entelos, Inc. Treatment of rheumatoid arthritis with FLIP antagonists
US8288439B2 (en) 2003-11-04 2012-10-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods and compositions for the inhibition of HIV-1 replication
US20060258752A1 (en) 2004-02-12 2006-11-16 Vander Jagt David L Method and compounds for cancer treatment utilizing NFkB as a direct or ultimate target for small molecule inhibitors
JP2005314381A (ja) 2004-03-30 2005-11-10 Anges Mg Inc 増殖性腎疾患の予防・治療・改善剤
JP5087400B2 (ja) 2004-09-07 2012-12-05 パシフィック アロー リミテッド アンゲロイル基を有する抗腫瘍化合物
WO2006089406A1 (en) * 2005-02-22 2006-08-31 Gemin X Biotechnologies Inc. Diterpenoid compounds, compositions thereof and their use as anti-cancer or anti-fungal agents
EP1863800A4 (en) 2005-03-17 2011-05-04 Harvard College SYNTHESIS OF AVRAINVILLAMID, STEPHACIDINE B AND ANALOGUE THEREOF
AU2006265113A1 (en) 2005-07-01 2007-01-11 The Johns Hopkins University Compositions and methods for the treatment or prevention of disorders relating to oxidative stress
DE102005041613A1 (de) 2005-09-01 2007-03-08 Ergonex Pharma Gmbh Pharmazeutische Zusammensetzungen zur Behandlung von Karzinoid-Syndrom
US20070232577A1 (en) 2006-03-23 2007-10-04 Advanced Life Sciences, Inc. Synthetic pentacyclic triterpenoids and derivatives of betulinic acid and betulin
US20070249561A1 (en) 2006-04-25 2007-10-25 Taylor Bradley K Pharmacological method for treatment of neuropathic pain
WO2008000068A1 (en) 2006-06-27 2008-01-03 Wellington Laboratories Inc. Method for preparing 2-iodo triterpenoid compounds
WO2008016095A1 (en) 2006-08-02 2008-02-07 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. PREVENTIVE OR REMEDY FOR KERATOCONJUNCTIVAL DISORDERS CONTAINING Nrf2 ACTIVATOR AS THE ACTIVE INGREDIENT
JP2008110962A (ja) 2006-08-02 2008-05-15 Santen Pharmaceut Co Ltd Ｎｒｆ２活性化物質を有効成分として含む角結膜障害の予防または治療剤
US8735411B2 (en) 2006-10-02 2014-05-27 Abbvie Inc. Macrocyclic benzofused pyrimidine derivatives
WO2008063318A2 (en) 2006-10-12 2008-05-29 The Texas A & M University System And Safe Et Al Betulinic acid, derivatives and analogs thereof and uses therefor
EP2094651A1 (en) 2006-11-17 2009-09-02 Trustees Of Dartmouth College Synthesis and biological activities of new tricyclic-bis-enones (tbes)
US8299046B2 (en) 2006-11-17 2012-10-30 Trustees Of Dartmouth College Synthetic triterpenoids and tricyclic-bis-enones for use in stimulating bone and cartilage growth
EP2680010A1 (en) 2007-02-08 2014-01-01 Biogen Idec MA Inc. Nrf2 screening assays and related methods and compositions
WO2008111497A1 (ja) 2007-03-08 2008-09-18 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. トリテルペノイドを有効成分として含有する酸化ストレスが関連する眼疾患の予防又は治療剤
WO2008136838A1 (en) 2007-05-04 2008-11-13 Trustees Of Dartmouth College Novel amide derivatives of cddo and methods of use thereof
WO2009023845A2 (en) 2007-08-15 2009-02-19 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Combination therapy with synthetic triterpenoids and gemcitabine
US8088824B2 (en) 2007-08-15 2012-01-03 Reata Pharmaceuticals Inc. Forms of CDDO methyl ester
WO2009058849A1 (en) 2007-10-29 2009-05-07 University Of Rochester Use of electrophilic compounds for inducing platelet production or maintaining platelet function
BRPI0907423A2 (pt) 2008-01-11 2020-10-27 Reata Pharmaceuticals, Inc. composto triterpenoide sintético para uso em um método de melhoria da função renal em um indivíduo, e uso do referido composto
KR101713140B1 (ko) 2008-04-18 2017-03-08 리타 파마슈티컬스 잉크. Ｃ-환에서 포화된 산화방지성 염증 조절제 올레아놀산 유도체
MX2010011439A (es) 2008-04-18 2011-01-25 Reata Pharmaceuticals Inc Moduladores de inflamacion antioxidantes: derivados del acido oleanolico homologacion c-17.
US8071632B2 (en) 2008-04-18 2011-12-06 Reata Pharmaceuticals, Inc. Antioxidant inflammation modulators: novel derivatives of oleanolic acid
JP5529851B2 (ja) 2008-04-18 2014-06-25 リアタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗酸化炎症モジュレーター：ｃ−１７においてアミノ改変およびその他の改変を加えたオレアノール酸誘導体
WO2009146218A2 (en) * 2008-04-18 2009-12-03 Reata Pharmaceuticals, Inc. Compounds including an anti-inflammatory pharmacore and methods of use
US8278311B2 (en) 2008-04-28 2012-10-02 Abbott Laboratories Substituted pyrimidine derivatives
EP2309860B1 (en) 2008-07-22 2014-01-08 Trustees of Dartmouth College Monocyclic cyanoenones and methods of use thereof
WO2010053817A1 (en) 2008-11-04 2010-05-14 Trustees Of Dartmouth College Betulinic acid derivatives and methods of use thereof
SI2395979T1 (sl) 2009-02-13 2017-12-29 Reata Pharmaceuticals, Inc. Peroralni farmacevtski sestavki, ki vsebujejo amorfni CDDO-Me, z zapoznelim sproščanjem
TWI481607B (zh) 2009-12-17 2015-04-21 Lundbeck & Co As H 作為ｐｄｅ１０ａ酵素抑制劑的２－芳基咪唑衍生物
DK2558105T3 (da) 2010-04-12 2020-01-27 Reata Pharmaceuticals Inc Bardoxolonmethyl til behandling af fedme
CN102079772A (zh) 2010-12-09 2011-06-01 中国药科大学 一类五环三萜-13,28-内酯化合物、其制备方法和用途
WO2012082580A2 (en) 2010-12-17 2012-06-21 E. I. Du Pont De Nemours And Company Fungicidal azocyclic amides
CN103596929B (zh) 2010-12-17 2016-10-19 里亚塔医药公司 作为抗氧化发炎调节剂的吡唑及嘧啶三环烯酮
US8846647B2 (en) 2011-01-31 2014-09-30 Bristol-Myers Squibb Company C-17 and C-3 modified triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
MX348862B (es) 2011-03-11 2017-07-03 Reata Pharmaceuticals Inc Derivados c4-monometil triterpenoides y sus metodos de uso.
TWI623548B (zh) 2012-04-27 2018-05-11 瑞塔醫藥有限責任公司 齊墩果酸（ｂａｒｄｏｘｏｌｏｎｅ ｍｅｔｈｙｌ）之２，２-二氟基丙醯胺衍生物、多晶型及其使用方法
WO2013188818A1 (en) 2012-06-15 2013-12-19 Reata Pharmaceuticals, Inc. A-ring epoxidized triterpenoid-based anti-inflammation modulators and methods of use thereof
SMT201700501T1 (it) 2012-09-10 2017-11-15 Reata Pharmaceuticals Inc Derivati c17-eteroarilici dell'acido oleanolico e metodi d'uso degli stessi
US9512094B2 (en) 2012-09-10 2016-12-06 Reata Pharmaceuticals, Inc. C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof
WO2014040073A1 (en) 2012-09-10 2014-03-13 Reata Pharmaceuticals, Inc. C13-hydroxy derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof
JP6243428B2 (ja) 2012-09-10 2017-12-06 リアタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド オレアノール酸のｃ１７−アルカンジイルおよびアルケンジイル誘導体ならびにその使用方法
EP4736949A2 (en) 2013-08-23 2026-05-06 Reata Pharmaceuticals Holdings, LLC Methods of treating and preventing endothelial dysfunction using bardoxolone methyl or analogs thereof

Also Published As

Publication number Publication date
AU2011343466B2 (en) 2017-01-05
WO2012083306A3 (en) 2012-10-11
KR102000301B1 (ko) 2019-07-15
SG191181A1 (en) 2013-07-31
US20160130220A1 (en) 2016-05-12
IL226923A (en) 2016-06-30
BR112013015241B1 (pt) 2022-03-29
JP2014501250A (ja) 2014-01-20
EP2651902A2 (en) 2013-10-23
SI2651902T1 (en) 2018-02-28
US20180265455A1 (en) 2018-09-20
BR112013015241A2 (pt) 2021-04-20
US20140051739A1 (en) 2014-02-20
US9884809B2 (en) 2018-02-06
AR084353A1 (es) 2013-05-08
SMT201800069T1 (it) 2018-03-08
US20220281807A1 (en) 2022-09-08
CY1120032T1 (el) 2018-12-12
EP2651902B1 (en) 2017-11-08
CN103596929A (zh) 2014-02-19
LT2651902T (lt) 2018-01-10
WO2012083306A2 (en) 2012-06-21
TWI527788B (zh) 2016-04-01
EA201390894A1 (ru) 2013-12-30
CA2822071A1 (en) 2012-06-21
US9174941B2 (en) 2015-11-03
US11192852B2 (en) 2021-12-07
CL2013001754A1 (es) 2013-11-29
CO6910185A2 (es) 2014-03-31
HUE038046T2 (hu) 2018-09-28
ZA201305060B (en) 2016-07-27
ES2653717T3 (es) 2018-02-08
PL2651902T3 (pl) 2018-04-30
EA025568B1 (ru) 2017-01-30
CA2822071C (en) 2019-07-16
HRP20171859T1 (hr) 2018-01-26
US20120196880A1 (en) 2012-08-02
MX2013006902A (es) 2013-10-17
NZ612788A (en) 2015-10-30
ME02973B (me) 2018-07-20
DK2651902T3 (en) 2018-01-08
CN103596929B (zh) 2016-10-19
NO2651902T3 (sr) 2018-04-07
US11814338B2 (en) 2023-11-14
JP5857068B2 (ja) 2016-02-10
HK1189595A1 (zh) 2014-06-13
KR20130130784A (ko) 2013-12-02
US8513436B2 (en) 2013-08-20
TW201249785A (en) 2012-12-16
PT2651902T (pt) 2018-02-01
US20200207706A1 (en) 2020-07-02
AU2011343466A1 (en) 2013-07-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11814338B2 (en) Pyrazolyl and pyrimidinyl tricyclic enones as antioxidant inflammation modulators
EP2683731B1 (en) C4-monomethyl triterpenoid derivatives and methods of use thereof
EP2892911B1 (en) C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof
ES2731758T3 (es) Derivados de alcanodiil y alquenodiil de c17 del ácido oleanólico y métodos de uso de los mismos
WO2014040073A1 (en) C13-hydroxy derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof
CA2974726A1 (en) Imidazolyl tricyclic enones as antioxidant inflammation modulators