RU2571157C2 - Protective drying medium for obtaining symbiotic preparation - Google Patents
Protective drying medium for obtaining symbiotic preparation Download PDFInfo
- Publication number
- RU2571157C2 RU2571157C2 RU2014109049/10A RU2014109049A RU2571157C2 RU 2571157 C2 RU2571157 C2 RU 2571157C2 RU 2014109049/10 A RU2014109049/10 A RU 2014109049/10A RU 2014109049 A RU2014109049 A RU 2014109049A RU 2571157 C2 RU2571157 C2 RU 2571157C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- symbiotic
- drying
- protective
- obtaining
- concentration
- Prior art date
Links
- 238000001035 drying Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 15
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 9
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 8
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims abstract description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 8
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 8
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 abstract description 2
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 abstract 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 10
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 9
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 7
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 206010013496 Disturbance in attention Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 150000000996 L-ascorbic acids Chemical class 0.000 description 1
- BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N L-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid group Chemical class C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- -1 essential ones) Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical class N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Chemical class 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Chemical class 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical class [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и зоотехнике и может быть использовано при промышленном производстве симбиотического препарата на основе штамма Escherichia coli VL-613.The invention relates to biotechnology and livestock and can be used in the industrial production of a symbiotic preparation based on the strain Escherichia coli VL-613.
В настоящее время техническая микробиология является активно развивающимся научным направлением, использующим биотехнологические процессы при разработке и производстве широкого спектра биопрепаратов (вакцин, сывороток, диагностикумов, пробиотиков), биологически активных веществ (ферментов, антибиотиков, пребиотиков и др.), добавок к кормам (белков и аминокислот). Их применение в животноводстве и птицеводстве способствует повышению продуктивности животных и птицы, обеспечению ветеринарного благополучия хозяйств, гарантии качества, биологической и экологической безопасности как самой продукции, так и процесса ее производства.Currently, technical microbiology is an actively developing scientific field that uses biotechnological processes in the development and production of a wide range of biologics (vaccines, serums, diagnostics, probiotics), biologically active substances (enzymes, antibiotics, prebiotics, etc.), feed additives (proteins) and amino acids). Their use in animal husbandry and poultry helps to increase the productivity of animals and poultry, ensure the veterinary well-being of farms, guarantee the quality, biological and environmental safety of both the product itself and the process of its production.
В настоящее время активно развивается использование симбиотиков не только как антагонистов патогенной микрофлоры, но и как продуцента лизина - незаменимой аминокислоты, которая входит в состав структурных тканевых белков и белковых ферментов, является важным фактором биологически полноценного кормления, способствует улучшению пищеварения, играет важную роль в формировании костяка, повышении продуктивности сельскохозяйственных моногастричных животных (птицы и свиней). Такие симбиотики используются в качестве альтернативы дорогостоящему синтетическому лизину (моногидрохлорид лизина), в основном, импортного производства. Поэтому разработка новых препаратов такой группы и технологии их производства является актуальной проблемой.Currently, the use of symbiotics is actively developing not only as antagonists of pathogenic microflora, but also as a producer of lysine, an essential amino acid that is part of structural tissue proteins and protein enzymes, is an important factor in biologically complete feeding, helps improve digestion, plays an important role in the formation of skeleton, increasing the productivity of agricultural monogastric animals (birds and pigs). Such symbiotics are used as an alternative to expensive synthetic lysine (lysine monohydrochloride), mainly imported. Therefore, the development of new drugs of this group and the technology of their production is an urgent problem.
Симбиотики - продукты биотехнологического производства, содержащие живые микроорганизмы, продуцирующие в желудочно-кишечном тракте животных и птиц аминокислоты (в том числе незаменимые), ферменты, витамины и таким образом способствующие повышению продуктивности.Symbiotics are biotechnological products containing live microorganisms that produce amino acids (including essential ones), enzymes, vitamins in the gastrointestinal tract of animals and birds, and thus increase productivity.
Известен способ получения симбиотического препарата на основе Escherichia coli VL-613 (патент РФ №2450051 от 18.08.2010 г.), включающий засев штамма Escherichia coli VL-613, культивирование в жидкой питательной среде на основе перевара Хоттингера, концентрирование бактериальной суспензии с последующим смешиванием со стабилизатором, расфасовку и лиофилизацию препарата.A known method of producing a symbiotic preparation based on Escherichia coli VL-613 (RF patent No. 2450051 dated 08/18/2010), including inoculation of the strain Escherichia coli VL-613, cultivation in a liquid nutrient medium based on the Hottinger digest, concentration of the bacterial suspension followed by mixing with stabilizer, packaging and lyophilization of the drug.
В качестве ближайшего аналога (прототипа) выбрана технология получения симбиотического препарата «Пролизэр» на основе штамма Escherichia coli VL-613, при которой среда высушивания готовится по следующей прописи: концентрация основных компонентов имеет следующие значения: желатин - 2,0%; сахароза - 10,0%. В качестве растворителя - калий фосфатный буфер (Павленко И.В., Самуйленко А.Я., Еремец В.И. и др. Разработка технологии производства симбиотического препарата Пролизэр на основе Escherichia coli VL-613. Часть 2. Оптимизация условий сохранения жизнеспособности Escherichia coli VL-613 в симбиотическом препарате Пролизэр // Вестник Казанского технологического университета Т.16, - №9, - 2013, - стр. 176-181.)As the closest analogue (prototype), the technology for producing the Proliser symbiotic preparation based on the Escherichia coli strain VL-613 was chosen, in which the drying medium is prepared according to the following formula: the concentration of the main components has the following values: gelatin - 2.0%; sucrose - 10.0%. Potassium phosphate buffer is used as a solvent (Pavlenko IV, Samuilenko A.Ya., Yeremets V.I. et al. Development of the production technology of the Proliser symbiotic preparation based on Escherichia coli VL-613.
Однако в данном случае защитная среда высушивания не оптимальна по своему составу, что не позволяет получить стабильную по биологическим свойствам культуру, и срок хранения препарата «Пролизэр» составляет 9 месяцев.However, in this case, the protective drying environment is not optimal in composition, which does not allow to obtain a culture stable in biological properties, and the shelf life of the Prolizer preparation is 9 months.
Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является разработка защитной среды, оптимизированной для процесса сублимационного высушивания и длительного хранения, при получении симбиотического препарата на основе штамма Е. coli VL-613, что позволит получить более стабильный по биологическим свойствам препарат и увеличить срок его хранения.The problem to which the invention is directed, is to develop a protective environment that is optimized for the freeze-drying process and long-term storage, upon receipt of a symbiotic preparation based on E. coli strain VL-613, which will make it possible to obtain a drug that is more stable in biological properties and increase its life storage.
Техническим результатом изобретения является снижение потерь концентрации жизнеспособных эшерихий при сублимационном высушивании и повышение длительности сохранения биологических свойств симбиотического препарата до 12 месяцев.The technical result of the invention is to reduce the concentration loss of viable Escherichia during freeze-drying and increase the duration of preservation of the biological properties of the symbiotic preparation up to 12 months.
Указанная задача решается тем, что после культивирования штамма Escherichia coli VL-613 в жидкой питательной среде на основе перевара Хоттингера, концентрирования бактериальной суспензии, ее смешивают с защитной средой высушивания, состоящей из желатина - 1,5%; сахарозы - 10,0%; хитозана пищевого - 2%, в качестве растворителя - калий фосфатный буфер до 100%, с последующей расфасовкой и лиофилизацией препарата.This problem is solved in that after cultivation of the strain Escherichia coli VL-613 in a liquid nutrient medium based on the Hottinger reagent, concentration of the bacterial suspension, it is mixed with a protective drying medium consisting of gelatin - 1.5%; sucrose - 10.0%; food chitosan - 2%, as a solvent - potassium phosphate buffer up to 100%, followed by packaging and lyophilization of the drug.
Эффективность технологии получения симбиотических препаратов зависит не только от состава питательной среды, режима культивирования, но и от соотношения концентраций компонентов защитной среды высушивания.The effectiveness of the technology for producing symbiotic preparations depends not only on the composition of the nutrient medium, the cultivation mode, but also on the ratio of the concentrations of the components of the protective drying environment.
Известно, что повышению стабильности препаратов в процессе сушки и в процессе хранения способствуют различные соединения: это природные и синтетические высокомолекулярные соединения - полисахариды (декстран, декстрин, агароза), соли альгиновой кислоты, желатин и поливинилпирролидон. Они создают защитные барьеры для клеток в процессе сушки, после высушивания. В высоких концентрациях (исключая полисахариды) они ухудшают условия удаления влаги при высушивании. Тиомочевина и натриевые соли глутаминовой, лимонной и аскорбиновой кислот, легко окисляясь, блокируют свободнорадикальные и аммоно-карбонильные реакции в сухой биомассе.It is known that various compounds contribute to increasing the stability of preparations during drying and during storage: these are natural and synthetic high-molecular compounds - polysaccharides (dextran, dextrin, agarose), salts of alginic acid, gelatin and polyvinylpyrrolidone. They create protective barriers for cells during the drying process, after drying. In high concentrations (excluding polysaccharides), they worsen the conditions for moisture removal during drying. Thiourea and the sodium salts of glutamic, citric and ascorbic acids, easily oxidized, block free radical and ammono-carbonyl reactions in dry biomass.
Хитин и хитозан являются природными полимерами, относящиеся к природным полисахаридам.Chitin and chitosan are natural polymers related to natural polysaccharides.
Способ получения симбиотического препарата осуществляют следующим образом.A method of obtaining a symbiotic preparation is as follows.
На основе полученного нами патента РФ №2450051, который является оптимальным по питательной среде и процессу культивирования, была получена бактериальная культура Escherichia coli шт. VL-613 с общей концентрацией по окончанию культивирования 16-30 млрд. м.к./см3.On the basis of our patent of the Russian Federation No. 2450051, which is optimal for the nutrient medium and the cultivation process, a bacterial culture of Escherichia coli pcs was obtained. VL-613 with a total concentration at the end of the cultivation of 16-30 billion cubic meters / cm 3 .
Для этого в стерильный ферментер, который снабжен системой автоматического контроля и регулирования основных технологических параметров (температура, обороты мешалки, pH, рО2, еН), загружают жидкую питательную среду - бульон Хоттингера (приготовленный на основе перевара Хоттингера с содержанием 600-800 мг% аминного азота), приготовленную по следующей прописи, масс. %:To do this, in a sterile fermenter, which is equipped with an automatic control and regulation system for the main technological parameters (temperature, stirrer speed, pH, pO 2 , еН), a liquid nutrient medium, Hottinger broth (prepared on the basis of the Hottinger booster with a content of 600-800 mg%, is loaded amine nitrogen) prepared according to the following recipe, mass. %:
Готовая стерильная питательная среда должна содержать 160-180 мг% аминного азота и иметь pH 7,4-7,6 ед. pH.Ready sterile culture medium should contain 160-180 mg% of amine nitrogen and have a pH of 7.4-7.6 units. pH
В ферментер с питательной средой инокулируют 18-24-часовую матриксную культуру эшерихий (Escherichia coli шт. VL-613), выращенную в жидкой питательной среде по составу, аналогичному со средой культивирования, в соотношении 5-10% от объема питательной среды в ферментере, и культивируют при (37±1)°C в течение 4-7 часов. Общая концентрация эшерихий по окончанию культивирования составляет 16-30 млрд. м.к./см3.In a fermenter with a nutrient medium, an 18-24-hour matrix culture of Escherichia (Escherichia coli pcs. VL-613), grown in a liquid nutrient medium in a composition similar to the cultivation medium, in the ratio of 5-10% of the volume of the nutrient medium in the fermenter, is inoculated. and cultured at (37 ± 1) ° C for 4-7 hours. The total concentration of Escherichia at the end of cultivation is 16-30 billion cubic meters / cm 3 .
Полученную бактериальную культуру концентрируют, осадок бакмассы после концентрирования смешивают с защитной средой высушивания. После тщательного перемешивания бактериальной суспензии до концентрации 10-14 млрд./см Е. coli в жидком препарате ее расфасовывают по 2 или 4 см с соблюдением условий асептики в стерильные флаконы объемом 10 или 20 см и проводят сублимационное высушивание.The resulting bacterial culture is concentrated, the Bakmass residue after concentration is mixed with a protective drying medium. After thoroughly mixing the bacterial suspension to a concentration of 10-14 billion / cm E. coli in a liquid preparation, it is packaged in 2 or 4 cm, subject to aseptic conditions, in sterile 10 or 20 cm vials and freeze-drying is carried out.
Результаты испытания защитной среды высушивания с разными концентрациями компонентов представлены в табл. 1.The test results of the protective drying environment with different concentrations of the components are presented in table. one.
Анализируя полученные данные по оптимизации состава ЗС для процесса сушки эшерихий, можем считать опыт №7 (табл. 1) - лучшим.Analyzing the obtained data on the optimization of the composition of the GL for the drying process of Escherichia, we can consider experiment No. 7 (Table 1) - the best.
Защитная среда высушивания готовится по следующей прописи: желатин - 1,5%; сахароза - 10,0%; хитозан пищевой - 2%. В качестве растворителя - калий фосфатный буфер до 100%.The protective drying environment is prepared according to the following recipe: gelatin - 1.5%; sucrose - 10.0%; food chitosan - 2%. As a solvent - potassium phosphate buffer up to 100%.
Количество жизнеспособных (ж/с) эшерихий в процессе длительного хранения определяли через 1, 3, 6, 9 и 12 месяцев хранения (табл. 2).The number of viable (s / s) Escherichia during long-term storage was determined after 1, 3, 6, 9 and 12 months of storage (table. 2).
Пример 1. Контроль (защитная среда - прототип)Example 1. Control (protective environment - prototype)
Контрольная среда высушивания готовится по следующей прописи: концентрация основных компонентов имеет следующие значения: желатин - 2,0%; сахароза - 10,0%. В качестве растворителя - калий фосфатный буфер до 100%.The control drying environment is prepared according to the following recipe: the concentration of the main components has the following values: gelatin - 2.0%; sucrose - 10.0%. As a solvent - potassium phosphate buffer up to 100%.
Концентрация жизнеспособных клеток эшерихий перед сушкой 12,83 млрд/см3.The concentration of viable Escherichia cells before drying is 12.83 billion / cm 3 .
Пример 2. Разработанная защитная средаExample 2. The developed protective environment
Защитная среда высушивания готовится по следующей прописи: концентрация основных компонентов имеет следующие значения: желатин - 1,5%; сахароза - 10,0%; хитозан пищевой - 2%. В качестве растворителя - калий фосфатный буфер до 100%.The protective drying environment is prepared according to the following recipe: the concentration of the main components has the following values: gelatin - 1.5%; sucrose - 10.0%; food chitosan - 2%. As a solvent - potassium phosphate buffer up to 100%.
Концентрация жизнеспособных клеток эшерихий перед сушкой 12,4 млрд/см3.The concentration of viable Escherichia cells before drying is 12.4 billion / cm 3 .
В таблице 3 представлены данные по сохраняемости ж/с эшерихий на защитных средах высушивания: в прототипе (1), в предлагаемой среде (2) в процессе длительного хранения - с 1 по 12 месяц хранения.Table 3 presents the data on the shelf life of esherichia on protective drying media: in the prototype (1), in the proposed environment (2) during long-term storage - from 1 to 12 months of storage.
Из данных таблицы 3 можно сделать вывод, что на разработанной защитной среде Е. coli лучше переносят процесс сублимационного высушивания и длительного хранения. При этом срок хранения препарата увеличивается до 12 месяцев, а сохраняемость жизнеспособных клеток выше на 15,34%, чем у прототипа.From the data of table 3 it can be concluded that the process of freeze-drying and long-term storage is better tolerated in the developed protective environment of E. coli. In this case, the shelf life of the drug is increased to 12 months, and the shelf life of viable cells is 15.34% higher than that of the prototype.
На рисунке 1 показана зависимость выживаемости Е. coli в процессе длительного хранения препарата (срок наблюдения 12 месяцев).Figure 1 shows the survival of E. coli during long-term storage of the drug (
Преимущества защитной среды высушивания для получения симбиотического препарата по разработанной технологи:The advantages of a protective drying environment for obtaining a symbiotic preparation according to the developed technology:
1. Использование оптимизированной защитной среды высушивания позволяет повысить выживаемость Е. coli штамма VL-613 в процессе сублимационного высушивания и длительного хранения препарата на 15-17% по сравнению с прототипом.1. The use of an optimized protective drying environment allows to increase the survival of E. coli strain VL-613 during freeze-drying and long-term storage of the drug by 15-17% compared with the prototype.
2. Срок хранения симбиотического препарата Escherichia, coli штамма VL-613 составляет 12 месяцев.2. The shelf life of the symbiotic drug Escherichia, coli strain VL-613 is 12 months.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014109049/10A RU2571157C2 (en) | 2014-03-11 | 2014-03-11 | Protective drying medium for obtaining symbiotic preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014109049/10A RU2571157C2 (en) | 2014-03-11 | 2014-03-11 | Protective drying medium for obtaining symbiotic preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014109049A RU2014109049A (en) | 2015-09-20 |
| RU2571157C2 true RU2571157C2 (en) | 2015-12-20 |
Family
ID=54147442
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014109049/10A RU2571157C2 (en) | 2014-03-11 | 2014-03-11 | Protective drying medium for obtaining symbiotic preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2571157C2 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6979560B1 (en) * | 1998-12-30 | 2005-12-27 | Ajinomoto Co., Inc. | Eschericha bacteria overexpressing the yahn gene for feedback-insensitive amino acid production |
| RU2450051C1 (en) * | 2010-08-18 | 2012-05-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности РАСХН | METHOD OF PRODUCING Escherichia coli VL-613 BASED SYMBIOTIC PREPARATION |
-
2014
- 2014-03-11 RU RU2014109049/10A patent/RU2571157C2/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6979560B1 (en) * | 1998-12-30 | 2005-12-27 | Ajinomoto Co., Inc. | Eschericha bacteria overexpressing the yahn gene for feedback-insensitive amino acid production |
| RU2450051C1 (en) * | 2010-08-18 | 2012-05-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности РАСХН | METHOD OF PRODUCING Escherichia coli VL-613 BASED SYMBIOTIC PREPARATION |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ПАВЛЕНКО И.В. и др., Разработка технологии производства симбиотического препарата ПРОЛИЗЭР на основе Escherichia coli VL-613, оптимизация технологии культивирования основе Escherichia coli VL-613 для получения симбиотического препарата ПРОЛЛИЗЭР, Вестник Казанского Технологического Университета, Т16, N 9, 2013, стр.176-181. КУЗЬМИНА О.М., Исследование влияния состава защитной среды на выживаемость микроорганизмов в процессе криозамораживания, автореф. дис. на соискание ученой степени кандидата технических наук, М, 2010, стр.13-20. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2014109049A (en) | 2015-09-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20210002627A1 (en) | Systems and methods for growing a biofilm of probiotic bacteria on solid particles for colonization of bacteria in the gut | |
| RU2290829C2 (en) | Feed supplement for oligotrophy pigs | |
| CN114651915B (en) | A method and application for preparing postbiotics that improve immunity and promote growth | |
| CN103966118A (en) | Bacillusamyloliquefaciens and application thereof | |
| Aleksandrova et al. | Intestinal microbiocenosis and fodder digestibility in broiler chickens when using probiotics | |
| Wlazło et al. | Fermented rapeseed meal as a component of the mink diet (Neovison vison) modulating the gastrointestinal tract microbiota | |
| Fraga et al. | The use of Prevotella bryantii 3C5 for modulation of the ruminal environment in an ovine model | |
| RU2652832C1 (en) | Method of feeding farm birds | |
| CN107043724B (en) | A kind of Bacillus licheniformis and its separation method and application | |
| RU2280464C2 (en) | Method for preparing dry probiotic preparation "batsell" | |
| RU2571157C2 (en) | Protective drying medium for obtaining symbiotic preparation | |
| RU2649754C2 (en) | Method of manufacture of formolvaccine of hydrooxyaluminum polystammal against streptococcal diseases of large cattle | |
| RU2450051C1 (en) | METHOD OF PRODUCING Escherichia coli VL-613 BASED SYMBIOTIC PREPARATION | |
| RU2352136C2 (en) | Feed additive based on beet pulp and method of producing feed additive through fermentation of beet pulp | |
| RU2184774C1 (en) | Strain of bacterium bacillus subtilis used for preparing probiotic preparation designated for prophylaxis and treatment of gastroenteric diseases in animals, poultry and piscine | |
| KR101852336B1 (en) | A feed additive composition comprising a mixture of lactic acid bacteria cultured with Industrial medium for shrimp and manufacturing method of thereof | |
| RU2541454C1 (en) | Nutrient culture medium for swine erysipelas strain erysipelothrix rhuisipathie | |
| RU2493723C1 (en) | Biopreparation with probiotic activity for optimisation of assimilation of fodders intended for farm animals and birds | |
| RU2156062C1 (en) | Broiler chicken growing method | |
| RU2662949C1 (en) | Method for obtaining a native symbiotic preparation | |
| RU2764118C1 (en) | Polyvalent vaccine against salmonellosis of productive animals | |
| CN111685238A (en) | Sterile feed for large sterile mice and preparation method thereof | |
| RU2235772C1 (en) | Strain of bacterium bacillus pantothenticus 1-85 for using in granulated fodder | |
| RU2217493C2 (en) | Biopreparation- probiotic, method for its preparing and strain streptococcus faecium te-17 for preparing biopreparation-probiotic for animals and poultry | |
| RU2022008C1 (en) | Method of preparing of base for nutrient media for microorganism growing |