RU2169192C2 - Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis - Google Patents
Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2169192C2 RU2169192C2 RU99117157A RU99117157A RU2169192C2 RU 2169192 C2 RU2169192 C2 RU 2169192C2 RU 99117157 A RU99117157 A RU 99117157A RU 99117157 A RU99117157 A RU 99117157A RU 2169192 C2 RU2169192 C2 RU 2169192C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- wild animals
- fur
- foxes
- pseudomonas aeruginosa
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 17
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 17
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 title claims abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 8
- 241000282421 Canidae Species 0.000 abstract description 11
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 6
- 244000052769 pathogen Species 0.000 abstract description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 241000282342 Martes americana Species 0.000 abstract description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 abstract description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 abstract description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 238000009313 farming Methods 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract description 2
- 241000596212 Vulpes lagopus Species 0.000 abstract 1
- 229910021502 aluminium hydroxide Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000282487 Vulpes Species 0.000 description 11
- 208000032536 Pseudomonas Infections Diseases 0.000 description 8
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 7
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 description 6
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 2
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- YNCMLFHHXWETLD-UHFFFAOYSA-N pyocyanin Chemical compound CN1C2=CC=CC=C2N=C2C1=CC=CC2=O YNCMLFHHXWETLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 102100022712 Alpha-1-antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 description 1
- 108050008072 Cytochrome c oxidase subunit IV Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N Gluconic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101000823116 Homo sapiens Alpha-1-antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 101001010513 Homo sapiens Leukocyte elastase inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000700110 Myocastor coypus Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000489256 Pseudomonas aeruginosa PA7 Species 0.000 description 1
- 108010083498 alkaline elastase Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000003749 cleanliness Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 210000004994 reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000004861 thermometry Methods 0.000 description 1
- 230000001551 toxigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940031572 toxoid vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарии и предназначено для производства вакцинных препаратов против синегнойной инфекции пушных зверей, преимущественно песцов и лисиц. The invention relates to the field of biotechnology and veterinary medicine and is intended for the production of vaccines against pseudomonas infection of fur animals, mainly arctic foxes and foxes.
Синегнойная инфекция распространена повсеместно, наносит значительный экономический ущерб звероводству и представляет опасность здоровью людей. В зверосовхозах ежегодно регистрируются энзоотипии среди норок, песцов и лисиц. Зарегистрированы случаи болезни у кроликов, нутрий, хорей. В последние годы стали отмечать синегнойную инфекцию у собак домашнего содержания. Pseudomonas infection is ubiquitous, causing significant economic damage to animal farming and poses a danger to human health. In fur farms, enzootypes among minks, arctic foxes and foxes are recorded annually. Cases of the disease have been reported in rabbits, nutria, trochees. In recent years, a Pseudomonas infection has been observed in dogs of domestic maintenance.
Патология при синегнойной инфекции как у людей, так у животных очень разнообразна - поражение репродуктивной системы, септические процессы в организме, поражение желудочно-кишечного тракта у молодых животных, поражение молочных желез и т.д. У лисиц и песцов она протекает с поражениями гениталий и сопровождается нарушением процесса беременности - абортами, рассасыванием эмбрионов, пропустованием самок. The pathology of Pseudomonas infection in humans and animals is very diverse - damage to the reproductive system, septic processes in the body, damage to the gastrointestinal tract in young animals, damage to the mammary glands, etc. In foxes and arctic foxes, it occurs with lesions of the genitals and is accompanied by a violation of the pregnancy process - abortion, resorption of embryos, and the passage of females.
Возбудитель псевдомоноза обладает серотиповой вариабельностью, поэтому эффективность специфической профилактики определяется полнотой антигенного состава входящих в вакцину компонентов. The causative agent of pseudomonosis has serotypic variability, therefore the effectiveness of specific prophylaxis is determined by the completeness of the antigenic composition of the components included in the vaccine.
Известен вакцинный штамм Pseudomonas aeruginosa PA-7 второго серотипа, используемый для изготовления анатоксин-вакцины против синегнойной инфекции (SU N 1202109, опубл. 15.06.86). Known vaccine strain Pseudomonas aeruginosa PA-7 of the second serotype used for the manufacture of toxoid vaccines against Pseudomonas infection (SU N 1202109, publ. 15.06.86).
Однако известный штамм не содержит антигены возбудителя псевдомоноза пушных зверей и не обеспечивает формирование иммунитета против синегнойной инфекции пушных зверей. Наиболее близким аналогом является штамм Pseudomonas aeruginosa N 202 шестого серотипа, входящий в состав инактивированной вакцины против псевдомоноза пушных зверей, преимущественно норок ("Ветеринарные препараты". Справочник, под ред. Д.Ф. Осидзе., М: Колос., 1981, с. 306-308). However, the known strain does not contain antigens of the pathogen pseudomonosis of fur animals and does not provide the formation of immunity against Pseudomonas infection of fur animals. The closest analogue is the sixth serotype strain Pseudomonas aeruginosa N 202, which is part of the inactivated vaccine against pseudomonosis of fur animals, mainly minks ("Veterinary preparations". Handbook, edited by DF Osidze., M: Kolos., 1981, p. . 306-308).
Однако известный производственный штамм имеет нестабильные вирулентные и иммуногенные свойства и, более того, не позволяет профилактировать псевдомоноз песцов и лисиц, вызываемый возбудителями других серовариантов. However, the known production strain has unstable virulent and immunogenic properties and, moreover, does not prevent the pseudomonosis of arctic foxes and foxes caused by pathogens of other serovariants.
Задачей изобретения является получение штамма Pseudomonas aeruginosa для изготовления эффективной вакцины против псевдомоноза пушных зверей независимо от серологического профиля возбудителя. The objective of the invention is to obtain a strain of Pseudomonas aeruginosa for the manufacture of an effective vaccine against pseudomonosis of fur animals, regardless of the serological profile of the pathogen.
Технический результат изобретения заключается в получении нового штамма Pseudomonas aeruginosa ЛО3, способного продуцировать основные факторы патогенности в оптимальных значениях и позволяющего изготовить вакцину против любых серовариантов синегнойной палочки не только для песцов и лисиц, но и других восприимчивых к данной инфекции зверей и животных.The technical result of the invention is to obtain a new strain of Pseudomonas aeruginosa LO 3 , capable of producing the main pathogenicity factors in optimal values and making it possible to produce a vaccine against any serovariants of Pseudomonas aeruginosa not only for arctic foxes and foxes, but also other animals and animals susceptible to this infection.
Сущность изобретения: штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa ЛО3 выделен в Ленинградском ветеринарном институте и депонирован в коллекции штаммов - возбудителей заболеваний пушных зверей музея бактериальных и вирусных культур Научно-исследовательского института пушного звероводства и кролиководства (НИИПЗК) им. В.А. Афанасьева и имеет регистрационный номер ЛО3. Штамм Ps. aeruginosa ЛО3 предназначен в качестве продуцента протеолитических ферментов (щелочной протеазы и эластазы) при изготовлении специфического иммунного препарата против синегнойной инфекции песцов и лисиц.The inventive bacterial strain Pseudomonas aeruginosa LO 3 isolated at the Leningrad Veterinary Institute and deposited in the collection of strains - pathogens of fur-bearing animals of the Museum of Bacterial and Viral Cultures of the Scientific Research Institute of Fur Breeding and Rabbit Breeding (NIIPZK) them. V.A. Afanasyev and has a registration number LO 3 . Strain Ps. aeruginosa LO 3 is intended as a producer of proteolytic enzymes (alkaline protease and elastase) in the manufacture of a specific immune preparation against pseudomonas infection of arctic foxes and foxes.
Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa НИИПЗК N ЛО3 характеризуется следующими признаками и свойствами.The bacterial strain Pseudomonas aeruginosa NIIPZK N LO 3 is characterized by the following features and properties.
Генетические маркеры. Genetic markers.
Серовариант 03 (Habs)
Пиоцинотип 843568
Фаготип 44; М-4; 73; 68; 119x; F-8, CoL-11; 21.Serovariate 03 (Habs)
Pyocinotype 843568
Phagotype 44; M-4; 73; 68; 119x; F-8, CoL-11; 21.
Штамм ЛО3 протеолитический, слизеобразующий, с адгезивной активностью в отношении эритроцитов кролика.Strain LO 3 proteolytic, mucus-forming, with adhesive activity against rabbit erythrocytes.
Морфологические свойства. Производственная культура представляет собой тонкие прямые грамотрицательные палочки, размером 2-3 х 0,5 микрона. Палочки подвижные, монотрихи, спор не образуют, в мазках располагаются поодиночке и рядами. Morphological properties. Industrial culture is a thin straight gram-negative sticks, 2-3 x 0.5 microns in size. The rods are movable, monotrichi, do not form a spore, in strokes are located singly and in rows.
Культуральные свойства. Аэроб, оптимальная температура роста при 32-37oC, сохраняет способность к росту и размножению при 42oC. Растет почти на всех питательных средах с pH 8,0. На поверхности МПБ образует характерную серовато-серебристую пленку. Образует пигмент пиоцианин. Лучшей средой культивирования является среда Iensen'a, обогащенная солями и аминопептидом. На МПА образует S- и R-формы, с преобладанием S-форм.Cultural properties. Aerob, the optimum growth temperature at 32-37 o C, retains the ability to grow and reproduce at 42 o C. It grows on almost all nutrient media with a pH of 8.0. On the surface of the MPB forms a characteristic grayish-silver film. Forms pigment pyocyanin. The best culture medium is Iensen's, enriched with salts and aminopeptide. On MPA forms S- and R-forms, with the predominance of S-forms.
Биохимическая активность. Высокая кислотообразующая активность в отношении глюкозы и галактозы; в аэробных условиях расщепляет сахара с образованием глюконовой кислоты без газа, разжижает желатин, свертывает молоко, не вызывает образования индола и сероводорода. Образует цитохромоксидазу, вызывает гидролиз ацетамида. Biochemical activity. High acid-forming activity against glucose and galactose; under aerobic conditions it breaks down sugars to form gluconic acid without gas, liquefies gelatin, coagulates milk, and does not cause the formation of indole and hydrogen sulfide. It forms cytochrome oxidase, causes hydrolysis of acetamide.
Вирулентные свойства. При внутрибрюшинном введении белым мышам LD/50 составляет 5•108 КОЕ/мл.Virulent properties. When administered intraperitoneally to white mice, the LD / 50 is 5 • 10 8 CFU / ml.
Антигенные свойства. Штамм вырабатывает щелочную протеазу, эластазу, экзотоксин А, внеклеточную слизь, обладает адгезивной активностью. Antigenic properties. The strain produces alkaline protease, elastase, exotoxin A, extracellular mucus, has adhesive activity.
Токсигенные свойства. В жидкой питательной среде вырабатывает щелочную протеазу (показатель гидролиза казеина 80), эластазу (РП 1:32), экзотоксин А (РПГА 1:64), внеклеточную слизь в МПЕ и на МПА. Титр адгезина в РГА 1:8. Toxigenic properties. In a liquid nutrient medium it produces an alkaline protease (casein hydrolysis index 80), elastase (RP 1:32), exotoxin A (RPGA 1:64), extracellular mucus in MPE and MPA. Adhesion titer in RGA 1: 8.
Хранение штамма. При температуре 6±2oC в ампулах в лиофилизированном состоянии более трех лет; в пробирках в столбике полужидкого агара, приготовленного на бульоне Мартена с добавлением 0,5%-ного глютамата натрия и 1%-ного глицерина, под вазелиновым маслом в течение трех месяцев; в пробирках на скошенном агаре не более 14 дней.Strain storage. At a temperature of 6 ± 2 o C in ampoules in a lyophilized state for more than three years; in test tubes in a column of semi-liquid agar prepared on Marten broth with the addition of 0.5% sodium glutamate and 1% glycerol, under liquid paraffin for three months; in test tubes on mowed agar no more than 14 days.
Контроль за состоянием штамма. Контролируют морфологические, биохимические, культуральные и вирулентные свойства не реже 1 раза в три месяца. Антигенные свойства (протеазу и эластазу) проверяют перед производством иммунного препарата. Штамм предварительно культивируют в среде Iensen'a. Показатель гидролиза казеина щелочной протеазой в реакции диффузия в казеиновый агар должен быть не менее 80, а титр эластазы в реакции супернатанта с моновалентной антиэластазной сывороткой в 1%-ном агаре Пурифайта должен быть не менее 1:32. Monitoring the status of the strain. Morphological, biochemical, cultural and virulent properties are monitored at least once every three months. Antigenic properties (protease and elastase) are tested before production of the immune preparation. The strain is pre-cultured in Iensen's environment. The rate of hydrolysis of casein with an alkaline protease in the diffusion reaction to casein agar should be at least 80, and the elastase titer in the reaction of the supernatant with monovalent anti-elastase serum in 1% Purifait agar should be at least 1:32.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами:
Пример 1. Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa ЛО3 культивируют на бульоне Мартена или синтетической среде при 32oC в течение 18-20 часов при постоянном встряхивании на шуттель-аппарате. По истечении срока инкубации культуру проверяют на чистоту роста в мазках, окрашенных по Грамму.The invention is illustrated by the following examples:
Example 1. The bacterial strain Pseudomonas aeruginosa LO 3 is cultured on a Marten broth or synthetic medium at 32 o C for 18-20 hours with constant shaking on a shuttle machine. After the incubation period, the culture is checked for cleanliness of growth in smears stained by Gram.
Далее из выросшей культуры отбирают пробу, центрифугируют ее при 6000 об. /мин в течение 20 мин. Надосадочную жидкость сливают и исследуют на содержание: экзотоксина А в реакции преципитации (РП) с антитоксической сывороткой и/или на щелочную протеазу в реакции гидролиза казеина и/или на эластазу в РП с моновалентной антиэластазной сывороткой. Титры должны составлять: экзотоксина А - не ниже 1:4, щелочной протеазы не ниже 1:32, эластазы - не ниже 1:16. Next, a sample is taken from the grown culture, centrifuged at 6,000 rpm. / min for 20 minutes The supernatant is drained and examined for the content of: exotoxin A in a precipitation reaction (RP) with antitoxic serum and / or an alkaline protease in casein hydrolysis and / or elastase in a RP with monovalent antelastase serum. Titles should be: exotoxin A - not lower than 1: 4, alkaline protease not lower than 1:32, elastase - not lower than 1:16.
После контроля выросшей культуры на токсигенность и протеолитическую активность отделенную бакмассу подвергают инактивации любым известным способом и добавляют адъювант, например гидроокись алюминия. After controlling the grown culture for toxigenicity and proteolytic activity, the separated bacmass is inactivated by any known method and an adjuvant, for example aluminum hydroxide, is added.
Пример 2. Полученную по примеру 1 вакцину проверяют на безвредность на 9 песцах. Вакцину вводят внутримышечно в область бедра правой лапы в дозах: трем песцам по 1,0 мл, трем - по 2,0 мл и трем - по 3,0 мл. Example 2. Obtained in example 1, the vaccine is checked for harmlessness on 9 Arctic foxes. The vaccine is administered intramuscularly in the thigh area of the right paw in doses: three foxes, 1.0 ml each, three - 2.0 ml each and three - 3.0 ml each.
Проводят ежедневное наблюдение за песцами в течение 7 дней с индивидуальным прощупыванием места инъекции. Термометрию песцов проводят дважды на 2-ой и 4-ый дни после введения препарата. Conduct daily monitoring of Arctic foxes for 7 days with individual probing of the injection site. Thermometry of foxes is carried out twice on the 2nd and 4th days after administration of the drug.
Результаты исследования показали, что все песцы вели себя обычно, корм поедали полностью, агрессивность не наблюдалась. Температура тела была в пределах нормы 37-39oC. При прощупывании места инъекции вакцины не было обнаружено опухания конечности, болезненности.The results of the study showed that all Arctic foxes behaved normally, completely ate food, and aggressiveness was not observed. Body temperature was within the normal range of 37-39 o C. When probing the injection site of the vaccine, no swelling of the limb or soreness was detected.
Пример 3. Полученной вакциной иммунизируют песцов на ферме, неблагополучной по синегнойной инфекции, для исследования влияния иммунизации на результаты воспроизводства, поскольку основная патология при синегнойной инфекции проявляется именно в период воспроизводства. Example 3. The resulting vaccine is used to immunize Arctic foxes on a farm unsuccessful for Pseudomonas aeruginosa to study the effect of immunization on the results of reproduction, since the main pathology in Pseudomonas infection manifests itself during the reproduction period.
В данном хозяйстве среди песцов отмечаются случаи абортов, пропустования самок, рождение мертвых щенков. При этом у абортированных самок на последних сроках беременности (за неделю до срока щенности) при бактериологическом исследовании была выделена культура синегнойной палочки 03 и 09 сероваров. In this household, there are cases of abortion, omission of females, and the birth of dead puppies among arctic foxes. Moreover, in aborted females in the last stages of pregnancy (one week before the gestation period), bacteriological examination revealed a culture of Pseudomonas aeruginosa 03 and 09 serovars.
Полученной по примеру 1 вакциной иммунизируют 50 самок песцов внутримышечно в дозе 1,5 мл. В качестве контроля служат другие 50 самок, аналогичные по возрасту, окрасу и условиям содержания и кормления. Obtained according to example 1, the vaccine is immunized with 50 female foxes intramuscularly at a dose of 1.5 ml. Another 50 females, similar in age, color, and conditions of keeping and feeding, serve as control.
Установлено, что применение вакцины повысило плодовитость песцов опытной группы на 0,7 щенка. Вакцина предотвратила рассасывание плодов у некоторых самок опытной группы, в то время как у некоторых самок контрольной группы был зарегистрирован приплод всего в 4-5 щенков. Это чаще всего обусловлено рассасыванием плодов в первой половине беременности. It was found that the use of the vaccine increased the fecundity of the foxes of the experimental group by 0.7 puppies. The vaccine prevented the resorption of the fruit in some females of the experimental group, while in some females of the control group the offspring was registered in only 4-5 puppies. This is most often due to resorption of the fetus in the first half of pregnancy.
Таким образом, вакцина на основе штамма ЛО3 позволит предотвратить скрытые потери при воспроизводстве пушных зверей в хозяйствах, неблагополучных по синегнойной инфекции.Thus, the vaccine based on the strain LO 3 will prevent latent losses during the reproduction of fur animals in farms that are disadvantageous with Pseudomonas aeruginosa.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99117157A RU2169192C2 (en) | 1999-08-12 | 1999-08-12 | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99117157A RU2169192C2 (en) | 1999-08-12 | 1999-08-12 | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU99117157A RU99117157A (en) | 2001-05-20 |
| RU2169192C2 true RU2169192C2 (en) | 2001-06-20 |
Family
ID=20223573
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU99117157A RU2169192C2 (en) | 1999-08-12 | 1999-08-12 | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2169192C2 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1538933A (en) * | 1975-03-12 | 1979-01-24 | Univ Tokyo | Method of preventing mink infection by pseudomonas aeruginosa |
| US4578458A (en) * | 1983-03-23 | 1986-03-25 | Brigham And Women's Hospital | Mucoid exopolysaccharide vaccine against Pseudomonas aeruginosa |
| RU1587723C (en) * | 1988-12-13 | 1995-05-20 | Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова | Method of preparing exotoxin a from pseudomonas aeruginosa |
| RU1066074C (en) * | 1982-07-23 | 1995-12-10 | Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов | Pseudomonose vaccine for fur-bearing animals, mainly, minks and method of producing the same and method of its prophylaxis |
| RU95113158A (en) * | 1993-06-07 | 1998-03-10 | Чейл Фудз энд Кемикалз, Инк. | NEW IMPAIRED PSEUDOMONAS AERUGINOSA STRAINS |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL194910C (en) * | 1993-06-07 | 2003-07-04 | Cheil Foods & Chem | Weakened strain of Pseudomonas aeruginosa, as well as a vaccine and a drug against Pseudomonas aeruginosa infections, and a method of preparing the vaccine. |
-
1999
- 1999-08-12 RU RU99117157A patent/RU2169192C2/en active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1538933A (en) * | 1975-03-12 | 1979-01-24 | Univ Tokyo | Method of preventing mink infection by pseudomonas aeruginosa |
| RU1066074C (en) * | 1982-07-23 | 1995-12-10 | Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов | Pseudomonose vaccine for fur-bearing animals, mainly, minks and method of producing the same and method of its prophylaxis |
| US4578458A (en) * | 1983-03-23 | 1986-03-25 | Brigham And Women's Hospital | Mucoid exopolysaccharide vaccine against Pseudomonas aeruginosa |
| RU1587723C (en) * | 1988-12-13 | 1995-05-20 | Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова | Method of preparing exotoxin a from pseudomonas aeruginosa |
| RU95113158A (en) * | 1993-06-07 | 1998-03-10 | Чейл Фудз энд Кемикалз, Инк. | NEW IMPAIRED PSEUDOMONAS AERUGINOSA STRAINS |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ГВОЗДЯК Р.И., ЯКОВЛЕВА Л.М. Об особенностях патогенности Pseudomonas Aeruginosa Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - М.: МЕДИЦИНА, 1987, № 3, с.3-6. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2169193C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5142 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
| CN110124022A (en) | A kind of mycoplasma hyopneumoniae and haemophilus parasuis, Streptococcus suis, Actinobacillus pleuropneumoniae tetrad inactivated vaccine and its application | |
| RU1066074C (en) | Pseudomonose vaccine for fur-bearing animals, mainly, minks and method of producing the same and method of its prophylaxis | |
| RU2403063C1 (en) | Inactivated combined vaccine against viral diarrhea, rota-, corona-virus diseases and escherichiosis of cattle | |
| RU2169192C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
| RU2159127C1 (en) | Vaccine for preventing pseudomonosis of fur-bearing animals | |
| RU2169191C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5291 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
| RU2169190C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5292 used for making vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
| RU2169766C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa лo1 used for preparing vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
| RU2169195C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5271 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
| RU2169188C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 4492 used for making vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
| RU2169189C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 4762 used for making vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
| RU2169764C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5132 used for preparing vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
| RU2169194C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5211 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
| RU2147318C1 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5241 used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
| RU2169765C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5002 used for preparing vaccine against fur wild animal pseudomonosis | |
| RU2147317C1 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 4992, used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
| RU2263143C2 (en) | Strain of bacterium streptococcus pyogenes 289 used for preparing vaccine against streptococcosis in fur animal | |
| RU2098127C1 (en) | Mixed vaccine for control over cattle necrobacteriosis | |
| RU2129441C1 (en) | Mixed vaccine against anaerobic enterotoxemia and escherichiosis in piglets | |
| RU2098128C1 (en) | Mixed vaccine for control over sheep limb illness | |
| RU1092947C (en) | Strain pseudomonas acruginosa sepotype 11 n 48 used for obtaining pseudomonous antigen | |
| RU2109519C1 (en) | Method of preparing vaccine for necrobacteriosis control in animals | |
| RU2217163C2 (en) | Vaccine against candidosis in agriculture animals | |
| RU2521651C1 (en) | STRAINS OF BACTERIA Moraxella bovoculi "SH-CH6 N-DEP" USED TO MANUFACTURE DIAGNOSTIC PREPARATIONS AND VACCINES AGAINST INFECTIOUS KERATOCONJUNCTIVITIS OF CATTLE |