RS67463B1 - Nlrp3 inhibitori inflamasoma - Google Patents

Description

[0001] Opis

[0003] Područje

[0005] U ovoj specifikaciji opisana su jedinjenja (uključujući njihove soli) koja su inhibitori NLRP3 inflamasoma, upotreba takvih jedinjenja i kompozicije koje sadrže takva jedinjenja.

[0007] Osnovne informacije

[0009] NLRP3 inflamasom je multiproteinski kompleks koji se sastoji od pirinskog domena porodice NLR koji sadrži 3 (NLRP3) proteina, PYD i domen CARD koji sadrži (ASC, takođe poznat kao PYCARD) i kaspazu 1 (CASP1), i predstavlja put za detekciju stresa koji dovodi do inflamatornog odgovora (Swanson KV i sar. Nat Rev Immunol. avg. 2019.; 19(8):477-489). Kada se aktiviraju, ova tri proteina se kondenzuju u veliki multiproteinski kompleks; mrlju.

[0011] NLRP3 protein se sastoji od tri domena, PYD, NACHT i LRR (Sharif H i sar. Nature. juni 2019.;570(7761):338-343). Smatra se da je aminoterminalni PYD domen važan u vezivanju NLRP3 za PYD domen ASC, NACHT domen ima aktivnost ATPaze predloženu za regulisanje oligomerizacije, potencijalno kroz konformacionu promenu LRR domena, a smatra se da LRR domen izaziva autoinhibiciju preklapanjem na NACHT domen. Aktivnost proteina NLRP3 je dalje regulisana mnoštvom posttranslacionih modifikacija, uključujući fosforilacije i ubikvitinilacije.

[0013] Pokazalo se da mnoštvo ćelijskih stresora kao što su molekularni obrasci povezani sa patogenom (PAMP), endogeni signali opasnosti (VLAGE) i iritansi životne sredine dovode do kondenzacije inflamasoma u mrlju. Smatra se da aktivacija inflamasoma zahteva dva koraka (McKee CM i sar. J Leukoc Biol. sept. 2020.;108(3):937-952). Početni korak pripreme služi za povećanje nivoa komponenti inflamasoma i može se pokrenuti na primer lipopolisaharidom (LPS, uobičajeni PAMP). LPS se detektuje putem receptora sličnih naplatnim stanicama, što rezultira transkripcijom NLRP3 i IL1B vođenom NF-kB. Sekundarna povreda pokreće brzu oligomerizaciju komponenti inflammasoma u fleci, stvarajući aktiviranu kaspazu 1.

[0014] Pored ovog procesa u dva koraka, pokazano je da veoma visoka indukcija NLRP3 transkripcije pokreće aktivaciju inflamasoma u jednom koraku, obično kroz produženu izloženost LPS-u.

[0016] Nizvodni efekti aktiviranog NLRP3 inflamasoma se dalje proširuju cepanjem posredovanim kaspazom-1 i samim tim aktivacijom gasdermina D. Kada se aktivira, gasdermin D formira velike pore koje dovode do regulisanog oblika litičke ćelijske smrti nazvane piroptoza (Kovacs SB i sar. Trends Cell Biol. sept. 2017.;27(9):673-684). U stvari, piroptoza pojačava upalu oslobađanjem ćelijskog sadržaja koji kasnije dovodi do regrutovanja i priliva dodatnih imunoloških ćelija.

[0018] Verovatno je da disregulisani inflamasomski pogon može, čak i na niskim nivoima tokom nekoliko godina, dovesti do oštećenja tkiva i hroničnih bolesti. Ovo je dokazano za periodične sindrome 1, 2 i 3 povezane sa kriopirinom, pri čemu su identifikovane uzročne genetske lezije u NLRP3 (Kacar M i sar.

[0019] Rheumatology (Oxford).nov. 2019. 1;58(Suppl 6):vi31-vi43).

[0021] Aktivacija NLRP3 inflamasoma je povezana sa više indikacija (kao što je ovde diskutovano) često sa dokazanim prisustvom ili aktivnošću u zahvaćenom tkivu, pa će inhibicija NLRP3 inflamasoma stoga rešiti nepovoljnu upalu.

[0023] NLRP3 inflamasom može modulisati i akutnu povredu bubrega (AKI) i hroničnu bolest bubrega (CKD); miševi sa nedostatkom NLRP3 inflamasomskih komponenti i njegovih nizvodnih medijatora mogu biti zaštićeni od povrede bubrega u eksperimentalnim modelima i AKI i CKD (Hutton HL i sar. Nephrology.

[0024] 2016 21(9):736-744). Upala igra ključnu ulogu u patogenezi AKI; nakon inicijalnog ishemijskog, septičkog ili nefrotoksičnog okidača, oslobađanje inflamatornih citokina i hemokina od strane bubrežnih endotelnih ćelija i tubularnog epitela može dovesti do regrutacije leukocita i naknadne povrede bubrega. Uloga inflamasoma u ovom procesu vidljiva je i u studijama o biomarkerima i eksperimentalnim modelima AKI (Andersen K i sar. Kidney Int. nov.2014.;86(5):965-78). Sve veći dokazi iz kliničkih i eksperimentalnih studija ukazuju na to da i sistemsko i lokalno zapaljenje bubrega imaju ključnu ulogu u razvoju i progresiji dijabetičke bolesti bubrega (DKD) (Tang SCW i sar. Nat Rev Nephrol. april 2020.;16(4):206-222). Konkretno, NLRP3 inflamasom povezuje detekciju metaboličkog stresa u bubregu dijabetičara sa aktivacijom proinflamatornih kaskada putem indukcije IL-1β i IL-18 što dovodi do hronične povrede i funkcionalnog pada bubrega u CKD/DKD (Shahzad K i sar. J Am Soc Nephrol. avg.2016.;27(8):2270-5).

[0026] Studije su uključivale NLRP3 inflamasom kod kardiovaskularnih bolesti (An N i sar. Front Immunol. juli 2019.10;10:1592). Dobro je opisana veza između NLRP3 inflamasoma i koronarne aterosklerotske bolesti srca preko kristala holesterola/mononatrijum glutamata i nizvodnih faktora i vaskularnih povreda (Jin Y i sar. J Am Heart Assoc. juni 2019.18;8(12):e012219). Pored toga, NLRP3 inflamasom može biti uključen i u patološki mehanizam kardiomiopatija, uključujući infarkt miokarda (MI), remodeliranje srca i srčanu hipertrofiju (An N i sar. Front Immunol. juli 2019.10;10:1592).

[0028] Nealkoholna bolest masne jetre (NAFLD) se definiše kao prekomerna akumulacija masti u jetri (masna jetra) veća od 5% izazvana uzrocima koji nisu unos alkohola. Masna jetra napreduje do nealkoholnog steatohepatitisa (NASH) sa ili bez fibroze kod varijabilnog udela pojedinaca, što na kraju dovodi do ciroze jetre, zatajenja jetre i hepatocelularnog karcinoma kod osetljivih pojedinaca (Friedman i sar. Nat Med. juli 2018.;24(7):908-922). Upala uključujući NLRP3 inflamasom doprinosi patogenezi većine akutnih i hroničnih bolesti jetre uključujući NAFLD, NASH, alkoholni steatohepatitis, hroničnu infekciju virusom hepatitisa C (HCV), ishemijskoreperfuzionu povredu i povredu jetre izazvanu paracetamolom (Szabo i sar. Nat Rev Gastroenterol Hepatol 2015; 12:387-400). Nivoi NLRP3 u jetri i ciljni mRNK u donjem toku su povećani u NASH-u i koreliraju sa nivoima ekspresije kolagena u jetri kod ljudi. Pored toga, NLRP3 indukovana aktivacija povećava fibrozu jetre kod miševa, a NLRP3 nokaut miševi su zaštićeni od eksperimentalno indukovanog NASH, uključujući upalu jetre i fibrozu (Wree i sar. J Mol Med, 2014, DOI: 10.1007/s00109-014-1170-1). Inhibicija NLRP3 inflamasoma korišćenjem malog inhibitora molekula (MCC950) smanjuje upalu i fibrozu jetre u eksperimentalnim modelima NASH-a, pri čemu su miševi hranjeni ishranom sa visokim sadržajem masti ili ishranom sa nedostatkom metionina i holina (Mridha i sar. Journal of Hepatology, 2017, DOI:

[0029] 10.1016/j.jhep.2017.01.022). Dakle, inhibicija NLRP3 inflamasoma može zaštititi od bolesti jetre, uključujući NAFLD i NASH.

[0030] Nekoliko prekomerno aktivirajućih mutacija u NLRP3 povezano je sa autoinflamatornim poremećajima koji dovode do neodgovarajućeg oslobađanja inflamatornih citokina, uključujući IL-1β i inflamatorne simptome. Periodični sindromi povezani sa kriopirinom, CAPS, uključuju porodični hladni autoinflamatorni sindrom (FCAS), Muckle-Wells sindrom (MWS), hronični infantilni neurološki kožni zglobni sindrom (CINCA) ili neonatalnu pojavu multisistemske inflamatorne bolesti (NOMID) (Booshehri ML i sar. J Clin Immunol. april 2019.;39(3):277-286).

[0032] NLRP3 inflamasom je takođe indikovan kod gihta i pseudo gihta jer su mononatrijum urat (MSU) i kalcijum pirofosfat dihidrat (CPPD), oba kristala pronađena kod gihta, aktivatori NLRP3 inflamasoma (Martinon F i sar. Nature 440: 237-241, 2006). Kod sarkoidoze, NLRP3 inflamasom je identifikovan kao jedan od ključnih ćelijskih puteva (Riteau N i sar. Eur Respir J.2020; 55(3): 2000149) i pokazana je povećana aktivnost u plućima sarkoidnih pacijenata.

[0034] Dokazi ukazuju na to da inflamasomi igraju ulogu u autoimunim bolestima, a inhibicija NLRP3 inflamasoma može imati pozitivan efekat kod reumatoidnog artritisa (RA), multiple skleroze (MS), Adisonove bolesti, celijakije, sistemskog eritematoznog lupusa (SLE) i vitiliga (Shaw PJ i sar. Trends Mol Med. feb. 2011.;17(2):57-64).

[0036] Kod inflamatornih kožnih oboljenja, NLRP3 aktivacija inflamasoma je pokazana kod akni vulgaris (Li ZJ i sar. J Invest Dermatol. nov.

[0037] 2014;134(11):2747-2756) i hidradenitis suppurativa (Kelly G i sar. Br J Dermatol. dec. 2015.;173(6):1431-9).

[0039] Novi dokazi ukazuju na to da perzistentna aktivacija NLRP3 može biti uključena u progresiju nekoliko hroničnih plućnih bolesti, uključujući idiopatsku plućnu fibrozu (IPF), hroničnu opstruktivnu plućnu bolest (HOBP) i astmu (De Nardo D. i sar. Am J Pathol. jan.2014.;184(1):42-54).

[0041] Kod inflamatorne bolesti creva (IBD) postoje dokazi koji pokazuju da IL-Iβ i IL-18 vođeni inflamasomima igraju ulogu u patologiji IBD-a i da NLRP3 inhibitori inflamasoma mogu biti efikasni kod ulceroznog kolitisa (UC) i Kronove bolesti. (Zhen Y i sar. Front Immunol. feb.2019. 28;10:276).

[0042] Shodno tome, inhibitori NLRP3 inflamasoma mogu biti korisni u lečenju ovde opisanih bolesti i stanja koja su povezana sa aktivacijom NLRP3 inflamasoma. Međutim, do danas nijedan sintetički inhibitor malih molekula NLRP3 inflamasoma nije odobren za medicinsku upotrebu.

[0044] Inhibitori malih molekula NLRP3 inflamasoma su prethodno razmatrani, na primer, u WO2020/234715 A1, ali, uprkos gore navedenom, i dalje postoji potreba za daljim jedinjenjima koja su inhibitori NLRP3 inflamasoma, što može učiniti jedinjenja posebno obećavajućim za razvoj kao terapijska agensa.

[0045] Jedinjenja koja su ovde obelodanjena takođe mogu pokazati poboljšanu inhibiciju (in vitro i in vivo) NLRP3 inflamasoma u poređenju sa drugim poznatim inhibitorima NLRP3 inflamasoma. Jedinjenja koja su ovde obelodanjena takođe mogu imati povoljne toksikološke profile (na primer, smanjenu inhibiciju hERG-a), povoljne farmakokinetičke profile i/ili povoljna fizička svojstva (na primer, veću rastvorljivost u vodi) u poređenju sa drugim poznatim NLRP3 inhibitorima inflamasoma. Stoga, takva jedinjenja mogu biti posebno korisna u lečenju stanja bolesti u kojima je inhibicija NLRP3 inflamasoma korisna.

[0047] Sažetak

[0049] Pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (I):

[0052]

[0055] ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu

[0057] R<1>je odabran iz

[0058]

[0061] svaki R<3>je nezavisno odabran iz grupe -H i -C1-3 alkil;

[0063] R<4>je odabran iz -H i -CC1-3 alkila;

[0065] R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su svaki nezavisno odabrani iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila zamenjenog sa 0-3 -F supstituentima, ciklopropilom, -OCF3, i -SO2Me;

[0067] W, X, Y i Z su svaki nezavisno odabrani iz CR<5>i N; nula ili jedan od W, X, Y i Z su N, a ostatak od W, X, Y i Z su CR<5>;

[0069] svako R<5>je nezavisno odabran iz -H, -Me i -F.

[0071] Ova specifikacija takođe delomično opisuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje iz formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijent.

[0073] Ova specifikacija takođe delimično opisuje jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u terapiji.

[0075] Ova specifikacija takođe delimično opisuje jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju subjekta sa bolešću ili stanjem u koje je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma.

[0077] Ova specifikacija takođe delimično opisuje jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju bolesti ili stanja izabranih između bolesti bubrega, kardiovaskularnih bolesti, bolesti jetre, inflamatornih bolesti, inflamatornih kožnih bolesti, inflamatornih bolesti creva, autoimunih bolesti i respiratornih bolesti.

[0078] Ova specifikacija takođe delimično opisuje upotrebu jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u proizvodnji leka za lečenje bolesti ili stanja u koje je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma.

[0080] Ova specifikacija takođe delimično opisuje upotrebu jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u proizvodnji leka za lečenje bolesti ili stanja odabranih iz bolesti bubrega, kardiovaskularnih bolesti, bolesti jetre, inflamatornih bolesti, inflamatornih kožnih bolesti, inflamatornih bolesti creva, autoimunih bolesti i respiratornih bolesti.

[0082] Ova specifikacija takođe delimično opisuje metod za lečenje bolesti ili stanja u kojima je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma, kod subjekta kome je potreban takav tretman, koji sadrži primenu terapijski efikasne količine jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli navedenom subjektu.

[0084] Ova specifikacija takođe delimično opisuje metod za lečenje bolesti ili stanja odabranih iz bolesti bubrega, kardiovaskularnih bolesti, bolesti jetre, inflamatornih bolesti, inflamatornih kožnih bolesti, inflamatornih bolesti creva, autoimunih bolesti i respiratornih bolesti, kod subjekta kome je potrebno takvo lečenje, što sadrži davanje navedenom subjektu terapeutski efikasne količine jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0086] Dalji aspekti ovog obelodanjivanja biće očigledni stručnjaku u ovoj oblasti nakon čitanja ove specifikacije.

[0088] Opis ilustrativnih otelotvorenja

[0090] Pronalazak je definisan u priloženim patentnim zahtevima. Otelotvorenja koja nisu obuhvaćena patentnim zahtevima data su u referentne svrhe.

[0092] Svako pozivanje u opisu na metode lečenja odnosi se na jedinjenja, farmaceutske kompozicije ili lekove iz predmetnog pronalaska koji se koriste u metodi terapijskog tretmana ljudi (ili životinja).

[0094] Mnoga otelotvorenja su detaljno opisana u celoj specifikaciji i biće očigledna stručnjaku u ovoj oblasti. Specifikaciju ne treba tumačiti kao ograničenu na bilo koje posebno otelotvorenje(a) opisano(a) u ovoj specifikaciji.

[0095] U jednom otelotvorenju dato je jedinjenje formule (I):

[0098]

[0100] ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu

[0101] R<1>je odabran iz

[0104]

[0106] svaki R<3>je nezavisno odabran iz grupe -H i -C1-3 alkil;

[0107] R<4>je odabran iz -H i -CC1-3 alkila;

[0108] R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su svaki nezavisno odabrani iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila zamenjenog sa 0-3 -F supstituentima, ciklopropilom, -OCF3, i -SO2Me;

[0109] W, X, Y i Z su svaki nezavisno odabrani iz CR<5>i N; nula ili jedan od W, X, Y i Z su N, a ostatak od W, X, Y i Z su CR<5>;

[0110] svako R<5>je nezavisno odabran iz -H, -Me i -F.

[0111] Sledeća otelotvorenja delova R<1>, R<2A>, R<2B>, R<2C>, R<2D>R<3>, R<4>, R<5>, W, X, Y, Z mogu se primeniti, pojedinačno ili u kombinaciji, na ovde date opise jedinjenja formule (I).

[0113] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0116]

[0119] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0122]

[0125] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0128]

[0129]

[0131] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0132]

[0134] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0135]

[0136]

[0138] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0140]

[0142] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0143]

[0144]

[0146] U jednom otelotvorenju, R<1>je

[0149]

[0151] U jednom otelotvorenju, R<1>je

[0154]

[0156] U jednom otelotvorenju, svaki R<3>je nezavisno odabran iz -H i -C1-3 alkila. U jednom otelotvorenju, svaki R<3>je nezavisno odabran iz -H i -Me.

[0157] U jednom otelotvorenju, svaki R<3>je -H.

[0158] U jednom otelotvorenju, svaki R<3>je -Me.

[0159] U jednom otelotvorenju, R<4>je odabran iz -H i -CC1-3 alkila.

[0160] U jednom otelotvorenju, R<4>je odabran iz -H i -Me.

[0161] U jednom otelotvorenju, R<4>je -H.

[0162] U jednom otelotvorenju, R<4>je -Me.

[0163] U jednom otelotvorenju, R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su svaki nezavisno odabrani iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila zamenjenog sa 0-3 -F supstituentima, ciklopropilom, -OCF3, i -SO2Me.

[0164] U jednom otelotvorenju, R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su svaki nezavisno odabrani iz -H, -F, - Cl, -Me, -Et, -n-Pr, -i-Pr, -CH2F, -CHF2, -CF3, ciklopropila, -OCF3 i -SO2Me.

[0166] U jednom otelotvorenju, R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su svaki nezavisno odabrani iz -H, -F, -Cl, -Me, -Et, ciklopropila, -CF3, -OCF3 i -SO2Me.

[0168] U jednom otelotvorenju, dva, tri ili četiri od R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su -H, a ostatak R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>nije -H.

[0170] U jednom otelotvorenju, dva ili tri od R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su -H, a ostatak R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>nije -H.

[0172] U jednom otelotvorenju, dva od R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su -H i dva od R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>nije -H.

[0174] U jednom otelotvorenju, tri od R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su -H, i jedan od R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>nije -H.

[0176] U jednom otelotvorenju, R<2A>je odabran iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila supstituisanog sa 0-3 -F supstituenta, ciklopropila, -OCF3 i -SO2Me.

[0178] U jednom otelotvorenju, R<2A>je odabran iz -H, -F, -Cl, -Me, -Et, ciklopropil, -CF3, -OCF3 i -SO2Me.

[0180] U jednom otelotvorenju, R<2A>je odabran iz -H i -F.

[0182] U jednom otelotvorenju, R<2A>je -H.

[0184] U jednom otelotvorenju, R<2B>je odabran iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila supstituisanog sa 0-3 -F supstituenta, ciklopropila, -OCF3 i -SO2Me.

[0186] U jednom otelotvorenju, R<2B>je odabran iz -H, -F, -Cl, -Me, -Et, ciklopropil, -CF3, -OCF3 i -SO2Me.

[0188] U jednom otelotvorenju, R<2B>je odabran iz -H, -F, -CF3 i -SO2Me.

[0190] U jednom otelotvorenju, R<2B>je odabran iz -F, -CF3 i -SO2Me.

[0192] U jednom otelotvorenju, R<2B>je -H.

[0193] U jednom otelotvorenju, R<2B>nije -H.

[0195] U jednom otelotvorenju, R<2B>je -F.

[0197] U jednom otelotvorenju, R<2B>je -CF3.

[0199] U jednom otelotvorenju, R<2B>je -SO2Me.

[0201] U jednom otelotvorenju, R<2C>je odabran iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila supstituisanog sa 0-3 -F supstituenta, ciklopropila, -OCF3 i -SO2Me.

[0203] U jednom otelotvorenju, R<2C>je odabran iz -H, -F, -Cl, -Me, -Et, ciklopropil, -CF3, -OCF3 i -SO2Me.

[0205] U jednom otelotvorenju, R<2C>je odabran iz -H i -F.

[0207] U jednom otelotvorenju, R<2C>je -H.

[0209] U jednom otelotvorenju, R<2D>je odabran iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila supstituisanog sa 0-3 -F supstituenta, ciklopropila, -OCF3 i -SO2Me.

[0211] U jednom otelotvorenju, R<2D>je odabran iz -H, -F, -Cl, -Me, -Et, ciklopropil, -CF3, -OCF3 i -SO2Me.

[0213] U jednom otelotvorenju, R<2D>je odabran iz -H i -F.

[0215] U jednom otelotvorenju, R<2D>je -H.

[0217] U jednom otelotvorenju, R<2D>je -F.

[0219] U jednom otelotvorenju, R<2A>i R<2C>su -H.

[0221] U jednom otelotvorenju, R<2A>je -H, R<2B>je odabran iz -H, -F, -CF3 i -SO2Me, R<2C>je -H, a R<2D>je -H.

[0223] U jednom otelotvorenju, R<2A>je -H, R<2B>je odabran iz -F, -CF3 i -SO2Me, R<2C>je -H, a R<2D>je -H.

[0225] U jednom otelotvorenju, R<2A>je -H, R<2B>je -F, R<2C>je -H, a R<2D>je -H.

[0226] U jednom otelotvorenju, R<2A>je -H, R<2B>je -CF3, R<2C>je -H, a R<2D>je -H.

[0227] U jednom otelotvorenju, R<2A>je -H, R<2B>je -SO2Me, R<2C>je -H, a R<2D>je -H. U jednom otelotvorenju, R<2A>je -H, R<2B>je odabran iz -H ili -Cl, R<2C>je -H, a R<2D>je -F.

[0228] U jednom otelotvorenju, W, X, Y i Z su svaki nezavisno odabrani iz CR<5>i N; nula ili jedan od W, X, Y i Z su N, a ostatak od W, X, Y i Z su CR<5>.

[0229] U jednom otelotvorenju, W, X i Z su svaki CR<5>; a Y je CR<5>ili N. U jednom otelotvorenju, W, X i Z su svaki CR<5>.

[0230] U jednom otelotvorenju, W, X i Z su svaki CR<5>; a Y je N.

[0231] U jednom otelotvorenju, jedan od W, X, Y i Z je CR<5>; nula ili jedan od W, X, Y i Z je N; a ostatak W, X, Y i Z su CH.

[0232] U jednom otelotvorenju, svaki R<5>je nezavisno odabran iz -H, -Me i -F. U jednom otelotvorenju, svaki R<5>je -H.

[0233] U jednom otelotvorenju, W, X i Z su svaki CH.

[0234] U jednom otelotvorenju, W, X i Z su svaki CH; a Y je N.

[0235] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0238]

[0240] svaki R<3>je nezavisno odabran iz -H i -Me, opciono svaki R<3>je -H; R<4>je odabran iz -H i -Me; opciono R<4>je -H;

[0241] R<2A>i R<2C>su svaki -H;

[0242] R<2B>je odabran iz -H, -F, -CF3 i -SO2Me; opciono R<2B>je -CF3;

[0243] R<2D>je odabran iz -H i -F; opciono R<2D>je -H;

[0244] jedan od W, X, Y i Z je CR<5>; nula ili jedan od W, X, Y i Z je N; a ostatak W, X, Y i Z su CH.

[0245] R<5>je odabran iz -H, -Me i -F.

[0246] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0248]

[0249] svaki R<3>je nezavisno odabran iz -H i -Me, opciono svaki R<3>je -H; R<4>je odabran iz -H i -Me; opciono R<4>je -H;

[0250] R<2A>i R<2C>su svaki -H;

[0251] R<2B>je odabran iz -H, -F, -CF3 i -SO2Me; opciono R<2B>je -CF3; R<2D>je odabran iz -H i -F; opciono R<2D>je -H;

[0252] jedan od W, X, Y i Z je CR<5>; nula ili jedan od W, X, Y i Z je N; a ostatak W, X, Y i Z su CH.

[0253] R<5>je odabran iz -H, -Me i -F.

[0254] U jednom otelotvorenju, R<1>je odabran iz

[0257]

[0259] svaki R<3>je nezavisno odabran iz -H i -Me, opciono svaki R<3>je -H; R<4>je odabran iz -H i -Me; opciono R<4>je -H;

[0260] R<2A>i R<2C>su svaki -H;

[0261] R<2B>je odabran iz -H, -F, -CF3 i -SO2Me; opciono R<2B>je -CF3; R<2D>je odabran iz -H i -F; opciono R<2D>je -H;

[0262] W, X i Z su svaki CH; a Y je CH ili N.

[0263] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje odabrano iz:

[0264] 3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(4-hloro-3-fluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(4,5-difluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(4-hloro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometoksi)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-[2-fluoro-6-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-,2-diol;

[0265] 3-[[4-(2,4-difluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(4-hloro-2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(2-hloro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(2-hidroksi-4-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(2-hidroksi-5-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-7-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-,2-diol;

[0266] 3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-6-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-,2-diol;

[0267] 2-[4-[[3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol; 2-[4-[[3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-metilsulfonil-fenol;

[0268] 2-[4-[[2-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol; 2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol; 2-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]cikloheptanol; 2-(4-((3-hidroksicikloheksil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0269] 2-(4-((3-hidroksiciklobutil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0270] 3-fluoro-2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)ftalazin-1-il)fenol;

[0272] 2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0274] 2-[4-[[3-hidroksi-3-metil-ciklopentil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0276] 2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0278] 2-[1-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0280] 5-hloro-2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0281] 3-fluoro-2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0283] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0285] 3-fluoro-2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0287] 2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0289] 2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-3-(trifluorometil)fenol;

[0291] 5-etil-2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0292] 5-ciklopropil-2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0293] 4-fluoro-2-[4-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0295] 4-fluoro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0297] 3-fluoro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0299] 2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0301] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0303] 5-hloro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0304] 2-[4-[[3-hidroksi-3-metil-cikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0306] 2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0308] 3-fluoro-2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0310] 3-hloro-2-fluoro-6-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0312] 4,5-difluoro-2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0314] 3-fluoro-2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0316] 5-hloro-2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0317] 3,5-difluoro-2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0319] 2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0321] 5-hloro-2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0323] 2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0325] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0327] 3-fluoro-2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0329] 5-fluoro-2-(4-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0331] 3-fluoro-2-(4-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0333] 3-fluoro-2-(1-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

[0335] 5-fluoro-2-(1-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

[0337] 2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0339] 2-[4-[[3-hidroksiciklopentil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0341] 2-(4-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0342] 5-fluoro-2-(4-((3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0344] 3-fluoro-2-(1-((3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

[0346] 3-[[1-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]propan-1,2-diol;

[0348] 2-[8-[[3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0350] 3-fluoro-2-(8-((3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[2,3-d]piridazin-5-il)fenol;

[0352] 2-[8-[[3-hidroksicikloheksil]amino]-2-metil-pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol; i

[0354] 3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil] ftalazin-1-il]amino] -2-metilpropan-1,2-diol; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0356] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje odabrano iz:

[0357] (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0359] (2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0361] (2S)-3-[[4-(4-hloro-3-fluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0363] (2R)-3-[[4-(4-hloro-3-fluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol,

[0365] (2S)-3-[[4-(4,5-difluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0366] (2R)-3-[[4-(4,5-difluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0367] (2S)-3-[[4-(2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2R)-3-[[4-(2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0368] (2S)-3-[[4-(4-hloro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0369] (2R)-3-[[4-(4-hloro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0370] (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometoksi)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0372] (2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometoksi)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0374] (2S)-3-[[4-[2-fluoro-6-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0376] (2R)-3-[[4-[2-fluoro-6-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0378] (2S)-3-[[4-(2,4-difluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0379] (2R)-3-[[4-(2,4-difluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0380] (2S)-3-[[4-(4-hloro-2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0382] (2R)-3-[[4-(4-hloro-2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol,

[0384] (2S)-3-[[4-(2-hloro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0385] (2R)-3-[[4-(2-hloro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0386] (2S)-3-[[4-(2-hidroksi-4-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0387] (2R)-3-[[4-(2-hidroksi-4-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0388] (2S)-3-[[4-(2-hidroksi-5-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0389] (2R)-3-[[4-(2-hidroksi-5-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-7-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0391] (2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-7-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0393] (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-6-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0395] (2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-6-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

[0397] 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0399] 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0401] 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0403] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0405] 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-metilsulfonil-fenol;

[0406] 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-metilsulfonil-fenol;

[0407] 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-metilsulfonil-fenol;

[0408] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-metilsulfonil-fenol;

[0409] 2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0411] 2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0413] 2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0414] 2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0416] 2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0418] 2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0420] 2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0422] 2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0424] (1R,2R)-2-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]cikloheptanol;

[0426] (1S,2S)-2-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]cikloheptanol;

[0428] (1R,2S)-2-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]cikloheptanol;

[0430] (1S,2R)-2-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]cikloheptanol;

[0432] 2-(4-(((1R,3R)-3-hidroksicikloheksil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0434] 2-(4-(((1S,3S)-3-hidroksicikloheksil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0436] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0438] 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0439] 2-(4-((1r ,3r) -3-hidroksiciklobutil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0441] 2-[4-[[(1s,3s)-3-hidroksiciklobutil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0443] 3-fluoro-2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)ftalazin-1-il)fenol;

[0445] 3-fluoro-2-(4-((1r ,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)ftalazin-1-il)fenol;

[0447] 2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0449] 2-(4-(((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)ftalazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0451] 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksi-3-metil-ciklopentil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0453] 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksi-3-metil-ciklopentil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0455] 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksi-3-metil-ciklopentil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0457] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksi-3-metil-ciklopentil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0459] 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0461] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0463] 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0464] 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0466] 2-[1-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0468] 2-[1-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0470] 2-[1-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0472] 2-[1-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0474] 5-hloro-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0476] 5-hloro-2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0478] 5-hloro-2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0480] 5-hloro-2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0482] 3-fluoro-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0484] 3-fluoro-2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0486] 3-fluoro-2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0488] 3-fluoro-2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0489] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0491] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0493] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0495] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0497] 3-fluoro-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0499] 3-fluoro-2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0501] 3-fluoro-2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0503] 3-fluoro-2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0505] 2-[4-[[(1R,3S) -3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0507] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0509] 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0511] 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0513] 2-[4-[[(1R,3S) -3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-3-(trifluorometil)fenol;

[0514] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-3-(trifluorometil)fenol;

[0516] 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-3-(trifluorometil)fenol;

[0518] 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-3-(trifluorometil)fenol;

[0520] 5-etil-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0522] 5-etil-2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0524] 5-etil-2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0526] 5-etil-2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0528] 5-ciklopropil-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0530] 5-ciklopropil-2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0532] 5-ciklopropil-2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0534] 5-ciklopropil-2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0536] 4-fluoro-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0538] 4-fluoro-2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0539] 4-fluoro-2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0541] 4-fluoro-2-[4-[[(1S,3S) -3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0543] 4-fluoro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0545] 4-fluoro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0547] 4-fluoro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0549] 4-fluoro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0551] 3-fluoro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0553] 3-fluoro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0555] 3-fluoro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0557] 3-fluoro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0559] 2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0561] 2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0563] 2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0564] 2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0566] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0568] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0570] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0572] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0574] 5-hloro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0576] 5-hloro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0578] 5-hloro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0580] 5-hloro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0582] 2-(4-((1R,3R) -3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0584] 2-(4-((1R,3S) -3-hidroksiciklopentil) amino)pirido[3,4-d] piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0586] 2-(4-(((1S,3R)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0588] 2-(4-(((1S,3S)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0589] 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksi-3-metil-cikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0591] 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksi-3-metil-cikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0593] 2-[4-[[(1S,3R)-3-hidroksi-3-metil-cikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0595] 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksi-3-metil-cikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0597] 2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0599] 2-(4-((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0601] 3-fluoro-2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0603] 3-fluoro-2-(4-((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0605] 3-hloro-2-fluoro-6-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0607] 3-hloro-2-fluoro-6-(4-(((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0609] 4,5-difluoro-2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0611] 4,5-difluoro-2-(4-((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0613] 3-fluoro-2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0614] 3-fluoro-2-(4-((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0616] 5-hloro-2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0618] 5-hloro-2-(4-((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0620] 3,5-difluoro-2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0622] 3,5-difluoro-2-(4-((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0624] 2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0626] 5-hloro-2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0628] 2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

[0630] 5-hloro-3-fluoro-2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

[0632] 3-fluoro-2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0634] 5-fluoro-2-(4-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0636] 5-fluoro-2-(4-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0638] 5-fluoro-2-(4-((1S,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0639] 5-fluoro-2-(4-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0641] 3-fluoro-2-(4-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0643] 3-fluoro-2-(4-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0645] 3-fluoro-2-(4-((1S,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol,

[0647] 3-fluoro-2-(4-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0649] 3-fluoro-2-(1-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0651] 3-fluoro-2-(1-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0653] 3-fluoro-2-(1-((1S,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol,

[0655] 3-fluoro-2-(1-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0657] 5-fluoro-2-(1-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0659] 5-fluoro-2-(1-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0661] 5-fluoro-2-(1-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0663] 5-fluoro-2-(1-((1S,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin--il)fenol;

[0664] 2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0666] 2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0668] 2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0670] 2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0672] 2-(4-(((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0674] 2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol;

[0676] 5-fluoro-2-(4-((1R,3R)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0678] 5-fluoro-2-(4-(((1S,3S)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0680] 5-fluoro-2-(4-(((1R,3S)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0682] 5-fluoro-2-(4-(((1S,3R)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

[0684] 3-fluoro-2-(1-((1R,3R)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

[0686] 3-fluoro-2-(1-(((1R,3S)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

[0688] 3-fluoro-2-(1-(((1S,3R)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

[0689] 3-fluoro-2-(1-(((1S,3S)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

[0691] (2S)-3-[[1-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]propan-1,2-diol;

[0693] (2R)-3-[[1-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]propan-1,2-diol;

[0695] 2-[8-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0697] 2-[8-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0699] 2-[8-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0701] 2-[8-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0703] 3-fluoro-2-(8-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[2,3-d]piridazin-5-il)fenol;

[0705] 3-fluoro-2-(8-((1r,3r)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[2,3-d]piridazin-5-il)fenol;

[0707] 2-[8-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]-2-metil-pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0709] 2-[8-[[(1S,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]-2-metil-pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0711] 2-[8-[[(1R,3R)-3-hidroksicikloheksil]amino]-2-metil-pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0713] 2-[8-[[(1S,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]-2-metil-pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol;

[0714] (S)-3-((4-(2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)ftalazin-1-il)amino)-2-metilpropan-1,2-diol; i

[0716] (R)-3-((4-(2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)ftalazin-1-il)amino)-2-metilpropan-1,2-diol;

[0718] ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0720] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje odabrano iz:

[0723]

[0726] ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0728] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje koje je:

[0731]

[0734] ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0736] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje koje je:

[0739]

[0740] ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0742] Termini koji nisu ovde posebno definisani treba da se shvate kao da imaju značenja koja bi im dao stručnjak u ovoj oblasti u svetlu obelodanjivanja i konteksta.Međutim, na način na koji se koriste u specifikaciji i priloženim patentnim zahtevima, osim ako nije drugačije definisano, sledeći termini imaju naznačeno značenje i poštuju se sledeće konvencije. U grupama definisanim u nastavku, broj atoma ugljenika je često naveden ispred grupe, na primer, C1-3 alkil označava alkil grupu ili radikal koji ima 1 do 3 atoma ugljenika.

[0744] „Alkil“ označava zasićenu alifatsku razgranatu ili pravolančanu ugljovodoničnu grupu koja ima određeni broj atoma ugljenika. Na primer, C1-3 alkil označava grupu koja ima od 1 do 3 atoma ugljenika u linearnom ili razgranatom rasporedu, kao što je -CH2CH2CH3 ili -CH(CH3)2.

[0746] „Halogen“ označava radikal fluora (fluoro), hlora (hloro), broma (bromo) ili joda (jodo).

[0748] Hemijski nazivi jedinjenja opisanih u ovoj specifikaciji generisani su korišćenjem ChemDraw<®>Professional verzije 19.0.0.22 iz PerkinElmer<®>ili Biovia Draw 2020 EE. Stručnjaci će shvatiti da različiti softveri za hemijsko imenovanje mogu generisati različita hemijska imena za određeno jedinjenje. U slučaju da je ovde opisano jedinjenje prikazano u obliku hemijskog imena i formule, formula će prevladati u slučaju bilo kakvog odstupanja.

[0750] U supstituentima kao što su -Oh i -CN, „-“ označava tačku vezivanja supstituenta za ostatak molekula.

[0752] U fragmentima kao što su

[0755]

[0758] označava tačku vezivanja fragmenta za ostatak molekula.

[0759] Termin „farmaceutski prihvatljiv“ se koristi za preciziranje da je predmet (na primer so, oblik doziranja ili pomoćna supstanca) pogodan za upotrebu kod pacijenata. Primer liste farmaceutski prihvatljivih soli može se naći u Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, P. H. Stahl i C. G. Wermuth, iz., Weinheim/Zürich: Wiley-YCH/VHCA, 2002. Pogodna farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja formule (I) je, na primer, so za adiciju kiseline ili so za adiciju baze. Kiselinska adiciona so jedinjenja formule (I) može se formirati dovođenjem jedinjenja u kontakt sa odgovarajućom neorganskom ili organskom kiselinom pod uslovima poznatim stručnjaku. Kiselinska adiciona so može se, na primer, formirati korišćenjem neorganske kiseline izabrane iz grupe koja se sastoji od hlorovodonične kiseline, bromovodične kiseline, sumporne kiseline i fosforne kiseline. Kiselinska adiciona so se takođe može formirati korišćenjem organske kiseline izabrane iz grupe koja se sastoji od trifluoroacetne kiseline, limunske kiseline, maleinske kiseline, oksalne kiseline, sirćetne kiseline, mravlje kiseline, benzojeve kiseline, fumarne kiseline, jantarne kiseline, vinske kiseline, mlečne kiseline, piruvinske kiseline, metansulfonske kiseline, benzensulfonske kiseline i para-toluensulfonske kiseline.

[0761] Stoga, u jednom otelotvorenju postoji jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, fosforna kiselina, trifluoroacetna kiselina, limunska kiselina, maleinska kiselina, oksalna kiselina, sirćetna kiselina, mravlja kiselina, benzojeva kiselina, fumarna kiselina, jantarna kiselina, vinska kiselina, mlečna kiselina, piruvinska kiselina, metansulfonska kiselina, benzensulfonska kiselina ili para-toluensulfonska kiselina.

[0763] Jedinjenja opisana u ovoj specifikaciji mogu formirati bazne adicione soli. So za adiciju baze jedinjenja formule (I) može se formirati dovođenjem jedinjenja u kontakt sa odgovarajućom neorganskom ili organskom bazom pod uslovima poznatim stručnjaku. Na primer, može biti moguće napraviti alkalni metal (kao što je natrijum, kalijum ili litijum) ili zemnoalkalijski metal (kao što je kalcijum) tretiranjem jedinjenja alkalnim metalom ili zemnoalkalijskim metalnim hidroksidom ili alkoksidom (npr. etoksidom ili metoksidom) ili odgovarajuće bazičnim organskim aminom (npr. holinom ili megluminom) u vodenom medijumu. Stoga, u jednom otelotvorenju postoji jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijum, kalijum, litijum, kalcijum, holin ili meglumin so.

[0765] U jednom otelotvorenju obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0767] U jednom otelotvorenju obezbeđeno je jedinjenje formule (I).

[0769] U jednom otelotvorenju obezbeđena je farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja formule (I).

[0771] Jedinjenja i soli opisani u ovoj specifikaciji mogu postojati u rastvorenim oblicima i nerastvorenim oblicima. Na primer, rastvoreni oblik može biti hidrirani oblik, kao što su hemi-hidrat, monohidrat, di-hidrat, tri-hidrat ili njihova alternativna količina. Svi takvi rastvoreni i nerešeni oblici jedinjenja formule (I) su obuhvaćeni ovim dokumentom.

[0773] Atomi jedinjenja i soli opisanih u ovoj specifikaciji mogu postojati kao njihovi izotopi. Ovde su obuhvaćena sva jedinjenja formule (I), pri čemu je atom zamenjen jednim ili više njegovih izotopa (na primer jedinjenje formule (I), pri čemu je jedan ili više atoma ugljenika izotop ugljenika od<11>C ili<13>C, ili pri čemu je jedan ili više atoma vodonika izotop od<2>H ili<3>H).

[0775] Jedinjenja primene mogu postojati u jednom ili više geometrijskih, optičkih, enantiomernih i dijastereomernih oblika, uključujući, ali ne ograničavajući se na, cis- i trans-oblike, E- i Z-oblike i R-, S- i mezo-oblike. Osim ako nije drugačije navedeno, pozivanje na određeno jedinjenje uključuje sve takve izomerne oblike, uključujući racemične i druge njihove smeše. Po potrebi, takvi izomeri se mogu odvojiti od svojih smeša primenom ili prilagođavanjem poznatih metoda (npr. hromatografske tehnike i tehnike rekristalizacije).

[0777] Jedinjenja formule (I) mogu uključivati jedan ili više hiralnih centara. U meri u kojoj struktura ili hemijsko ime ne ukazuju na hiralnost, namena strukture ili imena je da obuhvati bilo koji pojedinačni stereoizomer koji odgovara toj strukturi ili imenu, kao i bilo koju smešu stereoizomera uključujući racemate Kada struktura u ovoj specifikaciji uključuje veze izvučene kao čvrsti ili heširani klinovi (tj. i ), predviđeno je da čvrsti i heširani klinovi ukazuju na apsolutnu konfiguraciju hiralnog centra, osim ako su „ili“ ili „&“ hiralne zastavice prisutne u hiralnom centru. Grupe povezanih hiralnih zastavica označene su istim celim brojem, na primer „ili1“, „&1“, „ili2“, „&2“ itd. Stručnjak će razumeti značenje hiralnih zastava u hiralnim centrima. Na primer, struktura

[0780]

[0783] označava da je jedinjenje jedan stereoizomer sa definisanom apsolutnom konfiguracijom. Kao dodatni primer, struktura

[0786]

[0790]

[0793] označava da je jedinjenje jedan stereoizomer sa definisanom relativnom konfiguracijom u označenim hiralnim centrima, ali nepoznata apsolutna konfiguracija u označenim hiralnim centrima. Kao dodatni primer, struktura

[0796]

[0799] označava da je jedinjenje smeša stereoizomera koji imaju definisanu relativnu konfiguraciju u označenim hiralnim centrima.

[0801] U znanosti je dobro poznato kako se takvi optički aktivni oblici mogu razdvojiti. Na primer, jedan stereoizomer se može dobiti izolacijom iz mešavine izomera (npr. racemata) koristeći, na primer, hiralno hromatografsko razdvajanje. U drugim otelotvorenjima, jedan stereoizomer se dobija direktnom sintezom iz, na primer, hiralnog početnog materijala.

[0802] Prema jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je jedan enantiomer sa viškom enantiomera (%ee) od ≥ 95%, ≥ 98% ili ≥ 99%. Pogodno je da je jedan enantiomer prisutan u suvišku enantiomera od ≥ 99%.

[0804] Prema jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je jedan enantiomer koji je u suvišku enantiomera (%ee) u opsegu od 95 do 100%.

[0806] Prema jednom otelotvorenju, obezbeđena je farmaceutska kompozicija, koja sadrži jedinjenje formule (I) koje je jedan enantiomer sa viškom enantiomera (%ee) od ≥ 95%, ≥ 98% ili ≥ 99% ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u vezi sa farmaceutski prihvatljivim razblaživačem ili nosačem. Pogodno je da je jedan enantiomer prisutan u suvišku enantiomera od ≥ 99%.

[0808] Prema jednom otelotvorenju, obezbeđena je farmaceutska kompozicija, koja sadrži jedinjenje formule (I) koje je jedan enantiomer koji je u enantiomernom višku (%ee) u opsegu od 95 do 100%, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u vezi sa farmaceutski prihvatljivim razblaživačem ili nosačem.

[0810] Jedinjenja aplikacije mogu postojati u jednom ili više tautomernih oblika, uključujući, ali ne ograničavajući se na, keto- i enol-oblike. Upućivanje na određeno jedinjenje uključuje sve tautomerne oblike, uključujući njihove smeše. Shodno tome, struktura koja je ovde prikazana kao jedan tautomer ima za cilj da uključi i druge tautomere.

[0812] Jedinjenja formule (I) se mogu primeniti u obliku predleka, koji je jedinjenje koje se razlaže u ljudskom ili životinjskom telu kako bi se oslobodilo jedinjenje formule (I). Takvi, farmaceutski prihvatljivi, predlekovi jedinjenja za formulu (I) su opisani, ali nisu u opsegu pronalaska.

[0814] U znanosti su poznati različiti oblici predlekova. Na primer, vidi

[0815] a) Design of Pro-drugs, uredio H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);

[0816] b) A Textbook of Drug Design and Development, uredili Krogsgaard-Larsen i H Bundgaard, poglavlje 5 „Design and Application of Pro-drugs“, H.

[0817] Bundgaard str.113-191 (1991);

[0819] c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

[0820] d) H. Bundgaard, i sar., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); i

[0822] e) N. Kakeya, i sar., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984).

[0824] U jednom otelotvorenju obezbeđen je predlek jedinjenja formule (I) kako je ovde definisano, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0826] U jednom otelotvorenju obezbeđen je N-oksid jedinjenja formule (I) kako je ovde definisano, ili njegov prolek ili farmaceutski prihvatljiva so.

[0828] Kao rezultat njihove NLRP3 inflammsome inhibitorne aktivnosti, očekuje se da će jedinjenja formule (I) i njihove farmaceutski prihvatljive soli biti korisna u terapiji.

[0830] Termin „terapija“ ima za cilj da ima svoje normalno značenje bavljenja bolešću ili stanjem kako bi se u potpunosti ili delimično ublažio jedan, neki ili svi njegovi simptomi, ili kako bi se ispravila ili kompenzovala osnovna patologija. Termin „terapija“ takođe uključuje „profilaksu“, osim ako postoje specifične indikacije koje ukazuju na suprotno. Termine „terapeutski“ i „terapijski“ treba tumačiti na odgovarajući način.

[0832] Termin „profilaksa“ ima za cilj da ima svoje normalno značenje i uključuje primarnu profilaksu za sprečavanje razvoja bolesti ili stanja i sekundarnu profilaksu, pri čemu se bolest ili stanje već razvilo i pacijent je privremeno ili trajno zaštićen od pogoršanja ili pogoršanja bolesti ili stanja, ili razvoja novih simptoma povezanih sa bolešću ili stanjem.

[0834] Termin „lečenje“ se koristi sinonimno sa terminom „terapija“. Slično tome, termin „lečenje“ može se smatrati „primenom terapije“, pri čemu je „terapija“ definisana ovde.

[0835] Shodno tome, ovde opisana jedinjenja ili farmaceutske kompozicije mogu se koristiti u terapiji, na primer za lečenje bolesti ili poremećaja. Takođe je predviđen metod lečenja bolesti ili poremećaja koji sadrži primenu terapeutski efikasne količine jedinjenja opisanih u ovom dokumentu kod subjekta ili pacijenta kome je to potrebno.

[0837] U jednom otelotvorenju predviđena je metoda za lečenje bolesti ili stanja u kojem je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma, kod subjekta kome je potreban takav tretman, koja sadrži primenu na navedenom subjektu terapeutski efikasne količine jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0839] U jednom otelotvorenju predviđena je metoda za lečenje bolesti ili stanja izabranih iz bolesti bubrega kao što su akutna povreda bubrega, hronična bolest bubrega i dijabetička bolest bubrega; kardiovaskularnih bolesti kao što su koronarna aterosklerotska bolest srca, kardiomiopatija, infarkt miokarda, srčana hipertrofija i povreda usled ishemije-reperfuzije; bolesti jetre kao što su nealkoholna masna bolest jetre, nealkoholni steatohepatitis, alkoholni steatohepatitis, hronična infekcija virusom hepatitisa C i povreda jetre izazvana paracetamolom; inflamatornih bolesti kao što su autoinflamatorni poremećaji, periodični sindromi povezani sa kriopirinom, porodični hladni autoinflamatorni sindrom (FCAS), Muckle-Wells sindrom (MWS), hronični infantilni neurološki kožni zglobni (CINCA) sindrom i neonatalna multisistemska inflamatorna bolest (NOMID); inflamatorne kožne bolesti kao što su akne vulgaris i hidradenitis suppurativa; inflamatorne bolesti creva kao što su ulcerozni kolitis (UC) i Kronova bolest; autoimune bolesti kao što su giht, pseudo giht, reumatoidni artritis (RA), multipla skleroza (MS), Adisonova bolest, celijakija, sistemski eritematozni lupus (SLE) i vitiligo; i respiratorne bolesti kao što su hronične plućne bolesti, idiopatska plućna fibroza (IPF), hronična opstruktivna plućna bolest (COPD) i astma, kod subjekta kome je potrebno takvo lečenje, koji obuhvata primenu na navedenom subjektu terapeutski efikasne količine jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0841] U jednom otelotvorenju je obezbeđen metod za lečenje bolesti ili stanja odabranog iz akutnog oštećenja bubrega, hronične bolesti bubrega, dijabetičke bolesti bubrega, koronarne aterosklerotske bolesti srca, kardiomiopatije, infarkta miokarda, srčane hipertrofije, ishemijsko-reperfuzionog oštećenja, nealkoholne masne bolesti jetre, nealkoholnog steatohepatitisa, alkoholnog steatohepatitisa, hronične infekcije virusom hepatitisa C, oštećenja jetre izazvane paracetamolom, autoinflamatornih poremećaja, periodičnih sindroma povezanih sa kriopirinom, familijarnog autoinflamatornog sindroma prehlade (FCAS), Muckle-Wells sindroma (MWS), hroničnog infantilnog neurološkog kožno-artikularnog (CINCA) sindroma, multisistemske inflamatorne bolesti novorođenčadi (NOMID), akne vulgaris, hidradenitis supurativa, ulceroznog kolitisa (UC), Kronove bolesti, gihta, pseudogihta, reumatoidnog artritisa (RA), multiple skleroze (MS), Adisonove bolesti, celijakije, sistemskog eritematoznog lupusa (SLE), vitiliga, hroničnih plućnih bolesti, idiopatske plućne fibroze (IPF), hronične opstruktivne plućne bolesti (COPD) i astme, kod subjekta kome je potreban takav tretman, koji sadrži davanje pomenutom subjektu terapeutski efikasne količine jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0843] U jednom otelotvorenju obezbeđeno je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u terapiji.

[0845] U jednom otelotvorenju obezbeđeno je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju subjekta sa bolešću ili stanjem u koje je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma.

[0847] U jednom otelotvorenju obezbeđeno je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju bolesti ili stanja odabranih iz bolesti bubrega kao što su akutno oštećenje bubrega, hronična bolest bubrega i dijabetička bolest bubrega; kardiovaskularnih bolesti kao što su koronarna aterosklerotska bolest srca, kardiomiopatija, infarkt miokarda, srčana hipertrofija i ishemijsko-reperfuzijska povreda; bolesti jetre kao što su nealkoholna masna bolest jetre, nealkoholni steatohepatitis, alkoholni steatohepatitis, hronična infekcija virusom hepatitisa C i oštećenje jetre izazvano paracetamolom; inflamatornih bolesti kao što su autoinflamatorni poremećaji, periodični sindromi povezani sa kriopirinom, familijarni hladni autoinflamatorni sindrom (FCAS), Muckle-Wells sindrom (MWS), hronični infantilni neurološki kutani artikularni (CINCA) sindrom i neonatalna multisistemska inflamatorna bolest (NOMID); inflamatornih bolesti kože kao što su akne vulgaris i hidradenitis supurativa; inflamatornih bolesti creva kao što su ulcerozni kolitis (UC) i Kronova bolest; autoimune bolesti kao što su giht, pseudogiht, reumatoidni artritis (RA), multipla skleroza (MS), Adisonova bolest, celijakija, sistemski eritematozni lupus (SLE) i vitiligo; i respiratorne bolesti kao što su hronične plućne bolesti, idiopatska plućna fibroza (IPF), hronična opstruktivna plućna bolest (COPD) i astma.

[0849] U jednom otelotvorenju obezbeđeno je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju bolesti ili stanja odabranog iz akutnog oštećenja bubrega, hronične bolesti bubrega, dijabetičke bolesti bubrega, koronarne aterosklerotske bolesti srca, kardiomiopatije, infarkta miokarda, srčane hipertrofije, ishemijsko-reperfuzionog oštećenja, nealkoholne masne bolesti jetre, nealkoholnog steatohepatitisa, alkoholnog steatohepatitisa, hronične infekcije virusom hepatitisa C, oštećenja jetre izazvane paracetamolom, autoinflamatornih poremećaja, periodičnih sindroma povezanih sa kriopirinom, familijarnog autoinflamatornog sindroma prehlade (FCAS), Muckle-Wells sindroma (MWS), hroničnog infantilnog neurološkog kožno-artikularnog (CINCA) sindroma, multisistemske inflamatorne bolesti novorođenčadi (NOMID), akne vulgaris, hidradenitis supurativa, ulceroznog kolitisa (UC), Kronove bolesti, gihta, pseudogihta, reumatoidnog artritisa (RA), multiple skleroze (MS), Adisonove bolesti, celijakije, sistemskog eritematoznog lupusa (SLE), vitiliga, hroničnih plućnih bolesti, idiopatske plućne fibroze (IPF), hronične opstruktivne plućne bolesti bolest (COPD) i astma.

[0851] U jednom otelotvorenju predviđena je upotreba jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u proizvodnji leka za lečenje bolesti ili stanja u koje je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma.

[0853] U jednom otelotvorenju je obezbeđena upotreba jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u proizvodnji leka za lečenje bolesti ili stanja odabranog iz bolesti bubrega kao što su akutna povreda bubrega, hronična bolest bubrega i dijabetička bolest bubrega; kardiovaskularne bolesti kao što su koronarna aterosklerotska bolest srca, kardiomiopatija, infarkt miokarda, srčana hipertrofija i povreda usled ishemije-reperfuzije; bolesti jetre kao što su nealkoholna masna bolest jetre, nealkoholni steatohepatitis, alkoholni steatohepatitis, hronična infekcija virusom hepatitisa C i povreda jetre izazvana paracetamolom; inflamatorne bolesti kao što su autoinflamatorni poremećaji, periodični sindromi povezani sa kriopirinom, porodični hladni autoinflamatorni sindrom (FCAS), Muckle-Wells sindrom (MWS), hronični infantilni neurološki kožni zglobni (CINCA) sindrom i neonatalni početak multisistemske inflamatorne bolesti (NOMID); inflamatorne kožne bolesti kao što su akne vulgaris i hidradenitis suppurativa; inflamatorne bolesti creva kao što su ulcerozni kolitis (UC) i Kronova bolest; autoimune bolesti kao što su giht, pseudo giht, reumatoidni artritis (RA), multipla skleroza (MS), Adisonova bolest, celijakija, sistemski eritematozni lupus (sle) i vitiligo; i respiratorne bolesti kao što su hronične plućne bolesti, idiopatska plućna fibroza (IPF), hronična opstruktivna plućne bolesti (COPD) i astme.

[0855] U jednom otelotvorenju je obezbeđena upotreba jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u proizvodnji leka za lečenje bolesti ili stanja odabranog iz akutnog oštećenja bubrega, hronične bolesti bubrega, dijabetičke bolesti bubrega, koronarne aterosklerotske bolesti srca, kardiomiopatije, infarkta miokarda, srčane hipertrofije, ishemijsko-reperfuzionog oštećenja, nealkoholne masne bolesti jetre, nealkoholnog steatohepatitisa, alkoholnog steatohepatitisa, hronične infekcije virusom hepatitisa C, oštećenja jetre izazvane paracetamolom, autoinflamatornih poremećaja, periodičnih sindroma povezanih sa kriopirinom, familijarnog autoinflamatornog sindroma prehlade (FCAS), Muckle-Wells sindroma (MWS), hroničnog infantilnog neurološkog kožno-artikularnog (CINCA) sindroma, multisistemske inflamatorne bolesti novorođenčadi (NOMID), akne vulgaris, hidradenitis supurativa, ulceroznog kolitisa (UC), Kronove bolesti, gihta, pseudogihta, reumatoidnog artritisa (RA), multiple skleroze (MS), Adisonove bolesti, celijakije, sistemskog eritematoznog lupusa (SLE), vitiliga, hroničnih plućnih bolesti, idiopatske plućne fibroze (IPF), hronične opstruktivne plućne bolesti bolest (HOBP) i astma.

[0857] Termin „terapijski efikasna količina“ odnosi se na količinu jedinjenja formule (I) kako je opisano u bilo kom od otelotvorenja ovde koja je efikasna za pružanje „terapije“ kod subjekta, ili za „lečenje“ bolesti ili stanja kod subjekta.

[0858] Terapijski efikasna količina može prouzrokovati bilo koju od promena koje se mogu uočiti ili izmeriti kod subjekta kao što je gore opisano u definiciji „terapije“, „lečenja“ i „profilakse“. Kao što su prepoznali stručnjaci, efektivne količine mogu varirati u zavisnosti od načina primene, upotrebe pomoćnih supstanci i zajedničke upotrebe sa drugim agensima. Na primer, kada se koristi kombinovana terapija, količina jedinjenja formule (I) ili farmaceutski prihvatljive soli opisane u ovoj specifikaciji i količina drugih farmaceutski aktivnih agensa su, kada se kombinuju, zajednički efikasne za lečenje ciljanog poremećaja ili stanja kod subjekta. U tom kontekstu, kombinovane količine su u „terapijski efikasnoj količini“ ako su, kada se kombinuju, dovoljne za smanjenje simptoma bolesti ili stanja koje reaguje na inhibiciju NLRP3 inflamasoma kao što je gore opisano. Tipično, takve količine može odrediti stručnjak u struci, na primer, počevši od opsega doziranja opisanog u ovoj specifikaciji za jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i odobrenog ili na drugi način objavljenog opsega doziranja drugih farmaceutski aktivnih jedinjenja.

[0860] „Subjekti“ uključuju, na primer, sisare, na primer, ljude.

[0862] Jedinjenja formule (I), i njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu se primenjivati kao farmaceutske kompozicije, koji sadrže jednu ili višu farmaceutski prihvatljivih pomoćnih supstanci.

[0864] Stoga, u jednom otelotvorenju je obezbeđena farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i najmanje jednu farmaceutsku prihvatljivu pomoćnu supstancu.

[0866] Pomoćna supstanca(e) odabrani za uključivanje u određenu kompoziciju zavisiće od faktora kao što su način primene i oblik date kompozicije. Odgovarajuće farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance su dobro poznate stručnjacima u ovoj oblasti i opisane su, na primer, u Pharmaceutical Excipients, šesto izdanje, Pharmaceutical Press, uredili Rowe, Ray C; Sheskey, Paul J;

[0867] Quinn, Marian. Farmaceutski prihvatljive pomoćne materije mogu funkcionisati kao, na primer, pomoćna sredstva, razređivači, nosači, stabilizatori, arome, bojila, punila, veziva, sredstva za dezintegraciju, maziva, klizači, agensi za zgušnjavanje i agensi za oblaganje. Kako će to ceniti stručnjaci, određene farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance mogu imati više od jedne funkcije i mogu imati alternativne funkcije u zavisnosti od toga koliko je pomoćne supstance prisutno u kompoziciji i koje druge pomoćne supstance su prisutne u kompoziciji.

[0868] U jednom otelotvorenju obezbeđena je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i najmanje jednu farmaceutski prihvatljivu pomoćnu supstancu, pri čemu je količina farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance u sastavu veća ili jednaka 1 mg. U daljem otelotvorenju, količina farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance u kompoziciji je veća ili jednaka 10 mg. U daljem otelotvorenju, količina farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance u kompoziciji je veća ili jednaka 100 mg.

[0870] Farmaceutske kompozicije mogu biti u obliku pogodnom za oralnu upotrebu (na primer, kao tablete, pastile, tvrde ili meke kapsule, vodene ili uljane suspenzije, emulzije, disperzibilni praškovi ili granule, sirupi ili eliksiri), za lokalnu upotrebu (na primer, kao kreme, masti, gelovi ili vodeni ili uljani rastvori ili suspenzije), za primenu inhalacijom (na primer, kao fino usitnjeni prah ili tečni aerosol), za primenu insuflacijom (na primer, kao fino usitnjeni prah) ili za parenteralnu primenu (na primer, kao sterilni vodeni ili uljani rastvor za intravenozno, potkožno, intramuskularno ili intramuskularno doziranje), ili kao supozitorija za rektalno doziranje. Kompozicije se mogu dobiti konvencionalnim postupcima koji su dobro poznati u znanosti. Prema tome, kompozicije namenjene za oralnu primenu mogu sadržati, na primer, jedan ili više agensa za bojenje, zaslađivanje, aromatizaciju i/ili jedan ili više konzervanasa.

[0872] Jedinjenje formule (I) se obično daje subjektu u jediničnoj dozi u opsegu 2,5-5000 mg/m<2>telesne površine subjekta, ili približno 0,05-100 mg/kg, što obično obezbeđuje terapijski efikasnu dozu. Oblik jedinične doze kao što je tableta ili kapsula može sadržati, na primer, 0,1-400 mg aktivnog sastojka. Dnevna doza će nužno varirati u zavisnosti od lečenog domaćina, određenog puta primene, bilo koje terapije koja se istovremeno primenjuje i težine bolesti ili stanja koje se leči.

[0874] Ovde opisana farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenja formule (I), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, i stoga se očekuje da bude korisna u terapiji.

[0876] Kao takva, u jednom otelotvorenju obezbeđena je farmaceutska kompozicija kao što je ovde obelodanjeno za upotrebu u terapiji.

[0877] U jednom otelotvorenju obezbeđena je farmaceutska kompozicija kao što je ovde obelodanjeno za upotrebu u lečenju subjekta sa bolešću ili stanjem u koje je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma.

[0879] U jednom otelotvorenju je obezbeđena farmaceutska kompozicija kako je ovde opisano za upotrebu u lečenju bolesti ili stanja odabranih iz bolesti bubrega kao što su akutno oštećenje bubrega, hronična bolest bubrega i dijabetička bolest bubrega; kardiovaskularnih bolesti kao što su koronarna aterosklerotska bolest srca, kardiomiopatija, infarkt miokarda, srčana hipertrofija i ishemijsko-reperfuzijska povreda; bolesti jetre kao što su nealkoholna masna bolest jetre, nealkoholni steatohepatitis, alkoholni steatohepatitis, hronična infekcija virusom hepatitisa C i oštećenje jetre izazvano paracetamolom; inflamatornih bolesti kao što su autoinflamatorni poremećaji, periodični sindromi povezani sa kriopirinom, familijarni hladni autoinflamatorni sindrom (FCAS), Muckle-Wells sindrom (MWS), hronični infantilni neurološki kutani artikularni (CINCA) sindrom i neonatalna multisistemska inflamatorna bolest (NOMID); inflamatornih bolesti kože kao što su akne vulgaris i hidradenitis supurativa; inflamatornih bolesti creva kao što su ulcerozni kolitis (UC) i Kronova bolest; autoimune bolesti kao što su giht, pseudogiht, reumatoidni artritis (RA), multipla skleroza (MS), Adisonova bolest, celijakija, sistemski eritematozni lupus (SLE) i vitiligo; i respiratorne bolesti kao što su hronične plućne bolesti, idiopatska plućna fibroza (IPF), hronična opstruktivna plućna bolest (COPD) i astma.

[0881] U jednom otelotvorenju je obezbeđena farmaceutska kompozicija kako je ovde opisano za upotrebu u lečenju bolesti ili stanja odabranog iz akutnog oštećenja bubrega, hronične bolesti bubrega, dijabetičke bolesti bubrega, koronarne aterosklerotske bolesti srca, kardiomiopatije, infarkta miokarda, srčane hipertrofije, ishemijsko-reperfuzionog oštećenja, nealkoholne masne bolesti jetre, nealkoholnog steatohepatitisa, alkoholnog steatohepatitisa, hronične infekcije virusom hepatitisa C, oštećenja jetre izazvane paracetamolom, autoinflamatornih poremećaja, periodičnih sindroma povezanih sa kriopirinom, familijarnog autoinflamatornog sindroma prehlade (FCAS), Muckle-Wells sindroma (MWS), hroničnog infantilnog neurološkog kožno-artikularnog (CINCA) sindroma, multisistemske inflamatorne bolesti novorođenčadi (NOMID), akne vulgaris, hidradenitis supurativa, ulceroznog kolitisa (UC), Kronove bolesti, gihta, pseudogihta, reumatoidnog artritisa (RA), multiple skleroze (MS), Adisonove bolesti, celijakije, sistemskog eritematoznog lupusa (SLE), vitiliga, hroničnih plućnih bolesti, idiopatske plućne fibroze (IPF), hronične opstruktivne plućne bolesti bolest (COPD) i astma.

[0883] Sintetičke metode

[0885] Jedinjenja formule (I) mogu se pripremiti u skladu sa procedurama sledećih šema, koristeći odgovarajuće materijale, i dalje su ilustrovana specifičnim primerima navedenim u ovom dokumentu. Štaviše, korišćenjem ovde opisanih procedura, stručnjak može lako da pripremi dodatna jedinjenja koja spadaju u obim ovih patentnih zahteva. Primeri dalje ilustruju detalje za pripremu jedinjenja koja su ovde obelodanjena. Stručnjaci će lako razumeti da se poznate varijacije uslova i procesa sledećih pripremnih postupaka mogu koristiti za pripremu ovih jedinjenja.

[0887] Jedinjenja prikazana ovde mogu se takođe izolovati u obliku njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, kao što su one opisane ranije ovde.

[0889] Možda će biti potrebno zaštititi reaktivne funkcionalne grupe (npr. hidroksi) u intermedijerima koji se koriste u pripremi jedinjenja formule (I) kako bi se izbeglo njihovo neželjeno učešće u reakciji koja dovodi do formiranja jedinjenja. Mogu se koristiti konvencionalne zaštitne grupe, na primer one koje je opisao P. G. M. Wuts u „Greene's Protective Groups in Organic Synthesis“, peto izdanje, John Wiley & Sons Inc., 2014. Na primer, kada je fenolna hidroksi grupa zaštićena kao metil eter, zaštitna grupa se može ukloniti korišćenjem BBr3 u dihlorometanu. Benzilne zaštitne grupe se mogu ukloniti hidrogenacijom preko paladijumskog katalizatora, a parametoksibenzilne grupe se mogu ukloniti korišćenjem HCl u alkoholu. Acetalne zaštitne grupe diola mogu se ukloniti tretmanom kiselinom (na primer AcOH/H2O ili HCl u 1,4-dioksanu).

[0890] Šema 1

[0893]

[0896] Jedinjenje 6 se može pripremiti procesom prikazanim u Šemi 1.

[0897] Jedinjenje 1 može reagovati sa aminoalkoholom (2) u prisustvu baze (kao što je DIPEA) u polarnom rastvaraču (kao što je NMP) kako bi se dobilo jedinjenje 3. Kada R<5>nije -H, dobijeni regioizomeri se mogu razdvojiti odgovarajućim tehnikama razdvajanja kao što je hromatografija. Jedinjenje 3 može reagovati sa opciono zaštićenim estrom aril boronske kiseline/boronata (4) u Suzuki reakciji unakrsnog spajanja u prisustvu odgovarajućeg katalizatora prelaznog metala da bi se dobilo jedinjenje 5. PG<1>je odgovarajuća fenolna hidroksi zaštitna grupa kao što su metil, benzil ili 4-metoksibenzil. Jedinjenje 6 se obezbeđuje uklanjanjem zaštitne grupe PG<1>(kada je prisutna) koristeći odgovarajuće uslove.

[0898] Šema 1

[0901]

[0904] Jedinjenje 10 se može pripremiti procesom prikazanim u Šemi 2.

[0905] Jedinjenje 1 može reagovati sa opciono zaštićenim aminodiolom (7) u prisustvu baze (kao što je DIPEA) u polarnom rastvaraču (kao što je NMP) kako bi se dobilo jedinjenje 8. PG<2>je odgovarajuća zaštitna grupa za diol, kao što je acetal. Kada R<5>nije -H, dobijeni regioizomeri se mogu razdvojiti odgovarajućim tehnikama razdvajanja kao što je hromatografija. Jedinjenje 8 može reagovati sa opciono zaštićenim estrom aril boronske kiseline/boronata (4) u Suzuki reakciji unakrsnog spajanja u prisustvu odgovarajućeg katalizatora prelaznog metala da bi se dobilo jedinjenje 9. PG<1>je odgovarajuća fenolna hidroksi zaštitna grupa kao što su metil, benzil ili 4-metoksibenzil. Jedinjenje 10 se obezbeđuje uklanjanjem zaštitnih grupa PG<1>i PG<2>(kada su prisutne) koristeći odgovarajuće uslove. Alternativno, u prvom koraku može se koristiti nezaštićeni aminodiol, a zaštitna grupa PG<2>uvedena je pre Suzukijeve reakcije unakrsnog spajanja.

[0907] Derivati Aza jedinjenja 6 i 10 mogu se pripremiti korišćenjem procesa prikazanih u Šemi 1 i Šemi 2 korišćenjem jedinjenja 11 i 12 umesto jedinjenja 1, i odvajanjem dobijenih regioizomera korišćenjem odgovarajućih tehnika separacije kao što je hromatografija.

[0908]

[0911] Jedinjenje 17 se može pripremiti procesom prikazanim u Šemi 3.

[0912] Jedinjenje 14 se dobija litijum-halogenom razmenom jedinjenja 13 sa alkillitijumom (kao što je n-BuLi) u rastvaraču kao što je THF, nakon čega sledi dodavanje 3-(tercbutil)-4-metil piridin-3,4-dikarboksilata i reakcija sa hidrazinom da bi se dobilo jedinjenje 14. PG<1>je odgovarajuća fenolna hidroksi zaštitna grupa kao što su metil, benzil ili 4-metoksibenzil. Jedinjenje 16 može biti hlorisano agensom za hlorisanje kao što je fosforil trihlorid u prisustvu baze (kao što je piridin) i rastvarača (kao što je 1,4-dioksan), nakon čega sledi reakcija sa aminoalkoholom 15 u prisustvu baze (kao što je trietilamin) i polarnog rastvarača (kao što je MeCN). Alternativno, jedinjenje 16 se može obezbediti spajanjem sa aminoalkoholom 15 u prisustvu reagensa za spajanje (kao što je BOP) i baze (kao što je dBu) u prisustvu polarnog rastvarača (kao što je DMF). Jedinjenje 17 se obezbeđuje uklanjanjem zaštitne grupe PG<1>iz jedinjenja 16 uz odgovarajuće uslove.

[0914] U gornjim šemama 1-3,

[0915]

[0918] predstavljaju R<1>kao što je ovde opisano.

[0920] Primeri

[0922] Jedinjenja opisana u ovoj specifikaciji dalje su ilustrovana u sledećim primerima. Ovi primeri su dati samo kao ilustracija i nisu ograničavajući.

[0924] U primerima, maseni spektri visoke rezolucije snimljeni su na masenom spektrometru Mikromasa LCT opremljenom interfejsom elektrosprej (LC-HRMS).

[0926] <1>H NMR merenja su izvršena na Bruker Avance III 300, 400, 500 i 600 spektrometrima, koji rade na<1>H frekvencijama od 300, 400, 500 i 600 MHz, respektivno. Eksperimenti su obično zabeleženi na 25 °C. Hemijski pomaci su dati u ppm sa rastvaračem kao internim standardom. Protoni na heteroatomima kao što su NH i OH protoni prijavljuju se samo kada se otkriju u NMR i stoga mogu nedostajati. Korišćene su sledeće skraćenice (i njihovi derivati, npr. dd, dublet dubleta itd.): s, singlet; d, dublet; t, triplet; q, kvartet; m, multiplet; br, široko; qn, kvintet; p, pentet.

[0928] Flash hromatografija je izvršena korišćenjem ili normalne faze silika FLASH+<®>(40M, 25M ili 12M), Biotage<®>SNAP kertridža KP-Sil (340, 100, 50 ili 10), Biotage<®>SNAP kertridža KP-NH (340, 100, 50 ili 10) ili Agela<®>Flash Column Silica-CS kertridža (330, 180, 120, 80), osim ako nije drugačije navedeno.

[0930] Reverzna fazna fleš hromatografija je izvedena pomoću Agela<®>C-18 sferičnih kertridža od 20-35 µm 100A, osim ako nije drugačije navedeno.

[0932] Prečišćavanje je vršeno preparativnom HPLC, preparativnom SFC ili fleš hromatografijom sa reverznom fazom na standardnoj opremi, korišćenjem MS ili UV aktiviranog prikupljanja frakcija, i korišćenjem navedenih uslova.

[0934] Generalno, svi korišćeni rastvarači su bili komercijalno dostupni i analitičkog kvaliteta. Za reakcije su rutinski korišćeni bezvodni rastvarači.

[0935] Mikrotalasne reakcije su izvedene na Biotage<®>Initator+ pomoću adekvatnog staklenog reaktora.

[0936] Intermedijeri i primeri imenovani u nastavku imenovani su pomoću ChemDraw Professional verzije 19.0.0.22 iz PerkinElmer ili Biovia Draw 2020 EE. Stručnjaci će shvatiti da različiti softveri za hemijsko imenovanje mogu generisati različita hemijska imena za određeno jedinjenje.

[0937] Spisak skraćenica

[0938] AcOH = sirćetna kiselina

[0939] aq. = vodeno

[0940] BOP = (benzotriazol-1-iloksi)tris(dimetilamino)fosfonijum heksafluorofosfat

[0941] d = dani

[0942] DBU = 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en

[0943] DCM = dihlorometan

[0944] DIPEA = N,N-diizopropiletilamin

[0945] DMAP = dimetilaminopiridin

[0946] DME = dimetoksietan

[0947] DMF = dimetilformamid

[0948] DMSO = dimetilsulfoksid

[0949] DMSO-d6 = heksadeuterodimetil sulfoksid

[0950] Et2O = dietil eter

[0951] EtOAc = etilacetat

[0952] EtOH = etanol

[0953] h = sati

[0954] HPLC = visokopritisna tečna hromatografija

[0955] IPA = 2-propanol

[0956] IPE = izopropil eter

[0957] iPrOAc = izopropil acetat

[0958] KOAc = kalijum acetat

[0959] LCMS = tečna hromatografija masena spektrometrija MeCN = acetonitril

[0960] MeLi = metil litijum

[0961] MeOH = metanol

[0962] min = minuta

[0963] MS (Esi)/ HRMS (Esi) = masena spektrometrija (jonizacija elektrosprej)/masena spektrometrija visoke rezolucije

[0964] MTBE = terc-butil metileter

[0965] NaOAc = natrijum acetat

[0966] n-BuLi = 1-butil litijum

[0967] n-BuNH2 = 1-butilamin

[0968] NMP = N-metil-2-pirolidon

[0969] Pd/C = paladijum na ugljeniku

[0970] PdCl2(Amphos)2 = bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijum(II)

[0971] Pd(dppf)Cl2 = [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 = [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II), kompleks sa dihlorometanom

[0972] Pd(PPh3)4 = tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)

[0973] PMBCl = 4-metoksibenzil hlorid

[0974] rt = sobna temperatura

[0975] RT = vreme zadržavanja

[0976] sat. = zasićeno

[0977] SFC = superkritična fluidna hromatografija

[0978] SPhos Pd G3 = (2-dicikloheksilfosfino-2',6'-dimetoksibifenil) [2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat

[0979] TEA = trietilamin

[0980] TFA = trifluoroacetatna kiselina

[0981] THF = tetrahidrofuran

[0982] TLC = tankoslojna hromatografija

[0983] Xphos Pd G3 = (2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat

[0984] Intermedijeri

[0985] Intermedijer 1

[0986] Korak 1: Intermedijer 2: terc-butil 4-[2-metoksi-4-(trifluorometil)benzoil]piridin-3-karboksilat

[0987]

[0990] Rastvoru 1-bromo-2-metoksi-4-(trifluorometil)benzena (37,7 g; 148,0 mmol; 1,0 ekv.) u THF (100 ml) dodat je n-BuLi (100 ml; 158,0 mmol;

[0991] 1,1 ekv.) (1,6 M u heksanima) na -78 °C i rastvor je mešan na -78 °C. Nakon 10 min, O3-tert-butil O4-metil piridin-3,4-dikarboksilat (35,1 g; 148,0 mmol;

[0992] 1,0 ekv.) u THF-u (20 ml) je dodat kap po kap špricom tokom 20 min i reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 2 sata. Smeši je dodat AcOH (9,1 ml) u 350 ml H2O na -78 °C, a reakcionoj smeši je ostavljeno da dostigne sobnu temperaturu. Smeši je dodat EtOAc i dve faze su razdvojene, a vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je osušena preko Na2SO4 i uparena da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57,5 g; 62%) u vidu smeđeg ulja. MS

[0993] (ESI): m/z [M+H]<+>: 382,2.

[0995] Korak 2: Intermedijer 3: 1-[2-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]-3H-pirido[3,4-d]piridazin-4-on

[0998]

[1001] Intermedijer 2 (57,4g; 91,8 mmol; 61 mas. % čistoće) je rastvoren u EtOH (306 ml) i dodat je hidrazin monohidrat (26,8 ml; 551,1 mmol; 6,0 ekv.) i smeša je mešana 10 minuta, zatim 4,0 M NaOH ekv. (92,0 ml; 367,4 mmol;

[1002] 6,0 ekv.) je dodato. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Smeša je dodata AcOH (31,5 ml; 551,1 mmol; 6,0 ekv) i produkt je počeo da se taloži. Reakciona smeša je filtrirana, a čvrsta supstanca je isprana sa EtOH/H2O (1:1, 400 ml) i osušena da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (21,7 g; 68%) u vidu bledo žute čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>: 322,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,81 (s, 3H), 7,21 (dd, 1H), 7,47 - 7,54 (m, 2H), 7,63 (d, 1H), 8,94 (d, 1H), 9,51 (d, 1H), 13,24 (br s, 1H).

[1004] Korak 3: Intermedijer 1: 4-hloro-1-[2-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin

[1007]

[1010] Suspenziji intermedijera 3 (32 g; 100 mmol) u 1,4-dioksanu (100 ml) i fosforil trihloridu (200 g; 1304 mmol) dodat je piridin (12 ml; 149,6 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 110 °C i mešana 1 sat. Smeša je koncentrovana in vacuo, a zatim je ostatak bio azeotropan sa toluenom. Ostatak je rastvoren u CHCl3 (dodat amilen) i slanoj vodi, a sloj je odvojen. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc, kombinovani organski sloj je osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je bio azeotropan sa toluenom, a zatim je sirova smeša triturirana heksanom/EtOAc (8:2) i filtrirana da bi se dobio intermedijer 1 (22,3 g; 66%) u vidu čvrste supstance smeđe boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>:

[1011] 340,1/342,1.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3,78 (s, 3H), 7,31 (s, 1H), 7,43 (dd, 1H), 7,45 - 7,49 (m, 1H), 7,63 (dd, 1H), 9,04 (d, 1H), 9,82 (d, 1H).

[1013] Intermedijeri 4 i 5

[1015] Korak 1: Intermedijer 6: terc-butil N-[(1R,3S)-3-hidroksiciklopentil]karbamat

[1018]

[1021] Rastvoru (1S,3R) -3-aminociklopentanol hidrohlorida (3,0 g; 21,8 mmol) i TEA (6,1 ml; 43,6 mmol) u THF (50 ml) dodat je di-terc-butil dikarbonat (5,7 g; 26,2 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 60 °C i mešana 16 sati.

[1022] Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana. Filtrat je koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone silikagela koristeći gradijent od 40-100% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,3 g; 97%) kao bezbojni sirup. MS (ESI): m/z [M+H]<+>:

[1023] 202,0.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,44 (s, 9H), 1,57 - 1,67 (m, 1H), 1,70 - 1,83 (m, 2H), 1,87 - 2,12 (m, 2H), 2,31 - 2,52 (m, 1H), 3,96 - 4,09 (m, 1H), 4,31 - 4,42 (m, 1H), 5,05 - 5,33 (m, 1H).

[1025] Korak 2: Intermedijer 7: terc-butil N-[(1R)-3-oksociklopentil]karbamat

[1028]

[1031] Rastvoru intermedijera 6 (4,3 g; 21,1 mmol) u CH2Cl2 (100 ml) dodat je (1,1-diacetoksi-3-okso-1λ<5>,2-benziodoksol-1-il) acetat (13,5 g; 31,8 mmol) polako na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 2 sata na 0 °C. Reakciona smeša je ugašena zasić. vod. NaHCO3 i mešana na 20 minuta, a zatim je smeša dodata zas. vod. Na2S2O3 i mešana na 20 min. Smeša je ekstrahovana sa CHCl3.

[1032] Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone koristeći gradijent od 10-60% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3,8 g; 90%) kao bezbojni prah.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,45 (s, 9H), 1,78 - 1,91 (m, 1H), 2,07 - 2,16 (m, 1H), 2,17 - 2,29 (m, 1H), 2,30 - 2,43 (m, 2H), 2,62 (dd, 1H), 4,23 (br d, 1H), 4,64 (br s, 1H).

[1034] Korak 3: Intermedijer 4: terc-butil N-[(1R,3S)-3-hidroksi-3-metilciklopentil]karbamat i Intermedijer 5: terc-butil N-[(1R,3R)-3-hidroksi-3-metilciklopentil]karbamat

[1037]

[1040] Rastvoru intermedijera 7 (3,8 g; 19,0 mmol) u THF-u (160 ml) dodat je MeLi (24,5 ml; 3,1 mol/l u Et2O; 76 mmol) kapanjem na -78 °C i smeša je mešana na -78 °C. Nakon 1 sata, u reakcionu smešu je dodat MeLi (24,5 ml; 3,1 mol/l u Et2O; 76 mmol) kapanjem na -78 °C i smeša je mešana na -78 °C tokom 1 sata. Smeši je dodat sat NH4Cl vod. i smeša je zagrejana do sobnoj temperaturi. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc, isprana slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4 i koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone silikagela koristeći gradijent od 20-70% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobio intermedijer 4 (926 mg; 23%) kao bezbojna tečnost i intermedijer 5 (779 mg; 19%) kao bezbojna tečnost.

[1042] Intermedijer 4:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,36 (s, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,54 - 1,62 (m, 1H), 1,63 - 1,70 (m, 1H), 1,73 - 1,86 (m, 2H), 1,87 - 1,97 (m, 1H), 2,06 - 2,16 (m, 1H), 2,44 (br s, 1H), 3,96 - 4,16 (m, 1H), 5,30 (br s, 1H).

[1044] Intermedijer 5:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,37 (s, 3H), 1,44 (s, 11H), 1,66 - 1,84 (m, 2H), 1,95 - 2,04 (m, 1H), 2,11 - 2,20 (m, 1H), 2,21 - 2,33 (m, 1H), 4,11 - 4,30 (m, 1H), 4,55 (br s, 1H).

[1046] Intermedijer 8: 3-(terc-butil) 4-metil piridin-3,4-dikarboksilat

[1049]

[1052] Terc-butanol (200 ml) je dodat u 4-(metoksikarbonil)nikotinsku kiselinu (25,0 g; 138 mmol), nakon čega je dodat di-terc-butil dikarbonat (60,2 g;

[1053] 276 mmol) i piridin (25 ml). DMAP (100 mg, kat.) je dodat i reakcija je mešana na 35 °C preko noći. Dodata je voda i DCM, a faze su razdvojene. Organski ekstrakt je ispran sa dve porcije vode, uparen i ostatak je uparen dva puta sa toluenom. Ostatak je filtriran kroz kolonu silicijum dioksida koristeći 40% MTBE u heptanu kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (27,7 g, 84%) kao bledožuto ulje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,52 (s, 9H), 3,88 (s, 3H), 7,65 (dd, 1H), 8,87 (d, 1H), 8,96 (d, 1H).

[1054] Intermedijer 9: 2-[2-fluoro-6-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

[1057]

[1060] Rastvoru 1-fluoro-3-metoksi-5- (trifluorometil)benzena (2,00 g; 10,3 mmol) u THF (20 ml) dodat je n-BuLi (6,5 ml; 10,3 mmol) na -78 °C i smeša je mešana na -78 °C. Nakon 1 sata, u reakcionu smešu je dodat 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (2,3 ml; 11,0 mmol) na -78 °C i smeša je mešana na -78 °C tokom 2 sata. Smeši je dodato 10% vod. limunske kiseline i EtOAc, a smeša je zagrejana do sobne temperature, ekstrahovana sa EtOAc, isprana slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4 i filtrirana. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirova smeša je triturirana sa IPE i filtrirana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1055 mg; 32%) u vidu bezbojnog praha. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom i sirova smeša je prečišćena hromatografijom kolone silikagela koristeći gradijent od 20-50% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1814 mg; 55%) u vidu bezbojnog praha. MS (ESI): m/z [M- C6H11]<->237,0.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,39 (s, 12H), 3,85 (s, 3H), 6,83 (s, 1H), 6,91 (dd, 1H).

[1062] Intermedijer 10: [2-fluoro-6-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]borna kiselina

[1065]

[1068] Rastvoru intermedijera 9 (614,6 mg; 1,9 mmol) u CH2Cl2 (4 ml) na 0 °C dodato je BBr3 (6,0 ml; 6,0 mmol; 1 M u CH2Cl2) i mešano na 0 °C 1 sat.

[1069] Reakciona smeša je sipana u ledenu vodu i ekstrahovana sa CHCl3. Organski sloj je izdvojen i koncentrovan in vacuo. Ostatak je trituriran heksanom i filtriran da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (285 mg; 50%) u vidu ružičastog praha. MS (ESI): m/z [M-H]<->222,9.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5,87 (br d, 2H), 6,83 (dd, 1H), 7,00 (s, 1H), 9,07 (s, 1H).

[1071] Intermedijer 11: (4-hloro-2-fluoro-6-hidroksi-fenil)borna kiselina

[1074]

[1077] Jedinjenje iz naslova (2,2 g; 77%) u vidu belog praha pripremljeno je analogno intermedijeru 10 koristeći (4-hloro-2-fluoro-6-metoksi-fenil)boronsku kiselinu (3,0 g; 14,7 mmol). MS (ESI): m/z [M-H]<->188,9/190,9.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 3,37 (s, 1H), 6,59 - 6,66 (m, 2H).

[1079] Intermedijer 12: 1-bromo-4-ciklopropil-2-metoksi-benzen

[1082]

[1085] U suspenziju 1-bromo-4-jodo-2-metoksi-benzena (2,0 g; 6,4 mmol) i kalijuma; dodat je ciklopropil(trifluoro) boranuid (1,4 g; 9,7 mmol) u toluenu (12 ml) i H2O (6 ml) Cs2CO3 (6,3 g; 19,3 mmol), butildi-1-adamantilfosfin (230 mg;

[1086] 0,64 mmol) i diacetoksipaladijum (74 mg; 0,33 mmol) na sobnoj temperaturi.

[1087] Smeša je zagrejana na 100 °C i mešana 6 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je H2O, a smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone silikagela koristeći gradijent od 0-10% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (992,7 mg; 48%) kao smeđa tečnost. MS (ESI): m/z [M-H]<->nije otkriveno.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,65 - 0,71 (m, 2H), 0,95 - 1,01 (m, 2H), 1,82 - 1,92 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 6,53 (dd, 1H), 6,65 (d, 1H), 7,38 (d, 1H).

[1088] Intermedijer 13: 2-(4-ciklopropil-2-metoksi-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

[1091]

[1094] Jedinjenje iz naslova (371 mg; 43%) kao smeđa čvrsta supstanca pripremljeno je analogno intermedijeru 9 korišćenjem intermedijera 12 (987,2 mg; 3,1 mmol). MS (ESI): m/z [M+H]<+>275,1.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,70 - 0,75 (m, 2H), 0,93 - 1,00 (m, 2H), 1,33 (s, 12H), 1,88 (tt, 1H), 3,82 (s, 3H), 6,59 (d, 1H), 6,62 (dd, 1H), 7,57 (d, 1H).

[1096] Intermedijer 14: 2-[5-fluoro-2-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

[1099]

[1102] Rastvoru 1-fluoro-5-jodo-4-metoksi-2- (trifluorometil)benzena (2,8 g; 8,8 mmol) u 1,4-dioksanu (30 ml) dodati su 4,4,5,5-tetrametil-2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (2,8 g; 11,0 mmol), KOAc (2,5 g; 25,4 mmol) i Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (689 mg; 0,84 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 100 °C i mešana 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je H2O, a smeša je filtrirana. Filtrat je ekstrahovan sa EtOAc (2 puta). Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone silikagela koristeći gradijent od 10-40% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobila smeđa guma. Rezultat je trituriran sa EtOAc i filtriran. Filtrat je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (459,7 mg; 16%) u vidu crne gume. MS (ESI): m/z [M-H]<->nije otkriveno.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,36 (s, 12H), 3,85 (s, 3H), 6,99 (d, 1H), 7,46 (d, 1H).

[1104] Intermedijer 15

[1106] Korak 1: Intermedijer 16: 2-benziloksi-1-bromo-4-metilsulfonil-benzen

[1109]

[1112] Suspenziji natrijum hidrida (60% u mineralnom ulju, 1,9 g; 48,0 mmol; 1,1 ekv.) u DMF-u (80 ml; 0,5 M), dodat je benzil alkohol (5,0 ml; 48,0 mmol;

[1113] 1,1 ekv.) na 0 °C, a rastvor je mešan 5 minuta. Zatim je smeši dodat 2-bromo-5-metilsulfonilfenol (11,1 g; 43,9 mmol; 1,0 ekv.) na 0 °C. Smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, a zatim je polako dodata H2O (100 ml). Talog je sakupljen filtracijom i ispran sa H2O (100 ml). Talog je ispran heksanom/EtOAc = 48/2 (300 ml) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16,3 g; 47,7 mmol; kvant.) u vidu čvrste supstance bele boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>338,7/340,9.

[1115] Korak 2: Intermedijer 15: 2-(2-benziloksi-4-metilsulfonil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

[1118]

[1121] U rastvor intermedijera 16 (13,9 g; 40,6 mmol; 1,0 ekv.) u 1,4-dioksanu (135 ml), bis(pinakolato)diboronu (15,5 g; 60,9 mmol; 1,5 ekv.), KOAc (10,0 g; 102,0 mmol; 2,5 ekv.) i Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (1,7 g; 2,0 mmol; 0,05 eq) je dodat na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 110 °C i mešana 26 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana kroz Celite<®>. Nerastvorljivi rastvori su isprani sa EtOAc (300 ml). Filtrat je ispran sa H2O (100 ml) i slanim rastvorom (30 ml). Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone silikagela koristeći gradijent od 20-40% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobio bledo žuti sirup. Zatim je dobijeni sirup kristalizovan heksanom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11,0 g, 69%) kao beli prah; MS (ESI): m/z [M+H]<+>389,3.

[1123] Primeri

[1125] Primeri 1-15, 23-26, 40, 54-58, 75-81, 88 i 92 su primeri prema pronalasku, drugi primeri su referentni primeri.

[1127] Primer 1:

[1129] Korak 1: Intermedijer 17: 4-hloro-N-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metil]ftalazin-1-amin

[1132]

[1135] Rastvoru 1,4-dihloroftalazina (177 g; 889 mmol; 1,0 ekv.) u bezvodnom NMP (450 ml) dodati su DIPEA (310 ml; 1,78 mmol; 2,0 ekv.) i (S)-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanamin (123 g; 938 mmol; 1,05 ekv.) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i sipana u H2O. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc/heksanom=1:1 i isprana sa H2O. Organski sloj je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je trituriran sa IPE i filtriran da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (212 g; 81%) u vidu bledo žutog praha. MS(ESI): m/z 294,1/296,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,28 (s, 3H), 1,38 (s, 3H), 3,50 - 3,77 (m, 3H), 4,00 - 4,20 (m, 1H), 4,40 - 4,48 (m, 1H), 7,83 - 7,91 (m, 1H), 7,97 - 8,04 (m, 2H), 8,05 - 8,11 (m, 1H), 8,35 - 8,41 (m, 1H).

[1136] Korak 2: Intermedijer 18:2-[4-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metilamino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1139]

[1142] Za suspenziju intermedijera 17 (203 g; 691 mmol; 1,0 ekv.) i (2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)boronske kiseline (213 g; 1,03 mol 1,5 ekv.) u 1,4-dioksanu (1,7 L) i 2,0 M ekv. Na2CO3 (1,04 l; 2,08 mol; 3,0 ekv.) je dodat Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (11,3 g; 13,8 mmol; 0,02 ekv.) i smeša je mešana i refluksovana pod atmosferom argona tokom 6 sati. Reakcionoj smeši su dodati (2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)boronska kiselina (28,5 g; 138 mmol) i Pd(dppf )Cl2·CH2Cl2 (11,3 g; 13,8 mmol; 0,02 ekv.). Nakon 3 sata, smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i sipana u H2O i EtOAc. Rastvaraču je dodat aktivni ugalj i smeša je mešana i filtrirana kroz Celite<®>. Filtrat je ekstrahovan sa EtOAc i organski sloj je uparen pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid; CHCl3/MeOH=100/0-19/1-8/2). Prikupljene frakcije su dalje prečišćene fleš hromatografijom (NH-silika; CHCl3/MeOH= 100/0-39/1-8/2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (112 g; 39%) u vidu čvrste supstance smeđe boje. MS(ESI) m/z 420,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,29 (s, 3H), 1,40 (s, 3H), 3,60 - 3,73 (m, 1H), 3,76 - 3,87 (m, 2H), 4,01 - 4,10 (m, 1H), 4,46 - 4,55 (m, 1H), 7,25 - 7,33 (m, 2H), 7,41 - 7,57 (m, 2H), 7,69 - 7,91 (m, 3H) 8,32 - 8,38 (m, 1H), 10,3 (br s, 1H).

[1144] Korak 3: Primer 1: (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol

[1145]

[1148] Suspenziji intermedijera 18 (112 g; 267 mmol) u AcOH (240 ml) dodato je H2O (80 ml) i smeša je mešana na 80 °C tokom 5 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i uparena pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid; CHCl3/MeOH= 100/0-90/10-80/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (65,3 g; 57%) u vidu bezbojne čvrste supstance. Ostatak (65,3 g+7,51 g (ostatak prethodne serije)) je trituriran sa MeOH i filtriran. Dobijenoj čvrstoj supstanci je dodat EtOH, a rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (62,7 g; 86%) u vidu bezbojne čvrste supstance. MS(ESI): m/z 380,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,39 - 3,49 (m, 2H), 3,51 - 3,61 (m, 1H), 3,70 - 3,80 (m, 1H), 3,82 -3,91 (m, 1H), 4,80 - 4,90 (m, 1H), 5,21 - 5,29 (m, 1H), 7,26 - 7,32 (m, 2H), 7,43 -7,48 (m, 1H), 7,49 - 7,54 (m, 1H), 7,71 (br s, 1H), 7,77 - 7,83 (m, 1H), 7,85 - 7,92 (m, 1H), 8,32 - 8,41 (m, 1H) , 10,37 (br s, 1H).

[1150] Primeri 2-11 u tabeli 1 u nastavku sintetizovani su iz intermedijera 17, koristeći dole navedene borne kiseline u analogiji sa procedurom iz primera 1. Primer 12 je sintetizovan korišćenjem R-enantiomera intermedijera 17 u analogiji sa pripremom primera 1.

[1151] Tabela 1

[1152]

[1153]

[1154]

[1157] Primer 13:

[1159] Korak 1: Intermedijer 19: 2-bromo-1-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-metil-benzen

[1162]

[1165] Suspenziji 2-bromo-4-metil-fenola (1,0 g; 5,3 mmol) i K2CO3 (2,2 g; 16 mmol) u DMF-u (9 ml) dodat je PMBCl (1,0 g; 6,4 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 dana. Reakciona smeša je sipana u H2O i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran sa H2O i uparen pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (normalni silicijum dioksid; heksan/EtOAc = 95/5-80/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,7 g, quant) kao bezbojno ulje. MS(ESI): nije otkriveno.

[1167] Korak 2: Intermedijer 20: 2-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-5-metil-fenil]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

[1168]

[1171] Suspenziji intermedijera 19 (1,7 g; 5,5 mmol), NaOAc (1,1 g; 11 mmol) i bis(pinacolate)diborona (1,7 g; 6,7 mmol) u 1,4-dioksanu (14 ml) dodat je PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (0,45 g; 0,55 mmol) i smeša je zagrejana na 100 °C i mešana 4 sata. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, sipana u H2O i filtrirana kroz Celite<®>. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid; heksan/EtOAc= 100/0-80/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,73 g; 88%) u vidu žutog ulja. MS(ESI): m/z 355,0 [M+H]<+>.

[1173] Korak 3: Intermedijer 21: N-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metil]-4-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-5-metil-fenil]ftalazin-1-amin

[1176]

[1179] Suspenziji intermedijera 20 (271 mg; 0,766 mmol), intermedijera 17 (150 mg; 0,511 mmol) i Na2CO3 (162 mg; 1,53 mmol) u 1,4-dioksanu (2,6 ml) i H2O (0,5 ml) dodat je SPhos Pd G3 (40 mg; 0,051 mmol). Bočica je zapečaćena i reakcija je vođena na 120 °C 1 sat u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je sipana u slanu vodu i ekstrahovana sa CHCl3. Organski sloj je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid; CHCl3/MeOH=100/0-93/7). Prikupljene frakcije su dalje prečišćene fleš hromatografijom (NH-silika; CHCl3/MeOH= 100/0-90/10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (182 mg; 73%) u vidu žutog amorfnog jedinjenja. MS(ESI): m/z 484,4 [M-H]- Korak 4: Primer 13: (2S)-3-[[4-(2-hidroksi-5-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol

[1182]

[1185] Suspenziji intermedijera 21 (180 mg) u MeOH (1 ml) dodato je 2 M HCl u 1,4-dioksan (1 ml) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid; 100/0 do 85/15) i obrnutom faznom fleš hromatografijom na koloni C18 koristeći gradijent od 20-50% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (55 mg; 46%) u vidu bledo žutog amorfnog jedinjenja. MS(ESI): m/z 326,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,27 (s, 3H), 3,39 - 3,47 (m, 2H), 3,50 - 3,60 (m, 1H), 3,68 - 3,77 (m, 1H), 3,80 - 3,89 (m, 1H), 4,84 - 4,91 (m, 1H), 5,30 - 5,38 (m, 1H), 6,85 -6,90 (m, 1H), 6,95 - 7,16 (m, 2H), 7,48 - 7,59 (m, 2H), 7,75 - 7,90 (m, 2H), 8,30 -8,35 (m, 1H), 9,30 - 9,45 (m, 1H).

[1187] Primer 14 i primer 15:

[1189] Korak 1: Intermedijer 22: 6-metil-2,3-dihidroftalazin-1,4-dion

[1192]

[1193] Rastvoru 5-metilisobenzofuran-1,3-diona (5,0 g; 31 mmol) u AcOH (15 ml) dodat je hidrazin monohidrat (4,9 ml; 0,10 mol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati i zagrevana na 110 °C. Nakon 1 sata, smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i smeši su dodati IPE i EtOH. Talog je filtriran i sipan u H2O. Talog je filtriran i osušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,97 g; 91%) u vidu bezbojnog praha. MS(ESI): m/z 177,1 [M+H]<+>.

[1195] Korak 2: Intermedijer 23: 1,4-dihloro-6-metil-ftalazin

[1198]

[1201] Rastvoru intermedijera 22 (4,97 g; 28,2 mmol) u toluenu (1,0 ml) i piridinu (4,5 ml) dodat je fosforil trihlorid (13,2 ml) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 100 °C tokom 2 sata. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i uparena pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je sipana u H2O na 0 °C i mešana na sobnoj temperaturi. Talog je filtriran i osušen da bi se dobilo naslovno jedinjenje (5,10 g; 83%) u vidu bledo žutog praha. MS(ESI): m/z 213,1/215,1 [M+H]<+>.

[1203] Korak 3: Intermedijer 24: 4-hloro-N-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metil]-7-metil-ftalazin-1-amin

[1206]

[1209] i Intermedijer 25: 4-hloro-N-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metil]-6-metil-ftalazin-1-amin

[1210]

[1213] Rastvoru intermedijera 23 (2,10g; 9,86 mmol) u bezvodnom NMP (10 ml) dodati su DIPEA (4,11 ml; 29,6 mmol) i (S)-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanamin (1,40 g; 10,7 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 100 °C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i sipana u H2O. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i organski sloj je uparen pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid, heksan/EtOAc= 100/0-20/80) da bi se dobili intermedijeri 22 i 23 mešavine 1:1 (0,898 g; 30%) u vidu bledo žutog amorfnog. MS(ESI): m/z 308,1/310,1 [M+H]<+>

[1215] Korak 4: Intermedijer 26: 2-[4-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metilamino]-6-metil-ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1218]

[1221] i Intermedijer 27: 2-[4-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metilamino]-7-metil-ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1222]

[1225] Suspenziji smeše 1:1 intermedijera 24 i intermedijera 25 (400 mg;

[1226] 1,30 mmol), (2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)boronske kiseline (401 mg; 1,95 mmol) i Na2CO3 (413 mg; 3,90 mmol) u 1,4-dioksanu (3,2 ml) i H2O (1 ml) dodat je SPhos PdG3 (101 mg; 0,130 mmol). Bočica je zapečaćena i reakcija je vođena na 120 °C 30 minuta u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je sipana u H2O i ekstrahovana sa CHCl3. Organski sloj je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena hromatografijom kolone (silicijum dioksid, CHCl3/MeOH=100/0-95/5). Prikupljene frakcije su dalje prečišćene hromatografijom kolone (NH-silika, CHCl3/MeOH = 100/0-95/5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (180 mg; 32%) u vidu žutog amorfnog jedinjenja. Izolovani materijal je imao odnos 1:16-metil/7-metil. MS(ESI): m/z 434,2 [M+H]<+>

[1228] Korak 5: Primer 14: (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-7-metilftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol

[1231]

[1234] i primer 15: (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-6-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol

[1235]

[1238] Suspenziji smeše 1:1 intermedijera 26 i intermedijera 27 (179 mg;

[1239] 0,41 mmol) u MeOH (1 ml) dodato je 2 M HCl u 1,4-dioksanu (4 ml) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (normalni silicijum dioksid; CHCl3/MeOH = 100/0-80/20) da bi se dobio primer 14 (24 mg; 15%) kao bledo žuti amorfni i primer 15 (64 mg; 39%) kao bledo žuti amorfni.

[1241] Primer 14:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,47 (s, 3H), 3,38 - 3,78 (m, 4H), 3,85 - 3,93 (m, 1H), 7,29 - 7,37 (m, 3H), 7,52 - 7,57 (m, 1H), 7,80 - 7,91 (m, 1H), 8,45 - 8,60 (m, 1H). MS(ESI): m/z 394,1 [M+H]<+>.

[1243] Primer 15:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,47 (s, 3H), 3,41 - 3,52 (m, 2H), 3,57 - 3,68 (m, 1H), 3,72 - 3,81 (m, 1H), 3,87 - 3,93 (m, 1H), 7,30 - 7,36 (m, 2H), 7,37 - 7,42 (m, 1H), 7,52 - 7,56 (m, 1H), 7,82 - 7,88 (m, 1H), 8,60 - 8,67 (m, 1H). MS(ESI): m/z 394,1 [M+H]<+>.

[1245] Primer 16

[1247] Korak 1: Intermedijer 28: (1R,3R)-3-[(4-hloroftalazin-1-il)amino]ciklopentanol

[1248]

[1251] U rastvor 1,4-dihloroftalazina (1,40 g; 7,0 mmol) u NMP (9 ml), (1R,3R) -3-aminociklopentanola; dodati su hidrohlorid (0,97 g; 7,0 mmol; 1,0 ekv.) i DIPEA (6,1 ml; 35 mmol; 5,0 ekv.) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je zagrevana na 110 °C tokom 22 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3 i ekstrahovana sa CHCl3.

[1252] Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi materijal.Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom kolone (silicijum dioksid, CHCl3/MeOH = 100:0-90:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,37 g; 74%) u vidu smeđeg praha. MS(ESI): m/z 264,1/266,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,52 - 1,54 (m, 1H), 1,57 - 1,67 (m, 1H), 1,70 - 1,80 (m, 1H), 1,81 - 1,91 (m, 1H), 2,10 - 2,20 (m, 1H), 2,34 - 2,42 (m, 1H), 2,48 - 2,58 (m, 1H), 4,48 - 4,55 (m, 1H), 4,83 - 4,92 (m, 1H), 5,00 - 5,07 (m, 1H), 7,72 - 7,75 (m, 1H), 7,82 - 7,89 (m, 2H), 8,17 - 8,20 (m, 1H).

[1254] Korak 2: Primer 16: 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1257]

[1258] Rastvoru intermedijera 28 (400 mg; 27,0 mmol; 1,1 ekv.) i [2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]boronske kiseline (310 mg; 1,5 mmol; 1,0 ekv.) u DME (5,0 ml) dodati su Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (124 mg; 0,15 mmol; 0,1 ekv.) i 2M vod.

[1259] Na2CO3 (2,3 ml; 3,0 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 85 °C i mešana 5 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je H2O, zatim je smeša ekstrahovana sa CHCl3 (3 puta). Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone (NH-silika, CHCl3/MeOH = 100:0-80:20). Prikupljene frakcije su dalje prečišćene hromatografijom kolone (silikagel, CHCl3/MeOH = 100:0-90:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (217 mg; 37%) u vidu žutog praha. MS(ESI): m/z 390,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,51 -1,68 (m, 2H), 1,80 - 1,88 (m, 1H), 1,96 - 2,10 (m, 2H), 2,21 - 2,31 (m, 1H), 4,27 - 4,35 (m, 1H), 4,53 (d, 1H), 4,77 - 4,88 (m, 1H), 7,22 - 7,30 (m, 3H), 7,44 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,76 (td, 1H), 7,84 (td, 1H), 8,39 (d, 1H), 10,0 - 10,6 (m, 1H).

[1261] Primer 17

[1263] Korak 1: Intermedijer 29: (1S,3S)-3-[(4-hloroftalazin-1-il)amino]ciklopentanol

[1266]

[1269] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno istim postupkom kao intermedijer 28 korišćenjem polaznog materijala (1S,3S)-3-aminociklopentanol hidrohlorida. Jedinjenje je izolovano kao smeđa čvrsta materija. MS(ESI): m/z 264,1/266,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,50 - 1,54 (m, 1H), 1,57 - 1,66 (m, 1H), 1,70 - 1,80 (m, 1H), 1,81 - 1,91 (m, 1H), 2,10 - 2,20 (m, 1H), 2,34 - 2,42 (m, 1H), 2,48 -2,58 (m, 1H), 4,48 - 4,55 (m, 1H), 4,83 - 4,92 (m, 1H), 5,00 - 5,07 (m, 1H), 7,72 -7,75 (m, 1H), 7,82 - 7,89 (m, 2H), 8,17 - 8,20 (m, 1H).

[1270] Korak 2: Primer 17: 2-[4-[[(1S,3S)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1273]

[1276] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno istim postupkom kao u primeru 16 koristeći intermedijer 29 kao početni materijal. Jedinjenje je izolovano kao smeđa čvrsta materija.

[1278] MS(ESI): m/z 390,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,50 -1,69 (m, 2H), 1,80 - 1,89 (m, 1H), 1,94 - 2,12 (m, 2H), 2,21 - 2,31 (m, 1H), 4,26 -4,36 (m, 1H), 4,52 (d, 1H), 4,77 - 4,88 (m, 1H), 7,23 - 7,33 (m, 3H), 7,44 (d, 1H), 7,52 (d, 1H), 7,76 (td, 1H), 7,84 (td, 1H), 8,39 (d, 1H), 10,0 - 10,6 (m, 1H).

[1280] Primer 18

[1282] Korak 1: Intermedijer 30: (1R,3R)-3-[[4-(2-benziloksi-4-metilsulfonilfenil)ftalazin-1-il]amino]ciklopentanol

[1285]

[1288] Rastvoru intermedijera 28 (70 mg; 0,265 mmol; 1,0 ekv.) i intermedijera 15 (104 mg; 0,268 mmol; 1,0 ekv.) u DME (0,5 ml) dodati su Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (22 mg; 0,0265 mmol; 0,1 eq) i 2M vod. Na2CO3 (0,8 ml;

[1289] 3,0 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 90 °C i mešana 3 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je H2O, zatim je smeša ekstrahovana sa EtOAc (3 puta). Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone (silicijum dioksid, EtOAc/MeOH = 100:0-93:7) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (34,3 mg; 26%) u vidu čvrste narandžaste supstance. MS(ESI): m/z 490,3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,50 - 1,70 (m, 2H), 1,70 - 1,83 (m, 1H), 1,85 - 1,98 (m, 1H), 2,12 - 2,15 (m, 1H), 2,53 - 2,63 (m, 1H), 3,09 (s, 3H), 4,51 - 4,58 (m, 1H), 4,95 -5,05 (m, 1H), 5,05 - 5,18 (m, 3H), 6,97 - 7,03 (m, 2H), 7,13 - 7,20 (m, 3H), 7,53 (d, 1H), 7,63 (d, 1H), 7,65 - 7,72 (m, 2H), 7,75 (s, 1H), 7,76 - 7,79 (m, 2H).

[1291] Korak 2: Primer 18: 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksiciklopentil]amino]ftalazin-1-il]-5-metilsulfonil-fenol

[1294]

[1297] Rastvoru intermedijera 30 (34,3 mg; 0,070 mmol; 1,0 ekv.) u EtOH (2 ml) dodat je Pd/C (26,0 mg; 5% vlažno) u azotnoj atmosferi. Zatim je azot zamenjen sa 1 atm vodonika i reakciona smeša je mešana 7 sati na sobnoj temperaturi. Smeša je filtrirana kroz Celite<®>podlogu. Filtrat je koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom kolone koristeći gradijent od 5-10% MeOH u EtOAc kao mobilnoj fazi, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (24,7 mg; 88%) u vidu žućkastog praha. MS(ESI): m/z 400,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,50 - 1,69 (m, 2H), 1,80 - 1,89 (m, 1H), 1,95 - 2,10 (m, 2H), 2,21 - 2,31 (m, 1H), 3,26 (s, 3H), 4,27 - 4,33 (m, 1H), 4,52 (d, 1H), 4,78 - 4,90 (m, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,47 - 7,52 (m, 2H), 7,56 (d, 1H), 7,77 (td, 1H), 7,85 (td, 1H), 8,39 (d, 1H), 10,2 - 10,7 (m, 1H).

[1299] Primeri 19 do 37 u tabeli 2 pripremljeni su analogno proceduri za primer 17 korišćenjem odgovarajućeg aminoalkohola.

[1301] Tabela 2

[1303]

[1304]

[1305]

[1306]

[1307]

[1310] Primer 38

[1312] Korak 1: Intermedijer 31: (1R,3R)-3-[[1-[2-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]-1-metil-ciklopentanol

[1315]

[1318] Rastvoru intermedijera 5 (149,8 mg; 0,70 mmol) u CH2Cl2 (2 ml) dodat je TFA (1,0 ml; 13,1 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana 40 minuta na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je azeotropiran toluenom. U rastvor ostatka u MeCN (1,2 ml) dodat je TEA (0,49 ml; 3,50 mmol) i smeša je mešana 10 minuta na sobnoj temperaturi. Smeši je dodat intermedijer 1 (199,3 mg; 0,59 mmol) i bočica je zaptivena. Reakcija je vođena na 130 °C tokom 2,5 sata u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom kolone NH-silikagela koristeći gradijent 0-10% MeOH u EtOAc kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (195 mg; 74%) u vidu smeđeg praha. MS (ESI): m/z [M+H]<+>: 419,1.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,47 (s, 3H), 1,67 - 1,80 (m, 2H), 1,83 - 2,02 (m, 2H), 2,52 - 2,72 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 4,99 - 5,15 (m, 1H), 5,50 (br d, 1H), 7,23 - 7,29 (m, 2H), 7,41 (dd, 1H), 7,63 (d, 1H), 8,83 (d, 1H), 9,32 (s, 1H).

[1320] Korak 2: Primer 38: 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksi-3-metilciklopentil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1323]

[1326] Rastvoru intermedijera 31 (195 mg; 0,44 mmol) u 2,4,6-trimetilpiridinu (5 ml) dodat je LiI (626,9 mg; 4,68 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana 4 sata na 160 °C u mraku. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je H2O. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 puta). Kombinovani organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen hromatografijom NH kolone koristeći gradijent od 10-30% MeOH u EtOAc kao mobilnoj fazi da bi se dobila crvena guma. Rezultat je prečišćen fleš hromatografijom kolone koristeći gradijent 0-20% MeOH u EtOAc kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (102,6 mg; 56%) u vidu žutog praha. MS (ESI): m/z [M+H]<+>405,0.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,33 (s, 3H), 1,64 - 1,86 (m, 4H), 2,22 (dd, 1H), 2,28 - 2,41 (m, 1H), 4,41 (s, 1H), 4,86 -5,01 (m, 1H), 7,24 - 7,30 (m, 2H), 7,32 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 8,84 (d, 1H), 9,78 (d, 1H), 10,44 (br s, 1H).

[1328] Primer 39: 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksi-3-metil-ciklopentil ]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1329]

[1332] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno analogno primeru 38 korišćenjem intermedijera 4 umesto intermedijera 5. MS (ESI): m/z [M+H]<+>405,2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,30 (s, 3H), 1,51 - 1,67 (m, 1H), 1,74 - 1,91 (m, 2H), 1,93 - 2,08 (m, 1H), 2,10 - 2,25 (m, 2H), 4,59 - 4,80 (m, 2H), 7,22 - 7,36 (m, 3H), 7,56 (d, 1H), 7,90 (br d, 1H), 8,84 (d, 1H), 9,78 (s, 1H).

[1334] Primer 40

[1336] Korak 1: Intermedijer 32: 1-bromo-2-((4-metoksibenzil)oksi)-4-(trifluorometil)benzen

[1339]

[1342] 2-bromo-5-(trifluorometil)fenol (3,0 g; 12,45 mmol) i 1-(bromometil)-4-metoksibenzen (2,53 g; 12,57 mmol) su rastvoreni u MeCN (30 ml) i kalijum karbonat (1,892 g; 13,69 mmol) je dodat u jednom delu (nema ili je veoma slaba egzoterma). Reakciona smeša postaje žuta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je završena nakon 16 sati prema NMR. Dodata je voda i DCM, a faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovani organski ekstrakt je ispran slanim rastvorom i uparen. To je dalo bledo narandžasto ulje koje se nije kristalizovalo iz IPA (približno 15 ml). Ulje je umesto toga prečišćeno hromatografijom kolone (silika gel, heptan/EtOAc:20/1 kao eluent) da bi se dobilo 3,58 g (80%) jedinjenja iz naslova kao bezbojno ulje koje je kristalisalo nakon stajanja.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 3,76 (s, 3H), 5,23 (s, 2H), 6,95 - 7,00 (m, 2H), 7,22 - 7,28 (m, 1H), 7,42 (d, 2H), 7,51 (d, 1H), 7,80 - 7,86 (m, 1H).

[1344] Korak 2: Intermedijer 33: terc-butil 4-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)benzoil]piridin-3-karboksilat

[1347]

[1350] Intermedijer 8 (7,0 g; 29,6 mmol) je rastvoren u THF (50 ml) i ohlađen na -78 °C. U drugoj tikvici, intermedijer 32 (10,7 g; 29,6 mmol) je rastvoren u THF (50 ml) i n-Buli (19,4 ml; 31,1 mmol; 1,6 M u heksanima) je dodat na -78 °C.

[1351] Svetložuti rastvor je mešan na -78 °C 15 sekundi pre nego što je dodan kap po kap preko kanile u prvi rastvor. Reakciona smeša je mešana na -78 °C 10 minuta, zatim je dodat AcOH (1,9 ml u 100 ml vode), nakon čega je dodat EtOAc.

[1352] Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i dve faze su razdvojene. Organski ekstrakt je ispran vodom i uparen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14,4 g, kvant.) u vidu narandžinog ulja. Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. MS (ESI): m/z [M+H]<+>488,3.

[1354] Korak 3: Intermedijer 34: 1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]-3H-pirido[3,4-d]piridazin-4-on

[1357]

[1360] Intermedijer 33 (41,4 g; 84,9 mmol) je rastvoren u THF (300 ml), dodat je hidrazin monohidrat (21,1 ml; 340 mmol; 50% u vodi) i reakciona smeša je mešana na 60 °C tokom 16 sati. Dodata je voda (100 ml) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pre sipanja u vodu (600 ml). Čvrsta supstanca je filtrirana i isprana vodom i MTBE. Proizvod je razmućen u refluksu EtOAc (1 l), ohlađen na sobnu temperaturu i filtriran da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (17,3 g; 48%) u vidu čvrste supstance prljavo bele boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>428,2.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 3,68 (s, 3H), 5,15 (s, 2H), 6,75 (d, 2H), 7,02 (d, 2H), 7,27 (d, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,65 (d, 2H), 8,93 (d, 1H), 9,48 (s, 1H), 13,23 (s, 1H).

[1362] Korak 4: Intermedijer 35: 4-hloro-1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin

[1365]

[1368] Intermedijer 34 (6,0 g; 14,0 mmol) je razmućen u 1,4-dioksanu (55 ml). Dodati su piridin (9,9 ml; 122 mmol) i fosforil triklorid (4,6 ml; 48,9 mmol) i reakcija je mešana na 60 °C tokom 19 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i zatim dodata u trinatrijum citrat (180 ml, vod., 1 M). Taloženi proizvod je filtriran, ispran vodom (2 x 50 ml) i osušen pod vakumom da bi se dobila žućkasta čvrsta supstanca. Sirova nafta je razmućena u MeCN (80 ml) i zagrejana na 80 °C do rastvaranja. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i formirani talog je filtriran, ispran sa MeCN (2 x 15 ml) i osušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,57 g; 41%) u vidu žućkaste čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>446,3.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 3,66 (s, 3H), 5,15 (s, 2H), 6,73 (d, 2H), 6,99 (d, 2H), 7,58 (d, 1H), 7,65 (dd, 1H), 7,72 (d, 2H), 9,10 (d, 1H), 9,69 - 9,82 (m, 1H).

[1370] Korak 5: Intermedijer 36: (1R,2R)-2-[[1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]cikloheksanol

[1371]

[1374] Intermedijer 35 (2,6 g; 5,7 mmol), (1R,2R)-2-aminocikloheksan-1-ol (1,1 g; 9,2 mmol) i NaHCO3 (2,4 g; 28,7 mmol) su pomešani u IPA (22 ml) i mešani na 80 °C tokom 3 dana. Reakciona smeša je sipana u vodu (100 ml) i mešana do sobne temperature 2 sata. Čvrsta supstanca je filtrirana, isprana vodom i osušena pod vakumom na 40 °C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,9 g; 96%) u vidu žućkaste čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>535,6.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,30 (s, 4H), 1,69 (d, 2H), 1,97 (d, 1H), 2,12 (s, 1H), 3,61 (d, 1H), 3,66 (s, 3H), 4,19 (s, 1H), 4,83 (s, 1H), 5,11 (s, 2H), 6,74 (d, 2H), 7,03 (d, 2H), 7,26 (d, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,60 (s, 2H), 7,67 (d, 1H), 8,81 (d, 1H), 9,76 (s, 1H).

[1376] Korak 6: Primer 40: 2-(4-((1R,2R) -2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol

[1379]

[1382] Intermedijer 36 (2,9 g; 5,5 mmol) je razmućen u apsolutnom EtOH (99,5%; 7 ml), dodata je HCl (4 M u 1,4-dioksanu; 20,7 ml; 82,9 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Smeša je dodata kapima u Et2O (150 ml) uz mešanje da bi se dobio talog koji je filtriran, ispran sa Et2O i osušen da bi se dobila svetlo žuta čvrsta supstanca (HCl-so). Čvrsta supstanca je pomešana u vodi (50 ml), napravljena je bazna (pH=9) sa zasić. vod. NaHCO3 i ekstrahovana sa DCM:MeOH = 9:1 (više puta). Kombinovani organski ekstrakti su filtrirani kroz fazni separator i ispareni da bi se dobilo 1,85 g narandžaste polučvrste supstance. Ova sirova supstanca je rastvorena u MeCN (20 ml) i IPA (0,5 ml) na 70 °C, ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana, isprana MeCN-om i osušena pod vakumom na 40 °C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,25 g; 56%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>405,3. HRMS

[1383] (ESI): m/z [M+H]<+>calcd za C20H19F3N4O2: 405,1538, utvrđeno: 405,1538.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,25 - 1,41 (m, 4H), 1,72 (d, 2H), 1,99 (d, 1H), 2,13 (s, 1H), 3,56 - 3,69 (m, 1H), 4,17 - 4,28 (m, 1H), 7,24 - 7,36 (m, 3H), 7,55 (d, 1H), 7,71 (d, 1H), 8,84 (d, 1H), 9,80 (s, 1H), 10,46 (s, 1H).

[1385] Primer 41

[1387] Korak 1: Intermedijer 37: (1S,3R)-3-[(1-hloropirido[3,4-d]piridazin-4-il)amino]cikloheksanol

[1390]

[1393] i Intermedijer 38: (1S,3R)-3-[(4-hloropirido[3,4-d]piridazin-1-il)amino]cikloheksanol

[1396]

[1399] U suspenziju (1S,3R) -3-aminocikloheksanol hidrohlorida (0,93 g;

[1400] 6,1 mmol; 1,1 ekv.) u NMP (12 ml; 0,5 M), dodato je 1,4-dihloropirido[3,4d]piridazin (1,1 g; 5,7 mmol; 1,0 ekv.) i DIPEA (4,0 ml; 23 mmol; 4,1 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 90 °C i mešana 20 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone (silicijum dioksid, heksan/EtOAc = 50:50) da bi se dobila smeša jedinjenja iz naslova (Intermedijer 37/Intermedijer 38 = 7:3, 2,1 g, 89%) u vidu žute karamele. MS(ESI): m/z 279,1/281,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,4 - 1,5 (m, 1H), 1,6 - 1,7 (m, 1H), 2,1 - 1,8 (m, 6H), 2,18 (br s, 2H), 4,19 (br s, 1H), 4,5 - 4,6 (m, 0,3H), 4,6 - 4,7 (m, 0,7H), 6,5 - 6,7 (m, 0,3H), 6,9 - 7,1 (m, 0,7H), 7,55 (dd, 0,3H), 7,87 (dd, 0,7H), 8,99 (d, 0,3H), 9,00 (d, 0,7H), 9,28 (d, 0,7H), 9,52 (d, 0,3H).

[1402] Korak 2: Intermedijer 39: N-[(1R,3S)-3-[tercbutil(dimetil)silil]oksicikloheksil]-1-hloro-pirido[3,4-d]piridazin-4-amin

[1405]

[1408] i Intermedijer 40: N-[(1R,3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksicikloheksil]-4-hloro-pirido[3,4-d]piridazin-1-amin

[1411]

[1414] U rastvor smeše intermedijera 37 i intermedijera 38 iz prethodnog koraka (1,7 g; 4,1 mmol; 1,0 ekv.) u DMF-u (25 ml) dodati su imidazol (0,34 g; 5,0 mmol; 1,2 ekv.), tercbutildimetilsilil hlorid (0,68 mg; 4,5 mmol; 1,1 ekv.) i DMAP (0,16 mg; 1,3 mmol; 0,3 ekv.) na 0 °C, a smeša je mešana 22 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je sipana u ledenu vodu i ekstrahovana sa EtOAc (50 ml, 2 puta). Organski sloj je ispran sa H2O (20 ml; 3 puta) i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone (silicijum dioksid, heksan/EtOAc = 70:30) da bi se dobio intermedijer 39 (798 mg; 50%) kao bledo žuti amorfni i intermedijer 40 (176 mg; 11%) kao bledo žuti prah.

[1416] Intermedijer 39:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,18 (s, 3H), 0,21 (s, 3H), 0,96 (s, 9H), 1,4 - 1,5 (m, 1H), 1,6 - 1,8 (m, 3H), 1,8 - 2,0 (m, 3H), 2,0 - 2,1 (m, 1H), 4,1 - 4,2 (m, 1H), 4,6 - 4,7 (m, 1H), 7,00 (br s, 1H), 7,86 (dd, 1H), 9,01 (d, 1H), 9,24 (s, 1H). MS(ESI): m/z 393,2/395,2 [M+H]+.

[1418] Intermedijer 40:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,16 (s, 3H), 0,19 (s, 3H), 0,96 (s, 9H), 1,39 - 1,50 (m, 1H), 1,51 - 1,96 (m, 6H), 1,99 - 2,09 (m, 1H), 4,11 - 4,20 (m, 1H), 4,61 - 4,70 (m, 1H), 6,65 (br s, 1H), 7,53 (d, 1H), 8,98 (d, 1H) 9,53 (s, 1H). MS(ESI): m/z 393,2/395,2 [M+H]+.

[1420] Korak 3: Intermedijer 41: 2-[4-[[(1R,3S)-3-[tercbutil(dimetil)silil]oksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1423]

[1426] Rastvoru intermedijera 39 iz prethodnog koraka (201 mg; 0,51 mmol; 1,0 ekv.), [2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]boronske kiseline (131 mg; 0,63 mmol; 1,2 ekv.) i Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (45 mg; 0,06 mmol; 0,1 ekv.) u 1,4-dioksanu (4 ml; 0,1 M) dodat je 2 M Na2CO3 vod. (0,80 ml; 1,6 mmol; 3,1 ekv.). Smeša je zagrejana na 100 °C i mešana 4 sata pod atmosferom argona. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa H2O i EtOAc.Organski sloj je ekstrahovan sa EtOAc (10 ml, 2 puta), ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone (silicijum dioksid, heksan/EtOAc = 60:40), a zatim (NH-silicijum, EtOAc/MeOH = 95:5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (145 mg; 52%) u vidu žutog amorfnog jedinjenja. MS(ESI): m/z 519,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,21 (s, 3H), 0,25 (s, 3H), 0,99 (s, 9H), 1,4 - 1,6 (m, 2H), 1,6 - 1,8 (m, 3H), 1,9 - 2,1 (m, 3H), 4,27 (d, 1H), 4,80 (td, 1H), 4,80 (td, 1H), 7,2 - 7,3 (m, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,6 - 7,4 (br s, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,98 (dd, 1H), 8,98 (d, 1H), 9,36 (s, 1H), 11,63 (br s, 1H).

[1428] Korak 4: Primer 41: 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1431]

[1434] Rastvoru intermedijera 41 (140 mg; 0,26 mmol; 1,0 ekv.) u THF (3 ml) dodat je 1 M tetrabutilamonijum fluorida u THF rastvoru (0,4 ml; 0,40 mmol;

[1435] 1,6 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 22 sata. Dobijenoj smeši je dodata zas. vod. NaHCO3 i ekstrahovana je sa EtOAc (15 ml, 2 puta). Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolonee (silicijum dioksid, EtOAc/MeOH = 95:5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (96 mg; 89%) u vidu žutog amorfnog jedinjenja. MS(ESI): m/z 405,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,5 - 1,6 (m, 1H), 1,7 - 2,1 (m, 6H), 2,1 - 2,2 (m, 1H), 3,7 - 3,8 (m, 1H), 4,2 - 4,3 (m, 1H), 4,7 - 4,8 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 7,2 - 7,3 (m, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 8,98 (d, 1H), 9,37 (s, 1H), 11,4 - 11,7 (m, 1H).

[1436] Primer 42

[1438] Korak 1: Intermedijer 42: (1S,3R)-3-[[1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]cikloheksanol

[1441]

[1444] Intermedijer 35 (1,45 g; 3,3 mmol), (1S;3R)-3-aminocikloheksan-1-ol, HCl (0,54 g; 3,6 mmol) i Na2CO3 (0,72 g; 6,8 mmol) su pomešani sa sulfolanom (14 ml) i reakcija je mešana na 120 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu pre dodavanja vode i iPrOAc-a i razdvajanja faza. Vodena faza je ekstrahovana sa iPrOAc i kombinovani organski ekstrakt je dva puta ispran vodom i uparen. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom koristeći EtOAc kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,47 g; 86%) u vidu bledo žute čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>525,5.

[1446] Korak 2: Primer 42: 2-(4-(((1R,3S)-3-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol dihidrohlorid

[1449]

[1452] HCl (15 ml; 60 mmol; 4 M u 1,4-dioksanu) je dodat intermedijeru 42 (1,75 g; 3,34 mmol) u apsolutnom EtOH (3 ml) da bi se dobio bistar rastvor.

[1453] Reakcija je mešana na 40 °C 15 min, zatim do sobne temperature. Reakciona smeša je dodata kapima u Et2O (100 ml) i čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa Et2O. Čvrsta supstanca je ponovo rastvorena u EtOH i EtOAc je dodat da bi se precipitirao produkt. Čvrsta supstanca je filtrirana, isprana sa dve porcije EtOAc i osušena da bi se dobila žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je dalje rastvorena u MeCN/vodi i liofilizirana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,45 g; 91%). MS (ESI): m/z [M+H]<+>405,3. HRMS (ESI): m/z [M+H]<+>calcd za C20H19F3N4O2: 405,1536, utvrđeno: 405,1534.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,09 - 1,21 (m, 1H), 1,38 (q, 1H), 1,46 - 1,63 (m, 2H), 1,80 (dt, 1H), 1,87 (d, 1H), 1,98 (d, 1H), 2,24 (d, 1H), 3,57 (ddd, 1H), 4,15 (dt, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,58 (d, 1H), 9,11 (d, 1H), 10,24 (s, 1H), 11,02 (s, 1H).

[1455] Primer 43: 2-[1-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1458]

[1461] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno analogno primeru 41 korišćenjem intermedijera 40 umesto intermedijera 39. MS(ESI): m/z 405,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,10 - 1,20 (m, 1H), 1,20 - 1,45 (m, 3H), 1,72 - 1,82 (m, 1H), 1,82 - 1,93 (m, 1H), 1,98 - 2,08 (m, 1H), 2,23 - 2,33 (m, 1H), 3,50 - 3,63 (m, 1H), 4,22 - 4,35 (m, 1H), 4,65 - 4,75 (m, 1H), 7,15 - 7,30 (m, 2H), 7,45 - 7,60 (m, 2H), 8,25 (d, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,90 (d, 1H).

[1463] Primer 44

[1465] Korak 1: Intermedijer 43: 2-[4-[[(1R,3S)-3-[tercbutil(dimetil)silil]oksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-hloro-fenol

[1466]

[1469] Rastvoru intermedijera 39 in (1,1 g; 2,8 mmol), 5-hloro-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenola (1,0 g; 3,9 mmol) i Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (231 mg; 0,283 mmol; 0,1 ekv.) u 1,4-dioksanu (4 ml) dodat je 2 M Na2CO3 vod. (4,2 ml; 8,4 mmol; 3,0 ekv.). Smeša je zagrejana na 100 °C i mešana 2,5 sata pod atmosferom argona. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa H2O.Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela koristeći gradijent od 20-50% EtOAc u heksanu kao mobilnu fazu. Prikupljene frakcije su dalje prečišćene hromatografijom kolone NH-silikagela koristeći gradijent 50-100% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (774,7 mg; 55%) kao žuto amorfno jedinjenje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>485,2/487,1.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,20 (s, 3H), 0,24 (s, 3H), 0,99 (s, 9H), 1,45 - 1,62 (m, 1H), 1,63 - 1,83 (m, 3H), 1,87 - 2,10 (m, 4H), 4,20 - 4,30 (m, 1H), 4,72 - 4,83 (m, 1H), 6,99 (dd, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,32 (br s, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,97 (dd, 1H), 8,96 (d, 1H), 9,33 - 9,35 (m, 1H), 11,63 (br s, 1H).

[1471] Korak 2: Primer 44: 5-hloro-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol

[1474]

[1475] Rastvoru intermedijera 43 (174,6 mg; 0,35 mmol; 1,0 ekv.) u THF (3 ml) dodat je 1 M tetrabutilamonijum fluorida u THF rastvoru (0,52 ml; 0,52 mmol;

[1476] 1,5 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 21 sat. Dobijena smeša je dodata u zas. NaHCO3 i ekstrahovana je sa EtOAc.Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom kolone koristeći gradijent 0-5% MeOH u EtOAc kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (114,5 mg; 81%) u vidu žutog amorfnog jedinjenja. MS (ESI): m/z [M+H]<+>371,1/373,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,08 - 1,21 (m, 1H), 1,22 - 1,44 (m, 3H), 1,71 - 1,82 (m, 1H), 1,82 - 1,93 (m, 1H), 1,98 - 2,08 (m, 1H), 2,24 - 2,36 (m, 1H), 3,50 - 3,63 (m, 1H), 4,25 - 4,40 (m, 1H), 6,91 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,67 (d, 1H), 8,82 (d, 1H), 9,74 (d, 1H).

[1478] Primeri uključeni u tabelu 3 u nastavku sintetizovani su analogno postupku u dva koraka iz primera 44 korišćenjem specificiranih bornih kiselina i borolana.

[1480] Tabela 3

[1482]

[1483]

[1486] Primer 49 i primer 50: (R) i (S) atropizomeri 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-3-(trifluorometil)fenol

[1489]

[1492] Rastvoru intermedijera 39 u (200 mg; 0,51 mmol; 1,0 ekv.), [2-hidroksi-6-(trifluorometil)fenil]boronske kiseline (125,8 mg; 0,61 mmol) i SPhos Pd G3 (39,8 mg; 0,05 mmol; 0,1 ekv.) u 1,4-dioksanu (0,77 ml) dodat je 2 M Na2CO3 vod. (0,77 ml; 1,5 mmol; 3,0 ekv.) i bočica je zapečaćena. Reakcija je vođena na 150 °C tokom 1 sata u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa H2O i EtOAc. Organski sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3 puta), ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone koristeći gradijent od 0-10% MeOH u EtOAc, a zatim hromatografijom kolone NH koristeći gradijent od 5-20% MeOH u EtOAc kao mobilnu fazu da bi se dobila smeša produkta u vidu bledo žutog praha. Ostatak je rastvoren u THF (3 ml), a smeši je dodat 1 M tetrabutilamonijum fluorida u THF rastvoru (0,6 ml; 0,60 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 6 sati. Dobijena smeša je dodata u zas. NaHCO3 i ekstrahovana je sa EtOAc (2 puta). Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom sa reverznom fazom na koloni C18 koristeći gradijent od 20-50% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnu fazu da bi se dobilo prvo eluirajuće jedinjenje izomer 1 primer 49 (33,3 mg) kao bež prah, a drugo eluirajuće jedinjenje izomer 2 primer 50 (30,3 mg) kao bež prah.

[1494] Primer 49: MS (ESI): m/z [M+H]<+>405,0.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,09 - 1,21 (m, 1H), 1,21 - 1,47 (m, 3H), 1,72 - 1,82 (m, 1H), 1,83 - 1,93 (m, 1H), 2,01 - 2,13 (m, 1H), 2,21 - 2,37 (m, 1H), 3,51 - 3,63 (m, 1H), 4,24 - 4,39 (m, 1H), 4,74 (br d, 1H), 7,02 (dd, 1H), 7,27 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,56 (dd, 1H), 7,71 (d, 1H), 8,81 (d, 1H), 9,77 (s, 1H), 10,16 (br s, 1H).

[1496] Primer 50: MS (ESI): m/z [M+H]<+>405,0.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,09 - 1,21 (m, 1H), 1,27 - 1,45 (m, 3H), 1,74 - 1,83 (m, 1H), 1,83 - 1,93 (m, 1H), 1,96 - 2,06 (m, 1H), 2,28 - 2,39 (m, 1H), 3,49 - 3,62 (m, 1H), 4,25 - 4,41 (m, 1H), 4,72 (br d, 1H), 7,02 (dd, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,56 (dd, 1H), 7,71 (d, 1H), 8,81 (d, 1H), 9,77 (s, 1H), 10,15 (br s, 1H).

[1498] Primer 51

[1500] Korak 1: Intermedijer 44: 2-[4-[[(1R,3S)-3-[tercbutil(dimetil)silil]oksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-vinil-fenol

[1503]

[1504] Rastvoru intermedijera 43 (185,2 mg; 0,37 mmol) u 1,4-dioksanu (1,2 ml) i vodi (0,8 ml) dodat je K3PO4 (477,2 mg; 2,2 mmol), kalijum; trifluoro(vinil)boranuid (149,6 mg; 1,1 mmol) i Xphos PdG3 (30,0 mg; 0,035 mmol). Bočica je zapečaćena i reakcija je vođena na 120 °C 30 minuta u mikrotalasnom reaktoru. Reakcija je zatim razblažena sa EtOAc i H2O. Slojevi su razdvojeni, vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su isprani sa zas. vod. NaHCO3 i slanom vodom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen. Sirovi produkt je prečišćen fleš hromatografijom kolone koristeći gradijent od 15-70% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (54,3 mg; 30%) u vidu smeđeg praha. MS (ESI): m/z [M+H]<+>477,2.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,20 (s, 3H), 0,24 (s, 3H), 0,99 (s, 9H), 1,44 - 1,53 (m, 1H), 1,64 - 1,84 (m, 3H), 1,87 - 2,11 (m, 4H), 4,20 - 4,27 (m, 1H), 4,72 - 4,83 (m, 1H), 5,34 (d, 1H), 5,85 (d, 1H), 6,73 (dd, 1H), 7,06 (dd, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,53 (d, 1H), 8,03 (d, 1H), 8,95 (d, 1H), 9,33 (s, 1H).

[1506] Korak 2: Intermedijer 45: 2-[4-[[(1R,3S)-3-[tercbutil(dimetil)silil]oksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-etil-fenol

[1509]

[1512] Rastvoru intermedijera 44 (52 mg; 0,11 mmol) u EtOAc (2 ml) dodat je Pd/C (22 mg; 10% vlažno) u azotnoj atmosferi. Zatim je azot zamenjen sa 1 atm vodonika i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Smeša je filtrirana kroz Celite<®>podlogu. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom kolone koristeći gradijent od 10-35% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33,4 mg; 66%) u vidu žutog praha. MS (ESI): m/z [M+H]<+>479,2.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,20 (s, 3H), 0,23 (s, 3H), 0,98 (s, 9H), 1,30 (t, 3H), 1,45 - 1,55 (m, 1H), 1,63 - 1,84 (m, 3H), 1,88 - 2,12 (m, 4H), 2,69 (q, 2H), 4,19 - 4,27 (m, 1H), 4,72 - 4,82 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 7,03 (d, 1H), 7,48 (d, 1H), 8,05 (dd, 1H), 8,94 (d, 1H), 9,33 (d, 1H), 11,26 (br s, 1H).

[1514] Korak 3: Primer 51: 5-etil-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol

[1517]

[1520] Jedinjenje iz naslova je dobijeno analogno primeru 44 koristeći intermedijer 45. MS (ESI): m/z [M+H]<+>365,2.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,29 (t, 3H), 1,47 - 1,76 (m, 3H), 1,79 - 2,04 (m, 4H), 2,12 - 2,25 (m, 1H), 2,69 (q, 2H), 4,24 (br s, 1H), 4,61 - 4,79 (m, 1H), 6,86 (dd, 1H), 7,03 (d, 1H), 7,47 (d, 1H), 8,05 (dd, 1H), 8,93 (d, 1H), 9,34 (s, 1H).

[1522] Primer 52

[1524] Korak 1: Intermedijer 46: (1S,3R)-3-[[1-(4-ciklopropil-2-metoksifenil)pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]cikloheksanol

[1527]

[1530] Jedinjenje iz naslova je dobijeno analogno primeru 44 koristeći intermedijer 13. MS (ESI): m/z [M+H]<+>391,2.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,76 - 0,83 (m, 2H), 1,00 - 1,08 (m, 2H), 1,42 - 1,81 (m, 4H), 1,82 - 2,03 (m, 3H), 2,17 - 2,33 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 4,06 - 4,17 (m, 1H), 4,62 - 4,77 (m, 1H), 6,42 - 6,63 (m, 1H), 6,76 (d, 1H), 6,80 (dd, 1H), 7,32 (dd, 1H), 7,37 (d, 1H), 8,77 (d, 1H), 9,28 (s, 1H).

[1532] Korak 2: Primer 52: 5-ciklopropil-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol

[1535]

[1538] Rastvoru intermedijera 46 (200 mg; 0,45 mmol) u CH2Cl2 (4 ml) dodat je BBr3 (3,0 ml; 3,0 mmol; 1 M u CH2Cl2) na -78 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C 1 sat. Reakcija je ugašena sa NaHCO3 vod. i ekstrahovana sa CHCl3-MeOH (3 puta). Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom kolone koristeći gradijent 0-10% MeOH u CHCl3 kao mobilnu fazu da bi se dobila smeđa guma. Rezultat je prečišćen fleš hromatografijom sa reverznom fazom na koloni C18 koristeći gradijent od 30-60% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (98,7 mg; 50%) u vidu narandžastog praha. MS

[1539] (ESI): m/z [M+H]<+>377,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0,65 - 0,74 (m, 2H), 0,95 - 1,03 (m, 2H), 1,08 - 1,21 (m, 1H), 1,23 - 1,45 (m, 3H), 1,72 - 1,82 (m, 1H), 1,83 - 1,97 (m, 2H), 2,03 (br d, 1H), 2,21 - 2,36 (m, 1H), 3,48 - 3,63 (m, 1H), 4,21 -4,42 (m, 1H), 4,72 (br d, 1H), 6,64 - 6,73 (m, 2H), 7,19 (d, 1H), 7,32 (dd, 1H), 7,64 (d, 1H), 8,83 (d, 1H), 9,66 (br s, 1H), 9,73 (d, 1H).

[1541] Primer 53: 4-fluoro-2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1542]

[1545] Koristeći intermedijer 14 nakon postupka u dva koraka opisanog za primer 52, dobijeno je jedinjenje iz naslova. MS (ESI): m/z [M+H]<+>423,0.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,09 - 1,21 (m, 1H), 1,23 - 1,45 (m, 3H), 1,73 - 1,82 (m, 1H), 1,83 - 1,93 (m, 1H), 1,97 - 2,09 (m, 1H), 2,24 - 2,36 (m, 1H), 3,50 - 3,65 (m, 1H), 4,27 - 4,40 (m, 1H), 4,73 (br s, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,32 (dd, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,82 (d, 1H), 8,84 (d, 1H), 9,77 (s, 1H).

[1547] Primer 54

[1549] Korak 1: Intermedijer 47: (1R,2R)-2-[(1-hloropirido[3,4-d]piridazin-4-il)amino]cikloheksanol

[1552]

[1555] i Intermedijer 48: (1R,2R)-2-[(4-hloropirido[3,4-d]piridazin-1-il)amino]cikloheksanol

[1558]

[1559] U suspenziju (1R,2R) -2-aminocikloheksanol hidrohlorida (3,18 g;

[1560] 21 mmol; 1,1 ekv.) u MeCN (20 ml; 1 M), dodato je 1,4-dihloropirido[3,4-d]piridazin (4,0 g; 20 mmol; 1,0 ekv.) i DIPEA (10,4 ml; 60 mmol; 3 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrejana na 100 °C i mešana 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone koristeći gradijent 0-3% MeOH u EtOAc kao mobilnoj fazi da bi se dobila mešavina 3:1 intermedijera 47 i intermedijera 48 (4,2 g; 56%) u vidu bledo žute čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>279,1/281,1.

[1562] Korak 2: Intermedijer 49: 1-hloro-N-[(1R,2R)-2-triizopropilsililoksicikloheksil]pirido[3,4-d]piridazin-4-amin

[1565]

[1568] Rastvoru smeše intermedijera 47 i intermedijera 48 iz prethodnog koraka (3,2 g; 11,5 mmol; 1,0 ekv.) u CH2Cl2 (35 ml) dodat je 2,6-dimetilpiridin (2,7 ml; 23 mmol; 2 ekv.), triizopropilsilil trifluorometansulfonat (4,63 ml;

[1569] 17,2 mmol; 1,5 ekv.) na 0 °C, a smeša je mešana 30 minuta na istoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa H2O i smeša je mešana. Organski sloj je izdvojen i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom NH kolone koristeći gradijent od 10-30% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3,1 g; 61%) u vidu bledo žutog amorfnog jedinjenja. MS (ESI): m/z [M-H]-433,3/435,3.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,00 - 1,14 (m, 21H), 1,17 - 1,44 (m, 2H), 1,45 - 1,73 (m, 3H), 1,78 - 1,89 (m, 1H), 1,99 - 2,12 (m, 1H), 2,57 - 2,71 (m, 1H), 3,87 - 3,99 (m, 1H), 4,09 - 4,20 (m, 1H), 5,65 (br d, 1H), 7,89 (dd, 1H), 9,02 (d, 1H), 9,21 - 9,24 (m, 1H).

[1571] Korak 3: Intermedijer 50: 1-[5-fluoro-2-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]-N-[(1R,2R)-2-triizopropilsililoksicikloheksil]pirido[3,4-d]piridazin-4-amin

[1572]

[1575] Rastvoru intermedijera 49 (150 mg; 0,34 mmol), intermedijera 14 (206,9 mg; 0,52 mmol) i PdCl2(Amphos)2 (12,2 mg; 0,02 mmol; 0,05 ekv.) u 1,4-dioksanu (2 ml) i H2O (0,5 ml) dodat je Cs2CO3 (337 mg; 1,03 mmol; 3,0 ekv.) i bočica je zapečaćena. Reakcija je vođena na 120 °C tokom 1 sata u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa H2O.Smeši je dodat CHCl3 i promešana. Organski sloj je izdvojen i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone koristeći gradijent od 5-35% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (126,3 mg; 62%) u vidu bledo žutog amorfnog jedinjenja. MS

[1576] (ESI): m/z [M-H]<->591,3.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0,99 - 1,16 (m, 21H), 1,23 -1,46 (m, 2H), 1,47 - 1,75 (m, 3H), 1,78 - 1,90 (m, 1H), 2,02 - 2,15 (m, 1H), 2,65 -2,79 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,90 - 4,01 (m, 1H), 4,20 - 4,31 (m, 1H), 5,76 (d, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,24 - 7,27 (m, 1H), 7,41 (d, 1H), 8,84 (d, 1H), 9,28 (d, 1H).

[1578] Korak 4: Intermedijer 51: (1R,2R)-2-[[1-[5-fluoro-2-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]cikloheksanol

[1581]

[1584] Počevši od intermedijera 50, jedinjenje iz naslova je pripremljeno analogno primeru 44. MS (ESI): m/z [M+H]<+>437,0.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,46 - 1,72 (m, 3H), 1,76 - 2,03 (m, 4H), 2,17 - 2,28 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 4,15 -4,25 (m, 1H), 4,69 - 4,81 (m, 1H), 6,76 - 6,96 (m, 1H), 7,19 (d, 1H), 7,23 (dd, 1H), 7,40 (d, 1H), 8,83 (d, 1H), 9,30 - 9,33 (m, 1H).

[1586] Korak 5: Primer 54: 4-fluoro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1589]

[1592] Počevši od intermedijera 51, jedinjenje iz naslova je pripremljeno analogno koraku 2 iz primera 52. MS (ESI): m/z [M+H]<+>422,9.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,22 - 1,43 (m, 4H), 1,63 - 1,78 (m, 2H), 1,92 - 2,06 (m, 1H), 2,06 - 2,19 (m, 1H), 3,57 - 3,68 (m, 1H), 4,18 - 4,30 (m, 1H), 4,81 (br d, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,31 (dd, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,73 (d, 1H), 8,84 (d, 1H), 9,80 (s, 1H).

[1594] Primeri uključeni u tabelu 4 u nastavku sintetizovani su po analogiji sa postupkom iz primera 54, koraka 3 i 4, počevši od intermedijera 49 i specificiranih bornih kiselina kao početnog materijala.

[1596] Tabela 4

[1598]

[1599]

[1601] Primer 59

[1602] Korak 1: Intermedijer 52: (1R,3R)-3-[[1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]ciklopentanol

[1604]

[1605] Intermedijer 35 (2,6 g; 5,8 mmol), (1R;3R)-3-aminociklopentan-1-ol hidrohlorid (0,96 g; 7,0 mmol) i NaHCO3 (2,94 g; 35 mmol) su pomešani u IPA (25 ml) i mešani na 80 °C tokom 20 sati. Smeša je izlivena na vodu (100 ml), smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, čvrsti proizvod je filtriran, ispran vodom i osušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,82 g; 95%) u vidu čvrste supstance bež boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>511,5.<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 1,61 (ddd, 2H), 1,84 (dt, 1H), 1,94 - 2,15 (m, 2H), 2,25 (dd, 1H), 3,67 (s, 3H), 4,20 - 4,39 (m, 1H), 4,57 (d, 1H), 4,84 (h, 1H), 5,11 (s, 2H), 6,73 (d, 2H), 7,02 (d, 2H), 7,28 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,56 - 7,69 (m, 2H), 7,76 (d, 1H), 8,83 (d, 1H), 9,75 (s, 1H).

[1607] Korak 2: Primer 59: 2-(4-((1R,3R) -3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol

[1610]

[1613] Intermedijer 52 (2,7 g; 5,29 mmol) je razmućen u apsolutnom EtOH (7 ml) i dodata je HCl (4 M u 1,4-dioksanu; 19,8 ml; 79 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, pre nego što je kapanjem dodata u Et2O (150 ml) uz mešanje. Talog je filtriran i ispran sa Et2O. Sirova čvrsta supstanca je rastvorena u vodi (100 ml) i isprana sa DCM-om (2x50 ml). Vodena faza je zatim bazirana sa NaHCO 3 (zas., 50 ml, pH=9), formirana kaša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, čvrsta, filtrirana, isprana vodom i osušena pod vakumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,8 g; 87%) u vidu žućkaste čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>391,3. HRMS (ESI): m/z [M+H]<+>calcd za C19H17F3N4O2:

[1614] 391,1382, utvrđeno: 391,1392.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,51 - 1,70 (m, 2H), 1,85 (dt, 1H), 1,95 - 2,12 (m, 2H), 2,27 (dq, 1H), 4,26 - 4,34 (m, 1H), 4,57 (d, 1H), 4,86 (h, 1H), 7,23 - 7,34 (m, 3H), 7,55 (d, 1H), 7,78 (d, 1H), 8,82 (d, 1H), 9,77 (s, 1H), 10,42 (s, 1H).

[1615] Primer 60

[1617] Korak 1: Intermedijer 53: (1S,3R)-3-[[1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]ciklopentanol

[1620]

[1623] Intermedijer 35 (2,6 g; 5,8 mmol), (1S,3R)-3-aminociklopentan-1-ol hidrohlorid (0,95 g; 6,9 mmol) i NaHCO3 (2,94 g; 35,0 mmol) su pomešani u IPA (25 ml) i mešani na 80 °C tokom 20 sati. Smeša je izlivena na vodu (100 ml), smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, čvrsti proizvod je filtriran, ispran vodom i osušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,87 g; 96%) u vidu čvrste supstance bež boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>511,5.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,58 - 1,95 (m, 4H), 2,07 (d, 1H), 2,32 - 2,45 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 4,18 (s, 1H), 4,58 (h, 1H), 4,74 (d, 1H), 5,11 (s, 2H), 6,74 (d, 2H), 7,01 (d, 2H), 7,28 (d, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,58 - 7,66 (m, 2H), 7,86 (d, 1H), 8,83 (d, 1H), 9,76 (s, 1H).

[1625] Korak 2: Primer 60: 2-(4-((1R,3S) -3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometil)fenol

[1626]

[1629] Intermedijer 53 (2,8 g; 5,4 mmol) je razmućen u apsolutnom EtOH (7 ml) i dodata je HCl (4 M u 1,4-dioksanu; 20,2 ml; 80,8 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, pre nego što je kapanjem dodata u Et2O (150 ml) uz mešanje. Talog je filtriran i ispran sa Et2O. Sirova čvrsta supstanca je razmućena u vodi (130 ml) i isprana DCM-om (3x50 ml). Vodena faza je zatim napravljena bazičnom sa NaHCO 3 (zas., 50 ml, pH=9) i ekstrahovana sa DCM:MeOH 9:1 nekoliko puta. Kombinovani organski ekstrakti su upareni da bi se dobila vodena kaša i nakon mešanja 2 sata, kaša je filtrirana, čvrsta supstanca je isprana vodom i osušena pod vakumom na 40 °C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,45 g; 69%) u vidu žućkaste čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>391,3. HRMS (ESI): m/z [M+H]<+>calcd za C19H17F3N4O2:

[1630] 391,1382, utvrđeno: 391,1382.

[1632] <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,67 (ddt, 2H), 1,78 (dq, 1H), 1,87 (dt, 1H), 2,08 (dq, 1H), 2,39 (dt, 1H), 4,18 (p, 1H), 4,59 (h, 1H), 7,19 - 7,31 (m, 3H), 7,53 (d, 1H), 7,86 (d, 1H), 8,82 (d, 1H), 9,78 (s, 1H).

[1634] Primer 61

[1636] Korak 1: Intermedijer 54: terc-butil N-[(1R)-3-hidroksi-3-metilcikloheksil]karbamat

[1639]

[1640] Mešanom rastvoru terc-butil N-[(1R)-3-oksocikloheksil]karbamata (920 mg; 4,31 mmol) u THF-u (40 ml) dodat je metillitijum u Et2O (1,06 mol/l; 16,3 ml; 17,3 mmol) na -78 °C, a rastvor je mešan na -78 °C 1 sat. Ovom rastvoru je ponovo dodat metillitijum u Et2O (1,06 mol/l; 16,3 ml; 17,3 mmol) na -78 °C, a rastvor je mešan na -78 °C tokom 1 sata, ugašen zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 ml) i ekstrahovan sa EtOAc. Organski sloj je ispran zasićenom slanom vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatku je dodat heksan, a rezultujući talog je prikupljen filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1:4 smeša, 584 mg; 59%) kao bezbojno amorfno jedinjenje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>230,2.

[1642] Korak 2: Intermedijer 55: (3R)-3-amino-1-metil-cikloheksanol

[1645]

[1648] Rastvoru intermedijera 54 (580 mg; 2,53 mmol) iz prethodnog koraka u CH2Cl2 (6 ml) dodat je TFA (3 ml), a rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakcioni rastvor je uparen pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1176 mg; 27,7% čistoće, kvant.) u vidu bezbojnog ulja. Materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

[1650] Korak 3: Intermedijer 56: (1R,3R)-3-[[1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]-1-metil-cikloheksanol

[1653]

[1654] i Intermedijer 57: (1S,3R)-3-[[1-[2-[(4-metoksifenil)metoksi]-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]-1-metil-cikloheksanol

[1657]

[1660] Rastvoru intermedijera 55 (540 mg; 27,7% čistoće; 1,17 mmol) u prethodnom koraku i intermedijera 34 (500 mg; 1,17 mmol) u DMF-u (2 ml) dodati su DBU (1,31 ml; 8,78 mmol) i BOP (1280 mg; 2,63 mmol), a rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 17 sati. Reakcioni rastvor je sipan u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3, a smeša je ekstrahovana sa CHCl3. Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom eluiranjem sa gradijentom CHCl3 do CHCl3/MeOH (90/10), nakon čega je usledila hiralna HPLC (kolona: CHIRALPAK IE Φ30 mm*250 mm, rastvarač: heksan/EtOH/nBuNH2 (35/65/0,1), protok: 20 ml/min) da bi se dobio intermedijer 56 (40 mg; 6%, MS (ESI): m/z 539,3 [M+H]<+>) u vidu bezbojnog praha, a intermedijer 57 (49 mg; 8%, MS (ESI): m/z 539,3 [M+H)<+>) u vidu bezbojnog praha.

[1662] Korak 4: Primer 61: 2-[4-[[(1R,3R)-3-hidroksi-3-metilcikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1665]

[1666] U tikvicu koja sadrži intermedijer 56 (35 mg; 0,065 mmol) iz prethodnog koraka dodat je hlorovodonik u 1,4-dioksanu (4 M; 2 ml; 8,0 mmol), a rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakcioni rastvor je sipan u zas. vod.

[1667] NaHCO3 rastvor, a smeša je ekstrahovana sa CHCl3. Organski sloj je ispran rastvorom soli, osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom.Ostatak je rekristalizovan iz EtOAc i heksana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (22 mg; 81%) u vidu žutog praha. MS (ESI): m/z 419,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,19 (s, 3 H), 1,21 - 1,33 (m, 2 H), 1,47 (t, 1 H), 1,54 -1,59 (m, 2 H), 1,72 - 1,85 (m, 1 H), 1,94 - 2,00 (m, 1 H), 2,08 - 2,15 (m, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,64 - 4,75 (m, 1 H), 7,26 - 7,28 (m, 1 H), 7,29 (br s, 1H), 7,32 (d, 1 H), 7,55 (d, 1H), 7,61 (d, 1 H), 8,83 (d, 1 H), 9,77 (s, 1 H), 10,44 (br s, 1 H).

[1669] Primer 62: 2-[4-[[(1R,3S)-3-hidroksi-3-metil-cikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1672]

[1675] Jedinjenje iz naslova (24 mg; 70%) u vidu žutog praha pripremljeno je analogno primeru 61 iz intermedijera 57 (44 mg; 0,082 mmol). MS (ESI): m/z 419,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,23 (s, 3 H) 1,36 - 1,53 (m, 3 H) 1,53 - 1,61 (m, 1 H) 1,62 - 1,68 (m, 1 H) 1,69 - 1,81 (m, 1 H) 1,88 - 2,00 (m, 1 H) 4,39 - 4,54 (m, 1 H) 4,69 (s, 1 H) 7,27 - 7,29 (m, 1 H) 7,29 (s, 1 H) 7,30 - 7,35 (m, 1 H) 7,55 (d, 1 H) 7,87 (d, 1 H) 8,84 (d, 1 H) 9,66 (s, 1 H) 10,23 - 10,61 (br, 1 H).

[1677] Primer 63

[1679] Korak 1: Intermedijer 58: (1s,3s)-3-((1-hloropirido[3,4-d]piridazin-4-il)amino)-1-metilciklobutan-1-ol

[1680]

[1683] U suspenziju 3-amino-1-metil-ciklobutanol hidrohlorida (1,5 g; 11,0 mmol; 1,1 ekv.) u MeCN (10 ml), dodato je 1,4-dihloropirido[3,4-d]piridazin (2,0 g; 10,0 mmol; 1,0 ekv.) i DIPEA (5,2 ml; 30,0 mmol; 3,0 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je vođena na 130 °C tokom 0,5 sata u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je H2O (50 ml), a smeša je ekstrahovana sa EtOAc (30 ml, 3 puta). Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone silikagela koristeći gradijent 0-5% MeOH u CHCl3 kao mobilnu fazu i fleš hromatografijom reverzne faze na C18 koloni koristeći gradijent 12-17% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,1 g; 43%).

[1685] Korak 2: Primer 63: 2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)-5-(trifluorometoksi)fenol

[1688]

[1691] Rastvoru intermedijera 58 (80,9 mg; 0,28 mmol; 1,0 ekv.) i [2-hidroksi-4-(trifluorometoksi)fenil]boronske kiseline (91,6 mg; 0,41 mmol; 1,5 ekv.) u 1,4-dioksanu (1,8 ml) dodat je Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (22,5 mg; 2,5 mmol; 0,1 ekv.) i Na2CO3 (0,41 ml; 0,83 mmol; 2,0 M u H2O) na sobnoj temperaturi. Smeša je vođena na 100 °C tokom 0,5 sata u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata je H2O (10 ml) i CHCl3 (10 ml). Smeša je filtrirana pomoću Phase-separator<®>, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen obrnuto-faznom fleš hromatografijom na C18 koloni koristeći gradijent od 30-60% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10,4 mg, 9%); MS (ESI): m/z [M+H]<+>407,1.<1>H NMR

[1692] (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,35 (s, 3H), 2,13 - 2,27 (m, 2H), 2,50 - 2,57 (m, 2H), 4,23 - 4,35 (m, 1H), 5,04 (s, 1H), 6,89 - 6,97 (m, 2H), 7,28 (dd, 1H), 7,39 - 7,47 (m, 1H), 8,06 (d, 1H), 8,84 (d, 1H), 9,78 (s, 1H).

[1694] Primer 64: 3-fluoro-2-(4-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol

[1697]

[1700] Koristeći intermedijer 58, (2-fluoro-6-hidroksi-fenil)boronsku kiselinu i Sphos Pd G3 prema metodi analognoj primeru 63, dobijeno je jedinjenje iz naslova (79,9 mg; 60%). MS (ESI): m/z [M+H]<+>341,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,35 (s, 3H), 2,13 - 2,28 (m, 2H), 2,47 - 2,50 (m, 2H), 4,19 - 4,33 (m, 1H), 5,06 (s, 1H), 6,81 (t, 1H), 6,85 (d, 1H), 7,16 (d, 1H), 7,36 (ddd, 1H), 8,11 (d, 1H), 8,85 (d, 1H), 9,81 (d, 1H), 10,03 (brs, 1H).

[1702] Primeri uključeni u tabelu 5 u nastavku sintetizovani su analogno postupku iz primera 63 korišćenjem naznačenih bornih kiselina. Borne kiseline su komercijalno dostupne, osim ako nije drugačije navedeno.

[1703] Tabela 5

[1704]

[1705]

[1708] Primer 70

[1710] Korak 1: Intermedijer 59: 1-[(1-hloropirido[3,4-d]piridazin-4-il)amino]-2-metil-propan-2-ol

[1713]

[1716] U rastvor 1,4-dihloropirido [3,4-d]piridazina (3,0 g; 15 mmol) u MeCN-u (15 ml) dodati su TEA (6,3 ml; 45 mmol) i 1-amino-2-metil-propan-2-ol (1,5 g;

[1717] 16 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na temperaturi refluksa 1 sat. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i uparena pod smanjenim pritiskom. Sirovoj smeši su dodati CHCl3 i H2O i dva sloja su razdvojena. Organski sloj je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,15 g; 30%) u vidu žute amorfne čvrste supstance. MS(ESI): m/z 253,1/255,1 [M+H]<+>.

[1719] Korak 2: Primer 70: 2-[4-[(2-hidroksi-2-metil-propil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1720]

[1723] Suspenziji intermedijera 59 (200 mg; 791 mmol; 1,0 ekv.), (2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)boronske kiseline (261 mg; 1,273 mmol) i Na2CO3 (252 mg; 2,34 mol) u 1,4-dioksanu (1 ml) i H2O (1 ml) dodat je SPhos PdG3 (124 mg;

[1724] 158 mmol). Bočica je zapečaćena i reakcija je vođena na 120 °C 1 sat u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je sipana u H2O i ekstrahovana sa CHCl3. Organski sloj je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid, CHCl3/MeOH = 100/0-85/15) i fleš hromatografijom obrnute faze na koloni C18 koristeći gradijent od 20-30% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (77 mg; 24%) u vidu žutog praha. MS(ESI): m/z 379,0 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,23 (s, 6H), 3,65 - 3,75 (m, 2H), 5,00 - 5,12 (m, 1H), 7,22 - 7,34 (m, 3H), 7,51 - 7,60 (m, 2H), 7,82 - 7,93 (m, 1H), 8,81 - 8,90 (m, 1H), 9,77 -9,84 (m, 1H).

[1726] Primeri uključeni u tabelu 6 u nastavku sintetizovani su analogno postupku iz primera 70 korišćenjem navedenog polaznog materijala i intermedijera 59.

[1728] Tabela 6

[1730]

[1731]

[1734] Primer 74

[1736] Korak 1: Intermedijer 60: 1-[[1-[2-fluoro-6-metoksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]-2-metil-propan-2-ol

[1739]

[1742] Suspenziji intermedijera 59 (200 mg; 791 mmol), intermedijera 9 (226 mg; 950 mmol) i Na2CO3 (252 mg; 2,37 mol) u 1,4-dioksanu (2,0 ml) i H2O (1,0 ml) dodat je SPhos Pd G3 (62 mg; 79 mmol). Bočica je zapečaćena i reakcija je vođena na 120 °C 1 sat u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je sipana u H2O i ekstrahovana sa CHCl3. Organski sloj je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid, CHCl3/MeOH = 100/0-94/6) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (342 mg, quant) kao žuto amorfno jedinjenje. MS(ESI): m/z 409,1 [M-H]-.

[1743] Korak 2: Primer 74: 3-fluoro-2-[4-[(2-hidroksi-2-metilpropil)amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1746]

[1749] Rastvoru intermedijera 60 (342 mg; 833 mmol) u 2,4,6-trimetilpiridinu (1,0 ml) dodat je LiI (1,12 g; 8,33 mol) i smeša je zagrejana na 160 °C i mešana. Nakon 0,5 sata, smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i prečišćena fleš hromatografijom (silicijum dioksid, CHCl3/MeOH = 100/0-80/20) i fleš hromatografijom obrnute faze na koloni C18 koristeći gradijent od 20-25% MeCN u H2O kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (94 mg; 28%) u vidu žutog amorfnog jedinjenja. MS(ESI): m/z 397,0 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,23 (s, 6H), 3,66 - 3,76 (m, 2H), 4,95 - 5,05 (m, 1H), 7,11 - 7,19 (m, 1H), 7,20 - 7,31 (m, 2H), 7,90 - 7,99 (m, 1H), 8,82 - 8,90 (m, 1H), 9,80 - 9,90 (m, 1H).

[1751] Primer 75

[1753] Korak 1: Intermedijer 47: (1R,2R)-2-((1-hloropirido[3,4-d]piridazin-4-il)amino)cikloheksan-1-ol

[1756]

[1759] i Intermedijer 48: (1R,2R)-2-((4-hloropirido[3,4-d]piridazin-1-il)amino)cikloheksan-1-ol

[1760]

[1763] DIPEA (6,46 g; 49,99 mmol) je dodat u (1R,2R)-2-aminocikloheksan-1-ol (1,267 g; 11,00 mmol), 1,4-dihloropirido[3,4-d]piridazin (2 g; 10,00 mmol) u NMP (25 ml) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan na 80 °C tokom 12 sati. Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom i sirovi proizvod je prečišćen preparativnim hiralnim-HPLC (kolona: CHIRAL ART Cellulose-SB, 3*25 cm, 5 µm; mobilna faza A: CO2, mobilna faza B:IPA (0,5% 2 M NH3 u MeOH); 70 ml/min sa 50% B na 35 °C). Kombinovane frakcije proizvoda sa RT od 6,05 min su liofilizovane da bi se dobilo 0,600 g intermedijera 47 (21,5%) u vidu čvrste supstance žute boje. Kombinovane frakcije proizvoda sa RT od 7,67 min su liofilizovane da bi se dobilo 0,200 g intermedijera 48 (7,2%) u vidu čvrste supstance žute boje.

[1765] Intermedijer 47: MS (ESI): m/z [M+H]<+>279,10.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,10 - 1,42 (m, 4 H), 1,67 (s, 2 H), 1,83 - 2,11 (m, 2 H), 3,50 - 3,65 (m, 1 H), 4,10 (s, 1H), 4,75 (m, 1H), 7,70 - 7,85 (m, 2 H), 9,02 (m, 1 H), 9,78 (m, 1 H).

[1767] Intermedijer 48: MS (ESI): m/z [M+H]<+>279,05.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,27 (m, 4 H), 1,65 (m, 2 H), 1,87 - 2,13 (m, 2H), 3,57 (m, 1 H), 4,05 (m, 1 H), 4,69 (m, 1 H), 7,58 (m, 1 H), 8,33 (m, 1 H), 9,07 (m, 1 H), 9,37 (m, 1 H).

[1769] Korak 2: Primer 75: 5-fluoro-2-(4-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol

[1772]

[1773] Pd(PPh3)4 (20,73 mg; 0,02 mmol) je dodat intermedijeru 47 (100 mg; 0,36 mmol), (4-fluoro-2-hidroksifenil)boroničnoj kiselini (84 mg; 0,54 mmol) i K3PO4 (152 mg; 0,72 mmol) u 1,4-dioksanu (5 ml) i vodi (1 ml) u inertnoj atmosferi. Dobijeni rastvor je mešan na 90 °C tokom 12 sati. Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: YMC-Actus Triart C18 ExRS, 30 mm X 150 mm, 5 µm; mobilna faza A: voda(10 mmol/l NH4HCO3 i 0,1% NH3), mobilna faza B: MeCN; 60 ml/min; sa gradijentom od 10% do 43% B za 7 min. Kombinovane frakcije proizvoda sa RT od 6,63 min su liofilizovane da bi se dobilo 0,038 g jedinjenja iz naslova (29,9%) u vidu bledo žute čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>355,05.<1>H NMR

[1774] (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,30 (m, 4 H), 1,69 (s, 2 H), 2,04 (m, 2 H), 3,61 (m, 1 H), 4,20 (m, 1 H),4,80 (s, 1 H), 6,68 - 6,87 (m, 2 H), 7,18 - 7,40 (m, 2 H), 7,58 (d, 1 H), 8,82 (d, 1 H), 9,76 (d, 1 H), 10,26 (s, 1 H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -111,322, -111,669(1 F).

[1776] Primer 76: 3-fluoro-2-(4-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol

[1779]

[1782] Pd(PPh3)4 (20,73 mg; 0,02 mmol) je dodat intermedijeru 47 (100 mg; 0,36 mmol), (2-fluoro-6-hidroksifenil)boroničnoj kiselini (84 mg; 0,54 mmol) i K3PO4 (152 mg; 0,72 mmol) u 1,4-dioksanu (5 ml) i vodi (1 ml) u inertnoj atmosferi. Rezultujući rastvor je mešan na 90 °C tokom perioda od 12 sati. Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: XBridge Prep OBD C18 kolona, 30×150mm, 5µm; mobilna faza A: voda(10 mmol/l NH4HCO3 i 0,1% NH3), mobilna faza B: MeCN; 60 ml/min; sa gradijentom od 10% do 40% B za 8 min). Kombinovane frakcije proizvoda sa RT od 7,80 min su liofilizovane da bi se dobilo 0,057 g jedinjenja iz naslova (45,1%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>355,15.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,30 (m, 5 H), 1,70 (m, 2 H), 1,97 (s, 1H), 2,11 (s, 1 H), 3,60 (s, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 4,81 (m, 1 H), 6,73 - 6,88 (m, 2 H), 7,13 (m, 1H), 7,34 (m, 1 H), 7,65 (m, 1 H), 8,82 (m, 1 H), 9,78 (m, 1 H), 10,01 (s, 1 H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -114,433, -114,780 (1 F).

[1784] Primer 77: 3-fluoro-2-(1-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol

[1787]

[1790] Pd(PPh3)4 (20,73 mg; 0,02 mmol) je dodat intermedijeru 48 (100 mg; 0,36 mmol), (2-fluoro-6-hidroksifenil)boroničnoj kiselini (84 mg; 0,54 mmol) i K3PO4 (152 mg; 0,72 mmol) u 1,4-dioksanu (5 ml) u inertnoj atmosferi. Rezultujući rastvor je mešan na 90 °C tokom perioda od 12 sati. Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: YMC-Actus Triart C18, 30 mm X 150 mm, 5 µm; mobilna faza A: voda(10 mmol/l NH4HCO3 i 0,1% NH3), mobilna faza B: MeCN; 60 ml/min; sa gradijentom od 12% do 32% B za 10 min). Kombinovane frakcije proizvoda sa RT od 9,92 min su liofilizovane da bi se dobilo 0,050 g jedinjenja iz naslova (39,3%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>355,00.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,31 (m, 4 H), 1,69 (m, 2 H), 1,96 (m, 1 H), 2,11 (m, 1 H), 3,60 (m, 1 H), 4,16 (s, 1 H), 4,76 (s, 1 H), 6,76 - 6,90 (m, 2 H), 7,36 (m, 1 H), 7,45 (m, 1 H), 8,32 (m, 1 H), 8,68 (s, 1 H), 8,93 (d, 1 H), 10,08 (s, 1 H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -114,742 (1 F).

[1792] Primer 78: 5-fluoro-2-(1-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol

[1793]

[1796] Pd(PPh3)4 (20,73 mg; 0,02 mmol) je dodat intermedijeru 48 (100 mg; 0,36 mmol), (4-fluoro-2-hidroksifenil)boroničnoj kiselini (84 mg; 0,54 mmol) i K3PO4 (152 mg; 0,72 mmol) u 1,4-dioksanu (5 ml) i vodi (1 ml) u inertnoj atmosferi. Rezultujući rastvor je mešan na 90 °C tokom perioda od 12 sati. Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: YMC-Actus Triart C18, 30 mm X 150 mm, 5 µm; mobilna faza A: voda(10 mmol/l NH4HCO3 i 0,1% NH3), mobilna faza B: MeCN; 60 ml/min; sa gradijentom od 16% do 36% B za 10 min). Kombinovane frakcije proizvoda sa RT od 7,80 min su liofilizovane da bi se dobilo 0,062 g jedinjenja iz naslova (48,5%) u vidu čvrste supstance bele boje. MS (ESI): m/z [M+H]<+>355,05.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,29 (m, 5 H), 1,96 (m, 1 H), 2,10 (m, 1 H), 3,59 (s, 1 H), 4,13 (s, 1 H), 4,75 (s, 1 H), 6,65 - 6,98 (m, 2 H), 7,38 (m, 2 H), 8,28 (m, 1H), 8,80 (s, 1 H), 8,90 (m, 1 H), 10,31 (s, 1 H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ - 111,459 (1 F).

[1798] Primeri uključeni u tabelu 7 u nastavku sintetizovani su analogno koraku 5 postupka da bi se napravio primer 40, ali sa intermedijerom 1 umesto intermedijerom 35 i navedenim aminoalkoholom umesto (1R,2R) -2-aminocikloheksan-1-ola, nakon čega sledi deprotekcija analogno koraku 2 postupka da bi se napravio primer 74.

[1799] Tabela 7

[1800]

[1801]

[1803] Primer 85

[1804] Korak 1: Intermedijer 61: (1R,3R)-3-((1-hloropirido[3,4-d]piridazin-4-il)amino)ciklopentan-1-ol

[1806]

[1808] i Intermedijer 62: (1R,3R)-3-((4-hloropirido[3,4-d]piridazin-1-il)amino)ciklopentan-1-ol

[1809]

[1812] DIPEA (5,04 g; 39,00 mmol) je dodata u 1,4-dihloropirido[3,4-d]piridazin (1,3 g; 6,50 mmol), (1R;3R)-3-aminociklopentan-1-ol hidrohlorid (0,984 g;

[1813] 7,15 mmol) u NMP (5 ml) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan na 80 °C tokom 12 sati. Rastvarač je uklonjen pod smanjenim pritiskom i sirovi proizvod je prečišćen preparativnim hiralnim-HPLC (kolona: OptiChiral-C9-5, 3*25 cm, 5 µm; mobilna faza A: CO2, mobilna faza B:MeOH (0,5% 2 M NH3 u MeOH); 100 ml/min; 50% B na 35 °C). Frakcije koje sadrže željeni proizvod sa RT od 2,88 min su osušene da bi se dobio 1,00 g intermedijera 61 (58,1%) u vidu čvrste supstance žute boje. Frakcije koje sadrže željeni proizvod sa RT od 3,92 min su osušene da bi se dobilo 0,44 g intermedijera 62 (25,6%) u vidu čvrste supstance žute boje.

[1815] Intermedijer 61: MS (ESI): m/z [M+H]<+>265,05.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,45 - 1,67 (m, 2 H), 1,80 (m, 1 H), 1,88 - 2,09 (m, 2 H), 2,13 - 2,29 (m, 1 H), 4,27 (m, 1 H), 4,44 - 4,80 (m, 2 H), 7,77 - 7,91 (m, 2 H), 9,02 (m, 1 H), 9,76 (m, 1 H).

[1817] Intermedijer 62: MS (ESI): m/z [M+H]<+>265,05.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,56 (m, 2 H), 1,78 (m, 1 H), 1,88 - 2,08 (m, 2 H), 2,12 - 2,28 (m, 1 H), 4,26 (m, 1 H), 4,42 - 4,77 (m, 2 H), 7,69 (m, 1 H), 8,32 (m, 1 H), 9,06 (m, 1 H), 9,37 (m, 1 H).

[1819] Korak 2: Primer 85: 5-fluoro-2-(4-((1R,3R)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol

[1820]

[1823] Pd(PPh3)4 (32,7 mg; 0,03 mmol) je dodat intermedijeru 61 (150 mg; 0,57 mmol), (4-fluoro-2-hidroksifenil)boroničnoj kiselini (133 mg; 0,85 mmol) i K3PO4 (241 mg; 1,13 mmol) u 1,4-dioksanu (5 ml) i vodi (0,2 ml) u inertnoj atmosferi. Rezultujući rastvor je mešan na 90 °C tokom perioda od 12 sati.

[1824] Rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: XBridge Shield RP18 OBD kolona, 30*150mm, 5µm; mobilna faza A: voda(10 mmol/l NH4HCO3 i 0,1% NH3), mobilna faza B: MeCN; 60 ml/min; sa gradijentom od 16% do 26% B za 8 min). Kombinovane frakcije proizvoda sa RT od 8,75 min su liofilizovane da bi se dobilo 0,035 g jedinjenja iz naslova (18,2%) u vidu čvrste supstance sive boje. MS

[1825] (ESI): m/z [M+H]<+>341,15.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,49 - 1,71 (m, 2 H), 1,78 - 1,90 (m, 1 H), 2,03 (m, 2 H), 2,21 - 2,31 (m, 1 H), 4,30 (s, 1 H), 4,57 (m, 1 H), 4,85 (m, 1 H), 6,72 - 6,86 (m, 2 H), 7,23 - 7,41 (m, 2 H), 7,70 (m, 1 H), 8,83 (m, 1 H), 9,76 (s, 1 H), 10,22 (s, 1 H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -111,625,-111,689,-111,768 (1 F).

[1827] Primer 86: 3-fluoro-2-(1-((1R,3R)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol

[1830]

[1833] Pd(PPh3)4 (21,8 mg; 0,02 mmol) je dodat intermedijeru 62 (100 mg;

[1834] 0,38 mmol), (2-fluoro-6-hidroksifenil)boroničnoj kiselini (70,7 mg; 0,45 mmol) i K3PO4 (241 mg; 1,13 mmol) u 1,4-dioksanu (3 ml) i vodi (0,5 ml) u inertnoj atmosferi. Rezultujući rastvor je mešan na 25 °C tokom perioda od 16 sati. Reakcija je zaustavljena dodavanjem vode i ekstrahovana tri puta koristeći EtOAc.

[1835] Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4 i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (kolona:

[1836] XSelect CSH Fluoro fenil, 30*150 mm, 5 µm; mobilna faza A: voda (0,1% mravlje kiseline), mobilna faza B: MeCN; 60 ml/min; sa gradijentom od 2% do 12% B za 7 min). Kombinovane frakcije produkta su liofilizovane da bi se dobilo 0,072 g jedinjenja iz naslova (53,3% ) u vidu čvrste supstance žute boje. MS

[1837] (ESI): m/z [M+H]<+>341,00.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,60 (m, 2 H), 1,82 (m, 1 H), 1,98 (m, 2 H), 2,24 (m, 1 H), 4,29 (s, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 4,80 (m, 1 H), 6,83 (m, 2 H), 7,36 (m, 1H), 7,57 (m, 1 H), 8,30 (m, 1 H), 8,69 (s, 1H), 8,93 (m, 1 H), 10,07 (s, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -114,705, -114,756, -135,688 (1 F).

[1839] Primer 87

[1841] Korak 1: Intermedijer 63: (1S,3R)-3-((1-hloropirido[3,4-d]piridazin-4-il)amino)ciklopentan-1-ol

[1844]

[1847] i Intermedijer 64: (1S,3R)-3-((4-hloropirido[3,4-d]piridazin-1-il)amino)ciklopentan-1-ol

[1850]

[1851] 1,4-dihloropirido[3,4-d]piridazin (1,1 g; 5,50 mmol), (1S,3R)-3-aminociklopentan-1-ol hidrohlorid (0,795 g; 5,77 mmol) i Na2CO3 (1,224 g;

[1852] 11,55 mmol) su razblaženi sulfolanom (11 ml) i zagrejani na 80 °C tokom 3 sata uz mešanje i inertnu atmosferu. Formirana čvrsta supstanca je filtrirana, filtrat je ispran sa DCM i MeOH i rastvarači su uklonjeni pod smanjenim pritiskom. Prep-HPLC je korišćen za separaciju regioizomera (kolona: Chiralpak IB N-3,

[1853] 150 * 4,6 mm, 3 µm; mobilna faza A: CO2, mobilna faza B:EtOH (20 mM DEA u EtOH); 3,5 ml/min; 25% B na 40 °C). Frakcije sa RT od 2,63 min su objedinjene i osušene da bi se dobio 1,1 g intermedijera 63 (76,0%). Frakcije sa RT od 1,96 min su objedinjene i osušene da bi se dobio 347 mg intermedijera 64 (23,8%).

[1855] Intermedijer 63:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,57 - 1,71 (m, 2H), 1,71 - 1,88 (m, 2H), 2,03 - 2,15 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 4,11 - 4,24 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,09 (s, 1H), 9,39 (s, 1H).

[1857] Intermedijer 64:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,57 - 1,71 (m, 2H), 1,71 - 1,88 (m, 2H), 2,03 - 2,15 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 4,11 - 4,24 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,09 (s, 1H), 9,39 (s, 1H).

[1859] Korak 2: Primer 87: 3-fluoro-2-(1-((1R,3S)-3-hidroksiciklopentil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol

[1862]

[1865] Smeša intermedijera 64 (100 mg; 0,38 mmol), (2-fluoro-6-hidroksifenil)boronske kiseline (70,7 mg; 0,45 mmol), Pd(PPh3)4 (21,83 mg;

[1866] 0,02 mmol) i K3PO4 (241 mg; 1,13 mmol) u vodi (1 ml) i 1,4-dioksana (5 ml) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na 90 °C 15 sati u inertnoj atmosferi. Reakcija je zaustavljena dodavanjem vode i ekstrahovana tri puta koristeći EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: XSelect CSH Fluoro fenil, 30*150 mm, 5 µm; mobilna faza A: Voda (0,1% mravlje kiseline), mobilna faza B: MeCN; 60 ml/min; 2% B do 12% B za 7 min). Kombinovane frakcije sa RT od 5,72 min su objedinjene i liofilizovane. Ova reakcija je dala 0,089 g jedinjenja iz naslova (66,6% ) u vidu bledo žute čvrste supstance. MS (ESI): m/z [M+H]<+>341,00.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,65 (m, 2H), 1,82 (m, 2H), 2,07 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 4,17 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 4,76 (s, 1H), 6,83 (m, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,67 (m, 1H), 8,32 (m, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,93 (m, 1H), 10,07 (s, 1H);<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -114,714, -114,897 (1 F).

[1868] Primer 88

[1870] Korak 1: Intermedijer 65: 2-[4-[[(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metilamino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1873]

[1876] U rastvor [(4S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metanamina (85,0 mg; 0,65 mmol; 1,1 ekv.) u MeCN-u (2,0 ml) dodati su DIPEA (0,31 ml; 1,8 mmol; 3,0 ekv.) i ontermedijer 1 (200,0 mg; 0,59 mmol; 1,0 ekv.). Smeša je mešana na 100 °C tokom 44 sata. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatku je dodato 2,4,6-trimetilpiridin (12 ml; 89,11 mmol) i LiI (788,0 mg; 5,89 mmol; 10,0 ekv.) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 160 °C 5 sati u mraku. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana. Reakcija je zaustavljena dodavanjem vode i ekstrahovana sa CHCl3 (3 puta). Kombinovani organski sloj je osušen preko Na2SO4 i koncentrovan in vacuo.Ostatak je prečišćen obrnuto-faznom fleš hromatografijom na C18 koloni koristeći gradijent od 20-50% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta smeđa supstanca (129,3 mg, 50%); MS (ESI): m/z [M+H]<+>421,1.

[1877] Korak 2: Primer 88: (2S)-3-[[1-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]propan-1,2-diol

[1880]

[1883] Suspenziji intermedijera 65 (124,6 mg; 0,30 mmol; 1,0 ekv.) u AcOH (2 ml) dodato je H2O (0,6 ml) i smeša je mešana na 80 °C tokom 1 sata. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom sa reverznom fazom na koloni C18 koristeći gradijent od 20-50% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, vod.) kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova u vidu čvrste supstance bele boje (47,4 mg; 39%). MS

[1884] (ESI): m/z [M+H]<+>381,1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,43 - 3,47 (m, 2H), 3,51 - 3,64 (m, 1H), 3,75 - 3,84 (m, 1H), 3,85 - 3,97 (m, 1H), 4,76 (t, 1H), 5,10 (d, 1H), 7,17 - 7,39 (m, 3H), 7,56 (d, 1H), 8,08 - 8,16 (m, 1H), 8,85 (d, 1H), 9,76 (d, 1H), 10,46 (br d, 1H).

[1886] Primer 89

[1888] Korak 1: Intermedijer 66: 6,7-dihidropirido[2,3-d]piridazin-5,8-dion

[1891]

[1894] Suspenziji furo[3,4-b] piridin-5,7-diona (5,00 g; 33,5 mmol) u AcOH (25 ml) dodat je hidrazin monohidrat (5,3 ml; 110 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na refluksu 17 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i talog je filtriran i ispran sa H2O da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5,15 g; 94%) u vidu bezbojnog praha. MS(ESI): m/z 164,0 [M+H]<+>.

[1896] Korak 2: Intermedijer 67: 5,8-dihloropirido[2,3-d]piridazin

[1899]

[1902] Rastvoru intermedijera 66 (2,0 g; 12 mmol) u piridinu (1,9 g; 25 mmol) dodat je fosforil triklorid (10 ml) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 100 °C tokom 6 sati. Smeša je uparena pod smanjenim pritiskom, sipana u ledenu vodu, ekstrahovana sa CHCl3, osušena preko Na2SO4 i filtrirana. Organski rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2,4 g; 98%) u vidu čvrste supstance smeđe boje. MS(ESI): m/z 200,0/202,0 [M+H]<+>.

[1904] Korak 3: Intermedijer 68: (1S,3R)-3-[(5-hloropirido[2,3-d]piridazin-8-il)amino]cikloheksanol

[1907]

[1910] Rastvoru intermedijera 67 (1,20 g; 6,00 mmol) i (1S,3R)-3-aminocikloheksanol hidrohlorida u NMP (6,0 ml) dodat je DIPEA (3,5 ml) i smeša je mešana na 80 °C tokom 17 sati. Smeša je uparena pod smanjenim pritiskom i prečišćena fleš hromatografijom (NH silicijum dioksid; EtOAc/MeOH = 100/0-80/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (236 mg; 13%) u vidu čvrste supstance žute boje. MS(ESI): m/z 279,1/281,2 [M+H]<+>.

[1911] Korak 4: Primer 89: 2-[8-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]pirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1914]

[1917] U rastvor intermedijera 68 (236 mg; 0,847 mmol) i (2-fluoro-6-metoksifenil)boronske kiseline (209 mg; 1,02 mmol) u 1,4-dioksanu (5 ml) i 2,0 M Na2CO3 vod. (2,5 ml) je dodat Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (69 mg; 0,085 mmol) i smeša je mešana na 100 °C tokom 5 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, sipana u H2O, ekstrahovana sa CHCl3, isprana sa H2O, osušena preko Na2SO4, filtrirana i uparena pod smanjenim pritiskom. Sirova smeša je prečišćena fleš hromatografijom (NH silicijum dioksid; CHCl3/MeOH=100/0-90/10). Kombinovane frakcije proizvoda su koncentrovane i dalje prečišćene fleš hromatografijom (silicijum dioksid; CHCl3/MeOH = 100/0-90/10), zatim triturirane sa 10% MeOH u IPE da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (78 mg; 23%) u vidu bledo žutog praha. MS(ESI): m/z 405,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1,30 - 1,75 (m, 5H), 1,88 - 2,24 (m, 3H), 2,41 - 2,55 (m, 1H), 3,91 - 4,05 (m, 1H), 4,40 - 4,52 (m, 1H), 7,20 -7,27 (m, 1H), 7,40 - 7,48 (m, 1H), 7,59 - 7,65 (m, 1H), 7,74 - 7,82 (m, 1H), 8,48 -8,57 (m, 1H), 9,02 - 9,09 (m, 1H).

[1919] Primer 90: 3-fluoro-2-(8-(((1s,3s)-3-hidroksi-3-metilciklobutil)amino)pirido[2,3-d]piridazin-5-il)fenol

[1920]

[1923] Jedinjenje iz naslova je sintetizovano analogno postupku iz primera 63, počevši od intermedijera 67 i (2-fluoro-6-hidroksi-fenil)borne kiseline. MS(ESI): m/z 341,1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,33 (s, 3H), 2,16 - 2,27 (m, 2H), 2,45 - 2,55 (m, 2H), 4,31 - 4,42 (m, 1H), 5,01 (br s, 1H), 6,77 - 6,91 (m, 2H), 7,31 -7,41 (m, 1H), 7,51 - 7,62 (m, 1H), 7,72 - 7,82 (m, 1H), 7,82 - 7,91 (m, 1H), 9,08 -9,15 (m, 1H).

[1925] Primer 91

[1927] Korak 1: Intermedijer 69: 2-metil-6,7-dihidropirido[2,3-d]piridazin-5,8-dion

[1930]

[1933] Suspenziji 2-metilfuro [3,4-b] piridin-5,7-diona (5,42 g; 31,6 mmol) u AcOH (24 ml) dodat je hidrazin monohidrat (5,0 ml; 103 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 125 °C tokom 40 minuta. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i talog je filtriran, ispran sa H2O i osušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4,80 g; 86%) u vidu bezbojnog praha. MS(ESI): m/z 178,0 [M+H]<+>.

[1935] Korak 2: Intermedijer 70: 5,8-dihloro-2-metil-pirido[2,3-d]piridazin

[1936]

[1939] Rastvoru intermedijera 69 (1,10 g; 6,21 mmol) u piridinu (1,0 ml) dodat je fosforil trihlorid (5,0 ml) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 100 °C tokom 5 sati pod atmosferom argona. Smeša je uparena pod smanjenim pritiskom, sipana u ledenu vodu, ekstrahovana sa CHCl3 i osušena preko Na2SO4 i filtrirana. Organski rastvarač je uparen pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (585 mg; 44%) u vidu crvenog praha. MS(ESI): m/z 214,0/216,0 [M+H]<+>.

[1941] Korak 3: Primer 91: 2-[8-[[(1R,3S)-3-hidroksicikloheksil]amino]-2-metilpirido[2,3-d]piridazin-5-il]-5-(trifluorometil)fenol

[1944]

[1947] Počevši od intermedijera 70, jedinjenje iz naslova je sintetizovano analogno postupku iz primera 89. MS(ESI): m/z 419,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,20 - 1,52 (m, 4H), 1,73 - 2,00 (m, 3H), 2,16 - 2,25 (m, 1H), 2,73 (s, 3H), 3,60 - 3,70 (m, 1H), 4,19 - 4,30 (m, 1H), 4,70 - 4,77 (m, 1H), 7,22 - 7,34 (m, 2H), 7,52 - 7,59 (m, 1H), 7,67 - 7,73 (m, 1H), 7,78 - 7,82 (m, 1H).

[1949] Primer 92

[1951] Korak 1: Intermedijer 71: 3-[(4-hloroftalazin-1-il)amino]-2-metilpropan-1,2-diol

[1952]

[1955] Rastvoru 1,4-dihloroftalazina (300 mg; 1,51 mmol; 1,0 ekv.) u MeCN (2 ml) dodat je DIPEA (0,78 ml; 4,52 mmol; 3,0 ekv.) i 3-amino-2-metil-propan-1,2-diol (190 mg; 1,81 mmol; 1,2 ekv.). Bočica je zapečaćena i reakcija je vođena na 120 °C 1 sat u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i rezidualni precipitat je trituriran sa CHCl3 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (290 mg; 72%) u vidu bezbojnog praha. MS(ESI): m/z 268,1/270,1 [M+H]<+>.

[1957] Korak 2: Intermedijer 72: 4-hloro-N-[(2,2,4-trimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil]ftalazin-1-amin

[1960]

[1963] Smeši intermedijera 71 (200 mg; 0,747 mmol; 1,0 eq) u DMF-u (3 ml) i acetona (3 ml) dodati su 2,2-dimetoksipropan (3,0 ml; 24,46 mmol; 33 ekv.) i paratoluensulfonska kiselina monohidrat (28,4 mg; 0,149 mmol; 0,2 ekv.), zatim je smeša mešana na sobnoj temperaturi 12 sati. Reakciona smeša je koncentrovana i dodata je zasićena vodena NaHCO3. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i isprana slanim rastvorom, zatim je organski sloj uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom NH kolone silikagela koristeći gradijent od 25-50% EtOAc u heksanu kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (255 mg; 100%) kao bezbojna guma. MS(ESI) m/z 308,1/310,0 [M+H]<+. 1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,29 (s, 3H), 1,31 (s, 3H), 1,33 (s, 3H), 3,63 - 3,66 (m, 1H), 3,65 3,69 (m, 1H), 3,79 - 3,83 (m, 1H), 4,06 - 4,08 (m 1H), 7,61 - 7,63 (m, 1H), 7,97 -8,02 (m, 2H), 8,06 - 8,09 (m, 1H), 8,41 - 8,45 (m, 1H).

[1965] Korak 3: Intermedijer 73: 5-(trifluorometil)-2-[4-[(2,2,4-trimetil-1,3-dioksolan-4-il)metilamino]ftalazin-1-il]fenol

[1968]

[1971] Rastvoru intermedijera 72 (120 mg; 0,35 mmol), [2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]boronske kiseline (108 mg; 0,53 mmol) i

[1972] PdCl2(Amphos)2 (24,9 mg; 0,035 mmol; 0,1 ekv.) u DME (2 ml) i H2O (0,5 ml) dodat je Cs2CO3 (343 mg; 1,05 mmol; 3,0 ekv.) i bočica je zatvorena. Reakcija je vođena na 120 °C tokom 1 sata u mikrotalasnom reaktoru. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa H2O.Smeši je dodat CHCl3 i promešana. Organski sloj je izdvojen i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom kolone koristeći gradijent 0-10% MeOH u CHCl3 kao mobilnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (135 mg; 89%) u vidu bledo žutog praha. MS(ESI) m/z 434,2 [M+H].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,34 (s, 3H), 1,35 - 1,36 (m, 6H), 3,68 - 3,71 (m, 1H), 3,73 - 3,76 (m, 1H), 3,89 - 3,94 (m, 1H), 4,13 - 4,15 (m, 1H), 7,27 - 7,30 (m, 2H), 7,44 - 7,47 (m, 2H), 7,51 - 7,54 (m, 1H), 7,77 - 7,81 (m, 1H), 7,86 - 7,88 (m, 1H), 8,38 - 8,40 (m, 1H) , 10,36 (br s, 1H).

[1974] Korak 4: Primer 92: 3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]-2-metil-propan-1,2-diol

[1975]

[1978] Rastvoru intermedijera 73 (135 mg; 0,312 mmol) u trifluoroacetnoj kiselini (2 ml) dodat je H2O (0,8 ml) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i uparena pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom sa reverznom fazom na koloni C18 koristeći gradijent od 30-60% MeCN u (NH4)2CO3 (10 mM, aq) kao mobilnoj fazi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (84 mg; 68%) u vidu bezbojnog praha. MS(ESI): m/z 394,4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,15 (s, 3H), 3,18 -3,29 (m, 2H), 3,60 - 3,66 (m, 2H), 5,33 - 5,36 (m, 2H), 7,26 - 7,32 (m, 2H), 7,45 -7,47 (m, 1H), 7,51 - 7,53 (m, 1H), 7,65 - 7,68 (m, 1H), 7,80 - 7,84 (m, 1H), 7,88 -7,92 (m, 1H), 8,38 - 8,39 (m, 1H) , 10,36 (br s, 1H).

[1980] Tabela 8: MS i NMR podaci za jedinjenja navedena u tabelama

[1982]

[1983]

[1984]

[1985]

[1986]

[1987]

[1988]

[1991] Biološki i fizičko-hemijski podaci

[1993] Test formiranja mrlja na ljudskom NLRP3 (Test A)

[1995] Za profilisanje jedinjenja za aktivnost antagonista NLRP3 u pogledu inhibicije formiranja mrlja izazvanog nigericinom, korišćeni su monociti reportera ASC-GFP (InvivoGen # thp-ascgfp). Test se zasniva na NF-kB zavisnoj ekspresiji ASC::GFP fuzionog proteina. LPS-primanje ćelija povećava ASC::GFP ekspresiju i Nigericin regrutuje ASC::GFP, pro-kaspazu-1 i NLRP3 kako bi se formirali kompleksi veličine mikrometra, ASC-specks, koji se kvantifikuju fluorescentnom mikroskopijom.

[1997] Priprema reagenasa za analizu:

[1999] Medijum za ispitivanje: RPMI 1640 (Gibco #72400-021) dopunjen sa 10% toplotno inaktiviranog FBS-a (Gibco #10270)

[2001] Ćelije: THP-ASC-GFP su kultivisani u RPMI 1640 (Gibco # 72400-021) dopunjeni sa 10% toplotno inaktiviranog FBS-a (Gibco #10270) i 100 µg/ml Zeocina (Life Technologies # 46-0072) (svaki drugi prolaz) za održavanje ASC::GFP ekspresije.

[2003] Protokol korak po korak za pokretanje testa:

[2005] Dan 1

[2007] 1. Ćelije su prebrojane pomoću CEDEX-A (Innovartis) i razblažene testnim medijumom dopunjenim 100 nM Phorbol 12-miristat 13 acetatom (Sigma # P8139) do 375000 ćelija/ml.

[2008] 2. Gorenavedena ćelijska mešavina od 20 µl izdata je u crne µclear TC-tretirane (Greiner #781091) 384 ploče bušotine sa Multidrop Combi (ThermoFisher).

[2010] 3. Ploče su inkubirane na 37 °C, 5% CO2 tokom 20 sati.

[2012] Dan 2

[2014] 1. 10 µl LPS (Sigma #L2654) je izdato sa Multidrop Combi (ThermoFisher) za 1 µg/ml.

[2016] 2. Ploče su inkubirane na 37 °C, % CO2 tokom 3 sata.

[2018] 3. 80 nl test jedinjenja u DMSO pripremljeno je u krivim koncentracionim odgovorima i razblaženo sa medijumom za analizu od 20 µl dopunjenim sa 68 µM ZVAD-FMK (Promega #7231) u pločama bušotine od polipropilena 384 (Greiner # 781280)

[2020] 4. 10 µl iznad rastvora test jedinjenja je prebačeno na ćelijsku ploču sa Bravo (Agilent).

[2022] 5. Ploče su inkubirane na 37 °C, 5% CO2 tokom 30 min

[2024] 6. 15 µl nigericina (Sigma #SNIL1779) na 75 µM izdato je na ćelijske ploče sa Certus (Gyger)

[2026] 7. Ploče su inkubirane na 37 °C, 5% CO2 tokom 1 sata

[2028] 8. 15 µl 17,3% formaldehida (Sigma # F8775) sa dodatkom Hoechst boje nukleinske kiseline (Life Technologies # H3570) razblaženog sa

[2029] 1:5000 dodato je sa Multidrop (ThermoFisher)

[2031] 9. Ploče su inkubirane na sobnoj temperaturi 15 min

[2033] 10. Ploče su oprane dva puta sa 40 µl PBS (Gibco #100100) sa Bluewasher (BlueCatBio)

[2035] 11. Ploče su snimljene pomoću ImageXpress-a (molekularni uređaji) Podaci o slici su obrađeni pomoću softvera Columbus (Perkin Elmer) korišćenjem nijansirane mrlje za identifikaciju ćelija i detekciju tačaka za identifikaciju ASC-mrlja unutar ćelija. Za dalju obradu podataka korišćen je skener (Genedata AG). Podaci o odgovoru na koncentraciju broja čestica po ćeliji ugrađeni su pomoću logističkog uklapanja sa četiri parametra i vrednosti EC50 navedenih u tabeli 9.

[2037] Test izazvan nigericinom (humani NLRP3) IL-1β (test B)

[2039] Jedinjenja su profilisana za aktivnost antagonista NLRP3 u pogledu inhibicije oslobađanja IL-1β izazvanog nigericinom iz humanih monocita THP-1. Kvantifikacija je izvršena korišćenjem komercijalno dostupnog kompleta za detekciju humanog IL-1β HTRF-a (CisBio, 62HIL1BPEH). Test koristi dva anti-IL-1β antitela u formatu sendvič testa. Jedan označen donorskim fluoroforom (Eu kriptatom), drugi akceptorom (XL). Imunološki kompleksi koji sadrže dva antitela vezana za isti molekul IL-1β omogućavaju prenos energije fluorescentne rezonance (FRET) između donora i akceptora nakon ekscitacije donora izvorom svetlosti, što kasnije rezultira fluorescencijom na 665 nM od akceptora. Intenzitet fluorescentnog signala je proporcionalan koncentraciji IL-1β u uzorku.

[2041] Priprema reagenasa za analizu:

[2043] Ćelije: THP ćelijska linija humane monocitne leukemije. Ćelije generalno prolaze svaka 2-3 dana sa gustinom od 0,2 do 0,4*10^6 ćelija/ml.

[2045] Kultura i medijum za ispitivanje: RPMI 1640 (Gibco, 72400-021) dopunjen sa 10% FBS (Sigma, F2442)

[2047] IL-1β standard: rekonstituisani IL-1β standard predviđen u CisBio kompletu je razblažen u medijumu za ispitivanje do najviše konačne koncentracije od 2 ng/ml u testu.

[2049] HTRF reagensi za detekciju: cAMP-d2 i anti-cAMP kriptat su rekonstituisani u skladu sa uputstvima CisBio kompleta. Neposredno pre upotrebe, reagensi su kombinovani koristeći sledeće proporcije: 10/24 Pufer za detekciju (isporučen sa kompletom), 14/24 PBS (Gibco, 10010), 1/120 IL-1β Eu-kriptatno antitelo i 1/120 IL-1β XL antitelo.

[2050] Protokol korak po korak za pokretanje testa:

[2052] Dan 1

[2054] 1. 20 nL testnih jedinjenja rastvorenih u DMSO su akvaristički izdata (Labcyte Echo) na bele ploče sa 384 jažice (Greiner; 784075), zapečaćena i čuvana na sobnoj temperaturi do analize.

[2056] 2. 20 nL 50 µM kontrolnog jedinjenja u DMSO (konačna koncentracija 250 nM) je dodato u 100% inhibicione kontrolne bušotine i 20 nL DMSO je dodato u 0% kontrolnih bušotina pomoću Echo raspršivača. Kontrolno jedinjenje se može izabrati između MCC950 (N-[[(1,2,3,5,6,7-heksahidro-s-indacen-4-il)amino]karbonil]-4-(1-hidroksi-1-metiletil)-2-furansulfonamida) ili bilo kog drugog jedinjenja koje deluje kao pun antagonist u testu.

[2058] 3. Alikvot ćelija je izvađen iz ćelija uzgojenih u kontinuiranoj kulturi i prebrojan pomoću Cedex-a (Innovatis).

[2060] 4. Broj ćelija potrebnih za eksperiment je centrifugiran 5 minuta na 250 xg i resuspendiran na 1,0*10^6 ćelija/ml sa medijumom za ispitivanje na 37 °C.

[2062] 5. LPS (Sigma; L2654) je dodat u konačnu koncentraciju od 1 µg/ml.

[2063] 6. Ćelije su LPS-primirane u rasutom stanju u epruveti od 50 ml inkubacijom na 37 °C, 5% CO2 i 95% vlažnosti tokom 3 sata.

[2065] 7. 4 µl ćelijski rastvor na 1,0*10^6 ćelija/ml je izdat sa Multidrop Combi (Thermo Fisher) u bele ploče male zapremine 384 bušotine (Greiner; 784075) da bi se dobilo 4000 ćelija po bušotini.

[2067] 8. 30 min inkubacije na 37 °C, 5% CO2 i 95% vlažnosti.

[2069] 9. 4 µl 40 µM nigericina u medijumu za ispitivanje je dodat sa Certus (Gyger) do konačne koncentracije od 20 µM.

[2071] 10. 1 sat inkubacije na 37 °C, 5% CO2 i 95% vlažnosti.

[2073] 11. 4 µl HTRF reagensi za detekciju su dodati sa Multidrop Combi.

[2074] 12. 3 sata inkubacije na sobnoj temperaturi zaštićeno od svetlosti.

[2076] 13. Signal homogene vremenski rešene fluorescencije (HTRF) detektovan je pomoću čitača Envision (PerkinElmer) ili Pherastar (BMG Labtech) (λex = 340 nm, λem = 665 i 615 nm).

[2078] Koristeći IL-1β standardnu krivu, HTRF podaci su konvertovani u količinu IL-1β proizvedenu u uzorcima koja je u osnovi korišćena za izračunavanje odgovora koncentracije. Podaci o odgovoru na koncentraciju analizirani su pomoću skenera (Genedata) i opremljeni logističkim prilagođavanjem sa četiri parametra. Rezultati testa su navedeni u tabeli 9 kao IC50 (µM).

[2080] IC50 se definiše kao koncentracija pri kojoj inhibitorna aktivnost dostiže 50% svog maksimalnog nivoa. Ako je test izveden više puta za isto jedinjenje, prijavljuje se geometrijska sredina. Da bi se olakšalo poređenje podataka o efikasnosti, efikasnost je normalizovana na % inhibitornog efekta ispitivanog jedinjenja u poređenju sa inhibicijom uzrokovanom koncentracijom zasićenja kontrolnog jedinjenja (250 nM).

[2082] BzATP aktiviran (humani NLRP3) IL-1β test (Test C)

[2084] U varijanti testa IL-1β, jedinjenja su testirana na njihovu sposobnost da inhibiraju BzATP (2'(3')-O-(4-benzoilbenzoil)adenozin 5'-trifosfat) izazvano oslobađanje IL-1β iz ljudskih monocita THP-1. Kao i test koji je pokrenuo nigericin, kvantifikacija je izvršena pomoću humanog IL-1β HTRF kompleta za detekciju (CisBio, 62HIL1BPEH).

[2086] Postojale su neke razlike između testa izazvanog nigericinom (Test B) i testa izazvanog BzATP-om. Uslovi u testu koji je pokrenuo BzATP sa relevantnim razlikama u poređenju sa testom koji je pokrenuo nigericin uključuju:

[2088] - Medijum ćelijske kulture: RPMI 1640 (Gibco, 11875-119) dopunjen sa 10% FBS (Sigma, 171012) i penicilin-streptomicin (Thermo Fisher, 15140-122).

[2090] - Medijum za analizu: RPMI 1640 (Gibco, 22400-105) dopunjen sa 1% FBS (Sigma, 171012).

[2091] ‐ Ćelije su premazane LPS-om (Sigma, L2630) u konačnoj koncentraciji od 2 µg/ml tokom 24 sata (umesto 1 µg/ml tokom 3 sata).

[2093] ‐ Proizvodnja IL-1β pokrenuta je dodavanjem BzATP-a (Sigma, B6396) (umesto nigericina) u konačnoj koncentraciji od 1 mM, nakon čega je usledila 30-minutna inkubacija na 37 °C, 5% CO2 i 95% vlažnosti.

[2095] Rezultati testa su navedeni u tabeli 9 kao IC50 (µM).

[2097] hERG test (Test D)

[2099] Eksperimenti su izvedeni na SyncroPatch 384PE (Nanion Technologies) platformi stezaljki visoke propusnosti na sobnoj temperaturi i korišćeni su čipovi srednje otpornosti sa 4 rupe po lokaciji. Ćelijska linija jajnika kineskog hrčka K1 (Cho) koja izražava hERG korišćena je u formatu spremnom za analizu i držana je u tečnom azotu do upotrebe.2 bočice ćelija (10 x 10<6>ćelija po bočici) su odmrznute i dodate u 20 ml fiziološkog rastvora sa Hepes puferom (HBSS). HBSS se sastojao od 140 mM NaCl, 4 mM KCl, 10 mM HEPES i 5 mM glukoze (pH 7,4). Rastvor unutrašnje stezne stezaljke bio je KF 120 mM, KCl 20 mM, HEPES 10 mM, EGTA 10 mM i 25 µM Escin (pH7,2). Nakon završetka početnog procesa zaptivanja, na ćelije je primenjen rastvor za pojačavanje zaptivke koji sadrži HBSS dopunjen sa 10 mM CaCl2 i 1mM MgCl2. Spoljni rastvor je zatim zamenjen (4 puta) za rastvor spoljne stezaljke koja sadrži NaCl 80 mM, KCl 4 mM, HEPES 10 mM, CaCl22 mM, MgCl21 mM, glukozu 5 mM i NMDG 60 mM (pH 7,4). Svi rastvori su čuvani na sobnoj temperaturi, osim Escina, koji je čuvan na 4 °C. Sva jedinjenja su izdata u pločama bušotine Greiner-bio 384 i testirana u kumulativnom testu sa 6 tačaka (konačna koncentracija DMSO 0,33%). U ovoj analizi korišćene su samo bušotine koje su zadovoljile kriterijume prihvatljivosti (otpor zaptivača od 30 MegaOhm, Z prime >0,4 i veličina struje >0,2 nA). IC50 (µM) rezultati hERG testa su navedeni u tabeli 9.

[2101] Rastvorljivost (Test E)

[2103] Test je sproveden u skladu sa testom rastvorljivosti opisanim na stranicama 164-167 Wernevik, J. i sar., „A Fully Integrated Assay Panel for Early Drug Metabolism and Pharmacokinetics Profiling”, Assay and Drug Development Technologies, 2020, 18(4), 157-179. Podaci su navedeni u tabeli 9 kao rastvorljivost (µM). Ako je test izveden više puta za isto jedinjenje, prijavljuje se aritmetička sredina.

[2105] Rastvorljivost (Test F)

[2107] Nakon sušenja 20 mM DMSO rastvora koji sadrži test jedinjenje, dinatrijum hidrogenfosfat-citronska kiselina puferski rastvor (razblaženi McIlvaine pufer, pH6.5) je dodat da se razblaži 100 puta. Pod ovim uslovima, teoretska maksimalna koncentracija ispitivanog jedinjenja bila je 200 µM. Pufer je soniran, protresen i držan na 25 °C 24 do 72 sata. Uzorak pufera je filtriran i filtrat je razblažen sa jednakom zapreminom acetonitrila/metanola (1: 1, vol./vol.) u ploči bušotine 96.20 mM DMSO rastvor koji sadrži test jedinjenje je razblažen 100 puta acetonitrilom/metanolom (1: 1, vol./vol.) i ista količina McIlvaine pufera (pH 6,5) je dodata da se koristi kao standardni rastvor. Standardni i testni uzorci su prebačeni na ploču bušotine 384 i analizirani HPLC-om. Rezultati testa rastvorljivosti su navedeni u tabeli 9 u µg/ml.

[2109] Tabela 9 - Podaci o analizi

[2111]

[2112]

[2113]

[2114]

[2117] LPS/ATP test

[2119] Muški 7-nedeljni BALB/cAJcl miševi su intraperitonealno primenjeni 0,5 ml rastvora 4 µg/ml LPS (Sigma-Aldrich Co. LLC, L2630) u PBS (Thermo Fisher Scientific Inc., 10010). Sat vremena kasnije, suspenzija test proizvoda u 0,5% (tež./vol.) CMC natrijumu (Nacalai tesque INC., 07326-95) vodeni rastvor je primenjen oralno u zapremini od 10 ml/kg. Jedan sat nakon primene proizvoda, intraperitonealno je primenjeno 0,5 ml 30 µmol/L ATP (Sigma-Aldrich Co. LLC, A7699) rastvora u PBS-u. Dvadeset minuta kasnije životinje su eutanazirane iščašenjem grlića materice pod anestezijom sevofluranom. Odmah nakon eutanazije, peritonealna šupljina svake životinje je isprana sa 3 ml ledeno hladnog PBS intraperitonealno ubrizganog. Zatim je prikupljen PBS, a koncentracije IL-1β su određene pomoću seta Elisa (R&D Systems Inc., MLB00C). Rezultati testa su prikazani u tabeli 10.

[2121] Tabela 10 - Podaci o LPS/ATP test

[2123]

[2124] Stručnjaci će ceniti da se gore opisani biološki testovi mogu izvoditi korišćenjem alternativne opreme i manjih varijacija protokola bez značajnog uticaja na rezultate.

[2126] Gornji opis ilustrativnih otelotvorenja namenjen je samo upoznavanju drugih stručnjaka u oblasti sa pronalaskom podnosioca zahteva, njegovim principima i njegovom praktičnom primenom, tako da drugi stručnjaci u oblasti mogu lako da prilagode i primene pronalazak u njegovim brojnim oblicima, jer oni mogu najbolje odgovarati zahtevima određene upotrebe. Ovaj opis i njegovi specifični primeri i referentni primeri namenjeni su samo za ilustraciju. Ovaj pronalazak, stoga, nije ograničen na ilustrativna otelotvorenja opisana u ovoj specifikaciji i može se različito modifikovati. Pored toga, treba uvažiti da se različite karakteristike pronalaska koje su, zbog jasnoće, opisane u kontekstu odvojenih otelotvorenja, takođe mogu kombinovati da bi se formiralo jedno otelotvorenje. Nasuprot tome, različite karakteristike pronalaska koje su, iz razloga sažetosti, opisane u kontekstu jednog otelotvorenja, takođe se mogu kombinovati da bi se formirale njihove potkombinacije.

[2128] _____________________

Claims (19)

1. PATENTNI ZAHTEVI

1. Jedinjenje formule (I):

Formula (I)

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što

R<1>je odabran iz

svaki R<3>je nezavisno odabran iz grupe -H i -C1-3 alkil;

R<4>je odabran iz -H i -CC1-3 alkila;

R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>su svaki nezavisno odabrani iz -H, -F, -Cl, -CC1-3 alkila zamenjenog sa 0-3 -F supstituentima, ciklopropilom, -OCF3, i -SO2Me;

W, X, Y i Z su svaki nezavisno odabrani iz CR<5>i N; nula ili jedan od W, X, Y i Z su N, a ostatak od W, X, Y i Z su CR<5>;

svako R<5>je nezavisno odabran iz -H, -Me i -F.

2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je R<1>

.

3. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time što su dva ili tri od R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>-H, a ostatak R<2A>, R<2B>, R<2C>i R<2D>nisu -H;

opciono pri čemu su R<2A>i R<2C>-H.

4. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time što

(a) R<2B>je odabran iz -H, -F, -CF3 i -SO2Me; i/ili

(b) R<2D>je odabran iz -H i -F.

5. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, naznačeno time što je R<2B>odabran iz -H ili -Cl, a R<2D>je -F.

6. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time što R<2B>nije -H.

7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, naznačeno time što je R<2A>-H, R<2B>je -CF3, R<2C>je -H, a R<2D>je -H.

8. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time što

(a) W, X i Z su svaki CR<5>;

(b) W, X i Z su svaki CR<5>; a Y je N; ili

(c) jedan od W, X, Y i Z je CR<5>; nula ili jedan od W, X, Y i Z je N; a ostatak W, X, Y i Z su CH.

9. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time što je svako R<5>-H.

10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je jedinjenje odabrano iz:

3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(4-hloro-3-fluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(4,5-difluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-(2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-(4-hloro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometoksi)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-[2-fluoro-6-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-(2,4-difluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-(4-hloro-2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; 3-[[4-(2-hloro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-(2-hidroksi-4-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-(2-hidroksi-5-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-7-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-6-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

4-fluoro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

3-fluoro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol; 5-fluoro-2-(4-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol; 3-fluoro-2-(4-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol; 3-fluoro-2-(1-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol; 5-fluoro-2-(1-((2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol; 2-[4-[[2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

3-[[1-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]propan-1,2-diol; i

3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]-2-metil-propan-1,2-diol;

ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je jedinjenje odabrano iz:

(2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-(4-hloro-3-fluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2R)-3-[[4-(4-hloro-3-fluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-(4,5-difluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2R)-3-[[4-(4,5-difluoro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-(2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-(2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-(4-hloro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-(4-hloro-2-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometoksi)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometoksi)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2S)-3-[[4-[2-fluoro-6-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-[2-fluoro-6-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2S)-3-[[4-(2,4-difluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2R)-3-[[4-(2,4-difluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-(4-hloro-2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2R)-3-[[4-(4-hloro-2-fluoro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-(2-hloro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-(2-hloro-6-hidroksi-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol; (2S)-3-[[4-(2-hidroksi-4-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-(2-hidroksi-4-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2S)-3-[[4-(2-hidroksi-5-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-(2-hidroksi-5-metil-fenil)ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-7-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-7-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2S)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-6-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[4-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]-6-metil-ftalazin-1-il]amino]propan-1,2-diol;

2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]ftalazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

4-fluoro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

4-fluoro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

4-fluoro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

4-fluoro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

3-fluoro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

3-fluoro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

3-fluoro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

3-fluoro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometoksi)fenol;

5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-3-fluoro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-hloro-2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]fenol;

5-fluoro-2-(4-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

5-fluoro-2-(4-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

5-fluoro-2-(4-((1S,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

5-fluoro-2-(4-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

3-fluoro-2-(4-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

3-fluoro-2-(4-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

3-fluoro-2-(4-((1S,2R) -2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

3-fluoro-2-(4-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-1-il)fenol;

3-fluoro-2-(1-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

3-fluoro-2-(1-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

3-fluoro-2-(1-((1S,2R) -2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

3-fluoro-2-(1-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

5-fluoro-2-(1-((1R,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

5-fluoro-2-(1-((1S,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

5-fluoro-2-(1-((1R,2S)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

5-fluoro-2-(1-((1S,2R)-2-hidroksicikloheksil)amino)pirido[3,4-d]piridazin-4-il)fenol;

2-[4-[[(1S,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[(1R,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[(1S,2S)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

2-[4-[[(1R,2R)-2-hidroksicikloheksil]amino]pirido[3,4-d]piridazin-1-il]-5-(trifluorometil)fenol;

(2S)-3-[[1-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]propan-1,2-diol;

(2R)-3-[[1-[2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil]pirido[3,4-d]piridazin-4-il]amino]propan-1,2-diol;

(S)-3-((4-(2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)ftalazin-1-il)amino)-2-metilpropan-1,2-diol; i

(R)-3-((4-(2-hidroksi-4-(trifluorometil)fenil)ftalazin-1-il)amino)-2-metilpropan-1,2-diol;

ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je jedinjenje:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je jedinjenje:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je jedinjenje:

15. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što je jedinjenje:

.

16. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva i farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance.

17. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 15 za upotrebu u terapiji.

18. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 di 15 za upotrebu u lečenju subjekta sa bolešću ili stanjem u koje je uključena aktivnost NLRP3 inflamasoma.

19. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 15 za upotrebu u lečenju subjekta sa bolešću ili stanjem izabranim iz grupe koja se sastoji od bolesti bubrega kao što su akutno oštećenje bubrega, hronična bolest bubrega i dijabetička bolest bubrega; kardiovaskularnih bolesti kao što su koronarna

aterosklerotska bolest srca, kardiomiopatija, infarkt miokarda, srčana hipertrofija i ishemijsko-reperfuzijska povreda; bolesti jetre kao što su nealkoholna masna bolest jetre, nealkoholni steatohepatitis, alkoholni steatohepatitis, hronična infekcija virusom hepatitisa C i oštećenje jetre izazvano paracetamolom; inflamatornih bolesti kao što su autoinflamatorni poremećaji, periodični sindromi povezani sa kriopirinom, familijarni hladni autoinflamatorni sindrom (FCAS), Muckle-Wells sindrom (MWS), hronični infantilni neurološki kutani artikularni (CINCA) sindrom i neonatalna multisistemska inflamatorna bolest (NOMID); inflamatornih bolesti kože kao što su akne vulgaris i hidradenitis supurativa; inflamatornih bolesti creva kao što su ulcerozni kolitis (UC) i Kronova bolest; autoimune bolesti kao što su giht, pseudogiht, reumatoidni artritis (RA), multipla skleroza (MS), Adisonova bolest, celijakija, sistemski eritematozni lupus (SLE) i vitiligo; i respiratorne bolesti kao što su hronične plućne bolesti, idiopatska plućna fibroza (IPF), hronična opstruktivna plućna bolest (COPD) i astma.

______________________

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd

171