RS58276B1 - Derivati tetrahidronaftalena koji inhibiraju mcl-1 protein - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja koja inhibiraju protein 1 mijeoidne ćelijske leukemije (Mcl-1, takođe skraćeno kao MCL-1 ili MCL1); jedinjenja za upotrebu u postupcima tretiranja bolesti ili stanja, kao što je kancer, i farmaceutske kombinacije koje sadrže ova jedinjenja.

POZADINA OVOG PRONALASKA

[0002] Jedna zajednička karakteristika ljudskog kancera je prekomerna ekspresija Mcl-1. Prekomerna ekspresija Mcl-1 sprečava da ćelije kancera prođu kroz programiranu ćelijsku smrt (apoptozu), čime se omogućava preživljavanje tih ćelija uprkos široko rasprostranjenim genetskim oštećenjima.

[0003] Mcl-1 je član Bcl-2 familije proteina. Bcl-2 familija uključuje pro-apoptotske članove (kao što je BAX i BAK) koji, po aktivaciji, formiraju homo-oligomer spoljnoj mitohondrijalnoj membrani koji vodi ka formiranju i otpuštanje mitohondrijalnih sadržaja, faza u izazivanju apoptoze. Antiapoptotski članovi Bcl-2 familije (kao što je Bcl-2, Bcl-XL, i Mcl-1) blokiraju aktivnost BAX i BAK. Drugi proteini (kao što je BID, BIM, BIK, i BAD) ispoljavaju dodatne regulatorne funkcije.

[0004] Ispitivanje je pokazalo da Mcl-1 inhibitori mogu biti korisni za tretiranje kancera. MCl-1 je prekomerno izražen kod brojnih kancera. Videti Beroukhim et al. (2010) Nature 463, 899-90. Ćelije kancera koje sadrže amplifikacije koje okružuju Mcl-1 i Bcl-2-1-1 anti-apoptotske gene zavise od ekspresije ovih gena za preživljavanje. Beroukhim et al. Mcl-1 je relevanta meta za ponovnu inicijaciju apoptoze ko brojnih ćelija kancera. Videti G. Lessene, P. Czabotar i P. Colman, Nat. Rev. Drug. Discov., 2008, 7, 989-1000; C. Akgul Cell. Mol. Life Sci. Vol.66, 2009; i Arthur M. Mandelin II, Richard M. Pope, Ekspert Opin. Ther. Targets (2007) 11(3):363-373.

[0005] Nove kombinacije i postupci za pripremu i formulisanje Mcl-1 inhibitora mogle bi biti korisni.

KRATAK OPIS NACRTA

[0006]

Fig.1 prikazuje Mcl-1 inhibitornu in-vivo efikasnost jedinjenja Primera 4.

Fig.2 prikazuje Mcl-1 inhibitornu in-vivo efikasnost jedinjenja Primera 17.

Fig.3 prikazuje Mcl-1 inhibitornu in-vivo efikasnost jedinjenja Primera 20.

SUŠTINA PRONALASKA

[0007] U jednom primeru izvođenja, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja Formule I,

gde, b, predstavljeno simbolom predstavlja jednostruku ili dvostruku hemijsku vezu koja može biti cis ili trans; R je halo; R<1>je H, C1-6alkil, i (CH2CH2O)nCH3, gde n je ceo broj od 1 do 4; R<2>je H ili C1-6alkil; R<2A>je H ili C1-6alkil; R<3>je H ili C1-6alkil; i R<3A>je H, C1-6alkil, C3-6cikloalkil, ili (CH2)m-C3-6cikloalkil, gde m je ceo broj od 1 do 4. U jednom primeru izvođenja, R je Cl. U jednom primeru izvođenja, R<1>je C1-6alkil. U još jednom primeru izvođenja, R<1>je CH3. U jednom primeru izvođenja, R<2>je H i R<2A>je C1-6alkil. U jednom primeru izvođenja, R<3>je H i R<3A>je C1-6alkil. U još jednom primeru izvođenja, b označava dvostruku vezu.

[0008] U nekim primerima izvođenja ovog pronalaska jedinjenje Formule I je jedinjenje Formule II,

gde R<1>, R<2>, R<2A>, R<3>i R<3A>su pretodno definisani.

[0009] U nekim primerima izvođenja ovog pronalaska, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja sledećih struktura:

�

�

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0010] Jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje, gde to jedinjenje ima strukturu izabranu od:

1

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0011] Jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

1

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0012] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0013] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0014] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0015] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

1

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0016] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0017] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0018] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0019] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

1

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0020] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenje koje ima strukturu

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja.

[0021] Jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na farmaceutsku kombinaciju koja obuhvata jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.

[0022] Još jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenja za upotrebu u postupku inhibiranja proteina 1 mijeoidne ćelijske leukemije (Mcl-1) ćelije, koji obuhvata dovođenje u kontakt te ćelije sa jedinjenjem Formule I u efektivnoj količini radi inhibiranja Mcl-1, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja. U jednom primeru izvođenja, dovođenje u kontakt je u vitro. U još jednom primeru izvođenja, dovođenje u kontakt je u vivo. U jednom primeru izvođenja, dovođenje u kontakt obuhvata davanje jedinjenja subjektu. U jednom primeru izvođenja, davanje je oralno, parenteralno, putem injekcije, putem inhalacije, transdermalno, ili transmukozalno. U jednom primeru izvođenja, subjekat boluje od kancera.

[0023] Jedan primer izvođenja ovog pronalaska usmeren je na jedinjenja za upotrebu u postupku tretiranja kancera, pri čemu taj postupak obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebno terapeutski

1

efektivne količine jedinjenja Formule I ili farmaceutske kombinacije koja obuhvata jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, u konjukciji sa bilo kojim od gore ili dole navedenim primerima izvođenja. U jednom primeru izvođenja, kancer je hematološki malignitet. U jednom primeru izvođenja, kancer je odabran iz grupe koju čine kancer dojke, kolorektalni kancer, kancer kože, melanom, kancer jajnika, kancer bubrega, kancer pluća, nemikroćelijski kancer pluća, limfom, ne-Hodžkinov limfom, mijelom, multiple mijelom, leukemija, i akutna mijelogenozna leukemija. U jednom primeru izvođenja, kancer je multiple mijelom. U još jednom primeru izvođenja, postupak dalje obuhvata fazu davanja pacijentu kome je to potrebno terapeutski efektivne količine najmanje jednog dodatnog farmaceutski aktivnog jedinjenja. U jednom primeru izvođenja, to dodatno farmaceutski aktivno jedinjenje je karfilzomib, u konjukciji sa bilo kojim pretodnim primerima izvođenja.

[0024] Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni pojmovi koji se ovde koriste imaju isto značenje koje se uobičajeno podrazumkeva od strane stručnjaka iz ove oblasti kojoj ovaj opis pripada. Postupci i materijali ovde su opisani za upotrebu u ovom pronalasku; takođe se mogu primeniti drugi, pogodni postupci i materijali poznati u stanju tehnike. Materijali, postupci, i primeri u samo ilustrativni i nemaju nameru ograničavanja. U slučaju konflikta, ovaj pronalazak, uključujući definicije, biće kontrolisan.

[0025] Druge karakteristike i prednosti ovog pronalaska biće jasne iz detaljnog opisa i nacrta i patentnih zahteva.

DETALJAN OPIS

[0026] Simbol "-" predstavlja kovelantnu vezu i takođe se može koristiti u radikalnoj grupi da ukaže na tačku vezivanja za drugu grupu. U hemisjkim strukturama, simbol – obično se koristi da označi metil grupu u molekulu.

[0027] Kako se ovde koristi, hemijske strukture koje sadrže jedan ili više stereocentara prikazanih isprekidanim i podebljani vezama (tj., i ) namenjene su da označe apsolutnu stereohemijsu stereocentra(ara) prisutnog(ih) u toj hemijskoj strukturi. Kako se ovde koristi, veze označene jednostavnom linijom ne ukazuju na stereo-preferencu. Ukoliko pak nije drugačije naznačeno, hemijske strukture koje uključuju jedan ili više stereocentara koji su ovde prikazani bez ukazivanja apsolutne ili realitvne sterehemije obuhvataju sve moguće stereohemijske oblike jedinjenja (npr., diastereomere, enantiomere) i njihove mešavine. Strukture sa jednom podebljanom ili isprekidanom linijom, i najmanje jednom dodatnom jednostavnom linijom, obuhvataju pojedinačne enantiomerne serije svih mogućih diastereomera.

2

[0028] Kako se ovde koristi, pojam "oko" namenjen je da označi varijacije usled eksperimentalne greške. Sva ovde prijavljena merenja treba shvatiti kao modifikovana pojmom "oko," bilo da taj pojam jeste ili neje eksplicitno upotrebljen, ukoliko eksplicitnop nije naznačeno drugačije.

[0029] Pojam "alkil" označava ravno ili razgranato lančani ugljovodonik. Reprezentativni primeri alkil grupe uključuju metil, etil, propil, izopropil, butil, izobutil, tert-butil, sek-butil, pentil i heksil. Tipične alkil grupe su alkil grupe sa od 1 do 8 atoma ugljenika, koje grupe su obično prikazane kao C1-8alkil.

[0030] Pojam "jedinjenje", kako se ovde koristi namenjeno je da uključi sve stereoziomere, geometrijske izomere, tautomere, i izotope prikazanih struktura. Jedinjenja ovde definisana nazivom ili strukturom kao jedan određen tatomerni oblik namenjena su da uključe i druge tatomerne oblike ukoliko nije drugačije specificirano.

[0031] Sva jedinjenja, i njihove farmnaceutski prihvatljive soli, mogu se pronaći zajedno sa drugim supstancama kao što su voda i rastvarači (npr., hidrati i solvati).

[0032] Pojam "cikloalkil" označava ciklični, nearomatični ugljovodonik. Reprezentativni primeri cikloalkil grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i cikloheptil. Cikloalkil grupa može da sadrži jednu ili više dvostrukih veza. Reprezentativni primeri cikloalkil grupa koji sadrže dvostruke veze uključuju ciklopentenil, ciklohekse nil, cikloheksadienil i ciklobutadienil. Uobičajene cikloalkil grupe su C3-

8cikloalkil grupe.

[0033] Pojam "ekscipijens", kako se ovde koristi, označava bilo koji farmaceutski prihvatljiv aditiv, nosač, razblaživač, adjuvans ili drugi sastojak, pored aktivnog farmaceutskog sastojka (API), koji je tipično uključen za formulacija i/ili davanje pacijentu. Handbook of Pharmaceutical Ekscipients, 5. izdanje, R.C. Rowe, P.J. Sheskey, i S.C. Owen, uređivači, Pharmaceutical Press, 2005, Hardback, 928, 0853696187.

[0034] Za pojmove "na primer" i "kao što je" i njihove gramatičke ekvivalente, poderazumeva se da ih prati izraz "i bez ograničavanja" ukoliko eksplicitno nije drugačije navedeno.

[0035] Pojam "halogen" ili "halo" označava F, Cl, Br ili I.

[0036] Pojam "pacijent" označava subjekte koji uključuju životinje, kao što su psi, mačke, krave, konje, ovce i ljude. Određeni pacijenti su sisari. Pojam pacijent uključuje mužijake i ženke.

[0037] Pojam "pacijent kome je to potrebno" označava pacijenta koji ima, ili u riziku od razvijanja, jedne ili više bolesti ili stanja u kojima je uključen Mcl-1 protein, kao što su kanceri. Identifikovanje pacijenta kome je to potrebno može biti po proceni subjekta ili zdravstvenog radnika i može biti subjektivno (npr., mišljenje) ili objektivno (npr., merljivo testom ili dijagnostičkim postupkom).

[0038] Izrazi "parenteralno davanje" i "davanje paranteralno" kako se ovde koristi označava načine davanja pored enteralnog i topikalnog davanja, obično injekcijom, i uključuje, bez ograničavanja, intravenoznu, intramuskularnu, intraarterijalnu, intratekalnu, intrakapsularnu, intraorbitalnu, intrakardijalnu, intradermalnu, intraperitonealnu, transtrahealnu, subkutanu, subkutikularnu, intraartikularnu, subkapsularnu, subarahnoidnu, intraspinalnu i intrastemalnu injekciju, i infuziju.

[0039] Kombinacije pogodne za parenteralnu injekciju mogu da obuhvataju fiziološki prihvatljive sterilne vodene ili nevodene rastvore, disperzije, suspenzije, ili emulzije, i sterilne praškove za rekonstruisanje u sterilnim injektabilnim rastvorima ili disperzijama. Primeri pogodnih vodenih i nevodenih nosača, razblaživača, rastvarači, ili prenosnika uključu vodu, etanol, poliole (propilen glikol, polietilen glikol, glicerol, i slično), pogodne njihove mešavine, biljna ulja (kao što je maslinovo ulje) i injektabilne organske estre kao što je etil oleat. Odgovarajuća fluidnost može se održavati, na primer, upotrebom obloge kao što je lecitin, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija, i upotrebom surfaktanata.

[0040] Pojam "farmaceutski prihvatljiv" je koristi se ovde da označi one ligande, materijale, kombinacije, i/ili dozne oblike koji su, u okviru medicinske procene, pogodni za davanje pacijentu, srazmerno razumnom odnosu dobrobit/rizik.

[0041] Izraz "farmaceutski prihvatljiv nosač" kako se ovde koristi označava farmaceutski prihvatljiv materijal, kombinaciju, ili nosač, kao što je tečan ili čvrst punilac, razblaživač, ekscipijens, rastvarač ili enkapsulirajući materijal. Kako se ovde koristi izraz "farmaceutski prihvatljiv nosač" uključuje pufer, sterilnu vodu za injekciju, rastvarače, disperziona podloga, obloge, antibakterijske i antigljivične agense, izotonične i agense odlaganja apsorpcije, i slično, kompatibilne sa farmaceutskim davanjem. Svaki nosač mora biti "prihvatljiv" u smuslu da su kompatibilni sa drugim sastojcima formulacije i da nisu štetni za pacijenta. Neki primeri materijala koji mogu da služe kao farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju: (1) šećere, kao što je laktoza, glukoza, i saharoza; (2) skrobove, kao što je kukuruzni skrob, krompirov skrob, i supstituisan ili nesupstituisan β-ciklodekstrin; (3) celulozu, i njene derivati, kao što je natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza, i celuloza acetat; (4) praškasti tragakant; (5) slad; (6) želatin; (7) talk; (8) ekscipijense, kao što je kakao buter i supozitorni voskovi; (9) ulja, kao što je ulje kikirikija, ulje semena pamuka, ulje šafranika, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje, i sojino ulje; (10) glikoli, kao što je propilen glikol; (11) poliole, kao što je glicerin, sorbitol, manitol, i polietilen glikol; (12) estri, kao što je etil oleat i etil laurat; (13) agar; (14) puferujuće agense, kao što je magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; (15) algininsku kiselinu; (16) vodu bez pirogena; (17) izotonični slani rastvor; (18) Ringerov rastvor; (19) etil alkohol; (20) fosfatne puferske rastvore; i (21) druge ne-toksične kompatibilne supstance upotrebljene u farmaceutskim formulacijama. U određenim primerima izvođenja, farmaceutske kombinacije koje su ovde obezbeđene su ne-pirogene, tj., ne idnukuju značajna povećanja temperature po davanju pacijentu.

[0042] Pojam "farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na relativno ne-toksične, neorganske i organske kisele adicione soli jedinjenja koja su ovde obezbeđena. Ove soli mogu se pripremiti u situ tokom konačnog izolovanja i prečišćavanja jedinjenja koja su ovde obezbeđena, ili odvojenim reagovanjem jedinjenja u obliku njegove slobodne baze sa pogodnom organskom ili neorganskom kiselinom, i izolovanjem tako formirane soli. Reprezentativne soli uključuju hidrobromid, hidrohlorid, sulfat, bisulfat, fosfat, nitrat, acetat, valerat, oleat, palmitat, stearat, laurat, benzoat, laktat, fosfat, tosilat, citrat, maleat, fumarat, sukcinat, tartrat, naftilat, mezilat, glukoheptonat, laktobionat, laurilsulfonat soli, i amino kiselinske soli, i slično. (Videti, na primer, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci.

66: 1-19.)

[0043] Izrazi "sistemsko davanje", "davanje sistemski", "periferno davanje", i "davanje periferno" kako se ovde koristi označavaju davanje liganda, leka, ili drugog materijala putem koji je različit od direktno u centralni nervni sistem, tako da ulazi u pacijentov sistem i zbog toga, podvrgnut metabolizmu i drugim sličnim procesima, na primer, subkutano davanje.

[0044] Pojam "terapeutski efektivna količina" označava neku količinu jedinjenja koje ublažava, slabi ili elminiše jedan ili više simptoma određene bolesti ili stanja, ili sprečava ili odlaže početak jednog od više simptoma određene bolesti ili stanja.

[0045] Pojamovi "tretiranje", "tretirati" ili "tretman" i slično uključuju preventativno (npr., profilaktičko) i palijativno tretiranje.

[0046] Postupci koji su ovde obezbeđeni uključu proizvodnju farmaceutskih kombinacija, koje uključuju jedno ili više jedinjenja koja su ovde obezbeđena. Takođe su uključene i same farmaceutske kombinacije.

2

[0047] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje koje je ovde obezbeđeno može da sadrži jednu ili više kiselih funkcionalnih grupe i, stoga, sposobno je da formira farmaceutski prihvatljive soli sa farmaceutski prihvatljivim bazama. Pojam "farmaceutski prihvatljive soli" u ovim slučajevima odnosi se na relativno ne-toksične neorganske i organske bazne adicione soli jedinjenja koja su ovde obezbeđena. Ove soli takođe se mogu pripremiti u situ tokom konačnog izolovanja i prečišćavanje jedinjenja, ili odvojenim reagovanjem prečišćenog jedinjenja u njegovom slobodnom kiselom obliku sa pogodnom bazom, kao što je hidroksid, karbonat, ili bikarbonat farmaceutski prihvatljivog metalnog katjona, sa amonijak, ili sa farmaceutski prihvatljivim organskim primarnim, sekundarnim, ili tercijarnim aminom. Reprezentativne alkalne ili zemno alkalne soli uključu litijum, natrijum, kalijum, kalcijum, magnezijum, i aluminijum soli, i slično. Reprezentativni organski amini korisni za formiranje baznih adicionih soli uključuju etilamin, dietilamin, etilendiamin, etanolamin, dietanolamin, piperazin, i slično (videti, na primer, Berge et al., supra).

[0048] Agensi vlaženja, emulzifikatori, i lubrikanti, kao što je natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat, kao i agesni za bojenje, agensi za oslobađanje, agensi za oblaganje, zaslađivači, arome, i agensi mirisa, prezervativi i antioksidansni Primeri farmaceutski prihvatljivih antioksidanasa uključu: (1) u vodi rastvorljiv antioksidansi, kao što je askorbinska kiselina, cisteine hidrohlorid, natrijum bisulfat, natrijum metabisulfit, natrijum sulfit, i slično; (2) u ulju rastvorljivi antioksidansi, kao što je askorbil palmitat, butilovan hidroksianisol (BHA), butilovan hidroksitoluen (BHT), lecitin, propil galat, alfa-tokoferol, i slično; i (3) metal helirajući agensi, kao što je limunska kiselina, etilendiamin tetrasirćetna kiselina (EDTA), sorbitol, tartarna kiselina, fosforna kiselina, i slično.

[0049] Farmaceutska kombinacija može takođe da sadrži adjuvanse kao što su prezervativi, agensi vlaženja, emulzifikatori, i dispergujući agensi. Prevencija aktivnosti mikroorganizama može se obezbediti uključivanjem raznih antibakterijskih i antigljivičnih agenasa, na primer, paraben, hlorobutanol, fenol sorbinska kiselina, i slično. Takođe može biti moguće da se uključe agensi podešavanja toničnosti, kao što su šećeri i slično u kombinacije. Dodatno, produžena apsorpcija injektabilnih farmaceutskih oblika može dovesto do uključivanja agenasa koji odlažu apsorpciju kao što je aluminijum monostearat i želatin.

[0050] U nekim slučajevima, radi produženog efekta jednog ili više jedinjenja koja su ovde obezbeđena, poželjno je usporiti apsorpciju jedinjenja od subkutane ili intramuskularne injekcije. Na primer, odložena apsorpcija paranteralnog davanja jedinjenje može se postići rastvaranjem ili suspendovanjem jedinjenja u uljnom nosaču.

[0051] Jedinjenja ovog pronalaska daju se pacijentu u terapeutski efektivnim količinama. Jedinjenja se mogu davati sama ili kao deo farmaceutski prihvatljive kombinacije ili formulacije. Dodatno, jedinjenja ili kombinacije mogu se davati sva odjednom, kao na primer, bolus injekcijom, u više navrata, kao što je serijom tableta, ili dostaviti suštinski uniformno tokom nekog perioda, kao na primer, primenom transdermalne dostave. Doza jedinjenja ili kombinacija može varirati tokom vremena. Sve kombinacije, postupci dostave i sekvence davanja mogu se zamisliti.

[0052] Jedinjenja ovog pronalaska i u nekim primerima izvođenja, pored dodatnih farmaceutski aktivnih jedinjenja, mogu se davati pacijentu ili oralno, rektalno, paranteralno, (na primer, intravenozno, intramuskularno, ili subkutano) intracisternalno, intravaginalno, intraperitonealno, intravezikularno, lokalno (na primer, praškovi, masti ili kapi), ili kao bukalni ili nazalni sprej. Mogu se zamisliti svi postupci koji se koriste od strane stručnjaka iz ove oblasti za davanje farmaceutski aktivnog agensa.

[0053] Kombinacije pripremljene kako je ovde opisano mogu se davati u različitim oblicima, zavisno od poremećaja koji se tretira i starosti, stanja, i telesne mase pacijenta, kao što je dobro poznato u struci. Na primer, kada se kombinacije daju oralno, mogu biti formulisane kao tablete, kapsule, granula, praškovi, ili sirupi; ili za parenteralno davanje, mogu biti formulisani kao injekcije (intravenozne, intramuskularne, ili subkutane), preparati za kapajuće infuzije, ili supozitorije. Za nanošenje putem oftalmološke mukozne membrane, mogu biti formulisane kao kapi za oči ili masti za oči. Ove formulacije mogu se pripremiti uobičajenim sredstvima u konjukciji sa ovde opisanim postupcima, i, ukoliko je poželjno, aktivni sastojak može biti pomešan sa bilo kojim konvencionalnim aditivom ili ekscipijensom, kao što je vezivo, agens za dezintegraciju, lubrikant, ispravljač, agens rastvaranja, sredstvo za potpomaganje suspenzije, emulzifikatori, ili agensi za oblaganje.

[0054] Formulacije pogodne za oralno davanje mogu biti u obliku kapsula (npr., želatin kapsule), kesica, pilula, tableta, lozengi (upotrebom aromatizovane baze, obično saharoze i akacije ili tragakanta), praškova, dražeja, granula, ili u obliku rastvora ili suspenzija u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti, ili kao ulje-u-vodi ili voda-u-ulju tečna emulzija, ili kao eliksir ili sirup, ili kao pastile (primenom inertne matrice, kao što je želatin i glicerin, ili saharoza i akacija) i/ili tečnosti ispriranje usta, i slično, od kojih svaki sadrži pretodno određenu količinu jedinjenja koja je ovde obezbeđena kao aktivni sastojak. Kombinacija takođe može biti za davanje kao bolus, elekturiarijum, ili pasta. Oralne kombinacije generalno uključuju inertni razblaživač ili jesitivi nosač.

[0055] Farmaceutski kompatibilni vezujući agensi, i/ili adjuvansni materijali mogu biti uključeni kao deo

2

oralne kombinacije. U čvrstim doznim oblicima za oralno davanje (kapsule, tablete, pilule, dražeje, praškovi, granule, i slično), aktivni sastojak može biti pomešan sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat, i/ili bilo koji od sledećih: (1) punioci ili ekstenderi, kao što su skrobovi, ciklodekstrini, laktoza, saharoza, saharin, glukoza, manitol, i/ili silicilna kiselina; (2) veziva, kao što je, na primer, karboksimetilceluloza, mikrokristalna celuloza, guma tragakant, alginati, želatin, polivinil pirolidon, saharoza, i/ili akacija; (3) ovlaživači, kao što je glicerol; (4) agensi dezintregracije, kao što je agar-agar, kalcijum karbonat, krompirov, kukuruzni, ili tapioka skrob, algininska kiselina, Primogel, određeni silikati, i natrijum karbonat; (5) agensi za usporavanja rastvora, kao što je parafin; (6) agensi za ubrzavanje apsorpcije, kao što su kvaternarna amonijak jedinjenja; (7) agensi vlaženja, kao što je, na primer, acetil alkohol i glicerol monostearat; (8) adsorbenti, kao što je kaolinska i bentonitna glina; (9) lubrikanti, kao što je talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, Steroti, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, i njihove mešavine; (10) glidant, kao što je koloidni silikon dioksid; (11) agensi bojenja; i (12) agensi za aromatizovanje kao što je pepermint, metil salicilat, ili aroma pomorandže. U slučaju kapsula, tableta, i pilula, farmaceutske kombinacije takođe mogu da obuhvataju puferujuće agense. Čvrste kombinacije sličnog tipa takođe se mogu primeniti kao punioci u mekim i čvrstim želatinastim kapsulama upotrebom takvih ekscipijenasa kao što su laktoza ili mlečni šećeri, kao i polietilen glikole velike molekulske mase, i slično.

[0056] Tableta može biti pripremljena sabijanjem ili oblikovanjem u kalupu, opciono sa jednim ili više dodatnih sastojaka. Sabijene tablete mogu biti pripremljene upotrebom veziva (na primer, želatin ili hidroksipropilmetil celuloza), lubrikanta, inertnog razblaživača, prezervativa, dezintegratnta (na primer, natrijum skrob glikolat ili umrežena natrijum karboksimetil celuloza), površinski-aktivni ili dispergujući agens. U kalupu oblikovane tablete mogu biti pripremljene oblikovanjem u kalupu u pogodnom uređaju mešavine praškastog jedinjenja navlaženog inertnim tečnim razblaživačem.

[0057] Tablete, i drugi čvrsti dozni oblici, kao što su dražeje, kapsule, pilule, i granule, opciono mogu biti zasečene ili pripremljen sa oblogama i opnama, kao što su enterične obloge i druge obloge dobro poznate u oblasti formulisanja farmaceutika. One takođe mogu biti formulisane tako da obezbeđuju sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka koji se u njimanalazi upotrebom, na primer, hidroksipropilmetil celuloze u raznim odnosima radi obezbeđivanja željenog profila oslobađanja, drugim polimernim matricama, lipozomima, mikrosferama, i/ili nanočesticama. One mogu biti sterilizovane, na primer, filtriranjem kroz filter koji zadržava bakterije, ili uključivanjem sterilišućeg agensa u obliku sterilne čvrste kombinacije koje se mogu rastvoriti u sterilnoj vodi, ili nekoj drugoj sterilnoj injektabilnoj podlozi neposredno pre upotrebe. Ove kombinacije takođe opciono mogu da sadrže agense za neprozirnost i mogu biti od kombinacije koje oslobađaju aktivni sastojak(ke) samo, ili poželjno, u

2

određenom delu gastrointestinalnog trakta, opciono, na odložen način. Primeri kombinacija za uobličavanje koje se mogu primeniti uključuju polimerne supstance i voskove. Aktivni sastojak takođe može biti u mikro-enkapsuliranom obliku, ukoliko je pogodno, sa jednim ili više pretodno navedenih ekscipijenasa.

[0058] Tečni dozni oblici za oralno davanje uključuju farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe, i eliksire. Pored aktivnog sastojka, tečni dozni oblici mog da sadrže inertne razblaživače koji se uobičajeno koriste u ovoj oblasti, kao što je, na primer, voda ili drugi rastvarači, agensi rastvaranja, i emulzifikatori kao što je etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, ulja (određenije, ulja semena pamuka, usitnjenog lešnika, kukuruza, klica, maslina, kasto, i susama), glicerol, tetrahidrofuril alkohol, polietilen glikoli, i estri masnih kiselina sorbitana, i njihove mešavine.

[0059] Pored inertnih razblaživača, oralne kombinacije takođe mogu da uključe adjuvanse kao što su agensi vlaženja, emulzifikatori i suspendujući agensi, zaslađivači, arome, boje, agensi za parfimisanje, i prezervative.

[0060] Suspenzije, pored aktivnog(ih) jedinjenja može da sadrži suspendujuće agense kao, na primer, etoksilovani izostearilni alkoholi, polioksietilen sorbitol i sorbitan estri, mikrokristalna celuloza, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragakant, i njihove mešavine.

[0061] Farmaceutske kombinacije pogodne za parenteralno davanje mogu da uključe jedno ili više jedinjenja koja su ovde obezbeđena u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sterilnih vodenih ili nevodenih rastvora, disperzija, suspenzija ili emulzija, ili sterilnih praškova koji se mogu rekonstruisati u sterilnim injektabilnim rastvorima ili disperzijama neposredno pre upotrebe, koji mogu da sadrže antioksidanse, pufere, bakteriostatike, supstance koje se rastvaraju koji obezbeđuju da je formulacija izotonična sa krvlju namenjenog primaoca ili agensima za suspendovanje ili zgušnjavanje.

[0062] U jednom primeru izvođenja, IV formulacija sastoji se od kombinacije koja sadrži hidroksipropil beta ciklodekstrin u pH opsegu od između 8 - 10 kao puferovani ili nepuferovani rastvor. IV formulacija može se formulisati kao sterilni rastvor spreman za injekciju, sterilni rastvor spreman za razblaživanje u IV smeši ili sterilna čvrsta materija za rekonstituisanje. API u IV formulaciji može da postoji kao slobodna kiselina/baza ili u situ so.

[0063] Primeri pogodnih vodenih i nevodenih nosača koji mogu biti upotrebljeni u farmaceutskim

2

kombinacijama koje su ovde obezbeđene uključuju vodu za injekciju (npr., sterilna voda za injekciju), bakteriostatičnu vodu, etanol, poliol (kao što je glicerol, propilen glikol, polietilen glikol kao što je tečni polietilen glikol, i slično), sterilni pufer (kao što je citratni pufer), i pogodne njihove mešavine, biljna ulja, kao što je maslinovo ulje, injektabilne organske estre, kao što je etil oleat, i Cremophor EL™ (BASF, Parsippany, NJ). U svim slučajevima, kombinacija mora biti sterilna i mora biti tečna do mere da se može davati špricem. Odgovarajuća fluidnost može se održavati, na primer, upotrebom materijala obloge, kao što je lecitin, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija, i upotrebom surfaktanata.

[0064] Kombinacija bi trebalo da je stabilna pod uslovima proizvodnje i skladištenja i mora biti zaštićena od kontaminirajućeg dejstva mikroorganizama kao što su bakterije i gljivice. Prevencija aktivnosti mikroorganizama može se postići raznim antibakterijskim i antigljivičnim agensima, na primer, parabeni, hlorobutanol, fenol, askorbinska kiselina, timerosal, i slično. U većini slučajeva, poželjno je uključiti izotonične agensi, na primer, šećere, polialkohole kao što je manitol, sorbitol, i natrijum hlorid u kombinaciju. Produžena apsorpcija injektabilnih kombinacija može se obezbediti uključivanjem u kombinaciju nekog agensa koji odlaže apsorpciju, na primer, aluminijum monostearat i želatin.

[0065] Sterilni injektabilni rastvori mogu se pripremiti smeštanjem aktivnog jedinjenja u potrebnoj količini u odgovarajući rastvarač sa jednim ili kombinacijom sastojaka koji su prethodno navedeni, po potrebi, praćeno filtrirajućon sterilizacijom. Generalno, disperzije se pripremaju smeštanjem aktivnog jedinjenja u sterilni nosač, koji sadrži baznu disperzionu podlogu i potrebne druge sastojske od prethodno navedenih. U slučaju sterilnih praškova za pripremanje sterilnih injektabilnih rastvora, postupci pripreme su sušenje zamrzavanjem (liofilizacija), koja daje prah aktivnog sastojka plus bilo koji dodatni željeni sastojak od njihovih prethodno pomenutih sterilno filtriranih rastvora.

[0066] Injektabilni depot oblici mogu biti izrađeni formiranjem mikroenkapsulirajućih ili nanoenkapsulirajućih matrica jedinjenja koja su ovde obezbeđena u biorazgradivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. Zavisno od odnosa leka prema polimeru, i prirode određenih upotrebljenih polimera, brzina oslobađanja leka može se kontrolisati. Primeri drugih biorazgradivih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Depot injektabilne formulacije takođe se pripremanju zatvaranjem leka u lipozome, mikroemulzije ili nanoemulzije, koje su kompatibilne sa telesnim tkivima.

[0067] Za davanje inhaliranjem, jedinjenja se mogu dostaviti u obliku aerosolnog spreja iz kontejnera ili dispenzera pod pritiskom koji sadrži pogodan propelant (npr., gas kao što je ugljen dioksid) ili nebulizator. Takvi postupci uključuju one opisane u U.S. Patent No.6,468,798. Dodatno, intranazalna dostava može se postići, kako je opisano od strane, inter alia, Hamajima et al., Clin. Immunol.

2

Immunopathol., 88(2), 205-10 (1998). Lipozomska (npr., kako je opisano u U.S. Patent No.6,472,375), mikroenkapsulacija i nanoenkapsulacija takođe se može primeniti. Sistemi za dostavu biorazgradivih mikročestica koje se mogu ciljati ili sistemi za dostavu biorazgradivih nanočestica koje se mogu ciljati, takođe se mogu koristiti (npr., kako je opisano u U.S. Patent No.6,471,996).

[0068] Sistemsko davanje terapeutskog jedinjenja kako je ovde opisano takođe može biti transmukozalnim ili transdermalno označava. Dozni oblici za topikalno ili transdermalno davanje jedinjenja koja su ovde obezbeđena uključuju praškove, sprejeve, masti, paste, kreme, losione, gelove, rastvori, flasteri, i inhalanti. Aktivna komponenta može se umešati pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, i sa bilo kojim prezervativima, puferima, ili propelantima koji mogu biti neophodni. Za transmukozalno ili transdermalno davanje, sredstva za penetraciju pogodni barijeru kroz koju treba da prođu koristre se u formulaciji. Takva sredstva za penetraciju generalno su poznata u struci, i uključuju, na primer, za transmukozalno davanje, deterdžente, žučne soli, i derivate fusidičke kiseline. Transmukozalno davanje može se postići upotrebom nazalčnih sprejeva ili supozitorija. Za transdermalno davanje, aktivna jedinjenja formulišu se u mastima, melemima, gelovima, ili kremama kao što je generalno poznato u struci.

[0069] Masti, paste, kreme, i gelvi mogu da sadrže, pored jednog ili više jedinjenja koja su ovde obezbeđena, ekscipijense, kao što su životinjske i biljne masti, ulja, voskovi, parafini, skrob, tragakant, derivati celuloze, polietilen glikoli, silikoni, bentoniti, silicijumova kiselina, talk, i cink oksid, ili njihove mešavine.

[0070] Praškovi i sprejevi mogu da sadrže, pored jedinjenja koje su ovde obezbeđene, ekscipijense kao što je laktoza, talk, silicijumova kiselina, aluminijum hidroksid, kalcijum silikati, i poliamidni prašak, ili mešavine ovih supstanci. Sprejevi mogu dodatno da sadrže uobičajene propelante, kao što su hlorofluorougljovodonici i isparljivi nesupstituisani ugljovodonici, kao što je butan i propan.

[0071] Jedinjenje koje je ovde obezbeđeno može se davati aerosolom. To se postiže pripremanjem vodenog aerosola, lipozomalnog pripravka, ili čvrstih čestica koje sadrže jedinjenje ili kombinaciju koja je ovde obezbeđena. Nevodena (npr., fluorougljenični propelant) suspenzija se može koristiti. U nekim primerima izvođenja, sonični nebulizatori se koriste jer oni smanjuju izlaganje agensa smicanju, što može da rezultuje u degradaciji jedinjenja.

[0072] Obično, vodeni aerosol može se izraditi formulisanjem vodenog rastvora ili suspenzije agensa zajedno sa konvencionalnim farmaceutski prihvatljivim nosačima i stabilizatorima. Nosači i stabilizatori

2

variraju sa zahtevima određene kombinacije, ali tipično uključuju nejonske surfaktante (TWEEN® (polisorbati), PLURONIC® (poloksameri), sorbitan estri, lecitin, CREMOPHOR® (polietoksilati)), farmaceutski prihvatljiv ko-rastvarače kao što je polietilen glikol, neškodljive proteine kao što je serumski albumin, sorbitan estri, oleinska kiselina, lecitin, amino kiseline kao što je glicin, puferi, soli, šećeri, ili šećerni alkoholi. Aerosoli se generalno pripremaju od izotoničnih rastvora.

[0073] Transdermalni flasteri imaju dodatnu prednost obezbeđivanja kontrolisane dostave jedinjenja koja su ovde obezbeđena do tela. Takvi dozni oblici mogu se priprimeiti rastvaranjem ili dispergovanjem agensa u odgovarajućoj podlozi. Pojačivači apsorpcije se takođe mogu koristiti za povećanje fluksa jedinjenja kroz kožu. Brzina takvog fluksa može se kontrolisati ili obezbeđivanjem membrane za kontrolisanje brzine ili dispergujućeg jedinjenja u polimernoj matrici ili gelu.

[0074] Farmaceutske kombinacije takođe se mogu pripremiti u obliku supozitorija ili zadržavajuće klizme za rektalnu i/ili vaginalnu dostavu. Formulacije spremljene u obliku supozitorija mogu se pripremiti mešanjem jednog ili više jedinjenja koja su ovde obezbeđena sa jednim ili više pogodnih neiritirajućih ekscipijenasa ili nosača koji obuhvataju, na primer, kakao buter, gliceride, polietilen glikol, supozitorni vosak ili salicilat, koji je čvrst na sobnoj temperaturi, ali je tečan na telesnoj temperaturi, i, prema tome, topi se u rektumu ili vaginalnoj šupljini i oslobađa aktivni agens. Formulacije koje su pogodne za vaginalno davanje takođe uključuju pesare, tampone, kreme, gelove, paste, pene, ili sprejne formulacije koje sadrže takve nosače koji se u stanju tehnike smatraju pogodnim.

[0075] U jednom primeru izvođenja, terapeutska jedinjenja pripremljena su sa nosačima koji štite ta terapeutska jedinjenja od brzog oslobađanja iz tela, kao što je formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem, koja uključuje implante i mikroenkapsulirane sisteme za dostavu. Biorazgradivi, biokompatibilni polimeri mogu se koristiti, kao što je etilen vinil acetat, polianhidridi, poliglikolna kiselina, kolagen, poliortoestri, i polimlečna kiselina. Takve formulacije mogu se pripremiti upotrebom standardnih tehnika, ili dobiti na komercijalan način (npr., od Alza Corporation i Nova Pharmaceuticals, Inc). Lipozomalne suspenzije (koje uključuju lipozome ciljane za određene ćelije sa monoklonskim antitelima prema ćelijskim antigenima) takođe se mogu koristiti kao farmaceutski prihvatljivi nosači. One se mogu pripremiti prema postupci poznatim stručnjacima iz ove oblasti, na primer, kako je opisano u U.S. Patent No.4,522,811.

[0076] Jedinjenja ovog pronalaska koriste se u lečenju bolesti, poremećaja ili simptoma posredovanih Mcl-1 inhibicijom. Primeri bolesti, poremećaja ili simptoma posredovanih Mcl-1 inhibicijom uključu, ali se ne ograničavaju na, kancere. Neograničavajući primeri kancera uključuju kancer dojke, kolorektalni kancer, kancer kože, melanom, kancer jajnika, kancer bubrega, kancer pluća, nemikroćelijski kancer pluća, limfom, ne-Hodžkinov limfom, mijelom, multiple mijelom, leukemiju, i akutnu mijelogenoznu leukemiju.

[0077] Kanceri mogu da uključe karcinome (koji potiču iz spoljnog sloja ćelija kože i unutrašnjih membrana, npr., dojke, bubrezi, pluća, koža); sarkome (koji proizilaze od veznog tkiva kao što su kosti, mišići, hrskavica, i krvni sudovi), i hematološke malignosti (npr., limfomi i leukemije, koji se javljaju u krvi ili organima koji formiraju krv kao što je jetra, limfni čvorovi, i koštana srž). Ćelije kancera mogu da uključe, na primer, ćelije tumora, neoplastične ćelije, maligne ćelije, ćelije metastaze, i hiperplastične ćelije.

[0078] U jednom primeru izvođenja, bolest, poremećaj ili simptom je hiperproliferativni poremećaj, npr., limfom, leukemija, karcinom (npr., bubrega, dojke, pluća, kože), multiple mijelom, ili sarkom. U jednom primeru izvođenja, leukemija je akutna mijeloidna leukemija. U jednom primeru izvođenja, hiperproliferativni poremećaj je recidivni ili refraktorni kancer.

[0079] Stvarni dozni nivoi aktivnih sastojaka u farmaceutskim kombinacijama koje su ovde obezbeđene mogu varirati tako da se dobije neka količina aktivnog sastojka koje je efektivan za postizanje željenog terapeutskog odgovora za određenog pacijenta, kombinaciju, i način davanja, bez toksičnosti po pacijenta.

[0080] Specifična doza i dozni opseg zavisi od brojnih faktora koji uključuju zahteve pacijenta, težinu stanja ili bolesti koja se tretira, farmakokinetičkih karakteristika jedinjenja(a) koja se koriste, i puta davanja. U nekim primerima izvođenja, kombinacije koje su ovde obezbeđene mogu se obezbediti u vodenim rastvorima koji sadrže oko 0.1-10% w/v ovde opisanih jedinjenja, između ostalih supstanci, za parenteralno davanje. Tipični dozni opsezi mogu da uključe od oko 0.01 do oko 50 mg/kg telesne mase na dan, dato u 1-4 podeljenih doza. Svaka podeljena doza može da sadrži ista ili različitita jedinjenja. Doza je terapeutski efektivna količina zavisno od nekoliko faktora koji uključuju opšte zdravlje pacijenta, i formulaciju i put davanja odabranog(ih) jedinjenja.

[0081] Dozni oblici ili kombinacije koji sadrže jedinjenje kako je ovde opisano u opsegu od 0.005% do 100% sa balansom dobijenim od ne-toksičnog nosača mogu biti pripremljene. Postupci za pripremu ovih kombinacija poznati su stručnjaku iz ove oblasti. Zamišljene kombinacije mogu da sadrže oko 0.001%-100% aktivnog sastojka, u jednom primeru izvođenja od oko 0.1 do oko 95%, u još jednom primeru izvođenja od oko 75 to oko 85%. Iako doza varira zavisno od simptoma, starosti i telesne mase pacijenta,

1

prirode i težine poremećaja koji se tretira ili prevenira, načina davanja i oblika leka, generalno, dnevna doza od oko 0.01 do oko 3,000 mg jedinjenja preporučuje se za odraslog humanog čoveka, a ona se može davati kao jedna doza ili u podeljenim dozama. Količina aktivnog sastojka koja može biti kombinovana sa materijalom nosača za proizvodnju jednog doznog oblika generalno će biti ona količina jedinjenja koja proizvodi terapeutski efekat.

[0082] Farmaceutska kombinacija može biti za jedno davanje, ili može biti podeljena na više manjih doza za davanje u nekim vremenskim intervalima. Podrazumeva se da su tačna doza i trajanje tretmana u funkciji bolesti koja se tretira i mogu se odrediti empirijski upotrebom poznatih ispitnih protokola ili ekstrapolacijom iz u vivo ili u vitro isptinih podataka. Treba zapaziti da koncentracije i dozne vrednosti takođe mogu varirati sa težinom stanja koje se ublažava. Dalje treba zapaziti da bi se za bilo kog određenog pacijenta, specifični dozni režimi trebalo podešavati tokom vremena u skladu sa pojedinačnom potrebom i profesionalnom procenom osobe koja daje ili nadgleda davanje tih kombinacija, i da su koncentracioni opsezi koji ovde navedeni samo u službi primera bez namere da ograniče obim ili praksu kombinacija zaštićenih patentnim zahtevima.

[0083] Tačno vreme davanja i/ili količina kombinacije koji obezbeđuju najefektivnije rezultate u smislu efikasnosti tretmana kod datog pacijenta, zavisiće od dejstva, farmakokinetika, i biodostupnosti određenog jedinjenja, fiziološkog stanja pacijenta (koje uključuje starost, pol, tip bolesti i stadijum, opšteg fizičkog stanja, stepena odgovora na datu dozu, i vrstu leka), načina davanja, itd. Međutim, gornje smernice mogu se koristiti kao osnova za fino podešavanje tretmana, npr., određivanje optimalnog vremena i/ili količine davanje, što ne zahteva više od rutinskog ispitivanja koje se sastoji od praćenja pacijenta i podešavanja doze i/ili tajminga.

[0084] Jedinjenja ovog pronalaska mogu se davati sama, u kombinaciji sa drugim jedinjenjima ovog pronalaska, ili sa drugim farmaceutski aktivnim jedinjenjima ili agensima. Druga farmaceutski aktivna jedinjenja/agensi mogu namenjeni za tretiranje iste bolesti ili stanja kao i jedinjenja ovog pronalaska ili različite bolesti ili stanja. Ako pacijent treba da primi ili prima više farmaceutski aktivnih jedinjenja ili agenasa, jedinjenja se mogu davati simultano ili sekvencijalno.

[0085] Jedinjenja ovog pronalaska, ili njihove farmnaceutski prihvatljive soli, mogu se koristiti u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih farmaceutski aktivnih jedinjenja/agenasa.

[0086] Jedno ili više dodatnih farmaceutski aktivnih jedinjenja ili agenasa mogu se davati odvojeno, kao deo višestrukog doznog režima, od jedinjenja Formule I (npr., sekvencijalno, npr., u različitim

2

preklapajućim rasporedima u odnosu na davanje jednog ili više jedinjenja Formule I (koji uključuju bilo koju njegovu podvrstu ili specifična jedinjenja). U drugim primerima izvođenja, jedan ili više dodatnih jedinjenja/agenasa mogu biti deo jednog doznog oblika, pomešani zajedno sa jedinjenjem Formule I u jednu kombinaciju. U još jednom primeru izvođenja, jedno ili više dodatnih jedinjenja/agenasa mogu biti dati kao odvojena doza koja je za davanje u otprilike isto vreme u kojem se daju jedno ili više jedinjenja Formule I (npr., simultano sa davanjem jednog ili jedinjenja Formule I (koji uključuju bilo koju podvrstu ili njegova specifična jedinjenja). I jedinjenje Formule I i jedno ili više dodatnih jedinjenja/agenasa mogu biti prisutni u doznim nivoima od između oko 1 do 100%, a poželjnije između oko 5 do 95% doze koja se uobičajeno daje u monoterapijskom režimu.

[0087] U određenom primeru izvođenja, dodatno farmaceutski aktivno jedinjenje/agens je jedinjenje ili agens koji se mogu primeniti za tretiranje kancera. Na primer, dodatno farmaceutski aktivno jedinjenje/agens mogu se odabrati od antineoplastinih agenasa, anti-angiogenih agenasa, hemoterapeutskih agenasa, i agenasa za peptidnu terapiju raka. U još jednom primeru izvođenja, antineoplastični agensi odabrani su od antibiotičkog tipa agenasa, alkilirajućih agenasa, antimetaboličkih agenasa, hormonalnih agenasa, imunoloških agenasa, interferonskog tipa agenasa, inhibitora kinaze, inhibitora proteazoma, i njihovih kombinacija. Treba zapaziti da dodatno farmaceutski aktivno jedinjenje/agens može biti konvencionalno mali organski hemijski molekul ili može biti makromolekul kao što je protein, antitelo, peptitelo, DNK, RNK ili fragment takvih makromolekula.

[0088] Primeri dodatnih farmaceutski aktivnih jedinjenja/agenasa koji se mogu primeniti u tretiranju kancera i koji se mogu primeniti u kombinaciji sa jednim ili više jedinjenja ovog pronalaska uključuju: acemanan; acklarubicin; aldesleukin; alitretinoin; amifostin; amrubicin; amsakrin; anagrelid; arglabin; arsenik trioksid; BAM 002 (Novelos); bikalutamid; broksuridin; celmoleukin; cetroreliks; kladribin; klotrimazol; DA 3030 (Dong-A); daklizumab; denileukin diftitoks; deslorelin; dilazep; dokosanol; dokserkalciferol; doksifluridin; bromokriptin; citarabin; HIT diklofenak; interferon alfa; tretinoin; edelfosin; edrekolomab; eflornitin; emitefur; epirubicin; epoetin beta; etopozid fosfat; eksisulind; fadrozol; finasterid; fludarabine fosfat; formestan; fotemustin; galijum nitrat; gemtuzumab zogamicin; gimeracil/oteracil/tegafur kombinacija; glikopin; goserelin; heptaplatin; humani horionski gonadotropin; humani fetalni alfa fetoprotein; ibandronska kiselina; interferon alfa; interferon alfa prirodan; interferon alfa-2; interferon alfa-2a; interferon alfa-2b; interferon alfa-N1; interferon alfa-n3; interferon alfakon-1; interferon alfa prirodan; interferon beta; interferon beta-1a; interferon beta-1b; interferon gama prirodan; interferon gama-1a; interferon gama-lb; interleukin-1 beta; jobenguan; irsogladin; lanreotid; LC 9018 (Yakult); leflunomid; lenograstim; lentinan sulfat; letrozol; leukocit alfa interferon; leuprorelin; levamizol+fluorouracil; liarozol; lobaplatin; lonidamin; lovastatin; mazoprokol; melarsoprol; metoklopramid; mifepriston; miltefosin; mirimostim; neusklađena dvolančana RNK; mitogvazon; mitolaktol; mitoksantron; molgramostim; nafarelin; nalokson+pentazocin; nartograstim; nedaplatin; nilutamid; noskapin; novi protein koji stimuliše eritropoezu; NSC 631570 oktreotid; oprelvekin; osateron; paklitaksel; pamidroniska kiselina; peginterferon alfa-2b; pentosan polisulfat natrijum; pentostatin; picibanil; pirarubicin; zečije antitimocitno poliklonalno antitelo; polietilen glikol interferon alfa-2a; porfimer natrijum; raltitreks d; razburikaza; renijum Re 186 etidronat; RII retinamid; romurtid; samarijum (153 Sm) leksidronam; sargramostim; sizofuran; sobuzoksan; sonermin; strontium-89 hlorid; suramin; tasonermin; tazaroten; tegafur; temoporfin; tenipozid; tetrahlorodecaoksid; timalfasin; tirotropin alfa; toremifen; tositumomab-jodin 131; treosulfan; tretinoin; trilostan; trimetreksat; triptorelin; prirodni alfa faktor nekroze tumora; ubenimeks; vakcina kancera bešike; Maruyama vakcina; vakcina lizata melanoma; valrubicin; verteporfin; virulizin; zinostatin stimalamer; abareliks; AE 941 (Aeterna); ambamustin; antismisleni oligonukleotid; bcl-2 (Genta); APC 8015 (Dendreon); deksaminoglutetimid; diazikvon; EL 532 (Elan); EM 800 (Endorecherche); eniluracil; etanidazol; fenretinid; galocitabin; gastrin 17 imunogen; HLA-B7 genska terapija (Vical); faktor stimulisanja granulocitne kolonije makrofaga; histamin dihidrohlorid; ibritumomab tiuksetan; ilomastat; IM 862 (Cytran); interleukin-2; iproksifen; LDI 200 (Milkhaus); leridistim; lintuzumab; CA 125 monoklonalno antitelo (MAb) (Biomira); kancer MAb (Japan Pharmaceutical Development); HER-2 i Fc MAb (Medareks); idiotipski 105AD7 MAb (CRC Technology); idiotipski CEA MAb (Trileks); LYM-1-jodin 131 MAb (Techniclone); polimorfni epitelijelni mucin-itrijum 90 MAb (Antisoma); marimastat; menogaril; mitumomab; moteksafin gadolinijum; MX 6 (Galderma); nolatreks d; P 30 protein; pegvisomant; porfiromicin; prinomastat; RL 0903 (Shire); rubitecan; satraplatin; natrijum fenilacetat; sparfosic kiselina; SRL 172 (SR Pharma); SU 5416 (SUGEN); TA 077 (Tanabe); tetratiomolibdat; taliblastin; trombopoietin; tin etil etiopurpurin; tirapazamin; vakcina za kancer (Biomira); vakcina za melanom; vakcina melanom onkolizata; vakcina virusnog melanoma ćelijkog lizata; valspodarl; fluorouracil; 5-fluorouracil; pacitaksel; imatinib; altretamin; kladibrin; ciklofosfamin; dekarazin; irinotekan; mitosmicin; mitoksan; topotekan; vinorelbin; adriamicin; mitram; imikvimod; alemtuzmab; ekse mestan; bevacizumab; cetuksimab; azacitidin; klofarabin; decitabin; desatinib; deksrazoksan; docetaksel; epirubicin; oksaliplatin; erlotinib; raloksifen; fulvestrant; letrozol; gefitinib; gemtuzumab; trastuzumab; gefitinib; iksabepilon; lapatinib; lenalidomid; aminolevulinska kiselina; temozolomid; nelarabin; sorafenib; nilotinib; pegaspargaza; pemetreks d; rituksimab; dasatinib; talidomid; beksaroten; temsirolimus; bortezomib; karfilozmib; oprozomib; vorinostat; kapecitabin; zoledronska kiselina; anastrozol; sunitinib; aprepitant i nelarabin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0089] Dodatna farmaceutski aktivno jedinjenja/agensi koji se mogu upotrebiti u tretiranju kancera i koji se mogu upotrebiti u kombinaciji sa jednim ili više jedinjenja ovog pronalaska uključuju: epoetin alfa;

4

darbepoetin alfa; panitumumab; pegfilgrastim; palifermin; filgrastim; denosumab; ancestim; AMG 102; AMG 386; AMG 479; AMG 655; AMG 745; AMG 951; i AMG 706, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.

[0090] U određenim primerima izvođenja, a kombinacija koje su ovde obezbeđene je conjointly davanje sa a hemoterapeutski agens. Pogodni hemoterapeutski agensi mogu da uključe, prirodne proizvode kao što su vinka alkaloide (npr., vinblastin, vinkristin, i vinorelbin), paklitaksel, epidipodofilotoksine (npr., etopozid i tenipozid), antibiotike (npr., daktinomicin (aktinomicin D), daunorubicin, doksorubicin, i idarubicin), antraciklini, mitoksantron, bleomicini, plikamicin (mitramicin), mitomicin, enzimi (npr., L-asparaginaza koja sistemski metabolizuje L-asparagin i oduzima ćelije koje nemaju kapacitet da sintetišu njihov sopstven asparagin), antiagregacioni agensi, antiproliferativni/antimitotički alkinišući agensi kao što su azotni iperiti (npr., mehloretamin, ciklofosfamid i analozi, melfalan, i hlorambucil), etilenimini i metilmelamini (npr., heksaametilmelamin i tiotepa), CDK inhibitori (npr., seliciklib, UCN-01, P1446A-05, PD-0332991, dinaciklib, P27-00, AT-7519, RGB286638, i SCH727965), alkil sulfonati (npr., busulfan), nitrozourea (npr., karmustin (BCNU) i analozi, i streptozocin), trazeni-dakarbazinin (DTIC), antiproliferativni/antimitotični antimetaboliti kao što su analozi folne kiseline (npr., metotreksat), analozi pirimidina (npr., fluorouracil, floksuridin, i citarabin), analozi purina i povezani inhibitori (npr., merkaptopurin, tiogvanin, pentostatin i 2-hlorodeoksiadenozin), inhibitori aromataze (npr., anastrozol, eksemestan, i letrozol), i koordinirajući kompleksi platine (npr., cisplatin i karboplatin), prokarbazin, hidroksiurea, mitotan, aminoglutetimid, histon deacetilaza (HDAC) inhibitori (npr., trihostatin, natrijum butirat, apicidan, suberoil anilidna hidroamična kiselina, vorinostat, LBH 589, romidepsin, ACY-1215, i panobinostat), mTor inhibitori (npr., temsirolimus, everolimus, ridaforolimus, i sirolimus), KSP(Eg5) inhibitori (npr., Array 520), DNK vezujući agensi (npr., Zalypsis), PI3K delta inhibitor (npr., GS-1101 i TGR-1202), PI3K delta i gama inhibitor (npr., CAL-130), multi-kinaza inhibitor (npr., TG02 i sorafenib), hormoni (npr., estrogen) i hormonski agonisti kao što su leutinizirajući hormon oslobađajući hormonski (LHRH) agonisti (npr., goserelin, leuprolid i triptorelin), BAFF-neutrališuće antitelo (npr., LY2127399), IKK inhibitori, p38MAPK inhibitori, anti-IL-6 (npr., CNTO328), telomeraza inhibitori (npr., GRN 163L), aurora kinaza inhibitori (npr., MLN8237), ćelijska površinska monoklonalna antitela (npr., anti-CD38 (HUMAX-CD38), anti-CSl (npr., elotuzumab), HSP90 inhibitori (npr., 17 AAG i KOS 953), P13K/ Akt inhibitori (npr., perifozin), Akt inhibitor (npr., GSK-2141795), PKC inhibitori (npr., enzastaurin), FTIs (npr., Zarnestra™), anti-CD138 (npr., BT062), Torc1/2 specifični inhibitori kinaze (npr., INK128), inhibitor kinaze (npr., GS-1101), ER/UPR ciljajući agens (npr., MKC-3946), cFMS inhibitor (npr., ARRY-382), JAK1/2 inhibitor (npr., CYT387), PARP inhibitor (npr., olaparib i veliparib (ABT-888)), BCL-2 antagonist. Drugi hemoterapeutski agensi mogu da uključe mehloretamin, kamptotecin, ifosfamid, tamoksifen, raloksifen, gemcitabin, navelbin, sorafenib, ili bilo koja njihova analogna ili derivatna varijanta.

[0091] Jedinjenja ovog pronalaska takođe se mogu primeniti u kombinaciji sa zračnom terapijom, hormonskom terapijom, operacijom i imunoterapijom, koje terapije su dobro poznate stručnjaku iz ove oblasti.

[0092] U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kombinacija koja ovde obezbeđena daje se u konjukciji sa steroidom. Pogodni steroidi mogu da uključe, ali se ne ograničavaju na, 21-acetoksipregnenolon, alklometazon, algeston, amcinonid, beklometazon, betametazon, budesonid, hloroprednizon, clobetasol, clokortolon, cloprednol, korticosterone, kortizon, kortivazol, deflazakort, desonid, desoksimetazon, deksametazon, diflorazon, diflukortolon, difuprednat, enokzolon, fluazakort, flukloronid, flumetazon, flunizolid, fluocinolon acetonid, fluocinonid, fluokortin butil, fluokortolon, fluorometolon, fluperolon acetat, flupredniden acetat, fluprednizolon, flurandrenolid, flutikazon propionat, formokortal, halcinonid, halobetasol propionat, halometazon, hidrokortizon, loteprednol etabonat, mazipredon, medrizon, meprednizon, metilprednizolon, mometazon furoat, parametazon, prednikarbat, prednizolon, prednizolon 25-dietilaminoacetat, prednizolon natrijum fosfat, prednizon, prednival, predniliden, rimekzolon, tiksokortol, triamcinolon, triamcinolon acetonid, triamcinolon benetonid, triamcinolon heksacetonid, i njihove soli i/ili derivati. U određenom primeru izvođenja, jedinjenja ovog pronalaska takođe se mogu upotrebiti u kombinaciji sa dodatnim farmaceutski aktivnim agensima koji tretiraju mučninu. Primeri agenasa koji se mogu primeniti za tretiranje mučnine uključuju: dronabinol; granisetron; metoklopramid; ondansetron; i prohlorperazin; ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0093] Kako se jedan aspekat ovog pronalaska odnosi na tretiranje bolesti/stanja kombinacijom farmaceutski aktivnih jedinjenja koja se mogu davati odvojeno, ovaj pronalazak dalje se odnosi na kombinovanje odvojenih farmaceutskih kombinacija u obliku kompleta. Taj komplet obuhvata dve odvojene farmaceutske kombinacije: jedinjenje ovog pronalaska, i drugo farmaceutsko jedinjenje. Taj komplet obuhvata kontejner koji sadrži odvojene kombinacije kao što je podeljena bočica ili podeljeno pakovanje od folije. Dodatni primeri kontejnera uključuju špriceve, kutijice, i kesice. U nekim primerima izvođenja, taj komplet obuhvata smernice za upotrebu ovih odvojenih komponenti. Taj komplet je naročito poželjan kada se odvojene komponente poželjno daju u različitim doznim oblicima (npr., oralno i parenteralno), daju u različitim doznim intervalima, ili kada je poželjno titriranje pojedinačnih komponenti od strane medicinskog radnika.

[0094] Jedinjenja ovog pronalaska mogu se davati kao farmaceutski prihvatljive soli, estri, amidi ili prolekovi. Pojam "soli" odnosi se na neorganske i organske soli jedinjenja ovog pronalaska. Te soli mogu se pripremiti u situ tokom konačnog izolovanja i prečišćavanje jedinjenja, ili odvojenim reagovanjem prečišćenog jedinjenja u njegovom slobodno baznom ili kiselom obliku sa pogodnom organskom ili neorganskom bazom ili kiselinom i izolovanjem tako formirane soli. Reprezentativne soli uključuju hidrobromid, hidrohlorid, sulfat, bisulfat, nitrat, acetat, oksalat, palmitiat, stearat, laurat, borat, benzoat, laktat, fosfat, tosilat, citrat, maleat, fumarat, sukcinat, tartrat, naftilat, mezilat, glukoheptonat, laktobionat, i laurilsulfonat soli, i slično. Te soli mogu da uključe katjone na bazi alkalnih i zemno alkalnih metala, kao što je natrijum, litijum, kalijum, kalcijum, magnezijum, i slično, kao i ne-toksične amonijum, quaternarne amonijum, i amin katjone koji uključuju, ali se na ograničavaju na, amonijum, tetrametilamonijum, tetraetilamonijum, metilamin, dimetilamin, trimetilamin, trietilamin, etilamin, i slično. Videti, na primer, S. M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts," J Pharm Sci, 66: 1-19 (1977).

[0095] Pojam "prolek" označava jedinjenja koja su transformisana u vivo da bi dala jedinjenje ovog pronalaska. Ta transformacija može se odviti raznim mehanizmima, kao što je putem hidrolize u krvi. Rasprava o upotrebi prolekova obezbeđena je od strane T. Higuchi i W. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol.14 of the A.C.S. Symposium Series, i u Bioreversible Carriers u Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association i Pergamon Press, 1987.

[0096] Radi ilustracije, ako jedinjenje ovog pronalaska sadrži funkcionalnu grupu karboksilne kiseline, prolek može da obuhvata estar formiran zamenom atoma vodonika kiselinske grupe grupom kao što je (C1-C8alkil, (C2-Cl2)alkanoiloksimetil, 1-(alkanoiloksi)etil sa od 4 do 9 atoma ugljenika, 1-metil-1-(alkanoiloksi)etil sa od 5 do 10 atoma ugljenika, alkoksikarboniloksimetil sa od 3 do 6 atoma ugljenika, 1-(alkoksikarboniloksi)etil sa od 4 do 7 atoma ugljenika, 1-metil-1-(alkoksikarboniloksi)etil sa od 5 do 8 atoma ugljenika, N-(alkoksikarbonil)aminometil sa od 3 do 9 atoma ugljenika, 1-(N-(alkoksikarbonil)aminometil sa od 4 do 10 atoma ugljenika, 3-fthalidil, 4-krotonolaktonil, gamabutirolakton-4-il, di-N,N-(C1-C2)alkilamino(C2-C3)alkil (kao što je β-dimetilaminoetil), karbamoil-(C1-C2)alkil, N,N-di(C1-C2)alkilkarbamoil-(C1-C2)alkil i piperidino-, pirolidino- ili morfolino(C2-3)alkil.

[0097] Na sličan način, ako jedinjenje ovog pronalaska obuhvata alkoholnu funkcionalnu grupu, prolek se može formirati zamenom atoma vodonika alkoholne grupe grupom kao što je (C1-C6)alkanoiloksimetil, 1-((C1-C6)alkanoiloksi)etil, 1-metil-1-((C1-C6)alkanoiloksi)etil, (C1-C6)alkoksikarboniloksimetil, N-(C1-C6)alkoksikarbonilaminometil, sukcinoil, (C1-C6)alkanoil, α-amino(C1-C4)alkanoil, arilacil i α-aminoacil, ili α-aminoacil-α-aminoacil, gde je svaka α-aminoacil grupa nezavisno odabrana od prirodnih L-amino kiselina, -P(O)(OH)2, -P(O)(O(C1-C6)alkil)2ili glikozila (radikal koji je rezultat uklanjanj hidroksil grupe hemiacetalnog oblika karbohidrata).

[0098] Jedinjenja ovog pronalaska mogu da sadrže asimetrične ili hiralne centre, i prema tome, postoje u raznim stereoziomernim oblicima. Predviđa se da svi stereoziomerni oblici jedinjenja kao i njihove mešavine, koje uključuju racemske mešavine, obrazuju deo ovog pronalaska. Dodatno, ovaj pronalazak predviđa sve geometrijske i pozicione izomere. Na primer, ako jedinjenje sadrži dvostruku vezu, predviđaju se i cis i trans oblici (označeni kao Z i E, respektivno), kao i njihove mešavine.

[0099] Mešavine stereoziomera, kao što su diastereomerne mešavine, mogu se odvojiti u njihove pojedinačne stereohemijske komponente na bazi njihovih fizičkih hemijskih razlika poznatim postupcima kao što su hromatografija i/ili frakciona kristalizacija. Enantiomeri se takođe mogu razdvojiti konvertovanjem enantiomernih mešavina u diasteromernu mešavinu reagovanjem sa pogodnim optički aktivnim jedinjenjem (npr., alkohol), odvajajući diastereomere i konvertovanjem (npr., hidrolizovanjem) pojedinačnih diastereomere u odgovarajuće čiste enantiomere.

[0100] Jedinjenja ovog pronalaska mogu da postoje u nesolvatiranim kao i solvatiranim oblicima sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračima kao što je voda (hidrat), etanol, i slično. Ovaj pronalazak predviđa i obuhvata i solvatirane i nesolvatirane oblike.

[0101] Takođe je moguće da jedinjenja ovog pronalaska mogu da postoje u različitim tatomernim oblicima. Svi tautomeri jedinjenja ovog pronalaska su predviđeni. Stručnjak iz ove oblasti prepoznaje da nazivi jedinjenja i strukture koje su ovde sadržane mogu biti bazirani na određenim tautomernim jedinjenjima. Dok se naziv ili struktura za samo određeni tautomer mogu koristiti, predviđeno je da su svi tautomeri obuhvaćeni ovim pronalaskom, ukoliko nije drugačije navedeno.

[0102] Takođe je predviđeno da ovaj pronalazak obuhvata jedinjenja koja su sintetizovana u vitro upotrebom laboratorijskih tehnika, kao što su one dobro poznate sintetičkim hemičarima; ili sintetizovana upotrebom u vivo tehnika, kao što je putem metabolizma, fermentacije, digestije, i slično. Takođe se predviđa da jedinjenja ovog pronalaska može biti sintetizovanoa upotrebom kombinacije u vitro i u vivo tehnika.

[0103] Jedinjenja ovog pronalaska mogu da postoje u raznim čvrstim stanjima koja uključuju kristalna stanja i amorfna stanja. Različita kristalna stanja, koja se takođe nazivaju polimorfi, i amorfna stanja ovih jedinjenja, predviđena su kao deo ovog pronalaska.

PRIMERI

[0104] Primeri koji slede prikazuju specifične primere izvođenje ovog pronalaska. Ovi primeri namenjeni su da budu reprezentativni, a bez namere da ograniče obim patentnih zahteva ni na koji način.

[0105] Ovde se mogu koristiti sledeće skraćenice:

∼ oko

Ac2O sirćetni anhidrid

AcOH sirćetna kiselina

Al2O3aluminijum oksid

Calcd Izračunato

CO2karbon dioksid

CSA 10-kamforsulfonska kiselina

DBU 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en

DCE Dihloroetan

DCM Dihlorometan

DEA Dietilamin

Dess-Martin perjodinan; 1,1,1-triacetoksi-1,1-dihidro-1,2-benziodoksol-3-(1H)-on

DIEA ili DIPEA Diizopropiletilamin

DMAP 4-dimetilaminopiridin

DMF N,N-dimetilformamid

DMSO dimetil sulfoksid

EDC N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid

ee ili e.e. enantiomerni višak

eq Ekvivalent

ESI ili ES elektrosprejna jonizacija

Et Etil

Et2O dietil etar

EtOAc etil acetat

Et3N trietilamin

EtOH etil alkohol

G gram(i)

GC gasovita hromatografija

h sat(i)

<1>H NMR protonska nuklearna magnetna rezonancijska spektroskopija

H2gas vodonika

H2O Voda

H2SO4sumporna kiselina 1-[Bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-HATU triazolo[4,5-b]piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat HCl hlorovodnična kiselina

Heks heksan(i)

HPLC tečna hromatografija visokih performansi

IP intraperitonealno

IPA izopropil alkohol

IPAc izopropil acetat

K2CO3kalijum karbonat

K3PO4kalijum fosfat

KF Karl Fischer titriranje

KHMDS kalijum heksametildisilazid

KOAc kalijum acetat

KOH kalijum hidroksid

L litar(i)

LAH litijum aluminijum hidrid

LCMS, LC-MS ili LC/MS tečna hromatografija masena spektrometrija LiHMDS litijum heksametildisilazid

LiOH litijum hidroksid

M molarni (mol L<-1>)

Me metil

MeCN acetonitril

MeI jodometan

MeOH metil alkohol

MeTHF metiltetrahidrofuran

mg miligram(i)

MgSO4magnezijum sulfat

min minut(i)

mL mililitar(i)

MS masena spektrometrija

MSA metansulfonska kiselina

MsCl metansulfonil hlorid

MTBE metil tert-butil etar

m/z odnos masa-prema-naelektrisanju

N Normalnost (Eq/L)

4

N2gas azota

NaCl natrijum hlorid

Na2CO3natrijum karbonat

NaHCO3natrijum bikarbonat

NaH2PO4natrijum dihidrogen fosfat

NaNO2natrijum nitrit

NaOH natrijum hidroksid

NaOtBu natrijum tert-butoksid

Na2SO4natrijum sulfat

Na2S2O3natrijum tiosulfat

NH3amonijak, azan

NH4Cl amonijum hlorid

NH4OH amonijum hidroksid

NMP 1-metil-2-pirolidinon

NMR nuklearna magnetno rezonantna spektroskopija

PO oralno

POCl3fosforil hlorid

PhMe toluen

ppm milionitih delova

QD jednom dnevno

QNMR kvantitativna NMR

RBF fiola okruglog dna

RT ili rt ili r.t. sobna temperatura

sat. ili sat'd ili satd Zasićen

SFC superkritična fluidna hromatografija

SiO2silikon dioksid, silika

SOCl2tionil hlorid

TEMPO (2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1 -il)oksidanil

TFA triflourosirćetna kiselina

THF Tetrahidrofuran

TLC tankoslojna hromatografija

TsOH toluen sulfonska kiselina

v/v zapreminski

[0106] Napominje se da je procenat (%) kada se koristi u pogledu tečnosti, predstavlja zapreminski procenat u odnosu na rastvor. Kada se koristi sa čvrstim materijama, predstavlja procenat u odnosu na čvrstu kombinaciju.

BIOLOŠKI OGLEDI

Ćelijski slobodan Mcl-1 :Bim afinitetni ogled (Mcl-1 HTRF)

[0107] Inhibicija Mcl-1/Bim interakcije izmerena je upotrebom ogleda transfera energije rezonancije u funkciji vremena (TR-FRET). Rekombinantni humani Mcl-1 (C-terminalno 6xHis tagovan Mcl-1 koji sadrži ostatke 171-327) generisan je u Amgen Inc (Thousand Oaks, CA). Biotinilisani peptid izveden iz humanog Bim (ostaci 51-76) kupljen je od CPC Scientific (San Jose, CA). TR-FRET ogled sproveden je u beloj ploči sa 384-bazenčića OptiPlate™ (PerkinElmer, Waltham, MA) u ukupnoj zapremini od 40 µL. Reakciona mešavina sadržavalaje 0.1 nM Mcl-1(171-327), 0.05 nM biotin-Bim(51-76), 0.05 nM LANCE® Eu-W1024 Anti-6xHis (PerkinElmer), 0.072 nM Streptavidin-XLent (Cisbio, Bedford, MA), i serijski razblažena test jedinjenja u vezujućem puferu od 20 mM Hepes, pH 7.5, 150 mM NaCl, 0.016 mM Brij®35, i 1 mM ditiotreitol. Test jedinjenja su pred-inkubisana sa Mcl-1(171-327) i biotin-Bim (51-76) 60 min pre dodavanja mešavine za detekciju (LANCE® Eu-W1024 Anti-6xHis i Streptavidin-XLent). Reakcine ploče dalje su inkubisane preko noći , a zatim očitane na Envision® čitaču sa više načina rada (PerkinElmer). Signali fluorescencije izmereni su na 620 nm (40-nm pojasne širine) i 665 nm (7.5-nm pojasne širine) sa a 60 µs odlaganjem posle ekscitacije na 320 nm (75-nm pojasne širine). Signalni odnos na 665/620 nm odgovara Mcl-1/Bim interakcijama i korišćen je za sve analize podataka. IC50vrednosti test jedinjenja određena su iz dupliciranih podataka analizom kompeticionih krivi upotrebom četvoro-parametarnog sigmoidalnog modela u GraphPad Prism (GraphPad Software, San Diego, CA) ili u Genedata Screener® (Genedata, Basel, Switzerland).

Ogled baziran na ćelijama (odvojena Luciferaza)

[0108] Ogled izvođenja odvajanja luciferaza razvijen je radi određivanja inhibicije Mcl-1/Bak proteinprotein interakcija u ćelijama. pcDNA-Luc(1-298)-BAK ekspresioni vektor koji kodira amino kiseline (1-298) luciferaze vilinog konjica fuzionisane sa humanim Bak generisanim duž pcDNK-Luc(395-550)-Mcl-1 ekspresionog vektora koji kodira amino kiseline (395-550) luciferaze vilinog konjica fuzionisane sa humanim Mcl-1 genom.293 M ćelije humanog embrionskog bubrega (HEK) tranzietno su transfektovane sa pcDNK-Luc(1-298)-BAK i pcDNK-Luc(395-550)-Mcl-1 pri odnosu DNK mešavine 3:1. Tranzijetna transfekcija izvedena je upotrebom Lipofectamin® LTX/Plus™ reagensa (Life Technologies, Grand Island, NY).24 h po transfekciji, ćelije su sakupljene upotrebom ne-enzimski baziranog ćelijskog disocijacionog pufera StemPro® Accutase® (Life Technologies), i resuspendovane u oslobođenoj od seruma Opti-MEM® (Life Technologies). Ćelije su zatim zasejane u ogledne ploče sa serijskim razblaženim test jedinjenjima u 0.3% DMSO pri gustini od 5000 ćelije/bazenčić. Ćelije su zatim inkubisane tokom 4 h na 37°C u inkubatoru za uzgajanje ćelija opremljen dopunjen sa 5% CO2. Test ploče ekvilibrisane su na sobnoj temperaturi tokom 30 min pre dodavanja 30 µL Steady-Glo® Luciferaza oglednog reagensa (Promega, Madison, WI) u svaki test bazenčić. Luminescencija je određena upotrebom EnVision® Čitača višestruko obeleženih ploča 25 min po dodavanju detekcionog reagensa. IC50vrednosti su zatim izračunate sa Xlfit upotrebom logističkog 4-parametarnog modela poklapanja u GraphPad Prism (GraphPad Software, San Diego, CA) ili u Genedata Screener® (Genedata, Basel, Switzerland).

Ogled ćelijske vijabilnosti (OPM-210 FBS)

[0109] Ćelijska linija humanog multiple mijeloma, OPM-2, uzgajana je u kopletnoj podlozi za rast koja sadrži RPMI 1640 i 10% fetalni goveđi serum (FBS). Ćelije su zasejane u ploče sa 384-bazenčića pri gustini od 3000 ćelije/bazenčić u kompletnoj podlozi za rast koja sadrži 10% FBS, i inkubisane tokom 16 h sa serijski razblaženim test jedinjenjima u na 37°C inkubatoru sa 5% CO2. Ćelijska vijabilnost ispitanaje upotrebom CellTiter-Glo® ogleda (Promega, Madison, WI) u skaldu sa uputstvima proizvođača.

Luminescencija je određena upotrebom EnVision® Čitača višestruko obeleženih ploča 25 min po dodavanju detekcionog reagensa. IC50vrednosti su zatim izračunate sa Xlfit upotrebom logističkog 4-parametarnog modela poklapanja u GraphPad Prism (GraphPad Software, San Diego, CA) ili u Genedata Screener® (Genedata, Basel, Switzerland).

[0110] Rezultati za jedinjenja testirana u ovim biološkim ogledima dati su u nastavku.

4

4

OPM2 multiple mijelom ksenograft model

[0111] Ženke golih atimičnih (Harlan, Inc., Indianapolis, IN) miševa inokulisane su subkutano sa 5 miliona OPM-2 ćelija. Fig.1, 2 i 3 prikazuju rezultate tretmana test jedinjenjima u različitim koncentracijama, u poređenju sa nosačem, definiasn kao ekscipijens(i) bez nekog aktivnog jedinjenja, a na Fig.2 dodatno u poređenju sa bortezomib ™, jedinjenje koje je komercijalno dostupno od Millennium Pharmaceuticals, Inc. (Cambride, MA). Tretman je započet 14 dana kasnije kada su tumori dostigli prosečnu zapreminu od 100-200 mm<3>i nstavljeno je tokom dodatnih 10 dana. Zapremine tumora i telesne mase beležene su upotrebom elektronskih pomičnih merila i analitičke vage, respektivno, dva puta nedeljno. Statistička analiza izvedena je upotrebom Repeated Measures ANOVA (RMANOVA) praćeno Dunnett's post-hoc analizom.

[0112] Sledeće šeme sinteze generalno pokazuju kako se pripremaju intermedijeri i jedinjenja ovog pronalaska.

OPŠTE ŠEME SINTEZE

Opšti postupak 1

4

[0114] Intermedijeri III mogu se pripremiti upotrebom standardne hemijske tehnike. Na primer, ciklobutan karbaldehid II kombinovan je sa oksazepinom I u pogodnom rastvaraču na temperaturi ispod RT, poželjno oko 0°C. Natrijum cijanoborohidrid je dodat, i mešavina je dodata NaOH rastvoru, da bi se obezbedilo jedinjenje III.

Opšti postupak 2

[0116] Intermedijeri IV mogu se pripremiti upotrebom standardne hemije nalik peptidima. Na primer, DMAP je dodat karboksilnoj kiselini Intermedijera AA i Intermedijera EE u pogodnom rastvaraču na temperaturi ispod RT, poželjno oko 0°C, praćeno dodavanjem EDC hidrohlorida. Mešavina je zagrejana na ambijentalnoj temperaturi, da bi se obezbedio karboksamid IV.

Opšti postupak 3

[0117]

[0118] Primer A intermedijeri mogu se pripremiti upotrebom standardne hemijske tehnike. Na primer, karboksamid IV kombinovan je sa DCM praćeno dodavanjem Hoveyda-Grubbs II. Mešavina je ohlađena na ambijentalnoj temperaturi da bi se obezbedio Primer A.

4

Opšti postupak 4

[0120] Intermedijeri V mogu se pripremiti upotrebom standardne hemijske tehnike. Na primer, Intermedijer AA kombinovan je sa Intermedijerom EE u pogodnom rastvaraču praćeno dodavanjem Hoveyda-Grubbs II da bi se obezbedilo jedinjenje V.

Opšti postupak 5

[0121]

[0122] Primer A intermedijeri mogu se pripremiti upotrebom standardne hemijske tehnike. Na primer, N,N-dimetilpiridin-4-amin kombinovan je sa jedinjenjem VI u pogodnom rastvaraču na temperaturi ispod RT, poželjno oko 0°C, praćeno dodavanjem N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorida. Rezultujuća mešavina zagrejana je na ambijentalnoj temperaturi da bi se obezbedio Primer A.

Opšti postupak 6

[0123]

[0124] Primer B intermedijeri mogu se pripremiti upotrebom standardne hemijske tehnike. Na primer,

4

natrijum hidrid je dodat rastvoru Primera A na temperaturi ispod RT, poželjno oko 0°C, praćeno dodavanjem MeI. Rezultujuća mešavina zagrejana je na ambijentalnoj temperaturi da bi se obezbedio Primer B.

Opšti postupak 7

[0126] Intermedijeri kao što je Primer C mogu se pripremiti upotrebom standardne hemijske tehnike. Na primer, Primer A i/ili B i/ili VII i platina (IV) oksid kombinovani su u pogodnom rastvaraču na ambijentalnoj temperaturi da bi se obezbedio Primer C.

[0127] Jedinjenja ovog pronalaska generalno mogu se pripremiti kombinovanjem i daljom razgradnjom sintetičkih intermedijera generisanih od komercijalno dostupnih početnih materijala. Siteze ovih intermedijera navedene su u nastavku, a dalje navođenje može se naći u obezbeđenim specifičnim primerima.

Intermedijer AA11A

(S)-6'-HLORO-5 -(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIALIL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0128]

4

FAZA 1: (R)-6-HLORO-3,4-DIHIDRO-2H-SPIRO[NAFTALEN-1,2'-OKSIRAN] i (R)-6-HLORO-3,4-DIHIDRO-2H-SPIRO[NAFTALEN-1,2'-OKSIRAN]

[0130] 2L 4-grla-RBF napunjena je sa 6-hloro-3,4-dihidro-1(2H)-naftalenonom (123 g, 681 mmol), trimetilsulfonijum jodidom (143 g, 701 mmol), i DMSO (1100 mL). KOH (76 g, 1362 mmol) (peleti) je dodat. Suspenzija je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 2 dana, psle čega sirova<1>H NMR pokazuje da nema preostalih početnih materijala. Rastvor se sipan u 800 g izmrvljenog leda, isprana sa MTBE (200 mL), i dodatni deo MTBE (700 mL) je dodat. Rezultujuća mešavina je mešana tokom 5 min i posle podele, donji vodeni sloj ekstrahovan je sa MTBE dva puta (500 mL, 300 mL), i kombinovan sa glavnim MTBE ekstrakt. Kombinovani organski tok opran je fiziološkim rastvorom (2X600 mL) i 330 g Al2O3(neutral) je dodato. Rezultujuća suspenzija je mešana tokom 5 min na 22°C, filtrirana, i oprana MTBE (400 mL). Filtrat je koncetrovan da bi se dobio proizvod kao crveno viskozno ulje (125 g, 94%).

FAZA 2: (S)-6-HLORO-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-KARBALDEHID i (R)-6-HLORO-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-KARBALDEHID

[0132] 3L 3-grla- RBF napunjena je racemskim 6-hloro-3,4-dihidro-2H-spiro[naftalen-1,2'-oksiranom] (160 g, 822 mmol) i THF (1760 mL). Po hlađenju serije na -8°C kupatilu suvi led/IPA , boron trifluorid dietil etarat (5.07 mL, 41.1 mmol) je dodavan tokom 3 min. Egzoterm trenutno podiže temp serije na 10°C. Serija je mešana na -5 do 0°C tokom 5 min, i LC/MS analiza uzorka (ugašena u hladnom NaHCO3rastvoru) pokazuje potpunu konverziju. Reakcija je ugašena dodavanjem sat. NaHCO3(300 mL) na -5°C praćeno MTBE (400 mL) i mešavina je transferovana u separacioni levak i isprana sa MTBE (240 mL). Posle podele, vodeni sloj je odbačen zajedno sa nekom belom čvrstom materijom (verovatno borna kiselina ili boraks). Organski sloj opran je fiziološkim rastvorom (350 mL) i koncetrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo crveno ulje. Ovaj sirovi materijal upotrebljen je direktno u Fazi 4.

FAZA 3: (6-HLORO-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1,1-DIIL)DIMETANOL

[0134] Racemski 6-hloro-1,2,3,4-tetrahidro-1-naftalenkarbaldehid sipan je u 3L 3-grlu-RBF i ispran dietilen glikolom (1000 mL). Formaldehid (37% rastvor u H2O; 652 mL, 8757 mmol) je dodat i rezultujuća biofazna emulzija je ohlađena na 5°C kupatilu suvi led/IPA . KOH (45% vodene rastvor, 652 mL, 11.9 mol) je dodavan tokom ∼30 min, održavajući temperaturu ispod 20°C. Po završetku dodavanja, serija (20°C) je polako zagrejana na 45°C (Oprez: eksotermna reakcija) i ostavljena tokom 1 h. HPLC pokazuje potpunu konverziju. Nešto viskoznog nerastvorljivog katrana je formirano, koji je uklonjen pre vodene obrade. U tu seriju je dodat fiziološki rastvor (500 mL), a mešavina je ekstrahovana sa DCM dok sadržaj proizvoda u vodenoj fazi nije bio manji od 5%. Kombinovani DCM ekstrakt je koncentrovan do 750 mL kao crveno ulje, opran H2O (500 mL), i proizvod počinje da se kristališe. Po razdvajanju, bistar gornji vodeni sloj je odbačen i donji sloj je mešan u kupatilu led/ H2O tokom 30 min, filtriran, i opran DCM (∼100 mL) i H2O (100 mL). Proizvod je osušen pod suvi vazduh/vakuum da bi se dobio prvi prinos (113 g, 498 mmol, 57 % prinos). DCM sloj rezultujuće matične tečnosti odvojen je i koncentrovan do 200-300 g (KF = 0.5%), zasejan, i mešan u led/H2O kupatilu tokom 30 min. Proizvod je filtriran, opran DCM (50 mL), i osušen u suvom vazduhu/vakuumu da bi se dobio drugi prinos (14.3 g, 63.1 mmol, 7 % prinos) za kombinovani ukupan prinos 6-hloro-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1,1-diil)dimetanola od 127 g (64%).

FAZA 4: (S)-(6-HLORO-1-(HIDROKSIMETIL)-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-IL)METIL 4-BROMOBENZOAT

[0135]

[0136] Rastvoru 2,6-bis((R)-5,5-dibutil-4-fenil-4,5-dihidrooksazol-2-il)piridina (R,R-Kang Katalizator) (1.57 g, 2.64 mmol) u suvom DCM (450 mL), bakar(II) hlorid (0.355 g, 2.64 mmol) je dodat i rezultujući u zeleno obojen rastvor je mešan na rt tokom 1 h. Ovaj rastvor je dodat putem kanile rastvoru (6-hloro-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1,1-diil)dimetanola (30 g, 132.73 mmol) u suvom DCM (800 mL). Rezultujuća mešavina je ohlađena na -78°C i primećen je u svetlo zeleno obojen talog. Rastvor 4-bromobenzoil hlorida (34.77 g, 158.79 mmol) u DCM (500 mL) je zatim polako dodat, praćeno ukapavanjem N-etil-N-izopropilpropan-2-amina (20 g, 154 mmol). Rezultujuća reakciona mešavina je mešana na -78°C tokom 3

1

h, zatim je ugašena sa pH 3 fosfatnim puferom (1 L) i zagrejana je na ambijentalnoj temperaturi uz snažno mešanje. Mešavina je zatim razblažena sa DCM (2 L) i slojevi su odvojeni. Organska faza je oprana pH 3 puferom (1 L), sat. NaHCO3(1 L), i fiziološkim rastvorom (2 L), a zatim je osušena preko Na2SO4, filtrirana, i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom na koloni preko SiO2gel (100-200 sito, 80% DCM u Heks) radi dobijanja čistog (S)-(6-hloro-1-(hidroksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 4-bromobenzoata (45 g, 84 %; e.r = 91.4:8.6). ChiralCel® OD-H (250 mm x 4.6 mm); Mobilna faza: n-Heksan:IPA: 90:10; Vreme rada: 20 min; brzina protoka: 1mL/min; priprema uzoraka: IPA. Vreme zadržavanja (najveći pik)- 9.32 min; Vreme zadržavanja (najmanji pik)-11.46 min).

FAZA 5: (R)-(6-HLORO-1-FORMIL-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-IL)METIL 4-BROMOBENZOAT [0137]

[0138] U umešan rastvor (S)-(6-hloro-1-(hidroksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 4-bromobenzoata (100 g, 244.5 mmol) u DCM (2.5 L), Dess-Martin perjodinan (121.4 g, 293.3 mmol) je dodat na 10°C. Kupatilo za rashlađivanje je uklonjeno posle dodavanja i reakciona mešavina je mešana tokom 30 min na ambijentalnoj temperaturi. H2O (9 mL) je zatim dodata i rezultujuća biofazna mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 30 min. Reakciona mešavina je ohlađena na 0°C i ugašena sa 2 L 1:1 mešavine 10% Na2S2O3/sat. NaHCO3rastvora. Reakciona mešavina je mešana dalje na ambijentalnoj temperaturi tokom 10 min, zatim su slojevi odvojeni i vodeni sloj ekstrahovan je sa EtOAc (2 x 1.5 L). Kombinovani organski sloj je opran 1 L 10% Na2S2O3/sat. NaHCO3rastvora i 1 L fiziološkog rastvora, zatim je osušen preko Na2SO4, filtriran, i koncetrovan. Prečišćavanje ostatka hromatografijom na koloni preko SiO2gela (100-200 sito, 5% EtOAc/Heks) daje (R)-(6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 4-bromobenzoat (80 g, 81%).

[0139] Enantiomerna čistoća naslovljenog jedinjenja može se poboljšati sledećim postupkom: (R)-(6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 4-bromobenzoat (190 g) je dodat u toluenu (950 mL) i zagrejan na 50°C do potpunog rastvaranja. Homogeni rastvor je ohlađen na ambijentalnoj temperaturi i zasejan sa racemskim jedinjenjem. Rastvor je ohlađen na - 25°C i ostavljen preko noći. Matična tečnost je zatim odsuta i koncentrovana radi obezbeđivanja 160 g enantiomerno obogaćenog (R)-(6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 4-bromobenzoata (94% ee kako je određeno hiralnom HPLC). Hiralni HPLC uslovi: Kolona: ChiralCel® OD-H (250 mm x 4.6 mm); Mobilna faza: n-Heksan:IPA:

2

90:10. Vreme rada: 20 min. Brzina protoka: 1mL/min. Priprema uzoraka: etanol. Vreme zadržavanja (najveći pik): 8.488 min (96.97%); Vreme zadržavanja (najmanji pik): 9.592 min (3.03%).

FAZA 6: (R)-(6-HLORO-1-(DIMETOKSIMETIL)-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-IL)METANOL [0140]

[0141] Rastvoru (R)-(6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 4-bromobenzoata (75 g, 183.8 mmol) u anhidrovanom MeOH (1 L), p-TsOH (1 g, 9.2 mmol) i trimetil ortoformau (58.4 mL, 551 mmol) dodati su i reakciona mešavina je refluksovana dok početni materijal nije potpuno potrošen (∼ 4 h). Reakciona masa je koncentrovana do 50% zapremina i razblažena sa THF (1L) i 1N NaOH (1 L, 1 mol). Rezultujuća reakciona mešavina je mešana na 40°C preko noći i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen sa EtOAc (1.5 L). Vodeni sloj odvojen je i estrahovan sa EtOAc (2 x 500 mL) i kombinovani organski slojevi su oprani u NaOH (1 L) i fiziološkim rastvorom (1 L), osušeni preko Na2SO4i koncetrovani pod sniženim pritiskom. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom na koloni preko 100-200 veličine sita SiO2gela (10% EtOAc/Heks) da bi se dobio čist (R)-(6-hloro-1-(dimetoksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metanol kao svetlo braon gusto ulje (44 g, 89%).

FAZA 7: TERT-BUTIL-4-FLUORO-3-NITROBENZOAT

[0142]

[0143] Rastvoru 4-fluoro-3-nitrobenzojeva kiselina (100 g, 540.2 mmol) u t-butanolu (2.5 L), DMAP (13.18 g, 108.04 mmol) i di tert-butil dikarbonat (248 mL, 1080.4 mmol) dodati su i reakciona mešavina je zagrejana na 40°C preko noći. Po završetku, reakciona mešavina je razblažena sa H2O i vodena faza ekstrahovana je sa EtOAc (3 x 1.5 L). Kombinovani organski sloj je opran dalje sa H2O (1x 1L), fiziološkim rastvorom (1x 1L), i osušen preko Na2SO4. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ovaj sirovi materijal dobijen na ovaj način prečišćen je hromatografijom na koloni (100-200 veličine sita SiO2gel, eluiranjem sa gradijentom 100% Heks do 5% EtOAc u Heks) dajući čist tert-butil-4-fluoro-3-nitrobenzoat (70 g, 54%) kao svetlo žuta čvrsta materija.

FAZA 8: (R)-TERT-BUTIL 4-((6-HLORO-1-(DIMETOKSIMETIL)-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-IL)METOKSI)-3-NITROBENZOAT

[0144]

[0145] Rastvor (R)-(6-hloro-1-(dimetoksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metanola (70 g, 259.2 mmol) u suvom THF (3.5 L) je ohlađen na 0°C i LiHMDS (1 M u THF; 363 mL, 363 mmol) je dodat ukapavanjem. Posle 5 min, rastvor tert-butil 4-fluoro-3-nitrobenzoata (74.9 g, 311 mmol) u THF (500 mL) je dodat ukapavanjem putem levka za ukapavanje i rezultujuća mešavina je zagrejana na ambijentalnoj temperaturi. Po završetku (∼1 h), mešavina je ohlađena na 0°C, ugašena sa sat. NH4Cl rastvorom (1 L) i estrahovana sa EtOAc (3 x 1 L). Kombinovani organski slojevi su oprani NH4Cl (1 L) i fiziološkim rastvorom (1 L), osušeni preko Na2SO4i koncetrovani pod sniženim pritiskom. Ovaj sirovi materijal dobijen na ovaj način prečišćen je hromatografijom na koloni upotrebom 100-200 veličine sita SiO2gel (5% EtOAc/heksan) radi dobijanja (R)-tert-butil 4-((6-hloro-1-(dimetoksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzoata u obliku žutog gustog ulja (110 g, 87% prinos).

FAZA 9A: (R)-4-((6-HLORO-1-FORMIL-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-IL)METOKSI)-3-NITROBENZOJEVA KISELINA

[0146]

[0147] Rastvoru (R)-tert-butil 4-((6-hloro-1-(dimetoksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzoata (35 g, 71.25 mmol) u MeCN (1 L), erbijum triflat (4.3 g, 7.1 mmol) i H2O (13 mL) dodati su. Rezultujuća mešavina je zagrejana na 80°C preko noći. Rastvarač je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u Et2O (1.5 L) i opran u HCl (500 mL) i fiziološkim rastvorom (500 mL). Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, i koncentrovan radi obezbeđivanja (R)-4-((6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzojeve kiseline (30 g), koja je upotrebljena bez daljeg prečišćavanja.

[0148] Alternativno, (R)-4-((6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzojeva

4

kiselina može biti pripremljena od (6-hloro-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1,1-diil)dimetanola (Faza 4) kako sledi:

250 mL 3-grla-RBF napunjena je sa bakar (II) hloridom (0.095 g, 0.02 eq), 2,6-bis((R)-5,5-dibutil-4-fenil-4,5-dihidrooksazol-2-il)piridinom (0.42 g, 0.02 eq) i THF (28.5 g, 4V). Posle inercije sa N2, serija je mešana na 20°C tokom 0.5 h. U homogeni zeleni rastvor dodat je (6-hloro-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1,1-diil)dimetanol (8.0 g, 1.00 eq) praćeno THF (14.2 g, 2V) i 4-metilmorfolinom (3.75 g, 1.05 eq). Reakciona mešavina je ohlađena na -20°C, i rastvor 1-naptoil hlorida (7.06 g, 1.05 eq) u THF (21.3 g, 3 V) je dodat u tu seriju preko 0.5 h održavajući temperaturu ispod -15°C. Posle ostarivanja na -20°C tokom 20 h, alikvot reakcione suspenzije uzorkovana je i ispitana putem HPLC. Ta suspenzija je direktno filtrirana kroz od fritovanog stakla levak održavajući temperaturu na -20°C. Filter kolač je opran sa dve porcije hladnog (<-10°C) THF (2 x 14.2 g, 2V) propušten kroz reakcioni sud. Filter kolač (4-metilmorfolin•HCl) je transferovan u obeleženi kontejner. Matična tečnost i pranja su koncentrovana do minimum zapremine i zamene destilacionog rastvarača uvođenjem toluena do zapremine serije od 6V i odnos toluen/THF >98:2 (v/v) kako je izmereno sa QNMR. U tu seriju na 20°C je dodat heptan (11 g, 2V) i suspenzija je zagrejana na 85°C (primećeno rastvaranje). Rastvor je ohlađen na 75°C i dopunjen zasadom (0.27 g, 0.02 eq). Suspenzija je ohlađena na 20°C preko 3 h i ostavljena tokom >1 h. Serija je filtrirana kroz od fritovanog stakla filter i kolač je opran toluen/heptanom (3:1 v/v) (11 g, 2V) zatim toluen/heptanom (1:1 v/v) (11 g, 2V). Kolač je osušen pod N2tokom 12 h na ambijentalnoj temperaturi i kolač je ispitan suv sa QNMR (<1 mas.% toluen i heptan). Proizvod je dobijen kao beličasta čvrsta materija (8.75 g, 63% posle posle podešavanja mase).

[0149] 60L obloženi reaktor ventiliran je izbeljivačem ispunjenim sa (S)-(6-hloro-1-(hidroksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 1-naftoatom (2.693 Kg, 88.6 mas.%, 6.3 mol) praćeno DCM (17.9 Kg, 5 vol) i EtNiPr2(2.84 Kg, 3.5 eq). Posle N2inercije, serija je uzburkana i ohlađena na 0°C. U alkoholnu suspenzionu mešavinu u reaktor je dodat rastvor sveže pripremljenog sulfur trioksid piridina (2.10 Kg, 2.5 eq sulfur trioksid piridina u 7.43 Kg, 3 vol. DMSO) duže od 30 min održavajući temperaturu serije ispod 15°C. Posle dodavanja, HPLC ogled pokazuje >99% konverzije. Serija je ugašena dodavanjem H2O (14 L, 5 vol) preko ∼20 min. održavajući temperaturu serije ispod 15°C i zatim je toluen (16.8 L, 6 vol) dodat. Posle podele, organski sloj tretiran je sa H2O (14 L, 5 vol) i toluenom (16.8 L, 6 vol). Gornji organski sloj je opran 2 N HCl dva puta (14 L svaki, 5 vol) i fiziološkim rastvorom (14 L, 5 vol). Organski sloj je dreniran u čist kontejner, ispitan putem HPLC i zatim transferovan nazad u čist 60L reaktor kroz linijski filter. Serija je koncentrovana do minimalne zapremine i rastvarač zamenjen sa MeOH dok zapremina serije nije dostigla 28 L (10 vol) i MeOH/toluen odnos bio je 3:1 (v/v) kako je izmereno sa QNMR. Serija je zatim transferovana u 30L obloženi reaktor kroz linijski filter. Posle podešavanja temperature serije na 30°C, serija je zasejana sa aldehidom (51 g, 0.02 eq) kao suspenzija u MeOH (400 mL). Pošto je suspenzija ostavljena tokom 30 min na 30°C, seriji je zamenjen rastvarač destilacijom sa MeOH dok zapremina serije nije bila 11 L (4 vol) i MeOH/toluen odnos je ≥99:1 (v/v). Serija je zatim ohlađena na 5°C i MeOH/H2O mešavina (3.70 Kg MeOH 1.34 Kg H2O) je dodavana tokom 1.5 h da bi se došlo do ukupne zapremine rastvarača od približno 5.5 vol i konačno MeOH/H2O do 90/10 (v/v). Serija je zagrejana na 65°C duže od 30 min, i ohlađena na 20°C duže od 2h i ostavljena tokom ∼ 2 h. Serija je filtrirana kroz Aurora® filter opremljen sa ≤ 25 µm filter tkaninom. Kolač je opran MeOH/H2O (10:1) (1x2 vol), zatim MeOH/H2O (2:1) (1x2 vol). Kolač je osušen pod N2na ambijentalnoj temperaturi tokom ≥ 4 h do sušenja da bi se dobio proizvod kao beličasta čvrsta materija (1.99 Kg, 72% posle podešavanja mas.%).

[0150] 3-grla 250mL RBF napunjena je sa (R)-(6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metil 1-naftoatom (10 g, 94.4 mas.%, 95.3% LCAP, >99% ee), metanolom (100 mL), trimetil ortoformatom (7 mL), i TsOH · H2O (0.24 g). RBF je inertovana sa N2, i započeto je uzburkavanje. Serija je zagrejana na 60 °C i ostavljena tokom 2 h. HPLC ogled pokazuje ≥98% konverzije.

[0151] Serija je koncetrovana pod vakuumom (∼150-190 dorr, spoljna temp ∼40°C) do minimalne zapremine upotrebom rotoisparivača. Serija je okrenuta u THF uvođenjem THF tri puta (50 mL svaki put) i destilovanjem pod vakuumom (∼165 torr, spoljna temp ∼40°C). Posle svakog od prva dva THF punjenja, serija je koncetrovana do minimalne zapremine, i posle poslednjeg THF punjenja i destilacije QNMR analiza uzorka pokazuje ciljani odnos od >20/1 THF/MeOH (v/v). LiOH·H2O (10.46 g, 10 eq) i H2O (50 mL) dopunjeni su u 3-grlu 250mL RBF. Reakciona mešavina je zagrejana na 65°C i ostavljena tokom 18 h. HPLC ogled pokazuje >99% konverzije. Serija je ohlađena na 20°C i transferovana u 500-mL separacioni levak. MTBE (106 mL) dopunjen je u separacioni levak, a levak dobro protresen. Posle smirivanja tokom 5 min, donji vodeni sloj je dreniran. Gornji organski sloj je opran 20% K2CO3dva puta (32 mL i 11 mL). Serija je transferovana u 250mL RBF. Ispitivanje HPLC pokazuje <2% naftanoična kiselina kao nusproizvod. Serija je koncentrovana do minimalne zapremine na sniženom pritisku na rotoisparivaču (300 mbar, spoljna temp ∼40°C). Serija je okrenuta u THF upotrebom rotoisparivača (∼250 mbar, spoljna temp ∼40°C) dodavanjem i destilovanjem THF (∼50 mL, ∼50 mL). Posle svakog THF punjenja, serija je destilovana do minimalne zapremine. THF (50 mL) je dopunjen u 250mL RBF. KF uzorka pokazuje 0% H2O (≤0.1% prihvatljiv). Serija je filtrirana do uglačanja (60mL srednje porozan levak) u čistu i suvu 250 mL 3-grla-RBF upotrebom THF (50 mL) za ispiranje i podešavanje zapremine. U tu seriju je dodata 4-fluoro-3-nitrobenzojeva kiselina (4.61 g, 1.0 eq), mešavina je ohlađena na - 20°C, i 20% kalijum tert-butoksid THF rastvor (40 mL) je dodavan tokom 1.5 h, održavajući temperaturu serije na - 20 ± 10°C (egzotermna). Po završetku dodavanja, serija je ostavljena na -20°C i alikvot ispitan putem HPLC posle 1.5 h pokazuje 98% konverzije. U tu seriju u fiolu je dodat sat. NH4Cl rastvor (10 mL), održavajući temperaturu na -20 ± 10°C, praćeno dodavanjem H2O (20 mL) i MeTHF (34 mL) na -20 ± 20°C. Mešavina je zagrejana na 20°C i uzburkana tokom 13 h. Serija je transferovana u separacioni levak, ostavljena da se slegne tokom ∼5 min, i donji vodeni sloj je uklonjen održavajući tepih sa organskim tokom. Gornji organski tok je opran sat. NH4Cl rastvorom (10 mL) i H2O (20 mL) na 20°C. Posle ∼5 min sleganja, vodeni sloj je odvojen. U ukupan sirovi organski tok (KF=14%) je dodat MSA (4 mL) u 250mL 3-grloj-RBF. Serija je zagrejana na refluksu (65°C) tokom 25 h i LC ogled pokazuje potpunu konverziju (≥97%).

[0152] Serija je ohlađena na <20°C i K3PO4·H2O (4.5 g) i H2O (7 mL) dodati su. Serija je transferovana u separacioni levak i donji vodeni sloj je dreniran da bi se dobio sirovi rastvor aldehidnog proizvoda.

Kombinovani organski sirovi tok je koncentrovan do minimalne zapremine upotrebom rotacionog isparivača. U tu seriju u 500mL RBF dopunjen je AcOH (∼50 mL, ∼50 mL) i destilovan upotrebom rotacionog isparivača pri sniženom pritisku (30 mbar, spoljna temp ∼40°C). THF nivo izmeren je QNMR i ništa nije primećeno. Mešavina je transferovana u 250mL 3-grlu RBF i AcOH je dodat radi podešavanja ukupne zapremine na ∼40 mL, kada se javlja kristalizacija. U tu seriju je dodata H2O (12 mL) preko ∼ 1 h. Posle ostarivanja tokom >1 h, LC ogled supernatantne koncentracije bio je 9 mg/mL. Ako je koncentracija >10 mg/mL onda se može dodati mala porcija H2O (0.2 vol); posle provere sa LC, ponoviri ako je potrebno. Serija je filtrirana, oprana 20% H2O/AcOH (23 mL) i osušena pod N2/vakuumom tokom 3.25 h da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (8.22 g) kao beličasta čvrsta materija (82% prinosa korigovano radi čistoće).

FAZA 9B: (R)-TERT BUTIL 4-((6-HLORO-1-FORMIL-1,2,3,4-TETRAHIDRONAFTALEN-1-IL)METOKSI)-3-NITROBENZOAT

[0153]

[0154] Rastvoru (R)-tert-butil 4-((6-hloro-1-(dimetoksimetil)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzoata (1g, 2.033 mmol) u anhidrovanom acetonu (41 mL) je dodat amberlyst®-15 (1g, 2.033 mmol; prethodno opran 2 x 10 mL suvog acetona). Mešavina je zagrejana na 50°C tokom 3.5 h, zatim filtrirana i isprana sa DCM. Filtrat je koncetrovan i osušen pod visokim vakuumom preko noći (prelazi u tamno crvenu boju). LC/MS i NMR analiza sugeriše da je ∼ 10% odgovarajuće karboksilne kiseline prisutno kao i 0.5 eq mezitil oksida. Mešavina je uvedena u Fazu 11 bez daljeg prečišćavanja.

FAZA 10: (S)-6'-HLORO-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0155]

[0156] Rastvor sirove (R)-4-((6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzojeve kiseline (30 g, 77.10 mmol) u AcOH (1 L) je zagrejan na 70°C i dodat je prah železa (28 g, 500 mmol). Rezultujuća mešavina je zagrejana tokom ∼4 h na 70°C. AcOH je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u DCE (1 L). Natrijum triacetoksi borohidrid (46.5 g, 740 mmol) je dodat u porcijama i reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 1 h. Reakcija je zatim ugašena sa H2O praćeno 10% vodenom limunskom kiselinom (500 mL). Vodena faza ekstrahovana je sa DCM (2 x 1 L) i kombinovani organski sloj opran je fiziološkim rastvorom (500 mL), osušen preko Na2SO4i koncetrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni upotrebom 100-200 veličine sita SiO2gel (40% EtOAc/Heks) radi dobijanja čiste (S)-6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline kao bele čvrste materije (24 g, 99% posle dve faze).

Alternativno, (S)-6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilna kiselina sa ((1S,4R)-7,7-dimetil-2-oksobiciklo[2.2.1]heptan-1-il)metansulfonskom kiselinom (1:1) mogu biti pripremljeni kako sledi:

[0157] Reaktor pod pritiskom napunjen je sa (R)-4-((6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzojevom kiselinom (20 g, 94 mas.%), 5%Pt/S/C vlažan (2.2 g), THF (400 mL) i titanijum izopropoksidom (0.5 mL). Reaktor je zatvoren, prečišćen inertnim gasom (3 ciklusa, najmanje jednom uz mešanje), i zatim prečišćen sa H2(1 ciklus). Reaktor je stavljen pod pritisak sa H2do 70 psig, mešanje (950 o/min) je započeto, a temperatura povećana na 90 °C održavajući the H2pritisak u reaktoru (70 psig na 22-30 °C, 80 psig na 50-60 °C i 90 psig na 88-91 °C). Posle 16 h, reaktor je ohlađen na ambijentalnoj temperaturi i prečišćen inertnim gasom (3 ciklusa). HPLC analiza reakcije potvrđuje > 98% konverzije.

[0158] Reakciona mešavina je filtrirana kroz Celite® sloj (2 inča) upotrebom dodatnog THF za ispiranja, i filtrat je koncetrovan pod sniženim pritiskom na 40 °C. U ostatak je dodat IPA (60 mL) i 2-4% vodenog MeOH (10 mL). Mešavina je mešana tokom 10 min i zatim je filtrirana kroz Celite® sloj (2 inča). MeOH je uparen pod sniženim pritiskom na 40 °C i u koncetrovani IPA rastvor ohlađen na ambijentalnoj temperaturi dodat je rastvor CSA (56.0 g) u IPA (200 mL) ukapavanjem duže od 2h. Posle 10% CSA rastvora je dodato, mešavina je zasejana sa kristalima naslovljenog jedinjenja (10 - 15 mg) praćeno dodavanjem preostalog CSA rastvora. Posle mešanja na ambijentalnoj temperaturi preko noći, mešavina je filtrirana, a filter kolač je opran 100 mL IPA i osušen pod vakuum/N2na ambijentalnoj temperaturi. Proizvod je izolovan kao bela čvrsta materija:(S)-6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilna kiselina sa ((1S,4R)-7,7-dimetil-2-oksobiciklo[2.2.1]heptan-1-il)metansulfonskom kiselinom (1:1) (85 - 88% prinos, > 99.5% ee).

FAZA 11A: (S)- METIL 6'-HLORO-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0159]

[0160] Rastvoru (S)-6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (130 g, 379 mmol) u metanolu (6 L) dodat je amberlyst®-15 (130 g, prethodno opran anhidrovanim metanolom) i zagrejan na refluksu tokom 10 h. Amberlyst® je zatim uklonjen filtriranjem i ispran metanolom (3 x 300 mL). Kombinovani filtrat je koncetrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni da bi se dobio čist (S)- metil 6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat kao bela čvrsta materija (105 g, 77%). Hiralni HPLC uslovi: Kolona: ChiralCel® OD-H (250 mm x 4.6 mm, 5 µm); Mobilna faza: n-Heksan:EtOH: 95:05. Vreme rada: 25 min. Brzina protoka: 1mL/min. Vreme zadržavanja (najmanji pik): 10.162 min (1.98%); Vreme zadržavanja (najveći pik): 12.292 min (98.02%).

FAZA 11B: (S)-TERTBUTIL 6'-HLORO-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0162] Rastvoru (R)-tert-butil 4-((6-hloro-1-formil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il)metoksi)-3-nitrobenzoata (0.9 g, 2.018 mmol) u AcOH (20.22 mL, 353 mmol) na 70 °C je dodato železo (0.676 g, 12.11 mmol). Mešavina je mešana snažno tokom 4 h, zatim koncentrovana, i ostatak je razblažen sa 20 mL 1,2-DCE. Natrijum triacetoksihidroborat (1.711 g, 8.07 mmol) je dodat i mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 20 min. Po gašenju dodavanjem 20 mL H2O, formirana je gusta suspenzija.20 mL 10% rastvora limunske kiseline dodato je i mešavina postaje svetlije boje. Slojevi su odvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa 2 x 20 mL DCM. Kombinovani organski delovi su oprani 10 mL 10% limunske kiseline i 10 mL fiziološkog rastvora, osušeni preko MgSO4, filtrirani, i koncetrovani. Ostatak je smešten na 3 g SiO2gela i prečišćen upotrebom 5-10% EtOAc u Heks da bi se dobio (S)-tertbutil 6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat (557 mg, 1.393 mmol, 69.0 % prinos). Dalje eluiranje sa 30% EtOAc u Heks daje (S)-6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilnu kiselinu (132 mg, 0.384 mmol, 19.02 % prinos).

FAZA 12: (1R,2S)-1,2-CIKLOBUTANDIILDIMETANOL

[0163]

[0164] U rapidno umešam rastvor LAH (1.0 M rastvor u THF, 1000 mL, 1000 mmol) na ambijentalnoj temperaturi u 3000 mL 3-grloj RBF pod tokom argona, čvrsti (1R,5S)-3-oksabiciklo[3.2.0]heptan-2,4-dion (40 g, 317 mmol) postepeno je dodat duže od 2h, održavajući unutrašnju temperaturu reakcione mešavine ispod 50°C. Reakcija je mešana preko noći na ambijentalnoj temperaturi pod argonom. Posle 16 h, reakciona mešavina je ohlađena ledenim kupatilom na 10°C, i, pod brzim tokom argona, rastvor 36 mL H2O je dodat ukapavanjem levkom za dodavanje brzinom koja održava temperaturu između 12 -15°C, približno 1 mL/min, uz snažno mešanje (500 o/min). Mešavina je zatim snažno mešana (500 o/min) u ledenom kupatilu tokom 1 h, zatim je uklonjena iz kupatila i mešana na rt tokom 1 h pre ponovnog hlađenja sa ledenim kupatilom na 5-10°C. U mešavinu je dodato 36 mL 15% NaOH vodenog rastvora preko perioda od 45 min, održavajući temperaturu između 10 - 20°C. U mešavinu je dodato 108 mL H2O ukapavanjem levkom za dodavanje, održavajući temperaturu između 10 - 20°C, preko ∼1 h.

Posle potpunog dodavanja H2O, fiola je uklonjena iz ledenog kupatila, ekvilibrisana na rt i ostavljena da se umešava snažno pod argonom preko noći. Posle mešanje od 16 h, mešavina je filtrirana, a filtrat koncetrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja bezbojnog, blago neprozirnog ulja. To ulje je preuzeto u Et2O i mešano preko anhidrovanog MgSO4i filtrirano kroz sloj Celite®. Filtrat je koncetrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja 32.8 g bezbojnog ulja, koje je upotrebljeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja (89% prinos).

FAZA 13: CIS-CIKLOBUTAN-1,2-DIILBIS(METILEN) DIACETAT

[0165]

[0166] Ac2O (2.59 mL; 3.0 eq) je dodat to the CIS-1,2-ciklobutandiildimetanol (1.06 g, 9.15 mmol) i Rezultujući rastvor je zagrejana na 50°C. Posle mešanja preko noći, mešavina je ispitana putem GC i pokazuje potpunu konverziju. Mešavina je zatim razblažena sa 15mL heptana i koncetrovana pod vakuumom da bi se dobilo bistro ulje. Ulje je rastvoreno u 15mL heptana i koncetrovano nazad u ulje (azeotropno uklanjanje Ac2O) da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje kao ulje (1.827g, 88% prinos, 88.3% čistoće sa QNMR upotrebom benzil benzoata kao unutrašnjeg standarda).

FAZA 14: ((1R,2S)-2-(HIDROKSIMETIL)CIKLOBUTIL)METIL ACETAT

[0167]

[0168] 12 L 3-grle-RBF opremljena sa mehaničkom mešalicom napunjena je sa 1M rastvorom natrijum citrata (pripremljen mešanjem natrijum citratnog trobaznog dihidrata; 682 g, 2320 mmol) i H2O radi dostizanja ukupne zapremine ∼2.3 L) i 3.48 L H2O (∼25°C). Mešavina je ohlađena upotrebom led/H2O kupatila do ∼20.2°C. pH∼8.46 (izmereno pH sondom). Amano Lipaza od Pseudomonas fluorescens (41.8 g, 1547 mmol) je zatim dodata u jednom unosu (pH ∼ 8.12) i mešavina je snažno mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom ∼5 min. (1R,2S)-ciklobutan-1,2-diilbis(metilen) diacetat (348 g, 1547 mmol) je dodat u jednom punjenju, a rezultujuća mešavina je mešana snažno na ambijentalnoj temperaturi uz praćenje unutrašnje temperature i pH. Posle mešanja mešavine preko noći (∼20.9°C i pH∼5.45) sakupljen je alikvot, estrahovan sa IPAc, razblažen sa MeCN i analiziran GC i reakcija je smatrana potpuno završenom (1.21% SM ostatak, 0.17% enantiomera, 1.8% diola). Celite® (70 g) je

1

dodat reakcionoj mešavini, a suspenzija je filtrirana kroz Celite® sloj na staklenom fliteru srednje poroznosti (brza filtracija, 15-20 min), isprana sa 2.5 L IPA. Biofazna mešavina je transferovana u 12L-ekstraktor i mešana tokom 1 min. Vodeni sloj je odvojen i estrahovan sa IPAc (1x 4 L), a kombinovani organski ekstrakt je koncetrovan u vacuo dajući 337.28g (99.6 % ee; ∼50-60 mol% preostalog IPA sa

<1>HNMR; QNMR: 37.63mg benzil benzoat (Aldrich kat#B6630, ser# MKBG9990V, 61.27mg; Rezultat: ∼65mas.%; korigovan prinos 89%). Sirovi proizvod upotrebljen je kao takav u sledećoj fazi.

FAZA 15: ((1R,2R)-2-FORMILCIKLOBUTIL)METIL ACETAT

[0169]

[0170] A 2-L Atlas reaktor napunjen je ((1R,2S)-2-(hidroksimetil)ciklobutil)metil acetatom (126.39 g, 79.6 mas.% sa QNMR; 636 mmol) i 1L DCM, a temperatura omotača podešena je na 20°C. Jodobenzen diacetat (225 g, 700 mmol) je dodat kao čvrsta materija (endotermno dodavanje: temperature snižena na 15°C). TEMPO (3.97 g, 25.4 mmol) je dodat kao čvrsta materija u jednoj porciji što rezultuje u mutnom narandžastom rastvoru, koji postaje bistar kroz 20 min. Posle mešanja na 20°C preko noći, sakupljen je alikvot, razblažen sa MeOH, i analiziran GC. Dodatno punjenje jodobenzen diacetata i TEMPO može se primeniti radi završavanja reakcije ukoliko je to potrebno. Reakciona mešavina je zatim ohlađena na 1.8°C (unutrašnja temperatura, led/suv led/ H2O kupatilo) i DIPEA (194 mL, 1113mol) je dodata ukapavanjem levkom za dodavanje duže od 65 min održavajući unutrašnju temperaturu <5°C. Kupatilo za rashlađivanje je uklonjeno, a mešavina je ostavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi uz mešanje. Posle 48 h sakupljen je alikvot, razblažen metanolom, i analiziran GC koja pokazuje 12:1 odnos trans: cis izomera. Reakciona mešavina je zatim ohlađena na <5°C (led/ H2O kupatilo) i H2O (230 mL) je dodavan tokom ∼10 min (unutrašnja temperatura dostiže 14°C). Organski sloj je odvojen, opran H2O (125 mL) i 1M vodenim NaH2PO4(90 mL) i koncetrovan u vacuo radi dobijanja 273.4 g ((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil acetata (QNMR: 68.85mg benzil benzoat (Aldrich kat# B6630, Ser#MKBG9990V, 72.36mg). Sirovi proizvod upotrebljen je kao takav u sledećoj fazi.

FAZA 16: ((1R,2R)-2-((R)-(1H-BENZO[D][1,2,3]TRIAZOL-1-IL)(HIDROKSI)METIL)CIKLOBUTIL)METIL ACETAT

[0171]

2

[0172] Rastvoru sirovog ((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil acetata (5 g, 10.27 mmol) u 8 mL MTBE je dodat benzotriazol (1.296 g, 10.00 mmol) kao čvrsta materija (blago egzotermna). Bistar rastvor postaje mutniji i formira se talog. Mešavina je ostavljena da ekvilibriše preko noći na ambijentalnoj temperaturi zatim je dodat heptan (6 mL). Posle ostarivanja od 6 h mešavina je filtrirana na ambijentalnoj temperaturi i oprana 10 mL 1:1 MTBE/heptan. Bela čvrsta materija je osušena na vazduhu na fritu pod vakuumom dajući 2.48 g ((1R,2R)-2-((R)-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)(hidroksi)metil)ciklobutil)metil acetata.

FAZA 17: (S)-METIL 5-(((1S,2R)-2- ACETOKSICIKLOBUTIL)METIL)-6'-HLORO-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0173]

[0174] ((1R,2R)-2-Formilciklobutil)metil acetat (iz Faze 16; 4.36 g, 27.9 mmol) je dodat rastvoru (S)-metil 6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (5.0 g, 13.97 mmol) (Faza 12) u DCM (78 mL) i AcOH (38.8 mL). Rastvor je mešan na ambijentalnoj temperaturi tokom 10 min, zatim ohlađen na 0°C, i natrijum cijanoborohidrid (1.463 mL, 27.9 mmol) je dodat polako duže od 1 h. Mešavina je mešana na 0°C tokom 10 min, zatim sipana polako u hladan NaOH rastvor, i estrahovana sa EtOAc (120mL). Organska faza oprana je fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, i koncetrovana. Ostatak je uveden u 220 g ISCO zlatne kolone i eluiran sa 0 % do 10 % EtOAc/Heks da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje kao 6.0 g naslovljenog jedinjenja kao bela čvrsta materija. m/z (ESI ve jon) 498.1 (M+H)<+>.

FAZA 18A: (S)-METIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-(HIDROKSIMETIL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0175]

[0176] KOH (0.278 mL, 10.14 mmol) je dodat rastvoru (S)-metil 5-(((1R,2S)-2

(acetoksimetil)ciklobutil)metil)-6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (iz Faze 18; 1.530 g, 3.07 mmol) u MeOH (99 mL). Mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 4 h, zatim neutralizovana sa u HCl do pH = 7, i koncetrovana pod sniženim pritiskom. Vodeni rastvor ekstrahovan je sa EtOAc (400 mL) i organski ekstrakt opran je fiziološkim rastvorom, osušen preko anhidrovan Na2SO4, i filtriran kroz katak sloj SiO2gela radi dobijanja naslovljenog jedinjenja kao bela čvrsta materija. (1.354 g je dobijeno. m/z (ESI, ve jon) 456.2 (M+H)<+>)

[0177] Alternativno, (S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-(hidroksimetil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat može se pripremiti kako sledi:

U suspenziju (S)-6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline sa ((1S,4R)-7,7-dimetil-2-oksobiciklo[2.2.1]heptan-1-il)metansulfonskom kiselinom (1:1) (Faza 11) (32.22 g, 52.5 mmol) i ((1R,2R)-2-((R)-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)(hidroksi)metil)ciklobutil)metil acetatom (Faza 17) (15.89 g, 57.7 mmol) u DCM (226 mL, 7 mL/g) dodat je natrijum triacetoksilborohidrid (13.90 g, 65.6 mmol) u 4 poricje duže od 30 min. Dodatno ((1R,2R)-2-((R)-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)(hidroksi)metil)ciklobutil)metil acetat (2.89 g, 10.50 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (2.78 g, 13.12 mmol) dodati su radi vođenja reakcije do završetka (određeno HPLC ogledom).80 mL H2O je zatim dodato, a rezultujuća mešavina je uzburkana tokom 5 min. Slojevi su odvojeni, organska faza je oprana sa 60 mL H2O i 20 mL fiziološkog rastvora, a zatim koncentrovana do ulja pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u 50 mL MeOH i 40mL 5N NaOH su zatim dodati na ambijentalnoj temperaturi (egzotermna). Po završetku reakcije (određeno HPLC ogledom), reakciona mešavina podeljena je na 133 mL MTBE i 35mL 1.5 M limunske kiseline. Organska faza je transferovana u RBF i rastvarač je izmenjen u MeCN atmosferskom destilacijom. Ovaj rastvor je zasejan na 62°C (razvijena suspenzija), ostavljen radi dostizanja ambijentalne temperature, i zatim ostavljen preko noći. Suspenzija je filtrirana na 20.5°C kroz levak od grubog fritovanog stakla sinter, a filter kolač je opran upotrebom 60 mL MeCN, zatim osušen u vakuumskoj pećnici na 40°C do konstantne mase. Konačna masa: 21.87g (96.4 mas.% sa HPLC).

[0178] 100 mL 3-grla-RBF napunjena je sa (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-(hidroksimetil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilnom kiselinom (4.53 g, 1.0 eq), MeOH (45 mL, 10 vol), a zatim je pripremljen rastvor SOCl2(11.28 mL, 1.0M u MeCN, 1.1 eq). Pod atmosferom N2, serija je zagrejana na 55°C i mešana tokom 18 h (ili do > 99% konverzije kako je određeno HPLC). Reakciona mešavina je zatim ostavljena da se ohladi na 20°C duže od 2h. U dobijenu belu suspenziju je dodata Hunig-ova baza (3.94 mL, 2.2 eq) i posle ostarivanja od 0.5 h, H2O (9.0 mL, 2 V) je dodata kao antirastvarač duže od 1h. Bela suspenzija je ostavljena tokom >2 h i serija je filtrirana kroz filter od fritovanog stakla, a kolač je opran MeOH/H2O (5:1 v/v) (9.0 mL, 2V) zatim MeOH/ H2O (2:1 v/v)

4

(9.0 mL, 2V). Kolač je osušen pod N2sa vakuumom tokom 12 h na ambijentalnoj temperaturi. Proizvod je dobijen kao bela čvrsta materija (4.36 g, 92% prinos).

FAZA 18B: (S)-TERTBUTIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-(HIDROKSIMETIL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0179]

[0180] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je iz (S)-tertbutil 6'-hloro-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (Intermedijer AA11A, Faza 12B) sledeći postupke opisane za Intermedijer AA11A, Faze 18-19A).

FAZA 19A: (S)-METIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-FORMILCIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0181]

[0182] U ohlađen (-70°C) rastvor DMSO (7.12 mL, 2.5 eq) i DCM (183 mL, 10 vol) u 1 L 3-grlu- RBF inertovana sa N2dodat je oksalil hlorid (26.1 mL, 1.0M u DCM, 1.3 eq) pri brzini za održavanje temperature ispod -70°C. Serija je ostavljena ispod -70°C tokom 30 min, a zatim je pripremljen rastvor (S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-(hidroksimetil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (iz Faze 19A; 18.3 g, 1.0 eq) u DCM (183 mL, 10 vol) dodat brzinom za održavanje reakcione temperature <-70°C. Serija je ostavljena tokom 1.5 h i zatim Et3N (22.4 mL, 4.0 eq) je dodat brzinom za održavanje temperature šarže <-70°C. Posle ostarivanja od 1 h, serija je ostavljena da se zagreje na -20°C i H2O (366 mL, 20 vol) je dodata. Serija je uzburkana na 20°C i faze su odvojene. Organski sloj je opran 2 x 1N HCl (183 mL, 10 vol) i fiziološkim rastvorom (183 mL, 10 vol). Organski sloj je filtriran do poliranja i koncetrovana u vacuo radi dobijanja (S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (19.91 g, 94% prinos korigovan za mas.%) kao tamna pena.

FAZA 19B: (S)-TERTBUTIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-FORMILCIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0183]

[0184] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-tertbutil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-(hidroksimetil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (Intermedijer AA 11A, Faza 19B) sledeći postupak opisan za Intermedijer AA11A, faza 20A.

FAZA 20: (S)-METIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIALIL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0185]

[0186] U pećnici osušena 3-grla-RBF opremljena sa levkom za dodavanje koji ima mogućnost izjednačavanje pritiska, uređajem za merenje temperature, i magnetnom mešalicom, ohlađena je na ambijentalnoj temperaturi uz pročišćavanje gasom argona. Fiola je napunjena sa (1R,2S)-2-morfolino-1-fenilpropan-1-olom (40.2 g, 182 mmol; pripremljen prema postupku iz literature od Brubaker, J.D.; Myers, A.G. Org. Lett.2007, 9, 3523-3525) protiv pozitivnog pritiska argona. Levak za dodavanje napunjen je toluenom (450 mL), koji je ubačen u reaktor. Rastvor je ohlađen u etilenglikol-CO2kupatilu (∼ -12°C) i tretiran rastvorom butillitijuma (2.5 M u Heks, 72.6 mL, 182 mmol), što je izazvalo taloženje bele čvrste materije koja postepeno prelazi u rastvor budući da je mešana duže od 30 min. Rastvor divnilcinka (605 mL, 182 mmol; pripremljen prema Brubaker, J.D.; Myers, A.G. Org. Lett.2007, 9, 3523-3525. Koncentracija rastvora divnilcinka je određena titriranjem protiv jodina (Krasovskiy, A.; Knochel, P. Synthesis 2006, 890-891; koncentracija je generalno iznosila ∼0.25M) koji je dodat, a rastvor je ostavljen uz mešanje u hladnom kupatilu tokom 1 h; unutrašnja temperatura bila je - 15°C. (S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b] [1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat (iz Faze 20A; 48.5 g, 107 mmol) (azeotropovana tri puta toluenom) dodat je kao rastvor u toluenu (200 mL, 150 mL 2 x 25 mL ispiranje kanilom/bočicom) putem kanile (16 G), preko ∼ 20 min. Unutrašnja temperatura podiže se do -10°C. Mešavina je mešana tokom 90 min održavajući unutrašnju reakcionu temperaturu ispod -5°C. Levak za dodavanje napunjen je sa 30mas.% vodene limunske kiseline (450 mL), zatim je reakcija ugašena dodavanjem rastvora reakcionoj mešavini. Reaktor je uklonjen iz kupatila i ostavljen da se umešava na ambijentalnoj temperaturi. Rastvor je transferovan u separacioni levak, a fiola je isprana toluenom i 30% vodenom limunskom kiselinom (50 mL svaki). Slojevi su pomešani, a zatim razdvojeni. Organski sloj je opran H2O (250 mL), zatim fiziološkim rastvorom (250 mL), i konačno osušen sa MgSO4. Rastvor je filtriran i koncentrovan da bi se dobilo žutog ulje, ∼90 g posle vakuuma preko noći, 20:1 dr. Ono je podeljeno na 3 serije i prečišćeno hromatografijom na koloni 10 do 20% EtOAc/Heks 1.5kg SiO2, da bi se obezbedio (S)-metil-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat (43.3 g, 84%). Vodeni sloj i pranja smeštena su u led/H2O kupatilo i učinjeni baznim do pH > 13 dodavanjem 8N vodene NaOH. Ovaj rastvor je zatim estrahovan toluenom (3 x 250 mL). Kombinovani organski ekstrakti su oprani H2O (250 mL) i fiziološkim rastvorom (250 mL), zatim osušeni sa MgSO4. Rastvor je filtriran i koncentrovan izdvanja ligand u >95% prinosa.

FAZA 21: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIALIL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0187] Rastvoru (S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (iz Faze 21; 4.59 g, 9.52 mmol) u mešavini THF (18 mL), MeOH (6.00 mL) i H2O (6.00 mL) je dodat LiOH·H2O (0.799 g, 19.05 mmol) i reakcija je mešana na 50°C tokom 4 h. Reakciona mešavina je koncentrovana do ∼ 15 mL, ohlađena na 0°C i zakišeljena sa 2N HCl do pH = 3. Rezultujuće viskozno ulje je razblaženo sa 20 mL H2O i 50 mL EtOAc i dobijen je bistra dvoslojna mešavina. Dodato je još EtOAc (ca.200mL) i organski sloj je odvojen, opran fiziološkim rastvorom, osušen sa MgSO4, filtriran i koncetrovan pod sniženim pritiskom. Ovaj sirovi materijal je uveden u kolonu (220 g), i prečišćen sa EtOAc u Heks upotrebom sledećeg gradijenta: 0-2.5 min 0% EtOAc, 2.5 m-6 m 0-20% EtOAc, 6m-35m 20-60% EtOAc, 35m-40 m 70% EtOAc da bi se dobila (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilna kiselina (4.22 g, 9.02 mmol, 95 % prinos) kao bela čvrsta materija.

Intermedijer AA12A

(S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-HIDROKSIHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

FAZA 1A: (S)-METIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-HIDROKSIHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT [0189]

[0190] Pod atmosferom argona, suva 3-grla-RBF dopunjena sa suvim Heks (27 mL) je ohlađena na 0°C. U ovaj rastvor je dodat boran-metil sulfid kompleks (3.29 mL, 34.6 mmol) i cikloheksen (7.01 mL, 69.3 mmol) i mešavina je mešana na 0°C tokom 2 h. U dobijenu belu suspenziju dodat je 1-pentin (3.41 mL, 34.6 mmol) i mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 0.5 h. Mešavina je zatim ohlađena na -78°C i dietilcink, 1.0 M rastvor u Heks (32.3 mL, 32.3 mmol) je dodat. Posle dodavanja mešavina je zagrejana na 0°C, mešana tokom 3 min zatim ponovo ohlađena na -78°C. Ovaj rastvor nazvan je rastvor A. Odvojena fiola napunjena je mešavinom ((S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (Intermedijer AA11A, Faza 20A, 5.24g, 11.54 mmol) i (2s)-3-ekso-(morfolino) izoborneal (0.486 g, 2.032 mmol) u Heks (50.9 mL) i toluenom (16.97 mL). Mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi dok sva čvrsta materija nije rastvorena, zatim je ohlađena na 0°C. Pod atmosferom argona 54 mL rastvora A je dodato polako špricem tokom 1.6 h. Posle mešanja od 5 min na 0°C, mešavina je ugašena sa sat. NH4Cl rastvorom (70 mL), razblažena sa H2O (30 mL) i estrahovana sa EtOAc (3 x 270 mL), oprana fiziološkim rastvorom, osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncetrovana. Ostatak je uveden u 330g ISCO zlatnu kolonu i eluiran sa 0% do 5% EtOAc/Heks, da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje 3.8 g kao bela čvrsta materija. m/z (ESI, ve jon) 524.1 (M+H)<+>.

FAZA 1B: (S)-TERTBUTIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-HIDROKSIHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT i (S)-TERTBUTIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((R,E)-1-HIDROKSIHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0192] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-tert-butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (3.19 g, Intermedijer AA11A, Faza 20B) sledeći postupak opisan za Intermedijer AA12A, Faza 1A. Ovaj sirovi materijal apsorbovan je na čep SiO2i prečišćen na 330 g ISCO zlatne kolone eluiranjem sa 0 do 15 % EtOAc u heptanima preko 45 min da bi se obezbedio (S)-tertbutil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat (2.36 g). Dalje eluiranje daje (S)-tert-butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((R,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat (0.45 g).

FAZA 2: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-HIDROKSIHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA [0193] Mešavina (S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (od intermedijera AA12A, Faza A; 4.6 g, 8.78 mmol) i LiOH·H2O (3.68 g, 88 mmol) u MeOH (98 mL) i THF (98 mL) (sa nekoliko kapi H2O) je mešana na 50°C preko noći. Rastvarač je uklonjen, a ostatak zakišeljen sa u HCl do pH 2-3.

Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc (80 mL x 3), a kombinovani organski sloj opran je fiziološkim rastvorom (10 mL), osušen preko anhidrovanog MgSO4i koncetrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobila (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilna kiselina (4.25 g, 8.34 mmol, 95 % prinos).

Alternativno, naslovljeno jedinjenje može biti sintetizovano kako sledi:

U čvrstu mešavinu (S)-tert-butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (Intermedijer AA12A, Faza 1B, prvo eluirajući izomera, 4.50 g 7.95 mmol) i LiOH·H2O (1.66 g, 39.7 mmol) dodat je rastvarač dioksan/MeOH (1:1) (159 mL). Mešavina je zagrejana na 65°C i mešana preko noći. Mešavina je zatim razblažena sa H2O i zakišeljena sa 1.0 N HCl do pH∼4. Organski rastvarači su upareni pod sniženim pritiskom i u ostatak je dodata H2O. Vodena mešavina je zatim estrahovan sa EtOAc tri puta, i kombinovani organske ekstrakt je koncetrovan. Ostatak je prečišćen na 120 g SiO2gel koloni eluiranjem sa gradijentom 0-70% EtOAc u Heks da bi se obezbedila (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilna kiselina (3.80 g, 7.45 mmol, 94 % prinos).

Intermedijer AA13A

(S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0194]

FAZA 1A: (S)-METIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL) CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT [0195]

[0196] U pećnici osušena 200-mL fiola dopunjena suspenzijom (1R,2R)-N-metil-1-fenil-1-(((1 S,5S,10R)-10-(trimetilsilil)-9-borabiciklo[3.3.2]decan-9-il)oksi)propan-2-aminom (5.40 g, 14.54 mmol) u Et2O (73 mL) pod argonom je ohlađena na -78°C i tretirana alilmagnezijum bromid (13.22 mL, 13.22 mmol) rastvorom, ukapavanjem. Mešavina je ostavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi i mešana tokom 1 h. Rastvor (∼ 0.17 M; rastvor A) je zatim ponovo ohlađen na -78°C.

[0197] Zasebna 200 mL fiola dopunjena sa ((S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilatom (Intermedijer AA11A, Faza 20A, 2.0 g, 4.41 mmol) u Et2O (22.03 mL) pod argonom je ohlađena na -78°C. U ovaj rastvor je dodato 40 mL prethodno navedenog rastvora A i rezultujuća mešavina je mešana na -78°C tokom 40 min. 4-metilmorfolin 4-oksid (3.10 g, 26.4 mmol) je zatim dodat i mešavina je ostavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi tokom 10 min. Metanol (10 mL) je dodat, a isparljive organske materije su uparene pod sniženim pritiskom na ambijentalnoj temperaturi. Dodatno je dodat metanol (100 mL) i posle mešanja na ambijentalnoj temperaturi tokom 1 h mešavina je koncetrovana. Ostatak je razblažen sa EtOAc (450 mL), opran u HCl (15 mL), Na2CO3rastvorom (10 mL), i fiziološkim rastvorom (6 mL), osušen preko anhidrovan Na2SO4i koncetrovan. Ostatak je uveden u 220g ISCO zlatne kolone i eluiran sa 0% do 5% EtOAc/Heks, da bi se obezbedilo 1.88 g naslovljenog jedinjenja kao bela čvrsta materija. m/z (ESI, ve jon) 496.0 (M+H)<+>.

FAZA 1B: (S)-TERTBUTIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4] OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT [0198]

[0199] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-tert-butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-formilciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (Intermedijer AA11A, Faza 20B; 3.0 g) sledeći postupak opisan za Intermedijer AA13A, Faza 1A. Ovaj sirovi materijal prečišćen je na 220 g SiO2gel kolone eluiranjem sa 5% EtOAc u Heks preko 60 min da bi se obezbedio (S)-tert-butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilat (2.19 g).

FAZA 2: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA [0200] Mešavina (S)-metil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b] [1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (od intermedijera AA13A, Faza 1A; 1.88 g, 3.79 mmol) i LiOH rastvora (1M) (34.1 mL, 34.1 mmol) u MeOH (34 mL) i THF (50 mL) je mešana na 65°C tokom 50 min. Posle hlađenja na ambijentalnoj temperaturi, mešavina je zakišeljena sa u HCl do pH 2 do 3, estrahovana sa EtOAc (350 mL), osušena preko anhidrovanog Na2SO4i koncetrovana da bi se obezbedilo 1.82 g naslovljenog jedinjenja kao bela čvrsta materija. m/z (ESI, ve jon) 482.0 (M+H)<+>.

Alternativno, naslovljeno jedinjenje može biti sintetizovano kako sledi:

Rastvoru (S)-tert-butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (Intermedijer AA13A, Faza 1B; 250 mg, 0.465 mmol) u DCM (3.717 mL) na ambijentalnoj temperaturi, TFA (0.929 mL) je dodat i reakciona mešavina je mešana tokom 4 h. Sirova reakciona mešavina je zatim koncetrovana, ostatak je

1

preuzet u EtOAc, opran jednom sa sat. NaHCO3, osušena preko MgSO4, filtrirana i koncetrovana da bi se dobila bela pena. Ovaj sirovi materijal upotrebljen je kao takav, bez daljeg prečišćavanja.

Intermedijer EE11

N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)AMIN

[0201]

[0202] Rastvor 4-metoksibenzaldehida (Spectrochem; 100 g, 734.5 mmol) i 4-metoksibenzil amin (G.L.R.;100 g, 734.5 mmol) u toluenu (0.8 L) je refluksovan na 130 °C upotrebom Dean-Stark urešaja tokom 6 h. Reakcija je praćena sa TLC i po završetku, višak rastvarača je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u metanolu (0.8 L). Rezultujući rastvor je ohlađen na 0°C i natrijum borohidrid (36.12 g, 954.8 mmol) je dodat u porcijama. Po završetku dodavanja, reakciona mešavina je mešana tokom 3 h na ambijentalnoj temperaturi. Metanol je uklonjen, a ostatak je razblažen sa H2O (1.0 L) i EtOAc (2.0 L). Slojevi su odvojeni i vodeni sloj ekstrahovan je sa EtOAc (2 x 1.0 L). Kombinovani organski sloj je opran H2O, fiziološkim rastvorom, i osušen preko Na2SO4. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ovako dobijen sirovi materijal prečišćen je hromatografijom na koloni preko SiO2gel (100-200 veličine sita) eluiranjem sa gradijentom 100% Heks do 25% EtOAc u Heks dajući naslovljeno jedinjenje (160 g, 84.6%) kao bezbojna, ali neprozirna tečnost.

Intermedijer EE12

N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)METANSULFONAMID

[0203]

[0204] Mešavina metansulfonamida (Sigma-Aldrich, 5 g, 52.6 mmol), p-metoksibenzil hlorida (14.98 mL, 110 mmol), K2CO3anhidrovanog (36.3 g, 263 mmol) i kalijum jodida (0.873 g, 5.26 mmol) u anhidrovanom 2-butanonu (175 mL) je refluksovana (75°C) preko noći. Reakcija je praćena sa TLC i LC/MS i po završetku, mešavina je ohlađena na ambijentalnoj temperaturi, filtrirana, oprana Et2O i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal (17.54 g, 52.3 mmol, 99 % prinos) upotrebljen je bez daljeg prečišćavanja. MS (ESI, pozitivni jon) m/z: 358.1 (M+Na).

2

Intermedijer EE13

N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)ETANSULFONAMID

[0205]

[0206] Rastvoru N,N-bis(4-metoksibenzil)amina (Intermedijer EE11; 200 g, 775.19 mmol) u DCM (2.5 L) je dodat Et3N (336.17 mL, 2325.5 mmol), i reakciona mešavina je ohlađena na 0 °C. Etansulfonil hlorid ( 95 mL, 1007.75 mmol) je dodat ukapavanjem praćeno DMAP (19.0 g, 155.03 mmol). Rezultujuća reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 30 min. Reakcija je praćena sa TLC i po završetku, mešavina je razblažena sa H2O i slojevi su odvojeni i vodena faza ekstrahovana je sa DCM (3 x 1.5 L). Kombinovani organski sloj je opran H2O, fiziološkim rastvorom, i osušen preko Na2SO4.

Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog materijala koji je prečišćen hromatografijom na koloni preko SiO2gel (100-200 sito), eluiranjem sa gradijentom 0-12% EtOAc u Heks dajući naslovljeno jedinjenje (145 g, 53.4%) kao bela paperijasta čvrsta materija.

Intermedijer EE14

N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)PROPANSULFONAMID

[0207]

[0208] Rastvoru N,N-bis(4-metoksibenzil)amina (Intermedijer EE11; 405 g, 1569.7 mmol) u DCM (4.0 L) je dodat Et3N (681.0 mL, 4709.3 mmol), i reakciona mešavina je ohlađena na 0 °C. Propansufonil hlorid (231 mL, 2040.6 mmol) je dodat ukapavanjem praćeno DMAP (38.3 g, 313.9 mmol). Rezultujuća mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 30 min. Reakcija je praćena sa TLC i po završetku, mešavina je razblažena sa 2.0 L H2O, slojevi su odvojeni i vodena faza ekstrahovana sa DCM (3 x 2.0 L). Kombinovani organski sloj je opran H2O, fiziološkim rastvorom, i osušen preko Na2SO4.

Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog materijala koji je prečišćen hromatografijom na koloni preko SiO2gela (100-200 sito), eluiranjem sa gradijentom 0-12% EtOAc u Heks dajući naslovljeno jedinjenje (300 g, 52.44%) kao bela paperijasta čvrsta materija.

Intermedijer EE15

BUT-3-EN- 1 -SULFONAMID

[0209]

FAZA 1: NATRIJUM BUT-3-EN-1-SULFONAT

[0210]

[0211] Mešavina 4-bromo-1-butena (LLBChem, 3.01 mL, 29.6 mmol) i natrijum sulfita (4.11 g, 32.6 mmol) u H2O (20 mL) je mešana na 110°C preko noći. Reakcija je praćena sa TLC i po završetku, H2O je uklonjena pod sniženim pritiskom i ostatak je titruisan acetonom. Dobijena čvrsta materija je filtrirana radi dobijanja naslovljenog jedinjenja kao bela čvrsta materija (4.53 g) koja je upotrebljena kao takva u sledećoj fazi.

FAZA 2: BUT-3-EN-1-SULFONAMID

[0212] Mešavina natrijum but-3-en-1-sulfonata (4.50 g, 28.5 mmol) i fosfornog oksihlorida (70 mL) je mešana na 135°C tokom 7 h. Fosforni oksihlorid je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom radi dobijanja tamnog ostatka koji sadrži belu čvrstu materiju. Ovaj ostatak je razblažen sa MeCN (20 mL), i zatim filtriran radi uklanjanja taloga. Filtrat je ohlađen na 0°C i tretiran rastvorom amonijaka (30% voden) (30 mL) ukapavanjem. Po završetku dodavanja, reakcija je mešana na 0 °C tokom 30 min. Mešavina je razblažena sa EtOAc (300 mL), oprana fiziološkim rastvorom, i osušena preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak prečišćen hromatografijom na koloni preko SiO2gela (100-200 sito; eluiranjem sa 1:1 EtOAc/Heks), dajući naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta materija (1.55 g, prinos: 40%). MS (ESI, pozitivni jon) m/z: 117.1 (M+1).

Intermedijer EE16

N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)BUT-3-EN-1-SULFONAMID

[0213]

[0214] Mešavina but-3-en-1-sulfonamida (Intermedijer EE15; 1.5 g, 11.10 mmol), p-metoksibenzil

4

hlorida (3.76 mL, 27.7 mmol), K2CO3anhidrovanog (7.67 g, 55.5 mmol) i natrijum jodida (0.166 g, 1.110 mmol) u anhidrovanom 2-butanonu (55.5 mL) je refluksovana (75°C) preko noći. Reakcija je praćena sa TLC i LC/MS i po završetku, mešavina je ohlađena na ambijentalnoj temperaturi, filtrirana, i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal apsorbovan je na čep SiO2gela i prečišćen hromatografijom kroz SiO2gel (100-200 sito), eluiranjem sa 0 do 30 % EtOAc u Heks, da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (4.10 g, 10.92 mmol, 98 % prinos) kao bezbojno ulje. MS (ESI, pozitivni jon) m/z: 376.2 (M+1).

Intermedijer EE17

(R)-PENT-4-EN-2-SULFONAMID

[0215]

FAZA 1: (S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)PENT-4-EN-2-SULFONAMID i (R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)PENT-4-EN-2-SULFONAMID

[0216]

[0217] N,N-bis(4-metoksibenzil)but-3-en-1-sulfonamid (Intermedijer EE16; 50.0 g, 133.2 mmol) azeotropovan je toluenom i osušen pod vakuumom tokom 1 h. THF (890 mL) je dodat i mešavina je ohlađena na -78°C. Butil litijum (2.5 M u Heks, 63.9 mL, 159.9 mmol) je zatim dodat i reakciona mešavina je mešana na -78°C tokom 1h. Ovaj anjonski rastvor je dodat polako rastvoru MeI (16.8 mL, 266.5 mmol) u THF (300 mL) ohlađen na -78°C. Rezultujuća reakciona mešavina je mešana tokom dodatnih 15 min na -78°C. Na završetku reakcije (praćena sa TLC) mešavina je ugašena sa sat. NH4Cl rastvorom i estrahovana sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncetrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog materijala koji je prečišćen hromatografijom na koloni preko SiO2gela eluiranjem sa 5-10% EtOAc u Heks da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje kao racemska mešavina (22.0 g) polučvrste prirode. Razdvajanje enantiomera putem SFC (Kolona: Chiralpak® AD-H, 50 X 250 mm, 5 µm; Mobilna faza A: CO2; Mobilna faza B: Etanol; Izokratski: 40% B sa CO2uređaju za reciklovanje; Brzina protoka: 200 g/min; Uvođenje: 2.0 mL uzorka pripremljen na prethodno opisan način (∼100 mg); Detekcija: UV @ 230 nm; Vreme ciklusa: 5 min; Ukupno vreme eluiranja: 10 min; Instrument: Thar 350 (Lakers)) daje (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-2-sulfonamid kao prvi eluirajući izomer (vreme zadržavanja: 2.22 min) i (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-2-sulfonamid kao drugi eluirajući izomer (vreme zadržavanja: 2.57 min).

FAZA 2: (R)-PENT-4-EN-2-SULFONAMID

[0218] Rastvoru (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-2-sulfonamida (Intermedijer EE17, Faza 1, drugi eluirajući izomer; 221 mg, 0.567 mmol) u DCM (2.8 mL), je dodata trifluorosirćetna kiselina (1.7 mL, 22.70 mmol) ukapavanjem (bistar rastvor veoma brzo postaje taman). Posle mešanja od 7 h (TLC 30% EtOAc/Heks pokazuje potpun gubitak početnog materijala) mešavina je razblažena sa EtOAc, oprana sat. NaHCO3, ponovo ekstrahovana sa EtOAc, osušena preko MgSO4, i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom (12 g ISCO zlatne kolone; 0-40% EtOAc Heks) da bi se obezbedio (R)-pent-4-en-2-sulfonamid (70 mg, 0.469 mmol, 83 % prinos)

Intermedijer EE172

(S)-PENT-4-EN-2-SULFONAMID

[0219]

[0220] Ovaj intermedijer sintetizovan je od (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-2-sulfonamida (Intermedijer EE17, Faza 1, prvi eluirajući izomer) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer EE17, Faza 2.

Intermedijer EE18

(R)-HEKS-5-EN-3-SULFONAMID

[0221]

FAZA 1: (S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)HEKS-5-EN-3-SULFONAMID i (R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)HEKS-5-EN-3-SULFONAMID

[0222]

[0223] N,N-bis(4-metoksibenzil)but-3-en-1-sulfonamid (Intermedijer EE16; 40.0 g, 106.6 mmol) azeotropovan je u toluenu pod vakuumom tokom 2 h. THF (700 mL) je dodat pod atmosferom argona i reakciona mešavina je ohlađena na - 78°C. Butil litijum (2.5 M u Heks; 71.6 mL, 127.9 mmol) je dodat i reakciona mešavina je mešana na -78°C tokom 1h. Ovaj anjonski rastvor je dodat polako rastvoru etil jodida (36.44 mL, 340.1 mmol) u THF (40 mL) ohlađen na -78°C. Rezultujuća reakciona mešavina je zatim ugašena sa sat. NH4Cl rastvorom, ostavljena da ostavljena da dostigne ambijentalnu temperaturu i estrahovana sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncetrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog materijala koji prečišćen hromatografijom na koloni preko SiO2gela eluiranjem sa 5-10% EtOAc u Heks da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje kao racemska mešavina (24 g) polučvrste prirode. MS (ESI, pozitivni jon) m/z; 404.03 (M+1).Razdvajanje enantiomera putem SFC (Priprema uzoraka: 14.4 g/200 mL (72 mg/mL) rastvor uzorak u MeOH:DCM (3:1); Kolona: Chiralpak® AD-H, 30 X 250 mm, 5 µm; Mobilna faza A: CO2; Mobilna faza B: MeOH (20mM NH3); Izokratski: 50% B, Brzina protoka: 100 mL/min; Izlazni pritisak: 100 bar; Uvođenje: 1.0 mL rastvora uzorka pripremljen na prethodno opisan način (72 mg); Detekcija: UV @ 227 nm; Vreme ciklusa: 8 min; Ukupno vreme eluiranja: 17 min; Instrument: Thar 350 SFC) daje (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)heks-5-en-3-sulfonamid kao prvi eluirajući izomer i (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)heks-5-en-3-sulfonamid kao drugi eluirajući izomer.

FAZA 2: (R)-HEKS-5-EN-3-SULFONAMID

[0224] Ovaj intermedijer sintetizovan je od (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)heks-5-en-3-sulfonamida (Intermedijer EE18, Faza 1, drugi eluirajući izomer) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer EE17, Faza 2.

Intermedijer EE182

(S)-HEKS-5-EN-3-SULFONAMID

[0225]

[0226] Ovaj intermedijer sintetizovan je od (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)heks-5-en-3-sulfonamida (Intermedijer EE18, Faza 1, prvi eluirajući izomer) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer EE17, Faza 2.

Intermedijer EE19

N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)PENT-4-EN-1-SULFONAMID

[0227]

FAZA 1: NATRIJUM PENT-4-EN-1-SULFONAT

[0228]

[0229] U 3L 3-grlu-RBF opremljenu mehaničkom mešalicom, N2gasnim ulazom, kondenzatorom, i temperaturnom sondom dopunjena je 5-bromo-1-pentenom (Sigma Aldrich, 200 g, 1342 mmol), natrijum sulfitom (Strem Hemijskis; 186 g, 1476 mmol), i H2O (400 mL). Mešavina je zagrejana na refluksu (podešen na 100°C i refluksovan na 93-94°C) 4 h; alikvot NMR pokazuje >95% konverzije. Mešavina je koncetrovana i azeotropovana acetonom radi uklanjanja H2O. Sirova čvrsta materija je oprana acetonom i filtrirana radi dobijanja natrijum pent-4-en-1-sulfonata (350 g, 2033 mmol).

FAZA 2: PENT-4-EN-1-SULFONAMID

[0230]

[0231] U 3L 3-grlu-RBF opremljenu mehaničkom mešalicom, N2gasnim ulazom, kondenzatorom, i temperaturnom sondom dopunjen je natrijum pent-4-en-1-sulfonat (100 g, 581mmol) (∼150 g sirovog materijala iz Faze 1) i fosforni oksihlorid (Sigma Aldrich; 532 mL, 5808 mmol). Mešavina je zagrejana na 90°C tokom 18 h posle čega je reakcija filtrirana, a čvrsta materija je oprana MeCN. Organski rastvor je koncetrovan i azeotropovan sa MeCN radi uklanjanja POCl3radi dobijanja 85 g pent-4-en-1-sulfonil hlorid intermedijera. Ovaj materijal (rastvor u 300 mL MeCN) sipan je u 1L 3-grlu-RBF opremljenu mehaničkom mešalicom, N2gasnim ulazom, kondenzatorom, i temperaturnom sondom. Reakcija je ohlađena na 0-5°C i NH4OH (Sigma Aldrich; 28 % NH3; 404 mL, 2904 mmol) je dodat polako duže od 30 min. Reakcija je mešana na 0-5°C tokom 1 h, posle čega EtOAc (300mL) je dodat i mešavina je ekstrahovana sa EtOAc i koncentrovana radi obezbeđivanja pent-4-en-1-sulfonamida (50 g, 335 mmol, 57.7 % prinos) kao braon ulje.

FAZA 3: N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)PENT-4-EN-1-SULFONAMID

[0232] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od pent-4-en-1-sulfonamida (4.5 g, 30.2 mmol) sledeći postupak opisan za Intermedijer EE16. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-1-sulfonamid (11.4 g, 29.3 mmol, 97% prinos) kao bezbojno ulje.

Intermedijer EE20

(R)-HEKS-5 -EN-2-SULFONAMID

[0233]

FAZA 1: (S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)HEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)HEKS-5-EN-2-SULFONAMID

[0234]

[0235] Rastvor N,N-bis(4-metoksibenzil)etansulfonamida (Intermedijer EE13; 140.0 g, 400.64 mmol) u THF (1.4 L, THF je prečišćen argonom tokom 15 min pre upotrebe) je ohlađen na -78°C i butil litijum rastvor (2.6 M u Heks, 200.0 mL, 520.83 mmol) je dodat ukapavanjem. Rezultujući rastvor je mešan na -78°C tokom 10 min, i 4-bromo-1-buten (73.2 mL, 721.15 mmol) je dodavan tokom 2 min. Posle 5 min, reakcija je ostavljena radi dostizanja ambijentalne temperature i mešana tokom 1 h. Reakcija je praćena sa TLC i po završetku, mešavina je ugašena sa sat. NH4Cl rastvorom (400 mL), a rezultujući vodeni sloj ekstrahovan je sa EtOAc (2 x 1.0 L). Kombinovani organski sloj opran je fiziološkim rastvorom i osušen preko Na2SO4. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog materijala koji je prečišćen hromatografijom na koloni (SiO2gel 100-200 sito) eluiranjem sa gradijentom 0-4% aceton u Heks dajući naslovljeno jedinjenje (racemska mešavina, 80.0 g, 49.5%) kao bezbojno gusto ulje. MS (ESI, pozitivni jon) m/z: 404.25 (M+1). Razdvajanje enantiomera putem SFC (Priprema uzoraka: 75 g/1.5 L (50 mg/mL) rastvor uzorak u MeOH; Kolona: Chiralpak® IF, 21 X 250 mm, 5 µm; Mobilna faza A: CO2;

Mobilna faza B: MeOH(0.2% DEA); Izokratski: 40% B; Brzina protoka: 80 mL/min; Izlazni pritisak: 100 bar; Uvođenje: 3.0 mL rastvora uzorka pripremljeno na prethodno opisan način (150 mg); Detekcija: UV @ 225 nm; Vreme ciklusa: 3.9 min; Ukupno vreme eluiranja: 6 min; Instrument: Thar 80 SFC) daje (S)-N,Nbis(4-metoksibenzil)heks-5-en-2-sulfonamid kao prvi eluirajući izomer i (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)heks-5-en-2-sulfonamid kao drugi eluirajući izomer.

FAZA 2: (R)-HEKS-5-EN-2-SULFONAMID

[0236] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)heks-5-en-2-sulfonamida (Intermedijer EE20, Faza 1, drugi eluirajući izomer) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer EE17, Faza 2.

Intermedijer EE202

(S)-HEKS-5-EN-2-SULFONAMID

[0237]

[0238] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)heks-5-en-2-sulfonamida (Intermedijer EE20, Faza 1, prvi eluirajući izomer) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer EE17, Faza 2.

Intermedijer EE21

(R)-HEPT-6-EN-3-SULFONAMID

[0239]

FAZA 1: (S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)HEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)HEPT-6-EN-3-SULFONAMID

[0240]

[0241] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od N,N-bis(4-metoksibenzil)propansulfonamida (Intermedijer EE14) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer AA20, Faza 1. Razdvajanje enantiomera putem SFC (Priprema uzoraka: 40.55g/170mL (238.5 mg/mL) rastvor uzorka u MeOH; Kolona: Chiralpak® AD-H, 50 X 150 mm, 5 µm; Mobilna faza A: CO2; Mobilna faza B: MeOH (20mM NH3); Izokratski: 50% B; Brzina protoka: 190 mL/min; Izlazni pritisak: 100 bar; Uvođenje: 1.5 mL rastvora uzorka pripremljeno na prethodno opisan način (357.8 mg); Detekcija: UV @ 227 nm; Vreme ciklusa: 17.5 min; Ukupno vreme eluiranja: 21 min; Instrument: Thar 350 SFC) daje (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)hept-6-en-3-sulfonamid kao prvi eluirajući izomer i (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)hept-6-en-3-sulfonamid kao drugi eluirajući izomer.

FAZA 2: (R)-HEPT-6-EN-3-SULFONAMID

[0242] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)hept-6-en-3-sulfonamida (Intermedijer EE21, Faza 1, drugi eluirajući izomer) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer EE17, Faza 2.

Intermedijer EE212

(S)-HEPT-6-EN-3-SULFONAMID

[0243]

[0244] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)hept-6-en-3-sulfonamida (Intermedijer EE21, Faza 1, prvi eluirajući izomer) upotrebom postupka opisanog za Intermedijer EE17, Faza 2.

Intermedijer EE22

(2R,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID

[0245]

FAZA 1: (4S,5S)-4,5-DIMETIL-1,3,2-DIOKSATIOLAN 2,2-DIOKSID

[0246]

[0247] U 500-mL, 3-grle-RBF (opremljena sa H2O-ohlađenim refluks kondenzatorom i HCl zamkom) dodat je (2s,3s)-(+)-2,3-butandiol (Aldrich; 15.00 mL, 166 mmol) i CCl4(120 mL). SOCl2, reagensplus

1

(14.57 mL, 200 mmol) je zatim dodat ukapavanjem špricem preko perioda od 20 min, a rezultujuća mešavina je zagrejana na 98°C tokom 45 min, zatim ostavljena da se ohladi na rt. Reakciona mešavina je zatim ohlađena u led/H2O kupatilu, MeCN (120 mL) i H2O (150 mL) dodati su praćeno rutenijum(III) hloridom (0.035 g, 0.166 mmol). Natrijum perjodat (53.4 g, 250 mmol) je zatim dodat polako u porcijama duže od 30 min. Rezultujuća biofazna braon mešavina je mešana snažno dok je ostavljena da dostigne rt tokom perioda od 1.5 h (unutrašnja temperatura nikada nije prešla iznad rt). TLC (50% EtOAc u heptanima) pokazuje potpunu konverziju. Sirova mešavina je zatim sipana u ice H2O i ekstrahovana dva puta sa 300 mL Et2O. Kombinovani organski slojevi su oprani jednom sa 200 mL sat. natrijum bikarbonata, oprani jednom sa 200 mL fiziološkog rastvora, osušeni preko Na2SO4, i koncetrovani rotacionim uparavanjem da bi se dobio (4S,5S)-4,5-dimetil-1,3,2-dioksatiolan 2,2-dioksid (21.2 g, 139 mmol) kao crveno ulje.

FAZA 2: (2S,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-OL

[0248]

[0249] U 500 mL fiolu je dodat (4S,5S)-4,5-dimetil-1,3,2-dioksatiolan 2,2-dioksid (od intermedijera EE22, Faza 1; 21.2 g, 139 mmol) i THF (220 mL) za koje vreme rastvor je ohlađen na - 78°C i podvrgnut je 3-om ciklusu pražnjenje/ponovno punjenje argonom. U taj rastvor je dodat dilitijum tetrahlorocuprat(ii), 0.1M rastvor u THF (69.7 mL, 6.97 mmol). Rezultujuća mešavina je mešana na -78°C tokom 30 min, a zatim je polako dodat zatim alilmagnezijum bromid, 1.0 M rastvor u Et2O (397 mL, 397 mmol) putem kanile preko 80 min. Rezultujuća mešavina je mešana na 0°C tokom 4 h. Mešavina je ugašena sa 200 mL H2O i ostavljena da dostigne rt za koje vreme su isparljive materije uklonjene rotacionim uparavanjem. U vodeni rastvor je zatim dodata 50% H2SO4(150 mL), mešavina je mešana tokom 5 min, Et2O je zatim dodat (400 mL) i mešavina je mešana snažno na rt preko noći. Slojevi su odvojeni; vodeni sloj ekstrahovan je sa 300 mL Et2O, a kombinovani organski slojevi su oprani sa 300 mL sat. NaHCO3, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncetrovani rotacionim uparavanjem da bi se dobio (2S,3S)-3-metilheks-5-en-2-ol (6.7 g, 58.7 mmol) kao bistro ulje.

FAZA 3: 2-(((2R,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-IL)TIO)PIRIMIDIN

[0250]

2

[0251] U 2000 mL suvu RBF koja sadrži umešani rastvor tributilfosfina (57.7 mL, 231 mmol) u 1000 mL degasiranog THF (pošprcan argonom tokom 30 min plus 5 ciklusa upumpavanja/dodavanja argona) na 0°C je dodat dietil azodikarboksilat (40 mas.% rastvor u toluenu; 103 mL, 262 mmol) ukapavanjem pod atmosferom argona. Rastvor (2S,3S)-3-metilheks-5-en-2-ola (od intermedijera EE22, Faza 2; 17.6 g, 154 mmol; osušen preko Na2SO4) je dodat ukapavanjem kao rastvor u 50 mL THF u rastvor fosfin/dietil azodikarboksilat kompleksa, špric-filterom (0.45 um). Rezultujuća ROH/dietil azodikarboksilat/tri-nbutilfosfin mešavina je ostavljena na nula stepeni 15 min (rastvor postaje svetlo narandžast), za koje vreme pirimidin-2-tiol (49.3 g, 439 mmol) je dodat postepeno u gornji reakcioni sud (kao čvrsta materija) pod pozitivnim pritiskom argona. Reakcija je mešana na 0°C tokom 1 h zatim na rt 15 h (reakcija nije bila potpuna na 12 h izmereno LC/MS). Sirova reakcija je zatim filtrirana radi uklanjanja viška pirimidin-2-tiola, razblažena sa 1000 mL EtOAc, ekstrahovana dva puta sa 500 mL 1 N K2CO3, i jednom sa 500 mL fiziološkog rastvora. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa 300 mL EtOAc i kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4. Organski rastvor je zatim filtriran, rastvarač uklonjen rotacionim uparavanjem, a sirova materija filtrirana radi uklanjanja (E)-dietil diazen-1,2-dikarboksilata generisanog u reakciji. Filtrat (125 g) propušten kroz SiO2čep (500 g SiO2, eluiranjem sa 2 L DCM) da bi se dobilo 75 g sirovog proizvoda posle uklanjanja rastvarača. Sirovi proizvod prečišćen je ponovo na Combiflash® (125 g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 10% EtOAc u heptanima da bi se dobio 2-(((2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-il)tio)pirimidin (20.37 g, 98 mmol) kao svetlo žuto ulje.

FAZA 4: 2-(((2R,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-IL)SULFONIL)PIRIMIDIN

[0252]

[0253] U 500 mL 3-grla-RBF sa refluks kondenzatorom, dodata je fenilfosfonska kiselina (3.95 g, 24.96 mmol), natrijum volframat oksid dihidrat (8.23 g, 24.96 mmol), tetrabutilamonijum sulfat (50 mas.% rastvor u H2O, 28.7 mL, 24.96 mmol), katalitička količina vodonik peroksida (30% u H2O, 12.75 mL, 125 mmol), toluen (200 mL) i 2-(((2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-il)tio)pirimidin (od intermedijera EE22, Faza 3; 52 g, 250 mmol). Reakcija je mešana na 45°C tokom 5 min za koje vreme vodonik peroksid 30% u H2O (58.6 mL, 574 mmol) je dodat u porcijama (10 mL u svakom periodu). Pet min posle dodavanja prvog dela vodonik peroksida, egzoterm je primećen (65°C), reakcija je izmeštena iz uljnog kupatila, dodavanje je zaustavljeno, a fiola smešten u H2O kupatilo do stabilizovanja temperature. Fiola je izmeštena iz H2O kupatila i dodavanje u porcijama vodonik peroksida nastavljeno je brzinom kojom je je unutrašnja temperatura ostala između 45°C i 55°C (∼ 40 min). Ledeno kupatilo je korišćeno ako je temperatura prelazila iznad 60°C, a uljno kupatilo upotrebljeno je ako je temperatura padala ispod 45°C. Reakcija je zatim mešana na 45°C tokom 1 h. Reakcija je razblažena sa 1400 mL EtOAc i ekstrahovana dva puta sa 500 mL H2O i jednom sa 500 mL fiziološkog rastvora. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, koncetrovan, i sirova materija prečišćena na Combiflash® (330 g zlatne SiO2kolone na 30 grama sirove materije), eluiranjem sa 0% - 50% EtOAc u heptanima da bi se dobio 2-(((2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-il)sulfonil)pirimidin (55.7 g, 232 mmol) kao svetlo žuto ulje.

FAZA 5: NATRIJUM (2R,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFINAT

[0254]

[0255] Rastvoru 2-(((2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-il)sulfonil)pirimidin (od intermedijera EE22, Faza 4; 52 g, 216 mmol) u MeOH (400 mL) na rt je dodat natrijum metoksid rastvor (51.0 mL, 223 mmol) preko 70 min. Natrijum metoksid je dodat u porcijama, unutrašnja temperatura je praćena, a dodavanje je usporilo ili je reakcija ohlađena u H2O kupatilu, nedozvoljavajući da unutrašnje temperatura pređe 30°C. Mešavina je koncetrovana rotacionim uparavanjem, a voštana čvrsta materija je titruisana sa MTBE (dodavanjem 200 mL MTBE, mešano tokom 1 h upotrebom spatule radi razbijanja grudvica), filtrirana (upotrebom toka N2preko filter kolača), i oprana 100 mL hladnom MTBE radi dobijanja natrijum (2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfinata (46 g, 250 mmol) kao beličasta čvrsta materija.

FAZA 6: (2R,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID

[0256] U 1000 mL 3-grlu-RBF je dodat natrijum (2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfinat (od intermedijera EE22, Faza 5; 46 g, 225 mmol), 500 mL H2O i KOAc (44.1 g, 449 mmol) na rt. Fiola je smeštena u 45°C zagrejano uljno kupatilo, a hidroksilamin-O-sulfonska kiselina (21.09 g, 187 mmol) je dodata u porcijama preko 90 min. Unutrašnja temperatura reakcija je praćena, a reakcija je uklonjena iz uljnog kupatila (ukoliko je bilo potrebno) kako bi se kontrolisao egzoterm (Tmax = 55°C). Reakcija je praćena sa LC/MS svakih 10 min i bila je potpuna po dodavanju 0.83 eq. hidroksilamin-O-sulfonske kiseline. Mešavina je zatim ohlađena na rt i ekstrahovana sa 1000 mL EtOAc. Organska faza je ekstrahovana tri puta sa 500 mL 1 N HCl, dva puta sa 300 mL sat. natrijum bikarbonata, jednom sa 200 mL fiziološkog rastvora, osušena preko Na2SO4, filtrirana, i koncetrovana rotacionim uparavanjem da bi se obezbedio (2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamid (32 g, 181 mmol) kao bela čvrsta materija.

PRIMER 1. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',11'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

4

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>·0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0257]

FAZA 1: 2,2-DIMETILPENT-4-EN-1-OL

[0258]

[0259] U 100 mL fiolu je dodat metil 2,2-dimetilpent-4-enoat (Sigma-Aldrich; 8.40 g, 59.1 mmol), litijum tetrahidroborat (4.06 mL, 124 mmol) i zatim polako (1 mL svakih 5 min) MeOH (5.26 mL, 130 mmol). Reakcija je mešana na 22°C tokom 2 h. Reakcija je zatim ugašena sa 300 mL H2O i ekstrahovana 2 puta sa 300 mL Et2O. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, i rastvarač je uklonjen rotacionim uparavanjem (polako duže od 4 h sa H2O kupatilom na 0°C i polako snižavajući pritisak, bez tragova proizvoda u zamci) da bi se dobio 2,2-dimetilpent-4-en-1-ol (6.75 g, 59.1 mmol, 100 % prinos) kao bistro ulje.

FAZA 2: 2,2-DIMETILPENT-4-EN-1-IL METANSULFONAT

[0260]

[0261] Rastvoru 2,2-dimetilpent-4-en-1-ola (iz Faze 1, 6.5 g, 56.9 mmol) u DCM (40 mL) ohlađen na -78°C je dodat MsCl (6.75 mL, 85 mmol). Posle dodavanja mešavina je smeštena u ledeno kupatilo i mešana tokom 16 h (kupatilo je bilo na rt posle 16 h). Reakcija je filtrirana i razblažena sa 400 mL DCM. Organski sloj je ekstrahovan jednom sa 200 mL H2O i ponovo sa 200 mL u HCl. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, i koncetrovan da bi se dobilo narandžasto ulje. Sirovi proizvod prečišćen je na Combiflash® (80g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 10% do 50% EtOAc u heptanima, da bi se dobio 2,2-dimetilpent-4-en-1-il metansulfonat (6.66 g, 34.6 mmol, 60.8 % prinos) kao bistro ulje.

FAZA 3: 2-((2,2-DIMETILPENT-4-EN-1-IL)TIO)PIRIMIDIN

[0263] Rastvor pirimidin-2-tiol (962 mg, 8.58 mmol) i natrijum metoksida (30 mas.% rastvor u metanolu, 1.825 mL, 9.83 mmol) u MeOH (8 mL) tretiran je rastvorom 2,2-dimetilpent-4-en-1-il metansulfonata (1500 mg, 7.80 mmol) u 2 mL MeOH. U taj rastvor je dodat 20 mL DMF, a zatim je rastvordegasiran propuštanjem mehurića argona kroz reakcionu mešavinu tokom 10 min. Reakcija je zagrejana na 130°C uz ventiliranje MeOH kroz dve igle veličine 18 tokom 11 h. Reakcija je razblažena sa 300 mL EtOAc i ekstrahovana dva puta sa 200 mL fiziološkog rastvora. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, koncetrovan, i sirova materija prečišćena na Combiflash® (24g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 10% do 50% EtOAc u heptanima, da bi se dobio 2-((2,2-dimetilpent-4-en-1-il)tio)pirimidin (1250 mg, 6.00 mmol, 77 % prinos) kao bistro ulje.

FAZA 4: 2-((2,2-DIMETILPENT-4-EN-1-IL)SULFONIL)PIRIMIDIN

[0264]

[0265] U 25 mL fiolu dodati su fenilfosfonska kiselina (0.056 mL, 0.504 mmol), natrijum volframat oksid dihidrat (0.051 mL, 0.504 mmol), tetrabutilamonijum sulfat (50 mas.% rastvor u H2O, 0.580 mL, 0.504 mmol) i vodonik peroksid (30% u H2O, 1.287 mL, 12.60 mmol). Reakcija je mešana na 22°C tokom 5 min za koje vreme 2-((2,2-dimetilpent-4-en-1-il)tio)pirimidin (iz Faze 3, 1050 mg, 5.04 mmol) je dodat kao rastvor u 5 mL toluena. Reakcija je mešana 22°C tokom 30 min zatim na 50°C tokom 1 h. Reakcija je razblažena sa 300 mL EtOAc i ekstrahovana jednom sa 100 mL H2O i zatim jednom sa 100 mL fiziološkog rastvora. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, koncetrovan i sirova materija prečišćena na Combiflash® (12g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 10% do 50% EtOAc u heptanima, da bi se dobio 2-((2,2-dimetilpent-4-en-1-il)sulfonil)pirimidin (910 mg, 3.79 mmol, 75 % prinos) kao bistro ulje.

FAZA 5: NATRIJUM 2,2-DIMETILPENT-4-EN-1-SULFINAT

[0266]

[0267] U 100 mL fiolu je dodat 2-((2,2-dimetilpent-4-en-1-il)sulfonil)pirimidin (iz Faze 4, 910 mg, 3.79 mmol) i MeOH (20 mL) za koje vreme natrijum metoksid rastvor (30 mas.% rastvor u metanol, 0.710 mL, 3.79 mmol) je dodat na 22°C i mešavina je mešana tokom 45 min. Reakciona mešavina je zatim koncetrovana rotacionim uparavanjem i ostatak je titruisan sa Et2O. Čvrsta materija je sakupljena i osušena da bi se dobio natrijum 2,2-dimetilpent-4-en-1-sulfinat (465 mg, 2.52 mmol, 66.7 % prinos) kao svetlo narandžasta čvrsta materija.

FAZA 6: 2,2-DIMETILPENT-4-EN-1-SULFONAMID

[0268]

[0269] Rastvoru natrijum 2,2-dimetilpent-4-en-1-sulfinata (iz Faze 5, 465 mg, 2.52 mmol) i natrijum acetata (414 mg, 5.05 mmol) u H2O (20 mL) na rt je dodata hidroksilamin-o-sulfonska kiselina (571 mg, 5.05 mmol). Mešavina je zagrejana na 50°C i mešana tokom 1 h zatim mešana na rt tokom 4 h.

Mešavina je ekstrahovana sa EtOAc, organska faza je osušen preko Na2SO4, filtrirana i koncetrovana. Sirova materija prečišćena je na Combiflash® (12g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 10 % do 50% EtOAc u heptanima, da bi se obezbedio 2,2-dimetilpent-4-en-1-sulfonamid (246 mg, 1.388 mmol, 55.0 % prinos) kao bela čvrsta materija.

FAZA 7: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-HIDROKSI-5,5-DIMETIL-6-SULFAMOILHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0270]

[0271] U 100 mL fiolu je dodat (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A; 100 mg, 0.196 mmol), 2,2-dimetilpent-4-en-1-sulfonamid (iz Faze 6, 104 mg, 0.588 mmol) i DCE (2 mL). Rastvor je pošprcan argonom tokom 15 min za koje vreme (1,3-dimesitilimidazolidin-2-ilidene)(2-izopropoksibenziliden)rutenijum(VI) hlorid (12.29 mg, 0.020 mmol) je dodat kao 0.2 mL rastvor u DCE na rt. Mešavina je mešana na rt tokom 16 h. Kroz reakcionu mešavinu je zatim propušten vazduh u mehurićima tokom 5 min pa je filtrirana. Rastvarač je uklonjen iz filtrata, a sirovi proizvod je direktno prečišćen na Combiflash® (12g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 50% - 90% EtOAc u heptanima 0.2% AcOH, da bi se dobila (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksi-5,5-dimetil6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilna kiselina (98 mg, 0.159 mmol, 81 % prinos) kao bela čvrsta materija.

FAZA 8: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',11'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0∼3,6∼.0∼19,24∼]PEN TAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0272] U 250 mL fiolu koja sadrži (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksi-5,5-dimetil-6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilnu kiselinu (iz Faze 7, 98 mg, 0.159 mmol) koja je prethodno osušena azeotropiranjem dva puta sa 5 mL toluena, dodat je N,N-dimetilpiridin-4-amin (33.0 mg, 0.270 mmol) i 100 mL DCM. Reakciona mešavina je ohlađena na 0°C kada je dodat N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (60.9 mg, 0.318 mmol). Reakcija je mešana na rt tokom 12 h. Mešavina je zatim ugašena sa 100 mL 1N HCl i estrahovan sa 300 mL DCM. Organski sloj je osušen preko anhidrovan Na2SO4, filtriran, i koncetrovan rotacionim uparavanjem. Sirova materija je prvo prečišćena na Combiflash® (12g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 30% - 70 % EtOAc u heptanima 0.2% AcOH, praćeno preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; Phenomenex,, Torrance, CA; gradijent eluiranja od 10% do 90% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 45 min postupak), da bi se dobio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-hloro-7'-hidroksi-11',11'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (2.5 mg, 4.17 µmοl, 2.63 % prinos) kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.35 (br. s., 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.85 - 6.79 (m, 1H), 5.98 - 5.82 (m, 1H), 5.69 (dd, J=8.1, 15.4 Hz, 1H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 4.14 - 4.01 (m, 2H), 4.15 -3.94 (m, 1H), 3.79 - 3.60 (m, 2H), 3.25 (d, J=13.3 Hz, 2H), 3.14 - 2.95 (m, 1H), 2.86 - 2.62 (m, 2H), 2.49 -2.21 (m, 3H), 2.14 - 1.89 (m, 4H), 1.86 - 1.80 (m, 3H), 1.69 - 1.61 (m, 1H), 1.48 - 1.36 (m, 1H), 1.26 (s, 6H). m/z (ESI, ve jon) 599.0 (M+H)<+>.

PRIMER 2. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0273]

FAZA 1: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIALIL)CIKLOBUTIL)METIL)-N-(((2R,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-IL)SULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO [BENZO [B] [1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID

[0274]

[0275] DMAP (3.42 g, 28.0 mmol) je dodat rastvoru (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA11A; 7.7 g, 16.45 mmol) i (2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida (Intermedijer EE22; 5.83 g, 32.9 mmol) u DCM (411 mL) ohlađen na 0°C. EDC hidrohlorid (6.31 g, 32.9 mmol) je zatim dodat polako u porcijama. Mešavina je mešana omogućavajući joj da dostigne ambijentalnu temperaturu preko noći. Mešavina je oprana 1N HCl i fiziološkim rastvorom, a vodeni sloj je ponovo estrahovan sa EtOAc. Kombinovane organske materije su osušene preko MgSO4, filtrirane i koncetrovane. Žuti uljasti ostatak je uveden na 220 ISCO zlatnu kolonu i prečišćen eluiranjem sa 0 % do 20 % EtOAc (koji sadrži 0.3 % AcOH)/heptane, da bi se obezbedio (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-N-(((2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-il)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamid (7.89 g, 12.58 mmol, 76 % prinos).

FAZA 2: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0276] U 20L reaktor obavijen argonom dopunjeno je 14 L 1,2-DCE. (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-N-(((2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-il)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamid (18.75 g, 29.9 mmol) je dodat kao rastvor u 400 mL 1,2-DCE praćeno 400 mL ispiranjem. Reaktor je zatvoren i prečišćen argonom. Hoveyda-Grubbs II (1.873 g, 2.99 mmol) je dodat kao rastvor u 150 mL 1,2-DCE praćeno 50 mL ispiranjem. Reaktor je zagrejan na 60°C duže od 1h sa argonskim pomeranjem praznog prostora i održavanjem na toj temperaturi tokom 9 h. Reakcija je ugašena dodavanjem 2-(2-(viniloksi)etoksi)etanol (1.501 g, 11.36 mmol), ohlađena na ambijentalnoj temperaturi, i koncentrovana do ∼ 200 mL zapremine rotacionim uparavanjem. Reakcija je transferovana U 1 L RBF i razblažena do 500 mL zapremine sa 1,2-DCE.

Reakcija je tretirana sa 52 g Silicycle Si-Tiol (Silicycle Inc., Quebec City, Quebec CANADA Cat# R51030B) uz mešanje tokom 9 h na 40°C, filtrirana i isprana sa 2 x 65 mL DCM. Rastvor je propušten kroz Whatman GF/F filter čašu (GE Healthcare Bio-Sciences Pittsburgh, PA, USA) radi dobijanja transparentnog žutog rastvora. Reakcija je koncentrovana radi obezbeđivanja sirovog proizvoda mase od 27.4 g. Ostatak je suspendovan u 250 mL IPAc i uparen do suvoće tri puta. Reakcija je suspendovana u 270 mL IPAc, zagrejana do rastvaranja, ostavljena da se ohladi na ambijentalnoj temperaturi, i mešana tokom 18. Čvrste materije su filtrirane i oprane sa 65 mL IPAc. Čvrsta materija je osušena na vazduhu tokom 30 min zatim smeštena pod visoki vakuum tokom 3 h radi dobijanja 12.56g (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida koji je iznosio 91.7 mas.%<1>H NMR (500 MHz, CD2Cl2) δ 8.06 (s, 1 H), 7.71 (d, J=8.56 Hz, 1 H), 7.17 (dd, J=8.44, 2.32 Hz, 1 H), 7.09 (d, J=2.20 Hz, 1 H), 6.91 (s, 3 H), 5.81 (ddd, J=14.92, 7.82, 4.16 Hz, 1 H), 5.71 (dd, J=15.41, 8.31 Hz, 1 H), 4.16 - 4.26 (m, 2 H), 3.83 (d, J=14.43 Hz, 1 H), 3.69 (d, J=14.43 Hz, 1 H), 3.25 (d, J=14.43 Hz, 1 H), 3.04 (dd, J=15.28, 9.66 Hz, 1 H), 2.68 - 2.84 (m, 2 H), 2.41 (app qd, J=9.80, 3.70 Hz, 1 H), 2.25 - 2.34 (m, 1H), 1.93 - 2.00 (m, 5 H), 1.74 - 2.11 (m, 9 H), 1.62 - 1.73 (m, 1 H), 1.43 (d, J=7.09 Hz, 3 H) 1.35 - 1.42 (m, 1 H) 1.03 (d, J=6.60 Hz, 3 H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.2 (M+H)<+>.

PRIMER 3. (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0277]

[0278] 1000 mL RBF napunjena je sa (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-N-(((2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-il)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamidom (Primer 2, Faza 1, 710 mg, 1.132 mmol) i DCM (569.00 mL). Rastvor je pošprcan argonom tokom 15 min, zatim Hoveyda-Grubbs II (70.9 mg, 0.113 mmol) je dodat. Mešavina je mešana na 45°C tokom 15 h. Reakciona mešavina je pošprcana vazduhom tokom 20 min uz hlađenje na ambijentalnoj temperaturi, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovo ulje apsorbovano je na čepu SiO2gela i prečišćeno kroz 220 g ISCO zlatne kolone, eluiranjem sa 10-20 (15 min)-50 % EtOAc (koja sadrži 0.3% AcOH) u heptanima preko 36 min da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'R)-6-hloro7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 3) kao prvi eluirajući niži izomer praćeno (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksidom (Primer 2) kao drugi eluirajući viši izomer. Polučist materijal dobijen na ovaj način je uveden na SiO2gel kolonu i prečišćen eluiranjem sa 5% acetonom u DCM da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje.<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.83 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.11 (dd, J=1.6, 8.2 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.93 (d, J=8.1 Hz, 1H), 5.82 - 5.75 (m, 1H), 5.67 (dd, J=6.5, 11.4 Hz, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.12 - 4.05 (m, 2H), 3.85 - 3.76 (m, 2H), 3.67 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.25 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.28 - 3.19 (m, 1H), 2.83 - 2.65 (m, 3H), 2.38 - 2.23 (m, 2H), 2.19 - 2.11 (m, 2H), 2.10 - 1.99 (m, 3H), 1.97 - 1.87 (m, 2H), 1.87 - 1.80 (m, 1H), 1.79 - 1.70 (m, 2H), 1.47 (d, J=7.3 Hz, 3H), 1.47 - 1.40 (m, 1H), 1.06 (d, J=6.6 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.1 (M+H)<+>.

PRIMER 4. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON-13',13'-DIOKSID

[0279]

[0280] U suspenziju (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'hspiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 2; 32.6 g, 49.1 mmol) (koji sadrži 9.8% toluen, početni materijal ne potpuno rastvorljiv u Me-THF) i MeI (15.2 mL, 245 mmol) u Me-THF (820 mL) dodat je KHMDS (1.0 M u THF, 167 mL, 167 mmol) ukapavanjem tokom 30 min održavajući reakcione temperature između - 44°C i - 38°C pod N2. Posle je mešavina mešana na - 44°C tokom 30 min, reakcija je ostavljena da se zagreje na rt i mešana tokom 1.5 h (LC/MS potvrđuje da je reakcija potpuna). Reakciona mešavina je ohlađena na 5°C, ugašena (170 mL sat. vodena NH4Cl i 170 mL H2O) održavajući temperature između 5°C i 14°C, i zakišeljena (340 mL 10% vodena limunska kiselina). Organski sloj odvojen, a vodeni sloj je ponovo estrahovan sa EtOAc (500 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani fiziološkim rastvorom (3 × 500 mL), osušeni (MgSO4), i koncetrovani pod sniženim pritiskom da bi se obezbedilo sirovo ciljano

1

jedinjenje (30.1 g, 49.1 mmol, kvantitativno) (čistoća >98% sa ne preko 1% većih nečistoća putem HPLC) kao svetlo žuto čvrsta materija. Posle toga, kada je reakcija iste skale je ponovljena četiri puta, svi sirovi proizvodi (4 × 49.1 mmol = 196 mmol) rastvoreni su u EtOAc, kombinovani, i koncetrovani pod sniženim pritiskom. Zatim je kombinovani sirovi proizvod rekristalizovan kako sledi: etanol (800 mL) je dodat u sirovi proizvod, a rezultujući suspenzioni rastvor je protresen uz zagrevanje rastvora tokom 20 min. H2O (250 mL) je dodata ukapavanjem tokom 30 min na rt i suspenzija je ohlađena do 0°C. Posšto je suspenzija držana u ledenom kupatilu tokom4 h, čvrst proizvod je filtriran kroz filter papir. Filter kolač je ispran ledeno-hladnom 30% H2O u EtOH (300 mL) i osušen na vazduhu tokom 2 dana. Proizvod je dalje osušen pod visokim vakuumom na 40°C tokom 4 dana da bi se obezbedili čisto ciljano jedinjenje (115 g, 188 mmol, 96 % prinos) kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.91 (s, 1 H), 7.65 (d, J= 8.6 Hz, 1 H), 7.27 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1 H), 7.17 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.04 (dd, J = 8.2, 2.0 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.76 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 5.71 (ddd, J = 15.1, 9.7, 3.5 Hz, 1 H), 5.50 (ddd, J = 15.2, 9.2, 1.1 Hz, 1 H), 4.08 (qd, J = 7.2, 7.2, 7.2, 1.5 Hz, 1 H), 4.04 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.99 (d, J = 12.3 Hz, 1 H), 3.73 (d, J = 14.9 Hz, 1 H), 3.56 (d, J= 14.1 Hz, 1 H), 3.53 (dd, J = 9.1, 3.3 Hz, 1 H), 3.19 (d, J = 14.1 Hz, 1 H), 3.09 (s, 3 H), 3.03 (dd, J = 15.4, 10.4 Hz, 1 H), 2.79 (dt, J = 17.0, 3.5, 3.5 Hz, 1 H), 2.69 (ddd, J = 17.0, 10.7, 6.3 Hz, 1 H), 2.44-2.36 (m, 1 H), 2.24-2.12 (m, 2 H), 2.09 (ddd, J= 15.5, 9.6, 2.3 Hz, 1 H), 1.97 (dt, J = 13.6, 3.6, 3.6 Hz, 1 H), 1.91-1.80 (m, 4 H), 1.80-1.66 (m, 3 H), 1.38 (td, J = 12.3, 12.3, 3.5 Hz, 1 H), 1.33 (d, J = 7.2 Hz, 3 H), 0.95 (d, J= 6.8 Hz, 3 H); [α]D(24°C, c = 0.0103 g/mL, DCM) = - 86.07 °; m.p.222.6 - 226.0°C; FT-IR (KBr): 3230 (b), 2931 (b), 1688 (s), 1598 (s), 1570 (s), 1505 (s), 1435 (s), 1384 (s), 1335 (s), 1307 (s), 1259 (s), 1155 (s), 1113 (s), 877 (s), 736 (s) cm<-1>; Anal. Calcd. za C33H41ClN2O5S: C, 64.64; H, 6.74; N, 4.57; Cl, 5.78; S, 5.23. Found: C, 64.71; H, 6.81; N, 4.65; Cl, 5.81; S, 5.11; HRMS (ESI) m/z 613.2493 [M H]<+>(C33H41ClN2O5S zahteva 613.2503).

[0281] Matična tečnost je koncetrovana pod sniženim pritiskom, a dalje prečišćavanje ostatka fleš hromatografijom na koloni (200 g SiO2, 10% i 10% do 45% i 45% EtOA/Heks w/ 0.3% AcOH, gradijent eluiranja) daje dodatno čistog proizvod (3.1 g, 5.1 mmol, 2.6%) kao beličasta čvrsta materija.

PRIMER 5. (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

2

[0283] Rastvoru (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'hspiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 3; 34 mg; 0.057 mmol) u THF ohlađen na 0°C je dodat natrijum hidrid (60% disperzija u mineralnom ulju; 22.70 mg, 0.567 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 20 min, i zatim MeI (0.018 mL, 0.284 mmol) je dodat. Reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 1 h, zatim ugašena sa vodenom NH4Cl, i razblažena sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko MgSO4i koncetrovan. Prečišćavanje ovog sirovog materijala hromatografijom na koloni eluiranjem sa 10-40 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH)/heptani daje (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'R)-6-hloro-7'-metoksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (34 mg, 0.054 mmol, 95% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.29 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.01 (dd, J=1.6, 7.8 Hz, 1H), 6.92 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.90 - 5.80 (m, 1H), 5.54 (t, J=10.2 Hz, 1H), 4.14 - 4.04 (m, 3H), 3.87 - 3.79 (m, 2H), 3.73 (d, J=14.7 Hz, 1H), 3.32 (d, J=14.5 Hz, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.28 - 3.19 (m, 1H), 2.82 - 2.73 (m, 2H), 2.62 (t, J=10.6 Hz, 1H), 2.55 - 2.44 (m, 1H), 2.29 - 2.21 (m, 1H), 2.10 - 1.97 (m, 4H), 1.97 - 1.80 (m, 4H), 1.75 (dd, J=8.9, 18.7 Hz, 1H), 1.48 (d, J=7.4 Hz, 3H), 1.43 (br. s., 1H), 1.08 (d, J=6.5 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 613.3 (M+H)<+>.

PRIMER 6. (1S,3'R,6'R,7'S,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0284]

[0285] Mešavina (15,3'R,6'R,7'S,8'E,11'5,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'hspiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 2, 7.5 mg, 0.013 mmol) i platina (IV) oksid (2.84 mg, 0.013 mmol) u EtOAc (1.536 mL) je mešana pod atmosferom H2(balon) na ambijentalnoj temperaturi tokom 45 min. Reakciona mešavina je zatim filtrirana kroz filter špric. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz Redi-Sep® prethodno spakovanu SiO2gel kolonu (4 g), eluiranjem sa 15 % do 50 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH)/heptani, da bi se obezbedio naslovljen proizvod.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.24 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.06 (d, J=1.8 Hz, 1H), 6.99 (dd, J=2.0, 8.0 Hz, 1H), 6.93 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.10 (s, 2H), 4.05 (ddd, J=1.2, 7.2, 14.3 Hz, 1H), 3.82 (d, J=15.3 Hz, 1H), 3.74-3.69 (br. S., 1H), 3.68 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.23 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.06 (dd, J=7.3, 15.4 Hz, 1H), 2.84 - 2.68 (m, 2H), 2.38 (d, J=3.5 Hz, 2H), 2.08 - 1.96 (m, 3H), 1.96 -1.88 (m, 1H), 1.88 - 1.75 (m, 2H), 1.74 - 1.56 (m, 4H), 1.47 (d, J=12.1 Hz, 2H), 1.40 (d, J=7.2 Hz, 3H), 1.32 -1.26 (m, 2H), 1.23 - 1.15 (m, 2H), 1.00 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 601.2 (M+H)<+>.

PRIMER 7. (1S,3'R,6'R,7'S,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0286]

[0287] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od mešavine (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-metoksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on-13', 13'-dioksida (Primer 4) sledeći postupak opisan u Primeru 6.<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.14 (s, 1H), 7.72 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.00 (d, J=1.7 Hz, 1H), 6.95 (dd, J=2.0, 8.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.10 (s, 2H), 4.07 (ddd, J=1.2, 7.1, 14.2 Hz, 1H), 3.81 (dd, J=2.0, 15.2 Hz, 1H), 3.68 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.22 (dd, J=9.0, 14.4 Hz, 1H), 3.03 (dd, J=8.6, 15.4 Hz, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 2H), 2.60 - 2.51 (m, 1H), 2.41 - 2.32 (m, 1H), 2.07 - 2.01 (m, 1H), 1.99 - 1.88 (m, 2H), 1.88 - 1.77 (m, 1H), 1.76 - 1.68 (m, 1H), 1.68 - 1.58 (m, 2H), 1.53 - 1.46 (m, 2H), 1.45 - 1.42 (m, 1H), 1.40 (d, J=7.1 Hz, 3H), 1.29 (br. s., 1H), 1.25 - 1.21 (m, 2H), 1.20 - 1.10 (m, 2H), 0.99 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 615.1 (M+H)<+>.

4

PRIMER 8. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0288]

FAZA 1: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-HIDROKSI-6-SULFAMOILHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0289]

[0290] U 100 mL fiolu je dodata (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5 -tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A; 500 mg, 0.980 mmol), pent-4-en-1-sulfonamid (Intermedijer EE19; 878 mg, 5.88 mmol), i DCE (14 mL). Rastvor je pošprcan argonom tokom 15 min za koje vreme Hoveyda-Grubbs II (61.4 mg, 0.098 mmol) je dodat kao 0.2 mL rastvor u DCE na rt. Mešavina je mešana na rt i pošprcana argonom (bočica je ventilirana) tokom 2 h. Kroz reakcionu mešavinu je zatim propušten vazduh u mehurićima tokom 5 min i filtrirana do razdvajanja nerastvorljivog sulfonamid homodimera. Sirovi proizvod prečišćen je na Combiflash® (24g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 50% - 90% EtOAc u heptanima 0.2% AcOH) da bi se dobila (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksi-6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2h,2'h-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilna kiselina (439 mg, 0.745 mmol, 76 % prinos) kao bela čvrsta materija.

FAZA 2: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0291] U 1 L fiolu koja sadrži (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksi-6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilnu kiselinu (iz Faze 1, 439 mg, 0.745 mmol), koja je prethodno osušena azeotropiranjem dva puta sa 10 mL toluena, je dodat N,N-dimetilpiridin-4-amin (155 mg, 1.267 mmol) i 400 mL DCM. Reakciona mešavina je ohlađena na 0°C za koje vreme N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (286 mg, 1.490 mmol) je polako dodat. Reakcija je zatim mešana na rt tokom 18 h. Mešavina je ugašena sa 200 mL 1N HCl i estrahovana sa 600 mL EtOAc. Organski sloj je osušen preko anhidrovane Na2SO4, filtriran, i koncetrovan rotacionim uparavanjem. Sirovi proizvod prečišćen je na Combiflash® (24g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 30% - 70% EtOAc u heptanima, da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.75 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.20 (dd, J=2.9, 7.6 Hz, 1H), 7.12 (d, J=3.7 Hz, 1H), 7.00 (dd, J=1.7, 8.8 Hz, 1H), 6.94 (d, J=8.3 Hz, 1H), 6.88 (d, J=2.2 Hz, 1H), 5.95 - 5.86 (m, 1H), 5.70 (dd, J=8.8, 15.9 Hz, 1H), 4.25 - 4.19 (m, 1H), 4.22 (dd, J=4.4, 8.6 Hz, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 3H), 4.14 - 4.05 (m, 3H), 3.84 (d, J=15.2 Hz, 1H), 3.68 (d, J=15.2 Hz, 1H), 3.09 (dd, J=8.3, 15.9 Hz, 1H), 2.87 -2.74 (m, 2H), 2.45 - 2.30 (m, 3H), 2.14 - 1.88 (m, 5H), 1.86 - 1.69 (m, 4H). m/z (ESI, ve jon) 571.2 (M+H)<+>.

PRIMER 9. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-HLORO-7'-METOKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0292]

[0293] U 100 mL fiolu je dodat (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-hloro-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 8, 138 mg, 0.242 mmol), THF (10 mL), i natrijum hidrid (29.0 mg, 1.208 mmol). Reakcija je mešana na rt tokom 15 min za koje vreme MeI (0.092 mL, 1.480 mmol) je dodat. Reakcija je mešana na rt tokom 2 h za koje vreme su dodatno dodati natrijum hidrid (58.0 mg, 2.42 mmol) i MeI (0.092 mL, 1.480 mmol) i reakcija je mešana na rt tokom dodatnih 16 h. Reakcija je ugašena sa 100 mL satd NH4Cl i estrahovana sa 400 mL EtOAc. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, i rastvarač je uklonjen rotacionim uparavanjem. Sirovi proizvod prečišćen je na Combiflash® (12g zlatne SiO2kolone), eluiranjem sa 10% do 50% EtOAc u heptanima, da bi se dobio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-hloro-7'-metoksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (120 mg, 0.205 mmol, 85 % prinos) as beličasta čvrsta materija.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.97 - 6.87 (m, 2H), 6.84 (d, J=1.6 Hz, 1H), 5.88 (ddd, J=5.2, 8.1, 15.1 Hz, 1H), 5.53 (dd, J=8.7, 15.4 Hz, 1H), 4.30 (ddd, J=4.8, 9.8, 15.0 Hz, 1H), 4.15 - 3.98 (m, 2H), 3.84 - 3.69 (m, 2H), 3.67 (dd, J=3.8, 8.7 Hz, 1H), 3.36 - 3.21 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.01 (dd, J=10.3, 15.2 Hz, 1H), 2.87 - 2.64 (m, 2H), 2.52 - 2.29 (m, 3H), 2.25 - 1.91 (m, 5H), 1.88 - 1.75 (m, 3H), 1.71 - 1.60 (m, 2H), 1.41 (t, J=12.4 Hz, 1H). m/z (ESI, ve jon) 585.0 (M+H)<+>.

PRIMER 10. (1S,3'R,6'R,7S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'HSPIRO[NAFTALEN-1,22'[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTA COSA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0294]

Faza 1: (1'S)-N-(BUT-3-EN-1-ILSULFONIL)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-(1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B] [1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN] -7-KARBOKSAMID

[0295]

[0296] DMAP (0.830 g, 6.80 mmol) je dodat rastvoru (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA13A; 1.82 g, 3.78 mmol) i but-3-en-1-sulfonamida (EE15; 1.873 g, 13.86 mmol) u DCM (140 mL) koji je ohlađen na 0 °C. EDC (1.303 g, 6.80 mmol) je dodat u porcijama i zatim mešan na ambijentalnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona mešavina je razblažena sa EtOAc (400 mL), oprana u HCl rastvoru (2x5 mL), fiziološkim rastvorom (3 mL), osušena preko anhidrovane Na2SO4, i koncetrovana. Ostatak je uveden u 80g ISCO zlatne kolone i eluiran sa 0 % do 15 % EtOAc (koji sadrži 0.3 % AcOH)/Heks (koji sadrži 0.3 % AcOH) da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (2.09 g) kao bela čvrsta materija. m/z (ESI, ve jon) 599.0 (M+H)<+>.

Faza 2: (1S,3'R,6'R,7'S,9'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1 ,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0297]

[0298] 1L RBF napunjena je sa (1'S)-N-(but-3-en-1-il-sulfonil)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-(1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro [benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamidom (iz Faze 1, 1.02 g, 1.70 mmol) u toluenu (587 mL). Mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 10 min radi rastvaranja čvrstog početnog materijala i zatim podvrgnuta trostrukom ciklusu pražnjenje/ponovno punjenje sa N2. U homogeni rastvor je dodat rastvor Hoveyda-Grubbs II (0.213 g, 0.340 mmol) u toluenu (20 mL). Kada je mešavina umešana na 106°C pod N2tokom 75 min, produvan je vazduh tokom 10 min radi deaktiviranja katalizatora, i zatim je koncentrovana. Ostatak je uveden u 330g ISCO zlatne kolone i eluiran sa 0 % do 25 % EtOAc (koji sadrži 0.3 % AcOH)/Heks (koji sadrži 0.3 % AcOH). Drugi pik je naslovljeno jedinjenje (0.27 g) kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ 9.96 (br. s., 1H), 7.78-7.65 (m, 1H), 7.37 (dd, J=1.96, 8.22 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=2.35, 8.61 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.15 Hz, 1H), 7.04 (br. s., 1H), 6.98(m, 1H), 5.66-5.47 (m, 2H), 4.23-4.09 (m, 2H), 3.98 (ddd, J=5.18, 10.56, 15.55 Hz, 1H), 3.86 (dd, J=3.81, 9.49 Hz, 1H), 3.64-3.49 (m, 2H), 3.38 (td, J=4.74, 15.36 Hz, 2H), 2.92 (br. s., 1H), 2.81 (br. s., 1H), 2.79-2.73 (m, 2H), 2.73-2.63 (m, 1H), 2.52 (d, J=12.72 Hz, 1H), 2.40-2.25 (m, 2H), 2.18 (d, J=8.22 Hz, 1H), 2.01-1.52 (m, 8H). m/z (ESI, ve jon) 571.0 (M+H)<+>.

Faza 3: (1S,3'R,6'R'7S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'HSPIRO[NAFTALEN-1,22'[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0299] Mešavina (1S,3'R,6'R,7'S,9'E)-6-hloro-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (iz Faze 2, 0.112 g, 0.196 mmol) i platina (IV) oksida (0.045 g, 0.196 mmol) u EtOAc (33 mL) je mešana pod H2na ambijentalnoj temperaturi tokom 3 h. Mešavina je filtrirana kroz filter špric radi uklanjanja čvrstog katalizatora, a rastvor je koncetrovan da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (112 mg) kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ 8.93 (m, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.15 (m, 3H), 7.09 (d, J=2.35 Hz, 1H), 6.95 (m, 1H), 4.10 (m, 2H), 3.78-3.62 (m, 4H), 3.46-3.34 (m, 1H), 3.26 (d, J=14.28 Hz, 1H), 3.16 (dd, J=9.00, 15.26 Hz, 1H), 2.82-2.71 (m, 2H), 2.45-2.33 (m, 1H), 2.26-2.16 (m, 1H), 2.08-1.16 (m, 17H). m/z (ESI, ve jon) 573.2 (M+H)<+>.

PRIMER 11. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i

PRIMER 12. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0300]

[0301] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogno onom opisanom u Primeru 2 upotrebom mešavine (R)-heks-5-en-sulfonamida (Intermedijer EE20) i (S)-heks-5-en-sulfonamida (Intermedijer EE202), i željeni proizvod, (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (1. epimer izolovan preparativnom reverzno-faznom HPLC, Primer 11) i (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (2. epimer izolovan preparativnom reverzno-faznom HPLC, Primer 12) su izolovani. Zajednička kristalna struktura Primera 11 potvrđuje da metil grupa na 12-položaju ima R stereohemiju.

(1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.74 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=3.5, 11.5 Hz, 1H), 7.12 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.01 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.01 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.94 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.89 - 5.81 (m, 1H), 5.73 (dd, J=7.4, 14.5 Hz, 1H), 4.22 (dd, J=3.5, 7.6 Hz, 1H), 4.18 - 4.12 (m, 1H), 4.09 (d, J=2.0 Hz, 2H), 3.85 (d, J=15.1 Hz, 1H), 3.85 (d, J=15.3 Hz, 1H), 3.68 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.08 (dd, J=10.2, 15.1 Hz, 1H), 2.87 - 2.73 (m, 2H), 2.48 - 2.18 (m, 4H), 2.11 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.05 - 1.65 (m, 8H), 1.52 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.47 - 1.41 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 585.2 (M+H)<+>; (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.73 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=2.5, 8.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.12 - 7.10 (m, 1H), 7.05 (dd, J=1.8, 8.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J=8.6 Hz, 1H), 5.93 - 5.83 (m, 1H), 5.65 (dd, J=5.5, 15.5 Hz, 1H), 4.12 (d, J=6.8 Hz, 2H), 4.06 (dd, J=4.1, 10.2 Hz, 1H), 3.91 (dd, J=6.3, 12.5 Hz, 1H), 3.67 - 3.55 (m, 2H), 3.53 - 3.46 (m, 1H), 3.29 - 3.08 (m, 1H), 2.88 - 2.70 (m, 2H), 2.64 - 2.52 (m, 1H), 2.49 - 2.31 (m, 2H), 1.98 - 1.91 (m, 3H), 1.99 -1.89 (m, 4H), 1.86 - 1.73 (m, 4H), 1.49 (d, J=7.4 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 585.2 (M+H)<+>.

PRIMER 13. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0302]

[0303] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan onom opisanom u Primeru 4 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 11), a željeni proizvod, (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-7'-metoksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid je izolovan kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.75 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=1.8, 8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.00 (dd, J=2.2, 7.8 Hz, 1H), 6.95 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.86 (d, J=1.6 Hz, 1H), 5.92 - 5.84 (m, 1H), 5.58 (dd, J=9.0, 15.1 Hz, 1H), 4.85 - 4.85 (m, 1H), 4.20 (ddd, J=3.0, 6.7, 9.8 Hz, 1H), 4.08 (d, J=2.2 Hz, 2H), 3.86 (d, J=15.3 Hz, 1H), 3.73 (dd, J=2.9, 8.6 Hz, 1H), 3.67 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.26 - 3.23 (m, 3H), 3.08 (dd, J=10.3, 15.2 Hz, 1H), 2.88 - 2.72 (m, 2H), 2.54 - 2.25 (m, 4H), 2.12 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.99 - 1.71 (m, 7H), 1.53 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.50 - 1.40 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 599.2 (M+H)<+>.

PRIMER 14. (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

1

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0304]

FAZA 1: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-N-((R)-PENT-4-EN-2-ILSULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN] -7-KARBOKSAMID

[0305]

[0306] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA13A; 166 mg, 0.344 mmol) i (R)-pent-4-en-2-sulfonamida (intermedijer EE17; 87 mg, 0.585 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 2, Faza 1. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-((R)-pent-4-en-2-ilsulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamid (134 mg, 0.219 mmol, 63.5% prinos).

FAZA 2. (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1 1

[0308] 500 mL RBF napunjena je sa (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-((R)-pent-4-en-2-ilsulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamidom (134 mg, 0.219 mmol) u toluenu (146.00 mL). Mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 10 min radi rastvaranja čvrstog početnog materijala i zatim podvrgnuta trostrukom ciklusu pražnjenje/ponovno punjenje sa N2. U homogeni rastvor je dodat rastvor Hoveyda-Grubbs II (27.4 mg, 0.044 mmol) u toluenu (8 mL) na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je mešana na 106°C pod N2tokom 80 min. Vazduh je produvan kroz rastvor tokom 10 min radi deaktiviranja katalizatora, a zatim mešavina je koncetrovana. Sirovo tamno ulje apsorbovano je na čepu SiO2gela i prečišćeno hromatografijom kroz 24 g ISCO kolone, eluiranjem sa 10 % do 20 % do 40% EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 90 min. da bi se obezbedila mešavina naslovljenih jedinjenja.

FAZA 3: (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0309]

[0310] Naslovljeno jedinjenje (94 mg, 0.160 mmol, 79% prinos) sintetizovano je od mešavine (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida i (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (iz Faze 2, 119 mg, 0.203 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 6.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 9.03 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.13 (dd, J=2.2, 8.2 Hz, 1H), 7.10 (br. s., 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.93 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.86 (td, J=5.3, 6.8 Hz, 1H), 3.74 (d,

1 2

J=14.1 Hz, 1H), 3.70 (br. s., 1H), 3.65 (d, J=14.9 Hz, 1H), 3.25 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.13 (dd, J=8.2, 15.5 Hz, 1H), 2.85 - 2.68 (m, 2H), 2.44 (quin, J=8.8 Hz, 1H), 2.25 (ddd, J=5.5, 9.6, 17.8 Hz, 1H), 2.04 - 1.94 (m, 2H), 1.89 (dt, J=5.0, 9.5 Hz, 2H), 1.85 - 1.77 (m, 2H), 1.76 - 1.68 (m, 2H), 1.68 - 1.60 (m, 4H), 1.60 - 1.50 (m, 3H), 1.48 (d, J=7.0 Hz, 3H), 1.46 - 1.35 (m, 2H). MS (ESI, ve jon) m/z 587.1 (M+H)<+>.

PRIMER 15. (1S,3'R,6'R,7'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0311]

FAZA 1: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-N-((S)-PENT-4-EN-2-ILSULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN] -7-KARBOKSAMID

[0312]

[0313] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA13A; 15 mg, 0.031 mmol) i (S)-pent-4-en-2-sulfonamida (Intermedijer EE172; 5.6 mg, 0.037 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 2, Faza 1. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-((S)-pent-4-en-2-ilsulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamid (19 mg, 0.031 mmol).

FAZA 2: (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1 ,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-

1

SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0315] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-((S)-pent-4-en-2-ilsulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida (iz Faze 1, 42.5 mg, 0.067 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 14, Faza 2. Prečišćavanje hromatografijom kroz 24 g ISCO kolone, eluiranjem sa 10 % do 20 % do 40% EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 90 min. praćeno drugim prečišćavanja kroz 12 g ISCO kolone, eluiranjem sa 0 % do 30% EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks daje (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao prvi eluirajući izomer (13.4 mg, 0.023 mmol 34.3% prinos) i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid je dobijen kao drugi eluirajući izomer (13.2 mg, 0.023 mmol 34.3% prinos).

FAZA 3: (1S,3'R,6'R,7'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0316]

[0317] Naslovljeno jedinjenje (7.5 mg, 0.013 mmol, 71% prinos) sintetizovano je od mešavine (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid i (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-

1 4

[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (iz Faze 2,10.8 mg, 0.018 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 6.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 9.72 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.30 (dd, J=2.0, 8.4 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.16 (dd, J=2.4, 8.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.94 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.05 (m, 2H), 3.85 - 3.76 (m, 1H), 3.70 (d, J=15.1 Hz, 1H), 3.60 (br. s., 1H), 3.60 (d, J=13.9 Hz, 1H), 3.26 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.23 - 3.14 (m, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 2H), 2.33 (quin, J=8.6 Hz, 1H), 2.12 (quin, J=8.2 Hz, 1H), 2.04 - 1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.85 (m, 1H), 1.84 -1.71 (m, 5H), 1.71 - 1.64 (m, 2H), 1.64 - 1.52 (m, 3H), 1.49 (d, J=7.2 Hz, 3H), 1.52 - 1.43 (m, 2H), 1.38 -1.28 (m, 2H). MS (ESI, ve jon) m/z 587.2 (M+H)<+>.

PRIMER 16. (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0318]

[0319] Mešavina (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-7'-metoksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 13; 5 mg, 8.34 µmol) i platina (iv) oksida (0.379 mg, 1.67 µmol, Omega) u EtOAc (2.8 mL) umešani su pod H2(balon) na rt tokom 3 hr, zatim filtrirani kroz Celite® radi uklanjanja čvrstog katalizatora, koncetrovani, i prečišćeni preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 40% do 95% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se dobio (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-6-hloro-7'-metoksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H, 15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid (4.4 mg, 7.32 µmol).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.73 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 2H), 6.93 (d, J=9.1 Hz, 2H), 4.14 - 4.03 (m, 3H), 3.83 (d, J=14.7 Hz, 1H), 3.69 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.33 -3.29 (m, 3H overlap sa rastvarač), 3.23 (d, J=14.5 Hz, 1H), 3.06 (dd, J=9.1, 15.4 Hz, 1H), 2.85 - 2.71 (m, 2H), 2.62 (d, J=8.2 Hz, 1H), 2.36 (t, J=8.5 Hz, 1H), 2.10 - 1.84 (m, 5H), 1.84 - 1.56 (m, 6H), 1.55 - 1.40 (m, 6H), 1.38 - 1.24 (m, 3H). m/z (ESI, ve jon) 601.2 (M+H)<+.>

1

PRIMER 17. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID,

PRIMER 18. (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i

PRIMER 19. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'S)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0321] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 2 upotrebom (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksialil)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA11A) i racemske mešavine (R)-hept-6-en-3-sulfonamida (Intermedijer EE21) i (S)-hept-6-en-3-sulfonamid (Intermedijer EE212), i željeni proizvodi, (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 17) kao prvi eluirajući većih izomer izolovan preparativnom reverznofaznom HPLC, (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14] diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 18) kao drugi eluirajući niži izomer izolovan preparativnom reverzno-faznom HPLC, i (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'S)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 19) kao treći eluirajući viši izomer izolovan preparativnom reverzno-faznom HPLC su izolovani. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-

1

dioksid (Primer 17):<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.75 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=2.0, 8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.00 (dd, J=1.8, 8.0 Hz, 1H), 6.93 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.87 (d, J=1.6 Hz, 1H), 5.90 - 5.82 (m, 1H), 5.73 (dd, J=7.8, 15.1 Hz, 1H), 4.21 (dd, J=3.7, 7.8 Hz, 1H), 4.09 (dd, J=12.1, 14.7 Hz, 2H), 4.02 (dd, J=6.5, 13.5 Hz, 1H), 3.85 (d, J=15.1 Hz, 1H), 3.68 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.29 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.08 (dd, J=10.0, 15.3 Hz, 1H), 2.88 - 2.73 (m, 2H), 2.46 - 2.22 (m, 4H), 2.16 - 2.05 (m, 2H), 2.02 - 1.79 (m, 8H), 1.73 (dd, J=9.0, 17.6 Hz, 1H), 1.46 (t, J=12.6 Hz, 1H), 1.20 (t, J=7.5 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 599.2 (M+H)<+>; (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia [1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 18).<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.75 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=2.0, 8.1 Hz, 1H), 6.97 - 6.92 (m, 2H), 5.62 - 5.55 (m, 2H), 4.49 (dd, J=3.5, 7.9 Hz, 1H), 4.09 (dd, J=12.5, 21.8 Hz, 2H), 3.88 (d, J=15.7 Hz, 1H), 3.71 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.62 (br. s., 1H), 2.87 - 2.74 (m, 2H), 2.49 - 2.38 (m, 3H), 2.26 - 2.10 (m, 3H), 2.06 - 1.89 (m, 8H), 1.84 - 1.73 (m, 3H), 1.55 -1.40 (m, 1H), 1.16 (t, J=7.5 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 599.2 (M+H)<+>; i (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'S)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 19):<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.74 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.08 - 7.02 (m, 2H), 6.95 (d, J=9.0 Hz, 1H), 5.92 (ddd, J=5.9, 14.7, 21.5 Hz, 1H), 5.66 (dd, J=6.1, 15.3 Hz, 1H), 4.15 - 4.05 (m, 3H), 3.74 - 3.62 (m, 3H), 3.47 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.51 - 3.43 (m, 1H), 2.88 - 2.74 (m, 2H), 2.58 - 2.33 (m, 3H), 2.24 - 2.03 (m, 4H), 1.97 - 1.73 (m, 8H), 1.63 - 1.45 (m, 1H), 1.17 (t, J=7.5 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 599.2 (M+H)<+.>

PRIMER 20. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-METOKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON13',13'-DIOKSID

[0322]

[0323] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 4 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-

1

dioksid (Primer 17), i željeni proizvod, (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-metoksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid je izolovan kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.75 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1H), 7.12 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.00 (dd, J=1.8, 8.2 Hz, 1H), 6.94 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.86 (d, J=1.6 Hz, 1H), 5.94 - 5.85 (m, 1H), 5.58 (dd, J=8.9, 15.2 Hz, 1H), 4.13 - 4.02 (m, 3H), 3.85 (d, J=14.9 Hz, 1H), 3.74 (dd, J=3.9, 9.0 Hz, 1H), 3.68 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.26 (s, 3H), 3.22 - 3.04 (m, 1H), 2.88 - 2.73 (m, 2H), 2.54 - 2.39 (m, 2H), 2.33 (t, J=7.4 Hz, 2H), 2.12 (qd, J=7.3, 14.4 Hz, 2H), 2.02 - 1.69 (m, 10H), 1.45 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.21 (t, J=7.5 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 613.2 (M+H)<+>.

PRIMER 21. (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-METOKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN] -15'-ON 13',13'-DIOKSID [0324]

[0325] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 6 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-metoksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 20), i željeni proizvodi, (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-metoksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid je izolovan.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.76 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.06 (dd, J=2.0, 8.3 Hz, 1H), 7.00 (d, J=1.7 Hz, 1H), 6.95 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.11 (ddd, J=2.9, 12.0, 14.2 Hz, 2H), 3.88 - 3.81 (m, 2H), 3.69 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.30 (s, 3H), 3.12 (dd, J=8.1, 14.9 Hz, 1H), 2.86 - 2.74 (m, 2H), 2.69 - 2.62 (m, 1H), 2.35 (t, J=7.7 Hz, 1H), 2.15 - 2.05 (m, 2H), 2.01 - 1.85 (m, 5H), 1.82 - 1.63 (m, 4H), 1.47 (br. s., 5H), 1.42 - 1.24 (m, 4H), 1.18 (t, J=7.6 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 615.2 (M+H)<+.>

PRIMER 22. (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1

[0327] Mešavina (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 18; 5.2 mg, 8.68 µmol) i paladijuma 10 mas.% (suve baze) na aktivnom uglju, vlažan (4.6 mg, 4.34 µmol) u 1:1 odnosu za EtOAc:EtOH (3.0 mL) je mešan pod H2na rt preko noći, zatim filtriran kroz Celite® radi uklanjanja čvrstog katalizatora. Organski sloj je koncetrovan i prečišćen preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 40% do 95% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se dobio (1S,3'R,6'R,7'S,12'R)-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid (1.9 mg, 3.35 µmol).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.77 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.21 - 7.02 (m, 4H), 6.97 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J=2.2 Hz, 1H), 4.13 (dd, J=12.1, 22.7 Hz, 2H), 3.92 - 3.80 (m, 2H), 3.76 - 3.70 (m, 2H), 3.13 (dd, J=8.8, 19.2 Hz, 1H), 2.87 - 2.75 (m, 2H), 2.44 - 2.29 (m, 2H), 2.15 - 2.04 (m, 2H), 1.99 - 1.37 (m, 17H), 1.18 (t, J=7.6 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 567.2 (M+H)<+>.

PRIMER 23. (1S,3'R,6'R,7'S,12'S)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN] -15'-ON 13',13'-DIOKSID [0328]

FAZA 1: (S)-6'-HLORO-N-((R)-HEKS-5-EN-3-ILSULFONIL)-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (S)-6'-HLORO-N-((S)-HEKS-5-EN-3-ILSULFONIL)-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID

1

[0330] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA13A; 224 mg, 0.465 mmol) i racemske mešavine (R)-heks-5-en-3-sulfonamida (Intermedijer EE18) i (S)-heks-5-en-3-sulfonamida (Intermedijer EE182; 167 mg, 1.023 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 2, Faza 1. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje mešavinu (S)-6'-hloro-N-((R)-heks-5-en-3-ilsulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamid i (S)-6'-hloro-N-((S)-heks-5-en-3-ilsulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida (235 mg, 0.375 mmol, 81% prinos).

FAZA 2. (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,12'S)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,12'S)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0331]

[0332] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od mešavine (S)-6'-hloro-N-((R)-heks-5-en-3-ilsulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida i (S)-6'-hloro-N-((R)-heks-5-en-3-ilsulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida (iz Faze 1,235 mg, 0.375 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 14, Faza 2. Ovaj sirovi materijal je podvrgnut prvom prečišćavanju

11

hromatografijom kroz 24 g ISCO kolone, eluiranjem sa 10 % do 20 % do 40% EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 60 min da bi se obezbedila mešavina naslovljenih jedinjenja.

FAZA 3: (1S,3'R,6'R,7'5,12'S)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0333]

[0334] Naslovljeno jedinjenje (6.3 mg, 0.010 mmol, 52.3% prinos) sintetizovano je od mešavine (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,12'S)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<1,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetraen]-15'-on13',13'-dioksida i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,12'S)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[9,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (iz Faze 2, 12 mg, 0.020 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 6.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 10.11 (br. s., 1H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.36 (dd, J=2.1, 8.3 Hz, 1H), 7.28 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.15 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.08 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.93 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.06 (d, J=11.5 Hz, 1H), 3.99 (d, J=12.1 Hz, 1H), 3.76 (d, J=15.5 Hz, 1H), 3.65 - 3.61 (m, 1H), 3.59 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.57 - 3.50 (m, 1H), 3.16 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.09 (dd, J=8.5, 15.2 Hz, 1H), 2.83 - 2.67 (m, 2H), 2.25 (quin, J=9.0 Hz, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 3H), 2.03 - 1.88 (m, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 7H), 1.72 - 1.57 (m, 3H), 1.55 - 1.39 (m, 2H), 1.36 - 1.19 (m, 2H), 1.10 (t, J=7.4 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 601.2 (M+H)<+>.

PRIMER 24. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0335]

FAZA 1: (3R,4S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-4-METILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3S,4S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-4-METILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID

[0337] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od N,N-bis(4-metoksibenzil)propan-1-sulfonamida (Intermedijer EE14; 1512 mg, 4.16 mmol) i (R)-pent-4-en-2-il 4-metilbenzensulfonata (pripremljen prema postupku od Sigman, M. S. et al.; J. Am. Chem. Soc., 2012,134(28), 11408-11411; 1999 mg, 8.32 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, faza 1. (3R,4S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metilhept-6-en-3-sulfonamid i (3S,4S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metilhept-6-en-3-sulfonamid dobjeni su kao nerazdvojiva mešavina (335 mg, 0.776 mmol, 18.7 % prinos).

FAZA 2: (3R,4S)-4-METILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3S,4S)-4-METILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID [0338]

[0339] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od (3R,4S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metilhept-6-en-3-sulfonamida i (3S,4S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metilhept-6-en-3-sulfonamida (335 mg, 0.776 mmol, Faza 1) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 2. (3R,4S)- 4-metilhept-6-en-3-sulfonamid i (3S,4S)-4-metilhept-6-en-3-sulfonamid dobjeni su kao nerazdvojiva mešavina (67.6 mg, 0.35 mmol, 45.5% prinos).

FAZA 3: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6R,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILOKT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6S,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILOKT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0341] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A; 40 mg, 0.078 mmol) i mešavine (3R,4S)- 4-metilhept-6-en-3-sulfonamida i (3S,4S)-4-metilhept-6-en-3-sulfonamida (67.6 mg, 0.35 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 3. Mešavina (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6R,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilokt-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilokt-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (46 mg, 0.073 mmol, 92 % prinos) preneta je u sledeću fazu.

FAZA 4. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0342] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6R,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilokt-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilokt-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (63 mg, 0.100 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 4. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 12 g ISCO zlatne kolone, eluiranjem sa 10-40-50 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 24 min, da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao drugi eluirajući viši izomer. Ovaj materijal ponovo je prečišćen hromatografijom kroz 12 g ISCO zlatne kolone, eluiranjem sa 0-10 % acetonom u DCM da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (20 mg, 0.033 mmol, 32.7% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.33 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.96 - 6.88 (m, 3H), 5.86 (ddd, J=3.9, 9.0, 15.1 Hz, 1H), 5.71 (dd, J=8.2, 15.1 Hz, 1H), 4.22 (dd, J=3.9, 8.2 Hz, 1H), 4.09 - 4.08 (m, 2H), 3.98 (ddd, J=1.2, 3.7, 8.8 Hz, 1H), 3.82 (d, J=14.7 Hz, 1H), 3.69 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.25 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.04 (dd, J=9.5, 15.4 Hz,

11

1H), 2.85 - 2.69 (m, 2H), 2.41 (ddd, J=3.7, 9.8, 18.4 Hz, 1H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.21 - 2.11 (m, 1H), 2.10 -2.03 (m, 2H), 1.99 - 1.90 (m, 3H), 1.90 - 1.74 (m, 5H), 1.67 (quin, J=9.5 Hz, 2H), 1.45 - 1.34 (m, 1H), 1.27 (t, J=7.4 Hz, 3H), 1.02 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 613.0 (M+H)<+>.

PRIMER 25. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0343]

[0344] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 24; 10 mg, 0.016 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 4. Prečišćavanje ovog sirovog materijala hromatografijom na koloni eluiranjem sa 10-40 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u heptanima daje (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-metoksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza [8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid (7.3 mg, 0.012 mmol, 71.4% prinos).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.13 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.87 (s, 1H), 5.84 (ddd, J=3.4, 9.6, 15.1 Hz, 1H), 5.51 (dd, J=9.0, 15.2 Hz, 1H), 4.11 - 4.06 (m, 2H), 4.04 - 4.00 (m, 1H), 3.82 (d, J=15.4 Hz, 1H), 3.69 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.64 (dd, J=3.3, 9.2 Hz, 1H), 3.25 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.18 (s, 3H), 3.03 (dd, J=10.1, 15.3 Hz, 1H), 2.84 - 2.69 (m, 2H), 2.44 (ddd, J=3.2, 9.8, 18.6 Hz, 1H), 2.33 (quin, J=8.8 Hz, 1H), 2.28 - 2.21 (m, 1H), 2.15 - 2.09 (m, 1H), 2.09 - 2.02 (m, 2H), 2.01 - 1.90 (m, 3H), 1.90 - 1.73 (m, 4H), 1.72 - 1.61 (m, 1H), 1.39 (t, J=12.6 Hz, 1H), 1.28 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.02 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 627.1 (M+H)<+>.

PRIMER 26. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0347] N,N-bis(4-metoksibenzil)etansulfonamid (Intermedijer EE13; 1030 mg, 2.95 mmol) azeotropovan je u toluenu pod vakuumom tokom 2 h. Pod argonom, THF je dodat i rastvor je ohlađen na -78° C. N-butillitijum rastvor (2.5 M u Heks, 1.533 mL, 3.83 mmol) je zatim dodat i mešavina je mešana na -78° C tokom 60 min. (S)-pent-4-en-2-il 4-metilbenzensulfonat (pripremljen prema postupku od Sigman, M. S. et al., J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(28), 11408-11411; 1417 mg, 5.90 mmol) je dodat kao rastvor u 3 mL. THF je zatim dodat. Posle 5 min mešavina je ostavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi i mešana preko noći pod argonom. Mešavina je ugašena sa satd NH4Cl i estrahovana sa EtOAc, osušena preko MgSO4, i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal je injektovan u SiO2gel kastu i prečišćen hromatografijom kroz 40 g ISCO kolone, eluiranjem sa 5 % do 10% do 20% do 40% EtOAc u Heks, da bi se obezbedio 2.3:1 mešavinu naslovljenih jedinjenja (420 mg, 1.00 mmol, 34.1% prinos).

FAZA 2: (2R,3R)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2S,3R)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID [0348]

[0349] Rastvoru (2R,3R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida i (2S,3R)-N,N-bis(4-

11

metoksibenzil)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida (2.3:1 mešavina diastereomera; 420 mg, 1.00 mmol) i anizola (1.093 mL, 10.06 mmol) u DCM (5.029 mL) na ambijentalnoj temperaturi je polako dodata trifluorosirćetna kiselina (2.99 mL, 40.2 mmol). Posle mešanje preko noći, mešavina je koncetrovana. Ostatak je razblažen sa EtOAc, opran satd NaHCO3, ponovo ekstrahovan sa EtOAc, osušen preko MgSO4, i koncetrovan. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom na 24 g ISCO zlatne kolone eluiranjem sa gradijentom 0-50% EtOAc u Heks) da bi se obezbedila 2.3:1 mešavina naslovljenih jedinjenja (153 mg, 0.863 mmol, 86% prinos).

FAZA 3: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,6R,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEPT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,6S,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEPT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0351] Bočica je napunjena sa (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilnom kiselinom (Intermedijer AA12A; 75 mg, 0.147 mmol) i 2.3:1 mešavinom (2R,3R)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida i (2S, 3R)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida (153 mg, 0.863 mmol) u 1,2-DCE (2.101 mL). Rastvor je pošprcan argonom, zatim Hoveyda-Grubbs II (9.21 mg, 0.015 mmol) je dodat kao rastvor u 1 mL 1,2-DCE na ambijentalnoj temperaturi. Rezultujuća mešavina je mešana (prskanjem argonom i ventiliranjem bočice) na ambijentalnoj temperaturi. Posle 2 h reakciona mešavina je pošprcana vazduhom tokom 5 min i filtrirana radi odvajanja nerastvorljivog sulfonamid homodimera. Filtrat je direktno injektovan u 12 g ISCO zlatne kolone, i prečišćen eluiranjem sa 0-20-50-100% EtOAc u Heks preko 16 min da bi se dobila mešavina naslovljenih jedinjenja (74 mg, 0.120 mmol, 82% prinos).

FAZA 4. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-

11

2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID [0352] N,N-dimetilpiridin-4-amin (24.90 mg, 0.204 mmol) je dodat rastvoru (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,6R,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilhept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,6S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilhept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (74 mg, 0.120 mmol) (prethodno azeotropovana sa 2.0 mL PhMe tokom 3 h) u DCM (59.900 mL) na 0 °C. N-(3-dimetilaminopropil)-'N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (46.0 mg, 0.240 mmol) je zatim polako dodat u porcijama i rezultujuća mešavina je mešana omogućavajući da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi tokom 15 h. Mešavina je oprana u HCl i fiziološkim rastvorom, vodena faza je ponovo ekstrahovana sa EtOAc, a kombinovane organske materije su osušene preko anhidrovanog magnezijum sulfata, zatim koncentrovane. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 12 g ISCO zlatne kolone, eluiranjem sa 10-40-50 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 24 min, da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao prvi eluirajući većih izomer (19.5 mg, 0.033 mmol, 27.1% prinos, 90% čistoća).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.31 (br. s., 1H), 7.65 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.62 (br. s., 1H), 7.14 (dd, J=2.4, 8.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.93 (dd, J=2.0, 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J=8.0 Hz, 1H), 5.66 (dd, J=3.7, 15.8 Hz, 1H), 5.58 - 5.45 (m, 1H), 4.22 (s, 2H), 4.15 - 4.08 (m, 2H), 3.87 (br. s., 1H), 3.74 (d, J=13.9 Hz, 1H), 3.33 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.11 (d, J=13.9 Hz, 1H), 2.79 - 2.69 (m, 2H), 2.57 - 2.39 (m, 2H), 2.06 -1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.81 (m, 4H), 1.80 - 1.73 (m, 4H), 1.71 - 1.55 (m, 2H), 1.41 (d, J=7.4 Hz, 3H), 1.04 (d, J=6.7 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.1 (M+H)<+>.

PRIMER 27. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

11

[0354] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je kako je opisano u Primeru 26, Faza 4.

(1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid je izolovan kao drugi eluirajući niži izomer (11.5 mg, 0.019 mmol, 16.0 % prinos, 95% čistoća).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 9.08 - 8.57 (m, 1H), 7.72 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.06 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.93 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.03 (ddd, J=5.3, 8.2, 15.7 Hz, 1H), 5.76 (dd, J=7.8, 15.7 Hz, 1H), 4.20 (dd, J=3.2, 7.9 Hz, 1H), 4.14 - 4.03 (m, 3H), 3.78 - 3.63 (m, 2H), 3.29 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.12 (dd, J=9.9, 15.4 Hz, 1H), 2.85 - 2.68 (m, 2H), 2.62 (br. s., 1H), 2.55 - 2.42 (m, 1H), 2.36 (dq, J=3.2, 9.2 Hz, 1H), 2.26 -2.16 (m, 1H), 2.14 - 2.07 (m, 1H), 2.04 - 1.93 (m, 3H), 1.90 (dd, J=4.1, 9.2 Hz, 1H), 1.87 - 1.74 (m, 3H), 1.73 - 1.63 (m, 1H), 1.46 (d, J=7.2 Hz, 3H), 1.46 - 1.39 (m, 1H), 1.07 (d, J=7.0 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.0 (M+H)<+>.

PRIMER 28. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0355]

FAZA 1: (2R,3S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2S,3S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID

11

[0357] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od N,N-bis(4-metoksibenzil)etansulfonamida (Intermedijer EE13; 1148 mg, 3.29 mmol) i (R)-pent-4-en-2-il 4-metilbenzensulfonata (pripremljen prema postupku od Sigman, M. S. et al.; J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(28), 11408-11411; 1579 mg, 6.57 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 1. (2R,3S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamid i (2S,3S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamid dobjeni su kao 2.4:1 mešavina (539 mg, 1.29 mmol, 39.3% prinos).

FAZA 2: (2R,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2S,3S)-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID [0358]

[0359] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od (2R,3S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida i (2S,3S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida (539 mg; 1.29 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 2. (2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamid i (2S,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamid dobjeni su kao 2.3:1 mešavina (203 mg, 1.15 mmol, 89% prinos).

FAZA 3: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6R,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEPT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6S,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEPT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

11

[0361] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A; 75 mg, 0.147 mmol) i 2.3: 1 mešavine (2R,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida i (2S,3S)-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida (153 mg, 0.863 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 3. Mešavina (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6R,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilhept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilhept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (73 mg, 0.118 mmol, 80 % prinos) preneta je u sledeću fazu.

FAZA 4. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0362] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6R,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilhept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,6S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilhept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (73 mg, 0.118 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 4. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 12 g ISCO zlatne kolone, eluiranjem sa 10-40-50 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 24 min, da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao prvi eluirajući niži izomer. Ovaj materijal ponovo je prečišćen preparativnom reverzno-faznom HPLC eluiranjem sa 50-70 % MeCN (koji sadrži 0.1 % TFA) u H2O (koji sadrži 0.1 % TFA) da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (5.8 mg, 0.0097 mmol, 8.2% prinos, 90% čistoća).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.21 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.14 (dd, J=2.1, 8.1 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.95 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.69 (br. s., 1H), 6.10 - 5.99 (m, 1H), 5.67 (dd, J=6.4, 15.4 Hz, 1H), 4.20 - 4.14 (m, 1H), 4.11 (d, J=12.1 Hz, 1H), 4.06 (d, J=11.9 Hz, 1H), 3.84 -3.74 (m, 1H), 3.76 (d, J=15.5 Hz, 1H), 3.65 (d, J=14.7 Hz, 1H), 3.44 (d, J=14.7 Hz, 1H), 3.33 - 3.20 (m, 1H), 2.86 - 2.70 (m, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 2H), 2.31 - 2.20 (m, 2H), 2.08 - 1.98 (m, 2H), 1.97 - 1.80 (m, 4H), 1.79 -1.68 (m, 1H), 1.67 - 1.49 (m, 2H), 1.46 (d, J=7.2 Hz, 3H), 1.42 (br. s., 1H), 1.08 (d, J=7.0 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.1 (M+H)<+>.

12

PRIMER 29. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0365] N,N-bis(4-metoksibenzil)metansulfonamid (Intermedijer EE12; 1.05 g, 3.13 mmol) azeotropovan je u PhMe pod vakuumom tokom 12 h. Pod argonom, THF (21 mL) je dodat i rastvor je ohlađen na -78° C. Butillitijum rastvor (2.5 M u Heks; 1.63 mL, 4.07 mmol) je zatim dodat i mešavina je mešana na -78° C tokom 30 min. Pent-4-en-2-il 4-metilbenzensulfonat (pripremljen prema postupku od Sigman, M. S. et al.; J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(28), 11408-11411; 1.3 g, 5.41 mmol) je dodat kao rastvor u 1.5 mL THF. Po završetku dodavanja mešavina je ostavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi i umešava preko noći. LC/MS analiza pokazuje 50% konverzije u željeni proizvod; produženo mešanje dodatnih 24 h nije poboljšalo konverziji. Mešavina je zatim ugašena sa satd NH4Cl, i estrahovana sa EtOAc, osušena preko MgSO4i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 24 g ISCO kolone, eluiranjem sa 10 % do 20 % do 60% EtOAc u Heks, da bi se obezbedila racemska mešavina (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (408 mg, 1.01 mmol, 32% prinos).

FAZA 2: (S)-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID i (R)-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID

[0366]

[0367] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (506 mg, 1.25 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 2. (S)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamid i (R)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamid dobjeni su kao racemska mešavina (152 mg, 0.93 mmol, 74% prinos).

FAZA 3: (1'S)-TERT BUTIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT i (1'S)-TERT BUTIL 6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILAT

[0369] Bočica je napunjena sa ((S)-tert-butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5 -tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilatom (Intermedijer AA12A, Faza 1B, prvi eluirajući izomer; 120 mg, 0.212 mmol) i racemskim mešavinama (S)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (R)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (156 mg, 0.954 mmol) u 1,2-DCE (3.028 mL). Rastvor je pošprcan argonom i Hoveyda-Grubbs II (13.28 mg, 0.021 mmol) je dodat kao rastvor u 1.5 mL 1,2-DCE na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je mešana (prskanjem argonom i ventiliranjem bočice) na ambijentalnoj temperaturi tokom 1.5 h (70% konverzije izmereno LC/MS analizom). Reakciona mešavina je zatim pošprcana vazduhom tokom 5 min, koncetrovana, i direktno injektovana u 24 g ISCO zlatne kolone, i prečišćena eluiranjem sa 0-20-50-100% EtOAc/Heks preko 16 min da bi se dobila mešavina (1'S)-tert butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata i (1'S)-tert butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-hidroksi-5-metil-6sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (63 mg, 0.096 mmol, 45.1 % prinos).

FAZA 4: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOILHEKS-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0371] U čvrstu mešavinu (1'S)-tert butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3 ',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata i (1'S)-tert butil 6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilata (63 mg, 0.096 mmol) i LiOH monohidrata (0.013 mL, 0.478 mmol) je dodata 1: 1 mešavina dioksan/MeOH (1.911 mL). Reakcija je zagrejana na 70°C. Virtuelno nije zapažena nikakva reakcija posle 1.5 h; H2O (∼0.4 mL) je dodata i mešavina je mešana tokom 40 h. Mešavina je zatim ugašena sa 1 N HCl (1.0 mL), razblažena fiziološkim rastvorom, estrahovana sa EtOAc, osušena preko MgSO4, i koncetrovana. Ovako dobijen sirovi materijal upotrebljen je u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.

FAZA 5. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0372] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoilheks-

12

2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (57 mg, 0.095 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 4. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 12 g ISCO zlatne kolone, eluiranjem sa 10-40-50 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 24 min, da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao prvi eluirajući niži izomer (11 mg, 0.019 mmol, 19.9% prinos, 90% čistoća).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.41 (s, 1H), 7.66 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.50 (br. s., 1H), 7.15 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.95 (dd, J=2.0, 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J=8.0 Hz, 1H), 5.69 (dd, J=4.3, 15.8 Hz, 1H), 5.63 -5.54 (m, 1H), 4.20 (s, 2H), 4.04 (d, J=15.3 Hz, 1H), 3.94 (dd, J=2.2, 5.2 Hz, 1H), 3.89 - 3.81 (m, 1H), 3.74 -3.63 (m, 1H), 3.39 (d, J=15.3 Hz, 1H), 3.26 - 3.17 (m, 1H), 3.09 - 2.96 (m, 1H), 2.81 - 2.71 (m, 2H), 2.57 -2.41 (m, 2H), 2.16 (dd, J=6.5, 11.7 Hz, 1H), 1.92 - 1.76 (m, 6H), 1.75 - 1.63 (m, 3H), 1.62 - 1.41 (m, 2H), 1.19 (d, J=6.1 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 585.1 (M+H)<+>.

PRIMER 30. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0373]

[0374] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je kako je opisano u Primeru 29, Faza 5.

(1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid je izolovan kao drugi eluirajući viši izomer (11.6 mg, 0.020 mmol, 21.0% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.44 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.95 - 6.90 (m, 2H), 6.89 (s, 1H), 5.82 (ddd, J=5.1, 7.6, 15.1 Hz, 1H), 5.70 (dd, J=8.2, 15.3 Hz, 1H), 4.24 (dd, J=3.9, 12.3 Hz, 1H), 4.20 (dd, J=4.7, 8.8 Hz, 1H), 4.10 - 4.05 (m, 2H), 3.82 (d, J=14.9 Hz, 1H), 3.69 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.25 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.05 (dd, J=9.6, 15.1 Hz, 1H), 2.98 (dd, J=8.0, 15.3 Hz, 1H), 2.84 - 2.67 (m, 2H), 2.41 (ddd, J=4.3, 9.8, 18.0 Hz, 1H), 2.36 - 2.28 (m, 1H), 2.24 (ddd, J=2.2, 7.9, 15.2 Hz, 1H), 2.08 - 1.99 (m, 2H), 1.98 - 1.87 (m, 3H), 1.87 - 1.74 (m, 4H), 1.68 (dd, J=9.4, 18.8 Hz, 1H), 1.46 - 1.35 (m, 1H), 1.15 (d, J=6.5 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 585.1 (M+H)<+>.

PRIMER 31. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0375]

[0376] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 29; 8.0 mg, 0.014 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 4. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-metoksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-metoksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (8.1 mg, 0.014 mmol, 99% prinos, 94% čistoća).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.22 (s, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=2.3, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.97 - 6.88 (m, 3H), 5.84 (td, J=6.3, 15.6 Hz, 1H), 5.48 (dd, J=7.3, 15.4 Hz, 1H), 4.15 - 4.03 (m, 2H), 3.64 (dd, J=6.5, 15.3 Hz,

12

1H), 3.61 - 3.56 (m, 2H), 3.55 - 3.46 (m, 2H), 3.38 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.23 (d, J=14.1 Hz, 1H), 2.84 - 2.68 (m, 2H), 2.48 - 2.31 (m, 2H), 2.27 - 2.15 (m, 3H), 2.02 - 1.93 (m, 1H), 1.93 - 1.82 (m, 3H), 1.77 -1.63 (m, 3H), 1.56 - 1.44 (m, 1H), 1.16 (d, J=6.5 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.0 (M+H)<+>.

PRIMER 32. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0378] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 30; 8.0 mg, 0.014 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 4. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-metoksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-metoksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (8.1 mg, 0.014 mmol, 99% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.18 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.93 - 6.87 (m, 2H), 6.82 (s, 1H), 5.82 (ddd, J=5.7, 7.6, 14.9 Hz, 1H), 5.52 (dd, J=9.2, 15.3 Hz, 1H), 4.32 (dd, J=4.9, 15.3 Hz, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.81 (d, J=14.9 Hz, 1H), 3.70 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.64 (dd, J=3.5, 9.2 Hz, 1H), 3.23 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.19 (s, 3H), 3.02 (dd, J=6.1, 15.3 Hz, 1H), 2.99 (dd, J=3.2, 15.2 Hz, 1H), 2.85 - 2.67 (m, 2H), 2.44 (ddd, J=3.3, 9.6, 18.6 Hz, 1H), 2.36 - 2.23 (m, 2H), 2.15 - 2.02 (m, 1H), 2.00 - 1.89 (m, 2H), 1.88 - 1.82 (m, 1H),

12

1.82 - 1.74 (m, 2H), 1.71 - 1.62 (m, 1H), 1.59 - 1.48 (m, 2H), 1.44 - 1.34 (m, 1H), 1.14 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.0 (M+H)<+>.

PRIMER 33. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-11'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0379]

FAZA 1: (S)-2-ETIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)PENT-4-en-1-SULFONAMID i (R)- 2-ETIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)PENT-4-en-1-SULFONAMID

[0380]

[0381] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od N,N-bis(4-metoksibenzil)metansulfonamida (Intermedijer EE12; 1.10 g, 3.28 mmol) i heks-5-en-3-il 4-metilbenzensulfonata (pripremljen prema postupku od Sigman, M. S. et al.; J. Am. Chem. Soc., 2012, 134(28), 11408-11411; 1.50 g, 5.90 mmol) prema postupku opisanom za Intermedijer 26, Faza 1. (S)-2-etil-N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-1-sulfonamid i (R)-2-etil-N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-1-sulfonamid dobjeni su kao racemska mešavina (435 mg, 1.04 mmol, 31.8% prinos).

FAZA 2: (S)-2-ETILPENT-4-en-1-SULFONAMID i (R)- 2-ETILPENT-4-en-1-SULFONAMID

[0382]

[0383] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od racemske mešavine (S)-2-etil-N,N-bis(4-

12

metoksibenzil)pent-4-en-1-sulfonamida i (R)-2-etil-N,N-bis(4-metoksibenzil)pent-4-en-1-sulfonamida (435 mg, 1.04 mmol) prema postupku opisanom u Primeru 26, Faza 2. (S)-2-etilpent-4-en-1-sulfonamida i (R)-2-etilpent-4-en-1-sulfonamida dobjeni su kao racemska mešavina (149 mg, 0.84 mmol, 81% prinos).

FAZA 3: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-HIDROKSI-5-(SULFAMOILMETIL)HEPT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-HIDROKSI-5-(SULFAMOILMETIL)HEPT-2-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0385] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A; 80 mg, 0.157 mmol) i mešavine (S)-2-etilpent-4-en-1-sulfonamida i (R)-2-etilpent-4-en-1-sulfonamida (149 mg, 0.84 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 3.

Prečišćavanje ovog sirovog materijala eluiranjem sa gradijentom 0-20-50-100% EtOAc u heptanima praćeno gradijentom od 20-50% EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u heptanima daje nerazdvojivu mešavinu (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-hidroksi-5-(sulfamoilmetil)hept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-hidroksi-5-(sulfamoilmetil)hept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (75 mg, 0.122 mmol, 77% prinos).

FAZA 4.1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-11'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0386] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5S,E)-1-hidroksi-5-(sulfamoilmetil)hept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,5R,E)-1-hidroksi-5-(sulfamoilmetil)hept-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-

12

3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (75 mg, 0.122 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 26, Faza 4. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 12 g ISCO zlatne kolone, eluiranjem sa 10-30-50 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u Heks preko 24 min, da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-11'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao prvi eluirajući izomer (20.4 mg, 0.034 mmol, 28.0% prinos).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.45 (br. s., 1H), 7.67 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.44 (br. s., 1H), 7.15 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.96 (dd, J=1.8, 8.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J=8.0 Hz, 1H), 5.71 (dd, J=4.7, 15.7 Hz, 1H), 5.66 - 5.55 (m, 1H), 4.24 -4.13 (m, 2H), 3.96 (br. s., 1H), 3.92 (d, J=15.7 Hz, 1H), 3.79 (br. s., 1H), 3.64 (d, J=13.3 Hz, 1H), 3.42 (d, J=14.5 Hz, 1H), 3.30 - 3.11 (m, 2H), 2.79 - 2.71 (m, 2H), 2.56 - 2.41 (m, 2H), 2.29 (dd, J=5.5, 13.9 Hz, 1H), 1.91 - 1.75 (m, 7H), 1.75 - 1.63 (m, 4H), 1.45 (dt, J=7.6, 14.3 Hz, 2H), 0.92 (t, J=7.3 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.0 (M+H)<+>.

PRIMER 34. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-11'-ETIL-7'-HIDROKSI-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0387]

[0388] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je kako je opisano u Primeru 33, Faza 4.

(1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-11'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao drugi eluirajući izomer. Ovaj materijal ponovo je prečišćen eluiranjem sa 60% EtOAc u heptanima da bi se obezbedilo čisto naslovljeno jedinjenje (15.7 mg, 0.026 mmol, 21.6% prinos).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.59 (br. s., 1H), 7.69 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.15 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.08 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.93 (dd, J=2.0, 8.1 Hz, 1H), 6.90 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.85 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.81 (td, J=6.6, 15.2 Hz, 1H), 5.68 (dd, J=8.3, 15.2 Hz, 1H), 4.19 (dd, J=3.9, 8.1 Hz, 1H), 4.12 (dd, J=5.9, 15.4 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.78 (d, J=14.9 Hz, 1H), 3.68 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.23 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.13 (dd, J=6.7, 15.5 Hz, 1H), 3.02 (dd, J=9.7, 15.3 Hz, 1H), 2.82 - 2.68 (m, 2H), 2.39 (ddd, J=4.2, 9.8, 18.1 Hz, 1H), 2.36 - 2.25 (m, 2H), 2.06 - 1.96 (m, 3H), 1.96 - 1.88 (m, 2H), 1.87 - 1.70 (m, 4H), 1.69 - 1.56 (m, 3H), 1.42 - 1.35 (m, 1H), 0.90 (t, J=7.5 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 599.2 (M+H)<+>.

12

PRIMER 35. (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0390] Mešavina (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 26; 17 mg, 0.028 mmol) i platina (IV) oksida (6.44 mg, 0.028 mmol) u EtOAc (3.5 mL) umešani su pod H2(balon) na ambijentalnoj temperaturi tokom 50 min. Reakciona mešavina je zatim filtrirana kroz filter špric. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz Redi-Sep® prethodno spakovanu SiO2gel kolona (4 g), eluiranjem sa 20 % do 50 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u heptanima, da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid (12.1 mg, 0.020 mmol, 70.9% prinos).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.55 (br. s., 1H), 7.67 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.48 (br. s., 1H), 7.14 (dd, J=2.4, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=1.7, 8.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.22 - 4.13 (m, 2H), 4.05 - 3.96 (m, 1H), 3.66 (br. s., 1H), 3.61 (d, J=13.7 Hz, 1H), 3.51 - 3.45 (m, 1H), 3.43 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.28 (d, J=12.2 Hz, 1H), 2.81 - 2.69 (m, 2H), 2.62 - 2.53 (m, 1H), 2.48 - 2.41 (m, 1H), 2.16 - 2.08 (m, 2H), 1.91 (q, J=9.0 Hz, 1H), 1.87 - 1.78 (m, 3H), 1.78 - 1.72 (m, 1H), 1.68 (q, J=8.6 Hz, 2H), 1.59 (dd, J=6.1, 10.3 Hz, 2H), 1.50 - 1.43 (m, 1H), 1.41 (d, J=7.1 Hz, 3H), 1.37 - 1.25 (m, 4H), 1.00 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 601.0 (M+H)<+>.

1

PRIMER 36. (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0392] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza [8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza [8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 27; 9.4 mg, 0.016 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 35. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,11'R,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid (5.2 mg, 0.0087 mmol, 55.1 % prinos).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 9.70 (br. s., 1H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.97 (d, J=8.1 Hz, 1H), 4.18 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.12 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.69 - 3.57 (m, 3H), 3.49 (d, J=14.7 Hz, 1H), 3.38 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.33 (br. s., 1H), 2.90 (d, J=4.6 Hz, 2H), 2.82 - 2.70 (m, 2H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 2.31 - 2.20 (m, 1H), 2.11 - 2.01 (m, 1H), 1.99 - 1.91 (m, 3H), 1.90 - 1.78 (m, 3H), 1.77 - 1.70 (m, 2H), 1.70 - 1.62 (m, 4H), 1.61 -1.55 (m, 1H), 1.45 (m, 1H), 1.42 (d, J=7.3 Hz, 3H), 0.97 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 601.1 (M+H)<+>.

PRIMER 37. (1S,3'R,6'R,7'S,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

1 1

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0393]

[0394] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 28; 3.9 mg, 0.0065 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 35. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje (1S,3'R,6'R,7'S,11'S,12'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[16,18,24]trien]-15'-on 13',13'-dioksid (2.8 mg, 0.0047 mmol, 71.6% prinos, 90% čistoća).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 10.44 (s, 1H), 7.73 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=2.2, 8.3 Hz, 1H), 7.32 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.4, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.96 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.10 - 4.05 (m, 2H), 3.87 (d, J=15.4 Hz, 1H), 3.66 (d, J=13.9 Hz, 1H), 3.61 (q, J=8.8 Hz, 1H), 3.55 (ddd, J=1.2, 7.1, 14.4 Hz, 1H), 3.16 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.09 (dd, J=8.7, 15.3 Hz, 1H), 2.84 - 2.69 (m, 2H), 2.46 - 2.37 (m, 1H), 2.34 (d, J=8.6 Hz, 1H), 2.24 (quin, J=8.8 Hz, 1H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 2.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 2.04 - 1.96 (m, 1H), 1.96 - 1.87 (m, 1H), 1.86 - 1.71 (m, 5H), 1.71 - 1.61 (m, 2H), 1.51 - 1.46 (m, 1H), 1.45 - 1.41 (m, 1H), 1.40 (d, J=7.3 Hz, 3H), 1.35 - 1.28 (m, 1H), 1.03 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 601.1 (M+H)<+>.

PRIMER 38. (1S,3'R,6'R,7'S,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1 2

FAZA 1: (S)-BENZIL(2-METILBUT-3-EN-1-IL)SULFAN i (R)-BENZIL(2-METILBUT-3-EN-1-IL)SULFAN [0396]

[0397] Mešavina 2-metilbut-3-en-1-ola (1.198 mL, 11.61 mmol), fenilmetantiola (2.044 mL, 17.42 mmol) i 2-(tributilfosforanilidene) MeCN (4.67 mL, 17.42 mmol) zagrejana je 100°C tokom 2 h. Reakciona mešavina je ohlađena na rt, razblažena sa EtOAc, oprana satd vodenim rastvorom NH4Cl i fiziološkim rastvorom, osušena preko Na2SO4, i koncetrovana. Sirovi proizvod apsorbovan je u 30g of SiO2gel i osušen i zatim prečišćen hromatografijom on SiO2gel eluiranjem sa Heks da bi se obezbedio naslovljen proizvod kao bezbojno ulje (1.62g, 72.4%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44 - 7.27 (m, 5H), 5.84 (ddd, J=17.17, 10.32, 6.75 Hz, 1H), 5.16 - 5.03 (m, 2H), 3.79 (s, 2H), 2.58 - 2.39 (m, 3H), 1.19 - 1.14 (m, 3H).

FAZA 2: (S)-2-METILBUT-3-EN-1-SULFONAMID i (R)-2-METILBUT-3-EN-1-SULFONAMID

[0398]

[0399] U mešavinu (S)-benzil(2-metilbut-3-en-1-il)sulfana, (R)-benzil(2-metilbut-3-en-1-il)sulfana (0.650 g, 3.38 mmol) i jodosobenzena (2.454 g, 11.15 mmol) u 133 mL etra je polako dodata koncetrovana HCl (18.31 mL, 220 mmol) uz snažno mešanje. Rezultujuća mešavina je mešana tokom 30 min. Reakciona mešavina je ostavljena da se slegne i slojevi su odvojeni. Organski sloj je koncetrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je osušen pod visoki vakuumom tokom 1 h. Rastvor ostatak u 8 mL DCM je dodat u mešavinu amonijak, 7.0 M rastvor u metanol (2.414 mL, 16.90 mmol), N,N- DIPEA (2.94 mL, 16.90 mmol) i 4-(dimetilamino)piridin (8.26 mg, 0.068 mmol) u 10 mL DCM. Reakciona mešavina je koncetrovana posle mešanje na rt tokom 16 h. Sirovi proizvod prečišćen je hromatografijom na SiO2gelu eluiranjem sa 0% do 60% EtOAc u Heksanu da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (0.076g, 15.1%).

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.82 (ddd, J=17.36, 10.03, 7.63 Hz, 1 H), 5.21 - 5.05 (m, 4 H), 3.25 - 3.07 (m, 2 H), 2.92 - 2.78 (m, 1 H), 1.20 (d, J=6.85 Hz, 3 H).

FAZA 3: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-N-(((S)-2-METILBUT-3-EN-1-IL)SULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-

1

IL)CIKLOBUTIL)METIL)-N-(((R)-2-METILBUT-3-EN-1-IL)SULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID

[0400]

[0401] Mešavina (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA13A; 0.010 g, 0.021 mmol), (S)-2-metilbut-3-en-1-sulfonamida i (R)-2-metilbut-3-en-1-sulfonamida (0.019 g, 0.124 mmol), 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohlorida (0.012 g, 0.062 mmol) i 4-(dimetilamino)piridina (7.60 mg, 0.062 mmol) u DCM (0.5 mL) je mešana na rt tokom 16 h. Mešavina je direktno uvedena na kolonu (5g SiO2gel) radi prečišćavanja hromatografijom, eluirana sa 0% do 50% EtOAc (koji sadrži 0.2% AcOH) u Heksanu da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (0.011g.86%). m/z (ESI, ve jon) 613.2 (M+H)<+>.

FAZA 4: (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID (116762-34-3) i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1 4

[0403] Rastvor (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-(((S)-2-metilbut-3-en-1-il)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-(((R)-2-metilbut-3-en-1-il)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida (21 mg, 0.034 mmol) u toluenu (80 mL) podvrgnut je trostrukom ciklusu pražnjenje/ponovno punjenje sa N2. U homogeni rastvor je dodat rastvor Hoveyda-Grubbs II (4.29 mg, 6.85 µmol) u 1 mL toluenu na rt. Reakciona mešavina je mešana na 106°C pod N2tokom 2 h. Vazduh je produvan u mešavinu. Reakcija je ohlađena na rt i koncetrovana. Ostatak je prečišćen preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185µm kolona; gradijent eluiranja od 40% do 90% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se obezbedila mešavina naslovljenih jedinjenja.

FAZA 5: (1S,3'R,6'R,7'S,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0404] Mešavina (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,11'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (116762-34-3) i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E,11'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-

1

dioksida i (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,11'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida i (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z,11'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14] diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (iz Faze 4,1.6 mg, 2.73 µmol) i platina (iv) oksida (0.621 mg, 2.73 µmol) u EtOAc (2.0 mL) je mešana pod H2(balon) na rt tokom 2 h. Čvrst katalizator je filtriran upotrebom filter špriac, a filtrate je koncetrovan da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod prečišćen je preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185µm kolona; gradijent eluiranja od 40% do 90% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje kao drugi eluirajući izomer kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.02 (br. s., 1H), 7.73 - 7.69 (m, 1 H), 7.22 - 7.16 (m, 3 H), 7.09 (d, J=2.20 Hz, 1 H), 6.96 (d, J=8.07 Hz, 1 H), 4.16 - 4.09 (m, 2 H), 3.88 - 3.63 (m, 6 H), 3.28 - 3.22 (m, 1 H), 3.17 (dd, J=15.16, 5.87 Hz, 1 H), 3.13 - 3.07 (m, 1 H), 2.80 - 2.74 (m, 2 H), 2.36 - 2.29 (m, 2 H), 2.21 - 2.18 (m, 1 H), 2.03 - 1.98 (m, 2 H), 1.94 - 1.77 (m, 2 H), 1.75 - 1.27 (m, 9 H), 1.13 (d, J=6.85 Hz, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 587.2 (M+H)<+>.

PRIMER 39. (1S,3'R,6'R,7'S,11'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,11'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0406] Naslovljeno jedinjenje je izolovano kao drugi eluirajući izomer izolovan preparativnom reverznofaznom HPLC u Primeru 38.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.38 (br. s., 1H), 7.69 (d, J=8.61 Hz, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.25 - 7.15 (m, 2H), 7.10 (d, J=2.35 Hz, 1H), 6.98 (d, J=8.22 Hz, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.89 - 3.83 (m, 1H), 3.67 (d, J=7.83 Hz, 1H), 3.61 - 3.44 (m, 4H), 3.41 (d, J=12.52 Hz, 2H), 2.81 - 2.68 (m, 3H), 2.23 - 2.06 (m, 3H), 2.02 - 1.72 (m, 5H), 1.64 - 1.51 (m, 5H), 1.49 - 1.38 (m, 2H), 1.25 - 1.13 (m, 1H), 1.06 (d, J=6.85 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 587.1 (M+H)<+>.

1

PRIMER 40. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i

PRIMER 41. (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0409] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan onom opisanom za Intermedijer EE20 upotrebom 5 eq. butillitijum rastvora, 2.5 M u Heksanima (Aldrich) i 5 eq. MeI (Aldrich), i željeni proizvod 1-(trifluorometoksi)hept-6-en-3-sulfonamid je izolovan kao svetlo braon ulje.

FAZA 2: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1

[0410] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 2, Faze 1 i 2, upotrebom Intermedijera AA11A i 2-metilheks-5-en-2-sulfonamida iz Faze1, i željeni proizvodi, (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-hloro-7'-hidroksi-12',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 40) kao prvi eluirajući veći izomer izolovan je preparativnom reverzno-faznom HPLC, a (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z)-6-hloro-7'-hidroksi-12',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 41) kao drugi eluirajući viši izomer izolovan preparativnom reverzno-faznom HPLC. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E)-6-hloro-7'-hidroksi-12',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 40):<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.75 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.20 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.07 (br. s., 1H), 6.94 (d, J=7.8 Hz, 2H), 5.82 (br. s., 1H), 5.65 (dd, J=7.5, 15.5 Hz, 1H), 4.17 (br. s., 1H), 4.10 (dd, J=12.0, 46.0 Hz, 2H), 3.78 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.67 (d, J=13.4 Hz, 1H), 3.11 - 3.00 (m, 1H), 2.87 - 2.75 (m, 2H), 2.54 (br. s., 1H), 2.41 - 2.07 (m, 5H), 2.01 - 1.88 (m, 3H), 1.80 (dd, J=8.1, 14.2 Hz, 3H), 1.70 (dd, J=9.0, 18.3 Hz, 1H), 1.54- 1.42 (m, 2H), 1.45 (d, J=8.1 Hz, 6H). m/z (ESI, ve jon) 599.2 (M+H)<+>; (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z)-6-hloro-7'-hidroksi-12',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (Primer 41):<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.76 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.20 (dd, J=2.2, 8.4 Hz, 1H), 7.17 (br. s., 1H), 7.13 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.96 (d, J=7.5 Hz, 1H), 5.68 - 5.60 (m, 1H), 5.53 (dd, J=8.4, 11.2 Hz, 1H), 4.59 (dd, J=1.8, 8.6 Hz, 1H), 4.11 (s, 2H), 4.07 (d, J=13.7 Hz, 1H), 3.74 (d, J=15.3 Hz, 1H), 3.45 (d, J=14.5 Hz, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 2H), 2.72 - 2.53 (m, 1H), 2.50 - 2.40 (m, 1H), 2.40 - 2.23 (m, 2H), 2.14 (d, J=13.1 Hz, 1H), 2.08 - 1.96 (m, 4H), 1.96 - 1.78 (m, 5H), 1.53 (d, J=12.7 Hz, 6H) 1.52 -1.46 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 599.2 (M+H)<+>.

PRIMER 42. (1S,3'R,6'R,7'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-ETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0411]

FAZA 1. N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)2-METILPENT-4-EN-2-SULFONAMID

1

[0413] N,N-bis(4-metoksibenzil)but-3-en-1-sulfonamid (Intermedijer EE16; 500 mg, 1.332 mmol) azeotropovan je u PhMe pod vakuumom tokom 1 h. Pod argonom, THF je dodat i rastvor je ohlađen na -78°C. Butillitijum rastvor (Sigma Aldrich, 2.5 M u heksanima; 1.065 mL, 2.66 mmol) je zatim dodat i mešavina je mešana na -78°C tokom 60 min. MeI (Sigma Aldrich; 0.166 mL, 2.66 mmol) je dodat i mešavina je mešana na -78°C tokom dodatnih 30 min, (LC/MS analiza pokazuje potpunu konverziju u 1:1 mešavinu mono i di-metilovanih proizvoda). Mešavina je ugašena sa satd NH4Cl, ostavljena da dostigne ambijentalnu temperaturu, estrahovana sa EtOAc, osušena preko MgSO4, i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal prečišćen je kroz 24 g ISCO zlatne kolone eluiranjem sa gradijentom 5-10% EtOAc u heksanima da bi se obezbedio N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-2-sulfonamid (173 mg, 0.429 mmol, 32.2 % prinos).

FAZA 2.2-METILPENT-4-EN-2-SULFONAMID

[0414]

[0415] Rastvoru N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-2-sulfonamida (173 mg, 0.429 mmol) u DCM, tioanizol (0.503 mL, 4.29 mmol) je dodat praćeno ukapavanjem trifluorosirćetne kiseline (1.2 mL, 16.15 mmol). Posle mešanja od 6 h (TLC u 30% EtOAc/heksani pokazuje potpun gubitak početnog materijala) mešavina je razblažena sa EtOAc, oprana satd NaHCO3, ponovo ekstrahovana sa EtOAc, osušena preko MgSO4i koncetrovana. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 12 g ISCO zlatne kolone eluiranjem sa gradijentom 10-50% EtOAc heksani da bi se obezbedio 2-metilpent-4-en-2-sulfonamid (45 mg, 0.276 mmol, 64.3 % prinos).

FAZA 3: (S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-HIDROKSIBUT-3-EN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-N-((2-METILPENT-4-EN-2-IL)SULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2H,2'H-SPIRO[BENZO[B][1,4]OKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID

1

[0417] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA13A; 41 mg, 0.085 mmol) i 2-metilpent-4-en-2-sulfonamida (45 mg, 0.276 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 2, Faza 1. Prečišćavanje ovog sirovog materijala daje (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-((2-metilpent-4-en-2-il)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamid (45.8 mg, 0.073 mmol, 86 % prinos).

FAZA 4: (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[9,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0419] Naslovljeno jedinjenje sintetizovano je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S)-1-hidroksibut-3-en-1-il)ciklobutil)metil)-N-((2-metilpent-4-en-2-il)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida (45.8 mg, 0.073 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 14, Faza 2. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz 12 g ISCO kolone, eluiranjem sa 10 % do 20 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH) u heksanima preko 90 min da bi se obezbedila mešavina naslovljenih jedinjenja.

14

FAZA 5: (1S,3'R,6'R,7'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-12',12'-ETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[16,18,24]TRIEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0420] Naslovljeno jedinjenje (6.4 mg, 0.011 mmol, 71% prinos) sintetizovano je od mešavine (1S,3'R,6'R,7'S,9'Z)-6-hloro-7'-hidroksi-12',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1 ,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida i (1S,3'R,6'R,7'S,9'E)-6-hloro-7'-hidroksi-12',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[9,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid (iz Faze 4, 9 mg, 0.015 mmol) sledeći postupak opisan u Primeru 14, Faza 3.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 10.50 (br. s., 1H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.47 (dd, J=1.2, 8.4 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.14 (dd, J=2.0, 8.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.02 (d, J=12.1 Hz, 1H), 3.96 (d, J=11.9 Hz, 1H), 3.73 (d, J=15.5 Hz, 1H), 3.64 - 3.54 (m, 1H), 3.13 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.05 (dd, J=9.1, 15.6 Hz, 1H), 2.94 (d, J=8.6 Hz, 1H), 2.82 - 2.71 (m, 2H), 2.33 (quin, J=8.6 Hz, 1H), 2.20 - 2.06 (m, 2H), 2.05 -1.96 (m, 2H), 1.95 - 1.87 (m, 3H), 1.86 - 1.74 (m, 4H), 1.73 - 1.59 (m, 4H), 1.49 (s, 3H), 1.47 (s, 3H), 1.44 -1.34 (m, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 601.2 (M+H)<+>.

PRIMER 43. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-11',12'-DIMETIL-7'-(1-METILETOKSI)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZA TETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON-13', 13'-DIOKSID

[0421]

[0422] Rastvoru (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,H'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'hspiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 2; 20.4 mg, 0.034 mmol) u THF (0.681 mL) ohlađen na 0°C je dodat natrijum hidrid (60% disperzija u mineralnom ulju; 13.62 mg, 0.340 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 15 min i zatim 2-jodopropan (3.40 µl, 0.034 mmol) je dodat. Reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 4 dana, dodavajući još reagenasa radi pokretanja reakcije. Mešavina je zatim ugašena sa aq NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko MgSO4i koncetrovan. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz Redi-Sep® prethodno spakovanu SiO2gel kolonu (4 g), eluiranjem sa 10-40 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH)/heptani da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (0.6 mg).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.03 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.91 - 6.89 (m, 2H), 6.88 (s, 1H), 5.72 (ddd, J=3.4, 9.3, 15.2 Hz, 1H), 5.53 (dd, J=8.8, 15.4 Hz, 1H), 4.29 - 4.22 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.85 - 3.80 (m, 2H), 3.69 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.59 (td, J=6.1, 12.2 Hz, 1H), 3.28 - 3.22 (m, 2H), 3.02 (dd, J=9.7, 15.3 Hz, 1H), 2.83 - 2.70 (m, 2H), 2.39 - 2.24 (m, 2H), 2.20 - 2.02 (m, 3H), 2.01 - 1.89 (m, 3H), 1.83 (dd, J=5.6, 12.7 Hz, 1H), 1.81 - 1.75 (m, 1H), 1.70 - 1.59 (m, 1H), 1.44 (d, J=7.3 Hz, 3H), 1.43 - 1.35 (m, 1H), 1.09 (d, J=5.9 Hz, 3H), 1.04 (d, J=6.1 Hz, 3H), 1.02 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 641.0 (M+H)<+>.

PRIMER 44. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<1,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<1,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETPAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

FAZA 1: (2S)-METILPENT-4-ENAL i (2R)-METILPENT-4-ENAL

[0425] Rastvoru oksalil hlorida (6.65 mL, 74.9 mmol) u DCM (30 mL) na -60°C je dodat rastvor DMSO anhidrovan (10.62 mL, 150 mmol) u DCM (20 mL) pod N2i mešan tokom 2 min. Rastvor 2-metilpent-4-en-1-ola (5.00 g, 49.9 mmol) u DCM (20 mL) je dodat, i rezultujuća mešavina je mešana tokom 15 min na -60°C. Et3N (34.7 mL, 250 mmol) je zatim dodat i reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 20 min. Mešavina je ugašena sa DCM i H2O. Organski sloj opran je fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4), i filtriran. Filtrat je koncentrovan radi obezbeđivanja naslovljenog jedinjenja (4.90 g, 100 %) bez daljeg prečišćavanja.

FAZA 2: (1S,2R)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-OL i (1R,2R)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-OL i (1S,2S)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-OL i (1R,2S)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-OL

[0426]

[0427] Rastvoru (2S)-metilpent-4-enala i (2R)-metilpent-4-enala (9.80 g, 100 mmol) u THF (30 mL) je dodat ciklopropilmagnezijum bromid, 1.0 M u 2-MeTHF (300 mL, 150 mmol) na -78°C. Reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 3 h. Mešavina je ugašena sa sat. vodenom NH4Cl, i estrahovan sa etrom. Organski sloj opran je fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncetrovan. Rezultujuća ostatak je hromatografisan (SiO2gel, 0 do 40%, EtOAc/heksan) radi dobijanja naslovljenog jedinjenja (4.20 g, 30.0%).

FAZA 3: (1R,2R)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-SULFONAMID i (1R,2R)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-SULFONAMID i (1R,2R)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-SULFONAMID i (1R,2R)-1-CIKLOPROPIL-2-METIL-4-PENTEN-1-SULFONAMID

[0428]

14

[0429] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od mešavine (1S,2R)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1-ola, (1R,2R)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1-ola, (1S,2S)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1-ola, i (1R,2S)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1-ola (iz Faze 2) kao početni alkohol, sledeći sličan postupak opisan u E22, Faze 3 do 6.

Faza 4: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24] TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID [0430] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A) i mešavina (1R,2R)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1-sulfonamida, (1R,2R)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1 -sulfonamida, (1R,2R)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1-sulfonamida, i (1R,2R)-1-ciklopropil-2-metil-4-penten-1-sulfonamida (iz Faze 3), sledeći sličan postupak opisan u Primeru 2, Faze 1 i 2. Ovo sirovo ulje prečišćeno je preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 50% do 90% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) radi dobijanja naslovljenog jedinjenja kao prvi eluirajući izomer (12 mg, 6.7%).<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.15 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 2.3, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.93 - 6.88 (m, 3H), 5.91 - 5.63 (m, 2H), 4.22 (dd, J = 3.9, 7.6 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 3.68 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 3.40 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.25 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 3.04 (dd, J = 9.8, 15.3 Hz, 1H), 2.82 - 2.67 (m, 2H), 2.49 - 2.23 (m, 3H), 2.14 - 1.84 (m, 11H), 1.73 - 1.62 (m, 1H), 1.45 - 1.34 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.17 - 1.07 (m, 1H), 0.93 - 0.76 (m, 3H), 0.50 - 0.37 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 625.2 (M+H)<+>.

PRIMER 45. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0432] Naslovljeno jedinjenje (5 mg, 2.8%) je dobijeno kao drugi eluirajući izomer preparativno reverzno-faznim HPLC razdvajanjem u Primeru 49.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 9.04 (br. s., 1H), 7.83 -7.61 (m, 1H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.09 (m, 1H), 6.97 - 6.88 (m, 1H), 6.84 (m, 1H), 6.15 (br. s., 1H), 5.92 - 5.69 (m, 1H), 4.26 - 4.04 (m, 2H), 3.68 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.36 - 2.94 (m, 3H), 2.77 (m, 2H), 2.38 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.24 - 1.87 (m, 6H), 1.69 (dd, J = 9.8, 19.4 Hz, 2H), 1.53 - 1.41 (m, 1H), 1.30 - 1.06 (m, 10H), 0.83 (d, J = 3.1 Hz, 2H), 0.44 (br. s., 1H) m/z (ESI, ve jon) 625.2 (M+H)<+>.

PRIMER 46. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili

14

(1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0434] Naslovljeno jedinjenje (9 mg, 5.0%) je dobijeno kao treći eluirajući izomer preparativno reverznofaznim HPLC razdvajanjem u Primeru 49.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.21 (br. s., 1H), 7.66 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.44 (br. s., 1H), 7.14 (dd, J = 2.3, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.94 - 6.86 (m, 2H), 5.62 (br. s., 2H), 4.20 (s, 2H), 3.92 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.85 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.66 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.39 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 3.33 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.17 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.74 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.57 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 2.40 (td, J = 8.7, 17.1 Hz, 1H), 2.29 - 2.16 (m, 1H), 2.03 - 1.62 (m, 10H), 1.60 - 1.45 (m, 1H), 1.22 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.17 - 1.04 (m, 1H), 0.91 - 0.78 (m, 3H), 0.52 - 0.41 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 625.2 (M+H)<+>.

PRIMER 47. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

14

[0436] Naslovljeno jedinjenje (3 mg, 1.9%) je dobijeno kao najsporije eluirajući izomer preparativno reverzno-faznim HPLC razdvajanjem u Primeru 49.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.14 (br. s., 1H), 7.71 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.22 - 7.06 (m, 3H), 6.98 - 6.91 (m, 1H), 6.62 (br. s., 1H), 6.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.69 (dd, J = 5.8, 15.2 Hz, 1H), 4.19 (br. s., 1H), 4.15 - 3.99 (m, 2H), 3.79 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 3.65 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 3.43 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 3.33 - 3.22 (m, 1H), 2.99 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.86 - 2.66 (m, 3H), 2.51 (br. s., 2H), 2.32 - 2.18 (m, 2H), 2.09 - 1.87 (m, 5H), 1.75 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 1.52 - 1.38 (m, 2H), 1.19 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.11 (br. s., 1H), 0.93 - 0.73 (m, 3H), 0.54 - 0.40 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 625.2 (M+H)<+>.

PRIMER 48. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZA TETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOPROPIL-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

14

[0438] Naslovljeno jedinjenje (9.5 mg, 62%) pripremljeno je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-hloro-12'-ciklopropil-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro [naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-12'-ciklopropil-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-hloro-12'-ciklopropil-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-hloro-12'-ciklopropil-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 49) upotrebom sličnog postupka opisanog u Primeru 46.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ 8.15 - 7.94 (m, 1H), 7.71 (d, J = 8.41 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 2.35, 8.41 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.15 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 0.98 Hz, 2H), 6.86 (s, 1H), 5.81 - 5.70 (m, J = 3.13, 9.39 Hz, 1H), 5.51 (ddd, J = 1.17, 8.41, 14.67 Hz, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.80 (d, J = 15.06 Hz, 1H), 3.69 (d, J = 14.28 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 3.33, 9.00 Hz, 1H), 3.45 (d, J = 10.17 Hz, 1H), 3.25 (d, J = 14.28 Hz, 1H), 3.17 (s, 3H), 3.03 (dd, J = 10.17, 15.26 Hz, 1H), 2.80 - 2.72 (m, 2H), 2.59 - 2.39 (m, 2H), 2.38 - 2.25 (m, 1H), 2.17 - 1.73 (m, 8H), 1.72 - 1.59 (m, 1H), 1.21 (d, J = 6.85 Hz, 3H), 1.17 - 1.08 (m, 1H), 0.92 - 0.78 (m, 4H), 0.47 - 0.37 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 639.2 (M+H)<+>.

PRIMER 49. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON

14

13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0441] Rastvoru 2-metilpent-4-enala (2.40 g, 24.4 mmol) u THF (10 mL) je dodat izopropilmagnezijum hlorid, 2.0 M u THF (24.4 mL, 48.9 mmol) na 0°C. Reakciona mešavina je ostavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi. Posle mešanja na ambijentalnoj temperaturi tokom 12 h, reakciona mešavina je ugašena (sat. NH4Cl), ekstrahovana (2 × Et2O), i oprana (fiziološki rastvor). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncetrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je injektovan u 40g ISCO zlatne kolone i prečišćen sa Combi-Flash®, eluiranjem sa 0% do 20% EtOAc/heksani da bi se dobila naslovljena jedinjenja (550 mg, 3.85 mmol).

14

FAZA 2: (3S,4R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3S,4S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3R,4R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3R,4S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID

[0443] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od mešavine (3R,4R)-2,4-dimetilhept-6-en-3-ola,(3R,4S)-2,4-dimetilhept-6-en-3-ola,(3S,4R)-2,4-dimetilhept-6-en-3-ola, i (3S,4S)-2,4-dimetilhept-6-en-3-ola (iz Faze 1), sledeći sličan postupak opisan za Intermedijer EE22, Faze 3 do 6.

FAZA 3: (3S,4R)- 2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3S,4S) -2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3R,4R)- 2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID i (3R,4S) -2,4-DIMETILHEPT-6-EN-3-SULFONAMID

[0444]

1

[0445] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od mešavine (3S,4R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida, (3S,4S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida, (3R,4R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida, i (3R,4S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida (iz Faze 2), sledeći sličan postupak opisan u Primeru 26, Faza 2.

FAZA 4: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID (IZOMER1)

[0446] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A) i mešavine (3S,4R)- 2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida, (3S,4S)-2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida, (3R,4R)- 2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida, i (3R,4S) -2,4-dimetilhept-6-en-3-sulfonamida, sledeći sličan postupak opisan u Primeru 2, Faze 1 i 2. Ostatak je injektovan u 40g ISCO zlatne kolone i prečišćen sa Combi-Flash®, eluiranjem sa 10 % do 100 % EtOAc (koji sadrži 0.5 % AcOH)/heksani da bi se dobio sirovi proizvod kao brži eluirajući izomer. Ovaj sirovi proizvod prečišćen je preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 50% do 90% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se obezbedilo jedno od naslovljenih jedinjenja kao bela pena.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.30 (s, 1H), 7.79 - 7.70 (m, 1H), 7.66 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.14 (m, 1H), 7.10 (m, 1H), 6.95 - 6.87 (m, 2H), 5.67 (dd, J=4.1, 15.8 Hz, 1H), 5.44 - 5.34 (m, 1H), 4.29 - 4.13 (m, 3H), 4.04 (m, 1H), 3.89 - 3.77 (m, 2H), 3.29 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.05 (dd, J=3.5, 16.0 Hz, 1H), 2.78 - 2.69 (m, 2H), 2.62 - 2.53 (m, 1H), 2.48 (m, 1H), 2.31 -2.19 (m, 1H), 2.05 - 1.70 (m, 9H), 1.61 (m, 1H), 1.37 (d, J=7.0 Hz, 3H), 1.35 - 1.26 (m, 4H), 1.17 (d, J=6.7 Hz, 3H); m/z (ESI, ve jon) 627 (M+H)<+>.

1 1

PRIMER 50. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0448] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno kao drugi (sporiji) eluirajući izomer upotrebom Combi-Flash® razdvajanja kako je opisano u Primeru 54.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.13 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.91 (m, 3H), 5.79 - 5.67 (m, 2H), 4.22 - 4.13 (m, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.90 - 3.78 (m, 1H), 3.69 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.24 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.03 (dd, J=9.3, 15.4 Hz, 1H), 2.83 - 2.70 (m, 2H), 2.46 - 2.37 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 2H), 2.19 - 1.91 (m, 6H), 1.88 - 1.75 (m, 3H), 1.70 - 1.61 (m, 1H), 1.44 - 1.30 (m, 7H), 1.14 (d, J=6.7 Hz, 3H); m/z (ESI, ve jon) 627 (M+H)<+>.

1 2

PRIMER 51. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0449]

[0450] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno kao treći (sporiji) eluirajući izomer upotrebom Combi-Flash® razdvajanja kako je opisano u Primeru 54.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.11 (s, 1H), 7.77 - 7.69 (m, 1H), 7.16 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.13 - 7.06 (m, 1H), 7.00 - 6.88 (m, 3H), 5.85 - 5.60 (m, 2H), 4.24 - 4.06 (m, 4H), 3.95 - 3.80 (m, 1H), 3.69 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.51 - 3.34 (m, 2H), 2.83 - 2.70 (m, 2H), 2.46 - 2.24 (m, 3H), 2.18 - 1.90 (m, 6H), 1.87 - 1.70 (m, 4H), 1.35 (dd, J=7.0, 14.3 Hz, 7H), 1.22 - 1.07 (m, 3H); m/z (ESI, ve jon) 627 (M+H)<+>.

PRIMER 52. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

1

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0452] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno je kao četvrti (sporiji) eluirajući izomer upotrebom Combi-Flash® razdvajanja kako je opisano u Primeru 54.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.11 (br. s., 1H), 7.71 (t, J=6.9 Hz, 1H), 7.25 - 6.87 (m, 5H), 5.88 - 5.43 (m, 2H), 4.20 - 4.02 (m, 3H), 3.84 (m, 1H), 3.74 - 3.55 (m, 2H), 3.55 - 3.40 (m, 1H), 3.40 - 3.12 (m, 1H), 2.82 - 2.62 (m, 3H), 2.53 (d, J=5.3 Hz, 2H), 2.32 (m, 3H), 2.08 - 1.62 (m, 8H), 1.37 - 1.12 (m, 10H); m/z (ESI, ve jon) 627 (M+H)<+>.

PRIMER 53. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-

1 4

3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-METOKSI-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0453]

[0454] Rastvoru proizvoda (iz Primera 54; 9 mg, 0.014 mmol) u THF (1 mL) je dodat natrijum hidrid, 60% disperzija u mineralnom ulju (1.43 mg, 0.036 mmol), praćeno MeI (3.1 mg, 0.022 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je zatim ugašena sa sat. NH4Cl i fiziološkim rastvorom, ekstrahovana (2 × Et2O), i oprana (1 × fiziološki rastvor). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncetrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je injektovan u 4g ISCO zlatne kolone i prečišćen sa Combi-Flash®, eluiranjem sa 0 % do 100 % EtOAc (koji sadrži 0.5 % AcOH)/heksani da bi se dobio jedno od naslovljenih jedinjenja (7 mg, 10.9 µmοl) as bezbojnog ulje.<1>H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.15 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.90 (m, 2H), 6.84 (m, 1H), 5.73 (ddd, J=3.9, 8.7, 15.2 Hz, 1H), 5.52 (dd, J=8.8, 15.5 Hz, 1H), 4.23 (m, 1H), 4.12 -4.04 (m, 2H), 3.82 (d, J=15.1 Hz, 1H), 3.72 - 3.62 (m, 2H), 3.25 - 3.17 (m, 4H), 3.02 (dd, J=10.0, 15.5 Hz, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 2H), 2.47 - 2.38 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 3H), 2.21 - 2.02 (m, 3H), 1.97 - 1.72 (m, 5H), 1.68 - 1.60 (m, 1H), 1.40 - 1.30 (m, 7H), 1.13 (d, J=6.7 Hz, 3H); m/z (ESI, ve jon) 641 (M+H)<+>.

1

PRIMER 54. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-12'-(1-METILETIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0455]

[0456] Rastvoru proizvoda iz Primera 54 (10 mg, 0.016 mmol) u THF (1 mL) je dodat natrijum hidrid, 60% disperzija u mineralnom ulju (1.6 mg, 0.040 mmol), praćeno 2-bromoetil metil etrom (2.2 mg, 0.016 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom ∼48 h. Reakcija je zatim ugašena sa sat. NH4Cl i fiziološkim rastvorom, ekstrahovana (2 × Et2O), i oprana (1 × fiziološki rastvor). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncetrovani pod sniženim pritiskom. Ovaj sirovi proizvod prečišćen je preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 50% do 90% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se obezbedilo jedno

1

od naslovljenih jedinjenja (4 mg, 5.8 µmol) kao bela amorfna čvrsta materija.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.09 (s, 1H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.94 - 6.87 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 5.71 (ddd, J=4.0, 8.5, 15.3 Hz, 1H), 5.60 - 5.48 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.86 - 3.74 (m, 2H), 3.68 (d, J=13.9 Hz, 1H), 3.53 - 3.36 (m, 4H), 3.32 (s, 3H), 3.23 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.01 (dd, J=10.1, 15.2 Hz, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 2H), 2.48 - 2.39 (m, 1H), 2.34 - 2.12 (m, 4H), 2.12 - 2.01 (m, 2H), 1.99 - 1.75 (m, 5H), 1.72 - 1.63 (m, 1H), 1.45 - 1.30 (m, 7H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H); m/z (ESI, ve jon) 685 (M+H)<+>.

PRIMER 55. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.

.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

FAZA 1: (R)-2-METILPENT-4-ENAL i (S)-2-METILPENT-4-ENAL

1

[0459] Rastvoru oksalil hlorid (6.65 mL, 74.9 mmol) u DCM (30 mL) na -60°C je dodat rastvor DMSO anhidrovan (10.6 mL, 150 mmol) u DCM (20 mL) pod N2. Posle umešavanja tokom 2 min, rastvor 2-metilpent-4-en-1-ola (5.00 g, 49.9 mmol) u DCM (20 mL) je dodat, i rezultujuća mešavina je mešana tokom 15 min na -60°C. Et3N (34.7 mL, 250 mmol) je zatim dodat. Posle umešavanja na ambijentalnoj temperaturi tokom 20 min, mešavina je ugašena sa DCM i H2O, ekstrahovana (2 × Et2O), i oprana (1 × fiziološki rastvor). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncetrovani pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovljenog jedinjenja. Naslovljeno jedinjenje je upotrebljeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.

FAZA 2: (1R,2R)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-OL i (1R,2S)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-OL i (1S,2R)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-OL i (1S,2S)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-OL [0460]

[0461] Rastvoru (R)-2-metilpent-4-enala i (S)-2-metilpent-4-enala (5g, 50.9 mmol) (Primer 183, Faza 1) u THF (30 mL) je dodat ciklobutilmagnezijum bromid (17.8 g, 112 mmol) na -78°C. Reakcija je ostavljena da se zagreje na sobnoj temperaturi. Posle umešavanja na sobnoj temperaturi tokom 3 h, reakcija je ugašena (sat. NH4Cl), ekstrahovana (2 × Et2O), i oprana (1 × fiziološki rastvor). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncetrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je injektovan u 40g ISCO zlatne kolone i prečišćen sa Combi-Flash®, eluiranjem sa 0 % do 30 % EtOAc /heksani da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (4.2 g, 27.2 mmol).

FAZA 2: (1S,2R)-1-CIKLOBUTIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2-METILPENT -4-EN-1-SULFONAMID i (1R,2R)-1-CIKLOBUTIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID i (1S,2S)-1-

1

CIKLOBUTIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID i (1R,2S)-1-CIKLOBUTIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID

[0462]

[0463] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od mešavine (1R,2R)-1-ciklobutil-2-metilpent-4-en-1-ola, (1R,2S)-1-ciklobutil-2-metilpent-4-en-1-ola, (1S,2R)-1-ciklobutil-2-metilpent-4-en-1-ola, i (1S,2S)-1-ciklobutil-2-metilpent-4-en-1-ola (iz Faze 2), sledeći sličan postupak opisan za Intermedijer EE22, Faze 3 do 6.

FAZA 3: (1S,2R)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID i (1R,2R)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID i (1S,2S)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID i (1R,2S)-1-CIKLOBUTIL-2-METILPENT-4-EN-1-SULFONAMID

[0465] Naslovljena jedinjenja sintetizovana su od mešavine (1S,2R)-1-ciklobutil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida, (1R,2R)-1-ciklobutil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida, (1S,2S)-1-ciklobutil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-

1

sulfonamida, i (1R,2S)-1-ciklobutil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (iz Faze 2), sledeći sličan postupak opisan u Primeru 26, Faza 2.

FAZA 4: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<1,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2 .0<1,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0466] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12) i mešavine (1S,2R)-1-ciklobutil-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida, (1R,2R)-1-ciklobutil-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida, (1S,2S)-1-ciklobutil-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida, i (1R,2S)-1-ciklobutil- 2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (iz Faze 3), sledeći sličan postupak opisan u Primeru 2, Faze 1 i 2. Ostatak je injektovan u 40g ISCO zlatne kolone i prečišćen sa Combi-Flash®, eluiranjem sa 10 % do 100 % EtOAc (koji sadrži 0.5 % AcOH)/heksani da bi se dobio sirovi proizvod kao brži eluirajući izomer. Ovaj sirovi proizvod prečišćen je preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 50% do 90% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se obezbedilo jedno od naslovljenih jedinjenja kao bela pena.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.26 (br. s., 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.95 - 6.89 (m, 3H), 5.91 (ddd, J=3.8, 8.9, 15.0 Hz, 1H), 5.70 (dd, J=8.1, 15.2 Hz, 1H), 4.25 (dd, J=3.8, 8.1 Hz, 1H), 4.12 - 4.05 (m, 3H), 3.84 (m, 1H), 3.68 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.25 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.09 - 3.02 (m,1H), 3.00 - 2.89 (m, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 2H), 2.47 - 2.38 (m, 1H), 2.36 - 2.12 (m, 5H), 2.06 -1.94 (m, 6H), 1.88 - 1.77 (m, 4H), 1.73 - 1.62 (m, 1H), 1.49 - 1.32 (m, 2H), 1.08 (d, J=6.8 Hz, 3H); m/z (ESI, ve jon) 639 (M+H)<+>.

PRIMER 56. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON

1

13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0468] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno kao drugi (sporiji) eluirajući izomer upotrebom Combi-Flash® razdvajanja kako je opisano u Primeru 55.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.10 (br. s., 1H), 7.73 - 7.67 (m, 1H), 7.17 (m, 1H), 7.11 - 7.05 (m, 2H), 6.97 - 6.89 (m, 2H), 6.01 (m, 1H), 5.65 (dd, J=6.1, 15.5 Hz, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.13 - 4.01 (m, 2H), 3.75 (m, 2H), 3.60 (m, 1H), 3.40 (m, 1H), 3.25 (m, 1H), 2.92 (m, 1H), 2.83 - 2.72 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.35 - 1.56 (m, 16H), 1.44 (m, 1H), 1.15 - 1.03 (m, 3H); m/z (ESI, ve jon) 639 (M+H)<+>.

PRIMER 57. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON

1 1

13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-CIKLOBUTIL-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0470] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno kao treći (sporiji) eluirajući izomer upotrebom Combi-Flash® razdvajanje kako je opisano u Primeru 55.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.22 (br. s., 1H), 7.67 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.58 (m, 1H), 7.15 (dd, J=2.3, 8.4 Hz, 1H), 7.10 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.94 - 6.88 (m, 2H), 5.78 - 5.61 (m, 2H), 4.26 - 4.18 (m, 2H), 4.07 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.02 - 3.87 (m, 2H), 3.72 (m, 1H), 3.36 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.00 - 1.60 (m, 21H), 1.55 - 1.40 (m, 1H), 1.10 (d, J=6.7 Hz, 3H); m/z (ESI, ve jon) 639 (M+H)<+>.

PRIMER 58. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-

1 2

DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0473] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od intermedijera EE12 i pent-4-en-2-il 4-metilbenzensulfonat sledeći sličan postupak opisan u Primeru 26, Faza 1.

FAZA 2: (2S,3R)-1-CIKLOPROPIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-3-METIL-5-HEKSE NE-2-SULFONAMID i (2R,3S)-1-CIKLOPROPIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-3-METIL-5-HEKSE NE-2-SULFONAMID i (2R,3R)-1-CIKLOPROPIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-3-METIL-5-HEKSE NE-2-SULFONAMID i (2S,3S)-1-CIKLOPROPIL-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-3-METIL-5-HEKSE NE-2-SULFONAMID

1

[0475] Rastvoru (2S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (2R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (600 mg, 1.49 mmol) u THF je dodat butillitijum rastvor, 2.5 N u heksanima (0.624 mL, 1.561 mmol) na -78°C pod N2. Posle mešanja reakcije na -78°C tokom 15 min, rastvor (bromometil)-ciklopropana (0.288 mL, 2.97 mmol) u THF (1 mL) je dodat. Reakciona mešavina je mešana na - 78°C tokom 1 h i zatim oslavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi. Mešavina je ugašena sa H2O i estrahovana sa EtOAc. Organski sloj je opran H2O i osušen (Na2SO4). Rastvarač je uparen, a rezultujući ostatak prečišćen je hromatografijom (SiO2gel, 10 do 50%, EtOAc/Heksani) radi dobijanja naslovljenih jedinjenja kao bezbojno tečni.

FAZA 3: (120637-9): (2S, 3S)-1-CIKLOPROPIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2S, 3R)-1-CIKLOPROPIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2R, 3S)-1-CIKLOPROPIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2R, 3R)-1-CIKLOPROPIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID

[0476]

[0477] Mešavina (2S,3R)-1-Ciklopropil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metil-5-hekse ne-2-sulfonamida, (2R,3S)-1-ciklopropil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metil-5-hekse ne-2-sulfonamida, (2R,3R)-1-ciklopropil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metil-5-hekse ne-2-sulfonamida, i (2S,3S)-1-ciklopropil-N,N-bis(4-metoksibenzil)-3-metil-5-hekse ne-2-sulfonamida (510 mg, 1.11 mmol) tretiran je anizolom (1.81 g, 16.7 mmol) u TFA (3.81 g, 33.4 mmol). Mešavina je mešana, zagrejana na 40°C tokom 18 h, i zatim koncentrovana. Rezultujući ostatak prečišćen je hromatografijom (SiO2gel, heksan/EtOAc, 9:1 do 1:1) radi dobijanja naslovljenih jedinjenja kao svetlo braon ulje.

FAZA 4: (3S)-6'-HLORO-N-(((2R,3S)-1-CIKLOPROPIL-3-METIL-5-HEKSE N-2-IL)SULFONIL)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (3S)-6'-HLORO-N-(((2R,3R)-1-CIKLOPROPIL-3-METIL-5-HEKSE N-2-IL)SULFONIL)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (3S)-6'-HLORO-N-(((2S,3S)-1-CIKLOPROPIL-3-METIL-5-HEKSE N-2-IL)SULFONIL)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (3S)-6'-HLORO-N-(((2S,3R)-1-CIKLOPROPIL-3-METIL-5-HEKSE N-2-IL)SULFONIL)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-

1 4

IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID

[0479] Mešavina (2S, 3S)-1-ciklopropil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida, (2S, 3R)-1-ciklopropil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida, (2R, 3S)-1-ciklopropil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida, i (2R, 3R)-1-ciklopropil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida (160 mg, 0.74 mmol) je dodata (S)-6'-hloro-5-(((1R,2S)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilnoj kiselini (Intermedijer AA12A; 250 mg, 0.49 mmol), 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohloridu (141 mg, 0,74 mmol), DMAP (90 mg, 0.74 mmol) i Et3N (0.20 mL, 1.47 mmol) u DCM (1 mL). Reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 3 dana. Mešavina je zatim razblažena sa DCM i H2O je dodata. Organski sloj je osušen (MgSO4) i koncetrovan. Rezultujuća ostatak je hromatografisan (SiO2gel, 1:0 do 1:1, heksan/EtOAc+0.5%HOAc) radi dobijanja naslovljenog jedinjenja.

FAZA 5: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPIL METIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1

[0480] RBF napunjena je gornjom mešavinom (3S)-6'-hloro-n-(((2R,3S)-1-ciklopropil-3-metil-5-hekse n-2-il)sulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida, (3S)-6'-hloro-n-(((2R,3R)-1-ciklopropil-3-metil-5-hekse n-2-il)sulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida, (3S)-6'-hloro-n-(((2S,3S)-1-ciklopropil-3-metil-5-hekse n-2-il)sulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida i (3S)-6'-hloro-n-(((2S,3R)-1-ciklopropil-3-metil-5-hekse n-2-il)sulfonil)-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida (210 mg, 0.30 mmol) u DCE (100 mL). Posle propuštanja mehurića argona kroz fiolu tokom 15 min, u homogeni rastvor je dodat Hoveyda-Grubbs II (65 mg, 0.35 mmol) i sadržaji fiole mešani su na 50 °C tokom 18 h. Reakciona mešavina je ohlađena, i vazduh je uveden propuštanjem mehurića u fiolu tokom 2 min. Rastvarač je uparen, a sirovi ostatak prečišćen je preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 25% do 75% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) radi dobijanja naslovljenog jedinjenja kao prvi eluirajući izomer.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.08 (s, 1 H), 7.70 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1 H), 7.10 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 6.99 (br s, 1 H), 6.97 - 6.89 (m, 2 H), 5.97 - 5.88 (m, 1 H), 5.72 (dd, J=8.1, 15.2 Hz, 1H), 4.30 -4.22 (m, 2 H), 4.10 (s, 2 H), 3.82 (d, J=14.9 Hz, 1 H), 3.69 (d, J=14.2 Hz, 1 H), 3.26 (d, J=14.2 Hz, 1 H), 3.06 (br s, 1 H), 2.85 - 2.71 (m, 2 H), 2.53 - 2.39 (m, 1 H), 2.33 (quin, J=8.7 Hz, 1 H), 2.27 - 2.12 (m, 2 H), 2.09 -1.86 (m, 5 H), 1.86 - 1.77 (m, 3 H), 1.75 - 1.61 (m, 1H), 1.50 - 1.31 (m, 2 H), 1.23 - 1.12 (m, 1 H), 1.05 (d, J=6.8 Hz, 3 H), 0.63 (d, J=7.8 Hz, 2 H), 0.35 - 0.25 (m, 1 H), 0.13 - 0.06 (m, 1H). m/z (ESI, ve jon) 639.2 (M+H)<+>.

PRIMER 59. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPIL METIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24] TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1

[0482] Naslovljeno jedinjenje je dobijeno kao jedan izomer (drugi eluirajući pik) preparativno reverznofaznim HPLC razdvajanjem u Primeru 58.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.17 (br s, 1 H), 7.79 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.24 - 7.15 (m, 2 H), 7.10 (s, 1 H), 6.98 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 6.67 (br s, 1 H), 6.03 (m, 1 H), 5.66 (dd, J=6.4, 15.2 Hz, 1 H), 4.32 - 4.02 (m, 3 H), 3.91 - 3.82 (m, 1 H), 3.80 - 3.72 (m, 1 H), 3.63 (m, 1 H), 3.42 -3.38 (m, 1 H), 3.30 -3.20 (m, 1 H), 2.85 - 2.73 (m, 2 H), 2.55 -2.50 (m, 2 H), 2.29 (br s, 1 H), 2.20 -2.15 (m, 1 H), 2.10 - 1.60 (m, 9 H), 1.55 - 1.43 (m, 2 H), 1.42 -1.35 (m, 1 H), 1.13 (d, J=7.1 Hz, 3 H), 0.61 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 0.30 - 0.25 (m, 1 H), 0.15 -0.11 (m, 1 H). m/z (ESI, ve jon) 639.2 (M+H)<+>.

PRIMER 60. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPIL METIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA [8,16,18,24] TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0483]

1

ili

[0484] Naslovljeno jedinjenje je dobijeno kao jedan izomer (treći eluirajući pik) preparativno reverznofaznim HPLC razdvajanjem u Primeru 58.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.19 (br s, 1 H), 7.72 (br s, 1 H), 7.65 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1 H), 7.11 (s, 1 H), 6.92 (s, 2 H), 5.72 (dd, J=3.7, 15.7 Hz, 1 H), 5.55 (br s, 1 H), 4.27 - 4.20 (m, 2 H), 4.20 - 4.14 (m, 1 H), 4.14 - 4.10 (m, 1 H), 4.00 - 3.88 (m, 1 H), 3.79 (d, J=12.7 Hz, 1 H), 3.30 (d, J=13.9 Hz, 1 H), 3.10 (d, J=15.7 Hz, 1 H), 2.80 - 2.70 (m, 2 H), 2.58 - 2.39 (m, 2 H), 2.35 - 2.06 (m, 3 H), 2.05 - 1.93 (m, 3 H), 1.90 - 1.62 (m, 4 H), 1.70 - 1.64 (m, 1 H), 1.51 - 1.30 (m, 2 H), 1.24 - 1.15 (m, 1 H), 1.11 (d, J=5.1 Hz, 3 H), 0.71 - 0.50 (m, 2 H), 0.31 (qd, J=4.8, 9.4 Hz, 1 H), 0.15 (qd, J=4.6, 9.3 Hz, 1 H). m/z (ESI, ve jon) 639.2 (M+H)<+>.

PRIMER 61. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPIL METIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13] TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA

1

[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID [0485]

[0486] Naslovljeno jedinjenje je dobijeno kao jedan izomer (četvrti eluirajući pik) preparativno reverznofaznim HPLC razdvajanjem u Primeru 58.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.72 (d, J=11 Hz, 1 H), 7.50 -7.44 (m, 1 H), 7.21 - 7.16 (m, 1 H), 7.15 - 7.05 (m, 2 H), 7.00 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 5.75 (m, 1 H), 5.54 (m, 1 H), 4.42 (br s, 1 H), 4.16 - 4.01 (m, 2 H), 3.90 (d, J=15.2 Hz, 1 H), 3.80 - 3.60 (m, 2 H), 3.25 - 3.04 (m, 2 H), 2.87 - 2.70 (m, 2 H), 2.27 - 2.10 (m, 3 H), 2.09 - 1.52 (m, 9 H), 1.53 - 1.39 (m, 3 H), 1.21-1.14 (m, 1H), 1.08 (d, J=6.8 Hz, 3 H), 0.71 - 0.50 (m, 2 H), 0.31 - 0.20 (m, 1 H), 0.16 - 0.10 (m, 1 H). m/z (ESI, ve jon) 639.2 (M+H)<+>.

PRIMER 62. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili

1

(1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-METOKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID [0487]

[0488] U 15-mL RBF je dodat natrijum hidrid, 60% disperzija u mineralnom ulju (8.3 mg, 0.203 mmol) i (15,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'hspiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14] diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14] diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksid (13 mg, 0.020 mmol) u THF (1 mL) na 0°C. Reakciona mešavina je mešana na 0°C tokom 30 min i MeI (6.32 µl, 0.102 mmol) je dodat. Mešavina je mešana i oslavljena da se zagreje od 0°C do ambijentalne temperature tokom 18 h, ugašena sa vodenom 1.0 N HCl, i estrahovana sa EtOAc. Organski sloj je osušen (MgSO4) i koncetrovan. Ostatak je hromatografisan (SiO2gel, 10-40%, EtOAc+10% metanol/heksan) radi dobijanja naslovljenog jedinjenja kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.08 (s, 1 H), 7.70 (d,

1

J=8.4 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1 H), 7.10 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 6.96 - 6.90 (m, 3 H), 5.90 - 5.70 (m, 1 H), 5.53 (dd, J=9.8, 14.5 Hz, 1 H), 4.32 (dd, J=4.7, 7.0 Hz, 1 H), 4.10 (s, 2 H), 3.83 (d, J=15.1 Hz, 1 H), 3.74 -3.66 (m, 2 H), 3.28 - 3.20 (m, 4 H), 3.02 (dd, J=10.2, 15.3 Hz, 1 H), 2.84 - 2.71 (m, 2 H), 2.51 - 2.43 (m, 1 H), 2.39 - 2.18 (m, 3 H), 2.14 - 1.92 (m, 4 H), 1.90 - 1.75 (m, 3 H), 1.65 - 1.50 (m, 2 H), 1.47 - 1.35 (m, 2 H), 1.25 - 1.18 (m, 1 H), 1.05 (d, J=6.8 Hz, 3 H), 0.67 - 0.58 (m, 2 H), 0.34 - 0.26 (m, 1 H), 0.12 - 0.04 (m, 1 H). m/z (ESI, ve jon) 653.2 (M+H)<+>.

PRIMER 63. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2 .0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0489]

1 1

FAZA 1: (2R,3R)-1-CIKLOBUTIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2S,3S)-1-CIKLOBUTIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2R,3S)-1-CIKLOBUTIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID i (2S,3R)-1-CIKLOBUTIL-3-METILHEKS-5-EN-2-SULFONAMID

[0490]

[0491] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (bromometil)ciklobutana postupkom koji je analogan onom opisanom u Primeru 58, Faze 2 do 3.

FAZA 2: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2 .0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0492] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12) i mešavine (2R,3R)-1-ciklobutil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida, (2S,3S)-1-ciklobutil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida, (2R,3S)-1-ciklobutil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida, i (2S,3R)-1-ciklobutil-3-metilheks-5-en-2-sulfonamida (iz Faze 1) postupkom koji je analogan onom opisanom u Primeru 58, Faze 4 kroz 5. Ostatak je prečišćen preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 50% do 95% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se obezbedilo jedno od naslovljenih jedinjenja kao brži eluirajući izomer kao bela pena.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.09 (s, 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.95 - 6.88 (m, 3H), 5.82 - 5.68 (m, 2H), 4.19 (dd, J=4.1, 7.6 Hz, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.93 (dd, J=2.5, 8.8 Hz, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.68 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.25 (d,

1 2

J=14.3 Hz, 1H), 3.05 (dd, J=9.4, 15.3 Hz, 1H), 2.83 - 2.68 (m, 3H), 2.41 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.23 - 2.10 (m, 4H), 2.08 - 2.00 (m, 2H), 1.98 - 1.52 (m, 12H), 1.48 - 1.33 (m, 1H), 1.01 (d, J=6.8 Hz, 3H); m/z (ESI, ve jon) 653 (M+H)<+>.

PRIMER 64. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOBUTILMETIL)-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0494] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno kao drugi (sporiji) eluirajući izomer upotrebom preparativne reverzno-fazne HPLC kako je opisano u Primeru 63.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.05 (s, J=7.4, 7.4 Hz, 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1H), 7.14 - 7.08 (m, 2H), 6.97 - 6.90 (m, 1H), 6.65 (m, 1H), 6.00 (m, 1H), 5.65 (dd, J=6.1, 15.1 Hz, 1H), 4.19 - 4.02 (m, 3H), 3.76 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 3.52 (m, 1H), 3.43 (d, J=14.5 Hz, 1H), 3.24 (m, 1H), 2.83 - 2.73 (m, 2H), 2.73 - 2.62 (m, 1H), 2.55 -

1

2.46 (m, 1H), 2.35 - 2.10 (m, 5H), 2.08 - 1.96 (m, 3H), 1.95 - 1.81 (m, 6H), 1.79 - 1.65 (m, 5H), 1.47 (d, J=15.3 Hz, 1H), 1.16 - 1.07 (m, 3H); m/z (ESI, ve jon) 653 (M+H)<+>.

PRIMER 65. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19>'<24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1 4

[0497] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od (R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (Primer 58, Faza 1) i izobutil bromida postupkom koji je analogan onom opisanom u Primeru 58, Faze 2 do 3.

FAZA 2: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0498] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od (S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12) i mešavina (4R,5R)-2,5-dimetilokt-7-en-4-sulfonamida, (4S,5S)-2,5-dimetilokt-7-en-4-sulfonamida, (4R,5S)-2,5-dimetilokt-7-en-4-sulfonamida, i (4S,5R)-2,5-dimetilokt-7-en-4-sulfonamida (iz Faze 1) postupkom koji je analogan onom opisanom u Primeru 58, Faze 4 kroz 5. Ostatak prečišćen je preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 50% do 95% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) da bi se obezbedilo jedno od naslovljenih jedinjenja kao brži eluirajući izomer kao bela pena.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.09 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.3, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.3 Hz, 1H), 6.96 - 6.90 (m, 3H), 5.86 - 5.78 (m, 1H), 5.76 - 5.68 (m, 1H), 4.22 - 4.12 (m, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.84 (m, 1H), 3.69 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.26 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.05 (dd, J=9.4, 15.3 Hz, 1H), 2.83 - 2.70 (m, 2H), 2.46 - 2.28 (m, 2H), 2.18 - 1.91 (m, 8H), 1.88 - 1.76 (m, 3H), 1.76 - 1.66 (m, 1H), 1.46 - 1.31 (m, 2H), 1.04 -0.98 (m, 9H); m/z (ESI, ve jon) 641 (M+H)<+>.

PRIMER 66. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON

1

13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0499]

[0500] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno kao jedan izomer (drugi, sporiji, eluirajući pik) upotrebom preparativne reverzno-fazne HPLC kako je opisano u Primeru 65.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.11 - 8.04 (m, 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=2.2, 8.4 Hz, 1H), 7.15 - 7.09 (m, 2H), 6.97 -6.90 (m, 1H), 6.65 (m, 1H), 6.04 (m, 1H), 5.65 (dd, J=6.4, 15.4 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.07 (q, J=12.2 Hz, 2H), 3.81 - 3.69 (m, 2H), 3.63 (m, 1H), 3.43 (d, J=14.3 Hz, 1H), 3.24 (m, 1H), 2.82 - 2.71 (m, 2H), 2.56 -2.48 (m, 1H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 2.07 - 1.82 (m, 9H), 1.81 - 1.65 (m, 2H), 1.51 - 1.38 (m, 3H), 1.09 (d, J=7.0 Hz, 3H), 1.05 - 0.93 (m, 6H); m/z (ESI, ve jon) 641 (M+H)<+>.

PRIMER 67. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-

1

METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R, 7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-(2-METILPROPIL)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0502] Jedno od naslovljenih jedinjenja je dobijeno kao jedan izomer (treći eluirajući pik) upotrebom preparativne reverzno-fazne HPLC kako je opisano u Primeru 65.<1>H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.17 (br. s., 1H), 7.74 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.10 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.73 - 5.66 (m, 2H), 4.43 (br. s., 1H), 4.23 (s, 2H), 4.15 - 4.04 (m, 4H), 3.90 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 3.70 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 3.33 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.22 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 3.11 (d, J = 15.1 Hz, 2H), 2.75 (d, J = 5.7 Hz, 3H), 2.51 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 2.07 - 1.88 (m, 10H), 1.06 - 1.00 (m, 9H) m/z (ESI, ve jon) 641 (M+H)<+>.

PRIMER 68. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

1

[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-H'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0503]

FAZA 1: (4R,5S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID i (4S,5S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID i (4S,5R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID i (4R,5R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID i [0504]

[0505] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od (2S)-N, N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-

1

sulfonamida i (2R)-N, N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (iz Primera 58, Faza 1) sa 1-bromopropanom, sledeći sličan postupak opisan u Primeru 58, Faza 2.

FAZA 2: (4R,5S)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID i (4R,5R)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID i (4S,5S)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID i (4S,5R)-5-METIL-7-OKTEN-4-SULFONAMID

[0507] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od mešavine (4R,5S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida, (4S,5S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida, (4S,5R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida i (4R,5R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida sličnim postupkom kao onaj opisan u Primeru 58, Faza 3.

FAZA 3: (3S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5R,6S)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOIL-2-NONEN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (3S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5R,6R)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOIL-2-NONEN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (3S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5S,6S)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOIL-2-NONEN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA i (3S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5S,6R)-1-HIDROKSI-5-METIL-6-SULFAMOIL-2-NONEN-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSILNA KISELINA

[0508]

[0509] U mešavinu (S)-6'-hloro-5-(((1R,2S)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-

1

tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A, 120 mg, 0.24 mmol), mešavinu (4R,5S)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida, (4R,5R)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida, (4S,5S)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida, i (4S,5R)-5-metil-7-okten-4-sulfonamida (iz Faze 2,121 mg; 0.59 mmol) u 1,2 dihloroetanu (2 mL) uveden je argon propuštanjem mehurića argona u reakcionu fiolu tokom 20 min. Hoveyda-Grubbs II je zatim dodat. Mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 2 h, koncetrovana, a ostatak je hromatografisan (SiO2gel, 9:1 do 0:1, heksan/0.3%AcOH+EtOAc) radi dobijanja sivog ulje kao naslovljena jedinjenja.

FAZA 4: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA [1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETR AEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0510] Mešavina (3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5R,6S)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoil-2-nonen-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline, (3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5R,6R)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoil-2-nonen-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline, (3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5S,6S)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoil-2-nonen-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline, i (3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E,5S,6R)-1-hidroksi-5-metil-6-sulfamoil-2-nonen-1-il)ciklobutil) metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (110 mg, 0.170 mmol) dodata je 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimidu, HCl (98 mg, 0.51 mmol), i DMAP (41.7 mg, 0.341 mmol) u DCM (80 mL) na 0 °C. Reakciona mešavina je zatim oslavljena da se zagreje na ambijentalnoj temperaturi i mešana tokom 18 h. Rastvarač je uparen, a sirovi ostatak je hromatografisan (SiO2gel, 9:1 do 0:1, heksan/EtOAc+0.3%AcOH) radi dobijanja sivog ulje (65 mg). Dalje prečišćavanje ulja preparativnom reverzno-faznom HPLC (Gemini™ Prep C185 µm kolona; gradijent eluiranja od 25% do 75% MeCN u H2O, pri čemu oba rastvarača sadrže 0.1% TFA, 30 min postupak) dalo je prvi eluirajući izomer kao naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.07 (s, 1 H), 7.70 (d, J=8.3 Hz, 1 H),

1

7.19 (dd, J=2.0, 8.6 Hz, 1 H), 7.10 (s, 1 H), 6.98 - 6.88 (m, 3 H), 5.93 - 5.85 (m, 1 H), 5.72 (dd, J=7.9, 15.3 Hz, 1 H), 4.26 (dd, J=4.0, 8.2 Hz, 1 H), 4.16 - 4.06 (m, 3 H), 3.83 (d, J=14.9 Hz, 1 H), 3.70 (d, J=14.4 Hz, 1 H), 3.24 (d, J=14.2 Hz, 1 H), 3.03 (dd, J=9.8, 15.2 Hz, 1 H), 2.83 - 2.72 (m, 2 H), 2.45 (dd, J=3.7, 8.6 Hz, 1 H), 2.32 (t, J=9.0 Hz, 1 H), 2.16 - 1.94 (m, 7 H), 1.91 - 1.74 (m, 5 H), 1.74 - 1.62 (m, 2 H), 1.40 (t, J=12.8 Hz, 1 H), 1.10 - 0.98 (m, 6 H). m/z (ESI, ve jon) 627.2 (M+H)<+>.

PRIMER 69. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1 1

[0512] Naslovljena jedinjenja dobjena su kao drugi eluirajući izomer preparativno reverzno-faznim HPLC razdvajanjem u Primeru 68.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.71 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.11 - 7.08 (m, 1 H), 7.00 - 6.87 (m, 2 H), 6.84 (br s, 1 H), 6.14 (br s, 1 H), 5.81 (br s, 1 H), 4.23 (br s, 1 H), 4.19 - 4.04 (m, 3 H), 3.69 (d, J=14.4 Hz, 2 H), 3.58 (br s, 1 H), 3.40 - 3.18 (br, 2 H), 3.15 - 3.00 (br s, 1 H), 2.85 - 2.70 (m, 2 H), 2.44 (br s, 1 H), 2.35 (br s, 2 H), 2.18 (br s, 1 H), 2.10 - 1.90 (m, 3 H), 1.80 - 1.63 (m, 6 H), 1.63 - 1.54 (m, 1 H), 1.48 (br s, 1H), 1.11 (br s, 3 H), 1.05 - 0.99 (m, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 627.2 (M+H)<+>.

PRIMER 70. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R, 7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-12'-PROPIL-3,4-DIHIDRO-2H, 15'H-

1 2

SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON13',13'-DIOKSID

[0513]

[0514] Naslovljena jedinjenja dobjeni su kao treći eluirajući izomer preparativno reverzno-faznim HPLC razdvajanjem u Primeru 68.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ ppm 8.32 (br s, 1 H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.23 - 7.16 (m, 2 H), 7.10 (s, 1 H), 6.97 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 6.66 (br s, 1 H), 6.08 (br s, 1 H), 5.66 (dd, J=6.2, 15.3 Hz, 1 H), 4.21 (br s, 1 H), 4.15 - 4.00 (m, 2 H), 3.83 - 3.60 (m, 3 H), 3.42 (d, J=14.7 Hz, 1 H), 3.25 (br s, 1 H), 2.85 - 2.74 (m, 2 H), 2.60 - 2.47 (m, 2 H), 2.38 - 2.18 (m, 2 H), 2.15 - 2.00 (m, 3 H), 2.00 - 1.58 (m, 9 H), 1.46 (br s, 1H), 1.17 - 1.08 (m, 3 H), 1.07 - 0.96 (m, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 627.2 (M+H)<+>.

PRIMER 71. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1

Faza 1: (4S,5R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID i (4R,5R)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID i (4S,5S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID i (4R,5S)-N,N-BIS(4-METOKSIBENZIL)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID [0516] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od (2S)-N, N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida i (2R)-N, N-bis(4-metoksibenzil)-2-metilpent-4-en-1-sulfonamida (iz Primera 58, Faza 1) sa 1-bromobutan sledeći sličan postupak opisan u Primeru 58, Faza 2.

FAZA 2: (4S,5R)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID i (4S,5R)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID i (4S,5R)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID i (4S,5R)-4-METIL-1-NONEN-5-SULFONAMID

[0517]

[0518] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od mešavine (4S,5R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida, (4R,5R)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida, (4S,5S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida, (4R,5S)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida sličnim postupkom kao onaj opisan u Primeru 58, Faza 3.

FAZA3:(3S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-IL)CIKLOBUTIL)METIL)-N-(((2R,3S)-3-(2-PROPEN-1-IL)-2-HEPTANIL) SULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (3S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-IL)CIKLOBUTIL) METIL)-N-(((2R,3S)-3-(2-PROPEN-1-IL)-2-HEPTANIL)SULFONIL)-3',4,4',5-

1 4

TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (3S)-6'-HLORO-5-(((1 R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-IL)CIKLOBUTIL) METIL)-N-(((2R,3S)-3-(2-PROPEN-1-IL)-2-HEPTANIL)SULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID i (3S)-6'-HLORO-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-HIDROKSI-2-HEKSE N-1-IL)CIKLOBUTIL) METIL)-N-(((2R,3S)-3-(2-PROPEN-1-IL)-2-HEPTANIL)SULFONIL)-3',4,4',5-TETRAHIDRO-2'H-SPIRO[1,5-BENZOKSAZEPIN-3,1'-NAFTALEN]-7-KARBOKSAMID

[0519]

[0520] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od mešavine (4S,5R)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida, (4R,5R)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida, (4S,5S)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida i (4R,5R)-4-metil-1-nonen-5-sulfonamida (Faza 2) i (S)-6'-hloro-5-(((1R,2S)-2-((S,E)-1-hidroksiheks-2-en-1-il)ciklobutil)metil)-3',4,4',5-tetrahidro-2H,2'H-spiro[benzo[b][1,4]oksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksilne kiseline (Intermedijer AA12A) upotrebom sličnog postupka opisanog u Primeru 58, Faza 4.

FAZA 4: (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1 ,22'-[20]OKSA[13] TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI -11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1

[0521] Naslovljena jedinjenja pripremljena su od gornje mešavine (3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-N-(((2R,3S)-3-(2-propen-1-il)-2-heptanil)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida i (3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-N-(((2R,3S)-3-(2-propen-1-il)-2-heptanil)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida i (3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1s,2e)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-N-(((R,3S)-3-(2-propen-1-il)-2-heptanil)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamidand(3S)-6'-hloro-5-(((1R,2R)-2-((1S,2E)-1-hidroksi-2-hekse n-1-il)ciklobutil)metil)-N-(((2R,3S)-3-(2-propen-1-il)-2-heptanil)sulfonil)-3',4,4',5-tetrahidro-2'H-spiro[1,5-benzoksazepin-3,1'-naftalen]-7-karboksamida upotrebom sličnog postupka opisanog u Primeru 58, Faza 5.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.07 (br s, 1 H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.19 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.11 - 7.09 (m, 1 H), 6.99 - 6.87 (m, 3 H), 5.93 - 5.86 (m, 1H), 5.72 (dd, J=8.2, 15.3 Hz, 1 H), 4.26 (dd, J=3.9, 8.3 Hz, 1 H), 4.13 - 4.07 (m, 3 H), 3.83 (d, J=15.4 Hz, 1H), 3.70 (d, J=14.4 Hz, 1 H), 3.24 (d, J=14.2 Hz, 1 H), 3.03 (dd, J=9.5, 15.2 Hz, 1 H), 2.83 - 2.72 (m, 2 H), 2.51 - 2.39 (m, 1H), 2.32 (t, J=9.4 Hz, 1 H), 2.20 - 1.64 (m, 6 H), 1.63 - 1.63 (m, 7 H), 1.63 - 1.53 (m, 1 H), 1.50 - 1.33 (m, 3 H), 1.06 (d, J=6.8 Hz, 3 H), 0.97 (t, J=7.3 Hz, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 641.2 (M+H)<+>.

PRIMER 72. (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'R,12'R)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'R,12'S)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'R)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'Z,11'S,12'S)-12'-BUTIL-6-HLORO-7'-HIDROKSI-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0522]

1

[0523] Naslovljena jedinjenja dobjena su kao jedan izomer (drugi eluirajući pik) preparativno reverznofaznim HPLC razdvajanjem u Primeru 71.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ = 9.92 (br s, 1 H), 7.71 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.47 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.20 - 7.12 (m, 1 H), 7.12 - 7.06 (m, 2 H), 6.98 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 5.75 (br s, 1H), 5.53 (td, J= 2.4, 2.4, 11.8 Hz, 1H), 4.41 (br s, 1H), 4.13 - 4.01 (m, 2 H), 3.88 (d, J=15.4 Hz, 1 H), 3.64 (d, J=14.4 Hz, 1 H), 3.57 (br s, 1 H), 3.19 - 2.99 (m, 2 H), 2.83 - 2.71 (m, 2 H), 2.29 - 2.15 (m, 2 H), 2.13 -2.02 (m, 2 H), 2.02 - 1.87 (m, 4 H), 1.77 - 1.63 (m, 7 H), 1.62 - 1.50 (m, 1H), 1.49 - 1.31 (m, 3 H), 1.12 -1.03 (m, 3 H), 1.02 - 0.88 (m, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 641.2 (M+H)<+>.

PRIMER 73. (15,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-7'-BUTOKSI-6-HLORO-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0524]

[0525] Rastvoru (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h,15'h-

1

spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 2; 60 mg, 0.1 mmol) u THF (2 mL) je dodat 60% natrijum hidrid u mineralnom ulju (20 mg, 0.5 mmol) na 0°C. Mešavina je mešana na 0°C tokom 30 min.1-jodobutan (92 mg, 54 uL, 0.5 mmol) je dodat i mešavina dobijen na ovaj način je mešana na 0°C tokom 4 h, a HPLC-MS analiza karakteriše završetak reakcije. Reakcija je ugašena sa sat. NH4Cl i estrahovana sa EtOAc.

Kombinovani organski slojevi su oprani fiziološki rastvor i osušen preko MgSO4. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom i ostatak prečišćen je fleš hromatografija na SiO2gelu (24 g, HP SiO2, Teledyne ISCO) eluiranjem sa 15% do 65% EtOAc u Heksanu da bi se obezbedio (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-7'-butoksi-6-hloro-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2h, 15'h-spiro[naftalen-1,22'

[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksid kao bela čvrsta materija (15 mg, 23% prinos).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.13 (s, 1 H), 7.70 (d, J= 8.4, 2.3 Hz, 1 H), 7.09 (d, J= 2.2 Hz, 1 H), 6.92 - 6.95 (m, 2 H), 6.89 (s, 1H), 5.80 (ddd, J= 15.1, 9.6, 3.2 Hz, 1 H), 5.54 (dd, J= 15.1, 9.6 Hz, 1 H), 4.31-4.36 (m, 1 H), 4.07-4.11 (m, 2 H), 3.84 (d, J = 15.4 Hz, 1 H), 3.68-3.74 (m, 2 H), 3.39 (dt, J = 9.3, 6.7 Hz, 1 H), 3.22-3.27 (m, 2 H), 3.00 (dd, J= 15.2, 10.3 Hz, 1 H), 2.75-2.83 (m, 2 H), 2.41-2.47 (m, 1 H), 2.30-2.36 (m, 1 H), 2.14-2.21 (m, 1 H), 1.94-2.12 (m, 2 H), 1.73-1.88 (m, 4 H), 1.58-1.62 (m, 1H), 1.48-1.55(m, 4 H), 1.20-1.42 (m, 4 H), 1.05 (d, J = 10.0 Hz, 3 H), 0.92 (t, J = 10.0 Hz, 3H); MS m/z (ESI, ve jon) 656.0 (M+H)<+>.

PRIMER 74. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13] TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24] TETRAEN]-15'-ON-13', 13'-DIOKSID

[0526]

[0527] Rastvoru (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksidu (Primer 2, 100 mg, 0.167 mmol) u DMF (3.34 mL) ohlađen na 0°C je dodat natrijum hidrid, 60% disperzija u mineralnom ulju (66.8 mg, 1.67 mmol). Reakciona mešavina je mešana na 0 °C tokom 15 min, i zatim 2-bromoetil metil etar (Alfa Aesar, 0.078 mL, 0.834 mmol) je dodat. Reakciona mešavina je mešana na ambijentalnoj temperaturi.

1

Posle 48 h, mešavina je ugašena sa aq. NH4Cl i razblažena vodom, zatim estrahovana sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko MgSO4 i koncetrovan. Ovaj sirovi materijal prečišćen je hromatografijom kroz Redi-Sep prethodno spakovanu kolonu silicijum dioksid gela (12 g), eluiranjem sa 10-40 % EtOAc (koji sadrži 0.3% AcOH)/heptani da bi se obezbedilo naslovljeno jedinjenje (61 mg, 0.093 mmol, 55.6% prinos).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.02 (s, 1H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.86 (s, 1H), 5.79 (ddd, J=3.3, 9.6, 15.2 Hz, 1H), 5.54 (dd, J=9.8, 14.4 Hz, 1H), 4.26 (ddd, J=1.0, 7.3, 14.4 Hz, 1H), 4.12 - 4.04 (m, 2H), 3.82 (d, J=15.2 Hz, 1H), 3.75 (dd, J=3.3, 9.2 Hz, 1H), 3.69 (d, J=14.7 Hz, 1H), 3.53 - 3.49 (m, 1H), 3.48 - 3.41 (m, 2H), 3.39 - 3.34 (m, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.25 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.02 (dd, J=10.3, 15.4 Hz, 1H), 2.83 - 2.70 (m, 2H), 2.49 - 2.41 (m, 1H), 2.36 - 2.28 (m, 1H), 2.21 - 2.13 (m, 1H), 2.13 - 2.07 (m, 1H), 2.05 (d, J=13.7 Hz, 1H), 1.99 - 1.91 (m, 3H), 1.89 - 1.77 (m, 3H), 1.71 - 1.59 (m, 1H), 1.44 (d, J=7.3 Hz, 3H), 1.39 (t, J=13.1 Hz, 1H), 1.02 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 657.1 (M+H)<+>.

PRIMER 75. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-(2-METOKSIETOKSI)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0528]

[0529] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 74 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<9,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 17) i 1-bromo-2-metoksietana (Aldrich).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.75 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=2.2, 8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.01 (dd, J=1.6, 8.2 Hz, 1H), 6.94 (d, J=8.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J=1.6 Hz, 1H), 5.89 (ddd, J=6.1, 13.1, 21.5 Hz, 1H), 5.60 (dd, J=9.0, 15.1 Hz, 1H), 4.09 (dd, J=12.7, 15.3 Hz, 2H), 4.05 - 3.99 (m, 1H), 3.91 - 3.82 (m, 2H), 3.69 (d, J=14.5 Hz, 1H), 3.62 - 3.57 (m, 1H), 3.53 (dd, J=4.1, 8.0 Hz, 2H), 3.50 - 3.45 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.08 (dd, J=10.3, 15.2 Hz, 1H), 2.87 - 2.73 (m, 2H), 2.55 - 2.40 (m, 2H), 2.40 - 2.26 (m, 2H), 2.11 (dd, J=7.4, 15.1 Hz, 2H), 1.98 - 1.65 (m, 10H), 1.46 (t, J=10.9 Hz, 1H), 1.20 (t, J=7.4 Hz, 3H). m/z (ESI, ve jon) 657.2 (M+H)<+>.

1

PRIMER 76. (1,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-12'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0530]

[0531] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 74 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-12'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 11) i 1-bromo-2-metoksietana (Aldrich).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.72 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.16 (dd, J=8.5, 2.2 Hz, 1 H), 7.10 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 6.98 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 6.91 (d, J=8.2 Hz, 1 H), 6.85 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 5.80 - 5.87 (m, 1 H), 5.58 (dd, J=15.5, 8.8 Hz, 1 H), 4.03 - 4.18 (m, 3 H), 3.80 - 3.86 (m, 2 H), 3.41 - 3.68 (m, 5 H), 3.35 (s, 3H), 3.06 (dd, J=15.3, 10.4 Hz, 1H), 2.70 - 2.81 (m, 2 H), 2.24 - 2.53 (m, 4 H), 2.09 (d, J=13.7 Hz, 1H), 1.68 - 1.96 (m, 7 H), 1.50 (d, J=7.0 Hz, 3 H), 1.39 - 1.47 (m, 2 H). m/z (ESI, ve jon) 643.2 (M+H)<+>.

PRIMER 77. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,9>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID [0532]

1

[0533] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 74 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 30) i 1-bromo-2-metoksietana (Aldrich).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.32 (s, 1 H), 7.68 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.17 (dd, J=2.2, 8.6 Hz, 1 H), 7.09 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.05 - 6.97 (m, 1H), 6.92 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 5.94 - 5.85 (m, 1 H), 5.51 (dd, J=7.0, 15.3 Hz, 1H), 4.17 - 4.04 (m, 2 H), 3.75 - 3.68 (m, 2 H), 3.66 - 3.46 (m, 7 H), 3.44 - 3.34 (m, 4 H), 2.80-2.72 (m 2 H), 2.45 - 2.40 (m, 2 H), 2.22 - 2.10 (m, 3 H), 2.00 - 1.75 (m, 6 H), 1.75-1.55 (m, 2 H), 1.53-1.48 (m, 1 H), 1.18 (d, J=6.4 Hz, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 643.2 (M+H)<+>.

PRIMER 78. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-HLORO-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0534]

[0535] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 74 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S)-6-hloro-7'-metoksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<9,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida ili (15,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R)-6-hloro-7'-metoksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetra en]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 31) i 1-bromo-2-metoksietan (Aldrich).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 8.22 (s, 1 H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J=2.1, 8.4 Hz, 1 H), 7.09 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 6.95 - 6.88 (m, 2 H), 6.83 (s, 1 H), 5.88 - 5.80 (m, 1 H), 5.56 (dd, J=9.0, 15.2 Hz, 1H), 4.36 (dd, J=4.8, 15.3 Hz, 1 H), 4.14 - 4.04 (m, 2

1 1

H), 3.85 - 3.78 (m, 2 H), 3.71 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.60 - 3.48 (m, 3 H), 3.45 - 3.34 (m, 4 H), 3.23 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.09 - 2.91 (m, 2 H), 2.84 - 2.71 (m, 2 H), 2.53 - 2.44 (m, 1 H), 2.36 - 2.23 (m, 2 H), 2.13-1.92 (m, 5 H), 1.89 - 1.74 (m, 3 H), 1.69 - 1.54 (m, 1H), 1.39 (t, J=12.6 Hz, 1 H), 1.16 (d, J=6.6 Hz, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 643.2 (M+H)<+>.

PRIMER 79. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-(2-(2-METOKSIETOKSI)ETOKSI)-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24] TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID [0536]

[0537] Mešavina suvog (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (15 mg, 0.025 mmol) (Primeri 2) i natrijum hidrida, 60% disperzija u mineralnom ulju (9.9 mg, 0.43 mmol) u DMF je mešana pod argonom tokom 10 min. 1-(2-bromoetoksi)-2-metoksietan (22.6 mg, 0.124 mmol) je dodat na ambijentalnoj temperaturi. Reakciona mešavina je mešana tokom 18 h, ugašena zasićenom vodenom NH4Cl, i estrahovana sa EtOAc (X3). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4) i koncetrovani. Ostatak je hromatografisan (silica gel, 0-50%, EtOAc+0.3%HOAc/heksan) radi dobijanja naslovljenog jedinjenja kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.09 (s, 1 H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1 H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 6.95 - 6.87 (m, 3 H), 5.82 (ddd, J=3.2, 9.4, 15.1 Hz, 1 H), 5.54 (dd, J=9.1, 15.2 Hz, 1 H), 4.35 - 4.24 (m, 1 H), 4.16 - 4.05 (m, 2 H), 3.87 - 3.74 (m, 2 H), 3.70- 3.54 (m, 8 H), 3.45 - 3.44 (m, 1 H), 3.40 (s, 3 H), 3.23 (d, J=14.3 Hz, 1H), 2.99 (dd, J=10.2, 15.3 Hz, 1H), 2.84 - 2.71 (m, 2 H), 2.53 - 2.42 (m, 1 H), 2.38 - 2.24 (m, 1 H), 2.15 - 1.93 (m, 4 H), 1.90 - 1.72 (m, 3 H), 1.72 - 1.57 (m, 3 H), 1.49 (d, J=7.2 Hz, 3 H), 1.42-1.35 (m, 1 H), 1.05 (d, J=6.8 Hz, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 701.2 (M+H)<+>.

PRIMER 80. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-7'-(2-(2-(2-METOKSIETOKSI)ETOKSI)ETOKSI)-11',12'-DIMETIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

1 2

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0538]

[0539] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'[20]oksa[13]tia[1,14] diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 2) upotrebom sličnog postupka opisanog u Primeru 79 zamenom 1-(2-bromoetoksi)-2-metoksietan sa 1-bromo-2-[2-(2-metoksietoksi)etoksi]etana.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.97 (s, 1 H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J=2.2, 8.4 Hz, 1 H), 7.10 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 6.95 - 6.87 (m, 3 H), 5.86 - 5.75 (m, 1H), 5.54 (dd, J=9.0, 15.1 Hz, 1 H), 4.35 - 4.22 (m, 1 H), 4.13 - 4.05 (m, 2 H), 3.86 - 3.76 (m, 2 H), 3.72 - 3.63 (m, 7 H), 3.63 - 3.54 (m, 5 H), 3.44 - 3.42 (m, 1H), 3.40 (s, 3 H), 3.23 (d, J=14.3 Hz, 1H), 2.99 (dd, J=10.1, 15.4 Hz, 1H), 2.84 - 2.71 (m, 2 H), 2.48 (d, J=10.6 Hz, 1 H), 2.38 - 2.26 (m, 1 H), 2.21 - 1.90 (m, 4 H), 1.89 - 1.72 (m, 3 H), 1.70 - 1.58 (m, 3 H), 1.50 (d, J=7.2 Hz, 3 H), 1.45-1.32 (m, 1 H), 1.06 (d, J=6.8 Hz, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 745.2 (M+H)<+>.

PRIMER 81. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-11',12'-DIMETIL-7'-(3,6,9,12-TETRAOKSATRIDEC-1-ILOKSI)-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO [NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14] DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA[8,16,18,24] TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

1

[0541] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je od (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-7'-hidroksi-11',12'-dimetil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2 .0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 2) upotrebom sličnog postupka opisanog u Primeru 79, zamenom 1-(2-bromoetoksi)-2-metoksietan sa trietilen glikol 2-bromoetil metil etra.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.02 (s, 1 H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.19 (dd, J=2.2, 8.4 Hz, 1 H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 6.94 - 6.88 (m, 3 H), 5.85 - 5.77 (m, 1H), 5.54 (dd, J=8.5, 15.4 Hz, 1 H), 4.31 (q, J=7.4 Hz, 1 H), 4.09 (s, 2 H), 3.85 - 3.75 (m, 2 H), 3.74 - 3.62 (m, 11 H), 3.62-3.50 (m, 5 H), 3.45 - 3.42 (m, 1H), 3.39 (s, 3 H), 3.23 (d, J=14.3 Hz, 1 H), 3.03 - 2.95 (m, 1 H), 2.83 - 2.72 (m, 2 H), 2.52 - 2.43 (m, 1 H), 2.32 (t, J=9.5 Hz, 1 H), 2.21 - 1.92 (m, 4 H), 1.90 - 1.74 (m, 3 H), 1.68 - 1.56 (m, 3 H), 1.50 (d, J=7.2 Hz, 3 H), 1.40 (t, J=13.2 Hz, 1 H), 1.06 (d, J=6.8 Hz, 3 H). m/z (ESI, ve jon) 789.2 (M+H)<+>.

Primer 82. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO [14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] PENTAKOZA[8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-HLORO-12'-(CIKLOPROPILMETIL)-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

1 4

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON 13',13'-DIOKSID

[0543] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 74 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'hspiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'S)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14] diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'R)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'hspiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>] pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida ili (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'R,12'S)-6-hloro-12'-(ciklopropilmetil)-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2h,15'h-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13] tia[1,14] diazatetraciklo[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 59), i 1-bromo-2-metoksietana (Aldrich).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 8.05 (s, 1 H), 7.70 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J=2.2, 8.5 Hz, 1 H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 6.96 - 6.90 (m, 3 H), 5.91 - 5.83 (m, 1H), 5.56 (dd, J=9.0, 15.1 Hz, 1 H), 4.30 (dd, J=4.5, 7.2 Hz, 1 H), 4.09 (s, 2 H), 3.87 - 3.79 (m, 2 H), 3.74 - 3.67 (m, 1 H), 3.59 - 3.50 (m, 3 H), 3.48 - 3.41 (m, 1H), 3.41 - 3.35 (s, 3 H), 3.23 (d, J=14.5 Hz, 1H), 3.00 (dd, J=10.2, 15.3 Hz, 1H), 2.84 - 2.71 (m, 2 H), 2.50 (d, J=10.6 Hz, 1H), 2.37 - 2.16 (m, 3 H), 2.13 - 1.92 (m, 4 H), 1.91 - 1.73 (m, 3 H), 1.71 - 1.52 (m, 2 H), 1.51 - 1.34 (m, 2 H), 1.23 - 1.14 (m, 1 H), 1.05 (d, J=6.8 Hz, 3 H), 0.67 - 0.58 (m, 2 H), 0.29 (dd, J=4.4, 9.1 Hz, 1H), 0.08 (dd, J=4.1, 9.0 Hz, 1H). m/z (ESI, ve jon) 697.3 (M+H)<+>.

PRIMER 83. (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-HLORO-12'-ETIL-7'-(2-METOKSIETOKSI)-11'-METIL-3,4-DIHIDRO-2H,15'H-SPIRO[NAFTALEN-1,22'-

1

[20]OKSA[13]TIA[1,14]DIAZATETRACIKLO[14.7.2.0<3,6>.0<19,24>]PENTAKOZA [8,16,18,24]TETRAEN]-15'-ON-13', 13'-DIOKSID

[0544]

[0545] Naslovljeno jedinjenje pripremljeno je na način analogan opisanom u Primeru 74 upotrebom (1S,3'R,6'R,7'S,8'E,11'S,12'R)-6-hloro-12'-etil-7'-hidroksi-11'-metil-3,4-dihidro-2H,15'H-spiro[naftalen-1,22'-[20]oksa[13]tia[1,14]diazatetraciklo [14.7.2.0<1,6>.0<19,24>]pentakoza[8,16,18,24]tetraen]-15'-on 13',13'-dioksida (Primer 24), i 1-bromo-2-metoksietana (Aldrich).<1>H NMR (500MHz, CD2Cl2) δ 8.08 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J=2.4, 8.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J=0.7 Hz, 2H), 6.87 (s, 1H), 5.82 (ddd, J=3.4, 9.4, 15.3 Hz, 1H), 5.54 (dd, J=9.4, 15.8 Hz, 1H), 4.11 - 4.05 (m, 2H), 4.00 (dd, J=2.8, 9.4 Hz, 1H), 3.82 (d, J=14.9 Hz, 1H), 3.78 (dd, J=3.2, 9.0 Hz, 1H), 3.69 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.53 (ddd, J=3.4, 5.4, 9.3 Hz, 1H), 3.45 (dt, J=3.7, 5.0 Hz, 2H), 3.38 (ddd, J=3.4, 5.9, 9.5 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.25 (d, J=14.4 Hz, 1H), 3.02 (dd, J=10.3, 15.4 Hz, 1H), 2.84 - 2.70 (m, 2H), 2.45 (ddd, J=3.7, 10.0, 19.1 Hz, 1H), 2.37 - 2.29 (m, 1H), 2.29 - 2.19 (m, 1H), 2.13 - 2.08 (m, 1H), 2.08 - 2.01 (m, 2H), 2.00 - 1.89 (m, 3H), 1.89 -1.77 (m, 4H), 1.66 (quin, J=8.6 Hz, 1H), 1.44 - 1.35 (m, 1H), 1.28 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.02 (d, J=6.8 Hz, 3H). MS (ESI, ve jon) m/z 671.1 (M+H)<+>; 693.1 (M+Na)<+>.

1

Claims (23)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule I:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, u kojoj: gde b, predstavljeno simbolom predstavlja jednostruku ili dvostruku hemijsku vezu koja može biti cis ili trans; R je halo; R<1>je H, C1-6alkil, ili -(CH2CH2O)nCH3, gde n je ceo broj od 1 do 4; R<2>je H ili C1-6alkil; R<2A>je H ili C1-6alkil; R<3>je H ili C1-6alkil; i R<3A>je H, C1-6alkil, C3-6cikloalkil, ili (CH2)m-C3-6cikloalkil, gde m je ceo broj od 1 do 4.
2. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1, gde b označava dvostruku vezu.
3. 3. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili zahtevu 2, gde R je Cl.
4. 4. Jedinjenje prema zahtevu 1, gde R<1>je C1-6alkil.
5. 5. Jedinjenje prema zahtevu 4, gde R<1>je CH3.
6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-5, gde R<2>je H, a R<2A>je C1-6alkil.
7. 7. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-6, gde R<3>je H, a R<3A>je C1-6alkil.
8. 8. Jedinjenje prema zahtevu 1, gde jedinjenje Formule I ima Formulu II:

   ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u kojoj: R<1>, R<2>, R<2A>, R<3>i R<3A>su pretodno definisani.
9. 9. Jedinjenje prema zahtevu 1, gde to jedinjenje ima strukturu izabranu od:

   1

   �

   �

   21

   22

   �

   ��

   �

   �

   �

   �

   ili 2

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
10. 10. Jedinjenje prema zahtevu 1, gde to jedinjenje ima strukturu izabranu od:

    21 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
11. 11. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je jedinjenje koje ima strukturu

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
12. 12. Farmaceutska kombinacija koja obuhvata jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 11 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
13. 13. Farmaceutska kombinacija prema zahtevu 12, gde jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so predstavlja jedinjenje prikazano u zahtevu 11 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-11 za upotrebu u postupku inhibiranja proteina 1 mijeoidne ćelijske leukemije (Mcl-1) ćelije, pri čemu taj postupak obuhvata dovođenje u kontakt te ćelije sa jedinjenjem prema bilo kom od zahteva 1 do 11 u nekoj efektivnoj količini radi inhibiranja Mcl-1.
15. 15. Jedinjenje za upotrebu u postupku inhibiranja proteina 1 mijeoidne ćelijske leukemije (Mcl-1) ćelije, prema zahtevu 14, gde dovođenje u kontakt obuhvata davanje jedinjenja nekom subjektu.
16. 16. Jedinjenje za upotrebu u postupku inhibiranja proteina 1 mijeoidne ćelijske leukemije (Mcl-1) ćelije, prema zahtevu 15, gde je davanje oralno, parenteralno, putem injekcije, putem inhalacije, transdermalno, ili transmukozalno.
17. 17. Jedinjenje za upotrebu u postupku inhibiranja proteina 1 mijeoidne ćelijske leukemije (Mcl-1) ćelije, prema zahtevu 15, gde subjekat boluje od kancera.
18. 18. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-11 za upotrebu u postupku tretiranja kancera, pri čemu taj postupak obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebno, terapeutski efektivne količine jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1-11, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
19. 19. Jedinjenje za upotrebu u postupku tretiranja kancera prema zahtevu 18, gde je kancer neki hematološki malignitet.
20. 20. Jedinjenje za upotrebu u postupku tretiranja kancera prema zahtevu 18, gde je kancer odabran iz grupe koju čine kancer dojke, kolorektalni kancer, kancer kože, melanom, kancer jajnika, kancer bubrega, kancer pluća, nemikroćelijski kancer pluća, limfom, ne-Hodžkinov limfom, mijelom, multiple mijelom, leukemija, i akutna mijelogenozna leukemija.
21. 21. Jedinjenje za upotrebu u postupku tretiranja kancera prema zahtevu 18, gde je kancer multiple mijelom.
22. 22. Jedinjenje za upotrebu u postupku tretiranja kancera prema zahtevu 18, gde postupak dalje obuhvata davanje pacijentu kome je to potrebno terapeutski efektivne količine dodatnog farmaceutski aktivnog jedinjenja.
23. 23. Jedinjenje za upotrebu u postupku tretiranja kancera prema zahtevu 22, gde je to dodatno farmaceutski aktivno jedinjenje karfilzomib.