RS66871B1 - Kompozicija za kontrolisanu stimulaciju jajnika - Google Patents

Description

Opis

Osnova pronalaska

[0001] Tehnologije medicinski asistirane reprodukcije (MAR) kao što je in vitro oplodnja (in vitro fertilisation, IVF) dobro su poznate. MAR uopšteno zahteva korak kontrolisane stimulacije jajnika (controlled ovarian stimulation, COS), kada se kohorta folikula stimuliše do pune zrelosti. Standardni režimi COS obuhvataju primenu gonadotropina, kao što je folikulostimulišući hormon (FSH), samostalno ili u kombinaciji sa aktivnošću luteinizirajućeg hormona (LH) kako bi se stimulisao razvoj više folikula. COS obično zahteva primenu analoga GnRH ili agonista GnRH pre i/ili tokom stimulacije kako bi se sprečio prerani skok LH koji može da indukuje ovulaciju pre planiranog dobijanja oocita. Farmaceutske kompozicije koje se obično koriste za COS uključuju rekombinantni folikulostimulišući hormon (rFSH), uključujući REKOVELLE<®>i GONAL-F<®>, FSH dobijen iz urina, preparate rekombinantnog FSH LH, menotrofin [humani menopauzalni gonadotropin (hMG)] dobijen iz urina i visoko prečišćeni humani menopauzalni gonadotropin (HP-hMG).

[0002] U slučaju prevelikog odgovora jajnika, COS može biti povezan sa rizikom od sindroma hiperstimulacije jajnika (OHSS), koji u teškim slučajevima može biti opasan po život. Sposobnost predviđanja potencijalnog odgovora jajnika žena na COS može omogućiti razvoj personalizovanih ili individualizovanih protokola COS. Takvi individualizovani protokoli bi mogli, na primer, da smanje rizik od OHSS kod žena za koje se predviđa da će imati prekomeran odgovor jajnika na COS, i/ili da poboljšaju verovatnoću trudnoće kod žena za koje je ocenjeno da imaju loš odgovor. Koncentracija anti-Milerovog hormona (AMH) u serumu sada je uspostavljena kao pouzdan biomarker rezerve jajnika (Dewailly et al, 2014). Nivoi AMH su neposredno povezani sa odgovorom jajnika na gonadotropine tokom COS. Tako, visoki nivoi AMH su dobar prediktor prekomernog odgovora jajnika, kao i indikator rizika od OHSS, dok niski nivoi AMH predviđaju loš odgovor jajnika na COS.

[0003] Kliničko istraživanje je poslednjih godina usmereno na razvoj individualizovanih doznih režima za COS, prvobitno bez korišćenja AMH, već na bazi drugih prediktora odgovora jajnika. Ovi prediktori uključuju starost, indeks telesne mase (BMI), FSH i broj antralnih folikula (AFC). Kao tipičan primer, studija CONSORT je primenjivala algoritam doziranja koji je obuhvatao bazalni FSH, BMI, starost i AFC radi predviđanja optimalne početne doze rFSH za COS (Olivennes et. al., 2009). Algoritam doziranja u studiji CONSORT individualizuje doze rFSH (GONAL-F<®>) za MAR, uz dodeljivanje inkrementalnih doza od 37,5 i.j. na osnovu sledećih karakteristika pacijentkinje: bazalnog FSH, BMI i AFC. Studija CONSORT je bila prospektivna, nekontrolisana, međunarodna, pilot studija vršena u 18 centara na ženama sa normalnom ovulacijom starosti

[0004] od 18 godina do 34 godine koje su podvrgnute stimulaciji prema protokolu dugoročne terapije agonistom. Doza rekombinantnog FSH je dodeljena pomoću algoritma i predviđeno je da se menja samo u slučaju postojanja rizika od OHSS. Primarna krajnja tačka je bio broj dobijenih oocita. Analizirano je pet doznih grupa koje su obuhvatale ukupno 161 pacijentkinju: 75 i.j. (n = 48), 112,5 i.j. (n = 45), 150 i.j. (n = 34), 187,5 i.j. (n = 24), 225 i.j. (n = 10). Otkazivanje usled neodgovarajućeg odgovora je bilo veće od očekivanog u grupi sa 75 i.j. (12/48). Na nivou cele studije, dobijeno je prosečno 9,0 oocita (8,5, 8,0, 10,0, 12,0 i 8,0 u grupama sa 75, 112,5, 150, 187,5, odnosno 225 i.j.). Stope kliničke trudnoće/započeti ciklusi su bili 31,3, 31,1, 35,3, 50,0, odnosno 20,0% (na nivou studije 34,2%). Dve pacijentkinje su imale težak OHSS. Zaključeno je da je algoritam studije CONSORT postigao odgovarajući prinos oocita i dobre stope trudnoće u ovoj preliminarnoj studiji. Međutim, prilagođavanje algoritma bi bilo neophodno radi smanjenja stope otkazivanja. Stoga, postoji potreba za pouzdanijim individualizovanim protokolima COS koji obezbeđuju odgovarajući odgovor na stimulaciju i/ili smanjeni rizik od OHSS.

[0005] Kao što je prethodno naznačeno, standardni protokoli COS zahtevaju svakodnevnu primenu FSH radi indukovanja rasta folikula kako bi se dobilo dovoljno oocita za IVF. FSH je prirodni hormon koji luči anteriorna hipofiza. Kod žena, FSH svakog meseca indukuje rast jednog dominantnog folikula koji ovulira tokom svakog prirodnog ciklusa. FSH sadrži alfa podjedinicu od 92 aminokiseline, koja je takođe prisutna kod drugih glikoproteinskih hormona LH i CG, i beta podjedinicu od 111 aminokiselina koja je jedinstvena za FSH i daje biološku specifičnost hormonu (Pierce i Parsons, 1981). Svaka podjedinica je posttranslaciono modifikovana dodatkom složenih ugljovodoničnih ostataka. Obe podjedinice imaju 2 mesta za vezivanje N-vezanog glikana, alfa podjedinica na aminokiselinama 52 i 78, a beta podjedinica na aminokiselinskim ostacima 7 i 24 (Rathnam i Saxena, 1975, Saxena i Rathnam, 1976). FSH je tako glikolizovan do oko 30% masenih (Dias i Van Roey. 2001. Fox et al.2001).

[0006] FSH prečišćen iz urina postmenopauzalnih žena godinama je korišćen za lečenje neplodnosti, kako za pospešivanje ovulacije kod prirodne reprodukcije, tako i za indukciju rasta više folikula kako bi se dobilo dovoljno oocita za MAR. Sve donedavno, jedini odobreni proizvodi rFSH za stimulaciju jajnika, kao što su folitropin alfa (GONAL-F<®>, Merck Serono / EMD Serono) i folitropin beta (PUREGON<®>/ FOLLISTIM<®>, MSD / Schering-Plough), dobijani su od ćelijske linije jajnika kineskog hrčka (CHO).

[0007] Postoji značajna heterogenost povezana sa FSH preparatima koja je povezana sa razlikama u količini različitih izooblika koji su prisutni. Individualni izooblici FSH imaju identične aminokiselinske sekvence ali se razlikuju po stepenu glikozilacije. Ove specifične izooblike može karakterisati heterogenost njihovih razgranatih struktura ugljovodonika i različite količine inkorporacije sijalinske kiseline (terminalni šećer), pri čemu izgleda da oba utiču na biološku aktivnost specifičnog izooblika.

[0008] Glikozilacija prirodnog FSH je veoma složena. Glikani u prirodno dobijenom hipofiznom FSH mogu da sadrže širok raspon struktura koje mogu da uključuju kombinacije mono-, bi-, tri- i tetraantenarnih glikana (Pierce i Parsons, 1981. Ryan et al., 1987. Baenziger i Green, 1988). Glikani mogu imati dalje modifikacije: fukozilaciju jezgra, bisekcioni glukozamin, lance produžene acetil laktozaminom, delimičnu ili potpunu sijalilaciju, sijalilaciju sa α2,3 i α2,6 vezama i sulfatisani galaktozamin koji zamenjuje galaktozu (Dalpathado et al., 2006). Nadalje, postoje razlike u raspodeli glikanskih struktura na pojedinačnim mestima glikozilacije. Uporedivi nivo složenosti glikana je otkriven kod FSH dobijenog iz seruma pojedinaca i iz urina postmenopauzalnih žena (Wide et al., 2007).

[0009] Glikozilacija proizvoda rFSH odražava raspon glikozil-transferaza koje su prisutne u liniji ćelije domaćina. Komercijalno dostupni proizvodi rFSH dobijeni od konstruisanih ćelija CHO imaju ograničeniji raspon glikanskih modifikacija nego što se može naći kod prirodnih proizvoda. Primeri za smanjenu heterogenost glikana koja se može videti kod rFSH dobijenog od CHO ćelija uključuju nedostatak bisektujućeg glukozamina i smanjen sadržaj fukozilacije jezgra i ekstenzija acetil laktozamina (Hard et al., 1990). Pored toga, ćelije CHO mogu da adiraju sijalinsku kiselinu samo pomoću α2,3 veze (Kagawa et al, 1988, Takeuchi et al, 1988, Svensson et al., 1990). rFSH dobijen od ćelija CHO uključuje samo α2,3-vezanu sijalinsku kiselinu, i ne uključuje α2,6-vezanu sijalinsku kiselinu.

[0010] Dakle, FSH dobijen od CHO ćelija je različit od prirodno proizvedenog FSH (npr. humanog hipofiznog / serumskog / urinarnog FSH) koji sadrži glikane sa smešom α2,3 i α2,6-vezane sijalinske kiseline, gde prva preovlađuje.

[0011] Podnosioci predmetne prijave su razvili rFSH dobijen iz humane ćelijske linije koji je predmet međunarodne prijave patenta br. PCT/GB2009/000978, koja je objavljena kao WO2009/127826A. Rekombinantni FSH sa smešom α2,3 i α2,6-vezane sijalinske kiseline je napravljen konstruisanjem humane ćelijske linije koja eksprimira i rFSH i α2,3 sijalil transferazu. Eksprimirani proizvod je veoma kiseo, i ima smešu i α2,3- i α2,6-vezanih sijalinskih kiselina; ova druga je obezbeđena putem aktivnosti endogene sijalil transferaze. Otkriveno je da vrsta veze sijalinske kiseline, α2,3- ili α2,6-, može imati izuzetan uticaj na biološki klirens FSH. Rekombinantni FSH sa smešom i α2,3 i α2,6-vezane sijalinske kiseline ima dve prednosti u odnosu na rFSH eksprimiran u konvencionalnim CHO ćelijama: prvo, supstanca je u većoj meri sijalilovana usled kombinovanog dejstva dve sijalil transferaze, a drugo, supstanca je u većoj meri slična prirodnom FSH. To će verovatno u većoj meri biti biološki pogodno u poređenju sa rekombinantnim proizvodima dobijenim od CHO ćelija koje imaju samo α2,3 vezanu sijalinsku kiselinu (Kagawa et al, 1988, Takeuchi et al, 1988, Svensson et al., 1990) i imaju smanjeni sadržaj sijalinske kiseline (Ulloa-Aguirre et al.1995., Andersen et al.2004).

[0012] Aminokiselinska sekvenca rekombinantnog FSH dobijenog od humane ćelijske linije je predmet međunarodne patentne prijave br. PCT/GB2009/000978, koja je objavljena kao WO2009/127826A, predstavlja nativnu sekvencu i identična je prirodnom humanom FSH i postojećim rFSH proizvodima dobijenim od CHO. Međutim, podnosioci predmetne prijave su otkrili da humano dobijeni rekombinantni FSH proizvodi (tj. rekombinantni FSH proizveden ili eksprimiran u humanoj ćelijskoj liniji, npr. napravljen konstruisanjem humane ćelijske linije) koji imaju smešu i α2,3 i α2,6-vezane sijalinske kiseline mogu biti naročito delotvorni kada se koriste u protokolima COS (npr. individualizovanim).

[0013] 13. decembra 2016. godine, Evropska komisija (EK) dala je dozvolu za lek REKOVELLE<®>(folitropin delta, poznat i kao FE 999049), rekombinantni folikulostimulišući hormon dobijen od humane ćelijske linije (humani rFSH), za upotrebu u kontrolisanoj stimulaciji jajnika za razvoj više folikula kod žena koje su podvrgnute tehnologijama medicinski asistirane reprodukcije (MAR), kao što je ciklus in vitro oplodnje (IVF). REKOVELLE<®>je prvi rFSH koji je dobijen od humane ćelijske linije. Proizvod REKOVELLE<®>(folitropin delta) proizvodi se postupcima koji su otkriveni u međunarodnoj patentnoj prijavi br. PCT/GB2009/000978.

[0014] Dva randomizovana, kontrolisana, multicentrična ispitivanja faze 2 sa paralelnim grupama, slepa za procenjivača, stratifikovana na osnovu anti-Milerovog hormona (AMH), sprovedena su kod IVF/ICSI pacijenata, jedno u Evropi, a drugo u Japanu, sa ciljem utvrđivanja odnosa između doze i odgovora za FE 999049 i dobijenog broja oocita. U oba ispitivanja, randomizacija je stratifikovana na osnovu nivoa AMH na skriningu; niski AMH (5,0–14,9 pmol/l) ili visoki AMH (15,0–44,9 pmol/l). U evropskom ispitivanju doze i odgovora faze 2, ispitivano je pet doza FE 999049 u rasponu od 5,2 µg/dan do 12,1 µg/dan, i takođe je uključena referentna grupa sa odobrenim rFSH proizvodom (GONAL-F<®>, 150 i.j./dan). U japanskom ispitivanju doze i odgovora faze 2, ispitivane su tri doze FE 999049 (6 µg/dan, 9 µg/dan i 12 µg/dan) i takođe je uključena standardna terapija odobrenim rFSH proizvodom (FOLLISTIM<®>, 150 i.j./dan). Folitropin beta (FOLLISTIM<®>) trenutno je jedini medicinski proizvod odobren u Japanu za kontrolisanu stimulaciju jajnika u ciklusima IVF/ICSI.

[0015] U evropskim i japanskim ispitivanjima faze 2, dnevna doza je bila fiksna tokom perioda stimulacije. U oba ispitivanja, uočen je statistički značajan odnos doze i odgovora za FE 999049 u pogledu broja oocita koji su dobijeni za ukupnu populaciju i za svaki nivo AMH randomizacije. Prihvatljive stope trudnoće su ostvarene sa svim dozama FE 999049. Nadalje, uočeni profil doze i odgovora FE 999049 bio je sličan u evropskom ispitivanju i japanskom ispitivanju.

[0016] Ovo ispitivanje je omogućilo razvoj individualizovanih protokola COS za doziranje proizvoda REKOVELLE<®>(folitropin delta, FE 999049).

[0017] Podnosioci predmetne prijave su prethodno otkrili da je obično potrebno da se dobije oko devet oocita kako bi se omogućio odabir dva visoko kvalitetna embriona za transfer.

[0018] Podnosioci predmetne prijave su otkrili da je kod ispitanica koje imaju nizak AMH (AMH < 15 pmol/l po litru) potrebna prilično velika doza folitropina delta (na primer, 12 µg) kako bi se to postiglo. Sa tom dozom, biće dobijeno 8 do 14 oocita od 60% ispitanica sa niskim AMH. To je neočekivano i značajno poboljšanje u odnosu na lečenje ispitanica sa niskim AMH koje se leče sa 150 i.j. GONAL-F<®>, gde je 8 do 14 oocita dobijeno samo od oko 33% ispitanica. Podnosioci predmetne prijave su otkrili da nema potrebe da se ova doza prilagođava prema telesnoj težini pacijentkinje.

[0019] Međutim, 60% populacije (i 80% žena mlađih od 30 godina koje se leče zbog neplodnosti) ima visok AMH (to jest, AMH ≥15 pmol/l). Za ove ispitanice, obično je relativno jednostavno da se dobije u proseku 9 do 11 oocita. Problem kod protokola stimulacije je rizik od OHSS. Podnosioci predmetne prijave su otkrili da kod pacijentkinja kojima su davane male doze folitropina delta postoji odnos između dobijenih oocita i telesne težine ispitanica. To znači da može postojati rizik povezan sa lečenjem fiksnom dozom FSH (koje je uobičajeno u tehnici). Podnosioci predmetne prijave su utvrdili odnos između doze FSH i nivoa AMH i težine ispitanice koji obezbeđuje poboljšan bezbednosni profil (smanjen rizik od OHSS) sa prihvatljivim ili poboljšanim brojem dobijenih oocita u poređenju sa konvencionalnim protokolima lečenja.

[0020] Doziranje leka REKOVELLE<®>je individualizovano za svaku pacijentkinju, i ima za cilj dobijanje odgovora jajnika koji je povezan sa povoljnim profilom bezbednosti/delotvornosti, tj. ima za cilj postizanje adekvatnog broja dobijenih oocita i smanjenje intervencija za sprečavanje OHSS. Lek REKOVELLE<®>se dozira u mikrogramima.

[0021] Za prvi ciklus lečenja, pojedinačna dnevna doza će biti određena na osnovu koncentracije AMH u serumu žene i njene telesne težine. Doza treba da se zasniva na nedavno utvrđenom AMH (tj. tokom poslednjih 12 meseci) koji se meri sledećim dijagnostičkim testom kompanije Roche: ELECSYS<®>AMH Plus imunološki test. Pojedinačna dnevna doza treba da se održava tokom perioda stimulacije.

[0022] Za žene sa AMH <15 pmol/l, dnevna doza leka REKOVELLE<®>je 12 mikrograma, nezavisno od telesne težine.

[0023] Za žene sa AMH ≥15 pmol/l, dnevna doza leka REKOVELLE<®>se smanjuje sa 0,19 na 0,10 mikrograma/kg uz porast koncentracije AMH (tabela A, ispod).

[0024] Doza treba da se zaokruži na najbliža 0,33 mikrograma kako bi se uskladila sa skalom doziranja na injekcionom penu. Maksimalna dnevna doza za prvi ciklus lečenja je 12 mikrograma. Radi izračunavanja doze leka REKOVELLE<®>, telesna težina treba da se izmeri bez obuće i kaputa neposredno pre početka stimulacije.

Tabela A Dozni režim

[0025] Koncentracija AMH se izražava u pmol/l i zaokružuje se na najbliži ceo broj. Ako je koncentracija AMH u ng/ml, koncentracija pre upotrebe treba da se konvertuje u pmol/l množenjem sa 7,14 (ng/ml x 7,14 = pmol/l).

[0026] Lečenje lekom REKOVELLE<®>treba da se započne 2. ili 3. dana nakon početka menstrualnog krvarenja. Lečenje se nastavlja dok se ne ostvari odgovarajući folikularni razvoj (≥3 folikule ≥17 mm), što je u proseku do devetog dana lečenja (raspon 5 do 20 dana). Jedna injekcija od 250 mikrograma rekombinantnog humanog horionskog gonadotropina (hCG) ili 5000 i.j. hCG se primenjuje za indukciju finalnog folikularnog sazrevanja. Kod pacijentkinja sa prekomernim folikularnim razvojem (sa ≥25 folikula ≥12 mm), lečenje lekom REKOVELLE<®>treba obustaviti, i ne treba izvršiti aktiviranje finalnog folikularnog sazrevanja pomoću hCG.

[0027] Za dalje cikluse lečenja, dnevnu dozu leka REKOVELLE<®>treba zadržati ili modifikovati u skladu sa odgovorom jajnika pacijentkinje u prethodnom ciklusu. Ako je pacijentkinja imala adekvatan odgovor jajnika u prethodnom ciklusu bez nastanka OHSS, treba koristiti istu dnevnu dozu. U slučaju hipo-odgovora jajnika u prethodnom ciklusu, dnevnu dozu u sledećem ciklusu treba povećati za 25% ili 50% u skladu sa opsegom uočenog odgovora. U slučaju hiperodgovora jajnika u prethodnom ciklusu, dnevnu dozu u sledećem ciklusu treba smanjiti za 20% ili 33% u skladu sa opsegom uočenog odgovora. Kod pacijentkinja kod kojih se javio OHSS ili su bile pod rizikom od OHSS u prethodnom ciklusu, dnevna doza za sledeći ciklus je 33% niža od doze u ciklusu u kome se javio OHSS ili rizik od OHSS. Maksimalna dnevna doza je 24 mikrograma.

[0028] Delotvornost i bezbednost individualizovanog doznog režima leka REKOVELLE<®>koji se zasniva na AMH u serumu žene i na njenoj telesnoj težini potvrđeni su u velikom ispitivanju faze 3, ESTHER-1 (Ispitivanje stimulacije humanim rFSH u Evropi i ostatku sveta na bazi dokaza, Evidence based Stimulation Trial with Human rFSH in Europe and Rest of World), koje je sprovedeno u 11 zemalja, uključujući Evropu, Severnu Ameriku i Latinsku Ameriku. Ispitivanje ESTHER-1 je sprovedeno na 1326 IVF/ICSI pacijentkinja koje su randomizovane 1:1 za kontrolisanu stimulaciju jajnika jednim od sledećih lečenja: 1) FE 999049 sa individualizovanim doznim režimom gde je dnevna doza fiksna tokom stimulacije, ili 2) odobreni rFSH proizvod dobijen od CHO (folitropin alfa, GONAL-F<®>) sa standardnom početnom dozom od 150 i.j./dan nakon koje sledi prilagođavanje doze na osnovu folikularnog odgovora ispitanice tokom stimulacije. Pokazalo se da FE 999049 sa individualizovanim doznim režimom nije lošiji u odnosu na folitropin alfa u pogledu tekuće stope trudnoće (30,7% prema 31,6%) i tekuće stope implantacije (35,2% prema 35,8%). Za ukupnu populaciju, nije postojala statistički značajna razlika između lečenih grupa u pogledu broja dobijenih oocita, sa prosekom od 10,0 za FE 999049 i 10,4 za folitropin alfa. Bez obzira na to, individualizovani dozni režim FE 999049, u poređenju sa folitropinom alfa, doveo je do statistički značajno više dobijenih oocita kod pacijentkinja sa AMH <15 pmol/l (populacija kod koje postoji rizik od hipoodgovora), sa prosečno 8,0 prema 7,0, i statistički značajno manje oocita kod pacijentkinja sa AMH ≥15 pmol/l (populacija kod koje postoji rizik od hiperodgovora), sa prosečno 11,6 prema 13,3. Neposredan klinički značaj ovog pomaka u odgovoru jajnika sa terapijom pomoću FE 999049 je realizovan kao statistički značajno manje pacijentkinja sa ekstremnim odgovorom jajnika u poređenju sa folitropinom alfa, tj. <4 oocita kod pacijentkinja sa AMH <15 pmol/l (12% prema 18%) i ≥15 ili ≥20 oocita kod pacijentkinja sa AMH ≥15 pmol/l (28% prema 35%, i 10% prema 16%). Procenat pacijentkinja sa adekvatnim odgovorom jajnika, definisan za FE 999049 kao 8–14 oocita, dostignut je kod više pacijentkinja koje su lečene sa FE 999049 u poređenju sa folitropinom alfa, tj. 43% prema 38%, uprkos implementacije prilagođavanja doze tokom stimulacije kod 37% pacijentkinja u grupi sa folitropinom alfa nasuprot individualizovanom doznom režimu sa fiksnom dozom za FE 999049. Uočena je statistički značajno manja ukupna doza gonadotropina u grupi sa FE 999049 u poređenju sa grupom sa proizvodom rFSH dobijenim od CHO, sa prosečno 90 µg, odnosno 104 µg.

[0029] Najozbiljniji rizik koji je povezan sa lečenjem gonadotropinom je sindrom hiperstimulacije jajnika (OHSS). Sveukupno, u ESTHER-1 ispitivanjima faze 3, OHSS i/ili preventivne intervencije za rani OHSS javili su se u 4,4% ciklusa FE 999049 i 6,5% ciklusa folitropina alfa. Umereni/teški OHSS i/ili preventivne intervencije za rani OHSS su uočeni sa učestalošću od 3,3% i 5,6% kod ciklusa lečenja sa FE 999049, odnosno folitropinom alfa.

[0030] Kao što je prethodno objašnjeno, protokoli COS takođe mogu da koriste FSH i aktivnost LH, dok potonji može biti u obliku humanog horionskog gonadotropina (hCG). Humani horionski gonadotropin (hCG) je prirodni glikoprotein koji proizvodi ljudska posteljica. Tokom normalne trudnoće, hCG koji izlučuje posteljica održava žuto telo nakon prestanka izlučivanja LH, što podržava kontinuirano lučenje estrogena i progesterona kako bi se osigurala implantacija embriona i razvoj rane trudnoće. Tokom normalnog menstrualnog ciklusa, LH podržava FSH u razvoju i sazrevanju dominantnog folikula, a pošto je hCG takođe agonist receptora LH, on može preuzeti ovu ulogu LH.

[0031] HCG sadrži alfa podjedinicu od 92 aminokiseline, koja je takođe prisutna kod drugih glikoproteinskih hormona LH i FSH, i beta podjedinicu od 145 aminokiselina koja je jedinstvena za hCG i određuje specifičnost hormona. Svaka podjedinica je posttranslaciono modifikovana dodatkom složenih ugljovodoničnih ostataka. Alfa podjedinica sadrži 2-N-vezana mesta glikozilacije na aminokiselinama 52 i 78, a beta podjedinica sadrži 2-N-vezana mesta glikozilacije na aminokiselinama 13 i 30 i četiri O-vezana mesta glikozilacije na aminokiselinama 121, 127, 132 i 138.

[0032] HCG ekstrahovan iz mokraće trudnica [CHORAGON<®>(Ferring)] godinama je korišćen za lečenje neplodnosti. Proizvodnja hCG ekstrahovanog iz mokraće uključuje prikupljanje i obradu velikih količina mokraće. Rekombinantna verzija hCG, OVITRELLE<®>(Merck Serono), takođe je dostupna i eksprimira se u CHO ćelijama.

[0033] Podnosioci predmetne prijave su razvili rekombinantni hCG dobijen od humane ćelijske linije koji je predmet međunarodne patentne prijave br. PCT/GB2010/001854, koja je objavljena kao WO2011/042688A. Rekombinantni hCG sa smešom α2,3 i α2,6-vezane sijalinske kiseline je napravljen konstruisanjem humane ćelijske linije koja eksprimira rFSH kao i α2,3 sijalilt ransferazu. Eksprimirani proizvod je veoma kiseo, i ima smešu i α2,3- i α2,6-vezanih sijalinskih kiselina; ova druga je obezbeđena putem aktivnosti endogene sijalil transferaze. Rekombinantni hCG sa smešom α2,3 i α2,6-vezane sijalinske kiseline ima dve prednosti u odnosu na rhCG eksprimiran u konvencionalnim CHO ćelijama: prvo, supstanca je u većoj meri sijalilovana usled kombinovanog dejstva dve sijalil transferaze, a drugo, supstanca je u većoj meri slična prirodnom hCG.

[0034] FE 999302 je rekombinantni hCG dobijen od humane ćelijske linije koji se proizvodi postupkom koji je opisan u međunarodnoj patentnoj prijavi br. PCT/GB2010/001854. Tvorac leka FE 999302 je kompanija Ferring Pharmaceuticals, i namenjen je za lečenje neplodnosti kada se daje u vidu svakodnevnih primena, npr. u kombinaciji sa rFSH. FE 999302 se proizvodi u istoj humanoj ćelijskoj liniji kao FE999049 (folitropin delta, REKOVELLE<®>). Ovo je ćelijska linija dobijena od ljudi, PER.C6<®>, što ga razlikuje od OVITRELLE<®>, koji je rekombinantni hCG koji proizvode CHO ćelije. Ćelijska linija PER.C6<®>je generalno već godinama komercijalno dostupna. Nadalje, ćelija Per.C6 je zavedena pod pristupnim brojem 96022940 kod Evropske kolekcije ćelijskih kultura ECACC, UK. Evropska patentna prijava koja se odnosi na zavedeni biološki materijal je EP 1 4453322 A1 koji je podneo Crucell Holland B.V.14. juna 1996. godine. Ova ćelijska linija je bila dostupna na zahtev prema pravilu 33 EPC zaključno sa datumom predmetnog zahteva, pri čemu je i komercijalno dostupna.

[0035] Doze leka FE 999302 koje se primenjuju daju se kao masa, pošto je to predviđeni oblik za finalni proizvod. Ispitivanje faze I je pokazalo da su jedna supkutana primena 4-256 µg FE 999302 i ponovljena primena 8 µg/dan i 16 µg/dan FE 999302 bile bezbedne i dobro podnošene i nisu dovele ni do kakvih nedoumica vezanih za bezbednost. FE 999302 je pokazao poboljšanu farmakokinetiku (AUC) u poređenju sa hCG proizvodom dobijenim od CHO ćelija.

[0036] Nakon uspešnog razvoja individualizovanog lečenja folitropinom delta (REKOVELLE<®>) koje je prethodno opisano, podnosioci predmetne prijave su razvili kombinovanu formulaciju koja sadrži rFSH (REKOVELLE<®>, FE 999049, folitropin delta) kao i rhCG (FE 999302) u optimalnom terapijskom odnosu. U protokolima u kojima se FSH i hCG primenjuju zajedno, pogodno je da dva aktivna sastojka budu u istom preparatu, kako bi se broj injekcija koje se daju pacijentkinji sveo na minimum. Međutim, kada je doziranje individualizovano (tj. doza leka je specifično prilagođena pojedinačnoj pacijentkinji, tako da različite pacijentkinje mogu primati izrazito različite doze) može biti teško da se obezbedi jedna formulacija koja sadrži FSH kao i hCG koja je pogodna za svaku pacijentkinju. Na primer, količina FSH može biti individualizovana prema prethodnom protokolu, ali uključivanje hCG u isti preparat uz fiksni odnos FSH : hCG može značiti, u zavisnosti od količine FSH koja se primenjuje, da je količina hCG previše niska (nedelotvorna) ili previše visoka (nedelotvorna i/ili može dovesti do potencijalno ozbiljnih neželjenih dejstava).

[0037] Podnosioci predmetne prijave su razvili pojedinačne kompozicije koje sadrže FSH kao i hCG sa odnosom FSH prema hCG koji obezbeđuje delotvorno i bezbedno doziranje FSH i hCG bez obzira na nivo AMH i telesnu težinu pacijentkinje. Kompozicije iz zahteva omogućavaju, na primer, individualizovano doziranje FSH na osnovu AMH i, u zavisnosti od nivoa AMH kod pacijentkinje, njene telesne težine, zajedno sa dozom hCG koja je farmaceutski delotvorna. Smatra se da će kliničko ispitivanje faze II koje je predloženo u primeru 1 pokazati da je primena FSH i hCG u naznačenim dozama i odnosu biti naročito delotvorna, npr. u pogledu poboljšanog kvaliteta blastociste i/ili embriona (npr. poboljšani razvoj blastocisti kategorije 3BB ili boljih). Više kvalitetnih blastocisti omogućava više transfera zamrznutih embriona, te stoga i veću kumulativnu stopu trudnoće (tj. kombinaciju svežeg i zamrznutog transfera). Smatra se da je kvalitet blastociste najbolji pokazatelj za projektovanje ispitivanja faze 3 u kome je željeni ishod porast trudnoće i/ili kumulativnih stopa trudnoće. Smatra se da poboljšana implantacija embriona takođe može biti posledica primene FSH i hCG u navedenim dozama i odnosu. Kompozicije iz zahteva takođe mogu biti delotvorne (npr. u većim dozama) za lečenje pacijentkinja koje su imale nedovoljan odgovor jajnika tokom prethodnog lečenja (npr. prethodnog ciklusa COS), na primer, uz smanjen rizik od OHSS.

[0038] Trenutno je poželjno da kompozicija uključuje FE999302, rekombinantni hCG dobijen od humane ćelijske linije (PERC6<®>) koji se proizvodi postupkom koji je opisan u međunarodnoj patentnoj prijavi br. PCT/GB2010/001854. Međutim, biće jasno da u kompoziciji mogu da se koriste drugi proizvodi hCG, kao što su OVITRELLE<®>i CHORAGON<®>.

Opis pronalaska

[0039] Prema predmetnom pronalasku, u prvom aspektu obezbeđena je kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd.

[0040] Poželjno, kompozicija se nalazi u obliku jedne kompozicije (npr. jedne farmaceutske kompozicije) koja sadrži FSH i hCG.

[0041] Kompozicija može biti namenjena za upotrebu, pri čemu se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd.

[0042] Kompozicija može biti namenjena za upotrebu, pri čemu maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1.

[0043] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđena je kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg, na primer 12 µg, dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude 3:1 ili 1,5:1 [npr. dnevna doza od 12 µg rFSH sa dnevnom dozom rhCG od 4 µg (3:1) ili dnevna doza od 12 µg rFSH sa dnevnom dozom rhCG od 8 µg (1,5:1)].

[0044] Rekombinantni FSH i rekombinantni hCG mogu da se primenjuju u dnevnim dozama od 12 µg rekombinantnog FSH sa 4 µg rekombinantnog hCG; ili od 12 µg rekombinantnog FSH sa 8 µg rekombinantnog hCG.

[0045] Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene određenih doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l. Korak identifikacije pacijentkinje (pre lečenja) na osnovu nivoa AMH u serumu pacijentkinje može da se obavi neposredno pre (npr.

0 do 2 dana pre) nego što se doze FSH i hCG prvi put primene na pacijentkinji. Korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje može da se obavi do dvanaest meseci pre prve primene doze na pacijentkinji. Nivo AMH u serumu pacijentkinje se poželjno određuje (ili meri) pomoću ELECSYS<®>AMH Plus imunološkog testa (dostupan od kompanije Roche, iz Švajcarske, vidite www.roche.com).

[0046] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđena je kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu ≥15 pmol/l, pri čemu kompozicija treba da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 12:1, 6:1, 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd.

[0047] Poželjno, kompozicija se nalazi u obliku jedne kompozicije (npr. jedne farmaceutske kompozicije) koja sadrži FSH i hCG.

[0048] Kompozicija može biti namenjena za upotrebu, pri čemu se kompozicija primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd.

[0049] Kompozicija može biti namenjena za upotrebu, pri čemu je dnevna doza rekombinantnog FSH u rasponu od najmanje 6 µg do najviše 12 µg.

[0050] Kompozicija može biti namenjena za upotrebu, pri čemu maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1.

[0051] Prema predmetnom pronalasku, u jednom aspektu obezbeđena je kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu ≥15 pmol/l, pri čemu kompozicija treba da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude 3:1 ili 1,5:1.

[0052] Kompozicija može biti za upotrebu u (i) lečenju pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu od 15 do 24,9 pmol/l, gde se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 0,14 do 0,19 µg po kg telesne težine pacijentkinje dnevno; ili (ii) za upotrebu u lečenju pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu od 25 do 34,9 pmol/l, gde se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 0,11 do 0,14 µg po kg telesne težine pacijentkinje dnevno; ili (iii) za upotrebu u lečenju pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu ≥ 35 pmol/l, gde se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 0,10 do 0,11 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno.

[0053] Lečenje neplodnosti može da uključuje korak identifikacije pacijentkinje (pre lečenja) na osnovu nivoa AMH u serumu. Lečenje neplodnosti može da uključuje korak primene definisanih doza FSH i hCG na pacijentkinji za koju je identifikovano da ima definisani nivo AMH u serumu. Na primer, lečenje neplodnosti može da uključuje korak identifikacije pacijentkinje (pre lečenja) na osnovu nivoa AMH u serumu i telesne težine pacijentkinje, i korak primene doze na pacijentkinji za koju je identifikovano (pre lečenja) da ima AMH ≥ 15 pmol/l (na primer, AMH ≥ 16 pmol/l, na primer, AMH ≥ 19 pmol/l, na primer, AMH ≥ 26 pmol/l, na primer, AMH ≥ 28 pmol/l, na primer, AMH ≥ 40 pmol/l).

[0054] Korak identifikacije pacijentkinje (pre lečenja) na osnovu nivoa AMH u serumu i telesne težine pacijentkinje može da se obavi neposredno pre (npr. 0 do 2 dana pre) nego što se doza prvi put primeni na pacijentkinji. Korak identifikacije pacijentkinje može da se zasniva na nivou AMH u serumu koji je prethodno utvrđen (npr. nivo AMH u serumu koji je utvrđen do dvanaest meseci pre nego što se doza prvi put primeni na pacijentkinji). Nivo AMH u serumu pacijentkinje se poželjno određuje (ili meri) pomoću ELECSYS<®>AMH Plus imunološkog testa (dostupan od kompanije Roche, iz Švajcarske, vidite www.roche.com). Telesna težina pacijentkinje može da se odredi neposredno pre (npr. 0 do 2 dana pre) prve primene doze na pacijentkinji. U koraku određivanja telesne težine pacijentkinje može da se koristi vaga za merenje, kao što je dobro poznato.

[0055] Poželjno, rFSH (npr. rekombinantni FSH dobijen od humane ćelijske linije) uključuje α2,3- i α2,6- sijalilaciju. U rFSH za upotrebu prema pronalasku, 1% do 99% ukupne sijalilacije može biti α2,3-sijalilacija. U rFSH za upotrebu prema pronalasku, 1% do 99% ukupne sijalilacije može biti α2,6-sijalilacija. U rekombinantnom FSH, od 1% do 50% ukupne sijalilacije može biti α2, 6-sijalilacija, a od 50% do 99% ukupne sijalilacije može biti α 2,3-sijalilacija. Poželjno, 80 do 95%, na primer, 80 do 90%, na primer, 82 do 89%, na primer, 85 do 89% ukupne sijalilacije je α2,3-sijalilacija. Poželjno, 5 do 20%, na primer, 10 do 20%, na primer, 11 do 18%, na primer, 11 do 15%, ukupne sijalilacije je α2,6-sijalilacija.

[0056] Rekombinantni hCG poželjno obuhvata α2,6-sijalilaciju i α2,3-sijalilaciju. U rhCG za upotrebu prema pronalasku, od 1% do 99% ukupne sijalilacije može biti α2,3-sijalilacija. U rhCG za upotrebu prema pronalasku, od 1% do 99% ukupne sijalilacije može biti α2,6-sijalilacija. U rekombinantnom hCG, od 1% do 50% ukupne sijalilacije može biti α2, 6-sijalilacija, a od 50% do 99% ukupne sijalilacije može biti α 2,3-sijalilacija. rhCG poželjno može da uključuje dodatne tetra (4S) sijalilovane strukture. rhCG poželjno može dalje da uključuje mono (1S), di (2S), tri (3S) i tetra (4S) sijalilovane strukture. Mono (1S), di (2S), tri (3S) i tetra (4S) sijalilovane strukture su dobro poznate u struci, npr. kao što je opisano u WO2011/042688.

[0057] U ovom tekstu, pod „sijalilacijom“ se podrazumeva količina sijalinskih ostataka koji su prisutni na FSH (ili hCG) ugljovodoničnim strukturama. α2,3-sijalilacija označava sijalilaciju na poziciji 2,3 (kao što je dobro poznato u tehnici), a α2,6 sijalilacija na poziciji 2,6 (takođe dobro poznato u tehnici). Tako, „% ukupne sijalilacije može biti α 2,3 sijalilacija“ odnosi se na % ukupnog broja ostataka sijalinske kiseline prisutnih u FSH (ili hCG) koji su sijalilirani na poziciji 2,3. Termin „% ukupne sijalilacije koja je α2,6-sijalilacija“ odnosi se na % ukupnog broja ostataka sijalinske kiseline prisutnih u FSH (ili hCG) koji su sijalilirani na poziciji 2,6. rFSH i/ili hCG mogu biti prisutni kao jedan izooblik, ili kao smeša izooblika.

[0058] Pacijent je pacijentkinja. Pacijentkinja može imati više od 30 godina, opciono više od 37 godina. Pacijentkinja može imati najmanje jedan neuspešan prethodni ciklus lečenja neplodnosti. U jednom specifičnom primeru, kompozicija je namenjena za lečenje pacijentkinje starije od 30 godina, pri čemu je pacijentkinja prethodno imala najmanje jedan neuspešan ciklus lečenja neplodnosti. Pacijentkinja može imati do tri neuspešna prethodna ciklusa lečenja neplodnosti.

[0059] Lečenje neplodnosti može biti namenjeno za pospešivanje blastocisti dobrog kvaliteta (npr. blastociste kategorije 3BB ili više, npr. lečenje neplodnosti kako bi se povećao broj blastocisti kategorije 3BB ili više 3. i/ili 5. dana nakon dobijanja oocita) i/ili za poboljšanje implantacije embriona. U ovom tekstu, „blastocista dobrog kvaliteta“ se definiše kao blastocista kategorije 3BB ili više (tj.3BB, 3BA, 3AC, 3AB, 3AA, 4CC, 4CB,4CA, 4BC, 4BB, 4BA, 4AC, 4AB, 4AA, 5CC, 5CB, 5CA, 5BC, 5BB, 5BA, 5AC, 5AB, 5AA, 6CC,6CB, 6CA, 6BC, 6BB, 6BA, 6AC, 6AB, 6AA). Lečenje neplodnosti može biti lečenje neplodnosti kako bi se povećao broj blastocisti kategorije 3BB ili više 3. i/ili 5. dana nakon dobijanja oocita (npr. u poređenju sa lečenjem sa Rekovelle<®>ili GONAL-F<®>, vidite, npr. primer 1). Lečenje neplodnosti može biti lečenje neplodnosti kako bi se povećao broj oplođenih (2PN) oocita (npr. u poređenju sa lečenjem sa Rekovelle<®>ili GONAL-F<®>).

[0060] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu je obezbeđena (npr. jedna) farmaceutska kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) pri čemu maseni odnos rekombinantnog FSH prema rekombinantnom hCG (količina rFSH u µg : količina rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1.

[0061] U ovom tekstu, „prvi dan lečenja“, koji se naziva i „prvi dan stimulacije“, odnosi se na prvi dan kada se doza (npr. rekombinantnog) FSH i (npr. rekombinantnog) hCG primenjuje na pacijentkinji. Prvi dan lečenja (stimulacije) može biti 1, 2. ili 3. dana, poželjno 2. dana ili 3.

dana menstrualnog ciklusa pacijentkinje. Drugim rečima, prvi dan lečenja (stimulacije) može biti jedan, dva ili tri dana, poželjno dva ili tri dana, nakon početka menstrualnog krvarenja kod pacijentkinje, kao što se primenjuje u kliničkoj praksi protokola sa antagonistima GnRH ili agonistima GnRH.

[0062] Doza FSH i hCG počinje prvog dana lečenja, i može da se nastavi tokom dva do dvadeset dana, na primer, da se nastavi tokom 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20 dana. Doza FSH i hCG počinje prvog dana lečenja, i može da se nastavi tokom sedam do trinaest dana, na primer, od devet do trinaest dana, na primer, od 10 do 13 dana, na primer, od 10 do 11 dana. Doza FSH i hCG može da se primeni u dozi koja je jednaka dnevnim dozama koje su prethodno navedene. Na primer, kompozicija može biti za primenu u dnevnim dozama od 12 µg FSH i 8 µg hCG, ili ekvivalentu od 36 µg FSH i 24 µg hCG na svaka tri dana (npr. za primenu 1, 4, 7. dana, i tako dalje).

[0063] Kompozicija (npr. farmaceutska kompozicija) ili lek može da se primeni nakon prethodnog lečenja pacijentkinje (različitom) farmaceutskom kompozicijom koja potiskuje endogenu proizvodnju gonadotropina pre prvog dana lečenja sa FSH i hCG (npr. nakon što je ispitanica (prethodno) lečena steroidom, agonistom GnRH, antagonistom GnRH, itd.). U ovom tekstu, termin „prethodno lečena“ ili „prethodno lečenje“ odnosi se na primenu farmaceutske kompozicije koja suzbija endogenu proizvodnju gonadotropina pre prvog dana lečenja sa FSH i hCG, kao što se koristi u kliničkoj praksi sa dugotrajnim protokolima agonista GnRH. Tako, kompozicija (npr. farmaceutska kompozicija) ili lek mogu biti za primenu 12 do 16, npr.13 do 15, npr.14 dana nakon primene (npr. nakon početka primene, npr. nakon početka svakodnevne primene) agonista GnRH (npr. SYNAREL<®>, LUPRON<®>, DECAPEPTYL<®>). Kompozicija može biti za primenu sa agonistom GnRH.

[0064] U drugim primerima, kompozicija (npr. farmaceutska kompozicija) ili lek mogu biti za primenu pre primene antagonista GnRH (npr. GANIRELIX<®>, CETRORELIX<®>), na primer za primenu pet ili šest dana pre primene antagonista GnRH. Proizvod može biti za primenu sa antagonistom GnRH.

[0065] Kompozicija (npr. farmaceutska kompozicija) ili lek su poželjno za primenu pre primene velike doze hCG (na primer, od 4000 do 11.000 i.j. hCG, npr. 5000 i.j. hCG, 10.000 i.j. hCG, itd., ili od 150 do 350 mikrograma rekombinantnog hCG, na primer, 250 mikrograma rekombinantnog hCG) za indukciju finalnog folikularnog sazrevanja.

[0066] Gorenavedene doze mogu biti za lečenje neplodnosti u prvom protokolu stimulacije pacijentkinje (ispitanice). Jasno je da u daljim ciklusima stimulacije doze mogu biti prilagođene u skladu sa stvarnim odgovorom jajnika u prvom ciklusu.

[0067] U svim aspektima poželjno je da lečenje neplodnosti predstavlja ili uključuje korak COS. Pacijent je poželjno pacijentkinja (muškarci nemaju jajnike). Uzrok neplodnosti može biti to što partner žene boluje od muške neplodnosti, mada će biti jasno da je žena je ta koja se leči putem COS.

[0068] Podnosioci predmetne prijave su osmislili „individualizovane“ protokole COS u kojima se specifične doze rekombinantnog FSH sa specifičnim karakteristikama koriste za lečenje pacijentkinja na osnovu njihovih specifičnih nivoa AMH, zajedno sa delotvornom količinom hCG, čime se povećava verovatnoća adekvatnog odgovora na stimulaciju (npr. kod pacijentkinja sa malim potencijalom za odgovor) i/ili sa smanjuje rizik od OHSS (npr. kod pacijentkinja za koje je ocenjeno da imaju veliki ili prekomeran odgovor).

[0069] Nivo AMH u serumu može da se utvrdi (npr. izmeri) bilo kojim validiranim testom AMH. Nivo AMH u serumu može da se izmeri koristeći AMH Gen-II test sa imunosorbentom vezanim za enzim, kao komplet (Beckman Coulter, Inc., Webster, Texas). Nivo AMH u serumu može da se izmeri koristeći automatizovani AMH ACCESS<®>test (Beckman Coulter, Inc., Webster, Texas). Poželjno, nivo AMH u serumu se meri koristeći ELECSYS<®>AMH test kompanije Roche Diagnostics. Mogu da se koriste i drugi testovi.

[0070] U ovom tekstu, vrednosti AMH u serumu se obično navode u pmol/l. To može da se konvertuje u ng/ml koristeći jednačinu za konverziju 1 ng/ml AMH = 7,1 pmol/l AMH.

[0071] U ovom tekstu, termini „pacijentkinja“ i „ispitanica“ se koriste naizmenično.

[0072] U ovom tekstu, termin „lečenje neplodnosti“ obuhvata lečenje neplodnosti kontrolisanom stimulacijom jajnika (COS) ili postupcima koji uključuju korak ili fazu kontrolisane stimulacije jajnika (COS), na primer, in vitro oplodnjom (IVF) ili intracitoplazmatičnom injekcijom sperme (ICSI). Termin „lečenje neplodnosti“ obuhvata lečenje neplodnosti kod ispitanice sa tubarnom ili neobjašnjenom neplodnošću, uključujući lečenje neplodnosti kod ispitanice sa endometriozom, na primer, endometriozom I ili II stadijuma, i/ili kod ispitanice sa anovulatornom neplodnošću, na primer, anovulatornom neplodnošću SZO tipa II i/ili kod ispitanice čiji partner ima muški faktor neplodnosti. Proizvod (ili kompozicija) mogu biti za (upotrebu za) lečenje neplodnosti (i/ili kontrolisanu stimulaciju jajnika) kod ispitanice sa endometriozom, na primer, kod ispitanice koja ima endometriozu stadijuma I ili II, definisanu prema sistemu klasifikacije Američkog društva za reproduktivnu medicinu (The American Society for Reproductive Medicine, ASRM) za različite stadijume endometrioze (stadijum IV najteža, stadijum I najmanje teška) [American Society for Reproductive Medicine. Revidirana klasifikacija endometrioze od strane Američkog društva za reproduktivnu medicinu: 1996. Fertil Steril 1997; 67,817821.].

[0073] Kompozicija ili lek mogu biti za (upotrebu za) lečenje neplodnosti (i/ili kontrolisanu stimulaciju jajnika) kod ispitanice koja ima normalan serumski nivo FSH od 1 do 16 i.j./l, na primer, od 1 do 15 i.j./l, na primer, od 1 do 12 i.j./l, u ranoj folikularnoj fazi.

[0074] Kompozicija ili lek mogu biti za (upotrebu za) lečenje neplodnosti (i/ili za kontrolisanu stimulaciju jajnika) kod ispitanice starosti od 18 do 42 godine, na primer, od 25 do 37 godina ili od 30 do 42 godine. Proizvod može biti za (upotrebu za) lečenje neplodnosti (i/ili za kontrolisanu stimulaciju jajnika) kod ispitanice koja ima BMI >1 i BMI < 35 kg/m<2>, na primer, ispitanice sa BMI >18 i BMI < 32 kg/m<2>, na primer, ispitanice sa BMI >18 i BMI < 25 kg/m<2>, na primer, ispitanice sa BMI >20 i BMI < 25 kg/m<2>.

[0075] rFSH i rhCG mogu biti proizvedeni ili eksprimirani u humanoj ćelijskoj liniji, poželjno PER.C6<®>ćelijskoj liniji. rFSH i rhCG mogu biti proizvedeni ili eksprimirani u ćelijskoj liniji PER.C6<®>, ćelijskoj liniji dobijenoj od PER.C6<®>ili modifikovanoj ćelijskoj liniji PER.C6<®>. rFSH koji je proizveden ili eksprimiran u ćelijskoj liniji PER.C6<®>uključivaće neke α2,6-vezane sijalinske kiseline (α2,6 sijalilacija) dobijene putem aktivnosti endogene sijalil transferaze [ćelijske linije] i uključivaće neke α2,3-vezane sijalinske kiseline (α2,3 sijalilacija) obezbeđene putem aktivnosti endogene sijalil transferaze. Ćelijska linija može da se modifikuje koristeći α2,3-sijalil transferazu. Ćelijska linija može da se modifikuje koristeći α2,6-sijalil transferazu. Alternativno ili dodatno, rFSH može da uključuje α2,6-vezane sijalinske kiseline (α2,6 sijalilacija) obezbeđene putem aktivnosti endogene sijalil transferaze [ćelijske linije]. U ovom tekstu, termin „humano dobijeni rekombinantni FSH“ znači rekombinantni FSH koji je proizveden ili eksprimiran u humanoj ćelijskoj liniji (npr. rekombinantni FSH napravljen konstruisanjem humane ćelijske linije).

[0076] Kompozicija može biti farmaceutska kompozicija. Farmaceutska kompozicija je namenjena lečenju neplodnosti. Lečenje neplodnosti može da obuhvata COS pre MAR. Farmaceutske kompozicije mogu da se koriste, na primer, u medicinskim indikacijama kada se koriste poznati FSH preparati.

[0077] Kompozicija ili farmaceutska kompozicija mogu biti formulisane u dobro poznate kompozicije za bilo koji način primene leka, npr. oralno, rektalno, parenteralno, transdermalno (npr. tehnologija flastera), intravenski, intramuskularno, supkutano, intracisternalno, intravaginalno, intraperitonealno, lokalno (praškovi, melemi ili kapi) ili kao bukalni ili nazalni sprej. Uobičajena kompozicija sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač, kao što je vodeni rastvor, netoksične ekscipijense, uključujući soli i konzervanse, pufere i slično, kao što je, između ostalog, opisano u Remington's Pharmaceutical Sciences, petnaesto izdanje (Matt Publishing Company, 1975), na stranama 1405 do 1412 i 1461 – 87, i u National formulary XIV, četrnaesto izdanje (American Pharmaceutical Association, 1975).

[0078] Primeri odgovarajućih vodenih i nevodenih farmaceutskih nosača, razblaživača, rastvarača ili vehikuluma uključuju vodu, etanol, poliole (kao što je glicerol, propilen glikol, polietilen glikol, i slično), karboksimetil celulozu i njene odgovarajuće smeše, biljna ulja (kao što je maslinovo ulje) i injektabilne organske estre, kao što je etil oleat. Kompozicije iz predmetnog pronalaska takođe mogu da sadrže aditive kao što su, bez ograničenja, konzervansi, kvašljivci, emulgatori, surfaktanti i agensi za disperziju. Antibakterijski i antifungalni agensi mogu biti uključeni radi sprečavanja rasta mikroba i uključuju, na primer, m-krezol, benzil alkohol, paraben, hlorbutanol, fenol, sorbinsku kiselinu, i slično. Ako je uključen konzervans, poželjni su benzil alkohol, fenol i/ili m-krezol. Međutim, konzervans ni u kom slučaju nije ograničen na ove primere. Nadalje, može biti poželjno da se uključe izotonični agensi kao što su šećeri, natrijum hlorid, aminokiseline i slično.

[0079] Kompozicija ili lek poželjno sadrže rekombinantni FSH i rekombinantni hCG i jedno ili više od polisorbata 20, L-metionina, fenola i arginin hidrohlorida.

[0080] Injektabilne formulacije mogu biti sterilisane, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije, ili inkorporacijom sterilišućih agensa u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje mogu da se rastvore ili disperguju u sterilnoj vodi ili drugom sterilnom injektabilnom medijumu neposredno pre upotrebe. Injektabilne formulacije mogu da se dostave u bilo kojoj odgovarajućoj ambalaži, npr. bočici, prethodno napunjenom špricu, ulošku za injekciju, i slično.

[0081] Kompozicija ili lek mogu biti formulisani za jednokratnu upotrebu ili za višekratnu upotrebu (više doza). Ako su kompozicija ili lek formulisani za višekratnu upotrebu, poželjno je da bude uključen jedan ili više konzervansa. Ako je uključen konzervans, poželjni su benzil alkohol, fenol ili m-krezol. Međutim, konzervans ni u kom slučaju nije ograničen na ove primere. Kompozicija ili lek formulisani za jednokratnu ili višekratnu upotrebu mogu dalje da sadrže aminokiselinu ili kombinaciju aminokiselina. Aminokiselina je poželjno arginin, na primer, dodaje se kao arginin, ili poželjnije kao arginin hidrohlorid.

[0082] Kompozicija ili lek mogu biti dati u ambalaži kao što je bočica, prethodno napunjeni uložak (npr. za jednokratnu primenu ili za višekratnu upotrebu) ili sredstvo za ubrizgavanje kao što je „pen“, npr. za primenu višekratnih doza.

[0083] Kompozicija ili farmaceutska kompozicija može biti formulacija (npr. injektabilna formulacija) koja sadrži FSH i hCG. Kompozicija ili lek mogu biti dostavljeni u bilo kom odgovarajućem pakovanju. Na primer, kompozicija ili lek mogu da uključuju više ambalaža (npr. prethodno napunjenih špriceva ili bočica) koje sadrže FSH kao i hCG. Špricevi ili bočice mogu biti zapakovani u blister pakovanje ili druga sredstva za očuvanje sterilnosti. Svaka kompozicija ili lek može opciono da sadrži uputstvo za upotrebu formulacije FSH i hCG.

[0084] pH i tačna koncentracija različitih komponenti farmaceutske kompozicije su prilagođeni u skladu sa rutinskom praksom u ovoj oblasti. Vidite GOODMAN and GILMAN's THE PHARMACOLOGICAL BASIS FOR THERAPEUTICES, 7. izdanje. U poželjnom otelotvorenju, kompozicija ili lek iz pronalaska se isporučuju kao kompozicije za parenteralnu primenu. Opšti postupci za pripremu parenteralnih formulacija su poznati u struci i opisani su u REMINGTON; THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, gore, na stranama 780–820. Parenteralne kompozicije mogu biti isporučene u tečnoj formulaciji ili kao čvrsta supstanca koja će se pomešati sa sterilnim injektabilnim medijumom neposredno pre primene.

U naročito poželjnom otelotvorenju, parenteralne kompozicije su isporučene u jediničnom doznom obliku radi lakoće primene i uniformnosti doze.

[0085] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđen je postupak za lečenje neplodnosti kod (npr. ženskog) pacijenta koji ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l, koji obuhvata korak primene na pacijentkinji (npr. jedne) kompozicije koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) poželjno iznosi 3:1 ili 1,5:1. Rekombinantni FSH i rekombinantni hCG poželjno treba da se primenjuju u dnevnim dozama od 12 µg rekombinantnog FSH sa 4 µg rekombinantnog hCG; ili 12 µg rekombinantnog FSH sa 8 µg rekombinantnog hCG. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene određenih doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l.

[0086] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđen je postupak za lečenje neplodnosti kod (npr. ženskog) pacijenta koji ima nivo AMH u serumu ≥15 pmol/l, koji obuhvata korak primene na pacijentkinji (npr. jedne) kompozicije koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu se kompozicija primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Kompozicija može da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Dnevna doza rekombinantnog FSH poželjno je u rasponu od minimalne doze od 6 µg do maksimalne doze od 12 µg. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) poželjno je 3:1 ili 1,5:1. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima definisani nivo AMH u serumu.

[0087] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđena je upotreba rekombinantnog folikulostimulišućeg hormona (FSH) i rekombinantnog humanog horionskog gonadotropina (hCG) u proizvodnji (jednog) leka za lečenje neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1. Rekombinantni FSH i rekombinantni hCG poželjno treba da se primenjuju u dnevnoj dozi od 12 µg rekombinantnog FSH sa 4 µg rekombinantnog hCG; ili 12 µg rekombinantnog FSH sa 8 µg rekombinantnog hCG. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene određenih doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l.

[0088] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđena je upotreba rekombinantnog folikulostimulišućeg hormona (FSH) i rekombinantnog humanog horionskog gonadotropina (hCG) u proizvodnji (jednog) leka za lečenje neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu ≥15 pmol/l, pri čemu kompozicija treba da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Kompozicija može da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1, na primer 3:1 ili 1,5:1. Ovaj odnos (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti, na primer, 12:1, 6:1, 3:1, 2:1, 1,5:1, 1:1, itd. Dnevna doza rekombinantnog FSH može biti u rasponu od najmanje 6 µg do najviše 12 µg. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) poželjno iznosi 3:1 ili 1,5:1. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima definisani nivo AMH u serumu.

[0089] Kompozicije iz pronalaska mogu da se koriste, na primer, u većim dozama, za lečenje pacijentkinja koje su prošle prethodno lečenje neplodnosti, ili kod kojih su iz drugih razloga potrebne veće doze FSH.

[0090] Tako, prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu je obezbeđena kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja je prošla prethodno lečenje neplodnosti (npr. prethodno lečenje neplodnosti putem kontrolisane stimulacije jajnika) u kome je (od pacijentkinje) dobijeno 5 do 7 oocita, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti 3:1 ili 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 15 µg dnevno, a rekombinantni hCG se primenjuje u dozi od 5 µg dnevno ili 7,5 µg dnevno.

[0091] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđena je kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja je prošla prethodno lečenje neplodnosti (npr. prethodno lečenje neplodnosti putem kontrolisane stimulacije jajnika) u kome je (od pacijentkinje) dobijeno 0 do 4 oocita ili prethodno lečenje neplodnosti koje je otkazano usled nedovoljnog odgovora jajnika, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti 3:1 ili 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 20 µg dnevno, a rekombinantni hCG se primenjuje u dozi od 6,67 µg dnevno ili 13,33 µg dnevno.

[0092] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđena je kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

[0093] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu je obezbeđena kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

[0094] U ovim aspektima pronalaska, lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene doze rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l. Rekombinantni FSH može da uključuje α2,6-sijalilaciju i α2,3-sijalilaciju, opciono pri čemu, od 1% do 50% ukupne sijalilacije može biti α2, 6-sijalilacija, a od 50% do 99% ukupne sijalilacije može biti 2,3-sijalilacija. Rekombinantni hCG može da uključuje α2,6-sijalilaciju i α2,3-sijalilaciju, opciono pri čemu hCG uključuje mono (1S), di (2S), tri (3S) i tetra (4S) sijalilovane strukture. Pacijentkinja može biti starija od 30 godina i/ili je prethodno neuspešno prošla najmanje jedan ciklus lečenja neplodnosti. Lečenje neplodnosti može da promoviše blastociste dobrog kvaliteta (npr. blastociste kategorije 3BB ili više (tj.3BB, 3BA, 3AC, 3AB, 3AA, 4CC, 4CB,4CA, 4BC, 4BB, 4BA, 4AC, 4AB, 4AA, 5CC, 5CB, 5CA, 5BC, 5BB, 5BA, 5AC, 5AB, 5AA, 6CC,6CB, 6CA, 6BC, 6BB, 6BA, 6AC, 6AB, 6AA) npr. povećava broj blastocisti kategorije 3BB ili više 3. dana i/ili 5. dana nakon dobijanja oocita) ili da poboljša implantaciju embriona.

[0095] Ovi aspekti pronalaska uključuju odgovarajuće postupke lečenja i upotrebu FSH i hCG u proizvodnji lekova za upotrebu u odgovarajućim lečenjima.

[0096] Kompozicije iz pronalaska generalno obuhvataju pojedinačne kompozicije koje sadrže FSH kao i hCG.

[0097] Međutim, u drugim aspektima pronalaska su obezbeđeni proizvodi koji sadrže zasebne kompozicije FSH i hCG koje mogu da se primenjuju zasebno ili zajedno.

[0098] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđen je proizvod za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l, pri čemu proizvod obuhvata kompoziciju koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i (npr. zasebnu) kompoziciju koja sadrži rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti 3:1 ili 1,5:1. Rekombinantni FSH i rekombinantni hCG mogu da se primenjuju u dnevnim dozama od 12 µg rekombinantnog FSH sa 4 µg rekombinantnog hCG; ili od 12 µg rekombinantnog FSH sa 8 µg rekombinantnog hCG. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene određenih doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l.

[0099] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu obezbeđen je proizvod za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu ≥15 pmol/l, pri čemu proizvod obuhvata kompoziciju koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i (npr. zasebnu) kompoziciju koja sadrži rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. rFSH može da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Dnevna doza rekombinantnog FSH može biti u rasponu od najmanje 6 µg do najviše 12 µg. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti 3:1 ili 1,5:1. Proizvod može biti za upotrebu u (i) lečenju pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu od 15 do 24,9 pmol/l, pri čemu se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 0,14 do 0,19 µg po kg telesne težine pacijentkinje dnevno; ili (ii) za upotrebu u lečenju pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu od 25 do 34,9 pmol/l, pri čemu se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 0,11 do 0,14 µg po kg telesne težine pacijentkinje dnevno; ili (iii) za upotrebu u lečenju pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu ≥ 35 pmol/l, pri čemu se rekombinantni FSH primenjuje u dozi od 0,10 do 0,11 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima definisani nivo AMH u serumu.

[0100] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu je obezbeđen proizvod za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja je prošla prethodno lečenje neplodnosti (npr. prethodno lečenje neplodnosti putem kontrolisane stimulacije jajnika) u kome je (od pacijentkinje) dobijeno 5 do 7 oocita, pri čemu proizvod obuhvata kompoziciju koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i (npr. zasebnu) kompoziciju koja sadrži rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti 3:1 ili 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 15 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje u dozi od 5 µg dnevno ili 7,5 µg dnevno. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene određenih doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l.

[0101] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu je obezbeđen proizvod za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja je prošla prethodno lečenje neplodnosti (npr.

prethodno lečenje neplodnosti putem kontrolisane stimulacije jajnika) u kome je (od pacijentkinje) dobijeno 0 do 4 oocita ili prethodno lečenje neplodnosti koje je otkazano usled nedovoljnog odgovora jajnika, pri čemu proizvod obuhvata kompoziciju koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i (npr. zasebnu) kompoziciju koja sadrži rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1. Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) može biti 3:1 ili 1,5:1. Rekombinantni FSH može da se primenjuje u dozi od 20 µg dnevno, a rekombinantni hCG može da se primenjuje u dozi od 6,67 µg dnevno ili 13,33 µg dnevno. Lečenje neplodnosti može da obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene određenih doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l.

[0102] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu je obezbeđen proizvod za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje, pri čemu proizvod obuhvata kompoziciju koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i (npr. zasebnu) kompoziciju koja sadrži rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

[0103] Prema predmetnom pronalasku, u daljem aspektu je obezbeđen proizvod za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje, pri čemu proizvod obuhvata kompoziciju koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i (npr. zasebnu) kompoziciju koja sadrži rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG), pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

[0104] Rekombinantni FSH može da uključuje α2,6-sijalilaciju i α2,3-sijalilaciju, opciono pri čemu, od 1% do 50% ukupne sijalilacije može biti α2, 6-sijalilacija, a od 50% do 99% ukupne sijalilacije može biti 2,3-sijalilacija. Rekombinantni hCG može da uključuje α2,6-sijalilaciju i α2,3-sijalilaciju, opciono pri čemu hCG uključuje mono (1S), di (2S), tri (3S) i tetra (4S) sijalilovane strukture. Pacijentkinja može biti starija od 30 godina i/ili je prethodno neuspešno prošla najmanje jedan ciklus lečenja neplodnosti. Lečenje neplodnosti može da promoviše blastociste dobrog kvaliteta (npr. blastociste kategorije 3BB ili više (tj.3BB, 3BA, 3AC, 3AB, 3AA, 4CC, 4CB,4CA, 4BC, 4BB, 4BA, 4AC, 4AB, 4AA, 5CC, 5CB, 5CA, 5BC, 5BB, 5BA, 5AC, 5AB, 5AA, 6CC,6CB, 6CA, 6BC, 6BB, 6BA, 6AC, 6AB, 6AA) npr. povećava broj blastocisti kategorije 3BB ili više 3. dana i/ili 5. dana nakon dobijanja oocita) ili da poboljša implantaciju embriona.

[0105] Ovi aspekti pronalaska uključuju odgovarajuće postupke lečenja i upotrebu FSH i hCG u proizvodnji lekova za upotrebu u odgovarajućim lečenjima.

Definicije

[0106] Tehnički i naučni termini koji se ovde koriste imaju značenje koje je uobičajeno poznato osobi sa uobičajenim znanjem i veštinama u oblasti medicinski asistirane reprodukcije kojoj predmetni pronalazak pripada, osim ako nije drugačije definisano. Ovde se upućuje na različite metodologije koje su poznate osobama sa uobičajenim znanjem i veštinama u oblasti. Bilo koji pogodni materijali i/ili postupci koji su poznati osobama sa uobičajenim znanjem i veštinama u ovoj oblasti mogu da se koriste u praktikovanju predmetnog pronalaska. Međutim, opisani su konkretni materijali i postupci. Materijali, reagensi i slično na koje se upućuje u sledećem opisu i primerima mogu da se pribave iz komercijalnih izvora, osim ako nije drugačije naznačeno.

[0107] Treba razumeti da bilo koje definicije i termini koji su ovde definisani treba da imaju isto značenje i namenu u bilo kojim aspektima i otelotvorenjima pronalaska, osim ako izričito nije navedeno drugačije.

[0108] Kao što se ovde koriste, oblici za jedninu označavaju i jedninu i množinu, osim ako nije izričito naznačeno da označavaju samo jedninu.

[0109] Kao što se ovde koristi, termin „oko“ znači da broj ili raspon nije ograničen na tačan broj ili raspon koji je prikazan, već obuhvata raspone oko navedenog broja ili raspona, kao što će biti jasno osobama sa uobičajenim znanjem i veštinama u ovoj oblasti u zavisnosti od konteksta u kome se broj ili raspon koristi. Osim ako nije na drugi način jasno na osnovu konteksta ili dogovora u struci, „oko“ znači do plus ili minus 10% konkretnog termina.

[0110] U ovom tekstu, termini „pacijentkinja“ i „ispitanica“ se koriste naizmenično.

[0111] Maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) od 1,5:1 isti je kao maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) od 3:2. Tako, za kompozicije za upotrebu prema pronalasku gde rekombinantni FSH i rekombinantni hCG treba da se primenjuju u dnevnoj dozi od 12 µg rekombinantnog FSH sa 8 µg rekombinantnog hCG ovde može da se kaže da imaju maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) od 1,5:1 ili 3:2.

[0112] Dnevne doze rFSH i rhCG su date u mikrogramima, što može da se prikaže skraćenicom µg ili mcg.

[0113] U ovom tekstu, termin „lečenje neplodnosti“ obuhvata lečenje neplodnosti kontrolisanom stimulacijom jajnika (COS) ili postupcima koji uključuju korak ili fazu kontrolisane stimulacije jajnika (COS), na primer, in vitro oplodnjom (IVF) ili intracitoplazmatičnom injekcijom sperme (ICSI). Termin „lečenje neplodnosti“ obuhvata lečenje neplodnosti kod ispitanice sa tubarnom ili neobjašnjenom neplodnošću, uključujući lečenje neplodnosti kod ispitanice sa endometriozom, na primer, endometriozom I ili II stadijuma, i/ili kod ispitanice čiji partner ima muški faktor neplodnosti. Kompozicija može biti za (upotrebu za) lečenje neplodnosti (i/ili kontrolisanu stimulaciju jajnika) kod ispitanice sa endometriozom, na primer, kod ispitanice koja ima endometriozu stadijuma I ili II, definisanu prema sistemu klasifikacije Američkog društva za reproduktivnu medicinu (The American Society for Reproductive Medicine, ASRM) za različite stadijume endometrioze (stadijum IV najteža, stadijum I najmanje teška) [American Society for Reproductive Medicine. Revidirana klasifikacija endometrioze od strane Američkog društva za reproduktivnu medicinu: 1996. Fertil Steril 1997; 67,817821.].

[0114] Termin „agonist GnRH“ u ovom tekstu označava agonist gonadotropin oslobađajućeg hormona. Agonisti GnRH su klasa lekova koji deluju kao agonisti receptora gonadotropin oslobađajućeg hormona (receptor GnRH), koji je biološka meta gonadotropin oslobađajućeg hormona.

[0115] Termin „antagonist GnRH“ u ovom tekstu označava antagonist gonadotropin oslobađajućeg hormona. Antagonisti GnRH su klasa lekova koji antagonizuju receptor gonadotropin oslobađajućeg hormona (receptor GnRH), te tako i dejstvo gonadotropin oslobađajućeg hormona (GnRH).

[0116] Termin „folikul“ u ovom tekstu označava folikul jajnika koji je mehur ispunjen tečnošću koji sadrži nezrelu jajnu ćeliju, ili oocit.

[0117] Blastocista nastaje tokom ranog razvoja ljudi (ili drugih sisara). Kod ljudi, formiranje blastociste počinje oko 5 dana nakon oplodnje. Upotreba blastocisti u (IVF) obično uključuje dobijanje (izolovanje) od žene više oocita dobijenih u ciklusu kontrolisane stimulacije jajnika; oplodnju (inseminaciju) jednog ili više oocita i uzgajanje oplođene jajne ćelije (oocita) tokom pet dana radi nastanka blastociste (tj. omogućavanje da se oplođeni oocit razvije do stadijuma blastociste); i implantaciju blastociste u matericu.

[0118] Prema svim aspektima koji su ovde opisani, poželjno je da lečenje neplodnosti koje je ovde opisano predstavlja ili uključuje korak COS. Uzrok neplodnosti može biti to što partner žene boluje od muške neplodnosti, mada će biti jasno da, prema predmetnom pronalasku, žena je ta koja se leči putem COS.

[0119] Lečenje neplodnosti, kao što je ovde opisano, može biti namenjeno i delotvorno za razvoj više folikula i trudnoću nakon transfera svežeg i/ili krioprezerviranog embriona kod ovulatornih žena koje su podvrgnute tehnikama medicinski asistirane reprodukcije (MAR).

[0120] Lečenje neplodnosti, kao što je ovde opisano, može biti namenjeno i delotvorno za pospešivanje blastocisti dobrog kvaliteta (npr. blastociste kategorije 3BB ili više, npr. lečenje neplodnosti kako bi se povećao broj blastocisti kategorije 3BB ili više 5. dana nakon dobijanja oocita) i/ili za poboljšanje implantacije embriona. U ovom tekstu, „blastocista dobrog kvaliteta“ se definiše kao blastocista kategorije 3BB ili više (tj.3BB, 3BA, 3AC, 3AB, 3AA, 4CC, 4CB,4CA, 4BC, 4BB, 4BA, 4AC, 4AB, 4AA, 5CC, 5CB, 5CA, 5BC, 5BB, 5BA, 5AC, 5AB, 5AA, 6CC,6CB, 6CA, 6BC, 6BB, 6BA, 6AC, 6AB, 6AA). Lečenje neplodnosti može biti lečenje neplodnosti kako bi se povećao broj blastocisti kategorije 3BB ili više 5. dana nakon dobijanja oocita (npr. u poređenju sa lečenjem sa Rekovelle<®>ili GONAL-F<®>). Lečenje neplodnosti može biti lečenje neplodnosti kako bi se povećao broj oplođenih (2PN) oocita (npr. u poređenju sa lečenjem sa Rekovelle<®>ili GONAL-F<®>).

[0121] Kao što se koristi u ovom tekstu, „prvi dan lečenja“, koji se naziva i „prvi dan stimulacije“, odnosi se na prvi dan kada se doza (npr. rekombinantnog) FSH primenjuje na pacijentkinji. Prvi dan lečenja (stimulacije) može biti 1, 2. ili 3. dana, na primer, 2. dana ili 3. dana menstrualnog ciklusa pacijentkinje. Drugim rečima, prvi dan lečenja (stimulacije) može biti jedan, dva ili tri dana, na primer, dva ili tri dana, nakon početka menstrualnog krvarenja kod pacijentkinje, što je dosledno upotrebi ovog termina u kliničkoj praksi protokola sa antagonistima GnRH ili agonistima GnRH. Termin „tokom lečenja“ odnosi se na dan ili na dane kada se FSH primenjuje na pacijentkinji.

Primeri

Primer 1: Randomizovano, dvostruko slepo, placebom kontrolisano, ispitivanje doznog raspona sa paralelnim grupama za ispitivanje delotvornosti i bezbednosti FE 999302 kao dodatka lečenju folitropinom delta (REKOVELLE<®>) kod žena koje su podvrgnute kontrolisanoj stimulaciji jajnika u dugotrajnom protokolu agonista GnRH

[0122] FE 999302 je rekombinantni humani horiogonadotropin (rhCG) koji razvija kompanija Ferring Pharmaceuticals i namenjen je za lečenje neplodnosti kada se daje u vidu svakodnevnih primena u kombinaciji sa rekombinantnim folikulostimulišućim hormonom (rFSH). FE 999302 je proizveden u ćelijskoj liniji dobijenoj od ljudi, PER.C6<®>, što ga razlikuje od OVITRELLE<®>, koji je rekombinantni hCG koji proizvode ćelije jajnika kineskog hrčka (CHO). Doze leka FE 999302 koje se primenjuju daju se kao masa, pošto je to predviđeni oblik za finalni proizvod. FE 999302 je proizveden postupkom koji je opisan u međunarodnoj patentnoj prijavi br. PCT/GB2010/001854, koja je objavljena kao WO2011/042688A. Ispitivanje faze I je pokazalo da su jedna supkutana primena 4-256 µg FE 999302 i ponovljena primena 8 µg dnevno i 16 µg FE 999302 dnevno bile bezbedne i dobro podnošene, i nisu dovele ni do kakvih nedoumica vezanih za bezbednost. Nakon jedne primene rhCG kod muškaraca sa smanjenom regulacijom, prosečna AUC je bila 1,5 puta veća za FE 999302 nego za rhCG eksprimiran u CHO ćelijama. Prosečna Cmax je bila slična za ova dva preparata. U skladu sa razlikama za AUC, uočeni klirens (tj. odnos CL/F) bio je niži za FE 999302 (CL/F 0,5 u odnosu na 0,8 l/h), što se objašnjava dužim terminalnim poluživotom (47 u odnosu na 32 sata). Uočene distribucione zapremine (Vz/F) bile su uporedive. Koncentracije testosterona (predstavljaju odraz proizvodnje testosterona kao odgovor na izloženost hCG) prikazivale su farmakokinetičke profile sa blagim zakašnjenjem, što je dovelo do 59% veće AUC sa FE 999302. Farmakokinetički parametri za FE 999302 su bili uporedivi kod muškaraca i žena pri dozi od 125, odnosno 128 µg.

Materijali i postupci

[0123] Ovo je multicentrično, dvostruko slepo, randomizovano ispitivanje faze 2 doznog raspona sa paralelnim grupama za procenu delotvornosti i bezbednosti FE 999302 kao dodatka lečenju folitropinom delta (REKOVELLE<®>) kod pacijentkinja u prvom ili drugom ciklusu starosti od 30 do 42 godine koje su podvrgnute kontrolisanoj stimulaciji jajnika u dugotrajnom protokolu agonista GnRH. Ovo ispitivanje je osmišljeno tako da pokaže dodatno dejstvo FE 999302 na kvalitet blastociste i druge klinički relevantne indikatore koji se odnose na sveukupan uspešan ishod lečenja. Smatra se da je kvalitet blastociste najbolji pokazatelj za projektovanje ispitivanja faze 3 u kome je željeni ishod porast trudnoće i/ili kumulativnih stopa trudnoće.

[0124] Cilj ovog ispitivanja faze II doznog raspona je da se utvrdi delotvornost i bezbednost FE999302 kada se primenjuje kao dodatak lečenju folitropinom delta za COS pre MAR. Na osnovu prethodnih kontrolisanih ispitivanja u kojima je FSH dopunjen sa hCG radi COS, očekuje se da lečenje sa FE999302 može da poboljša ukupan broj blastocisti dobrog kvaliteta kao i implementaciju nakon transfera svežeg embriona. Porast broja blastocisti dobrog kvaliteta i unapređenje implementacije će povećati promenu statusa trudnoće u ciklusu lečenja nakon transfera svežeg embriona. Veći broj blastocisti dobrog kvaliteta će takođe dovesti do više krioprezerviranih blastocisti sa potencijalom za transfer zamrznutog embriona, čime se povećava kumulativna stopa trudnoće za bilo koji ciklus lečenja.

[0125] Pošto je terapijski okvir za FE 999302 relativno nepoznat, ovo ispitivanje faze 2 doznog raspona je osmišljeno da ispita delotvornost i bezbednost širokog doznog raspona FE 999302 kada se primenjuje u kombinaciji sa folitropinom delta za COS pre MAR. U ovom ispitivanju, COS neće biti ugrožen pošto će sve podobne ispitanice primiti individualizovanu dozu folitropina delta na osnovu nivoa AMH u serumu na skriningu ili do 3 meseca pre skrininga i telesne težine prilikom randomizacije.

[0126] Planirana je randomizacija 600 ispitanica, pri čemu će približno 500 ispitanica biti randomizovano da prima jednu od 5 doza FE 999302 (1, 2, 4, 8 ili 12 µg), a približno 100 ispitanica da prima placebo. Procenjeno je da do 660 ispitanica treba da prođe skrining kako bi se dobilo 600 ispitanica koje su podobne za randomizaciju.

Kriterijumi za uključivanje

[0127]

1. Dokumenti informisanog pristanka koji su potpisani pre procena koje se vrše na skriningu.

2. Ispitanica je po proceni istraživača dobrog fizičkog i mentalnog zdravstvenog stanja.

3. Nivoi anti-Milerovog hormona (AMH) na skriningu 5,0-35,0 pmol/l (na osnovu ELECSYS<®>AMH Plus imunološkog testa [Roche Diagnostics] koji se obavlja u centralnoj laboratoriji).

4. Predmenopauzalne žene starosti od 30 do 42 godine. Ispitanice moraju imati najmanje 30 godina (uključujući 30. rođendan) i najviše 42 godina (sve do jednog dana pre 43. rođendana) prilikom potpisivanja obrasca informisanog pristanka.

5. Neplodne žene kojima je dijagnostikovana tubarna neplodnost, neobjašnjiva neplodnost, endometrioza stadijuma I/II ili sa partnerom kome je dijagnostikovan muški faktor neplodnosti, pogodne za lečenje in vitro oplodnjom (IVF) i/ili intracitoplazmatskom injekcijom sperme (ICSI) koristeći svežu ili zamrznutu ejakulisanu spermu muškog partnera ili donora sperme.

eplodnost u trajanju od najmanje godinu dana pre skrininga za ispitanice <35 godina ili najmanje 6 meseci za ispitanice ≥35 godina (nije primenljivo u slučaju tubarne neplodnosti ili teškog muškog faktora neplodnosti).

iklus u okviru ovog ispitivanja će ispitanici biti prvi ili drugi ciklus kontrolisane stimulacije jajnika i ispitanica mora biti podobna za individualizovano lečenje folitropinom delta na osnovu telesne težine i AMH, tj. nije dozvoljen prethodni ciklus sa folitropinom delta.

edovni menstrualni ciklusi od 24–35 dana (uključujući krajnje vrednosti), za koje se pretpostavlja da su ovulatorni.

isterosalpingografija, histeroskopija, sonografija sa infuzijom fiziološkog rastvora ili transvaginalni ultrazvuk koji dokumentuju matericu konzistentnu sa očekivanom normalnom funkcijom (npr. nema dokaza o postojanju klinički ometajućih fibroida materice koji se definišu kao submukozni ili intramuralni fibroidi veći od 3 cm u prečniku, nema polipa ni kongenitalnih strukturnih anomalija povezanih sa smanjenom verovatnoćom trudnoće) u roku od 6 meseci pre skrininga.

Transvaginalni ultrazvuk koji dokumentuje prisustvo i adekvatnu vizuelizaciju oba jajnika, bez dokaza o postojanju značajnih anomalija (npr. uvećani jajnici koji bi kontraindikovali upotrebu gonadotropina) i normalni adneksi (npr. bez hidrosalpinksa) u roku od 1 godine pre skrininga. Oba jajnika moraju biti pristupačna za dobijanje oocita.

Nivoi FSH u serumu u ranoj folikularnoj fazi (2-5. dan ciklusa) od 1 do 15 i.j./l (na osnovu merenja u centralnoj laboratoriji).

12. Negativni testovi za utvrđivanje prisustva antitela na površinski antigen hepatitisa B (HBsAg), virus hepatitisa C (HCV) i virus humane imunodeficijencije (HIV) u serumu u roku od 1 godine pre randomizacije.

13. Indeks telesne mase (BMI) od 17,5 do 32,0 kg/m2 (uključujući obe vrednosti) prilikom skrininga.

14. Smanjena regulacija potvrđena u roku od 28 dana nakon prve primene agonista GnRH.

15. Ispitanica je voljna da pristane na ICSI bez obzira na uzrok neplodnosti.

16. Ako ispitanica ima ≤37 godina, voljna je da pristane na transfer jedne blastociste. Ako ispitanica ima ≥38 godina, voljna je da pristane na transfer jedne blastociste dobrog kvaliteta ili transfer najviše 2 blastociste ako nema dostupne blastociste dobrog kvaliteta.

17. Ispitanica je voljna da pristane na transfer najviše 2 blastociste po transferu u ciklusima sa krioprezerviranim blastocistama poreklom iz ciklusa ispitivanja i obavljenog u roku od 1 godine nakon randomizacije.

Kriterijumi za isključivanje

[0128]

1. Poznato postojanje sindroma policističnih jajnika (PCOS) povezano sa anovulacijom ili poznato postojanje endometrioze stadijuma III–IV (definisano prema revidiranoj klasifikaciji Američkog društva za reproduktivnu medicinu (The American Society for Reproductive Medicine, ASRM), 1996).

2. Loš odgovor u prethodnom ciklusu kontrolisane stimulacije jajnika na IVF/ICSI, definisan kao nastanak <4 folikula sa prečnikom ≥12 mm.

3. Preteran odgovor jajnika u prethodnom ciklusu kontrolisane stimulacije jajnika na IVF/ICSI, definisan kao nastanak ≥25 folikula sa prečnikom ≥12 mm.

edan ili više folikula ≥10 mm (uključujući ciste) primećeno na transvaginalnom ultrazvuku nakon nishodne regulacije pre randomizacije 1. dana stimulacije (pucanje ciste pre randomizacije je dozvoljeno).

oznata istorija ponovljenih pobačaja (definisana kao tri uzastopna gubitka trudnoće nakon potvrde trudnoće ultrazvukom [ne uključujući vanmateričnu trudnoću] i pre 24. nedelje trudnoće).

oznat abnormalni kariotip ispitanice ili njenog partnera / donora sperme, kako je primenljivo, u zavisnosti od porekla sperme koja se u ovom ispitivanju koristi za inseminaciju. U slučaju kada se koristi sperma partnera i proizvodnja sperme je značajno umanjena (koncentracija <1 milion/ml), mora biti dokumentovan normalan kariotip, uključujući izostanak mikrodelecije Y-hromozoma.

ilo koja klinički značajna sistemska bolest (npr. insulinski zavisan dijabetes).

oznato postojanje nasleđene ili stečene bolesti trombofilije.

ktivna arterijska ili venska tromboembolija ili težak tromboflebitis, ili istorija ovih događaja.

Poznato postojanje porfirije.

Bilo koje poznate endokrine ili metaboličke anomalije (hipofize, nadbubrežne žlezde, pankreasa, jetre ili bubrega) sa izuzetkom kontrolisanog oboljenja tiroidne funkcije.

Poznato postojanje prisustva anti-hCG antitela (na osnovu informacija koje su dostupne u zdravstvenom kartonu ispitanice, tj. ne na osnovu analiza anti-FE 999302 antitela koje su obavljene u ispitivanju).

Poznati tumori jajnika, dojke, materice, nadbubrežne žlezde, hipofize ili hipotalamusa, što bi kontraindikovalo upotrebu gonadotropina.

Poznato postojanje oštećenja funkcije bubrega ili jetre.

Bilo koji abnormalni nalazi kliničke biohemije i hematologije na skriningu ili vitalnih znakova prilikom randomizacije, koje je istraživač ocenio kao klinički relevantne i/ili zahtevaju intervenciju.

Trenutno doji.

Nedijagnostikovano vaginalno krvarenje.

Poznata klinički značajna abnormalna citologija cerviksa uočena u roku od 3 godine pre skrininga (osim ako klinički značaj nije razrešen).

Nalazi na ginekološkom pregledu na skriningu koji isključuju stimulaciju gonadotropinom ili su povezani sa smanjenom verovatnoćom trudnoće, npr. kongenitalne anomalije materice ili zadržano intrauterino sredstvo.

Trudnoća (negativni testovi na trudnoću moraju biti potvrđeni na skriningu i pre početka nishodne regulacije) ili kontraindikacije za trudnoću.

Poznata trenutna aktivna inflamatorna bolest karlice.

Upotreba lekova za modifikaciju plodnosti tokom poslednjeg menstrualnog ciklusa pre skrininga, uključujući dehidroepiandrosteron (DHEA) ili programiranje ciklusa oralnim sredstvima za kontracepciju, progesteronskim ili estrogenskim preparatima.

Upotreba hormonskih preparata (osim lekova za tiroidnu žlezdu) tokom poslednjeg menstrualnog ciklusa pre skrininga.

Poznata istorija hemioterapije (osim za gestaciona stanja) ili radiološke terapije.

Tekuća ili prošla (u roku od 1 godine pre skrininga) zloupotreba alkohola ili droga/lekova, i/ili tekući (prošlog meseca) unos više od 14 jedinica alkohola nedeljno.

26. Tekuća ili prošla (u roku od 90 dana pre skrininga) navika pušenja više od 10 cigareta dnevno.

27. Hipersenzitivnost na bilo koji aktivan sastojak ili ekscipijens u medicinskim proizvodima koji se koriste u ovom ispitivanju.

28. Prethodno učešće u ovom ispitivanju (tj. nije dopušten ponovni skrining).

29. Upotreba bilo kojih neregistrovanih ispitivanih lekova tokom poslednjih 90 dana pre skrininga.

Primarna krajnja tačka:

[0129] Broj blastocisti dobrog kvaliteta 5. dana nakon dobijanja oocita (stepena 3BB ili više)

Sekundarne krajnje tačke

[0130]

● Ispitanice sa najmanje jednom blastocistom dobrog kvaliteta 5. dana nakon dobijanja oocita (stepena 3BB ili više)

● Ispitanice sa najmanje dve blastociste dobrog kvaliteta 5. dana nakon dobijanja oocita (stepena 3BB ili više)

● Broj i kvalitet embriona 3. dana nakon dobijanja oocita

● Broj i kvalitet blastocisti 5. dana nakon dobijanja oocita

● Promene nivoa hormona u serumu od 1. dana stimulacije do 6. dana stimulacije, 8. dana stimulacije, kraja stimulacije (progesteron, 17-OH-progesteron, androsten dion, testosteron, estradiol, inhibin A, inhibin B, FSH i LH), i dobijanja oocita (progesteron, 17-OH-progesteron, androsten dion, testosteron, estradiol)

Broj i veličina folikula 6. dana stimulacije i na kraju stimulacije

Pozitivan test na βhCG (pozitivan test na βhCG u serumu 13-15 dana nakon transfera)

Klinička trudnoća (najmanje jedan gestacioni mešak 5-6 nedelja nakon transfera)

Vitalna trudnoća (najmanje jedan intrauterini gestacioni mešak sa otkucajima srca fetusa 5-6 nedelja nakon transfera)

Tekuća trudnoća (najmanje jedan intrauterini vijabilni fetus 10-11 nedelja nakon transfera)

Broj izolovanih oocita

Broj oocita metafaze II

Broj oplođenih (2PN) oocita

Ukupna doza gonadotropina i broj dana stimulacije

Učestalost otkazivanja ciklusa

Koncentracija FE 999302 u serumu 1, 6. i 8. dana stimulacije i na kraju stimulacije

Učestalost sindroma hiperstimulacije jajnika (ranog ili kasnog, bilo kog stepena)

Učestalost i intenzitet neželjenih događaja

Promene nivoa parametara medicinske biohemije i hematologije u krvotoku

● Učestalost i intenzitet reakcija na mestu ubrizgavanja nakon primene FE 999302 (crvenilo, bol, svrab, oticanje i nastanak modrica) po oceni ispitanice tokom perioda stimulacije

● Učestalost anti-FE 999302 antitela uzrokovanih lečenjem, kako ukupnih tako i sa sposobnošću neutralizacije

● Učestalost gestacije sa više fetusa, biohemijske trudnoće, spontanog abortusa, vanmaterične trudnoće (sa medicinskom/hirurškom intervencijom i bez nje) i resorpcije jednog od blizanaca

[0131] Pogodne ispitanice će započeti nishodnu regulaciju agonistom GnRH (triptorelin acetat, GONAPEPTYL<®>) 0,1 mg/dan supkutano u srednjoj lutealnoj fazi (tj. 21. do 24. dan ciklusa) menstrualnog ciklusa. Stimulacija jajnika će započeti nakon 14 dana (±1 dan) ako je potvrđena nishodna regulacija aktivnosti hipofize (estradiol u serumu <50 pg/ml ili 180 pmol/l; lokalna laboratorija), a lečenje agonistom GnRH se nastavlja sve do kraja perioda stimulacije.

[0132] 1. dana stimulacije, ispitanice sa smanjenom regulacijom će biti randomizovane da dobijaju dnevnu dozu od 1, 2, 4, 8 ili 12 µg FE 999302 ili placeba. Sve randomizovane ispitanice će takođe primati individualizovanu fiksnu dnevnu dozu folitropina delta (vidite tabelu C), određenu na osnovu njihovog nivoa AMH na skriningu (meri se pomoću ELECSYS® AMH Plus imunološkog testa [Roche Diagnostics]) i telesne težine 1. dana stimulacije, tokom celog perioda stimulacije.

[0133] Tokom stimulacije, ispitanice će biti praćene pomoću transvaginalnog ultrazvuka 1. i 6. dana stimulacije i nakon toga barem svakog drugog dana. Kada vodeći folikul dostigne ≥15 mm, transvaginalni ultrazvuk se mora obavljati svakog dana. Aktiviranje finalnog sazrevanja folikula će se obaviti čim se uoče ≥3 folikula prečnika ≥17 mm. Ako postoji <25 folikula prečnika ≥12 mm, biće primenjena jedna doza hCG (OVITRELLE<®>) od 250 µg, ali ako postoji ≥25 folikula prečnika ≥12 mm, ciklus je neophodno otkazati.

[0134] Dobijanje oocita će se odigrati 36 h (±2 h) nakon aktivacije finalnog sazrevanja folikula. Svi inseminirani oociti će biti inkubirani u uređaju EMBRYOSCOPE<®>(Vitrolife) radi praćenja protoka vremena, i razvoj embriona će biti evidentiran do dana transfera. Procena kvaliteta embriona 3. dana nakon dobijanja oocita biće obavljena lokalno. Procena kvaliteta blastocisti 5. dana nakon dobijanja oocita biće obavljena lokalno i centralno i obuhvataće procenu tri parametra: statusa ekspanzije i sazrevanja blastociste (ocena 1-6), ocenjivanja unutrašnje ćelijske mase blastociste (ocena A-D) i ocenjivanja trofektoderme (ocena A-D), kao što je dobro poznato u struci. Blastocistama će biti dodeljena numerička vrednost pomoću sistema čiji su autori Gardner & Schoolcraft, kao što je dobro poznato u struci, uz dodatak D kategorija za unutrašnju ćelijsku masu i trofektodermu. Primarna krajnja tačka se zasniva na centralnoj proceni (vrše je dva nezavisna procenjivača).

[0135] Za sve ispitanice, transfer blastociste se vrši 5. dana nakon dobijanja oocita. Transfer jedne blastociste je obavezan za ispitanice koje imaju ≤37 godina. Kod ispitanica koje imaju ≥38 godina, politika transfera zavisi od kvaliteta dostupnih blastocisti, tj. transfer jedne blastociste ako imaju najmanje jednu blastocistu dobrog kvaliteta, a transfer najviše 2 blastociste ako nemaju nijednu blastocistu dobrog kvaliteta (ako su dostupne dve blastociste). Preostale blastociste mogu biti krioprezervirane i ispitanice ih mogu koristiti nakon završetka ispitivanja, u skladu sa lokalnim smernicama i propisima.

Dozni režim za FE 999302/placebo

[0136] Ispitanice će biti randomizovane da primaju dnevnu dozu od 1, 2, 4, 8 ili 12 µg FE 999302 ili placeba u obliku supkutane injekcije (vidite primer 1). Dnevna doza će biti fiksna tokom perioda stimulacije. Doziranje će se nastaviti sve do ispunjenja kriterijuma za aktiviranje finalnog sazrevanja folikula. Ispitanice mogu biti lečene pomoću FE 999302 tokom najviše 20 dana.

Dozni režim za folitropin delta

[0137] Za randomizovane ispitanice, pojedinačna doza će biti određena na osnovu nivoa AMH prilikom skrininga i telesne težine prilikom 1. dana stimulacije. Za ispitanice sa niskim AMH (<15 pmol/l), dnevna doza folitropina delta je 12 µg, nezavisno od telesne težine. Za ispitanice sa visokim AMH (≥15 pmol/l), dnevna doza folitropina delta je na kontinualnoj skali u rasponu od 0,19 do 0,10 µg/kg, tj. zavisi od stvarnog AMH i telesne težine.

[0138] Dnevna doza folitropina delta će biti fiksna tokom perioda stimulacije. Maksimalna dozvoljena dnevna doza folitropina delta je 12 µg. Doziranje će se nastaviti sve do ispunjenja kriterijuma za aktiviranje finalnog sazrevanja folikula. Ispitanice mogu biti lečene pomoću folitropina delta tokom najviše 20 dana. Zaustavljanje (eng. coasting) nije dozvoljeno.

[0139] Kompletan dozni režim za folitropin delta je detaljno tabelarno prikazan u tabeli B ispod.

Tabela B Dozni režim za folitropin delta

[0140] Ispitanice mogu biti lečene tokom najviše 20 dana.

[0141] Folitropin delta se primenjuje kao jedna ili više svakodnevnih supkutanih injekcija u abdomen. Kako bi se lokalne reakcije na mestu injekcije svele na minimum, preporučljiva je redovna promena mesta injekcije, ali ono uvek treba da bude desno od pupka ispitanice kako bi mogle da se razlikuju reakcije na mestu injekcije povezane sa FE 999302 ili placebom i one koje su povezane sa folitropinom delta.

[0142] Na osnovu prethodno navedenog biće jasno da će se na nekim pacijentkinjama (npr. onima koje imaju nizak AMH, koje imaju visok AMH i veliku telesnu težinu) primenjivati FSH i hCG u dnevnoj dozi od 12 µg rekombinantnog FSH sa 4 µg rekombinantnog hCG; ili 12 µg rekombinantnog FSH sa 8 µg rekombinantnog hCG. Drugačije rečeno, neke pacijentkinje će dobijati doze pri čemu maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1. Očekuje se da će ovo ispitivanje pokazati da su ove doze i odnosi veoma delotvorni (npr. u pogledu porasta broja oocita kategorije BB ili više; implantacije, itd.) i predstavljaju put ka jednoj kompoziciji koja će obezbediti individualizovano lečenje sa FSH i hCG za bilo koju pacijentkinju, bez obzira na nivo AMH i telesnu težinu.

[0143] Takođe se očekuje, na osnovu rezultata u fazi I, da će uključivanje hCG u kompoziciju (i protokol lečenja) omogućiti da kompozicije iz zahteva takođe budu bezbedne i delotvorne (npr. pri višim dozama) za lečenje pacijentkinja sa nedovoljnim odgovorom jajnika u prethodnom lečenju (npr. jednom ili više prethodnih ciklusa COS). Očekuje se da će uključivanje hCG omogućiti da se ove pacijentkinje delotvorno leče pomoću doze od 15 ili 20 µg FSH (zajedno sa hCG), što je značajno niže od trenutne maksimalne doze (24 µg FSH) koja se koristi za lečenje ovih pacijentkinja.

PRIMER 2 – kompozicija sa kombinacijom REKOVELLE<®>i hCG

[0144] Lek REKOVELLE<®>je rekombinantni FSH eksprimiran u ćelijskoj liniji PER.C6<®>koja je konstruisana postupcima koji su otkriveni u WO2013/020996 i WO2009/127826A.

[0145] Nosilac dozvole za stavljanje u promet za lek REKOVELLE<®>je kompanija Ferring Pharmaceuticals A/S iz Kay Fiskers Plads 11, 2300 Copenhagen S, Danska, i on je dostupan u UK od kompanije Ferring Pharmaceuticals, Drayton Hall, Church Road, West Drayton, UB7 7PS, UK.

[0146] Aktivna supstanca u leku REKOVELLE<®>je folitropin delta (FE999049). REKOVELLE<®>je u velikoj meri sijalilovan i uključuje α2,3- i α2,6-sijalilaciju, pri čemu je oko 85% do 90% ukupne sijalilacije α2,3-sijalilacija i oko 10% do 15% ukupne sijalilacije je α2,6-sijalilacija.

[0147] Lek REKOVELLE<®>je bistar i bezbojan rastvor za injekciju (injekcija). Jedan mililitar rastvora sadrži 33,3 mikrograma folitropina delta u svakom mililitru rastvora. Ostali sastojci su fenol, polisorbat 20, L-metionin, natrijum sulfat dekahidrat, dinatrijum fosfat dodekahidrat, koncentrovana fosforna kiselina, natrijum hidroksid i voda za injekciju.

[0148] FE999302 je rekombinantni hCG eksprimiran u ćelijskoj liniji PER.C6<®>koja je konstruisana postupcima koji su otkriveni u WO2011/042688A i WO2016/170113A. FE999302 je u velikoj meri sijalilovan i uključuje α2,3- i α2,6- sijalilaciju, kao i mešavinu mono, di, tri i tetra sijalilovanih struktura.

Primer 2A

[0149] FE 999302 može da se doda u rastvor leka REKOVELLE<®>u odnosu FSH : hCG koji iznosi, na primer, 3:1 ili 1,5:1, postupcima koji su dobro poznati u struci. Jedan mililitar kombinovanog rastvora može da sadrži 100 µg rekombinantnog FSH i 33,3 µg FE 999302 ili jedan mililitar kombinovanog rastvora može da sadrži 100 µg rekombinantnog FSH i 66,7 µg FE 999302.

Primer 2B

[0150] U još jednom primeru, kombinovani proizvod FE 999302 i rekombinantnog FSH (npr. rekombinantnog FSH eksprimiranog u ćelijskoj liniji PER.C6<®>koja je konstruisana postupcima koji su otkriveni u WO2013/020996 i WO2009/127826A) može dalje da sadrži fenol, polisorbat 20, L-metionin, arginin hidrohlorid, hlorovodoničnu kiselinu, natrijum hidroksid i vodu za injekciju.

[0151] Jedan primer za kompoziciju je sledeći (natrijum hidroksid i hlorovodonična kiselina se dodaju do pH 6,8, količina aktivnog sastojka po ml je data iznad u zavisnosti od odnosa 3:1 ili 1,5:1):

5,0 mg/ml fenola

0,005 mg/ml polisorbata 20

0,15 mg/ml L-metionina

150 mM L-arginin hidrohlorid

Q.s. hlorovodonična kiselina

Q.s. natrijum hidroksid

pH 6,8 (raspon 6,0-8,0)

voda za injekciju

[0152] Jedan mililitar rastvora može da sadrži 100 µg rekombinantnog FSH i 33,3 µg FE 999302 (odnos FSH : hCG iznosi 3:1) ili jedan mililitar kombinovanog rastvora može da sadrži 100 µg rekombinantnog FSH i 66,7 µg FE 999302 (odnos 1,5:1).

[0153] Ova reprezentativna kompozicija je pogodna za primenu prema pronalasku.

Reference

[0154]

Baenziger JU and Green ED. (1988). Pituitary glycoprotein hormone oligosaccharides: structure, synthesis and function of the asparagine-linked oligosaccharides on lutropin, follitropin and thyrotropin. Biochim Biophys Acta. 947(2), 287-306.

Dalpathado DS, Irungu J, Go EP, Butnev VY, Norton K, Bousfield GR, and Desaire H. (2006). Comparative glycomics of the glycoprotein follicle stimulating hormone: glycopeptide analysis of isolates from two mammalian species. Biochemistry.45(28), 8665-8673.

Dewailly D, Andersen CY, Balen A, Broekmans F, Dilaver N, Fanchin R, Griesinger G, Kelsey TW, La Marca A, Lambalk C et al. The physiology and clinical utility of anti-Mullerian hormone in women. Hum Reprod Update 2014;20:370-385.

Dias JA, Van Roey P. (2001). Structural biology of human follitropin and its receptor. Arch Med Res.32(6), 510-519

Fox KM, Dias JA, and Van Roey P. (2001). Three-dimensional structure of human folliclestimulating hormone. Mol Endocrinol.15(3), 378-89

Kagawa Y, Takasaki S, Utsumi J, Hosoi K, Shimizu H, Kochibe N, and Kobata A. (1988). Comparative study of the asparagine-linked sugar chains of natural human interferon-beta 1 and recombinant human interferon-beta 1 produced by three different mammalian cells. J Biol Chem. 263(33), 17508-17515.

Olivennes F, Howles CM, Borini A, Germond M, Trew G, Wikland M, Zegers-Hochschild F, Saunders H (2009) Individualizing FSH dose for assisted reproduction using a novel algorithm: the CONSORT study. Reprod Biomed Online.2009 Feb;18(2):195-204.

Pierce JG, and Parsons TF (1981) Glycoprotein hormones: structure and function Annu Rev Biochem. 50, 465-495.

Rathnam P, and Saxena BB. (1975). Primary amino acid sequence of follicle-stimulating hormone from human pituitary glands. I. alpha subunit. J Biol Chem.;250(17):6735-6746.

Ryan RJ, Keutmann HT, Charlesworth MC, McCormick DJ, Milius RP, Calvo FO and Vutyavanich T. (1987). Structure-function relationships of gonadotropins. Recent Prog Horm Res.;43,:383-429.

Saxena BB and Rathnam P. (1976) Amino acid sequence of the beta subunit of folliclestimulating hormone from human pituitary glands. J Biol Chem.251(4), 993-1005

Takeuchi M, Takasaki S, Miyazaki H, Kato T, Hoshi S, Kochibe N, and Kobata A (1988). Comparative study of the asparagine-linked sugar chains of human erythropoietins purified from urine and the culture medium of recombinant Chinese hamster ovary cells. J Biol Chem.

263(8), 3657-3663.

Ulloa-Aguirre A, Midgley AR Jr, Beitins IZ, and Padmanabhan V. (1995). Follicle-stimulating isohormones: characterization and physiological relevance. Endocr Rev.16(6), 765-787.

Wide L, Naessén T, Sundström-Poromaa I, Eriksson K. (2007) Sulfonation and sialylation of gonadotropins in women during the menstrual cycle, after menopause, and with polycystic ovarian syndrome and in men. J Clin Endocrinol Metab.;92(11), 4410-4417.

Yding Andersen C, Westergaard LG, i van Wely M. (2004). FSH isoform composition of commercial gonadotrophin preparations: a neglected aspect? Reprod Biomed Online. 9(2), 231-236.

Claims (15)

Patentni zahtevi

1. Kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

2. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 11 do 13 µg dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1; i/ili pri čemu maseni odnos rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1; i/ili pri čemu se rekombinantni FSH i rekombinantni hCG primenjuju u dnevnoj dozi od 12 µg rekombinantnog FSH sa 4 µg rekombinantnog hCG; ili 12 µg rekombinantnog FSH sa 8 µg rekombinantnog hCG.

3. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom prethodnom zahtevu, pri čemu lečenje neplodnosti obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l.

4. Kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja ima nivo AMH u serumu ≥15 pmol/l, pri čemu kompozicija treba da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

5. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 4, pri čemu kompozicija treba da se primenjuje u dozi od 0,09 do 0,19 µg rekombinantnog FSH po kg telesne težine pacijentkinje dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1; i/ili pri čemu je dnevna doza rekombinantnog FSH u rasponu od minimalne doze od 6 µg do maksimalne doze od 12 µg ; i/ili pri čemu maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1.

6. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 4 ili 5, pri čemu lečenje neplodnosti uključuje korak određivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima definisani nivo AMH u serumu.

7. Kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja je prošla prethodno lečenje neplodnosti (npr. prethodno lečenje neplodnosti putem kontrolisane stimulacije jajnika) u kome je (od pacijentkinje) dobijeno 5 do 7 oocita, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

8. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 7, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1; i/ili pri čemu maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1; i/ili pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 15 µg dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje u dozi od 5 µg dnevno ili 7,5 µg dnevno.

9. Kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje koja je prošla prethodno lečenje neplodnosti (npr. prethodno lečenje neplodnosti putem kontrolisane stimulacije jajnika) u kome je (od pacijentkinje) dobijeno 0 do 4 oocita ili prethodno lečenje neplodnosti koje je otkazano usled nedovoljnog odgovora jajnika, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

10. Kompozicija za upotrebu prema zahtevu 9, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1; i/ili pri čemu maseni odnos rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) iznosi 3:1 ili 1,5:1; i/ili pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 20 µg dnevno, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje u dozi od 6,67 µg dnevno ili 13,33 µg dnevno.

11. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 9 ili 10, pri čemu lečenje neplodnosti obuhvata korak utvrđivanja nivoa AMH u serumu pacijentkinje i korak primene određenih doza rekombinantnog FSH i rekombinantnog hCG na pacijentkinji koja ima nivo AMH u serumu <15 pmol/l.

12. Kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti kod pacijentkinje, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 14 do 16 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

13. Kompozicija koja sadrži rekombinantni folikulostimulišući hormon (FSH) i rekombinantni humani horionski gonadotropin (hCG) za upotrebu u lečenju neplodnosti, pri čemu rekombinantni FSH treba da se primenjuje u dozi od 18 do 24 µg dnevno ili ekvivalentnoj, a rekombinantni hCG treba da se primenjuje tako da maseni odnos dnevne doze rekombinantnog FSH prema dnevnoj dozi rekombinantnog hCG (dnevna doza rFSH u µg : dnevna doza rhCG u µg) bude od 15:1 do 1:1, na primer od 3:1 do 1,5:1.

14. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu rekombinantni FSH uključuje α2,6-sijalilaciju i α2,3-sijalilaciju, opciono pri čemu je 1% do 50% ukupne sijalilacije α2, 6-sijalilacija, a 50% do 99% ukupne sijalilacije je α 2,3-sijalilacija; i/ili pri čemu rekombinantni hCG uključuje α2,6-sijalilaciju i α2,3-sijalilaciju, opciono pri čemu hCG uključuje mono (1S), di (2S), tri (3S) i tetra (4S) sijalilovane strukture.

15. Kompozicija za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu pacijentkinja ima više od 30 godina i/ili je prethodno doživela neuspeh najmanje u jednom ciklusu lečenja neplodnosti; i/ili pri čemu lečenje neplodnosti treba da promoviše blastociste dobrog kvaliteta (npr. blastociste kategorije 3BB ili više (tj.3BB, 3BA, 3AC, 3AB, 3AA, 4CC, 4CB,4CA, 4BC, 4BB, 4BA, 4AC, 4AB, 4AA, 5CC, 5CB, 5CA, 5BC, 5BB, 5BA, 5AC, 5AB, 5AA, 6CC,6CB, 6CA, 6BC, 6BB, 6BA, 6AC, 6AB, 6AA) npr. lečenje neplodnosti treba da poveća broj blastocisti kategorije 3BB ili više 3. dana i/ili 5. dana nakon dobijanja oocita) ili da poboljša implantaciju embriona.

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd

54