RU2137490C1 - Иммуностимулирующее средство эстифан и способ его получения - Google Patents
Иммуностимулирующее средство эстифан и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2137490C1 RU2137490C1 RU98106723A RU98106723A RU2137490C1 RU 2137490 C1 RU2137490 C1 RU 2137490C1 RU 98106723 A RU98106723 A RU 98106723A RU 98106723 A RU98106723 A RU 98106723A RU 2137490 C1 RU2137490 C1 RU 2137490C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- estifan
- extract
- echinacea purpurea
- drug
- lactose
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 title claims description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 28
- 235000014134 echinacea Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 240000004530 Echinacea purpurea Species 0.000 claims abstract description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 13
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 11
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 8
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 claims description 8
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 claims description 8
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 7
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 7
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 claims description 6
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 claims description 6
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims description 5
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 3
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 claims description 2
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 8
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 abstract description 6
- 244000133098 Echinacea angustifolia Species 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011861 anti-inflammatory therapy Methods 0.000 abstract description 2
- 235000009413 Ratibida columnifera Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000009160 phytotherapy Methods 0.000 abstract 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 2
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N methyl pentane Natural products CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LIFNDDBLJFPEAN-BPSSIEEOSA-N (2s)-4-amino-2-[[(2s)-2-[[2-[[2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carbonyl]amino]propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 LIFNDDBLJFPEAN-BPSSIEEOSA-N 0.000 description 1
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- WPQRDUGBKUNFJW-SLUROAMNSA-N Apigenin 7-(6''-p-coumarylglucoside) Natural products O=C(OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](Oc2cc(O)c3C(=O)C=C(c4ccc(O)cc4)Oc3c2)O1)/C=C/c1ccc(O)cc1 WPQRDUGBKUNFJW-SLUROAMNSA-N 0.000 description 1
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 244000298479 Cichorium intybus Species 0.000 description 1
- 235000007542 Cichorium intybus Nutrition 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N D-galactopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-YMDCURPLSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000008197 Laryngitis Diseases 0.000 description 1
- HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N Levamisole Chemical compound C1([C@H]2CN3CCSC3=N2)=CC=CC=C1 HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- MKYBYDHXWVHEJW-UHFFFAOYSA-N N-[1-oxo-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propan-2-yl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(C(C)NC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 MKYBYDHXWVHEJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPQRDUGBKUNFJW-ZZSHFKPLSA-N [(2r,3s,4s,5r,6s)-3,4,5-trihydroxy-6-[5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4-oxochromen-7-yl]oxyoxan-2-yl]methyl (e)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-enoate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](OC=2C=C3C(C(C=C(O3)C=3C=CC(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1)O)O)OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 WPQRDUGBKUNFJW-ZZSHFKPLSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000007767 bonding agent Substances 0.000 description 1
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000009050 echinacin Substances 0.000 description 1
- DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N enol-phenylpyruvic acid Chemical class OC(=O)C(O)=CC1=CC=CC=C1 DEDGUGJNLNLJSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 229960001614 levamisole Drugs 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 206010044008 tonsillitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической промышленности. Предложено лекарственное средство иммуностимулирующего действия эстифан - сухой экстракт из травы эхинацеи пурпурной и способ его получения в форме таблеток. Эстифан оказывает хорошее терапевтическое действие в случаях недостаточной эффективности антибактериальной и противовоспалительной терапии. 2 с.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается способа получения лекарственных препаратов растительного происхождения. Преимущественно может быть использовано для получения пероральных лекарственных форм препарата эстифан из травы эхинацеи пурпурной, обладающего иммуностимулирующей активностью.
В качестве иммуностимуляторов используют лекарственные средства левамизол, тималин, нуклеинат натрия, продигиозан, обладающие рядом недостатков.
Известны препараты эхинацеи пурпурной, представляющие собой спиртовые настойки, а также препарат эхинацин фирмы MADAUS на основе свежего сока растения, получаемого прессованием непосредственно после сбора.
Известен способ получения биологически активных веществ из растений рода эхинацея [1] , который состоит в том, что размолотый порошок корней и/или травы экстрагируют спиртом (C1-C4) или спиртоводной смесью, концентрируют, разбавляют спиртом и затем водой и проводят очистку экстракта, липофильными растворителями - гексан, пентан, дихлорметан, диэтиловый эфир. Иммуностимулирующее действие получаемого сгущенного экстракта связывают с присутствием в нем суммы производных оксикоричных кислот (далее ПОК) общей формулы:
где R= H или алкильный остаток от C1 до C4; R1=H или ацил коричной или бензойной кислоты с одним или несколькими гидроксильными или метоксильными остатками в ароматическом ядре; R2=H или ацил коричной или бензойной кислоты с одним или несколькими гидроксильными или метоксильными остатками в ароматическом ядре.
где R= H или алкильный остаток от C1 до C4; R1=H или ацил коричной или бензойной кислоты с одним или несколькими гидроксильными или метоксильными остатками в ароматическом ядре; R2=H или ацил коричной или бензойной кислоты с одним или несколькими гидроксильными или метоксильными остатками в ароматическом ядре.
Данный способ является наиболее близким к заявляемому и принят за прототип.
Недостаток указанного изобретения - отсутствие технологии получения готового продукта в виде сухого вещества, пригодного для производства твердых дозированных лекарственных форм, удобных для применения в медицинской практике.
Целью предлагаемого изобретения является создание иммуностимулирующего средства из травы эхинацеи пурпурной в виде твердой пероральной лекарственной формы (таблеток) и способа его получения.
В результате решения поставленной задачи создан препарат эстифан в виде таблеток, содержащих в качестве действующего вещества сухой экстракт травы эхинацеи пурпурной и физиологически приемлемые наполнители - лактозу, крахмал, метилцеллюлозу, стеарат кальция или магния при следующем соотношении компонентов в % по массе:
эстифан - 25 - 60
лактоза - 14 - 49
крахмал картофельный - 23 - 27
метилцеллюлоза - 0,1- 0,2
стеарат кальция или магния - 0,3 - 0,5
Эстифан (сухой экстракт травы эхинацеи пурпурной) получают исчерпывающей экстракцией измельченного растительного сырья водным 24-26% этиловым спиртом при температуре 60oC, спирт упаривают под вакуумом, водный концентрат центрифугируют и подвергают распылительной сушке в оптимальном режиме, позволяющем сохранить биологическую активность сухого экстракта и получить продукт с заданными технологическими параметрами, необходимыми для производства твердой лекарственной формы.
эстифан - 25 - 60
лактоза - 14 - 49
крахмал картофельный - 23 - 27
метилцеллюлоза - 0,1- 0,2
стеарат кальция или магния - 0,3 - 0,5
Эстифан (сухой экстракт травы эхинацеи пурпурной) получают исчерпывающей экстракцией измельченного растительного сырья водным 24-26% этиловым спиртом при температуре 60oC, спирт упаривают под вакуумом, водный концентрат центрифугируют и подвергают распылительной сушке в оптимальном режиме, позволяющем сохранить биологическую активность сухого экстракта и получить продукт с заданными технологическими параметрами, необходимыми для производства твердой лекарственной формы.
Предлагаемый способ получения отличается тем, что 1) водно-спиртовое извлечение после концентрирования не подвергают очистке липофильными растворителями; 2) лекарственное вещество получают после распылительной сушки в виде сухого экстракта; 3) предложен способ получения твердой пероральной лекарственной формы сухого экстракта из травы эхинацеи пурпурной в виде таблеток.
Предлагаемый способ имеет перед способом-прототипом следующие преимущества: 1) отсутствие использования токсичных растворителей в технологической схеме процесса производства, так как водонерастворимые балластные вещества удаляются сепарированием концентрата после упаривания; 2) целевое вещество в виде порошка с необходимыми для изготовления таблеток технологическими свойствами получают методом распылительной сушки; 3) предложен способ получения таблеток эстифана (сухого экстракта травы эхинацеи пурпурной).
Иммуностимулирующее действие препарата эстифан в основном обусловлено присутствием ПОК и полисахаридов [2]. Последние представлены в нем сложными разветвленными структурами, в состав которых входят рамноза, арабиноза, ксилоза, глюкоза и галактуроновая кислота. Компоненты, обладающие биологической активностью, имеют молекулярную массу от 25000 до 75000 Д. Основным компонентом фракции ПОК является цикориевая (дикофеоилвинная) кислота, содержание которой в сумме ПОК достигает 70%. В эту сумму входят также эфиры кофейной, феруловой и кумаровой кислот с винной кислотой.
В процессе отработки технологии получения эстифана было найдено, что оптимальной является следующая схема производства. Измельченное до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 3 мм, сырье травы эхинацеи пурпурной (ВФC 42-2371-94) экстрагируют 3 раза 24-26% этиловым спиртом не менее 2 час при 50-60oC с постоянным перемешиванием. Соотношение твердой и жидкой фаз 1:15 без учета ложного днища. На вторую и третью экстракцию каждый раз подают количество растворителя равное объему слитого экстракта. Объединенные первый и второй экстракты подают на упаривание в вакуум-выпарной аппарат, третий экстракт используют для экстракции свежей порции сырья. В отличие от прототипа стадии упарки не предшествует форэкстракция липофильными растворителями.
Упарку водно-спиртовых экстрактов ведут при температуре реакционной массы 45-50oC примерно до 1/35 части первоначального объема. Упаренный экстракт сепарируют для отделения твердых частиц и подают на установку для распылительной сушки. B результате широкомасштабного поиска экспериментально было установлено, что режимом сушки, позволяющим максимально сохранить биологически активные вещества, и одновременно получить продукт с необходимыми технологическим свойствами, являются следующие параметры процесса: температура на входе 160-200oC и на выходе 70-90oC при скорости подачи 2,2-3,5 л/час.
При изготовлении таблеток из сухого экстракта травы эхиноцеи необходим нетрадиционный подход вследствие таких особенностей эстифана, как ярко выраженная гигроскопичность, склонность к карамелизации при экспонировании на воздухе, а также к электризации, плохая прессуемость и недостаточная сыпучесть. При отработке состава и технологии таблеток использовались растворы различных склеивающих веществ таких, как метилцеллюлоза, крахмал, желатин, сахар. Были также исследованы варианты состава таблеток с различными вспомогательными веществами, улучшающими прессуемость таблеточной массы.
Для коррекции гигроскопичности и карамелизации в состав таблеток первоначально был введен аэросил, оказавшийся впоследствии химически несовместимым с биологически активными веществами, ввиду чего возникла необходимость изменения первоначального состава, и технологии таблеток для устранения этого нежелательного компонента. В итоге экспериментально был найден способ введения увлажнителя и определена оптимальная остаточная влажность таблеточной массы перед таблетированием, что позволяет получить таблетки эстифана и обеспечить необходимое качество данной лекарственной формы в течение соответствующего срока хранения.
Таким образом, были отработаны оптимальные технология и состав таблеток, вес которых составляет 0,5 г.
Пример 1
4 кг измельченного до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 3 мм, сырья травы эхинацеи пурпурной (ВФС 42- 2371-94) экстрагируют 110 л 25% этилового спирта 2 часа при температуре 55-60oC при постоянном перемешивании, сливают первый экстракт в количестве 51 л и заливают свежей порцией экстрагента в количестве 51 л. Экстракцию повторяют в тех же условиях и сливают второй экстракт в количестве 50 л, объединяя его с первой порцией. Сырье в экстракторе заливают третьей порцией свежего экстрагента в количестве 50 л и повторяют экстракцию, как описано выше. Полученное третье извлечение используют в дальнейшем для подачи на свежее сырье. Объединенный экстракт подают на упаривание в вакуум-выпарной аппарат, упаривают при температуре 50-60oC до объема около 3 л и подают на сепаратор для отделения твердой фазы. Очищенный концентрат после сепаратоpa подают на распылительную сушку с температурой на входе 160oC и 70oC на выходе при скорости подачи 2,2 л/час. Полученный продукт в количестве 0,843 кг (или 89% от количества экстрактивных веществ в исходном сырье) содержит 7,38% суммы ПОК, что соответствует 70% выхода по действующим веществам. Полученный сухой экстракт смешивают с 0,678 кг молочного сахара и 0,499 кг картофельного крахмала, полученную массу увлажняют 0,06 кг раствора метилцеллюлозы и сушат при температуре 40oC. Высушенную массу гранулируют, опудривают 0,020 кг стеарата магния и готовую таблеточную массу прессуют. Получают 1,89 кг таблеток сухого экстракта эхинацеи пурпурной (эстифана) по 0,2 г.
4 кг измельченного до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 3 мм, сырья травы эхинацеи пурпурной (ВФС 42- 2371-94) экстрагируют 110 л 25% этилового спирта 2 часа при температуре 55-60oC при постоянном перемешивании, сливают первый экстракт в количестве 51 л и заливают свежей порцией экстрагента в количестве 51 л. Экстракцию повторяют в тех же условиях и сливают второй экстракт в количестве 50 л, объединяя его с первой порцией. Сырье в экстракторе заливают третьей порцией свежего экстрагента в количестве 50 л и повторяют экстракцию, как описано выше. Полученное третье извлечение используют в дальнейшем для подачи на свежее сырье. Объединенный экстракт подают на упаривание в вакуум-выпарной аппарат, упаривают при температуре 50-60oC до объема около 3 л и подают на сепаратор для отделения твердой фазы. Очищенный концентрат после сепаратоpa подают на распылительную сушку с температурой на входе 160oC и 70oC на выходе при скорости подачи 2,2 л/час. Полученный продукт в количестве 0,843 кг (или 89% от количества экстрактивных веществ в исходном сырье) содержит 7,38% суммы ПОК, что соответствует 70% выхода по действующим веществам. Полученный сухой экстракт смешивают с 0,678 кг молочного сахара и 0,499 кг картофельного крахмала, полученную массу увлажняют 0,06 кг раствора метилцеллюлозы и сушат при температуре 40oC. Высушенную массу гранулируют, опудривают 0,020 кг стеарата магния и готовую таблеточную массу прессуют. Получают 1,89 кг таблеток сухого экстракта эхинацеи пурпурной (эстифана) по 0,2 г.
Пример 2
10 кг измельченного до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 3 мм, сырья травы эхинацеи пурпурной заливают 200 л 26% этилового спирта, экстрагируют 2 часа при постоянном перемешивании при температуре 55-60oC, сливают первый экстракт в количестве 154 л и заливают сырье свежей порцией экстрагента в количестве 154 л. Экстракцию повторяют в тех же условиях, сливают 148 л экстракта, объединяют его с первой порцией и упаривают в вакуум-выпарном аппарате до объема около 9 л при температуре 55-60oC. Сырье заливают свежей порцией экстрагента объемом 148 л, проводят экстракцию в тех же условиях и используют слитый экстракт для подачи на новую порцию сырья. После упаривания полученный концентрат подают на сепаратор и затем на установку для распылительной сушки, имеющую температуру на входе и выходе соответственно 180 и 80oC, скорость подачи 2,8 л/час. Полученный продукт в количестве 2,345 кг (98% от содержания экстрактивных веществ в исходном сырье) содержит 7,43% суммы ПОК, что соответствует 78% выхода действующих веществ. К полученному сухому экстракту добавляют 1,89 кг молочного сахара и 1,39 кг картофельного крахмала, тщательно перемешивают и увлажняют полученную смесь 0,166 кг раствора метилцеллюлозы, сушат при температуре 40oC, гранулируют и опудривают 0,022 кг стеарата кальция. Готовую таблеточную массу прессуют и получают 5,27 кг таблеток эстифана по 0,2 г.
10 кг измельченного до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 3 мм, сырья травы эхинацеи пурпурной заливают 200 л 26% этилового спирта, экстрагируют 2 часа при постоянном перемешивании при температуре 55-60oC, сливают первый экстракт в количестве 154 л и заливают сырье свежей порцией экстрагента в количестве 154 л. Экстракцию повторяют в тех же условиях, сливают 148 л экстракта, объединяют его с первой порцией и упаривают в вакуум-выпарном аппарате до объема около 9 л при температуре 55-60oC. Сырье заливают свежей порцией экстрагента объемом 148 л, проводят экстракцию в тех же условиях и используют слитый экстракт для подачи на новую порцию сырья. После упаривания полученный концентрат подают на сепаратор и затем на установку для распылительной сушки, имеющую температуру на входе и выходе соответственно 180 и 80oC, скорость подачи 2,8 л/час. Полученный продукт в количестве 2,345 кг (98% от содержания экстрактивных веществ в исходном сырье) содержит 7,43% суммы ПОК, что соответствует 78% выхода действующих веществ. К полученному сухому экстракту добавляют 1,89 кг молочного сахара и 1,39 кг картофельного крахмала, тщательно перемешивают и увлажняют полученную смесь 0,166 кг раствора метилцеллюлозы, сушат при температуре 40oC, гранулируют и опудривают 0,022 кг стеарата кальция. Готовую таблеточную массу прессуют и получают 5,27 кг таблеток эстифана по 0,2 г.
Пример 3
10 кг измельченного до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 3 мм, сырья травы эхинацеи пурпурной заливают 200 л экстрагента, состоящего из 154 л третьего экстракта из примера 2 (смотри выше) и 46 л 24% этилового спирта, и проводят экстракцию, концентрирование и сепарирование концентрата, как описано в Примере 2. Полученный концентрат подают на установку для распылительной сушки с температурой на входе и выходе соответственно 200 и 90oC, скорость подачи 3,4 л/час. Полученный продукт в количестве 2,354 кг (99% от содержания экстрактивных веществ в исходном сырье) содержит 7,35% суммы ПОК, что соответствует 77% выхода действующих веществ. Полученный сухой экстракт смешивают с 1,89 кг молочного сахара и 1,39 кг картофельного крахмала. Тщательно перемешанную смесь увлажняют 0,167 кг раствора метилцеллюлозы, сушат при температуре 40oC, гранулируют, опудривают 0,022 кг стеарата магния и прессуют. Получают 5,29 кг таблеток эстифана по 0,2 г.
10 кг измельченного до размера частиц, проходящих через сито с диаметром отверстий 3 мм, сырья травы эхинацеи пурпурной заливают 200 л экстрагента, состоящего из 154 л третьего экстракта из примера 2 (смотри выше) и 46 л 24% этилового спирта, и проводят экстракцию, концентрирование и сепарирование концентрата, как описано в Примере 2. Полученный концентрат подают на установку для распылительной сушки с температурой на входе и выходе соответственно 200 и 90oC, скорость подачи 3,4 л/час. Полученный продукт в количестве 2,354 кг (99% от содержания экстрактивных веществ в исходном сырье) содержит 7,35% суммы ПОК, что соответствует 77% выхода действующих веществ. Полученный сухой экстракт смешивают с 1,89 кг молочного сахара и 1,39 кг картофельного крахмала. Тщательно перемешанную смесь увлажняют 0,167 кг раствора метилцеллюлозы, сушат при температуре 40oC, гранулируют, опудривают 0,022 кг стеарата магния и прессуют. Получают 5,29 кг таблеток эстифана по 0,2 г.
Фармакологическое изучение продукта, полученного по заявленному способу, показало, что он обладает иммуностимулирующей активностью. Клинические испытания препарата эстифан (таблетки по 0,2 г) были проведены в отделе "Иммунодефицитов взрослых" Института Иммунологии МЗ РФ на 60 больных с хроническими неспецифическими заболеваниями органов дыхания такими, как пневмонии, бронхиты (в дозах по 1-2 таблетки 3 раза в день, курс 10-20 дней) и ЛОР-органов (ларингиты, тонзиллиты - в дозах по 1 таблетке 1-3 раза в день, курс 10-20 дней). В результате исследований было установлено, что эстифан хорошо переносится больными, способствует выраженной положительной динамике инструментальных и клинических показателей у 100% больных, повышает исходно сниженные значения показателей гуморального и клеточного иммунитета. Отмечено, что наиболее выраженная положительная динамика показателей клеточного иммунитета выявляется у больных в фазе обострения бронхолегочного процесса. Установлено достоверное увеличение под влиянием эстифана количества Т-хелперов, что свидетельствует о стимулирующем влиянии препарата на противоинфекционный иммунитет.
Препарат разрешен к применению в медицинской практике приказом МЗ РФ N 229 от 26.10.94 г. в качестве иммуностимулирующего средства для лечения и профилактики заболеваний, связанных с иммунодефицитными состояниями, при хронических рецидивирующих заболеваниях воспалительного характера различной этиологии (хронические бронхиты, пневмонии, заболевания ЛОР-органов и др.). Эстифан оказывает хорошее терапевтическое действие в случаях недостаточной эффективности антибактериальной и противовоспалительной терапии, при лейкопении, иммунодепрессиях, обусловленных воздействием ионизирующего излучения, применением цитостатиков, лучевой терапии и т.п.
Источники
1. Заявка ФРГ N 3744570 от 30.12.1987 г. опубл. 13.07.1989 г
2.Р.Вагнер, Х.Бауер, Эхинацея. Справочник для врачей, аптекарей и научных работников, Научное издательское общество. Штутгарт, 1990 г.
1. Заявка ФРГ N 3744570 от 30.12.1987 г. опубл. 13.07.1989 г
2.Р.Вагнер, Х.Бауер, Эхинацея. Справочник для врачей, аптекарей и научных работников, Научное издательское общество. Штутгарт, 1990 г.
Claims (1)
1. Иммуностимулирующее средство из эхинацеи пурпурной, содержащее активное вещество и физиологически приемлемые наполнители, отличающееся тем, что оно представляет собой таблетированную форму и содержит в качестве активного вещества эстифан, а в качестве физиологически приемлемых наполнителей лактозу, крахмал картофельный, метилцеллюлозу, стеарат кальция или магния при следующем соотношении компонентов, % по массе:
Эстифан - 25-60
Лактоза - 14-49
Крахмал картофельный - 23-27
Метилцеллюлоза - 0,1-0,2
Стеарат кальция или магния - 0,3-0,5
2. Способ получения иммуностимулирующего средства из травы эхинацеи пурпурной путем экстракции измельченного сырья водно-спиртовой смесью с последующим концентрированием экстракта, отличающийся тем, что измельченную траву эхинацеи пурпурной 3 раза экстрагируют водным спиртом, извлечение упаривают под вакуумом, водный концентрат сепарируют, подвергают распылительной сушке, целевой продукт, полученный в виде порошка смешивают с лактозой и крахмалом, полученную массу увлажняют раствором метилцеллюлозы, сушат при 35 - 45oC, гранулируют и опудривают стеаратом магния или кальция с последующим таблетированием.
Эстифан - 25-60
Лактоза - 14-49
Крахмал картофельный - 23-27
Метилцеллюлоза - 0,1-0,2
Стеарат кальция или магния - 0,3-0,5
2. Способ получения иммуностимулирующего средства из травы эхинацеи пурпурной путем экстракции измельченного сырья водно-спиртовой смесью с последующим концентрированием экстракта, отличающийся тем, что измельченную траву эхинацеи пурпурной 3 раза экстрагируют водным спиртом, извлечение упаривают под вакуумом, водный концентрат сепарируют, подвергают распылительной сушке, целевой продукт, полученный в виде порошка смешивают с лактозой и крахмалом, полученную массу увлажняют раствором метилцеллюлозы, сушат при 35 - 45oC, гранулируют и опудривают стеаратом магния или кальция с последующим таблетированием.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98106723A RU2137490C1 (ru) | 1998-03-26 | 1998-03-26 | Иммуностимулирующее средство эстифан и способ его получения |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU98106723A RU2137490C1 (ru) | 1998-03-26 | 1998-03-26 | Иммуностимулирующее средство эстифан и способ его получения |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2137490C1 true RU2137490C1 (ru) | 1999-09-20 |
Family
ID=20204598
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU98106723A RU2137490C1 (ru) | 1998-03-26 | 1998-03-26 | Иммуностимулирующее средство эстифан и способ его получения |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2137490C1 (ru) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2180586C1 (ru) * | 2000-11-14 | 2002-03-20 | Башкирский государственный университет | Иммуностимулирующее и противовоспалительное средство и способ его получения |
| RU2182011C1 (ru) * | 2001-01-05 | 2002-05-10 | Закрытое акционерное общество "Эвалар" | Биологически активная добавка к пище для профилактики ослабления иммунной системы |
| RU2208450C1 (ru) * | 2002-10-08 | 2003-07-20 | Мен-Сек Ким | Средство "рянчун", обладающее иммуностимулирующим и противовоспалительным действием, и способ его получения |
| RU2208448C1 (ru) * | 2002-10-08 | 2003-07-20 | Мен-Сек Ким | Лекарственное средство "кондянди", обладающее иммуностимулирующим, противовоспалительным и противоаллергическим действием, и способ его получения |
| RU2228190C1 (ru) * | 2002-12-26 | 2004-05-10 | Лимонов Виктор Львович | Композиция с иммуностимулирующими свойствами |
| RU2261103C1 (ru) * | 2004-09-07 | 2005-09-27 | Макаров Игорь Юрьевич | Способ получения настойки эхинацеи пурпурной echinacea purpurea l. (варианты) |
| RU2288732C1 (ru) * | 2005-08-29 | 2006-12-10 | Владимир Александрович Куркин | Способ получения иммуномодулирующего средства |
| RU2311918C1 (ru) * | 2006-04-19 | 2007-12-10 | ГУ Научно-исследовательский институт фармакологии Томского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук ГУ НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН | Средство, обладающее иммуностимулирующей активностью |
| RU2516932C2 (ru) * | 2012-08-20 | 2014-05-20 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное объединение "Перспектива" | Биологически активная добавка к пище, обладающая гепатопротекторными и иммуностимулирующими свойствами |
-
1998
- 1998-03-26 RU RU98106723A patent/RU2137490C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Заявка DE N 3744570 от 30.12.87, опублик. 13.07.89. * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2180586C1 (ru) * | 2000-11-14 | 2002-03-20 | Башкирский государственный университет | Иммуностимулирующее и противовоспалительное средство и способ его получения |
| RU2182011C1 (ru) * | 2001-01-05 | 2002-05-10 | Закрытое акционерное общество "Эвалар" | Биологически активная добавка к пище для профилактики ослабления иммунной системы |
| RU2208450C1 (ru) * | 2002-10-08 | 2003-07-20 | Мен-Сек Ким | Средство "рянчун", обладающее иммуностимулирующим и противовоспалительным действием, и способ его получения |
| RU2208448C1 (ru) * | 2002-10-08 | 2003-07-20 | Мен-Сек Ким | Лекарственное средство "кондянди", обладающее иммуностимулирующим, противовоспалительным и противоаллергическим действием, и способ его получения |
| RU2228190C1 (ru) * | 2002-12-26 | 2004-05-10 | Лимонов Виктор Львович | Композиция с иммуностимулирующими свойствами |
| RU2261103C1 (ru) * | 2004-09-07 | 2005-09-27 | Макаров Игорь Юрьевич | Способ получения настойки эхинацеи пурпурной echinacea purpurea l. (варианты) |
| RU2288732C1 (ru) * | 2005-08-29 | 2006-12-10 | Владимир Александрович Куркин | Способ получения иммуномодулирующего средства |
| RU2311918C1 (ru) * | 2006-04-19 | 2007-12-10 | ГУ Научно-исследовательский институт фармакологии Томского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук ГУ НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН | Средство, обладающее иммуностимулирующей активностью |
| RU2516932C2 (ru) * | 2012-08-20 | 2014-05-20 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное объединение "Перспектива" | Биологически активная добавка к пище, обладающая гепатопротекторными и иммуностимулирующими свойствами |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7594607B2 (ja) | 新型コロナウイルス肺炎治療用漢方薬組成物、その調製方法、検出方法およびその使用 | |
| RU2349337C2 (ru) | Фармацевтическая композиция, содержащая стероидные сапонины, способ ее получения и ее применение | |
| KR101082007B1 (ko) | 한약 조성물, 이에 함유된 곤충 추출물 및 그의 제법 | |
| CN101429254A (zh) | 一种白及多糖及其制备方法和新用途 | |
| RU2137490C1 (ru) | Иммуностимулирующее средство эстифан и способ его получения | |
| CN105168235A (zh) | 延龄草皂苷类物质及其制剂的制备方法与其在制备治疗老年痴呆及阿尔茨海默病药物中应用 | |
| CN1210289C (zh) | 两头尖提取物的制备工艺和用途 | |
| JPS6026376B2 (ja) | 抗乾癬活性物質およびその製法 | |
| JP3294618B2 (ja) | ハルパゴフィツム プロカムベンスからのハルパゴシドに富む抽出物およびその製造方法 | |
| JP2000505065A (ja) | 薬剤の使用及び薬剤を製造するため物質混合物の使用 | |
| RU2162701C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего противоописторхозным действием | |
| US6395308B1 (en) | Purified extract from Harpagophytum procumbens and/or Harpagophytum zeyheri dence | |
| CN102058642A (zh) | 人参次苷提取物及制备方法 | |
| CN100540014C (zh) | 一种植物提取物和它的制备方法及用途 | |
| RU2141841C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего гипогликемической активностью | |
| EA012065B1 (ru) | Способ получения экстракта из листьев плюща и полученный этим способом экстракт | |
| RU2064301C1 (ru) | Способ получения средства, обладающего мочегонной и противовоспалительной активностью | |
| CN101550081A (zh) | 一种侧柏叶的有效组分及其制备方法 | |
| Ajibade et al. | Histopathological and toxicological effects of crude saponin extract from Phyllanthus niruri, L (Syn. P. franternus. Webster) on organs in animal studies | |
| JP2025514212A (ja) | 胡黄連ククルビタン型サポニン抽出物および便秘を治療するための薬の調製におけるその使用 | |
| CN1887324B (zh) | 一种治疗肝肾不足的中药组合物及其制备方法和分析方法 | |
| IE48415B1 (en) | Natural terpenes having an antipsoriatic activity | |
| CN101474264B (zh) | 一种白芍的有效组分及其制备方法与用途 | |
| CN101019924A (zh) | 秦艽地上部分提取的龙胆总苷在促进肠胃消化功能药物中的应用 | |
| CN113633718A (zh) | 华石斛、密花石斛或本斯石斛的提取物及其主要成分作为抗炎症制剂的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160327 |