RS65998B1

RS65998B1 - Derivati n-(piridinil) acetamida kao inhibitori p300/cbp hat i metode za njihovu upotrebu

Info

Publication number: RS65998B1
Application number: RS20241084A
Authority: RS
Inventors: Jonathan E Wilson
Original assignee: Constellation Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2019-02-27
Filing date: 2020-02-26
Publication date: 2024-10-31
Also published as: TW202045492A; HRP20241237T1; CN113727756A; US20220135538A1; JP2022522349A; DK3930838T3; WO2020176558A1; PT3930838T; PL3930838T3; JP7638880B2; EP3930838A1; ES2989353T3; SI3930838T1; TWI850342B; CN113727756B; FI3930838T3; HUE068415T2; SMT202400386T1; EP3930838B1; AU2020227742A1

Description

Opis

POZIVANJE NA POVEZANE PRIJAVE PATENTA

[0001] Ova prijava zahteva prioritet u vezi sa Privremenom prijavom U.S. No. 62/879,852, podnetom 29. jula 2019. godine i Privremenom prijavom U.S. No.62/811,143, podnetom 27. februara 2019. godine.

OSNOVNE INFORMACIJE

[0002] Hromatin je složena kombinacija DNK i proteina koji čine hromozome. Nalazi se unutar jedara eukariotskih ćelija i podeljen je između heterohromatinskih (kondenzovanih) i euhromatinskih (proširenih) oblika. Glavne komponente hromatina su DNK i proteini. Histoni su glavne proteinske komponente hromatina, koji deluju kao kalemi oko kojih se namotava DNK. Funkcije hromatina su da upakuje DNK u manju zapreminu kako bi se uklopila u ćeliju, da ojača DNK kako bi se omogućila mitoza i mejoza i da služi kao mehanizam za kontrolu ekspresije i replikacije DNK. Struktura hromatina je kontrolisana nizom post-translacionih modifikacija do histonskih proteina, posebno histona H3 i H4, a najčešće unutar "histonskih repova" koji se protežu izvan strukture jedra nukleosoma. Histonski repovi imaju tendenciju da budu slobodni za interakciju protein-protein i takođe su deo histona koji je najskloniji posttranslacionim modifikacijama (Goll i Bestor, 2002, Genes Dev.16:1739- 1742; Grant, 2001, Genome Biol. 2:). Ove modifikacije uključuju acetilaciju, metilaciju, fosforilaciju, ubikvitinilaciju, SUMOilaciju. Ovi epigenetski markeri su napisani i obrisani od strane specifičnih enzima koji postavljaju oznake na specifične ostatke unutar histonskog repa, čime se formira epigenetski kod, koji se zatim interpretira od strane ćelije kako bi se omogućila genska specifična regulacija strukture hromatina i time transkripcija.

[0003] Kovalentna modifikacija histona je osnovni mehanizam kontrole ekspresije gena i jedan od glavnih epigenetskih mehanizama u eukariotskim ćelijama (Kouzarides, Cell, 128, 693-705 (2007)). Pošto različita transkripciona stanja definišu osnovne ćelijske procese, kao što su specifikacija tipa ćelije, posvećenost lozi, aktivacija ćelije i smrt ćelije, njihova nenormalna regulacija je u srži niza bolesti (Medzhitov et al., Nat. Rev. Immunol., 9, 692-703 (2009); Portela et al., Nat. Biotech., 28, 1057-1068 (2010)). Različite klase enzima, i to histonske acetiltransferaze (HATS) i histonske deacetilaze (HDAC), acetilat ili deacetilat specifični histonski lizinski ostaci (Struhl K., Genes Dev., 1998, 12, 5, 599-606).

[0004] Histonske acetiltransferaze (HATs) katalizuju acetilaciju (prenos acetil grupe) na εamino grupi ciljnog bočnog lanca lizina unutar histona supstrata, a histonske deacetilaze (HDACs) katalizuju uklanjanje acetil grupa iz ostataka lizina. Nakon toga, pokazano je da se acetilirani histoni jedra preferencijalno povezuju sa transkripciono aktivnim hromatinom. Vidi Nucleic Acids Res.5:1863-1876 (1978); Proc. Natl. Acad. Sci.75:2239-2243 (1978); i EMBO J. 7:1395-1402 (1988). HAT su kategorisani u četiri glavne porodice na osnovu homologije primarne sekvence, zajedničkih strukturnih karakteristika i funkcionalnih uloga: Gcn5/PCAF (generalni kontrolni nerepresivni protein 5 i p300 i CBP asocirani faktor); MYST (nazvan po osnivačima MOZ, Ybf2/Sas3, Sas2 i Tip60); p300/CBP (protein od 300 kDa i CREB vezujući protein); i Rtt109 (regulator proizvodnje gena za transpoziciju Tyl 109).

[0005] Paralozi p300 i CBP (CREB vezujući protein) su prvobitno identifikovani kao vezujući partneri proteina ranog regiona 1A adenovirusa (E1A) (Yee i Branton, 1985, Virology 147: 142-153; Harlow et al., 1986, Mol. Cell Biol. 6:1579-1589), odnosno cAMP-regulisani pojačivač (CRE) vezujući proteini (Chrivia et al, 1993, Nature 365: 855-859). p300 i CBP HAT domeni imaju >90% identičnosti sekvence i konzervirani su u metazoanima sa mnogim preklapajućim funkcijama. Pored domena HAT, p300/CBP sadrži i druge domene interakcije proteina, uključujući tri domena bogata cisteinom i histidinom (CH1, CH2 i CH3), KIX domen, bromodomen i domen interakcije koaktivatora steroidnih receptora (SID, takođe domen interakcije SRC-1) (Arany et al, Cell.1994 Jun 17;77(6): 799-800). Utvrđeno je da p300/CBP ima unutrašnju HAT aktivnost (Ogryzko et al., 1996, Cell 87: 953-959; Bannister and Kouzarides, 1996, Nature 384:641-643). Pored acetilacije višestrukih lizina na sva četiri jezgrena histona (H2A, H2B, H3 i H4), pokazalo se da p300/CBP ima aktivnost acetiltransferaze prema > 70 supstrata (Wang et al., 2008, Curr. Opin.Struct. Biol.18:741-747), uključujući, na primer, p53 (Gu et al., 1997, Cell 90:595-606), MyoD (Polesskaya et al., 2002, J. Biol. Chem. 275:34359-64), STAT3 (Yuan et al., 2005, Science 307:269-73) i NFκβ (Chen et al., 2002, EMBO J. 21:6539-48). Ove dve acetiltransferaze su odgovorne za većinu acetilacije histon H3 lizin 18 (H3K18ac) i H3K27ac, modifikacije povezane sa aktivnim promoterima i pojačivačima (Horwitz et al.2008; Jin et al.2011),

[0006] Pored toga što deluje kao acetiltransferaza, p300 takođe deluje kao skafold za transkripcione faktore ili most za povezivanje transkripcionih faktora i bazalnog transkripcionog mehanizma za aktiviranje transkripcije (Chan i Thangue, 2001, J. Cell Sci.

114:2363-2373; Chen i Li, 2011, Epigenetics 6:957-961). P300/CBP proteini su uključeni u mnoge ćelijske procese, uključujući rast ćelija, proliferaciju i diferencijaciju (navedeno u Chan i Thangue, 2001, J. Cell Sci. 114:2363-2373). Mutacije u p300/CBP uočene su u mnogim ljudskim bolestima, posebno karcinoma sa učestalošću do 30%. Veća učestalost ovih mutacija se javlja unutar domena HAT, što ukazuje na selektivni pritisak da se promeni ova aktivnost kod karcinoma. Ove mutacije su uglavnom monoalelne, sa gubitkom heterozigotnosti drugog alela, u skladu sa Knudsonovom hipotezom klasičnog tumor supresorskog gena. Vidi Nature 376, 348-351, 1995; Oncogene 12, 1565-1569, 1996; i Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 8732-8737, 1997. Heterozigotne mutacije u CBP prvi put su opisane u RTS, autosomno dominantnoj bolesti, koju karakterišu mentalna retardacija, skeletne nenormalnosti i visoka incidencija neoplazije (Nature 376, 348-351, 1995). To sugeriše da je za normalan razvoj neophodna potpuna komplementarna doza gena CBP. P300/CBP geni su takođe uključeni u različite hromozomske translokacije, posebno u hematološke maligne bolesti i eventualno doprinose nenormalnom rastu putem dobitka funkcije (Kitabayashi et al.2001; Panagopoulos et al.2001)

[0007] Visoka ekspresija p300, u korelaciji sa lošim preživljavanjem i agresivnim fenotipovima, zapažena je kod raka prostate (Debes et al 2003; Cancer Res. 63: 7638-7640; Heemers et al., 2008, Adv. Exp. Med. Biol. 617:535-40; Isharwal et al., 2008, Prostate 68:1097-104), raka jetre (Yokomizo et al., 2011, Cancer Lett. 310:1407; Li et al., 2011, J. Transl. Med. 9:5), raka dojke (Fermento et al., 2010, Exp. Mol. Patol.88:256-64), karcinoma jednjaka (Li et al, 2011, Ann Thorac Surg.91: 1531-1538) i karcinoma skvamoznih ćelija kože (Chen et al, 2014, Br J Dermatol. 172: 111-119). Inhibicija p300/CBP ima terapeutski potencijal kod karcinoma (Iyer et al., 2004, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:7386-7391; Stimson et al., 2005, Mol. Cancer Ther.4:1521-1532; Zheng et al., 2004, Methods Enzymol.

376:188-199), srčane bolesti (Davidson et al., 2005, Chembiochem. 6:162-170); dijabetes melitusa (Zhou et al., 2004, Nat. Med.10:633-637), i HIV (Varier i Kundu, 2006, Curr. Pharm. Des. 12:1975-1993). P300/CBP je takođe uključen u regulisanje inflamatornih medijatora (Deng et al., 2004, Blood WO 2016/044770 PCT/US2015/051028 103: 2135-42; TumerBrannen et al., 2011, J. Immunol. 186:7127-7135). P300/CBP je takođe povezan sa drugim bolestima, kao što je fibroza (Ghosh and Varga, 2007, J. Cell. Physiol. 213:663-671), metabolički sindrom (Bricambert et al., 2010, J. Clin. Invest. 120:4316-4331), i progresivnih neurodegenerativnih bolesti, kao što je Hantingtonova bolest (Cong et al., 2005, Mol. Cell. Neurosci. 30:12-23), Kennedyjeva bolest (Lieberman et al., 2002, Hum. Mol. Genet.11:1967-76), i Alchajmerova bolest (Francis et al., 2007, Neurosci. Lett. 413:137-140).

[0008] Asocijacija aktivnosti p300/CBP u patogenezi bolesti ukazuje na potencijalnu korisnost p300/CBP kao terapijske mete. Međutim, identifikacija potentnih, specifičnih inhibitora histon acetiltransferaze je izazovna (Cole, 2008, Nat. Chem. Biol. 4:590-97). P300 HAT inhibitori izvedeni iz prirodnih jedinjenja imaju umerenu potenciju, ali im nedostaje specifičnost (Dekker i Haisma, 2009, Dmg Disc. Today 14:942-8). Lys-CoA, konvertovan u ćelijski permeabilnu formu sa Tat peptid priključkom, je selektivniji, ali ima ograničenu primenu u farmakološkim studijama zbog svoje složenosti. Nedavno je identifikovan selektivni p300 inhibitor C646 korišćenjem strukture Lys-CoA/p300 HAT u pristupu virtuelnom skriningu liganda (Bowers et al., 2010, Chemistry & Biology 17:471-482). Iako je postignut napredak u ovoj oblasti, i dalje postoji potreba u struci za poboljšanim HAT inhibitorima.

[0009] WO 2016/196117 obelodanjuje derivate N-piridinil-acetamida korisne za lečenje raka.

SAŽETAK

[0010] Ovde su navedena jedinjenja koja imaju formulu I:

i njihove farmaceutski prihvatljive soli i sastavi, pri čemu su R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<a>, R, q i p kao što je ovde opisano. Obelodanjena jedinjenja i sastavi moduliraju histon acetiltranferaze (vidi npr. Tabelu 2) i korisni su u različitim terapijskim primenama kao što je, na primer, lečenje raka. Pronalazak je definisan u priloženim patentnim zahtevima.

DETALJAN OPIS

1. Opšti opis jedinjenja

[0011] Ovde je dato jedinjenje formule I:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

R<1>, R<3>i R<4>su svaki nezavisno vodonik ili C1-4alkil;

R<2>je fenil ili 5- do 6-člani heteroaril, od kojih je svaki opciono supstituisan

sa 1 do 3 grupe izabrane iz R<c>;

R<5>je C1-6alkil supstituisan sa 4- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu je svaki od navedenih 4- do 6-članog heterociklila ili 5- do 6-članog heteroarila opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane između R<d>; ili R<5>je 4-do 6-člani heterociklil ili 4- do 6-člani heteroaril, pri čemu je svaki od navedenih 4- do 6-članog heterociklila ili 5- do 6-članog heteroarila opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane od R<d>;

R<a>, R, R<c>i R<d>su svaki nezavisno halo, CN, okso, NO2, C1-6alkil, C2-6alkenil, C1-

6alkoksi, halo(C1-6alkoksil), halo(C1-6alkil), -C1-6alkilOR<e>,

-C(O)R<f>, -C(O)OR, -C1-6alkilC(O)OR<e>, -C(O)N(R<e>)2, -C(O)NR<e>C1-6alkilOR<e>, -OC1-

6alkilN(R<e>)2, -C1-6alkilC(O)N(R<e>)2, -C1-6alkilN(R<e>)2, -N(R<e>)2, -C(O)NR<e>C1-

6alkilN(R<e>)2, -NR<e>C1-6alkilN(R<e>)2. -NR<e>C1-6alkilOR<e>, -SOR<e>, -S(O)2R<e>, -SON(R<e>)2, -SO2N(R<e>)2, SF5, -O(C3-C6)cikloalkil, -O-C1-4alkilaril, -C1-6alkil(C3-C6)cikloalkil, -C1-

6alkilaril, -C1-6alkilheteroaril, -C1-6alkilheterociklil, (C3-C6)cikloalkil, heterociklil, heteroaril, ili aril, pri čemu su svaki od navedenih (C3-C6)cikloalkil, heterociklil, aril, i heteroaril sam i u vezi sa -O(C3-C6)cikloalkil, -C1-6alkil(C3-C6)cikloalkil, -C1-6alkilaril, -C1-6alkilheteroaril, i -C1-6alkilheterociklil su opciono supstituisani sa 1 do 3 grupa izabranih iz grupe koju čine halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6alkoksi, C1-6haloalkoksi, -N(R<e>)2, -C(O)R<f>, i -C1-6alkilOR<e>;

svaki R<e>je nezavisno vodonik, halo(C1-4alkil) ili C1-4alkil;

svaki R<f>je nezavisno vodonik, halo(C1-4alkil),C1-4alkil ili (C3-C4)cikloalkil;

q je 0, 1 ili 2; i

p je 0, 1, 2 ili 3.

[0012] Prema pronalasku,

R<1>, R<3>i R<4>su svaki nezavisno vodonik ili C1-4alkil;

R<2>je fenil ili pirazolil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa halogenom ili C1-4alkilom;

R<5>je C1-6alkil supstituisan sa 4- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu je svaki od navedenih 4- do 6-članog heterociklila ili 5- do 6-članog heteroarila opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane od R<d>; ili R<5>je 4- do 6-člani heterociklil ili 4- do 6-člani heteroaril, pri čemu je svaki od navedenih 4- do 6-članog heterociklila ili 5- do 6-članog heteroarila opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane od R<d>;

R<a>, ako je prisutan, je C1-3alkil, C1-3alkoksi, halo(C1-3alkil), haloC1-3alkoksi, ili halo; Rje halo, cijano, ili -SO2NH2;

svaki od R<d>je nezavisno halo, CN, okso, NO2, C1-6alkil, C2-6alkenil, C1-6alkoksi, halo(C1-6alkoksi), halo(C1-6alkil), -C1-6alkilOR<e>, -C(O)R<f>, -C(O)OR, -C1-6alkilC(O)OR<e>, -C(O)N(R<e>)2, -C(O)NR<e>C1-6alkilOR<e>, -OC1-6alkilN(R<e>)2, -C1-6alkilC(O)N(R<e>)2, -C1-6alkilN(R<e>)2, -N(R<e>)2, -C(O)NR<e>C1-6alkilN(R<e>)2, -NR<e>C1-6alkilN(R<e>)2,-NR<e>C1-6alkilOR<e>, - SOR<e>, -S(O)2R<e>, -SON(R<e>)2, -SO2N(R<e>)2, -O(C3-C6)cikloalkil, -O-C1-4alkilaril, -C1-6alkil(C3-C6)cikloalkil, -C1-6alkilaril, -C1-6alkilheteroaril, -C1-6alkilheterociklil, (C3-C6)cikloalkil, heterocikll, heteroaril, ili aril, pri čemu svaki od navedenih (C3-C6)cikloalkil, heterociklil, aril, i heteroaril sam i u vezi sa -O(C3-C6)cikloalkil, - C1-6alkil(C3-C6)cikloalkil, -C1-6alkilaril, -C1-6alkilheteroaril, i -C1-6alkilheterociklil su opciono supstituisani sa 1 do 3 grupe koju čine halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6alkoksi, C1-6haloalkoksi, -N(R<e>)2, -C(O)R<f>, i -C1-6alkilOR<e>; svaki R<e>je nezavisno vodonik, halo (C1-4alkil) ili C1-4alkil;

q je 0 ili 1;

i p je 1.

2. Definicije

[0013] Kada se koristi u vezi sa opisivanjem hemijske grupe koja može imati više tačaka vezivanja, crtica (-) označava tačku vezivanja te grupe za promenljivu za koju je definisana. Na primer, -N(R<d>)2i -NR<d>C1-6alkilOR<d>znače da se tačka vezivanja za ovu grupu javlja na atomu azota.

[0014] Termini „halo“ i „halogen“ koji se ovde koriste odnose se na atom izabran iz grupe koju čine fluor (fluoro, -F), hlor (hloro, -Cl), brom (bromo, -Br) i jod (jodo, -I).

[0015] Termin „alkil“ koji se koristi sam ili kao deo većeg dela, kao što su "haloalkil", označava zasićeni ravnolančani ili razgranati monovalentni ugljovodonični radikal. Osim ako nije drugačije navedeno, alkil grupa obično ima 1-6 atoma ugljenika, tj. (C1-C6)alkil.

[0016] „Alkoksi“ označava alkil radikal vezan preko kiseoničnog vezujućeg atoma, predstavljen sa -O-alkilom. Na primer, "(C1-C4) alkoksi" uključuje metoksi, etoksi, proproksi i butoksi.

[0017] Termin „haloalkil“ uključuje mono, poli i perhaloalkilne grupe gde se halogeni nezavisno biraju iz grupe koju čine fluor, hlor, brom i jod.

[0018] „Haloalkoksi“ je haloalkil grupa koja je vezana za drugi deo preko atoma kiseonika kao što je npr., ali nije ograničena na -OCHCF2ili -OCF3.

[0019] Termin „okso“ se odnosi na =O.

[0020] Termin „aril“ se odnosi na aromatični karbociklični jednostruki prsten ili dva spojena prstenasta sistema koji sadrže 6 do 10 atoma ugljenika. Primeri uključuju fenil, indanil, tetrahidronaftalen i naftil.

[0021] Termin „cikloalkil“ se odnosi na 4-člani do 12-člani monociklični, biciklični (npr. premošćeni ili spiro biciklični prsten), policiklični (npr. triciklični) ili kondenzovani sistem ugljovodoničnog prstena koji je potpuno zasićen. Monociklične cikloalkil grupe uključuju, bez ograničenja, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i ciklooktil. Premošćene biciklične cikloalkil grupe uključuju, bez ograničenja, biciklo[3.2.1]oktan, biciklo[2.2.1]heptan, biciklo[3.1.0]heksan, biciklo[1.1.1]pentan i slično. Spiro biciklične cikloalkilne grupe uključuju, npr. spiro[3.6]dekan, spiro[4.5]dekan i slično. Fuzionisani cikloalkil prstenovi uključuju, npr., dekahidronaftalen, oktahidropentalen i slično. Podrazumeva se da, kada je navedeno, opcioni supstituenti na cikloalkilu mogu biti prisutni na bilo kojoj supstitubilnoj poziciji i, uključuju, npr. poziciju na kojoj je cikloalkilna grupa priključena. U jednom aspektu, cikloalkil je C3-C6monociklični ugljovodonični prstenasti sistem koji je potpuno zasićen.

[0022] Termin „heteroaril“ koji se koristi sam ili kao deo većeg dela odnosi se na aromatični radikal od 5 do 12 članova (npr. od 5 do 7 članova ili od 5 do 6 članova) koji sadrži 1-4 heteroatoma izabrana između N, O i S. Heteroarilna grupa može biti mono- ili biciklična. Monociklični heteroaril uključuje, na primer, tienil, furanil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, izoksazolil, oksadiazolil, tiazolil, izotiazolil, tiadiazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, itd. Biciklični heteroarili obuhvataju grupe u kojima je monociklični heteroarilni prsten fuzionisan sa jednim ili više arilnih ili heteroarilnih prstenova. Neograničavajući primeri uključuju indolil, imidazopiridinil, benzooksazolil, benzooksodiazolil, indazolil, benzimidazolil, benzotiazolil, hinolil, hinazolinil, hinoksalinil, pirolopiridinil, pirolopirimidinil, pirazolopiridinil, tienopiridinil, tienopirimidinil, indolizinil, purinil, naftiridinil i pteridinil. Podrazumeva se da, kada je navedeno, opcioni supstituenti na heteroaril grupi mogu biti prisutni na bilo kojoj supstitubilnoj poziciji i, uključuju, npr. poziciju na kojoj je heteroaril priljučen.

[0023] Termin „heterociklil“ označava 4-12-člani (npr.4- do 7-člani ili 4- do 6-člani) zasićeni ili delimično nezasićeni heterociklični prsten koji sadrži 1 do 4 heteroatoma nezavisno izabrana između N, O i S. Može biti monociklični, biciklični (npr. premošćeni, fuzionisani ili spiro biciklični prsten) ili triciklični. Heterociklični prsten može biti vezan za svoju bočnu grupu na bilo kom heteroatomu ili atomu ugljenika što rezultira stabilnom strukturom. Primeri takvih zasićenih ili delimično nezasićenih heterocikličkih radikala uključuju, bez ograničenja, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, terahidropiranil, pirolidinil, piridinonil, pirolidonil, piperidinil, oksazolidinil, piperazinil, dioksanil, dioksolanil, morfolinil, dihidrofuranil, dihidropiranil, dihidropiridinil, tetrahidropiridinil, dihidropirimidinil, oksetanil, azetidinil i tetrahidropirimidinil. Heterociklil grupa može biti mono- ili biciklična. Termin „heterociklil“ takođe uključuje, npr. nezasićene heterociklične radikale fuzionisane sa drugim nezasićenim heterocikličnim radikalom ili aril ili heteroaril prstenom, kao što su na primer tetrahidronaftiridin, indolinon, dihidropirolotriazol, imidazopirimidin, hinolinon, dioksaspirodekan. Takođe će se podrazumevati da kada su navedeni, opcioni supstituenti na heterociklil grupi mogu biti prisutni na bilo kojoj supstitutivnoj poziciji i, uključuju, npr. poziciju na kojoj je heterociklil vezan (npr. u slučaju opciono supstituisanog heterociklila ili heterociklila koji je opciono supstituisan).

[0024] Termin „spiro“ se odnosi na dva prstena koja dele jedan atom prstena (npr. ugljenik).

[0025] Termin „fuzionisan“ se odnosi na dva prstena koji međusobno dele dva susedna atoma prstena.

[0026] Termin „premošćen“ odnosi se na dva prstena koji međusobno dele tri ili više atoma prstena.

[0027] Obelodanjena jedinjenja postoje u različitim stereoizomernim oblicima. Stereoizomeri su jedinjenja koja se razlikuju samo po svom prostornom rasporedu. Enantiomeri su parovi stereoizomera čije se slike u ogledalu ne mogu superponirati, najčešće zato što sadrže asimetrično supstituisani atom ugljenika ili atome ugljenika koji deluju kao hiralni centar. "Enantiomer" označava jedan od para molekula koji su međusobno slike u ogledalu i koji se ne mogu superponirati. Diastereomeri su stereoizomeri koji sadrže dva ili više asimetrično supstituisanih atoma ugljenika. "R" i "S" predstavljaju konfiguraciju supstituenata oko jednog ili više hiralnih atoma ugljenika.

[0028] "Hash" (isprekidana klinasta) veza kao u " " predstavlja tačku u kojoj je prikazana grupa priključena definisanoj promenljivoj. Na primer, ako je R<5>definisan kao

u jedinjenju koje ima formulu I, to znači da rezultujuće jedinjenje ima sledeću formulu:

[0029] „Racemat“ ili „racemska smeša“ označava jedinjenje ekvimolarnih količina dva enantiomera, pri čemu takve smeše ne pokazuju optičku aktivnost, tj. ne rotiraju ravan polarizovane svetlosti.

[0030] Jedinjenja iz ovog dokumenta mogu se pripremiti kao pojedinačni enantiomeri bilo enantio-specifičnom sintezom ili razdvojiti iz enantiomerno obogaćene smeše. Konvencionalne tehnike razdvajanja uključuju formiranje soli slobodne baze svakog izomera enantiomernog para korišćenjem optički aktivne kiseline (nakon čega sledi frakciona kristalizacija i regeneracija slobodne baze), formiranje soli kiselog oblika svakog enantiomera enantiomernog para korišćenjem optički aktivnog amina (nakon čega sledi frakciona kristalizacija i regeneracija slobodne kiseline), formiranje estra ili amida svakog od enantiomera enantiomernog para korišćenjem optički čiste kiseline, amina ili alkohola (nakon čega sledi hromatografsko odvajanje i uklanjanje hiralne pomoćne supstance), ili razdvajanje enantiomerne smeše ili početnog materijala ili konačnog proizvoda korišćenjem različitih dobro poznatih hromatografskih metoda. Pored toga, jedinjenja se mogu pripremiti kao pojedinačni enantiomeri odvajanjem racemske smeše konvencionalnim tehnikama hiralne hromatografije.

[0031] Kada je stereohemija obelodanjenog jedinjenja imenovana ili prikazana strukturom, imenovani ili prikazani stereoizomer je najmanje 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 99,9% tež. čist u odnosu na sve ostale stereoizomere. Težinski procenat čistog u odnosu na sve druge stereoizomere je odnos težine jednog stereoizomera i težine drugih stereoizomera. Kada je pojedinačni enantiomer imenovan ili prikazan strukturom, prikazani ili imenovani enantiomer je najmanje 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 99,9% tež. optički čist. Težinski procenat optičke čistoće je odnos težine enantiomera i težine enantiomera plus težine njegovog optičkog izomera.

[0032] Kada je stereohemija obelodanjenog jedinjenja imenovana ili prikazana po strukturi, a imenovana ili prikazana struktura obuhvata više od jednog stereoizomera (npr. kao u dijastereomernom paru), treba podrazumevati da je uključen jedan od obuhvaćenih stereoizomera ili bilo koja smeša obuhvaćenih stereoizomera. Dalje treba razumeti da je stereoizomerna čistoća imenovanog ili prikazanog stereoizomera najmanje 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 99,9% tež. čista u odnosu na sve ostale stereoizomere. Stereoizomerna čistoća u ovom slučaju se određuje deljenjem ukupne težine u smeši stereoizomera obuhvaćenih nazivom ili strukturom sa ukupnom težinom u smeši svih stereoizomera. Osim ako nije drugačije naznačeno, ako su samo neki od stereohemijskih centara u obelodanjenom jedinjenju prikazani ili imenovani po strukturi, imenovana ili prikazana konfiguracija je obogaćena u odnosu na preostale konfiguracije, na primer, molarnim viškom od najmanje 60%, 70% , 80%, 90%, 99% ili 99,9%. Na primer, struktura:

znači da je konfiguracija oko hiralnog ugljenika gde je stereohemija prikazana stereohemijski obogaćena kao S (npr. molarnim viškom od najmanje 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 99,9%) i da stereohemija u drugom hiralnom centru, za koji stereohemija nije identifikovana, može biti R ili S, ili njihova smeša.

[0033] Kada je obelodanjeno jedinjenje imenovano ili prikazano strukturom bez ukazivanja na stereohemiju, a jedinjenje ima jedan hiralni centar, treba shvatiti da ime ili struktura obuhvata jedan enantiomer jedinjenja bez odgovarajućeg optičkog izomera, racemsku smešu jedinjenja ili smeše obogaćene jednim enantiomerom u odnosu na njegov odgovarajući optički izomer.

[0034] Kada je obelodanjeno jedinjenje imenovano ili prikazano strukturom bez ukazivanja na stereohemiju i, npr. jedinjenje ima više od jednog hiralnog centra (npr. najmanje dva hiralna centra), treba razumeti da ime ili struktura obuhvata jedan stereoizomer bez drugih stereoizomera, smeša stereoizomera ili smeša stereoizomera u kojima je jedan ili više stereoizomera obogaćen u odnosu na druge stereoizomere. Na primer, naziv ili struktura može obuhvatiti jedan stereoizomer bez drugih dijastereomera, smeša stereoizomera ili smeša stereoizomera u kojima je jedan ili više dijastereomera obogaćen u odnosu na druge dijastereomere.

[0035] Termini „ispitanik“ i „pacijent“ mogu se koristiti naizmenično i znače sisara kome je potrebno lečenje, npr. kućne životinje (npr. psi, mačke i slično), domaće životinje (npr. krave, svinje, konji, ovce, koze i slično) i laboratorijske životinje (npr. pacovi, miševi, zamorci i slično). Obično je ispitanik čovek kome je potrebno lečenje.

[0036] Termini „inhibirati“, „inhibicija“ ili „inhibirajuće“ podrazumevaju smanjenje osnovne aktivnosti biološke aktivnosti ili procesa.

[0037] Kao što se ovde koristi, termini "lečenje", "lečiti" i "tretirati" odnose se na preokretanje, ublažavanje, odlaganje početka ili inhibiranje progresije bolesti ili poremećaja, ili jednog ili više njihovih simptoma, kao što je ovde opisano. U nekim aspektima, lečenje se može primeniti nakon što se razvije jedan ili više simptoma, tj. terapijsko lečenje. U drugim aspektima, lečenje se može primeniti u odsustvu simptoma. Na primer, lečenje se može primeniti kod osetljive osobe pre pojave simptoma (npr. u svetlu istorije simptoma i/ili u svetlu izloženosti određenom organizmu ili drugim faktorima osetljivosti), tj. profilaktičko lečenje. Lečenje se takođe može nastaviti nakon što se simptomi povuku, na primer, kako bi se odložio ili sprečio njihov recidiv.

[0038] Termin „farmaceutski prihvatljiv nosač“ odnosi se na netoksični nosač, adjuvans ili vehikulum koji ne uništava farmakološku aktivnost jedinjenja sa kojim je formulisan. Farmaceutski prihvatljivi nosači, adjuvansi ili vehikulumi koji se mogu koristiti u ovde opisanim sastavima uključuju, ali nisu ograničeni na, jonske izmenjivače, aluminijum oksid, aluminijum stearat, lecitin, serumske proteine, kao što su humani serumski albumin, puferske supstance kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina, kalijum sorbat, delimične gliceridne smeše zasićenih biljnih masnih kiselina, voda, soli ili elektroliti, kao što su protamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid, cinkove soli, koloidni silicijum dioksid, magnezijum trisilikat, polivinil pirolidon, supstance na bazi celuloze, polietilen glikol, natrijum karboksimetil celuloza, poliakrilati, voskovi, polietilenpolioksipropilen-blok polimeri, polietilen glikol i lanolin.

[0039] Termin „efikasna količina“ ili „terapeutski efikasna količina“ odnosi se na količinu jedinjenja opisanu u ovom dokumentu koja će izazvati biološki ili medicinski odgovor ispitanika, npr. doza između 0,01 - 100 mg/kg telesne težine/dan.

3. Jedinjenja

[0040] U prvom otelotvorenju, pod uslovom da je ovde jedinjenje formule I:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu su varijable kao što je gore opisano ili u priloženim patentnim zahtevima za jedinjenja iz pronalaska.

[0041] U drugom otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule II:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu su preostale varijable kao opisane za formulu I gore, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja iz pronalaska.

[0042] U trećem otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule III:

[0043] U četvrtom otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule IV:

[0044] U petom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, q u jedinjenju formule I, II, III ili IV je 0 ili 1.

[0045] U šestom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, R<a>, ako je prisutan, u jedinjenju formule I, II, III ili IV je C1-3alkil, C1-3alkoksi, halo(C1-3alkil), haloC1-3alkoksi ili halogen.

[0046] U sedmom otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule V:

[0047] U osmom otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule VI ili VII:

[0048] U devetom otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule VIII, IX, X ili XI:

[0049] U desetom otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule XII, XIII, XIV ili XV:

[0050] U jedanaestom otelotvorenju, jedinjenje formule I je formule XVI ili XVII:

[0051] U dvanaestom otelotvorenju, R<2>u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je fenil ili pirazolil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane iz R<c>, pri čemu su preostale varijable kao opisane za formulu I gore, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja iz pronalaska.

[0052] U trinaestom otelotvorenju, R<c>u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je halo, C1-6alkil, halo (C1-6alkil), C1-6alkoksi ili halo(C1-6alkoksi), pri čemu su preostale varijable kao opisane za formulu I iznad, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja iz pronalaska, ili dvanaesto otelotvorenje.

[0053] U četrnaestom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, R<2>u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je fenil ili pirazolil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa halo ili C1-4alkilom. Alternativno, R u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je fenil.

[0054] U petnaestom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, p u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je 1.

[0055] U šesnaestom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, Ru jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je halo, cijano ili -SO2NH2. Alternativno, Ru jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je cijano .

[0056] U sedamnaestom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, R<5>u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je C1-4alkil supstituisan pirazolilom ili oksazolidinilom, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane iz R<d>; ili R<5>je piperidinil, azetidinil, heksahidropirimidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, oksetanil, pirazolil, pirolidinil ili pirimidinil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane iz R<d>, pri čemu su preostale varijable kao opisane za gornju formulu I, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja pronalaska, ili dvanaesto, trinaesto, četrnaesto, petnaesto ili šesnaesto otelotvorenje.

[0057] U osamnaestom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, R<d>u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI, ili XVII je izabran između halo, okso, C1-4alkil, C1-4alkoksi, halo(C1-4alkil), -C1-4alkilOR<e>, -C(O)R<f>, -C(O)N(R<e>)2, -C1-

6alkilC(O)N(R<e>)2, i -S(O)2R<e>, pri čemu su preostale varijable kao opisane za gornju formulu I, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja iz pronalaska, ili dvanaestog, trinaestog, četrnaestog, petnaestog, šesnaestog ili sedamnaestog otelotvorenja. Alternativno, R<d>u jedinjenjima formule I , II, III, IV, V, VI, VII, VIII , IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII se bira između C1-6alkil, -C(O)R<f>i okso, pri čemu su preostale varijable kao opisane za formulu I iznad, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja pronalaska, ili dvanaestog, trinaestog, četrnaestog, petnaestog, šesnaestog ili sedamnaestog otelotvorenja.

[0058] U devetnaestom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, R<e>u jedinjenjima formule I , II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je vodonik ili C1-

3alkil, pri čemu su preostale varijable kao opisane za formulu I iznad, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja pronalaska, ili dvanaestog, trinaestog, četrnaestog, petnaestog, šesnaestog, sedamnaestog ili osamnaestog otelotvorenja.

[0059] U dvadesetom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, R<f>u jedinjenjima formule I , II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je ciklopropil ili C1-

4alkil, pri čemu su preostale varijable kao opisane za formulu I iznad, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja pronalaska, ili dvanaestog, trinaestog, četrnaestog, petnaestog, šesnaestog, sedamnaestog, osamnaestog ili devetnaestog otelotvorenja.

[0060] U dvadeset prvom otelotvorenju, koje je prema pronalasku, R<5>u jedinjenjima formule I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI ili XVII je

gde su preostale varijable kao opisane za gornju Formulu I, ili u priloženim zahtevima za jedinjenja pronalaska, ili dvanaesto, trinaesto, četrnaesto, petnaesto, šesnaesto, sedamnaesto, osamnaesto, devetnaesto ili dvadeseto otelotvorenje.

[0061] U dvadeset drugom otelotvorenju, i prema pronalasku, jedinjenje formule I se bira iz sledeće formule:

ili njegove farmaceutski prihvatljive soli bilo kog od gore navedenih.

[0062] Specifični primeri jedinjenja dati su u odeljku PRIMERA i uključeni su kao deo dvadeset trećeg otelotvorenja ovde. Uključene su i farmaceutski prihvatljive soli, kao i neutralni oblici ovih jedinjenja.

[0063] Ovde su takođe navedeni farmaceutski sastavi koji se sastoje od jedinjenja opisanog ovde; i farmaceutski prihvatljivog nosača.

4. Upotrebe, formulacija i primena

[0064] Upućivanja na metode lečenja u narednim stavovima treba tumačiti kao upućivanja na jedinjenja, farmaceutske sastave i medikamente ovog pronalaska za upotrebu u metodi za lečenje ljudskog ili životinjskog tela terapijom ili za dijagnozu.

[0065] Ovde opisana jedinjenja i sastavi su generalno korisni za modulaciju aktivnosti p300 i/ili CBP HAT. U nekim aspektima, ovde opisana jedinjenja i sastavi inhibiraju aktivnost p300 i/ili CBP HAT.

[0066] U nekim aspektima, ovde opisana jedinjenja i sastavi su korisni u lečenju poremećaja povezanog sa p300 i/ili CBP HAT funkcijom. Stoga, pod uslovom da su ovde navedene metode lečenja poremećaja povezanog sa funkcijom p300 i/ili CBP HAT, koje se sastoje od primene na ispitaniku kome je to potrebno, terapijski efikasne količine jedinjenja opisanog u ovom dokumentu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili sastava koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Takođe je predviđena upotreba jedinjenja opisanog u ovom dokumentu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili sastava koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za proizvodnju leka za lečenje poremećaja povezanog sa funkcijom p300 i/ili CBP HAT. Takođe je dato jedinjenje opisano u ovom dokumentu, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili sastav koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu u lečenju poremećaja povezanog sa p300 i/ili CBP HAT.

[0067] U nekim aspektima, ovde opisana jedinjenja i sastavi su korisni u lečenju poremećaja povezanog sa acetilacijom hromatina na H3K27, H3K18 i drugim mestima acetilacije na baznim ostacima hromatina na koje deluje p300 i/ili CBP enzim. Stoga, ovde su navedene metode lečenja poremećaja povezanog sa acetilacijom hromatina na H3K27, H3K18 i drugim mestima acetilacije na baznim ostacima hromatina na koje deluje p300 i/ili CBP enzim, koje se sastoje od primene na ispitaniku kome je to potrebno, terapeutski efikasne količine jedinjenja opisanog u ovom dokumentu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili sastava koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Takođe je data upotreba jedinjenja opisanog u ovom dokumentu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili sastava koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za proizvodnju leka za lečenje poremećaja povezanog sa acetilacijom hromatina na H3K27, H3K18 i drugim mestima acetilacije na baznim ostacima hromatina na koje deluje enzim p300 i/ili CBP. Takođe je dato jedinjenje opisano u ovom dokumentu, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili sastav koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu u lečenju poremećaja povezanog sa acetilacijom hromatina na mestima H3K27, H3K18 i drugim mestima acetilacije na baznim ostacima hromatina na koje deluje enzim p300 i/ili CBP.

[0068] U nekim aspektima, ovde opisana jedinjenja i sastavi su korisni u lečenju poremećaja povezanog sa hiperacetilacijom hromatina i/ili hiperacetilacijom proteina za koje je poznato da su acetilirani sa p300 i/ili CBP. Stoga, ovde su navedene metode lečenja poremećaja povezanog sa hiperacetilacijom hromatina i/ili hiperacetilacijom proteina za koje je poznato da su acetilirani sa p300 i/ili CBP, koje se sastoje od primene na ispitaniku kome je to potrebno, terapijski efikasne količine jedinjenja opisanog u ovom dokumentu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili sastava koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Takođe je data upotreba jedinjenja opisanog u ovom dokumentu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili sastava koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za proizvodnju leka za lečenje poremećaja povezanog sa hiperacetilacijom hromatina i/ili hiperacetilacijom proteina za koje je poznato da su acetilirani sa p300 i/ili CBP. Takođe je dato jedinjenje opisano u ovom dokumentu, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili sastav koji se sastoji od obelodanjenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu u lečenju poremećaja povezanog sa hiperacetilacijom hromatina i/ili hiperacetilacijom proteina za koje je poznato da su acetilirani sa p300 i/ili CBP.

[0069] U nekim aspektima, ovde opisana jedinjenja i sastavi su korisni u lečenju raka, srčanih oboljenja, metaboličkih oboljenja, fibrotičkih oboljenja, inflamatornih oboljenja ili virusnih infekcija.

[0070] U nekim aspektima, kancer tretiran jedinjenjima i sastavima opisanim u ovom dokumentu izabran je između adenokarcinoma dojke, prostate i debelog creva; bronhogenog karcinoma pluća; mijeloida; melanoma; hepatoma; neuroblastoma; papiloma; apudoma; horistoma; branhioma; malignog karcinoidnog sindroma; karcinoidne bolesti srca; karcinoma (npr. Walker-ov, bazalnih ćelija, bazoskvamoznog, Brown-Pearce-ov, duktalnog, Ehrlich tumora, Krebs 2, merkelovih ćelija, mucinoznih, plućni ne-malih ćelija, plućni malih ćelija, papilarnih, ciroznih, bronhiolarnih, bronhogenih, skvamoznih ćelija i prelaznih ćelija); histiocitnih poremećaja; leukemije; histiocytosis malignant; Hodgkin-ove bolesti; imunoproliferativnog malog; ne-Hodgkin-ovog limfoma; plazmacitoma; retikuloendotelioze; melanoma; hondroblastoma; hondroma; hondrosarkoma; fibroma; fibrosarkoma; tumora gigantskih ćelija; histiocitoma; lipoma; liposarkoma; mezotelioma; miksoma; miksosarkoma; osteoma; osteosarkoma; hordoma; kraniofaringoma; disgerminoma; hamartoma; mezenhimoma; mezonefroma; miosarkoma; ameloblastoma; cementoma; odontoma; teratoma; timoma; trofoblastičnog tumora; adenoma; holangioma; holesteatoma; ciklindroma; cistadenokarcinoma; cistadenoma; tumora granuloza ćelija; ginandroblastoma; hepatoma; hidradenoma; tumora ostrvskih ćelija; tumora Leydig-ovih ćelija; papiloma; tumora sertoli ćelija; tumora teka ćelija; leimioma; leiomiosarkoma; mioblastoma; mioma; miosarkoma; rabdomioma; rabdomiosarkoma; ependimoma; ganglioneuroma; glioma;

meduloblastoma; meningioma; neurilemoma; neuroblastoma; neuroepitelioma; neurofibroma; neuroma; paraganglioma; nehromafinskih paraganglioma; angiokeratoma; angiolimfoid hiperplazije sa eozinofilijom; angioma sclerosa; angiomatoze; glomangioma; hemangioendotelioma; hemangioma; hemangiopericitoma; hemangiosarkoma; limfangioma; limfangiomioma; limfangiosarkoma; pinealoma; karcinosarkoma; hondrosarkoma; cistosarkoma filodes; fibrosarkoma; hemangiosarkoma; leiomiosarkoma; leukosarkoma; liposarkoma; limfangiosarkoma; miosarkoma; miksosarkoma; karcinoma jajnika; rabdomiosarkoma; sarkoma; neoplazmi; nerofibromatoze; i cervikalne displazije.

[0071] U drugim aspektima, kancer tretiran ovde opisanim jedinjenjima i sastavima izabran je između akustičnog neuroma, akutne leukemije, akutne limfocitne leukemije, akutne mijelocitne leukemije, akutne T-ćelijske leukemije, karcinoma bazalnih ćelija, karcinoma žučnog kanala, karcinoma bešike, karcinoma mozga, karcinoma dojke, bronhogenog karcinoma, karcinoma grlića materice, hondrosarkoma, hordoma, horiokarcinoma, hronične leukemije, hronične limfocitne leukemije, hronične mijelocitne leukemije, hronične mijelogene leukemije, karcinoma debelog creva, kolorektalnog karcinoma, kraniofaringioma, cistadenokarcinoma, difuznog limfoma velikih B-ćelija, disproliferativnih promena, embrionalnog karcinoma, karcinoma endometrija, endoteliosarkoma, ependimoma, epitelnog karcinoma, eritroleukemije, karcinoma jednjaka, karcinoma dojke pozitivnog na estrogenske receptore, esencijalne trombocitemije, Juingovog tumora, fibrosarkoma, folikularnog limfoma, karcinoma testisa germinativnih ćelija, glioma, glioblastoma, gliosarkoma, bolesti teškog lanca, karcinoma glave i vrata, hemangioblastoma, hepatoma, hepatocelularnog karcinoma, hormonski neosetljivog raka prostate, leiomiosarkoma, leukemije, liposarkoma, raka pluća, limfagioendoteliosarkoma, limfangiosarkoma, limfoblastične leukemije, limfoma, limfoidne maligne bolesti T-ćelijskog ili B-ćelijskog porekla, medularnog karcinoma, meduloblastoma, melanoma, meningioma, mezotelioma, multiplog mijeloma, mijeloične leukemije, mijeloma, miksosarkoma, neuroblastoma, NUT karcinoma srednje linije (NMC), raka pluća nemalih ćelija, oligodendroglioma, karcinoma usne šupljine, osteogenog sarkoma, raka jajnika, raka pankreasa, papilarnih adenokarcinoma, papilarnih karcinoma, pinealoma, policitemije vera, karcinoma prostate, karcinoma rektuma, karcinoma bubrežnih ćelija, retinoblastoma, rabdomiosarkoma, sarkoma, karcinoma lojnih žlezda, seminoma, karcinoma kože, karcinoma pluća malih ćelija, solidnih tumora (karcinomi i sarkomi), karcinoma pluća malih ćelija, karcinoma želuca, karcinoma skvamoznih ćelija, sinovioma, karcinoma znojnih žlezda, karcinoma štitaste žlezde, Waldenstromove makroglobulinemije, tumora testisa, karcinom materice i Wilmsovog tumora.

[0072] U nekim aspektima, rak tretiran ovde opisanim jedinjenjima i sastavima izabran je između karcinoma debelog creva, karcinoma želuca, karcinoma štitne žlezde, karcinoma pluća, leukemije, karcinoma pankreasa, melanoma, multiplog melanoma, karcinoma mozga, karcinoma CNS, karcinoma bubrega, karcinoma prostate, karcinoma jajnika, leukemije i karcinoma dojke.

[0073] U nekim aspektima, rak tretiran ovde opisanim jedinjenjima i sastavima izabran je između raka pluća, raka dojke, raka pankreasa, kolorektalnog raka i melanoma.

[0074] U nekim aspektima, kancer tretiran ovde opisanim jedinjenjima i sastavima izabran je između kancera prostate, pokretača karcinoma, multiplog mijeloma i limfoma (npr. limfom plaštenih ćelija). Vidi npr., Santer et al 2011, Mol Cancer Ther. 10: 1644-1655; Lasko et al, 2017, Nature. Oct 5;550(7674):128-132; Tie F, et al. 2009 Development 136:3131-3141; Bergsagel PL, Kuehl WM 2001, Oncogene, 20(40):5611-22; Chesi and Bergsagel 2013, Int J Hematol. 97(3): 313-323; i Jares P et al 2007, Nat Rev Cancer.7(10):750-762.

[0075] U jednom aspektu, srčana bolest tretirana ovde opisanim jedinjenjem i sastavima izabrana je između srčane hipertrofije i srčane insuficijencije.

[0076] U jednom aspektu, metabolička bolest tretirana ovde opisanim jedinjenjem i sastavima izabrana je između gojaznosti, steatoze jetre, dislipidemije, hipertenzije, koronarne bolesti srca, upale jetre i dijabetes melitusa tipa 2.

[0077] U jednom aspektu, fibrotička bolest tretirana ovde opisanim jedinjenjem i sastavima izabrana je između pneumonitisa izazvanog zračenjem, radijacione fibroze, sindroma akutnog respiratornog distresa, hronične opstruktivne plućne bolesti, idiopatske plućne fibroze, intersticijske bolesti pluća, infarkta miokarda, ishemijskog moždanog udara, ishemijske bolesti bubrega, odbacivanja transplantacije, lišmanijaze, dijabetesa tipa I, reumatoidnog artritisa, hroničnog hepatitisa, ciroze, inflamatorne bolesti creva, Kronove bolesti, skleroderme, keloida, postoperativne fibroze, hemoterapijom indukovane fibroze (npr. hemoterapijom indukovane plućne fibroze ili kortikalne fibroze jajnika), nefrogene sistemske fibroze, retroperitonealne fibroze, mijelofibroze, mediastinalne fibroze, cistične fibroze, asbestoze, astme i plućne hipertenzije.

[0078] U jednom aspektu, inflamatorna bolest tretirana ovde opisanim jedinjenjem i sastavima izabrana je između astme, inflamatorne bolesti creva (Kronova bolest ili ulcerozni kolitis), hronične opstruktivne plućne bolesti, reumatoidnog artritisa i psorijaze. U drugom aspektu, zapaljenska bolest tretirana jedinjenjem i sastavima opisanim u ovom dokumentu izabrana je iz Addisonove bolesti, akutnog gihta, ankilozantnog spondilitisa, astme, ateroskleroze, Behčetove bolesti, bulozne kožne bolesti, hronične opstruktivne plućne bolesti, Kronove bolesti, dermatitisa, ekcema, gigantocelularnog arteritisa, fibroze, glomerulonefritisa, vaskularne okluzije jetre, hepatitisa, hipofizitisa, sindroma imunodeficijencije, inflamatorne bolesti creva, Kawasaki bolesti, lupus nefritisa, multiple skleroze, miokarditisa, miozitisa, nefritisa, odbacivanja transplantacije organa, osteoartritisa, pankreatitisa, perikarditisa, Polyarteritis nodosa, pneumonitisa, primarne bilijarne ciroze, psorijaze, psorijatičnog artritisa, reumatoidnog artritisa, skleritisa, sklerozirajućeg holangitisa, sepse, sistemskog eritematoznog lupusa, Takajasu-ovog arteritisa, toksičnog šoka, tiroiditisa, dijabetesa tipa I, ulceroznog kolitisa, uveitisa, vitiliga, vaskulitisa, i Wegenerove granulomatoze.

[0079] U jednom aspektu, virusna infekcija tretirana ovde opisanim jedinjenjem i sastavima izabrana je između virusa humane imunodeficijencije, virusa hepatitisa C i humanog papiloma virusa.

[0080] U jednom aspektu, ovde opisana jedinjenja i sastavi su korisni u lečenju neuroloških poremećaja.

[0081] Primeri neuroloških poremećaja uključuju: (i) hronične neurodegenerativne bolesti kao što su fronto-temporalna lobarna degeneracija (frontotemporalna demencija, FTD), FTD-GRN, porodična i sporadična amiotrofična lateralna skleroza (FALS, odnosno ALS), porodična i sporadična Parkinsonova bolest, demencija Parkinsonove bolesti, Hantingtonova bolest, porodična i sporadična Alchajmerova bolest, multipla skleroza, mišićna distrofija, olivopontocerebelarna atrofija, multipla sistemska atrofija, Vilsonova bolest, progresivna supranuklearna paraliza, difuzna bolest Levijevih tela, kortikodentatonigralna degeneracija, progresivna porodična mioklonična epilepsija, striatonigralna degeneracija, torziona distonija, porodični tremor, Daunov sindrom, Gilles de la Tourette sindrom, Hallervorden-Spatz bolest, periferna neuropatija, dijabetička periferna neuropatija, demencia pugilistica, AIDS demencija, demencija povezana sa starenjem, oštećenje pamćenja povezano sa starenjem i neurodegenerativne bolesti povezane sa amiloidozom, kao što su one izazvane prionskim proteinom (PrP) koji je povezan sa transmisivnom spongiformnom encefalopatijom (Creutzfeldt-Jakobova bolest, Gerstmann-Straussler-Scheinker sindrom, skrapie i kuru), i one izazvane viškom akumulacije cistatina C (nasledna cistatin C angiopatija); i (ii) akutnim neurodegenerativnim poremećajima kao što su traumatska povreda mozga (npr. povreda mozga povezana sa operacijom), cerebralni edem, oštećenje perifernog nerva, povreda kičmene moždine, Leighova bolest, Guillain-Barreov sindrom, poremećaji skladištenja lizosoma kao što su lipofuscinoza, Alperova bolest; patologije koje nastaju hroničnom zloupotrebom alkohola ili droga, uključujući, na primer, degeneraciju neurona u locus coeruleusu i cerebellumu, poremećaji kretanja izazvani lekovima; patologije koje nastaju starenjem uključujući degeneraciju cerebelarnih neurona i kortikalnih neurona koji dovode do kognitivnih i motoričkih oštećenja; i patologije koje nastaju hroničnom zloupotrebom amfetamina do uključivanja degeneracije neurona bazalnih ganglija koji dovode do motoričkih oštećenja; patološke promene koje proizilaze iz fokalne traume kao što su moždani udar, fokalna ishemija, vaskularna insuficijencija, hipoksično-ishemijska encefalopatija, hiperglikemija, hipoglikemija ili direktna trauma; patologije koje nastaju kao negativan sporedni efekat terapijskih lekova i tretmana (npr. degeneracija neurona cingulata i entorinalnog korteksa kao odgovor na antikonvulzivne doze antagonista NMDA klase glutamat receptora) i demencija povezana sa Wernicke-Korsakoff sindromom.

[0082] Ostali neurološki poremećaji uključuju povredu nerva ili traumu povezanu sa povredom kičmene moždine. Neurološki poremećaji limbičkog i kortikalnog sistema uključuju npr. cerebralnu amiloidozu, Pick-ovu atrofiju i Rett-ov sindrom. U drugom aspektu, neurološki poremećaji uključuju poremećaje raspoloženja, kao što su afektivni poremećaji i anksioznost; poremećaji socijalnog ponašanja, kao što su karakterni defekti i poremećaji ličnosti; poremećaji učenja, pamćenja i inteligencije, kao što su mentalna retardacija i demencija. Dakle, u jednom aspektu obelodanjena jedinjenja i sastavi mogu biti korisni u lečenju šizofrenije, delirijuma, poremećaja hiperaktivnosti sa deficitom pažnje (ADHD), šizoafektivnog poremećaja, Alchajmerove bolesti, vaskularne demencije, Rubinštajn-Tejbijevog sindroma, depresije, manije, poremećaja deficita pažnje, zavisnosti od droga, demencije i demencije sa manifestacijama BPSD.

[0083] Dalja neurološka stanja uključuju npr. tauopatije, spinalnu i bulbarnu mišićnu atrofiju, spinocerebelarnu ataksiju tipa 3, bol (uključujući npr. akutni i hronični bol, somatski bol, visceralni bol, neuropatski bol, perifernu neuropatiju, nociceptivni bol, sindrom centralnog bola, bol u mišićima ili zglobovima) i neuroinflamaciju.

[0084] U jednom aspektu, ovde opisana jedinjenja i sastavi su korisni u lečenju neurološkog poremećaja izabranog između frontotemporalne demencije, Alchajmerove bolesti, tauopatija, vaskularne demencije, Parkinsonove bolesti i demencije sa Levijevim telima.

[0085] U određenim aspektima, ovde opisani sastav je formulisan za primenu kod pacijenta kome je potreban takav sastav. Sastavi opisani u ovom dokumentu mogu se primenjivati oralno, parenteralno, inhalacionim sprejom, topikalno, rektalno, nazalno, bukalno, vaginalno ili putem implantiranog rezervoara. Termin "parenteralno" kako se ovde koristi uključuje supkutane, intravenske, intramuskularne, intraartikularne, intrasinovijalne, intrasternalne, intratekalne, intrahepatičke, intralezione i intrakranijalne injekcije ili tehnike infuzije. U nekim otelotvorenjima, sastavi se primenjuju oralno, intraperitonealno ili intravenski. Sterilni injekcioni oblici ovde opisanih sastava mogu biti vodena ili uljna suspenzija. Ove suspenzije se mogu formulisati u skladu sa tehnikama poznatim u struci koristeći odgovarajuća sredstva za dispergovanje ili kvašenje i sredstva za suspenziju.

[0086] U nekim aspektima, sastavi se primenjuju oralno.

[0087] Specifična doza i režim lečenja za svakog određenog pacijenta će zavisiti od različitih faktora, uključujući aktivnost određenog korišćenog jedinjenja, starost, telesnu težinu, opšte zdravstveno stanje, pol, ishranu, vreme primene, brzinu izlučivanja, kombinaciju lekova i procenu ordinirajućeg lekara i težinu određene bolesti koja se leči. Količina jedinjenja opisanog ovde u sastavu će takođe zavisiti od određenog jedinjenja u sastavu.

[0088] Ovde opisana jedinjenja mogu biti prisutna u obliku farmaceutski prihvatljivih soli. Za primenu u lekovima, soli ovde opisanih jedinjenja odnose se na netoksične "farmaceutski prihvatljive soli". Farmaceutski prihvatljivi oblici soli uključuju farmaceutski prihvatljive kisele/anjonske ili bazne/katjonske soli. Pogodne farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli ovde opisanih jedinjenja uključuju npr. soli neorganskih kiselina (kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična, fosforna, azotna i sumporna kiselina) i organskih kiselina (kao što su sirćetna kiselina, benzensulfonska, benzoeva, metansulfonska i p-toluensulfonska kiselina). Jedinjenja ovog pronalaska sa kiselim grupama kao što su karboksilne kiseline mogu formirati farmaceutski prihvatljive soli sa farmaceutski prihvatljivom bazom(bazama). Odgovarajuće farmaceutski prihvatljive bazne soli uključuju npr. amonijumove soli, soli alkalnih metala (kao što su soli natrijuma i kalijuma) i soli zemnoalkalnih metala (kao što su soli magnezijuma i kalcijuma). Jedinjenja sa kvartarnom amonijum grupom takođe sadrže kontraanjon kao što su hlorid, bromid, jodid, acetat, perhlorat i slično. Drugi primeri takvih soli uključuju hidrohloride, hidrobromide, sulfate, metansulfonate, nitrate, benzoate i soli sa aminokiselinama kao što je glutaminska kiselina.

[0089] Ovde su takođe uključene kombinovane terapije koje koriste terapijski efikasnu količinu jedinjenja formule I, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i efikasnu količinu jednog ili više dodatnih farmaceutski aktivnih agenasa. Dodatni aktivni agensi koji se mogu kombinovati sa jedinjenjem formule I, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli, uključuju npr. one koji ciljaju estrogenski receptor (ER). To uključuje, ali nije ograničeno na selektivne razgrađivače estrogenskih receptora (SERD), ER antagoniste, selektivne modulatore estrogenskih receptora (SERM) i inhibitore aromataze (AI). Primeri SERD i ER antagonista uključuju, ali nisu ograničeni na, fulvestrant, RAD-1901 (elacestrant), GDC-0927 ((2S)-2- (4-{2-[3-(fluorometil) -1-azetidinil]etoksi}fenil) -3- (3-hidroksifenil)-4-metil-2H-hromen-6-ol), GDC-0810 (brilanestrant), AZD-9496 ((2E)-3-[3,5-difluoro-4-[(1R,3R)-2-(2-fluoro-2-metilpropil)-2,3,4,9-tetrahidro-3-metil-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il]fenil]-2-propensku kiselinu), OP-1250 (prolek (S)-3- (4-hidroksifenil)-4-metil-2-(4-(2-((R)-3-metilpirolidin-1-il)etoksi)fenil)-2H-hromen-7-ol nađen u US 9,018,244, čiji su sadržaji inkorporirani ovde referencom), (S)-3-(4-hidroksifenil)-4-metil-2-(4-(2-((R)-3-metilpirolidin-1-il)etoksi)fenil)-2H-hromen-7-ol, takođe nađen u US 9,018,244, čiji su sadržaji inkorporirani ovde referencom), LSZ102 ((E)-3-(4-((2-(2-(1,1-difluoroetil)-4-fluorofenil)-6-hidroksibenzo [b]tiofen-3-il)oksi)fenil)akrilna kiselina), i H3B-6545 ((E)-N,N-dimetil-4-((2-((5-((Z)-4,4,4-trifluoro-1-(3-fluoro-1H-indazol-5-il)-2-fenilbut-1-en-1-il)piridin-2-il)oksi)etil)amino)but-2-enamid). Primeri SERM uključuju, ali nisu ograničeni na, tamoksifen, toremifen, raloksifen, bazedoksifen, ospemifen i nafoksiden. Primeri AI uključuju, ali nisu ograničeni na, anastrozol, letrozol, eksemestan, vorozol, formestan i fadrozol. U jednom aspektu, dato je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i dodatno terapijsko sredstvo izabrano između fulvestranta, RAD-1901, GDC-0927, GDC-0810, AZD-9496, OP-1250, LSZ102, H3B-6545, tamoksifena, toremifena, raloksifena, bazedoksifena, ospemifena, nafoksidena, anastrozola, letrozola, eksemestana, vorozola, formestana i fadrozola. U jednom aspektu, dodatno terapeutsko sredstvo je fulvestrant. Upotreba jedne ili više gorenavedenih kombinovanih terapija za lečenje stanja navedenog u ovom dokumentu takođe je uključena u obim ovog obelodanjivanja. Na primer, u jednom aspektu, gorenavedena srednja vrednost kombinovanog lečenja korisna je u lečenju raka, npr. raka dojke.

PRIMERI

[0090] Reprezentativni primeri obelodanjenih jedinjenja prikazani su u sledećim neograničavajućim metodama, šemama i primerima.

[0091] Sledeće skraćenice imaju naznačena značenja: Ac = acetil; ACN = acetonitril; AcO acetat; BOC = t-butiloksikarbonil; CBZ = karbobenzoksi; CDI = karbonildiimidazol; DBU = 1,8-diazabicikloundek-7-en; DCC = 1,3-dicikloheksilkarbodiimid; DCE = 1,2-dihloroetan; DI = dejonizovan; DIAD = Diizopropil azodikarboksilat; DIBAL = diizobutil aluminijum hidrid; DIPA = diizopropilamin; DIPEA ili DIEA = N, N-diizoproiletilamin, poznat i kao Hunigova baza; DMA = dimetilacetamid; DMAP = 4-(dimetilamino)piridin; DMF = dimetilformamid; DMP = Dess-Martin perjodinan; DPPA = difenilfosforilazid; DPPP = 1,3-bis(difenilfosfino)propan; Dtbbpy = 4,4 '-di-/e/7-butil-2,2 ' -dipiridil; EDC ili EDCI = 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohlorid; EDTA = etilendiamintetrasirćetna kiselina, tetranatrijum so; EtOAc = etil acetat; FAB = brzo atomsko bombardovanje; FMOC = 9-fluorenilmetoksikarbonil; HFIP = heksafluoroizopropanol; HMPA = heksametilfosforamid; HATU=(9-(7-Azabenzotriazol-l-il)-N, N, N, N-tetrametiluronijumheksafluorofosfat; HOAt = 1-hidroksi-7-azabenzotriazol ili 3H- [1,2,3]triazolo[4,5-b] piridin-3-ol; HOBt = 1-hidroksizotribenzotazol; HRMS = masena spektrometrija visoke rezolucije; KHMDS = kalijum heksametildisilazan; LC-MS = tečna hromatografija-masena spektrometrija; LDA = litijumdiizopropilamid; LiHMDS = litijumheksametildisilazan; MCPBA = metahloroperbenzoeva kiselina; MMPP = magnezijum monoperoksiftalat heksahidrat; Ms = metansulfonil = mezil; MsO = metanfulfonat = mezilat; MTBE = metil t-butil etar; NBS = N-bromosukcinimid; NMM = 4-metilmorfolin; NMP = N-metilpiroIidinon; NMR = nuklearna magnetna rezonanca; PCC = piridinijum hlorohromat; PDC = piridinijum dihromat; Ph = fenil; PPTS = piridinijum p-toluen sulfonat; pTSA = p-toluen sulfonska kiselina; r.t./RT = sobna temperatura; rac. = racemska; T3P = 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioksatrifosfinan 2,4,6trioksid; TEA = trietilamin; TFA = trifluorosirćetna kiselina; TfO = trifluorometansulfonat = triflat; THF = tetrahidrofuran; TLC = tankoslojna hromatografija; TMSC1 = trimetilsililhlorid.

[0092] Napredovanje reakcija je često praćeno pomoću TLC ili LC-MS. LC-MS je zabeležen pomoću jedne od sledećih metoda.

METODA-C3:

[0093]

PDS metoda-J:

[0094]

Metoda-H:

[0095]

Metoda-F:

[0096]

Metoda-G:

[0097]

[0098] NMR je sniman na sobnoj temperaturi, osim ako nije drugačije naznačeno, na spektrometrima Varian Inova 400 ili 500 MHz sa pikom rastvarača koji se koristi kao referenca ili na Bruker 300 ili 400 MHz spektrometrima sa TMS pikom koji se koristi kao interna referenca.

[0099] Osim ako nije drugačije navedeno, apsolutna konfiguracija svakog eluirajućeg stereoizomera u sledećim primerima nije identifikovana.

[0100] Ovde opisana jedinjenja mogu se pripremiti sledećim metodama i šemama. Osim ako nije drugačije navedeno, svi polazni materijali koji su korišćeni su komercijalno dostupni.

Metoda 1

[0102] Metoda 1 je protokol u četiri koraka za sintezu 5-hidroksi-1,3-dimetil tetrahidropirimidin-2(1H)-ona iz 1,3-diaminopropan-2-ola koji je koristan za sintezu intermedijera na putu do ovde opisanih jedinjenja.

Metoda 2

[0103]

[0104] Metoda 2 je protokol za pripremu alkoksi-nitro piridina, iz reakcije halonitropiridina sa alkoholima, koji je koristan za sintezu intermedijera na putu do ovde opisanih jedinjenja.

Metoda 3

[0105]

[0106] Metoda 3 je dvostepeni protokol za pripremu 1-(3-((6-nitropiridin-3-il)oksi) heterocikl-1-il)etan-1-on derivata koji je koristan za sintezu intermedijera na putu do ovde opisanih jedinjenja.

Metoda 4

[0107]

[0108] Metoda 4 je protokol za pripremu supstituisanih 2-amino piridina iz 2-nitro piridina putem reakcije hidrogenacije katalizovane paladijumom koja je korisna za sintezu intermedijera na putu do ovde opisanih jedinjenja.

Metoda 5

[0109]

[0110] Metoda 5 je trostepeni protokol za pripremu pirimidiniloksipiridin-2-amina iz hloropirimidina koji je koristan za sintezu intermedijera na putu do ovde opisanih jedinjenja.

Metoda 6

[0111]

[0112] Metoda 6 je petostepeni protokol za pripremu supstituisanih 2-ariletilamina i 2-heteroareletilamina koji koriste supstituisane benzaldehide ili ketone, koji je koristan za sintezu intermedijera na putu do ovde opisanih jedinjenja.

Metoda 7

[0113]

[0114] Metoda 7 je protokol u dva koraka, koji se koristi za pripremu supstituisanih etil 2-(ariletilamino)-2-(1-supstituisanih-1H-pirazol-4-il)acetata počev od ariletilamina i supstituisanih boronat (ili boronske kiseline) pirazola, koji je koristan za sintezu intermedijera na putu do ovde opisanih jedinjenja.

[0115] Šema 1 ilustruje sintetičku sekvencu u dva koraka za konverziju α-bromoestra u N-aril-2-(alkilamino)acetamid. Metoda je korisna za sintezu podskupa jedinjenja formule I gde je R<1>supstituisani fenil, a B, R<a>, R<2>, R<3>, R<4>i R<5>su kao što je ovde opisano.

Metoda 1

[0116]

5-Hidroksi-1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-on

Metoda 1, korak 1.2-((triizopropilsilil)oksi)propan-1,3-diamin:

[0117] U rastvor 1, 3-diaminopropan-2-ola (2,0 g; 22,19 mmol) u suvom DCM (26 ml) uz mešanje dodat je trietilamin (6,74 g; 66,57 mmol), nakon čega je dodat kap-po-kap TIPS-hlorid (4,71 g; 24,41 mmol) na 0°C pod atmosferom azota. Reakciona smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 20 sati. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 ml) i ekstrahovana sa DCMm (2 × 10 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (5,0 g), koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z = 247,46 [M+1].

Metoda 1, korak 2.5-((triizopropilsilil)oksi)tetrahidropirimidin-2 (1H)-on:

[0118] Mešanom rastvoru 2-((triizopropilsilil)oksi) propan-1,3-diamina (5,0 g; 20,28 mmol) u metanolu (81 ml) dodat je S, S'-dimetilditiokarbonat (3,72 g; 30,43 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 60°C tokom 20 sati. Po završetku reakcije, reakciona smeša je koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen silikagel hromatografijom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (1,25 g; 21%; 2 koraka). LCMS: m/z = 273,48 [M+1].

Metoda 1, korak 3.1,3-dimetil-5-((triizopropilsilil)oksi)tetrahidropirimidin-2 (1H-on:

[0119] Mešanom rastvoru 5-((triizopropilsilil)oksi)tetrahidropirimidin-2 (1H)-ona (1,25 g; 4,59 mmol) u DMF (25 ml) dodat je NaH (0,551 g; 60% u ulju; 13,77 mmol) na 0°C. Rezultirajuća reakciona smeša je mešana 1 sat na 0°C. Zatim je u reakcionu smešu dodat metil jodid (1,96 g; 13,77 mmol). Reakcija je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 20 sati. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu vodu (25 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 25 ml). Organski sloj je ispran vodom (2 × 25 ml), osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen silikagel hromatografijom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (1,0 g; 73%). LCMS: m/z = 301,23 [M+1].

Metoda 1, korak 4.5-hidroksi-1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2 (1H-ona:

[0120] Mešanom rastvoru 1,3-dimetil-5-((triizopropilsilil)oksi)tetrahidropirimidin-2(1H)-ona (1,0 g; 3,33 mmol) u apsolutnom etanolu (10 ml) dodat je 4M HCl u 1,4-dioksanu (8,32 ml; 33,28 mmol) na 0°C. Zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 5 sati. Posle završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Čvrsta supstanca je razblažena vodom (5 ml), a vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3 × 10 ml). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (10 ml), osušen nad bezvodnim Na2SO4i koncentrovan pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (1,5 g, korišćeno kao takvo u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja). LCMS: m/z = 145,17 [M+1].

Metoda 2:

5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)-2-nitropiridin

Metoda 2. 5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)-2-nitropiridin:

[0122] Mešanom rastvoru 1-metilpiperidin-4-ola (1,44 g; 12,49 mmol) i 5-fluoro-2-nitropiridina (0,7 g; 6,25 mmol) u suvom DMF (7 ml) dodat je NaH (0,3 g; 95%; 12,49 mmol) u porcijama na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakciona smeša je zatim sipana u ledeno hladnu vodu (10 ml) i smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 × 30 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (10 ml), osušeni na bezvodnom Na2SO4i koncentrovani pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,54 g; 66%). LCMS: m/z = 238.3 [M+1].

terc-butil 3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)azetidin-1-karboksilat

Metoda 2. terc-butil 3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)azetidin-1-karboksilat:

[0123] Mešanom rastvoru terc-butil 3-hidroksiazetidin-1-karboksilata (3,00 g; 17,32 mmol) u suvom THF (20 ml) dodat je NaH (1,38 g; 60% u ulju; 34,64 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 30 minuta i 5-fluoro-2-nitropiridin (2,04 g; 14,35 mmol) je dodat u reakcionu smešu na 0°C. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu vodu (75 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 100 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (70 ml), osušeni na bezvodnom natrijum sulfatu i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo naslovno jedinjenje (2,00 g; 47,1%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,40 (s, 9H), 3,89 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 4,37 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 5,25 (s, 1H), 7,60-7,63 (m, 1H), 8,31 (dd, J = 8,8 Hz, J = 3,2 Hz, 2H).

Metoda 3:

[0124]

1-(3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)azetidin-1-il)etan-1-on

Metoda 3, korak 1.5-(Azetidin-3-iloksi)-2-nitropiridin HCl:

[0125] Mešanom rastvoru terc-butil 3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)azetidin-1-karboksilata (3,50 g; 11,85 mmol) u DCM (35 ml), dodat je 4M HCl u 1,4-dioksanu (3,5 ml; 14,0 mmol) kap po kap na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Posle završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je trituriran npentanom (15 ml) i filtriran da bi se dobilo naslovno jedinjenje (2,50 g; 91,0%) u vidu čvrste supstance. LCMS: m/z = 196,04 [M+1].

Metoda 3, korak 2.1-(3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)azetidin-1-il)etan-1-on:

[0126] Mešanom rastvoru 5-(azetidin-3-iloksi)-2-nitropiridin hidrohlorida (2,5 g; 10,79 mmol) u DCM (25 ml) dodat je TEA (4,3 g; 43,17 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 10 minuta na 0°C. Zatim je dodat acetil hlorid (1,2 g; 15,19 mmol) kap po kap na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C još 1 sat. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je sipana u zasićeni rastvor natrijum bikarbonata (15 ml) i ekstrahovana sa DCM (2 × 30 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni natrijum sulfatom i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo naslovno jedinjenje (2,0 g; 78,1%). LCMS: m/z = 238,51 [M+1].

(S)-1-(3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)etan-1-on

Metoda 3, korak 1. (S)-2-Nitro-5-(piperidin-3-iloksi)piridin:

[0127] Mešanom rastvoru terc-butil (S)-3- ((6-nitropiridin-3-il) oksi) piperidin-1-karboksilata (0,50 g; 1,54 mmol) u DCM (10 ml), dodata je TFA (2,5 ml; 5 V) kap po kap na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je sipana u zasićeni rastvor natrijum bikarbonata (15 ml) i ekstrahovana sa DCM (2 × 30 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni natrijum sulfatom i koncentrovani do suvoće pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je trituriran pentanom (5 zapremina) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,4 g; 70%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,31-8,33 (m, 2H), 7,75-7,78 (m, 1H), 4,53-4,59 (m, 1H), 3,10-3,13 (m, 1H), 2,75-2,80 (m, 1H), 2,57-2,62 (m, 2H), 2,05-2,09 (m, 1H), 1,68-1,71 (m, 1H), 1,51-1,68 (m, 1H), 1,46-1,50 (m, 1H); LCMS: m/z = 224,3 [M+1].

Metoda 3, korak 2. (S)-1-(3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)piperidin-1-il)etan-1-on:

[0128] Mešanom rastvoru (S)-2-nitro-5-(piperidin-3-iloksi) piridina (0,40 g; 1,79 mmol) u DCM (8 ml; 20 zapremina) dodat je trietilamin (0,38 ml; 2,69 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C 10 minuta i dodat je acetil hlorid (0,168 ml; 2,15 mmol) u DCM (1 ml) kap po kap. Reakciona smeša je mešana na 0°C 1 sat. Reakciona smeša je sipana u zasićeni rastvor natrijum bikarbonata (15 ml) i ekstrahovana sa DCM (2 × 30 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni natrijum sulfatom i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,3 g; 47%). LCMS: m/z = 266,4 [M+1].

Metoda 4

[0129]

5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)piridin-2-amin

Metoda 4. 5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)piridin-2-amin:

[0130] Mešanom rastvoru 5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi) -2-nitropiridina (0,54 g; 2,29 mmol) u smeši 1:1 metanol:etil acetat (12 ml) dodato je 10% Pd/C (0,054 g; 50% vlage). Zatim je reakcija mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom gasa H2tokom 3 sata. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je razblažena etil acetatom i filtrirana kroz sloj celita. Eluent je koncentrovan pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,22 g; 44%) u vidu čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,50-1,70 (m, 2H), 1,80-1,90 (m, 2H), 2,09-2,21 (m, 5H), 2,40-2,68 (m, 2H), 4,03-4,15 (m, 1H), 5,51 (s, 2H,-NH2), 6,40 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 7,10 (dd, J = 8,8 Hz, 2,8 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 2,8 Hz, 1H).

Metoda 4. 1-(3-((6-Aminopiridin-3-il)oksi)azetidin-1-il)etan-1-on:

[0131] Mešanom rastvoru 1-(3-((6-nitropiridin-3-il)oksi)azetidin-1-il) etan-1-ona (2,0 g; 8,43 mmol) u smeši 1: 1 etanol:etil acetat (60 ml) je dodat Pt2O (0,2 g; 10% m/m). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi pod pritiskom gasa od 15 kg H2tokom 16 sati. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je razblažena etil acetatom (25 ml) i filtrirana kroz sloj celita. Celitna podloga je isprana etil acetatom (2 × 25 ml) i kombinovani filtrat je koncentrovan pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (1,40 g; 80,1%) u vidu čvrste supstance. LCMS: m/z = 208,05 [M+1].

Metoda 5

[0132]

5-((5-metilpirimidin-2-il)oksi)piridin-2-amin

[0133] Metoda 5, korak 1.2-((6-hloropiridin-3-il)oksi)-5-metilpirimidin: Mešanom rastvoru 6-hloropiridin-3-ola (1 g; 7,77 mmol) u NMP (5 ml) dodat je kalijum terc-butoksid (1,3 g; 11,62 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodat je 2-hloro-5-metilpirimidin (0,99 g; 7,77 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80°C tokom 2 sata. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je ugašena vodom (15 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 20 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (10 ml), osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1 g, 58%). LCMS: m/z = 222,35 [M+1].

Metoda 5, korak 2. N- (4-metoksibenzil)-5-((5-metilpirimidin-2-il)oksi)piridin-2-amin:

[0134] Mešanom rastvoru 2-((6-hloropiridin-3-il)oksi)-5-metilpirimidina (0,5 g; 2,26 mmol) u 1,4-dioksanu (10 ml) dodat je 4-metoksibenzilamin (0,37 g; 2,71 mmol), BINAP (0,07 g; 0,11 mmol), Pd2(dba)3(0,04 g; 0,05 mmol) i natrijum terc-butoksid (0,65 g; 6,78 mmol). Reakciona smeša je pročišćena gasom argona 15 minuta i zagrevana na 100°C 4 sata. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je ugašena vodom (50 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (10 ml), osušeni na bezvodnom natrijum sulfatu i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0,15 g, 21%). LCMS: mlz = 323,43 [M+1].

Metoda 5, korak 3.5-((5-metilpirimidin-2-il)oksi)piridin-2-amin:

[0135] U N-(4-metoksibenzil)-5-((5-metilpirimidin-2-il)oksi)piridin-2-amin (0,13 g; 0,40 mmol), dodata je TFA (1,3 ml; 10 V) kap po kap na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Posle završetka reakcije, reakciona smeša je koncentrisana pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je trituriran pentanom (5 zapremina) da bi se dobilo sirovo jedinjenje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (0,2 g, TFA so). LCMS: m/z = 203,51 [M+1].

Metoda 6

[0136]

(S)-4-(1-Aminopropan-2-il)benzonitril hidrohlorid

Metoda 6, korak 1. Etil (E,Z)-3-(4-cijanofenil)but-2-enoat:

[0137] Mešanom rastvoru kalijum terc-butoksida (10,09 g; 89,7 mmol) u suvom THF (90 ml) dodat je trietil fosfonoacetat (20,08 g; 89,7 mmol) na 0°C pod atmosferom azota. Zatim je reakciona smeša mešana 15 minuta na istoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 1 sat. Zatim je dodat 4-acetilbenzonitril (10,0 g; 69,0 mmol) kao rastvor u THF (50 ml) i reakciona smeša je zagrevana na 70°C tokom 3 sata. Nakon završetka reakcije (praćene pomoću TLC), pH reakcione smeše je podešen na 3-4 sa 1N HCl. THF je uklonjen pod smanjenim pritiskom i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 × 50 ml). Sjedinjeni organski slojevi isprani su slanim rastvorom (50 ml), osušeni nad anhidrovanim Na2SO4i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silikagelu da bi se dobilo naslovno jedinjenje (8,5 g; 58%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,15 (t, J = 6,8 Hz, 1,5 H), 1,36 (t, J = 6,8 Hz, 3 H), 2,21 (s, 1,5 H), 2,60 (s, 3H), 4,05 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 4,27 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 6,01 (S, 0,5 H), 6,19 (S, 1H), 7,30-7,71 (m, 6 H).

Metoda 6, korak 2. Etil 3-(4-cijanofenil)butanoat:

[0138] Mešanom rastvoru etil (E, Z) 3-(4-cijanofenil)but-2-enoata (8,0 g; 37,2 mmol) u metanolu: etil acetat (1:4; 140 ml) je dodat Pd/C (0,8 g; 10% m/m; 50% vlage). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom vodoničnog gasa 3 sata. Reakciona smeša je razblažena etilacetatom i filtrirana kroz sloj celita. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo naslovno jedinjenje (4,5 g; 56%).

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,62 (dd, J = 7,6 Hz, 1,2 Hz, 2H), 3,70 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 4,07-4,15 (m, 2H), 7,37 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 8,4 Hz, 2H).

Metoda 6, korak 3.3-(4-cijanofenil)butanska kiselina:

[0139] Mešanom rastvoru etil 3-(4-cijanofenil)butanoata (4,5 g; 20,71 mmol) u smeši MeOH : THF : H2O (4:2:1; 100 ml) dodat je LiOH (3,48 g; 82,95 mmol) na 5°C do 10°C. Rezultirajuća reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1,5 sat. Nakon završetka reakcije (praćene pomoću TLC), reakcioni rastvarač je uparen. Ostatak je rastvoren u vodi (10 ml) i ekstrahovan etil acetatom (2 × 15 ml). pH vodenog sloja podešen je na 3-4 sa koncentrovanom HCl. Talog koji se formirao je filtriran da bi se dobilo naslovno jedinjenje (3,8 g; 97%) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,23 (d, J = 6,8, 3H), 2,58 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,24 (q, J =7,2, 1H), 7,49 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,77 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 12,15 (s, 1H).

Metoda 6, korak 4. terc-butil (2-(4-cijanofenil)propil)karbamat:

[0140] Mešanom rastvoru 3-(4-cijanofenil)butanske kiseline (5,0 g; 26,45 mmol) u tercbutanolu (65 ml) dodat je trietilamin (11,0 ml; 79,36 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je reakciona smeša ohlađena na 5-10°C i dodat je DPPA (12.30 g; 44.97 mmol) kap po kap. Nakon formiranja acilazida, reakcija je mešana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (40 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 40 ml). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom (25 ml), osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo naslovno jedinjenje (4,5 g; 66%) u vidu čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,17 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 1,33 (s, 9H), 2,90-3,00 (m, 1H), 3,04-3,15 (m, 2H), 6,91 (t, J = 5,2 Hz, 1H, -NH), 7,42 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,77 (d, J = 7,2 Hz, 2H).

Metoda 6, korak 5.4-(1-Aminopropan-2-il)benzonitril hidrohlorid:

[0141] Mešanom rastvoru terc-butil- (2-(4-cijanofenil)propil)karbamata (4,5 g; 17,29 mmol) u metanolu (9 ml) dodat je rastvor 4M HCl u dioksanu (10,8 ml; 2,4 vol.) kap po kap na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (2,81 g; 83%) u vidu čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,28 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,03 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 3,15-3,26 (m, 1H), 7,55 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,83 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 8,21 (s, 3H). LCMS: m/z = 161,6 [M+1].

Metoda 6, korak 6.4-(1-Aminopropan-2-il)benzonitril:

[0142] 4-(1-aminopropan-2-il)benzonitril hidrohlorid je tretiran vodenim rastvorom zasićenog natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom (3 × 30 ml) da bi se dobilo sirovo jedinjenje u vidu tečnosti koje je dalje prečišćeno hromatografijom na silika gelu (DCM: MeOH = 90:10) kako bi se dobilo naslovno racemsko jedinjenje u vidu gustog ulja (2,29 g; 83%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 1,28 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,85 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 7,34 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,63 (d, J = 7,2 Hz, 2H). LCMS: m/z =161,5 [M+1]. Racemski amin se može razdvojiti u enantiočisto naslovno jedinjenje preparativnim hiralnim SFC pomoću kolone CHIRALPAK AD-H (250 mm, 50 mm, 5 mikrona; mobilna faza 25% acetonitril:metanol: dimetilamin (80:20:0,1) u 75% CO2). Rani eluirajući izomer je nedvosmisleno opredeljen kao (S)-4-(1-aminopropan-2-il)benzonitril dobijanjem rendgenskih ko-kristalnih struktura povezanih strukturno povezanih inhibitora sa skraćenim oblikom p300.

Metoda 7

[0143]

Etil 2-((2-(4-cijanofenil)propil) amino)-2- (1-metil-1H-pirazol-4-il)acetat

Metoda 7, korak 1.2-((2-(4-cijanofenil)propil)amino)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)sirćetna kiselina:

[0144] Mešanom rastvoru 4-(1-aminopropan-2-il)benzonitril hidrohlorida (5 g; 30,86 mmol) u DCM (75 ml) dodat je TEA (3,12 g; 30,86 mmol), 2-oksosirćetna kiselina (2,28 g; 30,86 mmol) i (1-metil-1H-pirazol-4-il)boronska kiselina (3,80 g; 30,86 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 15 minuta. Nakon toga je dodat HFIP (13,48 g; 80,24 mmol) i reakciona smeša je mešana 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana i ostatak je mešan sa DCM:pentanom (3:7; 150 ml) tokom 30 minuta. Čvrsta istaložena supstanca koja je filtrirana na Bihnerovom levku i isprana n-pentanom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (5,5 g; 59%). LCMS: m/z = 299 [M+1].

Metoda 18, korak 2. Etil 2-((2-(4-cijanofenil)propil)amino)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)acetat:

[0145] Smeša 2-((2-(4-cijanofenil)propil)amino)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)sirćetne kiseline (5 g; 16,77 mmol) u DMF (100 ml) zagrevana je na 80°C dok reakciona smeša nije postala bistar rastvor. K2CO3(5,79 g; 41,94 mmol) i etil jodid (2,61 g; 16,77 mmol) su dodati na istoj temperaturi i smeša je mešana 30 minuta. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakcija je ugašena ledenom vodom (200 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 75 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (100 ml), osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen silikagel hromatografijom da bi se dobilo naslovno jedinjenje (2,5 g; 45%) u vidu guste tečnosti. LCMS: m/z = 327,7 [M+1].

Šema 1

[0146] Polazni materijali potrebni za sintezu primera pripremljenih korišćenjem šeme 1 bili su ili komercijalno dostupni ili pripremljeni korišćenjem metoda od 1 do 7.

Primer 1

[0147]

(R)- i (S)-2-((4-cijanofenetil)amino)-N- (5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)piridin-2-il)-2-fenilacetamid

[0148] Šema 1, korak 1. Etil 2-((4-cijanofenetil)amino)-2-fenilacetat: Smeša etil 2-bromo-2-fenilacetata (2,0 g; 8,22 mmol), 4-(2-aminoetil)benzonitril hidrohlorida (2,25 g; 12,33 mmol) i TEA (2,50 g; 24,66 mmol) u DMF (20 ml) zagrevana je 3 sata na 60 °C. Reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu vodu (50 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 ml). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom (25 ml), osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo naslovno jedinjenje (2,2 g; 86%) u vidu guste tečnosti.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,10 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 2,62-2,82 (m, 4H), 4,02-4,09 (m, 2H), 4,39 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,28-7,35 (m, 5H), 7,40 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 2H). LCMS: m/z = 309,28 [M+1].

[0149] Šema 1, korak 2, postupak 2. (R)- i (S)-2-((4-cijanofenetil)amino)-N-(5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)piridin-2-il)-2-fenilacetamid: Mešanom rastvoru 5-((1-metilpiperidin-4-il)oksi) piridin-2-amina (0,10 g; 0,48 mmol), etil 2-((4-cijanofenetil)amino) -2-fenilacetata (0,14 g; 0,48 mmol) u suvom toluenu (2 ml) dodat je trimetilaluminijum (0,5 ml; 2M u toluenu, 0,96 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 100°C 2 sata. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je sipana u hladnu vodu (25 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (25 ml), osušeni nad anhidrovanim natrijum sulfatom i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,10 g; 45%) kao racemska smeša.

[0150] Racemsko naslovno jedinjenje je razdvojeno pomoću hiralne HPLC (CHIRALCEL OJ-H; 25% MeOH u tečnom CO2+ 0,1% DEA) da bi se obezbedila enantiočista jedinjenja. Brže eluirajući enantiomer (izomer 1) naslovnog jedinjenja dobijen je kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,60-1,65 (m, 2H), 1,89 (bs, 2H), 2,12-2,17 (m, 5H), 2,51 (bs, 2H), 2,74-2,77 (m, 2H), 2,85-2,86 (m, 2H), 4,36 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,26-7,36 (m, 3H), 7,42-7,45 (m, 5H), 7,74 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,96 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 10,32 (s, 1H). LCMS: m/z = 470,51 [M+1].

[0151] Enantiomer sa sporijim eluiranjem (izomer 2) naslovnog jedinjenja dobijen je kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,58-1,66 (m, 2H), 1,89 (bs, 2H), 2,12-2,17 (m, 5H), 2,51 (bs, 2H), 2,75 (bs, 2H), 2,85-2,88 (m, 2H), 4,34-4,38 (m, 1H), 4,49 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,25-7,35 (m, 3H), 7,42-7,45 (m, 5H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,96 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,02 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 10,31 (s, 1H). LCMS: m/z = 470,51 [M+1].

Primer 2

[0152]

Šema 1, korak 1. (R, S)- i (S, S)-etil 2-((2-(4-cijanofenil)propil)amino)-2-fenilacetat:

[0153] Smeša etil 2-bromo-2-fenilacetata (9,11 g; 37,5 mmol), (S)-4-(1-aminopropan-2-il)benzonitrila (5,0 g; 31,2 mmol) i TEA (13,1 ml; 93,7 mmol) u DMF (50 ml) zagrevana je na 60°C tokom 3 sata. Reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu vodu (150 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 150 ml). Sjedinjeni organski slojevi isprani su slanim rastvorom (150 ml), osušeni nad anhidrovanim Na2SO4i koncentrisani pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu kako bi se dobila smeša naslovnih jedinjenja (7,0 g; 70%) u vidu guste tečnosti.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,08 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 1,16 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,35-2,44 (m, 1H), 2,49-2,66 (m, 1H), 2,96 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 3,96-4,06 (m, 2H), 4,32 (s, 1H), 7,26-7,42 (m, 7H), 7,74 (t, J = 7,6 Hz, 2H). LCMS: m/z = 323,6 [M+1].

Šema 1, korak 2, postupak 1. (R)- i (S)-N-(5-((1-acetilazetidin-3-il)oksi)piridin-2-il)-2-(((S)-2-(4-cijanofenil)propil)amino)-2-fenilacetamid:

[0154] Mešanom rastvoru 1-(3- ((6-aminopiridin-3-il)oksi)azetidin-1-il) etan-1-ona (2,0 g; 9,65 mmol), etil 2-((2-(4-cijanofenil)propil) amino)-2-fenilacetata (3,7 g; 11,58 mmol) u DMF (20 ml) dodat je 1M LiHMDS u THF-u (24,2 ml; 24,12 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 50°C 1 sat. Nakon završetka reakcije (praćene pomoću TLC), reakciona smeša je sipana u ledeno hladnu vodu (15 ml) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 25 ml). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (15 ml), osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen silikagel hromatografijom da bi se dobila naslovna jedinjenja (3,0 g; 61%) u vidu smeše.

[0155] Naslovna jedinjenja su razdvojena pomoću hiralne HPLC (CHIRALCEL OJ-H; 15% MeOH u LIQUID.CO2+ 0,1% DEA) da bi se obezbedila enantiočista jedinjenja. Bržeeluirajući enantiomer naslovnog jedinjenja dobijen je kao čvrsta supstanca (Izomer 1): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,23 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,79 (s, 3H), 2,64 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 3,00-3,04 (m, 1H), 3,74-3,77 (m, 1H), 4,07-4,10 (m, 1H), 4,25-4,29 (m, 1H), 4,44 (s, 1H), 4,51-4,55 (m, 1H), 5,05 (s, 1H), 7,24-7,45 (m, 8H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,96-8,00 (m, 2H), 10,41 (s, 1H). LCMS: m/z = 484,5 [M+1]. Sporije-eluirajući enantiomer naslovnog jedinjenja dobijen je kao čvrsta supstanca (Izomer 2):<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1,23 (d, J = 8,0 Hz, 3H), 1,79 (s, 3H), 2,68 (s, 3H), 3,02 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 3,75-3,77 (m, 1H), 4,08-4,10 (m, 1H), 4,25-4,29 (m, 1H), 4,42 (s, 1H), 4,51-4,55 (m, 1H), 5,04 (s, 1H), 7,24-7,46 (m, 8H), 7,75 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,94-7,98 (m, 2H), 10,22 (s, 1H). LCMS: mlz = 484,47 [M+1].

[0156] Sledeća jedinjenja su pripremljena korišćenjem sličnih procedura kao što su one koje su opisane za primere 1 i 2 korišćenjem odgovarajućih polaznih materijala.

[0157] Sledeća jedinjenja su pripremljena korišćenjem sličnih procedura kao što su one koje su opisane za primere 1 i 2 korišćenjem odgovarajućih polaznih materijala. Odvojeni izomeri za svako jedinjenje su navedeni redosledom kojim eluiraju. Na primer, u slučajevima kada postoje dva izomera, izomer 1 je izomer sa bržim eluiranjem, a izomer 2 je izomer sa sporijim eluiranjem. U slučajevima kada postoje četiri izomera, izomer 1 je najbrži eluirajući izomer praćen izomerom 2, zatim izomerom 3, a zatim izomerom 4. Pored toga, kada je navedeno više od jedne hiralne kolone, kolone se koriste u sekvencijalnom redosledu kako je navedeno. Na primer, ako su navedene dve kolone za prečišćavanje jedinjenja sa 2 stereocentra, prva kolona je korišćena za razdvajanje smeše u čisti stereoizomer 1, čisti stereoizomer 2 i smešu stereoizomera 3 i 4, a druga kolona je korišćena za razdvajanje smeše stereoizomera 3 i 4. U nekim slučajevima, jedna hiralna kolona može razdvojiti sva četiri stereoizomera.

[0158] Stereohemijska reprezentacija (tj. R ili S) svakog izomera jedinjenja nije nacrtana u tabeli i imenovana je kako bi se jasno stavilo do znanja da je namenjena podrška za oba izomera. Hiralni atomi ugljenika označeni su zvezdicom (*).

1. a abel T

Primer 26

[0159]

(R, S)- i (S, S)-N-(5-(azetidin-3-iloksi)piridin-2-il)-2-(((S)-2-(4-cijanofenil)propil)amino)-2-fenilacetamid

[0160] Korak 1. (R, S)- i (S, S)- N-(5-(azetidin-3-iloksi)piridin-2-il)-2-(((S)-2-(4-cijanofenil)propil) amino)-2-fenilacetamid: Mešanom rastvoru terc-butil 3-((6-(2-((2-(4-cijanofenil)propil)amino) -2-fenilacetamido)piridin-3-il)oksi) azetidin-1-karboksilata (0,50 g; 0,92 mmol) u DCM (15 ml), TFA (2,5 ml) je dodat kap po kap na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (15 ml) i ekstrahovan sa DCM (2 × 30 ml). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 ml), osušen na bezvodnom natrijum sulfatu i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Dobijeni ostatak je trituriran pentanom (50 ml) i dobijena čvrsta supstanca je prečišćena reverznom faznom hromatografijom da bi se dobilo naslovno racemsko jedinjenje (0,275 g; 68%).

[0161] Naslovno racemsko jedinjenje je razdvojeno pomoću hiralne HPLC (CHIRALCEL AD-H; 30% (50:50 MeOH:ACN) u tečnom CO2+ 0,1% DEA) da bi se obezbedila enantiočista jedinjenja. Brže eluirajući enantiomer naslovnog jedinjenja dobijen je kao čvrsta supstanca (Izomer 1):<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 2.65 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.00-3.02 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.79 (bs, 2H), 4.39 (s, 1H), 4.99 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.25-7.45 (m, 8H), 7.73 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.88-7.93 (m, 2H), 10.15 (s, 1H). LCMS: m/z = 442,46 [M+1]. Sporije-elutirajući enantiomer naslovnog jedinjenja dobijen je kao čvrsta supstanca (Izomer 2):<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,21 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,62 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,00-3,01 (m, 1H), 3,66 (s, 2H), 3,98 (bs, 2H), 4,42 (s, 1H), 5,01 (s, 1H), 7,24-7,44 (m, 8H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,91-7,96 (m, 2H), 10,37 (s, 1H). LCMS: m/z = 442,35 [M+1].

Primer 27

[0162]

(R, S)- i (S, S)-2-(((S)-2-(4-cijanofenil)propil)amino)-N-(5-((1-(2-hidroksiacetil)azetidin-3-il)oksi)piridin-2-il)-2-fenilacetamid

1. korak: (R, S)- i (S, S)-2-(((S)-2-(4-cijanofenil)propil)amino)-N-(5-((1-(2-hidroksiacetil)azetidin-3-il)oksi)piridin-2-il)-2-fenilacetamid:

[0163] Mešanom rastvoru glikolne kiseline (0,058 g; 0,76 mmol) u suvom DMF (1,5 ml) dodat je HATU (0,35 g; 0,92 mmol) na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Nakon 1 sata, u reakcionu smešu dodata je TFA so N-(5-(azetidin-3-iloksi)piridin-2-il)-2-((2-(4-cijanofenil)propil)amino)-2-fenilacetamida (0,3 g; 0,54 mmol) u DMF (1,5 ml), a zatim DIPEA (0,21 g; 1,62 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Nakon završetka reakcije (koju prati TLC), reakciona smeša je ugašena ledenom vodom i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 10 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni natrijum sulfatom i koncentrovani pod smanjenim pritiskom radi dobijanja sirovog proizvoda. Sirovi proizvod je prečišćen Combi-fleš hromatografijom u DCM:MeOH, nakon čega je usledila reverzno fazna HPLC da bi se dobilo racemsko naslovno jedinjenje (0,105 g; 39%).

[0164] Racemsko naslovno jedinjenje je razdvojeno hiralnom HPLC (CHIRALCEL OJ-H; 20% (50:50 IPA:ACN) u tečnom CO2+ 0,1% DEA) da bi se obezbedila enantiočista jedinjenja. Brže-eluirajući enantiomer naslovnog jedinjenja dobijen je kao čvrsta supstnca (Izomer 1): Izomer-1:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,22 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,69 (s, 3H), 3,03 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 4,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,34 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 4,43 (s, 1H), 4,62 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 5,03 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 5,09 (s, 1H), 7,25-7,47 (m, 6H), 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,97 (d, J = 10,8 Hz, 2H), 10,22 (s). LCMS: m/z = 500,5 [M+1]. Izomer-2:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,23 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,65 (s, 3H), 3,02 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,82 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,10-4,15 (m, 1H), 4,33-4,43 (m, 2H), 4,61 (m, 1H), 5,00 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 5,08 (s, 1H), 7,26-7,45 (m, 6H), 7,75 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,98 (d, J = 13,2 Hz, 2H), 10,39 (s, 1H). LCMS: m/z = 500,8 [M+1].

Biohemijski i ćelijski testovi

[0165] Aktivnost jedinjenja opisanih u ovom dokumentu kao inhibitori p300/CBP HAT može se lako odrediti korišćenjem metodologije testa scintilacione blizine (SPA) (Udenfriend, S.; Gerber, L.; Nelson, N. Scintillation Proximity Assay: A Sensitive and Continuous Isotopic Method for Monitoring Ligand/Receptor and Antigen/Antibody Interactions. Anal. Biochem.

1987, 161, 494-500). Konkretno, jedinjenja sledećih primera imala su aktivnost u referentnim testovima pokazujući sposobnost inhibicije acetilacije histonskog peptida skraćenim oblikom enzima p300 (p300 HAT). Svako jedinjenje koje pokazuje IC50od oko 100 µM ili manje smatralo bi se p300/CBP-HAT inhibitorom, kako je ovde definisano.

[0166] U tipičnom eksperimentu, inhibitorna aktivnost p300 HAT jedinjenja opisanih u ovom dokumentu određena je u skladu sa sledećom eksperimentalnom metodom.

[0167] Domen p300 HAT (ostaci 1287-1666) je eksprimiran i prečišćen sa N-terminal His oznakom iz ćelija Escherichia coli. Eksprimirani protein je prečišćen pomoću Ni2+ afiniteta, nakon čega je usledila anjonska izmenjivačka hromatografija. Odgovarajuće frakcije su objedinjene i puferski izmenjene u 20mM Hepes pH 7,5, 150mM NaCl i 1mM TCEP.

[0168] Jedinjenja od interesa rastvorena u DMSO su presovana u pločicu Greiner black sa 384 bunara u dvostrukom odgovoru doze od 10 tačaka korišćenjem Echo 550 (Labcyte). p300-HAT domen prečišćen interno (aa 1287-1666) je razblažen na 6nM u reakcionom puferu (50mM Tris pH 8,0, 100mM NaCl, 1mM DTT, 0,069mM Brij-35, 0,1mM EDTA, 0.1mg/mL BSA), u kombinaciji sa 4,14µM AcCoA (Sigma-Aldrich) i 0,46µM<3>H-AcCoA (PerkinElmer), i 12,5 µL dodat u svaki bunar i inkubiran 30 minuta na sobnoj temperaturi (RT). Reakcije su inicirane sa 12,5 µL 2µM biotinilisanog H3(1-21) peptida (New England Peptide) i pokrenute na 1 sat na sobnoj temperaturi, a zatim ugašene sa 20µL rastvorom za zaustavljanje (200m TrisM pH 8,0, 200mM EDTA, 2M NaCl, 160 µM anakardinske kiseline).35 µL reakcione zapremine je prebačeno u streptavidinsku FlashPlate sa 384 bunara (PerkinElmer) pomoću Bravo manipulatora tečnosti (Velocity 11) i inkubirano 1,5 sat na RT. Ploče su aspirirane, isprane sa 95 µL pufera za pranje (15mM Tris pH 8,5; 0,069 µM Brij-35), aspirirane, zatopljene i scintilacione brojevi očitani na Topcount (PerkinElmer). Podaci su analizirani u Genedata kako bi se utvrdile vrednosti inhibitora IC50.

[0169] Test p300 SPA pune dužine je sproveden po istom protokolu kao i test p300 HAT SPA, ali je korišćen 6nM prečišćeni p300 pune dužine (kupljen od Active Motif) umesto prečišćenog p300-HAT domena.

[0170] Izabrana jedinjenja su takođe procenjena u ćelijskom testu H3K18Ac MSD koji meri sposobnost jedinjenja da inhibiraju acetilaciju hromatina na H3K18, procesu katalizovanom sa p300 i CBP. U tipičnom eksperimentu, inhibitorna aktivnost p300 HAT unutar ćelija ovde opisanih jedinjenja određena je u skladu sa sledećom eksperimentalnom metodom.20k HCT-116 ćelija po bunaru su zasejane u 75 µL RPMI+10% FBS medijuma noć pre tretmana. Jedinjenja zasejana u DMSO u 4x finalnoj koncentraciji resuspendovana su u 30 µL RPMI+10% FBS, a zatim je 25 µL sjedinjeno sa odgovarajućim bunarima koji sadrže ćelije. Tretirane ćelije su inkubirane 2 sata na 37°C, zatim lizirane u finalnoj zapremini od 500 µL i zamrznute na -80°C. MSD ploče (Meso Scale Discovery) su preko noći premazane na 4°C sa 60µL 1:500 α-total histon antitela (Millipore MAB3422) u PBS. Ploče su zatim blokirane sa 5% BSA u TBST protresajući na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, isprane i 30 µL lizata je dodato u svaki bunar za 2 sata protresanja na sobnoj temperaturi. Ploče su isprane i dodato je 25 µL 1:216 α-H3K18ac antitela (CST 9675) u PBS, zatim je inkubirano 1 sat protresajući na sobnoj temperaturi. Ploče su ponovo isprane, zatim je 25 µL 1:1000 Sulfo-Tag kozje α-zečje antitelo (Meso Scale Discovery R32Ab-1) u PBS dodato za 1 sat protresanja na sobnoj temperaturi. Ploče su isprane još jednom, a zatim je 150 µL 1× Read Buffer (MSD # R92TD-3) dodato u sve bunare i očitano na MSD SECTOR Imager 2400 koristeći konvencionalni uređaj za očitavanje.

[0171] Jedinjenja sledećih primera imala su aktivnost u inhibiciji domena HAT enzima p300 u gore pomenutim testovima sa IC50manjim od oko 100 µM. Mnoga ovde opisana jedinjenja imala su aktivnost u inhibiciji domena HAT enzima p300 u gore pomenutim testovima, sa IC50manjim od oko 10 µM, poželjno manjim od ili oko 0,1 µM. Dodatni podaci su dati u sledećim primerima. Takav rezultat ukazuje na suštinsku aktivnost jedinjenja koja se koriste kao inhibitori domena histon acetil transferaze enzima p300. Generalno, prosečni stručnjak u ovoj oblasti bi procenio da se smatra da supstanca efikasno inhibira aktivnost p300 HAT ako ima IC50manji ili oko 1 µM, poželjno manji ili oko 0,1 µM. Ovo obelodanjivanje takođe uključuje jedinjenja koja poseduju aktivnost kao inhibitori drugih enzima histon acetil transferaze, kao što je CBP-HAT. IC50za p300 HAT je mera sposobnosti ispitivanog jedinjenja da inhibira delovanje enzima p300.

[0172] Inhibitorna aktivnost P300 ovde opisanih jedinjenja procenjena iz P300 HAT SPA testa prikazana je u Tabeli 2. Sve aktivnosti predstavljaju prosek od najmanje 2 replicirane titracije.

Tabela 2

[0173] Iako smo opisali niz otelotvorenja, očigledno je da naši osnovni primeri mogu biti izmenjeni kako bi pružili druga otelotvorenja koja koriste jedinjenja i metode ovog pronalaska. Stoga će se ceniti da će obim ovog pronalaska biti definisan priloženim patentnim zahtevima, a ne specifičnim otelotvorenjima koja su predstavljena kao primer.

[0174] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste dobijaju značenje koje je opšte poznato prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti.

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu R<1>, R<3>i R<4>su svaki nezavisno vodonik ili C1-4alkil; R<2>je fenil ili pirazolil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa halogenom ili C1-4alkilom; R<5>je C1-6alkil supstituisan sa 4- do 6-članim heterociklilom ili 5- do 6-članim heteroarilom, pri čemu je svaki od navedenih 4- do 6-članog heterociklila ili 5- do 6-članog heteroarila opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane od R<d>; ili R<5>je 4- do 6-člani heterociklil ili 5- do 6-člani heteroaril, pri čemu je svaki od navedenih 4- do 6-članog heterociklila ili 5- do 6-članog heteroarila opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane od R<d>; R<a>, ako je prisutan, je C1-3alkil, C1-3alkoksi, halo(C1-3alkil), haloC1-3alkoksi ili halo; Rje halo, cijano ili -SO2NH2; svaki R<d>je nezavisno halo, CN, okso, NO2, C1-6alkil, C2-6alkenil, C1-6alkoksi, halo(C1- 6alkoksi), halo(C1-6alkil), -C1-6alkilOR<e>, -C(O)R<f>, -C(O)OR, -C1-6alkilC(O)OR<e>, -C(O)N(R<e>)2, -C(O)NR<e>C1-6alkilOR<e>, -OC1-6alkilN(R<e>)2, -C1-6alkilC(O)N(R<e>)2, -C1- 6alkilN(R<e>)2, -N(R<e>)2, -C(O)NR<e>C1-6alkilN(R<e>)2, -NR<e>C1-6alkilN(R<e>)2, -NR<e>C1- 6alkilOR<e>, -SOR<e>, -S(O)2R<e>, -SON(R<e>)2, -SO2N(R<e>)2, -O(C3-C6)cikloalkil, -O-C1- 4alkilaril, -C1-6alkil(C3-C6)cikloalkil, -C1-6alkilaril, -C1-6alkilheteroaril, -C1-6alkilheterociklil, (C3-C6)cikloalkil, heterociklil, heteroaril ili aril, pri čemu svaki od navedenih (C3-C6)cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril sam i u vezi sa -O(C3-C6)cikloalkil, -C1-6alkil(C3-C6)cikloalkil, -C1-6alkilaril, -C1-6alkilheteroaril i -C1-6alkilheterociklil su opciono supstituisani sa 1 do 3 grupe izabrane između halo, C1-6alkil, C1-6haloalkil, C1-6alkoksi, C1-6haloalkoksi, -N(R<e>)2, -C(O)R<f>i -C1-6alkilOR<e>; svaki R<e>je nezavisno vodonik, halo (C1-4alkil) ili C1-4alkil; svaki R<f>je nezavisno vodonik, halo(C1-4alkil), C1-4alkil, ili (C3-C4) cikloalkil; q je 0 ili 1; i pri čemu: termin aril se odnosi na aromatični karbociklični jednostruki prsten ili dva spojena prstenasta sistema koji sadrže 6 do 10 atoma ugljenika; termin heteroaril koji se koristi sam ili kao deo većeg dela odnosi se na aromatični radikal od 5 do 12 članova koji sadrži 1 do 4 heteroatoma izabrana između N, O i S; i termin heterociklil se odnosi na 4-člani do 12-člani zasićeni ili delimično nezasićeni heterociklični prsten koji sadrži 1 do 4 heteroatoma nezavisno izabrana između N, O i S.
2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu jedinjenje je formule V:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu jedinjenje je formule VI ili VII:

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
4. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 3, pri čemu je jedinjenje formule VIII, IX, X ili XI:

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
5. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 4, pri čemu je R<2>fenil.
6. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 5, pri čemu je Rcijano.
7. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, pri čemu R<5>je C1-4alkil supstituisan pirazolilom ili oksazolidinilom, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane od R<d>; ili je R<5>piperidinil, azetidinil, heksahidropirimidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, oksetanil, pirazolil, pirolidinil ili pirimidinil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 grupe izabrane od R<d>.
8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, pri čemu je R<d>izabran između halo, okso, C1-4alkil, C1-4alkoksi, halo(C1-4alkil), -C1-4alkilOR<e>, -C(O)R<f>, -C(O)N(R<e>)2, -C1-6alkilC(O)N(R<e>)2i -S(O)2R<e>.
9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8, pri čemu je R<d>izabran između C1-6alkila, -C(O)R<f>i okso.
10. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 8, pri čemu je R<e>vodonik ili C1-3alkil.
11. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 10, pri čemu je R<f>ciklopropil ili C1-4alkil.
12. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 11, pri čemu je R<5>
13. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje izabrano od

ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli.
14. Farmaceutski sastav koji se sastoji od jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1 do 13, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli; i farmaceutski prihvatljivog nosača.
15. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 13, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili sastav prema zahtevu 14, za upotrebu u lečenju poremećaja posredovanog sa CBP i/ili EP300, koji je izabran iz grupe koju čine rak, srčano oboljenje, metaboličko oboljenje, fibrotičko oboljenje, inflamatorno oboljenje i virusna infekcija. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 74