Deprecated: The each() function is deprecated. This message will be suppressed on further calls in /home/zhenxiangba/zhenxiangba.com/public_html/phproxy-improved-master/index.php on line 456
RS63051B1 - Jedinjenja i kompozicije za intracelularnu isporuku agenasa - Google Patents
[go: Go Back, main page]

RS63051B1 - Jedinjenja i kompozicije za intracelularnu isporuku agenasa - Google Patents

Jedinjenja i kompozicije za intracelularnu isporuku agenasa

Info

Publication number
RS63051B1
RS63051B1 RS20220291A RSP20220291A RS63051B1 RS 63051 B1 RS63051 B1 RS 63051B1 RS 20220291 A RS20220291 A RS 20220291A RS P20220291 A RSP20220291 A RS P20220291A RS 63051 B1 RS63051 B1 RS 63051B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
group
compound
examples
alkyl
independently selected
Prior art date
Application number
RS20220291A
Other languages
English (en)
Inventor
Kerry E Benenato
William Butcher
Original Assignee
Modernatx Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=57944500&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS63051(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Modernatx Inc filed Critical Modernatx Inc
Publication of RS63051B1 publication Critical patent/RS63051B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/10—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms
    • C07D211/14—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1808—Epidermal growth factor [EGF] urogastrone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • A61K48/0058—Nucleic acids adapted for tissue specific expression, e.g. having tissue specific promoters as part of a contruct
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/10—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms
    • C07D211/16—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms with acylated ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/04—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/12—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms
    • C07D295/125—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms with the ring nitrogen atoms and the substituent nitrogen atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C07D295/13—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly or doubly bound nitrogen atoms with the ring nitrogen atoms and the substituent nitrogen atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings to an acyclic saturated chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/182—Radicals derived from carboxylic acids
    • C07D295/185—Radicals derived from carboxylic acids from aliphatic carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)

Description

Opis
POVEZANE PRIJAVE
[0001] Ova patentna prijava zahteva pravo prvenstva i korist od SAD privremene patentne prijave br.
62/271,160, podnete 22. decembra 2015, 62/271,179, podnete 22. decembra 2015, 62/271,137, podnete 22. decembra 2015, 62/271,200, podnete 22. decembra 2015, 62/271,146, podnete 22. decembra 2015; 62/338,474, podnete 18 maja 2016; 62/413,345, podnete 26. oktobra 2016.
OBLAST TEHNIKE
[0002] Predmetni prikaz obezbeđuje jedinjenja, kompozicije koje sadrže ova jedinjenja i postupke koji uključuju kompozicije lipidnih nanočestica za isporučivanje jednog ili više terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u, i/ili za proizvodnju polipeptida u ćelijama ili organima sisara. Osim amino lipida, kompozicije lipidnih nanočestica prema prikazu mogu da uključuju jedan ili više katjonskih i/ili jonizabilnih aminolipida, fosfolipida, uključujući polinezasićene lipide, PEG lipida, strukturnih lipida i/ili terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa u specifičnim udelima.
OSNOV PRONALASKA
[0003] Efikasna ciljana isporuka biološki aktivnih supstanci kao što su lekovi malog molekula, proteini i nukleinske kiseline predstavlja kontinuirani izazov u medicini. Konkretno, isporuka nukleinskih kiselina u ćelije je otežana relativnom nestabilnošću i niskom sposobnošću ulaska u ćelije ovih vrsta molekula. Stoga postoji potreba da se razviju postupci i kompozicije koje olakšavaju isporučivanje u ćelije terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa kao što su nukleinske kiseline.
[0004] Pokazalo se da su kompozicije nanočestica koje sadrže lipide, lipozomi i lipopleksi, efikasna sredstva za transport u ćelije i/ili intracelularne odeljke za biološki aktivne supstance kao što su lekovi malog molekula, proteini i nukleinske kiseline. Ove kompozicije u principu uključuju jedan ili više "katjonskih" i/ili amino (jonizabilnih) lipida, fosfolipida koji uključuju polinezasićene lipide, strukturnih lipida (npr., sterola), i/ili lipida koji sadrže polietilen glikol (PEG lipida). Katjonski i/ili jonizabilni lipidi uključuju, na primer, lipide koji sadrže amine, a koji mogu lako da se protonizuju.
Iako je prikazan niz različitih ovakvih kompozicija sa nanočesticama koje sadrže lipide, poboljšanja bezbednosti, efikasnosti i specifičnosti i dalje nedostaju.
REZIME
[0005] Predmetni prikaz obezbeđuje jedinjenja i kompozicije, kao i postupke koji ih uključuju.
[0006] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (I) ili formule (Ib)
ili njegovu so ili izomer, gde prsten A predstavlja
t je 1 ili 2;
A1i A2je svaki nezavisno odabran od CH ili N;
A6i A7je svaki nezavisno odabran od CH ili N, pri čemu najmanje jedan od A6i A7je N; Z je CH2ili je odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
R1, R2, R3, R4, i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila, C5-20alkenila, -R"MR', -R<∗>YR", -YR", i -R<∗>OR";
svaki M je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe; pri čemu kada jedinjenje ima formulu (Ib), tada M nije -OC(O)O-;
X<1>, X<2>, i X<3>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od veze, -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
X<4>i X<5>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
svaki Y je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C2-12alkenila; svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C3-6karbocikla; svaki R' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila, pri čemu kada jedinjenje ima formulu (I), i kada prsten A predstavlja
tada
i) najmanje jedan od X<1>, X<2>, i X<3>nije -CH2-; i/ili
ii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'; i
kada jedinjenje ima formulu (I) i prsten A je
i X<1>, X<2>, i X<3>su svaki ―CH2, tada
najmanje jedan od A<1>i A<2>je N,
R1, R2, R3, R4i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila, i
kada prsten A predstavlja
tada
i) R1, R2, R3, R4, i R5su isti, pri čemu R1nije C12alkil, C18alkil, ili C18alkenil;
ii) samo jedan od R1, R2, R3, R4i R5je odabran od C6-20alkenila;
iii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5ima drugačiji broj atoma ugljenika u odnosu na najmanje jedan drugi od R1, R2, R3, R4, i R5;
iv) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkenila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkila; ili v) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkenila.
[0007] Jedinjenja formule (I) može da uključuje jedno ili više od sledećih svojstava, kada je primenljivo.
[0008] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje ima bilo koju od formula (Ia1)-(Ia6):
ili
[0009] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od X<1>, X<2>, i X<3>nije -CH2-. Na primer, u određenim primerima izvođenja, X<1>nije -CH2-. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od X<1>, X<2>, i X<3>je - C(O)-. U nekim primerima izvođenja, X<3>je veza dok svaki od X<1>i X<2>nije veza. U nekim primerima izvođenja, nijedan od X<1>, X<2>, i X<3>nije veza.
[0010] U nekim primerima izvođenja, R1i R2su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su isti. U nekim primerima izvođenja, R4i R5su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti.
[0011] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'. U nekim primerima izvođenja, najviše jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'. Na primer, najmanje jedan od R1, R2, i R3može da bude -R"MR', i/ili najmanje jedan od R4i R5je -R"MR'. U određenim primerima izvođenja, najmanje jedan M je -C(O)O-. U nekim primerima izvođenja, svaki M je -C(O)O-. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan M je -OC(O)-. U nekim primerima izvođenja, svaki M je -OC(O)- U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C3alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C3alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C5alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C5alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C6alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C6alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C7alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C7alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R' je C5alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R' je C5alkil. U drugim primerima izvođenja, najmanje jedan R' je C1alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R' je C1alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R' je C2alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R' je C2alkil.
[0012] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je C12alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki od R1, R2, R3, R4, i R5je C12alkil.
[0013] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje ima formulu (IIa):
[0014] U nekim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti, i nisu C12alkil, C18alkil, ili C18alkenil. U nekim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti i predstavljaju C9alkil ili C14alkil.
[0015] U nekim primerima izvođenja, samo jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je odabran od C6-20alkenila. U nekim takvim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5imaju isti broj atoma ugljenika. U nekim primerima izvođenja, R4je odabran od C5-20alkenila. Na primer, R4može da bude C12alkenil ili C18alkenil.
[0016] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5ima drugačiji broj atoma ugljenika u odnosu na najmanje jedan drugi od R1, R2, R3, R4, i R5.
[0017] U određenim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkenila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkila. U drugim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkenila. U nekim primerima izvođenja, R1, R2, i R3imaju isti broj atoma ugljenika, i/ili R4i R5imaju isti broj atoma ugljenika. Na primer, R1, R2, i R3, ili R4i R5, mogu da imaju 6, 8, 9, 12, 14, ili 18 atoma ugljenika. U nekim primerima izvođenja, R1, R2, i R3, ili R4i R5, su C18alkenil (npr., linoleil). U nekim primerima izvođenja, R1, R2, i R3, ili R4i R5, su alkil grupe uključujući 6, 8, 9, 12, ili 14 atoma ugljenika.
[0018] U nekim primerima izvođenja, R1ima drugačiji broj atoma ugljenika od R2, R3, R4, i R5. U drugim primerima izvođenja, R3ima drugačiji broj atoma ugljenika od R1, R2, R4, i R5. U sledećim primerima izvođenja, R4ima drugačiji broj atoma ugljenika od R1, R2, R3, i R5.
[0019] U ovom dokumentu opisano je i jedinjenje formule (II):
ili njegova so ili izomer, pri čemu
A1i A2su svaki nezavisno odabrani od CH ili N i najmanje jedan od A1i A2je N;
Z je CH2ili odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
R1, R2, R3, R4, i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila; pri čemu kada prsten A predstavlja
tada
i) R1, R2, R3, R4, i R5su isti, pri čemu R1nije C12alkil, C18alkil, ili C18alkenil;
ii) samo jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je odabran od C6-20alkenila;
iii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5ima drugačiji broj atoma ugljenika u odnosu na najmanje jedan drugi od R1, R2, R3, R4, i R5;
iv) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkenila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkila; ili v) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkenila.
[0020] Opisano je i jedinjenje prema formuli (III):
ili njegova so ili izomer, gde
A3je CH ili N;
A4je CH2ili NH; i najmanje jedan od A3i A4je N ili NH;
Z je CH2ili odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
R1, R2, i R3su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila, C5-20alkenila, -R"MR', -R<∗>YR", -YR", i -R<∗>OR";
svaki M je nezavisno odabran od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH) -, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe; X<1>i X<2>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
svaki Y je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C2-12alkenila; svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C3-6karbocikla; svaki R' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila.
[0021] Jedinjenja formule (III) mogu da uključuju jedno ili više od sledećih svojstava kada je primenljivo.
[0022] Jedinjenje formule (III) može da bude jedinjenje formule (IIIa):
[0023] R1, R2, i R3mogu da budu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. R1, R2, i R3mogu da budu isti. R1, R2, i R3mogu da budu C6, C9, C12, ili C14alkil. R1, R2, i R3mogu da budu C18alkenil. Na primer, R1, R2, i R3mogu da budu linoleil.
[0024] U nekim primerima, najmanje jedan od X<1>i X<2>nije -CH2-. Na primer, u nekim slučajevima, X<1>nije -CH2-. U nekim slučajevima, najmanje jedan od X<1>i X<2>je -C(O)-.
[0025] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje je jedinjenje prema formuli (Ib):
ili njegova so ili izomer, gde
A6i A7su svaki nezavisno odabrani od CH ili N, pri čemu najmanje jedan od A6i A7je N; Z je CH2ili odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
X<4>i X<5>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
R1, R2, R3, R4, i R5svaki su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila, -R"MR', -R<∗>YR", -YR", i -R<∗>OR";
svaki M je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe;
svaki Y je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C2-12alkenila; svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C3-6karbocikla; svaki R' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila.
[0026] Jedinjenja formule (Ib) mogu da uključuju jedno ili više od sledećih svojstava kada je primenljivo.
[0027] U nekim primerima izvođenja, R1i R2su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su isti. U nekim primerima izvođenja, R4i R5su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti.
[0028] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je C9-12alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki od R1, R2, R3, R4, i R5nezavisno je C9, C12ili C14alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki od R1, R2, R3, R4, i R5je C9alkil.
[0029] U nekim primerima izvođenja, A6je N i A7je N. U nekim primerima izvođenja, A6je CH i A7je N.
[0030] U nekim primerima izvođenja, X<4>je-CH2- i X<5>je -C(O)-. U nekim primerima izvođenja, X<4>i X<5>su -C(O)-.
[0031] U jednom primeru izvođenja, jedinjenje ima formulu (IV)
[0032] Opisano je i jedinjenje koje ima formulu (17-I):
ili njegova so ili izomer, pri čemu R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, -C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R<a>)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2R<a>i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2ai R3asu svaki nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C3-24alkila, C3-24alkenila, -R<a∗>Y<a>R<a>", -Y<a>R<a>", i -R<a∗>OR<a>";
svaki Y<a>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<a∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
svaki R<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H; i svaki R<a>" je odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila;
pri čemu R2auključuje 7 ili manje atoma ugljenika.
[0033] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0034] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima izvođenja, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0035] U nekim primerima, R3auključuje 7 ili manje atoma ugljenika.
[0036] Ovde je opisano i jedinjenje koje ima formulu (17-I)
ili njegova so ili izomer, pri čemu
R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, - C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R<a>)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2R<a>i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
R2aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-24alkenila;
R3aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-24alkila; i
svaki R<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0037] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0038] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima izvođenja, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0039] U nekim primerima, R3aje alkil koji uključuje 9, 12, 14, ili 18 atoma ugljenika.
[0040] U nekim primerima, R2aje C18alkenil (npr., linoleil).
[0041] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (17-I)
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, - C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2Ra i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
R2aje odabran iz grupe koja se sastoji od C13-20alkila;
R3a je odabran iz grupe koja se sastoji od C8-20alkila; i
svaki R<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0042] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0043] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima izvođenja, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0044] U nekim primerima, R2ai R3asu isti.
[0045] U nekim primerima, R2ai/ili R3aje C14alkil.
[0046] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (17-I)
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde Q<a>je ―OR<a>, R<a>je odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H, i n<a>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5; i
R2ai R3asu svaki nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C8-20alkenila, pri čemu i) R<a>je odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C2-3alkenila; ili
ii) R1aje -(CH2)2OH, i R2ai R3asvaki uključuje jednu ili manje dvostrukih veza.
[0047] U nekim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0048] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0049] U određenim primerima, R1aje -(CH2)2OCH3. U drugim primerima, R1aje -(CH2)2OH.
[0050] U nekim primerima, R2aje C18alkenil (npr., linoleil). U određenim primerima, R3aje C18alkenil (npr., linoleil).
[0051] U nekim primerima, R2ai R3asu isti.
[0052] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje formule (17-I)
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, - C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R<a>)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2R<a>i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
R2aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-12alkila;
R3aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-20alkila; i
svaki R<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0053] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0054] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0055] U određenim primerima, Q<a>je -OR<a>i n<a>je odabran od 2, 3, i 4.
[0056] U nekim primerima, R2aje C9alkil. U drugim primerima, R2aje C12alkil.
[0057] U nekim primerima, R2ai R3asu isti.
[0058] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (19-I),
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1bje odabran iz grupe koja se sastoji od H, C1-5alkila, C2-5alkenila, -R<b>"M<b>R<b>', C3-6karbocikla, -(CH2)nQ<b>, i -(CH2)nCHQ<b>R<b>, gde je Q<b>odabran od heterocikla, -OR<b>, -O(CH2)nN(R<b>)2, -C(O)OR<b>, -OC(O)R<b>, -CX<b>3, -CXb2H, -CX<b>H2, -CN, -N(R<b>)2, -C(O)N(R<b>)2, -N(R<b>)C(O)R<b>, i -N(R<b>)S(O)2R<b>i svaki n je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2bi R3bsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila, C2-20alkenila, -R<b>"MR<b>', -R<b∗>YR<b>", -YR<b>", i -R<b∗>OR<b>";
svaki M<b>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<b>')-, -N(R<b>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR<b>')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe;
W je odabran iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -CHR<b>-, -C(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
svaki X<b>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
svaki Y<b>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<b∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki R<b>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C3-6karbocikla, C2-3alkenila, i H;
svaki R<b>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R<b>" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila.
[0059] U nekim primerima, W nije -CH2-. U određenim takvim primerima, W je -C(O)-.
[0060] U nekim primerima, najmanje jedan od R2bi R3bje -R<b>"M<b>R<b>'. U određenim primerima, najmanje jedan M<b>je -C(O)O-. U nekim primerima, najmanje jedan R<b>" je C5alkil. U određenim primerima, najmanje jedan R<b>' je C5alkil.
[0061] U nekim primerima, R2bi/ili R3bsu odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila. Na primer, R2bi/ili R3bmogu da budu alkil grupe koje uključuju 9 ili 12 atoma ugljenika. U drugim primerima, R2bi/ili R3bsu odabrani iz grupe koja se sastoji od C2-20alkenila. Na primer, R2bi/ili R3bmogu da budu alkenil grupe koje uključuju 18 atoma ugljenika (npr., linoleil grupe). U određenim primerima, R2bi R3bsu isti.
[0062] U nekim primerima, R1bje H, dok u drugim primerima, R1bje odabran od C1-5alkila. Na primer, R1bmože da bude C1alkil.
[0063] U određenim primerima, R1bje -(CH2)nQ<b>. U takvim primerima, Q<b>je heterocikl kao što je fenil grupa. Na primer, Q<b>može da bude fenil grupa sa jednim ili više supstituenata, kao što je ovde opisano.
[0064] Ovde su opisana i jedinjenja formule (19-II):
ili njihove soli ili izomeri, pri čemu
R1bje odabran iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila; i
R2bi R3bsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkenila.
[0065] U određenim primerima, R1bje C12alkil.
[0066] U nekim primerima, R2bi/ili R3bsu C18alkenil (npr., linoleil).
[0067] U određenim primerima, R2bi R3bsu oba linoleil.
[0068] Ovde su opisana i jedinjenja formule (20-I):
ili njihova so ili izomer, pri čemu
R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od C3-6karbocikla, -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>odabran od heterocikla, -OR<c>, -O(CH2)n<c>N(R<c>)2, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -CX<c>3, -CX<c>2H, -CX<c>H2, -CN, -N(R<c>)2, -C(O)N(R<c>)2, -N(R<c>)C(O)R<c>, i -N(R<c>)S(O)2R<c>i svaki n<c>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2c, R3c, i R4csu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila, C2-20alkenila, -R<c>"M<c>R<c>', -R<c∗>Y<c>R<c>", -Y<c>R<c>", i -R<c∗>OR<c>";
svaki M<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<c>')-, -N(R<c>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe;
svaki X<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
svaki Y<c>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<c∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H; svaki R<c>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R<c>" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila, pri čemu
i) R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od C3-6karbocikla, -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>odabran od heterocikla, -O(CH2)n<c>N(R<c>)2, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -CX<c>3, -CXc2H, -CX<c>H2, -C(O)N(R<c>)2, -N(R<c>)C(O)R<c>, i -N(R<c>)S(O)2R<c>i svaki n<c>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5; i/ili
ii) najmanje jedan od R2c, R3c, i R4cje -R<c>"M<c>R<c>'.
[0069] U nekim primerima, R1je odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, pri čemu je Q<c>odabran od heterocikla, -O(CH2)n<c>N(R<c>)2, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -CX<c>3, -CXc2H, -CX<c>H2, -CN, -C(O)N(R<c>)2, -N(R<c>)C(O)R<c>, i -N(R<c>)S(O)2R<c>i svaki n je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5. U određenim primerima, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U nekim primerima, n<c>je 2. U nekim primerima, Q<c>je -C(O)OR<c>, pri čemu je R<c>, na primer, H.
[0070] U nekim primerima, najmanje jedan od R2c, R3c, i R4cje -R<c>"M<c>R<c>'. Na primer, R2c, R3c, i/ili R4cmože da bude -R<c>"M<c>R<c>'. U nekim primerima, najmanje jedan M<c>je -C(O)O-. U određenim primerima, svaki M<c>je -C(O)O-. U nekim primerima, najmanje jedan R<c>" je C5ili C7alkil. U određenim primerima, svaki R<c>" je C5alkil. U drugim primerima, svaki R<c>" je C7alkil. U nekim primerima, najmanje jedan R<c>' je C5, C7, ili C9alkil. U određenim primerima, svaki R<c>' je C5alkil. U drugim primerima, svaki R<c>' je C7alkil. U drugim primerima, svaki R<c>' je C9alkil. U nekim primerima, R<c>' je granat.
[0071] U nekim primerima, R2c, R3c, i R4csu odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila. U određenim primerima, R2c, R3c, i R4csu C12alkil.
[0072] U nekim primerima, R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. Na primer, R2cmože da bude C12alkil.
[0073] U nekim primerima, R3cje odabran iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. Na primer, R3cmože da bude C6, C9, ili C12alkil.
[0074] U nekim primerima, R4cje odabran iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. Na primer, R4cmože da bude C6, C9, ili C12alkil.
[0075] U nekim primerima, R3ci R4csu isti.
[0076] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje prema formuli (20-I):
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1je odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>odabran od -OR<c>, -CN, i -N(R<c>)2, i n<c>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2ci R3csu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila;
R4cje odabran iz grupe koja se sastoji od C13-20alkila i C5-20alkenila; i
svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0077] U nekim primerima, R3cje C14alkil.
[0078] U nekim primerima, R4cje C14alkil.
[0079] U nekim primerima, R3cje C18alkenil. Na primer, R3cmože da bude linoleil.
[0080] U nekim primerima, R4cje C18alkenil. Na primer, R4cmože da bude linoleil.
[0081] U nekim primerima, R2cje C12alkil. U drugim primerima, R2cje C14alkil. U nekim primerima, R2cje C18alkenil. Na primer, R2cmože da bude linoleil.
[0082] U nekim primerima, R3ci R4csu isti.
[0083] U nekim primerima, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U nekim primerima, Q<c>je -OR<c>. Na primer, Q<c>može da bude -OH. U nekim primerima, n<c>je 2 ili 3.
[0084] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (20-I):
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1je odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, pri čemu je Q<c>odabran od -OR<c>, -CN, i -N(R<c>)2, i n<c>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2c, R3c, i R4csu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila; i svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H; gde
i) R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila, i/ili
ii) R3cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila.
[0085] U nekim primerima, R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila. Na primer, R2cmože da bude C6ili C9alkil.
[0086] U nekim primerima, R3cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila. Na primer, R3cmože da bude C6ili C9alkil.
[0087] U nekim primerima, R3cje C12alkil.
[0088] U nekim primerima, R2cje C12alkil.
[0089] U nekim primerima, R4cje C6, C9, ili C12alkil.
[0090] U nekim primerima, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U određenim primerima, Q<c>je -OR<c>. U nekim primerima, R<c>je H. U nekim primerima, n<c>je 2 ili 3.
[0091] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje prema formuli (20-I):
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>odabran od -OR<c>, -CN, i -N(R<c>)2, i n<c>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od H, C12-20alkila, i C6-20alkenila;
R3ci R4csu C12alkil; i
svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0092] U nekim primerima, R2cje H. U drugim primerima, R2cje C12alkil ili alkenil. U nekim primerima, R2cje C14alkil. U drugim primerima, R2cje C18alkenil. Na primer, R2cmože da bude linoleil.
[0093] U nekim primerima, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U određenim primerima, Q<c>je -OR<c>. Na primer, Q<c>može da bude OH. U nekim primerima, n<c>je 2, 3, ili 4.
[0094] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenja formule (21-I):
ili njihove soli ili izomere, pri čemu
R1di R2dsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od H, C1-5alkila, i C2-5alkenila; n<d>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
k je odabran od 0, 1, 2, i 3;
R3di R4dsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila, C2-20alkenila, -R<d>"M<d>R<d>', -R<d∗>Y<d>R<d>", -Y<d>R<d>", i -R<d∗>OR<d>";
svaki M<d>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<d>')-, -N(R<d>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR<d>')O-, i -S(O)2-, ili je odsutan;
svaki R<d>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; svaki Y<d>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<d∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki R<d>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R<d>" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila, pri čemu su R3di R4dvezani ili za i) isti atom ugljenika ili ii) za susedne atome ugljenika.
[0095] U nekim primerima, R3di R4dsu vezani za isti atom ugljenika. Na primer, R3di R4dmogu da budu vezani za atom ugljenika susedan C<∗>. U određenim primerima, R3di R4dnisu vezani za atom ugljenika susedan C<∗>.
[0096] U drugim primerima, R3di R4dsu vezani za susedne atome ugljenike. U određenim primerima, jedan ili oba od R3di R4dsu vezana za atome ugljenika susedne C<∗>.
[0097] U nekim primerima, k je 0. U drugim primerima, k je 1, 2, ili 3.
[0098] U određenim primerima, M<d>je odsutan. U drugim primerima, M<d>je odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<d>')-, -N(R<d>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR<d>')O-, i -S(O)2-. U određenim takvim primerima, M<d>je -C(O)O-.
[0099] U nekim primerima, n<d>je 1, 2, ili 3.
[0100] U nekim primerima, R1di/ili R2dsu odabrani od C1-5alkila. U određenim primerima, R1di/ili R2dsu C1alkil.
[0101] U određenim primerima, R3di/ili R4dsu odabrani od C2-20alkenila. U određenim primerima, R3di/ili R4dsu alkenil grupe koje uključuju 17, 18, ili 19 atoma ugljenika. Na primer, R3di/ili R4dmogu da budu C18alkenil grupe (npr., linoleil).
[0102] U sledećem aspektu, pronalazak obezbeđuje kompoziciju nanočestica koja uključuje lipidnu komponentu koja sadrži jedinjenje prema jednoj od formula (I) ili (Ib), kao što je gore opisano. Takođe su opisane kompozicije nanočestica koje uključuju lipidnu komponentu koja sadrži jedinjenje prema jednoj od formula (Ia1)-(Ia6), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), i (20-I). U nekim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje fosfolipid. U određenim primerima izvođenja, fosfolipid iz kompozicije nanočestica uključuje fosfolipidni fragment i jedan ili više fragmenata masnih kiselina, od kojih jedan ili više mogu da budu nezasićeni. Na primer, kompozicija nanočestica može da uključuje lipid prema formuli (V)
u kojoj Rppredstavlja fosfolipidni fragment i R1i R2predstavljaju fragmente nezasićenih masnih kiselina koji mogu da budu isti ili različiti.
[0103] Fosfolipidni fragment može da bude odabran iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od fosfatidil holina, fosfatidil etanolamina, fosfatidil glicerola, fosfatidil serina, fosfatidinske kiseline, 2-lizofosfatidil holina i sfingomijelina. Fragment masne kiseline može da bude odabran iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od laurinske kiseline, miristinske kiseline, miristoleinske kiseline, palmitinske kiseline, palmitoleinske kiseline, stearinske kiseline, oleinske kiseline, linolne kiseline, alfa-linolenske kiseline, erucinske kiseline, arahidinske kiseline, arahidonske kiseline, fitanske kiseline, eikozapentaenoinske kiseline, behenske kiseline, dokozapentaenoinske kiseline i dokozaheksaenoinske kiseline. Na primer, u određenim primerima izvođenja, fosfolipid je odabran iz grupe koja se sastoji od 1,2-dilinoleoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DLPC), 1,2-dimiristoil-sn-glicerofosfoholina (DMPC), 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DOPC), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DPPC), 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DSPC), 1,2-diundekanoil-sn-glicerofosfoholina (DUPC), 1-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfoholina (POPC), 1,2-di-O-oktadecenil-snglicero-3-fosfoholina (18:0 Diether PC), 1-oleoil-2-holesterilhemisukcinoil-sn-glicero-3-fosfoholina (OChemsPC), 1-heksadecil-sn-glicero-3-fosfoholina (C16 Lyso PC), 1,2-dilinolenoil-sn-glicero-3-fosfoholina, 1,2-diarahidonoil-sn-glicero-3-fosfoholina, 1,2-didokozaheksaenoil-sn-glicero-3-fosfoholina, 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoetanol amina (DOPE), 1,2-difitanoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina (ME 16.0 PE), 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dilinoleoil-snglicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dilinolenoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-diarahidonoil-snglicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-didokozaheksaenoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, natrijumove soli 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerola) (DOPG), i sfingomijelina. U određenim primerima izvođenja, fosfolipid je DOPE. U drugim primerima izvođenja, fosfolipid je DSPC. Neprirodne vrste, uključujući prirodne vrste sa modifikacijama i supstitucijama uključujući grananje, oksidaciju, ciklizaciju i alkine, su takođe obuhvaćene.
[0104] U nekim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje strukturni lipid. U određenim primerima izvođenja, strukturni lipid je odabran iz grupe koja se sastoji od holesterola, fekosterola, sitosterola, ergosterola, kampesterola, stigmasterola, brasikasterola, tomatidina, ursolne kiseline i alfa-tokoferola. U određenim primerima izvođenja, strukturni lipid je holesterol.
[0105] U nekim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje PEG lipid. U određenim primerima izvođenja, PEG lipid je odabran iz grupe koja se sastoji od PEG-modifikovanog fosfatidiletanolamina, PEG-modifikovane fosfatidne kiseline, PEG-modifikovanog ceramida, PEG-modifikovanog dialkilamina, PEG-modifikovanog diacilglicerola i PEG-modifikovanog dialkilglicerola.
[0106] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje lipidnu komponentu koja sadrži jedinjenje prema jednoj od formula (I) ili (Ib), fosfolipid (koji može, ali ne mora da bude nezasićen), PEG lipid, i strukturni lipid. Opisana je i kompozicija nanočestica koja uključuje lipidnu komponentu koja sadrži jedinjenje prema formulama (Ia1)-(Ia6), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), fosfolipid (koji može, ali ne mora da bude nezasićen), PEG lipid i strukturni lipid. U određenim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje oko 30 mol% do oko 60 mol% jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-1), (19-1), (19-II), (20-I) i (21-I), oko 0 mol% do oko 30 mol% fosfolipida, oko 18.5 mol% do oko 48.5 mol% strukturnog lipida, i oko 0 mol% do oko 10 mol% PEG lipida. U nekim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje oko 30 mol% do oko 45 mol% jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), oko 5 mol% do oko 25 mol% fosfolipida, oko 30 mol% do oko 40 mol% strukturnog lipida, i oko 0 mol% do oko 10 mol% PEG lipida. U nekim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje oko 35 mol% do oko 55 mol% jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), oko 5 mol% do oko 25 mol% fosfolipida, oko 30 mol% do oko 40 mol% strukturnog lipida, i oko 0 mol% do oko 10 mol% PEG lipida. U određenim primerima izvođenja, lipidna komponenta uključuje oko 50 mol% navedenog jedinjenja, oko 10 mol% fosfolipida, oko 38.5 mol% strukturnog lipida, i oko 1.5 mol% PEG lipida. U drugim primerima izvođenja, lipidna komponenta uključuje oko 40 mol% navedenog jedinjenja, oko 20 mol% fosfolipida, oko 38.5 mol% strukturnog lipida, i oko 1.5 mol% PEG lipida. U nekim od ovih primera izvođenja, fosfolipid je DOPE, dok je u drugim primerima izvođenja fosfolipid DSPC. U određenim primerima izvođenja, strukturni lipid je holesterol. U određenim primerima izvođenja, PEG lipid je PEG-DMG. U bilo kom od gore navedenih slučajeva, ukupni sadržaj lipidne komponente ne može da pređe 100%.
[0107] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje više od jednog fosfolipida, PEG lipida, strukturnih lipida, ili drugih lipida. U određenim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica dalje uključuje katjonski i/ili jonizabilni lipid kao što je aminolipid. U određenim primerima izvođenja, katjonski i/ili jonizabilni lipid je odabran iz grupe koja se sastoji od 3-(didodecilamino)-N1,N1,4-tridodecil-1-piperazinetanamina (KL10), N1-[2-(didodecilamino)etil]-N1,N4,N4-tridodecil-1,4-piperazindietanamina (KL22), 14,25-ditridecil-15,18,21,24-tetraazaoktatriakontana (KL25), 1,2-dilinoleiloksi-N,N-dimetilaminopropana (DLin-DMA), 2,2-dilinoleil-4-dimetilaminometil-[1,3]-dioksolana (DLin-K-DMA), heptatriakonta-6,9,28,31-tetraen-19-il 4-(dimetilamino)butanoata (DLin-MC3-DMA ili MC3), 2,2-dilinoleil-4-(2-dimetilaminoetil)-[1,3]-dioksolana (DLin-KC2-DMA), 1,2-dioleiloksi-N,N-dimetilaminopropana (DODMA), 2-({8-[(3β)-holest-5-en-3-iloksi]oktil}oksi)-N,N-dimetil-3-[(9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-iloksi]propan-1-amina (Octyl-CLinDMA), (2R)-2-({8-[(3β)-holest-5-en-3-iloksi]oktil}oksi)-N,N-dimetil-3-[(9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-iloksi]propan-1-amina (Octyl-CLinDMA (2R)), (2S)-2-({8-[(3β)-holest-5-en-3-iloksi]oktil}oksi)-N,N-dimetil-3-[(9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-iloksi]propan-1-amina (Octyl-CLinDMA (2S)), (12Z, 15Z)-N,N-dimetil-2-nonilhenikoza-12,15-dien-1-amina, i N,N-dimetil-1-{(1S,2R)-2-oktilciklopropil}heptadekan-8-amina.
[0108] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje terapijski i/ili profilaktički agens. U određenim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens može da bude odabran iz grupe koja se sastoji od proteina, leka malog molekula, citotoksičnog agensa, radioaktivnog jona, hemoterapijskog agensa, vakcine, jedinjenja koje izaziva imunski odgovor, i/ili nukleinske kiseline (kao što je dezoksiribonukleinska kiselina ili ribonukleinska kiselina). U određenim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je ribonukleinska kiselina (RNK). RNK može da bude odabrana iz grupe koja se sastoji od male interferirajuće RNK (siRNA), asimetrične interferirajuće RNK (aiRNA), mikroRNK (miRNA), RNK koja predstavlja supstrat za Dicer (dsRNA), RNK u vidu male ukosnice (shRNA), informacione RNK (iRNK), i njihovih smeša. U određenim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je informaciona RNK (iRNK). RNK u kompoziciji nanočestica može da bude prirodna ili neprirodna i može da uključuje jednu ili više struktura drškapetlja, nukleozid koji dovodi do terminacije lanca, poliA sekvencu, signal za poliadenilaciju, i/ili strukturu 5' kape.
[0109] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje više od jednog terapijskog i/ili profilaktičkog agensa, kao što je jedna ili više RNK. Terapijski i/ili profilaktički agens može da bude istog ili različitih vrsta (npr., dve iRNK, dve siRNA, jedna iRNK i jedna siRNA, jedna iRNK i jedan lek malog molekula, itd.).
[0110] U nekim primerima izvođenja, efikasnost inkapsulacije terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u kompoziciju nanočestica je najmanje 50%. U određenim primerima izvođenja, efikasnost inkapsulacije je najmanje 80%. U određenim primerima izvođenja, efikasnost inkapsulacije je veća od 90%.
[0111] U nekim primerima izvođenja, tež./tež. odnos lipidne komponente prema terapijskom i/ili profilaktičkom agensu u kompoziciji nanočestica je od oko 10:1 do oko 60:1. U određenim primerima izvođenja, tež./tež. odnos je oko 20:1.
[0112] U nekim primerima izvođenja, odnos N:P kompozicije nanočestica je od oko 2:1 do oko 30:1. U određenim primerima izvođenja, odnos N:P je od oko 2:1 do oko 8:1. U određenim primerima izvođenja, odnos N:P je od oko 5:1 do oko 8:1. Na primer, odnos N:P može da bude oko 5.0:1, oko 5.5:1, oko 5.67:1, oko 6.0:1, oko 6.5:1, ili oko 7.0:1. U nekim primerima izvođenja, srednja veličina kompozicije nanočestica je od oko 40 nm do oko 150 nm. U određenim primerima izvođenja, srednja veličina je od oko 70 nm do oko 100 nm. U jednom primeru izvođenja, srednja veličina može da bude oko 80 do oko 100 nm. U određenim primerima izvođenja, srednja veličina može da bude oko 80 nm. U drugim primerima izvođenja, srednja veličina može da bude oko 100 nm.
[0113] Indeks polidisperznosti kompozicije nanočestica je od oko 0 do oko 0.25 u određenim primerima izvođenja. U određenim primerima izvođenja, indeks polidisperznosti je od oko 0.10 do oko 0.20.
[0114] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica ima zeta-potencijal od oko -10 mV do oko 20 mV.
[0115] U nekim primerima izvođenja, nakon dovođenja u kontakt jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), i (IV) (npr., bilo koje od jedinjenja 1-109) ili njihove kompozicije nanočestica sa sisarskom ćelijom, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je nezavisno od LDLR. U nekim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je zavisno od LDLR. U nekim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je nezavisno od apoE. U nekim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je zavisno od apoE. U nekim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je nezavisno od interakcije LDLR-apoE. U nekim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je zavisno od interakcije LDLR-apoE.
[0116] U nekim primerima izvođenja, nakon dovođenja u kontakt jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), i (IV) (npr., bilo koje od jedinjenja 1-109) ili njihove kompozicije nanočestica sa ćelijom sisara u cilju proizvodnje polipeptida, proizvodnja polipeptida je viša u hepatocitima sisara nego u ćelijama drugačijeg tkiva (npr., slezina ili bubreg).
[0117] U nekim primerima izvođenja, nakon dovođenja u kontakt jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), i (IV) (npr., bilo koje od jedinjenja 1-109) ili njihove kompozicije nanočestica sa sisarskom ćelijom u cilju proizvodnje polipeptida, proizvodnja polipeptida se uglavnom javlja u hepatocitima sisara (npr., postoji malo ili nimalo proizvodnje polipeptida u drugim ćelijama, npr., ćelijama slezine ili renalnim ćelijama).
[0118] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje jednu ili više dodatnih komponenata uključujući, ali bez ograničenja, jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa, malih hidrofobnih molekula, terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa, ugljenih hidrata, polimera, molekula za poboljšanje permeabilnosti, pufera, i agenasa koji menjaju površinu.
[0119] U još jednom aspektu, prikaz opisuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži kompoziciju nanočestica prema prethodnim aspektima i farmaceutski prihvatljiv nosač. Na primer, farmaceutska kompozicija se hladi u frižideru ili smrzava zbog skladištenja i/ili transporta (npr., skladišti se na temperaturi od 4 °C ili nižoj, kao što je temperatura između oko -150 °C i oko 0 °C ili između oko 80 °C i oko -20 °C (npr., oko -5 °C, -10 °C, -15 °C, -20 °C, -25 °C, -30 °C, -40 °C, -50 °C, -60 °C, -70 °C, -80 °C, -90 °C, -130 °C ili -150 °C). Na primer, farmaceutska kompozicija je rastvor koji se hladi u frižideru zbog skladištenja i/ili transporta na, na primer, oko -20° C, -30 °C, - 40 °C, -50 °C, -60 °C, -70 °C, ili -80 °C.
[0120] Takođe je opisan, ali ne čini deo pronalaska, postupak za isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., iRNK) u ćeliju (npr., ćeliju sisara). Ovaj postupak uključuje korak davanja subjektu (npr., sisaru, kao što je čovek) kompozicije nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja obuhvata fosfolipid (kao što je polinezasićeni lipid), PEG lipid, strukturni lipid, i jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) i (ii) terapijski i/ili profilaktički agens, gde davanje uključuje dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom nanočestica, pri čemu se terapijski i/ili profilaktički agens isporučuje u ćeliju.
[0121] Opisan je i postupak proizvodnje polipeptida od interesa u ćeliji (npr., ćelija sisara). Postupak uključuje korak dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja obuhvata fosfolipid (kao što je polinezasićeni lipid), PEG lipid, strukturni lipid, i jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) i (ii) iRNK koja kodira polipeptid od interesa, pri čemu iRNK može da se translatira u ćeliji kako bi se proizveo polipeptid.
[0122] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje kompoziciju nanočestica prema pronalasku za upotrebu u postupku za lečenje bolesti ili poremećaja kod sisara (npr., čoveka) kome je to potrebno. Postupak uključuje korak davanja sisaru terapijski efikasne količine kompozicije nanočestica, npr. kompozicije nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja obuhvata fosfolipid (kao što je polinezasićeni lipid), PEG lipid, strukturni lipid, i jedinjenje prema jednoj od formula (I) ili (Ib), i (ii) terapijski i/ili profilaktički agens (npr., iRNK). Opisani su i primeri takvog postupka u kojima je jedinjenje prema jednoj od formula (Ia1)-(Ia6), (II), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I). U nekim primerima izvođenja, bolest ili poremećaj se odlikuje nefunkcionalnošću ili poremećenom aktivnošću proteina ili polipeptida. Na primer, bolest ili poremećaj su odabrani iz grupe koja se sastoji od retkih bolesti, infektivnih bolesti, kancera i proliferativnih bolesti, genetskih bolesti (npr., cistična fibroza), autoimunskih bolesti, dijabetesa, neurodegenerativnih bolesti, kardiovaskularnih i renovaskularnih bolesti, i metaboličkih bolesti.
[0123] Opisan je i postupak za isporuku (npr., specifičnu isporuku) terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u organ sisara (npr., jetra, slezina, pluća, ili butna kost). Ovaj postupak uključuje korak davanja subjektu (npr., sisaru) kompozicije nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja obuhvata fosfolipid, PEG lipid, strukturni lipid i jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) i (ii) terapijski i/ili profilaktički agens (npr., iRNK), gde davanje uključuje dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom nanočestica, pri čemu se terapijski i/ili profilaktički agens isporučuje u organ kao što je jetra.
[0124] Opisan je i postupak za poboljšanu isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., iRNK) u ciljno tkivo (npr., jetra, slezina, pluća, ili butna kost). Ovaj postupak uključuje davanje subjektu (npr., sisaru) kompozicije nanočestica, gde kompozicija uključuje (i) lipidnu komponentu koja obuhvata jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), fosfolipid, strukturni lipid i PEG lipid; i (ii) terapijski i/ili profilaktički agens, gde davanje uključuje dovođenje u kontakt ciljnog tkiva sa kompozicijom nanočestica, pri čemu se terapijski i/ili profilaktički agens isporučuje u ciljno tkivo. Isporuka može da bude poboljšana u poređenju sa referentnom kompozicijom koja sadrži referentni lipid umesto jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I).
[0125] Takođe je opisan, ali ne čini deo pronalaska, postupak za snižavanje imunogenosti koji obuhvata uvođenje kompozicije nanočestica prema prikazu u ćelije, pri čemu kompozicija nanočestica snižava indukciju ćelijskog imunskog odgovora ćelija na kompoziciju nanočestica, u poređenju sa indukcijom ćelijskog imunskog odgovora u ćelijama indukovanim referentnom kompozicijom koja sadrži referentni lipid umesto jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I). Na primer, ćelijski imunski odgovor je urođeni imunski odgovor, adaptivni imunski odgovor, ili oba.
[0126] U određenim primerima izvođenja gore navedenih aspekata, ćelija koja se u postupku dovodi u kontakt je ćelija sisara.
[0127] U bilo kom od prethodnih aspekata, sisar može da bude, na primer, glodar, primat koji nije čovek, ili čovek. U određenim primerima izvođenja, sisar je čovek. U određenim primerima izvođenja, sisar ima nedostatak LDLR, ili ima nedostatak apoE, ili oba. U određenim primerima izvođenja, sisar nema nedostatak LDLR. U određenim primerima izvođenja, sisar nema nedostatak apoE. U određenim primerima izvođenja, sisar nema nedostatak LDLR, niti ima nedostatak apoE. U određenim primerima izvođenja, sisar ima poremećenu interakciju LDLR-apoE. U određenim primerima izvođenja, sisar ima normalnu interakciju LDLR-apoE.
[0128] U bilo kom od prethodnih aspekata, terapijski i/ili profilaktički agens može da bude iRNK.
[0129] U nekim primerima izvođenja gore opisanih postupaka, terapijski i/ili profilaktički agens može da bude specifično isporučen u ciljno tkivo od interesa (npr., jetra, slezina, pluća, ili butna kost sisara).
[0130] U nekim primerima izvođenja gore opisanih postupaka, polipeptid od interesa može da bude specifično proizveden u ciljnoj ćeliji ili tkivu od interesa (npr., hepatocit, jetra, slezina, pluća, ili butna kost sisara), npr., proizvodnja polipeptida je suštinski veća u ciljnoj ćeliji ili tkivu nego u ćeliji/tkivu koje nije ciljno.
[0131] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica se primenjuje intravenski, intramuskularno, intradermalno, subkutano, intraarterijalno, intratumorski, ili inhalacijom. U određenim primerima izvođenja, sisaru se daje doza od oko 0.001 mg/kg do oko 10 mg/kg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., iRNK).
[0132] U bilo kom od prethodnih aspekata, u nekim primerima izvođenja, isporuka (npr., efikasnost isporuke) terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara je nezavisna od LDLR. U nekim primerima izvođenja, isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara je zavisna od LDLR. U nekim primerima izvođenja, isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara je nezavisna od apoE. U nekim primerima izvođenja, isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara je zavisna od apoE. U nekim primerima izvođenja, isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara je nezavisna od interakcije LDLR-apoE. U nekim primerima izvođenja, isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara je zavisna od interakcije LDLR-apoE.
[0133] U bilo kom od prethodnih aspekata, u nekim primerima izvođenja, proizvodnja (npr., prinos) polipeptida od interesa u ćeliji sisara je nezavisna od LDLR. U nekim primerima izvođenja, proizvodnja polipeptida od interesa u ćeliji sisara je zavisna od LDLR. U nekim primerima izvođenja, proizvodnja polipeptida od interesa u ćeliji sisara je nezavisna od apoE. U nekim primerima izvođenja, proizvodnja polipeptida od interesa u ćeliji sisara je zavisna od apoE. U nekim primerima izvođenja, proizvodnja polipeptida od interesa u ćeliji sisara je nezavisna od interakcije LDLR-apoE. U nekim primerima izvođenja, proizvodnja polipeptida od interesa u ćeliji sisara je zavisna od interakcije LDLR-apoE.
[0134] U prethodnim aspektima, jedna ili više kompozicija nanočestica od kojih svaka uključuje jedan ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa mogu da se koriste u kombinaciji. U nekim primerima izvođenja, jedna ili više kompozicija nanočestica od kojih svaka uključuje jedan ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa mogu da budu istovremeno dovedene u kontakt sa ćelijom, ili isporučene u ćeliju ili organ sisara. U drugim primerima izvođenja, jedna ili više kompozicija nanočestica se dovode u kontakt sa ćelijom ili isporučuju u ćeliju ili organ sisara u različito vreme.
[0135] U prethodnim aspektima, jedan ili više dodatnih terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa ili jedinjenja mogu da budu upotrebljeni u kombinaciji sa kompozicijom nanočestica koja uključuje terapijski i/ili profilaktički agens. U nekim primerima izvođenja, dodatni terapijski i/ili profilaktički agens ili jedinjenje mogu da se primene u isto ili gotovo isto vreme kao kompozicija nanočestica (npr., unutar jednog časa). U drugim primerima izvođenja, dodatni terapijski i/ili profilaktički agens ili jedinjenje mogu da se primene pre ili posle (npr., jedan ili više časova pre ili posle) kompozicije nanočestica kao predtretmanska ili posttretmanska terapija. U nekim primerima izvođenja, dodatni terapijski i/ili profilaktički agens ili jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od antiinflamatornog jedinjenja, steroida (npr., kortikosteroida), statina, estradiola, inhibitora BTK, agonista S1P1, modulatora glukokortikoidnog receptora (GRM), ili antihistaminika. U određenim primerima izvođenja, dodatni terapijski i/ili profilaktički agens ili jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od deksametazona, metotreksata, acetaminofena, blokatora H1 receptora, ili blokatora H2 receptora.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0136] Stručnjak će razumeti da su crteži prvenstveno u ilustrativne svrhe i nisu namenjeni da ograniče obim inventivnog predmeta koji je ovde opisan. Crteži nisu nužno u razmeri; u nekim slučajevima, različiti aspekti inventivnog predmeta otkrivenog ovde mogu da budu prikazani preuveličano ili uvećano na crtežima da bi se olakšalo razumevanje različitih karakteristika. Na crtežima, slični referentni znakovi uglavnom se odnose na slične karakteristike (npr. funkcionalno slični i/ili strukturno slični elementi).
[0137] Gore navedene karakteristike će biti bolje shvaćene iz sledećeg detaljnog opisa posmatranog zajedno sa priloženim crtežima.
Slika 1 je par grafikona koji porede nivoe ekspresije luciferaze kod miševa (celo telo) nakon primene kompozicija nanočestica koje sadrže jedinjenja prema prikazu tokom vremena. Slika 2 je grafikon koji sumira nivoe ekspresije luciferaze 3 h nakon primene kompozicija nanočestica koje sadrže jedinjenja prema prikazu. Ukupne vrednosti svetlosnog fluksa su dobijene pomoću luminiscentnog snimanja tela (BLI) 3 h nakon primene. Na ovoj slici brojevi 1-12 se odnose na kompozicije koje sadrže jedinjenja 42-52, odnosno MC3.
Slika 3 je grafikon koji sumira nivoe ekspresije luciferaze 6 časova nakon primene kompozicija nanočestica koje sadrže jedinjenja prema prikazu. Ukupne vrednosti svetlosnog fluksa su dobijene putem BLI 6 h nakon primene. Na ovoj slici brojevi 1-12 se odnose na kompozicije koja sadrže jedinjenja 42-52, odnosno MC3.
Slika 4 je grafikon koji sumira nivoe ekspresije luciferaze 24 h nakon primene kompozicija nanočestica koje sadrže jedinjenja prema prikazu. Ukupne vrednosti svetlosnog fluksa su dobijene putem BLI 24 h nakon primene. Na ovoj slici brojevi 1-12 se odnose na kompozicije koje sadrže jedinjenja 42-52, odnosno MC3.
Slika 5 je grafikon koji sumira nivoe ekspresije luciferaze u jetri miša 6 časova nakon primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema prikazu. Na ovoj slici, brojevi 1-12 se odnose na kompozicije koje sadrže jedinjenja 42-52, odnosno MC3.
Slika 6 je grafikon koji sumira nivoe ekspresije luciferaze u plućima miša 6 časova nakon primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema prikazu. Na ovoj slici brojevi 1-12 se odnose na kompozicije koje sadrže jedinjenja 42-52, odnosno MC3.
Slika 7 je grafikon koji sumira nivoe ekspresije luciferaze u slezini miša 6 časova nakon primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema prikazu. Na ovoj slici, brojevi 1-12 se odnose na kompozicije koje sadrže jedinjenja 42-52, odnosno MC3.
Slika 8 je par grafikona koji ilustruju nivoe ekspresije hEPO kod pacova koji su primili doze jedinjenja prema prikazu u poređenju sa KL22, koji pokazuje da KL22 i njegovi derivati u odnosu na dužinu lanca (koji su prethodno pokazali poboljšanu ekspresiju proteina kod miševa), ne eksprimiraju hEPO kod pacova. PBS (fosfatno puferisani slani rastvor) je korišćen kao kontrola. Grafikon A upoređuje koncentraciju hEPO nakon primene kompozicija nanočestica koje sadrže jedinjenje 23, jedinjenje 11, KL22 i MC3 pri 2 mpk, i.v. primenom. LNP sa jedinjenjem 11 je pokazala ekspresiju hEPO uporedivu sa MC3 i poboljšanu podnošljivost u poređenju sa KL22. Grafikon B ilustruje rezultate studije odgovora na dozu korišćenjem jedinjenja 20, KL22 i MC3 u dozi od 0.2, 0.5 i 1 mpk. Pokazalo se da su KL22 i jedinjenje 23 toksični u dozi od 2 mg/kg. Na grafikonu A brojevi 1-5 odnose se na kompozicije koje sadrže: 1: jedinjenje 23, 2: jedinjenje 11, 3: KL22; 4: MC3; 5: PBS. Na grafikonu B brojevi 1-9 odnose se na kompozicije koje sadrže: 1: jedinjenje 20, 0.2 mpk; 2: jedinjenje 20, 0.5 mpk; 3: jedinjenje 20, 1 mpk; 4: KL22, 0.2 mpk; 5: KL22, 0.5 mpk; 6: KL22, 1 mpk; 7: MC3, 0.2 mpk; 8: MC3, 0.5 mpk; 9: MC3, 1 mpk; 10: PBS.
Slika 9 je par grafikona koji ilustruju učinak jedinjenja 11 kao lipida nezavisnog od LDLr. Grafikon A je stubičasti grafikon koji prikazuje ekspresiju luciferaze izazvanu primenom kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenje 11 u dozama od 0.05 mpk, 0.25 mpk, i 0.5 mpk kod LDLR -/- knockout miševa i miševa divljeg tipa. Grafikon B prikazuje nivoe LDL-c kod LDLR knockout miševa nakon davanja kontrolne iRNK, tj. netranslatirajućeg faktora IX (<">NT-FIX<">) i različitih kompozicija koje sadrže iRNK koje kodiraju LDL receptor kod miševa, sa KL22 pri 0.5 mpk, ili sa jedinjenjem 11 pri 0.5 i 1 mpk. Utvrđeno je da nivoi LDL-c kod miševa opadaju sa kompozicijom nanočestica koja sadrži jedinjenje 11.
Slika 10 je grafikon koji pokazuje nivoe hEPO kod primata izuzev ljudi do ~50 h nakon primene kompozicije nanočestica koja sadrži jedinjenje 4, u poređenju sa kompozicijom koja sadrži MC3. LNP sa jedinjenjem 4 je pokazala trostruko višu ekspresiju hEPO u poređenju sa MC3, uspostavljajući jedinjenje 4 kao lipid nezavisan od LDLr koji se prevodi u više vrste. Slika 11 je par slika na kojima se porede rezultati imunohistohemije (IHC) jetre miša korišćenjem iRNK koja eksprimira zeleni fluorescentni protein (GFP) nakon primene kompozicija nanočestica koje sadrže jedinjenje 4 i MC3. Grafikon A prikazuje CD-1 ćelije jetre miša nakon primene GFP iRNK u LNP sa MC3, 6 h nakon intravenske primene u dozi od 0.5 mpk. Proteinska ekspresija GFP iRNK iz kompozicije LNP sa MC3 primećena je i u hepatocitima i u Kupferovim ćelijama. Grafikon B prikazuje ćelije jetre LDLR knockout miša nakon primene GFP iRNK u LNP sa jedinjenjem 4, 8 h nakon intravenske primene u dozi od 0.5 mpk. Za razliku od MC3, čini se da LNP koja sadrži jedinjenje 4 pokazuje manju ekspresiju proteina u Kupferovim ćelijama.
Slika 12 je skup grafikona koji ilustruju nivoe ekspresije hEPO kod CD-1 miševa koji su primili doze jedinjenja prema prikazu, u poređenju sa MC3. PBS se koristi kao kontrola. Grafikon A prikazuje koncentraciju hEPO 3 h nakon primene kompozicija nanočestica. Grafikon B prikazuje koncentraciju hEPO 6 h nakon primene kompozicija nanočestica. Grafikon C prikazuje koncentraciju hEPO 24 h nakon primene kompozicija nanočestica. Na grafikonima A-C brojevi 1-14 odnose se na kompozicije koje sadrže: 1: jedinjenje 73, 2: jedinjenje 80, 3: jedinjenje 70; 4: jedinjenje 81; 5: jedinjenje 69; 6: jedinjenje 82; 7: jedinjenje 83; 8: jedinjenje 62; 9: jedinjenje 84; 10: jedinjenje 85; 11: jedinjenje 86; 12: jedinjenje 87; 13: MC3; 14: PBS.
Slika 13 je grafikon koji prikazuje nivoe hEPO (pg/mL) kod CD-1 miševa do ~25 h nakon primene kompozicije nanočestica koja sadrži jedinjenja prema prikazu, u poređenju sa kompozicijom koja sadrži MC3. Brojevi 1-13 odnose se na kompozicije koje sadrže: 1: jedinjenje 73, 2: jedinjenje 80, 3: jedinjenje 70; 4: jedinjenje 81; 5: jedinjenje 69; 6: jedinjenje 82; 7: jedinjenje 83; 8: jedinjenje 62; 9: jedinjenje 84; 10: jedinjenje 85; 11: jedinjenje 86; 12: jedinjenje 87; 13: MC3.
Slika 14 je par grafikona koji prikazuje procente aktiviranih B-ćelija u slezinama CD-1 miševa koji su primili dozu jedinjenja prema prikazu, u poređenju sa MC3, i u poređenju sa miševima koji nisu primili nikakav tretman (naivni ispitanik). PBS se koristi kao kontrola. Grafikon A prikazuje procenat CD19+ ćelija. Grafikon B prikazuje procenat CD19+ CD69+ CD86+ ćelija. Brojevi 1-13 odnose se na kompozicije koje sadrže: 1: jedinjenje 73, 2: jedinjenje 80, 3: jedinjenje 70; 4: jedinjenje 81; 5: jedinjenje 69; 6: jedinjenje 82; 7: jedinjenje 83; 8: jedinjenje 62; 9: jedinjenje 84; 10: jedinjenje 85; 11: jedinjenje 86; 12: jedinjenje 87; 13: MC3; 14: PBS; 15: subjekt koji nije podvrgnut tretmanu.
Slika 15 je grafikon koji sumira nivoe ekspresije luciferaze na 6 h nakon primene kompozicija nanočestica koje sadrže jedinjenja prema prikazu kod CD-1 miševa u dozi od 0.5 mpk. Ukupne vrednosti svetlosnog fluksa su dobijene pomoću luminiscentnog snimanja tela (BLI) 6 h nakon primene. Na ovoj slici brojevi 1-7 i 10 odnose se na kompozicije koje sadrže jedinjenja 4-10, odnosno MC3.
Slika 16 je grafikon koji prikazuje nivoe GFP u jetri LDLR knockout miševa u periodu od 30 min do 24 h nakon intravenske primene RNK eGFP u lipidnoj kompoziciji koja sadrži jedinjenje 4. Nivoi GFP u jetri su određivani putem IHC. Kvadratni markeri predstavljaju broj GFP-pozitivnih ćelija nakon primene kompozicije u dozi od 0.1 mpk. Kružni markeri predstavljaju broj GFP-pozitivnih ćelija nakon primene kompozicije u dozi od 0.5 mpk. Slika 17 je par grafikona koji prikazuje zavisnost ApoE od ekspresije luciferaze (<">Luc<">) nakon primene kompozicije koja sadrži Luc iRNK i jedinjenje 4 kod miševa u dozi od 0.5 mpk. Ekspresija nakon primene kompozicije koja sadrži Luc iRNK i MC3 je predstavljena za poređenje. Grafikon A prikazuje ukupan fluks u jetri 6 h nakon primene. Procenat promene u ekspresiji Luc u jetri ApoE knockout miševa u odnosu na miševe divljeg tipa (tj. (srednja ekspresija u WT - srednja ekspresija u KO)/srednja ekspresija u WT]∗100%) bila je 91.9% za jedinjenje 4 i 97.5% za MC3. Grafikon B prikazuje ukupan fluks u slezini 6 h nakon primene. Procenat promene ekspresije u slezini kod apoE knockout miševa u odnosu na miševe divljeg tipa bio je 4.34% za jedinjenje 4 i 72.2% za MC3. Brojevi 1-4 odnose se na sledeće: 1: kompozicija koja sadrži jedinjenje 4, primenjena kod ApoE knockout miševa; 2: kompozicija koja sadrži jedinjenje 4, primenjena kod miševa divljeg tipa; 3: kompozicija koja sadrži MC3, primenjena kod ApoE knockout miševa; 4: kompozicija koja sadrži MC3, primenjena kod miševa divljeg tipa.
Slika 18 je par grafikona koji prikazuje efekat kompozicije koja sadrži jedinjenje 4 na enzime jetre. Kompozicija je davana pacovima pri 0.1 mpk i 1 mpk. Za poređenje su prikazani efekti MC3. PBS je korišćen kao kontrola. Grafikon A pokazuje efekat na aspartat aminotransferazu (AST). Grafikon B pokazuje efekat na alanin aminotransferazu (ALT).
Slika 19 je skup grafikona koji prikazuje aktivaciju imunskih ćelija kompozicijom koja sadrži jedinjenje 4. Za poređenje su prikazani efekti MC3. PBS (fosfatno puferisani slani rastvor) je korišćen kao kontrola. Kompozicije su davane pacovima pri 0.1 mpk ili 1 mpk. Grafikon A pokazuje efekat na aktivaciju neutrofila. Grafikon B pokazuje uticaj na aktivaciju limfocita. Grafikon C pokazuje efekat na aktivaciju monocita. Brojevi 1-5 na grafikonima A-C odnose se na sledeće: 1: jedinjenje 4, 0.1 mpk; 2: jedinjenje 4; 1 mpk; 3: MC3, 0.1 mpk 4: MC3, 1 mpk; 5: PBS.
Slika 20 je grafikon koji prikazuje ekspresiju proteina Stefin A Quadruple Mutant-Tracy (SQT) proteina u jetri miša određenu preko FLAG IHC u različitim vremenskim trenucima nakon intravenske primene različitih kompozicija nanočestica koje sadrže SQT iRNK i lipide koji su ovde otkriveni. Brojevi 1-11 na slici odnose se na sledeće: 1: 0 h, PBS; 2:0 č, jedinjenje 4; 3: 0.5 h, jedinjenje 4; 4: 4 h, jedinjenje 4; 5: 8 č, jedinjenje 4; 6: 24 č, jedinjenje 4; 7: 0 h, MC3; 8: 0.5 h, MC3; 9: 4 h, MC3; 10: 8 h, MC3; 11:24 h, MC3.
DETALJAN OPIS
[0138] Prikaz se odnosi na nove lipide i kompozicije lipidnih nanočestica koje uključuju novi lipid. Prikaz takođe obezbeđuje postupak za isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara, kojim se specifično isporučuje terapijski i/ili profilaktički agens u organ sisara, proizvodi polipeptid od interesa u ćeliji sisara, i leči bolest ili poremećaj kod sisara kome je to potrebno. Na primer, postupak za proizvodnju polipeptida od interesa u ćeliji uključuje dovođenje u kontakt kompozicije nanočestica koja sadrži iRNK sa ćelijom sisara, pri čemu iRNK može da bude translatirana proizvodeći polipeptid od interesa. Postupak za isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju ili organ sisara može da uključuje primenu kompozicije nanočestica koja sadrži terapijski i/ili profilaktički agens kod subjekta, gde primena uključuje dovođenje u kontakt ćelije ili organa sa kompozicijom, pri čemu se terapijski i/ili profilaktički agens isporučuje u ćeliju ili organ.
Lipidi
[0139] Predmetni prikaz obezbeđuje lipide koji uključuju centralni piperazinski fragment. Lipidi koji su ovde opisani mogu da budu pogodno upotrebljeni u kompozicijama lipidnih nanočestica za isporuku terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa u ćelije ili organe sisara. Na primer, lipidi koji su ovde opisani ispoljavaju malo, ili nimalo imunogenosti. Na primer, lipidno jedinjene bilo koje od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) ima nižu imunogenost u poređenju sa referentnim lipidom (npr., MC3, KC2, ili DLinDMA). Na primer, formulacija koja sadrži ovde opisani lipid i terapijski ili profilaktički agens ima povećani terapijski indeks u poređenju sa odgovarajućom formulacijom koja sadrži referentni lipid (npr., MC3, KC2, ili DLinDMA) i isti terapijski ili profilaktički agens.
[0140] Lipidi predmetnog pronalaska su jedinjenja formule (I) ili formule (Ib),
ili njihove soli ili izomeri, gde prsten A predstavlja
t je 1 ili 2;
A1i A2su svaki nezavisno odabrani od CH ili N;
A6i A7su svaki nezavisno odabrani od CH ili N, pri čemu najmanje jedan od A6i A7je N; Z je CH2ili odsutan, pri čemu, kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
R1, R2, R3, R4, i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila, C5-20alkenila, -R"MR', -R<∗>YR", -YR", i -R<∗>OR";
svaki M je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe; pri čemu kada jedinjenje ima formulu (Ib), tada M nije -OC(O)O-;
X<1>, X<2>, i X<3>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od veze, -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
X<4>i X<5>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
svaki Y je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C2-12alkenila; svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C3-6karbocikla; svaki R' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila, pri čemu kada je prsten A
tada
i) najmanje jedan od X<1>, X<2>, i X<3>nije -CH2-; i/ili
ii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'; ili
kada jedinjenje ima formulu (I) i prsten A je
i X<1>, X<2>, i X<3>su svaki ―CH2, tada
najmanje jedan od A<1>i A<2>je N,
R1, R2, R3, R4i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila, i
kada je prsten A
tada
i) R1, R2, R3, R4, i R5su isti, pri čemu R1nije C12alkil, C18alkil, ili C18alkenil;
ii) samo jedan od R1, R2, R3, R4i R5je odabran od C6-20alkenila;
iii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5ima drugačiji broj atoma ugljenika u odnosu na najmanje jedan drugi od R1, R2, R3, R4, i R5;
iv) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkenila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkila; ili v) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkenila.
[0141] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje ima bilo koju od formula (Ia1)-(Ia6):
[0142] Jedinjenja formule (I) ili bilo koje od (Ia1)-(Ia6) uključuju jednu ili više od sledećih karakteristika, kada je primenljivo.
[0143] U nekim primerima izvođenja, prsten A je
[0144] U nekim primerima izvođenja, prsten A je
[0145] U nekim primerima izvođenja, prsten A je
[0146] U nekim primerima izvođenja, prsten A je
[0147] U nekim primerima izvođenja, prsten A je
ili
[0148] U nekim primerima izvođenja, prsten A je
gde je u prstenu N atom povezan sa X<2>.
[0149] U nekim primerima izvođenja, Z je CH2.
[0150] U nekim primerima izvođenja, Z je odsutan.
[0151] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od A1i A2je N.
[0152] U nekim primerima izvođenja, svaki od A1i A2je N.
[0153] U nekim primerima izvođenja, svaki od A1i A2je CH.
[0154] U nekim primerima izvođenja, A1je N i A2je CH.
[0155] U nekim primerima izvođenja, A1je CH i A2je N.
[0156] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od X<1>, X<2>, i X<3>nije -CH2-. Na primer, u određenim primerima izvođenja, X<1>nije -CH2-. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od X<1>, X<2>, i X<3>je -C(O)-.
[0157] U nekim primerima izvođenja, X<2>je -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, ili -CH2-OC(O)-.
[0158] U nekim primerima izvođenja, X<3>je -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, ili -CH2-OC(O)-. U drugim primerima izvođenja, X<3>je -CH2-.
[0159] U nekim primerima izvođenja, X<3>je veza ili -(CH2)2-.
[0160] U nekim primerima izvođenja, R1i R2su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su isti. U nekim primerima izvođenja, R4i R5su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti.
[0161] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'. U nekim primerima izvođenja, najviše jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'. Na primer, najmanje jedan od R1, R2, i R3može da bude -R"MR', i/ili najmanje jedan od R4i R5je -R"MR'. U određenim primerima izvođenja, najmanje jedan M je -C(O)O-. U nekim primerima izvođenja, svaki M je -C(O)O-. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan M je -OC(O)-. U nekim primerima izvođenja, svaki M je -OC(O)-. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan M je -OC(O)O-. U nekim primerima izvođenja, svaki M je -OC(O)O-. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C3alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C3alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C5alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C5alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C6alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C6alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R" je C7alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R" je C7alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R' je C5alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R' je C5alkil. U drugim primerima izvođenja, najmanje jedan R' je C1alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R' je C1alkil. U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan R' je C2alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki R' je C2alkil.
[0162] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je C12alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki od R1, R2, R3, R4, i R5je C12alkil.
[0163] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od:
Ċ
i
[0164] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje ima formulu (IIa):
[0165] Jedinjenja formule (II) ili (IIa) uključuju jednu ili više od sledećih karakteristika, kada je primenljivo.
[0166] U nekim primerima izvođenja, Z je CH2.
[0167] U nekim primerima izvođenja, Z je odsutan.
[0168] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od A1i A2je N.
[0169] U nekim primerima izvođenja, svaki od A1i A2je N.
[0170] U nekim primerima izvođenja, svaki od A1i A2je CH.
[0171] U nekim primerima izvođenja, A1je N i A2je CH.
[0172] U nekim primerima izvođenja, A1je CH i A2je N.
[0173] U nekim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti, i nisu C12alkil, C18alkil, ili C18alkenil. U nekim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti i predstavljaju C9alkil ili C14alkil.
[0174] U nekim primerima izvođenja, samo jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je odabran od C6-20alkenila. U nekim takvim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5imaju isti broj atoma ugljenika. U nekim primerima izvođenja, R4je odabran od C5-20alkenila. Na primer, R4može da bude C12alkenil ili C18alkenil.
[0175] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5ima drugačiji broj atoma ugljenika u odnosu na najmanje jedan drugi od R1, R2, R3, R4, i R5.
[0176] U određenim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkenila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkila. U drugim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkenila. U nekim primerima izvođenja, R1, R2, i R3imaju isti broj atoma ugljenika, i/ili R4i R5imaju isti broj atoma ugljenika. Na primer, R1, R2, i R3, ili R4i R5, mogu da imaju 6, 8, 9, 12, 14, ili 18 atoma ugljenika. U nekim primerima izvođenja, R1, R2, i R3, ili R4i R5, su C18alkenil (npr., linoleil). U nekim primerima izvođenja, R1, R2, i R3, ili R4i R5, su alkil grupe koje uključuju 6, 8, 9, 12, ili 14 atoma ugljenika.
[0177] U nekim primerima izvođenja, R1ima drugačiji broj atoma ugljenika od R2, R3, R4, i R5. U drugim primerima izvođenja, R3ima drugačiji broj atoma ugljenika od R1, R2, R4, i R5. U sledećim primerima izvođenja, R4ima drugačiji broj atoma ugljenika od R1, R2, R3, i R5.
[0178] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0179] Ovde je opisan i lipid formule (II)
ili njegova so ili izomer, pri čemu
A1i A2su svaki nezavisno odabrani od CH ili N i najmanje jedan od A1i A2je N;
Z je CH2ili odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
R1, R2, R3, R4, i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila; pri čemu kada je prsten A
tada
i) R1, R2, R3, R4, i R5su isti, pri čemu R1nije C12alkil, C18alkil, ili C18alkenil;
ii) samo jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je odabran od C6-20alkenila;
iii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5ima drugačiji broj atoma ugljenika u odnosu na najmanje jedan drugi od R1, R2, R3, R4, i R5;
iv) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkenila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkila; ili v) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkenila.
[0180] Opisano je i jedinjenje formule (III)
ili njegova so ili izomer, gde
A3je CH ili N;
A4je CH2ili NH; i najmanje jedan od A3i A4je N ili NH;
Z je CH2ili odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
R1, R2, i R3su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila, C5-20alkenila, -R"MR', -R<∗>YR", -YR", i -R<∗>OR";
svaki M je nezavisno odabran od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH) -, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe;
X<1>i X<2>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
svaki Y je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C2-12alkenila; svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C3-6karbocikla; svaki R' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila.
[0181] U nekim primerima, jedinjenje ima formulu (IIIa):
[0182] Jedinjenja formule (III) ili (IIIa) uključuju jednu ili više od sledećih karakteristika, kada je primenljivo.
[0183] U nekim primerima, Z je CH2.
[0184] U nekim primerima, Z je odsutan.
[0185] U nekim primerima, najmanje jedan od A3i A4je N ili NH.
[0186] U nekim primerima, A3je N i A4je NH.
[0187] U nekim primerima, A3je N i A4je CH2.
[0188] U nekim primerima, A3je CH i A4je NH.
[0189] U nekim primerima, najmanje jedan od X<1>i X<2>nije -CH2-. Na primer, u određenim primerima, X<1>nije -CH2-. U nekim primerima, najmanje jedan od X<1>i X<2>je -C(O)-.
[0190] U nekim primerima, X<2>je -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, ili -CH2-OC(O)-.
[0191] U nekim primerima, R1, R2, i R3su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. U nekim primerima, R1, R2, i R3su isti. U određenim primerima, R1, R2, i R3su C6, C9, C12, ili C14alkil. U drugim primerima, R1, R2, i R3su C18alkenil. Na primer, R1, R2, i R3mogu da budu linoleil.
[0192] U nekim primerima, jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od:
[0193] U još jednom aspektu pronalazak obezbeđuje jedinjenje prema formuli (Ib):
ili njegovu so ili izomer, gde
A6i A7su svaki nezavisno odabrani od CH ili N, pri čemu najmanje jedan od A6i A7je N; Z je CH2ili odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne;
X<4>i X<5>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
R1, R2, R3, R4, i R5svaki su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila, C5-20alkenila, -R"MR', -R<∗>YR", -YR", i -R<∗>OR";
svaki M je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe;
svaki Y je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C2-12alkenila; svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C3-6karbocikla; svaki R' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila.
[0194] U nekim primerima izvođenja, svaki od R1, R2, R3, R4, i R5je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila.
[0195] U nekim primerima izvođenja, R1i R2su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, i R3su isti. U nekim primerima izvođenja, R4i R5su isti. U određenim primerima izvođenja, R1, R2, R3, R4, i R5su isti.
[0196] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je C9-12alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki od R1, R2, R3, R4, i R5nezavisno je C9, C12ili C14alkil. U određenim primerima izvođenja, svaki od R1, R2, R3, R4, i R5je C9alkil.
[0197] U nekim primerima izvođenja, A6je N i A7je N. U nekim primerima izvođenja, A6je CH i A7je N.
[0198] U nekim primerima izvođenja, X<4>je-CH2- i X<5>je -C(O)-. U nekim primerima izvođenja, X<4>i X<5>su -C(O)-.
[0199] U nekim primerima izvođenja, kada A6je N i A7je N, najmanje jedan od X<4>i X<5>nije -CH2-, npr., najmanje jedan od X<4>i X<5>je -C(O)-. U nekim primerima izvođenja, kada A6je N i A7je N, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'.
[0200] U nekim primerima izvođenja, najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5nije -R"MR'.
[0201] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje je
[0202] U jednom primeru izvođenja, jedinjenje ima formulu (IV)
[0203] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (17-I)
ili njegovu so ili izomer, pri čemu R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, -C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R<a>)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2R<a>i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2ai R3asu svaki nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C3-24alkila, C3-24alkenila, -R<a∗>Y<a>R<a>", -Y<a>R<a>", i -R<a∗>OR<a>";
svaki Y<a>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<a∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
svaki R<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H; i svaki R<a>" je odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila;
gde R2auključuje 7 ili manje atoma ugljenika.
[0204] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima izvođenja, R<a>je -CH3.
[0205] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima izvođenja, n<a>je 2. U drugim primerima, n je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0206] U nekim primerima, R3auključuje 7 ili manje atoma ugljenika.
[0207] U nekim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0208] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (17-I)
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, - C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R<a>)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2R<a>i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
R2aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-24alkenila;
R3aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-24alkila; i
svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0209] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0210] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0211] U nekim primerima, R3aje alkil koji uključuje 9, 12, 14, ili 18 atoma ugljenika.
[0212] U nekim primerima, R2aje C18alkenil (npr., linoleil).
[0213] U nekim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0214] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (17-I)
ili njegova so ili izomer, pri čemu
R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, - C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R<a>)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2R<a>i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
R2aje odabran iz grupe koja se sastoji od C13-20alkila;
R3aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-20alkila; i
svaki R<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0215] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima izvođenja, R<a>je -CH3.
[0216] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0217] U nekim primerima, R2ai R3asu isti.
[0218] U nekim primerima, R2ai/ili R3aje C14alkil.
[0219] U nekim primerima, jedinjenje je
[0220] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (17-I)
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1aje -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>―OR<a>, R<a>je odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H, i n<a>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5; i
R2ai R3asu svaki nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C8-20alkenila, pri čemu iii) R<a>je odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C2-3alkenila; ili
iv) R1aje -(CH2)2OH, i R2ai R3asvaki uključuje jednu ili manje dvostrukih veza.
[0221] U nekim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0222] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima, n<a>je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0223] U određenim primerima, R1aje -(CH2)2OCH3. U drugim primerima, R1aje -(CH2)2OH.
[0224] U nekim primerima, R2aje C18alkenil (npr., linoleil). U određenim primerima, R3aje C18alkenil (npr., linoleil).
[0225] U nekim primerima, R2ai R3asu isti.
[0226] U nekim primerima, jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od
[0227] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje formule (17-I)
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1je -(CH2)n<a>Q<a>, gde je Q<a>odabran od heterocikla, -OR<a>, -O(CH2)n<a>N(R<a>)2, - C(O)OR<a>, -OC(O)R<a>, -CX<a>3, -CXa2H, -CX<a>H2, -CN, -N(R<a>)2, -C(O)N(R<a>)2, -N(R<a>)C(O)R<a>, i -N(R<a>)S(O)2R<a>i svaki n<a>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
svaki X<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
R2aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-12alkila;
R3aje odabran iz grupe koja se sastoji od C8-20alkila; i
svaki R<a>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0228] U nekim primerima, Q<a>je -OR<a>. U određenim primerima, R<a>je H. U drugim primerima, R<a>je -CH3.
[0229] U nekim primerima, n<a>je 1. U drugim primerima, n<a>je 2. U drugim primerima, n je 3. U drugim primerima, n<a>je 4. U nekim primerima, n<a>je 5.
[0230] U određenim primerima, Q<a>je -OR<a>i n<a>je odabran od 2, 3, i 4.
[0231] U nekim primerima, R2aje C9alkil. U drugim primerima, R2aje C12alkil.
[0232] U nekim primerima, R2ai R3asu isti.
[0233] U nekim primerima, jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od:
[0234] Prikaz takođe obezbeđuje jedinjenje koje ima formulu (19-I),
ili njegovu so ili izomer, pri čemu
R1bje odabran iz grupe koja se sastoji od H, C1-5alkila, C2-5alkenila, -R<b>"M<b>R<b>', C3-6karbocikla, -(CH2)nQ<b>, i -(CH2)nCHQ<b>R<b>, gde je Q<b>odabran od heterocikla, -OR<b>, O(CH2)nN(R<b>)2, -C(O)OR<b>, -OC(O)R<b>, -CX<b>3, -CXb2H, -CX<b>H2, -CN, -N(R<b>)2, -C(O)N(R<b>)2, -N(R<b>)C(O)R<b>, i -N(R<b>)S(O)2R<b>i svaki n je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2bi R3bsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila, C2-20alkenila, -R<b>"MR<b>', -R<b∗>YR<b>", -YR<b>", i -R<b∗>OR<b>";
svaki M<b>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<b>')-, -N(R<b>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR<b>')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe;
W je odabran iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -CHR<b>-, -C(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-;
svaki X<b>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
svaki Y<b>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<b∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki R<b>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C3-6karbocikla, C2-3alkenil, i H;
svaki R<b>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R<b>" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila.
[0235] U nekim primerima, W nije -CH2-, npr., W je -C(O)-.
[0236] U nekim primerima, najmanje jedan od R2bi R3bje -R<b>"M<b>R<b>'. U određenim primerima, najmanje jedan M<b>je -C(O)O-. U nekim primerima, najmanje jedan R<b>" je C5alkil. U određenim primerima, najmanje jedan R<b>' je C5alkil.
[0237] U nekim primerima, R2bi/ili R3bsu odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila. Na primer, R2bi/ili R3bmogu da budu alkil grupe koje uključuju 9 ili 12 atoma ugljenika. U drugim primerima, R2bi/ili R3bsu odabrani iz grupe koja se sastoji od C2-20alkenila. Na primer, R2bi/ili R3bmogu da budu alkenil grupe koje uključuju 18 atoma ugljenika (npr., linoleil grupe). U određenim primerima, R2bi R3bsu isti.
[0238] U nekim primerima, R1bje H, dok je u drugim primerima, R1bodabran od C1-5alkila. Na primer, R1bmože da bude C1alkil.
[0239] U određenim primerima, R1bje -(CH2)nQ<b>. U takvim primerima, Q<b>je heterocikl kao što je fenil grupa. Na primer, Q<b>može da bude fenil grupa sa jednim ili više supstituenata, kao što je ovde opisano.
[0240] U određenim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0241] U drugim primerima, lipidi su jedinjenja formule (19-II)
ili njena so ili izomer, pri čemu
R1bje odabran iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila; i
R2bi R3bsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkenila.
[0242] U određenim primerima, R1bje C12alkil.
[0243] U nekim primerima, R2bi/ili R3bsu C18alkenil (npr., linoleil).
[0244] U određenim primerima, R2bi R3bsu oba linoleil.
[0245] U jednom primeru, jedinjenje je
[0246] Lipidi mogu da budu jedinjenja formule (20-I),
ili njena so ili izomer, pri čemu
R1c, je odabran iz grupe koja se sastoji od C3-6karbocikla, -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>je odabran od heterocikla, -OR<c>, -O(CH2)n<c>N(R<c>)2, -C(O)OR<c>, - OC(O)R<c>, -CX<c>3, -CXc2H, -CX<c>H2, -CN, -N(R<c>)2, -C(O)N(R<c>)2, -N(R<c>)C(O)R<c>, i -N(R<c>)S(O)2R<c>i svaki n<c>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2c, R3c, i R4csu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila, C2-20alkenila, -R<c>"M<c>R<c>', -R<c∗>Y<c>R<c>", -Y<c>R<c>", i -R<c∗>OR<c>";
svaki M<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<c>')-, -N(R<c>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR<c>')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe;
svaki X<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, i I;
svaki Y<c>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<c∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H; svaki R<c>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R<c>" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila, pri čemu
i) R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od C3-6karbocikla, -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<C>(R<C>)2, gde je Q<c>odabran od heterocikla, -O(CH2)n<c>N(R<c>)2, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -CX<c>3, -CXc2H, -CX<c>H2, -C(O)N(R<c>)2, -N(R<c>)C(O)R<c>, i -N(R<c>)S(O)2R<c>i svaki n<c>je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5; i/ili
ii) najmanje jedan od R2c, R3c, i R4cje -R<c>"M<c>R<c>'.
[0247] U nekim primerima, R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>odabran od heterocikla, -O(CH2)n<c>N(R<c>)2, -C(O)OR<c>, -OC(O)R<c>, -CX<c>3, -CX<c>2H, -CX<c>H2, -CN, -C(O)N(R<c>)2, -N(R<c>)C(O)R<c>, i -N(R<c>)S(O)2R<c>i svaki n je nezavisno odabran od 1, 2, 3, 4, i 5. U određenim primerima, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U nekim primerima, n<c>je 2. U nekim primerima, Q<c>je -C(O)OR<c>, gde je R<c>, na primer, H.
[0248] U nekim primerima, najmanje jedan od R2c, R3c, i R4cje -R<c>"M<c>R<c>'. Na primer, R2c, R3c, i/ili R4cmože da bude -R<c>"M<c>R<c>'. U nekim primerima, najmanje jedan M<c>je -C(O)O-. U određenim primerima, svaki M<c>je -C(O)O-. U nekim primerima, najmanje jedan R<c>" je C5ili C7alkil. U određenim primerima, svaki R<c>" je C5alkil. U drugim primerima, svaki R<c>" je C7alkil. U nekim primerima, najmanje jedan R<c>' je C5, C7, ili C9alkil. U određenim primerima, svaki R<c>' je C5alkil. U drugim primerima, svaki R<c>' je C7alkil. U drugim primerima, svaki R<c>' je C9alkil. U nekim primerima, R<c>' je granat.
[0249] U nekim primerima, R2c, R3c, i R4csu odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkil. U određenim primerima, R2c, R3c, i R4csu C12alkil.
[0250] U nekim primerima, R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. Na primer, R2cmože da bude C12alkil.
[0251] U nekim primerima, R3cje odabran iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. Na primer, R3cmože da bude C6, C9, ili C12alkil.
[0252] U nekim primerima, R4cje odabran iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila. Na primer, R4cmože da bude C6, C9, ili C12alkil.
[0253] U nekim primerima, R3ci R4csu isti.
[0254] U nekim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0255] U drugim primerima, lipid je jedinjenje prema formuli (20-I)
ili njena so ili izomer, pri čemu
R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>je odabran od -OR<c>, -CN, i -N(R<c>)2, i n<c>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2ci R3csu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila;
R4cje odabran iz grupe koja se sastoji od C13-20alkila i C5-20alkenila; i
svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0256] U nekim primerima, R3cje C14alkil.
[0257] U nekim primerima, R4cje C14alkil.
[0258] U nekim primerima, R3cje C18alkenil. Na primer, R3cmože da bude linoleil.
[0259] U nekim primerima, R4cje C18alkenil. Na primer, R4cmože da bude linoleil.
[0260] U nekim primerima, R2cje C12alkil. U drugim primerima, R2cje C14alkil. U nekim primerima, R2cje C18alkenil. Na primer, R2cmože da bude linoleil.
[0261] U nekim primerima, R3ci R4csu isti.
[0262] U nekim primerima, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U nekim primerima, Q<c>je -OR<c>. Na primer, Q<c>može da bude -OH. U nekim primerima, n<c>je 2 ili 3.
[0263] U nekim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0264] U drugim primerima, lipid je jedinjenje koje ima formulu (20-I)
ili njegova so ili izomer, pri čemu
R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>odabran od -OR<c>, -CN, i -N(R<c>)2, i n<c>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2c, R3c, i R4csu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila; i svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H; pri čemu
i) R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila, i/ili
ii) R3cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila.
[0265] U nekim primerima, R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila. Na primer, R2cmože da bude C6ili C9alkil.
[0266] U nekim primerima, R3cje odabran iz grupe koja se sastoji od C1-11alkila i C2-5alkenila. Na primer, R3cmože da bude C6ili C9alkil.
[0267] U nekim primerima, R3cje C12alkil.
[0268] U nekim primerima, R2cje C12alkil.
[0269] U nekim primerima, R4cje C6, C9, ili C12alkil.
[0270] U nekim primerima, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U određenim primerima, Q<c>je -OR<c>. U nekim primerima, R<c>je H. U nekim primerima, n<c>je 2 ili 3.
[0271] U nekim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0272] U drugim primerima, lipid je jedinjenje prema formuli (20-I)
ili njegova so ili izomer, pri čemu
R1cje odabran iz grupe koja se sastoji od -(CH2)n<c>Q<c>, -(CH2)n<c>CHQ<c>R<c>, -CHQ<c>R<c>, i -CQ<c>(R<c>)2, gde je Q<c>odabran od -OR<c>, -CN, i -N(R<c>)2, i n<c>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
R2cje odabran iz grupe koja se sastoji od H, C12-20alkila, i C6-20alkenila;
R3ci R4csu C12alkil; i
svaki R<c>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila, C2-3alkenila, i H.
[0273] U nekim primerima, R2cje H. U drugim primerima, R2cje C12alkil ili alkenil. U nekim primerima, R2cje C14alkil. U drugim primerima, R2cje C18alkenil. Na primer, R2cmože da bude linoleil.
[0274] U nekim primerima izvođenja, R1cje -(CH2)n<c>Q<c>. U određenim primerima, Q<c>je -OR<c>. Na primer, Q<c>može da bude OH. U nekim primerima, n<c>je 2, 3, ili 4.
[0275] U nekim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0276] U još jednom primeru, lipidi mogu da budu jedinjenja formule (21-I),
ili njihova so ili izomer, pri čemu
R1di R2dsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od H, C1-5alkila, i C2-5alkenila; n<d>je odabran od 1, 2, 3, 4, i 5;
k je odabran od 0, 1, 2, i 3;
R3di R4dsu nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C1-20alkila, C2-20alkenila, -R<d>"M<d>R<d>', -R<d∗>Y<d>R<d>", -Y<d>R<d>", i -R<d∗>OR<d>";
svaki M<d>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<d>')-, -N(R<d>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR<d>')O-, i -S(O)2-, ili je odsutan;
svaki R<d>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; svaki Y<d>je nezavisno C3-6karbocikl;
svaki R<d∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C1-12alkenila; svaki R<d>' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R<d>" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila, pri čemu su R3di R4dvezani ili za i) isti atom ugljenika ili za ii) susedne atome ugljenika.
[0277] U nekim primerima, R3di R4dsu vezani za isti atom ugljenika. Na primer, R3di R4dmogu da budu vezani za atom ugljenika susedan C<∗>. U određenim primerima, R3di R4dnisu vezani za atom ugljenika susedan C<∗>.
[0278] U drugim primerima, R3di R4dsu vezani za susedne atome ugljenika. U određenim primerima, jedan ili oba od R3di R4dsu vezana za atom ugljenika susedan C<∗>.
[0279] U nekim primerima, k je 0. U drugim primerima, k je 1, 2, ili 3.
[0280] U određenim primerima, M<d>je odsutan. U drugim primerima, M<d>je odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R<d>')-, -N(R<d>')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR<d>')O-, i -S(O)2-. U određenim takvim primerima, M<d>je -C(O)O-.
[0281] U nekim primerima, n<d>je 1, 2, ili 3.
[0282] U nekim primerima, R1di/ili R2dsu odabrani od C1-5alkila. U određenim primerima, R1di/ili R2dsu C1alkil.
[0283] U određenim primerima, R3di/ili R4dsu odabrani od C2-20alkenila. U određenim primerima, R3di/ili R4dsu alkenil grupe koje uključuju 17, 18, ili 19 atoma ugljenika. Na primer, R3di/ili R4dmogu da budu C18alkenil grupe (npr., linoleil).
[0284] U određenim primerima, jedinjenje je odabran iz grupe koja se sastoji od:
[0285] Kako se ovde koristi, izraz "alkil" ili "alkil grupa" označava linearni ili razgranati zasićeni ugljovodonik koji uključuje jedan ili više atoma ugljenika (npr., jedan, dva, tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet, deset, jedanaest, dvanaest, trinaest, četrnaest, petnaest, šesnaest, sedamnaest, osamnaest, devetnaest, dvadeset, ili više, atoma ugljenika), koji je izborno supstituisan. Na primer, oznaka "C1-
24alkil" se odnosi na izborno supstituisani linearni ili razgranati zasićeni ugljovodonik koji uključuje 1-24 atoma ugljenika. Ovde opisana alkil grupa se odnosi i na nesupstituisanu i na supstituisanu alkil grupu, osim ako je naznačeno drugačije.
[0286] Kako se ovde koristi, izraz "alkenil" ili "alkenil grupa" označava linearni ili razgranati ugljovodonik koji uključuje dva ili više atoma ugljenika (npr., dva, tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet, deset, jedanaest, dvanaest, trinaest, četrnaest, petnaest, šesnaest, sedamnaest, osamnaest, devetnaest, dvadeset, ili više, atoma ugljenika) i najmanje jednu dvostruku vezu, i koji je izborno supstituisan. Oznaka "C2-24alkenil" se odnosi na izborno supstituisani linearni ili razgranati zasićeni ugljovodonik koji uključuje 2-24 atoma ugljenika i najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu. Alkenil grupa može da uključuje jednu, dve, tri, četiri, ili više ugljenik-ugljenik dvostrukih veza. Na primer, C18alkenil može da uključuje jednu ili više dvostrukih veza. C18alkenil grupa koja uključuje dve dvostruke veze može da bude linoleil grupa. Ovde opisana alkenil grupa se odnosi i na nesupstituisanu i na supstituisanu grupu, osim ako je naznačeno drugačije.
[0287] Kako se ovde koristi, izraz "karbocikl" ili "karbociklična grupa" označava izborno supstituisan mono- ili multi-ciklični sistem koji uključuje jedan ili više prstenova sa atomima ugljenika. Prstenovi mogu da budu sa tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet, deset, jedanaest ili dvanaest članova. Oznaka "C3-6karbocikl" se odnosi na karbocikl koji uključuje jedan prsten koji ima 3-6 atoma ugljenika. Karbocikli mogu da uključuju jednu ili više ugljenik-ugljenik dvostrukih ili trostrukih veza i mogu da budu nearomatični ili aromatični (npr., cikloalkil ili aril grupe). Primeri karbocikla uključuju ciklopropil, ciklopentil, cikoheksil, fenil, naftil, i 1,2-dihidronaftil grupe. Karbocikli koji su ovde opisani odnose se i na nesupstituisane i na supstituisane karbocikle, osim ako je naznačeno drugačije. Izraz "cikloalkil" kako se ovde koristi, označava nearomatični karbocikl i može, ali ne mora da uključuje bilo koju dvostruku ili trostruku vezu. Osim ako nije drugačije specifično navedeno, ovde opisani karbocikli odnose se i na nesupstituisane i na supstituisane karbocikl grupe, tj., izborno supstituisane karbocikle.
[0288] Kako se ovde koristi, izraz "heterocikl" ili "heterociklična grupa" označava izborno supstituisani monociklični ili multiciklični sistem koji uključuje jedan ili više prstenova, pri čemu najmanje jedan prsten uključuje najmanje jedan heteroatom. Heteroatomi mogu da budu, na primer, atomi azota, kiseonika ili sumpora. Prstenovi mogu da budu sa tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet, deset, jedanaest ili dvanaest članova. Heterocikli mogu da uključuju jednu ili više dvostrukih ili trostrukih veza i mogu da budu nearomatični ili aromatični. Primeri heterocikla uključuju imidazolil, imidazolidinil, oksazolil, oksazolidinil, tiazolil, tiazolidinil, pirazolidinil, pirazolil, izoksazolidinil, izoksazolil, izotiazolidinil, izotiazolil, morfolinil, pirolil, pirolidinil, furil, tetrahidrofuril, tiofenil, piridinil, piperidinil, hinolil i izohinolil grupe. Heterocikli mogu da budu izborno supstituisani.
[0289] Kako se ovde koristi, "biorazgradiva grupa" je grupa koja može da olakšava brži metabolizam lipida u sisarskom entitetu. Biorazgradiva grupa može da bude odabrana iz grupe koja se sastoji od, ali nije ograničena na, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupu i heteroaril grupu. Kako se ovde koristi, "aril grupa" je karbociklična grupa koja uključuje jedan ili više aromatičnih prstenova. Primeri aril grupa uključuju fenil i naftil grupe. Kako se ovde koristi, "heteroaril grupa" je heterociklična grupa koja uključuje jedan ili više aromatičnih prstenova. Primeri heteroaril grupa uključuju pirolil, furil, tiofenil, imidazolil, oksazolil i tiazolil. Aril i heteroaril grupe mogu da budu izborno supstituisane. Na primer, svako M, M<b>, M<c>ili M<d>može da bude nezavisno izabrano iz neograničavajuće grupe koja se sastoje od fenila, oksazola i tiazola. U gore navedenim formulama, svako M, M<b>, M<c>ili M<d>može da bude nezavisno izabrano sa liste prethodno navedenih biorazgradivih grupa.
[0290] Alkil, alkenil, i ciklil (npr., karbociklil i heterociklil) grupe mogu da budu izborno supstituisane osim ako nije drugačije specifično navedeno. Izborni supstituenti mogu da budu izabrani iz grupe koja se sastoji od, ali bez ograničenja, halogenog atoma (npr., hlorid, bromid, fluorid ili jodid grupa), karboksilne kiseline (npr., -C(O)OH), alkohola (npr., hidroksil, -OH), estra (npr., -C(O)OR ili -OC(O)R), aldehida (npr.,-C(O)H), karbonila (npr., -C(O)R, alternativno predstavljen kao C=O), acil halogenida (npr.,-C(O)X, gde je X halogenid izabran od bromida, fluorida, hlorida i jodida), karbonata (npr., -OC(O)OR), alkoksi (npr., -OR), acetala (npr.,-C(OR)2Rʺʺ, gde je svaki OR alkoksi grupa koja može da bude ista ili različita i Rʺʺ je alkil ili alkenil grupa), fosfata (npr., P(O)4<3->), tiola (npr., -SH), sulfoksida (npr., -S(O)R), sulfinske kiseline (npr., -S(O)OH), sulfonske kiseline (npr., -S(O)2OH), tiala (npr., -C(S)H), sulfata (npr., S(O)4<2->), sulfonila (npr., -S(O)2-), amida (npr., -C(O)NR2, ili -N(R)C(O)R), azido (npr., -N3), nitro (npr., -NO2), cijano (npr., -CN), izocijano (npr., -NC), aciloksi (npr.,-OC(O)R), amino (npr., -NR2, -NRH, ili -NH2), karbamoila (npr., -OC(O)NR2, -OC(O)NRH, ili -OC(O)NH2), sulfonamida (npr., -S(O)2NR2, -S(O)2NRH, -S(O)2NH2, -N(R)S(O)2R, -N(H)S(O)2R, -N(R)S(O)2H, ili -N(H)S(O)2H), ciklil (npr., karbociklil ili heterociklil) grupe, alkil grupe i alkenil grupe. U bilo kom od prethodnih slučajeva, R je alkil ili alkenil grupa, kako je ovde definisana. U nekim primerima izvođenja, i same grupe supstituenata mogu da budu dodatno supstituisane sa, na primer, jednim, dva, tri, četiri, pet ili šest supstituenata, kako su ovde definisani. Na primer, C5-20alkil grupa može da bude dodatno supstituisana sa jednim, dva, tri, četiri, pet, šest ili više supstituenata, kako su ovde opisani.
[0291] Aminski fragment lipida prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) može da bude protonovan na fiziološkom pH. Prema tome, lipid može da ima pozitivno ili delimično pozitivno naelektrisanje na fiziološkom pH. Takvi lipidi mogu da budu označeni kao katjonski ili jonizabilni (amino)lipidi. Lipidi mogu da budu cviterjonski, tj., neutralni molekuli koji imaju i pozitivno i negativno naelektrisanje.
Kompozicije nanočestica
[0292] Prikaz takođe opisuje kompozicije nanočestica koje uključuju lipidnu komponentu koja sadrži jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) kao što je ovde opisano. U nekim primerima izvođenja, najveća dimenzija kompozicija nanočestica je 1 µm ili manje (npr., 1 µm, 900 nm, 800 nm, 700 nm, 600 nm, 500 nm, 400 nm, 300 nm, 200 nm, 175 nm, 150 nm, 125 nm, 100 nm, 75 nm, 50 nm, ili manje), npr., kada se meri dinamičkim rasejanjem svetlosti (DLS), transmisionom elektronskom mikroskopom, skenirajućom elektronskom mikroskopijom ili drugom metodom. Kompozicije nanočestica uključuju, na primer, lipidne nanočestice (LNP), lipozome, lipidne vezikule i lipoplekse. U nekim primerima izvođenja, kompozicije nanočestica su vezikule koje uključuju jedan ili više lipidnih dvosloja. U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje dva ili više koncentričnih dvosloja razdvojenih vodenim odeljcima. Lipidni dvosloji mogu biti funkcionalizovani i/ili umreženi jedan sa drugim. Lipidni dvosloji mogu da uključuju jedan ili više liganada, proteina ili kanala.
[0293] Kompozicije nanočestica uključuju lipidnu komponentu koja sadrži najmanje jedan lipid, kao što je jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), kao što je ovde opisano. Na primer, u nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica može da uključuje lipidnu komponentu koja sadrži jedno od jedinjenja 1 do 88, jedinjenja 17-1 do 17-13, jedinjenja 19-1 do 19-6, jedinjenja 20-1 do 20-25 i jedinjenja 21-1 do 21-6. Kompozicije nanočestica mogu takođe da uključuju razne druge komponente. Na primer, lipidna komponenta kompozicije nanočestica mogu da uključuju jedan ili više drugih lipida pored lipida prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I).
Katjonski/jonizabilni lipidi
[0294] Kompozicija nanočestica može da uključuje jedan ili više katjonskih i/ili jonizabilnih lipida (npr., lipida koji mogu da imaju pozitivno ili delimično pozitivno naelektrisanje na fiziološkom pH) uz lipid prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19II), (20-I) i (21-I). Katjonski i/ili jonizabilni lipidi mogu da budu odabran iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od 3-(didodecilamino)-N1,N1,4-tridodecil-1-piperazinetanamina (KL10), N1-[2-(didodecilamino)etil]-N1,N4,N4-tridodeci1-1,4-piperazindietanamina (KL22), 14,25-ditridecil-15,18,21,24-tetraaza-oktatriakontana (KL25), 1,2-dilinoleiloksi-N,N-dimetilaminopropana (DLinDMA), 2,2-dilinoleil-4-dimetilaminometil-[1,3]-dioksolana (DLin-K-DMA), heptatriakonta-6,9,28,3 1-tetraen-19-il 4-(dimetilamino)butanoata (DLin-MC3-DMA), 2,2-dilinoleil-4-(2-dimetilaminoetil)-[1,3]-dioksolana (DLin-KC2-DMA), 1,2-dioleiloksi-N,N-dimetilaminopropana (DODMA), 2-({8-[(3β)-holest-5-en-3-iloksi]oktil}oksi)-N,N-dimetil-3-[(9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-iloksi]propan-1-amina (Octyl-CLinDMA), (2R)-2-({8-[(3β)-holest-5-en-3-iloksi]oktil}oksi)-N,N-dimetil-3-[(9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-iloksi]propan-1-amina (Octyl-CLinDMA (2R)), (2S)-2-({8-[(3β)-holest-5-en-3-iloksi]oktil}oksi)-N,N-dimetil-3-[(9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-iloksi]propan-1-amina (Octyl-CLinDMA (2S)),
(tj., (12Z, 15Z)-N,N-dimetil-2-nonilhenikoza-12,15-dien-1-amina), i
(tj., N,N-dimetil-1-{(1S,2R)-2-oktilciklopropil}heptadekan-8-amina).
[0295] Pored ovih, katjonski lipid može da bude i lipid koji uključuje cikličnu amino grupu. Dodatni katjonski i/ili jonizabilni lipidi koji su pogodni za ovde opisane formulacije i postupke uključuju one opisane u WO2015199952, WO2016176330 i WO2015011633.
PEG lipidi
[0296] Lipidna komponenta kompozicije nanočestica može da uključuje jedan ili više PEG ili PEG-modifikovanih lipida. Ove vrste mogu alternativno da se označavaju kao PEGilovani lipidi. PEG lipid je lipid modifikovan polietilen glikolom. PEG lipid može da bude izabran iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od PEG-modifikovanih fosfatidiletanolamina, PEG-modifikovanih fosfatidinskih kiselina, PEG-modifikovanih ceramida, PEG-modifikovanih dialkilamina, PEG-modifikovanih diacilglicerola, PEG-modifikovanih dialkilglicerola, i njihovih smeša. Na primer, PEG lipid može da bude PEG-c-DOMG, PEG-DMG, PEG-DLPE, PEG-DMPE, PEG-DPPC, ili PEG-DSPE lipid.
Strukturni lipidi
[0297] Lipidna komponenta kompozicije nanočestica može da uključuje jedan ili više strukturnih lipida. Strukturni lipidi mogu da budu odabrani iz grupe koja se sastoji od, ali bez ograničenja, holesterola, fekosterola, sitosterola, ergosterola, kampesterola, stigmasterola, brasikasterola, tomatidina, tomatina, ursolne kiseline, alfa-tokoferola, i njihovih smeša. U određenim primerima izvođenja, strukturni lipid je holesterol. U nekim primerima izvođenja, strukturni lipid uključuje holesterol i kortikosteroid (kao što je prednizolon, deksametazon, prednizon i hidrokortizon), ili njihovu kombinaciju.
Fosfolipidi
[0298] Lipidna komponenta kompozicije nanočestica može da uključuje jedan ili više fosfolipida, kao što je jedan ili više (poli)nezasićenih lipida. Fosfolipidi mogu da se organizuju u vidu jednog ili više lipidnih dvosloja. U principu, fosfolipidi mogu da uključuju fosfolipidni fragment i jedan ili više fragmenata masne kiseline. Na primer, fosfolipid može da bude lipid prema formuli (V)
u kojoj Rppredstavlja fosfolipidni fragment, a R1i R2predstavljaju fragmente masne kiseline sa ili bez nezasićenosti, koji mogu da budu isti ili različiti. Fosfolipidni fragment može da bude odabran iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od fosfatidil holina, fosfatidil etanolamina, fosfatidil glicerola, fosfatidil serina, fosfatidinske kiseline, 2-lizofosfatidil holina i sfingomijelina. Fragment masne kiseline može da bude odabran iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od laurinske kiseline, miristinske kiseline, miristoleinske kiseline, palmitinske kiseline, palmitoleinske kiseline, stearinske kiseline, oleinske kiseline, linoleinske kiseline, alfa-linolenske kiseline, erucinske kiseline, fitanske kiseline, arahidinske kiseline, arahidonske kiseline, eikozapentaenoinske kiseline, behenske kiseline, dokozapentaenoinske kiseline i dokozaheksaenoinske kiseline. Razmatraju se i neprirodne vrste koje uključuju prirodne vrste sa modifikacijama i supstitucijama koje uključuje grananje, oksidaciju, ciklizaciju, kao i alkini. Na primer, fosfolipid može da bude funkcionalizovan ili unakrsno povezan sa jednim ili više alkina (npr., alkenil grupa u kojoj je jedna ili više dvostrukih veza zamenjeno trostrukom vezom). Pod pogodnim reakcionim uslovima, alkinska grupa može da se podvrgne bakrom katalizovanoj cikloadiciji, kada se izloži azidu. Ove reakcije mogu da budu korisne pri funkcionalizaciji lipidnog dvosloja kompozicije nanočestica u cilju olakšavanja prolaska kroz membranu ili prepoznavanja ćelija ili prilikom konjugacije kompozicije nanočestica sa korisnim fragmentom kao što je fragment koji omogućava usmeravanje ili vizuelizaciju (npr., boja).
[0299] Fosfolipidi korisni u ovde opisanim kompozicijama i postupcima mogu da budu odabrani iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DSPC), 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina (DOPE), 1,2-dilinoleoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DLPC), 1,2-dimiristoil-sn-glicero-fosfoholina (DMPC), 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DOPC), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoholina (DPPC), 1,2-diundekanoil-sn-glicero-fosfoholina (DUPC), 1-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfoholina (POPC), 1,2-di-O-oktadecenil-sn-glicero-3-fosfoholina (18:0 Diether PC), 1-oleoil-2-holesterilhemisukcinoil-sn-glicero-3-fosfoholina (OChemsPC), 1-heksadecil-sn-glicero-3-fosfoholina (C16 Lyso PC), 1,2-dilinolenoil-sn-glicero-3-fosfoholina, 1,2-diarahidonoil-sn-glicero-3-fosfoholina, 1,2-didokozaheksaenoi1-sn-glicero-3-fosfoholina, 1,2-difitanoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina (ME 16.0 PE), 1,2-distearoi1-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dilinoleoi1-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dilinolenoi1-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-diarahidonoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-didokozaheksaenoil-snglicero-3-fosfoetanolamina, natrijumove soli 1,2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerola) (DOPG) i sfingomijelina.
[0300] U određenim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje DSPC. U određenim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje DOPE. U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje i DSPC i DOPE.
Adjuvansi
[0301] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica koja uključuje jedan ili više ovde opisanih lipida može dodatno da uključuje jedan ili više adjuvanasa, npr., glukopiranozil lipidni adjuvans (GLA), CpG oligodezoksinukleotide (npr., klasa A ili B), poli(I:C), aluminijum hidroksid i Pam3CSK4.
Terapijski agensi
[0302] Kompozicije nanočestica mogu da uključuju jedan ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa. Prikaz opisuje postupke za isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju ili organ sisara, proizvodnju polipeptida od interesa u ćeliji sisara, i lečenje bolesti ili poremećaja kod sisara kome je to potrebno, a koji obuhvata primenu kod sisara i/ili dovođenje u kontakt ćelije sisara sa kompozicijom nanočestica koja uključuje terapijski i/ili profilaktički agens.
[0303] Terapijski i/ili profilaktički agensi uključuju biološki aktivne supstance i naizmenično se nazivaju "aktivnim agensima". Terapijski i/ili profilaktički agens može da bude supstanca koja, kada se jednom unese u ćeliju ili organ, dovodi do željene promene u ćeliji, organu ili drugom telesnom tkivu ili sistemu. Takve vrste mogu biti korisne u lečenju jedne ili više bolesti, poremećaja ili stanja. U nekim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je lek sa malim molekulom koji je koristan u lečenju određene bolesti, poremećaja ili stanja. Primeri lekova korisnih u ovde opisanim kompozicijama nanočestica obuhvataju, ali nisu ograničeni na, antineoplastične agense (npr. vinkristin, doksorubicin, mitoksantron, kamptotecin, cisplatin, bleomicin, ciklofosfamid, metotreksat i streptozotocin), antitumorske agense, (npr., aktinomicin D, vinkristin , vinblastin, citozin arabinozid, antraciklini, alkilirajuća sredstva, jedinjenja platine, antimetaboliti i analozi nukleozida, kao što su metotreksat i analozi purina i pirimidina), antiinfektivne agense, lokalne anestetike (npr. dibukain i hlorpromazin), beta-adrenergičke blokatore (npr. propranolol, timolol i labetalol), antihipertenzivne agense (npr. klonidin i hidralazin), antidepresive (npr. imipramin, amitriptilin i doksepin), antikonvulzante (npr. fenitoin), antihistaminike (npr. difenhidramin, hlorfeniramin i prometazin), antibiotike/antibakterijske agense (npr. gentamicin, ciprofloksacin i cefoksitin), antifungalne agense (npr. mikonazol, terkonazol, ekonazol, izokonazol, butakonazol, klotrimazol, itrakonazol, nistatin, naftifin i amfotericin B), antiparazitske agense, hormone, antagoniste hormona, imunomodulatore, antagoniste neurotransmitera, agense protiv glaukoma, vitamine, narkotike i agense za snimanje.
[0304] U nekim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je citotoksin, radioaktivni jon, hemoterapeutik, vakcina, jedinjenje koje izaziva imunski odgovor, i/ili drugi terapijski i/ili profilaktički agens. Citotoksin ili citotoksični agens uključuje bilo koji agens koji može da bude štetan za ćelije. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, taksol, citohalazin B, gramicidin D, etidijum bromid, emetin, mitomicin, etopozid, tenipozid, vinkristin, vinblastin, kolhicin, doksorubicin, daunorubicin, dihidroksiantracindion, mitoksantron, mitramicin, aktinomicin D, 1-dehidrotestosteron, glukokortikoide, prokain, tetrakain, lidokain, propranolol, puromicin, majtanzinoide, npr., majtanzinol, rahelmicin (CC-1065), i njihove analoge ili homologe. Radioaktivni joni uključuju, ali nisu ograničeni na jod (npr., jod 125 ili jod 131), stroncijum 89, fosfor, paladijum, cezijum, iridijum, fosfat, kobalt, itrijum 90, samarijum 153 i prazeodijum. Vakcine uključuju jedinjenja i preparate koji mogu da obezbede imunitet protiv jednog ili više stanja povezanih sa zaraznim bolestima kao što su grip, male boginje, humani papiloma virus (HPV), besnilo, meningitis, veliki kašalj, tetanus, kuga, hepatitis i tuberkuloza i mogu da uključuju iRNK koje kodiraju antigene i/ili epitope poreklom iz infektivnih bolesti. Vakcine takođe uključuju jedinjenja i preparate koji usmeravaju imunski odgovor protiv ćelija raka i mogu da uključuju iRNK koje kodiraju antigene, epitope i/ili neoepitope poreklom iz tumorskih ćelija. Jedinjenja koja izazivaju imunski odgovor mogu da uključuju vakcine, kortikosteroide (npr. deksametazon) i druge vrste. U nekim primerima izvođenja, vakcina i/ili jedinjenje koje je sposobno da izazove imunski odgovor se primenjuje intramuskularno preko kompozicije koja uključuje jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I). Ostali terapijski i/ili profilaktički agensi uključuju, ali nisu ograničeni na, antimetabolite (npr. metotreksat, 6-merkaptopurin, 6-tioguanin, citarabin, 5-fluorouracil, dakarbazin), alkilirajuća sredstva (npr., mehloretamin, tiotepa hlorambucil, rahelmicin (CC-1065), melfalan, karmustin (BSNU), lomustin (CCNU), ciklofosfamid, busulfan, dibromomanitol, streptozotocin, mitomicin C i cis-dihlorodiamin platina (II) (DDP) cisplatin), antracikline (npr., daunorubicin (ranije daunomicin) i doksorubicin), antibiotike (npr. daktinomicin (ranije aktinomicin), bleomicin, mitramicin i antramicin (AMC)) i antimitotičke agense (npr. vinkristin, vinblastin, taksol i majtanzinoidi),
[0305] U drugim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je protein. Terapijski proteini korisni u nanočesticama pronalaska uključuju, ali nisu ograničeni na, gentamicin, amikacin, insulin, eritropoetin (EPO), faktor stimulacije kolonije granulocita (G-CSF), faktor stimulacije kolonije granulocita-makrofaga (GM-CSF) , faktor VIR, analoge oslobađajućeg hormona luteinizirajućeg hormona (LHRH), interferone, heparin, površinski antigen hepatitisa B, vakcinu protiv tifusa i vakcinu protiv kolere.
Polinukleotidi i nukleinske kiseline
[0306] U nekim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je polinukleotid ili nukleinska kiselina (npr. ribonukleinska kiselina ili dezoksiribonukleinska kiselina). Izraz "polinukleotid", u svom najširem smislu, uključuje bilo koje jedinjenje i/ili supstancu koja je, ili može da bude, ugrađena u oligonukleotidni lanac. Primeri polinukleotida za upotrebu u skladu sa ovim prikazom uključuju, ali nisu ograničeni na, jedno ili više od sledećeg: dezoksiribonukleinske kiseline (DNK), ribonukleinske kiseline (RNK) uključujući informacionu iRNK (iRNK), njihove hibride, agense za indukciju RNAi, RNAi agense , siRNA, shRNA, miRNA, antisens RNK, ribozime, katalitičku DNK, RNK koje indukuju formiranje trostrukog heliksa, aptamere, vektore, itd. U određenim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je RNK. RNK koje su korisne u ovde opisanim kompozicijama i postupcima mogu da se odaberu iz grupe koja se sastoji od, ali bez ograničenja, šortmera, antagomera, antisens RNK, ribozima, male interferirajuće RNK (siRNA), asimetrične interferirajuće RNK (aiRNA), mikroRNK (miRNA), RNK koja predstavlja supstrat za Dicer (dsRNA), RNK u vidu male ukosnice (shRNA), transportne RNK (tRNK), informacione RNK (iRNK) i njihovih smeša. U određenim primerima izvođenja, RNK je iRNK.
[0307] U nekim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je iRNK. iRNK može da kodira bilo koji polipeptid od interesa, uključujući bilo koji polipeptid koji se pojavljuje ili ne pojavljuje u prirodi ili koji je na drugi način modifikovan. Polipeptid kodiran putem iRNK može da bude bilo koje veličine i može da ima bilo koju sekundarnu strukturu ili aktivnost. U nekim primerima izvođenja, polipeptid kodiran putem iRNK može da ima terapijski efekat kada se eksprimira u ćeliji.
[0308] U drugim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je siRNA. siRNA može da bude u stanju da selektivno isključi ili smanji ekspresiju gena od interesa. Na primer, siRNA može da se odabere kako bi utišala gen povezan sa nekom bolešću, poremećajem ili stanjem nakon što se kod subjekta kome je to potrebno primeni kompozicija nanočestica koja uključuje siRNA. siRNA može da sadrži sekvencu koja je komplementarna sekvenci iRNK koja kodira gen ili protein od interesa. U nekim primerima izvođenja, siRNA može da bude imunomodulatorna siRNA.
[0309] U nekim primerima izvođenja, terapijski i/ili profilaktički agens je shRNA ili vektor ili plazmid koji je kodira. shRNA može da se proizvede u ciljnoj ćeliji nakon isporuke odgovarajućeg konstrukta u jedro. Konstrukti i mehanizmi koji se odnose na shRNA su dobro poznati u odgovarajućoj oblasti tehnike.
[0310] Nukleinske kiseline i polinukleotidi korisni u, ili pogodni za jedinjenja i postupke prema prikazu, obično uključuju prvi region povezanih nukleozida koji kodiraju polipeptid od interesa (npr. kodirajući region), prvi bočni region koji se nalazi na 5'-terminusu prvog regiona (npr.5'-UTR), drugi bočni region koji se nalazi na 3'-terminusu prvog regiona (npr. 3'-UTR), najmanje jedan region 5'-kape i 3'-stabilizujući region. U nekim primerima izvođenja, nukleinska kiselina ili polinukleotid dalje uključuje poli-A region ili Kozak sekvencu (npr., u 5'-UTR). U nekim slučajevima, polinukleotidi mogu da sadrže jednu ili više intronskih nukleotidnih sekvenci koje mogu da se iseku iz polinukleotida. U nekim primerima izvođenja, polinukleotid ili nukleinska kiselina (npr. iRNK) može da uključuje strukturu 5' kape, nukleozid koji dovodi do terminacije lanca, strukturu drške-petlje, poliA sekvencu i/ili signal za poliadenilaciju. Bilo koji od regiona nukleinske kiseline može da uključuje jednu ili više alternativnih komponenti (npr. alternativni nukleozid). Na primer, 3'-stabilizujući region može da sadrži alternativni nukleozid kao što je L-nukleozid, invertovani timidin ili 2'-O-metil nukleozid i/ili kodirajući region, 5'-UTR, 3'-UTR , ili region kape može da sadrži alternativni nukleozid kao što je 5-supstituisani uridin (npr. 5-metoksiuridin), 1-supstituisani pseudouridin (npr. 1-metil-pseudouridin ili 1-etil-pseudouridin) i/ili 5-supstituisani citidin (npr. 5-metil-citidin).
[0311] U principu, najkraća dužina polinukleotida može da bude dužina polinukleotidne sekvence koja je dovoljna da kodira dipeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira tripeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira tetrapeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira pentapeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira heksapeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira heptapeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira oktapeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira nonapeptid. U još jednom primeru izvođenja, dužina polinukleotidne sekvence je dovoljna da kodira dekapeptid.
[0312] Primeri dipeptida koje mogu da kodiraju alternativne polinukleotidne sekvence uključuju, ali nisu ograničeni na, karnozin i anserin.
[0313] U nekim slučajevima, polinukleotid je duži od 30 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, polinukleotidni molekul je duži od 35 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 40 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 45 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 55 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 50 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 60 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 80 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 90 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 100 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 120 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 140 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 160 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 180 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 200 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 250 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 300 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 350 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 400 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 450 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 500 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 600 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 700 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 800 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 900 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1000 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1100 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1200 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1300 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1400 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1500 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1600 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1800 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 2000 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 2500 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 3000 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 4000 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 5000 nukleotida, ili veća od 5000 nukleotida.
[0314] Nukleinske kiseline i polinukleotidi mogu da uključuju jednu ili više komponenti koje se javljaju u prirodi, uključujući bilo koji od kanonskih nukleotida A (adenozin), G (guanozin), C (citozin), U (uridin) ili T (timidin). U jednom primeru izvođenja, svi ili suštinski svi nukleotidi koji sadrže (a) 5'-UTR, (b) otvoreni okvir čitanja (ORF), (c) 3'-UTR, (d) poli A rep i bilo koju kombinaciju (gore navedenih a, b, c ili d) sadrže kanonske nukleotide koji se javljaju u prirodi A (adenozin), G (guanozin), C (citozin), U (uridin) ili T (timidin).
[0315] Nukleinske kiseline i polinukleotidi mogu da uključuju jednu ili više alternativnih komponenti, kao što je ovde opisano, koje daju korisna svojstva uključujući povećanu stabilnost i/ili nedostatak suštinske indukcije urođenog imunskog odgovora ćelije u koju se polinukleotid uvodi. Na primer, alternativni polinukleotid ili nukleinska kiselina pokazuju smanjenu degradaciju u ćeliji u koju su polinukleotid ili nukleinska kiselina uvedeni, u odnosu na odgovarajući nepromenjeni polinukleotid ili nukleinsku kiselinu. Ove alternativne vrste mogu da poboljšaju efikasnost proizvodnje proteina, intracelularno zadržavanje polinukleotida i/ili vijabilnost ćelija sa kojim su dovedeni u kontakt, kao i da poseduju smanjenu imunogenost.
[0316] Polinukleotidi i nukleinske kiseline mogu da budu prirodni ili neprirodni. Polinukleotidi i nukleinske kiseline mogu da uključuju jednu ili više modifikovanih (npr. izmenjenih ili alternativnih) nukleobaza, nukleozida, nukleotida ili njihovih kombinacija. Nukleinske kiseline i polinukleotidi korisni u ovde opisanim kompozicijama nanočestica mogu da uključuju i bilo koju korisnu modifikaciju ili izmenu, na primer u nukleobazi, šećeru ili internukleozidnoj vezi (npr. u vezujućem fosfatu/u fosfodiestarskoj vezi/u fosfodiestarskom osnovnom lancu). U određenim primerima izvođenja, izmene (npr. jedna ili više izmena) su prisutne u svakom od sledećeg: nukleobaze, šećera i internukleozidne veze. Izmene u skladu sa ovim pronalaskom mogu da budu izmene ribonukleinskih kiselina (RNK) u dezoksiribonukleinske kiseline (DNK), na primer, supstitucija 2'-OH u prstenu ribofuranozila u 2'-H, treoza nukleinske kiseline (TNA), glikolne nukleinske kiseline (GNA), peptidne nukleinske kiseline (PNA), zaključane nukleinske kiseline (LNA) ili njihovi hibridi. Dodatne izmene su ovde opisane.
[0317] Polinukleotidi i nukleinske kiseline mogu i ne moraju da budu ravnomerno izmenjeni celom dužinom molekula. Na primer, jedan ili više, ili svi tipovi nukleotida (npr., purin ili pirimidin, ili bilo koji jedan, ili više, ili svaki od A, G, U, C) mogu, ali ne moraju da budu ravnomerno izmenjeni u polinukleotidu ili nukleinskoj kiselini, ili u datom predefinisanom regionu njene sekvence. U nekim slučajevima, svi nukleotidi X u polinukleotidu (ili datom regionu njegove sekvence) su izmenjeni, pri čemu X može da bude bilo koji od nukleotida A, G, U, C, ili bilo koja od kombinacija A+G, A+U, A+C, G+U, G+C, U+C, A+G+U, A+G+C, G+U+C ili A+G+C.
[0318] Različite izmene šećera i/ili internukleozidnih veza (npr., strukture osnovnog lanca) mogu da postoje na različitim pozicijama u polinukleotidu. Stručnjak sa uobičajenim znanjem u ovoj oblasti će razumeti da analozi nukleotida ili jedna ili više drugačijih izmena mogu da budu locirane na bilo kojoj poziciji(ama) u polinukleotidu tako da funkcija polinukleotida nije značajno smanjena. Izmena može takođe da bude 5'- ili 3'-terminalna izmena. U nekim primerima izvođenja, polinukleotid uključuje izmenu na 3'-terminusu. Polinukleotid može da sadrži od oko 1% do oko 100% alternativnih nukleotida (bilo u odnosu na ukupan sadržaj nukleotida, ili u odnosu na jedan ili više tipova nukleotida, tj. bilo koji jedan ili više od A, G, U ili C) ili bilo koji procenat u okviru ovog intervala (npr., od 1% do 20%, od 1% do 25%, od 1% do 50%, od 1% do 60%, od 1% do 70%, od 1% do 80%, od 1% do 90%, od 1% do 95%, od 10% do 20%, od 10% do 25%, od 10% do 50%, od 10% do 60%, od 10% do 70%, od 10% do 80%, od 10% do 90%, od 10% do 95%, od 10% do 100%, od 20% do 25%, od 20% do 50%, od 20% do 60%, od 20% do 70%, od 20% do 80%, od 20% do 90%, od 20% do 95%, od 20% do 100%, od 50% do 60%, od 50% do 70%, od 50% do 80%, od 50% do 90%, od 50% do 95%, od 50% do 100%, od 70% do 80%, od 70% do 90%, od 70% do 95%, od 70% do 100%, od 80% do 90%, od 80% do 95%, od 80% do 100%, od 90% do 95%, od 90% do 100%, i od 95% do 100%). Podrazumeva se da se svaki preostali procenat objašnjava prisustvom kanonskog nukleotida (npr., A, G, U, ili C).
[0319] Polinukleotidi mogu da sadrže najmanje nula i najviše 100% alternativnih nukleotida, ili bilo koji procenat u okviru ovog intervala, kao što je najmanje 5% alternativnih nukleotida, najmanje 10% alternativnih nukleotida, najmanje 25% alternativnih nukleotida, najmanje 50% alternativnih nukleotida, najmanje 80% alternativnih nukleotida, ili najmanje 90% alternativnih nukleotida. Na primer, polinukleotidi mogu da sadrže alternativni pirimidin kao što je alternativni uracil ili citozin. U nekim primerima izvođenja, najmanje 5%, najmanje 10%, najmanje 25%, najmanje 50%, najmanje 80%, najmanje 90% ili 100% uracila u polinukleotidu je zamenjeno alternativnim uracilom (npr. , 5-supstituisani uracil). Alternativni uracil može da bude zamenjen jedinjenjem koje ima jednu jedinstvenu strukturu, ili može da bude zamenjen mnoštvom jedinjenja koja imaju različite strukture (npr. 2, 3, 4 ili više jedinstvenih struktura). U nekim slučajevima, najmanje 5%, najmanje 10%, najmanje 25%, najmanje 50%, najmanje 80%, najmanje 90% ili 100% citozina u polinukleotidu je zamenjeno alternativnim citozinom (npr. , 5-supstituisani citozin). Alternativni citozin može da bude zamenjen jedinjenjem koje ima jednu jedinstvenu strukturu, ili može da bude zamenjen mnoštvom jedinjenja koja imaju različite strukture (npr.2, 3, 4 ili više jedinstvenih struktura).
[0320] U nekim slučajevima, nukleinske kiseline suštinski ne indukuju urođeni imunski odgovor ćelije u koju je uveden polinukleotid (npr. iRNK). Karakteristike indukovanog urođenog imunskog odgovora uključuju 1) povećanu ekspresiju proinflamatornih citokina, 2) aktivaciju intracelularnih PRR (RIG-I, MDA5, itd., i/ili 3) prekid ili smanjenje translacije proteina.
[0321] Nukleinske kiseline mogu izborno da uključuju druge agense (npr. agense koji indukuju RNAi, RNAi agense, siRNA, shRNA, miRNA, antisens RNK, ribozime, katalitičku DNK, tRNK, RNK koje indukuju formiranje trostrukog heliksa, aptamere i vektore). U nekim primerima izvođenja, nukleinske kiseline mogu da obuhvataju jednu ili više informacionih RNK (iRNK) koje imaju jedan ili više alternativnih nukleozida ili nukleotida (tj. alternativne molekule iRNK).
[0322] U nekim primerima izvođenja, molekul nukleinske kiseline (npr. iRNK), formula, kompozicija ili postupak koji su sa njim u vezi, sadrže jedan ili više polinukleotida koji obuhvataju karakteristike koje su opisane u WO2002/098443, WO2003/051401, WO2008/052770, WO2009127230, WO2006122828, WO2008/083949, WO2010088927, WO2010/037539, WO2004/004743, WO2005/016376, WO2006/024518, WO2007/095976, WO2008/014979, WO2008/077592, WO2009/030481, WO2009/095226, WO2011069586, WO2011026641, WO2011/144358, WO2012019780, WO2012013326, WO2012089338, WO2012113513, WO2012116811, WO2012116810, WO2013113502, WO2013113501, WO2013113736, WO2013143698, WO2013143699, WO2013143700, WO2013/120626, WO2013120627, WO2013120628, WO2013120629, WO2013174409, WO2014127917, WO2015/024669, WO2015/024668, WO2015/024667, WO2015/024665, WO2015/024666, WO2015/024664, WO2015101415, WO2015101414, WO2015024667, WO2015062738, WO2015101416.
Alternative nukleobaza
[0323] Alternativni nukleozidi i nukleotidi mogu da uključuju alternativnu nukleobazu. Nukleobaza nukleinske kiseline je organska baza kao što je purin ili pirimidin ili njihov derivat. Nukleobaza može da bude kanonska baza (npr., adenin, guanin, uracil, timin i citozin). Ove nukleobaze mogu da se izmene, ili da se sasvim zamene kako bi se dobio polinukleotidni molekul koji ima poboljšana svojstva, npr., povećanu stabilnost kao što je otpornost na nukleaze. Nekanonske ili modifikovane baze mogu da uključuju, na primer, jednu ili više supstitucija ili modifikacija uključujući, ali ne i ograničeno na, alkil, aril, halo, okso, hidroksil, alkiloksi, i/ili tio supstitucije; jedan ili više fuzionisanih ili otvorenih prstenova, oksidaciju; i/ili redukciju.
[0324] Alternativno sparivanje nukleotidnih baza obuhvata ne samo standardne bazne parove adenintimin, adenin-uracil, ili guanin-citozin, nego i bazne parove obrazovane između nukleotida i/ili alternativnih nukleotida koji uključuju nestandardne ili alternativne baze, pri čemu raspored donora i akceptora u vodoničnoj vezi omogućava vodonične veze između nestandardne baze i standardne baze ili između dve komplementarne strukture nestandardnih baza. Jedan primer ovakvog nestandardnog sparivanja baza je sparivanje baza između alternativnog nukleotida inozina i adenina, citozina ili uracila.
[0325] U nekim primerima izvođenja, nukleobaza je alternativni uracil. Tipične nukleobaze i nukleozidi koji imaju alternativni uracil uključuju pseudouridin (ψ), piridin-4-on ribonukleozid, 5-aza-uracil, 6-aza-uracil, 2-tio-5-aza-uracil, 2-tio-uracil (s<2>U), 4-tio-uracil (s<4>U), 4-tio-pseudouridin, 2-tio-pseudouridin, 5-hidroksi-uracil (ho<5>U), 5-aminoalil-uracil, 5-halo-uracil (npr., 5-jodo-uracil ili 5-bromo-uracil), 3-metil-uracil (m<3>U), 5-metoksi-uracil (mo<5>U), uracil 5-oksisirćetnu kiselinu (cmo<5>U), metil estar uracil 5- oksisirćetne kiseline (mcmo<5>U), 5-karboksimetil-uracil (cm<5>U), 1-karboksimetilpseudouridin, 5-karboksihidroksimetil-uracil (chm<5>U), 5-karboksihidroksimetil-uracil metil estar (mchm<5>U), 5-metoksikarbonilmetil-uracil (mcm<5>U), 5-metoksikarbonilmetil-2-tio-uracil (mcm<5>s<2>U), 5-aminometil-2-tio-uracil (nm<5>s<2>U), 5-metilaminometil-uracil (mnm<5>U), 5-metilaminometil-2-tiouracil (mnm<5>s<2>U), 5-metilaminometil-2-seleno-uracil (mnm<5>se<2>U), 5-karbamoilmetil-uracil (ncm<5>U), 5-karboksimetilaminometil-uracil (cmnm<5>U), 5-karboksimetilaminometil-2-tio-uracil (cmnm<5>s<2>U), 5-propinil-uracil, 1-propinil-pseudouracil, 5-taurinometil-uracil (τm<5>U), 1-taurinometil-pseudouridin, 5-taurinometil-2-tio-uracil(τm<5>s<2>U), 1-taurinometil-4-tio-pseudouridin, 5-metil-uracil (m<5>U, tj., koji ima nukleobazu dezoksitimin), 1-metil-pseudouridin (m<1>ψ), 1-etil-pseudouridin (Et<1>ψ), 5-metil-2-tiouracil (m<5>s<2>U), 1-metil-4-tio-pseudouridin (m<1>s<4>ψ), 4-tio-1-metil-pseudouridin, 3-metil-pseudouridin (m<3>ψ), 2-tio-1-metil-pseudouridin, 1-metil-1-deaza-pseudouridin, 2-tio-1-metil-1-deazapseudouridin, dihidrouracil (D), dihidropseudouridin, 5,6-dihidrouracil, 5-metil-dihidrouracil (m<5>D), 2-tio-dihidrouracil, 2-tio-dihidropseudouridin, 2-metoksi-uracil, 2-metoksi-4-tio-uracil, 4-metoksipseudouridin, 4-metoksi-2-tio-pseudouridin, N1-metil-pseudouridin, 3-(3-amino-3-karboksipropil)uracil (acp<3>U), 1-metil-3-(3-amino-3-karboksipropil)pseudouridin (acp<3>ψ), 5-(izopentenilaminometil)uracil (inm<5>U), 5-(izopentenilaminometil)-2-tio-uracil (inm<5>s<2>U), 5,2'-O-dimetil-uridin (m<5>Um), 2-tio-2'-O_metil-uridin (s<2>Um), 5-metoksikarbonilmetil-2'-O-metil-uridin (mcm<5>Um), 5-karbamoilmetil-2'-O-metil-uridin (ncm<5>Um), 5-karboksimetilaminometil-2'-O-metiluridin (cmnm<5>Um), 3,2'-O-dimetil-uridin (m<3>Um), i 5-(izopentenilaminometil)-2'-O-metil-uridin (inm<5>Um), 1-tio-uracil, dezoksitimidin, 5-(2-karbometoksivinil)-uracil, 5-(karbamoilhidroksimetil)-uracil, 5-karbamoilmetil-2-tio-uracil, 5-karboksimetil-2-tio-uracil, 5-cijanometil-uracil, 5-metoksi-2-tio-uracil, i 5-[3-(1-E-propenilamino)]uracil.
[0326] U nekim primerima izvođenja, nukleobaza je alternativni citozin. Tipične nukleobaze i nukleozidi koji imaju alternativni citozin uključuju 5-aza-citozin, 6-aza-citozin, pseudoizocitidin, 3-metil-citozin (m3C), N4-acetil-citozin (ac4C), 5-formil-citozin (f5C), N4-metil-citozin (m4C), 5-metil-citozin (m5C), 5-halo-citozin (npr., 5-jodo-citozin), 5-hidroksimetil-citozin (hm5C), 1-metilpseudoizocitidin, pirolo-citozin, pirolo-pseudoizocitidin, 2-tio-citozin (s2C), 2-tio-5-metil-citozin, 4-tio-pseudoizocitidin, 4-tio-1-metil-pseudoizocitidin, 4-tio-1-metil-1-deaza-pseudoizocitidin, 1-metil-1-deaza-pseudoizocitidin, zebularin, 5-aza-zebularin, 5-metil-zebularin, 5-aza-2-tio-zebularin, 2-tiozebularin, 2-metoksi-citozin, 2-metoksi-5-metil-citozin, 4-metoksi-pseudoizocitidin, 4-metoksi-1-metil-pseudoizocitidin, lizidin (k2C), 5,2'-O-dimetil-citidin (m5Cm), N4-acetil-2'-O-metil-citidin (ac4Cm), N4,2'-O-dimetil-citidin (m4Cm), 5-formil-2'-O-metil-citidin (f5Cm), N4,N4,2'-O-trimetilcitidin (m42Cm), 1-tio-citozin, 5-hidroksi-citozin, 5-(3-azidopropil)-citozin, i 5-(2-azidoetil)-citozin.
[0327] U nekim primerima izvođenja, nukleobaza je alternativni adenin. Tipične nukleobaze i nukleozidi koji imaju alternativni adenin uključuju 2-amino-purin, 2,6-diaminopurin, 2-amino-6-halopurin (npr., 2-amino-6-hloro-purin), 6-halo-purin (npr., 6-hloro-purin), 2-amino-6-metil-purin, 8-azido-adenin, 7-deaza-adenin, 7-deaza-8-azaadenin, 7-deaza-2-amino-purin, 7-deaza-8-aza-2-aminopurin, 7-deaza-2,6-diaminopurin, 7-deaza-8-aza-2,6-diaminopurin, 1-metil-adenin (m1A), 2-metiladenin (m2A), N6-metil-adenin (m6A), 2-metiltio-N6-metil-adenin (ms2m6A), N6-izopenteniladenin (i6A), 2-metiltio-N6-izopentenil-adenin (ms2i6A), N6-(cis-hidroksiizopentenil)adenin (io6A), 2-metiltio-N6-(cis-hidroksiizopentenil)adenin (ms2io6A), N6-glicinilkarbamoil-adenin (g6A), N6-treonilkarbamoil-adenin (t6A), N6-metil-N6-treonilkarbamoil-adenin (m6t6A), 2-metiltio-N6treonilkarbamoil-adenin (ms2g6A), N6,N6-dimetil-adenin (m62A), N6-hidroksinorvalilkarbamoiladenin (hn6A), 2-metiltio-N6-hidroksinorvalilkarbamoil-adenin (ms2hn6A), N6-acetl-adenin (ac6A), 7-metil-adenin, 2-metiltio-adenin, 2-metoksi-adenin, N6,2'-O-dimetil-adenozin (m6Am), N6,N6,2'-O-trimetil-adenozin (m62Am), 1,2'-O-dimetil-adenozin (m1Am), 2-amino-N6-metil-purin, 1-tioadenin, 8-azido-adenin, N6-(19-amino-pentaoksanonadecil)-adenin, 2,8-dimetil-adenin, N6-formladenin, i N6-hidroksimetil-adenin.
[0328] U nekim primerima izvođenja, nukleobaza je alternativni guanin. Primeri nukleobaza i nukleozida koji imaju alternativni guanin uključuju inozin (I), 1-metil-inozin (m1I), viozin (imG), metilviozin (mimG), 4-demetil-viozin (imG-14), izoviozin (imG2), vibutozin (yW), peroksivibutozin (o2yW), hidroksivibutozin (OHyW), nedovoljno modifikovani hidroksivibutozin (OHyW<∗>), 7-deazaguanin, kveozin (Q), epoksikveozin (oQ), galaktozil-kveozin (galQ), manozil-kveozin (manQ), 7-cijano-7-deaza-guanin (preQ0), 7-aminometil-7-deaza-guanin (preQ1), arheozin (G+), 7-deaza-8-azaguanin, 6-tio-guanin, 6-tio -7-deaza-guanin, 6-tio-7-deaza-8-aza-guanin, 7-metil-guanin (m7G), 6-tio-7-metil-guanin, 7-metil-inozin, 6-metoksi-guanin, 1-metil-guanin (m1G), N2-metil-guanin (m2G), N2,N2-dimetil-guanin (m22G), N2,7-dimetil-guanin (m2,7G), N2,N2,7- dimetil-guanin (m2,2,7G), 8-okso-guanin, 7-metil-8-okso-guanin, 1-metil-6-tio-guanin, N2-metil-6-tio-guanin, N2,N2 -dimetil-6-tio-guanin, N2-metil-2'-O-metil-guanozin (m2Gm), N2,N2-dimetil-2'-O-metil-guanozin (m22Gm), 1-metil-2'-O-metil-guanozin (m1Gm), N2,7-dimetil-2'-O-metil-guanozin (m2,7Gm), 2'-O-metilinozin (Im), 1,2'-O-dimetil-inozin (m1Im), 1-tio-guanin i O-6-metil-guanin.
[0329] Alternativna nukleobaza nukleotida može nezavisno da bude purin, pirimidin, purinski ili pirimidinski analog. Na primer, nukleobaza može da bude alternativa adeninu, citozinu, guaninu, uracilu ili hipoksantinu. U drugom primeru izvođenja, nukleobaza takođe može da uključuje, na primer, prirodne i sintetičke derivate baze, uključujući pirazolo[3,4-d]pirimidine, 5-metilcitozin (5-me-C), 5-hidroksimetil citozin, ksantin, hipoksantin, 2-aminoadenin, 6-metil i druge alkil derivate adenina i guanina, 2-propil i druge alkil derivate adenina i guanina, 2-tiouracil, 2-tiotimin i 2-tiocitozin, 5-propinil uracil i citozin , 6-azo uracil, citozin i timin, 5-uracil (pseudouracil), 4-tiouracil, 8-halo (npr.8-bromo), 8-amino, 8-tiol, 8-tioalkil, 8-hidroksi i druge 8-supstituisane adenine i guanine, 5-halo, posebno 5-bromo, 5-trifluorometil i druge 5-supstituisane uracile i citozine, 7-metilguanin i 7-metiladenin, 8-azaguanin i 8-azaadenin, deazaguanin, 7-deazaguanin, 3-deazaadenin, deazaadenin, 7-deazaadenin, 3-deazaadenin, pirazolo[3,4-d]pirimidin, imidazo[1,5-a]1,3,5 triazinone, 9-deazapurine, imidazo[4,5-d]pirazine, tiazolo[4,5-d]pirimidine, pirazin-2-one, 1,2,4-triazin, piridazin; ili 1,3,5 triazin. Kada su nukleotidi prikazani upotrebom skraćenice A, G, C, T ili U, svako slovo se odnosi na reprezentativnu bazu i/ili njene derivate, npr. A uključuje adenin ili analoge adenina, npr. 7-deaza adenin).
Izmene na šećeru
[0330] Nukleozidi uključuju molekul šećera (npr., šećer sa 5 ili 6 ugljenika, kao što je pentoza, riboza, arabinoza, ksiloza, glukoza, galaktoza, ili njihov dezoksi derivat) u kombinaciji sa nukleobazom, dok su nukleotidi zapravo nukleozidi koji sadrže nukleozid i fosfatnu grupu ili alternativnu grupu (npr., boranofosfat, tiofosfat, selenofosfat, fosfonat, alkil grupa, amidat i glicerol). Nukleozid ili nukleotid mogu da pripadaju kanonskom tipu, npr., nukleozid ili nukleotid koji uključuje kanonsku nukleobazu, šećer, i, u slučaju nukleotida, fosfatnu grupu, ili može da bude alternativni nukleozid ili nukleotid koji uključuje jednu ili više alternativnih komponenti. Na primer, alternativni nukleozidi i nukleotidi mogu da budu izmenjeni na šećeru nukleozida ili nukleotida. U nekim primerima izvođenja, alternativni nukleozidi ili nukleotidi uključuju strukturu:
[0331] U svakoj od formula VI, VII, VIII, i IX,
svaki od m i n je nezavisno, ceo broj od 0 do 5,
svaki od U i U' nezavisno je O, S, N(R<U>)nu, ili C(R<U>)nu, gde je nu je ceo broj od 0 do 2 i svaki R<U>je, nezavisno, H, halo, ili izborno supstituisani alkil;
svaki od R<1ʹ>, R<2′>, R<1ʺ>, R<2ʺ>, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, i R<5>je, nezavisno, ukoliko je prisutan, H, halo, hidroksi, tiol, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkoksi, izborno supstituisani alkeniloksi, izborno supstituisani alkiniloksi, izborno supstituisani aminoalkoksi, izborno supstituisani alkoxialkoksi, izborno supstituisani hidroksialkoksi, izborno supstituisani amino, azido, izborno supstituisani aril, izborno supstituisani aminoalkil, izborno supstituisani aminoalkenil, izborno supstituisani aminoalkinil, ili je odsutan; pri čemu R<3>može da se kombinuje sa jednim ili više od R<1′>, R<1ʺ>, R<2ʹ>, R<2ʺ>, ili R<5>(npr., kombinacija R<1ʹ>i R<3>, kombinacija R<1ʺ>i R<3>, kombinacija R<2ʹ>i R<3>, kombinacija R<2ʺ>i R<3>, ili kombinacija R<5>i R<3>) kako bi zajedno obrazovali izborno supstituisani alkilen ili izborno supstituisani heteroalkilen i, uzeti zajedno sa ugljenicima za koje su vezani, obezbeđuju izborno supstituisani heterociklil (npr., biciklični, triciklični ili tetraciklični heterociklil); pri čemu R<5>može da se kombinuje sa jednim ili više od R<1ʹ>, R<1ʺ>, R<2ʹ>, ili R<2ʺ>(npr., kombinacija R<1ʹ>i R<5>, kombinacija R<1ʺ>i R<5>, kombinacija R<2ʹ>i R<5>, ili kombinacija R<2ʺ>i R<5>) kako bi zajedno obrazovali izborno supstituisani alkilen ili izborno supstituisani heteroalkilen i, uzeti zajedno sa ugljenicima za koje su vezani, obezbeđuju izborno supstituisani heterociklil (npr., biciklični, triciklični ili tetraciklični heterociklil); i pri čemu R<4>može da se kombinuje sa jednim ili više od R<1ʹ>, R<1ʺ>, R<2ʹ>, R<2ʺ>, R<3>, ili R<5>kako bi zajedno obrazovali izborno supstituisani alkilen ili izborno supstituisani heteroalkilen i, uzeti zajedno sa ugljenicima za koje su vezani, obezbeđuju izborno supstituisani heterociklil (npr., biciklični, triciklični ili tetraciklični heterociklil); svaki od mʹ i mʺ je, nezavisno, ceo broj od 0 do 3 (npr., od 0 do 2, od 0 do 1, od 1 do 3, ili od 1 do 2); svaki od Y<1>, Y<2>, i Y<3>, je, nezavisno, O, S, Se, —NR<N1>—, izborno supstituisani alkilen, ili izborno supstituisani heteroalkilen, pri čemu R<N1>je H, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani aril, ili je odsutan; svaki Y<4>je, nezavisno, H, hidroksi, tiol, boranil, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani alkenil, izborno supstituisani alkinil, izborno supstituisani alkoksi, izborno supstituisani alkeniloksi, izborno supstituisani alkiniloksi, izborno supstituisani tioalkoksi, izborno supstituisani alkoksialkoksi, ili izborno supstituisani amino;
svaki Y<5>je, nezavisno, O, S, Se, izborno supstituisani alkilen (npr., metilen), ili izborno supstituisani heteroalkilen; i
B je nukleobaza, bilo modifikovana ili nemodifikovana. U nekim primerima izvođenja, 2'-hidroksi grupa (OH) može da bude modifikovana ili zamenjena određenim brojem različitih supstituenata. Tipične supstitucije na poziciji 2' uključuju, ali nisu ograničene na H, azido, halo (npr., fluoro), izborno supstituisani C1-6alkil (npr., metil); izborno supstituisani C1-6alkoksi (npr., metoksi ili etoksi); izborno supstituisani C6-10ariloksi; izborno supstituisani C3-
8cikloalkil; izborno supstituisani C6-10aril-C1-6alkoksi, izborno supstituisani C1-12(heterociklil)oksi; šećer (npr., riboza, pentoza, ili bilo koji ovde opisan); polietilenglikol (PEG), -O(CH2CH2O)nCH2CH2OR, pri čemu, R je H ili izborno supstituisani alkil, i n je ceo broj od 0 do 20 (npr., od 0 do 4, od 0 do 8, od 0 do 10, od 0 do 16, od 1 do 4, od 1 do 8, od 1 do 10, od 1 do 16, od 1 do 20, od 2 do 4, od 2 do 8, od 2 do 10, od 2 do 16, od 2 do 20, od 4 do 8, od 4 do 10, od 4 do 16, i od 4 do 20); "zaključane" nukleinske kiseline (LNA) kod kojih je 2'-hidroksi povezan preko C1-6alkilenskog ili C1-6heteroalkilenskog mosta sa 4'-ugljenikom iste riboze, pri čemu, tipični mostovi uključuju metilenske, propilenske, etarske, ili amino mostove; gde je aminoalkil, kao što je ovde definisano; aminoalkoksi, kao što je ovde definisano; amino kao što je ovde definisano; i aminokiselina, kao što je ovde definisano.
[0332] U principu, RNK uključuje šećernu grupu riboze, koja predstavlja 5-člani prsten koji ima kiseonik. Tipično, neograničavajući alternativni nukleotidi uključuju zamenu kiseonika u ribozi (npr., sa S, Se, ili alkilenom, kao što je metilen ili etilen); dodavanje dvostruke veze (npr., da bi se zamenila riboza sa ciklopentenilom ili cikloheksenilom); kontrakciju prstena riboze (npr., da bi se obrazovao 4-člani prsten ciklobutana ili oksetana); ekspanziju prstena riboze (npr., da bi se obrazovao 6- ili 7-člani prsten koji ima dodatni ugljenik ili heteroatom, kao za anhidroheksitol, altritol, manitol, cikloheksanil, cikloheksenil, i morfolino (koji ima i fosforamidatni osnovni lanac)); multiciklične oblike (npr., triciklo i "otključane" oblike, kao što je glikol nukleinska kiselina (GNA) (npr., R-GNA ili S-GNA, gde je riboza zamenjena glikolnim jedinicama koje su vezane za fosfodiestarske veze), treoza nukleinska kiselina (TNA, gde je riboza zamenjena sa α-L-treofuranozilom-(3'→2')), i peptidna nukleinska kiselina (PNA, gde 2-amino-etil-glicinske veze menjaju ribozu i fosfodiestarski osnovni lanac).
[0333] U nekim primerima izvođenja, šećerna grupa sadrži jedan ili više ugljenika koji imaju suprotnu stereohemijsku konfiguraciju odgovarajućeg ugljenika u ribozi. Tako, polinukleotidni molekul može da uključuje nukleotide koji kao šećer sadrže, npr., arabinozu ili L-ribozu.
[0334] U nekim primerima izvođenja, polinukleotid uključuje najmanje jedan nukleozid pri čemu je šećer L-riboza, 2'-O-metil-riboza, 2'-fluoro-riboza, arabinoza, heksitol, LNA, ili PNA.
Izmene na internukleozidnim vezama
[0335] Alternativni nukleotidi mogu da budu izmenjeni na internukleozidnim vezama (npr., fosfatni osnovni lanac). U ovom dokumentu, u kontekstu polinukleotidnog osnovnog lanca, fraze "fosfat" i "fosfodiestar" se koriste naizmenično. Fosfatne grupe osnovnog lanca mogu da se izmene tako što se jedan ili više atoma kiseonika zamene drugačijim supstituentom.
[0336] Alternativni nukleotidi mogu da uključuju potpunu zamenu neizmenjenog fosfatnog fragmenta drugom internukleozidnom vezom, kao što je ovde opisano. Primeri alternativnih fosfatnih grupa uključuju, ali nisu ograničene na, fosforotioat, fosforoselenate, boranofosfate, boranofosfatne estre, vodonik fosfonate, fosforamidate, fosforodiamidate, alkil ili aril fosfonate, i fosfotriestre. Kod fosforoditioata su oba nevezujuća kiseonika zamenjena sumporom. Fosfatni linker može takođe da bude izmenjen tako što se vezujući kiseonik zameni azotom (premošćeni fosforamidati), sumporom (premošćeni fosforotioati) i ugljenikom (premošćeni metilen-fosfonati).
[0337] Alternativni nukleozidi i nukleotidi mogu da uključuju zamenu jednog ili više nepremošćujućih kiseonika boranskim fragmentom (BH3), sumporom (tio), metilom, etilom, i/ili metoksi. Kao neograničavajući primer, dva nepremošćujuća kiseonika na istoj poziciji (npr., alfa (α), beta (β) ili gama (γ) pozicija) mogu da budu zamenjena sumporom (tio) i metoksi grupom.
[0338] Zamena jednog ili više atoma kiseonika na α poziciji fosfatnog fragmenta (npr., α-tio fosfat) obezbeđena je kako bi obezbedila stabilnost (kao što je otpornost na egzonukleaze i endonukleaze) RNK i DNK putem neprirodnih fosforotioatnih veza osnovnog lanca. Fosforotioatna DNK i RNK imaju povećanu otpornost na nukleaze i usled toga duži poluživot u ćelijskom okruženju.
[0339] Ovde su opisane i druge internukleozidne veze koje mogu da se upotrebljavaju u skladu sa predmetnim prikazom uključujući internukleozidne veze koje ne sadrže atom fosfora.
Unutrašnja mesta za ulazak u ribozome
[0340] Polinukleotidi mogu da sadrže unutrašnja mesta za ulazak u ribozome (IRES). IRES može da deluje kao pojedinačno mesto za vezivanje ribozoma, ili može da služi kao jedno od više mesta za vezivanje ribozoma u molekulu iRNK. Polinukleotid koji sadrži više od jednog funkcionalnog mesta za vezivanje ribozoma može da kodira nekoliko peptida ili polipeptida koje ribozomi nezavisno translatiraju (npr., multicistronska iRNK). Kada polinukleotidi imaju IRES, dodatno je izborno obezbeđen drugi region koji može da se translatira. Primeri IRES sekvenci koje mogu da se koriste u skladu sa predmetnim prikazom uključuju bez ograničenja, sekvence iz pikornavirusa (npr., FMDV), Pestivirusa (CFFV), polio virusa (PV), virusa encefalomiokarditisa (ECMV), virusa slinavke i šapa (FMDV), virusa hepatitisa C (HCV), klasičnih virusa svinjske kuge (CSFV), virusa leukemije miša (MLV), virusa imunodeficijencije majmuna (SIV) ili virusa paralize cvrčka (CrPV).
Struktura 5'-kape
[0341] Polinukleotid (npr., iRNK) može da uključuje strukturu 5’-kape. Struktura 5’-kape polinukleotida je uključena u eksport iz jedra i pojačanu stabilnost polinukleotida i vezuje protein koji se vezuje za iRNK kapu (CBP), a koji je odgovoran za stabilnost polinukleotida u ćeliji i translacionu kompetentnost putem povezivanja CBP sa poli-A vezujućim proteinom kako bi se obrazovale zrele ciklične vrste iRNK. Kapa dalje pomaže u uklanjanju 5'-proksimalnih introna tokom splajsovanja iRNK.
[0342] Endogeni polinukleotidni molekuli mogu da budu sa kapom na 5'-kraju i da daju 5'-ppp-5'-trifosfatnu vezu između terminalnog guanozinskog ostatka u kapi i 5'-terminalnog transkribovanog sens nukleotida u polinukleotidu. Ova 5'-guanilatna kapa može zatim da se metiluje kako bi dala N7-metil-guanilatni ostatak. Ribozni šećeri terminalnih i/ili anteterminalnih transkribovanih nukleotida na 5' kraju polinukleotida mogu izborno da budu i 2'-O-metilovani. Uklanjanje 5'-kape hidrolizom i isecanjem strukture guanilatne kape može da obeleži polinukleotidni molekul, kao što je molekul iRNK, kao ciljni molekul za degradaciju.
[0343] Izmene na polinukleotidima mogu da generišu strukturu kape koja ne može da hidrolizuje čime se sprečava uklanjanje kape i tako povećava poluživot polinukleotida. Usled toga što hidroliza strukture kape zahteva razgradnju 5'-ppp-5' fosforodiestarskih veza, alternativni nukleotidi mogu da se koriste tokom reakcije u kojoj se postavlja kapa. Na primer, enzim vakcinije za dodavanje kape, kompanije New England Biolabs (Ipswich, MA) može da se koristi sa α-tio-guanozinskim nukleotidima u skladu sa uputstvima proizvođača kako bi se formirala fosforotioatna veza u 5'-ppp-5' kapi. Moguće je koristiti i dodatne alternativne guanozinske nukleotide kao što su α-metil-fosfonatni i seleno-fosfatni nukleotidi.
[0344] Dodatne izmene uključuju, ali nisu ograničene na, 2'-O-metilaciju riboznih šećera 5'-terminalnih i/ili 5'-anteterminalnih nukleotida u polinukleotidu (kao što je prethodno pomenuto), na 2'-hidroksi grupi šećera. Više različitih struktura 5'-kape može da se koristi za obrazovanje 5'-kape polinukleotida kao što je molekul iRNK.
[0345] Strukture 5'-kape uključuju strukture opisane u objavama međunarodnih patenata br. WO2008127688, WO 2008016473, i WO 2011015347.
[0346] Analozi kape, koji se u ovom dokumentu označavaju i kao sintetički analozi kape, hemijski analozi kape, ili strukturni ili funkcionalni analozi kape, razlikuju se od prirodnih (tj., endogenih, divljeg tipa, ili fizioloških) 5'-kapa po svojoj hemijskoj strukturi, zadržavajući pritom funkciju kape.
Analozi kape mogu da budu hemijski (tj., neenzimski) ili enzimski sintetisani i/vezani za polinukleotid.
[0347] Na primer, kapa u vidu anti-reverznog analoga kape (ARCA) sadrži dva guanozina povezana 5'-5'-trifosfatnom grupom, pri čemu jedan guanozin sadrži N7-metil grupu kao i 3'-O-metil grupu (tj., N7,3'-O-dimetil-guanozin-5'-trifosfat-5'-guanozin, m<7>G-3'mppp-G, koji ekvivalentno može da se označava kao 3' O-Me-m7G(5')ppp(5')G). 3'-O atom drugog, neizmenjenog guanozina vezuje se za 5'-terminalni nukleotid polinukleotida sa kapom (npr., iRNK). N7- i 3'-O-metilovani guanozin obezbeđuje terminalni fragment polinukleotida sa kapom (npr., iRNK).
[0348] Druga tipična kapa je mCAP, koja je slična ARCA kapi ali ima 2'-O-metil grupu na guanozinu (tj., N7,2'-O-dimetil-guanozin-5'-trifosfat-5'-guanozin, m<7>Gm-ppp-G).
[0349] Kapa može da bude dinukleotidni analog kape. Kao neograničavajući primer, dinukleotidni analog kape može da bude modifikovan na različitim pozicijama fosfata pomoću boranofosfatne grupe ili fosforoselenoatne grupe kao što su dinukleotidni analozi kape opisani u SAD patentu br.8,519,110.
[0350] Alternativno, analog kape može da bude N7-(4-hlorofenoksietil) supstituisani analog dinukleotidne kape poznat u tehnici i/ili ovde opisan. Neograničavajući primeri analoga N7-(4-hlorofenoksietil) supstituisanih dinukleotidnih kapa uključuju analog kape N7-(4-hlorofenoksietil)-G(5')ppp(5')G i N7-(4-hlorofenoksietil)-m3'-OG(5')ppp(5')G (videti, npr. različite analoge kapa i metode sinteze analoga kape opisane u Kore et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry 201321:4570-4574). U drugim slučajevima, analog kape koristan u polinukleotidima prema predmetnom prikazu je 4-hloro/bromofenoksietil analog.
[0351] Dok analozi kape omogućavaju istovremeno dodavanje kape polinukleotidu u reakciji transkripcije in vitro, do 20% transkripata ostaje bez kape. Ovo, kao i strukturne razlike analoga kape od endogenih struktura 5'-kape polinukleotida proizvedenih endogenom, ćelijskom transkripcionom mašinerijom, mogu da dovedu do smanjene translacione kompetencije i smanjene ćelijske stabilnosti.
[0352] Alternativni polinukleotidima kapa može da se doda i posle transkripcije, korišćenjem enzima, da bi se generisale autentičnije strukture5'-kape. Kako se ovde koristi, izraz "autentičniji" se odnosi na osobinu koja blisko odražava ili oponaša, bilo strukturno ili funkcionalno, endogenu ili karakteristiku divljeg tipa. To jest, "autentičnija" karakteristika bolje reprezentuje endogenu, divljeg tipa, prirodnu ili fiziološku ćelijsku funkciju i/ili strukturu u poređenju sa sintetičkim karakteristikama ili analozima prethodnog stanja tehnike, ili koja nadmašuje odgovarajuću endogenu, divljeg-tipa, prirodnu ili fiziološku karakteristiku u jednom ili više aspekata. Neograničavajući primeri autentičnijih struktura 5'-kape korisnih u polinukleotidima ovog prikaza su oni koji, između ostalog, imaju poboljšano vezivanje proteina koji vezuju kapu, produženi poluživot, smanjenu osetljivost na 5'-endonukleaze i/ili smanjeno uklanjanje 5'-kape, u poređenju sa sintetičkim strukturama 5'-kape poznatim u tehnici (ili sa divljim tipom, prirodnom ili fiziološkom strukturom5'-kape). Na primer, rekombinantni enzim vakcinije za dodavanje kape i rekombinantni enzim 2'-O-metiltransferaza mogu da stvore kanonsku 5'-5'-trifosfatnu vezu između 5'-terminalnog nukleotida polinukleotida i guanozinskog nukleotida kape gde guanozin kape sadrži N7-metilaciju i 5'-terminalni nukleotid polinukleotida sadrži 2'-O-metil. Takva struktura se naziva Cap1 struktura. Ova kapa rezultira višom translacionom kompetentnošću, ćelijskom stabilnošću i smanjenom aktivacijom ćelijskih proinflamatornih citokina, u poređenju, na primer, sa drugim analognim strukturama 5' kape poznatim u tehnici. Druge primerne strukture kape uključuju 7mG(5')ppp(5')N,pN2p (Cap 0), 7mG(5')ppp(5')N1mpNp (Cap 1), 7mG(5')-ppp(5')N1mpN2mp (Cap 2), i m(7)Gpppm(3)(6,6,2')Apm(2')Apm(2')Cpm(2)(3,2')Up (Cap 4).
[0353] Usled toga što alternativni polinukleotidi mogu da dobiju kapu nakon translacije, i zbog toga što je ovaj proces efikasniji, blizu 100% alternativnih polinukleotida može da bude sa kapom. Ovo je u suprotnosti sa ~80%, kada se analog kape vezuje sa polinukleotidom u toku reakcije transkripcije in vitro.
[0354] 5'-terminalne kape mogu da uključuju endogene kape ili analoge kape. 5'-terminalna kapa može da uključuje guanozinski analog. Korisni guanozinski analozi uključuju inozin, N1-metilguanozin, 2'-fluoro-guanozin, 7-deaza-guanozin, 8-okso-guanozin, 2-amino-guanozin, LNA-guanozin, i 2-azido-guanozin.
[0355] U nekim slučajevima, polinukleotid sadrži modifikovanu 5'-kapu. Modifikacija na 5'-kapi može da poveća stabilnost polinukleotida, da poveća poluživot polinukleotida, i mogla bi da poveća efikasnost translacije polinukleotida. Modifikovana 5'-kapa može da uključuje, ali nije ograničena na, jednu ili više sledećih modifikacija: modifikaciju na 2'- i/ili 3'-poziciji guanozin trifosfata (GTP) sa kapom, zamenu kiseonika u prstenu šećera (koja proizvodi karbociklični prsten) metilenskim fragmentom (CH2), modifikaciju na fragmentu trifosfatnog mosta u strukturi kape, ili modifikaciju na feagmentu nukleobaze (G).
5'-UTR regioni
[0356] 5'-UTR može da bude obezbeđen kao bočni region za polinukleotide (npr., iRNK molekuli).
5'-UTR može da bude homolog ili heterolog u odnosu na kodirajući region koji se nalazi u polinukleotidu. U bočni region može da bude uključeno više 5'-UTR regiona i oni mogu da imaju istu ili različite sekvence. Bilo koji udeo bočnih regiona, uključujući nijedan, može da bude optimizovan po pitanju kodona i bilo koji može nezavisno da sadrži jednu ili više različitih strukturnih ili hemijskih izmena, pre i/ili posle optimizacije kodona.
[0357] U tabeli 21 u SAD privremenoj patentnoj prijavi br. 61/775,509, i u tabeli 21 i u tabeli 22 u SAD privremenoj patentnoj prijavi br.61/829,372, koje su ovde obuhvaćene referencom, prikazana je lista start i stop mesta u alternativnim polinukleotidima (npr., iRNK). U tabeli 21 svaki 5'-UTR (5'-UTR-005 do 5'-UTR 68511) identifikovan je svojim start i stop mestom u odnosu na svoj nativni transkript ili transkript (homologi) divljeg tipa (ENST; identifikacija koja se koristi u ENSEMBL bazi podataka).
[0358] Kako bi se jedno ili više svojstava polinukleotida (npr., iRNK) izmenilo, 5'-UTR regioni koji su heterologi u odnosu na kodirajući region alternativnog polinukleotida (npr., iRNK) mogu da se dobiju inženjeringom. Polinukleotidi (npr., iRNK) mogu zatim da se primene na ćelije, tkiva ili organizme i ishodi kao što je nivo proteina, lokalizacija, i/ili poluživot mogu da se mere kako bi se procenili korisni efekti koje heterologi 5'-UTR može da ima na alternativne polinukleotide (iRNK). Mogu da se koriste varijante 5'-UTR regiona kod kojih su jedan ili više nukleotida dodati ili uklonjeni sa krajeva, uključujući A, T, C ili G. 5'-UTR regioni takođe mogu da budu optimizovani kad su u pitanju kodoni, ili izmenjeni na bilo koji ovde opisani način.
5'-UTR regioni, 3'-UTR regioni, i elementi za pojačavanje translacije (TEE elementi)
[0359] 5ʹ-UTR elementi polinukleotida (npr., iRNK) mogu da uključuju najmanje jedan element za pojačavanje translacije. Izraz "element za pojačavanje translacije" odnosi se na sekvence koje povećavaju količinu polipeptida ili proteina koji se proizvodi sa polinukleotide. Kao neograničavajući primer, TEE može da bude smešten između transkripcionog promotora i start kodona. Polinukleotidi (npr., iRNK) sa najmanje jednim TEE u 5ʹ-UTR mogu da uključuju strukturu kape na 5ʹ-UTR. Dalje, najmanje jedan TEE može da bude smešten u 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) koji podležu translaciji koja je zavisna od kape ili nezavisna od kape.
[0360] U jednom aspektu, elementi TEE su konzervisani elementi u UTR koji mogu da pospešuju translacionu aktivnost polinukleotida kao što su, ali bez ograničenja, translacija zavisna od kape ili translacija nezavisna od kape. Konzervisanost ovih sekvenci su ranije pokazali autori Panek et al. (Nucleic Acids Research, 2013, 1-10) za 14 vrsta, uključujući ljude.
[0361] U jednom neograničavajućem primeru, poznati TEE elementi mogu da budu u 5'-liderskoj sekvenci homeodomenskog proteina Gtx (Chappell et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:9590-9594, 2004).
[0362] U još jednom neograničavajućem primeru, TEE su opisani u objavama SAD patenata br.
2009/0226470 i 2013/0177581, objavama međunarodnih patenata br. WO2009/075886, WO2012/009644, i WO1999/024595, SAD patentima br.6,310,197 i 6,849,405.
[0363] U još jednom neograničavajućem primeru, TEE može da bude unutrašnje mesto za ulazak u ribozom (IRES), HCV-IRES ili IRES element kao što su, ali bez ograničenja, oni opisani u SAD patentu br. 7,468,275, objavama SAD patenata br. 2007/0048776 i 2011/0124100 i objavama međunarodnih patenata br. WO2007/025008 i WO2001/055369. Elementi IRES mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na sekvence Gtx (npr., Gtx9-nt, Gtx8-nt, Gtx7-nt) opisane kod Chappell et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:9590-9594, 2004) i Zhou et al. (PNAS 102:6273-6278, 2005) i u objavama SAD patenata br. 2007/0048776 i 2011/0124100 i objavi međunarodnog patenta br. WO2007/025008.
[0364] "Polinukleotidi koji pojačavaju translaciju" su polinukleotidi koji uključuju jedan ili više specifičnih TEE koji su ovde ilustrovani i/ili opisani u stanju tehnike (videti npr., SAD patente br.
6,310,197, 6,849,405, 7,456,273, 7,183,395, objave SAD patenata br.20090/226470, 2007/0048776, 2011/0124100, 2009/0093049, 2013/0177581, objave međunarodnih patenata br. WO2009/075886,WO2007/025008, WO2012/009644, WO2001/055371, WO1999/024595, i evropske patente br.2610341 i 2610340) ili njihove varijante, homologe ili funkcionalne derivate. U polinukleotidu (npr., iRNK) može da bude prisutna jedna ili više kopija specifičnog TEE. TEE u polinukleotidima koji pojačavaju translaciju mogu da budu organizovani u jednom ili više segmenata sekvence. Segment sekvence može da nosi jedan ili više ovde ilustrovanih specifičnih TEE, pri čemu je svaki TEE prisutan u jednoj ili više kopija. Kada je više segmenata sekvence prisutno u polinukleotidu za pojačavanje translacije, oni mogu da budu homogeni ili heterogeni. Prema tome, višestruki segmenti sekvence u polinukleotidu za pojačavanje translacije mogu da nose identične ili različite vrste ovde ilustrovanih specifičnih TEE, identičan ili različit broj kopija svakog od specifičnih TEE, i/ili identičnu ili različitu organizaciju TEE u svakom segmentu sekvence.
[0365] Polinukleotid (npr., iRNK) može da uključuje najmanje jedan TEE koji je opisan u objavama međunarodnih patenata br. WO1999/024595, WO2012/009644, WO2009/075886, WO2007/025008, WO1999/024595, objavama evropskih patenata br.2610341 i 2610340, SAD patentima br.6,310,197, 6,849,405, 7,456,273, 7,183,395, i objavama SAD patenata br. 2009/0226470, 2011/0124100, 2007/0048776, 2009/0093049, i 2013/0177581. TEE može da se nalazi u 5'-UTR polinukleotida (npr., iRNK).
[0366] Polinukleotid (npr., iRNK) može da uključuje najmanje jedan TEE koji ima najmanje 50%, najmanje 55%, najmanje 60%, najmanje 65%, najmanje 70%, najmanje 75%, najmanje 80%, najmanje 85%, najmanje 90%, najmanje 95% ili najmanje 99% identičnosti sa TEE opisanim u objavama SAD patenata br.2009/0226470, 2007/0048776, 2013/0177581 i 2011/0124100, objavama međunarodnih patenata br. WO1999/024595, WO2012/009644, WO2009/075886 i WO2007/025008, objavama evropskih patenata br. 2610341 i 2610340, SAD patentima br. 6,310,197, 6,849,405, 7,456,273, 7,183,395.
[0367] 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) može da uključuje najmanje 1, najmanje 2, najmanje 3, najmanje 4, najmanje 5, najmanje 6, najmanje 7, najmanje 8, najmanje 9, najmanje 10, najmanje 11, najmanje 12, najmanje 13, najmanje 14, najmanje 15, najmanje 16, najmanje 17, najmanje 18 najmanje 19, najmanje 20, najmanje 21, najmanje 22, najmanje 23, najmanje 24, najmanje 25, najmanje 30, najmanje 35, najmanje 40, najmanje 45, najmanje 50, najmanje 55 ili više od 60 TEE sekvenci. Sekvence TEE u 5'-UTR polinukleotida (npr., iRNK) mogu da budu iste ili različite sekvence TEE. Sekvence TEE mogu da ispoljavaju obrazac kao što je ABABAB, AABBAABBAABB, ili ABCABCABC, ili njihove varijante, ponovljene jednom, dva puta, ili više od tri puta. U ovim obrascima, svako slovo, A, B, ili C predstavlja sekvencu TEE koja se razlikuje na nivou nukleotida.
[0368] U nekim slučajevima, 5ʹ-UTR može da uključuje spejser za razdvajanje dve sekvence TEE. Kao neograničavajući primer, spejser može da bude spejser od 15 nukleotida i/ili drugi spejseri poznati u stanju tehnike. Kao još jedan neograničavajući primer, 5ʹ-UTR može da uključuje modul sekvenca TEE-spejser ponovljen najmanje jednom, najmanje dva puta, najmanje 3 puta, najmanje 4 puta, najmanje 5 puta, najmanje 6 puta, najmanje 7 puta, najmanje 8 puta, najmanje 9 puta, ili više od 9 puta u 5'-UTR.
[0369] U drugim slučajevima, spejser koji razdvaja dve sekvence TEE može da uključuje druge sekvence poznate u stanju tehnike koje mogu da regulišu translaciju polinukleotida (npr., iRNK) predmetnog prikaza kao što su, ali bez ograničenja, sekvence miR (npr., vezujuća mesta miR i region "semena" miR). Kao neograničavajući primer, svaki spejser upotrebljen za razdvajanje dve sekvence TEE može da uključuje drugačiju sekvencu miR ili komponentu sekvence miR (npr., region "semena" sekvence miR).
[0370] U nekim slučajevima, TEE u 5'-UTR polinukleotida (npr., iRNK) može da uključuje najmanje 5%, najmanje 10%, najmanje 15%, najmanje 20%, najmanje 25%, najmanje 30%, najmanje 35%, najmanje 40%, najmanje 45%, najmanje 50%, najmanje 55%, najmanje 60%, najmanje 65%, najmanje 70%, najmanje 75%, najmanje 80%, najmanje 85%, najmanje 90%, najmanje 95%, najmanje 99% ili više od 99% sekvence TEE opisane u objavama SAD patenata br.2009/0226470, 2007/0048776, 2013/0177581 i 2011/0124100, objavama međunarodnih patenata br. WO1999/024595, WO2012/009644, WO2009/075886 i WO2007/025008, objavama evropskih patenata br. 2610341 i 2610340, i SAD patentima br.6,310,197, 6,849,405, 7,456,273, i 7,183,395. U još jednom primeru izvođenja, TEE u 5'-UTR polinukleotida (npr., iRNK) predmetnog prikaza može da uključuje fragment od 5-30 nukleotida, fragment od 5-25 nukleotida, fragment od 5-20 nukleotida, fragment od 5-15 nukleotida, fragment od 5-10 nukleotida sekvence TEE opisane u objavama SAD patenata br.2009/0226470, 2007/0048776, 2013/0177581 i 2011/0124100, objavama međunarodnih patenata br. WO1999/024595, WO2012/009644, WO2009/075886 i WO2007/025008, objavama evropskih patenata br. 2610341 i 2610340, i SAD patentima br. 6,310,197, 6,849,405, 7,456,273, i 7,183,395.
[0371] U nekim slučajevima, TEE u 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) predmetnog prikaza može da uključuje najmanje 5%, najmanje 10%, najmanje 15%, najmanje 20%, najmanje 25%, najmanje 30%, najmanje 35%, najmanje 40%, najmanje 45%, najmanje 50%, najmanje 55%, najmanje 60%, najmanje 65%, najmanje 70%, najmanje 75%, najmanje 80%, najmanje 85%, najmanje 90%, najmanje 95%, najmanje 99% ili više od 99% sekvenci TEE opisanih u Chappell et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:9590-9594, 2004) i Zhou et al. (PNAS 102:6273-6278, 2005), u dopunskoj tabeli 1 i u dopunskoj tabeli 2 prikazanim kod Wellensiek et al (Genome-wide profiling of human capindependent translation-enhancing elements, Nature Methods, 2013; DOI:10.1038/NMETH.2522). U još jednom primeru izvođenja, TEE u 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) predmetnog prikaza može da uključuje fragment od 5-30 nukleotida, fragment od 5-25 nukleotida, fragment od 5-20 nukleotida, fragment od 5-15 nukleotida, fragment od 5-10 nukleotida iz sekvenci TEE opisanih u Chappell et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:9590-9594, 2004) i Zhou et al. (PNAS 102:6273-6278, 2005), u dopunskoj tabeli 1 i u dopunskoj tabeli 2 prikazanim kod Wellensiek et al (Genome-wide profiling of human cap-independent translation-enhancing elements, Nature Methods, 2013; DOI:10.1038/NMETH.2522).
[0372] U nekim slučajevima, TEE upotrebljen u 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) je IRES sekvenca kao što su, ali bez ograničenja, one opisane u SAD patentu br. 7,468,275 i objavi međunarodnog patenta br. WO2001/055369.
[0373] U nekim slučajevima, TEE upotrebljen u 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) može da bude identifikovan postupcima opisanim u objavama SAD patenata br. 2007/0048776 i 2011/0124100 i objavama međunarodnih patenata br. WO2007/025008 i WO2012/009644.
[0374] U nekim slučajevima, TEE upotrebljen u 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) predmetnog prikaza može da bude transkripcioni regulatorni element opisan u SAD patentima br. 7,456,273 i 7,183,395, objavi SAD patenta br. 2009/0093049, i međunarodnoj objavi br. WO2001/055371. Transkripcioni regulatorni elementi mogu da budu identifikovani postupcima poznatim u stanju tehnike, kao što su, ali bez ograničenja, postupci opisani u SAD patentima br.7,456,273 i 7,183,395, objavi SAD patenta br.2009/0093049, i međunarodnoj objavi br. WO2001/055371.
[0375] U drugim slučajevima, TEE upotrebljen u 5ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) je polinukleotid ili njegov deo kao što je opisano u SAD patentima br.7,456,273 i 7,183,395, objavi SAD patenta br.
2009/0093049, i međunarodnoj objavi br. WO2001/055371.
[0376] 5ʹ-UTR koji uključuje najmanje jedan ovde opisani TEE može da bude uključen u monocistronsku sekvencu kao što je, ali bez ograničenja, vektorski sistem ili polinukleotidni vektor. Kao neograničavajući primer, vektorski sistemi i polinukleotidni vektori mogu da uključuju one opisane u SAD patentima br. 7,456,273 i 7,183,395, objavama SAD patenata br. 2007/0048776, 2009/0093049 i 2011/0124100, i objavama međunarodnih patenata br. WO2007/025008 i WO2001/055371.
[0377] Ovde opisani TEE mogu da se nalaze u 5ʹ-UTR i/ili 3ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK). TEE koji se nalaze u 3ʹ-UTR mogu da budu isti i/ili različiti od TEE koji se nalaze u i/ili su opisani za uključivanje u 5ʹ-UTR.
[0378] U nekim slučajevima, 3ʹ-UTR polinukleotida (npr., iRNK) može da uključuje najmanje 1, najmanje 2, najmanje 3, najmanje 4, najmanje 5, najmanje 6, najmanje 7, najmanje 8, najmanje 9, najmanje 10, najmanje 11, najmanje 12, najmanje 13, najmanje 14, najmanje 15, najmanje 16, najmanje 17, najmanje 18 najmanje 19, najmanje 20, najmanje 21, najmanje 22, najmanje 23, najmanje 24, najmanje 25, najmanje 30, najmanje 35, najmanje 40, najmanje 45, najmanje 50, najmanje 55 ili više od 60 sekvenci TEE. Sekvence TEE u 3'-UTR polinukleotida (npr., iRNK) predmetnog prikaza mogu da budu iste ili različite sekvence TEE. Sekvence TEE mogu da ispoljavaju obrazac kao što je ABABAB, AABBAABBAABB, ili ABCABCABC, ili njihove varijante, ponovljene jednom, dva puta, ili više od tri puta. U ovim obrascima, svako slovo, A, B, ili C predstavlja sekvencu TEE koja se razlikuje na nukleotidnom nivou.
[0379] U jednom slučaju, 3ʹ-UTR može da uključuje spejser za razdvajanje dve sekvence TEE. Kao neograničavajući primer, spejser može da bude spejser od 15 nukleotida i/ili drugi spejseri poznati u stanju tehnike. Kao još jedan neograničavajući primer, 3ʹ-UTR može da uključuje modul sekvenca TEE-spejser ponovljen najmanje jednom, najmanje dva puta, najmanje 3 puta, najmanje 4 puta, najmanje 5 puta, najmanje 6 puta, najmanje 7 puta, najmanje 8 puta, najmanje 9 puta, ili više od 9 puta u 3'-UTR.
[0380] U drugim slučajevima, spejser koji razdvaja dve sekvence TEE može da uključuje druge sekvence poznate u stanju tehnike koje mogu da regulišu translaciju polinukleotida (npr., iRNK) predmetnog prikaza kao što su, ali bez ograničenja, sekvence miR (npr., vezujuća mesta miR i region "semena" miR). Kao neograničavajući primer, svaki spejser upotrebljen za razdvajanje dve sekvence TEE može da uključuje drugačiju sekvencu miR ili komponentu sekvence miR (npr., region "semena" sekvence miR).
[0381] U drugim slučajevima, uključivanje sekvence miR i/ili sekvence TEE menja oblik regiona drška-petlja koji može da poveća i/ili smanji translaciju. (videti npr., Kedde et al. A Pumilio-induced RNA structure switch in p27-3'UTR controls miR-221 and miR-22 accessibility. Nature Cell Biology.
2010).
Strukture drška-petlja
[0382] Polinukleotidi (npr., iRNK) mogu da uključuju strukture drška-petlja kao što je, ali bez ograničenja, histonska struktura drška-petlja. Struktura drška-petlja može da bude nukleotidna sekvenca dugačka oko 25 ili oko 26 nukleotida kao što su, ali bez ograničenja, one opisane u objavi međunarodnog patenta br. WO2013/103659. Histonska struktura drška-petlja može da bude locirana 3' u odnosu na kodirajući region (npr., na 3'-terminusu kodirajućeg regiona). Kao neograničavajući primer, struktura drška-petlja može da bude locirana na 3 ' kraju ovde opisanog polinukleotida. U nekim slučajevima, polinukleotid (npr., iRNK) uključuje više od jedne strukture drška-petlja (npr., dve strukture drška-petlja). Primeri sekvenci struktura drška-petlja su opisani u objavama međunarodnih patenata br. WO2012/019780 i WO201502667. U nekim slučajevima, polinukleotid uključuje sekvencu strukture drška-petlja CAAAGGCTCTTTTCAGAGCCACCA (SEQ ID NO: 1). u drugim slučajevima, polinukleotid uključuje sekvencu struktura drška-petlja CAAAGGCUCUUUUCAGAGCCACCA (SEQ ID NO: 2).
[0383] Struktura drška-petlja može da se nalazi u drugom terminalnom regionu polinukleotida. Kao neograničavajući primer, struktura drška-petlja može da se nalazi u netranslatiranom regionu (npr., 3ʹ-UTR) u drugom terminalnom regionu.
[0384] U nekim slučajevima, polinukleotid kao što je, ali bez ograničenja iRNK, koji uključuje histonsku strukturu drška-petlja može da bude stabilizovan dodavanjem 3'-stabilizujućeg regiona (npr., 3'-stabilizujućeg regiona koji uključuje najmanje jedan nukleozid koji dovodi do terminacije lanca). Bez želje za vezivanjem za neku određenu teoriju, dodavanje najmanje jednog nukleozida koji dovodi do terminacije lanca može da uspori razgradnju polinukleotida i time produži poluživot polinukleotida.
[0385] U drugim slučajevima, polinukleotid kao što je, ali bez ograničenja iRNK, koji uključuje histonsku strukturu drška-petlja može da bude stabilizovan izmenom u 3 '-regionu polinukleotida koja može da spreči i/ili inhibira dodavanje oligio(U) (videti npr., objavu međunarodnog patenta br. WO2013/103659).
[0386] U drugim slučajevima, polinukleotid kao što je, ali bez ograničenja iRNK, koji uključuje histonsku strukturu drška-petlja može da bude stabilizovan dodavanjem oligonukleotida koji se završava 3ʹ-dezoksinukleozidom, 2ʹ,3ʹ-didezoksinukleozidom 3ʹ-O-metilnukleozidima, 3ʹ-O-etilnukleozidima, 3ʹ-arabinozidima, i drugim alternativnim nukleozidima koji su poznati u stanju tehnike i/ili ovde opisani.
[0387] U nekim slučajevima, polinukleotidi predmetnog prikaza mogu da uključuju histonsku strukturu drška-petlja, poli-A region, i/ili strukturu 5ʹ-kape. Histonska struktura drška-petlja može da se nalazi ispred i/ili iza poli-A regiona. Polinukleotidi koji uključuju sekvencu histonske strukture drška-petlja i poli-A regiona mogu da uključuju ovde opisani nukleozid koji dovodi do terminacije lanca.
[0388] U drugim slučajevima, polinukleotidi predmetnog prikaza mogu da uključuju histonsku strukturu drška-petlja i strukturu 5'-kape. Struktura 5'-kape može da uključuje, ali nije ograničena na one koje su ovde opisane i/ili poznate u stanju tehnike.
[0389] U nekim slučajevima, konzervisani region drška-petlja može da uključuje ovde opisanu sekvencu miR. Kao neograničavajući primer, region drška-petlja može da uključuje sekvencu regiona "semena" ovde opisane sekvence miR. U još jednom neograničavajućem primeru, region drška-petlja može da uključuje sekvencu region "semena" miR-122.
[0390] U određenim slučajevima, konzervisani region drška-petlja može da uključuje ovde opisanu sekvencu miR, i može takođe da uključuje sekvencu TEE.
[0391] U nekim slučajevima, uključivanje sekvence miR i/ili sekvence TEE menja oblik regiona drška-petlja koji može da poveća i/ili smanji translaciju. (videti npr., Kedde et al. A Pumilio-induced RNA structure switch in p27-3'UTR controls miR-221 and miR-22 accessibility. Nature Cell Biology.
2010).
[0392] Polinukleotidi mogu da uključuju najmanje jedan histonski region drška-petlja i poli-A region ili poliadenilacioni signal. Neograničavajući primeri polinukleotidnih sekvenci koje kodiraju najmanje jedan histonski region drška-petlja i poli-A region ili poliadenilacioni signal opisani su u objavi međunarodnog patenta br. WO2013/120497, WO2013/120629, WO2013/120500, WO2013/120627, WO2013/120498, WO2013/120626, WO2013/120499 i WO2013/120628. U nekim slučajevima, polinukleotid koji kodira histonski region drška-petlja i poli-A region ili poliadenilacioni signal može da kodira antigen patogena ili njegov fragment kao što je polinukleotidna sekvenca opisana u objavi međunarodnog patenta br WO2013/120499 i WO2013/120628. U drugim slučajevima, polinukleotid koji kodira histonski region drška-petlja i poli-A region ili poliadenilacioni signal može da kodira terapijski protein kao što su polinukleotidne sekvence opisane u objavi međunarodnog patenta br WO2013/120497 i WO2013/120629. U nekim slučajevima, polinukleotid koji kodira histonski region drška-petlja i poli-A region ili poliadenilacioni signal može da kodira tumorski antigen ili njegov fragment kao što su polinukleotidne sekvence opisane u objavi međunarodnog patenta br WO2013/120500 i WO2013/120627. U drugim slučajevima, polinukleotid koji kodira histonski region drška-petlja i poli-A region ili poliadenilacioni signal može da kodira alergeni antigen ili autoimunski sopstveni antigen kao što su polinukleotidne sekvence opisane u objavi međunarodnog patenta br WO2013/120498 i WO2013/120626.
Poli-A regioni
[0393] Polinukleotid ili nukleinska kiselina (npr., iRNK) može da uključuje poliA sekvencu i/ili poliadenilacioni signal. PoliA sekvenca može da bude sačinjena u celosti ili uglavnom od adeninskih nukleotida ili njihovih analoga ili derivata. PoliA sekvenca može da bude rep koji se nalazi odmah do 3' netranslatiranog regiona nukleinske kiseline.
[0394] Tokom obrade RNK, dugi lanac adenozinskih nukleotida (poli-A region) se normalno dodaje na molekule informacione RNK (iRNK) kako bi se povećala stabilnost molekula. Odmah nakon transkripcije, 3'-kraj transkripta se cepa kako bi se oslobodio 3'-hidroksi. Zatim poli-A polimeraza dodaje lanac adenozinskih nukleotida na RNK. U ovom procesu, nazvanom poliadenilacija, dodaje se poli-A region dužine između 100 i 250 ostataka.
[0395] Poli-A regioni jedinstvenih dužina mogu da obezbede izvesne prednosti u odnosu na alternativne polinukleotide prema predmetnom prikazu.
[0396] Uopšteno, dužina poli-A regiona polinukleotida predmetnog prikaza je najmanje 30 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, poli-A region je dužine najmanje 35 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 40 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 45 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 55 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 60 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 70 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 80 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 90 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 100 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 120 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 140 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 160 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 180 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 200 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 250 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 300 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 350 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 400 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 450 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 500 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 600 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 700 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 800 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 900 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1000 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1100 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1200 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1300 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1400 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1500 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1600 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1700 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1800 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 1900 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 2000 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 2500 nukleotida. U još jednom primeru izvođenja, dužina je najmanje 3000 nukleotida.
[0397] U nekim slučajevima, poli-A region može da bude dužine 80 nukleotida, 120 nukleotida, 160 nukleotida na alternativnom molekulu polinukleotida koji je ovde opisan.
[0398] U drugim slučajevima, poli-A region može da bude dužine 20, 40, 80, 100, 120, 140 ili 160 nukleotida na alternativnom molekulu polinukleotida koji je ovde opisan.
[0399] U nekim slučajevima, poli-A region je konstruisan u odnosu na dužinu celog alternativnog polinukleotida. Ova konstrukcija može da bude zasnovana na dužini kodirajućeg regiona alternativnog polinukleotida, dužini određene karakteristike ili regiona alternativnog polinukleotida (kao što je iRNK), ili da bude zasnovana na dužini krajnjeg proizvoda eksprimiranog sa alternativnog polinukleotida. U odnosu na bilo koju karakteristiku alternativnog polinukleotida (npr., različitu od dela iRNK koji uključuje poli-A region) poli-A region može da bude dužine koja je 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 ili 100% veća od dodatne karakteristike. Poli-A region može takođe da bude konstruisan kao frakcija alternativnog polinukleotida kome pripada. U tom kontekstu, poli-A region može da predstavlja 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, ili 90% ili više od ukupne dužine konstrukta ili ukupnu dužinu konstrukta umanjenu za poli-A region.
[0400] U nekim slučajevima, konstruisana vezujuća mesta i/ili konjugovanje polinukleotida (npr., iRNK) za poli-A vezujući protein može da se upotrebi za pojačanje ekspresije. Konstruisana vezujuća mesta mogu da budu senzorske sekvence koje mogu da funkcionišu kao vezujuća mesta za ligande lokalnog mikrookruženja polinukleotida (npr., iRNK). Kao neograničavajući primer, polinukleotidi (npr., iRNK) mogu da uključuju najmanje jedno konstruisano vezujuće mesto za izmenu vezujućeg afiniteta poli-A vezujućeg proteina (PABP) i njegovih analoga. Ugrađivanje najmanje jednog konstruisanog vezujućeg mesta mogu da povećaju vezujući afinitet PABP i njihovih analoga.
[0401] Dodatno, veći broj različitih polinukleotida (npr., iRNK) može da bude vezan zajedno za PABP (poli-A vezujući protein) preko 3'-kraja upotrebom alternativnog nukleotida na 3'-terminusu poli-A regiona. Eksperimenti transfekcije mogu da se sprovedu u relevantnim ćelijskim linijama i proizvodnja proteina može da se oceni ELISA testom na 12 časova, 24 časa, 48 časova, 72 časova i dana 7 posle-transfekcije. Kao neograničavajući primer, eksperimenti transfekcije mogu da se upotrebe za procenu uticaja na afinitet vezivanja PABP ili njegovih analoga kao rezultat dodavanja najmanje jednog konstruisanog vezujućeg mesta.
[0402] U nekim slučajevima, poli-A region može da se upotrebi za modulaciju inicijacije translacije. Bez želje za vezivanjem za neku određenu teoriju, poli-A region angažuje PABP koji zauzvrat može da stupi u interakciju sa kompleksom inicijacije translacije i stoga može da bude od suštinskog značaja za sintezu proteina.
[0403] U nekim slučajevima, poli-A region može takođe da se koristi u predmetnom prikazu za zaštitu od digestije 3'-5'-egzonukleazom.
[0404] U nekim slučajevima, polinukleotid (npr., iRNK) može da uključuje poli-A-G kvartet. G-kvartet je ciklični niz povezan vodonicima od četiri guanozinska nukleotida koji mogu da budu formirani pomoću sekvenci bogatih sa G i u DNK i u RNK. U ovom primeru izvođenja, G-kvartet je inkorporiran u kraj poli-A regiona. Kod dobijenih polinukleotida (npr., iRNK) mogu da se testiraju stabilnost, proizvodnja proteina, i drugi parametri uključujući vreme poluživota u različitim vremenskim tačkama. Otkriveno je da poliA-G kvartet dovodi do proizvodnje proteina jednake najmanje 75% proizvodnje koja se uočava kada se koristi samo poli-A region od 120 nukleotida.
[0405] U nekim slučajevim polinukleotid (npr., iRNK) može da uključuje poli-A region i može da bude stabilizovan dodavanjem 3'-stabilizujućeg regiona. Polinukleotidi (npr., iRNK) sa poli-A regionom mogu dalje da uključuju strukturu 5’-kape.
[0406] U drugim slučajevima, polinukleotid (npr., iRNK) može da uključuje poli-A-G kvartet. Polinukleotidi (npr., iRNK) sa poli-A-G kvartetom mogu dalje da uključuju strukturu 5’-kape.
[0407] U nekim slučajevima, 3'-stabilizujući region koji može da se koristi da stabilizuje polinukleotid (npr., iRNK) koji uključuje poli-A region ili poli-A-G kvartet, može da bude, ali nije ograničen na, regione opisane u objavi međunarodnog patenta br. WO2013/103659. U drugim slučajevima, 3'-stabilizujući region koji može da se koristi sa polinukleotidima predmetnog pronalaska uključuje nukleozid koji dovodi do terminacije lanca kao što je 3'-dezoksiadenozin (kordicepin), 3'-dezoksiuridin, 3'-dezoksicitozin, 3'-dezoksiguanozin, 3'-dezoksitimin, 2',3'-didezoksinukleozidi, kao što je 2',3'-didezoksiadenozin, 2',3'-didezoksiuridin, 2',3'-didezoksicitozin, 2',3'-didezoksiguanozin, 2',3'-didezoksitimin, 2'-dezoksinukleozid, ili O-metilnukleozid.
[0408] U drugim slučajevima, polinukleotid kao što je, ali bez ograničenja, iRNK, koji uključuje poli-A region ili poli-A-G kvartet, može da se stabilizuje izmenom 3'-regiona polinukleotida koja može da spreči i/ili inhibira dodavanje oligo(U) (videti npr., objavu međunarodnog patenta br. WO2013/103659).
[0409] U nekim drugim slučajevima, polinukleotid kao što je, ali bez ograničenja, iRNK, koji uključuje poli-A region ili poli-A-G kvartet, može da se stabilizuje dodavanjem oligonukleotida koji se završava 3'-dezoksinukleozidom, 2',3'-didezoksinukleozidom 3'-O-metilnukleozidima, 3'-O-etilnukleozidima, 3'-arabinozidima, i drugim alternativnim nukleozidima koji su poznati u stanju tehnike i/ili opisani u ovom dokumentu.
Nukleozidi koji dovode do terminacije lanca
[0410] Nukleinska kiselina može da uključuje nukleozid koji dovodi do terminacije lanca. Na primer, nukleozid koji dovodi do terminacije lanca može da uključuje nukleozide koji su dezoksigenisani na 2' i/ili 3' pozicijama svoje šećerne grupe. Ove vrste mogu da uključuju 3'-dezoksiadenozin (kordicepin), 3'-dezoksiuridin, 3'-dezoksicitozin, 3'-dezoksiguanozin, 3'-dezoksitimin, i 2',3'-didezoksinukleozide, kao što je 2',3'-didezoksiadenozin, 2',3'-didezoksiuridin, 2',3'-didezoksicitozin, 2',3'-didezoksiguanozin i 2',3'-didezoksitimin.
Druge komponente
[0411] Kompozicija nanočestica može da uključuje jednu ili više komponenti, osim komponenti koje su opisane u prethodnim odeljcima. Na primer, kompozicija nanočestica može da uključuje jedan ili više malih hidrofobnih molekula kao što je vitamin (npr., vitamin A ili vitamin E) ili sterol.
[0412] Kompozicije nanočestica mogu takođe da uključuju jedan ili više molekula koji poboljšavaju permeabilnost, ugljene hidrate, polimere, agense koji menjaju površinu ili druge komponente. Molekul koji poboljšava permeabilnost može da bude molekul opisan u objavi SAD patentne prijave br. 2005/0222064, na primer. Ugljeni hidrati mogu da uključuju proste šećere (npr., glukozu) i polisaharide (npr., glikogen i njegove derivate i analoge).
[0413] Polimer može da bude uključen u i/ili iskorišćen za, inkapsulaciju ili delimičnu inkapsulaciju kompozicije nanočestica. Polimer može da bude biorazgradiv i/ili biokompatibilan. Polimer može da bude izabran od, ali ne i ograničen na, poliamine, poli etre, poliamide, poliestre, polikarbamate, poliuree, polikarbonate, polistirene, poliimide, polisulfone, poliuretane, poliacetilene, polietilene, polietilenimine, polizocijanate, poliakrilate, polimetakrilate, poliakrilonitrile i poliarilate. Na primer, polimer može da uključuje poli(kaprolakton) (PCL), etilen vinil acetatni polimer (EVA), poli(mlečnu kiselinu) (PLA), poli(L-mlečnu kiselinu) (PLLA), poli(glikolnu kiselinu) (PGA), poli(mlečnu kiselinu-ko-glikolnu kiselinu) (PLGA), poli(L-mlečnu kiselinu-ko-glikolnu kiselinu) (PLLGA), poli(D,L-laktid) (PDLA), poli(L-laktid) (PLLA), poli(D,L-laktid-ko-kaprolakton), poli(D,L-laktidko-kaprolakton-ko-glikolid), poli(D,L-laktid-ko-PEO-ko-D,L-laktid), poli(D,L-laktid-ko-PPO-ko-D,L-laktid), polialkil cijanoakrilat, poliuretan, poli-L-lizin (PLL), hidroksipropil metakrilat (HPMA), polietilenglikol, poli-L-glutaminsku kiselinu, poli(hidroksi kiseline), polianhidride, poliortoestre, poli(estarske amide), poliamide, poli(estarske etre), polikarbonate, polialkilene kao što su polietilen i polipropilen, polialkilen glikole kao što je poli(etilen glikol) (PEG), polialkilen okside (PEO), polialkilen tereftalate kao što je poli(etilen tereftalat), polivinil alkohole (PVA), polivinil etre, polivinil estre kao što je poli(vinil acetat), polivinil halide kao što je poli(vinil hlorid) (PVC), polivinilpirolidon (PVP), polisiloksane, polistiren (PS), poliuretane, derivatizovane celuloze kao što su alkil celuloze, hidroksialkil celuloze, etre celuloze, estre celuloze, nitro celuloze, hidroksipropilcelulozu, karboksimetilcelulozu, polimere akrilnih kiselina, kao što su poli(metil(met)akrilat) (PMMA), poli(etil(met)akrilat), poli(butil(met)akrilat), poli(izobutil(met)akrilat), poli(heksil(met)akrilat), poli(izodecil(met)akrilat), poli(lauril(met)akrilat), poli(fenil(met)akrilat), poli(metil akrilat), poli(izopropil akrilat), poli(izobutil akrilat), poli(oktadecil akrilat) i njihovi kopolimeri i smeše, polidioksanon i njegove kopolimere, polihidroksialkanoate, polipropilen fumarat, polioksimetilen, poloksamere, polioksamine, poli(orto)estre, poli(buternu kiselinu), poli(valerijsku kiselinu), poli(laktid-ko-kaprolakton), trimetilen karbonat, poli(N-akriloilmorfolin) (PAcM), poli(2-metil-2-oksazolin) (PMOX), poli(2-etil-2-oksazolin) (PEOZ) i poliglicerol.
[0414] Agensi koji menjaju površinu mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na, anjonske proteine (npr., goveđi serumski albumin), surfaktante (npr. katjonski surfaktanti kao što je dimetildioktadecilamonijum bromid), šećere ili derivate šećera (npr., ciklodekstrin), nukleinske kiseline, polimere (npr., heparin, polietilen glikol, i poloksamer), mukolitičke agense (npr. acetilcistein, pelin, bromelain, papain, klerodendrum, bromheksin, karbocistein, eprazinon, mesna, ambroksol, sobrerol, domiodol, letostein, stepronin, tiopronin, gelsolin, timozin β4, dornaza alfa, nelteneksin, i erdostein), i DNaze (npr., rhDNase). Agensi za promenu površine mogu da budu raspoređeni unutar nanočestice i/ili na površini kompozicije nanočestica (npr. premazivanjem, adsorpcijom, kovalentnim vezivanjem ili drugim postupkom).
[0415] Kompozicija nanočestica može takođe da sadrži jedan ili više funkcionalizovanih lipida. Na primer, lipid može da bude funkcionalizovan alkin grupom koja, kada je izložena azidu pod odgovarajućim reakcionim uslovima, može da podlegne reakciji cikloadicije. Konkretno, lipidni dvosloj može da bude funkcionalizovan na ovaj način pomoću jedne ili više grupa korisnih u olakšavanju membranske permeacije, ćelijskog prepoznavanja ili snimanja. Površina kompozicije nanočestica takođe može da bude konjugovana sa jednim ili više korisnih antitela. Funkcionalne grupe i konjugati korisni u isporuci u ciljne ćelije, slikanju, i membranskoj permeaciji su dobro poznati u tehnici.
[0416] Osim ovih komponenti, kompozicije nanočestica mogu da uključuju bilo koju supstancu koja je od koristi u farmaceutskim kompozicijama. Na primer, kompozicija nanočestica može da uključuje jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa ili pomoćnih sastojaka kao što je, ali ne i ograničeno na, jedan ili više rastvarača, disperzionih medijuma, razblaživača, disperzionih pomoćnih supstanci, pomoćnih supstanci za suspendovanje, pomoćnih supstanci za granulisanje, sredstava za raspadanje, punilaca, sredstava za klizenje, tečnih vehikuluma, vezujućih sredstava, površinski aktivnih sredstava, izotoničnih sredstava, sredstava za zgušnjavanje ili emulgatora, sredstava za puferisanje, sredstava za podmazivanje, ulja, konzervanasa, i drugih vrsta. Ekscipijensi kao što su voskovi, buteri, sredstva za bojenje, sredstva za oblaganje, arome i sredstva za davanje mirisa, mogu takođe da budu uključeni. Farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi su dobro poznati u oblasti (videti na primer Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro; Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006).
[0417] Primeri razblaživača mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na, kalcijum karbonat, natrijum karbonat, kalcijum fosfat, dikalcijum fosfat, kalcijum sulfat, kalcijum hidrogen fosfat, natrijum fosfat laktozu, saharozu, celulozu, mikrokristalnu celulozu, kaolin, manitol, sorbitol, inozitol, natrijum hlorid, suvi skrob, kukuruzni skrob, šećer u prahu, i/ili njihove kombinacije. Sredstva za granulisanje i dispergovanje mogu da budu izabrana sa neograničavajuće liste koja se sastoji od krompirovog skroba, kukuruznog skroba, tapioka skrob, natrijum skrob glikolata, glina, alginske kiseline, guar gume, pulpe citrusa, agara, bentonita, celuloznih i drvenih proizvoda, prirodnog sunđera, katjonskih jonoizmenjivačkih smola, kalcijum karbonata, silikata, natrijum karbonata, umreženog poli(vinilpirolidona) (krospovidona), natrijum karboksimetil skroba (natrijum skrob glikolata), karboksimetil celuloze, umrežene natrijum karboksimetil celuloze (kroskarmeloze), metilceluloze, preželatiniziranog skroba (skrob 1500), mikrokristalnog skroba, skroba nerastvorljivog u vodi, kalcijum karboksimetil celuloze, magnezijum aluminijum silikata (VEEGUM®), natrijum lauril sulfata, kvaternernih jedinjenja amonijaka, i/ili njihovih kombinacija.
[0418] Površinski aktivni agensi i/ili emulgatori mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na, prirodne emulgatore (npr. bagrem, agar, alginska kiselina, natrijum alginat, tragakant, hondruks, holesterol, ksantan, pektin, želatin, žumance, kazein, lanolin, holesterol, vosak, i lecitin), koloidne gline (npr. bentonit [aluminijum silikat] i VEEGUM® [magnezijum aluminijum silikat]), dugolančane derivate aminokiselina, alkohole visoke molekulske težine (npr. stearil alkohol, cetil alkohol, oleil alkohol, triacetin monostearat, etilen glikol distearat, gliceril monostearat, i propilen glikol monostearat, polivinil alkohol), karbomere (npr. karboksi polimetilen, poliakrilna kiselina, polimer akrilne kiseline, i karboksivinil polimer), karagenan, celulozne derivate (npr., hidroksimetil celuloza natrijum, sprašena celuloza, hidroksimetil celuloza, hidroksipropil celuloza, hidroksipropil metilceluloza, metilceluloza), sorbitan estre masnih kiselina (npr. polioksietilen sorbitan monolaurat [TWEEN®20], polioksietilen sorbitan [TWEEN®60], polioksietilen sorbitan monooleat [TWEEN®80], sorbitan monopalmitat [SPAN®40], sorbitan monostearat [SPAN®60], sorbitan tristearat [SPAN®65], gliceril monooleat, sorbitan monooleat [SPAN®80]), polioksietilen estre (npr. polioksietilen monostearat [MYRJ®45], polioksietilen hidrogenizovano ricinusovo ulje, polietoksilovano ricinusovo ulje, polioksimetilen stearat, i SOLUTOL®), saharozne estre masnih kiselina, polietilen glikolne estre masnih kiselina (npr. CREMOPHOR®), polioksietilen etre, (npr., polioksietilen lauril etar [BRIJ® 30]), poli(vinil-pirolidon), dietilen glikol monolaurat, trietanolamin oleat, natrijum oleat, kalijum oleat, etil oleat, oleinsku kiselinu, etil laurat, natrijum lauril sulfat, PLURONIC®F 68, POLOXAMER® 188, cetrimonijum bromid, cetilpiridinijum hlorid, benzalkonijum hlorid, dokusat natrijum, i/ili njihove kombinacije.
[0419] Agensi za vezivanje mogu da budu skrob (npr. kukuruzni skrob i skrobna pasta); želatin; šećeri (npr. saharoza, glukoza, dekstroza, dekstrin, melasa, laktoza, laktitol, manitol); prirodne i sintetičke gume (npr. bagrem, natrijum alginat, ekstrakt irske mahovine, panvar guma, gati guma, sluz ljuspica psilijuma, karboksimetilceluloza, metilceluloza, etilceluloza, hidroksietilceluloza, hidroksipropil celuloza, hidroksipropil metil celuloza, mikrokristalna celuloza, celulozni acetat, poli(vinil-pirolidon), magnezijum aluminijum silikat (VEEGUM®), i aribogalaktan ariša); alginati; polietilen oksid; polietilen glikol; neorganske soli kalcijuma; silicijumova kiselina; polimetakrilati; voskovi; voda; alkohol; i njihove kombinacije, ili bilo koji drugi pogodan vezivni agens.
[0420] Primeri konzervansa mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na, antioksidante, helatne agense, antimikrobne konzervanse, antifungalne konzervanse, alkoholne konzervanse, kisele konzervanse, i/ili druge konzervanse. Primeri antioksidanata uključuju, ali nisu ograničeni na, alfa tokoferol, askorbinsku kiselinu, akorbil palmitat, butilovani hidroksianizol, butilovani hidroksitoluen, monotioglicerol, kalijum metabisulfit, propionsku kiselinu, propil galat, natrijum askorbat, natrijum bisulfit, natrijum metabisulfit i/ili natrijum sulfit. Primeri helatnih agenasa uključuju etilendiamintetrasirćetnu kiselinu (EDTA), monohidrat limunske kiseline, dinatrijum edetat, dikalijum edetat, edetinsku kiselinu, fumarnu kiselinu, jabučnu kiselinu, fosfornu kiselinu, natrijum edetat, vinsku kiselinu, i/ili trinatrijum edetat. Primeri antimikrobnih konzervansa uključuju, ali se ne ograničavaju na, benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid, benzil alkohol, bronopol, cetrimid, cetilpiridinijum hlorid, hlorheksidin, hlorobutanol, hlorokrezol, hloroksilenol, krezol, etil alkohol, glicerin, heksetidin, imidureu, fenol, fenoksietanol, feniletil alkohol, fenil-živa nitrat, propilen glikol, i/ili timerosal. Primeri antifungalnih konzervansa uključuju, ali nisu ograničeni na, butil paraben, metil paraben, etil paraben, propil paraben, benzojevu kiselinu, hidroksibenzojevu kiselinu, kalijum benzoat, kalijum sorbat, natrijum benzoat, natrijum propionat, i/ili sorbinsku kiselinu. Primeri alkoholnih konzervansa uključuju, ali nisu ograničeni na, etanol, polietilen glikol, benzil alkohol, fenol, fenolna jedinjenja, bisfenol, hlorobutanol, hidroksibenzoat, i/ili feniletil alkohol. Primeri kiselih konzervansa uključuju, ali nisu ograničeni na, vitamin A, vitamin C, vitamin E, beta-karoten, limunsku kiselinu, sirćetnu kiselinu, dehidroaskorbinsku kiselinu, askorbinsku kiselinu, sorbinsku kiselinu, i/ili fitinsku kiselinu. Ostali konzervansi uključuju, ali nisu ograničeni na, tokoferol, tokoferol acetat, detoksim mezilat, cetrimid, butilovani hidroksianizol (BHA), butilovani hidroksitoluen (BHT), etilendiamin, natrijum lauril sulfat (SLS), natrijum lauril etar sulfat (SLES), natrijum bisulfit, natrijum metabisulfit, kalijum sulfit, kalijum metabisulfit, GLYDANT PLUS®, PHENONIP®, metilparaben, GERMALL<®>115, GERMABEN<®>II, NEOLONE™, KATHON™, i/ili EUXYL<®>.
[0421] Primeri puferskih sredstava obuhvataju, ali nisu ograničeni na, rastvore citratnog pufera, rastvore acetatnog pufera, rastvore fosfatnog pufera, amonijum hlorid, kalcijum karbonat, kalcijum hlorid, kalcijum citrat, kalcijum glubionat, kalcijum gluceptat, kalcijum glukonat, d-glukonsku kiselinu, kalcijum glicerofosfat, kalcijum laktat, kalcijum laktobionat, propansku kiselinu, kalcijum levulinat, pentansku kiselinu, dvobazni kalcijum fosfat, fosfornu kiselinu, trobazni kalcijum fosfat, kalcijum hidroksid fosfat, kalijum acetat, kalijum hlorid, kalijum glukonat, mešavine kalijuma, dvobazni kalijum fosfat, jednobazni kalijum fosfat, mešavine kalijum fosfata, natrijum acetat, natrijum bikarbonat, natrijum hlorid, natrijum citrat, natrijum laktat, dvobazni natrijum fosfat, jednobazni natrijum fosfat, mešavine natrijum fosfata, trometamin, amino-sulfonatne pufere (npr. HEPES), magnezijum hidroksid, aluminijum hidroksid, alginsku kiselinu, vodu bez pirogena, izotonični fiziološki rastvor, Ringerov rastvor, etil alkohol i/ili njihove kombinacije. Sredstva za podmazivanje mogu da se izaberu iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od magnezijum stearata, kalcijum stearata, stearinske kiseline, silicijum dioksida, talka, slada, gliceril behenata, hidrogenizovanih biljnih ulja, polietilen glikola, natrijum benzoata, natrijum acetata, natrijum hlorida, leucina, magnezijum lauril sulfata, natrijum lauril sulfata i njihovih kombinacija.
[0422] Primeri ulja uključuju, ali nisu ograničeni na, ulje badema, koštice kajsije, avokada, babasu palme, bergamota, semena crne ribizle, boražine, kleke, kamilice, kanole, kima, karnaube, ricinusa, cimeta, kakao puter, ulje kokosa, jetre bakalara, kafe, kukuruza, semena pamuka, emua, eukaliptusa, noćurka, ribe, lanenog semena, geraniol, ulje tikve, semena grožđa, lešnika, miloduha, izopropil miristat, ulje jojobe, kukui oraha, lavandina, lavande, limuna, Litsea cubeba, makademija oraha, sleza, semena manga, semena limnante, ulje minka, muškatnog oraščića, masline, narandže, atlantske sluzoglavke, palme, palminog jezgra, jezgra breskve, kikirikija, semena maka, semena bundeve, semena repice, pirinčanih mekinja, ruzmarina, šafranike, sandalovine, kamelije čajnog cveta, čubra, morskog trna, susama, ši puter, silikonsko ulje, sojino ulje, ulje suncokreta, čajevca, čička, japanske kamelije, vetivera, oraha, i pšeničnih klica, kao i butil stearat, kaprilni triglicerid, kaprinski triglicerid, ciklometikon, dietil sebakat, dimetikon 360, simetikon, izopropil miristat, mineralno ulje, oktildodekanol, oleil alkohol, silikonsko ulje i/ili njihove kombinacije.
Formulacije
[0423] Kompozicije nanočestica mogu da uključuju lipidnu komponentu i jednu ili više dodatnih komponenti, kao što je terapijski i/ili profilaktički agens. Kompozicija nanočestica može da bude dizajnirana za jednu ili više specifičnih primena ili ciljeva. Elementi kompozicije nanočestica mogu da budu odabrani na osnovu određene primene ili cilja, i/ili na osnovu efikasnosti, toksičnosti, troškova, lakoće upotrebe, dostupnosti ili druge karakteristike jednog ili više elemenata. Slično tome, konkretna formulacija kompozicije nanočestica može da bude odabrana za određenu primenu ili cilj prema, na primer, efikasnosti i toksičnosti određenih kombinacija elemenata.
[0424] Lipidna komponenta kompozicije nanočestica može da uključuje, na primer, lipid prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), fosfolipid (kao što je nezasićeni lipid, npr., DOPE ili DSPC), PEG lipid, i strukturni lipid. Elementi lipidne komponente mogu da budu obezbeđeni u specifičnim udelima.
[0425] U nekim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje lipid prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), fosfolipid, PEG lipid, i strukturni lipid. U određenim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje oko 30 mol% do oko 60 mol% jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), oko 0 mol% do oko 30 mol% fosfolipida, oko 18.5 mol% do oko 48.5 mol% strukturnog lipida, i oko 0 mol% do oko 10 mol% PEG lipida, pod uslovom da ukupni mol% ne prelazi 100%. U nekim primerima izvođenja, lipidna komponenta kompozicije nanočestica uključuje oko 35 mol% do oko 55 mol% jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), oko 5 mol% do oko 25 mol% fosfolipida, oko 30 mol% do oko 40 mol% strukturnog lipida, i oko 0 mol% do oko 10 mol% PEG lipida. U određenim primerima izvođenja, lipidna komponenta uključuje oko 50 mol% navedenog jedinjenja, oko 10 mol% fosfolipida, oko 38.5 mol% strukturnog lipida, i oko 1.5 mol% PEG lipida. U drugim primerima izvođenja, lipidna komponenta uključuje oko 40 mol% navedenog jedinjenja, oko 20 mol% fosfolipida, oko 38.5 mol% strukturnog lipida, i oko 1.5 mol% PEG lipida. U nekim primerima izvođenja, fosfolipid može da bude DOPE ili DSPC. U drugim primerima izvođenja, PEG lipid može da bude PEG-DMG i/ili strukturni lipid može da bude holesterol.
[0426] Kompozicije nanočestica mogu da budu dizajnirane za jednu ili više specifičnih primena ili ciljeva. Na primer, kompozicija nanočestica može da bude dizajnirana da isporuči terapijski i/ili profilaktički agens kao što je RNK u određenu ćeliju, tkivo, organ, ili sistem ili grupu njih u telu sisara. Fiziohemijska svojstva kompozicija nanočestica mogu da budu izmenjena u cilju povećanja selektivnosti za određene ciljeve u telu. Na primer, veličine čestica mogu da budu prilagođene na osnovu veličine fenestracije različitih organa. Terapijski i/ili profilaktički agens uključen u kompoziciju nanočestica može takođe da bude izabran na osnovu željenog cilja ili ciljeva isporuke. Na primer, terapijski i/ili profilaktički agens može da bude odabran za određenu indikaciju, stanje, bolest, ili poremećaj i/ili za isporuku u određenu ćeliju, tkivo, organ, ili sistem ili grupu njih (npr. lokalizovana ili specifična isporuka). U određenim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica može da uključuje iRNK koja kodira polipeptid interesa koji može da se translatira unutar ćelije da bi proizveo polipeptid od interesa. Takva kompozicija može da bude dizajnirana da se specifično isporuči u određeni organ. U određenim primerima izvođenja, kompozicija može da bude dizajnirana da bude specifično isporučena u jetru sisara.
[0427] Količina terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u kompoziciji nanočestica može da zavisi od veličine, kompozicije, željenog cilja i/ili primene, ili drugih svojstava kompozicije nanočestica kao i od svojstava terapijskog i/ili profilaktičkog agensa. Na primer, količina RNK korisna u kompoziciji nanočestica može da zavisi od veličine, sekvence i drugih karakteristika RNK. Relativne količine terapijskog i/ili profilaktičkog agensa i drugih elemenata (npr., lipida) u kompoziciji nanočestica takođe mogu da variraju. U nekim primerima izvođenja, tež./tež. odnos lipidnih komponenti prema terapijskom i/ili profilaktičkom agensu u kompoziciji nanočestica može da bude od oko 5:1 do oko 60:1, kao što je 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, 11:1, 12:1, 13:1, 14:1, 15:1, 16:1, 17:1, 18:1, 19:1, 20:1, 25:1, 30:1, 35:1, 40:1, 45:1, 50:1, i 60:1. Na primer, tež./tež. odnos lipidne komponente prema terapijskom i/ili profilaktičkom agensu može da bude od oko 10:1 do oko 40:1. U određenim primerima izvođenja, tež./tež. odnos je oko 20:1. Količina terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u kompoziciji nanočestica može, na primer, da se meri upotrebom apsorpcionu spektroskopiju (npr., ultraljubičasto-vidljiva spektroskopija).
[0428] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica uključuje jednu ili više RNK, i jednu ili više RNK, lipida, i njihove količine mogu da budu odabrane tako da obezbede specifičan odnos N:P. Odnos N:P kompozicije se odnosi na molarni odnos atoma azota u jednom ili više lipida prema broju fosfatnih grupa u RNK. Uopšteno, poželjan je niži odnos N:P. Jedna ili više RNK, lipida i njihove količine mogu da budu odabrane tako da obezbede odnos N:P od oko 2:1 do oko 30:1, kao što je 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, 12:1, 14:1, 16:1, 18:1, 20:1, 22:1, 24:1, 26:1, 28:1, ili 30:1. U određenim primerima izvođenja, odnos N:P može da bude od oko 2:1 do oko 8:1. U drugim primerima izvođenja, odnos N:P je od oko 5:1 do oko 8:1. Na primer, odnos N:P može da bude oko 5.0:1, oko 5.5:1, oko 5.67:1, oko 6.0:1, oko 6.5:1, ili oko 7.0:1. Na primer, odnos N:P može da bude oko 5.67:1.
Fizičke karakteristike
[0429] Karakteristike kompozicije nanočestica mogu da zavise od njihovih komponenti. Na primer, kompozicija nanočestica koja uključuje holesterol kao strukturni lipid može da ima različite karakteristike u odnosu na kompoziciju nanočestica koja uključuje drugačiji strukturni lipid. Slično, karakteristike kompozicije nanočestica mogu da zavise od apsolutnih ili relativnih količina njenih komponenti. Na primer, kompozicija nanočestica koja uključuje viši molski udeo fosfolipida može da ima drugačije karakteristike u odnosu na kompoziciju nanočestica koja uključuje niži molski udeo fosfolipida. Karakteristike mogu takođe da variraju u zavisnosti od postupka i uslova pripreme kompozicije nanočestica.
[0430] Kompozicije nanočestica mogu se okarakterisati različitim metodama. Na primer, mikroskopija (npr. transmisiona elektronska mikroskopija ili skenirajuća elektronska mikroskopija) mogu da se koriste za ispitivanje morfologije i raspodele veličine kompozicije nanočestica. Dinamičko rasejanje svetlosti ili potenciometrija (npr. potenciometrijske titracije) mogu da se koriste za merenje zeta potencijala. Dinamičko rasipanje svetlosti takođe može da se koristi za određivanje veličine čestica. Instrumenti kao što je Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments Ltd, Malvern, Worcestershire, UK) mogu takođe da se koriste za merenje višestrukih karakteristika kompozicije nanočestica, kao što su veličina čestica, indeks polidisperznosti i zeta potencijal.
[0431] Srednja veličina kompozicije nanočestica može da bude u rasponu od desetina nm do stotina nm. Na primer, srednja veličina može da bude od oko 40 nm do oko 150 nm, kao što je oko 40 nm, 45 nm, 50 nm, 55 nm, 60 nm, 65 nm, 70 nm, 75 nm, 80 nm, 85 nm, 90 nm, 95 nm, 100 nm, 105 nm, 110 nm, 115 nm, 120 nm, 125 nm, 130 nm, 135 nm, 140 nm, 145 nm, ili 150 nm. U nekim primerima izvođenja, srednja veličina kompozicije nanočestica može da bude od oko 50 nm do oko 100 nm, od oko 50 nm do oko 90 nm, od oko 50 nm do oko 80 nm, od oko 50 nm do oko 70 nm, od oko 50 nm do oko 60 nm, od oko 60 nm do oko 100 nm, od oko 60 nm do oko 90 nm, od oko 60 nm do oko 80 nm, od oko 60 nm do oko 70 nm, od oko 70 nm do oko 100 nm, od oko 70 nm do oko 90 nm, od oko 70 nm do oko 80 nm, od oko 80 nm do oko 100 nm, od oko 80 nm do oko 90 nm, ili od oko 90 nm do oko 100 nm. U određenim primerima izvođenja, srednja veličina kompozicije nanočestica može da bude od oko 70 nm do oko 100 nm. U nekim primerima izvođenja, srednja veličina može da bude oko 80 nm. U drugim primerima izvođenja, srednja veličina može da bude oko 100 nm.
[0432] Kompozicija nanočestica može da bude relativno homogena. Indeks polidisperznosti može da bude upotrebljen za označavanje homogenosti kompozicije nanočestica, npr., raspodele veličine čestica kompozicija nanočestica. Mali (npr., manji od 0.3) indeks polidisperznosti uopšteno označava usku raspodelu veličine čestica. Kompozicija nanočestica može da ima indeks polidisperznosti od oko 0 do oko 0.25, kao što je 0.01, 0.02, 0.03, 0.04, 0.05, 0.06, 0.07, 0.08, 0.09, 0.10, 0.11, 0.12, 0.13, 0.14, 0.15, 0.16, 0.17, 0.18, 0.19, 0.20, 0.21, 0.22, 0.23, 0.24, ili 0.25. U nekim primerima izvođenja, indeks polidisperznosti kompozicije nanočestica može da bude od oko 0.10 do oko 0.20.
[0433] Zeta potencijal kompozicije nanočestica može da bude upotrebljen za označavanje elektrokinetičkog potencijala kompozicije. Na primer, zeta potencijal može da opiše površinsko naelektrisanje kompozicije nanočestica. Kompozicije nanočestica sa relativno niskim naelektrisanjima, pozitivnim ili negativnim, su uopšteno poželjne, budući da vrste koje su jače naelektrisane mogu da stupe u nepoželjne interakcije sa ćelijama, tkivima, i drugim elementima u telu. U nekim primerima izvođenja, zeta potencijal kompozicije nanočestica može da bude od oko -10 mV do oko 20 mV, od oko -10 mV do oko 15 mV, od oko -10 mV do oko 10 mV, od oko -10 mV do oko 5 mV, od oko -10 mV do oko 0 mV, od oko -10 mV do oko -5 mV, od oko -5 mV do oko 20 mV, od oko -5 mV do oko 15 mV, od oko -5 mV do oko 10 mV, od oko -5 mV do oko 5 mV, od oko -5 mV do oko 0 mV, od oko 0 mV do oko 20 mV, od oko 0 mV do oko 15 mV, od oko 0 mV do oko 10 mV, od oko 0 mV do oko 5 mV, od oko 5 mV do oko 20 mV, od oko 5 mV do oko 15 mV, ili od oko 5 mV do oko 10 mV.
[0434] Efikasnost inkapsulacije terapijskog i/ili profilaktičkog agensa opisuje količinu terapijskog i/ili profilaktičkog agensa koja je inkapsulirana ili na drugi način dovedena u vezu sa kompozicijom nanočestica nakon pripreme, u odnosu na obezbeđenu početnu količinu. Efikasnost inkapsulacije je poželjno visoka (npr., blizu 100%). Efikasnost inkapsulacije može da se meri, na primer, tako što se poredi količina terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u rastvoru koji sadrži kompoziciju nanočestica pre i posle degradacije razlaganja kompozicije nanočestica pomoću jednog ili više organskih rastvarača ili deterdženata. Fluorescencija može da se koristi za merenje količine slobodnog terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., RNK) u rastvoru. Za ovde opisane kompozicije nanočestica, efikasnost inkapsulacije terapijskog i/ili profilaktičkog agensa može da bude najmanje 50%, na primer 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, ili 100%. U nekim primerima izvođenja, efikasnost inkapsulacije može da bude najmanje 80%. U nekim primerima izvođenja, efikasnost inkapsulacije može da bude najmanje 90%.
[0435] Kompozicija nanočestica može izborno da sadrži jednu ili više obloga. Na primer, kompozicija nanočestica može da bude formulisana kao kapsula, film, ili tableta koja ima oblogu. Kapsula, film, ili tableta koja uključuje ovde opisanu kompoziciju može da ima bilo koju korisnu dimenziju, zateznu čvrstoću, tvrdoću ili gustinu.
Farmaceutske kompozicije
[0436] Kompozicije nanočestica mogu da budu formulisane u celini ili delom kao farmaceutske kompozicije. Farmaceutske kompozicije mogu da uključuju jednu ili više kompozicija nanočestica. Na primer, farmaceutska kompozicija može da uključuje jednu ili više kompozicija nanočestica koje uključuju jedan ili više različitih terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa. Farmaceutske kompozicije mogu dalje da uključuju jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa ili pomoćnih sastojaka kao što su sastojci opisani u ovom dokumentu. Opšte smernice za formulisanje i proizvodnju farmaceutskih kompozicija i agenasa, dostupne su, na primer, u publikaciji Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro; Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006. Konvencionalni ekscipijensi i pomoćni sastojci mogu da se koriste u bilo kojoj farmaceutskoj kompoziciji, izuzev ukoliko je konvencionalni ekscipijens ili pomoćni sastojak nekompatibilan sa jednom ili više komponenti kompozicije nanočestica. Ekscipijens ili pomoćni sastojak može da bude nekompatibilan sa komponentom kompozicije nanočestica ako njegova kombinacija sa tom komponentom može da dovede do bilo kog neželjenog biološkog efekta, ili na drugi način štetnog efekta.
[0437] U nekim primerima izvođenja, jedan ili više ekscipijenasa ili pomoćnih sastojaka mogu da čine više od 50% ukupne mase ili zapremine farmaceutske kompozicije koja uključuje kompoziciju nanočestica. Na primer, jedan ili više ekscipijenasa ili pomoćnih sastojaka mogu da čine 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, ili više farmaceutske konvencije. U nekim primerima izvođenja, farmaceutski prihvatljiv ekscipijens je najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97%, najmanje 98%, najmanje 99%, ili 100% čist. U nekim primerima izvođenja, ekscipijens je odobren za upotrebu kod ljudi i za veterinarsku upotrebu. U nekim primerima izvođenja, ekscipijens je odobrila Uprava za hranu i lekove Sjedinjenih Država. U nekim primerima izvođenja, ekscipijens je farmaceutskog stepena čistoće. U nekim primerima izvođenja, ekscipijens ispunjava standarde Farmakopeje Sjedinjenih Država (USP), Evropske farmakopeje (EP), Britanske farmakopeje, i/ili Međunarodne farmakopeje.
[0438] Relativne količine jedne ili više kompozicija nanočestica, jednog ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa, i/ili bilo kojih dodatnih sastojaka u farmaceutskoj kompoziciji u skladu sa predmetnim prikazom, variraće, u zavisnosti od vrste, veličine i/ili stanja subjekta koji se leči, i dodatno će zavisiti od puta kojim se kompozicija primenjuje. Kao primer, farmaceutska kompozicija može da sadrži između 0.1% i 100% (tež./tež.) jedne ili više kompozicija nanočestica.
[0439] U određenim primerima izvođenja, kompozicije nanočestica i/ili farmaceutske kompozicije prema prikazu se hlade ili zamrzavaju u cilju skladištenja i/ili transporta (npr., čuvaju se na temperaturi od 4 °C ili nižoj, kao što je temperatura između oko -150 °C i oko 0 °C ili između oko -80 °C i oko -20 °C (npr., oko -5 °C, -10 °C, -15 °C, -20 °C, -25 °C, -30 °C, -40 °C, -50 °C, -60 °C, -70 °C, -80 °C, -90 °C, -130 °C ili - 150 °C). Na primer, farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kojoj od formula (I)-(IV) je rastvor koji se hladi u cilju skladištenja i/ili transporta na, na primer, oko -20 °C, -30 °C, -40 °C, -50 °C, -60 °C, -70 °C ili -80 °C. U nekim primerima izvođenja, prikaz se takođe odnosi na postupak za povećanje stabilnosti kompozicija nanočestica i/ili farmaceutskih kompozicija koje sadrže jedinjenje prema bilo kojoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), čuvanjem kompozicija nanočestica i/ili farmaceutskih kompozicije na temperaturi od 4 °C ili nižoj, kao što je temperatura između oko -150 °C i oko 0 °C ili između oko -80 °C i oko -20 °C, npr., oko -5 °C, -10 °C, -15 °C, -20 °C, -25 °C, -30 °C, -40 °C, -50 °C, -60 °C, -70 °C, -80 °C, -90 °C, -130 °C ili -150 °C). Na primer, kompozicije nanočestica i/ili farmaceutske kompozicije koje su ovde opisane, stabilne su tokom oko najmanje 1 nedelje, najmanje 2 nedelje, najmanje 3 nedelje, najmanje 4 nedelje, najmanje 5 nedelja, najmanje 6 nedelja, najmanje 1 mesec, najmanje 2 meseca, najmanje 4 meseca, najmanje 6 meseci, najmanje 8 meseci, najmanje 10 meseci, najmanje 12 meseci, najmanje 14 meseci, najmanje 16 meseci, najmanje 18 meseci, najmanje 20 meseci, najmanje 22 meseca, ili najmanje 24 meseca, npr., na temperaturi od 4 °C ili nižoj (npr., između oko 4 °C i -20 °C). U jednom primeru izvođenja, formulacija je stabilizovana tokom najmanje 4 nedelje na oko 4 °C. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija prema prikazu sadrži ovde prikazanu kompoziciju nanočestica i farmaceutski prihvatljiv nosač izabran od jednog ili više od, Tris pufera, acetata (npr., natrijum acetata), citrata (npr., natrijum citrata), slanog rastvora, PBS pufera i saharoze. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija prema prikazu ima pH vrednost između oko 7 i 8 (npr., 6.86.9, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9 ili 8.0, ili između 7.5 i 8 ili između 7 i 7.8). Na primer, farmaceutska kompozicija prema prikazu sadrži ovde opisanu kompoziciju nanočestica, Tris, fiziološki rastvor i saharozu, i ima pH od oko 7.5-8, koji je pogodan za skladištenje i/ili transport na, na primer, oko -20 °C. Na primer, farmaceutska kompozicija prema prikazu sadrži ovde prikazanu kompoziciju nanočestica i PBS i ima pH od oko 7-7.8, pogodan za skladištenje i/ili transport na, na primer, oko 4 °C ili niže. "Stabilnost", "stabilizovan" i "stabilan" u kontekstu predmetnog prikaza, odnose se na otpornost ovde prikazanih kompozicija nanočestica i/ili farmaceutskih kompozicija na hemijske ili fizičke promene (npr., degradaciju, promenu veličine čestica, agregaciju, promene inkapsulacije, itd.) pod datim uslovima proizvodnje, pripreme, transporta, skladištenja i/ili upotrebe, npr., kada se primenjuje stres kao što je sila naprezanja, stres usled zamrzavanja/otapanja, itd.
[0440] Kompozicije nanočestica i/ili farmaceutske kompozicije koje uključuju jednu ili više kompozicija nanočestica mogu da se primenjuju kod bilo kog pacijenta ili subjekta, što uključuje one pacijente ili subjekte koji mogu da imaju koristi od terapijskog efekta obezbeđenog isporučivanjem terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u jednu ili više konkretnih ćelija, tkiva, organa, ili sistema ili grupa navedenog, kao što je bubrežni sistem. Iako su ovde obezbeđeni opisi kompozicija nanočestica i farmaceutskih kompozicija koje uključuju kompozicije nanočestica u principu usmereni na kompozicije koje su pogodne za primenu kod ljudi, stručnjak u oblasti će razumeti da su ove kompozicije u principu pogodne za primenu i kod bilo kog drugog sisara. Modifikacija kompozicija pogodnih za primenu kod ljudi kako bi one postale pogodne za primenu kod različitih životinja dobro je poznato, i prosečan farmakolog u veterini može da osmisli i/ili izvede takvu modifikaciju pomoću isključivo običnog, ili sasvim bez, eksperimentisanja. Subjekti kod kojih se razmatra primena kompozicija uključuju, ali nisu ograničeni na, ljude, druge primate i druge sisare, uključujući komercijalno relevantne sisare kao što su goveda, svinje, konji, ovce, mačke, psi, miševi i/ili pacovi.
[0441] Farmaceutska kompozicija koja uključuje jednu ili više kompozicija nanočestica može da se pripremi bilo kojim postupkom koji je poznat ili nakon ovoga razvijen u oblasti farmakologije. U principu, ovakvi preparativni postupci uključuju dovođenje aktivnog sastojka u vezu sa ekscipijensom i/ili jednim ili više drugih pomoćnih sastojaka, a zatim, ukoliko je poželjno ili neophodno, deljenje, oblikovanje, i/ili pakovanje proizvoda u poželjne jedinice sa jednom ili više doza.
[0442] Farmaceutska kompozicija u skladu sa predmetnim prikazom može da se priprema, pakuje, i/ili prodaje u balku, u vidu pojedinačne jedinične doze, i/ili kao veći broj jediničnih doza. Kako se ovde koristi, "jedinična doza" je diskretna količina farmaceutske kompozicije koja sadrži prethodno definisanu količinu aktivnog sastojka (npr., kompozicije nanočestica). Količina aktivnog sastojka je u principu jednaka dozi aktivnog sastojka koja se primenjuje kod subjekta i/ili pogodnom delu takve doze, kao što je, na primer, jedna polovina ili jedna trećina takve doze.
[0443] Farmaceutske kompozicije se mogu da se pripreme u različitim oblicima pogodnim za različite puteve i metode primene. Na primer, farmaceutske kompozicije mogu da se pripreme kao tečni dozni oblici (npr. emulzije, mikroemulzije, nanoemulzije, rastvori, suspenzije, sirupi i eliksiri), oblici za injekcije, čvrsti dozni oblici (npr. kapsule, tablete, pilule, prahovi i granule ), dozni oblici za topikalnu i/ili transdermalnu primenu (npr. masti, paste, kreme, losioni, gelovi, prahovi, rastvori, sprejevi, inhalanti i flasteri), suspenzije, prahovi i drugi oblici.
[0444] Tečni dozni oblici za oralnu i parenteralnu primenu uključuju, ali nisu ograničeni na, farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, nanoemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i/ili eliksire. Pored aktivnih sastojaka, tečni dozni oblici mogu da sadrže inertne razblaživače koji se obično koriste u tehnici, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, agensi za rastvaranje i emulgatori kao što su etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, dimetilformamid, ulja (posebno, semena pamuka, kikirikija, kukuruza, klica, maslinovo, ricinusovo i susamovo ulje), glicerol, tetrahidrofurfuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina sorbitana i njihove mešavine. Pored inertnih razblaživača, oralne kompozicije mogu da uključuju dodatne terapijske i/ili profilaktičke agense, dodatne agense kao što su sredstva za vlaženje, emulgatori i agensi za suspendovanje, zaslađivači, arome i/ili mirisi. U određenim primerima izvođenja za parenteralnu primenu, kompozicije se mešaju sa agensima za rastvaranje kao što su Cremophor®, alkoholi, ulja, modifikovana ulja, glikoli, polisorbati, ciklodekstrini, polimeri i/ili njihove kombinacije.
[0445] Preparati za injekcije, na primer, sterilne injektabilne vodene ili uljne suspenzije mogu da budu formulisane u skladu sa poznatim stanjem tehnike korišćenjem odgovarajućih disperzionih agenasa, sredstava za vlaženje i/ili sredstava za suspendovanje. Sterilni preparati za injekcije mogu da budu sterilni rastvori za injekcije, suspenzije i/ili emulzije u netoksičnim parenteralno prihvatljivim razblaživačima i/ili rastvaračima, na primer, kao rastvor u 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji se mogu koristiti su voda, Ringerov rastvor, U.S.P. i izotonični rastvor natrijum hlorida. Sterilna, fiksna ulja se konvencionalno koriste kao rastvarač ili medijum za suspendovanje. U tu svrhu može se koristiti bilo koje blago fiksno ulje uključujući sintetičke monoili digliceride. Masne kiseline kao što je oleinska kiselina mogu se koristiti u pripremi injekcija.
[0446] Formulacije za injekcije mogu da se sterilišu, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije, i/ili inkorporacijom sredstava za sterilizaciju u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje se mogu rastvoriti ili dispergovati u sterilnoj vodi ili drugom sterilnom medijumu za injekcije pre upotrebe.
[0447] Da bi se produžio efekat aktivnog sastojka, često je poželjno da se uspori apsorpcija aktivnog sastojka iz subkutane ili intramuskularne injekcije. Ovo se može postići upotrebom tečne suspenzije kristalnog ili amorfnog materijala sa slabom rastvorljivošću u vodi. Brzina apsorpcije leka tada zavisi od njegove brzine rastvaranja koja, zauzvrat, može zavisiti od veličine kristala i kristalnog oblika. Alternativno, odložena apsorpcija parenteralno primenjenog oblika leka se postiže rastvaranjem ili suspendovanjem leka u uljnom nosaču. Oblici za depo injekcije se prave formiranjem mikrokapsuliranih matrica leka u biorazgradivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. U zavisnosti od odnosa leka prema polimeru i prirode određenog polimera koji se koristi, brzina oslobađanja leka može da se kontroliše. Primeri drugih biorazgradivih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli (anhidride). Formulacije za depo injekcije se pripremaju zarobljavanjem leka u lipozome ili mikroemulzije koje su kompatibilne sa telesnim tkivima.
[0448] Kompozicije za rektalnu ili vaginalnu primenu su tipično supozitorije koje se mogu pripremiti mešanjem kompozicija sa odgovarajućim neiritirajućim ekscipijensima kao što su kakao puter, polietilen glikol ili vosak za supozitorije koji su čvrsti na sobnoj temperaturi, ali tečni na telesnoj temperaturi i stoga se tope u rektalnoj ili vaginalnoj šupljini i oslobađaju aktivni sastojak.
[0449] Čvrsti dozni oblici za oralnu primenu uključuju kapsule, tablete, pilule, filmove, prahove i granule. U takvim čvrstim doznim oblicima, aktivni sastojak je pomešan sa najmanje jednim inertnim, farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat i/ili punioci ili ekstenderi (npr. skrobovi, laktoza, saharoza, glukoza, manitol i silicijumska kiselina), veziva (npr. karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinilpirolidinon, saharoza i bagrem), ovlaživači (npr. glicerol), sredstva za dezintegraciju (npr. agar, kalcijum karbonat, skrob od krompira ili tapioke, alginska kiselina, određeni silikati, i natrijum karbonat), sredstva za usporavanje rastvaranja (npr. parafin), akceleratori apsorpcije (npr. jedinjenja kvaternarnog amonijuma), sredstva za vlaženje (npr. cetil alkohol i glicerol monostearat), apsorbenti (npr. kaolin i bentonit glina, silikati) i maziva (npr. talk , kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat) i njihove smeše. U slučaju kapsula, tableta i pilula, dozni oblik može da sadrži puferske agense.
[0450] Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu se koristiti kao punioci u mekim i tvrdo punjenim želatinskim kapsulama korišćenjem ekscipijenasa kao što su laktoza ili mlečni šećer, kao i polietilen glikoli visoke molekularne težine i slično. Čvrsti dozni oblici tableta, dražeja, kapsula, pilula i granula mogu se pripremiti sa oblogama i omotačima kao što su enteričke obloge i druge obloge dobro poznate u oblasti farmaceutske formulacije. Mogu opciono da sadrže sredstva za zamućenje i mogu biti sastava da oslobađaju aktivni sastojak/sastojke samo, ili poželjno, u određenom delu crevnog trakta, izborno, na odložen način. Primeri kompozicija za ugradnju koje mogu da se koriste uključuju polimerne supstance i voskove. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu da se koriste kao punioci u mekim i tvrdopunjenim želatinskim kapsulama upotrebom ekscipijenasa kao što su laktoza ili mlečni šećer, kao i polietilen glikoli visoke molekularne težine i slično.
[0451] Dozni oblici za topikalnu i/ili transdermalnu primenu kompozicije mogu da uključuju masti, paste, kreme, losione, gelove, prahove, rastvore, sprejeve, inhalante i/ili flastere. U principu, aktivni sastojak se meša pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom i/ili bilo kojim potrebnim konzervansima i/ili puferima po potrebi. Dodatno, predmetni prikaz razmatra upotrebu transdermalnih flastera, koji često imaju dodatnu prednost obezbeđivanja kontrolisane isporuke jedinjenja u telo. Takvi dozni oblici mogu da se pripreme, na primer, rastvaranjem i/ili raspoređivanjem jedinjenja u odgovarajućem medijumu. Alternativno ili dodatno, brzina može da se kontroliše bilo obezbeđivanjem membrane za kontrolu brzine i/ili dispergovanjem jedinjenja u polimernoj matrici i/ili gelu.
[0452] Pogodni uređaji za upotrebu u isporuci intradermalnih farmaceutskih kompozicija opisanih ovde uključuju uređaje sa kratkim iglama kao što su oni opisani u SAD patentima 4,886,499; 5,190,521; 5,328,483; 5,527,288; 4,270,537; 5,015,235; 5,141,496; i 5,417,662. Intradermalne kompozicije se mogu davati pomoću uređaja koji ograničavaju efektivnu dužinu prodiranja igle u kožu, kao što su oni opisani u PCT objavi WO 99/34850 i njenim funkcionalnim ekvivalentima. Pogodni su uređaji za mlazno ubrizgavanje koji isporučuju tečne kompozicije u dermis preko mlaznog injektora tečnosti i/ili preko igle koja probija stratum corneum i proizvodi mlaz koji dopire do dermisa. Uređaji za mlazno ubrizgavanje su opisani, na primer, u SAD patentima 5,480,381; 5,599,302; 5,334,144; 5,993,412; 5,649,912; 5,569,189; 5,704,911; 5,383,851; 5,893,397; 5,466,220; 5,339,163; 5,312,335; 5,503,627; 5,064,413; 5,520,639; 4,596,556; 4,790,824; 4,941,880; 4,940,460; i PCT objavama WO 97/37705 i WO 97/13537. Pogodni su balistički uređaji za isporuku praha/čestica koji koriste komprimovani gas da ubrzaju vakcinu u obliku praha kroz spoljašnje slojeve kože do dermisa. Alternativno ili dodatno, konvencionalni špricevi se mogu koristiti u klasičnoj metodi Mantoux testa intradermalne primene.
[0453] Formulacije pogodne za topikalnu primenu uključuju, ali nisu ograničene na tečne i/ili polutečne preparate kao što su linimenti, losioni, emulzije ulja u vodi i/ili vode u ulju, kao što su kreme, masti i/ili paste, i/ili rastvori i/ili suspenzije. Formulacije koje se primenjuju topikalno mogu, na primer, da sadrže od oko 1% do oko 10% (tež./tež.) aktivnog sastojka, iako koncentracija aktivnog sastojka može biti visoka kao granica rastvorljivosti aktivnog sastojka u rastvaraču. Formulacije za topikalnu primenu mogu dalje da sadrže jedan ili više dodatnih sastojaka opisanih ovde.
[0454] Farmaceutska kompozicija se može pripremiti, upakovati i/ili prodati u formulaciji pogodnoj za plućnu primenu preko bukalne šupljine. Takva formulacija može da sadrži suve čestice koje sadrže aktivni sastojak. Takve kompozicije su pogodno u obliku suvih prahova za davanje pomoću uređaja koji sadrži rezervoar za suvi prah u koji se struja propelanta može usmeriti da rasprši prah i/ili korišćenjem samohodnog kontejnera za doziranje rastvarača/praha, kao što je uređaj koji sadrži aktivni sastojak rastvoren i/ili suspendovan u propelantu niske tačke ključanja u zapečaćenom kontejneru. Kompozicije suvog praha mogu da uključuju čvrsti fini prah za razblaživanje kao što je šećer i pogodno se obezbeđuju u obliku jedinične doze.
[0455] Propelanti niske tačke ključanja u principu uključuju tečne propelante koji imaju tačku ključanja ispod 65 °F (18.3 °C) na atmosferskom pritisku. U principu, propelant može da čini 50% do 99.9% (tež./tež.) kompozicije, a aktivni sastojak može da čini 0.1% do 20% (tež./tež.) kompozicije. Propelant može dalje da sadrži dodatne sastojke kao što su tečni nejonski i/ili čvrsti anjonski surfaktant i/ili čvrsti razblaživač (koji mogu imati veličinu čestica istog reda veličine kao čestice koje čine aktivni sastojak).
[0456] Farmaceutske kompozicije formulisane za isporuku u pluća mogu da obezbede aktivni sastojak u obliku kapljica rastvora i/ili suspenzije. Takve formulacije mogu biti pripremljene, upakovane i/ili prodavane kao vodeni i/ili razblaženi alkoholni rastvori i/ili suspenzije, opciono sterilni, koji sadrže aktivni sastojak, i mogu se prikladno primeniti korišćenjem bilo kog uređaja za nebulizaciju i/ili atomizaciju. Takve formulacije mogu dalje da sadrže jedan ili više dodatnih sastojaka uključujući, ali ne ograničavajući se na, aromu kao što je natrijum saharin, isparljivo ulje, pufersko sredstvo, površinski aktivno sredstvo i/ili konzervans kao što je metilhidroksibenzoat. Kapljice koje se dobijaju ovim putem primene mogu imati prosečan prečnik u opsegu od oko 1 nm do oko 200 nm.
[0457] Formulacije koje su ovde opisane kao korisne za isporuku u pluća su korisne za intranazalnu isporuku farmaceutske kompozicije. Druga formulacija pogodna za intranazalnu primenu je grubi prah koji sadrži aktivni sastojak i ima prosečnu česticu od oko 0.2 µm do 500 µm. Ovakva formulacija se primenjuje na način na koji se uzima burmut, odnosno brzim udisanjem kroz nosni prolaz iz posude sa prahom koja se drži blizu nosa.
[0458] Formulacije pogodne za nazalnu primenu mogu, na primer, da sadrže od oko 0.1% (tež./tež.) do čak 100% (tež./tež.) aktivnog sastojka, i mogu da sadrže jedan ili više ovde opisanih dodatnih sastojaka. Farmaceutska kompozicija može biti pripremljena, upakovana i/ili prodavana u formulaciji pogodnoj za bukalnu primenu. Takve formulacije mogu, na primer, biti u obliku tableta i/ili pastila napravljenih korišćenjem uobičajenih postupaka, i mogu, na primer, da sadrže 0.1% do 20% (tež./tež.) aktivnog sastojka, a ostatak čini oralno rastvorljiva i/ili razgradiva kompozicija i, opciono, jedan ili više dodatnih sastojaka opisanih ovde. Alternativno, formulacije pogodne za bukalnu primenu mogu da sadrže prah i/ili aerosolizovan i/ili atomizovani rastvor i/ili suspenziju koji sadrži aktivni sastojak. Takve praškaste, aerosolizovane i/ili aerosolizovane formulacije, kada su dispergovane, mogu imati prosečnu veličinu čestica i/ili kapljica u opsegu od oko 0.1 nm do oko 200 nm, i mogu dalje da sadrže jedan ili više bilo kojih dodatnih sastojaka opisanih ovde.
[0459] Farmaceutska kompozicija može biti pripremljena, upakovana i/ili prodavana u formulaciji pogodnoj za oftalmičku primenu. Takve formulacije mogu, na primer, biti u obliku kapi za oči koje uključuju, na primer, 0.1/1.0% (tež./tež.) rastvor i/ili suspenziju aktivnog sastojka u vodenom ili uljnom tečnom ekscipijensu. Takve kapi mogu dalje da sadrže puferske agense, soli i/ili jedan ili više drugih sastojaka koji su ovde opisani. Druge formulacije koje se mogu primeniti u oftalmologiji i koje su korisne uključuju one koje sadrže aktivni sastojak u mikrokristalnom obliku i/ili u lipozomskom preparatu. Kapi za uši i/ili kapi za oči se razmatraju u okviru ovog prikaza.
Postupci za proizvodnju polipeptida u ćelijama
[0460] Predmetni prikaz obezbeđuje postupke za proizvodnju polipeptida od interesa u sisarskoj ćeliji. Postupci za proizvodnju polipeptida uključuju dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom nanočestica koja uključuje iRNK koja kodira polipeptid od interesa. Nakon što ćelija dođe u kontakt sa kompozicijom nanočestica, iRNK može da se preuzme i translatira u ćeliji kako bi bio proizveden polipeptid od interesa.
[0461] U principu, korak u kome se sisarska ćelija dovodi u kontakt sa kompozicijom nanočestica koja uključuje iRNK koja kodira polipeptid od interesa može da se izvodi in vivo, ex vivo, u kulturi, ili in vitro. Količina kompozicije nanočestica koja je dovedena u kontakt sa ćelijom, i/ili količina iRNK u njoj, može da zavisi od tipa ćelije ili tkiva sa kojim se dovodi u kontakt, načina primene, fizičko-hemijskih karakteristika kompozicije nanočestica i iRNK (npr. veličine, naelektrisanja i hemijskog sastava) u njima i drugih faktora. U principu, efikasna količina kompozicije nanočestica će omogućiti efikasnu proizvodnju polipeptida u ćeliji. Pokazatelji efikasnosti mogu da uključuju translaciju polipeptida (označeno ekspresijom polipeptida), nivo degradacije iRNK i indikatore imunskog odgovora.
[0462] Korak dovođenja u kontakt kompozicije nanočestica koja uključuje iRNK sa ćelijom može da uključuje ili izazove transfekciju. Fosfolipid koji je uključen u lipidnu komponentu kompozicije nanočestica može da olakša transfekciju i/ili da poveća efikasnost transfekcije, na primer, interakcijom i/ili spajanjem sa ćelijskom ili intracelularnom membranom. Transfekcija može da omogući translaciju iRNK unutar ćelije.
[0463] U nekim primerima izvođenja, ovde opisane kompozicije nanočestica mogu da se koriste u terapiji. Na primer, iRNK uključena u kompoziciju nanočestica može da kodira terapijski polipeptid (npr. u regionu koji može da se translatira) i da proizvede terapijski polipeptid nakon kontakta i/ili ulaska (npr. transfekcije) u ćeliju. U drugim primerima izvođenja, iRNK uključena u kompoziciju nanočestica može da kodira polipeptid koji može da poboljša ili poveća imunitet subjekta. Na primer, iRNK može da kodira faktor koji stimuliše kolonije granulocita ili trastuzumab.
[0464] U određenim primerima izvođenja, iRNK uključena u kompoziciju nanočestica može da kodira rekombinantni polipeptid koji može da zameni jedan ili više polipeptida koji mogu biti suštinski odsutni u ćeliji koja je u kontaktu sa kompozicijom nanočestica. Jedan ili više polipeptida koji su suštinski odsutni mogu da nedostaju zbog genetske mutacije kodirajućeg gena ili njegovog regulatornog puta. Alternativno, rekombinantni polipeptid proizveden translacijom iRNK može da antagonizuje aktivnost endogenog proteina prisutnog u ćeliji, na površini ćelije ili izlučenog iz ćelije. Antagonistički rekombinantni polipeptid može da bude poželjan za borbu protiv štetnih efekata izazvanih aktivnostima endogenog proteina, kao što su izmenjene aktivnosti ili lokalizacija izazvana mutacijom. U drugoj alternativi, rekombinantni polipeptid proizveden translacijom iRNK može indirektno ili direktno da antagonizuje aktivnost biološkog fragmenta prisutnog u, na površini ili se izlučuje iz ćelije. Antagonizovani biološki fragmenti mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na, lipide (npr. holesterol), lipoproteine (npr. lipoprotein niske gustine), nukleinske kiseline, ugljene hidrate i toksine malih molekula. Rekombinantni polipeptidi proizvedeni translacijom iRNK mogu da budu konstruisani za lokalizaciju unutar ćelije, kao što je unutar određenog odeljka, kao jedro, ili mogu da budu konstruisani za izlučivanje iz ćelije ili za translokaciju u plazma membranu ćelije.
[0465] U nekim primerima izvođenja, dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom nanočestica koja uključuje iRNK može da smanji urođeni imunski odgovor ćelije na egzogenu nukleinsku kiselinu.
Ćelija može da bude dovedena u kontakt sa prvom kompozicijom nanočestica koja uključuje prvu količinu prve egzogene iRNK koja sadrži region koji može da se translatira i može se odrediti nivo urođenog imunskog odgovora ćelije na prvu egzogenu iRNK. Nakon toga, ćelija može da bude dovedena u kontakt sa drugom kompozicijom koja uključuje drugu količinu prve egzogene iRNK, pri čemu je druga količina manja količina prve egzogene iRNK u poređenju sa prvom količinom. Alternativno, druga kompozicija može da uključuje prvu količinu druge egzogene iRNK koja se razlikuje od prve egzogene iRNK. Koraci dovođenja u kontakt ćelije sa prvom i drugom kompozicijom mogu da se ponove jednom ili više puta. Dodatno, efikasnost proizvodnje polipeptida (npr. translacije) u ćeliji može da bude opciono određena, i ćelija može da bude ponovo dovedena u kontakt sa prvom i/ili drugom kompozicijom više puta dok se ne postigne ciljna efikasnost proizvodnje proteina
[0466] U nekim primerima izvođenja, postupak proizvodnje polipeptida od interesa u ćeliji sisara uključuje dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja sadrži fosfolipid, strukturni lipid, PEG lipid, i jedinjenje jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), kao što je ovde opisano; i (ii) iRNK koja kodira polipeptid od interesa, pri čemu iRNK može da bude translatirana u ćeliji proizvodeći polipeptid od interesa.
Postupci za isporuku terapijskih agenasa u ćelije i organe
[0467] Ovaj prikaz daje postupke za isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju ili organ sisara. Isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju uključuje davanje kompozicije nanočestica koja uključuje terapijski i/ili profilaktički agens subjektu, pri čemu primena kompozicije uključuje dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom. Na primer, protein, citotoksični agens, radioaktivni jon, hemoterapijski agens ili nukleinska kiselina (kao što je RNK, npr. iRNK) mogu biti isporučeni u ćeliju ili organ. U slučaju da je terapijski i/ili profilaktički agens iRNK, nakon kontakta ćelije sa kompozicijom nanočestica, iRNK koja može da se translatira može da bude translatirana u ćeliji da bi se proizveo polipeptid od interesa. Međutim, iRNK koje u suštini ne mogu da se translatiraju takođe mogu da se isporuče ćelijama. iRNK koje suštinski ne mogu da se translatiraju mogu da budu korisne kao vakcine i/ili mogu da sekvestriraju translacione komponente ćelije da bi smanjile ekspresiju drugih vrsta u ćeliji.
[0468] U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica može da bude usmerena na određeni tip ili klasu ćelija (npr. ćelije određenog organa ili njihovog sistema). Na primer, kompozicija nanočestica koja uključuje terapijski i/ili profilaktički agens od interesa može specifično da se isporuči u jetru, bubreg, slezinu, butnu kost ili pluća sisara. Specifična isporuka određenoj klasi ćelija, organu, sistemu ili njihovoj grupi podrazumeva da se veći udeo kompozicija nanočestica, koje uključuju terapijski i/ili profilaktički agens isporučuje na odredište (npr. tkivo) od interesa u odnosu na druge destinacije, na primer, nakon davanja kompozicije nanočestica sisaru. U nekim primerima izvođenja, specifična isporuka može dovesti do većeg od 2 puta, 5 puta, 10 puta, 15 puta ili 20 puta povećanja količine terapijskog i/ili profilaktičkog agensa po 1 g tkiva ciljanog odredišta (npr. tkiva od interesa, kao što je jetra) u poređenju sa drugom destinacijom (npr. slezinom). U određenim primerima izvođenja, tkivo od interesa se bira iz grupe koja se sastoji od jetre, bubrega, pluća, slezine, butne kosti, vaskularnog endotela u krvnim sudovima (npr. intrakoronarnim ili intra-femoralnim) ili bubrega, i tumorskog tkiva (npr. putem intratumorske injekcije).
[0469] Kao još jedan primer ciljane ili specifične isporuke, iRNK koja kodira vezujućeg partnera proteina (npr. antitelo ili njegov funkcionalni fragment, protein skele ili peptid) ili receptor na površini ćelije može da bude uključena u kompoziciju nanočestica. Za usmeravanje sinteze i ekstracelularne lokalizacije lipida, ugljenih hidrata ili drugih bioloških fragmenata može dodatno ili zamenski da se koristi iRNK. Alternativno, drugi terapijski i/ili profilaktički agensi ili elementi (npr. lipidi ili ligandi) kompozicije nanočestica mogu da budu odabrani na osnovu njihovog afiniteta za određene receptore (npr. receptore lipoproteina niske gustine) tako da kompozicija nanočestica može lakše da interaguje sa populacijom ciljnih ćelija koja uključuje receptore. Na primer, ligandi mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na, članove specifičnog vezujućeg para, antitela, monoklonska antitela, Fv fragmente, jednolančane Fv (scFv) fragmente, Fab' fragmente, F(ab')2 fragmente, jednodomenska antitela, kamelizovana antitela i njihove fragmente, humanizovana antitela i njihove fragmente i njihove multivalentne verzije; multivalentne vezujuće reagense uključujući mono- ili bi-specifična antitela kao što su Fv fragmenti stabilizovani disulfidom, scFv tandemi, dijatela, triatela ili tetratela; i aptameri, receptori i fuzioni proteini.
[0470] U nekim primerima izvođenja, ligand može da bude površinski vezano antitelo, koje može da dozvoljava podešavanje specifičnosti ciljanog delovanja na ćelije. Ovo je posebno korisno jer visoko specifična antitela mogu da se generišu protiv epitopa od interesa za željeno ciljano mesto. U jednom primeru izvođenja, višestruka antitela se eksprimiraju na površini ćelije, a svako antitelo može da ima različitu specifičnost za željeni cilj. Takvi pristupi mogu da povećaju aviditet i specifičnost interakcija ciljanog delovanja.
[0471] Ligand može da izabere, na primer, stručnjak u oblasti biologije, na osnovu željene lokalizacije ili funkcije ćelije. Na primer, ligand estrogenskog receptora, kao što je tamoksifen, može ciljano da deluje na ćelije raka dojke zavisne od estrogena koje imaju povećan broj estrogenskih receptora na površini ćelije. Drugi neograničavajući primeri interakcija ligand/receptor uključuju CCR1 (npr. za lečenje zapaljenog zglobnog tkiva ili mozga kod reumatoidnog artritisa i/ili multiple skleroze), CCR7, CCR8 (npr. za ciljno delovanje na tkivo limfnih čvorova), CCR6, CCR9, CCR10 (npr. za ciljno delovanje na crevno tkivo), CCR4, CCR10 (npr. za ciljno delovanje na kožu), CXCR4 (npr. za opštu pojačanu transmigraciju), HCELL (npr. za lečenje zapaljenja i inflamatornih poremećaja, koštanu srž), Alfa4beta7 (npr. za ciljno delovanje na crevnu sluzokožu) i VLA-4NCAM-1 (npr. za ciljno delovanje na endotel). U principu, bilo koji receptor uključen u ciljno delovanje (npr. metastaza raka) može da se iskoristi za upotrebu u ovde opisanim postupcima i kompozicijama.
[0472] Ciljne ćelije mogu da uključuju, ali nisu ograničene na, hepatocite, epitelne ćelije, hematopoezne ćelije, epitelne ćelije, endotelne ćelije, ćelije pluća, ćelije kosti, matične ćelije, mezenhimske ćelije, nervne ćelije, srčane ćelije, adipocite, glatke mišićne ćelije krvnih sudova, kardiomiocite, skeletne mišićne ćelije, beta ćelije, ćelije hipofize, ćelije sinovijalnog omotača, ćelije jajnika, ćelije testisa, fibroblaste, B ćelije, T ćelije, retikulocite, leukocite, granulocite i tumorske ćelije.
[0473] U određenim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica može ciljano da deluje na hepatocite. Pokazano je da se apolipoproteini kao što je apolipoprotein E (apoE) vezuju u telu sa kompozicijama nanočestica koje sadrže neutralne ili skoro neutralne lipide, a poznato je i da se vezuju sa receptorima kao što su receptori za lipoprotein niske gustine (LDLR receptori) koji se nalaze na površini hepatocita. Videti, npr., Akinc, A. et al., Mol. Ther.2010, 18, 1357―1364 i Dong, Y. et al., PNAS 2014, 111, 3955-3960. Dakle, kompozicija nanočestica koja uključuju lipidnu komponentu sa neutralnim ili skoro neutralnim naelektrisanjem, koja se primenjuje kod subjekta, može da usvoji apoE u telu subjekta i može potom ciljano da na usmereni način isporuči terapijski i/ili profilaktički agens (npr., RNK) u hepatocite koji uključuju LDLR receptore.
[0474] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje u ćelije jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), i (IV), kao što je ovde opisano ili kompozicije nanočestica koja sadrži jedinjenje može da zavisi od nivoa i/ili aktivnosti LDLR, odnosno, preuzimanje kompozicije nanočestica u ćelije je zavisno od LDLR. Na primer, ako ćelija ima nedostatak LDLR (npr., ima aberantnu aktivnost LDLR i/ili nenormalno nizak nivo LDLR), preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju može da opadne u poređenju sa preuzimanjem u normalnu ćeliju.
[0475] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje u ćelije jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), i (IV), kao što je ovde opisano ili kompozicije nanočestica koja sadrži jedinjenje može da bude nezavisno od nivoa i/ili aktivnosti LDLR, ili odnosno, preuzimanje kompozicije nanočestica u ćelije je nezavisno od LDLR. Na primer, ako ćelija ima nedostatak LDLR (npr., ima aberantnu aktivnost LDLR i/ili nenormalno nizak nivo LDLR), preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je suštinski isto kao preuzimanje u normalnu ćeliju.
[0476] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje u ćelije jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), i (IV), kao što je ovde opisano ili kompozicije nanočestica koja sadrži jedinjenje može da zavisi od nivoa i/ili aktivnosti apoE, odnosno, preuzimane kompozicije nanočestica u ćelije je zavisno od apoE. Na primer, ako ćelija ima nedostatak apoE (npr., ima aberantnu aktivnost apoE i/ili nenormalno nizak nivo apoE), preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju može da opadne u poređenju sa preuzimanjem u normalnu ćeliju.
[0477] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje u ćelije jedinjenja jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), i (IV) kao što je ovde opisano ili kompozicije nanočestica koja sadrži jedinjenje može da bude nezavisno od nivoa i/ili aktivnosti apoE, ili odnosno, preuzimanje kompozicije nanočestica u ćelije je nezavisno od apoE. Na primer, ako ćelija ima nedostatak apoE (npr., ima aberantnu aktivnost apoE i/ili nenormalno nizak nivo apoE), preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je suštinski isto kao preuzimanje u normalnu ćeliju.
[0478] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica koja je ovde opisana u ćeliju može da bude zavisno od LDLR, kao i zavisno od apoE.
[0479] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica koja je ovde opisana u ćeliju može da bude zavisno od interakcije LDLR i apoE. Na primer, ako je interakcija LDLR i apoE poremećena (npr., dovodi do nenormalno niskog nivoa nishodne signalizacije), preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju može da opadne u poređenju sa preuzimanjem u normalnu ćeliju.
[0480] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica koja je ovde opisana u ćeliju može da bude nezavisna od LDLR, kao i nezavisno od apoE.
[0481] U određenim primerima izvođenja, preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica koja je ovde opisana u ćeliju može da bude nezavisno od interakcije LDLR i apoE. Na primer, ako je interakcija LDLR i apoE poremećena (npr., dovodi do nenormalno niskog nivoa nishodne signalizacije), preuzimanje jedinjenja ili kompozicije nanočestica u ćeliju je suštinski isto kao preuzimanje u normalnu ćeliju.
[0482] U određenim primerima izvođenja, apoE je apoE3.
[0483] U nekim primerima izvođenja, postupak za isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u ćeliju sisara uključuje davanje subjektu kompozicije nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja sadrži fosfolipid, strukturni lipid, PEG lipid, i jedinjenje jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), kao što je ovde opisano; i (ii) terapijski i/ili profilaktički agens (npr., iRNK), gde davanje uključuje dovođenje u kontakt ćelije sa kompozicijom nanočestica, pri čemu se terapijski i/ili profilaktički agens isporučuje u ćeliju.
[0484] U sledećim primerima izvođenja, postupak za specifičnu isporuku terapijskog i/ili profilaktičkog agensa organ sisara uključuje davanje sisaru kompozicije nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja sadrži fosfolipid, strukturni lipid, PEG lipid, i jedinjenje jedne od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), kao što je ovde opisano; i (ii) terapijski i/ili profilaktički agens (npr., iRNK), gde davanje uključuje dovođenje u kontakt organa sisara sa kompozicijom nanočestica, pri čemu se terapijski i/ili profilaktički agens isporučuje u organ.
[0485] U određenim primerima izvođenja, efikasnost isporuke terapijskog i/ili profilaktičkog agensa je nezavisna od LDLR ili nezavisna od apoE, ili oba. U određenim primerima izvođenja, efikasnost isporuke terapijskog i/ili profilaktičkog agensa je zavisna od LDLR ili zavisna od apoE, ili oba. U određenim primerima izvođenja, efikasnost isporuke terapijskog i/ili profilaktičkog agensa je nezavisna od interakcije LDLR-apoE. U određenim primerima izvođenja, efikasnost isporuke terapijskog i/ili profilaktičkog agensa je zavisna od interakcije LDLR-apoE.
Postupci za lečenje bolesti i poremećaja
[0486] Kompozicije nanočestica mogu da budu korisne za lečenje bolesti, poremećaja ili stanja. Konkretno, ove kompozicije mogu da budu korisne za lečenje bolesti, poremećaja ili stanja koja se karakterišu odsustvom ili poremećenom aktivnošću proteina ili polipeptida. Na primer, kompozicija nanočestica koja sadrži iRNK koja kodira odsutan ili poremećen polipeptid može da se primeni ili isporuči u ćeliju. Translacijom iRNK koja sledi može da se proizvede polipeptid, čime se smanjuje ili eliminiše problem koji je nastao usled odsustva ili poremećene aktivnosti koju uzrokuje polipeptid. Pošto translacija može da se odvija vrlo brzo, postupci i kompozicije mogu da budu korisne za lečenje akutnih bolesti, poremećaja ili stanja kao što su sepsa, moždani udar i infarkt miokarda. Terapijski i/ili profilaktički agens koji je uključen u kompoziciju nanočestica takođe može da bude u stanju da izmeni brzinu transkripcije date kategorije, čime utiče na ekspresiju gena.
[0487] Bolesti, poremećaji i/ili stanja koja se karakterišu nefunkcionalnom ili poremećenom aktivnošću proteina ili polipeptida za koje kompozicija može da se primenjuje, obuhvataju, ali nisu ograničene na, retke bolesti, zarazne bolesti (i kao vakcine i kao terapeutici), kancer i proliferativne bolesti, genetske bolesti (npr. cistična fibroza), autoimunske bolesti, dijabetes, neurodegenerativne bolesti, kardiovaskularne i renovaskularne bolesti i metaboličke bolesti. Višestruke bolesti, poremećaji i/ili stanja mogu da se karakterišu izostankom (ili značajnim smanjenjem, tako da ne dolazi do pravilnog funkcionisanja proteina) aktivnosti proteina. Takvi proteini mogu da budu odsutni ili mogu da budu suštinski nefunkcionalni. Specifičan primer nefunkcionalnog proteina su varijante gena za regulator transmembranske provodljivosti cistične fibroze (CFTR) sa misens mutacijama, koje proizvode nefunkcionalnu varijantu CFTR proteina, koja izaziva cističnu fibrozu. Predmetni prikaz obezbeđuje postupak za lečenje takvih bolesti, poremećaja i/ili stanja kod subjekta putem primene kompozicije nanočestica koja uključuje RNK i lipidnu komponentu koja uključuje lipid prema bilo kojoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), fosfolipid (izborno nezasićen), PEG lipid i strukturni lipid, pri čemu RNK može da bude iRNK, koja kodira polipeptid koji antagonizuje ili na drugi način prevazilazi poremećenu aktivnost proteina prisutnu u ćeliji subjekta.
[0488] U nekim primerima izvođenja, postupak za lečenje bolesti ili poremećaja kod sisara kome je to potrebno uključuje davanje sisaru terapijski efikasne količine kompozicije nanočestica koja uključuje (i) lipidnu komponentu koja sadrži fosfolipid, strukturni lipid, PEG lipid, i jedinjenje formule (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), ili (20-I), kao što je ovde opisano; i (ii) a terapijski i/ili profilaktički agens (npr., iRNK).
[0489] Prikaz obezbeđuje postupke koji obuhvataju primenu kompozicija nanočestica koje uključuju jedno ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa i farmaceutskih kompozicija koje ih sadrže. Izrazi terapijski i profilaktički mogu ovde da se koriste kao sinonimi kad su u pitanju karakteristike i primeri izvođenja predmetnog prikaza. Terapijske kompozicije, ili njihove kompozicije za vizuelizaciju dijagnostiku ili profilaksu, mogu da se daju subjektu uporebljavajući bilo koju razumnu količinu i bilo koji put primene koji su efikasni za prevenciju, lečenje, dijagnostikovanje ili vizuelizaciju bolesti, poremećaja i/ili stanja i/ili u bilo koje druge svrhe. Specifična količina koja se daje određenom subjektu može da varira u zavisnosti od vrste, starosti i opšteg stanja subjekta; od cilja primene; konkretne kompozicije; načina primene; i slično. Kompozicije u skladu sa predmetnim prikazom mogu da se formulišu u obliku jedinične doze radi lakše primene i uniformnosti doziranja. Podrazumeva se, međutim, da će o ukupnoj dnevnoj upotrebi kompozicije prema predmetnom prikazu odlučivati nadležni lekar, u okvirima razumne medicinske procene. Specifičan nivo doziranja koji je terapijski efikasan, profilaktički efikasan ili na drugi način pogodan (npr. za vizuelizaciju) za svakog određenog pacijenta zavisiće od niza faktora koji uključuju težinu i identitet poremećaja koji se leči, ako postoji; da li je primenjen jedan ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa; od toga koja se specifična kompozicija koristi; od starosti, telesna težina, opšteg zdravlja, pola i ishrane pacijenta; od vremena primene, puta primene i brzine izlučivanja specifične farmaceutske kompozicije koja se koristi; od toga koliko lečenje traje; od lekova koji se koriste u kombinaciji ili istovremeno sa specifičnom farmaceutskom kompozicijom koja se koristi; i od sličnih faktora koji su dobro poznati u oblasti medicine.
[0490] Kompozicija nanočestica koja uključuje jedan ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa može da se primenjuje bilo kojim putem. U nekim primerima izvođenja, kompozicije, uključujući kompozicije za profilaksu, dijagnostiku ili vizuelizaciju, koje uključuju jednu ili više ovde opisanih kompozicija nanočestica, primenjuju se jednim ili većim brojem različitih puteva primene, uključujući oralni, intravenski, intramuskularni, intraarterijski, intramedularni, intratekalni, potkožni, intraventrikularni, trans- ili intradermalni, interdermalni, rektalni, intravaginalni, intraperitonealni, intraokularni, subretinalni, intravitrealni, topikalni (npr. prahovima, mastima, kremama, gelovima, losionima i/ili kapima), mukozni, nazalni, bukalni, enteralni, vitrealni, intratumorski, sublingvalni, intranazalni; intratrahealnom instilacijom, bronhijalnom instilacijom i/ili inhalacijom; u vidu oralnog spreja i/ili praha, spreja za nos, i/ili aerosola, i/ili kroz kateter portalne vene. U nekim primerima izvođenja, kompozicija može da se primenjuje intravenski, intramuskularno, intradermalno, intraarterijski, intratumorski, potkožno, intraokularno, subretinalno, intravitrealno ili inhalacijom. Međutim, predmetni prikaz obuhvata isporuku ili primenu kompozicija bilo kojom pogodnim putem uzimajući u obzir verovatan napredak nauke o isporuci lekova. U principu, najpogodniji put primene zavisiće od niza faktora, uključujući prirodu kompozicije nanočestica koja uključuje jedan ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa (npr. njihovu stabilnost u različitim telesnim okruženjima kao što su krvotok i gastrointestinalni trakt), stanje pacijenta (npr. da li pacijent može da toleriše određene puteve primene), itd.
[0491] U određenim primerima izvođenja, kompozicije u skladu sa predmetnim prikazom mogu da se primenjuju u doznim nivoima dovoljnim za isporuku od oko 0.0001 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 0.001 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 0.005 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 0.01 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 0.05 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 0.1 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 1 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 2 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 5 mg/kg do oko 10 mg/kg, od oko 0.0001 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 0.001 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 0.005 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 0.01 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 0.05 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 0.1 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 1 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 2 mg/kg do oko 5 mg/kg, od oko 0.0001 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 0.001 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 0.005 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 0.01 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 0.05 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 0.1 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 1 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 2 mg/kg do oko 2.5 mg/kg, od oko 0.0001 mg/kg do oko 1 mg/kg, od oko 0.001 mg/kg do oko 1 mg/kg, od oko 0.005 mg/kg do oko 1 mg/kg, od oko 0.01 mg/kg do oko 1 mg/kg, od oko 0.05 mg/kg do oko 1 mg/kg, od oko 0.1 mg/kg do oko 1 mg/kg, od oko 0.0001 mg/kg do oko 0.25 mg/kg, od oko 0.001 mg/kg do oko 0.25 mg/kg, od oko 0.005 mg/kg do oko 0.25 mg/kg, od oko 0.01 mg/kg do oko 0.25 mg/kg, od oko 0.05 mg/kg do oko 0.25 mg/kg, ili od oko 0.1 mg/kg do oko 0.25 mg/kg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., iRNK) u datoj dozi, pri čemu doza od 1 mg/kg (mpk) obezbeđuje 1 mg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa po 1 kg telesne težine subjekta. U određenim primerima izvođenja, može da se primenjuje doza od oko 0.001 mg/kg do oko 10 mg/kg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., iRNK) kompozicije nanočestica. U drugim primerima izvođenja, može da se primenjuje doza od oko 0.005 mg/kg do oko 2.5 mg/kg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa. U nekim primerima izvođenja, može da se primenjuje doza od oko 0.1 mg/kg do oko 1 mg/kg. U drugim primerima izvođenja, može da se primenjuje doza od oko 0.05 mg/kg do oko 0.25 mg/kg. Doza može da se primenjuje jednom ili više puta na dan, u istoj ili u različitoj količini, kako bi se dobio željeni nivo ekspresije iRNK; i/ili terapijski, dijagnostički, profilaktički efekat ili efekat vizualizacije. Željena doza može da se isporučuje, na primer, tri puta na dan, dva puta na dan, jednom dnevno, svaki drugi dan, svaki treći dan, svake nedelje, svake dve nedelje, svake tri nedelje, ili svake četiri nedelje. U određenim primerima izvođenja, željena doza može da se isporučuje putem višestrukih primena (npr., dve, tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet deset, jedanaest, dvanaest, trinaest, četrnaest, ili više, primena). U nekim primerima izvođenja, jedna doza može da se primeni, na primer, pre ili posle hirurške procedure ili u slučaju akutne bolesti, poremećaja ili stanja.
[0492] Kompozicije nanočestica koje uključuju jedan ili više terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili više drugih terapijskih, profilaktičkih, dijagnostičkih, ili sredstava za vizuelizaciju. "U kombinaciji sa" nema nameru da implicira da sredstva moraju da se primene u isto vreme i/ili da budu formulisana za isporuku zajedno, premda su ovi postupci isporuke u obimu predmetnog prikaza. Na primer, jedna ili više kompozicije nanočestica koje uključuju jedan ili više različitih terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa mogu da se primenjuju u kombinaciji.
Kompozicije mogu da se primenjuju istovremeno, pre, ili nakon, jednog ili više željenih terapeutika ili medicinskih procedura. U principu, svako sredstvo će se primenjivati u dozi ili prema vremenskom rasporedu utvrđenom za to sredstvo. U nekim primerima izvođenja, predmetni prikaz obuhvata isporuku kompozicija, ili svojih kompozicija za vizuelizaciju dijagnostiku ili profilaksu, u kombinaciji sa sredstvima koja poboljšavaju njihovu bioraspoloživost, snižavaju i/ili modifikuju njihov metabolizam, inhibiraju njihovu ekskreciju i/ili modifikuju njihovu distribuciju u telu.
[0493] Dalje će biti jasno da terapijski, profilaktički, dijagnostički ili aktivni agensi za snimanje koji se koriste u kombinaciji mogu da se primenjuju zajedno u jednoj kompoziciji ili da se primenjuju odvojeno u različitim kompozicijama. U principu, očekuje se da će se agensi koji se koriste u kombinaciji koristiti na nivoima koji ne prelaze nivoe na kojima se koriste pojedinačno. U nekim primerima izvođenja, nivoi koji se koriste u kombinaciji mogu biti niži od onih koji se koriste pojedinačno.
[0494] Posebna kombinacija terapija (terapeutika ili procedura) koja se koristi u kombinovanom režimu će uzeti u obzir kompatibilnost željenih terapeutika i/ili procedura i željeni terapijski efekat koji treba postići. Takođe će biti cenjeno da primenjene terapije mogu postići željeni efekat za isti poremećaj (na primer, kompozicija korisna za lečenje raka može se primenjivati istovremeno sa hemoterapijskim agensom), ili mogu postići različite efekte (npr. neželjeni efekti, kao što su reakcije povezane sa infuzijom).
[0495] Kompozicija nanočestica može da se koristi u kombinaciji sa agensom za povećanje efikasnosti i/ili terapijskog okvira kompozicije. Takav agens može da bude, na primer, antiinflamatorno jedinjenje, steroid (npr., kortikosteroid), statin, estradiol, inhibitor BTK, agonist S1P1, modulator glukokortikoidnog receptora (GRM) ili antihistaminik. U nekim primerima izvođenja, kompozicija nanočestica može da se koristi u kombinaciji sa deksametazonom, metotreksatom, acetaminofenom, blokatorom H1 receptora ili blokatorom H2 receptora. U određenim primerima izvođenja, postupak lečenja subjekta kome je to potrebno ili davanja terapijskog i/ili profilaktičkog agensa subjektu (npr. sisaru) može da uključuje prethodni tretman subjekta jednim ili većim brojem agenasa pre primene kompozicije nanočestica. Na primer, subjekt može da bude prethodno tretiran korisnom količinom (npr.10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg ili bilo kojom drugom korisnom količinom) deksametazona, metotreksata, acetaminofena, blokatora H1 receptora ili blokatora H2 receptora. Predtretman može da se desi 24 časa ili manje (npr. 24 časa, 20 časova, 16 časova, 12 časova, 8 časova, 4 časa, 2 časa, 1 čas, 50 minuta, 40 minuta, 30 minuta, 20 minuta ili 10 minuta) pre primene kompozicije nanočestica i može da se odvija jednom, dva ili više puta u, na primer, rastućim količinama doze.
[0496] U bilo kom ovde opisanom postupku ili upotrebi, u određenim primerima izvođenja, subjekat kome je potrebno navedeno ima nedostatak LDLR ili ima nedostatak apoE ili oba. U određenim primerima izvođenja, subjekat kome je potrebno navedeno nema nedostatak LDLR ili ima normalne nivoe i/ili aktivnosti LDLR. U određenim primerima izvođenja, subjekat kome je potrebno navedeno nema nedostatak apoE ili ima normalne nivoe i/ili aktivnosti apoE. U određenim primerima izvođenja, subjekat kome je potrebno navedeno ima poremećenu interakciju LDLR i apoE. U određenim primerima izvođenja, subjekat kome je to potrebno ima normalnu interakciju LDLR i apoE.
[0497] Oko, približno: Kako se ovde koriste, izrazi "približno" i "oko," kada se primenjuju na jednu ili više vrednosti od interesa, odnose se na vrednost koja je slična navedenoj referentnoj vrednosti. U nekim primerima izvođenja, izraz "približno" ili "oko" odnosi se na opseg vrednosti koje padaju unutar 25%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, ili manje, u bilo kom pravcu od (veće od ili manje od) navedene referentne vrednosti osim ako je drugačije navedeno ili na drugi način evidentno iz konteksta (osim kada bi taj broj premašio 100% moguće vrednosti). Na primer, kada se koristi u kontekstu količine datog jedinjenja u lipidnoj komponenti kompozicije nanočestica, "oko" može da označava srednju vrednost /- 10% navedene vrednosti. Na primer, kompozicija nanočestica koje uključuju lipidnu komponentu koja ima oko 40% datog jedinjenja, može da uključuje 30-50% jedinjenja.
[0498] Jedinjenje: Kako se ovde koristi, predviđeno je da izraz "jedinjenje" uključuju sve izomere i izotope prikazane strukture. "Izotopi" se odnosi na atome koji imaju isti atomski broj ali različit maseni broj, što je posledica različitog broja neutrona u jezgrima. Na primer, izotopi vodonika uključuju tricijum i deuterijum. Dalje, jedinjenje, soli ili kompleksi prema predmetnom prikazu mogu da se pripremaju u kombinaciji sa molekulima rastvarača ili vode kako bi rutinskim postupcima formirali solvate i hidrate.
[0499] Dovođenje u kontakt: Kako se ovde koristi, izraz "dovođenje u kontakt" označava uspostavljanje fizičke povezanosti između dva ili više entiteta. Na primer, dovođenje u kontakt sisarske ćelije sa kompozicijom nanočestica znači da sisarska ćelija i nanočestica dele fizičku vezu. Postupci dovođenja u kontakt ćelija sa spoljašnjim entitetima, kako in vivo tako i ex vivo, dobro su poznati u oblasti biologije. Na primer, dovođenje u kontakt kompozicije nanočestica i sisarske ćelije koja se nalazi u sisaru može da se izvodi različitim putevima primene (npr., intravenski, intramuskularno, intradermalno i potkožno) i može da uključuje različite količine kompozicija nanočestica. Štaviše, sa kompozicijama nanočestica može da se dovede u kontakt više od jedne sisarske ćelije.
[0500] Isporučivanje: Kako se ovde koristi, izraz "isporučivanje" označava obezbeđivanje nekog entiteta na određenoj destinaciji. Na primer, isporučivanje terapijskih i/ili profilaktičkog agensa kod subjekta može da uključuje primenjivanje kod subjekta kompozicije nanočestica koja uključuje terapijski i/ili profilaktički agens (npr., intravenskim, intramuskularnim, intradermalnim ili potkožnim putem). Primena kompozicije nanočestica kod sisara, ili na sisarsku ćeliju, može da uključuje dovođenje u kontakt jedne ili više ćelija sa kompozicijom nanočestica.
[0501] Poboljšana isporuka: Kako se ovde koristi, izraz "poboljšana isporuka" označava isporuku više (npr., najmanje 1.5 put više, najmanje 2 puta više, najmanje 3 puta više, najmanje 4 puta više, najmanje 5 puta više, najmanje 6 puta više, najmanje 7 puta više, najmanje 8 puta više, najmanje 9 puta više, najmanje 10 puta više) terapijskog i/ili profilaktičkog agensa putem nanočestice u ciljno tkivo od interesa (npr., sisarsku jetru) u poređenju sa nivoom isporuke terapijskog i/ili profilaktičkog agensa putem kontrolne nanočestice u ciljno tkivo od interesa (npr., MC3, KC2 ili DLinDMA). Nivo isporuke nanočestice u dato tkivo može da se meri tako što se poredi količina proteina proizvedenog u tkivu sa težinom navedenog tkiva, količina terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u tkivu sa težinom navedenog tkiva, količina proteina proizvedenog u tkivu sa ukupnom količinom proteina u navedenom tkivu, ili količina terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u tkivu sa ukupnom količinom terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u navedenom tkivu. Podrazumeva se da poboljšana isporuka nanočestice u ciljno tkivo ne mora da se odredi u subjektu koji se leči, već može da bude određena u surogatu kao što je životinjski model (npr., pacovski model).
[0502] Specifična isporuka: Kako se ovde koristi, izraz "specifična isporuka", "specifično isporučiti" ili " specifično isporučivanje" označava isporuku više (npr., najmanje 1.5 put više, najmanje 2 puta više, najmanje 3 puta više, najmanje 4 puta više, najmanje 5 puta više, najmanje 6 puta više, najmanje 7 puta više, najmanje 8 puta više, najmanje 9 puta više, najmanje 10 puta više) terapijskog i/ili profilaktičkog agensa putem nanočestice u ciljno tkivo od interesa (npr., sisarsku jetru) u poređenju sa drugim tkivom koje nije ciljno (npr., sisarska slezina). Nivo isporuke nanočestice u dato tkivo može da se meri tako što se poredi količina proteina proizvedenog u tkivu sa težinom navedenog tkiva, količina terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u tkivu sa težinom navedenog tkiva, količina proteina proizvedenog u tkivu sa ukupnom količinom proteina u navedenom tkivu, ili količina terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u tkivu sa ukupnom količinom terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u navedenom tkivu. Na primer, kada su ciljevi bubrežno-vaskularni, smatra se da je terapijski i/ili profilaktički agens specifično obezbeđen u sisarskom bubregu u poređenju sa jetrom i slezinom, ukoliko se nakon sistemske primene terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u bubreg isporuči 1.5 put, 2 puta, 3 puta, 5 puta, 10 puta, 15 puta ili 20 puta više terapijskog i/ili profilaktičkog agensa na 1 g tkiva, nego u jetru ili slezinu. Podrazumeva se da sposobnost nanočestice da vrši specifično isporučivanje u ciljno tkivo ne mora da se odredi u subjektu koji se leči, već može da bude određena u surogatu kao što je životinjski model (npr., pacovski model).
[0503] Efikasnost inkapsulacije: Kako se ovde koristi, "efikasnost inkapsulacije" odnosi se na količinu terapijskog i/ili profilaktičkog agensa koja postaje deo kompozicije nanočestica, u odnosu na početnu ukupnu količinu terapijskog i/ili profilaktičkog agensa koja se koristi u pripremi kompozicije nanočestica. Na primer, ako je 97 mg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa inkapsulirano u kompoziciji nanočestica od ukupno 100 mg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa koji je inicijalno obezbeđen za kompoziciju, efikasnost inkapsulacije može da bude data kao 97%. Kako se ovde koristi, "inkapsulacija" može da se odnosi na potpuno, suštinsko ili delimično zatvaranje, obuhvatanje, okruživanje ili oblaganje.
[0504] Ekspresija: Kako se ovde koristi, "ekspresija" sekvence nukleinske kiseline odnosi se na translaciju iRNK u polipeptid ili protein i/ili post-translacionu modifikaciju polipeptida ili proteina.
[0505] In vitro: Kako se ovde koristi, izraz "in vitro" odnosi se na događaje koji se odvijaju u veštačkom okruženju, npr., u epruveti ili reakcionom sudu, u ćelijskoj kulturi, u Petri šolji, itd., a ne unutar organizma (npr., životinje, biljke ili mikroba).
[0506] In vivo: Kako se ovde koristi, izraz "in vivo" odnosi se na događaje koji se odvijaju unutar organizma (npr., životinje, biljke ili mikroba ili njihove ćelije ili tkiva).
[0507] Ex vivo: Kako se ovde koristi, izraz "ex vivo" odnosi se na događaje koji se odvijaju unutar organizma (npr., životinje, biljke ili mikroba ili njihove ćelije ili tkiva). Ex vivo događaji mogu da se odvijaju u okruženju koje je minimalno izmenjeno u odnosu na prirodno (npr., in vivo) okruženje.
[0508] Izomer: Kako se ovde koristi, izraz "izomer" označava bilo koji geometrijski izomer, tautomer, cviterjon, stereoizomer, enantiomer ili dijastereomer jedinjenja. Jedinjenja mogu da uključuju jedan ili više hiralnih centara i/ili dvostrukih veza i mogu, dakle, da postoje kao stereoizomeri, kao što su izomeri dvostruke veze (tj., geometrijski E/Z izomeri) ili dijastereomeri (npr., enantiomeri (tj., (+) ili (-)) ili cis/trans izomeri). Predmetni prikaz uključuje bilo koji i sve izomere ovde opisanih jedinjenja, uključujući stereomerno čiste oblike (npr., geometrijski čiste, enantiomerno čiste, ili dijastereomerno čiste) i enantiomerne i stereoizomerne smeše, npr., racemate. Enantiomerne i stereomerne smeše jedinjenja i sredstva za njihovo razdvajanje na enantiomerne ili stereoizomerne komponente su dobro poznata.
[0509] Lipidna komponenta: Kako se ovde koristi, "lipidna komponenta" je komponenta kompozicije nanočestica koja uključuje jedan ili više lipida. Na primer, lipidna komponenta može da uključuje jedan ili više katjonskih/jonizabilnih, PEGilovanih, strukturnih i drugih lipida, kao što su fosfolipidi.
[0510] Linker: Kako se ovde koristi, "linker" je fragment koji povezuje dva fragmenta, na primer, veza između dva nukleozida u jednoj vrsti kape. Linker može da uključuje jednu ili više grupa uključujući, ali ne i ograničeno na, fosfatne grupe (npr., fosfati, boranofosfati, tiofosfati, selenofosfati i fosfonati), alkil grupe, amidate, ili glicerole. Na primer, dva nukleozida u analogu kape mogu da budu povezani na svojim 5' pozicijama preko trifosfatne grupe ili preko lanca koji uključuje dva fosfatna fragmenta i boranofosfatni fragment.
[0511] Postupci primene: Kako se ovde koristi, "postupci primene" mogu da uključuju intravenske, intramuskularne, intradermalne, potkožne, ili druge postupke za isporučivanje kompozicije subjektu. Postupak primena može da se odabere tako da ostvaruje ciljanu isporuku (npr., da specifično isporučuje) u specifični region ili sistem u telu.
[0512] Modifikovan: Kako se ovde koristi, "modifikovan" znači neprirodan. Na primer, RNK može da bude modifikovana RNK. Odnosno, RNK može da uključuje jednu ili više nukleobaza, nukleozida, nukleotida, ili linkera koji se ne javljaju u prirodi. "Modifikovana" vrsta može u ovom dokumentu da se označava i kao "izmenjena" vrsta. Vrsta može da bude modifikovana ili izmenjena hemijski, strukturno ili funkcionalno. Na primer, modifikovana vrsta nukleobaze može da uključuje jednu ili više supstitucija koje se ne javljaju u prirodi.
[0513] Odnos N:P: Kako se ovde koristi, "odnos N:P" je molski odnos jonizabilnih (u fiziološkom opsegu pH) atoma azota u lipidnim grupama prema fosfatnim grupama u RNK, npr., u kompoziciji nanočestica koja uključuje lipidnu komponentu i RNK.
[0514] Kompozicija nanočestica: Kako se ovde koristi, "kompozicija nanočestica" je kompozicija koja sadrži jedan ili više lipida. Kompozicije nanočestica su tipično veličine reda mikrometara ili manje i mogu da uključuju dvosloj lipida. Kompozicije nanočestica obuhvataju lipidne nanočestice (LNP), lipozome (npr. lipidne vezikule) i lipoplekse. Na primer, kompozicija nanočestica može da bude lipozom koji ima dvosloj lipida prečnika 500 nm ili manje.
[0515] Prirodni: Kako se ovde koristi, "prirodni" znači postojanje u prirodi bez veštačke pomoći.
[0516] Pacijent: Kako se ovde koristi, "pacijent" se odnosi na subjekat koji može da traži ili mu je potreban tretman, koji zahteva lečenje, koji se leči, koji će biti na lečenju, ili subjekat koji je pod negom obučenog stručnjaka za određenu bolest ili stanje.
[0517] PEG lipid: Kako se ovde koristi, "PEG lipid" ili "PEGilovani lipid" se odnosi na lipid koji sadrži komponentu polietilen glikola.
[0518] Farmaceutski prihvatljiv: Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde koristi tako da se odnosi na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili dozne oblike koji su, u okviru razumne medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudskih bića i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugog problema ili komplikacije, srazmerno razumnom odnosu koristi i rizika.
[0519] Farmaceutski prihvatljiv ekscipijens: Izraz "farmaceutski prihvatljiv ekscipijens", kako se ovde koristi, odnosi se na bilo koji sastojak osim ovde opisanih jedinjenja (na primer, vehikulum sposoban da suspenduje, formira komplekse ili rastvori aktivno jedinjenje) i koji ima svojstvo da je u suštini netoksičan i neinflamatoran kod pacijenata. Ekscipijensi mogu da uključuju, na primer: antiadherente, antioksidante, veziva, obloge, sredstva za kompresiju, sredstva za raspadanje, sredstva za bojenje (boje), emolijente, emulgatore, punioce (razblaživače), sredstva za stvaranje filma ili obloge, arome, mirise, sredstva za klizenje (pojačivače tečljivosti), lubrikante, konzervanse, štamparske boje, sorbente, sredstva za suspendovanje ili dispergovanje, zaslađivače i vode za hidrataciju. Primeri ekscipijenasa uključuju, ali nisu ograničeni na: butilovani hidroksitoluen (BHT), kalcijum karbonat, kalcijum fosfat (dvobazni), kalcijum stearat, kroskarmelozu, umreženi polivinil pirolidon, limunsku kiselinu, krospovidon, cistein, etil celulozu, želatin, hidroksipropil celulozu, hidroksipropil metilcelulozu, laktozu, magnezijum stearat, maltitol, manitol, metionin, metilcelulozu, metil paraben, mikrokristalnu celulozu, polietilen glikol, polivinil pirolidon, povidon, preželatinizovani skrob, propil paraben, retinil palmitat, šelak, silicijum dioksid, natrijum karboksimetilcelulozu, natrijum citrat, natrijum skrob glikolat, sorbitol, skrob (kukuruzni), stearinsku kiselinu, saharozu, talk, titanijum dioksid, vitamin A, vitamin E (alfa-tokoferol), vitamin C, ksilitol i druge vrste koje su ovde prikazane.
[0520] U predmetnoj specifikaciji, strukturna formula jedinjenja predstavlja određeni izomer radi pogodnosti u nekim slučajevima, ali ovaj prikaz uključuje sve izomere, kao što su geometrijski izomeri, optički izomeri zasnovani na asimetričnom ugljeniku, stereoizomeri, tautomeri i slično, podrazumeva se da svi izomeri ne mogu imati isti nivo aktivnosti. Pored toga, kristalni polimorfizam može da bude prisutan kod jedinjenja predstavljenih formulom. Treba napomenuti da je bilo koji kristalni oblik, smeša kristalnih oblika ili njihov anhidrid ili hidrat uključen u obim ovog pronalaska.
[0521] Izraz "kristalni polimorfi", "polimorfi" ili "kristalni oblici" označava kristalne strukture u kojima jedinjenje (ili njegova so ili solvat) može da kristalizuje u različitim rasporedima pakovanja kristala, od kojih svi imaju isti elementalni sastav. Različiti kristalni oblici obično imaju različite obrasce difrakcije X-zraka, infracrvene spektre, tačke topljenja, tvrdoću gustinu, kristalni oblik, optička i električna svojstva, stabilnost i solubilnost. Rastvarač za rekristalizaciju, brzina kristalizacije, temperatura skladištenja, i drugi faktori, mogu da dovedu do dominacije jednog kristalnog oblika. Kristalni polimorfi jedinjenja mogu da se pripremaju kristalizacijom pod različitim uslovima.
[0522] Farmaceutski prihvatljive soli: Kompozicije mogu takođe da uključuju soli jednog ili više jedinjenja. Soli mogu da budu farmaceutski prihvatljive soli. Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljive soli" odnosi se na derivate prikazanih jedinjenja gde je matično jedinjenje izmenjeno tako što se postojeći kiselinski ili bazni fragment konvertuje u oblik svoje soli (npr., reakcijom slobodne bazne grupe sa pogodnom organskom kiselinom). Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali nisu ograničene na, soli mineralnih ili organskih kiselina soli baznih ostataka kao što su amini; alkalne ili organske soli kiselih ostataka kao što su karboksilne kiseline; i slično. Reprezentativne kisele adicione soli uključuju acetat, adipat, alginat, askorbat, aspartat, benzensulfonat, benzoat, bisulfat, borat, butirat, kamforat, kamforsulfonat, citrat, ciklopentanpropionat, diglukonat, dodecilsulfat, etansulfonat, fumarat, glukoheptonat, glicerofosfat, hemisulfat, heptonat, heksanoat, hidrobromid, hidrohlorid, hidrojodid, 2-hidroksi-etansulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauril sulfat, malat, maleat, malonat, metansulfonat, 2-naftalensulfonat, nikotinat, nitrat, oleat, oksalat, palmitat, pamoat, pektinat, persulfat, 3-fenilpropionat, fosfat, pikrat, pivalat, propionat, stearat, sukcinat, sulfat, tartrat, tiocijanat, toluensulfonat, undekanoat, valerat, i slično. Reprezentativne soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala uključuju natrijum, litijum, kalijum, kalcijum, magnezijum, i slično, kao i netoksične amonijumske, kvaternerne amonijumske i aminske katjone, uključujući, ali ne i ograničeno na, amonijum, tetrametilamonijum, tetraetilamonijum, metilamin, dimetilamin, trimetilamin, trietilamin, etilamin, i slično. Farmaceutski prihvatljive soli prema predmetnom prikazu uključuju konvencionalne netoksične soli matičnih jedinjenja koje se obrazuju, na primer, od netoksičnih neorganskih ili organskih kiselina. Farmaceutski prihvatljive soli prema predmetnom prikazu mogu da se sintetišu od matičnog jedinjenja koje sadrži bazni ili kiseli fragment, putem konvencionalnih hemijskih postupaka. U principu, ove soli mogu da se pripremaju tako što slobodni kiseli ili bazni oblici ovih jedinjenja reaguju sa stehiometrijskom količinom pogodne baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u smeša ova dva; u principu, poželjni su nevodeni medijumi kao što su etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril. Liste pogodni soli mogu da se nađu u publikaciji Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p.
1418, Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, P.H. Stahl i C.G. Wermuth (eds.), Wiley-VCH, 2008, i Berge et al., Journal of Pharmaceutical Science, 66, 1-19 (1977).
[0523] Fosfolipid: Kako se ovde koristi, "fosfolipid" je lipid koji uključuje fosfatni fragment i jedan ili više lanaca ugljenika, kao što su lanci nezasićenih masnih kiselina. Fosfolipid može da sadrži jednu ili više višestrukih (npr. dvostrukih ili trostrukih) veza (npr. jednu ili više nezasićenosti). Određeni fosfolipidi mogu da olakšavaju fuziju sa membranom. Na primer, katjonski fosfolipid može da interaguje sa jednim ili više negativno naelektrisanih fosfolipida membrane (npr. ćelijske ili intracelularne membrane). Fuzija fosfolipida sa membranom može da omogući da jedan ili više elemenata kompozicije koja sadrži lipide prođe kroz membranu dozvoljavajući, npr., isporuku jednog ili više elemenata u ćeliju.
[0524] Indeks polidisperznosti: Kako se ovde koristi, "indeks polidisperznosti" je odnos koji opisuje homogenost distribucije veličine čestica u sistemu. Mala vrednost, na primer, manja od 0.3, ukazuje na usku distribuciju veličine čestica.
[0525] Polipeptid: Kako se ovde koristi, izraz "polipeptid" ili "polipeptid od interesa" odnosi se na polimer aminokiselinskih ostataka koji su tipično spojeni peptidnim vezama koji se mogu proizvesti prirodno (npr. izolovani ili prečišćeni) ili sintetički.
[0526] RNK: Kako se ovde koristi, "RNK" se odnosi na ribonukleinsku kiselinu koja može da bude prirodna ili neprirodna. Na primer, RNK može uključivati modifikovane i/ili komponente koje se ne pojavljuju u prirodi kao što su jedna ili više nukleobaza, nukleozida, nukleotida ili linkera. RNK može da sadrži strukturu kape, nukleozid koji dovodi do terminacije lanca, strukturu drška-petlja, poliA sekvencu i/ili signal za poliadenilaciju. RNK može da ima nukleotidnu sekvencu koja kodira polipeptid od interesa. Na primer, RNK može da bude informaciona RNK (iRNK). Translacija iRNK koja kodira određeni polipeptid, na primer, in vivo translacija iRNK unutar ćelije sisara, može da proizvede kodirani polipeptid. RNK mogu biti odabrane iz neograničavajuće grupe koja se sastoji od male interferirajuće RNK (siRNA), asimetrične interferirajuće RNK (aiRNA), mikroRNK (miRNA), RNK koja predstavlja supstrat za Dicer (dsRNA), RNK u vidu male ukosnice (shRNA), iRNK i njihovih mešavina.
[0527] Pojedinačna jedinična doza: Kao što je ovde korišćeno, "pojedinačna jedinična doza" je doza bilo kog terapeutika primenjenog u jednoj dozi/u jednom trenutku/jednim putem/u jednoj tački kontakta, tj. jednokratno davanje.
[0528] Podela doze: Kako se ovde koristi, "podela doze" je podela pojedinačne jedinične doze ili ukupne dnevne doze na dve ili više doza.
[0529] Ukupna dnevna doza: Kako se ovde koristi, "ukupna dnevna doza" je količina data ili propisana u periodu od 24 sata. Može da se primenjuje kao pojedinačna jedinična doza.
[0530] Veličina: Kako se ovde koristi, "veličina" ili "srednja veličina" u kontekstu kompozicija nanočestica se odnosi na srednji prečnik kompozicije nanočestica.
[0531] Subjekat: Kako se ovde koristi, izraz "subjekat" ili "pacijent" se odnosi na bilo koji organizam kod koga može da se primeni kompozicija u skladu sa prikazom, npr., u eksperimentalne, dijagnostičke, profilaktičke i/ili terapijske svrhe. Tipični subjekti uključuju životinje (npr. sisare kao što su miševi, pacovi, zečevi, primati izuzev ljudi i ljudi) i/ili biljke.
[0532] Ciljne ćelije: Kako se ovde koristi, "ciljne ćelije" se odnosi na bilo koju jednu ili više ćelija od interesa. Ćelije se mogu naći in vitro, in vivo, in situ, ili u tkivu ili organu organizma. Organizam može da bude životinja, poželjno sisar, poželjnije čovek i najpoželjnije pacijent.
[0533] Ciljno tkivo: Kako se ovde koristi, "ciljno tkivo" se odnosi na bilo koji jedan ili više tipova tkiva od interesa u kojima bi isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa rezultirala željenim biološkim i/ili farmakološkim efektom. Primeri ciljnih tkiva od interesa uključuju specifična tkiva, organe i sisteme ili njihove grupe. U posebnim primenama, ciljno tkivo može da bude bubreg, pluća, slezina, vaskularni endotel u sudovima (npr. intrakoronarni ili intra-femoralni) ili tumorsko tkivo (npr., putem intratumoralne injekcije). "Tkivo koje nije ciljno" odnosi se na bilo koji jedan ili više tipova tkiva u kojima ekspresija kodiranog proteina ne dovodi do željenog biološkog i/ili farmakološkog efekta. U posebnim primenama, tkiva koja nisu ciljna mogu da uključuju jetru i slezinu.
[0534] Terapijski i/ili profilaktički agens: Izraz "terapijski agens" odnosi se na bilo koji agens koji, kada se daje subjektu, ima terapijski i/ili dijagnostički efekat i/ili izaziva željeni biološki i/ili farmakološki efekat. Izraz "profilaktički agens" odnosi se na bilo koji agens koji, kada se daje subjektu, ima profilaktički efekat Terapijski i/ili profilaktički agensi se takođe nazivaju "aktivne supstance" ili "aktivni agensi". Takvi agensi uključuju, ali nisu ograničeni na, citotoksine, radioaktivne jone, hemoterapijske agense, lekove sa malim molekulima, proteine i nukleinske kiseline.
[0535] Terapijski efikasna količina: Kako se ovde koristi, izraz "terapijski efikasna količina" označava količinu agensa koji treba da se isporuči (npr. nukleinska kiselina, lek, kompozicija, terapijski agens, dijagnostički agens, profilaktički agens, itd.) koja je dovoljna, kada se daje se subjektu koji pati ili je podložan infekciji, bolesti, poremećaju i/ili stanju, u cilju lečenja, poboljšanja simptoma, dijagnoze, prevencije i/ili odlaganja početka infekcije, bolesti, poremećaja i/ili stanja .
[0536] Transfekcija: Kako se ovde koristi, "transfekcija" se odnosi na uvođenje vrste (npr. RNK) u ćeliju. Transfekcija može da se odvija, na primer, in vitro, ex vivo ili in vivo.
[0537] Lečenje: Kako se ovde koristi, izraz "lečenje" se odnosi na delimično ili potpuno smanjivanje, ublažavanje, poboljšavanje, olakšavanje, odlaganje početka, inhibiranje progresije, smanjenje ozbiljnosti i/ili smanjenje učestalosti jednog ili više simptoma ili karakteristika određena infekcija, bolest, poremećaj i/ili stanje. Na primer, "lečenje" kancera može da se odnosi na inhibiciju preživljavanja, rasta i/ili širenja tumora. Tretman može da se primenjuje kod subjekta koji ne pokazuje znake bolesti, poremećaja i/ili stanja i/ili kod subjekta koji pokazuje samo rane znake bolesti, poremećaja i/ili stanja u cilju smanjenja rizika za razvoj patologije povezane sa bolešću, poremećajem i/ili stanjem.
[0538] Zeta potencijal: Kako je ovde korišćen, "zeta potencijal" je elektrokinetički potencijal lipida, npr., u kompoziciji čestica.
[0539] Stručnjaci će prepoznati, ili moći da utvrde koristeći samo rutinsko eksperimentisanje, mnoge ekvivalente specifičnih primera izvođenja u skladu sa predmetnim prikazom. Nije predviđeno da obim predmetnog prikaza bude ograničen na prethodni Opis, već je kao što je navedeno u priloženim patentnim zahtevima.
[0540] U patentnim zahtevima, pojmovi u jednini mogu da označavaju jedno ili više od jednog, osim ako suprotno nije naznačeno ili na drugi način očigledno iz konteksta. Patentni zahtevi ili opisi koji uključuju „ili“ između jednog ili više članova grupe smatraju se ispunjenim ako je jedan, više od jednog ili ako su svi članovi grupe prisutni u, upotrebljeni u, ili na drugi način relevantni za dati proizvod ili postupak, osim ako suprotno nije naznačeno ili na drugi način očigledno iz konteksta. Prikaz uključuje primere izvođenja u kojima je tačno jedan član grupe prisutan u, upotrebljen u, ili na drugi način relevantan za dati proizvod ili postupak. Prikaz uključuje primere izvođenja u kojima je više od jednog ili su svi članovi grupe prisutni u, upotrebljeni u, ili na drugi način relevantni za dati proizvod ili postupak. Kako su ovde upotrebljeni, izrazi "jedno ili više od A, B, ili C," "jedno ili više A, B, ili C," "jedno ili više od A, B, i C," "jedno ili više A, B, i C", "odabran od A, B, i C," "odabran iz grupe koja se sastoji od A, B, i C," i slično, koriste se kao sinonimi i svi se odnose na izbor iz grupe koja se sastoji od A, B, i/ili C, tj., jedno ili više A, jedno ili više B, jedno ili više C, ili bilo koja njihova kombinacija, ako nije drugačije navedeno.
[0541] Takođe se napominje da je predviđeno da izraz "sadrži" bude otvoren i da dozvoljava, ali ne zahteva, uključivanje dodatnih elemenata ili koraka. Kada se ovde koristi izraz "sadrži", izrazi "koji se suštinski sastoji od" i "sastoji se od" su stoga takođe obuhvaćeni i prikazani. U celom opisu, kada se opisuje da kompozicije imaju, uključuju ili sadrže specifične komponente, smatra se da se kompozicije takođe sastoje suštinski od, ili se sastoje od navedenih komponenti. Slično, kada se opisuje da metode ili postupci imaju, uključuju ili sadrže specifične korake postupka, postupci se takođe suštinski sastoje od, ili se sastoje od navedenih koraka postupka. Dalje, treba razumeti da je redosled koraka ili redosled za izvođenje određenih radnji nebitan sve dok pronalazak ostaje funkcionalan. Osim toga, dva ili više koraka ili radnji mogu da se sprovode istovremeno.
[0542] Kada su dati opsezi, uključene su i krajnje tačke. Štaviše, treba razumeti da osim ako nije drugačije naznačeno ili na drugi način očigledno iz konteksta i razumevanja prosečnog stručnjaka u oblasti, vrednosti koje su izražene kao opsezi mogu da imaju bilo koju specifičnu vrednost ili podopseg unutar navedenih opsega u različitim primerima izvođenja prikaza, sve do desetine jedinice donje granice opsega, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije.
[0543] Sintetski postupci prema prikazu mogu da tolerišu širok spektar funkcionalnih grupa, pa otuda mogu da se koriste različiti supstituisani polazni materijali. Postupci u principu obezbeđuju željeno finalno jedinjenje na kraju ili pri kraju celokupnog postupka, iako u određenim slučajevima može da bude poželjno da se jedinjenje dalje konvertuje u svoju farmaceutski prihvatljivu so.
[0544] Jedinjenja prema predmetnom prikazu mogu da se pripremaju na niz različitih načina, koristeći komercijalno dostupne polazne materijale, jedinjenja poznata iz literature, ili od intermedijera koji se lako pripremaju, upotrebom standardnih sintetskih postupaka i procedura koje su ili poznate stručnjacima u oblasti, ili su obučenom stručnjaku očigledne u svetlu ovde izloženih instrukcija. Standardni sintetski postupci i procedure za pripremu organskih molekula i transformacije i manipulacije funkcionalnim grupama mogu da se dobiju iz relevantne naučne literature ili iz standardnih udžbenika za ovu oblast. Iako nema ograničenja na bilo koji izvor ili na nekoliko izvora, klasični tekstovi kao što su Smith, M. B., March, J., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th edition, John Wiley & Sons: New York, 2001; Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999; R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); L. Fieser i M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); i L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) predstavljaju korisne i priznate referentne udžbenike za organsku sintezu, koji su poznati stručnjacima u oblasti.
Opisi sintetskih postupaka koji slede osmišljeni su tako da ilustruju, ali ne i ograničavaju, opšte procedure za pripremu jedinjenja prema predmetnom prikazu.
[0545] Jedinjenja prema ovom prikazu koja imaju bilo koju od ovde opisanih formula, mogu da se pripremaju prema procedurama koje su ilustrovane na šemama 1-3 koje slede u tekstu, od komercijalno dostupnih polaznih materijala ili polaznih materijala koji mogu da se pripreme upotrebom procedura iz literature. Promenljive na šemama (npr., R1, R2, R3, R4i R5) su onakve kao što su ovde opisane, npr., R1, R2, R3, R4i R5su svaka nezavisno alkil. Prosečan stručnjak u oblasti će zapaziti da tokom sekvence reakcija i sintetskih šema koje su ovde opisane, redosled određenih koraka kao što su uvođenje i uklanjanje protektivnih grupa, može da se promeni.
[0546] Prosečan stručnjak u oblasti će prepoznati da za neke grupe može da bude neophodna zaštita od uslova reakcije u vidu upotrebe protektivnih grupa. Protektivne grupe takođe mogu da se koriste za diferenciranje sličnih funkcionalnih grupa u molekulima. Lista protektivnih grupa i način uvođenja i uklanjanja ovih grupa može da se nađe u publikaciji Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999. Poželjne protektivne grupe uključuju, ali nisu ograničene na:
Za hidroksilni fragment: TBS, benzil, THP, Ac;
Za karboksilne kiseline: benzil estar, metil estar, etil estar, alil estar;
Za amine: Fmoc, Cbz, BOC, DMB, Ac, Bn, Tr, Ts, trifluoroacetil, ftalimid, benzilidenamin; Za diole: Ac (x2) TBS (x2), ili za zajedno uzete, acetonidi;
Za tiole: Ac;
Za benzimidazole: SEM, benzil, PMB, DMB;
Za aldehide: di-alkil acetali kao što su dimetoksi acetal ili dietil acetil.
[0547] U reakcionim šemama koje su ovde opisane moguća je proizvodnja više stereoizomera. Kada nije naznačen ni jedan konkretan stereoizomer, podrazumeva se da on predstavlja sve moguće stereoizomere koji bi mogli da se proizvedu u toj reakciji. Prosečan stručnjak u oblasti će znati da reakcije mogu da se optimizuju tako da preferencijalno daju jedan izomer, ili da mogu da se razviju nove šeme kako bi bio proizveden samo jedan izomer. Ukoliko se proizvode smeše, tehnike kao što je preparativna tankoslojna hromatografija, preparativna HPLC, preparativna hiralna HPLC, ili preparativna SFC mogu da se koriste kako bi se izomeri razdvojili.
[0548] Šema 1 iznad ilustruje proceduru od 11 koraka za sintezu lipida prema prikazu. (a) Aldehid (I-1) reaguje sa hidrohloridom glicin metil estra u prisustvu redukujućeg agensa, npr. NaBH(OAc)3, i baze, npr. NEt3, u odgovarajućem rastvaraču, npr. AcOH, da bi se dobio metil dialkilglicinat (I-2). Ova reakcija može da se odvija u organskom rastvaraču, npr. dihloretanu. Metil dialkilglicinat (I-2) hidrolizuje korišćenjem litijum hidroksida, npr. u THF, da bi se proizveo odgovarajući litijum alkil glicinat (I-3). Rastvor (I-3), npr. u THF, reaguje sa 1-terc-butil-piperazinom u prisustvu baze, npr. diizopropiletilamina (DIPEA), i agensa za kuplovanje, npr. anhidrida propilfosfonske kiseline, da bi se formirao terc-butil 4-(alkil)piperazin-1-karboksilat (I-4), sa koga se zatim uklanja protektivna grupa, upotrebom npr. trifluorosirćetne kiseline (TFA), da bi se dobio 2-(alkil)-1-(piperazin-1-il)etan1-on (I-5). Ova reakcija može da se odvija u organskom rastvaraču, npr. dihlorometanu (DCM). (b) Bromoalkan (I-6) reaguje sa terc-butil-metil alkil glicinatom u prisustvu jake baze, npr. NaH, i u odgovarajućem rastvaraču, npr. dimetilformamidu (DMF), kako bi se obrazovao metil N-(terc-butil)-N-alkilicinat (I-7), sa koga se zatim uklanja protektivna grupa, upotrebom npr. TFA, da bi se dobio metil alkilglicinat (I-8). Reakcija uklanjanja zaštitne grupe može da se odvija u organskom rastvaraču, npr. dihlorometanu. (c) Bromoalkan (I-6) reaguje sa etanol-1-aminom pod alkalnim uslovima (npr. K2CO3) i u prisustvu katalizatora, npr. KI u odgovarajućem rastvaraču (npr. acetonitrilu), da bi se obrazovao 2-(dialkilamino)etanol (I-9), koji se prevodi u N-(2-hloroetil)-N-alkilalkan-1-amin (I-10) upotrebom pogodnog reagensa, npr. mezilhlorida u prisustvu baze, npr. trietilamina, i odgovarajućeg rastvarača, npr. DCM. (d) metil alkilglicinat (I-8), dobijen prema (b) i N-(2-hloroetil)-N-alkilalkan-1-amin (I-10) dobijen prema (c) se kupluju u prisustvu baze, npr.K2CO3i nukleofilnog katalizatora, npr. KI u odgovarajućem rastvaraču (npr. acetonitrilu), da bi se obrazovao intermedijer metil glicinat (I-11), koji zatim hidrolizuje upotrebom litijum hidroksida u odgovarajućem rastvaraču, npr. tetrahidrofuranu (THF), da bi se dobilo jedinjenje litijum glicinat (I-12). (e) 2-(alkil)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on (I-5) dobijen prema (a) i jedinjenje (I-12) dobijeno prema (d) reaguju u prisustvu baze, npr. diizopropiletilamina (DIPEA), i agensa za kuplovanje, npr. anhidrid propilfosfonske kiseline, da bi se dobio proizvod (P-1). Ova reakcija može da se odvija u organskom rastvaraču, npr. THF.
[0549] Šema 2 iznad ilustruje proceduru od 6 koraka za sintezu lipida prema prikazu. (a) Komercijalno dostupan hidrohlorid terc-butil 4-glicilpiperazin-1-karboksilata (II-1) reaguje sa bromoalkanom u prisustvu baze, npr.K2CO3i nukleofilnim katalizatorom, npr. KI u odgovarajućem rastvaraču, npr.
smeši ciklopentil metil etar/acetonitril, i uklanja mu se zaštitna grupa upotrebom, npr. trifluorosirćetne kiseline (TFA) da bi se dobio 2-(dialkilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on. Korak uklanjanja zaštitne grupe može da se odvija u organskom rastvaraču, npr. dihlorometanu (DCM) (b) terc-butil 2-bromoacetat (II-4) reaguje sa 1,2-diamino etanom, u odgovarajućem rastvaraču, npr. DCM da bi se dobio terc-butil (2-aminoetil)glicinat (II-5) koji se kupluje sa bromoalkanom u prisustvu baze, npr. K2CO3i nukleofilnim katalizatorom, npr. KI u odgovarajućem rastvaraču, npr. acetonitrilu, da bi se dobio terc-butil N-(2-(dialkilamino)etil)-N-alkilglicinat (II-6). Uklanjanje zaštitne grupe sa II-6, upotrebom npr. TFA, daje odgovarajuće jedinjenje glicina (II-7). (c) Reakcija (II-3), dobijenog prema (a), i (II-7), dobijenog prema (b), u prisustvu baze, npr. diizopropiletilamina (DIPEA), i agensa za kuplovanje, npr. anhidrida propilfosfonske kiseline, daje proizvod (P-2). Ova reakcija može da se odvija u organskom rastvaraču, npr.2-metiltetrahidrofuranu.
[0550] Kao što je ilustrovano na šemi 3 iznad, intermedijeri za sintezu određenih jedinjenja prikaza mogu da se dobiju alkilacijom amino grupe terc-butil 4-(2-aminoetil)piperidin-1-karboksilata. Slične reakcije mogu da se izvedu sa različitim polaznim materijalima kao što su
[0551] Pored toga, treba razumeti da bilo koji konkretan primer izvođenja prema ovom prikazu koja spada u prethodno stanje tehnike može da bude eksplicitno isključen iz bilo kog, jednog ili više, patentnog zahteva. Pošto se smatra da su takvi primeri izvođenja poznati prosečnom stručnjaku u oblasti, oni mogu da se isključe čak i ako to isključivanje nije eksplicitno izloženo u ovom dokumentu.
[0552] U slučaju suprotstavljenih navoda citiranog izvora i aktuelne prijava, izjava u aktuelnoj prijavi će imati prevagu. Navođenje objava i patentnih dokumenata nije predviđeno kao priznanje da je bilo koje od njih relevantno stanje tehnike, niti predstavlja bilo kakvo priznavanje sadržaja ili datuma istih. Pošto je pronalazak sada opisan pisanim opisom, stručnjaci u ovoj oblasti će razumeti da pronalazak može da se praktikuje u raznim primerima izvođenja i da su prethodni opis i primeri u nastavku samo u svrhu ilustracije, a ne ograničavanja patentnih zahteva koji slede.
Primeri
[0553] Primer 1: Sinteza jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I).
A. Opšta razmatranja
[0554] Svi rastvarači i reagensi koji su korišćeni, dobijeni su komercijalno i upotrebljeni u dobijenom stanju, osim ako je drugačije napomenuto.<1>H NMR spektri su snimani u CDCl3, pri 300 K, pomoću instrumenta Bruker Ultrashield 300 MHz ili instrumenta Varian Unity Inova 400MHz. Hemijski pomaci su beleženi kao delovi na milion (ppm) u odnosu na TMS (0.00) za<1>H. Silika gel hromatografije su izvedene na instrumentima ISCO CombiFlash Rf+ Lumen Instruments pomoću patrona ISCO RediSep Rf Gold Flash Cartridges (veličina čestice: 20-40 mikrona). Reverzno-fazne hromatografije su izvedene na instrumentima ISCO CombiFlash Rf+ Lumen Instruments pomoću kolona RediSep Rf Gold C18 High Performance. Za sva finalna jedinjenja je utvrđeno da su čistoće veće od 85% putem analize reverzno-fazne UPLC-MS (vremena zadržavanja, RT, u minutima) koristeći instrument Waters Acquity UPLC sa DAD i ELSD i kolonu ZORBAX Rapid Resolution High Definition (RRHD) SB-C18 LC, 2.1 mm, 50 mm, 1.8 µm, i gradijent od 65 do 100% acetonitrila u vodi sa 0.1% TFA tokom 5 minuta pri 1.2 mL/min. Zapremina injektiranja je bila 5 µL, a temperatura kolone 80 °C. Detekcija se zasnivala na elektrosprej jonizaciji (ESI) u pozitivnom modu, uz upotrebu masenog spektrometra Waters SQD (Milford, MA, SAD) i detektora evaporacionog rasejanja svetlosti.
[0555] Procedure koje su opisane za sintezu jedinjenja 12 i 19 su primenljive na sintezu jedinjenja prema formulama (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), uopšteno.
[0556] U ovom dokumentu korišćene su sledeće skraćenice:
rt: Sobna temperatura
MeOH: Metanol
DCM: Dihlorometan
DCE: Dihloroetan
DMAP: 4-Dimetilaminopiridin
DMF: N,N-Dimetilformamid
EtOAc: Etilacetat
MeCN: Acetonitril
THF: Tetrahidrofuran
EDC·HCl: N-(3-Dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid
B. Jedinjenje 1: 2-(Didodecilamino)-N-(2-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N-dodecilacetamid
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(dodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0557]
[0558] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-(dodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od 1-bromododekana (3.3 g, 13.1 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazina (3.0 g, 13.1 mmol), K2CO3(3.62 g, 26.2 mmol), i KI (217 mg, 1.31 mmol) u MeCN (60 mL). Prinos (1.42 g, 27%). UPLC/ELSD: RT = 1.18 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 398.56 za C23H47N3O2
[0559]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.45 (br. m, 4H); 2.75 (br. m, 2H); 2.65 (br. m, 2H); 2.55 (br. m, 2H); 2.42 (br. m, 4H); 1.60-1.22 (br. m, 29H); 0.91 (br. m, 3H).
Korak 2: terc-Butil 4-(2-(2-(didodecilamino)-N-dodecilacetamido)etil)piperazin-1-karboksilat
[0561] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 11, terc-butil 4-(2-(2-(didodecilamino)-N-dodecilacetamido)etil)plperazine-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(dodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.25 mmol), litijum didodecilglicina (0.10 g, 0.25 mmol), anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.45 mL, 0.75 mmol), i i-Pr2EtN (0.044 mL, 0.25 mmol) u THF (2 mL). Prinos (0.12 g, 63%).
[0562] UPLC/ELSD: RT = 3.36 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 792.082 za C49H98N4O3
Korak 3: 2-(Didodecilamino)-N-dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)acetamid
[0563]
[0564] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, 2-(didodecilamino)-N-dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)acetamid je sintetisan od terc-butil 4-(2-(2-(didodecilamino)-N-dodecilacetamido)etil)piperazin-1-karboksilata (0.12 g, 0.16 mmol) i TFA (0.25 mL, 3.2 mmol) u 0.25 mL DCM.
[0565] UPLC/ELSD: RT = 3.06 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 692.984 za C44H90N4O
Korak 4: Jedinjenje 1: 2-(Didodecilamino)-N-(2-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N-dodecilacetamid
[0567] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, 2-(didodecilamino)-N-(2-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N-dodecilacetamid je sintetisan od 2-(didodecilarnino)-N-dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)acetamida (65 mg, 0.094 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (42 mg, 0.10 mmol), K2CO3(13 mg, 0.094 mmol) i KI (2 mg, 0.0094 mmol) u 0.5 mL MeCN da bi se dobilo 58.5 mg za 58% prinosa. UPLC/ELSD: RT = 3.75 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1072.585 za C70H143N5O
[0568]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.82-3.23 (br. m. 8H); 3.04-2.90 (br. m., 2H); 2.47 (m, 18H); 1.24 (m, 100H); 0.96 (m, 15H).
C. Jedinjenje 2: 2-((2-(Didodecilamino)etil)(dodecil)amino)-1-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0569]
[0570] Smeša 1-bromododekana (1.1 mL, 4.6 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazina (1.0 g, 4.4 mmol), K2CO3(0.61 g, 4.4 mmol), u 10 mL MeCN je ostavljena da se meša na rt tokom 12 h. Nakon tog vremena reakcija je filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM sa 1% NH4OH da bi se dobio terc-butil 4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat (450 mg, 0.80 mmol, 18%). UPLC/ELSD: RT = 2.87 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 566.655 za C35H71N3O2
[0571]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.40 (m, 4H); 2.56 (m, 2H); 2.40 (m, 10H); 1.44 (s, 9H); 1.40-1.24 (m, 40H); 0.86 (t, 6H).
Korak 2: N-Dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin
[0572]
[0573] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 18, N-dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin je sintetisan od terc-butil 4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (0.92 g, 1.63 mmol), TFA (6.2 mL, 82 mmol) u 6 mL DCM da bi se dobilo 490 mg za 65% prinosa. UPLC/ELSD: RT = 2.10 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 466.379 za C30H63N3
[0574]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.88 (t, 4H); 2.61 (m, 2H); 2.45 (m, 10H); 1.43-1.24 (m, 40H); 0.86 (t, 6H).
Korak 3: Jedinjenje 2: 2-((2-(Didodecilamino)etil)(dodecil)amino)-1-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0576] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)-1-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od N-dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amina (32 mg, 0.069 mmol), N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicina (43 mg, 0.069 mmol), anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.12 mL, 0.21 mmol) i i-Pr2EtN (0.024 mL, 0.14 mmol) u 0.5 mL THF čime je dobijeno 17.7 mg (17%).
[0577] UPLC: RT = 3.90 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1071.475 za C70H143N5O
[0578]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.65 (m, 2H); 3.57 (m, 2H); 3.26 (s, 2H); 2.33-2.57 (m, 22H); 1.24-1.39 (m, 100H); 0.88 (t, 15H).
D. Jedinjenje 3: 2-(Didodecilamino)-1-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0579]
[0580] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(dodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (700 mg, 1.76 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (806 mg, 1.93 mmol), K2CO3(486 mg, 3.52 mmol), i KI (29 mg, 0.176 mmol) u THF (15 mL). Prinos (683 mg, 50%).
[0581] UPLC/ELSD: RT = 3.35 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 778.16 za C49H100N4O2
[0582]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.44 (t, 4H); 3.11-2.86 (br. m, 4H); 2.78-2.32 (br. m, 14H); 1.80-1.05 (br. m, 69H); 0.91 (t, 9H).
Korak 2: N<1>,N<1>,N<2>-Tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0584] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 18, N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin je sintetisan od terc-butil 4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (683 mg, 0.879 mmol), i TFA (3.4 mL, 43.9 mmol) u DCM (3.4 mL). Prinos (595 mg, 99%).
[0585] UPLC/ELSD: RT = 2.94 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 678.16 za C44H92N4
Korak 3: Jedinjenje 3:
2-(Didodecilamino)-1-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0586]
[0587] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-(didodecilamino)-1-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etan-1-on je dobijen od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (50 mg, 0.074 mmol), litijum didodecilglicina (33 mg, 0.078 mmol), anhidrida propilfosfonske kiseline (50% u EtOAc, 0.13 mL, 0.22 mmol) i i-Pr2EtN (0.026 mL) u 0.5 mL THF čime je dobijeno 33.9 mg (43%).
[0588] UPLC: RT = 3.90 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1071.475 za C70H143N5O
[0589]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.65 (m, 2H); 3.57 (m, 2H); 3.26 (s, 2H); 2.33-2.57 (m, 22H); 1.24-1.39 (m, 100H); 0.88 (t, 15H).
E. Jedinjenje 4: 2-(Dinonilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
Korak 1: Metil dinonilglicinat
[0590]
[0591] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 11, metil dinonilglicinat je sintetisan od hidrohlorida glicin metil estra (5.0 g, 39.8 mmol), trietilamina (8.3 mL, 59.7 mmol), 95% nonanala (15.0 g, 99.6 mmol), natrijum triacetoksiborohidrida (21.1 g, 99.6 mmol), i sirćetne kiseline (5.7 mL, 99.6 mmol) u DCE (50 mL). Prinos (3.5 g, 26%). UPLC/ELSD: RT = 1.82 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 343.62 za C21H43NO2
[0592]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.35 (s, 2H); 2.57 (t, 4H); 1.46 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 24H); 0.90 (t, 6H).
Korak 2: Litijum dinonilglicinat
[0593]
[0594] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 11, litijum dinonilglicinat je sintetisan od metil dinonilglicinata (3.5 g, 10.2 mmol) i 1M LiOH (50 mL, 50 mmol) u THF (50 mL). Prinos (3.0 g, 88%).
UPLC/ELSD: RT = 1.71 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 328.37 za C20H41NO2
[0595]<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ: ppm 3.13 (s, 2H); 2.59 (t, 4H); 1.51 (br. m, 4H); 1.32 (br. m, 24H); 0.92 (t, 6H).
Korak 3: terc-Butil 4-(dinonilglicil)piperazin-1-karboksilat
[0596]
[0597] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 11, terc-butil 4-(dinonilglicil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od litijum dinonilglicinata (2.0 g, 6.00 mmol), 1-boc-piperazina (1.23 g, 6.58 mmol), i-Pr2EtN (2.3 mL, 13.2 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 10.7 mL, 17.9 mmol). Prinos (824 mg, 28%).
[0598] UPLC/ELSD: RT = 2.19 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 496.72 za C29H57N3O3
Korak 4: 2-(Dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on
[0599]
[0600] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od terc-butil 4-(dinonilglicil)piperazin-1-karboksilata (824 mg, 1.66 mmol) i TFA (6.4 mL, 83.1 mmol) u DCM (6.4 mL). Prinos (246 mg, 37%). UPLC/ELSD: RT = 1.25 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 396.68 za C24H49N3O
[0601]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.63 (br. m, 4H); 3.28 (s, 2H); 2.89 (br. m, 4H); 2.48 (t, 4H); 1.45 (br. m, 4H); 1.28 (br. m, 24H); 0.90 (t, 6H).
Korak 5: Metil N-(terc-butoksikarbonil)-N-nonilglicinat
[0602]
[0603] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 11, metil N-(terc-butoksikarbonil)-N-nonilglicinat je sintetisan od N-(terc-butoksikarbonil)glicin metil estra (7.7 g, 40.7 mmol) i NaH (60%, 1.71 g, 42.7 mmol) u DMF (100 mL). Prinos (3.32 g, 26%).
[0604]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.02-3.84 (br. m, 2H); 3.75 (s, 3H); 3.26 (br. m, 2H); 1.65-1.39 (br. m, 11H); 1.28 (br. m, 12H); 0.90 (t, 3H).
Korak 6: Metil nonilglicinat
[0605]
[0606] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 11, metil nonilglicinat je sintetisan od metil N-(tercbutoksikarbonil)-N-nonilglicinata (3.32 g, 10.5 mmol) i TFA (16 mL, 210 mmol) u DCM (16 mL). Prinos (2.23 g, 98%).
[0607]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.75 (s, 3H); 3.44 (s, 2H); 2.61 (t, 2H); 1.69 (br. m, 1H); 1.51 (br. m, 2H); 1.28 (br. m, 12H); 0.90 (t, 3H).
Korak 7: Metil N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicinat
[0609] Na isti način kao u koraku 9 za jedinjenje 11, metil N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicinat je sintetisan od metil nonilglicinata (449 mg, 2.08 mmol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (830 mg, 2.50 mmol), K2CO3(576 mg, 4.16 mmol), i KI (35 mg, 0.208 mmol) u MeCN (13 mL). Prinos (958 mg, 90%). UPLC/ELSD: RT = 3.11 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.97 za C32H66N2O2
[0610]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.42 (s, 2H); 2.95-2.15 (br. m, 10H); 1.85-1.00 (br. m, 42H); 0.90 (t, 9H).
Korak 8: N-(2-(Dinonilamino)etil)-N-nonilglicin
[0611]
[0612] Na isti način kao u koraku 10 za jedinjenje 11, N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicin je sintetisan od metil N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicinata (958 mg, 1.88 mmol), i 1M LiOH (10 mL, 10 mmol) u THF (10 mL). Prinos (514 mg, 55%). UPLC/ELSD: RT = 2.75 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 497.95 za C31H64N2O2
[0613]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.92 (br. m, 6H); 3.14 (br. m, 6H); 1.77 (br. m, 6H); 1.45-1.13 (br. m, 36H); 0.90 (t, 9H).
Korak 9: Jedinjenje 4: 2-(Dinonilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0615] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-(dinonilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (61.5 mg, 0.155 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (85 mg, 0.171 mmol), i-Pr2EtN (60 µL, 0.342 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.278 mL, 0.466 mmol). Prinos (38 mg, 28%).
[0616] UPLC/ELSD: RT = 3.13 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 875.76 za C55H111N5O2
[0617]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.82-3.49 (br. m, 8H); 3.33 (s, 2H); 3.27 (s, 2H); 2.68-2.18 (br. m, 14H); 1.82-1.02 (br. m, 70H); 0.90 (t, 15H).
F. Jedinjenje 5: 2-(Dinonilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
Korak 1: Metil N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicinat
[0618]
[0619] Na isti način kao u koraku 9 za jedinjenje 11, metil N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicinat je sintetisan od metil dodecilglicinata (535 mg, 2.08 mmol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (830 mg, 2.50 mmol), K2CO3(576 mg, 4.16 mmol), i KI (35 mg, 0.208 mmol) u MeCN (13 mL). Prinos (385 mg, 34%). UPLC/ELSD: RT = 3.34 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 553.96 za C35H72N2O2
[0620]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.41 (s, 2H); 2.90-2.20 (br. m, 10H); 1.85-1.05 (br. m, 48H); 0.90 (t, 9H).
Korak 2: N-(2-(Dinonilamino)etil)-N-dodecilglicin
[0621]
[0622] Na isti način kao u koraku 10 za jedinjenje 11, N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicin je sintetisan od metil N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicinata (385 mg, 0.696 mmol), i 1M LiOH (3.5 mL, 3.5 mmol) u THF (3.5 mL). Prinos (225 mg, 60%).
[0623] UPLC/ELSD: RT = 3.13 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 539.93 za C34H70N2O2
[0624]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.73 (s, 2H); 3.62-3.39 (br. m, 4H); 3.09 (br. m, 6H); 1.76 (br. m, 6H); 1.28 (br, 42H); 0.90 (t, 9H).
Korak 3: Jedinjenje 5:
2-(Dinonilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0625]
[0626] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-(dinonilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (62 mg, 0.155 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicina (92 mg, 0.171 mmol), i-Pr2EtN (60 µL, 0.342 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.278 mL, 0.466 mmol). Prinos (38 mg, 26%).
[0627] UPLC/ELSD: RT = 3.32 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 917.67 za C58H117N5O2
[0628]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.86-3.45 (br. m, 8H); 3.33 (s, 2H); 3.28 (s, 2H); 2.73-2.27 (br. m, 14H); 1.86-1.00 (76H); 0.91 (t, 15H).
G. Jedinjenje 6:
2-((2-(Didodecilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
Korak 1: Metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicinat
[0629]
[0630] Na isti način kao u koraku 9 za jedinjenje 11, metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicinat je sintetisan od metil nonilglicinata (355 mg, 1.65 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (825 mg, 1.98 mmol), K2CO3(457 mg, 3.30 mmol), i KI (27 mg, 0.165 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (460 mg, 47%). UPLC/ELSD: RT = 3.62 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 596.03 za C38H78N2O2
[0631]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.42 (s, 2H); 2.80-2.24 (br. m, 10H); 1.56-1.00 (br. m, 54H); 0.90 (t, 9H).
Korak 2: N-(2-(Didodecilamino)etil)-N-nonilglicin
[0632]
[0633] Na isti način kao u koraku 10 za jedinjenje 11, N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicin je sintetisan od metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicinata (460 mg, 0.773 mmol), i 1M LiOH (3.9 mL, 3.9 mmol) u THF (3.9 mL). Prinos (323 mg, 72%).
[0634] UPLC/ELSD: RT = 3.37 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 582.00 za C37H76N2O2
[0635]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.17 (s, 2H); 4.00 (br. m, 2H); 3.84 (br. m, 2H); 3.34 (br. m, 2H); 3.18 (br. m, 4H); 1.82 (br. m, 6H); 1.27 (br. m, 48H); 0.91 (t, 9H).
Korak 3: Jedinjenje 6:
[0636] 2-((2-(Didodecilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0637] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(didodecilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (62 mg, 0.155 mmol), N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicina (99 mg, 0.171 mmol), i-Pr2EtN (60 µL, 0.342 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.278 mL, 0.466 mmol). Prinos (45 mg, 30%).
[0638] UPLC/ELSD: RT = 3.46 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 959.98 za C61H123N5O2
[0639]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.81-3.49 (br. m, 8H); 3.33 (s, 2H); 3.27 (s, 2H); 2.70-2.25 (br. m, 14H); 1.90-1.00 (br. m, 82H); 0.90 (t, 15H).
H. Jedinjenje 7:
2-((2-(Didodecilamino)etil)(dodecil)amino)-1-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0641] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)-1-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (62 mg, 0.155 mmol), N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicina (107 mg, 0.171 mmol), i-Pr2EtN (60 µL, 0.342 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.278 mL, 0.466 mmol). Prinos (34 mg, 20%).
[0642] UPLC/ELSD: RT = 3.60 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1001.97 za C64H129N5O2
[0643]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.85-2.18 (br. m, 26H); 1.91-1.00 (br. m, 88H); 0.90 (t, 15H).
I. Jedinjenje 8:
2-(Didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0644]
[0645] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-(didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od 2-(didodecilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (202 mg, 0.421 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (230 mg, 0.463 mmol), i-Pr2EtN (0.162 mL, 0.926 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.752 mL, 1.26 mmol). Prinos (148 mg, 37%).
[0646] UPLC/ELSD: RT = 3.41 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 959.74 za C61H123N5O2
[0647]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.82-3.49 (br. m, 8H); 3.33 (s, 2H); 3.27 (s, 2H); 2.66-2.30 (br. m, 14H); 1.85-1.02 (br. m, 82H), 0.90 (t, 15H).
J. Jedinjenje 9:
2-(Didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0648]
[0649] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-(didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od (76 mg, 0.157 mmol), (93 mg, 0.173 mmol), i-Pr2EtN (60 µL, 0.342 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.278 mL, 0.466 mmol). Prinos (59 mg, 37%). UPLC/ELSD: RT = 3.57 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1001.65 za C64H129N5O2
[0650]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.95-2.23 (br. m, 26H); 2.05-1.00 (br. m, 88H); 0.90 (t, 15H).
K. Jedinjenje 10:
2-(Didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0652] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-(didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od 2-(didodecilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (76 mg, 0.157 mmol), N-(2-(didodecilamino)etil)-N-nonilglicina (101 mg, 0.173 mmol), i-Pr2EtN (60 µL, 0.342 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.278 mL, 0.466 mmol). Prinos (56 mg, 34%).
[0653] UPLC/ELSD: RT = 3.72 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1043.88 za C67H135N5O2
[0654]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.95-2.15 (br. m, 26H); 1.90-1.05 (br. m, 94H); 0.90 (t, 15H).
L. Jedinjenje 11:
2-(Didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
Korak 1: Metil didodecilglicinat
[0655]
[0656] Rastvor hidrohlorida glicin metil estra (5.0 g, 39.8 mmol) i trietilamina (8.3 mL, 59.7 mmol) u DCE (50 mL) je ostavljen da se meša 15 minuta na sobnoj temperaturi. Dodat je rastvor 92% dodekanola (20.0 g, 99.6 mmol) u DCE (50 mL) i smeša je ohlađena do 0 °C. Dodati su natrijum triacetoksiborohidrid (21.1 g, 99.6 mmol) i sirćetna kiselina (5.7 mL, 99.6 mmol) i reakcija je ostavljena da ponovo postigne sobnu temperaturu i mešana 16 časova. Reakcija je ugašena sporim dodavanjem zasićenog natrijum bikarbonata i ekstrahovana pomoću DCM. Kombinovani ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-30% EtOAc/heksani) dalo je metil didodecilglicinat (7.7 g, 45%).
[0657] UPLC/ELSD: RT = 2.82 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 426.69 za C27H55NO2
[0658]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.35 (s, 2H); 2.57 (t, 4H); 1.46 (m, 4H); 1.28 (br. m, 36H); 0.91 (t, 6H).
Korak 2: Litijum didodecilglicinat
[0659]
[0660] Rastvor metil didodecilglicinata (7.7 g, 18.1 mmol) u THF (100 mL) i 1M LiOH (90.4 mL, 90.4 mmol) je ostavljen da se meša 16 časova na 65 °C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana do belog praha. Prah je suspendovan u vodi, filtriran, opran vodom i dietil etrom, i osušen pod vakuumom čime je dobijen litijum didodecilglicinat (7.0 g, 93%).
[0661] UPLC/ELSD: RT = 2.74 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 412.83 za C26H53NO2
[0662]<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ: ppm 3.14 (s, 2H); 2.60 (t, 4H); 1.51 (m, 4H); 1.31 (br. m, 36H); 0.92 (t, 6H).
Korak 3: terc-Butil 4-(didodecilglicil)piperazin-1-karboksilat
[0663]
[0664] Rastvor litijum didodecilglicinata (2.0 g, 4.79 mmol), 1-boc-piperazina (978 mg, 5.25 mmol), i-Pr2EtN (1.84 mL, 10.5 mmol), i anhidrida propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 8.53 mL, 14.3 mmol) u THF (24 mL) je ostavljen da se meša na sobnoj temperaturi 48 časova. Reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je terc-butil 4-(didodecilglicil)piperazin-1-karboksilat (983 mg, 35%).
[0665] UPLC/ELSD: RT = 3.06 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 581.02 za C35H69N3O3
Korak 4: 2-(Didodecilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on
[0666]
[0667] U rastvor terc-butil 4-(didodecilglicil)piperazin-1-karboksilata (983 mg, 1.69 mmol) u DCM (6.5 mL) na 0 °C ukapana je TFA (6.5 mL, 84.7 mmol). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i mešana 16 časova. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i sirovi materijal je rastvoren u CHCl3. Rastvor je opran sa 5% Na2CO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu čime je dobijen 2-(didodecilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on (163 mg, 20%).
[0668] UPLC/ELSD: RT = 2.07 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 480.89 za C30H61N3O
[0669]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.67 (br. m, 4H); 3.32 (s, 2H); 2.92 (br. m, 4H); 2.53 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.28 (br. m, 36H); 0.91 (t, 6H).
Korak 5: Metil N-(terc-butoksikarbonil)-N-dodecilglicinat
[0670]
[0671] Rastvor N-(terc-butoksikarbonil)glicin metil estra (7.7 g, 40.7 mmol) u DMF (100 mL) na 0 °C obrađen je sa NaH (60%, 1.71 g, 42.7 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 30 minuta. Rastvor je ostavljen da ponovo dostigne sobnu temperaturu pre dodavanja 1-bromododekana (15.2 g, 61.0 mmol). Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% EtOAc/heksani) dalo je metil N-(tercbutoksikarbonil)-N-dodecilglicinat (4.03 g, 28%).<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.01-3.84 (br. m, 2H); 3.75 (s, 3H); 3.27 (br. m, 2H); 1.67-1.39 (br. m, 11H); 1.28 (br. m, 18H); 0.90 (t, 3H).
Korak 6: Metil dodecilglicinat
[0672]
[0673] U rastvor metil N-(terc-butoksikarbonil)-N-dodecilglicinata (4.03 g, 11.3 mmol) u DCM (17 mL) na 0 °C ukapana je TFA (17 mL, 226 mmol). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i mešana 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i sirovi materijal je rastvoren u DCM. Rastvor je opran sa 10% NaOH, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu čime je dobijen metil dodecilglicinat (2.84 g, 98%).
[0674]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.75 (s, 3H); 3.44 (s, 2H); 2.62 (t, 2H); 1.70 (br, 1H); 1.51 (m, 2H); 1.29 (br. m, 18H); 0.90 (t, 3H).
Korak 7: 2-(Didodecilamino)etan-1-ol
[0675]
[0676] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, 2-(didodecilamino)etan-1-ol je sintetisan od 1-bromododekana (10 g, 40.1 mmol), etanolamina (1.10 mL, 18.2 mmol), K2CO3(11.1 g, 80.1 mmol), i KI (302 mg, 1.82 mmol) u MeCN (84 mL). Prinos (3.87 g, 53%).
[0677] UPLC/ELSD: RT = 2.69 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 398.56 za C26H55NO
[0678]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.57 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.49 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 36H); 0.91 (t, 6H).
Korak 8: N-(2-Hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin
[0679]
[0680] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin je sintetisan od 2-(didodecilamino)etan-1-ola (3.87 g, 9.73 mmol), trietilamina (1.76 mL, 12.6 mmol), i metansulfonil hlorida (0.941 mL, 12.2 mmol) u DCM (50 mL). Prinos (1.92 g, 47%).
[0681]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.51 (t, 2H); 2.78 (t, 2H); 2.47 (br. m, 4H); 1.44 (br. m, 4H); 1.28 (br. m, 36H); 0.90 (t, 6H).
Korak 9: Metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicinat
[0682]
[0683] U rastvor metil dodecilglicinata (425 mg, 1.65 mmol) u MeCN (10 mL) dodat je N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin (825 mg, 1.98 mmol), K2CO3(457 mg, 3.30 mmol), i KI (27 mg, 0.165 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 72 časa na 82 °C. Reakciona smeša je filtrirana i čvrsta supstanca je oprana heksanima. Filtrat je koncentrovan u vakuumu čime je dobijen sirovi proizvod. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicinat (652 mg, 62%).
[0684] UPLC/ELSD: RT = 3.77 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 638.18 za C41H84N2O2
[0685]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.41 (s, 2H); 2.90-2.20 (br. m, 10H); 1.60-1.00 (br. m, 60H); 0.90 (t, 9H).
Korak 10: N-(2-(Didodecilamino)etil)-N-dodecilglicin
[0686]
[0687] Rastvor metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicinata (652 mg, 1.02 mmol) u THF (6 mL) i 1M LiOH (5 mL, 5 mmol) je ostavljen da se meša na 65 °C 16 časova. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i acidifikovana pomoću 10% HCl. Smeša je ekstrahovana hloroformom, i organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog Na2SO4,filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicin (153 mg, 24%). UPLC/ELSD: RT = 3.60 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 624.07 za C40H82N2O2
[0688]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.02-3.40 (br. m, 6H); 3.16 (br. m, 6H); 1.78 (br. m, 6H); 1.46-1.01 (br. m, 54H); 0.90 (t, 9H).
Korak 11: Jedinjenje 11: 2-(Didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
[0690] U rastvor N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicina (212 mg, 0.340 mmol) i 2-(didodecilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (163 mg, 0.340 mmol) u THF (4 mL) dodat je i-Pr2EtN (0.119 mL, 0.680 mmol), i anhidrid propilfosfonske kiseline (50% rastvor EtOAc, 0.606 mL, 1.02 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% [DCM, 20% MeOH, 1% NH4OH]/MeOH) dalo je 2-(didodecilamino)-1-(4-(N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on (148 mg, 37%).
[0691] UPLC/ELSD: RT = 3.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1086.94 za C70H141N5O2
[0692]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.00-2.20 (br. m, 26H); 1.77 (br. m, 6H); 1.54-1.02 (br. m, 94H); 0.90 (t, 15H).
M. Jedinjenje 12: Pentil 6-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)heksanoat
Korak 1: Pentil 6-bromoheksanoat
[0693]
[0694] U rastvor 6-bromoheksanoinske kiseline (2 g, 10.3 mmol) i pentan-1-ola (2.2 mL, 20.5 mmol) u 26 mL DCM, dodati su EDC·HCl (1.97 g, 10.3 mmol) i DMAP (0.26 g, 2.1 mmol). Rastvor je ostavljen da se meša na rt preko noći. Nakon tog vremena reakcija je ugašena dodavanjem vode. Smeša je ekstrahovana tri puta pomoću DCM. Organske supstance su spojene i oprane zasićenim NaHCO3, 10% limunskom kiselinom i slanim rastvorom. Organske supstance su zatim osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heksanima) čime je dobijen željeni proizvod (2.3 g, 8.67 mmol).
[0695]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.06 (t, 2H); 3.39 (t, 2H); 2.30 (t, 2H); 1.84 (m, 2H); 1.62 (m, 4H); 1.46 (m, 2H); 1.31 (m, 4H); 0.88 (t, 3H).
Korak 2: 2-(Dodecilamino)etan-1-ol
[0696]
[0697] Metil dodecilglicinat (3.4 g, 13.2 mmol) je rastvoren u 2 mL THF pod atmosferom N2i reakcioni balon je ostavljen da se ohladi u ledenom kupatilu. U rastvor je polako dodat LiAlH4(0.55 g, 14.5 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na istoj temperaturi 1 h. Nakon tog vremena reakcija je ugašena uzastopnim dodavanjem 0.55 mL H2O, 0.55 mL 10% NaOH i zatim 1.65 mL H2O. Reakcija je zatim filtrirana i filtrat je koncentrovan u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM, sa 1% NaOH) čime je dobijen željeni alkohol (1.9 g, 8.28 mmol, 63% prinosa).
[0698]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.63 (t, 2H); 2.78 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 1.48 (m, 2H); 2.14 (m, 18H); 0.88 (t, 3H).
Korak 3: Pentil 6-(dodecil(2-hidroksietil)amino)heksanoat
[0700] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, pentil 6-(dodecil(2-hidroksietil)amino)heksanoat je sintetisan od pentil 6-bromoheksanoata (0.87 g, 3.27 mmol), 2-(dodecilamino)etan-1-ola (0.50 g, 2.18 mmol), K2CO3 (0.60 g, 4.36 mmol) i KI (36 mg, 0.22 mmol) u 10 mL THF čime je dobijeno 0.30 g željenog proizvoda (33%).
[0701]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.04 (t, 2H); 3.51 (m, 2H); 2.56 (m, 2H); 2.42 (m, 4H); 2.28 (t, 2H); 1.60 (m, 4H); 1.42 (m, 4H); 1.30-1.24 (m, 24); 0.87 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoat
[0702]
[0703] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, pentil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoat je sintetisan od pentil 6-(dodecil(2-hidroksietil)amino)heksanoata (300 mg, 0.73 mmol), metansulfonil hlorida (0.062 mL, 0.80 mmol) i trietilamina (0.13 mL, 1.3 mmol) u 2 mL DCM čime je dobijeno 285 mg željenog proizvoda (66%).
[0704]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.04 (t, 2H); 3.45 (t, 2H); 2.74 (t, 2H); 2.43 (m, 4H); 2.28 (t, 2H); 1.65-1.59 (m, 4H); 1.31-1.24 (m, 32H); 0.88 (m, 6H).
Korak 5: Jedinjenje 12: Pentil 6-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil) piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C69H141N5O2
Molekulska težina: 1072.92
[0706] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, pentil 6-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil) (dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)heksanoat je sintetisan od pentil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoata (75 mg, 0.17 mmol), N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (107 mg, 0.16 mmol), K2CO3(23 mg, 0.17 mmol) i KI (2.7 mg, 0.1 mmol) u 1 mL MeCN čime je dobijeno 99 mg željenog proizvoda (58%).
[0707] UPLC: RT = 3.53 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1073.325 za C69H141N5O2
[0708]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.03 (t, 2H); 2.56-2.37 (br. m., 30H); 2.27 (t, 2H); 1.61 (m, 4H); 1.40-1.23 (br. m.; 90H); 0.87 (m, 15H).
N. Jedinjenje 13: Pentil 6-((2-(4-(2-((2-(ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)heksanoat
Korak 1: 2-(Ditetradecilamino)etan-1-ol
[0709]
[0710] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, 2-(ditetradecilamino)etan-1-ol je sintetisan od 1-bromotetradekana (21.6 mL, 72.8 mmol), etanolamina (2 mL, 33.1 mmol), K2CO3 (20 g, 145.5 mmol), i KI (549 mg, 3.31 mmol) u MeCN (165 mL). Prinos (12 g, 81%).
[0711] UPLC/ELSD: RT = 3.30 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 454.46 za C30H63NO
[0712]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.54 (br. m, 2H); 2.59 (br. m, 2H); 2.46 (br. m, 4H); 1.56-1.17(br. m, 48H); 0.90 (br. m, 6H).
Korak 2: N-(2-Hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amin
[0713]
Hemijska formula: C30H62ClN
Molekulska težina: 472.28
[0714] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, N-(2-hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amin je sintetisan od 2-(ditetradecilamino)etan-1-ola (10 g, 22.0 mmol), trietilamina (4.0 mL, 28.6 mmol), i metansulfonil hlorida (2.75 mL, 27.5 mmol) u DCM (110 mL). Sirovi materijal je prenet u sledeći korak bez prečišćavanja. Prinos (10.2 g, 98%).
[0715] UPLC/ELSD: RT = 3.37 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 472.45 za C30H62ClN
[0716]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.27-2.20 (br. m, 8H); 1.96-1.17 (br. m, 48H); 0.90 (br. m, 6H).
Korak 3: terc-Butil 4-(2-(tetradecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0717]
[0718] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-(tetradecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od 1-bromotetradekana (3.63 g, 13.1 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-bocpiperazina (3.0 g, 13.1 mmol), K2CO3(3.62 g, 26.2 mmol), i KI (217 mg, 1.31 mmol) u MeCN (60 mL). Prinos (1.42 g, 27%).
[0719] UPLC/ELSD: RT = 1.58 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 426.61 za C25H51N3O2
[0720]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.45 (t, 4H); 2.75 (t, 2H) 2.65 (t, 2H); 2.54 (t, 2H); 2.42 (t, 4H); 1.61-1.41 (br. m, 11H); 1.40-1.20 (br. m, 22H); 0.90 (t, 3H).
Korak 4: terc-Butil 4-(2-((2-(ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0721]
[0722] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-((2-(ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(tetradecilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (700 mg, 1.64 mmol), N-(2-hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amina (1.01 g, 2.14 mmol), K2CO3(455 mg, 3.29 mmol), i KI (27 mg, 0.164 mmol) u THF (15 mL). Prinos (740 mg, 52%).
[0723] UPLC/ELSD: RT = 3.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 862.47 za C55H112N4O2
[0724]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.45 (br. m, 4H); 3.10-2.83 (br. m, 4H); 2.74-2.34 (br. m, 14H); 1.75-1.20 (br. m, 81H); 0.91 (t, 9H).
Korak 5: N<1>-(2-(Piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin
[0725]
[0726] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin je sintetisan od terc-butil 4-(2-((2-(ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (740 mg, 0.859 mmol), i TFA (3.3 mL, 42.9 mmol) u DCM (3.3 mL). Prinos (661 mg, 99%). UPLC/ELSD: RT = 3.38 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 762.42 za C50H104N4
[0727]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.92 (t, 4H); 2.70-2.30 (br. m, 18H); 1.46 (br. m, 6H); 1.37-1.20 (br. m, 66H); 0.90 (t, 9H).
Korak 6: Jedinjenje 13: Pentil 6-((2-(4-(2-((2-(ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etil) piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)heksanoat
[0729] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, pentil 6-((2-(4-(2-((2-(ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)heksanoat je sintetisan od N<1>-(2-(piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamina (66 mg, 0.087 mmol), pentil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoata (42 mg, 0.095 mmol) K2CO3(24 mg, 0.17 mmol), i KI (2 mg, 0.012 mmol) u THF (2 mL). Prinos (38 mg, 38%).
[0730] UPLC/ELSD: RT = 3.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1157.70 za C75H153N5O2
[0731]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (m, 2H); 3.16-2.15 (br. m, 32H); 1.65 (br. m, 4H); 1.54-1.00 (br. m, 100H); 0.91 (br. m, 15H).
O. Jedinjenje 14: Dipentil 6,6'-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)azanediil)diheksanoat
Korak 1: Dipentil 6,6'-((2-hidroksietil)azanediil)diheksanoat
[0732]
[0733] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, dipentil 6,6'-((2-hidroksietil)azanediil)diheksanoat je sintetisan od pentil 6-bromoheksanoata (0.50 g, 1.89 mmol), etanolamina (0.052 mL, 0.86 mmol), K2CO3(0.52 g, 3.77 mmol) i KI (14 mg, 0.098 mmol) u 4 mL MeCN čime je dobijeno 234 mg (55%).
[0734]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08(t, 4H); 3.62 (m, 2H); 2.68-2.56 (br. m., 6H); 2.33 (t, 4H); 1.64-1.54 (m, 13H); 1.35 (m, 12H); 0.93 (t, 6H).
Korak 2: Dipentil 6,6'-((2-hloroetil)azanediil)diheksanoat
[0736] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, dipentil 6,6'-((2-hloroetil)azanediil)diheksanoat je sintetisan od dipentil 6,6'-((2-hidroksietil)azanediil)diheksanoata (124 mg, 0.29 mmol), metansulfonil hlorida (0.025 mL, 0.32 mmol) i trietilamina (0.060 mL, 0.44 mmol) u 1.5 mL DCM čime je dobijeno 84 mg (65%).
[0737]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.04 (t, 4H); 3.46 (t, 2H); 2.73 (t, 2H); 2.43 (t, 4H); 2.28 (t, 4H); 1.60 (m, 8H); 1.40 (m, 4H); 1.29 (m, 12H); 0.89 (t, 6H).
Korak 3: Jedinjenje 14: Dipentil 6,6'-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil) piperazin-1-il)etil)azanediil)diheksanoat
[0738]
[0739] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, dipentil 6,6'-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)azanediil)diheksanoat je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (105 mg, 0.16 mmol), dipentil 6,6'-((2-hloroetil)azanediil)diheksanoata (84 mg, 0.19 mmol) i K2CO3(22 mg, 0.16 mmol) u 1 mL MeCN. Prinos (53 mg, 0.049 mmol, 30%).
[0740] UPLC: RT = 3.47 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1089.53 za C68H137N5O4
[0741]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.04 (t, 4H); 2.89-2.98 (m, 4H); 2.39-2.68 (m, 26H); 2.27 (t, 4H); 1.57-1.71 (m, 10H); 1.35 (m, 4H); 1.28-1.35 (m, 74H); 0.90 (m, 15H).
P. Jedinjenje 15: Metil 12-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)dodekanoat
Korak 1: Metil 12-bromododekanoat
[0742]
[0743] U rastvor 12-bromododekanoinske kiseline (2.5 g, 8.95 mmol) u THF (7 mL) dodat je metanol (7.2 mL, 179 mmol). Ukapana je sumporna kiselina (0.50 mL, 8.95 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na 65 °C dva časa. Reakciona smeša je oprana sa 5% NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% EtOAc/heksani) dalo je metil 12-bromododekanoat (2.40 g, 92%).
[0744]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.44 (t, 2H); 2.33 (t, 2H); 1.88 (br. m, 2H); 1.64 (br. m, 2H); 1.45 (br. m, 2H); 1.31 (br. m, 12H).
Korak 2: Metil 12-(dodecil(2-hidroksietil)amino)dodekanoat
[0745]
[0746] U rastvor metil 12-((2-hidroksietil)amino)dodekanoata (413 mg, 1.51 mmol) u MeCN (5 mL) dodat je 1-bromododekan (452 mg, 1.81 mmol), K2CO3(418 mg, 3.02 mmol), i KI (25 mg, 0.151 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na 82 °C 16 časova. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa H2O, i ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% [DCM, 20% MeOH, 1% NH4OH]/MeOH) dalo je metil 12-(dodecil(2-hidroksietil)amino)dodekanoat (409 mg, 61%).
[0747] UPLC/ELSD: RT = 2.39 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 442.60 za C27H55NO3
[0748]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.61 (t, 2H); 2.68 (t, 2H); 2.54 (t, 4H); 2.32 (t, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.50 (br. m, 4H); 1.28 (br. m, 32H); 0.90 (t, 3H).
Korak 3: Metil 12-((2-hloroetil)(dodecil)amino)dodekanoat
Hemijska formula: C27H54ClNO2
Molekulska težina: 460.18
[0750] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, metil 12-((2-hloroetil)(dodecil)amino)dodekanoat je sintetisan od metil 12-((2-hidroksietil)amino)dodekanoata (409 mg, 0.926 mmol), trietilamina (0.168 mL, 1.20 mmol), i metansulfonil hlorida (0.090 mL, 1.16 mmol) u DCM (5 mL). Prinos (307 mg, 72%). UPLC/ELSD: RT = 4.30 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 460.80 za C27H54ClNO2
[0751]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.59 (s, 3H); 3.42 (br. m, 2H); 2.70 (br. m, 2H); 2.38 (br. m, 4H); 2.30 (t, 2H); 1.55 (m, 2H); 1.36 (br. m, 4H); 1.27-0.96 (br. m, 32H); 0.81 (t, 3H).
Korak 4: Jedinjenje 15: Metil 12-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil) piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)dodekanoat
[0753] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, metil 12-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)(dodecil)amino)dodekanoat je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (150 mg, 0.221 mmol), metil 12-((2-hloroetil)(dodecil)amino)dodekanoata (134 mg, 0.266 mmol) K2CO3(61 mg, 0.443 mmol), i KI (4 mg, 0.024 mmol) u THF (5 mL). Prinos (32 mg, 15%).
[0754] UPLC/ELSD: RT = 4.83 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1102.11 za C71H145N5O2
[0755]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 2.75-2.24 (br. m, 32H); 1.64 (m, 2H); 1.52-1.00 (br. m, 96H); 0.90 (t, 12H).
Q. Jedinjenje 16: Dimetil 12,12'-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil) piperazin-1-il)etil)azanediil)didodekanoat
Korak 1: Dimetil 12,12'-((2-hidroksietil)azanediil)didodekanoat
[0756]
Hemijska formula: C28H55NO5
Molekulska težina: 485.75
[0757] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, dimetil 12,12'-((2-hidroksietil)azanediil)didodekanoat je sintetisan od metil 12-bromododekanoata (1.5 g, 5.12 mmol), etanolamina (0.310 mL, 5.12 mmol), K2CO3(1.42 g, 10.2 mmol), i KI (85 mg, 0.512 mmol) u MeCN (11 mL). Prinos (563 mg, 45%).
[0758] UPLC/ELSD: RT = 1.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 486.63 za C28H55NO5
[0759]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 6H); 3.59 (br. m, 2H); 2.75-2.40 (br. m, 6H); 2.32 (t, 4H); 1.64 (m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 28H).
Korak 2: Dimetil 12,12'-((2-hloroetil)azanediil)didodekanoat
Hemijska formula: C28H54ClNO4
Molekulska težina: 504.19
[0761] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, dimetil 12,12'-((2-hloroetil)azanediil)didodekanoat je sintetisan od dimetil 12,12'-((2-hidroksietil)azanediil)didodekanoata (518 mg, 1.07 mmol), trietilamina (0.193 mL, 1.39 mmol), i metansulfonil hlorida (0.103 mL, 1.33 mmol) u DCM (5.5mL). Prinos (376 mg, 70%).
[0762] UPLC/ELSD: RT = 2.17 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 504.75 za C28H54ClNO4
Korak 3: Jedinjenje 16: Dimetil 12,12'-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil) piperazin-1-il)etil)azanediil)didodekanoat
[0763]
[0764] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, dimetil 12,12'-((2-(4-(2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)azanediil)didodekanoat je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (150 mg, 0.221 mmol), dimetil 12,12'((2-hloroetil)azanediil)didodekanoata (134 mg, 0.266 mmol) K2CO3(61 mg, 0.443 mmol), i KI (4 mg, 0.024 mmol) u THF (5 mL). Prinos (32 mg, 15%). UPLC/ELSD: RT = 3.46 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1146.07 za C72H145N5O4
[0765]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 6H); 2.75-2.24 (br. m, 34H); 1.64 (m, 4H); 1.52-1.00 (br. m, 92H); 0.90 (t, 9H).
R. Jedinjenje 17: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-triheksiletan-1,2-diamin
Korak 1: 2-(Diheksilamino)etan-1-ol
Hemijska formula: C14H31NO
Molekulska težina: 229.41
[0767] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, 2-(diheksilamino)etan-1-ol je sintetisan od 1-bromoheksana (5 g, 82 mmol), etanolamina (11.5 mL, 82 mmol), K2CO3(22.7 g, 164 mmol), i KI (1.36 g, 8.2 mmol) u MeCN (380mL). Prinos (2.58g, 14%). UPLC/ELSD: RT = 0.41 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 229.95 za C14H31NO
[0768]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.62 (t, 2H); 2.70 (t, 2H), 2.57 (t, 4H); 1.50 (br. m, 4H); 1.30 (br, 12H); 0.91 (t, 6H).
Korak 2: N-(2-Hloroetil)-N-heksilheksan-1-amin
[0770] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, N-(2-hloroetil)-N-heksilheksan-1-amin je sintetisan od 2-(diheksilamino)etan-1-ola (2.50 g, 10.9 mmol), trietilamina (2.0 mL, 14.2 mmol), i metansulfonil hlorida (1.0 mL, 13.6 mmol) u DCM (56 mL). Prinos (1.93 g, 71%).
[0771] UPLC/ELSD: RT = 0.42 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 247.86 za C14H30ClN
[0772]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.50 (t, 2H); 2.77 (t, 2H); 2.51 (t, 4H); 1.42 (br. m, 4H); 1.27 (br, 12H); 0.89 (t, 6H).
Korak 3: terc-Butil 4-(2-(heksilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0773]
[0774] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-(heksilamino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od 1-bromoheksana (1.44 g, 8.72 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazina (2.0 g, 8.72 mmol), K2CO3(2.4 g, 17.4 mmol), i KI (145 mg, 0.872 mmol). Prinos (446 mg, 16%).
[0775]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.44 (br. m, 4H); 2.75 (br. m, 2H); 2.65 (br. m, 2H); 2.54 (br. m, 2H); 2.42 (br. m, 4H); 1.60-1.43 (br. m, 11H); 1.40-1.05 (br. m, 6H); 0.91 (br. m, 3H).
Korak 4: terc-Butil 4-(2-((2-(diheksilamino)etil)(heksil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0776]
[0777] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-((2-(diheksilamino)etil)(heksil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(heksilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (250 mg, 0.797 mmol), N-(2-hloroetil)-N-heksilheksan-1amina (217 mg, 0.877 mmol), K2CO3(220 mg, 1.59 mmol), i KI (13 mg, 0.0797 mmol) u THF (5 mL). Prinos 308 mg, 74%).
[0778] UPLC/ELSD: RT = 1.40 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 525.83 za C31H64N4O2
[0779]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.45 (br. m, 4H); 3.15-2.15 (br. m, 18H); 1.85-1.00 (br. m, 33H); 0.91 (9H).
Korak 5: N<1>,N<1>,N<2>-Triheksil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0780]
[0781] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 18, N<1>,N<1>,N<2>-triheksil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin je sintetisan od terc-butil 4-(2-((2-(diheksilamino)etil)(heksil)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (308 mg, 0.587 mmol), i TFA (2.25 ml, 29.3 mmol) u DCM (2.5 mL). Prinos (220 mg, 88%).
[0782]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.92 (br. m, 4H); 2.70-2.20 (br. m, 18H), 1.54-1.22 (br. m, 24H); 0.91 (br. m, 9H).
Korak 6: Jedinjenje 17: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-triheksiletan-1,2-diamin
[0783]
Hemijska formula: C52H109N5
Molekulska težina: 804.48
[0784] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-triheksiletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-triheksil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (110 mg, 0.259 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (162 mg, 0.388 mmol), K2CO3(72 mg, 0.518 mmol), i KI (5 mg, 0.0259 mmol) u THF (6 mL). Prinos (81 mg, 39%). UPLC/ELSD: RT = 2.79 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 806.30 za C52H109N5
[0785]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.05-2.10 (br. m, 30H); 1.80-1.05 (br. m, 64H); 0.91 (br. m, 15H).
S: Jedinjenje 18: N<1>-(2-(4-(2-(Dinonilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-trinoniletan-1,2-diamin
Korak 1: 2-(Dinonilamino)etan-1-ol
[0786]
[0787] U rastvor 1-bromononana (8.31 g, 40.1 mmol) u MeCN (84 mL) dodat je etanolamin (1.10 mL, 18.2 mmol), K2CO3(11.1 g, 80.1 mmol), i KI (302 mg, 1.82 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 48 časova na 82 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je ekstrahovan pomoću heksana, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je 2-(dinonilamino)etan-1-ol (4.06 g, 71%).
[0788]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.57 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.49 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 24H); 0.91 (t, 6H).
Korak 2: N-(2-Hloroetil)-N-nonilnonan-1-amin
[0790] U rastvor 2-(dinonilamino)etan-1-ola (4.06 g, 12.9 mmol) i trietilamina (2.35 ml, 16.8 mmol) u DCM (65 mL) na 0 °C ukapan je rastvor metansulfonil hlorida (1.25 mL, 16.18 mmol) u DCM (5 mL). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i mešana 16 časova. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je opran zasićenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-10% EtOAc/heksani) dalo je N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amin (2.58 g, 60%).
[0791]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.51 (t, 2H); 2.78 (t, 2H); 2.47 (br. m, 4H); 1.44 (br. m, 4H); 1.28 (br. m, 24H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: terc-Butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0792]
[0793] U rastvor 1-bromononana (1.81 g, 8.72 mmol) u MeCN (44 mL) dodat je 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazin (2.0 g, 8.72 mmol), K2CO3(2.4 g, 17.4 mmol), i KI (145 mg, 0.872 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 16 časova na 65 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je ekstrahovan heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperazin-1-karboksilat (775 mg, 25%).
[0794] UPLC/ELSD: RT = 0.47 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 356.41 za C20H41N3O2
[0795]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.44 (br. m, 4H); 2.74 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.53 (t, 2H); 2.41 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 9H); 1.30 (br. m, 14H); 0.90 (t, 3H).
Korak 4: terc-Butil 4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0796]
[0797] U rastvor terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (500 mg, 1.41 mmol) u THF (9 mL) dodat je N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amin (514 mg, 1.55 mmol), K2CO3(390 mg, 2.82 mmol), i KI (23 mg, 0.141 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na 65 °C 72 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom, i ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-15% MeOH/DCM) dalo je terc-butil 4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperazin-1-karboksilat (763 mg, 83%). UPLC/ELSD: RT = 2.61 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 651.91 za C40H82N4O2
[0798]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.45 (br. m, 4H); 2.75-2.30 (br. m, 18H); 1.55-1.20 (br. m, 51H); 0.91 (br. m, 9H).
Korak 5: N<1>,N<1>,N<2>-Trinonil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0799]
[0800] U rastvor terc-butil 4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (763 mg, 1.17 mmol) u DCM (4.5 mL) na 0 °C ukapana je TFA (4.5 mL, 58.5 mmol). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i mešana 16 časova. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i sirovi materijal je rastvoren u CHCl3. Rastvor je opran sa 5% Na2CO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% [DCM, 20% MeOH, 1% NH4OH]/MeOH) dalo je N<1>,N<1>,N<2>-trinonil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin (218 mg, 34%). UPLC/ELSD: RT = 1.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 551.78 za C35H74N4
[0801]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.91 (br. m, 4H); 2.70-2.35 (br. m, 18H); 1.46 (br. m, 6H); 1.29 (br. m, 36H); 0.91 (br. m, 9H)
Korak 6: Jedinjenje 18: N<1>-(2-(4-(2-(Dinonilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-trinoniletan-1,2-diamin
[0802]
[0803] U rastvor N<1>,N<1>,N<2>-trinonil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (74 mg, 0.134 mmol) i N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (58 mg, 0.175 mmol) u THF (4 mL) dodat je K2CO3(37 mg, 0.269 mmol), i KI (3 mg, 0.0134 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na 65 °C 48 časova. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom, i ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO C18 fleš hromatografijom (50-100% [MeCN 0.1% TFA]/[H2O 0.1% TFA]) dalo je željeni proizvod u vidu soli TFA. So je rastvorena u CHCl3i rastvor je opran sa 5% Na2CO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu čime je dobijen N<1>-(2-(4-(2-(dinonilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-trinoniletan-1,2-diamin (66 mg, 58%).
[0804] UPLC/ELSD: RT = 2.91 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 847.30 za C55H115N5
[0805]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.10-2.25 (br. m, 30H); 1.90-1.35 (br. m, 10H); 1.29 (br. m, 60H); 0.91 (br. m, 15H).
T: Jedinjenje 19: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-trinoniletan-1,2-diamin
[0806]
[0807] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-trinoniletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-trinonil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (70 mg, 0.127 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (79 mg, 0.191 mmol), K2CO3(35 mg, 0.254 mmol), i KI (2 mg, 0.0127 mmol) u THF (3 mL). Prinos (52 mg, 44%). UPLC/ELSD: RT = 3.35 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 931.61 za C61H127N5
[0808]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.70 (br. m, 30H); 1.56-1.02 (br. m, 82H); 0.90 (t, 15H).
U: Jedinjenje 20: N<1>-(2-(4-(2-(Ditetradecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-trinoniletan-1,2-diamin
[0809]
[0810] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(ditetradecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-trinoniletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-trinonil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (74 mg, 0.134 mmol), N-(2-hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amina (95 mg, 0.201 mmol), K2CO3(37 mg, 0.269 mmol), i KI (3 mg, 0.0134 mmol) u THF (2 mL). Prinos (50 mg, 38%) UPLC/ELSD: RT = 3.55 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 987.87 za C65H135N5
[0811]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.20-2.25 (br. m, 30H); 1.85-1.00 (br. m, 90H); 0.91 (t, 15H).
V: Jedinjenje 21: N<1>-(2-(4-(2-(Diheksilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
[0812]
[0813] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(diheksilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (67 mg, 0.099 mmol), N-(2-hloroetil)-N-heksilheksan-1-amina (32 mg, 0.129 mmol), K2CO3(28 mg, 0.198 mmol), i KI (2 mg, 0.0099 mmol) u THF (2 mL). Prinos (30 mg, 34%). UPLC/ELSD: RT = 3.24 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.58 za C58H121N5
[0814]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.15-2.20 (br. m, 30H); 1.85-1.00 (br. m, 76H); 0.91 (br. m, 15H).
W: Jedinjenje 22: N<1>-(2-(4-(2-(Dioktilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
Korak 1: 2-(Dioktilamino)etan-1-ol
[0816] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, jedinjenje je sintetisano od etanolamina (5 g, 82 mmol), 1-bromooktana (14 mL, 82 mmol), i K2CO3(11 g, 82 mmol) u 200 mL MeCN. Prinos (3.13 g, 11 mmol, 13%).
[0817] UPLC/ELSD: RT = 1.78 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 286.22 za C18H39NO
[0818]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.54 (m, 2H); 2.60-2.47 (m, 6H); 1.44 (m, 4H); 1.26 (m, 21H); 0.86 (t, 6H).
Korak 2: N(2-Hloroetil)-N-oktiloktan-1-amin
[0819]
[0820] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, N-(2-hloroetil)-N-oktiloktan-1-amin je sintetisan od 2-(dioktilamino)etan-1-ola (3.13 g, 11 mmol), metansulfonil hlorida (0.85 mL, 11 mmol) i Et3N (1.5 mL, 11 mmol) u 30 mL DCM. Prinos (1.55 g, 5.1 mmol, 46%).
[0821] UPLC/ELSD: RT = 3.86 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 304.43 za C18H38ClN
[0822]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.48 (2, 2H); 2.75 (t, 2H); 2.43 (t, 4H); 1.40-1.25 (m, 24H); 0.86 (t, 6H).
Korak 3: Jedinjenje 22: N<1>-(2-(4-(2-(Dioktilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
[0824] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(dioktilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (150 mg, 0.221 mmol), N-(2-hloroetil)-N-oktiloktan-1-amina 54 (81 mg, 0.266 mmol), K2CO3(61 mg, 0.443 mmol), i KI (4 mg, 0.024 mmol) u THF (5 mL). Prinos (200 mg, 96%). UPLC/ELSD: RT = 3.41 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 945.96 za C62H129N5
[0825]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.76-2.10 (br. m, 30H); 1.56-1.00 (br. m, 84H); 0.90 (t, 15H).
X: Jedinjenje 23: N<1>-(2-(4-(2-(Dinonilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
[0826]
[0827] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(dinonilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (595 mg, 0.879 mg), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (350 mg, 1.05 mmol), K2CO3(243 mg, 1.76 mmol), i KI (15 mg, 0.0879 mmol) u THF (13 mL). Prinos (534 mg, 62%). UPLC/ELSD: RT = 3.50 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 973.60 za C64H133N5
[0828]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.70-2.30 (br. m, 30H); 1.56-1.37 (br. m, 10H); 1.28 (br. m, 78H); 0.90 (t, 15H).
Y: Jedinjenje 24: (Z)-N<1>-(2-(4-(2-(Dodec-6-en-1-il(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
Korak 1: (6-Hidroksiheksil)trifenilfosfonijum bromid
[0830] 6-Bromo-1-heksanol (4.89 g, 27 mmol) i trifenilfosfin (7.87 g, 30 mmol) i 50 mL MeCN su kombinovani u balonu sa okruglim dnom. Na balon je pričvršćen kondenzator i smešten u grejnu oblogu i reakcija je ostavljena da se meša 48 h na 82 °C. Nakon tog vremena reakcija je ostavljena da se ohladi do rt i rastvor je prebačen pomoću kanile u 200 mL Et2O, stvarajući beli talog. Čvrste supstance su ostavljene da se slegnu i rastvarač je dekantovan. Dodato je 20 mL DCM da bi se čvrste supstance rastvorile, a zatim je polako dodato 100 mL Et2O čime je dobijen beli talog. Rastvarač je zatim uklonjen u vakuumu čime je dobijen čist (6-hidroksiheksil)trifenilfosfonijum bromid (9.4 g, 21.2 mmol, za 78% prinosa).
[0831]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 7.80 (m, 15H); 3.80 (m, 2H); 3.65 (m, 2H); 2.23 (m, 2H); 1.68 (m, 4H); 1.52 (m, 4H).
Korak 2: (Z)-Dodec-6-en-1-ol
[0832]
[0833] Rastvor (6-hidroksiheksil)trifenilfosfonijum bromida (3.0 g, 6.77 mmol) u 25 mL THF je ostavljen da se ohladi u kupatilu sa mešavinom suvi led/aceton na -78 °C. Kada se ohladio, ukapan je n-BuLi (2.5 M u heksanima) (5.7 mL, 14.2 mmol). Nakon1 h, dodato je još 10 mL THF i n-BuLi (1.35 mL) i mešanje je nastavljeno na istoj temperaturi 1 h. Nakon tog vremena dodat je 1-heksanal (1.6 mL, 13.5 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreje do rt i mešana 3 h. Nakon tog vremena reakcija je ugašena dodavanjem viška zasićenog NH4Cl. Rastvor je ekstrahovan tri puta pomoću EtOAc. Spojene organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-50% EtOAc u heksanima) čime je dobijen željeni proizvod kao bistro ulje (0.76 g, 4.1 mmol, 61%).
[0834]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 3.62 (t, 2H); 2.01 (m, 4H); 1.56 (m, 2H); 1.35-1.27 (m, 11H); 0.87 (t, 3H).
Korak 3: (Z)-Dodec-6-en-1-il metansulfonat
[0835]
[0836] U rastvor (Z)-dodec-6-en-1-ola (1.81 g, 9.3 mmol) u 20 mL DCM na 0 °C, dodat je Et3N (1.7 mL, 12.1 mmol) i metansulfonil hlorid (0.80 mL, 10.2 mmol). Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do rt i mešana preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem vode i smeša je ekstrahovana dva puta pomoću DCM. Organske supstance su spojene, oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heksanima) čime je dobijen čist željeni proizvod (2.2 g, 8.4 mmol, 90%).
[0837]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 4.20 (t, 2H); 2.98 (s, 3H); 2.01 (m, 4H); 1.74 (m, 2H); 1.38-1.27 (m, 10H); 0.87 (t, 3H).
Korak 4: (Z)-1-Bromododec-6-en
[0838]
[0839] U balonu okruglog dna, pod N2, (Z)-dodec-6-en-1-il metansulfonat (2.2 g, 8.3 mmol) je rastvoren u 40 mL Et2O. Dodat je MgBr2·Et2O (6.5 g, 25 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša 48 h. Nakon tog vremena reakcija je ugašena dodavanjem leda. Smeša je zatim ekstrahovana pomoću Et2O tri puta. Spojene organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heksanima) čime je dobijen željeni proizvod (1.8 g, 7.28 mmol, 88%).
[0840]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 3.39 (t, 2H); 2.01-1.84 (m, 6H); 1.28 (m, 10H); 0.87 (t, 3H).
Korak 5: (Z)-2-(Dodec-6-en-1-il(dodecil)amino)etan-1-ol
[0841]
[0842] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, (Z)-2-(dodec-6-en-1-il(dodecil)amino)etan-1-ol je sintetisan od (Z)-1-bromododec-6-ena (0.25 g, 1.0 mmol), 2-(dodecilamino)etan-1-ola (0.23 g, 1.0 mmol), K2CO3(0.14 g, 1.0 mmol) i KI (2 mg, 0.01 mmol) u 5 mL MeCN.
[0843]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 3.65 (br. m., 2H); 2.64 (br. m, 6H); 2.00 (m, 4H); 1.55 (m, 6H); 1.24 (m, 26H); 0.86 (t, 6H).
Korak 6: (Z)-N-(2-Hloroetil)-N-dodecildodec-6-en-1-amin
[0844]
[0845] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, (Z)-N-(2-hloroetil)-N-dodecildodec-6-en-1-amin je sintetisan od (Z)-2-(dodec-6-en-1-il(dodecil)amino)etan-1-ola (35 mg, 0.088 mmol), metansulfonil hlorida (0.008 mL, 0.097 mmol) i trietilamina (0.018 mL, 0.13 mmol) u 0.5 mL DCM. Prinos (17.3 mg, 47%).
[0846]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 3.47 (t, 2H); 2.74 (t, 2H); 2.43 (t, 4H); 2.0 (m, 4H); 1.24 (m, 32H); 0.86 (t, 6H).
Korak 7: Jedinjenje 24: (Z)-N<1>-(2-(4-(2-(Dodec-6-en-1-il(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
[0847]
Hemijska formula: C70H143N5
Molekulska težina: 1054.95
[0848] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, (Z)-N<1>-(2-(4-(2-(dodec-6-en-1-il(dodecil)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (27 mg, 0.040 mmol) i (Z)-N-(2-hloroetil)-N-dodecildodec-6-en-1-amina (17.3 mg, 0.042 mmol), K2CO3(6 mg, 0.040 mmol) u 0.5 mL DCM. Prinos (24 mg, 0.023 mmol, 57%).
[0849] UPLC: RT = 3.78 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1056.376 za C70H143N5
[0850]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 2H); 2.53-2.35 (m, 30H); 2.00 (m, 4H); 1.39-1.24 (m, 92H); 0.86 (m, 15H).
Z: Jedinjenje 25: N<1>-(2-(4-(2-(Di((Z)-dodec-6-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
Korak 1: 2-(Di((Z)-dodec-6-en-1-il)amino)etan-1-ol
[0851]
[0852] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, 2-(di((Z)-dodec-6-en-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od etanolamina (60 mg, 1.0 mmol), (Z)-1-bromododec-6-ena (0.51 g, 2.1 mmol) i K2CO3(0.14 g, 1.0 mmol) u 5 mL DCM. Prinos (0.22 g, 0.56 mmol, 56%).
[0853]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 4H); 3.59 (m, 2H); 2.65-2.53 (m, 6H); 2.00 (m, 9H); 1.49 (m, 4H); 1.23 (m, 20H); 0.86 (t, 6H).
Korak 2: (Z)-N-(2-Hloroetil)-N-((Z)-dodec-6-en-1-il)dodec-6-en-1-amin
[0854]
[0855] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, (Z)-N-(2-hloroetil)-N-((Z)-dodec-6-en-1-il)dodec-6-en-1-amin je sintetisan od 2-(di((Z)-dodec-6-en-1-il)amino)etan-1-ola (0.22 g, 0.56 mmol), metansulfonil hlorida (0.047 mL, 0.61 mmol) i trietilamina (0.12 mL, 0.84 mmol) u 3 mL DCM. (Prinos (150 mg, 0.36 mmol, 65%).
[0856]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 4H); 3.47 (t, 2H); 2.74 (t, 2H); 2.43 (t, 4H); 2.00 (m, 8H); 1.41-1.27 (m, 24H); 0.87 (m, 6H).
Korak 3: Jedinjenje 25: N<1>-(2-(4-(2-(Di((Z)-dodec-6-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
[0857]
[0858] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(di((Z)-dodec-6-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od (Z)-N-(2-hloroetil)-N-((Z)-dodec-6-en-1-il)dodec-6-en-1-amina (56 mg, 0.14 mmol), N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (84 mg, 0.12 mmol) i K2CO3(17 mg, 0.12 mmol) u 1 mL MeCN. Prinos (41.9 mg, 0.040 mmol, 33%).
[0859] UPLC: RT = 3.74 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1053.564 za C70H141N5
[0860]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.33 (m, 4H); 2.55-2.35 (br. m, 30H); 1.98 (m, 8H); 1.32-1.24 (m, 84H); 0.86 (m, 15H).
AA: Jedinjenje 26: N<1>-(2-(4-(2-(Ditetradecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
[0861]
[0862] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(ditetradecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (75 mg, 0.111 mmol), N-(2-hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amina (58 mg, 0.122 mmol), K2CO3(31 mg, 0.221 mmol), i KI (3 mg, 0.0181 mmol) u THF (4 mL). Prinos (17 mg, 7%). UPLC/ELSD: RT = 3.88 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1113.59 za C74H153N5
[0863]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.15-2.00 (br. m, 30H); 1.75-0.90 (br. m, 108H); 0.81 (t, 15H).
AB: Jedinjenje 27: N<1>,N<1>,N<2>-Tridodecil-N<2>-(2-(4-(2-(dodecil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
Korak 1: (6Z,9Z)-18-(Metilsulfonil)oktadeka-6,9-dien
[0865] U rastvor linoleil alkohola (10 mL, 31.2 mmol) na 0 °C i trietilamina (5.68 mL, 40.5 mmol)) u DCM (50 mL) ukapan je rastvor metansulfonil hlorida (2.66 mL, 34.3 mmol) u DCM (20 mL). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i ostavljena da se meša 4 časa. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je opran zasićenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-40% EtOAc/heksani) dalo je (6Z,9Z)-18-(metilsulfonil)oktadeka-6,9-dien (10.0 g, 93%).
[0866]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 4H); 4.22 (t, 2H); 2.99 (s, 3H); 2.77 (t, 2H); 2.04 (q, 4H); 1.74 (m, 2H); 1.30 (br. m, 16H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: (6Z,9Z)-18-Bromooktadeka-6,9-dien
Hemijska formula: C18H33Br
Molekulska težina: 329.37
[0868] U rastvor (6Z,9Z)-18-(metilsulfonil)oktadeka-6,9-diena (10.0 g, 29.0 mmol) u dietil etru (372 mL) dodat je magnezijum bromid etil eterat (22.5 g, 87.1 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 16 časova. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću dietil etra. Kombinovani organski slojevi su oprani sa 1% K2CO3, slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom dalo je (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-dien (8.9 g, 93%).
[0869]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 4H); 3.41 (t, 2H); 2.77 (t, 2H); 2.05 (q, 4H); 1.86 (m, 2H); 1.48-1.22 (br. m, 16H); 0.89 (t, 3H).
Korak 3: Metil N-dodecil-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)glicinat
[0871] U rastvor metil dodecilglicinat·HCl (1 g, 3.4 mmol) u 8.5 mL DMF, dodati su (Z)-1-bromooktadec-9-en (1.68 g, 5.1 mmol) i K2CO3(1.4 g, 10.2 mmol). Reakcija je zatim ostavljena da se meša 12 h na 85 °C. Nakon tog vremena reakcija je ostavljena da se ohladi do rt i ugašena dodavanjem viška H2O. Smeša je ekstrahovana 3 puta pomoću EtOAc. Organske supstance su spojene i oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% EtOAc u heksanima) čime je dobijen željeni proizvod (0.87 g, 1.72 mmol, 50%).
[0872]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.33 (m, 4H); 3.68 (s, 3H); 3.30 (s, 2H); 2.74 (t, 2H); 2.52 (m, 4H); 2.02 (m, 4H); 1.23 (m, 38H); 0.86 (m, 6H).
Korak 4: 2-(Dodecil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
[0873]
[0874] U rastvor metil N-dodecil-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)glicinata (980 mg, 1.94 mmol) u THF (10 mL) na 0 °C ukapan je litijum aluminijum hidrid (184 mg, 4.85 mmol). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i ostavljena da se meša 3 časa. Smeša je polako ugašena postepenim dodavanjem vode (0.184 mL), 10% NaOH (0.552 mL) i vode (0.184 mL). Reakciona smeša je filtrirana, oprana sa THF i koncentrovana u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% [DCM, 20% MeOH, 1% NH4OH]/MeOH) dalo je 2-(dodecil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol (660 mg, 71%).
[0875] UPLC/ELSD: RT = 3.13 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 478.52 za C32H63NO
[0876]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.39 (br. m, 4H); 3.56 (br. m, 2H); 2.80 (br. m, 2H); 2.61 (br. m, 2H); 2.48 (br. m, 4H); 2.09 (br. m, 4H); 1.57-1.17 (br. m, 38H); 0.91 (br. m, 6H).
Korak 5: (9Z,12Z)-N-(2-Hloroetil)-N-dodeciloktadeka-9,12-dien-1-amin
[0877]
[0878] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)-N-dodeciloktadeka-9,12-dien-1-amin je sintetisan od 2-(dodecil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ola (660 mg, 1.38 mmol), trietilamina (0.249 mL, 1.80 mmol), i metansulfonil hlorida (0.172 mL, 1.73 mmol) u DCM (7 mL). Prinos (123 mg, 18%). UPLC/ELSD: RT = 3.23 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 496.72 za C32H62ClN
[0879]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.29 (br. m, 4H); 3.43 (br. m, 2H); 2.71 (br. m, 4H); 2.38 (br. m, 4H); 1.98 (br. m, 4H); 1.45-1.07 (br. m, 38H); 0.82 (br. m, 6H).
Korak 6: Jedinjenje 27: N<1>,N<1>,N<2>-Tridodecil-N<2>-(2-(4-(2-(dodecil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0880]
Hemijska formula: C76H153N5
Molekulska težina: 1137.10
[0881] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(4-(2-(dodecil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (67 mg, 0.099 mmol), (9Z,12Z)-N(2-hloroetil)-N-dodeciloktadeka-9,12-dien-1-amina (64 mg, 0.129 mmol) K2CO3(28 mg, 0.198 mmol), i KI (2 mg, 0.012 mmol) u THF (2 mL). Prinos (48 mg, 43%).
[0882] UPLC/ELSD: RT = 3.90 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1137.95 za C76H153N5
[0883]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.48-5.29 (m, 4H); 3.15-2.15 (br. m, 32H); 2.07 (br. m, 4H); 1.83-1.00 (br. m, 98H); 0.91 (br. m, 15H).
AC: Jedinjenje 28: N<1>-(2-(4-(2-(Di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
Korak 1: (Z)-1-(Metilsulfonil)oktadec-9-en
[0884]
[0885] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 27, (Z)-1-(metilsulfonil)oktadec-9-en je sintetisan od oleil alkohola (10 mL, 31.7 mmol), trietilamina (5.74 mL, 41.2 mmol), i metansulfonil hlorida (2.70 mL, 34.9 mmol) u DCM (50 mL). Prinos (8.55 g, 78%).
[0886]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.33 (m, 2H); 4.20 (t, 2H); 2.98 (s, 3H); 2.00 (m, 4H); 1.73 (m, 2H); 1.44-1.16 (br. m, 22H); 0.87 (t, 3H).
Korak 2: (Z)-1-Bromooktadec-9-en
Hemijska formula: C18H35Br
Molekulska težina: 331.38
[0888] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 27, (Z)-1-bromooktadec-9-en je sintetisan od (Z)-1-(metilsulfonil)oktadec-9-ena (8.55 g, 24.7 mmol), i magnezijum bromid etil eterata (19.1 g, 74.1 mmol) u dietil etru (317 mL). Prinos (7.42 g, 91%).<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 2H); 3.41 (t, 2H); 2.01 (m, 4H); 1.85 (m, 2H); 1.48-1.14 (br. m, 22H); 0.88 (t, 3H).
Korak 3: 2-(Di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etan-1-ol
[0889]
[0890] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, 2-(di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od (Z)-1-bromooktadec-9-ena (5 g, 15.1 mmol), etanolamina, (0.414 mL, 6.86 mmol), K2CO3(4.17 g, 30.2 mmol), i KI (114 mg, 0.686 mmol) u MeCN (32 mL). Prinos (3.2 g, 83%).
[0891] UPLC/ELSD: RT = 7.325 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 562.60 za C38H75NO
[0892]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 4H); 3.53 (t, 2H); 2.58 (t, 2H); 2.45 (t, 4H); 2.01 (m, 8H); 1.44 (m, 4H); 1.38-1.18 (br. m, 44H); 0.88 (t, 6H).
Korak 4: (Z)-N-(2-Hloroetil)-N-((Z)-oktadec-9-en-1-il)oktadec-9-en-1-amin
[0893]
[0894] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, (Z)-N-(2-hloroetil)-N-((Z)-oktadec-9-en-1-il)oktadec-9-en-1-amin je sintetisan od 2-(di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etan-1-ola (1.64 g, 2.92 mmol) trietilamina (0.529 mL, 3.79mmol), i metansulfonil hlorida (0.282 mL, 3.65 mmol) u DCM (15 mL). Prinos (1.47 g, 87%). UPLC/ELSD: RT = 3.75 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 580.64 za C38H74ClN
[0895]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 4H); 3.48 (br. m, 2H); 2.77 (br. m, 2H); 2.45 (br. m, 4H); 2.02 (br. m, 8H); 1.62-1.05 (br. m, 48H); 0.89 (t, 6H).
Korak 5: Jedinjenje 28: N<1>-(2-(4-(2-(Di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
Hemijska formula: C82H165N5
Molekulska težina: 1221.26
[0897] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (75 mg, 0.111 mmol), (Z)-N-(2-hloroetil)-N-(1-il)oktadec-9-en-1-amina (71 mg, 0.122 mmol) K2CO3(31 mg, 0.222 mmol), i KI (3 mg, 0.018 mmol) u THF (1.5 mL). Prinos (20 mg, 15%).
[0898] UPLC/ELSD: RT = 4.05 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1221.72 za C82H165N5
[0899]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.29-5.14 (br. m, 4H); 2.95-2.00 (br. m, 30H); 1.96-1.77 (br. m, 8H); 1.60-0.85 (br. m, 108H); 0.76 (br. m, 15H).
AD: Jedinjenje 29: N<1>-(2-(4-(2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
Korak 1: 2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
[0900]
[0901] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, 2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-diena (4 g, 12.1 mmol), etanolamina, (0.334 mL, 5.52 mmol), K2CO3(3.36 g, 24.3 mmol), i KI (92 mg, 0.552 mmol) u MeCN (26 mL). Prinos (1.9 g, 62%).
[0902] UPLC/ELSD: RT = 6.80 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 557.94 za C38H71NO
[0903]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 8H); 3.52 (t, 2H); 2.77 (t, 4H); 2.57 (t, 2H); 2.43 (t, 4H); 2.04 (q, 8H); 1.48-1.18 (br. m, 36H); 0.89 (t, 6H).
Korak 2: (9Z,12Z)-N-(2-Hloroetil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amin
[0904]
[0905] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amin je sintetisan od 2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ola (250 mg, 0.45 mmol), trietilamina (81 µL, 0.58 mmol), i metansulfonil hlorida (38 µL, 0.49 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (134 mg, 52%).
[0906]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 8H); 3.49 (t, 2H); 2.78 (m, 6H); 2.45 (t, 4H); 2.05 (q, 8H); 1.48-1.18 (br. m, 36H); 0.89 (t, 6H).
Korak 3: Jedinjenje 29: N<1>-(2-(4-(2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin
[0907]
[0908] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tridodeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (75 mg, 0.111 mmol), (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amina (71 mg, 0.122) K2CO3(31 mg, 0.222 mmol), i KI (3 mg, 0.018 mmol) u THF (3 mL). Prinos (20 mg, 15%)
[0909] UPLC/ELSD: RT = 3.97 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1217.95 za C82H161N5
[0910]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.48-5.28 (m, 12H); 3.30-2.20 (br. m, 36H); 2.17-1.92 (br. m, 12H); 1.90-1.00 (br. m, 94H); 0.87 (br. m, 15H).
AE: Jedinjenje 30: N<1>-(2-(4-(2-(Dinonilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin
[0911]
Hemijska formula: C70H145N5
Molekulska težina: 1056.97
[0912] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(dinonilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>-(2-(piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamina (150 mg, 0.197 mmol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (79 mg, 0.236 mmol), K2CO3(54 mg, 0.394 mmol), i KI (3 mg, 0.0134 mmol) u THF (4 mL). Prinos (50 mg, 24%). UPLC/ELSD: RT = 3.79 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1057.74 za C70H145N5
[0913]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.15-2.20 (br. m, 30H); 1.90-1.00 (br. m, 100H); 0.90 (t, 15H).
AF: Jedinjenje 31: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin
[0915] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>-(2-(piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamina (150 mg, 0.197 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (98 mg, 0.236 mmol), K2CO3(54 mg, 0.394 mmol), i KI (3 mg, 0.0134 mmol) u THF (4 mL). Prinos (42 mg, 19%). UPLC/ELSD: RT = 3.98 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1142.14 za C76H157N5
[0916]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.20-2.20 (br. m, 30H); 1.90-1.00 (br. m, 112H); 0.90 (t, 15H).
AG: Jedinjenje 32: N<1>-(2-(4-(2-(Ditetradecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin
[0917]
[0918] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(ditetradecilamino)etil)plperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>-(2-(piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamina (150 mg, 0.197 mmol), N-(2-hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amina (130 mg, 0.276 mmol), K2CO3(54 mg, 0.394 mmol), i KI (3 mg, 0.0134 mmol) u THF (4 mL). Prinos (17 mg, 7%). UPLC/ELSD: RT = 4.11 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1198.32 za C80H165N5
[0919]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.20-2.15 (br. m, 30H); 1.90-1.00 (br. m, 120H); 0.90 (t, 15H).
AH: Jedinjenje 33: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)etan-1,2-diamin
Korak 1: terc-Butil (Z)-4-(2-(oktadec-9-en-1-ilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0921] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 18, terc-butil (Z)-4-(2-(oktadec-9-en-1-ilamino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od (Z)-1-bromooktadec-9-ena (1.95 g, 11.8 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazina (1.35 g, 5.89 mmol), K2CO3(1.60 g, 11.8 mmol), i KI (98 mg, 0.689 mmol) u MeCN (30 mL). Prinos (790 mg, 28%).
[0922]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.32 (m, 2H); 3.45 (br, 4H); 2.75 (t, 2H); 2.65 (t, 2H); 2.57 (t, 2H); 2.40 (br, 4H); 2.09 (br, 4H); 1.48 (br. m, 11H); 1.41-1.10 (br, 22H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: terc-Butil 4-(2-((2-(di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0923]
[0924] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-((2-(di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil (Z)-4-(2-(oktadec-9-en-1-ilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (573 mg, 1.19 mmol), (Z)-N-(2-hloroetil)N-((Z)-oktadec-9-en-1-il)oktadec-9-en-1-amina (693 mg, 1.19 mmol), K2CO3(329 mg, 2.38 mmol), i KI (20 mg, 0.119 mmol) u THF (6 mL). Prinos (918 mg, 75%).
[0925]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.37 (m, 6H); 3.45 (br. m, 4H); 2.72-2.18 (br. m, 18H); 2.04 (br. m, 12H); 1.65-1.05 (br. m, 81H) 0.91 (br. m, 9H).
Korak 3: N<1>,N<1>,N<2>-Tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0926]
[0927] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 18, N<1>,N<1>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin je sintetisan od, terc-butil 4-(2-((2-(di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (740 mg, 0.859 mmol), i TFA (3.3 mL, 42.9 mmol) u DCM (3.3 mL). Prinos (115 mg, 14%).
[0928]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 6H); 2.91 (br, 4H); 2.74-2.34 (br. m, 18H); 2.03 (br. m, 12H); 1.54-1.04 (br. m, 72H); 0.90 (br. m, 9H).
Korak 4: Jedinjenje 33: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)etan-1,2-diamin
[0929]
Hemijska formula: C88H175N5
Molekulska težina: 1303.40
[0930] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)etan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (58 mg, 0.063 mmol), N-(2-hloroetil)-Ndodecildodekan-1-amina (31 mg, 0.075 mmol), K2CO3(17 mg, 0.13 mmol), i KI (1 mg, 0.006 mmol) u THF (1.5 mL). Prinos (30 mg, 37%).
[0931] UPLC/ELSD: RT = 4.16 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1304.03 za C88H175N5
[0932]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36-5.24 (br. m, 6H); 2.66-2.08 (br. m, 30H); 2.04-1.82 (br. m, 12H); 1.57-0.87 (br. m, 112H); 0.81 (br. m, 15H).
AI: Jedinjenje 34: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)etan-1,2-diamin
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
Hemijska formula: C29H55N3O2
Molekulska težina: 477.78
[0934] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-(((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-diena (3.0 g, 9.11 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazina (2.09 g, 9.11 mmol), K2CO3(2.52 g, 18.22 mmol), i KI (151 mg, 0.911 mmol) u MeCN (44 mL). Prinos (1.20 g, 27%).
[0935]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 4H); 3.42 (t, 4H); 2.77 (t, 2H); 2.73 (t, 2H); 2.62 (t, 2H); 2.51 (t, 2H); 2.38 (t, 4H); 2.04 (q, 4H); 1.60-1.20 (br. m, 27H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: terc-Butil 4-(2-((2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
[0937] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 18, terc-butil 4-(2-((2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (600 mg, 1.26 mmol), (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amina (796 mg, 1.38 mmol), K2CO3(347 mg, 2.51 mmol), i KI (21 mg, 0.126 mmol) u THF (8 mL). Prinos (793 mg, 62%).
[0938] UPLC/ELSD: RT = 3.95 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1018.19 za C67H124N4O2
Korak 3: N<1>,N<1>,N<2>-Tri((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0939]
[0940] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 18, N<1>,N<1>,N<2>-tri((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin je sintetisan od terc-butil 4-(2-((2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (793 mg, 0.779 mmol), i TFA (3.0 mL, 39.0 mmol) u DCM (3.0 mL). Prinos (374 mg, 52%).
[0941] UPLC/ELSD: RT = 3.68 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 918.84 za C62H116N4
[0942]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 12H); 4.12 (m, 6H); 3.30-2.55 (22H); 2.04 (q, 12H); 1.80-1.00 (br. m, 54H); 0.89 (t, 9H).
Korak 4: N<1>-(2-(4-(2-(Didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)etan-1,2-diamin
[0944] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)etan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tri((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (75 mg, 0.082 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (37 mg, 0.090) K2CO3(23 mg, 0.163 mmol), i KI (2 mg, 0.012 mmol) u THF (3 mL). Prinos (20 mg, 15%).
[0945] UPLC/ELSD: RT = 4.00 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1297.88 za C88H169N5
[0946]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.48-5.28 (Br, 12H); 3.30-2.20 (br. m, 36H); 2.17-1.92 (br. m, 12H); 1.90-1.00 (br. m, 94H); 0.87 (br. m., 15H).
AJ: Jedinjenje 35: N<1>,N<1>,N<2>-Triheksil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
Jedinjenje 35 je sintetisano prema koracima 1-5 za jedinjenje 17.
[0947]
Hemijska formula: C26H56N4
Molekulska težina: 424.76
AK: Jedinjenje 36: N<1>,N<1>,N<2>-Trinonil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
Jedinjenje 36 je sintetisano prema koracima 1-5 prikazanim za jedinjenje 18.
AL: Jedinjenje 37: N<1>,N<1>,N<2>-Tridodecil-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin Jedinjenje 37 je sintetisano prema koracima 1 i 2 za jedinjenje 3.
[0949]
AM: Jedinjenje 38: N<1>-(2-(Piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tritetradeciletan-1,2-diamin
[0950] Jedinjenje 38 je sintetisano prema koracima 1-5 za jedinjenje 13.
AN: Jedinjenje 39: 2-(Didodecilamino)-N-dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)acetamid
[0951] Jedinjenje 39 je sintetisano prema koracima 1-3 za jedinjenje 1.
Hemijska formula: C44H90N4O
Molekulska težina: 691.23
AO: Jedinjenje 40: N<1>,N<1>,N<2>-Tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0952] Jedinjenje 40 je sintetisano prema koracima 1-3 za jedinjenje 33.
AP: Jedinjenje 41: N<1>,N<1>,N<2>-Tri((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamin
[0953] Jedinjenje 41 je sintetisano prema koracima 1-3 za jedinjenje 34.
AQ: Jedinjenje prema formuli (IV): N<1>-(2-(4-(2-(Di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)etan-1,2-diamin
Hemijska formula: C100H195N5
Molekulska težina: 1467.70
[0955] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 18, N<1>-(2-(4-(2-(di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etil)piperazin-1-il)etil)-N<1>,N<2>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)etan-1,2-diamin je sintetisan od N<1>,N<1>,N<2>-tri((Z)-oktadec-9-en-1-il)-N<2>-(2-(piperazin-1-il)etil)etan-1,2-diamina (75 mg, 0.0812 mmol), (Z)-N-(2-hloroetil)-N-((Z)-oktadec-9-en-1-il)oktadec-9-en-1-amina (57 mg, 0.0974 mmol) K2CO3(22 mg, 0.162 mmol), i KI (2 mg, 0.012 mmol) u THF (1.5 mL). Prinos (30 mg, 25%)
[0956] UPLC/ELSD: RT = 4.41 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1469.08 za C100H195N5
[0957]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.40-5.27 (br. m, 10H); 3.18-2.22 (br. m, 30H); 2.06-1.89 (m, 20H); 1.80-0.97 (br. m, 120H); 0.88 (t, 15H).
AR: Jedinjenje 42: 2-(Dinonilamino)-1-(5-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 5-(dinonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat
Hemijska formula: C30H57N3O3
Molekulska težina: 507.80
[0959] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 11, terc-butil 5-(dinonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat je sintetisan od litijum dinonilglicinata (500 mg, 1.50 mmol), terc-butil 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (357 mg, 1.80 mmol), iPr2EtN (628 µL, 3.60 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 2.68 mL, 4.50 mmol) u THF (15 mL). Prinos (710 mg, 78%).
[0960] UPLC/ELSD: RT = 0.87 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 508.44 za C30H57N3O3
[0961]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.98-4.46 (br. m, 2H); 4.30-3.15 (br. m, 10H); 2.14-1.60 (br. m, 6H); 1.49 (s, 9H); 1.40-1.00 (br. m, 24H); 0.89 (t, 6H).
Korak 2: 1-(2,5-Diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-2-(dinonilamino)etan-1-on
[0963] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, 1-(2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-2-(dinonilamino)etan-1-on je sintetisan od terc-butil 5-(dinonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (710 mg, 1.40 mmol) i TFA (5.4 mL, 70 mmol) u DCM (5 mL). Prinos (446 mg, 78%)
[0964] UPLC/ELSD: RT = 0.67 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 408.64 za C25H49N3O
[0965]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.90-3.00 (br. m, 8H); 2.49 (br. m, 4H); 1.79 (br. m, 2H); 1.58-1.08 (br. m, 28H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: 2-(Dinonilamino)-1-(5-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)etan-1-on
[0966]
[0967] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-(dinonilamino)-1-(5-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)etan-1-on je sintetisan od 1-(2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-2-(dinonilamino)etan-1-ona (100 mg, 0.25 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (134 mg, 0.27 mmol), iPr2EtN (94 µL, 0.54 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 438 µL, 0.74 mmol) u THF (20 mL). Prinos (50 mg, 23%).
[0968] UPLC/ELSD: RT = 3.60 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 887.12 za C56H111N5O2
[0969]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.15-2.28 (br. m, 26H); 2.16-1.00 (br. m, 70H); 0.90 (t, 15H).
AS: Jedinjenje 43: 2-((2-(Didodecilamino)etil)(dodecil)amino)-1-(5-(dinonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)etan-1-on 3
[0970]
Hemijska formula: C65H129N5O2
Molekulska težina: 1012.78
[0971] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)-1-(5-(dinonilglicil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)etan-1-on je sintetisan od 1-(2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-2-(dinonilamino)etan-1-ona (100 mg, 0.25 mmol), N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicina (168 mg, 0.27 mmol), iPr2EtN (94 µL, 0.54 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 438 µL, 0.74 mmol) u THF (20 mL). Prinos (150 mg, 60%).
[0972] UPLC/ELSD: RT = 3.60 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1013.24 za C65H129N5O2
[0973]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.15-2.26 (br. m, 24H); 2.13-1.09 (br. m, 90H); 0.90 (t, 15H).
AT: Jedinjenje 44: Metil 8-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)oktanoat
Korak 1:terc-Butil nonilglicinat
Hemijska formula: C15H31NO2
Molekulska težina: 257.42
[0975] U smešu terc-butil glicina (3.0 g, 23 mmol) i 1-bromononana (2.4 g, 11.5 mmol) u MeCN (100 mL) dodat je K2CO3(3.2 g, 23 mmol) i KI (190 mg, 1.1 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 24 časa na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT i filtrirana kroz čep od celita, uz ispiranje heksanima. MeCN je ekstrahovan 3x heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-15% MeOH/DCM) dalo je terc-butil nonilglicinat kao bistro bezbojno ulje (848 mg, 29%).
[0976]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.31 (s, 2H); 2.60 (t, 2H); 1.82-1.63 (br, 1H); 1.56-1.20 (br. m, 23H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: Metil 8-bromooktanoat
Hemijska formula: C9H17BrO2
Molekulska težina: 237.14
[0978] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 15, metil 8-bromooktanoat je sintetisan od 8-bromooktanske kiseline (5.0 g, 22 mmol), metanola (20 mL, 450 mmol), i H2SO4(1.2 mL, 22 mmol) u THF (20mL). Prinos (5.0 g, 95%).
[0979]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.42 (t, 2H); 2.33 (t, 2H); 1.88 (kvint, 2H); 1.65 (kvint, 2H); 1.54-1.27 (br. m, 6H).
Korak 3: Metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)oktanoat
[0980]
[0981] U smešu terc-butil nonilglicinata (300 mg, 1.17 mmol) i metil 8-bromooktanoata (290 mg, 1.22 mmol) u MeCN (12mL) dodat je K2CO3(341 mg, 2.45 mmol) i KI (19 mg, 0.12 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT i filtrirana kroz čep od celita, uz ispiranje heksanima. MeCN je ekstrahovan 3x heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-10% EtOAc/Heksani) dalo je metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)oktanoat (353 mg, 73%).
[0982] UPLC/ELSD: RT = 1.60 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 414.51 za C24H47NO4
[0983]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.23 (s, 2H); 2.57 (t, 4H); 2.32 (t, 2H); 1.70-1.18 (br. m, 33H); 0.90 (t, 3H).
Korak 4: N-(8-Metoksi-8-oksooktil)-N-nonilglicin
Hemijska formula: C20H39NO4
Molekulska težina: 357.54
[0985] U rastvor metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)oktanoata (353 mg, 0.85 mmol) u DCM (4mL) dodata je TFA (3.3 mL, 43 mmol) i rastvor je ostavljen da se meša 4 časa na RT. Rastvor je koncentrovan u vakuumu, apsorbovan u DCM, i opran sa 5% Na2CO3i slanim rastvorom, osušen nad Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu čime je dobijen N-(8-metoksi-8-oksooktil)-N-nonilglicin (305 mg, 99%).
[0986]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.49 (s, 2H); 3.06 (t, 4H); 2.32 (t, 2H); 1.79-1.14 (br. m, 24H); 0.90 (t, 3H).
Korak 5: terc-Butil 4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-karboksilat
[0987]
[0988] U rastvor N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (1.0 g, 2.0 mmol) i 1-boc-piperazina (412 mg, 2.2 mmol) u THF (20 mL) dodat je iPr2EtN (773 µL, 4.4 mmol) i T3P (50% rastvor EtOAc, 3.6 mL, 6.0 mmol) i rastvor je ostavljen da se meša 12 časova na RT. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana 3x pomoću EtOAc. Kombinovane organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad Na2SO4, filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je terc-butil 4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-karboksilat (961 mg, 72%). UPLC/ELSD: RT = 3.27 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 665.79 za C40H80N4O3
[0989]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.43-2.90 (br. m, 20H); 2.04-0.99 (br. m, 51H); 0.90 (t, 9H).
Korak 6: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on
Hemijska formula: C35H72N4O
Molekulska težina: 564.99
[0991] U rastvor terc-butil 4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-karboksilata (961 mg, 1.44 mmol) u DCM (6 mL) dodata je TFA (5.5 mL, 72 mmol) i rastvor je ostavljen da se meša 4 časa. Rastvor je koncentrovan u vakuumu, apsorbovan u DCM, i opran sa 5% Na2CO3, slanim rastvorom, osušen nad Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu čime je dobijen 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-on (743 mg, 91%). UPLC/ELSD: RT = 2.14 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 565.82 za C35H72N4O
[0992]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.59 (br, 4H); 3.36 (br, 2H); 2.99-2.03 (br. m, 14H); 1.74-1.01 (br. m, 42H); 0.90 (t, 9H).
Korak 7: Metil 8-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)oktanoat
[0993]
[0994] U rastvor N-(8-metoksi-8-oksooktil)-N-nonilglicina (100 mg, 0.28 mmol) i 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (174 mg, 0.31 mmol) u THF (25 mL) dodat je), iPr2EtN (107 µL, 0.62 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.50 mL, 0.84 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organske supstance su osušene iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM/[DCM 20% MeOH 1% NH4OH]) dalo je metil 8-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)oktanoat (121 mg, 48%).
[0995] UPLC/ELSD: RT = 2.88 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905 za C55H109N5O4
[0996]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.64-3.36 (br. m, 11H); 3.18 (s, 2H); 3.13 (s, 2H); 2.54-2.09 (br. m, 16H); 1.55-0.88 (br. m, 66H); 0.76 (t, 12H).
AU: Jedinjenje 45: Pentil 4-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)butanoat
Korak 1: Pentil 4-bromobutanoat
[0997]
[0998] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 15, pentil 4-bromobutanoat je sintetisan od 4-bromobutanoinske kiseline (2.0 g, 12 mmol), pentanola (1.7 mL, 15.6 mmol), i H2SO4(0.65 mL, 12 mmol) u THF (20mL). Prinos (1.26 g, 44%).
[0999]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.10 (t, 2H); 3.49 (t, 2H); 2.52 (t, 2H); 2.20 (kvint, 2H); 1.65 (kvint, 2H); 1.35 (m, 4H); 0.93 (t, 3H).
Korak 2: Pentil 4-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)butanoat
[1001] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 44, pentil 4-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil nonilglicinata (300 mg, 1.17 mmol) i pentil 4-bromobutanoata (290 mg, 1.22 mmol) u MeCN (12 mL) dodat je K2CO3(341 mg, 2.45 mmol) i KI (19 mg, 0.12 mmol). Prinos (343 mg, 71%).
[1002] UPLC/ELSD: RT = 1.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 415 za C24H47NO4
[1003]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.23 (s, 2H); 2.60 (br. m, 4H); 2.37 (t, 2H); 1.78 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.52-1.20 (br. m, 27H); 0.90 (m, 6H).
Korak 3: N-Nonil-N-(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicin
Hemijska formula: C20H39NO4
Molekulska težina: 357.54
[1005] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, N-nonil-N-(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicin je sintetisan od pentil 4-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)butanoata (343 mg, 0.83 mmol) i TFA (3.17 mL, 41.5 mmol) u DCM (4 mL). Prinos (296 mg, 99%).
[1006] UPLC/ELSD: RT = 1.29 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 358 za C20H39NO4
[1007]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.43 (br, 2H); 2.94 (br, 4H); 2.41 (t, 2H); 1.98 (br. m, 2H); 1.74-1.54 (br. m, 4H); 1.40-1.16 (br. m, 16H); 0.91 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 4-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)butanoat
[1009] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, pentil 4-((2-(4-(N(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od N-nonil-N-(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicina (100 mg, 0.28 mmol), 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (174 mg, 0.31 mmol), iPr2EtN (107 µL, 0.62 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.50 mL, 0.84 mmol) u THF (25 mL). Prinos (121 mg, 48%).
[1010] UPLC/ELSD: RT = 3.01 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905 za C55H109N5O4
[1011]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.93 (t, 2H); 3.61-3.31 (br. m, 8H); 3.17 (m, 4H); 2.55-2.08 (br. m, 16H); 1.71-0.90 (br. m, 64H); 0.75 (m, 15H).
AV: Jedinjenje 46: Metil 8-((2-((2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino) etil)(nonil)amino)oktanoat
Korak 1: 2-(Nonilamino)etan-1-ol
Hemijska formula: C11H25NO
Molekulska težina: 187.33
[1013] U smešu etanolamina (4.4 mL, 72 mmol) i 1-bromononana (3.0g, 14.5 mmol) u MeCN (150 mL) dodat je K2CO3(4.0 g, 29 mmol) i KI (240 mg, 1.5 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT i filtrirana preko jastučeta od celita, uz ispiranje heksanima. MeCN je ekstrahovan heksanima 3x, i kombinovani heksani su koncentrovani. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM/[DCM 20% MeOH 1% NH4OH]) dalo je 2-(nonilamino)etan-1-ol (1.0 g, 38%)
[1014]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.66 (t, 2H); 2.80 (t, 2H); 2.62 (t, 2H); 1.96 (br. m, 2H); 1.50 (br. m, 2H); 1.28 (br. m, 12H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: Metil 8-((2-hidroksietil)(nonil)amino)oktanoat
[1015]
[1016] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, metil 8-((2-hidroksietil)(nonil)amino)oktanoat je sintetisan od 2-(nonilamino)etan-1-ola (500 mg, 2.67 mmol), metil 8-bromooktanoata (665 mg, 2.8 mmol), K2CO3(780 mg, 5.6 mmol), i KI (44 mg, 0.27 mmol) u MeCN (30 mL). Prinos (578 mg, 63%).
[1017] UPLC/ELSD: RT = 1.01 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 344.31 za C20H41NO3
[1018]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.59 (t, 2H), 2.65 (br, 2H); 2.51 (t, 4H); 2.32 (t, 2H); 1.65 (br. m, 2H); 1.49 (br. m, 4H); 1.30 (br. m, 18H); 0.90 (t, 3H).
Korak 3: Metil 8-((2-hloroetil)(nonil)amino)oktanoat
Hemijska formula: C20H40ClNO2
Molekulska težina: 362.00
[1020] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, metil 8-((2-hloroetil)(nonil)amino)oktanoat je sintetisan od metil 8-((2-hidroksietil)(nonil)amino)oktanoata (578 mg, 1.68 mmol), metansulfonil hlorida (163 µL, 2.10 mmol) i trimetilamina (305 µL, 2.20 mmol) u DCM (10 mL). Prinos (418 mg, 69%). UPLC/ELSD: RT = 1.21 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 363 za C20H40ClNO2
[1021]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (br, 3H); 3.51 (br, 2H), 2.78 (br. m, 2H); 2.47 (br. m, 4H); 2.33 (t, 2H); 1.72-1.20 (br. m, 24H); 0.91 (t, 3H).
Korak 4: Metil 8-((2-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino)oktanoat
Hemijska formula: C35H70N2O4
Molekulska težina: 582.96
[1023] U smešu terc-butil nonilglicinata (218 mg, 0.85 mmol) i metil 8-((2-hloroetil)(nonil)amino)oktanoata (337 mg, 0.93 mmol) u MeCN (10 mL) dodat je K2CO3(236 mg, 1.69 mmol) i KI (14 mg, 0.08 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT i filtrirana kroz čep od celita, uz ispiranje heksanima. Smeša je ekstrahovana heksanima 3x i kombinovani heksani su koncentrovani. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-10% MeOH/DCM) dalo je metil 8-((2-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino)oktanoat (283 mg, 57%).
[1024] UPLC/ELSD: RT = 2.92 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 584 za C35H70N2O4
[1025]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.28 (s, 2H); 2.80-2.20 (br. m, 12H); 1.85-1.10 (br. m, 47H); 0.91 (t, 6H).
Korak 5: N-(2-((8-Metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)-N-nonilglicin
Hemijska formula: C31H62N2O4
Molekulska težina: 526.85
[1027] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, N-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)-N-nonilglicin je sintetisan od metil 8-((2-((2-(terc-butoksi)-2oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino)oktanoata (283 mg, 0.49 mmol) i TFA (1.86 mL, 24.3 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (255 mg, 99%).
[1028] UPLC/ELSD: RT = 2.18 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 528 za C31H62N2O4
[1029]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H), 3.26 (s, 2H), 2.79 (br. m, 8H), 2.59 (t, 2H), 2.33 (t, 2H), 1.76-1.08 (br. m, 38H); 0.90 (t, 6H).
Korak 6: Metil 8-((2-((2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino) oktanoat
[1030]
[1031] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, metil 8-((2-((2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino)oktanoat je sintetisan od 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (75 mg, 0.20 mmol), N-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)-N-nonilglicina (150 mg, 0.28 mmol), iPr2EtN (88 µL, 0.50 mmol) i T3P (50% rastvor EtOAc, 409 µL, 0.69 mmol). Prinos (57 mg, 32%). UPLC/ELSD: RT = 2.88 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905 za C55H109N5O4
[1032]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.82-2.87 (br. m, 27H); 2.64 (m, 2H); 2.33 (t, 2H); 1.80-1.15 (br. m, 66H); 0.90 (t, 12H).
AW: Jedinjenje 47: Metil 8-((2-(dinonilamino)etil)(2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)amino)oktanoat
Korak 1: Metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)amino)oktanoat
Hemijska formula: C15H29NO4
Molekulska težina: 287.40
[1034] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 44, metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)amino)oktanoat je sintetisan od terc-butil glicina (2.0 g, 12 mmol), metil 8-bromooktanoata (2.8 g, 12 mmol), K2CO3(3.3 g, 24 mmol), i KI (198 mg, 1.2 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (1.16 g, 34%).
[1035]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.33 (s, 2H); 2.62 (t, 2H); 2.32 (s, 2H); 2.16-1.80 (br, 1H); 1.72-1.42 (br. m, 13H); 1.34 (br. m, 6H).
Korak 2: Metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(2-(dinonilamino)etil)amino)oktanoat
[1036]
[1037] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 46, metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(2-(dinonilamino)etil)amino)oktanoat je sintetisan od metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)amino)oktanoata (300 mg, 1.0 mmol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (381 mg, 1.15 mmol), K2CO3(320 mg, 2.3 mmol), i KI (17 mg, 0.10 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (285 mg, 47%).
[1038] UPLC/ELSD: RT = 2.89 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 584 za C35H70N2O4
[1039]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.29 (s, 2H); 3.10 (br. m, 8H); 2.59 (t, 2H); 2.32 (t, 2H); 1.82 (br. m, 4H); 1.74-1.16 (br. m, 43H); 0.91 (t, 6H).
Korak 3: N-(2-(dinonilamino)etil)-N-(8-metoksi-8-oksooktil)glicin
Hemijska formula: C31H62N2O4
Molekulska težina: 526.85
[1041] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 46, N-(2-(dinonilamino)etil)-N-(8-metoksi-8-oksooktil)glicin je sintetisan od metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(2-(dinonilamino)etil)amino)oktanoata (285 mg, 0.50 mmol), i TFA (1.87 mL, 24.4 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (254 mg, 98%).
[1042] UPLC/ELSD: RT = 2.16 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 528 za C31H62N2O4
[1043]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.25 (s, 2H); 2.90-2.72 (br. m, 8H); 2.59 (t, 2H); 2.32 (t, 2H); 1.66 (br. m, 6H); 1.48 (br. m, 2H); 1.40-1.20 (br. m, 30H); 0.91 (t, 6H).
Korak 4: Metil 8-((2-(dinonilamino)etil)(2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)amino)oktanoat
[1044]
[1045] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, metil 8-((2-(dinonilamino)etil)(2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)amino)oktanoat je sintetisan od 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (75 mg, 0.20 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-(8-metoksi-8-oksooktil)glicina (150 mg, 0.28 mmol), iPr2EtN (88 µL, 0.50 mmol) i T3P (50% rastvor EtOAc, 409 µL, 0.69 mmol). Prinos (80 mg, 39%). UPLC/ELSD: RT = 2.87 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905 za C55H109N5O4
[1046]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.81-2.21 (br. m, 31H); 1.89-1.05 (br. m, 66H); 0.90 (t, 12H).
AX: Jedinjenje 48: Metil 8-((2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)amino)oktanoat
Korak 1: Metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)amino) oktanoat
Hemijska formula: C35H68N2O6
Molekulska težina: 612.94
[1048] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 46, metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)amino)oktanoat je sintetisan od metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)amino)oktanoata (65 mg, 0.23 mmol), metil 8-((2-hloroetil)(nonil)amino)oktanoata (86 mg, 0.24 mmol), K2CO3(69 mg, 0.50 mmol), i KI (4 mg, 0.02 mmol) u MeCN (4 mL). Prinos (60 mg, 43%).
[1049] UPLC/ELSD: RT = 2.42 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 614 za C35H68N2O6
[1050]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.66 (s, 6H); 3.25 (s, 2H); 2.66 (m, 2H); 2.54 (m, 4H); 2.38 (m, 4H); 2.28 (t, 4H); 1.61 (m, 4H); 1.54-1.10 (br. m, 39H); 0.87 (t, 3H).
Korak 2: N-(8-metoksi-8-oksooktil)-N-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)glicin
Hemijska formula: C31H60N2O6
Molekulska težina: 556.83
[1052] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 46, N-(8-metoksi-8-oksooktil)-N-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)glicin je sintetisan od metil 8-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)amino)oktanoata (60 mg, 0.10 mmol), i TFA (0.37 mL, 4.9 mmol) u DCM (1 mL). Prinos (54 mg, 99%).
[1053]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.60 (s, 6H); 3.15 (s, 2H); 2.72 (br. m, 8H); 2.50 (t, 2H); 2.22 (t, 4H); 1.70-1.05 (br. m, 34H); 0.81 (t, 3H).
Korak 3: Metil 8-((2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)amino)oktanoat
[1054]
Hemijska formula: C55H107N5O6
Molekulska težina: 934.49
[1055] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, metil 8-((2-(4-(dinonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)amino)oktanoat je sintetisan od 2-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (26 mg, 0.07 mmol), N-(8-metoksi-8-oksooktil)-N-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)glicina (54 mg, 0.10 mmol), iPr2EtN (30 µL, 0.17 mmol) i T3P (50% rastvor EtOAc, 140 µL, 0.24 mmol). Prinos (20 mg, 27%).
[1056] UPLC/ELSD: RT = 2.56 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 935 za C55H107N5O6
[1057]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.70-3.00 (br. m, 18H); 2.55-2.05 (br. m, 18H); 1.70-0.95 (br. m, 62H); 0.76 (t, 9H).
AY: Jedinjenje 49: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat
[1059] U smešu terc-butil 4-(2-aminoetil)piperidin-1-karboksilata (1.50 g, 6.6 mmol) i 1-bromononana (1.36 g, 6.57 mmol) u MeCN (100 mL) dodat je K2CO3(1.83 g, 13.1 mmol) i KI (109 mg, 0.66 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT, filtrirana preko jastučeta od celita uz ispiranje heksanima, i koncentrovana u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM/[DCM 20% MeOH 1% NH4OH]) dalo je terc-butil 4-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat (602 mg, 19%).
[1060] UPLC/ELSD: RT = 2.41 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 482 za C30H60N2O2
[1061]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.20-2.26 (br. m, 10H); 1.77-1.10 (br. m, 44H); 0.91 (t, 6H).
Korak 2: N-Nonil-N-(2-(piperidin-4-il)etil)nonan-1-amin
Hemijska formula: C25H52N2
Molekulska težina: 380.71
[1063] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, N-nonil-N-(2-(piperidin-4-il)etil)nonan-1-amin je sintetisan od terc-butil 4-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (602 mg, 1.25 mmol) i TFA (4.8 mL, 63 mmol) u DCM (5 mL). Prinos (406 mg, 85%).
[1064] UPLC/ELSD: RT = 1.27 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 382 za C25H52N2
[1065]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.15 (br. m, 2H); 2.65 (br. m, 2H); 2.42 (br. m, 6H); 1.83-1.04 (br. m, 35H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on
[1066]
[1067] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on je sintetisan od N-nonil-N-(2-(piperidin-4-il)etil)nonan-1-amina (200 mg, 0.53 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (287 mg, 0.58 mmol), iPr2EtN (201 µL, 1.2 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 938 µL, 1.6 mmol) u THF (10 mL). Prinos (90 mg, 20%). UPLC/ELSD: RT = 3.26 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 860 za C56H114N4O [1068]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.62-4.09 (br. m, 2H); 3.55-2.21 (br. m, 20H); 1.94-1.00 (br. m, 77H); 0.91 (t, 15H).
AZ: Jedinjenje 50: 2-(Dinonilamino)-1-(4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C21H42N2O2
Molekulska težina: 354.58
[1070] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-aminoetil)piperidin-1-karboksilata (1.50 g, 6.6 mmol), 1-bromononana (1.36 g, 6.57 mmol), K2CO3(1.83 g, 13.1 mmol), i KI (109 mg, 0.66 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (288 mg, 13%).
[1071] UPLC/ELSD: RT = 1.23 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 356 za C21H42N2O2
[1072]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (br. m, 2H); 2.67 (br. m, 6H); 1.80-0.98 (br. m, 30H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: terc-Butil 4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
[1073]
[1074] U smešu terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat (288 mg, 0.81 mmol) i N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amin (297 mg, 0.89 mmol) u MeCN (20 mL) dodat je K2CO3(249 mg, 1.79 mmol), i KI (13 mg, 0.08 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT i filtrirana preko jastučeta od celita uz ispiranje heksanima, i koncentrovana. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM/[DCM 20% MeOH 1% NH4OH]) dalo je terc-butil 4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat (216 mg, 41%) UPLC/ELSD: RT = 2.72 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 651 za C41H83N3O2
[1075]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (br, 2H); 2.83-2.29 (br. m, 14H); 1.75-1.00 (br. m, 58H); 0.90 (t, 9H).
Korak 3: N<1>,N<1>,N<2>-Trinonil-N<2>-(2-(piperidin-4-il)etil)etan-1,2-diamin
Hemijska formula: C36H75N3
Molekulska težina: 550.02
[1077] Na isti način kao u koraku 6 za jedinjenje 44, N<1>,N<1>,N<2>-trinonil-N<2>-(2-(piperidin-4-il)etil)etan-1,2-diamin je sintetisan od terc-butil 4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperidin-1karboksilata (216 mg, 0.33 mmol) i TFA (1.27 mL, 16.6 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (178 mg, 97%).
[1078] UPLC/ELSD: RT = 1.84 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 551 za C36H75N3
[1079]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.08 (br. m, 2H); 2.70-2.25 (br. m, 14H); 2.0 (br, 1H); 1.80-1.02 (br. m, 49H); 0.90 (t, 9H).
Korak 4: 2-(Dinonilamino)-1-(4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on
[1080]
[1081] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, 2-(dinonilamino)-1-(4-(2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on je sintetisan od dinonilglicina (96 mg, 0.29 mmol), N<1>,N<1>,N<2>-trinonil-N<2>-(2-(piperidin-4-il)etil)etan-1,2-diamina (178 mg, 0.32 mmol), iPr2EtN (112 µL, 0.65 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 525 µL, 0.88 mmol) u THF (6 mL). Prinos (121 mg, 48%).
[1082] UPLC/ELSD: RT = 2.96 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 860 za C56H114N4O
[1083]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.63-4.08 (br. m, 4H); 3.34-2.25 (br. m, 18H); 1.90-1.01 (br. m, 77H); 0.91 (t, 15H).
BA: Jedinjenje 51: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(ditetradecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
Korak 1: Metil ditetradecilglicinat
Hemijska formula: C31H63NO2
Molekulska težina: 481.85
[1085] Na isti način kao u koraku 1 iz jedinjenja 11, metil 3-(ditetradecilamino)propanoat je sintetisan od hidrohlorida glicin metil estra (564 mg, 4.49 mmol), tetradekanala (2.1 g, 9.89 mmol), natrijum triacetoksiborohidrida (2.1 g, 9.89 mmol), sirćetne kiseline (0.6 mL, 9.89 mmol), trimetilamina (0.93 mL, 6.74 mmol), u DCE (22 mL). Prinos (1.93 g, 89%).
[1086]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.34 (s, 2H); 1.56 (t, 4H); 1.60-1.03 (br. m, 48H); 0.91 (t, 6H).
Korak 2: Litijum ditetradecilglicinat
[1087]
[1088] Na isti način kao u koraku 2 iz jedinjenja 11, litijum ditetradecilglicinat je sintetisan od metil ditetradecilglicinata (1.93 g, 4.0 mmol) i 1M LiOH (20 mL, 20 mmol) u THF (20 mL). Prinos (1.81 g, 97%).
[1089]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.17 (s, 2H); 2.64 (t, 4H); 1.52 (br. m, 4H); 1.31 (br. m, 44H); 0.93 (t, 6H).
Korak 3: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(ditetradecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on
Hemijska formula: C65H131N5O2
Molekulska težina: 1014.80
[1091] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(ditetradecilglicil)piperazin-1-il)etan-1-on je sintetisan od litijum ditetradecilglicinata (126 mg, 0.26 mmol), 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (134 mg, 0.24 mmol), iPr2EtN (91 µL, 0.52 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 424 µL, 0.71 mmol) u THF (4 mL)
[1092] UPLC/ELSD: RT = 3.64 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 1016 za C65H131N5O2
[1093]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.84-2.34 (br. m, 26H); 1.88-0.99 (br. m, 90H); 0.90 (t, 15H).
BB: Jedinjenje 52: 3-(Dinonilamino)-1-(4-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil) piperazin-1-il)propan-1-on
Korak 1: Metil 3-(dinonilamino)propanoat
[1094]
[1095] U smešu metil 3-aminopropanoat hidrohlorida (2.0 g, 14 mmol) i 1-bromononana (2.7 mL, 14 mmol) u MeCN (100 mL) dodat je K2CO3(4.0 g, 29 mmol) i KI (238 mg, 1.4 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT i filtrirana preko jastučeta od celita uz pranje heksanima, i koncentrovana u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-10% MeOH/DCM) dalo je metil 3-(dinonilamino)propanoat (663 mg, 13%).
[1096]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 2.80 (t, 2H); 2.41 (br. m, 6H); 1.70-1.10 (br. m, 28H); 0.90 (t, 6H).
Korak 2: Litijum 3-(dinonilamino)propanoat
Hemijska formula: C21H42LiNO2
Molekulska težina: 347.51
[1098] Na isti način kao u koraku 2 iz jedinjenja 11, litijum 3-(dinonilamino)propanoat je sintetisan od metil 3-(dinonilamino)propanoata (663 mg, 1.86 mmol) i 1M LiOH (9.32 mL, 9.32 mmol) u THF (10 mL). Prinos (636 mg, 99%).
[1099]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.94-1.65 (br. m, 8H); 1.65-1.04 (br. m, 28H); 0.90 (t, 6H).
terc-Butil 4-(3-(dinonilamino)propanoil)piperazin-1-karboksilat
[1100] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 11, terc-butil 4-(3-(dinonilamino)propanoil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od litijum 3-(dinonilamino)propanoata (636 mg, 1.83 mmol), 1-boc-piperazina (388 mg, 2.08 mmol), iPr2EtN (726 µL, 4.17 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 3.4 mL, 5.68 mmol) u THF (20 mL). Prinos (839 mg, 87%).
[1101] UPLC/ELSD: RT = 2.26 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511 za C30H59N3O3
[1102]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.71-2.21 (br. m, 16H); 1.92-0.98 (br. m, 37H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: 3-(Dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)propan-1-on
Hemijska formula: C25H51N3O
Molekulska težina: 409.70
[1104] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, 3-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)propan-1-on je sintetisan od terc-butil 4-(3-(dinonilamino)propanoil)piperazin-1-karboksilata (839 mg, 1.65 mmol), i TFA (6.3 mL, 83 mmol) u DCM (7 mL). Prinos (501 mg, 74%).
[1105] UPLC/ELSD: RT = 1.19 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 411 za C25H51N3O
[1106]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.61 (t, 2H); 3.47 (t, 2H); 2.86 (br. m, 6H); 2.46 (br. m, 6H); 1.80 (br, 1H); 1.56-1.08 (br. m, 28H); 0.90 (t, 6H).
Korak 4: Metil 3-(nonilamino)propanoat
Hemijska formula: C13H27NO2
Molekulska težina: 229.36
[1108] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 52, metil 3-(nonilamino)propanoat je sintetisan od metil 3-aminopropanoat hidrohlorida (2.0 g, 14 mmol), 1-bromononana (2.7 mL, 14 mmol), K2CO3(4.0 g, 29 mmol) i KI (238 mg, 1.4 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (300 mg, 9%)
[1109]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.70 (s, 3H); 2.91 (t, 2H); 2.60 (br. m, 4H); 1.90 (br, 1H); 1.58-1.02 (br. m, 14H); 0.90 (t, 3H).
Korak 5: Metil 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoat
Hemijska formula: C33H68N2O2
Molekulska težina: 524.92
[1111] Na isti način kao u koraku 9 iz jedinjenja 10, metil 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoat je sintetisan od metil 3-(nonilamino)propanoata (300 mg, 1.31 mmol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (478 mg, 1.44 mmol), K2CO3(400 mg, 2.88 mmol), i KI (22 mg, 0.13 mmol) u MeCN (20 mL). Prinos (348 mg, 51%).
[1112] UPLC/ELSD: RT = 2.66 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 526 za C33H68N2O2
[1113]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 2.82 (t, 2H); 2.44 (br. m, 12H); 1.85-1.05 (br. m, 42H); 0.90 (t, 9H).
Korak 6: 3-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanska kiselina
Hemijska formula: C32H66N2O2
Molekulska težina: 510.89
[1115] Na isti način kao u koraku 10 iz jedinjenja 10, 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanska kiselina je sintetisana od metil 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoata (348 mg, 0.66 mmol) i 1M LiOH (3.3 mL, 3.3 mmol) u THF (3.3 mL). Prinos (338 mg, 99%).
[1116] UPLC/ELSD: RT = 2.29 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 512 za C32H66N2O2
Korak 7: 3-(Dinonilamino)-1-(4-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)propan-1-on
[1117]
[1118] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 3-(dinonilamino)-1-(4-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)propan-1-on je sintetisan od 3-(dinonilamino)-1-(piperazin-1-il)propan-1-ona (298 mg, 0.73 mmol), 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanske kiseline (338 mg, 0.68 mmol), iPr2EtN (254 µL, 1.46 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 1.18 mL, 1.98 mmol) u THF (10 mL). Prinos (218 mg, 37%).
[1119] UPLC/ELSD: RT = 2.89 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 903 za C57H115N5O2
[1120]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.65 (br. m, 4H); 3.50 (br. m, 4H); 2.82 (br. m, 4H); 2.66-2.30 (br. m, 18H); 1.61-1.02 (br. m, 70H); 0.90 (t, 15H).
BC: Jedinjenje 53: Etil 7-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)heptanoat
Korak 1: Etil 7-bromoheptanoat
Hemijska formula: C9H17BrO2
Molekulska težina: 237.14
[1122] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 15, etil 7-bromoheptanoat je sintetisan od 7-bromoheptanske kiseline (1.0 g, 4.8 mmol), etanola (5.6 mL, 96 mmol), i H2SO4(0.25 mL, 4.8 mmol) u THF (6 mL). Prinos (911 mg, 80%).
[1123]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.15 (q, 2H); 3.42 (t, 2H); 2.33 (t, 2H); 1.87 (m, 2H); 1.66 (m, 2H); 1.57-1.14 (br. m, 7H).
Korak 2: Etil 7-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)heptanoat
[1124]
[1125] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 44, etil 7-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)heptanoat je sintetisan od terc-butil nonilglicinata (250 mg, 0.97 mmol), etil 7-bromoheptanoata (253 mg, 1.07 mmol), K2CO3(270 mg, 1.94 mmol), i KI (16 mg, 0.10 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (298 mg, 74%).
[1126] UPLC/ELSD: RT = 1.60 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 414.68 za C24H47NO4
[1127]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.14 (q, 2H); 3.23 (s, 2H); 2.57 (t, 4H); 2.31 (t, 2H); 1.74-1.12 (br. m, 34H); 0.90 (t, 3H).
Korak 3: N-(7-Etoksi-7-oksoheptil)-N-nonilglicin
Hemijska formula: C20H39NO4
Molekulska težina: 357.54
[1129] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, N-(7-etoksi-7-oksoheptil)-N-nonilglicin je sintetisan od etil 7-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)heptanoata (298 mg, 0.72 mmol), i TFA (2.8 mL, 36 mmol) u DCM (3 mL). Prinos (244 mg, 95%).
[1130] UPLC/ELSD: RT = 1.07 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 358.50 za C20H39NO4
[1131]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.15 (q, 2H); 3.46 (br, 2H); 3.01 (br, 4H); 2.31 (t, 2H); 1.86-1.10 (br. m, 25H); 0.91 (t, 3H).
Korak 4: Etil 7-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil) amino)heptanoat
[1132]
[1133] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, etil 7-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)heptanoat je sintetisan od N-(7-etoksi-7-oksoheptil)-N-nonilglicina (111 mg, 0.31 mmol), 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-1-il)etan-1-ona (160 mg, 0.28 mmol), iPr2EtN (109 µL, 0.62 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.51 mL, 0.81 mmol) u THF (10 mL). Prinos (70 mg, 27%).
[1134] UPLC/ELSD: RT = 2.88 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905.33 za C55H109N5O4
[1135]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.00 (q, 2H); 3.65-3.34 (br. m, 8H); 3.19 (s, 2H); 3.13 (s, 2H); 2.50-2.10 (br. m, 16H); 1.65-0.90 (br. m, 67H); 0.75 (t, 12H).
BD: Jedinjenje 54: Propil 6-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)heksanoat
Korak 1: Propil 6-bromoheksanoat
[1136]
Hemijska formula: C9H17BrO2
Molekulska težina: 237.14
[1137] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 15, propil 6-bromoheksanoat je sintetisan od 6-bromoheksanoinske kiseline (1.0 g, 5.1 mmol), 1-propanola (1.5 g, 26 mmol), i H2SO4(0.27 mL, 5.1 mmol) u THF (5 mL). Prinos (1.14 g, 94%).
[1138]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.05 (t, 2H); 3.43 (t, 2H); 2.34 (t, 2H); 1.90 (m, 2H); 1.68 (m, 4H); 1.50 (m, 2H); 0.96 (t, 3H).
Korak 2: Propil 6-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)heksanoat
[1139]
[1140] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 44, propil 6-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)heksanoat je sintetisan od terc-butil nonilglicinata (250 mg, 0.97 mmol), propil 6-bromoheksanoata (253 mg, 1.07 mmol), K2CO3(270 mg, 1.94 mmol), i KI (16 mg, 0.10 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (258 mg, 64%).
[1141] UPLC/ELSD: RT = 1.62 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 414.59 za C24H47NO4
[1142]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.05 (t, 2H); 3.23 (s, 2H); 2.58 (br. m, 4H); 2.33 (t, 2H); 1.75-1.15 (br. m, 31H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: N-Nonil-N-(6-okso-6-propoksiheksil)glicin
[1143]
[1144] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, N-nonil-N-(6-okso-6-propoksiheksil)glicin je sintetisan od propil 6-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)heksanoata (258 mg, 0.62 mmol), i TFA (2.4 mL, 31 mmol) u DCM (3 mL). Prinos (223 mg, 99%).
[1145] UPLC/ELSD: RT = 1.13 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 358.50 za C20H39NO4
[1146]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (t, 2H); 3.34 (s, 2H); 2.87 (br. m, 4H); 2.36 (t, 2H); 1.77-1.10 (br. m, 22H); 0.92 (m, 6H).
Korak 4: Propil 6-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)heksanoat
[1147]
[1148] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, propil 6-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)heksanoat je sintetisan od N-nonil-N-(6-okso-6-propoksiheksil)glicina (111 mg, 0.31 mmol), 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-1il)etan-1-ona (160 mg, 0.28 mmol), iPr2EtN (109 µL, 0.62 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.51 mL, 0.81 mmol) u THF (10 mL). Prinos (72 mg, 28%).
[1149] UPLC/ELSD: RT = 2.91 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905.33 za C55H109N5O4
[1150]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (t, 2H); 3.78-3.46 (br. m, 8H); 3.34 (s, 2H); 3.28 (s, 2H); 2.68-2.24 (br. m, 16H); 1.85-1.10 (br. m, 64H); 0.92 (m, 15H).
BE: Jedinjenje 55: Butil 5-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)pentanoat
Korak 1: Butil 5-bromopentanoat
[1151]
[1152] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 15, butil 5-bromopentanoat je sintetisan od 5-bromopentanske kiseline (1.47 g, 8.1 mmol), 1-butanola (0.50 g, 6.8 mmol), i H2SO4(0.36 mL, 6.8 mmol) u THF (7 mL). Prinos (1.42 g, 0.89%).
[1153]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.10 (t, 2H); 4.34 (t, 2H); 2.36 (t, 2H); 1.93 (m, 2H); 1.80 (m, 2H); 1.62 (m, 2H); 1.40 (m, 2H); 0.96 (t, 3H).
Korak 2: Butil 5-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)pentanoat
[1155] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 44, butil 5-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)pentanoat je sintetisan od terc-butil nonilglicinata (250 mg, 0.97 mmol), butil 5-bromopentanoata (253 mg, 1.07 mmol), K2CO3(270 mg, 1.94 mmol), i KI (16 mg, 0.10 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (284 mg, 71%).
[1156] UPLC/ELSD: RT = 1.67 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 414.59 za C24H47NO4
[1157]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (t, 2H); 3.23 (s, 2H); 2.58 (m, 4H); 2.34 (t, 2H); 1.74-1.20 (br. m, 31H); 0.93 (m, 6H).
Korak 3: N-(5-Butoksi-5-oksopentil)-N-nonilglicin
[1158]
[1159] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, N-(5-butoksi-5-oksopentil)-N-nonilglicin je sintetisan od butil 5-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)pentanoata (284 mg, 0.69 mmol), i TFA (2.6 mL, 34 mmol) u DCM (3 mL). Prinos (245 mg, 99%).
[1160] UPLC/ELSD: RT= 1.09 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 358.50 za C20H39NO4
[1161]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.05 (t, 2H); 3.48 (s, 2H); 3.03 (br. m, 4H); 2.34 (t, 2H); 1.85-1.15 (br. m, 22H); 0.93 (m, 6H).
Korak 4: Butil 5-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)pentanoat
Hemijska formula: C55H109N5O4
Molekulska težina: 904.51
[1163] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, butil 5-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)pentanoat je sintetisan od N-(5-butoksi-5-oksopentil)-N-nonilglicina (111 mg, 0.31 mmol), 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-l-il)etan-1-ona (160 mg, 0.28 mmol), iPr2EtN (109 µL, 0.62 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.51 mL, 0.81 mmol) u THF (10 mL). Prinos (92 mg, 36%).
[1164] UPLC/ELSD: RT = 2.88 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905.33 za C55H109N5O4
[1165]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.90 (t, 2H); 3.65-3.35 (br. m, 8H); 3.19 (s, 2H); 3.13 (t, 2H); 2.52-2.06 (br. m, 16H); 1.65-0.95 (br. m, 64H); 0.77 (m, 15H).
BF: Jedinjenje 56: 3-((2-(4-(N-(2-(Dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)propil heksanoat
Korak 1: 3-Bromopropil heksanoat
[1166]
[1167] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 15, 3-bromopropil heksanoat je sintetisan od 3-bromopropan-1-ola (0.87 mL, 9.6 mmol), heksanoinske kiseline (1.0 mL, 8.0 mmol), i H2SO4(1.0 mL, 8.0 mmol) u THF (10 mL). Prinos (823 mg, 44%).
[1168]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.23 (t, 2H); 3.49 (t, 2H), 2.33 (t, 2H); 2.20 (m, 2H); 1.65 (m, 2H); 1.34 (m, 4H), 0.91 (t, 3H).
Korak 2: 3-((2-(terc-Butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)propil heksanoat
Hemijska formula: C24H47NO4
Molekulska težina: 413.64
[1170] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 44, 3-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)propil heksanoat je sintetisan od terc-butil nonilglicinata (250 mg, 0.97 mmol), 3-bromopropil heksanoata (253 mg, 1.07 mmol), K2CO3(270 mg, 1.94 mmol), i KI (16 mg, 0.10 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (335 mg, 83%).
[1171] UPLC/ELSD: RT = 1.78 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 414.59 za C24H47NO4
[1172]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.14 (t, 2H); 3.23 (s, 2H); 2.68 (t, 2H); 2.58 (t, 2H); 2.30 (t, 2H); 1.79 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.55-1.20 (br. m, 27H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: N-(3-(Heksanoiloksi)propil)-N-nonilglicin
[1173]
[1174] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, N-(3-(heksanoiloksi)propil)-N-nonilglicin je sintetisan od 3-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)propil heksanoata (335 mg, 0.81 mmol), i TFA (3.1 mL, 40 mmol) u DCM (4 mL). Prinos (284 mg, 98%).
[1175]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.11 (t, 2H); 3.17 (s, 2H); 2.68 (br. m, 4H); 2.30 (t, 2H); 1.87 (m, 2H); 1.63 (m, 2H); 1.48 (m, 2H); 1.28 (br. m, 16H); 0.91 (m, 6H).
Korak 4: 3-((2-(4-(N-(2-(Dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)propil heksanoat
Hemijska formula: C55H109N5O4
Molekulska težina: 904.51
[1177] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, 3-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(nonil)amino)propil heksanoat je sintetisan od N-(3-(heksanoiloksi)propil)-N-nonilglicina (111 mg, 0.31 mmol), 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-l-il)etan-1-ona (160 mg, 0.28 mmol), iPr2EtN (109 µL, 0.62 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.51 mL, 0.81 mmol) u THF (10 mL). Prinos (55 mg, 21%).
[1178] UPLC/ELSD: RT = 2.94 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 905.25 za C55H109N5O4
[1179]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.01 (t, 2H); 3.77-3.43 (br. m, 8H), 3.23 (m, 4H); 2.64-2.15 (m, 16H); 1.70 (m, 2H); 1.54 (m, 2H); 1.50-0.96 (br. m, 60H); 0.81 (m, 15H).
BG: Jedinjenje 57: Metil 8-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)oktanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
[1180]
[1181] U smešu terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (239 mg, 0.67 mmol) i metil 8-bromooktanoata (192 mg, 0.81 mmol) u MeCN (10 mL) dodat je K2CO3(188 mg, 1.35 mmol) i KI (11 mg, 0.07 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT i filtrirana preko jastučeta od celita uz ispiranje sa EtOAc, i koncentrovana u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-80% EtOAc/heksani) dalo je terc-butil 4-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat (241 mg, 70%).
[1182] UPLC/ELSD: RT = 1.87 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 512.76 za C30H58N2O4
[1183]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07 (br. m, 2H); 3.69 (s, 3H); 2.70 (m, 2H); 2.37 (br. m, 8H); 1.75-1.00 (br. m, 40H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: Metil 8-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)oktanoat
Hemijska formula: C25H50N2O2
Molekulska težina: 410.69
[1185] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, metil 8-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)oktanoat je sintetisan od terc-butil 4-(2-((8-metoksi-8-oksooktil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilata (241 mg, 0.47 mmol), i TFA (1.8 mL, 24 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (193 mg, 99%).
[1186]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69 (s, 3H); 3.08 (m, 2H); 2.60 (m, 2H); 2.49-2.24 (br. m, 8H); 2.06 (br, 1H); 1.78-1.02 (br. m, 31H); 0.90 (t, 3H).
Korak 3: Metil 8-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)oktanoat
[1187]
Hemijska formula: C56H112N4O3
Molekulska težina: 889.54
[1188] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, metil 8-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)oktanoat je sintetisan od metil 8-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)oktanoata (141 mg, 0.34 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (188 mg, 0.38 mmol), iPr2EtN (132 µL, 0.76 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 614 µL, 1.03 mmol) u THF (10 mL). Prinos (70 mg, 23%).
[1189] UPLC/ELSD: RT = 2.97 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.24 za C56H112N4O3
[1190]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.64-4.09 (br. m, 2H); 3.69 (s, 3H); 3.42-2.83 (br. m, 3H); 2.69-2.24 (br. m, 19H); 1.81-0.99 (br. m, 73H); 0.90 (t, 12H).
BH: Jedinjenje 58: Etil 7-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)heptanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(2-((7-etoksi-7-oksoheptil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C30H58N2O4
Molekulska težina: 510.80
[1192] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 4-(2-((7-etoksi-7-oksoheptil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (239 mg, 0.67 mmol), etil 7-bromoheptanoata (192 mg, 0.81 mmol), K2CO3(188 mg, 1.35 mmol) i KI (11 mg, 0.07 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (247 mg, 72%).
[1193] UPLC/ELSD: RT = 1.91 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.62 za C30H58N2O4
[1194]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (br. m, 4H); 2.80-2.15 (br. m, 10H); 1.75-1.00 (br. m, 41H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: Etil 7-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)heptanoat
Hemijska formula: C25H50N2O2
Molekulska težina: 410.69
[1196] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, etil 7-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)heptanoat je sintetisan od terc-butil 4-(2-((7-etoksi-7oksoheptil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilata (247 mg, 0.48 mmol), i TFA (1.9 mL, 24 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (194 mg, 98%).
[1197]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.14 (t, 2H); 3.08 (m, 2H); 2.60 (m, 2H); 2.52-2.24 (br. m, 8H); 2.12 (br, 1H); 1.77-1.05 (br. m, 32H); 0.90 (t, 3H).
Etil 7-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)heptanoat
Hemijska formula: C56H112N4O3
Molekulska težina: 889.54
[1199] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, etil 7-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)heptanoat je sintetisan od etil 7-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)heptanoata (141 mg, 0.34 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (188 mg, 0.38 mmol), iPr2EtN (132 µL, 0.76 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 614 µL, 1.03 mmol) u THF (10 mL). Prinos (42 mg, 14%). UPLC/ELSD: RT = 3.00 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.32 za C56H112N4O3
[1200]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.55-3.95 (br. m, 4H); 3.38-2.72 (br. m, 4H); 2.66-2.10 (br. m, 18H); 1.72-0.91 (br. m, 74H); 0.81 (t, 12H).
BI: Jedinjenje 59: Propil 6-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)heksanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(nonil(6-okso-6-propoksiheksil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C30H58N2O4
Molekulska težina: 510.80
[1202] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 4-(2-(nonil(6-okso-6-propoksiheksil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (239 mg, 0.67 mmol), propil 6-bromoheksanoata (192 mg, 0.81 mmol), K2CO3(188 mg, 1.35 mmol) i KI (11 mg, 0.07 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (240 mg, 70%).
[1203] UPLC/ELSD: RT = 1.93 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.78 za C30H58N2O4
[1204]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.05 (br. m, 4H); 2.80-2.20 (br. m, 10H); 1.85-1.04 (br. m, 38H); 0.92 (t, 6H).
Korak 2: Propil 6-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C25H50N2O2
Molekulska težina: 410.69
[1206] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, propil 6-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)heksanoat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(nonil(6-okso-6-propoksiheksil)amino)etil)piperidin-1-karboksilata (240 mg, 0.47 mmol), i TFA (1.8 mL, 23 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (183 mg, 95%).
[1207]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.04 (t, 2H); 3.08 (m, 2H); 2.60 (m, 2H); 2.35 (br. m, 8H); 1.95 (br, 1H); 1.75-1.00 (br. m, 29H); 0.92 (m, 6H).
Korak 3: Propil 6-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C56H112N4O3
Molekulska težina: 889.54
[1209] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, propil 6-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)heksanoat je sintetisan od propil 6-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)heksanoata (141 mg, 0.34 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (188 mg, 0.38 mmol), iPr2EtN (132 µL, 0.76 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 614 µL, 1.03 mmol) u THF (10 mL). Prinos (67 mg, 22%).
[1210] UPLC/ELSD: RT = 3.02 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.32 za C56H112N4O3
[1211]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.65-4.13 (br. m, 2H); 4.05 (t, 2H); 3.50-2.81 (br. m, 4H); 2.69-2.18 (br. m, 18H); 1.98-1.02 (br. m, 71H); 0.92 (br. m, 15H).
BJ: Jedinjenje 60: Butil 5-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)pentanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(2-((5-butoksi-5-oksopentil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C30H58N2O4
Molekulska težina: 510.80
[1213] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 4-(2-((5-butoksi-5-oksopentil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (239 mg, 0.67 mmol), butil 5-bromopentanoata (192 mg, 0.81 mmol), K2CO3(188 mg, 1.35 mmol) i KI (11 mg, 0.07 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (211 mg, 61%).
[1214] UPLC/ELSD: RT = 1.95 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.78 za C30H58N2O4
[1215]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (br. m, 4H); 2.70 (br. m, 2H); 2.38 (br. m, 8H); 1.73-1.02 (br. m, 38H); 0.93 (br. m, 6H).
Korak 2: Butil 5-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)pentanoat
[1216]
[1217] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, butil 5-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)pentanoat je sintetisan od terc-butil 4-(2-((5-butoksi-5-oksopentil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilata (211 mg, 0.41 mmol), i TFA (1.6 mL, 21 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (169 mg, 99%).
[1218]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (t, 2H); 3.07 (m, 2H); 2.60 (m, 2H); 2.37 (br. m, 8H); 1.83 (br, 1H); 1.76-1.04 (br. m, 29H); 0.93 (br. m, 6H).
Korak 3: Butil 5-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)pentanoat
Hemijska formula: C56H112N4O3
Molekulska težina: 889.54
[1220] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, butil 5-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)pentanoat je sintetisan od butil 5-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)pentanoata (141 mg, 0.34 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (188 mg, 0.38 mmol), iPr2EtN (132 µL, 0.76 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 614 µL, 1.03 mmol) u THF (10 mL). Prinos (46 mg, 15%). UPLC/ELSD: RT = 3.03 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.32 za C56H112N4O3
[1221]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.62-4.13 (br. m, 2H); 4.09 (t, 2H); 3.41-2.84 (br. m, 4H); 2.72-2.25 (br. m, 18H); 1.82-1.02 (br. m, 71H); 0.91 (br. m, 15H).
BK: Jedinjenje 61: 3-((2-(1-(N-(2-(Dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)propil heksanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(2-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
[1222]
[1223] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 4-(2-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (239 mg, 0.67 mmol), 3-bromopropil heksanoata (192 mg, 0.81 mmol), K2CO3(188 mg, 1.35 mmol) i KI (11 mg, 0.07 mmol) u MeCN (10 mL). Prinos (195 mg, 57%).
[1224] UPLC/ELSD: RT = 1.97 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.86 za C30H58N2O4
[1225]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.11 (br. m, 4H); 2.69 (m, 2H); 2.56-2.22 (br. m, 8H); 1.76 (m, 2H); 1.65 (m, 4H); 1.55-1.05 (br. m, 32H); 0.91 (m, 6H).
Korak 2: 3-(Nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)propil heksanoat
Hemijska formula: C25H50N2O2
Molekulska težina: 410.69
[1227] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, 3-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)propil heksanoat je sintetisan od terc-butil 4-(2-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)etil)piperidin-1-karboksilata (195 mg, 0.38 mmol), i TFA (1.5 mL, 19 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (149 mg, 95%).
[1228]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (t, 2H); 3.08 (m, 2H); 2.70-2.22 (br. m, 10H); 2.07 (br, 1H); 1.70 (br. m, 6H); 1.48-1.00 (br. m, 23H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: 3-((2-(1-(N-(2-(Dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)propil heksanoat
[1229]
[1230] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 3-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)propil heksanoat je sintetisan od 3-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)propil heksanoata (141 mg, 0.34 mmol), N-(2-(dinonilarmino)etil)-N-nonilglicina (188 mg, 0.38 mmol), iPr2EtN (132 µL, 0.76 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 614 µL, 1.03 mmol) u THF (10 mL). Prinos (64 mg, 21%).
[1231] UPLC/ELSD: RT = 3.02 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.41 za C56H112N4O3
[1232]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.67 (br. m, 4H); 3.42-2.81 (br. m, 3H); 2.73-2.23 (br. m, 19H); 1.87-1.00 (br. m, 71H); 0.90 (t, 15H).
BL: Jedinjenje 62: Pentil 4-((3-(4-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)-3-oksopropil)(nonil)amino)butanoat
Korak 1: terc-Butil 3-(nonilamino)propanoat
Hemijska formula: C16H33NO2
Molekulska težina: 271.45
[1234] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 44, terc-butil 3-(nonilamino)propanoat je sintetisan od terc-butil 3-aminopropanoat hidrohlorida (2.8 g, 15 mmol), 1-bromononana (3.2 g, 15 mmol), K2CO3(4.3 g, 31 mmol), i KI (256 mg, 1.54 mmol) u MeCN (200 mL). Prinos (1.74 g, 42%).
[1235]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.86 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.46 (t, 2H); 1.65 (br, 1H); 1.47 (br. m, 11H); 1.29 (br. m, 12H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: Pentil 4-((3-(terc-butoksi)-3-oksopropil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C25H49NO4
Molekulska težina: 427.67
[1237] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 44, pentil 4-((3-(terc-butoksi)-3-oksopropil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 3-(nonilamino)propanoata (750 mg, 2.76 mmol), pentil 4-bromobutanoata (786 mg, 3.31 mmol), K2CO3(764 mg, 5.52 mmol), i KI (46 mg, 0.28 mmol) u MeCN (30 mL). Prinos (934 mg, 79%). UPLC/ELSD: RT= 1.82 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 428.62 za C25H49NO4
[1238]<1>H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 2.74 (t, 2H); 2.50-2.28 (br. m, 8H); 1.76 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.50-1.14 (br. m, 27H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: 3-(Nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propanska kiselina
Hemijska formula: C21H41NO4
Molekulska težina: 371.56
[1240] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, 3-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propanska kiselina je sintetisana od pentil 4-((3-(terc-butoksi)-3-oksopropil)(nonil)amino)butanoata (934 mg, 2.18 mmol), i TFA (8.4 mL, 109 mmol) u DCM (10 mL). Prinos (793 mg, 98%).
[1241] UPLC/ELSD: RT= 1.23 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 372.52 za C21H41NO4
[1242]<1>H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: ppm 4.10 (t, 2H); 2.88 (t, 2H); 2.70 (br. m, 4H); 2.52 (t, 2H); 2.38 (t, 2H); 1.90 (m, 2H); 1.73-1.49 (br. m, 4H); 1.47-1.17 (br. m, 16H); 0.92 (m, 6H).
Korak 4: terc-Butil 4-(3-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propanoil)piperazin-1-karboksilat
Hemijska formula: C30H57N3O5
Molekulska težina: 539.80
[1244] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 11, terc-butil 4-(3-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propanoil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od 3-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propanske kiseline (793 mg, 2.13 mmol), 1-boc-piperazina (477 mg, 2.56 mmol), iPr2EtN (0.82 mL, 4.7 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 3.8 mL, 6.4 mmol). Prinos (1.15 g, 99%).
[1245] UPLC/ELSD: RT = 1.86 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 540.65 za C30H57N3O5
Korak 5: Pentil 4-(nonil(3-okso-3-(piperazin-1-il)propil)amino)butanoat
Hemijska formula: C25H49N3O3
Molekulska težina: 439.69
[1247] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, pentil 4-(nonil(3-okso-3-(piperazin-1-il)propil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 4-(3-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propanoil)piperazin-1-karboksilata (1.15 g, 2.13 mmol), i TFA (8.2 mL, 106 mmol) u DCM (10 mL). Prinos (901 mg, 96%).
[1248] UPLC/ELSD: RT = 0.75 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 440.47 za C25H49N3O3
[1249]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.70-3.40 (br. m, 4H); 2.88 (br. m, 6H); 2.57 (br. m, 6H); 2.36 (t, 2H); 1.83 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.49 (m, 2H); 1.41-1.18 (br. m, 17H); 0.91 (m, 6H).
Korak 6: terc-Butil 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoat
Hemijska formula: C36H74N2O2
Molekulska težina: 567.00
[1251] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 46, terc-butil 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoat je sintetisan od terc-butil 3-(nonilamino)propanoata (1.13 mg, 4.14 mol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (1.65 g, 4.97 mmol), K2CO3(1.15 g, 8.33 mmol), i KI (138 mg, 0.83 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (1.41 g, 60%).
[1252] UPLC/ELSD: RT = 2.90 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 567.79 za C36H74N2O2<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.78 (t, 2H); 2.69-2.29 (br. m, 12H); 1.55-1.15 (br. m, 51H); 0.90 (t, 9H).
Korak 7: 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanska kiselina
Hemijska formula: C32H66N2O2
Molekulska težina: 510.89
[1254] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanska kiselina je sintetisana od terc-butil 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoata (1.41 g, 2.49 mmol), i TFA (9.6 mL, 124 mmol) u DCM (10 mL). Prinos (924 mg, 73%).
[1255] UPLC/ELSD: RT = 2.26 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.78 za C32H66N2O2
[1256]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.76 (br. m, 6H); 2.61 (br. m, 6H); 2.47 (t, 2H); 1.52 (br. m, 6H); 1.40-1.10 (br. m, 36H); 0.90 (t, 9H).
Korak 8: Pentil 4-((3-(4-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)-3-oksoPropil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C57H113N5O4
Molekulska težina: 932.56
[1258] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, pentil 4-((3-(4-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)-3-oksopropil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-(nonil(3-okso-3-(piperazin-1-il)propil)amino)butanoata (268 mg, 0.61 mmol), 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanske kiseline (343 mg, 0.67 mmol), iPr2EtN (234 µL, 1.34 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 1.09 mL, 1.83 mmol) u THF (20 mL). Prinos (243 mg, 43%).
[1259] UPLC/ELSD: RT= 2.26 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 933.10 za C57H113N5O4<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07 (t, 2H); 3.72-3.40 (br. m, 8H); 2.81 (m, 4H); 2.66-2.28 (br. m, 20H); 1.77 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.54-1.08 (br. m, 60H); 0.90 (t, 15H).
BM: Jedinjenje 69: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-(2-(dinonilamino)etil)pirolidin-1-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 3-(2-(dinonilamino)etil)pirolidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C29H58N2O2
Molekulska težina: 466.80
[1261] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 3-(2-(dinonilamino)etil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(2-aminoetil)pirolidin-1-karboksilata (1.25 g, 5.47 mmol), 1-bromononana (1.13 g, 5.47 mmol), K2CO3(757 mg, 5.47 mmol), i KI (91 mg, 0.55 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (710 mg, 28%).
[1262] UPLC/ELSD: RT = 2.23 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 467.74 za C29H58N2O2
[1263]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.67-3.34 (br. m, 2H); 3.34-2.75 (br. m 2H); 2.52-1.89 (br. m, 8H); 1.70-1.03 (br. m, 40H); 0.90 (t, 6H).
Korak 2: N-Nonil-N-(2-(pirolidin-3-il)etil)nonan-1-amin
[1264]
[1265] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, N-nonil-N-(2-(pirolidin-3-il)etil)nonan-1-amin je sintetisan od terc-butil 3-(2-(dinonilamino)etil)pirolidin-1-karboksilata (710 mg, 1.52 mmol), i TFA (5.8 mL, 76 mmol) u DCM (6 mL). Prinos (541 mg, 97%).
[1266] UPLC/ELSD: RT= 1.23 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 367.70 za C24H50N2<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.32-1.90 (br. m, 11H); 1.66-1.14 (br. m, 33H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-(2-(dinonilamino)etil)pirolidin-1-il)etan-1-on
Hemijska formula: C55H112N4O
Molekulska težina: 845.53
[1268] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-(2-(dinonilamino)etil)pirolidin-1-il)etan-1-on je sintetisan od N-nonil-N-(2-(pirolidin-3-il)etil)nonan-1-amina (250 mg, 0.68 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (308 mg, 0.62 mmol), iPr2EtN (0.24 mL, 1.4 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 1.1 mL, 1.9 mmol) u THF (10 mL). Prinos (100 mg, 19%). UPLC/ELSD: RT = 3.17 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 846.20 za C55H112N4O
[1269]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.82-2.90 (br. m, 6H); 2.74-1.94 (br. m, 16H); 1.83-1.00 (br. m, 75H); 0.90 (t, 15H).
BN: Jedinjenje 70: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-((dinonilamino)metil)pirolidin-1-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 3-((dinonilamino)metil)pirolidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C28H56N2O2
Molekulska težina: 452.77
[1271] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 3-((dinonilamino)metil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilata (2.0 g, 10.0 mmol), 1-bromononana (2.07 g, 10.0 mmol), K2CO3(1.39 g, 10.0 mmol), i KI (166 mg, 1.00 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (1.16 g, 26%).
[1272] UPLC/ELSD: RT = 2.17 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 453.72 za C29H58N2O2
[1273]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72-2.90 (br. m, 4H); 2.36 (br. m, 6H); 2.04-1.04 (br. m, 40H); 0.90 (t, 6H).
Korak 2: N-Nonil-N-(pirolidin-3-ilmetil)nonan-1-amin
[1274]
Hemijska formula: C23H48N2
Molekulska težina: 352.65
[1275] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, N-nonil-N-(pirolidin-3-ilmetil)nonan-1-amin je sintetisan od terc-butil 3-((dinonilamino)metil)pirolidin-1-karboksilata (1.16 g, 2.56 mmol), i TFA (9.8 mL, 128 mmol) u DCM (10 mL). Prinos (900 mg, 99%).
[1276] UPLC/ELSD: RT = 1.17 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 353.66 za C23H48N2
[1277]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.33-2.23 (br. m, 10H); 1.99 (br, 1H); 1.65-1.00 (br. m, 31H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-((dinonilamino)metil)pirolidin-1-il)etan-1-on
Hemijska formula: C54H110N4O
Molekulska težina: 831.50
[1279] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-((dinonilamino)metil)pirolidin-1-il)etan-1-on je sintetisan od N-nonil-N-(pirolidin-3-ilmetil)nonan-1-amina (200 mg, 0.57 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (256 mg, 0.52 mmol), iPr2EtN (0.198 mL, 1.14 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.92 mL, 1.56 mmol). Prinos (114 mg, 27%). UPLC/ELSD: RT = 3.22 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 832.26 za C54H110N4O
[1280]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.79-2.96 (br. m, 6H); 2.75-2.18 (br. m, 16H); 2.12-1.01 (br. m, 73H); 0.90 (t, 15H).
BO: Jedinjenje 72: Dipentil 4,4'-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)azanediil)dibutirat
Korak 1: Dipentil 4,4'-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)azanediil)dibutirat
[1281]
Hemijska formula: C24H45NO6
Molekulska težina: 443.63
[1282] U smešu terc-butil glicina (200 mg, 1.52 mmol) i pentil 4-bromobutanoata (759 mg, 3.2 mmol) u MeCN (30 mL) dodat je K2CO3(637 mg, 4.6 mmol) i KI (51 mg, 0.30 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 12 časova na 82 °C. Suspenzija je ohlađena do RT, filtrirana preko jastučeta od celita uz ispiranje EtOAc, i koncentrovana u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% EtOAc/heksani) dalo je dipentil 4,4'-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)azanediil)dibutirat (230 mg, 34%).
[1283] UPLC/ELSD: RT = 1.54 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 444.61 za C24H45NO6
[1284]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07 (t, 4H); 3.22 (s, 2H); 2.63 (t, 4H); 2.36 (t, 4H); 1.77 (m, 4H); 1.64 (m, 4H); 1.47 (s, 9H); 1.35 (br. m, 8H); 0.93 (t, 6H).
Korak 2: Bis(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicin
Hemijska formula: C20H37NO6
Molekulska težina: 387.52
[1286] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, bis(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicin je sintetisan od dipentil 4,4'-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)azanediil)dibutirata (230 mg, 0.52 mmol), i TFA (2 mL, 26 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (200 mg, 99%).
[1287] UPLC/ELSD: RT = 0.80 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 388.51 za C20H37NO6<1>H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: ppm 4.05 (t, 4H); 3.10 (s, 2H); 2.58 (m, 4H); 2.32 (t, 4H); 1.80 (br. m, 4H); 1.63 (br. m, 4H); 1.32 (br. m, 8H); 0.92 (t, 6H).
Korak 3: Dipentil 4,4'-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)azanediil)dibutirat
[1288]
Hemijska formula: C55H107N5O6
Molekulska težina: 934.49
[1289] Na isti način kao u koraku 7 za jedinjenje 44, dipentil 4,4'-((2-(4-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)azanediil)dibutirat je sintetisan od bis(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicina (200 mg, 0.52 mmol), 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(piperazin-lil)etan-1-ona (265 mg, 0.47 mmol), iPr2EtN (180 µL, 1.03 mmol) i T3P (50% rastvor EtOAc, 838 µL, 1.41 mmol) u THF (10 mL). Prinos (250 mg, 57%).
[1290] UPLC/ELSD: RT = 2.85 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 935.26 za C55H107N5O6
[1291]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 4H); 3.78-3.46 (br. m, 8H); 3.34 (br. m, 4H); 2.72-2.24 (br. m, 18H); 1.78 (m, 4H); 1.64 (m, 4H); 1.50-1.16 (br. m, 50H); 0.91 (m, 15H).
[1292] BP: Jedinjenje 73: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-(2-(dinonilamino)etil) piperidin-1-il)etan-1-on
Korak 1: terc-Butil 3-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C30H60N2O2
Molekulska težina: 480.82
[1294] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 3-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(2-aminoetil)piperidin-l-karboksilata (1.00 g, 4.38 mmol), 1-bromononana (907 mg, 4.38 mmol), K2CO3(610 mg, 4.38 mmol), i KI (73 mg, 0.44 mmol) u MeCN (50 mL). Prinos (514 mg, 24%).<1>H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: ppm 4.12-2.24 (br. m, 10H); 1.92-1.00 (br. m, 44H); 0.90 (t, 6H).
N-Nonil-N-(2-(piperidin-3-il)etil)nonan-1-amin
Hemijska formula: C25H52N2
Molekulska težina: 380.71
[1296] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, N-nonil-N-(2-(piperidin-3-il)etil)nonan-1-amin je sintetisan od terc-butil 3-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (514 mg, 1.07 mmol), i TFA (4.1 mL, 53mmol) u DCM (4 mL). Prinos (378 mg, 93%).
[1297] UPLC/ELSD: RT = 1.27 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 381.62 za C25H52N2
[1298]<1>H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: ppm 3.12-1.95 (br. m, 11H); 1.93-0.98 (br. m, 35H); 0.90 (t, 6H).
2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on
Hemijska formula: C56H114N4O
Molekulska težina: 859.56
[1300] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(3-(2-(dinonilamino)etil)piperidin-1-il)etan-1-on je sintetisan od N-nonil-N-(2-(piperidin-3-il)etil)nonan-1-amina (250 mg, 0.66 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (297 mg, 0.60 mmol), iPr2EtN (0.23 mL, 1.3 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 1.06 mL, 1.8 mmol) u THF (10 mL). Prinos (136 mg, 27%). UPLC/ELSD: RT = 3.22 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 860.39 za C56H114N4O
[1301]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.56-4.01 (br. m, 2H); 3.48-2.20 (br. m, 20H), 1.99-1.00 (br. m, 77H); 0.90 (t.15H).
BQ: Jedinjenje 71: Pentil 4-(nonil(2-(4-(N-nonil-N-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)glicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)amino)butanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(N-nonil-N-(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicil)piperazin-1-karboksilat
Hemijska formula: C29H55N3O5
Molekulska težina: 525.78
[1303] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 11, terc-butil 4-(N-nonil-N-(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od N-nonil-N-(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicina (480 mg, 1.34 mmol), 1-boc-piperazina (275 mg, 1.48 mmol), iPr2EtN (5.14 µL, 2.95 mmol) i T3P (50% rastvor EtOAc, 2.40 mL, 4.03 mmol) u THF (15 mL). Prinos (700 mg, 99%).
[1304] UPLC/ELSD: RT = 1.90 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 526.79 za C29H55N3O5
[1305]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.70-3.10 (br. m, 14H); 2.45 (t, 2H); 2.13 (br. m, 2H); 2.00-1.00 (br. m, 29H); 0.91 (br. m, 6H).
Korak 2: Pentil 4-(nonil(2-okso-2-(piperazin-1-il)etil)amino)butanoat
Hemijska formula: C24H47N3O3
Molekulska težina: 425.66
[1307] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, pentil 4-(nonil(2-okso-2-(piperazin-1-il)etil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 4-(N-nonil-N-(4-okso-4-(pentiloksi)butil)glicil)piperazin-1-karboksilata (700 mg, 1.33 mmol), i TFA (5.1 mL, 66.6 mmol) u DCM (5 mL). Prinos (560 mg, 99%).
[1308] UPLC/ELSD: RT = 0.77 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 426.65 za C24H47N3O3
[1309]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07 (t, 2H); 3.59 (br. m, 4H); 3.28 (s, 2H); 2.86 (br. m, 4H); 2.50 (br. m, 4H); 2.33 (t, 2H); 2.05 (br, 1H); 1.77 (m, 2H); 1.63 (m, 2H); 1.30 (br. m, 18H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: Pentil 4-((2-hidroksietil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C20H41NO3
Molekulska težina: 343.55
[1311] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 18, pentil 4-((2-hidroksietil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od 2-(nonilamino)etan-1-ola (350 mg, 1.87 mmol), pentil 4-bromobutanoata (487 mg, 2.06 mmol), K2CO3(572 mg, 4.11 mmol), i KI (31 mg, 0.19 mmol) u MeCN (40 mL). Prinos (427 mg, 66%).
[1312] UPLC/ELSD: RT= 1.25 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 344.55 za C20H41NO3
[1313]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (t, 2H); 3.61 (t, 2H); 2.67 (t, 2H); 2.56 (m, 4H); 2.36 (t, 2H); 1.85 (m, 2H); 1.65 (m, 2H); 1.49 (m, 2H); 1.42-1.18 (br. m, 16H); 0.91 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 4-((2-hloroetil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C20H40ClNO2
Molekulska težina: 362.00
[1315] Na isti način kao u koraku 2 za jedinjenje 18, pentil 4-((2-hloroetil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-((2-hidroksietil)(nonil)amino)butanoata (427 mg, 1.27 mmol), metansulfonil hlorida (120 µL, 1.55 mmol), i trietilamina (225 µL, 1.62 mmol) u DCM (8 mL). Prinos (448 mg, 99%). UPLC/ELSD: RT = 1.52 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 362.51 za C20H40ClNO2
[1316]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07-3.71 (br. m, 4H); 3.45-2.76 (br. m, 6H); 2.30 (br. m, 2H); 2.24-1.05 (br. m, 22H); 0.82 (br. m, 6H).
Korak 5: Pentil 4-((2-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C35H70N2O4
Molekulska težina: 582.96
[1318] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 46, pentil 4-((2-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil nonilglicinata (338 mg, 1.31 mmol), pentil 4-((2-hloroetil)(nonil)amino)butanoata (527 mg, 1.46 mmol), K2CO3(402 mg, 2.89 mmol), i KI (22 mg, 0.13 mmol) u MeCN (30 mL). Prinos (200 mg, 26%).
[1319] UPLC/ELSD: RT = 3.03 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 583.95 za C35H70N2O4
[1320]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07 (t, 2H); 3.27 (s, 2H); 2.76-2.24 (br. m, 12H); 1.85-1.10 (br. m, 45H); 0.90 (m, 9H).
Korak 6: N-Nonil-N-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)glicin
Hemijska formula: C31H62N2O4
Molekulska težina: 526.85
[1322] Na isti način kao u koraku 5 za jedinjenje 46, N-nonil-N-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)glicin je sintetisan od pentil 4-((2-((2-(terc-butoksi)-2-oksoetil)(nonil)amino)etil)(nonil)amino)butanoata (200 mg, 0.34 mmol), i TFA (1.31 mL, 17.2 mmol), u DCM (2 mL). Prinos (160 mg, 89%).
[1323] UPLC/ELSD: RT = 2.39 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 527.77 za C31H62N2O4
[1324]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (t, 2H); 3.27 (s, 2H); 2.94-2.74 (br. m, 6H); 2.61 (t, 2H); 2.37 (m, 2H); 2.15-1.90 (br. m, 2H); 1.80-1.05 (br. m, 36H); 0.90 (m, 9H).
Korak 7: Pentil 4-(nonil(2-(4-(N-nonil-N-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)glicil) piperazin-1-il)-2-oksoetil)amino)butanoat
[1325]
Hemijska formula: C55H107N5O6
Molekulska težina: 934.49
[1326] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, pentil 4-(nonil(2-(4-(N-nonil-N-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)glicil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-(nonil(2-okso-2-(piperazin-1-il)etil)amino)butanoata (142 mg, 0.33 mmol), N-nonil-N-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)glicina (160 mg, 0.30 mmol), iPr2EtN (116 µL, 0.67 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 542 µL, 0.91 mmol). Prinos (53 mg, 19%).
[1327] UPLC/ELSD: RT= 2.79 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 935.34 za C55H107N5O6
[1328]<1>H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: ppm 4.08 (t, 4H); 3.78-3.53 (br. m, 8H); 3.32 (br. m, 4H); 2.76-2.24 (br. m, 18H); 1.87-1.10 (br. m, 58H); 0.91 (br. m, 15H).
BR: Jedinjenje 80: Pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-3-il)etil)(nonil)amino)butanoat
Korak 1: terc-Butil 3-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat
[1329]
[1330] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 3-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(2-aminoetil)piperidin-1-karboksilata (1.00 g, 4.38 mmol), 1-bromononana (907 mg, 4.38 mmol), K2CO3(610 mg, 4.38 mmol), i KI (73 mg, 0.44 mmol) u MeCN (50 mL). Prinos (474 mg, 31%).
[1331] UPLC/ELSD: RT= 1.23 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 355.58 za C21H42N2O2
[1332]<1>H-NMR (300 MHz, CDC13) δ: ppm 3.88 (br, 2H); 3.00-2.43 (br. m, 6H); 1.92-0.97 (br. m, 30H), 0.90 (t, 3H).
Korak 2: terc-Butil 3-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C30H58N2O4
Molekulska težina: 510.80
[1334] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 3-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (474 mg, 1.34 mmol), pentil 4-bromobutanoata (380 mg, 1.6 mmol), K2CO3(223 mg, 1.60 mmol) i KI (44 mg, 0.27 mmol) u MeCN (15 mL). Prinos (492 mg, 72%).
[1335] UPLC/ELSD: RT = 2.09 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.70 za C30H58N2O4
[1336]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.90 (br. m, 2H); 2.87-2.22 (br. m, 10H); 1.91-1.00 (br. m, 38H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: Pentil 4-(nonil(2-(piperidin-3-il)etil)amino)butanoat
Hemijska formula: C25H50N2O2
Molekulska težina: 410.69
[1338] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, pentil 4-(nonil(2-(piperidin-3-il)etil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 3-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)piperidin-1-karboksilata (492 mg, 0.96 mmol), i TFA (3.7 mL, 48 mmol) u DCM (4 mL). Prinos (390 mg, 99%).
[1339] UPLC/ELSD: RT = 0.85 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 411.72 za C25H50N2O2<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.03 (br. m, 2H); 2.66-2.18 (br. m, 10H); 2.18-0.98 (br. m, 30H); 0.91 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-3-il)etil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C56H112N4O3
Molekulska težina: 889.54
[1341] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-3-il)etil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-(nonil(2-(piperidin-3-il)etil)amino)butanoata (250 mg, 0.61 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (275 mg, 0.55 mmol), iPr2EtN (0.21 mL, 1.2 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.98 mL, 1.7 mmol). Prinos (96 mg, 20%).
[1342] UPLC/ELSD: RT = 3.08 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.32 za C56H112N4O3
[1343]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.55-4.01 (br. m, 4H); 3.48-2.21 (br. m, 22H); 1.95-1.00 (br. m, 71H); 0.90 (m, 15H).
BS: Jedinjenje 81: Pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)pirolidin-3-il)etil)(nonil)amino)butanoat
Korak 1: terc-Butil 3-(2-(nonilamino)etil)pirolidin-1-karboksilat
[1344]
[1345] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 3-(2-(nonilamino)etil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(2-aminoetil)pirolidin-1-karboksilata (1.25 g, 5.47 mmol), 1-bromononana (1.13 g, 5.47 mmol), K2CO3(757 mg, 5.47 mmol), i KI (91 mg, 0.55 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (420 mg, 23%).
[1346] UPLC/ELSD: RT = 1.08 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 341.52 za C20H40N2O2
[1347]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.68-1.91 (br. m, 9H); 1.71-1.12 (br. m, 28H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: terc-Butil 3-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)pirolidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C29H56N2O4
Molekulska težina: 496.78
[1349] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 3-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(2-(nonilamino)etil)pirolidin-1-karboksilata (420 mg, 1.23 mmol), pentil 4-bromobutanoat (321 mg, 1.36 mmol), K2CO3(187 mg, 1.36 mmol), i KI (41 mg, 0.25 mmol). Prinos (390 mg, 64%).
[1350] UPLC/ELSD: RT = 1.98 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 497.67 za C29H56N2O4
[1351]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.50 (br. m, 2H); 3.34-2.76 (br. m, 2H); 2.52-1.87 (br. m, 10H); 1.87-1.02 (br. m, 34H); 0.91 (t, 6H).
Korak 3: Pentil 4-(nonil(2-(pirolidin-3-il)etil)amino)butanoat
[1352]
[1353] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, pentil 4-(nonil(2-(pirolidin-3-il)etil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 3-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)pirolidin-1-karboksilata (390 mg, 0.79 mmol), i TFA (3.0 mL, 40 mmol) u DCM (3 mL). Prinos (298 mg, 96%).
[1354] UPLC/ELSD: RT = 0.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 397.62 za C24H48N2O2
[1355]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.20-2.82 (br. m, 4H); 2.58-2.24 (br. m, 8H); 2.11-1.11 (br. m, 28H); 0.91 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)pirolidin-3-il)etil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C55H110N4O3
Molekulska težina: 875.51
[1357] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)pirolidin-3-il)etil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-(nonil(2-(pirolidin-3-il)etil)amino)butanoata (202 mg, 0.51 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (230 mg, 0.46 mmol), iPr2EtN (0.177 mL, 1.0 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.82 mL, 1.4 mmol) u THF (10 mL). Prinos (109 mg, 27%).
[1358] UPLC/ELSD: RT = 3.06 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 876.30 za C55H110N4O3
[1359]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.83-2.85 (br. m, 7H); 2.78-1.88 (br. m, 19H); 1.83-1.14 (br. m, 67H); 0.90 (m, 15H).
BT: Jedinjenje 82: Pentil 4-(((1-(N(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)pirolidin-3-il)metil)(nonil)amino)butanoat
Korak 1: terc-Butil 3-((nonilamino)metil)pirolidin-1-karboksilat
[1360]
[1361] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 3-((nonilamino)metil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilata (2.0 g, 10.0 mmol), 1-bromononana (2.07 g, 10.0 mmol), K2CO3(1.39 g, 10.0 mmol), i KI (166 mg, 1.00 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (1.53 g, 47%).
[1362] UPLC/ELSD: RT= 0.92 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 327.54 za C19H38N2O2
[1363]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.69-1.79 (br. m, 9H); 1.74-1.13 (br. m, 26H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: terc-Butil 3-((nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)metil)pirolidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C28H54N2O4
Molekulska težina: 482.75
[1365] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 3-((nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)metil)pirolidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 3-((nonilamino)metil)pirolidin-1-karboksilata (500 mg, 1.53 mmol), pentil 4-bromobutanoata (400 mg, 1.68 mmol), K2CO3(423 mg, 3.07 mmol), i KI (51 mg, 0.31 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (233 mg, 32%).
[1366] UPLC/ELSD: RT = 1.85 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 483.65 za C28H54N2O4
[1367]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.59-2.91 (br. m, 4H); 2.49-1.83 (br. m, 10H); 1.83-1.13 (br. m, 32H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: Pentil 4-(nonil(pirolidin-3-ilmetil)amino)butanoat
[1368]
[1369] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, pentil 4-(nonil(pirolidin-3-ilmetil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 3-((nonil(4-okso-4(pentiloksi)butil)amino)metil)pirolidin-1-karboksilata (233 mg, 0.48 mmol), i TFA (1.84 mL, 24 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (179 mg, 97%).
[1370] UPLC/ELSD: RT = 0.70 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 383.51 za C23H46N2O2
[1371]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.11-2.81 (br. m, 3H); 2.67-1.51 (br. m, 16H); 1.51-1.03 (br. m, 19H); 0.91 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 4-(((1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)pirolidin-3-il)metil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C54H108N4O3
Molekulska težina: 861.48
[1373] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, pentil 4-(((1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)pirolidin-3-il)metil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-(nonil(pirolidin-3-ilmetil)amino)butanoata (179 mg, 0.47 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (211 mg, 0.43 mmol), iPr2EtN (163 µL, 0.95 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 0.76 mL, 1.1 mmol). Prinos (88 mg, 24%).
[1374] UPLC/ELSD: RT = 3.05 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 862.28 za C54H108N4O3
[1375]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.76-2.17 (br. m, 24H); 2.12-1.05 (br. m, 67H); 0.90 (m, 15H).
BU: Jedinjenje 83: Pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)butanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat
[1377] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 4-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(nonilamino)etil)piperidin-1-karboksilata (500 mg, 1.41 mmol), pentil 4-bromobutanoata (368 mg, 1.55 mmol), K2CO3(390 mg, 2.82 mmol), i KI (23 mg, 0.14 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (487 mg, 68%).
[1378] UPLC/ELSD: RT = 2.03 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 511.57 za C30H58N2O4
[1379]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (m, 4H); 2.69 (m, 2H); 2.51-2.25 (br. m, 8H); 1.83-1.55 (br. m, 6H); 1.53-1.02 (br. m, 32H); 0.91 (m, 6H).
Korak 2: Pentil 4-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)butanoat
Hemijska formula: C25H50N2O2
Molekulska težina: 410.69
[1381] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, pentil 4-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 4-(2-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)etil)piperidin-1-karboksilata (487 mg, 0.953 mmol), i TFA (3.6 mL, 48 mmol) u DCM (4 mL). Prinos (386 mg, 98%).
[1382] UPLC/ELSD: RT = 0.87 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 411.43 za C25H50N2O2
[1383]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.07 (m, 2H); 2.60 (m, 2H); 2.50-2.28 (br. m, 8H); 2.03 (br, 1H); 1.86-1.55 (br. m, 6H); 1.52-1.02 (br. m, 23H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: Pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino) butanoat
[1384]
[1385] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, pentil 4-((2-(1-(N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicil)piperidin-4-il)etil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-(nonil(2-(piperidin-4-il)etil)amino)butanoata (351 mg, 0.855 mmol), N-(2-(dinonilamino)etil)-N-nonilglicina (467 mg, 0.941 mmol), iPr2EtN (328 µL, 1.88 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 1.53 mL, 2.56 mmol) u THF (15 mL). Prinos (192 mg, 25%).
[1386] UPLC/ELSD: RT= 3.00 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 890.13 za C56H112N4O3<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.61-4.14 (br. m, 2H); 4.08 (t, 2H); 3.40-2.24 (br. m, 22H); 1.86-0.99 (br. m, 71H); 0.90 (m, 15H).
BV: Jedinjenje 84: Pentil 4-((3-(1-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperidin-4-il)Propil)(nonil)amino)butanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(3-(nonilamino)propil)piperidin-1-karboksilat
Hemijska formula: C22H44N2O2
Molekulska težina: 368.61
[1388] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 4-(3-(nonilamino)propil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(3-aminopropil)piperidin-1-karboksilata (2.50 g, 10.3 mmol), 1-bromononana (2.14 g, 10.3 mmol), K2CO3(2.85 g, 20.6 mmol), i KI (171 mg, 0.10 mmol) u MeCN (200 mL). Prinos (1.27 g, 33%).
[1389]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (m, 2H), 2.69 (br. m, 6H); 1.79-0.98 (br. m, 32H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: terc-Butil 4-(3-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propil)piperidin-1-karboksilat
[1390]
[1391] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 4-(3-(nonil(4-okso-4-(pentiloksi)butil)amino)propil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(3-(nonilamino)propil)piperidin-1-karboksilata (500 mg, 1.36 mmol), pentil 4-bromobutanoata (354 mg, 1.49 mmol), K2CO3(375 mg, 2.71 mmol), i KI (23 mg, 0.14 mmol) u MeCN (20 mL). Prinos (624 mg, 88%).
[1392] UPLC/ELSD: RT= 2.12 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 525.60 za C31H60N2O4<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (br. m, 4H); 2.69 (m, 2H); 2.38 (br. m, 8H); 1.85-1.55 (br. m, 6H); 1.54-1.00 (br. m, 34H); 0.91 (m, 6H).
Korak 3: Pentil 4-(nonil(3-(piperidin-4-il)propil)amino)butanoat
[1393]
[1394] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, pentil 4-(nonil(3-(piperidin-4-il)Propil)amino)butanoat je sintetisan od terc-butil 4-(3-(nonil(4-okso-4(pentiloksi)butil)amino)propil)piperidin-1-karboksilata (624 mg, 1.19 mmol), i TFA (4.5 mL, 60 mmol) u DCM (5 mL). Prinos (467 mg, 92%).
[1395] UPLC/ELSD: RT= 0.94 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 424.62 za C26H52N2O2
[1396]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.16 (m, 2H); 2.65 (m, 2H); 2.39 (br. m, 8H); 1.84-1.57 (br. m, 6H); 1.52-1.04 (br. m, 26H); 0.91 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 4-((3-(1-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperidin-4-il)propil)(nonil)amino)butanoat
Hemijska formula: C58H116N4O3
Molekulska težina: 917.59
[1398] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, pentil 4-((3-(1-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperidin-4-il)propil)(nonil)amino)butanoat je sintetisan od pentil 4-(nonil(3-(piperidin-4-il)propil)amino)butanoata (259 mg, 0.61 mmol), 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanske kiseline (343 mg, 0.67 mmol), iPr2EtN (234 µL, 1.34 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 1.09 mL, 1.83 mmol) u THF (20 mL). Prinos (270 mg, 48%).
[1399] UPLC/ELSD: RT = 2.85 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 918.18 za C58H116N4O3
[1400]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.61 (m, 1H); 4.08 (t, 2H); 4.08 (m, 1H); 3.08-2.72 (br. m, 4H); 2.63-2.26 (br. m, 20H); 1.87-1.57 (br. m, 6H); 1.54-1.00 (br. m, 67H); 0.90 (m, 15H).
BW: Jedinjenje 85: 3-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(3-(dinonilamino)propil)piperidin-1-il)propan-1-on
Korak 1: terc-Butil 4-(3-(dinonilamino)propil)piperidin-1-karboksilat
[1401]
Hemijska formula: C31H62N2O2
Molekulska težina: 494.85
[1402] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 49, terc-butil 4-(3-(dinonilamino)propil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(3-aminopropil)piperidin-1-karboksilata (2.50 g, 10.3 mmol), 1-bromononana (2.14 g, 10.3 mmol), K2CO3(2.85 g, 20.6 mmol), i KI (171 mg, 0.10 mmol) u MeCN (200 mL). Prinos (1.03 g, 20%).
[1403] UPLC/ELSD: RT = 2.46 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 495.66 za C31H62N2O2
[1404]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.09 (br. m, 2H); 2.69 (br. m, 2H); 2.39 (br. m, 6H); 1.75-1.00 (br. m, 46H); 0.90 (t, 6H).
Korak 2: N-Nonil-N-(3-(piperidin-4-il)propil)nonan-1-amin
Hemijska formula: C26H54N2
Molekulska težina: 394.73
[1406] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, N-nonil-N-(3-(piperidin-4-il)propil)nonan-1-amin je sintetisan od terc-butil 4-(3-(dinonilamino)propil)piperidin-1-karboksilata (1.03 g, 2.08 mmol), i TFA (8.0 mL, 104 mmol) u DCM (10 mL). Prinos (778 mg, 95%).
[1407] UPLC/ELSD: RT = 1.31 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 395.61 za C26H54N2
[1408]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.18-2.50 (br. m, 4H); 2.40 (br. m, 6H); 1.70 (m, 2H); 1.58-1.03 (br. m, 36H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: 3-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(3-(dinonilamino)propil)piperidin-1-il)propan-1-on
Hemijska formula: C58H118N4O
Molekulska težina: 887.61
[1410] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)-1-(4-(3-(dinonilamino)propil)piperidin-1-il)propan-1-on je sintetisan od N-nonil-N-(3-(piperidin-4-il)propil)nonan-1-amina (247 mg, 0.63 mmol), 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanske kiseline (352 mg, 0.69 mmol), iPr2EtN (240 µL, 1.4 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 1.1 mL, 1.9 mmol) u THF (20 mL). Prinos (293 mg, 53%).
[1411] UPLC/ELSD: RT = 3.01 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 888.08 za C58H118N4O
[1412]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.61 (m, 1H); 3.86 (m, 1H); 2.99 (m, 1H); 2.82 (m, 2H); 2.61-2.29 (br. m, 19H); 1.75 (m, 2H); 1.60-1.00 (br. m, 77H); 0.89 (t, 15H).
BX: Jedinjenje 86: 3-((3-(4-(3-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)-3-oksopropil)(nonil)amino)propil heksanoat
Korak 1: 3-((3-(terc-Butoksi)-3-oksopropil)(nonil)amino)propil heksanoat
Hemijska formula: C25H49NO4
Molekulska težina: 427.67
[1414] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 44, 2-((3-(terc-butoksi)-3-oksopropil)(nonil)amino)etil heptanoat je sintetisan od terc-butil 3-(nonilamino)propanoata (750 mg, 2.76 mmol), 3-bromopropil heksanoata (786 mg, 3.32 mmol), K2CO3(764 mg, 5.53 mmol), i KI (46 mg, 0.28 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (661 mg, 56%).
[1415] UPLC/ELSD: RT = 1.80 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 428.49 za C25H49NO4<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (t, 2H); 2.73 (t, 2H); 2.56-2.24 (br. m, 8H); 1.77 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.55-1.10 (br. m, 27H); 0.91 (m, 6H).
Korak 2: 3-((3-(Heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propanska kiselina
Hemijska formula: C21H41NO4
Molekulska težina: 371.56
[1417] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 44, 3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propanska kiselina je sintetisana od 3-((3-(terc-butoksi)-3-oksopropil)(nonil)amino)propil heksanoata (661 mg, 1.55 mmol), i TFA (5.9 mL, 77 mmol) u DCM (6 mL). Prinos (556 mg, 97%).
[1418] UPLC/ELSD: RT = 1.14 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 372.31 za C21H41NO4
[1419]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.13 (t, 2H); 2.84 (t, 2H); 2.72 (t, 2H); 2.62 (t, 2H); 2.46 (t, 2H); 2.31 (t, 2H); 1.90 (m, 2H); 1.72-1.10 (br. m, 20H); 0.90 (M, 6H).
Korak 3: terc-Butil 4-(3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-karboksilat
[1420]
Hemijska formula: C30H57N3O5
Molekulska težina: 539.80
[1421] Na isti način kao u koraku 3 za jedinjenje 11, terc-butil 4-(3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-karboksilat je sintetisan od 3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propanske kiseline (570 mg, 1.49 mmol), 1-boc-piperazina (334 mg, 1.80 mmol), iPr2EtN (573 µL, 3.29 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 2.67 mL, 4.49 mmol) u THF (20 mL). Prinos (635 mg, 79%).
[1422] UPLC/ELSD: RT = 1.85 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 540.52 za C30H57N3O5
[1423]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (t, 2H); 3.60 (m, 2H); 3.46 (br. m, 6H); 2.80 (m, 2H); 2.58-2.37 (br. m, 6H); 2.30 (t, 2H); 1.78 (m, 2H); 1.63 (m, 2H); 1.54-1.10 (br. m, 27H); 0.90 (m, 6H) .
Korak 4: 3-(Nonil(3-okso-3-(piperazin-1-il)propil)amino)propil heksanoat
Hemijska formula: C25H49N3O3
Molekulska težina: 439.69
[1425] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, 3-(nonil(3-okso-3-(piperazin-1-il)propil)amino)propil heksanoat je sintetisan od terc-butil 4-(3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-karboksilata (635 mg, 1.18 mmol), i TFA (4.5 mL, 59 mmol) u DCM (5 mL). Prinos (510 mg, 99%).
[1426] UPLC/ELSD: RT = 0.72 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 440.47 za C25H49N3O3
[1427]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (t, 2H); 3.60 (m, 2H) 3.46 (m, 2H); 2.85 (br. m, 6H); 2.49 (br. m, 6H); 2.30 (t, 2H); 1.80 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.52-1.10 (br. m, 19H); 0.91 (m, 6H).
Korak 5: 3-((3-(4-(3-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)-3-oksopropil)(nonil)amino)propil heksanoat
Hemijska formula: C57H113N5O4
Molekulska težina: 932.56
[1429] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 3-((3-(4-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperazin-1-il)-3-oksopropil)(nonil)amino)propil heksanoat je sintetisan od 3-(nonil(3-okso-3-(piperazin-1-il)propil)amino)propil heksanoata (154 mg, 0.351 mmol), 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanske kiseline (197 mg, 0.386 mmol), iPr2EtN (134 µL, 0.77 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 616 µL, 1.05 mmol) u THF (10 mL). Prinos (69 mg, 21%).
[1430] UPLC/ELSD: RT = 2.70 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 933.10 za C57H113N5O4
[1431]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (t, 2H); 3.72-3.40 (br. m, 8H); 2.81 (br. m, 4H); 2.61-2.36 (br. m, 18H); 2.30 (t, 2H); 1.78 (m, 2H); 1.64 (m, 2H); 1.54-1.06 (br. m, 60H); 0.90 (m, 15H).
BY: Jedinjenje 87: 3-((3-(1-(3-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperidin-4-il)propil)(nonil)amino)propil heksanoat
Korak 1: terc-Butil 4-(3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propil)piperidin-1-karboksilat
[1432]
Hemijska formula: C31H60N2O4
Molekulska težina: 524.83
[1433] Na isti način kao u koraku 1 za jedinjenje 57, terc-butil 4-(3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propil)piperidin-1-karboksilat je sintetisan od terc-butil 4-(3-(nonilamino)propil)piperidin-1-karboksilata (500 mg, 1.36 mmol), 3-bromopropil heksanoata (386 mg, 1.63 mmol), K2CO3(375 mg, 2.71 mmol), i KI (45 mg, 0.27 mmol) u MeCN (100 mL). Prinos (322 mg, 45%).
[1434] UPLC/ELSD: RT = 2.09 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 525.60 za C31H60N2O4
[1435]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (br. m, 4H); 2.67 (m, 2H); 2.56-2.24 (br. m, 8H); 1.90-1.00 (br. m, 40H); 0.91 (m, 6H).
Korak 2: 3-(nonil(3-(piperidin-4-il)propil)amino)propil heksanoat
[1436]
Hemijska formula: C26H52N2O2
Molekulska težina: 424.71
[1437] Na isti način kao u koraku 4 za jedinjenje 11, 3-(nonil(3-(piperidin-4-il)propil)amino)propil heksanoat je sintetisan od terc-butil 4-(3-((3-(heksanoiloksi)propil)(nonil)amino)propil)piperidin-1karboksilata (322 mg, 0.614 mmol), i TFA (2.3 mL, 31 mmol) u DCM (2.5 mL). Prinos (260 mg, 99%).
[1438] UPLC/ELSD: RT = 0.89 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 425.54 za C26H52N2O2
[1439]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.12 (t, 2H); 3.12 (m, 2H); 2.75-2.24 (br. m, 10H); 1.84-1.54 (br. m, 6H); 1.54-1.02 (br. m, 26H); 0.90 (m, 6H).
Korak 3: 3-((3-(1-(3-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperidin-4-il)propil)(nonil)amino)propil heksanoat
Hemijska formula: C58H116N4O3
Molekulska težina: 917.59
[1441] Na isti način kao u koraku 11 za jedinjenje 11, 3-((3-(1-(3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanoil)piperidin-4-il)propil)(nonil)amino)propil heksanoat je sintetisan od 3-(nonil(3-(piperidin-4-il)propil)amino)propil heksanoata (149 mg, 0.351 mmol), 3-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)propanske kiseline (197 mg, 0.386 mmol), iPr2EtN (134 µL, 0.77 mmol), i T3P (50% rastvor EtOAc, 616 µL, 1.05 mmol) u THF (10 mL). Prinos (39 mg, 12%).
[1442] UPLC/ELSD: RT = 2.83 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 918.01 za C58H116N4O3
[1443]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.61 (m, 1H); 4.12 (t, 2H); 3.87 (m, 1H); 3.08-2.74 (br. m, 4H); 2.70-2.23 (br. m, 20H); 1.82-1.56 (br. m, 6H); 1.56-1.00 (br. m, 67H); 0.90 (m, 15H).
BZ. Jedinjenje 17-1: 2-(Diheksilamino)etan-1-ol
[1444]
Hemijska formula: C14H31NO
Molekulska težina: 229.41
[1445] U rastvor 1-bromoheksana (5 g, 82 mmol) u MeCN (380 mL) dodat je etanolamin (11.5 mL, 82 mmol), K2CO3(22.7 g, 164 mmol), i KI (1.36 g, 8.2 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 48 časova na 82 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je ekstrahovan heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je 2-(diheksilamino)etan-1-ol (2.58 g, 14%).
[1446] UPLC/ELSD: RT = 0.41 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 229.95 za C14H31NO<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.62 (t, 2H); 2.70 (t, 2H), 2.57 (t, 4H); 1.50 (br. m, 4H); 1.30 (br, 12H); 0.91 (t, 6H).
CA. Jedinjenje 17-2: 2-(Heksil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
Korak 1: 2-(Heksilamino)etan-1-ol
2-(Heksilamino)etan-1-ol je izolovan iz iste reakcije u kojoj je proizvedeno jedinjenje 1, 2-(diheksilamino)etan-1-ol.
[1447]
Hemijska formula: C8H19NO
Molekulska težina: 145.25
[1448]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.62 (t, 2H); 2.78 (t, 2H); 2.62 (t, 2H); 2.10-1.80 (br. m, 2H); 1.49 (m, 2H); 1.30 (br. m, 6H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: 2-(Heksil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
[1449]
Hemijska formula: C26H51NO
Molekulska težina: 393.70
[1450] U rastvor (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-diena (0.2 g, 0.61 mmol) u MeCN (3.5 mL) dodat je 2-(heksilamino)etan-1-ol (80 mg, 0.55 mmol), K2CO3(76 mg, 0.55 mmol), i KI (9 mg, 0.06 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 18 časova. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, dodat je etil acetat i reakcija je ekstrahovana vodom. Kombinovani ekstrakti su osušeni pomoću Na2SO4, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-10% MeOH/DCM) dalo je 2-(heksil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol (23 mg, 11%).
[1451] LC/ELSD: RT = 2.47 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 394.60 za C26H51NO
[1452]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 4H); 4.07 (m, 2H); 3.23-3.13 (m, 6H); 2.77 (m, 2H); 2.04 (m, 4H); 1.86 (m, 4H); 1.34 (m, 23H); 0.89 (m, 6H)
CB. Jedinjenje 17-3: 2-(Nonil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
Jedinjenje 17-3 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-2.
[1453]
Hemijska formula: C29H57NO
Molekulska težina: 435.78
[1454] LC/ELSD: RT = 2.72 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 436.63 za C29H57NO
[1455]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 4H); 3.55 (t, 2H); 2.77 (t, 2H); 2.60 (t, 2H); 2.47 (m, 4H); 2.04 (m, 4H); 1.55-1.18 (br. m, 33H); 0.87 (m, 6H).
CD. Jedinjenje 17-4: 2-(Dodecil((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
[1456] Jedinjenje 17-4 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-2.
Hemijska formula: C32H63NO
Molekulska težina: 477.86
[1457] UPLC: RT = 3.18 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 478.516 za C32H63NO
[1458]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.33 (m, 4H); 3.53 (s, 2H); 2.75 (t, 2H); 2.58 (m, 2H); 2.45 (m, 4H); 2.03 (dt, 4H); 1.43 (m, 4H); 1.24 (m, 34H); 0.86 (m, 6H).
CE. Jedinjenje 17-5: 2-(((9Z,12Z)-Oktadeka-9,12-dien-1-il)(tetradecil)amino)etan-1-ol
[1459] Jedinjenje 17-5 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-2.
[1460] LC/ELSD: RT = 3.39 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 506.56 za C34H67NO
[1461]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.37 (m, 4H); 3.58 (m, 2H); 2.80 (m, 2H); 2.69 -2.42 (br. m, 5H); 2.07 (m, 4H); 1.56-1.18 (br. m, 44H); 0.91 (m, 6H).
CF. Jedinjenje 17-6: 2-(((9Z,12Z)-Oktadeka-9,12-dien-1-il)(oktadecil)amino)etan-1-ol
[1462] Jedinjenje 17-6 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-2.
Hemijska formula: C38H75NO
Molekulska težina: 562.02
[1463] LC/ELSD: RT = 3.68 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 562.58 za C38H75NO
[1464]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.39 (m, 4H); 3.58 (m, 2H); 2.80 (m, 2H); 2.68 -2.44 (br. m, 5H); 2.07 (m, 4H); 1.57-1.20 (br. m, 52H); 0.91 (m, 6H).
CG. Jedinjenje 17-7: 2-(Ditetradecilamino)etan-1-ol
[1465] Jedinjenje 17-7 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-1.
Hemijska formula: C30H63NO
Molekulska težina: 453.84
[1466] UPLC/ELSD: RT = 3.30 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 454.46 za C30H63NO
[1467]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.54 (br. m, 2H); 2.59 (br. m, 2H); 2.46 (br. m, 4H); 1.56-1.17(br. m, 48H); 0.90 (br. m, 6H).
CG. Jedinjenje 17-8: 2-(Di((Z)-oktadec-9-en-1-il)amino)etan-1-ol
[1468] Jedinjenje 17-8 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-1.
[1469] UPLC/ELSD: RT = 7.325 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 562.60 za C38H75NO<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 4H); 3.53 (t, 2H); 2.58 (t, 2H); 2.45 (t, 4H); 2.01 (m, 8H); 1.44 (m, 4H); 1.38-1.18 (br. m, 44H); 0.88 (t, 6H).
CH. Jedinjenje 17-9: (9Z,12Z)-N-(2-Metoksietil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amin
[1470] Jedinjenje 17-9 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-1.
Hemijska formula: C39H73NO
Molekulska težina: 572.02
[1471] LC/ELSD: RT = 3.53 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 572.72 za C39H73NO
[1472]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.39 (m, 8H); 3.47 (m, 2H); 3.37 (s, 3H); 2.80 (m, 4H); 2.5 (m, 2H); 2.46 (m, 4H); 2.09 (m, 8H); 1.50-1.22 (m, 36H); 0.92 (m, 6H).
CI. Jedinjenje 17-10: 2-(Dinonilamino)etan-1-ol
[1473] Jedinjenje 17-10 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-1.
Hemijska formula: C20H43NO
Molekulska težina: 313.57
[1474]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.57 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.49 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 24H); 0.91 (t, 6H).
CJ: Jedinjenje 17-11: 2-(Didodecilamino)etan-1-ol
[1475] Jedinjenje 17-11 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-1.
Hemijska formula: C26H54ClN
Molekulska težina: 416.18
[1476] UPLC/ELSD: RT = 2.69 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 398.56 za C26H55NO<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.57 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.49 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 36H); 0.91 (t, 6H).
CK. Jedinjenje 17-12: 3-(Didodecilamino)propan-1-ol
[1477] Jedinjenje 17-12 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 1.
Hemijska formula: C27H57NO
Molekulska težina: 411.76
[1478] UPLC/ELSD: RT = 2.75 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 412.36 za C27H57NO
[1479]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.79 (t, 2H); 2.66 (t, 2H); 2.43 (br. m, 4H); 1.69 (br. m, 2H); 1.47 (br. m, 4H) 1.25 (br. m, 36H); 0.87 (t, 6H).
CL. Jedinjenje 17-13: 4-(Didodecilamino)butan-1-ol
[1480] Jedinjenje 17-13 je sintetisano prema istoj proceduri kao jedinjenje 17-1.
[1481] UPLC/ELSD: RT = 2.80 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 426.42 za C28H59NO
[1482]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.56 (br. m, 2H); 2.46 (br. m, 6H); 1.66 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.26 (br. m, 36H); 0.88 (t, 6H).
CM. Jedinjenje 19-1: N-Nonil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)nonan-1-amin
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(dinonilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
Hemijska formula: C29H59N3O2
Molekulska težina: 481.81
[1484] Smeša 1-bromononana (1.81 g, 8.72 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazina (2.0 g, 8.72 mmol), K2CO3(2.4 g, 17.4 mmol), KI (145 mg, 0.872 mmol) u 44 mL MeCN je ostavljena da se meša 16 časova na 65 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je ekstrahovan heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je terc-butil 4-(2-(dinonilamino)etil)piperazin-1-karboksilat (924 mg, 1.92 mmol, 44%).
[1485] UPLC/ELSD: RT = 1.99 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 482.36 za C29H59N3O2
[1486]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.45 (br. m, 4H); 3.10 (br. m, 2H); 2.59 (br. m, 2H); 2.44 (br. m, 8H); 1.60-1.00 (br. m, 37H); 0.91 (t, 6H).
Korak 2: Jedinjenje 19-1: N-Nonil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)nonan-1-amin
Hemijska formula: C24H51N3
Molekulska težina: 381.69
[1488] Rastvor terc-butil 4-(2-(dinonilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (924 mg, 1.92 mmol) u 8 mL DCM obrađen je sa TFA (7.4 mL, 96 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 16 časova. Reakcija je koncentrovana, i sirovi ostatak je apsorbovan u u hloroformu i opran sa 5% Na2CO3i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM/[DCM, 20% MeOH, 1% NH4OH]) dalo je N-nonil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)nonan-1-amin (563 mg, 1.48 mmol, 77%).
[1489] UPLC/ELSD: RT = 1.27 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 382.54 za C24H51N3
[1490]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.92 (br. m, 4H); 2.62 (br. m, 2H); 2.48 (br. m, 10H); 2.40-1.88 (br. m, 1H); 1.46 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 24H), 0.91 (t, 6H).
CN. Jedinjenje 19-2: N-Dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin
Korak 1: terc-Butil 4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat
Hemijska formula: C35H71N3O2
Molekulska težina: 565.97
[1492] Smeša 1-bromododekana (1.1 mL, 4.6 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-boc-piperazina (1.0 g, 4.4 mmol), K2CO3(0.61 g, 4.4 mmol), u 10 mL MeCN je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 12 h. Nakon tog vremena reakcija je filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM sa 1% NH4OH čime je dobijen terc-butil 4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilat (450 mg, 0.80 mmol, 18%).
[1493] UPLC/ELSD: RT = 2.87 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 566.655 za C35H71N3O2
[1494]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.40 (m, 4H); 2.56 (m, 2H); 2.40 (m, 10H); 1.44 (s, 9H); 1.40-1.24 (m, 40H); 0.86 (t, 6H).
Korak 2: Jedinjenje 19-2: N-Dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin
Hemijska formula: C30H63N3
Molekulska težina: 465.86
[1496] Rastvor terc-butil 4-(2-(didodecilamino)etil)piperazin-1-karboksilata (154 mg, 0.27 mmol) u 1 mL DCM obrađen je sa TFA (0.21 mL, 2.7 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša preko noći. Nakon tog vremena dodata je TFA (0.1 mL, 1.3 mmol). Nakon još 3 h reakcija je koncentrovana. Sirovi ostatak je apsorbovan u DCM i opran sa 5% K2CO3i slanim rastvorom, osušen nad Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM sa 1% NH4OH) čime je dobijen N-dodecil-N-(2-(piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin (109 mg, 87%).
[1497] UPLC/ELSD: RT = 2.10 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 466.379 za C30H63N3
[1498]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.88 (t, 4H); 2.61 (m, 2H); 2.45 (m, 10H); 1.43-1.24 (m, 40H); 0.86 (t, 6H).
CO. Jedinjenje 19-3: (9Z,12Z)-N-((9Z,12Z)-Oktadeka-9,12-dien-1-il)-N-(2-(piperazin-1-il)etil)oktadeka-9,12-dien-1-amin
Korak 1: (9Z,12Z)-Oktadeka-9,12-dien-1-il metansulfonat
Hemijska formula: C19H36O3S
Molekulska težina: 344.55
[1500] U rastvor linoleil alkohola (10 mL, 31.2 mmol) i trimetilamina (5.68 mL, 40.5 mmol) ) u DCM (50 mL) na 0 °C ukapan je rastvor metansulfonil hlorida (2.66 mL, 34.3 mmol) u DCM (20 mL). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i ostavljena da se meša 4 časa. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je opran zasićenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-40% EtOAc/heksani) dalo je (9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il metansulfonat (10.0 g, 93%).
[1501]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 4H); 4.22 (t, 2H); 2.99 (s, 3H); 2.77 (t, 2H); 2.04 (q, 4H); 1.74 (m, 2H); 1.30 (br. m, 16H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: (6Z,9Z)-18-Bromooktadeka-6,9-dien
Hemijska formula: C18H33Br
Molekulska težina: 329.37
[1503] U rastvor (9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il metansulfonata (10.0 g, 29.0 mmol) u dietil etru (372 mL) dodat je magnezijum bromid etil eterat (22.5 g, 87.1 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 16 časova. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću dietil etra. Kombinovani organski slojevi su oprani sa 1% K2CO3, slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom dalo je (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-dien (8.9 g, 93%).
[1504]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 4H); 3.41 (t, 2H); 2.77 (t, 2H); 2.05 (q, 4H); 1.86 (m, 2H); 1.48-1.22 (br. m, 16H); 0.89 (t, 3H).
Korak 3: terc-Butil 4-(2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat
Hemijska formula: C47H87N3O2
Molekulska težina: 726.23
[1506] Smeša (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-dien (1.5 g, 4.55 mmol), 4-(2-aminoetil)-1-bocpiperazina (1.04 g, 4.54 mmol), K2CO3(1.27 g, 9.10 mmol), KI (75 mg, 0.452 mmol), u 22 mL MeCN je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 48 časova. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je ekstrahovan heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-50% DCM/[DCM, 20% MeOH, 1% NH4OH]) dalo je terc-butil 4-(2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilat (1.08 g, 1.49 mmol, 65%).
[1507]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.43-5.26 (br. m, 8H); 3.42 (t, 4H); 2.77 (m, 4H); 2.57 (m, 2H); 2.41 (br. m, 10H); 2.04 (br. m, 8H); 1.60-1.00 (br. m, 45H); 0.89 (t, 6H).
Korak 4: Jedinjenje 19-3: (9Z,12Z)-N-((9Z,12Z)-Oktadeka-9,12-dien-1-il)-N-(2-(piperazin-1-il)etil)oktadeka-9,12-dien-1-amin
Hemijska formula: C42H79N3
Molekulska težina: 626.12
[1509] Rastvor terc-butil 4-(2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)piperazin-1-karboksilata (1.06 g, 1.46 mmol) u 6 mL DCM obrađen je sa TFA (5.6 mL, 73 mmol). Nakon 4 časa smeša je koncentrovana. Sirovi ostatak je apsorbovan u hloroformu, opran sa 5% Na2CO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM/[DCM, 20% MeOH, 1% NH4OH]) i ISCO C18 fleš hromatografijom (50-100% [MeCN 1% TFA]/[H2O 1% TFA]). Željene frakcije su oprane sa 5% Na2CO3i ekstrahovane heksanima. Heksani su oprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani u vakuumu čime je dobijen (9Z,12Z)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)-N-(2-(piperazin-1-il)etil)oktadeka-9,12-dien-1-amin (108 mg, 12%).
[1510] UPLC/ELSD: RT = 2.98 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 626.75 za C42H79N3
[1511]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.47-5.25 (br. m, 8H); 2.92 (m, 4H); 2.76 (m, 4H); 2.66 (br. m, 2H); 2.50 (br. m, 10H); 2.05 (m, 8H); 1.60-1.10 (br. m, 36H), 0.89 (t, 6H).
CP. Jedinjenje 19-4: N-Dodecil-N-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin
Intermedijer 1: 2-(Didodecilamino)etan-1-ol
Hemijska formula: C26H55NO
Molekulska težina: 397.73
[1513] U rastvor 1-bromododekana (10 g, 40.1 mmol) u MeCN (84 mL) dodat je etanolamin (1.10 mL, 18.2 mmol), K2CO3(11.1 g, 80.1 mmol), i KI (302 mg, 1.82 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 48 časova na 82 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je ekstrahovan heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je 2-(didodecilamino)etan-1-ol (3.87 g, 53%).
[1514] UPLC/ELSD: RT = 2.69 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 398.56 za C26H55NO
[1515]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.57 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.49 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.29 (br. m, 36H); 0.91 (t, 6H).
Korak 2: N-(2-Hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin
Hemijska formula: C26H54ClN
Molekulska težina: 416.18
[1517] U rastvor 2-(didodecilamino)etan-1-ola (3.87 g, 9.73 mmol) trietilamina (1.76 mL, 12.6 mmol) u DCM (50 mL) na0 °C ukapan je rastvor metansulfonil hlorida (0.941 mL, 12.2 mmol) u DCM (5 mL). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i mešana 16 časova. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je opran zasićenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-10% EtOAc/heksani) dalo je N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin (1.92 g, 47%).
[1518]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.51 (t, 2H); 2.78 (t, 2H); 2.47 (br. m, 4H); 1.44 (br. m, 4H); 1.28 (br. m, 36H); 0.90 (t, 6H).
Korak 3: Jedinjenje 19-4: N-Dodecil-N-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin
Hemijska formula: C31H65N3
Molekulska težina: 479.88
[1520] Smeša N-metilpiperazina (40 µL, 0.36 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (166 mg, 0.4 mmol), i K2CO3(50 mg, 0.36 mmol) u 2 mL MeCN je ostavljena da se meša 12 h na 82 °C. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM sa 1% NH4OH) čime je dobijen N-dodecil-N-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin (87.9 mg, 51%).
[1521] UPLC: RT = 2.24 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 480.662 za C31H65N3
[1522]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 2.49 (m, 16H); 2.36 (s, 3H); 1.50 (m, 4H); 1.34 (m, 36H); 0.96 (t, 6H).
CQ. Jedinjenje 19-5: N-Dodecil-N-(2-(4-(4-metoksibenzil)piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin
[1524] Smeša 1-(4-metoksibenzil)piperazina (206 mg, 1.0 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (289 mg, 0.69 mmol), K2CO3(286 mg, 2.07 mmol) i KI (11 mg, 0.069 mmol) u 3.5 mL MeCN je ostavljena da se meša 2 h na 80 C. Nakon tog vremena reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i ugašena vodom. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc tri puta. Spojene organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM) čime je dobijen N-dodecil-N-(2-(4-(4-metoksibenzil)piperazin-1-il)etil)dodekan-1-amin (0.24 g, 59%).
[1525] UPLC: RT = 2.30 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 586.92 za C38H71N3O
[1526]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 7.19 (d, 2H); 6.83 (d, 2H); 3.78 (s, 3H); 3.42 (s, 2H); 2.99-2.45 (br. m, 16H); 1.71-1.24 (br. m, 40H); 0.86 (t, 6H).
CR. Jedinjenje 19-6: (9Z,12Z)-N-(2-(4-Dodecilpiperazin-1-il)etil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amin
[1527]
[1528] Smeša (9Z,12Z)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)-N-(2-(piperazin-1-il)etil)oktadeka-9,12-dien-1-amina (54 mg, 0.086 mmol), 1-bromododekana (24 mg, 0.095 mmol), K2CO3(24 mg, 0.172 mmol), KI (2 mg, 0.012 mmol), u 1.5 mL THF je ostavljena da se meša 16 časova na 65 °C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa H2O, i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog MgSO4, filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM/[DCM 20% MeOH 1% Et3N]) dalo je (9Z,12Z)-N-(2-(4-dodecilpiperazin-1-il)etil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amin (51 mg, 0.064 mmol, 74%). UPLC: RT = 3.40 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 795.12 za C54H103N3.
CS. Jedinjenje 20-1: N-(2-(Didodecilamino)etil)-N-dodecilglicin
Korak 1: Metil N-(terc-butoksikarbonil)-N-dodecilglicinat
[1529]
Hemijska formula: C20H39NO4
Molekulska težina: 357.54
[1530] Rastvor N-(terc-butoksikarbonil)glicin metil estra (7.7 g, 40.7 mmol) u DMF (100 mL) na 0 °C obrađen je sa NaH (60%, 1.71 g, 42.7 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 30 minuta. Rastvor je ostavljen da ponovo dostigne sobnu temperaturu pre dodavanja 1-bromododekana (15.2 g, 61.0 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša preko noći. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% EtOAc/heksani) dalo je metil N-(terc-butoksikarbonil)-N-dodecilglicinat (4.03 g, 28%).
[1531]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.01-3.84 (br. m, 2H); 3.75 (s, 3H); 3.27 (br. m, 2H); 1.67-1.39 (br. m, 11H); 1.28 (br, 18H); 0.90 (t, 3H).
Korak 2: Metil dodecilglicinat
Hemijska formula: C15H31NO2
Molekulska težina: 257.42
[1533] U rastvor metil N-(terc-butoksikarbonil)-N-dodecilglicinata (4.03 g, 11.3 mmol) u DCM (17 mL) na 0 °C ukapana je TFA (17 mL, 226 mmol). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i mešana 6 časova. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i sirovi materijal je rastvoren u DCM. Rastvor je opran sa 10% NaOH, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu čime je dobijen metil dodecilglicinat (2.84 g, 98%).
[1534]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.75 (s, 3H); 3.44 (s, 2H); 2.62 (t, 2H); 1.70 (br, 1H); 1.51 (m, 2H); 1.29 (br, 18H); 0.90 (t, 3H).
Korak 3: 2-(Didodecilamino)etan-1-ol
Hemijska formula: C26H55NO
Molekulska težina: 397.73
[1536] U rastvor 1-bromododekana (10 g, 40.1 mmol) u MeCN (84 mL) dodat je etanolamin (1.10 mL, 18.2 mmol), K2CO3(11.1 g, 80.1 mmol), i KI (302 mg, 1.82 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 48 časova na 82 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je ekstrahovan heksanima, i kombinovani ekstrakti su koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je 2-(didodecilamino)etan-1-ol (3.87 g, 53%).
[1537] UPLC/ELSD: RT = 2.69 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 398.56 za C26H55NO
[1538]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.57 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 2.49 (br. m, 4H); 1.48 (br. m, 4H); 1.29 (br, 36H); 0.91 (t, 6H).
Korak 4: N-(2-Hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin
Hemijska formula: C26H54ClN
Molekulska težina: 416.18
[1540] U rastvor 2-(didodecilamino)etan-1-ola (3.87 g, 9.73 mmol) i trietilamina (1.76 mL, 12.6 mmol) u DCM (50 mL) na0 °C ukapan je rastvor metansulfonil hlorida (0.941 mL, 12.2 mmol) u DCM (5 mL). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i mešana 16 časova. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je opran zasićenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-10% EtOAc/heksani) dalo je N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin (1.92 g, 47%).
[1541]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.51 (t, 2H); 2.78 (t, 2H); 2.47 (br. m, 4H); 1.44 (br. m, 4H); 1.28 (br, 36H); 0.90 (t, 6H).
Korak 5: Metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicinat
Hemijska formula: C41H84N2O2
Molekulska težina: 637.14
[1543] U rastvor metil dodecilglicinats (425 mg, 1.65 mmol) u MeCN (10 mL) dodat je N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin (825 mg, 1.98 mmol), K2CO3(457 mg, 3.30 mmol), i KI (27 mg, 0.165 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 72 časa na 82 °C. Reakciona smeša je filtrirana i čvrste supstance su oprane heksanima. Filtrat je koncentrovan u vakuumu čime je dobijen sirovi proizvod. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicinat (652 mg, 62%).
[1544] UPLC/ELSD: RT = 3.77 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 638.18 za C41H84N2O2
[1545]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.72 (s, 3H); 3.41 (s, 2H); 2.90-2.20 (br. m, 10H); 1.60-1.00 (br. m, 60H); 0.90 (t, 9H).
Korak 6: N-(2-(Didodecilamino)etil)-N-dodecilglicin
[1547] Rastvor metil N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicinata (652 mg, 1.02 mmol) u THF (6 mL) i 1M LiOH (5 mL, 5 mmol) je ostavljen da se meša na 65 °C 16 časova. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i acidifikovana pomoću 10% HCl. Smeša je ekstrahovana pomoću hloroforma, i organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirane, i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-20% MeOH/DCM) dalo je N-(2-(didodecilamino)etil)-N-dodecilglicin (153 mg, 24%).
[1548] UPLC/ELSD: RT = 3.60 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 624.07 za C40H82N2O2
[1549]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.02-3.40 (br. m, 6H); 3.16 (br, 6H); 1.78 (br, 6H); 1.46-1.01 (br. m, 54H); 0.90 (t, 9H).
CT. Jedinjenje 20-2: Pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat
Korak 1: 2-(Dodecilamino)etan-1-ol
Hemijska formula: C14H31NO
Molekulska težina: 229.41
[1551] Metil dodecilglicinat (3.4 g, 13.2 mmol) je rastvoren u 2 mL THF pod atmosferom N2i reakcioni balon je ostavljen da se ohladi u ledenom kupatilu. U rastvor je polako dodat LiAlH4(0.55 g, 14.5 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na istoj temperaturi 1 h. Nakon tog vremena reakcija je ugašena uzastopnim dodavanjem 0.55 mL H2O, 0.55 mL 10% NaOH, a zatim 1.65 mL H2O. Reakcija je zatim filtrirana i filtrat je koncentrovan u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM, sa 1% NH4OH) čime je dobijen 2-(dodecilamino)etan-1-ol (1.9 g, 8.28 mmol, 63% prinos).
[1552]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.63 (t, 2H); 2.78 (t, 2H); 2.63 (t, 2H); 1.48 (m, 2H); 2.14 (m, 18H); 0.88 (t, 3H).
Korak 2: Pentil 6-bromoheksanoat
[1553]
[1554] U rastvor 6-bromoheksanoinske kiseline (2 g, 10.3 mmol) i pentan-1-ola (2.2 mL, 20.5 mmol) u 26 mL DCM, dodati su EDC·HCl (1.97 g, 10.3 mmol) i DMAP (0.26 g, 2.1 mmol). Rastvor je ostavljen da se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Nakon tog vremena reakcija je ugašena dodavanjem vode. Smeša je ekstrahovana tri puta pomoću DCM. Organske supstance su spojene i oprane zasićenim NaHCO3, 10% limunskom kiselinom i slanim rastvorom. Organske supstance su zatim osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heksanima) čime je dobijen željeni proizvod (2.3 g, 8.67 mmol).
[1555]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.06 (t, 2H); 3.39 (t, 2H); 2.30 (t, 2H); 1.84 (m, 2H); 1.62 (m, 4H); 1.46 (m, 2H); 1.31 (m, 4H); 0.88 (t, 3H).
Korak 3: Pentil 6-(dodecil(2-hidroksietil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C25H51NO3
Molekulska težina: 413.69
[1557] U rastvor 2-(dodecilamino)etan-1-ola (0.50 g, 2.18 mmol) u 10 mL THF, dodat je pentil 6-bromoheksanoat (0.87 g, 3.27 mmol) praćen sa K2CO3(0.60 g, 4.36 mmol) i KI (36 mg, 0.22 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša pod N2na 65 °C tokom 24 h. Nakon tog vremena reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i reakcija je razblažena vodom. Smeša je ekstrahovana tri puta pomoću EtOAc. Spojene organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% EtOAc u heksanima) čime je dobijen pentil 6-(dodecil(2-hidroksietil)amino)heksanoat (300 mg, 33%).
[1558]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.04 (t, 2H); 3.51 (m, 2H); 2.56 (m, 2H); 2.42 (m, 4H); 2.28 (t, 2H); 1.60 (m, 4H); 1.42 (m, 4H); 1.30-1.24 (m, 24); 0.87 (m, 6H).
Korak 4: Pentil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C25H50ClNO2
Molekulska težina: 432.13
[1560] U rastvor pentil 6-(dodecil(2-hidroksietil)amino)heksanoata (300 mg, 0.73 mmol) u 2 mL DCM na 0 °C, dodat je metansulfonil hlorid (0.062 mL, 0.80 mmol), praćen trietilaminom (0.13 mL, 1.3 mmol). Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana 12 h pod N2. Reakcija je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću DCM. Spojene organske supstance su osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan pomoću EtOAc tri puta. Organske supstance su spojene i oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je kombinovan i prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heksanima) čime je dobijen pentil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoat (285 mg, 66%).
[1561]<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.04 (t, 2H); 3.45 (t, 2H); 2.74 (t, 2H); 2.43 (m, 4H); 2.28 (t, 2H); 1.65-1.59 (m, 4H); 1.31-1.24 (m, 32H); 0.88 (m, 6H).
Korak 5: Pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C39H80N2O3
Molekulska težina: 625.08
[1563] U rastvor pentil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoata (94 mg, 0.22 mmol) u MeCN (2 mL) i THF (2 mL) dodat je 2-(dodecilamino)etan-1-ol (50 mg, 0.22 mmol), K2CO3(60 mg, 0.44 mmol), i KI (4 mg, 0.022 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 18 časova na 65 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima i EtOAc. Filtrat je ekstrahovan pomoću EtOAc tri puta. Spojene organske supstance su oprane vodom i slanim rastvorom, osušene nad Na2SO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM, [20% MeOH, 1% NH4OH]/DCM) dalo je pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat (21 mg, 15%).
[1564] UPLC/ELSD: RT = 2.86 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 625.86 za C39H80N2O3
[1565]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07-4.05 (m, 2H); 3.53 (m, 2H), 2.60-2.43 (br. m, 12H); 2.33-2.29 (m, 2H); 1.65-1.64 (m, 4H); 1.46 (m, 6H); 1.34-1.28 (br. m, 42H); 0.92-0.90 (m, 9H).
CU. Jedinjenje 20-3: Pentil 6-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)heksanoat
Korak 1: Pentil 6-((2-hidroksietil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C13H27NO3
Molekulska težina: 245.36
[1567] U rastvor pentil 6-bromoheksanoata (4.65 g, 17.5 mmol) u MeCN (88 mL) dodat je etanolamin (1.10 mL, 17.5 mmol), K2CO3(4.85 g, 35.1 mmol), i KI (291 mg, 1.75 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 48 časova na 82 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, i čvrste supstance su oprane heksanima i EtOAc. Filtrat je ekstrahovan pomoću EtOAc tri puta. Spojene organske supstance su oprane vodom i slanim rastvorom, osušene nad Na2SO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-100% DCM, [20% MeOH, 1% NH4OH]/DCM) dalo je pentil 6-((2-hidroksietil)amino)heksanoat (1.74 g, 41%).
[1568] UPLC/ELSD: RT = 0.30 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 246.21 za C13H27NO3
[1569]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.69 (t, 2H), 2.82 (t, 2H); 2.68 (t, 2H); 2.35-2.31 (m, 4H); 1.72-1.52 (br. m, 6H); 1.39-1.32 (br. m, 6H); 0.93 (t, 3H).
Korak 2: Pentil 6-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)heksanoat
[1570]
[1571] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, pentil 6-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)heksanoat je sintetisan od pentil 6-((2-hidroksietil)amino)heksanoata (108 mg, 0.44 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (183 mg, 0.44 mmol), K2CO3(122 mg, 0.88 mmol), i KI (7.3 mg, 0.044 mmol) u MeCN (1 mL) i THF (1 mL). Prinos (88 mg, 32%).
[1572] UPLC/ELSD: RT = 2.92 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 626.0 za C39H80N2O3
[1573]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07 (t, 2H); 3.53 (t, 2H), 2.62-2.40 (br. m, 12H); 2.31 (t, 2H); 1.70-1.60 (m, 4H); 1.53-1.43 (m, 6H); 1.27 (br. m, 42H); 0.91 (m, 9H).
CV. Jedinjenje 20-4: Dipentil 6,6'-((2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)azanediil)diheksanoat
Hemijska formula: C38H76N2O5
Molekulska težina: 641.04
[1575] Na isti način kao pentil-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, dipentil 6,6'-((2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)azanediil)diheksanoat je sintetisan od 2-(dodecilamino)etan-1-ola (60 mg, 0.26 mmol), dipentil 6,6'-((2-hloroetil)azanediil)diheksanoata (118 mg, 0.26 mmol), K2CO3(73 mg, 0.53 mmol), i KI (5 mg, 0.026 mmol) u MeCN (1 mL) i THF (1 mL). Prinos (60 mg, 36%).
[1576] UPLC/ELSD: RT = 2.37 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 641.95 za C38H76N2O5
[1577]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 4H); 3.57 (m, 2H), 2.64-2.53 (br. m, 12H); 2.32 (t, 4H); 1.72-1.60 (m, 8H); 1.50 (m, 6H); 1.38-1.28 (br. m, 30H); 0.95-0.88 (m, 9H).
CW. Jedinjenje 20-5:
[1578] Diheptil 6,6'-((2-((6-(heptiloksi)-6-oksoheksil)(2 hidroksietil)amino)etil)azanediil) diheksanoat
Hemijska formula: C43H84N2O7
Molekulska težina: 741.15
[1579] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, diheptil 6,6'-((2-((6-(heptiloksi)-6-oksoheksil)(2-hidroksietil)amino)etil)azanediil)diheksanoat je sintetisan od heptil 6-((2-hidroksietil)amino)heksanoata (100 mg, 0.37 mmol), diheptil 6,6'-((2hloroetil)azanediil)diheksanoata (184 mg, 0.37 mmol), K2CO3(101 mg, 0.73 mmol), i KI (6 mg, 0.037 mmol) u MeCN (2 mL) i THF (2 mL). Prinos (91 mg, 34%).
[1580] UPLC/ELSD: RT = 3.33 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 742.08 za C43H84N2O7<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 6H); 3.66 (m, 2H), 3.23-2.53 (br. m, 12H); 2.37-2.30 (m, 6H); 1.74-1.31 (br. m, 48H); 0.93-0.89 (m, 9H).
CX. Jedinjenje 20-6: Pentil 6-((2-(dinonilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)heksanoat
[1581]
Hemijska formula: C33H68N2O3
Molekulska težina: 540.92
[1582] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, pentil 6-((2-(dinonilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)heksanoat je sintetisan od pentil 6-((2-hidroksietil)amino)heksanoata (100 mg, 0.41 mmol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (101 mg, 0.41 mmol), K2CO3(108 mg, 0.82 mmol), i KI (7 mg, 0.041 mmol) u MeCN (1 mL) i THF (1 mL). Prinos (25 mg, 13%).
[1583] UPLC/ELSD: RT = 3.37 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 541.90 za C33H68N2O3
[1584]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.54 (t, 2H), 2.63-2.42 (br. m, 12H); 2.32 (t, 2H); 1.71-1.61 (m, 4H); 1.51-1.46 (m, 6H); 1.35-1.29 (br. m, 30H); 0.95-0.88 (m, 9H).
CX. Jedinjenje 20-7: Heptil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat
Hemijska formula: C41H84N2O3
Molekulska težina: 653.13
[1586] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, heptil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat je sintetisan od 2-(dodecilamino)etan-1-ola (100 mg, 0.37 mmol), heptil 6-((2-hloroetil)(dodecil)amino)heksanoata (152 mg, 0.37 mmol), K2CO3(101 mg, 0.73 mmol), i KI (6 mg, 0.037 mmol) u MeCN (2 mL) i THF (2 mL). Prinos (41 mg, 17%).
[1587] UPLC/ELSD: RT = 3.14 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 654.0 za C41H84N2O3
[1588]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.55 (t, 2H), 2.63-2.45 (br. m, 12H); 2.32 (t, 2H); 1.71-1.59 (m, 4H); 1.54-1.28 (br. m, 52H); 0.92-0.88 (m, 9H).
CY. Jedinjenje 20-8: Nonil 8-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)oktanoat
[1589]
Hemijska formula: C45H92N2O3
Molekulska težina: 709.24
[1590] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, nonil 8-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)oktanoat je sintetisan od nonil 8-((2-hidroksietil)amino)oktanoata (240 mg, 0.73 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (335 mg, 0.80 mmol), K2CO3(121 mg, 0.88 mmol), i KI (12 mg, 0.072 mmol) u MeCN (1.5 mL) i THF (1.5 mL). Prinos (122 mg, 24%).
[1591] UPLC/ELSD: RT = 3.41 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 709.93 za C45H92N2O3
[1592]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.08 (t, 2H); 3.56 (m, 2H), 2.91-2.37 (br. m, 12H); 2.31 (m, 2H); 1.64(br. m, 4H); 1.55-1.20(br. m, 60H); 0.91 (m, 9H).
CZ: Jedinjenje 20-9: Heptadekan-9-il 8-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino) oktanoat
Korak 1: Heptadekan-9-il 8-bromooktanoat
[1593]
[1594] U rastvor 8-bromooktanske kiseline (1.04 g, 4.6 mmol) i heptadekan-9-ola (1.5 g, 5.8 mmol) u dihlorometanu (20 mL) dodat je N-(3-dimetilaminopropil)-N-etilkarbodiimid hidrohlorid (1.1 g, 5.8 mmol), N,N-diizopropiletilamin (3.3 mL, 18.7 mmol) i DMAP (114 mg, 0.9 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 18 h. Reakcija je razblažena dihlorometanom i ekstrahovana zasićenim natrijum bikarbonatom. Organski sloj je odvojen, opran slanim rastvorom i osušen nad MgSO4. Organski sloj je filtriran i filtrat je evaporisan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% etil acetat u heksanima) kako bi se dobio heptadekan-9-il 8-bromooktanoat (875 mg, 1.9 mmol, 41%).
[1595]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.89 (m, 1H); 3.42 (m, 2H); 2.31 (m, 2H); 1.89 (m, 2H); 1.73-1.18 (br. m, 36H); 0.88 (m, 6H).
Korak 2: Heptadekan-9-il 8-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)oktanoat
[1596]
Hemijska formula: C53H108N2O3
Molekulska težina: 821.46
[1597] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, heptadekan-9-il 8-((2-(didodecilamino)etil)(2-hidroksietil)amino)oktanoat je sintetisan od heptadekan-9-il 8-((2-hidroksietil)amino)oktanoata (100 mg, 0.23 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin (94 mg, 0.23 mmol), K2CO3(63 mg, 0.45 mmol), i KI (4 mg, 0.023 mmol) u MeCN (1 mL) i THF (1 mL). Prinos (107 mg, 57%).
[1598] UPLC/ELSD: RT = 3.91 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 822.3 za C53H108N2O3
[1599]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.89 (p, 1H); 3.56 (m, 2H), 2.62-2.45 (br. m, 12H); 2.30 (t, 2H); 1.88-1.11 (br. m, 78H); 0.92-0.88 (m, 12H).
DA. Jedinjenje 20-10: Dinonil 8,8'-((2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)azanediil)dioktanoat
[1600]
Hemijska formula: C50H100N2O5
Molekulska težina: 809.36
[1601] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, dinonil 8,8'-((2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)azanediil)dioktanoat je sintetisan od 2-(dodecilamino)etan-1-ola (100 mg, 0.44 mmol), dinonil 8,8'-((2-hloroetil)azanediil)dioktanoata (269 mg, 0.44 mmol), K2CO3(121 mg, 0.87 mmol), i KI (72 mg, 0.044 mmol) u MeCN (2.5 mL) i THF (2.5 mL). Prinos (172 mg, 49%).
[1602] UPLC/ELSD: RT = 4.09 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 810.31 za C50H100N2O5
[1603]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 4.07 (t, 4H); 3.55 (m, 2H), 2.64-2.47 (br. m, 12H); 2.31 (t, 4H); 1.66-1.59 (br. m, 8H); 1.46-1.28 (br. m, 60H); 0.92-0.88 (m, 9H).
DB: Jedinjenje 20-11: 3-((2-(Ditetradecilamino)etil)(dodecil)amino)propan-1-ol
Hemijska formula: C45H94N2O
Molekulska težina: 679.26
[1605] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 3-((2-(ditetradecilamino)etil)(dodecil)amino)propan-1-ol je sintetisan od 3-(dodecilamino)propan-1-oloktanoata (50 mg, 0.21 mmol), N-(2-hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amina (109 mg, 0.23 mmol), K2CO3(57 mg, 0.41 mmol), i KI (3.4 mg, 0.021 mmol) u MeCN (1 mL) i THF (1 mL). Prinos (65 mg, 46%).
[1606] UPLC/ELSD: RT = 3.65 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 679.81 za C45H94N2O
[1607]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.76 (t, 2H); 2.63-2.42 (br. m, 12H), 1.66-1.26 (br. m, 70H); 0.90-0.86 (m, 9H).
DC: Jedinjenje 20-12: 2-((2-(Ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etan-1-ol
[1608]
Hemijska formula: C46H96N2O
Molekulska težina: 693.29
[1609] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 2-((2-(ditetradecilamino)etil)(tetradecil)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(tetradecilamino)etan-1-ola (100 mg, 0.39 mmol), N-(2-hloroetil)-N-tetradeciltetradekan-1-amina (184 mg, 0.39 mmol), K2CO3(107 mg, 0.78 mmol), i KI (6.5 mg, 0.039 mmol) u MeCN (2 mL) i THF (2 mL). Prinos (87 mg, 32%).
[1610] UPLC/ELSD: RT = 3.81 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 694.02 za C46H96N2O
[1611]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.56 (m, 2H); 2.61-2.45 (br. m, 12H), 1.47-1.29 (br. m, 72H); 0.91 (m, 9H).
DD: Jedinjenje 20-13: 2-((2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)(dodecil) amino)etan-1-ol
Korak 1: (6Z,9Z)-18-(Metilsulfonil)oktadeka-6,9-dien
Hemijska formula: C19H36O3S
Molekulska težina: 344.55
[1613] U rastvor linoleil alkohola (10 mL, 31.2 mmol) i trietilamina (5.68 mL, 40.5 mmol) ) u DCM (50 mL) na0 °C ukapan je rastvor metansulfonil hlorida (2.66 mL, 34.3 mmol) u DCM (20 mL). Reakcija je ostavljena da ponovo dostigne sobnu temperaturu i ostavljena da se meša 4 časa. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je opran zasićenim NaHCO3, slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom (0-40% EtOAc/heksani) dalo je (6Z,9Z)-18-(metilsulfonil)oktadeka-6,9-dien (10.0 g, 93%).
[1614]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 4H); 4.22 (t, 2H); 2.99 (s, 3H); 2.77 (t, 2H); 2.04 (q, 4H); 1.74 (m, 2H); 1.30 (br. m, 16H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: (6Z,9Z)-18-Bromooktadeka-6,9-dien
Hemijska formula: C18H33Br
Molekulska težina: 329.37
[1616] U rastvor (6Z,9Z)-18-(metilsulfonil)oktadeka-6,9-diena (10.0 g, 29.0 mmol) u dietil etru (372 mL) dodat je magnezijum bromid etil eterat (22.5 g, 87.1 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 16 časova. Smeša je ugašena dodavanjem vode i ekstrahovana dietil etrom. Kombinovani organski slojevi su oprani sa 1% K2CO3, slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom dalo je (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-dien (8.9 g, 93%).
[1617]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 4H); 3.41 (t, 2H); 2.77 (t, 2H); 2.05 (q, 4H); 1.86 (m, 2H); 1.48-1.22 (br. m, 16H); 0.89 (t, 3H).
Korak 3: 2-((2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)(dodecil)amino)etan-1-ol
[1618]
Hemijska formula: C52H100N2O
Molekulska težina: 769.39
[1619] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 2-((2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)(dodecil)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(dodecilamino)etan-1-ola (50 mg, 0.22 mmol), (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amina (126 mg, 0.22 mmol), K2CO3(60 mg, 0.44 mmol), i KI (3.6 mg, 0.022 mmol) u MeCN (2 mL). Prinos (33 mg, 20%).
[1620] UPLC/ELSD: RT = 3.74 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 770.20 za C52H100N2O
[1621]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.39 (m, 8H); 3.55 (m, 2H), 2.80 (m, 4H); 2.61-2.44 (br. m, 12H); 2.07 (m, 8H); 1.46-1.29 (br. m, 56H); 0.92 (m, 9H).
DE: Jedinjenje 20-14: 2-((2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
Korak 1: 2-(((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
[1623] Na isti način kao 2-(dodecilamino)etan-1-ol, 2-(((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od etanolamina (0.37 mL, 6.1 mmol), (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-diena (2.0 g, 6.1 mmol), K2CO3(1.67 g, 12.1 mmol), i KI (101 mg, 0.607 mmol) u MeCN (28 mL). Prinos (453 mg, 24%).
[1624] UPLC/ELSD: RT = 5.457 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 311.38 za C20H39NO
[1625]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 4H); 3.62 (t, 2H); 2.78 (m, 4H); 2.61 (t, 2H); 2.05 (m, 4H); 1.49 (m, 2H); 1.30 (br. m, 16H); 0.89 (t, 3H).
Korak 2: 2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
Hemijska formula: C38H71NO
Molekulska težina: 557.99
[1627] Na isti način kao 2-(didodecilamino)etan-1-ol, 2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od (6Z,9Z)-18-bromooktadeka-6,9-diena (4 g, 12.1 mmol), etanolamina, (0.334 mL, 5.52 mmol), K2CO3(3.36 g, 24.3 mmol), i KI (92 mg, 0.552 mmol) u MeCN (26 mL). Prinos (1.9 g, 62%).
[1628] UPLC/ELSD: RT = 6.80 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 557.94 za C38H71NO
[1629]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (m, 8H); 3.52 (t, 2H); 2.77 (t, 4H); 2.57 (t, 2H); 2.43 (t, 4H); 2.04 (q, 8H); 1.48-1.18 (br. m, 36H); 0.89 (t, 6H).
Korak 3: (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amin
Hemijska formula: C38H70ClN
Molekulska težina: 576.44
[1631] Na isti način kao jedinjenje N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin, (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amin je sintetisan od 2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ola (250 mg, 0.45 mmol), trietilamina (81 µL, 0.58 mmol), i metansulfonil hlorida (38 µL, 0.49 mmol) u DCM (2 mL). Prinos (134 mg, 52%).
[1632]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.36 (m, 8H); 3.49 (t, 2H); 2.78 (m, 6H); 2.45 (t, 4H); 2.05 (q, 8H); 1.48-1.18 (br. m, 36H); 0.89 (t, 6H).
Korak 4; 2-((2-(Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
[1633]
Hemijska formula: C58H108N2O
Molekulska težina: 849.52
[1634] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 2-((2-(di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etil)((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ola (75 mg, 0.24 mmol), (9Z,12Z)-N-(2-hloroetil)-N-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)oktadeka-9,12-dien-1-amina (154 mg, 0.27 mmol), K2CO3(67 mg, 0.49 mmol), i KI (4 mg, 0.024 mmol) u MeCN (2 mL). Prinos (35 mg, 17%).
[1635] UPLC/ELSD: RT = 3.94 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 850.03 za C58H108N2O
[1636]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.35 (br. m, 12H); 2.77 (t, 6H) 2.70-2.38 (br. m, 14H); 2.05 (m, 12H); 1.50-1.00 (br. m, 54H); 0.88 (t, 9H).
DF: Jedinjenje 20-15: 2-((2-(Didodecilamino)etil)(heksil)amino)etan-1-ol
Hemijska formula: C34H72N2O
Molekulska težina: 524.96
[1638] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 2-((2-(didodecilamino)etil)(heksil)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(heksilamino)etan-1-ola (50 mg, 0.34 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (143 mg, 0.34 mmol), K2CO3(95 mg, 0.69 mmol), i KI (5.7 mg, 0.034 mmol) u MeCN (2 mL). Prinos (145 mg, 80%).
[1639] UPLC/ELSD: RT = 2.73min. MS (ES): m/z (MH<+>) 525.66 za C34H72N2O
[1640]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.54 (m, 2H); 2.61-2.44 (br. m, 12H), 1.46-1.28 (br. m, 48H); 0.90 (m, 9H).
DG: Jedinjenje 20-16: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(nonil)amino)etan-1-ol
[1641]
Hemijska formula: C31H66N2O
Molekulska težina: 482.88
[1642] U rastvor 2-((2-aminoetil)amino)etan-1-ola (2.0 g, 18.6 mmol) i DCE (50 mL) na 0 °C dodat je nonanal (12.8 mL, 74.6 mmol), praćen sa AcOH (3.2 mL, 55.9 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na 0 °C tokom 20 min. Dodat je Na(OAc)3BH (15.8 g, 74.6 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 18 časova na sobnoj temperaturi. Smeša je ugašena sporim dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NaHCO3i ekstrahovana pomoću DCM tri puta. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje ISCO silika fleš hromatografijom dalo je 2-((2-(dinonilamino)etil)(nonil)amino)etan-1-ol. Prinos (75 mg, 0.8%).
[1643] UPLC/ELSD: RT = 2.28 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 483.47 za C21H66N2O
[1644]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.53 (m, 2H); 2.61-2.41 (br. m, 12H), 1.43-1.25 (br. m, 42H); 0.86 (m, 9H).
DH: Jedinjenje 20-17: 2-((2-(Didodecilamino)etil)(nonil)amino)etan-1-ol
[1645]
Hemijska formula: C37H78N2O
Molekulska težina: 567.04
[1646] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 2-((2-(didodecilamino)etil)(nonil)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(nonilamino)etan-1-ola (50 mg, 0.27 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (111 mg, 0.27 mmol), K2CO3(74 mg, 0.53 mmol), i KI (4.4 mg, 0.027 mmol) u 1,4-dioxane (1.5 mL). Prinos (29 mg, 19%).
[1647] UPLC/ELSD: RT = 3.05 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 567.91 za C37H78N2O
[1648]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.71 (m, 2H); 3.14-2.97 (br. m, 8H), 2.80 (m, 2H); 2.66 (m, 2H); 1.70 (m, 4H); 1.53 (m, 2H); 1.34-1.28 (br. m, 48H); 0.90 (m, 9H).
DI: Jedinjenje 20-18: 2-((2-(Dinonilamino)etil)(dodecil)amino)etan-1-ol
[1649]
Hemijska formula: C34H72N2O
Molekulska težina: 524.96
[1650] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 2-((2-(dinonilamino)etil)(dodecil)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(dodecilamino)etan-1-ola (100 mg, 0.44 mmol), N-(2-hloroetil)-N-nonilnonan-1-amina (145 mg, 0.44 mmol), K2CO3(120 mg, 0.87 mmol), i KI (7.2 mg, 0.044 mmol) u MeCN (1 mL) i THF (1 mL). Prinos (155 mg, 67%).
[1651] UPLC/ELSD: RT = 2.78 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 525.99 za C34H72N2O
[1652]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.55 (m, 2H); 2.63-2.47 (br. m, 12H), 1.47-1.28 (br. m, 48H); 0.90 (m, 9H).
[1653] DJ: Jedinjenje 20-19: 2-((2-(Didodecilamino)etil)amino)etan-1-ol
Hemijska formula: C28H60N2O
Molekulska težina: 440.80
[1654] Etanolamin (50 mg, 0.82 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amin (0.75 g, 1.8 mmol), K2CO3(0.25 g, 1.8 mmol) i KI (14 mg, 0.082) i 4 mL THF su kombinovani u balonu okruglog dna. Reakcija je smeštena u grejnu oblogu na 65 °C i ostavljena da se meša pod N2tokom 12 h. Nakon tog vremena reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i filtrirana. Filtrat je opran sa H2O i slanim rastvorom, osušen nad MgSO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću C18 reverzno-fazne hromatografije (5-100% MeCN u H2O sa 0.1% TFA). Frakcije su spojene i koncentrovane. Izolovani materijal je apsorbovan u CHCl3, opran sa 10% NaOH i slanim rastvorom, osušen nad MgSO4, filtriran i koncentrovan. Proizvod je zatim ponovo prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% MeOH u DCM sa 1% NH4OH) čime je dobijen 2-((2-(didodecilamino)etil)amino)etan-1-ol (0.15 g, 41%).
[1655] UPLC/ELSD: RT = 2.15 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 441.37 za C28H60N2O
[1656]<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.59 (t, 2H); 2.75 (t, 2H); 2.62 (t, 2H); 2.50 (t, 2H); 2.37 (t, 4H); 1.39 (m, 4H); 1.24 (m 38H); 0.86 (t, 6H).
DK: Jedinjenje 20-20: 2-((2-(Didodecilamino)etil)(dodecil)amino)etan-1-ol
Hemijska formula: C40H84N2O
Molekulska težina: 609.13
[1658] Rastvor 2-((2-aminoetil)amino)etan-1-ola (2 g, 19.2 mmol) u 50 mL DCE je ostavljen da se ohladi pod N2u ledenom kupatilu. Dodat je dodekanal (26 mL, 76.8 mmol) praćen sirćetnom kiselinom (3.3 mL, 57.6 mmol). Nakon 20 min., dodat je Na(OAc)3BH (16.3 g, 76.8 mmol). Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana 48 h. Nakon tog vremena reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog NaHCO3u porcijama. Smeša je ekstrahovana tri puta pomoću DCM. Spojene organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-100% EtOAc u heksanima) dva puta čime je dobijen čist 2-((2-(didodecilamino) etil)(dodecil)amino)etan-1-ol (7.4 g, 63%).
[1659] UPLC/ELSD: RT = 3.20 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 609.97 za C40H84N2O
[1660]<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.51 (t, 2H); 2.57-2.40 (br. m, 12H); 1.41-1.23 (br. m., 60H); 0.86 (t, 9H).
DL: Jedinjenje 20-21: 3-((2-(Didodecilamino)etil)(dodecil)amino)propan-1-ol
[1661]
Hemijska formula: C41H86N2O
Molekulska težina: 623.15
[1662] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 3-((2-(didodecilamino)etil) (dodecil)amino)propan-1-ol je sintetisan od 3-(dodecilamino)propan-1-ola (39 mg, 0.16 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (75 mg, 0.18 mmol), K2CO3(44 mg, 0.32 mmol), i KI (2.7 mg, 0.016 mmol) u THF (1 mL). Prinos (170 mg, >98%).
[1663] UPLC/ELSD: RT = 3.29 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 623.71 za C41H86N2O
[1664]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.76 (m, 2H); 2.64-2.39 (br. m, 12H), 1.66 (m, 2H); 1.44-1.26 (br. m, 60H); 0.88 (m, 9H).
DM: Jedinjenje 20-22: 4-((2-(Didodecilamino)etil)(dodecil)amino)butan-1-ol
4-(dodecilamino)butan-1-ol
Hemijska formula: C16H35NO
Molekulska težina: 257.46
[1666] Na isti način kao 2-(dodecilamino)etan-1-ol, 4-(dodecilamino)butan-1-ol je sintetisan od 4-aminobutan-1-ola (2.5 mL, 27 mmol), 1-bromododekana (6.75 g, 27 mmol), K2CO3(7.5 g, 54 mmol), i KI (450 mg, 2.7 mmol) u MeCN (125 mL). Prinos (303 mg, 4%).
[1667] UPLC/ELSD: RT = 1.09 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 258.22 za C16H35NO
[1668]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.60 (t, 2H); 2.76-2.62 (br. m, 4H); 1.72-1.58 (br. m, 6H); 1.29 (br. m, 18H); 0.89 (t, 3H).
Hemijska formula: C42H88N2O
Molekulska težina: 637.18
[1669] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 4-((2-(didodecilamino)etil)(dodecil)amino)butan-1-ol je sintetisan od 4-(dodecilamino)butan-1-ola (75 mg, 0.29 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (133 mg, 0.32 mmol), K2CO3(80 mg, 0.58 mmol), i KI (5 mg, 0.029 mmol) u MeCN (2 mL). Prinos (104 mg, 56%).
[1670] UPLC/ELSD: RT = 3.27 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 637.85 za C42H88N2O
[1671]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.56 (br. m, 2H); 2.58 (br. m, 4H); 2.45 (br. m, 8H); 1.65 (br. m, 4H); 1.45 (br. m, 6H); 1.25 (br. m, 54H); 0.88 (t, 9H).
DN: Jedinjenje 20-23: (Z)-2-((2-(Didodecilamino)etil)(dodec-6-en-1-il)amino)etan-1-ol
Korak 1: (6-Hidroksiheksil)trifenilfosfonijum bromid
Hemijska formula: C24H28BrOP
Molekulska težina: 443.36
[1673] 6-Bromo-1-heksanol (4.89 g, 27 mmol) i trifenilfosfin (7.87 g, 30 mmol) i 50 mL MeCN su kombinovani u balonu okruglog dna. Na balon je postavljen kondenzator i smešten je u grejnu oblogu i reakcija je ostavljena da se meša na 82 °C tokom 48 h. Nakon tog vremena reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i rastvor je prebačen pomoću kanile u 200 mL Et2O, stvarajući beli talog. Čvrste supstance su ostavljene da se slegnu i rastvarač je dekantovan. Dodato je 20 mL DCM kako bi se čvrste supstance rastvorile, a zatim je polako dodato 100 mL Et2O čime je dobijen beli talog. Rastvarač je zatim uklonjen u vakuumu čime je dobijen čist (6-hidroksiheksil)trifenilfosfonijum bromid (9.4 g, 21.2 mmol, za 78% prinosa).
[1674]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 7.80 (m, 15H); 3.80 (m, 2H); 3.65 (m, 2H); 2.23 (m, 2H); 1.68 (m, 4H); 1.52 (m, 4H).
Korak 2: (Z)-Dodec-6-en-1-ol
Hemijska formula: C12H24O
Molekulska težina: 184.32
[1676] Rastvor (6-hidroksiheksil)trifenilfosfonijum bromida (3.0 g, 6.77 mmol) u 25 mL THF je ostavljen da se ohladi u kupatilu sa mešavinom suvi led/aceton na -78 °C. Kada se ohladio, ukapan je n-BuLi (2.5 M u heksanima) (5.7 mL, 14.2 mmol). Nakon 1 h, dodato je još 10 mL THF i n-BuLi (1.35 mL) i mešanje je nastavljeno na istoj temperaturi 1 h. Nakon tog vremena, dodat je 1-heksanal (1.6 mL, 13.5 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreje do rt i mešana 3 h. Nakon tog vremena reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog NH4Cl u višku. Rastvor je ekstrahovan tri puta pomoću EtOAc. Spojene organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-50% EtOAc u heksanima) čime je dobijen željeni proizvod kao bistro ulje (0.76 g, 4.1 mmol, 61%).
[1677]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 3.62 (t, 2H); 2.01 (m, 4H); 1.56 (m, 2H); 1.35-1.27 (m, 11H); 0.87 (t, 3H).
Korak 3: (Z)-Dodec-6-en-1-il metansulfonat
[1678]
Hemijska formula: C13H26O3S
Molekulska težina: 262.41
[1679] U rastvor (Z)-dodec-6-en-1-ola (1.81 g, 9.3 mmol) u 20 mL DCM na 0 °C, dodat je Et3N (1.7 mL, 12.1 mmol) i metansulfonil hlorid (0.80 mL, 10.2 mmol). Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i meša preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem vode i smeša je ekstrahovana dva puta pomoću DCM. Organske supstance su spojene, oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heksanima) čime je dobijen čist željeni proizvod (2.2 g, 8.4 mmol, 90%).
[1680]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 4.20 (t, 2H); 2.98 (s, 3H); 2.01 (m, 4H); 1.74 (m, 2H); 1.38-1.27 (m, 10H); 0.87 (t, 3H).
Korak 4: (Z)-1-Bromododec-6-en
Hemijska formula: C12H23Br
Molekulska težina: 247.22
[1682] U balon okruglog dna, pod N2, (Z)-dodec-6-en-1-il metansulfonat (2.2 g, 8.3 mmol) je rastvoren u 40 mL Et2O. Dodat je MgBr2·Et2O (6.5 g, 25 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša 48 h. Nakon tog vremena reakcija je ugašena dodavanjem leda. Smeša je zatim ekstrahovana pomoću Et2O tri puta. Spojene organske supstance su oprane slanim rastvorom, osušene nad MgSO4, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heksanima) čime je dobijen željeni proizvod (1.8 g, 7.28 mmol, 88%).
[1683]<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.34 (m, 2H); 3.39 (t, 2H); 2.01-1.84 (m, 6H); 1.28 (m, 10H); 0.87 (t, 3H).
Korak 5: (Z)-2-((2-(Didodecilamino)etil)(dodec-6-en-1-il)amino)etan-1-ol
[1684]
Hemijska formula: C40H82N2O
Molekulska težina: 607.11
[1685] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, (Z)-2-((2-(didodecilamino)etil)(dodec-6-en-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od (Z)-2-(dodec-6-en-1-ilamino)etan-1-ola (100 mg, 0.44 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (183 mg, 0.44 mmol), K2CO3(122 mg, 0.88 mmol), i KI (7.3 mg, 0.044 mmol) u MeCN (1 mL) i THF (1 mL). Prinos (90 mg, 34%).
[1686] UPLC/ELSD: RT = 3.24 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 608.08 za C40H82N2O
[1687]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.42-5.35 (m, 2H); 3.55 (m, 2H), 2.62-2.45 (br. m, 12H); 2.06-2.00 (m, 4H); 1.48-1.28 (br. m, 52H); 0.91 (m, 9H).
DO: Jedinjenje 20-24: 2-((2-(Didodecilamino)etil)(tetradecil)amino)etan-1-ol
[1688]
Hemijska formula: C42H88N2O
Molekulska težina: 637.18
[1689] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil)amino)heksanoat, 2-((2-(didodecilamino)etil)(tetradecil)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(tetradecilamino)etan-1-ola (100 mg, 0.39 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (162 mg, 0.39 mmol), K2CO3(107 mg, 0.78 mmol), i KI (6.5 mg, 0.039 mmol) u MeCN (3 mL). Prinos (128 mg, 52%).
[1690] UPLC/ELSD: RT = 3.47 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 637.92 za C42H88N2O
[1691]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 3.54 (m, 2H); 2.61-2.44 (br. m, 12H); 1.46-1.28 (br. m, 64H); 0.91 (m, 9H).
DP: Jedinjenje 20-25: 2-((2-(Didodecilamino)etil)((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol
[1692]
Hemijska formula: C46H92N2O
Molekulska težina: 689.26
[1693] Na isti način kao pentil 6-(dodecil(2-(dodecil(2-hidroksietil)amino)etil) amino)heksanoat, 2-((2-(didodecilamino)etil)((9Z, 12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ol je sintetisan od 2-(((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)amino)etan-1-ola (50 mg, 0.16 mmol), N-(2-hloroetil)-N-dodecildodekan-1-amina (67 mg, 0.16 mmol), K2CO3(45 mg, 0.32 mmol), i KI (3 mg, 0.016 mmol) u MeCN (2 mL). Prinos (45 mg, 41%).
[1694] UPLC/ELSD: RT = 3.64 min. MS (ES): m/z (MH<+>) 689.95 za C46H92N2O
[1695]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: ppm 5.39-5.32 (m, 4H); 3.56 (m, 2H), 2.80 (m, 2H); 2.62-2.52 (br. m, 12H); 2.08 (m, 4H); 1.48-1.28 (br. m, 58H); 0.91 (m, 9H).
DQ. Jedinjenje 21-1: 1-(2,2-Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopropil)-N,N dimetilmetanamin
[1697] Na 0 °C, rastvor nonan-1,9-diola (96.16 g, 0.60 mol) u 100 mL DMF je polako dodat u suspenziju NaH (24.0 g, 0.60 mol) u 800 mL DMF. Nakon mešanja tokom 1 h, polako je dodat rastvor benzil bromid (71.4 mL, 0.60 mol) u 200 mL DMF. Posle dodavanja, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. TLC je pokazala da je polazni materijal gotovo potpuno potrošen. Reakciona smeša je izlivena na led, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i slanim rastvorom, a zatim osušeni nad natrijum sulfatom. Posle filtracije i koncentrovanja, sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 100% EtOAc/heksani zatim 0 do 5% MeOH/dihlorometan) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (74.4 g, 50%).
[1698] Na 0 °C, u rastvor 9-(benziloksi)nonan-1-ola (14.88 g, 61.5 mmol) u 150 mL dihlorometana, dodat je CBr4(30.6 mmol, 92.2 mmol). Zatim je dodat trifenilfosfin (27.4 g, 0.104 mol) u porcijama. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi preko noći, TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakciona smeša je izlivena na led, a zatim ekstrahovana dihlorometanom (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i slanim rastvorom, a zatim osušeni nad magnezijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (21.0 g, kvant.).
[1699] U suspenziju magnezijuma (3.23 g, 0.134 mol) u 80 mL THF, dodata je katalitička količina joda, a zatim je smeša mešana do nestanka boje. Rastvor (((9-bromononil)oksi)metil)benzena (21.0 g, 67.2 mmol) u 40 mL THF je polako dodavan tokom 15 min na sobnoj temperaturi, a zatim je smeša zagrevana do refluksa 1 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, ukapan je rastvor metil formata (4.2 mL, 67.2 mmol) u 10 mL THF, i smeša je mešana preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem 5 N HCl i vode, i smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfate. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je rastvoren u EtOH, a zatim su dodati KOH i voda. Nakon mešanja preko noći, reakciona smeša je koncentrovana do suva. Dodata je voda, a zatim je pH podešen na ~7 pomoću 1 N HCl. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X), i kombinovani organski sloj je osušen nad magnezijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (6.64 g, 40%).
[1700] Na 0 °C, rastvor 1,19-bis(benziloksi)nonadekan-10-ola (6.64 g, 13.4 mmol) u 30 mL dihlorometanu je polako dodat u rastvor Dess-Martinovog perjodinana (7.94 g, 18.7 mmol) u 70 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na ovoj temperaturi 3 h. TLC je pokazala da je polazni materijal potrošen. Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom, a zatim su dodati 10% rastvor Na2S2O3i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Posle ekstrakcije dihlorometanom (2 X), kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i koncentrovani. Ostatak je rastvoren u etru i opran zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom. Nakon sušenja iznad natrijum sulfata, rastvor je filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 20% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (6.23 g, 94%).
[1701] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (1.70 g, 15.1 mmol) je dodat u rastvor metilfosfonijum bromida (5.40 g, 15.1 mmol) u 80 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Nakon 1 h, rastvor 1,19-bis(benziloksi)nonadekan-10-ona (6.23 g, 12.6 mmol) u 20 mL THF (pročišćen azotom 3 puta) prebačen je pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena, i reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Posle koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (6.0 g, 96%).
[1702] U refluksni rastvor (((10-metilenenonadekan-1,19-diil)bis(oksi))bis(metilen))dibenzena (2.99 g, 6.08 mmol) u 160 mL dihlorometanu, dodat je rastvor Cu(acac)2(180 mg, 0.69 mmol) u 40 mL dihlorometana. Zatim je, na svakih 30 min. dodavan etil diazoacetat (sadrži 13% dihlorometan, 9 X 1.1 mL). MS je pokazala formiranje proizvoda. Reakcija je ugašena sa MeOH i mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Posle koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (3.65 g, sadrži 1 ekvivalent acetatnog sporednog proizvoda).
[1703] Smeša etil 2,2-bis(9-(benziloksi)nonil)ciklopropan-1-karboksilata (2.8 g, 4.8 mmol) i paladijuma na ugljeniku (10 tež.%, 500 mg) u 500 mL EtOAc je mešana na sobnoj temperaturi pod balonom sa vodonikom tokom 4.5 h. MS i TLC su pokazale da je reakcija završena. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i oprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan čime je dobijen proizvod pomešan sa sporednim proizvodom, dietil sukcinatom (2.53 g, sadrži 0.94 ekvivalenta sporednog proizvoda, 94%).
[1704] Na 0 °C, rastvor etil 2,2-bis(9-hidroksinonil)ciklopropan-1-karboksilat (2.4 g, 6 mmol) u 100 mL dihlorometana je polako dodat u suspenziju Dess-Martinovog perjodinana (7.67 g, 18 mmol) u 100 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Posle gašenja sa 10% vodenim Na2S2O3i zasićenim natrijum bikarbonatom, smeša je ekstrahovana pomoću dihlorometana (2 X). Kombinovani organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfate i koncentrovani kako bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (2.3 g, sadrži oko 0.7 g sporednog proizvoda).
[1705] Priprema (Z)-non-3-en-1-iltrifenilfosfonijum jodida:
Na 0 °C, rastvor trifenilfosfina (110 g, 0.419 mol) u 200 mL dihlorometana je polako dodat u rastvor (Z)-non-3-en-1-ola (49.6 g, 0.349 mol), imidazola (50.0 g, 0.732 mol) i joda (124 g, 0.488 mol) u 800 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša ostavljena na sobnoj temperaturi preko noći. TLC je pokazala malu količinu preostalog (Z)-non-3-en-1-ola. Reakciona smeša je koncentrovana, i ostatak je triturisan heksanima. Rastvor je filtriran kroz čep od silika gela i eluiran heksanima čime je dobijen jodid kao bezbojna tečnost (81 g, 92%).
[1706] Rastvor (Z)-1-jodonon-3-ena (81 g, 0.321 mol) i trifenilfosfina (169 g, 0.643 mol) u acetonitrilu (1.1 L) je refluktovan preko noći. Nakon koncentrovanja do suva, ostatak je triturisan heksanima. Bela guma je rastvorena u dihlorometanu i prečišćena fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 5% MeOH/CH2Cl2) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje koje se zatim pretvorilo u belu čvrstu supstancu (114 g
[1707] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (1.98 g, 17.7 mmol) je dodat u rastvor (Z)-non-3-en-1-iltrifenilfosfonijum jodida (9.2 g, 17.9 mmol) u 300 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Posle 1 h, rastvor etil 2,2-bis(9-oksononil)ciklopropan-1-karboksilata (2.05 g, 5.2 mmol) u 100 mL THF (pročišćen azotom 3 puta) prebačen je pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana heksanima (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 5% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (1.54 g, 48%).
[1708] Rastvor litijum aluminijum hidrida (2.0 M u THF, 1.9 mL, 3.8 mmol) je polako dodat u rastvor etil 2,2-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopropan-1-karboksilata (1.54 g, 2.52 mmol) u 150 mL THF, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 30 min. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena sporim dodavanjem Na2SO4·10H2O, a zatim je smeša filtrirana i oprana sa THF. Filtrat je koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 15% EtOAc/Heksani) da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (1.2 g, 84%).
[1709] Na 0 °C, rastvor (2,2-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopropil)metanola (1.04 g, 1.83 mmol) u 100 mL dihlorometana je polako dodat u suspenziju Dess-Martinovog perjodinana (1.18 g, 2.77 mmol) u 200 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Nakon gašenja zasićenim natrijum bikarbonatom, smeša je ekstrahovana dihlorometanom (2 X). Kombinovani organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom i koncentrovan da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (0.95 g, 91%).
Hemijska formula: C42H77N
Molekulska težina: 596.09
[1710] U rastvor 2,2-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopropan-1-karbaldehida (0.95 g, 1.68 mmol) u 300 mL THF, redom su dodati dimetilamin (2.0 M u THF, 2 mL, 4 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (840 mg, 4 mmol) i sirćetna kiselina (0.23 mL, 4 mmol), i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. MS je pokazala da je reakcija završena, i dodat je zasićeni natrijum bikarbonat da bi se ugasila reakcija. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X), i kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% MeOH/dihlorometan) da bi se dobio proizvod 1-(2,2-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopropil)-N,N-dimetilmetanamin kao bezbojno ulje (0.56 g, 56%).
[1711]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.27-5.42 (m, 8 H), 2.76 (t, 4 H, J= 6.2 Hz), 2.38 (bs, 8 H), 2.04 (q, 8 H, J = 6.6 Hz), 1.18-1.41 (m, 38 H), 0.96-1.17 (m, 2 H), 0.88 (t, 6 H, J = 6.6 Hz), 0.66-0.76 (m, 1 H), 0.48-0.56 (m, 1 H), 0.05-0.13 (m, 1 H).
[1712] APCI: m/z = 596.6 [M+H]<+>.
DR. Jedinjenje 21-2: 3,3-Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklobutil 4-(dimetilamino)butanoat
[1713]
[1714] Priprema para Zn-Cu: Suspenzija cinkove prašine (10 g) u 10 mL 4 M HCl je mešana 10 min, a zatim je vodena faza dekantovana. Nakon što je čvrsta supstanca oprana vodom (2 × 20 mL), dodato je 20 mL vode i bakar sulfat (0.75 g). Nakon mešanja preko noći, voda je dekantovana, a zatim je ostatak opran sa THF (2 × 10 mL). Čvrsta crna supstanca je osušena pod vakuumom i skladištena pod azotom.
[1715] U suspenziju para Zn-Cu (1.295 g, 19.8 mmol) u 30 mL etra pročišćenog azotom 3 puta, dodat je rastvor (((10-metilennonadekan-1,19-diil)bis(oksi))bis(metilen))dibenzena (2.96 g, 6.0 mmol) u 10 mL etra pročišćenog azotom, a zatim je ukapan rastvor POCl3(1.85 mL, 19.8 mmol) i 2,2,2-trihloroacetil hlorida (2.23 mL, 19.8 mmol) u 15 mL etra pročišćenog azotom. Nakon dodavanja, smeša je zagrevana do refluksa 22 h. TLC je pokazala polazni materijal u tragovima. Reakciona smeša je ohlađena u ledenom kupatilu, a zatim je dodato 8.0 g kalijum karbonata. Ukapano je 30 mL MeOH i mešano do prestanka oslobađanja gasa. Dodat je EtOAc i smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (3.02 g, 83%).
[1716] U rastvor 3,3-bis(9-(benziloksi)nonil)-2,2-dihlorociklobutan-1-ona (3.02 g, 5.0 mmol) u 80 mL MeOH, dodata je prašina Zn (1.96 g, 30 mmol). Nakon mešanja od 15 min, dodat je amonijum hlorid (1.6 g, 30 mmol), i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. TLC je pokazala da je reakcija završena, i smeša je koncentrovana do suva. Dodato je 100 mL vode i 100 mL EtOAc, i smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je opran slanim rastvorom i osušen nad magnezijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, dobijen je proizvod (2.58 g, 97%), koji je upotrebljen za sledeći korak bez prečišćavanja.
[1717] Na 0 °C, natrijum borohidrid (0.51 g, 13.51 mmol) je dodat u rastvor 3,3-bis(9-(benziloksi)nonil)ciklobutan-1-ona (2.58 g, 4.82 mmol) u 48 mL MeOH/THF (5:1), a zatim je reakcija mešana na ovoj temperaturi 1 h. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim natrijum bikarbonatom, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, dobijen je proizvod u vidu bezbojnog ulja (2.68 g, kvant.), koji je upotrebljen za sledeći korak bez prečišćavanja.
[1718] U rastvor 3,3-bis(9-(benziloksi)nonil)ciklobutan-1-ola (3.31 g, 6.17 mmol) i imidazola (0.92 g, 13.57 mmol) u 50 mL dihlorometana, dodat je terc-butildimetilsilil hlorid (1.15 g, 7.28 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. TLC je pokazala da je reakcija završena. Dodata je voda kako bi se reakcija ugasila, i smeša je ekstrahovana dihlorometanom (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 20% EtOAc/heksani) čime je dobijen
[1719] Smeša (3,3-bis(9-(benziloksi)nonil)ciklobutoksi)(terc-butil)dimetilsilana (3.53 g, 5.42 mmol) i paladijuma na ugljeniku (10 tež.%, 0.71g) u 350 mL EtOAc pročišćena je azotom i vodonikom, redom. Nakon mešanja pod balonom sa vodonikom preko noći, TLC je pokazala da je reakcija završena, a zatim je reakciona smeša filtrirana kroz celit. Posle koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 70% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (2.35 g,
[1720] Na 0 °C, rastvor 9,9'-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklobutan-1,1-diil)bis(nonan-1-ola) (1.49 g, 3.16 mmol) u 20 mL dihlorometana je polako dodat u rastvor Dess-Martinovog perjodinana (2.68 g, 6.33 mmol) u 70 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na ovoj temperaturi 3 h. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi od 1 h, reakciona smeša je razblažena dihlorometanom, a zatim su dodati 10% rastvor Na2S2O3i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Nakon ekstrakcije dihlorometanom (2 X), kombinovani organski slojevi su oprani zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (0.88 g, 60%).
[1721] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (0.51 g, 4.53 mmol) je dodat u rastvor (Z)-non-3-en-1-iltrifenilfosfonijum jodida (2.33 g, 4.53 mmol) u 30 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Posle 1 h, rastvor 9,9'-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklobutan-1,1-diil)dinonanala (0.88 g, 1.89 mmol) u 25 mL THF (pročišćen azotom 3 puta)je prebačen pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 20% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (543 mg, 42%).
[1722] U rastvor terc-butil(3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklobutoksi)dimetilsilana (0.67 g, 0.98 mmol) u 60 mL THF, dodat je rastvor TBAF (1.0 M u THF, 9.8 mL, 9.8 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. TLC je pokazala da je reakcija završena. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 20% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (0.64 g, Kvant.).
[1723] Na 0 °C, piridin (2.4 mL) i rastvor anhidrida propilfosfonske kiseline (50 tež.% u DMF, 2.4 mL, 4.16 mmol) su dodati u rastvor hidrohlorida 4-(dimetilamino)butanske kiseline (564 mg, 3.37 mmol) u 6 mL DMF. Nakon mešanja od 10 min, dodat je rastvor 3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklobutan-1-ola (0.64 g, 1.12 mmol) u 4 mL DMF i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. MS i TLC su pokazale formiranje proizvoda. Dodat je zasićeni rastvor natrijum bikarbonata kako bi se reakcija ugasila, a zatim je smeša ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i slanim rastvorom. Nakon sušenja nad natrijum sulfatom i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 100% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod 3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklobutil 4-(dimetilamino)butanoat kao blago žuto ulje (479 mg, 63%).
[1724]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.28-5.42 (m, 8 H), 4.89-4.99 (m, 1 H), 2.76 (t, 4 H, J = 6.1 Hz), 2.30 (t, 4 H, J= 7.4 Hz), 2.23 (s, 6 H), 2.15-2.21 (m, 2H), 2.04 (q, 8 H, J = 6.6 Hz), 1.68-1.84 (m, 4 H), 1.08-1.40 (m, 40 H), 0.88 (t, 6 H, J= 6.6 Hz).
[1725] APCI: m/z = 682.6 [M H]<+>.
DS. Jedinjenje 21-3: 3,3-Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopentil 3-(dimetilamino)propanoat
[1726]
[1727] Na 0 °C, u rastvor 1,4-dibromobutan-2-ola (75.0 g, 0.328 mol) i imidazola (49.0 g, 0.72 mol) u 500 mL dihlorometana, ukapan je rastvor terc-butildimetilsilil hlorida (57.0 g, 0.36 mol) u 300 mL dihlorometana. Nakon dodavanja, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešanje je nastavljeno preko noći. TLC je pokazala jasnu konverziju. Reakciona smeša je filtrirana i oprana dihlorometanom. Posle koncentrovanja, ostatak je apsorbovan dihlorometanom i opran vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen nad Na2SO4. Nakon filtracije i koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% etar/heksani) čime je dobijen čist proizvod kao bezbojna tečnost (83.05 g, 71%).
[1728] Rastvor terc-butil((1,4-dibromobutan-2-il)oksi)dimetilsilana (53.7 g, 0.152 mol), dietil malonata (10.0 g, 0.138 mol), kalijum karbonata (47.6 g, 0.345 mol) i tetrabutilamonijum bromida (4.45 g, 13.8 mmol) u 700 mL DMF je mešan na sobnoj temperaturi 3 dana. TLC je pokazala gotovo potpuno odsustvo polaznog materija. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X), i kombinovani organski slojevi su oprani zasićenim amonijum hlorid i slanim rastvorom. Nakon sušenja iznad natrijum sulfata, rastvor je filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) kako bi se dobio željeni proizvod kao bezbojno ulje (36.92 g, 77%).
[1729] Na 0 °C, rastvor litijum aluminijum hidrida (2.0 M u THF, 43.2 mL, 86.4 mmol) je dodat u rastvor dietil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-dikarboksilata (14.89 g, 43.2 mmol) u 60 mL THF, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi preko noći. TLC je pokazala čistu konverziju. Reakcija je ugašena sporim dodavanjem vode (6 mL) i 1 N NaOH (20 mL), a zatim mešanjem tokom 30 min. Suspenzija je filtrirana kroz celit i oprana sa EtOAc. Posle koncentrovanja, ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 90% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (9.86 g, 88%).
[1730] Na -78 °C, rastvor DMSO (2.15 mL, 30.3 mmol) u 10 mL dihlorometana ukapan je u rastvor oksalil hlorida (1.35 mL, 15.2 mmol) u 15 mL dihlorometana, a zatim je odmah dodat rastvor (3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-diil)dimetanola (1.88 g, 7.2 mmol) u 15 mL dihlorometana. Nakon mešanja od 30 min, dodat je trietilamin (7.25 mL, 52.0 mmol) i reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature. TLC je pokazala čistu konverziju. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana etrom (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani zasićenim amonijum hloridom i slanim rastvorom. Nakon sušenja nad natrijum sulfatom, rastvor je filtriran i koncentrovan da bi se dobio proizvod kao žuto ulje (2.00 g, kvant.), koji je upotrebljen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
Priprema (8-(benziloksi)oktil)trifenilfosfonijum jodida:
[1731]
[1732] Na 0 °C, rastvor oktan-1,8-diola (100 g, 0.684 mol) u 100 mL DMF je polako dodat u suspenziju NaH (27.35 g, 0.684 mol) u 700 mL DMF. Nakon mešanja od 30 min, polako je dodat rastvor benzil hlorida (78.7 mL, 0.684 mol) u 200 mL DMF. Nakon dodavanja, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. TLC je pokazala da je polazni materijal gotovo potpuno potrošen. Reakciona smeša je izlivena na led, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i slanim rastvorom, a zatim osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 60% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (85.83 g, 53%).
[1733] Na 0 °C, rastvor trifenilfosfina (114.4 g, 0.436 mol) u 300 mL dihlorometana je polako dodat u rastvor 8-(benziloksi)oktan-1-ola (85.83 g, 0.363 mol), imidazola (52 g, 0.76 mol) i joda (129.1 g, 0.51 mol) u 1200 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša ostavljena da se uravnoteži na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Nakon filtracije, filtrat je koncentrovan i ostatak je triturisan heksanima. Rastvor je filtriran kroz čep od silika gela i eluiran 10% etrom u heksanima čime je dobijen proizvod kao zamućena tečnost (81.09 g). Gumasta čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometan i propuštena kroz silika gel i eluirana 10% etrom u heksanima čime je dobijena zamućena tečnost (20.0 g). Ukupni prinos: 101.1 g (80%).
[1734] Rastvor (((8-jodooktil)oksi)metil)benzena (101.1 g, 0.293 mol) i trifenilfosfina (154.1 g, 0.586 mol) u acetonitrilu (1 L) je refluktovan preko noći. Nakon koncentrovanja do suva, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% MeOH/CH2Cl2) čime je dobijen proizvod kao žuto ulje (144.1 g, 81%).
[1735] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (2.42 g, 21.6 mmol) je dodat u rastvor (8-(benziloksi)oktil)trifenilfosfonijum jodida (14.2 g, 23.3 mmol) u 80 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Posle 1 h, rastvor 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-dikarbaldehida (2.00 g, 7.2 mmol) u 20 mL THF (pročišćen azotom 3 puta) prebačen je pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana etrom (2 X). Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom i osušen nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 6% etar/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (3.77 g, 79%).
[1736] Smeša ((3,3-bis((Z)-9-(benziloksi)non-1-en-1-il)ciklopentil)oksi)(terc-butil)dimetilsilana (3.04 g, 4.6 mmol) i paladijuma na ugljeniku (10%, 600 mg) u 200 mL EtOAc je pročišćena azotom i zatim vodonikom, a zatim mešana pod vodonikom preko noći. TLC i MS je pokazala da je reakcija završena. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i oprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (2.32 g, Kvant.).
[1737] Na 0 °C, rastvor 9,9'-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-diil)bis(nonan-1-ola) (2.32 g, 4.6 mmol) u 30 mL dihlorometana je polako dodat u rastvor Dess-Martinovog perjodinata (5.46 g, 12.88 mmol) u 70 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na ovoj temperaturi 4 h. TLC je pokazala da je polazni materijal potrošen. Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom, a zatim su dodati 10% rastvor Na2S2O3i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Nakon ekstrakcije dihlorometanom (2 X), kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i koncentrovani. Ostatak je rastvoren u etru i opran zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom. Nakon sušenja nad natrijum sulfatom, rastvor je filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 50% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (0.73 g, 16%).
[1738] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (363 mg, 3.23 mmol) je dodat u rastvor (Z)-non-3-en-1-iltrifenilfosfonijum jodida (1.66 g, 3.23 mmol) u 30 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Nakon 1 h, rastvor 9,9'-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-diil)dinonanala (0.52 g, 1.08 mmol) u 10 mL THF (pročišćen azotom 3 puta) je prebačen pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana etrom (2 X).
Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 5% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (170 mg, 22%).
[1739] U rastvor terc-butil((3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopentil)oksi)dimetilsilana (170 mg, 0.24 mmol) u 20 mL THF, dodat je rastvor TBAF (1.0 M u THF, 2.4 mL, 2.4 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. TLC je pokazala da je reakcija završena. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 20% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (80 mg, 57%).
Hemijska formula: C46H83NO2
Molekulska težina: 682.18
[1740] Na 0 °C, piridin (0.1 mL) i rastvor anhidrida propilfosfonske kiseline (50 tež.% u EtOAc, 0.51 mmol) su dodati u rastvor hidrohlorida 3-(dimetilamino)propanske kiseline (63 mg, 0.41 mmol) u 3 mL DMF. Nakon mešanja od 10 min, dodat je rastvor 3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopentan-1-ola (80 mg, 0.14 mmol) u 2 mL DMF i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. MS i TLC je pokazala formiranje proizvoda. Zasićeni rastvor natrijum bikarbonata dodat je da bi ugasio reakciju, i smeša je zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski sloj je opran vodom i slanim rastvorom. Nakon sušenja nad natrijum sulfatom i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 100% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod 3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopentil 3-(dimetilamino)propanoat kao bezbojno ulje (59 mg, 62%).
[1741]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.28-5.42 (m, 8 H), 5.12-5.17 (m, 1 H), 2.76 (t, 4 H, J = 6.0 Hz), 2.59 (t, 2 H, J= 6.9 Hz), 2.42 (t, 2 H, J= 6.9 Hz), 2.23 (s, 6 H), 2.04 (q, 8 H, J= 6.9 Hz), 1.75-2.00 (m, 2 H), 1.38-1.72 (m, 5 H), 1.14-1.39 (m, 39 H), 0.88 (t, 6 H, J = 6.9 Hz).
[1742] APCI: m/z = 682.6 [M+H]<+>
DT. Jedinjenje 21-4: 3,3-Di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopentil 4-(dimetilamino)butanoat
[1743]
Hemijska formula: C47H85NO2
Molekulska težina: 696.20
[1744] Na 0 °C, piridin (0.6 mL) i rastvor anhidrida propilfosfonske kiseline (50 tež.% u DMF, 2.4 mL, 4.16 mmol) su dodati u rastvor hidrohlorida 4-(dimetilamino)butanske kiseline (565 mg, 3.37 mmol) u 3 mL DMF. Nakon mešanja od 10 min, dodat je rastvor 3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopentan-1-ola (0.65 g, 1.115 mmol) u 1 mL DMF i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. MS i TLC je pokazala formiranje proizvoda. Zasićeni rastvor natrijum bikarbonata dodat je da bi ugasio reakciju, i smeša je zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski sloj je opran vodom i slanim rastvorom. Nakon sušenja nad natrijum sulfatom i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 100% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod 3,3-di((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dien-1-il)ciklopentil 4-(dimetilamino)butanoat kao bezbojno ulje (556 mg, 72%).
[1745]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.28-5.42 (m, 8 H), 5.06-5.15 (m, 1 H), 2.76 (t, 4 H, J = 6.0 Hz), 2.29 (t, 4 H, J = 7.4 Hz), 2.23 (s, 6 H), 2.04 (q, 8 H, J= 6.6 Hz), 1.14-1.99 (m, 48 H), 0.88 (t, 6 H, J = 6.9 Hz).
[1746] APCI: m/z =696.6 [M H]<+>.
DU. Jedinjenje 21-5: 3,3-Di((10Z,13Z)-nonadeka-10,13-dien-1-il)ciklopentil 3-(dimetilamino)propanoat
[1747]
[1748] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (10.03 g, 89.4 mmol) je dodat u rastvor (9-(benziloksi)nonil)trifenilfosfonijum jodida (43.0 g, 69.0 mmol) u 160 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Nakon 1 h, rastvor 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-dikarbaldehida (7.70 g, 29.8 mmol) u 60 mL THF (pročišćen azotom 3 puta) prebačen je pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana etrom (2 X). Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom i osušen nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 6% etar/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (6.52 g, 32%).
[1749] Smeša ((3,3-bis((Z)-10-(benziloksi)dec-1-en-1-il)ciklopentil)oksi)(terc-butil)dimetilsilana (6.52 g, 9.86 mmol) i paladijuma na ugljeniku (10%, 1.30 g) u 400 mL EtOAc pročišćena je azotom i zatim vodonikom, a zatim mešana pod vodonikom preko noći. TLC i MS je pokazala da je reakcija završena. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i oprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan, i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 80% EtOAc/heksani) da bi se dobio proizvod kao polu čvrsta supstanca (4.60 g, 96%).
[1750] Na 0 °C, rastvor 10,10'-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-diil)bis(dekan-1-ola) (4.60 g, 9.49 mmol) u 100 mL dihlorometana je polako dodat u rastvor Dess-Martinovog perjodinana (11.276 g, 26.6 mmol) u 50 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na ovoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom, a zatim su dodati 10% rastvor Na2S2O3i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Posle ekstrakcije dihlorometanom (2 X), kombinovani organski sloj je opran zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 80% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (1.20 g, 26%).
[1751] Priprema (9-(benziloksi)nonil)trifenilfosfonijum jodida:
[1752] Na 0 °C, rastvor nonan-1,9-diola (96.16 g, 0.60 mol) u 100 mL DMF je polako dodat u suspenziju NaH (24.0 g, 0.60 mol) u 800 mL DMF. Nakon mešanja od 1 h, polako je dodat rastvor benzil bromida (71.4 mL, 0.60 mol) u 200 mL DMF. Nakon dodavanja, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. TLC je pokazala je pokazala gotovo potpunu potrošnju. Reakciona smeša je izlivena na led, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X). Kombinovani organski sloj je opran vodom i slanim rastvorom, a zatim osušen nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 100% EtOAc/heksana zatim 0 do 5% MeOH/dihlorometana) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (74.4 g, 50%).
[1753] Na 0 °C, rastvor trifenilfosfina (30.65 g, 0.117 mol) u 100 mL dihlorometana je polako dodat u rastvor 9-(benziloksi)nonan-1-ola (23.0 g, 0.097 mol), imidazola (13.93 g, 0.204 mol) i joda (34.60 g, 0.136 mol) u 200 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša ostavljena na sobnoj temperaturi preko noći. Nakon filtracije, filtrat je koncentrovan i ostatak je triturisan heksanima. Rastvor je filtriran kroz čep od silika gela i eluiran 10% etrom u heksanima čime je dobijen proizvod kao zamućena tečnost (32.2 g, 95%).
[1754] Rastvor (((9-jodononil)oksi)metil)benzena (32.2 g, 0.093 mol) i trifenilfosfina (48.93 g, 0.186 mol) u acetonitrilu (500 mL) je refluktovan preko noći. Posle koncentrovanja do suva, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% MeOH/CH2Cl2) čime je dobijen proizvod kao žuto ulje (44.4 g, 78%).
[1755] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (587 mg, 5.23 mmol) je dodat u rastvor (Z)-non-3-en-1-iltrifenilfosfonijum jodida (3.69 g, 7.17 mmol) u 70 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Posle 1 h, rastvor 10,10'-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklopentan-1,1-diil)bis(dekanala) 9' (838 mg, 1.65 mmol) u 30 mL THF (pročišćen azotom 3 puta) prebačen je pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana etrom (2 X). Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom i osušen nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 5% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (926 mg, 77%).
[1756] U rastvor terc-butil((3,3-di((10Z,13Z)-nonadeka-10,13-dien-1-il)ciklopentil)oksi) dimetilsilana (926 mg, 1.27 mmol) u 100 mL THF, dodat je rastvor TBAF (1.0 M u THF, 13.3 mL, 13.3 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. TLC je pokazala da je reakcija završena. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 20% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (830 mg, Kvant.).
Hemijska formula: C48H87NO2
Molekulska težina: 710.23
[1757] Na 0 °C, piridin (0.35 mL) i rastvor anhidrida propilfosfonske kiseline (50 tež.% u EtOAc, 0.7 mL, 1.21 mmol) su dodati u rastvor hidrohlorida 3-(dimetilamino)propanske kiseline (151 mg, 0.98 mmol) u 6 mL DMF. Nakon mešanja od 10 min, dodat je rastvor 3,3-di((10Z,13Z)-nonadeka-10,13-dien-1-il)ciklopentan-1-ola (200 mg, 0.33 mmol) u 4 mL DMF i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. MS i TLC je pokazala formiranje proizvoda. Zasićeni rastvor natrijum bikarbonata dodat je da ugasi reakciju, i smeša je zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i slanim rastvorom. Nakon sušenja nad natrijum sulfatom i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 100% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod 3,3-di((10Z,13Z)-nonadeka-10,13-dien-1-il)ciklopentil 3-(dimetilamino) propanoat kao bezbojno ulje (135 mg, 58%).
[1758]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.28-5.42 (m, 8 H), 5.10-5.17 (m, 1 H), 2.76 (t, 4 H, J = 6.1 Hz), 2.59 (t, 2 H, J= 6.9 Hz), 2.42 (t, 2 H, J= 6.9 Hz), 2.23 (s, 6 H), 2.04 (q, 8 H, J= 6.9 Hz), 1.75-2.00 (m, 2 H), 1.38-1.72 (m, 5 H), 1.14-1.39 (m, 43 H), 0.88 (t, 6 H, J = 6.9 Hz).
[1759] APCI: m/z = 710.7 [M H]<+>
DV. Jedinjenje 21-6: 1-(2,3-Di((8Z,11Z)-heptadeka-8,11-dien-1-il)ciklopropil)-N,N-dimetilmetanamin
[1760]
[1761] Na 0 °C, rastvor nonan-1,9-diola (96.16 g, 0.60 mol) u 100 mL DMF je polako dodat u suspenziju NaH (24.0 g, 0.60 mol) u 800 mL DMF. Nakon mešanja od 1 h, polako je dodat rastvor benzil bromida (71.4 mL, 0.60 mol) u 200 mL DMF. Nakon dodavanja, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. TLC je pokazala polazni materijal gotovo potpuno potrošen. Reakciona smeša je izlivena na led, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X). Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i slanim rastvorom, a zatim osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 100% EtOAc/heksana zatim 0 do 5% MeOH/dihlorometana) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (74.4 g, 50%).
[1762] Na 0 °C, rastvor trifenilfosfina (6.29 g, 24 mmol) u 100 mL dihlorometana je polako dodat u rastvor 9-(benziloksi)nonan-1-ola (5.0 g, 20 mmol), imidazola (2.9 g, 42 mmol) i joda (8.5 g, 33.6 mmol) u 100 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša ostavljena na sobnoj temperaturi preko noći. Posle koncentrovanja, ostatak je triturisan heksanima čime je dobijen proizvod kao zamućena tečnost (5.38 g, 75%).
[1763] Rastvor (((9-jodononil)oksi)metil)benzena (5.38 g, 14.9 mmol) i trifenilfosfina (7.8 g, 29.8 mmol) u acetonitrilu (100 mL) je refluktovan preko noći. Nakon koncentrovanja do suva, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% MeOH/CH2Cl2) čime je dobijen proizvod kao žuto ulje (8.5 g, 92%).
[1764] Na 0 °C, rastvor 9-(benziloksi)nonan-1-ola (5.0 g, 20 mmol) u 50 mL dihlorometana je polako dodat u suspenziju Dess-Martinovog perjodinana (12.5 g, 29.5 mmol) u 100 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Nakon gašenja zasićenim natrijum bikarbonatom, smeša je ekstrahovana dihlorometanom (2 X). Kombinovani organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom i koncentrovan da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (4.0 g, 80%).
[1765] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (1.54 g, 13.7 mmol) je dodat u suspenziju (9-(benziloksi)nonil)trifenilfosfonijum jodida (8.5 g, 13.6 mmol) u 150 mL THF. Nakon 1 h, rastvor 9-(benziloksi)nonanala (3.0 g, 12 mmol) u 50 mL THF ukapan je u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom 4 h. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana heksanima (2 X). Kombinovani organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 100% dihlorometan/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (3.5 g, 63%).
[1766] U refluktujući rastvor (Z)-1,18-bis(benziloksi)oktadec-9-ena (3.5 g, 7.5 mmol) u 200 mL dihlorometana, dodat je rastvor Cu(acac)2 (200 mg, 0.76 mmol) u 40 mL dihlorometana. Zatim je etil diazoacetat (sadrži 13% dihlorometana, 9 × 1.3 mL) dodavan na svakih 30 min. MS je pokazala formiranje proizvoda. Reakcija je ugašena dodatkom MeOH i mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Posle koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (2.23 g, 82% čistog proizvoda pomešanog sa acetatnim sporednim proizvodom).
[1767] Smeša etil 2,3-bis(8-(benziloksi)oktil)ciklopropan-l-karboksilata (2.23 g, 4.05 mmol) i paladijuma na ugljeniku (10 tež.%, 200 mg) u 200 mL EtOAc je mešana na sobnoj temperaturi pod balonom sa vodonikom tokom 4.5 h. MS i TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i oprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan čime je dobijen proizvod pomešan sa sporednim proizvodom, dietil sukcinatom (1.62 g, sadrži 0.55 ekvivalenata sporednog proizvoda,
[1768] Na 0 °C, rastvor etil 2,3-bis(8-hidroksioktil)ciklopropan-1-karboksilata (1.43 g, 4.03 mmol) u 100 mL dihlorometana je polako dodat u suspenziju Dess-Martinovog perjodinana (3.63 g, 8.5 mmol) u 150 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Nakon gašenja zasićenim natrijum bikarbonatom, smeša je ekstrahovana dihlorometanom (2 X). Kombinovani organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom i koncentrovan da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (1.2 g, 81%).
[1769] Na 0 °C, kalijum terc-butoksid (1.7 g, 15.1 mmol) je dodat u rastvor (Z)-non-3-en-1-iltrifenilfosfonijum jodida (5.8 g, 15.1 mmol) u 150 mL THF koji je pročišćen azotom 3 puta. Nakon 1 h, rastvor etil 2,3-bis(8-oksooktil)ciklopropan-1-karboksilata (1.2 g, 3.28 mmol) u 50 mL THF (pročišćen azotom 3 puta) prebačen je pomoću kanile u reakcionu smešu, a zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature preko noći. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom, a zatim ekstrahovana heksanima (2 X). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen pomoću ISCO (SiO2: 0 do 3% EtOAc/heksani) čime je dobijen proizvod kao bezbojno ulje (1.3 g, 68%).
[1770] Rastvor litijum aluminijum hidrida (2.0 M u THF, 1.7 mL, 3.35 mmol) je polako dodat u rastvor etil 2,3-di((8Z,11Z)-heptadeka-8,11-dien-1-il)ciklopropan-1-karboksilata (1.3 g, 2.23 mmol) u 150 mL THF, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 30 min. TLC je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je ugašena sporim dodavanjem Na2SO4·10H2O, a zatim je smeša filtrirana i oprana sa THF. Filtrat je koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% EtOAc/Heksani) da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (1.1 g, 91%).
[1771] Na 0 °C, rastvor (2,3-di((8Z,11Z)-heptadeka-8,11-dien-1-il)ciklopropil)metanola (1.1 g, 2.03 mmol) u 50 mL dihlorometana je polako dodat u suspenziju Dess-Martinovog perjodinana (1.30 g, 3.05 mmol) u 150 mL dihlorometana, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Nakon gašenja zasićenim natrijum bikarbonatom, smeša je ekstrahovana dihlorometanom (2 X). Kombinovani organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfatom i koncentrovani da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje (0.87 g, 79%).
Hemijska formula: C40H73N
Molekulska težina: 568.03
[1772] U rastvor 2,3-di((8Z,11Z)-heptadeka-8,11-dien-1-il)ciklopropan-1-karbaldehida (0.87 g, 1.61 mmol) u 200 mL THF, dodati su redom dimetilamin (2.0 M u THF, 1.61 mL, 3.22 mmol), natrijum triacetoksiborohidrid (682 mg, 3.22 mmol) i sirćetna kiselina (0.19 mL, 3.22 mmol), i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. MS je pokazala da je reakcija završena, i zasićeni natrijum bikarbonat je dodat da ugasi reakciju. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X), i kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije i koncentrovanja, ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (SiO2: 0 do 10% MeOH/dihlorometan) da bi se dobio proizvod 1-(2,3-di((8Z,11Z)-heptadeka-8,11-dien-1-il)ciklopropil)-N,N-dimetilmetanamin kao bezbojno ulje (620 mg, 65%).
[1773]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.27-5.42 (m, 8 H), 2.76 (t, 4 H, J = 6.0 Hz), 2.38 (bs, 8 H), 2.04 (q, 8 H, J = 6.6 Hz), 1.18-1.59 (m, 36 H), 0.88 (t, 6 H, J = 6.6 Hz), 0.52-0.58 (m, 2 H), 0.28-0.38 (m, 1 H).
[1774] APCI: m/z = 568.6 [M H]<+>.
Primer 2: Proizvodnja kompozicija nanočestica
Proizvodnja kompozicija nanočestica
[1775] Kako bi se ispitalo koje su kompozicije nanočestica bezbedne i efikasne za upotrebu u isporučivanju terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa u ćelije, pripremljen je i testiran niz formulacija. Specifično, optimizovani su konkretni elementi i njihovi odnosi u lipidnoj komponenti kompozicija nanočestica.
[1776] Nanočestice mogu da se pripreme postupcima mešanja dva toka fluida, od kojih jedan sadrži terapijski i/ili profilaktički agens, a drugi ima lipidne komponente, kao što su mikrofluidno mešanje i mešanje ubrizgavanjem sistemom T-spojnice.
[1777] Lipidne kompozicije se pripremaju tako što se kombinuje lipid prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), fosfolipid (kao što je DOPE ili DSPC, koji je moguće nabaviti od firme Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL), PEG lipid (kao što je 1,2-dimiristoil-sn-glicerol metoksipolietilen glikol, poznat i kao PEG-DMG, koji je moguće nabaviti od firme Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL), i strukturni lipid (kao što je holesterol, koji je moguće nabaviti od firme Sigma-Aldrich, Taufkirchen, Nemačka), pri koncentracijama od oko 50 mM u etanolu. Rastvori bi trebalo da se skladište na hladnom, na primer, na -20° C. Lipidi se kombinuju kako bi se dobili željeni molski odnosi (videti, na primer, tabelu 1) i razblažuju vodom i etanolom do finalne koncentracije lipida od između oko 5.5 mM i oko 25 mM.
[1778] Kompozicije nanočestica koje uključuju terapijski i/ili profilaktički agens i lipidnu komponentu pripremljene su kombinovanjem rastvora lipida sa rastvorom koji uključuje terapijski i/ili profilaktički agens sa težinskim odnosima lipidne komponente prema terapijskom i/ili profilaktičkom agensu između oko 5:1 i oko 50:1. Rastvor lipida se vrlo brzo ubrizgava pomoću NanoAssemblr sistema na bazi mikrofluida pri brzinama protoka između oko 10 ml/min i oko 18 ml/min u rastvor terapijskog i/ili profilaktičkog agensa, kako bi se proizvela suspenzija sa odnosom vode prema etanolu između oko 1:1 i oko 4:1.
[1779] Kod kompozicija nanočestica koje uključuju RNK, rastvori RNK u koncentracijama od 0.1 mg/ml u dejonizovanoj vodi razblažuju se u 50 mM natrijum citratnom puferu na pH između 3 i 4 kako bi se obrazovao stok rastvor.
[1780] Kompozicije nanočestica mogu da se obrade dijalizom kako bi se uklonio etanol i postigla zamena pufera. Formulacije se podvrgavaju dijalizi dva puta fosfatno puferisanim fiziološkim rastvorom (PBS), pH 7.4, sa zapreminama 200 puta većim od primarnog proizvoda pomoću kaseta Slide-A-Lyzer (Thermo Fisher Scientific Inc., Rockford, IL) sa graničnom vrednošću molekulske težine od 10 kD. Prva dijaliza se izvodi na sobnoj temperature tokom 3 časa. Formulacije se zatim podvrgavaju dijalizi preko noći na 4° C. Dobijena suspenzija nanočestica se filtrira kroz sterilne filtere od 0.2 µm (Sarstedt, Nümbrecht, Nemačka) u staklene bočice koje se zatvaraju jednokratnim uklonjivim zatvaračem. U principu se dobijaju rastvori kompozicija nanočestica od 0.01 mg/ml do 0.10 mg/ml.
[1781] Prethodno opisani postupak indukuje nano-precipitaciju i obrazovanje čestica. Alternativni postupci koji uključuju, ali nisu ograničeni na ubrizgavanje sistemom T-spojnice i direktno ubrizgavanje, mogu da se koriste kako bi se postigla ista nano-precipitacija.
Karakterizacija kompozicija nanočestica
[1782] Instrument Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments Ltd, Malvern, Worcestarshire, UK) može da se koristi za određivanje veličine čestica, indeksa polidisperznosti (PDI) i zeta potencijala kompozicija nanočestica u 1×PBS kod određivanje veličine čestica i 15 mM PBS kod određivanja zeta potencijala.
[1783] Ultraljubičasta-vidljiva spektroskopija može da se koristi za određivanje koncentracije terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., RNK) u kompozicijama nanočestica. 100 µL razblažene formulacije u 1×PBS se dodaje u 900 µL smeše metanola i hloroforma u odnosu 4:1 (zapr./zapr.). Nakon mešanja se snima apsorpcioni spektar rastvora, na primer, između 230 nm i 330 nm na spektrofotometru DU 800 (Beckman Coulter, Beckman Coulter, Inc., Brea, CA). Koncentracija terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u kompoziciji nanočestica može da se izračuna na osnovu ekstinkcionog koeficijenta terapijskog i/ili profilaktičkog agensa koji se koristi u kompoziciji i razlike između apsorbancije na talasnoj dužini od, na primer, 260 nm i osnovne vrednosti na talasnoj dužini od, na primer, 330 nm.
[1784] Za kompozicije nanočestica koje uključuju RNK, test QUANT-IT™ RIBOGREEN<®>RNK assay (Invitrogen Corporation Carlsbad, CA) može da se koristi da bi se ocenila inkapsulacija RNK u kompoziciji nanočestica. Uzorci se razblaže do koncentracije od približno 5 µg/mL u rastvoru TE pufera (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5).50 µL razblaženih uzoraka se prebaci u bunarčiće polistirenske ploče sa 96 bunarčića i u bunarčiće se doda ili 50 µL TE pufera ili 50 µL 2% Triton X-100 rastvora. Ploča se inkubira na temperaturi od 37° C tokom 15 minuta. Reagens RIBOGREEN<®>reagent se razblaži 1:100 u TE puferu, i 100 µL ovog rastvora se doda u svaki bunarčić. Intenzitet fluorescencije može da se meri pomoću fluorescentnog čitača ploča (Wallac Victor 1420 Multilablel Counter; Perkin Elmer, Waltham, MA) na ekscitacionoj talasnoj dužini od, na primer, oko 480 nm i emisionoj talasnoj dužini od, na primer, oko 520 nm. Vrednosti fluorescencije blanka za reagens oduzimaju se od vrednosti za svaki od uzoraka i procenat slobodne RNK se određuje tako što se intenzitet fluorescencije za intaktni uzorak (kome se ne dodaje Triton X-100) podeli sa vrednošću fluorescencije degradiranog uzorka (nastaje kada se doda Triton X-100).
In vivo ispitivanje formulacija
[1785] Da bi se pratilo koliko efikasno različite kompozicije nanočestica isporučuju terapijske i/ili profilaktičke agense ciljanim ćelijama, različite kompozicije nanočestica koje uključuju određeni terapijski i/ili profilaktički agens (na prajmer, modifikovana ili prirodna RNK kao što je iRNK) se pripremaju i primenjuju na populacije glodara. Miševima se intravenski, intramuskularno, intraarterijski, ili intratumorski daje jedna doza koja uključuje kompoziciju nanočestica sa formulacijom kao što je ona data u tabeli 1. U nekim slučajevima, miševi mogu da inhaliraju doze. Veličine doza mogu da variraju od 0.001 mg/kg do 10 mg/kg, gde 10 mg/kg opisuje dozu koja uključuje 10 mg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u kompoziciji nanočestica na svakih 1 kg telesne mase miša. Takođe može da se upotrebi kontrolna kompozicija koja uključuje PBS.
[1786] Nakon davanja kompozicija nanočestica miševima, profili isporuke doze, odgovori na dozu i toksičnost određenih formulacija i njihovih doza mogu da se mere enzimskim imunosorbentnim testovima (ELISA), bioluminiscentnim snimanjem ili drugim metodama. Za kompozicije nanočestica koje uključuju iRNK, vremenski tokovi ekspresije proteina takođe mogu da se procene. Uzorci prikupljeni od glodara za procenu mogu da uključuju krv, serume i tkivo (na primer, mišićno tkivo sa mesta intramuskularne injekcije i unutrašnje tkivo); prikupljanje uzoraka može da uključuje žrtvovanje životinja.
[1787] Kompozicije nanočestica koje uključuju iRNK su korisne u proceni efikasnosti i korisnosti različitih formulacija za isporuku terapijskih i/ili profilaktičkih agenasa. Viši nivoi ekspresije proteina izazvani primenom kompozicije koja uključuje iRNK će biti indikativni za veću efikasnost translacije iRNK i/ili isporuku iRNK putem kompozicije nanočestica. Kako se smatra da komponente koje nisu RNK ne utiču na same translacione mašinerije, viši nivo ekspresije proteina verovatno ukazuje na veću efikasnost isporuke terapeutskog i/ili profilaktičkog agensa datom kompozicijom nanočestica u odnosu na druge kompozicije nanočestica ili u odnosu njihovo odsustvo.
Primer 3: Primeri formulacija
[1788] Kompozicija nanočestica koje uključuju terapijski i/ili profilaktički agens mogu da se optimizuju na osnovu izbora jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), izbora dodatnih lipida, količine svakog lipida u lipidnoj komponenti, i težinskog odnosa lipidne komponente prema terapijskom i/ili profilaktičkom agensu, kao što je ovde opisano.
[1789] Izvedene su inicijalne studije kako bi se uporedila efikasnost isporučivanja kompozicija nanočestica koje uključuju različita jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I). Katjonski lipid MC3 je trenutno standard u oblasti. U skladu sa tim, standardna MC3 formulacija koja uključuje oko 50 mol% MC3, oko 10 mol% DSPC, oko 38.5 mol% holestarola i oko 1.5 mol% PEG-DMG korišćena je kao osnov u ovoj studiji. Kompozicije nanočestica koje uključuju DOPE ili DSPC kao fosfolipid, holesterol kao strukturni lipid, PEG-DMG kao PEG lipid, RNK, i jedinjenje prema jednoj od formula koje su ovde opisane, npr., odabrano od jedinjenja formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), pripremljene su prema primerima 1 i 2. Odnosi lipida bili su 40:20:38.5:1.5 mol% za ovde opisani lipid:DOPE:holesterol:PEG-DMG ili 50:10:38.5:1.5 mol% za ovde opisani lipid:DSPC:holesterol:PEG-DMG. RNK koja je korišćena bila je iRNK koja kodira G5 luciferazu (Luc) ili G5 hEPO. Tabele 1, 1b, 17-1, 19-1, 20-1 i 21-1 daju sažet pregled sadržaja i karakteristika formulacija.
[1790] Kao što je prikazano u tabelama 1 i 1a, kompozicije nanočestica koje uključuju jedinjenje 1 proizvele su najveće čestice među onima u tabelama 1 i 1a, dok su one koje uključuju jedinjenja 34 i 50 proizvele najmanje čestice među onima u tabelama 1 i 1da. Efikasnosti inkapsulacije među onima na tabelama 1 i 1a bile su najviše za kompozicije koje uključuju jedinjenja 36, 37, 40, i 41, a najniže za one koje uključuju jedinjenja 1 i 24.
Tabela 1. Karakteristike kompozicija nanočestica koje uključujući jedinjenja jedne od formula (I),
(Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III) i (IIIa).
Tabela 1b. Karakteristike kompozicija nanočestica koje uključujući jedinjenja jedne od formula (I),
(Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III) i (IIIa).
[1791] Kao što je prikazano u tabeli 17-1, jedinjenja 17-7 i 17-12 su proizvela najmanje čestice među onima u tabeli 17-1, dok su jedinjenja 17-2 i 17-10 proizvela najveće čestice među onima u tabeli 17-1. Efikasnosti inkapsulacije za jedinjenja 17-6 i 17-8 bile su uporedive sa onima za MC3. Jedinjenja 17-2 i 17-10 nisu inkapsulirala RNK sa velikom efikasnošću.
Tabela 17-1. Karakteristike kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (17-I).
[1792] Kao što je prikazano u tabeli 19-1, kompozicije koje uključuju jedinjenje 19-6 proizvodile su najveće čestice među onima u tabeli 19-1 sa najnižom efikasnošću inkapsulacije, dok su one koje uključuju jedinjenje 19-3 proizvodile najmanje čestice među onima u tabeli 19-1 sa najvišom efikasnošću inkapsulacije.
Tabela 19-1. Karakteristike kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (19-I) ili (19-II).
[1793] Kao što je prikazano u tabeli 20-1, kompozicije koje uključuju jedinjenje 20-12 proizvodile su najveće čestice među onima u tabeli 20-1, dok su kompozicije koje uključuju jedinjenja 20-8, 20-9, i 20-15 proizvodile najmanje čestice među onima u tabeli 20-1. Efikasnosti inkapsulacije za jedinjenja iz tabele 20-1 bile su najviše za kompozicije koje uključuju jedinjenje 20-19.
Tabela 20-1. Karakteristike kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (20-I).
[1794] Kao što je prikazano u tabeli 21-1, kompozicije koje uključuju jedinjenje 21-1 proizvodile su najveće čestice, među onima u tabeli 21-1, dok su one koje uključuju jedinjenje 21-2 proizvodile najmanje čestice među onima u tabeli 21-1. Efikasnost inkapsulacije za sve kompozicije iz tabele 21-1 bila je veća od 98%.
Tabela 21-1. Karakteristike kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (21-I).
Primer 4: Ekspresija Luc indukovana primerima formulacija
[1795] Efikasnost kompozicije nanočestica koje su prikazane u tabelama 1, 1a, 17-1, 19-1, 20-1 i 21-1 ocenjena je putem proučavanja bioluminescencije. Formulacije su primenjene intravenski kod miševa (n = 6) u dozi od 0.5 mg/kg (mpk) i bioluminescencija je merena u vremenskim tačkama na 3, 6, i 24 časa. Standardna MC3 formulacija i PBS kontrola su ocenjivane u cilju poređenja.
[1796] Kao što je jasno iz tabele 2, ukupni fluks za kompozicije koje su u njoj prikazane bio je uopšteno uporediv na 3 i 6 časova. Ukupni fluks posle 24 časa bio je uglavnom niži od fluksa u ranijim vremenskim tačkama. Među kompozicijama iz tabele 2, kompozicije koje uključuju jedinjenja 18, 23, i 30 ispoljile su najviši fluks posle 3 časa. Od kompozicija iz tabele 2, kompozicije koje uključuju jedinjenja 36 i 37 ispoljile su najniži fluks posle 24 časa. Uopšteno, ovi rezultati sugerišu da ovde opisana jedinjenja mogu da budu korisna kada se primenjuju za transfekciju.
Tabela 2. Ekspresija luciferaze indukovana primenom kompozicija nanočestica koje uključuju
jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III) i (IIIa).
[1797] Kao što se vidi iz tabele 17-2, kompozicije nanočestica koje uključuju MC3 ispoljile su najviši ukupni fluks u tabeli 17-2, dok su one koje uključuju jedinjenja 17-4 i 17-8 ispoljile suštinski viši fluks od kompozicija koje uključuju jedinjenja 17-2, 17-3, i 17-7. Ukupni fluks na 6 časova bio je viši od onog na 3 časa za neke kompozicije iz tabele 17-2. Uglavnom, za kompozicije iz tabele 17-2, ukupni fluks na 24 časa bio je niži nego ukupni fluks izmeren na 3 ili 6 časova.
Tabela 17-2. Ekspresija luciferaze indukovana primenom kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (17-I).
[1798] Kao što se vidi iz tabele 19-2, kompozicije koje uključuju MC3 indukovale su najvišu ekspresiju od kompozicija iz tabele 19-2 u svakoj vremenskoj tački. Kompozicije koje uključuju jedinjenja 19-5 i 19-6 proizvodile su sledeći najviši fluks iz tabele 19-2 u svakoj vremenskoj tački, dok su one koje uključuju jedinjenje 19-2 proizvodile najniži ukupni fluks iz tabele 19-2 u svakoj vremenskoj tački.
Tabela 19-2. Ekspresija luciferaze indukovana primenom kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (19-I) ili (19-II).
[1799] Kao što se vidi u tabeli 20-2, fluks je za kompozicije iz tabele 20-2 bio uopšteno najviši 3 časa posle primene. Ukupni fluks za kompozicije iz tabele 20-2 bio je najviši posle 3 časa za kompozicije koje uključuju MC3, jedinjenje 20-6, ili jedinjenje 20-7. Među kompozicijama iz tabele 20-2, ekspresija je 24 časa posle primene bila najniža za kompozicije koje uključuju jedinjenja 20-1, 20-6, i 20-16.
Tabela 20-2. Ekspresija luciferaze indukovana primenom kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (20-I).
[1800] Kao što se vidi u tabeli 21-2, kompozicije koje uključuju MC3 proizvele su najvišu ekspresiju luciferaze među kompozicijama iz tabele 21-2 u svim vremenskim tačkama, dok, među kompozicijama iz tabele 21-2, one koje uključuju jedinjenje 21-2 su pokazale najmanju ekspresiju na 3 i 6 časova. Svaka kompozicija iz tabele 21-2 je pokazala suštinsku ekspresiju. Fluks je po pravilu opadao tokom vremena. Ovi rezultati sugerišu da ovde opisana jedinjenja mogu da budu korisna kada se primenjuju za transfekciju.
Tabela 21-2. Ekspresija luciferaze indukovana primenom kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (21-I).
Primer 5: Ekspresija Luc koju indukuju primeri formulacija u različitim organima
[1801] Efikasnost kompozicija nanočestica koje su prikazane u tabelama 1, 1a, 17-1, 19-1, 20-1 i 21-1 dodatno je ocenjivana merenjem ekspresije modifikovane luciferaze u jetri, plućima, slezini i butnoj kosti nakon primene date kompozicije. Formulacije su primenjivane intravenski kod miševa (n = 3) u dozi od 0.5 mpk i bioluminescencija je merena nakon 6 sati. Standardna MC3 formulacija i PBS kontrola takođe su testirane.
[1802] Kao što se vidi u tabeli 3, ekspresija je bila najviša u jetri za sve formulacije iz tabele 3. Od kompozicija iz tabele 3, najviši ukupni fluks izmeren je za kompozicije koje uključuju jedinjenje 20. Ekspresija u plućima i slezini bila je uopšteno uporediva za jedinjenja iz tabele 3, dok je ekspresija u butnoj kosti, gde je mereno, bila je nešto niža.
Tabela 3. Ekspresija luciferaze u različitim organima 6 časova posle primene kompozicija
nanočestica koje uključuju jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III) i (IIIa).
[1803] Kao što se vidi u tabeli 17-3, ukupni fluks za kompozicije iz tabele 17-3 bio je generalno viši u jetri nego u drugim organima. Ukupni fluks u jetri za kompozicije nanočestica iz tabele 17-3 koje uključuju jedinjenja 17-5 i 17-8 bio je donekle uporediv sa onima koje uključuju MC3, koje su ispoljile najviši ukupni fluks među kompozicijama iz tabele 17-3 u svakom organu. Za kompozicije iz tabele 17-3, ukupni fluks u slezini bio je generalno viši od onog u plućima i bio je najviši za kompozicije koje uključuju jedinjenja 17-4, 17-5, i 17-8.
Tabela 17-3. Ekspresija luciferaze u različitim organima 6 časova posle primene kompozicija
nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (17-I).
[1804] Kao što se vidi u tabeli 19-3, ukupni fluks za kompozicije iz tabele 19-3 bio je najviši za kompozicije koje uključuju MC3. Za kompozicije iz tabele 19-3, ekspresija u jetri bila je viša od ekspresije u plućima i slezini za sva ispitivana jedinjenja iz tabele 19-3. Od kompozicija iz tabele 19-3, kompozicije koje uključuju jedinjenje 19-2 dala su najniži ukupni fluks u jetri.
Tabela 19-3. Ekspresija luciferaze u različitim organima 6 časova posle primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (19-I) ili (19-II).
[1805] Kao što se vidi u tabeli 20-3, ekspresija za prikazana jedinjenja bila je generalno najviša u jetri i najniža u plućima i butnoj kosti. Ukupni fluks za jedinjenja iz tabele 20-3 u jetri bio je najviši za kompozicije koje uključuju MC3 ili jedinjenje 20-7 i najniži za ona koja uključuju jedinjenje 20-16.
Tabela 20-3. Ekspresija luciferaze u različitim organima 6 časova posle primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (20-I).
[1806] Kao što se vidi u tabeli 21-3, ekspresija je bila najviša u jetri i najniža u plućima za sve kompozicije iz tabele 21-3. Od kompozicija iz tabele 21-3, kompozicije koje uključuju MC3 proizvodile su najvišu ekspresiju u svakom organu, dok su kompozicije koje uključuju jedinjenja 21-2 i 21-4 proizvodile najnižu ekspresiju u svakom organu.
Tabela 21-3. Ekspresija luciferaze u različitim organima 6 časova posle primene kompozicija
nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (21-I).
Primer 6: Proizvodnja citokina koju indukuju primeri formulacija
[1807] Unošenje stranog materijala u telo sisara izaziva urođeni imunski odgovor koji promoviše proizvodnju citokina. Takvi imunski odgovori na, na primer, kompozicije nanočestica koje uključuju terapijske i/ili profilaktičke agense, su nepoželjni. Indukcija određenih citokina se prema tome meri da bi se procenila efikasnost kompozicija nanočestica. Koncentracije različitih citokina kod miševa posle intravenske primene kompozicija nanočestica predstavljene u tabelama 1, 1a, 17-1, 19-1, 20-1 i 21-1 u dozi od 0.5 mpk merene su na 6 časova. Standardna formulacija MC3 i PBS kontrola su takođe testirane.
[1808] Kao što se vidi u tabeli 4, ekspresija IP-10 bila je niža od ekspresije IL-6 za kompozicije iz tabele 4. Od kompozicija iz tabele 4, kompozicije koje uključuju jedinjenje 13 indukovale su najvišu ekspresiju oba, i IL-6 i IP-10, dok su kompozicije koje uključuju jedinjenje 3 indukovale najnižu ekspresiju IL-6, a one koje uključuju jedinjenje 36 su indukovale najnižu ekspresiju IP-10.
Tabela 4. Indukcija citokina 6 časova posle primene kompozicija nanočestica koje uključuju
jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III) i (IIIa).
[1809] Kao što se vidi u tabeli 17-4, kompozicije nanočestica iz tabele 17-4 indukuju više nivoe IP-10 od nivoa IL-6. Od kompozicija nanočestica iz tabele 17-4, kompozicije koje uključuju MC3 i jedinjenje 17-4 indukovale su najviše nivoe IL-6 i IP-10, dok su one koje uključuju jedinjenja 17-2, 17-3, i 17-10 indukovale najniže nivoe IL-6, a kompozicije koje uključuju jedinjenja 17-2 i 17-3 indukovale su najniže nivoe IP-10.
Tabela 17-4. Indukcija citokina 6 časova posle primene kompozicija nanočestica koje uključuju
jedinjenja prema formuli (17-I).
J
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
M
[1810] Kao što se vidi u tabeli 19-4, od kompozicija nanočestica iz tabele 19-4, kompozicije koje uključuju jedinjenje 19-6 indukovale su najvišu ekspresiju IL-6, dok su one koje uključuju jedinjenje 19-3 indukovale najnižu ekspresiju IL-6. Od kompozicija nanočestica iz tabele 19-4, kompozicije koje uključuju jedinjenja 19- 4 i 19-6 dale su najvišu ekspresiju IP-10, dok su one koje uključuju jedinjenje 19-1 indukovale najnižu ekspresiju IP-10.
Tabela 19-4. Indukcija citokina 6 časova posle primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (19-I) ili (19-II).
[1811] Kao što se vidi u tabeli 20-4, za kompozicije nanočestica iz tabele 20-4, indukcija IP-10 je bila generalno viša od indukcije IL-6. Za kompozicije nanočestica iz tabele 20-4, indukcija IP-10 bila je najviša za kompozicije koje uključuju jedinjenje 20-14 i najniža za kompozicije koje uključuju jedinjenje 20-6. Indukcija IL-6 bila je najviša za kompozicije koje uključuju jedinjenje 20-10 i najniža za kompozicije koje uključuju jedinjenje 20-6 za kompozicije nanočestica iz tabele 20-4.
Tabela 20-4. Indukcija citokina 6 časova posle primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (20-I).
[1812] Kao što se vidi u tabeli 21-4, indukcija IP-10 prikazanim kompozicijama bila je suštinski viša od indukcije IL-6.
Tabela 20-4. Indukcija citokina 6 časova posle primene kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (21-I).
Primer 7: Ekspresija hEPO indukovana primerima formulacija
[1813] Formulacije su pripremljene prema tabeli 5 i uključivale su iRNK koja kodira hEPO.
Tabela 5. Karakteristike kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III) i (IIIa).
n.d.=nije određeno
[1814] Formulacije su primenjene intravenski kod pacova (n=3 ili 6) u dozi od 0.2 mg/kg ili 0.5 mg/kg (mpk) i nivoi hEPO su mereni u vremenskim tačkama na 3, 6, i 24 časa. U vremenskoj tački posle 48 časova, jetre i slezine su sakupljene i zamrznute. Kao što se vidi u tabeli 6, kompozicije koje uključuju MC3 dale su najvišu ekspresiju hEPO u svakoj vremenskoj tački, dok su kompozicije koje uključuju jedinjenje 16 dale najnižu ekspresiju hEPO u svakoj vremenskoj tački.
Tabela 6. Ekspresija hEPO indukovana primenom kompozicija nanočestica koje uključuju jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III) i (IIIa).
[1815] Kao što je prikazano u tabeli 7a, ekspresija hEPO kod miševa bila je suštinski viša za kompozicije koje uključuju jedinjenje 12 od onih koje uključuju MC3. Nasuprot tome, ekspresija hEPO kod pacova indukovana primenom kompozicije nanočestica koja uključuje jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), i (IIIa) bila je suštinski niža od one izmerene za MC3. Ekspresija Luc kod miševa bila je nekoliko puta viša za jedinjenje 23 nego za MC3, ali značajno niža za jedinjenja 12 i 14. Tabela 7b prikazuje ekspresije Luc kod CD-1 miševa nasuprot LDLr-/- miševima. Tabela 7c i 7d prikazuju dodatne podatke o ekspresiji proteina i klirensu za kompozicije sa različitim ovde opisanim jedinjenjima u poređenju sa MC3. Tabela 7e prikazuje podatke o ekspresiji hEPO kod CD-1 miševa u dozi od 0.5 mpk. Slični rezultati su postignuti sa različitim sojevima miševa, npr. himernim miševima sa humanizovanim jetrama (PXB) ili imunodeficijentnim miševima (SCID).
Tabela 7a. Poređenje ekspresije indukovane primenom kompozicija nanočestica koje uključuju MC3 ili jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), i (IIIa).
n.d.=nije određeno
Tabela 7b. Poređenje ekspresije Luc indukovane primenom kompozicija nanočestica koje uključuju MC3 ili jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), i (IIIa) kod CD-1 miševa i LDLr-/- miševa.
Tabela 7c. Poređenje ekspresije indukovane primenom kompozicija nanočestica koje uključuju MC3 ili jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), i (IIIa).
doze
Tabela 7d. Poređenje ekspresije hEPO kod S.D. pacova indukovane primenom kompozicija nanočestica koje uključuju MC3 ili jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II),
(IIa), (III), i (IIIa).
Tabela 7e. Poređenje ekspresije hEPO kod CD-1 miševa indukovane primenom kompozicija nanočestica koje uključuju MC3 ili jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II),
(IIa), (III), i (IIIa) u dozi od 0.5 mpk.
[1816] Količina lipida u jetri i slezini 48 časova posle primene kompozicije nanočestica je takođe merena. Kao što je prikazano u tabeli 8, manje od 6% doza koje uključuju jedinjenja 14, 15, i 16 preostalo je u jetri posle 48 časova. Nasuprot tome, približno 60% doza koje uključuju MC3 ili jedinjenje 22 preostalo je u jetri posle 48 časova. Manje od 3% doze preostalo je u slezini za svaku ispitivanu kompoziciju.
Tabela 8. Nivoi lipida u jetri i slezini nakon primene kompozicija nanočestica koje uključuju MC3 ili jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), i (IIIa).
Primer 8: Optimizacija odnosa lipid:terapijski agens
[1817] Relativne količine lipidne komponente i terapijskog i/ili profilaktičkog agensa u kompoziciji nanočestica mogu da se optimizuju u skladu sa razmatranjima efikasnosti i podnošljivosti. Za kompozicije koje uključujući RNK kao terapijski i/ili profilaktički agens, odnos N:P može da služi kao korisno merilo.
[1818] Budući da odnos N:P u kompoziciji nanočestica kontroliše i ekspresiju i podnošljivost, poželjne su kompozicije nanočestica sa niskim odnosima N:P i snažnom ekspresijom. Odnosi N:P variraju u skladu sa odnosom lipida prema RNK u kompoziciji nanočestica. Dakle, težinski odnos ukupnog lipida prema RNK varira između10:1, 15:1, 20:1, 32:1, 40:1, 50:1, i 60:1 za lipidnu formulaciju koja uključuje oko 50 mol% jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I), oko 10 mol% fosfolipida (npr. DOPE ili DSPC), oko 38.5 mol% strukturnog lipida (npr. holesterol), i oko 1.5 mol% PEG lipida (npr. PEG-DMG). Odnosi N:P su izračunati za svaku kompoziciju nanočestica pod pretpostavkom da je jedan atom azota protonovan. Takođe se meri efikasnost inkapsulacije (EE), veličina i indeks polidisperznosti svake kompozicije.
[1819] U principu, kompozicije sa većim odnosima ukupni lipid:RNK daju manje čestice sa većom efikasnošću inkapsulacije, a obe karakteristike su poželjne. Međutim, odnos N:P za takve formulacije u principu prelazi 4. Trenutni standardi u tehnici, kao što je formulacija MC3 koja je gore opisana, imaju odnos N:P od 5.67. Dakle, treba postići ravnotežu između N:P odnosa, veličine i efikasnosti inkapsulacije.
[1820] Da bi se istražila efikasnost kompozicija nanočestica sa različitim odnosima N:P, ispituje se ekspresija luciferaze (Luc) ili humanog eritropoetina (hEPO) kod miševa nakon niske (0.05 mg/kg) ili visoke (0.5 mg/kg) doze intravenski primenjenih kompozicija nanočestica. Koncentracija eksprimirane Luc ili hEPO se meri 3, 6 i/ili 24 časa nakon primene.
Primer 9: Optimizacija sadržaja kompozicije koja sadrži jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I)
[1821] Budući da su manje čestice sa većim efikasnostima inkapsulacije u principu poželjne, relativne količine različitih elemenata u lipidnim komponentama kompozicija nanočestica se optimizuju u skladu sa ovim parametrima.
[1822] Jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) je odabrano za optimizaciju. Relativna količina jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) se varira između 30 mol% i 60 mol% u kompozicijama koje uključuju DOPE ili DSPC kao fosfolipide kako bi se odredila optimalna količina jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) u formulacijama. Formulacije se pripremaju primenom standardizovanog postupka sa odnosom vode prema etanolu u rastvoru lipidiRNK od 3:1 i brzini ubrizgavanja lipidnog rastvora u rastvor iRNK od 12 mL/min na sistemu na bazi mikrofluida NanoAssemblr. Ovaj postupak indukuje nano-precipitaciju i obrazovanje čestica. Alternativni postupci koji uključuju, ali bez ograničenja, ubrizgavanje sistemom T-spojnice ili direktno ubrizgavanje, mogu takođe da se upotrebe za postizanje iste nano-precipitacije.
[1823] U principu su poželjne formulacije koje proizvode najmanje čestice sa najvećom efikasnošću inkapsulacije, međutim, čestice većih ili manjih dimenzija mogu da budu poželjne na osnovu date primene (npr., na osnovu veličine fenestracije ciljnog organa). Kompozicije se takođe ocenjuju prema nivoima ekspresije Luc ili hEPO i citokinskim profilima.
Primer 10: Optimizacija fosfolipida
[1824] Relativna količina fosfolipida u lipidnoj komponenti kompozicije nanočestica se varira kako bi se formulacija dodatno optimizovala. Jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) je odabrano za upotrebu u kompoziciji nanočestica, a DOPE i DSPC su odabrani kao fosfolipidi. Dodatni fosfolipidi mogu takođe da se ocenjuju. Kompozicije nanočestica se pripremaju sa relativnim sadržajem fosfolipida koji varira između 0 mol% i 30 mol%. Kompozicije se ocenjuju prema veličini, efikasnosti inkapsulacije, nivoima ekspresije Luc ili hEPO i citokinskim profilima.
Primer 11: Optimizacija strukturnog lipida
[1825] Relativna količina strukturnog lipida u lipidnoj komponenti kompozicije nanočestica se varira kako bi se formulacija dodatno optimizovala. Jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-1), (19-II), (20-I) i (21-I) je odabrano za upotrebu u kompoziciji nanočestica, a holesterol je odabran kao strukturni lipid. Dodatni strukturni lipidi mogu takođe da se ocenjuju. Kompozicije nanočestica se pripremaju sa relativnim sadržajem strukturnog lipida koji varira između 18.5 mol% i 48.5 mol%. Kompozicije se ocenjuju prema veličini, efikasnosti inkapsulacije, nivoima ekspresije Luc ili hEPO i citokinskim profilima.
Primer 12: Optimizacija PEG lipida
[1826] Relativna količina PEG lipida u lipidnoj komponenti kompozicije nanočestica se varira kako bi se formulacija dodatno optimizovala. Jedinjenje prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6), (Ib), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I) je odabrano za upotrebu u kompoziciji nanočestica, a PEG-DMG je odabran kao PEG lipid. Dodatni PEG lipidi mogu takođe da se ocenjuju. Kompozicije nanočestica se pripremaju sa relativnim sadržajem PEG lipida koji varira između 0 mol% i 10 mol%. Kompozicije se ocenjuju prema veličini, efikasnosti inkapsulacije, nivoima ekspresije Luc ili hEPO i citokinskim profilima.
[1827] Primeri formulacija koje su korisne u optimizaciji formulacija kompozicija nanočestica prikazani su u tabeli 9.
Tabela 9. Primeri formulacija koje uključuju jedinjenja prema jednoj od formula (I), (Ia1)-(Ia6),
(Ib), (II), (Ila), (III), (IIIa), (IV), (17-I), (19-I), (19-II), (20-I) i (21-I).
Primer 13: Optimizacija veličine čestica
[1828] Veličine fenestracija za različite telesne organe često variraju; na primer, poznato je da bubreg ima manju veličinu fenestracije od jetre. Prema tome, ciljna isporuka terapijskog i/ili profilaktičkog agensa (npr., specifična isporuka) u određeni organ ili grupu organa može da zahteva primenu kompozicija nanočestica različitih veličina čestica. Kako bi se ispitao ovaj efekat, pripremljene su kompozicije nanočestica sa formulacijama kao što su one uključene u tabelu 9 sa raznim veličinama čestica upotrebom instrumenta Nanoassemblr. Kompozicije nanočestica uključuju RNK koja kodira Luc. Svaka kompozicija nanočestica sa drugačijom veličinom čestica je zatim primenjena na miševima kako bi se ocenio efekat veličine čestica na selektivnost isporuke. Ekspresija Luc u dva ili više organa ili grupe organa može da se meri upotrebom bioluminescencije za procenu relativne ekspresije u svakom organu.
Primer 14: Primena nakon predtretmana
[1829] Primena kompozicija nanočestica na subjekte može dovesti do upale, reakcija povezanih sa infuzijom i drugih neželjenih efekata koji ukazuju na nisku podnošljivost. Ovi efekti se mogu pripisati neželjenoj imunoaktivnosti.
[1830] U cilju suzbijanja negativnih efekata, kompozicije nanočestica se primenjuju kod subjekata istovremeno sa jednom ili više supstanci (npr., ko-lekovi ili dodatni terapijski i/ili profilaktički agensi). Potencijalno korisni dodatni terapijski i/ili profilaktički agensi uključuju steroide (npr., kortikosteroide), antihistaminike, blokatore H1 receptora, blokatore H2 receptora, antiinflamatorna jedinjenja, statine, inhibitore BTK, agoniste S1P1, modulatore glukokortikoidnog receptora (GRM), i estradiole. Primati izuzev ljudi se prethodno tretiraju jednim ili većim brojem dodatnih terapijskih agenasa odabranih od deksametazona i acetaminofena. Dodatni terapijski agens se primenjuje ili 24 časa, 1 čas, ili i 24 časa i 1 čas pre primena kompozicije nanočestica. Protokol uzorkovanja je sažet u tabeli 10. Profili citokina, zapaljenje i drugi parametri su mereni i upoređeni kako bi se procenila efikasnost predtretmana.
Tabela 10. Protokol uzorkovanja za studiju predtretmana.
[1831] Na primer, koristan terapijski tretman može da uključuje primenu dodatnog terapijskog i/ili profilaktičkog agensa i dan pre i na dan (jedan čas pre) davanja kompozicije nanočestica u nivou doze od 1.3 mpk. Dodatni terapijski i/ili profilaktički agensi mogu da budu formulisani za isporuku brojnim različitim putevima. Na primer, deksametazon može da bude isporučen oralno. Uglavnom, dodatni terapijski i/ili profilaktički agensi se primenjuju u klinički odobrenim ili tipičnim nivoima doze.
Primer 15: Primena kod primata izuzev ljudi
[1832] Podnošljivost i efikasnost kompozicija nanočestica za primate izuzev ljudi procenjeni su kod majmuna Cinomolgus. Majmunima je davana optimizovana kompozicija nanočestica koja uključuje iRNK koja kodira hEPO jednom nedeljno tokom četiri nedelje. Nivoi proteina hEPO, iRNK, i profili citokina su mereni korišćenjem tehnika zasnovanih na ELISA testu pre, i 2, 6, 12, 24, 48, 72, i 120 časova posle svake primene.
[1833] Efekti predtretmana na primate izuzev ljudi procenjeni su korišćenjem standardne MC3 formulacije koja uključuje iRNK koja kodira hEPO. Dizajn studije je sažet u tabeli 11. Mužjacima majmuna je kompozicija nanočestica davana jednom nedeljno tokom četiri nedelje pri brzini primene doze od 5 ml/kg/h i prethodno su tretirani ili metotreksatom ili deksametazonom.
Tabela 11. Protokol za studiju predtretmana kod majmuna Cinomolgus.
Primer 16: Postupci za lečenje bolesti i poremećaja
[1834] Za upotrebu je odabrana formulacija kompozicije nanočestica koja ima dobru podnošljivost (npr., koja izaziva nizak imunski odgovor) i efikasnost (npr., olakšava delotvornu i efikasnu inkapsulaciju terapijskog i/ili profilaktičkog agensa i isporuku agensa do željnog cilja). Terapijski i/ili profilaktički agens za formulaciju sa kompozicijom nanočestica je odabran za upotrebu na osnovu stanja subjekta. Na primer, iRNK koja kodira vaskularni faktor rasta endotela A (VEGF-A) može da se odabere kako bi se pospešila angiogeneza u cilju lečenja aterosklerotične renovaskularne bolesti, dok za lečenje metaboličke bolesti ili poremećaja kao što je dislipidemija, može da se odabere siRNA koja može da isključi apolipoprotein B (apoB).
[1835] Subjekat kome je potreban tretman, prethodno se tretira malom dozom deksametazona jedan ili više časova pre tretmana kompozicijom nanočestica. Kompozicija nanočestica se poželjno daje subjektu intravenski, međutim, prihvatljivi su i intramuskularni, intradermalni, subkutani, intranazalni, ili inhalacioni putevi primene. Tretman se primenjuje u dozi od oko 0.001 mg/kg do oko 10 mg/kg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa i ponavlja se dnevno, nedeljno, na dve nedelje, ili mesečno, prema potrebama subjekta.
Primer 17: Ekspresija indukovana primerima formulacija nakon intramuskularne primene
[1836] Pripremljeni su primeri formulacija koje uključuju i iRNK za modifikovanu luciferazu (Luc), kao i H10 iRNK i primenjeni intramuskularno na dan 1 i dan 21 i istovremeno su ocenjene rezultujuća ekspresija i imunogenost. Formulacije koje uključuju jedinjenja prema formuli (20-I) su pripremljene i primenjene u dozama od 0.001 i 0.01 mpk (npr., doze od 0.0005 mpk formulacije koja uključuje Luc iRNK i formulacije koja uključuje H10 iRNK ili doze od 0.005 mpk formulacije koja uključuje Luc iRNK i formulacije koja uključuje H10 iRNK). Kao što je prikazano u tabeli 20-4, ukupni fluks bio je viši nakon primene druge doze za svaku kompoziciju i na svakom nivou doze. Ukupni fluks bio je viši za viši nivo doze.
Tabela 12. Ukupni fluks (p/s) izmeren 6 časova posle intramuskularne primene kompozicija
nanočestica koje uključuju jedinjenja prema formuli (20-I).
[1837] Podrazumeva se da iako su jedinjenja i postupci predmetnog prikaza opisani u vezi sa njihovim detaljnim opisom, prethodni opis ima za cilj da ilustruje, a ne da ograniči obim predmetnog prikaza, koji je definisan obimom priloženih patentnih zahteva. Ostali aspekti, prednosti i izmene su u okviru patentnih zahteva koji slede.

Claims (28)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje koje ima formulu (I) ili formulu (Ib):
    ili njegova so ili izomer, pri čemu prsten A je
    t je 1 ili 2; A1i A2su svaki nezavisno odabrani od CH ili N; A6i A7su svaki nezavisno odabrani od CH ili N, gde najmanje jedan od A6i A7je N; Z je CH2ili je odsutan, pri čemu kada je Z CH2, svaka od isprekidanih linija (1) i (2) predstavlja jednostruku vezu; a kada je Z odsutan, isprekidane linije (1) i (2) su obe odsutne; R1, R2, R3, R4, i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila, C5-20alkenila, -R"MR', -R<∗>YR", -YR", i -R<∗>OR"; svaki M je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R')-, -N(R')C(O)-, -C(O)-, -C(S)-, -C(S)S-, -SC(S)-, -CH(OH)-, -P(O)(OR')O-, -S(O)2-, aril grupe, i heteroaril grupe; pri čemu kada jedinjenje ima formulu (Ib), tada M nije -OC(O)O-; X<1>, X<2>, i X<3>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od veze, -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-; X<4>i X<5>su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od -CH2-, -(CH2)2-, -CHR-, -CHY-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)-CH2-, -CH2-C(O)-, -C(O)O-CH2-, -OC(O)-CH2-, -CH2-C(O)O-, -CH2-OC(O)-, -CH(OH)-, -C(S)-, i -CH(SH)-; svaki Y je nezavisno C3-6karbocikl; svaki R<∗>je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila i C2-12alkenila; svaki R je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-3alkila i C3-6karbocikla; svaki R' je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C1-12alkila, C2-12alkenila, i H; i svaki R" je nezavisno odabran iz grupe koja se sastoji od C3-12alkila i C3-12alkenila; pri čemu kada jedinjenje ima formulu (I), i kada je prsten A
    tada i) najmanje jedan od X<1>, X<2>, i X<3>nije -CH2-; i/ili ii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'; kada jedinjenje ima formulu (I) i prsten A je
    i X<1>, X<2>, i X<3>su svaki -CH2, tada najmanje jedan od A<1>i A<2>je N, R1, R2, R3, R4i R5su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C6-20alkila i C6-20alkenila, i kada je prsten A
    tada i) R1, R2, R3, R4, i R5su isti, pri čemu R1nije C12alkil, C18alkil, ili C18alkenil; ii) samo jedan od R1, R2, R3, R4i R5je odabran od C6-20alkenila; iii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5ima drugačiji broj atoma ugljenika u odnosu na najmanje jedan drugi od R1, R2, R3, R4, i R5; iv) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkenila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkila; ili v) R1, R2, i R3su odabrani od C6-20alkila, i R4i R5su odabrani od C6-20alkenila.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde jedinjenje ima formulu (I) i: (i) prsten A je
    poželjno
    ili
    (ii) prsten A je
    poželjno
    ili
    (iii) prsten A je
    u kome je N atom povezan sa X<2>; ili (iv) prsten A je
    u kojima je N atom povezan sa X<2>.
  3. 3. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde (i) najmanje jedan od A1i A2u formuli (I) je N; (ii) u formuli (I) A1je N i A2je CH; (iii) u formuli (I) A1je CH i A2je N, i/ili u formuli (Ib) A6je CH i A7je N; (iv) u formuli (I) A1je N i A2je N, i/ili u formuli (Ib) A6je N i A7je N; ili (v) u formuli (I) svaki od A1i A2je CH.
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, sa bilo kojom od formula (Ia1)-(Ia6):
    ili
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-3, gde je jedinjenje odabrano od:
  6. i njihovih soli ili izomera. 6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-3, sa formulom (IIa)
  7. 7. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde su R1, R2, i R3: (i) nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od C5-20alkila i C5-20alkenila; (ii) isti; (iii) C6alkil; (iv) C9alkil; (v) C12alkil; (vi) C14alkil; (vii) C18alkenil; ili (viii) linoleil.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde (i) najmanje jedan od X<1>i X<2>nije -CH2-; (ii) X<1>nije -CH2-; (iii) X<1>je -C(O)-; (iv) X<2>nije -CH2-; ili (v) X<2>je -C(O)-.
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu kada A6je N i A7je N, tada (i) najmanje jedan od X<4>i X<5>nije -CH2-, (ii) najmanje jedan od X<4>i X<5>je -C(O)-; i/ili (iii) najmanje jedan od R1, R2, R3, R4, i R5je -R"MR'.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde (i) X<4>je-CH2- i X<5>je -C(O)-; ili (ii) X<4>i X<5>su -C(O)-.
  11. 11. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde su R2, R3, R4, i R5isti.
  12. 12. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde su R2, R3, R4, i R5C9alkil.
  13. 13. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde je jedinjenje odabrano od jedinjenja 67:
    i njegovih soli ili izomera.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, gde je jedinjenje odabrano od jedinjenja 4:
    i njegovih soli ili izomera.
  15. 15. Kompozicija nanočestica koja uključuje lipidnu komponentu koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva.
  16. 16. Kompozicija nanočestica prema patentnom zahtevu 15, gde lipidna komponenta dalje sadrži: (i) fosfolipid; (ii) strukturni lipid, i/ili (iii) PEG lipid.
  17. 17. Kompozicija nanočestica prema bilo kom od patentnih zahteva 15-16, gde je strukturni lipid odabran iz grupe koja se sastoji od holesterola, fekosterola, sitosterola, ergosterola, kampesterola, stigmasterola, brasikasterola, tomatidina, ursolne kiseline, alfa-tokoferola, i njihovih smeša.
  18. 18. Kompozicija nanočestica prema bilo kom od patentnih zahteva 15-17, koja dalje sadrži terapijski i/ili profilaktički agens; pri čemu je izborno terapijski i/ili profilaktički agens (i) vakcina ili jedinjenje koje može da izazove imunski odgovor; (ii) nukleinska kiselina; ili (iii) ribonukleinska kiselina (RNK), gde je izborno RNK odabrana iz grupe koja se sastoji od male interferirajuće RNK (siRNA), asimetrične interferirajuće RNK (aiRNA), mikroRNK (miRNA), RNK koja predstavlja supstrat za Dicer (dsRNA), RNK u vidu male ukosnice (shRNA), informacione RNK (iRNK), i njihovih smeša.
  19. 19. Farmaceutska kompozicija koja sadrži kompoziciju nanočestica prema bilo kom od patentnih zahteva 15-18 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
  20. 20. Kompozicija nanočestica prema bilo kom od patentnih zahteva 15-18, za upotrebu u postupku za lečenje bolesti ili poremećaja kod sisara kome je to potrebno, gde je sisar izborno čovek.
  21. 21. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema patentnom zahtevu 20, gde je bolest ili poremećaj naznačen nefunkcionalnom ili poremećenom aktivnošću proteina ili polipeptida, ili gde je bolest ili poremećaj odabran iz grupe koja se sastoji od infektivnih bolesti, kancera i proliferativnih bolesti, genetskih bolesti, autoimunskih bolesti, dijabetesa, neurodegenerativnih bolesti, kardiovaskularnih i renovaskularnih bolesti, i metaboličkih bolesti.
  22. 22. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 20-21, gde kompozicija nanočestica sadrži jedinjenje 4:
  23. 23. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 20-22, gde se kompozicija nanočestica primenjuje intravenski, intramuskularno, intradermalno, subkutano, intranazalno, ili putem inhalacije.
  24. 24. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 20-23, gde se sisaru daje doza od oko 0.01 mg/kg do oko 10 mg/kg terapijskog i/ili profilaktičkog agensa.
  25. 25. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 20-24, gde postupak dalje obuhvata, pre koraka dovođenja u kontakt ili primene, predtretman navedenog sisara jednim ili većim brojem dodatnih jedinjenja, gde predtretman obuhvata davanje navedenog jednog ili većeg broja dodatnih jedinjenja navedenom sisaru; pri čemu se izborno navedeni sisar podvrgava predtretmanu 24 ili manje časova pre koraka dovođenja u kontakt ili primene, izborno, oko jednog časa pre koraka dovođenja u kontakt ili primene.
  26. 26. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema patentnom zahtevu 25, gde je navedeno jedno ili više dodatnih jedinjenja odabrano iz grupe koja se sastoji od antiinflamatornih jedinjenja, steroida, statina, estradiola, inhibitora BTK, agonista S1P1, modulatora glukokortikoidnog receptora (GRM), i antihistaminika; gde je izborno navedeno jedno ili više dodatnih jedinjenja odabrano iz grupe koja se sastoji od deksametazona, metotreksata, acetaminofena, blokatora H1 receptora, i blokatora H2 receptora.
  27. 27. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 20-26, gde sisar (a) ima nedostatak LDLR; (b) ima nedostatak apoE; i/ili (c) ima poremećenu interakciju LDLR-apoE.
  28. 28. Kompozicija nanočestica za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 20-26, gde sisar (a) nema nedostatak LDLR; (b) nema nedostatak apoE; i/ili (c) ima normalnu interakciju LDLR-apoE.
RS20220291A 2015-12-22 2016-12-22 Jedinjenja i kompozicije za intracelularnu isporuku agenasa RS63051B1 (sr)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562271146P 2015-12-22 2015-12-22
US201562271200P 2015-12-22 2015-12-22
US201562271179P 2015-12-22 2015-12-22
US201562271160P 2015-12-22 2015-12-22
US201562271137P 2015-12-22 2015-12-22
US201662338474P 2016-05-18 2016-05-18
US201662413345P 2016-10-26 2016-10-26
PCT/US2016/068300 WO2017112865A1 (en) 2015-12-22 2016-12-22 Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
EP16831870.7A EP3394030B2 (en) 2015-12-22 2016-12-22 Compounds and compositions for intracellular delivery of agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS63051B1 true RS63051B1 (sr) 2022-04-29

Family

ID=57944500

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220291A RS63051B1 (sr) 2015-12-22 2016-12-22 Jedinjenja i kompozicije za intracelularnu isporuku agenasa

Country Status (16)

Country Link
US (3) US10799463B2 (sr)
EP (2) EP4036079B1 (sr)
JP (2) JP7114465B2 (sr)
AU (2) AU2016377681B2 (sr)
CA (1) CA3007297A1 (sr)
CY (1) CY1125087T1 (sr)
DK (1) DK3394030T3 (sr)
ES (1) ES2913626T5 (sr)
HR (1) HRP20220268T1 (sr)
HU (1) HUE057877T2 (sr)
LT (1) LT3394030T (sr)
PL (1) PL3394030T3 (sr)
RS (1) RS63051B1 (sr)
SI (1) SI3394030T1 (sr)
SM (1) SMT202200252T1 (sr)
WO (1) WO2017112865A1 (sr)

Families Citing this family (173)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3052521A1 (en) 2013-10-03 2016-08-10 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
PL4023249T3 (pl) 2014-04-23 2025-03-10 Modernatx, Inc. Szczepionki z kwasem nukleinowym
HUE060907T2 (hu) 2014-06-25 2023-04-28 Acuitas Therapeutics Inc Új lipidek és lipid nanorészecske formulációk nukleinsavak bevitelére
PT3313829T (pt) 2015-06-29 2024-07-08 Acuitas Therapeutics Inc Formulações de lípidos e de nanopartículas lipídicas para a administração de ácidos nucleicos
MA42543A (fr) 2015-07-30 2018-06-06 Modernatx Inc Arn épitope peptidiques concatémériques
JP6948313B6 (ja) 2015-09-17 2022-01-14 モデルナティエックス インコーポレイテッド 治療剤の細胞内送達のための化合物および組成物
AU2016341309A1 (en) 2015-10-22 2018-06-07 Modernatx, Inc. Cancer vaccines
EP4011451A1 (en) 2015-10-22 2022-06-15 ModernaTX, Inc. Metapneumovirus mrna vaccines
HRP20230209T1 (hr) 2015-10-28 2023-04-14 Acuitas Therapeutics Inc. Novi lipidi i lipidne formulacije nanočestica za isporuku nukleinskih kiselina
LT3394030T (lt) 2015-12-22 2022-04-11 Modernatx, Inc. Junginiai ir kompozicijos terapinei medžiagai teikti intraceliuliniu būdu
CA3036831A1 (en) 2016-09-14 2018-03-22 Modernatx, Inc. High purity rna compositions and methods for preparation thereof
US12491261B2 (en) 2016-10-26 2025-12-09 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticle formulations
US11583504B2 (en) 2016-11-08 2023-02-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
AU2017357758B2 (en) 2016-11-10 2023-11-16 Translate Bio, Inc. Improved process of preparing mRNA-loaded lipid nanoparticles
MA46766A (fr) 2016-11-11 2019-09-18 Modernatx Inc Vaccin antigrippal
EP4186888B1 (en) 2017-03-15 2025-11-26 ModernaTX, Inc. Compound and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
CA3055653A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle formulation
WO2018170322A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Crystal forms of amino lipids
JP2020514370A (ja) 2017-03-17 2020-05-21 キュアバック アーゲー 組合せ抗癌療法のためのｒｎａワクチン及び免疫チェックポイント阻害剤
US11905525B2 (en) 2017-04-05 2024-02-20 Modernatx, Inc. Reduction of elimination of immune responses to non-intravenous, e.g., subcutaneously administered therapeutic proteins
WO2018191657A1 (en) 2017-04-13 2018-10-18 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for delivery of active agents
CN110799492B (zh) 2017-04-28 2023-06-27 爱康泰生治疗公司 用于递送核酸的新型羰基脂质和脂质纳米颗粒制剂
WO2018232120A1 (en) * 2017-06-14 2018-12-20 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
MA49421A (fr) 2017-06-15 2020-04-22 Modernatx Inc Formulations d'arn
SG11201911430PA (en) 2017-07-04 2020-01-30 Curevac Ag Novel nucleic acid molecules
CA3073020A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for use in lipid nanoparticle formulations
EP4501322A3 (en) 2017-08-17 2025-04-16 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for use in lipid nanoparticle formulations
WO2019036028A1 (en) 2017-08-17 2019-02-21 Acuitas Therapeutics, Inc. LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICULAR FORMULATIONS
WO2019036030A1 (en) * 2017-08-17 2019-02-21 Acuitas Therapeutics, Inc. LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS
WO2019036682A1 (en) 2017-08-18 2019-02-21 Modernatx, Inc. RNA VARIANTS POLYMERASE
MA49914A (fr) 2017-08-18 2021-04-21 Modernatx Inc Procédés analytiques par hplc
EP3668979A4 (en) 2017-08-18 2021-06-02 Modernatx, Inc. METHOD OF HPLC ANALYSIS
US11602557B2 (en) 2017-08-22 2023-03-14 Cure Vac SE Bunyavirales vaccine
EP3675817A1 (en) * 2017-08-31 2020-07-08 Modernatx, Inc. Methods of making lipid nanoparticles
KR102696307B1 (ko) * 2017-09-08 2024-08-16 제너레이션 바이오 컴퍼니 비-바이러스성 캡시드-비함유 dna 벡터의 지질 나노입자 제형
US11167043B2 (en) 2017-12-20 2021-11-09 Translate Bio, Inc. Composition and methods for treatment of ornithine transcarbamylase deficiency
EP3746090A4 (en) 2018-01-29 2021-11-17 ModernaTX, Inc. RSV RNA Vaccines
WO2019193183A2 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Curevac Ag Novel yellow fever nucleic acid molecules for vaccination
AU2019254591B2 (en) 2018-04-17 2025-12-11 CureVac SE Novel RSV RNA molecules and compositions for vaccination
WO2019226650A1 (en) * 2018-05-23 2019-11-28 Modernatx, Inc. Delivery of dna
EP3813874A1 (en) 2018-06-27 2021-05-05 CureVac AG Novel lassa virus rna molecules and compositions for vaccination
US20240254252A1 (en) 2018-07-13 2024-08-01 Genmab A/S Trogocytosis-mediated therapy using cd38 antibodies
US20200017600A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Genmab A/S Variants of cd38 antibody and uses thereof
KR20210091120A (ko) 2018-08-29 2021-07-21 트랜슬레이트 바이오 인코포레이티드 Mrna-로딩된 지질 나노입자를 제조하는 개선된 공정
CA3113025A1 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Modernatx, Inc. Peg lipids and uses thereof
WO2020061367A1 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
WO2020061295A1 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Modernatx, Inc. High-purity peg lipids and uses thereof
WO2020061457A1 (en) 2018-09-20 2020-03-26 Modernatx, Inc. Preparation of lipid nanoparticles and methods of administration thereof
IL281615B2 (en) 2018-09-21 2026-01-01 Acuitas Therapeutics Inc Systems and methods for producing lipid nanoparticles and liposomes
HRP20240586T1 (hr) 2018-10-09 2024-07-19 The University Of British Columbia Sastavi i sustavi koji sadrže transfekcijske sposobne vezikle bez organskih otapala i deterdženta i s njim povezanim postupcima
CA3116576A1 (en) 2018-10-18 2020-04-23 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for lipid nanoparticle delivery of active agents
CN109265359B (zh) * 2018-10-22 2021-09-03 大连百傲化学股份有限公司 一种侧链型水溶性聚季铵盐及其制备方法
BR112021009422A2 (pt) 2018-12-21 2021-10-26 Curevac Ag Rna para vacinas contra malária
PT3908568T (pt) 2019-01-11 2024-09-30 Acuitas Therapeutics Inc Lípidos para a administração de agentes ativos por nanopartículas lipídicas
CN118697900A (zh) 2019-01-31 2024-09-27 摩登纳特斯有限公司 制备脂质纳米颗粒的方法
KR20210133218A (ko) 2019-01-31 2021-11-05 모더나티엑스, 인크. 볼텍스 믹서 및 연계된 방법, 시스템 및 이의 장치
US20220133908A1 (en) 2019-02-08 2022-05-05 Curevac Ag Coding rna administered into the suprachoroidal space in the treatment of ophthalmic diseases
CN113874502A (zh) 2019-03-11 2021-12-31 摩登纳特斯有限公司 补料分批体外转录方法
US12070495B2 (en) 2019-03-15 2024-08-27 Modernatx, Inc. HIV RNA vaccines
CA3140423A1 (en) 2019-05-14 2020-11-19 Translate Bio, Inc. Improved process of preparing mrna-loaded lipid nanoparticles
EP3986452A1 (en) 2019-06-18 2022-04-27 CureVac AG Rotavirus mrna vaccine
CN114502204A (zh) 2019-08-14 2022-05-13 库尔维科公司 具有降低的免疫刺激性质的rna组合和组合物
CA3155015A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Modernatx, Inc. Carbonate containing lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
AU2020350759A1 (en) 2019-09-19 2022-03-31 Modernatx, Inc. Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
CA3155075A1 (en) * 2019-10-18 2021-04-22 Michael Mitchell Lipid nanoparticles and formulations thereof for car mrna delivery
CN114901360A (zh) 2019-12-20 2022-08-12 库瑞瓦格股份公司 用于递送核酸的新型脂质纳米颗粒
CA3169669A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Modernatx, Inc. Methods of preparing lipid nanoparticles
KR20220144416A (ko) 2020-02-04 2022-10-26 큐어백 아게 코로나바이러스 백신
CN115427021A (zh) 2020-02-25 2022-12-02 翻译生物公司 制备负载mrna的脂质纳米颗粒的改进方法
EP4132576A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Nucleic acid vaccines for coronavirus
WO2021204175A1 (en) 2020-04-09 2021-10-14 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid nanoparticle composition
IL297419B2 (en) 2020-04-22 2025-02-01 BioNTech SE Coronavirus vaccine
CA3170740A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 Curevac Ag Nucleic acid based combination vaccines
KR20230030588A (ko) 2020-06-30 2023-03-06 쑤저우 아보젠 바이오사이언시스 컴퍼니 리미티드 지질 화합물 및 지질 나노입자 조성물
ES3054438T3 (en) 2020-07-16 2026-02-03 Acuitas Therapeutics Inc Cationic lipids for use in lipid nanoparticles
CN111718361B (zh) * 2020-07-23 2022-04-05 南京工业大学 一种金属β-内酰胺酶抑制剂及其制备方法与应用
WO2022023559A1 (en) 2020-07-31 2022-02-03 Curevac Ag Nucleic acid encoded antibody mixtures
EP4192432A1 (en) 2020-08-06 2023-06-14 ModernaTX, Inc. Methods of preparing lipid nanoparticles
CN114391008B (zh) * 2020-08-20 2024-05-03 苏州艾博生物科技有限公司 脂质化合物和脂质纳米颗粒组合物
EP4157344A2 (en) 2020-08-31 2023-04-05 CureVac SE Multivalent nucleic acid based coronavirus vaccines
EP4228658A4 (en) 2020-10-14 2025-02-19 George Mason Research Foundation, Inc. IONIZABLE LIPIDS AND METHODS FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF
WO2022115645A1 (en) 2020-11-25 2022-06-02 Akagera Medicines, Inc. Lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids, and related methods of use
EP4255888A4 (en) * 2020-12-02 2024-12-04 Merck Sharp & Dohme LLC LIPID DNANOPARTICLE COMPOSITIONS WITH CATIONIC MONOESTER LIPIDS
TW202237068A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 美商建南德克公司 製備脂質奈米顆粒的高通量方法及其用途
US11918643B2 (en) 2020-12-22 2024-03-05 CureVac SE RNA vaccine against SARS-CoV-2 variants
CA3171051A1 (en) 2020-12-22 2022-06-30 Curevac Ag Pharmaceutical composition comprising lipid-based carriers encapsulating rna for multidose administration
CN112641942B (zh) * 2020-12-25 2023-05-19 深圳大学 近红光控纳米气体诊疗剂及其制备方法和应用
EP4274607A1 (en) 2021-01-11 2023-11-15 ModernaTX, Inc. Seasonal rna influenza virus vaccines
AU2022207550C1 (en) * 2021-01-14 2025-04-17 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions
WO2022152109A2 (en) 2021-01-14 2022-07-21 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions
WO2022152141A2 (en) 2021-01-14 2022-07-21 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Polymer conjugated lipid compounds and lipid nanoparticle compositions
US20240102065A1 (en) 2021-01-27 2024-03-28 CureVac SE Method of reducing the immunostimulatory properties of in vitro transcribed rna
WO2022174079A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Modernatx, Inc. Lnp compositions comprising payloads for in vivo therapy
CA3212653A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Glaxosmithkline Biologicals Sa Immunogenic compositions
CA3171429A1 (en) 2021-03-31 2022-09-30 Alexander SCHWENGER Syringes containing pharmaceutical compositions comprising rna
EP4334446A1 (en) 2021-05-03 2024-03-13 CureVac SE Improved nucleic acid sequence for cell type specific expression
WO2022234003A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Avacta Life Sciences Limited Cd33 binding polypeptides with stefin a protein
US20220363937A1 (en) 2021-05-14 2022-11-17 Armstrong World Industries, Inc. Stabilization of antimicrobial coatings
KR20240013087A (ko) 2021-05-24 2024-01-30 쑤저우 아보젠 바이오사이언시스 컴퍼니 리미티드 지질 화합물 및 지질 나노입자 조성물
CN119137109A (zh) * 2021-08-12 2024-12-13 生命技术公司 用于核酸递送的脂质
US20240398933A1 (en) 2021-09-03 2024-12-05 CureVac SE Novel lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids comprising phosphatidylserine
US20240398940A1 (en) 2021-09-03 2024-12-05 CureVac SE Novel lipid nanoparticles for delivery of nucleic acids
IL311141A (en) 2021-09-06 2024-04-01 Genmab As Antibodies capable of binding to CD27, their variants and uses thereof
AU2022341440A1 (en) * 2021-09-10 2024-05-02 Maxirna (Shanghai) Pharmaceutical Co., Ltd. Ionizable lipids, their preparation and application in gene delivery
TW202328067A (zh) * 2021-09-14 2023-07-16 美商雷納嘉德醫療管理公司 環狀脂質及其使用方法
EP4413038A1 (en) 2021-10-07 2024-08-14 Avacta Life Sciences Limited Pd-l1 binding affimers
US20240409638A1 (en) 2021-10-07 2024-12-12 Avacta Life Sciences Limited Serum half-life extended pd-l1 binding polypeptides
AR127312A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Suzhou Abogen Biosciences Co Ltd Compuestos lipídicos ycomposiciones de nanopartículas lipídicas
CN116064598B (zh) 2021-10-08 2024-03-12 苏州艾博生物科技有限公司 冠状病毒的核酸疫苗
JP2024536406A (ja) 2021-10-08 2024-10-04 スージョウ・アボジェン・バイオサイエンシズ・カンパニー・リミテッド 脂質化合物及び脂質ナノ粒子組成物
EP4413039A1 (en) 2021-10-08 2024-08-14 Genmab A/S Antibodies binding to cd30 and cd3
WO2023064469A1 (en) 2021-10-13 2023-04-20 Modernatx, Inc. Compositions of mrna-encoded il15 fusion proteins and methods of use thereof
EP4422698A1 (en) 2021-10-29 2024-09-04 CureVac SE Improved circular rna for expressing therapeutic proteins
KR20240141231A (ko) * 2021-11-11 2024-09-26 오하이오 스테이트 이노베이션 파운데이션 아미노 지질 화합물을 포함하는 조성물과 이의 제조 및 사용 방법
US12186387B2 (en) 2021-11-29 2025-01-07 BioNTech SE Coronavirus vaccine
US20250041442A1 (en) * 2021-12-06 2025-02-06 Ohio State Innovation Foundation Diamino lipid (dal) compounds and pharmaceutical compositions comprising an immunotherapeutic agent
AR127892A1 (es) 2021-12-10 2024-03-06 Modernatx Inc Compuestos y composiciones para la administración de agentes terapéuticos
CA3242402A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for use in lipid nanoparticle formulations
WO2023114889A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Modernatx, Inc. Processes for preparing lipid nanoparticles
JP2025502599A (ja) 2021-12-23 2025-01-28 スージョウ・アボジェン・バイオサイエンシズ・カンパニー・リミテッド 脂質化合物及び脂質ナノ粒子組成物
US20250099614A1 (en) 2022-01-28 2025-03-27 CureVac SE Nucleic acid encoded transcription factor inhibitors
EP4475882A1 (en) 2022-02-09 2024-12-18 ModernaTX, Inc. Mucosal administration methods and formulations
KR102465349B1 (ko) * 2022-02-25 2022-11-11 주식회사 테르나테라퓨틱스 신규 이온화 지질 및 이를 포함하는 지질 나노입자
KR20240166554A (ko) * 2022-03-25 2024-11-26 세일 바이오메디슨스, 인크. 신규한 이온화 가능 지질 및 지질 나노입자, 및 이를 사용하는 방법
US20250214046A1 (en) 2022-04-01 2025-07-03 Modernatx, Inc. Cross mixers for lipid nanoparticle production, and methods of operating the same
CN119325466A (zh) * 2022-04-08 2025-01-17 尚威天成信使核糖核酸治疗公司 可电离脂质化合物和脂质纳米颗粒组合物
WO2023218243A1 (en) 2022-05-12 2023-11-16 Avacta Life Sciences Limited Lag-3/pd-l1 binding fusion proteins
US20250345407A1 (en) 2022-05-25 2025-11-13 CureVac SE Nucleic acid based vaccine encoding an escherichia coli fimh antigenic polypeptide
CA3256897A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Akagera Medicines, Inc. Lipid nanoparticles for the administration of nucleic acids and their methods of use
US20250353809A1 (en) * 2022-06-06 2025-11-20 Shanghai Rnacure Biopharma Co., Ltd. Nitrogen-containing chain compound, preparation method, composition containing said compound, and use thereof
CN116589435A (zh) * 2022-06-20 2023-08-15 成都威斯津生物医药科技有限公司 用于核酸递送的可电离脂质及其组合物
US12297285B2 (en) 2022-06-24 2025-05-13 Orna Therapeutics, Inc. Circular RNA encoding chimeric antigen receptors targeting BCMA
WO2024002985A1 (en) 2022-06-26 2024-01-04 BioNTech SE Coronavirus vaccine
EP4342460A1 (en) 2022-09-21 2024-03-27 NovoArc GmbH Lipid nanoparticle with nucleic acid cargo
AU2023353931A1 (en) 2022-09-26 2025-03-20 Glaxosmithkline Biologicals Sa Influenza virus vaccines
CN117917398A (zh) * 2022-10-21 2024-04-23 华中师范大学 一种可离子化脂质化合物、核酸药物分子递送系统及应用
EP4608442A1 (en) 2022-10-28 2025-09-03 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Nucleic acid based vaccine
US20240189243A1 (en) * 2022-11-14 2024-06-13 Industrial Technology Research Institute Lipid compound or a derivative thereof and pharmaceutical composition employing the same
CN118125994A (zh) * 2022-11-25 2024-06-04 艾斯拓康医药科技(北京)有限公司 可离子化脂质及其应用
WO2024123978A1 (en) 2022-12-08 2024-06-13 Modernatx, Inc. Ionizable lipids with malonate tails
AU2023414262B2 (en) 2022-12-29 2025-08-14 Rinuagene Biotechnology Co., Ltd. Polynucleotide molecule for preventing or treating hpv infection-related diseases
WO2024160936A1 (en) 2023-02-03 2024-08-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Rna formulation
GB202302092D0 (en) 2023-02-14 2023-03-29 Glaxosmithkline Biologicals Sa Analytical method
WO2024178305A1 (en) 2023-02-24 2024-08-29 Modernatx, Inc. Compositions of mrna-encoded il-15 fusion proteins and methods of use thereof for treating cancer
WO2024184500A1 (en) 2023-03-08 2024-09-12 CureVac SE Novel lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
WO2024183821A1 (zh) 2023-03-09 2024-09-12 上海吉量医药工程有限公司 可离子化脂质分子及其制备方法和应用
EP4683665A1 (en) 2023-03-23 2026-01-28 ModernaTX, Inc. Peg targeting compounds for delivery of therapeutics
EP4683666A1 (en) 2023-03-23 2026-01-28 ModernaTX, Inc. Peg targeting compounds for delivery of therapeutics
WO2024197310A1 (en) 2023-03-23 2024-09-26 Modernatx, Inc. Peg targeting compounds for delivery of therapeutics
EP4687991A1 (en) 2023-03-30 2026-02-11 Ose Immunotherapeutics Lipid-based nanoparticle targeted at activated immune cells for the expression of immune cell enhancing molecule and use thereof
WO2024200820A1 (en) 2023-03-30 2024-10-03 Ose Immunotherapeutics Method of synthesis of targeted lipid nanoparticle and uses thereof
AU2024260120A1 (en) 2023-04-27 2025-11-06 Glaxosmithkline Biologicals Sa Influenza virus vaccines
WO2024223724A1 (en) 2023-04-27 2024-10-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Influenza virus vaccines
WO2024230934A1 (en) 2023-05-11 2024-11-14 CureVac SE Therapeutic nucleic acid for the treatment of ophthalmic diseases
TW202509071A (zh) 2023-05-12 2025-03-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 能夠與ｏｘ４０結合之抗體、其變異體及其用途
WO2024259373A1 (en) 2023-06-14 2024-12-19 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for delivery of therapeutic agents
CN116514696B (zh) * 2023-06-29 2023-12-01 艾斯拓康医药科技(北京)有限公司 可离子化脂质及其应用
TW202509077A (zh) 2023-06-30 2025-03-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 與纖維母細胞活化蛋白α及死亡受體４結合之抗體
WO2025011529A2 (en) 2023-07-07 2025-01-16 Shanghai Circode Biomed Co., Ltd. Circular rna vaccines for seasonal flu and methods of uses
WO2025027116A1 (en) 2023-08-01 2025-02-06 Institut Curie Nanoparticles comprising nucleic acid sequences encoding cyclic gmp-amp synthase
WO2025045142A1 (en) 2023-08-29 2025-03-06 Shanghai Circode Biomed Co., Ltd. Circular rna encoding vegf polypeptides, formulations, and methods of uses
IL326647A (en) 2023-09-01 2026-04-01 Novoarc Gmbh Lipid nanoparticles with a nucleic acid charge and an ionizable lipid
TW202525812A (zh) * 2023-10-24 2025-07-01 南韓商綠十字股份有限公司 可離子化脂質及其用途
WO2025132839A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Glaxosmithkline Biologicals Sa Influenza virus vaccines
WO2025133115A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Ose Immunotherapeutics Lipid-based nanoparticles comprising il-35
WO2025140594A1 (zh) * 2023-12-29 2025-07-03 厦门赛诺邦格生物科技股份有限公司 一种含有多级叔胺的不对称阳离子脂质
WO2025160381A1 (en) 2024-01-26 2025-07-31 Modernatx, Inc. Methods of preparing lipid nanoparticles
GB202404607D0 (en) 2024-03-29 2024-05-15 Glaxosmithkline Biologicals Sa RNA formulation
WO2026020171A2 (en) 2024-07-19 2026-01-22 Aera Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptor constructs
WO2026068705A1 (en) 2024-09-26 2026-04-02 Ose Immunotherapeutics Lipid-based nanoparticles comprising non-glycosylated fc domains and uses thereof
CN119661389A (zh) * 2024-10-15 2025-03-21 山东大学 一种基于反式-1,4-环己烷二甲醇的可电离脂质、脂质纳米颗粒及其制备方法与应用
CN119528797B (zh) * 2025-01-13 2025-05-06 北京安龙生物医药有限公司 用于递送治疗的脂质化合物、寡核苷酸递送系统及其制备方法和应用
CN120842107B (zh) * 2025-09-24 2025-12-30 北京悦康科创医药科技股份有限公司 乙二胺结构类型脾靶向的阳离子脂质化合物、包含其的组合物及用途

Family Cites Families (368)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3324182A (en) 1962-12-26 1967-06-06 Monsanto Res Corp Penta-alkyldialkylenetriamines
US3872171A (en) 1971-05-24 1975-03-18 Pfizer Polyamines as antiviral agents in animals
US3799876A (en) * 1970-12-11 1974-03-26 Texaco Inc Corrosion inhibiting lubrication method
US4125544A (en) 1977-06-09 1978-11-14 G. D. Searle 20/22/23/24-Oxa-7-oxocholesterols and esters thereof
US4270537A (en) 1979-11-19 1981-06-02 Romaine Richard A Automatic hypodermic syringe
US4957735A (en) 1984-06-12 1990-09-18 The University Of Tennessee Research Corporation Target-sensitive immunoliposomes- preparation and characterization
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
CA1283827C (en) 1986-12-18 1991-05-07 Giorgio Cirelli Appliance for injection of liquid formulations
GB8704027D0 (en) 1987-02-20 1987-03-25 Owen Mumford Ltd Syringe needle combination
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US4940460A (en) 1987-06-19 1990-07-10 Bioject, Inc. Patient-fillable and non-invasive hypodermic injection device assembly
US5339163A (en) 1988-03-16 1994-08-16 Canon Kabushiki Kaisha Automatic exposure control device using plural image plane detection areas
FR2638359A1 (fr) 1988-11-03 1990-05-04 Tino Dalto Guide de seringue avec reglage de la profondeur de penetration de l'aiguille dans la peau
CA2489769A1 (en) 1989-03-21 1990-10-04 Philip L. Felgner Expression of exogenous polynucleotide sequences in a vertebrate
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5190521A (en) 1990-08-22 1993-03-02 Tecnol Medical Products, Inc. Apparatus and method for raising a skin wheal and anesthetizing skin
US5527288A (en) 1990-12-13 1996-06-18 Elan Medical Technologies Limited Intradermal drug delivery device and method for intradermal delivery of drugs
FR2676072B1 (fr) 1991-05-03 1994-11-18 Transgene Sa Vecteur de delivrance d'arn.
GB9118204D0 (en) 1991-08-23 1991-10-09 Weston Terence E Needle-less injector
SE9102652D0 (sv) 1991-09-13 1991-09-13 Kabi Pharmacia Ab Injection needle arrangement
JPH07503372A (ja) 1992-01-23 1995-04-13 バイカル・インコーポレイテッド 生体外遺伝子導入
US5328483A (en) 1992-02-27 1994-07-12 Jacoby Richard M Intradermal injection device with medication and needle guard
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5569189A (en) 1992-09-28 1996-10-29 Equidyne Systems, Inc. hypodermic jet injector
US5334144A (en) 1992-10-30 1994-08-02 Becton, Dickinson And Company Single use disposable needleless injector
WO1995024176A1 (en) 1994-03-07 1995-09-14 Bioject, Inc. Ampule filling device
US5466220A (en) 1994-03-08 1995-11-14 Bioject, Inc. Drug vial mixing and transfer device
US5807861A (en) 1994-03-24 1998-09-15 Cell Therapeutics, Inc. Amine substituted xanthinyl compounds
US5599302A (en) 1995-01-09 1997-02-04 Medi-Ject Corporation Medical injection system and method, gas spring thereof and launching device using gas spring
US5795587A (en) 1995-01-23 1998-08-18 University Of Pittsburgh Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production
US5730723A (en) 1995-10-10 1998-03-24 Visionary Medical Products Corporation, Inc. Gas pressured needle-less injection device and method
US5893397A (en) 1996-01-12 1999-04-13 Bioject Inc. Medication vial/syringe liquid-transfer apparatus
GB9607549D0 (en) 1996-04-11 1996-06-12 Weston Medical Ltd Spring-powered dispensing device
US7288266B2 (en) 1996-08-19 2007-10-30 United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Liposome complexes for increased systemic delivery
US6143276A (en) 1997-03-21 2000-11-07 Imarx Pharmaceutical Corp. Methods for delivering bioactive agents to regions of elevated temperatures
US5993412A (en) 1997-05-19 1999-11-30 Bioject, Inc. Injection apparatus
US20030083272A1 (en) 1997-09-19 2003-05-01 Lahive & Cockfield, Llp Sense mrna therapy
US6673192B1 (en) 1997-09-25 2004-01-06 Loctite Corporation Multi-amine compound primers for bonding of polyolefins with cyanoacrylate adhesives
US6303378B1 (en) 1997-10-24 2001-10-16 Valentis, Inc. Methods for preparing polynucleotide transfection complexes
CA2309535A1 (en) 1997-11-12 1999-05-20 Brigham And Women's Hospital, Inc. The translation enhancer element of the human amyloid precursor protein gene
ATE550042T1 (de) 1997-11-20 2012-04-15 Vical Inc Behandlung von krebs mithilfe cytokin- exprimierender polynukleotide und zusammensetzungen dafür
IT1298087B1 (it) 1998-01-08 1999-12-20 Fiderm S R L Dispositivo per il controllo della profondita' di penetrazione di un ago, in particolare applicabile ad una siringa per iniezioni
US6432925B1 (en) 1998-04-16 2002-08-13 John Wayne Cancer Institute RNA cancer vaccine and methods for its use
GB9808268D0 (en) 1998-04-17 1998-06-17 Imp College Innovations Ltd Compound
US6395253B2 (en) 1998-04-23 2002-05-28 The Regents Of The University Of Michigan Microspheres containing condensed polyanionic bioactive agents and methods for their production
JP2000169864A (ja) 1998-12-07 2000-06-20 New Japan Chem Co Ltd 模型エンジン用燃料組成物
EP1156781B1 (en) 1999-02-26 2005-06-08 Chiron Corporation Microemulsions with adsorbed macromolecules and microparticles
AU7725500A (en) 1999-09-30 2001-04-30 National Jewish Medical And Research Center Method for inhibition of pathogenic microorganisms
US7060291B1 (en) 1999-11-24 2006-06-13 Transave, Inc. Modular targeted liposomal delivery system
US7468275B2 (en) 2000-01-28 2008-12-23 The Scripps Research Institute Synthetic internal ribosome entry sites and methods of identifying same
CA2398790A1 (en) 2000-01-28 2001-08-02 The Scripps Research Institute Methods of identifying synthetic transcriptional and translational regulatory elements, and compositions relating to same
US6696038B1 (en) 2000-09-14 2004-02-24 Expression Genetics, Inc. Cationic lipopolymer as biocompatible gene delivery agent
US20040142474A1 (en) 2000-09-14 2004-07-22 Expression Genetics, Inc. Novel cationic lipopolymer as a biocompatible gene delivery agent
US7708915B2 (en) 2004-05-06 2010-05-04 Castor Trevor P Polymer microspheres/nanospheres and encapsulating therapeutic proteins therein
US6652886B2 (en) 2001-02-16 2003-11-25 Expression Genetics Biodegradable cationic copolymers of poly (alkylenimine) and poly (ethylene glycol) for the delivery of bioactive agents
DE10109897A1 (de) 2001-02-21 2002-11-07 Novosom Ag Fakultativ kationische Liposomen und Verwendung dieser
RU2294192C2 (ru) 2001-05-30 2007-02-27 Дзе Скриппс Рисерч Инститьют Система доставки нуклеиновых кислот
ES2340499T3 (es) 2001-06-05 2010-06-04 Curevac Gmbh Arnm de antigeno tumoral estabilizado con un contenido de g/c aumentado.
DE10162480A1 (de) 2001-12-19 2003-08-07 Ingmar Hoerr Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen
DE10207178A1 (de) 2002-02-19 2003-09-04 Novosom Ag Komponenten für die Herstellung amphoterer Liposomen
US20050222064A1 (en) 2002-02-20 2005-10-06 Sirna Therapeutics, Inc. Polycationic compositions for cellular delivery of polynucleotides
US20050152980A1 (en) 2002-03-13 2005-07-14 Michael Ausborn Pharmeutical microparticles
EP3006043B1 (en) 2002-04-04 2019-05-29 Zoetis Belgium S.A. Immunostimulatory g,u-containing oligoribonucleotides
EP1519714B1 (en) 2002-06-28 2010-10-20 Protiva Biotherapeutics Inc. Method and apparatus for producing liposomes
DE10229872A1 (de) 2002-07-03 2004-01-29 Curevac Gmbh Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA
DE10335833A1 (de) 2003-08-05 2005-03-03 Curevac Gmbh Transfektion von Blutzellen mit mRNA zur Immunstimulation und Gentherapie
US8668926B1 (en) 2003-09-15 2014-03-11 Shaker A. Mousa Nanoparticle and polymer formulations for thyroid hormone analogs, antagonists, and formulations thereof
CA2542099A1 (en) 2003-10-11 2005-04-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Methods and compositions for enhancing innate immunity and antibody dependent cellular cytotoxicity
US8372966B2 (en) 2003-12-19 2013-02-12 University Of Cincinnati Oligonucleotide decoys and methods of use
JP4764426B2 (ja) 2004-06-07 2011-09-07 プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド カチオン性脂質および使用方法
CA2569664C (en) 2004-06-07 2013-07-16 Protiva Biotherapeutics, Inc. Lipid encapsulated interfering rna
CA2571292C (en) 2004-06-30 2013-05-21 Nektar Therapeutics Al, Corporation Polymer-factor ix moiety conjugates
DE102004042546A1 (de) 2004-09-02 2006-03-09 Curevac Gmbh Kombinationstherapie zur Immunstimulation
US8663599B1 (en) 2004-10-05 2014-03-04 Gp Medical, Inc. Pharmaceutical composition of nanoparticles
WO2006063249A2 (en) 2004-12-10 2006-06-15 Justin Hanes Functionalized poly (ether-anhydride) block copolymers
DE102005023170A1 (de) 2005-05-19 2006-11-23 Curevac Gmbh Optimierte Formulierung für mRNA
WO2006138380A2 (en) 2005-06-15 2006-12-28 Massachusetts Institute Of Technology Amine-containing lipids and uses thereof
EP2479254A1 (en) 2005-08-24 2012-07-25 The Scripps Research Institute Translation enhancer-element dependent vector systems
DE102006007433A1 (de) 2006-02-17 2007-08-23 Curevac Gmbh Adjuvanz in Form einer Lipid-modifizierten Nukleinsäure
EP2012751A4 (en) 2006-03-21 2010-11-24 Morehouse School Of Medicine NEW NANOPARTICLES FOR THE ACTIVE COMPOSITION
CA2648099C (en) 2006-03-31 2012-05-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc System for targeted delivery of therapeutic agents
JP5630998B2 (ja) 2006-05-15 2014-11-26 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 機能的粒子のためのポリマー
JP5571380B2 (ja) 2006-07-24 2014-08-13 ルミナス バイオサイエンシズ，インコーポレイテッド オストワルド熟成を減少させた水不溶性の医薬品物質の固体ナノ粒子処方物
US8304529B2 (en) 2006-07-28 2012-11-06 Life Technologies Corporation Dinucleotide MRNA cap analogs
EP2046954A2 (en) 2006-07-31 2009-04-15 Curevac GmbH NUCLEIC ACID OF FORMULA (I): GIXmGn, OR (II): CIXmCn, IN PARTICULAR AS AN IMMUNE-STIMULATING AGENT/ADJUVANT
CA2927045A1 (en) 2006-10-03 2008-04-10 Muthiah Manoharan Lipid containing formulations
US8313777B2 (en) 2006-10-05 2012-11-20 The Johns Hopkins University Water-dispersible oral, parenteral, and topical formulations for poorly water soluble drugs using smart polymeric nanoparticles
DE102006051516A1 (de) 2006-10-31 2008-05-08 Curevac Gmbh (Basen-)modifizierte RNA zur Expressionssteigerung eines Proteins
DE102006061015A1 (de) 2006-12-22 2008-06-26 Curevac Gmbh Verfahren zur Reinigung von RNA im präparativen Maßstab mittels HPLC
DE102007001370A1 (de) 2007-01-09 2008-07-10 Curevac Gmbh RNA-kodierte Antikörper
WO2008109712A2 (en) 2007-03-05 2008-09-12 Washington University Nanoparticle delivery systems for membrane-integrating peptides
WO2008127688A1 (en) 2007-04-13 2008-10-23 Hart Communication Foundation Synchronizing timeslots in a wireless communication protocol
US8703204B2 (en) 2007-05-03 2014-04-22 Bend Research, Inc. Nanoparticles comprising a cholesteryl ester transfer protein inhibitor and anon-ionizable polymer
HUE040417T2 (hu) 2007-05-04 2019-03-28 Marina Biotech Inc Aminosavlipidek és alkalmazásuk
US9144546B2 (en) 2007-08-06 2015-09-29 Clsn Laboratories, Inc. Nucleic acid-lipopolymer compositions
US20090042825A1 (en) 2007-08-06 2009-02-12 Majed Matar Composition, method of preparation & application of concentrated formulations of condensed nucleic acids with a cationic lipopolymer
CA2695420A1 (en) 2007-08-23 2009-02-26 Novartis Ag Methods for detecting oligonucleotides
WO2009030254A1 (en) 2007-09-04 2009-03-12 Curevac Gmbh Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation
EP2436376B1 (en) 2007-09-28 2014-07-09 BIND Therapeutics, Inc. Cancer cell targeting using nanoparticles
JP2011500569A (ja) 2007-10-12 2011-01-06 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー ワクチンナノテクノロジー
TW200927915A (en) 2007-10-25 2009-07-01 Croda Int Plc Laundry formulations and method of cleaning
SG10201408162PA (en) 2007-12-11 2015-01-29 Scripps Research Inst Compositions and methods related to mrna translational enhancer elements
WO2009086558A1 (en) 2008-01-02 2009-07-09 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Improved compositions and methods for the delivery of nucleic acids
DK2176408T5 (en) 2008-01-31 2015-12-14 Curevac Gmbh Nucleic acids comprising FORMULA (NuGiXmGnNv) a AND DERIVATIVES AS IMMUNE STIMULATING AGENTS / ADJUVANTS.
CA2721333C (en) 2008-04-15 2020-12-01 Protiva Biotherapeutics, Inc. Novel lipid formulations for nucleic acid delivery
WO2009129385A1 (en) 2008-04-16 2009-10-22 Abbott Laboratories Cationic lipids and uses thereof
WO2009129395A1 (en) 2008-04-16 2009-10-22 Abbott Laboratories Cationic lipids and uses thereof
WO2009127230A1 (en) 2008-04-16 2009-10-22 Curevac Gmbh MODIFIED (m)RNA FOR SUPPRESSING OR AVOIDING AN IMMUNOSTIMULATORY RESPONSE AND IMMUNOSUPPRESSIVE COMPOSITION
EP2288336B8 (en) 2008-04-25 2017-03-22 Northwestern University Nanostructures suitable for sequestering cholesterol
US8697098B2 (en) 2011-02-25 2014-04-15 South Dakota State University Polymer conjugated protein micelles
PL215513B1 (pl) 2008-06-06 2013-12-31 Univ Warszawski Nowe boranofosforanowe analogi dinukleotydów, ich zastosowanie, czasteczka RNA, sposób otrzymywania RNA oraz sposób otrzymywania peptydów lub bialka
JP2011525180A (ja) 2008-06-16 2011-09-15 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療的標的化ナノ粒子の製作に用いるためのジブロックコポリマーで官能化された標的薬の製造方法
WO2010005726A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same
EA020954B1 (ru) 2008-06-16 2015-03-31 Бинд Терапьютикс, Инк. Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака
WO2010030739A1 (en) 2008-09-10 2010-03-18 Abbott Laboratories Polyethylene glycol lipid conjugates and uses thereof
WO2010037408A1 (en) 2008-09-30 2010-04-08 Curevac Gmbh Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof
CA2740000C (en) 2008-10-09 2017-12-12 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids
EP3269395A1 (en) 2008-11-07 2018-01-17 Massachusetts Institute Of Technology Aminoalcohol lipidoids and uses thereof
CN111808084A (zh) 2008-11-10 2020-10-23 阿布特斯生物制药公司 用于递送治疗剂的新型脂质和组合物
US8734853B2 (en) 2008-11-17 2014-05-27 University Of North Texas Health Science Center At Fort Worth HDL particles for delivery of nucleic acids
WO2010060818A1 (de) 2008-11-25 2010-06-03 Basf Se Alkoxylierte oligo- oder polyamine als oxidationsstabilisatoren
US8563041B2 (en) 2008-12-12 2013-10-22 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
JP2012512175A (ja) 2008-12-15 2012-05-31 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子
EP3243504A1 (en) 2009-01-29 2017-11-15 Arbutus Biopharma Corporation Improved lipid formulation
WO2010088927A1 (en) 2009-02-09 2010-08-12 Curevac Gmbh Use of pei for the improvement of endosomal release and expression of transfected nucleic acids, complexed with cationic or polycationic compounds
US20140141089A1 (en) 2009-02-11 2014-05-22 Colorado School Of Mines Nanoparticles, Compositions Thereof, and Methods of Use, and Methods of Making the Same
US8460696B2 (en) 2009-03-20 2013-06-11 Egen, Inc. Polyamine derivatives
US8287910B2 (en) 2009-04-30 2012-10-16 Intezyne Technologies, Inc. Polymeric micelles for polynucleotide encapsulation
US8715736B2 (en) 2009-04-30 2014-05-06 Florida Agricultural And Mechanical University Nanoparticle formulations for skin delivery
SG10201911942UA (en) 2009-05-05 2020-02-27 Muthiah Manoharan Lipid compositions
CA3045126A1 (en) 2009-05-05 2010-11-11 Arbutus Biopharma Corporation Methods of delivering oligonucleotides to immune cells
CA2762095A1 (en) 2009-05-16 2010-11-25 Kunyuan Cui Compositions comprising cationic amphiphiles and colipids for delivering therapeutic molecules
KR101766408B1 (ko) 2009-06-10 2017-08-10 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 향상된 지질 조성물
JP5894913B2 (ja) 2009-06-15 2016-03-30 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． Ｐｃｓｋ９遺伝子を標的とする、脂質で製剤化されたｄｓｒｎａ
US9018187B2 (en) 2009-07-01 2015-04-28 Protiva Biotherapeutics, Inc. Cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents
US8569256B2 (en) 2009-07-01 2013-10-29 Protiva Biotherapeutics, Inc. Cationic lipids and methods for the delivery of therapeutic agents
WO2011000107A1 (en) 2009-07-01 2011-01-06 Protiva Biotherapeutics, Inc. Novel lipid formulations for delivery of therapeutic agents to solid tumors
EP2281579A1 (en) 2009-08-05 2011-02-09 BioNTech AG Vaccine composition comprising 5'-Cap modified RNA
WO2011017548A1 (en) 2009-08-05 2011-02-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of eg5 and vegf genes
US20110053829A1 (en) 2009-09-03 2011-03-03 Curevac Gmbh Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids
US8449916B1 (en) 2009-11-06 2013-05-28 Iowa State University Research Foundation, Inc. Antimicrobial compositions and methods
PH12012500929A1 (en) 2009-11-12 2012-11-26 Kao Corp Method for producing olefins
EP3318248B1 (en) 2009-12-01 2019-04-10 Translate Bio, Inc. Delivery of mrna for the augmentation of proteins and enzymes in human genetic diseases
EP3296398A1 (en) 2009-12-07 2018-03-21 Arbutus Biopharma Corporation Compositions for nucleic acid delivery
WO2011069529A1 (en) 2009-12-09 2011-06-16 Curevac Gmbh Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids
DK2509634T3 (en) 2009-12-11 2019-04-23 Pfizer Stable formulations for lyophilization of therapeutic particles
EP3494963A1 (en) 2009-12-18 2019-06-12 The University of British Columbia Methods and compositions for delivery of nucleic acids
CA3009891C (en) 2009-12-23 2020-09-15 Novartis Ag Lipids, lipid compositions, and methods of using them
US9149432B2 (en) 2010-03-19 2015-10-06 Massachusetts Institute Of Technology Lipid vesicle compositions and methods of use
WO2011119262A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc. Methods and systems for generating nanoparticles
US20130037977A1 (en) 2010-04-08 2013-02-14 Paul A. Burke Preparation of Lipid Nanoparticles
US20110250264A1 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Pacira Pharmaceuticals, Inc. Method for formulating large diameter synthetic membrane vesicles
KR101773643B1 (ko) 2010-04-28 2017-08-31 교와 핫꼬 기린 가부시키가이샤 양이온성 지질
US20130156845A1 (en) 2010-04-29 2013-06-20 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated single stranded rna
WO2011143230A1 (en) 2010-05-10 2011-11-17 Alnylam Pharmaceuticals Methods and compositions for delivery of active agents
US20130123338A1 (en) 2010-05-12 2013-05-16 Protiva Biotherapeutics, Inc. Novel cationic lipids and methods of use thereof
WO2011141704A1 (en) 2010-05-12 2011-11-17 Protiva Biotherapeutics, Inc Novel cyclic cationic lipids and methods of use
EP2387999A1 (en) 2010-05-21 2011-11-23 CureVac GmbH Histidine-containing solution for transfection and/or injection of nucleic acids and uses thereof
US8802863B2 (en) 2010-05-24 2014-08-12 Sirna Therapeutics, Inc. Amino alcohol cationic lipids for oligonucleotide delivery
DK2575767T3 (en) 2010-06-04 2017-03-13 Sirna Therapeutics Inc HOWEVER UNKNOWN LOW MOLECULAR CATIONIC LIPIDS TO PROCESS OIGONUCLEOTIDES
US9006417B2 (en) 2010-06-30 2015-04-14 Protiva Biotherapeutics, Inc. Non-liposomal systems for nucleic acid delivery
JP5635690B2 (ja) 2010-07-01 2014-12-03 ポステック アカデミー‐インダストリー ファウンデーション 細菌由来マイクロベシクルを用いた癌治療及び癌診断方法
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
ES2557382T3 (es) 2010-07-06 2016-01-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Liposomas con lípidos que tienen un valor de pKa ventajoso para el suministro de ARN
MX342608B (es) 2010-07-06 2016-10-06 Novartis Ag * Particulas de suministro similares a viriones para moleculas de arn de autorreplicacion.
US20130230884A1 (en) 2010-07-16 2013-09-05 John Chaput Methods to Identify Synthetic and Natural RNA Elements that Enhance Protein Translation
KR101761388B1 (ko) 2010-07-30 2017-07-25 큐어백 아게 트랜스펙션 및 면역 자극을 위한 이황화-크로스링크된 양이온 성분 및 핵산의 복합체
WO2012019630A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein
WO2012024595A2 (en) 2010-08-20 2012-02-23 University Of Washington Circumferential aerosol device for delivering drugs to olfactory epithelium and brain
LT4226941T (lt) 2010-08-31 2025-01-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Pegilintos liposomos, skirtos imunogeną koduojančios rnr pristatymui
MX2013002332A (es) 2010-08-31 2013-03-18 Novartis Ag Lipidos apropiados para suministro liposomal del arn que codifica la proteina.
SI4043040T1 (sl) 2010-08-31 2023-04-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Mali liposomi za dostavo imunogen-kodirajoče RNA
US9549901B2 (en) 2010-09-03 2017-01-24 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Lipid-polymer hybrid particles
US10307372B2 (en) 2010-09-10 2019-06-04 The Johns Hopkins University Rapid diffusion of large polymeric nanoparticles in the mammalian brain
CA2809858C (en) 2010-09-20 2019-11-12 Sirna Therapeutics, Inc. Novel low molecular weight cationic lipids for oligonucleotide delivery
BR112013008697A2 (pt) 2010-09-24 2016-06-21 Massachusetts Inst Technology géis nanoestruturados capazes de liberação controlada de agentes encapsulados
CA2811430A1 (en) 2010-09-30 2012-04-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Low molecular weight cationic lipids for oligonucleotide delivery
EP3485913A1 (en) 2010-10-21 2019-05-22 Sirna Therapeutics, Inc. Low molecular weight cationic lipids for oligonucleotide delivery
CN103380113B (zh) 2010-11-15 2018-03-30 生命科技公司 含胺的转染试剂及其制备和使用方法
WO2012089225A1 (en) 2010-12-29 2012-07-05 Curevac Gmbh Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation
CN102068701B (zh) 2011-01-18 2012-11-07 沈阳药科大学 可断裂peg脂质衍生物在制剂中的应用
US20140065172A1 (en) 2011-01-26 2014-03-06 Cenix Bioscience Gmbh Delivery system and conjugates for compound delivery via naturally occurring intracellular transport routes
US10363309B2 (en) 2011-02-04 2019-07-30 Case Western Reserve University Targeted nanoparticle conjugates
WO2012116715A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Curevac Gmbh Vaccination in newborns and infants
WO2012112730A2 (en) 2011-02-15 2012-08-23 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for delivering nucleic acid to a cell
WO2012113413A1 (en) 2011-02-21 2012-08-30 Curevac Gmbh Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates
WO2012116714A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Curevac Gmbh Vaccination in elderly patients
CN102204920B (zh) 2011-03-18 2013-03-20 海南本创医药科技有限公司 阿司匹林钠普伐他汀钠药物组合物固体制剂
WO2012129483A1 (en) 2011-03-24 2012-09-27 Novartis Ag Adjuvant nanoemulsions with phospholipids
WO2012142132A1 (en) 2011-04-11 2012-10-18 Life Technologies Corporation Polymer particles and methods of making and using same
WO2013158127A1 (en) 2012-04-16 2013-10-24 Molecular Transfer, Inc. Agents for improved delivery of nucleic acids to eukaryotic cells
AU2012249474A1 (en) 2011-04-28 2013-11-07 Stc.Unm Porous nanoparticle-supported lipid bilayers (protocells) for targeted delivery and methods of using same
MX374963B (es) 2011-04-29 2025-03-06 Selecta Biosciences Inc Nanoportadores sintéticos tolerogénicos para reducir las respuestas de anticuerpos.
ES2762224T3 (es) 2011-05-12 2020-05-22 Yissum Res Dev Co Of Hebrew Univ Jerusalem Ltd Liposomas que comprenden lípidos conjugados con polímero y usos relacionados
US8691750B2 (en) * 2011-05-17 2014-04-08 Axolabs Gmbh Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds
EP2714017B1 (en) 2011-06-02 2018-08-01 The Regents of The University of California Membrane encapsulated nanoparticles and method of use
ES2795110T3 (es) 2011-06-08 2020-11-20 Translate Bio Inc Lípidos escindibles
RU2013154295A (ru) 2011-06-08 2015-07-20 Шир Хьюман Дженетик Терапис, Инк. КОМПОЗИЦИИ ЛИПИДНЫХ НАНОЧАСТИЦ И СПОСОБЫ ДЛЯ ДОСТАВКИ мРНК
CN102813929B (zh) 2011-06-09 2014-04-09 沈阳药科大学 低浓度peg脂质衍生物及其应用
MX350258B (es) 2011-07-06 2017-08-31 Novartis Ag Emulsiones cationicas de aceite en agua.
JP6059220B2 (ja) 2011-07-06 2017-01-18 ノバルティス アーゲー 核酸を含む水中油型エマルジョン
EP2729165B1 (en) 2011-07-06 2017-11-08 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic combination compositions and uses thereof
EP4115875A1 (en) 2011-07-06 2023-01-11 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Liposomes having useful n:p ratio for delivery of rna molecules
CA2841047A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novartis Ag Immunogenic compositions and uses thereof
WO2013016058A1 (en) 2011-07-22 2013-01-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel bis-nitrogen containing cationic lipids for oligonucleotide delivery
US9126966B2 (en) 2011-08-31 2015-09-08 Protiva Biotherapeutics, Inc. Cationic lipids and methods of use thereof
JP2014527071A (ja) 2011-08-31 2014-10-09 マリンクロッド エルエルシー Ｈ−ホスホネートによるナノ粒子ｐｅｇの改変
MX366055B (es) 2011-08-31 2019-06-26 Novartis Ag Liposomas pegilados para admistracion de acido ribonucleico (arn) que codifica para inmunogeno.
CA2848212C (en) 2011-09-08 2022-03-29 Sage Therapeutics, Inc. Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof
WO2013072929A2 (en) 2011-09-23 2013-05-23 Indian Institute Of Technology Nanop article based cosmetic composition
EP3456317B1 (en) 2011-09-27 2025-09-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Di-aliphatic substituted pegylated lipids
EP2765997A4 (en) 2011-10-14 2015-06-24 Stc Unm POROUS NANOPARTICLE-SUPPORTED LIPID DOUBLE LAYERS (PROTOCOLS) FOR THE TARGETED RELEASE BY TRANSDERMAL RELEASE AND USE METHOD THEREFOR
CN107266391B (zh) 2011-10-18 2020-04-17 迪克纳制药公司 胺阳离子脂质及其用途
EP2768528A1 (en) 2011-10-20 2014-08-27 Novartis AG Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming
WO2013059922A1 (en) 2011-10-25 2013-05-02 The University Of British Columbia Limit size lipid nanoparticles and related methods
CN104023793B (zh) 2011-10-31 2017-11-24 马林克罗特有限公司 用于治疗癌症的联合脂质体组合物
US9579338B2 (en) 2011-11-04 2017-02-28 Nitto Denko Corporation Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery
EP3485875A1 (en) 2011-11-04 2019-05-22 Nitto Denko Corporation Single use system for sterelily producing lipid-nucleic acid particles
US9872870B2 (en) 2011-11-04 2018-01-23 University Of Notre Dame Du Lac Multifunctional micellar nanoparticle-based drug and targeting agent system
US9849087B2 (en) 2011-11-08 2017-12-26 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Methods and compositions for X-ray induced release from pH sensitive liposomes
JP2015500241A (ja) 2011-12-02 2015-01-05 ペガサス ラボラトリーズ インコーポレイテッド 両親媒性脂質をベースとする徐放性組成物
WO2013086354A1 (en) 2011-12-07 2013-06-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Biodegradable lipids for the delivery of active agents
AU2012347605B2 (en) 2011-12-07 2017-09-21 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Branched alkyl and cycloalkyl terminated biodegradable lipids for the delivery of active agents
WO2013086373A1 (en) 2011-12-07 2013-06-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipids for the delivery of active agents
EP2787977A4 (en) 2011-12-09 2015-05-06 Univ California LIPOSOMAL ACTIVE INVERTING
KR20140111272A (ko) 2011-12-12 2014-09-18 교와 핫꼬 기린 가부시키가이샤 양이온성 지질의 조합을 함유하는 지질 나노 입자
JP6182457B2 (ja) 2011-12-12 2017-08-16 協和発酵キリン株式会社 カチオン性脂質を含有するドラックデリバリーシステムのための脂質ナノ粒子
EP2604253A1 (en) 2011-12-13 2013-06-19 Otto Glatter Water-in-oil emulsions and methods for their preparation
WO2013087083A1 (en) 2011-12-15 2013-06-20 Biontech Ag Particles comprising single stranded rna and double stranded rna for immunomodulation
CA3018046A1 (en) 2011-12-16 2013-06-20 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
WO2013103659A1 (en) 2012-01-04 2013-07-11 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Stabilizing rna by incorporating chain-terminating nucleosides at the 3'-terminus
EP2623121A1 (en) 2012-01-31 2013-08-07 Bayer Innovation GmbH Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and an antigen
WO2013113325A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Curevac Gmbh Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation
WO2013113326A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Curevac Gmbh Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen
CN104245745B (zh) 2012-02-09 2017-03-29 生命技术公司 亲水性聚合物颗粒及其制备方法
WO2013120500A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded tumour antigen
WO2013120499A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen
WO2013120497A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein
WO2013120498A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen
US20140037573A1 (en) 2012-02-22 2014-02-06 Cerulean Pharma Inc. Conjugates, particles, compositions, and related methods
US20130243867A1 (en) 2012-02-23 2013-09-19 University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) Micelle compositions and methods for their use
EP2817287B1 (en) 2012-02-24 2018-10-03 Arbutus Biopharma Corporation Trialkyl cationic lipids and methods of use thereof
US10322089B2 (en) 2012-03-14 2019-06-18 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Nanoparticles, nanoparticle delivery methods, and systems of delivery
AU2013231638B2 (en) 2012-03-16 2017-10-12 Merck Patent Gmbh Targeting aminoacid lipids
US9717685B2 (en) 2012-03-26 2017-08-01 President And Fellows Of Harvard College Lipid-coated nucleic acid nanostructures of defined shape
WO2013143555A1 (en) 2012-03-26 2013-10-03 Biontech Ag Rna formulation for immunotherapy
AU2013240051B2 (en) 2012-03-27 2017-11-30 Sirna Therapeutics, Inc. Diether based biodegradable cationic lipids for siRNA delivery
SG11201405542UA (en) 2012-03-27 2014-10-30 Curevac Gmbh Artificial nucleic acid molecules
WO2013143700A2 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Curevac Gmbh Artificial nucleic acid molecules comprising a 5'top utr
MX362981B (es) 2012-03-27 2019-02-28 Curevac Ag Moleculas artificiales de acido nucleico para la expresion mejorada de proteina o peptido.
AU2013237874B2 (en) 2012-03-29 2018-01-18 Translate Bio, Inc. Lipid-derived neutral nanoparticles
WO2013151650A1 (en) 2012-04-05 2013-10-10 University Of Florida Research Foundation, Inc. Neurophilic nanoparticles
CA2869748C (en) 2012-04-12 2017-10-24 Yale University Vehicles for controlled delivery of different pharmaceutical agents
AU2013249548A1 (en) 2012-04-19 2014-11-06 Sirna Therapeutics, Inc. Novel diester and triester based low molecular weight, biodegradable cationic lipids for oligonucleotide delivery
EP2841056A4 (en) 2012-04-23 2015-09-16 Massachusetts Inst Technology STABLE LAYER COATED PARTICLES
AU2013256008B2 (en) 2012-05-04 2016-02-25 The Johns Hopkins University Lipid-based drug carriers for rapid penetration through mucus linings
WO2013173693A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Nanoparticles with enhanced entry into cancer cells
EP2852380A4 (en) 2012-05-23 2016-01-20 Univ Ohio State LIPID-COATED ALBUMIN NANOPARTICLE COMPOSITIONS AND METHOD FOR THE PREPARATION AND METHOD OF USE THEREOF
WO2013174409A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Curevac Gmbh Reversible immobilization and/or controlled release of nucleic acid containing nanoparticles by (biodegradable) polymer coatings
EP2858679B2 (en) 2012-06-08 2024-06-05 Translate Bio, Inc. Pulmonary delivery of mrna to non-lung target cells
HRP20181855T1 (hr) 2012-06-08 2018-12-28 Nitto Denko Corporation Lipidi za formulacije namijenjene unosu terapijskog sredstva
WO2014008334A1 (en) 2012-07-06 2014-01-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Stable non-aggregating nucleic acid lipid particle formulations
TW201408625A (zh) 2012-07-06 2014-03-01 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd 陽離子性脂質
US9956291B2 (en) 2012-07-10 2018-05-01 Shaker A. Mousa Nanoformulation and methods of use of thyroid receptor beta1 agonists for liver targeting
WO2014028487A1 (en) 2012-08-13 2014-02-20 Massachusetts Institute Of Technology Amine-containing lipidoids and uses thereof
CA2881605A1 (en) 2012-08-14 2014-02-20 Aaron FROESE Internal structured self assembling liposomes
JP2015524849A (ja) 2012-08-15 2015-08-27 ザ・ユニバーシティ・オブ・シカゴＴｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｃｈｉｃａｇｏ 神経変性疾患に対するエキソソームに基づく治療法
WO2014047649A1 (en) 2012-09-24 2014-03-27 The Regents Of The University Of California Methods for arranging and packing nucleic acids for unusual resistance to nucleases and targeted delivery for gene therapy
US20150246137A1 (en) 2012-09-27 2015-09-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Lipid coated nanoparticles containing agents having low aqueous and lipid solubilities and methods thereof
WO2014048969A1 (en) 2012-09-28 2014-04-03 Ionovation Gmbh Reactive, lipophilic nucleoside building blocks for the synthesis of hydrophobic nucleic acids
US20150202153A1 (en) 2012-10-04 2015-07-23 University Of The Witwatersrand, Johannesburg Liposomal drug delivery system
WO2014071072A2 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Pungente Michael D Novel cationic carotenoid-based lipids for cellular nucleic acid uptake
US9669104B2 (en) 2012-11-07 2017-06-06 Council Of Scientific And Industrial Research Nanocomplex containing amphipathic peptide useful for efficient transfection of biomolecules
EP4331620A3 (en) 2012-12-07 2024-12-04 Translate Bio, Inc. Lipidic nanoparticles for mrna delivery
US9974845B2 (en) 2013-02-22 2018-05-22 Curevac Ag Combination of vaccination and inhibition of the PD-1 pathway
US20160032316A1 (en) 2013-03-14 2016-02-04 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Purification and Purity Assessment of RNA Molecules Synthesized with Modified Nucleosides
CN105143456A (zh) 2013-03-15 2015-12-09 不列颠哥伦比亚大学 用于转染的脂质纳米粒子和相关方法
EP3388834B1 (en) 2013-03-15 2020-04-15 Translate Bio, Inc. Synergistic enhancement of the delivery of nucleic acids via blended formulations
WO2014182661A2 (en) 2013-05-06 2014-11-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc Dosages and methods for delivering lipid formulated nucleic acid molecules
WO2014210356A1 (en) 2013-06-26 2014-12-31 Massachusetts Institute Of Technology Multi-tailed lipids and uses thereof
WO2015002667A1 (en) 2013-07-01 2015-01-08 Myq, Inc. A location regulated point-of-sale system and enhancements
JP6620093B2 (ja) 2013-07-23 2019-12-11 アービュートゥス バイオファーマ コーポレイションＡｒｂｕｔｕｓ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ メッセンジャーｒｎａを送達するための組成物及び方法
MY174677A (en) 2013-08-21 2020-05-06 Curevac Ag Composition and vaccine for treating lung cancer
BR112016001192A2 (pt) 2013-08-21 2017-08-29 Curevac Ag Vacina contra a raiva
BR112016003361A2 (pt) 2013-08-21 2017-11-21 Curevac Ag vacina do vírus sincicial respiratório (rsv)
AU2014310935B2 (en) 2013-08-21 2019-11-21 CureVac SE Combination vaccine
RU2016109938A (ru) 2013-08-21 2017-09-26 Куревак Аг Композиция и вакцина для лечения рака предстательной железы
KR102354389B1 (ko) 2013-08-21 2022-01-20 큐어백 아게 Rna―암호화된 단백질의 발현을 증가시키는 방법
WO2015062738A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Curevac Gmbh Modified rna with decreased immunostimulatory properties
US9365610B2 (en) 2013-11-18 2016-06-14 Arcturus Therapeutics, Inc. Asymmetric ionizable cationic lipid for RNA delivery
US10426737B2 (en) 2013-12-19 2019-10-01 Novartis Ag Lipids and lipid compositions for the delivery of active agents
SG11201604198YA (en) 2013-12-30 2016-07-28 Curevac Ag Methods for rna analysis
CN111304231A (zh) 2013-12-30 2020-06-19 库瑞瓦格股份公司 人工核酸分子
CA2927254C (en) 2013-12-30 2023-10-24 Curevac Ag Artificial nucleic acid molecules
US10821175B2 (en) 2014-02-25 2020-11-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Lipid nanoparticle vaccine adjuvants and antigen delivery systems
US9833416B2 (en) 2014-04-04 2017-12-05 Ohio State Innovation Foundation Oligonucleotide lipid nanoparticle compositions, methods of making and methods of using the same
HUE060907T2 (hu) 2014-06-25 2023-04-28 Acuitas Therapeutics Inc Új lipidek és lipid nanorészecske formulációk nukleinsavak bevitelére
BR112016030852A2 (pt) 2014-07-02 2018-01-16 Shire Human Genetic Therapies encapsulação de rna mensageiro
US9840479B2 (en) 2014-07-02 2017-12-12 Massachusetts Institute Of Technology Polyamine-fatty acid derived lipidoids and uses thereof
CN104644555A (zh) 2014-11-18 2015-05-27 中国科学院过程工程研究所 一种避免加速血液清除现象的长循环脂质体、制备方法及应用
JP2018509387A (ja) 2015-01-21 2018-04-05 フェーズアールエックス インコーポレイテッド 細胞に治療および診断剤を送達するための方法、組成物、ならびにシステム
EP3247363A4 (en) 2015-01-21 2018-10-03 Moderna Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticle compositions
AU2016253972B2 (en) 2015-04-27 2020-01-02 Acuitas Therapeutics Inc. Nucleoside-modified RNA for inducing an adaptive immune response
PT3313829T (pt) 2015-06-29 2024-07-08 Acuitas Therapeutics Inc Formulações de lípidos e de nanopartículas lipídicas para a administração de ácidos nucleicos
JP2018150239A (ja) * 2015-07-15 2018-09-27 協和発酵キリン株式会社 β２ＧＰＩ遺伝子発現抑制ＲＮＡｉ医薬組成物
EP3325505B1 (en) 2015-07-23 2020-08-19 Modernatx, Inc. Messenger ribonucleic acids for the production of intracellular binding polypeptides and methods of use thereof
US11564893B2 (en) 2015-08-17 2023-01-31 Modernatx, Inc. Methods for preparing particles and related compositions
JP6948313B6 (ja) 2015-09-17 2022-01-14 モデルナティエックス インコーポレイテッド 治療剤の細胞内送達のための化合物および組成物
EP4011451A1 (en) 2015-10-22 2022-06-15 ModernaTX, Inc. Metapneumovirus mrna vaccines
AU2016342376A1 (en) 2015-10-22 2018-06-07 Modernatx, Inc. Sexually transmitted disease vaccines
HRP20230209T1 (hr) 2015-10-28 2023-04-14 Acuitas Therapeutics Inc. Novi lipidi i lipidne formulacije nanočestica za isporuku nukleinskih kiselina
PL3386484T3 (pl) 2015-12-10 2022-07-25 Modernatx, Inc. Kompozycje i sposoby dostarczania środków terapeutycznych
WO2017100744A1 (en) * 2015-12-11 2017-06-15 Preceres Inc. Aminolipidoids and uses thereof
MA43568A (fr) 2015-12-17 2018-11-14 Modernatx Inc Polynucléotides codant pour la méthylmalonyl-coa mutase
LT3394030T (lt) 2015-12-22 2022-04-11 Modernatx, Inc. Junginiai ir kompozicijos terapinei medžiagai teikti intraceliuliniu būdu
WO2017117528A1 (en) 2015-12-30 2017-07-06 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
EP3405579A1 (en) 2016-01-22 2018-11-28 Modernatx, Inc. Messenger ribonucleic acids for the production of intracellular binding polypeptides and methods of use thereof
US10457631B2 (en) 2016-04-06 2019-10-29 Ohio State Innovation Foundation Biodegradable amino-ester nanomaterials for nucleic acid delivery
WO2017180917A2 (en) 2016-04-13 2017-10-19 Modernatx, Inc. Lipid compositions and their uses for intratumoral polynucleotide delivery
WO2017192470A1 (en) 2016-05-03 2017-11-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination therapy of anti-il-10 antibody and compositions comprising lipid nanoparticles and tlr9 agonist cpg oligonucleotides
WO2017201328A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Modernatx, Inc. POLYNUCLEOTIDES ENCODING α-GALACTOSIDASE A FOR THE TREATMENT OF FABRY DISEASE
JP2019519516A (ja) 2016-05-18 2019-07-11 モデルナティーエックス， インコーポレイテッド がんの治療のためのｍＲＮＡ併用療法
US11001861B2 (en) 2016-05-18 2021-05-11 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding galactose-1-phosphate uridylyltransferase for the treatment of galactosemia type 1
SI3458083T1 (sl) 2016-05-18 2023-03-31 Modernatx, Inc. Polinukleotidi, ki kodirajo interlevkin-12 (IL12) in njihova uporaba
US12123030B2 (en) 2016-05-18 2024-10-22 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding lipoprotein lipase for the treatment of hyperlipidemia
WO2017201342A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding jagged1 for the treatment of alagille syndrome
EP3458108A4 (en) 2016-05-18 2020-04-22 ModernaTX, Inc. POLYNUCLEOTIDES ENCODING A CYSTIC FIBROSIS TRANSMEMBRANE CONDUCTANCE REGULATOR FOR THE TREATMENT OF CYSTIC FIBROSIS
JP7194594B2 (ja) 2016-05-18 2022-12-22 モデルナティエックス インコーポレイテッド 免疫調節ポリペプチドをコードするｍＲＮＡの組み合わせ及びその使用
US20190298657A1 (en) 2016-05-18 2019-10-03 Modernatx, Inc. Polynucleotides Encoding Acyl-CoA Dehydrogenase, Very Long-Chain for the Treatment of Very Long-Chain Acyl-CoA Dehydrogenase Deficiency
WO2017201317A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Modernatx, Inc. Polyribonucleotides containing reduced uracil content and uses thereof
MA45036A (fr) * 2016-05-18 2019-03-27 Modernatx Inc Polynucléotides codant pour la citrine pour le traitement de la citrullinémie de type 2
IL263079B2 (en) 2016-05-18 2024-05-01 Modernatx Inc Polynucleotides encoding relaxin
EP3458104A1 (en) 2016-05-18 2019-03-27 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding porphobilinogen deaminase for the treatment of acute intermittent porphyria
WO2017218704A1 (en) 2016-06-14 2017-12-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
CA3040337A1 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Curevac Ag Lipid nanoparticle mrna vaccines
EP3532103B1 (en) 2016-10-26 2025-12-03 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticle formulations
US20190274968A1 (en) 2016-10-27 2019-09-12 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Nucleoside-modified rna for inducing an adaptive immune response
US11583504B2 (en) 2016-11-08 2023-02-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
BR112019015797A2 (pt) 2017-02-01 2020-03-17 Modernatx, Inc. Composições de mrna terapêuticas imunomoduladoras que codificam peptídeos de mutação de oncogene de ativação
EP4186888B1 (en) 2017-03-15 2025-11-26 ModernaTX, Inc. Compound and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
WO2018170270A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Varicella zoster virus (vzv) vaccine
EP3595713A4 (en) 2017-03-15 2021-01-13 ModernaTX, Inc. RESPIRATORY SYNCYTIAL VIRUS Vaccine
WO2018170322A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Crystal forms of amino lipids
CA3055653A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle formulation
WO2018191719A1 (en) 2017-04-13 2018-10-18 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipid delivery of therapeutic agents to adipose tissue
CN110799492B (zh) 2017-04-28 2023-06-27 爱康泰生治疗公司 用于递送核酸的新型羰基脂质和脂质纳米颗粒制剂
WO2018225871A1 (ja) 2017-06-09 2018-12-13 協和発酵キリン株式会社 カチオン性脂質としての化合物
WO2018232120A1 (en) 2017-06-14 2018-12-20 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
CA3073020A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for use in lipid nanoparticle formulations
WO2019036030A1 (en) 2017-08-17 2019-02-21 Acuitas Therapeutics, Inc. LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS
EP3675817A1 (en) 2017-08-31 2020-07-08 Modernatx, Inc. Methods of making lipid nanoparticles
WO2019089828A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Acuitas Therapeutics, Inc. Lamellar lipid nanoparticles
US20190314291A1 (en) 2018-01-30 2019-10-17 Modernatx, Inc. Compositions and methods for delivery of agents to immune cells
WO2019193183A2 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Curevac Ag Novel yellow fever nucleic acid molecules for vaccination
AU2019254591B2 (en) 2018-04-17 2025-12-11 CureVac SE Novel RSV RNA molecules and compositions for vaccination
EP3813874A1 (en) 2018-06-27 2021-05-05 CureVac AG Novel lassa virus rna molecules and compositions for vaccination
WO2020061367A1 (en) 2018-09-19 2020-03-26 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
WO2020061457A1 (en) 2018-09-20 2020-03-26 Modernatx, Inc. Preparation of lipid nanoparticles and methods of administration thereof
TW202039534A (zh) 2018-12-14 2020-11-01 美商美國禮來大藥廠 KRAS變體mRNA分子
AU2020350759A1 (en) 2019-09-19 2022-03-31 Modernatx, Inc. Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
US20230000773A1 (en) 2019-09-19 2023-01-05 Modernatx, Inc. Novel headgroup lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
CA3155015A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Modernatx, Inc. Carbonate containing lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
WO2021204175A1 (en) 2020-04-09 2021-10-14 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid nanoparticle composition
US20240226026A1 (en) 2021-03-24 2024-07-11 Modernatx, Inc. Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
AR127892A1 (es) 2021-12-10 2024-03-06 Modernatx Inc Compuestos y composiciones para la administración de agentes terapéuticos
CN116924923A (zh) 2022-04-02 2023-10-24 科镁信（上海）生物医药科技有限公司 阳离子脂质、脂质体及用途

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017112865A1 (en) 2017-06-29
AU2016377681B2 (en) 2021-05-13
EP4036079A2 (en) 2022-08-03
AU2021215174B2 (en) 2023-09-28
US20180369419A1 (en) 2018-12-27
US10195156B2 (en) 2019-02-05
SI3394030T1 (sl) 2022-04-29
ES2913626T5 (en) 2025-05-12
US12396961B2 (en) 2025-08-26
EP3394030A1 (en) 2018-10-31
US20180333366A1 (en) 2018-11-22
US10799463B2 (en) 2020-10-13
EP4036079B1 (en) 2025-11-19
CA3007297A1 (en) 2017-06-29
JP2019508371A (ja) 2019-03-28
JP2022160523A (ja) 2022-10-19
SMT202200252T1 (it) 2022-07-21
JP7114465B2 (ja) 2022-08-08
EP3394030B1 (en) 2021-12-22
CY1125087T1 (el) 2023-06-09
HRP20220268T1 (hr) 2022-05-13
AU2016377681A1 (en) 2018-06-14
US20210161829A1 (en) 2021-06-03
AU2021215174A1 (en) 2021-09-02
JP7367137B2 (ja) 2023-10-23
HUE057877T2 (hu) 2022-06-28
EP4036079A3 (en) 2022-09-28
ES2913626T3 (es) 2022-06-03
DK3394030T3 (da) 2022-03-28
EP3394030B2 (en) 2025-02-12
LT3394030T (lt) 2022-04-11
PL3394030T3 (pl) 2022-04-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7367137B2 (ja) 薬剤の細胞内送達のための化合物および組成物
US12077501B2 (en) Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
JP7326395B2 (ja) 治療剤の細胞内送達のための化合物および組成物
JP7410135B2 (ja) 治療薬の細胞内送達のための化合物及び組成物
JP7167049B2 (ja) 治療剤の細胞内送達のための化合物及び組成物
HK40078722A (en) Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
RU2798342C2 (ru) Соединения и композиции для внутриклеточной доставки терапевтических агентов