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BR122024002146A2 - Compostos inibidores da interação de menina-llm e forma cristalina destes - Google Patents
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Compostos inibidores da interação de menina-llm e forma cristalina destes Download PDF

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Abstract

A presente invenção está direcionada aos inibidores da interação de menina com LLM e proteínas de fusão de LLM, composições farmacêuticas contendo os mesmos, e seu uso no tratamento de câncer e outras doenças mediadas pela interação de menina-LLM.

Description

CAMPO TÉCNICO
[001] A presente invenção está direcionada aos inibidores da interação de menina com as proteínas de fusão LLM e LLM, composições farmacêuticas contendo os mesmos, e seu uso no tratamento de câncer e outras doenças mediadas pela interação de menina-LLM.
ANTECEDENTES
[002] A proteína de leucemia de linhagem mista (LLM) é uma histona metiltransferase que é clinicamente mutada em subgrupos clínica e biologicamente distintos de leucemia aguda. A leucemia de linhagem mista rearranjada (LLM-r) envolve translocações recorrentes do locus cromossômico 11q23 que induzem a uma forma agressiva de leucemia aguda com opções terapêuticas limitadas. Estas translocações alvejam o gene LLM criando uma proteína de fusão oncogênica que compreende o terminal amino de LLM fundido em estrutura com mais do que 60 parceiros de proteína de fusão diferentes. Menina, uma proteína nuclear, ubiquamente expressa, codificada pelo gene supressor de tumor de neoplasia endócrina múltipla tipo 1 (MEN1), tem uma elevada interação de ligação por afinidade com proteínas de fusão de LLM e é um cofator essencial de proteínas de fusão de LLM-r oncogênica (Yokoyama et al., 2005, Cell, 123:207-18; Cierpicki & Grembecka, 2014, Future Med. Chem., 6:447-462). A ruptura desta interação induz à inibição de crescimento seletiva e apoptose de células de leucemia de LLM-r ambas in vitro (Grembecka et al., 2012, Nat. Chem. Biol., 8:277-284) e in vivo (Yokoyama et al., 2005, op. cit.; Borkin et al., 2015, Cancer Cell, 27:589-602).
[003] O complexo de menina-LLM desempenha um papel no câncer de próstata avançado/resistente à castração, e um inibidor de menina-LLM mostrou reduzir o crescimento de tumor in vivo (Malik et al., 2015, Nat. Med., 21:344-352). Adicionalmente, um inibidor de menina-LLMmostrou realçar a proliferação de célula ß humana (Chamberlain et al., 2014, J. Clin. Invest., 124:4093-4101), suportando um papel para os inibidores da interação de menina-LLM no tratamento de diabetes (Yang et al., 2010, Proc Natl Acad Sci U S A., 107:20358 20363). A interação entre menina e LLM ou proteínas de fusão de LLM é um alvo atrativo para intervenção terapêutica, e existe uma necessidade de novos agentes que inibam a interação de menina-LLM para o tratamento de várias doenças ou condições, incluindo leucemia, outros cânceres e diabetes.
SUMÁRIO
[004] A presente invenção fornece inibidores de interação de menina-LLM, tal como um composto de Fórmula I: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que as varáveis constituintes são definidas aqui.
[005] A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula l, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável.
[006] A presente invenção também fornece formas de sal farmaceuticamente aceitável do compostos de Fórmula I.
[007] A presente invenção também fornece formas cristalinas dos compostos de Fórmula I.
[008] A presente invenção também fornece um método de inibição da interação entre menina e LLM compreendendo contatar a menina e LLM com um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[009] A presente invenção também fornece um método de tratamento de câncer em um paciente compreendendo administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0010] A presente invenção também fornece um método de tratamento de resistência à insulina, pré-diabetes, diabetes, risco de diabetes, ou hiperglicemia em um paciente que compreende administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0011] A figura 1 mostra um padrão de XRPD característico de N- etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida.
[0012] A figura 2 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido sesquifumárico N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida.
[0013] A figura 3 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido bis-metanossulfônico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida.
[0014] A figura 4 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido bis-clorídrico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida.
[0015] A figura 5 mostra um padrão de XRPD característico de 5- fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida.
[0016] A figura 6 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido bis-metanossulfônico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida.
[0017] A figura 7 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida.
[0018] A figura 8 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido bis-clorídrico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida.
[0019] A figura 9 mostra o padrão de XRPD característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina A, Forma B, Forma C+Forma A, Forma D, Forma, E, e Forma F.
[0020] A figura 10 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina A.
[0021] A figura 11 mostra um termograma de DSC característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina A.
[0022] A figura 12 mostra um termograma de TGA característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina A.
[0023] A figura 13 mostra um padrão de DVS característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina A.
[0024] A figura 14 mostra os padrões de (VT)-XRPD de temperatura variável característicos de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N- di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina A.
[0025] A figura 15 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina B.
[0026] A figura 16 mostra os padrões de XRPD característicos de sal de ácido fumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina B e Forma D isolada de uma preparação de aumento de escala como um xarope (traço superior; Forma B), uma massa úmida após filtragem a vácuo (traço intermediário; Forma B), e após secagem da massa úmida a 45oC durante a noite (traço inferior; Forma D).
[0027] A figura 17 mostra um termograma de DSC característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina D.
[0028] A figura 18 mostra um termograma de TGA característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina D.
[0029] A figura 19 mostra um termograma de DSC característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina F.
[0030] As figuras 20-21 mostram representações de ORTEP de sal de ácido bis-metanossulfônico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida com 50% de probabilidade de elipsoides térmicos.
[0031] A figura 22 mostra uma representação de ORTEP de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida com 50% de probabilidade de elipsoides térmicos.
[0032] A figura 23 mostra um padrão de XRPD característico de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, forma cristalina D.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[0033] A presente invenção fornece inibidores da interação de menina-LLM, tal como um composto de Fórmula I: R1-(Cy)m-(L)n I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: A, B, D, e E são cada qual independentemente selecionados de - C(RA1)(RA2)-, -C(RA1)(RA2)-C(RA1)(RA2)-, -C(RA1)(RA2)-O-, -C(RA1)(RA2)-NRA3-, - C(=O)-, -C(RA1)(RA2)-C(=O)-, e -N=C(NH2)- em que não mais do que um de A, B, D, e E é -C(RA1)(RA2)-O-, -C(RA1)(RA2)-NRA3-, -C(RA1)(RA2)- C(=O)-, -C(=O)-, ou -N=C(NH2)-; U é N ou CRU, em que RU é H, halo, CN, OH, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, amino, C1-4 alquil amino, ou C2-8 dialquilamino; W é N ou CRW, em que RW é H, halo, CN, OH, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, amino, C1-4 alquil amino, ou C2-8 dialquilamino; X é N ou CRX, em que RX é H, halo, CN, OH, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, amino, C1-4 alquil amino, ou C2-8 dialquilamino, em que quando X for N, o átomo de L que é diretamente ligado com X será diferente de N, O, ou S; L é selecionado de -C1-6 alquileno- e -(C1-4 alquileno)a-Q-(C1-4 alquileno)b-, em que o grupo C1-6 alquileno e qualquer grupo C1-4 alquileno do grupo -(C1-4 alquileno)a-Q-(C1-4 alquileno)b- é opcionalmente substituído com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, OH, C1-3 alquila, C1-3 alcóxi, C1-3 haloalquila, C1-3 haloalcóxi, amino, C1-3 alquilamino, e di(C1-3 alquil)amino; Q é -O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)-, -C(=O)NRq1-, -C(=O)O-, -OC(=O)NRq1-, -NRq1-, -NRq1C(=O)O-, -NRq1C(=O)NRq1-, -S(=O)2NRq1-, -C(=NRq2)-, ou -C(=NRq2)-NRq1-, em que cada Rq1é independentemente selecionado de H ou C1-6 alquila, e em que cada Rq2é independentemente selecionado de H, C1-6 alquila, e CN; Cy é uma ligação de C6-14 arila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 16 membros, ou grupo heterocicloalquila de 4 a 18 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy; cada RCyé independentemente selecionado de halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C6-10 arila, C3 10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, heterociloalquila de 4 a 10 membros, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, NRc1C(O)NRc1Rd1, NRc1S(O)Rb1, NRc1S(O)2Rb1, NRc1S(O)2NRc1Rd1, S(O)Rb1, S(O)NRc1Rd1, S(O)2Rb1, e S(O)2NRc1Rd1, em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, e heterocicloalquila de 4 a 10 membros são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, NRc1C(O)NRc1Rd1, NRc1S(O)Rb1, NRc1S(O)2Rb1, NRc1S(O)2NRc1Rd1, S(O)Rb1, S(O)NRc1Rd1, S(O)2Rb1, e S(O)2NRc1Rd1; R1é H, Cy1, halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, CN, NO2, ORa2, SRa2, C(O)Rb2, C(O)NRc2Rd2, C(O)ORa2, OC(O)Rb2, OC(O)NRc2Rd2, C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2Rd2, NRc2C(O)Rb2, NRc2C(O)ORa2, NRc2C(O)NRc2Rd2, NRc2S(O)Rb2, NRc2S(O)2Rb2, NRc2S(O)2NRc2Rd2, S(O)Rb2, S(O)NRc2Rd2, S(O)2Rb2 e S(O)2NRc2Rd2, em que a referida C1 6 alquila, C2-6 alquenila, e C2-6 alquinila são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, NO2, ORa2, SRa2, C(O)Rb2, C(O)NRc2Rd2, C(O)ORa2, OC(O)Rb2, OC(O)NRc2Rd2, C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2Rd2, NRc2C(O)Rb2, NRc2C(O)ORa2, NRc2C(O)NRc2Rd2, NRc2S(O)Rb2, NRc2S(O)2Rb2, NRc2S(O)2NRc2Rd2, S(O)Rb2, S(O)NRc2Rd2, S(O)2Rb2, e S(O)2NRc2Rd2; Y é O, S, CRY1RY2 ou NRY3, em que RY1, RY2, e RY3são cada qual independentemente selecionados de H e C1-4 alquil; Z é Cy2, halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, CN, NO2, ORa3, SRa3, C(O)Rb3, C(O)NRc3Rd3, C(O)ORa3, OC(O)Rb3, OC(O)NRc3Rd3, C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3Rd3, NRc3C(O)Rb3, NRc3C(O)ORa3, NRc3C(O)NRc3Rd3, NRc3S(O)Rb3, NRc3S(O)2Rb3, NRc3S(O)2NRc3Rd3, S(O)Rb3, S(O)NRc3Rd3, S(O)2Rb3, S(O)2NRc3Rd3, e P(O)Rc3Rd3 em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, e C2-6 alquinila são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de Cy2, halo, CN, NO2, CN, NO2, ORa3, SRa3, C(O)Rb3, C(O)NRc3Rd3, C(O)ORa3, OC(O)Rb3, OC(O)NRc3Rd3, C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3Rd3, NRc3C(O)Rb3, NRc3C(O)ORa3, NRc3C(O)NRc3Rd3, NRc3S(O)Rb3, NRc3S(O)2Rb3, NRc3S(O)2NRc3Rd3, S(O)Rb3, S(O)NRc3Rd3, S(O)2Rb3, e S(O)2NRc3Rd3; cada R2 e R3é independentemente selecionado de H, halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, CN, NO2, ORa4, SRa4, C(O)Rb4, C(O)NRc4Rd4, C(O)ORa4, OC(O)Rb4, OC(O)NRc4Rd4, C(=NRe4)NRc4Rd4, NRc4C(=NRe4)NRc4Rd4, NRc4Rd4, NRc4C(O)Rb4, NRc4C(O)ORa4, NRc4C(O)NRc4Rd4, NRc4S(O)Rb4, NRc4S(O)2Rb4, NRc4S(O)2NRc4Rd4, S(O)Rb4, S(O)NRc4Rd4, S(O)2Rb4, e S(O)2NRc4Rd4, em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, e C2-6 alquinila são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, NO2, ORa4, SRa4, C(O)Rb4, C(O)NRc4Rd4, C(O)ORa4, OC(O)Rb4, C(=NRe4)NRc4Rd4, NRc4C(=NRe4)NRc4Rd4, NRc4Rd4, NRc4C(O)ORa4, NRc4C(O)NRc4Rd4, NRc4S(O)Rb4, NRc4S(O)2NRc4Rd4, S(O)Rb4, S(O)NRc4Rd4, S(O)2Rb4, cada RA1é independentemente selecionado de H, halo, C1-4 alquila, C1 4 alcóxi, C1-4 haloalquila, C1-4 haloalcóxi, amino, C1-4 alquilamino, C2-8 dialquilamino, CN, NO2, e OH; cada RA2é independentemente selecionado de H, halo, C1-4 alquila, C1 4 alcóxi, C1-4 haloalquila, C1-4 haloalcóxi, amino, C1-4 alquilamino, C2-8 dialquilamino, CN, NO2, e OH; cada RA3é independentemente selecionado de H, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalquila, C(O)Rz, e C(O)ORz, em que a referida C1-4 alquila é opcionalmente substituída por fenila, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalcóxi, CN, NO2, ou OH; Rzé H, C1-4 alquila, ou fenila; cada Cy1é independentemente selecionado de C6-14 arila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 16 membros, e heterocicloalquila de 4 a 18 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy1; cada Cy2é independentemente selecionado de C6-14 arila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 16 membros, e heterocicloalquila de 4 a 18 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy2; cada RCy1 e RCy2é independentemente selecionado de halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, fenila, C3 7 cicloalquila, heteroarila de 5 a 6 membros, e heterocicloalquila de 4 a 7 membros, CN, NO2, ORa5, SRa5, C(O)Rb5, C(O)NRc5Rd5, C(O)ORa5, OC(O)Rb5, OC(O)NRc5Rd5, C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5Rd5, NRc5C(O)Rb5, NRc5C(O)ORa5, NRc5C(O)NRc5Rd5, NRc5S(O)Rb5, NRc5S(O)2Rb5, NRc5S(O)2NRc5Rd5, S(O)Rb5, S(O)NRc5Rd5, S(O)2Rb5, e S(O)2NRc5Rd5, em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, fenila, C3-7 cicloalquila, heteroarila de 5 a 6 membros, e heterocicloalquila de 4 a 7 membros são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de CN, NO2, ORa5, SRa5, C(O)Rb5, C(O)NRc5Rd5, C(O)ORa5, OC(O)Rb5, OC(O)NRc5Rd5, C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5Rd5, NRc5C(O)Rb5, NRc5C(O)ORa5, NRc5C(O)NRc5Rd5, NRc5S(O)Rb5, NRc5S(O)2Rb5, NRc5S(O)2NRc5Rd5, S(O)Rb5, S(O)NRc5Rd5, S(O)2Rb5, e S(O)2NRc5Rd5; cada Ra1, Rb1, Rc1, Rd1, Ra2, Rb2, Rc2, Rd2, Ra3, Rb3, Rc3, Rd3, Ra4, Rb4, Rc4, Rd4, Ra5, Rb5, Rc5, e Rd5é independentemente selecionado de H, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, heterociloalquila de 4 a 10 membros, C6-10 aril-C1-6 alquila, C3-10 cicloalquil-C1-6 alquila, (heteroarila de 5 a 10 membros)-C1-6 alquila, e (heterocicloalquila de 4 a 10 membros)-C1-6 alquila, em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2 6 alquinila, C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, heterociloalquila de 4 a 10 membros, C6-10 aril-C1-6 alquila, C3-10 cicloalquil-C1-6 alquila, (heteroarila de 5 a 10 membros)-C1-6 alquila, e (heterocicloalquila de 4 a 10 membros)-C1-6 alquila são cada qual opcionalmente substituída com 1, 2, 3, 4, ou 5 substituintes independentemente selecionados de Rg; cada Re1, Re2, Re3, Re4, e Re5é independentemente selecionado de H, C1-4 alquila, e CN; cada Rgé independentemente selecionado do grupo que consiste em OH, NO2, CN, halo, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-4 haloalquila, C1-6 alcóxi, C1-6 haloalcóxi, ciano-C1-3 alquila, HO-C1-3 alquila, amino, C1-6 alquilamino, di(C1-6 alquil)amino, tiol, C1-6 alquiltio, C1-6 alquilsulfinila, C1-6 alquilsulfonila, carbóxi, aminocarbonila, C1-6 alquilcarbonila, e C1-6 alcoxicarbonila; n é 0 ou 1; m é 0 ou 1; p é 0, 1, 2, ou 3; q é 0, 1, ou 2; a é 0 ou 1; e b é 0 ou 1, em que qualquer grupo cicloalquila ou heterocicloalquila é opcionalmente também substituído por 1 ou 2 grupos oxo.
[0034] Em algumas modalidades, Y é O.
[0035] Em algumas modalidades, Y é NRY3. Em algumas modalidades, Y é NH.
[0036] Em algumas modalidades, U é CRU. Em algumas modalidades, U é CH.
[0037] Em algumas modalidades, W é N.
[0038] Em algumas modalidades, W é CRW. Em algumas modalidades, W é CH.
[0039] Em algumas modalidades, X é N.
[0040] Em algumas modalidades, X é CRX. Em algumas modalidades, X é selecionado de CH ou CNH2.
[0041] Em algumas modalidades, A, B, D, e E são cada qual independentemente selecionados de —C(RA1)(RA2)—, —C(RA1)(RA2)—C(RA1)(RA2)—, -C(RA1)(RA2)-O-, - C(RA1)(RA2)-C(=O)-, e —C(=O)—, em que não mais do que um de A, B, D, e E é -C(RA1)(RA2)-O-, -C(RA1)(RA2)-C(=O)-, ou -C(=O)-.
[0042] Em algumas modalidades, A, B, D, e E são cada qual independentemente selecionados de -C(RA1)(RA2)-, -C(RA1)(RA2)- C(RA1)(RA2)-, e -C(RA1)(RA2)-O-, em que não mais do que um de A, B, D, e E é -C(RA1)(RA2)-O-.
[0043] Em algumas modalidades, A, B, D, e E são cada qual independentemente selecionados de -C(RA1)(RA2)- ou -C(RA1)(RA2)- C(RA1)(RA2)-.
[0044] Em algumas modalidades, cada RA1 e RA2 são independentemente selecionados de H, OH, e NH2.
[0045] Em algumas modalidades, A, B, D, e E são cada qual independentemente selecionados de -CH2-, -CH2-CH2-, e -CH2O-.
[0046] Em algumas modalidades, A, B, D, e E são cada qual independentemente selecionados de -CH2- ou -CH2-CH2-.
[0047] Em algumas modalidades, a porção espiro representada pela fórmula abaixo: em que e e f indicam pontos de ligação ao restante da molécula, é selecionada de:
[0048] Em algumas modalidades, a porção espiro representada pela fórmula abaixo: em que e e f indicam pontos de ligação ao restante da molécula, éselecionada de:
[0049] Em algumas modalidades, a porção espiro representada pela fórmula abaixo: em que e e f indicam pontos de ligação ao restante da molécula, é selecionada de:
[0050] Em algumas modalidades, L é selecionado de -C1-6 alquileno- opcionalmente substituído com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, OH, C1-3 alquila, C1-3 alcóxi, C1-3 haloalquila, C1-3 haloalcóxi, amino, C1-3 alquilamino, e di(C1-3 alquil)amino.
[0051] Em algumas modalidades, L é selecionado de metileno, etileno, e -CH2-CH(OH)-.
[0052] Em algumas modalidades, L é metileno.
[0053] Em algumas modalidades, L é selecionado de -(C1-4 alquileno)a-Q-(Ci—4 alquileno)b-, em que qualquer grupo C1-4 alquileno do grupo -(C1-4 alquileno)a-Q-(C1-4 alquileno)b-é opcionalmente substituído com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, OH, C1-3 alquila, C1-3 alcóxi, C1-3 haloalquila, C1-3 haloalcóxi, amino, C1-3 alquilamino, e di(C1-3 alquil)amino.
[0054] Em algumas modalidades, a é 1.
[0055] Em algumas modalidades, a é 0.
[0056] Em algumas modalidades, b é 1.
[0057] Em algumas modalidades, b é 0.
[0058] Em algumas modalidades, a e b são cada qual 1.
[0059] Em algumas modalidades, a e b são cada qual 0.
[0060] Em algumas modalidades, a é 1 e b é 0.
[0061] Em algumas modalidades, a é 0 e b é 1.
[0062] Em algumas modalidades, L é selecionado de -C(O)-CH2-, - C(O)-CH2-CH2-, C(O), -NH-CH2-, NH, -C(O)-CH(NH2)-, -NH-CH(CH3)-, - N(CH3)-C(O)-, N(CH3)-CH2-, -CH2-CH2-O-, e -C(O)-NH-.
[0063] Em algumas modalidades, Cy é uma ligação de fenila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, ou um grupo heterocicloalquila de 4 a 9 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy.
[0064] Em algumas modalidades, Cy é uma ligação de fenila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, ou um grupo heterocicloalquila de 4 a 9 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy.
[0065] Em algumas modalidades, Cy é uma ligação de grupo tendo a fórmula: opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy.
[0066] Em algumas modalidades, Cy é uma ligação de grupo tendo a fórmula:
[0067] Em algumas modalidades, Z é Cy2 ou C(O)NRc3Rd3.
[0068] Em algumas modalidades, cada Cy2é independentemente selecionado de C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, e heterociloalquila de 4 a 10 membros, cada uma das quais é opcionalmente substituída com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy2.
[0069] Em algumas modalidades, cada Cy2é independentemente selecionado de fenila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 6 membros, e heterocicloalquila de 4 a 6 membros, cada uma das quais é opcionalmente substituída com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy2.
[0070] Em algumas modalidades, n é 0.
[0071] Em algumas modalidades, n é 1.
[0072] Em algumas modalidades, m é 0.
[0073] Em algumas modalidades, m é 1.
[0074] Em algumas modalidades, p é 0.
[0075] Em algumas modalidades, p é 1.
[0076] Em algumas modalidades, q é 0.
[0077] Em algumas modalidades, q é 1.
[0078] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é um composto de Fórmula IIa, IIb, IIIa, ou IIIb: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0079] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, é um composto de Fórmula IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, ou IVf: IVf, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0080] Em algumas modalidades, o composto ou sal farmaceuticamente aceitável do composto de Fórmula I fornecido aqui é cristalino. Como usado aqui, "cristalino" ou "forma cristalina" destina- se a referir-se a uma configuração de treliça de uma substância cristalina.
[0081] Diferentes formas cristalinas da mesma substância tipicamente têm diferentes treliças cristalinas (por exemplo, células unitárias) que são atribuídas a diferentes propriedades físicas que são características de cada uma das formas cristalinas. Em alguns casos, diferentes configurações de treliça têm diferente teor de água ou solvente.
[0082] Diferentes formas cristalinas do mesmo composto ou sal podem ter diferentes propriedades de volume relacionando-se, por exemplo à higroscopicidade, solubilidade, estabilidade, e similares. Formas com pontos de fusão elevados frequentemente têm estabilidade termodinâmica que é vantajosa no prolongamento da vidade prateleira de formulações de fármaco contend a forma sólida. Formas com pontos de fusão inferiores frequentemente são menos termodinamicamente estáveis, porém são vantajosas pelo fato de que têm solubilidade em água aumentada, traduzindo-se para biodisponibilidade de fármaco aumentada. Formas que são fracamente higroscópicas são desejáveis por sua estabilidade ao calor e umidade e são resistentes à degradação durante longa armazenagem.
[0083] As diferentes formas cristalinas podem ser identificadas por métodos de caracterização de estado sólido tal como difração de pó de raio X (XRPD). Outros métodos de caracterização tais como calorimetria de varredura diferencial (DSC), análise termogravimétrica (TGA), sorção dinâmica de vapor (DVS), e similares também ajudam a identificar a forma, bem como ajudar a determinar a estabilidade e teor de solvente/água.
[0084] Um padrão de XRPD de reflexos (picos) é tipicamente considerado uma impressão digital de uma forma cristalina particular. É bem conhecido que as intensidades relativas dos picos de XRPD podem amplamente variar dependendo, inter alia, da técnica de preparação de amostra, distribuição por tamanho de cristal, vários filtros usados, do procedimento de montagem de amostra, e do instrumento particular empregado. Em alguns casos, novos picos podem ser observados ou picos existentes podem desaparecer, dependendo do tipo do intrumento ou das configurações. Como usado aqui, o termo "pico" refere-se a um reflexo tendo uma altura/intensidade de pico de pelo menos cerca de 5% da altura/intensidade de pico máximo. Além disso, a variação de instrumento e outros fatores podem afetar os valores 2-theta. Desse modo, as designações de pico, tais como aquelas reportadas aqui, podem variar em mais ou menos cerca de 0,2° (2-theta), e o termo "substancialmente" e "cerca de" como usado no contexto de XRPD aqui destina-se abranger as variações acima mencionadas.
[0085] Do mesmo modo, as leituras de temperatura em conexão com DSC, TGA, ou outros experimentos térmicos podem variar de cerca de ±3°C dependendo do instrumento, configurações particulares, preparação de amostra, etc. Consequentemente, a forma cristalina reportada aqui tendo um termograma de DSC "substancialmente" como mostrado em qualquer uma das figuras ou o termo "cerca de"é entendido acomodar tal variação.
[0086] A presente invenção fornece formas cristalinas de certos compostos, ou sais dos mesmos. Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I é 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0087] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece a 5- fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida cristalina caracterizada, por exemplo, por um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 5.
[0088] Em algumas modalidades, 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida cristalina tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 6,2o, cerca de 8,3°, cerca de 16,1o, cerca de 16,6o, cerca de 17,3o, cerca de 19,0o, cerca de 23,5o, cerca de 25,3o, e cerca de 26,9o.
[0089] Em algumas modalidades, 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida cristalina tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 6,2o, cerca de 8,3°, cerca de 16,1o, cerca de 16,6o, e cerca de 19,0o.
[0090] Em algumas modalidades, a 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida pode ser isolada como um sal de ácido bis-metanossulfônico do qual pode ser cristalino tendo um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 6.
[0091] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido bis-metanossulfônico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 5,6°, cerca de 8,8°, cerca de 10,2°, cerca de 12,6o, cerca de 13,8o, cerca de 15,3o, cerca de 16,2o, cerca de 16,8o, cerca de 17,6o, cerca de 18,6o, cerca de 20,3o, cerca de 20,9o, cerca de 21,2o, cerca de 22,7o, e cerca de 24,6o.
[0092] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido bis-metanossulfônico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 5,6°, cerca de 8,8°, cerca de 10,2°, cerca de 12,6o, cerca de 13,8o, cerca de 15,3o, cerca de 16,2o, cerca de 16,8o, cerca de 17,6o, cerca de 18,6o, cerca de 20,3o.
[0093] Em algumas modalidades, a 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida pode ser isolada como um sal de ácido bis-clorídrico do qual pode ser cristalino tendo um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 8.
[0094] Em algumas modalidades, a 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida pode ser isolada como um sal de ácido fumárico, tal sal de ácido sesquifumárico que pode ser cristalino. O sal de ácido sesquifumárico cristalino pode ser hidratado (por exemplo, um mono-hidrato), solvado (por exemplo, contém solvente diferente de água), ou anidroso e não solvatado. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é substancialmente anidrosa ou substancialmente não solvatada. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é hidratada ou solvatada. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é hidratada. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é um mono-hidrato.
[0095] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 7.
[0096] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 2,9o, cerca de 5,8o, cerca de 8,7o, cerca de 13,2o, cerca de 16,0o, cerca de 17,6o, cerca de 19,1o, cerca de 20,3°, cerca de 20,4°, cerca de 20,8o, cerca de 21,8o, cerca de 22,9o, cerca de 23,0°, cerca de 23,3o, cerca de 24,9o, e cerca de 26,0o.
[0097] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 2,9o, cerca de 5,8o, cerca de 8,7o, cerca de 13,2o, cerca de 16,0o, cerca de 17,6o, cerca de 19,1o, cerca de 20,3°, cerca de 20,4°, cerca de 20,8o, cerca de 21,8o, cerca de 23,0°, cerca de 23,3o, cerca de 24,9o, e cerca de 26,0o.
[0098] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 2,9o, cerca de 5,8o, cerca de 8,7o, cerca de 13,2o, cerca de 16,0o, cerca de 19,1o, cerca de 21,8o, cerca de 24,9o, e cerca de 26,0o.
[0099] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 2,9o, cerca de 5,8o, cerca de 8,7o, cerca de 13,2o, cerca de 16,0o, cerca de 19,1o, e cerca de 21,8o.
[00100] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é selecionado da forma cristalina A, forma cristalina B, forma cristalina C, forma cristalina D, forma cristalina E, e forma cristalina F.
[00101] Em algumas modalidades, a forma cristalina A do sal de ácido sesquifumárico de mono-hidrato de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2- ((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 10.
[00102] Em algumas modalidades, a forma cristalina A do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 5.8o, cerca de 13.2o, cerca de 15,9o, cerca de 19.2o, cerca de 20,3o, cerca de 21.8o, cerca de 23.0o, e cerca de 23.3o.
[00103] Em algumas modalidades, a forma cristalina A do mono- hidrato de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2- ((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é caracterizada por um termograma de DSC tendo um pico endotérmico em cerca de 183oC.
[00104] Em algumas modalidades, a forma cristalina A do mono- hidrato de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2- ((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é caracterizado por uma análise termográfica (TGA) substancialmente como mostrado na figura 12.
[00105] Em algumas modalidades, a forma cristalina A do mono- hidrato de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2- ((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é caracterizada por análise de sorção de vapor dinâmico substancialmente como mostrado na figura 13.
[00106] Em algumas modalidades, a forma cristalina B do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 15.
[00107] Em algumas modalidades, a forma cristalina B do sal de ácido sesquifumárico 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 6,2o, cerca de 7,8o, cerca de 8,5o, cerca de 10,9o, cerca de 12,6o, cerca de 13,2o, cerca de 13,5o, cerca de 16,1o, cerca de 19,0o, cerca de 19,3o, cerca de 21,2o, cerca de 21,4o, e cerca de 21,6o.
[00108] Em algumas modalidades, a forma cristalina D do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 23.
[00109] Em algumas modalidades, a forma cristalina D do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 7,2o, cerca de 8,5o, cerca de 11,8o, cerca de 14,5o, cerca de 16,0o, cerca de 17,4o, cerca de 19,3o, cerca de 19,7o, e cerca de 21,8o.
[00110] Em algumas modalidades, a forma cristalina D do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é caracterizada por um termograma de DSC tendo um pico endotérmico em cerca de 167 oC.
[00111] Em algumas modalidades, a forma cristalina D do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é caracterizada por uma análise termográfica (TGA) substancialmente como mostrado na figura 18.
[00112] Em algumas modalidades, a forma cristalina E do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 9.
[00113] Em algumas modalidades, a forma cristalina F do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 9.
[00114] Em algumas modalidades, a forma cristalina F do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é caracterizada por uma análise termográfica (TGA) substancialmente como mostrado na figura 18.
[00115] Em algumas modalidades, a 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é um sal de ácido benzenossulfônico (besilato) que pode ser cristalino.
[00116] Em algumas modalidades, a 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é um sal de ácido naftalenodissulfônico (napadisilato) que pode ser cristalino. Em algumas modalidades, a 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é um sal de ácido naftaleno-1,5- dissulfônico que pode ser cristalino.
[00117] Em algumas modalidades, a 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida é um sal de ácido toluenossulfônico (tosilato) que pode ser cristalino.
[00118] A presente invenção também fornece formas cristalinas do composto N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00119] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece a forma cristalina de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida, tendo, por exemplo, um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 1.
[00120] Em algumas modalidades, a forma cristalina de N-etil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- theta, selecionados de cerca de 9,7o, cerca de 11,6o, cerca de 12,6o, cerca de 16,6o, cerca de 17,5o, cerca de 18,8o, cerca de 19,2o, cerca de 19,8o, cerca de 21,0o, e cerca de 25,3o.
[00121] Em algumas modalidades, a N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida pode ser isolada como um sal de ácido fumárico, tal como um sal de ácido sesquifumárico, que pode ser cristalino. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é substancialmente anidrosa. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é hidratada ou solvatada. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é hidratada. Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico é um mono-hidrato.
[00122] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 2.
[00123] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- theta, selecionados de cerca de 5,8o, cerca de 8,7o, cerca de 13,2o, cerca de 16,0o, cerca de 17,4o, cerca de 17,6o, cerca de 19,1o, cerca de 20,3o, cerca de 21,8o, cerca de 23,0o, cerca de 23,3o, cerca de 24,9o, e cerca de 26,0o.
[00124] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- theta, selecionados de cerca de 5,8o, cerca de 8,7o, cerca de 13,2o, cerca de 16,0o, cerca de 17,4o, cerca de 17,6o, cerca de 19,1o, cerca de 20,3o, cerca de 21,8o, e cerca de 23,0o.
[00125] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido sesquifumárico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- theta, selecionados de cerca de 5,8o, cerca de 8,7o, cerca de 13,2o, cerca de 16,0o, cerca de 17,4o, cerca de 17,6o, e cerca de 19,1o.
[00126] Em algumas modalidades, a N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida é um sal de ácido bis- metanossulfônico de que pode ser cristalino, tendo, por exemplo, um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 3.
[00127] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido bis-metanossulfônico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- theta, selecionados de cerca de 5,6o, cerca de 11,0o, cerca de 13,3o, cerca de 16,7o, cerca de 20,1o, cerca de 20,9o, cerca de 22,1o, cerca de 23,6o, cerca de 24,9o, e cerca de 29,6o.
[00128] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido bis-metanossulfônico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um XRPD peak, em termos de 2- theta, selecionados de cerca de 5,6o e cerca de 16,7o.
[00129] Em algumas modalidades, ae N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida é um sal de ácido bis- clorídrico de que pode ser cristalino, tendo, por exemplo, um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na figura 4.
[00130] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido bis-clorídrico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um, tem pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- theta, selecionados de cerca de 4,7o, cerca de 10,7o, cerca de 13,4o, cerca de 15,9o, cerca de 17,0o, cerca de 19,5o, cerca de 20,1o, cerca de 23,8o, cerca de 25,8o, e cerca de 28,1o.
[00131] Em algumas modalidades, a forma cristalina do sal de ácido bis-clorídrico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um ou dois picos de XRPD, em termos de 2-theta, selecionados de cerca de 4,7o, cerca de 17,0o, e cerca de 19,5o.
[00132] É apreciado que certas características da invenção, que são, para clareza, descritas no contexto de modalidades separadas, podem também ser fornecidas em combinação em uma única modalidade.
[00133] Contrariamente, várias características da invenção que são, para brevidade, descritas no contexto de uma única modalidade, podem ser fornecidas separadamente ou em qualquer subcombinação adequada.
[00134] Como usado aqui, a frase "opcionalmente substituído"significa não substituído ou substituído. Como usado aqui, o termo "substituído"significa que o átomo de hidrogênio é removido e substituído por um substituinte. O termo "substituído"pode também significar que dois átomos de hidrogênio são removidos por um substituinte divalente tal como um grupo oxo ou sulfeto. Deve-se entender que a substituição em um determinado átomo é limitada por valência.
[00135] Em vários lugares na presente especificação, substituintes de compostos da invenção são descritos em grupos ou em faixas. Pretende-se especifiamente que a invenção inclua cada e qualquer subcombinação individual dos membros de tais grupos e faixas. Por exemplo, o termo "C1-6 alquila"é especificamente pretendido descrever individualmente metila, etila, C3 alquila, C4 alquila, C5 alquila, e C6 alquila.
[00136] O termo "membros z" (onde z é um número inteiro) tipicamente descreve o número de átomos de formação em uma porção onde o número de átomos de formação de anel é z. Por exemplo, piperidinila é um exemplo de um anel heterocicloalquila de 6 membros, pirazolila é um exemplo de um anel heteroarila de 5 membros, piridila é um exemplo de um anel heteroarila de 6 membros, e 1, 2, 3, 4-tetra- hidro-naftaleno é um exemplo de grupo cicloalquila de 10 membros.
[00137] Em vários lugares na presente especificação, substituintes de ligação são descritos. Especificamente pretende-se que cada substituinte de ligação inclua tanto as formas dianteiras quanto retrógadas do substituinte de ligação. Por exemplo, -NR(CR’R’’)n- inclui tanto -NR(CR’R’’)n- quanto -(CR’R’’)nNR-. Onde a estrutura claramente requer um grupo de ligação, as variáveis Markush listadas para aquele grupo são entendidas ser grupos de ligação. Por exemplo, se a estrutura requerer um grupo de ligação e a definição de grupo Markush para tal variável listar "alquila" ou "arila", então entende-se que a "alquila" ou "arila" representa um grupo de ligação alquileno ou grupo arileno, respectivamente.
[00138] Em vários lugares na presente especificação vários anéis arila, heteroarila, cicloalquila, e heterocicloalquila são descritos. A menos que de outro modo especificado, estes anéis podem ser ligados ao restante da molécula em qualquer membro de anel quando permitido pela valência. Por exemplo, o termo "um anel piridina" ou "piridinila" pode referir-se a um anel piridin-2-ila, piridin-3-ila, ou piridin-4-ila.
[00139] Para compostos da invenção em que uma variável aparece mais do que uma vez, cada variável pode ser uma porção diferente independentemente selecionada do grupo que define a variável. Por exemplo, onde a estrutura é descrita tendo dois grupos R que estão simultaneamente presentes no mesmo composto, os dois grupos R podem representar diferentes porções independentemente selecionadas do grupo definido para R.
[00140] Como usado aqui, o termo "Ci-j alquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo hidrocarboneto saturado que pode ser de cadeia linear ou ramificada, tendo carbonos i a j. Em algumas modalidades, o grupo alquila contém de 1 a 6 átomos de carbono, ou de 1 a 4 átomos de carbono, ou de 1 a 3 átomos de carbono. Exemplos de porções alquila incluem, porém não estão limitados a, grupos químicos tais como metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, s-butila, e t-butila. Em algumas modalidades, onde um grupo alquila é um grupo de ligação, pode ser referido como "Ci-j alquileno."
[00141] Como usado aqui, o termo "Ci-j alcóxi,"empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -O-alquila, em que o grupo alquila tem carbonos i a j. Exemplos de grupos alcóxi incluem metóxi, etóxi, e propóxi (por exemplo, n-propóxi e isopropóxi). Em algumas modalidades, o grupo alquila tem de 1 a 3 átomos de carbono.
[00142] Como usado aqui, "Ci-j alquenila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo hidrocarboneto insaturado tendo uma ou mais ligações duplas de carbono-carbono e tendo carbonos i a j. Em algumas modalidades, a porção alquenila contém de 2 a 6 ou 2 a 4 átomos de carbono. Exemplos de grupos alquenila incluem, porém não estão limitados à etenila, n-propenila, isopropenila, n-butenila, sec-butenila, e similares.
[00143] Como usado aqui, "Ci-j alquinila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo hidrocarboneto insaturado tendo uma ou mais ligações triplas de carbono-carbono e tendo carbonos i a j. Exemplos de grupos alquinila incluem, porém não estão limitados à etinila, propin-1-ila, propin-2-ila, e similares. Em algumas modalidades, a porção alquinila contém de 2 a 6 ou 2 a 4 átomos de carbono.
[00144] Como usado aqui, o termo "Ci-j alquilamino," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -NH(alquil), em que o grupo alquila tem átomos de carbono de i a j.
[00145] Em algumas modalidades, o grupo alquila tem 1 a 6 ou 1 a 4 átomos de carbono.
[00146] Como usado aqui, o termo "di-Ci-j-alquilamino," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -N(alquil)2, em que cada dos dois grupos alquila tem, independentemente, átomos de carbono de i a j. Em algumas modalidades, cada grupo alquila tem de 1 a 6 ou 1 a 4 átomos de carbono. Em algumas modalidades, o grupo dialquilamino é -N(Ci-4 alquil)2 tal como, por exemplo, dimetilamino ou dietilamino.
[00147] Como usado aqui, o termo "Ci-j alquiltio," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -S-alquila, em que o grupo alquila tem átomos de carbono de i a j. Em algumas modalidades, o grupo alquila has 1 a 6 ou 1 a 4 átomos de carbono. Em algumas modalidades, o grupo alquiltio é C1-4 alquiltio tal como, por exemplo, metiltio ou etiltio.
[00148] Como usado aqui, o termo "tiol," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a -SH.
[00149] Como usado aqui, o termo "amino," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula - NH2.
[00150] Como usado aqui, "Ci-j haloalcóxi," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula - O-haloalquil tendo átomos de carbono de i a j. Um exemplo de grupo haloalcóxi é OCF3. Um grupo haloalcóxi adicional exemplar é OCHF2. Em algumas modalidades, o grupo haloalcóxi é fluorado apenas. Em algumas modalidades, o grupo alquila tem de 1 a 6 ou 1 a 4 átomos de carbono.
[00151] Em algumas modalidades, o grupo haloalcóxi é C1-4 haloalcoxi.
[00152] Como usado aqui, o termo "halo," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um átomo de halogênio selecionado de F, Cl, I ou Br. Em algumas modalidades, "halo" refere- se a um átomo de halogênio selecionado de F, Cl, ou Br. Em algumas modalidades, o substituinte de halo é F.
[00153] Como usado aqui, o termo "Ci-j haloalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo alquila tendo tendo de um átomo de halogênio a 2s+1 átomos de halogênio que podem ser iguais ou diferentes, onde "s"é o número de átomos de carbono no grupo alquila, em que o grupo alquila tem átomos de carbono de i a j. Em algumas modalidades, o grupo haloalquila é fluorado apenas. Em algumas modalidades, o grupo haloalquila é fluorometila, difluorometila, ou trifluorometila. Em algumas modalidades, o grupo haloalquila é trifluorometila. Em algumas modalidades, o grupo haloalquila é 2,2,2-trifluoroetila. Em algumas modalidades, o grupo haloalquila é 2,2-difluoroetila. Em algumas modalidades, o grupo haloalquila tem de 1 a 6 ou 1 a 4 átomos de carbono.
[00154] Como usado aqui, "Ci-j cianoalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula CN-(Ci-j alquil)-.
[00155] Como usado aqui, o termo "arila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um hidrocarboneto monocíclico ou policíclico (por exemplo, tendo 2, 3 ou 4 anéis fundidos), tal como, porém não limitado à fenila, 1-naftila, 2-naftila, antracenila, fenantrenila, e similares. Em algumas modalidades, arila é C6-10 arila. Em algumas modalidades, arila é C6-14 arila. Em algumas modalidades, o grupo arila é um anel naftaleno ou anel fenila. Em algumas modalidades, o grupo arila é fenila.
[00156] Como usado aqui, o termo "Ci-j cicloalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a uma porção hidrocarboneto não aromático tendo átomos de carbono de i a j de formação de anel, que podem conter opcionalmente um ou mais grupos alquenileno como parte da estrutura de anel. Grupos cicloalquila podem incluir sistemas de anel mono ou policíclico. Sistemas de anel policíclico podem incluir sistemas de anel fundido e espirociclos. Também incluídas na definição de cicloalquila são porções que têm um ou mais anéis fundidos aromáticos (isto é, tendo uma ligação em comum com) ao anel cicloalquila, por exemplo, benzo ou pirido derivados de ciclopentano, ciclopenteno, ciclo-hexano, e similares. Um grupo heterocicloalquila que inclui uma porção aromática fundida (por exemplo, arila ou heteroarila) pode ser ligada à molécula através de um átomo de uma porção aromática ou não aromática. Um ou mais átomos de carbono de formação de anel de um grupo cicloalquila podem ser oxidados para formar ligações de carbonila. Em algumas modalidades, cicloalquila é C3-10 cicloalquila, C3-7 cicloalquila, ou C5-6 cicloalquila. Grupos cicloalquila exemplars incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila, ciclopentenila, ciclo-hexenila, ciclo-hexadienila, ciclo-heptatrienila, norbornila, norpinila, norcarnila, e similares. Outros grupos cicloalquila exemplares incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, e ciclo-hexila. Grupos cicloalquila exemplares adicionais, onde o grupo cicloalquila tem uma porção arila ou heteroarila fundida, incluem tetra-hidronaftalen-2-ila, 2,3-di-hidro-1H-inden-2-ila; 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-carbazol-7-ila; 2,6,7,8-tetra- hidrobenzo[cd]indazol-4-ila; e 5,6,7,8,9,10-hexa-hidrociclo- hepta[b]indol-3-ila.
[00157] Como usado aqui, o termo "heteroarila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a uma porção heterocíclica aromática monocíclica ou polcíclica (por exemplo, tendo 2, 3 ou 4 anéis fundidos), tendo um ou mais membros de anel heteroátomo selecionados de nitrogênio, enxofre e oxigênio. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila tem 1, 2, 3, ou 4 membros de anel heteroátomo. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila tem 1, 2, ou 3 membros de anel heteroátomo. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila tem 1 ou 2 membros de anel heteroátomo. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila tem 1 membro de anel heteroátomo. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila é de 5 a 10 membros ou de 5 a 6 membros. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila é de 5 membros. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila é de 6 membros. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila é bicíclica de 9 a 10 membros. Em algumas modalidades, a heteroarila é bicíclica de 9 membros. Quando o grupo heteroarila contém mais do que um membro de anel heteroátomo, os heteroátomos podem ser iguais ou diferentes.
[00158] Os átomos de nitrogênio no anel(s) do grupo heteroarila podem ser oxidados para formar N-óxidos. Grupos heteroarila exemplares incluem, porém não estão limitados à piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, pirrolila, pirazolila, azolila, oxazolila, isoxazolila, thiazolila, isothiazolila, imidazolila, furanila, tiofenila, triazolila, tetrazolila, thiadiazolila, quinolinila, isoquinolinila, indolila, benzotiofeneíla, benzofuranila, benzisoxazolila, benzoimidazolila, imidazo[1, 2- b]thiazolila, purinila, triazinila, e similares. Em algumas modalidades, o grupo heteroarila é 9H-carbazol-2-ila; 1H-benzo[d]imidazol-6-ila; 1H- indol-6-ila; 1H-indazol-6-ila; 2H-indazol-4-ila; 1H-benzo[d][1,2,3]triazol- 6-ila; benzo[d]oxazol-2-ila; quinolin-6-ila; ou benzo[d]tiazol-2-ila.
[00159] Como usado aqui, o termo "heterocicloalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um sistema de anel heterocíclico aromático, que pode opcionalmente conter uma ou mais insaturações como parte da estrutura do anel, e que tem pelo menos um membro de anel heteroátomo independentemente selecionado de nitrogênio, enxofre e oxigênio. Em algumas modalidades, o grupo heterocicloalquila tem de 1, 2, 3, ou 4 membros de anel heteroátomo. Em algumas modalidades, o grupo heterocicloalquila tem de 1, 2, ou 3 membros de anel heteroátomo. Em algumas modalidades, o grupo heterocicloalquila tem 1 ou 2 membros de anel heteroátomo. Em algumas modalidades, o grupo heterocicloalquila tem 1 membro de anel heteroátomo. Quando o grupo heterocicloalquila contém mais do que um heteroátomo no anel, os heteroátomos podem ser iguais ou diferentes. Membros de formação de anel exemplares incluem CH, CH2, C(O), N, NH, O, S, S(O), e S(O)2. Grupos heterocicloalquila podem incluir sistemas de anel mono ou policíclico (por exemplo, tendo 2, 3 ou 4 anéis fundidos).
[00160] Anéis policíclicos podem incluir tanto sistemas fundidos quannto espirociclos. Também incluídas na definição de heterocicloalquila estão porções que têm um ou mais anéis fundidos aromáticos (isto é,tendo uma ligação em comum com) no anel aromático, por exemplo, 1, 2, 3, 4-tetra-hidro-quinolina, di- hidrobenzofurano e similares. Um grupo heterocicloalquila que inclui uma porção aromática fundida pode ser ligada à molécula através de um átomo de uma porção aromática ou não aromática. Os átomos de carbono ou heteroátomos no anel(s) do grupo heterocicloalquila podem ser oxidados para formar um grupo carbonila, sulfinila, ou sulfonila (ou outra ligação oxidada) ou um átomo de nitrogênio pode ser quaternizado. Em algumas modalidades, heterocicloalquila é de 5 a 10 membros, 4 a 10 membros, 4 a 7 membros, de 5 membros, ou de 6 membros. Exemplos de grupos heterocicloalquila incluem 1, 2, 3, 4- tetra-hidro-quinolinila, di-hidrobenzofuranila, azetidinila, azepanila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, e piranila. Exemplos de grupos heterocicloalquila que incluem um ou mais grupos aromáticos fundidos (por exemplo, arila ou heteroarila) incluem N-(2'- oxospiro[ciclo-hexano-1,3'-indolin]-6'-ila; 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin- 6-ila; 2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-ila; 1,3-di-hidrospiro[indeno- 2,3'-indolin]-6'-ila; 2,3-di-hidrobenzo[d]oxazol-5-ila; 1,2-di-hidroquinolin- 7-ila; indolin-6-ila; espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-6'-ila; espiro[ciclo- hexano-1,3'-indolin]-6'-ila; croman-6-ila; 3,4-di-hidro-2H- benzo[b][1,4]oxazin-6-ila; e benzo[d][1,3]dioxol-5-ila.
[00161] Como usado aqui, o termo "arilalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo alquila substituído por um grupo arila.
[00162] Como usado aqui, o termo "cicloalquilalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo alquila substituído por um grupo cicloalquila.
[00163] Como usado aqui, o termo "heteroarilalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo alquila substituído por um grupo heteroarila.
[00164] Como usado aqui, o termo "hetercicloalquilalquila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo alquila substituído por um grupo heterocicloalquila.
[00165] Como usado aqui, o termo "Ci-j alquilsulfinila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -S(=O)-(Ci-j alquil).
[00166] Como usado aqui, o termo "Ci-j alquilsulfinila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -S(=O)2-(Ci—j alquil).
[00167] Como usado aqui, o termo "carbóxi," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo -C(=O)OH.
[00168] Como usado aqui, o termo "Ci-j alquilcarbonila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -C(=O)-(Ci-j alquil).
[00169] Como usado aqui, o termo "Ci-j alcoxicarbonila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -C(=O)O-(Ci-j alquil).
[00170] Como usado aqui, o termo "aminocarbonila," empregado sozinho ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo de fórmula -C(=O)NH2.
[00171] Os compostos descritos aqui podem ser assimétricos (por exemplo, tendo um ou mais estereocentros). Todos os estereoisômeros, tais como enantiômeros e diastereoisômeros, são pretendidos, a menos que de outro modo indicado.
[00172] Onde um nome de composto ou estrutura é silencioso com respeito à estereoquímica de um estereocentro, todas possíveis configurações no estereocentro são pretendidas. Os compostos da presente invenção que podem conter átomos de carbono assimetricamente substituídos podem ser isolados em formas oticamente ativas ou racêmicas. Métodos de como preparar as formas oticamente ativas de materiais de partida oticamente inativos são conhecidos na técnica, tal como por resulução de misturas racêmicas ou por síntese estereosseletica. Isômeros geométricos de olefinas, ligações duplas de C=N, e similares podem estar presentes nos compostos descritos aqui, e todos os tais isômeros estáveis são contemplados na presente invenção. Isômeros geométricos Cis e trans dos compostos da presente invenção são descritos e podem ser isolados como uma mistura de isômeros ou como formas isoméricas separadas.
[00173] Quando os compostos da invenção contêm um centro quiral, os compostos podem ser de qualquer um dos possíveis estereoisômeros.
[00174] Em compostos com um único centro quiral, a estereoquímica do centro quiral pode ser (R) ou (S). Em compostos com dois centros quirais, a estereoquímica dos centros quirais podem cada qual ser independentemente (R) ou (S) a fim de que a configuração dos centros quirais possa ser (R) e (R), (R) e (S); (S) e (R), ou (S) e (S). Em compostos com três centros quirais, a estereoquímica de cada um dos três centros quirais pode ser independentemente (R) ou (S) a fim de que a configuração dos centros quirais possa ser (R), (R) e (R); (R), (R) e (S); (R), (S) e (R); (R), (S) e (S); (S), (R) e (R); (S), (R) e (S); (S), (S) e (R); ou (S), (S) e (S).
[00175] Resolução de misturas racêmicas de compostos pode ser realizada por quaisquer de numerosos métodos conhecidos na técnica. Um exemplo de método inclui recristalização fracional usando um ácido de resolução quiral que é um ácido orgânico de formação de sal opticamente ativo. Adequados agentes de resolução para métodos de recristalização fracional são, por exemplo, ácidos opticamente ativos, tais como, as formas D e L de ácido tartárico, ácido diacetiltartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido mandélico, ácido málico, ácido lático ou os vários ácidos canforsulfônicos opticamente ativos, tal como, ácido ß- canforsulfônico. Outros agentes de resolução adequados para métodos de cristalização fracional incluem formas estereoisomericamente puras de a-metilbenzilamina (por exemplo, formas S e R, ou formas diaestereoisomericamente puras), 2-fenilglicinol, norefedrina, efedrina, N-metilefedrina, ciclo-hexiletilamina, 1, 2-diaminociclo-hexano, e similares.
[00176] Resolução de misturas racêmicas pode também ser realizada por eluição sobre uma coluna empacotada com um agente de resolução opticamente ativo (por exemplo, dinitrobenzoilfenilglicina). Adequada composição de solvente de eluição pode ser determinada por alguém versado na técnica.
[00177] Quando um composto descrito é nomeado ou retratado sem indicar a estereoquímica de um ou mais estereocentros, cada dos estereoisômeros resultando das possíveis estereoquímicas no(s) estereocentro(s) indefinido(s) são destinados a ser abrangidos. Por exemplo, se um estereocentro não for designado como R ou S, então um ou ambos são destinados.
[00178] Os compostos da invenção também incluem formas tautoméricas. As formas tautoméricas resultam da troca de um ligação simples com uma ligação dupla adjacente juntamente com a migração concomitante de um próton. As formas tautoméricas incluem tautômeros prototrópicos que são estados de protonação isoméricos tendo a mesma fórmula empírica e carga total. Exemplos de tautômeros prototrópicos incluem pares de enol - cetona, pares de ácido imídico - amida, pares de lactam - lactim, pares de amida - ácido imídico, pares de enamina - imina, e formas anulares onde um próton pode ocupar duas ou mais posições de um sistema heterocíclico, por exemplo, 1H- e 3H-imidazol, 1H-, 2H- e 4H- 1, 2, 4-triazol, 1H- e 2H- isoindol, e 1H- e 2H-pirazol. As formas tautoméricas podem estar em equilíbrio ou bloqueadas estericamente em uma forma por substituição apropriada.
[00179] Os compostos da invenção podem também incluir todos os isótopos de átomos ocorrendo nos intermediários ou compostos finais. Os isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico, porém, diferentes números de massa. Os isótopos de átomos constituintes dos compostos da invenção podem estar presentes em abundância natural ou não natural. Exemplos de isótopos de hidrogênio incluem deutério e trítio. Em algumas modalidades, os compostos da invenção são deuterados, significando ter pelo menos um átomo de deutério presente no lugar de um átomo de hidrogênio. Em algumas modalidades, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, ou 8 hidrogênios em um composto da invenção são substituídos por deutério. Métodos para substituir hidrogênio com deutério em uma molécula são conhecidos na técnica.
[00180] O termo "composto" como usado aqui é destinado a incluir todos os estereoisômeros, isômeros geométricos, tautômeros, e isótopos das estruturas retratadas. Os compostos aqui identificados por nome ou estrutura como uma particular forma tautomérica são destinados a incluir outras formas tautoméricas a menos que de outro modo especificado (por exemplo, no caso de anéis de purina, a menos que de outro modo indicado, quando o nome de composto ou estrutura tem o tautômero 9H, é entendido que o tautômero 7H é também abrangido).
[00181] Todos os compostos, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, podem ser encontrados juntamente com outras substâncias, tais como, água e solventes (por exemplo, hidratos e solvatos) ou podem ser isolados.
[00182] Em algumas modalidades, os compostos da invenção, ou sais dos mesmos, ou formas cristalinas de quaisquer dos acima mencionados, são purificados ou substancialmente isolados. Por "substancialmente isolado" entende-se que o composto é pelo menos parcialmente ou substancialmente separado do ambiente em que ele foi formado ou detectado. Separação parcial pode incluir, por exemplo, uma composição enriquecida em um composto da invenção. Separação substancial podem incluir composições contendo pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 70%, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95%, pelo menos cerca de 97%, ou pelo menos cerca de 99% por peso dos compostos da invenção, ou sal dos mesmos. Em algumas modalidades, os compostos da invenção, ou sais dos mesmos, ou formas cristalinas de quaisquer dos acima mencionados, podem ser preparados com uma pureza de cerca de 75% ou mais, 80% ou mais, 85% ou mais, 90% ou mais, 95% ou mais, 98% ou mais, ou 99% ou mais.
[00183] A frase "farmaceuticamente aceitável" é empregada aqui para se referir àqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que se incluem no escopo do diagnóstico médico seguro, adequado para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem excessiva toxicidade, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, compatível com uma relação de benefício/risco razoável.
[00184] As expressões, "temperatura ambiente (ambient temperature)" e "temperatura ambiente (room temperature)," como usadas aqui, são entendidas na técnica, e se referem geralmente a uma temperatura, por exemplo, uma temperatura de reação, que é cerca da temperatura do ambiente em que a reação é realizada, por exemplo, uma temperatura de cerca de 20°C a cerca de 30°C.
[00185] A presente invenção também inclui sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos descritos aqui. Como usado aqui, "sais farmaceuticamente aceitáveis" referem-se a derivados dos compostos descritos em que o composto origem é modificado convertendo uma porção de base ou ácido existente em sua forma de sal. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, porém não estão limitados a, sais de ácido mineral ou orgânico de resíduos básicos, tais como, aminas; sais orgânicos ou de álcali de resíduos acídicos, tais como, ácidos carboxílicos; e similares. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção incluem os sais não tóxicos convencionais do composto origem formados, por exemplo, de ácidos orgânicos ou inorgânicos não tóxicos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados do composto origem que contém uma porção básica ou acídica por métodos químicos convencionais. Geralmente, tais sais podem ser preparados reagindo as formas de base ou ácido livres destes compostos com uma quantidade estoiquiométrica da apropriada base ou ácido em água ou em um solvente orgânico, ou em uma mistura dos dois; geralmente, meio não aquoso tipo éter, acetato de etila, álcoois (por exemplo, metanol, etanol, iso-propanol, ou butanol) ou acetonitrila (MeCN) são preferidos. Listas de adequados sais são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a Ed., (Mack Publishing Company, Easton, 1985), p. 1418, Berge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66(1), 1-19, e em Stahl et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (Wiley, 2002).
[00186] Como usado aqui, os termos "indivíduo" e "paciente" podem ser usados de forma intercambiável, e significam um mamífero em necessidade de tratamento, por exemplo, animais de companhia (por exemplo, cachorros, gatos, e similares), animais de fazenda (por exemplo, vacas, porcos, cavalos, ovelhas, cabras e similares) e animais de laboratório (por exemplo, ratos, camundongos, cobaias e similares). Tipicamente, o indivíduo ou paciente é um humano em necessidade de tratamento. Síntese
[00187] Os compostos da invenção, incluindo sais dos mesmos, podem ser preparados usando técnicas de síntese orgânica conhecidas e podem ser sintetizados de acordo com quaisquer de numerosas possíveis rotinas sintéticas.
[00188] As reações para preparar compostos da invenção podem ser realizadas em adequados solventes que podem ser prontamente selecionados por alguém versado na técnica de síntese orgânica. Adequados solventes podem ser substancialmente não reativos com os materiais de partida (reagentes), os intermediários, ou produtos nas temperaturas em que as reações são realizadas, por exemplo, temperaturas que podem variar da temperatura de congelamento do solvente à temperatura de ebulição do solvente. Uma dada reação pode ser realizada em um solvente ou uma mistura de mais do que um solvente.
[00189] Dependendo da particular etapa de reação, adequados solventes para uma particular etapa de reação podem ser selecionados pelo técnico versado.
[00190] Preparação de compostos da invenção pode envolver a proteção e desproteção de vários grupos químicos. O necessário para proteção e desproteção, e a seleção de apropriados grupos de proteção ("Pg"), podem ser prontamente determinados por alguém versado na técnica. A química de grupos de proteção ("Pg") pode ser encontrada, por exemplo, em P. G. M. Wuts e T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 4a Ed., Wiley & Sons, Inc., New York (2006), que é incorporado aqui por referência em sua totalidade.
[00191] Os compostos da invenção podem ser preparados empregando métodos convencionais que utilizam reagentes e materiais de partida prontamente disponíveis. Os reagentes usados na preparação dos intermediários desta invenção podem ser comercialmente obtidos ou podem ser preparados por procedimentos padrão descritos na literatura. Várias tecnologias, tais como, química de fase sólida, química de micro-ondas ou química de fluxo, etc., podem também ser utilizadas para sintetizar intermediários ou compostos finais. Além disso, outros métodos de preparar compostos da invenção serão prontamente aparentes à pessoa versada na técnica em luz dos seguintes reação e esquemas e exemplos. A menos que de outro modo indicado, todas as variáveis são definidas abaixo. Adequados métodos de síntese são descritos nas seguintes referências: March, Advanced Organic Chemistry, 3aedição, John Wiley & Sons, 1985; Greene e Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 2a ed., John Wiley & Sons 1991; e Larock, Comprehensive Organic Transformations, 4a ed., VCH publishers Inc., 1989. Além disso, em qualquer síntese, um ou mais dos reagentes, intermediários ou produtos químicos podem ser usados em quantidade excessiva para assegurar a conclusão de reação. Adequadas temperaturas de reação geralmente variam de cerca de 0°C a cerca do ponto de ebulição do solvente. Mais tipicamente, as temperaturas são suficientemente elevadas para permitir refluxo, por exemplo, cerca de 68°C para tetra-hidrofurano. Em alguns casos, tais como, condições de micro-ondas, a temperatura da reação pode exceder o ponto de ebulição do solvente.
[00192] Os compostos da invenção podem ser sintetizados pelos métodos descritos nos esquemas 1 a 3 abaixo. Muitas das etapas sintéticas são bem descritas como em F.A. Carey, R.J. Sundberg, Advanced Organic Chemistry, 2a ed., Publicação de plenário em 1983. A síntese de vários heterociclos substituídos por hidroxila é bem documentada na literatura e pode ser sintetizada por conhecidos métodos de literatura. A síntese geral de anéis heterocíclicos úteis é referenciada em The Handbook of Heterocyclic Chemistry, Alan R. Katritzky; Pergamon Press, NY, USA, 1a ed. 1986. Os intermediários retratados podem também estar disponíveis como reagentes comerciais de numerosos fornecedores. Esquema 1.
[00193] Os compostos da invenção podem ser sintetizados por numerosos métodos, com base em análise retro sintética de alvos finais. Os métodos exemplares são mostrados em rotinas A, B & C.
[00194] Rotina A: Este método envolve acoplamento de Intermediário de amina I com vários aldeídos, aminas, ácidos, haletos de arila, e similares. Os aldeídos e cetonas podem ser condensados com Intermediário I por aminação redutiva. Este método envolve reação de aldeídos ou cetonas com amina na presença de um agente de redução (por exemplo, cianoboro-hidreto de sódio ou cianoboro-hidreto de sódio de triacetóxi). Vários métodos alternativos para reação de aminas com aldeído e cetonas sob condições redutivas são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, estas reações podem ser realizadas em vários solventes próticos e apróticos e em temperaturas de -78°C às condições de refluxo. Um método envolve reação de aminas com aldeídos ou cetonas em solventes, tais como, por exemplo, metanol, etanol, tetra-hidrofurano, diclorometano ou 1,2-dicloroetano ou uma combinação dos mesmos na presença de um agente de redução (por exemplo, boro-hidreto de sódio de triacetóxi ou cianoboro- hidreto de sódio) entre RT e condições de refluxo na presença ou ausência de reator de micro-ondas.
[00195] Rotina B: Este método envolve o acoplamento de Intermediário II com Intermediário III. O Intermediário II (W = NH) pode ser sintetizado, por exemplo, de várias aminas espirocíclicas usando procedimentos sintéticos conhecidos como descrito na literatura e por métodos conhecidos pela pessoa versada na técnica. Por exemplo, Intermediário III pode ser sintetizado por quaisquer dos vários métodos descritos abaixo. O grupo de saída (LVG) pode ser qualquer grupo adequado, tais como, por exemplo, um halogênio, mesilato, tosilato, ou quaisquer outros grupos que podem ser adequados para substituição nucleofílica catalisada por base ou por deslocamento catalisado por metal (por exemplo, cobre, paládio, e similares). Estes métodos são bem descritos em Handbook of Reagents for Organic Synthesis, Catalyst Components for Coupling Reactions; Gary Molander, 1a ed., 2013; John Wiley & sons. Um método envolve reação de derivados de halo de Intermediário III com amina sob solventes próticos ou apróticos na presença de base orgânica ou inorgânica em temperatura elevada. Um exemplo adicional envolve tratamento de derivados de cloro de Intermediário III com uma amina em um solvente aprótico (por exemplo, DMF ou DMSO) na presença de base orgânica (por exemplo, trietilamina ou piridina) em temperaturas elevadas. Para compostos de Intermediário II onde W é carbon, a reação pode ser realizada, por exemplo, por uma reação de acoplamento cruzado de boronatos de vinila de espiroaminas com Intermediário III, seguida por hidrogenação para produzir análogos de carbono.
[00196] Rotina C: O composto final pode ser sintetizado de Intermediário IV por modificação de grupo funcional. O grupo funcional pode ser, por exemplo, um ácido, álcool, amina, haleto de arila, e similares. Esta reação utiliza aminas com vários agentes de acilação (por exemplo, cloreto de acila, cloreto de sulfonila, isocianatos, e similares). Alternativamente, grupos funcionais, tal como, ácido podem ser convertidos em amidas. Haletos de arila podem ser convertidos no desejado produto usando métodos convencionais conhecidos por outros grupos funcionais e muitas destas transformações de grupo funcional são bem conhecidas na literatura e descritas em "Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations" por Richard C. Larock, Edição 2, 1999, Wiley & Sons. Uma transformação de grupo funcional envolve reação de uma amina com vários agentes de acilação (por exemplo, cloreto de acila ou cloreto de sulfonila) na presença de um solvente aprótico e base. Outro exemplo envolve reação de uma amina com cloreto de sulfonila em diclorometano na presença de uma base orgânica (por exemplo, piridina, trimetilamina, e similares). Esquema 2.
[00197] Intermediário I pode ser sintetizado por numerosos métodos como retratado no Esquema 2. Os métodos exemplares são mostrados nas rotinas D, E & F.
[00198] Rotina D: O método empregado na rotina D é análogo ao método empregado na rotina B (Esquema 1). Para espirodiaminas, uma das funcionalidades da amina pode ser seletivamente protegida a fim de realizar a reação de uma maneira regiosseletiva. Os grupos de proteção são escolhidos de tal modo que eles possam ser compatíveis com outros grupos funcionais e suas transformações, e podem ser removidos seletivamente. Vários grupos de proteção de amina são bem conhecidos na literatura e são bem documentados em Greene's Protective Groups in Organic Synthesis por Peter G. M. Wuts & Theodora W. Greene; 4a Ed.; 2006, Wiley-Interscience. O grupo de proteção de amina comumente usado inclui, por exemplo, terc- butoxicarbonila que é clivada sob condição acídica em solventes apróticos. Um método exemplar compreende o uso de ácido trifluoroacético ou gás de cloridrato em solventes apróticos (por exemplo, 1,4-dioxano, diclorometano, e similares) em RT.
[00199] Rotina E: O grupo funcional Fg de Intermediário V pode sofrer várias transformações de grupo funcional para preparar Intermediário I. Tais transformações são bem documentadas na literatura, por exemplo, como em Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, por Jerry March, Wiley- Interscience; 6 edição 2007. Um exemplo de reação envolve o acoplamento cruzado de um haleto de arila (por exemplo, onde Fg é um halogênio) de Intermediário V com vários boronatos, reagentes de estanho, e similares. Estas reações de acoplamento cruzado podem ser efetuadas com vários catalisadores de metal (por exemplo, cobre, paládio, ródio, e similares) em uma variedade de solventes próticos/apróticos ou combinação dos mesmos, na presença de base orgânicas ou inorgânicas em temperaturas variando de RT à temperaturas elevadas. Um opcional reator de micro-ondas pode também ser usado. Um exemplo de método envolve reação de um derivado de cloro ou bromo de Intermediário V com um reagente Suzuki de arila na presença de um catalisador de paládio em vários solventes (por exemplo, DMF, tolueno/água, e similares) em temperatura elevada na presença de base inorgânica (por exemplo, carbonato de césio ou fosfato de potássio). Em certos casos, outra funcionalização pode ser realizada para chegar ao desejado composto. Por exemplo, um grupo halo de Fg em Intermediário V pode ser convertido em um ácido e também convertido em uma amida, álcool, éter, e similares. Similarmente, o grupo halo de Fg de Intermediário V pode ser convertido em um grupo ciano, que pode ser também convertido em outros grupos funcionais como é bem conhecido na técnica.
[00200] Rotina F: Este método envolve reações de fenóis, tióis, anilinas com 3-halopiridinas ou 5-halo pirimidina usando reações mediadas por metal. O deslocamento nucleofílico de 3-halopiridinas ou 5-halo pirimidina por fenóis, anilinas e aril tióis é bem conhecido na literatura como descrito, por exemplo, em Copper-Mediated Cross-Coupling Reactions por Gwilherm Evano & Nicolas Blanchard por John Wiley & Sons, Edição 1, 2013. Por exemplo, Intermediário VII pode ser sintetizado de uma 3,4-di-halopiridina ou uma 4,5-di-halo pirimidina por reação com uma espiroamina usando métodos similares àquele descrito na rotina B. Adicionalmente, o análogo de carbono pode ser sintetizado, por exemplo, por reação de acoplamento cruzado de Intermediário VII com vários haletos de zinco de alquila na presença de catalisador de metal como descritos em "Applied Cross-Coupling Reactions" por Yasushi Nishihara Springer Science Edição 1, 2013. Um exemplo de método envolve reação de brometo de zinco de benzila com catalisador de paládio em um solvente aprótico (por exemplo, dietiléter ou tetra- hidrofurano) em temperatura elevada na presença ou ausência de um reator de micro-ondas. Anilinas, tióis e fenóis substituídos por flúor são bem conhecidos na literatura e podem ser sintetizados por vários métodos conhecidos por alguém versado na técnica.
[00201] Vários métodos são disponíveis para síntese de Intermediário III contendo um éter de fenol-pirimida. Alguns dos métodos são ilustrados no Esquema 3, Rotinas A e B Esquema 3, Rotina A.
[00202] Esquema 3, Rotina A envolve reação de um fenol com um acetato de 2-halo. Este método é bem conhecido na literatura e descrito, por exemplo, em Journal of Medicinal Chemistry (1980), 23(9), 1026-31. Esta reação é ativada convertendo um fenol no correspondente fenolato por reação com um hidreto de metal em um solvente aprótico (por exemplo, DMF, THF, e similares). Um exemplo envolve reação de fenol com hidreto de sódio em solventes apróticos (por exemplo, DMF), seguida por adição de metilcloroacetato no mesmo vaso em temperatura variando de -78°C a RT. O intermediário de 2-fenoxiacetato é também condensado com formaldeído na presença de um hidreto de metal (por exemplo, NaH) em um solvente aprótico como descrito na primeira etapa. Este intermediário é em seguida reagido com tioureia em um solvente prótico (por exemplo, álcool) sob temperatura elevada para produzir intermediário de 2-tiopirimidina. A tiopirimidina pode ser reduzida para pirimidina ou convertida em pirimidina 2-substituída por várias rotinas sintéticas conhecidas na literatura. Um exemplo de método envolve redução de tiopirimidina para pirimidina sob condições de hidrogenação catalisada por metal (por exemplo, níquel em um solvente prótico, tais como, etanol, e similares). O intermediário de 4- pirimidona pode em seguida ser convertido em uma 4-halopirimidona por reação com um solvente de cloração (por exemplo, cloreto de tionila, tricloreto de fósforo-óxi, e similares) puro ou em um solvente aprótico (por exemplo, tolueno, THF, e similares) em temperatura elevada. Alternativamente, a 4-pirimidona pode ser reagida com um cloreto de sulfonila (por exemplo, cloreto de metano sulfonila ou cloreto de trifluorometano sulfonila) para gerar um sulfonato como um grupo de saída adequado para deslocamento nucleofílico, que pode ser também utilizado na preparação dos desejados compostos como descrito aqui nos Esquemas 1 e 2. Esquema 3, Rotina B.
[00203] A primeira etapa no Esquema 3, Rotina B, envolve o acoplamento de fenol com 5-halopirimidina como descrito, por exemplo, em Organic Letters, 14(1), 170-173; 2012, ou em Journal of Organic Chemistry, 75(5), 1791-1794; 2010. A pirimidina resultante pode em seguida ser oxidada com um perácido em um solvente aprótico em RT para produzir um N-óxido de pirimidina. Um exemplo de método envolve reação de éter de pirimdina com ácido meta-percloro perbenzoico em um solvente halogenado (por exemplo, diclorometano, 1,2-dicloroetano, e similares) como descrito em J. Org. Chem., 1985, 50 (17), pp 3073 3076.
[00204] O intermediário cru pode ser também tratado com tricloreto de fósforo-óxi ou pentacloreto de fósforo para produzir Intermediário III como descrito em Pedido de Patente Internacional No WO 2009/137733. Métodos e Usos
[00205] Os compostos da invenção são inibidores da interação de menina com proteínas de fusão de LLM e LLM. Em algumas modalidades, a presente invenção está direcionada um método de inibição da interação entre menina e LLM ou uma proteína de fusão de LLM contatando a menina e LLM ou a proteína de fusão de LLM com um composto da invenção. O contato pode ser realizado in vitro ou in vivo.
[00206] Em algumas modalidades, os compostos da invenção podem ligar-se à menina, desse modo interferindo com a ligação de LLM à menina. Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método de inibição da atividade de menina por contato de menina com um composto da invenção na presença de LLM ou uma proteína de fusão de LLM. Em outras modalidades, a presente invenção fornece um método de inibição da ligação de LLM ou uma proteína de fusão de LLM à menina, compreendendo contatar a menina com um composto da invenção na presença da LLM ou proteína de fusão de LLM.
[00207] Os compostos da invenção são também úteis no tratamento de doenças associadas com a interação de menina-LLM ou interação de menina-proteína de fusão de LLM. Por exemplo, doenças e condições tratáveis com os métodos da invenção incluem câncer, tal como leucemia, e outras doenças ou distúrbios mediados pela interação de menina-LLM ou interação de menina-proteína de fusão de LLM tal como diabetes.
[00208] Consequentemente, acredita-se que os compostos da invenção sejam eficazes contra uma ampla faixa de cânceres, incluindo, porém não limitados a câncer hematológico (por exemplo, leucemia e linfoma), câncer de bexiga, câncer cerebral (por exemplo, glioma, glioma pontino intríseco difuso (DIPG)), câncer de mama (por exemplo, câncer de mama triplo negativo, câncer de mama positivo de receptor de estrogênio (isto é, câncer de mama ER+)), câncer colorretal, câncer cervical, câncer gastrointestinal (por exemplo, carcinoma colorretal, câncer gástrico), câncer geniturinário, câncer de cabeça e pescoço, câncer de fígado, câncer de pulmão, melanoma, câncer de ovário, câncer pancreático, câncer de próstata (por exemplo, câncer de próstata resistente à castração), câncer renal (por exemplo, carcinoma de células renais), câncer de pele, câncer de tireoide (por exemplo, carcinoma papilar de tireoide), câncer de testículo, sarcoma (por exemplo, sarcoma de Ewing), e cânceres relacionados a AIDS. Em algumas modalidades, o câncer é associado com gene de LLM rearranjado. Em algumas modalidades, a patofisiologia da câncer é dependente do gene de LLM. Em algumas modalidades, o câncer é associado com ganho de função de p53 mutante.
[00209] Em algumas modalidades, os cânceres específicos que podem ser tratados pelos compostos, composições e métodos descritos aqui incluem cânceres cardíacos, tais como, por exemplo, sarcoma (por exemplo: lngiossarcoma, fibrosarcoma, rabdomiossarcoma e lipossarcoma), mixoma, rabdomioma, fibroma, lipoma e teratoma; câncer de pulmão, incluindo, por exemplo, carcinoma broncogênico (por exemplo, células escamosas, células pequenas não diferenciadas, células não diferenciadas de grande porte e adenocarcinoma), carcinoma alveolar e bronquiolar, adenoma brônquico, sarcoma, linfoma, condromatoso hamartoma, mesotelioma, câncer de pulmão de células não pequenas, câncer de pulmão de pequenas células, adenomas brônquicos/carcinóides, e blastoma pleuropulmonar; câncer gastrointestinal, incluindo, por exemplo, cânceres do esôfago (por exemplo, carcinoma de célula escamosa, adenocarcinoma, leiomiossarcoma, e linfoma), cânceres do estômago (por exemplo, carcinoma, linfoma, e leiomiossarcoma), cânceres dos pâncreas (por exemplo, adenocarcinoma ductal, insulinoma, glicagonoma, gastrinoma, tumores de carcinoide, e vipoma), cânceres do intestino delgado (por exemplo, adenocarcinoma, linfoma, tumores carcinoide, sarcoma de Kaposi, leiomioma, hemangioma, lipoma, neurofibroma, e fibroma), cânceres do intestino grosso ou cólon, (por exemplo, adenocarcinoma, tubular adenoma, adenoma viloso, hamartoma, e leiomioma), e outros cânceres do trato digestivo (por exemplo, câncer anal, câncer anorretal, câncer do apêndice, câncer do canal anal, câncer da língua, câncer da vesícula biliar, tumor estromal gastrointestinal (GIST), câncer de colon, câncer colorretal, câncer do duto biliar extra- hepático, câncer do duto biliar intra-hepático, câncer retal, e câncer do intestino delgado); cânceres do trato genitourinário, incluindo, por exemplo, cânceres do rim (por exemplo, adenocarcinoma, tumor de Wilm (nefroblastoma), linfoma, e leucemia), cânceres da bexiga e uretra (por exemplo, carcinoma da célula escamosa, carcinoma de célula transitória, e adenocarcinoma), câncer da próstata (por exemplo, adenocarcinoma e sarcoma), cânceres dos testículos, (por exemplo, seminoma, teratoma, carcinoma embriônico, teratocarcinoma, coriocarcinoma, sarcoma, carcinoma da célula intersticial, fibroma, fibroadenoma, tumores adenomatoide, e lipoma), bem como câncer da célula transicional, câncer da célula transicional da pelve renal e ureter e outros órgãos urinários, câncer uretral, e câncer da bexiga urinária; cânceres hepáticos, incluindo, por exemplo, hepatoma (por exemplo, carcinoma hepatocelular), colangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiossarcoma, adenoma hepatocelular, e hemangioma; cânceres ósseos, incluindo, por exemplo, sarcoma osteogênico (osteossarcoma), fibrossarcoma, histiocitoma fibroso maligno, condrossarcoma, sarcoma de Ewing, linfoma maligno (sarcoma da célula de retículo), mieloma múltiplo, cordoma de tumor de célula gigante maligno, osteocrondroma (exostoses osteocartilaginosas), condroma benigno, condroblastoma, condromixofibroma, osteoma osteoide e tumores da célula gigante; cânceres do sistema nervoso, incluindo, por exemplo, cânceres do crânio (por exemplo, osteoma, hemangioma, granuloma, xantoma, e osteíte deformans); cânceres das meninges (por exemplo, meningioma, meningiossarcoma, e gliomatose); cânceres do cérebro (por exemplo, astrocitoma, meduloblastoma, glioma, ependimoma, germinoma (pinealoma), glioblastoma multiforme, oligodendroglioma, schwannoma, retinoblastoma, e tumores congênitos); cânceres da medula espinhal (por exemplo, neurofibroma, meningioma, glioma, e sarcoma), e cânceres do sistema nervoso (por exemplo, glioma do tronco cerebral, glioma pontino intrínseco difuso (DIPG), tumor cerebral, câncer do sistema nervoso central, astrocitoma cerebelar, astrocitoma cerebral/glioma maligno, astrocitoma cerebelar da infância, astrocitoma cerebral da infância, linfoma do sistema nervoso central primário, glioma da via visual e hipotalâmico, linfoma do sistema nervoso, tumores neuroectodeimais primitivos supratentoriais, pineoblastoma e tumores neuroectodérmicos supratentorial primitivos); cânceres ginecológicos, incluindo, por exemplo, cânceres de útero (por exemplo, carcinoma endometrial), câncer do colo do útero (por exemplo, carcinoma cervical e displasia cervical pré-tumoral), cânceres dos ovários (por exemplo, carcinoma ovariano, incluindo cistoadenocarcinoma seroso, cistoadenocarcinoma mucinoso, carcinoma não classificado, tumores de células tecais da granulosa, tumores de células de Sertoli Leydig, disgerminoma e teratoma maligno), cânceres de vulva (por exemplo, carcinoma de células escamosas, carcinoma intraepitelial, adenocarcinoma, fibrossarcoma e melanoma), câncer da vagina (por exemplo, carcinoma de células claras, carcinoma de células escamosas, sarcoma botrioide e rabdomiossarcoma embriônico) e cânceres das trompas de Falópio (por exemplo, carcinoma); outros cânceres do trato reprodutivo, incluindo, por exemplo, câncer endometrial, câncer uterino endometrial, tumor de células germinativas, tumor trofoblástico gestacional, glioma de tumor trofoblástico gestacional, câncer epitelial de ovário, tumor de células germinativas ovariano, tumor de baixo potencial maligno ovariano, câncer de pênis, câncer vaginal câncer vulvar, tumor da célula germinativa extracranial, tumor da célula germinativa extragonadal, câncer uterino, câncer do corpo uterino, sarcoma uterino; cânceres linfáticos e hematológicos, incluindo, por exemplo, cânceres do sangue (por exemplo, leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia mieloide crônica (LMC), leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia linfoblástica crônica, leucemia linfocítica crônica, doenças mieloproliferativas, mieloma múltiplo, e síndrome mielodisplásica, linfoma de Hodgkin, linfoma de não Hodgkin (linfoma maligno) e macroglobulinemia de Waldenstrom), e outros cânceres linfáticos ou hematológicos incluindo, por exemplo, leucemia da infância, distúrbios mieloproliferativos (por exemplo, mielofibrose primária), neoplasma de célula plasmática/mieloma múltiplo, mielodisplasia, síndrome mielodisplásica, linfoma de célula T cutâneo, neoplasma linfoide, linfoma relacionado a AIDS, timoma, timoma e carcinoma tímico, micoses fungoides, e Síndrome Sézary; cânceres de pele, incluindo, por exemplo, melanoma maligno, carcinoma da célula basal, carcinoma de célula escamosa, sarcoma de Kaposi, nervos displásicos moles, lipoma, angioma, dermatofibroma, queloides, psoríase, carcinoma da célula de Merkel, carcinoma de pele da célula de Merkel, melanoma, e tumor carcinoide; cânceres da glândula adrenal, incluindo, por exemplo, neuroblastoma; outros cânceres associados com o sistema endócrino incluindo, por exemplo, carcinoma adrenocortical, neoplasia endócrina múltipla (por exemplo, neoplasia endócrina múltipla do tipo I), síndrome de neoplasia endócrina múltipla, câncer paratiroide, tumor pituitário, feocromocitoma, câncer pancreático de célula ilhota, e tumores da célula ilhota); câncer do tecido conectivo (por exemplo, câncer ósseo, câncer ósseo e articulação, osteossarcoma e histiocitoma fibroso maligno); câncer associado com a cabeça, pescoço e boca (por exemplo, câncer de cabeça e pescoço, câncer do sino paranasal e cavidade nasal, câncer do pescoço escamoso metastático, câncer de boca, câncer da garganta, câncer esofágico, câncer da laringe, câncer da faringe, câncer hipofaríngeo, câncer do lábio e cavidade oral, câncer nasofaríngeo, câncer oral, câncer orofaríngeo, e câncer da glândula salivar); e câncer associado com o olho (por exemplo, câncer ocular, melanoma intraocular). Em algumas modalidades, o câncer é sarcoma de Ewing.
[00210] Em algumas modalidades, o câncer é um câncer hematológico tal como leucemia ou linfoma. Exemplos de leucemia e linfomas tratáveis pelos compostos da invenção incluem leucemia de linhagem mista (LLM), leucemia relacionada à LLM, leucemia associada à LLM, leucemia positiva para LLM, leucemia induzida por LLM, leucemia de linhagem mista rearranjada (LLM-r), leucemia associada com um rearranjo de LLM ou um rearranjo do gene de LLM, leucemia aguda, leucemia crônica, leucemia indolente, leucemia linfoblástica, leucemia linfocítica, leucemia mieloide, leucemia mielogenosa, leucemia da infância, leucemia linfocítica aguda (LLA) (também referida como leucemia linfoblástica aguda ou leucemia linfoide aguda), leucemia mieloide aguda (LMA) (também referida como leucemia mielogenosa aguda ou leucemia mieloblástica aguda), leucemia granulocítica aguda, leucemia não linfocítica aguda, leucemia linfocítica crônica (CLL) (também referida como leucemia linfoblástica crônica), leucemia mielogenosa crônica (LMC) (também referida como leucemia mieloide crônica), leucemia relacionada à terapia, síndrome mielodisplásica (MDS), doença mieloproliferativa (MPD) (tal como mielofibrose primária (PMF)), neoplasia mieloproliferativa (MPN), neoplasma de célula plasmática, mieloma múltiplo, mielodisplasia, linfoma de célula T cutâneo, neoplasma linfoide, linfoma relacionado a AIDS, timoma, carcinoma tímico, micoses fungoides, síndrome Alibert- Bazin, granuloma fungoides, Síndrome Sézary, leucemia da célula capilar, leucemia pró-linfocítica de célula T (T-PLL), leucemia linfocítica granular grande, leucemia meningeal, leptomeningite leucêmica, meningite leucêmica, mieloma múltiplo, linfoma de Hodgkin, linfoma de não Hodgkin (linfoma maligno), e macroglobulinemia de Waldenstrom. Em algumas modalidades, a leucemia mieloide aguda (LMA) é leucemia mieloide aguda mutada por (NPM1) de nucleofosmino abstrato (isto é, leucemia mieloide aguda NPM1mut).
[00211] Em modalidades particulares, os compostos da invenção são usados para tratar leucemia associada com um rearranjo de LLM, leucemia linfocítica aguda associada com um rearranjo de LLM, leucemia linfoblástica aguda associada com um rearranjo de LLM, leucemia linfoide aguda associada com um rearranjo de LLM, leucemia mieloide aguda associada com um rearranjo de LLM, leucemia mielogenosa aguda associada com um rearranjo de LLM, ou leucemia mieloblástica aguda associada com um rearranjo de LLM. Como usado aqui, "rearranjo de LLM" significa um rearranjo do gene de LLM.
[00212] Em algumas modalidades, doenças e condições tratáveis com compostos da invenção incluem resistência à insulina, pré- diabetes, diabetes (por exemplo, diabetes do tipo 2 ou diabetes do tipo 1), e risco de diabetes. Em algumas modalidades, doenças e condições tratáveis com compostos da invenção incluem hiperglicemia. Em algumas modalidades, a hiperglicemia é associada com diabetes, tal como diabetes do tipo 2. Em algumas modalidades, compostos da invenção são usados para tratar perda de resposta a outros agentes antidiabéticos e/ou função de célula beta reduzida em um paciente ou indivíduo. Em algumas modalidades, os compostos da invenção são usados para restaurar a resposta a outros agentes antidiabéticos e/ou restaurar a função de celula beta e/ou reduzir a necessidade de insulina em um paciente ou indivíduo. Em algumas modalidades, os compostos da invenção são usados para reduzir aresistência à insulina, reduzir o risco de diabetes, ou reduzir os aumentos na glicose sanguínea causados por uma estatina em um indivíduo tomando uma estatina. Em algumas modalidades, os compostos da invenção são usados para tratar diabetes e um indivíduo tomando uma estatina ou prevenir diabetes em um indivíduo tomando uma estatina. Métodos da invenção incluem diminuir, reduzir, inibir, suprimir, limitar ou controlar nos níveis de glicose sanguínea elevada do paciente. Em outros aspectos, métodos da invenção incluem aumento, estimulação, realce, promoção, indução ou ativação na sensibilidade à insulina do indivíduo. Estatinas incluem, porém não estão limitados à atorvastatina, cerivastatina, fluvastatina, lovastatina, mevastatina, pitavastatina, pravastatina, rousuvastatina e simvastatina.
[00213] Em algumas modalidades, um paciente é tratado com (por exemplo, administrado) um composto da presente invenção em uma quantidade suficiente para tratar ou melhorar uma ou mais das doenças e condições relacionadas acima (por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz). Os compostos da invenção podem também ser úteis na prevenção de uma ou mais das doenças relacionadas aqui. Terapia de Combinação
[00214] A invenção também se refere a uma terapia de combinação para o tratamento de uma doença ou um distúrbio descrito aqui. Em algumas modalidades, a terapia de combinação compreende administrar pelo menos um composto da presente invenção em combinação com um ou mais outros agentes farmaceuticamente ativos para o tratamento de câncer ou outros distúrbios mediados por menina/LLM. Em algumas modalidades, a terapia de combinação compreende administrar pelo menos um composto da presente invenção em combinação com um ou mais outros agentes farmaceuticamente ativos, tal como para o tratamento de câncer. Os agentes farmaceuticamente ativos podem ser combinados com um composto da invenção em forma de dosagem simples, ou os terapêuticos podem ser administrados simultânea ou sequencialmente como formas de dosagem separadas.
[00215] Os compostos de acordo com a invenção podem também ser usados em combinação com imunoterapias, incluindo porém não limitado às terapias com base em célula, terapias de anticorpo e terapias de citocina, para o tratamento de uma doença ou distúrbio descrito aqui.
[00216] Em certas modalidades, os compostos de acordo com a invenção são usados em combinação com uma ou mais imunoterapias passivas, incluindo porém não limitados a fármacos de anticorpo monoclonal nu e fármacos de anticorpo monoclonal conjugado. Exemplos de fármacos de anticorpo monoclonal nu que podem ser usados, porém não estão limitados a rituximabe (Rituxan®), um anticorpo contra o antígeno CD20; trastuzumabe (Herceptin®), um anticorpo contra a proteína HER2; alemtuzumabe (Lemtrada®, Campath®), um anticorpo contra o antígeno CD52; cetuximabe (Erbitux®), um anticorpo contra a proteína EGFR; e bevacizumabe (Avastin®) que um inibidor antiangiogênese de proteína VEGF.
[00217] Exemplos de anticorpos monoclonais que podem ser usados incluem, porém não estão limitados ao anticorpo radiorrotulado ibritumomabe tiuxetan (Zevalin®); anticorpo radiorrotulado tositumomabe (Bexxar®); e imunotoxina gentuzumabe ozogamicina (Mylotarg®) que contém caliceamicina; BL22, um conjugado de imunotoxina-anticorpo monoclonal anti-CD22; anticorpos radiorrotulados tais como OncoScint® e ProstaScint®; brentuximabe vedotina (Adcetris®); ado-trastuzumabe entansina (Kadcyla®, também chamado TDM-1).
[00218] Outros exemplos de anticorpos terapêuticos que podem ser usados incluem, porém não estão limitados a, REOPRO® (abciximabe), um anticorpo contra o receptor de glicoproteína IIb/IIIa em plaquetas; ZENAPAX® (daclizumabe) um imunossupressor, anticorpo monoclonal humanizado anti-CD25; PANOREX™, um anticorpo IgG2a de antígeno de superfície celular anti-17-IA de murino; BEC2, um anticorpo de IgG anti-idiotipo de murino (epítopo GD3); IMC-C225, um anticorpo de IgG anti-EGFR quimérico; VITAXIN™ um anticorpo humanizado de integrina anti-aVß3; Campath 1H/LDP-03, um anticorpo de IgG1 v anti CD52; Smart M195, um anticorpo de IgG humanizado anti-CD33; LYMPHOCIDE™, um anticorpo de IgG humanizado anti-CD22; LYMPHOCIDE™ Y-90; Linfoscan; Nuvion® (contra CD3; CM3, um anticorpo humanizado anti-ICAM3; IDEC-114, um anticorpo primatizado anti-CD80; IDEC-131, um anticorpo humanizado anti-CD40L; IDEC- 151, um anticorpo primatizado anti-CD4; IDEC-152, um anticorpo primatizado anti-CD23; SMART anti-CD3, uma IgG humanizada anti- CD3; 5G1.1, um um anticorpo de fator anticomplemento 5 (C5); D2E7, um anticorpo humanizado anti-TNF-a; CDP870, um fragmento de Fab anti-TNF-a humanizado; IDEC-151, um anticorpo de IgG1 primatizado anti-CD4; MDX-CD4, um anticorpo de IgG humano anti-CD4; CD20- estreptdavidina (+biotina-ítrio 90); CDP571, um anticorpo de IgG4 humanizado anti-TNF-a; LDP-02, um anticorpo humanizado anti-a4ß7; OrthoClone OKT4A, um anticorpo de IgG humanizado anti-CD4; ANTOVA™, um anticorpo de IgG humanizado anti-CD40L; ANTEGREN™, um anticorpo humanizado anti-VLA-4 IgG antibody; e CAT-152, um anticorpo humano anti-TGF-ß2.
[00219] Em certas modalidades, os compostos de acordo com a invenção são usados em combinação com uma ou mais imunoterapias alvejadas contendo toxinas, porém não um, incluindo porém não limitado a denileucina diftitox (Ontak®), IL-2 ligada à toxina da difteria.
[00220] Os compostos de acordo com a invenção podem tambem ser usados em combinação com imunoterapias adjuvantes para o tratamento de uma doença ou distúrbio descrito aqui. Tais imunoterapias adjuvants incluem, porém não estão limitadas às citocinas, tais como fator de estimulação de colônia de granulócito- macrófago (GM-CSF), fator de estimulação de colônia de granulócito (G-CSF), proteína inflamatória de macrófago (MIP)-1-alfa, interleucinas (incluindo IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-12, IL-15, IL-18, IL-21, e IL-27), fatores de necrose de tumor (incluindo TNF-alfa), e interferons (incluindo IFN-alfa, IFN-beta, e IFN-gama); hidróxido de alumínio (alum); Bacille Calmette-Guérin(BCG); hemocianina da lapa do buraco de fechadura (KLH); adjuvante de Freund incompleto (IFA); QS-21; DETOX; Levmaisol; e Dinitrofenil (DNP), e combinações dos mesmos, tal como, por exemplo, combinações de interleucinas, por exemplo IL-2, com outras citocinas, tal como IFN-alfa.
[00221] Em certas modalidades, os compostos de acordo com a invenção são usaados em combinação com terapia de vacina, incluindo porém não limitado a vacinas de célula de tumor autolóloga e alogênica, vacinas de antígeno (incluindo vacinas de antígeno polivalente), vacinas de célula dendrítica, e vacinas virais.
[00222] Em outra modalidade, a presente invenção compreende administrar a um indivíduo com câncer uma quantidade eficaz de um composto da invenção e uma ou mais terapias anticâncer adicionais selecionadas de: cirurgia, agentes/fármacos anticâncer, terapia biológica, terapia de radiação, terapia anti-angiogênese, imunoterapia, transferência adotiva de células efetoras, terapia de gene ou terapia hormonal. Exemplos de agentes/fármacos anticâncer são descritos abaixo.
[00223] Em algumas modalidades, os agentes/fármaco anticâncer é/são, por exemplo, adriamicina, aactinomicina, bleomicina, vinblastina, cisplatina, acivicina; aclarubicina; cloridrato de acodazol; acronina; adozelesina; aldesleucina; altretamina; ambomicina; acetato de ametantrona; aminoglutetimida; ansacrina; anastrozol; antramicina; asparaginase; asperlina; azacitidina; azetepa; azotomicina; batimastate; benzodepa; bicalutamida; cloridrato de bisantreno; dimesilato de bisnafida; bizelesina; sulfato de bleomicina; brequinar sódico; bropirimina; bussulfano; cactinomicina; calusterona; caracemida; carbetímero; carboplatina; carmustina; cloridrato de carubicina; carzelesina; cedefingol; clorambucila; cirolmicina; cladribina; mesilato de crisnatol; ciclofosfamida; citarabina; dacarbazina; cloridrato de daunorrubicina; decitabina; dexormaplatina; dezaguanina; mesilato de dezaguanina; diaziquona; doxorubicina; cloridrato de doxorrubicina; droloxifeno; citrato de droloxifeno; propionato de dromostanolona; duazomicina; edatrexate; cloridrato de eflornitina; elsamitrucina; enloplatina; enpromato; epipropidina; cloridrato de epirrubicina; erbulozol; cloridrato de esorrubicina; estramustina; fosfato sódico de estramustina; etanidazol; etoposida; fosfato de etoposida; etoprina; cloridrato de fadrozol; fazarabina; fenretinida; floxuridina; fosfato de fludarabina; fluorouracil; flurocitabina; fosquidona; fostriecina sódica; gencitabina; cloridrato de gencitabina; hidroxiureia; cloridrato de idarrubicina; ifosfamida; ilmofosina; iproplatina; cloridrato de irinotecan; acetato de lanreotida; letrozol; acetato de leuprolida; cloridrato de liarozol; lometrexol sódico; lomustina; cloridrato de losoxantrona; masoprocol; maitansina; cloridrato de mecloretamina; acetato de megestrol; acetato de melengestrol; melfalan; menogaril; mercaptopurina; metotrexato; metotrexato sódico; metoprina; meturedepa; mitindomida; mitocarcina; mitocromina; mitogilina; mitomalcina; mitomicina; mitosper; mitotano; cloridrato de mitoxantrona; ácido micofenólico; nocodazol; nogalamicina; ormaplatina; oxissurano; pegaspargase; peliomicina; pentamustina; sulfato de peplomicina; perfosfamida; pipobromano; pipossulfano; cloridrato de piroxantrona; plicamicina; plomestano; porfímero sódico; porfiromicina; prednimustina; cloridrato de procarbazina; puromicina; cloridrato de puromicina; pirazofurina; riboprina; rogletimida; safingol; cloridrato de safingol; semustina; simtrazeno; esparfosato sódico; esparsomicina; cloridrato de espirogermânio; espiromustina; espiroplatina; estreptonigrina; estreptozocina; sulofenur; talisomicina; sódico tecogalan; tegafur; cloridrato de teloxantrona; temoporfina; teniposida; teroxirona; testolactona; thiamiprina; tioguanina. tiotepa; tiazofurina; tirapazamina; citrato de toremifeno; acetato de trestolona; fosfato de triciribina; trimetrexato; glicuronato de trimetrexato; triptorelina; cloridrato de tubulozol; mostarda de uracila; uredepa; vapreotida; verteporfina; sulfato de vinblastina; sulfato de vincristina; vindesina; sulfato de vindesina; sulfato de vinepidina; sulfato de vinglicinato; sulfato de vinleurosina; tartarato de vinorelbina; sulfato de vinrosidina; sulfato de vinzolidina; vorozol; zeniplatina; zinostatina; cloridrato de zorubicina; palbociclibe; Iervoi® (ipilimumabe); MecinistTM (trametinibe); peginterferon alfa-2b, interferon alfa-2b recombinante; SilatronTM (peginterferon alfa-2b); Tafinlar® (dabrafenibe); Zelboraf® (vemurafenibe); ou nivolumabe.
[00224] Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser administrados em combinação com métodos existentes de tratamento de cânceres, por exemplo, por quimioterapia, irradiação ou cirurgia. Desse modo, e também fornecido um método de tratamento de câncer que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto da invenção, ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um indivíduo em necessidade de tal tratamento, em que uma quantidade eficaz tem pelo menos um agente quimioterapêutico de câncer adicional é administrado ao indivíduo. Exemplos de agentes quimioterapêuticos de câncer adequados incluem qualquer um de: abarelix, ado-trastuzumabe entansina, aldesleucina, alentuzumabe, alitretinoina, alopurinol, altretamina, anastrozol, trióxido arsênico, asparaginase, azacitidina, bevacizumabe, bexaroteno, bleomicina, bortezombi, bortezomibe, bussulfano intravenoso, bussulfano oral, calusterona, capecitabina, carboplatina, carmustina, cetuximabe, clorambucil, cisplatina, cladribina, clofarabina, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, dalteparina sódica, dasatinibe, daunorrubicina, decitabina, denileucina, denileucina diftitox, dexrazoxano, docetaxel, doxorrubicina, propionato de dromostanolone, eculizumabe, entansina, epirubicina, eribulina, erlotinibe, estramustina, fosfato de etoposida, etoposida, everolimus, exemestano, citrato de fentanila, filgrastim, floxuridina, fludarabina, fluorouracil, fruquintinibe, fulvestrant, gefitinibe, gencitabina, gentuzumabe ozogamicina, acetato de goserelina, acetato de histrelina, ibritumomabe tiuxetan, idarubicina, ifosfamida, imatinibe mesilato, interferon alfa 2a, irinotecan, ixabepilona, lapatinibe ditosilato, lenalidomida, letrozol, leucovorina, acetato de leuprolida, levmaisol, lomustina, mecloretamina, acetato de megestrol, melfalan, mercaptopurina, metotrexato, metoxsalen, mitomicina C, mitotano, mitoxantrona, fenpropionato de nandrolona, nelarabina, nofetumomabe, oxaliplatina, paclitaxel, paclitaxel formulação de nanopartícula estabilizada por albumina, pamidronato, panitumumabe, pegaspargase, pegfilgrastim, pemetrexed dissódico, pentostatina, pertuzuma, pipobroman, plicamicina, procarbazina, quinacrina, rasburicase, rituximabe, sorafenibe, estreptozocina, sulfatinibe, sunitinibe, sunitinibe maleato, tamoxifeno, temozolomida, teniposida, testolactona, talidomida, tioguanina, tiotepa, topotecan, toremifeno, tositumomabe, trastuzumabe, tretinoina, mostarda de uracila, valrubicina, vinblastina, vincristina, vinorelbina, volitinibe, vorinostate, e zoldronato.
[00225] Em modalidades particulares, os compostos de acordo com a invenção são usados em combinação com um ou mais agentes anti- câncer selecionados de metotrexato, formulação de nanopartícula estabilizada por paclitaxel albumina, ado-trastuzumabe entansina, eribulina, doxorrubicina, fluorouracil, everolimo, anastrozol, pamidronato dissódico, exemestano, capecitabina, ciclofosfamida, docetaxel, epirrubicina, toremifeno, fulvestrante, letrozol, gencitabina, cloridato de gencitabina, acetato de goserelina, trastuzumabe, ixabepilona, lapatinibe ditosilato, megestrol acetato, tamoxifeno citrato, pamidronato dissódico, palbociclibe, e pertuzumabe para o tratamento de câncer de mama.
[00226] Outros agentes/fármacos anticâncer incluem, porém não estão limitados a: 20-epi-1,25 di-hidroxivitamina D3; 5-etiniluracil; abiraterona; aclarrubicina; acilfulveno; adecipenol; adozelesina; aldesleucina; antagonistas de ALL-TK; altretamina; ambamustina; amidox; amifostina; câncer aminolevulínico; anrrubicina; ansacrina; anagrelida; andrografolida; inibidores de angiogênese; antagonista D; antagonista G; antarelix; proteína-1 morfogenética anti-dorsalizing; antiandrogênio; antiestrogênio; antineoplaston; oligonucleotídeos antissentido; glicinato de afidicolina; moduladores de gene de apoptose; reguladores de apoptose; câncer apurínico; ara-CDP-DL-PTBA; arginina desaminase; asulacrina; atamestano; atrimustina; axinastatina 1; axinastatina 2; axinastatina 3; azasetron; azatoxina; azatirosina; derivados de baccatina III; balanol; batimastate; antagonistas de BCR/ABL; benzoclorinas; benzoilstaurosporina; derivados de beta lactam; beta-aletina; betaclamicina B; ácido betulínico; inibidor de bFGF; bicalutamida; bisantreno; bisaziridinilspermina; bisnafeto; bistrateno A; bizelesina; breflato; bropirimina; budotitano; butionina sulfoximina; calcipotriol; calfostina C; derivados de camptotecina; canaripox IL-2; capecitabina; carboxamida-amino-triazol; carboxiamidotriazol; CaRest M3; CARN 700; inibidor derivado de cartilagem; carzelesina; inibidores de caseína cinase; castanospermina; cecropina B; cetrorelix; clorinas; cloroquinoxalina sulfonamida; cicaproste; cis-porfirina; cladribina; análogos de clomifeno; clotrimazol; colismicina A; colismicina B; combretastatina A4; análogo de combretastatina; conagenina; crambescidina 816; crisnatol; criptoficina 8; derivados de criptoficina A; curacina A; inibidores de cinase dependente de ciclina; ciclopentantraquinonas; cicloplatam; cipemicina; ocfosfato de citarabina; fator de citolítico; citostatina; dacliximabe; decitabina; dehidrodidemnina B; deslorelina; dexametasona; dexifosfamida; dexrazoxano; dexverapamil; diaziquona; didemina B; didox; dietilnorspermina; di-hidro-5-azacitidina; 9- dioxamicina; difenil espiromustina; docosanol; dolasetron; doxifluridina; droloxifeno; dronabinol; duocarmicina SA; ebselen; ecomustina; edelfosina; edrecolomabe; eflornitina; elemeno; emitefur; epirrubicina; epristerida; análogo de estramustina; agonistas de estrogênio; antagonistas de estrogênio; etanidazol; fosfato de etoposida; fadrozol; fazarabina; fenretinida; filgrastim; finasterida; flavopiridol; flezelastina; fluasterona; fludarabina; cloridrato de fluorodaunorunicina; forfenimex; formestano; fostriecina; fotemustina; texafirina de gadolínio; nitrato de gálio; galocitabina; ganirelix; inibidores de gelatinase; gencitabina; inibidores de glutationa; hepsulfam; heregulina; bisacetamida de hexametileno; hipericina; ácido ibandrônico; idarrubicina; idoxifeno; idramantona; ilmofosina; ilomastate; imidazoacridonas; imiquimode; peptídeos imunoestimulates; inibidor de receptor de fator 1 crescimento semelhante à insulina; iobenguano; iododoxorrubicina; ipomeanol, 4-; iroplact; irsogladina; isobengazol; iso-homo-halicondrina B; itasetron; jasplacinolida; kahalalide F; triacetato de lamelarina-N; lanreotida; leinamicina; lenograstim; sulfato de lentinan; leptolstatina; letrozol; fator de inibição de leucemia; leuprolida+estrogênio+progesterona; leuprorelina; levmaisol; liarozol; análogo de poliamina linear; peptídeo dissacarídeo lipofílico; compostos de platina lipofílicos; lissoclinamida 7; lobaplatina; lombricina; lometrexol; lonidamina; losoxantrona; lovastatina; loxoribina; lurtotecan; texafirina de lutécio; lisofilina; peptídeos líticos; maitansina; manostatina A; marimastate; masoprocol; maspina; inibidores de matrilisina; inibidores de metaloproteinase matriz; menogaril; merbarona; meterelina; metioninase; metoclopramida; inibidor de MIF; mifepristona; miltefosina; mirimostim; RNA de filamento duplo incompatível; mitoguazona; mitolactol; análogos de mitomicina; mitonafida; fator de crescimento de crescimento de fibroblasto de mitotoxina-saporina; mitoxantrona; mofaroteno; molgramostim; anticorpos monoclonais, gonadotrofina coriônica humana; monofosforil lipídio A+parede de célula de miobacteria sk; mopidamol; inibidor de gene de resistência a múltiplos fármacos; terapia com base em suppressor de múltiplos tumores 1; agente anticâncer de mostarda; micaperóxido B; extrato de parede de célula micobacteriana; miriaporona; N-acetildinalina; benzamidas substituídas por N; nafarelina; nagrestipe; naloxona+pentazocina; napavina; nafterpina; nartograstim; nedaplatina; nemorrubicina; ácido neridrônico; endopeptidase neutra; nilutamida; nisamicina; moduladores de óxido nítrico; antioxidante de nitróxido; nitrulina; O6-benzilguanina; octreotídeo; ocicenona; oligonucleotídeos; onapristona; ondansetrona; ondansetrona; oracina; indutor de citocina oral; ormaplatina; osaterona; oxaliplatina; oxaunomicina; palauamina; palmitoilrizoxina; ácido pamidrônico; panaxitriol; panomifeno; parabactina; pazeliptina; pegaspargase; peldesina; polissulfato pentosano de sódio; pentostatina; pentrozol; perflubron; perfosfamida; álcool perílico; fenazinomicina; fenilacetato; inibidores de fosfatase; picibanila; cloridrato de pilocarpina; pirarrubicina; piritrexim; placetina A; placetina B; inibidor de ativador de plasminógeno; complexo de platina; compostos de platina; complexo de platina-triamina; porfímero sódico; porfiromicina; prednisona; propil bis- acridona; prostaglandina J2; inibidores de proteassoma; modulador imunológico com base em proteína A; inibidores de proteína cinase C; microalgal; inibidores de proteína tirosina fosfatase; inibidores de purina nucleosídeo fosforilase; purpurinas; pirazoloacridina; conjugado de hemoglobina piridoxilada - polioxietileno; antagonistas de raf; raltitrexed; ramosetron; inibidores de ras farnesil proteína transferase; inibidores de ras; inibidor de ras-GAP; retelliptina desmetilada; rênio Re 186 etidronato; rizoxina; ribozimas; RII retinamida; rogletimida; roitucina; romurtida; roquinimex; rubiginona B1; ruboxila; safingol; saintopina; SarCNU; sarcofitol A; sargramostimo; miméticos de Sdi 1; semustina; inibidor de derivado de senescência 1; oligonucleotídeos de sentido; inibidores de transdução de sinal; moduladores de transdução de sinal; proteína de ligação de antígeno de cadeia simples; sizofirano; sobuzoxano; borocaptato de sódio; fenilacetato de sódio; solverol; proteína de ligação de somatomedina; sonermina; ácido esparfósico; espicamicina D; espiromustina; esplenopentina; espongistatina 1; esqualamina; inibidor de célula tronco; inibidores de divisão de célula tronco; estipiamida; inibidores de estromelisina; sulfinosina; antagonista de peptídeo intestinal vasoativo superativo; suradista; suramina; swainsonina; glicosaminoglicanos sintéticos; talimustina; metiodeto de tamoxifeno; tauromustina; tazaroteno; tecogalan sódico; tegafur; telurapirílio; inibidores de telomerase; temoporfina; temozolomida; teniposídeo; tetraclorodecaóxido; tetrazomina; taliblastina; tiocoralina; trombopoietina; mimético de trombopoietina; timalfasina; agonista de receptor de timopoietina; timotrinano; hormônio estimulante de tiroide; etiopurpurina de etila de estanho; tirapazamina; bicloreto de titanoceno; topsentina; toremifeno; fator de célula tronco totipotente; inibidores de tradução; tretinoína; triacetiluridina; triciribina; trimetrexato; triptorelina; tropisetrona; turosteroide; inibidores de tirosina cinase; tirfostinas; inibidores de UBC; ubenimex; fator inibitório de cresimento derivado de sino urogenital; antagonistas de receptor de urocinase; vapreotida; variolina B; sistema vetor, terapia de gene eritrócito; velaresol; veramina; verdinas; verteporfina; vinorelbina; vinxaltina; vitaxina; zanoterona; zilascorbe; estimalâmero de zinostatina; 5-fluorouracil; e leucovorina.
[00227] Em algumas modalidades, o agente/fármaco anticâncer é um agente que estabiliza os microtúbulos. Como usado aqui, um "estabilizante de microtubulina" significa um agente/fármaco anticâncer que age capturando as células nas fases G2-M devido à estabilização de microtúbulos. Exemplos de estabilizantes de microtubulina incluem análogos de ACLITAXEL® e Taxol®. Exemplos adicionais de estabilizantes de microtubilina incluem sem limitação os fármacos comercializados e fármacos em desenvolvimento: Discodermolida (também conhecida como NVP-XX-A-296); Epotilonas (tais como Epotilona A, Epotilona B, Epotilona C (também conhecida como desoxiEpotilona A ou dEpoA); Epotilona D (também referida como KOS- 862, dEpoB, e desoxiEpotilona B); Epotilona E; Epotilona F; N-óxido de Epotilona B; N-óxido de Epotilona A; 16-aza-Epotilona B; 21- aminoEpotilona B (também conhecida como BMS-310705); 21-hidroxiEpotilona D (também conhecida como DesoxiEpotilona F e dEpoF), 26-fluoroEpotilona); FR-182877 (Fujisawa, também conhecido como WS-9885B), BSF-223651 (BASF, também conhecido como ILX- 651 e LU-223651); AC-7739 (Ajinomoto, também conhecido como AVE- 8063A e CS-39.HCl); AC-7700 (Ajinomoto, também conhecido como AVE-8062, AVE-8062A, CS-39-L-Ser.HCl, e RPR-258062A); Fijianolida B; Laulimalida; Ceribrosídeo; Caribaeolina; Tacalonolida; Eleuterobina; Sarcodictina; Laulimalida; Dictiostatin-1; Jatrofano ésteres; e análogos e derivados dos mesmos.
[00228] Em outra modalidade, o agente/fármaco anticâncer é um agente que inibe os microtúbulos. Como usado aqui, um "inibidor de microtubulina" significa um agente anticâncer que age inibindo a polimerização de tubulina ou montagem de microtúbulo. Exemplos de inibidores de microtubulina incluem, sem limitação os seguintes fármacos comercializados e fármacos em desenvolvimento: Erbulozol (também conhecido como R-55104); Dolastatina 10 (também conhecida como DLS-10 e NSC-376128); isetionato de mivobulina (também conhecido como CI-980); Vincristina; NSC-639829; ABT-751 (Abbott, também conhecido como E-7010); Altorirtinas (tais como Altorirtina A e Altorirtina C); Espongistatinas (tal como Espongistatina 1, Espongistatina 2, Espongistatina 3, Espongistatina 4, Espongistatina 5, Espongistatina 6, Espongistatina 7, Espongistatina 8, e Espongistatina 9); cloridrato de Cemadotina (também conhecido como LU-103793 e NSC-D-669356); Auristatina PE (também conhecida como NSC- 654663); Soblidotina (também conhecida como TZT-1027), LS-4559-P (Pharmacia, também conhecido como LS-4577); LS-4578 (Pharmacia, também conhecido como LS-477-P); LS-4477 (Pharmacia), LS-4559 (Pharmacia); RPR-112378 (Aventis); sulfato de vincristina; DZ-3358 (Daiichi); GS-164 (Takeda); GS-198 (Takeda); KAR-2 (Hungarian Academy of Sciences); SAH-49960 (Lilly/Novartis); SDZ-268970 (Lilly/Novartis); AM-97 (Armad/Kyowa Hakko); AM-132 (Armad); AM- 138 (Armad/Kyowa Hakko); IDN-5005 (Indena); Criptoficina 52 (também conhecida como LY-355703); Vitilevuamida; Tubulisina A; Canadensol; Centaureidina (também conhecida como NSC-106969); T-138067 (Tularik, também conhecido como T-67, TL-138067 e TI-138067); COBRA-1 (Parker Hughes Institute, também conhecido como DDE-261 e WHI-261); H10 (Kansas State University); H16 (Kansas State University); Oncocidina A1 (também conhecida como BTO-956 e DIME); DDE-313 (Parker Hughes Institute); SPA-2 (Parker Hughes Institute); SPA-1 (Parker Hughes Institute, também conhecido como SPIKET-P); 3-IAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, também conhecido como MF-569); Narcosina (também conhecida como NSC- 5366); Nascapina, D-24851 (Asta Medica), A-105972 (Abbott); Hemiasterlina; 3-BAABU (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine, também conhecido como MF-191); TMPN (Arizona State University); acetilacetonato de Vanadoceno; T-138026 (Tularik); Monsatrol; Inanocina (também conhecida como NSC-698666); 3-IAABE (Cytoskeleton/Mt. Sinai School of Medicine); A-204197 (Abbott); T-607 (Tularik, também conhecido como T-900607); RPR-115781 (Aventis); Eleuterobinas (tal como Desmetileleuterobina, Desaetileleuterobina, Isoeleuterobina A, e Z-Eleuterobina); Halicondrina B; D-64131 (Asta Medica); D-68144 (Asta Medica); Diazonamida A; A-293620 (Abbott); NPI-2350 (Nereus); TUB-245 (Aventis); A-259754 (Abbott); Diozostatina; (-)-Fenil-histina (também conhecida como NSCL-96F037); D-68838 (Asta Medica); D-68836 (Asta Medica); Mioseverina B; D 43411 (Zentaris, também conhecido como D-81862); A-289099 (Abbott); A-318315 (Abbott); HTI-286 (também conhecido como SPA- 110, sal de trifluoroacetato) (Wyeth); D-82317 (Zentaris); D-82318 (Zentaris); SC-12983 (NCI); fosfato sódico de resverastatina; BPR-0Y- 007 (National Health Research Institutes); SSR-250411 (Sanofi); Combretastatina A4; eribulina (Halaven®); e análogos e derivados dos mesmos.
[00229] Em outras modalidades, os compostos de acordo com a invenção são usados em combinação com um ou mais agentes de alquilação, antimetabólitos, produtos naturais ou hormônicos.
[00230] Exemplos de agentes de alquilação úteis nos métodos da invenção incluem, porém não estão limitados a mostardas de nitrogênio (por exemplo, mecloroetamina, ciclofosfamida, clorambucil, melfalan, etc.), etilenimina e metilmelaminas (por exemplo, hexametilmelamina, tiotepa), sulfonatos de alquila (por exemplo, bussulfano), nitrosoureias (por exemplo, carmustina, lomusitna, semustina, estreptozocina, etc.), ou triazenos (decarbazina, etc.).
[00231] Exemplos de antimetabólitos úteis nos métodos da invenção incluem, porém não estão limitados a análogo de ácido fólico (por exemplo, metotrexato), ou análogos de pirimidina (por exemplo, fluorouracila, floxouridina, citarabina), e análogos de purina (por exemplo, mercaptopurina, tioguanina, pentostatina). Exemplos de produtos naturais úteis nos métodos da invenção incluem, porém não estão limitados a alcaloides vinca (por exemplo, vinblastina, vincristina), epipodofilotoxinas (por exemplo, etoposida, teniposida), antibióticos (por exemplo, actinomicina D, daunorrubicina, doxorrubicina, bleomicina, plicamicina, mitomicina) ou enzimas (por exemplo, L- asparaginase).
[00232] Exemplos de hormônios e antagonistas úteis para o tratamento de câncer incluem, porém não estão limitados a adrenocorticosteroides (por exemplo, prednisona), progestinas (por exemplo, caproato de hidroxiprogesterona, acetato de megestrol, acetato de medroxiprogesterona), estrogênios (por exemplo, dietilstilbestrol, etinil estradiol), antiestrogênio (por exemplo, tamoxifeno), androgênios (por exemplo, propionate de testosterona, fluoximesterona), antiandrogênio (por exemplo, flutamida), e análogo de hormônio de liberação de gonadotropina (por exemplo, leuprolida).
[00233] Outros agentes que podem ser usados em combinação com os compostos da invenção para o tratamento de câncer incluem complexos de coordenação de platina (por exemplo, cisplatina, carboblatina), antracenediono (por exemplo, mitoxantrona), ureia substituída (por exemplo, hidroxiureia), derivado de metil hidrazina (por exemplo, procarbazina), e supressor adrenocortical (por exemplo, mitotano, aminoglutetimida). Outros agentes/fármacos anticâncer que podem ser usados em combinação com os compostos da invenção incluem, porém não estão limitados a, moduladores de receptor de fígado X (LXR), incluindo agonistas de LXR e agonistas beta-seletivos de LXR; inibidores de receptor de hidrocarboneto de arila (AhR); inibidores da enzima poli ADP ribose polimerase (PARP), incluindo olaparibe, iniparibe, rucaparibe, veliparibe; inibidores de tirosina cinases receptoras de fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), incluindo cediranibe; inibidores de proteína de morte celular programada 1 (PD-1), incluindo nivolumabe (Bristol-Myers Squibb Co.) e pembrolizumabe (Merck & Co., Inc.; MK-3475); inibidores de MEK, incluindo cobimetinibe; inibidores de enzima B-Raf, incluindo vemurafenibe; inibidores de antígeno de linfócito T citotóxico (CTLA-4), incluindo tremelimumabe; inibidores de ligante de morte programada 1 (PD-L1), incluindo MEDI4736 (AstraZeneca); inibidores da via Wnt; inibidores de receptor de fator de crescimento epidérmico (EGFR) incluindo AZD9291 (AstraZeneca), erlotinibe, gefitinibe, panitumumabe, e cetuximabe; inibidores de receptor de adenosina A2A; inibidores de receptor de adenosina A2B; inibidores de receptor de fator estimulante de colônia 1 (CSF1R), incluindo PLX3397 (Plexxikon), e inibidores de CD73.
[00234] Os compostos da invenção podem ser usados em combinação com uma ou mais estratégias terapêuticas incluindo inibidores de ponto de verificação imunológica, incluindo inibidores de PD-1, PD-L1, e CTLA-4.
[00235] Os compostos da invenção podem ser usados em combinação com um ou mais agentes anticâncer selecionados de inibidores de MCL-1, por exemplo, homo-harringtonina (HHT) e omacetaxina; inibidores de BCL-2, por exemplo, venetoclax (ABT-199), navitoclax (ABT-263), ABT-737, gossipol (AT-101), apogossipolona (ApoG2) e obatoclax; inibidores seletivos de exportação nuclear (SINEs), por exemplo, selinexor (KPT-330).
[00236] Em modalidades particulares, os compostos da invenção são usados em combinação com um ou mais agentes anticancer selecionados de metotrexato (Abitrexate®; Folex®; Folex PFS®; Mexate®; Mexate-AQ®); nelarabina (Arranon®); blinatumomabe (Blincyto®); cloridrato de rubidomicina ou cloridrato de daunorrubicina (Cerubidine®); ciclofosfamida (Clafen®; Cytoxan®; Neosar®); clofarabina (Clofarex®; Clolar®); citarabina (Cytosar-U®; Tarabina PFS®); dasatinibe (Sprycel®); cloridrato de doxorrubicina; asparaginase Erwinia chrysanthemi (Erwinaze); mesilato de imatinibe (Gleevec®); cloridrato de ponatinibe (Iclusig®); mercaptopurina (Purinethol; Purixan); pegaspargase (Oncaspar®); prednisona; sulfato de vincristina (Oncovin®, Vincasar PFS®, Vincrex®); lipossoma de sulfato de vincristina (Marqibo®); hiper-CVAD (ciclofosfamida fracionada, vincristina, adriamicina, e dexametasona); trióxido arsênico (Trisenox®); cloridrato de idarrubicina (Idamycin®); cloridrato de mitoxantrona; tioguanina (Tabloid®); ADE (citarabina, daunorrubicina, e etoposida); alentuzumabe (Lemtrada®, Campath®); clorambucil (Ambochlorin®, Amboclorin®, Leukeran®, Linfolizin®); ofatumumabe (Arzerra®); cloridrato de bendamustina (Treanda®); fosfato de fludarabina (Fludara®); obinutuzumabe (Gazyva®); ibrutinibe (Imbruvica®); idelalisibe (Zydelig®); cloridrato de mecloretamina (Mustargen®); rituximabe (Rituxan®); clorambucil-prednisona; CVP (ciclofosfamida, vincristina, e prednisona); bosutinibe (Bosulif®); bussulfano (Busulfex®; Myleran®); mepessuccinato de omacetaxina (Synribo®); nilotinibe (Tasigna®); Intron® A (interferon Alfa-2b recombinante); inibidores de DOT1L, incluindo EPZ-5676 (Epizima, Inc.); e inibidores de bromodomínio e proteínas de motif extra-terminal (BET) (inibidores de BET), incluindo MS417, JQ1, I-BET 762, e I-BET 151 para o tratamento de leucemia.
[00237] Os compostos da invenção podem ser usados em combinação com um ou mais outros agentes ou terapias para o tratamento de resistência à insulina, pré-diabetes, diabetes (por exemplo, diabetes do tipo 2 ou diabetes do tipo 1), e risco de diabetes, incluindo porém não limitado a insulinas e análogos de insulina, tais como Humulin® (EIi Lilly), Lantus® (Sanofi Aventis), Novolin® (Novo Nordisk), e Exubera® (Pfizer); Avandamet® (HCI de metformina e maleato de rosiglitazona, GSK); Avandaril® (glimepirida e maleato de rosiglitazona, GSK); Metaglip® (glipizida e HCl de metformina, Bristol Myers Squibb); Glucovance® (gliburida e HCl de metformina, Bristol Myers Squibb); agonistas de PPAR gama, tal como Avandia® (maleato de rosiglitizona, GSK) e Actos® (cloridrato de pioglitazona, Takeda/Eli Lilly); sulfonilureias, tais como Amaril® (glimepirida, Sanofi Aventis), Diabeta® (gliburida, Sanofi Aventis), Micronase®/Glynase® (gliburida, Pfizer), e Glucotrol®/Glucotrol XL® (glipizida, Pfizer); meglitinidas, tais como Prandin®/NovoNorm® (repaglinida, Novo Nordisk), Starlix® (nateglinida, Novartis), e Glufast® (mitiglinida, Takeda); biguanidas, tal como Glucophase®/Glucophase XR® (HCl de metformina, Bristol Myers Squibb) e Glumetza® (HCl de metformina, Depomed); tiazolidinadionas; análogos de amilina; análogos de GLP-1; inibidores de DPP-IV tais como Januvia® (sitagliptina, Merck) e Galvus® (vildagliptina, Novartis); inibidores de PTB-1 B; inibidores de proteína cinase (incluindo inibidores de proteína cinase ativada por AMP); antagonistas de glucagon, beta inibidores de de glicogênio sintase cinase-3; inibidores de glicose-6- fosfatase; inibidores de glicogênio fosforilase; inibidores de cotransportador de glicose sódica; e inibidores de alfa-glicosidase, tal como Glycet® (miglitol, Pfizer); Estatinas, fibratos, e Zetia® (ezetimiba); alfa-bloqueadores; beta-bloqueadores; bloqueadores de canal de cálcio; diuréticos; inibidores de enzima convertendo angiotensina (ACE); ACE duplo e inibidores de endopeptidase neutros (NEP); bloqueadores receptores de angiotensina (ARBs); inibidores de aldosterona sintase; antagonistas receptores de aldosterona; antagonistas receptores de endotelina; orlistate; fentermina; sibutramina; Acomplia® (rimonabante); tiazolidinodionas (por exemplo, rosiglitazona, pioglitazona); inibidores de SGLT 2 (por exemplo, dapagliflozina, etabonato de remogliflozina, sergliflozina, canagliflozina, e 1-cloro-4-(ß-D-glucopiranos-1-il)-2-[4-(('S)-tetra-hidrofuran-3-il0xi)- benzil]-benzeno); agonistas de PPAR-gama (por exemplo, Gl 262570) e antagonistas; moduladores de PPAR-gama/alfa (por exemplo, KRP 297); inibidores de alfa-glucosidase (por exemplo, acarbose, voglibose); inibidores de DPPIV (por exemplo, Januvia® (sitagliptina), Galvus®/Zomelis® (vildagliptina), Onglyza® (saxagliptina), Nesina®/Vipidia® (alogliptina), e Tradjenta®/Trajenta® (linagliptina)); antagonistas de alfa2; análogos e agonistas de receptor de proteína-1 tipo glucagon (GLP-1) (por exemplo, exendina-4); amilina; inibidores de proteína tirosinafosfatase 1; substâncias que afetam produção de glicose desregulada no fígado, por exemplo, inibidores de glicose-6- fosfatase, ou frutose-1,6-bisfosfatase, glicogênio fosforilase; antagonistas receptores de glucagon; inibidores de fosfoenol piruvato carboxiquinase; glicogênio sintase quinase e ativadores de glucoquinase; agentes de redução de lipídio, tais como, inibidores de HMG-CoA-redutase (por exemplo, sinvastatina, atorvastatina); fibratos (por exemplo, bezafibrato, fenofibrato), ácido nicotínico e os derivados dos mesmos, agonistas de PPAR-alfa, agonistas de PPAR-delta; inibidores de ACAT (por exemplo, avasimiba); inibidores de absorção de colesterol, tal como, ezetimiba; substâncias de ligação de ácido biliar, tal como, colestiramina; inibidores de transporte de ácido biliar ilíaco; compostos que aumentam HDL, tais como, inibidores de CETP e reguladores de ABC1; substâncias ativas para o tratamento de obesidade, tais como, sibutramina e tetra-hidrolipostatina; SDRIs; axoquina; leptina; miméticos de leptina; antagonistas do receptor de canabinoide l; e antagonistas de receptor de MCH-1; agonistas receptores de MC4; antagonistas de NPY5 e NPY2; agonistas beta3 adrenérgicos, tais como, SB-418790 e AD-9677; agonistas do receptor de 5HT2c; antagonistas receptores de GABA; bloqueadores de canal de Na; topiramato; inibidores de proteína-quinase C; inibidores de produto final de glicação avançada; e inibidores de aldose redutase. Formulações Farmacêuticas, Administração e Formas de Dosagem
[00238] Quando empregados como produtos farmacêuticos, os compostos da invenção podem ser administrados na forma de uma composição farmacêutica que se refere a uma combinação de um composto da invenção, ou seu sal farmaceuticamente aceitável, e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável. Estas composições podem ser preparadas de uma maneira bem conhecida na técnica farmacêutica, e podem ser administradas por uma variedade de rotinas, dependendo de se o tratamento sistêmico ou local é desejado e da área a ser tratada. A administração pode ser tópica (incluindo oftálmica e às membranas mucosas incluindo liberação intranasal, vaginal e retal), pulmonar (por exemplo, por inalação ou insuflação de pós ou aerosóis, incluindo por nebulizador; intratraqueal, intranasal, epidérmica e transdérmica), ocular, oral ou parenteral. Os métodos para liberação ocular podem incluir administração tópica (colírios), injeção intravitreal, subconjuntival ou periocular ou introdução por cateter balão ou inserções oftálmicas cirurgicamente colocadas no saco conjuntival. A administração parenteral inclui infusão ou injeção intravenosa, intraarterial, subcutânea, intraperitoneal, ou intramuscular; ou administração intracranial, por exemplo, intratecal ou intraventricular. A administração parenteral pode ser na forma de uma dose única em bolus, ou pode ser, por exemplo, por uma bomba de perfusão contínua. As formulações e composições farmacêuticas para administração tópica podem incluir emplastros transdérmicos, ungüentos, loções, cremes, géis, gotas, supositórios, pulverizadores, líquidos e pós. Veículos farmacêuticos convencionais, bases aquosas, oleosas ou em pó, espessantes e similares podem ser necessários ou desejáveis.
[00239] Esta invenção também inclui composições farmacêuticas que contêm, como o ingrediente ativo, um ou mais dos compostos da invenção acima em combinação com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis. Na preparação das composições da invenção, o ingrediente ativo é tipicamente misturado com um excipiente, diluído por um excipiente ou incluso dentro de um tal veículo na forma de, por exemplo, uma cápsula, sachê, papel, ou outro recipiente. Quando o excipiente serve como um diluente, ele pode ser um material sólido, semissólido ou líquido, que age como um veículo (vehicle), veículo (carrier) ou meio para o ingrediente ativo. Desse modo, as composições podem ser na forma de comprimidos, pílulas, pós, pastilhas, sachês, selos, elixires, suspensões, emulsões, soluções, xaropes, aerosóis (como um sólido ou em um meio líquido), unguentos contendo, por exemplo, até 10% por peso do composto ativo, cápsulas de gelatina macias e duras, supositórios, soluções injetáveis estéreis, e pós embalados estéreis.
[00240] Compostos ou composições descritos aqui podem ser administrados a um paciente usando qualquer quantidade e qualquer rotina de administração eficaz para o tratamento ou diminuição da severidade de uma ou mais das doenças e condições descritas aqui. A quantidade exata requerida variará de indivíduo para indivíduo, dependendo das espécies, idade, e condição geral do indivíduo, a severidade da infecção, doença ou distúrbio, o agente particular, seu modo de administração, e similares. Os compostos fornecidos são preferivelmente formulados em uma particular forma de dosagem unitária para facilidade de administração e uniformidade de dosagem. A expressão "forma de dosagem unitária"como usada aqui se refere a uma unidade fisicamente discreta de agente apropriado para o paciente a ser tratado.
[00241] A dosagem terapêutica dos compostos da presente invenção pode variar de acordo com, por exemplo, o particular uso para o que o tratamento é preparado, a maneira de administração do composto, a saúde e condição do paciente, e o diagnóstico do médico prescritor. A proporção ou concentração de um composto da invenção em uma composição farmacêutica pode variar dependendo de alguns fatores incluindo dosagem, características químicas (por exemplo, hidrofobicidade), e a rotina de administração. Por exemplo, os compostos da invenção podem ser fornecidos em uma solução de tampão fisiológico aquosa contendo cerca de 0,1 a cerca de 10% peso/v do composto para administração parenteral. Algumas faixas de dose típicas são de cerca de 1 µg/kg a cerca de 1 g/kg de peso corporal por dia. Em algumas modalidades, a faixa de dose é de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia. A dosagem é provável depender de tais variáveis como o tipo e extensão de progressão da doença ou distúrbio, o estado de saúde total do paciente particular, a eficácia biológica relativa do composto selecionado, formulação do excipiente, e sua rotina de administração. As doses eficazes podem ser extrapoladas de curvas de resposta de dose derivadas de sistemas de teste de modelo de animal ou in vitro.
EXEMPLOS
[00242] Como retratado nos exemplos abaixo, os compostos da invenção foram preparados e isolados de acordo com os seguintes procedimentos gerais. Será apreciado que, embora os métodos gerais possam retratar a síntese de certos compostos da presente invenção, os seguintes métodos gerais, e outros métodos conhecidos por alguém versado na técnica, podem ser aplicados a todos os compostos e subclasses e espécies de cada destes compostos, como descrito aqui.
[00243] As reações de micro-ondas foram realizadas em um reator CEM usando sistema discovery SP. Onde os dados de RMN são apresentados, os espectros foram obtidos em um Varian-400 (400 MHz).
[00244] Os espectros são reportados como ppm downfield de tetrametilsilano com o número de próton, multiplicidades e, em certos casos, constantes de acoplamento indicados parenteticamente junto com referência ao solvente deuterado. Os compostos foram também purificados por sistema de cromatografia rápida ISCO utilizando métodos padrão descritos no manual.
[00245] Os compostos foram purificados por método de HPLC preparativa acídica, básica ou neutra como descrito abaixo nos Métodos de HPLC A a G.
Método A de RP-HPLC preparativa:
[00246] RP-HPLC (C-18, Boston Green ODS 150*30mm*5 µm; eluente-gradiente: água+0,1% de TFA / acetonitrila = 81:19 a 51:49)
[00247] Fase móvel A: água+0,1% de TFA; Fase móvel B: CH3CN; Taxa de fluxo: 30 mL/min; Detecção: UV 220 nm / 254 nm; Coluna: Boston Green ODS 150*30mm*5 µm; Temperatura de Coluna: 30°C.
Método B de RP-HPLC preparativa:
[00248] RP-HPLC (C-18, Phenomenex Synergi C18 250*21,2mm*4µm; eluente-gradiente: água+0,1% de TFA / acetonitrila = 75: 25 a 45:55).
[00249] Fase móvel A: água+0,1% de TFA; Fase móvel B: CH3CN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Detecção: UV 220 nm / 254 nm; Coluna: Phenomenex Synergi C18 250*21,2mm*4µm; Temperatura de Coluna: 30°C.
Método C de RP-HPLC preparativa:
[00250] RP-HPLC (C-18, Phenomenex Synergi C18 250*21,2mm*4µm; eluente-gradiente: água+0,05% de HCl/acetonitrila = 82:18 a 52:48).
[00251] Fase móvel A: Água com 0,05% de HCl; Fase móvel B: CH3CN; Taxa de fluxo: 30 mL/min; Detecção: UV 220 nm / 254 nm; Coluna: Phenomenex Gemini 150*30mm*4µm; Temperatura de Coluna: 30°C.
Método D de RP-HPLC preparativa:
[00252] RP-HPLC (C-18, Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 µm; eluente-gradiente: água+0,05% de hidróxido de amônia / acetonitrila = 30:70 a 0:100).
[00253] Fase móvel A: Água com 0,05% ammonia hydroxide; Fase móvel B: CH3CN; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Detecção: UV 220 nm / 254 nm; Coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10µm; Temperatura de Coluna: 30°C. Método E de RP-HPLC preparativa:
[00254] Fase móvel A: Água com 0,1% de TFA; Fase móvel B: acetonitrila com 0,1% de TFA; Taxa de fluxo: 25 mL/min; Detecção: UV 220 nm / 254 nm; Coluna: C-18 Synergi Max-RP 150*30mm*4µm; Temperatura de Coluna: 30°C. Método F de HPLC preparativa neutra: Fase móvel A: água Fase móvel B: CH3CN Taxa de fluxo: 120 mL/min Detecção: UV 220 nm / 254 nm Coluna: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50mm*10 um Temperatura de Coluna: 30°C Método G de HPLC preparativa: Fase móvel A: Água (NH4HCO3 a 10 mM) Fase móvel B: CH3CN Taxa de fluxo: 25 mL/min Detecção: UV 220 nm / 254 nm Coluna: Xtimate C18 150 * 25 mm * 5 um Temperatura de Coluna: 30°C
[00255] Os dados de LCMS foram obtidos utilizando as seguintes condições cromatográficas: Método A de LCMS:
[00256] Sistema de HPLC: Waters ACQUITY; Coluna: Waters ACQUITY CSHTM C18 1,7 µM.Guard coluna: Waters Assy. Frita, 0,2 µM, 2,1 mm; Temperatura de Coluna: 40 °C.
[00257] Fase móvel: A: TFA: Água (1: 1000, v:v); Fase móvel B: TFA: ACN (1: 1000, v:v); Taxa de fluxo: 0.65 mL/min; Volume de injeção: 2 µL; Tempo de aquisição: aproximadamente 1,5 min. Programa de Gradiente:
[00258] Espectrômetro de Massa: Waters SQD; Ionização: Ionização por Eletrovaporização Positiva (ESI); Modo de varredura (100-1400 m/z a cada 0,2 segundo); Voltagem Capilar ES: 3,5 kV; Voltagem de Cone ES: 25 V.
[00259] Temperatura da Fonte: 120°C; Temperatura da Dessolvatação: 500°C; Fluxo de gás de dessolvatação: Configuração de nitrogênio 650 (L/h); Fluxo de Gás de Cone: Configuração de nitrogênio 50 (L/h).
Método B de LCMS:
[00260] Sistema de HPLC: Waters ACQUITY; Coluna: Waters ACQUITY CSHTM C18 1,7 µM.Guard coluna: Waters Assy. Frita, 0,2 µM, 2,1 mm; temperatura da coluna: 40°C.
[00261] Fase móvel: A: TFA: Água (1: 1000, v:v); Fase móvel B: TFA: ACN (1: 1000, v:v); Taxa de fluxo: 0,65 mL/min; Volume de injeção: 2 µL; Tempo de aquisição: aproximadamente 1,5 min.
[00262] Espectrômetro de Massa: Waters SQD; Ionização: Ionização por Eletrovaporização Positiva (ESI); Modo de varredura (100-1400 m/z a cada 0,2 segundo); Voltagem Capilar ES: 3,5 kV; Voltagem de Cone ES: 25 v.
[00263] Temperatura da Fonte: 120°C; Temperatura da Dessolvatação: 500°C; Fluxo de gás de dessolvatação: Configuração de nitrogênio 650 (L/h); Fluxo de Gás de Cone: Configuração de nitrogênio 50 (L/h). Método C de LCMS:
Método G de LCMS:
[00264] Sistema de HPLC: Waters ACQUITY; Coluna: coluna Waters ACQUITY CSHTM C18 1,7 µM.Guard: Waters Assy. Frita, 0,2 µM, 2,1 mm; temperatura da Coluna: 40°C.
[00265] Fase móvel: A: TFA: Água (1: 1000, v:v); Fase móvel B: TFA: ACN (1: 1000, v:v); Taxa de fluxo: 1 mL/min; Volume de injeção: 2 µL; Tempo de aquisição: aproximadamente 115 min.
[00266] Espectrômetro de Massa: Waters SQD; Ionização: Ionização por Eletrovaporização Positiva (ESI); Modo de varredura (100-1400 m/z a cada 0,2 segundo); Voltagem Capilar ES: 3,5 kV; Voltagem de Cone ES: 25 v.
[00267] Temperatura da Fonte: 120°C; Temperatura da Dessolvatação: 500°C; Fluxo de gás de dessolvatação: Configuração de nitrogênio 650 (L/h); Fluxo de Gás de Cone: Configuração de nitrogênio 50 (L/h).
[00268] Os seguintes são métodos de separação por Cromatografia de Fluido Supercrítico (SFC) para compostos racêmicos. Método A
[00269] Instrumento: Thar SFC 80; Coluna: AD 250mm*30mm, 5 µm; Fase móvel: A: CO2 supercrítico, B: IPA (0,05% de DEA), A: B =80:20 at 60 mL/min; Temperatura de Coluna: 38 °C; Pressão do Bico: 100 Bar; Temperatura do Bico: 60°C; Temperatura do Evaporador: 20°C; Temperatura do Aparador: 25°C; Comprimento de onda: 220 nm. Método B
[00270] Instrumento: SFC MG2; Coluna: OJ 250mm*30mm, 5 µm; Fase móvel: A: CO2 supercrítico, B: MeOH (0,05% de DEA), A:B =90:10 a 70 mL/min; Temperatura de Coluna: 38°C; Pressão do Bico: 100 Bar Temperatura do Bico: 60°C; Temperatura do Evaporador: 20°C; Temperatura do Aparador: 25°C; Comprimento de onda: 220nm.
[00271] Os seguintes são os métodos de SFC analítica (anal.) uilizados para caracterizar os compostos finais.
[00272] Método A de SFC analítica: Instrumento: Thar SFC 80; Coluna: AD_H 4 mm*40 mm, 5 µm; Fase móvel: A: CO2 supercrítico, B: IPA (0,05% de DEA), A: B =80:20 a 4 mL/min; ciclo de 3 minutos, Temperatura de Coluna: 38°C; Pressão do Bico: 100 Bar; Temperatura do Bico: 60°C; Temperatura do Evaporador: 20°C; Temperatura do Aparador: 25°C; Comprimento de onda: 220 nm.
[00273] Método B de SFC analítica: Instrumento: Thar SFC 80; Coluna: AD_H 4 mm*40mm, 5 µm; Fase móvel: A: CO2 supercrítico, B: IPA (0,05% de DEA), A: B =80:20 a 2,4 mL/min; 10 min run, Temperatura de Coluna: 38°C; Pressão do Bico: 100 Bar; Temperatura do Bico: 60°C; Temperatura do Evaporador: 20°C; Temperatura do Aparador: 25°C; Comprimento de onda: 220 nm.
[00274] Método C de SFC analítica: Instrumento: Thar SFC 80; Coluna: AD_H 4 mm*40mm, 5 µm; Fase móvel: A: CO2 supercrítico, B: IPA (0,05% de DEA), A: B =80:20 a 2,8 mL/min; ciclo de 13 min, Temperatura de Coluna: 38°C; Pressão do Bico: 100 Bar; Temperatura do Bico: 60°C; Temperatura do Evaporador: 20°C; Temperatura do Aparador: 25°C; Comprimento de onda: 220 nm.
[00275] Método D de SFC analítica: Instrumento: Thar SFC 80; Coluna: AD-3, 5 mm*40mm, 5 µm; Fase móvel: A: CO2 supercrítico, B: IPA (0,05% de DEA), A: B =80:20 at 25 mL/min; ciclo de 5 minutos, Temperatura de Coluna: 38°C; Pressão do Bico: 100 Bar; Temperatura do Bico: 60°C; Temperatura do Evaporador: 20°C; Temperatura do Aparador: 25°C; Comprimento de onda: 220 nm.
Método A de Difração de Pó de Raio X (XRPD)
[00276] Difractômetro de raio X Rigaku MiniFlex 600 com um detector D/teX de velocidade elevada foi usado sob as seguintes condições: 40kV, 15mA, radiação por Cu K-alfa (comprimento de onda = 1,54 A). A faixa de varredura 2-theta foi de 3-45° e a faixa de varredura foi de 10°/min. Método B de Difração de Pó de Raio X (XRPD)
Método C de Difração de Pó de raio X (XRPD) Geometria de Transmissão
[00277] Os padrões de XRPD foram coletados com um difractômetro PANalítico X'Pert PRO MPD usando um feixe incidente de radiação por Cu produzida usando uma fonte de foco fino, longo Optix. Um reflexo de múltiplas camadas elipticamente graduado foi usado para focalizar os raios X de Cu Kaatravés do espécime e no detector. Antes da análise, um espécime de silício (NIST SRM 640e) foi analisado para verificar se a posição observada do pico Si-111 era consistente com a posição certificada por NIST. Um espécime da amostra foi colocado entre películas de 3 µm de espessura e foi analisado em geometria de transmissão. Uma interrupção de feixe, antidispersão de curta extensão e e ponta de faca antidispersão foram usadas para minimizar o fundo gerado pelo ar. Fendas Soller para os feixes incidentes e difratados foram usados para minimizar a ampliação da divergência axial. Os padrões de dofração foram coletados usando um detector sensível à posição de varredura (X'Celerator) 240 mm do espécime e software Data Collector v.2.2b. Geometria de Reflexo
[00278] Os padrões de XRPD foram coletados com um difractômetro PANalítico X'Pert PRO MPD usando um feixe incidente de radiação por Cu Kaproduzida usando uma fonte de foco fino, longo e um filtro de níquel. O difractômetro foi configurado usando a geometria Bragg- Brentano simétrica. Antes da análise, um espécime de silício (NIST SRM 640e) foi analisado para verificar se a posição observada do pico Si-111 era consistente com a posição certificada por NIST. Um espécime da amostra foi preparado como uma camada fina, circular centrada em um substrato de fundo zero de silício. Fendas antidispersão (SS) foram usadas para minimizar o fundo gerado por ar. Fendas Soller para os feixes incidentes e difratados foram usados para minimizar a ampliação da divergência axial. Padrões de difração foram coletados usando um detector sensível à posição de varredura (X'Celerator) localizado a 240 mm da amostra e software Data Collector v.2.2b.
Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC)
[00279] Medições de DSC foram realizadas usando um calorímetro de varredura diferencial TA Instruments 2920. A calibração de temperatura foi realizada usando metal de índio rastreável por NIST. Sorção/Desorção
Dinâmica de Vapor (DVS)
[00280] Os dados de sorção/desorção de umidade foram coletados em um Analisador de Sorção de Vapor VTI SGA-100. NaCl e PVP foram usados como padrões de calibração. As amostras não foram secadas antes da análise. Os dados de sorção e desorção foram coletados sobre uma faixa de umidade relativa a 5% a 95% em incrementos de umidade relativa a 10% sob uma purga de nitrogênio. O critério de equilíbrio usado para análise foi menor do que 0,0100% em peso de mudança em 5 minutos com um equilíbrio máximo de 3 horas. Os dados não foram corrigidos quanto ao teor de umidade inicial das amostras.
Análise Gravimétrica Térmica (TGA)
[00281] As análises de TG foram realizadas usando um analisador termogravimétrico TA Instruments Q5000 IR. A calibração de temperatura foi realizada usando níquel e ALUMEL™. Cada amostra foi preparada em uma panela de platina e o forno foi aquecido sob nitogênio.
[00282] A invenção é ilustrada pelos seguintes exemplos, em que as seguintes abreviações podem ser empregadas:
Etapa 1: 2-(2-bromo-4-fluorofenóxi)acetato de etila
[00283] À solução de 2-bromo-4-fluorofenol (250 g, 1,31 mol) em CH3CN (2 L) foram adicionados K2CO3 (270 g, 1,97 mol) e 2- bromoacetato de etila (219 g, 1,31 mol). A suspensão foi aquecida a 90°C durante 1,5 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para fornecer 2-(2-bromo-4-fluorofenóxi)acetato de etila cru um óleo marrom, que foi usado na etapa seguinte. Produção: 312 g; 1H RMN (CDCl3): d 7,32 (dd, J = 7,6, 3,2 Hz, 1H), 6,95-6,97 (m, 1H), 6,82 (dd, J = 8,8, 4,4 Hz, 1H), 4,66 (s, 2H), 4,27 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H). 1F RMN (CDCl3): d -120,06 (s, 1F). Etapa 2: 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-2-tioxo-2,3-di-hidropirimidin-4(1H)- ona
[00284] A uma solução de 2-(2-bromo-4-fluorofenóxi)acetato de etila (100 g) em THF não anidroso (2 L) foram adicionados formiato de etila (108 g) e NaH (20 g) a 0°C. A mistura foi agitada a 35-45°C durante 18 h. O solvente foi removido sob vácuo e EtOH anidroso (2 L) e tioureia (25 g, 324,8 mmol) foram adicionados e agitados a 90°C durante 16 h. A mistura foi concentrada e diluída com água (2 L) e extraída com éter de petróleo:acetato de etila (10:1; 500 mL x 3). A camada aquosa foi acidificada para pH = 4 por HCl aquoso (1N, 200 mL) e o sólido branco foi precipitado. A mistura foi filtrada e a massa filtrada resultante foi secada para fornecer 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-2-tioxo-2,3-di- hidropirimidin-4(1H)-ona crua (62 g) como um sólido branco, que foi usado na etapa seguinte sem purificação. Produção: 62 g; método C de LCMS: Rt = 0,638 min; (M+H)+ = 316,9, 318,9 (isótopos de cloro). Etapa 3: 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-ol
[00285] A uma solução de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-2-tioxo-2,3-di- hidropirimidin-4(1H)-ona (62 g) em EtOH anidroso (1,5 L) foi adicionado Ni de Raney (62 g) e a mistura foi aquecida ao refluxo durante 6 h. O solvente foi removido sob vácuo e EtOH anidroso (2 L) foi adicionado. A mistura foi filtrada e a matéria-prima filtrada foi concentrada para fornecer 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-ol cru como um sólido cinza. Produção: 55 g. método C de LCMS: Rt = 0,619 min, (M+H)+ = 284,9 287,0 (isótopos de cloro).
Etapa 4: 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-4-cloropirimidina
[00286] A uma solução de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-ol (55 g) em SOCl2 (500 mL) foi adicionado DMF anidroso (5 mL). A mistura foi aquecida a 70°C durante 4 h. A mistura foi concentrada, dissolvida com DCM (500 mL), em seguida vertida em NaHCO3 saturado (aq) (500 mL) e agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A camada orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada. O resíduo foi em seguida purificado por coluna ISCO em sílica gel (de 100% éter de petróleo para EtOAc: éter de petróleo = 9:1) para fornecer 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-4-cloropirimidina como um sólido amarelo claro. Produção: 32 g. método C de LCMS: Rt = 0,858 min, (M+H)+ = 302,9, 304,9 (isótopos de cloro & bromo); 1H RMN (CDCl3): d 8,77 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,45 (dd, J = 7,6 3,2 Hz, 1H), 7,06 7,12 (m, 2H). 1F RMN (CDCl3): d -113,64 (s, 1F). Intermediários 2-10a.
[00287] Os seguintes intermediários foram preparados de acordo com o procedimento descrito para o Intermediário 1. Tabela 1. Intermediários 2-10a.
[00288] Uma solução de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-4-cloropirimidina (Intermediário 1, 4 g, 13,18 mmol), 2,7-diazaespiro[4.4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (3,0 g, 13,18 mmol) e K2CO3 (7,3 g, 52,72 mmol) em CH3CN (100 mL) foi agitada a 95°C durante 8 h. O sólido foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 10:1 a 3:2) para fornecer terc-butila 7-(5- (2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4.4]nonano-2- carboxilato de (Intermediário 11) como um óleo amarelo. Produção: 9,5 g; HPLC método C: Rt = 0.749 min; (M+H)+ = 493,0 495,1(isótopos de bromo); 1H RMN (CD3OD): d 8,29 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,54 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7-16 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,67-3,81 (t, 4H), 3,37 (s, 2H), 3,23-3,27 (m, 2H), 1,87-1,96 (t, 4H), 1,44 (s, 9H). 19F RMN (CD3OD): d -119,01. Intermediários 12-19.
[00289] Os seguintes intermediários foram preparados de acordo com o procedimento descrito para o Intermediário 11. Tabela 2. Intermediários 12-19
[00290] A uma solução de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-4- cloropirimidina (Intermediário 1, 5,55 g, 18,4 mmol) em CH3CN (80 mL) foi adicionado 2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (3,62 g, 18,4 mmol) e Na2CO3 (3,89 g, 36,74 mmol). A mistura foi agitada a 90-95°C durante 16 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica gel (éter de petróleo:acetato de etila = 0:1) para fornecer 6-(5-(2-bromo-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido amarelo. Produção: 6,5 g; método C de HPLC: Rt = 0,742 min, (M+H)+ = 465,0, 467,0 (isótopos de bromo). Intermediários 20a-25.
[00291] Os seguintes intermediários foram preparados de acordo com o procedimento descrito para o Intermediário 20. Tabela 3. Intermediários 20a-25
[00292] A uma suspensão de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4.4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 200 mg, 0,40 mmol), ácido (4-isopropilpirimidin-5- il)borônico (130 mg, 0,80 mmol) e K3PO4 (170 mg, 0,80 mmol) em dioxano (6 mL) e H2O (2 mL) foi adicionado paladaciclo de Sphos (14,4 mg, 0,02 mmol) sob atmosfera de N2 e a mistura foi agitada a 90°C durante 16 h. A mistura reacional foi lavada com água (80 mL) e extraída com EtOAc (3 x 50 mL), as camadas orgânicas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc = 1: 1, Rf = 0,25) para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(4- isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4] nonano- 2-carboxilato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 110 mg; método C de HPLC: Rt = 0,759 min; (M+H)+ = 535.2. Etapa 2: 2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano
[00293] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila (100 mg, 1,87 mmol) em CH2Cl2 (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A mistura foi agitada a 20-25°C durante 2 h. Em seguida, a mistura reacional foi neutralizada com NH3-H2O (pH = 8) e lavada com água (80 mL) e extraída com CH2Cl2 (3 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas em vácuo para fornecer 2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin- 4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano cru como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 90 mg; método C de HPLC: Rt = 0,575 min; (M+H)+ = 435.2. Intermediários 27-32.
[00294] Os seguintes intermediários foram preparados de acordo com o procedimento descrito para o Intermediário 26. Tabela 4. Intermediários 27-32 Intermediário 33. 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropil-N-metilbenzamida Etapa 1. 7-(5-(4-fluoro-2-(metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00295] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 9,5 g, 19,31 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (7,1 g, 9,66 mmol) foi adicionado em Et3N (13,4 mL) e MeOH (100 mL). Em seguida, a mistura reacional foi agitada a 65°C sob CO (3,51 kg/cm2 (50 psi)) durante cerca de 16 h. A reação foi filtrada através de celita e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com DCM: MeOH = 1: 0 ~ 10:1) para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo marom. Produção: 9,0 g; método de LC-MS E: Rt = 0,914 min; (M+H)+ = 473,2. Etapa 2. Ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico
[00296] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2- (metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (3,3 g, 6,99 mmol) em MeOH (30 mL), THF (30 mL) e H2O (10 mL) foi adicionado KOH (0,78 g, 13,98 mmol). A mistura foi agitada a 13-23°C durante 16 h. A mistura foi concentrada, e ajustada para o pH = 3-4 com HCl aquoso (3 mol / L). A mistura foi extraída com EtOAc (3 x 50 mL), e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer o ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico cru como um sólido marrom, que foi usado diretamente sem outra purificação. Produção: 3,2 g; método C de LCMS: Rt = 0,702 min, (M+H)+ = 459,0. 1H RMN (DMSO-d6): d8,30 (s, 1 H), 7,39-7,69 (m, 3 H), 6,95-7,05 (m, 1 H), 3,60-3,72 (m, 5 H), 3,17 (s, 3 H), 1,77-1,88 (m, 4 H), 1,38 (s, 9 H). 19F RMN (DMSO-d6): d-119,13. Etapa 3. 7-(5-(4-fluoro-2-isopropil(metil)carbamoil)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00297] A uma solução de ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico (2,9 g, 5,45 mmol) e N-metilpropan-2-amina (0,6 g, 8,18 mmol) em DCM (100 mL) foram adicionados HATU (3,1 g, 8,18 mmol) e DIPEA (2,1 g, 16,3 mmol). A mistura foi agitada a 13-21°C durante 16 h. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa neutra para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-isopropil(metil)carbamoil)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila. Produção: 2,1 g; Método E de LCMS: Rt = 0,731 min (M+H)+ = 514.1. 1H RMN (DMSO-d6): d8,30-8,33 (m, 1 H), 7,77-7,82 (m, 1 H), 7,19-7,29 (m, 2 H), 6,87-6,97 (m, 1 H), 4,67 (s, 1 H), 3,56-3,78 (m, 6 H), 3,15-3,17 (m, 2 H), 2,67-2,83 (m, 3 H), 1,79-1,84 (m, 4 H), 1,38 (s, 9 H), 1,06-1,11 (m, 6 H). 19F RMN (DMSO-d6): d-111,36. Etapa 4. 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro- N-isopropil-N-metilbenzamida
[00298] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2- (isopropil(metil)carbamoil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (1 g, 1,95 mmol) em DCM anidroso (10 mL) foi adicionado HCl-MeOH (2 mL, 4 mol / L em MeOH) lentamente a 0°C sob N2. A reação foi agitada a 17-23°C durante 16 h. A mistura foi ajustada para o pH = 11~12 com NaOH aquoso (1 mol / L) em seguida foi extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro- N-isopropil-N-metilbenzamida crua como um sólido marrom. Produção: 0,8 g (95% crude); método C de LCMS: Rt = 0,508 min, (M+H)+ = 414,0. Intermediários 35-39.
[00299] Os seguintes intermediários foram preparados de acordo com os procediento fornecido para o Intermediário 33. Tabela 5. Intermediários 35-39 Intermediário 40. 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído
[00300] A uma suspensão de 2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-carbonitrila (10 g, 57,75 mmol) em HCO2H (187 mL) e H2O (63 mL) fori adicionada liga de Ni-Al (6,19 g,144,38 mmol) em porções. Em seguida, a mistura foi agitada a 90°C durante 16 h. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado foi lavado com EtOH e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi lavado com água (150 mL) e filtrada. A massa filtrada foi secada sob pressão reduzida para fornecer 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído como um sólido branco acinzentado. Produção: 9,1 g (97,2%); Método D de LCMS: Rt = 1,404 min, (M+H)+ = 163,0. 1H RMN (CD3OD): d 9,87 (s, 1H), 7,65 (dd, J = 8,4, 1,2 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,19 (d, J = 8,0 Hz, 1H). Intermediário 41. 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida Etapa 1. 5-fluoro-2-metoxibenzoato de metila
[00301] A uma solução de ácido 5-fluoro-2-hydroxibenzoico (100 g, 641 mmol) em acetona (1000 mL) foram adicionados K2CO3 (190 g, 1380 mmol) e MeI (268,3 g, 1890 mmol). A mistura foi agitada a 50°C durante 16 h. A mistura foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com EtOAc (500 mL) e lavado com H2O (3 x 300 mL). A camada orgânica foi em seguida secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 20:1 para fornecer 5-fluoro-2-metoxibenzoato de metila. Produção: 78 g (66%). 1H RMN (CDCl3): d 7,50 (dd, J = 3,6 Hz, 8,8 Hz, 1H), 7,17-7,18 (m, 1H), 6,92 (dd, J = 4,0 Hz, 8,8 Hz 1H), 3,89 (s, 3H), 3,88 (s, 3H). Etapa 2. Ácido 5-fluoro-2-metoxibenzoico
[00302] A uma solução de 5-fluoro-2-metoxibenzoato de metila (25 g, 135,9 mmol) em MeOH (250 mL) e H2O (50 mL) foi adicionado KOH (25 g, 446,4 mmol). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 h. A mistura foi em seguida ajustada para o pH 3-4 solução de HCl a 2N e concentrada para remover MeOH sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com EtOAc (200 mL) e lavado com H2O (2 x 200 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer ácido 5-fluoro-2- metoxibenzoico cru como um sólido branco, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 23 g. Etapa 3. 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-metoxibenzamida
[00303] A uma solução de ácido 5-fluoro-2-metoxibenzoico (20 g, 117,6 mmol) e di-isopropilamina (23,8 g, 235,6mmol) em CH2Cl2 anidroso (300 mL) foram adicionados DIEA (22,8 g, 176,7 mmol) e HATU (53,6 g, 141,4 mmol) a 0°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 16 h. A mistura foi em seguida lavada com H2O (3 x 200 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 5:1 para fornecer 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-metoxibenzamida como um sólido branco. Produção: 22 g. método C de LCMS: valor de Rt: 0,785 min, (M+H)+ = 254,0. Etapa 4. 5-fluoro-2-hidróxi-N,N-di-isopropilbenzamida
[00304] A uma solução de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2- metoxibenzamida (15 g, 59,3 mmol) em anidroso CH2Cl2 (250 mL) foi adicionada com BBr3 (11 mL, 116,6 mmol) gota a gota at -70°C. A mistura foi agitada a 5°C durante 16 h. A mistura reacional foi extinta com MeOH (30 mL) lentamente a -78°C e ajustada para o pH 7-8 com solução de NaHCO3 saturado. A mistura foi extraída com EtOAc (2 x 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 4:1 para fornecer 5-fluoro-2- hidróxi-N,N-di-isopropilbenzamida como um sólido branco. Produção: 11 g. Método C de LCMS: Rt = 0,744 min; (M+H)+ = 240,0. Etapa 5. 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzamida
[00305] A uma solução de 5-fluoro-2-hidróxi-N,N-di- isopropilbenzamida (11,0 g, 46,0 mmol) e 5-bromopirimidina (21,8 g, 138,0 mmol) em DMF anidroso (300 mL) foi adicionado Cs2CO3 (45,0 g, 138,0 mmol). A mistura foi agitada a 130°C durante 16 h. A mistura foi adicionada a EtOAc (500 mL) e lavada com H2O (3 x 300 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 3:1 para fornecer 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzamida como um sólido branco. Produção: 14 g (97%) método C de LCMS: Rt = 0,731 min; (M+H)+ = 317,9. Etapa 6. 5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidina-1-óxido
[00306] A uma solução de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-(pirimidin-5- ilóxi)benzamida (14 g, 44,2 mmol) em CH2Cl2 anidroso (400 mL) foi adicionado m-CPBA (27 g, 132,7 mmol). A mistura foi agitada a 10°C durante 16 h. A mistura reacional foi extinta com solução de Na2SO3 saturado (200 mL) e lavada com NaHCO3 (2 x 200 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2CO3 anidroso, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 1-óxido de 5-(2-(di-isopropilcarbamoil)- 4-fluorofenóxi)pirimidina como um sólido amarelo claro, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 16 g (109%). método C de LCMS: Rt = 0,705 min, (M+H)+ = 333,9. Etapa 7. 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida
[00307] A uma solução de Et3N (7,3 g, 72,3 mmol) em CHCl3 (30 mL) foi adicionado POCl3 (12,5 g, 81,7 mmol) a 0°C. Em seguida, a mistura foi adicionada a uma solução de 5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidina-1-óxido (16,0 g, 48,0 mmol) em CHCl3 (270 mL) lentamente a 0°C. A mistura foi agitada a 65°C durante 16 h. A mistura foi em seguida lentamente adicionada a uma solução de NaHCO3 saturado (500 mL) e o pH foi ajustado para o 7-8 pela solução de NaHCO3 saturado NaHCO3. A mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 5:1 para fornecer 2-((4- cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (6 g) como um sólido amarelo. Método C de HPLC: Rt = 0,735 min, (M+H)+ = 351,9. 1H RMN (CDCl3): d8,71 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,02-7,12 (m, 3H), 3,73 3,80 (m, 1H), 3,46-3,53 (m, 1H), 1,49 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,26 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,14 (d, J = 6,8 Hz, 3H). 19F RMN (CDCl3): d-114.5. Intermediário 41a. 2-((4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro- N,N-di-isopropilbenzamida
[00308] O composto título foi sintetizado a partir do Intermediário 41 e 2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila pelo método descrito para a preparação de Intermediário 20. Método C de LCMS: 0,620 min, (M+H)+ = 413,2.
Intermediários 41b-41f.
[00309] Os seguintes intermediários foram preparados de acordo com o procedimento descrito para os Intermediários 41 e 41a. Tabela 6. Intermediários 42b-42f Intermediários 42 e 42c. 1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-carbaldeído e formiato de 2-(5-formil-2-oxo-2,3- di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)etila Etapa 1. 4-((2-hidroxietil)amino)-3-nitrobenzonitrila
[00310] A uma solução de 4-fluoro-3-nitrobenzonitrila (15 g, 90,4 mmol) e 2-aminoetanol (11,0 g, 180,7 mmol) em DMF anidroso (600 mL) foi adicionado K2CO3 (37,4 g, 271,2 mmol) sob N2, em seguida, a mistura reacional foi agitada a 25°C durante 2 h. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi lavado com H2O (100 mL) e a mistura foi extraída com EtOAc (3 x 500 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas para fornecer 4-((2-hidroxietil)amino)-3-nitrobenzonitrila. O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação como um sólido amarelo. Produção: 17,3 g. Método E de LCMS: Rt = 1,016 min; (M+H)+ = 207,9. Etapa 2. 3-amino-4-((2-hidroxietil)amino)benzonitrila
[00311] A uma solução de 4-((2-hidroxietil)amino)-3-nitrobenzonitrila (17,3 g, 83,6 mmol) em EtOH (800 mL) e H2O (400 mL) foram adicionados Fe (23,4 g, 418,0 mmol) e NH4Cl (44,8 g, 836,0 mmol) sob N2. A mistura reacional foi agitada a 80°C durante 2 h. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (500 mL), lavado com H2O (2 x 100 mL), salmoura (20 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtrada, e concentrada para fornecer 3-amino-4-((2-hidroxietil)amino)benzonitrila. O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação como um sólido vermelho amarronado. Produção: 11,6 g. Método D de LCMS: Rt = 0,941 min; (M+H)+ = 178,2. Etapa 3. 3-amino-4-((2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)amino)benzonitrila H
[00312] A uma solução de 3-amino-4-((2- hidroxietil)amino)benzonitrila (11,6 g, 65,46 mmol) e terc- butilclorodimetilsilano (11,84 g, 78,55 mmol) em DMF anidroso (300 mL) foi adicionado imidazol (11,14 g, 163,65 mmol), em seguida a reação foi agitada a 35°C durante 16 h. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. A mistura reacional foi adicionado à água (1000 mL) e extraída com EtOAc (3 x 500 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (100 mL), secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 3-amino-4-((2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)amino)benzonitrila como um óleo preto, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 25 g. método C de LCMS: Rt = 0,878 min; (M+H)+ = 292,1. Etapa 4. 1-(2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-carbonitrila
[00313] A uma solução de 3-amino-4-((2-((terc- butildimetilsilil)óxi)etil)amino)benzonitrila (14 g, 48,1 mmol) em anidroso THF (400 mL) foi adicionada uma solução de BTC (28,5 g, 96,2 mmol) a 0°C. Em seguida Et3N (33 mL) foi adicionado gota a gota à mistura a 0°C. Após adição, a reação foi agitada a 25°C durante 2 h. A reação foi vertida em NaHCO3 aquoso saturado (500 mL), extraída com EtOAc (3 x 300 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo: EtOAc = 5:1 a 1:1) para fornecer 1-(2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)-2- oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbonitrila. Produção: 4,8 g (31%). Método F de LCMS: Rt = 1,378 min, (M+H)+ = 318,3 1H RMN (CDCl3): d10,06 (brs, 1 H), 7,31 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,16 (s, 1H), 7,11 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 3,94-3,96 (m, 2 H), 3,83-3,85 (m, 2 H), 0,67 (s, 9 H), -0,198 (s, 6H). Etapa 5. 1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- carbaldeído e formiato de 2-(5-formil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-1-il)etila
[00314] A uma solução de 1-(2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)-2-oxo- 2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbonitrila (6,1 g, 19,2 mmol) em HCOOH (120 mL) e H2O (40 mL) foi adicionado Ni-Al (8,27 g, 96,2 mmol) sob N2, em seguida, a mistura reacional foi agitada a 90°C durante 16 h. A mistura reacional foi em seguida filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com DCM:MeOH = 10:1) para fornecer 1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol- 5-carbaldeído como um sólido branco e formiato de 2-(5-formil-2-oxo- 2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)etila como um sólido amarelo. Intermediário 42. Formiato de 2-(5-formil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-1-il)etila: Produção: 1,7 g (27%). Método F de LCMS: Rt = 0,858 min; (M+H)+ = 235,2 1H RMN (DMSO-d6): d 11,27 (brs, 1 H), 9,87 (s, 1 H), 8,12 (s, 1H), 7,63 (dd, J = 8,0, 1,2 Hz, 1 H), 7,42 (s, 1H), 7,37 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,35-4,38 (m, 2 H), 4,12-4,14 (m, 2 H). Intermediário 42c. 1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-carbaldeído: Produção: 1,5 g (27%). Método F de LCMS: Rt = 0,788 min; (M+H)+ = 207,2 1H RMN (DMSO-d6): d 11,20 (brs, 1 H), 9,86 (s, 1 H), 7,60 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,40 (s, 1H), 7,31 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,86 (s, 1 H), 3,85-3,86 (m, 2 H), 3,63-3,65 (m, 2 H). Intermediário 42a. 1-(2-metoxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- carbaldeído
[00315] O produto título foi preparado de acordo com o procedimento fornecido para o Intermediário 41 iniciando com 2-metoxietan-1-amina. Método F de LCMS: Rt = 0,828 min; (M+H)+ = 221,2. Intermediário 42b. 1-etil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído
[00316] O produto título foi preparado de acordo com o proedimento fornecido para o Intermediário 41, iniciando com etilamina Método F de LCMS: Rt = 0,868 min; (M+H)+ = 191,2. Intermediário 43. 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropil-N-metilbenzamida Etapa 1. 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidina
[00317] A uma solução de 2-bromo-4-fluorofenol (6 g, 31,41 mmol) e 5-bromopirimidina (5.7 g, 36,12 mmol) em DMF anidroso (60 mL) foi adicionado Cs2CO3 (30,7 g, 94,23 mmol) sob N2. A mistura reacional foi agitada a 130°C durante 16 h. A mistura reacional foi em seguida filtrada através de uma celita e diluída com H2O (60 mL). A mistura foi extraída com EtOAc (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 100 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 5-(2- bromo-4-fluorofenóxi)pirimidina como um óleo marrom que foi usado para a etapa seguinte diretamente. Produção: 6,5 g. Método F de LCMS: Rt = 0,969 min, (M+H)+ = 269,1. Etapa 2. 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzamida
[00318] A uma solução de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidina (5,5 g, crude, 20,45 mmol) e N-metilpropan-2-amina (12 g, 163,60 mmol) em DMF anidroso (60 mL) foram adicionados Pd(dppf)Cl2 (3 g, 4,09 mmol) e Et3N (14 mL, 102,25 mmol, d = 0,726 g/mL) sob atmosfera de CO. A reação foi agitada a 80°C durante 20 h com 3,51 kg/cm2 (50 psi). A reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo:EtOAc = 10:1 a 1:1) para fornecer 5-fluoro-N-isopropil- N-metil-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzamida um óleo marrom. Produção: 3,5 g. Método E de LCMS: Rt = 0,700 min; (M+H)+ = 290,1. Etapa 3. 5-(4-fluoro-2-(isopropil(metil)carbamoil)fenóxi)pirimidina-1- Óxido
[00319] A uma solução de 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-(pirimidin-5- ilóxi)benzamida (1,8 g, 6,22 mmol) em anidroso CH2Cl2 (80 mL) foi adicionado m-CPBA (2,6 g, 15,55 mmol) sob N2. A reação foi agitada a 11-20°C durante 30 h. A reação foi extinta com solução de NaHSO3 saturado (100 mL), extraída com CH2CI2 (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de NaHCO3 saturado (3 x 100 mL), salmoura (3 x 100 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 5-(4- fluoro-2 (isopropil(metil)carbamoil)-fenóxi)pirimidina-1-óxido como um sólido amarelo que foi usado para a etapa seguinte diretamente. Produção: 1,6 g; Método F de LCMS: Rt =0,886 min; (M+H)+ = 306,1. Etapa 4. 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropil-N- Metilbenzamida
[00320] A uma solução de Et3N (1,1 mL, 7,86 mmol, d = 0,726 g/mL) e POCl3 (1,2 g, 7,86 mmol) em CHCl3 (5 mL) foi adicionado 5-(4-fluoro- 2-(isopropil(metil)carbamoil)fenóxi)pirimidina-1-óxido (1,6 g, 5,24 mmol) em CHCl3 (15 mL) lentamente sob N2. A mistura reacional foi agitada a 65°C durante 16 h. A mistura reacional foi em seguida extinta com solução de NaHCO3 saturado (100 mL) e extraída com CH2Cl2 (3 x 80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 80 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo: EtOAc = 20:1 a 3:1) para fornecer 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro- N-isopropil-N-metilbenzamida como um sólido amarelo. Produção: 470 mg . Método E de LCMS: Rt = 0,982 min; (M+H)+ = 324,2. Intermediário 43a. 5-(2-(benzilóxi)-4-fluorofenóxi)-4-cloropirimidina
[00321] O produto título foi sintetizado de acordo com o procedimento descrito para o Intermediário 43, iniciando de 2- (benzilóxi)-4-fluorofenol. Método B de LCMS: Rt = 2,13 min; (M+H)+ = 313,3 1H RMN (CDCI3, 400 MHz): d8,66 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,32 - 7,27 (m, 3H), 7,19 - 7,15 (m, 3H), 6,84 - 6,81 (m, 1H), 6,76 - 6,71 (m, 1H), 5,02 (s, 2H). Intermediário 43b. 7-(5-(4-fluoro-2-hidroxifenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila Etapa 1. 7-(5-(2-(benzilóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00322] Uma solução de 5-(2-(benzilóxi)-4-fluorofenóxi)-4- cloropirimidina (0,80 mmol) e 2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (218 mg, 0,96 mmol) em iPrOH (2 mL) foi adicionada base de Hunig (285 µL, 1,60 mmol). A mistura reacional foi aquecida no reator de micro-ondas a 120°C durante 90 min. Após refriar para temperatura ambiente, a mistura foi diluída com H2O (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 15 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre Na2SO4, e concentrada sob vácuo. O produto cru foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel eluindo com 3% MeOH / DCM para fornecer 170 mg de 7-(5-(2-(benzilóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo laranja. Método B de LCMS: Rt = 1,71 min; (M+H)+ = 521,7. Etapa 2. 7-(5-(4-fluoro-2-hidroxifenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00323] A uma solução de 7-(5-(2-(benzilóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (160 mg, 0,3 mmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado paládio sobre carbono (5% de base seca, 33 mg, 30 µmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente sob a atmosfera de um balão de nitrogênio durante 3 h e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi em seguida concentrada sob pressão reduzida. O produto cru foi usado diretamente para a reação de etapa seguinte sem outra purificação. Método B de LCMS: Rt = 1,56 min; (M+H)+ = 431. Intermediário 44. N-(2-(5-formil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-1- il)etil)acetamida Etapa 1. N-(2-((4-ciano-2-nitrofenil)amino)etil)acetamida
[00324] A uma solução de 4-fluoro-3-nitrobenzonitrila (200 mg, 1,2 mmol) e N-(2-aminoetil)acetamida (245 mg, 2,4 mmol) em DMF anidroso (10 mL) foi adicionado K2CO3 (496 mg, 3,6 mmol) sob N2, em seguida, a mistura reacional foi agitada a 14-20°C durante 4 h. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi em seguida extraído com H2O (10 mL) e EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas para fornecer N-(2-((4- ciano-2-nitrofenil)amino)etil)acetamida. O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação como um sólido amarelo. Produção: 250 mg. Método D de LCMS: Rt = 1,256 min, (M+H)+ = 249,1. Etapa 2. N-(2-((2-amino-4-cianofenil)amino)etil)acetamida
[00325] A uma solução de N-(2-((4-ciano-2- nitrofenil)amino)etil)acetamida (250 mg, 1,0 mmol) em EtOH (10 mL) e H2O (5 mL) foram adicionados Fe (280 mg, 5,0 mmol) e NH4Cl (530 mg, 10 mmol) sob N2. A mistura reacional foi agitada a 80°C durante 2 h. A mistura reacional foi em seguida filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi extraído com H2O (10 mL) e EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada, e concentrada para fornecer N-(2-((2-amino- 4-cianofenil)amino)etil)acetamida. O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação como um sólido marrom. Produção: 200 mg. Método F de LCMS: Rt = 0,992 min, (M+H)+ = 219,1. Etapa 3. N-(2-(5-ciano-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-1- il)etil)acetamida
[00326] A uma solução de N-(2-((2-amino-4- cianofenil)amino)etil)acetamida (10 mg, 0,046 mmol) em THF anidroso (4 mL) foi adicionado Et3N (0,5 mL), em seguida uma solução de BTC (27 mg, 0,092 mmol) em THF anidroso (2 mL) foi adicionado gota a gota à mistura a 0°C. Após adição, a mistura reacional foi agitada a 3-14°C durante 12 h. A mistura reacional foi extraída com H2O (5 mL) e EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com CH2Cl2: MeOH = 1:0 a 10:1) para fornecer N-(2-(5-ciano-2-oxo-2,3- di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)etil)acetamida como um óleo marrom. Produção: 20 mg. Método F de LCMS: Rt = 1,175 min; (M+H)+ = 245,2. Etapa 4. N-(2-(5-formil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-1- il)etil)acetamida
[00327] A uma solução de N-(2-(5-ciano-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-1-il)etil)acetamida (20 mg, 0,082 mmol) em HCOOH (3 mL) e H2O (1 mL) foi adicionado Ni-Al (35 mg, 0,41 mmol), em seguida a reação foi agitada a 90 °C durante 12 h. A reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer N-(2-(5- formil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-1-il)etil)acetamida (15 mg, 92% de pureza, 75%). O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação como um sólido marrom. Produção: 15 mg. Método F de LCMS: Rt = valor de Rt: 0,773 min; (M+H)+ = 248,1. Intermediário 44a. 1-(2-(dimetilamino)etil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- carbaldeído
[00328] O produto título foi sintetizado de acordo com o procedimento descrito para o Intermediário 44 iniciando com N1,N1- dimetiletano-1,2-diamina e 4-fluoro-3-nitrobenzonitrila. Método F de LCMS: Rt = 0,773 min; (M+H)+ = 233,1. Intermediário 45. 3,3-dimetil-2-oxoindolina-6-carbaldeído
[00329] A uma solução de 6-bromo-3,3-dimetilindolin-2-ona (502 mg, 2,09 mmol) em DMF (10 mL) sob atmosfera de N2 foram adicionados Pd(OAc)2 (14 mg, 0,063 mmol), sacarina de N-formila (662 mg, 3,14 mmol), dppb (39 mg, 0,094 mmol), Na2CO3 (315 mg, 3,16 mmol) e Et3SiH ( 316 mg, 2,72 mmol). A mistura resultante foi aquecida para 80°C durante 16 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, lavada com H2O, salmoura, secada sobre anidroso Na2SO4, e filtrada. O filtrado foi em seguida concentrado para secura. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida para fornecer 70 mg de 3,3-dimetil-2-oxoindolina- 6-carbaldeído. Método B de LCMS: Rt = 1,63 min; (M+H)+ = 190. Intermediário 46. 6-formil-3-metil-2-oxoindolina-3-carbonitrila Etapa 1. 4-(2-ciano-1-ethóxi-1-oxopropan-2-il)-3-nitrobenzoato de Metila
[00330] A uma supensão a 60% de hidreto de sódio (2,0 g, 50 mmol) em DMF seco (50 mL) a 0°C foi adicionado 2-cianoacetato de etila (5,33 mL, 50 mmol) gota a gota e a mistura reacional foi agitada durante mai 30 min a 0°C. A suspensão cinza resultante foi adicionado 4-fluoro-3- nitrobenzoato de metila (7,97 g, 40 mmol) a 0°C. A mistura vermelho escuro resultante foi agitada a 0°C durante 30 min e aquecida para temperatura ambiene duante 2 h. A mistura reacional foi resfriada para 0°C, e MeI (7,8 mL) foi adicionado, seguido por KOtBu (8,4 g, 75 mmol). Após a adição, a mistura foi agitada durante 2 dias em temperatura ambiente e subsequentemente extinta com solução de NH4Cl aquoso. A mistura resultante foi em seguida extraída com EtOAc duas vezes. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com H2O e salmoura sucessivamente, e secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida para fornecer 4-(2-ciano-1-ethóxi-1-oxopropan-2-il)-3-nitrobenzoato de metila. Produção 6,04 g. Método B de LCMS: Rt = 1,63 min. Etapa 2. 3-ciano-3-metil-2-oxoindolina-6-carboxilato de metila
[00331] A uma solução de 4-(2-ciano-1-ethóxi-1-oxopropan-2-il)-3- nitrobenzoato de metila (6,039 g, 19,72 mmol) em EtOH (60 mL) foi adicionada solução de NH4Cl aquoso saturado (15 mL) e pó de ferro (5,803 g, 98,61 mmol). A mistura foi aquecida para refluxo durante a noite. A mistura foi em seguida resfriada para temperatura ambiente e filtrada através de uma curta almofada de celita e subsequentemente lavada com EtOAc. O filtrado foi lavado com H2O, salmoura, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida para fornecer 3-ciano-3-metil-2- oxoindolina-6-carboxilato de metila. Produção 4,404 g. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,07 min; (M+H)+ = 231. Etapa 3. 6-(Hidroximetil)-3-metil-2-oxoindolina-3-carbonitrila
[00332] A uma solução de 3-ciano-3-metil-2-oxoindolina-6- carboxilato de metila (2,101 g, 9,12 mmol) em THF seco (40 mL) sob atmosfera de N2 foi adicionada uma solução de LiBH4 (9,1 mL, 18,2 mmol), seguido por MeOH (0,2 mL). A mistura foi aquecida para refluxo durante 2 h e subsequentemente extinta com solução de NH4Cl aquoso. A mistura foi em seguida extraída duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com H2O e salmoura sucessivamente, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida para fornecer 6-(hidroximetil)-3-metil-2-oxoindolina-3-carbonitrila. Produção 1,42 g. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,79 min; (M+H)+ = 203,1. Etapa 4. 6-formil-3-metil-2-oxoindolina-3-carbonitrila
[00333] A uma solução de 6-(hidroximetil)-3-metil-2-oxoindolina-3- carbonitrila (0,597 g, 2,95 mmol) em DCM foi adicionado MnO2 ativo (2,57 g, 29,56 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite e em seguida filtrada através de uma almofada curta de celita. O filtrado foi concentrado para remover o solvente. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida para fornecer 6-formil-3-metil-2- oxoindolina-3-carbonitrila. Produção 0,347 g. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,25 min, (M+H)+ = 201,1. Intermediário 47. N-((1r,4r)-4-formilciclo-hexil)metanossulfonamida Etapa 1. (1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexano-1-carboxilato de Metila
[00334] Uma mistura de cloridrato de (1r,4r)-4-aminociclo-hexano-1- carboxilato de metila (50 g, 0,259 mol) e Et3N (130,8 g, 1,295 mol) em CH2Cl2 anidroso (2000 mL) foi agitada temperatura ambiente durante 20 min. MsCl (29,8 g, 0,259 mol) foi adicionado gota a gota a 0°C sob N2 e a mistura foi agitada a 0°C durante 2 h. A mistura reacional de DCM foi lavada com H2O (3 X 800 mL) e salmoura (800 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A mistura foi purificada por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo: EtOAc = 2:1 a 1:1 (adicionando 25 mL de CH2Cl2 em 1 L de éter de petróleo/acetato de etila para o eluente) para fornecer (1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexano-1-carboxilato de metila (58 g, 89,5%) como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3): d 4,45 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,29-3,23 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,24-2,13 (m, 1H), 2,11-2,09 (m, 2H), 2,05-2,02 (m, 2H), 1,55-1,51 (m, 2H), 1,29-1,26 (m, 2H). Etapa 2. N-((1r,4r)-4-formilciclo-hexil)metanossulfonamida
[00335] (1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexano-1-carboxilato de metila (20 g, 85,11 mmol) em toluene anidroso (500 mL) foi agitada a 40 °C durante 30 min sob N2. A solução resultante foi resfriada para -70 °C (temperatura interna). Uma solução de DIBAL-H (1 M em tolueno, 180 mL, 180 mmol) foi adicionada gota a gota em um período de tempo de 110 min sob N2 (mantendo a temperatura interna abaixo -70°C). Após adição, a mistura foi agitada vigorosamente a -70°C durante 4 h. MeOH (30 mL) foi em seguida cuidadosamente adicionado gota a gota durante um período de 30 minutos (mantendo a temperatura interna abaixo - 70°C). Após ser agitada durante 10 min, solução de sal Rochelle (600 mL) foi adicionado a -70°C e a mistura foi aquecida para temperatura ambiente. EtOAc (300 mL) foi adicionado e a mistura agitada em temperatura ambiente durante 16 h. A mistura foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 X 400 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 X 500 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer N-((1r,4r)-4-formilciclo-hexil)metanossulfonamida crua (19 gramas) que foi usada para a etapa seguinte sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3): d 9,65 (s, 0,035H), 9,62 (s, 1H), 4,40-4,39 (m, 1H), 3,28 3,25 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,18-2,03 (m, 5H), 1,38-1,28 (m, 4H). Etapa 3. (R)-hidróxi((1r,4R)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metanossulfonato de sódio
[00336] A uma solução de N-((1r,4r)-4-formilciclo- hexil)metanossulfonamida crua (19 gramas) em THF (200 mL) foi adicionada solução de NaHSO3 aquoso (4 M, 110 mL) durante um período de 10 minutos a 45°C. Após ser agitada a 45°C durante 30 min, a mistura foi resfriada para temperatura ambiente e agitada durante mais 1 h. O precipitado branco resultante foi filtrado e a massa filtrada foi lavada com THF (3 X 50 mL) e secada sob vácuo elevado para fornecer (R)-hidroxi((1r,4R)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metanossulfonato de sódio (16,5 g, 55% durante as Etapas 2-3) como um sólido branco, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. 1H RMN (DMSO-d6): d 9,90 (s, 0,17H), 6,91 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,98 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 3,65 (t, J = 4,4 Hz, 1H), 2,97-2,95 (m, 1H), 2,89 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,06-2,03 (m, 1H), 1,86-1,81 (m, 3H), 1,61 (brs, 1H), 1,23-1,06 (m, 4H). Etapa 4. N-((1r,4r)-4-formilciclo-hexil)metanossulfonamida
[00337] A uma mistura de (R)-hidróxi((1r,4R)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metanossulfonato de sódio (16,5 g, 53,4 mmol) em CH2Cl2 (160 mL) foi adicionada solução de Na2CO3 aquoso (1M, 160 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi separada e a camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 X 80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer N-((1r,4r)-4- formilciclo-hexil)metanossulfonamida crua (7,5 g, 69%) como um sólido branco, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3): d 9,66 (s, 0,021H), 9,62 (s, 1H), 4,38 (brs, 1H), 3,30-3,25 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,18-2,14 (m, 3H), 2,05-2,01 (m, 2H), 1,42-1,30 (m, 4H). Intermediário 48. 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoato de metila Etapa 1: 2-(2-bromo-4-fluorofenóxi)acetato de etila
[00338] À solução de 2-bromo-4-fluorofenol (250 g, 1,31 mol) em MeCN (2 L) foram adicionados K2CO3 (270 g, 1,97 mol) e 2- bromoacetato de etila (219 g, 1,31 mol). A suspensão foi aquecida a 90°C durante 1,5 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para fornecer 2-(2-bromo-4-fluorofenóxi)acetato de etila cru um óleo marrom, que foi usado na etapa seguinte (312 g); 1H RMN (CDCl3): d 7,32 (dd, J = 7,6, 3,2 Hz, 1 H), 6,95-6,97 (m, 1 H), 6,82 (dd, J = 8,8, 4,4 Hz, 1 H), 4,66 (s, 2 H), 4,27 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3 H); 1F RMN (CDCl3): d -120,06 (s, 1F). Etapa 2: 5-(2-Bromo-4-fluorofenóxi)-2-tioxo-2,3-di-hidropirimidin-4(1H)- ona
[00339] A uma solução de 2-(2-bromo-4-fluorofenóxi)acetato de etila (100 g) em THF não anidroso (2 L) foi adicionado formiato de etila (108 g) e NaH (20 g) a 0°C. A mistura foi agitada a 35-45°C durante 18 h. O solvente foi removido sob vácuo e EtOH anidroso (2 L) e tioureia (25 g, 324,8 mmol) foram adicionados e a mistura foi agitada a 90°C durante 16 h. A mistura foi concentrada e diluída com água (2 L) e extraída com éter de petróleo:acetato de etila (10:1; 500 mL x 3). A camada aquosa foi acidificada para pH = 4 por HCl aquoso (1N, 200 mL) e a o sólido branco foi precipitado. A mistura foi filtrada e a massa filtrada resultante foi secada para fornecer 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-2-tioxo-2,3-di- hidropirimidin-4(1H)-ona crua (62 g) como um sólido branco, que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação; método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,638 min; (M+H)+ = 316,9, 318,9 (isótopos de cloro). Etapa 3: 5-(2-Bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-ol
[00340] A uma solução de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-2-tioxo-2,3-di- hidropirimidin-4(1H)-ona (62 g) em EtOH anidroso (1,5 L) foi adicionado Ni de Raney (62 g), e a mistura foi aquecida ao refluxo durante 6 h. O solvente foi removido sob vácuo e EtOH anidroso (2 L) foi adicionado. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para fornecer 5-(2- bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-ol cru como um sólido cinza (55 g); método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,62 min, (M+H)+ = 284,9, 287,0 (isótopos de bromo). Etapa 4: 5-fluoro-2-((4-hidroxipirimidin-5-il)óxi)benzoato de metila
[00341] A uma solução de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-ol (60 g, 0,17 mol) em DMF (100 mL) e MeOH (150 mL) foi adicionado TEA (25,5 g, 0,252 mol) e Pd(dppf)Cl2 (12,4 g, 0,017 mol). A mistura reacional resultante foi agitada sob 3,51 kg/cm2 (50 psi) de CO a 80°C durante 24 h. A mistura foi em seguida concentrada, diluída com H2O (300 mL), e extraída com DCM/MeOH (10:1) (200 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas, e concentradas para fornecer o produto cru, que foi lavado com acetato de etila (100 mL). A massa filtrada foi secada para fornecer 5-fluoro-2-((4- hidroxipirimidin-5-il)óxi)benzoato de metila cru como um sólido marrom (20 g, 45%); método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,56 min; (M+H)+ = 264,9. Etapa 5: 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoato de metila
[00342] A uma solução de 5-fluoro-2-((4-hidroxipirimidin-5- il)óxi)benzoato de metila cru (11 g, 42 mmol) em SOCl2 (5 mL) foi adicionado DMF (0,5 mL). A mistura resultante foi aquecida a 70°C durante 2 h. A mistura foi concentrada para fornecer o resíduo que foi dissolvido em DCM (100 mL) e H2O (100 mL). A mistura foi neutralizada com NaHCO3 saturado (50 mL). A camada orgânica separada foi secada sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (éter de petróleo: acetato de etila = 5:1 - 1:1) para fornecer 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoato de metila como um sólido marrom (8,3 g, 57%); método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,74 min; (M+H)+ = 283,5. Intermediário 49. Ácido 5-Fluoro-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzoico Etapa 1: 5-(2-Bromo-4-fluorofenóxi)pirimidina
[00343] Um reator encmaisado de 100 l foi carregado com 2-bromo- 4-fluorofenol (11,00 kg, 57,59 moles), 5-bromopirimidina (9,43 kg, 59,32 moles), carbonato de césio (24,39 kg, 74,87 moles), e DMA (66,00 L), e a mistura foi aquecida para 115-125°C durante 2,5 h. A batelada foi em seguida agitada a 120°C durante 4 dias. A temperatura interna da batelada foi em seguida ajustada para 20-30°C. Visto que a batelada foi resfriada, ela foi dividida entre água desionizada (132,00 L) e MTBE (44,00 L) em um reator Schott de 250 L. Os teores do reator foram agitados em temperatura ambiente durante 30 min. Após este tempo, a agitação foi interrompida e a separação de camada foi deixada ocorrer. A camada orgânica de topo foi removida e colocada em um recipiente separado. Um total de quatro extrações de MTBE foi realizado. Os extratos de MTBE foram combinados e lavados com hidróxido de sódio a 2 N (22,00 L), em seguida por solução de ácido cítrico a 0,5 M (11,00 L), e finalmente por 5% em peso de solução de bicarbonato de sódio (11,00 L). A solução de MTBE foi concentrada usando um evaporador giratório (25 em vácuo de Hg, banho de água a 40°C). O resíduo foi passado através de um sistema evaporador de película limpa (WFE) para remover os voláteis (MTBE) e uma porção de 5-bromopirimidina restante. As condições para a destilação de WFE foram como segue: a primeira passagem - vácuo 10-15 em Hg, velocidade de limpador 600 rpm, temperatura da cmaisa 150-160°C, taxa de adição 4 mL/min; a segunda passagem - vácuo 0,7 Torr, velocidade de limpador 600 rpm, temperatura da cmaisa 160-170°C, taxa de adição 4 mL/min. O produto 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-pirimidina foi isolado em 45% de produção (7,15 kg) com pureza de HPLC 95,3% (AUC). Etapa 2: 5-fluoro-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzoato de metila MeCX/O
[00344] Um reator de aço inoxidável encmaisada de 80 l foi carregado com catalisador de paládio (complexo de Pd(dppf)Cl2 DCM) (1,00 kg, 1,22 moles), 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidina (8,54 kg, 31,59 moles), TEA (6,38 kg, 63,18 moles), e metanol (42,50 L). O reator foi purgado com nitrogênio (3 vezes até 3,51 kg/cm2g (50 psi) de pressão de nitrogênio) e em seguida com gás de monóxido de carbono (3 vezes até 3,51 kg/cm2g (50 psi) de monoxide de carbono). A temperatura interna do reactor foi ajustada para o 65-75°C durante 75 min. Visto que na temperaura, a pressão interna do vaso foi ajustada para o 3,51 kg/cm2g (50 psi) com gás de monóxido de carbono. Os teores do reator foram agitados e a temperatura e pressão especificadas durante pelo menos 34 h. Após este tempo, a mistura reacional foi resfriada para 15-25°C e foi purgada com nitrogênio três vezes com pressão de 3,51 kg/cm2g (50 psi) para fornecer uma solução metanólica contendo 5-fluoro-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzoate de metila. A batelada foi filtrada durante uma almofada de Celite™ para remover o catalisador de paládio. Etapa 3: ácido 5-Fluoro-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzoico
[00345] A solução metanólica contendo o composto 5-fluoro-2- (pirimidin-5-ilóxi)benzoato de metila de Etapa 2 foi colocada em um reator de vidro encmaisado de 100 l e foi diluída com água (17,00 L). Depois disso, 50% em peso de solução aquosa de hidróxido de sódio (10,11 kg, 126,36 moles) foram adicionados, mantendo uma temperatura interna de batelada a 35-45°C. Visto que a adição foi concluída, a temperatura foi ajustada para o 35-45°C, e a batelada foi agitada durante pelo menos 14 h. O volume de reação foi diminuído por destilação a vácuo de 87 a 33 litros (27 em. vácuo de Hg foi obtido; no término, a temperatura da batelada era de 32,4°C). A batelada foi em seguida diluída com água (42,5 L), resfriada para 20-30°C, e foi filtrada através de uma almofada de Celite™ para remover o catalisador. A camada aquosa foi extraída duas vezes com MTBE (17 L). A batelada foi ajustada para o pH = 2 usando ácido clorídrico a 6 M (cerca de 17 L), mantendo uma temperatura de batelada interna a 10-20°C. Visto que a adição de ácido foi concluída, a batelada foi resfriada para 0-10 °C e filtrada sobre um tecido de polipropileno usando um filtro/secador. A massa filtrada foi lavada com água (17,00 L) e secada sob corrente de nitrogênio a 40-45°C durante diversos dias até o nível de água ser de 0,3% em peso por análise de KF. O produto foi isolado em 102% de produção (7,57 kg) com a pureza de HPLC de 97,5% (AUC) e 94% em peso de pureza por análise de RMN. Intermediário 50. 4-metilbenzenossulfonato de ((1r,4r)-4-(Etilsulfonamido)ciclo- hexil)metila Etapa 1: (1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexano-1-carboxilato de metila
[00346] Uma solução de cloridrato de (1r,4r)-4-aminociclo-hexano-1- carboxilato de metila (120 g, 0,62 mol) e Et3N (346 mL, 2,48 mol) em DCM anidroso (2,5 L) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. Cloreto de etanossulfonila (80,6 g, 0,63 mol) foi adicionado gota a gota durante 30 min à mistura reacional a 0-5°C. Após adição, a mistura foi agitada a 0°C durante 3 h. A mistura foi extinta com água (250 mL) a 0°C. Após divisão, a camada orgânica foi lavada com H2O (600 mL, 5 volumes) e HCl a 1 N (2 x 600 mL, 2 x 5 volumes), H2O (600 mL, 5 volumes) e salmoura (600 mL, 5 volumes), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer crude (1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexano-1-carboxilato de metila (117,6 g, 76%) como um sólido amarelo claro, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. 1H RMN (CDCl3 400 MHz): d4,36 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 3,29-3,22 (m, 1 H), 3,04 (q, J = 7,6 Hz, 2 H), 2,25-2,21 (m, 1 H), 2,15-2,09 (m, 2 H), 2,08-2,01 (m, 2 H), 1,58 1,51 (m, 2 H), 1,39-1,25 (m, 5 H). Etapa 2. N-((1r,4r)-4-(hidroximetil)ciclo-hexil)etanossulfonamida
[00347] A uma solução de (1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexano-1- carboxilato de metila cru (100 g, 402 mmol) em anidroso THF (1 L) foi adicionado LiAlH (403 mL, 403 mmol, 1 M em THF) gota a gota a 0-5°C sob N2 durante cerca de 1 h. A mistura foi em seguida agitada a 0°C durante 2 h sob N2. LiAlH4 adicional (40 mL, 40 mmol, 1 M em THF) foi em seguida adicionado à mistura reacional. A mistura foi agitada a 0°C durante 1 h sob N2. A mistura foi extinta com solução de NaCl a 20% (20 mL) lentamente a 0°C e diluída com THF (500 mL, 5 volumes). A mistura foi aquecida para 15°Ce agitada durante 15 min. A mistura foi filtrada e lavada com THF (2 X 200 mL). A massa filtrada foi suspensa em THF (1 L, 10 volumes) durante 30 min. A suspensão foi filtrada e lavada com THF (2 x 200 mL). A suspensão de massa filtrada e filtragem foi repetida duas vezes em THF (1 L, 10 volumes), e foi em seguida enxaguada com THF (2 x 200 mL). O filtrado combinado foi secado sobre anidroso Na2SO4, concentrado sob pressão reduzida para fornecer N-((1r,4r)-4-(hidroximetil)ciclo-hexil)etanossulfonamida crua (72 g, 81%) como um sólido branco, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação; 1H RMN (CDCl3 400 MHz): d4,23 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 3,46 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,25-3,18 (m, 1 H), 3,04 (q, J = 7,6 Hz, 2 H), 2,11-2,07 (m, 2H), 1,88-1,84 (m, 2 H), 1,46-1,35 (m, 4 H), 1,29-1,24 (m, 2 H), 1,09-1,00 (m, 2 H). Etapa 3: 4-metilbenzenossulfonato de ((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metila
[00348] A uma solução de N-((1r,4r)-4-(hidroximetil)ciclo- hexil)etanossulfonamida crua (30 g, 136 mmol) em DCM anidroso (300 mL) foram adicionados TsCl (25,84 g, 136 mmol), DMAP (1,66 g, 13,6 mmol) e Et3N (41,2 g, 408 mmol). A mistura foi agitada a 10°C durante 6 h sob N2. A mistura foi em seguida extinta com H2O (200 mL). Após divisão, a camada orgânica foi lavada com H2O (2 x 150 mL) e salmoura (150 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo/ acetato de etila = 1/0 ~ 2/1 para fornecer 4-metilbenzenossulfonato de ((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metila (37 g, 73%) como um sólido branco; 1H RMN (CDCl3 400 MHz): d7,78 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,35 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 4,23 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 3,81 (d, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,19-3,14 (m, 1 H), 3,01 (q, J = 7,6 Hz, 2 H), 2,46 (s, 3 H), 2,09-2,03 (m, 2 H), 1,79-1,74 (m, 2 H), 1,66 1,56 (m, 1 H), 1,35 (t, J = 7,6 Hz, 3 H), 1,28-1,18 (m, 2 H), 1,09-1,01 (m, 2 H). Exemplo 1. 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Mistura racêmica) Etapa 1. 7-(5-(4-fluoro-2-(metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00349] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 900 mg, 1,82 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (134 mg, 0,18 mmol) foram adicionados em Et3N (3 mL) e MeOH (20 mL). Em seguida, a mistura reacional foi agitada a 65°C sob CO (3,51 kg/cm2 (50 psi)) durante cerca de 16 h. A mistura reacional foi filtrada através de uma almofada de celita, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com diclorometano: metanol = 1: 0 ~ 0: 1) para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2- (metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila como um óleo amarelo claro. Produção: 850 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,739 min; (M+H)+ = 473,2. Etapa 2. Ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico
[00350] A uma mistura de 7-(5-(4-fluoro-2- (metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (850 mg, 1,79 mmol) e NaOH (143 mg, 3,58 mmol) foram adicionados MeOH (10 mL) e H2O (2 mL) sob N2. A mistura reacional foi agitada a 21-27°C durante 12 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o resíduo. Em seguida, HCl a 1N foi adicionado para ajustar a solução para pH 5 ~ 6 e EtOAc (10 mL) foi adicionado. A camada orgânica foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico. Produção: 700 mg (85%). método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,705 min (M+H)+ = 459,2. Etapa 3. 7-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00351] A uma solução de ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico (800 mg, 1,746 mmol) em anidroso CH2Cl2 (15 mL) foram adicionados HATU (553 mg, 1,455 mmol) e DIEA (677 mg, 5,238 mmol) sob N2, e a mistura reacional foi agitada a 9-20°C durante 30 min. Em seguida, di- isopropilamina (265 mg, 2,619 mmol) foi adicionada à solução e a mistura reacional foi agitada a 9-20°C durante 12 h. O solvente foi em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com CH2Cl2: MeOH = 1: 0 ~ 10: 1) para fornecer 7-(5-(2-(di- isopropilcarbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo marom. Produção: 900 mg. Método F de LCMS: temperatura ambiente = 1,238 min; (M+H)+ = 542,4. Etapa 4. 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro- N,N-di-isopropilbenzamida
[00352] A uma solução de 7-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (900 mg, 1,67 mmol) em anidroso CH2Cl2 (25 mL) foi adicionado TFA(5 mL) sob N2. A mistura reacional foi agitada a 10-22°C durante 2 h. O solvente foi em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi ajustado para o pH para 9 ~ 10 usando NaOH a 10%. Em seguida, a mistura foi extraída com CH2CI2 (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida. O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação, um óleo marrom. Produção: 730 mg. Método F de LCMS: temperatura ambiente = 0,888 min; (M+H)+ = 442,4. Etapa 5. 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)benzamida
[00353] A uma mistura de 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (730 mg, 1,654 mmol), 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 536 mg, 3,308 mmol) e peneiras moleculares de 4Â- (100 mg) foi adicionado MeOH anidroso (20 mL), em seguida a reação foi agitada a 60°C durante 30 min sob N2. Em seguida NaBH3CN (513 mg, 8,270 mmol) foi adicionado à solução e a mistura reacional foi agitada a 60°C durante 4 h. A mistura reacional foi em seguida filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi diluído com MeOH (15 mL) e a mistura foi purificada por método C de RP-HPLC preparativa (HCl) para fornecer o composto 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2- ((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida como um sólido branco. Produção: 540 mg (55%). Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,931; (M+H)+ = 588,5. 1H RMN (CD3OD): d8,30-8,38 (m, 1 H), 7,62-7,84 (m, 1 H), 6,86-7,15 (m, 6 H), 4,22-4,30 (m, 3 H), 3,20-4,03 (m, 9 H), 1,87-2,04 (m, 5 H), 0,81-1,30 (m, 11 H).19F RMN (CD3OD): d- 117,14. Exemplos 1A e 1B. 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Isômeros 1 e 2)
[00354] O composto racêmico de Exemplo 1 foi separado por método A de SFC A para fornecer dois isômeros.
[00355] Isômero 1 (Exemplo 1A): Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,931; (M+H)+ = 588,5. 1H RMN (CD3OD): d8,54-8,61 (m, 1 H), 7,86-8,09 (m, 1 H), 7,20-7,31 (m, 5 H), 7,15 (d, J = 36,4 Hz, 1 H), 4,41-4.51 (m, 3 H), 3,40-4,02 (m, 9 H), 2,15-2,25 (m, 4 H), 1,06-1,48 (m, 12 H).19F RMN (CD3OD): d -117,11. Método A Analítico de SFC: tR = 0,569 min, ee = 100%.
[00356] Isômero 2 (Exemplo 1B): Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,930; (M+H)+ = 588,5. 1H RMN (CD3OD): d 8,58-8,65 (m, 1 H), 7,90-8,14 (m, 1 H), 7,25-7,35 (m, 5 H), 7,18 (d, J = 44,8 Hz, 1 H), 4,45-4.54 (m, 3 H), 3,43-4,06 (m, 9 H), 2,18-2,30 (m, 4 H), 1,10-1,52 (m, 12 H). 19F RMN (CD3OD 400 MHz): d -117,10. Método A Analítico de SFC: t R= 0,809 min, ee = 98,87%. Exemplo 2. N-etil-5-fluoro-N-isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Mistura racêmica)
[00357] O produto título foi sintetizado pelo método descrito no Exemplo 1. Na etapa 3, N-isopropil-N-etil amina foi utilizada. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,164; (M+H)+ = 574,1. Exemplos 2A e 2B. N-etil-5-fluoro-N-isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Isômeros 1-2)
[00358] O composto racêmico de Exemplo 2 foi separado pelo Método A de SFC para fornecer dois isômeros.
[00359] Isômero 1 (Exemplo 2A): Produção: 92,5 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,132 min; (M+H)+ = 574,3 1H RMN (CD3OD): ? 8,20-8,29 (m, 1 H), 7,72-7,80 (m, 1 H), 6,85-7,16 (m, 6 H), 4,35-4,41 (m, 1 H), 3,45-3,89 (m, 8H), 3,12-3,23 (m, 1H), 2,50-2,71 (m, 4 H), 1,76-1,96 (m, 4 H), 1,05-1,27 (m, 8 H). 19F RMN (CD3OD): ? - 120,380. Método A Analítico de SFC: t R= 0,722 min, ee = 100%.
[00360] Isômero 2 (Exemplo 2B): Produção: 115,8 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,121 min; (M+H)+ = 574,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,21-8,29 (m, 1 H), 7,71-7,80 (m, 1 H), 6,85-7,16 (m, 6 H), 4,35-4,42 (m, 1 H), 3,45-3,90 (m, 8H), 3,15-3,23 (m, 1H), 2,48-2,71 (m, 4 H), 1,76-1,96 (m, 4 H), 1,05-1,27 (m, 8 H). 19F RMN (CD3OD): d - 120,390. Método A Analítico de SFC: t R= 1,455 min, ee = 99,65%. Exemplos 3A e 3B. 5-fluoro-2-((4-(7-((1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di-isopropilbenzamida (Isômeros 1-2)
[00361] A uma solução de 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (70 mg, 0,16 mmol) e 1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- carbaldeído (Intermediário 42c, 33 mg, 0,16 mmol) em anidroso MeOH (3 mL) foi adicionado NaBH3CN (50 mg, 0,80 mmol) sob N2. A reação foi agitada a 55°C durante 16 h. A reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica gel (CH2Cl2: MeOH = 10: 1), e também purificado por método B de SFC preparativa e método E de RP-HPLC para fornecer o composto como dois isômeros.
[00362] Isômero 1 (Exemplo 3A): Sólido branco. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,736 min (M+H)+ = 632,4. 1H RMN (CD3OD): d 8,28 (s, 1H), 7,80 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,89-7,15 (m, 5H), 6,89-6,90 (m, 1H), 3,99 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,55-3,85 (m, 10H), 2,52-2,72 (m, 4H), 1,84-1,96 (m, 4H), 1,54 (dd, J = 2,4, 6,8 Hz, 3H), 1,43 (t, J = 4,8 Hz, 3H), 1,19 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 1,32 (t, J = 4,8 Hz, 3H).19F RMN (CD3OD): d -120,25 - 120,33. Método B de SFC analítica: tR= 7,26 min, ee = 100%.
[00363] Isômero 2 (Exemplo 3B): Sólido branco. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,738 min. (M+H)+ = 632,4. 1H RMN (CD3OD): d 8,28 (s, 1H), 7,80 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,89-7,15 (m, 5H), 6,89-6,90 (m, 1H), 3,99 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,55-3,85 (m, 10H), 2,52-2,72 (m, 4H), 1,84-1,96 (m, 4H), 1,54 (dd, J = 2,4, 6,8 Hz, 3H), 1,43 (t, J = 4,8 Hz, 3H), 1,19 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 1,32 (t, J = 4,8 Hz, 3H). 19F RMN (CD3OD): d -120,27 - 120,35. Método B de SFC analítica: t R= 7,92 min, ee = 97,04%. Exemplo 4. N-etil-5-fluoro-2-((4-(7-((1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-N-isopropilbenzamida
[00364] A uma solução de 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N-isopropilbenzamida (preparada como um intermediário durante a síntese de Exemplo 2, 100 mg, 0,23 mmol) em anidroso MeOH (10 mL) foi adicionado 1-(2-hidroxietil)-2-oxo- 2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 42c, 72 mg, 0,35 mmol), e foi agitada durante 5 min sob N2. Em seguida NaBH3CN (71 mg, 1,15 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 65°C durante 2 h. A mistura reacional, com mais 20 mg de 2-((4-(2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N- isopropilbenzamida, foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com diclorometano: metanol = 20: 1 a 10: 1) para fornecer N- etil-5-fluoro-2-((4-(7-((1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-N-isopropilbenzamida como um óleo amarelo. Produção: 70 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,583 min; (M+H)+ = 618,1. Exemplos 4A e 4B. N-etil-5-fluoro-2-((4-(7-((1-(2-hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-N-isopropilbenzamida (Isômeros 1-2)
[00365] Uma quantidade de 70 mg de N-etil-5-fluoro-2-((4-(7-((1-(2- hidroxietil)-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N-isopropilbenzamida (Exemplo 4) foi separada com Método A de SFC para fornecer Isômeros 1 e 2 como sólidos brancos.
[00366] Isômero 1 (Exemplo 4A): Produção: 8,70 mg. temperatura ambiente = 1,14 min; (M+H)+ = 618,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,27-8,29 (m, 1 H), 7,78-7,82 (m, 1 H), 6,89-7,18 (m, 6 H), 3,33-4,01 (m, 13 H), 2,48-2,75 (m, 4 H), 1,75-1,96 (m, 4 H), 1,05-1,26 (m, 9 H). 19F RMN (CD3OD): d -120,390. Método C de SFC Analítica: t R= 1,870 min, ee = 98,60%.
[00367] Isômero 2 (Exemplo 4B): Produção: 9,2 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = temperatura ambiente value: 1,140 min;(M+H)+ = 618,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,25-8,31 (m, 1 H), 7,76-7,25 (m, 1 H), 6,85-7,20 (m, 6 H), 3,48-4,00 (m, 13 H), 2,48-2,75 (m, 4 H), 1,75-1,96 (m, 4 H), 1,05-1,33 (m, 9 H). 19F RMN (CD3OD): d -120,398. Método C de SFC Analítica: t R= 2,922 min, ee = 99,43%. Exemplo 5. 5-fluoro-N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro- 1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida Etapa 1. 7-(5-(2-((2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)(isopropil)carbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00368] A uma solução de ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico (Intermediário 33, Etapa 2, 50 mg, 0,1092 mmol) em DMF anidroso (3 mL) foi adicionada N-(2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)propan-2-amina (36 mg, 0,1637 mmol), HATU (83 mg, 0,2183 mmol) e DIEA (28 mg, 0,2183 mmol)and a mistura foi agitada a 16°C durante 6 h sob N2. A mistura foi em seguida diluída com EtOAc (20 mL) e lavada com salmoura (3 x 20 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa com EtOAc para fornecer 7-(5-(2-((2-((terc- butildimetilsilil)óxi)etil)(isopropil)carbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo amarelo. Produção: 50 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,851 min, (M+H)+ = 658,1. Etapa 2. 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro- N-(2-hidroxietil)-N-isopropilbenzamida
[00369] A uma solução de 7-(5-(2-((2-((terc- butildimetilsilil)óxi)etil)(isopropil)carbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (50 mg, 0,0761 mmol) em CH2Cl2 (4 mL) foi adicionado TFA (1 mL) e a mistura foi agitada a 16°C durante 3 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi ajustado para o pH = 8-9 com solução de NaHCO3 saturado e diluída com água (15 mL). A camada aquosa foi extraída com CH2CI: iPrOH (3:1, 3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-((4-(2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-(2-hidroxietil)-N- isopropilbenzamida crua como um óleo amarelo, que foi usado para a etapa seguinte diretamente sem outra purificação. Produção: 34 mg. Etapa 3. 5-fluoro-N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di- hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00370] A uma solução de 2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-(2-hidroxietil)-N-isopropilbenzamida (34 mg, 0,0761 mmol) em MeOH anidroso (3 mL) foi adicionado 2-oxo-2,3- di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 25 mg, 0,1522 mmol) e NaBH3CN (24 mg, 0,3805 mmol). A mistura foi agitada a 60°C durante 16 h sob N2. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e purificada diretamente por Método de RP-HPLC para fornecer 5-fluoro-N-(2-hidroxietil)-N- isopropil-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida como um sólido amarelo claro. Produção: 10,00 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,560 min, (M+H)+ = 590,2 1H RMN (CDCl3): d 10,35-10,15 (m, 0,5H), 9,75-9,60 (m, 0,5H), 9,01-8,77 (m, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,81-7,70 (m, 1H), 7,35-7,25 (m, 0,5H), 7,18-7,08 (m, 0,5H), 7,05 6,90 (m, 2H), 6,89-6,75 (m, 2H), 6,65-6,50 (m, 1H), 4,05-3,25 (m, 12H), 2,97-2,25 (m, 4H), 2,12-1,85 (m, 4H), 1,30-1,07 (m, 6H). 19F RMN (CDCl3): d -119,3. Exemplo 6A. 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida Etapa 1. 2-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila
[00371] Uma mistura de 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida (Intermediário 41, 1,8 g, 5,13 mmol), 2,7- diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila (1,35 g, 5,13 mmol) e DIEA (1,32 g, 10,26 mmol) em iPrOH (20 mL) foi agitada a 70°C durante 16 h. Após concentração, a mistura foi purificada diretamente por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo: acetato de etila = 3: 7 para fornecer 2-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila como um óleo amarelo. Produção: 2,9 g. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,767 min; (M+H)+ = 542,2 Etapa 2: 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro- N,N-di-isopropilbenzamida
[00372] À solução de 2-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila (2,9 g, 5,35 mmol) em CH2Cl2 anidroso (30 mL) foi adicionado TFA (10 mL) e a mistura foi agitada a 25°C durante 2 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida e ao resíduo foi adicionada solução de NaOH aquoso a 30% para um pH = 11-12. A camada aquosa foi em seguida extraída com CH2CI2/i PrOH (4/1,3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-((4-(2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida crua como um sólido amarelo, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 2,3 g. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,584 min, (M+H)+ = 442,1. Etapa 3: ((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo- hexil)carbamato de terc-butila (Exemplo 99A)
[00373] A uma solução de 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (2,3 g, 5,20 mmol) em MeOH anidroso (50 mL) foi ajustada para o pH 6-7 por AcOH. Em seguida ((1r,4r)-4-formilciclo-hexil)carbamato de terc-butila (1,3 g, 5,72 mmol) foi adicionado. Após ser agitada a 25°C durante 5 min, NaBH3CN (656 mg, 10,41 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 70°C durante 1 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido com EtOAc (50 mL) e lavado com H2O (2 x 30 mL). A camada orgânica foi secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 3:7 para fornecer ((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(di- isopropilcarbamoil)-4 fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 3,0 g. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,929 min; (M+H)+ = 653,3. Etapa 4: 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida
[00374] A uma solução de ((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)- 4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo- hexil)carbamatO de terc-butila (3 g, 4,60 mmol) em CH2Cl2 de etila anidroso (30 mL) foi adicionado com TFA (10 mL) e a mistura foi agitada a 25°C durante 2 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida para fornecer 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida crua como um óleo amarelo claro, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 4,0 g. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,513 min; (M+H)+ = 553,2. Etapa 5: (5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida)
[00375] A uma solução de 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida (3,6 g, crua, cerca de 4,14 mmol) e Et3N (2,47 g, 24,0 mmol) em CH2Cl2 anidroso (50 mL) foi adicionado MsCl (844 mg, 7,34 mmol) gota a gota a 0°C sob N2 e a mistura foi agitada a 0°C durante 2 h. A mistura foi em seguida lavada com H2O (3 x 50 mL) e salmoura (50 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com CH2Cl2: CH3OH = 19:1 para fornecer 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)- 4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida como um sólido branco, que foi purificado por método D de RP-HPLC para fornecer 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida como um sólido branco. Produção: 1,59 g. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,565 min; (M+H)+ = 631,1. 1H RMN (CDCl3): d 8,27 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,17-7,15 (m, 2H), 7,03-6,99 (m, 1H), 4,06-4,03 (m, 2H), 3,96-3,89 (m, 2H), 3,87-3,84 (m, 1H), 3,66-3,63 (m, 1H), 3,34-3,32 (m, 1H), 3,20-3,15 (m, 1H), 2,95 (s, 3H), 2,55-2,51 (m, 3H), 2,33-2,30 (m, 2H), 2,06-2,04 (m, 2H), 1,89-1,87 (m, 6H), 1,56 (d, J = 6,8 Hz, 4H), 1,48 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,33-1,30 (m, 2H), 1,20 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,08-1,07 (m, 2H). 19F RMN (CDCl3): d -119,7. Exemplos 6A-6B. Síntese Alternativa de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 6A) e 5-fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1s,4s)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 6B)
[00376] A uma solução de 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (Exemplo 6A, Etapa 2, 11 g, 24,9 mmol) em CH2Cl2 anidroso (170 mL) foi adicionado Intermediário 47 (7,5 g, 36,6 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 15 min e NaBH(OAc)3 (7,2 g, 33,9 mmol) foi adicionado em porções durante 5 min. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante mais 2 h. A mistura foi lavada com H2O (3 X 100 mL) e salmoura (100 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com CH2Cl2 /CH3OH = 24/1 a 10/1 para fornecer o composto título como a base livre com uma relação trans:cis de 97:3. Método de LC-MS D tR = 0,555 min, MS (m/z 631,3 [M+H]+ Os isômeros trans e cis foram separados pelo Método A de SFC.
[00377] Trans-isômero (Exemplo 6A): método de LC-MS E tR = 3,881 min, m/z 631,3 [M+H]+. Isômero SFC tR = 4,430 min em cromatografia de 10 min (Coluna: OD-3; Nome do método: OD- 3_EtOH/dietilamina_5_40_25mL, trans = 100%). 1H RMN (CD3OD ): d 8,22 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,23-7,10 (m, 2H), 7,01-6,95 (m, 1H), 4,08 3,80 (m, 5H), 3,68-3,56 (m, 1H), 3,20-3,07 (m, 1H), 2,92 (s, 3H), 2,48 2,25 (m, 4H), 2,13 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,06-1,96 (m, 2H), 1,91-1,76 (m, 6H), 1,53 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,51-1,45 (m, 1H), 1,45 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,35-1,24 (m, 2H), 1,17 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,06-0,98 (m, 2H). 19F RMN (CDCl3): d -119,711.
[00378] Cis-isômero (Exemplo 6B): Método de LC-MS D: tR = 0,582 minm/z 631,1 [M+H]+. Isômero SFC tR= 4,461 min em cromatografia de 10 min (Coluna: OD-3; Nome do método: OD- 3_EtOH/dietilamina_5_40_25mL, trans/ cis = 2,1% / 97,9%). 1H RMN (CDCl3): d 8,36 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,05-6,96 (m, 2H), 6,80-6,71 (m, 1H), 4,40-4,30 (m, 1H), 4,05-3,75 (m, 5H), 3,70-3,60 (m, 1H), 3,55-3,45 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,45-2,09 (m, 6H), 1,85-1,65 (m, 10H), 1,60-1,45 (m, 7H), 1,44-1,19 (m, 2H), 1,13 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 6,8 Hz, 3H). 19F RMN (CDCl3): d -118,583. Exemplo 7. 5-((7-(5-(2-(amino(ciclopentil)metil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H- benzo[d]imidazol-2-ona Etapa 1: 7-(5-(2-(1-((terc-butilsulfinil)amino)etil)-4-fluorofenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-Butila
[00379] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 407 mg, 0,83 mmol) e (E)-N-(ciclopentilmetileno)-2-metilpropano-2- sulfinamida (249 mg, 1,24 mmol) em THF anidroso (6 mL) foi adicionada solução de BuLi a 1,6 M em hexano (0,78 mL, 1,24 mmol) gota a gota sob atmosfera de N2 a -78°C. Após a adição, a mistura foi agitada durante durante 30 min antes de extinguir com solução de NH4Cl aquoso. A mistura reacional foi extraída duas vezes com EtOAc e a fase orgânica combinada foi lavada com H2O, secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida usando DCM/MeOH como eluente para produzir 461 mg do produto desejado 7-(5-(2-(1-((terc- butilsulfinil)amino)etil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,32 min, (M+H)+ = 616,3. Etapa 2: N-((2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)(ciclopentil)metil)-2-metilpropano-2-sulfinamida
[00380] A uma solução de 7-(5-(2-(1-((terc-butilsulfinil)amino)etil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (61 mg, 0,099 mmol) em DCM (6 mL) foi adicionado TFA (0,3 mL). A mistura foi agitada 16 h em temperatura ambiente. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, lavada com solução de NaHCO3 aquosa e salmoura sucessivamente, secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida para fornecer 37 mg de produto cru, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 3: N-(ciclopentil(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)fenil)metil)-2-metilpropano-2-sulfinamida
[00381] A uma solução de N-((2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)(ciclopentil)metil)-2-metilpropano-2- sulfinamida (37 mg, 0,072 mmol) em MeOH (2 mL) foram adicionados 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 14 mg, 0,086 mmol) e NaBH3CN (9 mg, 0,14 mmol). A suspensão foi agitada em temperatura ambiente durante 24 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 4: 5-((7-(5-(2-(amino(ciclopentil)metil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H- benzo[d]imidazol-2-ona
[00382] O produto cru acima foi dissolvido em MeOH (1 mL) e HCl a 4 M/dioxano (3 ml). A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min antes dos solventes serem removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por método A de RP-HPLC para fornecer 5-((7-(5-(2-(amino(ciclopentil)metil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H- benzo[d]imidazol-2-ona. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,15 min, (M+H)+ = 558,3. 1H RMN (CD3OD) d: 8,57 (s, 1H), 7,83 (m, 1H), 7,41 (m, 1H), 7,26-7,17 (m, 4H), 7,09 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,42 (m, 2H), 4,07 (m, 4H), 3,64-3,34 (m,4H), 2,48 (m, 1H), 2,22-2,03 (m, 5 H), 1,78-1,48 (m, 6H), 1,39 (d, J = 6,4 Hz, 1H). Exemplo 8. 5-((7-(5-(2-(ciclopentil(dimetilamino)metil)-4-fluorofenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H- benzo[d]imidazol-2-ona
[00383] A uma solução de sal de tri-TFA de 5-((7-(5-(2- (amino(ciclopentil)metil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol-2- ona (Exemplo 7, 8,7 mg, 0,01 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TEA (1 gota), paraformadeído (4 mg), seguido por NaBH3(OAc)3 (9 mg, 0,04 mmol). A mistura foi agitada durante a noite em temperatura ambiente antes do solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por RP- HPLC método A para fornecer o composto título. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,53 min, (M+H)+ = 586,3. 1H RMN (CD3OD) d: d: 8,57 (s, 1H), 7,83 (m, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,26 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,18 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,43 (m, 2H), 4,14 (m, 2H), 3,62-3,45 (m, 3H), 2,84 (s, 6H), 2,20-2,06 (m, 5H), 1,76 (m, 2H), 1,62-1,47 (m, 4H), 0,99 (m, 1H). Exemplo 9. N-(ciclopentil(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)metil)acetamida
[00384] O produto título foi sintetizado por acilação do composto de Exemplo 7 com anidrido acético em piridina. O produto final foi purificado por Método A de RP-HPLC. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,53 min, (M+H)+ = 600,3. Exemplo 10. 6-((7-(5-(4-fluoro-2-(1-hidróxi-2-metilpropil)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-3,3-dimetilindolin-2-ona Etapa 1: 1-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)-2-metilpropan-1-ol
[00385] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 526 mg, 1,065 mmol) e N-metóxi-N-metilisobutiramida (268 mg, 2,04 mmol) em THF seco (6 mL) sob atmosfera de N2 a -78°C foi adicionado BuLi a 1,6 M (0,7 mL, 1,067 mmol) gota a gota. Após a adição, a mistura reacional foi agitada durante mais 10 min antes de extinguir com solução de NH4Cl aquoso. A mistura resultante foi extraída com EtOAc, lavada com H2O, salmoura, secada sobre anidroso Na2SO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado para secura. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida para fornecer 249 mg de 7-(5-(4-fluoro-2- isobutirilfenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 41b). Método B de LCMS: tR: 1,76 min, (M+H)+ = 485,3
[00386] A uma solução fria de Intermediário 41b (83 mg, 0,17 mmol) em THF/MeOH (2/0,5 mL) a 0°C foi adicionado NaBH4 (20 mg, 0,53 mmol). A mistura foi agitada durante mais 20 min e extinta com acetona. O solvente foi removido para fornecer o produto cru. O produto cru foi em seguida dissolvido em MeOH (1 mL) HCl a 4M/dioxano (0,5 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 30 min. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida para fornecer o produto cru como o sal de bis-HCl. Etapa 2: 6-((7-(5-(4-fluoro-2-(1-hidróxi-2-metilpropil)fenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-3,3-dimetilindolin-2-ona
[00387] O produto cru de Etapa 1 foi dissolvido em DCM (1 mL) contendo TEA (0,1 mL). Solvente foi em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi dissolvido em DCM (2 mL). À esta solução foram adicionados o Intermediário 45 (32 mg, 0,17 mmol) e NaBH(OAc)3 (72 mg, 0,34 mmol) e a mistura foi agitada durante 30 min. Os solventes foram removidos e o resíduo foi purificado por método A de HPLC preparativa para fornecer o composto título como um sal de TFA. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 075 min, (M+H)+ = 560,3,1H RMN (CD3OD) d: 8,53 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,36-7,10 (m, 6H), 4.53-3,78 (m, 11H), 2,22 (m, 4 H), 1,96 (m, 1H), 1,34 (s, 6H), 1,00 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,84 (d, J = 6,8 Hz, 3H). Exemplo 11. 6-((7-(5-(4-fluoro-2-isobutirilfenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-3-metil-2-oxoindolina-3- carbonitrila
[00388] O composto título foi sintetizado a partir do 7-(5-(4-fluoro-2- isobutirilfenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 41b), pelo método descrito para etapa 2 e 3 na síntese de Exemplo 10. Na etapa 3, 6-formil-3-metil-2-oxoindolina-3- carbonitrila foi utilizada. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,57 min, (M+H)+ = 569,3. Exemplo 12. 5-fluoro-2-((4-(6-(3-(4-fluorofenil)propanoil)-2,6- diazaespiro[3,4]octan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di- isopropilbenzamida
[00389] A uma solução de Intermediário 41b (10 mg, 0,02 mmol), ácido 3-(4-fluorofenil)propanoico (10 mg, 0,06 mmol) e iPr2NEt (0,02 mL, 0,11 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado HATU (12 mg, 0,03 mmol) em temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 1 h em temperatura ambiente. EtOAc (5 mL) e H2O (2 mL) foram adicionados para preparação. A camada de EtOAc foi secada usando Na2SO4 e evaporada. O resíduo cru foi purificado por cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 10% de MeOH em DCM) para fornecer 5-fluoro-2-((4-(6-(3-(4-fluorofenil)propanoil)-2,6-diazaespiro[3,4]octan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di-isopropilbenzamida como a base livre. Método G de LCMS: tR = 6,728 min, MS (ESI) m/z 578,56 [M+H]+. 1H RMN (CD3OD): d 8,45 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,25-7,17 (m, 5H), 6,93 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 4,65-4,20 (m, 4H), 3,77-3,72 (m, 1H), 3,60-3,56 (m, 3H), 3,44-3,40 (m, 2H), 2,85 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,55 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,16 2,10 (m, 2H), 1,46 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,37 )d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 6,4 Hz, 3H). Exemplo 13. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- 3-oxo-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol- 2(3H)-ona Etapa 1: 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona
[00390] À solução de 8-oxo-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (1 g, 4,2 mmol) em anidroso CH2Cl2 (5 mL) foi adicionado HCl-dioxano (5 mL) e agitada a 16-34°C durante 1 h. A mistura foi concentrada para fornecer 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona (sal de HCl, cru) como sólido branco, que foi usado na etapa seguinte diretamente. Produção: 900 mg (sal de HCl). Etapa 2: 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-3-ona
[00391] À solução de 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona (900 mg, 4,1 mmol, Sal de HCl, cru) em CH3CN (20 mL) foi adicionada 5-(2-bromo-4- fluorofenóxi)-4-cloropirimidina (Intermediário 1, 1,3 g, 4,05 mmol) e K2CO3 (1,1 g, 8,1 mmol). A mistura foi agitada a 85°C durante 24 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para purificar por cromatografia de coluna ISCO em sílica gel (de 100% de DCM a 5% de MeOH em DCM) para fornecer 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona como óleo incolor. Produção: 1,2 g (73%); método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,659 min. (M+H)+ = 407,0, 409,0 (isótopos de bromo). Etapa 3: 7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona
[00392] À solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-3-ona (850 mg, 2,09 mmmol) em dioxano:H2O (15 mL, 1:1) foram adicionados ácido (1-isopropil-1H-pirazol-5- il)borônico (385 mg, 2,51 mmol), Sphos Pallacycle-gen 2 (75 mg, 0,105 mmol) e K3PO4 (1,34 g, 6,27 mmol). A mistura foi aquecida a 115°C durante 30 min em um micro-ondas. A mistura foi em seguida concentrada e diluída com EtOAc (30 mL) e lavada com salmoura (50 mL x 2). As camadas orgânicas foram concentradas e o resíduo foi purificado por cromatogtafia de coluna ISCO em sílica gel (de 100% de DCM a 10% de MeOH em DCM) para fornecer um sólido marrom. Este sólido foi purificado por método D de RP-HPLC preparativa básica para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona como um sólido branco. Produção: 350 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,629 min; (M+H)+ = 437,2. 1H RMN (CDCl3): d8,40 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,05 7,15 (m, 2H), 6,81 (dd, J = 9,2 4,4 Hz, 1H), 6,17 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,74 (s, 1H), 4,30-4,41 (m, 1H), 3,80-3,85 (m, 1H), 3,71 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,50-3,65 (m, 2H), 3,30-3,43 (m, 2H), 2,15-2,25 (m, 1H), 2,00-2,10 (m, 2H), 1,75-1,85 (m, 1H), 143 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,47 (d, J = 6,8 Hz, 3H). 19F RMN (CDCl3): d-119,08. Etapa 4: 7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il) fenóxi)pirimidin-4- il)-2-(4-fluoro-3-nitrobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona
[00393] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona (50 mg, 0,11 mmmol) em THF anidroso (3 mL) foram adicionados NaH (7 mg, 0,17 mmol) e n-Bu4I (4 mg, 0,01 mmol). Em seguida, 4-(bromometil)-1-fluoro- 2-nitrobenzeno (33 mg, 0,14 mmol, dissolvido em 1 mL THF) foi adicionado gota a gota na mistura e a mistura foi agitada a 0°C durante 30 min. Em seguida, a mistura foi agitada a 16-25°C durante 2 h. A mistura foi extinta com NH4Cl saturado (5 mL, aq.) e extraída com EtOAc (5 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo resultante foi purificado por método A de RP-HPLC preparativa acídica para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(1- isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2-(4-fluoro-3-nitrobenzil)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona como o sal de TFA como um sólido branco. Produção: 21 mg (32%); método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,740 min; (M+H)+ = 589,9,1H RMN (MeOD): d8,54 (s, 1H), 8,03 (d, J = 6,8 Hz, 1H),7,94 (s, 1H), 7,60-7,70 (m, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,46 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 7,35-7,40 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,30 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4,35-4,45 (m, 1H), 4,05-4,15 (m, 1H), 4,00-4,05 (m, 1H), 3,85-3,95 (m, 1H), 3,65-3,80 (m, 1H), 3,35-3,50 (m, 2H), 2,00- 2,25(m, 4H), 1,30-1,45 (m, 6H). 19F RMN (MeOD): d-77,21, -117,66, - 122,07. Etapa 5: 2-(4-amino-3-nitrobenzil)-7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H- pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona
[00394] À solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2-(4-fluoro-3-nitrobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-3-ona (80 mg, 0,14 mmmol) em NH3-MeOH (5 mL) foi aquecida para 70°C durante 36 h em uma autoclave. A mistura foi em seguida concentrada e purificado por TLC preparativa em sílica gel (DCM: MeOH = 10: 1) para fornecer 2-(4-amino-3-nitrobenzil)-7-(5- (4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-3-ona como um sólido amarelo. Produção: 65 mg (80%); método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,713 min; (M+H)+ = 587,2. 1H RMN (MeOD): d 8,29 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,22-7,30 (m, 2H), 7,19 (dd, J = 8,0 2,8 Hz, 1H), 6,96-6,99 (m, 2H), 6,19 (s, 1H), 4,38-4,43 (m, 3H), 3,65-3,73 (m, 1H), 3,59-3,71 (m, 2H), 3,51 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,35 (s, 1H), 3,27-3,29 (m, 1H), 2,11-2,16 (m, 1H), 1,84-2,06 (m, 3H), 1,33-1,44 (m, 6H).19F RMN (MeOD): d - 120,79. Etapa 6: 2-(3,4-diaminobenzil)-7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol- 5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona
[00395] A uma solução de 2-(4-amino-3-nitrobenzil)-7-(5-(4-fluoro-2- (1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-3-ona (50 mg, 0,85 mmol) em EtOH anidroso (10 mL) foi adicionado Ni de Raney (10 mg, úmido) e agitada a 17-26°C durante 18 h sob H2 (1,05 kg/cm2 (15 psi)). A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por TLC preparativa em sílica gel (DCM: MeOH = 10: 1) para fornecer 2-(3,4-diaminobenzil)-7- (5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-3-ona como um sólido branco. Produção: 20 mg (42%); Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,624 min. (M+H)+ = 557,3. Etapa 7: 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin- 4-il)-3-oxo-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol- 2(3H)-ona
[00396] À solução de 2-(3,4-diaminobenzil)-7-(5-(4-fluoro-2-(1- isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan- 3-ona (13 mg, 0,023 mmol) em anidroso THF (5 mL) foi adicionado Et3N (10 µL) e bis(triclormetil)carbonato (7 mg, 0,023 mmol) e a mistura resultante foi agitada a 18-26°C durante 16 h. TLC (DCM: MeOH = 10: 1, Rf = 0,7) mostrou uma nova mancha e 2-(3,4-diaminobenzil)-7-(5-(4- fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-3-ona não foi consumida completamente. A mistura foi vertida em água (5 mL) e extraída com EA (10 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL x 2), secadas sobre Na2SO4 e concentradas para purificar por método D de RP-HPLC preparativa básica para fornecer 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(1- isopropil-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-3-oxo-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona como um sólido branco. Produção: 2,9 mg (22%); método C de LCMS: Temperatura ambiente =: 1,596 min, (M+H)+ = 583,2. 1H RMN (MeOD): d8,30 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,25-7,35 (m, 1H), 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,00-7,05 (m, 1H), 6,95-7,00 (m, 3H), 6,16 (s, 1H), 4,35 4.55 (m, 3H), 3,80-3,90 (m, 1H), 3,55-3,70 (m, 2H), 3,45-3,55 (m, 1H), 3,20-3,30 (m, 2H), 1,85-2,20 (m, 4H), 1,35-1,45 (m, 6H).19F RMN (MeOD): d-120,78. Exemplos 14A-14B. N-(4-fluoro-2-(5-isopropil-3-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2- il)pirimidin-5-amina (Exemplo 14A) & 4-(5-fluoro-2-((4-(6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-5-isopropil-3-metilisoxazol (Exemplo 14B) Etapa 1. 5-isopropil-3-metilisoxazol e 3-isopropil-5-metilisoxazol
[00397] Uma suspensão de 5-metil-hexano-2,4-diona (300 mg, 2,34 mmol) e hidroxilamina HCl (194 mg, 2,82 mmol) em EtOH foi aquecida durante 3 min em um micro-ondas a 130°C. O EtOH foi evaporada e o produto cru foi dividido entre Et2O (5 mL) e água (3 mL). A camada de Et2O foi secada usando MgSO4 e subsequentemente evaporada para fornecer o produto cru como uma mistura de 4:1 de regioisômeros de isoxazol. O maior isômero foi designado como 5-isopropil-3- metilisoxazol e o menor como 3-isopropil-5-metilisoxazol. Esta mistura crua foi usada diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. Método A de LCMS: tR = 1,485; [M + H]+ = 126,28. Etapa 2. 4-bromo-5-isopropil-3-metilisoxazol e 4-bromo-3-isopropil-5- metilisoxazol
[00398] A uma solução de 5-isopropil-3-metilisoxazol cru (mistura de 4:1 crua de Etapa 1, 2,34 mmol) em DMF (3 mL) foi adicionada N- bromossuccinimida (625 mg, 3,51 mmol) em temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 15 h em temperatura ambiente. EtOAc (10 mL) e H2O (10 mL) foram em seguida adicionados para a preparação. A camada de EtOAc foi separada e lavada com uma solução aquosa de Na2S2O5 saturado seguido por salmoura. A camada de EtOAc foi em seguida secada usando Na2SO4 e evaporada. O produto cru foi purificado por cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 20% de EtOAc em hexanos) para fornecer 200 mg (42% durante 2 etapas) de produto como uma mistura de 4:1 de regioisômeros. O maior isômero foi designado como 4-bromo-5- isopropil-3-metilisoxazol e o menor isômero como 4-bromo-3-isopropil- 5-metilisoxazol. Método A de LCMS: tR = 1,787; [M]+ = 204,25 e 206,26. 1H RMN (CDCl3): de isoxazol maior, (4-bromo-5-isopropil-3- metilisoxazol) d 3,21-3,14 (m, 1H), 2,26 (s, 3H), 1,32 (d, J = 7,2 Hz, 6H). Etapa 3. 5-isopropil-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)isoxazol e 3-isopropil-5-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)isoxazol
[00399] Uma mistura de 4-bromo-5-isopropil-3-metilisoxazol (4:1 de regioisômeros de Etapa 2, 100 mg, 0,49 mmol), pinacol borano (0,11 mL, 0,78 mmol), PdCl2(MeCN)2 (3 mg, 2 mol%), ligante de SPhos (10 mg, 5 mol%) e Et3N (0,24 mL, 1,72 mmol) em dioxano (2 mL) foi aquecida a 100 °C em um frasconete selado sob uma manta de N2 durante 1 h. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada através de um tampão de celita e evaporada. O resíduo cru foi purificado usando cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 20% de EtOAc em hexanos) para fornecer 100 mg de 5-isopropil-3- metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoxazol e 3-isopropil- 5-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoxazol como uma mistura de 4:1 de regioisômeros e usada na etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 4. 6-(5-bromopirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2- carboxilato de terc-butila
[00400] Uma suspensão de 5-bromo-4-cloropirimidina (1,67 g, 8,65 mmol), sal de hemioxalato de 2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (2 g, 4,12 mmol) e iPr2NEt (1,80 mL, 10,3 mmol) em iPrOH (10 mL) foi aquecida ao refluxo durante 15 h. Solução aquosa de NH4Cl saturada (10 mL) e EtOAc (20 mL) foram adicionados à reação para a preparação. A camada de EtOAc foi separada e a camada aquosa foi extraída novamente com EtOAc. As camadas de EtOAc foram combinadas, lavadas com água, em seguida salmoura, e secadas usando Na2SO4.
[00401] A evaporação do EtOAc forneceu 6-(5-bromopirimidin-4-il)- 2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido espumoso off-white (2 gramas, 70%) que estava quase puro por análise de LCMS e usado diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. Método A de LCMS: tR = 1,330 min; [M + H]+ = 355,41 e 357. Etapa 5. 6-(5-((2-cloro-4-fluorofenil)amino)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00402] Uma mistura de 6-(5-bromopirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (100 mg, 0,28 mmol), 2-cloro-4-fluoroanilina (39 mg, 0,27 mmol), Pd2(dba)3 (5 mg, 0,005 mmol), Xphos (11 mg, 0,023 mmol) e NaOtBu (60 mg, 0,63 mmol) em tolueno (2 mL) foi aquecida em um micro-ondas de CEM a 160°C durante 30 min. Sob resfriamento, a reação foi diluída com 5 mL de EtOAc e filtrada através de um tampão de celita.
[00403] A evaporação dos solventes forneceu um sólido cru que foi triturado durante a noite usando hexanos. A filtração do sólido material forneceu 92 mg (79%) de 6-(5-((2-cloro-4-fluorofenil)amino)pirimidin-4- il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila que estava quase puro por análise de LCMS e usado diretamente na etapa seguinte sem outra purificação. Método A de LCMS: tR = 1,411; [M + H]+ = 420,54 e 422,55. Etapa 6. 6-(5-((4-fluoro-2-(5-isopropil-3-metilisoxazol-4- il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila e 6-(5-((4-fluoro-2-(3-isopropil-5-metilisoxazol-4- il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato e terc-butila
[00404] Uma mistura de 6-(5-((2-cloro-4-fluorofenil)amino)pirimidin- 4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila de (35 mg, 0,083 mmol) e 5-isopropil-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)isoxazol e 3-isopropil-5-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)isoxazol como uma mistura de 4:1 de isômeros (Etapa 3, 21 mg, 0,083 mmol), K3PO4 (53 mg, 0,25 mmol) e SPhos- paladaciclo (CAS#:1375325-64-6, 3 mg, 0,004 mmol) em dioxano / H2O (1 mL / 0,40 mL) foi aquecida para 120°C durante 15 min em um micro- ondas de CEM. Sob resfriamento, a mistura reacional foi filtrada através de celita e evaporada. A purificação por cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 100% de EtOAc) forneceu 6-(5-((4-fluoro-2-(5- isopropil-3-metilisoxazol-4-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila como o maior isômero de isoxazol (mistura de 4:1) da mistura isomérica de materiais de partida. Esta mistura isomérica de produtos foi usada diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. Método A de LCMS: tR = 1,367; [M + H]+ = 509,70. Etapa 7. N-(4-fluoro-2-(5-isopropil-3-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-amina e N-(4-fluoro-2-(3- isopropil-5-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2- il)pirimidin-5-amina
[00405] A uma solução de 6-(5-((4-fluoro-2-(5-isopropil-3- metilisoxazol-4-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila e 6-(5-((4-fluoro-2- (3-isopropil-5-metilisoxazol-4-il)fenil)amino)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (mistura de 4:1 de regioisômeros de isoxazol de Etapa 6, 40 mg, 0,079 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL) em temperatura ambiente. A reação agitada durante 1 h em temperatura ambiente e os solventes foram em seguida removidos. DCM (2 mL) e Et3N (0,05 mL) foram adicionados para formar a amina de base livre do sal de TFA. A evaporação dos solventes e secagem sob vácuo elevado forneceram N-(4-fluoro-2-(5- isopropil-3-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2- il)pirimidin-5-amina e N-(4-fluoro-2-(3-isopropil-5-metilisoxazol-4- il)fenil)-4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-amina como a base livre (mistura de 4:1 de regioisômeros de isoxazol).
[00406] Este material foi usado diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 8. N-(4-fluoro-2-(5-isopropil-3-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5- amina e N-(4-fluoro-2-(3-isopropil-5-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5- amina
[00407] A uma solução de crude N-(4-fluoro-2-(5-isopropil-3- metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5- amina e N-(4-fluoro-2-(3-isopropil-5-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5- amina (mistura de 4:1 de regioisômeros de isoxazol de Etapa 7, 0,079 mmol) e tetra-hidro-2H-piran-4-carbaldeído (27 mg, 0,24 mmol) em dicloroetano (2 mL, contendo 1% AcOH) foi adicionado NaBH(OAc)3 (50 mg, 0,24 mmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada durante 30 min e foi concluída por análise de LCMS. A evaporação do solvente seguido por purificação usando o método A de HPLC forneceu o sal de TFA de N-(4-fluoro-2-(5-isopropil-3- metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-amina e sal de TFA de N-(4- fluoro-2-(3-isopropil-5-metilisoxazol-4-il)fenil)-4-(6-((tetra-hidro-2H- piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-amina como uma mistura de 4:1 de regiosômeros de isoxazol (15 mg). Método B de LCMS: tR = 1,124; [M + H]+ = 507,70. Exemplo 14A: maior regioisômero de isoxazol Método B de LCMS: tR = 1,013; [M + H]+ = 507,70 1H RMN (CD3OD). d 8,55 (bs, 1H), 7,79 (bs, 1H), 7,17-7,12 (m, 1H), 7,00 (dd, J = 3,2, 8,8 Hz, 1H), 6,83 (dd, J = 5,2, 9,2 Hz, 1H), 4,60-4,35 (m, 8H), 3,93 (dd, J = 4,0, 11,6 Hz, 2H), 3,40 (t, J = 11,6 Hz, 2H), 3,11 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,07-3,00 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 1,93-1,87 (m, 1H), 1,60 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 1,37-1,20 (m, 1H), 1,27 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,26 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,21-1,16 (1H, m). Exemplo 14B: menor regioisômero de isoxazol Método B de LCMS tR = 1,124; [M + H]+ = 507,70. Exemplo 15. N-(5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)-4-(6-((tetra-hidro-2H- piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-amina
[00408] O produto título foi sintetizado pelo método descrito no Exemplos 14A-14B. Na etapa 3, ácido 2-isopropil fenil borônico foi usado. Método G de LCMS: temperatura ambiente = 4,88 min; M+H+ = 502,85. 1H RMN (d4-MeOH) 8,45 (s, 1H), 7,72, (s, 1H), 7,47 (d, 1H), 7,42 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,07 (m, 1H), 6,92 (m, 1H), 6,81 (m, 1H), 4,32 - 4.56 (m, 8H), 3,94 (m, 2H), 3,39 (m, 2H), 3,11 (d, 2H), 2,82 (m, 2H), 1,86 (m, 1H), 1,59 (d, 2H), 1,33 (m, 2H), 1,20 (d, 3H), 1,13 (d, 3H) ppm. Exemplo 16. 5-fluoro-2-((4-(2-(2-hidróxi-2-metilpropil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5-il)amino)-N,N-di- isopropilbenzamida Etapa 1. Ácido 2-((4-(2-(terc-butoxicarbonil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan- 7-il)pirimidin-5-il)amino)-5-fluorobenzoico
[00409] A um frasco de base redonda foi adicionado 7-(5- iodopirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc- butila (Exemplo 71, Etapa 1, 500 mg, 1 eq.), ácido 2-amino-5- fluorobenzoico (216 mg, 1,2 eq), Pd2(dba)3 (21 mg, 0,02 eq.), Xantphos (54 mg, 0,08 eq.) e Cs2CO3 (1,33 g, 3,5 eq.). A esta mistura sólida foi adicionado dioxano (8 mL, 0,15 M com respeisto a 7-(5-iodopirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc-butila). A solução heterogênea foi purgada com uma corrente de nitogênio durante 1 min. O frasco foi tampado e a reação foi aquecida durante a noite a 100°C. O Cs2CO3 foi em seguida filtrada e o filtrado foi diluída com EtOAc e 0,5 M HCl foi adicionado. O sólido branco resultante foi filtrada e secada sobre vácuo. Produção: 400 mg. Etapa 2. 7-(5-((2-(di-isopropilcarbamoil)-4-fluorofenil)amino)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00410] A um frasco de base redonda foram adicionados ácido 2-((4- (2-(terc-butoxicarbonil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5- il)amino)-5-fluorobenzoico (500 mg) e HOBt (184 mg). A esta mistura sólida foram adicionados DMF (3,65 mL), di-isopropilamina (1 mL) e di- isopropiletilamina (209 µL), seguido por reagente de BOP (532 mg, 1,1 eq.) e a mistura foi agitada durante a noite. A mistura foi em seguida dividida entre EtOAc e água. As fases foram separadas e a fase aquosa foi novamente extraída com EtOAc duas vezes. A fase orgânica combinadas foram secada sobre sulfato de magnésio e concentrada. O material cru foi purificado por cromatografia rápida (40 g SiO2, MeOH / DCM como os eluentes) produzindo 7-(5-((2-(di-isopropilcarbamoil)-4- fluorofenil)amino)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2- carboxilato de terc-butila (300 mg). Etapa 3. 5-fluoro-2-((4-(2-(2-hidróxi-2-metilpropil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5-il)amino)-N,N-di- isopropilbenzamida
[00411] A um frasco de base redonda foram adicionados 7-(5-((2-(di- isopropilcarbamoil)-4-fluorofenil)amino)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc-butila (300 mg), DCM (5 mL), e TFA (5 mL) e a mistura reacional foi agitada durante 30 min em temperatura ambiente. Os voláteis foram em seguida removidos sob vácuo. O resíduo cru foi coevaporado com DCM duas vezes produzindo sal de bis-TFA de 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5- il)amino)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida. A um frasco de base redonda foi adicionado o sal de bis-TFA (20 mg), 2,2-dimetiloxirano (11 mg), trietilamina (21 µL) e THF: etanol (2 mL, 1:1 ratio). O frasco foi tampado e a mistura foi aquecida a 65°C durante a noite. Quando a reação foi concluída, os voláteis foram removidos sob vácuo. O material cru foi purificado por método A de RP-HPLC produzindo 5-fluoro-2-((4- (2-(2-hidróxi-2-metilpropil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5- il)amino)-N,N-di-isopropilbenzamida (3,7 mg). Método G de LCMS temperatura ambiente = 3,65 min; (M+H)+ = 513,61. 1H RMN (d4-MeOH) 8,52 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,07 - 7,15 (m, 2H), 6,93 (m, 1H), 4,23 (d, 2H), 4,04 (d, 2H), 3,82 - 3,89 (m, 6H), 1,93 - 1,99 (m, 4H), 1,26 - 1,34 (m, 18H). Exemplo 17. 5-((7-(5-(2-(dimetilphosphoril)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona Etapa 1. 7-(5-(2-(dimetilfosforil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00412] A uma mistura de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 200 mg, 0,41 mmol), (CH3)2PO (35 mg, 0,45 mmol), K3PO4 (104 mg, 0,49 mmol) em DMF anidroso (3 mL) foram adicionados Pd(OAc)2 (1,0 mg, 0,004 mmol) e Xantphos (4,0 mg, 0,006 mmol) e a reação foi agitada a 150 °C sob um micro-ondas durante 30 min. A reação foi filtrada através de uma almofada de celita e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com diclorometano: metanol = 1: 0 ~ 10: 1) para fornecer 7-(5-(2-(dimetilphosphoril)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como óleo amarelo claro. Produção: 120 mg. Método E de LCMS: Temperatura ambiente = 0,836 min.(M+H)+ = 491,2. Etapas 2-3. 5-((7-(5-(2-(dimetilphosphoril)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona Etapas 2-3 foram realizadas de acordo com os procedimentos de Etapas 4-5 de Exemplo 1. Método E de LCMS: temperatura ambiente =1,344 min; (M+H)+ = 537,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,34 (s, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,61 (m, 1 H), 7,22-7,60 (m, 1 H), 6,96-7,00 (m, 3 H), 6,73-6,77 (m, 1 H), 3,59 (s, 6 H), 2,43-2,67 (m, 4 H), 1,90 (d, J = 14 Hz, 8 H), 1,78 (t, J = 6,4 Hz, 2 H). 19F RMN (CD3OD): d -120,92. Exemplo 18. 2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-N-(4- fluorobenzil)-5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-amina Etapa 1. 5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-ona trifluoroacetato
[00413] A uma solução de 7-oxo-5-oxa-2-azaespiro[3,4]octano-2- carboxilato de terc-butila (300 mg, 1,32 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL) em temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 1 h em temperatura ambiente. Os solventes foram removidos para fornecer sal de TFA de 5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7- ona que foi usado diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. Método A de LCMS: tR = 0,269 min; [M+H]+ = 128,28. Etapa 2. 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-5-oxa-2- azaespiro[3,4]octan-7-ona
[00414] Uma mistura de sal de TFA de 5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan- 7-ona (168 mg, 1,32 mmol), 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-4-cloropirimidina (Intermediário 1, 481 mg, 1,58 mmol) e iPr2NEt (0,92 mL,5,28 mmol) em iPrOH (3 mL) foi aquecida a 100°C durante 12 h. A purificação usando cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 10% de MeOH em DCM) forneceu 406 mg de 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-5- oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-ona. Método A de LCMS: tR = 0,961 min; [M+H]+ = 394,35 e 396,37. Etapa 3. 2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-5- oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-ona
[00415] Uma mistura de 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-ona (147 mg, 0,37 mmol), ácido (4- isopropilpirimidin-5-il)borônico (93 mg, 0,56 mmol), PdCl2(PPh3)2 (26 mg, 0,037 mmol) e K3PO4 (237 mg, 1,12 mmol) em dioxano (2,5 mL) e água (0,25 mL) foi aquecida a 120°C em um micro-ondas de CEM durante 2 h.
[00416] A mistura foi filtrada através de celita e evaporada. A purificação usando cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 10% de MeOH em DCM) gave 151 mg de 2-(5-(4-fluoro-2-(4- isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan- 7-ona. Método A de LCMS: tR = 0,926 min; [M+H]+ = 436,48. Etapa 4. 2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- N-(4-fluorobenzil)-5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-amina
[00417] A uma solução de 2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-ona (14 mg, 0,03 mmol) e (4-fluorofenil)metanamina (0,006 mL, 0,047 mmol) em MeOH (2 mL) foi adicionado NaBH3CN (8 mg, 0,12 mmol) e a mistura reacional foi agitada a 50°C durante 6 h. A evaporação do solvente e purificação usando uma HPLC Gilson forneceu 4,6 mg de sal de TFA de 2-(5-(4- fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-N-(4-fluorobenzil)- 5-oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-amina. Método A de LCMS: tR = 0,572 min; [M+H]+ = 545,60. 1H RMN (CD3OD): d 9,10 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,38-7,34 (m, 2H), 7,30-7,22 (m, 2H), 7,10 7,03 (m, 3H), 4,19 (bs, 1H), 4,14-4,03 (m, 3H), 3,91 (dd, J = 6,0, 9,0 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,71-3,66 (m, 1H), 3,46-3,41 (m, 1H), 3,08 3,01 (m, 1H), 2,35-2,30 (m, 1H), 2,08-2,02 (m, 1H), 1,19 (d, J = 6,8 Hz, 6H). Exemplo 19. 4-(((2-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-5- oxa-2-azaespiro[3,4]octan-7-il)amino)metil)benzonitrila
[00418] O composto título foi sintetizado de acordo com o método descrito para o Exemplo 18. Na etapa 3, ácido 2-isopropilfenil borônico foi usado. Na etapa 4, 4-cianobenzaldeído foi usado. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 1,125 min; (M+H)+ = 550,68. 1H RMN (CD3OD): d 8,12 (s, 1H), 7,70 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,55 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,38-7,32 (m, 2H), 7,21-7,05 (m, 5H), 4,19-4,09 (m, 2H), 4,03-3,97 (m, 2H), 3,92-3,87 (m, 1H), 3,87-3,82 (m, 2H), 3,67 (dd, J = 4,8, 9,0 Hz, 1H), 3,40 (bs, 1H), 2,84-2,78 (m, 1H), 2,29-2,22 (m, 1H), 2,05-2,01 (m, 2H), 1,11-1,08 (m, 6H). Exemplo 20. 7-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-N-(4- fluorobenzil)-1-oxa-7-azaespiro[4,4]nonan-3-amina
[00419] O composto título foi sintetizado iniciando com 3-oxo-1-oxa- 7-azaespiro[4,4]nonano-7-carboxilato de terc-butila de acordo com o método descrito para o Exemplo 18. Método A de LCMS: tR =0,585; [M+H]+ = 559,61,1H RMN (CD3OD): d 9,10 (s, 1H), 8,57 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,41-7,35 (m, 2H), 7,28-7,20 (m, 2H), 7,09-6,95 (m, 3H), 4,42 (bs, 1H), 3,97-3,47 (m, 8H), 3,12-3,05 (m, 1H), 2,27-2,23 (m, 1H), 2,18-2,10 (m, 1H), 1,99-1,81 (m, 2H), 1,24-1,19 (m, 6H). Exemplo 21. 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilcarbamoil)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida Etapa 1. (1r,4r)-4-((2-(5-(4-fluoro-2- (isopropil(metil)carbamoil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo-hexano-1-carboxilato de metila
[00420] O composto título foi sintetizado por aminação redutiva entre 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropil-N-metilbenzamida (0,18 mmol) e (1r,4r)-4-formilciclo-hexano- 1-carboxilato de metila (100 µL) pelo método descrito para Exemplo 18, Etapa 4. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,73 min, (M+H)+ = 568,5. Etapa 2. Ácido (1r,4r)-4-((2-(5-(4-fluoro-2- (isopropil(metil)carbamoil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo-hexano-1-carboxílico
[00421] A uma solução de (1r,4r)-4-((2-(5-(4-fluoro-2- (isopropil(metil)carbamoil) fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo-hexano-1-carboxilato de metila (30 mg, 0,053 mmol) em MeOH (1 mL), foi adicionada solução de LiOH a 2 N (0,2 mL). A solução foi agitada a temperatura ambiente durante a noite, o solvente foi removido para secura, e o resíduo foi usado para a etapa seguinte sem purificação; Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,63 min, (M+H)+ = 554,6. Etapa 3. 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilcarbamoil)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00422] A uma solução do produto cru de Etapa 2 em DMF (0,5 mL) foram adicionados MeNH2HCl (15 mg) e Et3N (200 µL), seguido por HATU (20 mg) e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. O produto foi purificado por Método A de RP- HPLC preparativa para fornecer 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilcarbamoil)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida como um sal de TFA (7 mg); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,60 min, (M+H)+ = 567,6; 1H RMN (MeOH-d4): d 8,38, 8,37 (s, 1 H), 7,73, 7,61 (br.s, 1 H), 7,24-7,12 (m, 3 H), 4,65 (m, 1 H), 4.52-3,96 (m, 4 H), 3,45 (m, 2 H), 2,88 (m, 4 H), 2,82, 2,68 (dois s, 3 H), 2,58 (s, 3 H), 2,16 (m, 2 H), 2,08-1,88 (m, 3 H), 1,74 (m, 5 H), 1,41 (m, 2 H), 1,12-0,92 (m, 8 H). Exemplos 22A e 22B. 2-((4-(7-amino-7-(4-cianobenzil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (Isômeros1-2) Etapa 1. 7-(4-bromobenzil)-7-((terc-butilsulfinil)amino)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00423] A uma solução de terc-butil-7-((terc-butilsulfinil)imino)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato (Exemplos 250A-250B, Etapa 1, 0,73 g, 2,13 mmol) em THF (15 mL) a 0°C, brometo de 4-bromo- benzilmagnésio (0,25M em Et2O, 20 mL) foi adicionado, a solução aquecida para temperatura ambiente. Após 2 h, mais 20 mL de reagente Grignard foi adicionado e a mistura foi agitada durante mais 2 h. A reação foi extinta com NH4Cl saturado e camada orgânica foi separada. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2x5 mL), as camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por coluna de sílica gel para fornecer 7-(4-bromobenzil)-7-((terc-butilsulfinil)amino)-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (174,4 mg, 16%). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 2,22 min; (M+H)+ = 513,6. Etapa 2. 7-((terc-butilsulfinil)amino)-7-(4-cianobenzil)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00424] butilsulfinil)amino)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (88,4 mg, 0,17 mmol) em DMF anidroso (0,5 mL), foram adicionados Zn(CN)2 (20 mg, 0,17 mmol) e Pd(PPh3)4 (20 mg, 0,02 mmol). A solução resultante foi desgaseificada, e aquecida a 110°C sob N2 em um banho de óleo durante a noite. A reação foi resfriada, diluída com EtOAc, lavada com HCl a 1N (5 mL), salmoura, e secada sobre Na2SO4. Após remover o solvente, o resíduo foi purificado por coluna de sílica gel (0 9% de MeOH/DCM) para fornecer 7-((terc-butilsulfinil)amino)-7-(4- cianobenzil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (56 mg, 72%). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,67 min; (M+H)+ = 460,6. Etapa 3: 4-((7-amino-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)metil)benzonitrila
[00425] A uma solução de 7-((terc-butilsulfinil)amino)-7-(4- cianobenzil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (56 mg, 0,12 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (50 µL), e a solução resultante foi agitada a temperatura ambiente durante a noite para fornecer 4-((7-amino-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)metil)benzonitrila. O solvente foi removido e o resíduo resultante foi usado na etapa seguinte sem purificação. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,32 min; (M+H)+ = 256,6. Etapa 4. 2-((4-(7-amino-7-(4-cianobenzil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (Isômeros 1-2)
[00426] A uma solução do produto cru de Etapa 3 em isopropanol (0,5 mL), foram adicionados 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N- di-isopropilbenzamida (Intermediário 41, 30 mg) e EtßN (200 µL), a solução resultante foi aquecida em um micro-ondas de reator de CEM reactor at 110°C durante 1 hr. A reação foi resfriada resfriada para temperatura ambiente, e purificado por Método A de RP-HPLC preparativa para fornecer: Isômero 1 como sal de TFA (1,22 mg); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,83 min; (M+H)+ = 571,4. 1H RMN (MeOH-d4): d 8,49 (s, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 7,70 (m, 2H), 7,47 (d, J =6,8 Hz , 2 H), 7,19 (m, 2 H), 7,07 (br, 1 H), 4,04-3,66 (m, 4 H), 3,61 (m, 2 H), 3,26 (m, 1 H), 3,08 (s, 2 H), 2,28-1,76 (m, 8 H), 1,49 (m, 3 H), 1,40 (m, 3 H), 1,17 (d, J = 7,6 Hz, 3 H), 1,10 (m, 3 H); e Isômero 2 como sal de TFA (1,36 mg); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,89 min; (M+H)+ = 571,4. 1H RMN (MeOH-d4): d 8,36 (s, 1 H), 7,86 (br, 1 H), 7,57 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,32 (d, J =7,6 Hz , 2 H), 7,04 (d, J = 7,6 Hz, 2 H), 6,96 (br, 1 H), 3,80-3,48 (m, 5 H), 3,18 (m, 1 H), 2,94 (s, 2 H), 2,05 (m, 2 H), 1,86-1,58 (m, 4 H), 1,49 (m, 2 H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 3 H), 1,24 (d, J = 6. 4 Hz, 3 H), 1,02 (d, J = 6,8 Hz, 3 H), 0,94 (d, J = 6,8 Hz, 3 H). Exemplos 23A-23C. 5-fluoro-2-((4-(7-hidróxi-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-N,N-di-isopropilbenzamida (Isômeros 1-3) Etapa 1. terc-butil-7-oxo-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metileno)-2-azaespiro [4,4]nonano-2-carboxilato
[00427] A uma solução de terc-butila 7-oxo-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de (0,28 g, 1,17 mmol) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 0,23 g, 1,29 mmol) em DMSO (3 mL), foram adicionados L-prolina (40 mg), 2,2,2-trifluoroacetato de 3-etil-1-metil-1H-imidazol-3-ío ([EMIm][CF3COO]) (79 mg, 0,35 mmol) e H2O (0,32 g). A mistura resultante foi aquecida a 80°C durante 4 dias, resfriada para temperatura ambiente, diluída com H2O (5 mL), e extraída com EtOAc (4 x 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas, e o resíduo foi purificado por coluna de sílica gel (0-4% de MeOH/DCM) para fornecer terc-butil-7-oxo-8-((2-oxo-2,3-di-hidro- 1H-benzo[d]imidazol-5-il)metileno)-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato (~190 mg, ~42%, com o material de partida de aldeído ainda presente); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,16 min; (M- 55)+ = 328,3; 1H RMN (MeOH-d4): d 9,62 (br 1 H), 9,46 (br, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 7,03 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 5,24 (s, 1 H), 3,40 (m, 2 H), 3,28, 3,20 (dois s, 2 H), 2,88 (s, 2 H), 2,40 (s, 2 H), 1,80 (m, 2 H), 1,4, 1,40 (dois s, 9 H). Etapa 2. 7-hidróxi-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila e 7-oxo-8- ((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00428] A uma solução de terc-butil-7-oxo-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metileno)-2-azaespiro [4,4]nonano-2-carboxilato (130 mg) em MeOH (10 mL), foi adicionado Pd-C (10 mg), e a solução foi agitada a temperatura ambiente com um balão de H2 durante a noite. LC-MS mostrou uma mistura de 7-hidróxi-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila e 7-oxo-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila. A mistura reacional foi filtrada através de uma almofada de celita, e solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por a coluna de sílica gel (3-7% de MeOH/DCM) para fornecer 7-oxo-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (~50 mg); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,17 min; (M-55)+ = 330,3; e 7-hidróxi-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (~80 mg); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,17 min; (M-55)+ = 332,3. Etapa 3. 5-((8-hidróxi-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)metil)-1,3-di-hidro-2H- benzo[d]imidazol-2-ona
[00429] A uma solução de 7-hidróxi-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (20 mg, 0,052 mmol) em DCM (0,5 mL), foi adicionado TFA (0,2 mL) e a solução foi agitada em temperatura ambiente durante meia hora. O solvente foi em seguida removido até a secura para fornecer um sal de TFA de 5-((8-hidróxi-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)metil)-1,3-di- hidro-2H-benzo[d]imidazol-2-ona, que foi usado para a etapa seguinte sem purificação; Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,47 min; (M+H)+ = 288,3. Etapa 4. 5-fluoro-2-((4-(7-hidróxi-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-N,N-di-isopropilbenzamida (Isômeros 1-3)
[00430] A uma solução do produto cru de Etapa 3 em isopropanol (0,3 mL), foi adicionada 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida (Intermediário 41, 20 mg) e Et3N (150 µL), e a solução resultante foi aquecida em um reator de micro-ondas de CEM a 110°C durante 1 h. LC-MS mostrou três produtos a tR = 0,88, 0,90 e 0,95 min com uma relação de 1:1:5. Os produtos foram isolados pelo Método A de RP-HPLC preparativa para fornecer: Isômero 1 como um sal de TFA (1,4 mg), Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,88 min; (M+H)+ = 603,5. 1H RMN (MeOH-d4): d 8,37 (s, 1 H), 7,68, 7,54 (dois br, 1 H), 7,10 (m, 3 H), 6,84-6,72 (m, 3 H), 4,08-3,94 (m, 2 H), 3,94-3,50 (m, 5 H), 3,00-2,74 (m, 1 H), 2,52-2,26 (m, 1 H), 2,14-1,78 (m, 5 H), 1,68-1,30 (m, 6 H), 1,24-1,02 (m, 6 H), 1,02 0,82 (m, 2 H); Isômero 2 como um sal de TFA (0,82 mg), Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,90 min; (M+H)+ = 603,5. 1H RMN (MeOH-d4): d 8,33 (s, 1 H), 7,62, 7,50 (dois br, 1 H), 7,10 (m, 3 H), 6,84-6,70 (m, 3 H), 3,98-3,54 (m, 6 H), 3,52-3,34 (m, 1 H), 3,02-2,92 (m, 1 H), 2,78, 2,48 (dois br, 1 H), 2,28 (m, 1 H), 2,08-1,92 (m, 2 H), 1,90-1,72 (m, 2 H), 1,68 1,46 (m, 2 H), 1,34 (m, 3 H), 1,28-0,84 (m, 7 H); e Isômero 3 como um sal de TFA (5 mg), Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,95 min; (M+H)+ = 603,5. 1H RMN (MeOH-d4): d 8,35 (s, 1 H), 7,68-7,50 (m, 1 H), 7,22-7,04 (m, 3 H), 6,77 (m, 3 H), 4,08-3,90 (m, 2 H), 3,90-3,56 (m, 4 H), 3,56-3,32 (m, 1 H), 2,76 (m, 1 H), 2,45 (m, 1 H), 2,11 (m, 1 H), 1,88-1,58 (m, 4 H), 1,55-1,24 (m, 6 H), 1,22 0,98 (m, 6 H), 0,92 (br, 1 H), 0,84 (br, 1 H). Exemplos 24A-24B. 2-((4-(7-amino-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N- di-isopropilbenzamida (Isômeros 1-2) Etapa 1. terc-butil-7-((terc-butilsulfinil)imino)-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato
[00431] O produto título foi sintetizado as uma mistura de multiple diasteoroisômeros de acordo com o procedimento descritos nos Exemplos 23A-23C, Etapa 1, seguido por Etapa 1 de Exemplos 250A- 250B, iniciando com 7-oxo-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol- 5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (veja os Exemplos 23A-23C, Etapa 2). O produto título foi usado para a etapa seguinte sem purificação. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,29-1,32 min, múltiplos picos; (M+H)+ = 489,4. Etapa 2. 7-((terc-butilsulfinil)amino)-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00432] A uma solução do resíduo de Etapa 1 em THF (5 mL), foram adicionados NaBH4 (10 mg, 0,26 mmol), e 1 gota de água. A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante duas horas. A reação foi extinta com água gelada e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob vácuo e o resíduo foi purificado por método A de RF-HPLC preparativa para fornecer duas frações de diasteoroiosômeros: Fração 1 (5,8 mg, sal de TFA): método de LC-MS B: temperatura ambiente = 1,26 min, (M+H)+ = 491,4; Fração 2 (18,8 mg, sal de TFA): método de LC-MS B: temperatura ambiente = 1,32 min, (M+H)+ = 491,4. Etapa 3. 2-metil-N-(8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)propano-2-sulfinamida
[00433] A uma solução de 7-((terc-butilsulfinil)amino)-8-((2-oxo-2,3- di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (18,8 mg, 0,038 mmol, Fração 2, Etapa 2) em DCM (3 mL), foi adicionado TFA (50 µL) e a solução resultante foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Et3N foi em seguida adicionado à solução para neutralizer o ácido. Na remoção do solvente, o resíduo foi usado para a etapa seguinte sem purificação. Etapa 4. 2-((4-(7-((terc-butilsulfinil)amino)-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida
[00434] A uma solução do produto cru from Etapa 3 in isopropanol (0,3 mL) foi adicionado 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida (Intermediário 41, 20 mg) e Et3N (100 µL), e a solução resultante foi aquecida em um micro-ondas de CEM reactor at 110°C durante 1 h. O solvente foi removido para fornecer o produto cru, que foi usado para a etapa seguinte sem purificação; Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,06 min, (M+H)+ = 706,6. Etapa 5. 2-((4-(7-amino-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- isopropilbenzamida (Isômeros 1-2)
[00435] Ao produto cru de Etapa 4 em MeOH (2 mL) foi adicionado HCl a 6N (2 mL) e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. LC-MS mostrou dois produtos a tr = 0,65, 0,69 min com uma relação de 1:6; Os produtos foram isolados pelo Método A de RP-HPLC preparativa para fornecer dois isômeros.
[00436] Isômero 1 como um sal de TFA (0,67 mg); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,65 min, (M+H)+ = 602,5; 1H RMN (MeOH-d4): d8,33, 8,31 (dois s, 1 H), 7,78, 7,71 (dois br, 1 H), 7,06 (m, 2 H), 6,96 (m, 1 H), 6,82 (m, 1 H), 6,76 (m, 2 H), 3,78-3,62 (m, 3 H), 3,56-3,40 (m, 2 H), 3,38-3,28 (m, 1 H), 3,08-2,82 (m, 1 H), 2,58-2,12 (m, 2 H), 1,92-1,54 (m, 4 H), 1,36 (m, 6 H), 1,22 (m, 1 H), 1,06 (m, 6 H), 1,02-0,88 (m, 2 H).
[00437] Isômero 2 como um sal de TFA (4,24 mg); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,69 min, (M+H)+ = 602,5. 1H RMN (MeOH-d4): d8,34 (s, 1 H), 7,80 (br, 1 H), 7,09 (m, 2 H), 6,99 (m, 1 H), 6,82 (m, 1 H), 6,76 (m, 2 H), 3,84-3,62 (m, 3 H), 3,58-3,42 (m, 2 H), 3,36 3,26 (m, 1 H), 3,08-2,98 (m, 1 H), 2,45-2,12 (m, 2 H), 1,88-1,54 (m, 4 H), 1,37 (m, 6 H), 1,22 (m, 1 H), 1,05 (m, 6 H), 0,95 (m, 2 H). Exemplo 25. 2-((4-(7-amino-8-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N- di-isopropilbenzamida (Isômero 3)
[00438] O composto título foi sintetizado de acordo com o procedimento de Exemplos 24A-24B, usando a fração 1 (5,8 mg) preparada na Etapa 2 de Exemplos 24A-24B. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,69 min, (M+H)+ = 602,5. Exemplos 26A-26B. 5-fluoro-2-((4-(8-(4-fluorobenzil)-7-(2-hidroxietil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di- isopropilbenzamida (Isômeros 1-2) Etapa 1. 7-benzil-3-oxo-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00439] A uma solução de 7-benzil-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-3-ona (500 mg, 2,17 mmol) em DCM (15 mL) foi adicionado Boc2O (1,04 g, 4,8 mmol) seguido por adição em porções de DMAP (662 mg, 5,4 mmol) em temperatura ambiente e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 dias. A reação foi extinta por adição de H2O (20 mL) e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (30 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas sobre Na2SO4 e evaporadas para fornecer o produto cru, que foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel eluindo com 70% de EtOAc/Hexanos para fornecer 400 mg de 7-benzil- 3-oxo-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo incolor (56% de produção). Método A de LCMS: tR = 0,73 min, [M+H]+ = 331,4. Etapa 2. ((1-benzil-3-(3-(4-fluorofenil)-2-oxopropil)pirrolidin-3- il)metil)carbamato de terc-butila
[00440] A 0°C, a uma solução de 7-benzil-3-oxo-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (280 mg, 0,85 mmol) em THF seco (2 mL) foi adicionado cloreto de (4-fluorobenzil)magnésio a 0,25 M em Et2O (5,0 mL, 1,25 mmol) lentamente sob N2. A mistura foi agitada durante 1 h a 0°C em seguida extinta pela adição de H2O (10 mL). A mistura foi em seguida extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secadas sobre Na2SO4 e evaporadas para fornecer produto cru, que foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel eluindo com 30% de EtOAc/Hexanos para fornecer 240 mg de ((1-benzil-3-(3-(4-fluorofenil)-2-oxopropil)pirrolidin-3- il)metil)carbamato de terc-butila como um óleo incolor (65% de produção). Método A de LCMS: tR = 1,10 min, [M+H]+ = 441,4. Etapa 3. 7-benzil-3-(4-fluorobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila
[00441] A uma solução de ((1-benzil-3-(3-(4-fluorofenil)-2- oxopropil)pirrolidin-3-il)metil)carbamato de terc-butila (240 mg, 0,55 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (0,5 mL) em temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 1 h em temperatura ambiente e em seguida concentrada sob pressão reduzida.
[00442] O produto cru resultante foi dissolvido into DCM (3 mL) e neutralizada com TEA, seguido por adição de NaCNBH3 (39 mg, 0,6 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. Boc2O (135 mg, 0,65 mmol) foi adicionado à mistura reacional e agitada em temperatura ambiente durante 4 h. A mistura foi diluída com H2O (20 mL) e extraída com EtOAc (2 x 20 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O produto cru foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel eluindo com 20% de EtOAc/hexanos para fornecer 184 mg de 7-benzil-3-(4-fluorobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo incolor (80% de produção). Método A de LCMS: tR = 1,17 min, [M+H]+ = 425,5. Etapa 4. 3-(4-fluorobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00443] A uma solução de 7-benzil-3-(4-fluorobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (184 mg, 0,43 mmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado Pd(OH)2 em carbono (5% de base seca, 123 mg, 43 µmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente sob um balão de nitrogênio durante 40 h e filtrada através de uma almofada de celita. O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida. O produto cru foi usado diretamente para a reação de etapa seguinte sem outra purificação. Método A de LCMS: tR = 1,01 min, [M+H]+ = 335,5. Etapa 5. 7-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-3- (4-fluorobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00444] Uma solução de 3-(4-fluorobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (94 mg, 0,28 mmol) e 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida (Intermediário 41, 100 mg, 0,31 mmol) em iPrOH (2 mL) foi aquecida em um reator de micro-ondas a 120°C durante 2 h. Após refriar para temperatura ambiente, a mistura foi diluída com H2O (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 15 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre Na2SO4, e concentrada.
[00445] O produto cru foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel eluindo com 70% de EtOAc/Hexanos para fornecer 127 mg de 7-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-3-(4- fluorobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo incolor (70% de produção). Método A de LCMS: tR = 1,48 min, [M+H]+ = 650,4. Etapa 6. 5-fluoro-2-((4-(8-(4-fluorobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di-isopropilbenzamida
[00446] A uma solução de 7-(5-(2-(di-isopropilcarbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-3-(4-fluorobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (100 mg, 0,15 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (0,4 mL) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada durante 1 h e neutralizada com solução de NaHCO3 aquoso. A mistura foi em seguida extraída com DCM (4 x 15 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O produto cru foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel eluindo com 10% de MeOH/DCM para fornecer 65 mg de 5-fluoro-2-((4-(8-(4- fluorobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di- isopropilbenzamida como um óleo incolor (80% de produção). Método A de LCMS: tR = 0,92 min, [M+H]+ = 550,5. Etapa 6. 2-((4-(7-(2-((terc-butildimetilsilil)óxi)etil)-8-(4-fluorobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di- Isopropilbenzamida
[00447] A uma solução de 5-fluoro-2-((4-(8-(4-fluorobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di-isopropilbenzamida (10 mg, 18 µmol) e (2-bromoethóxi)(terc-butil) dimetilsilano (7 mg, 27 µmol) em DMF (0,5 mL) foi adicionado K2CO3 (7 mg, 45 µmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada a 50°C durante 4 h e extraída com EtOAc (4 x 5 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O produto cru foi usado diretamente para a reação de etapa seguinte sem outra purificação. Método A de LCMS: tR = 1,34 min, [M+H]+ = 708,5. Etapa 7. 5-fluoro-2-((4-(8-(4-fluorobenzil)-7-(2-hidroxietil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N,N-di-isopropilbenzamida (Isômeros 1-2)
[00448] A uma solução de crude 2-((4-(7-(2-((terc- butildimetilsilil)óxi)etil)-8-(4-fluorobenzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N,N-di-isopropilbenzamida em THF (0,5 mL) foi adicionado TBAF em solução de THF (1 M, 0,1 mL, 0,1 µmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h e concentrada sob pressão reduzida. O produto cru foi purificado em uma Gilson-HPLC para produzir o produto título como uma mistura de dois racematos.
[00449] Isômero 1: Método A de LCMS: tR = 0,93 min, [M+H]+ = 594,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,58 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,33 - 7,25 (m, 5H), 7,27 - 7,09 (m, 2H), 3,97 - 3,88 (m, 8H), 3,68 - 3,61 (m, 2H), 3,48 - 3,41 (m, 2H), 3,26 - 3,21 (m, 1H), 3,15 - 3,05 (m, 1H), 2,90 - 2,85 (m, 1H), 2,15 - 2,04 (m, 4H), 1,55 - 1,52 (m, 3H), 1,39 - 1,37 (m, 3H), 1,23 - 1,21 (m, 3H), 1,11 - 1,07 (m, 3H). 19F RMN (CD3OD): d -76,90, -77,38, - 117,20.
[00450] Isômero 2: Método A de LCMS: tR = 0,92 min, [M+H]+ = 594,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,56 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,33 - 7,31 (m, 2H), 7,28 - 7,25 (m, 1H), 7,24 - 7,20 (m, 2H), 7,10 - 7,08 (m, 2H), 3,90 - 3,81 (m, 8H), 3,62 - 3,53 (m, 2H), 3,48 - 3,41 (m, 2H), 3,24 - 3,13 (m, 2H), 2,90 - 2,81 (m, 1H), 2,16 - 2,10 (m, 2H), 1,94 - 1,91 (m, 2H), 1,53 - 1,51 (m, 3H), 1,29 - 1,27 (m, 3H), 1,21 - 1,19 (m, 3H), 1,11 - 1,07 (m, 3H). Exemplo 27. 6-((7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1-metil-1H-benzo[d]imidazol- 2(3H)-ona Etapa 1. 7-(((trifluorometil)sulfonil)óxi)-2-azaespiro[4,4]non-7-eno-2- carboxilato de terc-butila
[00451] A uma solução de LiHMDS (4 mL, 4 mmol, 1M em THF) em THF (10 mL, anidroso) foi adicionado 7-oxo-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (500 mg, 2 mmol) em THF (4 mL, anidroso) gota a gota a -78°C e a mistura foi agitada a -78°C durante 1 h sob N2. PhNTf2 (1,1 g, 3 mmol) em THF (6 mL, anidroso) foi adicionado e a reação foi aquecida para 12-21°C e agitada durante 16 h sob N2. A mistura resultante foi extinta por NH4Cl aquoso saturado (30 mL) e extraída com EtOAc (3 x 30 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer o resíduo cru. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (SiO2, 1%~50% de EtOAc/Éter de petróleo) para fornecer 7- (((trifluorometil)sulfonil)óxi)-2-azaespiro[4,4]non-7-eno-2-carboxilato de terc-butila (impuro) como um óleo incolor. Produção: 950 mg. 1H RMN (MeOD-d4): d5,69 (s, 1 H), 3,38-3,50 (m, 2 H), 3,20-3,30 (m, 2 H), 2,65 2,80 (m, 2 H), 1,90-2,10 (m, 3 H), 1,77-1,85 (m, 1 H), 1,46 (s, 9 H). Etapa 2. 7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2- azaespiro[4,4]non-7-eno-2-carboxilato de terc-butila
[00452] A uma solução de 7-(((trifluorometil)sulfonil)óxi)-2- azaespiro[4,4]non-7-eno-2-carboxilato de terc-butila (950 mg, 2 mmol, 55% de pureza), e 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-octametil-2,2’-bi(1,3,2- dioxaborolano) (760 mg, 3 mmol) em dioxano (10 mL, anidroso) foi adicionado a Pd(dppf)Cl2 (73 mg, 0,11 mmol) e KOAc (390 mg, 4 mmol) sob N2. A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 16 h sob N2. A mistura resultante foi concentrada para fornecer o resíduo cru. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (SiO2, 1%~100% de EtOAc em éter de petróleo) para fornecer 7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-2-azaespiro[4,4]non-7-eno-2-carboxilato de terc- butila (cru impuro) como um óleo incolor. Produção: 800 mg. 1H RMN (MeOD-d4): d 6,27 (s, 1 H), 3,38-3,50 (m, 2 H), 3,15-3,30 (m, 2 H), 2,40 2,60 (m, 2 H), 1,65-1,90 (m, 2 H), 1,40-1,50 (m, 9 H), 1,26 (s, 12 H), 0,80-0,95 (m, 2 H). Etapa 3. 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]non- 7-eno-2-carboxilato de terc-butila
[00453] A uma solução de 4-cloro-5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidina (Intermediário 10A, 50 mg, 0,2 mmol), terc-butila 7-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2-azaespiro[4,4]non-7-eno-2-carboxilato de (140 mg, 0,4 mmol, 50% de pureza) em dioxano (2,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi adicionado a Pd(dppf)Cl2 (15 mg, 0,02 mmol) e Na2CO3 (42 mg, 0,4 mmol) sob N2. A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 16 h sob N2. A mistura resultante foi diluída com água (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer o resíduo. O resíduo foi purificado por prep-TLC (EtOAc:éter de petróleo = 2:1) para fornecer 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]non-7-eno-2-carboxilato de terc-butila como um óleo amarelo. Produção: 50 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,914 min; (M+H)+ = 446,0, 448,0 (isótopos de cloro). Etapa 4: 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00454] A uma solução de 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2-azaespiro[4,4]non-7-eno-2-carboxilato de terc-butila (50 mg, 0,11 mmol) em MeOH (5 mL, anidroso) e THF (5 mL, anidroso) foi adicionado PtO2 (5 mg, 10%). A mistura resultante foi agitada a 25°C durante cerca de 16 h under H2 (1,40 kg/cm2 (20 psi)). A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado e purificado por TLC preparativa em sílica gel (EtOAc: éter de petróleo = 1:5) para fornecer 7-(5-(2-cloro-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo amarelo. Produção: 30 mg (61%). método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,923 min, (M+H)+ = 448,0, 450,0 (isótopos de cloro). Etapa 5. 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonano
[00455] Uma solução de 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (30 mg, 0,07 mmol) em TFA-CH2Cl2 (3 mL, V: V = 1: 4) foi agitada a 10-21°C durante cerca de 3 h. A mistura foi em seguida concentrada. A mistura resultante foi ajustada para o pH 8 com NaHCO3 saturado, aquoso e extraída com CH2CI2 (2 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonano como um óleo amarelo, que foi usado para a etapa seguinte diretamente sem outra purificação. Produção: 30 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,642 min; (M+H)+ = 348,0, 350,0 (isótopos de cloro). Etapa 6: 6-((7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00456] A uma solução de 7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2-azaespiro[4,4]nonano (30 mg, 0,07 mmol, cru) e 1-metil-2-oxo-2,3-di- hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (12 mg, 0,07 mmol,) em MeOH (3 mL, anidroso) foi adicionado NaBH3CN (22 mg, 0,35 mmol). A mistura resultante foi agitada a 10-21°C durante cerca de 16 h. A mistura foi concentrada e purificada por método A de RP-HPLC preparativa acídica para fornecer 6-((7-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 15 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,902 min; (M+H)+ = 508,3, 510,3 (isótopos de cloro). 1H RMN (MeOD-d4): d 8,70-8,85 (m, 1 H), 7,99 (d, J = 5,2 Hz, 1 H), 7,35-7,50 (m, 1 H), 7,10-7,35 (m, 5 H), 4,35-4.50 (m, 2 H), 3,80-3,95 (m, 1 H), 3,35-3,70 (m, 6 H), 3,20-3,30 (m, 1 H), 1,75-2,40 (m, 8 H). 19F RMN (MeOD-d4): d -77,02, -116,39. Exemplo 28. 5-((7-(3-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)piridin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol- 2-ona Etapa 1. 4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenol
[00457] A uma solução de 2-bromo-4-fluorofenol (650 mg, 3,40 mmol) em dioxano (15 mL) e H2O (3 mL) foram adicionados ácido (4- isopropilpirimidin-5-il)borônico (622 mg, 3,74 mmol), Pd(dppf)Cl2 (125 mg, 0,17 mmol) e Na2CO3 (720 mg, 6,55 mmol). A mistura resultante foi desgaseificada com N2 e agitada a 90°C em um banho de óleo sob N2 durante cerca de 20 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para remover dioxano e o resíduo resultante foi diluído com EtOAc (20 mL). A suspensão foi filtrada através de uma almofada curta de sílica gel. O filtrado foi diluído com EtOAc (20 mL) e água (20 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (2 x 30 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc = 10: 1 a 1: 1) para fornecer 4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenol como um sólido amarelo. Produção: 300 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,705 min; (M+H)+ = 233,1. Etapa 2. 7-(3-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il) fenóxi) piridin-4-il)-2, 7- diazaespiro [4,4] nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00458] A uma solução de 4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenol (250 mg, 1,08 mmol) em DMSO (25 mL) foram adicionados 7-(3- bromopiridin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila (412 mg, 1,08 mmol), CuI (206 mg, 1,08 mmol), ácido 2-picolínico (266 mg, 2,16 mmol) e K3PO4 (916 mg, 4,32 mmol). A mistura resultante foi purgada com N2 durante 10 min e agitada a 110°C em um banho de óleo sob N2 durante cerca de 24 h. A mistura reacional foi diluída com água (30 mL) e extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (3 x 40 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (EtOAc) para fornecer 7-(3-(4-fluoro-2- (4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)piridin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano- 2-carboxilato de terc-butila como um sólido amarelo. Produção: 25 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,747 min; (M+H)+ = 534,1. Etapas 3-4. 5-((7-(3-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi) piridin- 4-il) -2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)- ona Etapas 3 e 4 foram realizadas como descrito no Exemplo 1, Etapas 4-5. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 1,190 min; (M+H)+ = 580,3. 1H RMN (MeOD-d4): d9,12 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 7,91-8,10 (m, 2H), 7,10-7,38 (m, 6H), 6,89 (s, 1H), 4,40-4,48 (m, 2H), 3,37-3,87 (m, 8H), 3,00-3,14 (m, 1H), 1,99-2,25 (m, 4H), 1,11-1,29 (m, 6H). 19F RMN (MeOD-d4): d-118,50, -76,93. Exemplo 29. 5-((7-(5-(2-(3-ciclopropil-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-2-il)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)- 1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol-2-ona (Mistura racêmica) Etapa 1. 2-cloro-3-ciclopropil-6-metoxipiridina
[00459] A um frasco de base redonda foram adicionados 3-bromo-2- cloro-6-metoxipiridina (10,57 g), ácido ciclopropil borônico (4,28 g), acetato de paládio (533 mg), triciclo-hexilfosfina (1,33 g) e fosfato de potássio (35,2 g). A esta mistura sólida foram adicionados tolueno:H2O (158 mL; relação de 9:1). A mistura heterogênea foi purgada com uma corrente de nitogênio durante 1 min e em seguida foi aquecida a refluxo durante a noite. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (100 mL) e água (100 mL). As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída novamente duas vezes com acetato de etila (100 mL cada). As fases orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de magnésio e o resíduo cru foi purificado por cromatografia rápida (acetato de etila / hexanos como os eluentes) produzindo 8,6 gramas de 2-cloro-3- ciclopropil-6-metoxipiridina como um óleo incolor. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,61 min; (M+H)+ = 222,2, 224,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,45 (s, 1H), 8,33 (s, 1H), 3,90-4,00 (m, 2H), 3,70-3,80 (m, 2H), 3,20-3,55 (m, 4H), 1,80-2,0 (m, 4H), 1,27 (s, 9H). Etapa 2. 6-cloro-5-ciclopropilpiridin-2(1H)-ona
[00460] A um frasco de base redonda foi adicionada 2-cloro-3- ciclopropil-6-metoxipiridina (15,6 g) e acetonitrila (170 mL). À esta solução foi adicionado clorotrimetilsilano (21,6 mL) seguido por iodeto de sódio (25,6 g,). A solução heterogênea foi aquecida a 50°C durante 3 h. Metanol (40 mL) foi em seguida adicionado para extinguir a reação e os voláteis foram removidos sob vácuo. Diclorometano foi adicionado (250 mL) e a solução foi agitada durante 30 min. Os sólidos foram precipitados, filtrados, e o filtrado foi concentrado. O resíduo cru foi purificado por cromatografia rápida (120 g de SiO2, MeOH / CH2Cl2 como os eluentes produzindo um óleo marrom claro (14 g). Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,0,54 min; (M+H)+ = 222,2, 224,2 1H RMN (CDCl3): d 7,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H), 1,95-2,10 (m, 1H), 0,90-1,05 (m, 2H), 0,55-0,65 (m, 4H). Etapa 3. 6-cloro-5-ciclopropil-1-metilpiridin-2(1H)-ona
[00461] A um frasco de base redonda foram adicionados 6-cloro-5- ciclopropilpiridin-2(1H)-ona (7,9 g), carbonato de potássio (12,9 g), brometo de lítio (8,12 g) e brometo de tetrabutil amônio (1,5 g). A esta mistura sólida foram adicionados tolueno:H2O (156 mL, relação de 100:1) seguido por iodeto de metila (14,6 mL) e a mistura heterogênea foi aquecida a 50°C. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada com HCl a 1M. A fase orgânica foi secada sobre MgSO4 e concentrada. O material cru foi purificado por cromatografia rápida (120 g de SiO2, MeOH / CH2Cl2 como os eluentes) produzindo 4,5 g de 6-cloro-5- ciclopropil-1-metilpiridin-2(1H)-ona como um óleo amarelo claro. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,0,63 min; (M+H)+ = 222,2, 224,2 Etapa 4. 5-ciclopropil-6-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-1-metilpiridin-2(1H)-ona Boc I
[00462] A um frasco de base redonda de 100 mL foram adicionados ácido (5-fluoro-2-hidroxifenil)borônico (852 mg), Sphos palladacyle Gen 2 (39 mg), fluoreto de potássio (951 mg), e 6-cloro-5-ciclopropil-1- metilpiridin-2(1H)-ona (500 mg). A esta mistura sólida foram adicionados dioxano (8 mL) e água (2 mL). A solução foi purgada com N2 durante 1 min e em seguida aquecida ao refluxo durante 2 h. Tolueno:EtOAc (30 mL, relação de 1:1) foram adicionados, seguidos por água (30 mL). O sólido fo filtrada e enxaguado com 15 mL de tolueno:EtOAc (1:1), produzindo 581 mg do produto desejado. LC/MS (método 16 mem) - temperatura ambiente = 5,40 min.; M+H = 260,56 1H RMN (d4-MeOH) - 7,27 (d, 1H), 7,11 (dd, 1H), 6,99-6,3 (m, 2H), 6,55 (d, 1H), 3,32 (s, 3H), 1,40 (m, 1H), 0,71 - 0,66 (m, 1H), 0,49 - 0,60 (m, 3H) ppm. Etapas 5-7. 5-((7-(5-(2-(3-ciclopropil-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-2- il)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)- 1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol-2-ona
[00463] O produto título foi preparado como descrito nas Etapas 2-4 de Exemplo 28. Método G de LC/MS, temperatura ambiente = 3,15 min.; M+H = 608,64. 1H RMN (d4-MeOH) 8,21 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,30 - 7,34 (m, 2H), 7,15 (m, 1H), 6,97 - 7,06 (m, 4 H), 6,54 (d, 1H), 3,57 - 3,69 (m, 4H), 3,42 - 3,52 (m, 2H), 3,31 (d, 3H), 2,72 (bm, 2H), 2,55 (bm, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,79 (m, 2H), 1,28 (m, 1H), 0,75 (m, 1H), 0,66 (m, 1H), 0,55 (m, 1H), 0,48 (m, 1H) ppm. Exemplos 29A-29B. 5-((7-(5-(2-(3-ciclopropil-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidropiridin-2-il)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)- 1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol-2-ona (Isômeros 1-2)
[00464] O composto de Exemplo 29 foi separado pelo Método A de SFC para fornecer dois isômeros.
[00465] Exemplo 29A (Isômero 1): 1H RMN (CD3OD): d8,24 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,30-7,40 (m, 2H), 7,10-7,20 (m, 1H), 6,95 7,07 (m, 4H), 6,50-6,60 (m, 1H), 3,40-3,70 (m, 6H), 3,30-3,40 (m, 3H), 2,60-2,70 (m, 2H), 2,40-2,50 (m, 2H), 1,75-1,95 (m, 4H), 1,20-1,35 (m, 1H), 0,40-0,85 (m, 4H). 19F RMN: (CD3OD 400 MHz): d -119,20 ~ - 119,12. SFC: tR=17,556 min, EE = 98,93%. ROTAÇÃO: ou °Arc = 0,389.
[00466] Exemplo 29B (Isômero 2): 1H RMN (CD3OD): d 8,24 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,30-7,40 (m, 2H), 7,10-7,20 (m, 1H), 7,00 7,07 (m, 4H), 6,50-6,60 (m, 1H), 3,50-3,70 (m, 6H), 3,30-3,40 (m, 3H), 2,60-2,75 (m, 2H), 2,40-2,50 (m, 2H), 1,75-1,95 (m, 4H), 1,20-1,35 (m, 1H), 0,45-0,85 (m, 4H). 19F RMN: (CD3OD): d -119,21 ~ -119,13. SFC: tR =14,363 min, EE = 8,46%. Exemplo 30. N-(5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)-4-(6-((tetra-hidro-2H- piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)piridin-3-amina
[00467] O produto título foi sintetizado pelo método descrito para Exemplo 28. Na etapa 1, 2-bromo-4-fluoroanilinA e ácido 2-isopropil fenil borônico foram utilizados. Na etapa 2, terc-butila 2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de foi utilizado. Na etapa 5, tetra- hidro-2H-piran-4-carbaldeído foi utilizado. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,96 min; (M+H)+ = 500. 1H RMN (CD3OD) d: 8,00 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,49-7,43 (m, 2H), 7,31-7,23 (m, 2H), 7,02 (s, 1H), 6,88 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,64-6,57 (m, 2H). Exemplo 31. 2-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano Etapa 1. 2-bromo-5-fluorobenzoato de metila
[00468] A uma solução de ácido 2-bromo-5-fluorobenzoico (4,00 g, 18,26 mmol) em MeOH (120 mL, anidroso) foi adicionado SOCl2 (3,26 g, 27,40 mmol) gota a gota a 0°C e a mistura foi aquecida a 68°C durante 18 h. TLC (éter de petróleo: EtOAc = 5:1) confirmou o produto desejado. A mistura foi concentrada e o resíduo foi misturado com EtOAc (200 mL), lavado por NaHCO3 (150 mL), salmoura (150 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada para fornecer 2-bromo-5- fluorobenzoato de metila como um óleo incolor. Produção: 2,7 g método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,77 min. Etapa 2: 2-(2-bromo-5-fluorofenil)propan-2-ol
[00469] A uma solução de 2-bromo-5-fluorobenzoato (2,70 g, 11,59 mmol) em THF (85 mL, anidroso) a 0°C sob N2 foi adicionado MeMgBr (9,66 mL, 28,97 mmol, 3,0 M em Et2O) gota a gota, e a mistura foi agitada a 23-28°C durante 4 h. A mistura foi extinta por NH4Cl aquoso saturado (80 mL) e extraída por EtOAc (60 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (40 mL), secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatogtafia de coluna ISCO em sílica gel (13% de EtOAc em éter de petróleo) para fornecer 2-(2-bromo-5-fluorofenil)propan-2-ol como um óleo incolor. Produção: 2,5 g (94%). 1H RMN (CDCl3): d 7,42-7,57 (m, 2H), 6,77-6,88 (m, 1H), 1,75 (s, 6H). Etapa 3. 1-bromo-4-fluoro-2-(2-fluoropropan-2-il)benzene
[00470] A uma solução de 2-(2-bromo-5-fluorofenil)propan-2-ol (2,54 g, 10,90 mmol) a -78°C foi adicionado DAST (2,28 g, 14,17 mmol) gota a gota. A mistura resultante foi agitada a 21-27°C durante 18 h. A mistura foi extinta por NH4Cl aquoso saturado (50 mL), extraída por EtOAc (50 mL), lavada por salmoura (50 mL), secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatogtafia de coluna ISCO (5% de EtOAc em éter de petróleo) para fornecer 1-bromo-4-fluoro-2-(2-fluoropropan-2-il)benzeno como um óleo incolor. Produção: 2,2 g. 1H RMN (CDCl3): d 7,49-7,56 (m, 1H), 7,40 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz, 1H), 6,81-6,90 (m, 1H), 1,88 (s, 3H), 1,82 (s, 3H). Etapa 4. 4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-ol
[00471] Uma solução de 1-bromo-4-fluoro-2-(2-fluoropropan-2- il)benzeno (400 mg, 1,70 mmol), ácido (5-fluoro-2-hidroxifenil)borônico (316 mg, 2,04 mmol) e K3PO4 (720 mg, 3,40 mmol) em dioxano (9 mL) e H2O (3 mL) foi borbulhado com N2 durante 1 min e SPhos Paladaciclo (62 mg, 0,086 mmol) foi em seguida adicionado. A mistura resultante foi aquecida sob um micro-ondas a 115°C durante 0,5 h. A mistura foi diluída por EtOAc (30 mL) e H2O (30 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (30 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por TLC preparativa em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc = 5: 1) para fornecer 4',5-difluoro-2'-(2- fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-ol como óleo amarelo claro. Produção: 380 mg. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 1,070 min; (M+H)+ = 247,1. Etapa 5. 6-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00472] A uma solução de 6-(5-iodopirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (231 mg, 0,58 mmol) em DMSO (6 mL) foi borbulhado N2 durante 1 min e uma solução de 4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-ol (183 mg, 0,69 mmol) em DMSO (2 mL) foi em seguida adicionada. A mistura resultante foi aquecida a 110°C durante 22 h. A mistura foi em seguida diluída por EtOAc (25 mL) e H2O (25 mL). A camada orgânica foi lavada por salmoura (20 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa básica para 6-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin- 4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de fornecer terc-butila como um gel incolor. Produção: 90 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,808 min; (M+H)+ = 541,2. Etapa 6. 2-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano
[00473] A uma solução de 6-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2- carboxilato de terc-butila (40 mg, 0,09 mmol) em DCM (2 mL, anidroso) resfriada para 0°C foi adicionado TFA (0,25 mmol). A mistura foi agitada a 0°C durante 4 h. A mistura foi extinta por NaHCO3 aquoso saturado (5 mL). Em seguida DCM (20 mL) foi adicionado, a camada orgânica foi separada, secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada para fornecer o produto cru de 2-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano como óleo amarelo claro, que foi diretamente usado na etapa seguinte. Produção: 44 mg Etapa 7. 2-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)-6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptanos
[00474] A uma solução de 2-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano (44 mg, 0,10 mmol, cru) e tetra-hidro-2H-piran-4-carbaldeído (15 mg, 0,13 mmol) em MeOH (2 mL, anidroso) foi adicionado NaBH3CN (12 mg, 0,20 mmol) e a mistura foi agitada a 20-25°C durante 17 h. LCMS mostrou que o produto desejado foi produzido em ~30% de produção, e um subproduto foi também produzido em ~32% de produção. A mistura foi concentrada, e o resíduo foi purificado por método D de RP-HPLC básica para fornecer 2-(5-((4',5-difluoro-2'-(2-fluoropropan-2-il)-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptanos como um gel incolor. Produção: 6,7 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,88 min; (M+H)+ = 539,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,15 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,25 (dd, J = 10,8, 2,4 Hz, 1H), 7,04-7,20 (m, 4H), 7,00 (dd, J = 9,2, 4,8 Hz, 1H), 4,14-4,22 (m, 4H), 3,93 (dd, J = 11,2, 4,0 Hz, 2H), 3,35-3,45 (m, 6H), 2,38 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 1,57-1,66 (m, 8H), 1,19-1,33 (m, 2H). 19F RMN (CD3OD): d - 115,50, -121,33, -132,73. Exemplo 32. 5-fluoro-N-isopropil-2-((4-(6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzenesulfonamida Etapa 1. 6-(5-(2-(benziltio)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00475] Uma mistura de 6-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 20, 200 mg, 0,43 mmol), benzil mercaptan (0,06 mL, 0,52 mmol), Pd2(dba)3 (39 mg, 10 mol%), Xantphos (50 mg, 20 mol%) e iPrNEt (0,15 mL, 0,86 mmol) em dioxano foi aquecida para 110°C em um micro ondas de CEM durante 2,5 h. A mistura reacional foi em seguida filtrada através de celita e os solventes evaporados. O resíduo cru foi purificado usando cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 100% EtOAc) para fornecer 210 mg de 6-(5-(2-(benziltio)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido amarelo (96%). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,544 min; (M+H)+ = 509,6. Etapa 2. 6-(5-(2-(clorosulfonil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00476] A uma solução de 6-(5-(2-(benziltio)-4-fluorofenóxi)pirimidin- 4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (50 mg, 0,10 mmol) em MeCN (2 mL), H2O (0,10 mL) e AcOH (0,10 mL) foi adicionado 1,3-dicloro-5,5-dimetilimidazolidina-2,4-diona (39 mg, 0,20 mmol) a 0°C. A reação foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 2 h. EtOAc (5 mL) e H2O (5 mL) foram em seguida adicionados para a preparação. A camada de EtOAc foi separada, secada usando Na2SO4, e evaporada. O resíduo cru foi purificado usando cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 10% de MeOH em DCM) para fornecer 21 mg de 6-(5-(2-(clorosulfonil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,492 min; (M+H)+ = 485,47 e 487,50 Etapa 3. 6-(5-(4-fluoro-2-(N-isopropilsulfamoil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00477] A uma solução de 6-(5-(2-(clorosulfonil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (21 mg, 0,04 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado propan-2- amina (0,20 mL) em temperatura ambiente. Após 1 h, os solventes foram removidos e o produto cru foi triturado com 50% de EtOAc em hexanos para fornecer 15 mg de 6-(5-(4-fluoro-2-(N- isopropilsulfamoil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2- carboxilato de terc-butila (75%). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,374 min; (M+H)+ = 508,64 Etapa 4. 2-((4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluoro-N-isopropilbenzenossulfonamida
[00478] A uma solução de 6-(5-(4-fluoro-2-(N- isopropilsulfamoil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2- carboxilato de terc-butila (15 mg) in DCM (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL) em temperatura ambiente. A reação agitada durante 30 min em temperatura ambiente e os solventes foram em seguida removidos para fornecer sal de TFA de 2-((4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin- 5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzenesulfonamida. O material foi misturado com DCM e Et3N (0,10 mL) foi adicionado. Na dissolução completa do material, os solventes foram removidos para fornecer o produto como a base livre. Este material cru foi usado diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 5. 5-fluoro-N-isopropil-2-((4-(6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)- 2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzenossulfonamida
[00479] À solução de 2-((4-(2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin- 5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzenossulfonamida crua e tetra-hidro-2H- piran-4-carbaldeído (14 mg, 0,12 mmol) em dicloroetano (2 mL, contendo 1% de AcOH) foi adicionado NaBH(OAc)3 (25 mg, 0,12 mmol) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada durante 30 min e a reação foi confirmada concluída por análise de LCMS. A evaporação do solvente seguida por purificação usando uma HPLC Gilson forneceram sal de TFA de 5-fluoro-N-isopropil-2-((4-(6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)benzenossulfonamida. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,293 min; (M+H)+ = 506,57. 1H RMN (CD3OD): d 8,55 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,77-7,75 (m, 2H), 7,53-7,49 (m, 1H), 7,40-7,37 (m, 1H), 4,60-4,40 (m, 8H), 3,96 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,57-3,54 (m, 1H), 3,44 (t, J = 11,6 Hz, 2H), 3,17 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 2,00-1,84 (m, 1H), 1,63 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 1,40-1,32 (m, 2H), 1,17 (d, J = 6,0 Hz, 6H). Exemplo 33. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(2-metoxibutan-2-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol- 2-ona Etapa 1. terc-butila 7-(5-(4-fluoro-2-(2-hidroxibutan-2-il)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato
[00480] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 53 mg, 0,11 mmol) e butan-2-ona (5 equiv.) em THF (2 mL) foi adicionada uma solução a 1,6 M de n-BuLi em hexanos (0,08 mL) a - 78°C. A mistura reacional foi aquecida para temperatura ambiente durante 1 h e na obtenção da temperatura ambiente, uma solução aquosa de NH4Cl saturado (1 mL) foi adicionada além do EtOAc (5 mL) para a preparação.
[00481] A purificação do resíduo cru usando cromatografia de coluna rápida ISCO (eluindo com 5% de MeOH em DCM) forneceu 20 mg de 7-(5-(4-fluoro-2-(2-hidroxibutan-2-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (38%). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,589 min; (M+H)+ = 487,62. 1H RMN (CDCl3): d 8,42 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,36 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,90-6,86 (m, 1H), 6,58-6,50 (m, 1H), 3,80-3,25 (m, 8H), 2,53-2,42 (m, 1H), 2,15-2,05 (m, 1H), 1,95-1,82 (m, 5H), 1,65 (s, 3H), 1,45 (s, 9H), 0,84 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Etapa 2. 2-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)butan-2-ol
[00482] A uma solução a 4 N de HCl em dioxano (2 mL) foi adicionado terc-butil-7-(5-(4-fluoro-2-(2-hidroxibutan-2- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato (10 mg) em temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 2 h. Os solventes foram removidos para fornecer o produto como o sal de HCl. DCM (2 mL) e Et3N (0,10 mL) foram adicionados ao produto e os solventes foram removidos para fornecer o 2-(2-((4-(2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)butan-2-ol cru como a base livre que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 3. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(2-metoxibutan-2-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol- 2-ona
[00483] A uma solução de 2-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)butan-2-ol cru e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 7 mg, 0,04 mmol) em MeOH (3 mL) foi adicionado NaBH3CN (8 mg, 0,13 mmol) em temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 15 h. A evaporação do solvente seguido por purificação por método A de RP- HPLC forneceu 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(2-metoxibutan-2-il)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H- benzo[d]imidazol-2-ona TFA salt. Método G de LCMS: temperatura ambiente = 4,01 min; (M+H)+ = 547,62. 1H RMN (CD3OD): d 8,52 (bs, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,34 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,21-7,18 (m, 2H), 7,13-7,10 (m, 3H), 4,43 (s, 2H), 4,20-3,95 (m, 4H), 3,70-3,50 (m, 2H), 3,47-3,36 (m, 2H), 3,15 (s, 3H), 2,34-2,05 (m, 4H), 1,96-1,87 (m, 2H), 1,58 (s, 3H), 0,76 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Exemplo 34. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidroxipentan-3-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol- 2-ona Etapa 1. 7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidroxipentan-3-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00484] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 106 mg, 0,22 mmol) e pentan-3-ona (0,10 mL, 1,07 mmol) em THF (3 mL) foi adicionada uma solução a 1,6 M de n-BuLi em hexanos (0,66 mL) at -78°C. A reação foi aquecida para temperatura ambiente durante 1 h. Ao alcançar a temperatura ambiente, uma solução aquosa de NH4Cl saturado (2 mL) foi adicionado além de EtOAc (8 mL) para a preparação. A purificação do resíduo cru usando cromatografia de coluna rápida (eluindo com 5% de MeOH em DCM) forneceu 32 mg de terc-butil-7-(5- (4-fluoro-2-(3-hidroxipentan-3-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato. Etapa 2. 3-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)pentan-3-ol
[00485] A uma solução a 4 N de HCl em dioxano (2 mL) foi adicionada a 7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidroxipentan-3-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (32 mg) em temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante 2 h. Os solventes foram em seguida removidos para fornecer o produto como o sal de HCl. DCM (2 mL) e Et3N (0,10 mL) foram adicionados ao produto e os solventes foram removidos para fornecer 3-(2-((4-(2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)pentan-3-ol cru como a base livre que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 3. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidroxipentan-3-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol- 2-ona
[00486] A uma solução de 3-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)pentan-3-ol cru do acima e 2-oxo-2,3-di- hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 20 mg, 0,12 mmol) em MeOH (3 mL) foi adicionado NaBH3CN (10 mg, 0,16 mmol) em temperatura ambiente e a mistura reacional agitada durante 4 h. A evaporação do solvente seguida pelo método A de RP-HPLC forneceram 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidroxipentan-3-il)fenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H- benzo[d]imidazol-2-ona. Método G de LCMS: temperatura ambiente = 3,197 min; (M+H)+ = 547,61. 1H RMN (CD3OD): d 8,52 (bs, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,45 (dd, J = 2,8, 10,6 Hz, 1H), 7,21-7,18 (m, 2H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,05-6,96 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 4,20-3,90 (m, 4H), 3,70-3,50 (m, 2H), 3,48-3,33 (m, 2H), 2,34-1,90 (m, 6H), 1,89-1,80 (m, 2H), 0,78 (t, J = 7,2 Hz, 6H). Exemplos 35-36. 2-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-N- metilciclopropano carboxamida (Exemplo 35) & 5-((7-(5-(4-fluoro-2- (3-hidróxi-3-metilbutil)fenóxi) pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona (Exemplo 36) Etapa 1. 7-(5-(4-fluoro-2-(3-metóxi-3-oxopropil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00487] À solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(3-metóxi-3-oxoprop-1-en-1- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de (E)- terc-butila (Exemplo 37, Etapa 1, 450 mg, 0,9 mmmol) em MeOH anidroso (25 mL) foi adicionado Pd/C (45 mg). A mistura foi agitada sob H2 (2,10 kg/cm2 (30 psi)) a 14-25°C durante 18 h. LCMS mostrou que a a reação foi concluída. A mistura foi filtrada e concentrada para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(3-metóxi-3-oxopropil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um gel amarelo claro. Produção: 402 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,749 min; (M+H)+ = 501,2. Etapa 2. 7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidróxi-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00488] À solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(3-metóxi-3- oxopropil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (200 mg, 0,4 mmol) em THF anidroso (5 mL) foi adicionado gota a gota brometo de metilmagnésio (0,53 mL, 1,6 mmol) a 0°C durante 10 min. A mistura foi extinta com saturação de NH4CI (aq.) (10 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL x 3), secadas sobre Na2SO4 e concentradas para purificação por coluna ISCO em sílica gel (100% de DCM ta 2% de MeOH em DCM) para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidróxi-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como óleo incolor. Produção: 180 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,744 min; (M+H)+ = 501,3. Etapa 3. 7-(5-(4-fluoro-2-(3-fluoro-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00489] À solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidróxi-3- metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (180 mg, 0,16 mmmol) em CH2Cl2 anidroso (3 mL) foi adicionado DAST (70 mg, 0,43 mmol) a 0°C, gota a gota durante 5 min e a mistura foi em seguida agitada a 17-25°C durante 2 h. LCMS mostrou o produto desejado e que o 7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidróxi-3- metilbutil)fenóxi) pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila foi completamente consumido. A mistura foi vertida em NH4CI saturado (aq) (5 mL) e extraída com DCM (10 mL x 3).As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, concentradaa, e purificado por HPLC preparativa acídica para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(3-fluoro-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como óleo incolor. Produção: 84 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,790 min; (M+H)+= 503,3. Etapa 4. 2-(5-(4-fluoro-2-(3-fluoro-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano
[00490] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(3-fluoro-3- metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (80 mg, 0,16 mmmol) em anidroso CH2Cl2 (4 mL) foi adicionado TFA (0,5 mL) e a mistura resultante foi agitada a 16-25°C durante 2 h. A mistura foi em seguida vertida em NaHCO3 saturado (aq) (10 mL) e extraída com DCM (10 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 e concentradas para fornecer 2-(5-(4-fluoro-2-(3-fluoro-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano como um óleo incolor, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 50 mg. Etapa 5: 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(3-fluoro-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona e 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidróxi-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00491] A uma solução de 2-(5-(4-fluoro-2-(3-fluoro-3- metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano (50 mg, 0,12 mmmol) em anidroso MeOH (2 mL) foi adicionado 2-oxo-2,3-di-hidro- 1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 22 mg, 0,14 mmol) e NaBH3CN (23 mg, 0,37 mmol) e a solução foi agitada a 50°C durante 16 h. LCMS mostrou o composto desejado e que o 2-(5-(4- fluoro-2-(3-fluoro-3-metilbutil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano foi consumido. A mistura foi purificada pelo método D de RP-HPLC preparativa básica para fornecer 5-((7-(5-(4- fluoro-2-(3-fluoro-3-metilbutil)fenóxi) pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona e 5- ((7-(5-(4-fluoro-2-(3-hidróxi-3-metilbutil)fenóxi) pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona, ambos os produtos como um sólido branco.
[00492] Exemplo 35. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,618 min; (M+H)+ = 610,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,23 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,05-7,12 (m, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,95-7,01 (m, 2H), 6,85 6,95 (m, 1H), 6,70-6,75 (m, 1H), 3,63-3,83 (m, 4H), 3,61 (s, 2H), 2,72 2,78 (m, 2H), 2,60-2,70 (m, 2H), 2,48-2,59 (m, 2H), 1,78-1,98 (m, 6H), 1,33 (d, J = 21,6 Hz, 6H).19F RMN (CD3OD): d -120,97, -140,72.
[00493] Exemplo 36. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,586 min; (M+H)+ = 547,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,23 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,09 (dd, J = 9,2 2,8 Hz, 1H), 7,05 (s, 1H), 6,95-7,00 (m, 2H), 6,85-6,95 (m, 1H), 6,72 (dd, J = 8,8 4,8 Hz, 1H), 3,69-3,83 (m, 4H), 3,65 (s, 2H), 2,49-2,75 (m, 6H), 1,90-2,00 (m, 2H), 1,84 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,67-1,76 (m, 2H), 1,20 (s, 6H). 19F RMN (MeOD): d -121,18. Exemplo 37. 2-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)fenil)ciclopropanocarboxilato de metila Etapa 1. 7-(5-(4-fluoro-2-(3-metóxi-3-oxoprop-1-en-1-il)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de (E)-terc-butila
[00494] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 1,20 g, 2,44 mmol), acrilato de metila (838 mg, 9,74 mmol) e Et3N (246 mg, 2,44 mmol) em THF (24 mL, anidroso) foi adicionado P(o-Tol)3 (292 mg, 0,96 mmol) seguido por Pd2(dba)3 (448 mg, 0,48 mmol) sob N2. A mistura foi aquecida em um tubo selado a 80°C durante 17 h. A mistura foi em seguida diluída por EtOAc (300 mL) e H2O (30 mL). A camada orgânica foi filtrada e secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado pelo método D de RP-HPLC para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(3-metóxi-3-oxoprop-1-en-1-il)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de (E)-terc-butila como um gel incolor. Produção: 482 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,005 min; (M+H)+ = 499,3. Etapa 2. 7-(5-(4-fluoro-2-(2-(metoxicarbonil)ciclopropil)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00495] A uma suspensão de NaH (43 mg, 1,07 mmol, 60% em óleo mineral) em DMSO (3 mL) foi adicionado Me3SOI (383 mg, 1,74 mmol) sob N2. Em seguida uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(3-metóxi-3- oxoprop-1-en-1-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de (E)-terc-butila (383 mg, 1,74 mmol) em DMSO (3 mL) e THF (3 mL) foi adicionada e a mistura foi agitada a 18-23°C durante 4 h. A mistura foi em seguida extinta por HCl a 1N (20 mL) e extraída com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi lavada por H2O, secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatogtafia de coluna ISCO (EtOAc) para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(2- (metoxicarbonil)ciclopropil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro [4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um gel incolor. Produção: 300 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,014 min; (M+H)+ = 513,3. Etapa 3: 2-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)ciclopropanocarboxilato de metila
[00496] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(2- (metoxicarbonil)ciclopropil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (300 mg, 0,58 mmol) em DCM (8 mL) foi adicionado HCl-dioxano (1,6 mL, 4 N). A mistura foi agitada a 11-16°C durante 4 h, em cujo tempo TLC (DCM: Metanol = 10: 1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada, misturado com DCM (20 mL), lavada por NaHCO3 saturado aquoso (20 mL), salmoura (20 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada para fornecer 2-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)ciclopropanocarboxilato de metila como um gel incolor. Produção: 220 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,846 min; (M+H)+ = 413,3. Etapa 4. 2-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol- 5-il) metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)fenil)ciclopropanocarboxilato de metila
[00497] A uma solução de 2-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)ciclopropanocarboxilato de metila (110 mg, 0,27 mmol) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 53 mg, 0,33 mmol) em MeOH (2 mL) foi adicionado NaBH3CN (34 mg, 0,54 mmol). A mistura foi agitada a 11-16 °C durante 16 h. A mistura foi concentrada, e purificada por cromatografia de sílica (DCM: MeOH = 10: 1) para fornecer 2-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di- hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)ciclopropanocarboxilato de metila como um sólido branco. Produção: 80 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,898 min; (M+H)+ = 599,3. 1H RMN (CDCl3): d 9,95-10,20 (s, 2H), 8,32-8,39 (m, 1H), 7,68 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 6,88-6,97 (m, 2H), 6,77-6,86 (m, 1H), 6,58-6,72 (m, 2H), 3,51-3,79 (m, 9H), 2,41-2,81 (m, 5H), 1,75-1,98 (m, 5H), 1,55-1,60 (m, 1H), 1,25 1,38 (m, 1H). 19F RMN (CDCl3): d -119,00. Exemplo 38. 2-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-N- metilciclopropano carboxamida
[00498] A uma solução de 2-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro- 1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin- 5-il)óxi)fenil)ciclopropanocarboxilato de metila (Exemplo 37, 36 mg, 0,064 mmol) em THF (0,5 mL) foi adicionado MeNH2 (1 mL, solução de água) e a mistura foi agitada a 14-18°C durante 72 h. A mistura foi em seguida concentrada e o resíduo foi purificado pelo método A de RP- HPLC para fornecer 2-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)fenil)-N-metilciclopropanocarboxamida (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 22 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,892 min; (M+H)+ = 558,1. 1H RMN (CD3OD): d 8,49 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,17-7,28 (m, 3H), 7,05-7,15 (m, 2H), 6,98 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,05-4,20 (m, 4H), 3,35-3,78 (m, 4H), 2,66 (s, 3H), 2,45-2,50 (m, 1H), 2,02-2,40 (m, 4H), 1,65 (s, 1H), 1,27-1,47 (m, 2H). 19F RMN (CD3OD): d -77,03, -116,71. Exemplo 39. 6-((2-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,4]octan-6-il)metil)-3,3-dimetilindolin-2-ona
[00499] Uma mistura de 2-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,6-diazaespiro[3,4]octano sintetizado de Intermediário 24A por desproteção de ácido (80 mg, 0,19 mmol, 81% de pureza), Intermediário 45 (54 mg, 0,29 mmol) e NaBH3CN (60 mg, 0,95 mmol) em MeOH (5 mL) foi agitada a 70°C (banho de óleo) durante 18 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pelo método D de RP-HPLC preparativa básica para fornecer 6-((2-(5-(2- cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,4]octan-6-il)metil)- 3,3-dimetilindolin-2-ona como um sólido branco. Produção: 17 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,584 min; (M+H)+ = 508,0, 510,0 (isótopos de cloro). 1H RMN (CD3OD): d 8,24 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,41-7,42 (m, 1H), 7,20 (m, J = 7,6 Hz, 1H), 6,99-7,08 (m, 3H), 6,95 (s, 1H), 4,21-4,26 (m, 4H), 3,62 (s, 2H), 2,81 (s, 2H), 2,66 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,16 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,34 (s, 6H). 19F RMN (CD3OD): d -118,54 ~ -117,89. Exemplo 40. 2-(6-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carbonil)-2,3-di-hidro-1H-indeno-5- sulfonamide Etapa 1. 2,3-di-hidro-1H-indeno-2-carboxilato de metila
[00500] A uma solução de ácido 2,3-di-hidro-1H-indeno-2-carboxílico (8,40 g, 51,85 mmol) em MeOH (220 mL, anidroso) foi adicionado H2SO4 (4,4 mL) a 0°C e a mistura foi aquecida a 70°C durante 17 h. A mistura foi concentrada, diluída por EtOAc (80 mL), lavada por H2O (80 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada para fornecer 2,3-di-hidro-1H-indeno-2-carboxilato de metila (8,70 g, 95%) como um óleo amarelo claro. Produção: 8,7 g. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,045 min; (M+H)+ = 177,2. Etapa 2. 5-(clorossulfonil)-2,3-di-hidro-1H-indeno-2-carboxilato de Metila
[00501] 2,3-di-hidro-1H-indeno-2-carboxilato de metila (1,00 g, 5,68 mmol) foi adicionado durante 20 min a uma solução pré-resfriada de ClSO3H (5 mL) e a mistura resultante foi agitada a 13-21°C durante 3 h, após cujo tempo, ela foi vertida em água gelada seguida por EtOAc (30 mL). A camada orgânica foi separada, e secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada para fornecer 5-(clorosulfonil)-2,3-di-hidro-1H- indeno-2-carboxilato de metila como um óleo incolor. Produção: 1,4 g. 1H RMN (CDCl3): d 7,82-7,89 (m, 2H), 7,43 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,74 3,77 (m, 3H), 3,28-3,50 (m, 5H). Etapa 3. 5-sulfamoil-2,3-di-hidro-1H-indeno-2-carboxilato de metilar
[00502] A uma solução de 5-(clorosulfonil)-2,3-di-hidro-1H-indeno-2- carboxilato de metila (100 mg, 0,36 mmol) em THF (2 mL) foi adicionado NH3^H2O (100 µL) sob 0°C e a mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h. A mistura foi em seguida concentrada, diluída por EtOAc (15 mL), lavada por NH4Cl saturado aquoso (10 mL) e salmoura (10 mL), secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada para fornecer 5-sulfamoil-2,3- di-hidro-1H-indeno-2-carboxilato de metila como um gel incolor. Produção: 80 mg. 1H RMN (CDCl3): d 7,65-7,75 (m, 2H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,37-3,46 (m, 1H), 3,21-3,27 (m, 4H). Etapa 4. Ácido 5-sulfamoil-2,3-di-hidro-1H-indeno-2-carboxílico
[00503] A uma solução de 5-sulfamoil-2,3-di-hidro-1H-indeno-2- carboxilato (80 mg, 0,31 mmol), em MeOH (1 mL) foram adicionados H2O (1 mL) seguido por LiOH (96 mg, 4,0 mmol). A mistura foi agitada a 18-23°C durante 4 h. O pH foi ajustado para o 2-3 com HCl aquoso, e a mistura foi concentrada para fornecer o ácido 5-sulfamoil-2,3-di-hidro- 1H-indeno-2-carboxílico cru como um sólido branco. Produção: 131 mg. Etapa 5. 2-(6-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3] heptanos-2-carbonil)-2,3-di-hidro-1H-indeno-5-sulfonamida
[00504] A uma solução de ácido 5-sulfamoil-2,3-di-hidro-1H-indeno- 2-carboxílico (131 mg, 0,31 mmol) e 2-(5-(2-cloro-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano sintetizada de Intermediário 20A por desproteção de ácido (100 mg, 0,31 mmol) em DMF (4 mL, anidroso) foram adicionados HATU (177 mg, 0,47 mmol) e DIEA (120 mg, 154 µL). A mistura foi agitada a 13-20°C durante 17 h, em cujo tempo LCMS mostrou que o produto desejado foi produzido em cerca de 17% de produção. A mistura foi diluída por EtOAc (20 mL), lavada por H2O (20 mL), salmoura (20 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado pelo método A de RP-HPLC preparativa acídica para fornecer 2-(6-(5-(2-cloro-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carbonil)-2,3- di-hidro-1H-indeno-5-sulfonamida (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 9 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,843 min; (M+H)+ = 544,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,48 (s, 1H), 7,67-7,76 (m, 2H), 7,59 (s, 1H), 7,50 (dd, J = 8,4, 3,2 Hz, 1H), 7,33-7,43 (m, 2H), 7,21 7,29 (m, 1H), 4,71-4,86 (m, 4H), 4,57 (s, 2H), 4,27 (s, 2H), 3,36-3,45 (m, 1H), 3,17-3,24 (m, 4H). 19F RMN (CD3OD): d -77,02, -115,29. Exemplo 41. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)- ona Etapa 1. 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00505] Uma mistura de 5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)-4-cloropirimidina (Intermediário 1, 15 g, 49,4 mmol), 2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (14,7 g, 54,3 mmol) e Na2CO3 (20,9 g, 197,6 mmol) em CH3CN (300 mL) foi agitada ao refluxo durante 3 h. A mistura foi em seguida filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com acetato de etila) para fornecer 7-(5-(2-bromo-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (isto é, Intermediário 11), como um sólido amarelo. Produção: 23 g. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,759 min; (M+H)+ = 492,8, 494,9 (isótopos de bromo). 1H RMN (CDCl3): d 8,35 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,31-7,33 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,90-6,95 (m, 1H), 6,68-6,70 (m, 1H), 3,50-3,85 (m, 4H), 3,10-3,45 (m, 4H), 1,80-1,95 (m, 4H), 1,39 (s, 9H). Etapa 2. 7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro [4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00506] A uma mistura desgaseificada de Intermediário 11 (15 g, 30,4 mmol), ácido (2-isopropilfenil)borônico (7,8 g, 45,6 mmol) e K3PO4 (19,4 g, 91,2 mmol) em dioxano (360 mL) e H2O (90 mL) foi adicionado Sphos Paladaciclo (2,2 g, 3,04 mmol) sob N2 e a mistura foi agitada a 90°C durante 18 h. A mistura foi em seguida filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para remover o dioxano. O resíduo resultante foi extraído com acetato de etila (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (100 mL) e salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo: acetato de etila = 1: 2 a 1: 3) para fornecer 7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila como um sólido amarelo. Produção: 8,6 g. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,785 min; (M+H)+ = 533,1. 1H RMN (CDCl3): d8,33 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,3-7,38 (m, 2H), 7,10 7,20 (m, 1H), 6,90-7,05 (m, 3H), 6,70-6,80 (m, 1H), 3,30-3,70 (m, 6H), 3,10-3,30 (m, 2H), 2,80-2,90 (m, 1H), 1,70-1,85 (m, 4H), 1,46 (s, 9H), 1,11-1,16 (m, 6H). Etapa 3. 2-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano
[00507] A uma mistura de 7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila (8,6 g, 16,1 mmol) em CH2Cl2 (150 mL) foi adicionado HCl-dioxano (30 mL, 4 N) sob água gelada e a mistura foi agitada a 14-18°C durante 2 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi basificado para o pH 12-13 com solução aquosa a 10%, extraída com EtOAc (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano como um sólido amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 6,8 g. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,649 min; (M+H)+ = 433,1. Etapa 4. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4] nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00508] Uma mistura de 2-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro [4,4]nonano (6,8 g, 15,7 mmol), 2- oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 3,05 g, 18,8 mmol), NaBH3CN (3,9 g, 62,8 mmol) e HOAc (3,4 mL) em MeOH (130 mL) foi agitada a 70°C durante 18 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida e o resíduo ajustado para o pH = 8 com solução de NaHCO3 saturado e extraída com acetato de etila (3 x 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pelo método D de RP-HPLC preparativa básica para fornecer 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona como um sólido amarelo claro. Produção: 7,2 g. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,663 min; (M+H)+ = 579,1. 1H RMN (CD3OD): d 8,13 (s, 1H), 7,58 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,95-7,35 (m, 10H), 3,62 (s, 2H), 3,40-3,55 (m, 3H), 2,55-2,85 (m, 4H), 2,30-2,45 (m, 2H), 1,65-1,85 (m, 4H), 1,00-1,10 (m, 6H). Exemplos 41A-41B. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)- ona (Isômeros 1-2)
[00509] 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-isopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)- ona (Exemplo 40, 1 g, 1,7 mmol) foi purificado por método A de separação de SFC para fornecer dois isômeros como um sólido branco que foram isolados como sais de HCl.
[00510] Isômero 1: método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,660 min; (M+H)+ = 579,1.
[00511] 1H RMN (CD3OD): d 8,28 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,10-7,37 (m, 10H), 4,45 (s, 2H), 3,71-3,34 (m, 8H), 2,77-2,85 (m, 1H), 2,03-2,11 (m, 4H), 1,06-1,14 (m, 6H). 19F RMN (CD3OD): d -119,18. Método D de SFC analítica: 8,122 min, ee = 91,32%
[00512] Isômero 2: método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,659 min; (M+H)+ = 579,1.
[00513] 1H RMN (CD3OD400 MHz): d 8,27 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,10 7,37 (m, 10H), 4,44 (s, 2H), 3,33-3,70 (m, 8H), 2,77-2,83 (m, 1H), 2,03- 2,11 (m, 4H), 1,06-1,14 (m, 6H). 19F RMN (CD3OD 400 MHz): d -119,30. Método D de SFC analítica: 8,122 min, ee = 93,84% Exemplo 42. 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carbonitrila (Mistura racêmica)
[00514] O produto título foi sintetizado de acordo com o método descrito para o Exemplo 41. Na etapa 2, ácido 4-ciano-2-ciclopropil fenil borônico foi usado. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 1,42 min, 602 (M+H)+. 1H RMN CD3OD) d: 8,15 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,42 (m,1H), 7,29 (m, 1H), 7,23-7,14 (m, 3H), 7,07-7,01 (m, 4H), 3,65 (s, 2H), 3,58-3,41 (m, 4H), 2,68 (m, 2H), 2,47 (m, 2H),1,85 (m, 2H), 1,72 (m, 3H), 0,87 (m, 2H), 0,65 (m, 2H). Exemplos 42A-42B. 2-ciclopropil-5’-fluoro-2’-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carbonitrila (Isômeros 1-2)
[00515] O composto de Exemplo 42 foi separado pelo Método A de SFC para fornecer dois isômeros.
[00516] Isômero 1: Método D de LCMS: temperatura ambiente value: 1,435 min, M+H)+ = 602,2;1H RMN (CD3OD ) : d 8,15 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,43 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,10-7,20 (m, 3H), 7,05-7,10 (m, 2H), 7,01 (s, 2H), 3,63 (s, 2H), 3,35-3,60 (m, 4H), 2,60-2,75 (m, 2H), 2,35-2,50 (m, 2H), 1,80-1,90 (m, 2H), 1,60-1,75 (m, 3H), 0,87 (s, 2H), 0,66 (s, 2H).19F RMN (CD3OD): d -120,38. Método D de SFC analítica: tR = 5,306 min, ee = 99,70%.
[00517] Isômero 2: Método D de LCMS: temperatura ambiente value: 1,435 min, M+H)+ = 602,2;1H RMN (CD3OD 400 MHz): d 8,15 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,29 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,10-7,25 (m, 3H), 6,95-7,10 (m, 4H), 3,60-3,70 (m, 2H), 3,35-3,60 (m, 4H), 2,55-2,75 (m, 2H), 2,35-2,50 (m, 2H), 1,80-1,90 (m, 2H), 1,60-1,75 (m, 3H), 0,87 (s, 2H), 0,65 (s, 2H).19F RMN (CD3OD 400 MHz) : d -120,383. Método D de SFC analítica: tR = 7,188 min, ee = 99,32%. Exemplos 43-44. 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carboxamida (Exemplo 43) e ácido 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carboxílico (Exemplo 44)
[00518] Uma mistura de 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4-(7-((2-oxo-2,3- di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carbonitrila sal de bis-HCl (Exemplo 42, 41 mg, 0,06 mmol), THF (3 mL) e 2 M LiOH (1 mL) foi carregada em um tubo de este de micro-ondas CEm de 10 ml e aquecida para 120°C durante 4,5 h em um reator de micro-ondas de CEM. LC/MS mostrou dois produtos em uma relação de cerca de 1:1. A mistura reacional foi neutralizada com 1 M HCl solution, e evaporada para secura e o resíduo resultante waspurificado pelo método A de RP-HPLC para fornecer sal de TFA de 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carboxamida e ácido 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4- (7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carboxílico como um sal de TFA.
[00519] Exemplo 43: Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,68 min, (M+H)+ = 620,3. 1H RMN (CD3OD) d: 8,38 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,63 (m, 1H), 7,45 (dd, J = 8,4, 4,4 Hz, 1H), 7,34-7,30 (m, 2H), 7,25-7,20 (m, 4H), 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,43 (s, 2H), 3,91-3,34 (m, 8H), 2,05 (m, 4H), 1,62 (s, 1H), 0,91-0,70 (m, 4H).
[00520] Exemplo 44: Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,75 min, (M+H)+ = 621,3. 1H RMN (CD3OD) d: 8,38 (s, 1H), 7,78 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,45-7,42 (m, 2H), 7,33 (td, J = 8,4, 4,4 Hz, 1H), 7,28-7,23 (m, 3H), 7,20 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,82-3,46 (m, 8H), 2,07 (m, 4H), 1,63 (s, 1H), 0,92 (m, 2H), 0,65 (m, 2H). Exemplo 45. 2-ciclopropil-5'-fluoro-N,N-dimetil-2'-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carboxamida
[00521] A uma solução de ácido 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4-(7-((2- oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carboxílico (Exemplo 44, 10 mg, 0,012 mmol) em DCM (1 mL) foram adicionados TEA (0,05 mL), HATU (5 mg, 0,013 mmol) e Me2NH a 2,0 M em THF (0,2 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite e em seguida os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi em seguida purificado pelo método A de RP-HPLC para fornecer 2- ciclopropil-5'-fluoro-N,N-dimetil-2'-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4-carboxamida como um sal de TFA. Produção: 8,5 mg. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,74 min, (M+H)+ = 648,3. 1H RMN (CD3OD) d: 8,40 (s, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,45 (m, 1H), 7,33 (m, 1H), 7,26-7,22 (m, 5H), 7,12 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,85-3,42 (m, 8H), 3,06 (s, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,09 (m, 4H), 1,62 (s, 1H), 0,91 (m, 2H), 0,62 (m, 2H). Exemplo 46. 5-((7-(2-cloro-5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di- hidro-2H-benzo[d]imidazol-2-ona
[00522] O composto título foi sintetizado como descrito no Exemplo 41 iniciando de 2,4-dicloro-5-bromo pirimidina. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,45 min, (M+H)+ = 603,6; 1H RMN (MeOH-d4): d 7,90 (s, 1 H), 7,45 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 7,30 (d, J = 5,6 Hz, 2 H), 7,21 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,16 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,12 (d, J = 8 Hz, 1 H), 6,14 (s, 1 H), 4,41 (s, 2 H), 4,37 (m, 1 H), 3,90-3,65 (m, 3 H), 3,64-3,34 (m, 4 H), 3,26 (m, 1 H), 2,18 (m, 1 H), 2,32-1,92 (m, 3 H), 1,36 (m, 6 H). Exemplos 47-52.
[00523] Exemplos 47-52 foram preparados de acordo com os procedimento fornecido no Exemplo 41. Tabela 7. Exemplos 47 -52Exemplo 53. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona Etapa 1. 1-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-isopropil-1H-imidazol
[00524] A uma solução de ácido (5-fluoro-2-metoxifenil)borônico (12,0 g, 70,59 mmol), 2-isopropil-1H-imidazol (7,0 g, 64,17 mmol) em DCM anidroso (150 mL) foi adicionado Cu(OAc)2 (1,73 g, 9,62 mmol) e piridina (15 mL, 192,51 mmol) sob O2 (2,10 kg/cm2 (30 psi)) e a mistura resultante foi agitada a 20°C durante 16 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi lavado com água (2 x 100 mL), secado sobre Na2SO4 anidroso, filtrado através de celita, e concentrado sob pressão reduzida para fornecer 1-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-isopropil-1H-imidazol cru como um óleo preto, que foi usado para etapa seguinte. Produção: 15,0 g. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,948 min, (M+H)+ = 253,3. Etapa 2. 4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenol
[00525] Uma solução de 1-(5-fluoro-2-metoxifenil)-2-isopropil-1H- imidazol (15,0 g, 64,17 mmol) em HCl-Py (150 g) foi agitada a 195°C durante 2 h sob N2. LCMS mostrou que o material de partida foi consumido. À reação foi adicionada água (500 mL), e ajustada para o pH ~ 10 por solução de NaOH a 1N. A mistura foi extraída com EtOAc (3 x 200 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada através de uma celita, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com DCM/MeOH = 10: 1) para fornecer 4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenol como um sólido branco. Cerca de 760 mg de 4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol- 1-il)fenol foram também purificados por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com diclorometano:metanol = 10:1) para fornecer o composto 4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenol (541,40 mg) como um sólido branco. Produção: 1,41 g. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,980 min, (M+H)+ = 221,2. 1H RMN (CD3OD): d10,06 (s, 1 H), 7,15-7,20 (m, 2 H), 7,00-7,03 (m, 2 H), 6,88 (s, 1H), 2,73-2,76 (m, 1H), 1,10 (d, J = 6,8 Hz, 2 H). 19F RMN (CD3OD): d- 124,63. Etapa 3. 2-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)acetato de Etila
[00526] A uma solução de 4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenol (0,65 g, 2,95 mmol) e 2-bromoacetato de etila (492 mg, 2,95 mmol) em CH3CN (15 mL) foi adicionado K2CO3 (610 mg, 4,42 mmol), em seguida a reação foi agitada a 80°C durante 16 h sob N2. A mistura reacional foi em seguida filtrada através de celita e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo: EtOAc = 1: 1 ~ 1: 2) para fornecer 2-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol- 1-il)fenóxi)acetato de etila como um óleo amarelo. Produção: 720 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,619 min, (M+H)+ = 307,0 Etapa 4. 5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)-2-tioxo-2,3- di-hidropirimidin-4(1H)-ona
[00527] A uma solução de 2-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenóxi)acetato de etila (720 mg, 2,35 mmol) e formiato de etila (782 mg, 10,58 mmol) em THF anidroso (15 mL) foi adicionado NaH (141 mg, 3,52 mmol, 60% em óleo mineral) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 35°C durante 2 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer (Z)-2-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenóxi)-3-hidroxiacrilato de etila como óleo marrom claro, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. O intermediário foi dissolvido em EtOH anidroso (15 mL), e tioureia (179 mg, 2,35 mmol) foi adicionado sob N2. A mistura reacional foi em seguida agitada a 90°C durante cerca de 16 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com diclorometano:metanol = 20:1 a 10:1) para fornecer 5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)-2-tioxo-2,3- di-hidropirimidin-4(1H)-ona como um óleo amarelo, e cerca de 300 mg de 2-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)acetato de etila foram reciclados. Produção: 280 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,945 min, (M+H)+ = 347,1 Etapa 5. 5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4-ol
[00528] A uma solução de 5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenóxi)-2-tioxo-2,3-di-hidropirimidin-4(1H)-ona (280 mg, 0,813 mmol) em EtOH (10 mL) foi adicionado níquel de Raney úmido (1 g), e a mistura reacional foi agitada a 90°C durante 16 h sob N2. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o 5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4-ol (256 mg, 98% de pureza, cru 100%) como um óleo amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 256 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,958 min, (M+H)+ = 315,1 Etapa 6. 4-cloro-5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenóxi)pirimidina
[00529] A uma solução de 5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenóxi)pirimidin-4-ol (256 mg, 0,813 mmol) em SOCl2 anidroso (5 mL) foi adicionado DMF anidroso (0,5 mL) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 80°C durante 2 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi misturado com CH2Cl2 (100 mL) e lavado com NaHCO3 saturado aquoso (30 mL), salmoura (20 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 4-cloro-5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenóxi)pirimidina como um óleo amarelo. Produção: 210 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,958 min, (M+H)+ = 333,1. Etapa 7. 7-(5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00530] Uma solução de 4-cloro-5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H- imidazol-1-il)fenóxi)pirimidina (100 mg, 0,301 mmol), 2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (82 mg, 0,301 mmol) e DIEA (116 mg, 0,903 mmol) em propan-2-ol (3 mL) foi agitada a 90°C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila cru como um óleo amarelo, que foi usado na etapa seguinte. Produção: 157 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,675 min, (M+H)+ = 523,1. Etapa 8. 2-(5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano
[00531] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol- 1-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (157 mg, 0,301 mmol) em DCM anidroso (5 mL) foi adicionado TFA (1 mL) lentamente a 0°C sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 4-10°C durante 2 h. A mistura reacional foi em seguida concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi dissolvido em água (30 mL) e ajustada para o pH 10 com NaOH (10% em água) para pH 10. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2/iPrOH (10: 1, 3 x 20 mL). A camada orgânica foi secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 2-(5-(4-fluoro-2-(2- isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano como um sólido amarelo, que foi usado na etapa seguinte. Etapa 9. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol-1- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00532] A uma solução de 2-(5-(4-fluoro-2-(2-isopropil-1H-imidazol- 1-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano (10 mg, 0,024 mmol) em anidroso MeOH (2 mL) foi adicionado 2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 6 mg, 0,036 mmol), e a mistura foi agitada durante 5 min sob N2. Em seguida NaBH3CN (70 mg, 0,118 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a 65°C durante 16 h. A mistura reacional foi em seguida concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por método G de RP-HPLC preparativa para fornecer 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(2- isopropil-1H-imidazol-1-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona como um sólido branco. Produção: 2,7 mg (20%) Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,675 min, (M+H)+ = 569,1. 1H RMN (CD3OD): d 8,27 (s, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,30-7,40 (m, 2 H), 6,98-7,11 (m, 6 H), 3,41-3,65 (m, 6 H), 2,81-2,96 (m, 1 H), 2,62-2,70 (m, 2H), 2,42-2,55 (m, 2 H), 1,71-1,96 (m, 4 H), 1,22 (d, J = 5,2 Hz, 6 H). 19F RMN (CD3OD): d -119,023. Exemplo 54. 5-((7-(5-(2-(ciclopropilmetóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol- 2-ona Etapa 1. terc-butila 7-(5-(2-(ciclopropilmetóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato
[00533] A uma solução de Intermediário 43b (40 mg, 90 µmol) em DMF (0,5 mL) foi adicionado (bromometil)ciclopropano (11 µL, 110 µmol) seguido por K2CO3 (20 mg, 135 µmol) e a mistura resultante foi agitada a 50 °C durante 15 h. Após refriar para temperatura ambiente, a mistura foi diluída com H2O (10 mL) e extraída com EtOAc (2 x 10 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre Na2SO4, e concentrada sob vácuo. O produto cru foi purificado por cromatografia rápida sobre sílica gel eluindo com 50% de EtOAc/hexanos para fornecer 42 mg de 7-(5-(2-(ciclopropilmetóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo amarelo (90% de produção). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,69 min; (M+H)+ = 485,6. 1H RMN (CD3OD): d8,50 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,33 - 7,29 (m, 1H), 7,00 - 6,97 (m, 1H), 6,80 - 6,75 (m, 1H), 3,84 - 3,82 (m, 3H), 3,48 - 3,35 (m, 4H), 2,12 - 2,02 (m, 5H), 1,46 (s, 11H), 1,10 - 1,09 (m, 1H), 0,54 - 0,52 (m, 2H), 0,20 - 0,19 (m, 2H). Etapa 2. 5-((7-(5-(2-(ciclopropilmetóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol-2- ona
[00534] A uma solução de 7-(5-(2-(ciclopropilmetóxi)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (42 mg, 87 µmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (0,4 mL) em temperatura ambiente. A mistura reacional foi agitada durante 1 h e em seguida neutralizada com solução de NaHCO3 aquoso. A mistura foi extraída com DCM (5 x 15 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O produto cru foi usado sem outra purificação.
[00535] A uma solução do produto cru, (12 mg, 30 µmol), 2-oxo-2,3- di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 5 mg, 30 µmol) em MeOH (1 mL) foi adicionado NaCNBH3 (10 mg, 45 µmol). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 15 h e purificado pelo método A de HPLC para fornecer sal de TFA de 5-((7- (5-(2-(ciclopropilmetóxi)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol-2- ona como um óleo incolor. Método G de LCMS: temperatura ambiente = 3,83 min; (M+H)+ = 531,7. 1H RMN (CD3OD): d 8,51 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,30 - 7,28 (m, 1H), 7,22 - 7,18 (m, 2H), 7,12 - 7,10 (m, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,43 - 4,41 (m, 2H), 4,12 - 4,09 (m, 2H), 3,80 - 3,78 (m, 2H), 2,30 - 2,15 (m, 5H), 1,29 -1,20 (m, 5H), 0,90 - 0,88 (m, 1H), 0,51 - 0,48 (m, 2H), 0,15 - 0,13 (m, 2H). Exemplo 55. 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)tiazol-4- carboxilato de etila
[00536] A uma solução de 2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-2-ciclopropil-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-4-carbonitrila (220 mg, 0,48 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado 2-clorotiazol-4- carboxilato de etila (111 mg, 0,58 mmol), CuI (9,2 mg, 0,048 mmol) e K2CO3 (132 mg, 0,96 mmol) e a mistura reacional foi aquecida em um micro-ondas a 100°C durante 16 h. A mistura foi em seguida filtrada através de celita e a massa filtrada foi lavada duas vezes com EtOAc (30 mL). O filtrado foi combinado e diluído com H2O (100 mL), extraída com EtOAc (50 mL x 2).
[00537] As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer o produto cru que foi purificado por TLC preparativa (éter de petróleo:acetato de etila = 1:2) para fornecer 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)tiazol-4-carboxilato de etila um óleo marrom. Produção: 100 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,783 min, (M+H)+ = 610,9. 1H RMN (CDCl3): d 8,35 (s, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 7,35-7,50 (m, 2 H), 7,15-7,25 (m, 2 H), 6,95-7,10 (m, 2 H), 6,83 (s, 1 H), 4,30-4,45 (m, 2 H), 3,60-3,75 (m, 2 H), 3,40-3,60 (m, 6 H), 1,85-2,05 (m, 4 H), 1,55-1,80 (m, 1 H), 1,20-1,50 (m, 3 H), 0,85-0,95 (m, 2 H), 0,60-0,75 (s, 2 H). 19F RMN (CDCl): d -118,94. Exemplo 56. 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)tiazol-4- carboxilic acid
[00538] A uma solução de 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)tiazol- 4-carboxilato de etila (20 mg, 0,033 mmol) em THF (2 mL) foi adicionado LiOH aquoso (1 mL, 4 N) e a mistura reacional foi agitada a 18-26°C durante 16 h. A mistura foi concentrada e purificada pelo método A de RP-HPLC para fornecer o ácido 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)tiazol- 4-carboxílico como um sólido. Produção: 6 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,726 min, (M+H)+ = 582,9. 1H RMN (CD3OD): d 8,46 (s, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,50-7,55 (m, 2 H), 7,20-7,45 (m, 5 H), 3,70-4,05 (m, 4 H), 3,45-3,65 (m, 4 H), 2,00-2,20 (m, 4 H), 1,70-1,75 (m, 1 H), 0,60-1,00 (m, 4 H). 19F RMN (CD3OD): d -117,77. Exemplo 57. 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)-N-metiltiazol-4- carboxamida
[00539] A uma solução de (2'-((4-(7-(4-amino-3-fluorobenzil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-2-ciclopropil-5'-fluoro-[1,1'- bifenil]-4-carbonitrila (25 mg, 0,03mmol) em DMF (2 mL) foram adicionados DIEA (12 mg, 0,06mmol), HATU (17 mg, 0,045 mmol) e solução de metanamina THF (30 µL, 0,06mmol, 2 N). Em seguida a reação foi agitada a 16-25°C durante 16 h. A mistura foi purificada pelo método A de RP-HPLC para fornecer 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5- fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)-N-metiltiazol-4-carboxamida (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 2,7 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,744 min, (M+H)+ = 596,1. 1H RMN (CD3OD): d8,47 (s, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,25-7,48 (m, 7 H), 3,49-3,92 (m, 8 H), 2,92 (s, 3 H), 1,95-2,20 (m, 4 H), 1,70 (s, 1 H), 0,89-0,90 (m, 2 H), 0,67 (s, 2 H). 19F RMN: (CD3OD 400 MHz): d-117,725 (s 1 F). Exemplo 58. 2-(7-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)-N,N- dimetiltiazol-4-carboxamida
[00540] O composto título foi sintetizado de acordo com os métodos descitos para o Exemplo 57, substituindo dimetil amina por metil amina. Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,191 min, (M+H)+ = 610,3. 1H RMN (CD3OD): d 8,45 (s, 1 H), 7,80 (s, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,30-7,40 (m, 3 H), 7,20-7,30 (m, 2 H), 7,06 (s, 1 H), 3,70-4,10 (m, 4 H), 3,35-3,65 (m, 4 H), 3,21 (s, 3 H), 3,07 (s, 3 H), 2,00-2,20 (m, 4 H), 1,65-1,75 (m, 1 H), 0,60-0,95 (m, 4 H). 19F RMN (CD3OD ): d -119,19. Exemplo 59. 7-benzil-2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2-azaespiro[4,4]nonano Etapa 1. 7-benzilideno-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de (E)- terc-butila Boc
[00541] A uma suspensão agitada de NaH (160 mg, 4 mmol, 60% em óleo mineral) em THF (8 mL, anidroso) foi adicionado benzilfosfonato de dietila (920 mg, 4 mmol) em THF (6 mL, anidroso) gota a gota a 0°C sob N2 e a mistura foi agitada durante 20 min a 0°C. Uma mistura de 7-oxo- 2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (200 mg, 0,8 mmol) e 15-coroa-5 (880 mg, 4 mmol) em THF (6 mL, anidroso) foi adicionada gota a gota à mistura reacional a 0°C e a mistura foi em seguida aquecida para 14-17°C agitada durante 16 h sob N2. A mistura resultante foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (20 mL) e extraída com EtOAc (3 x 30 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtrada e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia rápida (SiO2, 10%~100% de EtOAc/Éter de petróleo) para fornecer 7-benzilideno-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de (E)-terc-butila como um óleo incolor. Produção: 230 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,911 min, (M+H)+ = 258,0. Etapa 2. 7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00542] A uma solução de 7-benzilideno-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de (E)-terc-butila (230 mg, 0,73 mmol) em MeOH (20 mL, anidroso) foi adicionado Pd-C (100 mg, 10% sobre carbono, seco) e a mistura resultante foi agitada a 30°C durante cerca de 16 h sob H2 (40 psi). A suspensão foi filtrada através de um funil frito e o filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia rápida (EtOAc éter de petróleo de 10%~100%) para fornecer 7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo incolor. Produção: 120 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,965 min, (M+H)+ = 338,0. Etapa 3. 7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonano
[00543] Uma solução de 7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (120 mg, 0,38 mmol) em TFA-CH2Cl2 (5 mL, v:v = 1:4) foi agitada a 12-18°C durante cerca de 2 h, em cujo tempo LCMS mostrou a reação foi concluída. A mistura resultante foi ajustada para o pH = 8 por NaHCO3 aquoso saturado e extraída com CH2Cl2 (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer 7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonano cru como um óleo incolor, que foi usado para a etapa seguinte diretamente sem outra purificação. Produção: 120 mg. método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,627 min, (M+H)+ = 216,1. Etapa 4. 7-benzil-2-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonano
[00544] Uma solução de 7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonano (120 mg, 0,38 mmol, cru) e 4-cloro-5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidina (98 mg, 0,38 mmol) em MeCN (10 mL) foi adicionado K2CO3 (158 mg, 1,14 mmol). A mistura resultante foi agitada a 90°C durante cerca de 4 h. A mistura foi filtrada e massa filtrada lavada com EtOAc (2 x 30 mL). O filtrado foi concentrado e purificado pelo método A de RP-HPLC para fornecer 7-benzil-2-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonano (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 80 mg. Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,144 min, (M+H)+ = 483,8. 1H RMN (CD3OD ): d8,43-8,59 (m, 1 H), 7,60-7,79 (m, 1 H), 7,40-7,55 (m, 1 H), 7,30-7,40 (m, 1 H), 7,10-7,30 (m, 6 H), 3,65-4,30 (m, 4 H), 2,60 2,75 (m, 2 H), 2,20-2,45 (m, 1 H), 1,55-2,10 (m, 6 H), 1,25-1,50 (m, 2 H). 19F RMN (MeOD): d-77,26, -115,69. Etapa 5. 7-benzil-2-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]nonano
[00545] A uma solução de 7-benzil-2-(5-(2-cloro-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]nonano (70 mg, 0,16 mmol), ácido (4-isopropilpirimidin-5-il)borônico (40 mg, 0,24 mmol) em dioxano (2 mL) e H2O (1 mL) foi adicionado a Sphos Palodaciclo (6 mg, 0,008 mmol) e K3PO4 (85 mg, 0,4 mmol) sob N2 e a mistura resultante foi agitada a 115°C durante 45 min sob micro-ondas. A mistura resultante foi diluída com água (20 mL) e extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado pelo método A de RP-HPLC para fornecer 7-benzil-2-(5-(4- fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonano (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 45 mg. Método D de LCMS: Temperatura ambiente = 1,135 min, (M+H)+ = 524,4. 1H RMN (CD3OD): d9,03-9,20 (m, 1 H), 8,55-8,67 (m, 1 H), 8,48 (s, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,21-7,40 (m, 5 H), 7,10-7,20 (m, 3 H), 3,35 3,93 (m, 4 H), 2,95-3,12 (m, 1 H), 2,55-2,70 (m, 2 H), 2,20-2,40 (m, 1 H), 1,49-1,96 (m, 6 H), 1,10-1,30 (m, 8 H) 19F RMN (MeOD): d-77,23, - 117,91. Exemplo 60. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)- ona (Mistura) Etapa 1. 7-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00546] A uma solução de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 600 mg, 1,2 mmol), ácido (2-acetilfenil)borônico (390 mg, 2,4 mmol) em dioxano (10 mL) e H2O (2 mL) foi adicionado a Pd(dppf)Cl2 (87 mg, 0,12 mmol) e Na2CO3 (320 mg, 3 mmol) sob N2 e a mistura resultante foi agitada a 80°C durante 16 h sob N2.. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e extraída com EtOAc (3 x 30 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas em vácuo para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia rápida (SiO2, 10%~100% de EtOAc/Éter de petróleo) para fornecer 7-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila como um sólido amarelo. Produção: 400 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,761 min, (M+H)+ = 533,2. Etapa 2. 7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00547] A uma solução de 7-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila (350 mg, 0,66 mmol) em MeOH (20 mL, anidroso) e THF (10 mL, anidroso) foi adicionado NaBH4 (98 mg, 2,65 mmol) e a mistura resultante foi agitada a 50°C durante cerca de 2 h sob N2. A mistura resultante foi em seguida extinta com NH4Cl saturado aquoso (20 mL) e extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer terc-butila 7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de como um sólido preto, que foi usado para a etapa seguinte diretamente sem outra purificação. Produção: 380 mg. Etapa 3. 1-(2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5'- fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)etanol
[00548] Uma solução de 7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]- 2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila (380 mg, 0,66 mmol, cru) em TFA-CH2Cl2 (9 mL, v:v = 1:8) foi agitada a 17-24°C durante cerca de 2 h. A mistura foi concentrada e ajustada para o pH = 8 com aquoso saturado NaHCO3 e extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer 1-(2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)- 5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)etanol como um sólido amarelo, que foi usado para a etapa seguinte diretamente sem outra purificação. Produção: 330 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,581 min, (M+H)+ = 435,2. Etapa 4. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00549] A uma solução de 1-(2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)etanol (330 mg, 0,66 mmol, cru) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 106 mg, 0,66 mmol,) em MeOH (10 mL, anidroso) foi adicionado AcOH (0,2 mL). A mistura foi agitada a 17-25°C durante cerca de 30 min, em seguida NaBH3CN (82 mg, 1,32 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a 17-25°C durante cerca de 16 h. A mistura foi extinta por NaHCO3 aquoso saturado (10 mL) e extraída com CH2CI2 (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado pelo método A de RP-HPLC para fornecer 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 290 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,593 min, (M+H)+ = 581,2 1H RMN (CD3OD): d8,00-8,15 (m, 1 H), 7,50-7,70 (m, 2 H), 6,90-7,40 (m, 9 H), 4,67 (s, 1 H), 4,43 (s, 2 H), 3,35-3,95 (m, 8 H), 1,90-2,25 (m, 4 H), 1,20-1,35 (m, 3 H).19F RMN (CD3OD): d-76,92, -117,29 ~ -118,17. Exemplos 60A-60D. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)- ona (Isômeros 1-4)
[00550] O composto título de Exemplo 60 foi separado como diastereômeros pelo Método A de SFC e cada diastereômero foi também separado como enantiômeros pelo método 2 de SFC.
[00551] Isômero 1: método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,606 min, (M+H)+ = 581,2. 1H RMN (CD3OD): d8,30-8,45 (m, 1 H), 7,52-7,79 (m, 2 H), 7,10-7,40 (m, 8 H), 6,95-7,10 (m, 1 H), 4,66 (s, 1 H), 4,35-4,50 (m, 2 H), 3,55-3,95 (m, 5 H), 3,35-3,50 (m, 3 H), 1,82-2,26 (m, 4 H), 1,20-1,35 (m, 3 H). 19F RMN (CD3OD): d-76,99, -117,37 ~ -118,33. SFC: tR = 3,036 min (ee = 100%).
[00552] Isômero 2: método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,608 min, (M+H)+ = 581,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,30-8,45 (m, 1 H), 7,50-7,75 (m, 2 H), 7,25-7,40 (m, 3 H), 7,10-7,25 (m, 5H), 6,95-7,10 (m, 1 H), 4,66 (s, 1 H), 4,35-4,45 (m, 2 H), 3,55-4,00 (m, 8 H), 1,95-2,30 (m, 4 H), 1,20-1,35 (m, 3 H). 19F RMN (CD3OD): d -76,98 8, -117,39 ~ - 118,17. SFC: tR = 3,353 min (ee = 100%).
[00553] Isômero 3: método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,606 min, (M+H)+ = 581,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,15 (s, 1 H), 7,57-7,66 (m, 2 H), 7,31-7,40 (m, 1 H), 7,10-7,25 (m, 3 H), 6,83-7,10 (m, 5 H), 4,72 4,82 (m, 1 H), 3,63 (s, 2 H), 3,35-3,60 (m, 4 H), 2,55-2,75 (m, 2 H), 2,35 2,50 (m, 2 H), 1,65-1,90 (m, 4 H), 1,20-1,30 (m, 3 H). 19F RMN (CD3OD): d -120,89 ~ -121,17. SFC: tR = 7,926 min (ee = 100%).
[00554] Isômero 4: método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,609 min, (M+H)+ = 581,2. 1H RMN (CD3OD ): d 8,15 (s, 1 H), 7,55-7,68 (m, 2 H), 7,30-7,40 (m, 1 H), 6,81-7,27 (m, 8 H), 4,71-4,82 (m, 1 H), 3,40 3,72 (m, 6 H), 2,60-2,70 (m, 2 H), 2,40-2,50 (m, 2 H), 1,65-1,90 (m, 4 H), 1,28 (dd, J = 13,6, 6,4 Hz, 3 H). 19F RMN (CD3OD): d -120,79 ~ -121,27 (m, 1 F). SFC: tR = 9,407 min (ee = 100%). Exemplo 61. 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-((4-(7-(3-(2-oxooxazolidin-3- il)benzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)benzamida Etapa 1. 3-(2-oxooxazolidin-3-il)benzonitrila
[00555] A uma solução de oxazolidin-2-ona (240 mg, 2,75 mmol), K2CO3 (760 mg, 5,5 mmol), CuI (16 mg, 0,083 mmol) e trans-ciclo- hexanodiamina (32 mg, 0,275 mmol) em dioxano anidroso (15 mL) foi adicionada 3-bromobenzonitrila (500 mg, 2,75 mmol) sob uma atmosfera de nitrogênio e a mistura foi agitada a 110°C durante 16 h. Em seguida, a mistura reacional foi adicionada em EtOAc (30 mL) e filtrada com diatomita. O filtrado foi concentrado sob uma pressão reduzida para fornecer o produto cru que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (éter de petróleo:acetato de etila = 1: 1) para fornecer 3-(2-oxooxazolidin-3-il)benzonitrila como um sólido branco. Produção: 75 mg. 1H RMN (CDCl3): d 7,80-7,90 (m, 2H), 7,45-7,55 (m, 1H), 7,35-7,45(m, 1H), 4,45-4,55 (m, 2H), 4,00-4,10 (m, 2H). Etapa 2. 3-(2-oxooxazolidin-3-il)benzaldeído
[00556] A uma solução de 3-(2-oxooxazolidin-3-il)benzonitrila (75 mg, 0,4 mmol) em HCO2H (11 mL) e H2O (4 mL) foi adicionado liga de Ni-Al (86 mg, 1 mmol) a 20-24°C, em seguida, a mistura foi agitada a 90°C durante 16 h. A mistura reacional foi agitada durante mais 6 h e foi em seguida filtrada. O filtrado foi concentrado sob uma pressão reduzida e o resíduo resultante foi adicionado à água (50 mL) e extraída com CH2CI2 (3 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e concentradas sob uma pressão reduzida para fornecer o produto cru 3-(2-oxo-oxazolidin-3-il)benzaldeído como um sólido branco. Produção: 60 mg. Método D de LCMS: temperatura ambiente = 0,911 min, (M+H)+ = 192,2. Etapa 3. 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-((4-(7-(3-(2- oxooxazolidin-3- il)benzil)-2,7-diazaespiro [4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00557] O produto título foi preparado de acordo com o procedimento descrito na etapa 4 de Exemplo 41. O produto cru foi purificado pelo método D de RP-HPLC para fornecer 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-((4- (7-(3-(2-oxooxazolidin-3-il)benzil)-2,7-diazaespiro [4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida como um sólido branco. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,230 min, (M+H)+ = 589,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,20-8,30 (m, 1H), 7,70-7,85 (m, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,40-7,50 (m, 1H), 7,25-7,35 (m, 1H), 7,05-7,20 (m, 3H), 6,75 - 6,95 (m, 1H), 4,40-4,55 (m, 2H), 4,00-4,15 (m, 2H), 3,55-3,80 (m, 6H), 2,94 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 2,77 (s, 2H), 2,60-2,75 (m, 2H), 2,40-2,60 (m, 2H), 1,85-2,00 (m, 2H), 1,70-1,85 (m, 2H), 1,05-1,25 (m, 6H).19F RMN (MeOD) : d -120,09 ~ -120,54. Exemplo 62. 5-fluoro-N-isopropil-N-metil-2-((4-(7-(4-(2-oxooxazolidin-3- il)benzil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)benzamida
[00558] O produto título foi sintetizado de acordo com um método similar àquele procedimento descrito para o Exemplo 61 iniciando de 4- bromo cianobenzene. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,607 min, (M+H)+ = 589,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,29-8,33 (m, 1H), 7,80 7,88 (m, 1H),7,60-7,62 (m, 2H), 7,43-7,45 (m, 2H), 7,18-7,20 (m, 2H), 6,83-6,97 (m, 1H), 4,50-4,52 (m, 2H), 4,11-4,15 (m, 2H), 3,93-3,96 (m, 3H), 3,55-3,76 (m, 4H), 2,95-3,05 (m, 2H), 2,75-2,90 (m,3H), 1,93-2,05 (m, 5H), 1,18-1,35 (m, 7H). 19F RMN (CD3OD): d -120,17 ~ -120,58 Exemplo 63. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(2-hidroxipropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona Etapa 1. 1-(2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5'- fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)etanona
[00559] Uma solução de 7-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila (200 mg, 0,37 mmol) em TFA-CH2Cl2 (5 mL, V: V = 1: 5) foi agitada a 16-24°C durante cerca de 2 h. A mistura resultante foi concentrada e ajustada para o pH = 8 com Na2CO3 aquoso saturado. A mistura foi em seguida extraída com CH2CI2 (3 x 20 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer 1-(2'-((4-(2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)etanona crua como um óleo amarelo, que foi usado para a etapa seguinte diretamente sem outra purificação. Etapa 2. 5-((7-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4] nonan-2-il) metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00560] A uma solução de 1-(2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)etanona (200 mg, 0,37 mmol, cru) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 60 mg, 0,37 mmol,) em MeOH (5 mL, anidroso) foi adicionado AcOH (0,2 mL). A mistura resultante foi agitada a 50°C durante cerca de 2 h sob N2, em seguida NaBH3CN (156 mg, 0,74 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a 50°C durante cerca de 16 h. A mistura foi extinta por NaHCO3 aquoso saturado (50 mL) e extraída com CH2CI2 (5 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia rápida em sílica gel (MeOH em CH2Cl2 de 10%~100%) para fornecer 5-((7-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona como um sólido amarelo. Produção: 100 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,606 min, (M+H)+ = 579,2. Etapa 3. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(2-hidroxipropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00561] A uma solução de 5-((7-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona (100 mg, 0,17 mmol) em THF (5 mL, anidroso) foi adicionado MeMgBr(0,6 mL, 1,7 mmol, 3 M em éter) gota a gota a -78°C sob N2 e a mistura resultante foi agitada a -78°C durante cerca de 4 h sob N2. A mistura foi em seguida extinta com NH4Cl aquoso saturado (10 mL) e extraída com EtOAc (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado pelo método D de RP-HPLC preparativa básica para fornecer 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(2-hidroxipropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il) metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona como um sólido branco. Produção: 6 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,614 min, (M+H)+ = 595,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,10-8,31 (m, 1 H), 7,58-7,86 (m, 2 H), 7,24-7,40 (m, 1 H), 6,81-7,22 (m, 8 H), 4,04 (s, 2 H), 3,45-3,63 (m, 4 H), 2,69-3,20 (m, 4 H), 1,80-2,03 (m, 4 H), 1,23-1,55 (m, 6 H). 19F RMN (CD3OD): d - 76,92, -121,82. Exemplo 64. 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-6-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano
[00562] O composto título foi preparsdo de Intermediário 27 (200 mg, 0,49 mmol) e 1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carbaldeído (101 mg, 0,59 mmol), por aminação redutiva como descrito na etapa 4 de Exemplo 11. O produto foi purificado por método D de RP-HPLC para fornecer 2-(1,4- dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-6-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano como óleo amarelo claro. Produção: 50 mg. Método D de LCMS: temperatura ambiente = 0,803 min, (M+H)+ = 561,4 1H RMN (CD3OD): d 9,09 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,61-7,68 (m, 1H), 7,20-7,30 (m, 2H), 7,03-7,10 (m, 1H), 4,17 (s, 4H), 3,90 (s, 4H), 3,36 (s, 4H), 3,01-3,11 (m, 1H), 2,30-2,35 (m, 2H), 1,68-1,78 (m, 4H), 1,43-1,51 (m, 2H), 1,32-1,39 (m, 1H), 1,15-1,26 (m, 8H). 19F RMN (CD3OD ): d -119,88. Exemplo 65. 4-((6-(5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il) metil)ciclo-hexanol
[00563] (2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-6-(5-(4-fluoro-2-(4- isopropil pirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano (1,0 mmol) foi tratada com HCl aquoso a 4N (10 ml) em temperatura ambiente durante 6 h. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória,o produto cru foi misturado com MeOH (5 mL), NaBH4 (3,0 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada durante 30 min. O solvente foi removido por meio de evaporação giratória e o resíduo resultante foi purificado pelo método A de RP-HPLC para fornecer 4-((6- (5-(4-fluoro-2-(4-isopropilpirimidin-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il) metil)ciclo-hexanol (sal de TFA) como um óleo incolor. Produção: 6,3 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,854 min, (M+H)+ = 519,4 1H RMN (CD3OD ): d 9,12 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,25-7,41 (m, 3H), 4,22-4,65 (m, 8H), 3,43-3,53 (m, 1H), 3,00-3,14 (m, 3H), 1,94-1,99 (m, 2H), 1,72-1,79 (m, 2H), 1,50-1,59 (m, 1H), 1,03-1,33 (m, 10H). 19F RMN (CD3OD): d - 117,71, -77,02. Exemplo 66. 2-ciclopropil-5'-fluoro-2'-((4-(6-((4-hidroxiciclo-hexil)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-[1,1'-bifenil]-4- carbonitrila
[00564] O produto título foi sintetizado de acordo com o método descrito para o Exemplo 65 iniciando de 2'-((4-(2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-2-ciclopropil-5'-fluoro-[1,1'- bifenil]-4-carbonitrila (Intermediário 32). Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,154 min, (M+H)+ = 540,4. Exemplo 67. 2-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-6- ((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano Etapa 1. 6-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro [3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00565] A uma solução de 6-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 20, 150 mg, 0,322 mmol), ácido (2-acetilfenil)borônico (63 mg, 0,387 mmol) e K3PO4 (205 mg, 0,97 mmol) em dioxano / H2O (2 mL / 0,5 mL) foi adicionado Sphos paladaciclo (23 mg, 0,032 mmol) sob N2. A mistura reacional foi selada e aquecida em um micro-ondas a 115°C durante 0,5 h. A mistura foi em seguida diluída com H2O (20 mL), filtrada e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo cru foi combinado e purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 10:1 a 2:3) para fornecer 6-(5-((2'-acetil-5- fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2- carboxilato de terc-butila como um óleo amarelo. Produção: 180 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,755 min, (M+H)+ = 505,2 Etapa 2. 6-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-2,6-diazaespiro [3,3]heptano-2-carboxilator
[00566] A uma solução de 6-(5-((2'-acetil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc- butila (180 mg, 0,36 mmol) em anidroso THF (10 mL) foi adicionado NaBH4 (40 mg, 1,07 mmol) a -30°C sob N2 e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi extinta com H2O (20 mL) e concentrada sob pressão reduzida para remover THF e MeOH. O resíduo foi extraído com EtOAc (20 mL x 3) e as camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 6-(5-((5- fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 181 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,745 min, (M+H)+ = 507,2 Etapa 3. 6-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il) óxi)pirimidin-4- il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00567] A uma solução de 6-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxietil)-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (100 mg, 0,20 mmol) em THF anidroso (5 mL) foi adicionado NaH (40 mg, 1,00 mmol, 60% em óleo mineral) a 0°C sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 0°C durante 0,5 h. MeI (2,19 g, 15,43 mmol) foi em seguida adicionado e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 18 h. A mistura foi extinta com H2O (0,1 mL) e concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 10:1 a 2:3) para fornecer 6-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc- butila como um óleo amarelo. Produção: 43 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,748 min, (M+H)+ = 521,2 Etapa 4. 2-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-2,6-diazaespiro [3,3]heptano
[00568] A uma solução de 6-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (43 mg, 0,082 mmol) em DCM anidroso (10 mL) foi adicionado TFA (2 mL) a 0°C e a mistura reacional foi agitada a 19-26°C durante 2 h. A mistura foi diluída com NaOH a 1N (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 2-(5-((5-fluoro-2'-(1- metoxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano como um óleo amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 5. 2-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4- il)-6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3] heptano
[00569] Uma solução de 2-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'-bifenil]- 2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano (35 mg, 0,083 mmol, cru), tetra-hidro-2H-piran-4-carbaldeído (19 mg, 0,17 mmol), e HOAc (20 µL) em MeOH anidroso (10 mL) foi agitada a 19-25°C durante 0,5 h. NaBH3CN (21 mg, 0,33 mmol) foi em seguida adicionado e a mistura reacional foi agitada a 60°C durante 4 h, em cujo tempo LCMS mostrou o produto desejado foi produzido. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida e o resíduo resultante purificado por método A de HPLC para fornecer 2-(5-((5-fluoro-2'-(1-metoxietil)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 22 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,735 min, (M+H)+ = 519,2 1H RMN (CD3OD): d 8,38 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,55-7,60 (m, 1H), 7,40-7,50 (m, 1H), 7,30-7,34 (m, 3H), 7,13 7,28 (m, 2H), 4,4,25-4,60 (m, 9H), 3,94 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,35-3,45 (m, 2H), 3,05-3,15 (m, 5H), 1,80-1,95 (m, 1H), 1,62 (d, J = 12,4 Hz, 2H), 1,27-1,37 (m, 5H).19F RMN (MeOD): d -76,83, 117,75. Exemplo 68. 5-(5-fluoro-2-((4-(6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-2,3-di-hidro-1H- inden-2-amina Etapa 1. 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il) -2,6- diazaespiro[3,3]heptano
[00570] A uma mistura de Intermediário 20 (120 mg, 0,3 mmol) em CH2Cl2 (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL) sob água gelada e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi ajustada para o pH 10-12 com solução de NaOH a 10% e extraída com CH2CI2 (3 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano como um sólido amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 2. 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-6-((tetra-hidro-2H- piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano
[00571] Uma mistura de 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,6-diazaespiro[3,3]heptano (90 mg, 0,24 mmol), tetra-hidro-2H-piran-4- carbaldeído (41mg, 0,36 mmol), NaBH3CN (60 mg, 0,96 mmol) e HOAc (0,05 mL) em MeOH (5 mL) foi agitada a 70°C durante 5 h. Solução saturada de NaHCO3 foi em seguida adicionada para ajustar o pH para 8. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Água (20 mL) foi adicionada ao resíduo e subsequentemente extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com diclorometano:metanol = 10:1) para fornecer 2-(5-(2-bromo-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano como um sólido branco. Produção: 90 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,539 min, (M+H)+ = 463,0, 465,0 (isótopos de bromo). Etapa 3. (5-(5-fluoro-2-((4-(6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil) -2,6- diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-2,3-di-hidro-1H- inden-2-il)carbamato de terc-butila
[00572] A uma mistura de 2-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano (50 mg, 0,13 mmol), (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2,3-di- hidro-1H-inden-2-il)carbamato de terc-butila (59 mg, 0,17 mmol) e K3PO4 (70 mg, 0,33 mmol) em dioxano (2 mL) e H2O (0,5 mL) foi adicionado Sphos Paladaciclo (8 mg, 0,011 mmol) sob N2 e a mistura foi agitada a 115°C durante 30 min em um micro-ondas. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida.O resíduo resultante foi adicionado a H2O (20 mL) e extraído com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa em sílica gel (eluindo com diclorometano:metanol = 10: 1) para fornecer (5-(5-fluoro-2-((4-(6- ((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-2,3-di-hidro-1H-inden-2-il)carbamato de terc- butila como um óleo amarelo. Produção: 35 mg. Etapa 4. 5-(5-fluoro-2-((4-(6-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6- diazaespiro[3,3] heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-2,3-di-hidro-1H- inden-2-amina
[00573] A uma mistura de (5-(5-fluoro-2-((4-(6-((tetra-hidro-2H-piran- 4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-2,3-di- hidro-1H-inden-2-il)carbamato de terc-butila (35 mg, 0,06 mmol) em CH2Cl2 (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL) sob água gelada e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por método D de RP-HPLC para fornecer 5-(5-fluoro-2-((4-(6-((tetra-hidro-2H-piran- 4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-2,3-di- hidro-1H-inden-2-amina como um sólido branco. Produção: 1,2 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,516 min, (M+H)+ = 516,2 1H RMN (CD3OD): d 8,10 (s, 1H), 7,30-7,40 (m, 4H), 7,10-7,23 (m, 3H), 4,31 (s 4H), 3,90-4,05 (m, 3H), 3,35-3,40 (m, 8H), 2,85-2,95 (m, 2H), 2,37-2,39 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 1,62-1,64 (d, J = 10,0 Hz, 3H), 1,20-1,35 (m, 2H). 19F RMN (CD3OD): d -76,93, -119,56. Exemplo 69. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxipropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona Etapa 1. 7-(5-((2'-bromo-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4] nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00574] Um frasco redondo de 100 ml equipado com um balão de nitrogêno e um condensador foram carregados com 7-(5-(2-bromo-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 1,0 g, 2,0 mmol), EtOH (20 mL), tolueno (8 mL) e H2O (8 mL), respectivamente. À mistura resultante foi adicionado ácido (2-bromofenil)borônico (0,41 g, 2,0 mmol), Pd(OAc)2 (9 mg, 0,04 mmol), PPh3 (26 mg, 0,1 mmol) e Na2CO3 (636 mg, 6,0 mmol), respectivamente, sob N2 com agitação. Após adição, a mistura final foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes, em seguida aquecida a 75 80 °C sob N2 durante 16 h. A mistura foi em seguida concentrada sob pressão reduzida para remover os solventes orgânicos e H2O (30 mL) e salmoura (30 mL) foram adicionados ao resíduo, em seguida extraídos com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL x 2), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo resultante foi purificado por método D de RP-HPLC para fornecer 7-(5-((2'-bromo-5-fluoro-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 0,26 g. Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,074 min, (M+H)+ = 569,2. Etapa 2. 7-(5-((5-fluoro-2'-(prop-1-en-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-il) óxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00575] A uma suspensão de 7-(5-((2'-bromo-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila (0,26 g, 0,37 mmol) em dioxano (15 mL) e H2O (3 mL) foi adicionado 4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (0,12 g, 0,74 mmol) e K3PO4 (0,16 g, 0,74 mmol), Sphos paladaciclo (13 mg, 0,019 mmol) sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura resultante foi desgaseificada e purgada com N2 3 vezes, e subsequentemente aquecida a 70-75°C sob N2 durante 24 horas. Uma batelada adicional de 4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (70 mg, 0,42 mmol) e Sphos paladaciclo (7 mg, 0,0097 mmol) foram adicionados sob N2, e a mistura resultante foi aquecida a 70-75°C sob N2 durante mais 18 h, em cujo tempo LCMS mostrou que a reação foi concluída. Após resfriamento, H2O (30 mL) e salmoura (30 mL) foram adicionados à mistura, que foi em seguida extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL x 2), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (éter de petróleo:EtOAc = 1:1 a 1:2) para fornecer 7-(5-((5-fluoro-2'-(prop-1-en-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 0,20 g. Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,108 min, (M+H)+ = 531,2. 1H RMN (CDCl3): d8,35 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,20-7,35 (m, 3H), 7,10-7,15 (m, 1H), 6,90-7,10 (m, 2H), 6,65-6,75 (m 1H), 5,03 (s, 1H), 4,80 (s, 1H), 3,50-3,65 (m 2H), 3,35-3,50 (m, 3H), 3,20-3,35 (m, 1H), 3,10-3,20 (m, 2H), 1,82 (s, 3H), 1,70-1,80 (m, 4H), 1,47 (s, 9H). 19F RMN (CDCl3): d-120,31. Etapa 3. 7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxipropan-2-il)- [1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc- butila
[00576] Um frasco redondo de 500 ml equipado com um balão de nitrogêno carregado com terc-butila 7-(5-((5-fluoro-2'-(prop-1-en-2-il)- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de (140 mg, 0,23 mmol) e THF (5 mL, seco) sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura resultante foi resfriada para 0-3°C sob N2. BH3-THF (1 mL, 1,0 mmol, 1,0 M em THF) foi em seguida adicionado gota a gota a 0-3°C sob N2 com agitação, e a mistura reacional foi agitada a 0-3°C sob N2 durante 1 h, em seguida aquecida para temperatura ambiente durante a noite. H2O (0,5 mL) e NaBO3,4H2O (50 mg, 0,32 mmol) foram adicionados sequencialmente e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h. A reação foi extinta pela adição de H2O (30 mL). Salmoura (30 mL) foi adicionada ao resíduo e a mistura foi extraída com EtOAc (15 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (15 mL x 2), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo resultante foi purificado usando TLC preparativa em sílica gel (éter de petróleo:EtOAc = 1:4) para fornecer 7-(5-((5-fluoro-2'-(1- hidroxipropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 71 mg. Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,019 min, (M+H)+ = 549,2. Etapa 4. 2-(2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il) óxi)-5'- fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)propan-1-ol
[00577] A uma solução de 7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxipropan-2-il)- [1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (35 mg, 0,064 mmol) em CH2Cl2 (3 mL) foi adicionado HCl-MeOH (0,5 mL, 2 mmol, 4 M em MeOH) a 0-3°C com agitação e a mistura reacional foi agitada durante 1 h. A reação foi extinta pela adição de H2O (5 mL), e ajustada para o pH = 12 com 10% de NaOH aquoso. Salmoura (10 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com CH2CI2 (10 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (10 mL x 2), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-(2'-((4- (2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]- 2-il)propan-1-ol cru como um sólido amarelo viscoso. Etapa 5. 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxipropan-2-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi) pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H- benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00578] A uma suspensão de 2-(2'-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)propan-1-ol (20 mg, 0,45 mmol) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 7,3 mg,0,045 mmol) em MeOH anidroso (3 mL) foi adicionado NaBH3CN (5,8 mg, 0,09 mmol) sob uma atmosfera de nitrogênio e a mistura foi agitada a 60-65°C durante 16 h. Uma batelada adicional de 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (10 mg, 0,062 mmol) e NaBH3CN (7 mg, 0,11 mmol) foram adicionados, a mistura reacional foi agitada a 60-65°C durante mais 18 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por método A de RP-HPLC para fornecer 5-((7-(5-((5-fluoro-2'-(1-hidroxipropan-2- il)-[1,1'-bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona (sal de TFA) como um sólido branco. Produção: 13 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,752 min, (M+H)+ = 595,2 1H RMN (CD3OD): d 8,45 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,07-7,44 (m, 10 H), 4,35-4,50 (m, 2H), 3,40-3,95 (m, 9H), 3,10 3,25 (m, 1H), 2,75-2,85 (m, 1H), 1,95-2,20 (m, 4H), 1,00-1,25 (m, 3H). 19F RMN (C MeOD): d -117,47, -76,69 ~ -77,90. Exemplo 70. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(morfolinometil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona Etapa 1. 7-(5-(4-fluoro-2-(morfolina-4-carbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00579] A uma solução de ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico (Intermediário 33, Etapa 2, 60 mg, 0,13 mmol) em anidroso CH2Cl2 (5 mL) foi adicionado HATU (61 mg, 0,16 mmol), DIEA (168 mg, 1,3 mmol) e morfolina (113 mg, 1,3 mmol) e a mistura foi agitada a 7°C durante 16 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de sílica gel (CH2Cl2: MeOH = 20: 1) para fornecer 7- (5-(4-fluoro-2-(morfolina-4-carbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila cru um óleo marrom. Produção: 60 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,700 min, (M+H)+ = 528,2. Etapa 2. 7-(5-(4-fluoro-2-(morfolinometil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00580] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(morfolina-4- carbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (50 mg, 0,09 mmol) em THF anidroso (5 mL) foi adicionado BH3-Me2S (0,2 mL, 10,0 M em Me2S) a 0°C e a mistura foi agitada a 60°C durante 4 h sob N2. A mistura reacional foi extinta com MeOH (5 mL) a 0°C e agitada a 60°C durante 0,5 h. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica gel (CH2Cl2: MeOH = 20: 1) para fornecer 7-(5-(4-fluoro-2-(morfolinometil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 35 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,642 min, (M+H)+ = 514,2. Etapa 3. 4-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorobenzil)morfolina H
[00581] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2- (morfolinometil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (35 mg, 0,05 mmol) em anidroso CH2Cl2 (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL) e a mistura foi agitada a 10°C durante 0,5 h sob N2. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi ajustado para o pH 9-10 com solução de NaOH a 10% e extraída com EtOAc (5 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 4-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzil)morfolina um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte. Etapa 4. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-(morfolinometil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona
[00582] A uma solução de 4-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzil)morfolina (20 mg, crua, 0,05 mmol) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 16 mg, 0,10 mmol) em anidroso MeOH (3 mL) foi adicionado NaBH3CN (17 mg, 0,25 mmol) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 55°C durante 16 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado pelo método F de RP-HPLC para fornecer o composto 5-((7-(5-(4-fluoro-2- (morfolinometil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)metil)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-ona como um sólido branco. Produção: 7,10 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,635 min, (M+H)+ = 560,2. 1H RMN (CD3OD): d 8,23 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,27 (dd, J = 9,2, 3,2 Hz, 1H), 7,00-7,05 (dd, J = 8,8, 4,4 Hz, 4H), 3,74-3,81 (m, 3H), 3,57-3,68 (m, 9H), 2,59-2,74 (m, 3H), 2,45-2,51 (m, 5H), 1,93-1,99 (s, 2H), 1,84 (t, J = 6,8 Hz, 2H). 19F RMN (CD3OD): d -121,05. Exemplo 71. 1-(7-(5-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)amino)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)-2-metilpropan-2-ol Etapa 1. 7-(5-iodopirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2- carboxilato de terc-butila
[00583] A uma solução de 4-cloro-5-iodopirimidina (2 g, 8,3 mmol) em MeCN (30 mL) foi adicionado 2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2- carboxilato de terc-butila (1,9 g, 8,3 mmol) e K2CO3 (2,3 g, 16,6 mmol) e a suspensão resultante foi agitada a 90°C durante 16 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado e em seguida purificado por coluna ISCO em sílica gel (éter de petróleo: EtOAc = 10: 1 a 3: 1) para fornecer terc-butila 7-(5-iodopirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2- carboxilato de como um sólido amarelo. Produção: 3,4 g. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,718 min, (M+H)+ = 431,1. Etapa 2. 7-(5-((2-bromo-4-fluorofenil)amino)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00584] A uma solução de terc-butila 7-(5-iodopirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de (350 mg, 0,813 mmol) e 2- bromo-4-fluoroanilina (186 mg, 0,976 mmol) e NaOtBu (234 mg, 2,44 mmol) em tolueno anidroso (5 mL) foi adicionado Pd2(dba)3 (37 mg, 0,041 mmol) sob N2 e a mistura reacional foi selada e aquecida em um micro-ondas a 120 °C durante 1 h. A mistura foi em seguida diluída com H2O (20 mL), filtrada e extraída com acetato de etila (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:EtOAc (100:0 a 1:1) para fornecer 7-(5-((2-bromo-4- fluorofenil)amino)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2- carboxilato de terc-butila como um sólido marrom. Produção: 485 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 2,229 min, (M+H)+ = 492,1, 494,1 (isótopos de bromo). Etapa 3. 7-(5-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)amino)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00585] A uma mistura de 7-(5-((2-bromo-4- fluorofenil)amino)pirimidin-4-il)-2, 7-diazaespiro[3,5] nonano-2- carboxilato de terc-butila (350 mg, 0,711 mmol), ácido (2-etilfenil) borônico (128 mg, 0,853 mmol) e Na2CO3 (226 mg, 2,133 mmol) em dioxano/H2O (20 mL/5 mL) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (52 mg, 0,071 mmol) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 100 °C durante 18 h. A mistura foi em seguida diluída com H2O (20 mL), filtrada e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica gel eluindo com éter de petróleo:EtOAc (10:1 a 3:2) para fornecer 7-(5-((2'- etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)amino)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo vermelho. Produção: 300 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,803 min, (M+H)+ = 518,3. Etapa 4. N-(2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)-4-(2,7- diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5-amina
[00586] A uma solução de 7-(5-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)amino)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-2-carboxilato de terc- butila (250 mg, 0,483 mmol) em DCM anidroso (20 mL) foi adicionado HCl-dioxano (5 mL, 4 M em dioxano) a 0°C e a mistura foi agitada a 20-24°C durante 2 h. O resíduo resultante foi concentrado sob pressão reduzida e vácuo elevado para fornecer sal de HCl de N-(2'-etil-5-fluoro- [1,1'-bifenil]-2-il)-4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5-amina como um óleo cinza, que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 5. 1-(7-(5-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)amino)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)-2-metilpropan-2-ol
[00587] Uma solução de N-(2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)-4-(2- (3,3,3-trifluoropropil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)pirimidin-5-amina (20 mg, 0,05 mmol), 2,2-dimetiloxirano (5 mg, 0,07 mmol) e Et3N (24 mg, 0,4 mL, 0,24 mmol) em EtOH anidroso (3 mL) foi agitada a 60°C durante 18 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e purificada pelo método A de RP-HPLC para fornecer 1-(7-(5-((2'-etil-5- fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)amino)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan- 2-il)-2-metilpropan-2-ol (sal de TFA) como um óleo incolor. Produção: 15,8 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,616 min, (M+H)+ = 490,1. 1H RMN (CD3OD): d 8,39 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,30 7,40 (m, 2H), 7,15-7,25 (m, 1H), 7,05-7,15 (m, 2H), 6,98 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,85-6,95 (m, 1H), 4,15-4,25 (m, 2H), 3,95-4,05 (m, 2H), 3,65-3,85 (m, 4H), 3,25-3,35 (m, 2H), 2,40-2,55 (m, 2H), 1,70-2,00 (m, 4H), 1,27 (s, 1H), 1,08 (t, J = 7,6 Hz, 3H). 19F RMN (CD3OD): d -76,88, -122,09. Exemplo 72. 1-((6-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)metil)ciclo- hexan-1-ol Etapa 1. 6-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00588] A um frasco de base redonda foi adicionado 6-(5-(2-bromo- 4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 20, 1 g, 1 eq.), ácido (1-isopropil-3- (trifluorometil)-1H-pirazol-5-il)borônico acid (598 mg, 1,25 eq.), Sphos paladaciclo 2a geração (47 mg, 0,03 eq.; CAS #1375325-64-6) e fosfato de potássio tribásico (1,37 g, 3 eq.). A esta mistura sólida foram adicionados dioxano (5,6 mL) e água (1,4 mL). A solução resultante foi purgada com uma corrente de nitogênio durante 1 min e aquecida a refluxo durante a noite. A mistura reacional foi em seguida diluída com EtOAc e água. As fases foram separadas e a fase aquosa foi novamente extraída com EtOAc duas vezes. As fases orgânicas combinadas foram secadas sobre MgSO4 e o filtrado foi concentrado. O resíduo cru foi purificado por cromatografia rápida (80 g de SiO2, acetato de etila / hexanos como os eluentes) produzindo 6-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3- (trifluorometil)-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (1,0 g) como um sólido branco. Etapa 2. 2-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano (Intermediário 101)
[00589] A um frasco de base redonda foi adicionado 6-(5-(4-fluoro-2- (1-isopropil-3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (200 mg, 1 eq.), DCM (2 mL) e TFA (2 mL) e a mistura reacional foi agitada durante 30 min em temperatura ambiente. Os voláteis foram em seguida removidos sob vácuo e o resíduo cru foi co-evaporado com diclorometano duas vezes produzindo sal de bis-TFA de 2-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3- (trifluorometil)-1H-pirazol-5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano (isto é, Intermediário 101). Etapa 3. 1-((6-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)metil)ciclo-hexan- 1-ol
[00590] A um frasco de base redonda foram adicionados sal de bis- TFA de 2-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5- il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano (20 mg, 1 eq.), 1- oxaspiro[2,5]octano (16 mg, 5 eq.), trietilamina (21 µL, 5 eq.) e isopropanol (2 mL). O frasco foi tampado e a mistura foi aquecida a 70°C durante a noite. Os voláteis foram em seguida removidos sob vácuo e o material cru resultante foi purificado pelo método A de RP-HPLC produzindo 1-((6-(5-(4-fluoro-2-(1-isopropil-3-(trifluorometil)-1H-pirazol- 5-il)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptan-2-il)metil)ciclo- hexan-1-ol (2,42 mg) como um óleo incolor. Método G de LCMS: temperatura ambiente = 5,58 min.; M+H = 575,68. 1H RMN (d4-MeOH) 8,41 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,25 - 7,38 (m, 3H), 6,67 (s, 1H), 4,58 (bs, 2H), 4,20 - 4,49 (m, 6H), 3,12 - 3,32 (m, 7H), 1,39 (m , 5H), 1,24 - 1,30 (m, 6H). Exemplo 73. N-(2-amino-2-oxoetil)-N-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)isobutiramida Etapa 1. 7-(5-(2-(N-(cianometil)isobutiramido)-4-fluorofenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00591] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2- isobutiramidofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (100 mg, 0,2 mmol) em THF anidroso (4 mL) foi adicionado NaH (24 mg, 1,0 mmol) sob N2, em seguida, a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. 2- bromoacetonitrila (48 mg, 0,4 mmol) foi adicionado e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 12 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido com EtOAc (10 mL) e H2O (5 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e concentradas sob pressão reduzida para fornecer terc-butila 7-(5-(2-(N-(cianometil)isobutiramido)- 4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de um óleo marrom. Produção: 100 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,190 min, (M+H)+ = 539,3. Etapa 2. N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)-N-(2-amino-2-oxoetil)isobutiramida
[00592] A uma solução de 7-(5-(2-(N-(cianometil)isobutiramido)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (100 mg, 0,185 mmol) em anidroso CH2Cl2 (10 mL) foi adicionado TFA (2 mL) sob N2 e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer um resíduo e o pH foi ajustado para o 9-10 com 10% de NaOH. Em seguida, a mistura foi extraída com CH2Cl2 (10 mLx3). As camadas orgânicas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)-N-(2-amino-2-oxoetil)isobutiramida um óleo marrom que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Produção: 80 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,714 min, (M+H)+ = 457,2. Etapa 3. N-(2-amino-2-oxoetil)-N-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro- 1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin- 5-il)óxi)fenil)isobutiramida
[00593] A uma solução de N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)-N-(2-amino-2-oxoetil)isobutiramida (40 mg, crua) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 29 mg, 0,18 mmol) em anidroso MeOH (4 mL) foi adicionado peneiras moleculares de 4Â (50 mg), em seguida a reação foi agitada a 50°C durante 2 h sob N2. Após 2 h, NaBH3CN (28 mg, 0,45 mmol) foi adicionado into a solução e a mistura reacional foi agitada a 50°C durante 12 h. A mistura reacional foi em seguida filtrada, concentrada sob pressão reduzida, e purificada pelo método G de RP- HPLC para fornecer N-(2-amino-2-oxoetil)-N-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo- 2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)isobutiramida como um sólido branco. Produção: 7,00 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 1,498 min, (M+H)+ = 603,3,1H RMN (CD3OD): d 8,30 (s, 1 H), 7,76 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 6,87-7,03 (m, 4 H), 4,73 (dd, J = 16,4, 3,6 Hz, 1 H), 3,82 (dd, J =16,0, 4,8 Hz, 1 H), 3,56-3,85 (m, 5 H), 2,45-2,69 (m, 5 H), 1,81-1,94 (m, 5 H), 1,05 (dd, J = 36,8, 6,8 Hz, 6 H).19F RMN (CD3OD): d -119,24. Exemplo 74. N-(5-fluoro-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)propano-2- sulfonamide Etapa 1. 2-(5-(4-fluoro-2-(1-metiletilsulfonamido)fenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila
[00594] Um frasco foi carregado com 7-(5-bromopirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (1,264 g, 3,3 mmol), N-(5-fluoro-2-hidroxifenil)propano-2-sulfonamida (0,727 g, 3,16 mmol), CuI (30 mg, 0,16 mmol), K3PO4 (1,34 g, 6,3 mmol) e ácido picolínico (20 mg, 0,16 mmol) e foi desgaseificado e recarregado com N2 três vezes. DMSO anidroso (10 mL) foi adicionado e a mistura foi desgaseificada recarregada com N2, e a mistura reacional foi aquecida a 80°C durante 16 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, lavada com H2O, salmoura, secada sobre Na2SO4 anidroso e filtrada. O filtrado foi concentrado para secura e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia rápida usando DCM/MeOH como um eluente para fornecer 1,33 g de 2-(5-(4-fluoro-2-(1- metiletilsulfonamido)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7- carboxilato de terc-butila. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,35 min, (M+H)+ = 536,3. Etapa 2. N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)propano-2-sulfonamida
[00595] Uma mistura de 2-(5-(4-fluoro-2-(1- metiletilsulfonamido)fenóxi) pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano- 7-carboxilato de terc-butila (526 mg, 0,98 mmol) em MeOH (10 mL) contendo HCl a 4M/dioxano (4 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para produzir N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)propano-2-sulfonamida como o sal de HCl. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,56 min, (M+H)+ = 436,1. Etapas 3-5. N-(5-fluoro-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)fenil)propano-2-sulfonamida
[00596] As etapas 3-5 foram realizadas como descrito para as Etapas 3-5 de Exemplo 6A. Método A de LCMS: temperatura ambiente = 0,68 min, (M+H)+ = 625,1. 1H RMN (CD3OD) d: 8,50 (s, 1H), 7,62 (brs, 1H), 7,35 (dd, J= 8,8, 1,6 Hz, 1H), 7,24 (dd, J= 8,8, 1,6 Hz, 1H), 7,03 (m, 1H), 4,64 (m, 2H), 4,22 (m, 2H), 3,58 (d, J = 12,4 Hz, 2H), 3,47 (m, 1H), 3,17 (m, 1H), 3,03-2,94 (m, 7H), 2,28 (d, J = 13,6 Hz, 2 H), 2,13 (d, J = 12,8 Hz, 2 H), 2,06 (d, J = 10,8 Hz, 2 H), 1,87 (d, J = 12,8 Hz, 2 H), 1,81 (m, 1H), 1,41 (d, J = 6,8 Hz, 6 H), 1,36 (m, 2H), 1,17 (m, 2H). Exemplo 75. 7-(5-(4-fluoro-2-(N-metilisobutiramido)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila Etapa 1: 7-(5-(2-amino-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 102)
[00597] A uma mistura de 7-(5-(2-bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4- il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 2,0 g, 4,0 mmol) e NaN3 (1,63 g, 25 mmol) em EtOH (20 mL) e H2O (10 mL) foi adicionado CuI (1,0 g, 5,0 mmol) e - ascorbato de sódio (0,5 g, 2,5 mmol) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 100°C durante 24 h. A mistura reacional foi filtrada através de celita e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com DCM: MeOH = 1: 0 ~ 10: 1) para fornecer 7-(5-(2-amino-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um sólido marrom claro. Produção: 1,4 g. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,724 min, (M+H)+ = 430,1. Etapa 2. 7-(5-(4-fluoro-2-isobutiramidofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (Intermediário 103)
[00598] A uma mistura de 7-(5-(2-amino-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (700 mg, 1,63 mmol) em piridina (20 mL) foi adicionado cloreto de isobutirila (1,73 g, 16,3 mmol) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 19-21°C durante 12 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi extraído com EtOAc (20 mL) e H2O (10 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 7- (5-(4-fluoro-2-isobutiramidofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila como um óleo marom. Produção: 700 mg. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,732 min, (M+H)+ = 500,1. Etapa 3. 7-(5-(4-fluoro-2-(N-metilisobutiramido)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00599] A uma mistura de 7-(5-(4-fluoro-2- isobutiramidofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (400 mg, 0,80 mmol) e CH3I (500 mg, 3,5 mmol) em anidroso THF (10 mL) foi adicionado NaH (96 mg, 4,00 mmol) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 12-21°C durante 2 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi extraído com EtOAc (10 mL) e H2O (5 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna em sílica gel (eluindo com DCM: MeOH = 1: 0 ~ 10: 1) para fornecer o 7-(5-(4-fluoro-2-(N- metilisobutiramido)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 201 mg . Método D de LCMS: temperatura ambiente = 0,995 min, (M+H)+ = 514,1. 1H RMN (CD3OD): d 8,29-8,34 (m, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,33 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,17-7,21 (m, 1 H), 6,85-7,05 (m, 1 H), 3,35-3,81 (m, 8 H), 2,57-2,62 (m, 1 H), 1,88-1,97 (m, 5 H), 1,45 (s, 11 H), 1,05 (dd, J = 18,8, 6,8 Hz, 6 H).19F RMN (CD3OD): d -119,09. Exemplo 76. N-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5- il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-N- metilisobutiramida Etapa 1. N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5- fluorofenil)-N-metilisobutiramida
[00600] A uma solução de 7-(5-(4-fluoro-2-(N- metilisobutiramido)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (Exemplo 75, 70 mg, 0,14 mmol) em CH2Cl2 anidroso (10 mL) foi adicionado TFA(2 mL) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 19-25°C durante 5 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo resultante foi ajustado para o pH 9-10 usando solução de NaOH a 10%. O resíduo cru foi em seguida extraída com CH2CI2 (3x15 mL). A camada orgânica foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)-N-metilisobutiramida um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 2. N-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol- 5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)fenil)-N- metilisobutiramida
[00601] A uma mistura de N-(2-((4-(2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorofenil)-N-metilisobutiramida (55 mg, 0,15 mmol) e 2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[d]imidazol-5-carbaldeído (Intermediário 40, 45 mg, 0,28 mmol) em MeOH anidroso (2 mL) e HOAc (0,1 mL) foi adicionado NaBH3CN (43,4 mg, 0,7 mmol) sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 65°C durante 2 h, em cujo tempo LCMS mostrou que o material de partida foi consumido. A mistura reacional foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida e o resíduo resultante foi diluído com MeOH (5 mL) purificado por método G de HPLC preparativa para fornecer N-(5-fluoro-2-((4-(7-((2-oxo-2,3-di-hidro-1H- benzo[d]imidazol-5-il)metil)-2,7-diazaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)fenil)-N-metilisobutiramida como um sólido branco. Produção: 7,8 mg. Método E de LCMS: temperatura ambiente = 0,936 min, (M+H)+ = 560,1. 1H RMN (CD3OD): d8,29 (s, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,32 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,14 (brs, 1 H), 6,87-6,91 (m, 4 H), 3,60-3,73 (m, 2 H), 3,61 (d, J = 4,4 Hz, 2 H), 3,21 (s, 3 H), 2,45-2,67 (m, 6 H), 1,79-1,95 (m, 5 H), 1,06 (d, J = 6,8 Hz, 6 H). 19F RMN (CD3OD): d-119,16. Exemplo 77. 5-((7-(5-(4-fluoro-2-isobutilfenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol- 2-ona Etapa 1. 7-(5-(2-benzil-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila
[00602] A um frasco de base redonda foram adicionados 7-(5-(2- bromo-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (Intermediário 11, 50 mg, 1 eq.) e THF (1 mL) e a solução foi purgada com uma corrente de nitogênio durante 1 min. Brometo de benzilzinco (610 µL, 0,5 M in THF, 3 eq.) foi adicionado e a solução foi purgada com uma corrente de nitrogênio. Pd(PtBu3)2 (3 mg, 0,05 eq.) foi adicionado e a solução foi purgada com uma corrente de nitogênio durante 1 min e a solução foi aquecida para 60°C. A mistura reacional foi em seguida resfriada para temperatura ambiente. Celita foi adicionada à solução e concentrada sob vácuo. O resíduo cru foi purificado por cromatografia rápida (12 g de SiO2, acetato de etila / hexanos) usando uma t'cnica de carga seca. As frações correspondentes foram combinadas e concentradas, produzindo 7-(5- (2-benzil-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (70 mg). Etapas 2-4. 5-((7-(5-(2-benzil-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[4,4]nonan-2-il)metil)-1,3-di-hidro-2H-benzo[d]imidazol-2-ona
[00603] O produto título foi sintetizado de 7-(5-(2-benzil-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila de acordo com o métodos descritos nas Etapas 3-4 de Exemplo 41. Método G de LCMS: temperatura ambiente = 4,07 min.; M+H = 551,59. Exemplo 78. 2-(3-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano 6-(3-(2-cloro-4-fluorobenzil)piridin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00604] A uma solução de 6-(3-bromopiridin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (63 mg, 0,178 mmol) em THF anidroso (4 mL) sob atmosfera de N2 foi adicionada solução de brometo de (2-cloro-4-fluorofenil)zinco(II) em THF (0,7 mL, 0,35 mmol, 0,5 M), seguido por Pd(PBu3)2 (6 mg, 7 mol%) e a mistura foi aquecida a 70°C durante 1,5 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, lavada com NH4Cl aquoso, salmoura, secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado para secura. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida, seguido por método A de HPLC preparativa para fornecer 29 mg de 6-(3-(2-cloro-4-fluorobenzil)piridin- 4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila como um sal de TFA. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,17 min.; M+H = 418,1. Etapa 2. 6-(3-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila
[00605] Sal de TFA de 6-(3-(2-cloro-4-fluorobenzil)piridin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila (29 mg, 0,055 mmol), ácido (2-etilfenil)borônico (9,8 mg, 0,065 mmol), K3PO4 (80 mg, 0,38 mmol), SPhos-Pd-G2 (8 mg), e dioxano (2 mL) e H2O (1 mL) foram misturados sob atmosfera de N2 e aquecida a 110°C durante 15 min em um micro-ondas. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, lavada com H2O, salmoura, secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada, e o filtrado foi concentrado para secura. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida para fornecer 16 mg de 6-(3-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)metil)piridin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc- butila. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,34 min.; M+H = 488,1. Etapa 3: 2-(3-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano
[00606] 6-(3-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano-2-carboxilato de terc-butila foi dissolvido em 20% de TFA/DCM (1 mL) e agitado e temperatura ambiente durante 30 min. Os solventes foram removidos para fornecer 2-(3-((2'-etil-5-fluoro- [1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano como o sal de TFA que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Etapa 4. 2-(3-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-6-((tetra- hidro-2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano
[00607] 2-(3-((2'-Etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-2,6- diazaespiro[3,3]heptano foi dissolvido em MeOH (2 mL), K2CO3 (40 mg) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada durante 10 min e filtrada através de um micro filtro de HPLC. O filtrado foi concentrado para secura para fornecer amina livre. Um terço da amina foi dissolvido em DCM (1 mL), e à esta solução foi adicionada 1 gota de HOAc e tetra- hidro-2H-piran-4-carbaldeído (1 gota), seguida por NaBH(OAc)3 (18 mg, 0,085 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min e concentrada para remover o solvente. O resíduo resultante foi purificado pelo método A de HPLC preparativa para fornecer 1,93 mg de 2-(3-((2'-etil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2-il)metil)piridin-4-il)-6-((tetra-hidro- 2H-piran-4-il)metil)-2,6-diazaespiro[3,3]heptano como um sal de TFA. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,89 min.; M+H = 496,1. 1H RMN (CD3OD) d: 7,99 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,26 (m, 1H), 7,21-7,18 (m, 2H), 6,99 (m, 2H), 6,44 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 4,43 (m, 4H), 3,95 (m, 2H), 3,84 (d, J = 16,4 Hz, 2H), ), 3,71 (d, J = 16,4 Hz, 2H),3,41 (m, 2H), 3,12 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 2,31 (m, 2H), 1,90 (m, 1H), 1,61 (m, 2H), 1,34 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,6 Hz, 3H).
Exemplos 79-240.
[00608] Os exemplos 79-240 foram preparados de acordo com o procedimento descrito na Tabela 9 usando os materiais de partida apropriados. Os dados de caracteização para os Exemplos 79-240 são mostrados na Tabela 10. Tabela 9. Exemplos 79-240 Exemplos 241-249.
[00609] Os exemplos 241-249 foram preparados de acordo com o procedimento descrito na Tabela 11 usando os materiais de partida apropriados. Dados de caracterização para os Exemplos 241-249 são mostrados na Tabela 12. Tabela 11. Exemplos 241-249Exemplos 250A-250B. 2'-((4-(7-amino-7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)- 2-ciclopropil-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-4-carbonitrila (Isômeros 1-2) Etapa 1. terc-butil-7-((terc-butilsulfinil)imino)-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato
[00610] A uma solução de 7-oxo-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila (175 mg, 0,73 mmol) e 2-metilpropano-2- sulfinamida (106,2 mg, 1,2 eq) em THF (6 mL), foi adicionado tetraetoxititânio (283 mg, 260 µL, 1,7 eq) e a solução resultante foi aquecida a refluxo sob N2 durante 5 h. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente e salmoura (10 gotas) foi adicionado à solução, e agitada durante 1 h em temperatura ambiente. A mistura foi filtrada através de uma almofada de celita e lavado com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram removidas para fornecer terc- butil-7-((terc-butilsulfinil)imino)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato (0,16 g, 64%). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,48 min; (M+H)+ = 343,1. Etapa 2. 7-benzil-7-((terc-butilsulfinil)amino)-2-azaespiro[4,4]nonano-2- carboxilato de terc-butila
[00611] À solução de terc-butil-7-((terc-butilsulfinil)imino)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato (0,16 g, 0,47 mmol) em THF (0,5 mL) a 0°C, foi adicionado brometo de benzilmagnésico (1 N em THF, 1 mL). A solução resultante foi aquecida para temperatura ambiente agitada durante a noite, e em seguida extinta com solução aquosa de NH4Cl saturado. A extração com EtOAc forneceu 7-benzil-7-((terc- butilsulfinil)amino)-2-azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (112 mg), que foi usado para a etapa seguinte sem purificação. Etapa 3. N-(7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-2-metilpropano-2- Sulfinamida
[00612] A uma solução de 7-benzil-7-((terc-butilsulfinil)amino)-2- azaespiro[4,4]nonano-2-carboxilato de terc-butila (112 mg) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (200 µL), e a solução resultante foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido sob vácuo, e o produto cru foi usado para a etapa seguinte sem purificação. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,27 min; (M+H)+ = 335,2. Etapa 4. N-(7-benzil-2-(5-(2-cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2- azaespiro[4,4]nonan-7-il)-2-metilpropano-2-sulfinamida
[00613] A um sal de TFA de N-(7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)- 2-metilpropano-2-sulfinamida (0,18 mmol) em iPrOH (1 mL) foi adicionada trimetilamina (100 µL) e 4-cloro-5-(2-cloro-4- fluorofenóxi)pirimidina (Intermediário 10a) (40 mg, 0,15 mmol). A solução resultante foi aquecida em um micro-ondas de CEM a 110°C durante 1 hr. Após resfriar, a solução foi diluída com EtOAc, filtrada, e o filtrado foi concentrado para secura. O resíduo foi purificado com coluna de sílica ISCO com 100% de EtOAc para fornecer N-(7-benzil-2-(5-(2- cloro-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-2- metilpropano-2-sulfinamida (31 mg, 31%). Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,72 min; (M+H)+ = 558,1. Etapa 5. N-(7-benzil-2-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro-[1,1'-bifenil]-2- il)óxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-2-metilpropano-2- Sulfinamida
[00614] A uma solução de N-(7-benzil-2-(5-(2-cloro-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-2-metilpropano- 2-sulfinamida (31 mg, 0,056 mmol), 3-ciclopropil-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrila (18 mg, 0,067 mmol), K3PO4 (24 mg, 0,112 mmol) em 1,4-dioxano (0,6 mL) e água (0,3 mL), foi adicionado cloro(2-diciclo-hexilpfosfino-2‘,6‘-dimetóxi-1,1‘-bifenil)[2-(2‘-amino-1,1 ‘- bifenil)]paládio(II) (2 mg, 5mol%). A solução resultante foi desgaseificada, estimulada com N2, e aquecida em um reator de micro-ondas de CEM a 110°C durante 1 h. Após resfriar, a mistura reacional foi extraída com EtOAc e lavada com salmoura. As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, concentradas para secura para fornecer produto cru, que foi usado para etapa seguinte. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,79 min; (M+H)+ = 664,7. Etapa 5. 2'-((4-(7-amino-7-benzil-2-azaespiro[4,4]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-2-ciclopropil-5'-fluoro-[1,1'-bifenil]-4-carbonitrila (Isômeros 1-2)
[00615] À N-(7-benzil-2-(5-((4'-ciano-2'-ciclopropil-5-fluoro-[1,1'- bifenil]-2-il)óxi)pirimidin-4-il)-2-azaespiro[4,4]nonan-7-il)-2- metilpropano-2-sulfinamida em MeOH (1 mL) foi adicionada solução de HCl aquoso a 6 N (1 mL) e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente até nenhum material de partitida restar. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi purificado pelo método E de RP-HPLC preparativo para fornecer o produto desejado como dois isômeros.
[00616] Isômero 1 como sal de TFA (1,81 mg): Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,41 min; (M+H)+ = 560,6. 1H RMN (MeOH-d4): d 8,34 (s, 1 H), 7,71 (s, 1 H), 7,45-7,21 (m, 11 H), 3,72 (m, 2 H), 3,44 (m, 1 H), 3,32 (m, 1 H), 2,96 (s, 2 H), 2,14 (m, 2 H), 1,88 (m, 8 H), 1,84 (m, 1 H), 0,78 (m, 2 H), 0,60 (m, 2 H).
[00617] Isômero 2 como sal de TFA (1,76 mg): Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,45 min; (M+H)+ = 560,6. 1H RMN (MeOH-d4): d 8,24 (s, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,38 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,35-7,18 (m, 8 H), 7,13 (m, 2 H), 3,70-3,40 (m, 3 H), 3,28 (m, 1 H), 2,92 (s, 2 H), 2,08 (m, 2 H), 1,86-1,50 (m, 6 H), 1,49 (m, 1 H), 0,78 (m, 2 H), 0,60 (m, 4 H). Exemplo 251. 2-((4-(3-(4-acetamidobenzil)-2-amino-4-oxo-1,3,7- triazaespiro[4,4]non-1-en-7-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropil-N-metilbenzamida Etapa 1: 4-acetamidobenzilcarbamato de terc-butila BocHN^^^i O
[00618] Uma solução resfriada de 4-aminobenzilcarbamato de terc- butila (510 mg, 2,29 mmol) a 0°C em piridina (5 mL) foi tratada com o cloreto de acetila (216 mg, 2,75 mmol) e agitada durante 18 h em temperatura ambiente. O solvente foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna rápida (ISCO) em sílica gel (eluindo com éter de petróleo: EtOAc =10:1 a 1:1) para fornecer 4-acetamidobenzilcarbamato de terc-butila como um sólido branco. Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,894 min; (M+Na)+ = 287,2. Etapa 2: N-(4-(aminometil)fenil)acetamida
[00619] A uma solução de 4-acetamidobenzilcarbamato de terc- butila (550 mg, 2,08 mmol) em DCM anidroso (12 mL) foi adicionado TFA (3 mL) lentamente a 0oC sob N2 e a mistura reacional foi agitada a 0oC durante 1,5 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer N-(4-(aminometil)fenil)acetamida, que foi usada para a etapa seguinte sem outra purificação como um sólido branco como sal de TFA. Produção: 342 mg (100% cru). Método D de LCMS: temperatura ambiente = 0,1,338 min; (2M+H)+ = 329,1. Etapa 3: N-(4-((3-terc-butoxicarboniltioureido)metil)fenil)acetamida
[00620] A uma mistura de N,N’-bis-terc-butoxicarboniltioureia (500 mg, 1,81 mmol) e THF anidroso (20 mL) foi adicionado NaH a 60% (87 mg, 2,17 mmol) a 0°C. A mistura reacional foi agitada a 14-17 oC durante 1 h, em seguida TFAA (193 mg/0,129 mL, 1,99 mmol) foi adicionado e a agitação continuous durante mais 1 h. Em seguida, N-(4- (aminometil)fenil)acetamida (249 mg, 1,99 mmol) e Et3N (1 mL) em THF não anidroso (10 mL) foram adicionados e a reação resultante foi agitada a 14-17oC durante 18 h. H2O (50 mL) foi adicionado para extinguir a reação e a mistura foi extraída com EtOAc (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2 x 40 mL), secadas sobre com anidroso Na2SO4, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna rápida (ISCO) em sílica gel (eluindo com éter de petróleo: EtOAc =1:0 a 10:1) para fornecer N-(4-((3-terc- butoxicarbonil tioureido)metil)fenil)acetamida como um sólido branco.
[00621] Método C de LCMS: temperatura ambiente = 0,998 min; (M+Na)+ = 346,2. Etapa 4: 3-(4-acetamidobenzil)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-4-oxo- 1,3,7-triazaespiro[4,4]non-1-eno-7-carboxilato de terc-butila
[00622] A uma solução de 3-metil 3-aminopirrolidine-1,3-dicarboxilato de 1-terc-butila (100 mg, 0,409 mmol) em 5 mL de DMF foram adicionados N-(4-((3-terc-butoxicarboniltioureido)metil)fenil)acetamida (159 mg, 0,491 mmol), EDCI (127 mg, 0,819 mmol) e DIEA (106 mg, 0,819 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 48 h. O solvente foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna rápida (ISCO) em sílica gel (eluindo com éter de petróleo:EtOAc = 10:1 a 1:1) para fornecer 3-(4-acetamidobenzil)-2- ((terc-butoxicarbonil)amino)-4-oxo-1,3,7-triazaespiro[4,4]non-1-eno-7- carboxilato de terc-butila como um sólido branco. Produção: 114 mg (55% duas etapas). Método D de LCMS: temperatura ambiente = 1,090 min; (M+H)+ = 502,4. Etapa 5: N-(4-((2-amino-4-oxo-1,3,7-triazaespiro[4,4]non-1-en-3- il)metil)fenil)acetamida
[00623] A uma solução de 3-(4-acetamidobenzil)-2-((terc- butoxicarbonil)amino)-4-oxo-1,3,7-triazaespiro[4,4]non-1-eno-7- carboxilato de terc-butila (114 mg, 0,227 mmol) em DCM anidroso (3 mL) foi adicionado TFA (1 mL) lentamente a 0oC sob N2 e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer N-(4-((2-amino-4-oxo-1,3,7-triazaespiro[4,4]non-1-en-3- il)metil)fenil)acetamida crua que foi usada para a etapa seguinte sem outra purificação como um óleo incolor. Produção: 68 mg (100% cru). Etapa 6: 2-((4-(3-(4-acetamidobenzil)-2-amino-4-oxo-1,3,7- triazaespiro[4,4]non-1-en-7-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropil-N- metilbenzamida
[00624] A uma solução de N-(4-((2-amino-4-oxo-1,3,7- triazaespiro[4,4]non-1-en-3-il)metil)fenil)acetamida (25 mg, 0,077 mmol) e Intermediário 43 (30 mg, 0,1 mmol) em i-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (60 mg, 0,462 mmol) e a mistura reacional foi aquecida para 110 oC ao refluxo durante 18 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado pelo método A de HPLC preparativa para fornecer o produto título como um sólido branco. Produção: 10,20 mg (22%). Método D de LCMS: temperatura ambiente = 0,995 min; (M+H)+ = 589,1. 1H RMN (CD3OD): d 8,55-8,79 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,61 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,25-7,46 (m, 5H), 4,16 4,88 (m, 6H), 3,91 (brs, 1H), 2,72-3,03 (m, 3H), 2,43-2,70 (m, 2H), 2,14 (s, 3H), 1,02-1,30 (m, 6H). 19F RMN (CD3OD): d -116,87, 117,22. Exemplo 252. N-Etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida Etapa 1: 2-(5-(4-fluoro-2-(metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila
[00625] Uma mistura de 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-5- fluorobenzoato de metila (Intermediário 48, 0,30 g, 0,11 mmol), cloridrato de 2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila (CAS#: 1023301-84-9) (0,28 g, 1,06 mmol) e TEA (0,32 g, 3,18 mmol) em iPrOH (3 mL) foi aquecida com um reator de micro-ondas CEM a 110°C durante 1 h. Após resfriar, a mistura foi diluída com EtOAc (15 mL) e agitada até um sólido branco formar-se, em seguida filtrada através de uma almofada de celitaTM, e subsequentemente lavado com EtOAc (~10 mL). O filtrado combinado foi concentrado sob vácuo para fornecer o produto cru 2-(5-(4-fluoro-2-(metoxicarbonil)fenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila como um sólido escuro (0,59 g, 100% de conversão), que foi usado para a etapa seguinte sem purificação; Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,13 min; (M+H)+ = 473,5. Etapa 2: ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico
[00626] A uma solução de 2-(5-(4-fluoro-2-(metoxicarbonil)fenóxi)- pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila (0,59 g, ~1,06 mmol) em MeOH (3 mL), foi adicionada solução aquosa de LiOH a 2N (1,1 mL, 2,2 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 4 h, o solvente foi removido, e o resíduo foi lavado com EtOAc (10 mL), acidificado para o pH = 3, e secado para fornecer ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico como um sólido (0,47 g, 97%), que foi usado para a etapa seguinte sem purificação; Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,02 min; (M+H)+ = 458,6. Etapa 3: 2-(5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila
[00627] A uma mistura de ácido 2-((4-(7-(terc-butoxicarbonil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluorobenzoico (0,2 g, 0,44 mmol), N-etilpropan-2-amina (114 mg, 1,32 mmol), e TEA (200 µL) em DMF (1 mL) a 0°C, foi adicionado reagente de BOP (233 mg, 0,53 mmol). A solução resultante foi aquecida lentamente para temperatura ambiente, e agitada durante 4 h. Água foi adicionada, a mistura foi extraída com DCM (4x, 5 mL), e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, concentradas para secura, e purificadas por coluna rápida ISCO (10% de MeOH/DCM) para fornecer 2-(5-(2- (etil(isopropil)carbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7- diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila (160 mg, 70%) como uma espuma; Método B de LCMS: temperatura ambiente = 1,16 min; (M+H)+ = 528,6. Etapa 4: 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5- fluoro-N-isopropilbenzamida
[00628] A uma solução de 2-(5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4- fluorofenóxi)-pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila (160 mg, 0,30 mmol) em DCM anidroso (3 mL), foi adicionado TFA (0,6 mL). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para secura e usada para a etapa seguinte como um sal de TFA cru; Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,57 min, (M+H)+ = 427,6. Etapa 5: ((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo- hexil)carbamato de terc-butila
[00629] A uma solução de 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N-isopropilbenzamida (0,30 mmol) em MeOH anidroso (5 mL) foi adicionado NaOAc (140 mg) para ajustar o pH para 6-7. Em seguida ((1r,4r)-4-formilciclo-hexil)carbamato de terc- butila (CAS#: 181308-57-6) (105 mg, 0,45 mmol) foi adicionado. Após ser agitada em temperatura ambiente durante 10 min, NaBH3CN (28 mg, 0,45 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado em uma coluna rápida ISCO (8% de MeOH/DCM) para fornecer ((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo- hexil)carbamato de terc-butila como um sólido branco (156,5 mg, 82% in dois etapas); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,87 min; (M+H)+ = 639,5. Etapa 6: 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N- isopropilbenzamida
[00630] Uma solução de ((1r,4r)-4-((2-(5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-7-il)metil)ciclo- hexil)carbamato de terc-butila (156,5 mg, 0,25 mmol) em 1,25 N HCl/MeOH (3 mL) foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi em seguida removido para fornecer 2-((4-(7-(((1r,4r)-4- aminociclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N- etil-5-fluoro-N-isopropilbenzamida como um sal de HCl com 100% de conversão, que foi usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,52 min; (M+H)+ = 539,6. Etapa 7: N-Etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida
[00631] A uma solução de cloridrato de 2-((4-(7-(((1r,4r)-4- aminociclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)- N-etil-5-fluoro-N-isopropilbenzamida (0,25 mmol) e Et3N (75 mg, 0,75 mmol) em DCM anidroso (2 mL) a 0°C, foi adicionado cloreto de etanossulfonila (33 mg, 0,26 mmol) gota a gota e a mistura foi agitada a 0°C durante 2 h. A mistura reacional foi extinta com H2O (5 mL), extraída com DCM (3x 5 mL), e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por coluna rápida ISCO eluindo com 8-10% de MeOH/DCM para fornecer N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)-ciclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropil- benzamida como um sólido branco (41 mg, 26%); Método B de LCMS: temperatura ambiente = 0,73 min; (M+H)+ = 631,6; 1H RMN (MeOD-d4): d 8,23, 8,22 (dois s, 1 H), 7,74, 7,70 (dois s, 1 H), 7,22-7,15 (m, 2 H), 7,03-6,96 (m, 1 H), 4,45, 3,51 (dois m, 1 H), 4,08-3,82 (m, 4 H), 3,36 (m, 1 H), 3,24 (m, 1 H), 3,12-2,94 (m, 3 H), 2,32 (m, 4 H), 2,10 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 1,96 (m, 2 H), 1,88-1,76 (m, 6 H), 1,48 (m, 1 H), 1,20-1,04 (m, 14 H), 1,02 (m, 2 H); 19F RMN (MeOD-d4): d -119,7. Exemplo 253. Síntese de escala de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida Etapa 1: N-etil-5-fluoro-N-isopropil-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzamida
[00632] A uma solução de ácido 5-fluoro-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzoico (Intermediário 49, 5 g, 21,4 mmol) em DCM anidroso (60 mL) a 0°C, foi adicionado cloreto de oxalila (2,2 mL, 25,6 mmol) lentamente. A mistura foi agitada a 0°C durante 30 min e a solução tornou-se turva. Trietilamina (3,6 mL, 25,6 mmol) foi em seguida adicionada no reator em porções a cada 30 min. Após a adição foi concluída, o banho de água foi aquecido para temperatura ambiente e a mistura reacional foi agitada durante cerca de 3 h. Em seguida, uma solução de isopropil etilamina (6,5 mL, 53,5 mmol) foi adicionada à mistura reacional lentamente e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 10 h. Os teores do reator foram lavados sequencialmente solução aquosa de HCl a 1 N e hidróxido de sódio a 1 N. A camada orgânica foi concentrada e secada sob vácuo elevado para fornecer o produto cru N-etil-5-fluoro-N- isopropil-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzamida um óleo marrom (6,2 g); Método B de LCMS: tR = 1,18 min; [M+H]+ = 304,2 Etapa 2: 1-óxido de 5-(2-(Etil(isopropil)carbamoil)-4- fluorofenóxi)pirimidina
[00633] Em temperatura ambiente, um frasco de base redonda foi carregado com N-etil-5-fluoro-N-isopropil-2-(pirimidin-5-ilóxi)benzamida crua de Etapa 1 e pó de peróxido de hidrogênio (15-17% de base de oxigênio ativo, 14,1 g, 150 mmol) em THF (60 mL). Anidrido trifluoroacético (6 mL, 42,8 mmol) foi em seguida adicionado lentamente à mistura reacional. Após a adição ser concluída, a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 45 min. A reação foi extinta por lenta adição de solução de NaHCO3 saturado. O produto foi extraído com diclorometano. A camada orgânica foi tratada com Na2S2O3 a 1 M. a mistura bifásica foi testada por papel teste de KI-amido e mostrou resultado negativo. Em seguida, as fases foram em seguida separadas, a camada orgânica foi secada sobre Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O produto cru 5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4-fluorofenóxi)- pirimidina 1-óxido foi em seguida secada em um vácuo elevado para fornecer um óleo laranja (5,8 g); método de LC-MS B: tR = 1,03 min; [M+H]+ = 320,3. Etapa 3: 2-((4-Cloropirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N- Isopropilbenzamida
[00634] A uma suspensão de 1-óxido de 5-(2- (etil(isopropil)carbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidina cru de Etapa 2 (5,8 g, ~90% de pureza) e DIEA (16,2 mL, 90,9 mmol) em EtOAc (70 mL) foi adicionado POCI3 (2,0 mL, 21,8 mmol) lentamente a 0°C. Após adição, a mistura reacional resultante foi aquecida para temperatura ambiente e agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reacional foi resfriada para 0°C e extinta by slow adição de H2O (30 mL). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre salmoura, Na2SO4, filtrada, e em seguida concentradas sob pressão reduzida e secadas sob vácuo para fornecer o produto cru 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N- isopropilbenzamida como um sólido escuro, que foi usado diretamente para a etapa seguinte sem outra purificaçãos; método de LC-MS B: tR = 1,40 min; [M + H]+= 338,2 Etapa 4: 2-(5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin-4-il)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila
[00635] Uma mistura de 2-((4-cloropirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro- N-isopropilbenzamida crua de Etapa 3, cloridrato de 2,7- diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila (CAS#: 1023301 84-9) (5,0 g, 19,1 mmol) e DIEA (9,8 mL, 54,6 mmol) em iPrOH (35 mL) foi agitada a 80°C durante 5 hoas. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente e diluída com EtOAc (60 mL). A mistura foi em seguida lavada com H2O (60 mL); a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (60 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre salmoura, Na2SO4, filtradas, e em seguida concentradas sob pressão reduzida e secadas sob vácuo. O produto cru foi purificado por coluna rápida ISCO (3% de MeOH/DCM) para fornecer 2-(5-(2-(etil(isopropil)-carbamoil)-4-fluorofenóxi)pirimidin- 4-il)-2,7-diazaespiro-[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila como um sólido marrom (4,95 g, 44% over 4 etapas); método de LC-MS B: tR = 1,17 min; [M + H]+ = 528,4; 1H RMN (CD3OD, 400 MHz): d 8,24 (s, 1 H), 7,76 (s, 1 H), 7,21- 7,15 (m, 2 H), 7,00-6,96 (m, 1 H), 4,05-3,95 (m, 2 H), 3,95-3,90 (m, 3 H), 3,31-3,27 (m, 2 H), 1,75-1,70 (m, 5 H), 1,45 (s, 9 H), 1,31 - 1,10 (m, 12 H). Etapa 5: 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5- fluoro-N-isopropilbenzamida
[00636] A uma solução de 2-(5-(2-(etil(isopropil)carbamoil)-4- fluorofenóxi)-pirimidin-4-il)-2,7-diazaespiro[3,5]nonano-7-carboxilato de terc-butila de Etapa 4 (69 g, 130,9 mmol) em DCM anidroso (300 mL) foi adicionado HCl-dioxano (110 mL, 4M em dioxano). A mistura reacional foi agitada a 5-9°C durante 4 h. A mistura foi diluída com água (500 mL) e extraída com DCM (3 x 400 m). A camada aquosa foi ajustada para o pH = 12-14 com solução de NaOH a 10% e extraída com DCM (3 x 800 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N-isopropil-benzamida (46 g, 100%) como um sólido amarelo, que foi usado para a etapa seguinte diretamente sem outra purificação; método de LC-MS C: temperatura ambiente = 0,416 min; [M+H]+ = 428,2. Etapa 6: N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida
[00637] A uma mistura de 2-((4-(2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-N-etil-5-fluoro-N-isopropilbenzamida de Etapa 5 (39,0 g, 91,3 mmol) em N-metil-2-pirrolidona (400 mL) foi adicionado 4- metilbenzenossulfonato de ((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metila (Intermediário 50, 41 g, 109,56 mmol), KI (16 g, 95,9 mmol) e K2CO3 (63 g, 456,5 mmol). A mistura reacional foi em seguida agitada a 70-75°C durante 6 h sob atmosfera de N2. A reação foi resfriada para temperatura ambiente e mais 4-metilbenzenossulfonato de ((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metila (Intermediário 50, 4,0 g, 10,9 mmol) foi adicionado e a mistura reacional foi agitada a 70-75°C durante mais 12 h sob atmosfera de N2. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente, diluída com água (500 mL), e extraída com DCM (3 x 800 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3 x 1,5 L), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado pelo método A de prep-HPLC neutral para fornecer N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida (20,9 g, 36,8%) como sólido branco; Método A de LCMS: temperatura ambiente = 1,82 min; [M+H]+ = 631,3; 1H RMN (CDCl3 400 MHz): dppm 8,36-8,37 (m, 1 H), 7,76 (s, 1 H), 6,99-7,04 (m, 2 H), 6,74-6,80 (m, 1 H), 4,59-4,66 (m, 0,2 H), 4,04-4,06 (m, 1 H), 3,83 3,93 (m, 4 H), 3,48-3,53 (m, 0,8 H), 3,30-3,39 (m, 1 H), 3,17-3,21 (m, 1 H), 3,02-3,06 (m, 2 H), 2,25 (s, 4 H), 2,03-2,05 (s, 4 H), 1,73-1,84 (m, 7 H), 1,12-1,36 (m, 14 H), 0,89-0,98 (m, 2 H); 19F RMN (CDCl3 400 MHz): dppm -118,57; Método A de SFC: tR = 1,357 min; método A de HPLC: tR = 6,84 min.
Exemplo 254. Cristalização de Amina Livre de N-Etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida
[00638] Amina livre de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida (0,50 g) foi dissolvida em uma mistura de EtOAc (6 mL) e hexano (9 mL) para fornecer uma solução clara, que foi semeada com <1 mg de cristal de amina livre de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 6A). A solução resultante foi agitada a 25°C durante 2 dias, o sólido branco foi coletado por filtragem, e secado sobre vácuo elevado durante a noite (0,39 g, 76%); 1H RMN (MeOD-d4): d8,23, 8,22 (dois s, 1 H), 7,74, 7,70 (dois s, 1 H), 7,22-7,15 (m, 2 H), 7,03-6,96 (m, 1 H), 4,45, 3,51 (dois m, 1 H), 4,08-3,82 (m, 4 H), 3,36 (m, 1 H), 3,24 (m, 1 H), 3,12-2,94 (m, 3 H), 2,32 (m, 4 H), 2,10 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 1,96 (m, 2 H), 1,88-1,76 (m, 6 H), 1,48 (m, 1 H), 1,20-1,04 (m, 14 H), 1,02 (m, 2 H); 19F RMN (MeOD-d4): d-119,7; ponto de fusão = 156,6-157,6°C. Concentração em água para obter o pH = 7: 7,6 mg/mL.
[00639] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o composto cristalino de amina livre (Método A de XRPD) e é mostrado na figura 1. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 13 abaixo. Tabela 13.
Exemplo 255. Cristalização de sal de ácido sesquifumárico de N-Etil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida (Sesquifumarato) 0
[00640] Amina livre de N-Etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida (497,2 mg, 0,79 mmol) e ácido fumárico (137,2 mg, 1,5 eq) foram dissolvidos em EtOH (5 mL) para fornecer uma solução clara; EtOH foi removidos sob vácuo, e o sal foi secado sobre vácuo elevado durante a noite.
[00641] O sal (0,54 g) foi dissolvido em EtOH/MeCN (21,8 mL, ~4 % de EtOH) e a solução resultante foi agitada a 25°C durante a noite, durante a qual um sólido branco precipitous-se lentamente. O sólido branco foi coletado por filtragem e secado sobre vácuo elevado durante 24 horas (0,41 g, 76%). 1H-RMN (DMSO-d6, retardo de relaxamento de 25 s): d8,26, 8,25 (dois s, 1 H), 7,72, 7,66 (dois s, 1 H), 7,32-7,22 (m, 2 H), 7,06 (m, 1 H), 7,00 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,59 (s, 3 H), 4,39, 3,72 (dois m, 1 H), 3,98-3,76 (m, 4 H), 3,38 (m, 1 H), 3,22 (m, 1 H), 2,98 (m, 3 H), 2,42 (m, 4 H), 2,20 (d, J = 6,4 Hz, 2 H), 1,84 (m, 2 H), 1,74 (m, 6 H), 1,43 (m, 1 H), 1,28-0,82 (m, 16 H); 19F RMN (DMSO-d6): d-118,43; ponto de fusão = 176,1-177,8 °C.
[00642] Concentração em água para obter o pH = 7: 224,7 mg/mL.
[00643] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o sal cristalino de ácido sesquifumárico (Método B de XRPD) e é mostrado na figura 2. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 14 abaixo. Relação de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida : ácido fumárico = 1:1,5). Tabela 14.
Exemplo 256. Cristalização de Sal de Ácido Bis-Metanossulfônico (Bis-Mesilato) de N-Etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida
[00644] A uma solução clara de amina livre de N-etil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida (419,7 mg) em iPrOH (2,5 mL) e EtOAc (3 mL), foi adicionado MeSO3H (>99,5%, Sigma-Aldrich) (0,13 g, 88,6 µL, 2,05 eq) gota a gota. Mais 3 mL de EtOAc foram adicionados à solução resultante, e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Sólido branco foi em seguida coletado por filtragem, todo os sólido foi transferido como licor mãe duas vezes, e secados sobre vácuo elevado durante 2 dias (535,1 g, 97%); 1H-RMN (MeOD-d4): d 8,53, 8,52 (dois s, 1 H), 7,92, 7,82, 7,71 (three s, 1 H), 7,38-7,22 (m, 3 H), 4,69-4,16 (br, m, 4 H), 3,90 (m, 1 H), 3,57 (m, 2 H), 3,45 (m, 1 H), 3,26 (m, 1 H), 3,16 (m, 1 H), 3,03 (q, J = 7,6 Hz, 2 H), 2,98 (m, 4 H), 2,68 (s, 6 H), 2,22-2,02 (m, 6 H), 1,92-1,74 (m, 3 H), 1,44-1,06 (m, 16 H); 19F RMN (MeOD-d4): d -116,53, -116,79, -117,27; ponto de fusão = 207,6-209,7°C. Concentração em água para obter o pH = 7: 261 mg/mL.
[00645] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o sal cristalino de ácido bis-metanossulfônico (Método A de XRPD) e é mostrado na figura 3. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 15 abaixo. Relação de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida : ácido metanossulfônico = 1:2). Tabela 15.
Exemplo 257. Cristalização de Sal de Ácido Bis-Clorídrico (Bis-Cloridrato) de N- Etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida
[00646] A uma solução clara de amina livre de N-etil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan- 2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida (0,71 g) em EtOH (3 mL) foi adicionada solução aquosa de HCl a 1 N (2,25 mL, 2 eq) gota a gota. A solução resultante foi misturada e evaporada para secura sob vácuo elevado.
[00647] O sal resutante (0,71 g) foi dissolvido em iPrOH (4 mL) e EtOAc (7 mL) para fornecer uma solução clara. Um cristal de semente foi gerado dissolvendo o Exemplo 252 (~5 mg) em EtOH (100 µL), seguido por lenta evaporação em uma câmara contendo iPrOH (~5 mL). A solução de sal de ácido bis-clorídrico foi semeada com o cristal de semente e a solução foi agitada a 25°C durante a noite. Sólido branco foi coletado por filtragem e secadas sobre vácuo elevado durante 2 dias (0,54 g, 76%); 1H RMN (MeOD-d4): d8,54, 8,52 (dois s, 1 H), 7,92, 7,82, 7,71 (three s, 1 H), 7,38-7,24 (m, 3 H), 4,68-4,12 (br, m, 4 H), 3,88 (m, 1 H), 3,57 (m, 2 H), 3,45 (m, 1 H), 3,26 (m, 1 H), 3,16 (m, 1 H), 3,03 (q, J = 7,6 Hz, 2 H), 2,99 (m, 4 H), 2,34-2,02 (m, 6 H), 1,94-1,76 (m, 3 H), 1,44-1,06 (m, 16 H); 19F RMN (MeOD-d4): d-116,48, -116,77, -117,26; ponto de fusão = 219-220°C. Concentração em água para obter o pH = 7: 317,6 mg/mL.
[00648] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o sal cristalino de ácido bis-clorídrico (Método A de XRPD) e é mostrado na figura 4. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 16 abaixo. Relação de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida : ácido clorídrico = 1:2). Tabela 16.
Exemplo 258. Cristalização de Amina Livre de 5-Fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00649] Amina livre de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 6A, 0,79 g) foi dissolvida em uma mistura de EtOAc e hexano (28 mL, ~38% de volume de EtOAc). Visto que todo o material entrou na solução, a solução clara gradualmente tornou-se turva. A solução resultante foi agitada a 25°C durante a noite.
[00650] O sólido branco foi em seguida coletado por filtragem e secado sobre vácuo elevado durante a noite (0,58 g, 73%); 1H-RMN mostrou o composto puro com traço de EtOAc; ponto de fusão = 177 178°C.
[00651] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o composto cristalino de amina livre (Método B de XRPD) e é mostrado na figura 5. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 17 abaixo. Tabela 17. Exemplo 259. Cristalização de Ácido Bis-metanossulfônico (Bis-mesilato) de 5- Fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)benzamida
[00652] Amina livre de 5-Fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 6A) (1,02 g) foi dissolvido em iPrOH (25 mL) e MeSO3H (>99,5%, Sigma-Aldrich) (0,31 g, 207,5 µL, 2,05 eq) foi adicionado a a solução lentamente. A solução resultante foi semeada com um cristal simples de sal de ácido bis-metanossulfônico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 264) e agitada em temperatura ambiente durante a noite.
[00653] Sólido branco foi coletado por filtragem, e secado sobre vácuo elevado durante 4 dias (0,94 g, 73%); 1H RMN confirmou bis- mesilato sem picos de solvente; ponto de fusão = 217,6-219,6 oC.
[00654] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o sal cristalino de ácido bis-metanossulfônico (Método B de XRPD), confirmando-o ser cristalino, e é mostrado na figura 6. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 18 abaixo. Tabela 18.
Exemplo 260. Cristalização de sal de ácido sesquifumárico (Sesquifumarato) de 5-Fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00655] Amina livre de 5-Fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 6A) (0,34 g) foi dissolvido em MeCN (2 mL). Ácido fumárico (82,3 mg, 1,3 eq) foi dissolvido em EtOH (1,5 mL, aquecido até ser dissolvido). A solução de ácido fumárico foi em seguida transferida para a solução de amina, bem misturada, em seguida solvente foi removido sob vácuo para secura. O resíduo resultante foi redissolvido em uma mistura de MeCN (10 mL) e EtOH (0,2 mL) para fornecer uma solução clara. Após semear com um cristal simples do sal de ácido sesquifumárico de (Exemplo 265), a solução foi agitada a 30oC durante a noite. Sólido branco foi coletado por filtragem, e secado sob vácuo elevado durante 24 horas (0,35 g, 83%). Ponto de fusão = 176-178oC.
[00656] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o sal cristalino de ácido sesquifumárico (Método B de XRPD) e é mostrado na figura 7. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 19 abaixo. Tabela 19. Exemplo 261. Sal de ácido bis-clorídrico (Bis-cloridrato) de 5-Fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00657] À base livre crua de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (~86 gramas, ~92% de pureza), foi adicionado EtOH (13 volumes) em temperatura ambiente. À esta solução foram adicionados 3 equivalentes de uma solução a 1-2 M de HCl em EtOH em temperatura ambiente. A solução foi agitada durante cerca de 15 minutos e di-isopropil éter (iPr2O, 7 volumes) foi em seguida lentamente adicionado à solução de EtOH em agitação em temperatura ambiente. A mistura foi agitada a temperatura ambiente e um precipitado branco formou-se durante cerca de 1 dia. O precipitado branco foi filtrado e lavado com uma mistura de 1:1 de EtOH e iPr2O para fornecer 67 gramas do sal de bis-HCl com uma pureza de ~96% por análise de HPLC. O material resultante pareceu ser uma mistura de formas amorfas e cristalinas. EtOH residual (~4,5 % de Em peso) foi removido por liofilização com ~8 volumes de água. O material após liofilização teve um ponto de fusão de ~210-215oC e pareceu decompor-se nestas temperaturas durante a análise de ponto de fusão.
[00658] O padrão de difração de pó de raio X (XRPD) foi determinado para o sal ácido bis-clorídrico (Método B de XRPD) e é mostrado na figura 8. O padrão de pó mostrado na figura 8 exibiu um perfil essencialmente macio e contínuo característico de um material não cristalino.
Exemplo 262. Análise de Resposta Cristalina Método de Filtro Digital
[00659] Uma porcentagem de resposta cristalina foi determinada para os Exemplos 258-261. Nos dados de difração de pó de raio X, a presença de material cristalino indicada pela presença de picos de difração bem definidos agudos. A porcentagem de resposta cristalina é essencialmente o sinal de difração contido em todos os picos cristalinos expressos como a porcentagem com respeito ao sinal de difração total da amostra. Para determinar a resposta de difração da amostra, os dados medidos foram primeiro pré-processados removendo o fundo instrumental e, em seguida normalizados para uma área comum. Os dados pré-processados foram em seguida passados através de dois filtros digitais, um para remover a dispersão difusa térmica e Compton e o outro para remover a resposta de amostra não cristalina do padrão. A porcentagem da intensidade normalizada total permaneceu após passar os dados através dos filtros digitais indica a porcentagem de material cristalino perfeito na amostra. Os valores de porcentagem de resposta cristalina determinados usando o filtro digital são sumariados na Tabela 20. Estes números não incluem material cristalino defeituoso e, como um resultado, não são o valor de porcentagem absoluta de cristalinidade. Os valores de porcentagem de cristalinidade como fornecidos na Tabela 20, permitem uma comparação relative de porcentagem de cristalinidade entre as amostras contendo o mesmo polimorfo cristalino. Tabela 20.
Modelo Bayesiano
[00660] Tomando a resposta essencialmente não cristalina observada para o Exemplo 261 como sendo um padrão não cristalino representative para todas as amostras, permite a definição de um modelo Bayesiano que pode ser usado para estimar o componente não cristalino máximo permitido pelos dados observados. Os resultados da porcentagem cristalina combinados usando o modelo Bayesiano são mostrados na Tabela 21. O modelo Bayesiano forneceu uma boa aproximação para a dispersão de raio X difusa observada para o grupo de dados de Exemplo 259, que sugeriu que os valores de porcentagem cristalina dentre 71% a 75% são razoáveis. O modelo Bayesiano não fornece um bom ajuste para os Exemplos 258 e 260. Ambos os grupos de dados parecem ser essencialmente cristalinos por natureza. Tabela 21.
Exemplo 263. Análise de forma cristalina de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida Preparação de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil- 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00661] O sal de ácido fumárico usado nos ensaios de análise de forma sólida foi preparado de base de amina livre de 5-fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida de acordo com o seguinte procedimento:
[00662] A base de amina livre foi purificada adicionando à água e agitação durante a noite. Os sólidos resultants foram em seguida secados sob nitrogênio. Em seguida, equivalentes de 1,6 molar de ácido fumárico foram adicionados a 4,4 g da base livre de 5-fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida em EtOH (35 mL) e a mistura reacional foi agitada. Uma porção adicional de EtOH (5 mL) foi adicionada e a mistura reacional foi secada sobre MgSO4. A mistura foi em seguida filtrada e dietil éter (150 mL) foi adicionado e a suspensão foi agitada durante a noite. Uma amostra da suspensão sólida foi identificada como Forma B (veja abaixo). Os sólidos resultantes foram em seguida coletados por meio de filtragem a vácuo. Uma da massa filtrada resultante foi também identificada como Forma B. A massa úmida foi em seguida secada sob vácuo a 45oC durante 1 dia e a amostra seca resultante foi identificada como a Forma D (veja, abaixo). Identificação de Formas Sólidas
[00663] Sete diferentes formas sólidas de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida foram observadas e são descritas abaixo. Os padrões de difração de pó de raio X (XRPD) (Método C de XRPD) para as formas de sal de ácido sesquifumárico identificadas são mostrados na figura 9. Amorfo: Formado de EtOH por meio de rápida evaporação. Forma A: Mono-hidrato de Ácido Sesquifumárico; Relação: 2:3:2 5- fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5- il)óxi)benzamida:ácido fumárico:água. • XRPD: Consistente com hidrato de ácido sesquifumárico (método C de XRPD), como mostrado na figura 10. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 22 abaixo. • DSC/TG: amplo endoterma que ocorre concorrentemente com perda de peso na TG entre 70 e 130°C. Evento endotérmico com início a 179°C, como mostrado na figura 11. Uma perda de peso de 1,7% observada até 90°C como mostrado na figura 12. • DVS: 0,92% de ganho de peso de 5 a 95% de RH. Perda de peso na desorção é mostrada na figura 13. • Temperatura variável (VT)-XRPD: Nenhuma mudança de forma observada. Mudança de pico consistente com expansão térmica no aquecimento, como mostrado na figura 14. Padrão de XRPD a 165 °C consistente com a Forma A. • Nenhuma mudança sob secagem a vácuo ou aquecimento. • Conversão de Forma B e Forma D para formar A em suspensões de atividade em água a 0,22 aw e acima. Tabela 22. • Forma B observada de experimentos de MeOH e EtOH. Padrão de XRPD (método C de XRPD) indexado e consistente com solvato, como mostrado na figura 15. Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 23 abaixo. • 1H-RMN indicou quantidades limitadas de MeOH na amostra analisada. • Durante um experimento de aumento em escala, duas subamostras foram isoladas (suspensão e massa úmida) e observadas ser de Forma B. A secagem do material volumoso em um forno a vácuo a 45°C convertido para formar D, como mostrado na figura 16 (Método C de XRPD). • Estabilidade: Convertida para formar A em suspensão de atividade em água, 0,22 aw. Tabela 23. Forma C: Observada como uma mistura com EtOH de Forma A gerado. Forma C apenas observada de etanol. Forma D: Formada de aumento em escala usando condições "secas" e de evaporação lenta de MeOH/heptano • XRPD: menor cristalinidade, como mostrado nas figuras 16 e 23 (método C de XRPD). Uma lista de picos de 2-theta é fornecida na Tabela 24 abaixo. • 1H RMN consistente com sal de sesquifumarato, nenhum solvente orgânico observado. • DSC/TG: amplo evento endotérmico com início a 157°C observado na DSC (A figura 17) e perda de peso 0,4% sob aquecimento até 90°C, como mostrado na figura 18. • Estabilidade: Convertida para formar A em suspensão de atividade em água, 0,22 aw Tabela 24. Forma E: solvato de THF • Nenhuma mudança observada em XRPD após forno a vácuo a 45 °C durante 1 dia (Método C de XRPD). • 1H-RMN indica solvato de THF. Após secagem a vácuo, 0,6 moles de THF ainda evidente. Forma F: • DSC: Endoterma de baixa temperatura ampla com o máximo próximo a 65°C induzindo a um evento exotérmico aparente com o máximo próximo a 109°C. Endoterma final com um início próximo a 143°C, como mostrado na figura 19. • Conversão para formar A foi observada quando suspense em mistura de ACN/água. Análise de Atividade de Água
[00664] Tabela 25 mostra os resultados de análise de atividade em água de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida em vários sistemas de solvent orgânico e aquoso. Tabela 25. Análise de Estabilidade Física
[00665] A Tabela 26 mostra os resultados de uma análise de estabilidade física de sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida. Tabela 26. RH = Umidade relativa
Exemplo 264. Preparação de Cristal simples de Sal de ácido Bis- metanossulfônico (Bis-Mesilato) de 5-Fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4- (7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00666] Cristais simples de sal de ácido bis-metanossulfônico de 5- fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo- hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida foram obtidos por difusão lenta de EtOAc a uma solução de iPrOH e confirmados por análise de estrutura de raio X. Um sumário da análise de estrutural de raio X de cristal simples é mostrado abaixo na Tabela 27. Representações de ORTEP do sal de ácido bis-metanossulfônico com 50% de probabilidade de elipsoides térmicos exibidos são mostradas na figuras 20-21. Tabela 27. Exemplo 265. Preparação de Cristal simples de sal (Sesquifumarato) de ácido sesquifumárico de 5-Fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00667] Cristais simples do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro- N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)- 2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida foram obtidos por baixa evaporação em solução de MeCN. Análise de raio X do cristal simples mostrou uma relação de 1:1,5 entre 5-fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida e ácido fumárico.
[00668] Um sumário da análise de estrutura de raio X de cristal simples é mostrado abaixo na Tabela 28. Uma representação de ORTEP do sal de ácido sesquifumárico de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2- ((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida com 50% de elipsoides térmicos é mostrada na figura 22. Tabela 28.
Exemplo 266. Preparação de Cristal simples de sal de ácido Bis- clorídrico de 5-Fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00669] Uma solução de HCl a 5N em iPrOH (2 mL) foi adicionada à base livre de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (140 mg) em temperatura ambiente. Após ser agitado em temperatura ambiente durante 30 min, o solvente foi removido para fornecer o sal de ácido bis-clorídrico de 5-fluoro-N,N-di- isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida. Uma porção deste material amorfo (~25 mg) foi apreendida e MeCN (0,5 mL) foi adicionado em temperatura ambiente. A suspensão resultante foi suavemente aquecida durante 2 minutos até a dissolução completa do material. A solução foi em seguida lentamente resfriada para temperatura ambiente durante a noite sob repouso para fornecer sal de ácido bis-clorídrico 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7-diazaespiro[3,5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida cristalino. Ponto de fusão: ~210-215oC.
Exemplo 267. Análise de Sal cristalino de 5-Fluoro-N,N-di-isopropil- 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida
[00670] Contraíons farmaceuticamente aceitáveis foram selecionados com base em valores pKa conhecidos e experimentos de cristalização de sal foram realizados de acordo com um procedimento geral de adição direta de aproximadamente um ou dois equivalentes molar do contraíon à base livre de 5-fluoro-N,N-di-isopropil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(metilsulfonamido)ciclo-hexil)metil)-2,7- diazaespiro[3,5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)óxi)benzamida (Exemplo 6A) em solução ou suspensão.
[00671] Os materiais sólidos foram colhidos quando precipitação de quantidade suficiente ocorreu. Etapas adicionais tais como resfriamento, adição antissolvente, e/ou suspensão foram realizadas para induzir à critalização ou aumentar as produções, se necessário. Os produtos foram qualitativamente avaliados quanto à cristalinidade por microscopia de luz polarizada (PLM) e/ou XRPD. Secagem a vácuo foi usada para identificar as formas de cristal não solvatadas dos sais potenciais. Espectroscopia de 1H-RMN de solução foi usada para confirmar a composição e estequiometria, que a degradação química não ocorreu, e para avaliar a quantidade de solvente presente. Para os sais de ácido clorídrico, espectroscopia de raio X de energia dispersa (EDX) foi usada para confirmar a estequiometria. A Tabela 29 mostra uma lista de sais farmaceuticamente aceitáveis identificados nos experimentos de análise. "n/a" refere-se aos dados não disponíveis (por exemplo, o sal foi incapaz de ser isolado em forma cristalina; o sal deliquescido a 75% de umidade relativa; o sal convertido em outra forma; ou um padrão de XRPD desordenado foi observado). Tabela 29. ENSAIOS BIOLÓGICOS
Ensaio 1 (ensaio de ligação)
[00672] Potências de compostos inibidores contra ligação de menina/LLM foram avaliadas por ensaio AlphaLISA usando (1) menina do tipo selvagem biotinilada ou (2) menina mutada (descrita em Huang et al, 2012, Nature, 482, 542-546) e proteína de fusão de LLM-AF9 transportando um epítopo de FLAG em seu terminal C. As proteína de menina foram expressas em E.coli e covalentemente modificadas com biotina usando EZ-Link™ Sulfo-NHS-Biotin (ThermoFisher Cat.No. 21217) de acordo com o protocolo dos fabricantes. LLM1-1,396 fundido a AF91- 92 e o peptídeo de FLAG de terminal C foi expresso em células HEK293 e usado como um lisado limpo a 21.000 x g durante 10 min.
[00673] Os compostos (2 µL de soluções em DMSO) foram distribuídos em placas de meia área de 96 cavidades brancas (Corning Cat.No.3693) e incubados durante 30 min em temperatura ambiente com menina biotinilada a 5 nM e quantidade apropriada de lisado de LLM-AF9-FLAG em 40 µL de tampão de Tris-HCl a 50 mM, pH 7,4 contendo 5%(v/v) de DMSO, NaCl a 50 mM, 0,01%(p/v) de albumina de soro bovino (BSA) e DTT a 1 mM. A esta mistura de incubação, 40 µL de contas aceptoras anti-FLAG AlphaLISA (PerkinElmer Cat.No.AL112C) e doadoras de estreptavidina (PerkinElmer Cat.No.6760002) (10 µg/mL cada) foram adicionados e a incubação continuou em temperatura ambiente durante 60 min. Sinal Alfa (ensaio homogêneo de proximidade luminescente ampliada) foi medido em uma leitora de placa de múltiplos rótulos Envision no término da incubação. Todas as etapas foram conduzidas sob luz fluorescente turva.
[00674] Os valores de porcentagem de inibição foram calculados com base em controles não inibidos (DMSO) e totalmente inibidos (MI- 2-2 a 10 µM, EMD Millipore Cat.No.444825). Estes valores de porcentagem de inibição foram regredidos contra as concentrações composto no ensaio usando ajuste de curva não linear logit de quatro parâmetros (XLFit, IDBS). Os valores IC50 foram derivados do ajuste de curva como pontos de inflexão nas curvas de resposta à dose e são estabelecidos na Tabela 30 abaixo.
Ensaio 2: (Ensaio de Proliferação Celular)
[00675] As potências de compostos inibidores contra proliferação celular foram avaliadas contra a linhagem de célula de leucemia monocítica aguda humana MV-4-11 (ATCC® CRL-9591™) com base em quantificação de ATP. Células MV-4-11 ou ou células HL-60 de controle de toxicidade (ATCC® CCL-240™) foram incubadas em placas de cultura de tecido de 96 cavidades (1,67 x 104 células em 200 µL de meio de cultura contendo FBS a 10% por cavidade) com ou sem composto teste durante 72 horas a 37°C, CO2a 5%.
[00676] Após incubação, cada cavidade foi misturada por pipetagem e 95 µL de cada cavidade foram transferidos para uma cavidade em placas OptiPlate® pretas de 96 cavidades (PerkinElmer). Um volume igual de reagente de Ensaio de Viabilidade Celular Luminescente CellTiter-Glo® (Promega) foi adicionado a cada cavidade, seguido por mistura durante 5 min em um agitador de placa orbital. A luminescência foi medida em uma leitora Wallac EnVision 2104 Multilabel (PerkinElmer) para quantificar ATP. A porcentagem de inibição de proliferação celular por compostos teste foi calculada com base em crescimento de célula não inibida (DMSO) versus células tratadas com um potente inibidor de menina em uma concentração produzindo pelo menos 100x LD50. Os valores EC50 foram calculados com base em curvas de resposta à dose de porcentagem de inibição versus concentração de composto e são estabelecidos na Tabela 30 abaixo.
[00677] Os dados para os Ensaios 1 e 2 são fornecidos abaixo na Tabela 27 ("n/a" refere-se aos dados não disponíveis; "+++" significa <100 nM; "++"significa >100 nM e <1000 nM; e "+"significa >1000 nM). Tabela 30. Dados Biológicos
[00678] Enquanto foram descritas diversas modalidades desta invenção, é evidente que os exemplos básicos podem ser alterados para fornecer outras modalidades que utilizam os compostos e métodos desta invenção. Portanto, será apreciado que o escopo desta invenção deve ser definido pelas reivindicações anexas, em vez de pelas modalidades que foram representadas por meio de Exemplo.
[00679] Os teores de todas as referências (incluindo referências de literaturas, patentes emitidas, pedidos de patente publicados, e pedidos de patente copendentes) citados por todo este pedido são pelo pesente expressamente incorporados aqui em suas totalidades por referência. A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos usados aqui estão de acordo com o significado comumente conhecido por alguém versado na técnica.

Claims (17)

1. Forma cristalina do composto N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro[3.5]nonan -2- il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida, caracterizado pelo fato de que apresenta pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-teta, selecionados dentre cerca de 9,7°, cerca de 11,6°, cerca de 12,6°, cerca de 16,6°, cerca de 17,5°, cerca de 18,8°, cerca de 19,2°, cerca de 19,8°, cerca de 21,0° e cerca de 25,3°.
2. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro [3.5]nonan-2- il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na Figura 1.
3. Forma cristalina de Sal de ácido sesquifumárico de N- etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7- diazaspiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida, caracterizado pelo fato de que apresenta pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-teta, selecionado dentre cerca de 5,8°, cerca de 8,7°, cerca de 13,2°, cerca de 16,0°, cerca de 17,4°, cerca de 17,6°, cerca de 19,1°, cerca de 20,3°, cerca de 21,8°, cerca de 23,0°, cerca de 23,3°, cerca de 24,9°, e cerca de 26,0 o .
4. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o sal de ácido sesquifumárico de N-etil- 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro o [3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na Figura 2.
5. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o sal de ácido sesquifumárico de N-etil- 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro [3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-teta, selecionado dentre cerca de 5,8°, cerca de 8,7°, cerca de 13,2°, cerca de 16,0°, cerca de 17,4°, cerca de 17,6°, cerca de 19,1°, cerca de 20,3°, cerca de 21,8 ° e cerca de 23,0°.
6. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o sal de ácido sesquifumárico de N-etil- 2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro [3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida tem pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2-teta, selecionado dentre cerca de 5,8°, cerca de 8,7°, cerca de 13,2°, cerca de 16,0°, cerca de 17,4°, cerca de 17,6 ° e cerca de 19,1°.
7. Forma cristalina de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro[3.5]nonan- Sal do ácido bis-metanossulfônico de 2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tendo pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- teta, selecionado dentre cerca de 5,6° , cerca de 11,0°, cerca de 13,3°, cerca de 16,7°, cerca de 20,1°, cerca de 20,9°, cerca de 22,1°, cerca de 23,6°, cerca de 24,9 ° e cerca de 29,6°.
8. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o sal de ácido bis-metanossulfônico de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7- diazaspiro [3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na Figura 3.
9. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro O sal do ácido bis- metanossulfônico de [3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um pico de XRPD, em termos de 2-teta, selecionado dentre cerca de 5,6 o e cerca de 16,7° .
10. Forma cristalina de N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro[3.5]nonan- Sal de ácido bis-clorídrico de 2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N-isopropilbenzamida tendo pelo menos um, pelo menos dois, pelo menos três, ou pelo menos quatro picos de XRPD, em termos de 2- teta, selecionado dentre cerca de 4,7°, cerca de 10,7°, cerca de 13,4°, cerca de 15,9°, cerca de 17,0°, cerca de 19,5°, cerca de 20,1°, cerca de 23,8°, cerca de 25,8 ° e cerca de 28,1°.
11. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que o N-etil-2-((4-(7-(((1r,4r)-4- (etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2,7-diazaspiro O sal de ácido bis- clorídrico de [3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem um perfil de XRPD substancialmente como mostrado na Figura 4.
12. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que a forma cristalina do N-etil-2-((4-(7- (((1r,4r)-4-(etilsulfonamido)ciclohexil)metil)-2 O sal de ácido bis- clorídrico de ,7-diazaspiro[3.5]nonan-2-il)pirimidin-5-il)oxi)-5-fluoro-N- isopropilbenzamida tem pelo menos um ou dois picos de XRPD, em termos de 2-teta, selecionado entre cerca de 4,7°, cerca de 17,0 ° e cerca de 19,5°.
13. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: A, B, D, e E são cada qual independentemente selecionados de -C(RA1)(RA2)-, -C(RA1)(RA2)-C(RA1)(RA2)-, -C(RA1)(RA2)-O-, - C(RA1)(RA2)-NRA3-, -C(=O)-, -C(RA1)(RA2)-C(=O)-, e -N=C(NH2)- em que não mais do que um de A, B, D, e E é -C(RA1)(RA2)-O-, - C(RA1)(RA2)-NRA3-, -C(RA1)(RA2)-C(=O)-, -C(=O)-, ou -N=C(NH2)-; U é N ou CRU, em que RUé H, halo, CN, OH, C1-4 alquila, C1 4 alcóxi, amino, C1-4 alquil amino, ou C2-8 dialquilamino; W é N ou CRW, em que RWé H, halo, CN, OH, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, amino, C1-4 alquil amino, ou C2-8 dialquilamino; X é N ou CRX, em que RXé H, halo, CN, OH, C1-4 alquila, C1 4 alcóxi, amino, C1-4 alquil amino, ou C2-8 dialquilamino, em que quando X for N, o átomo de L que é diretamente ligado com X será diferente de N, O, ou S; L é selecionado de -C1-6 alquileno- e -(C1-4 alquileno)a-Q- (C1-4 alquileno)b-, em que o grupo C1-6 alquileno e qualquer grupo C1-4 alquileno do grupo -(C1-4 alquileno)a-Q-(C1-4 alquileno)b-é opcionalmente substituído com 1, 2, ou 3 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, OH, C1-3 alquila, C1-3 alcóxi, C1-3 haloalquila, C1-3 haloalcóxi, amino, C1-3 alquilamino, e di(C1-3 alquil)amino; Q é -O-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)-, -C(=O)NRq1-, - C(=O)O-, -OC(=O)NRq1-, -NRq1-, -NRq1C(=O)O-, -NRq1C(=O)NRq1-, -S(=O)2NRq1-, -C(=NRq2)-, ou -C(=NRq2)-NRq1-, em que cada Rq1é independentemente selecionado de H ou C1-6 alquila, e em que cada Rq2é independentemente selecionado de H, C1-6 alquila, e CN; Cy é uma ligação de C6-14 arila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 16 membros, ou grupo heterocicloalquila de 4 a 18 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy; cada RCyé independentemente selecionado de halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, heterociloalquila de 4 a 10 membros, CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, NRc1C(O)NRc1Rd1, NRc1S(O)Rb1, NRc1S(O)2Rb1, NRc1S(O)2NRc1Rd1, S(O)Rb1, S(O)NRc1Rd1, S(O)2Rb1, e S(O)2NRc1Rd1, em que a referida C1 6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, e heterocicloalquila de 4 a 10 membros são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de CN, NO2, ORa1, SRa1, C(O)Rb1, C(O)NRc1Rd1, C(O)ORa1, OC(O)Rb1, OC(O)NRc1Rd1, C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1C(=NRe1)NRc1Rd1, NRc1Rd1, NRc1C(O)Rb1, NRc1C(O)ORa1, NRc1C(O)NRc1Rd1, NRc1S(O)Rb1, NRc1S(O)2Rb1, NRc1S(O)2NRc1Rd1, S(O)Rb1, S(O)NRc1Rd1, S(O)2Rb1, e S(O)2NRc1Rd1; R1é H, Cy1, halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, CN, NO2, ORa2, SRa2, C(O)Rb2, C(O)NRc2Rd2, C(O)ORa2, OC(O)Rb2, OC(O)NRc2Rd2, C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2Rd2, NRc2C(O)Rb2, NRc2C(O)ORa2, NRc2C(O)NRc2Rd2, NRc2S(O)Rb2, NRc2S(O)2Rb2, NRc2S(O)2NRc2Rd2, S(O)Rb2, S(O)NRc2Rd2, S(O)2Rb2 e S(O)2NRc2Rd2, em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, e C2-6 alquinila são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, NO2, ORa2, SRa2, C(O)Rb2, C(O)NRc2Rd2, C(O)ORa2, OC(O)Rb2, OC(O)NRc2Rd2, C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2C(=NRe2)NRc2Rd2, NRc2Rd2, NRc2C(O)Rb2, NRc2C(O)ORa2, NRc2C(O)NRc2Rd2, NRc2S(O)Rb2, NRc2S(O)2Rb2, NRc2S(O)2NRc2Rd2, S(O)Rb2, S(O)NRc2Rd2, S(O)2Rb2, e S(O)2NRc2Rd2; Y é O, S, CRY1RY2 ou NRY3, em que RY1, RY2, e RY3são cada qual independentemente selecionados de H e C1-4 alquila; Z é Cy2, halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, CN, NO2, ORa3, SRa3, C(O)Rb3, C(O)NRc3Rd3, C(O)ORa3, OC(O)Rb3, OC(O)NRc3Rd3, C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3Rd3, NRc3C(O)Rb3, NRc3C(O)ORa3, NRc3C(O)NRc3Rd3, NRc3S(O)Rb3, NRc3S(O)2Rb3, NRc3S(O)2NRc3Rd3, S(O)Rb3, S(O)NRc3Rd3, S(O)2Rb3, S(O)2NRc3Rd3, e P(O)Rc3Rd3 em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, e C2-6 alquinila são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de Cy2, halo, CN, NO2, CN, NO2, ORa3, SRa3, C(O)Rb3, C(O)NRc3Rd3, C(O)ORa3, OC(O)Rb3, OC(O)NRc3Rd3, C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3C(=NRe3)NRc3Rd3, NRc3Rd3, NRc3C(O)Rb3, NRc3C(O)ORa3, NRc3C(O)NRc3Rd3, NRc3S(O)Rb3, NRc3S(O)2Rb3, NRc3S(O)2NRc3Rd3, S(O)Rb3, S(O)NRc3Rd3, S(O)2Rb3, e S(O)2NRc3Rd3; cada R2 e R3é independentemente selecionado de H, halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, CN, NO2, ORa4, SRa4, OC(O)NRc4Rd4, NRc4C(O)Rb4, NRc4S(O)2Rb4, NRc4S(O)2NRc4Rd4, S(O)Rb4, S(O)NRc4Rd4, S(O)2Rb4, e S(O)2NRc4Rd4, em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, e C2-6 alquinila são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de halo, CN, NO2, ORa4, SRa4, C(O)Rb4, C(O)NRc4Rd4, C(O)ORa4, OC(O)Rb4, C(=NRe4)NRc4Rd4, NRc4C(=NRe4)NRc4Rd4, NRc4Rd4, NRc4C(O)ORa4, NRc4C(O)NRc4Rd4, NRc4S(O)Rb4, NRc4S(O)2NRc4Rd4, S(O)Rb4, S(O)NRc4Rd4, S(O)2Rb4, e S(O)2NRc4Rd4; cada RA1é independentemente selecionado de H, halo, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalquila, C1-4 haloalcóxi, amino, C1-4alquilamino, C2-8 dialquilamino, CN, NO2, e OH; cada RA2é independentemente selecionado de H, halo, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalquila, C1-4 haloalcóxi, amino, C1-4alquilamino, C2-8 dialquilamino, CN, NO2, e OH; cada RA3é independentemente selecionado de H, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalquila, C(O)Rz, e C(O)ORz, em que a referida C1-4 alquila é opcionalmente substituída por fenila, C1-4 alcóxi, C1-4 haloalcóxi, CN, NO2, ou OH; Rzé H, C1-4 alquila, ou fenila; cada Cy1é independentemente selecionado de C6-14 arila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 16 membros, e heterocicloalquila de 4 a 18 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy1; cada Cy2é independentemente selecionado de C6-14 arila, C3-18 cicloalquila, heteroarila de 5 a 16 membros, e heterocicloalquila de 4 a 18 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído com 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de RCy2; cada RCy1 e RCy2é independentemente selecionado de halo, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C1-4 cianoalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, fenil, C3-7 cicloalquila, heteroarila de 5 a 6 membros, e heterocicloalquila de 4 a 7 membros, CN, NO2, ORa5, SRa5, C(O)Rb5, C(O)NRc5Rd5, C(O)ORa5, OC(O)Rb5, OC(O)NRc5Rd5, C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5Rd5, NRc5C(O)Rb5, NRc5C(O)ORa5, NRc5C(O)NRc5Rd5, NRc5S(O)Rb5, NRc5S(O)2Rb5, NRc5S(O)2NRc5Rd5, S(O)Rb5, S(O)NRc5Rd5, S(O)2Rb5, e S(O)2NRc5Rd5, em que a referida C1 6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, fenil, C3-7 cicloalquila, heteroarila de 5 a 6 membros, e heterocicloalquila de 4 a 7 membros são cada qual opcionalmente substituída por 1, 2, 3, ou 4 substituintes independentemente selecionados de CN, NO2, ORa5, SRa5, C(O)Rb5, C(O)NRc5Rd5, C(O)ORa5, OC(O)Rb5, OC(O)NRc5Rd5, C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5C(=NRe5)NRc5Rd5, NRc5Rd5, NRc5C(O)Rb5, NRc5C(O)ORa5, NRc5C(O)NRc5Rd5, NRc5S(O)Rb5, NRc5S(O)2Rb5, NRc5S(O)2NRc5Rd5, S(O)Rb5, S(O)NRc5Rd5, S(O)2Rb5, e S(O)2NRc5Rd5; cada Ra1 Rb1 Rc1 Rd1 Ra2 Rb2 Rc2 Rd2 Ra3 Rb3 Rc3 Rd3 Ra4 Rb4, Rc4, Rd4, Ra5, Rb5, Rc5, e Rd5é independentemente selecionado de H, C1-6 alquila, C1-4 haloalquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, heterociloalquila de 4 a 10 membros, C6-10 aril-C1-6 alquila, C3-10 cicloalquil-C1-6 alquila, (heteroarila de 5 a 10 membros)-C1-6 alquila, e (heterocicloalquila de 4 a 10 membros)-C1- 6 alquila, em que a referida C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C6-10 arila, C3-10 cicloalquila, heteroarila de 5 a 10 membros, heterociloalquila de 4 a 10 membros, C6-10 aril-C1-6 alquila, C3-10 cicloalquil-C1-6 alquila, (heteroarila de 5 a 10 membros)-C1-6 alquila, e (heterocicloalquila de 4 a 10 membros)-C1-6 alquil são cada qual opcionalmente substituído com 1, 2, 3, 4, ou 5 substituintes independentemente selecionados de Rg; cada Re1, Re2, Re3, Re4, e Re5é independentemente selecionado de H, C1-4 alquila, e CN; cada Rgé independentemente selecionado do grupo que consiste em OH, NO2, CN, halo, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-4 haloalquila, C1-6 alcóxi, C1-6 haloalcóxi, ciano-C1-3 alquila, HO-C1-3 alquila, amino, C1-6 alquilamino, di(C1-6 alquil)amino, tiol, C1-6 alquiltio, C1 6 alquilsulfinila, C1-6 alquilsulfonila, carbóxi, aminocarbonila, C1-6 alquilcarbonila, e C1-6 alcoxicarbonila; LVG é um grupo de saída; Fg é um grupo funcional; n é 0 ou 1; m é 0 ou 1; p é 0, 1, 2, ou 3; q é 0, 1, ou 2; a é 0 ou 1; e b é 0 ou 1, em que qualquer grupo cicloalquila ou heterocicloalquila é opcionalmente também substituído por 1 ou 2 grupos oxo.
14. Composto de acordo com a reivindicação 13, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre os seguintes: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
15. Composto de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que LVG é um halogênio.
16. Composto de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
17. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
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