RU2288474C1 - Method for detecting toxic action of oral mucosal interferonotherapy - Google Patents
Method for detecting toxic action of oral mucosal interferonotherapy Download PDFInfo
- Publication number
- RU2288474C1 RU2288474C1 RU2005141168/15A RU2005141168A RU2288474C1 RU 2288474 C1 RU2288474 C1 RU 2288474C1 RU 2005141168/15 A RU2005141168/15 A RU 2005141168/15A RU 2005141168 A RU2005141168 A RU 2005141168A RU 2288474 C1 RU2288474 C1 RU 2288474C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mouse
- oral mucosal
- interferon
- enterocytes
- hepatocytes
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано при определении токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии.The invention relates to medicine and can be used to determine the toxic effect of oral mucosal interferon therapy.
Известен способ определения токсического действия рекомбинантного человеческого лейкоцитарного интерферона-α2 на основе изучения его пирогенных свойств на лабораторных животных - в том числе на устойчивых к эндотоксину мышах С3Н/HeJ. Согласно известному способу мышам С3Н/HeJ вводили рекомбинантный человеческий лейкоцитарный интерферон-α2 в хвостовую вену и измеряли ректальную температуру каждые 10-15 минут. Пик лихорадочной реакции наблюдали через 25-30 минут после инъекции. Минимальная пирогенная доза составляла 7,5×103 U на мышь, оптимальная пирогенная доза - 75×103 U на мышь (Dinarello Ch.A., Bemheim Н.А., Duff G.W., Le H.V., Nagabhushan T.L., Hamilton N.C., Coceanl F. Mechanisms of fever induced by recombinant human interferon // The Journal of clinical investigation. - 1984. - Vol.74, N 3. - P.906-913).A known method for determining the toxic effect of recombinant human leukocyte interferon-α 2 based on the study of its pyrogenic properties in laboratory animals - including endotoxin-resistant C3H / HeJ mice. According to the known method, C3H / HeJ mice were injected with recombinant human leukocyte interferon-α 2 into the tail vein and rectal temperature was measured every 10-15 minutes. The peak febrile reaction was observed 25-30 minutes after injection. The minimum pyrogenic dose was 7.5 × 10 3 U per mouse, the optimal pyrogenic dose was 75 × 10 3 U per mouse (Dinarello Ch.A., Bemheim N.A., Duff GW, Le HV, Nagabhushan TL, Hamilton NC, Coceanl F. Mechanisms of fever induced by recombinant human interferon // The Journal of clinical investigation. - 1984. - Vol. 74, N 3. - P.906-913).
Основным недостатком известного способа является то, что он непригоден для проведения комплексной оценки токсичности орально вводимого препарата, предназначенного для локальной интерферонотерапии, в связи с неадекватным для оральной мукозальной интерферонотерапии способом введения препарата и неинформативным для локальной интерферонотерапии показателем контроля токсического действия рекомбинантного человеческого лейкоцитарного интерферона-α2 - пирогенной реакции у мышей.The main disadvantage of this method is that it is not suitable for a comprehensive assessment of the toxicity of an orally administered drug intended for local interferon therapy, due to the inadequate method of drug administration for oral mucosal interferon therapy and an indicator of the toxic effect of recombinant human leukocyte interferon-α that is toxic for local interferon therapy 2 - pyrogenic reaction in mice.
Известен способ исследования кожно-резорбтивного действия липосомальной формы интерферона в хроническом эксперименте на крысах линии Wistar. Согласно известному способу препарат наносили на выстриженный участок кожи животных в течение 10 дней, по 100 мкл (5×103 ME). В качестве контроля использовали крыс, которым апплицировали липосомы либо физиологический раствор в эквивалентном объеме. Через сутки после последней аппликации проводили физиологическое обследование животных (регистрировали изменение массы и температуры тела, частоту сердечных сокращений, исследовательское поведение в тесте "открытое поле"), биохимический и гематологический анализ крови. В те же сроки умерщвляли крыс передозировкой диэтилового эфира для патоморфологического исследования внутренних органов, забирали образцы тканей на гистологическое исследование. В образцах крови определяли уровень гемоглобина, содержание эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, рассчитывали лейкограмму. Биохимические исследования включали оценку показателей интенсивности основных видов обмена, а также активности ферментов-маркеров функционального состояния печени, почек, сердца (Золин В.В., Агафонова О.А., Колокольцев А.А., Даниленко Е.Д., Федосова Л.К., Гамалей С.Г., Омигов В.В., Фадина В А., Масычева В.И. Изучение противовирусной активности, фармакокинетики и токсических свойств липосомальной формы рекомбинантного α2b-интерферона человека при наружном применении // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2001. - №5. - С.27-31).A known method of studying the skin-resorptive action of the liposomal form of interferon in a chronic experiment in rats of the Wistar strain. According to a known method, the preparation was applied to a trimmed area of animal skin for 10 days, 100 μl (5 × 10 3 ME). As a control, rats were used, which were applied liposomes or saline in an equivalent volume. A day after the last application, a physiological examination of the animals was performed (changes in body weight and temperature, heart rate, research behavior in the open field test were recorded), a biochemical and hematological blood test. At the same time, rats were killed by an overdose of diethyl ether for pathomorphological examination of internal organs, tissue samples were taken for histological examination. The hemoglobin level, the content of erythrocytes, leukocytes, and platelets were determined in blood samples, and the leukogram was calculated. Biochemical studies included the assessment of indicators of the intensity of the main types of metabolism, as well as the activity of enzymes-markers of the functional state of the liver, kidneys, heart (Zolin V.V., Agafonova O.A., Kolokoltsev A.A., Danilenko E.D., Fedosova L. .K., Gamaley S.G., Omigov V.V., Fadina V.A., Masycheva V.I. Study of the antiviral activity, pharmacokinetics and toxic properties of the liposomal form of the recombinant human α 2b interferon when used externally // Bulletin of the Russian Academy medical sciences. - 2001. - No. 5. - S.27-31).
Основным недостатком известного способа является то, что он непригоден для проведения комплексной оценки токсичности орально вводимого препарата, предназначенного для локальной интерферонотерапии, в связи с неадекватным для оральной мукозальной интерферонотерапии способом введения препарата и неинформативными для локальной интерферонотерапии системными показателями контроля токсического действия рекомбинантного человеческого интерферона-α2.The main disadvantage of this method is that it is not suitable for a comprehensive assessment of the toxicity of an orally administered drug intended for local interferon therapy, due to the inadequate method of drug administration for oral mucosal interferon therapy and systemic indicators of monitoring the toxic effect of recombinant human interferon-α that are not informative for local interferon therapy 2 .
В основу изобретения положена задача обеспечения адекватного введения препарата интерферона для оральной мукозальной интерферонотерапии при информативной регистрации его токсического действия.The basis of the invention is the task of ensuring adequate administration of an interferon preparation for oral mucosal interferon therapy with informative registration of its toxic effect.
Задача решена тем, что согласно заявляемому способу ежедневно в течение 3-5 дней в ротовую полость инбредной мыши BALB/c вводят оплавленный в виде оливы конец капроновой лески диаметром 0,5-2,0 мм, смоченный глицеринсодержащим препаратом рекомбинантного интерферона-α2, содержащим 104-106 МЕ/мл рекомбинантного человеческого интерферона-α2, затем у забитой мыши определяют в сравнении с интактной мышью морфофункциональное состояние гепатоцитов, энтероцитов, лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов и оценивают:The problem is solved in that according to the claimed method every day for 3-5 days in the mouth of an inbred mouse BALB / c injected melted in the form of olive end nylon line with a diameter of 0.5-2.0 mm, moistened with a glycerin-containing preparation of recombinant interferon-α 2 , containing 10 4 -10 6 IU / ml of recombinant human interferon-α 2 , then the morphofunctional state of hepatocytes, enterocytes, lymphoid tissue of regional lymph nodes is determined in comparison with an intact mouse, and the following are evaluated:
отсутствие токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии при отсутствии у инбредной мыши BALB/c, подвергшейся оральной мукозальной интерферонотерапии, дегенеративных изменений гепатоцитов, энтероцитов и лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов;the absence of toxic effects of oral mucosal interferon therapy in the absence of an inbred BALB / c mouse subjected to oral mucosal interferon therapy, degenerative changes in hepatocytes, enterocytes and lymphoid tissue of the regional lymph nodes;
наличие токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии при наличии у инбредной мыши BALB/c, подвергшейся оральной мукозальной интерферонотерапии, дегенеративных изменений гепатоцитов и/или энтероцитов, и/или лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов.the presence of the toxic effect of oral mucosal interferon therapy in the presence of an inbred BALB / c mouse subjected to oral mucosal interferon therapy, degenerative changes in hepatocytes and / or enterocytes, and / or lymphoid tissue of the regional lymph nodes.
В результате проведенных нами исследований были выбраны наиболее чувствительные к действию оральной мукозальной интерферонотерапии животные - мыши линии BALB/c; определены у чувствительных животных наиболее реактивные органы и ткани для данного метода введения выбранного препарата рекомбинантного интерферона-α2; впервые установлены информативные критерии токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии; разработано приспособление для осуществления оральной мукозальной интерферонотерапии у мышей; определены пределы варьирования доз глицеринсодержащего препарата рекомбинантного интерферона-α2 для исследования на мышах линии BALB/c.As a result of our studies, we selected the animals most sensitive to the action of oral mucosal interferon therapy - mice of the BALB / c line; in sensitive animals, the most reactive organs and tissues for this method of administration of the selected preparation of recombinant interferon-α 2 were determined; informative criteria for the toxic effect of oral mucosal interferon therapy were first established; a device has been developed for the implementation of oral mucosal interferon therapy in mice; the limits of dose variation of the glycerin-containing preparation of recombinant interferon-α 2 were determined for research on BALB / c mice.
Заявляемый способ определения токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии является новым и в литературе не описан.The inventive method for determining the toxic effects of oral mucosal interferon therapy is new and is not described in the literature.
Техническим результатом заявляемого изобретения является обеспечение адекватного введения препарата интерферона для оральной мукозальной интерферонотерапии при информативной регистрации его токсического действия.The technical result of the claimed invention is the provision of adequate administration of an interferon preparation for oral mucosal interferon therapy with informative registration of its toxic effect.
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, показывающих возможность обеспечения адекватного введения препарата интерферона для оральной мукозальной интерферонотерапии при информативной регистрации его токсического действия.The invention is illustrated by the following examples, showing the possibility of ensuring adequate administration of the drug interferon for oral mucosal interferon therapy with informative registration of its toxic effects.
Пример 1. Инбредной мыши BALB/c ежедневно в течение 3 дней в ротовую полость водили оплавленный в виде оливы конец капроновой лески диаметром 0,5 мм, смоченный глицеринсодержащим препаратом рекомбинантного интерферона-α2, содержащим 104 МЕ/мл рекомбинантного человеческого интерферона-α2, затем у забитой мыши определяли в сравнении с интактной мышью морфофункциональное состояние гепатоцитов, энтероцитов, лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов. Установили, что у мыши, после интерферонотерапии отсутствовали дегенеративные изменения гепатоцитов, энтероцитов и лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов. В соответствии с чем было установлено отсутствие токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии.Example 1. An inbred BALB / c mouse was injected daily into the oral cavity for 3 days with an olive-melted end of a nylon line with a diameter of 0.5 mm, moistened with a glycerin-containing preparation of recombinant interferon-α 2 containing 10 4 IU / ml of recombinant human interferon-α 2 , then the morphofunctional state of hepatocytes, enterocytes, lymphoid tissue of regional lymph nodes was determined in a slaughtered mouse in comparison with an intact mouse. It was found that in the mouse, after interferon therapy, there were no degenerative changes in hepatocytes, enterocytes and lymphoid tissue of the regional lymph nodes. In accordance with which it was found the absence of the toxic effects of oral mucosal interferon therapy.
Пример 2. Инбредной мыши BALB/c ежедневно в течение 4 дней в ротовую полость водили оплавленный в виде оливы конец капроновой лески диаметром 1,5 мм, смоченный глицеринсодержащим препаратом рекомбинантного интерферона-α2, содержащим 105 МЕ/мл рекомбинантного человеческого интерферона-α2, затем у забитой мыши определяли в сравнении с интактной мышью морфофункциональное состояние гепатоцитов, энтероцитов, лимфюидной ткани; региональных лимфатических узлов. У мыши после интерферонотерапии установлено наличие дегенеративных изменений энтероцитов. В соответствии с чем было установлено наличие токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии.Example 2. An inbred BALB / c mouse was injected daily into the oral cavity for 4 days with an olive-melted end of a nylon line with a diameter of 1.5 mm moistened with a glycerol-containing preparation of recombinant interferon-α 2 containing 10 5 IU / ml of recombinant human interferon-α 2 , then the morphofunctional state of hepatocytes, enterocytes, lymphoid tissue was determined in a slaughtered mouse in comparison with an intact mouse; regional lymph nodes. The presence of degenerative changes in enterocytes in the mouse after interferon therapy. In accordance with which the presence of the toxic effect of oral mucosal interferon therapy was established.
Пример 3. Инбредной мыши BALB/c ежедневно в течение 5 дней в ротовую полость водили оплавленный в виде оливы конец капроновой лески диаметром 1,5 мм, смоченный глицеринсодержащим препаратом рекомбинантного интерферона-α2, содержащим 105 МЕ/мл рекомбинантного человеческого интерферона-α2, затем у забитой мыши определяли в сравнении с интактной мышью морфофункциональное состояние гепатоцитов, энтероцитов, лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов. У мыши после интерферонотерапии установлено наличие дегенеративных изменений гепатоцитов. В соответствии с чем было установлено наличие токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии.Example 3. An inbred BALB / c mouse was injected daily into the oral cavity for 5 days with an olive-melted end of a capron line 1.5 mm in diameter moistened with a glycerol-containing preparation of recombinant interferon-α 2 containing 10 5 IU / ml of recombinant human interferon-α 2 , then the morphofunctional state of hepatocytes, enterocytes, lymphoid tissue of regional lymph nodes was determined in a slaughtered mouse in comparison with an intact mouse. After interferon therapy, a mouse showed the presence of degenerative changes in hepatocytes. In accordance with which the presence of the toxic effect of oral mucosal interferon therapy was established.
Пример 4. Инбредной мыши BALB/c ежедневно в течение 5 дней в ротовую полость водили оплавленный в виде оливы конец капроновой лески диаметром 2 мм, смоченный глицеринсодержащим препаратом рекомбинантного интерферона-α2, содержащим 105 МЕ/мл рекомбинантного человеческого интерферона-α2, затем у забитой мыши определяли в сравнении с интактной мышью морфофункциональное состояние гепатоцитов, энтероцитов, лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов. У мыши после интерферонотерапии установлено наличие дегенеративных изменений лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов. В соответствии с чем было установлено наличие токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии.Example 4. An inbred BALB / c mouse was injected daily into the oral cavity for 5 days with an olive-melted end of a nylon line with a diameter of 2 mm moistened with a glycerol-containing preparation of recombinant interferon-α 2 containing 10 5 IU / ml of recombinant human interferon-α 2 , then, the morphofunctional state of hepatocytes, enterocytes, lymphoid tissue of regional lymph nodes was determined in a clogged mouse in comparison with an intact mouse. In the mouse, after interferon therapy, the presence of degenerative changes in the lymphoid tissue of the regional lymph nodes was established. In accordance with which the presence of the toxic effect of oral mucosal interferon therapy was established.
Пример 5. Инбредной мыши BALB/c ежедневно в течение 5 дней в ротовую полость водили оплавленный в виде оливы конец капроновой лески диаметром 2 мм, смоченный глицеринсодержащим препаратом рекомбинантного интерферона-α2, содержащим 106 МЕ/мл рекомбинантного человеческого интерферона-α2, затем у забитой мыши определяли в сравнении с интактной мышью морфофункциональное состояние гепатоцитов, энтероцитов, лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов. У мыши после интерферонотерапии установлено наличие дегенеративных изменений гепатоцитов, энтероцитов и лимфоидной ткани региональных лимфатических узлов. В соответствии с чем было установлено наличие токсического действия оральной мукозальной интерферонотерапии.Example 5. An inbred BALB / c mouse was injected daily into the oral cavity for 5 days with an olive-melted end of a nylon line with a diameter of 2 mm moistened with a glycerol-containing preparation of recombinant interferon-α 2 containing 10 6 IU / ml of recombinant human interferon-α 2 , then, the morphofunctional state of hepatocytes, enterocytes, lymphoid tissue of regional lymph nodes was determined in a clogged mouse in comparison with an intact mouse. After interferon therapy, a mouse showed the presence of degenerative changes in hepatocytes, enterocytes and lymphoid tissue of regional lymph nodes. In accordance with which the presence of the toxic effect of oral mucosal interferon therapy was established.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005141168/15A RU2288474C1 (en) | 2005-12-28 | 2005-12-28 | Method for detecting toxic action of oral mucosal interferonotherapy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005141168/15A RU2288474C1 (en) | 2005-12-28 | 2005-12-28 | Method for detecting toxic action of oral mucosal interferonotherapy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2288474C1 true RU2288474C1 (en) | 2006-11-27 |
Family
ID=37664520
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005141168/15A RU2288474C1 (en) | 2005-12-28 | 2005-12-28 | Method for detecting toxic action of oral mucosal interferonotherapy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2288474C1 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2129437C1 (en) * | 1992-02-10 | 1999-04-27 | Интерферон Сайнс Инк. | Alpha-interferon composition and method of preparation thereof from human blood leukocytes |
| RU2139085C1 (en) * | 1998-06-23 | 1999-10-10 | Санкт-Петербургская общественная организация "Институт биорегуляции и геронтологии" | Agent stimulating reparative processes and method of its use |
| US6204022B1 (en) * | 1996-04-12 | 2001-03-20 | Pepgen Corporation And University Of Florida | Low-toxicity human interferon-alpha analogs |
| RU2166959C2 (en) * | 1994-04-12 | 2001-05-20 | Рисерч Дивелопмент Фаундейшн | Method for treating autoimmune diseases using type 1 interferons |
| RU2232387C1 (en) * | 2002-11-04 | 2004-07-10 | Научно-исследовательский институт по изучению лепры | Method for evaluation of general toxic effect of medicinal agents on body |
-
2005
- 2005-12-28 RU RU2005141168/15A patent/RU2288474C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2129437C1 (en) * | 1992-02-10 | 1999-04-27 | Интерферон Сайнс Инк. | Alpha-interferon composition and method of preparation thereof from human blood leukocytes |
| RU2166959C2 (en) * | 1994-04-12 | 2001-05-20 | Рисерч Дивелопмент Фаундейшн | Method for treating autoimmune diseases using type 1 interferons |
| US6204022B1 (en) * | 1996-04-12 | 2001-03-20 | Pepgen Corporation And University Of Florida | Low-toxicity human interferon-alpha analogs |
| RU2139085C1 (en) * | 1998-06-23 | 1999-10-10 | Санкт-Петербургская общественная организация "Институт биорегуляции и геронтологии" | Agent stimulating reparative processes and method of its use |
| RU2232387C1 (en) * | 2002-11-04 | 2004-07-10 | Научно-исследовательский институт по изучению лепры | Method for evaluation of general toxic effect of medicinal agents on body |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zikria et al. | Hydroxyethyl starch macromolecules reduce myocardial reperfusion injury | |
| ES2742730T3 (en) | Progenitor cell / mother cell mobilization methods | |
| Wang et al. | Endothelium-dependent relaxation is depressed at the macro-and microcirculatory levels during sepsis | |
| Eades et al. | Serial alterations in digital hemodynamics and endothelin-1 immunoreactivity, platelet-neutrophil aggregation, and concentrations of nitric oxide, insulin, and glucose in blood obtained from horses following carbohydrate overload | |
| Waterman et al. | Interstitial fluid and serum antibiotic concentrations | |
| Nagao et al. | Hepatitis C virus RNA detection in oral lichen planus tissue | |
| Lawrence et al. | Toxicity profile of epichlorohydrin | |
| CA2958696A1 (en) | Formulations of testosterone and methods of treatment therewith | |
| Moudgil et al. | Influence of anaesthesia and surgery on neutrophil chemotaxis | |
| Carlson et al. | Rattlesnake venom shock in the rat: development of a method | |
| Vest | The toxic Duvernoy's secretion of the wandering garter snake, Thamnophis elegans vagrans | |
| Long et al. | Acute Toxicity, Absorption and Excretion of Sulfathiazole and Certain of its Derivatives. | |
| Groschet et al. | Detection of calprotectin and its correlation to the accumulation of neutrophils within equine large colon during ischaemia and reperfusion | |
| Becker et al. | Cutaneous mast cell heterogeneity: response to antigen in atopic dogs | |
| RU2288474C1 (en) | Method for detecting toxic action of oral mucosal interferonotherapy | |
| Layton et al. | Primary pneumonic plague in the African Green monkey as a model for treatment efficacy evaluation | |
| CN108904511A (en) | A kind of drug and purposes for treating acute lung injury and acute respiratory distress syndrome | |
| Overman et al. | The effect of fatal P. knowlesi malaria on simian circulatory and body fluid compartment physiology | |
| MacKay et al. | Effect of eltenac in horses with induced endotoxaemia | |
| CA3176867A1 (en) | Drug for treating coronaviral and retroviral infections and hepatitis c | |
| HU227537B1 (en) | Use of n-acetylcysteine for the preparation of a medicament suitable for the intravenous administration to prevent oxidative stress in dialysed patients | |
| Magdalan et al. | Acute intranasal intoxication with mercuric chloride taken accidently instead of cocaine-A case report | |
| Hine et al. | Fatalities following exposure to 2-nitropropane | |
| Ansfield et al. | Immunosuppression by surface-active material: lack of species specificity | |
| McElnay et al. | The interaction of warfarin with antacid constituents in the gut |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181229 |