RS66798B1 - Supstituisani 1,2-dihidro-3h-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-oni - Google Patents

Description

Opis

Oblast pronalaska

[0001] Predmetna prijava se odnosi na jedinjenja koja su inhibitori WEE1 i ona za upotrebu u lečenju stanja koja karakteriše prekomerna ćelijska proliferacija, kao što je rak.

Opis

[0002] VEE1 kinaza igra ulogu u zaustavljanju kontrolne tačke G2-M ćelijskog ciklusa radi popravke DNK pre ulaska u mitozu. Normalne ćelije popravljaju oštećenu DNK tokom zaustavljanja G1. Ćelije raka često imaju nedostatak kontrolne tačke G1-S i zavise od funkcionalne G2-M kontrolne tačke za popravku DNK. VEE1 je prekomerno eksprimiran u različitim tipovima raka.

Kratak opis

[0003] Neke realizacije obezbeđuju jedinjenje Formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0004] Pojedine realizacije koje su ovde otkrivene odnose se na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu jednog ili više jedinjenja Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, i farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ekscipijens ili njihovu kombinaciju.

[0005] Neke realizacije opisane ovde se odnose na jedinjenje opisano ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu ovde opisanog jedinjenja (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ovde opisanu) za upotrebu poboljšanju i/ili u lečenju raka.

[0006] Pojedine realizacije opisane ovde se odnose na jedinjenje koje je ovde opisano (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu ovde opisanog jedinjenja (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so) za upotrebu u sprečavanju replikacije malignog rasta ili tumora, gde maligni rast ili tumor nastaje usled ovde opisanog raka.

[0007] Neke realizacije opisane ovde se odnose na jedinjenje koje je ovde opisano (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu ovde opisanog jedinjenja (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so) za upotrebu u poboljšanju ili lečenju malignog rasta ili tumora, gde maligni rast ili tumor je posledica ovde opisanog raka.

[0008] Neki ovde opisani primeri se odnose na ovde opisano jedinjenje (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu ovde opisanog jedinjenja (na primer, jedinjenje formule (I), ili farmaceutski prihvatljivo jedinjenje formule (I), ili farmaceutski prihvatljivu so) za upotrebu u inhibiciji aktivnosti WEE1 (na primer, inhibiranje aktivnosti WEE1 u mutiranim TP53 ćelijama, inhibiranje aktivnosti WEE1 u ćelijama TP53divljeg tipa, inhibiranje aktivnosti WEE1 u p53 -deficijentnim ćelijama i/ili smanjenje prekomerne ekspresije WEE1 u ćelijama).

[0009] Neki ovde opisani primeri se odnose na efektivnu količinu ovde opisanog jedinjenja (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efektivnu količinu ovde opisanog jedinjenja (na primer, jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) za ublažavanje ili lečenje raka koji je ovde opisan inhibiranjem aktivnosti WEE1 (na primer, inhibiranjem aktivnosti WEE1 u TP53 mutiranim ćelijama, inhibiranjem aktivnosti WEE1 u TP53 ćelijama divljeg tipa, inhibiranjem aktivnosti WEE1 u p53 deficijentnim ćelijama i/ili smanjenjem prekomerne ekspresije WEE1 u ćelijama).

DETALJAN OPIS

[0010] Bilo koje reference na metode lečenja/metode inhibicije ili upotrebu jedinjenja kao lekova ovde treba tumačiti kao reference na jedinjenja, farmaceutske kompozicije i lekove ovog pronalaska za upotrebu u postupku lečenja/metodu inhibicije ljudskog (ili životinjskog) tela terapijom.

[0011] WEE1 je tirozin kinaza koja je kritična komponenta kontrole kontrolne tačke G2 ćelijskog ciklusa posredovane ATR koja sprečava ulazak u mitozu kao odgovor na oštećenje ćelijske DNK. ATR fosforiliše i aktivira CHK1, koji zauzvrat aktivira WEE1, što dovodi do selektivne fosforilacije ciklin zavisne kinaze 1 (CDK1) na Ty15, čime se stabilizuje CDK1-ciklin B kompleks i zaustavlja napredovanje ćelijskog ciklusa. Ovaj proces daje prednost preživljavanju tako što daje tumorskim ćelijama vremena da poprave oštećenu DNK pre ulaska u mitozu. Inhibicija WEE1 ukida kontrolnu tačku G2, promovišući ćelije raka sa oštećenjem DNK da uđu u neplaniranu mitozu i podvrgnu ćelijskoj smrti putem mitotičke katastrofe. Stoga, inhibicija WEE1 ima potencijal da senzibilizira tumore na agense koji oštećuju DNK, kao što je cisplatin, i da izazove smrt tumorskih ćelija.

[0012] WEE1 inhibirajuća jedinjenja koja su korisna za lečenje raka su otkrivena npr. u WO 2007/126122 A1, AU 2008/315048 A1, WO 2017/075629 A2 ili WO 2019/028008 A1.

Definicije

[0013] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini korišćeni ovde imaju isto značenje koje obično razume stručnjak u ovoj oblasti. U slučaju da postoji više definicija za termin ovde, one navedene u ovom odeljku imaju prednost osim ako nije drugačije navedeno.

[0014] Kad god je grupa opisana kao "opciono supstituisana", ta grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana sa jednim ili više naznačenih supstituenata. Slično, kada je grupa opisana kao "nesupstituisana ili supstituisana" ako je supstituisana, supstituent(i) se može izabrati između jednog ili više naznačenih supstituenata. Ako supstituenti nisu naznačeni, znači da navedena „opciono supstituisana“ ili „supstituisana“ grupa može biti supstituisana sa jednom ili više grupa pojedinačno i nezavisno izabranih između alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, aril(alkil), cikloalkil(alkil), heteroaril(alkil), heterociklil(alkil), hidroksi, alkoksi, acil, cijano, halogen, tiokarbonil, O-karbamil, N-karbamil, O-tiokarbamil, N-tiokarbamil, C-amido, N-amido, S-sulfonamido, N-sulfonamido, C-karboksi, O-karboksi, nitro, sulfenil, sulfinil, sulfonil, haloalkil, hidroksialkil, haloalkoksi, amino, mono-supstituisana amin grupa, di-supstituisan amin grupa i amin(C1-C6alkil).

[0015] Kako se ovde koristi, "Cado Cb" u kojima su "a" i "b" celi brojevi se odnose na broj atoma ugljenika u grupi. Navedena grupa može da sadrži od "a" do "b", uključujući, atome ugljenika. Tako, na primer, " C1do C4alkil " grupa se odnosi na sve alkil grupe koje imaju od 1 do 4 ugljenika, to jest, , CH3-, CH3CH2-, CH3CH2CH2-, (CH3)2CH-, CH3CH2CH2CH2-, CH3CH2CH(CH3)- i (CH3)3C-. Ako "a" i "b" nisu označeni, pretpostavlja se najširi opseg opisan u ovim definicijama.

[0016] Ako su dve "R" grupe opisane kao "uzete zajedno", R grupe i atomi za koje su vezani mogu da formiraju cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril ili heterocikl. Na primer, bez ograničenja, ako je naznačeno da R<a>i R<b>su grupe NR<a>R<b>„uzete zajedno“, to znači da su kovalentno povezani jedna sa drugom da bi formirali prsten:

[0017] Kako se ovde koristi, termin "alkil" se odnosi na potpuno zasićenu alifatičnu ugljovodoničnu grupu. Alkil deo može biti razgranat ili pravog lanca. Primeri razgranatih alkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, izo-propil, sek-butil, t-butil i slično. Primeri alkil grupa pravog lanca uključuju, ali nisu ograničeni na metil, etil, n-propil, n-butil, n-pentil, n-heksil, n-heptil i slično. Alkil grupa može imati 1 do 30 atoma ugljenika (kad god se pojavljuje ovde, numerički opseg kao što je "1 do 30" se odnosi na svaki ceo broj u datom opsegu; npr. "1 do 30 atoma ugljenika" znači da se alkil grupa može sastojati od 1 atoma ugljenika, 2 atoma ugljenika, 3 atoma ugljenika, itd., do 30 atoma augljenika i uključujući 30 atoma ugljenika i pored toga što ove definicije takođe pokrivaju i pojavu termina „alkil“ gde nije naznačen numerički opseg). Alkil grupa takođe može biti alkil srednje veličine sa 1 do 12 atoma ugljenika. Alkil grupa takođe može biti niži alkil sa 1 do 6 atoma ugljenika. Alkil grupa može biti supstituisana ili nesupstituisana.

[0018] Termin "alkenil" koji se ovde koristi odnosi se na monovalentni prav ili razgranati radikal od dva do dvadeset atoma ugljenika koji sadrži dvostruku vezu(veze) ugljenika uključujući, ali bez ograničenja na, 1-propenil, 2-propenil, 2-metil-1-propenil, 1-butenil, 2-butenil i slično. Alkenil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana.

[0019] Termin "alkinil" koji se ovde koristi odnosi se na monovalentni prav ili razgranati lanac radikala od dva do dvadeset atoma ugljenika koji sadrži trostruku vezu(veze) ugljenika uključujući, ali bez ograničenja, 1-propinil, 1-butinil, 2-butinil i slično. Alkinil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana.

[0020] Kako se ovde koristi, "cikloalkil" se odnosi na potpuno zasićen (bez dvostrukih ili trostrukih veza) mono- ili multi-ciklični ugljovodonični prstenasti sistem. Kada se sastoje od dva ili više prstenova, prstenovi mogu biti spojeni kao kondenzovani, premošćeni ili spirociklični. Kako se ovde koristi, termin "kondenzovan" se odnosi na dva prstena koji imaju zajednička dva atoma i jednu vezu. Kako se ovde koristi, izraz "premošćeni cikloalkil" se odnosi na jedinjenja u kojima cikloalkil sadrži vezu od jednog ili više atoma koji povezuju atome koji nisu susedni. Kako se ovde koristi, termin "spiro" se odnosi na dva prstena koji imaju jedan zajednički atom i dva prstena nisu povezana mostom. Cikloalkil grupe mogu da sadrže 3 do 30 atoma u prstenu(prstenovima), 3 do 20 atoma u prstenu(prstenovima), 3 do 10 atoma u prstenu(prstenovima), 3 do 8 atoma u prstenu(prstenovima) ili 3 do 6 atoma u prstenu(prstenovima). Cikloalkil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana. Primeri monocikloalkil grupa uključuju, ali nisu ni na koji način ograničeni na, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i ciklooktil. Primeri kondenzovanih cikloalkil grupa su dekahidronaftalenil, dodekahidro-1H-fenalenil i tetradekahidroantracenil; primeri premoštenih cikloalkil grupa su biciklo[1.1.1]pentil, adamantanil i norbornanil; a primeri spiro cikloalkil grupa uključuju spiro[3.3]heptan i spiro[4.5]dekan.

[0021] Kako se ovde koristi, „cikloalkenil“ se odnosi na mono- ili poli-ciklični ugljovodonični prstenasti sistem koji sadrži jednu ili više dvostrukih veza u najmanje jednom prstenu; mada, ako ih ima više od jedne, dvostruke veze ne mogu formirati potpuno delokalizovani pi-elektronski sistem u svim prstenovima (u suprotnom bi grupa bila „aril“, kako je ovde definisano). Cikloalkenil grupe mogu da sadrže 3 do 10 atoma u prstenu(prstenovima), 3 do 8 atoma u prstenu(prstenovim) ili 3 do 6 atoma u prstenu(prstenovim). Kada su sastavljene od dva ili više prstenova, prstenovi mogu biti povezani zajedno kao kondenzovani, premošćeni ili spirociklični. Cikloalkenil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana.

[0022] Kako se ovde koristi, „karbociklil“ se odnosi na nearomatični mono- ili poli-ciklični ugljovodonični prstenasti sistem. Kada su sastavljeni od dva ili više prstenova, prstenovi mogu biti spojeni zajedno kao kondenzovani, premošćeni ili spirociklični, kao što je ovde opisano. Karbociklil grupe mogu da sadrže 3 do 30 atoma u prstenu(ima), 3 do 20 atoma u prstenu(ima), 3 do 10 atoma u prstenu(prstenovima), 3 do 8 atoma u prstenu(prstenovima) ili 3 do 6 atoma u prstenu(prstenovima). Karbociklil grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana. Primeri karbociklil grupa uključuju, ali ni na koji način nisu ograničeni na, cikloalkil grupe i cikloalkenil grupe, kako je ovde definisano, i nearomatične delove 1,2,3,4-tetrahidronaftalena, 2,3-dihidro-1H-indena, 5,6,7,8-tetrahidrohinolina i 6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridina.

[0023] Kako se ovde koristi, „aril“ se odnosi na karbociklični (samo ugljenik) monociklični ili poli-ciklični aromatični prstenasti sistem (uključujući kondenzovane prstenaste sisteme gde dva karbociklična prstena dele hemijsku vezu) koji ima potpuno delokalizovani pi-elektronski sistem u svim prstenovima. Broj atoma ugljenika u aril grupi može da varira. Na primer, aril grupa može biti C6-C14aril grupa, C6-C10aril grupa ili C6aril grupa. Primeri aril grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, benzen, naftalen i azulen. Aril grupa može biti supstituisana ili nesupstituisana.

[0024] Kako se ovde koristi, „heteroaril“ se odnosi na monociklični ili policiklični aromatični prstenasti sistem (prstenasti sistem sa potpuno delokalizovanim pi-elektronskim sistemom) koji sadrži jedan ili više heteroatoma (na primer, 1, 2 ili 3 heteroatoma), odnosno element koji nije ugljenik, uključujući, ali ne ograničavajući se na, azot, kiseonik i sumpor. Broj atoma u prstenu(prstenovima) heteroaril grupe može da varira. Na primer, heteroaril grupa može da sadrži 4 do 14 atoma u prstenu(prstenovima), 5 do 10 atoma u prstenu(prstenovima) ili 5 do 6 atoma u prstenu(prstenovima), kao što su devet atoma ugljenika i jedan heteroatom; osam atoma ugljenika i dva heteroatoma; sedam atoma ugljenika i tri heteroatoma; osam atoma ugljenika i jedan heteroatom; sedam atoma ugljenika i dva heteroatoma; šest atoma ugljenika i tri heteroatoma; pet atoma ugljenika i četiri heteroatoma; pet atoma ugljenika i jedan heteroatom; četiri atoma ugljenika i dva heteroatoma; tri atoma ugljenika i tri heteroatoma; četiri atoma ugljenika i jedan heteroatom; tri atoma ugljenika i dva heteroatoma; ili dva atoma ugljenika i tri heteroatoma. Štaviše, termin „heteroaril“ obuhvata kondenzovane prstenate sisteme gde dva prstena, kao što su najmanje jedan aril prsten i najmanje jedan heteroaril prsten ili najmanje dva heteroaril prstena, dele najmanje jednu hemijsku vezu. Primeri heteroarilnih prstenova uključuju, ali nisu ograničeni na furan, furazan, tiofen, benzotiofen, ftalizin, pirol, oksazol, benzoksazol, 1,2,3-oksadiazol, 1,2,4-oksadiazol, tiazol, 1,2,3-tiadiazol, 1,2,4-tiadiazol, benzotiazol, imidazol, benzimidazol, indole, indazol, pirazol, benzopirazol, isoksazol, benzoisoksazol, izotiazol, triazol, benzotriazol, tiadiazol, tetrazol, piridin, piridazinpirimidin, pirazinpurine, pteridin, hinolin, izohinolin, hinazolin, hinoksalin, cinolin i triazin. Heteroaril grupa može da bude supstituisana ili nesupstituisana.

[0025] Kako se ovde koristi, "heterociklil" ili "heteroaliciklil" se odnosi na tro-, četiri-, pet-, šest-, sedam-, osam-, devet-, deset-, do 18-člani monociklični, bicikličan i tricikličan prstenasti sistem u kome atomi ugljenika zajedno sa od 1 do 5 čine prstenasti sistem heterocikla. Heterocikl može opciono da sadrži jednu ili više nezasićenih veza postavljenih na takav način, da se potpuno delokalizovan sistem pi-elektrona ne pojavljuje u svim prstenovima. Heteroatom(i) je element koji nije ugljenik uključujući, ali ne ograničavajući se na, kiseonik, sumpor i azot. Heterocikl može dalje da sadrži jednu ili više karbonil ili tiokarbonil funkcionalnih grupa, tako da definicija uključuje okso-sisteme i tio-sisteme kao što su laktami, laktoni, ciklični imidi, ciklični tioimidi i ciklični karbamati. Kada se sastoje od dva ili više prstena, prstenovi mogu biti spojeni i to kao kondenzovani, premošćeni ili spiro. Kako se ovde koristi, termin "kondenzovan" se odnosi na dva prstena koji imaju zajednička dva atoma i jednu vezu. Kako se ovde koristi, termin "premošteni heterociklil" ili "premošćeni heteroaliciklil" odnosi se na jedinjenja u kojima heterociklil ili heteroaliciklil sadrži vezu jednog ili više atoma koji povezuju nesusedne atome. Kako se ovde koristi, termin "spiro" se odnosi na dva prstena koji imaju jedan zajednički atom, a dva prstena nisu povezana mostom. Heterociklil i heteroaliciklil grupe mogu da sadrže 3 do 30 atoma u prstenu (prstenovima), 3 do 20 atoma u prstenu (prstenovima), 3 do 10 atoma u prstenu prstenovima), 3 do 8 atoma u prstenu (prstenovima) ili 3 do 6 atoma u prstenu (prstenovima). Na primer, pet atoma ugljenika i jedan heteroatom; četiri atoma ugljenika i dva heteroatoma; tri atoma ugljenika i tri heteroatoma; četiri atoma ugljenika i jedan heteroatom; tri atoma ugljenika i dva heteroatoma; dva atoma ugljenika i tri heteroatoma; jedan atom ugljenika i četiri heteroatoma; tri atoma ugljenika i jedan heteroatom; ili dva atoma ugljenika i jedan heteroatom. Pored toga, bilo koji azot u heteroalicikllu može biti kvaternizovan. Heterociklil ili heteroaliciklilgrupe mogu biti nesupstituisane ili supstituisane. Primeri takvih grupa "heterociklil" ili "heteroaliciklil" uključuju, ali nisu ograničeni na, 1,3-dioksin, 1,3-dioksan, 1,4-dioksan, 1,2-dioksolan, 1,3-dioksolan, 1,4-dioksolan, 1,3-oksatian, 1,4-oksathiin, 1,3-oksathiolan, 1,3-ditiol, 1,3-ditiolan, 1,4-oksatian, tetrahidro-1,4-tiazin2H-1,2-oksazinmaleimid, suksinimid, barbiturinska kiselina, tiobarbiturinska kisleina, dioksopiperazinhidantoin, dihidrouracil, trioksan, heksahidro-1,3,5-triazinimidazolin, imidazolidin, izoksazolin, izoksazolidin, oksazolin, oksazolidin, oksazolidinon, tiazolin, tiazolidin, morfolin, oksirane, piperidin N-Oksid, piperidin, piperazinpirolidin, azepan, pirolidon, pirolidion, 4-piperidon, pirazolin, pirazolidin, 2-oksopirolidin, tetrahidropiran, 4H-piran, tetrahidrotiopiran, tiamorfolin, tiamorfolin sulfoksid, thiamorfolin sulfon i njihovi benzo-kondenzovani analozi (npr., benzimidazolidinon, tetrahidrohinolin i/ili 3,4-metilenedioksifenil). Primeri spiro heterociklil grupa uključuju 2-azaspiro[3.3]heptan, 2-oksaspiro[3.3]heptan, 2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan, 2,6-diazaspiro[3.3]heptan, 2-oksaspiro[3.4] oktan i 2-azaspiro[3.4]oktan.

[0026] Kako se ovde koristi, "aralkil" i "aril(alkil)" se odnose na aril grupu povezanu, kao supstituent, preko niže alkilen grupe. Niža alkilen i aril grupa aralkila može biti supstituisana ili nesupstituisana. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na benzil, 2-fenilalkil, 3-fenilalkil i naftilalkil.

[0027] Kako se ovde koristi, "heteroaralkil" i "heteroaril(alkil)" se odnose na heteroaril grupu koja je povezana, kao supstituent, preko niže alkilen grupe. Niža alkilen i heteroaril grupa heteroaralkila može biti supstituisana ili nesupstituisana. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na 2-tienilalkil, 3-tienilalkil, furilalkil, tienilalkil, pirolilalkil, piridilalkil, izoksazolilalkil i imidazolilalkil i njihove benzo-kondenzovane analoge.

[0028] "Heteroaliciklil(alkil)" i "heterociklil(alkil)" se odnose na heterocikličnu ili heteroalicikličnu grupu povezanu, kao supstituent, preko niže alkilen grupe. Niži alkilen i heterociklil (heteroaliciklil)alkila mogu biti supstituisani ili nesupstituisani. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni, tetrahidro-2H-piran-4-il(metil), piperidin-4-il(etil), piperidin-4-il(propil), tetrahidro-2H-tiopiran-4-il(metil) i 1,3-tiazinan-4-il(metil).

[0029] Kako se ovde koristi, "niže alkilen grupe" su ravnolančane -CH2-tetarske grupe, koje formiraju veze za povezivanje molekulskih fragmenata preko njihovih terminalnih atoma ugljenika. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na metilen (-CH2-), etilen (-CH2CH2-), propilen (-CH2CH2CH2-) i butilen (-CH2CH2CH2CH2-). Niža alkilen grupa se može supstituisati zamenom jednog ili više vodonika niže alkilens grupe i/ili supstitucijom oba vodonika na istom ugljeniku sa cikloalkil grupom (npr.

[0030] Kao što se ovde koristi, termin "hidroksi" se odnosi na -OH grupu.

[0031] Kako se ovde koristi, "alkoksi" se odnosi na formulu -OR u kojoj R je alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, a cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil) je ovde definisano. Neograničavajuća lista alkoksi grupa su metoksi, etoksi, n-propoksi, 1-metiletoksi (izo-propoksi), n-butoksi, izo-butoksi, sek-butoksi, terc-butoksi, fenoksi i benzoksi. Alkoksi može biti supstituisan ili nesupstituisan.

[0032] Kako se ovde koristi, "acil" se odnosi na vodonik, alkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklil, aril(alkil), heteroaril(alkil) i heterociklil(alkil) povezane, kao supstituente, preko karbonil grupe. Primeri uključuju formil, acetil, propanoil, benzoil i akril. Acil može biti supstituisan ili nesupstituisan.

[0033] "Cijano" grupa se odnosi na "-CN" grupu.

[0034] Termin "atom halogena" ili "halogen" kako se ovde koristi, označava bilo koji od radio-stabilnih atoma 7 grupe Periodnog sistema elemenata, kao što su fluor, hlor, brom i jod.

[0035] "Tiokarbonil" grupa se odnosi na "-C(=S)R" grupu u kojoj R može biti isti kao što je definisano u odnosu na O-karboksi. Tiokarbonil može biti supstituisan ili nesupstituisan.

[0036] „O-karbamil“ grupa se odnosi na "-OC(=O)N(RARB)" grupu u kojoj RAi RBmogu da budu nezavisno vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil(cikloalkil), cikloalkil(cikloalkil) heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). O-karbamil može biti supstituisan ili nesupstituisan.

[0037] "N-karbamil" grupa se odnosi na "ROC(=O)N(RA)-" grupu u kojoj R i RAmogu da budu nezavisno vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). N-karbamil može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0038] Grupa "O-tiokarbamil" se odnosi na grupu "-OC(=S)-N(RARB)" u kojoj RAi RBmogu da budu nezavisno vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). O-tiokarbamil može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0039] „N-tiokarbamil“ grupa se odnosi na "ROC(=S)N(RA)-" grupu u kojoj R i RAmogu da budu nezavisno vodonik, , alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). N-tiokarbamil može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0040] "C-amido" grupa se odnosi na "-C(=O)N(RARB)" grupu u kojoj RAi RBmogu da budu nezavisno vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). A C-amido može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0041] "N-amido" grupa se odnosi na "RC(=O)N(RA)-" grupu u kojoj R i RAmogu da budu nezavisno vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). N-amido može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0042] "S-sulfonamido" grupa se odnosi na "-SO2N(RARB)" grupu u kojoj RAi RBmogu da budu nezavisno vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). S-sulfonamido može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0043] "N-sulfonamido" grupa se odnosi na "RSO2N(RA)-" grupu u kojoj R i RAmogu da budu nezavisno vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). N-sulfonamido može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0044] „O-karboksi“ grupa se odnosi na „RC(=O)O-“ grupu u kojoj R može biti vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil), kao što je ovde definisano. O-karboksi može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0045] Termini "estar" i "C-karboksi" odnose se na "-C(=O)OR" grupu u kojoj R može bude isti kao što je definisano za O-karboksi. Estar i C-karboksi mogu da budu supstituisani ili nesupstituisani.

[0046] "Nitro" grupa se odnosi na "-NO2" grupu.

[0047] „Sulfenil“ grupa se odnosi na „-SR“ grupu u kojoj R može d abud vodonik, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili heterociklil(alkil). Sulfenil može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0048] Grupa "sulfinil" se odnosi na grupu "-S(=O)-R" u kojoj R može da budeisti kao što je definisano za sulfenil. Sulfinil može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0049] Grupa "sulfonil" se odnosi na grupu "SO2R" u kojoj R može biti isti kao što je definisano u odnosu na sulfenil. Sulfonil može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0050] Kako se ovde koristi, "haloalkil" se odnosi na alkil grupu u kojoj je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno halogenom (npr. mono-haloalkil, di-haloalkil, trihaloalkil i polihaloalkil). Takve grupe uključuju, ali nisu ograničene na, hlormetil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, 1-hlor-2-fluormetil, 2-fluoroizobutil i pentafluoroetil. Haloalkil može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0051] Kako se ovde koristi, "haloalkoksi" se odnosi na alkoksi grupu u kojoj je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno halogenom (npr. mono-haloalkoksi, dihaloalkoksi i trihaloalkoksi). Takve grupe uključuju, ali nisu ograničene na, hlormetoksi, fluormetoksi, difluormetoksi, trifluormetoksi, 1-hlor-2-fluormetoksi i 2-fluorizobutoksi. Haloalkoksi može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0052] Termin "amino" kao što se ovde koristi odnosi se na -NH2grupu.

[0053] "Mono-supstituisan amin" grupa se odnosi na "-NHRA" grupu u kojoj RAmože da bude alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil) ili kao heterociklil(alkil) definisan ovde. RAmože da bude supstituisan ili nesupstituisan. Primeri mono-supstituisanih amino grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, -NH(metil), -NH(fenil) i slično.

[0054] Grupa "di-supstituisan amin" se odnosi na "-NRARB" grupu u kojoj RAi RBmogu nezavisno da budu alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, aril, heteroaril, heterociklil, cikloalkil(alkil), aril(alkil), heteroaril(alkil), heteroaril(alkil) definisan kao heterociklil(alkil). RAi RBmogu nezavisno da budu supstituisani ili nesupstituisani. Primeri di-supstituisanih amino grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, -N(metil)2, -N(fenil)(metil), -N(etil)(metil) i slično.

[0055] Kao što se ovde koristi, "amin(alkil)" grupa se odnosi na -(alkilen)-NR'R" radikal gde su R' i R" nezavisno vodonik ili alkil kako je ovde definisano. Amin(alkil) može da bude supstituisan ili nesupstituisan. Primeri amin(alkil) grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, -CH2NH(metil), -CH2NH(fenil), -CH2CH2NH(metil), -CH2CH2NH(fenil), -CH2NH(metil), -CH2NH(fenil), -CH2CH2NH(metil), -CH2CH2NH(fenil), -CH2N(metil)2, -CH2N(fenil)(metil), -NCH2(etil)(metil), -CH2CH2N(metil)2, -CH2CH2N(fenil)(metil), -NCH2CH2(etil)(metil) i slično.

[0056] Tamo gde broj supstituenata nije određen (npr. haloalkil), može biti prisutan jedan ili više supstituenata. Na primer, "haloalkil" može da sadrži jedan ili više istih ili različitih halogena. Kao drugi primer, "C1-C3alkoksifenil" može da uključi jednu ili više istih ili različitih alkoksi grupa koje sadrže jedan, dva ili tri atoma.

[0057] Kako se ovde koristi, radikal označava vrste sa jednim, neuparenim elektronom tako da vrsta koja sadrži radikal može biti kovalentno vezana za drugu vrstu. Dakle, u ovom kontekstu, radikal nije nužno slobodni radikal. Umesto toga, radikal označava određeni deo većeg molekula. Termin "radikal" se može koristiti naizmenično sa terminom "grupa".

[0058] Izraz "farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na so jedinjenja koja ne izaziva značajnu iritaciju organizma kome je primenjena i ne poništava biološku aktivnost i svojstva jedinjenja. U nekim realizacijama, so je kisela adiciona so jedinjenja. Farmaceutske soli se mogu dobiti reakcijom jedinjenja sa neorganskim kiselinama kao što je halovodonična kiselina (npr. hlorovodonična kiselina ili bromovodonična kiselina), sumporna kiselina, azotna kiselina i fosforna kiselina (kao što je 2,3-dihidroksipropil dihidrogen fosfat). Farmaceutske soli se takođe mogu dobiti reakcijom jedinjenja sa organskom kiselinom kao što je alifatična ili aromatična karboksilna ili sulfonska kiselina, na primer, mravlja, acetatna, jantarna, mlečna, jabučna, vinska, limunska, askorbinska, nikotinska, metansulfonska, etansulfonska, etanolufonsulfonska p-toluensulfonska, trifluoracetatna, benzoeva, salicilnac, 2-oksopentandionska ili naftalenesulfonska kiselina. Farmaceutske soli se takođe mogu dobiti reakcijom jedinjenja sa bazom da bi se formirala so kao što je so amonijuma, soli alkalnog metala, kao što su natrijum, kalijum ili litijum soli, soli zemnoalkalnog metala, kao što je so kalcijuma ili magnezijuma, so karbonata, so bikarbonata, so organskih baza kao što je dicikloheksilamin, N-metil-D-glukamin, tris(hidroksimetil)metilamin, C1-C7alkilamin, cikloheksilamin, trietanolamin, etilenediamin i soli sa amino kiselinima kao što su arginin i lizin.. Za jedinjenja Formule (I), stručnjaci u ovoj oblasti razumeju da kada se so formira protonacijom grupe na bazi azota (na primer, NH2), grupa na bazi azota može biti povezana sa pozitivnim naelektrisanjem (na primer, NH2može postati NH3<+>) i pozitivno naelektrisanje može biti uravnoteženo negativno naelektrisanim kontrajonom (kao što je Cl-).

[0059] Podrazumeva se da, u bilo kom ovde opisanom jedinjenju koje ima jedan ili više hiralnih centara, ako apsolutna stereohemija nije izričito naznačena, onda svaki centar može nezavisno biti R-konfiguracije ili S-konfiguracije ili njihova smeša. Prema tome, ovde data jedinjenja mogu biti enantiomerno čista, enantiomerno obogaćena, racemska smeša, diastereomerno čista, diastereomerno obogaćena ili stereoizomerna smeša. Pored toga, razume se da, u bilo kom ovde opisanom jedinjenju koje ima jednu ili više dvostrukih veza koje stvaraju geometrijske izomere koji se mogu definisati kao E ili Z, svaka dvostruka veza može nezavisno biti E ili Z njihova smeša. Isto tako, podrazumeva se da, u bilo koje opisano jedinjenje, svi tautomerni oblici takođe treba da budu uključeni.

[0060] Podrazumeva se da tamo gde jedinjenja koja su ovde otkrivena imaju nepopunjene valence, tada valence treba da budu popunjene vodonicima ili njihovim izotopima, npr. vodonikom-1 (protijum) i vodonikom-2 (deuterijum).

[0061] Razume se da ovde opisana jedinjenja mogu biti izotopski obeležena. Zamena sa izotopima kao što je deuterijum može da pruži određene terapeutske prednosti koje su rezultat veće metaboličke stabilnosti, kao što je, na primer, povećan poluživot in vivo ili smanjeni zahtevi za dozom. Svaki hemijski element kao što je predstavljen u strukturi jedinjenja može uključivati bilo koji izotop navedenog elementa. Na primer, u strukturi jedinjenja atom vodonika može biti eksplicitno otkriven ili razumljivo da je prisutan u jedinjenju. Na bilo kojoj poziciji jedinjenja na kojoj može biti prisutan atom vodonika, atom vodonika može biti bilo koji izotop vodonika, uključujući ali bez ograničenja na vodonik-1 (protijum) i vodonik-2 (deuterijum). Dakle, referenca ovde na jedinjenje obuhvata sve potencijalne izotopske oblike osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije.

[0062] Razume se da metode i kombinacije koje su ovde opisane uključuju kristalne oblike (takođe poznate kao polimorfi, koji uključuju različite aranžmane kristalnog pakovanja istog elementarnog sastava jedinjenja), amorfne faze, soli, solvate i hidrate. U nekim realizacijama, ovde opisana jedinjenja postoje u rastvorenim oblicima sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračima kao što su voda, etanol ili slično. U drugim realizacijama, ovde opisana jedinjenja postoje u nesolvatisanom obliku. Solvati sadrže ili stehiometrijske ili nestehiometrijske količine rastvarača, i mogu se formirati tokom procesa kristalizacije sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračima kao što su voda, etanol ili slično. Hidrati nastaju kada rastvarač je voda ili alkoholati nastaju kada rastvarač je alkohol. Pored toga, ovde data jedinjenja mogu postojati u nesolvatisanom, kao i u solvatisanim oblicima. Uopšteno govoreći, solvatisani oblici se smatraju ekvivalentnim nesolvatisanim oblicima za potrebe jedinjenja i metoda koje su ovde date.

[0063] Kada je obezbeđen opseg vrednosti, podrazumeva se da je gornja i donja granica, i svaka intervenciona vrednost između gornje i donje granice opsega obuhvaćena realizacijama.

[0064] Termini i fraze koje se koriste u ovoj prijavi, i njihove varijacije, posebno u priloženim patentnim zahtevima, osim ako nije drugačije izričito navedeno, treba da se tumače kao otvorene, a ne kao ograničavajuće. Kao primer gore navedenog, termin 'uključujući' treba tumačiti kao 'uključujući, bez ograničenja', 'uključujući, ali ne ograničavajući se na,' ili slično; izraz 'sadrži' kako se ovde koristi je sinonim za 'uključujući,' 'sadrži' ili 'okarakterisan sa', i inkluzivan je ili otvoren i ne isključuje dodatne, nenavedene elemente ili korake metode; termin 'ima' treba tumačiti kao 'ima najmanje;' termin 'uključuje' treba tumačiti kao 'uključuje ali nije ograničen na;' izraz 'primer' se koristi da pruži primere predmeta o kome se raspravlja, a ne njegovu iscrpnu ili ograničavajuću listu; i upotreba termina kao što su „poželjno“, „preferirano“, „željeno“, ili „poželjno“, i reči sličnog značenja ne treba da shvatiti kao da impliciraju da su određene karakteristike kritične, suštinske, ili čak važne za strukturu ili funkciju, već umesto toga kao samo namenjenu da istakne alternativne ili dodatne karakteristike koje se mogu ili se možda ne koriste u određenoj realizaciji. Pored toga, termin „sadrži, obuhvata“ treba tumačiti sinonimno sa frazama „imati najmanje“ ili „uključujući barem“. Kada se koristi u kontekstu jedinjenja, kompozicije ili uređaja, izraz "sadrži" znači da jedinjenje, kompozicija ili uređaj uključuje najmanje navedene karakteristike ili komponente, ali takođe može uključivati dodatne karakteristike ili komponente.

[0065] U vezi sa upotrebom suštinski bilo kog termina u množini i/ili jednini ovde, prosečan stručnjak u ovoj oblasti može da prevode iz množine u jedninu i/ili iz jednine u množinu kako je prikladno za kontekst i/ili primenu. Različite permutacije jednine/množine mogu biti izričito navedene ovde radi jasnoće. Neodređeni član u engleskom jeziku "a/jedan" ili "an/jedno" ne isključuje množinu. Sama činjenica da su određene mere navedene u međusobno različitim zavisnim zahtevima ne ukazuje da se kombinacija ovih mera ne može koristiti u korist. Bilo koji referentni znaci u patentnim zahtevima ne bi trebalo da se tumače kao ograničavajući obim.

Jedinjenja

[0066] Neke realizacije koje su ovde otkrivene odnose se na jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so,koji imaju strukturu:

1

gde: R<1>je odabran od vodonika, halogena i supstituisanog ili nesupstituisanog C1-C6alkil; psten A je odabran od supstituisanog ili nesupstituisanog fenila i supstituisanog ili nesupstituisanog 5-6 članog monocikličnog heteroarila; Prsten B je odabran od supstituisanog ili nesupstituisanog monocikličnog 5-7 članog karbociklila i supstituisanog ili nesupstituisanog 5-7-članog monocikličnog heterociklila; R<2>je odabran od

m je 0, 1, 2 ili 3; R<3>je odabran iz grupe koju čine halogen i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil; X je odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, hidroksi, cijano, supstituisan ili nesupstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil, supstituisan ili nesupstituisan amin(C1-C6alkil), supstituisan ili nesupstituisan -NH-(CH2)1-6-amin, mono-supstituisan amin, di-supstituisan amin, amino, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkoksi, supstituisan ili nesupstituisan C3-C6cikloalkoksi, supstituisan ili nesupstituisan (C1-C6alkil)acil, supstituisan ili nesupstituisan C-amido, supstituisan ili nesupstituisan N-amido, supstituisan ili nesupstituisan C-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karbamil i supstituisan ili nesupstituisan N-karbamil; Y je CH ili N (azot); Y<1>je CR<4A>ili N (azot); Y<2>je CR<4B>ili N (azot); prsten C je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan C6-C10aril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-10 člani heteroaril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil, supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil i supstituisan ili nesupstituisan 7-10 člani bicikličan heterociklil; R<4A>i R<4B>su nezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen i nesupstituisan C1-4alkil; i R<5>je supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil.

[0067] Pojedini ovde opisani primeri se odnose na jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde: R<1>je odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil; prsten A je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan fenil i supstituisan ili nesupstituisan 5-6 člani monocikličan heteroaril; Prsten B je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil i supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil; R<2>je odabran od

m je 0, 1, 2 ili 3; R<3>može da bude iz grupe koju čine halogen i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil; X je odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, hidroksi, cijano, supstituisan ili nesupstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil, supstituisan ili nesupstituisan amin(C1-C6alkil), supstituisan ili nesupstituisan -NH-(CH2)1-6-amin, mono-supstituisan amin, di-supstituisan amin, an amino, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkoksi, supstituisan ili nesupstituisan C3-C6cikloalkoksi, supstituisan ili nesupstituisan (C1-C6alkil)acil, supstituisan ili nesupstituisan C-amido, supstituisan ili nesupstituisan N-amido, supstituisan ili nesupstituisan C-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karbamil i supstituisan ili nesupstituisan N-karbamil; Y je CH ili N (azot); Y<1>je CR<4A>ili N (azot); Y<2>je CR<4B>ili N (azot); prsten C je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan C6-C10aril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-10 člani heteroaril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil, supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil i supstituisan ili nesupstituisan 7-10 člani bicikličan heterociklil; i R<4A>i R<4B>su nezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen i nesupstituisan C1-4alkil.

[0068] U pojedinim realizacijama, R<2>je

poželjno, m je 0.

[0069] U pojedinim primerima , R<1>može da bude odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen i C1-C6alkil. U pojedinim realizacijama, R<1>može da bude vodonik. U ostalim primerima , R<1>može da bude halogen. U nekim primerima , R<1>može da bude fluor. U pojedinim primerima , R<1>može da bude nesupstituisan C1-C6alkil (kao što je metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, izo-butil, sek-butil, t-butil, pentil (prav ili razgranat lanac) ili heksil (prav ili razgranat lanac)). U nekim primerima , R<1>moež da bude nesupstituisan metil. U nekim primerima , R<1>može da bude supstituisan C1-C6alkil, kao što su oni koji su ovde opisani. U nekim primerima , R<1>može da bude nesupstituisan C1-C6haloalkil ( kao što su C1-C6fluoroalkil, C1-C6chloroalkil ili C1-C6chlorofluoroalkil). U nekim primerima , R<1>može da bude -CHF2, -CF3, -CF2CH3ili -CH2CF3.

[0070] Prsten A je odabran od supstituisan ili nesupstituisan fenil i supstituisan ili nesupstituisan 5-6 člani monocikličan heteroaril.

[0071] U nekim primerima , Prsten A može da bude supstituisan fenil. U drugim primerima , Prsten A može da bude nesupstituisan fenil.

[0072] U pojedinim realizacijama, Prsten A je supstituisan 5-6 člani monocikličan heteroaril. U pojedinim realizacijama, Prsten A je nesupstituisan 5-6 člani monocikličan heteroaril. U nekim primerima , Prsten A može da bude odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan pirol, supstituisan ili nesupstituisan furan, supstituisan ili nesupstituisan tiofen, supstituisan ili nesupstituisan imidazol, supstituisan ili nesupstituisan pirazol, supstituisan ili nesupstituisan oksazol, supstituisan ili nesupstituisan tiazol, supstituisan ili nesupstituisan piridin, supstituisan ili nesupstituisan pirazin supstituisan ili nesupstituisan pirimidine i supstituisan ili nesupstituisan piridazin.

[0073] Kada je supstituisan, Prsten A je supstituisan sa jednimi ili više supstituenata odabranim iz grupe koju čine halogen, nesupstituisan C1-C4haloalkil i nesupstituisan C1-C4alkil. U nekim primerima , Prsten A je mono-supstituisan halogenom (na prime, fluorom).

[0074] U pojedinim realizacijama,

je odabran iz grupe koju čine :

pri čemu je svaka od prethodno navedenih grupa supstituisana ili nesupstituisana. U nekim primerima

može da bude supstituisan ili nesupstituisan

U nekim primerima ,

može da bude supstituisan ili nesupstituisan

pri čemu Prsten A je nesupstituisan. U drugim primerima ,

može da bude selected odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan

1

supstituisan ili nesupstituisan

i supstituisan ili nesupstituisan

Kao što je ovde opisano , Prsten A deo

može da bude nesupstituisan.

[0075] Prsten B je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil i supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil.

[0076] U pojedinim realizacijama, Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil. U pojedinim realizacijama, Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5 člani karbociklil. U drugim primerima , Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 6 člani karbociklil. U pojedinim primerima , Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 7 člani karbociklil.

[0077] U nekim primerima ,

pri čemu je svaka od prethodno navedenih grupa supstituisana ili nesupstituisana.

[0078] U nekim primerima , Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani heterociklil. U nekim primerima , Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5 člani heterociklil. U drugim realizacijama, Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 6 člani heterociklil. In still other embodiments, Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 7 člani heterociklil.

[0079] U nekim primerima ,

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0080] U nekim primerima , Prsten B može da bude odabran od

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu. U nekim primerima , Prsten B može da bude supstituisan ili nesupstituisan

[0081] U nekim primerima , kada Prsten B je supstituisan, Prsten B može da bude supstituisan with 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine halogen, hidroksi, amino, nesupstituisan N-linked amido (fona primer, -NHC(O)C1-C6alkil), nesupstituisan C1-C6haloalkil (kao što su oni ovde opisani) i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U nekim primerima , kda Prsten B je supstituisan, Prsten B može da bude supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno

1

odabrana iz grupe koju čine halogen, hidroksi, amino, nesupstituisan N-linked amido (na primer, -NHC(O)C1-C6alkil) i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U pojedinim realizacijama, Prsten B može da bude supstituisan with 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, hidroksi, amino, nesupstituisan -NHC(O)C1-C6alkil, nesupstituisan C1-C6haloalkil (kao što su oni ovde opisani) i nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U nekim primerima , Prsten B može da bude supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, hidroksi, -CF3, -CHF2, -CF2CH3, nesupstituisan metil, nesupstituisan etil i -NHC(O)CH3.

[0082] U nekim primerima ,

može da bude odabran iz grupe koju čine:

1

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0083] U nekim primerima ,

može da bude odabran iz grupe koju čine:

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane. U nekim primerima

1

thodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane. U nekim primerima

može da bude supstituisan ili nesupstituisan

U pojedinim realizacijama,

može da bude supstituisan ili

[0084] I Prsten A i Prsten B mogu da bude supstituisani ili nesupstituisani. U nekim primerima , Prsten A i Prsten B u

mogu da budu nezavisno supstituisan ili nesupstituisani.

U nekim primerima , Prsten A i Prsten B u

mogu oba da budu nesupstituisani. U nekim primerima , Prsten A i Prsten B u

1

mogu oba nezavisno da budu supstituisani. U nekim primerima , Prsten A u

može da bude supstituisan i Prsten B u

može da bude nesupstituisan. U nekim primerima , Prsten A u

može da bude nesupstituisan i Prsten B u

može da bude supstituisan. U nekim primerima , Prsten A u

može da bude nesupstituisan i Prsten B u

može da bude supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine halogen, hidroksi i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U nekim primerima , Prsten A u

može da bude nesupstituisan i Prsten B u

1

može da bude supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, hidroksi, amino, nesupstituisan N-linked amido (na primer, -NHC(O)C1-C6alkil), nesupstituisan C1-C6haloalkil (kao što su oni ovde opisani) i nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U nekim primerima , Prsten A u

može da bude nesupstituisan i Prsten B u

može da bude supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, hidroksi, amino, -CF3, -CHF2, -CF2CH3, nesupstituisan metil, nesupstituisan etil i -NHC(O)CH3.

[0085] U nekim primerima , R<2>može da bude odabran od

U pojedinim realizacijama, R<2>je

[0086] U pojedinim realizacijama, Y je CH ; i X je supstituisan ili nesupstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil; ili pri čemu Y je CH; i X je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan azetidin, supstituisan ili nesupstituisan oksetan, supstituisan ili nesupstituisan diazetidin, supstituisan ili nesupstituisan azaoksetan, supstituisan ili nesupstituisan pirolidin, supstituisan ili nesupstituisan tetrahidrofuran, supstituisan ili nesupstituisan imidazolin, supstituisan ili nesupstituisan pirazolidin, supstituisan ili nesupstituisan piperidin, supstituisan ili nesupstituisan tetrahidropiran, supstituisan ili nesupstituisan piperazin supstituisan ili nesupstituisan morfolin i supstituisan ili nesupstituisan dioksan; ili gde Y je CH; i X je supstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil; ili gde Y je CH; i X je odabran iz grupe koju čine supstituisan azetidin, supstituisan oksetan, supstituisan diazetidin, supstituisan azaoksetan, supstituisan pirolidin, supstituisan tetrahidrofuran, supstituisan imidazolin, supstituisan pirazolidin, supstituisan piperidin, supstituisan tetrahidropiran, supstituisan piperazin supstituisan morfolin i supstituisan dioksan; ili gde Y je CH; i X je supstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil, supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, nesupstituisan C1-C6alkil, nesupstituisan C1-C6hidroksialkil, nesupstituisan amin(C1-C6alkil) i nesupstituisan (C1-C6alkil)acil; ili gde Y je CH; i X je odabran iz grupe koju čine supstituisan azetidin, supstituisan oksetan, supstituisan diazetidin, supstituisan azaoksetan, supstituisan pirolidin,

2

supstituisan tetrahidrofuran, supstituisan imidazolin, supstituisan pirazolidin, supstituisan piperidin, supstituisan tetrahidropiran, supstituisan piperazin supstituisan morfolin i supstituisan dioksan, pri čemu azetidin, oksetan, diazetidin, azaoksetan, pirolidin, tetrahidrofuran, imidazolin, pirazolidin, piperidin, tetrahidropiran, piperazint, morfolin i dioksan su supstituisani sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, nesupstituisan C1-C6alkil, nesupstituisan C1-C6hidroksialkil, nesupstituisan amin(C1-C6alkil) i nesupstituisan (C1-C6alkil)acil.

[0087] R<3>je odabran iz grupe koju čine halogen i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U nekim primerima , R<3>može da bude halogen. U nekim primerima , R<3>može da bude supstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U nekim primerima , R<3>može da bude nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani).

[0088] m je 0, 1, 2 ili 3. U pojedinim realizacijama, m je 0. U pojedinim realizacijama, m može da bude 1. U nekim primerima , m je 2. U nekim primerima , m je 3. Kada m je 2 ili 3, R<3>grupe mogu da se međusobno razlikuju ili dabudu iste.

[0089] X je odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, hidroksi, cijano, supstituisan ili nesupstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil, supstituisan ili nesupstituisan amin(C1-C6alkil), supstituisan ili nesupstituisan -NH-(CH2)1-6-amin, mono-supstituisan amin, di-supstituisan amin, an amino, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani), supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkoksi (kao što je metoksi, etoksi, n-propoksi, izo-propoksi, n-butoksi, izo-butoksi, sek-butoksi, tbutoksi, pentoksi (prav ili razgranat lanac) ili heksoksi (prav ili razgranat lanac)), supstituisan ili nesupstituisan C3-C6cikloalkoksi (kao što je ciklopropoksi, ciklobutoksi, ciklopentoksi ili cikloheksoksi), supstituisan ili nesupstituisan (C1-C6alkil)acil, supstituisan ili nesupstituisan C-amido, supstituisan ili nesupstituisan N-amido, supstituisan ili nesupstituisan C-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karbamil i supstituisan ili nesupstituisan N-karbamil.

[0090] U pojedinim realizacijama, X može da bude vodonik. U drugim realizacijama, X može da bude halogen. U pojedinim realizacijama, X može da bude fluor. U pojedinim realizacijama, X može da bude hlor. In still other embodiments, X može da bude hidroksi. U drugim realizacijama, X može da bude cijano. U pojedinim realizacijama, X može da bude amino.

[0091] U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan metil, nesupstituisan etil ili nesupstituisan izo-propil. U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani). U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan C1-C6haloalkil (kao što je C1-C6fluoralkil, C1-C6chloroalkil ili C1-C6hlorfluoralkil). U pojedinim realizacijama, X može da bude odabran od -CHF2, -CF3, -CF2CH3i -CH2CF3. U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan C1-C6hidroksialkil (kao što je C1-C6mono-hidroksialkil ili C1-C6di-hidroksialkil). U pojedinim realizacijama, X može da bude odabran od - CH2OH, -CH2CH2OH, -CH(OH)CH3i -C(OH)(CH3)2. U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan C1-C6cijanoalkil (kao što je C1-C6monocijanoalkil ili a C1-C6di-cijanoalkil). U nekim primerima , X može da bude od

U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan C1-C6alkoksialkil (kao što je C1-C6monoalkoksialkil ili a C1-C6di-alkoksialkil). U pojedinim realizacijama, X može da bude odabran od

U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan C1-C6alkil odabran od

[0092] U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan C1-C6alkoksi (kao što su oni ovde opisani). U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan metoksi, nesupstituisan etoksi ili nesupstituisan izo-propoksi. U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan C1-C6alkoksi (kao što su oni ovde opisani). U pojedinim realizacijama, X može da bude a C1-C6alkoksi supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine halogen, amino, a mono-supstituisan amin (kao što su oni ovde opisani) i a di-supstituisan amin (kao što su oni ovde opisani). U pojedinim realizacijama, X može da bude C1-C6alkoksi supstituisan sa 1 supstituentom odabranim iz grupe koju čine halogen, amino, mono-supstituisan amin (kao što su oni ovde opisani) i di-supstituisan amin (kao što je ovde opisano).

[0093] U pojedinim realizacijama, X može da bude odabran od

[0094] U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan C3-C6cikloalkoksi (kao što su oni ovde opisani). U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan C3-C6cikloalkoksi (kao što su oni ovde opisani).

[0095] U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan (C1-C6alkil)acil, kao što je supstituisan -(CO)-CH3. U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan (C1-C6alkil)acil, kao što je nesupstituisan -(CO)-CH3.

[0096] U pojedinim realizacijama, X je supstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil. U pojedinim realizacijama, X je nesupstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil. U pojedinim realizacijama, X je odabran od azetidin, oksetan, diazetidin, azaoksetan, pirolidin, tetrahidrofuran, imidazolin, pirazolidin, piperidin, tetrahidropiran, piperazinmorfolin i dioksan; pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu. U nekim primerima , X može da bude odabran od

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0097] U pojedinim realizacijama, X je a 4-6 člani monocikličan heterociklil (kao što su oni ovde opisani) supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine halogen, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni ovde opisani), mono-supstituisan amin (kao što su oni ovde opisani), di-supstituisan amin (kao što su oni ovde opisani), amino, supstituisan ili nesupstituisan amin(C1-C6alkil) i supstituisan ili nesupstituisan (C1-C6alkil)acil. U pojedinim realizacijama, X je 4-6 člani monocikličan heterociklil supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, nesupstituisan metil, nesupstituisan etil, nesupstituisan izo-propil, -CH2OH i - N(CH3)2. U nekim primerima , X može da bude odabran od

[0098] U nekim primerima , X može da bude supstituisan amin(C1-C6alkil). U pojedinim realizacijama, X može da bude nesupstituisan amin(C1-C6alkil). U nekim primerima , X može da bude odbran od

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0099] U nekim primerima , X može da bude supstituisan -NH-(CH2)1-6-amin. U nekim primerima , X može da bude nesupstituisan -NH-(CH2)1-6-amin. U nekim primerima , X može da bude odabran od

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0100] U nekim primerima , X može da bude a mono-supstituisan amin. U pojedinim realizacijama, supstituent mono-supstituisanog amina je nesupstituisan C1-C6alkil (kao što je ovde opisano ) ili nesupstituisan C3-C6cikloalkil (kao što je ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil).

[0101] U nekim primerima , X može da bude di-supstituisan amin. U nekim primerima , dva supstituenta u di-supstituisanom aminu su nezavisno odabrani iz grupe koju čine nesupstituisan C1-C6alkil (kao što su oni koji su ovde opisani ) i nesupstituisan C3-C6cikloalkil (kao što su oni koji su ovde opisani ).

[0102] U nekim primerima , X može da bude odabran od

2

[0103] U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan ili nesupstituisan C-amido. U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan ili nesupstituisan N-amido. U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan ili nesupstituisan C-karboksi. U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan ili nesupstituisan O-karboksi. U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan ili nesupstituisan O-karbamil. U pojedinim realizacijama, X može da bude supstituisan ili nesupstituisan N-karbamil. U pojedinim realizacijama, X može da bude mono-supstituisan nesupstituisanim C1-C6hidroksialkil (kao što su oni ovde opisani).

[0104] Y<1>je CR<4A>ili N (azot). U nekim primerima , Y<1>može da bude CR<4A>. U nekim primerima , Y<1>može da bude N (azot).

[0105] Y<2>je CR<4B>ili N (azot). U nekim primerima , Y<2>može da bude CR<4B>. U nekim primerima , Y<2>može da bude N (azot).

[0106] U nekim primerima , svaki od Y<1>i Y<2>može da budeN (azot). U nekim primerima , Y<1>može da bude CR<4A>, a Y<2>može da bude CR<4B>. U nekim primerima , Y<1>može da bude CR<4A>, a Y<2>može da bude N (azot). U nekim primerima , Y<1>može da bude N (azot) , a Y<2>može da bude CR<4B>.

[0107] U nekim primerima , R<4A>može da bude vodonik. U nekim primerima , R<4A>može da bude halogen. U nekim primerima , R<4A>može da bude nesupstituisan C1-4alkil (kao što su oni ovde opisani).

[0108] U nekim primerima , R<4B>može da bude vodonik. U nekim primerima , R<4B>može da bude halogen. U nekim primerima , R<4B>može da bude nesupstituisan C1-4alkil (kao što su oni ovde opisani).

[0109] U nekim primerima , svaki od R<4A>i R<4B>može da bude vosonik. U nekim primerima , svaki od R<4A>i R<4B>može da bude halogen (pri čemu halogeni mogu da budu međusobno isti ili različiti). U nekim primerima , svaki od R<4A>i R<4B>može da bude nesupstituisan C1-4alkil (kao što su oni ovde opisani, i pri čemu C1-4alkili mogu da budu međusobno isti ili reazličiti). U nekim primerima , jedan od R<4A>i R<4B>može da bude vodonik, a drugi u R<4A>i R<4B>može da bude halogen. U nekim primerima , jedan od R<4A>i R<4B>može da bude vodonik, a drugi od R<4A>i R<4B>može da bude nesupstituisan C1-4alkil (kao što su oni ovde opisani). U nekim primerima , jedan od R<4A>i R<4B>može da bude halogen, a drugi od R<4A>i R<4B>može da bude nesupstituisan C1-4alkil (kao što su oni ovde opisani).

[0110] U nekim primerima , R<2>može da bude

Na primer, R<2>može da bude

gde R<2>je

u nekim primerima , R<5>može da bude supstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil. U drugim primerima , R<5>može da bude nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil. Primeri R<5>grupa uključuju supstituisan ili nesupstituisan piperidinil, supstituisan ili nesupstituisan pirolidinil i supstituisan ili nesupstituisan azepanil. Kada je supstituisana R<5>grupa, mogući supstituenti uključuju nesupstituisan C1-4alkil, halogen, hidroksi i nesupstituisan C1-4haloalkil.

[0111] Prsten C je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan C6-C10aril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-10 člani heteroaril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil, supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil i supstituisan ili nesupstituisan 7-10 člani bicikličan heterociklil.

[0112] U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan C6-C10aril. U nekim primerima , Prsten C može da bude nesupstituisan C6-C10aril. U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan C6aril. U nekim primerima , Prsten C može da bude nesupstituisan C6aril.

[0113] U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan 5-10 člani heteroaril. U nekim primerima , Prsten C može da bude nesupstituisan 5-10 člani heteroaril. U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan 5-6 člani heteroaril. U nekim primerima , Prsten C može da bude nesupstituisan 5-6 člani heteroaril. U nekim primerima , Prsten C može da bude odabran iz grupe koju čine furan, tiofen, pirol, oksazol, tiazol, imidazol, benzimidazol, indole, pirazol, izoksazol, piridin, piridazinpirimidin, pirazinpurine, hinolin, izohinolin, hinazolin i hinoksalin; pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0114] U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5 člani karbociklil. U pojedinim realizacijama, Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 6 člani karbociklil. U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 7 člani karbociklil.

[0115] U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan 5 člani monocikličan heterociklil. U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan 6 člani monocikličan heterociklil. U pojedinim realizacijama, Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan 7 člani monocikličan heterociklil. U nekim primerima , Prsten C može da bude odabran iz grupe koju čine imidazolin, imidazolidin, isoksazolin, izoksazolidin, oksazolin, oksazolidin, oksazolidinone, tiazolin, tiazolidin, morfolin, piperidin, piperazinpirolidin, pirolidon, 4-piperidon, pirazolin, pirazolidin, tetrahidropiran, azepin, okspin i diazepin; pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0116] U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan 7 člani bicikličan heterociklil (na primer, kondenzovan, premošten ili spiro heterociklil). U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan 8 člani bicikličan heterociklil, kao što je kondenzovan, premošten ili spiro heterociklil. U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan 9 člani bicikličan heterociklil (na primer, kondenzovan, premošten ili spiro heterociklil). U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan ili nesupstituisan 10 člani bicikličan heterociklil, kao što je, kondenzovan, premošten ili spiro heterociklil. U pojedinim realizacijama, Prsten C može da bude odabran iz grupe koju čine pirolizidin, indolin, 1,2,3,4 tetrahidrohinolin, 2-azaspiro[3.3]heptan, 2-oksaspiro[3.3]heptan, 2-oksa-6-azaspiro[3.3]heptan, 2,6-

2

diazaspiro[3.3]heptan, 2-oksaspiro[3.4]oktan i 2-azaspiro[3.4]oktan; pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa su supstituisane ili nesupstituisane, uključujući svaku -NH grupu.

[0117] U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno odabrana iz grupe koju čine nesupstituisan C1-C6alkil (kao što je ovde opisano ) i nesupstituisan (C1-C6alkil)acil. U nekim primerima , Prsten C može da bude supstituisan jednim supstituentom odabranim id nesupstituisanog C1-C6alkila (kao što je ovde opisano ) i nesupstituisanog (C1-C6alkil)acila.

[0118] U nekim primerima , R<2>može da bude odabran od:

pri čemu svaka od prethodno navedenih grupa može da bude supstituisan ili nesupstituisan.

[0119] Primeri jedinjenja formule (I) uključuju:

2

�

�

ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kog od prethodno navedenih.

Sinteza

[0120] Jedinjenja Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu da budu dobijena na različite načine od strane prosečnog stručnjaka koristeći poznate tehnike koje su vođene detaljnim učenjima datim ovde. Na primer, u jednom izvođenju, jedinjenja Formule (I) se pripremaju u skladu sa opštom šemom 1 kao što je ovde prikazano.

[0121] Uopšteno, reakcije kuplovanja između jedinjenja opštih formula A i B da bi se formirala jedinjenja formule (I) kao što je ilustrovano u opštoj šemi 1 može da se izvede na način sličan reakcijama

2

kao što je ovde opisano u Primerima, odgovarajućim podešavanjem reagenasa i uslova opisanih u Primerima. Bilo koji preliminarni reakcioni koraci potrebni za formiranje polaznih jedinjenja opšte formule A i B, ili drugih prekursora, može da izvede prosečan stručnjak. U opštoj šemi 1, Prsten A, Prsten B , R<1>i R<2>mogu da budu kao što je ovde opisano .

Farmaceutska kompozicija

[0122] Neke ovde opisane realizacije se odnose na farmaceutsku kompoziciju, koja uključuje efikasnu količinu jednog ili više jedinjenja opisanih ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) i farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ekscipijens ili njihovu kombinaciju.

[0123] Termin "farmaceutska kompozicija" se odnosi na smesa jedno ili više jedinjenja i/ili soli ovde otkrivenih sa drugim hemijskim komponentama, kao što su razblaživači ili nosači. Farmaceutska kompozicija olakšavaadministriranje jedinjenja organizmu. Farmaceutske kompozicije se takođe mogu dobiti reakcijom jedinjenja sa neorganskim ili organskim kiselinama kao što je hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, p-toluensulfonska kiselina i salicilna kiselina. Farmaceutske kompozicije će generalno biti prilagođene specifičnom predviđenom putu administracije.

[0124] Termin "fiziološki prihvatljiv" definiše nosač, razblaživač ili ekscipijens koji ne poništava biološku aktivnost i svojstva jedinjenja niti izaziva značajnu štetu ili povredu životinji kojoj je namenjena isporuka kompozicije.

[0125] Kako se ovde koristi, "nosač" se odnosi na jedinjenje koje olakšava inkorporaciju jedinjenja u ćelije ili tkiva. Na primer, bez ograničenja, dimetil sulfoksid (DMSO) je standardno korišćen nosač koji olakšava resorpciju mnogih organskih jedinjenja u ćelije ili tkiva subjekta.

[0126] Kako se ovde koristi, "razblaživač" se odnosi na sastojak u farmaceutskoj kompoziciji koji nema značajnu farmakološku aktivnost, ali može biti farmaceutski neophodan ili poželjan. Na primer, razblaživač se može koristiti za povećanje mase potentnog leka čija je masa suviše mala za proizvodnju i/ili administraciju. Takođe može biti tečnost za rastvaranje leka koji se administrira injekcijom, gutanjem ili inhalacijom. Uobičajeni oblik razblaživača u tehnici je puferovani vodeni rastvor kao što je, bez ograničenja, fiziološki rastvor puferovan fosfatom koji imitira pH i izotoničnost ljudske krvi.

[0127] Kako se ovde koristi, "ekscipijens" se odnosi na suštinski inertnu supstancu koja je dodata farmaceutskoj kompoziciji da bi se kompoziciji, bez ograničenja, obezbedila zapremina, konzistencija, stabilnost, sposobnost vezivanja,lubrikacija, sposobnost dezintegracije itd. Na primer, stabilizatori kao što su antioksidansi i agensi za heliranje metala su ekscipijensi. U jednom aspektu, farmaceutska kompozicija sadrži antioksidans i/ili agens za heliranje metala. "Razblaživač" je vrsta ekscipijensa.

[0128] Farmaceutske kompozicije opisane ovde mogu sr admoinistrirati ljudskom pacijentu per se, ili u farmaceutskim kompozicijama gde su pomešane sa drugim aktivnim sastojcima, kao u kombinovanoj terapiji, ili nosačima, razblaživačima, ekscipijensma ili njihovim kombinacijama. Odgovarajuća formulacija zavisi od odabranog načina administracije. Tehnike formulisanja i administracije ovde opisanih jedinjenja su poznate stručnjacima u ovoj oblasti.

[0129] Farmaceutske kompozicije koje su ovde otkrivene mogu se proizvesti na način koji je i sam poznat, npr., pomoću konvencionalnih procesa mešanja, rastvaranja, granulacije, pravljenja dražeja, pretvaranja u prah, emulgovanja, kapsuliranja, hvatanja ili tabletiranja. Pored toga, aktivni sastojci su sadržani u količini koja je efikasna da postigne svoju namenu. Mnoga od jedinjenja koja se koriste u farmaceutskim kombinacijama koje su ovde otkrivene mogu biti obezbeđena kao soli sa farmaceutski kompatibilnim protivjonima.

[0130] Više tehnika administriranj jedinjenja, soli i/ili kompozicije postoje u tehnici, uključujući, ali ne ograničavajući se na, oralnu, rektalnu, plućnu, topikalnu, aerosolnu, injekciju, infuziju i parenteralnu isporuku, uključujući intramuskularne, subkutane, intravenske, intramedularne, intraperitone, direktne intraperitone injekcije, intra intranazalne i intraokularne injekcije. U pojedinim realizacijama, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, može da se administrira oralno.

[0131] Takođe se možeadministrira jedinjenje, so i/ili kompozicija na lokalni, a ne sistemski način, na primer, putem injekcije ili implantacije jedinjenja direktno u zahvaćeno područje, često u depo ili kao formulacija sa produženim oslobađanjem. Štaviše, jedinjenje se može primeniti u ciljanom sistemu za isporuku leka, na primer, u lipozomu obloženom tkivno specifičnim antitelom. Lipozomi će biti usmereni na organ i selektivno ih preuzimati. Na primer, može da bude poželjna intranazalna ili plućna isporuka za ciljanje respiratorne bolesti ili stanja.

[0132] Kompozicije mogu, po želji, biti predstavljene u pakovanju ili uređaju za doziranje koji može da sadrži jednu ili više jediničnih doznih oblika koji sadrže aktivni sastojak. Pakovanje na primer može da se sastoji od metalne ili plastične folije, kao što je blister pakovanje. Pakovanje ili uređaj za doziranje mogu biti propraćeni uputstvom za administraciju. Uz pakovanje ili dozator može se priložiti i obaveštenje u vezi sa kontejnerom u formi koju propisuje državna agencija koja reguliše proizvodnju, upotrebu, ili prodaju lekova, a koja označava da je agencija odobrila oblik leka za humanu ili veterinarsku primenu. Takvo obaveštenje, na primer, može biti označavanje koje je odobrila Uprava za hranu i lekove SAD za lekove na recept, ili odobreni umetak o proizvodu. Kompozicije koje mogu da obuhvate jedinjenje i/ili so ovde opisane kao formulisane u kompatibilnom farmaceutskom nosaču takođe se mogu pripremiti, staviti u odgovarajući kontejner i obeležiti za lečenje naznačenog stanja.

Upotreba i metode lečenja

[0133] Neke realizacije opisane ovde se odnose na jedinjenje opisano ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu ovde opisanog jedinjenja (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) za upotrebu u ublažavanju i/ili lečenju raka kao što je ovde opisano.

[0134] Pojedine realizacije opisane ovde se odnose na ovde opisano jedinjenje (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu jedinjenja opisanog ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) za upotrebu u inhibiciji replikacije replikacije malignog tumora, pri čemu su maligni rat ili tumor usled raka koji je ovde opisan.

[0135] Neke realizacije koje su ovde opisane odnose se na ovde opisano jedinjenje (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu jedinjenja opisanog ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova

1

farmaceutski prihvatljiva so) za upotrebu u lečenju malignog rasta ili tumora, gde je maligni rast ili tumor zbog raka koji je ovde opisan.

[0136] Neki primeri koji su ovde opisani odnose se na ovde opisano jedinjenje (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutski sastav koji uključuje efikasnu količinu jedinjenja opisanog ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) zZa upotrebu u inhibiciji aktivnosti WEE1 (na primer, inhibicija aktivnosti WEE1 u TP53 mutiranim ćelijama, inhibiciju aktivnosti WEE1 u TP53 ćelijama divljeg tima, inhibicija aktivnosti u WEE1 p53-deficitarnim ćelijama i/ili smanjivanje prekomerne ekspresije WEE1 u ćelijama).

[0137] Pojedini ovde opisani primeri odnose se na efektivnu količinu jedinjenja opisanog ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu jedinjenja opisanog ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili farmaceutski prihvatljiva so) za upotrebu u ublažavanju ili lečenju ovde opisanog raka inhibirajući aktivnost WEE1 (na primer, inhibiciju aktivnosti WEE1 u TP53-mutiranim ćelijama, inhibiciju aktivnosti WEE1 u TP53 ćelijama dilvljeg tipa, inhibiciju aktivnosti u WEE1 p53-deficitarnim ćelijama i/ili smanjivanje prekomerne ekspresije WEE1 u ćelijama).

[0138] Neki primeri koji su ovde otkriveni odnose se na jedinjenje koje opisano ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutsku kompoziciju koja uključuje efikasnu količinu jedinjenja opisanog ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) za upotrebu u inhibiciji aktivnosti WEE1.

[0139] Primeri pogodnih karcinoma uključuju, ali nisu ograničeni na: karcinom mozga, cervikocerebralni karcinom, karcinom jednjaka, karcinom štitaste žlezde, karcinom malih ćelija, karcinom nemalih ćelija, karcinom dojke, karcinom pluća (na primer karcinom nemalih ćelija pluća i karcinom malih ćelija pluća), karcinom stomaka, karcinomi žučne kese /žučnih kanala, rak jetre, karcinom pankreasa, karcinom debelog creva, karcinom rektuma, karcinom jajnika, horiokarcinomi, karcinom tela materice, karcinom tela materice, , uterocerviklani karcinomi, karcinom bubrežne karlice/mokraćovoda, karcinom mokraćne bešike, karcinom prostate, karcinomom penisa, karcinomom testisa, fetalni karcinom, Vilmsovom karcinom, rak kože, maligni melanom, neuroblastom,osteosarkomi, Juingovi tumori, sarkomi mekog dela, akutna leukemija, hronična limfatična leukemija, hronična mijelocitna leukemija, policitemija vera, maligni limfomi, multipli mijelom, Hodgkinovi limfomi i ne-Hodgkinovi limfomi.

[0140] Kao što je ovde opisano, kancer može postati otporan na jedno ili više sredstava protiv raka. U nekim primerima , ovde opisano jedinjenje (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) ili farmaceutska kompozicija koja uključuje efikasnu količinu jedinjenja opisanog ovde (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) može da se koristi za lečenje i/ili ublažavanje raka koji je postao otporan na jedan ili više agenasa protiv raka agents (kao što je one ili više WEE1 inhibitora). Primeri agenasa protiv raka za koje je subjekt možda razvio rezistenciju da uključuju, ali nisu ograničeni na, WEE1 inhibitore (kao što je AZD1775). U pojedinim realizacijama, karcinom koji je postao otporan na jedan ili više agenasa protiv raka može da bude karcinom kao što je ovde opisan.

[0141] Nekoliko poznatih WEE1 inhibitora može izazvati jedan ili više neželjenih efekata kod subjekta koji se leči. Primeri neželjenih neželjenih efekata uključuju, ali nisu ograničeni na, trombocitopeniju, neutropeniju, anemiju, dijareju, povraćanje, mučninu, bol u stomaku i zatvor. U određenim realizacijama, ovde opisano jedinjenje (na primer, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so) može smanjiti broj i/ili ozbiljnost jednog ili više neželjenih efekata povezanih sa

2

poznatim inhibitorom WEE1. U nekim realizacijama, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, može dovesti do ozbiljnosti neželjenog efekta (kao što je jedan od onih koji su ovde opisani) koji je 25% manji u poređenju sa ozbiljnošću istog neželjenog efekta koji ima subjekt koji prima poznati inhibitor WEE1 (kao što je AZD1775, zvanično poznat kao MKS br.955365-80-7, 22-alil-1-(6-(2-hidroksipropan-2-il)piridin-2-il)-6-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino)-1,2-dihidropirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on)). U određenim realizacijama, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, dovodi do brojnih neželjenih efekata koji su 25% manji nego u poređenju sa brojem neželjenih efekata koje doživljava subjekt koji je primio poznati inhibitor WEE1 (na primer, AZD1775). U nekim realizacijama, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, rezultira ozbiljnošću neželjenog efekta (kao što je jedan od onih koji su ovde opisani) koji je manji u opsegu od oko 10% do oko 30% u poređenju sa ozbiljnošću istog neželjenog efekta koji ima subjekt koji prima poznati inhibitor WEE1 (kao što je AZD1775). U nekim realizacijama, jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, dovodi do brojnih neželjenih efekata koji su u opsegu od oko 10% do oko 30% manji nego u poređenju sa brojem neželjenih efekata koje doživljava subjekt koji prima poznati inhibitor WEE1 (kao što je AZD1775).

[0142] Jedno ili više jedinjenja Formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koje se mogu koristiti za lečenje, ublažavanje i/ili inhibiranje rasta karcinom pri čemu je inhibiranje aktivnosti WEE1 korisno, dato je u bilo kojoj od realizacija opisanih u paragrafima [0064]-[0112] pod naslovom “ Jedinjenja”.

[0143] Kako se ovde koristi, "subjekt" se odnosi na životinju koja je predmet tretmana, posmatranja ili eksperimenta. „Životinja“ uključuje hladnokrvne i toplokrvne kičmenjake i beskičmenjake kao što su ribe, školjke, gmizavci i, posebno, sisari. „Sisar“ uključuje, bez ograničenja, miševe, pacove, zečeve, zamorce, pse, mačke, ovce, koze, krave, konje, primate, kao što su majmuni, šimpanze i majmuni, i, posebno, ljude. U nekim realizacijama, subjekt može biti čovek. U nekim realizacijama, subjekt može biti dete i/ili novorođenče, na primer, dete ili novorođenče sa groznicom. U drugim realizacijama, subjekt može biti odrasla osoba.

[0144] Kako se ovde koristi, izrazi "lečenje", "lečenje", "tretman", "terapeutski" i "terapija" ne znače nužno potpuno izlečenje ili nestanak bolesti ili stanja. Svako ublažavanje bilo kojih neželjenih znakova ili simptoma bolesti ili stanja, u bilo kojoj meri, može se smatrati lečenjem i/ili terapijom. Štaviše, tretman može uključivati radnje koje mogu pogoršati sveukupni osećaj dobrobiti ili izgleda subjekta.

[0145] Izrazi "terapeutski efikasna količina" i "efikasna količina" se koriste za označavanje količine aktivnog jedinjenja, ili farmaceutskog agensa, koji izaziva naznačeni biološki ili medicinski odgovor. Na primer, terapeutski efikasna količina jedinjenja, soli ili kompozicije može da bude količina potrebna za prevenciju, ublažavanje ili ublažavanje simptoma bolesti ili stanja, ili produženje preživljavanja subjekta koji se leči. Ovaj odgovor se može javiti u tkivu, sistemu, životinji ili čoveku i uključuje ublažavanje znakova ili simptoma bolesti ili stanja koje se leči. Određivanje efektivne količine je u granicama sposobnosti stručnjaka u ovoj oblasti, s obzirom na ovde dato otkriće. Terapeutski efikasna količina ovde otkrivenih jedinjenja koja je potrebna kao doza zavisiće od načina administracije, vrste životinje, uključujući čoveka, koja se leči i fizičkih karakteristika specifične životinje koja se razmatra. Doza može da bude prilagođena za postizanje željenog efekta, ali će zavisiti od faktora kao što su težina, ishrana, istovremeno uzimanje lekova i drugih faktora koje će prepoznati poznavaoci ove oblasti medicine.

[0146] Na primer, efikasna količina jedinjenja, ili zračenje, je količina koja rezultira: (a) smanjenjem, ublažavanjem ili nestankom jednog ili više simptoma izazvanih karcinomom (b) smanjenjem veličine tumora, (c) eliminacijom tumora i/ili (d) dugotrajnom stabilizacijom bolesti (zaustavljanjem rasta) tumora. U lečenju karcinoma pluća (kao što je karcinom ne-malih ćelija pluća) terapeutski efikasna količina je ta količina koja ublažava ili otklanja kašalj, gbitak daha i/ili bol. Kao drugi primer, efikasna količina, ili terapeutski efikasna količina inhibitora WEE1 je količina koja rezultira smanjenjem aktivnosti WEE1 i/ili fosforilacije (kao što je fosforilacija CDC2). Smanjenje aktivnosti WEE1 je poznato stručnjacima u ovoj oblasti i može da bude određeno analizom aktivnosti intrinzične kinaze WEE1 i nishodne fosforilacije supstrata .

[0147] Količina jedinjenja Formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva tako, potrebna za upotrebu u lečenju će varirati ne samo u zavisnosti od određenog jedinjenja ili soli odabranog, već i od načina administracije, prirode i/ili simptoma bolesti ili stanja koje se leči i starosti i stanja pacijenta i na kraju će biti određena prema diskreciji lekara ili kliničara. U slučajevima primene farmaceutski prihvatljive soli, doze se mogu izračunati kao slobodna baza. Kao što će stručnjaci sa iskustvom u ovoj oblasti razumeti, u određenim situacijama može biti neophodno primeniti jedinjenja koja su ovde otkrivena u količinama koje premašuju, ili čak daleko prevazilaze, opsege doziranja opisane ovde kako bi se efikasno i agresivno lečili posebno agresivna oboljenja ili stanja.

[0148] Generalno, međutim, pogodna doza će često biti u opsegu od oko 0,05 mg/kg do oko 10 mg/kg. Na primer, odgovarajuća doza može biti u rasponu od oko 0,10 mg/kg do oko 7,5 mg/kg telesne težine dnevno, kao što je oko 0,15 mg/kg do oko 5,0 mg/kg telesne težine primaoca dnevno, oko 0,2 mg/kg do 4,0 mg/kg telesne težine primaoca dnevno, ili bilo koja količina između ovih. Jedinjenje se može administrirati u obliku jedinične doze; na prajmer, koji sadrži 1 do 500 mg, 10 do 100 mg, 5 do 50 mg ili bilo koju količinu između, aktivnog sastojka po jediničnom doznom obliku.

[0149] Željena doza se može prikladno predstaviti u jednoj dozi ili kao podeljene doze administrirane u odgovarajućim intervalima, na primer, kao dve, tri, četiri ili više poddoza dnevno. Sama pod-doza se može dalje podeliti, npr., na brojne diskretne proizvoljno raspoređene administracije.

[0150] Kao što će biti očigledno stručnjaku u ovoj oblasti, korisna in vivo doza koja se administrira i određeni način administracije će varirati u zavisnosti od starosti, težine, težine bolesti, vrste sisara koji se leče, određenih jedinjenja koja se koriste i specifične upotrebe za koju se ova jedinjenja koriste. Određivanje efektivnih nivoa doziranja, koji su nivoi doziranja neophodni za postizanje željenog rezultata, može da bude postignuto od strane stručnjaka u ovoj oblasti koristeći rutinske metode, na primer, klinička ispitivanja na ljudima, in vivo studije i in vitro studije. Na primer, korisne doze jedinjenje formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, može se odrediti poređenjem njihove in vitro aktivnosti, i in vivo aktivnosti na životinjskim modelima. Takvo poređenje može da bude urađeno poređenjem sa utvrđenim lekom, kao što je cisplatin i/ili gemcitabin)

[0151] Količina doze i interval mogu da se podese pojedinačno da bi se obezbedili nivoi aktivnog dela u plazmi koji su dovoljni za održavanje modulacionih efekata, ili minimalne efektivne koncentracije (MEC). MEC će varirati za svako jedinjenje, ali može da se proceni na osnovu podataka dobijenih in vivo i/ili in vitro. Doze neophodne za postizanje MEC zavisiće od individualnih karakteristika i načina administracije. Međutim, HPLC testovi ili biološki testovi mogu da se koriste za određivanje koncentracija u plazmi. Intervali doziranja se takođe mogu odrediti korišćenjem MEC vrednosti. Kompozicije treba administrirati koristeći režim koji održava nivoe u plazmi iznad MEC tokom 10-90% vremena, poželjno između 30-90% i najpoželjnije između 50-90%. U slučajevima lokalne administracije ili selektivnog unosa, efektivna lokalna koncentracija leka možda nije povezana sa koncentracijom u plazmi.

[0152] Treba napomenuti da bi lekar znao kako i kada da prekine, prekine ili prilagodi administraciju zbog toksičnosti ili disfunkcije organa. Nasuprot tome, lekar bi takođe znao da prilagodi lečenje višim nivoima ako klinički odgovor nije adekvatan (isključujući toksičnost). Veličina administrirane doze u

4

lečenju poremećaja od interesa će varirati u zavisnosti od težine bolesti ili stanja koje se leči i od načina administracije. Ozbiljnost bolesti ili stanja može se, na primer, delimično proceniti standardnim prognostičkim metodama procene. Dalje, doza i možda učestalost doze će takođe varirati u zavisnosti od starosti, telesne težine i odgovora pojedinačnog pacijenta. U veterinarskoj medicini može se koristiti program uporediv sa onim koji je prethodno razmotren.

[0153] Jedinjenja, soli i kompozicije otkrivene ovde mogu da se procene za efikasnost i toksičnost korišćenjem poznatih metoda. Na primer, toksikologija određenog jedinjenja, ili podskupine jedinjenja, shaprsten Određene hemijske grupe, može se utvrditi određivanjem in vitro toksičnosti prema ćelijskoj liniji, kao što je ćelijska linija sisara, a poželjno ćelijskoj liniji čoveka. Rezultati ovakvih studija često predviđaju toksičnost kod životinja, kao što su sisari, ili tačnije, ljudi. Alternativno, toksičnost određenih jedinjenja u životinjskom modelu, kao što su miševi, pacovi, zečevi, psi ili majmuni, može se odrediti korišćenjem poznatih metoda. Efikasnost određenog jedinjenja može se utvrditi korišćenjem nekoliko priznatih metoda, kao što su in vitro metode, životinjski modeli ili klinička ispitivanja na ljudima. Prilikom izbora modela za određivanje efikasnosti, kvalifikovani stručnjak može da bude vođen stanjem tehnike da odabere odgovarajući model, dozu, način i/ili režim administracije.

PRIMERI

[0154] Dodatne realiyacije su detaljnije opisane u primerima koji slede, koji ni na koji način nisu namenjeni ograničavanju obima zahteva.

Intermedijer 1

2-Alil-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0156] Intermedijer 1 je pripremljen prema proceduri opisanoj u Matheson et al., ACS Chem. Biol. (2016) 11:2066-2067. MS (LCMS) 223.0 [M+H]<+>.

Intermedijer 2

2-Brom-6,7-dihido-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

[0158] Korak 1. Smesa propiolamid (62 g, 898.55 mmol), etil 2-oksociklopentankarboksilat (140.35 g, 898.55 mmol) i Na2CO3(94.3 g, 898.55 mmol) u vodi (2.25 L) je mešana na rt tokom 18 h. Smesa je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 500 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani rastvorom soli, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani dajući etil 1-(3-amino-3-oksoprop-1-enil)-2-oksociklopentankarboksilat (40 g, 20%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (LCMS) 226.3 [M+H]<+>.

[0159] Korak 2. Rastvor etil 1-(3-amino-3-oksoprop-1-enil)-2-oksociklopentankarboksilata (39 g, 173.33 mmol) u konc. HCl (390 mL) je mešan u zatvorenom sudu na 110 °C u trajanju od 18 h. Solvent je uklonjen i dodat je vodeni rastvor NaHCO3da bi se podesilo pH na 8-9 na 0 °C. Dobijeni čvrsti ostatak je profiltriran i ispran sa Et2O (2 x 100 mL) dajući 6,7-dihidro-1H-ciklopenta[b]piridin-2(5H)-on (15 g, 64% prinos) kao beličast čvrsti ostatak. MS (LCMS) 135.9 [M+H]<+>.

[0160] Korak 3. Rastvor 6,7-dihidro-1H-ciklopenta[b]piridin-2(5H)-ona (18 g, 133.33 mmol) u PBr3(180 mL) je zagrevan na 180 °C u trajanju od18 h. Reakcioni rastvor je zatim ostavljen da se ohladi na rt i sipan je u smešu hladne vode i leda. Podešeno je pH na 8-9 dodatkom zasićenog NaHCO3. Dobijeni rastvor je profiltriran kroz sloj Celita. Filtrat je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 500 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4) ikoncentrovani dajući 2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin (7 g, 26%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (LCMS) 197.8 [M+H]<+>.

[0161] Korak 4. U mešani rastvor 2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridina (4 g, 20.41 mmol) u DCM (120 mL) dodat je m-CPBA (10.5 g, 61.22 mmol). Smesa zagrevana da refluksuje tokom 16 h, dodat je zas. NaHCO3i ekstrahovana sa 5% MeOH/DCM (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani ajuči 2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin 1-oksid (3.3 g, 76% prinos) kao beličast čvrsti ostatak. MS (LCMS) 213.8 [M+H]<+>.

[0162] Korak 5. Rastvor 2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-1-oksid (3.2 g, 15.09 mmol) u Ac2O (30 mL) je zagrevan na 100 °C u trajanju od 16 h. Ac2O je uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 7% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija 2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-il acetat (2 g, 52%) kao ulje. MS (LCMS) 255.9 [M+H]<+>.

[0163] Korak 6. U mešani rastvor 2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-il acetata (2 g, 7.84 mmol) u THF/H2O (20 mL, 1:1) dodat je LiOH·H2O (0.755 g, 31.49 mmol) na rt. Reakciona smesa je mešana tokom 3 h i zatim razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 40% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 2 (1.2 g, 71%) kao braon čvrsta supstanca. MS (LCMS) 214.1 [M+H]<+>.

Intermedijer 3

2-Alil-1-(7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3(2H)-on

[0165] U rastvor Intermedijera 1 (450 mg, 2.02 mmol), Intermedijera 2 (558 mg, 2.62 mmol), CuI (384 mg, 2.02 mmol) i K2CO3(390 mg, 2.83 mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL), dodat je N,N'-Dimetiletilenediamin (0.43 mL, 4.02 mmol) na 80 °C. Suspenzija je zagrevana na 95 °C tokom 18 h. Smesa je ohlađena na rt, razblažena vodenim rastvorom NH4OH (30 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani rastvorom soli (20 mL), osušeni (Na2SO4) i upareni do suva. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 40% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 3 (280 mg, 38%) kao svetlo žuto ulje. MS (ESI) 356.4 [M+H]<+>.

Primer 1A

(S)-2-Alil-1-(7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 1B

(R)-2-Alil-1-(7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0168] U rastvor Intermedijera 3 (280 mg, 0.79 mmol) u toluenu (20 mL), dodat je m-CPBA (201 mg, 1.17 mmol) i smesa je mešana na rt tokom 1 h. Dodati su DIPEA (0.69 mL, 3.94 mmol) i 4-(4-metil piperzine-1-il)aniline (178 mg, 0.93 mmol) i smesa je mešana na rt tokom 18 h. Dodat je zasićen rastvor NaHCO3(25 mL) i smesa je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani rastvorom soli (20 mL), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Ostatak je prečišćen reversno faznom HPLC (acetonitril/voda) pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3(2H)-on (87 mg, 30% prinos) kao žuta čvrsta susptanca. Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiralpak AD-H, 40 % (0.5% DEA u etanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 1A, 19 mg) i Pik 2 (Primer 1B, 25 mg). Primer 1A: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 10.08 (brs, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.93 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.60-7.53 (m, 2H), 6.90 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.73-5.62 (m, 1H), 5.57-5.39 (m, 1H), 5.04-4.86 (m, 3H), 4.68-4.52 (m, 2H), 3.13-3.06 (m, 4H), 3.05-2.94 (m, 1H), 2.86-2.75 (m, 1H), 2.47-2.37 (m, 5H), 2.22 (s, 3H), 1.92-1.83 (m, 1H); MS (LCMS) 499.3 [M+H]<+>. Primer 1B: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 10.05 (brs, 1H), 8.80 (s, 1H), 7.93 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.60-7.53 (m, 2H), 6.90 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.73-5.62 (m, 1H), 5.57-5.39 (m, 1H), 5.04-4.86 (m, 3H), 4.68-4.52 (m, 2H), 3.13-3.06 (m, 4H), 3.05-2.94 (m, 1H), 2.86-2.75 (m, 1H), 2.47-2.37 (m, 5H), 2.22 (s, 3H), 1.91-1.83 (m, 1H); MS (LCMS) 499.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je proizvoljno dodeljena za Primer 1A i Primer 1B.

Intermedijer 4

2-Brom-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

[0170] Korak 1. U mešani rastvor racemskog 2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ola (1.4 g, 6.60 mmol) u DCM (15 mL) Dodat je Dess-Martin perjodinan (3.0 g, 7.26 mmol). Smesa je mešana na rt tokom 16 h, dodat je zasićen vodeni rastvor NaHCO3i ekstrahovana sa DCM (2 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 40% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija 2-brom-5H-ciklopenta[b]piridin-7(6H)-on (780 mg, 60%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (LCMS) 212.0 [M+H]<+>.

[0171] Korak 2. U mešani rastvor 2-brom-5H-ciklopenta[b]piridin-7(6H)-ona (400 mg, 1.90 mmol) u THF (10 mL) dodat je metil magnezijum jodid (2M THF, 7.5 mL) na 0 °C. Reakciona smesa je mešana od 0°C do rt u trajanju od 16 h, dodat je zasićen vodeni rastvor NH4Cl i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 40 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30 % EtOAc/petroletar ) pri čemu se dobija Intermedijer 4 (200 mg, 46%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (LCMS) 227.9 [M+H]<+>.

Intermedijer 5

2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0173] Intermedijer 5 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 4. MS (LCMS) 370.1 [M+H]<+>.

Primer 2A

(S)-2-Alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 2B

(R)-2-Alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0176] U mešani rastvor Intermedijera 5 (330 mg, 0.89 mmol) u THF/H2O (20 mL, 1: 1) dodat je Okson (673 mg, 2.68 mmol) i smesa je mešana na rt tokom 1 h, razblažen dodatkom vode (50 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija smesa sulfoksida i sulfona (330 mg, 0.822 mmol) kao polu-čvrst ostatak. U smesu sulfoksida i sulfona (330 mg, 0.82 mmol) u toluenu (10 mL), dodat je DIPEA (0.43 mL, 2.46 mmol) pa zatim i 4-(4-metilpiperazin-1-il)anilin (188 mg, 0.99 mmol) i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Smesa je razblažena dodatkom EtOAc (50 mL) i isprana vodom (50 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak prečišćen fleš hromatografijom (neutralni aluminijum oksid, 5% metanol/DCM) pri čemu se dobija racemslo 2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (260 mg) kao beličast čvrsti ostatak. Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiralpak AD-H, 15 % (15 mM Amonijum hidroksid u Metanol)u) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 2A, 105 mg) i Pik 2 (Primer 2B, 96 mg). Primer 2A: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.16 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.92 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.62-7.55 (m, 2H), 6.91 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.99 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.79-4.55 (m, 2H), 3.12-3.07 (m, 4H), 3.02-2.91 (m, 1H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.47-2.42 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (t, J=7.2 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H); MS (LCMS) 513.4 [M+H]<+>. Primer 2B: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.16 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.97-7.89 (m, 1H), 7.68 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.62-7.55 (m, 2H), 6.91 (d, J=9.6 Hz, 2H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.17 (br s, 1H), 4.98 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.85 (d, J=16.4 Hz, 1H), 4.79-4.55 (m, 2H), 3.12-3.07 (m, 4H), 3.02-2.91 (m, 1H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.47-2.42 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.12 (t, J=7.2 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H); MS (LCMS) 513.5 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 2A i Primer 2B.

Intermedijer 6

2-Brom-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

[0178] U mešani rastvor 2-brom-5,6-dihidro-7H-ciklopenta[b]piridin-7-ona (1.5 g, 7.08 mmol) u THF (20 mL) dodat je TMSCF3(3.2 ml, 21.23 mmol) pa zatim i TBAF (1M u THF) (0.7 ml, 0.71 mmol) na 0 °C. Reakciona smesa je mešana od 0 °C do rt tokom 12 h, dodata je 6N HCl i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 6 (825 mg, 41%) kao braon čvrsta supstanca. MS (LCMS) 281.9 [M+H]<+>.

Intermedijer 7

2-alil-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0180] Intermedijer 7 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 6. MS (LCMS) 424.3 [M+H]<+>.

Primer 3A

(S)-2-Alil-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 3B

(R)-2-Alil-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0183] Primeri 3A i 3B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 7 pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (330 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiralpak AD-H, 40 % (15 mM Amonijum hidroksid u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 3A, 126 mg) i Pik 2 (Primer 3B, 150 mg). Primer 3A: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.07 (br s, 1H), 7.92 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.65-7.58 (m, 2H), 6.94 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.79 (s, 1H), 5.68-5.60 (m, 1H), 4.96 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.79 (d, J=16.4 Hz, 2H), 4.61-4.53 (m, 1H), 3.14-3.02 (m, 5H), 3.00-2.90 (m, 1H), 2.61-2.60 (m, 1H), 2.49-2.44 (m, 4H), 2.22 (br s, 4H); MS (LCMS) 567.5 [M+H]<+>. Primer 3B: kao žuta čvrsta supstanca;<1>HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.07 (br s, 1H), 7.92 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.65-7.58 (m, 2H), 6.94 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.79 (s, 1H), 5.70-5.60 (m, 1H), 4.96 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.79 (d, J=16.4 Hz, 2H), 4.61-4.53 (m, 1H), 3.16-3.02 (m, 5H), 3.00-2.90 (m, 1H), 2.61-2.56 (m, 1H), 2.49-2.44 (m, 4H), 2.25 (br s, 4H); MS (LCMS) 567.6 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 3A i Primer 3B.

Intermedijer 8

5-Brom-3-metil-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-3-ol

4

[0185] Korak 1. 2,3-Dihidrofur[3,2-b]piridin-5-amin je pripremljen prema WO Publication No.

2008/069311. MS (LCMS) 137.1 [M+H]<+>.

[0186] Korak 2. U mešani rastvor 2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-amin (9.0 g, 66.17 mmol) u CH2Br2(200 mL) dodat je CuBr2(7.303 g, 33.08 mmol) i zatim je u kapima dodat izoamil nitrit (8.515 g, 72.78 mmol). Reakciona smesa je mešana na rt tokom 2 h, dodat je zasićen vodeni rastvor . NaHCO3(50 mL) i profiltrirana kroz sloje Celita. Filtrat je ekstrahovan sa DCM (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin (6.0 g, 45%) kao braon čvrsta supstanca. MS (ESI) 200.2 [M+H]<+>.

[0187] Korak 3. U mešani rastvor 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin (6.0 g, 30.15 mmol) u DCM (100 mL) dodat je m-CPBA (6.27 g, 36.18 mmol) na 0 °C i smesa je mešana na rt tokom 16 h. Reakciona smesa je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je triturisan sa n-pentanom i osušen pri čemu se dobija sirov 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin 4-oksid (9.5 g) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 216.2 [M+H]<+>. Dodat je anhidrid acetatne kiseline (100 mL) u 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin 4-oksid (9.5 g, 44.18 mmol) i smesa je zagrevana na 90 °C u trajanju od 1 h. Reakcioni rastvor je ohlađen na rt, koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je razblažen dodatkom yasićenog vodenog rastvora NaHCO3(100 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (3 x 60 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-3-il acetat (5.0 g, 65%) kao braon čvrsta supstanca. MS (ESI) 258.2 [M+H]<+>.

[0188] Korak 4. U mešani rastvor 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-3-il acetata (5.0 g, 19.45 mmol) u THF/H2O (1:1, 30 mL) dodat je LiOH·H2O (2.45 g, 58.35 mmol) i mešano na rt u trajanju od 2 h. Smesa je ekstrahovana sa EtOAc 3 x 100 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani vodom (100 mL) i rastvorom soli (100 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-3-ol (2.5 g, 59%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 216.1 [M+H]<+>.

[0189] Korak 5. U mešani rastvor 5-brom-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-3-ola (2.6 g, 12.09 mmol) u acetonu (30 mL), dodat je sveže pripremljen Jones-ov reagens (25 mL, CrO3(3 eq.) i vodeni rastvor H2SO4(3 ekv.) na 0 °C, i reakciona smesa je mešana na 0 °C u trajanju od 30 min. Reakcioni rastvor je razblažen dodatkom EtOAc (60 mL), ispran sa smesom leda-hladne vode (50 mL) i rastvora soli (50 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija 5-bromofuro[3,2-b]piridin-3(2H)-on (1.2 g, 46% prinos) kao braon čvrsta supstanca. MS (ESI) 214.4 [M+H]<+>.

[0190] Korak 6. U rastvor 5-bromofuro[3,2-b]piridin-3(2H)-on (1.1 g, 5.16 mmol) in Et2O (15 mL) ohlađen na 0 °C dodat je metil magnezijum jodid (8.6 mL, 3.0 M u Et2O, 25.80 mmol). Reakciona smesa je mešana na 0 °C u trajanju od 1 h, zatim je dodat vodeni NH4Cl (30 mL) i ekstrahovano sa EtOAc (2 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30 % EtOAc/pet etar ) dajući Intermedijer 8 (510 mg, 43% prinos) kao braon čvrsta supstanca. MS (ESI) 230.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 9

2-Alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0192] Intermedijer 9 je pripremljen prema proceduri opisanoj za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 8; MS (ESI) 372.6 [M+H]<+>.

Primer 4A

(S)-2-Alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 4B

(R)-2-Alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0195] Primeri 4A i 4B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 9 pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)-amino)-1,2-dihidro-3H\-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (350 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiralpak AD-H, 40% (0.5% DEA u Etanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 4A, 120 mg) i Pik 2 (Primer 4B, 120 mg). Primer 4A: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.10 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.70-7.53 (m, 4H), 6.85 (d, J=16.8 Hz, 2H), 5.81 (s, 1H), 5.71-5.64 (m, 1H), 5.01 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.89 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.50-4.43 (m, 4H), 3.07 (t, J=4.4 Hz, 4H), 2.44 (t, J=4.4 Hz, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.55 (s, 3H); MS (ESI) 515.6 [M+H]<+>. Primer 4B: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.10 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.70-7.53 (m, 4H), 6.85 (d, J=16.8 Hz, 2H), 5.81 (s, 1H), 5.71-5.64 (m, 1H), 5.01 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.89 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.50-4.43 (m, 4H), 3.07 (t, J=4.4 Hz, 4H), 2.44 (t, J=4.4 Hz, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.55 (s, 3H); MS (ESI) 515.5 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 4A i Primer 4B.

Intermedijer 10

3-etil-5-jod-2,3-dihidrobenzofuran-3-ol

[0197] Korak 1.5-jodbenzofuran-3(2H)-on je pripremljen prema WO Publication No.2008/068974. MS (ESI) m/z 260.9 [M+H]<+>.

[0198] Korak 2. U mešani rastvor 5-jodbenzofuran-3(2H)-on (2 g, 7.69 mmol) ohlađen na 0 °C u toluenu (20 mL) dodat je 3.0 M EtMgBr (12.82 mL, 38.46 mmol) u kapima. Smesa je ostavljena da se zagreje na rt i mešana je 16 h. po zavrpšenom TLC, reakcionom rastvoru je dodata voda (50 mL) i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 20 % EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 10 (1.5 g, 67%) kao žuta čvrsta supstanca. MS (ESI) 272.9 [M+H - H2O]<+>.

Intermedijer 11

2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidrobenzofuran-5-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0200] Intermedijer 11 je pripremljen prema proceduri opisanoj za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 10. MS (ESI) 385.1 [M+H]<+>.

Primer 5A

(R)-2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidrobenzofuran-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 5B

(S)-2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidrobenzofuran-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

4

[0203] Primeri 5A i 5B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 11 pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidrobenzofuran-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (380 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiralpak AD-H, 45 % (0.5% DEA u etanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 5A, 123 mg) i Pik 2 (Primer 5B, 141 mg). Primer 5A: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.95 (br s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.51 (d, J=2 Hz, 2H), 7.30-7.28 (m, 2H), 6.97 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.82 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.64 (m, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.93 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.46 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.32 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.05-3.03 (m, 4H), 2.44-2.42 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.91-1.82 (m, 2H), 0.84 (t, J=7.2 Hz, 3H); MS (ESI) 528.2 [M+H]<+>. Primer 5B: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.95 (brs, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.51 (d, J=2 Hz, 2H), 7.30-7.28 (m, 2H), 6.97 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.82 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.64 (m, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.93 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 4.32 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.20 (s, 2H), 3.05-3.03 (m, 4H), 2.44-2.42 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.91-1.82 (m, 2H), 0.84 (t, J=7.2 Hz, 3H); MS (ESI) 528.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 5A i Primer 5B.

Intermedijer 12

5-brom-3-(trifluormetil)-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-3-ol

[0205] Smeša KOH/Celite u težinskom odnosu 1/1 je fino samlevena. Smesa KOH/Celite (720 mg) upakovana u staklenu kapalicu. 5-bromfuro[3,2-b]piridin-3(2H)-on (500 mg, 2.35 mmol) i Me3SiCF3(666 mg, 4.69 mmol) su rastvoreni u DMF (2.0 mL). Rastvor je dodat u stakelnu kapalicu pomoću šprica. Proizvod je eluiran sa 4.0 mL DMF. Reakcija je ponovljne u razmeri 4 x 500 mg. Kombinovanim reakcionim smesama je dodat zasićen rastvor NH4Cl (50 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa Et2O (2 x 75 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani rastvorom soli (2 x 100 mL), osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 20 % EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 12 (530 mg, 16%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 284.2 [M+H]<+>.

Intermedijer 13

2-alil-1-(3-hidroksi-3-(trifluormetil)-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0207] Intermedijer 13 je pripremljen prema proceduri opisanoj za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 12. MS (ESI) 426.4 [M+H]<+>.

Primer 6A

(R)-2-alil-1-(3-hidroksi-3-(trifluormetil)-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 6B

(S)-2-alil-1-(3-hidroksi-3-(trifluormetil)-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0210] Primeri 6A i 6B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 13 dajući racemat 2-alil-1-(3-hidroksi-3-(trifluormetil)-2,3-dihidrofuro[3,2-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (170 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiral Pak IG, 40.0%, (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 6A, 35 mg) i Pik 2 (Primer 6B, 40 mg). Primer 6A: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.2 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.87-7.85 (m, 2H), 7.60-7.55 (m, 2H), 6.91 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.67-5.62 (m, 1H), 5.00-4.93 (m, 2H), 4.83 (d, J=16 Hz, 1H), 4.63 (d, J=12 Hz, 1H), 4.59 (d, J=12 Hz, 2H), 4.48-4.42 (m, 1H), 3.10-3.08 (m, 4H), 2.47-2.44 (m, 4H), 2.22 (s, 3H); MS (ESI) 569.2 [M+H]<+>. Primer 6B: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.2 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.87-7.85 (m, 2H), 7.60-7.55 (m, 2H), 6.91 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.67-5.62 (m, 1H), 5.00-4.93 (m, 2H), 4.83 (d, J=16 Hz, 1H), 4.63 (d, J=12 Hz, 1H), 4.59 (d, J=12 Hz, 2H), 4.48-4.42 (m, 1H), 3.10-3.08 (m, 4H), 2.47-2.44 (m, 4H), 2.22 (s, 3H); MS (ESI) 569.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 6A i Primer 6B.

4

Intermedijer 14

2-Brom-7,7-difluor-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin

[0212] U mešani rastvor 2-brom-5,6-dihidro-7H-ciklopenta[b]piridin-7-on (2.0 g, 9.43 mmol) u DCM (50 mL) na rt dodat je DAST (3.7 mL, 28.30 mmol) i smesa je mešana na rt tokom 4 dana. Reakcionom rastvoru je dodat vod. NaHCO3(25 mL) na 0 °C i ekstrahovan je sa DCM (3 x 30 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 3% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 14 (0.8 g, 36% prinos) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 233.9 [M+H]<+>.

Intermedijer 15

2-Alil-1-(7,7-difluor-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0214] Intermedijer 15 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 14; MS (ESI) 376.4 [M+H]<+>.

Primer 7

2-Alil-1-(7,7-difluor-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(piperazin-1-il) fenil) amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0216] Korak 1. Upotrebom terc-butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilata i Intermedijera 15 prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B dobijen je terc-butil 4-(4-((2-alil-1-(7,7-difluor-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il)amino)fenil)piperazin-1-karboksilat (120 mg, 19% prinos). MS (ESI) 605.2 [M+H]<+>.

[0217] Korak 2. U mešani rastvor terc-butil 4-(4-((2-alil-1-(7,7-difluor-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il) amino)fenil)piperazin-1-karboksilata (250 mg, 0.41 mmol) in Et2O (10 mL) dodata je 2M HCl u Et2O (5 mL) na 0 °C. Smesa je mešana na rt tokom 4 h, koncentrovana pod sniženim pritiskom, i triturisana dodatkom Et2O pri čemu se dobija Primer 7 u obliku hidrohloridne soli (94 mg, 42%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.28 (br s, 1H), 8.95 (br s, 2H), 8.87 (s, 1H), 8.17 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.0

4

Hz, 1H), 7.62 (br s, 2H), 7.00 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.75-5.65 (m, 1H), 5.01 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.61 (d, J=5.6 Hz, 2H), 3.38-3.20 (m, 8H), 3.14-3.05 (m, 2H), 2.78-2.62 (m, 2H); MS (ESI) 505.4 [M+H]<+>.

Primer 8

2-Alil-1-(7,7-difluor-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-id]pirimidin-3-on

[0219] Upotrebom 4-(4-metilpiperazin-1-il)anilina i Intermedijer 15 sledeći proceduru opisanu za Primere 2A i 2B afforded Primer 8 (120 mg, 19%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.24 (br s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.18 (br s, 1H), 8.06 (br s, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.94 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.75-5.65 (m, 1H), 5.00 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.61 (d, J=5.2 Hz, 2H), 3.10 (br s, 6H), 2.78-2.62 (m, 2H), 2.52-2.42 (m, 4H), 2.22 (s, 3H); MS (ESI) 519.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 16

2-brom-7-etil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

[0221] U rastvor 2-brom-5,6-dihidro-7H-ciklopenta[b]piridin-7-ona (2 g, 9.43 mmol)u PhMe (20 mL) ohlađen 0 °C dodat je EtMgBr 3M u DEE (9.4 mL, 28.29 mmol) u kapima. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Po završetku reakcije utvrđeno pomoću reakcije utvrđeno pomoću TLC, reakcioni rastvor je ohlađen na 0 °C i dodat je zasićen rastvor NH4Cl (30 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2 x 50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen (Na2SO4) i uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30 % EtOAc /Hexanes) pri čemu se dobija Intermedijer 16 (860 mg, 38%) kao ulje. MS (ESI) 244.2 [M+H]<+>.

Intermedijer 17

2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

4

[0223] Intermedijer 17 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 16. MS (LCMS) 384.5 [M+H]<+>.

Primer 9A

(S)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 9B

(R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0226] U rastvor Intermedijera 17 (4.5 g, 11.7 mmol) u toluenu (90 mL) ohlađenom na 0 °C dodat je m-CPBA (3.7 g, 12.9 mmol). Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana u trajanju od 30 min. Po završetku reakcije utvrđeno pomoću TLC, dodati su 4-(4-metilpiperazin-1-il)anilin (2.9 g, 15.2 mmol) i DIPEA (10.9 mL, 61.05 mmol) na 0 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Kraj reakcije je odrađena pomoću TLC i dodat je voda (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim rastvorom NaHCO3(250 mL), rastvorom soli (300 mL), osušeni (Na2SO4) i upareni pod sniženim pritiskom. Sirovom materijalu je dodat 30% Et2O/pentan pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-SH-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin -3-on (5.2 g, 84%). Racemski materijal (3.5 g) je razdvojen SFC hromatografijom (Chiralpak AD-H, 35% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 9A, 1.38 g) i Pik 2 (Primer 9B, 1.26 g). Primer 9A; kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.05 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.58 (br s, 2H), 6.92(d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.63 (m, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.74 (br s, 1H), 4.56 (d, J=10.8 Hz, 1H) 3.09-3.08 (m, 4H) 3.01-2.81 (m, 1H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.46-2.44 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.20-2.17 (m, 1H), 2.03-1.98 (m, 1H), 1.91-1.86 (m, 1H), 1.73-1.67 (m, 1H), 0.87 (t, J=7.2 Hz, 3H); MS (ESI) 527.5 [M+H]<+>. Primer 9B; kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.05 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.58 (br s, 2H), 6.92(d, iJ=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.63 (m, 1H), 5.05(s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.74 (br s, 1H), 4.56 (d, J=10.8 Hz, 1H) 3.09-3.08 (m, 4H) 3.01-2.81 (m, 1H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.46-2.44 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.20-2.17 (m, 1H), 2.03-1.98 (m, 1H), 1.91-1.86 (m, 1H), 1.73-1.67 (m, 1H), 0.87 (t, J=7.2 Hz, 3H); MS (ESI) 527.5 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 9A i Primer 9B.

4

Primer 10A

(S)-2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 10B

(R)-2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0229] Primeri 10A i 10B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 5 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (400 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak AD-H, 20 % (15 mM Amonijum hidroksid u Metanolu)) pri čmeu se dobijaju Pik 1 (Primer 10A, 120 mg) i Pik 2 (Primer 10B, 125 mg). Primer 10A: žuta čvrsta supstanca ;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.90 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.66 (br s, 1H) 7.41 (d,J=8.8 Hz, 1H), 6.98 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.72-5.63 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.79-4.69 (m, 1H), 4.66-4.56 (m, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.84-2.75 (m, 5H), 2.51-2.42 (m, 4H), 2.23 (s, 6H), 2.13 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H); MS (ESI) 527.5 [M+H]<+>. Primer 10B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.66 (br s, 1H) 7.41 (q, J=8.4, 2 Hz, 1H), 6.98 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.72-5.63 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.78-4.68 (m, 1H), 4.64-4.56 (m, 1H), 2.99-2.93 (m, 1H), 2.82-2.77 (m, 5H), 2.51-2.42 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.13 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.44 (s, 3H); MS (ESI) 527.4 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 10A i Primer 10B.

Primer 11A

(S)-2-alil-6-((3-fluor-4-(4-metilpiperazin- 1-il)fenil)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

4

Primer 11B

(R)-2-alil-6-((3-fluor-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0232] Primeri 11A i 11B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 5 pri čemu se dobija racemski 2-alil-6-((3-fluor-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklo-penta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (370 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, 25% (0.5% DEA in EtOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 11A, 90 mg) i Pik 2 (Primer 11B, 90 mg). Primer 11A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.25 (br s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.91 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.75 (br s, 1H), 7.71 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J=8 Hz, 1H), 7.02 (t, J=9.6 Hz, 1H), 5.73-5.64 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 5.01 (d, J=10 Hz, 1H), 4.89 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.72-4.61 (m, 2H), 3.02-2.96 (m, 5H), 2.84-2.76 (m, 1H), 2.51-2.47 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.16 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H); MS (ESI) 531.4 [M+H]<+>. Primer 11B:<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.25 (br s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.91 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.75 (br s, 1H), 7.71 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J=8 Hz, 1H), 7.02 (t, J=9.6 Hz, 1H), 5.73-5.64 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 5.01 (d, J=10 Hz, 1H), 4.89 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.72-4.61 (m, 2H), 3.02-2.96 (m, 5H), 2.84-2.76 (m, 1H), 2.51-2.47 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.16 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H); MS (ESI) 531.4. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 11A i Primer 11B.

Primer 12A

(S)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 12B

(R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0235] Primeri 12A i 12b su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 17 i 3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)anilin dajući racemski 2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (500 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiral Pak AD-H, 35 % (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 12A, 169 mg) i Pik 2 (Primer 12B, 166 mg). Primer 12A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.05 (br s, 1H), 8.83 (s, 1H), 7.89 (d, J=8 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.42 (dd, J=8.4 Hz, J=8.4 Hz 1H), 6.98 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.70-5.63 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J=16.8 Hz, 1H), 4.77-4.74 (m, 1H), 4.56 (dd, J=16.4 Hz, J=6.4 Hz, 1H) 3.09-2.93 (m, 1H) 2.81 -2.74 (m, 4H), 2.5-2.49 (m, 4H), 2.32-2.17 (m, 7H), 2.05-1.98 (m, 1H), 1.92-1.80 (m, 1H), 1.73-1.69 (m, 1H), 1.91-1.86 (m, 1H), 0.87 (t, J=7.6 Hz, 3H); MS (ESI) 541.3 [M+H]<+>. Primer 12b: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.05 (br s, 1H), 8.83 (s, 1H), 7.89 (d, J=8 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8 Hz, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.42 (dd, J= 8.4 Hz, J=8.4 Hz 1H), 6.98 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.70-5.63 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.99 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J=16.8 Hz, 1H), 4.77-4.74 (m, 1H), 4.56 (dd, J=16.4 Hz, J=6.4 Hz, 1H) 3.09-2.93 (m, 1H) 2.81-2.74 (m, 4H), 2.5-2.49 (m, 4H), 2.32-2.17 (m, 7H), 2.05-1.98 (m, 1H), 1.91-1.80 (m, 1H), 1.73-1.67 (m, 1H), 1.91-1.86 (m, 1H), 0.86 (t, J=7.6 Hz, 3H); MS (ESI) 541.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 12A i Primer 12B.

Primer 13A

(S)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 13B

(R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

1

[0238] Korak 1: 2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-(2,2,2-trifluoracetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on je pripremljen prema postupku opisanom za Primerr 9A i 9B koristeći Intermedijer 17 i 1-(4-(4-amino-2-metilfenil)piperazin-1-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-on. MS (ESI) 623.2 [M+H]<+>.

[0239] Korak 2: U mešani rastvor 2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-SH-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-(2,2,2-trifluoracetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona (900 mg, 1.45 mmol) u Metanolu (15 mL) dodat je K2CO3(399 mg, 2.89 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na rt tokom 4 h. Po završetku reakcije utvrđeno pomoću TLC, solvent je uparen. Reakcioni rastvor je razblažen dodatkom vode (30 mL) i čvrsto jedinjenje je profiltrirano pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (500 mg, 86%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, 40 % (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobijaju Pik 1 (Primer 13A, 162 mg) iPik 2 (Primer 13B, 108 mg). Primer 13A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.12 (brs, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.89 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8.1 Hz,<1>H ), 7.67 (brs, 1H), 7.41 (d, J= 8.4 Hz, 1H ), 6.96 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.67-5.66 (m, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.85 (d, J=18 Hz, 1H), 4.77-4.74 (m, 1H), 4.56 (dd, J=6.3, 6.6 Hz, 1H), 3.39-3.32 (m, 1H), 2.84-2.83 (m, 1H), 2.79-2.71 (m, 9H), 2.24 (s, 3H), 2.22-2.19 (m, 1H), 2.02- 2.01 (m, 1H), 1.89-1.86 (m, 1H), 1.73-1.69 (m, 1H), 0.86 (t, J=7.2 Hz, 3H); MS (ESI) 527.2 [M+H]<+>. Primer 13B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.12 (brs, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.89 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8.1 Hz,<1>H ), 7.67 (brs, 1H), 7.41 (d, J=8.4 Hz,<1>H ), 6.96 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.67-5.66 (m, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.85 (d, J=18 Hz, 1H), 4.77-4.74 (m, 1H), 4.56 (dd, J=6.3, 6.6 Hz, 1H), 3.39-3.32 (m, 1H), 2.84-2.83 (m, 1H), 2.79-2.71 (m, 9H), 2.24 (s, 3H), 2.22-2.19 (m, 1H), 2.02-2.01 (m, 1H), 1.89-1.86 (m, 1H), 1.73-1.69 (m, 1H), 0.86 (t, J=7.2 Hz, 3H); MS (ESI) 527.4 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 13A i Primer 13B.

Intermedijer 18

(S)-2-brom-7-etil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

Intermedijer 19

(R)-2-brom-7-etil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

2

[0242] Racemat Intermedijera 16 (6 g, 24.79 mmol) je prečišćen SFC prečišćavanjem (Lux Cellulose-2, 10 % Etanol) Intermedijer 18 (1.9 g, 7.88 mmol) i Intermedijer 19 (1.8 g, 7.47 mmol). Intermedijer 18: bezbojno ulje; [α]D<25>(c=0.5, CHCl3) - 27.31°; MS (ESI) 242.3 [M+H]<+>. Intermedijer 19: bezbojno ulje;

[α]<25>D(c=0.5, CHCl3) 35.53°; MS (ESI) 242.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 20

(R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0244] Intermedijer 20 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 19. [α]D<25>(c=0.1, CHCl3) 17.84°; MS (LCMS) 384.5 [M+H]<+>.

Primer 14

(R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0246] Korak 1: (R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-(2,2,2-trifluoracetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on je pripremljen prema postupku opisanom za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 20. MS (ESI) 609.6 [M+H]<+>.

[0247] Korak 2: U mešani rastvor (R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-(2,2,2-trifluoracetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3(2H)-ona (350 mg, 0.575 mmol) u MeOH (6 mL) dodat je K2CO3(238 mg, 1.72 mmol) na0 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Po završetku reakcije utvrđeno pomoću TLC, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dodata je voda (15 mL) i smesa je mešana 10 minuta. Smesa je razblažena dodatkom zas. NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 40 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirova smesa je prečišćena sa prep-HPLC (Voda/CH3CN) pri čemu se dobija Primer 14 (220 mg, 74%) kao beličast čvrsti ostatak.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.25 (brs, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.90 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.57 (brs, 2H), 6.90 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.63 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.99 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.74 (brs, 1H), 4.57-4.54 (m, 1H), 3.02-2.93 (m, 5H), 2.86-2.74 (m, 5H), 2.22-2.06 (m, 1H), 2.05-1.99 (m, 1H), 1.91-1.86 (m, 1H), 1.73-1.67 (m, 1H), 0.8 (t, J=7.2 Hz, 3H); MS (ESI) 513.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 21

2-brom-7-(difluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

[0249] U mešani rastvor Me3SiCF2H (1.175 g, 9.48 mmol) u 1,2-DME (10 mL) dodati su 18-kruna-6 (625 mg, 2.37 mmol) i CsF (715 mg, 4.739 mmol) na 0°C i reakciona smesa je mešana u trajanju od 15 min. U reakcioni rastvor je dodat 2-brom-5,6-dihidro-7H-ciklopenta[b]piridin-7-on (1 g, 4.74 mmol) na 0°C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h.Završetak reakcije je utvrđen sa TLC i reakciona smesa je razblažena dodatkom vode (30 mL) i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 50 mL). Odvojeni organski slojevi su isprani rastvorom soli, osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija sirovo jedinjenj. Prethodna reakcija je ponovljena u razmeri 4 x 1g. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 21 (470 mg) kao beličast čvrsti ostatak; MS (ESI) 266.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 22

2-alil-1-(7-(difluormetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0251] Intermedijer 22 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 21; MS (ESI) 406.3 [M+H]<+>.

Primer 15A

(S)-2-alil-1-(7-(difluormetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 15B

(R)-2-alil-1-(7-(difluormetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

4

[0254] Primeri 15A i 15B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 22 pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(7-(difluormetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (120 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiral Pak AD-H, 30.0% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 15A, 35 mg) i Pik 2 (Primer 15B, 35 mg). Primer 15A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.2 (br s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.02 (br s, 1H), 7.82 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.93 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.26 (t, J=59.1 Hz,<1>H ), 6.22 (s, 1H), 5.68-5.61 (m, 1H), 4.97 (d, J=9.9 Hz, 1H), 4.82 (d, J=17.4 Hz, 1H), 4.74 (br s, 1H), 4.60-4.54 (m, 1H), 3.10-2.90 (m, 6H), 2.47-2.46 (m, 5H), 2.22 (s, 3H), 2.11-2.04 (m, 1H); MS (ESI) 549.2 [M+H]<+>. Primer 15B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.2 (br s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.02 (br s, 1H), 7.82 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.93 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.26 (t, J=59.1 Hz, 1H ), 6.22 (s, 1H), 5.68-5.61 (m, 1H), 4.97 (d, J=9.9 Hz, 1H), 4.82 (d, J= 17.4 Hz, 1H), 4.74 (br s, 1H), 4.60-4.54 (m, 1H), 3.10-2.90 (m, 6H), 2.47-2.46 (m, 5H), 2.22 (s, 3H), 2.11-2.04 (m, 1H); MS (ESI) 549.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 15A i Primer 15B.

Intermedijer 23

[0256] U rastvor 2-brom-5H-ciklopenta[b]piridin-7(6H)-ona (4 g, 18.80 mmol) u THF (50 mL) ohlađen na 0 °C was dodat je rastvor 3M ciklopropil magnezijum bromida u THF (31 mL, 94.3 mmol). Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Po završetku reakcije utvrđeno pomoću reakcije utvrđeno pomoću TLC, reakcionom rastvoru je dodat vod. NH4Cl (200 mL). Smesa je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija 2-Intermedijer 23 (3 g, 63%) as a bezbojno ulje. MS (ESI) 255.9 [M+H]<+>.

Intermedijer 24

2-alil-1-(7-ciklopropil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0258] Intermedijer 24 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 23. MS (ESI) 396.5 [M+H]<+>.

Primer 16A

(R)-2-alil-1-(7-ciklopropil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 16B

(S)-2-alil-1-(7-ciklopropil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0260]

[0261] Primeri 16A i 16B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 24 pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(7-ciklopropil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (400 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, 45 % (0.5 % DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 16A, 159 mg) i Pik 2 (Primer 16B, 111 mg). Primer 16A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.71 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.58 (m, 2H), 6.92 (J=7.6 Hz, 2H), 5.70-5.64 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.98 (d, J=10 Hz, 1H), 4.87-4.77 (m, 2H), 4.65 (m, 1H), 3.09 (s, 4H), 2.93-2.79 (m, 2H), 2.46 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.09-1.99 (m, 2H), 1.22-1.21 (m, 1H), 0.44-0.30 (m, 4H); MS (ESI) 539.5 [M+H]<+>. Primer 16B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (m, 1H), 7.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.58 (m, 2H), 6.92 (J=8.7 Hz, 2H), 5.70-5.64 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.98 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.87-4.77 (m, 2H), 4.65 (m, 1H), 3.09 (s, 4H), 2.93-2.79 (m, 2H), 2.46 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.09-1.99 (m, 2H), 1.22-1.21 (m, 1H), 0.44-0.30 (m, 4H); MS (ESI) 539.5 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 16A i Primer 16B.

Primer 17A

2-alil-6-((4-((S)-3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((S)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 17B

2-alil-6-((4-((S)-3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((R)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0264] Primeri 17A i 17B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 5 i (S)-4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)aniline pri čemu se dobija smesa diastereomeras 2-alil-6-((4-((S)-3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona (500 mg). Diastereomeri su razdvojeni hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak IG, (0.5% DEA u Metanolu:Hexane (80:20)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 17A, 130 mg) i Pik 2 (Primer 17B, 75 mg). Primer 17A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.1 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.91 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 3.47 (t, J=10.8 Hz, 2H), 3.00-2.93 (m, 1H), 2.83-2.67 (m, 3H), 2.34-2.22 (m, 5H), 2.13 (t, J=6.8 Hz, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.05 (d, J=6.0 Hz, 3H); MS (ESI) 527.3 [M+H]<+>. Primer 17B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.1 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.93 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.91 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.76-4.70 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 3.52-3.47 (m, 2H), 3.01-2.93 (m, 1H), 2.83-2.67 (m, 3H), 2.36-2.11 (m, 8H), 1.45 (s, 3H), 1.05 (d, J=6.0 Hz, 3H); MS (ESI) 527.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 17A i Primer 17B.

Primer 18A

2-alil-6-((4-((R)-3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((S)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 18B

2-alil-6-((4-((R)-3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((R)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0267] Primeri 18A i 18B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 5 i (R)-4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)anilin pri čemu se dobija smesa diastereomera 2-alil-6-((4-((R)-3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona. Diastereomeri su razdvojeni hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak AD-H, 20.0% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 18A, 94 mg) i Pik 2 (Primer 18B, 85 mg). Primer 18A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.09 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.92 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.57 (m, 2H), 6.91 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.71-5.62 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J=16.8 Hz, 1H), 4.78-4.55 (m, 2H), 3.47 (t, J=10.4 Hz, 2H), 3.31-2.93 (m, 1H), 2.83-2.67 (m, 3H), 2.36-2.11 (m, 8H), 1.45 (s, 3H), 1.05 (d, J=5.6 Hz, 3H); MS (ESI) 527.3 [M+H]<+>. Primer 18B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6δ 10.10 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.57 (m, 2H), 6.91 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.72-5.62 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J=16.8 Hz, 1H), 4.76-4.70 (m, 1H), 4.61-4.58 (m, 1H), 3.48 (m, 2H), 3.01-2.93 (m, 1H), 2.83-2.71 (m, 3H), 2.32-2.11 (m, 8H), 1.45 (s, 3H), 1.07 (m, 3H); MS (ESI) 527.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija na tercijernom alkoholom je arbitratno pripisana za Primer 18A i Primer 18B.

Primer 19A

2-alil-6-((4-((S)-2,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((S)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 19B

2-alil-6-((4-((S)-2,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((R)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0270] Primeri 19A i 19B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 5 i (S)-4-(2,4-dimetilpiperazin-1-il)aniline pri čemu se dobija smesa diastereomera 2-alil-6-((4-((S)-2,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona (400 mg). Diastereomeri su razdvojeni hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak AD-H, 25.0% (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 19A, 158 mg) i Pik 2 (Primer 19B, 103 mg). Primer 19A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.1 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.88 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 3.87 (br s, 1H), 3.21-3.16 (m, 1H), 3.00-2.93 (m, 2H), 2.83-2.72 (m, 2H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.34-2.28 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.12 (t, J= 6.8 Hz, 3H), 1.45 (s, 3H), 0.97 (d, J=6.4 Hz, 3H); MS (ESI) 527.3 [M+H]<+>. Primer 19B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.1 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.88 (d, J=8.0 Hz, 2H), 5.71-5.64 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 3.87 (br s, 1H), 3.21-3.16 (m, 1H), 3.00-2.92 (m, 2H), 2.83-2.72 (m, 2H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.34-2.28 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.13 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.45 (s, 3H), 0.96 (d, J=6.4 Hz, 3H); MS (ESI) 527.2 [M+H]<+>. ]<+>. Apsolutna stereohemija na tercijernom alkoholom je arbitratno dodeljena za Primer 19A i Primer 19B.

Primer 20A

2-alil-6-((4-((R)-2,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((S)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 20B

2-alil-6-((4-((R)-2,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-((R)-7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0273] Primeri 20A i 20B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 5 i (R)-4-(2,4-dimetilpiperazin-1-il)anilin pri čemu se dobija smesa diastereomera 2-alil-6-((4-((R)-2,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (400 mg). Diastereomeri su razdvojeni hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak AD-H, 20.0% (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 20A, 170 mg) i Pik 2 (Primer 20B, 170 mg). Primer 20A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.1 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.88 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 3.87 (br s, 1H), 3.21-3.16 (m, 1H), 3.00-2.93 (m, 2H), 2.83-2.72 (m, 2H), 2.59-2.52 (m, 1H), 2.34-2.28 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.12 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.45 (s, 3H), 0.96 (d, J=6.4 Hz, 3H); MS (ESI) 527.2 [M+H]<+>. Primer 20B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.1 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 7.92 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.88 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.99 (d, J=10 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.78-4.71 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 3.87 (br s, 1H), 3.21-3.16 (m, 1H), 3.00-2.93 (m, 2H), 2.83-2.72 (m, 2H), 2.59-2.51 (m, 1H), 2.34-2.28 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.12 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.45 (s, 3H), 0.96 (d, J=6.4 Hz, 3H); MS (ESI) 527.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija na tercijernom alkoholom je arbitratno dodeljena za Primer 20A i Primer 20B.

Intermedijer 25

6-brom-1-metil-2,3-dihidro-1H-inden-1-ol

[0275] Suspenzija anhidrovanog CeCl3(17.5 g, 71.08 mmol) u THF (100 mL) je mešana na rt tokom 1 h i ohlađena na -78 °C. Dodat je 1.6 M MeLi u DEE (44 mL, 71.08 mmol) na -78 °C i reakciona smesa je mešana 30 min. U ovo, dodat je rastvor 6-brom-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (10 g, 47.39 mmol) u THF (100 mL) na - 78 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 2 h. Po završetku reakcije utvrđeno pomoću reakcije utvrđeno pomoću TLC, reakcionom rastvoru je dodat vod. NH4Cl (200 mL). Smesa je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su je prečišćen hromatografijom na koloni (SiO2, 30 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 25 (6 g, 55%) as a bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.43 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.35 (dd, J=8.0, 2.0 Hz, 1H), 7.16 (d, J=8.0 Hz, 1H), 5.14 (s, 1H) 2.89-2.81 (m, 1H), 2.75-2.66 (m, 1H), 2.07 (t, J=4.4 Hz, 2H), 1.40 (s, 3H).

Intermedijer 26

2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0277] Intermedijer 26 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 25. MS (ESI) 369.4 [M+H]<+>.

Primer 21A

(S)-2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 21B

(R)-2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0280] Primeri 21A i 21B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i Primeri 2B koristeći Intermedijer 26 pri čemu se dobija racemic 2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)-amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (350 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak IG, 40.0% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 21A, 70 mg) i Pik 2 (Primer 21B, 71 mg). Primer 21A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.03 (br s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.54 (br s, 2H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.27 (dd, J=8.0, 2.0 Hz, 1H), 6.86 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.68-5.62 (m, 1H), 5.15 (s, 1H), 5.09 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.93 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.24 (br s, 2H), 3.05 (s, 4H), 2.99-2.92 (m,1H), 2.85-2.77 (m, 1H), 2.50-2.46 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.43 (s, 3H); MS (ESI) 512.3 [M+H]<+>. Primer 21B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.03 (br s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.54 (br s, 2H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.27 (dd, J=8.0, 2.0 Hz, 1H), 6.86 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.68-5.62 (m, 1H), 5.15 (s, 1H), 5.09 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.93 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.24 (br s, 2H), 3.05 (s, 4H), 2.99-2.92 (m,1H), 2.85-2.77 (m, 1H), 2.50-2.46 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.43 (s, 3H); MS (ESI) 512.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 21A i Primer 21B.

1

Intermedijer 27

6-brom-1-etil-2,3-dihidro-1H-inden-1-ol

[0282] U mešani rastvor 6-brom-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (5.0 g, 23.68 mmol) u toluenu (50 mL) dodat je EtMgBr (23.70 mL, 71.07 mmol) u kapima na 0 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Reakcionom rastvoru je dodat zas. vod. NH4Cl (50 mL) i ekstrahovano EtOAc (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (SiO2, 20 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 27 (4 g, 70%) kao bezbojna tećnost. MS (ESI) 223.1 [M+H-H2O]<+>.

Intermedijer 28

2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0284] Intermedijer 28 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 27. MS (ESI) 383.4 [M+H]<+>.

Primer 22A

(S)-2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 22B

(R)-2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

2

[0287] Primeri 22A i 22B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 28 pri čemu se dobija racemat 2-alil-1-(3-etil-3-hidroksi-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona (340 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak IG, 35.0% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 22A, 102 mg) i Pik 2 (Primer 22B, 91 mg). Primer 22A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.01 (br s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.55 (br s, 2H), 7.38 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J=6.8 Hz, 2H), 6.85 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.71-5.62 (m, 1H), 5.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.92 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.23-4.19 (m, 2H), 3.06-3.04 (m, 4H), 2.98-2.91 (m, 1H), 2.81-2.75 (m, 1H), 2.44-2.32 (m, 4H), 2.21-2.16 (m, 4H), 2.05-1.98 (m, 1H), 1.82-1.75 (m, 1H), 1.69-1.62 (m, 1H), 0.86 (t, J=7.6 Hz, 3H); MS (ESI) 526.2 [M+H]<+>. Primer 22B:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.01 (br s, 1H), 8.79 (s, 1H), 7.55 (br s, 2H), 7.38 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J=6.8 Hz, 2H), 6.85 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.67-5.63 (m, 1H), 5.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.92 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.23-4.22 (m, 2H), 3.06-3.04 (m, 4H), 2.94-2.91 (m, 1H), 2.81-2.77 (m, 1H), 2.45-2.42 (m, 4H), 2.21-2.16 (m, 4H), 2.03-2.00 (m, 1H), 1.82-1.75 (m, 1H), 1.67-1.64 (m, 1H), 0.86 (t, J=7.6 Hz, 3H); MS (ESI) 526.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 22A i Primer 22B.

Primer 23A

(S)-2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 23B

(R)-2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0290] Primeri 23A i 24b su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 26 i 3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)aniline pri čemu se dobija racemic 2-alil-1-(3hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (635 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiral Pak AD-H, 40 % (0.5% izopropil amin u izopropil alkoholu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 23A, 223 mg) i Pik 2 (Primer 23B, 223 mg). Primer 23A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (brs, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.47-7.29 (m, 5H), 6.93 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.71-5.64 (m, 1H), 5.14 (s, 1H), 5.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.93 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.25 (brs, 2H), 2.99-2.91 (m, 1H), 2.85-2.76 (m , 5H), 2.45 (brs, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.12-2.09 (m, 2H), 1.42 (s, 3H); MS (ESI) 526.3 [M+H]<+>. Primer 23B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (brs, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.47-7.29 (m, 5H), 6.93 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.71-5.64 (m, 1H), 5.14 (s, 1H), 5.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.93 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.25 (brs, 2H), 2.99-2.91 (m, 1H), 2.85-2.76 (m, 5H), 2.45 (brs, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.12-2.09 (m, 2H), 1.42 (s, 3H); MS (ESI) 526.7 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 23A i Primer 23B.

Intermedijer 29

6-brom-4-fluor-1-metil-2,3-dihidro-1H-inden-1-ol

[0292] Korak 1: 6-brom-4-fluor-2,3-dihidro-1H-inden-1-on je pripremljen prema WO Publication No.

2005/095387.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3-d6) δ 7.70 (s, 1H), 7.42 (d, J=9.6 Hz, 1H), 3.10 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.75 (t, J=6.4 Hz, 2H).

[0293] Korak 2: U rastvor 6-brom-4-fluor-2,3-dihidro-1H-inden-1-on (6 g, 26 mmol) u dietil etru (60 mL) ohlađenom na 0 °C dodat je 3.0 M MeMgBr u DEE (87 mL, 262 mmol) u kapima. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcionom rastvor je dodata voda (50 mL) i ekstrhaovano je sa EtOAc (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (150 mL), rastvorom soli (150 mL), osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (SiO2, 10 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija 6-brom-4-fluor-1-metil-2,3-dihidro-1H-inden-1-ol (3 g, 47 %) kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.28 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.11 (dd, J=10.0, 4.8 Hz, 1H), 3.03-2.95 (m, 1H), 2.85-2.74 (m, 1H), 2.30-2.18 (m, 2H), 1.58 (s, 3H).

Intermedijer 30

2-alil-1-(7-fluor-3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0295] Intermedijer 30 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 29. MS (ESI) 387.3 [M+H]<+>.

4

Primer 24A

(S)-2-alil-1-(7-fluor-3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 24B

(R)-2-alil-1-(7-fluor-3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0298] Primeri 24A i 24B su pripremljeni prema proceduri opisanoj za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 30 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(7-fluor-3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidro-1H-inden-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)-amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (165 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa SFC hromatografijom (Chiral Pak AD-H, 30 % (0.5% izopropilamin in IPA)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 24A, 43 mg) i Pik 2 (Primer 24B, 47 mg). Primer 24A: žuta čvrsta supstanca; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.10 (brs, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.55 (brs, 2H), 7.21 (d, J=9.2 Hz, 2H), 6.86 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.71-5.64 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.09 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.96 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.28 (brs, 2H)), 3.05-2.78 (m, 6H), 2.50-2.45 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.16-2.13 (m, 2H), 1.44 (s, 3H); MS (ESI) 530.3 [M+H]<+>. Primer 24B: žuta čvrsta supstanca; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.10 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.55 (br s, 2H), 7.21 (d, J=9.6 Hz, 2H), 6.86 (d, J=9.2 Hz, 2H), 5.71-5.64 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.96 (d, J=16.8 Hz, 1H), 4.28 (br s, 2H)), 3.05-2.78 (m, 6H), 2.50-2.45 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.16-2.13 (m, 2H), 1.44 (s, 3H); MS (ESI) 530.3 [M+H]<+>. ]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 24A i Primer 24B.

Intermedijer 31

2-brom-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-8-ol

[0300] Korak 1: U mešani rastvor 2-hlor-6,7-dihidrohinolin-8(5H)-ona (1.7 g, 9.39 mmol) u CH3CN (30 mL), dodat je TMS-Br (2.86 g, 18.78 mmol) i reakciona smesa je zagrevana na 150 °C u CEM-mikrotalasnoj u trajanju od 20 min. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je razblažen dodatkom DCM (100 mL), ispran sa vod. NaHCO3(50 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 20 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija 2-brom-6,7-dihidrohinolin-8(5H)-on (1.2 g, 57%) kao braon ulje. MS (ESI) 226.3 [M+H].

[0301] Korak 2: U rastvor 2-brom-6,7-dihidrohinolin-8(5H)-on (1.20 g, 5.33 mmol) u DEE (30 mL) ohlađen na 0 °C, dodat je 3.0 M CH3MgI u DEE, (8.88 mL, 26.65 mmol) u kapima. Smesa je ostavljena da se zagreje na rt i mešana je 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcionom rastvoru je dodata voda (25 mL) i ekstrahovano je sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod was prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 20 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 31 (900 mg, 70 %) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 241.9 [M+H]<+>.

Intermedijer 32

2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0303] Intermedijer 32 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 31. MS (ESI) 384.1 [M+H]<+>.

Primer 25A

(S)-2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0304]

Primer 25B

(R)-2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0306] Primeri 25A i 25B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 32 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (450 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, 45% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 25A, 160 mg) i Pik 2 (Primer 25B, 165 mg). Primer 25A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.04 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.77 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J=6.8 Hz, 2H), 6.92 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.72-5.61 (m, 1H), 4.98 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.81 (br s, 1H), 4.65 (dd, J=16.0, 5.2 Hz, 1H) , 3.14-3.07 (m, 4H), 2.83-2.75 (m, 2H), 2.49-2.43 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.98-1.87 (m, 2H), 1.82 (d, J=10.8 Hz, 1H), 1.77-1.68 (m, 1H), 1.49 (s, 3H); MS (ESI) 527.3 [M+H]<+>. Primer 25B: kao žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.04 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.77 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.56 (d, J=6.8 Hz, 2H), 6.92 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.71-5.61 (m, 1H), 4.98 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.66 (dd, J=15.6, 5.2 Hz, 1H), 3.09 (s, 4H), 2.86-2.72 (m, 2H), 2.47-2.44 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.96-1.93 (m, 2H), 1.83-177 (m, 1H), 1.73-1.70 (m, 1H), 1.49 (s, 3H); MS (ESI) 527.3

[0307] [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 25A i Primer 25B.

Intermedijer 33

2-brom-8-etil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-8-ol

[0309] U rastvor 2-brom-6,7-dihidrohinolin-8(5H)-on (2.00 g, 8.88 mmol) u dietil etru (40 mL) ohlađen na 0 °C dodat je 3.0 M EtMgBr u DEE (14.82 mL, 44.44 mmol) u kapima. Uklonjeno je ledeno kupatilo i smesa je ostavljena da se zagreje na rt i mešana je 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcionom rastvoru je dodata voda (50 mL) i ekstrhovano je sa EtOAc (2 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi were isprani vodom, rastvorom soli, (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (SiO2, 10 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 33 (900 mg, 40%) kao svetlo žuto ulje. MS (ESI) 256.2 [M+H]<+>.

Intermedijer 34

2-alil-1-(8-etil-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0311] Intermedijer 34 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 33. MS (ESI) 398.0 [M+H]<+>.

Primer 26A

(S)-2-alil-1-(8-etil-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 26B

(R)-2-alil-1-(8-etil-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0314] Primeri 26A i 26B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 34 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(8-etil-8-hidroksi-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (600 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, 35% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 26A, 160 mg) i Pik 2 (Primer 26B, 136 mg). Primer 26A: žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.11 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.78 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.60-754 (m, 2H), 6.93 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.61 (m, 1H), 4.99 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.81 (br s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.59 (dd, J=16, 5.6 Hz, 1H), 3.12-3.06 (m, 4H), 2.85-2.67 (m, 2H), 2.49- 2.40 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.96-1.71 (m, 6H), 0.78 (t, J=7.6 Hz, 3H); MS (ESI) 541.3 Primer 26B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.11 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.78 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.60-754 (m, 2H), 6.93 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.61 (m, 1H), 4.99 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.81 (br s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.59 (dd, J=16, 5.6 Hz, 1H), 3.12-3.06 (m, 4H), 2.85-2.67 (m, 2H), 2.49-2.40 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.96-1.71 (m, 6H), 0.78 (t, J=7.6 Hz, 3H). MS (ESI) 541.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 26A i Primer 26B.

Primer 27A

(S)-2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 27B

(R)-2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0317] Primeri 27A i 27B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 32 i 3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)aniline pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((3-metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (800 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, 50% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 27A, 69 mg) i Pik 2 (Primer 27B, 68 mg). Primer 27A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.12 (brs, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.75-7.67 (m, 3H), 7.39 (d, J=8.8Hz, 1H), 6.99 (d, J=8.8Hz, 1H), 5.71-5.61 (m, 1H), 4.98 (d, J=10 Hz, 1H), 4.89 (d, J=8.4 Hz, 2H), 4.84-4.80 (m, 1H), 4.67-4.61 (m, 1H), 2.85-2.67 (m, 6H), 2.52-2.48 (m, 4H) 2.47 (s, 6H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.83-1.70 (m, 2H), 1.49 (s, 3H); MS (ESI) 541.2 [M+H]<+>. Primer 27B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.12 (brs, 1H), 8.84 (s, 1H), 7.75-7.67 (m, 3H), 7.39 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.99 (d, J=8.8Hz, 1H), 5.71-5.61 (m, 1H), 4.98 (d, J=10 Hz, 1H), 4.89 (d, J=8.4 Hz, 2H), 4.84-4.80 (m, 1H), 4.67-4.61 (m, 1H), 2.85-2.67 (m, 6H), 2.52-2.48 (m, 4H), 2.25-2.24 (m, 6H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.83-1.70 (m, 2H), 1.49 (s, 3H); MS (ESI) 541.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 27A i Primer 27B.

Primer 28A

(S)-2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 28B

(R)-2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0320] Korak 1: 2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-(2,2,2-trifluoracetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on je sintetisan prema proceduri opisanoj za Primer 9A i Primer 9B koristeći Intermedijer 32. MS (ESI) 609.5 [M+H]<+>.

[0321] Korak 2: U rastvor 2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-(2,2,2-trifluoracetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3(2H)-ona (400 mg, 0.66 mmol) u MeOH (6 mL) ohlađen na 0 °C dodat je K2CO3(272 mg, 1.97 mmol). Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dodata je voda (10 mL) i smesa je mešana 10 minuta. Dobijeni čvrsti ostatak je profiltriran i osušen pod vakuumom, pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(piperazin-1-il)fenil)-amino)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3(2H)-on (260 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-n, 40% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 28A, 39 mg) i Pik 2 (Primer 28B, 33 mg). Primer 28A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.10 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.76 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.56 (brs, 2H), 6.90 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.69-5.62 (m, 1H), 4.98 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.84-4.80 (m, 2H), 4.67-4.61 (m, 1H), 3.00-2.99 (m, 4H), 2.83-2.76 (m, 6H), 1.96-1.91 (m, 2H), 1.83-1.70 (m, 2H), 1.49 (s, 3H); MS (ESI) 513.3 [M+H]<+>. Primer 28B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.09 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.77 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J=7.2 Hz, 2H), 6.90 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.71-5.621 (m, 1H), 4.98 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.84-4.81 (m, 2H), 4.67-4.62 (s, 1H), 3.01-2.99 (m, 4H), 2.84-2.74 (m, 6H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.83-1.70 (m, 2H), 1.49 (s, 3H); MS (ESI) 513.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 28A i Primer 28B.

Intermedijer 35

1-(7'-amino-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-il)-2,2,2-trifluoroetan-1-on

[0323] Korak 1: 7'-nitro-2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin] je pripremljen prema US 7507748.

[0324] Korak 2: U mešani rastvor 7'-nitro-2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin] (2.5 g, 12.25 mmol) u DCM (40 mL) dodati su TEA (3.69 g, 36.75 mmol) i anhidrid trifluoracetatne kiseline (3.08 g, 14.70 mmol) na 0°C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je razblažen dodatkom DCM (100 mL), ispran vodom (100 mL) i rastvorom soli (50 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (SiO2, 10 % EtOAc/pet. etar ) pri čemu se dobija 2,2,2-trifluor-1-(7-nitro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-il)etan-1-on (1.7 g, 46 %) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (dd, J=20.7 Hz, 2.4 Hz, 1H), 8.05-8.00 (m, 1H), 7.13 (d, J=8.7 Hz, 1H), 5.04 (d, J=12.3 Hz, 2H), 3.74 (d, J=6.9 Hz, 2H), 1.24-1.15 (m, 4H).

[0325] Korak 3: U mešani rastvor 2,2,2-trifluor-1-(7'-nitro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-il)etan-1-ona (1.7 g, 5.66 mmol) u EtOH (17 mL) dodati su SnCl2(6.44 g, 33.99 mmol) i NH4Cl (1.81 g, 33.99 mmol). Reakciona smesa je zagrevana na 80 °C u trajanju od 2 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je koncetrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u vodi (50 mL), povećana mu je banost na pH-8 koristeći zas. NaHCO3i ekstrahovan je sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija Intermedijer 35 (1.4 g, 91 %) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (ESI) 270.9 [M+H]<+>.

Primer 29A

(S)-2-alil-6-((2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 29B

(R)-2-alil-6-((2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

1

[0328] Korak 1: 2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((2'-(2,2,2-trifluoracetil)-2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on je pripremljen prema postupku opisanom za Primeri 9A i 9B koristeći Intermedijer 5 i Intermedijer 35. MS (ESI) 592.4 [M+H]<+>.

[0329] Korak 2: U rastvor 2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((2'-(2,2,2-trifluoracetil)-2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (135 mg, 0.23 mmol) ohlađen na 0 °C u MeOH (6 mL) dodat je K2CO3(94 mg, 0.68 mmol). Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Voda (10 mL) je dodata u sirovo jedinjenje i rastvor je mešan 10 minuta. Talog je profiltriran i osušen pod vakuumom pri čemu se dobija racemski 2-alil-6-((2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (85 mg) kao beličast čvrsti ostatak. Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak IA, 45% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 29A, 30 mg) i Pik 2 (Primer 29B, 25 mg). Primer 29A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.16 (brs, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.55 (brs, 1H), 7.32 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.99 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.74 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.60 (dd, J=16.4 Hz, 6.0 Hz, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.03-2.94 (m, 1H), 2.87-2.72 (m, 3H), 2.13 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H), 0.88 (s, 2H), 0.77 (s, 2H). MS (ESI) 496.2 [M+H]<+>. Primer 29B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10.16 (brs, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.70 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.55 (brs, 1H), 7.32 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.66 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.85 (d, J=18 Hz, 1H), 4.74 (d, J=14 Hz, 1H), 4.60 (dd, J=16 Hz, 5.2 Hz, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.01-2.96 (m, 1H), 2.84-2.67 (m, 3H), 2.13 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H), 0.88 (s, 2H), 0.77 (s, 2H). MS (ESI) 496.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 29A i Primer 29B.

Intermedijer 36

terc-butil 7'-amino-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-karboksilat

[0331] Korak 1: U mešani rastvor 7'-nitro-2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin] (3 g, 14.63 mmol) u 1,4-dioksan: H2O (45 mL, 2:1) dodat je 1 N NaOH (15 mL) na 0 °C. Posle 5 min, dodat je di-terc-butil dikarbonat (3.7 mL, 16.91 mmolje dodat na 0 °C, i reakciona smesa je mešana na rt tokom 2 h. Reakcioni rastvor je zakišeljen dodatkom KHSO4(pH: 2-3), zatim je smesa ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (25 mL), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijena sirova smesa je prečišćen hromatografijom na koloni (SiO2, 20% EA/pet. etar ) pri čemu se dobija terc-butil 7'-nitro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-karboksilat (2.5 g, 56%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (LCMS) 249.0 [M-C4H10]<+>.

[0332] Korak 2: U mešani rastvor terc-butil 7'-nitro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-karboksilata (1.0 g, 3.28 mmol) u EtOH (50 mL) dodat je SnCl2(3.74 g, 19.67 mmol) pa zatim i NH4Cl (1.04 g, 19.67 mmol) na rt. Reakciona smesa je mešana na 70° C u trajajnju od 1 h. Nakon utvrđenog kraja reakcije pomoću LCMS, sirov reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, razblažen vodom (50 mL) i povećana mu je batnost dodatko zas. NaHCO3(pH: 8-9). Smesa je zatim profiltrirana kroz sloj celita, ekstrahovana sa 30% MeOH: DCM (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni

2

(Na2SO4) i koncentrovani pri čemu se dobija Intermedijer 36 (615 mg, 93%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (LCMS) 275.4 [M+H]<+>.

Intermedijer 37A

terc-butil (S)-7'-((2-alil-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il)amino)-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-karboksilat

Intermedijer 37B

terc-butil (R)-7'-((2-alil-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il)amino)-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-karboksilat

[0335] Intermediates 37A i 37B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 7 i Intermedijer 36 pri čemu se dobija racemic terc-butil-7'-((2-alil-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]-piridin-2-il)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-6-il)amino)-1'H-spiro-[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-2'(3'H)-karboksilat (364 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak IC, 35 % Metanol) pri čemu se dobija Pik 1 (Intermedijer 37A, 140 mg) i Pik 2 (Intermedate 37B, 135 mg). Intermedijer 37A: žuta čvrsta supstanca; MS (ESI) 650.5 [M+H]<+>. Intermedate 37B: žuta čvrsta supstanca; MS (ESI) 650.5 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Intermedijer 37A i Intermedijer 37B.

Primer 30A

(S)-2-alil-6-((2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1-(7-hidroksi-7-(trifluormetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0337] U mešani rastvor Intermedijera 37A (140 mg, 0.22 mmol) u DCM (4 mL) dodato je 2M HCl u Et2O (1 mL) na 0 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 4 h. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom i triturisan dodatkom dietil etra pri čemu se dobija Primer 30A (60 mg, 50 %) kao HCl so posle sušenja pod visokim vakuumom.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.38 (brs, 1H), 9.39 (s, 2H), 8.91 (s, 1H), 8.08 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.95 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.47 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.85 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.60 (m, 1H), 4.97 (d, J=15.4 Hz, 1H), 4.81-4.77 (m, 2H), 4.60-4.55 (m, 1H), 4.43-4.33 (m, 2H), 3.26 (brs, 1H), 3.13-2.94 (m, 2H), 2.67-2.56 (m, 2H), 2.33-2.23 (s, 1H), 1.09 (s, 4H); MS (ESI) 550.5 [M+H]<+>.

Primer 30B

[0339] Primer 30B je pripremljen prema proceduri za Primer 30A kao hidrohloridna so.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.38 (brs, 1H), 9.4 (s, 2H), 8.91 (s, 1H), 8.08 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.95 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.47 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.85 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.60 (m, 1H), 4.97 (d, J=15.4 Hz, 1H), 4.81-4.77 (m, 2H), 4.60-4.55 (m, 1H), 4.43-4.33 (m, 2H), 3.26 (brs, 1H), 3.13-2.94 (m, 2H), 2.67-2.56 (m, 2H), 2.33-2.23 (s, 1H), 1.09 (s, 4H); MS (ESI) 550.5 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 30A i Primer 30B.

Primer 31A

(S)-2-alil-6-((2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0342] Korak 1: 2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((2'-(2,2,2-trifluoracetil)-2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-

4

d]pirimidin-3-on (364 mg, 26 %) je pripremljen prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 32 i Intermedijer 35. MS (ESI) 606.4 [M+H]<+>.

[0343] Korak 2: U mešani rastvor 2-alil-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((2'-(2,2,2-trifluoracetil)-2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona (400 mg, 0.66 mmol) u MeOH (12 mL) dodat je K2CO3(183 mg, 1.32 mmol) i reakciona smesa je mešana na rt tokom 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, rastvarač je uparen. Reakciona smeša je razblažena dodatkom vode (20 mL) i ekstrahovana sa 10% MeOH u DCM (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija racemski 2-alil-6-((2',3'-dihidro-1'H-spiro[ciklopropan-1,4'-izohinolin]-7'-il)amino)-1-(8-hidroksi-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (310 mg) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak AD-H, (0.5% izopropilamin in IPA)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 31A, 120 mg) i Pik 2 (Primer 31B, 123 mg). Primer 31A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (br s, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.75-7.69 (m, 2H), 7.56 (br s, 1H), 7.30 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.67 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.71-5.61 (m, 1H), 4.99 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.90-4.81 (m, 3H), 4.67-4.62 (dd, J=16 Hz, J=6.0 Hz,1H), 3.92 (s, 2H), 2.86-2.66 (m, 4H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.84-1.71 (m, 2H), 1.49 (s, 3H), 0.88 (s, 2H), 0.78 (s, 2H); MS (ESI) 510.2 [M+H]<+>. Primer 31B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (br s, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.75-7.69 (m, 2H), 7.56 (br s, 1H), 7.30 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.67 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.70-5.63 (m, 1H), 4.99 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.89-4.80 (m, 3H), 4.67-4.62 (dd, J=16 Hz, J=5.6 Hz,1H), 3.92 (s, 2H), 2.86-2.74 (m, 4H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.84-1.78 (m, 1H), 1.73-1.71 (m, 1H), 1.49 (s, 3H), 0.88 (s, 2H), 0.78 (s, 2H); MS (ESI) 510.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 31A i Primer 31B.

Intermedijer 38

2-brom-5,6-dihidro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oksazin

[0345] Korak 1: 5,6-dihidro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oksazin je sintetisan prema proceduri iz WO 2016138821.

[0346] Korak 2: U mešani rastvor 5,6-dihidro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oksazin (3 g, 24.16 mmol) u CH3CN (30 mL), dodat je NBS (9.04 g, 50.80 mmol) u porcijama na 0 °C. Reakciona smesa je mešana na 0 °C u trajanju od 2 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je koncentrovan. Sirova smeša je triturisana dodatkom CCl4(5 x 30 mL), profiltrirana i filtrat je koncentrovan u vakuumu pri čemu se dobija 2,3-dibrom-5,6-dihidro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oksazin (3 g, 44 %) kao beli čvrsti ostatak. MS (ESI) 281.1 [M+H]<+>.

[0347] Korak 3: U mešani rastvor 2,3-dibrom-5,6-dihidro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oksazina (500 mg, 1.76 mmol) u suvom THF dodat je 1.6 M iPrMgCl (1.65 mL, 2.85 mmol) u kapima na 0 °C. Reakciona smesa je mešana na 0 °C u trajajnju od 2 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcionom rastvoru je dodata voda (25 mL) i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i upareni pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 3 % MeOH/DCM) pri čemu se dobija Intermedijer 38 (280 mg, 77%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) m/z 203.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 39

2-alil-1-(5,6-dihidro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oksazin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0349] Intermedijer 39 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 38. Smesa je degasirana 20 min i zati zagrevana u mikrotalasnoj na 100 °C u trajanju od 2 h. MS (ESI) 345.5 [M+H]<+>.

Primer 32

2-alil-1-(5,6-dihidro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oksazin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0351] Primer 32 (5 mg) je pripremljen prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 39.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.94 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.53-7.48 (m, 3H), 6.86 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.76 (s, 1H), 5.73-5.71 (m, 1H), 5.11 (d, J=10.8 Hz, 1H), 5.03 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.24 (s, 2H), 4.10-4.05 (m, 4H), 3.06 (t, J=4.4 Hz, 4H), 2.50-2.42 (m, 4H), 2.21 (s, 3H); MS (ESI) m/z 488.2 [M+H]<+>.

Intermedijer 40

2-jod-6-metil-5,6-dihidro-7H-pirolo[3,4-b]piridin-7-on

[0353] Korak 1: U mešani rastvor metil 6-hlor-3-metilpikolinata (10 g, 54 mmol) u CH3CN (50 mL) dodat je NaI (40 g, 270 mmol) pa zatim i TMS-Cl (36 mL, 270 mmol))na rt. Reakcioni rastvor je reflukosavan 8 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, rastvarač je uparen, ostatak je razblažen dodatkom vode (100 mL), i ekstrahovan je sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 50% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija 6-jod-3-metilpikolinksa kisleina (8 g, 57 %) kao beličast čvrsti ostatak.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.50 (br s, 1H), 7.72 (d, J = 3 Hz, 2H), 2.41 (s, 3H).

[0354] Korak 2: U mešani rastvor 6-jod-3-metilpikolinske kiseline (8 g, 30 mmol) u MeOH (80 mL) dodata je H2SO4(4.8 ml, 91 mmol) u kapima na 0 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i smesa je mešana uz refluksovanje u trajanju od 12 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, rastvarač je uparen, ostatak je razblažen dodatkom vode (100 mL). Podešeno je pH na 9 koristeći zasićen NaHCO3i reakciona smesa je ektrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Kombinovnai ekstrakti su isprani vodom (100 mL), brine (100 mL), osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 20% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija metil 6-jod-3-metilpikolinat (7 g, 83 %) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. MS (ESI) 278.3 [M+H]<+>.

[0355] Korak 3: U mešani rastvor metil 6-jod-3-metilpikolinata (8.5 g, 30 mmol) u CCl4(100 mL), dodati su NBS (7.1 g, 39 mmol), AIBN (492 mg, 3 mmol). Reakcioni rastvor je zagrevan na 65 °C u trajanju od 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, rastvarač je uparen i ostatak je suspended u vodi (100 mL). Smesa je ekstrahovana sa DCM (3 x 50 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 15% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija metil 3-(bromometil)-6-jodpikolinat (4.31 g, 40 %) kao braon tečnost. MS (ESI) 356.1 [M+H]<+>.

[0356] Korak 4: U mešani rastvor metil 3-(bromometil)-6-jodpikolinata (3 g, 8.4 mmol) u THF (10 mL) na rt, dodat je 2.0 M metilamin u THF (42 mL, 84 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na rt tokom 24 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, rastvarač je uparen i ostatak je razblažen dodatkom vode (30 mL). Dobijeni talog je profiltriran i osušen pri čemu se dobija Intermedijer 40 (1.3 g, 56 %) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 275.2 [M+H]<+>.

Intermedijer 41

2-alil-1-(6-metil-7-okso-6,7-dihidro-5H-pirolo[3,4-b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0358] Intermedijer 41 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 40. Smesa je degasirana 20 min i zatim zagrevana u mikrotalasnoj na 100 °C u trajanju od 2 h. MS (ESI) 369.4 [M+H]<+>.

Primer 33

2-alil-1-(6-metil-7-okso-6,7-dihidro-5H-pirolo[3,4-b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0360] Primer 33 (150 mg) je pripremljen prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 41.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.11 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.33 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8 Hz, 1H), 7.58 (br s, 2H), 6.94 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.73-5.66 (m, 1H), 5.00 (d, J=10 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.63-4.61 (m, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 3.11-3.09 (m, 4H), 2.47-2.44 (m, 4H), 2.22 (s, 3H); MS (ESI) 512.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 42

6-(terc-butil)-2-jod-5,6-dihidro-7H-pirolo[3,4-b]piridin-7-on

[0362] U mešani rastvor, na rt metil 3-(bromometil)-6-jodpikolinata (500 mg, 1.4 mmol) u THF (5 mL), dodat je terc-butilamin (256 mg, 3.50 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na rt u trajanju od 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, rastvarač je uparen i ostatak je razblažen dodatkom vode (30 mL). Staložen čvrsti ostatak je profiltriran i osušen pri čemu se dobija Intermedijer 42 (220 mg, 49 %) kao beličast čvrsti ostatak.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.96 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 1.49 (s, 9H).

Intermedijer 43

2-alil-1-(6-(terc-butil)-7-okso-6,7-dihidro-5H-pirolo[3,4-b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0364] Intermedijer 43 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 42. Smesa je degasirana 20 min i zatim zagrevana u mikrotalasnoj na 100 °C u trajanju od 2 h. MS (ESI) 411.14 [M+H]<+>.

Primer 34

2-alil-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-(7-okso-6,7-dihidro-5H-pirolo[3,4-b]piridin-2-il)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0366] Korak 1: 2-alil-1-(6-(terc-butil)-7-okso-6,7-dihidro-5H-pirolo[3,4-b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (150 mg) je pripremljen prema proceduri opisanoj za Primere 2A i 2B koristeći Intermedijer 43. MS (ESI) 554.0 [M+H]<+>.

[0367] Korak 2: U mešani rastvor 2-alil-1-(6-(terc-butil)-7-okso-6,7-dihidro-5H-pirolo[3,4-b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona (150 mg, 7.05 mmol) dodata je trifluormetansulfonska kiselina(0.7 mL) at 0 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 2 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je neutralisan dodatkom NaHCO3i zatim je ekstrahocan sa EtOAc (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen reversno faznom HPLC (H2O/CH3CN gradient) pri čemu se dobija Primer 34 (10 mg) kao beličast čvrsti ostatak.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (br s, 1H), 9.09 (br s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.32 (d, J=7.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.58 (br s, 2H), 6.94 (d, J=8.4 Hz, 2H), 5.74-5.67 (m, 1H), 5.01 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.80 (d, J=18.0 Hz, 1H), 4.63 (br s, 2H), 4.46 (br s, 2H), 3.10 (s, 4H), 2.47-2.45 (m, 4H), 2.22 (s, 3H); MS (ESI) 498.2 [M+H]<+>.

Intermedijer 44

5-brom-3-metil-2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridin-3-ol

[0369] Korak 1: U mešani rastvor etil 2-hidroksiacetata (27.67 g, 266.14 mmol) u DME (200 mL) dodat je 60% NaH (8.744 g, 380.2 mmol) na 0 °C u porcijama. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana 30 min. Dodat je etil 5-brom-2-hloronikotinat (20 g, 76.04 mmol) i reakciona smesa je refluksovana 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u vodi (150 mL). Podešeno je pH na 4 koristeći acetatnu kiselinu. Smesa je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 80 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija etil 5-brom-3-okso-2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridin-2-karboksilat (8.5 g, 30 %) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 285.9 [M+H]<+>.

[0370] Korak 2: Smesa etil 5-brom-3-okso-2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridin-2-karboksilata (9 g, 31.57 mmol) i 50% vodenog rastvora H2SO4(90 mL) je zagrevana na 60 °C i mešana 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je razblažen dodatkom smese led-hladna voda (200 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (2 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (150 mL), rastvorom soli (200 mL), osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija 5-bromofuro[2,3-b]piridin-3(2H)-on (4.5 g, 66 %) kao svetlo braon čvrsti ostatak. MS (ESI) 213.8 [M+H]<+>.

[0371] Korak 3: U mešani rastvor 5-brom-furo[2,3-b]piridin-3(2H)-ona (4 g, 18.77 mmol) u dietil etru (40 mL) dodat je 3.0 M CH3MgI u DEE (31 mL, 93.85 mmol) na 0°C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 1 h. Reakcionoj smesi je dodat zas. NH4Cl (50mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 20% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 44 (2.0 g, 46 %) kao braon čvrsta supstanca. MS (ESI) 229.9 [M+H]<+>.

Intermedijer 45

2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridin-5-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0373] Intermedijer 45 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 44. Smesa je degasirana 20 min i zatim zagrevana u mikrotalasnoj na 100 °C u trajanju od 6 h. MS (ESI) 372.4 [M+H]<+>.

Primer 35A

2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 35B

(S)-2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0376] Primeri 35A i 35B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i Primere 2B koristeći Intermedijer 45 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(3-hidroksi-3-metil-2,3-dihidrofuro[2,3-b]piridin-5-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (150 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, (35.0% (0.5% izopropilamin u IPA)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 35A, 48 mg) i Pik 2 (Primer 35B, 46 mg). Primer 35A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.30 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.18 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.83 (br s, 1H), 7.49 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.84 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.83 (s, 1H), 5.73-5.64 (m, 1H), 5.11 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.97 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.23 (br s, 2H), 3.09-3.01 (m, 4H), 2.46-2.41 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.57 (s, 3H); MS (ESI) 515.2 [M+H]<+>. Primer 35B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.04 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.17 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.83 (br s, 1H), 7.49 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.83 (d, J=8.4 Hz, 2H), 5.83 (s, 1H), 5.74-5.65 (m, 1H), 5.11 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.97 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.23 (br s, 2H), 3.09-3.01 (m, 4H), 2.47-2.39 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.57 (s, 3H); MS (ESI) 515.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 35A i Primer 35B.

Intermedijer 46

2-brom-7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-7-ol

[0378] Korak 1: 5,6-dihidro-7H-pirolo[1,2-a]imidazol-7-on je pripremljen prema U.S. Publication No.

2012/0214762.

[0379] Korak 2: U rastvor 5,6-dihidro-7H-pirolo[1,2-a]imidazol-7-ona (15 g, 123.0 mmol) u THF (150 mL) ohlađen na 0 °C dodat je 3M MeMgBr (49 mL, 147.0 mmol) u kapima. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt u trajanju od 5 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, u reakcioni ratvor je dodat zas. Rastvor NH4Cl na 0 °C. Smesa je ekstrahovana sa 10% MeOH/DCM (2 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i upareni pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 3% MeOH/DCM) pri čemu se dobija 7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-7-ol (5.1 g, 30 %) kao žuta čvrsta supstanca. MS (ESI) 139.1 [M+H]<+>.

[0380] Korak 3: U rastvor 7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-7-ola (14 g, 0.101 mol) u DCM (140 mL) ohlađe na 0 ° dodati su NaHCO3(0.111 mmol), i NBS (37.7 g, 0.212 mol) u porcijama tokom 10 min. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt u trajanju od 3 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 3% MeOH/DCM) pri čemu se dobija 2,3-dibrom-7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-7-ol (7 g, 23 %) kao žuta čvrsta supstanca. MS (ESI) 296.8 [M+H]<+>.

[0381] Korak 4: U rastvor 2,3-dibrom-7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-7-ola (7 g, 23.7 mmol) u THF (70 mL), ohlađen na 0 °C dodat je 1.3 M i-PrMgCl u THF (29 mL, 37.9 mmol) u kapima. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt u trajanju od 2 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, u reakcioni ratvor je dodat zas. NH4Cl (100 mL) i ekstrahovano sa EtOAc (2 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 3% MeOH/DCM) pri čemu se dobija Intermedijer 46 (3.5 g, 68 %) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 217.3 [M+H]<+>.

Intermedijer 47

2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0383] Intermedijer 47 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 46. MS (ESI) 359.1 [M+H]<+>.

1

Primer 36A

(S)-2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 36B

(R)-2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

[0386] Primeri 36A i 36B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 2A i Primere 2B koristeći Intermedijer 47 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(7-hidroksi-7-metil-6,7-dihidro-5H-pirolo[1,2-a]imidazol-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (250 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak OJ-H, 10.0% (0.5% DEA u etanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 36A, 53 mg) i Pik 2 (Primer 36B, 66 mg). Primer 36A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.92 (br s, 1H), 8.77 (s, 2H), 7.50 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 6.85 (d, J=7.2 Hz, 2H), 5.75-5.68 (m, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.10 (d, J=10.0 Hz, 1H), 5.02 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.24 (s, 2H), 4.12-4.02 (m, 2H) 3.05 (s, 4H), 2.44 (s, 1H) 2.43 (s, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.49 (s, 3H); MS (ESI) 502.2 [M+H]<+>. Primer 36B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.92 (br s, 1H), 8.77 (s, 2H), 7.50 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 6.85 (d, J=7.2 Hz, 2H), 5.75-5.68 (m, 1H), 5.55 (s, 1H), 5.10 (d, J=10.0 Hz, 1H), 5.02 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.24 (s, 2H), 4.12-4.02 (m, 2H), 3.06 (s, 4H), 2.46 (s, 1H), 2.45 (s, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.50 (s, 3H); MS (ESI) 502.3 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 36A i Primer 36B.

Intermedijer 48

3-brom-5-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-5-ol

[0388] Korak 1: 3-amino-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-5-on je pripremljen prema Sakairi, M., Arzneimittel Forschung, 62(11), 537-544; 2012.

[0389] Korak 2: U rastvor 3-amino-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-5-on (200 mg, 1.34 mmol) in dibrometana (2 mL) ohlađen na 0°C dodat je CuBr2(0.149 g, 0.668 mmol) u porcijama. Potom je u

2

kapima dodat izoamil nitrit (0.179 g, 1.49 mmol). Reakciona smesa je zagrejana na rt i mešana 16 h. Reakcionom rastvoru je dodata voda (50 mL), povećana je baznost dodatkom zas. NaHCO3i ekstrahovan je sa DCM (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija 3-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-5-on (60 mg, 21%) kao braon čvrsta supstanca. MS (ESI) 212.3 [M+H]<+>.

[0390] Korak 3: U rastvor 3-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-5-ona (50 mg, 0.23 mmol.) u Et2O (2 mL) ohlađen na 0 °C dodat je 3.0 M MeMgBr u Et2O (0.4 mL, 1.15 mmol.). Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt u trajanju od 16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcioni rastvor je sipan u led-vodu (15 mL) i ekstrahovan je sa EtOAc (2 x 20 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 30% EtOAc/pet etar ) pri čemu se dobija Intermedijer 48 (15 mg, 28 %) kao braon čvrsta supstanca. MS (ESI) 228.4 [M+H]<+>.

Intermedijer 49

2-alil-1-(5-hidroksi-5-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-3-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0392] Intermedijer 49 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 48. MS (ESI) 370.4 [M+H]<+>.

Primer 37A

(S)-2-alil-1-(5-hidroksi-5-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-3-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 37B

(R)-2-alil-1-(5-hidroksi-5-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-3-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0395] Primeri 37A i 37B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 9A i Primeri 9B koristeći Intermedijer 49 pri čemu se dobija racemic 2-alil-1-(5-hidroksi-5-metil-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[c]piridin-3-il)-6-((4-(4-metilpiperazin -1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (25 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak AD-H 20.0% (0.5% DEA u Metanolu)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 37A, 10 mg) i Pik 2 (Primer 37B, 10 mg). Primer 37A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.14 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.37 (s, 1H),7.75 (br s, 1H), 7.58 (br s, 2H), 6.93 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.70-5.61 (m, 1H), 5.49 (s, 1H), 5.02 (d, J=10 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.65-4.45 (m, 2H), 3.07-3.03 (m, 4H), 3.02-2.81 (m, 2H), 2.46-2.43 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.16 (t, J=7.6 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H); MS (ESI) 513.4 [M+H]<+>. Primer 37B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.14 (br s, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.75 (br s, 1H), 7.58 (br s, 2H), 6.93 (d, J=12.4 Hz, 2H), 5.70-5.61 (m, 1H), 5.49 (s, 1H), 5.02 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.65-4.45 (m, 2H), 3.08-3.06 (m, 4H), 3.04-2.81 (m, 2H), 2.46-2.43 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.16 (t, J=7.6 Hz, 2H), 1.45 (s, 3H); MS (ESI) 513.7 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 37A i Primer 37B.

Intermedijer 50

2-brom-7-(1,1-difluoroetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol

[0397] Korak 1: U mešani rastvor 2-brom-5,6-dihidro-7H-ciklopenta[b]piridin-7-ona (5 g, 23.58 mmol) u THF (50 mL) dodat je iPrMgCl 0.5 M u THF (70.7 mL, 35.37 mmol) u kapima na 0 °C. Reakciona smesa je mešana na rt u trajanju od 16 h. Po završetku, reakciona smesa je ohlađena na 0 °C i dodat je zasićen rastvor NH4Cl (100 mL) i ektrahovana sa EtOAc (2 x 200 mL). Kombinovani ekstrakti su isprani rastvorom soli (200 mL), osušeni (Na2SO4) i upareni do suva. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 15 % EtOAc/Hexanes) pri čemu se dobija 2-brom-7-(prop-1-en-2-il)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol (1.7 g, 28%) kao žuta tečnost. MS (ESI) 254.1 [M+H]<+>.

[0398] Korak 2: U mešani rastvor 2-brom-7-(prop-1-en-2-il)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ola (2.5 g, 9.82 mmol) u THF (25 mL) dodat je 60 % NaH (590 mg, 14.76 mmol) na 0 °C. Smesa je mešana 30 min. dodat je anhidrid acetatne kiseline (1.39 mL, 14.76 mmol) u kapima na 0 °C. Rekciona smesa je mešana na rt u trajanju od16 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcionoj smesi je dodata ledena voda i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 100 mL). Kombinovani eesktrakti su isprani vodom (100 mL), rastvorom soli (100 mL), osušeni (Na2SO4) i upareni do suva. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (neutralni aluminijum oksid, 10 % EtOAc/Pet. etar ) pri čemu se dobija 2-brom-7-(prop-1-en-2-il)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-il acetat (1.7 g, 58%) kao ćuta tečnost. MS (ESI) 296.0 [M+H]<+>.

[0399] Korak 3: Ozon gas je barbotiran kroz mešani rastvor 2-brom-7-(prop-1-en-2-il)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-il acetata (3.4 g, 11.5 mmol) u MeOH (40 mL) na -78 °C u trajanju od 30 min. Po

4

utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakcionoj smesi je dodat 1 mL dimetilsulfida na -78 °C a i mešana na rt for 1 h. Reakciona smesa je koncentrovana i razblažena vodom (100 mL) i EtOAc (200 mL). Organski sloj je dovojen, osušen (Na2SO4) i uparen pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija 7-acetil-2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-il acetat (2.1 g, 61%) kao beli čvrsti ostatak. MS (ESI) m/z 298.1 [M+H].

[0400] Korak 4: U zatvorenom sudu, u 7-acetil-2-brom-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-il acetat (800 mg, 2.69 mmol) je dodat DAST (8.9 mL, 67.34 mmol) i reakciona smesa je mešana na rt tokom 2 dana. Po završetku mešanja, reakciona smesa was added u kapima u smrvljeni led i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 100 mL). Organski sloj je odvojen, ispran vodom (2 x 50 mL), osušen (Na2SO4) i uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (SiO2, 10 % EtOAc/Heksan) pri čemu se dobija 2-brom-7-(1,1-difluoroetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta-[b]piridin-7-il acetat (85 mg, 10%) kao braon ulje. MS (ESI) 320.1 [M+H]<+>.

[0401] Korak 5: U mešani rastvor dobijenog 2-brom-7-(1,1-difluoroetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-il acetata (300 mg, 0.937 mmol) u MeOH (5 mL) dodat je K2CO3(259 mg, 1.88 mmol) na 0 °C. Uklonjeno je ledeno kupatilo i reakciona smesa je mešana na rt tokom 3 h. Po utvrđenom završetku reakcije pomoću TLC, reakciona smesa je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dodata je voda (20 mL) i smesa je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 50 mL), osušeni (Na2SO4) i upareni pod sniženim pritiskom pri čemu se dobija (2-brom-7-(1,1-difluoroetil)-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-7-ol (230 mg, 0.83 mmol, 88%) kao braon tečnost. MS (ESI) 278.0 [M+H]<+>.

Intermedijer 51

2-alil-1-(7-(1,1-difluoroetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-(metiltio)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0403] Intermedijer 51 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 50. MS (ESI) 420.2 [M+H]<+>.

Primer 38A

(S)-2-alil-1-(7-(1,1-difluoroetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo [3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 38B

(R)-2-alil-1-(7-(1,1-difluoroetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0406] Primeri 38A i 38B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 51 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(7-(1,1-difluoroetil)-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (105 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, (30.0% (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 38A, 10 mg) i Pik 2 (Primer 38B, 20 mg). Primer 38A:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.03 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.01 (br s, 1H), 7.81 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.92 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.12 (s, 1H), 5.6-5.62 (m, 1H), 4.99 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.86-4.77 (m, 2H), 4.5 (m, 1H), 3.09 (s, 5H), 3.01-2.99 (m, 1H), 2.98-2.89 (m,1H), 2.50-2.46 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.20-2.10 (m, 1H), 1.92 (t, J=19.6 Hz, 3H); MS (ESI) 563.5 [M+H]<+>. Primer 38B:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.03 (br s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.01 (br s, 1H), 7.81 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.57 (br s, 2H), 6.92 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.12 (s, 1H), 5.66-5.64 (m, 1H), 5.00-4.97 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.85-4.81 (m, 2H), 4.57 (m, 1H), 3.09-2.86 (m, 5H), 2.89-2.88 (m,1H), 2.57-2.50 (m, 5H), 2.22 (s, 3H), 2.15-2.05 (m, 1H) 1.92 (t, J=19.6 Hz, 3H); MS (ESI) 563.5 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 38A i Primer 38B.

Intermedijer 52

1-(1-metilpiperidin-4-il)-1H-indol-5-amin

[0408] Intermedijer 52 je pripremljen prema proceduri opisanoj u EP 2141163. MS (ESI) 230.6 [M+H]<+>.

Primer 39A

(S)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((1-(1-metilpiperidin-4-il)-1H-indol-5-il)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 39B

(R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((1-(1-metilpiperidin-4-il)-1H-indol-5-il)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0411] Primeri 39A i 39B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 17 i Intermedijer 52 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((1-(1-metilpiperidin-4-il)-1H-indol-5-il)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (240 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, (30.0% (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 39A, 69 mg) i Pik 2 (Primer 39B, 67 mg). Primer 39A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.21 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.09 (br s, 1H), 7.90 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.49-7.46 (m, 2H), 7.40-7.30 (m, 1H), 6.43 (d, J=3.2 Hz, 1H), 5.73-5.63 (m, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J=16.4 Hz, 1H), 4.83-4.70 (m, 1H), 4.60-4.50 (m, 1H), 4.35-4.25 (m, 1H), 3.01-2.89 (m, 3H), 2.82-2.75 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.24-2.12 (m, 3H), 2.03-1.86 (m, 6H), 1.73-1.68 (m, 1H), 0.87 (t, J=7.4 Hz, 3H); MS (ESI) 565.5 [M+H]<+>. Primer 39B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.21 (br s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.09 (br s, 1H), 7.90 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.49-7.46 (m, 2H), 7.40-7.30 (m, 1H), 6.43 (d, J=3.2 Hz, 1H), 5.71-5.63 (m, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.99 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.83-4.70 (m, 1H), 4.60-4.55 (m, 1H), 4.35-4.25 (m, 1H), 3.00-2.89 (m, 3H), 2.82-2.75 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.24-2.12 (m, 6H), 2.03-1.86 (m, 6H), 1.73-1.68 (m, 1H), 0.87 (t, J=7.4 Hz, 3H); MS (ESI) 565.4 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 39A i Primer 39B.

Intermedijer 53

3-metil-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)anilin

[0413] Intermedijer 53 je pripremljen prema proceduri analognoj onoj opisanoj u WO Publication No.

2014/134308. MS (ESI) 203.4 [M+H]<+>.

Primer 40A

S)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

Primer 40B

(R)-2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0416] Primeri 40A i 40B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 17 i Intermedijer 53 pri čemu se dobija racemski 2-alil-1-(7-etil-7-hidroksi-6,7-dihidro-5H-ciklopenta[b]piridin-2-il)-6-((3-metil-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on (217 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiral Pak AD-H, (30.0% (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 40A, 35 mg) i Pik 2 (Primer 40B, 33 mg). Primer 40A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (br s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.65 (brs, 1H), 7.45 (dd, J=8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.01 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.51-5.50 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.99 (d, J= 10 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.74-4.59 (m, 2H), 2.97-2.95 (m, 3H), 2.82-2.80 (m, 1H), 2.56-2.50 (m, 2H), 2.28-2.19 (m, 9H), 2.01-1.69 (m, 3H), 0.86 (t, J=7.6 Hz, 3H); MS (ESI) 538.2 [M+H]<+>. Primer 40B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.20 (br s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.65 (brs, 1H), 7.45 (dd, J= 8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.01 (d, J=8.4 Hz, 1H), 5.51-5.50 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.99 (d, J=10 Hz, 1H), 4.85 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.74-4.59 (m, 2H), 2.97-2.95 (m, 3H), 2.82-2.80 (m, 1H), 2.56-2.50 (m, 2H), 2.28-2.19 (m, 9H), 2.01-1.69 (m, 3H), 0.86 (t, J=7.6 Hz, 3H); MS (ESI) 538.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 40A i Primer 40B.

Intermedijer 54

N-(2-brom-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-8-il)acetamid

[0418] U mešani rastvor Intermedijera 31 (250 mg, 1.037 mmol) u acetonitrilu (6 mL) dodata je hlorsulfonska kiselina (0.2 mL) na rt i rastvor je mešan 2 h. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, razblažen u vodi (10 mL), ekstrahovan sa EtOAc (2 x 10 mL), osušen (Na2SO4), profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prethodni postupak je ponovljen u razmeri 3 x 250 mg. Kombinovani ostaci su prečišćeni fleš hromatografijom (SiO2, 40 % EtOAc/Pet etar ) pri čemu se dobija pri čemu se dobija Intermedijer 54 (480 mg, 41%) kao beličast čvrsti ostatak. MS (ESI) 283.1 [M+1]<+>.

Intermedier 55

[0419] Intermedijer 55 je pripremljen prema postupku opisanom za Intermedijer 3 koristeći Intermedijer 1 i Intermedijer 54. MS (ESI) 425.1 [M+H]<+>.

Primer 41A

(S)-N-(2-(2-alil-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-8-il)acetamid

[0422] Primeri 41A i 41B su pripremljeni prema procedurama opisanim za Primere 9A i 9B koristeći Intermedijer 17 i Intermedijer 55 pri čemu se dobija racemski N-(2-(2-alil-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-8-il)acetamid (220 mg). Enantiomeri su razdvojeni sa hiralnom SFC hromatografijom(Chiralpak IC, (40.0% (0.5% DEA u MeOH)) pri čemu se dobija Pik 1 (Primer 41A, 70 mg) i Pik 2 (Primer 41B, 50 mg). Primer 41A: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.12 (brs, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.71 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J=8.0 Hz, 3H), 6.96 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.60-5.55 (m, 1H), 4.97 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.87 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.75-4.70 (m, 1H), 4.53-4.51 (m, 1H), 3.30-3.10 (m, 4H), 2.93-2.76 (m, 6H), 2.68-2.58 (m, 4H), 1.86-1.68 (m, 6H), 1.40 (s, 3H); MS (ESI) 568.2 [M+H]<+>. Primer 41B: žuta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.12 (brs, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.71 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J=8.0 Hz, 3H), 6.92 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.60-5.55 (m, 1H), 4.97 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.87 (d, J=17.2 Hz, 1H), 4.73-4.69 (m, 1H), 4.53-4.48 (m, 1H), 3.10 (s, 4H), 2.79 (m, 2H), 2.63-2.58 (m, 1H), 2.47-2.44 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.84-1.68 (m, 6H), 1.40 (s, 3H); MS (ESI) 568.2 [M+H]<+>. Apsolutna stereohemija je arbitrarno dodeljena za Primer 41A i Primer 41B.

Primer 42

2-alil-1-(8-amino-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-2-il)-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1,2-dihidro-3H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-on

[0424] U mešani rastvor N-(2-(2-alil-6-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-1-il)-8-metil-5,6,7,8-tetrahidrohinolin-8-il)acetamida (500 mg, 0.881 mmol) u epruveti za visoke pritiske dodati su 1,4-dioksan (10 mL) i 6M HCl (10 mL). Reakcioni rastvor je zagrevan na 100°C tokom 16 h. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom i pH je podešeno na 8 dodatkom 1 M NaOH. Smesa je ekstrahovana sa 10% MeOH/DCM (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirov ostatak je prečišćen pomoću HPLC hromatografije (C18, voda/CH3CN) pri čemu se dobija Primer 42 (90 mg, 19%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (brs, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.74 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.65-7.52 (m, 3H), 6.92 (d, J=9.3 Hz, 2H), 5.76-5.60 (m, 1H), 5.00 (d, J=10.2 Hz, 1H), 4.86 (d, J=17.1 Hz, 1H), 4.74-4.60 (m, 2H), 3.15-3.05 (m, 4H), 2.85-2.75 (m, 2H), 2.48-2.43 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 1.90-1.75 (m, 6H), 1.35 (s, 3H); MS (ESI) 526.2 [M+H]<+>.

Procedura A

Test vezivanja Wee 1

[0425] Wee 1 kinaza je određena korišćenjem testa Fluorescentno rezonantni energetski transfer (FRET). U pločama sa 384 ležišta, Wee 1 kinaza (konačna koncentracija 2 nM) je pomešana sa AlexaFluor obeleženim trejserom 178 (konačna koncentracija 50 nM, Kd= 24 nM), Eu-anti-GST antitelom (konačna koncentracija 2 nM), a zatim inhibitorom (0,003 do 10 mikromol) u konačnoj zapremini od 16 µl kinaza pufera (50 mM HEPES pH 7,5, 0,01% BRIJ-35, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA). Ploča je mućkana 30 sekundi, inkubirana 60 minuta na sobnoj temperaturi i zabeležena na fluorescentnom čitaču ploča. Rezultati su prikazani u Tabeli 1.

Postupak B

H23 test ćelijske proliferacije

[0426] H23[ATCC (CRL-5800™)] ćelije su gajene i održavane u RPMI-1640 medijumu sa 10% FBS i 1% penicilin-streptomicina. Ćelije su tretirane jedinjenjima razblaženim u DMSO i serijskim razblaženjima od 9 tačaka, 5 puta. Ploče su stavljene na 37 °C, 5% CO2radi inkubacije u trjanju od 4 dana. Pre nego što su razvijene dodavanjem 100 µL CellTiter-Glo reagensa (Promega) na ploču za ispitivanje, ploče su kratko promućkane 2 minuta i ostavljene da se inkubiraju na sobnoj temperaturi 10 minuta. Ploče su očitane M5e čitačem ploča prema CellTiter-Glo protokolu. Za dobijanje C50vrednosti korišćen je GraphPad Prism softver. Rezultati su prikazani u Tabeli 1.

Tabela 1. We 1 enzimski i ćelijski podaci

[0427]

1

2

Za Wee1 enzimatski IC50: A = jedna IC50≤10 nM; B = jedna IC50>10 nM i < 100 nM; C = jedna IC50≥100 nM. Za H23 CTG IC50: A = jedna IC50≤ 100 nM; B = jedna IC50>100 nM i < 1000 nM; C = jedna IC50≥1000 nM.

4

Claims (17)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, strukture:

   gde: R<1>je odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil; Prsten A je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan fenil i supstituisan ili nesupstituisan 5-6 člani monocikličan heteroaril; Prsten B je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil i supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil; R<2>je odabran iz grupe koju čine

   m je 0, 1, 2 ili 3; R<3>je odabran iz grupe koju čine halogen i supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil; X je odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, hidroksi, cijano, supstituisan ili nesupstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil, supstituisan ili nesupstituisan amin(C1-C6alkil), supstituisan ili nesupstituisan -NH-(CH2)1-6-amin, mono-supstituisan amin, di-supstituisan amin, amino, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkil, supstituisan ili nesupstituisan C1-C6alkoksi, supstituisan ili nesupstituisan C3-C6cikloalkoksi, supstituisan ili nesupstituisan (C1-C6alkil)acil, supstituisan ili nesupstituisan C-amido, supstituisan ili nesupstituisan N-amido, supstituisan ili nesupstituisan C-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karboksi, supstituisan ili nesupstituisan O-karbamil i supstituisan ili nesupstituisan N-karbamil; Y je CH ili N; Y<1>je CR<4A>ili N; Y<2>je CR<4B>ili N; Prsten C je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan C6-C10aril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-10 člani heteroaril, supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil, supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil i supstituisan ili nesupstituisan 7-10 člani bicikličan heterociklil; R<4A>i R<4B>su nezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen i nesupstituisan C1-4alkil; i R<5>je supstituisan ili nesupstituisan 5-7 člani monocikličan heterociklil.
2. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time, što R<1>je vodonik.
3. 3. Jedinjenje prema jednom od zahteva 1-2, naznačeno time, što prsten A je supstituisan ili nesupstituisan 5-6 člani monocikličan heteroaril; ili gde

   je odabran iz grupe koju čine :

   pri čemu, svaka od prethodno navedenih grupa je supstituisana ili nesupstituisana; ili gde prsten A je nesupstituisan 5-6 člani monocikličan heteroaril; ili gde

   je odabran iz grupe koju čine :

   pri čemu svaka od pretodno navedenih grupa je nesupstituisana.
4. 4. Jedinjenje prema jednom od zahteva 1-3, naznačeno time, što prsten B je supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil; ili gde prsten B je supstituisan ili nesupstituisan monocikličan 5 člani karbociklil; ili pri čemu prsten B je supstituisan monocikličan 5-7 člani karbociklil supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, hidroksi, amino, nesupstituisan -NHC(O)C1-C6alkil, nesupstituisan C1-C6haloalkil i nesupstituisan C1-C6alkil; ili pri čemu prsten B je supstituisan monocikličan 5 člani karbociklil supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, hidroksi, amino, nesupstituisan -NHC(O)C1-C6alkil, nesupstituisan C1-C6haloalkil i nesupstituisan C1-C6alkil.
5. 5. Jedinjenje prema jednom od zahteva 1-4, naznačeno time, što R<2>je

   poželjno m je 0.
6. 6. Jedinjenje prema zahtevu 5, naznačeno time, što Y je CH; i X je supstituisan ili nesupstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil; ili pri čemu Y je CH; i X je odabran iz grupe koju čine supstituisan ili nesupstituisan azetidin, supstituisan ili nesupstituisan oksetan, supstituisan ili nesupstituisan diazetidin, supstituisan ili nesupstituisan azaoksetan, supstituisan ili nesupstituisan pirolidin, supstituisan ili nesupstituisan tetrahidrofuran, supstituisan ili nesupstituisan imidazolin, supstituisan ili nesupstituisan pirazolidin, supstituisan ili nesupstituisan piperidin, supstituisan ili nesupstituisan tetrahidropiran, supstituisan ili nesupstituisan piperazin supstituisan ili nesupstituisan morfolin i supstituisan ili nesupstituisan dioksan; ili gde Y je CH; i X je supstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil; ili gde Y je CH; i X je odabran iz grupe koju čine supstituisan azetidin, supstituisan oksetan, supstituisan diazetidin, supstituisan azaoksetan, supstituisan pirolidin, supstituisan tetrahidrofuran, supstituisan imidazolin, supstituisan pirazolidin, supstituisan piperidin, supstituisan tetrahidropiran, supstituisan piperazin supstituisan morfolin i supstituisan dioksan; ili gde Y je CH; i X je supstituisan 4-6 člani monocikličan heterociklil, supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluorine, nesupstituisan C1-C6alkil, nesupstituisan C1-C6hidroksialkil, nesupstituisan amin(C1-C6alkil) i nesupstituisan (C1-C6alkil)acil; ili gde Y je CH; i X je odabran iz grupe koju čine supstituisan azetidin, supstituisan oksetan, supstituisan diazetidin, supstituisan azaoksetan, supstituisan pirolidin, supstituisan tetrahidrofuran, supstituisan imidazolin, supstituisan pirazolidin, supstituisan piperidin, supstituisan tetrahidropiran, supstituisan piperazin supstituisan morfolin i supstituisan dioksan, pri čemu azetidin, oksetan, diazetidin, azaoksetan, pirolidin, tetrahidrofuran, imidazolin, pirazolidin, piperidin, tetrahidropiran, piperazin, morfolin i dioksan je supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrana iz grupe koju čine fluor, nesupstituisan C1-C6alkil, nesupstituisan C1-C6hidroksialkil, nesupstituisan amin(C1-C6alkil) i nesupstituisan (C1-C6alkil)acil.
7. 7. Jedinjenje prema zahtevu 1 naznačeno time, što je odabrano iz grupe koju čine:

   �

   ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kog od navedenih.
8. 8. Jedinjenje prema zahtevu 7, naznačeno time, što jedinjenje je ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
9. 9. Jedinjenje prema zahtevu 7, naznačeno time, što jedinjenje je ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
10. 10. Jedinjenje prema zahtevu 7, naznačeno time, što jedinjenje je , ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 1 1
11. 11. Jedinjenje prema zahtevu 7, naznačeno time, što jedinjenje je ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
12. 12. Jedinjenje prema zahtevu 7, naznačeno time, što jedinjenje je ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
13. 13. Jedinjenje prema zahtevu 7, naznačeno time, što jedinjenje je ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
14. 14. Farmaceutski sastav koji sadrži efikasnu količinu jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1-13, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ekscipijent ili njihovu kombinaciju.
15. 15. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-13, ili njegova farmaceutska prihvatljiva so, ili farmaceutska kompkmozicija prema zahtevu 14 za upotrebu u ublažavanju ili lečenju raka, pri čemu je rak izabran iz grupe: rak mozga, cervikocerebralni rak, rak jednjaka, rak štitne žlezde, rak malih ćelija, rak nemalih ćelija, rak dojke, rak pluća, rak želuca, rak žučne kese/žučnih kanala, rak jetre, rak pankreasa, rak debelog creva, rak rektuma, rak jajnika, horiokarcinom, rak tela materice, uterocervikalmni karcinom, rak bubrežne karlice/uretera, rak bešike, rak prostate, rak penisa, rak testisa, rak fetusa, Vilmsov karcinom, rak kože, maligni melanom, neuroblastom, osteosarkom, Juingov tumor, sarkoma mekog dela tela, akutna leukemija, hronična limfna leukemija, hronična mijelocitna leukemija, policitemija vera, maligni limfom, multipli mijelom, Hodžkinov limfom i ne-Hodžkinov limfom.
16. 16. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-13, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 14 za upotrebu u inhibiranju replikacije malignog rasta ili tumora, pri čemu 1 2 maligni rast ili tumor je posledica raka izabranog od raka mozga, cervikocerebralnog raka, raka jednjaka, raka štitne žlezde, raka malih ćelija, raka ne-malih ćelija, raka dojke, raka pluća, raka želuca, raka žučne kese/žučnih kanala, raka jetre, raka pankreasa, raka debelog creva, raka rektuma, raka jajnika, horiokarcinoma, raka tela materice, raka uteroceriksa, raka bubrežne karlice/uretera, raka bešike, raka prostate, raka penisa, raka testisa, raka fetusa, Vilmsovog raka, raka kože, malignog melanoma, neuroblastoma, osteosarkoma, Juingovog tumora, sarkoma mekog dela tela, akutne leukemije, hronične limfne leukemije, hronične mijelocitne leukemija, policitemije vere, maligni limfom, multipli mijelom, Hodžkinov limfom i ne-Hodžkinov limfom.
17. 17. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-13, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 14 za upotrebu u ublažavanju ili lečenju malignog rasta ili tumora, pri čemu je maligni rast ili tumor posledica raka izabranog od raka mozga, cervikocerebralnog raka, raka jednjaka, raka štitne žlezde, raka malih ćelija, ne-malih ćelija raka, raka dojke, raka pluća, raka želuca, raka žučne kese/žučnih kanala, raka jetre, raka pankreasa, raka debelog creva, raka rektuma, raka jajnika, horiokarcinoma, raka tela materice, raka grlića materice, raka bubrežne karlice/uretera, raka bešike, raka prostate, raka penisa, raka testisa, raka fetusa, Vilmsovog raka, raka kože, malignog melanoma, neuroblastoma, osteosarkoma, Juingovog tumora, sarkoma mekog dela tela, akutne leukemije, hronične limfne leukemije, hronične mijelocitne leukemije, policitemije vere, maligni limfom, multipli mijelom, Hodžkinov limfom i ne-Hodžkinov limfom. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 1