BG60530B2

BG60530B2 - Дехидрохолекалцифероли

Info

Publication number: BG60530B2
Application number: BG098544A
Authority: BG
Inventors: Enrico Baggiolini; Bernard Hennessy; Shian-Jan Shiuey; Gary Truitt; Milan Uskokovic
Original assignee: F. Hoffmann - La Roche Ag
Priority date: 1988-01-20
Filing date: 1994-02-24
Publication date: 1995-07-28
Also published as: JPH0764806B2; NO890239D0; DE58901056D1; YU11789A; NZ227641A; DK169945B1; HU201007B; FI890283A7; HUT49317A; AU622139B2; PH25605A; DK19789D0; DK19789A; NO175429B; KR960009119B1; FI90764B; FI90764C; AU2864489A; ZA8923B; IE890157L

Abstract

Съединенията се използват като средство за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания и като средство за лечение на неопластични заболявания. Те имат формула в която r означава водород или хидроксилна група и а означава -с=с-, -сн=снс е конфигурация или -сн2-сн2-. 7 претенции

Description

(54) ДЕХИДРОХОЛЕКАДЦИФЕРОЛИ

Изобретението се отнася до съединения с формула

където R означава водород или хидроксилна група и А означава -С = С-, -СН=СН- с Е-конфигурация или -СН₂-СН₂-, фармацевтичен препарат, съдържащ едно или повече съединения с формула I, и използването на тези съединения за получаване на такива препарати за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания като псориазис и за лечение на неопластични заболявания като левкемия.

Изобретението се отнася и до метод за получаване на лекарствени средства, при който активният компонент, именно едно или повече съединения с формула I, заедно с фармацевтично приемлив носител и други помощни вещества се привежда в приемлива за терапевтични цели форма, като се получава лекарствено средство за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания и на неопластични заболявания, представляващо комбинация от препарат, съдържащ едно или повече съединения с формула I, и информацията, която стои в пряка връзка с лечението на споменатото заболяване.

Примери за С -алкилни групи са метилна, стилна, пропилна, изопропилна,бутилна и трет.бутилна. Примери за арил С, ₄ алкилна група са бензилна, фенетилна и фенилпропилна. Примери за арилни групи са фенилна и р-толилна. Халоген означава бром, хлор, флуор или йод.

Следващите съединения от А до F попадат под формула I:

А:1,25-дихидрокси-16-дехидрохолекалциферол;

В: 25-хидрокси- 16-дехидрохолекалциферол;

С: 1,25-дихидрокси-16,23Е-бисдехидрохол е кал циферол;

D: 25-хидрокси-16,23 Е-бисдехидрохолекал циферол;

Е: 1,25-дихидрокси-16-дихидро-23 -дидехидрохолекалциферол и

F: 25-хидрокси-16-дехидро-23-дидехидрохолекалциферол, при което 1,25-дихидроксилираните съединения А, С и Е са предпочитани.

Съединенията с формула I, т.е. тези с формула 1а и lb, могат да се получат както е описано в схеми 1, 2 и 3, като съответно съединение с формула I, което вместо две или три хидроксилни групи съдържа две или три защитени хидроксилни групи с формула

-OSi (R,, R₂, Rj) където R, u R₃ означават C_{t 4}-алкилов остатък и Rj означава С_{( 4}-алкилов, арилов или арил-С, ₄-алкилов остатък, взаимодейства с реагент подходящ за отцепване на защитните групи.

СХЕМА 1

където A, R_r R₂ u R₃ имат горните значения

СХЕМА 2

V

VII

където R_|( R₂ u R₃ имат горните значения

СХЕМА 3

където R_p R₂ u R₃ имат горните значения, X е хлор, бром или йод и Ts е тозилов остатък.

Междинните продукти е формула II. например съединения е формула Па, ПЬ и Пс са нови и са обект на изобретението.

В схема 1 съединенията с формула II се превръщат в съединения с формула IVa или IVb чрез взаимодействие със съответното съединение с формула

з където Ph означава фенилов остатък, R₄означава водород или -OOSi(R_p R₂ и R₃) u R_pR₂ u R₃ имат горните значения.

Взаимодействието се извършва при температура от -60° до 90°С, за предпочитане 75°С в полярен, апротен, органичен разтворител, например сух етер или за предпочитане сух тетрахидрофуран (ТХФ), в присъствие на база като алкиллитий, напр. бутиллитий.

Защитните групи в съединението с формула IVa или IVb могат да се отстраняват с флуорна сол, напр.тетрабутиламониев флуорид в полярен, органичен разтворител, напр.етер или за предпочитане тетрахидрофуран. Получава се съответното съединение е формула 1а или lb.

В схема 2 съединението с формула V се окислява до съединение с формула VI. За това се използва напр. 2,2'-бипиридиниев хлорохромат или за предпочитане пиридиниев хлорохромат в апротен, органичен разтворител като метиленхлорид.

Съединението с формула VI се превръща в съединение с формула ПЬ, напр. чрез взаимодействие с триалкилсилилимидазол, като триметилсилилимидазол, в апротен, органичен разтворител като ТХФ или за предпочитане метиленхлорид.

Съединенията с формула V могат също така да се хидрират до съединения с формула VII, напр. чрез взаимодействие с редукционно средство като литиевоалуминиев хидрид, за предпочитане в присъствие на алкалнометални оксиди, в апротен, органичен разтворител, напр. етер или за предпочитане ТХФ, при температура на обратен хладник (около 68°С за ТХФ), Взаимодействието продължава около 1020 ч.

Полученото съединение с формула VII може да сс окисли до съединение с формула VIII, както е описано за окисляването на съединения с формула V до съединения с формула VI.

Съединенията с формула VIII могат да се превърнат в съединения с формула Па чрез взаимодействие с триалкилсилилимидазол, както е описано по-горе за превръщането на съединения с формула VI в съединения с формула ПЬ.

В схема 3 съединение с формула X реагира с магнезий в етер, за предпочитане ТХФ, при температура на кипене на обратен хладник. Полученият Гринярдов разтвор взаимодейства първо с мед (I)-йодид и след това със съединение е формула IX.

Полученото съединение с формула XI реагира с флуорид, напр. тетрабутиламониев флуорид в етер или за предпочитане тетрахидрофуран.

Полученото съединение с формула XII може да се окисли, както е описано по-горе за окисляването на съединение с формула V до съединение с формула VI.

Полученото съединение с формула XIII може да се превърне в съединение е формула Пс чрез третиране с триалкилсилилимидазол, както е описано по-горе за превръщането на съединение с формула VI в съединение е формула ПЬ.

За получаване на съединение с формула IX, съединение с формула

(Tetrahedron 40, 1984, 2283) взаимодейства е тозилиращо средство като ртолуолеулфонилхалогенид, напр. хлорид, в органична база, напр. колидин или за предпочитане пиридин. Полученото съединение с формула

напр. метиленхлорид при около -10 до 10С в продължение на 20 до 90 мин. Съединението с формула XIX се превръща в съединение с формула след това сс превръща в съединение с формула IX чрез взаимодействие с триалкилсилилхлорид, напр.триметилсилилхлорид, в присъствие на имидазол и в апротсн, органичен разтворител, напр. ТХФ или метиленхлорид.

За получаване на съединение с формула X, съединение с формула х-сн₂сн₂сосн₃ XVI се превръща в съединение с формула

Х-СН₂СН₂С(СН₃)₂-ОН XVII където X има горните значения, чрез взаимодействие с метил-Гринярдов реагент като метилмагнезиев бромид в етер. Съединението с формула XVII може да се превърне в съединение с формула X чрез взаимодействие с триалкилсилилхлорид, както е описано за превръщането на съединение с формула XV в съединение с формула IX.

За получаване на съединение с формула V, съединение с формула XV взаимодейства с цианидобразуващо средство, напр. натриев цианид, в апротен, органичен разтворител, например диметилсулфоксид (ДМСО), при температура между 80 и 100°С, в продължение на 1-5 ч. Получава се съединение с форн

чрез взаимодействие със смес от трифенилфосфин, тетрабромметан и цинков прах, в апротен, органичен разтворител, напр. метиленхлорид за около 1 до 30 ч.

Съединението с формула XX може да се превърне в съединение с формула

чрез взаимодействие със силна база, например бутиллитий, в полярен, апротен, органичен разтворител, напр. ТХФ, при около -80 до -70°С за около 1 до 3 ч. Съединението с формула XXI се превръща в съединението с формула

Това съединение се превръща в съединение с формула

чрез взаимодействието с триметилсилилимидазол в апротен, органичен разтворител, напр. ТХФ или метиленхлорид. Това съединение се превръща в съединение с формула чрез взаимодействие с редуциращо средство, напр. диизобутилалуминиев хидрид, последвано от хидролиза, напр. с неорганична киселина като солна киселина. Редукцията се провежда в апротен, органичен разтворител,

чрез взаимодействие със силна база, напр. бутиллитий и след това с ацетон.

Взаимодействието сс извършва в апротен, органичен разтворител, напр. ТХФ, при коло 80° до -60°С. Съединението с формула XX111 се превръща в съединение с формула V (в схема 2) чрез взаимодействие с флуорид, напр,- 5 тетрабутиламониев флуорид, в органичен разтворител, напр. етер или ТХФ.

Съединенията с формула I стимулират диференцирането и намаляват пролиферацията на човешки кератоцити. Поради това мо- 10 гат да се използват като средство за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания като псориазис, карцинома на базалните клетки, смущения в кератинизирането и кератоза. Съединенията с формула 1 могат да се използ- 15 ват също като средство за лечение на неопластични заболявания като левкемия.

Активността на съединенията с формула 1 като средство за лечение на хиперпролиферативни заболявания може да се докаже по познати методи, напр. както с описано в “The Society for Investigative Dermatolgv” 1986, 709714. Ефектите на съединенията от А до F върху морфологичното диференциране на култивирани човешки кератоцити, сравнени с ефекта на 1,25-дихидроксихолекалциферол (съединение X) са дадени в таблиците 1 до 4 като брой (хЮЪ култивирани човешки кератиноцити. Съединение, което индуцира диференцирането на базалните клетки до плоскоепителни клетки и кератинизирани плоскоепителни клетки е подходящо за лечение на кожни болести, които се характеризират със смущения в кератинизацията, като псориазис.

Таблица 1

Съеди- нение	Доза (М)	Брой клетки (х10⁴):
Общ брой	Базални клетки	Плоскоепителни клетки	Кератинизирали плоско-епителни клетки
Конт-
рола		133 ±5	118 ±4	15 ±1	18 ± 2
X	Ю ю	122 ± 4	103 ± 2	19+2	23 ± 1
	10 ⁸	112 ± 6	89 ± 2	23 ± 4	30 ±3
	10⁶	95 ± 7	64 ±6	31 ± 1	34 ± 2
А	10 ¹⁰	132 ± 8	115 ± 7	17 ± 1	27 ± 2
	10 ⁸	128 ±10	106 ± 8	22+2	33 ± 2
	10 ⁶	10 1± 7	71 ±5	30+2	39 ± 2
В	10 ю	133 ± 6	115 ±5	18 + 1	25 ± 1
	10 ⁸	13 1± 4	109 ± 2	22 ± 2	29 ± 2
	10 ⁶	104 ± 4	74 ±3	30 ± 1	33 ± 1

Таблица 2

Съеди-	Доза
пение	(М)	Общ брой	Брой клетки (х10⁴): Базални Плоско клетки епителни клетки	Кератинизирани плоско-епителни клетки

Кон-
рола		123 7	105	± 6	18	+	1	74 ± 7
X	10 ¹⁰	116 ± 9	95	± 8	21	+	1	91 ± 4
	ю⁸	101 ± 10	75	± 8	26	+	2	122 ±11
	10 ⁶	83 ± 5	57	± 4	26	+	1	146 ± 16
с	10 1°	117 + 4	92	± 2	25	+	2	103 ± 6
	10⁸	108 ± 3	80	± 2	28	+	1	128 ± 3
	10⁶	80 ± 7	54	± 6	26	+	1	153 ± 1
D	ю¹⁰	113 ± 7	93	± 6	20	+	1	104 ± 10
	ю·⁸	111 ± 7	86	+ 3	25	+	2	128 ±5
	10 ⁶	94 ±3	68	+ 1	26	+	2	144 ± 7

Таблица 3
Съединение	Доза (М) брой	Общ клетки	Базални клетки	Брой клетки (х10⁴) Плоскоепителни	Кератинизирани плоскоепителни клетки

Конт- рола	108 10	93	± 8	15	± 2	88	± 8
X	10 ¹⁰	106 ± 7	86	± 6	18	+	1	100	± 9
	10 ⁸	84 ± 8	61	± 5	23	+	3	122	± 8
	10 ⁶	73 ± 7	51	+ 5	22	+	2	142	± 11
Е	10 ¹⁰	86 ± 4	63	± 2	23	+	2	114	± 5
	10 ⁸	82 ± 3	53	± 2	29	+	1	141	+ 5
	10 ⁶	78 ± 3	41	± 1	27	+	2	147	+ 4
F	10-ю	103 ± 5	81	± 3	22	+	2	103	± 4
	10 ⁸	97 ± 3	67	± 2	29	+	1	121	± 6
	10 ⁶	84 ± 4	55	± 2	29	+	1	137	± 7

Активността на съединенията е формула I като средство за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания може също да се определи посредством броя на човешки кератоцити, кератинизирали плоскоспитслни клетки и плоскоспитслни карциномни клетъчни линии (SCC-115), които се образуват в присъствие на споменатите съединения.

Резултатите са дадени в таблици 4 и 5. 5

Таблица 4

Лечение	Доза (М)	Брой кератиноцити (х!0‘)	Брой кератинизирали плоскоспитслни клетки (х10⁴
Контрола
(0,1 % ета-
нол)		189,49 ± 22,3	858,28 ± 185,70
Съед. Е	10 ¹²	187,36 ± 15,33	1136,63 ± 383,66
	10 ¹⁰	175,34 ± 10,19	1444,87 ± 312,47
	10⁸	145,79 ± 15,66	2113,62 ± 1049,33
	10 ⁶	41,95 ±7,53	1916,83 ± 887,66

Контрола
(0,1% ета-
нол)		148,73	16,23	2193,7 921,9
Съед. А	10 ¹²	114,91	± 10,95	1662,2 ± 420,1
	10 ¹⁰	130,37	± 24,32	3973,8 ± 126,99
	10⁸	120,67	± 16,87	7235,2 ± 55,5
	10⁶	109,22	± 15,87	8323,5 ± 157,6

Таблица 5
Лечение		Доза	Брой клетъчни линии
		(М)	(SCC-15) (х10⁵)
Контрола			7,35 ± 1,75
Съед. Е	10¹²		6,98 ± 1,68
	10 ¹⁰		5,89 ± 1,58
	10⁸		5,76 ± 1,53
	10⁶		0,40 ± 0,98
Съед. А	10⁶		0,49 ± 0,13

Горните резултати показват, че съединенията с формула 1 индуцират диференцирането на кожни клетки и затова могат да се използват за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания като псориазис.

За доказване на активността на съединенията с формула I като средство за лечение на неопластични заболявания, се установяват антипролиферативният (АР) и диференцирано индуцираният <Dl) ефект на съединенията от А до F , както и броят на човешки промиелоцитни туморни клетки HL-60. В таблица 6 е даден АР ефектът като процентно намалс5 ние на броя на клетките и като концентрация

ID която намалява броя на клетките с 50%. DI-сфектът е даден като размер на процента на диференцираните клетки и като концентрация ED_J0 на съединенията, които осигуря10 ват 50% диференциране на клетките.

Таблица 6

Концентрация ^ED50 (хЮ М)	% намаляване броя на клетките	клетки (х10⁸М)	Диференцирани %	ed₅o (xlO’M
Съединение X
0,01	6		3
0,1	5		11
1	16	2	19	2
10	66		68
100	84		98
Съединение А
0,01	10		3
0,1	33		16
1	84	0,2	92	0,2
10	85		97
100	85		98
Съединение В
0,1	10		5
1	8		4
10	14	35	6	32
100	82		93
1000	95		95
Съединение С
0,01	18		3
0,1	20		19
1	81	0,3	92	0,3
10	85		97
100	86		99
Съединение D
0,1	12		1
1	12		2
10	17	150	17	200
100	46		31
1000	95		97
Съединение Е
0,01	6		9
0,1	59		50

1	80	0,07	96	0,1
10	81		98
Съединение F
0,1	13		4
1	10		12
10	8	70	21	70
100	58		55
1000	95		91

Тези резултати показват, че съединенията с формула I подтискат ин витро пролиферацията на човешки промиелоцитни клетки и при това на показват никаква клетъчна токсичност. По-късно клетките се диференцират до зрял фенотип при същите дози, които подтискат пролиферацията. От тези резултати следва, че тези съединения могат да се използват като средство за лечение на неопластични заболявания, като левкемия.

Съединенията с формула I могат да се дават орално за лечение на неопластични заболявания или за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания при топлокръвни, които се нуждаят от същото лечение, напр. при възрастни в дозировка в областта от 0,110 mg на ден.

За лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания, съединенията с формула I могат да се прилагат също и локално при топлокръвни в дневна доза от около 1 до 1000mg/g форма за локално приложение.

За орално приложение съединенията с формула I могат да се приготвят, напр. като капсули или таблети, заедно с фармацевтичноприемлив носител. Примери за такива носители за капсули са свързващи вещества като трагаканта, гуми или желатин; ексцепиенти като дикалциев фосфат; разпадащи средства като царевично нишесте; хлъзгащи средства като магнезиев стеарат; подсладители като захароза; ароматизиращи вещества като мента. Таблетите могат да се обвиват с шеллак, захар или и двата компонента. Сироп или елексир могат да съдържат подсладител, метил- и пропилпарабени като консервиращо средство, оцветител и ароматично вещество.

Дозираните форми за локално прилагане, съдържащи съединенията с формула I, са мази и кремове, състоящи се от маслени, резорбиращи се, водноразтворими и подобни на емулсии бази, като ланолин и полиетиленгликол. Други дозирани форми за локално приложение са голове, лосиони, прахове и аерозоли. Препаратите за локално приложение могат да се използват за лечение на възпаления на кожата и лигавицата, напр. на устната кухина или на дебелото черво.

Лосиони, т.е.течни препарати като разтвори, например водни или хидроалкохолни препарати, които съдържат субстанцията в прахообразна форма могат да съдържат и суспендиращи или диспергиращи средства като целулозни деривати, напр. етил- или метилцелулоза, желатин или гуми, както и носител като вода, алкохол или глицерол освен действащата съставка. Теловете са полутвърди препарати, които се приготвят от разтвор или суспензия на действащото вещество в носител. Водните или несъдържащите вода носители се обработват с желиращо средство, напр. карбоксиполиметилен и се неутрализират с база, напр. натриев хидроксид или амин като полиетиленкокоамен.

Пример 1

а) ОизсотЗЗД [1(R*), ЗаК*- Ga β, 4а, 7aa) ] За,4,5,6,7,7а-хексахидро-4-хидрокси/?,7а-диметил-ЗН-инден-1 -етанол, 30 ml пиридин и 3,51 g р-толуолеулфонилхлорид се разбъркват 18 ч при 0°С. След прибавяне на лед и разреждане с вода, сместа се екстрахира с метиленхлорид. Органичната фаза се промива с 1N H₂SO₄ и наситен разтвор на NaHCO₃. след това се суши и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел и се елуира с етилацетат-хексан (1:1,5). Получава се 4,61 g (82%) [1(R*), 3aR*-(3a/? ,4а ,7aa )JЗа,4,5,6,7а-хексахидро-4-хидрокси-/1 ,7а-диметил-ЗН-инден-1 -етанол-4-метилбензолсулфонат, [а²¹]_в+31,9° (с 0,53, СНС1₃).

в) Към разтвор от 4,61 g от продукта а) в 22 ml диметилсулфоксид се прибавя 1,10 g натриев цианид и сместа се нагрява 2 часа при 90°С. След охлаждане до стайна температура, разтворителят се отстранява при намалено налягане. Сместа се разрежда с вода и след това се екстрахира е етер. Органичната фаза се промива с наситен разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел като се елуира с метиленхлорид;хексан:етилацетат (86:7:7). Получава се 2,52 g (91%) [KR»), 3aR*-(3a Д 4α , 7аа)] -За, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-4-хидрокси- , 7а-диметил-ЗН-инден-1пропаннитрил, [a²¹ ]_D+29,2° (с 0,65, СНС1₃).

c) Към смес от 6,85 ml диизобутилалуминиев хидрид в хексан и 5,2 ml метиленхлорид се прибавя при -6°С разтвор от 0,430 g от продукт в) в 10 ml метиленхлорид. Сместа се разбърква 55 мин при -6°С. След прибавяне на наситен амониев хлорид сместа се хидролизира с помощта на 3N НСкетер (2:1). Водният слой се екстрахира с етер. Органичните слоеве се промиват с наситен разтвор на натриев хлорид, сушат се и се изпаряват. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:2). Получава се 260 mg (60%) [1 (R*), 3aR»-(3a)3 , 4α , 7aa )]-3a, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-4хидрокси- β, 7а-диметил-ЗН-инден-1 пропанол, [a²² ]_D +43,1° (с 0,32, СНС1₃).

d) Смес от 1,77 g трифенилфосфин, 2,23 g тетрабромметан, 441 mg цинков прах и 23 ml метиленхлорид се разбърква 31 ч при 25°С. Към сместа се прибавя разтвор от 0,430 g от продукта с) в 38 ml метиленхлорид и сместа се разбърква 18 ч. Сместа се разрежда с пентан и неразтворимият продукт се филтрира. Неразтворимата фракция се разтваря с метиленхлорид и разтворът се разрежда още веднъж с пентан. След филтриране, обединените филтрати се изпаряват. Остатъкът се пречиства върху силикагел с 1:4 етилацетат:хексан. Получава се 0,490 g (67%) [1 (R*), 3aR*-(3a β, 4α , lafi )]-1-(4,4-дибром-1-метил-3-бутенил)-3а, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-7а-метилЗН-инден-4-ол, [a²¹ ]_D +14,4° (c 0,55, CHC1₃).

e) Към разтвор от 0,680 g от продукта

d) в 31 ιηΙΤΧΦ при -75°С се прикапва 3,77 ml от 1,6М разтвор на бутиллитий в хексан. Сместа се разбърква 1 ч при -75° и 1 ч при 25°С. След прибавяне на наситен разтвор на натриев хлорид, сместа се разрежда с наситен воден разтвор на NaHCO₃ и се екстрахира с етер. Органичната фаза се промива с наситен разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:4).

Получава се 0,350 g (89%) [HR*), 3aR»-(lметил-3-бутинил)-ЗН-инден-4-ол, [сс²²] _L+30,7” (с 0,42. СНС1₃).

f) Към разтвор от 1,29 g от продукта с) в 80 ml метиленхлорид се прибавя 3,59 g 1(триметилсилил)имидазол. Сместа се разбърква 3 ч. След прибавяне на 40 ml вода и разбъркване в продължение на 20 мин, сместа се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се промива с вода и наситен разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се пречиства върху силикагел с етилацетат:хексан (1:15). Получава се 1,70 g (99%) [1(R»), 3aR»-(3a/3 , 4α , 7aa)]-3a, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-7а-метил-1 -(1-метил-3-бутинил)-4- [(триметилсилил)окси] -ЗН-инден, [a²⁰ ]_в+39,7° (с 0,30, СНС1₃).

g) Към разтвор от продукта f) в 48 ml ТХФ при -75°С се прикапва 1,6М бутиллитий в хексан. След 40 мин разбъркване се прибавя 3,05 ml ацетон и сместа се разбърква 20 мин при -75°С и 75 мин при 25° С. След прибавяне на 40 ml 1:1 смес от 2М КНСО₃ и 1М калиевонатриев тартарат, сместа се разбърква 20 минути и след това се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се промива с наситен разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:5). Получава се 1,62 g (89%) [1(R»), 3aR»-(3a/? , 4α , 7аа ))-6(За, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-7а-метил-4-[(триметилсилил)окси] -ЗН-инден-1-ил)-2-метил-3хептин-1-ол, [a²⁰ ]_D+39,7° (с 0,30, СНС1₃).

h) Към разтвор от 1,62 g от продукта g) в 53 ml тетрахидрофуран се прибавя 15,5 ml 1М тетрабутиламониев флуорид в ТХФ. Сместа се разбърква 50 мин. След разреждане с полуконцентриран NaHCO₃, сместа се изпарява за отстраняване на по-голямата част от разтворителя и се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се промива с полуконцентриран разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:1). Получава се 1,17 g (82%) [1 (R»), 3aR*-(3a/?, 4α , 7аа )]-За, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-1(1,5-диметил-5-хидрокси-3-хексинил) -7а-метил-ЗН-инден-4-ол, т. т. 105-107°С.

i) Към разтвор от 0,720 g от продукта h) в 44 ml метиленхлорид се прибавя 1,59 g натриев ацетат и 3,18 g 2,2'-бипиридиниев хлорохромат. Сместа се разбърква 2 ч. След прибавяне на 1,59 g 2,2'-бипиридинисв хлорхромат, разбъркването продължава 2 ч. След прибавяне на 6 ml 2-пропанол, сместа се разрежда с вода и се екстрахира с етер:етилацетат (1:1). Органичната фаза се промива е вода, IN H₂SO₄, наситен разтвор на NaHCOO₃и наситен разтвор на натриев хлорид. Разтворът се изпарява и остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:1). Получава се 0,560 g (78%) [1 (R*), 3aR*-(3a0 , 7аа )]-3, За, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-1-(5-хидрокси-1,5-диметил-З-хексинил) -7а-метил-4Нинден-4-он, [а^а1 ]_О+35,3 (с 0,36, СНС1₃).

j) Към разтвор от 0,552 g от продукта i) в 70 ml метиленхлорид се прибавя 2,00 g 1(триметилсилил)имидазол. След 17 ч разбъркване и прибавяне на 22 ml вода, сместа се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се промива с вода и наситен разтвор на натриев хлорид, след което се суши и изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:4). Получава се 0,693 g (99%) (1(R*), 3aR*-(3a/? , 7аа )]-3, За, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-1-(1,5-диметил-5[ (триметилсилил) -окси] -3-хексинил) -7а-метил-4Н-инден-4-он, [a²⁰]_D+29,5 (с0,20, СНС1₃).

k) Към разтвор от 2,00 g [3s-(1Z, 3α,5β )][2- [3,5-бис- [ [ (1,1-диметилетил)диметилсилил]окси]-2-метиленциклохексилиден]етил]дифенилфосфиноксид в 45 ml ТХФ при 75°С се прикапва 1,87 ml 1,6М бутиллитий в хексан. След 6 мин разбъркване се прикапва разтвор от 0,693 g от продукта j) в 26 ml ТХФ. След 70 мин разбъркване при -75°С и прибавяне на 1:1 смес от 1М калиевонатриев тартарат и 2М КНСО₃, сместа се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се промива с наситен разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:15). Получава се 1,23 g (87%) (Ια , 3β , 5Ζ, 7Ε)-

1,3 бис [[(1,1 -диметилетил)диметилсилил] окси] -25- [ (триметилсилил) -окси] -9,10-секохолеста-5, 7, 10(19), 16-тетраен-З-ин, [а¹’ ]D+47,1⁰(с 0,21, СНС13).

l) Към разтвор от 0,228 g от продукта к) в 11 ml ТХФ се прибавя 1,92 ml 1М тетрабутиламониев флуорид в ТХФ. Сместа се разбърква 16 ч. След разреждане с вода сместа се екстрахира с етилацетат. Органичната фаза се промива с полунаситен разтвор на натриев хлорид и наситен разтвор на натриев хлорид, су ши се и се изпарява. Остатъкът се пречиства върху силикагел с етилацетат:хексан (3:1). Получава се 0,126 g (96%) 1,25-дихидрокси16-дсхцдро-23-дидехцдрохатекатцифера1, [а²¹ ],+21,5 (с 0,20, МсОН).

Пример 2.

a) Както е описано в пример 1 к), но като се излиза от 0,343 g [5S-(lZ)]-[2-[5[[(1,1 -диметилетил) диметилсилил] окси]-2метиленциклохексилиден] етил] дифенилфосфиноксид и 0,186 g продукт от пример lj) се получава 0,205 g (80%) (3/3, 5Ζ, 7Е)-3-[[(1,1диметилетил) диметилсилил] окси] -25- [ (триметилсилил)-окси]-9,10-секохолеста-5, 7, 10(19), 16-тетраен-23-ин, MS m/e 580 (М+).

b) Чрез обработване на 0,248 g от продукта а), както е описано в пример 11), се получава 0,153 g (91%) 25-хидрокси-16-дехидро-23-дидехидрохалекалциферол, [а²¹ ] _в+99,6° (с 0,25, МеОН).

Пример 3.

a) Към смес от 0,146 g литиевоалуминиев хидрид, 0,211 g натриев метоксид и 6,5 ml ТХФ при 0°С се прикапва разтвор от 0,180 g от продукта lh) в 13 ml ТХФ. Сместа се нагрява 16 ч при 68°С и след това се охлажда до 0°С. След разреждане с 13 ml етер и прибавяне на 0,30 ml вода и 0,26 ml 10%-ен воден натриев хидроксид, сместа се разбърква 1 ч при стайна температура и се филтрира. Твърдият продукт се разбърква с етер и се филтрира. Обединените филтрати се изпаряват и се хроматографират върху силикагел с етилацетат:хексан (1:2) като се получава 0,179 g (99%) [1(R*), КЗЕ), 3ζβ ,4а, 7аа)]-(3а. 4, 5, 6, 7, 7а)-хексахидро-1-(5-хидрокси-1,5диметил-3-хексенил)-7а-метил-1 Н-инден-4ол, [a²¹ ]_D+11,5° (с 0,33, СНС1₃).

b) Към разтвор от 0,120 g от продукта а) в 10 ml метиленхлорид се прибавя 0,500 g пиридиниев дихромат и 25 mg пиридиниев ртолуолеулфонат. Сместа се разбърква 135 мин. След прибавяне на 40 ml етер сместа се разбърква 5 мин и се филтрира. Твърдият продукт се разбърква с етер и се филтрира. Обединените филтрати се промиват с наситен воден CuSO₄, вода, полунаситен воден разтвор на NaHCO₃ и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши и изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с 35 % етилацетат-хексан. Получава се 90 mg (76%) [1 (R*), КЗЕ), (3ζβ , 7аа )-3,

За, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-1-(5-хидрокси-1,5димстил-3-хексснил)-7а-метил-4Н-инден-4-он, [a²⁵ ),+30,6° (с 0,17, CHCip.

c) Чрез обработване на 0,099 g от продукта Ь), както е описано в пример lj), се получава 0,11 lg (89%) (1(R*), КЗЕ), (ЗаЬ, 7аа )]3, За, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-1-(1,5-диметил-

5- [(триметилсилил)окси] -3-хексенил)-7а-метил-4Н-инден~4-он, [а²⁴ ] ₀+26,4° (с 0,22, СНС1₃).

d) Както е описано в пример 1к), като се излиза от 0,265 g [3S-(1Z, За , 5β ))-(2[3,5-бис [ [ (1,1-диметилетил)диметилсилил] окси] -2-метиленциклохексилиден] етил] дифенилфосфиноксид и 0,095 g от продукта с), се получава 0,162 g (83%) (Λβ , За , 5Ζ, 7Ε, 23Ε)1,З-бис [[(1,1 -диметилетил) диметилсилил] окси] -25- [(триметилсилил] окси] -9,10-секохолеста-5, 7, 10 (19), 16, 23-пентаен, MS m/e 712 (М+).

e) Чрез обработване на 0,159 g от продукта d), както е описано в пример 11), се получава 0,077 g (84%) 1,25-дихидрокси-16, 23Е-бисдехидрохолекалциферол, [a²ⁱ ]_D+46,5° (с 0,20, МеОН).

Пример 4.

a) Както е описано в пример 1к), като се излиза от 0,225 g [5S-(lZ)]-[2-[5-[[(l,lдиметилетил) диметилсилил] окси] -2-метиленциклохексилиден] етил] диметилфосфиноксид и 0,110g от продукта Зс), се получава 0,150 g (81%) (3β , 5Ζ, 7Ε, 23Ε)-3-[[(1,1-диметилетил) диметилсилил] окси] -25- [ (триметилсилил) окси]-9,10-секохолеста-5, 7, 10 (19), 16, 23-пентаен, [а²⁴ ]_с+68,3° (е 0,18, СНС1₃).

b) Чрез обработване на 0,144 g от продукта а), както е описано в пример 11), се получава 0,076 g (78%) 25-хидрокси-16, 23Ебисдехидрохолекалциферол, [а²² )₀+62,5 (с 0,20, МеОН).

Пример 5.

а) Към разтвор от 6,25 g 3-брометилпропионат в 28 ml ТХФ при -20°С се прибавя 28,8 ml 2,8М метилмагнезиев бромид в етер. Сместа се разбърква 170 мин при стайна температура. След прибавяне на 15 ml наситен воден разтвор на амониев хлорид и 42 ml IN НС1 органичната фаза се отделя, а водната фаза се екстрахира с етер. Органичният екстракт се промива с наситен разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с 30% ети лацетат-хсксан. Получава се 2,57 g (45%) 4бром-2-мстил-2-бутанол, MS m/e 151 (М+ СН₃).

b) Към разтвор от 2,56 g 4-бром-2-метил-2-бутанол и 4,86 g имидазол в 15 ml Ν,Νдиметилформамид, при 0°С се прибавя 6,48 g хлортриетилсилан. Сместа се разбърква 200 мин при стайна температура. След прибавяне на лед, сместа се разрежда с вода и се екстрахира с пентан. Органичната фаза се промива с вода и наситен разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с пентан. Получава се 4,02 g (93%) (З-бром-1,1-диметилпропокси)триетилсилан, MS m/e 265 (М+ -СН₃).

c) Към разтвор от 0,930 g [1 (R*), 3aR*(3a/?, 4а ,7аа)]-3а, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-4-хидрокси-/?, 7а-диметил-ЗН-инден-1етанол-4-метил-бензосулфонат и 1,10 g имидазол в 73 ml метиленхлорид при 0°С се прибавя 0,580 g хлортриетилсилан. Сместа се разбърква 1,5 ч при стайна температура. След прибавяне на лед, сместа се разрежда с вода и се разбърква 20 мин. Органичният слой се екстрахира с метиленхлорид. Екстрактът се промива с вода, IN H₂SO₄, наситен воден разтвор на NaHCO₃ и наситен разтвор на натриев хлорид. След сушене и изпаряване остатъкът се пречиства върху силикагел с етилацетат:хексан (1:5). Получава се 1,22 g (100%) [1(R*), 3aR*-(3a β, 4а , 7acr )]-3a, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-4- [(триетилсилил)окси] - , 7адиметил-ЗН-инден-1 -етанол-4-метил-бензосулфонат [а²⁰]_с+46,1° (с 0,31, СНС1₃).

d) Към разтвор от 3,08 g (З-бром-1,1диметилпропокси)-триетилсилан в 31 ml ТХФ се прибавя 0,282 g магнезий. Сместа се нагрява 3,5 ч при 68°С. След това смес от 0,686 g мед (1)-йодид се разбърква заедно с гореспоменатия Гринярдов разтвор в продължение на 30 мин при 3°С. Прибавя се разтвор от 1,02 g от продукта с) и сместа се разбърква 40 мин стайна температура. След прибавяне на смес от лед и вода, сместа се екстрахира с етер. Органичната фаза се промива с 1N сярна киселина, наситен воден разтвор на NaH₃CO₃, суши се и се изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с етилацетат:хексан (1:15). Получава се 1,80 g [1 (R*), 3aR*(3ζβ , 4α , 7aa )]-3a, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро1 - [ 1,5-диметил-5- [ (триетилсилил) окси] -хексил] -4- [(триетилсилил)окси] -7а-метил-ЗН15 инден, MS m/c 479 (M+ -Et).

e) Към разтвор от 1,60 g от продукта d) в 5 ml ТХФ се прибавя 2,00 ml 1М тетрабутиламониев флуорид в ТХФ. Сместа се нагрява 50 мин при 68°С. След охлаждане до стайна температура, сместа се разрежда с вода и се екстрахира с метиленхлорид. Органичната фаза се промива с разтвор на натриев хлорид, суши се и се изпарява. Остатъкът се пречиства върху силикагел с етилацетат:хексан (1:1). Получава се 0,420 g (79%) [1 (R*), 3aR*-(3a/l, 4аа , 7аа ) j-За, 4, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-4хидрокси-а,а ,-ε, 7а-тетраметил-1Н-инден-1пентанол, [а²¹ ] _D+12,0° (с 0,25, СНС1₃).

f) Към разтвор от 0,210 g от продукта е) в 18 ml метиленхлорид се прибавя 0,870 g пиридиниев дихромат и 44 mg пиридиниев ртолуолсулфонат. Сместа се разбърква 175 мин. След прибавяне на 50 ml етер, сместа се разбърква 5 мин и се филтрира. Твърдият продукт се промива с наситен воден разтвор на CuSO₄, вода, полунаситен воден разтвор на NaHCO₃ и наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши и изпарява. Остатъкът се хроматографира върху силикагел с 35% етилацетат-хексан. Получава се 0,175 g (84%) [(R*), 3aR*-(3a£ , 7аа ,)]-3, За, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-1-(5-хидрокси-1,5димегитхекат)-7а-мегил-4Н-ицден-4-он, [¢^4,,+28,2⁰(с 0,22, СНС1₃).

g) Чрез обработване на 0,168 g от продукта f), както е описано в пример 1 j), се получава 0,211 g (100%) [1 (R*), 3aR*-(3a/?, 7аа )]3, За, 5, 6, 7, 7а-хексахидро-(1,5-диметил-5[(триметилсилил)окси] -7а-метил-4Н-инден-4он, [а²⁰ ]₀+21,9 (с 0,27, СНС1₃).

h) Както е описано в пример 1к), но като се излиза от 0,581 g [3S-(1Z, 3α, 5β)]-[2[3,5-бис [[(1,1 -диметилетил) диметилсилил] окси] -2-метиленциклохексилиден] етил]дифенилфосфиноксид и 0,210 g от продукта g), се получава 0,358 g (83%) (la , 3β , 5Ζ, 7Ε)-1,3бис [[(1,1 -диметилетил) диметилсилил] окси] 25- [(триметилсилил)окси] -9,10-секохолеста-5, 7, 10 (19), 16-тетраен, MS m/e 714 (М+).

i) Обработването на 0,350 g от продукта h), както е описано в пример 11), дава 0,168 g (83 %) 1,25-дихидрокси-16-дехидрохолекал циферол, [a²⁰ ]_D+40,0° (с 0,17, МЕОН).

Пример 6.

a) Както е описано в пример 1к) като се излиза от 0,383 g [5S-(lZ)]-[2-[5-[[(l.lдиметилетил)диметилсилил]окси] -2-метиленциклохексилиден] етил ] дифенилфосфиноксид и 0,188 g от продукта от пример 5g), се получава 0,245 g (78%) (3α , 5Z, 7Е)-3-[ [ (1.1ди метилетил) ди метилсил ил ]окси]-25-[(триметилсилил)]окси]-9. 10-секохолсста-5, 7, 10 (19), 16-тетраен, [а²⁴ ]_с+67,5° (с 0,20, СНС1₃).

b) Обработването на 0,239 g от продукта а), както е описано в пример 11), дава 0,135 g (83%) 25-хидрокси-16-дехидрохолекалциферол, [а²³ ]₀+75,4° (с 0,13, МеОН).

В следващите примери А и В е даден съставът на меки желатинови капсули за орална употреба и на крем за локално прилагане:

Пример А mg/капсула

Съединение Е	0,0001-0,010
Бутилхидрокситолуол	0,016
Бутилхидроксианизол	0,016
Фракционирано кокосово
масло	160,0
Пример В
	mg/g крем
Съединение Е	0,001-1,0
Цетилов алкохол	1,5
Стеарилов алкохол	2,5
Сорбитанмоностеарат	2,0
Глицерилмоностеарат и
полиокси-етилен-
гликолстеарат	4,0
Полисорбат 60	1,0
Минерално масло	4,0
Пропиленгликол	5,0
Пропилпарабен	0,05
Бутилхидроксианизол	0,05
Сорбитолов разтвор	2,0
EDTA-динатриева сол	0,01
Метилпарабен	0,18
Дестилирана вода до 100 g

Claims

Патентни претенции

1. Съединение с формула

където R означава водород или хидроксилна група и А означава -С = С-, -СН=СН- с Е-конфигурация или -СН₂-СН₂-.
2. Съединение съгласно претенция 1 от групата

1.25- дихидрокси-16-дехидро-23-дидехидрохолекалциферол,

1.25- дихидрокси-! 6,23Е-бисдехидрохолекалциферол и

1.25- дихидрокси-16-дехидрохолекалциферол.
3. Съединение с формула

където А означава -СН=СН- с Еконфигурация, -СН₂-СН₂- или особено -СеСи R, u R₃ независимо един от друг означават С -алкилов остатък, особено метил, и R₂ означава С, ₄ -алкилов остатък, особено метил, арилов остатък или арил-С алкилов остатък.
4. Използване на съединение съгласно претенция 1 или 2 като тсрапевтичноактивна субстанция, по-специално за лечение на хи-

5 перпролиферативни кожни заболявания, особено на псориазис или за лечение на неопластични заболявания, специално левкемия.
5. Метод за получаване на съединение съгласно претенция 1 или 2, характеризиращ

10 се с това, че съответно съединение с формула I, което вместо две или три хидроксилни групи съдържа две или три защитени хидроксилни групи с формула

15 -OSi (R,. R₂, R₃) където R, u R₃ означава Cj ₄-алкилов остатък и R₂ означава С -алкилов остатък, арилов остатък или арил-С₁₄-алкилов остатък, вза20 имодейства с реагент отцепващ защитните групи.
6. Средство, по-специално за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания, специално псориазис или за лечение на неоплас-

25 тични заболявания, специално левкемия, характеризиращ се с това, че съдържа ефективно количество от съединение съгласно претенция 1 или 2 и фармацевтичен носител, поспециално за орална или локална употреба.

30 7. Използване на съединение съгласно претенция 1 или 2 за приготвяне на медикаменти за лечение на хиперпролиферативни кожни заболявания, специално на псориазис, или за лечение на неопластични заболявания,

35 специално левкемия.