RS63483B1 - 3-supstituisane propionske kiseline kao inhibitori alfa v integrina - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na supstituisane 3-azolopropionske kiseline kao antagoniste αV integrina, farmaceutske kompozicije koje sadrže takva jedinjenja i na njihovu primenu u terapiji, posebno u lečenju ili profilaksi bolesti, poremećaja i stanja za koje je antagonist αV integrina indikovan kod ljudi.

STANJE TEHNIKE

[0002] Integrini pripadaju velikoj porodici α/β heterodimernih transmembranskih proteina koji su uključeni u ćelijsku adheziju na širok spektar proteina ekstracelularnog matriksa, interakcije ćelija-ćelija, migraciju ćelija, proliferaciju, opstanak i održavanje integriteta tkiva (Barczyk i sarad. Cell and Tissue Research 2010, 339, 269; Srichai, M. B.; Zent, R. u Cell-Extracellular Matrix Intereactions in Cancer, 2010). Kod sisara postoje 24 α/β heterodimerna integrina poznata iz različitih kombinacija 18 alfa i 8 beta podjedinica. Transformacioni faktor rasta-β (TGF-β) ima centralnu ulogu u pokretanju brojnih patoloških procesa koji su u osnovi fibroze, rasta ćelija i autoimunih bolesti. Alfa V (αV) integrini, koji uključuju αVβ1, αVβ3, αVβ5, αYβ6, i αVβ8, uključeni su u kritični put koji vodi ka konverziji latentnog TGF-β ka njegovom aktivnom obliku (Henderson, N. C.; Sheppard, D. Biochim, Biophys. Acta 2013, 1832, 891). Dakle, antagonizam takve aktivacije latentnog TGF-β posredovane sa αV integrinom pruža održiv terapijski pristup za intervenciju u patološkim stanjima izazvanim sa TGF-β (Sheppard, D. Eur. Resp. Rev. 2008, 17, 157; Goodman, S. L.; Picard, M. Trends Pharmacol. Sciences 2012, 33(7), 405; Hinz, B. Nature Medicine 2013, 19(12), 1567; Pozzi, A.; Zent, R.J. Am. Soc. Nephrol. 2013, 24(7), 1034). Svih pet αV integrina pripada malom podskupu (8 od 24) integrina koji prepoznaju motiv arginin-glicin-asparaginska kiselina (RGD) prisutan u njihovim prirodnim ligandima kao što su fibronektin, vitronektin i peptid povezan sa latencijom (LAP).

[0003] Eksprimiranje podtipova αV integrina značajno varira. Na primer, αYβ6 se eksprimira na epitelnim ćelijama u veoma niskim nivoima u zdravom tkivu, ali se značajno pojačava tokom upale i zarastanja rana. αVβ3 i αVβ5 eksprimiraju se na osteoklastima, endotelnim, ćelijama glatkih mišića i solidnih tumora, kao i na pericitima i podocitima, dok se αVβ1 eksprimirana aktiviranim fibroblastima i mezangijalnim ćelijama.

[0004] Fibrozna stanja koja predstavljaju glavne nezadovoljene medicinske potrebe su idiopatska plućna fibroza (IPF), fibroza jetre i bubrega, bolest nealkoholne masne jetre (NAFLD), nealkoholni steato-hepatitis (NASH), kao i sistemska skleroza. Dva leka, pirfenidon i nintedanib, koji deluju mehanizmima koji nisu posredovani integrinom, nedavno su odobrena za lečenje IPF-a. Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja koja inhibiraju ili antagonizuju dejstvo jednog ili više αV integrina u lečenju patoloških stanja, kao što su fibroza i kancer, posredovanih ovim integrinima.

[0005] U literaturi je prijavljen izvestan broj selektivnih ili neselektivnih sitnomolekulskih, peptidnih i antagonista αV integrina na bazi antitela (Kapp, T. G. i sarad. Expert Opin. Ther. Patents 2013, 23(10), 1273; O'Day, S. i sarad. Brit. J. Cancer 2011, 105(3), 346; Pickarski, M. i sarad. Oncol. Rep.2015, 33, 2737; Wirth, M. i sarad. Eur. Urol.2014, 897; Henderson, N. C. i sarad. Nature Medicine 2012, 19(12), 1617; Horan, G. S. i sarad. Am. J. Resp. Crit. Care Med.

2008, 177, 56; Puthawala, K. i sarad. Am. J. Resp. Crit. Care Med.2008, 177, 82; Reed, N. I. i sarad. Sci. Transl. Med.2015, 7(288), 288ra79; Anderson, N. A. i sarad. WO 2014/154725 A1, WO 2016/046225 A1, WO 2016/046226 A1, WO 2016/046230 A1, WO 2016/046241 A1). Dokument US2016/264566 stavlja na uvid javnosti selektvine inhibitore αvβ1 integrina. Dokumenti US 2008/045521 i US 2008/255183 otkrivaju α5β1 antagoniste. Dokumenti WO 99/30709 i US 6,090,944 odnose se na antagoniste integrinskih receptora αvβ3, αvβ5 i/ili αvβ6.

SUŠTINA PRONALASKA

[0006] U jednom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IIc), (III), (IVa) i (IVb), kao i njihove podrodove i vrste uključujući stereoizomere, tautomere, farmaceutski prihvatljive soli i solvate istog, koji su korisni kao antagonisti αV integrina.

[0007] U drugom aspektu, ovaj pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutske kompozicije koje sadrže farmaceutski prihvatljiv nosač i najmanje jedno od jedinjenja ovog pronalaska ili stereoizomere, tautomere, farmaceutski prihvatljive soli ili solvate istog.

[0008] U drugom aspektu, jedinjenja pronalaska mogu se koristiti u terapiji, bilo sama ili u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa.

[0009] Jedinjenja pronalaska mogu se koristiti u lečenju bolesti, poremećaja ili stanja koja su u vezi sa disregulacijom integrina koji sadrže αvkod pacijenta kojima je potrebno takvo lečenje administriranjem pacijentu terapijski efikasne količine jedinjenja, ili stereoizomera, tautomera, ili farmaceutski prihvatljive soli ili solvata istog. Bolest, poremećaj ili stanje mogu biti u vezi sa patološkom fibrozom. Jedinjenja pronalaska se mogu koristiti sama, u kombinaciji sa jednim ili više jedinjenja iz ovog pronalaska, ili u kombinaciji sa jednim ili više, npr., jednim do dva, druga terapijska agensa.

[0010] Ostale karakteristike i prednosti pronalaska biće očigledne iz sledećeg detaljnog opisa i patentnih zahteva.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0011] Predmetna prijava obezbeđuje jedinjenja, uključujući sve stereoizomere, solvate i farmaceutski prihvatljive soli i solvatne oblike istog, prema formulama (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IVa) i (IVb). Predmetna prijava takođe obezbeđuje farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno jedinjenje prema formuli (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IVa) i (IVb), ili ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog, i opciono najmanje jedan dodatni terapijski agens. Dodatno, predmetna prijava obezbeđuje jedinjenje iz ovog pronalaska, ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog, i opciono u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim terapijskim agensom za primenu u lečenju pacijenata koji pati od bolesti ili poremećaja modulisanog αV integrinom kao što je, na primer, idiopatska plućna fibroza (IPF), fibroza jetre i bubrega, bolest nealkoholne masne jetre (NAFLD), nealkoholni steato-hepatitis (NASH), fibroza srca i sistemska skleroza.

I. JEDINJENJA PRONALASKA

[0012] U jednom tehničkom rešenju, ovaj pronalazak obezbeđuje, inter alia, jedinjenje formule:

ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog, pri čemu: R<1>je segment mimetika arginina izabran iz grupe koja se sastoji od

X je C1-6alkilen supstituisan sa 0, 1, ili 2 R<7b>;

R<2>je vodonik ili C1-6alkil;

R<3>je

ili R<2>i R<3>uzeti zajedno sa atomom za koji su vezani formiraju karbociklil ili heterociklil, pri čemu je karbociklil i heterociklil svaki nezavisno supstituisan sa 0, 1, 2 ili 3 R<12>; R<4>je vodonik

R<5>je H ili R<5a>; i R<5a>je metil, etil, izopropil, n-butil, izopentil, ili strukturni segment odabran od

R<7b>su svaki nezavisno halo, cijano, hidroksil, amino, C1-6alkil, haloalkil, hidroksialkil, aminoalkil, alkoksi, haloalkoksi, amido, karbamat, ili sulfonamid;

R<12>je nezavisno halo, cijano, nitro, OH, amino, C1-6alkil, alkoksi, aminoalkil, haloalkil, haloalkoksi, haloaminoalkil, karbociklil sa 3 do 6 članova, ili heterociklil sa 3 do 6 članova, 6- do 10-člani aril, ili 5- do 10-člani heteroaril; gde je aril i heteroaril, samostalno ili kao deo druge grupe, svaki nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halo, cijano, hidroksil, amino, C1-6alkil, haloalkil, hidroksialkil, aminoalkil, alkoksi, haloalkoksi, amido, karbamat, i sulfonamid; i karbociklil i heterociklil, samostalno ili kao deo druge grupe je svaki nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halo, cijano, hidroksil, amino, okso, C1-6alkil, haloalkil, hidroksialkil, aminoalkil, alkoksi, haloalkoksi, amido, karbamat, ili sulfonamid.

[0013] U jednom tehničkom rešenju, R<3>i R<4>nisu oba vodonik.

[0014] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje je predstavljeno strukturnom formulom (IIa), (IIb), (IIc), ili (IId):

gde su X, R<1>, R<2>, R<3>, i R<4>isti kao što je prethodno definisano; i

[0015] U jednom tehničkom rešenju formule (IIa), (IIb), (IIc), ili (IId), X je C2-5alkilen.

[0016] U jednom tehničkom rešenju formule (IIa), (IIb), (IIc), ili (IId), R<2>je vodonik.

[0017] U jednom tehničkom rešenju formule (IIa), (IIb), (IIc), ili (IId), R<5>je vodonik.

[0018] U jednom tehničkom rešenju formule (IIa) ili (IIb), jedinjenje je predstavljeno sledećim strukturnim formulama:

[0019] U jednom tehničkom rešenju formule (IIe) ili (IIf), X je -CH2CH2CH2- ili -CH2CH2CH2CH2-;

[0020] U jednom tehničkom rešenju formule (IIe) ili (IIf), R<1>je

[0021] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje je predstavljeno strukturnom formulom (IVa) ili (IVb):

gde su X, R<1>, R<2>, R<3>, i R<4>isti kao što je prethodno definisano; i

R<5>je H, metil, etil, izopropil, n-butil, izopentil, ili strukturni segment odabran među

[0022] U jednom tehničkom rešenju formule (IVa) ili (IVb), R<1>je odabrano među strukturnim formulama odabranim iz grupe koja se sastoji od

1

[0023] U jednom tehničkom rešenju formule (IVa) ili (IVb), X is C2-5alkilen.

[0024] U jednom tehničkom rešenju formule (IVa) ili (IVb), R<2>je vodonik.

[0025] U jednom tehničkom rešenju formule (IVa) ili (IVb), R<5>je vodonik.

[0026] U jednom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak omogućava, inter alia, jedinjenja izabrana iz bilo kog od primera kao što je opisano u specifikaciji, ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog.

II. FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE, TERAPIJSKA SREDSTVA I KOMBINACIJE

[0027] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje kompoziciju koja sadrži najmanje jedno od jedinjenja predmetnog pronalaska, ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog.

[0028] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i bar jedno od jedinjenja predmetnog pronalaska ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog.

[0029] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i terapijski efikasnu količinu najmanje jednog od jedinjenja predmetnog pronalaska ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog.

[0030] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju kao što je prethodno definisano koja dalje sadrži jedan ili više dodatnih terapijskih agenasa.

[0031] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje predmetnog pronalaska, ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog, pacijentu za primenu u lečenju bolesti, poremećaja, ili stanja koje je u vezi sa disregulacijom αvintegrina kod pacijenta kome je potrebno takvo lečenje.

[0032] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje prema predmetnom pronalasku, ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog, za upotrebu u izazivanju antagonističkog efekta na receptor integrina kod pacijenta. U jednom tehničkom rešenju, antagonistički efekat na receptor integrina je antagonistički efekat na bilo kom od αvβ6, αvβ1, αvβ3, αvβ5, i αvβ8; ili kombinaciji jednog ili više od αvβ6, αvβ1, αvβ3, αvβ5, i αvβ8. Na primer, antagonistički efekat na receptor integrina može biti αvβ6, αvβ1, αvβ3, αvβ5, i αvβ8 antagonistički efekat.

[0033] U nekim tehničkim rešenjima, bolest, poremećaj, ili stanje je u vezi sa fibrozom, uključujući fibrozu pluća, jetre, bubrega, srca, kože, oka i pankreasa.

[0034] U drugim tehničkim rešenjima, bolest, poremećaj, ili stanje je u vezi sa poremećajima proliferacije ćelija, kao što je kancer. U nekim tehničkim rešenjima, kancer uključuje rast solidnog tumora ili neoplazije. U drugim tehničkim rešenjima, kancer uključuje metastaze tumora. U nekim tehničkim rešenjima, kancer predstavlja kancer mokraćne bešike, krvi, kostiju, mozga, dojke, centralnog nervnog sistema, grlića materice, debelog creva, endometrijuma, jednjaka, žučne kese, genitalija, genitourinarnog trakta, glave, bubrega, larinksa, jetre, pluća, mišićnog tkiva, vrata, oralne ili nazalne sluzokože, jajnika, pankreasa, prostate, kože, slezine, tankog creva, debelog creva, želuca, testisa, ili štitne žlezde. U drugim tehničkim rešenjima, kancer predstavlja karcinom, sarkom, limfom, leukemiju, melanom, mezoteliom, multipli mijelom, ili seminom.

[0035] Primeri bolesti, poremećaja, ili stanja koji su u vezi sa aktivnošću αvintegrina koji se mogu sprečiti, modulisati ili lečiti prema predmetnom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, injektiranje transplantata, fibrozne poremećaje (npr., idiopatsku plućnu fibrozu (IPF), intersticijsku bolest pluća, fibrozu jetre, fibrozu bubrega, fibrozu kože, sistemsku sklerozu), inflamatorne poremećaje (npr. akutni hepatitis, hronični hepatitis, nealkoholni steatohepatitis (NASH), psorijazu, sindrom iritabilnog creva (IBS), inflamatornu bolest creva (IBD)), osteoporozu, kao i poremećaje ćelijske proliferacije (npr. kancer, mijelom, fibrom, hepatokarcinom, Karpoši sarkom, solidne tumore).

[0036] Fibrozni poremećaji, inflamatorni poremećaji, kao i ćelijski proliferativni poremećaji koji su pogodni za sprečavanje ili lečenje jedinjenjem prema predmetnom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, idiopatsku plućnu fibrozu (IPF), intersticijsku bolest pluća, nespecifičnu intersticijsku pneumoniju (NSIP), uobičajenu intersticijsku pneumoniju (UIP), fibrozu izazvanu zračenjem, porodičnu plućnu fibrozu, fibrozu disajnih puteva, hroničnu opstruktivnu plućnu bolest (HOBP), dijabetesnu nefropatiju, fokalnu segmentnu glomerulosklerozu, IgA nefropatiju, nefropatiju izazvanu lekovima ili transplantacijom, autoimunu nefropatiju, lupus nefritis, fibrozu jetre, fibrozu bubrega, hroničnu bolest bubrega (HBB), dijabetesnu bolest bubrega (DKD), fibrozu kože, keloide, sistemsku sklerozu, sklerodermu, virusno izazvanu fibrozu, nealkoholnu masnu bolest jetre (NAMBJ), alkoholni ili nealkoholni steatohepatitis (NASH), akutni hepatitis, hronični hepatitis, cirozu jetre, primarni sklerozirajući holangitis, hepatitis izazvan lekovima, bilijarnu cirozu, portalnu hipertenziju, regenerativno zatajenje, hipofunkciju jetre, poremećaj protoka krvi u jetri, nefropatiju, pneumoniju, psorijazu, sindrom iritabilnog creva (SIC), inflamatornu bolest creva (IBC), abnormalnu sekreciju pankreasa, benignu hiperplaziju prostate, neuropatsku bolest mokraćne bešike, tumor kičmene moždine, herniju intervertebralnog diska, stenozu kičmenog kanala, srčanu insuficijenciju, srčanu fibrozu, vaskularnu fibrozu, perivaskularnu fibrozu, bolest ruku i nogu, kancer, mijelom, fibrom, hepatokarcinom, leukemiju, hroničnu limfocitnu leukemiju, Karpošijev sarkom, solidne tumore, cerebralni infarkt, cerebralnu hemoragiju, neuropatski bol, perifernu

1

neuropatiju, senilnu makularnu degeneraciju (SMD), glaukom, fibrozu oka, ožiljke rožnjače, dijabetesnu retinopatiju, proliferativnu vitreoretinopatiju (PVR), cikatricijalni pemfigoid ožiljak nakon filtracione operacije glaukoma, Kronovu bolest ili sistemski eritemski lupus; formiranje keloida kao rezultat abnormalnog zarastanja rana; fibrozu koja se javlja nakon transplantacije organa, mijelofibrozu, i fibroide. U jednom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za lečenje fibroznog poremećaja, inflamatornog poremećaja, ili poremećaja ćelijske proliferacije, koji obuhvata administraciju pacijentu kome je potrebno takvo lečenje terapijski efikasne količine najmanje jednog od jedinjenja predmetnog pronalaska, samog, ili, opciono u kombinaciji sa drugim jedinjenjenjem predmetnog pronalaska i/ili najmanje još jednim drugim tipom terapijskog agensa.

[0037] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje prema predmetnom pronalasku za primenu u terapiji.

[0038] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje prema predmetnom pronalasku za primenu u terapiji za lečenje fibroznog poremećaja, inflamatornog poremećaja, ili poremećaja proliferacije ćelija istog.

[0039] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje prvi i drugi terapijski agens, gde je prvi terapijski agens jedinjenje prema predmetnom pronalasku za primenu u lečenju fibroznog poremećaja, inflamatornog poremećaja, ili poremećaja proliferacije ćelija kod pacijenta kome je to potrebno.

[0040] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje kombinovani preparat jedinjenja prema predmetnom pronalasku i dodatnog terapijskog agensa/agenasa za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu primenu u terapiji.

[0041] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje kombinovani preparat jedinjenja prema predmetnom pronalasku i dodatnog terapijskog agensa/agenasa za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu primenu u terapiji fibroznog poremećaja, inflamatornog poremećaja ili poremećaja ćelijske proliferacije.

[0042] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu se koristiti u kombinaciji sa dodatnim terapijskim agensom(agensima), kao što je jedan ili više anti-fibrotičnih i/ili antiinflamatornih terapijskih agenasa.

[0043] U jednom tehničkom rešenju, dodatna terapijska sredstva koja se koriste u kombinovanim farmaceutskim kompozicijama ili kombinovanim postupcima ili kombinovanim primenama, biraju se od jednog ili više, poželjno jednog do tri, sledeća terapijska agensa: inhibitori sinteze TGFβ (na primer, pirfenidon), inhibitori faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF), faktor rasta koji potiče od trombocita (PDGF) i faktor rasta fibroblasta (FGF) receptor kinaze (na primer, nintedanib), humanizovano anti-αvβ6 monoklonsko antitelo (na primer, 3G9), humani rekombinantni pentraksin-2, rekombinantni humani serumski amiloid P, rekombinantno humano antitelo protiv TGFβ-1, -2, i -3, antagonisti receptora endotelina (na primer, macitentan), interferon gama, inhibitor c-Jun aminoterminalne kinaze (JNK) (na primer, 4-[[9-[(3S)-tetrahidro-3-furanil]-8-[(2,4,6-trifluorofenil)amino]-9H-purin-2-il]amino]-trans-cikloheksanol, 3-pentilbenzen sirćetna kiselina (PBI-4050), tetra-supstituisani porfirinski derivat koji sadrži mangan (III), monoklonsko antitelo koje cilja na eotaksin-2, interleukin-13 (IL-13) antitelo (na primer, lebrikizumab, tralokinumab), bispecifično antitelo koje targetira na interleukin 4 (IL-4) i interleukin 13 (IL-13), agonist NK1 tahikinin receptora (na primer, Sar<9>, Met(O2)<11>-supstanca P), cintredekin besudotoks, humana rekombinantna DNK-izvedena, IgG1 kapa monoklonsko antitelo na faktor rasta vezivnog, i potpuno humano IgG1 kapa antitelo, selektivno za CC-hemokin ligand 2 (na primer, karlumab, CCX140), antioksidansi (na primer, N-acetilcistein), inhibitori fosfodiesteraze 5 (PDE5) (na primer, sildenafil), agensi za lečenje opstruktivnih bolesti disajnih puteva kao što su muskarinski antagonisti (na primer, tiotropijum, ipatropijum bromid), adrenergični β2 agonisti (na primer, salbutamol, salmeterol), kortikosteroidi (na primer, triamcinolon, deksametazon, flutikazon), imunosupresivni agensi (na primer, takrolimus, rapamicin, pimekrolimus), i terapijski agensi korisni za lečenje fibroznih stanja, kao što je idiopatska plućna fibroza (IPF), fibroza jetre i bubrega, nealkoholna masna bolest jetre (NAMBJ), nealkoholni steato-hepatitis (NASH), srčana fibroza, i sistemska skleroza. Terapijski agensi korisni za lečenje takvih fibroznih stanja uključuju, ali nisu ograničeni na, FXR agoniste (na primer OCA, GS-9674, i LJN452), LOXL2 inhibitore (na primer simtuzumab), LPA1 antagoniste (na primer SAR 100842), PPAR modulatore (na primer, elafibrinor, pioglitazon, i saroglitazar, IVA337), SSAO/VAP-1 inhibitore (na primer, PXS-4728A i SZE5302), ASK-1 inhibitore (na primer GS-4997), ACC inhibitore (na primer, CP-640186 i NDI-010976), FGF21 agonistu (na primer, LY2405319), kaspaza inhibitore (na primer, emricasan), NOX4 inhibitore (na primer, GKT137831), MGAT2 inhibitor, i konjugate žučna kiselina/masna kiselina (na primer aramkol). Inhibitori αvraznih tehničkih rešenja predmetnog pronalaska takođe mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili više terapijskih agenasa kao što su CCR2/5 inhibitori (na primer, cenikrivirok), Galektin-3 inhibitori (na primer,

1

TD-139, GR-MD-02), antagonisti leukotrienskih receptora (na primer, tipelukast, montelukast), SGLT2 inhibitori (na primer, dapagliflozin, remogliflozin), GLP-1 agonisti (na primer, liraglutid i semaglutid), FAK inhibitori (na primer, GSK-2256098), CB1 inverzni agonisti (na primer, JD-5037), CB2 agonisti (na primer, APD-371 i JBT-101), autotaksin inhibitori (na primer, GLPG1690), prolil t-RNK sintetaza inhibitori (na primer, halofugenon), FPR2 agonisti (na primer, ZK-994), i THR agonisti (na primer, MGL:3196). U drugom tehničkom rešenju, dodatni terapijski agensi koji se koriste u kombinovanim farmaceutskim kompozicijama ili kombinovanim postupcima ili kombinovanim primenama, biraju se između jednog ili više, poželjno jednog do tri, imunonkološka agensa, kao što su Alemtuzumab, Atezolizumab, Ipilimumab, Nivolumab, Ofatumumab, Pembrolizumab i Rituksimab.

[0044] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu da se primene za bilo koju od ovde opisanih upotreba na bilo koji pogodan način, na primer, oralno, kao što su tablete, kapsule (od kojih svaka uključuje formulacije sa produženim ili vremenskim oslobađanjem), pilule, praškovi, granule, eliksiri, tinkture, suspenzije, sirupi, i emulzije; sublingvalno; bukalno; parenteralno, kao što su subkutane, intravenske, intramuskularne, ili intrasternalne injekcije, ili tehnike infuzije (npr. kao šsto su injektabilni sterilni vodeni ili nevodeni rastvori ili suspenzije); nazalno, uključujući administraciju na nazalne membrane, kao što je inhalacioni sprej; lokalno, kao što je u obliku kreme ili masti; ili rektalno kao na primer u obliku supozitorija. Mogu se administrirati samostalno, ali generalno će se primenjivati sa farmaceutskim nosačem odabranim na osnovu izabranog puta administracije i standardne farmaceutske prakse.

[0045] Izraz "farmaceutska kompozicija" označava kompoziciju koja sadrži jedinjenje pronalaska u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim farmaceutski prihvatljivim nosačem. Izraz "farmaceutski prihvatljiv nosač" se odnosi na medijume opšte prihvaćene u tehnici za isporuku biološki aktivnih agenasa životinjama, posebno sisarima, uključujući, tj. pomoćno sredstvo, ekscipijens ili transporter, kao što su razblaživači, konzervansi, punioci, agensi za regulaciju protoka, agensi za dezintegraciju, agensi za vlaženje, emulgatori, agensi za suspendovanje, zaslađivači, arome, mirisi, antibakterijski agensi, agensi protiv gljivica, agensi za lubrikaciju i agensi za distribuciju, u zavisnosti od prirode načina primene i doznih oblika. Farmaceutski prihvatljivi nosači su formulisani u skladu sa brojnim faktorima koji su u okviru delokruga onih koji su obično verzirani u stanje tehnike. Ovo uključuje, bez ograničenja: vrstu i prirodu aktivnog agensa koje se formuliše; subjekt kome treba da se administrira kompozicija koja sadrži agens; nameravani način primene kompozicije; i ciljanu terapijsku indikaciju. Farmaceutski prihvatljivi nosači obuhvataju i vodene i nevodene tečne medijume, kao i razne

1

čvrste i polučvrste dozne oblike. Takvi nosači mogu uključivati niz različitih sastojaka i aditiva pored aktivnog agensa, pri čemu su takvi dodatni sastojci uključeni u formulaciju iz raznih razloga, na primer, stabilizacija aktivnog agensa, vezivnih sredstava, itd., dobro poznati onima koji su stručni u oblasti. Opisi odgovarajućih farmaceutski prihvatljivih nosača, i faktora koji su uključeni u njihov izbor, nalaze se u nizu lako dostupnih izvora, kao što su, na primer, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. izdanje (1990).

[0046] Termini "lečiti" ili "lečenje" kako se ovde koriste odnose se na pristup za dobijanje korisnih ili željenih rezultata, uključujući kliničke rezultate, korišćenjem jedinjenja ili kompozicije ovog pronalaska. Za potrebe ovog pronalaska, korisni ili željeni klinički rezultati uključuju, ali nisu ograničeni na, jedno ili više od sledećeg: smanjenje težine i/ili učestalosti jednog ili više simptoma koji su rezultat bolesti, poremećaja ili stanja; smanjenje obima ili izazivanje regresije bolesti, poremećaja ili stanja; stabilizaciju bolesti, poremećaja ili stanja (npr. sprečavanje ili odlaganje pogoršanja bolesti, poremećaja ili stanja); odlaganje ili usporavanje progresije bolesti, poremećaja ili stanja; poboljšanje stanja bolesti, poremećaja ili stanja; smanjenje doze jednog ili više drugih lekova potrebnih za lečenje bolesti, poremećaja ili stanja; i/ili pobojšanje kvaliteta života.

[0047] Režim doziranja za jedinjenja ovog pronalaska će, naravno, varirati u zavisnosti od poznatih faktora, kao što su farmakodinamičke karakteristike određenog agensa i njegov način i put administracije; vrsta, starost, pol, zdravlje, zdravstveno stanje i težina primaoca; priroda i obim simptoma; vrsta istovremenog lečenja; učestalost lečenja; način primene, funkcija bubrega i jetre pacijenta i željeni efekat.

[0048] Kao opšte uputstvo, dnevna oralna doza svakog aktivnog sastojka, kada se koristi za naznačene efekte, kretaće se između oko 0.01 do oko 5000 mg na dan, poželjno između oko 0.1 do oko 1000 mg na dan, i najpoželjnije između oko 0.1 do oko 250 mg na dan. Intravenozno, najpoželjnije doze će se kretati od oko 0.01 do oko 10 mg/kg/minut tokom infuzije konstantne brzine. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se davati u jednoj dnevnoj dozi, ili ukupna dnevna doza se može primeniti u podeljenim dozama od dva, tri, ili četiri puta dnevno.

[0049] Jedinjenja se tipično administriraju u mešavini sa odgovarajućim farmaceutskim razblaživačima, ekscipijensima ili nosačima (koji se ovde zajednički nazivaju farmaceutski nosači) koji su prikladno odabrani u odnosu na predviđeni oblik primene, npr. oralne tablete, kapsule, eliksiri i sirupi, i konzistentni sa konvencionalnom farmaceutskom praksom.

1

[0050] Dozni oblici (farmaceutske kompozicije) pogodni za primenu mogu da sadrže od oko 1 miligram do oko 2000 miligrama aktivnog sastojka po jedinici doze. U ovim farmaceutskim kompozicijama aktivni sastojak će obično biti prisutan u količini od oko 0.1-95% po težini na osnovu ukupne težine kompozicije.

[0051] Tipična kapsula za oralnu primenu sadrži najmanje jedno od jedinjenja prema predmetnom pronalasku (250 mg), laktozu (75 mg), i magnezijum stearat (15 mg). Smeša se propušta kroz sito od 60 mesh-a i pakuje u želatinsku kapsulu br.1.

[0052] Tipičan preparat za injekcije se proizvodi aseptičkim stavljanjem najmanje jednog od jedinjenja iz ovog pronalaska (250 mg) u bočicu, aseptičkim sušenjem zamrzavanjem i zatvaranjem. Za upotrebu, sadržaj bočice se pomeša sa 2 mL fiziološkog rastvora, da bi se dobila injektabilni preparat.

[0053] Ovaj pronalazak obuhvata u okviru svog obima farmaceutske kompozicije koje sadrže, kao aktivni sastojak, terapijski efikasnu količinu najmanje jednog od jedinjenja iz ovog pronalaska, samog ili u kombinaciji sa farmaceutskim nosačem. Opciono, jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu koristiti sama, u kombinaciji sa drugim jedinjenjima pronalaska, ili u kombinaciji sa jednim ili više, poželjno jednim do tri, druga terapijska agensa, npr., FXR agonistima ili drugim farmaceutski aktivnim materijalom.

[0054] Prethodno navedeni drugi terapijski agensi, kada se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima iz ovog pronalaska, mogu se koristiti, na primer, u onim količinama navedenim u Phisicians' Desk Reference, kao u prethodno navedenim patentima, ili kako je drugačije određeno od strane običnog stručnjaka u ovoj oblast.

[0055] Naročito kada se daje kao pojedinačna dozna jedinica, postoji potencijal za hemijsku interakciju između kombinovanih aktivnih sastojaka. Iz tog razloga, kada se jedinjenje ovog pronalaska i drugi terapijski agens kombinuju u jednoj doznoj jedinici, oni su formulisani tako da iako su aktivni sastojci kombinovani u jednoj doznoj jedinici, fizički kontakt između aktivnih sastojaka je minimiziran (odnosno smanjen). Na primer, jedan aktivni sastojak može biti enterički obložen. Enteričkim oblaganjem jednog od aktivnih sastojaka, moguće je ne samo da se umanji kontakt između kombinovanih aktivnih sastojaka, već je moguće i kontrolisati oslobađanje jedne od ovih komponenti u gastrointestinalnom traktu tako da se jedna od ovih komponenti ne oslobađa se u želucu, već se oslobađa u crevima. Jedan od aktivnih sastojaka takođe može biti obložen materijalom koji utiče na produženo oslobađanje u celom gastrointestinalnom traktu i takođe služi za minimiziranje fizičkog kontakta između

1

kombinovanih aktivnih sastojaka. Štaviše, komponenta sa produženim oslobađanjem može biti dodatno obložena enteričkim premazom tako da se oslobađanje ove komponente dešava samo u crevima. Još jedan pristup bi uključivao formulaciju kombinovanog proizvoda u kojoj je jedna komponenta obložena polimerom za produženo i/ili enteričko oslobađanje, a druga komponenta je takođe obložena polimerom kao što je hidroksipropil metilceluloza niskog stepena viskoznosti (HPMC) ili drugih odgovarajućih materijala poznatih u tehnici, kako bi se dalje odvojile aktivne komponente. Polimerna obloga služi za formiranje dodatne barijere za interakciju sa drugom komponentom.

[0056] Ovi, kao i drugi načini smanjenja kontakta između komponenti kombinovanih proizvoda ovog pronalaska, bilo da se administriraju u jednom doznom obliku ili da se administriraju u odvojenim oblicima, ali u isto vreme na isti način, biće lako razumljivi za one koji su obučeni u ovoj oblasti tehnike, kada pred sobom imaju predmetnu objavu.

[0057] Jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu se administrirati sama ili u kombinaciji sa jednim ili više, poželjno jednim do tri dodatna terapeutska sredstva. Pod pojmom "administrirano u kombinaciji" ili "kombinovana terapija" podrazumeva se da se jedinjenje iz ovog pronalaska i jedno ili više, poželjno jedno do tri, dodatna terapijska sredstva daju istovremeno sisaru kojeg je potrebno lečiti. Kada se administrira u kombinaciji, svaka komponenta se može administrirati u isto vreme ili uzastopno bilo kojim redosledom u različitim vremenskim intervalima. Prema tome, svaka komponenta se može primeniti odvojeno, ali u dovoljno bliskom vremenskom intervalu da bi se obezbedio željeni terapijski efekat.

[0058] Jedinjenja iz ovog pronalaska su takođe korisna kao standardna ili referentna jedinjenja, na primer kao standard kvaliteta ili kontrola, u ispitivanjima ili testovima koji uključuju αvintegrine. Takva jedinjenja mogu biti obezbeđena u komercijalnom kompletu, na primer, za upotrebu u farmaceutskim istraživanjima koja uključuju aktivnost αvintegrina. Na primer, jedinjenje iz ovog pronalaska može se koristiti kao referenca u testu za upoređivanje njegove poznate aktivnosti sa jedinjenjem sa nepoznatom aktivnošću. Ovo bi osiguralo eksperimentatoru da je test pravilno izveden i pružilo osnovu za poređenje, posebno ako je test jedinjenje derivat referentnog jedinjenja. Kada se razvijaju novi testovi ili protokoli, jedinjenja prema ovom pronalasku mogu se koristiti za testiranje njihove efikasnosti.

[0059] Ovaj pronalazak takođe obuhvata proizvodni artikal. Kako se ovde koristi, proizvodni artikal treba da uključuje, ali nije ograničen na, komplete i pakete. Proizvodni artikal ovog

1

pronalaska obuhvata: (a) prvi kontejner; (b) farmaceutsku kompoziciju koja se nalazi unutar prvog kontejnera, pri čemu kompozicija sadrži: prvi terapijski agens, koji sadrži jedinjenje iz ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i, (c) umetak za pakovanje u kome se navodi da se farmaceutska kompozicija može koristiti za lečenje dislipidemija i njenih posledica. U drugom tehničkom rešenju, u umetku za pakovanje se navodi da se farmaceutska kompozicija može koristiti u kombinaciji (kao što je prethodno definisano) sa drugim terapijskim agensom za lečenje fibroze i njenih posledica. Proizvodni artikal može dalje da sadrži: (d) drugi kontejner, pri čemu se komponente (a) i (b) nalaze unutar drugog kontejnera, a komponenta (c) se nalazi unutar ili izvan drugog kontejnera. Locirano unutar prvog i drugog kontejnera znači da odgovarajući kontejner drži predmet unutar svojih granica.

[0060] Prvi kontejner je posuda koja se koristi za držanje farmaceutske kompozicije. Ovaj kontejner može biti za proizvodnju, skladištenje, otpremu i/ili pojedinačnu/zbirnu prodaju. Prvi kontejner je namenjen da pokrije flašu, teglicu, bočicu, bocu, špric, tubu (npr. za preparat u kremi) ili bilo koji drugi kontejner koji se koristi za proizvodnju, držanje, skladištenje ili distribuciju farmaceutskog proizvoda.

[0061] Drugi kontejner je onaj koji se koristi za držanje prvog kontejnera i, opciono, umetka za pakovanje. Primeri drugog kontejnera uključuju, ali nisu ograničeni na, kutije (npr. od kartona ili plastike), sanduke, kartone, kese (npr. papirne ili plastične kese), torbice i vreće. Umetak za pakovanje može biti fizički pričvršćen za spoljašnju stranu prvog kontejnera pomoću trake, lepka, spajalica ili nekim drugim načinom pričvršćivanja, ili može da stoji unutar drugog kontejnera bez ikakvih fizičkih sredstava za vezivanje za prvi kontejner. Alternativno, umetak za pakovanje se nalazi na spoljašnjoj strani drugog kontejnera. Kada se nalazi na spoljnoj strani drugog kontejnera, poželjno je da je umetak za pakovanje fizički pričvršćen pomoću trake, lepka, spajalica ili nekim drugim načinom pričvršćivanja. Alternativno, može biti u blizini ili dodirivati spoljašnju stranu drugog kontejnera, a da nije fizički pričvršćen.

[0062] Umetak za pakovanje je etiketa, oznaka, marker, itd. koji navodi informacije koje se odnose na farmaceutsku kompoziciju koja se nalazi unutar prvog kontejnera. Navedene informacije obično će odrediti regulatorna agencija koja reguliše oblast u kojoj će proizvod biti prodat (npr. Uprava za hranu i lekove Sjedinjenih Država). Poželjno, u umetku pakovanja su posebno navedene indikacije za koje je farmaceutska kompozicija odobrena. Umetak za pakovanje može biti napravljen od bilo kog materijala na kome osoba može da pročita informacije sadržane u njemu ili na njemu. Poželjno je da je umetak za pakovanje materijal

2

pogodan za štampanje (npr. papir, plastika, karton, folija, papir sa adhezivnom podlogom ili plastika, itd.) na kome su formirane željene informacije (npr. odštampane ili nanešene).

III. DEFINICIJE

[0063] U celoj specifikaciji i priloženim patentnim zahtevima, data hemijska formula ili naziv će obuhvatiti sve stereo i optičke izomere i njihove racemate tamo gde takvi izomeri postoje. Osim ako nije drugačije naznačeno, svi hiralni (enantiomerni i dijastereoizomerni) i racemski oblici su u okviru pronalaska. Mnogi geometrijski izomeri C=C dvostrukih veza, C=N dvostrukih veza, sistema prstena, i slično takođe mogu biti prisutni u jedinjenjima, a svi takvi stabilni izomeri su razmatrani u predmetnom pronalasku. Cis- i trans- (ili E- i Z-) geometrijski izomeri jedinjenja iz ovog pronalaska su opisani i mogu biti izolovani kao smeša izomera ili kao razdvojeni izomerni oblici. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti izolovana u optički aktivnim ili racemskim oblicima. Optički aktivni oblici mogu biti pripremljeni razdvajanjem racemskih oblika ili sintezom iz optički aktivnih početnih materijala. Svi procesi koji se koriste za dobijanje jedinjenja ovog pronalaska i intermedijera napravljenih u njima smatraju se delom ovog pronalaska. Kada se pripremaju enantiomerni ili dijastereoizomerni proizvodi, oni se mogu razdvojiti uobičajenim metodama, na primer, hromatografijom ili frakcionom kristalizacijom. U zavisnosti od uslova procesa, krajnji proizvodi ovog pronalaska se dobijaju ili u slobodnom (neutralnom) ili u obliku soli. I slobodni oblik i soli ovih krajnjih proizvoda pripadaju obimu pronalaska. Ako se tako želi, jedan oblik jedinjenja može biti preveden u drugi oblik. Slobodna baza ili kiselina se mogu pretvoriti u so; so se može konvertovati u slobodno jedinjenje ili drugu so; smeša izomernih jedinjenja predmetnog pronalaska može se razdvojiti na pojedinačne izomere. Jedinjenja ovog pronalaska, slobodni oblik i soli istog, mogu postojati u višestrukim tautomernim oblicima, u kojima su atomi vodonika transponovani u druge delove molekula i hemijske veze između atoma molekula su posledično preuređene. Trebalo bi razumeti da su svi tautomerni oblici, u meri u kojoj mogu da postoje, uključeni u pronalazak. Kako se ovde koristi, "jedinjenje pronalaska" ili "jedinjenja pronalaska" označava jedno ili više jedinjenja obuhvaćenih bilo kojom od formula (I), (IIa), (IIb), (IIc), (IId), (IIc), (IIf), (IIIa), (IIIb), (IVa) i (IVb), ili stereoizomer, tautomer, ili farmaceutski prihvatljivu so ili solvat istog.

[0064] Kako se ovde koristi, termin "alkil" ili "alkilen" namerava da obuhvati i razgranate i ravnolančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju određeni broj atoma ugljenika. Na primer, "C1do C10alkil" ili "C1-10alkil" (ili alkilen), namerava da obuhvati C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, i C10alkil grupe. Dodatno, na primer, "C1do C6alkil" ili "C1-6alkil" znači alkil koji ima od 1 do 6 ugljeničnih atoma. Alkil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana pri čemu je najmanje jedan vodonik zamenjen drugom hemijskom grupom. Primeri alkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, metil (Me), etil (Et), propil (napr., n-propil i izopropil), butil (npr., n-butil, izobutil, t-butil), i pentil (npr., n-pentil, izopentil, neopentil). Kada se "C0alkil" ili "C0alkilen" koristi, namenjeno je označavanju direktne veze.

[0065] Osim ako nije drugačije naznačeno, termin "niži alkil" se samostalno upotrebljava ili kao deo druge grupe koja obuhvata kako ugljovodonike ravnog tako i razgranatog lanca koji sadrže 1 do 8 ugljenika, i termin "alkil" i "alk" se samostalno upotrebljava ili kao deo druge grupe koja obuhvata kako ugljovodonike ravnog tako i razgranatog lanca koji sadrže 1 do 20 ugljenika, poželjno 1 do 10 ugljenika, poželjnije 1 do 8 ugljenika, u ravnom lancu, kao što su metil, etil, propil, izopropil, butil, t-butil, izobutil, pentil, heksil, izoheksil, heptil, 4,4-dimetilpentil, oktil, 2,2,4-trimetilpentil, nonil, decil, undecil, dodecil, različiti njihovi izomeri razgranatog lanca, i slično, kao i takve grupe koje uključuju 1 do 4 supstituenta kao što su halo, na primer F, Br, Cl ili I ili CF3, alkil, alkoksi, aril, ariloksi, aril(aril) ili diaril, arilalkil, arilalkiloksi, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, cikloalkilalkil, cikloalkilalkiloksi, hidroksi, hidroksialkil, acil, alkanoil, heteroaril, heteroariloksi, cikloheteroalkil, arilheteroaril, arilalkoksikarbonil, heteroarilalkil, heteroarilalkoksi, ariloksialkil, ariloksiaril, alkilamido, alkanoilamino, arilkarbonilamino, nitro, cijano, tiol, haloalkil, trihaloalkil i/ili alkiltio.

[0066] "Heteroalkil" se odnosi na alkil grupe gde je jedan ili više atoma ugljenika zamenjen heteroatomom kao što je, O, N, ili S. Na primer, ako se atom ugljenika alkil grupe koji je vezan za matični molekul zameni heteroatomom (npr., O, N, ili S), dobijene heteroalkil grupe su, redom, alkoksi grupa (npr., -OCH3, itd.), amino (npr., -NHCH3, -N(CH3)2, itd.), ili tioalkil grupa (npr., -SCH3). Ako se neterminalni atom ugljenika alkil grupe koji nije vezan za matični molekul zameni heteroatomom (napr., O, N, ili S) i dobijene heteroalkil grupe su, redom, alkil etarska (npr., -CH2CH2-O-CH3, itd.), alkil aminska (npr., -CH2NHCH3, -CH2N(CH3)2, itd.), ili tioalkil etarska (npr.,-CH2-S-CH3). Ako se terminalni atom ugljenika alkil grupe zameni sa heteroatomom (npr., O, N, ili S), dobijene heteroalkil grupe su, redom, hidroksialkil grupa (npr., -CH2CH2-OH), aminoalkil grupa (npr., -CH2NH2), ili alkil tiol grupa (npr., -CH2CH2-SH). Heteroalkil grupa može imati, na primer, 1 do 20 atoma ugljenika, 1 do 10 atoma ugljenika, ili 1 do 6 atoma ugljenika. C1-C6heteroalkil grupa označava heteroalkil grupu koja ima 1 do 6 atoma ugljenika.

[0067] "Alkenil" ili "alkenilen" je namenjen da uključuje ugljovodonične lance bilo ravne ili razgranate konfiguracije sa određenim brojem atoma ugljenika i jednom ili više, poželjno jednom do dve, ugljenik-ugljenik dvostruke veze koje se mogu pojaviti u bilo kojoj stabilnoj tački duž lanca. Na primer, "C2do C6alkenil" ili "C2-6alkenil" (ili alkenilen), je namenjeno da uključi C2, C3, C4, C5, i C6alkenil grupe. Primeri alkenila uključuju, ali nisu ograničeni na, etenil, 1- propenil, 2- propenil, 2-butenil, 3- butenil, 2-pentenil, 3, pentenil, 4-pentenil, 2-heksenil, 3-heksenil, 4-heksenil, 5-heksenil, 2-metil-2- propenil, i 4-metil-3- pentenil.

[0068] „Alkinil“ ili „alkinilen“ podrazumevaju ugljovodonične lance bilo ravne ili razgranate konfiguracije sa jednom ili više, poželjno jednom do tri trostruke veze ugljenik-ugljenik koje se mogu pojaviti u bilo kojoj stabilnoj tački duž lanca. Na primer, "C2do C6alkinil" ili "C2-6alkinil" (ili alkinilen), je namenjeno da uključi C2, C3, C4, C5, i C6alkinil grupe; kao što su etinil, propinil, butinil, pentinil, i heksinil.

[0069] Kako se ovde koristi, "arilalkil" (a.k.a. aralkil), "heteroarilalkil" "karbociklilalkil" ili "heterociklilalkil" odnosi se na aciklični alkil radikal u kome je jedan od atoma vodonika vezan za atom ugljenika, obično terminalni ili sp<3>ugljenični atom, i zamenjen je sa aril, heteroaril, karbociklil, ili heterociklil radikalom, redom. Tipično arilalkil grupe uključuju, ali nisu ograničene na, benzil, 2-feniletan-1-il, naftilmetil, 2-naftiletan-1-il, naftobenzil, 2-naftofeniletan-1-il i slično. Arilalkil, heteroarilalkil, karbociklilalkil, ili heterociklilalkil grupe mogu da sadrže od 4 do 20 atoma ugljenika i od 0 do 5 heteroatoma, npr., alkil segment može sadržati od 1 do 6 atoma ugljenika.

[0070] Termin "benzil", ovde upotrebljen, se odnosi na metil grupu na kojoj je jedan od atoma vodonika zamenjen fenil grupom, gde navedena fenil grupa može opciono biti supstituisana sa 1 do 5 grupa, poželjno 1 do 3 grupe, OH, OCH3, Cl, F, Br, I, CN, NO2, NH2, N(CH3)H, N(CH3)2, CF3, OCF3, C(=O)CH3, SCH3, S(=O)CH3, S(=O)2CH3, CH3, CH2CH3, CO2H, i CO2CH3. "Benzil" može se predstaviti i formulom "Bn".

[0071] Termin "niži alkoksi", "alkoksi" ili "alkiloksi", "ariloksi" ili "aralkoksi" se odnosi na bilo koje prethodno pomenute alkil, aralkil ili aril grupe povezane sa atomom kiseonika. "C1do C6alkoksi" ili "C1-6alkoksi" (ili alkiloksi), treba da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6alkoksi grupe. Primeri alkoksi grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, metoksi, etoksi, propoksi (npr., npropoksi i izopropoksi), i t-butoksi. Slično, "niži alkiltio", "alkiltio", "tioalkoksi", "ariltio", ili "aralkiltio" predstavljaju alkil, aril, ili aralkil grupe kao što je gore definisano sa naznačenim brojem atoma ugljenika vezanim preko sumpornog mosta; na primer metil-S- i etil-S-.

2

[0072] Termin "alkanoil" ili "alkilkarbonil" kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe se odnosi na alkil povezan sa karbonil grupom. Na primer, alkilkarbonil može predstavljati alkil-C(O)-. "C1do C6alkilkarbonil" (ili alkilkarbonil), je namenjeno da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6alkil-C(O)- grupe.

[0073] Termin "alkilsulfonil" ili "sulfonamid" kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe se odnosi na alkil ili amino povezan sa sulfonil grupom. Na primer, alkilsulfonil može biti predstavljen sa-S(O)2R', dok sulfonamid može biti predstavljen sa -S(O)2NR<c>R<d>. R' je C1do C6alkil; i R<c>i R<d>su isti kao što je definisano u nastavku za "amino".

[0074] Termin "amino" je definisan kao -NR<c>R<d>, gde su R<c>i R<d>nezavisno vodonik ili C1-6alkil; ili alternativno, R<c>i R<d>, uzeti zajedno sa atomima za koje su vezani, formiraju 3- do 8-člani karbociklični ili heterociklični prsten koji je opciono supstituisan sa jednom ili više grupa odabranih od halo, cijano, hidroksil, amino, okso, C1-6alkil, alkoksi, i alkilamino. Primeri alkilamino grupa uključuju, bez ograničenja, -NH2, metilamino, etilamino, propilamino, izopropilamino i slične.

[0075] Termin "alkilamino" se odnosi na alkil grupu na kojoj je jedan od vodonikovih atoma zamenjen amino grupom. Na primer, alkilamino može biti predstavljen sa N(R<c>R<d>)-alkilen-. "C1do C6" ili "C1-6" alkilamino" (ili alkilamino), je namenjeno da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6alkilamino grupe.

[0076] Termin "halogen" ili "halo" kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe se odnosi na hlor, brom, fluor, i jod, pri čemu su poželjni hlor ili fluor.

[0077] "Haloalkil" treba da uključi i razgranate i ravnolančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju određeni broj atoma ugljenika, supstituisane sa jednim ili više halogena. "C1do C6haloalkil" ili "C1-6haloalkil" (ili haloalkil), treba da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6haloalkil grupe. Primeri haloalkila uključuju, ali nisu ograničeni na, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, trihlorometil, pentafluoroetil, pentahloroetil, 2,2,2-trifluoroetil, heptafluoropropil, i heptahloropropil. Primeri haloalkila takođe uključuju "fluoroalkil" koji treba da uključi i razgranate i ravnolančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju određeni broj atoma ugljenika, supstituisane sa 1 ili više atoma fluora. Termin "polihaloalkil" kako se ovde upotrebljava odnosi se na "alkil" grupu koja je prethodno definisana i uključuje od 2 do 9, poželjno od 2 do 5, halo supstituenta, kao što su F ili C1, poželjno F, kao što je polifluoroalkil, na primer, CF3CH2, CF3ili CF3CF2CH2.

[0078] "Haloalkoksi" ili "haloalkiloksi" predstavlja haloalkil grupu kao što je prethodno definisano sa naznačenim brojem atoma ugljenika vezanim preko kiseoničnog mosta. Na primer, "C1do C6haloalkoksi" ili "C1-6haloalkoksi", je namenjeno da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6haloalkoksi grupe. Primeri haloalkoksi uključuju, ali nisu ograničeni na, trifluorometoksi, 2,2,2-trifluoroetoksi, i pentafluorotoksi. Slično, "haloalkiltio" ili "tiohaloalkoksi" predstavlja haloalkil grupu kao što je prethodno definisano sa naznačenim brojem atoma ugljenika vezanim preko sumpornog mosta; na primer trifluorometil-S-, i pentafluoroetil-S-. Termin "polihaloalkiloksi" kako se ovde koristi, odnosi se na "alkoksi" ili "alkiloksi" grupe kao što je prethodno definisano koje uključuju od 2 do 9, poželjno od 2 do 5, halo supstituenta, kao što su F ili Cl, poželjno F, kao što je polifluoroalkoksi, na primer, CF3CH2O, CF3O ili CF3CF2CH2O.

[0079] "Hidroksilalkil" je namenjeno da uključi i razgranate i ravnolančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju određeni broj atoma ugljenika, supstituisane sa 1 ili više hidroksil (OH). "C1do C6hidroksilalkil" (ili hidroksilalkil), je namenjeno da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6hidroksilalkil grupe.

[0080] Termin "cikloalkil" se odnosi na ciklizovane alkil grupe, koje uključuju mono-, bi- ili poli-ciklične prsten sisteme. "C3do C7cikloalkil" ili "C3-7cikloalkil" je namenjeno da uključi C3, C4, C5, C6, i C7cikloalkil grupe. Primeri cikloalkil grupa uključuju, ali nisu ograničene na, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, i norbornil. Razgranate cikloalkil grupe kao što su 1-metilciklopropil i 2-metilciklopropil su uključene u definiciju "cikloalkila".

[0081] Termin "cikloheteroalkil" se odnosi na ciklizovane heteroalkil grupe, koje uključuju mono-, bi- ili poli-ciklične prsten sisteme. "C3do C7cikloheteroalkil" ili "C3-7cikloheteroalkil" je namenjeno da uključi C3, C4, C5, C6, i C7cikloheteroalkil grupe. Primeri cikloheteroalkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, oksetanil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, azetidinil, pirolidinil, piperidinil, morfolinil, i piperazinil. Razgranate cikloheteroalkil grupe, kao što su piperidinilmetil, piperazinilmetil, morfolinilmetil, piridinilmetil, piridizilmetil, pirimidilmetil, i pirazinilmetil, su uključene u definiciju "cikloheteroalkila".

[0082] Ovde upotrebljen, termin "azaciklil" se odnosi na cikloheteroalkil koji sadrži jedan ili više atoma azota u prstenu. Primer azaciklil grupe uključuje, ali nije ograničen na, pirolidinil, piperidinil, morfolinil, i piperazinil.

[0083] Ovde upotrebljen, "karbociklus", "karbociklil", ili "karbociklični " je namenjeno da označi bilo koji stabilni 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, ili 8-člani monociklični ili 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10-, 11-,

2

12-, ili 13-člani policiklični (uključujući biciklične ili triciklične) ugljovodonični prsten, gde bilo koji od njih može biti zasićen ili parcijalno nezasićen. To jeste, termin "karbociklus", "karbociklil", ili "karbociklični" uključuje, bez ograničenja, cikloalkil i cikloalkenil. Primeri takvih karbociklusa uključuju, ali nisu ograničeni na, ciklopropil, ciklobutil, ciklobutenil, ciklopentil, ciklopentenil, cikloheksil, cikloheptenil, cikloheptil, cikloheptenil, adamantil, ciklooktil, ciklooktenil, ciklooktadienil, [3.3.0]biciklooktan, [4.3.0]biciklononan, [4.4.0]biciklodekan (dekalin), [2.2.2]biciklooktan, fluorenil, indanil, adamantil, i tetrahidronaftil (tetralin). Kao što je prethodno prikazano, premošćeni prstenovi su takođe uključeni u definiciju karbociklusa (napr., [2.2.2]biciklooktan). Poželjni karbociklusi, ukoliko nije drugačije naznačeno, su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, indanil, i tetrahidronaftil. Premošćen prsten nastaje kada jedan ili više, poželjno jedan do tri, atoma ugljenika povezuju dva nesusedna atoma ugljenika. Poželjni mostovi su jedan ili dva atoma ugljenika. Primećeno je da most uvek pretvara monociklični prsten u triciklični prsten. Kada je prsten premošćen, supstituenti navedeni za prsten mogu takođe biti prisutni na mostu.

[0084] Dalje, termin "karbociklil", uključujući "cikloalkil" i "cikloalkenil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe uključuje zasićene ili parcijalno nezasićene (koji sadrže 1 ili 2 dvostruke veze) ciklične ugljovodonične grupe koje sadrže 1 do 3 prstena, koji uključuju monocikličnialkil, bicikličnialkil i tricikličnialkil, koji sadrže ukupno od 3 do 20 ugljenika koji formiraju prstenove, poželjno 3 do 10 ugljenika, koji formiraju prsten i koji se mogu kondenzovati u 1 ili 2 aromatična prstena kao što je to opisano za aril, koji uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklooktil, ciklodecil i ciklododecil, cikloheksenil,

od kojih svaka grupa može biti opciono supstituisana sa 1 do 4 supstituenta kao što su halogen, alkil, alkoksi, hidroksi, aril, ariloksi, arilalkil, cikloalkil, alkilamido, alkanoilamino, okso, acil, arilkarbonilamino, nitro, cijano, tiol i/ili alkiltio i/ili bilo koji od alkil supstituenata.

2

[0085] Ovde upotrebljen, termin "biciklični karbociklus" ili "biciklična karbociklična grupa" je namenjen da označi stabilni 9- ili 10-člani karbociklični prsten sistem koji sadrži dva kondenzovana prstena i sastoji se od atoma ugljenika. Od dva kondenzovana prstena, jedan prsten je benzo prsten kondenzovan na drugi prsten; i drugi prsten je 5- ili 6-člani ugljenični prsten koji je zasićen ili parcijalno zasićen. Biciklična karbociklična grupa može biti prikačena za svoju bočnu grupu na bilo kom atomu ugljenika što rezultuje stabilnom strukturom. Biciklična karbociklična grupa opisana ovde može biti supstituisana na bilo kom ugljeniku ukoliko je rezultujuće jedinjenje stabilno. Primeri biciklične karbociklične grupe su, ali nisu ograničavajući na, 1,2-dihidronaftil, 1,2,3,4-tetrahidronaftil, i indanil.

[0086] Ovde upotrebljen, termin "aril", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, se odnosi na monociklične ili policiklične (uključujući biciklične i triciklične) aromatične ugljovodonike, uključujući, na primer, fenil, naftil, antracenil, i fenantranil. Aril segmenti su dobro poznati i opisani, na primer, u Lewis, R.J., ured., Hawley's Condensed Chemical Dictionary, 13. izdanje, John Wiley & Sons, Inc., New York (1997). U jednom tehničkom rešenju, termin "aril" znači monociklične i biciklične aromatične grupe koje sadrže 6 do 10 ugljenika u delu prstena (kao što su fenil ili naftil uključujući 1-naftil i 2-naftil). Na primer, "C6ili C10aril" ili "C6-10aril" se odnosi na fenil i naftil. Ukoliko nije drugačije naznačeno, "aril", "C6ili C10aril", "C6-10aril", ili "aromatični ostatak" može biti nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 5 grupa, poželjno 1 do 3 grupe, odabranih iz -OH, -OCH3, -Cl, -F, -Br, -I, -CN, -NO2, -NH2, -N(CH3)H, -N(CH3)2, -CF3, -OCF3, -C(O)CH3, -SCH3, -S(O)CH3, -S(O)2CH3, -CH3, -CH2CH3, -CO2H, i -CO2CH3.

[0087] Ovde upotrebljen, termin "heterociklus", "heterociklil", ili "heterociklična grupa" namenjen je da označi stabilni 3-, 4-, 5-, 6-, ili 7-člani monociklični ili 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12-, 13-, ili 14-člani policiklični (uključujući biciklične i triciklične) heterociklični prsten koji je zasićen, ili parcijalno nezasićen, i koji sadrži atome ugljenika i 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma nezavisno odabrana iz grupe koja se sastoji od N, O i S; i uključujući bilo koju policikličnu grupu u kojoj je bilo koji od gore definisanih heterocikličnih prstenova kondenzovan na karbociklični ili aril (napr., benzen) prsten. To jest, termin "heterociklus", "heterociklil", ili "heterociklična grupa" uključuje nearomatične prsten sisteme, kao što su heterocikloalkil i heterocikloalkenil. Azot i sumpor heteroatomi mogu opciono biti oksidovani (tj., N→O i S(O)p, gde je p 0, 1 ili 2). Atom azota može biti supstituisan ili nesupstituisan (tj. N ili NR gde R predstavlja H ili drugi supstituent, ukoliko je definisano). Heterociklični prsten može biti prikačen za svoju bočnu grupu na bilo kom heteroatomu ili atomu ugljenika što rezultuje

2

stabilnom strukturom. Heterociklični prstenovi opisani ovde mogu biti supstituisani na ugljeniku ili na atomu azota ukoliko je rezultujuće jedinjenje stabilno. Azot u heterociklusu može opciono biti kvaternizovan. Poželjno je da kada je ukupan broj S i O atoma u heterociklusu veći od 1, tada ovi heteroatomi nisu susedni jedan drugom. Poželjno je da ukupan broj S i O atoma u heterociklusu nije veći od 1.

[0088] Primeri heterciklila uključuju, bez ograničenja, azetidinil, piperazinil, piperidinil, piperidonil, piperonil, piranil, morfolinil, tetrahidrofuranil, tetrahidroizohinolinil, tetrahidrohinolinil, morfolinil, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofuran.

[0089] Ovde upotrebljen, termin "biciklični heterociklus" ili "biciklična heterociklična grupa" je namenjen da označi stabilni 9- ili 10-člani heterociklični prsten sistem koji sadrži dva kondenzovana prstena i sastoji se od atoma ugljenika i 1, 2, 3, ili 4 heteroatoma nezavisno odabrana iz grupe koja se sastoji od N, O i S. Od dva kondenzovana prstena, jedan prsten je 5-ili 6-člani monociklični aromatični prsten koji sadrži 5-člani heteroaril prsten, 6-člani heteroaril prsten ili benzo prsten, svaki kondenzovan za drugi prsten. Drugi prsten je 5- ili 6-člani monociklični prsten koji je zasićen, delimično nezasićen, ili nezasićen, i sadrži 5-člani heterociklus, 6-člani heterociklus ili karbociklus (pod uslovom da prvi prsten nije benzo kada je drugi prsten karbociklus).

[0090] Biciklična heterociklična grupa može biti prikačena za njenu bočnu grupu na bilo kom heteroatomu ili atomu ugljenika što rezultuje stabilnom strukturom. Biciklična heterociklična grupa opisana ovde može biti supstituisana na ugljeniku ili na atomu azota ukoliko je rezultujuće jedinjenje stabilno. Poželjno je da kada ukupan broj S i O atoma u heterociklusu pređe 1, onda ovi heteroatomi nisu susedni jedan drugom. Poželjno je da ukupan broj S i O atoma u heterociklusu nije veći od 1. Primeri biciklične heterociklične grupe su, ali nisu ograničeni na, 1,2,3,4-tetrahidrohinolinil, 1,2,3,4-tetrahidroizohinolinil, 5,6,7,8-tetrahidrohinolinil, 2,3-dihidro-benzofuranil, hromanil, 1,2,3,4-tetrahidro-hinoksalinil, i 1,2,3,4-tetrahidro-hinazolinil.

[0091] Premošćeni prstenovi su takođe uključeni u definiciju heterociklusa. Premošćeni prsten se javlja kada jedan ili više, poželjno jedan do tri, atoma (tj., C, O, N, ili S) povezuju dva nesusedna ugljenika ili atoma azota. Primeri premošćenih prstenova uključuju, ali nisu ograničeni na, jedan atom ugljenika, dva atoma ugljenika, jedan atom azota, dva atoma azota, i na ugljenik-azot grupu. Primećeno je da premošćavanje uvek pretvara monociklični prsten u

2

triciklični prsten. Kada je prsten premošćen, supstituenti navedeni za prsten mogu takođe biti prisutni na mostu.

[0092] Ovde upotrebljen, termin "heteroaril" treba da označi stabilne monociklične i policiklične (uključujući biciklične i triciklične) aromatične ugljovodonike koji uključuju bar jedan heteroatomski član prstena kao što je sumpor, kiseonik, ili azot. Heteroaril grupe uključuju, bez ograničenja, piridil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, triazinil, furil, hinolil, izohinolil, tienil, imidazolil, tiazolil, indolil, piroil, oksazolil, benzofuril, benzotienil, benztiazolil, izoksazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, indazolil, 1,2,4-tiadiazolil, izotiazolil, purinil, karbazolil, benzimidazolil, indolinil, benzodioksolanil, i benzodioksan. Heteroaril grupe su supstituisane ili nesupstituisane. Atom azota je supstituisan ili nesupstituisan (tj., N ili NR gde R predstavlja H ili drugi supstituent, ukoliko je definisano). Azot i sumpor heteroatomi mogu opciono biti oksidovani (tj., N→O i S(O)p, gde je p 0, 1 ili 2).

[0093] Primeri heteroarila uključuju, ali nisu ograničeni na, akridinil, azocinil, benzimidazolil, benzofuranil, benzotiofuranil, benzotiofenil, benzoksazolil, benzoksazolinil, benztiazolil, benztriazolil, benztetrazolil, benzizoksazolil, benzizotiazolil, benzimidazolinil, karbazolil, 4aH-karbazolil, karbolinil, hromanil, hromenil, cinolinil, dekahidrohinolinil, 2H,6H-1,5,2-ditiazinil, furanil, furazanil, imidazolidinil, imidazolinil, imidazolil, 1H-indazolil, imidazolopiridinil, indolenil, indolinil, indolizinil, indolil, 3H-indolil, izatinoil, izobenzofuranil, izohromanil, izoindazolil, izoindolinil, izoindolil, izohinolinil, izotiazolil, izotiazolopiridinil, izoksazolil, izoksazolopiridinil, metilendioksifenil, naftiridinil, oktahidroizohinolinil, oksadiazolil, 1,2,3-oksadiazolil, 1,2,4-oksadiazolil, 1,2,5-oksadiazolil, 1,3,4-oksadiazolil, oksazolidinil, oksazolil, oksazolopiridinil, oksazolidinilperimidinil, oksindolil, pirimidinil, fenantridinil, fenantrolinil, fenazinil, fenotiazinil, fenoksatianil, fenoksazinil, ftalazinil, pteridinil, purinil, pirazinil, pirazolidinil, pirazolinil, pirazolopiridinil, pirazolil, piridazinil, piridooksazolil, piridoimidazolil, piridotiazolil, piridinil, pirimidinil, pirolidinil, pirolinil, 2-pirolidonil, 2H-pirolil, pirolil, hinazolinil, hinolinil, 4H-hinolizinil, hinoksalinil, hinuklidinil, tetrazolil, tetrahidrofuranil, tetrahidroizohinolinil, tetrahidrohinolinil, 6H-1,2,5-tiadiazinil, 1,2,3-tiadiazolil, 1,2,4-tiadiazolil, 1,2,5-tiadiazolil, 1,3,4-tiadiazolil, tiantrenil, tiazolil, tienil, tiazolopiridinil, tienotiazolil, tienooksazolil, tienoimidazolil, tiofenil, triazinil, 1,2,3-triazolil, 1,2,4-triazolil, 1,2,5-triazolil, 1,3,4-triazolil, i ksantenil.

[0094] Primeri 5- do 10-članih heteroarila uključuju, ali nisu ograničeni na, piridinil, furanil, tienil, pirazolil, imidazolil, imidazolidinil, indolil, tetrazolil, izoksazolil, oksazolil, oksadiazolil, oksazolidinil, tiadiazinil, tiadiazolil, tiazolil, triazinil, triazolil, benzimidazolil, 1H-indazolil,

2

benzofuranil, benzotiofuranil, benztetrazolil, benzotriazolil, benzizoksazolil, benzoksazolil, oksindolil, benzoksazolinil, benztiazolil, benzizotiazolil, izatinoil, izohinolinil, oktahidroizohinolinil, izoksazolopiridinil, hinazolinil, hinolinil, izotiazolopiridinil, tiazolopiridinil, oksazolopiridinil, imidazolopiridinil, i pirazolopiridinil. Primeri 5- do 6-članih heterocikala uključuju, ali nisu ograničeni na, piridinil, furanil, tienil, pirolil, pirazolil, pirazinil, imidazolil, imidazolidinil, indolil, tetrazolil, izoksazolil, oksazolil, oksadiazolil, oksazolidinil, tiadiazinil, tiadiazolil, tiazolil, triazinil, i triazolil.

[0095] Osim ukoliko nije drugačije naznačeno, "karbociklil" ili "heterociklil" uključuju jedan do tri dodatna prstena kondenzovana za karbociklični prsten ili heterociklični prsten (kao što su aril, cikloalkil, heteroaril ili cikloheteroalkil prstenovi, na primer,

i mogu biti opciono supstituisani preko dostupnih atoma ugljenika sa 1, 2, ili 3 grupe odabrane iz vodonika, halo, haloalkila, alkila, haloalkila, alkoksi, haloalkoksi, alkenila, trifluorometila, trifluorometoksi, alkinila, cikloalkil-alkila, cikloheteroalkila, cikloheteroalkilalkila, arila, heteroarila, arilalkila, ariloksi, ariloksialkila, arilalkoksi, alkoksikarbonila, arilkarbonila, arilalkenila, aminokarbonilarila, ariltio, arilsulfinila, arilazo, heteroarilalkila, heteroarilalkenila, heteroarilheteroarila, heteroariloksi, hidroksi, nitro, cijano, tiola, alkiltio, ariltio, heteroariltio, ariltioalkila, alkoksiariltio, alkilkarbonila, arilkarbonila, alkilaminokarbonila, arilaminokarbonila, alkoksikarbonila, aminokarbonila, alkilkarboniloksi, arilkarboniloksi, alkilkarbonilamino, arilkarbonilamino, arilsulfinila, arilsulfinilalkila, arilsulfonilamino i arilsulfonaminokarbonila i/ili bilo kojih od alkil supstituenata iznetih ovde.

[0096] U skladu sa konvencijom koja se koristi u struci, veza koja je usmerena ka podebljanoj liniji, kao što je prikazano na

kao što je korišćeno u strukturnim formule ovde, prikazuje vezu koja je tačka vezivanja segmenta ili supstituenta za jezgro ili strukturu osnove. U skladu sa konvencijom koja se koristi u tehnici, talasasta veza u strukturnoj formuli, kao što je

koristi se za prikaz stereogeničnog centra atom ugljenika za koji su X', Y', i Z' prikačeni i namenjena je da predstavi oba enantiomera na jednoj slici. To jest, strukturna formula sa ovakvom talasastom vezom znači svaki od enantiomera pojedinačno, kao što su

ili

, kao i njihovu racemsku smešu.

[0097] Ovde se podrazumeva da ako karbociklični ili heterociklični segment može biti vezan ili na drugi način prikačen za određeni supstrat preko različitih atoma u prstenu bez označavanja

1

specifične tačke vezivanja, onda su sve moguće tačke podrazumevane, bilo preko atoma ugljenika ili, na primer, trovalentnog atoma azota. Na primer, izraz "piridil" znači 2-, 3- ili 4-piridil, izraz "tienil" znači 2- ili 3-tienil, itd.

[0098] Kada se tačkasti prsten koristi unutar strukture prstena, to ukazuje da struktura prstena može biti zasićena, delimično zasićena ili nezasićena.

[0099] Kada je prikazano da veza za supstituent prelazi vezu koja povezuje dva atoma u prstenu, onda takav supstituent može biti vezan za bilo koji atom u prstenu. Kada je supstituent naveden bez navođenja atoma u kome je takav supstituent vezan za ostatak jedinjenja date formule, onda takav supstituent može biti vezan preko bilo kog atoma u takvom supstituentu. Kombinacije supstituenata i/ili varijabli su dozvoljene samo ako takve kombinacije daju stabilna jedinjenja.

[0100] Stručnjak će prepoznati da supstituente i druge segmente jedinjenja iz ovog pronalaska treba izabrati da bi se obezbedilo jedinjenje koje je dovoljno stabilno da obezbedi farmaceutski korisno jedinjenje koje se može formulisati u prihvatljivu stabilnu farmaceutsku kompoziciju. Smatra se da jedinjenja iz predmetnog pronalaska koja imaju takvu stabilnost spadaju u obim ovog pronalaska.

[0101] Termin "kontra-jon" se koristi za predstavljanje negativno naelektrisanih vrsta kao što su hlorid, bromid, hidroksid, acetat i sulfat. Termin "jon metala" se odnosi na jone alkalnih metala kao što su natrijum, kalijum ili litijum i jone zemnoalkalnih metala kao što su magnezijum i kalcijum, kao i cink i aluminijum.

[0102] Kako je ovde navedeno, izraz "supstituisan" znači da je najmanje jedan atom vodonika zamenjen nevodoničnom grupom, pod uslovom da se održavaju normalne valencije i da supstitucija rezultira stabilnim jedinjenjem. Kada je supstituent keto (tj., =O), tada se 2 vodonika na atomu zamenjuju. Keto supstituenti nisu prisutni na aromatičnim segmentima. Kada se za sistem prstena (npr. karbociklični ili heterociklični) kaže da je supstituisan karbonil grupom ili dvostrukom vezom, podrazumeva se da karbonil grupa ili dvostruka veza budu deo (tj., unutar) prstena. Dvostruke veze u prstenu, kako se ovde koriste, su dvostruke veze koje se formiraju između dva susedna atoma u prstenu (napr., C=C, C=N, ili N=N).

[0103] U slučajevima kada postoje atomi azota (npr. amini) na jedinjenjima iz predmetnog pronalaska, oni se mogu konvertovati u N-okside tretmanom sa oksidacionim agensom (npr. mCPBA i/ili vodonik peroksidima) da bi se dobila druga jedinjenja ovog pronalaska. Dakle,

2

smatra se da prikazani i traženi atomi azota pokrivaju i prikazani azot i njegov N-oksid (N→O) derivat.

[0104] Kada se bilo koja promenljiva pojavljuje više puta u bilo kom konstituentu ili formuli za jedinjenje, njena definicija pri svakom pojavljivanju je nezavisna od njene definicije pri svakom drugom pojavljivanju. Tako, na primer, ako se pokaže da je grupa supstituisana sa 0, 1, 2 ili 3 R grupe, onda je navedena grupa nesupstituisana kada je supstituisana sa 0 R grupa, ili je supstituisana sa do tri R grupe, i pri svakom pojavljivanju R se bira nezavisno iz definicije za R.

[0105] Takođe, kombinacije supstituenata i/ili varijabli su dozvoljene samo ako takve kombinacije rezultiraju stabilnim jedinjenjima.

[0106] Kako se ovde koristi, termin "tautomer" se odnosi na svaki od dva ili više izomera jedinjenja koji postoje zajedno u ravnoteži, i koji se lako zamenjuju migracijom atoma ili grupe unutar molekula Na primer, stručnjak iz oblasti bi lako razumeo da 1,2,3-triazol postoji u dva tautomerna oblika kao što je prethodno definisano:

[0107] Dakle, ova objava ima za cilj da pokrije sve moguće tautomere čak i kada struktura prikazuje samo jedan od njih.

[0108] Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde koristi da se odnosi na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili oblike doziranja koji su, u okviru zdrave medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudskih bića i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora i/ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom korist/rizik odnosu.

[0109] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti prisutna kao soli, koje su takođe u okviru ovog pronalaska. Poželjne su farmaceutski prihvatljive soli. Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljive soli" se odnose na derivate otkrivenih jedinjenja gde je matično jedinjenje modifikovano stvaranjem kiselih ili baznih soli istog. Farmaceutski prihvatljive soli ovog pronalaska mogu se sintetizovati iz matičnog jedinjenja koje sadrži bazni ili kiseli deo konvencionalnim hemijskim metodama. Generalno, takve soli se mogu dobiti reakcijom slobodnih kiselinskih ili baznih oblika ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u smeši ova dva; generalno, poželjni su nevodeni medijumi kao što su etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril. Liste pogodnih soli nalaze se u Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. izdanje, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990).

[0110] Ako jedinjenja iz ovog pronalaska imaju, na primer, najmanje jedan bazni centar, mogu da formiraju soli adicije kiseline. One se formiraju, na primer, sa jakim neorganskim kiselinama, kao što su mineralne kiseline, na primer sumporna kiselina, fosforna kiselina ili halogenovodonična kiselina, sa organskim karboksilnim kiselinama, kao što su alkankarboksilne kiseline sa 1 do 4 atoma ugljenika, na primer sirćetna kiselina, koja su nesupstituisana ili supstituisana, na primer, halogenom kao hlorosirćetna kiselina, kao što su zasićene ili nezasićene dikarboksilne kiseline, na primer oksalna, malonska, ćilibarna, maleinska, fumarna, ftalna ili tereftalna kiselina, kao što su hidroksikarboksilne kiseline, npr, askorbinska, glikolna, mlečna, jabučna, vinska ili limunska kiselina, kao što su aminokiseline, (na primer asparaginska ili glutaminska kiselina ili lizin ili arginin), ili benzoeva kiselina, ili sa organskim sulfonskim kiselinama, kao što su (C1-C4) alkil ili arilsulfonske kiseline koje su nesupstituisane ili supstituisane, na primer halogenom, na primer metil- ili p-toluen-sulfonska kiselina. Odgovarajuće soli adicije kiseline se takođe mogu formirati sa, po želji, dodatno prisutnim baznim centrom. Jedinjenja iz ovog pronalaska koja imaju najmanje jednu kiselinsku grupu (na primer COOH) takođe mogu da formiraju soli sa bazama. Pogodne soli sa bazama su, na primer, soli metala, kao što su soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala, na primer soli natrijuma, kalijuma ili magnezijuma, ili soli sa amonijakom ili organskim aminom, kao što su morfolin, tiomorfolin, piperidin, pirolidin, mono, di ili tri-niži alkilamin, na primer etil, tercbutil, dietil, diizopropil, trietil, tributil ili dimetilpropilamin, ili mono, di ili trihidroksi niži alkilamin, na primer mono, di ili trietanolamin. Osim toga, mogu se formirati odgovarajuće unutrašnje soli. Uključene su i soli koje nisu pogodne za farmaceutsku upotrebu, ali koje se mogu koristiti, na primer, za izolovanje ili prečišćavanje slobodnih jedinjenja formule I ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli.

[0111] Poželjne soli jedinjenja formule I koje sadrže baznu grupu uključuju monohidrohlorid, hidrogensulfat, metansulfonat, fosfat, nitrat ili acetat.

4

[0112] Poželjne soli jedinjenja formule I koje sadrže kiselinsku grupu uključuju soli natrijuma, kalijuma i magnezijuma i farmaceutski prihvatljive organske amine.

[0113] Pored toga, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu imati prolek oblike. Svako jedinjenje koje će biti konvertovano in vivo da bi se dobilo bioaktivni agens je prolek. Termin "prolek" kako se ovde koristi obuhvata i prolekove zasnovane na ostatku karboksilne kiseline, tj., "prolek estre", i prolekove zasnovane na segmentu mimetika arginina, tj. "prolekove mimetika arginina". Takvi prolekovi se poželjno daju oralno, pošto se hidroliza u mnogim slučajevima dešava uglavnom pod uticajem digestivnih enzima. Parenteralna administracija se može koristiti kada je estar sam po sebi aktivan, ili u onim slučajevima kada se hidroliza javlja u krvi.

[0114] Jedinjenja predmetnog pronalaska sadrže karboksi grupu koja može da formira fiziološki hidrolizabilne estre koji služe kao prolekovi, tj., " prolek estri", tako što se hidrolizuju u telu da bi se dobila jedinjenja predmetnog pronalaska sama po sebi. Primeri fiziološki hidrolizabilnih estara jedinjenjenja predmetnog pronalaska uključuju C1do C6alkil, C1do C6alkilbenzil, 4-metoksibenzil, indanil, ftalil, metoksimetil, C1-6alkanoiloksi-C1-6alkil (napr., acetoksimetil, pivaloiloksimetil ili propioniloksimetil), C1do C6alkoksikarboniloksi-C1do C6alkil (napr., metoksikarbonil-oksimetil ili etoksikarboniloksimetil, gliciloksimetil, fenilgliciloksimetil, (5-metil-2-okso-1,3-dioksolen-4-il)-metil), i druge dobro poznate fiziološki hidrolizabilne estre koji se koriste, na primer, u oblasti penicilina i cefalosporina. Takvi estri mogu biti pripremljeni konvencionalnim tehnikama poznatim u tehnici. "Prolek estri" se mogu formirati reakcijom segmenta karboksilne kiseline jedinjenja iz predmetnog pronalaska sa bilo alkil ili aril alkoholom, halogenidom ili sulfonatom primenom postupaka poznatih stručnjacima u ovoj oblasti. Primeri takvih estara prolekova uključuju:

[0115] Jedinjenja ovog pronalaska sadrže segment mimetika arginina koji može da formira estre koji se fiziološki hidrolizuju i koji služe kao prolekovi, tj. "prolekovi mimetika arginina", tako što se hidrolizuju u telu da bi se dobila jedinjenja ovog pronalaska sama po sebi. Reprezentativni primeri prolekova mimetika arginina uključuju:

pri čemu je jedna od zvezdica u svakom od argininskih mimetičkih segmenata tačka vezivanja za matični molekul, a druge dve zvezdice su vodonik; R<f>= H, Me, Et, COOEt; R<g>= CH3, CH2CH3, CH2CCl3, fenil, 4-fluorofenil, 4-metoksifenil, benzil,

R<e>je OH, C1-4alkil, halo, haloalkil, ili C1-4cikloalkil; i r je ceo broj izabran između 0, 1, 2, ili 3.

[0116] Štaviše, različiti oblici prolekova su dobro poznati u tehnici. Za primere takvih derivata prolekova, videti:

Bundgaard, H., ured., Design of Prodrugs, Elsevier (1985), i Widder, K. i sarad., ured., Metods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985);

Bundgaard, H., poglavlje 5, "Design and Application of Prodrugs", Krosgaard-Larsen, P. i sarad., ured., A Textbook of Drug Design and Development, str.113-191, Harwood Academic Publishers (1991);

Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992);

Bundgaard, H. i sarad., J. Pharm. Sci., 77:285 (1988); i

Kakeya, N. i sarad., Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984).

[0117] Priprema prolekova je dobro poznata u tehnici i opisana u na primer, King, F.D., ured., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry, Kembridž, UK (1994); Testa, B. i sarad., Hidrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA i Wiley-VCH, Cirih, Švajcarska (2003); Wermuth, C.G., ured., The Practice of Medicinal Chemistry, Academic Press, San Dijego, CA (1999).

[0118] Predviđeno je da ovaj pronalazak obuhvati sve izotope atoma koji se javljaju u predmetnim jedinjenjima. Izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj, ali različite masene brojeve. Kao opšti primer i bez ograničenja, izotopi vodonika uključuju deuterijum i tricijum. Izotopi ugljenika uključuju<13>C i<14>C. Izotopski obeležena jedinjenja pronalaska se generalno mogu pripremiti konvencionalnim tehnikama poznatim stručnjacima ili postupcima analognim onima koji su ovde opisani, korišćenjem odgovarajućeg izotopski obeleženog reagensa umesto neobeleženog reagensa koji se inače koristi. Takva jedinjenja imaju različite potencijalne upotrebe, npr, kao standardi i reagensi u određivanju sposobnosti potencijalnog farmaceutskog jedinjenja da se veže za ciljne proteine ili receptore, ili za snimanje jedinjenja ovog pronalaska vezanih za biološke receptore in vivo ili in vitro.

[0119] "Stabilno jedinjenje" i "stabilna struktura" označavaju jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulaciju u efikasan terapijski agens. Poželjno je da jedinjenja iz ovog pronalaska ne sadrže N-halo, S(O)2H, ili S(O)H grupu.

[0120] Termin "solvat" označava fizičku povezanost jedinjenja ovog pronalaska sa jednim ili više molekula rastvarača, bilo organskih ili neorganskih. Ova fizička povezanost uključuje vodoničnu vezu. U određenim slučajevima, solvat će biti sposoban da se izoluje, na primer kada jedan ili više, poželjno jedan do tri, molekula rastvarača je ugrađeno u kristalnu rešetku kristalne čvrste supstance. Molekuli rastvarača u solvatu mogu biti prisutni u uređenom rasporedu i/ili neuređenom rasporedu. Solvat može da sadrži ili stehiometrijsku ili nestehiometrijsku količinu molekula rastvarača. "Solvat" obuhvata i solvate u fazi rastvora i izolovane solvate. Primeri solvata uključuju, ali nisu ograničeni na, hidrate, etanolate, metanolate i izopropanolate. Metode rastvaranja su opšte poznate u tehnici.

[0121] Skraćenice koje se ovde koriste su definisane na sledeći način: "1 x" za jednom, "2 x" za dva puta, "3 x" za tri puta, " °C" za stepene Celzijusa, "eq" za ekvivalent ili ekvivalente, "g" za gram ili grame, "mg" za miligram ili miligrame, "L" za litar ili litre, "mL" za mililitar ili mililitre, "µL" za mikrolitar ili mikrolitre, "N" za normalan, "M" za molarno, " mmol" za milimol ili milimole, "min" za minut ili minute, "h" za sat ili sate, "st" za sobnu temperaturu, "RBF" za balon sa okruglim dnom, "atm" za atmosferu, "psi" za funte po kvadratnom inču, "conc." za koncentrisano, "RCM" za metatezu zatvaranja prstena, "zas" ili "zasić " za zasićeno, "SFC" za superkritičnu fluidnu hromatografiju, "MW" za molekulsku masu, "tt" za tačku topljenja, "ee" za enantiomerni višak, "MS" ili "Mass Spec" za masenu spektrometriju, "ESI" za masenu spektroskopiju sa elektrosprej jonizacijom, "HR" za visoku rezoluciju, "HRMS" za masenu spektrometriju visoke rezolucije, "LCMS" za masenu spektrometriju tečne hromatografije, " HPLC" za tečnu hromatografiju visokog pritiska, "RP HPLC" za HPLC reverzne faze, "TLC" ili "tlc" za tankoslojnu hromatografiju, "NMR" za spektroskopiju nuklearne magnetne rezonance, "nOe" za spektroskopiju nuklearnog Overhauserovog efekta, "<1>H" za proton, "δ" za delta, "s" za singlet, "d" za dublet, "t" za triplet, "q" za kvartet, "m" za multiplet, "br" za širok, "Hz" za herc, i "α", "β", "R", "S", "E", i "Z" u stereohemijske oznake poznate stručnjaku.

Me metil

Et etil

Pr propil

i-Pr izopropil

Bu butil

i-Bu izobutil

t-Bu terc-butil

Ph fenil

Bn benzil

Boc ili BOC terc-butiloksikarbonil

Boc2O di-terc-butil dikarbonat

ACN acetonitril

AcOH ili HOAc sirćetna kiselina

AlCl3aluminijum hlorid

AIBN Azobisizobutironitril

BBr3bor tribromid

BCl3bor trihlorid

BEMP 2-terc-butilimino-2-dietilamino-1,3 -dimetilperhidro-1,3,2-diazafosforin

BOP reagens benzotriazol-1-iloksitris(dimetilamino)fosfonijum heksafluorofosfat

Burgess-ov reagens 1-metoksi-N-trietilamoniosulfoni1-metanimidat CBz karbobenziloksi

DCM ili CH2Cl2dihlorometan

CH3CN ili ACN acetonitril

CDCl3deutero-hloroform

CHCl3hloroform

mCPBA ili m-CPBA meta-hloroperbenzoeva kiselina

Cs2CO3cezijum karbonat

Cu(OAc)2bakar (II) acetat

Cy2NMe N-cikloheksil-N-metilcikloheksanamin

DBU 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en

DCE 1,2 dihloroetan

DEA dietilamin

DMP ili Dess-Martin-ov 1,1,1-tris(acetiloksi)-1,1-dihidro-1,2-beniziodoksol-3-Perjodinan (1H)-on

DIC ili DIPCDI diizopropilkarbodiimid

DIEA, DIPEA ili Hunig-ova diizopropiletilamin

baza

DMAP 4-dimetilaminopiridin

DME 1,2-dimetoksietan

DMF dimetil formamid

DMSO dimetil sulfoksid

cDNA komplementarna DNK

Dppp (R)-(+)-1,2-bis(difenilfosfino)propan

DuPhos (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benzen EDC N-(3-dimtilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid

EDCI N-(3-dimtilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid EDTA etilendiamintetrasirćetna kiselina

(S;S)-EtDuPhosRh(I) (+)-1,2-bis((2S,5S)-2,5-dietilfosfolano)benzen(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) trifluorometansulfonat Et3N ili TEA trietilamin

EtOAc etil acetat

Et2O dietil etar

EtOH etanol

GMF filter od staklenih mikrovlakana

Grubbs II (1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden)dihloro (fenilmetilen)(tricikloheksilfosfin)rutenijum

HCl hlorovodonična kiselina

HATU O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat

HEPES 4-(2-hidroksietil)piperaksin-1-etansulfonska kiselina Hex heksani

HOBt ili HOBT 1 -hidroksibenzotriazol

H2O2vodonik peroksid

IBX 2-jodoksibenzoeva kiselina

H2SO4sumporna kiselina

Jones-ov reagens CrO3u vodenom H2SO4, 2 M

K2CO3kalijum karbonat

K2HPO4kalijum fosfat dvobazni

KOAc kalijum acetat

K3PO4kalijum fosfat

LAH litijum aluminijum hidrid

LG odlazeća grupa

4

LiOH litijum hidroksid

MeOH metanol

MgSO4magnezijum sulfat

MsCl metansulfonil hlorid

MsOH ili MSA metilsulfonska kiselina

NaCl natrijum hlorid

NaH natrijum hidrid

NaHCO3natrijum bikarbonat

Na2CO3natrijum karbonat

NaOH natrijum hidroksid

Na2SO3natrijum sulfit

Na2SO4natrijum sulfat

NBS N-bromosukcinimid

NCS N-hlorosukcinimid

NH3amonijak

NH4Cl amonijum hlorid

NH4OH amonijum hidroksid

NH4COOH amonijum format

NMM N-metilmorfolin

OTf triflat ili trifluorometansulfonat

Pd2(dba)3tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) Pd(OAc)2paladijum(II) acetat

Pd/C paladijum na ugljeniku

Pd(dppf)Cl2[1,1'-bis(difenilfosfino)-ferocen]dihloropaladijum(II) Ph3PCl2trifenilfosfin dihlorid

PG zaštitna grupa

POCl3fosfor oksihlorid

PPTS piridinijum p-toluenesulfonat

i-PrOH ili IPA izopropanol

PS Polistiren

PtO2Oksid platine

st sobna temperatura

SEM-Cl 2-(trimetisilil)etoksimetil hlorid

SiO2silicijum oksid

SnCl2 kalaj(II) hlorid

TBAI tetra-n-butilamonijum jodid

TFA trifluorosirćetna kiselina

THF tetrahidrofuran

TMSCHN2trimetilsilildiazometan

T3P anhidrid propan fosfonske kiseline

TRIS tris (hidroksimetil) aminometan

pTsOH p-toluensulfonska kiselina

TsCl p-tolunesulfonil hlorid

IV. POSTUPCI PRIPREME

[0122] Jedinjenja ovog pronalaska se mogu pripremiti na više načina koji su dobro poznati stručnjacima u oblasti organske sinteze korišćenjem postupaka opisanih u nastavku, zajedno sa sintetičkim postupcima poznatim u oblasti sintetičke organske hemije, ili njihovim varijacijama kako to cene oni koji su stručni u ovoj oblasti. Poželjni postupci uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u nastavku. Reakcije se izvode u rastvaraču ili smeši rastvarača koji odgovaraju upotrebljenim reagensima i materijalima i pogodnim za transformacije na koje utiču. Stručnjaci u oblasti organske sinteze će razumeti da funkcionalnost prisutna na molekulu treba da bude u skladu sa predloženim transformacijama. Ovo će ponekad zahtevati procenu da se modifikuje redosled sintetičkih koraka ili da se izabere jedna posebna shema procesa u odnosu na drugu da bi se dobilo željeno jedinjenje pronalaska. Ograničenja na supstituente koji su kompatibilni sa reakcionim uslovima biće lako očigledna stručnjaku i tada se moraju koristiti alternativne metode. Takođe će biti prepoznato da još jedno glavno razmatranje u planiranju bilo kog sintetičkog puta u ovoj oblasti jeste razuman izbor zaštitne grupe koja se koristi za zaštitu reaktivnih funkcionalnih grupa prisutnih u jedinjenjima opisanim u ovom pronalasku. Posebno koristan zbornik sintetičkih metoda koji se mogu primeniti za pripremu jedinjenja predmetnog pronalaska može se naći u Larock, R.C., Comprehensive Organic Transformations, 2. izdanje VCH, Njujork (1999).

[0123] Jedinjenja iz predmetnog pronalaska se mogu pripremiti korišćenjem reakcija i tehnika opisanih u ovom odeljku. Reakcije se izvode u rastvaračima koji odgovaraju upotrebljenim reagensima i materijalima i pogodni su za transformacije koje se vrše. Takođe, u opisu sintetičkih metoda opisanih u nastavku, treba razumeti da su svi predloženi uslovi reakcije, uključujući rastvarač, reakcionu atmosferu, temperaturu reakcije, trajanje eksperimenta i procedure obrade, izabrani da budu standardni uslovi za tu reakciju, što bi trebalo lako da prepozna stručnjak u ovoj oblasti. Stručnjak u oblasti organske sinteze razume da funkcionalnost prisutna na različitim delovima molekula objave mora biti kompatibilna sa predloženim reagensima i reakcijama. Ne mogu sva jedinjenja pronalaska koja spadaju u datu klasu biti kompatibilna sa nekim od reakcionih uslova potrebnim u nekim od opisanih metoda. Takva ograničenja na supstituente, koji su kompatibilni sa reakcionim uslovima, biće lako očigledna stručnjaku u ovoj oblasti i moraju se koristiti alternativne metode. Posebno koristan zbornik sintetičkih metoda koji se mogu primeniti za pripremu jedinjenja ovog pronalaska može se naći u Larock, R.C., Comprehensive Organic Transformations, 2. izdanje VCH, Njujork (1999).

GENERIČKE SHEME

[0124] Referentna jedinjenja formule (I'), mogu se pripremiti prema opštim putevima prikazanim na shemama 1 do 7. Jedinjenja gde je L = N i M = C mogu se dobiti kao što je prikazano na shemi 1 počevši od bromida 1. Aza-Michael adicija 1 do nezasićenog estra 2 može dati estar 3. Jedinjenje 3 može onda biti kuplovano sa određenim alkenom kao što je 4 koristeći standardne Heck-ove uslove kuplovanja (Felpin, F.-X.; Nassar-Hardy, L.; Le Callonnec, F.; Fouquet, E. Tetrahedron 2011, 67, 2815-2831) da se dobije estar 5. Redukcija naftiridina i alkena praćena uklanjanjem zaštite na estru može dati jedinjenja formule (I'). Stručnjacima će biti očigledno da se pojedinačni stereoizomeri mogu dobiti hiralnom HPLC ili SFC preparativnim prečišćavanjem odgovarajućih intermedijara iz ove sekvence (kao što su 3 ili 5) ili finalnih kiselina formule (I').

4

[0125] Shema 2 opisuje sintezu jedinjenja formule (I') gde je M = C, L = N, i X = (CH2)3. Dakle, kao što je prikazano u Metodi A, bromid 3 može biti spojen sa odgovarajućim alkenom, što je predstavljeno primerom 4-hirdoksi-1-buten na shemi 2, preko Heck-ovog protokola kuplovanja u prisustvu paladijum acetata i fosfinskog liganda. Naknadna oksidacija alkohola i redukcija dvostruke veze mogu dati keton 6. Keton 6 se alternativno može dobiti preko Sonogashira kuplovanja bromida 3 sa odgovarajućim alkinom, što je predstavljeno primerom 4-hidroksi-1-butinom na shemi 2, nakon čega sledi redukcija trostruke veze i oksidacije alkohola u keton. Kondenzacija 6 sa 2-amino-3-formilpiridinom u Friedlenderovim uslovima (Jose Marco-Contelles; Elena Perez-Mayoral; Abdelouahid Samadi; Maria do Carmo Carreiras; Elena Soriano (2009). "Recent Advances in the Friedlander Reaction". Chemical Reviews.109 (6): 2652-71) može dati odgovarajući naftiridin, koji posle delimične redukcije i uklanjanja zaštite estra može da da jedinjenja formule (I'). Alternativni metod za dobijanje jedinjenja formule (I') je prikazan na shemi 2. Postupak B, gde, za razliku od postupka A, Sonogashira kuplovanje i formiranje naftiridinskog prstena prethode aza-Michael reakciji. Dakle, N-Boc zaštićeni bromid 7 može da se transformiše u 8 korišćenjem protokola opisanog za metod A. Nakon toga, formiranje Friedlenderovog naftiridinskog prstena kao što je ranije opisano, praćeno delimičnom redukcijom naftiridinskog prstena i uklanjanjem Boc grupe može dati 9. Aza -Michael pod baznim uslovima i hidrolizom estra može dati jedinjenja formule (I').

[0126] Jedinjenja formule (I') gde je M = N, L = C, i R<4>≠ H mogu se sintetizovati kao što je prikazano u Shemi 3, na primeru jedinjenja gde je R<4>= NHCbz. Kondenzacija aldehida 10 sa odgovarajućim R<4>-supstituisanim Horner-Emmonsovim reagensom (11) praćena redukcijom alkena i ponovnom zaštitom amina može dati intermedijer 12. N-alkilacijom 12 sa hloridom 13 praćenom cepanjem ketala 1 može se dobiti keton 14. Naknadno formiranje naftiridinskog prstena Friedlenderovom kondenzacijom praćeno delimičnom redukcijom može da se dobije 15. Niz u 3 koraka kojim se uklanja Boc grupa, refunkcionalizuje primarni amin reakcijom sa CbzCl i hidrolizuje nastali estar, može dati jedinjenja formule (I'). Jedinjenja formule (I') gde je X = (CH2)2mogu se dobiti preko Mitsunobu kuplovanja sa alkoholom 16, nakon čega sledi uklanjanje zaštite Boc grupa, acilacija slobodnog amina sa CBzCl i finalna hidroliza estra. Koristeći bilo koji od metoda prikazanih na Shemi 3, takođe se može pristupiti jedinjenjima formule (I') gde je X = (CH2)3-6.

4

[0127] Jedinjenja formule (I') gde je M = N, L = C, i R<3>≠ H mogu se dobiti polazeći od aldehida 10. Kondenzacija 10 sa odgovarajućim fosfornim reagensom može dati odgovarajući nezasićeni estar koji se može zaštititi (npr, tozil grupom) da se dobije 17. Haiashi reakcija (Hayashi, T. Synlett 2001, 879-887) sa odgovarajućom boronskom kiselinom u prisustvu rodijumskog katalizatora dodaje R<3>grupu na konjugovani način da bi se dobilo 18 nakon uklanjanja zaštitne grupe. Dalja funkcionalizacija, kao što je opisano ranije, da bi se omogućila postavka željene mimike arginina koja inkorporira linkere različitih dužina, može dati jedinjenja formule (I').

4

[0128] Jedinjenja formule (I') gde L = M = C i R<3>≠ H mogu se sintetisati kao što je prikazano na shemi 5 korišćenjem metoda opisanih u prethodnim shemama.

4

[0129] Shema 6 opisuje sintezu jedinjenja formule (I') gde je L = M = C i R<3>≠ H koja se mogu pripremiti korišćenjem metoda sličnih onima opisanim u shemi 2.

4

[0130] Shema 7 predstavlja sintezu jedinjenja formule (I') gde L = N i, A, G, E, M su CHR<6b>. Deprotonacija i alkilacija γ- butirolaktona (32) praćena reduktivnim otvaranjem prstena može dati diol koji se može konvertovati u bis-mesilat 34. Druge odlazeće grupe kao što su tozilat, hlorid ili bromid se takođe mogu koristiti umesto mesilata da bi se olakšalo naknadno formiranje pirolidinskog prstena sa 2-aminoestrom 35. Aminoestri kao što je 35 mogu se pripremiti korišćenjem metoda poznatih u literaturi (na primer, Hutchinson, J. H. i sarad. J. Med Chem. 2003, 46, 4790; Henderson, N. C. i sarad. Nature Medicine 2013, 19, 1617). Wacker oksidacija rezultujućeg alkena (36) praćena daljim transformacijama sličnim onima opisanim ranije može dati jedinjenja formule (I').

4

PRIMERI

[0131] Sledeći primeri su ponuđeni kao ilustrativni, kao delimični obim i posebna tehnička rešenja pronalaska i nije predviđeno da ograničavaju obim pronalaska. Skraćenice i hemijski simboli imaju svoja uobičajena i značenja koja su u primeni osim ako nije drugačije naznačeno. Osim ako nije drugačije naznačeno, ovde opisana jedinjenja su pripremljena, izolovana i okarakterisana korišćenjem shema i drugih metoda koje su ovde otkrivene ili se mogu pripremiti korišćenjem istih.

[0132] Prema potrebi, reakcije su sprovedene u atmosferi suvog azota (ili argona). Za bezvodne reakcije korišćeni su, DRISOLV<®>rastvarači iz EM. Za druge reakcije, korišćeni su rastvarači nivoa čistoće kao što su kod reagensa ili HPLC. Osim ako nije drugačije navedeno, svi komercijalno dobijeni reagensi su korišćeni kako su primljeni.

HPLC/MS I PRIPREMNE/ANALITIČKE HPLC METODE PRIMENJENE U KARAKTERIZACIJI ILI PREČIŠĆAVANJU PRIMERA

[0133] Spektri NMR (nuklearna magnetna rezonanca) su obično dobijeni na Bruker ili JEOL instrumentima od 400 MHz i 500 MHz u naznačenim rastvaračima. Svi hemijski pomaci su prijavljeni u ppm od tetrametilsilana sa rezonancom rastvarača kao internim standardom.

<1>HNMR spektralni podaci se obično izveštavaju na sledeći način: hemijski pomak, višestrukost (s = singlet, br s = širok singlet, d = dublet, dd = dublet dubleta, t = triplet, k = kvartet, sep = septet, m = multiplet, app = prividno), konstante spajanja (Hz) i integracija.

[0134] Termin HPLC se odnosi na Shimadzu instrument hromatografije visokih performansi sa jednom od sledećih metoda:

HPLC-1: Sunfire C18 kolona (4.6 × 150 mm) 3.5 µm, gradijent od 10 do 100% B:A tokom 12 min, zatim 3 min držati na 100% B.

Mobilna faza A: 0.05% TFA u voda:CH3CN (95:5)

Mobilna faza B: 0.05% TFA u CH3CN:voda (95:5)

TFA pufer pH = 2.5; Protok: 1 mL/ min; Talasna dužina: 254 nm, 220 nm.

HPLC-2: XBridge Phenil (4.6 × 150 mm) 3.5 µm , gradijent od 10 do 100% B:A tokom 12 min, zatim 3 min držati na 100% B.

Mobilna faza A: 0.05% TFA u voda:CH3CN (95:5)

Mobilna faza B: 0.05% TFA u CH3CN:voda (95:5)

TFA pufer pH = 2.5; Protok: 1 mL/ min; Talasna dužina: 254 nm, 220 nm.

HPLC-3: Chiralpak AD-H, 4.6 × 250 mm, 5 µm .

Mobilna faza: 30% EtOH-heptan (1:1) / 70% CO2

Protok = 40 mL/min, 100 bar, 35 °C; Talasna dužina: 220 nm

HPLC-4: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice;

Mobilna faza A: 5:95 CH3CN:voda sa 10 mM NH4OAc;

Mobilna faza B: 95:5 CH3CN:voda sa 10 mM NH4OAc;

Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, zatim 0.75-min držati na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

HPLC-5: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice;

Mobilna faza A: 5:95 CH3CN:voda sa 0.1% TFA;

Mobilna faza B: 95:5 CH3CN:voda sa 0.1% TFA;

1

Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, zatim 0.75-min držati na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 1

(±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0135]

[0136] Primer 1A: Rastvor 5-bromo-2-metoksipiridina (2.5 g, 13.30 mmol), terc-butil akrilata (6.75 mL, 46.5 mmol), trietilamina (5.00 mL, 35.9 mmol), paladijum(II) acetata (0.336 g, 1.498 mmol) i tri-o-tolilfosfina (0.673 g, 2.211 mmol) u MeCN (3.09 mL) je degasiran sa Ar tokom 10 min. Zatim je reakciona smeša zagrevana na 90 °C tokom 18 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo, toluen je dodat (10 mL) i smeša je koncentrovana. Dodat je etar i smeša je filtrirana kroz uložak sa slojem silika gela eluiranjem etrom. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 60% etil acetat/heksani) da bi se dobio Primer 1A (1.125 g, 4.78 mmol, 36% prinos) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca. LCMS (ES): m/z 236.2 [M+H]<+>.<1>H NMR

2

(400MHz, CDCl3) δ 7.49 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 7.31 - 7.18 (m, 3H), 6.95 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 1.54 (s, 9H).

[0137] Primer 1B: Rastvoru 3-bromo-1H-pirazola (94 mg, 0.638 mmol) i cezijum karbonata (208 mg, 0.638 mmol) u acetonitrilu (4 mL) pod Ar dodat je Primer 1A (150 mg, 0.638 mmol) i smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 80 °C tokom 60 min. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, smeša je podeljena između EtOAc (20 mL) i H2O (20 mL). Kombinovana organska faza je osušena (anhidrovani MgSO4) i rastvarač je uklonjen in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 20% etil acetat/heksani) da se dobije Primer 1B (126.5 mg, 0.331 mmol, 52% prinos) kao čvrsta bela supstanca.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.21 -8.10 (m, 1H), 7.64 (dd, J = 8.7, 2.6 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.65 (dd, J = 8.8, 6.3 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.54 - 3.42 (m, 1H), 3.03 (s, 1H), 1.38 (s, 9H)

[0138] Primer 1C: Rastvor Primera 1B (25 mg, 0.065 mmol), 2-(but-3-en-1-il)-1,8-naftiridina (12.05 mg, 0.065 mmol), trietilamina (0.025 mL, 0.177 mmol), paladijum(II) acetata (1.655 mg, 7.37 µmol) i tri-o-tolilfosfina (3.31 mg, 10.88 µmol) u ACN (0.6 mL) je degasiran sa Ar tokom 10 minuta. Zatim je reakciona smeša zagrevana na 90 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 100% etil acetat/heksani) da se dobije Primer 1C (22.7 mg, 0.047 mmol, 72% prinos) kao čvrsta žuta supstanca. LCMS (ES): m/z 486.1 [M+H]<+>.

[0139] Primer ID: Rastvor Primera 1C (20 mg, 0.041 mmol) i PtO2(1.871 mg, 8.24 µmol) u EtOH (0.4 mL) je mešan pod H2(balon, 1 atm) tokom 16 h. Nakon filtracije na ulošku CELITE<®>, koncentrisan je da bi se dobio Primer ID (20.2 mg, 0.041 mmol, 100% prinos) kao prljavo bela čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 492.1 [M+H]<+>.

[0140] Primer 1: Rastvoru Primera ID (20 mg, 0.041 mmol) dodata je sumporna kiselina (3M vod.) (0.098 mL, 0.297 mmol). Smeša je mešana na 40 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i podešena na pH 6 korišćenjem 50% vod. NaOH. Reakciona smeša je ekstrahovana sa CHCl3(3x) i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Smeša je prečišćena preparativnom LC/MS (Kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, 5-µm čestice;Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: 10-50% B tokom 20 minuta, zatim 5minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije Primer 1 (11.4 mg, 0.026 mmol, 64% prinos). LC/MS (m/z) = 436.0 (M+H)<+>.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 1H), 7.76 - 7.56 (m, 2H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.76 - 5.66 (m, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.60 - 3.50 (m, 1H), 3.39 - 3.28 (m, 1H), 3.26 - 3.20 (m, 2H), 3.11 - 3.02 (m, 1H), 2.63 - 2.57 (m, 2H), 2.50 - 2.47 (m, 4H), 2.42 (br. s., 1H), 1.91 (s, 1H), 1.80 - 1.69 (m, 2H), 1.53 (br. s., 4H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 6.0; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 2.4; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 1.5; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 262.

Primer 2

(±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0141]

4

[0142] Primer 2A: Rastvor 1B (50 mg, 0.131 mmol), pent-4-en-2-ola (0.047 mL, 0.458 mmol), trietilamina (0.049 mL, 0.353 mmol), paladijum(II) acetata (3.31 mg, 0.015 mmol) i trio-tolilfosfina (6.62 mg, 0.022 mmol) u ACN (1.3 mL) je degasiran sa Ar tokom 10 min. Zatim je smeša zagrevana na 90 °C tokom 16 h. Sirova smeša je koncentrovana i prečišćena fleš hromatografijom (0 do 50% etil acetat/heksani) da bi se dobio Primer 2A (29.1 mg, 0.075 mmol, 58% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. LCMS (ES): m/z 388.3 [M+H]<+>.

[0143] Primer 2B: Rastvoru Primera 2A (29 mg, 0.075 mmol) u CH2Cl2(0.7 mL) na sobnoj temperaturi dodat je Dess-Martin-ov perjodinan (38.1 mg, 0.090 mmol). Smeša je razblažena sa Et2O i filtrirana kroz uložak CELITE<®>i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 30% etil acetat/heksani) da se dobije Primer 2B (20 mg, 0.052 mmol, 69% prinos) kao čvrsta bela supstanca. LCMS (ES): m/z 386.1 [M+H]<+>.

[0144] Primer 2C: Rastvor Primera 2B (20 mg, 0.052 mmol) i PtO2(2.357 mg, 10.38 µmol) u EtOH (0.4 mL) je mešan pod H2(1 atm) tokom 16 h. Nakon filtracije na ulošku CELITE<®>, smeša je koncentrovana koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 388.1 [M+H]<+>.

[0145] Primer 2D: Rastvoru Primera 2C (20 mg, 0.052 mmol) u CH2Cl2(0.1 mL) i MeOH (0.300 mL) dodat je pirolidin (1.2 eq, 9.4 µL) praćen dodavanjem 2-aminonikotinaldehida (6.30 mg, 0.052 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se dobio Primer 2D (24.4 mg, 0.052 mmol, 100% prinos) kao tamnobraon ulje. Jedinjenje je korišćeno za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 444.2 [M+H]<+>.

[0146] Primer 2E: Rastvor Primera 2D (24 mg, 0.051 mmol) i PtO2(2.302 mg, 10.14 µmol) u EtOH (0.4 mL) je mešan pod H2(1 atm) (0.102 mg, 0.051 mmol) tokom 16 h. Nakon filtracije na ulošku CELITE<®>i koncentrisanja, Primer 2E je izolovan kao prljavo-bela čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 478.1 [M+H]<+>.

[0147] Primer 2: Rastvoru Primera 2E (24.2 mg, 0.051 mmol) u etil acetatu (0.2 mL) dodata je sumporna kiselina (3 M vod., 0.122 mL, 0.370 mmol). Vodeni sloj je odvojen i mešan na 40 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i podešena na pH 6 korišćenjem 50% vod. NaOH. Reakciona smeša je ekstrahovana sa CHCl3(3x) i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Smeša je prečišćena preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 10-50% B tokom 30 minuta, zatim 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min da bi se dobio Primer 2 (4.9 mg, 0.012 mmol, 23% prinos). LCMS (ES): m/z 422.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz,) δ 8.50 (s, 1H), 7.59 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.74 (dd, J = 8.7, 5.7 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.42 (dtd, J = 11.3, 5.5, 3.2 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 14.9, 5.7 Hz, 1H), 3.35 (dtd, J = 11.3, 5.5, 4.4 Hz, 1H), 3.29 (dd, J = 14.9, 8.7 Hz, 1H), 2.82 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.66 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.53 (td, J = 7.0, -16.4 Hz, 1H), 2.45 (td, J = 7.0, -16.4 Hz, 1H), 1.96 (kvin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.94 (dtt, J = 13.4, 7.0, 5.5 Hz, 1H), 1.94 - 1.89 (m, 1H), 1.87 (dtt, J = 13.4, 7.0, 5.5 Hz, 1H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 6.8; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 2.7; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 0.34; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 420.

Primer 3 i Primer 4

3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 3, enantiomer 1)

3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 4, enantiomer 2)

[0148]

[0149] Primer 3A: Suspenziji 6-metoksinikotinaldehida (24 g, 175 mmol) u THF (420 mL) je dodato 60 g molekularnih sita (4Å) praćenih etil 2-(dietoksifosforil)acetatom (42.0 mL, 210 mmol), i LiOH (5.03 g, 210 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je filtrirana preko CELITE<®>i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u EtOAc i opran sa zas. NaHCO3(2x) praćeno slanim rastvorom (2x). Organski sloj je osušen (anhidrovani Na2SO4) i koncentrisan. Prečišćavanje fleš hromatografijom dalo je Primer 3A (31g, 85%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.30 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.99 (s, 3H), 1.36 (t, J = 7.0 Hz, 3H)

[0150] Primer 3B: Smeša 3-bromo-1H-pirazola (22.62 g, 154 mmol), DABCO (15.70 g, 140 mmol), Primera 3A (29 g, 140 mmol), kalijum karbonata (0.193 g, 1.399 mmol) i acetonitrila (280 mL) je mešana na 75 °C tokom noći. Reakcija je kvenčovana slanim rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Prečišćavanje fleš hromatografijom dalo je Primer 3B (25g, 50%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.15 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 8.7, 2.6 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.25 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.70 (dd, J = 8.5, 6.4 Hz, 1H), 4.28 - 4.03 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.57 (dd, J = 16.4, 8.6 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 16.5, 6.4 Hz, 1H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)

[0151] Primer 3C: Smeša Primera 3B (6.0 g, 16.94 mmol), pent-4-in-2-ola (2.396 mL, 25.4 mmol), trietilamina (9.44 mL, 67.8 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum (II) hlorida (0.713 g, 1.016 mmol) i bakar (I) jodida (0.129 g, 0.678 mmol) u DMF (33.9 mL) je mešana na 80 °C tokom 2 h. Reakcija je razblažena sa EtOAc, isprana slanim rastvorom 3 puta, osušena preko anhidrovanog Na2SO4čvrsta supstanca je filtrirana, a filtrat je koncentrovan. Prečišćavanje fleš hromatografijom dalo je 3C (4g, 68%). LCMS (ES): m/z 358.3 [M+H]<+>.

[0152] Primer 3D: Rastvor Primera 3C (22 g, 61.6 mmol) i Pd-C (9.17 g, 8.62 mmol) u EtOH (308 mL) je mešan pod H2(balon, 1 atm) tokom noći. Nakon filtracije na ulošku CELITE<®>i koncentrisanja, Primer 3D (20 g, 55.3 mmol, 90% prinos) je izolovan kao smeđe ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 362.2 [M+H]<+>.

[0153] Primer 3E: Rastvoru Primera 3D u CH2Cl2(277 mL) na sobnoj temperaturi je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (32.9 g, 77 mmol). Posle 1 sata, smeša je razblažena sa Et2O, filtrirana, i filtrat je potom koncentrovan. Prečišćavanje fleš hromatografijom dalo je Primer 3E (15.7g, 79%). LCMS (ES): m/z 360.1 [M+H]<+>.

[0154] Primer 3F: Rastvoru Primera 3E (15.7 g, 43.7 mmol) u CH2Cl2(21.84 mL) i EtOH (65.5 mL) dodat je pirolidin (7.95 mL, 96 mmol) praćen dodavanjem 2-aminonikotinaldehida (5.87 g, 48.0 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 h. Smeša je koncentrovana na 45 °C da bi se dobio Primer 3F.

[0155] Sirovi materijal je korišćen kao takav u sledećem koraku. LCMS (ES): m/z 446.1 [M+H]<+>.

[0156] Primer 3G: Rastvor Primera 3F (19.47 g, 43.7 mmol) i PtO2(1.489 g, 6.56 mmol) u EtOH (146 mL) je mešan pod H2tokom 16 h. Nakon filtracije kroz CELITEⓇ uložak i koncentrovanja, Primer 3G (19.60 g, 43.60 mmol, 100% prinos) dobijen je kao tamno ulje, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 450.1 [M+H]<+>,

[0157] Primer 3 i Primer 4: Smeša Primera 3G (580 mg, 1.290 mmol) i 1M rastvora natrijum hidroksida (3871 µL, 3.87 mmol) u MeOH (8601 µL) je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Metanol je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen vodom i pH je podešen na 5-6 korišćenjem IN HCl kap po kap. Proizvod je ekstrahovan hloroformom tri puta, osušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi materijal je odvojen pomoću SFC (Chiralpak AD-H (3 × 25cm, 5µm), 100 bar, 45 °C, 160 mL/min, CO2/ MeOH: ACN [1:1 (v/v)] s 0.1%NH4OH (60/40)) da bi se dobio Primer 3 (210 mg, 38%) i Primer 4 (190 mg, 34%). Primer 3: LCMS (ES): m/z 422.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.18 - 8.08 (m, 1H), 7.79 - 7.63 (m, 2H), 7.02 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.36 - 6.19 (m, 2H), 6.03 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.72 (dd, J = 8.8, 6.4 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.53 - 3.04 (m, 7H), 2.64 - 2.57 (m, 2H), 2.48 - 2.39 (m, 3H), 1.96 - 1.70 (m, 2H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 3.2; Humani αVβ1 IC50 (nM) = 65; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 3.2; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 11; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 1,120. Primer 4: LCMS (ES): m/z 422.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.23 - 7.96 (m, 1H), 7.78 - 7.59 (m, 2H), 7.02 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.32 - 6.20 (m, 2H), 6.03 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.72 (dd, J = 8.7, 6.4 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.51 - 2.99 (m, 7H), 2.63 - 2.56 (m, 2H), 2.44 (dd, J = 14.9, 7.5 Hz, 3H), 1.91 - 1.64 (m, 2H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 210.

Primer 5

(±)-2-(((Benziloksi)karbonil)amino)-3-(1-(2-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftl1iridin-2-il)etil)-1H-pirazol-4-il)propanska kiselina (nije prema predmetnom pronalasku)

[0158]

[0159] Primer 5A: Rastvoru terc-butil 7-(2-metoksi-2-oksoetil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1 (2H)-karboksilata (1 g, 3.26 mmol) u THF (20 mL) dodat je 2M rastvor litijum borohidrida (2.122 mL, 4.24 mmol) u THF. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći.

Voda je polako dodavana u reakcionu smešu i dobijena smeša je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa EtOAc zatim ekstrahovana 3 puta sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Prečišćavanje fleš hromatografijom je dalo Primer 5A (782 mg, 86%). LCMS (ES): m/z 279.1 [M+H]<+>.

[0160] Primer 5B: Rastvoru metil 2-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-(dimetoksifosforil) acetata (101 mg, 0.306 mmol) u DCM (1 mL) dodat je DBU (0.042 mL, 0.280 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 10 minuta pod Ar na sobnoj temperaturi. Rastvor terc-butil 4-formil-1H pirazol-1-karboksilata (50 mg, 0.255 mmol) u DCM (0.5 mL) je dodat u reakcionu smešu. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod Ar tokom 1 h. Smeša je koncentrovana i prečišćena fleš hromatografijom da bi se dobio Primer 5B (76 mg, 74%). LCMS (ES): m/z 402.2 [M+H]<+>.

[0161] Primer 5C: Rastvoru Primera 5B (90 mg, 0.299 mmol) u MeOH (7 mL) dodat je HOAc (0.1 mL) i 10% Pd/C (40 mg, 0.038 mmol). Smeša je mešana pod H2(1 atm) tokom noći. Smeša filtrirana i koncentrovana. Sirova smeša je korišćena za sledeći korak bez prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 170.1 [M+H]<+>.

[0162] Primer 5D: Rastvoru Primera 5C (50 mg, 0.296 mmol) u THF (3 mL) i H2O (1.5 mL) je dodat natrijum bikarbonat (74.5 mg, 0.887 mmol) i Boc2O (0.106 mL, 0.458 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (30 mL). Organski slojevi su kombinovani i koncentrovani. Smeša je prečišćena preparativnom HPLC (Phenomenex Luna Axia 5µ C1830 x 100 mm; 10 min gradijent od 85% A: 15% B do 0% A:100% B (A = 90% H2O/10% ACN 0.1% TFA); (B = 90% ACN/10% H2O 0.1% TFA); detekcija na 220 nm) da bi se dobio Primer 5D (35 mg, 44%). LCMS (ES): m/z 270.1 [M+H]<+>.

[0163] Primer 5E: Smeši Primera 5D i Primera 5A (20.67 mg, 0.074 mmol) u toluenu (619 µL) je dodat tris(butil)fosfin (37.1 µL, 0.149 mmol) i 1,1'-azobis(N,N-dimetilformamid) (25.6 mg, 0.149 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod Ar tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovina je prečišćena prep HPLC (Phenomenex Luna Axia 5µ C1830 x 100 mm; 10 min gradijent od 85% A: 15% B do 0% A: 100% B (A = 90% H2O/10% ACN 0.1% TFA); (B = 90% ACN/10% H2O 0.1% TFA); detekcija na 220 nm) da bi se dobio Primer 5E (4 mg, 10%). LCMS (ES): m/z 530.4 [M+H]<+>.

1

[0164] Primer 5F: Rastvoru Primera 5E (4 mg, 7.55 µmol) u TFA (0.2 mL) i DCM (1 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen i ostatak je upotrebljen u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 430.3 [M+H]<+>.

[0165] Primer 5G: Rastvoru Primera 5F (2.48 mg, 7.53 µmol), natrijum bikarbonata (5 mg, 0.060 mmol) u THF (1.5 mL) i H2O (0.5 mL) dodat je benzil karbonohloridat (5 mg, 0.029 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Rastvarač je uparen. Vodeni ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 5 mL). Organski slojevi su kombinovani i koncentrovani da bi se dobio sirov Primer 5F koji je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 463.3 [M+H]<+>.

[0166] Primer 5: Rastvor Primera 5G (3.5 mg, 7.55 µmol), LiOH (3 mg, 0.125 mmol) u THF (1 mL) i H2O (0.5 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je prečišćena preparativnom LC/MS u sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-55% B tokom 15 minuta, zatim 3-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. da bi se dobio Primer 5 (3.3 mg, 96%). LCMS (ES): m/z 450.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.45 - 7.20 (m, 9H), 6.35 (br d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.21 - 5.00 (m, 2H), 4.66 - 4.49 (m, 2H), 4.34 (td, J = 6.4, 1.4 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.43 - 3.37 (m, 2H), 3.02 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.93 (br dd, J = 8.0, 5.9 Hz, 2H), 2.71 (br t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.87 (kvin, J = 5.6 Hz, 2H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 5,000.

2

Primer 6

(±)-2-(((Penziloksi)karl)onil)amino)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanska kiselina (nije prema predmetnom pronalasku)

[0167]

[0168] Primer 6A: Rastvoru Primera 5D (26 mg, 0.065 mmol, 59% prinos) u acetonitrilu (1 mL) dodat je 2-(3-hloropropil)-2-metil-1,3-dioksolan (40 mg, 0.243 mmol) i Cs2CO3(100 mg, 0.307 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110 °C tokom 1 h. Smeša je filtrirana, filtrat je koncentrisan, i sirovi proizvod je dalje prečišćen pomoću prep HPLC (Phenomenex Luna Axia 5µ C18 30 x 100 mm; 10 min gradijent od 85% A: 15% B do 0% A: 100% B (A = 90% H2O/10% ACN 0.1% TFA); (B = 90% ACN/10% H2O 0.1% TFA); detekcija pri 220 nm) da bi se dobio Primer 6A (26 mg, 59%). LCMS (ES): m/z 398.3 [M+H]<+>.

[0169] Primer 6B: Rastvoru Primera 6A (10 mg, 0.028 mmol, 94% prinos) u THF (0.5 mL) dodat je 1N HCl (0.5 mL, 0.500 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Rastvarač je uparen i voda (1 mL) je dodata. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 5 mL). Organski slojevi su kombinovani i koncentrovani da bi se dobio sirovi Primer 6B koji je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 354.2 [M+H]<+>.

[0170] Primer 6C: Rastvoru Primera 6B (22 mg, 0.062 mmol) u EtOH (1 mL) dodat je 2-aminonikotinaldehid (11.40 mg, 0.093 mmol) i pirolidin (10.30 µl, 0.125 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i zagrevana pri refluksu tokom 1 h. Rastvarač je uparen i sirovi proizvod je prečišćen sa prep HPLC (Phenomenex Luna Axia 5 µ C1830 x 100 mm; 10 min gradijent od 85% A: 15% B do 0% A: 100% B (A = 90% H2O/10% ACN 0.1% TFA); (B = 90% ACN/10% H2O 0.1% TFA); detekcija pri 220 nm) da bi se dobio Primer 6C (3.5 mg, 13%). LCMS (ES): m/z 440.1 [M+H]<+>.

[0171] Primer 6D: Rastvoru Primera 6C (3.5 mg, 7.96 µmol) u etanolu (2 mL) dodat je PtO2(0.362 mg, 1.593 µmol). Smeša je mešana pod H2atmosferom (balon, 1 atm) tokom noći. Smeša je filtrirana kroz CELITE<®>uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobio Primer 6D kao viskozno ulje. LCMS (ES): m/z 444.3 [M+H]<+>.

[0172] Primer 6E: Rastvoru Primera 6D (3.5 mg, 7.89 µmol) u CH2Cl2(1 mL) dodat je TFA (0.4 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Smeša je koncentrovana i sirovi materijal je korišćen za sledeći korak bez prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 344.1 [M+H]<+>.

[0173] Primer 6F: Rastvoru Primera 6E (2.7 mg, 7.86 µmol), natrijum bikarbonata (5 mg, 0.060 mmol) u THF (1.5 mL) i H2O (0.5 mL) dodat je benzil karbonohloridat (5 mg, 0.029 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1h. Rastvarač je uparen. Vodeni ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 5 mL). Organski slojevi su sakupljeni i koncentrovani da bi se dobio Primer 6F, koji je korišćen za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 478.3 [M+H]<+>.

[0174] Primer 6: Rastvoru Primera 6F (3.75 mg, 7.85 µmol) u THF (1 mL) i vodi (0.5 mL) dodat je litijum hidroksid (3 mg, 0.125 mmol) i MeOH (0.1 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 min. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i prečišćen preparativnom LC/MS u sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 3-40% B tokom 25 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. da bi se dobio Primer 6 (1.2 mg,

4

30%). LCMS (ES): m/z 464.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.62 - 7.15 (m, 8H), 6.55 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.39 - 4.97 (m, 3H), 4.19 (br t, J = 5.1 Hz, 1H), 4.13 - 3.93 (m, 2H), 3.46 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.96 (br d, J = 5.2 Hz, 2H), 2.78 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.54 - 2.39 (m, 1H), 2.31 - 2.10 (m, 3H), 2.01 - 1.87 (m, 2H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 80.

Primer 7

(±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanska kiselina (racemat)

[0175]

[0176] Primer 7A: Rastvoru 1H-pirazol-4-karbaldehida (300 mg, 3.12 mmol) dodat je etil 2-(trifenilfosforaniliden)acetat (1360 mg, 3.90 mmol) u toluenu (10 mL). Smeša je zagrevana na 90 °C tokom 2 h. Rastvarač je odstranjen in vacuo. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom da bi se dobio Primer 7A (450 mg, 2.71 mmol, 87% prinos) kao čvrsta bela supstanca. LCMS (ES): m/z 167.1 [M+H]<+>.

[0177] Primer 7B: Smeši Primera 7A u CH2Cl2(35 mL) dodat je 4-metilbenzen-1-sulfonil hlorid (952 mg, 4.99 mmol) i TEA (2.088 mL, 14.98 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvarač je uparen i smeša je razblažena sa 30 mL vode i ekstrahovana sa EtOAc (50 x 3 mL). Organski slojevi su kombinovani, koncentrovani i prečišćeni fleš hromatografijom da bi se dobio Primer 7B (1.15 g, 72%). LCMS (ES): m/z 321.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.24 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.89 (s, 1H), 7.51 (d,J = 16.1 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.27 (d,J= 16.0 Hz, 1H), 4.26 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.33 (t, J = 7.1 Hz, 3H).

[0178] Primer 7C: Degasiranom rastvoru (6-metoksipiridin-3-il)borne kiseline (477 mg, 3.12 mmol) i Primera 7B (500 mg, 1.56 mmol) u dioksanu (7804 µL) i THF (7804 µL) dodat je IN kalijum hidroksid (3121 µl, 3.12 mmol) i hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(l) dimer (92 mg, 0.187 mmol). Smeša je zagrevana na 80 °C 2 h. Smeša je razblažena sa 10 mL vode i ekstrahovana sa EtOAc (25 x 3 mL). Organski delovi su kombinovani, koncentrovani, i prečišćeni sa fleš hromatografijom da bi se dobio Primer 7C (206 mg, 30%). LCMS (ES): m/z 430.0 [M+H]<+>.

[0179] Primer 7D: Rastvoru Primera 7C (206 mg, 0.480 mmol) dodata je 4M HCl u dioksanu (1 mL) i etanol (0.3 mL). Reakciona smeša je mešana tokom 0.5 h. Smeša je koncentrovana i prečišćena sa prep HPLC (Phenomenex Luna Axia 5µ C1830 x 100 mm; 10 min gradijent od 85% A: 15% B do 0% A: 100% B (A = 90% H2O/10% ACN 0.1% TFA); (B = 90% ACN/10% H2O 0.1% TFA); detekcija pri 220 nm) da bi se dobio Primer 7D (578 mg, 87%). LCMS (ES): m/z 276.1 [M+H]<+>.

[0180] Primer 7 je pripremljen iz Primera 7D prema postupku opisanom u Primeru 6. LCMS (ES): m/z 422.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.04 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.41 - 7.20 (m, 2H), 6.75 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.45 (br d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.38 (br t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.11 (td, J = 13.7, 7.1 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.51 - 3.38 (m, 2H), 2.89 - 2.68 (m, 3H), 2.53 - 2.45 (m, 1H), 2.42 - 2.30 (m, 1H), 2.28 - 2.04 (m, 2H), 1.98 - 1.79 (m, 3H), 1.40 - 1.21 (m, 1H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 323.

Primer 8

(S)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(l-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanska kiselina

Primer 9

(R)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanska kiselina

[0181]

[0182] Primer 8 i Primer 9: Primer 7 (110 mg, 0.26 mmol) je odvojen pomoću SFC [Berger MGII SFC Prep, Kolona: Chiralpak AD-H, 21 x 250 mm, 5 mikrona Mobilna faza: 20% B= 10 mM amonijum acetat u (50:50) Acetonitril/MeOH-80% CO2, 150 bar, uslovi protoka: 45 mL/min, 120 bar, 40 °C. Talasna dužina detektora: 265 nm; detalji injektiranja: 0.5 mL od 22.2 mg/mL u MeOH/ACN] da bi se dobio Primer 8 (38 mg, 28%) i Primer 9 (41mg, 30%). Primer 8:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.65 (br d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.43 - 7.26 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.22 - 4.02 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.56 - 3.41 (m, 2H), 2.91 - 2.71 (m, 3H), 2.59 - 2.33 (m, 2H), 2.28 - 2.08 (m, 2H), 2.06 - 1.85 (m, 3H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 64.

[0183] Primer 9:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.65 (br d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.43 - 7.26 (m, 2H), 6.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.22 - 4.02 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.56 - 3.41 (m, 2H), 2.91 - 2.71 (m, 3H), 2.59 - 2.33 (m, 2H), 2.28 - 2.08 (m, 2H), 2.06 - 1.85 (m, 3H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 213.

Primer 10

(±)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirol-2-il)propanska kiselina (nije prema predmetnom pronalasku)

[0184]

[0185] Primer 10A: Mešanoj suspenziji NaH (60% u mineralnom ulju) (0.138 g, 3.45 mmol) u THF (19.16 mL) pri 23 °C dodat je 4-bromo-1H pirol-2-karbaldehid (0.500 g, 2.87 mmol) i reakciona smeša je mešana pri 23 °C pod N2tokom 1 h. Dodat je TsCl (0.603 g, 3.16 mmol) i reakciona smeša je mešana pri 23 °C pod N2tokom 23 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zas. NH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran sa vodom, slanim rastvorom, osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen sa hromatografijom (0 do 25% heksani/EtOAc) da bi se dobio Primer 10A (0.774 g, 2.358 mmol, 82% prinos) kao čvrsta bela supstanca.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.96 (s, 1H), 7.84 - 7.78 (m, 2H), 7.58 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H). LCMS (ES): m/z 330.1 [M+H]<+>.

[0186] Primer 10B: Rastvor Primera 10A (0.544 g, 1.658 mmol) i etil 2-(trifenilfosforaniliden)acetata (0.722 g, 2.072 mmol) u toluenu (5.31 mL) je zagrevan pri 90 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je odstranjen in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom (0 do 30% heksani/EtOAc) da bi se dobio Primer 10B (0.347 g, 0.871 mmol, 53% prinos). LCMS (ES): m/z 398.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz, DMSO) δ 7.89 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.18 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0187] Primer 10C: Degasiranom rastvoru (3-fluoro-4-metoksifenil)borne kiseline (0.296 g, 1.743 mmol) i Primera 10B (0.347 g, 0.871 mmol) u dioksanu (8.71 mL) dodat je KOH (1M vod.) (1.743 mL, 1.743 mmol) i hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(l) dimer (0.052 g, 0.105 mmol). Smeša je degasirana tokom 10 min i zagrevana na 100 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 25% heksani/EtOAc) da bi se dobio Primer 10C (0.264 g, 0.503 mmol, 58% prinos) kao bistro ulje. LCMS (ES): m/z 524.3 [M+H]<+>.

[0188] Primer 10D: Smeša Primera 10C (0.264 g, 0.503 mmol), pent-4-in-2-ola (0.071 mL, 0.755 mmol), trietilamina (0.281 mL, 2.014 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorida (0.021 g, 0.030 mmol) i bakar(I) jodida (3.84 mg, 0.020 mmol) u DMF (2.52 mL) je mešana pri 80 °C tokom 18 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa EtOAc i isprana sa 10% vod. LiCl. Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 50% heksani/etil acetat) da bi se dobio Primer 10D (0.122 g, 0.231 mmol, 46% prinos) kao žuto ulje. LCMS (ES): m/z 528.5 [M+H]<+>.

[0189] Primer 10E: Smeša Primera 10D (0.120 g, 0.227 mmol) i Pd/C (0.073 g, 0.068 mmol) u EtOH (1.995 mL) je mešana pod H2atmosferom (balon, 1 atm, 0.458 mg, 0.227 mmol) tokom 2.5 h. Nakon filtracije kroz uložak CELITE<®>i koncentrisanja, Primer 10E (0.110 g, 0.207 mmol, 91% prinos) je izolovan kao bistro ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 532.2 [M+H]<+>,

[0190] Primer 10F: Rastvoru Primera 10E (0.110 g, 0.207 mmol) u CH2Cl2(1.035 mL) na sobnoj temperaturi dodat je Dess-Martin-ov perjodinan (0.105 g, 0.248 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Smeša je razblažena sa Et2O, filtrirana kroz CELITE<®>i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 35% heksani/etil acetat) da bi se dobio Primer 10F (0.0613 g, 0.116 mmol, 56% prinos) kao svetložuto ulje. LCMS (ES): m/z 530.5 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.15 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 7.12 (s, 1H), 6.89 - 6.80 (m, 1H), 6.79 - 6.72 (m, 1H), 6.56 (dd, J = 12.5, 2.1 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.98 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 4.01 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.89 - 2.69 (m, 2H), 2.45 (dt, J = 18.1, 7.3 Hz, 4H), 2.35 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 1.85 - 1.75 (m, 2H), 1.10 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0191] Primer 10G: Rastvoru Primera 10F (60 mg, 0.113 mmol) u CH2Cl2(0.100 mL) i EtOH (0.300 mL) dodat je pirolidin (0.011 mL, 0.136 mmol) praćen 2-aminonikotinaldehidom (13.84 mg, 0.113 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 50% DCM/EtOAc) da bi se dobio Primer 10G (58 mg, 83%). LCMS (ES): m/z 616.6 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.12 (dd, J = 4.1, 1.9 Hz, 1H), 8.19 (dd, J = 8.0, 1.9 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 8.1, 4.3 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.3 Hz, 3H), 7.16 - 7.04 (m, 3H), 6.80 - 6.76 (m, 2H), 6.62 (dd, J = 12.4, 1.9 Hz, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.98 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.08 - 3.99 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.10 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.83 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 2.76 - 2.67 (m, 1H), 2.56 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.25 -2.14 (m, 2H), 1.14 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0192] Primer 10H: Rastvor Primera 10G (57.9 mg, 0.094 mmol) i PtO2(4.27 mg, 0.019 mmol) u EtOH (1.710 mL) je mešan pod H2(balon, 1 atm) tokom 20 h. Rastvarač je odstranjen in vacuo. Ovaj materijal je prečišćen sa Prep. HPLC (XBridge Prep C185u OBD 19 x 100 mm, 10 min gradijent, 15 min rada, 15% do 100% Rastvarač B = 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA, Rastvarač A = 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA da bi se dobio Primer 10H (49.6 mg, 0.068 mmol, 72% prinos). LCMS (ES): m/z 620.6 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.54 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 2H), 7.19 - 7.08 (m, 3H), 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.78 -6.73 (m, 1H), 6.57 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.52 (dd, J = 12.5, 2.1 Hz, 1H), 6.22 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.96 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.01 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.53 - 3.46 (m, 2H), 2.84 -2.75 (m, 4H), 2.71 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.54 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.01 - 1.92 (m, 4H), 1.10 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0193] Primer 10: Rastvoru Primera 10H (49.6 mg, 0.068 mmol) u EtOH (0.500 mL) dodat je NaOH (0.169 mL, 0.338 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Rastvarač je odstranjen in vacuo i prečišćen preparativnom LC/MS u sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 3-40% B tokom 25 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. da bi se dobio Primer 10 (14 mg, 44%). LCMS (ES): m/z 438.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.43 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.02 - 6.83 (m, 4H), 6.51 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.36 (dd, J = 9.3, 6.6 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.45 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.86 -2.80 (m, 1H), 2.76 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.73 - 2.68 (m, 1H), 2.58 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.53 - 2.40 (m, 2H), 1.95 - 1.86 (m, 4H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 136.

1

Primer 11

(±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)l)util)-1H-pirazol-4-il)propanska kiselina

[0194]

[0195] Primer 11A: Rastvoru Primera 7D ( 70 mg, 0.139 mmol) u acetonitrilu (3 mL) dodat je 6-hloroheksan-2-on (70 mg, 0.520 mmol) i Cs2CO3(200 mg, 0.614 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Čvrsta supstanca je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Prečišćavanje sa fleš hromatografijom dalo je Primer 11A (58 mg, 61%). LCMS (ES): m/z 374.4 [M+H]<+>.

[0196] Primer 11 je pripremljen iz Primera 11A prema postupku opisanom u Primeru 10. LCMS (ES): m/z 436.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.04 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.67 - 7.59 (m, 1H), 7.40 (br d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.75 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.43 (br d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.37 (br dd, J = 10.4, 6.2 Hz, 1H), 4.26 - 4.04 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.44 (br t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.89 - 2.68 (m, 4H), 2.57 - 2.40 (m, 2H), 1.95 - 1.77 (m, 4H), 1.49 - 1.14 (m, 2H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 100.

2

Primer 12

(S)-3-(6-Hidroksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-l-il)propanska kiselina

[0197]

[0198] Primer 12: Smeša Primera 3 (10 mg, 0.024 mmol) i piridin hidrohlorida (34.3 mg, 0.297 mmol) je zagrevana na 125 °C tokom 7.5 min. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature.Ovaj materijal je prečišćen sa Prep. HPLC (Phenomenex Luna AXIA 5u C1821.2 x 100 mm, 10 min gradijent, 12 min rada, 0% do 100% Rastvarač B = 90% ACN-10% H2O-0.1%TFA, Rastvarač A = 10% ACN-90% H2O-0.1%TFA) da bi se dobio Primer 12 (2.8 mg, 29%).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.62 - 7.53 (m, 2H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 6.51 - 6.42 (m, 2H), 6.10 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.62 (dd, J = 9.0, 6.4 Hz, 1H), 3.48 - 3.40 (m, 2H), 3.10 (dd, J = 14.7, 9.0 Hz, 1H), 2.94 (dd, J = 14.6, 6.3 Hz, 1H), 2.76 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.64 - 2.55 (m, 4H), 2.04 - 1.95 (m, 2H), 1.89 (br. s., 2H). LCMS (ES): m/z 408.4 [M+H]<+>. Humani αYβ6 IC50 (nM) = 31.

Primer 13 (Enantiomer 1) i Primer 14 (Enantiomer 2)

3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanska kiselina (hiralni)

[0199]

[0200] Primer 13A: Mešanom rastvoru 4-bromotiazol-2-karbaldehida (2 g, 10.41 mmol) u toluenu (30 mL) pod atmosferom azota dodat je (karbetoksimetilen)trifenilfosforan (4.35 g, 12.5 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana pri 100 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 23% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobio 13A (2 g, 73%) kao čvrsta bela supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (d, J = 16.00 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.75 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 1.33 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 264.2 [M+H]<+>.

4

[0201] Primer 13B: Mešani rastvor Primera 13A u 1,4-dioksanu (10 mL) i vodi (1 mL) je pročišćen argonom tokom 5 min. Hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) dimer (47 mg, 0.095 mmol) i TEA (0.53 mL, 3.81 mmol) su dodati i dobijena reakciona smeša je mešana pri 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je polako sipana u vodu (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli (50 mL), osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 22% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobio 13B (230 mg, 33%) kao bledo braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.13 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 2.80, 8.60 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.71 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 4.07 (q, J = 6.40 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.42 (dd, J = 7.20, 16.00 Hz, 1H), 2.96 (dd, J = 7.20, 16.80 Hz, 1H), 1.17 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 371.0 [M+H]<+>.

[0202] Primer 13C: Mešanom rastvoru Primera 13B (300 mg, 0.81 mmol) i 2-(but-3-en-1-il)-1,8-naftiridina (149 mg, 0.81 mmol) u acetonitrilu (4 mL) pod atmosferom argona dodat je trio-tolilfosfin (36.9 mg, 0.121 mmol), paladijum(II) acetat (18.14 mg, 0.081 mmol) i TEA (0.282 mL, 2.0 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana pri 80 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 4% MeOH u CHCl3) da bi se dobio 13C (320 mg, 83%) kao braon ulje. LCMS (ES): m/z 475.0 [M+H]<+>.

[0203] Primer 13D: Rastvoru Primera 3C (200 mg, 0.421 mmol) u etanolu (8 mL) dodat je platina(IV) oksid (2 mg, 8.81 µmol) pod atmosferom azota. Reakciona smeša je pročišćena vodonikom i mešana je pod pritiskom vodonika iz balona na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio 13D (180 mg, 63%) kao bledo-žuto ulje (sirovi). LCMS (ES): m/z 481.4 [M+H]<+>.

[0204] Primer 13 i Primer 14: Mešanom rastvoru Primera 13D (150 mg, 0.312 mmol), u smeši THF (3 mL) i metanola (3 mL), dodat je rastvor LiOH.H2O (15 mg, 0.31 mmol) u vodi (3 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Zatim je limunska kiselina (120 mg, 0.624 mmol) dodata i smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana i sirovi racemski proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC (Kolona: INTERSIL ODS C18 (250 x 19) mm 5 mikrona; M.Faza A: 10 mM NH4OAc u vodi; M.Faza B: Acetonitril, protok: 17.0 mL/min; vreme(min)/%B: 0/20, 8/40, 14/60; Detekcija: UV pri 254 nm) praćeno hiralnom preparativnom HPLC (Kolona: Luxcellulose C4 (250 x 21.2) mm 5 mikronska kolona; protok: 19.0 mL/min; Mobilna faza B: 0.1% DEA u MeOH; vreme (min)/%B: 0/100, 20/100, temperatura: 35°C; Detekcija: UV pri 254 nm) da bi se dobio Primer 13 (35 mg, 27%) kao čvrsta bela supstanca (izomer koji prvi eluira). LCMS (ES): m/z 453.2 [M+H]+.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.14 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 8.60 i 2.40 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 5.20 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.78 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.81-4.81 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.48 - 3.47 (m, 2H), 3.30 - 3.40 (m, 1H), 2.77 - 2.86 (m, 5H), 2.56 -2.65 (m, 2H), 1.91 - 1.95 (m, 3H), 1.71 - 1.74 (m, 1H), 1.46 - 1.49 (m, 2H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 77. Primer 14 (32 mg, 24%) je izolovan kao izomer koji drugi eluira kao čvrsta bela supstanca. LCMS (ES): m/z 453.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.14 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 8.60 i 2.40 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 5.20 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.78 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.81 - 4.81 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.48 - 3.47 (m, 2H), 3.30 - 3.40 (m, 1H), 2.77-2.86 (m, 5H), 2.56-2.65 (m, 2H), 1.91 -1.95 (m, 3H), 1.71-1.74 (m, 1H), 1.46-1.49 (m, 2H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 2.1; Humani αVβ1 IC50 (nM) = 241; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 1.9; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 11; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 510.

Primer 15 (Enantiomer 1) i Primer 16 (Enantiomer 2)

3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanska kiselina

[0205]

[0206] Primer 15A: Mešanom rastvoru Primera 13B (400 mg, 1.08 mmol), pent-4-in-2-ola (109 mg, 1.29 mmol) u TEA (8 mL) pod atmosferom azota dodat je bakar(I) jodid (10.26 mg, 0.05 mmol) praćen bis(trifenilfosfin)paladijum (II) dihloridom (38 mg, 0.05 mmol) i dobijena reakciona smeša je degasirana argon gasom tokom 2 min a zatim je mešana pri 80 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 54% EtOAc u pet etru) da bi se dobio 15A (190 mg, 47%) kao bledo-žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.14 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 8.80 i 2.40 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.71 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.73 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 4.08 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.90 - 4.00 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.44 (dd, J = 16.00 i 6.80 Hz, 1H), 2.96 (dd,J= 12.40 i 8.00 Hz, 1H), 2.50 - 2.60 (m, 2H), 1.28 (d, J = 12.00 Hz, 3H), 1.19 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 375.0 [M+H]<+>.

[0207] Primer 15B: Degasiranom rastvoru Primera 15A (200 mg, 0.534 mmol) u EtOH (5 mL) dodat je 10% paladijum na ugljeniku (2 mg, 0.019 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana pod pritiskom vodonika iz balona na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz CELITE<®>uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobio 15B (170 mg, 84%) kao bledo-žuto ulje. LCMS (ES): m/z 379.4 [M+H]<+>.

[0208] Primer 15C: Rastvoru Primera 15B (300 mg, 0.79 mmol) u dihlorometanu (15 mL) dodat je DMP (672 mg, 1.59 mmol) pri 0 °C i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 60 min. Reakciona masa je razblažena dihlorometanom (20 mL), isprana sa 20% natrijum bikarbonatnim rastvorom (20 mL), rastvorom soli (10 mL), osušena (Na2SO4), filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 62% EtOAc u pet etru) da bi se dobio 15C (150 mg, 50%) kao bledo-žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.16 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.80 i 2.40 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.70 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 4.11 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.40 (dd, J = 16.40 i 6.80 Hz, 1H), 2.95 (dd, J = 16.0 i 8.40 Hz, 1H), 2.70 - 2.80 (m, 2H), 2.45 - 2.55 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.90 - 2.00 (m, 2H), 1.12 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 377.0 [M+H]<+>.

[0209] Primer 15D: Rastvoru Primera 15C (130 mg, 0.35 mmol) i 2-aminonikotinaldehida (51 mg, 0.41 mmol) u etanolu (5 mL) pod azotom dodat je pirolidin (0.029 mL, 0.35 mmol) i rezultujuća smeša je mešana pri 70 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 100% EtOAc da bi se dobio 15D (150 mg, 82%) kao bledo-žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.08 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 8.15 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 8.80 i 2.40 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 8.80 i 2.80 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.70 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 4.06 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.40 (dd, J = 16.40 i 6.80 Hz, 1H), 3.10 (dd, J = 16.0 i 7.60 Hz, 2H), 2.99 (dd, J = 16.0 i 8.40 Hz, 1H), 2.86 (t, J = 7.20 Hz, 2H), 2.33 (m, 2H), 1.15 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 463.2 [M+H]<+>.

[0210] Primer 15E: Mešanom rastvoru Primera 15D (180 mg, 0.39 mmol) u etanolu (8 mL) dodat je platina(IV) oksid (2 mg, 8.81 µmol) pod atmosferom azota i reakciona smeša je pročišćena vodonikom i mešana pod pritiskom vodonika iz balona na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat koncentrovan da bi se dobio 15E (170 mg, 94%) kao bledo-žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.13 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 11.20 i 3.20 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.77 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 4.80 - 4.90 (m, 1H), 4.06 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.40 - 3.50 (m, 3H), 3.10 (dd, J = 16.0 i 7.60 Hz, 1H), 2.70 - 2.80 (m, 4H), 2.65 (t, J = 10.0 Hz, 2H), 2.06 (t, J = 10.0 Hz, 2H), 1.90 - 2.00 (m, 2H), 1.15 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 467.2 [M+H]<+>.

[0211] Primer 15 i Primer 16: Mešanom rastvoru Primera 15E (150 mg, 0.32 mmol) u THF (3 mL) i metanolu (3 mL) dodat je rastvor LiOH.H2O (15 mg, 0.64 mmol) u vodi (3 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Zatim je limunska kiselina (124 mg, 0.64 mmol) dodata i smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana i sirovi racemski proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC (Kolona: SYMMETRY C18 (250 x 19)mm 5 mikrona; M.Faza A: 10 mM NH4OAc u vodi (Ph = 4.5); M.Faza B: Acetonitril, protok: 18.0 mL/min; vreme(min)/%B: 0/20, 5/40, 14/60; Detekcija: UV pri 254 nm) zatim razdvojen na pojedinačne enantiomere hiralniim SFC (Chiralpak AD-H (250 x 21)mm, 5u;% CO2: 60%; % Co rastvarač: 40%(0.2% DEA u metanolu); Ukupni protok: 70g/min; povratni pritisak: 100 bar; temperatura: 25°C; detekcija: UV pri 238 nm.) da bi se dobio Primer 15 (30 mg, 21%) kao čvrsta bela supstanca (izomer koji prvi eluira).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.14 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.60 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.75 - 4.80 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.42 - 3.50 (m, 2H), 3.15 - 3.16 (m, 1H), 2.76 - 2.87 (m, 5H), 2.55 - 2.61 (m, 2H), 1.95 - 2.14 (m, 2H), 1.92 - 1.93 (m, 2H). LCMS (ES): m/z 439.2 [M+H]<+>. Humani αYβ6 IC50 (nM) = 0.7; Humani αVβ1 IC50 (nM) = 55; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 1.4; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 330. Primer 16 (31 mg, 22%, bela čvrsta supstanca) je izolovan kao izomer koji drugi eluira.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.14 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.80, 8.60 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.80 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 4.75 - 4.80 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.42 - 3.50 (m, 2H), 3.15 - 3.16 (m, 1H), 2.76 - 2.87 (m, 5H), 2.55 - 2.61 (m, 2H), 1.95 - 2.14 (m, 2H), 1.92 - 1.93 (m, 2H). LCMS (ES): m/z 439.2 [M+H]<+>. Humani αVβ6 IC50 (nM) = 36.

Primer 17 (Enantiomer 1) i Primer 18 (Enatiomer 2)

3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanska kiselina

[0212]

[0213] Primer 17A: Rastvoru trietil fosfonoacetata (12.88 g, 57.5 mmol) u THF (100 mL) pri 0 °C dodat je NaH (2.12 g, 53 mmol) u porcijama i dobijena reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi tokom 1 h. Tiazol-2-karbaldehid (5 g, 44 mmol) u THF (100 mL) je dodat i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je kvenčovana ledeno hladnom vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 200 mL). Kombinovani organski sloj je ispran vodom, rastvorom soli, osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat koncentrovan da bi se dobio 17A (6 g, 74%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.20 (d, J = 3.30 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 3.30 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 1.34 (t, J = 7.20 Hz, 3H).

[0214] Primer 17B: Mešanom rastvoru Primera 17A (2 g, 10.92 mmol) u dioksanu (45 mL) i vodi (15 mL) dodata je (6-metoksipiridin-3-il)borna kiselina (2.50 g, 16.37 mmol) i dobijena reakciona smeša je pročišćena sa argonom tokom 10 min. TEA (1.37 mL, 9.82 mmol) i hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) dimer (0.27 g, 0.55 mmol) su dodati i dobijena reakciona smeša je zagrevana do 80 °C i mešana tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 25% EtOAc u nheksanima) da bi se dobio 17B (1 g, 31%) kao bledo braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.14 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 8.4 i 2.40 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 4.82 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 4.08 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.42 (dd, J = 16.0 i 7.20 Hz, 1H), 2.99 (dd, J = 16.0 i 7.20 Hz, 1H), 1.17 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 293.2 [M+H]<+>.

[0215] Primer 17C: Mešanom rastvoru Primera 17B (700 mg, 2.39 mmol) u DMF (10 mL) dodat je NBS (639 mg, 3.59 mmol) u delovima na sobnoj temperaturi i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 h. Reakciona smeša je razblažena ledeno hladnom vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL). Kombinovani organski sloj je ispran vodom, rastvorom soli, osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 10% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobio 17C (300 mg, 34%) kao braon ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.11 (s, 1H), 7.45 - 7.60 (m, 2H), 6.71 (d, J = 8.70 Hz, 1H), 4.71 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 4.09 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.38 (dd, J = 16.0 i 7.2 Hz, 1H), 2.92 (dd, J = 16.0 i 7.2 Hz, 1H), 1.18 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 373.0 [M+H]<+>.

[0216] Primer 17D: Mešanom rastvoru Primera 17C (100 mg, 0.27 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je 2-(but-3-en-1-il)-1,8-naftiridin (74.4 mg, 0.4 mmol) i reakciona smeša je pročišćena sa azotom tokom 10 min. Trietilamin (82 mg, 0.808 mmol), tri-o-tolilfosfin (8.20 mg, 0.027 mmol), paladijum acetat (6.1mg, 0.027 mmol) su dodati i reakciona smeša je zagrevana do 90 °C i mešana tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz CELITE<®>, i filtrat je razblažena vodom (5 mL) i ekstrahovan sa DCM (2 x 10 mL). Kombinovani organski sloj je osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat koncentrovan. Sirovi

1

proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (4 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 3% metanolom u hloroformu da bi se dobio 17D (85 mg, 49%) kao bledo braon ulje. LCMS (ES): m/z 475.2 [M+H]<+>.

[0217] Primer 17E: Primer 17D (85 mg, 0.13 mmol) u etanolu (5 mL) je pročišćen azotom tokom 5 min. Platina(IV) oksid (10 mg, 0.044 mmol) je dodat i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom vodonika iz balona tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz CELITE<®>uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobio 17E (70 mg, 81%) kao bledo braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.11 (s, 1H), 7.67 (dd, J = 8.80 i 2.40 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.16 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.75 - 4.85 (m, 1H), 4.08 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.35 - 3.45 (m, 2H), 3.00 - 3.10 (m, 1H), 2.80 - 2.90 (m, 2H), 2.65 - 2.75 (m, 2H), 2.50 - 2.60 (m, 2H), 1.90 - 2.00 (m, 2H), 1.60 - 1.70 (m, 3H), 1.25-1.40 (m, 2H), 1.15 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 481.0 [M+H]<+>.

[0218] Primer 17 i Primer 18: Mešanom rastvoru Primera 17E (70 mg, 0.146 mmol) u THF (2 mL) i MeOH (2 mL) dodat je rastvor LiOH.H2O (12.22 mg, 0.29 mmol) u vodi (1 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 h. Nakon završetka reakcije, limunska kiselina (22.39 mg, 0.117 mmol) je dodata i reakciona smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC reverzne faze (Sunfire C18 (150 x 19)mm , 5 mikrona); Mobilna faza A: 10 mM CH3COONH4u vodi; Mobilna faza B: Acetonitril; protok: 17 mL/min; Vreme(min)/%B: 0/20, 24/70) zatim razdvojena na pojedinačne enantiomere hiralnom SFC (Chiralpak AD-H (250 x 21) mm, 5u; 60% CO2i 40% DEA u metanolu kao korastvaraču); Ukupni protok: 75 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 25°C; Detekcija: UV pri 247 nM) da bi se dobio Primer 17 (9 mg, 13%) kao čvrsta bela supstanca (izomer koji prvi eluira). LCMS (ES): m/z 453.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.01 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 2.40, 8.80 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.24 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.66 (dd, J = 6.80, 9.20 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.29 -3.36 (m, 2H), 3.01 - 3.15 (m, 1H), 2.71-2.84 (m, 3H), 2.65 (t, J = 6.27 Hz, 2H), 2.41 (t, J = 7.28 Hz, 2H) 1.71 - 1.88 (m, 2H), 1.43 - 1.67 (m, 4H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 16. Primer 18 (8 mg, 12%, bela čvrsta supstanca) je izolovan kao izomer koji drugi eluira.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.01 (d, J = 2.40 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 2.40, 8.80 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.24 (d, J = 3.20 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.66 (dd, J = 6.80, 9.20 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.29 -3.36 (m, 2H), 3.01 - 3.15 (m, 1H), 2.71-2.84 (m, 3H), 2.65 (t, J = 6.27 Hz, 2H),

2

2.41 (t, J = 7.28 Hz, 2H) 1.71 - 1.88 (m, 2H), 1.43 - 1.67 (m, 4H). LCMS (ES): m/z 453.2 [M+H]<+>. Humani αYβ6 IC50 (nM) = 6.7.

Primer 19 (Enantiomer 1) i Primer 20 (Enantiomer 2)

3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanska kiselina

[0219]

[0220] Primer 19A: Mešanom rastvoru Primera 17C (300 mg, 0.808 mmol), pent-4-in-2-ola (204 mg, 2.424 mmol) u TEA (10 mL) pod atmosferom azota dodat je bakar(I) jodid (15 mg, 0.081 mmol) praćen PdCl2(PPh3)2(57 mg, 0.081 mmol) i reakciona smeša je degasirana argonom tokom 2 min i zatim zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana, isprana sa EtOAc (5 mL), filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 20% EtOAc u pet etru) da bi se dobio 19A (300 mg, 94%) kao braon ulje. LCMS (ES): m/z 375.0 [M+H]<+>.

[0221] Primer 19B: Degasiranom rastvoru Primera 19A (280 mg, 0.748 mmol) u EtOH (2 mL) dodat je 10% paladijum na ugljeniku (28 mg, 0.026 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana pod pritiskom vodonika na sobnoj temperaturi tokom 40 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz CELITE<®>uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobio 19B (250 mg, 88%) kao bledo-žuto ulje. LCMS (ES): m/z 379.0 [M+H]<+>.

[0222] Primer 19C: Rastvoru Primera 19B (250 mg, 0.661 mmol) u dihlorometanu (2 mL) je dodat Dess Martin-ov perjodinan (560 mg, 1.321 mmol) pri 0 °C i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona masa je razblažena dihlorometanom (20 mL), isprana sa 20% natrijum bikarbonatnog rastvora (20 mL), rastvorom soli (10 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 45% EtOAc u pet etru) da bi se dobio 19C (170 mg, 68%) kao bledo braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.12 (d, J = 2.80 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.80 i 2.80 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 4.80 - 4.90 (m, 1H), 4.10 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.35 - 3.45 (m, 1H), 3.00 - 3.10 (m, 1H), 2.80 -2.90 (m, 2H), 2.50 - 2.60 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.80 - 1.90 (m, 2H), 1.18 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 377.0 [M+H]<+>.

[0223] Primer 19D: Rastvoru Primera 19C (130 mg, 0.345 mmol), 2-aminonikotinaldehida (46 mg, 0.380 mmol) u etanolu (5 mL) pod azotom dodat je pirolidin (0.029 mL, 0.345 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana pri 80 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 3% MeOH u CHCl3da bi se dobio 19D (100 mg, 63%) kao braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.05 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.33 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.60 - 7.70 (m, 2H), 7.65 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 4.75 - 4.80 (m, 1H), 4.10 (q, J = 7.20 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.95 - 3.20 (m, 4H), 2.20 - 2.30 (m, 2H), 1.30-1..45 (m, 2H), 1.15 (t, J = 7.20 Hz, 3H). LCMS (ES): m/z 463.3 [M+H]<+>.

[0224] Primer 19E: Mešanom rastvoru Primera 19D (100 mg, 0.216 mmol) u etanolu (25 mL) dodat je platina(IV) oksid (10 mg, 0.044 mmol) pod atmosferom azota i reakciona smeša je pročišćena vodonikom i mešana pod pritiskom vodonika iz balona na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio 19E (80 mg, 79%) kao bledo-žuto ulje. LCMS (ES): m/z 467.2 [M+H]<+>.

[0225] Primer 19 i Primer 20: Rastvor Primera 19E (80 mg, 0.171 mmol) u THF (2 mL) i metanolu (2 mL) je dodat rastvoru LiOH.H2O (29 mg, 0.686 mmol) u vodi (1 mL) i dobijena

4

reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Nakon završetka reakcije, limunska kiselina (99 mg, 0.514 mmol) je dodata i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC (Inertsil ODS (250 x 20)mm , 5 mikrona); Mobilna faza A: 10 mM CH3COONH4u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; protok: 17 mL/min; Vreme(min)/%B: 0/10, 12/55) zatim razdvojena na pojedinačne enantiomere hiralnom preparativnom SFC (Chiralpak AD-H (250 x 21) mm, 5u; 60% CO2i 40% DEA u metanolu kao korastvaraču); Ukupni protok: 75 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 25°C; Detekcija: UV pri 247 nM) da bi se dobio Primer 19 (23 mg, 20%, bela čvrsta supstanca) kao izomer koji prvi eluira.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.11 (d, J = 2.51 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.53, 2.51 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.32 (d, J = 7.03 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.53 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 7.53 Hz, 1H), 4.73 - 4.80 (m, 1H), 3.86 ( s, 3H), 3.38 - 3.44 (m, 2H), 3.14 - 3.26 (m, 1H), 2.90-2.94 (m, 1H), 2.78 - 2.85 (m, 2H), 2.72 (t, J = 6.27 Hz, 2H), 2.56 - 2.64 (m, 2H), 1.82 - 2.01 (m, 4H). LCMS (ES): m/z 439.2 [M+H]<+>. Humani αVβ6 IC50 (nM) = 44. Primer 20 (21 mg, 18%, bela čvrsta supstanca) je izolovan kao izomer koji drugi eluira.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.11 (br. s., 1H), 7.68 (dd, J = 8.53, 2.51 Hz, 1H), 7.38 (br. s., 1H), 7.32 (d, J = 7.53 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.53 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 7.03 Hz, 1H), 4.73 - 4.80 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.37 - 3.43 (m, 2H), 3.20 (dd, J = 14.81, 6.27 Hz, 1H), 2.79 - 2.98 (m, 3H), 2.73 (t, J = 6.02 Hz, 2H), 2.61 (t, J = 7.78 Hz, 2H), 1.78 - 2.06 (m, 4H). LCMS (ES): m/z 439.2 [M+H]<+>. Humani αVβ6 IC50 (nM) = 18.

Primer 21

(3S)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)pirolidin-1-il)propanska kiselina (dijastereoizomerna) (nije prema predmetnom pronalasku)

[0226]

[0227] Primer 21A: Rastvoru diizopropilamina (0.994 mL, 6.98 mmol) u THF (9.44 mL) pri 0 °C je dodat n-BuLi (1.6 M u heksanima, 4.16 mL, 6.66 mmol) kap po kap. Reakciona smeša je mešana na ovoj temperaturi tokom 15 min. HMPA (5.63 mL, 32.3 mmol) je dodat kap po kap i reakciona smeša je mešana pri 0 °C tokom 15 min zatim ohlađena na -78 °C. Rastvor dihidrofuran-2(3H)-on (0.488 mL, 6.34 mmol) rastvoren u THF (28.3 mL) je zatim dodat kap po kap tokom perioda od 30 min preko špric pumpe. Reakciona smeša je mešana na - 78 °C tokom 30 min. TBAI (0.358 g, 0.970 mmol) je zatim dodat u jednom delu što je praćeno dodavanjem kap po kap 5-bromopent-1-ena (0.826 mL, 6.98 mmol). Reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 1 h zatim zagrejana na 0 °C i mešana tokom 3 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zas. NH4Cl i zagrejana na st. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x) i kombinovani organski slojevi su isprani vodom, rastvorom soli, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 25% heksani/EtOAc) da bi se dobio Primer 21A (0.201 g, 1.30 mmol, 21% prinos) kao svetlo-žuto ulje. LCMS (ES): m/z 155 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.81 (ddt, J= 17.0, 10.3, 6.7 Hz, 1H), 5.10 - 4.90 (m, 2H), 4.35 (td, J = 8.7, 3.0 Hz, 1H), 4.20 (td, J = 9.4, 6.9 Hz, 1H), 2.62 - 2.49 (m, 1H), 2.45 - 2.35 (m, 1H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 2.00 - 1.83 (m, 2H), 1.56 - 1.38 (m, 3H).

[0228] Primer 21B: LAH (1.0 M u THF) (5.84 mL, 5.84 mmol) je dodat kap po kap rastvoru Primera 21A (0.180 g, 1.17 mmol) u THF (3.5 mL) pri 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 30 min zatim refluksovana tokom 1 h. Reakciona smeša je zatim ohlađena na 0 °C, razblažena dietil etrom i pažljivo kvenčovana vodom. Formirani percipitat je filtriran i filtrat je sekvencijalno ispran vodom i rastvorom soli. Organski sloj je odvojen, osušen preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovan in vacuo i sušen u struji vazduha pod vakuumom da bi se dobio Primer 21B (0.183 g, 1.16 mmol, 99% prinos) kao bistro ulje koje je kao takvo korišćeno za sledeći korak.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.81 (br dd, J = 17.1, 10.2 Hz, 1H), 5.05 - 4.90 (m, 2H), 3.80 (ddd, J = 10.7, 6.2, 4.5 Hz, 1H), 3.72 - 3.62 (m, 2H), 3.52 (dd, J = 10.7, 6.9 Hz, 1H), 2.10 - 2.03 (m, 2H), 1.76 - 1.64 (m, 2H), 1.48 - 1.24 (m, 5H).

[0229] Primer 21C: Rastvoru Primera 21B (180 mg, 1.14 mmol), DMAP (13.9 mg, 0.114 mmol) i trietilamina (0.476 mL, 3.41 mmol) u DCM (2.28 mL) je dodat MsCl (0.222 mL, 2.84 mmol) i reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 30 min i zatim na st tokom noći. Reakciona smeša je isprana vodom zatim sa 5% vod. NaHCO3. Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 60% heksani/EtOAc) da bi se dobio Primer 21C (293 mg, 0.932 mmol, 82% prinos) kao svetlo-žuto ulje.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.79 (ddt, J= 17.1, 10.3, 6.7 Hz, 1H), 5.08 -4.95 (m, 2H), 4.38 - 4.28 (m, 2H), 4.25 (dd, J = 9.9, 4.4 Hz, 1H), 4.19 - 4.13 (m, 1H), 3.04 (d, J = 1.7 Hz, 6H), 2.11 - 2.05 (m, 2H), 1.99 - 1.94 (m, 1H), 1.94 - 1.81 (m, 2H), 1.51 - 1.37 (m, 4H).

[0230] Primer 21D: Rastvor Primera 21C (268 mg, 0.852 mmol), (S)-Etil 3-amino-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoata (287 mg, 1.28 mmol) i trietilamina (0.356 mL, 2.56 mmol) u 1,4-Dioksanu (3.12 mL) je mešan na 75 °C tokom 16 h. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3x). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 100% heksani/EtOAc) da bi se dobio Primer 21D (76.5 mg, 0.221 mmol, 26% prinos) kao svetlo-žuto ulje. LCMS (ES): m/z 347 [M+H]<+>.

[0231] Primer 21E: Kaša Primera 21D (76.5 mg, 0.221 mmol) i PdCl2(39.2 mg, 0.221 mmol) i CuCl (65.6 mg, 0.662 mmol) u DMF (3.53 mL) i vodi (0.883 mL) je mešana pod O2atmosferom (balon, 1 atm) na sobnoj temperaturi tokom 8 h. Nakon filtracije reakcione smeše kroz CELITE<®>uložak i naknadnim pranjem pogače sa EtOAc, filtrat je ispran sa 10% LiCl, vodom i rastvorom soli. Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 15% DCM/MeOH) da bi se dobio Primer 21E (38.4 mg, 0.106 mmol, 48% prinos) kao braon ulje. LCMS (ES): m/z 363 [M+H]<+>.

[0232] Primer 21F: Rastvoru Primera 21E (38.4 mg, 0.106 mmol) u CH2Cl2(0.167 mL) i EtOH (0.500 mL) je dodat pirolidin (0.011 mL, 0.127 mmol) praćen 2-aminonikotinaldehidom (12.9 mg, 0.106 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC koristeći sledeće uslove: Kolona: Phenomenex Luna AXIA 5u C18 21.2 x 100 mm, Mobilna faza A: 10:90 metanol: voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 metanol: voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 5-100% B tokom 10 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. da bi se dobio Primer 21F (30 mg, 0.067 mmol, 63% prinos) kao žuto ulje. LCMS (ES): m/z 449 [M+H]<+>.

[0233] Primer 21G: Kaša Primera 21F (30.0 mg, 0.067 mmol) i PtO2(3.04 mg, 0.013 mmol) u EtOH (1.22 mL) je mešana pod atmosferom H2(balon, 1 atm) na sobnoj temperaturi tokom 5 h. Nakon filtracije reakcione smeše kroz CELITE<®>uložak i naknadnim pranjem pogače sa EtOH, filtrat je koncentrovan in vacuo i sušen u struji vazduha pod vakuumom da bi se dobio Primer 21G (26.6 mg, 0.059 mmol, 88% prinos) kao braon ulje koji je kao takvo korišćeno za sledeći korak. LCMS (ES): m/z 453 [M+H]<+>.

[0234] Primer 21: Rastvoru Primera 21G (26.6 mg, 0.059 mmol) u EtOH (1.73 mL) je dodat 1M vod. NaOH (0.176 mL, 0.176 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Rastvarač je odstranjen in vacuo i prečišćen preparativnom HPLC koristeći sledeće uslove: Kolona: Luna AXIA C18, 30 x 100 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 90:10 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 10-100% B tokom 10 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min. da bi se dobio Primer 21 (13.2 mg, 52%) kao čvrsta supstanca blede braon boje. LCMS (ES): m/z 425 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.26 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.91 - 7.82 (m, 1H), 7.24 (dd, J = 7.2, 0.8 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 7.3, 1.5 Hz, 1H), 4.52 (br t, J = 6.2 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.54 - 3.47 (m, 1H), 3.44 - 3.39 (m, 2H), 3.31 - 3.21 (m, 2H), 2.91 (s, 1H), 2.82 (br dd, J = 14.9, 8.3 Hz, 2H), 2.74 (br t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.56 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.32 (br dd, J = 14.9, 7.4 Hz, 1H), 2.22 - 2.11 (m, 1H), 1.91 (kvin, J= 5.9 Hz, 2H), 1.71 - 1.56 (m, 3H), 1.49 - 1.39 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 1.4; Humani αVβ1 IC50 (nM) = 6,500; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 4.4; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 10; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 180.

Primer 22

(±)-3-(2-Metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0235]

[0236] Primer 22A: Rastvoru 2-metilpirimidin-5-karbaldehida (1.0 g, 8.19 mmol) u THF (15 mL) dodato je 5 g molekularnih sita (4Å) praćenih etil 2-(dietoksifosforil)acetatom (1.967 mL, 9.83 mmol) i LiOH (0.235 g, 9.83 mmol). Nakon mešanja tokom noći na sobnoj temperaturi, reakcija je filtrirana kroz CELITE<®>i isparljive supstance su uklonjene. Ostatak je rastvoren u EtOAc i sekvencijalno ispran sa 10% NaHCO3vod rastvorom i rastvorom soli. Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 50% EtOAc/Heksani) da bi se dobio Primer 22A (0.841 g, 4.38 mmol, 53% prinos) kao čvrsta bela supstanca. LCMS (ESI) m/z 193.1 (M+H)<+>.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.79 (s, 1H), 7.61 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.56 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 1.37 (t, J = 7.2 Hz, 3H)

[0237] Primer 22B: Rastvoru 3-bromo-1H-pirazola (5 g, 34.0 mmol) u CH2Cl2(100 mL) je dodat DIEA (17.82 mL, 102 mmol) i di-terc-butil dikarbonat (11.14 g, 51.0 mmol). Katalitička količina DMAP (0.042 g, 0.340 mmol) je dodata, i reakcija je mešana na st tokom 1 h. Reakcija je zatim podeljena između CH2Cl2i vode. Organski sloj je odvojen i ispran sa zas. NaCl. Organski sloj je osušen anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran, i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 10% heksani/etil acetat) da bi se dobio Primer 22B (7.73 g, 31.3 mmol, 92% prinos) kao čvrsta bela supstanca.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.07 (s, 2H), 1.67 (s, 9H)

[0238] Primer 22C: Smeša Primera 22B (7.0 g, 28.3 mmol), pent-4-in-2-ola (4.01 mL, 42.5 mmol), trietilamina (15.79 mL, 113 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorida (1.193 g, 1.700 mmol) i bakar(I) jodida (0.216 g, 1.133 mmol) u DMF (100 mL) je mešana na 80 °C tokom 2 h. Reakcija je razblažena sa 300 mL EtOAc, isprana 10% LiCl rastvorom i rastvorom soli, osušena preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 100% etil acetat/heksani) da bi se dobio Primer 22C (7.0 g, 28.0 mmol, 99% prinos) kao čvrsta supstanca blede braon boje. LCMS (ESI) m/z 251 (M+H)<+>.

[0239] Primer 22D: Smeša Primera 22C (6.60 g, 26.4 mmol) i Pd/C (8.42 g, 7.91 mmol) u MeOH (200 mL) je mešana pod atmosferom H2(balon, 1 atm) tokom 16 h. Nakon filtracije na ulošku CELITE<®>i koncentrisanja, Primer 22D (6.68 g, 26.3 mmol, 100% prinos) je izolovan kao svetlo smeđe ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ESI) m/z: 277.1 (M+Na)<+>.

[0240] Primer 22E: Rastvoru Primera 22D (6.60 g, 26.0 mmol) u CH2Cl2(250 mL) na sobnoj temperaturi je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (13.21 g, 31.1 mmol) i reakcija je mešana tokom 1 sata. Smeša je razblažena sa Et2O, filtrirana kroz CELITE<®>uložak, i koncentrovan da bi se dobila prljavo-bela čvrsta supstanca. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 80% EtOAc/Heksani) da bi se dobio Primer 22E (4.61 g, 18.27 mmol, 70% prinos) kao čvrsta bela supstanca. LCMS (ESI) m/z 253.1 (M+H)<+>.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.96 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 2.69 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.49 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.95 (kvin, J = 7.5 Hz, 2H), 1.63 (s, 9H).

[0241] Primer 22F: Rastvoru Primera 22E (4.49 g, 17.80 mmol) u CH2Cl2(150 mL) je dodat pirolidin (3.24 mL, 39.20 mmol) praćen adicijom 2-aminonikotinaldehida (2.173 g, 17.80 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 40 h i zatim koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 10% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio Primer 22F (4.26 g, 12.59 mmol, 71% prinos). LCMS (ESI) m/z 339.1 (M+H)<+>.

[0242] Primer 22G: Rastvoru Primera 22F (2.31 g, 6.83 mmol) u CH2Cl2(40 mL) je dodat TFA (10 mL, 130 mmol) pri 0 °C pod N2(1 atm) i reakcionoj smeši je dozvoljeno da se zagreje do st i da se meša na st tokom 1 h pod N2(1 atm). CH2Cl2i TFA su odstranjeni pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod kao braon ulje. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 10% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobila so TFA Primera 22G (2.03 g, 5.76 mmol, 84% prinos) kao svetlo smeđe ulje. LCMS (ESI) m/z 240.1 (M+H)<+>.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 11.84 (br. s., 2H), 9.09 (dd, J = 4.3, 1.5 Hz, 1H), 8.28 (dd, J = 8.0, 1.7 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.1, 4.5 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.27 - 6.18 (m, 1H), 3.06 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.25 (d, J = 7.4 Hz, 2H). Rastvoru TFA soli Primera 22G (2.0 g, 5.68 mmol) u MeOH (50 mL) je dodata Diaion WA21J smola (10 g, 5.68 mmol) i reakciji dozvoljeno da se meša na st pod N2(1atm) tokom 0.5 h. Smola je filtrirana, dobro oprana sa MeOH i filtrat je koncentrovan da bi se dobio Primer 22G (1.168 g, 4.90 mmol, 86% prinos) kao svetlo smeđe ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ESI) m/z: 239.1 (M+H)<+>.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.12 (dd, J = 4.1, 1.9 Hz, 1H), 8.20 (dd, J = 8.0, 1.9 Hz, 1H), 8.16 - 8.11 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 1H), 7.51 - 7.46 (m, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 6.16 (s, 1H), 3.14 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.83 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.31 (t, J = 7.3 Hz, 2H).

[0243] Primer 22H: Suspenzija Primera 22G (900 mg, 3.78 mmol) i platina(IV) oksida (172 mg, 0.755 mmol) u EtOH (8 mL) je mešana pod atmosferom H2(balon, 1 atm) tokom 16 h. Nakon filtracije na ulošku CELITE<®>i koncentrovanja, Primer 22H (911 mg, 3.76 mmol, 100% prinos) je izolovan kao svetlo-žuto ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ESI) m/z: 243.1 (M+H)<+>,

1

[0244] Primer 22I: Smeša Primera 22H (100 mg, 0.413 mmol) i cezijum karbonata (403 mg, 1.238 mmol) u acetonitrilu (2.0 mL) je mešana tokom 5 min. Primer 22A (79 mg, 0.413 mmol) je dodat i smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Nakon hlađenja, reakcija je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 15% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio Primer 221 (90 mg, 0.207 mmol, 50% prinos) kao svetlo smeđe ulje. LCMS (ESI) m/z 435.1 (M+H)<+>.

[0245] Primer 22: Rastvoru Primera 221 (63 mg, 0.145 mmol) u MeOH (1.5 mL) je dodat 1 M vod. NaOH (0.725 mL, 0.725 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod Ar, 1 atm tokom 1 h. Smeša je prečišćen sa Prep. HPLC (Phenomenex Luna AXIA 5 u 21.2 x 100 mm, 10 min gradijent, 17 min rada, 0% do 70% Rastvarač A: 90% H2O-10% ACN-0.1%TFA, Rastvarač B: 10% ACN-90% H2O 0.1% TFA) da bi se dobio Primer 22A (83 mg, 0.111 mmol, 3TFA,76% prinos) kao svetlo smeđe ulje. LCMS (ESI) m/z 407.0 (M+H)<+>.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 2H), 7.83 - 7.70 (m, 1H), 7.19 - 7.01 (m, 1H), 6.36 - 6.22 (m, 1H), 6.13 - 6.01 (m, 1H), 5.85 - 5.69 (m, 1H), 3.24 (d, J = 24.8 Hz, 2H), 2.63 - 2.57 (m, 4H), 2.49 - 2.44 (m, 2H), 2.43 - 2.37 (m, 2H), 1.95 - 1.87 (m, 2H), 1.86 - 1.76 (m, 2H), 1.73 (br. s., 2H), 1.05 - 0.93 (m, 1H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 64.

[0246] Sledeći primeri (u tabeli A) su pripremljeni korišćenjem postupaka analognih onima navedenim u tabeli.

2

Tabela A:

4

Primer 45

(S)-3-(1-Metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina ditrifluorosirćetne kiseline so

[0247]

[0248] Primer 45A: SOCl2(9.93 µL, 0.136 mmol) je dodat kap po kap rastvoru na sobnoj temperaturi Primera 12 (37.6 mg, 0.059 mmol) u EtOH (0.592 mL). Nakon mešanja tokom noći, rastvarač je odstranjen in vacuo i ostatak je rastvoren u DCM i ispran sa zas. NaHCO3(2x). Organska faza je osušena preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo.

1

Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 10% MeOH/DCM) da bi se dobio 45A (17.2 mg, 0.038 mmol, 64% prinos) kao bistro ulje. LCMS (ES): m/z 436.5 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.66 - 7.57 (m, 2H), 7.39 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.49 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 6.36 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.64 (dd, J= 9.1, 6.3 Hz, 1H), 4.10 - 4.01 (m, 2H), 3.43 - 3.35 (m, 3H), 3.16 (dd, J = 16.1, 6.2 Hz, 1H), 2.71 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.61 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.54 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.98 - 1.84 (m, 4H), 1.15 (t, J = 7.0 Hz, 3H).

[0249] Primer 45B: Smeša Primera 45A (10 mg, 0.023 mmol), metil 4-nitrobenzensulfonata (5.0 mg, 0.023 mmol) i Cs2CO3(11.2 mg, 0.034 mmol) u DMF (0.221 mL) je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 24 h, dodatno su Cs2CO3(2.8 mg) i metil 4-nitrobenzensulfonat (1.3 mg) dodati i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 7 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i filtrirana kroz Celite<®>uložak. Filtrat je koncentrovan in vacuo i ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Kolona: Phenomenex Luna AXIA 5u C1821.2 x 100 mm; Mobilna faza A: 10% MeOH-90% H2O-0.1%TFA; Mobilna faza B: 90% MeOH-10% H2O-0.1%TFA; Gradijent: 0% do 100% B tokom 10 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobio Primer 45B, so ditrifluorosirćetne kiseline (10.1 mg, 0.013 mmol, 56% prinos) kao bistro ulje. LCMS (ES): m/z 450.5 [M+H]<+>.<1>H NMR (500MHz, CD3OD) δ 7.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.59 - 7.49 (m, 2H), 6.59 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.64 (dd, J = 9.4, 6.1 Hz, 1H), 4.07 (qd, J = 7.1, 3.0 Hz, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.49 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 3.41 (dd, J = 16.2, 9.4 Hz, 1H), 3.16 (dd, J = 16.2, 6.1 Hz, 1H), 2.81 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.68 (dt, J = 15.8, 7.8 Hz, 4H), 2.07 - 1.89 (m, 4H), 1.15 (t, J = 7.2 Hz, 3H) i Primer 3G (3.2 mg, 4.72 µmol, 21 % prinos) kao bistro ulje u odnosu ~5 : 1 pomoću analitičke HPLC.

[0250] Primer 45: Rastvoru Primera 45B (4.1 mg, 6.1 µmol) u EtOH (0.178 mL) je dodat 1M vod. NaOH (30 µL, 0.030 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 1 h, reakcija je koncentrovana in vacuo. Ostatak je zakišeljen sa 1M vod. HCl i zatim rekoncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Kolona: Phenomenex Luna AXIA 5µ C1821.2 x 100 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:H2O sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:H2O sa 0.1% TFA; Gradijent: 5-100% B tokom 10 minuta, zatim 2-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobio Primer 45, so ditrifluorosirćetne kiseline (1.4 mg, 2.0 µmol, 34% prinos) kao prljavo-bela čvrsta supstanca. LCMS (ES): m/z 422.6 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.71 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.61 - 7.44 (m, 2H), 6.59 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.13

1 1

(d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.67 - 5.58 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.52 - 3.46 (m, 2H), 3.43 - 3.33 (m, 1H), 3.14 (dd, J = 16.5, 6.1 Hz, 1H), 2.81 (br t, J= 6.2 Hz, 2H), 2.68 (dt, J = 11.8, 7.4 Hz, 4H), 2.01 - 1.88 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 1.6; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 1.6; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 3020.

Primer 46

(±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)fenil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina - nije prema predmetnom pronalasku.

[0251]

[0252] Primer 46A: Degasiranoj smeši Primera 3B (100 mg, 0.282 mmol), 2.0 M vod. Na2CO3(0.282 mL, 0.565 mmol) i Pd(Ph3P)4(16.3 mg, 0.014 mmol) u DMF (1.41 mL) je dodata (3-acetilfenil)borna kiselina (50.9 mg, 0.311 mmol) i reakcija je mešana na 90 °C u zatvorenoj reakcionoj bočici. Nakon 8 h, reakcija je ohlađena na sobnu temperatura, razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani sa 10% vod. LiCl, osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen sa

1 2

preparativnom HPLC (Kolona: Phenomenex Luna AXIA 5m C1821.2 x 100 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:H2O sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:H2O sa 0.1% TFA; Gradijent: 20-100% B tokom 10 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobio Primer 46A, so ditrifluorosirćetne kiseline (21.4 mg, 0.054 mmol, 19% prinos) kao bistro ulje. LCMS (ES): m/z 394.1 [M+H]<+>. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.51 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.37 (t, J = 1.7 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 8.01 (dt, J = 7.9, 1.3 Hz, 1H), 7.91 (dt, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.90 (dd, J = 8.1, 6.8 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 4.05 (s, 3H), 3.62 (dd, J = 16.5, 8.4 Hz, 1H), 3.23 (dd, J = 16.5, 6.6 Hz, 1H), 2.68 (s, 3H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0253] Primer 46B: Jedinjenje iz naslova je sintetisano prema postupku opisanom za sintezu Primera 10G, upotrebom Primera 46A kao početnog materijala: (12.5 mg, 0.026 mmol, 48% prinos, narandžasto ulje). LCMS (ES): m/z 480.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.10 - 9.06 (m, 1H), 8.76 (t, J = 1.7 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.46 (dd, J = 8.1, 2.0 Hz, 1H), 8.26 - 8.21 (m, 2H), 7.84 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.69 - 7.54 (m, 4H), 6.80 (dd, J = 5.6, 3.2 Hz, 2H), 5.95 (dd, J = 9.0, 6.4 Hz, 1H), 4.10 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.65 (dd, J = 16.2, 9.1 Hz, 1H), 3.32 - 3.26 (m, 1H), 1.16 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0254] Primer 46C: Jedinjenje iz naslova je sintetisano prema postupku opisanom za sintezu Primera 10H, upotrebom Primera 46B kao početnog materijala: (12.0 mg, 0.025 mmol, 95% prinos, narandžasto ulje). LCMS (ES): m/z 484.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.25 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.83 - 7.70 (m, 4H), 7.43 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 6.95 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.68 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 5.91 (dd, J = 9.0, 6.4 Hz, 1H), 4.08 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.59 (dd, J = 16.2, 9.1 Hz, 1H), 3.42 (dd, J = 10.8, 5.3 Hz, 2H), 3.26 (dd, J = 16.2, 6.3 Hz, 1H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.98 -1.85 (m, 2H), 1.14 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0255] Primer 46: Rastvoru Primera 46C (12 mg, 0.025 mmol) u EtOH (0.730 mL) je dodat 1M vod. NaOH (74 µL, 0.074 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 5 h, reakcija je koncentrovana in vacuo. Ostatak je zakišeljen sa 1M vod. HCl i zatim rekoncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 16-56% B tokom 20 minuta, zatim 4-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobio Primer 46 (7.8 mg, 0.017 mmol, 67% prinos). LCMS (ES): m/z 456.3 [M+H]<+>.<1>H

1

NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.25 (s, 1H), 8.17 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 - 7.65 (m, 4H), 7.43 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.89 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.50 (dd, J = 16.0, 8.5 Hz, 1H), 3.47 - 3.39 (m, 2H), 3.19 (dd, J = 16.0, 6.5 Hz, 1H), 2.79 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.96 - 1.86 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 28 Humani αVβ3 IC50 (nM) = 14; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 11; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 8200.

Primer 47

Etil (S)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat

[0256]

[0257] Primer 47: SOCl2(0.066 mL, 0.906 mmol) je dodat kap po kap rastvoru na sobnoj temperaturi Primera 2 (0.166 g, 0.394 mmol) u EtOH (3.94 mL). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom noći, rastvarač je odstranjen in vacuo da bi se dobio Primer 47, so trihloridridne kiseline (251 mg, 0.449 mmol) kao sirova žuto-braon čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez prečišćavanja. 15 mg ovog sirovog materijala je dalje prečišćeno preparativnom HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 21-61% B tokom 20 minut, zatim 4-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobio Primer 47 (11.9 mg, 0.025 mmol). LCMS (ES): m/z 450.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.07 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.74

1 4

(d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.79 (dd, J = 9.0, 6.4 Hz, 1H), 4.06 (qd, J = 7.1, 1.9 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.51 - 3.46 (m, 2H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.20 (dd, J = 16.0, 6.3 Hz, 1H), 2.79 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.72 - 2.52 (m, 4H), 2.06 - 1.86 (m, 4H), 1.14 (t, J = 7.1 Hz, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 11; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 1120; i Humani αVβ5 IC50 (nM) = 270.

Primer 48

(±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propoksi)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina - nije prema predmetnom pronalasku

[0258]

[0259] Primer 48A: Jedinjenje iz naslova je sintetisano prema postupku opisanom u Patentnom dokumentu WO 2011026937: (549 mg, 4.35 mmol, 73% prinos, bela čvrsta supstanca). LCMS (ES): m/z 127.3 [M+H]+.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.12 - 10.87 (m, 1H), 8.15 - 8.10 (m, 1H), 6.00 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H).

[0260] Primer 48B: Suspenzija Primera 48A (50 mg, 0.396 mmol), komercijalno dostupnog 5-bromopent-1-ena (0.063 mL, 0.528 mmol) i K2CO3(60.3 mg, 0.436 mmol) u DMF (1.32 mL) je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 24 h, reakciona smeša je razblažena vodom i

1

ekstrahovana sa EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 25% EtOAc/heksani) da bi se dobio Primer 48B (61 mg, 0.314 mmol, 79% prinos) kao bistro ulje. LCMS (ES): m/z 195.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 5.92 - 5.67 (m, 1H), 5.16 - 4.95 (m, 2H), 4.25 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.31 - 2.13 (m, 2H), 1.95 - 1.80 (m, 2H).

[0261] Primer 48C: Rastvoru Primera 48B (61 mg, 0.314 mmol) u MeOH (0.785 mL) je dodat 6M vod. NaOH (0.052 mL, 0.314 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 1 h, isparljive supstance su uklonjene in vacuo i ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran vodom (2x). Vodeni sloj je povratno-ekstrahovan sa EtOAc (2x) i kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo da bi se dobio Primer 48C (48.7 mg, 0.320 mmol) kao sirovo žuto ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 153.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.78 - 8.45 (m, 1H), 7.37 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.86 (ddt, J = 17.0, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 5.74 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.12 - 5.04 (m, 1H), 5.00 (dd, J = 10.3, 1.5 Hz, 1H), 4.17 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.28 - 2.17 (m, 2H), 1.94 - 1.83 (m, 2H).

[0262] Primer 48D: Smeša Primera 48C (48.7 mg, 0.320 mmol) i Cs2CO3(313 mg, 0.960 mmol) u CH3CN (2.13 mL) je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 5 min, Primer 3A (66.3 mg, 0.320 mmol) je dodat i reakcija je zagrevana na 80°C tokom 5 h. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakcija je filtrirana i filtrat je koncentrovan in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0 do 50% EtOAc/heksani) da bi se dobio Primer 48D (35.6 mg, 0.099 mmol, 31% prinos) kao svetlo-žuto ulje. LCMS (ES): m/z 360.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.14 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 8.5, 2.5 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.93 - 5.77 (m, 1H), 5.61 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.53 (dd, J = 8.4, 6.5 Hz, 1H), 5.06 (dd, J = 17.1, 1.7 Hz, 1H), 4.99 (dd, J = 10.2, 1.7 Hz, 1H), 4.17 - 4.04 (m, 4H), 3.92 (s, 3H), 3.50 (dd, J = 16.2, 8.5 Hz, 1H), 3.01 (dd, J = 16.2, 6.6 Hz, 1H), 2.29 - 2.15 (m, 2H), 1.93 - 1.76 (m, 2H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0263] Primer 48E: Rastvor Primera 48D (35.6 mg, 0.099 mmol), CuCl (29.4 mg, 0.297 mmol) i PdCl2(17.6 mg, 0.099 mmol) u DMF (2.03 mL) i vodi (0.508 mL) je mešan pod atmosferom O2(1 atm, balon) na sobnoj temperaturi. Nakon 7 h, reakcija je filtrirana kroz Celite<®>uložak i filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Kolona: Phenomenex Luna AXIA 5u C1821.2 x 100 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:H2O sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:H2O sa 0.1% TFA; Gradijent: 5-100% B tokom

1

10 minuta, zatim 2-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobio Primer 48E, ditrifluorosirćetne kiseline so (19.9 mg, 0.033 mmol, 33% prinos) kao braon ulje. LCMS (ES): m/z 376.1 [M+H]<+>.

[0264] Primer 48F: Jedinjenje iz naslova je sintetisano prema postupku opisanom za sintezu Primera 10G, upotrebom Primera 48E kao polaznog materijala: (15.2 mg, 0.033 mmol, 100% prinos, narandžasto ulje). LCMS (ES): m/z 462.2.

[0265] Primer 48G: Jedinjenje iz naslova je sintetisano prema postupku opisanom za sintezu Primer 10H, upotrebom Primera 48F kao polaznog materijala: (15.4 mg, 0.033 mmol, 100% prinos, braon ulje). LCMS (ES): m/z 466.2.

[0266] Primer 48 : Rastvoru Primera 48G (15.4 mg, 0.033 mmol) u EtOH (0.599 mL) je dodat 1M vod. NaOH (0.099 mL, 0.099 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 1 h, reakcija je koncentrovana in vacuo. Ostatak je zakišeljen sa 1M vod. HCl i zatim rekoncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 10-50% B tokom 20 minuta, zatim 4-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobio Primer 48 (4.6 mg, 0.010 mmol, 31% prinos). LCMS (ES): m/z 438.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.08 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 8.7, 2.4 Hz, 1H), 7.44 - 7.33 (m, 2H), 6.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.51 (br d, J= 6.8 Hz, 1H), 5.62 (br dd, J = 9.4, 4.8 Hz, 1H), 5.54 (s, 1H), 4.38 - 4.25 (m, 1H), 4.17 - 4.07 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.48 - 3.39 (m, 2H), 3.35 (br s, 1H), 3.01 - 2.88 (m, 1H), 2.80 - 2.71 (m, 4H), 2.17 (br dd, J = 13.5, 6.8 Hz, 1H), 2.09 (br dd, J = 13.3, 6.9 Hz, 1H), 1.91 (kvin, J = 6.0 Hz, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 29; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 7.5; i Humani αVβ5 IC50 (nM) = 2.7.

1

1

1

11

Primer 63 3-(5-metoksipiridin-3-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (racemska, N1 pirazol regioizomer)

Primer 64 3-(5-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (enantiomer A, N2 pirazol regioizomer)

Primer 65

3-(5-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (enantiomer B, N2 pirazol regioizomer)

[0267]

[0268] Primer 63A: Rastvoru 3-bromo-5-metoksipiridina (2.0 g, 10.64 mmol), etil akrilata (4.03 ml, 37.2 mmol), trietilamina (4.00 ml, 28.7 mmol) i tri-o-tolilfosfina (0.54 g, 1.769 mmol) u ACN (13.30 ml) koji je degasiran azotom tokom 10 min, dodat je paladijum(II) acetat (0.27 g, 1.20 mmol). Bočica je zatim zatim zagrevana pri 90 °C tokom 8 h, zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, osušeni sa MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0-75% EtOAc/Heks) da bi se dobio Primer 63A (1.83 g, 8.83 mmol, 83 % prinos) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca. LCMS (ESI) m/z 208.0 (M+H)<+>.<1>H NMR (500 MHz, METANOL-d4) δ 8.39 - 8.31 (m, 1H), 8.26 (d, J=2.8 Hz, 1H), 7.77 - 7.59 (m, 2H), 6.71 (d, J=16.0 Hz, 1H), 4.28 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.35 (t, J=7.2 Hz, 3H).

[0269] Rastvoru Primera 22H (0.35 g, 1.44 mmol) i Primera 63A (0.30 g, 1.44 mmol) u acetonitrilu (2 mL) je dodat cezijum karbonat (1.41 g, 4.33 mmol) i bočica je zagrevana do 80°C tokom 16 sati. Reakcija je koncentrovana pod strujom azota. Sirovi materijal [LCMS (ESI) m/z 450.4 i 422.3 (M+H)<+>] je rastvoren u MeOH (7.33 mL) i tretiran sa 1M NaOH (1.466 mL, 1.466 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakcija je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen sa HPLC reverzne faze (Početni %B =10, Krajnji %B = 90, Vreme gradijenta = 10 min, Protok = 40 mL/min, Talasna dužina = 220, Rastvarač A = 10% MeOH- 90% voda- 0.1% TFA , Rastvarač B = 90% MeOH- 10% voda-0.1% TFA, Phenominex Luna 5u C18 100x30MM) da bi se dobilo 324 mg žutog ulja. Materijal je dalje odvojen hiralnom SFC separacijom (Chromegachiral CC4, 21 × 250 mm, 5 mikrona, 43% MeOH/ACN (0.1%NH4OH) / 57% CO2, 45 mL/min, 120 Bar, 40°C, 220 nm) da bi se dobio Primer 63 (racemat), Primer 64 (enantiomer A), i Primer 65 (enantiomer B). Primer 63 (racemat, N1 pirazol regioizomer, 31.6 mg, 9.8 % prinos): LCMS (ESI) m/z 422.3 (M+H)<+>.<1>H NMR (500 MHz, METANOL-d4) δ 8.19 - 8.04 (m, 1H), 8.02 - 7.84 (m, 1H), 7.42 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.32 - 7.22 (m, 2H), 6.41 (d, J=7.1 Hz, 1H), 6.06 (d, J=1.0 Hz, 1H), 5.97 (br dd, J=8.8, 5.1 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.53 -3.35 (m, 3H), 3.08 - 2.97 (m, 1H), 2.82 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 2.73 (br t, J=5.9 Hz, 3H), 2.58 (t, J=7.6 Hz, 2H), 2.17 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 2.06 - 1.94 (m, 1H), 1.94 - 1.84 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 13; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 8.0; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 0.87; i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 770.

[0270] Primer 64 (enantiomer A, N2 pirazol regioizomer, 52 mg, 16 % prinos)): LCMS (ESI) m/z 422.3 (M+H)<+>.<1>H NMR (500 MHz, METANOL-d4) δ 8.50 - 7.87 (m, 2H), 7.67 (s,

11

1H), 7.39 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.47 (br d, J=7.3 Hz, 1H), 6.11 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.91 (br s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.45 - 3.39 (m, 2H), 3.31 (dt, J=3.2, 1.7 Hz, 1H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.74 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.66 - 2.54 (m, 4H), 2.05 - 1.84 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 19; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 3.8 i Humani αVβ8 IC50 (nM) = 110.

[0271] Primer 65 (enantiomer B, N2 pirazol regioizomer, 55.5 mg, 17 % prinos): LCMS (ESI) m/z 422.3 (M+H)<+>. 1H NMR (600 MHz, METANOL-d4) Pomak 8.24 - 8.12 (m, 1H), 8.08 (br s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.52 (br d, J=7.2 Hz, 1H), 7.38 (br s, 1H), 6.59 (br d, J=7.2 Hz, 1H), 6.14 (d, J=1.8 Hz, 1H), 5.91 (br dd, J=10.9, 4.3 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.49 (t, J=5.4 Hz, 2H), 3.04 (br dd, J=14.6, 4.3 Hz, 1H), 2.81 (br t, J=5.9 Hz, 2H), 2.72 - 2.53 (m, 4H), 2.16 - 2.03 (m, 2H), 2.01 - 1.89 (m, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 410; Humani αVβ3 IC50 (nM) = 4.3; Humani αVβ5 IC50 (nM) = 1.1.

Tabela A:

11

11

11

11

11

12

Primer 85

Primer 85: (S)-3-(2-hidroksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0272]

[0273] (S)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanskoj kiselini (Primer 82, 21 mg, 0.050 mmol) u acetonitrilu (1 mL) je dodata HCl, 1M (0.045 mL, 1.491 mmol). Reakciona smeša je mešana na st tokom 5 min. Uzorak je koncentrovan i zatim liofilizovan da bi se dobio (S)-3-(2-hidroksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina, 3 TFA Primer 85 (10 mg, 0.013 mmol, 25.5 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DEUTERIJUM OKSID) δ 8.32 - 8.28 (m, 2H), 7.69 - 7.65 (m, 1H), 7.41 - 7.34 (m, 1H), 6.44 - 6.35 (m, 1H), 6.17 - 6.11 (m, 1H), 5.79 - 5.69 (m, 1H), 3.42 - 3.36 (m, 2H), 3.33 - 3.17 (m, 2H), 2.70 - 2.64 (m, 2H), 2.63 - 2.54 (m, 4H), 2.00 - 1.91 (m, 2H), 1.87 - 1.78 (m, 2H). MS (ESI) (m/z):409.12 (M+H)<+>. Humani αYβ6 IC50 (nM) =52

Primer 86 i Primer 87

(S)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 86)

3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(5-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 87)

[0274]

12

[0275] Benzil 2-(prop-2-in-1-il)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat (86A). Rastvor 1,8-naftiridina (1.30g, 9.99 mmol) i sveže pripremljenog tributil(propa-1,2-dien-1-il)stanana (3.90 g, 9.49 mmol) u DCM (35 mL) pri 0 °C (ledeno vodeno kupatilo) je tretiran benzil karbonohloridatom (2.045 g, 11.99 mmol) kap po kap. Nakon 1 sata na 0 °C ledeno kupatilo je uklonjeno i mešanje je nastavljeno na ST tokom noći. R-ja je koncentrovana i prečišćena direktno pomoću Biotage (40 g kol, 10 -35% EtOAc/ Heksani, 16 CV) da bi se dobio željeni proizvod 86A (2.0 g, eluira oko 25% ETOAc/heksani) kao bistar vosak.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.44 - 8.30 (m, 1H), 7.46 - 7.42 (m, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 4H), 7.05 (dd, J=7.5, 4.8 Hz, 1H), 6.54 (d, J=9.5 Hz, 1H), 6.23 (dd, J=9.5, 5.8 Hz, 1H), 5.33 (d, J=5.5 Hz, 2H), 5.29 - 5.19 (m, 1H), 2.52 - 2.37 (m, 2H), 1.90 (t, J=2.5 Hz, 1H).

[0276] Terc-butil 3-bromo-1H-pirazol-1-karboksilat (86B). 3-bromo-1H-pirazolu (5 g, 34.0 mmol) i DIEA (17.83 ml, 102 mmol) u DCM (85 ml) pri 0 °C je dodat BOC-anhidrid (11.85 ml, 51.0 mmol) praćen sa DMAP (0.042 g, 0.340 mmol).Reakciona smeša je zagrejana do st a zatim je mešana tokom 3h na st. Voda je dodata i slojevi su razdvojeni. Sloj organskog rastvarača je ispran rastvorom soli i osušen preko natrijum sulfata. Uzorak je filtriran, koncentrovan, i ostatak je rastvoren u maloj količini dihlorometana i napunjen u kertridž sa 80 g silicijum gela koji je eluiran sa 0-30% etil acetat/heksani tokom perioda od 50 minuta. Željene frakcije su kombinovane i osušene in vacuo da bi se dobio terc-butil 3-bromo-1H-pirazol-1-karboailat 86B (8.2 g, 33.2 mmol, 98 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.05 - 7.96 (m, 1H), 6.43 (d, J=2.7 Hz, 1H), 1.67 (s, 9H). MS (ESI) (m/z): 190.77(M+H-tBu)<+>.

[0277] Benzil 2-(3-(1-(terc-butoksikarbonil)-1H-pirazol-3-il)prop-2-in-1-il)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat 86C. Rastv. terc-butil 3-bromo-1H-pirazol-1-karboksilata 86B (1.624 g, 6.57 mmol), benzil 2-(prop-2-in-1-il)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 86A (2.0 g, 6.57 mmol), i TEA (3.21 mL, 23.00 mmol) u acetonitrilu (30 mL) je pročišćen sa N2 barbotažom i sonikacijom tokom 10 min. Čvrst bakar(I) jodid (0.063 g, 0.329 mmol) i bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid (0.231 g, 0.329 mmol) su zatim dodati, bočica je zatvorena i zatim zagrevana do 70 °C tokom 6 sati (uljano kupatilo sa tajmerom). Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana sa H2O, rastvorom soli, osušena (MgSO4) i koncentrovana da bi se dobio taman vosak. Vosak je prečišćen sa Biotage (80g kol, 10-45% EtOAc/ Heksani, 14 CV) da bi se dobio željeni proizv. (1.50 g, žuti vosak). MS (ESI) (m/z): 493.03(M+Na)

[0278] Terc-butil 3-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-karboksilat (86D). Suspenzija benzil 2-(3-(1-(terc-butoksikarbonil)-1H-pirazol-3-il)prop-2in-1-il)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 86C (1.5 g, 3.19 mmol), i Pd-C (100 mg, 0.094 mmol) u etanolu (25 mL) je hidrogenizovana (PARR) pri 45 psi tokom 5 sati. Sirove LCMS i NMR pokazuju da je trostruka veza smanjena ali većina materijala je idalje Cbz zaštićena. R-ja. je zatim ponovo podvrgnuta istim uslovima, još dodatnih 18 h (Etanol, 100mg 10% Pd/C, 45 psi). Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite i zatim koncentrovana da bi se dobio željeni proizvod (1.02g, bistar vosak). MS (ESI) (m/z): 243.1(M-Boc)

[0279] 2-(3-(1H-pirazol-3-il)propil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin (86E). Rastv-u tercbutil 3-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-karboailata 86D (1.02 g, 2.98 mmol) na sobnoj temperaturi u DCM (1 mL) je dodat rastv. HCl (3 ml, 12.00 mmol) (4M u Dioksanu) kap po kap. Bistar rastv. je mešan na st tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana i i uzeta direktno na prečišćavanje pomoću Biotage, (40g kol, 0-10% MeOH/DCM, 12CV, zatim 10% MeOH/DCM, 6CV) da bi se dobio željeni proizvod 86E (835mg, bela čvrsta supstanca). Izomeri su razdvojeni korišćenjem preparativnog hiralnog SFC opremljenog sa Chiralcel OD-H (30 × 250 mm, 5 µm). Razdvajanja su obavljena upotrebom izokratskog postupka od 15% MeOH/0.1% DEA u CO2, 150 bar pri 35 °C sa protokom od 70 mL/min i praćeno na 314 nm.

[0280] (S)-2-(3-(1H-pirazol-3-il)propil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin (86F).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.66 - 12.20 (m, 1H), 7.77 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.55 - 7.37 (m, 1H), 7.30 (br d, J=7.1 Hz, 1H), 6.95 - 6.79 (m, 1H), 6.54 - 6.47 (m, 1H), 6.05 (s, 1H), 3.40 (br d, J=3.4 Hz, 1H), 2.68 (br t, J=6.2 Hz, 2H), 2.61 (br t, J=7.3 Hz, 2H), 1.97 - 1.82 (m, 1H), 1.75 - 1.65 (m, 2H), 1.64 - 1.37 (m, 3H)

[0281] (R)-2-(3-(1H-Pirazol-3-il)propil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin (86G).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.66 - 12.25 (m, 1H), 7.84 - 7.69 (m, 1H), 7.52 - 7.39 (m, 1H), 7.33 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 7.05 - 6.90 (m, 1H), 6.52 (t, J=6.2 Hz, 1H), 6.08 - 6.00 (m, 1H), 3.41 (br d, J=3.4 Hz, 1H), 2.69 (br t, J=6.2 Hz, 2H), 2.60 (br t, J=7.3 Hz, 2H), 1.93 - 1.83 (m, 1H), 1.77 - 1.65 (m, 2H), 1.63 - 1.40 (m, 3H)

[0282] Terc-butil (E)-3-(2-metilpirimidin-5-il)akrilat (86H). Smeši 2-metilpirimidin-5-karbaldehida (5.0 g, 40.9 mmol), terc-butil dietilfosfonoacetata (11.58 mL, 49.1 mmol), i molekularnih sita (4A) (20 g, 189 mmol) u THF (100 mL) dodat je litijum hidroksid (1.176 g, 49.1 mmol). Smeša je mešana na st tokom 72 h i zatim filtrirana. Filterska pogača je isprana sa THF. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani in vacuo i ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran sa H2O. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani,

12

koncentrovani, i ostatak podvrgnut fleš hromatografiji na koloni (etil acetat/heksani 1:1) da bi se dobio terc-butil (E)-3-(2-metilpirimidin-5-il)akrilat 86H (7.04 g, 32.0 mmol, 78 % prinos) kao čvrsta bela supstanca.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.75 (br s, 2H), 7.48 (br d, J=16.1 Hz, 1H), 6.47 (br d, J=16.1 Hz, 1H), 2.75 (br s, 3H), 1.53 (br s, 9H). MS (ESI) (m/z): 221.08(M+H)<+>.

[0283] Terc-butil 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetralhidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (86I) i terc-butil 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(5-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (86J).

Jedinjenja iz naslova su pripremljena pomoću postupka analognog Primeru 22A reakcijom (S)-2-(3-(1H-pirazol-3-il)propil)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridina (86F) sa akrilatom (86H). Sirovi proizvod je rastvoren u maloj količini dihlorometana i napunjen u zlatni kertridž od 24 g silicijumskog gela. Kolona je eluirana sa 0-8% dihlorometan / metanola tokom perioda od 60 minuta. TLC upotrebljavajući 2.5-5% MeOH/DCM eluirala je × prikazala je razdvojene regioizomere. Željene frakcije su kombinovane i osušene in vacuo da bi se dobio terc-butil 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (86I) (124.9 mg, 0.270 mmol, 32.7 % prinos, 2. eluirajući pik regioizomera) i tercbutil 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(5-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (86J) (14.9 mg, 0.032 mmol, 3.90 % prinos, 1. eluirajući pik regioizomera). Za 86I:<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.62 (s, 2H), 7.87 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.38 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.16 (br d, J=7.1 Hz, 1H), 6.54 - 6.45 (m, 1H), 6.07 (d, J=1.2 Hz, 1H), 5.67 (t, J=7.5 Hz, 1H), 4.88 (br s, 1H), 3.43 (br dd, J=15.9, 8.3 Hz, 2H), 3.11 (dd, J=16.1, 6.8 Hz, 1H), 2.73 (s, 5H), 2.68 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.01 - 1.91 (m, 1H), 1.82 - 1.72 (m, 2H), 1.64 - 1.57 (m, 3H), 1.37 (s, 9H). MS (ESI) (m/z): 463.33(M+H)<+>. NOE-na 7.38ppm-- prikazuje NOE sa C-alfa H, pirimidinskim H, pirazolskim H4 i t-butil grupom. Za 86J:<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.57 (s, 2H), 7.86 (br d, J=4.6 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.17 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 6.51 (t, J=6.2 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 5.69 (dd, J=8.6, 6.1 Hz, 1H), 4.94 - 4.81 (m, 1H), 3.57 (dd, J=16.1, 9.0 Hz, 1H), 3.47 - 3.38 (m, 1H), 3.06 (dd, J=16.4, 5.9 Hz, 1H), 2.82 - 2.69 (m, 6H), 2.60 (dt, J=15.3, 7.6 Hz, 1H), 1.99 - 1.86 (m, 1H), 1.84 - 1.70 (m, 2H), 1.68 - 1.44 (m, 3H), 1.36 (s, 9H). NOE-pri 7.5ppm-- prikazuje NOE sa pirazolskim H4 (6.06) i tBu.

[0284] Terc-butil (R)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (86K) i terc-butil (S)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-

12

1-il)propanoat (86L). Dijastereoizomeri terc-butil 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoata 861 su razdvojeni upotrebom preparativne hiralne SFC opremljene sa Chiralpak AD-H (30 × 250 mm, 5 µm). Razdvajanja su obavljena upotrebom izokratskog postupka od 25% MeOH/0.1% DEA u CO2, 150 bar pri 35 °C sa protokom od 70 mL/min. Za 86K:<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.62 (s, 2H), 7.89 - 7.82 (m, 1H), 7.38 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J=7.2 Hz, 1H), 6.49 (dd, J=7.2, 5.0 Hz, 1H), 6.06 (d, J=2.3 Hz, 1H), 5.66 (t, J=7.6 Hz, 1H), 4.90 - 4.81 (m, 1H), 3.48 - 3.36 (m, 2H), 3.17 - 3.06 (m, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.67 (t, J=7.6 Hz, 2H), 1.99 - 1.92 (m, 1H), 1.85 - 1.71 (m, 2H), 1.57 - 1.52 (m, 3H), 1.37 (s, 9H). MS (ESI) (m/z): 463.3(M+H)<+>. For 86L:.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.62 (s, 2H), 7.86 (d, J=3.7 Hz, 1H), 7.38 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J=7.2 Hz, 1H), 6.49 (dd, J=7.2, 5.0 Hz, 1H), 6.07 (d, J=2.3 Hz, 1H), 5.71 - 5.62 (m, 1H), 4.98-4.85 (m, 1H), 3.48 - 3.37 (m, 2H), 3.16 - 3.05 (m, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.67 (t, J=7.6 Hz, 2H), 2.00-1.91 (m, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 2H), 1.58 - 1.53 (m, 3H), 1.37 (s, 9H). MS (ESI) (m/z): 463.29(M+H)<+>.

Primer 86:

(S)-3-(2-Metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina.

[0285] Terc-butil (S)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoatu 86L (50 mg, 0.108 mmol) u CH2Cl2(1.5 mL) je dodat TFA (0.4 mL, 5.19 mmol). Reakciona smeša je mešana na st tokom noći.Uzorak je koncentrovan i osušen. Iz uzorka je uklonjena so koristeći Sep-Pak plus kertridž: Rastvarač A: 95:5 (voda/acetonitril) sa 0.1% NH4OH;Rastvarač B: acetonitril sa 0.1% NH4OH. Priprema Sep-Pak plus long (820mg/1.6ml): dodato je 20 mL metanola vlažnom materijalu i zatim isprano rastvaračem A (20 mL). Uvođenje: uzorak u rastvaraču A je uveden unutar kolone zatim ispran rastvaračem A(15mL). Elucija: acetonitril sa 0.1% NH4OH (10 mL) je dodat da se eluira proizvod praćen finalnim ispiranjem sa metanolom (6 mL). TLC je upotrebljen da bi se detektovao proizvod elucije na svakoj od frakcija. Željene frakcije su kombinovane i liofilizovane da bi se dobio željeni proizvod, Primer 86.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 8.62 (s, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.69 - 7.66 (m, 1H), 7.52 (d, J=7.1 Hz, 1H), 6.67 (t, J=6.6 Hz, 1H), 6.17 (s, 1H), 5.90 (dd, J=9.5, 5.6 Hz, 1H), 3.54 (br d, J=4.9 Hz, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 3.16 - 3.09 (m, 1H), 2.86 - 2.69 (m, 3H), 2.66 (s, 4H), 2.03 - 1.94 (m, 1H), 1.85 - 1.76 (m, 2H), 1.70 - 1.56 (m, 3H). MS (ESI) (m/z): 407.2(M+H)<+>. Humani αYβ6 IC50 (nM) = 270

12

Primer 87:

3-(2-Metilpirimidin-5-il)-3-(5-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0286] Uzorak je pripremljen korišćenjem metoda analognih Primeru 86.<1>H NMR prikazuje mešavinu dijastereoizmera. MS (ESI) (m/z): 407.2(M+H)<+>. Humani αYβ6 IC50 (nM) = 1382

12

12

1 Primer 96, Primer 97, i Primer 98

(±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 96)

Primer 97: Enantiomer 1 iz Primera 96

Primer 98: Enantiomer 2 iz Primera 96

[0287]

[0288] (1s,5s)-9-(4,4-dietoksibutil)-9-borabiciklo[3.3.1]nonan (96A) Jedinjenje 96A iz naslova je pripremljeno prema opisu u Journal of Organic Chemistry (2005) 70, 1771-1779 Keen i sarad.

[0289] Terc-butil 2-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat (96B): Jedinjenje 96B iz naslova je pripremljeno po postupku opisanom u WO 2011/059839.

1 1

[0290] Terc-butil 2-(4,4-dietoksibutil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat (96C) Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kako je opisano u Journal of Organic Chemistry (2005) 70, 1771-1779 Keen i sarad. sa izuzetkom da je degasirana voda dodata u reakcionu smešu. Kalijum karbonat (1.741 g, 12.60 mmol), paladijum(II) acetat (0.094 g, 0.420 mmol), DPPF (0.233 g, 0.420 mmol), i terc-butil 2-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96B (1.188 g, 4.20 mmol) su stavljeni u Šlenkovu flašicu. Flašica je zatvorena i sadržaj je ispran azotom. Sadržaju Šlenkove flašice je dodata smeša THF (50 mL) i vode (5 mL) koja je bila degasirana propuštanjem struje azota kroz nju. Reakciona smeša je ponovo degasirana smenom vakuuma i azota (3 puta). Zatim je rastvor (1s,5s)-9-(4,4-dietoksibutil)-9-borabiciklo[3.3.1]nonana 96A (12.61 mmol) u THF (35 mL) dodat. Sadržaj Šlenkove flašice je još jednom degasiran i zatim je smeša zagrevana na 80 °C tokom 18 h pod zatvorenom atmosferom azota. Ohlađena smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko MgSO4, filtriran i uparen. Prečišćavanje rezultujućeg ostataka fleš hromatografijom na silika gel koloni (5-95% EtOAc u heksanima) dalo je terc-butil 2-(4,4-dietoksibutil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96C (1.34 g, 3.42 mmol, 81% prinos). LCMS (ESI): m/z 393 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.45 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.98 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.52 (t, J=5.5 Hz, 1H), 3.90 - 3.72 (m, 1H), 3.70-3.40 (m, 6H, preklapajući multipleti), 2.78 (t, J=7.6 Hz, 2H), 2.70 (br t, J=5.5 Hz, 2H), 1.94-1.62 (m, 8H), 1.42 (br s, 9H), 1.25 - 1.04 (m, 6H).

[0291] Terc-butil 2-(4-oksobutil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat (96D): U flašici sa okruglim dnom, terc-butil 2-(4,4-dietoksibutil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96C (500 mg, 1.274 mmol) je mešan na st u smeši 1:1 AcOH (5 mL)/voda (5 mL) tokom 18 h. Rastvarač je uparen da se ukloni što je moguće više AcOH. Smeša je razblažena vodom i podešena na pH 8 dodavanjem zasić. rastvora vod. natrijum bikarbonata. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc i kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i upareni. Prečišćavanje fleš hromatografijom na silika gel koloni (10-100% EtOAc u heksanima) dalo je terc-butil 2-(4-oksobutil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96D (295 mg, 0.926 mmol, 72.7 % prinos). LCMS (ESI): m/z 319 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 9.79 (s, 1H), 7.48 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.98 (d, J=7.6 Hz, 1H), 3.06 - 2.85 (m, 1H), 2.81 (t, J=7.6 Hz, 1H), 2.76 -2.62 (m, 2H), 2.51 (t, J=7.3 Hz, 2H), 2.15 - 1.98 (m, 2H), 1.93 - 1.82 (m, 2H), 1.59 (br s, 2H), 1.80 - 1.52 (m, 4H), 1.43 (s, 9H).

1 2

[0292] Terc-butil 2-(3-(1H-pirazol-3-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9Hpirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat (96E) U flašici sa ravnim dnom, rastvor dietil (E)-(2-(2-tozilhidrazono)etil)fosfonata (1.15 g, 3.30 mmol, pripremljenog kako je opisano u WO 2007/073503) u THF (6 mL) je polako dodat u suspenziju od 60% NaH kao disperzija u mineralnom ulju (264 mg, 6.60 mmol) u THF (6 mL) uz hlađenje pri 0 °C. Ova smeša je mešana na 0 °C tokom 30 min tokom čega je smeša postala žuta suspenzija. Rastvor terc-butil 2-(4-oksobutil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboailata 96D (700 mg, 2.198 mmol) u THF je dodat suspenziji pri 0 °C nakon čega je ledeno kupatilo uklonjeno. Nakon mešanja na st tokom 1 h, smeša je zagrevana pri refluksu na 82 °C tokom 5.5 h praćeno mešanjem na st tokom 14 h. Smeša je razblažena zasić. vod. amonijum hloridom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko MgSO4, filtrirani i upareni. Prečišćavanje ostatka fleš hromatografijom na silika gel koloni (30-100% EtOAc u heksanima) dalo je jedinjenje iz naslova koje je bilo još uvek znatno onečišćeno. Prečišćavanje preparativnom HPLC (XBridge C18 19×100 mm Protok: 20 mL/min. Talasna dužina: 220 nM. Rastvarač A: 0.1%TFA u 95:5 H2O/CH3CN. Rastvarač B: 0.1% TFA u 5:95 H2O/CH3CN) praćeno prolaskom željenih frakcija kroz karbonatni kertridž za ekstrakciju u čvrstoj fazi (Agilent Technologies PL-HCO3 MP SPE) da se ukloni TFA i uparavanje dalo je jedninjenje iz naslova terc-butil 2-(3-(1H-pirazol-3-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96E (255 mg, 0.715 mmol, 32.5 % prinos). LCMS (ESI): m/z 357 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.56-7.38 (m, 2H), 7.00 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.08 (s, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 2H), 2.75 - 2.70 (m, 2H), 2.65 (br t, J=6.7 Hz, 2H), 2.61 - 2.13 (m, 2H), 2.05 (kvin, J=7.0 Hz, 2H), 1.94 - 1.77 (m, 2H), 1.77-1.49 (m, 2H), 1.49 - 1.24 (br s, 9H).

[0293] terc-butil 2-(3-(1-(3-(terc-butoksi)-1-(2-metilpirimidin-5-il)-3-oksopropil)-1H-pirazol-3-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat (96F) i tercbutil 2-(3-(1-(3-(terc-butoksi)-1-(2-metilpirimidin-5-il)-3-oksopropil)-1H-pirazol-5-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat (96G)

[0294] U maloj posudi pod pritiskom, terc-butil 2-(3-(1H-pirazol-3-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96E (93 mg, 0.261 mmol), terc-butil (E)-3-(2-metilpirimidin-5-il)akrilat (86 mg, 0.391 mmol), i cezijum karbonat (255 mg, 0.783 mmol) su mešani i zagrevani na 70 °C u CH3CN (3 mL) tokom 5 h, nakon čega je mešanje nastavljeno na st tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonio cezijum karbonat, čvrsta supstanca je isprana sa CH3CN, i filtrat je uparen. Prečišćavanje fleš hromatografijom na silika gel koloni (1% do 10% MeOH u CH2Cl2) je omogućilo separaciju proizvoda i akrilatnog

1

početnog materijala. Frakcije koje sadrže dva regioizomera su prečišćene preparativnom HPLC (XBridge C1819×100 mm, protok: 20 mL/min, talasna dužina: 220 nM, 20 min gradijent, 25 min toka, 0% do 100% Rastvarač A: 0.1%TFA u 95:5 H2O/CH3CN. Rastvarač B: 0.1% TFA u 5:95 H2O/CH3CN). Frakcije koje sadrže odvojene izomere su propuštene kroz SPE karbonatne kertridže (Agilent Technologies PL-HCO3 MP SPE) da bi se uklonio TFA i uparene da bi se dobio (terc-butil 2-(3-(1-(3-(terc-butoksi)-1-(2-metilpirimidin-5-il)-3-oksopropil)-1H-pirazol-3-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96F (55 mg, 0.095 mmol, 36.6 % prinos) i terc-butil 2-(3-(1-(3-(terc-butoksi)-1-(2-metilpirimidin-5-il)-3-oksopropil)-1H-pirazol-5-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboailat 96G (14 mg, 0.024 mmol, 9.30 % prinos). Za 96F: LCMS (ESI): m/z 577 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.62 (s, 2H), 7.49 - 7.44 (m, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 2H), 6.96 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.08 (d, J=2.3 Hz, 1H), 5.66 (t, J=7.6 Hz, 1H), 3.42 (dd, J=16.0, 8.4 Hz, 1H), 3.09 (dd, J=16.1, 6.9 Hz, 1H), 2.80 (br d, J=15.4 Hz, 2H), 2.73 (s, 3H), 2.73 - 2.52 (m, 6H), 2.09 -2.02 (m, 1H), 2.15 - 1.96 (m, 2H), 1.94 - 1.82 (m, 2H), 1.63-1.41 (m, 1H), 1.40 (br s, 9H), 1.36 (s, 9H). Za 96G: LCMS (ESI): m/z 577 [M+H]<+>. 1H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.55 (s, 2H), 7.49 (s, 1H), 7.46 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.92 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.68 (dd, J=8.9, 6.2 Hz, 1H), 3.53 (dd, J=16.0, 8.7 Hz, 1H), 3.07 (dd, J=16.4, 5.9 Hz, 1H), 2.81 (br t, J=7.1 Hz, 2H), 2.77-2.67 (m, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.66 - 2.50 (m, 1H), 2.18 - 1.96 (m, 3H), 1.88 (br s, 3H), 1.78 - 1.64 (m, 2H), 1.40 (br s, 9H), 1.36 (br s, 9H).

Primer 96 (racemska)

(±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0295] Terc-butil 2-(3-(1-(3-(terc-butoksi)-1-(2-metilpirimidin-5-i1)-3-oksopropil)-1H-pirazol-3-il)propil)-5,6,7,8-tetrahidro-9H-pirido[2,3-b]azepin-9-karboksilat 96F (55 mg, 0.095 mmol) i TFA (0.2 mL, 2.60 mmol) su mešani u CH2Cl2(1 mL) tokom 18 h. Rastvarač je uparen i ostatak je osušen in vacuo da bi se dobila (±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina, 3 TFA (Primer 96, 68 mg, 0.089 mmol, 86% prinos). LCMS (ESI): m/z 421 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, ACETONITRIL-d3) δ 8.72 (s, 2H), 7.61 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.60 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.14 (d, J=2.2 Hz, 1H), 5.85 (dd, J=9.3, 5.4 Hz, 1H), 3.56 (br t, J=5.0 Hz, 2H), 3.49 (dd, J=16.8, 9.4 Hz, 1H), 3.22 (dd, J=16.6, 5.4 Hz, 1H), 2.91 (br t, J=5.4 Hz, 2H), 2.74-2.62 (m, 4H), 2.69 (s, 3H), 2.07 - 1.85 (m, 6H). Humani αYβ6 IC50 (nM) = 17.

1 4

Primer 97 (Enantiomer 1) i Primer 98 (Enantiomer 2)

Enantiomer 1 od 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline (97)

Enantiomer 2 od 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline (98)

[0296] (±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina 96 je razdvojena na zasebne enantiomere hiralnom SFC (Chiralpak AD-H, 30 × 250mm, 5µm, 20% MeOH/0.1% NH4OH u CO2(150 bar), 35 °C, 70 mL/min, 28 min, λ 220 nm) da bi se dobio Primer 97 (prvi eluirajući enantiomer, 12 mg, 32% prinos) kao čvrsta bela supstanca. LCMS (ESI): m/z 421 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 8.65 (s, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.50 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.65 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.14 (s, 1H), 5.89 (br dd, J=9.2, 6.0 Hz, 1H), 3.43 - 3.24 (m, 3H), 3.18 - 3.01 (m, 1H), 2.89 - 2.74 (m, 2H), 2.71 - 2.51 (m, 4H), 2.67 (s, 3H), 2.14 - 1.62 (m, 6H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 45. Primer 98 (drugi eluirajući enantiomer, 14 mg, 35% prinos) je takođe izolovan kao čvrsta bela supstanca. LCMS (ESI): m/z 421 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 8.64 (s, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.63 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.14 (s, 1H), 5.93 - 5.83 (m, 1H), 3.38-3.34 (m, 2H), 3.27 (br d, J=9.0 Hz, 1H), 3.15 (br d, J=6.4 Hz, 1H), 2.85 - 2.75 (m, 2H), 2.71 - 2.53 (m, 4H), 2.67 (s, 3H), 2.11 - 1.75 (m, 6H). Humani αVβ6 IC50(nM) = 595.

Primer 99

(±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(5-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H pirazol-1-il)propanska kiselina - nije prema predmetnom pronalasku.

[0297]

[0298] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno iz 96G koristeći isti metod kao što je opisano za Primer 96 da bi se dobila (±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(5-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-

1

pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina Primer 99, 3 TFA (14 mg, 69% prinos). LCMS (ESI): m/z 421 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, ACETONITRIL-d3) δ 8.55 (s, 2H), 7.54 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.55 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.16 (s, 1H), 5.81 (dd, J=10.1, 4.3 Hz, 1H), 3.69 - 3.50 (m, 3H), 3.16 (dd, J=16.9, 4.4 Hz, 1H), 2.91 (br s, 2H), 2.86 - 2.65 (m, 4H), 2.64 (s, 3H), 2.15 - 1.74 (m, 6H). Humani αVβ6 IC50(nM) = 410.

1

1

1

Primer 109

(S)-3-(1-benzil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0299]

Etil (S)-3-(6-(benziloksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (109A) i etil (S)-3-(1-benzil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-l,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (109B).

1

[0300] Hladan (0 °C) rastvor etil (S)-3-(6-hidroksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-l,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoata (Primer 12; 817 mg, 1.876 mmol) benzil alkohola (0.195 mL, 1.876 mmol) i trifenilfosfina (590 mg, 2.251 mmol) u DCM (35 mL) je tretiran diizopropil azodikarboksilatom (0.438 mL, 2.251 mmol) kap po kap. Nakon 15 min ledeno kupatilo je uklonjeno i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je razblažena sa DCM i isprana sa H2O, rastvorom soli, osušena (MgSO4) i koncentrovana. Rezultujući žuti vosak je prečišćen sa Biotage (40g kol, 10-80% EtOAc / DCM, 13CV) da bi se uklonili reagensi. Kolona je zatim radila sa (0-8%MeOH/DCM, 12CV) da bi se dobila 1. traka, O- alkilovan proizvod, etil (S)-3-(6-(benziloksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (109A), 330 mg (30% prinos) . LCMS (ES): ret.vreme =0.88 min,m/z 526.07 [M+H]<+>, uz 2. traku, N-alkilovan proizvod, etil (S)-3-(l-benzil-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-l,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (109B) 690 mg (70% prinos). LCMS (ES): ret.vreme =0.73 min,m/z 526.07 [M+H]<+>.

Primer 109: (S)-3-(1-benzil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0301] Rastvor etil (S)-3-(1-benzil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5 ,6, 7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoata 109A (600 mg, 1.141 mmol) u MeOH (6 mL) je tretiran u jednom delu sa rastvorom IN vodenog NaOH (3.42 mL, 3.42 mmol). Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Reakcija je koncentrovana i zatim je rastvor razblažen sa H2O, blago zakišeljen sa IN HCl, i ekstrahovan sa DCM (5x). Organski slojevi su kombinovani, osušeni (MgSO4) i konc. da bi se dobio 556 mg bele čvrste supstance. Deo (15mg) sirovog materijala je prečišćen preparativnom LC/MS u sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 6-46% B tokom 20 minut, zatim 4-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min da bi se dobila (S)-3-(1-benzil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 109), 7.9 mg, . LCMS (ES):m/z 498.19[M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.86 (s, 1H), 7.66 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.44 (dd, J=9.5, 2.4 Hz, 1H), 7.31 - 7.24 (m, 5H), 7.02 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.36 (d, J=9.2 Hz, 1H), 6.24 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.00 (d, J=1.8 Hz, 1H), 5.50 (t, J=7.5 Hz, 1H), 5.09 - 4.99 (m, 2H), 3.91 (s, 1H), 3.58 - 3.35 (m, 2H), 3.20 - 3.04 (m, 2H), 2.94 (br d, J=6.4 Hz,

14

1H), 2.90 (s, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.65 - 2.60 (m, 1H), 2.43 (s, 1H), 1.90 (s, 2H), 1.82 (br t, J=7.5 Hz, 2H), 1.78 - 1.69 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50(nM) = 4.2

Primer 110

Etil (S)-3-(6-(benziloksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat

[0302]

[0303] Na sličan način kao i za pripremu Primera 109, etil (S)-3-(6-(benziloksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat 109B je saponifikovan da bi se dobila (S)-3-(6-(benziloksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 110), 8.2 mg, . LCMS (ES):m/z 498.2[M+H]<+>,<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (s, 1H), 7.74 - 7.65 (m, 2H), 7.43 - 7.29 (m, 5H), 7.02 (br d, J=7.0 Hz, 1H), 6.82 (d, J=8.5 Hz, 1H), 6.30 (br s, 1H), 6.23 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.03 - 6.00 (m, 1H), 5.72 (br t, J=7.5 Hz, 1H), 5.31 (s, 2H), 3.68 (br s, 2H), 3.32 - 3.25 (m, 2H), 3.20 - 3.11 (m, 1H), 3.02 (br dd, J=16.0, 6.6 Hz, 2H), 2.90 (s, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.60 (br s, 1H), 2.50 - 2.42 (m, 1H), 1.87 - 1.79 (m, 2H), 1.78 - 1.71 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50(nM) = 9.3

Primer 111

(S)-3-(1-(ciklopropilmetil)-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0304]

[0305] Etil (S)-3-(1-(ciklopropilmetil)-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (111A) i etil (S)-3-(6-(ciklopropilmetoksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8- tetrahidro-1,8-naftiridin- 2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (111B).

[0306] Rastvoru sobne temperature etil (S)-3-(6-hidroksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoata (Primer 12) (100 mg, 0.230 mmol) u DMSO (2 mL) dodat je Cs2CO3 (135 mg, 0.413 mmol) praćen (bromometil)ciklopropanom (31.0 mg, 0.230 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom noći. Reakcija je razblažena sa led/H2O, zatim ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, osušeni (MgSO4) i koncentrovani. Ostatak je zatim prečišćen sa Prep. HPLC (30X100 Luna kol, 5-80% MeCN/H2O, 10 mmol NH4OAc, 35 ml/ min, 16 min grad.) da bi se dobio N-alkilovan materijal, etil (S)-3-(1-(ciklopropilmetil)-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat 111A, 48mg (42% prinos), LCMS (ES): ret.vreme =0.69 min,m/z 490.08 [M+H]<+>, zajedno sa O-alkilovanim, etil (S)-3-(6-(ciklopropilmetoksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-l,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoatom 111B, 17mg (15% prinos), LCMS (ES):ret.vreme =0.74 min,m/z 490.11 [M+H]<+>.

(S)-3-(1-(ciklopropilmetil)-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina (Primer 111)

[0307] (S)-3-(1-(ciklopropilmetil)-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina je pripremljena i prečišćena na sličan način koristeći proceduru iz Primera 109 koristeći etil (S)-3-(1-(ciklopropilmetil)-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (111A) da bi se dobio Primer 111, 16.5 mg, LCMS (ES):m/z 462.22[M+H]<+>,<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.44 (br d, J=9.5 Hz, 1H), 7.02 (br d, J=7.0 Hz, 1H), 6.35 (d, J=9.2 Hz, 1H), 6.30 - 6.22 (m, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.54 - 5.48 (m, 1H), 3.69 (br dd, J=10.1, 7.3 Hz, 2H), 3.23 (br s, 2H), 3.17 (s, 1H), 2.63 - 2.54 (m, 2H), 2.49 - 2.40 (m, 2H), 1.91 (s, 2H), 1.83 (br t, J=7.5 Hz, 2H), 1.79 - 1.70 (m, 2H), 1.24 (s, 2H), 1.15 (br dd, J=7.5, 4.1 Hz, 1H), 0.43 (br d, J=7.9 Hz, 2H), 0.34 (br d, J=3.7 Hz, 2H). Humani αVβ6 IC50(nM) = 19

Primer 112

(S)-3-(6-(ciklopropilmetoksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina

[0308]

[0309] (S)-3-(6-(ciklopropilmetoksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanska kiselina je pripremljena i prečišćena na sličan način koristeći proceduru iz Primera 109 koristeći etil (S)-3-(6-(ciklopropilmetoksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat (111B) da bi se dobio Primer 112, 1.5 mg, LCMS (ES):m/z 462.22[M+H]<+>,<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.44 (br d, J=9.5 Hz, 1H), 7.02 (br d, J=7.0 Hz, 1H), 6.35 (d, J=9.2 Hz, 1H), 6.30 - 6.22 (m, 2H), 6.03 (s, 1H), 5.54 - 5.48 (m, 1H), 3.69 (br dd, J=10.1, 7.3 Hz, 2H), 3.23 (br s, 2H), 3.05 (br d, J=6.1 Hz, 1H), 2.63 - 2.54 (m, 2H), 2.49 - 2.40 (m, 2H), 1.91

14

(s, 2H), 1.83 (br t, J=7.5 Hz, 2H), 1.79 - 1.70 (m, 2H), 1.24 (s, 2H), 1.15 (br d, J=3.4 Hz, 1H), 0.43 (br d, J=7.9 Hz, 2H), 0.34 (br d, J=3.7 Hz, 2H). Humani αVβ6 IC50(nM) = 3.5 Primer 113

3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanska kiselina

[0310]

Etil 1-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)-1H-pirazol-3-karboksilat (113B)

[0311] DMF (40 mL) je dodat u flašicu koja sadrži etil 1H-pirazol-3-karboksilat (1.5 g, 10.70 mmol), natrijum hidrid (0.514 g, 12.84 mmol, 60% disperzija u mineralnom ulju) na 0 °C. Nakon 15 min na 0 °C, reakciona smeša je zagrejana do ST i mešana na ST tokom 30 min. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C i rastvor 2-(3-bromopropil)-2-metil-1,3-dioksolana (2.69 g, 12.84 mmol), i kalijum jodida (0.355 g, 2.141 mmol) u DMF (20 mL) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 15 min, zatim zagrejana do ST i mešana na ST tokom 16 h. Nakon hlađenja na 0 °C, reakciona smeša je kvenčovana sa vod. NH4Cl (30 mL), i sav DMF je odstranjen pod visokim vakuumom. Ostatak je razblažen sa EtOAc (200 mL), ispran sa rastvorom soli, osušen preko Na2SO4, filtriran, i koncentrovan. Fleš hromatografija (EtOAc/heksani) je dala Primer 113A (0.881 g, 3.28 mmol, 31 % prinos) i Primer 113B (1.724 g, 6.43 mmol, 60 % prinos). LCMS (ES): m/z 269.10 [M+H]<+>. Primer 113A:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (d, J=1.7 Hz, 1H), 6.79 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.55 (t, J=7.3 Hz, 2H), 4.30 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.88 (br d, J=2.9 Hz, 4H), 1.97 - 1.84 (m, 2H), 1.71 - 1.57 (m, 2H), 1.34 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.26 (s, 3H). Primer 113B:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38 (d, J=1.7 Hz, 1H), 6.74 (d, J=1.7 Hz, 1H), 4.34 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.17 (br t, J=7.2 Hz, 2H), 3.98 - 3.69 (m, 4H), 2.02 - 1.90 (m, 2H), 1.67 - 1.52 (m, 2H), 1.34 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.24 (s, 3H).

[0312] (1-(3-(2-Metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)metanol (113C): LiAlH4(3.21 mL, 6.41 mmol, 2 M u THF) je dodat na 0 °C rastvoru 113B (1.72 g, 6.41 mmol) u THF (50 mL) Nakon 1 h na 0 °C, sledeći reagensi su dodati sekvencijalno na 0 °C: H2O (1.1 mL), 1 N NaOH (1.1 mL), i H2O (3.3 mL). Rezultujuća suspenzija je mešana na 0 °C tokom 15 min i ST tokom 15 min, i zatim filtrirana kroz uložak Celite. Nakon toga je filtrat koncentrovan i osušen pod visokim vakuumom, CH2Cl2(100 mL) je dodat. Rezultujuća svetlo bela suspenzija je mešana preko Na2SO4tokom 30 min. Filtrirana je kroz uložak Celite, koncentrovana i osušena pod visokim vakuumom da bi se dobio Primer 113C (1.42 g, 6.26 mmol, 98 % prinos) kao bezbojna tečnost, koja je korišćena direktno bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 227.10 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.35 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.23 (d, J=2.2 Hz, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.12 (t, J=7.2 Hz, 2H), 4.03 - 3.80 (m, 4H), 2.45 - 2.23 (m, 1H), 2.06 - 1.92 (m, 2H), 1.72 - 1.61 (m, 2H), 1.32 (s, 3H).

[0313] 1-(3-(2-Metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)-1H-pirazol-3-karbaldehid (113D) Dess-Martin-ov perjodinan (3.17 g, 7.48 mmol) je dodat na ST rastvoru 113C (1.41 g, 6.23 mmol) u CH2Cl2(50 mL). Nakon mešanja na ST tokom 1 h, reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji (EtOAc/heksani) da bi se dobio Primer 113D (1.33 g, 5.93

14

mmol, 95 % prinos) kao tečnost veoma svetlosmeđe boje. LCMS (ES): m/z 225.09 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.89 (s, 1H), 7.42 (d, J=2.2 Hz, 1H), 6.72 (d, J=2.4 Hz, 1H), 4.19 (t, J=7.2 Hz, 2H), 3.94 - 3.73 (m, 4H), 2.15 - 1.80 (m, 2H), 1.69 - 1.46 (m, 2H), 1.24 (s, 3H).

[0314] (6-Metoksipiridin-3-il)(1-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)metanol (113E): (6-metoksipiridin-3-il)magnezijum hlorid (21.4 mL, 3.85 mmol) je dodat kap po kap rastvoru 113D (0.665 g, 2.97 mmol) u THF (10 mL) pri -40 °C. Reakciona smeša je zagrevana do 10 °C preko 3 h sa početnim rashladnim kupatilom i dalje uključenim. Rashladno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša je mešana na ST tokom 1 h. Nakon hlađenja do 0 °C, reakciona smeša je kvenčovana sa vod. NH4Cl, i sav THF je odstranjen pod vakuumom. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (3x) i rastvorom soli u prisustvu čvrstog NaCl. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani. Fleš hromatografija (MeOH/CH2Cl2) je dala 113E (0.774 g, 2.32 mmol, 78 % prinos). LCMS (ES): m/z 334.21 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.16 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.6, 2.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.68 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.00 (d, J=2.0 Hz, 1H), 5.81 (d, J=2.2 Hz, 1H), 4.06 (t, J=7.2 Hz, 2H), 3.92 - 3.83 (m, 5H), 3.89 (s, 3H), 1.98 - 1.84 (m, 2H), 1.66 -1.54 (m, 2H), 1.26 (s, 3H).

[0315] Metil 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (113F): TiCl4(1.0 M u CH2Cl2, 0.774 mL, 0.774 mmol) je dodat 0 °C rastvoru 113E (258 mg, 0.774 mmol) u CH2Cl2(7 mL). Nakon mešanja pri 0 °C tokom 30 min, 1-(terc-butildimetilsililoksi)-l-metoksieten (0.338 mL, 1.548 mmol) je dodat kap po kap. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h, i kvenčovana dodatkom zasićenog NaHCO3rastvora i ekstrahovana sa CH2Cl2(3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani, i koncentrovani. Fleš hromatografija (MeOH/CH2Cl2) je dala smešu željenog proizvoda. On je dalje prečišćen pomoću pre-HPLC u sledećim uslovima: Kolona: SunFire Prep 19 × 55 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-100% B tokom 10 minuta, zatim 2-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min da bi se dobio 113F (15.5 mg, 5.1% prinos). LCMS (ES): m/z 390.11 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.51 (dd, J=8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.27 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.68 (d, J=8.6 Hz, 1H), 5.95 (d, J=2.2 Hz, 1H), 4.53 (t, J=7.8 Hz, 1H), 4.09 (t, J=7.1 Hz, 2H), 3.97 - 3.88 (m, 4H), 3.92 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.22 (dd, J=15.8, 7.2 Hz, 1H), 2.91 (dd, J=15.8, 8.4 Hz, 1H), 2.02 - 1.87 (m, 2H), 1.73 - 1.53 (m, 2H), 1.31 (s, 3H).

14

[0316] Metil 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-(4-oksopentil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (113G): Smeša 113F (24.5 mg, 0.063 mmol) i piridinijum p-toluensulfonata (22 mg, 0.088 mmol) u acetonu (9 mL) i vodi (1 mL) je zagrevana na 73 °C tokom 3 h. Aceton je odstranjen pod vakuumom. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (3x) i ispran rastvorom soli u prisustvu čvrstog NaCl. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani, koncentrovani i osušeni pod visokim vakuumom da bi se dobio 113G (21.7 mg, 0.063 mmol, 100 % prinos), koji je korišćen direktno za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ES): m/z 346.12 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.10 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.51 (dd, J=8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.24 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.68 (d, J=8.6 Hz, 1H), 5.96 (d, J=2.2 Hz, 1H), 4.52 (t, J=7.8 Hz, 1H), 4.09 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.20 (dd, J=15.8, 7.5 Hz, 1H), 2.90 (dd, J=15.9, 8.3 Hz, 1H), 2.39 (t, J=7.0 Hz, 2H), 2.11 (s, 3H), 2.10 - 2.06 (m, 2H).

[0317] Metil 3-(1-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoat (113H): Pirolidin (0.056 mL, 0.677 mmol) je dodat rastvoru 113G i 2-aminonikotinaldehida (46.0 mg, 0.376 mmol) u CH2Cl2(4 mL). Nakon što je reakciona smeša mešana na ST tokom noći, sve isparljive supstance su uklonjene i ostatak podvrgnut fleš hromatografiji (MeOH/CH2Cl2) da bi se dobila smeša koja sadrži 113H (60 mg). LCMS (ES): m/z 432.08 [M+H]<+>. Korišćena je direktno za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.

[0318] Metil 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (113I): Smeša 113H (60 mg, upotrebljen kao sirov) i platina(IV) oksida (16.74 mg, 0.074 mmol) u MeOH (15 mL) je podvrgnuta hidrogenaciji pod balonom H2tokom noći na ST. Reakciona smeša je filtrirana kroz uložak Celite i filterska pogača je oprana dva puta sa MeOH. Kombinovani filtrati su koncentrovani, ostatak je podvrgnut Prep-HPLC u sledećim uslovima: Kolona: SunFire Prep 19 × 55 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-100% B tokom 10 minuta, zatim 2-minutno zadržavanje pri 100% B; Protok: 20 mL/min da bi se dobio 1131 (14.3 mg, 0.033 mmol, 44.6 % prinos preko dva koraka). LCMS (ES): m/z 436.12 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.52 (dd, J=8.6, 2.2 Hz, 1H), 7.30 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.11 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.68 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.26 (d, J=7.1 Hz, 1H), 5.95 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.53 (t, J=7.8 Hz, 1H), 4.10 (t, J=7.0 Hz, 2H), 4.05 (br s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.43 (br t, J=5.5 Hz, 2H), 3.22 (dd, J=15.8, 7.2 Hz, 1H), 2.91 (dd, J=15.8, 8.4 Hz, 1H), 2.70 (br t, J=6.1 Hz, 2H), 2.57 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.21 (kvin, J=7.2 Hz, 2H), 1.91 (kvin, J=5.9 Hz, 2H).

14

[0319] Primer 113: 3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanska kiselina: Rastvor litijum hidroksid monohidrata (6.39 µl, 0.230 mmol) u vodi (1 mL) je dodat na ST rastvoru 1131 (14.3 mg, 0.033 mmol) u MeOH (1 mL) i THF (1 mL). Nakon što je rezultujući bistar rastvor mešan na ST tokom noći, sve isparljive supstance su uklonjene pod visokim vakuumom. Voda (2 mL) je dodata, praćeno sa HCl (1N, 0.23 mL, 0.23 mmol). Smeša je koncentrovana i osušena pod visokim vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (1.5 mL), filtriran i podvrgnut preparativnoj LC/MS koristeći sledeće uslove: Kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 2-42% B tokom 15 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene pomoću centrifugalnog isparavanja. Materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS u sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 0-32% B tokom 30 minuta, zatim 5 minuta zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene pomoću centrifugalnog isparavanja da bi se dobila 3-(6-msetoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanska kiselina (Primer 113 (13.4 mg, 97% prinos). LCMS (ES): m/z 422.08 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.05 (s, 1H), 7.59 (br s, 2H), 7.03 (br d, J=7.0 Hz, 1H), 6.72 (d, J=8.5 Hz, 1H), 6.23 (br d, J=7.0 Hz, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.35 (br t, J=7.6 Hz, 1H), 4.02 (br t, J=7.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.25 - 3.17 (m, 2H), 3.00 (br dd, J=15.7, 7.2 Hz, 1H), 2.86 - 2.73 (m, 1H), 2.61 (br t, J=5.5 Hz, 2H), 2.36 (br t, J=7.3 Hz, 2H), 2.07 - 1.95 (m, 2H), 1.81 - 1.67 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 35.

14

Primer 114

(R)-3-(4-fluoro-3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H pirazol-1-il)-3-(2-metilpirimidin-5-il)propanska kiselina (Primer 114) (nije prema predmetnom pronalasku)

[0320]

[0321] Terc-butil (R)-3-(4-fluoro-3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H pirazol-1- il)-3-(2-metilpirimidin-5-il)propanoat (114A) Mešanom rastvoru terc-butil (R)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoata (366 mg, 0.791 mmol) u ACN (2.5 mL) pod atmosferom azota je dodat Selectfluor (280 mg, 0.791 mmol). Rezultujući rastvor je držan pod mikrotalasnim uslovima na 70 °C tokom 30 min. Selectfluor (280 mg, 0.791 mmol) je dodat opet da bi se osiguralo maksimalno formiranje proizvoda i reakcija je nastavljena da bude mešana pri istim uslovima tokom 1h. Reakciona masa je uparena pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Sunfire OBD (250 × 30) mm; kolona od 5 mikrona; Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi; Mobilna faza B: ACN, protok: 27.0 mL/min; vreme (min)/%B: 0/30, 18/70) da bi se dobilo jedinjenje 114A iz naslova (20 mg, 5%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.63 min; m/z = 481.4 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom od 1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

14

[0322] (R)-3-(4-Fluoro-3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H pirazol-1-il)-3-(2-metilpirimidin-5-il)propanska kiselina (Primer 114) Mešanom rastvoru terc-butil (R)-3-(4-fluoro-3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)-3-(2-metilpirimidin-5-il)propanoata (114A) (20 mg, 0.042 mmol) u DCM (0.2 mL) je dodat TFA (0.2 mL, 2.60 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na ST tokom 4h. Reakciona smeša je uparena pod sniženim pritiskom da bi se dobio željeni proizvod (22 mg, 88%) kao braon čvrsta supstanca (kao TFA so). LC-MS retenciono vreme = 1.09 min; m/z = 425.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.62 (s, 2H), 7.75 (d, J = 4.40 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.79 (dd, J = 6.00, 9.00 Hz, 1H), 3.45-3.52 (m, 3H), 3.24 (dd, J = 6.00, 16.40 Hz, 1H), 2.81 (m, 2H), 2.68-2.75 (m, 4H), 2.66 (s, 3H), 2.01-2.07 (m, 2H), 1.94-1.98 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 4800.

Primer 115 i Primer 116

Primer 115: Prvi eluirani enantiomer 3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanske kiseline - nije prema predmetnom pronalasku

Primer 116: Prvi eluirani enantiomer 3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanske kiseline - nije prema predmetnom pronalasku

[0323]

1

Etil 3-jodo-1H-pirazol-5-karboksilat (115A)

[0324] Mešanom rastvoru etil 5-amino-1H-pirazol-3-karboksilata (5g, 32.2 mmol) u DCM (100 mL) pod atmosferom azota je dodat dijodometan (4.54 mL, 56.4 mmol) praćeno terc-butil nitritom (5.80 mL, 48.3 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST tokom 14h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovo jedinjenje je

1 1

prečišćeno fleš hromatografijom na silika gel koloni upotrebom 0-50 % etil acetata i pet-etra kao mobilne faze da bi se dobilo jedinjenje 115A iz naslova (3.4 g, 39%) kao bledo žuta čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.651 min; m/z = 265.0 [M-H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 14.28 - 13.94 (br. s., 1H), 7.00 - 6.89 (br. s., 1H), 4.28 (br. s., 2H), 1.28 (t, J = 4.00 Hz, 3H).

Etil 3-jodo-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-karboksilat (115B)

[0325] Mešanom rastvoru etil 5-jodo-1H-pirazol-3-karboksilata 115A (3.4 g, 12.78 mmol) u THF (40 mL) pod atmosferom azota na 0°C dodat je NaH (0.511 g, 12.78 mmol) u vidu malih porcija i reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 1h. SEM-C1 (2.267 mL, 12.78 mmol) je dodat u prethodno navedenu reakcionu smešu i mešan na ST tokom 14h. Reakciona smeša je kvenčovana zasićenim amonijum hloridom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 80 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli (100 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 30% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 115B iz naslova (3.8 g, 74%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 3.667 min; m/z = 397.0 [M+H]<+>Kolona-KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.05 (s, 1H), 5.60 (s, 2H), 4.43 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.66 - 3.60 (m, 2H), 1.41 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.95 -0.89 (m, 2H), -0.01 (s, 9H).

Etil (E)-3-(3-(terc-butoksi)-3-oksoprop-1-en-1-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)-metil)-1H-pirazol-5-karboksilat (115C)

[0326] U zatvorenoj epruveti, etil 5-jodo-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-karboksilat 115B (3.8 g, 9.59 mmol) u ACN (40 mL) je tretiran terc-butil akrilatom (4.21 mL, 28.8 mmol) i rastvor je degasiran argon gasom tokom 5 min. TEA (4.01 mL, 28.8 mmol), triotolilfosfin (0.292 g, 0.959 mmol) praćen paladijum(II) acetatom (0.215 g, 0.959 mmol) je dodat i reakciona smeša je degasirana ponovo argonom tokom 5 min. Reakciona smeša je zatim

1 2

zagrevana do 80°C i mešana tokom 14h. Reakciona smeša je ohlađena, filtrirana kroz uložak Celite i isprana sa DCM (4 × 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 35% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 115C iz naslova (2.4 g, 62%) kao bledo-žuta tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.836 min; m/z = 397.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.63 (d, J = 21.60 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.43 (d, J = 21.20 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.46 (q, J = 9.60 Hz, 2H), 3.62 (t, J = 10.80 Hz, 2H), 1.57 (s, 9H), 1.44 (t, J = 9.60 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 10.80 Hz, 2H), -0.01 (s, 9H).

Etil 3-(3-(terc-butoksi)-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-karboksilat (115D)

[0327] Smeša etil (E)-3-(3-(terc-butoksi)-3-oksoprop-1-en-1-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-karboksilata 115C (2.4 g, 6.05 mmol) u 1,4-dioksanu (40 mL) i vodi (10 mL) u zatvorenoj epruveti je degasirana argon gasom tokom 5 min. (3-fluoro-4-metoksifenil)borna kiselina (1.543 g, 9.08 mmol) i TEA (1.687 mL, 12.10 mmol) su dodati i reakciona smeša je degasirana opet argonom tokom 5 min. Hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) dimer (0.149 g, 0.303 mmol) je dodat, degasiran argonom tokom dodatnih 5 min i reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 14h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite i prikupljena čvrsta supstanca je isprana sa DCM (4 × 15 mL). Kombinovani filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 30% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 115D (1.3 g, 40%) iz naslova kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.94 min; m/z = 323.4 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.03 - 6.95 (m, 3H), 6.89 (s, 1H), 5.53 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.37 - 5.28 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.72 (t, J=7.8 Hz, 1H), 4.47 (qd, J=7.2, 3.5 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.47 - 3.38 (m, 2H), 2.98 (dd, J=15.6, 8.5 Hz, 1H), 2.85 (dd, J=15.6, 7.0 Hz, 1H), 1.46 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.40 (s, 9H), 0.91 - 0.74 (m, 2H), -0.01 (s, 9H).

1

terc-Butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(hidroksimetil)-1-((2-(trimetilsilil)-etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (115E)

[0328] Mešanom rastvoru etil 3-(3-(terc-butoksi)-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-karboksilata 115E (1.1 g, 2.105 mmol) u THF (20 mL) pod atmosferom azota dodat je litijum borohidrid (1.368 mL, 2 M u THF, 2.74 mmol) na 0°C i reakciona smeša je mešana na ST tokom 48h. Reakciona smeša je kvenčovana vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 40 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli (30 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 70% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 115E iz naslova (0.750 g, 73%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.517 min; m/z = 481.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.15 - 7.01 (m, 3H), 6.32 (s, 1H), 5.34 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.18 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.04 (t, J=5.8 Hz, 1H), 4.48 (t, J=8.0 Hz, 1H), 4.34 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.79 ( s, 3H), 3.33 - 3.24 (m, 2H), 2.88 (dd, J=8.0, 4.0 Hz, 2H), 1.27 (s, 9H), 0.77 - 0.63 (m, 2H), -0.09 (s, 9H).

terc-Butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-formil-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)-metil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (115F)

[0329] Mešanom rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(hidroksimetil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoata 115E (0.750 g, 1.560 mmol) u DCM (20 mL) pod atmosferom azota je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (0.993 g, 2.341 mmol) i rezultujući rastvor je mešan na ST tokom 14h. Reakciona smeša je filtrirana kroz uložak Celite i ista ta je isprana sa DCM (4 × 15 mL). Kombinovani filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 40% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 115F iz naslova (0.750 g, 89%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.877 min; m/z = 479.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H

1 4

NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 9.94 (s, 1H), 6.94 - 6.86 (m, 3H), 6.81 (s, 1H), 5.46 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.66 (t, J=7.9 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.45 (ddd, J=10.6, 9.5, 6.1 Hz, 1H), 3.37 (ddd, J=10.8, 9.4, 6.0 Hz, 1H), 2.92 (dd, J=15.8, 8.8 Hz, 1H), 2.79 (dd, J=15.8, 7.3 Hz, 1H), 1.33 (s, 9H), 0.87 - 0.71 (m, 2H), -0.04 (s, 9H).

terc-Butil (E)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)prop-l-en-1-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (115G)

[0330] Mešanom rastvoru bromo(2-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)etil)trifenil-15-fosfana (1.242 g, 2.72 mmol) u THF (4 mL) je dodat nBuLi (1.4 mL, 3.40 mmol, 2.5 M rastvor u heksanu) pri 0°C i rezultujući rastvor je mešan tokom 30 min. terc-Butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-formil-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoat 115F (0.650 g, 1.358 mmol) rastvoren u THF (4 mL) je dodat prethodno navedenom rastvoru i mešan na ST tokom 2h. Reakciona smeša je kvenčovana zasićenim amonijum hloridom (20 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 20 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli (10 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 50% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 115G iz naslova (0.470 g, 60%) kao bledo-žuta tečnost. LC-MS retenciono vreme = 4.090 min; m/z = 577.4 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

terc-Butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (115H)

[0331] Mešanom rastvoru terc-butil (E)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)prop-1-en-1-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoata 115G (0.470 g, 0.815 mmol) u etanolu (10 mL) je dodat paladijum hidroksid na ugljeniku (47 mg, 0.067 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST pod H2iz balona tokom 14 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz uložak Celite i Celite je ispran sa MeOH (4 x 20 mL). Kombinovani filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje 115H (0.430 g, 91%) iz naslova. LC-MS retenciono vreme = 4.016 min; m/z = 579.4 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN;

1

50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 6.95 - 6.82 (m, 3H), 6.08 (s, 1H), 5.29 (d, J=11.3 Hz, 1H), 5.12 (d, J=11.3 Hz, 1H), 4.57 (t, J=7.9 Hz, 1H), 3.98 -3.87 (m, 4H), 3.85 (s, 3H), 3.45 - 3.28 (m, 2H), 2.87 (dd, J=15.4, 8.1 Hz, 1H), 2.75 (dd, J=15.4, 7.9 Hz, 1H), 2.62 - 2.56 (m, 2H), 1.91 (td, J=7.6, 3.9 Hz, 1H), 1.83 (br. s., 1H), 1.76 - 1.65 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s, 9H), 0.84-0.68 (m, 2H), -0.07 (s, 9H).

terc-Butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(4-oksopentil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)-metil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (1151)

[0332] Mešanom rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoata 115H (0.430 g, 0.743 mmol) u THF (8 mL) je dodat HCl (0.991 mL, 1.486 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST tokom 14h. Reakciona smeša je kvenčovana 10% natrijum bikarbonatom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli (40 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 60% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 1151 iz naslova (0.300 g, 71%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 4.010 min; m/z = 535.2 [M+H]<+>Kolona-KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 6.98 - 6.84 (m, 3H), 6.10 (s, 1H), 5.29 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.14 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.59 (t, J=7.7 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.47 - 3.31 (m, 2H), 2.89 (dd, J=15.5, 8.2 Hz, 1H), 2.77 (dd, J=15.3, 7.7 Hz, 1H), 2.62 (t, J=7.6 Hz, 2H), 2.52 - 2.43 (m, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.93 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 0.87 - 0.70 (m, 2H), -0.04 (s, 9H).

terc-Butil 3-(5-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)-metil)-1H-pirazol-3-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoat (115J)

[0333] Mešanom rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(4-oksopentil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoata 1151 (0.300 g, 0.561 mmol) u etanolu (10 mL) pod atmosferom azota je dodat pirolidin (0.046 mL, 0.561 mmol) i rezultujuća smeša je mešana tokom 10 min pri ST. Ovom rastvoru je dodat 2-aminonikotinaldehid (0.069 g, 0.561 mmol) i reakciona smeša je zagrejana na 75°C tokom 14h. Reakciona smeša je koncentrovana

1

pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 90% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 115J iz naslova (0.190 g, 50%) kao bledožuta tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.970 min; m/z = 621.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.03 (dd, J=4.5, 2.0 Hz, 1H), 8.42 (dd, J=8.0, 2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.58 (dd, J=8.0, 4.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.15 - 7.01 (m, 3H), 6.28 (s, 1H), 5.32 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.17 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.51 - 4.42 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.35 - 3.45 (m, 2H), 3.03 - 2.95 (m, 2H), 2.90 - 2.84 (m, 2H), 2.63 - 2.56 (m, 2H), 2.13 - 2.06 (m, 2H), 1.25 (s, 9H), 0.71 - 0.59 (m, 2H), -0.13 (s, 9H).

terc-Butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoat (115K)

[0334] Mešanom rastvoru terc-butil 3-(5-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoata 115J (0.140 g, 0.226 mmol) u etanolu (5 mL) je dodat platina(IV) oksid (14 mg, 0.062 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST pod pritiskom H2iz balona tokom 14h. Reakciona smeša je filtrirana kroz uložak Celite i Celite je ispran sa MeOH (4 x 10 mL). Kombinovani filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje 115K (0.130 g, 84%) iz naslova. LC-MS retenciono vreme = 1.635 min; m/z = 625.4 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 115: Prvi eluirani enantiomer 3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanske kiseline

Primer 116: Prvi eluirani enantiomer 3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanske kiseline

[0335] Mešanom rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-3-il)propanoata 115K (0.150 g, 0.240 mmol) u DCM (5 mL) je dodat TFA (1.5 mL, 19.47 mmol) pod

1

atmosferom azota i mešano je na ST tokom 14h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa HPLC reverzne faze (Sunfire C18 (150 x 21.2) mm, 5 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM Amonijum acetat u vodi, Mobilna faza B: ACN; Protok: 18 mL/min, Vreme (min)/ %B: 0/20, 2/20, 15/35, 16/100) da bi se dobilo racemat jedinjenje (50 mg). Pojedinačni enantiomeri su razdvojeni pomoću hiralne HPLC (Kolona: Lux Cellulose C4 (250 x 21.2) mm; 5 mikrona; Mobilna faza: 0.4% DEA u ACN: MeOH (70:30); Protok: 20 mL/min). Prvi eluirani enantiomer Primer 115 (Retenciono vreme 5.52 min., 25 mg, 23%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.29 min; m/z = 439.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.38 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.06 - 6.94 (m, 3H), 6.50 (d, J=7.5 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 4.48 (t, J=8.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.45 (J=5.6 Hz, 2H), 2.93 (dd, J=14.6, 9.0 Hz, 1H), 2.83 (dd, J=15.1, 7.0 Hz, 1H), 2.77 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.70 - 2.63 (m, 2H), 2.59 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.04 - 1.88 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 97. Drugi eluirani enantiomer Primer 116 (Retenciono vreme 7.77 min., 18 mg, 17%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.29 min; m/z = 439.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.38 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.06 - 6.94 (m, 3H), 6.50 (d, J=7.5 Hz, 1H), 6.06 (s, 1H), 4.48 (t, J=8.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.45 (J=5.6 Hz, 2H), 2.93 (dd, J=14.6, 9.0 Hz, 1H), 2.83 (dd, J=15.1, 7.0 Hz, 1H), 2.77 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.70 - 2.63 (m, 2H), 2.59 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.04 - 1.88 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 47.

1

1

1

11

12

1

14

1

1

1

1

1

1

11

12 Primer 137 i Primer 138

Primer 137: prvi eluirani enantiomer 3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 138: drugi eluirani enantiomer 3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0336]

5-(2-(1,3-dioksolan-2-il)tiazol (137A)

[0337] Rastvoru (120 mL) 4-bromotiazol-2-karbaldehida (7 g, 36.50 mmol) i etilen glikola (2.72 g, 43.7 mmol) u toluenu u balonu sa RB je dodata katalitička količina pTsOH (0.347 g, 1.823 mmol). Balon sa RB je povezan sa Dean-Stark uređajem i reakciona smeša je zagrevana da refluksira tokom 12h. Smeša je ohlađena na ST, i particionirana zasićenim vodenim NaHCO3

1

rastvorom. Organski sloj je odvojen, ispran zasićenim vodenim NaHCO3(2 X 120 mL) rastvorom i zatim jednom i sa rastvorom soli (100 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 20% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje 137A (8 g, 97%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.557 min; m/z = 236.0 [M+2H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.94 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 3.99 - 4.08 (m, 4H).

5-(2-(1,3-Dioksolan-2-il)tiazol-4-il)pent-4-in-2-ol (137B)

[0338] Mešanom rastvoru 5-(2-(1,3-dioksolan-2-il)tiazola 137A (5 g, 21.18 mmol), 4-pentin-2-ola (2.67 g, 31.80 mmol) u TEA (100 mL) pod atmosferom azota je dodat bakar (I) jodid (0.282 g, 1.483 mmol) praćen bis(trifenilfosfin)paladijum (II) dihloridom (0.988 g, 1.483 mmol) i reakciona smeša je degasirana argonom tokom 2 min. Zatim je reakciona smeša zagrevana do 80 °C i mešana tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena na ST i filtrirana kroz Celite uložak. Celite uložak je ispran sa EtOAc (2 X 250 mL) i kombinovani filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 90% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 137B iz naslova (4 g, 87%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.557 min; m/z = 240.0 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.91 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.84 (d, J=4.8 Hz, 1H), 3.99 - 4.09 (m, 4H), 2.41 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.193 (d, J=7.2 Hz, 3H).

5-(2-(1, 3-Dioksolan-2-il) tiazol-4-il) pentan-2-ol (137C)

[0339] Degasiranom rastvoru 5-(2-(1,3-dioksolan-2-il)tiazol-4-il)pent-4-in-2-ola 137B (4.0 g, 16.72 mmol) u EtOH (50 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (71 mg, 0.669 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana pod pritiskom vodonika iz balona na ST tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak i Celite uložak je ispran sa EtOH (100 mL).

1 4

Kombinovani filtrat je koncentrovan da bi se dobilo sirovo jedinjenje 137C iz naslova (4.0 g, 87%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.29 min; m/z = 244.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.

5-(2-(1, 3-dioksolan-2-il) tiazol-4-il) pentan-2-ol (137D)

[0340] Rastvoru 5-(2-(1, 3-dioksolan-2-il) tiazol-4-il) pentan-2-ola 137C (7.5 g, 30.8 mmol) u DCM (150 mL) je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (19.61 g, 42.2 mmol) na 0 °C. Rezultujuća reakciona smeša je zatim mešana na ST tokom 60 min. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (200 mL), isprana sa 20% natrijum bikarbonatnim rastvorom (200 mL), rastvorom soli (200 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 90% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 137D iz naslova (7.3 g, 86%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.33 min; m/z = 242.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.36 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 3.96 - 4.08 (m, 4H), 2.68 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.44 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.79 (pent, J=7.2 Hz, 2H).

4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-2-(1,3-dioksolan-2-il)tiazol (137E)

[0341] Rastvoru 5-(2-(1, 3-dioksolan-2-il) tiazol-4-il) pentan-2-ola 137D (4.0 g, 16.44 mmol) u etanolu (70 mL) je dodat pirolidin (1.268 mL, 15.33 mmol) pod atm. azota i rastvor je mešan tokom 10 min.2-Aminonikotinaldehid (2.06 g, 16.87 mmol) je zatim dodat i dobijena reakciona smeša je mešana na 75 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 100% EtOAc da bi se dobilo jedinjenje 137E iz naslova (4.1 g, 89%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 0.805 min; m/z = 328.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.<1>H

1

NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.02 - 9.03 (dd, J= 2.0, 1.6 Hz, 1H), 8.40- 8.43 (m, 1H), 8.33 - 8.38 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.52 - 7.59 (m, 2H), 7.41 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 3.96 - 4.08 (m, 4H), 3.00 - 3.04 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.79 - 2.83 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.20 (m, 2H).

2-(1,3-dioksolan-2-il)-4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol (137F)

[0342] Mešanom rastvoru 4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-2-(1,3-dioksolan-2-il)tiazola 137E (0.3 g, 0.916 mmol) u etanolu (40 mL) je dodat platina(IV) oksid (42 mg, 0.018 µmol) pod atmosferom azota. Reakciona smeša zatim je degasirana gasom vodonika i mešana pod pritiskom vodonika iz balona na ST tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak, Celite uložak je ispran sa EtOH (50 mL) i kombinovani filtrat koncentrovan da bi se dobio proizvod 137F iz naslova (270 mg, 53%) kao bledo-žuto ulje. Sirovi proizvod je uzet za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LC-MS retenciono vreme = 1.705 min; m/z = 332.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.

4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-karbaldehid (137G)

[0343] Rastvoru terc-butil 7-(3-(2-(1,3-dioksolan-2-il)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat2-(1,3-dioksolan-2-il)-4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazola 137F (3.7 g, 11.16 mmol) u etanolu (25 mL) i H2O (5 mL) je dodata konc. HCl (3.39 mL, 112 mmol) i rezultujući rastvor je mešan na ST tokom 12h. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak kvenčovan zas. vodenim NaHCO3(100 mL) rastvorom i ekstrahovan u etil acetatu (2 X 250 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, koncentrovan i sirovi željeni proizvod 137G (3.1 g, 69%) je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja. LC-MS retenciono vreme = 1.474 min; m/z = 288.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.

Etil (E)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)akrilat (137H )

[0344] Mešanom rastvoru 4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-karbaldehida 137G (0.14 g, 0.487 mmol) u suvom DCM (7.0 mL) je dodat (karbetoksimetilen)trifenilfosforan (0.204 g, 0.585 mmol) i rezultujuća reakciona smeša je

1

mešana pod atmosferom azota na ST tokom 12h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (4.0 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 0-100% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 137H iz naslova (0.11 g, 74%) kao polu-čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.507 min; m/z = 358.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-tiazol-2-il)propanoat (1371)

[0345] Rastvoru etil (E)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)akrilata 137H (300 mg, 0.839 mmol) ) u 1,4-dioksanu (15.0 mL) i H2O (2.5 mL) dodata je (4-(dimetilkarbamoil)fenil)borna kiselina (16.20 mg, 0.084 mmol). Reakciona smeša je degasirana argonom tokom 5 min. Hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) dimer (20.69 mg, 0.042 mmol) i TEA (0.234 mL, 1.678 mmol) su dodati i dobijena reakciona smeša je zagrevana do 85 °C i mešana tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena, sipana u vodu (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli (50 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 0-20% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje 1371 iz naslova (290 mg, 68%) kao polučvrsta supstanca. Sirovi proizvod je prenet u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LC-MS retenciono vreme = 2.024 min; m/z = 507.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.

Primer 137: prvi eluirajući enantiomer 3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 138: drugi eluirajući enantiomer 3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0346] Mešanom rastvoru etil 3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanoata 1371(0.29 g, 0.572 mmol) u THF (6.0 mL) i etanolu (4 mL) je dodat rastvor LiOH.H2O (27 mg, 1.145 mmol) u vodi (2.0 mL) i rastvor je mešan na

1

ST tokom 12h. Zatim je dodata limunska kiselina (50 mg) i mešano je na ST tokom 1h. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparative HPLC preparativne sa reverznom fazom (retenciono vreme =14.6 min, Kolona: INTERSIL ODS C18 (250 X 19) mm 5 mikrona; Mobilna faza A: 10mM NH4OAc u vodi; Mobilna faza B: ACN, protok: 17.0 mL/min; vreme (min)/%B: 0/20, 8/40, 14/60) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (110 mg) kao racemska smeša. Pojedinačni enantiomeri su zatim razdvojeni preparativnom HPLC (Kolona: Lux-cellulose C4 (250 X21.2) mm kolona od 5 mikrona; protok: 19.0 mL/min; Mobilna faza B: 0.1% DEA u MeOH; vreme (min)/%B: 0/100, 20/100, temperatura: 35°C; Detekcija: UV pri 220 nm). Prvi eluirajući enantiomer Primer 137 (Retenciono vreme 7.442 min., 24 mg, 9%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.192 min; m/z = 479.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.47 (m, 3H), 7.43 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.04 (s, 1H), 6.56 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.92 (dd, J=11.17, 4.77 Hz, 1H), 3.48 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.23 (dd, J=14.53, 11.14 Hz, 1H), 3.11 (s, 3 H), 3.01 (s, 3 H), 2.88 (dd, J=14.4, 4.8 Hz, 1H), 2.74 - 2.90 (m, 4H), 2.48 - 2.66 (m, 2H), 1.91 - 2.01 (m, 1H), 1.31 (s, 1H), 1.92-1.97 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 210. Drugi eluirajući enantiomer Primer 138 (Retenciono vreme 8.044 min., 19.5 mg, 8%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme =1.239; m/z = 479.2 [M+H] KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.47 (m, 3H), 7.43 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.04 (s, 1H), 6.56 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.92 (dd, J=11.17, 4.77 Hz, 1H), 3.48 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.23 (dd, J=14.53, 11.14 Hz, 1H), 3.11 (s, 3 H), 3.01 (s, 3 H), 2.88 (dd, J=14.4, 4.8 Hz, 1H), 2.74 - 2.90 (m, 4H), 2.48 - 2.66 (m, 2H), 1.91 - 2.01 (m, 1H), 1.31 (s, 1H), 1.92-1.97 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 4.0.

1

1

1

11

Primer 143 i Primer 144

Primer 143: prvi eluirajući enantiomer 3-(2-Metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 144: drugi eluirajući enantiomer 3-(2-Metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0347]

1 2

4-Bromotiazol-2-il)(2-metoksipirimidin-5-il)metanol (143A)

[0348] Mešanom rastvoru 4-bromotiazola (50.0 mg, 0.305 mmol) u THF (2 mL) pod atmosferom azota dodat je n-butillitijum (2.5 molarni rastvor u heksanu) (0.183 mL, 0.457 mmol) na - 78 °C. Rezultujući svetložuti rastvor je mešan na -78 °C tokom 30 min. Zatim je dodat, 2-metoksipirimidin-5-karbaldehid (37.9 mg, 0.274 mmol) u 0.5 mL THF i reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana vodom (2 mL) i razblažena etil acetatom (5 mL). Organski sloj je odvojen, ispran rastvorom soli, osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i uparen pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (4 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 72% EtOAc u nheksanima) da bi se dobilo jedinjenje 143A iz naslova (30 mg, 32%) kao bledožuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 0.84 min; m/z = 304.0 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50mm) kolona od 1.7 mikrona; Mobilna faza A: 5 mM amonijum acetat u 95% Vode/ 5% ACN; Mobilna faza B: 5 mM amonijum acetat u 5% Vode/ 95% ACN; Vreme gradijenta 1.7 min.

20% B do 90% B tokom 1.7 min. Protok 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.63 (s, 2H), 7.55 (s, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.03 (s, 3H).

4-Bromotiazol-2-il)(2-metoksipirimidin-5-il)metanon (143B)

[0349] Mešanom rastvoru (4-bromotiazol-2-il)(2-metoksipirimidin-5-il)metanola 143A (200 mg, 0.662 mmol) u DCM (6 mL) pod atmosferom azota dodat je Dess-Martin-ov perjodinan

1

(562 mg, 1.324 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na ST tokom 16h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i dobijeni sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 32% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 143B iz naslova (120 mg, 60%) kao bledožuta čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 2.32 min; m/z = 299.9 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.65 (s, 2H), 7.68 (s, 1H), 4.15 (s, 3H).

Etil (E)-3-(4-bromotiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)akrilat (143C)

[0350] Mešanom rastvoru (4-bromotiazol-2-il)(2-metoksipirimidin-5-il)metanona 143B (300 mg, 1.000 mmol) u toluenu (10 mL) pod atmosferom azota je dodat (karbetoksimetilen)trifenilfosforan (418 mg, 1.199 mmol) i reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 16h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je zatim prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 33% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 143C iz naslova (260 mg, 70%, smeša cis i trans izomera) kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 2.47 i 2.68 min; m/z = 372.0 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil (E)-3-(4-((E)-4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)akrilat (143D)

[0351] Mešanom rastvoru etil (E)-3-(4-bromotiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)akrilata 143C (30 mg, 0.081 mmol) u ACN (4 mL) pod atmosferom azota je dodat 2-(but-3-en-1-il)-1,8-naftiridin (14.9 mg, 0.081 mmol), tri-o-tolilfosfin (3.70mg, 0.012 mmol), paladijum(II) acetat (1.81 mg, 0.0081 mmol) i TEA (0.028 mL, 0.20 mmol). Reakciona smeša je degasirana argonom i mešana na 80 °C tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana, isprana sa EtOAc (5 mL) i kombinovani filtrat koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 3% MeOH u CHCl3) da bi se dobilo jedinjenje 143D iz naslova (30 mg, 80%) kao braon ulje. LC-MS retenciono vreme = 2.3 i 2.5 min; m/z = 474.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna

1 4

faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanoat (143E)

[0352] Mešanom rastvoru etil (E)-3-(4-((E)-4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)akrilata 143D (50 mg, 0.106 mmol) u etanolu (3 mL) je dodat platina(IV) oksid (2 mg, 8.81 µmol) pod atmosferom azota. Reakciona smeša je degasirana vodonikom i mešana pod pritiskom vodonika iz balona pri ST tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite, Celite je opran sa EtOH (5 mL) i kombinovani filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio naslovljen sirovi proizvod 143E (150 mg, 57%) kao bledožuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.28 min; m/z = 482.3 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18 (3.0×50mm) kolona od 1.7 mikrona; Mobilna faza A: 5 mM amonijum acetat u 95% Vode/ 5% ACN; Mobilna faza B: 5 mM amonijum acetat u 5% Vode/ 95% ACN; Vreme gradijenta 1.7 min.20% B do 90% B tokom 1.7 min. Protok 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 143: prvi eluirajući enantiomer 3-(2-Metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 144: drugi eluirajući enantiomer 3-(2-Metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0353] Mešanom rastvoru etil 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanoata 143E (80 mg, 0.166 mmol) u THF (3 mL), MeOH (3 mL) i vodi (3 mL) dodat je LiOH.H2O (7.96 mg, 0.332 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na ST tokom 4h. Zatim je dodata, limunska kiselina (63.8 mg, 0.332 mmol) i mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (YMC Trait (150mm × 20mm ID) 5µ kolonom. Mobilna faza A: 10mM NH4OAc u vodi; Mobilna faza B: ACN: MeOH (1:1). Protok: 18.0 mL/min; vreme (min)/%B: 0/20, 02/30, 15/50, 15.5/100) da bi se dobilo čisto jedinjenje kao racemska smeša. Individualni enantiomeri su odvojeni pomoću hiralne preparative SFC (Chiralpak AD-H (250 × 21)mm, kolona od 5 mikrona; % CO2: 50%; % Co rastvarač: 50%(0.2% DEA u IPA); Ukupni protok: 70g/min; Povratni pritisak: 100bara; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 240 nm) da bi se dobio prvi eluirajući izomer Primer 143 (retenciono vreme: 4.2 min, 7 mg, 8.8%) kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono

1

vreme = 1.46 min; m/z = 454.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.61 (s, 2H), 7.42 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.53 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.80-4.83 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.45 (t, J = 5.60 Hz, 2H), 3.17 (dd, J=14.6, 11.0 Hz, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 2.76-2.84 (m, 4H), 2.54-2.62 (m, 2H), 1.92-1.96 (m, 3H), 1.70-1.78 (m, 1H), 1.51-1.59 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 88. Dalje eluirajući istu kolonu dobio se drugi izomer, Primer 144 (retenciono vreme: 6.5 min., 7 mg, 8.8%) kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.46 min; m/z = 454.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.61 (s, 2H), 7.42 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.53 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.80-4.83 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.45 (t, J = 5.60 Hz, 2H), 3.17 (dd, J=14.6, 11.0 Hz, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 2.76-2.84 (m, 4H), 2.54-2.62 (m, 2H), 1.92-1.96 (m, 3H), 1.70-1.78 (m, 1H), 1.51-1.59 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 7.0.

Primer 145 i Primer 146

Primer 145: prvi eluirajući enantiomer 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 146: drugi eluirajući enantiomer 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0354]

1

Etil (E)-3-(4-(4-hidroksipent-1-in-1-il)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)akrilat (145A)

[0355] Mešanom rastvoru etil (E)-3-(4-bromotiazol-2-il)-3-(2-metilpirimidin-5-il)akrilata 143C (100 mg, 0.282 mmol) i pent-4-in-2-ola (23.75 mg, 0.282 mmol) u TEA (6 mL) pod atmosferom azota je dodat bakar(I) jodid (2.69 mg, 0.014 mmol) praćen bis(trifenilfosfin)paladijum (II) dihloridom (9.9 mg, 0.014 mmol). Zatim je, reakciona smeša degasirana argonom tokom 2 min i zatim zagrevana na 80 °C tokom 16h. Nakon hlađenja do ST, reakciona smeša je filtrirana kroz Celite, Celite je ispran sa EtOAc (5 mL) i kombinovani filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo ulje braon boje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 69% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 145A iz naslova (90 mg, 47%) kao bledo-žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.82 i 1.96 min; m/z = 375.0 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75)

1

mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(4-(4-hidroksipentil)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)propanoat (145B)

[0356] Degasiranom rastvoru etil (E)-3-(4-(4-hidroksipent-1-in-1-il)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)akrilata 145A (120 mg, 0.321 mmol) u EtOH (5 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (20 mg, 0.188 mmol). Rezultujuća reakciona smeša je mešana pod pritiskom vodonika iz balona pri ST tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo sirovo jedinjenje 145B iz naslova (120 mg, 76%) kao bledožuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.90 min; m/z = 380.0 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-oksopentil)tiazol-2-il)propanoat (145C)

[0357] Rastvoru etil 3-(4-(4-hidroksipentil)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)propanoata 145B (120 mg, 0.316 mmol) u DCM (15 mL) je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (268 mg, 0.632 mmol) pri 0 °C i rezultujuća smeša je mešana na ST tokom 2h. Reakciona masa je razblažena sa DCM (20 mL), isprana sa 20% natrijum bikarbonatnim rastvorom (20 mL), rastvorom soli (10 mL), osušena preko natrijum sulfata i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije bela sirova čvrsta supstanca. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 41% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 145C iz naslova (100 mg, 76%) kao bledo-žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.44 min; m/z = 378.2 [M+H]<+>LUNA 3.0 C18, (4 × 20) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi. Mobilna faza B: 0.1% TFA u ACN; 20% B do 98% B tokom 2.7 min, zatim zadržavanje 0.3 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)propanoat (145D)

[0358] Mešanom rastvoru etil 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-oksopentil)tiazol-2-il)propanoata 145C (130 mg, 0.344 mmol) i 2-aminonikotinaldehida (50.6 mg, 0.414 mmol) u etanolu (5 mL) pod azotom je dodat pirolidin (0.029 mL, 0.345 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 4h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim

1

pritiskom i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 100% EtOAc da bi se dobilo jedinjenje 145D iz naslova (75 mg, 42%) kao bledožuta tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.11 min; m/z = 464.2 [M+H]<+>LUNA 3.0 C18, (4 × 20) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi. Mobilna faza B: 0.1% TFA u ACN; 20% B do 98% B tokom 2.7 min, zatim zadržavanje 0.3 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanoat (145E)

[0359] Mešanom rastvoru etil 3-(4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)propanoata 145D (180 mg, 0.388 mmol) u etanolu (8 mL) je dodata platina(IV) oksid (2 mg, 8.81 µmol) pod atmosferom azota. Reakciona smeša je degasirana vodonikom i mešana pod pritiskom vodonika iz balona pri ST tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite, Celite je ispran sa EtOH (5 mL) i kombinovani filtrat uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod 145E iz naslova (150 mg, 94%) kao bledo-žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.11 min; m/z = 468.3 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18 (3.0×50mm) kolona od 1.7 mikrona; Mobilna faza A: 5 mM amonijum acetat u 95% Vode/ 5% ACN; Mobilna faza B: 5 mM amonijum acetat u 5% Vode/ 95% ACN; Vreme gradijenta 1.7 min. 20% B do 90% B preko 1.7 min. Protok 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 145: prvi eluirajući enantiomer 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 146: drugi eluirajući enantiomer 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0360] Mešanom rastvoru etil 3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanoata 145E (100 mg, 0.214 mmol) u THF (3 mL), MeOH (3 mL) i vodi (3 mL) je dodat LiOH.H2O (10 mg, 0.428 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na ST tokom 4h. Zatim je dodata, limunska kiselina (82 mg, 0.428 mmol) i mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC (Sunfire OBD (250mm × 30mm ID) 5µ. Mobilna faza A: 10mM NH4OAc u vodi; Mobilna faza B: ACN: MeOH (1:1); Protok: 18 mL/min; vreme (min)/%B: 0/20, 02/20, 15/60, 15.5/100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao racemat. Pojedinačni enantiomeri su odvojeni hiralnom SFC (Chiralpak AD-H (250 × 21)mm, kolona od 5 mikrona; % CO2: 50%; % Co rastvarač: 45%(0.2% NH4OH u MeOH i

1

ACN (1:1); Ukupni protok: 70g/min; Povratni pritisak: 100bara; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 245 nm.) da bi se dobio Primer 145 (retenciono vreme 4.5 min., 24 mg, 23%) kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.24 min; m/z = 440.2 [M+H]<+>(KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.61 (s, 2H), 7.42 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.53 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.80-4.83 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.45 (t, J = 5.60 Hz, 2H), 3.17 (dd, J=14.6, 11.0 Hz, 1H), 2.91 (dd, J=14.6, 11.8 Hz, 1H), 2.76-2.84 (m, 4H), 2.54-2.62 (m, 2H), 2.12-2.14 (m, 1H), 2.02-2.26 (m, 1H), 1.92-1.96 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 4.5. Drugi eluirajući enantiomer, Primer 146 (retenciono vreme 8.5 min, 22 mg, 23%) kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.24 min; m/z = 440.2 [M+H]<+>(KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.61 (s, 2H), 7.42 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.53 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 4.80-4.83 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.45 (t, J = 5.60 Hz, 2H), 3.17 (dd, J=14.6, 11.0 Hz, 1H), 2.91 (dd, J=14.6, 11.8 Hz, 1H), 2.76-2.84 (m, 4H), 2.54-2.62 (m, 2H), 2.12-2.14 (m, 1H), 2.02-2.26 (m, 1H), 1.92-1.96 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 140.

1

11

12

Primer 152 i Primer 153

Primer 152: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanske kiseline

Primer 153: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanske kiseline

[0361]

1

5-(4-Bromotiazol-2-il)pent-4-in-2-ol (152A)

[0362] Rastvoru 2,4-dibromotiazola (500 mg, 2.058 mmol) i pent-4-in-2-ola (208 mg, 2.47 mmol) u TEA (5 mL) je dodat bakar(I) jodid (19.6 mg, 103.0 mmol) praćeno bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihloridom (72.2 mg, 103 mmol) pod atmosferom azota. Reakciona smeša je degasirana argonom tokom 2 min a zatim je mešana na 80 °C tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod kao braon ulje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 52% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 152A iz naslova (350 mg, 69%) kao bledo braon ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.23 min; m/z = 248.0 [M+H]<+>LUNA 3.0 C18, (4 × 20) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi. Mobilna faza B: 0.1% TFA u ACN; 20% B do 98% B tokom 2.7 min, zatim zadržavanje 0.3 min. pri 20% B sa protokom 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.26 (s, 1H), 4.11 (m, 1H), 2.64-2.67 (m, 2H), 1.98 (s, 1H), 1.34 (d, J = 6.00 Hz, 3H).

1 4

(3-Fluoro-4-metoksifenil)(2-(4-hidroksipent-1-in-1-il)tiazol-4-il)metanon (152B)

[0363] Mešanom rastvoru 5-(4-bromotiazol-2-il)pent-4-in-2-ola 152A (300 mg, 1.219 mmol) u THF (8 mL) pod atmosferom azota je dodat n-BuLi (0.731 mL, 2.5 molarni rastvor u heksanu, 1.82 mmol) na -78 °C i rezultujući tamno braon rastvor je mešan na istoj temperaturi tokom 30 min. 3-Fluoro-N,4-dimetoksi-N-metilbenzamid (234 mg, 1.097 mmol) u 3.0 mL THF je dodat i reakcija je nastavljena da se meša na istoj temperaturi tokom 1h. Reakcija je kvenčovana vodom (20 mL) i razblažena etil acetatom (30 mL). Organski sloj je odvojen, ispran rastvorom soli, osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i uparen pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 66% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 152B iz naslova (220 mg, 56%) kao bledo-žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 2.42 min; m/z = 351.0 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.20 (s, 1H), 7.65-7.72 (m, 2H), 7.6 (t, J=8.4 Hz, 1H), 4.14 (q, J = 6.00 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 2.70 (m, 2H), 2.04 (s, 1H), 1.35 (dd, J = 4.00 Hz, 3H).

Etil (E)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(4-hidroksipent-1-in-1-il)tiazol-4-il)akrilat (152C)

[0364] Mešanom rastvoru (3-fluoro-4-metoksifenil)(2-(4-hidroksipent-1-in-1-il)tiazol-4-il)metanona (200 mg, 0.626 mmol) 152B u toluenu (10 mL) pod atmosferom azota je dodat (karbetoksimetilen)trifenilfosforan (262 mg, 0.752 mmol) i reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 16h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 67% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 152C iz naslova (330 mg, 60%) kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.86 min, (m/z = 390.2 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50)mm, kolona od 1.7 mikrona; Mobilna faza A: 5 mM amonijum acetat u 95% Vode/ 5% ACN; Mobilna faza B: 5 mM amonijum acetat u 5% Vode/ 95% ACN; Vreme gradijenta 1.7 min. 20% B do 90% B preko 1.7 min. Protok 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

1

Etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(4-hidroksipentil)tiazol-4-il)propanoat (152D)

[0365] Degasiranom rastvoru etil (E)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(4-hidroksipent-1-in-1-il)tiazol-4-il)akrilata 152C (200 mg, 0.506 mmol) u EtOH (5 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (20 mg, 0.303 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana pod pritiskom vodonika iz balona na ST tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo sirovo jedinjenje 152D iz naslova (180 mg, 96%) kao bledožuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 2.1 min; m/z = 396.2 [M+H]<+>LUNA 3.0 C18, (4 × 20) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi. Mobilna faza B: 0.1% TFA u ACN; 20% B do 98% B tokom 2.7 min, zatim zadržavanje 0.3 min. pri 20% B sa protokom 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(4-oksopentil)tiazol-4-il)propanoat (152E)

[0366] Rastvoru etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(4-hidroksipentil)tiazol-4-il)propanoata 152D (180 mg, 0.458 mmol) u DCM (15 mL) je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (324 mg, 0.916 mmol) pri 0 °C i rezultujuća smeša je mešana na ST tokom 2h. Reakciona masa je razblažena sa DCM (20 mL), isprana 20% natrijum bikarbonatnim rastvorom (20 mL), rastvorom soli (10 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i filtrat uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobio beli sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 91% EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 152E iz naslova (100 mg, 66%) kao bledožuta čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.24 min; m/z = 394.3 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50)mm; kolona od 1.7 mikrona; Mobilna faza A: 5 mM amonijum acetat u 95% Vode/ 5% ACN; Mobilna faza B: 5 mM amonijum acetat u 5% Vode/ 95% ACN; Vreme gradijenta 1.7 min.

20% B do 90% B preko 1.7 min. Protok 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(2-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-propanoat (152F)

[0367] Mešanom rastvoru etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(4-oksopentil)tiazol-4-il)propanoata 152E (100 mg, 0.254 mmol) i 2-aminonikotinaldehida (37.6 mg, 0.303 mmol) u etanolu (5 mL) pod azotom je dodat pirolidin (0.03 mL, 0.504 mmol) i smeša je mešana na 70 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana da se dobije braon sirovo ulje. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 10% MeOH u hloroformu da bi se dobilo jedinjenje 152F iz naslova (75 mg, 42%) kao bledožuta tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.24 min; m/z = 480.4 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18

1

(3.0×50mm) kolona od 1.7 mikrona; Mobilna faza A: 5 mM amonijum acetat u 95% Vode/ 5% ACN; Mobilna faza B: 5 mM amonijum acetat u 5% Vode/ 95% ACN; Vreme gradijenta 1.7 min. 20% B do 90% B preko 1.7 min. Protok 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanoat (152G)

[0368] Mešanom rastvoru etil 3-(2-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoata 152F (75 mg, 0.154 mmol) u etanolu (8 mL) je dodat platina(IV) oksid (2 mg, 6.61 µmol) pod atmosferom azota. Reakciona smeša je degasirana gasom vodonika i mešana pod pritiskom vodonika iz balona na ST tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana, isprana sa EtOH (5 mL), filtrat je uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod 152G iz naslova (40 mg, 78%) kao bledo-žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.31 min; m/z = 484.2 [M+H]<+>LUNA 3.0 C18, (4 × 20) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi. Mobilna faza B: 0.1% TFA u ACN; 20% B do 98% B tokom 2.7 min, zatim zadržavanje 0.3 min. pri 20% B sa protokom 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 152: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanske kiseline

Primer 153: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanske kiseline

[0369] Mešanom rastvoru etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanoata (40.0 mg, 0.083 mmol) 152G u THF (1 mL), MeOH (1 mL) i vodi (1 mL) je dodat LiOH.H2O (3.96 mg, 0.165 mmol) i rezultujuća smeša je mešana na ST tokom 4h. Zatim je dodata, limunska kiselina (32 mg, 0.165 mmol) i mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC (Sunfire OBD (250 × 30) mm; 5 mikrona; Mobilna faza A: 10mM NH4OAc u vodi; Mobilna faza B: ACN: MeOH (1:1); Protok: 17.0 mL/min; vreme (min)/%B: 0/20, 02/20, 15/60, 15.5/100) da bi se dobio čisti racemat. Pojedinačni enantiomeri su odvojeni hiralnom SFC (Chiralpak IG (250 × 4.6) mm, kolona od 5 mikrona; % CO2: 50%; % Co rastvarač: 50% (0.2% NH4OH u MeOH i ACN (1:1); Ukupni protok: 4g/min; Povratni pritisak: 100bar; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 245 nm). Prvi eluirajući enantiomer, Primer 152 (retenciono vreme 8.4 min., 3 mg, 7%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.92 min; m/z = 456.2 [M+H]<+>(KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM

1

HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.21 (dd, J = 1.60, 12.00 Hz, 1H), 7.09-7.11 (m, 3H), 7.02 (dd, J = 7.20, Hz, 1H), 6.27 (bs, 1H), 6.26 (dd, J = 7.20, Hz, 1H), 4.68 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.23 (t, J = 7.20 Hz, 2H), 3.18 (dd, J = 7.60, Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 8.00, 16.00 Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 8.00, 16.00 Hz, 1H), 2.59 - 2.69 (m, 4H), 2.45 (m, 2H), 1.90-1.93 (m, 2H), 1.73-1.76 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 180. Drugi eluirajući enantiomer, Primer 153 (retenciono vreme 11.0 min., 4 mg, 9%) kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.98 min; m/z = 456.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.21 (dd, J = 1.60, 12.00 Hz, 1H), 7.09-7.11 (m, 3H), 7.02 (dd, J = 7.20, Hz, 1H), 6.27 (bs, 1H), 6.26 (dd, J = 7.20, Hz, 1H), 4.68 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.23 (t, J = 7.20 Hz, 2H), 3.18 (dd, J = 7.60, Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 8.00, 16.00 Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 8.00, 16.00 Hz, 1H), 2.59 - 2.69 (m, 4H), 2.45 (m, 2H), 1.90-1.93 (m, 2H), 1.73-1.76 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 54.

Primer 154 , Primer 155, Primer 156, i Primer 157

Primer 154: prvi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 155: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 156: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 157: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0370]

1

Fenil 2-alil-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat (154A)

[0371] Ohlađenom rastvoru 1,8-naftiridina (1 g, 7.68 mmol) u THF (35 mL) je dodat fenil hloroformat (1.060 mL, 8.45 mmol) na 0°C i reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi tokom 30 min. Alil indijum bromid (sveže pripremljen dodavanjem bromoprop-1-ena (1.992 mL, 23.05 mmol) kap po kap suspenziji indijuma (1.764 g, 15.37 mmol) u DMF (10 mL) na ST i mešanju tokom 20 min) je dodat na 0°C i mešan na istoj temperaturi tokom 10 min. Reakciona smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran vodom (2 × 50 mL), rastvorom soli (50 mL), i osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i zatim koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 20% etil acetata u n-heksanu) da bi se dobilo jedinjenje 154A iz naslova (1.25 g, 56%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 2.85 min; m/z = 293.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm; kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.29 (dd, J=4.77, 1.76 Hz, 1H),7.67 (dd, J=7.53, 2.01 Hz, 1H), 7.38 - 7.46 (m, 2H), 7.23 - 7.29 (m, 1H), 7.16 -7.22 (m, 3H), 6.69 (d, J=9.54 Hz, 1H), 6.28 (dd, J=9.54, 6.02 Hz, 1H), 5.67 - 5.80 (m, 1H), 5.09 (dd, J=6.00, 13.20 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.99 (d, J=5.02 Hz, 1H), 2.28 - 2.37 (m, 1H), 2.10 - 2.19 (m, 1H).

1

Fenil (E)-2-(3-(2-(3-etoksi-1-(6-metoksipiridin-3-il)-3-oksopropil)tiazol-4-il)alil)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat (154B)

[0372] Degasiranom rastvoru fenil 2-alil-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat 154A (331 mg, 1.131 mmol) u ACN (10 mL) je dodat etil 3-(4-bromotiazol-2-il)-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoat (350 mg, 0.943 mmol), TEA (0.263 mL, 1.886 mmol), tri-o-tolilfosfin (28.7 mg, 0.094 mmol) i paladijum(II) acetat (21.17 mg, 0.094 mmol. Reakciona smeša je zatim zagrevana do 80°C i mešana je tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je filtrirana kroz Celite i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 40% etil acetat u n-heksan) da bi se dobilo jedinjenje 154B iz naslova (250mg, 45%) kao bledo smeđa gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.54 min; m/z = 583.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.

Fenil 2-(3-(2-(3-etoksi-1-(6-metoksipiridin-3-il)-3-oksopropil)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat (154C)

[0373] Degasiranom rastvoru fenil (E)-2-(3-(2-(3-etoksi-1-(6-metoksipiridin-3-il)-3-oksopropil)tiazol-4-il)alil)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 154B (250 mg, 0.429 mmol) u etanolu (10 mL) je dodat paladijum na ugljeniku (50 mg, 0.047 mmol) i reakciona smeša je mešana pod atmosferom vodonika iz balona na ST tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (220 mg, 87%) kao bledo smeđa gumena tečnost. Sirovi proizvod 154C je odnet na sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LC-MS retenciono vreme = 1.90 min; m/z = 587.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 154: prvi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 155: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

2

Primer 156: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 157: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0374] Rastvoru fenil 2-(3-(2-(3-etoksi-1-(6-metoksipiridin-3-il)-3-oksopropil)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 154C (220 mg, 0.375 mmol) u THF (4 mL) i t-BuOH (4 mL) je dodat rastvor natrijum hidroksida (75 mg, 1.875 mmol)) u vodi (2 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na 70°C tokom 40h. Nakon završetka reakcije, limunska kiselina (216 mg, 1.125 mmol) je dodata i reakciona smeša je mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana i preuzeta na prečišćavanje kao takva. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (SUNFIRE C18 (150 × 19) mm; 5 mikrona; Mobilna faza A: 10mM amonijum acetat (pH = 4.5); Mobilna faza B: ACN; protok: 15 mL/min; Vreme (min)/%B: 0/20, 25 /60) je dalo racemat jedinjenjea (70 mg) iz naslova. Pojedinačni dijastereoizomeri 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline su odvojeni pomoću hiralne SFC (Luxcellulose-2 (250 × 30) mm; 5 mikrona; 50% CO2i 50% od 0.2% NH4OH u MeOH+ ACN (1:1) kao zajedničkom rastvaraču; Ukupni protok: 80 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 245 nM). Prvi eluirajući dijastereoizomer, Primer 154 (Retenciono vreme 15.2 min., 7 mg, 4%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.68 min; m/z = 439.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.15 (d, J=2.01 Hz, 1H) 7.71 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1H), 7.67 (d, J=6.02 Hz, 1H), 7.53 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.80 (d, J=8.53 Hz, 1H), 6.64 (t, J=6.53 Hz, 1H), 4.80-4.90 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.54 - 3.63 (m, 1H), 3.13 - 3.25 (m, 1H), 2.88 (dd, J=13.30, 4.77 Hz, 1H), 2.76 - 2.85 (m, 4H), 1.88 - 2.05 (m, 3H), 1.45 - 1.70 (m, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 210. Drugi eluirajući dijastereoizomer, Primer 155 (Retenciono vreme 17.2 min., 6 mg, 3.6%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.69 min; m/z = 439.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz,

2 1

CD3OD) δ ppm 8.12 (d, J=2.01 Hz, 1H), 7.68 (d, J=6.53 Hz, 1H), 7.64 (dd, J=8.53, 2.01 Hz, 1H), 7.52 (d, J=7.53 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.78 (d, J=9.04 Hz, 1H), 6.67 (t, J=6.53 Hz, 1H), 4.82 (dd, J=10.29, 5.27 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.58 (m, 1H), 3.29-3.33 (m, 1H), 2.70 - 2.95 (m, 5H), 1.93 - 2.05 (m, 2H), 1.77 - 1.88 (m, 1H), 1.56 - 1.74 (m, 2H), 1.43 - 1.54 (m, 1H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 8.1. Treći eluirajući dijastereoizomer, Primer 156 (Retenciono vreme 19.3. min., 6 mg, 3.6%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca, LC-MS retenciono vreme = 1.37 min; m/z = 439.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.12 (d, J=2.01 Hz, 1H), 7.68 (d, J=6.02 Hz, 1H), 7.65 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1H), 7.50 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.78 (d, J=8.53 Hz, 1H), 6.65 (t, J=6.53 Hz, 1 H), 4.83 (dd, J=9.79, 5.27 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.53 - 3.62 (m, 1H), 3.29-3.33 (m, 1H), 2.68 - 2.95 (m, 5H), 1.91 - 2.04 (m, 2H), 1.76 - 1.88 (m, 1H), 1.56 - 1.73 (m, 2H), 1.41 - 1.55 (m, 1H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 260. Četvrti eluirajući dijastereoizomer, Primer 157 (Retenciono vreme 23.1 min., 6 mg, 3.6%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.37 min; m/z = 439.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.15 (d, J=2.01 Hz, 1H), 7.71 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1H), 7.66 (d, J=6.53 Hz, 1H), 7.54 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.80 (d, J=9.04 Hz, 1H), 6.67 (t, J=6.53 Hz, 1H), 4.85 (dd, J=13.20, 5.20 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H) 3.55 - 3.63 (m, 1H), 3.14 - 3.25 (m, 1H), 2.88 (dd, J=13.80, 5.27 Hz, 1H), 2.77 - 2.85 (m, 4H), 1.89 - 2.05 (m, 3H), 1.46 - 1.70 (m, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 27.

Primer 158, Primer 159, Primer 160, i Primer 161

Primer 158: prvi eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 159: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 160: treći eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

2 2

Primer 161: četvrti eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0375]

Etil 3-(4-bromotiazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoat (158A)

[0376] Etil (E)-3-(4-bromotiazol-2-il)akrilat 13A (1 g, 3.82 mmol) u 1,4-dioksanu (35 mL) i vodi (5 mL) je pročišćen argonom tokom 5 min. Hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) dimer (0.094 g, 0.191 mmol), (3-fluoro-4-metoksifenil)borna kiselina (0.973 g, 5.72 mmol) i TEA (1.064 mL, 7.63 mmol) su dodati i dobijena reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 16h. Reakciona smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli (50 mL), osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 25% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 158A iz naslova (500 mg, 34%) kao bledo braon ulje. LC-MS retenciono vreme = 3.25 min; m/z = 388.0 [M+2H]<+>(KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza

2

B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) □ ppm 7.06-7.10 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 6.85-7.03 (m, 1H), 4.74 (t, J = 10.00 Hz, 1H),4.08 (dq, J= 9.60, 6.40 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.40 (dd, J = 9.60, 20.80 Hz, H), 2.97 (dd, J = 10.80, 22.00 Hz, H), 1.18 (t, J = 9.60 Hz, 3H).

Fenil (E)-2-(3-(2-(3-etoksi-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)tiazol-4-il)alil)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat 158B

[0377] Degasiranom rastvoru fenil 2-alil-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata (316 mg, 1.082 mmol 158A u acetonitrilu (10 mL) je dodat etil 3-(4-bromotiazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoat (350 mg, 0.901 mmol, TEA (0.251 mL, 1.803 mmol), tri-o-tolilfosfin (27.4 mg, 0.090 mmol) i paladijum(II) acetat (20.24 mg, 0.090 mmol). Reakciona smeša je zatim zagrevana do 80°C i mešana tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je filtrirana kroz Celite i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 40% etil acetat u n-heksanu) da bi se dobilo jedinjenje 158B iz naslova (300 mg, 55%) kao bledo smeđa gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.73 min; m/z = 600.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.

Fenil 2-(3-(2-(3-etoksi-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat (158C)

[0378] Degasiranom rastvoru fenil (E)-2-(3-(2-(3-etoksi-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)tiazol-4-il)alil)-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 158B (300 mg, 0.500 mmol) u etanolu (10 mL) je dodat paladijum na ugljeniku (60 mg, 0.056 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST pod atmosferom vodonika iz balona tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 158C iz naslova (250 mg, 80%) bledo smeđa gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.66 min; m/z = 604.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

2 4

Primer 158: prvi eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 159: drugi eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 160: treći eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 161: četvrti eluirajući dijastereoizomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0379] Mešanom rastvoru fenil 2-(3-(2-(3-etoksi-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 158C (250 mg, 0.414 mmol) u THF (4 mL) i t-BuOH (4 mL), je dodat rastvor natrijum hidroksida (83 mg, 2.071 mmol)) u vodi (2 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na 70°C tokom 40h. Nakon završetka reakcije, limunska kiselina (239 mg, 1.242 mmol) je dodata i reakciona smeša je mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (SUNFIRE C18 (150 × 19) mm, 5 mikrona; Mobilna faza A: 10mM amonijum acetat (pH= 4.5); Mobilna faza B: Acetonitril; protok: 15 mL/min; Vreme (min)/%B: 0/10, 10/40, 17/40) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao dijastereoizomerna smeša (70 mg). Pojedinačni dijastereoizomeri jedinjenja iz naslova su odvojeni hiralnom SFC kolonom: Luxcellulose-2 (250 × 30) mm; 5 mikrona; 50% CO2i 50% od 0.2% NH4OH u Metanolu ACN (1:1) kao zajedničkom rastvaraču; Ukupni protok: 80 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 245 nM. Prvi eluirajući dijastereoizomer Primer 158 (Retenciono vreme 15.2 min.,10 mg, 5%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 2.09 min; m/z = 456.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm..<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.68 (d, J=5.02 Hz, 1H), 7.47 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.03 - 7.14 (m, 4H), 6.64 (t, J= 6.40 Hz, 1H), 4.78 (dd, J=9.54, 5.52 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.51 - 3.60 (m, 1H), 3.26 (dd, J=15.81, 10.29 Hz, 1H), 2.69 - 2.95 (m, 5H), 1.92 - 2.03 (m, 2H), 1.76 - 1.88 (m, 1H), 1.56 - 1.71 (m, 2H) 1.43 - 1.55 (m, 1H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 7.0. Drugi eluirajući dijastereoizomer Primer 159 (Retenciono vreme 17.2 min.,10 mg, 5%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme

2

= 2.06 min; m/z = 456.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.66 (br. s., 1H), 7.45 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.04 - 7.15 (m, 3H), 7.03 (s, 1H), 6.63 (br. s., 1H), 4.77 - 4.86 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.51 - 3.59 (m, 1H), 3.07 - 3.22 (m, 1H), 2.83 - 2.92 (m, 1H), 2.73 - 2.83 (m, 4H), 1.85 - 2.03 (m, 3H), 1.50 - 1.67 (m, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 370. Treći eluirajući dijastereoizomer, Primer 160 (Retenciono vreme 18.2. min.,7 mg, 4%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 2.07 min; m/z = 456.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.68 (br. s., 1H), 7.52 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.03 - 7.10 (m, 3H), 7.02 (s, 1H), 6.68 (br. s., 1H), 4.78 (dd, J=10.54, 5.02 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.51 -3.59 (m, 1H), 3.23 - 3.31 (m, 1H), 2.68 - 2.96 (m, 5H), 1.93 - 2.03 (m, 2H), 1.76 - 1.88 (m, 1H), 1.56 - 1.73 (m, 2H), 1.43 - 1.54 (m, 1H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 195. Četvrti eluirajući dijastereoizomer, Primer 161 (Retenciono vreme 22.3 min., 7 mg, 4%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 2.05 min; m/z = 456.2 [M+H]<+>Kolona- KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 50% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.66 (d, J=6.02 Hz, 1H), 7.52 (d, J=7.53 Hz, 1H), 7.04 - 7.15 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 6.67 (t, J=6.40 Hz, 1H), 4.81 (dd, J=11.04, 5.02 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.55 - 3.63 (m, 1H), 3.10 - 3.19 (m, 1H), 2.76 - 2.90 (m, 5H), 1.89 - 2.04 (m, 3H), 1.46 - 1.69 (m, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 12.

Primer 162 i Primer 163

Primer 162: prvi eluirajući enantiomer 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 163: drugi eluirajući enantiomer 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

2

Terc-butil (E)-7-(3-(2-(3-etoksi-3-oksoprop-1-en-1-il)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat (162A)

[0381] Rastvoru etil (E)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)akrilata 137H (300 mg, 0.839 mmol) u THF (5 mL) je dodat Boc2O (1.5 mL, 6.46 mmol) i reakciona smeša je mešana na 70°C tokom 12h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 90% etil acetata u Pet etar) da bi se dobilo jedinjenje 162A iz naslova (290 mg, 71%) kao bledo smeđa gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.2 i 3.4 min (smeša cis i trans); m/z = 458.2 [M+2H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Terc-butil 7-(3-(2-(1-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-etoksi-3-oksopropil)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilat (162B)

[0382] Rastvoru terc-butil (E)-7-(3-(2-(3-etoksi-3-oksoprop-1-en-1-il)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 162A (200 mg, 0.437 mmol) u ACN je dodat 3,5-

2

dimetil-1H-pirazol (42.0 mg, 0.437 mmol) i cezijum karbonat (285 mg, 0.874 mmol). Reakciona smeša je zatim zagrevana na 80°C i mešana je tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena na ST i filtrirana kroz Celite. Filtrat je koncentrovan i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (SYMMETRY C8 (300 × 19) mm; 7 mikrona; Mobilna faza A: 10mM amonijum acetat; Mobilna faza B: Trifluoroetanol; protok: 18 mL/min; Vreme (min)/%B: 0/50, 27 /100) da bi se dobilo jedinjenje 162B iz naslova (30 mg, 12%) neophodnog jedinjenja kao bela gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.72 min; m/z = 554.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanoat (162C)

[0383] Rastvoru terc-butil 7-(3-(2-(1-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-etoksi-3-oksopropil)tiazol-4-il)propil)-3,4-dihidro-1,8-naftiridin-1(2H)-karboksilata 162B (30 mg, 0.054 mmol) u DCM (10 mL) je dodat TFA (0.05 mL, 0.649 mmol) i mešano je na ST tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje 162C iz naslova (24 mg, 99%) kao svetlo-braon tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.87 min; m/z = 454.3 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 162: prvi eluirajući enantiomer 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

Primer 163: drugi eluirajući enantiomer 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline

[0384] Rastvoru etil 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanoata 162C (24 mg, 0.055 mmol) u THF (1 mL) i MeOH (1 mL) je dodat rastvor litijum hidroksid monohidrata (6.94 mg, 0.165 mmol) u vodi (0.5 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na ST tokom 16h. Nakon završetka reakcije, limunska kiselina (21.18 mg, 0.110 mmol) je dodata i reakciona smeša je mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne

2

faze (SUNFIRE C18 (150 × 19) mm; 5 mikrona; Mobilna faza A: 10mM amonijum acetat; Mobilna faza B: ACN; protok: 15 mL/min; Vreme (min)/%B: 0/20, 20 /60) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10 mg) kao racemska smeša. Pojedinačni enantiomeri 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline su odvojeni hiralnom kolonom (Lux Cellulose C2 (250 × 21.2)mm, 5 mikrona; Mobilna faza: 0.1% DEA u ACN : Trifluoroetanol (70:30); protok: 25 mL/ min). Prvi eluirajući enantiomer, Primer 162 (Retenciono vreme 5.01 min., 1.8 mg, 8%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.22 min; m/z = 426.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.49 (d, J=7.20 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.57 (d, J=7.20 Hz, 1H), 6.06 (dd, J=9.60, 5.20 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 3.49 (m, 2H), 3.42 (dd, J=14.40, 9.60 Hz, 1H), 3.04 (dd, J=14.20, 5.60 Hz, 1H), 2.55 - 2.85 (m, 6H), 2.33 (s, 3H), 2.19 ( s, 3H), 1.95 - 2.15 (m, 2H), 1.86 - 1.95 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 71. Drugi eluirajući enantiomer Primer 163 (Retenciono vreme. 10.61 min., 2.2 mg, 9%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.22 min; m/z = 426.2 [M+H]<+>Kolona: KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% Vode/ 98% ACN; 50% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.49 (d, J=7.20 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.57 (d, J=7.20 Hz, 1H), 6.06 (dd, J=9.60, 5.20 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 3.49 (m, 2H), 3.42 (dd, J=14.40, 9.60 Hz, 1H), 3.04 (dd, J=14.20, 5.60 Hz, 1H), 2.55 - 2.85 (m, 6H), 2.33 (s, 3H), 2.19 ( s, 3H), 1.95 - 2.15 (m, 2H), 1.86 - 1.95 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 220.

Primer 164 i Primer 165 (nije prema predmetnom pronalasku)

Primer 164: prvi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-metil-5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

Primer 165: drugi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-metil-5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

[0385]

2

Etil (E)-3-(5-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)akrilat (164A)

[0386] Mešanom rastvoru 5-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-karbaldehida (2.5 g, 13.23 mmol) u toluenu (50 mL) je dodat (karbetoksimetilen)trifenilfosforan (6.91 g, 19.84 mmol) pod atmosferom azota. Rezultujući bistar rastvor je zagrevan do 110°C i mešan je tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 30% etil acetat u nheksanima) da bi se dobilo jedinjenje 164A iz naslova (2 g, 60%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.56 (d, J=15.56 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.60 (d, J=15.56 Hz, 1H), 4.21 (q, J=7.03 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.27 (t, J=7.03 Hz, 3H).

Etil 3-(5-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoat (164B)

[0387] Mešanom rastvoru etil (E)-3-(5-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)akrilata 164A (1 g, 3.86 mmol) u dioksanu (30 mL) i vodi (10 mL) je dodata (6-metoksipiridin-3-il)borna kiselina (0.885 g, 5.79 mmol) i reakciona smeša je pročišćena argon gasom tokom 10 min. TEA (1.076 mL, 7.72 mmol) i hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(I) dimer (0.095 g, 0.193 mmol) su dodati i reakciona smeša je zagrevana do 80°C i mešana je tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena do ST, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 25% etil acetat u nheksanima) da bi se dobilo jedinjenje 164B iz naslova (350 mg, 25%) kao bledo smeđa gumena

21

tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.23 min; m/z = 370.1 [M+2H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.05 (d, J=2.51 Hz, 1H), 7.44 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.69 (d, J=8.53 Hz, 1H), 4.50 (dd, J=8.53, 6.53 Hz, 1H), 4.10 (q, J=7.03 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.36 - 3.46 (m, 1H), 2.85 (dd, J=16.56, 6.53 Hz, 1H), 1.20 (t, J=7.03 Hz, 3H).

Etil (E)-3-(5-(4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoat (164C)

[0388] Mešanom rastvoru etil 3-(5-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoata 164B (300 mg, 0.815 mmol) u acetonitrilu (15 mL) je dodat 2-(but-3-en-1-il)-1,8-naftiridin (225 mg, 1.22 mmol) i reakciona smeša je pročišćena azotom tokom 10 min. TEA (247 mg, 2.44 mmol), tri-o-tolilfosfan (24.80 mg, 0.081 mmol) i paladijum acetat (18.3 mg, 0.081 mmol) su dodati i reakciona smeša je zagrevana do 90 °C i mešana tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena do ST i filtrirana kroz Celite. Filtrat je razblažena vodom (5 mL) i ekstrahovan sa DCM (2 × 10 mL). Kombinovani organski sloj je osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (4 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje 3% metanolom u hloroformu da bi se dobilo jedinjenje 164C iz naslova (200 mg, 52%) kao svetlo-braon tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.15 min; m/z = 472.4 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-metil-5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanoat (164D)

[0389] Degasiranom rastvoru etil (E)-3-(5-(4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoata 164C (200 mg, 0.424 mmol) u etanolu (20 mL) je dodat platina(IV) oksid (20 mg, 0.088 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST pod atmosferom vodonika iz balona tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak, i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 164D iz naslova (200 mg, 99%) kao svetlobraon tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.17 min; m/z = 478.7 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50) mm;1.7 mikrona; Mobilna faza A: 10mM NH4COOCH3:ACN (95:5) Mobilna faza B: 10mM NH4COOCH3:ACN (5:95) Postupak:%B: 0 min-20%:1.1min -90%:1.7min-90%.

Primer 164: prvi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-metil-5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

Primer 165: drugi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-metil-5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

[0390] Mešanom rastvoru etil etil 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-metil-5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2il)butil)-1H-imidazol-2il)propanoata 164D (200 mg, 0.419 mmol) u THF (4 mL) i MeOH (4 mL) je dodat rastvor LiOH.H2O (12.22 mg, 0.291 mmol) u vodi (2 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na ST tokom 16h. Nakon završetka reakcije, limunska kiselina (241 mg, 1.256 mmol) je dodata i reakciona smeša je mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (Inersil ODS (250mm × 19mm ID,5u); Mobilna faza A: 10mM amonijum acetatpH-4.5; Mobilna faza B: Acetonitril; protok: 17 mL/min; Vreme(min)/%B: 0/10, 7 /22, 12.5/22) da se dobije jedinjenje iz naslova (50 mg) kao racemska smeša. Pojedinačni enantiomeri su zatim razdvojeni hiralnom SFC (Chiralpak AD-H (250 X 21) mm, 5u; 50% CO2i 50% od 0.2%NH4OH u metanolu kao zajedničkom rastvaraču); Ukupni protok: 70 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 220 nM. Prvi eluirajući enantiomer Primer 164 (Retenciono vreme 3.40 min., 17 mg, 9%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.13 min; m/z = 450.4 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.04 (d, J=2.01 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1H), 7.28 (d, J=7.03 Hz, 1H), 6.67 - 6.78 (m, 2H), 6.39 (d, J=7.53 Hz, 1H), 4.63 (dd, J=9.54, 5.52 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.52 (s, 3H), 3.39 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.19 (dd, J=16.0, 10.4 Hz, 1H), 2.84 (dd, J= 16.0, 5.6 Hz,1H), 2.56 - 2.76 (m, 4H), 2.42 - 2.56 (m, 1H), 2.21 -2.39 (m, 1H), 1.81 - 1.96 (m, 2H), 1.42 - 1.79 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 460. Drugi eluirajući enantiomer Primer 165 (Retenciono vreme 6.80 min., 18 mg, 9%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme =1.13; m/z = 450.4 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.04 (d, J=2.01 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1H), 7.28 (d, J=7.03 Hz, 1H), 6.67 - 6.78 (m, 2H), 6.39 (d, J=7.53 Hz, 1H), 4.63 (dd, J=9.54, 5.52 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.52 (s, 3H), 3.39 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.19 (dd, J=16.0, 10.4 Hz, 1H), 2.84 (dd, J= 16.0, 5.6 Hz,1H), 2.56 - 2.76 (m, 4H), 2.42 - 2.56 (m, 1H), 2.21 - 2.39 (m, 1H), 1.81 - 1.96 (m, 2H), 1.42 - 1.79 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 27.

21

Primer 168 i Primer 169 (nije prema predmetnom pronalasku)

Primer 168: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(1-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

Primer 169: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(1-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

[0391]

Etil (E)-3-(4-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)akrilat (168A)

[0392] Mešanom rastvoru 4-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-karbaldehida (2.4 g, 12.70 mmol) u toluenu (25 mL) je dodat karbetoksimetilen)trifenilfosforan (6.64 g, 19.05 mmol) pod atmosferom azota i dobijeni bistar rastvor je zagrevan do 110°C i mešan tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je ohlađena na ST i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 25% etil acetat u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 168A iz naslova (2.3 g, 58%) kao bezbojna tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.85 min; m/z = 261.0 [M+2H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm,

21

kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.50 (s, 1H), 7.44 (d, J=15.6 Hz, 1H), 6.51 (d, J=15.6 Hz, 1H), 4.18 (q, J= 7.20 Hz, 2H) 3.76 (s, 3H), 1.25 (t, J= 7.20 Hz, 3H).

Etil 3-(4-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-propanoat (168B)

[0393] Mešanom rastvoru etil (E)-3-(4-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)akrilata 168A (0.700 g, 2.70 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) i vodi (2.5 mL) je dodata (3-fluoro-4-metoksifenil)borna kiselina (0.689 g, 4.05 mmol) i reakciona smeša je pročišćen argonom tokom 5 min. TEA (0.753 mL, 5.40 mmol) i hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(i) dimer (0.067 g, 0.135 mmol) su dodati i rastvor je zagrevan do 85°C i mešan tokom 14h. Reakciona smeša je ohlađena, filtrirana kroz uložak Celite, Celite uložak je ispran dihlorometanom (4 × 15 mL) i kombinovani filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je zatim prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 70% etil acetat u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 168B iz naslova (0.5 g, 23%) kao gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.40 min; m/z = 385.0 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil (E)-3-(4-(4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoat (168C)

[0394] Mešanom rastvoru etil 3-(4-bromo-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoata168B (0.5 g, 0.623 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je dodat 2-(but-3-en-1-il)-1,8-naftiridin (0.344 g, 1.869 mmol) i reakciona smeša je pročišćena argonom tokom 5 min. TEA (0.261 mL, 1.869 mmol), tri-o-tolilfosfin (0.019 g, 0.062 mmol) i paladijum(II) acetat (0.014 g, 0.062 mmol) su dodati i rastvor je zagrevan do 90 °C i mešan tokom 14h. Reakciona smeša je ohlađena, filtrirana kroz uložak Celite i uložak je ispran dihlorometanom (4 × 10 mL). Kombinovani filtrat je koncentrovan i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 90% etil acetat u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 168C iz naslova (0.14 g, 35%) kao gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.42 min; m/z = 489.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM

21

HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(1-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanoat (168D)

[0395] Degasiranom rastvoru etil (E)-3-(4-(4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)-1-metil-1H-imidazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoata 168C (0.140 g, 0.287 mmol) u etanolu (3 mL) je dodat platina(IV) oksid (14 mg, 0.062 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST pod atmosferom vodonika iz balona tokom 14h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 168D iz naslova (110 mg, 73%) kao gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.69 min; m/z = 495.2 [M+H]<+>, KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 168: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(1-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

Primer 169: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(1-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanske kiseline

[0396] Mešanom rastvoru etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(1-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-imidazol-2-il)propanoata 168D (0.110 g, 0.222 mmol) u THF (1 mL) i metanolu (1 mL) je dodat rastvor LiOH.H2O (0.037 g, 0.890 mmol) u vodi (1 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na ST tokom 14h. Nakon završetka reakcije, dodata je limunska kiselina (128 mg, 0.667 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze da bi se dobio racemat jedinjenja (90 mg) iz naslova. Pojedinačni enantiomeri su odvojeni hiralnom preparativnom HPLC. Kolona: Lux-cellulose C4 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona, Mobilna faza: ACN:MeOH (1:1), Protok: 19 mL/min, Vreme(min)/%B: 0/100, 20/100. Prvi eluirajući enantiomer Primer 168 (Retenciono vreme 3.86 min., 4 mg, 3%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme 1.60 min; m/z = 467.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18 (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa

21

protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.38 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.06 - 6.99 (m, 3H), 6.79 (s, 1H), 6.45 (d, J=7.53 Hz, 1H), 4.63 (dd, J=10.79, 4.77 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.42 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.18 (dd, J=14.81, 11.29 Hz, 1H), 2.83 (dd, J=14.81, 11.29 Hz, 1H), 2.73 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.68 - 2.54 (m, 4H), 1.93 - 1.87 (m, 3H), 1.61 - 1.53 (m, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 91. Drugi eluirajući enantiomer Primer 169 (Retenciono vreme 4.73 min., 4 mg, 3%) je izolovan kao čvrsta bela supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.60 min; m/z = 467.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18 (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.38 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.06 - 6.99 (m, 3H), 6.79 (s, 1H), 6.45 (d, J=7.53 Hz, 1H), 4.63 (dd, J=10.79, 4.77 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.42 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.18 (dd, J=14.81, 11.29 Hz, 1H), 2.83 (dd, J=14.81, 11.29 Hz, 1H), 2.73 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.68 - 2.54 (m, 4H), 1.93 - 1.87 (m, 3H), 1.61 - 1.53 (m, 3H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 67.

Primer 170 i Primer 171 (nije prema predmetnom pronalasku)

Primer 170: prvi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)propanske kiseline

Primer 171: drugi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)propanske kiseline

21

2-(pent-4-in-1-il)-1,8-naftiridin (170A)

[0398] Rastvoru hept-6-in-2-ona (1 g, 9.08 mmol) u MeOH (30 mL) dodat je pirolidin (0.751 mL, 9.08 mmol) i rastvor je mešan na ST tokom 10 min. pod atmosferom azota. 2-aminonikotinaldehid (1.164 g, 9.53 mmol) je dodat i dobijena reakciona smeša je mešana na ST tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 60% etil acetat u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 170A iz naslova (1 g, 56%) kao bleda gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.55 min; m/z = 197.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.10 (dd, J=4.25, 2.00 Hz, 1H), 8.17 (dd, J=8.01, 2.00 Hz, 1H), 8.12 (d, J=8.51 Hz, 1H), 7.45 (dd, J=8.01, 2.00 Hz, 1H), 7.42 (d, J=8.2 Hz, 1H), 3.16 - 3.23 (t, J=7.6 Hz, 2H), 2.30 - 2.37 (m, 2H), 2.13 - 2.23 (m, 2H), 2.00 (t, J=2.63 Hz, 1H). ,

21

2-(3-(1H-1,2,3-triazol-4-il)propil)-1,8-naftiridin (170B)

[0399] Mešanom rastvoru 2-(pent-4-in-1-il)-1,8-naftiridina 170A (600 mg, 3.06 mmol) u tbutanolu (10 mL) i vodi (10 mL) je dodat TMSN3(0.812 mL, 6.11 mmol), natrijum askorbat (1211 mg, 6.11 mmol) i bakar(II) sulfat pentahidrat (229 mg, 0.917 mmol) pri ST. Reakciona smeša je zatim zagrevana do 80°C i mešana tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena ST, razblažena metanolom (50 mL), filtrirana kroz Celite uložak i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (24 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 8-10% metanol u hloroformu) da bi se dobilo jedinjenje 170B iz naslova (0.47 g, 60%) kao braon gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 0..80 min; m/z = 240.1 [M+H]<+>Kolona-Kinetex XB-C18 (75X3mm-2.6µm), Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi; Mobilna faza B: ACN, Protok: 1 mL/min, Gradijent B: 0 min - 20 %, 4 min -100%,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.04 (dd, J=4.52, 2.01 Hz, 1H), 8.34 - 8.47 (m, 1H), 8.37 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.53 - 7.65 (m, 3H), 3.03 (t, J=7.78 Hz, 2H), 2.65 -2.75 (m, 2H), 2.09 - 2.23 (m, 2H).

Etil 3-(4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)-3-(6-metoksi-piridin-3-il)propanoat (170C)

[0400] U zatvorenoj epruveti, mešanom rastvoru 2-(3-(1H-1,2,3-triazol-4-il)propil)-1,8-naftiridina 170B (270 mg, 1.128 mmol) u propionitrilu (5 mL) dodati su, etil (Z)-3-(6-metoksipiridin-3-il)akrilat (351 mg, 1.693 mmol) i 1,1,3,3-tetrametilgvanidin (0.425 mL, 3.39 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 100°C i mešana tokom 4d. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 3% metanolom u hloroformu) da bi se dobilo jedinjenje 170C iz naslova (150 mg, 30%) kao bledo smeđa gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.23 min; m/z = 447.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.03 (dd, J=4.40, 1.96 Hz, 1H), 8.42 (dd, J=8.07, 1.96 Hz, 1H), 8.37 (d, J=8.31 Hz, 1H), 8.18 (d, J=2.69 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=8.56, 2.69 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.58 (dd, J=8.07, 4.16 Hz, 1H), 7.53 (d, J=8.07 Hz, 1H), 6.80 (d, J=8.80 Hz, 1H), 6.07 (dd, J=10.03, 5.38 Hz, 1H), 3.96 - 4.04 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.58 (dd, J=16.63, 10.03 Hz, 1H), 2.96 - 3.02 (m, 2H), 2.67 - 2.74 (m, 2H), 2.12 (kvin, J=7.76 Hz, 2H), 1.06 (t, J=7.09 Hz, 3H).

22

Etil 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)propanoat (170D)

[0401] Degasiranom rastvoru etil 3-(4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)-3-(6-metoksipiridin-3-il)propanoata 170C (150 mg, 0.336 mmol) u etanolu (15 mL) je dodat platina(IV) oksid (15 mg, 0.066 mmol). Reakciona smeša je mešana na ST pod atmosferom vodonika iz balona tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 170D iz naslova (120 mg, 79%) kao svetlo-braon tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.60 min; m/z = 451.4 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Primer 170: prvi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)propanske kiseline

Primer 171: drugi eluirajući enantiomer 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)propanske kiseline

[0402] Mešanom rastvoru etil 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-2H-1,2,3-triazol-2-il)propanoata 170D (200 mg, 0.444 mmol) u THF (5 mL), vodi (2 mL) i MeOH (5 mL), dodat je LiOH.H2O (12.22 mg, 0.291 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na ST tokom 4h. Nakon završetka reakcije, limunska kiselina (171 mg, 0.888 mmol) je dodata i reakciona smeša je mešana na ST tokom 10 min. Reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen preparativom HPLC preparativne reverzne faze (Inersil ODS (250 × 19) mm; 5 mikrona; Mobilna faza A: 10mM amonijum acetat (pH= 4.5); Mobilna faza B: Acetonitril; protok: 17 mL/min; Vreme (min)/%B: 0/10, 7 /22, 12.5/22 ) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (80 mg) kao racemska smeša. Pojedinačni enantiomeri su odvojeni hiralnom SFC (Luxcellulose-4 (250 × 21.5) mm; 5 mikrona; 50% CO2i 50% od 0.2% NH4OH u Metanolu i ACN (1:1) kao zajedničkom rastvaraču); Ukupni protok: 70 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 225 nM. Prvi eluirajući enantiomer, Primer 170 (Retenciono vreme 7.0 min., 31 mg, 15%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.19 min; m/z = 423.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.16 (d, J=2.51 Hz, 1H), 7.75 (dd, J=8.78, 2.76 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.28 (d, J=8.03 Hz, 1H), 6.78 (d, J=8.53 Hz, 1H), 6.45 (d, J=7.03 Hz, 1H), 6.11 (dd, J=9.79, 5.77 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.44 (t, J=5.6 Hz, 2H), 3.35 (dd, J=14.92, 10.2 Hz, 1H), 3.02 (dd, J=14.92, 4.16 Hz, 1H), 2.76 (t, J=6.27 Hz, 2H), 2.66 - 2.72 (m, 2H), 2.55 - 2.62 (m, 2H), 1.96 - 2.10 (m, 2H), 1.87 - 1.96 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 620. Drugi eluirajući enantiomer, Primer 171 (Retenciono vreme.8.50 min., 27 mg, 13%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca, LC-MS retenciono vreme = 1.19 min; m/z = 423.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.16 (d, J=2.51 Hz, 1H), 7.75 (dd, J=8.78, 2.76 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.28 (d, J=8.03 Hz, 1H), 6.78 (d, J=8.53 Hz, 1H), 6.45 (d, J=7.03 Hz, 1H), 6.11 (dd, J=9.79, 5.77 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.44 (t, J=5.6 Hz, 2H), 3.35 (dd, J=14.92, 10.2 Hz, 1H), 3.02 (dd, J=14.92, 4.16 Hz, 1H), 2.76 (t, J=6.27 Hz, 2H), 2.66 - 2.72 (m, 2H), 2.55 - 2.62 (m, 2H), 1.96 - 2.10 (m, 2H), 1.87 - 1.96 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 27.

22

22

Primer 178 i Primer 179 (nije prema predmetnom pronalasku)

Primer 178: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)oksazol-2-il)propanske kiseline

Primer 179: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)oksazol-2-il)propanske kiseline

[0403]

22

Etil (E)-2-(3-(terc-butoksi)-3-oksoprop-1-en-1-il)oksazol-4-karboksilat (178A)

[0404] Mešanom rastvoru etil 2-formiloksazol-4-karboksilata (4 g, 23.65 mmol) u toluenu (100 mL) je dodat terc-butil 2-(trifenil-15-fosfaniliden)acetat (13.35 g, 35.5 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do 110°C i mešana tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje 45% etil acetat u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 178A iz naslova (5g, 79%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 2.77 min; m/z = 268.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.23 (s, 1H), 7.37 (d, J=16.01 Hz, 1H), 6.77 (d, J=16.01 Hz, 1H), 4.41 (q, J=7.00 Hz, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.40 (t, J=7.13 Hz, 3H).

Etil 2-(3-(terc-butoksi)-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)oksazol-4-karboksilat (178B)

[0405] Mešanom rastvoru etil (E)-2-(3-(terc-butoksi)-3-oksoprop-1-en-1-il)oksazol-4-karboksilata 178A (1 g, 3.74 mmol) u dioksanu (30 mL) i vodi (10 mL) je dodata (3-fluoro-4-metoksifenil)borna kiselina (0.954 g, 5.61 mmol). Reakciona smeša je pročišćena argonom tokom 10 min i zatim su dodati TEA (1.043 mL, 7.48 mmol) i hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(i) dimer (0.092 g, 0.187 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 80°C i mešana tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena do ST, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 35% etil acetatom u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 178B iz naslova (700 mg, 47%) kao prljavo bela gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.13 min; m/z = 338.1 [M-56+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(hidroksimetil)oksazol-2-il)propanoat (178C)

[0406] Mešanom rastvoru etil 2-(3-(terc-butoksi)-1-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-oksopropil)oksazol-4-karboksilata karboksilata 178B (700 mg, 1.779 mmol) u THF (20 mL) i

22

metanolu (0.5 mL) dodat je NaBH4(202 mg, 5.34 mmol) pod atmosferom azota na ST. Reakciona smeša je zagrevana do 50 °C i mešana tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je kvenčovana ledeno hladnom vodom (15 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 30 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 45% etil acetat u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 178C iz naslova (300 mg, 48%) kao prljavo bela gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.46 min; m/z = 352.3 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.50 (d, J=1.00 Hz, 1H), 6.98 - 7.09 (m, 2H), 6.85 - 6.94 (m, 1H), 4.58 (d, J=6.02 Hz, 2H), 4.52 (dd J=16.2, 8.03 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.19 (dd, J=16.06, 8.53 Hz, 1H), 2.85 (dd, J=16.06, 7.53 Hz, 1H), 2.01 (t, J=6.02 Hz, 1H), 1.36 (s, 9H).

Terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-formiloksazol-2-il)propanoat (178D)

[0407] Ohlađenom rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(hidroksimetil)oksazol-2-il)propanoata 178C (250 mg, 0.711 mmol) u DCM (5 mL) je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (604 mg, 1.423 mmol) na 0°C pod atmosferom azota. Reakciona smeša je polako zagrejana do ST i mešana na istoj temperaturi tokom 16 h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je razblažena etil acetatom (10 mL), isprana 10% natrijum bikarbonatnim rastvorom (2 × 5 mL), vodom (5 mL), rastvorom soli (5 mL), osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana a zatim koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (4 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 18% etil acetat u nheksanima) da bi se dobilo jedinjenje 178D iz naslova (120 mg, 48%) kao prljavo bela gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.76 min; m/z = 350.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.83 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.23 (dd, J=12.55, 2.01 Hz, 1H), 7.03 - 7.16 (m, 2H), 4.60 (dd, J=9.29, 6.78 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.18 (dd, J=16.31, 9.29 Hz, 1H), 2.90 (dd, J=16.06, 6.53 Hz, 1H), 1.29 (s, 9H).

22

Terc-butil (E)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)prop-1-en-1-il)oksazol-2-il)propanoat (178E)

[0408] Ohlađenom rastvoru bromo(2-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)etil)trifenil-15-fosfana (785 mg, 1.717 mmol) u THF (25 mL) je dodat butillitijum (0.859 mL, 2.147 mmol, 2.5M rastvor u heksanu) na 0°C pod atmosferom azota kap po kap i mešano je na istoj temperaturi tokom 30 min. terc-Butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-formiloksazol-2-il)propanoat 178D (300 mg, 0.859 mmol) u THF (25 mL) je dodavan kap po kap i reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi tokom 2h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je kvenčovana zasićen amonijum hlorid rastvorom (5 mL), ekstrahovana etil acetatom (2 × 10 mL). Kombinovani organski sloj je ispran vodom (10 mL), rastvorom soli rastvor (10 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (4 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 18% etil acetat u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 178E iz naslova (320 mg, 83%) kao prljavo bela gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.46 min; m/z = 448.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

Terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)oksazol-2-il)propanoat (178F)

[0409] Degasiranom rastvoru terc-butil (E)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2il)prop-1-en-1-il)oksazol-2-il)propanoata 178E (320 mg, 0.715 mmol) u etanolu (10 mL) je dodat paladijum hidroksid na ugljeniku (30 mg, 0.043 mmol) i reakciona smeša je mešana na ST pod atmosferom vodonika iz balona tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 178F iz naslova (300 mg, 93%) kao svetlo-braon tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.48 min; m/z = 450.6 [M+H]<+>AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50mm, 1.7µm, Mobilna faza A: 10mM NH4COOCH3:ACN (95:5) Mobilna faza B: 10mM NH4COOCH3:ACN (5:95), Postupak: %B:0 min- 20%:1.1min -90%:1.7min-90%.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.55 (s, 1H), 7.01 -7.09 (m, 3H), 4.51 (dd, J=9.54, 7.03 Hz, 1H), 3.86 - 3.96 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 3.15 (dd, J=16.06, 9.04 Hz, 1H), 2.88 (dd, J=16.06, 7.03 Hz, 1H), 2.44 - 2.57 (m, 2H), 1.59 - 1.78 (m, 4H), 1.36 (s, 9H), 1.29 (s, 3H).

22

Terc-buti 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(4-oksopentil)oksazol-2-il)propanoat (178G)

[0410] Ohlađenom rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(2-metil-1,3-dioksolan-2-il)propil)oksazol-2-il)propanoata 178F (300 mg, 0.667 mmol) u THF (2 mL) je dodata HCl (0.890 mL, 1.335 mmol, 1.5 M) pri 0°C i rastvor je mešan na istoj temperaturi tokom 6h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je razblažena vodom (25 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran 10% natrijum bikarbonatnim rastvorom (300 mL), vodom (30 mL), rastvorom soli (30 mL), i osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 178G iz naslova (250 mg, 92%) kao prljavo bela gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 3.00 min; m/z = 406.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.26 (s, 1H), 6.98 - 7.05 (m, 2H), 6.86 - 6.93 (m, 1H), 4.49 (t, J=8.0 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.16 (dd, J=16.01, 8.51 Hz, 1H), 2.83 (dd, J=16.01, 7.50 Hz, 1H), 2.41 - 2.53 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 1.87 - 1.93 (m, 2H), 1.36 (s, 9H).

Terc-butil 3-(4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)oksazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoat (178H)

[0411] Rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(4-oksopentil)oksazol-2-il)propanoata 178G (250 mg, 0.617 mmol) u etanolu (15 mL) je dodat pirolidin (0.102 mL, 1.233 mmol) i mešano je na ST pod atmosferom azota tokom 10 min. 2-Aminonikotinaldehid (90 mg, 0.740 mmol) je dodat i dobijena reakciona smeša je zagrevana do 80°C i mešana tokom 16h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrat i sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 65% etil acetata u nheksanima) da bi se dobilo jedinjenje 178H iz naslova (180 mg, 59%) kao bledo smeđa gumena tečnost. LC-MS retenciono vreme = 2.79 min; m/z = 492.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.04 (dd, J=4.52, 2.01 Hz, 1H), 8.42 (dd, J= 7.6, 2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.57 (dd, J=8.0. 4.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.16 (dd, J=12.2, 2.0 Hz, 1H), 7.10 (m, 1H), 7.05 (m, 1H), 4.46

2

(dd, J=9.54, 6.53 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.10 (dd, J=14.8, 11.6 Hz, 1H), 3.03 (t, J=7.6 Hz, 2H), 2.88 (dd, J=16.06, 7.03 Hz, 1H), 2.02 - 2.15 (m, 2H), 1.28 (s, 9H).

Terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-oksazol-2-il)propanoat (178I)

[0412] Degasiranom rastvoru terc-butil 3-(4-(3-(1,8-naftiridin-2-il)propil)oksazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoata 178H (80 mg, 0.163 mmol) u THF (10 mL), je pročišćen azotom tokom 5 min. Platina(IV) oksid (8 mg, 0.035 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana pod atmosferom vodonika iz balona na ST tokom 2h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je filtrirana kroz Celite uložak i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 178I iz naslova (70 mg, 87%) kao svetlo-braon tečnost. LC-MS retenciono vreme = 1.72 min; m/z = 496.2 [M+H]<+>Kolona- Luna 3.0 C18(2) 100A° LC kolona (20×4.0mm) Mercury MS TM, Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi, Mobilna faza B: 0.1% TFA u ACN, Protok: 1 mL/min, Gradijent B: 0 min - 20 %, 2.7 min -90%.

Primer 178: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)oksazol-2-il)propanske kiseline

Primer 179: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)oksazol-2-il)propanske kiseline

[0413] Ohlađenom rastvoru terc-butil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)oksazol-2-il)propanoata (130 mg, 0.262 mmol) u DCM (5 mL) dodat je TFA (0.061 mL, 0.787 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je polako zagrejana do ST i mešana tokom 18h. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (SUNFIRE C18 (150 × 19) mm; 5 mikrona; Mobilna faza A: 10mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: Acetonitril; protok: 17 mL/min; Vreme(min)/%B: 0/20, 12 /40) da se dobije jedinjenje iz naslova (60 mg) kao racemska smeša. Pojedinačni enantiomeri su odvojeni hiralnom SFC (Luxcellulose-4 (250 X 21.5) mm, 5 mikrona; 50% CO2i 50% od 0.2% NH4OH u metanolu i ACN (1:1) kao zajedničkom rastvaraču; Ukupni protok: 70 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 30°C; Detekcija: UV pri 230 nM). Prvi eluirajući enantiomer Primer 178 (Retenciono vreme 4.7 min., 20 mg, 16%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.42 min; m/z = 440.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje

2 1

0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.58 (s, 1H), 7.46 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.01 - 7.12 (m, 3H), 6.54 (d, J=7.53 Hz, 1H), 4.54 (dd, J=11.55, 5.02 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.47 (t, J=5.6 Hz, 2H), 3.10 (dd, J=14.8, 11.6 Hz, 1H), 2.71 - 2.82 (m, 3H), 2.51 - 2.63 (m, 4H), 1.89 - 2.09 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 1.4. Drugi eluirajući enantiomer Primer 179 (Retenciono vreme.6.8 min., 18 mg, 15%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.42 min; m/z = 440.2 [M+H]<+>KINETIX XB-C18, (3 X 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM HCO2NH4u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM HCO2NH4u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.5 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.58 (s, 1H), 7.46 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.01 - 7.12 (m, 3H), 6.54 (d, J=7.53 Hz, 1H), 4.54 (dd, J=11.55, 5.02 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.47 (t, J=5.6 Hz, 2H), 3.10 (dd, J=14.8, 11.6 Hz, 1H), 2.71 - 2.82 (m, 3H), 2.51 - 2.63 (m, 4H), 1.89 - 2.09 (m, 4H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 66.

Primer 180 i Primer 181 (nije prema predmetnom pronalasku)

Primer 180: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)oksazol-2-il)propanske kiseline

Primer 181: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)oksazol-2-il)propanske kiseline

[0414]

2 2

[0415] Mešanom rastvoru etil 5-metiloksazol-2-karboksilata (2.1 g, 13.54 mmol) u MeOH (30 mL) je dodat NaBH4(1.280 g, 33.8 mmol) u delovima na 0 °C. Rezultujuća smeša je polako zagrejana do ST i mešana tokom 16 h. Reakciona smeša je zatim koncentrovana i ostatak je razblažen vodom (20 mL) i ekstrahovan sa DCM (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran vodom, rastvorom soli, osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 180A iz naslova (1.3 g, 85 %) kao svetlo-žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 0.395 min; m/z = 114.2 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 6.75 - 6.63 (s, 1H), 5.53 (br. s., 1H), 4.40 (s, 2H), 2.24 (s, 3H).

5-metiloksazol-2-karbaldehid (180B)

[0416] Mešanom rastvoru (5-metiloksazol-2-il)metanola 180A (1.3 g, 11.49 mmol) u DCM (30 mL) je dodat Dess-Martin-ov perjodinan (7.31 g, 17.24 mmol) na 0 °C u delovima. Rezultujuća reakciona smeša je zagrejana do ST i mešana tokom 16h. Reakciona masa je razblažena dihlorometanom (50 mL), isprana 20% natrijum bikarbonatnim rastvorom (50 mL),

2

rastvorom soli (50 mL), osušena preko (Na2SO4), filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (40 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 20% EtOAc u n-heksanu) da bi se dobilo jedinjenje 180B iz naslova (0.8 g, 62.7 %) kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.68 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 2.46 (s, 3H).

Etil 3-(5-metiloksazol-2-il)akrilat (180C)

[0417] Rastvoru 5-metiloksazol-2-karbaldehida 180B (100 mg, 0.900 mmol) u toluenu (3 mL) je dodat etil 2-(trifenil-15-fosfaniliden)acetat (470 mg, 1.350 mmol) na ST. Rezultujuća smeša je zagrevana do 110 °C i mešana tokom 18h. Reakciona smeša je ohlađena do ST i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (4 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 15 % EtOAc u n-heksanu) da bi se dobilo jedinjenje 180C iz naslova (0.1 g, 61 %) kao žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 1.805 min; m/z = 182.2 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.40 (d, J=15.89 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.66 (d, J=16.14 Hz, 1H), 4.26 (q, J=7.09 Hz, 2H).2.36 (s, 3H), 1.34 (t, J=7.09 Hz, 3H).

Etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metiloksazol-2-il)propanoat (180D)

[0418] Mešanom rastvoru etil 3-(5-metiloksazol-2-il)akrilata 180C (0.7 g, 3.86 mmol) u dioksanu (16 mL) i vodi (4 mL) je dodata (3-fluoro-4-metoksifenil)borna kiselina (0.985 g, 5.79 mmol) na ST. Reakciona smeša je pročišćena argonom tokom 15 min., i dodat je trietilamin (1.077 mL, 7.73 mmol), hloro(1,5-ciklooktadien)rodijum(l) dimer (0.095 g, 0.193 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80°C i mešana tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena ST, filtrirana kroz Celite i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 20% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 180D iz naslova (250 mg, 21%) kao žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 2.556 min; m/z = 308.2 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.93 - 7.04 (m, 2H), 6.89 - 6.91 (m, 1H), 6.65 (m, 1H), 4.52

2 4

(t, J=7.78 Hz, 1H), 4.12 (q, J=7.36 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.26 (dd, J=16.31, 8.28 Hz, 1H), 2.92 (dd, J=16.31, 8.28 Hz, 1H), 2.25 (s, 3H), 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H).

Etil 3-(4-bromo-5-metiloksazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoat (180E)

[0419] Mešanom rastvoru etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metiloksazol-2-il)propanoata 180D (900 mg, 2.93 mmol) u DMF (5 mL) je dodat NBS (1042 mg, 5.86 mmol) u delovima pri ST i dobijena reakciona smeša je mešana tokom 24h. Reakciona smeša je razblažena ledeno hladnom vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 25 mL). Kombinovani organski sloj je ispran vodom, rastvorom soli, osušen (Na2SO4), filtriran i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 10% EtOAc u n-heksanima) da bi se dobilo jedinjenje 180E iz naslova (275 mg, 23%) kao žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 2.978 min; m/z = 386.0 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 254 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.98 - 7.03 (m, 2H), 6.89 (t, J=8.4 Hz, 1H), 4.48 (t, J=7.75 Hz, 1H), 4.08 (qd, J=7.13, 2.13 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.26 (dd, J=16.51, 8.51 Hz, 1H), 2.87 (dd, J=16.51, 7.25 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.19 (t, J=7.13 Hz, 3H).

(E)-Etil 3-(4-(4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)-5-metiloksazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksi-fenil)propanoat (180F)

[0420] Mešanom rastvoru etil 3-(4-bromo-5-metiloksazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoata 180E (250 mg, 0.647 mmol) u acetonitrilu (5 mL) je dodat 2-(but-3-en-1-il)-1,8-naftiridin (179 mg, 0.971 mmol) i rezultujuća reakciona smeša je pročišćena azotom tokom 15 min. Zatim dodat trietilamin (0.271 mL, 1.942 mmol), tri-o-tolilfosfin (19.70 mg, 0.065 mmol) i paladijum acetat (2.91 mg, 0.013 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do 85 °C i mešana tokom 16h. Reakciona smeša je ohlađena ST, filtrirana kroz Celite bed i filtrat je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen kombifleš hromatografijom (12 g Redisep<®>SiO2kolona, eluiranje sa 80 % EtOAc u pet etru) da bi se dobilo jedinjenje 180F iz naslova (170 mg, 54%) kao žuto ulje (smeša izomera). LC-MS retenciono vreme = 3.22 i 3.313 min; m/z = 490.2 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.

2

Etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-oksazol-2-il)propanoat (180G)

[0421] Rastvoru etil (E)-3-(4-(4-(1,8-naftiridin-2-il)but-1-en-1-il)-5-metiloksazol-2-il)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)propanoata 180F (170 mg, 0.347 mmol) u etanolu (10 mL) je pročišćen azotom tokom 5 min i dodat je platina(IV) oksid (20 mg, 0.088 mmol) pri ST. Reakciona smeša je mešana na ST pod atmosferom vodonika iz balona tokom 16h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 180G iz naslova (150 mg, 87 %) kao žuto ulje. LC-MS retenciono vreme = 3.385 min; m/z = 496.2 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok:1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% Vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% Vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.95 - 7.10 (m, 3H), 6.83 (t, J=7.6 Hz, 1H), 6.31 (d, J=7.6 Hz, 1H), 4.47 (t, J=7.63 Hz, 1H), 4.00 - 4.14 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.38 - 3.40 (m, 2H), 3.22 (dd, J=16.26, 7.75 Hz, 1H), 2.87 (dd, J=16.39, 7.88 Hz, 1H), 2.68 (t, J=6.25 Hz, 2H), 2.55 (t, J=7.38 Hz, 2H), 2.39 (t, J=6.88 Hz, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.83 -1.94 (m, 2H), 1.58 - 1.71 (m, 4H), 1.16 (t, J=7.13 Hz, 3H).

Primer 180: prvi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)oksazol-2-il)propanske kiseline

Primer 181: drugi eluirajući enantiomer 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)oksazol-2-il)propanske kiseline

[0422] Mešanom rastvoru etil 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-metil-4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)oksazol-2-il)propanoata 180G (150 mg, 0.303 mmol) u THF (2 mL) i MeOH (2 mL) dodat je rastvor LiOH.H2O (50.8 mg, 1.211 mmol) u vodi (1 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na ST tokom 18h. Nakon završetka reakcije, reakcionoj smeši je dodata limunska kiselina (174 mg, 0.908 mmol) i mešana na ST tokom 10 min. Zatim je reakciona smeša koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (Inertsil DS(250 ×19)mm; 5 mikrona, Mobilna faza A:10mM CH3COONH4(pH = 4.5); Mobilna faza B: Acetonitril, Protok: 17 mL/min, Gradijent: Vreme(Min) / %B 0/20, 20/60 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova ( 85 mg) kao racemsko. Pojedinačni enantiomeri su razdvojeni hiralnom SFC (Chiralpak IC (250 × 21) mm; 5 mikrona; 60% CO2i 40% (0.2% NH4OH) u MeOH+ACN (1:1) kao zajedničkom rastvaraču; Ukupni protok: 70 g/min; Povratni pritisak: 100 bar; Temperatura: 30 °C; Detekcija: UV pri 230 nM. Primer 180 (Retenciono vreme 4.7

2

min., 25 mg, 17%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.98 min; m/z = 468.2 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100 % B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.41 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.02 - 7.10 (m, 3H), 6.45 (d, J=7.03 Hz, 1H), 4.48 (dd, J=11.80, 4.77 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.43 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.07 - 3.14 (dd, J=15.2 11.6 Hz, 1H), 2.73 - 2.78 (m, 3H), 2.57 (m, 2H), 2.48 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.90 - 1.93 (m, 2H), 1.69 - 1.81 (m, 2H), 1.50 - 1.54 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 250. Primer 181 (Retenciono vreme 5.6 min., 29 mg, 19%) je izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS retenciono vreme = 1.983 min; m/z = 468.2 [M+H]<+>KINETEX XB-C18, (3 × 75) mm, kolona od 2.6 mikrona; Protok: 1 mL/min; Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u 98% vode/ 2% ACN; Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u 2% vode/ 98% ACN; 20% B do 100% B tokom 4.6 min, zatim zadržavanje 0.4 min. pri 20% B sa protokom 1-1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 300 nm.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.41 (d, J=7.03 Hz, 1H), 7.02 - 7.10 (m, 3H), 6.45 (d, J=7.03 Hz, 1H), 4.48 (dd, J=11.80, 4.77 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.43 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.07 - 3.14 (dd, J=15.211.6 Hz, 1H), 2.73 - 2.78 (m, 3H), 2.57 (m, 2H), 2.48 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.90 - 1.93 (m, 2H), 1.69 - 1.81 (m, 2H), 1.50 - 1.54 (m, 2H). Humani αVβ6 IC50 (nM) = 1060.

BIOLOŠKA EVALUACIJA

[0423] Svi testovi vezivanja su koristili tehnologiju HTRF (homogena vremenski razložena fluorescencija) kompanije Cisbio International, stoga su svi testovi opisani kao testovi vezivanja HTRF. Rezultati testa za Primere su navedeni gore zajedno sa podacima o karakterizaciji. Testovi vezivanja za HTRF su uspostavljeni za sledeće integrine: humani αVβ6, humani αVβ1, humani αVβ3, humani αVβ5, i humani αVβ8. Svi testovi su koristili sledeći pufer za ispitivanje: 20 mM Tris, pH 7.4, 1 mM MgCl2, 1 mM MnCl2, 0.01% Tween 20, i 0.01% BSA. Alternativno, za procenu vezivanja za receptor korišćen je test zasnovan na SPA.

[0424] Sledeće što je opisano su komponente i reprezentativna procedura za test vezivanja humanog αVβ6 HTRF: Rekombinantni humani αVβ6 integrin (R & D sistemi, 3817-AV) je biotinilovan. Biotinilovani humani αVβ6 integrin je dodat u posudu za ispitivanje u konačnoj koncentraciji od 1.25 nM. FITC-konjugovani fibronektin (Cytoskeleton, FNR02) je zatim dodat u konačnoj koncentraciji od 5 nM. Smeša je centrifugirana na 600 opm tokom tri minuta

2

korišćenjem Thermo Fisher Heraeus Multifuge X3 centrifuge i zatim inkubirana na ST jedan sat. Zatim je dodat Streptavidin Terbium (Cisbio international 610STLB) u konačnoj koncentraciji od 0.625 nM. Dobijena smeša je centrifugirana na 600 opm tokom tri minuta korišćenjem Thermo Fisher Heraeus Multifuge X3 centrifuge a zatim inkubirana na sobnoj temperaturi preko noći u mraku pre očitavanja HTRF signala.

[0425] Analiza zasnovana na SPA je sprovedena u skladu sa protokolom i procedurama sličnim onima opisanim u sledećoj referenci sa odgovarajućim modifikacijama agenasa i liganada koje lako razume stručnjak u ovoj oblasti: Pachter JA, Zhang R, Mayer-Ezell R., "Scintillation proximity assay to measure binding of soluble fibronectin to antibody-captured αVβ1 integrin" Anal Biochem.1995 Sep 1;230(1):101-7.

2

Claims (8)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule:

   pri čemu: X je C1-6alkilen supstituisan sa 0, 1, ili 2 R<7b>; R<1>je segment mimetika arginina odabran iz grupe koja se sastoji od

   2

   R<2>je vodonik ili C1-6alkil; R<3>je odabran iz grupe koja se sastoji iz vodonika,

   ili R<2>i R<3>uzeti zajedno sa atomom za koji su vezani formiraju karbociklil ili heterociklil, pri čemu je svaki od karbociklila i heterociklila nezavisno supstituisan sa 0, 1, 2, ili 3 R<12>; R<4>je vodonik; R<5>je H ili R<5a>; a R<5a>je metil, etil, izopropil, n-butil, izopentil, ili strukturni segment odabran od

   R<7b>je svaki nezavisno halo, cijano, hidroksil, amino, C1-6alkil, haloalkil, hidroksialkil, aminoalkil, alkoksi, haloalkoksi, amido, karbamat, ili sulfonamid; R<12>, je nezavisno halo, cijano, nitro, OH, amino, C1-6alkil, alkoksi, aminoalkil, haloalkil, haloalkoksi, haloaminoalkil, karbociklil sa 3 do 6 članova, ili heterociklil sa 3 do 6 članova, 6- do 10-člani aril, ili 5- do 10-člani heteroaril; pri čemu su aril i heteroaril, sami po sebi ili kao deo druge grupe, svaki nezavisno supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halo, cijano, hidroksil, amino, C1-6alkil, haloalkil, hidroksialkil, aminoalkil, alkoksi, haloalkoksi, amido, karbamat, i sulfonamida; i karbociklil i heterociklil, sami po sebi ili ili kao deo druge grupe, su svaki nezavisno supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halo, cijano, hidroksil, amino, okso, C1-6alkil, haloalkil, hidroksialkil, aminoalkil, alkoksi, haloalkoksi, amido, karbamat, ili sulfonamid; ili farmaceutski prihvatljiva so istog.
2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 odabrano iz grupe koja se sastoji od (±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)buti1)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propi1)-1H-pirazol-4-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(1-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-l,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-pirazol-4-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-Hidroksipiridm-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-Metoksipiridm-3-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; 24 (R)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-Metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(l-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanske kiseline; (±)-3-(3,5-Dihlorofenil)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-4-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-Etoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(Hinoksalin-2-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(Hinolin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(2,3-Dihidrobenzofuran-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(3-(3,5-Dimetil-1H-pirazol-1-il)fenil)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(3-Morfolinofenil)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(Pirido[2,3-b]pirazin-7-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-Metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(2,3-Dihidro-[1,4]dioksino[2,3-b]piridin-7-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; 3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(1-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-pirazol-4-il)propanske kiseline; (S)-3-(1-Metil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; Etil (S)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoata; (±)-3-(3-Fluoro-4-metoksifenil)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-(Azetidin-1-il)pirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; 24 (S)-3-(2,3-Dihidro-[1,4]dioksino[2,3-b]piridin-7-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(2,3-Dihidro-[1,4]dioksino[2,3-b]piridin-7-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propi1)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-(Azetidin-1-il)pirimidin-5-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-Metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-Metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-Etoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-Metoksipiridazin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-Metoksipiridazin-3-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(5-Metoksipirazin-2-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(5-Metoksipirazin-2-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-Metoksipiridin-3-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-Metoksipiridm-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridm-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±3)-(5-metoksipiridin-3-il)-3-(5-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(5-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; 24 (R)-3-(5-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-[5-(pirolidin-1-il)piridin-3-il]-3-{3-[3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil]-1H-pirazol-1-il}propanske kiseline; (S)-3-[5-(morfol-4-il)piridm-3-il]-3-{3-[3-(5,6,7,8-teirahidro-1,8-naftiridm-2-il)propil]-1H-pirazol-1-il}propanske kiseline; (R)-3-[5-(morfolin-4-il)piridin-3-il]-3-{3-[3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil]-1H-pirazol-1-il}propanske kiseline; (S)-3-(5-metilpiridin-3-il)-3-{3-[3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil]-1H-pirazol-1-il}propanske kiseline; (R)-3-(5-metilpiridin-3-il)-3-{3-[3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil]-1H-pirazol-1-il}propanske kiseline; (±)-3-[5-(dimetilkarbamoil)piridin-3-il]-3-{3-[3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil]-1H-pirazol-1-il}propanske kiseline; (±)-4-{[4-(2-karboksi-1-{3-[3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil]-1H-pirazol-1-il}etil)piridin-2-il]amino}butanske kiseline; 3-(5-(2-metoksietoksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-etoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metoksipirimidin-5il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; 3-(pirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-hidroksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; 24 (S)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; 3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(5-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridm-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-((R)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-((S)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-((R)-1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(3-(3-(6,7,8,9-tetrahidro-5H-pirido[2,3-b]azepin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; 24 (S)-3-(1-benzil-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-(Benziloksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanoat; (S)-3-(1-(ciklopropilmetil)-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propi1)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-(ciklopropilmetoksi)piridin-3-il)-3-(3-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-1-il)propanske kiseline; 3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(1-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)-1H-pirazol-3-il)propanske kiseline; (S)-3-(3-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(3-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(hinoksalin-6-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(hinoksalin-6-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-(dimetilamino)piridin-3-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-(dimetilamino)piridin-3-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3,4-dimetoksifenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(3,4-dimetoksifenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3-morfolinofenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; 24 (R)-3-(3-morfolinofenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-etoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-etoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(4-(dimetilkarbamoil)-3-fluorofenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(4-(dimetilkarbamoil)-3-fluorofenil)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(6-(dimetilamino)piridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(6-(dimetilamino)piridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(4-(dimetilkarbamoil)-3-fluorofenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(4-(dimetilkarbamoil)-3-fluorofenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(4-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; 2 (R)-3-(3-(dimetilkarbamoil)fenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3,4-dimetoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(3,4-dimetoksifenil)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-Metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-Metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(4-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)butil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metoksipirimidin-5il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-metoksipirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (±)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(2-metilpirimidin-5-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(5-metilpiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R)-3-(5-metilpiridin-3-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanske kiseline; (R)-3-(3-fluoro-4-metoksifenil)-3-(2-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-4-il)propanske kiseline; 2 1 (S,S)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S,R)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R,S)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R,R)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S,S)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S,R)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R,S)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (R,R)-3-(6-metoksipiridin-3-il)-3-(4-(3-(1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; (S)-3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; i (R)-3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-3-(4-(3-(5,6,7,8-tetrahidro-1,8-naftiridin-2-il)propil)tiazol-2-il)propanske kiseline; ili farmaceutski prihvatljiva so istog.
3. 3. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili farmaceutski prihvatljivu so istog, i nosač.
4. 4. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 2, ili farmaceutski prihvatljiva so istog, za primenu u terapiji.
5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili farmaceutski prihvatljiva so istog za primenu u lečenju bolesti, poremećaja ili stanja odabranih od patološke fibroze, odbacivanja transplantata, kancera, osteoporoze ili inflamatornih poremećaja kod pacijenta kome je to potrebno. 2 2
6. 6. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so istog za primenu prema patentnom zahtevu 5, pri čemu patološka fibroza je fibroza pluća, jetre, bubrežna, srčana, dernalna, okularna ili fibroza pankreasa.
7. 7. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so istog za primenu prema patentnom zahtevu 5, pri čemu bolest, poremećaj, ili stanje je idiopatska plućna fibroza (IPF), nealkoholni steatohepatitis (NASH), hronična bolest bubrega, dijabetesna bolest bubrega i sistemska skleroza.
8. 8. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so istog za primenu prema patentnom zahtevu 5, pri čemu kancer je kancer bešike, krvi, kostiju, mozga, dojke, centralnog nervnog sistema, grlića materice, debelog creva, endometrijuma, jednjaka, žučne kese, genitalija, genitourinarnog trakta, glave, bubrega, larinksa, jetre, pluća, mišićnog tkiva, vrata, oralne ili nazalne sluzokože, jajnika, pankreasa, prostate, kože, slezine, tankog creva, debelog creva, želuca, testisa ili štitne žlezde. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 2