Deprecated: The each() function is deprecated. This message will be suppressed on further calls in /home/zhenxiangba/zhenxiangba.com/public_html/phproxy-improved-master/index.php on line 456
CZ20014634A3 - Indazolové sloučeniny a farmaceutické přípravky pro inhibici proteinkináz a způsoby jejich použití - Google Patents
[go: Go Back, main page]

CZ20014634A3 - Indazolové sloučeniny a farmaceutické přípravky pro inhibici proteinkináz a způsoby jejich použití - Google Patents

Indazolové sloučeniny a farmaceutické přípravky pro inhibici proteinkináz a způsoby jejich použití Download PDF

Info

Publication number
CZ20014634A3
CZ20014634A3 CZ20014634A CZ20014634A CZ20014634A3 CZ 20014634 A3 CZ20014634 A3 CZ 20014634A3 CZ 20014634 A CZ20014634 A CZ 20014634A CZ 20014634 A CZ20014634 A CZ 20014634A CZ 20014634 A3 CZ20014634 A3 CZ 20014634A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
alkyl
substituted
pharmaceutically acceptable
aryl
Prior art date
Application number
CZ20014634A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ301667B6 (cs
Inventor
Robert Steven Kania
Steven Lee Bender
Allen J. Borchardt
John F. Braganza
Stephan James Cripps
Ye Hua
Michael David Johnson
Theodore Otto Johnson Jr.
Hiep The Luu
Cynthia Louise Palmer
Siegfried Heinz Reich
Anna Maria Tempczyk-Russell
Min Teng
Christine Thomas
Michael David Varney
Michael Brennan Wallace
Michael Raymond Collins
Original Assignee
Agouron Pharmaceuticals, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22498654&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ20014634(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Agouron Pharmaceuticals, Inc. filed Critical Agouron Pharmaceuticals, Inc.
Publication of CZ20014634A3 publication Critical patent/CZ20014634A3/cs
Publication of CZ301667B6 publication Critical patent/CZ301667B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Indazolové sloučeniny a farmaceutické přípravky pro inhibici proteinkináz a způsoby jejich použití
Tato přihláška je řádnou přihláškou k prozatímní patentové c-e přihlášky. Spojených Států č. 60/142 130, podané 2. července, 1999.
Oblast techniky
Tento vynález se týká indazolových sloučenin, které zprostředkovávají a/nebo inhibují aktivitu určitých proteinkináz, a farmaceutických přípravků, které tyto sloučeniny obsahují. Vynález se také týká terapeutického nebo profylaktického použití těchto sloučenin a přípravků a dále se týká léčení karcinomů a také dalších chorobných stavů spojených s nežádoucí angiogenezí a/nebo buněčnou proliferaci podáváním účinného množství těchto sloučenin.
Dosavadní stav techniky
Proteinkinázy jsou skupina enzymů, které katalyzují fosforylaci hydroxylové skupiny specifických tyrozinových, serinových nebo threoninových zbytků v proteinech. Tato fosforylace typicky významně naruší funkci proteinu a proteinkinázy jsou tedy klíčovými enzymy pro regulaci celé řady buněčných procesů, včetně metabolismu, buněčné proliferace, buněčné diferenciace a přežívání buněk. Z mnoha různých buněčných funkcí, o kterých je známo, že je u nich nezbytná aktivita proteinkinázy, některé procesy představují lákavé cíle pro terapeutickou intervenci u určitých chorobných stavů. Dvěma příklady jsou angiogeneze a řízení buněčného • ·
cyklu, kde proteinkinázy hraji stěžejní úlohu, přičemž tyto procesy jsou esenciální pro růst solidních nádorů, jakož i pro další onemocněni.
Angiogeneze je mechanismus, kterým jsou vytvořeny nové kapiláry z již existujících cév. Je-li nezbytné, vaskulární systém má potenciál k vytvořeni nových kapilárních síti, aby byla udržována řádná funkce tkáni a orgánů. Ale u dospělých je angiogeneze dosti omezena, nastává pouze při procesu hojeni ran a neovaskularizaci endometria během menstruace. (Viz Merenmies et al., Cell Growth & Differentiation, 8, 3-10 1997). Na druhé straně, nežádoucí angiogeneze je charakteristický znak několika onemocněni, jako jsou například retinopatie, psoriasis, revmatoidní artritida, makulárni degenerace se vztahem k věku (AMD) a karcinomy (solidní nádory). (Folkman, Nátuře Med., 1, 27-31 1995). Proteinkinázy, u kterých bylo prokázáno, že jsou zapojeny do angiogenního procesu, zahrnují tři členy skupiny tyrozinkinázových receptorů růstového faktoru: VEGF-R2 (receptor 2 vaskulárního endotelového růstového faktoru, také známý jako KDR (receptor s kinázovou doménou) a jako FLK-1), FGF-R (receptor fibroblastového růstového faktoru) a TEK (také znám jako Tie2) .
VEGF-R2, který je exprimován pouze na endotelových buňkách, váže silný angiogenní růstový faktor VEGF a zprostředkovává následnou signální transdukci aktivací aktivity své intracelulární kinázy. Očekává se tedy, že přímá inhibice aktivity kináza VEGF-R2 bude mít za následek redukci angiogeneze dokonce i v přítomnosti exogenního VEGF (viz Strawn et al., Cancer Research, 56, 3540-3545, 1996), jak bylo ukázáno u mutant VEGF-R2, které nesvedou zprostředkovat signální transdukci. (Millauer et al., Cancer Research, 56, 1615-1620, 1996). Navíc se zdá, že VEGF-R2 nemá jinou funkci u dospělých kromě zprostředkování angiogenní aktivity VEGF.
·· ···· · · ·· ·* ·· ··· ··· ···
Tudíž se očekává, že selektivní inhibitor aktivity kinázy VEGF-R2 by projevoval malou toxicitu.
Podobně FGF-R váže angiogenní růstové faktory aFGF a bFGF a zprostředkovává následnou intracelulární signální transdukci. Nedávno bylo navrženo, že růstové faktory, jako je například bFGF, mohou mít klíčovou úlohu v indukci angiogeneze u solidních nádorů, které dosáhly určité velikosti. (Yoshiji et al., Cancer Research, 57, 3924-3928, 1997). Ale na rozdíl od VEGF-R2 je FGF-R exprimován ve velkém počtu různých buněčných typů v celém organismu a může nebo nemusí mít důležitou úlohu v jiných normálních fyziologických procesech u dospělých. Nicméně bylo publikováno, že systémové podávání inhibitoru s malou molekulou, který inhiboval kinázovou aktivitu FGF-R, blokovalo angiogenezi indukovanou bFGF u myší bez zjevné toxicity. (Mohammad et al., EMBO Journal, 17, 59965904, 1998).
TEK (také známa jako Tie-2) je další receptorová tyrozinkináza exprimovaná pouze na endotelových buňkách, o které bylo prokázáno, že má úlohu v angiogenezi. Vazba faktoru angiopoietinu-1 má za následek autofosforylaci kinázové domény TEK a má za následek signální transdukci, která pravděpodobně zprostředkovává interakci endotelových buněk s peri-endotelovými podpůrnými buňkami, a tím usnadňuje maturaci nově vytvořených krevních cév. Na druhé straně faktor angiopoietin-2 pravděpodobně antagonizuje účinek angiopoietinu-1 na TEK a narušuje angiogenezi. (Maisonpierre et al., Science, 277, 55-60, 1997).
Jako důsledek výše popsaného výzkumu bylo navrženo léčit angiogenezi použitím sloučenin inhibujících kinázovou aktivitu VEGF-R2, FGF-R a/nebo TEK. Například, W1PO mezinárodní publikace č. WO 97/34876 popisuje určité cinnolinové deriváty, které jsou inhibitory VEGF-R2, které mohou být použity pro léčení chorobných stavů sdružených s abnormální angiogenezi • · a/nebo zvýšenou vaskulární permeabilitou, jako jsou například karcinomy, diabetes, psoriasis, revmatoidní artritida, Kaposiho sarkom, hemangiom, akutní a chronické nefropatie, aterom, arteriální restenóza, autoimunitní onemocnění, akutní záněty a oční onemocnění s proliferaci retinálních cév.
Kináza fosforylázy aktivuje glykogenfosforylázu, tedy zvyšuje rozpad glykogenu a uvolňování glukózy játry. Regulace produkce glukózy játry je narušena u diabetes typu 2 a je primární příčina hyperglykémie nalačno, která má za následek mnoho sekundárních komplikací, které tyto pacienty postihují. Redukce uvolňování glukózy z jater by tedy snížila zvýšenou hladinu plazmatické glukózy. Inhibitory kinázy fosforylázy by tudíž snížily fosforylázovou aktivitu a glykogenolýzu, a tak snížily hyperglykémii u pacientů.
Další fyziologická reakce na VEGF je vaskulární hyperpermeabilita, o které se předpokládá, že má úlohu v časných stadiích angiogeneze. V ischemických tkáních, jako jsou například ty, které se vyskytují v mozku obětí mozkové mrtvice, hypoxie spouští expresi VEGF, což vede ke zvýšené vaskulární permeabilitě a konečnému edému sousedních tkání. V modelu mozková mrtvice na laboratorních potkanech bylo ukázáno autory van Bruggen et al. (J. Clinícal Invest., 104, 1613-20, 1999), že podávání monoklonální protilátky k VEGF snižuje objem infarktu. Očekává se tedy, že inhibitory VEGFR budou použitelné pro léčení mozková mrtvice.
Kromě jejich úlohy v angiogenezi mají proteinkinázy také velmi důležitou úlohu v řízení buněčného cyklu. Nekontrolovaná buněčné proliferace je hlavní znak karcinomu. Buněčná proliferace jako reakce na různé podněty se projevuje deregulací cyklu buněčného dělení, procesu, kterým se buňky množí a dělí. Nádorové buňky mají typicky poškozeny geny, které přímo nebo nepřímo regulují postup cyklu buněčného dělení.
• · • · · to 9· ·· ·· • 9 9 9 9 9 9
9 99 9 9 9 99 9 • · to to ·· ··· · · • · ···· ·«· ···· ··· ·· ·· ·· ····
Kinázy závislé na cyklinu (CDKs) jsou serinthreoninové proteinkinázy, které mají rozhodující úlohu v regulaci přechodů mezi různými fázemi buněčného cyklu. (Viz např. články sebrané v Science, 274, 1643-1677, 1996) . CDK komplexy jsou vytvořeny spojením regulační cyklinové podjednotky (např. cyklin A, Bl, B2, Dl, D2, D3 a E) a katalytické kinázové podjednotky (např. cdc2 (CDK1), CDK2, CDK4, CDK5 a CDK6). Jak jméno napovídá, CDK projevují absolutní závislost na cyklinové podjednotce při fosforylaci svých cílových substrátů a různé páry kináza/cyklin působí na regulaci progrese specifických fází buněčného cyklu.
Je to komplex CDK4 s cykliny D, který má rozhodující úlohu v iniciaci cyklu buněčného dělení z odpočinkového nebo klidového stadia do stadia, kdy buňky začínají podstupovat buněčné dělení. Tato progrese je podrobena celé řadě růstových regulačních mechanismů, jak negativních tak pozitivních. Odchylky v tomto kontrolním systému, konkrétně ty, které ovlivňují funkci CDK4, jsou zapojeny do dalšího vývoje buněk k vysoce proliferativnímu stavu charakteristickému pro malignity, konkrétně familiární melanomy, esofageální karcinomy a pankreatické karcinomy. (Viz např. Kamb, Trends in Genetics, 11, 136-140, 1995, Kamb et al., Science, 264, 436440, 1994) .
Nesčetné publikace popisují celou řadu chemických sloučenin použitelných proti velkému množství terapeutických cílů. Například WIPO mezinárodní přihlášky č. WO 99/23077 a WO 99/23076 popisují sloučeniny obsahující indazol mající inhibiční aktivitu pro fosfodiesterázu typu IV, vytvořené bioisosterickým nahrazením katecholu indazolem. Patent Spojených Států č. 5 760 028 popisuje heterocyklus zahrnující 3-[1-[3-(imidazolin-2-ylamino)propyl]indazol-5-ylkarbonylamino]-2-(benzyloxykarbonylamino)propionovou kyselinu, které jsou použitelné jako antagonisté αβ3 integrinu a příbuzných ······ ·· ·· 99 ·* ·· 9 · 9 9 · 9 · • · ·· · · ·9♦ · * » adhezivních proteinových receptorů buněčného povrchu. WIPO mezinárodní přihláška č. WO 98/09961 popisuje určité deriváty indazolu a jejich použití jako inhibitory fosfodiesterázy (PDE) typ IV nebo produkci faktor nekrotizujícího nádory (TNF) u savců. Nedávné příspěvky do virtuální knihovny známých sloučenin obsahují sloučeniny popsané jako antiproliferativní terapeutické přípravky, které inhibují CDK. Například patent Spojených Států č. 5 621 082, Xiong et al., popisuje nukleovou kyselinu kódující inhibitor CDK6 a evropská patentová přihláška č. 0 666 270 A2 popisuje peptidy a peptidomimetika, která působí jako inhibitory CDKl a CDK2. Mezinárodní patentová přihláška č. WO 97/16447 popisuje určité analogy chromanů, které jsou inhibitory kináz závislých na cyklinu, obzvláště komplexů CDK/cyklin, jako je například CDK4/cyklin Dl, které mohou být použity pro inhibici nadměrné nebo abnormální buněčné proliferace, a tudíž pro léčbu karcinomu. WIPO mezinárodní přihláška č. WO 99/21845 popisuje deriváty 4-aminothiazolu, které jsou použitelné jako CDK inhibitory.
Ale stále trvá potřeba sloučenin s malou molekulou (tzv. malých molekul), které mohou být snadno syntetizovány a účinně inhibují jednu nebo více CDK nebo komplexy CDK/cyklin. Protože CDK4 může sloužit jako obecný aktivátor buněčného dělení ve většině buněk a komplexy CDK4 a cyklinů typu D řídí časnou Gi fázi buněčného cyklu, existuje potřeba účinných inhibitorů CDK4 a jejich komplexů cyklinů typu D pro léčbu jednoho nebo více typů nádorů. Také stěžejní úloha kináz komplexů cyklin E/CDK2 a cyklin Β/CDKl ve přechodech fází Gx/S a G2/M, v daném pořadí, poskytuje další cíle pro terapeutickou intervenci při supresi deregulované progrese buněčného cyklu u karcinomu.
Další proteinkináza, CHKl, má důležitou úlohu jako kontrolní bod v progresi buněčného cyklu. Kontrolní body jsou kontrolní systémy, které koordinují progresi buněčného cyklu • « «V • · · • « • · ·»♦ · • · ·
• ♦ • · · · ovlivněním formace, aktivace a následné inaktivace kináz závislých na cyklinu. Kontrolní body zabraňují progresi buněčného cyklu v nevhodný čas, udržují metabolickou rovnováhu buněk, když jsou buňky zdrženy v určité fází (arest), a v některých případech mohou indukovat apoptózu (programovanou buněčnou smrt), když nejsou podmínky pro kontrolní bod splněny. (Viz např. 0'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182,
1997), Nurse, Cell, 91, 865-867, 1997), Hartwell et al.,
Science, 266, 1821-1828 (1994), Hartwell et al. , Science, 246, 629-634, 1989) .
Jedna řada kontrolních bodů sleduje integritu genomu a po zjištění poškození DNA, tyto „kontrolní body poškození DNA blokují progresi ve fázích buněčného cyklu Gi a G2 a zpomalují progresi S fáze. (0'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182, 1997, Hartwell et al., Science, 266, 1821-1828, 1994). Tento účinek umožňuje opravné procesy DNA, aby byla jejich práce ukončena před replikací genomu a než proběhne následná separace genetického materiálu do nových dceřiných buněk. Je důležité, že nej častěji mutovaný gen u lidských karcinomů, nádorový supresorový gen p53, vytváří protein pro kontrolní bod poškození DNA, který blokuje progresi buněčného cyklu v Gi fázi a/nebo indukuje apoptózu (programovanou buněčnou smrt) po poškození DNA. (Hartwell et al., Science, 266, 1821-1828,
1994). Bylo prokázáno, že nádorový supresorový gen p53 také zesiluje účinek kontrolního bodu pro poškození DNA v G2 fázi buněčného cyklu. (Viz např. Bunz et al·., Science, 28, 14971501, 1998), Winters et al., Oncogene,- 17, 673-684, 1998),
Thompson, Oncogene, 15, 3025-3035, 1997).
Díky stěžejní povaze dráhy nádorového supresorového genu p53 u lidských karcinomů jsou aktivně vyhledávány terapeutické intervence, které využívají zranitelnost karcinomů defektních v p53. Jeden objevená zranitelnost leží v operaci kontrolního bodu G2 u buněk karcinomu defektního v p53. buňky karcinomu, **·· ** ** *· *· « » « * · · · • ·«« ♦ * »·* » 9 · • «·· 9 9 9 9 9 9 * • · 9 · · · 9 9 9
9999 999 99 99 ·· 9999 protože postrádají kontrolní bod Glř jsou obzvláště zranitelné při odstranění poslední zbylé bariéry chránící je před nádor likvidujícími („cancer-killing) účinky agens poškozujících DNA: kontrolní bod G2. Kontrolní bod G2 je regulován kontrolním systémem, který je zachován od kvasinek k člověku. V tomto zachovaném systému je důležitá kináza, CHKl, která transdukuje signály od komplexu citlivého na poškození DNA na inhibici aktivace kinázy cyklin B/Cdc2, která podporuje vstup do mitotické fáze (viz např. Peng et al., Science, 277, 15011505, 1997, Sanchez et al., Science, 277, 1497-1501, 1997).
Bylo ukázáno, že inaktivace CHKl ruší jak G2 arest indukovaný poškozením DNA způsobeným buď protirakovinnými agens nebo endogenním poškozením DNA, tak i způsobuje přednostní usmrcení následných buněk defektních v kontrolních bodech (viz např. Nurse, Cell, 91, 865-867, 1997, Weinert, Science, 277, 14501451, 1997, Walworth et al., Nátuře, 363, 368-371, 1993, a AlKhodairy et al., Molec. Biol. Cell, 5, 147-160, 1994).
Selektivní manipulace kontrolního bodu v karcinomových buňkách by mohla poskytnout široké využití v chemoterapeutických a radioterapeutických režimech při léčbě karcinomu a může kromě toho poskytnout obecný charakteristický znak „genomové nestability” lidských karcinomů ke zkoumání jako selektivní základ destrukce karcinomových buněk. Celá řada faktorů má CHKl jako stěžejní cíl pro kontrolní bod poškození DNA. Objasnění inhibitorů této a funkčně příbuzných kináz, . jako je například Cdsl/CHK2, kináza, o které bylo nedávno zjištěno, že kooperuje s CHKl při regulaci progrese S fáze (viz Zeng et al., Nátuře, 395, 507-510, 1998, Matsuoka,
Science, 282, 1893-1897, 1998), by mohlo poskytnout cennou novou terapeutickou podstatu pro léčení karcinomu.
Vazba receptoru integrinu k ECM iniciuje intracelulární signály zprostředkované FAK (kináza fokální adheze), které jsou zapojeny do motility buněk, buněčné proliferace a ·« ·· • · · · přežití. U lidských karcinomů je nadměrná exprese FAK zapojena do geneze tumoru a metastatického potenciálu díky své úloze v integrinem zprostředkovaných signálních drahách.
Tyrozinkinázy mohou být obecně receptorového typu (tj. mající extracelulární, transmembránové a intracelulární domény) nebo nereceptorového typu (tj. jsou . plně intracelulární). Má se za to, že alespoň jedna nereceptorová proteinová tyrozinkináza, jmenovitě LCK, zprostředkovává v T lymfocytech transdukci signálu z interakce proteinu buněčného povrchu (Cd4) s křížově navázanou protilátkou anti-Cd4 (detailnější diskuse o nereceptorových tyrozinkinázách je uvedena v práci autora Bolen, Oncogene, 8, 2025-2031, 1993, která je v tomto textu zahrnuta formou odkazu).
Kromě proteinkináz identifikovaných výše, bylo zjištěno, že mnoho dalších proteinkináz jsou terapeutické cíle a početné publikace popisují inhibitory kinázové aktivity, jako uvedeno v přehledu v následujících pracích (McMahon et al, Oncologist, 5, 3-10, 2000, Holash et al., Oncogene, 18, 5356-62, 1999, Thomas et al., J. Biol. Chem., 274, 36684-92, 1999, Cohen, Curr. Op. Chem. Biol., 3, 459-65, 1999, Klohs. et al., Curr. Op. Chem. Biol., 10, 544-49, 1999, McMahon et al., Current Opinion in Drug Discovery & Development, 1, 131-146, 1998, Strawn et al., Exp. Opin. Invest. Drugs, 7, 553-573, 1998). Mezinárodní patentová přihláška WO 00/18761 popisuje určité substituované 3-kyanochinoliny jako inhibitory proteinkináz.
Stále ale trvá potřeba účinných inhibitorů proteinkináz. Navíc, jak je odborníků jasné, je žádoucí, aby inhibitory kináz měly jak vysokou afinitu k cílové kináze nebo kinázám, tak byly také vysoce selektivní ve srovnání s dalšími proteinkinázami.
• · • ·· « • · • · · · • · • ·
Podstata vynálezu
Cílem vynálezu je poskytnout silné inhibitory proteinkináz. Dalším cílem vynálezu je poskytnout účinné inhibitory kináz, které mají silnou a selektivní afinitu pro jednu nebo více konkrétních kináz.
Těchto a dalších cílů vynálezu, které budou jasné z následujícího popisu, bylo dosaženo objevením indazolových sloučenin, jejich farmaceuticky přijatelných prekurzorů, farmaceuticky aktivních metabolitů a farmaceuticky přijatelných solí (tyto sloučeniny, prekurzory, metabolity a soli jsou souhrnně nazývány jako „agens neboli „činidla) popsaných níže, které modulují a/nebo inhibují aktivitu proteinkináz. Farmaceutické přípravky obsahující tato činidla jsou použitelné v léčbě onemocnění zprostředkovaných kinázovou aktivitou, jako jsou například karcinomy, a také další chorobné stavy sdružené s nežádoucí angiogenezi a/nebo buněčnou prolifepací, jako je například diabetická retinopatie, neovaskulární glaukom, revmatoidní artritida a psoriasis. Dále činidla mají výhodné vlastnosti týkající se modulace a/nebo inhibice kinázové aktivity sdružené s VEGF-R, FGF-R, komplexy CDK, CHK1, LCK, TEK, FAK a/nebo kinázou fosforylázy.
V obecném aspektu se vynález týká sloučenin vzorce I:
kde:
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3 kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a
R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina nebo Y-X, kde Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, S=0, S02, alkyliden, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a X je substituovaná nebo nesubstituovaná Ar, heteroarylová skupina, NH-alkylová skupina, NH-cykloalkylová skupina, NHheterocykloalkylová skupina, NH-arylová skupina, NHheteroarylová skupina, NH-alkoxyskupina nebo NHdialkylamidoskupina, kde Ar je arylová skupina.
Vynález se také týká farmaceuticky přijatelných prekurzorů, farmaceuticky aktivních metabolitů a farmaceuticky přijatelných solí sloučeniny vzorce I.
Také výhodné způsoby výroby sloučenin vzorce I jsou popsány.
V dalším obecném aspektu se vynález týká sloučenin vzorce
kde:
• · · · • · · · · · · · · · ·· t * · · · « · ···· · · · · · • · · · · · ··· ······· ·· · · ·*
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3 kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a
R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo Y-Ar, kde Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina S=0, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a Ar je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina.
Vynález se také týká farmaceuticky přijatelných prekurzorů, farmaceuticky aktivních metabolitů a farmaceuticky přijatelných solí sloučeniny vzorce I(a). Výhodné způsoby výroby sloučenin vzorce I(a) jsou také popsány.
V jednom výhodném obecném provedení se vynález týká sloučenin mající vzorec II:
kde:
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina, ·
R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, aryloxyskupina, thioarylová skupina, skupina CH2-OH, CH2-0-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, CH2-0-arylová skupina, CH2-Salkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku nebo CH2-Sarylová skupina,
R5 a R6 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, Z-alkylová skupina, Z-arylová skupina nebo skupina Z-CH2CH=CH2, kde Z je atom 0, S, skupina NH nebo skupina CH2 a alkylová skupina a arylová skupina ze Z-alkylové skupiny a Zarylové skupiny je každá volitelně substituovaná, a jejich farmaceuticky přijatelných prekurzorů, farmaceuticky aktivních metabolitů a farmaceuticky přijatelných solí.
Ve výhodném provedení vzorce II: R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a R5 a R6 jsou každý nezávisle atom halogenu, Z-alkylová skupina nebo skupina Z-CH2CH=CH2, kde Z je atom 0 nebo S.
V dalším výhodném obecném provedení jsou sloučeniny podle vynálezu vzorce III:
m
H ·« ···· Φ· ·· ·· φφ • < · · · φ · φ φ φφφφ φ · φφφ · · ♦ kde:
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová .skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová Skupina,
Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina S=0, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina nebo aryloxyskupina,
R10 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a nižší alkylová skupina
A jejich farmaceuticky přijatelné prekurzory, farmaceuticky přijatelné metabolity a farmaceuticky přijatelné soli.
Výhodněji ve vzorci III: R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, alkylová skupina a alkenylová skupina a Ri0 je atom vodíku nebo atom halogenu.
V dalším výhodném obecném provedení jsou sloučeniny podle vynálezu vzorce III(a):
• · · ·
·· ♦ · ·· ·«··
kde :
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina S=0, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina nebo aryloxyskupina,
A jejich farmaceuticky přijatelné prekurzory, farmaceuticky přijatelné metabolity a farmaceuticky přijatelné soli.
Výhodněji ve vzorci III(a): R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina.
V dalším výhodném obecném provedení jsou sloučeniny podle vynálezu vzorce IV:
« ft • · · · • · • · · · • · ·
kde :
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylové skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina S=0, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
Rg je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylové skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, cykloalkoxyskupina, NH-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, NH-arylová skupina, NH-heteroarylová skupina, N=CH-alkylová skupina, skupina NH(C=O)R1:L nebo skupina NH2, kde R11 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylové skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina a heteroarylová skupina a
R10 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a nižší alkylová skupina
A jejich farmaceuticky přijatelné prekurzory, farmaceuticky přijatelné metabolity a farmaceuticky přijatelné soli.
Výhodněji ve vzorci IV: R1 je skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, Y je S nebo skupina NH a
R9 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkoxyskupina nebo NH-heteroarylová skupina.
Nejvýhodnější jsou sloučeniny podle vynálezu vybrané ze skupiny, kterou tvoří následující sloučeniny:
o
·· 44
44
4 4
4 4 4 4
4» 44
44 4 • 4
4 4 • 4 44
Vynález se také týká způsobu modulace kinázové aktivity VEGF-R, FGF-R, komplexu CDK, a/nebo inhibice CHK1, LCK, TEK, •« ·* ♦ ♦ * ♦ 9 9·· • 9 99·· > 9 · · 99
999· farmaceuticky předkládaného aktivitu, tj.
minimální V jednom sloučeniny podle I, které mají v přijatelných farmaceuticky
FAK a/nebo kinázy fosforylázy podáváním sloučeniny vzorce I, II, III nebo IV nebo jejího farmaceuticky přijatelného prekurzoru, farmaceuticky aktivního metabolitu nebo přijatelné soli. Výhodné sloučeniny podle vynálezu, které mají selektivní kinázovou mají významnou aktivitu proti jedné nebo více specifickým kinázám, zatímco mají malou nebo aktivitu proti jedné nebo více různým kinázám. výhodném provedení vynálezu jsou předkládaného vynálezu sloučeniny vzorce podstatě vyšší účinnost proti tyrozinkináze receptoru VEGF než proti tyrozinkináze receptoru FGF-R1. Vynález se také týká způsobu modulace tyrozinkinázové aktivity receptoru VEGF bez významné modulace tyrozinkinázové aktivity receptoru FGF.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být použity výhodně v kombinaci s dalšími známými terapeutickými přípravky. Například sloučeniny vzorce I, II, III nebo IV, které mají antiangiogenní aktivitu, mohou být podávány společně s cytotoxickými chemoterapeutickými přípravky, jako je například taxol, taxoter, vinblastin, cis-platina, doxorubicin, adriamycin apod., aby se dosáhlo zvýšeného protinádorového účinku. Aditivní nebo synergické zesílení terapeutického účinku může také být získáno společným podáváním sloučenin, vzorce I, II., III nebo IV které mají antiangiogenní aktivitu, s dalšími antiangiogenními přípravky, jako je například combretastatin A-4, endostatin, prinomastat, celecoxib, rofocoxib, EMD121974, IM862, anti-VEGF monoklonální protilátky a anti-KDR monoklonální protilátky.
Vynález se také týká farmaceutických přípravků obsahujících účinné množství agens vybraného ze skupiny, kterou tvoří sloučeniny vzorce I a jeho farmaceuticky solí, farmaceuticky aktivních přijatelných prekurzorů a metabolitů a farmaceuticky • fc fcfcfc · fcfc ·· ·· ·· • fc· fcfcfc fcfcfc· fc··· · fc··· fc · fc fc fcfcfc·*»··· ♦ fc fcfcfcfcfcfcfc· fcfcfcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc fcfcfcfc přijatelného nosiče nebo vehikula tohoto agens. Vynález dále poskytuje léčbu karcinomu, a také dalších chorobných stavů sdružených s nežádoucí angiogenezi a/nebo buněčnou proliferaci, obsahující podávání účinného množství takového agens pacientovi, který tuto léčbu potřebuje.
Detailní popis vynálezu a výhodných provedení
Sloučeniny podle vynálezu vzorce I, II, III a IV jsou použitelné pro zprostředkování aktivity proteinkináz. Konkrétněji jsou sloučeniny použitelné jako antiangiogenní činidla a jako činidla pro modulaci a/nebo inhibici aktivity proteinkináz, a tak jsou užitečné při léčení karcinomu nebo jiných onemocnění sdružených s buněčnou proliferaci zprostředkovanou proteinkinázami.
Termín „alkylová skupina, jak se používá v tomto textu, se týká alkylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají jeden až dvanáct uhlíkových atomů. Příklady alkylových skupin jsou: methylová skupina, (Me), ethylová skupina (Et), n-propylová skupina, isopropylová skupina, butylová skupina, isobutylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina (t-Bu), pentylová skupina, isopentylová skupina, terc-pentylová skupina, hexylová skupina, isohexylová skupina apod. Termín „nižší alkylová skupina označuje alkylovou skupinu mající 1 až 8 atomů uhlíku (alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku). Vhodné substituované alkylové skupiny jsou: fluormethylová skupina, difluormethylová skupina, trifluormethylová skupina, 2-fluorethylová skupina, 3-fluorpropylová skupina, hydroxymethylová skupina, 2hydroxyethylová skupina, 3-hydroxypropylová skupina apod.
Termín „alkyliden se týká dvojmocného radikálu, který má jeden až dvanáct atomů uhlíku. Příklady alkylidenových skupin zahrnují skupinu CH2, skupinu CHCH3, skupinu (CH3)2 apod.
► ·· • · • ··· • fc fcfc·· • fc • fcfcfc ·· ··
Termín „alkenylová skupina se týká alkenylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, která má dva až dvanáct atomů uhlíku. Příklady alkenylových skupin zahrnují prop-2-enylovou skupinu, but-2-enylovou skupinu, but-3-enylovou skupinu, 2methylprop-2-enylovou skupinu, hex-2-enylovou skupinu apod.
Termín „alkynylová skupina se týká alkynylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají dva až dvanáct atomů uhlíku.
Termín „cykloalkylová skupina se týká saturovaných nebo částečně nesaturovaných karbocyklů, které mají tři až dvanáct bicyklických a tricyklických Vhodné cykloalkylové skupiny skupinu, cyklobutylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, atomů uhlíku, včetně cykloalkylových struktur zahrnují cyklopropylovou cyklopentylovou skupinu, cykloheptylovou skupinu apod.
Termín „heterocykloalkylová skupina znamená saturovaný nebo částečně nesaturovaný monocyklický radikál obsahující atomy uhlíku, výhodně 4 nebo 5 atomů uhlíku v kruhu a alespoň jeden heteroatom vybraný z atomů dusíku, kyslíku a síry.
Termíny „arylová skupina a „heteroarylová skupina se týkají monocyklických a polycyklických nesaturovaných nebo aromatických kruhových struktur, přičemž termín „arylová skupina se týká karbocyklů a termín „heteroarylová skupina se týká heterocyklů. Příklady aromatických kruhových struktur naftylová skupina, furylová skupina, skupina, pyridinylová imidazolylová skupina, pyrazinylová skupina, pyridazinylová skupina, 1,2,3-triazinylová skupina, 1,2,4-oxadiazolylová skupina, 1,3,4-oxadiazolylová skupina, 1H-tetrazol-5-ylová skupina, indolylová skupina, chinolinylová skupina, benzofuranylová skupina, benzothiofenylová skupina jsou: fenylová skupina, tetrahydronaftylová skupina, skupina, pyrolylová pyrazolylová skupina,
1,2,3,4thienylová skupina, • · ·«« · • · • · ·· (thianaftenylová skupina) apod. Tyto skupiny mohou být volitelně substituovány kondenzovanými kruhovými strukturami nebo můstky, například skupinou OCH2-O.
Termín „alkoxyskupina znamená radikál-O-alkylovou skupinu. Příklady obsahují methoxy skupinu, ethoxy skupinu, propoxy skupinu apod.
Termín „aryloxyskupina představuje -O-arylovou skupinu, přičemž arylová skupina je definována výše.
Termín „cykloalkoxyskupina představuje -O-cykloalkylovou skupinu, přičemž cykloalkylové skupina je definována výše.
Termín „atom halogenu představuje atom chloru, fluoru, bromu nebo jodu. Termín „halogen představuje atom chloru, fluoru, bromu nebo jodu.
Obecně, různé skupiny nebo funkční skupiny proměnných ve vzorcích mohou být volitelně substituovány jedním nebo více vhodnými substituenty. Příklady substituentů jsou atom halogenu (F, Cl, Br nebo I), nižší alkylová skupina, skupina -OH, skupina -N02, skupina -CN, skupina -CO2H, nižší -O-alkylová skupinu, -arylová skupina, -arylová-nižší alkylová skupina, skupina -CO2CH3, skupina -CONH2, skupina -OCH2CONH2, skupina -NH2, skupina -SO2NH2, halogenalkylová skupina (např. skupina -CF3, skupina -CH2CF3) , -O-halogenalkylová skupina (např. skupina -OCF3, skupina -OCHF2) apod.
Termíny „obsahující a „zahrnující jsou použity otevřeně, v neomezujícím významu.
Rozumí se, že i když sloučenina vzorce I může mít projevy tautomerie, obrázky vzorců v tomto popisu úmyslně zobrazují pouze jednu možnou tautomerní formu. Rozumí se tedy, že ve vynálezu vzorce představují každou tautomerní formu zobrazené sloučeniny a nejsou omezeny pouze na specifickou tautomerní formu zobrazenou obrázky vzorců.
·♦ 44
4
444
Některé ze sloučenin podle vynálezu mohou existovat jako jednoduché stereoizomery (tj. v podstatě bez dalšího stereoizomeru), racemáty a/nebo směsi enantiomerů a/nebo diastereomerů. Všech tyto jednotlivé stereoizomery, racemáty a jejich směsi jsou obsaženy v rozsahu předkládaného vynálezu. Výhodně sloučeniny podle vynálezu, které jsou opticky aktivní, jsou použity v opticky čisté formě.
Jak odborníci všeobecně vědí, opticky čistá sloučenina mající jedno chirální centrum, je sloučenina, která obsahuje v podstatě jeden ze dvou možných enantiomerů (tj. je enantiomerně čistá) a opticky čistá sloučenina mající více než jedno chirální centrum je sloučenina, která je čistá diastereomericky a čistá enantiomerně. Výhodně jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu použity ve formě, která je alespoň z 90 % opticky čistá, tj . ve formě, která obsahuje alespoň z 90 % jeden izomer (80% enantiomerní nadbytek („e.e.) nebo diastereomerní nadbytek („d.e.)), výhodněji alespoň z 95 % (90% e.e. nebo d.e.), ještě výhodněji alespoň z 97,5 % (95 % e.e. nebo d.e.) a nejvýhodněji alespoň z 99 % (98% e.e. nebo d.e.).
Kromě toho se předpokládá, že vzorce pokrývají solvatované,jakož i nesolvatované formy označených struktur. Například vzorec I zahrnuje sloučeniny určené struktury v hydratované i nehydratované formě. Další příklady solvátů zahrnují struktury v kombinaci s isopropanolem, ethanolem, methanolem, DMSO, ethylacetátem, octovou kyselinou nebo ethanolaminem.
Kromě sloučenin vzorce I, II, III a IV zahrnuje vynález farmaceuticky přijatelné prekurzory, farmaceuticky aktivní metabolity a farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin.
„Farmaceuticky přijatelný prekurzor je sloučenina, která může být konvertována za fyziologických podmínek nebo φ« ··· · • 4
444
4· 49 ·4
4 4 4
4 444 4 4 4 • 9 9 9 4 9 4 9
4 4 · · · 4 «· 44 44 4444 solvolýzou na specifickou sloučeninu nebo na farmaceuticky přijatelnou sůl této sloučeniny.
„Farmaceuticky aktivní metabolit znamená farmakologicky aktivní produkt vytvořený tělesným metabolizmem ze specifické sloučeniny nebo její soli. Metabolity sloučeniny mohou být identifikovány s použitím rutinních technik v oboru známých a jejich aktivity zjišťovány s použitím testů, jako jsou například testy popsané v tomto textu.
Prekurzory a aktivní metabolity sloučeniny mohou být identifikovány s použitím rutinních technik v oboru známých. (Viz např. Bertolini, G. et al., J. Med. Chem., 40, 2011-2016, 1997, Shan, D. et al., J. Pharm. Sci., 86 (7), 765-767,
Bagshawe K. , Drug Dev. Res., 34, 220-230, 1995, Bodor, N.,
Advances in Drug Res., 13, 224-331, 1984, Bundgaard, H.,
Design of Prodrugs (Elsevier Press 1985), a Larsen, I. K.,
Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen et al., vyd., Harwood Academie Publishers, 1991).
„Farmaceuticky přijatelná sůl znamená sůl, která si podržela biologickou účinnost volných kyselin a bází specifikovaných sloučenin, a která není biologicky nebo jinak nežádoucí. Sloučenina podle vynálezu může mít dostatečně kyselou, dostatečně bazickou nebo obě funkční skupiny a podle toho reagovat s jakýmkoliv počtem anorganických nebo organických bází a anorganických a organických kyselin, za vzniku farmaceuticky přijatelné soli. Příklady farmaceuticky přijatelných solí obsahují soli připravené reakcí sloučenin podle předkládaného vynálezu s minerální nebo organickou kyselinou nebo anorganickou bází, jako jsou například tyto soli: sulfáty, pyrosulfáty, bisulfáty, sulfity, bisulfity, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, metafosfáty, pyrofosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, dekanoáty, kapryláty, akryláty, formiáty, isobutyráty,
4« I * 4
44
4 4
4 444
4444
4 4 444
4« 444 4 kaproáty, heptanoáty, propioláty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, butyn-1,4dioáty, hexyn-1,β-dioáty, benzoáty, chlorbenzoáty, methylbenzoáty, dinitrobenzoáty, hydroxybenzoáty, methoxybenzoáty, ftaláty, sulfonáty, xylensulfonáty, fenylacetáty, fenylpropionáty, fenylbutyráty, citráty, laktáty, γ-hydroxybutyráty, glykoláty, tartráty, methansulfonáty, propansulfonáty, naftalen-l-sulfonáty, naftalen-2sulfonáty a mandeláty.
Jestliže je sloučenina podle vynálezu báze, požadovaná farmaceuticky přijatelná sůl může být připravena jakýmkoliv vhodným způsobem v oboru dostupným, například ošetřením volné báze anorganickou kyselinou, jako je například chlorovodíková kyselina, bromovodíková kyselina, sírová kyselina, dusičná kyselina, fosforečná kyselina apod. Nebo organickou kyselinou, octová kyselina, maleinová kyselina, mandlová kyselina, fumarová kyselina, malonová kyselina, pyrohroznová kyselina, oxalová kyselina, glykolová kyselina, salicylová kyselina, pyranosidylová kyselina, jako je například glukuronová kyselina nebo galakturonová kyselina, alfa-hydroxykyselina, jako je například kyselina citrónová nebo kyselina vinná, aminokyselina, jako je například asparagová kyselina nebo glutamová kyselina, aromatická kyselina, jako je například benzoová kyselina nebo skořicová kyselina, sulfonová kyselina, jako je například p-toluensulfonová kyselina nebo ethansulfonová kyselina nebo podobně.
Jestliže je sloučenina podle vynálezu kyselina, požadovaná farmaceuticky přijatelná sůl může být připravena jakoukoliv vhodnou metodou, například ošetřením volné kyseliny anorganickou nebo organickou bází, jako je například amin (primární, sekundární nebo terciární), hydroxid alkalického kov nebo hydroxid kovu alkalických zemin nebo podobně.
jako je například jantarová kyselina, • 4 44
4 4
4 4 44
4494
• 4 • 44 9
Ilustrativní příklady vhodných solí zahrnují organické soli derivované z aminokyselin, jako je například glycin a arginin, čpavek, primární, sekundární a terciární aminy a cyklické aminy, jako je například piperidin, morfolin a piperazin a anorganické soli derivované ze sodíku, kalcia, draslíku, magnézia, manganu, železa, mědi, zinku, aluminia a lithia.
V případě, že činidla jsou pevné látky, odborníci vědí, že· sloučeniny a soli podle vynálezu mohou existovat v různých krystalických nebo polymorfních formách, předpokládá se tedy, že všechny jsou zahrnuty v rozsahu předkládaného vynálezu a specifikovaných vzorcích.
Terapeuticky účinná množství činidel podle vynálezu mohou být použita k léčbě onemocnění zprostředkovaných modulací nebo regulací proteinkinázy. „účinné množství znamená množství činidla, které, když je podáváno savci, který toto léčení potřebuje, je postačující pro léčení nemoci zprostředkované aktivitou jedné nebo více proteinkináz, jako jsou například tyrozinkinázy. Tak např. terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I, její soli, aktivního metabolitů nebo prekurzoru je množství postačující modulovat, regulovat nebo inhibovat aktivitu jedné nebo více proteinkináz tak, že chorobný stav, který je zprostředkován touto aktivitou, je redukován nebo zmírněn.
Množství daného činidla, které odpovídá tomuto množství, kolísá v závislosti na faktorech, jako je například konkrétní sloučenina, chorobný stav a jeho závažnost, identita (např. hmotnost) savce, který tuto léčbu potřebuje, ale může být přesto rutinně určeno odborníkem v oboru. Termín „léčba,, znamená alespoň zmírnění chorobného stavu savce, například člověka, který je ovlivněn, alespoň částečně, aktivitou jedné nebo více proteinkináz, jako jsou například tyrozinkinázy, a zahrnuje: prevenci výskytu chorobného stavu u savce, konkrétně když je zjištěno, že savec má predispozice k výskytu »9 »9
9 9
9 • 9 ···· • 9 • «99
9« 99 • * * • 9 999 · · · « · * · 9 · · • 9 9999 999
99«· 999 99 99 99 «99« chorobného stavu, ale nemoc ještě nebyla diagnostikována, modulaci a/nebo inhibici chorobného stavu a/nebo úlevu od chorobného stavu.
Činidla podle vynálezu mohou být připravena s použitím reakcí a podle schémat syntézy, jak jsou popsána dále, s využitím technik v oboru dostupných a známých s použitím výchozích látek, které jsou snadno k dispozici.
V jednom obecném syntetickém procesu jsou sloučeniny vzorce I připraveny podle následujících reakčních schémat:
1) NaOH,fe
2) P8-X
Sndg
ΥΠ
NaNQ,
1) I se nahradí M
2) Ř2 + Pg
1) modifikace
2) -Pg
R2 ·· <···· * · · • ♦··
4» · ·· ·· • · · • · ··· ·» »· • · · * • · ·
6-nitroindazol (sloučenina V) byl podroben působení jodu a báze, např. NaOH, ve vodné/organické směsi, výhodně s dioxanem. Směs je acidifikována a produkt izolován filtrací. K výslednému 3-jod-6-nitroindazolu ve směsi dichlormethanu a 50% vodného KOH při teplotě 0 °C bylo přidáno činidlo chránící skupiny („Pg) (kde X = halogen), výhodně trimethylsílylethoxymethylchlorid (SEM-C1) a katalyzátor fázového přenosu, např. tetrabutylamoniumbromid (TBABr). Po 1 až 4 hodinách byly dvě fáze naředěny, organické vrstvy byly odděleny, usušeny nad sulfátem sodným, filtrovány a koncentrovány. Hrubý produkt byl purifikován chromatografií na silikagelu za vzniku sloučeniny vzorce VI. Ošetření sloučenin vzorce VI ve vhodném organickém rozpouštědle vhodným R1-organokovovým činidlem, výhodně kyselinou R1-boronovou, v přítomnosti vodné báze, např. uhličitanu sodného, a vhodného katalyzátoru, výhodně Pd(PPh3)4 dalo, po extrakčním zpracování a chromatografií na silikagelu, sloučeniny vzorce VII. R1 substituent může být vyměněn se sloučeninami vzorce VII nebo pozdějšími meziprodukty uvedenými v těchto schématech oxidačním štěpením (např. ozonolýzou), pak následovala adice k výsledné aldehydové
Wittigovou nebo kondenzační transformací (a-e)) . Ošetření sloučenin vzorce VII redukujícím činidlem, výhodně SnCl2, poskytuje, po obvyklém vodném zpracování a purifikaci, sloučeniny vzorce VIII. Pro řadu derivátů, kde Y = NH nebo N-nižší alkylová skupina, mohou být sloučeniny vzorce VIII podrobeny působení arylchloridy nebo heteroarylchloridy, bromidy, jodidy nebo trifláty v přítomnosti báze, výhodně CS2CO3 a katalyzátoru, výhodně Pd-BINAP, (a kde Y = N-nižší alkylová skupina, s následným alkylačním krokem) za vzniku sloučenin vzorce X. Aby se vytvořily další Y vazby, byl ke sloučeninám vzorce VIII přidán dusitan sodný v chlazených standardních vodných kyselých podmínkách, pak následovalo přidání jodidu draselného a mírné zahřívání. Standardní funkční skupině (typické příklady zpracování a purifikace dalo vznik jodidovým sloučeninám vzorce IX.
Ošetření sloučenin vzorce IX organokovovým činidlem, např. butyllithiem, podporuje výměnu halogenu za lithium. Tento meziprodukt reagoval s R2 elektrofilem, např. karbonylovou skupinou nebo triflátem, prostřednictvím možného zprostředkování dalšími kovy a katalyzátory, výhodně chloridem zinečnatým a Pd(PPh3)4 za vzniku sloučenin vzorce X. Alternativně mohou být sloučeniny vzorce IX podrobeny působení organokovového činidla, jako je například organoboronová kyselina v přítomnosti katalyzátoru, např. Pd(PPh3)4, v atmosféře oxidu uhelnatého za vzniku sloučenin vzorce X. Alternativně u derivátů, kde Y = NH nebo S, mohou být sloučeniny vzorce IX podrobeny působení vhodných aminů nebo thiolů v přítomnosti báze, výhodně katalyzátoru, výhodně Pd-BINAP cyklohexyl)bifenylfosfinu za vzniku
CS2CO3 nebo K3PO4 a nebo Pd-(bissloučenin vzorce X.
Obvyklé výměny funkčních skupin, jako jsou například oxidace, redukce, alkylace, acylace, kondenzace a deprotekce, pak mohou být použity k další derivatizaci této řady za vzniku konečných sloučenin vzorce I.
Sloučeniny podle vynálezu vzorce I mohou také být připraveny podle obecného postupu ukázaného v následujícím schématu:
• · • to
Η’-Μ katalyzátor
6-jodindazol (XI) byl podroben působení jodu a báze, např. NaOH, ve vodné/organické směsi, výhodně s dioxanem. Směs je acidifikována a produkt XII byl izolován filtrací. K výslednému 3,6-dijodindazolu ve směsi dichlormethanu a 50% vodného KOH při teplotě 0 °C bylo přidáno činidlo chránící skupiny, výhodně SEM-C1, a katalyzátor fázového přenosu, např. TBABr. Dvě fáze byly naředěny, organické vrstvy byly odděleny, usušeny nad sulfátem sodným, filtrovány a koncentrovány. Hrubý produkt byl purifikován chromatografií na silikagelu za vzniku sloučeniny vzorce XIII. Ošetření sloučenin vzorce XIII ve vhodném organickém rozpouštědle vhodným R2-organokovovým činidlem, např. R2-ZnCl nebo bor-R2-boronovým činidlem, a
• · • · · 9 9 9 9 • 9 9 9 99 9999 vhodného katalyzátoru, výhodně Pd(PPh3)4 dalo, po extrakčním zpracování a chromatografií na silikagelu, sloučeniny vzorce XIV. Ošetření sloučenin vzorce XIV ve vhodném organickém rozpouštědle vhodným R1-organokovovým činidlem (např. bor-R1boronovým činidlem nebo R1-ZnCl), v přítomnosti vodné báze, uhličitanu sodného, a vhodného katalyzátoru, výhodně Pd(PPh3)4 dalo, po extrakčním zpracování a chromatografií na silikagelu, sloučeniny Vzorce XV. Obvyklé výměny funkčních skupin, jako jsou například oxidace, redukce, alkylace, acylace, kondenzace a deprotekce, pak mohou být použity k další derivatizaci této řady za vzniku konečných sloučenin vzorce I.
Alternativně mohou být sloučeniny vzorce I, kde R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina Y-Ar, kde Y je atom 0 nebo S, připraveny podle následujícího obecného schématu:
XVI katalyzátor, zahřívání nebo
DDQ modifikace /p' n I • · ··· *· • · · ι • ·
Míchaný acetonový roztok 3-chlorcyklohex-2-enonu (XV), H-R2 a bezvodý uhličitan draselný byl zahříván k varu pod zpětným chladičem po dobu 15-24 hodin, ochlazen a filtrován. Koncentrace a chromatografie filtrátu na silikagelu poskytla 3-R2-cyklohex-2-enon (XVI).
Ketony vzorce XVI mohou reagovat s vhodnou bází (M-B), výhodně lithiumbis(trimethylsilyl)amidem a reagovat se skupinou R1-CO-X (kde X = halogen), které po standardním kyselém zpracování a purifikaci poskytly sloučeniny vzorce XVII. Tento produkt, ve směsi HOAc a EtOH, smíchaný s monohydrátem hydrazinu, byl zahříván při vhodné teplotě po vhodnou dobu, výhodně v 60-80 °C po dobu 2-4 hodin. Po ochlazení byla směs nalita do saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného, extrahována organickým rozpouštědlem, koncentrována a purifikována na silikagelu za vzniku sloučeniny vzorce XVIII. Sloučeniny vzorce XVIII mohou být oxidovány s použitím velkého počtu známých metod za vzniku sloučenin vzorce I.
Další sloučeniny vzorce I mohou být připraveny analogickým způsobem k obecným postupům popsaným výše nebo detailními postupy popsanými v příkladech v tomto textu. Afinita sloučenin podle vynálezu k receptoru může být zvýšena zajištěním mnoha kopií ligandu v těsné blízkosti, výhodně s použitím kostry poskytnuté nosičovou skupinou, bylo ukázáno, že poskytnutí takových multivalentních sloučenin s optimálními prostory mezi skupinami dramaticky zlepšuje vazbu k receptoru. (Viz např. Lee et al., Biochem, 23, 4255, 1984). Multivalentnost a prostorové oddělení mohou být řízeny selekcí vhodných nosičových skupin nebo spojovacích jednotek. Takové skupiny zahrnují molekulární nosiče, které obsahují velký počet funkčních skupin, které mohou reagovat s funkčními skupinami sdruženými se sloučeninami podle vynálezu. Samozřejmě může být použit velký počet nosičů, včetně ·* proteinů, jako je například BSA nebo HAS, rozmanité peptidy včetně například pentapeptidů, dekapeptidů, pentadekapeptidů apod. Peptidy nebo proteiny mohou obsahovat požadovaný počet aminokyselinových zbytků majících volné aminoskupiny ve svých postranních řetězcích, ale mohou také být použity další funkční skupiny, jako jsou například sulfhydrylové skupiny nebo hydroxylové skupiny, za zisku stabilních vazeb.
Sloučeniny, které silně regulují, modulují nebo inhibují proteinkinázovou aktivitu sdruženou s receptory VEGF, FGF, komplexy CDK, TEK, CHK1, LCK, FAK a kinázou fosforylázy, kromě jiných, a které inhibují angiogenezi a/nebo buněčnou proliferaci jsou žádoucí a jsou jedním výhodným provedením předkládaného vynálezu. Předkládaný vynález se dále týká způsobu modulace nebo inhibice proteinkinázové aktivity, například v savčí tkáni, podáváním činidla podle vynálezu. Aktivita sloučenin podle vynálezu jako modulátorů proteinkinázové aktivity, jako je například aktivita kináz, může být měřena jakoukoliv metodou odborníkům dostupnou, včetně testů in vivo a/nebo in vitro. Příklady vhodných testů pro měření aktivity obsahují testy popsané v pracích Parast C. et al., Biochemistry, 37, 16788-16801, 1998, Jeffrey et al., Nátuře, 376, 313-320, 1995, WIPO mezinárodní patentová přihláška č. WO 97/34876 a WIPO mezinárodní patentová přihláška č. WO 96/14843. Tyto vlastnosti mohou být stanoveny, například s použitím jednoho nebo několika biologických testovacích postupů uvedených v příkladech níže.
Aktivní činidla podle vynálezu mohou být formulována do farmaceutických přípravků, jak je popsáno dále. Farmaceutické přípravky podle tohoto vynálezu obsahují účinné modulační, regulační nebo inhibiění množství sloučenin vzorce I, II, III nebo IV a inertní, farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo. V jednom provedení farmaceutických přípravků jsou poskytnuty účinné hladiny činidel podle vynálezu tak, aby bylo « * dosaženo terapeuticky prospěšného účinku týkajícího se modulace proteinkináz. „Účinnými hladinami jsou míněny hladiny, při kterých je účinek proteinkináz regulován na minimum. Tyto přípravky jsou připraveny v jednotkové lékové formě vhodné pro požadovaný způsob podávání, např. parenterální nebo perorální podávání.
Činidlo podle vynálezu je podáván v obvyklé lékové formě připravené kombinací terapeuticky účinného množství činidla (např. sloučeniny vzorce I) jako účinné složky s vhodnými farmaceutickými nosiči nebo ředidly podle obvyklých postupů. Tyto postupy mohou zahrnovat míchání, granulaci a lisování, nebo rozpuštění složek, jak je to třeba v závislosti na požadovaném přípravku.
Použitý farmaceutický nosič může být buď pevný nebo tekutý. Příklady pevných nosičů jsou laktóza, sacharóza, talek, želatina, agar, pektin, arabská guma, stearát hořečnatý, kyselina stearová apod. Příklady tekutých nosičů jsou sirup, arašídový olej, olivový olej, voda apod. Podobně nosič nebo ředidlo může zahrnovat látku umožňující časově opožděné nebo časově řízené uvolňování, která je v oboru známá, jako je například glycerylmonostearát nebo glyceryldistearát, a sice samotnou, nebo s voskem, ethylcelulózou, hydroxypropylmethylcelulózou, methylmethakrylátem apod.
Může být použita celá řada farmaceutických forem. Tedy, jestliže byl použit pevný nosič, přípravek může být formulován do tablet, vložen do tvrdých želatinových tobolek ve formě prášku nebo pelet, nebo může být ve formě pastilek nebo zdravotních bonbónů. Množství pevného nosiče může kolísat, ale obecně je přibližně od 25 mg do přibližně 1 g. Jestliže byl použit tekutý nosič, přípravek je ve formě sirupu, emulze, měkké želatinové tobolky, sterilního roztoku pro injekci nebo suspenze v ampuli nebo lahvičce nebo nevodné tekuté suspenze.
«0 <0 ·0 0
0 0 0 ·0·
0» ··
Aby se získala stabilní ve vodě rozpustná léková forma, je farmaceuticky přijatelná sůl činidla podle vynálezu rozpuštěna ve vodném roztoku organické nebo anorganické kyseliny, jako je například 0,3M roztok jantarové kyseliny nebo kyseliny citrónové. Jestliže není dostupná forma rozpustné soli, činidlo může být rozpuštěno ve vhodném dalším rozpouštědle nebo kombinaci dalších rozpouštědel. Příklady vhodných dalších rozpouštědel bez omezení zahrnují alkohol, propylenglykol, polyethylenglykol 300, polysorbát 80, glycerin apod. v koncentracích v rozmezí od 0 do 60 % celkového objemu. V příkladném provedení byla sloučenina vzorce I rozpuštěna v DMSO a naředěna vodou. Přípravek může také být ve formě roztoku soli účinné složky ve vhodném vodném vehikulu, jako je například voda nebo isotonický fyziologický roztok nebo roztok dextrózy.
Je známo, že aktuální dávky činidel použitých v přípravcích podle tohoto vynálezu kolísají podle konkrétního použitého komplexu, formulovaného konkrétního přípravku, způsobu podávání a konkrétního místa podávání, příjemce a léčené nemoci. Optimální dávky pro dané chorobné stavy může být stanoven odborníky s použitím obvyklých testů pro stanovení dávky se zřetelem k experimentálním datům pro dané činidlo. Pro perorální podávání příkladná denní dávka obecně použitá je přibližně od 0,001 přibližně do 1000 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodněji přibližně od 0,001 přibližně do 50 mg/kg tělesné hmotnosti, s kúrami léčení opakovanými ve vhodných intervalech. Podávání prekurzorů jsou typicky dávkovány v hmotnostních hladinách, které jsou chemicky ekvivalentní k hmotnostním hladinám plně aktivní formy.
Přípravky podle vynálezu mohou být vyráběny metodami obecně známými pro přípravu farmaceutických přípravků, např.
obvyklými technikami, jako je například míchání, rozpuštění, granulace, dražování, „levigating, emulgace, enkapsulace,
• · • * • · ·· « · · ·· ♦· vychytávání nebo lyofilizace. Farmaceutické přípravky mohou být formulovány obvyklým způsobem s použitím jednoho nebo více fyziologicky přijatelných nosičů, které mohou být vybrány ze skupiny, kterou tvoří excipienty a další látky, které usnadňují zpracování účinných sloučenin do přípravků, které mohou být použit farmaceuticky.
Vlastní formulace je závislá na vybraném způsobu podávání. Pro injekce mohou být činidla podle vynálezu formulována do vodných roztoků, výhodně ve fyziologicky kompatibilních pufrech, jako je například Hanksův roztok, Ringerův roztok nebo fyziologický roztok. Pro podávání přes sliznice jsou ve formulacích použita penetrující činidla vhodná k přestoupení bariéry. Taková penetrující činidla jsou v oboru obecně známa.
mohou být s účinnou
Pro perorální podávání mohou být sloučeniny snadno formulovány kombinací účinných sloučenin s farmaceuticky přijatelnými nosiči v oboru známými. Takové nosiče umožňují, že sloučeniny podle vynálezu jsou formulována jako tablety, pilulky, dražé, tobolky, tekutiny, gely, sirupy, suspenze, suspenze apod. pro perorální požívání léčeným pacientem. Farmaceutické přípravky pro perorální použití získány s použitím pevného excipientu ve směsi složkou (činidlem), volitelně namletím výsledné směsi a zpracováním směsi granulí po přidání vhodných pomocných látek, je-li žádoucí, pro přípravu jader pro tablety nebo dražé. Vhodné excipienty obsahují: plnidla, jako jsou například sacharidy, včetně laktózy, sacharózy, mannitolu nebo sorbitolu, a celulózové přípravky, například, kukuřičný škrob, pšeničný škrob, rýžový škrob, bramborový škrob, želatina, guma, methylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, karboxymethylcelulóza sodná nebo polyvinylpyrolidon (PVP). Je-li to třeba, mohou být přidána rozvolňovadla, jako je například zesítěný polyvinylpyrolidon, agar nebo kyselina alginová nebo její sůl, jako je například alginát sodný.
• · • ·
Jádra dražé jsou opatřena vhodnými obaly. Pro tento účel mohou být použity koncentrované roztoky sacharidů, které volitelně zahrnuji arabskou gumu, polyvinylpyrolidon, gelový základ Carbopol, polyethylenglykol a/nebo oxid titaničitý, roztok laku a vhodná organický rozpouštědla nebo směsi rozpouštědel, barviva nebo pigmenty mohou být přidány do obalů (potahů) tablet nebo dražé pro identifikaci nebo pro charakterizaci odlišných kombinaci aktivních činidel.
Farmaceutický přípravky, které mohou být použity perorálně, zahrnují „push-fit tobolky vytvořené ze želatiny, a také měkké uzavřené tobolky vytvořené ze želatiny a změkčovadla, jako je například glycerol nebo sorbitol. „Pushfit tobolky mohou obsahovat účinné složky ve směsi s plnidly, jako je například laktóza, pojivý, jako jsou například škroby, a/nebo lubrikanty, jako je například talek nebo stearát hořečnatý a, volitelně, stabilizátory. V měkkých tobolkách mohou být aktivní činidla rozpuštěna nebo suspendována ve vhodných tekutinách, jako jsou například mastné oleje, tekutý parafin nebo tekuté polyethylenglykoly. Kromě toho mohou být přidány stabilizátory. Všechny formulace pro perorální podávání by měly být v dávkách vhodných pro toto podávání. Pro bukální podávání mohou mít přípravky formu tablety nebo pastilky formulované obvyklým způsobem.
Pro podávání intranazálně nebo inhalací byly sloučeniny pro použití podle předkládaného vynálezu obyčejně formulovány do aerosolového spreje, který je aplikován z tlakového balení nebo rozprašovače za pomoci vhodného hnacího plynu (propelentu), např. dichlordifluormethanu, trichlorfluormethanu, dichlortetrafluorethanu, oxidu uhličitého nebo dalšího vhodného plynu. V případě tlakového aerosolového balení může být jednotková dávka určena pomocí vhodného dávkovacího ventilu pro aplikaci odměřené dávky. Tobolky a zásobníky ze želatiny pro použití v inhalátoru nebo přístroji ► · · • · • 1 11 • · · · · · k · · • 191 ·* ···» pro insuflaci apod. mohou být formulovány tak, že obsahují práškovou směs sloučeniny a vhodný práškovou bázi, jako je například laktóza nebo škrob.
Sloučeniny mohou být formulovány pro parenterální podávání injekcí, např. injekcí bolusu nebo kontinuální infúzí. Formulace pro injekce mohou být předloženy v jednotkové lékové formě, např. v ampulích nebo v nádobkách s více dávkami, s přidanými konzervačními činidly. Přípravky mohou mít takové formy jako suspenze, roztoky nebo emulze v olejových nebo vodných vehikulech a mohou obsahovat formulační činidla, jako jsou například suspendující činidla, stabilizátory a/nebo dispergační činidla.
Farmaceutické formulace pro parenterální podávání zahrnují vodné roztoky účinných sloučenin ve formě rozpustné ve vodě. Kromě toho mohou být připraveny suspenze účinných činidel jako příslušné olejové injekční suspenze. Vhodná lipofilní rozpouštědla nebo vehikula obsahují mastná oleje, jako je například sezamový olej nebo syntetické estery mastných kyselin, jako je například ethyloleát nebo triglyceridy nebo lipozomy. Vodné injekční suspenze mohou obsahovat látky, které zvyšují viskozitu suspenze, jako je například karboxymethylcelulóza sodná, sorbitol nebo dextran. Volitelně suspenze mohou také obsahovat vhodné stabilizátory nebo činidla, která zvyšují rozpustnost sloučenin, aby byla umožněna příprava vysoce koncentrovaných roztoků.
Pro podávání do oka je sloučenina vzorce I, II, III nebo IV dodávána ve farmaceuticky přijatelném očním vehikulu, takže je sloučenina udržována v kontaktu s očním povrchem po dostatečně dlouhou dobu, aby se umožnilo sloučenině penetrovat rohovkovou oblast a vnitřní oblasti oka, včetně, například, přední komory, zadní komory, sklivce, komorové vody, tekutiny sklivce, rohovky, duhovky/řasnatého tělesa, čočky, cévnatky/sítnice. Farmaceuticky přijatelné oční vehikulum může ·· fcfcfc fc fcfc fcfcfcfc být mast, rostlinný olej nebo opouzdřovací látka. Sloučenina podle vynálezu může také být injikována přímo do sklivce a komorové vody.
Alternativně může být účinná složka v práškové formě pro rekonstituci s vhodným vehikulem, např. sterilní vodou bez pyrogenu, těsně před použitím. Sloučeniny mohou také být formulovány v rektálních přípravcích, jako jsou například čípky nebo retenční klystýry, např. obsahující obvyklé čípkové báze, jako je například kakaové máslo nebo další glyceridy.
Kromě formulací popsaných výše mohou také být sloučeniny formulovány jako depotní přípravky. Takové dlouhodobě působící formulace mohou být podávány implantací (například, subkutánně nebo intramuskulárně) nebo intramuskulární injekcí. Tak například sloučeniny mohou být formulovány s vhodnými polymernímí nebo hydrofobními látkami (například, jako emulze v přijatelném oleji) nebo iontoměničové pryskyřice nebo jako pomalu rozpustné deriváty, například, jako pomalu rozpustná sůl.
Farmaceutickým nosičem pro hydrofobní sloučeniny je systém dalších rozpouštědel (ko-solventů), obsahující benzylalkohol, nepolární surfaktant, organický polymer mísitelný s vodou a vodná fáze. Systém dalších rozpouštědel může být VPD systém dalších rozpouštědel. VPD je roztok 3% (hmotnost/objem) benzylalkoholu, 8% (hmotnost/objem) nepolárního surfaktantu polysorbátu 80 a 65% (hmotnost/objem) polyethylenglykoiu 300, doplněný do objemu absolutním ethanolem. VPD systém dalších rozpouštědel (VPD:5W) obsahuje VPD naředěný 1:1 roztokem 5% dextrózy ve vodě. Tento systém dalších rozpouštědel rozpouští dobře hydrofobní sloučeniny a samotný je málo toxický po systémovém podávání. Přirozeně vzájemný poměr systému dalších rozpouštědel může být značně změněn bez porušení jeho charakteristické rozpustnosti a toxicity. Navíc může být změněna identita složek systému dalších rozpouštědel:
·· ·· • 9 9 9
9 ♦ · · ·
9·· * · »* 9999 například mohou být použity další nepolární surfaktanty s nízkou toxicitou namísto polysorbátu 80, může být změněna velikost frakce polyethylenglykolu, další biokompatibilní polymery mohou nahradit polyethylenglykol, např.
polyvinylpyrolidon a dextróza může být substituována dalšími sacharidy nebo polysacharidy.
Alternativně mohou být použity pro hydrofobní farmaceutické sloučeniny další aplikační systémy. Lipozomy a emulze jsou známé příklady aplikačních vehikul nebo nosičů pro hydrofobní léky. Mohou být také použita určitá organická rozpouštědla, jako je například dimethylsulfoxid, ačkoliv obvykle za cenu vyšší toxicity.
sloučeniny aplikovány s použitím uvolňováním, jako jsou například pevných hydrofobních polymerů obsahující terapeutické činidlo. Byly zavedeny také různé materiály umožňující prodloužené uvolňování, které jsou odborníkům známy. Tobolky s prodlouženým uvolňováním mohou, v závislosti na své chemické povaze, uvolňovat sloučeniny po několik týdnů až 100 dnů. V závislosti na chemické povaze a biologické stabilitě terapeutického činidla mohou být použity pro stabilizaci proteinu další strategie.
Kromě toho mohou být systému s prodlouženým semipermeabilní matrice
Farmaceutické přípravky také mohou obsahovat vhodné pevné nebo gelové nosiče nebo excipienty. Příklady takových nosičů nebo excipientů obsahují uhličitan vápenatý, fosfát vápenatý, sacharidy, škroby, deriváty celulózy, želatinu a polymery, jako jsou například polyethylenglykoly.
Některé ze sloučenin podle vynálezu mohou být poskytnuty jako soli s farmaceuticky kompatibilními protiionty (counterionty). Farmaceuticky kompatibilní soli mohou být vytvořeny s mnoha kyselinami, včetně chlorovodíkové, sírové, octové, mléčné, vinné, jablečné, jantarové, apod. Soli mají tendenci k tomu, že jsou rozpustnější ve vodných nebo dalších » 99 ·
···
9« »··9 protonových rozpouštědlech než odpovídající formy s volnou bází.
Příprava výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu je popsána detailně v následujících příkladech, ale odborník rozpozná, které popsané chemické reakce mohou být snadno upraveny k přípravě celé řady dalších inhibitorů proteinkináz podle vynálezu. Například syntéza sloučenin podle vynálezu, které nejsou uvedeny v příkladech, může být úspěšně prováděna modifikací odborníkům známou, např. užitím vhodné ochrany pro interferující skupiny, záměnou vhodným reagencií v oboru známých nebo vytvořením rutinních modifikací reakčních podmínek. Alternativně další reakce popsané v tomto textu nebo v oboru známé jsou považovány za použitelné pro přípravu dalších sloučenin podle vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
V příkladech popsaných dále, není-li uvedeno jinak, jsou všechny teploty udávány ve stupních Celsia a všechny části a procenta jsou hmotnostní. Reagencie byly zakoupeny od komerčních dodavatelů, jako je například firma Aldrich Chemical Company nebo firma Lancaster Synthesis Ltd. a byly použity bez další purifikace, není-li uvedeno jinak. Tetrahydrofuran (THF), N,N-dimethylformamid (DMF), dichlormethan, toluen a dioxan byly zakoupeny od firmy Aldrich v zapečetěných lahvích a použity hned po obdržení. Všechna rozpouštědla byla purifikována s použitím standardních metod odborníkům známých, není-li uvedeno jinak.
Reakce uvedené níže byly obecně prováděny pod přetlakem argonu nebo dusíku nebo s vysoušením zkumavky, při teplotě místnosti (není-li uvedeno jinak), v bezvodých rozpouštědlech, a reakční baňky byly uzavřeny gumovými zátkami pro zavádění ♦
♦ « • · • · ·* substrátů a reagencií prostřednictvím injekční stříkačky. Chemické sklo bylo sušeno v pícce a/nebo bylo sušeno zahříváním. Analytická chromatografie na tenké vrstvě (TLC) byla prováděna na tepelně ošetřených skleněných destičkách se silikagelem 60 F 254 Analtech (0,25 mm) a pomocí eluce vhodnými poměry rozpouštědel (objem/objem) a jsou uvedeny na patřičném místě. Reakce byly testovány TLC a ukončeny poté, co bylo usouzeno, že výchozí látka je spotřebována.
Vizualizace TLC destiček byla prováděna postřikem p-anisaldehydovým činidlem nebo fosfomolybdenovou kyselinou (Aldrich Chemical 20 % (hmotnostních) v ethanolu) a aktivací zahříváním. Zpracování bylo typicky prováděno zdvojením réakčního objemu reakčním rozpouštědlem nebo extrakčním rozpouštědlem, a pak promytím uvedenými vodnými roztoky s použitím 25 % objemu z extrakčního objemu, není-li uvedeno jinak. Roztoky s produktem byly usušeny nad bezvodým Na2SC>4 před filtrací a evaporací rozpouštědel při sníženém tlaku na rotační odpařovačce, pak se uvádí, že rozpouštědla byla odstraněna ve vakuu. Velmi rychlá chromatografie (flash chromatography) na koloně (Still et al., J. Org. Chem., 43, 2923 1978) byla prováděna s použitím silikagelu pro velmi rychlou chromatografií (47-61 μιη, Baker) a silikagelu: poměr hrubé látky přibližně 20:1 až 50:1, není-li uvedeno jinak. Hydrogenolýza byla prováděna při tlaku uvedeném v příkladech nebo při tlaku okolí.
1H-NMR spektra byla zaznamenávána na Brukerově přístroji pracujícím ve 300 MHz a 13C-NMR spektra byla zaznamenávána v 75 MHz. NMR spektra byla získána jako roztoky CDCI3 (udáváno v ppm), s použitím chloroformu jako referenčního standardu (7,25 ppm a 77,00 ppm) nebo CD3OD (3,4 a 4,8 ppm a 49,3 ppm) nebo vnitřně tetramethylsílan (0,00 ppm), kde to bylo potřebné. Další NMR rozpouštědla byla použita podle potřeby. Kde je uveden větší počet vrcholů, byly použity následující tt tt ·· • · · ♦ · • 9999 9 9 tttt tt ··· · • 9 • 9 99 zkratky: s (singlet), d (dublet), t (triplet), m (multiplet), š (široký), dd (dublet dubletu), dt (doublet tripletů). Kde jsou uvedeny kondenzační konstanty, jsou v jednotkách Hertz (Hz) .
Infračervená (IR) spektra byla zaznamenávána na spektrometru Perkin-Elmer FT-IR pro čisté oleje, jako KBr pelety nebo jako roztoky CDCI3 a kde jsou uvedeny, jsou udávány ve vlnočtu (cm'1) . Hmotnostní spektra byla získána s použitím LSIMS nebo elektrosprejové metody. Všechny teploty tání (tt) byly nekorigovány.
Příklad 1(a)
3-[E-2-(3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazol
~205 mg (0,461 mmol) (teoreticky) 3-[E/Z-2-(3,4dimethoxyfenyl)vinyl]-6-[3-methoxy-4-(methoxymethoxy)fenyl]ΙΗ-indazolu bylo rozpuštěno v 10 ml tetrahydrofuranu (THF) a bylo podrobeno působení 10 ml vody a 20 ml trif luoroctové kyseliny (TFA). Reakční směs byla ponechána za míchání ve 23 °C po dobu 30 minut. Směs byla naředěna 100 ml toluenu a těkavé látky byly odstraněny při sníženém tlaku 3,99 kPa (30 mm Hg, 35 °C) za vzniku koncentrovaného objemu ~5 ml. Opět bylo přidáno 100 ml toluenu a směs byla koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surové látky, která ještě obsahovala částečně kyselinu. Látka byla rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný hydrouhličitan sodný, organická látka byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. ~185 mg (0,461 mmol)
I 9« • 9
9 99
9« 9999 (teoreticky)) zbytku, směsi olefinových izomerů, bylo nabráno do 50 ml dichlormethanu ve 23 °C a bylo podrobeno působení 80 mg jodu. Směs byla ponechána za míchání ve 23 °C po dobu 12 hodin. Směs byla podrobena působení 10 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného 10 ml a 5% vodného bisulfitu sodného. Směs byla naředěna 200 ml ethylacetátu a organická látka byla promyta 100 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surového produktu. Surový produkt byl purifikován na 40 ml silikagelu (směs ethylacetátu a hexanu 6:4 -> 7:3) a všechny frakce obsahující požadovaný produkt byly spojeny, koncentrovány a precipitovány z dvojvrstvy dichlormethanu a hexanu (1:3) za vzniku 93 mg (spojené výtěžky) 3-[E-2-(3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazolu jako bílé pevné látky: Rf srn 0,42, p 0,35 (směs ethylacetátu a hexanu 7:3), FTIR (tenký film) 3324, 1600, 1514, 1463, 1422, 1264, 1137, 1024, 959, 852 cm-1, 3H NMR
(CDC13) δ 10,0 (š s, 1H), 8, 08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,59 (s,
1H) , 7,49 (d, 1H, J = 16,6 Hz) , 7,45 (dd, 1H, J = 1,4, 8,4
Hz) , 7,34 (d, 1H, J = 16, 6 Hz) , 7,20-7,12 (m, 4H), 7,03 (d,
1H, J = 8,0 Hz), 6, 91 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 5, 68 (š s, 1H) ,
3,99 (s, 3H) , 3,97 (s, 3H) , 3,93 (s, 3H), 13C NMR (CDCI3) δ
149, 6, 149,5, 146,0, 144,0, 142,6, 140,8, 133,9, 131,4, 130,7,
121,7, 121,4, 120,9, 120,4, 120,2, 118,6, 115,4, 111,7, 110,8,
109,1, 108,2, . 56,4, 56,3, 56,2. HRMS (ES) [M+H]/z vypočteno
403,1658, změřeno 403,1658 [M-H]/z vypočteno 401, změřeno
401.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
NaNO2, HCl
ΚΙ, H2O, 0 až 50 °C
.............>
99
9 9
9 9 99
9999 »· ···· β-aminoindazolu v baňce (2 1) obsahující velké
9 9 999
Ke 40,8 g (0,3065 mol, 1 ekv. s kulatým dnem o objemu 2 litrů magnetické míchadlo bylo přidáno 256 g ledu, pak následovalo 128 ml vody a reakční nádoba byla ponořena do ledové lázně. K této míchané suspenzi bylo při teplotě 0 °C přidáno 128 ml (1,53 mol, 5 ekv.) koncentrované vodné HCI. Hned poté bylo přidáno 23,3 g (0,338 mol, 1,1 ekv.) roztoku NaNO2 v 96 ml vody. Po 10 minutách míchání při teplotě 0 °C bylo přidáno 61 g (0,368 mol, 1,2 ekv.) KI zpočátku velmi pomalu (najednou po -100 mg, protože první malé dávky KI způsobují prudký vývin plynu), a pak rychleji (celková doba 5 minut). Chladná lázeň byla odstraněna a reakční směs byla zahřáta na 40 °C (vyvíjel se plyn). Když klesla rychlost vývoje plynu (-30 minut), reakční směs byla zahřáta na 50 °C po dobu 30 minut. Směs pak byla ochlazena na 23 °C a bylo přidáno 320 ml 3N NaOH pro neutralizaci, a pak následovalo 320 ml 50% saturovaného NaHCO3. Suspenze pak byla filtrována přes Buchnerovu nálevku za vzniku tmavě červenohnědé pevné látky. Pevná látka byla nabrána do 800 ml ohřátého THF a za míchání bylo přidáno 600 ml suchého silikagelu. K této suspenzi bylo přidáno 1,2 1 hexanu a směs byla vakuově filtrována přes krátký sloupec 300 ml silikagelu ve velkém filtru s fritou. Silikagel byl dále promyt 2 1 40% THF v hexanu. Filtráty byly spojeny a koncentrovány při sníženém tlaku za vzniku pevné látky. Pevná látka byla dále triturována -100 ml ethylacetátu, filtrována a usušena při sníženém tlaku za vzniku 36,1 g (48% výtěžek) 6-jod-lH-indazolu jako světle hnědé pevné látky: srn 0,12, p
0,48 (směs hexanu a EtOAc 1:1), 1H NMR (300 MHz, CDCI3) 7,9 (s, 1H), 7,8 (s, 1H), 7,42 (d, 1H) , 7,33 (d, 1H) , MS (ES) [M+H]/z vypočteno 245, změřeno 245, [M-H]/z vypočteno 243, změřeno
243.
NaO-t-Bu, MUCJ, THF, 0*C,40 min
->
ΐχτ (11) ·· ··· · • · • ♦**
9 4 4 9 9 9
9 949 9 9 · • · 4 4 9 9 4 4 4
4444 444 44 44 ·· ···«
Κ roztoku 7,35 g (30,1 mmol, 1 ekv.) 6-jod-lH-indazolu ve 100 ml THF ochlazeného na 0 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 2,89 g (30,1 mmol, 1 ekv.) t-butoxidu sodného. Byla pozorována změna barvy z oranžové na červenou. V jedné dávce bylo přidáno 6,60 g (30,1 mmol, 1 ekv.) mesitylensulfonylchloridu a ledová lázeň byla odstraněna a reakční směs byla ponechána ohřát se na 23 °C. Po 40 minutách byla směs zastavena saturovaným chloridem amonným a rozdělena mezi vodu a ethylacetát. Vodná vrstva byla extrahována celkem 3 krát ethylacetátem. Spojené organické látky byly promyty solankou, usušeny nad sulfátem sodným a koncentrovány při sníženém tlaku za vzniku 12,8 g (100 % výtěžek, směs 2:1) 6-jod-l-(2,4,6trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazolu jako oranžové pevné látky. XH NMR (CDC13) 8,51 (s, 1H) , 7,95 (s, 0,66H, hlavní izomer) , 7,91 (s, 0,33H, vedlejší izómer), 7,47 (d, 0,33H, J = 8,4 Hz), 7,29 (d, 0,33H, J = 8,4 Hz), 7,26 (d, 0,66H, J = 8,9 Hz), 7,18 (d, 0,66H, 8,9 Hz), 6,84 (s, 2H), 2,51 (s, 6H), 2,15 (s, 3H) .
(iii)
OH
PdCI2{PPři3)j, etjN, KgCOa dioxan 7H2O,90*C, 2 h ->.
Směs 5,78 g (13,56 mmol, 1,00 ekv.) 6-jod-l-(2,4,6trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazolu a 3,45 g (16,27 mmol, 1,20 ekv.) 3-methoxy-4-(methoxymethoxy)benzenboronové kyseliny v argonové atmosféře byla rozpuštěna v 15 ml dioxanu a 2,0 ml vody. K tomuto roztoku bylo přidáno 2,83 ml (20,3 mmol, 1,5 ekv.) triethylaminu, 2,8 g (20,3 mmol, 1,5 ekv.) uhličitanu draselného a 476 mg (0,678 mmol, 0,05 ekv.) dichlorbis(trifenylfosfin)palladia. Reakční směs byla zahřívána na 90 °C po dobu 2 hodin, a pak byla ochlazena na 23 °C. Směs byla φφ φφ ř · Φ φ ř · <
φφ φφ
Φ · I φ φφφφ φφ φφ· · φ · · • φφφ φ · oddělena mezi 250 ml ethylacetátu a 150 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surového 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)1-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazolu, který byl sušen za vysokého vakua po dobu 15 hodin a byl použit bez další purifikace.
pak následovalo 10,1 methoxyfenolu, 4,00 ml chloridu (MOMC1) a
3-methoxy-4-(methoxymethoxy)benzenboronová kyselina byla připravena takto: v baňce o objemu 100 ml byla připravena směs 50% KOH ve vodě (20 g KOH, 7 ekv. , 20 g ledu) v argonové atmosféře. K této rychle míchané směsi při teplotě 0 °C (udržované v ledové lázni) bylo přidáno 50 ml dichlormethanu, g (50 mmol, 1,00 ekv.) 4-brom-2^42,5 mmol, 1,05 ekv.) methoxymethyl322 mg (1 mmol, 0,02 ekv.) tetrabutylamoniumbromidu. Lázeň byla odstraněna a směs byla pomalu ponechána ohřát se na 23 °C za rychlého míchání po dobu 2 hodin. Směs byla přenesena do dělicí nálevky a naředěna 350 ml dichlormethanu a 300 ml vody, které jsou použity k usnadnění přenosu. Organická látka (nyní spodní vrstva) byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku 11,9 g (97 %)
4-brom-2-methoxy-l-(methoxymethoxy)benzenu jako žluté j ako
H NMR (CDC13) δ 7,0 (s, [M+H]/z kapaliny, která je přečištěna H NMR
3H), 5,13 (s, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,47 (s, 3H). MS (El vypočteno 235, změřeno 235. Do baňky s kulatým dnem o objemu 50 ml bylo nabráno 4,80 g (19,4 mmol, 1,00 ekv.) 4-brom-2methoxy-1-(methoxymethoxy)benzenu v 35 ml THF a bylo ochlazeno na -78 °C (20 minut pro tento objem). K této směsi bylo přidáno 12,75 ml 1,6M v hexanu (20,4 mmol, 1,05 ekv.) n-BuLi a směs byla ponechána za míchání v -78 °C po dobu 40 minut. Směs pak byla přidána kanylou do druhé baňky obsahující 22 ml (194 mmol, 10 ekv.) B(OMe)3v50 ml THF v -78 °C. Po 20 minutách byla
9« 99
9 9
9 99·
9* 9999
9 9
999
9 ·
• 9 9 ·
99 ·9 • 9 9 9 * * 9*
9·9
9999 chladná lázeň odstraněna. Po 15 minutách zahřívání (~0 °C, led na boku baňky začal tát) bylo přidáno 50 ml vody k reakční směsi, která byla míchána po dobu 45 minut. Směs byla koncentrována při sníženém tlaku, aby se odstranila většina THF, a pak byla rozdělena mezi 300 ml ethylacetátu a 150 ml vody, která byla acidifikována přidáním malého množství, ~10 ml, 20% kyseliny citrónové. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku pevné látky. Triturace 10 ml ethylacetátu a 5 ml hexanu následovaná filtrací poskytla 3,15 g (77 %) 3-methoxy-4(methoxymethoxy)benzenboronové kyseliny jako bílé pevné látky: Rf sm 0,59, p 0,18 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,85 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,72 (s, 1H) , 7,22 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,30 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,55 (s, 3H).
(iv)
M1
NaOH, MeOH 45 *C, 1 h
Nepurifikovaný 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-1(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazol (v argonové atmosféře) byl rozpuštěn ve 20 ml THF a byl podroben působení 7 0 ml IN NaOH v MeOH (odplyněno probubláváním přes argon po dobu 3 až 5 minut) . Směs byla zahřívána na 45 °C po dobu 1 hodiny a ponechána vychladnout. Směs byla neutralizována přidáním 50 ml IN HCl, pak následovalo 200 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Produkt byl extrahován 350 ml ethylacetátu, usušen nad sulfátem sodným a koncentrován při sníženém tlaku za vzniku surového 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-ΙΗ-indazolu. Purifikace chromatografií na silikagelu (500 ml silikagelu, 1,8 1 20% ethylacetátu v benzenu, 1,8 1 30% ethylacetátu v benzenu) poskytla 1,19 g • · ···· • ♦ • ··· • 4 »· • · • >·· • · · • · · ·· ·· ·» ·· • · · · • · · • · · · • · · ·· ···· (31 %) 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazolu: ΧΗ NMR
(CDCI3) δ 7,80 (s, 1 H), 7,69 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,52 (s,
1H), 7,29 (d, 1H, J = 8,5 Hz) , 7,16 (s, 1H) , 7,13 (s, 1H) ,
7,08 (s, 1H). MS (ES) [m+Na]/z vypočteno 337, změřeno 337,
[m+Cl~] /z, vypočteno - 349, změřeno 349.
(v)
II Ij, NaOH, dioxan
23*C, 1h
V baňce s kulatým dnem o objemu 100 ml v argonové atmosféře bylo rozpuštěno 1,19 g (4,18 mmol, 1 ekv.) 6-(3methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazolu ve 25 ml dioxanu a 14 ml 3N NaOH. Tato směs byla podrobena působení 1,17 g (14,60 mmol, 1,10 ekv.) jodu, přidávaného v ~5 dávkách (~10 minut). Několik dalších dávek (~4) jodu po 50 mg bylo přidáváno, dokud nebyla reakce ukončena, jak bylo vizualizováno TLC (3:7 směs ethylacetátu a hexanu). Směs byla acidifikována 25 ml 20% kyseliny citrónové a bylo přidáno 20 ml 5% NaHSO3. Směs byla rozdělena mezi 150 ml ethylacetátu a 100 ml vody. Organická látka byla promyta 80 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného a 50 ml solanky a byla usušena nad sulfátem sodným a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace krystalizací ze 3 ml ethylacetátu, a pak 7 ml hexanu poskytla 1,33 g (78 %) čistého 3-jod-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazolu jako pevné látky: 1H NMR (CDCI3) δ 10,48 (š s, 1H) , 7,62 (s, 1H), 7,57 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,47 (dd, 1H, J = 1,3, 8,5 Hz), 7,18 (m, 3H), 5,29 (s, 2H), 3,99 (s, 3H) , 3,55 (s, 3H) .
•« ···· · · · · · · ·· • · ··· ·*··
V baňce s kulatým dnem o objemu 100 ml bylo rozpuštěno 921 mg (2,245 mmol, 1,00 ekv.) 3-jod-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-ΙΗ-indazolu ve 36 ml THF a ochlazeno na -78 °C (ponecháno 8 minut v tomto množství). Bylo přidáno 2,5 ml 1,8M roztoku (4,49 mmol, 2,00 ekv.) PhLi a směs byla ponechána za míchání po dobu 30 minut. Bylo přidáno 3,63 ml (4,71 mmol, 2,1 ekv.) roztoku s-BuLi a reakční směs byla ponechána za míchání po dobu 1 hodiny v -78 °C. Bylo přidáno 1,4 ml (18 mmol, 8,0 ekv.) čistého DMF. Chladná lázeň byla odstraněna a reakce byla ponechána ohřát se pomalu na 0 °C na vzduchu. Když led roztál, bylo přidáno 20 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Produkt byl extrahován 200 ml ethylacetátu z dalších 75 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného, usušen nad sulfátem sodným, dekantován a koncentrován při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu (450 ml silikagelu, 4:6 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 498 mg (71 %) 6—(3 — methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu: Rf sm 0,30, p 0,14 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), 1H NMR (CDC13) δ 10,85 (š s, ÍH) , 10,25 (s, ÍH) , 8,37 (d, ÍH, J = 8,4. Hz), 7,67 (s, ÍH) , 7,60 (d, ÍH, J = 8,4 Hz), 6,26 (d, ÍH, J = 8,7 Hz), 7,19 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,55 (s, 3H). .
(vil)
MU-C1,DMAP,CH,CI, 0 *C, 30 min --->
CH' • · • · · ·
ekv. ) ekv. )
441 mg (1,41 mmol, 1,0 ekv.) 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu bylo nabráno jako suspenze do 15 ml dichlormethanu a bylo ochlazeno na 0 °C. Tato směs byla podrobena působení 324 mg (1,48 mmol, 1,05 mesitylensulfonylchloridu a 181 mg (1,48 mmol, 1,05 dimethylaminopyridinu (DMAP). Směs byla ponechána za míchání po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a byla zastavena přidáním vody. Směs byla rozdělena mezi vodu a organickou vrstvu směsi ethylacetátu a hexanu 1:1. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surové látky, která byla purifikována chromatografii na silikagelu (50 ml silikagelu, 3:7 směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 374 mg (54 %) 6-(3-methoxy-4methoxymethoxyfenyl)-1-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-1Hindazol-3-karbaldehydu: Rf srn 0,17, p 0,53 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), XH NMR (CDC13) δ 10,20 (s, 1H), 8,41 (s, 1H) , 8,37 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,73 (dd, 1H, J = 1,4, 8,4 Hz), 7,3 (m, 3H), 7,08 (s, 2H) , 5,36 (s, 2H) , 4,08 (s, 3H) , 3,71 (s, 3H) ,
2,74 (s, 6H), 2,40 (s, 3H).
(viii) cm
1,09 g (2,22 mmol, 4,0 ekv.) jemně mletého trifenyl(3,4dimethoxybenzyl)fosfoniumbromidu bylo nabráno jako suspenze do 15 ml THF a bylo ochlazeno na -78 °C. K této směsi bylo přidáno 1,04 ml 1,6M (1,66 mmol, 3,0 ekv.) n-BuLi za vzniku červenooranžového roztoku. Směs byla ponechána ohřát se na 23 °C po dobu 1 hodiny. Tato směs pak byla při teplotě 0 °C přidána kanylou k roztoku 274 mg (0,554 mmol, 1,0 ekv.) 6-(34 4 ·· 4 4 4 4 ·· ·· 4 4 • •4 444 4 · 4 4
4444 · 4444 4 4 · methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-1-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl) -lH-indazol-3-karbaldehydu v 5 ml THF. Výsledná směs byla ponechána za míchání při teplotě 0 °C po dobu 10 minut a byla zastavena saturovaným hydrouhličitanem sodným. Výsledná směs byla rozdělena mezi saturovaný hydrouhličitan sodný a ethylacetát. Organická látka byla koncentrována při sníženém tlaku a zbytek byl purifikován chromatografií na silikagelu (50 ml silikagelu, 3:7-> 4:6 směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 289 mg (83 %) 2,5:1 směsi cis/trans 3—[2—(3,4— dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl) -1(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-indazolu: Rf sm 0,53, p 0,32 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), 1H NMR (CDC13) δ 8,35 (s,
0,3H), 8,32 (s, 0,7H), 8,03 (d, 0,3H, J = 8,4 Hz), 6,60-6,85 (m, H), 6,65 (d, 0,7H, J 8,4 Hz), 6,60 (d, 0,7H, J = 12,5 Hz),
5,30 (s, 0,6H), 5,29 (s, 1,4H), 4,00-3,50 (8 singletů, 12H) ,
2,72 (s, 1,8H), 2,67 (s, 4,2H), 2,34 (s, 3H) , MS (ES) [M+H]/z vypočteno 629, změřeno 629, [M-H]/z vypočteno 627, změřeno
627.
(ix)
Roztok 1,0 g (17,8 mmol) 1M KOH ve směsi vody a MeOH 1:1 (18 ml celkem) byl připraven v argonové atmosféře a byl odplyněn cykly vakuum/argon (5 krát). V samostatné baňce bylo rozpuštěno 289 mg (0,461 mmol, 1,0 ekv.) 3—[2—(3,4— dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-1(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazolu v 8 ml THF v argonové atmosféře. K tomuto roztoku bylo přidáno 10 ml výše uvedeného 1M roztoku KOH ve směsi vody a MeOH 1:1. Reakce byla • · • 4 • 4
4444
4 4 • 4 44
4 4 « · 4 4 • •444 4 · · zahřáta na 30 °C a byla ponechána za míchání po dobu 7 hodin. Reakční směs byla neutralizována přidáním 7 ml 20% kyseliny citrónové. Výsledná směs byla rozdělena mezi 150 ml ethylacetátu a 100 ml vody. Organická látka byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku cis a trans 3-[2-(3,4dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-1Hindazolu (použit surový produkt): Rf srn 0,46, pl 0,17, p2 0,23 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), XH NMR cis izomer (CDC13) δ 7,55 (s, 1H), 7,3-7,1 (m, 6H), 7,02 (dd, 1H, J = 1,9, 8,3 Hz), 6,85 (d, 1H, J = 12,5 Hz), 6,78 (d, 1H, J = 12,5 Hz), 6,74 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 5,21 (s, 2H) , 3,88 (s, 3H) , 3,70 (s, 3H) , 3,43 (s, 3H) , 3,42 (s, 3H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 447, změřeno 447, [M-H]/z vypočteno 445, změřeno 445.
Příklad 1(b)
3-(E-styryl)-6-(3-benzyloxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 1 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu l(a) kromě toho, že 4-brom-2-benzyloxyfenol byl použit v kroku (iii) namísto 4-brom-2-methoxyfenolu. R/ srn 0,35, p 0,30 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), XH NMR (CDC13) δ 8,06 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,637,18 (m, 17H), 7,05 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 5,19 (s, 2H). MS (Cn [M+H]/z vypočteno 419, změřeno 419, [M-H]/z vypočteno 417, změřeno 417.
* 9 9 · 4 ·
9
9 99 • · · ·
Příklad 1(c)
3-[E-2-(3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-allyloxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 1 (c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu l(a) kromě toho, že 3-allyloxy-4-(methoxymethoxy)benzenboronová kyselina byla použita namísto 3-methoxy-4-(methoxymethoxy)benzenboronové kyseliny v kroku (iii). MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 429, změřeno 429, MS (ESI) (M-H]/z vypočteno 427, změřeno 427.
Příklad 2(a)
3-(naftalen-2-yl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
mg (0,055 mmol) 6-(4-benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3naftalen-2-yl-lH-indazolu bylo rozpuštěno ve směsi 2 ml ethylacetátu, 2 ml benzenu a 2 ml methanolu. K tomuto roztoku bylo přidáno 25 mg 10% (hmotnostních) palladia na uhlí a reakční nádoba byla odplyněna cykly vakuum/vodík (pět cyklů). Reakční směs byla ponechána za míchání po dobu 3 dnů ve 23 °C a byla filtrována přes krátký sloupec celitu. Koncentrace a purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 8 mg (40 %) 3-(naftalen-2-yl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazolu: 1H « ·
NMR (CDCI3) δ 10,3 (b s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,20 (d, 1H, J = 8
Hz) , 7,98 (d, 1H, J = 8 Hz) , 7,90 (m, 1H) , 7,7-6, 8 (m, 9H) ,
3, 98 (s, 3H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 367, změřeno 367 , [M-
H]/z vypočteno 365 , změřeno 365.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
117 mg (0,564 mmol, 6,0 ekv.) 2-bromnaftalenu bylo rozpuštěno v 0,75 ml THF a ochlazeno na -78 °C. Směs byla podrobena působení 226 μΐ 2,5M (6,0 ekv.) n-BuLi a byla ponechána za míchání v -78 °C po dobu 30 minut. Směs pak byla kanylou přidána ke 139 mg (0,80 mmol, 8,5 ekv.) čerstvě usušeného pevného ZnCl2 a výsledná směs byla ponechána ohřát se na 23 °C (během přidávání vymizelo žluté zbarvení). Po 30 minutách ve 23 °C byla směs přidána kanylou ke směsi 60 mg (0,094 mmol, 1 ekv.) 6-(4-benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-jod-l(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-indazolu a 6 mg (0,005 mmol, 0,05 ekv.) Pd(PPh3)4. Výsledný roztok byl ponechán za míchání po dobu 16 hodin. Byl přidán saturovaný hydrouhličitan sodný a směs byla rozdělena mezi 15 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného a 15 ml ethylacetátu. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografii na silikagelu (1:9-2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 42 mg (70 %) 6-(4-benzyloxy-3methoxyfenyl)-3-naftalen-2-yl-l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazolu jako pevné látky: Rf sm 0,4, p 0,4 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 1H NMR (CDCI3) δ 8,44 (s, 1H), 8,41 > · · · · • « • · ·· • · • · ·♦ • · * (s, 1H), 8,12 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,05-7,00 (m, 17H), 5,30 (s,
2H), 4,02 (s, 3H), 2,80 (s, 3H), 2,34 (s, 3H) .
6-(4-benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-jod-l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 1(a), kroky (i) až (v).
(ii J
COr^
6-(4-benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-naftalen-2-yl-l-(2,4,6trimethylbenzensulfonyl)-ΙΗ-indazol byl konvertován na 6-(4benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-naftalen-2-yl-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu l(a), krok ethylacetátu a hexanu 3:7), 1H
(d, 1H, J = 8,5 Hz) , 8 ,10 (dd,
1H, J = 8,3 Hz) , 7,88 (m, 2H),
(m, 5H), 7,30 (m 3H) , 7,15 (d,
J = 2,1, 8,3 Hz) , , 6,91 (d, 1H,
(s, 3H) .
(ix) . Rf sm 0,40, P 0 <17 ( směs
NMR (CDC13) δ 8,40 (s, 1H) , 8,12
1H, J = 1,6, 8,4 Hz) , 7,93 (d,
7,61 (m, 1H) 7,56 (s, 1H) , 7,43
iH, J = 2,0 Hz), 7,08 (dd, 1H,
J = 8,3 Hz), 5,16 (s, 2H) , 3,91
Příklad 2(b)
3-fenyl-6-(3-methoxy-4-hydroxyf yl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 2 (b) byla připravena způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2 (a) kromě podobným toho, že • 9 • « « · 9 9 9 9 99
9 9 9 9 9 ·
999 9 9999 9 9 · • ··· · · 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 999 99 99 ·· ···· fenyllithium bylo použito namísto 2-naftyllithia vzniklého z 2-bromnaftylenu v kroku (i). 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,87 (d, 1H), 7,83 (d, 2H) , 7,55-7,27 (m, 5H) , 7,01 (m, 2H) , 6,80 (d, 1H) , 3,83 (s, 3H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 317, změřeno 317, [M-H]/z vypočteno 315, změřeno 315.
Příklad 2(c)
3-(3,4,5-trimethoxyfenyl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-1Hindazol
Sloučenina z příkladu způsobem, jak bylo popsáni 3,4,5-trimethoxyfenylbromid 2-bromnaftylenu. Rf sm 0,67,
8:2), 1H NMR (CDC13) δ 7,93 (d, 1H, J
7,39 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,10 (m, 4H),
3,90 (s, 9H) , 3,85 (s, 3H) , MS (ES) [M+H]/z vypočteno 407, změřeno 407, [M-H]/z vypočteno 405, změřeno 405.
2(c) byla připravena podobným
v příkladu 2(a) kromě toho, že
byl použit v kroku (i) namísto
p 0,38 (směs ethylacetátu a hexanu
(d, 1H, J = 8 Hz) , 7,58 (s, 1H),
(m, 4H) , 6, 92 (d, 1H, J = 8 Hz),
Příklad 2(d)
3-(lH-indol-2-yl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
• 9 9 99·
9 • 9 • 9 99«
Sloučenina z příkladu 2 (d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2 (a) uvedeném výše, kromě toho, že 1-fenylsulfonylindazol byl použit namísto 2bromnaftylenu . v kroku (i)
Rf sm 0,20,
0,15 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), 1H NMR (CDC13) δ 10,0 (š s, 1H) , 9,05 (š s, 1H), 8,01 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,55 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,49 (s, 1H) , 7,37 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,29 (d, 1H, J = 8
Hz), 7,2-7,1 (m, 5H) , 6,92 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,63 (š s, 1H) ,
MS (ES) [M+H]/z vypočteno 356, změřeno 356, [M-H]/z vypočteno
354, změřeno 354.
Příklad 2(e)
3- (benzofuran-2-yl)-6-(3-benzyloxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 2 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2 (a) uvedeném výše, kromě toho, že benzofuran byl použit namísto 2-bromnaftylenu v kroku (i). ’-Η NMR (CDC13) δ 8,21 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,60 (m, 3H) , 7,30-7,10 (m, 12H) , 7,01 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,82 (š s, 1H), 5,15 (s, 3H).
Příklad 3
3- (lH-indol-2-yl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
OH
9 999 9 9 9 99
9 9 9 9 9
9 99 9 9 9 99
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-β-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazol byl konvertován na 3,5 mg (28 %) 4-[3-(lHbenzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-yl]-2-methoxyfenolu podle postupu popsaného v příkladu 1 (a) . HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 357,1351, změřeno 357,1349.
Výchozí látka byla připravena takto:
OHI
CuAc» AeQH MoOK, Η,Ο
----------------
mg (0,064 mmol, 1 ekv.) 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu (z příkladu l(a), krok (vi) ) bylo rozpuštěno v 0,7 ml odplyněné směsi MeOH a vody 1:1 a bylo podrobeno působení 19 μΐ (5 ekv.) octové kyseliny, 8,3 mg (1,2 ekv.) 1,2-diaminobenzenu a 18 mg (1,4 ekv.) octanu měďnatého ve 23 °C. Směs byla míchána po dobu 30 minut, byla naředěna 3 ml ethanolu a 2 ml vody a byla podrobena probublávání proudem SH2 po dobu 3 minut, což poskytlo černý precipitát. Směs byla ponechána za míchání po dobu 12 hodin. Směs byla filtrována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (6:4 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 14 mg (54 %) 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-6-(3-methoxy-4methoxymethoxyfenyl)-ΙΗ-indazolu jako pevné látky, Rf srn 0,39, p 0,24 (směs ethylacetátu a hexanu 6:4), 1H NMR (CDCI3) δ 8,69 (d, IH, f = 8 Hz), 7,70 (š s, 2H) , 7,58 (s, IH) , 7,53 (d, IH, J = 8 Hz), 7,30-7,15 (m, 7H), 5,30 (s, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,58 (s, 3H) , MS (ES) [M+H]/z vypočteno 401, změřeno 401, [M-H]/z vypočteno 399, změřeno 399.
•fc ···« • fc fcfc fcfc fcfc fcfcfc fcfcfcfc • fcfcfcfc · · ·
Příklad 4(a)
N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]benzamid
HCl, MeOH
Roztok 0,09 g (0,17 mmol) N-[3-(2-benzoyl-3-styryl-lHindazol-6-yloxy) fenyl ] benzamidu ve 2 ml 6N vodné HCl a 3 ml MeOH byl zahříván v 65 °C po dobu přibližně 4 hodin. Ochlazený roztok byl nalit opatrně do saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného. Precipitát byl filtrován, sbírán a podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1). Bylo získáno 32 mg (50 %) N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]benzamidu jako béžové pevné látky: 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,50 (s, IH), 10,32 (s, IH), 8,23 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,92 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,72 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,71751 (m, 7H), 7,51-7,47 (m, 3H), 7,30 (t, IH, J = 7,2 Hz), 7,05 (s, IH), 7,01 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,86 (dd, IH, J = 8,2, 2,3 Hz). Anal. výpočet pro C28H21N3O2 · 0,3H2O: C, 76, 97, H, 4,98: N, 9,62. Změřeno: C, 76,94, H, 5,13, N, 9,40.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
.aceton refiux,
Suspenze amino)fenolu,
10,47 g (38,3 mmol) 3-(benzhydryliden5,00 g (38,3 mmol) 3-chlorcyklohex-2-enonu a 5,82 g (42,1 mmol) uhličitanu draselného ve 150 ml acetonu byla přes noc zahřívána k varu pod zpětným chladičem.
• to toto·· ·· toto to· ·· • to · ··· to··· toto·· · ···· · · · • ··· ·· ··· · to • ·····«··
Ochlazená reakční směs byla filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1). Tímto způsobem bylo získáno 8,82 g (63 %) 3-[3-(benzhydrylidenamino)fenoxy]cyklohex-2-enonu jako žluté pevné látky: 1H NMR
(CDC 13) δ 7,78 (d, 2H, J = 7,0 Hz), 7,50 1 (d, IH, J = 7,1 Hz) ,
7,45 (d, 2H, J = 7,7 Hz) , 734-7,10 (m, 6H) , 6,69 (d, IH, J =
8,0 Hz) , 6,61 (d, IH, J = 8,0 Hz), 6,38 (s, IH), 4,89 (s, IH) ,
2,55 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 2,34 (t, 2H, J = 6,2 Hz) , 2,06 (m,
2H) . Anal . výpočet pro 1 C25H21NO2 0,2H2O: C, 80,92, H, 5,81 , N,
3,78. Změřeno: C, 81,12, H, 5,81, N, 3,72.
3-(benzhydrylidenamino)fenol byl připraven takto: míchaný roztok 15,0 g (82,8 mmol) benzofenoniminu a 9,03 g (82,8 mmol) 3-aminofenolu ve 25 ml toluenu byl zahříván k varu pod zpětným chladičem s odstraněním H2O Dean-Starkovým jímadlem po dobu 3,5 hodiny. Krystaly, které vznikly z ochlazené reakční směsi, byly sbírány vakuovou filtrací, promyty hexanem a usušeny na vzduchu. Tímto způsobem bylo získáno 17,3 g (76 %) 3-(benzhydrylidenamino) fenolu jako světle žluté pevné látky: NMR
(CDCI3) δ 7,64 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,38 (d, IH, J = 7,1 Hz) ,
7,34-7,15 (m, 7H), 7,04 (d, , 2H, J = 7,2 Hz), 6,88 (t, IH, J =
8,1 Hz) , 6,82 (d, IH, J = 8,2 Hz), 6,23 (s, IH), 6,21 (d, IH,
J = 7,8 Hz) . Anal. výpočet pro C19H15NO: C, 83,49, H, 5,53 , N,
5,12. Změřeno: C, 83,51, H, 5,65, N, 5,03
(ii)
·· ···· ·« ·· • · · · · · • ··· tt · ··· tt · · · · · • · · · · •··tt ··« ·· ··
Roztok 4,37 g (11,89 mmol) 3-[3-(benzhydrylidenamino) fenoxy]cyklohex-2-enonu ve 20 ml THF byl přidán pomalu k 25,0 ml roztoku LiHMDS (l,0M roztok v THF) v 10 ml THF v -78 °C. Pět minut po skončení přidávání bylo najednou přidáno 1,98 g (11,89 mmol) trans-cinnamoylchloridu a míchání pokračovalo v -78 °C po dobu 30 minut. Reakce byla zastavena saturovaným roztokem NH4C1 a extrahována EtOAc (2 x) . Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSO4) a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (5:1). Tímto způsobem bylo získáno 3,34 g (56 %) 3—[3 — (benzhydrylidenamino)fenol)-6-(3-fenylakryloyl)cyklohex-2enonu jako žlutooranžové pevné látky: 1H NMR(CDCl3) δ 15,69 (s,
1H) , 7,80 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,63-7,01 (m, 15H) , 6,93 (d,
1H, J = 15,6 Hz), 6,75 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 6,66 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,46 (s, 1H), 4,92 (s, 1H) , 2,85 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,62 (t, 2H, J = 7,2 Hz). Anal. výpočet pro C34H27NO3: C, 82,07, H, 5,47, N, 2,82. Změřeno: C, 81,88, H, 5,53, N, 2,81.
(iii)
Wtt-HjO.HOAc, EtOH,70C ->.
(3,64 mmol) 3-[3roztoku 1,81 g (benzhydrylidenamino)fenol]-6-(3-fenylakryloyl)cyklohex-2enonu rozpuštěnému v 10 ml směsi HOAc/EtOH (1:1) byly přidány 2,0 ml (41,23 mmol) hydrátu hydrazinu. Roztok byl zahříván v 75 °C po dobu 25 minut. Po ochlazení byla reakční směs opatrně nalita do saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného a extrahována EtOAc (2 x) . Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSO4) a ···· «9 ·9 ·· 99 • · · · · · · « · « · · ·· 9 9 9 99 9 9 «
999 99 999 9 9
9 9999 999
9999 999 99 99 99 9999 koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1). Bylo získáno 539 mg (45 %) 3-(3-styryl-4,5-dihydro-lHindazol-6-yloxy)fenylaminu jako žluté pevné látky. 1H NMR
(DMSO-d6) δ 7,55 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,38 (t, 2H, J = 7,2 Hz),
7,27 (t, 1H, J = 7,2 Hz), 7,05 (m, 3H), 6,38 (d, 1H, J = 8,0
Hz) , 6, 31 (s, 1H), 6,23 (d, 1H , J = 7,9 Hz) , 5 ,52 (s, 1H),
5,26 (s, 2H) , 2,92 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 2,58 (t, 2H, J = 8,1
Hz) . Anal . výpočet pro C2iHi9N3O· 0,3H2O: C, 75 ,33, H, 5,90, N,
12,55. Změřeno: C, 75,46, H, 5,96, N, 12,35.
(iv)
K míchanému roztoku 50 mg (0,15 mmol) 3-(3-styryl-4,5dihydro-lH-indazol-6-yloxy)fenylaminu a 54 μΐ (0,31 mmol) N, N-diisopropylethylaminu v 5 ml CH2C12 bylo přidáno 36 μΐ (0,31 mmol) benzoylchloridu. Po 15 minutách byla reakční směs naředěna CH2C12 a promyta postupně 0,5N HCl, saturovaným roztokem hydrouhličitanu sodného a solankou, usušena (MgSOU a koncentrována při sníženém tlaku. K míchanému roztoku zbytku v 1,4-dioxanu bylo přidáno 35 mg (0,15 mmol) 2,3-dichlor-5,6dikyano-1,4-benzochinonu (DDQ). Po 1 hodině byla reakční směs koncentrována při sníženém tlaku a zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1). Tímto způsobem bylo připraveno 90 mg (kvantitativně) N-[3-(2-benzoyl-3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]benzamidu jako rezavě zbarvené pevné látky: 1H NMR(CDCl3) δ 8,13 (s, 1H),
9· fcfc·· ** *· fcfc *fc fcfcfc fcfcfc fcfcfcfc • fcfcfc · fcfcfc· · fc fc • fcfcfc fcfc fcfcfc fc fc • » fcfcfcfc fcfcfc ···» fcfcfc fcfc fcfc «« fcfcfc*
8,02 (d, 2H, J = 7,0 Hz), 7,94 (d, 1H, J = 8,7 Hz 2H, J = 6,8 Hz), 7,57-7,19 (m, 17H), 6,84 (d, 1H, J
7,74 (d,
8,3 Hz) .
Příklad 4(b)
N [3-(3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]acetamid
Sloučenina způsobem, jak kromě toho, že z příkladu 4 (b) byla připravena podobným bylo popsáno v příkladu 4(a) uvedeném výše, acetanhydrid byl použit namísto benzoylchloridu v kroku (iv) . XH NMR(DMSO-d6) δ 13,08 (š s, 1H) , 10,03 (s, 1H) , 8,22 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,72(d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,52 (s, 2H) , 7,44-7,27 (m, 6H) , 7,01 (s, 1H) , 6,96 (dd, 1H, J = 8,7, 2,1 Hz), 6,78 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 2,01 (s, 3H). Anal. výpočet pro C23H19N3O2 · 0,25 H2O: C, 73, 88, H, 5,26, N, 11,24. Změřeno: C, 74,20, H, 5,57, N, 10,82.
Příklad 5(a) {3-(3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyljamid 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny
Suspenze 57 mg (0,10 mmol) {3-[1-(5-methylthiazol-2karbonyl)-3-styryl-lH-indazol-6-yloxylfenyl}amidu 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny a 50 mg (0,36 mmol) uhličitanu ** 1111 «9 *9 99 *·♦ *99 · «« « · 9 9 9 9 9 9 9 ··· 9·· ·» 99 99 9·<>9 draselného v MeOH byla míchána ve 23 °C po dobu 20 minut. Roztok byl filtrován, naředěn EtOAc a promyt solankou (2 x). Organická vrstva byla usušena (MgSO4) a koncentrována při sníženém tlaku. Tímto způsobem byl připraven {3-(3-styryl-lHindazol-6-yloxy)fenyl}amid 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny jako žlutohnědá pevná látka při výtěžku 47 %: lH NMR (DMSO-d6) δ 13,00 (s, 1H) , 10,80 (s, 1H) , 8,23 (d, 1H, J = 8,8
Hz), 7,79 (s, 2H) , 7,71 (t, 2H, J = 8,6 Hz), 7,53 (s, 2H) , 7,41-7,27 (m, 5H) , 7,04 (s, 1H) , 7,00 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,89 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 2,54 (s, 3H) . Anal. výpočet pro
C26H20N4O2S · 1,15 H2O: C, 65, 98, H, 4,75, N, 11,84, S, 6,78. Změřeno: C, 65,99, H, 4,71, N, 11,58, S, 6,76.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
3-(3-styryl-4,5-dihydro-lH-indazol-6-yloxy)fenylamin byl konvertován na {3-[1-(5-methylthiazol-2-karbonyl)-3-styryl-lHindazol-6-yloxylfenyl}amid 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny působením 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny a HATU (o-(2-azabenzotriazol-l-yl)-Ν,Ν,Ν',N'-tetramethyluroniumhexafluorfosfát) v DMF a zpracování, působení DDQ a izolace byly analogické k příkladu 4 (a) , krok (iv) (50% výtěžek): XH NMR (DMSO-de) δ 10,85 (s, 1H), 8,45 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 8,24 (m, 3H), 7,99-7,62 (m, 6H) , 7,54-7,34 (m, 5H), 6,96 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 2,64 (s, 3H), 2,54 (s, 3H) .
Příklad 5(b)
3-methyl-N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]benzamid
íkladu 5 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 5(a) uvedeném výše, kromě toho, že m-tolylchlorid byl použit namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny a HATU v kroku (i). XH NMR (DMSO-d6) δ 13,04 (s, 1H) , 10,28 (s, 1H) , 8,23 (d, 1H, J = 8,8
Hz), 7,73-7,30 (m, 14 H) , 7,05 (s, 1H) , 6,99 (d, 1H, J = 8,5
Hz), 6,87 (d, 1H, J - 7,7 Hz), 2,38 (s, 3H). Anal. výpočet pro
C29H23N3O2 · 0,2 H2O · 0,2 hexan: C, 77,78, H, 5,66, N, 9,01.
Změřeno: C, 77,80, H, 5,84, N, 8,93.
Příklad 6(a)
N-(3-{3-[2-(4-chlorfenyl)vinyl]-lH-indazol-6yloxy}fenyl)benzamid
Κ,ΟΟ,,ΜΛΗ |]
---
Za použití N-(3-{l-benzoyl-3-[2-(4-chlorfenyl)vinyl]-lHindazol-6-yloxyl}fenyl)benzamidu byl použit obecný postup z příkladu 5 (a) pro přípravu sloučeniny uvedené v názvu jako špinavě bílé pevné látky při 72% výtěžku: 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,07 (s, 1H) , 10,32 (s, 1H) , 8,24 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,92 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,76 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,59-740 (m, 10H), 7,05 (s, 1H), 7,00 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,87 (d, 1H, J = * · ·· ···· · · · · • · · · · · • · ·· 9 · · ··
7,9 Hz). Anal. výpočet pro C28H20ClN3O2 · 0,4 H2O · 0,15 hexan,
C, 71,41, H, 4,75, N, 8,65. Změřeno: C, 71,62, H, 14,83, N, 8,45.
Výchozí látka byla připravena takto:
1) UHMOS,«7tTC
2) 4-CI-cinnamoylchlorid
3) HOAc, EtOH, 70°C
Xr
Za použití 3-[3-(benzhydrylidenamino)fenoxy]cyklohex-2enonu a 3-(4-chlorfenyl)akryloylchloridu (připraveného, jak popsáno níže) byl použit obecný postup z příkladu 4(a), krok (ii) . Produkt byl použit bez purifikace při cyklizaci hydrazinu, příklad 4 (a), krok (iii), za vzniku 3—{3—[2—(4 — chlorfenyl)vinyl]-4,5-dihydro-lH-indazol-6-yloxyl}fenylaminu jako žluté pevné látky při 30% výtěžku. 1H NMR (DMSO-d6) δ 12,45 (s, 1H), 7,58 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,52 (s, 1H) , 5,26 (s, 2H) , 2,92 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 2,58 (t, 2H, J - 8,0 Hz). Anal. výpočet pro C2iHi8C1N3O · 0,75 H2O: C, 66, 84, H, 5,21, N, 11,14. Změřeno: C, 66, 73, Η, 4,89, N, 11,01.
3-(4-chlorfenyl)akryloylchlorid byl připraven takto: k míchané suspenzi 2,51 g (13,77 mmol)4-chlor-trans-skořicové kyseliny v benzenu bylo přidáno 1,1 ml (15,14 mmol) thionylchloridu a katalytické množství DMAP. Reakční směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 1,5 hodiny. Těkavé látky byly odstraněny při sníženém tlaku. Bílý zbytek byl rozpuštěn v Et2O a koncentrován opět při sníženém tlaku za vzniku 2,78 g (kvantitativně) · 3-(4-chlorfenyl)akryloylchloridu jako bílé pevné látky: 1H NMR (CDC13) δ 7,81(d, 1H, J = 15,6 Hz), 7,54 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,44 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 6,65 (d, 1H, J = 15,6 Hz) .
• · • · ·
3-{3-[2-(4-chlorfenyl)vinyl]-4,5-dihydro-lH-indazol-6yloxyl}fenylamin byl konvertován na N-(3-{l-benzoyl-3-[2-(4chlorfenyl)vinyl]-lH-indazol-6-yloxyl}fenyl)benzamid postupem popsaným v příkladu 4 (a), krok (iv) (85% výtěžek), 1H NMR (DMSO-ds) δ 10,37 (s, 1H) , 8,43 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 8,00-7,39 (m, 21H), 7,34 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 6,93 (d, 1H, J = 8,8 Hz).
Příklad 6(b)
N-{3-[3-(2-indolyl)-lH-indazol-6-yloxy]fenyl}-3-methylbenzamid
Sloučenina z příkladu 6 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 6(a) uvedeném výše, kromě toho, že l-SEM-indazol-2-karboxylová kyselina byla použita v kroku (i) namísto 4-chlor-trans-skořicové kyseliny.
XH NM R (DMSO-d6) 6 13,19 (s, 1H), 11,59 (s, 1H), 10,29 (s, 1H) ,
8, 23 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,73 -7,38 (m, 9H) , 7,12 (s, 1H) ,
7, 03 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 6,88 (d, 1H, J = 7,8 Hz) , 2,38 (s,
1H). HRMS [M+H]/z vypočteno: 459,1821, změřeno 459,1836.
Příklad 7
3-(styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenylamin ·· ···· · 9 ·· ·· ··
9 9 9 9 9 · · 9 9
Suspenze 75 mg (0,23 mmol) 3-(3-styryl-4,5-dihydro-lHindazol-6-yloxy)fenylaminu a 90 mg 5% palladia na uhlí (Pd/C) byla zahřívána ve 155 °C. Po 4 hodinách bylo přidáno ještě 39 mg 5% Pd/C. Po 22 hodinách bylo přidáno ještě 30 mg 5% Pd/C. Reakční směs byla filtrována za horka po 26 hodinách. Katalyzátor byl promyt a filtrát koncentrován při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1). Vhodné frakce byly koncentrovány a triturovány směsí CH2CI2 a hexanu za vzniku 20 mg (27 %) sloučeniny uvedené v názvu jako špinavě bílé
pevné látky: XH NMR (DMSO-dg) δ 8,16 (d, ÍH, J = 8, 5 Hz), 7,71
(d, 2H, J = 6,7 Hz) , 7,50 (s, 2H) , 7,40 (t, 2H, J = 7,0 Hz),
7,30 (d, ÍH, J -- = 6, 5 Hz) , 7,06- -6, 92 (m, 3H) , 6,35 (d, 1H, J =
8,3 Hz), 6,23 (s, 2H) , 5,26 (s, 2H) . Anal. výpočet pro C21H17N3O • 0,15 CH2C12: C, 74,69, H, 5,13, N, 12,36. Změřeno: C, 74,64, H, 5,23, N, 12,25.
Příklad 8(a)
3-(E-styryl)-6-fenoxy-lH-indazol
Suspenze 200 mg (0,64 mmol) 3-(E-styryl)-6-fenoxy-4,5dihydro-lH-indazolu a 200 mg 5% Pd/C v 10 ml tetralinu byla zahřívána v 155 °C po dobu 18 hodin. Katalyzátor byl odstraněn filtrací horkého roztoku a promyt TFA, EtOAc a MeOH. Filtrát byl koncentrován při sníženém tlaku a zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc • · ·· ► · · · · · (2:1) za vzniku 110 mg (55 %) 3-(E-styryl)-6-fenoxy-lH-indazolu jako špinavě bílé pevné látky. XH NMR (DMSO-d6) δ 6,96 (s, 2H), 7,10 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 7,20 (t, 1H, J = 7,1 Hz), 7,30
(t, 1H, J = 7,1 Hz), 7,44 (m, 6H) , ΠΙ (d, 2H,
8,20 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 12,90 (s, 1H). Anal
C2iH16N20 · 0,1 H2O: C, 80,28, H, 5,20, N, 8,92
80,20, H, 5,21, N, 8,93.
výpočet pro
Výchozí látka byla připravena takto:
(i) K míchanému roztoku 3,00 g (23,0 mmol)3-chlorcyklohex-2enonu a 2,16 g (23,0 mmol) fenolu v 25 ml acetonu bylo přidáno 3,81 g (27,6 mmol) práškového bezvodého K2CO3. Po zahřívání k varu pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin byla směs ochlazena a filtrována. Filtrát byl koncentrován při sníženém tlaku a podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (4:1) za vzniku 3-fenoxycyklohex-2-enonu jako bílé pevné látky: XH NMR (CDC13) δ 2,10 (kvintet, 2H, J = 6,3 Hz), 2,40 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 2,68 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 5,14 (s, 1H), 7,05 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 7,26 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 7,41 (t, 2H, J = 7,6 Hz).
(ii) Roztok 301 mg (1,6 mmol) 3-fenoxycyklohex-2-enonu v 1 ml THF byl přidán k míchanému roztoku l,0M roztoku lithiumbis (trimethylsilyl) amidu ve 3,2 ml THF v -78 °C. Po 15 minutách bylo najednou přidáno 266 mg (1,6 mmol) cinnamoylchloridu. Po 15 minutách byla reakční směs nalita do 0,5N HCl a extrahována EtOAc (2 x) . Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSOU filtrovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Chromatografie zbytku směsí hexanu a ethylacetátu 4:1 jako eluentu poskytla 220 mg (43 %) 3-fenoxy-6-(3-fenylakryloyl)cyklohex-2-enonu jako žluté pevné látky: XH NMR (CDC13) δ (enolová forma) 2,66 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,84 (t, 2H, J = 7,1 Hz), 5,11 (s, 1 Η) , 6,86 (d, 1H, J - 15,6 Hz), 7,02 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,20 (m, ·· ··· · • ·
2H) , 7,28-7,38 (m, 3Η) . HRMS M+H+ vypočteno 319, 1334, změřeno
319,1340.
(iii) K míchanému roztoku 1,13 g (3,55 mmol) 3-fenoxy-6-(3fenylakryloyl)cyklohex-2-enonu ve 20 ml směsi HOAc/EtOH (1:1) bylo přidáno 0,21 ml (4,3 mmol) monohydrátu hydrazinu. Reakce byla zahřívána v 70 °C po dobu 3 hodin, ochlazena a nalita opatrně do saturovaného roztoku NaHCCb a extrahována EtOAc (2 x). Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCI, usušeny (MgSO4) a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1) za vzniku 406 mg (36 %) 6-fenoxy-3styryl-4,5-dihydro-lH-indazolu (3) jako špinavě bílé pevné
látky: XH NMR (DMSO-d6) δ 2,64 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 2,95 (t,
2H, J = 8,0 Hz), 5,46 (s, 1H), 7,04 (AB, 2H, J = 16, 8 Hz) ,
7,15 (d, 2H, J = 8,1 Hz) i, 7,25 ( 'm, 2H) , 7,42 (m, 4H), 7,55 (d,
2H, J = 7,7 Hz) , 12,44 (s, 1H) . Anal. výpočet pro C2Hi8N2O ·
0,2 H2O: C, 79, 32, H, 5,83, N, 8,81. Změřeno: C, 79,36, H,
5,85, N, 8,84.
Příklad 8 (b)
3-(E-styryl)-6-[4-(methoxymethoxy)fenoxy]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 8 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 8 (a) uvedeném výše, kromě toho, že 4-(methoxymethoxy)fenol byl použit namísto
fenolu v kroku (i) . 1H NMR (DMSO-d5) δ 12,90 (s, 1 H), 8, 17 (d,
1H, J = 8,8 Hz), 7,71 (d, 2H, J = 7,6 Hz) , 7,50 (s, 3H) , 7,41
(t, 2H, J = 7,6 Hz), 7,31 (d, 1H, J = = 7,4 Hz) , 7,10 (s, 3H) ,
6,95 (dd, 1H, J = 8,8, 1,9 Hz), 6,84 (s, 1H) , 5,20 (s, 2H) ,
φ φ φφ φφφφ ·Φ ·· φ φ φφφ
3,42 (s, 3Η) . Anal. výpočet pro C23H20N2O3: C, 74,17, H, 5,41,
N, 7,52. Změřeno: C, 74,21, H, 5,59, N, 7,46.
Příklad 8(c)
3- (E-styryl)-6-fenylsulfanyl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 8 (c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 8(a) uvedeném výše, kromě toho, že thiofenol byl použit v kroku (i) namísto fenolu. XH NMR (DMSO-dg) δ 7,29 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,45-7,59 (m, 9H) , 7,67 (s, 2H) , 7,86 (d, 2H, J = 7,2 Hz) , 8,35 (d, 1H,
J = 8,5 Hz), 13,30 (s, 1H) . Anal. výpočet pro C2iHi6N2S · 0,25
H20: C, 75,76, H, 5,00, N, 8,41, S, 9,63. Změřeno: C, 75,79, H, 4,99, N, 8,16, S, 9,63.
Příklad 8(d)
6-(3-brom-fenoxy)-3-styryl-lH-indazol
Br
Sloučenina z příkladu 8(d) byla připravena analogickým způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 8(a) uvedeném výše, kromě toho, že 3-bromfenol byl použit v kroku (i) namísto fenolu. X NMR (DMSO-d6) δ 13,08 (s, 1H), 8,23 (d, 1H, J = 8,8
Hz), 7,72 (d, 2H, J - 7,3 Hz), 7,53 (s, 2H) , 7,43-7,35 (m,
4H), 7,30 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 7,11 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 7,09 (s, 1H), 6,98 (d, 1H, J = 8,8 Hz). Anal. výpočet pro • 4 44
4 4 4
4 4 • ♦ · 4 • 0 4 • 4 4 44
C2iHi5BrN2O: C, 64,46, H, 3,86, Br, 20,42, N, 7,16. Změřeno: C, 64,31, H, 3,99, Br, 20,52, N, 7,11.
Příklad 9 (a)
3~(E-styryl)-6-[3-hydroxyfenoxy]-lH-indazol
K míchanému roztoku 50 mg (0,13 mmol) 3-(E-styryl)-6-[3(methoxymethoxy) fenoxy]-lH-indazolu v 5 ml CH2C12 v -25°C bylo přidáno 75 μΐ (0,57 mmol) trimethylsilylbromidu. Po 1,5 hodině byl přidán saturovaný roztok NaHCO3 a produkt byl extrahován EtOAc (2 x). Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSOU a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1) za vzniku po trituraci směsí CH2C12 a hexanu 22 mg (50 %) 3-(E-styryl)-6-[3-hydroxyfenoxy]lH-indazolu jako špinavě bílé pevné látky: 1H NMR (DMSO-dg) δ
6, 37 (s, 1H) , 6,43 (d, 1H, J = 8,1 Hz) , 6,50 (d, 1H, J = 8,1
Hz) , 6, 88 (d, 1H, J = 8,8 Hz) , 6,92 (s, 1H) , 7,12 (t, 1H, J =
8,1 Hz) , 7,24 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 7,31 (t, 2H, J = 7,6 Hz),
7,44 (s, 2H) , 7,64 (d, 2H, J = 7,5 Hz) , 8,12 (d, 1H, J = 8,7
Hz) , 9, 54 (s, 1H) , 12, 92 (s, 1H) . Anal. výpočet pro C2iHi6N2O2 ·
0,3H2O: C, 75,57, H, 5,01, N, 8,39. Změřeno: C, 75,74, H, 5,11, N, 8,25.
Výchozí látka, 3-(E-styryl)-6-[3-(methoxymethoxy)fenoxy]lH-indazol, byla připravena, jak bylo popsáno v příkladu 8(b).
I
4 4 lH NMR (CDC13) δ 3,42 (s, 3H) , 5,10 (s, 2H) , 6,64 (d, 1H, J = » · 4 • · • 4··
8, 2 Hz) , 6, 72 (s, 1H), 6,80 (d, 1H, J = 8, 3 Hz) , 6,98 (s, 1H),
7, 00 (d, 1H, J = 8,8 Hz) , 7,19-7,38 (m, 5H) , 7,53 (m, 3H) ,
7, 92 (d, 1H, J = 8,9 Hz) . Anal. výpočet pro C23H20N2O3: M+H+:
373,1552, změřeno 73,1546
Přiklad 9 (b)
3-(E-styryl)-6-[4-hydroxyfenoxy]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 9(b) byla připravena jako v příkladu 9(a) uvedeném výše, kromě toho, že 3-(E-styryl)-6-[4-(methoxymethoxy)fenoxy]-lH-indazol byl použit namísto 3-(E-styryl)-6[3-(methoxymethoxy)fenoxy]-ΙΗ-indazolu. 1H NMR (DMSO-dg) δ
12,95 (s, 1H) , 9,58 (s, 1 H) , 8,33 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 7,89
(d, 2H, J = 7,1 Hz) , 7,68 (s, 1H) , 7,58 (t, 1H, J = 7,3 Hz) ,
7,48 (d, 1H, J = 7,3 Hz) , 7,24 (s, 1H), 7,13 (m, 3H) , 6,99 (d,
2H, J = 8,8 Hz). HRMS [M+H]/z vypočteno: 329, 1290. Změřeno: 329, 1293. Anal. výpočet pro C21H16N2O2 · 0,35Η2<9: C, 75,36, H, 5,03, N, 8,37. Změřeno: C, 75,35, H, 5,22, N, 8,24.
Příklad 10
6-(1-fenylvinyl)-3-styryl-lH-indazol
16,2 mg ((0,0358 mmol) 6-(1-fenylvinyl)-3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazoiu bylo rozpuštěno • · · · · · ·· ·· fc· fcfc • •fc fcfcfc fcfcfcfc fcfc·· ····· ·· · • ··· ······ · • ·····♦·· ···· ··· ·· ·· ·· ···· v 0,6 ml THF a bylo podrobeno působení 0,6 ml ÍM tetrabutylamoniumfluoridu (TBAF) v THF. Směs byla zahřívána na 60 °C v argonové atmosféře po dobu 4 hodin. Směs byla ochlazena, neutralizována nadbytkem saturovaného hydrouhličitanu sodného a organická látka byla extrahována ethylacetátem a koncentrována. Tato směs 3 sloučenin (vizualizace TLC) byla podrobena působení 4 ml směsi THF-vodaTFA (1:1:2) po dobu 30 minut. Směs byla naředěna 2 0 ml toluenu, koncentrována, neutralizována nadbytkem saturovaného hydrouhličitanu sodného a organická látka byla extrahována ethylacetátem. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 4,6 mg (40 %) 6-(1-fenylvinyl)-3-styryl-lH-indazolu: Rf sm 0,62, p
0,24 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,99 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,60-7,25 (m, 14H), 5,58 (d, IH, J = 1,1 Hz), 5,56 (d, IH, J = 1,1 Hz), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 323,1548, změřeno 323,1545.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
l2, NaOH, dioxan-voda
6-jodindazol jak bylo popsáno byl konvertován v příkladu 1 (a),
CDCI3) δ 10,3 8,5 Hz), 7,24 (š s, IH) , 7,90 (s, (d, IH, J = 8,5 Hz).
na 3, 6-dijodindazol (82 %) krok (v) : XH NMR (300 MHz, IH), 7,52 (dd, IH, J = 1,2,
SEMBr.TBABr 80% KOH, CHaCl^
755 mg (2,04 mmol) 3,6-dijodindazolu bylo přidáno k 2,5 g 50% KOH v 2,5 ml vody při teplotě 0 °C a byly přidány 4 ml • to ·>
i toto <
t « · * · • · • to ·· dichlormethanu. K této směsi bylo přidáno 6,6 mg (0,02 mmol, 0,01 ekv.) tetrabutylamoniumbromidu (TBABr) a po kapkách bylo přidáno 397 μΐ (2,24 mmol, 1,10 ekv.) 2-(trimethylsilanyl)ethoxymethylchloridu (SEM-C1) po dobu 3 minut. Směs byla rychle míchána při teplotě 0 °C po dobu 1,5 hodiny. Bylo přidáno 20 ml vody a 20 ml dichlormethanu a organická látka byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným a koncentrována. Chromatografie na silikagelu (5% ethyíacetát v hexanu, 150 ml silikagelu) poskytla 2 isomerní sloučeniny (1-SEM, 763 mg, % a 2-SEM, 105 mg, 10 %): Rf srn 0,08, p 0,34 a 0,27 (směs ethylacetátu a hexanu 1:9), 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,0 (s,
IH), 7,55 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,24 (d, IH, J = 8,5 Hz), 5,69 (s, 2H), 3,58 (t, 2H J = 8,2 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,1 (s, 9H).
(iii)
μΐ (0 ,20 mmol, 2,0 ekv.) 1-bromstyrenu bylo rozpuštěno v 0,75 ml THF, ochlazeno na -78 °C a bylo podrobeno působení 235 μΐ (0,40 mmol, 4,0 ekv.) l,70M t-BuLi. Směs byla ponechána ohřát se na -42 °C po dobu 10 minut a byla přidána k 34 mg (0,25 mmol, 2,5 ekv.) čerstvě usušeného chloridu zinečnatého. Výsledný roztok byl ponechán ohřát se na 23 °C za míchání po dobu 25 minut. Tato směs byla přidána ke směsi 50 mg (0,10 mmol, 1 ekv.) čistého 3,6-dijod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu a Pd(PPh3)4 5 mg (0,004 mmol, 0,04 ekv.). Po 10 minutách bylo sledováním TLC zjištěno, že reakce byla ukončena a reakce byla zastavena saturovaným hydrouhličitanem sodným. Organická látka byla extrahována ethylacetátem,
4* 4444 • 4
4 44 usušena nad sulfátem sodným a koncentrována při sníženém tlaku. Chromatografie na silikagelu (5:95 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 33,1 mg (70 %) 3-jod-6-(1-fenylvinyl)-1-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu: Rf sm 0,39, p 0,36 (směs ethylacetátu a hexanu 1:9), 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ
7,50 (s, 1H) , 7,42 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,33 (m, 5H) , 7,22 (dd, 1H, J = 1,2, 8,4 Hz), 5,68 (s, 2H), 5,59 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 5,57 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 3,58 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,88 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -,09 (s, 9H), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 477,0859, změřeno 477,0866.
(iv)
í-BuLI.ZnCIj, THF, Pd(PPhj)«
Příprava 6-(1-fenylvinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu: 23 μΐ (0,174 mmol, 2,5 ekv.) E-2-bromstyrenu bylo rozpuštěno v 1,0 ml THF a bylo ochlazeno na -78 °C. Bylo přidáno 205 μΐ (0,348 mmol, 5,00 ekv.) t-BuLi a směs byla zahřáta na -42 °C po dobu 7 minut za vzniku sytě červené směsi. Roztok byl kanylou přidán ke 29 mg (0,209 mmol, 3,00 ekv.) čerstvě usušeného chloridu zinečnatého a směs byla ponechána ohřát se na 23 °C za míchání po dobu 20 minut. Tento roztok byl kanylou přidán k čisté směsi 33,1 mg (0,0696 mmol, 1,0 ekv.) 3-jod-6-(1-fenylvinyl)-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu a 4 mg (0,0035 mmol, 0,05 ekv.) Pd(PPh3)4 ve 23 °C. Tento roztok byl ponechán za míchání po dobu 15 minut a byl podroben působení saturovaného hydrouhličitanu sodného a extrahován ethylacetátem. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu • fc fcfcfcfc «fc fc* fcfc *fc • fcfc · · · «fcfcfc fc fc fcfc · · fcfcfc · « · • fcfcfc fcfc fcfcfc · · fc · fcfcfcfc»·· fcfcfcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc fcfcfcfc s použitím dvou kolon (5:95 směs ethylacetátu a hexanu, 12 ml silikagelu, a 1:99 směs ethylacetátu a benzenu, 12 ml silikagelu) poskytla 16,2 mg (51 %) 6-(1-fenylvinyl)-3-styryl1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu: Rf sm 0,38, p 0,29 (směs ethylacetátu a hexanu 1:9), 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (d, 1H, J - 8,4 Hz), 7,62-7,22 (m, 14H), 5,71 (s, 2H),
5,57 (s, 2H) , 3,60 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,90 (t, 2H, J - 8,2
Hz), -,08 (s, 9H) , HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 453,2362, změřeno 453,2354.
Příklad 11
N-methyl-N-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)benzen-1,3-diamin
mmol) N-methyl-N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}benzen-l,3-diaminu bylo přidáno 10,1 ml (10,1 mmol) 1M TBAF v THF, pak následovalo 0,34 ml (5,04 mmol) 10 ekv.) ethylendiaminu. Výsledná směs byla zahřívána na 70 °C po dobu 5 hodin. Reakce pak byla zastavena 10 ml saturovaného NaHCO3 a extrahována 3 x 35 ml EtOAc. Sloučené EtOAc fáze byly promyty 5 x 20 ml H2O, pak 20 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku do pěny. Surová látka byla purifikována chromatografií na silikagelu (9:1 směs dichlormethanu a ethylacetátu) za vzniku 120 mg (70% výtěžek) N-methyl-N-(3styryl-lH-indazol-6-yl)benzen-1,3-diaminu jako pěny. Rf sm 0,73, Rf p 0,27 (směs dichlormethanu a ethylacetátu 7:3), 13C
NMR (75 MHz, CDC13) δ 150,3, 148,8, 147,5, 147,5, 143,9, 143,4, 137,5, 131,1, 130,3, 129,3, 128,9, 128,2, 127,9, 126,7, 121,0,
444« * 9 4
4 44
4494 444 <·
4 »
4 444 «4 9
94 ·4 • 4 4 4
4 «
4·9 • 9 4 •4 444*
120,5, 117,0, 116,0, 112,6, 109,8, 109,0, 98,3, 40,7, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 341, změřeno 341. Anal. výpočet: C, 77,62, H, 5,92, N,16,46. Změřeno: C, 76,16, H, 5,88, N, 15,95.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i) l2, 3N NaOH
I
6-nitro-lH-indazol byl konvertován na 50,6 g (87 %) 3-jod6-nitro-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu l(a), krok (v) : FTIR (KBr) 3376, 3076, 2964, 2120, 1739, 1626, 1526,
1439, 1294, 1128, 954 cm-1, XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,28 (s, 1H) , 8,05 (s, 1H) , 7,66 (d, 1H, J = 8,13 Hz), 7,45 (dd, 1H, J
= 8,33, 1,38 Hz), 7,17 (d, 1H, J = 1,01 Hz), 7,14 (s, 1H),
7,03 (d, 1H, J = 8,04 Hz), 6, 89 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 2,55
(s, 6H), 2,21 (s, 3H), 1,32 (s, 9H) . MS (FAB) [M+H]/z
vypočteno 311, změřeno 311. N, 9,03. Změřeno: C, 69,41, Anal H, 5, . výpočet: C, 69,66, 98, N, 8,79. H, 5,85,
(ii)
SEMCI.TBAB 50% KOH, CH. CL 0to23’C
3-jod-6-nitro-lH-indazol byl konvertován na 10,2 g (81% výtěžek) 6-nitro-3-jod-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazol, jak bylo popsáno v příkladu 10, krok (ii) : tt 58 °C. Anal. výpočet: C, 37,24, H, 4,33, N, 10,02. Změřeno: C, 37,21, H, 4,38, N, 10,00.
(iii)
SEM
Ke směsi 11,0 g (26,1 mmol) 6-nitro-3-jod-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu, 4,64 (31,4 mmol) styrylboronové kyseliny a 1,25 g (1,08 mmol) Pd(PPh3)4 v argonové atmosféře bylo přidáno 192 ml toluenu, 4 ml MeOH a 32,6 ml (65,3 mmol) 2N vodného NaOH. Výsledná heterogenní směs byla zahřívána na 90 °C. Po 8 hodinách byla reakce naředěna 150 ml EtOAc a 50 ml vody, fáze byly odděleny a organická fáze byla extrahována 2 x 50 ml EtOAc. Sloučené organické fáze byly promyty 50 ml solanky, pak usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová reakční směs byla purifikována chromatografií na silikagelu (1:9 směs EtOAc a hexanu) za vzniku 7,65 g (74 %) 6-nitro-3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu jako žluté pevné látky: 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 148,3, 145,0, 141,3, 138,1,
134,2, 130,5, 129,9, 129,8, 129,5, 128,1, 127,4, 123,2, 119,8, 117,8, 108,2, 79,7, 68,5, 19,2, 0,0, MS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 418, změřeno 418. Anal. výpočet: C, 63,77, H, 6,37, N, 10,62. Změřeno: C, 64,04, H, 6,29, N, 10,56.
(iv)
·· • · · » · · > · · • · · · • · · • * • · · ·
8,1 g (20,5 mmol) 6-nitro-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu bylo rozpuštěno v 75 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře. Bylo přidáno 12,9 g (67,7 mmol) SnCl2, pak následovalo 1,7 ml (92,2 mmol) vody a výsledná směs byla zahřívána na 50 °C. Po 4 hodinách bylo přidáno 45 ml (135 mmol) 3N NaOH následováno 100 ml EtOAc. Výsledná emulze byla filtrována za horka přes celit a lože celitu bylo promyto za horka 3 x 100 ml EtOAc. Filtrát byl koncentrován při sníženém tlaku, zbytek byl rozpuštěn v EtOAc, promyt solankou, usušen nad Na2SO4, filtrován a koncentrován při sníženém tlaku za vzniku pevné látky. Surová látka byla purifikována ehromatografií na silikagelu (2:8 až 7: 3 směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 5,1 g (68% výtěžek) 3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6~ylaminu jako žluté pevné látky. MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 366, změřeno 366.
(v)
Ke směsi 1,1 g (3 mmol) 3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-ylaminu, 0,9 g (3,6 mmol) mnitrojodbenzenu, 0,07 g (0,133 mmol) BINAP, 34 mg (0,0375 mmol) Pd2(dba)3 a 1,37 g (4,2 mmol) Cs2CO3 v argonové atmosféře bylo přidáno 6 ml toluenu. Výsledná heterogenní směs byla zahřívána na 80 °C. Po 46 hodinách byla reakce ochlazena na 23 °C, naředěna 20 ml ethylacetátu (EtOAc) a filtrována. Bylo přidáno 5 ml vody, fáze byly odděleny a organická fáze byla • · · ·· ··· · · · ·· * · · · · · • · · · · · · · · extrahována 2 χ 50 ml EtOAc. Sloučené organické látky byly promyty solankou, pak usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová reakční směs byla purifikována chromatografií na silikagelu (za eluce 9:1 směsí hexanu a EtOAc) za vzniku 7,65 g (74 %) (3-nitrofenyl)-{3styryl-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6yllaminu jako žluté pevné látky: TLC (směs hexanu a EtOAc 7:3)
Rf sm 0,16, Rf p 0,30 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), FTIR
(KBr) 3391, 3059, 2952 , 2894, 1614, 1530, 1483, 1346, 1248,
1076, 836, 734 cm1, XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,86 (s, ÍH) ,
7,83 (s, ÍH), 7,65 (dt, 1H, J = 2,21, 5,13 Hz), 7,15-7,41 (m,
5H) , 6,93 (dd, ÍH, J = 1,87, 8,67 Hz), 5,56 (s, 2H) , 3,51 (t,
2H, J = 8,17 Hz) , 0,81 (t, 2H, J = 7,96 Hz), -0,15 (s, 9H) , 13C
NMR (75 MHz, CDC13) δ 149,6, 144,8, 143,5, 142,4, 140,9, 137,3, 131,8, 130,3, 129,0, 128,2, 126,7, 122,8, 122,6, 120,1, 119,3, 116,1, 115,6, 111,4, 98,5, 77,9, 66,7, 18,0, -1,2, MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 487, změřeno 487. Anal. výpočet: C, 66,64, H, 6,21, N, 11,51. Změřeno: C, 66,91, H, 6,21, N, 11,44.
(ví)
K 434 mg (0,89 mmol) (3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}aminu v 5 ml THF. ochlazeného na -5 °C v argonové atmosféře, bylo přidáno 0,42 ml (4,5 mmol) dimethylsulf átu, následováno 1,8 ml (1,8 mmol) LiHMDS (IM v THF) . Po 20 minutách byla reakce zastavena 2 ml saturovaného vodného NH4C1, pak extrahována 3 x 20 ml EtOAc. Sloučené organické látky byly promyty 10 ml solanky, φ φ φφφφ φ φ φ · · · ·· φφφ φφφ φ · φ · φφφφ · φφφφ φ · * φ φφ· · φ φφφ φ φ φ φ φφφφ φφφ φφφφ φφφ ·· *· φ· φφφφ usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu (za eluce směsí hexanu a EtOAc 9:1) poskytla 367 mg (82 %) methyl-(3nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazol-6-yl}aminu jako oleje: TLC (směs hexanu a EtOAc 7:3) Rf
srn 0,29, Rf p 0,39 (ethylacetát: hexan 3:7), FTIR (KBr) 2951,
2894, 1611, 1528, 1485, 1348, 1248, 1077 cm’1, XH NMR (300 MHz,
CDC13) δ 7,99 (d, 1H, J = 8,67 Hz) 7,77 (t, 1H, J = 2,25 Hz) ,
7,72 (dd, 1H, J = 0,79, 2,09 Hz), 7,60, (d, 2H, J = 7,22 Hz) ,
7,26-7,54 (m, 7H), 7,19 (dd, 1H, J = 0,78, 2,41 Hz) 7,07 (dd,
1H, J = 1,85, 8,69 Hz), 5,70 (s, 2H) , 3,63 (t, 2H, J = 8,10
Hz), 3,48 (s, 3H) , 0,92 (t, 2H, J = 8,10 Hz), -0,04 (s, 9H) ,
13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 150,2, 149,6, 147,1, 143,5, 142,5,
137,3, 131,9, 129,8, 129,0, 128,2, 126,8, 123,1, 122,6, 120,2,
120,0, 119,7, 114,4, 111,4, 104,5, 78,0, 66,8, 41,1, 18,0,
-1,2, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 501, změřeno 510.
(vil)
Methyl-(3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}amin byl konvertován na
N-methyl-N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazol-6-yl}benzen-l,3-diamin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv) . Rf srn 0,55, Rf p 0,31 (směs ethylacetátu a
hexanu 3:7), FTIR (tenký film) 3455, 3360, 2951, 2893, 1621,
1601, 1494, 1449, 1249, 1074 cm’1, 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ
7,81 (d, 1H, J = 8 ,θ Hz) , 7,58 (d, 2H, J = 7,21 Hz) >, 7,26-7,50
(m, 5H), 7,12 (t, 1H, J = 7,93 Hz), 7, 01 (d, 1H, J = 1,73 Hz),
• · • » • ·
9 9 9 9 *
99 99
6,95 (dd, 1H, J = 1, 99, 8,85 Hz), 5,67 (s, 2H) , 3,63 (t, 2H, J = 8,12 Hz), 3,38 (s, 3H), 0,93 (t, 2H, J = 8,13 Hz), -0,04 (s, 9H) , 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 150,3, 149, 0, 147,7, 143,4, 143,0, 137,6, 131,3, 130,4, 128,9, 128,0, 126,7, 121,2, 120,6, 117,3, 117,0, 113,1, 110,1, 109,3, 97,5, 77,8, 66,6, 41,0,
18,0, -1,2, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 471, změřeno 471.
Příklad 12(a)
N-{3-[methyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amino]fenyl}acetamid
mg (0,041 mmol) N-methyl-N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}benzen-l,3-diaminu, připraveného v příkladu 11, bylo suspendováno v 0,5 ml CH2CI2 ve 23 °C v argonové atmosféře. Bylo přidáno 81 μΐ (1,0 mmol) pyridinu, 94 μΐ (1,0 mmol) Ac2O a katalytické množství DMAP. Reakce se okamžitě stala homogenní. Po 1 hodině analýza TLC (CH2CI2:EtOAc 4:1) neprokázala žádnou výchozí látku. Reakce byla zastavena 2 ml vodného saturovaného NaHCO3, pak byla naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku na olej . Olej byl suspendován ve 2 ml MeOH a bylo přidáno 83 mg (0,6 mmol) K2CO3. Výsledná směs byla míchána ve 23 °C v argonové atmosféře. Po 1 hodině byla reakce naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová látka byla purifikována semipreparativní HPLC za vzniku 8,4 mg (22 %) N-{3-[methyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amino]fenyl}acetamidu.
1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,86 (d, 1H, J = 8,68 Hz), 7,58 (d, • · » · «.« • · · * ·· · · · · ····
1H, J = 7,17 Hz), 7,16-7,45 (m, 7H) , 7,15 (d, 1H, J = 8,29 Hz), 6,98 (m, 1H), 6,95 (d, 1H, J = 1,92 Hz), 6,8 (dd, 1H,.J = 1,16, 8,05 Hz), 3,37 (s, 3H), 2,14 (s, 3H). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 383, změřeno 383. Anal. výpočet: C, 75,37, H, 5,80, N, 14,65. Změřeno: C, 73,53, H, 6,01, N, 13,73.
Příklad 12(b)
N-{3-[methyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amino]fenyl}benzamid
Sloučenina z příkladu 12(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12(a) uvedeném výše, kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto acetanhydridu. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 475, změřeno 475. Anal. výpočet: C (78,36), H (5,44), N (12,60). Změřeno: C (76,57) , H (5,50) , N (12,12) .
Příklad 12(c)
Benzylester {3-[methyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amino]fenyl}karbamové kyseliny
Sloučenina z příkladu 12(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12(a) uvedeném výše, kromě toho, že karbobenzyloxychlorid byl použit namísto a· · ·
• 9 « a acetanhydridu. Rf sm 0,30, Rf p 0,57 (CH2C12: EtOAc 8:2), LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 475 změřeno 475, Anal. výpočet: C (75,93), H (5,52), N (11,81), změřeno, C (75,60), H (5,96), N (10,75).
Příklad 12(d) {3-[methyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amino]fenyl}amid
5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny
K roztoku 26 mg (0,075 mmol) N-methyl-N-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)benzen-1,3-diaminu, připraveného v příkladu 11, a 64 mg (0,45 mmol) 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny v 0,375 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 171 mg (0,45 mmol) HATU. Po 1 hodině analýza TLC (CH2C12: EtOAc 8:2) neprokázala výchozí látku. Reakce byla zastavena 2 ml saturovaného vodného NaHCO3, pak byla naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Olej byl suspendován ve 2 ml MeOH a bylo přidáno 62 mg (0,45 mmol) K2CO3. Výsledná směs byla míchána ve 23 °C v argonové atmosféře. Po 1 hodině analýza TLC (CH2C12:EtOAc 8:2) neprokázala výchozí látku. Reakce byla naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku na pevnou látku. Surová látka byla purifikována chromatografií na silikagelu (za eluce směsí CH2Cl2:EtOAc 85:15) za vzniku 9,9 mg (28 %) sloučeniny uvedené v názvu po purifikaci semipreparativní HPLC. Rf sm 0,25, Rfp 0,39 (směs hexanu a • « • φ φ » ··· · φ· • « φ · φ · • · a· φ · ··» · » φ ·»»····· v · φ · φφφφ φφφ φφφφ ·φ· Φ· ·· φ· ·Φ·
EtOAc 8:2), LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 466, změřeno 466. Anal. výpočet: C (69, 65), H (4,98), N (15,04), S (6,89). Změřeno: C (69,24), H (5,35), N (13,97), S (5,95).
Příklad 13
N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-ylamino)fenyl]benzamid
N-(3-(3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazol-6-ylamino}fenyl)benzamid byl konvertován na N—[3—(3— styryl-lH-indazol-6-ylamino)fenyl]benzamid, jak bylo popsáno v příkladu 11. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 431, změřeno 431. Anal. výpočet: C, 78,12, H, 5,15, N, 13,01. Změřeno: C, 77,06, H, 6,91, N, 9,88.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
(3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-indazol-6-yl}amin, připravený v příkladu 11, krok (vi), byl konvertován na N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}benzen-1,3-diamin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 457, změřeno 457.
• 9 · 9
9 9 •» ···· • · • · <9 • 9
9 •9 9999 (ϋ)
BzCI, pyr, OMAP, CH ,CJ,. 23 C
BzCI, pyr, OMAP, CH ,CI,. 23 C
NHBz
K roztoku 91 mg (0,2 mmol) N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}benzen-l,3-diaminu
0,081 ml (1,0 mmol) pyridinu v 0,5 ml CH2C12 ochlazenému na -5 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 0,028 ml (0,24 mmol) benzoylchloridu. Po 0,5 hodině byla reakce zastavena saturovaným vodným NaHCO3, pak extrahována 2 x 5 ml CH2C12. Sloučené organické látky byly promyty 5 ml solanky, usušeny nad Na2SC>4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku za vzniku oleje. Surová látka byla purifikována chromatografií na silikagelu (za eluce směsí hexanu a EtOAc 3:2) za vzniku 108 mg (96% výtěžek) N-(3—{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl ]-lH-indazol-6-ylamino}fenyl)benzamidu. Rf sm 0,35, Rf p 0,44 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), FTIR (tenký film) 3320, 2951, 2893, 1657, 1604, 1537, 1493, 1409, 1303, 1248, 1074 cm-1, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 561, změřeno 561. Anal. výpočet: C, 72,82, H, 6,47, N, 9,99. Změřeno: C, 72,33, H, 6,39, N, 9,81.
Příklad 14
Methylfenyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amin
Methylfenyl-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl ] -lH-indazol-6-yl } amin byl konvertován na methylfenyl• · * ♦ · · • · • · ·4 • · • ··· (3-styryl-lH-indazol-6-yl)amin, jak bylo popsáno v příkladu 11. MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 326, změřeno 326.
K roztoku 1,58 g (4 mmol) 3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl] -lH-indazol-6-ylaminu ve 14 ml AcOH, 3 ml vody a 1,67 ml koncentrované HCl ochlazenému na 2 °C bylo přidáno 304 mg (4,4 mmol) roztoku NaNO2 v 0,5 ml vody po dobu 5 minut. Výsledný tmavě červený roztok byl míchán ve 2 °C po dobu 0,5 hodiny, pak bylo přidáno 797 mg (4,8 mmol) roztoku KI a 610 mg (2,4 mmol) I2 v 1 ml vody po kapkách tak, aby se udržela vnitřní teplota pod 5 °C. Po 2 hodinách ve 2 °C byla reakce ponechána za míchání ve 23 °C po dobu 17 hodin. Reakce byla zastavena 3N vodným NaOH, naředěna 50 ml EtOAc a 15 ml H2O, fáze byly odděleny a vodná fáze byla extrahována 2 x 15 ml EtOAc. Sloučené organické fáze byly promyty 3 x 20 ml 5% NaHSO3, 15 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová reakční směs byla purifikována chromatografií na silikagelu (za eluce 1:1 směsí hexanu a EtOAc) za vzniku 1,3 g (68% výtěžek) 6-jod-3-styryl1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu jako bílé pevné látky. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,03 (s, 1H) , 7,79 (d,
1H, J = 9,0 Hz), 7,30-7,60 (m, 8H), 5,73 (s, 2H) , 3,63 (t, 2H, J = 6,0 Hz), 0,96 (t, 2H, J = 6,0 Hz), 0,0 (s, 9), 13C NMR (75
MHz, CDC13) δ 143,6, 142,4, 137,2, 132,1, 130,8, 129,0, 128,3,
126, 8, 122, 5, 122,4, 119,6, 119,5, 92,9, 78,1, 66,9, 18,0, -
1,2. Anal. výpočet: C, 52,94, H, 5,29, N, 5,88 Změřeno: C,
74.
52,66, H, 5,29, N, 5, (ϋ)
6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazol byl konvertován na methylfenyl-{3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}amin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (v). R/ srn 0,35 Rf p 0,13 (směs EtOAc a hexanu 1:9), IR (KBr) 3031, 2951, 1625, 1595, 1498, 1449, 1326, 1303, 1248, 1212, 1076, 835, 694 cm'1, MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 456, změřeno 456.
Příklad 15
N-[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]N-methylbenzen-1,3-diamin
[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]methyl(3-nitrofenyl)amin byl konvertován na N— [3— (2 — benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]-N-methylbenzen1,3-diamin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv) . LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 385, změřeno 385. Anal. výpočet: C, 71,86, H, 5,24, N, 14,57. Změřeno: C, 70,99, H, 5,60, N, 13,80.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i) • to · 4 to · to · ·· ► to» * · • ··>
to toto · • to · ·· ·♦··
Ke směsi 4,2 g (10 mmol) 6-nitro-3-jod-[2-(trimethylsilanyl ) ethoxymethyl ] -lH-indazolu, 3,46 g (15 mmol) boronové kyseliny a 0,58 g (0,5 mmol) Pd(PPh3)4 ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 38 ml 1,4-dioxanu a 12,5 ml (25 mmol) 2N vodného NaOH. Výsledná směs byla zahřívána na 90 °C. Po 2 hodinách byla reakce naředěna 100 ml EtOAc a 70 ml vody, fáze byly odděleny a organická fáze byla extrahována 2 x 100 ml EtOAc. Sloučené organické fáze byly promyty 20 ml solanky, a pak usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová směs byla purifikována chromatografií na silikagelu (za eluce 9:1 směsí hexanu a EtOAc) za vzniku 4,15 g (94% výtěžek) 3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-6-nitro-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu jako žluté pevné látky. FTIR (tenký film) 2950, 2898, 1523, 1501, 1483, 1446,
1344, 1249, 1080, 1043, 927 cm1, ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,56
(dd, IH, J = 0,68, 1, 75 Hz), 8,1 4 (d, IH, J = 1,78 Hz), 8,13
(d, IH, J = 0,67 H lz) , 7,50 (d, IH, 16,53 Hz) , 7,25 (d, IH,
16,5: 2 Hz) , 7,18 (d, IH, J = 1,67 Hz), 7,07 (dd, IH, J = 1 ,65,
8,13 Hz) , 6,88 (d, IH, J = 8,0 Hz), 6,05 (s, 2H), 5,84 (s,
2H) , 3, 66 (t, 2H, J = 7, 33 Hz), 0 ,97 (t, 2H , J = 7,24 Hz) , 0,0
(s, 9H), 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 148,5, 148,2, 147,0, 143,9, 140,1, 132,7, 131,3, 126,1, 122,3, 121,9, 116,7, 116,5, 108,7, 106,9, 105,7, 101,5, 78,4, 67,2, 17,9, -1,3, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 531, změřeno 531.
•4 44*4 ·
• 4 44 • 4 • 4 44 • 4 4 · 4 · 449
4449 449 44 49 4· 44·4 (ϋ)
3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-6-nitro-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-ΙΗ-indazol byl konvertován na 3—(2— benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy-
methyl]-lH-indazol -6-ylamin, jak bylo popsáno v příkladu 11,
krok (iv). ΧΗ NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,73 (d, 1H, J = 8,56 Hz) ,
7,52 (d, 1H, J = 16,57 Hz), 7,18 (d, 1H, J = 16,56 Hz) , 7,10
(d, 1H, J = 1,49 Hz), 6,98 (dd, 1H, J = 1,52, 8,06 Hz), 6,80
(d, 1H, J = 8,01 Hz), 6,68 (d, 1H, J = 1,44 Hz), 6,63 (dd, 1H,
J = 1, 86, 8,57 Hz), 5,95 (s, 2H), 5,59 (s, 2H) , 3,59 (t, 2H, J = 8,17· Hz), 0,91 (t, 2H, J = 8,33 Hz), 0,04 (s, 9H) , 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 148,3, 147,6, 146,4, 143,4, 143,0, 132,0,
130,8, 122,0, 121,7, 118,8, 116,5, 113,1, 108,5, 105,5, 101,3, 92,9, 77,6, 66,3, 17,9, -1,3, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno
410, změřeno 410.
(iii)
3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-1-(2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-ylamin byl konvertován na {3—(2— benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-indazol-6-yl }~ (3-nitrofenyl) amin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (v). 13C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 150,8, 149,7, ·· ···· ·· ·· • · · 9 9 9
9 99 9 9 9 99
9 9 9 9 9
9 9 9 9
9999
149,1, 146,0, 144,8, 143,6, 142,1, 133,1, 132,7, 131,6, 124,0, 123,8, 123,1, 120,4, 119,5, 117,2, 116,8, 112,6, 109,9, 106,9, 102,6, 99,7, 79,1, 67,9, 19,2, 0,0, MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 531, změřeno 531. Anal. výpočet: C, 63,38, H, 5,70, N, 10,56. Změřeno: C, 63,49, H, 5,76, N, 10,42.
(iv)
{3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}-(3-nitrofenyl)amin byl konvertován na {3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-1-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl[methyl-(3nitrofenyl) amin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (vi) . FTIR (KBr) 2952, 2894, 1612, 1529, 1503, 1489, 1446, 1407,
1348, 1306, 1251, 1077, 1039 cm'1, 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ
150,1, 149,5, 148,4, 147,8, 147,0, 143,5, 142,4, 131,8, 131,5, 129,8, 123,0, 122,49, 121,9, 120,1, 119,5, 118,2, 114,3, 11,3, 108,7, 105,7, 104,5, 101,4, 78,0, 66,8, 41,0, 17,9, -1,2, MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 545, změřeno 545. Anal. výpočet: C, 63,95, H, 5,92, N, 10,29. Změřeno: C, 62,63, H, 5,72, N, 9,62.
(v)
THF, WC
O • fc fc ·« ···· fcfc fcfc • fcfc fcfcfc • fcfcfc · fcfcfcfc fc fcfcfc fcfc fc · fcfcfcfc fcfcfc • fcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc fcfcfcfc {3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-ylJmethyl-(3-nitrofenyl)amin byl konvertován na [3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6yl]methyl-(3-nitrofenyl)amin, jak bylo popsáno v příkladu 11. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 415, změřeno 415. Anal. výpočet: C, 66,66, H, 4,38, N, 13,52. Změřeno: C, 66,56, H, 4,48, N, 13,35.
Příklad 16(a)
N-(3—{[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]methylamino}fenyl)benzamid
N-[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]N-methylbenzen-1,3-diamin (připravený, jak bylo popsáno v příkladu 15) byl konvertován na N-(3-{[3-(2benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]methylamino}fenyl)benzamid způsobem popsaným v příkladu 12(a). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 489, změřeno 489. Anal. výpočet: C, 73,76, H, 4,95, N, 11,47. Změřeno: C, 73,19, H, 5,09, N, 11,20.
Příklad 16(b)
N-(3—{[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]methylamino}fenyl)-3-methylbenzamid »4 44 ·· · · 4
4444 4 4 •4 44·· • · · ··
4444 444
44 44 4444
Sloučenina z příkladu 16 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 16(a) uvedeném výše, kromě toho, že m-toluylchlorid byl použit namísto benzoylchloridu. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 504, změřeno 504. Anal. výpočet: C, 74,09, H, 5,21, N, 11,15. Změřeno: C, 73,04, H, 5,84, N, 10,29.
Přiklad 16(c)
N-(3-{[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]methylamino}fenyl)-3-dimethylamino-benzamid
Sloučenina z příkladu způsobem, jak bylo popsáno m-dimethylaminobenzoylchlorid chloridu. LCMS (ESI) [M+H]/z výpočet: C, 72,30, H, 5,50, 5,80, N, 12,75.
(c) byla připravena v příkladu 16 (a) kromě byl použit namísto vypočteno 532, změřeno N, 13,17. Změřeno: C, podobným toho, že benzoyl532. Anal. 71,61, H, •9 ·»#· Μ • 9 9 9 • · 99 · • 9 · · • · ·
Příklad 16 (d)
N- (3-{[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]methylamino}fenyl)-3-trifluormethylbenzamid
Sloučenina z příkladu 16(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 16 (a) kromě toho, že m-trifluormethylbenzoylchlorid byl použit namísto benzoylchloridu. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 557, změřeno 557. Anal. výpočet: C, 66,90, H, 4,17, N, 10,07. Změřeno: C, 66,64, H, 4,34, N, 9,82.
Příklad 16(e)
3-acetyl-N-(3—{[3-(2-benzo[1,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazol-6 yl]methylamino}fenyl)benzamid
Sloučenina z příkladu způsobem, jak bylo popsáno m-acetylbenzoylchlorid byl LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno C, 72,44, H, 4,94, N, 1056. 7,58.
16(e) byla připravena podobným v příkladu 16 (a) kromě toho, že použit namísto benzoylchloridu. 531, změřeno 531. Anal. výpočet:
Změřeno: C, 55,51, H, 4,21, N,
44
4 9
99,4 « *· ** ' • · « · 9 ·
4 94 · 4 4 44
4 4 4 4 9 4
4 4 4 9 9
4444 444 49 49
4444
Příklad 16(f)
6-[N-(3-(4-terc-butyl-3-hydroxybenzamido)fenyl)-N-methylamino]-3-E-[(3,4-methylendioxyfenyl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 16(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 16(a) kromě toho, že 3-terc-butyl-4-hydroxybenzoová kyselina, HATU a TEA byly použity namísto benzoylchloridu. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7,90 (d, 1H, J = 8,91 Hz), 7,83 (d, 1H, J = 2,29 Hz), 7,63 (dd, 1H, J = 8,36 Hz, J = 2,31 Hz), 7,54 (t, 1H, J = 1,97 Hz), 7,257,43 (m, 4H), 7,14-7,20 (m, 2H), 7,06 (dd, 1H, J = 8,11 Hz, J = 1,55 Hz), 6,96 (dd, 1H, J = 8,93 Hz, 1 = 1,97 Hz), 6,90 (m, 1H) , 6,82 (t, 2H, J = 8,18 Hz), 6,0 (s, 2H) , 3,41 (s, 3H) ,
1,42 (s, 9H).
Příklad 17
Fenyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanon
Fenyl-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazol-6-ylJmethanon byl konvertován na 30 mg (78 %) fenyl(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanonu, jak bylo popsáno v příkladu 11. MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 325, změřeno 325.
• 9 4*44 44 44 ·* 44
44« 444 4 4 4
444 4 4 444 * 4 ·
444 49 444 4 4
4 · 4 4 · 449
4444 444 44 44 44 4444
Anal. výpočet: C, 81,46, H, 4,97, N, 8,46. Změřeno: C, 80,36, H, 5,16, N, 8,51.
Výchozí látka byla připravena takto:
K roztoku 143 mg (0,3 mmol) 6-jod-3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-lH-indazolu, připraveného v příkladu 14, krok (i), v 1 ml THF, ochlazenému na -78 °C v argonové atmosféře bylo po kapkách přidáno 0,2 ml (0,315 mmol) η-BuLi. Výsledná směs byla míchána v -78 °C po dobu 30 minut, pak bylo rychle kanylou přidáno 0,035 ml (0,33 mmol) roztoku benzaldehydu v 0,5 ml THF. Po 0,5 hodině byla reakce zastavena saturovaným vodným NH4C1 a naředěna 10 ml EtOAc a 3 ml H20. Fáze byly odděleny a vodná fáze byla extrahována 2 x 10 ml EtOAc. Sloučené EtOAc vrstvy byly promyty 5 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová směs byla purifikována chromatografii na silikagelu (za eluce směsí hexanu a EtOAc 4:1) za vzniku 68 mg (50% výtěžek) fenyl-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl) -lH-indazol-6-yl[methanolu. Rf sm = 0,72, Rf p = 0,39 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3368, 2952, 2893, 1621, 1478, 1449, 1374, 1307, 1249, 1216, 1078, 960, 859, 835 cm-1. MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 457, změřeno 457.
(ii)
Deee-Martln
CHjClj,23*C
• v w · · * ·
100
• · · ·· ♦· • · · <· ····
K roztoku 68 mg (0,15 mmol) fenyl-{3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl}-lH-indazol-6-yl[methanolu ve 3 ml dichlormethanu ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 190 mg (0,45 mmol) jodistanu (Dess-Martinovo činidlo). Výsledná směs byla míchána ve 23 °C po dobu 1 hodiny. Roztok pak byl naředěn 3 ml hexanu, pak filtrován přes celit a koncentrován při sníženém tlaku na pevnou látku. Surová směs byla purifikována chromatografií na silikagelu (za eluce směsí hexanu a EtOAc 9:1) za vzniku 54 mg (79% výtěžek) fenyl-{3styryl-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl}-lH-indazol-6-yl}methanonu. Rf srn = 0,41, Rf p = 0,63 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3059, 2952, 2894, 1659, 1474, 1448, 1307,
1249, 1078, 836, 649 cm-1. MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 455, změřeno 455.
Příklad 18 (3-aminofenyl)-(3-styryl-ΙΗ-indazol-6-yl)methanon
1MTBAF/THF, EDA 70 *C ·► (3-aminofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-indazol-6-yl [methanon byl konvertován na (3-aminofenyl) - (3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanon, jak bylo popsáno v příkladu 11. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,07 (dd, 1H, J =
J = 1,08, 7,89 Hz). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 340, změřeno
340.
Výchozí látka byla připravena takto:
101 (i)
6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-1Hindazol byl konvertován na (3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-lH-indazol-6-yl}methanol, jak bylo popsáno v příkladu 17, krok (i). Rf sm = 0,71, Rf p = 0,25 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3369, 3061, 2952, 2894, 2361, 1620, 1578, 1530, 1478, 1449, 1350, 1308, 1249,
1215, 1080, 961, 859 cm’1, XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,35 (s,
1H) , 8,14 (dd, 1H , J = 1,34, 8,14 Hz) , 7,99 (d, 1H, J = 8,38
Hz) , 7,76 (d, 1H, J = 7,72 Hz), 7,68 (s, 1H), 7,59-7,30 (m,
8H) , 7,21 (d, 1H, J = 8,33 Hz), 6,09 (s, 1H) , 5,73 (s, 2H) ,
3, 61 (t, 2H, J = 8,30 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,30 Hz), - 0, 06
(s, 9H) . 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 148,5, 145,9, 143,4, 142,4,
141,3, 137,1, 132,7, 132,0, 129,5, 128,9, 128,2, 126,7, 122,6, 122,6, 121,8, 121,5, 120,8, 119,6, 107,8, 77,7, 75,4, 66,8,
17,8, -1,3. Anal. výpočet: C, 67,04, H, 6,23, N, 8,38.
Změřeno: C, 66,93, H, 6,20, N, 8,41.
(3-nitrofenyl) -{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-indazol-6-yl[methanol byl konvertován na (3nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1H• ·
102 indazol-6-ylJmethanon, jak bylo popsáno v příkladu 17, krok (li) 129 mg 91 %) . Rf sm = 0,46, Rf p = 0,23 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3082, 2952, 2894, 1665, 1613, 1532, 1476, 1349, 1298, 1250, 1080, 836, 718 cm'1, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 500, změřeno 500.
(iii)
(3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-índazol-6-yl }methanon byl konvertován na (3aminofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazol-6-ylJmethanon, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv) 102 mg (84 %). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 340, změřeno 340.
Příklad 19(a)
N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyl]acetamid
(3-aminofenyl)-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanon, připravený v příkladu 18, byl konvertován na 12,2 mg (78 %)
N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyl]acetamidu, jak bylo popsáno v příkladu 12 (a). Rf srn = 0,16, R/ p = 0,35 (8:2
CH2C12: EtOAc) , LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 382, změřeno 382.
• · • · • · • · · · ·· • · « · · · • ·«· · · ♦·· • · · · • · · • · · · · • · · · • · · · · ·
103
Anal. výpočet: C, 75,57, H, 5,02, N, 11,02. Změřeno: C, 74,32, H, 5,41, N, 10,54.
Přiklad 19 (b)
N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyl]benzamid
Sloučenina z příkladu 19 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 19 (a) kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto acetanhydridu. 1H NMR (300 MHz, (CDC13) δ 8,40 (s, 1H), 8,02 (d, 1H, J = 8,49 Hz), 7,98 (d, 1H, J = 1,01 Hz), 7,95 (s, 1H) , 7,95 (s, 1H) , 7,83-7,88 (m, 3H), 7,65 (dd, 1H, J= 1,04, 8,48 Hz), 7,29-7,56 (m, 11H). MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 444, změřeno 444. Anal. výpočet: C, 78,54, H, 4,77, N, 9,47. Změřeno: C, 78,01, H, 4,87, N, 9,32.
Příklad 19(c)
Benzylester [3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyl]karbamové kyseliny
Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 19 (a) kromě toho, že karboxybenzyloxychlorid byl použit namísto acetanhydridu. ΤΗ
NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 8,37 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 7,98 (s
104
IH), 7,88 (s, IH), 7,79 (s, IH) , 7,75 (d, 2H, J = 7,44 Hz), 7,61 (d, 2H, J = 1,81 Hz), 7,58 (s, IH), 7,51 (t, IH, J = 7,79 Hz), 7,42 (t, 5H, J = 6,56 Hz), 7,31-7,37 (m, 4H) , 5,16 (s, 2H), LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 474, změřeno 474. Anal. výpočet: C, 76, 09, H, 4,90, N, 8,87.. Změřeno: C, 73,82, H, 4,93, N, 8,27.
Příklad 19 (d) [3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyl] amid 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny
(3-aminofenyl)-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanon byl konvertován na 9,9 mg 28 %) [3-(3-styryl-lH-indazol-6karbonyl)fenyl]amidu 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny,
jak bylo popsáno v příkladu 12 (d) . LH NMR (300 MHz, CDC13) δ
8,15 (d, IH, J = 8,49 Hz), 8,09 (t, IH, J = 1,86 Hz), 8,04
(dd, IH, J = 1,0, 7,98 Hz), 7,99 (s, IH) , 7,75 (dd, IH, J =
1,31 , 8,47 Hz), 7,67 (s, IH), 7,63 (d, 2H, J = 7,30 Hz) , 7,54-
7,58 (m, 3H), 7,50 (s, IH) , 7,42 (t, 3H, J = 8,09 Hz) , LCMS
(ESI) [M+H]/z vypočteno 465, změřeno 465.
Příklad 19 (e)
6-[3-(5-methylpyridin-3-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lHindazol • 4
4 4 4 4 4 4
4444 4 · 4 • 4 444 * • 4 • · 44
Sloučenina z příkladu 19(e) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 5-methylnikotinová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny. TH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,22 (s, 1H) ,
8,99 (d, 1H, J = 0,59 Hz), 8,67 (s, 1H) , 8,24 (s, 1H) , 8,16 (d, 1H, J = 8,32 Hz), 2,97 (dd, 1H, J = 8,3 Hz, J = 0,94 Hz), 7,72 (d, 1H, J = 16,65 Hz), 7,64 (d, 2H, J = 7,21 Hz), 7,197,47 (m, 8H) , 6,95 (d, 1H, J = 6,43 Hz), 2,49 (s, 3H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 459, změřeno 459. Anal. výpočet: C, 75,97. H, 4,84. N, 12,22. Změřeno: C, 75, 86. H, 4,94. N, 12,10.
Příklad 19(f)
6-[3-(indol-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 19(f) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19 (d) kromě toho, že lH-indol-4karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny. LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 483, změřeno 483. Anal. výpočet: C, 77,16, H, 4,60, N, 11,61. Změřeno: C, 76,15, H, 4,49, N, 11,31.
• · ···· ·· · * 4 4 4 4 4
444 4 · ···
106
Příklad 19(g)
6-[3-(pyridin-2-ylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
O'' Η IÍ λ-AJT 1 H
ί'ν'ν o Ί0
Sloučenina z příkladu 19(g) byla připravena podobným
způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že pyridin-2-
yloctová kyselina byla použita namísto uvedené sloučeniny. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,50 (dd, 1H, J = 4,86 Hz, J = 0,91 Hz), 8,37 (d, 1H, J = 8,51 Hz), 8,09 (s, 1H) , 7,94 (d, 1H, J = 7,89 Hz), 7,87 (s, 1H), 7,73-7,79 (m, 3H), 7,25-7,60 (m, 10H), 3,86 (s, 2H) . MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 459, změřeno 459. Anal. výpočet: C, 75, 97, H, 4,84, N, 12,22. Změřeno: C, 74,70, H, 4,83, N, 11,99,
Příklad 19(h)
6-[3-(2-methylpropionamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 19(h) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19 (a). Isobutyrylchlorid byl použit namísto acetylchloridu. 1H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 8,38 (d,
1H, J = 8,13 Hz), 8,08 (t, 1H) , 7,96 (s, 1H, J = 7,8 Hz, J =
1,91 Hz), 7,88 (s, 1H) , 7,75 (d, 2H, J = 7,25 Hz), 7,61 (d,
2H, 2,05 Hz), 7,40-7,58 (m, 5H) , 7,31 (m, 1H), 2,60 (m, 1H, J = 6,82 Hz), 1,1 (d, 6H, J = 6,82 Hz). (MS (ESI+) [M+Na]/z vypočteno 432, změřeno 432. Anal. výpočet: C, 76,26. H, 5,66. N, 10,26. Změřeno: C, 75,14. H, 5,62. N, 10,08.
·« 999 9 ··
9 9 9 9 9 • 9
107
Přiklad 19(i)
6-[3-(2-acetamido-2-fenylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lHindazol
Sloučenina z příkladu 19(i) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že acetylamino-2fenyloctová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,5 (s, 1H),
10.6 (s, 1H) , 8,66 (d, 1H, J = 7,66 Hz), 8,36 (d, 1H, J = 8,47 Hz), 8,07 (s, 1H) , 7,92 (d, 1H, J = 7,63 Hz), 7,86 (s, 1H) , 7,75 (d, 2H, J = 7,33 Hz), 7,29-7,60 (m, 13H, 5,61 (d, 1H, J =
7.6 Hz), 1,92 (s, 3H) . LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 515, změřeno 515. Anal. výpočet: C, 74,69. H, 5,09. N, 10,89. Změřeno: C, 73,01. H, 5,01. N, 10,60.
Přiklad 19(j)
6-[3-(pyridin-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 19(j) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že isonikotinová kyselina byla použita namísto 5 methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+Na]/z vypočteno 467, změřeno 467. Anal. výpočet: C, 75,66, H, 4,54, N, 12,60. Změřeno: C, 74,17, H, 4,62, N, 12,31.
•a aaaa a · aaaa a a aaaa aa ·· aaa a a aaaa a • •a aa aaa a aaaa a aa aa
108
Příklad 19(k)
6-[3-(pyridín-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 19 (k) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že pyridin-2karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+Na)/z vypočteno 467, změřeno 467. Anal. výpočet: C, 75,66, H, 454, N, 12,60. Změřeno: C, 74,17, H, 4,61, N, 12,44.
Příklad 19(1)
6-[3-(isoxazol-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 19(1) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že isoxazol-5karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 435, změřeno 435. Anal. výpočet: C, 71,88, H, 4,18, N, 12,90. Změřeno: C, 71,36, H, 4,33, N, 12,47.
Příklad 19(m)
6-[3-(6-chlorpyrídin-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lHindazol ·« *·*· • · • · · · ·· ·· ·» ·* • · · · · · · • · · ·· · · » • · · · · · · *
Sloučenina z příkladu 19(m) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 6-chlorpyridin2-karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+Na]/z vypočteno 501, změřeno 501.
Příklad 19 (n)
6-[3-(4-chlorpyridin-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lHindazol
Sloučenina z příkladu 19(n) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 4-chlorpyridin2-karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 479, změřeno 479. Anal. výpočet: C, 70,22, H, 4,00, N, 11,70. Změřeno: C, 70,07, H, 4,09, N, 11,64.
Příklad 19(o)
6-[3-(2-chlorpyridin-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lHindazol
Sloučenina z příkladu 19 (o) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 2-chlorisonikotinová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol~2karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 479, změřeno 479.
Příklad 19(p)
6-[3-(2-methylamino~2-fenylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lHindazol
K roztoku 115 mg (0,2 mmol) 6-[3-(2-(N-t-butoxykarbonylN-methylamino)-2-fenylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazolu ve 2 ml CH2CI2 ochlazenému na 0 °C byly přidány 2 ml TFA. Po 40 minutách byla reakční směs zastavena saturovaným vodným NaHCCh, pak extrahován 2 x 10 ml CH2C12. Organické vrstvy byly promyty solankou, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány. Purifikace chromatografií na silikagelu (1:10 směs methanolu a dichlormethanu) poskytla 38 mg (39 %) 6-[3(2-methylamino-2-fenylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazolu. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 487, změřeno 487. Anal. výpočet: C, 76, 52, H, 5,39, N, 11,51. Změřeno: C, 74,99, H, 5,76, N, 10,89.
Výchozí látka byla připravena, jak popsáno níže:
111 (i) 6-[3-(2-(N-t-butoxykarbonyl-N-methylamino)-2-fenylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
6-[3-(2-(N-t-butoxykarbonyl-N-methylamino)-2-fenylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol byl připraven podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že (t-butoxykarbonyl-methylamino)fenyloctová kyselina byla použita namísto
5- methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 587, změřeno 587.
Příklad 20(a)
6- (3-acetamidofenylsulfanyl)-3-styryl-lH-indazol
6-(3-acetamidofenylsulfanyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl] -lH-indazol byl konvertován na 6-(3-acet~ amidofenylsulfanyl)-3-styryl-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 11 30 mg (81 %) : sm 0,65, p 0,35 (10% methanol v dichlormethanu), 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,81 (d, 1H, J =
8,5 Hz), 7,59 (š s, 1H) , 7,48-7,0 (m, 13H) , 1,98 (s, 3H), HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 408,1147, změřeno 408,1156.
Výchozí látka byla připravena takto:
< · • ·
(i)
Κ 1,4 ekv. 9-BBN adiční sloučenině 3-ftalamidothiofenolu, která byla připravena in sítu, jak popsáno níže, bylo přidáno 250 mg (0,5 mmol) 3,6-dijod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-indazolu, 87 mg (0,2 ekv.) Pd(dppf)Cl2 a 339 mg (1,6 mmol, 3,00 ekv.) fosfátu draselného ve 3,0 ml DMF. Reakční směs byla zahřívána na 90 °C po dobu 9 hodin. Směs byla ochlazena a rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný hydrouhličitan sodný. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 159 mg (50 %) 6-(3-ftalamidofenylsulfanyl)-3-jod-lHindazolu jako oleje: XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,93 (m, 2H), 7,79 (m, 2H) , 7,62 (s, 1H) , 7,5-7,3 (m, 5H) , 7,22 (d, 1H) , 5,68 (s, 2H) , 3,55 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,87 (t, 2H, J = 8,2
Hz), -,06 (s, 9H), HRMS (FAB) [M+Cs]/z vypočteno 759,9563, změřeno 759,9571.
Boronová reagencie byla připravena takto: ve Schlenkově baňce o .objemu 10 ml byl usušen 3-ftalamidothiofenol za vysokého vakua. Byl přidán roztok 1,6 ml (1,0 ekv.) 9-BBN (0,5M v THF) . Směs byla zahřívána na 55 °C po dobu 2 hodin. Těkavá látka byla odstraněna v argonové atmosféře v 70 °C po dobu 1,5 hodiny. Zbytek byl použit bez další manipulace.
6-(3-ftalamidofenylsulfanyl)-3-jod-lH-indazol byl konvertován na 6-(3-ftalamidofenylsulfanyl)-3-styryl-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iii). 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,93 (m, 3H) , 7,78 (m 2H) , 7,7 (s, 1H) , 7,58 (m, 2H), 7,47-7,26 (m, 10H) , 5,71 (s, 2H) , 3,59 (t, 2H, J - 8,2 Hz), 0,89 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,06 (s, 9H) , HRMS (FAB) [M+Cs]/z vypočteno 736,1066, změřeno 736,1058.
(iii)
K roztoku 121 mg (0,2 mmol) 6-(3-ftalamidofenylsulfanyl)3-styryl-lH-indazolu ve 3,5 ml ethanolu bylo přidáno 63 μΐ (2,0 mmol) 10 ekv.) hydrazinu. Reakční směs byla ponechána za míchání ve 23 °C po dobu 45 minut a byla naředěna saturovaným hydrouhličitanem sodným a ethylacetátem. Organická' látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografii na silikagelu (3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 79 mg (90 %) 6-(3-aminofenylsulfanyl)-3styryl-lH-indazolu jako oleje: XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,92
(d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,57 (m, 3H) , 7,49 (d, 1H, J = 16,8 Hz) ,
7,4- -7,25 (m, 4H), 7,23 (dd, 1H, J = 1,5, 8,5 Hz) , r 7,11 (t, 1H,
J = 7,9 Hz) , 6,79 (m, 1H), 6,70 (t, 1H, J = 1,9 Hz), 6,59 (m,
1H) , • 5,6 6 (s , 2H) , 3,60 (š s, 2H), 3,59 (t, 2H, J = 8,2 Hz) ,
• to ► ···· • to to · ·· ·· toto··
114
0,90 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,05 (s, 9H) , HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 474,2035, změřeno 474,2019.
(iv)
K roztoku 43,7 mg (0,10 mmol) 6-(3-aminofenylsulfanyl)-3styryl-lH-indazolu v 0,5 ml dichlormethanu bylo přidáno 81 μΐ (1,0 mmol, 10 ekv.) pyridinu a 47 μΐ (0,5 mmol, 5 ekv.) acetanhydridu. Směs byla ponechána za míchání po dobu 10 minut ve 23 °C. Směs byla naředěna vodou a produkt byl extrahován
30% hexanem v ethylacetátu. Organická látka byla promyta 5% kyselinou citrónovou a saturovaným hydrouhličitanem sodným. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 50 mg (97 %) 6-(3acetamidofenylsulfanyl)-3-styryl-lH-indazolu jako oleje: Rf srn 0,33, Rf p 0,18 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,94 (d, 1 H) , 7,65-7,1 (m, 13H) , 5,70 (s, 2H) ,
3,62 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 2,18 (s, 3H) , 0,93 (t, 2H, J = 8,2
Hz), -0,05 (s, 9H) . HRMS (FAB) [M+Cs]/z vypočteno 648, 1117, změřeno 648,1098.
Příklad 20(b)
6-(3-(benzoylamido)fenylsulfanyl)-3-styryl-lH-indazol
o ··
115
Sloučenina uvedená v názvu byla připravena jako v příkladu 20(a) kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto acetanhydridu v kroku (iv). 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,03 (s,
1H), 7,73 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,63 (m, 2H) , 7,47 (m, 1H) , 7,42 (t, 1H, J = 1,9 Hz), 7,37 (m, 3H) , 7,31 (m, 1H) , 7,286,98 (m, 9H), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 448,1484, změřeno
448,1490.
Příklad 21
6-(1-(3-aminofenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol
NH,
H
Λ
NH,
6-(1-(3-aminofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl] -lH-indazol byl konvertován na 35 mg (85 %) sloučeniny uvedené v názvu, jak bylo popsáno v příkladu 11: Rf srn 0,72, p 0,37 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), FTIR (tenký film) 3385, 3169, 2953, 1621, 1581, 1489, 1447, 1349,
1251, 1165, 1071, 959, 906, 870, 817 cm'1, 1H (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,60 (m, 2H) , 7,51 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,40 (m, 3H), 7,29 (m, 2H) , 7,15 (m, 1H) , 6,78 (m, 1H) , 6,68 (m, 2H) , 5,50 (s, 2H) , 3,65 (š s, 2H) , MS (ES) [M+H]/z vypočteno 338, změřeno 338, MS (ES) [M-H]/z vypočteno 336, změřeno 336.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
n-BuU, ZnCt Pd<PRtí4
P“
NO, • 9
116
K roztoku 330 mg (0,693 mmol) 6-jod-3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-IH-indazolu, připraveného v příkladu 14, krok (i), ve 3,0 ml THF bylo v -78 °C přidáno 0,56 ml (1,2 ekv. ) 1,5M n-butyllithia. Po 20 minutách byl tento roztok pak přidán ke 170 mg bezvodého chloridu zinečnatého a směs byla zahřáta na 23 °C a míchána po dobu 15 minut. K této směsi bylo přidáno 146 μΐ (1,05 ekv.) l-(3nitrofenyl)vinyltriflátu a 40 mg (0,05 ekv.) Pd(PPh3)4. Tato směs byla míchána po dobu 30 minut, byla rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný hydrouhličitan sodný a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografii na silikagelu (1:9 směs ethylacetátu a hexanu) pak druhá kolona (1% směs ethylacetátu a benzenu) poskytla 180 mg (52 %) 6-(1-(3-nitrofenyl)vinyl)-3styryl-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu jako oleje: FTIR (tenký film) 2951, 1616, 1530, 1477, 1448, 1348,
7305, 1248, 1217, 1077, 961, 913, 859 cm-1, 1H (300 MHz, CDC13) δ 8,26 (t, 1H, J = 1,9 Hz), 8,21 (m, 1H) , 8,00 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,69 (dt, 1H, J= 1, 4, 7,8), 7,62-7,28 (m, 9H) , 7,19 (dd, 1H, J = 1,4, 8,4 Hz), 5,72 (s, 3H) , 5,69 (s, 1H) , 3,60 (t, 2H, J = 8,2 Hz),. 0,89 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,05 (s, 9H) , 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 149, 9, 149, 6, 144,7, 144,5, 142,8, 140,7,
138,6, 135,6, 133,1, 130,7, 130,2, 129,4, 128,0, 124,4, 124,2,
124,1, 123,8, 122,6, 121,2, 118,9, 111,0, 79,2, 68,0, 19,2,
0,0, HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 520,2031, změřeno 520,2046.
(ii)
• · · ·· ···* » · tttt · • tt • tttttt
117
6-(1-(3-nitrofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl ) ethoxymethyl ] -lH-indazol byl konvertován na 6-(1-(3aminofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv) 140 mg (95 %) : Rf srn 0,59, p 0,46 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), FTIR (tenký film) 3460, 3366, 3223, 3084, 3028, 2952,
2894, 2246, 1616, 1601, 1581, 1489, 1474, 1448, 1359. 1303,
1249, 1217, 1076, 961, 909, 860, 836, 733, 692 cm'1, ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) 5 7,96 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,59 (m, 3H) , 7,50 (s, 1H) , 7,46 (s, 1H) , 7,40 (m, 2H) , 7,30 (m, 1H) , 7,25 (m,
1H) , 7,14 (m, 1H) , 6,77 (m, 1H) , 6,68 (m, 2H) , 13C NMR (75 MHz,
CDC13) δ 151,6, 147,7, 144,6, 143,9, 142,8, 142,4, 138,6,
132,8, 130,6, 130,2, 129,3, 128,0, 124,4, 123,6, 121,9, 121,5,
120,2, 116,4, 116,1, 110,8, 79,0, 67,9, 19,2, 0,0, HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 490,2291, změřeno 490,2302.
Příklad 22(a)
6-(1-(3-(5-methylthiaxol-2-karboxoylamido)fenyl)vinyl)-3styryl-lH-indazol
6-(1-(3-aminofenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol byl konvertován na 20 mg (72 %) sloučeniny uvedené v názvu, jak bylo popsáno v příkladu 12(d): FTIR (tenký film) 3271, 1673,
1605, 1585, 1538, 1486, 1428, 1349, 1304, 1090, 960, 907, 871 cm’1, τΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,7 (š s, 1H) , 9,09 (s, 1H) , 8,0 (d, 1H), 7,79 (m, 1H) , 7,60 (m, 3H) , 7,51 (m, 3H) , 7,447,15 (m, 7H) , 5,59 (s, 2H) , 2,54 (s, 3H) , 13C NMR (75 MHz,
CDCI3) δ 162,2, 157,9, 149,8, 144,4, 142,8, 142,2, 141,9, « · ·· ·»·· ··. .
• · ♦ i ϊ • · ·· * t ί
118
141,5, 140,6, 137,63, 137,56, 131,6, 129,5, 129,1, 128,3,
126,9, 125,1, 122,6, 121,2, 120,9, 120,5, 120,2, 119,8, 116,1,
110,2, 12,8, HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 463,1593, změřeno
463,1582.
Příklad 22(b)
6-(1-(3-(benzoylamido)fenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol
i) Bz-CI, pyridin IQKjCOfrMtOH
->
Sloučenina z příkladu 22(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 22 (a) kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny a HATU. FTIR (tenký film) 3243, 1651, 1606, 1580, 1538, 1485, 1447, 1428, 1349, 1307, 1258, 1073, 959, 907 cm-1, XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,09 (s, 1H) , 7,99 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,78 (m, 1H) , 7,60 (m, 3H) , 7,51 (m, 3H) , 7,43-7,15 (m, 10H) , 5,56 (d, 2H, J = 3,2 Hz), 13C NMR (75 MHz, CDCls) δ 166,5, 149,7, 144,3, 142,7, 142,1, 140,6, 138,1,
137,6, 135,0, 132,3, 131,6, 129,4, 129,1, 128,3, 127,4, 126,9, 125,0, 122,5, 120,9, 120,8, 120,6, 120,5, 115,9, 110,2, HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 442,1919, změřeno 442,1919.
Příklad 22(c)
6-(1-(3-(benzoylamido)fenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol
I) Cbz-CI, pyridin
II) I^CC^M«OH
->
k · ··· · k * * * ·· * ·
119
Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 22 (a) kromě toho, že karbobenzyloxychlorid byl použit namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny a HATU. FTIR (tenký film) 3305, 1712, 1606, 1586, 1537, 1487, 1445, 1348, 1216, 1059, 959, 908 cm
-i
NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,99 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,6-7,0 (m, 18H) , 5,55 (s, 2H) , 5,19 (s, 2H) , 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 153,9, 149,8, 144,3, 142,7, 142,1, 140,7, 138,2, 137,6, 136,3,
131,7, 129,4, 129,1, 129,0, 128,7, 128,7, 128,3, 126,9, 124,0, 122,6, 121,1, 120,8, 120,4, 115,9, 110,1, 67,4, HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 472,025, změřeno 472,2026.
Příklad 23
6-(1-(3-acetamidofenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol
6-(1-(3-acetamidofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-trimethylsilanylethoxymethyl]-ΙΗ-indazol byl konvertován na 6-(1-(3acetamidofenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 11: FTIR (tenký film) 3252, 1667, 1606, 1557, 1486 cm1, TH NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,4 (š s, ÍH) , 7,91 (d, ÍH, J = 8,5 Hz), 7,5-7,0 (m, 13H), 5,47 (s, 2H) , 2,10 (s, 3H) , MS (ES) [M+H]/z vypočteno 380, změřeno 380, [M-H]/z vypočteno 378, změřeno 378.
Výchozí látka byla připravena takto:
·· ·· • · · • · · ♦ · • · · ♦ * · » * *· ♦ ·
• · · • · · · · ·
120
6-(1-(3-aminofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-trimethylsilanylethoxymethyl ] -lH-indazol byl konvertován na 6-(1-(3-acetamidofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-trimethylsilanylethoxymethyl]-1Hindazol, jak bylo popsáno v příkladu 12(a): Rf sm 0,42, p 0,26 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), FTIR (tenký film) 3305, 3059, 2952, 1667, 1608, 1585, 1555, 1486, 1448, 1433, 1369,
1306, 1249, 1076, 912, 859, 836, 748, 693 cm'1, XH NMR (300
MHz, CDCls) δ 7,98 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,7-7,4 (m, 9H) , 7,35 (m, 2H) , 7,26 (dd, 1H, J = 1,3, 8,4 Hz), 7,16 (bd, 1H, J = 7,8
Hz), 5,75 (s, 2H) , 5,62 (s, 1H), 5,61 (s, 1H), 3,66 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 2,16 (s, 3H) , 0,98 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,02 (s, 9H), 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 169, 8, 150, 9, 144,6, 143,5,
142,8, 142,0, 139,4, 138,6, 132,9, 130,3, 129,3, 127,9, 125,6, 124,2, 123,7, 122,0, 121,3, 121,0, 117,1, 110,8, 68,0, 25,8,
19,1, 0,0, HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 532,2396, změřeno
532,2410.
Příklad 24(a)
4-[3-(l-H-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-yl]-2-methoxy-5methylfenol
326 mg (0,43 mmol) 6-{5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethoxy]fenyl)-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hbenzamidazol-2-yl}-IH-indazolu bylo mícháno ve 4,5 ml 1M roztoku TBAF v THF, který byl koncentrován ve vakuu na 2,5 ml, • · ·· • · fc · • · • fc fcfc fc · fc • fc • · • · fcfc ·· · ·
121 a 0,6 ml (8,9 mmol) ethylendiaminu ve varu pod zpětným chladičem po dobu 40 hodin. Reakce byla naředěna 40 ml/5 ml směsi ethylacetátu a THF a promyta 20 ml H2O a 20 ml solanky. Organické vrstvy byly usušeny (MgSO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (60% směs THF a hexanu) a pak precipitace z chloroformu poskytla 108 mg (68 %)
4-[3-(1-H-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-yl]-2-methoxy-5methylfenolu jako bílé pevné látky. 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,62 (s, IH), 13,05 (š s, IH) , 9,01 (s, IH) , 8,50 (d, IH, J =
8,4 Hz), 7,62 (š s, 2H), 7,49 (s, IH), 7,28-7,20 (m, 3H), 6,85 (s, IH) , 6,74 (s, IH), 3,77 (s, 3H) , 2,15 (s, 3H) . Anal.
(C22Hi8N4O2 · 1,3 H2O) C, Η, N. Vypočteno C, 67,10, H, 5,27, N,
14,23. Změřeno: C, 67,30, H, 5,27, N, 14,11.
Výchozí látky byly připraveny takto:
(i)
1) ff-BuU.THF
2) h
I
Příprava 2-jod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hbenzimidazolu. Roztok 5,029 g (20,25 mmol) 1-[2-(trimethylsilanyl )ethoxymethyl]-lH-benzimidazolu (viz Witten et al., J. Org. Chem., 51, 1891-1894 1986) v 50 ml THF byl ochlazen na 7 8 °C a přidáván po kapkách po dobu 12 minut kanylou do baňky obsahující 12,2 ml 2,5M n-butyllithia v hexanu, ve 30 ml THF v -78 °C v argonové atmosféře. Po míchání po dobu 25 minut v -78 °C, baňka byla zahřáta na 0 °C po dobu 10 minut, pak byla opět ochlazena na -78 °C. Tento roztok pak byl přidán kanylou do druhé baňky obsahující 25,7 g (101 mmol) jodu v 50 ml THF v -78 °C. Jak bylo přidávání ukončeno (~5 minut), chladicí lázeň byla odstraněna a míchání pokračovalo po dobu 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi 500 ml ethylacetátu a 100 ml vody. Organická vrstva byla promyta 2 x 100 ml fcfc fcfcfcfc fc · ( fcfc » ► · · > · · » · · fcfc fcfcfcfc
• fc
122 saturovaného vodného metabisulfitu sodného, aby se odstranila tmavá barva jodu, usušena (MgSCM a koncentrována ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografii (10% až 50% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 4,79 g (63 %) čistého 2-jod-l[2“(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazolu jako žluté pevné látky. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,76-7,72 (m, 1H), 7,547,51 (m, 1H), 7,29-7,25 (m, 2H), 5,54 (s, 2H) , 3,59 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,92 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,03 (s, 9H) . Anal.
(Ci3Hi9IN2OS) C, H. Vypočteno C, 41,71, H, 5,12, I, 33,90, N, 7,48. Změřeno: C, 41,90, H, 5,09, I, 34,00, N, 7,37.
Příprava 6-nitro-l- [2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3(trimethylstannanyl)-lH-indazolu: 10,0 g (23,9 mmol) 3-jod-6nitro-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu a 10,0 g (30,5 mmol) hexamethyldicínu bylo vloženo do 45 ml suchého toluenu v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno 300 mg (0,26 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem v argonové atmosféře po dobu 2,5 hodiny. Reakce byla ochlazena na 23 °C a naředěna 60 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 20 ml 0,lN HCI a 20 ml solanky, usušeny (MgSO4) a koncentrovány. Purifikace chromatografií na silikagelu (3% až 8% směs etheru a hexanu) poskytla 7,70 g (71 %) 6-nitro-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -3- (trimethylstannanyl) -lH-indazolu, jako světle žluté pevné látky. ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,53 (d, 1H, J = 1,8
Hz), 8,03 (dd, 1H, J = 8,7, 1,8 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 8,7 Hz),
5,84 (s, 2H) , 3,58 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,1
···· ·· ·* • · · · · · .····..: .:«· ...* *♦·* *·· 9· • « · • · • · · • 9 ·· ·
123
Hz), 0,50 (t, 9H, J = 28,2 Hz) , -0,05 (s, 9H). Anal.
(Ci6H27N3O3SiSn) C, Η, N. Vypočteno C, 42,13, H, 5,97, N, 9,21.
Změřeno: C, 42,39, H, 6,01, N, 9,26.
·· (iii)
Příprava 6-nitro-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}lH-indazolu: 7,50 g (16,4 mmol) 6-nitro-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-3-(trimethylstannanyl)-lH-indazolu, 6,50 g (17,4 mmol) 3-jod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hbenzimidazolu a 313 mg (1,64 mmol) jodidu měďného bylo vloženo do 150 ml suchého THF v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem v argonové atmosféře po dobu 23 hodin. Reakce byla ochlazena a adsorbována přímo na silikagelu (~16 g) . Purifikace chromatografií na silikagelu (4% až 15% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 7,28 g (82 %) 6-nitro-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]—3—{l—[2— (dimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimídazol-2-yl}-lH-indazolu, jako světle žluté pevné látky. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,91 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 8,59 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 8,22 (dd,
1H, J = 8,7, 1,8 Hz), 7,92-7,89 (m, 1H) , 7,66-7,62 (m, 1H) ,
7,40-7,36 (m, 2H) , 6,24 (s, 2H) , 5,90 (s, 2H) , 3, 68-3,59 (m,
4H) , 0,94 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,86 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H) , -0,15 (s, 9H) . Anal. (C26H37N5O4Si2) C, Η, N. Vypočteno
C, 57,85, H, 6,91, N, 12,97. Změřeno: C, 57,60, H, 6,81, N,
12,82.
124
Příprava 6-amino-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}lH-indazolu: 12,0 g (63,3 mmol) chloridu cínatého bylo přidáno k roztoku 7,18 g (13,3 mmol) 6-nitro-l-(2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hbenzimidazol-2-yl}-ΙΗ-indazolu v 160 ml/10 ml směsi DMF/H2O a reakce byla míchána v 50 °C po dobu 2,5 hodiny. Reakce byla ochlazena na 0 °C a byl pomalu přidán saturovaný hydrouhličitan sodný, za míchání, dokud všechna pěna ze zastavení reakce nepoklesla. Látka byla koncentrována ve vakuu a nabrána do 100 ml etheru. Nerozpustná látka byla odstraněna filtrací a promyta 50 ml etheru. Filtrát byl promyt 50 ml solanky, usušen (Na2SO4) a koncentrován ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (25% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 6,05 g (89 %) 6-amino-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hbenzimidazol-2-yl}-ΙΗ-indazolu, jako světle žluté voskové pevné látky. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,40 (d, 1H, J = 9, 0
Hz) , 7,89 -7,86 (m, 1H), 7,63-7,60 (m, 1H) , 7,35-7,31 (m , 2H),
6, 78 (dd, 1H, J = 8,7, 1,8 Hz), 6,75 (s, 1H) , 6,25 (s , 2H) ,
5, 69 (s,. 2H) , 3, 93 (š s, 2H) , 3,65-355 (m, 4H), 0,93 (t, 2H, J
= 8,1 Hz) , 0,85 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H) , -0, 15 (s,
9H) . Anal (C26H39N5O2Si2) c, Η, N. Vypočteno C, 61,26, H, 7,71,
N, 13 ,74. Změřeno: C, 61, 18, H, 7,65, N, 13, 82.
125
Příprava 6-jod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]—3—{ΙΕ 2 — (trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}-1Hindazolu: Roztok 500 mg (0,98 mmol) 6-amino-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]lH-benzimidazol-2-yl}-ΙΗ-indazolu v 1,5 ml octové kyseliny byl naředěn 1,0 ml H2O a míchán při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 250 μΐ (~3 mmol) koncentrované HC1 250 μΐ v H2O. Bylo přidáno 90 mg (1,3 mmol) dusičnanu sodného ve 300 μΐ H20 a reakce byla míchána po dobu 8 minut. Bylo přidáno 10 mg jodu a roztok 250 mg (1,3 mmol) jodidu draselného ve 250 μΐ H2O a pěnící reakce byla míchána po dobu 30 minut ve 23 °C. Reakce byla naředěna 25 ml H2O a extrahován 2 x 20 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly promyty 10 ml saturovaného roztoku metabisulfitu sodného a 10 ml solanky, usušena (Na2SO4) a koncentrována ve vakuu. Purifikace chromatografii na silikagelu (8% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 316 mg (52 %) 6-jod-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]lH-benzimidazol-2-yl}-ΙΗ-indazolu, jako světle žlutého oleje, který pomalu krystalizoval na bílou pevnou látku. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,45 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 8,05 (s, 1H), 7,91-7,88 (m, 1H), 7,67-7,62 (m, 2H) , 7,38-7, 34 (m, 2H) , 6,24 (s, 2H) , 5,77 (s, 2H), 3,65-3,57 (m, 4H) , 0,93 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,85 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H) , -0,15 (s, 9H) . Anal. (C26H37IN4O2Si2) C, Η, N. Vypočteno C, 50,31, H, 6,01, N, 9,03. Změřeno: C, 50,55, H, 6,08, N, 9,00.
*· ···· • ♦ « · ··
Příprava [2- (4~brom-2-niethoxy-5-inethylfenoxyrnethoxy) ethyl]trimethylsilanu: 4-brom-2-methoxy-5-methylfenol (viz
Chien-Hsun et al., Syn. Lett., 12, 1351-1352, 1997) byl míchán ve 100 ml suchého CH2C12 ve 23 °C. Bylo přidáno 6,05 ml (34,6 mmol) DIEA, a pak 5,6 ml (31,7 mmol) 2-(trimethylsilyl)ethoxymethylchloridu. Po míchání po dobu 1 hodiny byl roztok promyt H2O, 0,lN HCl, H2O, saturovaným NaHCO3 a solankou, po 25 ml. Organické vrstvy byly usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (6% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 9,06 g (91 %) [2-(4-brom-2methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu jako čirého oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,06 (s, 1H) , 7,02 (s, 1H), 5,24 (s, 2H) , 3,84 (s, 3H) , 3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,31 (s, 3H), 0,96 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H).
(vii)
Příprava 5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny: 2,6 g (7,5 mmol) [2-(4-brom-2methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu bylo mícháno v 10 ml suchého TFA v -7 8 °C v argonové atmosféře. Po kapkách bylo přidáno 3,75 ml (9,36 mmol) 2,5M n-butyllithia v hexanu, a reakce byla míchána po dobu 30 minut předtím, než byla přenesena kanylou do baňky s 8,4 ml (75 mmol) » »· toto * «« • •to* • t • · ♦» ·· ·« ► · · » 9 99· • « to* • to • to
127 trimethylborátu v 15 ml THF, která byla také míchána v -78 °C v argonové atmosféře. Poté, co bylo přidávání ukončeno, byla reakce míchána 30 minut v -78 °C, a pak 30 minut při zahřívání na 0 °C. Reakce pak byla zastavena 20 ml H2O, acidif ikována O,1N HC1 a extrahována 2 x 25 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly promyty 20 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (20% až 50% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 1,11 g (47 %) 5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny jako bílé pevné látky. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,78 (s, IH) , 7,10 (s, IH) , 5,36 (s, 2H) , 3,93 (s, 3H) , 3,83 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,79 (s, 3H) , 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H) . Anal. (Ci4H25BO5Si-H2O)
C, H. Vypočteno C, 57,15, H, 7,88. Změřeno: C, 56,89, H, 7,87.
(viii)
Příprava 6-{5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylj-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}lH-indazolu. 350 mg (0,56 mmol) 6-jod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hbenzimidazol-2-yl}-lH-indazolu, 211 mg (0,68 mmol) 5-methoxy2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny a 72 mg (0,68 mmol) uhličitanu sodného byly míchány ve směsi 5 ml benzenu, 330 μΐ H2O a 1 ml methanolu v baňce
·-_,---128 probublávané argonem. Bylo přidáno tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem v argonové atmosféře po dobu 16 hodin. Po ochlazení na 23 °C byla reakce naředěna 20 ml etheru, promyta 10 ml H2O a 10 ml solanky, usušena (Na2SO4) a koncentrována ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (15% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 382 mg (89 %) 6-{5-methoxy-2-methyl-4-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenyl}-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]—3—{1—[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]lH-benzimidazol-2-yl}-ΙΗ-indazolu, jako bílé pevné látky. 1H NMR (300 MHz, CDC13, ) δ 8,68 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,93-7, 90 (m, 1H), 7,67-7,63 (m, 1H) , 7,54 (s, 1H), 7,38-7,32 (m, 3H), 7,13 (s, 1H) , 6,86 (s, 1H) , 6,29 (s, 2H) , 5,83 (s, 2H) , 5,34 (s,
2H), 3,89 (s, 3H) , 3,86 (t, 2H, J = 8,.4 Hz), 3, 69-3,58 (m,
4H), 2,22 (s, 3H) , 1,01 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,95-0,83 (m,
4H), 0,03 (s, 9H), -0,05 (s, 9H), -0,15 (s, 9H). Anal.
(C4oH6oN405Si3) C, Η, N. Vypočteno C, 63,12, H, 7,95, N, 7,36. Změřeno: C, 63,22, H, 7,93, N, 7,46.
Příklad 24 (b)
4-[3-(l-H-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-yl]-3-methylfenol
ethylen dlamln THF, reflux,40h
IBAF ·►
Pro přípravu sloučeniny uvedené v názvu byl následován postup popsaný v příkladu 24 (a), kde 2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethoxy] fenylboronová kyselina (připravená, jak popsáno níže) byla použita namísto 5-methoxy-2-methyl-4-[2• · · · · ·
129 (trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny v kroku (viii). *H NMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 13,60 (s, IH) , 12,99 (š s, IH), 9,41 (s, IH) , 8,49 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,72 (š s, IH) , 7,52 (š s, IH) , 7,45 (s, IH) , 7,25-7,21 (m, 3H) , 7,12 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6, 73-6, 67 (m, 2H) , 2,20 (s, 3H) . Anal. (C2iHi6N4O · 0,7 H2O) C, Η, N. Vypočteno C, 71,45, H, 4,97, N, 15,87. Změřeno: C, 71,44, H, 4,96, N, 15,77.
2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronová kyselina byla připravena takto:
(i)
[2-(4-brom-3-methylfenoxymethoxy)ethyl]trímethylsilan byl připraven při 86% výtěžku z 4-brom-3-methylfenolu podle postupu pro [2-(4-brom-2-methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trímethylsilan. ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,39 (d, IH, J = 8,7
Hz), 6,93 (d, IH, J = 2,7 Hz), 6,75 (dd, IH, J = 8,7, 2,7 Hz), 5,16 (s, 2H), 3,74 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,36 (s, 3H), 0,95 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H) . Anal. (C13H21BrO2Si) C, H.
Vypočteno C, 49,21, H, 6,67. Změřeno: C, 49,33, H, 6,67.
(ii)
1) rt-BuLl ,THF 2) B(OMe),
3) HjO
2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronová kyselina byla připravena při 52% výtěžku z [2—(4— brom-3-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu podle postupu • 4 • ·
• · » · · ft · · ·· • · · • · ·
Λ· ··
130 pro 5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronovou kyselinu uvedeného výše. ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,15 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6, 98-6, 92 (m, 2H) , 5,29 (s, 2H) , 3,78 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,78 (s, 3H) , 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H) . Anal. (C13H23BO4Si - H2O) C, H. Vypočteno C,
59,10, H, 8,01. Změřeno: C, 59,07, H, 8,08.
Příklad 24(c)
4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-yl]-2-chlor-5methylfenol
Pro přípravu sloučeniny uvedené v názvu, 5-chlor-2-methyl4- (2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronová kyselina, připravená, jak popsáno níže, byla použita namísto 5-methoxy2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny z postupu popsaného v příkladu 24 (a), krok (vili). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,61 (s, 1H) , 13,00 (š s, 1H) , 10,22 (s, 1H), 8,51 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,64 (š s, 2H) , 7,50 (s, 1H), 7,26-7,21 (m, 4H), 6,95 (s, 1H) , 2,19 (s, 3H) .
5- chlor-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronová kyselina byla připravena takto:
(i)
OH • φ • · φφ φ··« ► · * φφφφ
131
6,68 g (46,9 mmol) 2-chlor-5-methylfenolu bylo mícháno ve 200 ml acetonitrilu. Bylo přidáno 8,5 g (47,8 mmol) N-bromsukcinimidu a reakce byla míchána po dobu 45 minut. Roztok byl koncentrován ve vakuu a opět rozpuštěn ve 100 ml chloroformu. Organické vrstvy byly promyty 50 ml saturovaného NaHCO3 a 50 ml solanky, usušeny (MgSOU a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (8% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 7,98 g (77 %) 4-brom-3-chlor5-methylfenolu jako čirého oleje. ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,47 (s, 1H) , 6,91 (s, 1H) , 5,52 (š s, 1H) , 2,32 (s, 3H) . Anal. (C7HGClBrO · 0,1 H2O) C, H. Vypočteno C, 37,66, H, 2,80.
Změřeno: C, 37,57, H, 2,82.
(ii)
[2-(4-brom-2-chlor-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilan byl připraven při 83% výtěžku z 4-brom-3-chlor-5methylfenolu podle postupu pro [2-(4-brom-2-methoxy-5methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilan. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,51 (s, 1H), 7,09 (s, 1H) , 5,26 (s, 2H) , 3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,35 (s, 3H) , 0,95 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,02 (s, 9H) . Anal. (Ci3H2oClBr02Si) C, H. Vypočteno C, 44,39, H, 5,73. Změřeno: C, 45,08, H, 5,91.
HQ.-.OH
8EU (iii)
·· ·· » · · » · · · · » · · · » · · <
·· ·*
132
5-chlor-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronová kyselina byla připravena při 54% výtěžku z [2(4-brom-2-chlor-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsílanu podle postupu pro 5-methoxy-2~methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronovou kyselinu. XH NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,11 (s, 1H), 7,09 (s, 1H) , 5,37 (s, 2H) , 3,84 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,76 (s, 3H), 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H). Anal. (Ci3H22BclO4Si - H2O) C, H. Vypočteno C, 52,28, H, 6,75. Změřeno: C, 51,98, H, 6,84.
Příklad 24(d)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(4-hydroxy-2-methoxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 24(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že
4-brom-3-methoxyfenol, připravený, jak bylo popsáno autory Carreno et. Al. , Syn. Lett., 11, 1241-42, 1997, byl použit namísto 4-brom-2-methoxy-5-methylfenolu v kroku (vi) . XH NMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 1352 (s, 1H) , 12,98 (s, 1H), 9,63 (s, 1H) , 8,44 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,72 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 7,61(s, 1H), 7,50 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 7,36 (dd, 1H, J = 8,4, 1,5 Hz), 7,18-7,22 (m, 3H), 6,55 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 6,48 (dd, 1H, J = 8,1, 2,1 Hz), 3,74 (s, 3H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 357, změřeno 357, [M-H]/z vypočteno 355, změřeno 355.
···· .··.;··· ·/·; .····.. : .: · . · · · · * ·«·· ··· ··
133
Příklad 24(e)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-ethyl-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 24 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24 (a) kromě toho, že 4-brom-3-ethyl-fenol, připravený při 80% výtěžku podle postupu popsaného autory Carreno et. Al. , Syn. Lett., 11, 1241-42,
1997, pro syntézu 4-brom-3-methylfenolu, byl použit namísto 4-brom-2-methoxy-5-methylfenolu v kroku (vi) . 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,66 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 9,43 (s, 1H) , 8,49 (d,
7,72 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 7,53 (d, 1H, J =
1H, 7,18 -7,25 (m, 3H), 7,06 (d, 1H, J = : 8,1
J = 2,1 Hz), 6,66 (dd, 1H, J = 8,1, 2,1 Hz) ,
7,5 Hz) , 1,04 (t, 3H, J = 7,5 Hz). MS (ES)
[M+H]/z vypočteno 355, změřeno 355, [M-H]/z vypočteno 353, změřeno 353.
Příklad 24(f)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2,4-dihydroxyfenyl)-lH-indazol
mg (0,13 mmol) 6-(2-methoxy-4-hydroxyfenyl)-3-1Hbenzimidazol-2-yl-lH-indazolu, připraveného v příkladu 24(d), ·♦ • »
134 bylo zahříváno v 0,5 g pyridiniumchloridu ve 180 °C po dobu 2 hodin. Reakce byla ponechána vychladnout a byla zastavena 15 ml saturovaného NaHCO3 a extrahována 2 x 20 ml EtOAc. Organické vrstvy byly usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografii na silikagelu (60% směs THF a hexanu) poskytla 26 mg (59 %) sloučeniny uvedené v názvu jako bílé pevné látky. ΧΗ NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,49 (s, 1H) ,
12,94 (s, 1H), 9,49 (s, 1H) , 9, 39 (s, 1H) , 8,43 (d, 1H, J =
8,4 Hz), 7,71 7,74 (m, 2H) , 7,50 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 7,43
(dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz ), 7, 16-7,23 (m, ' 3H) , 6,45 (d, 1H, J =
2,1 Hz), 6,35 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz) . MS (ES) [M+H]/z
vypočteno 343, změřeno 343, [M-H]/z vypočteno 341, změřeno
341.
Příklad 24(g)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-fenoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 24 (g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(c) kromě toho, že 3-fenoxyfenol byl použit namísto 2-chlor-5-methylfenolu v kroku (i). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,54 (s, 1H) , 12,95
(s, 1H), : 9, 78 (s, 1H), 8,43 (d, 1H, J = 8, 4 Hz), 7,67-7,72 (m,
2H) , 7,49 (dd, 1H, J = 6,3, 2,1 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,4 Hz) ,
7,33 (t, 2H, J = 7,5 Hz) , 7,17-7,22 (m, 2H) , 6,96-7,07 (m,
3H) , 6,72 (dd, 1H, J - 8,4, 2,1 Hz), 6,40 (d, 1H, J = 2,1 Hz) .
MS (ES) [M+H]/z vypočteno 419, změřeno 419, [M-H]/z vypočteno
417, změřeno 417.
• ·
135
Příklad 24 (h)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6- (2- (2-methoxyethyl) -4-hydroxyfenyl) lH-índazol
Sloučenina z příkladu 24 (h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24 (a) kromě toho, že {2[4-brom-3-(2-methoxyethyl)fenoxymethoxy]ethyl}trimethylsilan, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto [2-(4-brom-2methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu v kroku
(vii) . XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,60 (s, 1H) , 13,01 (s,
1H) , 9, 44 (s, 1H) , 8,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,73 (š s, 1H) ,
7,51 (š s, 1H) , 7,46 (s, 1H), 7,21 (přibližně d, 3H, J = 8,1
Hz) , 7,09 (d, H, J = 8,1 Hz) , 6,78 (d, 1H, J = 2,4Hz) , 6, 70
(dd, 1H, J = 8 ,1, 2,4 Hz), 3,40 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 3,12 (s,
3H) , 2,75 (t, 2H, J - 7,2 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 385,
změřeno 385, [M-H]/z vypočteno 383, změřeno 383.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Br
4-brom-3-(2-hydroxyethyl)fenol byl připraven při 88% výtěžku substitucí 3-(2-hydroxyethyl)fenolu v postupu popsaném v příkladu 24(c), krok (i). 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,56 (s,
1H), 7,29 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,74 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 6,55
136 (dd, 1H, J = 8,7, 3,0 Hz), 4,71(t, 1H, J = 5,4 Hz), 3,52-3,59 (m, 2H), 2,73 (t, 2H, J = 7,2 Hz).
(ii)
ΌΗ
SEM-C1 DIEA, CHaCla
Br θ'δΕΜ
Příprava 2-[2-brom-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenylu]: byl připraven při 65% výtěžku substitucí 4-brom-3-(2hydroxyethyl)fenolu v postupu popsaném v příkladu 24(a), krok
(vi) . XH N MR. (300 MHz, CDC 13) δ 7,43 (d, 1H, J = 8,7 Hz) , 8,97
(d, 1H, J = 3,0 Hz), 6,82 (dd , 1H, J = 8,7, 3,0 Hz) , 5, 19 (s,
2H) , 3,88 (q, 2H, J = 6,6 Hz) , 3,74 (t, 2H, J = 8,4 Hz) , 2,99
(t, 2H, J = 6,6 Hz) , 1,42 (t, 1H, J = 6 ,6 Hz) . 0, 94 (t, 2H, J
= 8, 4 Hz), -0,01 (s, 9H).
(iii)
OH
Mel, KOH, DMSO 'SEM (2-[4-brom-3-(2-methoxyethyl)fenoxymethoxy]ethyl}trimethylsilan: 1,9 g (6,0 mmol) 2-[2-brom-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]ethanolu bylo přidáno k roztoku 1,35 g (24 mmol) hydroxidu draselného v 16 ml DMSO. Bylo přidáno 1,12 ml (18 mmol) jodmethanu a roztok byl míchán po dobu 16 hodin. Reakce byla naředěna 50 ml vody a extrahována 2 x 40 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 40 ml solanky, usušeny (NazSOU a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (10% směs etheru a hexanu) • · · · · • 4 44 • ' ·«·4 «·»
137 poskytla 1,28 g {2-[4-brom-3-(2-methoxyethyl)fenoxymethoxy]-
ethyl}trimethy lsilanu j ako čirého oleje. 1H NMR (300 MHz,
CDCls) δ 7,40 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,96 (d, 1H, J = 3,0 Hz) ,
6,80 (dd, 1H, J = 8,7 , 3,0 Hz), 5,18 (s, 2H), 3,74 (t, 2H, J =
8,4 Hz) , 3,60 (t, 2H, J = 7,2 Hz) , 3,37 (s, 3H), 2 ,98 (t, 2H,
J = 7,2 Hz), 0 , 95 (t, 2H, J =8,4 Hz), -0,01 (s, 9H)
Příklad 24(i)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-(2-hydroxyethyl)-4-hydroxyfenyl)lH-indazol
mg (0,26 mmol) 3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-(2-methoxyethyl )-4-hydroxyfenyl)-ΙΗ-indazolu, z příkladu 24(i), bylo rozpuštěno ve 20 ml EtOAc a ochlazeno na -78 °C v argonové atmosféře. Po kapkách byl přidán bromid boritý a reakce byla ponechána za míchání při zahřívání na teplotu místnosti po dobu 3 hodin. Roztok byl naředěn 60 ml EtOAc a promyt saturovaným NaHCO3 a solankou, po 20 ml. Organické vrstvy byly usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (THF) poskytla 56 mg (59 %) sloučeniny uvedené v názvu jako bílé pevné látky. 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,60 (s, 1H) , 13,01 (s, 1H) , 9,41 (s, 1H) , 8,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,71 (š s, 1H) , 7,51 (š s, 1H) , 7,46 (s, 1H), 7,21 (přibližně d, 3H, J = 8,1 Hz), 7,08 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,77 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 6,69 (dd, 1H, J = 8,1, 2,1 * 9 · · 9
138
Hz), 4,57 (š s, ÍH) , 3,46 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,68 (t, 2H, J = 7,2 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 371, změřeno 371, [M-H]/z vypočteno 369, změřeno 369.
Příklad 24(j)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2,6-dimethyl-4-hydroxy£enyl)-1Hindazol
Sloučenina z příkladu 24 (j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24 (a) kromě toho, že
4- brom-3,5-dimethylfenol byl použit namísto 4-brom-2-methoxy5- methylfenolu v kroku (vi) . *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,57 (s, ÍH), 12,99 (s, ÍH), 9,22 (s, ÍH) , 8,52 (d, ÍH, J = 8,4
Hz), 7,72 (d, 1H, J = 6,6 Hz), 7,51 (d, ÍH, J = 6,6 Hz), 7,31 (s, ÍH) , 7,16-7,25 (m, 2H) , 7,02 (d, ÍH, J = 8,4 Hz), 6,55 (s, 2H), 1,93 (s, 6H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 355, změřeno 355, [M-H]/z vypočteno 353, změřeno 353.
Příklad 24(k)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-methylsulfanyl-4-hydroxyfenyl)-1Hindazol
OH
9 99 9
9 9 ·99
9 ·
9 9 9 99 • ·»
139
Sloučenina z příkladu 24 (k) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24 (c) kromě toho, že 3-methylsulfanylfenol, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto 2-chlor-5-methylfenolu v kroku (i) . 1H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,59 (s, 1H) , 12,98 (s, 1H) , 9,64 (s, 1H) , 8,48 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,71 (š s, 1H) , 7,52 (přibližně s, 2H), 7,20-7,27 (m, 3H), 7,12 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 6,65 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 2,34 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 373, změřeno 373, [M-H]/z vypočteno
371, změřeno 371.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Mel
K2CO3 aceton
Příprava 3-methylsulfanylfenolu. 5,0 g (39,7 mmol) 3-hydroxythiofenolu a 6,03 g (43,6 mmol) uhličitanu draselného byly míchány v 80 ml acetonu při teplotě 0 °C. Po kapkách bylo přidáno 2,5 ml (40 mmol) jodmethanu a reakce byla míchána po dobu 45 minut. Roztok byl naředěn 150 ml H2O a extrahován 2 x 100 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 100 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (25% směs EtOAc a hexanu) poskytla 5,08 g (91 %) 3-methylsulfanylfenolu jako čirého oleje. ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,15 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 6,82 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,74 (t, 1H, J = 1,8 Hz), 6,60 (dd, 1H, J = 8,1, 1,8 Hz), 4,86 (s, 1H), 2,47 (s, 3H) .
9
4
4 4· ·· 44 ► · * » 4 4 44
140
Příklad 24(1)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-(ethoxymethyl)-5-methoxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 24(1) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že [2(4-brom-5-ethoxymethyl-2-methoxyfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilan, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto [2-(4brom-2-methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu v kroku (vii) . XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,63 (s, 1H) , 12,99
(s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,73 (dd, 1H,
J = 6,6, 2,1 Hz) , 7,59 (s, 1H), 7,51 (dd, 1H, J = 6,6, 2,1
Hz), 7,32 (d, , 1H, J = 8,4 Hz), 7,19-7,24 (m, 2H), 6,94 (s,
1H), 6,91 (s, 1H) , 4,22 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,39 (q, 2H, J
= 6,9 Hz) , 1, 13 (t , 3H, J = 6, 9 Hz) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno
415, změřeno 415.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
2-brom-4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)benzaldehyd byl připraven při 79% výtěžku substitucí 4-brom-3formyl-2-methoxyfenolu (Hazlet et. Al. , J. Org. Chem., 27, 3253-55, 1962) v postupu popsaném v příkladu 24(a), krok (vi) .
• · · » ·· ·# ► · · » · « ·* > fcfc <
» · ♦ *
141 XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,16 (s, 1H) , 7,68 (s, 1H) , 7,07 (s, 1H) , 5,28 (s, 2H), 3,94 (s, 3H) , 3,77 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,94 (t, 2H, J = 8,4 Hz), -0,03 (s, 9H).
(ii)
Příprava [2-(4-brom-5-ethoxymethyl-2-methoxyfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu: 275 mg (7,2 mmol) borohydridu sodného bylo přidáno v dávkách po dobu 10 minut k roztoku 1,3 g (3,6 mmol) 2-brom-4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxyjbenzaldehydu ve 20 ml MeOH při teplotě 0 °C. Po 30 minutách byla reakce naředěna 40 ml H2O a extrahována 2 x 30 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 30 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu za vzniku 1,31 g [2-brom-4methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]methanolu
jako čirého oleje . XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,29 (s, 1H), 7,05
(s, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,66 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 3,87 (s, 3H),
3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz) , 1,92 (t, 1H, J = 6, 6 Hz) , 0,96 (t,
2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H).
Surový benzylalkohol byl míchán s roztokem 800 mg (14,4 mmol) hydroxidu draselného v 8 ml DMSO. Bylo přidáno 580 ml (7,2 mmol) jodethanu a reakce byla míchána po dobu 16 hodin předtím, než byla naředěna 30 ml H20 a extrahována 2 x 30 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 20 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (15% směs EtOAc a hexanu) poskytla 1,30 g (92 %) sloučeniny uvedené v názvu jako čirého oleje. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,29 (s, 1H), 7,03 (s, 1H) , 5,26 (s, 2H) , 4,48 (s, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,58 (q, 2H, J =
142
6,9 Hz), 1,26 (t, 3H, J = 6,9 Hz), 0,95 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H).
Příklad 24 (m)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-(hydroxymethyl)-4-ethoxy-5methoxyfenyl)-lH-indazol
OH
.OEt
OMe
Sloučenina z příkladu 24 (m) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že [2(2-brom-5-ethoxy-4-methoxybenzyloxymethoxy)ethyl]trimethylsilan, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto [2—(4— brom-2-methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu v kroku (vii). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,64 (s, IH) , 13,00 (s, IH) , 8,50 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,73 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,62 (s, IH), 7,52 (dd, IH, J = 6,0, 1,8 Hz), 7,32 (dd, IH, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,19-7,24 (m, 2H) , 7,15 (s, IH) , 6,91 (s, IH), 5,11 (t, IH, J = 5,1 Hz), 4,37 (d, 2H, J = 5,1 Hz), 4,08 (q, 2H, J = 6,9 Hz), 3,80 (s, 3H) , 1,37 (t, 3H, J = 6,9 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 415, změřeno 415.
Výchozí látka byla připravena takto:
SEM
ΌΗ ___
SEM ·« ···· • · • ♦ ·♦ » * t · · * · > ·♦ • · • ··«
143
Příprava 4-brom-2-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) fenolu: [2-brom-4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]methanol, po jednom týdnu stání, kdy probíhala SEM-migrace z fenolického na benzylový alkohol za vzniku sloučeniny uvedené v názvu. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,04 (s, 1H) , 7,01 (s, 1H) , 5,54 (s, 1H) , 4,77 (s, 2H) , 4,57 (s, 2H) , 3,88 (s, 3H), 3,68 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,97 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,02 (s, 9H).
(ii)
SEM
Ett
KOH, DMSO
Příprava [2-(2-brom-5-ethoxy-4-methoxybenzyloxymethoxy)ethyl]trímethylsilanu: 1,28 g (3,53 mmol)4-brom-2-methoxy-5(2-trimethylsilanylethoxymethyl)fenolu bylo mícháno s roztokem 7 90 mg (14,1 mmol) hydroxidu draselného v 8 ml DMSO. Bylo přidáno 565 ml (7,1 mmol) jodethanu a reakce byla míchána po dobu 16 hodin předtím, než byla naředěna 30 ml H2O a extrahována 2 x 30 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 20 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (15% směs EtOAc a hexanu) poskytla 1,26 g (91 %) sloučeniny uvedené v názvu jako čirého oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,02 (s, 1H) , 6,98 (s, 1H) , 4,78 (s, 2H), 4,60 (s, 2H) , 4,09 (q, 2H, J = 6,6 Hz), 3,86 (s, 3H), 3,69 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 1,46 (t, 3H, J = 6,6
Hz), 0,97 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,04 (s, 9H).
··· • 9
999
O * 9 9
9 9 • 9 9
9 9
9 9 9 «· ·
9 ·
9 9
9 9
99*·
144
Příklad 24 (n)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-{2-(hydroxymethyl)-5-methoxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 24(n) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24 (a) kromě toho, že 6-[5-methoxy-2-hydroxymethyl-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[1-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-benzimidazol-2-yl] -lH-indazol, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto 6-[5methoxy-2-methyl-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl ) -lH-benzimidazol-2-yl ] -lH-indazolu . XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,59 (s, 1H) , 12,95 (s, 1H) , 9,05 (s, 1H) , 8,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,72 (dd, 1H, J = 6,3, 2,1 Hz), 7,60 (s, 1H) , 7,51 (dd, 1H, J = 6,3, 2,1 Hz), 7,31 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,20-7,24 (m, 2H) , 7,02 (s, 1H) , 6,87 (s, 1H) , 5,02 (t, 1H, J = 5,4 Hz), 4,32 (d, 2H, J = 5,4 Hz), 3,80 (s, 3H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 387, změřeno 387, [M-H]/z vypočteno 385, změřeno 385.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
• · ·· • to toto·· • to ··· • ·· · • · · · ·· ·· to « · · • to · ··♦ • · · ·♦ ··♦·
145
Příprava 4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2trimethylstannanylbenzaldehydu: 3,36 g (9,3 mmol) 2-brom-4methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)benzaldehydu a 5,0 g (15,3 mmol) hexamethyldicínu bylo mícháno v 60 ml suchého toluenu v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno 500 mg (0,45 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a reakce byla míchána ve 100 °C po dobu 23 hodin. Reakce byla ochlazena a koncentrována ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (5% směs EtOAc a hexanu) poskytla 2,77 g (67 %)
4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2-trimethylstannanylbenzaldehydu jako čirého oleje.. XH NMR (300 MHz, CDC13,) δ 9,81 (dd, IH, J = 3,0, 0,9 Hz), 7,66· (t, IH, J = 6,6 Hz), 7,21 (t, IH, J = 9,0 Hz), 5,35 (s, 2H) , 3,99 (s, 3H) , 3,82 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,25 (t, 9H, J = 26,7 Hz), 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), -0,01 (s, 9H).
(a)
Příprava [4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2trimethylstannanylfenyljmethanolu: 2,36 g (5,3 mmol)4-methoxy5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2-trimethylstannanylbenzaldehydu bylo mícháno ve 30 ml MeOH při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 400 mg (10,6 mmol) borohydridu sodného a reakce byla míchána po dobu 1 hodiny. Roztok byl naředěn 60 ml H2O a extrahován 2 x 50 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 50 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu za vzniku 2,16 g (91 %) [4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)2-trimethylstannanylfenyl]methanolu jako čirého oleje. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,18 (t, IH, J = 6,9 Hz), 7,03 (t, IH, J =
9,3 Hz), 5,27 (s, 2H) , 4,58-4,63 (m, 2H) , 3,89 (s, 3H) , 3,80 • 4
4« ·♦·· • ·
4 44
4
4
44
4 • 444
4 4 4 «
4 4 1
146 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 1,53 (t, 1H, J = 6,0 Hz), 0,96 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,31 (t, 9H, J = 27,3 Hz), 0,01 (s, 9H).
(iii)
SEM
n-sem
'SEM cĚaxan
Příprava 6-[5-methoxy-2-hydroxymethyl-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -3-[1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-benzimidazol2-yl]-lH-indazolu: 300 mg (0,48 mmol) 6-jod-1-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]lH-benzimidazol-2-yl}-ΙΗ-indazolu [příklad 24(a) , krok (v)] a 282 mg (0,63 mmol) [4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2-trimethylstannanylfenyl]methanolu byly míchány v 8 ml dioxanu v argonové atmosféře v 98 °C po dobu 16 hodin. Reakce byla ponechána vychladnout a byla naředěna EtOAc. Organické vrstvy byly promyty saturovaným NaHCO3 a solankou, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu.
na silikagelu (20% směs EtOAc mg (60 %) 6- [5-methoxy-2-hydroxymethyl-4-(2trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl } -3- [1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-1HBenzimidazol-2-yl]-lH-indazolu, jako světle žlutého oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,70 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,89-7,92 (m, 1H), 7,63-7,66 (m, 2H) , 7,34-7,41 (m, 4H) , 6,91 (s, 1H), 6,29 (s, 2H), 5,83 (s, 2H), 5,36 (s, 2H) , 4,55 (s, 2H) , 3,78-3,92
Purifikace a hexanu) chromatografií poskytla 224
·« ·«·· ·
♦ · ··
147 (m, 5H) , 3, 59-3,70 (m, 4H) , 0,83-1,04 (m, 6H) ,
-0,04 (s, 9H), -0,13 (s, 9 Hz).
0,03 (s, 9H) ,
Příklad 24(o)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(3-hydroxyfenyl)-lH-indazol
•H
Sloučenina z příkladu 24 (o) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24 (f) kromě toho, že
6-(3-methoxyfenyl)-3-lH-benzimidazol-2-yl-lH-indazol, připravený podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 3-methoxyfenylboronová kyselina byla použita namísto 5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny v kroku (viii), byl použit namísto 6-(2-methoxy-4-hydroxyfenyl)-3-lH-benzimidazol2- yl-lH-indazolu. XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,67 (s, 1H) ,
13,00 (s, 1H), 9,58 (s, 1H), 8,55 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,717,75 (m, 2H) , 7,49-7,57 (m, 2H) , 7,30 (t, 1H, J = 7,8 Hz),
7,12-7,24 (m, 4H) , 6,80 (dd, 1H, J = 8,1, 1,5 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 327, změřeno 327, [M-H]/z vypočteno 325, změřeno 325.
Příklad 24(p)
3- ΙΗ-benzimidazol-2-y1-6-(2-methoxy-3-hydroxyfenyl)-lH-indazol
9· 9999 • 9 • 9 *9 ·· ·9
9 9 9 * 9 9 * 9 999 9 9 9 _9 99 999 9 9
999 « 999 • 9 9« 99 9999
Sloučenina z příkladu 24 (p) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 3-brom-2-methoxyfenol, připravený, jak bylo popsáno autory Aristoff et al., Tet. Lett., 25, 3955-58, 1984 byl použit namísto 4-brom-2-methoxy-5-methylfenolu v kroku (vi) . XH NMR •(300 MHz, DMSO-d6) δ 13,60 (s, 1H) , 12,97 (s, 1H) , 9,37 (s, 1H), 8,52 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,69-7,74 (m, 2H) , 7,51 (dd, 1H, J = 7,8, 1,8 Hz), 7,43 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,197,24 (m, 2H), 7,02 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 6, 85-6, 93 (m, 2H) , 3,50 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 357, změřeno 355, [ΜΗ] /z vypočteno 357, změřeno 355.
Příklad 25(a)
3-(3H-imidazol[4,5-c]pyridin-2-yl)-6-(4-hydroxy-2-methoxyfenyl)-lH-indazol
Roztok 68 mg (0,11 mmol) 6-[5-methoxy-2-methyl-4-(2trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[3-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3Himidazo[4,5-c]pyridin-2-yl]-lH-indazolu v 1,2 ml (1,2 mmol) TBAF (1M v THF) se 150 ml (2,2 mmol) ethylendiaminu byl míchán v 68 °C po dobu 48 hodin. Roztok byl koncentrován ve vakuu a purifikován chromatografií na silikagelu (2:1 směs EtOH a ·· »» • * 4 ·*·· • * • · 44 • 4 44 • «4 • 4 444 · ·
149
EtOAc) . Precipitace z acetonitrilu poskytla 21 mg (53 %) 3(3H-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-6-(4-hydroxy-2-methoxyfenyl)ΙΗ-indazolu, jako bílé pevné látky. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ
13,70 (s, IH) r 13,49 (š s, IH) , 9,62 (s, IH), 9,01 (š s, IH) ,
8,43 (d, IH, J = 8,7 Hz) , 8,34 (d, IH, J = 5,7 Hz) , 7,64 (s,
IH) , 7,57 (š S, IH) , 7,39 (dd, IH, J = 8,7, 1,5 Hz), 7,21 (d,
IH, J = 8 ,1 Hz) , 6,5. 5 (d, IH, J = 2,1 Hz) , 6,49 (dd, IH, J -
8,1, 2,1 Hz) r 3,74 (s, 3H) . MS (ES) [m+H]/z vypočteno 358,
změřeno 358, [M-H]/z vypočteno 356, změřeno 356.
Meziprodukty byly připraveny takto:
3-(1,1-dimethoxymethyl)-6-jod-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol. Roztok 1,28 g (2,69 mmol) 6-jod-3-styryl1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu [příklad 14, krok (i)] ve 40 ml CH2C12/4O ml MeOH byl míchán v -78 °C. Reakce byla podrobena působení ozonu, dokud trvalo modré zbarvení, a pak byla probublána argonem. Byly přidány 4 ml methylsulfidu a reakce byla míchána 4 hodiny při zahřívání na teplotu místnosti. Koncentrace ve vakuu poskytla surovou směs acetalu a aldehydu, která byla konvertována kompletně na acetal mícháním v 10 ml trimethylorthoformiátu s 0,8 g kyselé iontoměničové pryskyřice Amberlyst 15 (vlhké) po dobu 1 hodiny. Pryskyřice byla odstraněna filtrací a roztok byl koncentrován ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 1,11 g (92 %) 3-(1,1-dimethoxymethyl)-6-jod-1-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-ΙΗ-indazolu jako čirého oleje. XH fcfc fc
150
NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (s, 7,48 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz)
3,53 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,43 Hz), -0,06 (s, 9H).
(ii) ·· fcfc·· ·* *· • · · · · » • «·· · * ··« • fcfc· · · fc fc fcfc fcfc · • fcfcfc fcfcfc fcfc fcfc
1H) , 7,68 (d, 1H, J = , 5,77 (s, 1H), 5,69 (s, 6H), 0,88 (t, 2H,
8,4 (s, fcfc fcfc • fc · • · • · • · fc···
Hz) , 2H) ,
8,4
3-(1,1-dimethoxymethyl)-6-[2-methoxy-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol. 1,06 g (2,37 mmol) 3-(1,1-dimethoxymethyl) -6-jod-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu, 0,99 g (3,32 mmol) 2-methoxy-4-(trimethylsilanylethoxymethoxy)fenylboronové kyseliny a 352 mg (1,4 mmol) uhličitanu sodného byly míchány ve směsi 15 ml benzenu, 3 ml MeOH a 1 ml vody v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno 220 mg (0,19 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Reakce byla ponechána vychladnout a byla naředěna 70 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 30 ml H2O a 30 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (15% směs EtOAc a hexanu) poskytla 1,12 g (82 %) 3-(1,1-dimethoxymethyl)-6-[2-methoxy-4(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-ΙΗ-indazolu, jako světle žlutého oleje. ΣΗ NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,91 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,64 (s, 1H) , 7,37 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,29 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,71-6,77 « ·
151 (m, 2H) , 5,82 (s, 1H) , 5,75 (s, 2H) , 5,28 (s, 2H) , 3,77-3,83 (m, 5H), 3,57 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,46 (s, 6H), 1,00 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,88 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,03 (s, 9H) , -0,05 (s, 9H) .
6-[2-methoxy-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd.
1,1 g (1,92 mmol) 3-(1,1-dimethoxymethyl)-6-[2-methoxy-4-(2trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-ΙΗ-indazolu bylo mícháno v 20 ml 1% směsi TFA a CH2C12 po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Koncentrace ve vakuu poskytla 1,01 g (100%) 6-[2-methoxy-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu jako čirého oleje, XH NMR (3
MHz, CDCI3) 1 δ 10,27 (s, 1H), 8,28 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 7,73 (s,
1H) , 7,55 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz) , 7,29 ( d, 1H , J = 8,4 Hz) ,
6, 72- -6,79 (m, 2H) , 5,82 (s, 2H) , 5,28 (s, 2H) , 3,78- -3,84 (m,
5H) , 3,61 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,89-1,03 (m, 4H) , 0,03 ( 3 T
9H) , -0,05 ( s r 9H) .
(iv)
O • ·
152
- [ 5-met ho?: y- 2 -methyl-4 - (2-trimethylsílanylethoxymethoxy) fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[3-(2-trimethylsílanylethoxymethyl)-3H-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl]-IH-indazol. 320 mg (0,61 mmol) 6-[2-methoxy-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy) fenyl] -1- (2-tr.imethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu, 68 mg (0,62 mmol) 3,4-diaminopyridinu a 23 mg (0,73 mmol) síry bylo vloženo do 2 ml suchého DMF a mícháno v 90 °C po dobu 16 hodin v argonové atmosféře. Reakce byla ponechána vychladnout a byla naředěna 20 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty saturovaným NaHCO3 a solankou, po 15 ml, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (75% až 100% směs EtOAc a hexanu) poskytla 78 mg (21 %) 6-[5-methoxy-2-methyl-4(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[3-(2-trimethylsílanylethoxymethyl)-3Himidazo[4,5-c]pyridin-2-yl]-ΙΗ-indazolu, jako bílé pevné
látky. X NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,69 (š s, 1H), 9,21 (s, 1H),
8,63 (dd, 1H, J = 8,4, 0,3 Hz) , 8,50 (d, 1H, J = 5,4 Hz), 7,73
(s, 1H), 7,47 (š s, 1H), 7,57 (dd, 1H, J = 8,7,1,2 Hz), 7,33
(d, 1H, J = 8, 4 Hz), 6,74-6,80 (m, 2H), 5,80 (s, 2H) , 5,29 (s,
2H) , 3,78-3,85 (m, 5H) , 3, 63 (t, 2H, J - 8,1 Hz), 0,89-1,04
(m, 4H), 0,04 (s, 9H), -0,06 (s, 9H).
Příklad 25(b)
3-[6-(2-morfolin-4-ylethylkarbamoyl)-lH-benzimidazol-2-yl]-6(2-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
O • · • · · · « · • · · · · · • « · · « · · ···· · · ··· · · · • · · · ·· · · · · · • · · · · · ··· ···· ··· ·· ·· ·· ····
ΙΕ 3
Sloučenina z příkladu 25(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25(a) kromě toho, že
3,4-diamino-N-(2-morfolin-4-ylethyl)benzamid připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto 3,4-diamínopyridinu v kroku (iv). NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,61 (s, 0,5H), 13,39 (s, 0,5H), 13,22 (s, 0,5H), 13,18 (s, 0,5H), 9,59 (s, 1H) , 8,358,46 (m, 2H) , 8,27 (s, 0,5H), 8,02 (s, 0,5H), 7,71-7,79 (m, 1,5H), 7,63 (s, 1H) , 7,53 (d, 0,5H, J = 8,7 Hz), 7,38 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,21 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,55 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 6,49 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 3,75 (s, 3H) , 3,58 (t, 4H, J = 4,5 Hz), 3,42 (q, 2H, J = 6,0 Hz), 2,43-2,51 (m, 6H).
MS (ES) [M+H]/z vypočteno 513, změřeno 513, [m-H]/z vypočteno
511, změřeno 511.
3,4-diamino-N-(2-morfolin-4-ylethyl)benzamid byl připraven takto:
BOC. DIEA. DMAP. CMF .NH,
NH,
3,4-diamino-N-(2-morfolin-4-ylethyl)benzamid. 5 g (32,9 mmol) 3,4-diaminobenzoové kyseliny, 5,2 ml (39,4 mmol) 4—(2 — aminoethyl)morfolinu, 9,2 ml (66 mmol) triethylaminu a DMAP 0,40 g (3,3 mmol) bylo vloženo do 80 ml suchého DMF při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 9,45 g (49,3 mmol) EDC a reakce byla míchána po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace ve vakuu a purifikace chromatografií na silikagelu (10% směs MeOH a CH2CI2 s 0,2% NH4OH) poskytla 2,6 g (31 %)
3,4-diamino-N-(2-morfolin-4-ylethyl)benzamidu jako světle
hnědé pevné látky. Ή NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 7,72 (t, EH ý J =
5,4 Hz), 7,02 (d, 1H, J = 1,8 Hz) , 6,92 (dd, 1H, J = 8,E , 1,3
Hz), 6,46 (d, li;, J = 8,1 Hz), 4,89 (š s, 2H), 4,51 (š s, 2H) ,
3,5 5 (t, 4H, J = 4,8 Hz) , 3, 29 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 2,3í )-2, 43
(m, 6H) .
• · · · • ··
154
Příklad 25(c)
3-[6- ( 4 -methylpiperazin-l-yl) -lH-benzimidazol-2-yl j -6- (2methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 25 (c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25 (a), kromě toho, že 4-(4-methylpiperazin-l-yl)benzen-1,2-diamin (Harapanhalli et al., J. Med. Chem., 39, 4804-09, 1996) byl použit namísto 3,4diaminopyridinu v kroku (iv). XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,51 (s, 0,33H), 13,38 (s, 0,67H), 12,66 (s, 0,33H), 12,59 (s, (d, 0,33H, J = 8,4 Hz), 8,41 (d,
1H), 7,55 (d, 0,67H, J = 8,7 Hz), přibližně d, 1,33H, J = 8,4 Hz), i, 1H, J = 1,5 Hz), 6,48 (dd, 1H, 3H) , 3,12 (š s, 4H) , 2,50 (š s,
4+H]/z vypočteno 455, změřeno 455, [M-H]/z vypočteno 453, změřeno 453.
0, 67H), 9 , 58 (s, 1H) , 8,42
0, 67H, J = = 8,' 1 Hz), 7,59 (s
7, 31-7,37 (m, 1,33H), 7,20
6, 92-7,01 (m, 1,67H), 6,55
J = 8,4, 2,1 Hz) , 3,7 4 (š,
4H ), 2,22 (s, 3H). MS (ES)
Příklad 25(d)
3-[4-(4-methylpiperazin-l-yl)-lH-benzimidazol-2-yl]-6-(2methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
OH • · • 0 0000 00 0· ··
00« 00« 0··« 0000 « «00« 0 « «
5
Sloučenina z příkladu 25 (d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25 (a), kromě toho, že 3-(4-methylpíperazin-l-yl)benzen-1,2-díamin (Harapanhalli et al., J. Med. Chem., 39, 4804-09, 1996), analogický k 4-isameru, byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv) . 'lH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,41 (š s, 1H) , 12,79 (š s,
1H), 9,60 (š s, 1H), 8,37 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,60 (s, 1H) , 7,36 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,22 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,03-7,07 (m, 2H) , 6, 46-6, 56 (m, 3H) , 3,75 (s, 3H) , 3,62 (š s,
4H), 2,62 (š s, 4H), 2,28 (s, 3H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno
455, změřeno 455, [M-H]/z vypočteno 453, změřeno 453.
Příklad 25(e)
3-imidazol-2-yl-6-(2-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 25 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25(a), kromě toho, že 6-[5-methoxy~2-methyl-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-imidazol-2-yl-lHindazol byl použit namísto 6-[5-methoxy-2-methyl-4-(2trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[3-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3H-
imidazo[4,5-c] pyridin-2-yl]-1H- •indazolu. NMR (300 MHz,
DMSO-dg) δ 13, 10 (s, 1H), 12,59 (s, 1H), 9,56 (s, 1H), 8,27 (d,
1H, J - 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,25 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz) ,
7,13-7,20 (m, 3H), 6,54 (d, Hp . J = = 2,1 Hz) , 6,47 (dd, 1H, J -
8,4, 2,1 Hz), 3,7 3 (s, 3H) . MS (ES) [M+H] /z vypočteno 30 7,
změřeno 307.
Výchozí látka byla. připravena takto:
fc · • fc • · · « · fc ·
0,4 ml (3,5 mmol) 40% (hmotnostních) glyoxalu v H20 bylo přidáno po kapkách k roztoku 420 mg (0,8 mmol) 6-[2-methoxy-4(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl ) -lH-indazol-3-karbaldehydu, z příkladu 25(a) krok (iii) a 0,6 ml 28% vodného čpavku v 8 ml THF/8 ml MeOH a roztok byl' míchán při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakce byla koncentrována ve vakuu a rozpuštěna v 50 ml CHC13. Organické vrstvy byly promyty H2O a solankou, po 25 ml, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (40% směs EtOAc a hexanu) poskytla 120 mg (27 %) 6[5-methoxy-2~methyl-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-imidazol-2-yl-lH-indazolu, jako čirého oleje. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,03 (s,
IH) , 8,48 (d, IH, J = 8, 4 Hz ), 7, 65 (s, IH) , 7,46 ( dd, IH, J
8,4, 1,5 Hz) , 7,29-7,48 (m, 2H) , 7,13 (d, IH, J = 1,5 Hz)
6,73- -6,78 (m, 2H), 5,73 (s, 2H) , 5,28 (s, 2H), 3, 78-3,86 (m
5H) , 3, 60 (t, 2H, J = 8,4 Hz) , 0,88-1 , 03 (m, 4H) , 0,03 (s
9H) , -0,05 (s, 9H) .
Příklad 25(f)
3-[4-(2-hydroxyethylsulfanyl)-lH-benzimidazol-2-yl]-6-(2methoxy-4-hydroxyfenyl)-IH-indazol
• ·· · ·· · · • · · · · ···· · · «·· • · • · · •· 494 4
157
Sloučenina z příkladu 25 (f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25 (a) kromě toho, že
2- ( 2,3-diaminofenylsulfanyl)ethanol byl použit namísto 3,4-di-
aminopyridinu v kroku (iv). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,51
(s, ÍH) , 13,02 (s, ÍH) , 9,59 (s, ÍH) , 8,45 (d, 1H, J = 8,4
Hz) , 7,61 (s, ÍH), 7,32-7,40 (m, 2H), 7 ,11-7, 23 (m, 3H), 6,55
(d, ÍH, J = 2,4 Hz), 6,48 (dd, ÍH, J = 8,1, 2,4 Hz), 4,96 (š
s, 1H) , 3,75 (s, 3H) , 3,65 (š s, 2H) , 3, 33 (t, 2H, J = 6, 9
Hz) MS (ES) [m+Na]/z vypočteno 455, změřeno 455, [M-H]/z
vypočteno 431, změřeno 431.
Výchozí látka byla připravena takto:
IL Λ
KjCQpDMF gx-s^OH (a
EtOA
Hj.1O%PcťC
2-(3-amino-2-nitrofenylsulfanyl)ethanol. 1,12 g (6,5 mmol) 3-chlor-2-nitroanilinu, 0,60 ml (8,6 mmol) 2-merkaptoethanolu a 0,99 g (7,1 mmol) uhličitanu draselného bylo vloženo do 15 ml suchého DMF a mícháno ve 130 °C po dobu 4 hodin. Roztok byl ponechán vychladnout a byl koncentrován ve vakuu chromatografií na silikagelu (70% směs EtOAc poskytla 1,29 g (93 %) 2-(3~amino-2-nitrofenylsulfanyl)ethanolu jako jasně červené pevné látky. XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,20 (t, ÍH, J = 8,1 Hz), 6,80 (s, 2H) , 6,73 (dd, 1H, J = 8,4, 0,9 Hz), 6,63 (dd, ÍH, J = 7,8, 1,2 Hz), 4,92 (t, ÍH, J = 6,0 Hz), 3,58 (q, 2H, J = 6,0 Hz), 2,98 (t, 2H, J = 6, 0 H z) .
Purifikace a hexanu)
2-(2,3-diaminofenylsulfanyl)ethanol. 1,02 g
2-(3-amino-2-nitrofenylsulfanyl)ethanolu bylo hydrogenaci s použitím 310.26 kPa (45 psi) H2 se Pd/ ’ ve 2 5 m' EtOAc po dobu 6 hodin. Po filtraci bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu, chromatografií na silikagelu (EtOAc) poskytla 762 (4,8 mmo1) redukováno
0 mg 10 s přes celit Purif i kace mg (87 %) •φ φφφφ • · φφφφ φ φ • ΦΦΦ
158 (2,3-diaminofenylsulfanyl)ethanolu jako svědě žluté pevné látky. r NMR (300 MHz, CDC13) δ 6,98 (dd, 1H, J = 7,5, 1,5 Hz), 6, 60-6,72 (m, 2H) , 3,65 (t, 2H, J = 5,7 Hz), 3,55 (š s, 5H), 2,91 (t, 2H, J = 5,7 Hz).
Příklad 25(g)
3-(5-methylkarbamoyl-lH-benzimidazol-2-yl)-6-(2-methoxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 25(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25 (a), kromě toho, že 3,4-diamino-N-methylbenzamid (Kumar, et. Al. J. Med. Chem., 27, 1083-89 1984) byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv) . \η NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,59 (s, 0,5H),
13,55 (s, 0,5H), 13,21 (s, 0,5H), 13,14 (s, 0,5H), 9,60 (s,
1H), 8,38-9,46 (m, 2H), 8,26 (s, 0,5H), 8,03 (s, 0,5H), 7,717,79 (m, 1,5H), 7,63 (s, 1H) , 7,52 (d, 0,5H, J = 8,4 Hz), 7,35-7,40 (m, 1H) , 7,21 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 6,55 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 6,49 (dd, 1H, J = 8,4, 2,4 Hz), 3,75 (s, 3H), 2,82 (d, 1,5H, J = 0,5 Hz), 2,81 (d, 1,5H, J = 1,5 Hz). MS . (ES) [M+H]/z vypočteno 414, změřeno 414, [M-H]/z vypočteno 412, změřeno 412.
Příklad 25(h)
- ' 5 - d i m e t h y i a rn ino-lH-benzi m i d a z o 1 - 2 - y 1) - 6 - (2 - rn e t h oxy- 4 hydroxy f enyl)-lH-indazol ···· ·* ·· ·· ·· • 4« · · · · > · · ···« · ···« · · ♦
159
Al., Can. J. namísto 3,4Sloučenina z příkladu 25 (h) byla připravena, podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25 (a) ·, kromě toho, že 3,4-diamino-N,N-dimethylanilin (Cazaux, et.
Chem., 71, 1236-46 1993) byl použit diaminopyridinu v kroku (iv). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,36 (s, 1H), 12,51 (š s, 1, 9,58 (s, 1H) , 8,42 (d, 1H, J = 8,4
Hz), 7,59 (s, 1H), 7,49 (š s, 1H) , 7,33 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,20 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,87 (br d, 2H, J = 8,1 Hz), 6,55 (d, 1H, J = 2,1 Hz), 6,48 (dd, 1H, J = 8,1, 2,1 Hz), 3,73 (s, 3H) , 2,92 (s, 6H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 400, změřeno 400, [M-H]/z vypočteno 398, změřeno 398.
Příklad 25(i)
3-(5-aminosulfonyl-lH-benzimidazol-2-yl)-6-(2-methoxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 25(1) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25 (a), kromě toho, že 3,4-diaminobenzensulfonamid byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,67 (s, 0,5H), 13,64 (s, 0,5H), 13,39 (s, 0,5H), 13,35 (s, 0,5H), 9,10 (s, 1H), 8,43 (d, 1H, J - 8,i Hz), 8,18 (d, 0,53, J = 1,5 Hz), • · ··* · tt · • · ·· tttt
99 99
9 9 9 9
9 9 99 9 9
160
7, 99 (d, 0,5H n J = 1,5 Hz) , 7,86 (d, 0,5H, J = 8,4 Hz) , 7, 62-
7,72 (m, 2,5 Hz) , 7,29 (d, 1H, J = 8 ,4 Hz), 7,20-7,28 (m, 3H) ,
6, 55 (d, 1H, J - 2,1 Hz) , 6,49 (dd, 1H, J = 8,4, 2,1 Hz), 3,7 5
(s, 3H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 436, změřeno 436, [M -H] /z
vypočteno 434, změřeno 434.
Příklad 25(j)
3-(4-methylkarbamoyl-lH-benzimidazol-2-yl)-6-(2-methoxy-4hydroxyfenyl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 25 (i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25(a), 2,3-diaminoN-methylbenzamid byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv). XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,71 (s, 1H), 13,46 (s, 1H) , 9,85 (br d, 1H, J = 4,8 Hz), 9,61 (s, 1H) , 8,38 (d, 1H, J == 8,4 Hz), 7,89 (dd, 1H, J = 7,5, 1,2 Hz), 7, 66-7,72 (m,
2H), 7,47 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,36 (t, 1H, J = 7,8 Hz),
7,23 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,56 (d, 1H, J = 2,4 Hz), 6,50 (dd,
1H, J = 8,4, 2,4 Hz), 3,76 (s, 3H), 3,10 (d, 3H, J = 1,8 Hz).
MS (ES) [m+H]/z vypočteno 414, změřeno 414, [M-H]/z vypočteno
412, změřeno 412.
2,3-diamino-N-methylbenzam.id byl připraven takto:
M«NH,-HCÍ,«DC,aeA
·« «··* ·« ·· » · · · · · « ·· 9 · ···
161
2-amino-N-methyl-3-nitro-benzamid. .1,8
2-amino-3-nitrobenzoové kyseliny a 1,33
·· ·· • « · · • « · • · · •· ·«*·
(99 mmo 1)
(19,8 mmol)
ml suchého
2,83 g (14,8
byl míchán 3
Reakce byla
mmo í ) buč a mi (z/, / mmoij υιω. a rozrox hodiny při zahřívání na teplotu místnosti, koncentrována ve vakuu a purifikována chromatografií na silikagelu (8% směs MeOH a CHCI3) za vzniku 1,42 g (74 %) (dd, 1H, J
jako žluté pevné látky. XH
s, IF, 8,23 (š s, 2H), 8,15
(dd, 1H, J = 8,1, 1,8 Hz),
3H, J = 4,5 Hz) .
1,4 g (7,2 mmol) 2-amino-
redukováno hydrogenací
N-methyl-3-nitrobenzamidu bylo s použitím 344.74 kPa (50 psi) H2 s 250 mg 10% Pd-C ve 25 ml EtOAc po dobu 5 hodin. Po filtraci přes celit bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (10% směs MeOH a CHC13) poskytla 1,08 mg (91 %) 2,3diamino-N-methylbenzamid jako světle žluté pevné látky. XH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6,87 (dd, 1H, J = 7,8, 1,5 Hz), 6,76 (dd, 1H, J = 7,8, 1,5 Hz), 6,59 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 6,14 (š s, 1H), 4,28 (š s, 4H), 2,95 (d, 3H, J - 5,1 Hz).
Příklad 26
6-(4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-3-[E-2-(4-glycylaminofenyl) ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 26 byla připravena z výchozí látky n fc «··< *· *· 99 99
9 9 9 9 9 9 9 9 9
999 9 9 999 fc « * • 999 99 999 9 9
9 9999 999
9999 999 99 99 99 99·9
162
popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
l(a): ]Ή NMR (300 MHz, CDCI3) 5 8,2 3 (d, 1H) , 7,80 (m, 5H) ,
7,58 (m, 3H) , 7,38 (s, H), 7,27 (d, 1H) , 7,01 (d, 1H), 4,00
(s, 3H), 3,42 (s, 2H), LCMS (100% oblast) Rt = 3,4 4 minuty
(poz) [M+H]/z vypočteno 415,1, změřeno 415,2
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
3-j od-6-{3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-1-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-lH-indazol byl připraven ze sloučeniny připravené v příkladu 1 (a) , krok (v), podobným, způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 10, krok (ii): Rf sm 0,11, p 0,43 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 1H) , 7,55 (m, 2H) , 7,33 (m,
5,33 (s, 2H) , 4,02 (s, 3H) , (t, 2.H) , -,03 (s, 9H) .
U NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,71 (s,
1H) , 7,20 (m, 2H) , 5,82 (s, 2H) , 3,64 (t, 2H) , 3,59 (s, 3H) , 0,95 (ii)
3-styryl-6~(3-methoxy~4-methoxymethoxyfenyl)-1-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1H-:ndazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iii): Rf sm 0.41, p 0,35 (směs ethylacetátu a hexanu 2:8), NMR (300 MHz, CDC13) δ 3,12 (d, 1H) , 7,73 (s, 1H) , 7,62 (m, 2H) , fcfc fc· • · fc • · •r ·>·· ·· «fc • · fc · · · • ·fcfc · · fcfcfc • fcfcfc «·»«·· · • · * · fc fc fcfcfc fcfcfcfc fcfcfc fcfc fc* fcfc fcfc··
163
7,5 1 (m, 2 hodin), 7,4 6 (m, 2H), 7,38 (m, 1H) , 7,30 (m, 4H),
5,8 5 (s, 2H) , 5,38 (s, 2H) , 4,03 (s, 3H), 3,70 (t, 2H) , o,62
(s, 3H), 0,98 (t, 2H), -0,02 (s, 9H) .
(iii)
3-karboxaldehyd-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-1-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (i): XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,33 (s, 1H) , 8,34 (d, 1H) , 7,82 (s, 1H), 7,65 (d, 1H) , 7,25 (m, 3H) , 5,90 (s, 2H) , 5,36 (s, 2H) , 4,02 (s, 3H), 3,67 (t, 2H) , 3,51 (s, 3H) , 0,98 (t, 2H), -0,02 (s, 9H).
(iv)
3-(4-nitrostyryl)-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-1[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (ii), kromě toho, že 4-nitrobenzyltrifeny.lfosfoniumbromid a lithiumhexamethyldisilazid byly použity namísto
2-pikolylt'rifenylfosfoniumchloridu/hydridu draselného: LCMS (1 a0% oblast) Rt = 6,89 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 562,4, změřeno 562.. 4 .
• · • ·
3- (4-nitrostyryl) -6- (3-methoxy·-4-methoxymethoxyf enyl) -1Hindazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11: FTIR (tenký film) 3335, 3178, 2954, 1592, 1512,
1338, 1257, 1136, 1257, 1136, 987 cm“1, XH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,22 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,70 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,58 (m, 3H), 7,45 (dd, 1H, J = 1,3, 8,5 Hz), 7,20 (m, 4H), 7,26 (s, 2H) , 3,95 (s, 3H) , 3,53 (s, 3H) , LCMS (100% oblast) Rt = 5,13 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 432,1, změřeno 432,1.
(vi)
3- ( 4-aminostyryl) -6- (3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl) --1Hindazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv): Rf sm 0,39, p 0,26 (směs ethylacetátu a hexanu 6:4), FTIR (tenký film) 3366, 3210, 2954, 1608, 1517,
1465, 1412, 1259, 1157, 1077, 989, 912 cm 1, NMR (300 MHz,
CDCI3) δ 8,11 (d, 1H) , 7,63 (s, 1H) , 7,50-7, 15 (m, 8H) , 6, r? 1
(d, 2H ), 5,36 (s, 2H) , 3,97 (s, 3H) , 3,61 (s , 3H), LCMS (102%
oblast ) Rt - 4 , 40 minuty (poz) [M+H 1 / z vypočteno 402,2,
-'.měřeno 4 0 2,2.
• · • · • · • · · · · ·
165 (vii)
mg (0,224 mmol) 3-(4-ammostyryl)-6-(3-methoxy-4methoxymethoxyfenyl)-ΙΗ-indazolu bylo rozpuštěno ve 2 ml dichlormethanu a bylo podrobeno působení 196 mg (1,12 mmol, 5 ekv.) Boc-glycinu, 82 mg (3 ekv.) DMAP a 426 mg (5 ekv.) HATU. Směs byla ponechána za míchání po dobu 30 minut. Směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická látka byla .1 methanolu a byla podrobena elného. Směs byla zahřívána na směs byla opět rozdělena mezi látka byla koncentrována a koncentrovaná, nabrana do 5 působení 100 mg uhličitanu dra 50 °C po dobu 3 dnů. Výsledná ethylacetát a vodu. Organická purifikována na silikagelu, 109 (směs ethylacetátu a hexanu 6: 8,18 (š s, 1H) , 8,03 (d, 1H, J (m, 3H) , 7,20 (m, 3H) , 5,29 (s,
3H), 3,96 (d, 2H), 3,54 (s, 3H),
mg (66 %): Rf sm 0,32, p 0 ,46
l), 1H NMR (300 MHz, CDC13; ) δ
= 8,1 Hz), 7,56 (m, 5H), 7 ,40
2H), 5,20 (š s, 1H), 3,98 (s,
1,48 (s, 9H).
Příklad 27(a)
6-fenyl-3-E-styryl-lH-indazol
(8,1
345 mg (0,81 mmol) 6-fenyl-3-styryl-l-[2-(trimethyl
s.i lany 1) echoxymethyl] ~ 1 ,Η-indazclu bylo podrobeno působení 1 nm (15 mmol) roztok TBAF, 1M roztok v THF, a 0,53 ml
• · ···· · · • * · · « · • · · · · · · • · · · · · • · · · · • · · · · · • · · · ·· · · * • · · · · • · · · • · ·· ····
16 6
mmol) ethylenddaminu a zahříváno v 70 °C po dobu 2 hodin.
Roztok byl pak nalit do 200 ml solanky a extrahován 3 x 30 ml
ethylacetátu. Organická vrstva byla usušena nad MgSO4 a
koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií aa silikagelu poskytla 80 mg (34 %) 6-fenyl-3~E-styryl-lH-indazolu jako bílé pevné látky: ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,10 (d, IH, J = 8,5 Hz), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 297,1392, změřeno 297,1393. Anal. výpočet: C (85,10), H (5,44), N (9,45). Změřeno: C (85,10), H (5,46), N (9,43).
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Roztok 476 mg (1,0 mmol) 6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl] -lH-indazolu, z příkladu 14 krok (i), ve 3 ml dioxanu (odplyněného sonikací a probubláváním argonem), 23 mg (0,05 mmol) Pd(PPh3)4, 302 mg (2,5 mmol) fenylboronové kyseliny a 1,25 ml 2M vodného roztoku Na2CO3 (odplyněného jak uvedeno výše) byl zahříván v 90 °C po dobu 2 hodin. Roztok pak byl naředěn 100 ml ethylacetátu a promyt 2 x 20 ml solanky. Organická vrstva byla usušena nad MgSO4 a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 345 mg (81 %) 6-fenyl-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl. )ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu jako hnědého oleje. XH NMR
(300 MHz, CDC13) δ 8,09 (dd IH, J = 8,5, 0,7
IH) , 7,70 (d, If 8, J - 7,0 Hz), 7,64-7,58 (m,
(m, : 3H), ' 7,50-7, 4 5 Uv 2H) , 7,45-7,36 (m, 4H) ,
IH) , 5,80 ( s, 2 H ) z 3,73 (t, 2H, J = 8,3 Hz), 1,
8,3 l· íz) .
2H), 7,56-7,51 '•, 34-7,27 (o, (t, 2.H, J ·· 44
4 4 4 · · • ·
167
9 4 4 4 4 · * · ·
4 4 · · ·
444 · · ···
4· 4444
Příklad 27(b)
6-(3-methoxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že
3-methoxyfenylboronová kyselina byla použita namísto
fenylboronové kyseliny v kroku (i) . XH NMR (300 MHz, MeOH-d.4) 8
8,16 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 7,70 (s, 1H), 7,67-7,61 (m, 2H) ,
7,60-7,43 (m, 3H), 7,43-7,33 (m, 3H), 7,32-7,21 (m, 3H), 6,996,92 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H) . HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno
349,1317, změřeno 349,1342. Analyzováno s 0,1 H2O, vypočteno: C (80,50), H (5,59), N (8,55). Změřeno: C (80,44.), H (5,49), N (8,55).
Příklad 27(c)
6-(4 methoxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že
4-mithoxyfenylboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). XH NMR (330 MHz, DMSO-de) δ
13,20 (s, 1H), 8,23 (d, 1H, u = 8,4 Hz), 7,76-7,64 (m, 5H) ,
7,54 (s, 1H) , 7, 50-7,37 (m, 3H) , 7,33-7,25 (m, 1H) , 7, 27 (5, • · ·· · · ·· ···· ·· ·» • · · · · · • · · · · · · · · ♦ * · · · · · ······· · ® · ·
3
2.3, J = 8,8 Hz), 3,82 (s, 3H) HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno
327,1497, změřeno 327,1502. Anal. výpočet: C (80,96), H (5,56), M (8,58). Změřeno: C (80,71), H (5,42), N (8,47).
Příklad 27(d)
6-naft-l-yl-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27 (d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 1-naftalenboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 1H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 10,11 (s, IH), 8,45 (d, IH, J = 8,41), 7,97-7,87 (m, 3H) , 7,66-7,37 (m,
13H), 7,35-7,28 (m, IH). HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 369,1368, změřeno 369,1359. Anal. výpočet: C (86,68), H (5,32), N (8,19). Změřeno: C (86,52), H (5,32), N (8,19).
Příklad 27(e)
6-pyridin-3-yl-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě kolo, ie
3-pyridinboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). XH NMR (300 MHz, MeOK-d4) 5 8,97 (s, • · · · · ·
169
8,63 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 8,30 (d, 1H, H = 8,5 Hz), 8,27 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,86 (s, 1H), 7,72 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 7,697,56 (m, 8H), 754-7,42 (m, 2H), 7,40-7,32 (m, 1H). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 298,1344, změřeno 298,1356. Analyzováno s 0,25 H2O, vypočteno: C (79,58), H (5,18), N (13,92). Změřeno: C (79,53), H (5,16), N (13,80).
Příklad 27(f)
6-pyridin-4-yl-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27 (f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27 (a) kromě toho, že 4-pyridinboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,69 (š s, 2H), 8,30 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,96 (s, 1H), 7,87 (d, 2H, H = 5,6 Hz), 7,75-7, 68 (m, 3H) , 7,68-7,50 (m, 2H) , 7,50-7,42 (m, 2H), 7,40-7,31 (m, 1H). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 298,1344, změřeno 298,1357. Analyzováno s 0,3 H20, vypočteno: C (79,34), H (5,19), N (13,88). Změřeno: C (79,14), H (5,08), N (13,84).
Příklad 27(g)
6-indol-4-yl-3-E-styryl-lH-indazol
• · • · · · · · » · « ···· ·«· ·» *· ·* «···
170
Sloučenina z příkladu 27 (g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27 (a) kromě toho, že 4-indolboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v krokvi (i) . 1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,25 (d, 1H,
J = 8,5 Hz), 7,85 (s, 1H) , 7,75-7,67 (m, 3H) , 7,67-7,52 (m, 2H) , 7,52-7,42 (m, 3H) , 7,39-7,22 (m, 4H) , 6,72 (d, 1H, J = 3,2 Hz). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 336,1501, změřeno 336,1506. Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (78,97), H (5,36), N (12,01). Změřeno: C (78,95), H (5,20), N (12,03).
Příklad 27(h)
6-[3-ethoxy-4-hydroxyfenyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27 (h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27 (a) kromě toho, že 3-ethoxy-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)benzenboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i) . hl NMR (300 MHz, CDC13) δ (s, 1H), 7,74-7,16 (m, 10H), (q, 2H, J = 14,0 Hz), 1,54 [M+H]/z vypočteno 357,1603,
0,2 H20, vypočteno: C (76,73), (76,72), H (5,91), N (7,63).
8,10 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,7 4
7,07 (d, 1H, J = 8,15 Hz), 4,27 (t, 3H, J = 14,0 Hz). HRMS (FAB) změřeno 357,1611.
H (5,71), N (7,78).
Analyzováno Změřeno: C
Výchoz! látka byla rřipravena takto:
• · ·· ► * · » · · · · • 4 ··· ·
171 (i)
OSEM
HO
ÓH
4-brom-2-ethoxy-f enol (Smith et al., Soc. Pl., 1877-78, 1992) byl konvertován na 3-ethoxy-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)benzenboronovou kyselinu podobným způsobem, jak bylo
popsáno v příkladu 24 (a) kroky (vi) (vil) . 2Η NMR (300
MHz, (CDC13) δ 7,82 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,72 (s, 1H) r 7,31 (d,
1H, J = 8,1 Hz), 5,37 (s, 2H), 4,29 (q, 2H, J = 14,0 Hz) , 3,87
(t, 2H, J = 16,8 Hz), 1,54 (t, 2H, J = 14,0 Hz) , 0, 99 (t, 2H,
J = 16,8 Hz), 0,03 (s, 9H).
Příklad 27(i)
6-[3-(2-hydroxyethoxy)-4-hydroxyfenyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27(i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27 (a) kromě toho, že 3-[2-(trimethylsilanylethoxymethoxy)ethoxy)-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)benzenboronová kyselina, připravená z 2-(2-hydroxyethoxy)fenolu (Yamaguchi et al., Bull. Chem. Soc. Jpn., 61, 2047-54, 1988) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24 (c), kroky (i)-(iii), byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). ’Ή NMR (300 MHz,
DMSO-dg) δ 8,17 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,73-7.17 (m, 11H), 6,92 (d, 1H, J - 2,2 Hz), 4,13 (t, 2H, J - 9,7 Hz), 3,8 )t, 2H, J =·9,7 Hz). HRMS (FAB) [M-rHj/z. vypočteno 373,1552, změřeno
373,1563. Analyzováno s 0,05 trifluoroctovou kyselinou, • · • 4 • · · ·
• · • ··» ·«»
172 vypočteno: C (73,37), H (5,35), N (7,41). Změřeno: C (73,11), H (5,33), N (7,39).
Příklad 27(j)
6-(3,4-d.imethoxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 27 (j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 3,4-dimethoxyfenylboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 8,01 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,51-7,05 (m, 11H), 6,86 (d, 1H, J =
8,0 Hz), 3,58 (s, 3H), 3,65 (s, 3H) . HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 357,1598, změřeno 357,1508. Analyzováno s 0,2 H2O, vypočteno: C (76,73), H (5,71), N (7,78). Změřeno: C (76,45), H (5,70), N (7,68).
Příklad 27(k)
6-(2-methoxypyridin-5-yl)-3-E-styryl-lH-indazol
6- (2-methoxypyridi.n-5-yl) -3- ( (E) styryl) -1- (2-trimethylsiJ anylethoxymethyl)-ΙΗ-indazol byl konvertován na 6 --(2inethoxypyridin-5-yl)-3-E-styryl-lH-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v přikladu 27 (a) . 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ
• fc ···· · * • fcfc · · · • · ·« · · · • fc fcfcfc ·· ·· • · fc • fc • · fcfc * • « • · • fcfcfc
173
8,53 (d, IH, J - 2,1 Hz), 8,15 (d, IH, J = 9,2 Hz), 7,97 (dd,
IH, J = 2,6, 8,6 Hz), 7, 7 9 (s, 11 4), 7 ,74-7,34 (m, 8H) , 6, 94
(d, IH, 0 = 8,6 Hz). HRMS (FAB) [M+H] /z vypočteno 328,1 450,
změřeno 323,1462. Anal. výpočet: C (77,04), H (5,23) , N
(12,83) . Změřeno: C (77,00 ), H (5,2 8) , N (12,65) .
···*
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Roztok 2,00 g (6,10 mmol) 5-brom-2-methoxypyridinu, 1,15 g (6,10 mmol) hexamethyldicínu a 0,28 g (0,24 mmol) Pd(PPh3)4 v 10 ml odplyněného dioxanu byl zahříván k varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. 2,90 g (6,10 mmol) 6-jod-3((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu bylo přidáno k výše uvedené směsi, následováno 0,35 g (0,31 mmol) Pd(PPh3)4. Reakční směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Směs pak byla naředěna 150 ml ethylacetátu a promyta 30 ml solanky. Organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4, a pak koncentrovány při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 1,12 g (40 %) 6-{2-methoxypyridin-5-yl)-3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl ) -lH-indazolu jako žluté pevné látky. JH NMR (300 MHz, CDCla) δ 8,51 (d, IH, J = 2,5 Hz), 8,50 (d, IH, J = 9,1
Hz), .7,93 (dd, IH, J = 2,5, 8,6 Hz), 7,69 (s, IH) , 7,69-7,28 (m, 8H), 6,89 (d, IH, J = 8,6 Hz), 5,83 (s, 28), 4,03 (s, 3H),
3,64 (z, 2 Η, J = 8,3 Hz), 0,93 (t, 2.H, J - 8,3 Hz), -0,03 (s,
9H) .
·« ···· « · • · · · * ♦
174
Příklad 28(a)
6- (3-hydroxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol
NJ |l OH ó
Roztok 100 mg ( ,3 mmol) 6- (3-methoxyfenyl) -3-E- -styryl-lH-
indazolu, z příkladu 27 (b) , byl ochlazen na -78 °C a podroben
působení 1, 8 ml (1,8 mmol) BBr3 (1M roztok v CH2CI2) . Výsledný
roztok byl udržován v -78 O C po dobu 15 minut, pak byl zahřát
na O °C a udržován 3 hodiny. Pak bylo přidáno 10 ml roztoku saturovaného vodného hydrouhličitanu sodného, následováno 50 ml ethylacetátu. Organická vrstva byla promyta 20 ml solanky, a pak koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografii na silikagelu poskytla 55 mg (59 %) 6-(3hydroxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazolu jako bílé pevné látky. XH NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,16 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,71-7,62 (m, 3H), 7,61-7,44 (m, 3H) , 7,43-7,35 (m, 2H) , 7,33-7,25 (m,
2H), 7,20-7,10 (m, 2H) , 6, 85-6,79 (m, 1H) , δ 13,14 (s, 1H) ,
9,60 (s, 1H) , 8,20 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,73 (d, 2H, J =7,3), 7,64-7,52 (m, 5H), 7,47-7,37 (m, 3H), 7,33-7,25 (m, 1H), 6,89 (d, 2H, J = 8,6 Hz).
Příklad 28(b)
6- ( 4-hydroxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol
«0
0 • 0
0 · «
« « « • 0 00
5
0 0«
6- ( 4-“methoxy fenyl)-3-E-szyryl-lH-indazol, z příkladu
27(c), byl konvertován na 6-(4-hydroxyfenyl)-3-E-styry1-1Hiodazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 28(a). Úl NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,14 (s, 1H) , 9,60 (s, 1H) , 8,20 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,73 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,64-7,52 (m,
5H), 7,47-7,37 (m, 3H) , 7,33-7,25 (m, 1H) , 6,89 (d, 2H, J =
8,6 Hz). HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 313,1341, změřeno 313,1347. Analyzováno s 0,5 H20, vypočteno: C (78,48), H (5,33), N (8,72). Změřeno: C (78,35), H (5,26), N (8,49).
Příklad 28(c)
6-(2-hydroxypyridin-5-yl)-3-E-styryl-lH-indazol
6-(2-methoxypyridin-5-yl)-3-E-styryl-lH-indazol, z příkladu 27(k), byl konvertován na 6-(2-hydroxypyridin-5yl)-3-E-styryl-lH-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 28(a). XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 8,22 (d, 1H, J =
8,4 Hz), 7,96 (dd, 1H, J = 2,6, 9,65 Hz), 7,81(d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,74-7,30 (m, 9H) , 6,50 (d, 2H, J = 9,4 Hz). HRMS (FAB) 314,1293, změřeno 314,1280.
Analyzováno (72,69), H [M+H]/z vypočteno s 0,1 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (4,86), N (12,59). Změřeno: C (72,77), H (4,81), N (12,65).
Příklad 28(d)
3- 33.4-dlhydroxyronyl;-3-E-styryl-iH-indazcl
6-(3,4-dimethoxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol, z příkladu (j), byl konvertován na 6-(3,4-dihydroxyfenyl)-3-E-styrylΙΗ-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu (a). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,09 (š s, 1H) , 9,07 (š s,
1H), 8,20 (d, 1H, J = 8,5), 7,73 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 7,56 (d,
2H, J = 10,1 Hz), 7,53 (s, 1H) , 7,43-7,29 (m, 4H) , 7,11 (s,
1H) , 7,04 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 8,2 Hz). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 329,1290, změřeno 329,1274. Analyzováno s 1,0 H2O, vypočteno: C (66,79), H (4,73), N (7,15). Změřeno: C (66,54), H (4,56), N (7,36).
Příklad 29(a)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2,6-dichlorfenyl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyrid-4-yl-3~E-[2-(2,6-dichlorfenyl)ethenyl]-i-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol byl konvertován na 6pyrid-4-yl-3-E-[2-(2,6-dichlorfenyl)ethenyl]-lH-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27 (a) . LH NMR (300 MHz, CDCl?) δ 13,55 (s, 1H) , 8,68 (dd, 2H, J = 4,6, 1,6
Hz), 8,21 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,96 (s, 1H) , 7,81 (dd, 2H, J =
4,5, 1,6 Hz), 7,6 6 (dd, 1H, Jl := 8,5, 1,4 Hz), /,5 8 (8, 2H, 6 = 3,0 Hz), 7,51 (s, 2H) , 7,39-7,32 (m, 1H) . MS (FAB) [M+H]/,.
vypočteno 366, změřeno 366. Analyzováno s 0,7 H20, vypočteno: C ··
9
9
9 99 9
9 9 • · ·
9 9 9 9 9
9 99 999 9 rn (63,40), Η (3,33), Ν (11,09). Změřeno: C (63,63), Η (3,75), Ν (10,83).
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
<OEt)2
1,20 g (5 mmol) 2,6-dichlorbenzylbromidu bylo smícháno s 1,66 g (10 mmol) triethylfosfitu a zahříváno v 150 °C po dobu 2 hodin. Výsledná směs pak byla destilována ve 160 0 C při sníženém tlaku 1,33 kPa (10 mm Hg) , aby se odstranil nadbytek triethylfosforitanu. Bylo získáno 1,46 g (100 %) diethylesteru (2,6-dichlorbenzyl)fosfonové kyseliny jako bezbarvé kapaliny. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,33-7,28 (m, 2H) , 7,15-7,07 (m, 1H) , 4,14-4,02 (m, 4H) , 3,60 (d, 2H, J = 22,4
Hz), 1,27 (t, 6H, J
7,0 Hz).
11,
Ozon byl probubláván přes roztok 2,13 g (5,0 mmol) 6-pyrid-4-yl-3-E-styryl-l- (2-trimethylsilanyl.ethoxymethyl) -1Hindazolu ve 25 ml THF a 25 ml MeOH v -78 °C po dobu 15 minut. Přes roztok pak byl probubláván argon po dobu 10 minut v -78 °C, pak bylo přidáno 1,46 ml )20 mmol) dimethylsulfidu. Roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti a udržován po doba 2 hodin. Rozíok byl nalit do 300 ml solanky, a pal extrahován 3 x 100 ml ethylacetátu.. Organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4, a pak evaporovány při sníženém tlaku.
4*44 «4 444 4
4 4 4 44
4 4 * 4
4 444 4 4 φ 4·· 44 44f · • 4 4·4 4 44 • 444 *44 4* 44 44
8
Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 2,2 g (75 %) 6-pyridin-4-yl-1- (2-trimethylsilanylet3oxymethyl) -1H -indazol3-karbaldehydu jako bílé pevné látky. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,39 (s, 1H) , 8,75 (d, 2H, J = 1,6 Hz), 8,45 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 7,91 (s, 1H), 7,75-7,66 (m, 3H) , 5,90 (s, 2H) , 3,63 (v,
2H, J = 2,7 Hz), 0,93 (t, 2H, J = 2,8 Hz), 0,00 (s, 9H) .
Roztok 582 mg (2,0 mmol) diethylesteru (2,6-dichlorbenzyl) fosfinové kyseliny v 15 ml DMF byl ochlazen na 0 °C a podroben působení 160 mg (4,0 mmol) NaH (60% v minerálním oleji). Výsledný roztok byl udržován při teplotě 0 °C po dobu 30 minut, a pak byl podroben působení 353 mg (1,0 mmol) 6-pyridin-4-yl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-1H-indazol3-karbaldehydu. Výsledný roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti po dobu 1 hodiny, a pak byl udržován při teplotě místnosti 2 hodiny. Roztok byl nalit do 250 ml solanky, a pak extrahován 3 x 80 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4, a pak koncentrovány při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 330 mg (67 %) 6-pyr.id-4-yl-3-E-[2-(2,6-dichlorfenyl) ethenyl]-1-(2trimethylsilanylethoxymethyl-lH-indazolu jako žlutého oleje. 1H
NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,72 (dd, 2H, 1H, J = 8,5 Hz) , 7,84 (s, 1H) , 7,62
7,e0 (s, 2H), /,5 6 (dd, 1H, J = 8,5, 8,1 Hz , 7,18-7,12 (m, 1H) , 3, 64 (t, 2H, 0‘ = 8,3 Hz) , 0,00 (s, 9H) .
J = 4,6, 1,5 Hz), 8,16 (d, (ss, 2H, J = 4,5,1,6 Hz) , 1,5 Hz) , 7,39 (d, 1H, J =
2H, J = 8,2 Hz), 0,92 (t.
* · • * •4 9999
179
Příklad 29(b)
6-pyrid-4-yl--3-E- [2- (3-met.hylf enyl) ethenyl] -lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na požadovaný produkt podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a) . 1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) 8,88 (d, 1H, J = 6,7 Hz), 8,41-8,35 (m, 3H) , 8,16 (s, 1H) , 7,80 (dd, 1H, J = 8,6, 1,6 Hz), 7,67-7,48 (m, 4H) , 7,35 (t, 1H, J = 7,6 Hz), 7,22-7,17 (m, 1H) , 4,88 (s, 3H) . MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 312, změřeno 312. Analyzováno s 0,2 H2O, 1,1 trif luoroctovou kyselinou, vypočteno C (63,27)., H (4,23), N (9,54). Změřeno: C (63,08), H (4,18), N (9,80).
Přiklad 29(c)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(4-chlorfenyl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-inda-
zol-3-karbaldehyd byl konvertován na požadovaný produkt
podohným způsobem , jak bylo popsáno v příkladu 29 (a) . H NMR
(300 MHz, OMSO-dg) 6 13, 40 (s, 1H), 8, 67 (dd, 2H, J = 4,6, 1,6
Hz), 8,33 (d, 1H, J = 8, .5 Hz) , 7, 92 (: 3, 1H), 7,81 (dd, 2H, J =
4,6, 1,6 H z ) , 7 , ' 7 8 (d, 2H, J - 8,5 Hz), 7,67 - 7,56 (m, 3H),
7,4 6 (d, z·...; r ·— 8,5 Hz ). Analyzováno s 0,15 H2O, vypočteno: C
·· ·· • · · « • · * ·« ·· • · · « · ··· • · · <
• * · <
·· ·· ·« ··*· • « • · ·· ·· ····
Ιού (71,81), Η (4,31), N (.12,56). Změřeno: C (71,85), H (4,26), N (12,48) .
Příklad 2 9(d)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(bifenyl-4-yl)ethenyl]-IH-indazol
6-pyridin-4-yl-l- (2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazol-3-karbaIdehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(d) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,40 (s, ÍH), 8,68 (d, 2H, J = 4,6,
1,5 Hz), 8,35 (d, ÍH, J = 8,5 Hz), 7,93 (s, ÍH), 7,87-7,79 (m, 4H) , 7,73 (d, 4H, J = 8,1 Hz), 7,66-7,60 (m, 3H) , 7,45 (m, 2H) , 7,41-7,34 (m, ÍH) . MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 374, změřeno 374. Analyzováno s 0,20 H2O, vypočteno: C (82,82), H (5,19), N (11,15). Změřeno: C (82,82), H (5,19), N (11,16).
Příklad 29(e)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(3-methoxyfenyl)ethenyl]-IH-indazol
- p y ri d ί n-4-y1-1-(2-trimethy1si1an y1e t hox ymet h y1)-1H-i n dazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29 (e) podobným způsobem., jak bylo popsáno v příkladu 2.9 (a) .
NMR (300 MHz, DřdO~ds) δ 13,39 (s, 1H) , 8,67 (d, 2H, J = 5,3
99 » 9 9 ·
I 9 ♦ • V 99 » 9 9
9 999 ·« Η»*
9
9 9 9
9 9 9
9* >·
181
Hz), 8,33 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,92 (s, 1H) , 7,81 (dd, 2H, J == 8,6, 1,5 Hz), 7,65-7,54 (m, 3H) , 7,35-7,28 (m, 3H) , 3,83 (s, 3H) . MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 328, změřeno 328. Analyzováno s 0,20 H2O, vypočteno: C (76,20), H (5,30), N (12,70). Změřeno: C (76,17), H (5,34), N (12,65).
Příklad 29(f)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(pyrid-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(f) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,68 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 8,62 (d, 1H, J = 3,8 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,99 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,94 (s, 1H) , 7,86-7,78 (m, 3H) , 7,73-7,57 (m,
3H) , 7,32-7,26 (m, 1H) . Analyzováno s 0,05 H2O, vypočteno: C (76,26), H (4,75), N (18,72). Změřeno: C (76,22), H (4,79), N (18,76).
Příklad 29(g)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(3-fluorfenyl)ethenyl]-lH-indazol
6.....p yr i d i n-4-yl-l-(2-1 r ime thylsilany1e t ho xyrce t h y1)-1H . n<
zot-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučenu z DÍK.
1U
9999
9 9 • 9 99 · · • ·
9··· ··· • 9 ·
• 9·9 • · 9 9
9 9 »· ··
9 9 9
9 ·
9 9 • 99 ·· 9999
182 (g) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29í a) . ΧΗ NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,40 (s, 1H) , 8,68 (dd, 2H, J - 4,5,
1,6 Hz), 8,34 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,92 (s, 1H), 7,81 (dd, 2H, Jl = 4,5, 1,6 Hz), 7,74-7,52 (m, 5H), 7,49-7,40 (m, 1H) , 7,167,07 (m, 1H) . MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 316, změřeno 316. Anal. výpočet: C (76,17), H (4,48), N (13,33). Změřeno: C (76,07), H (4,53), N (13,36).
Příklad 29(h)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2-fluorfenyl)ethenyl] -lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29 (h) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 1H
NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,43 (s, 1H), 8,66 (dd, 2H, J =
1,6 Hz) , 8,23 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,98-7,90 (m, 2H) ,
(dd, 2H, J - 4,5, 1,7 Hz) , 7,73-7,54 (m, 3H) , 7,40 -7,31
4,5,
7,80 (m,
1H) , 7,30-7,21 (m, 2H) . MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 316, změřeno 316. Anal. výpočet: C (76,17), H (4,48), N (13,33). Změřeno: C (76,12), H (4,51), N (13,29).
Příklad 29(i)
6-pyrid-4-~yl-3-E- [2- (3-chlorfenyl) ethenyl] -lH-indazol
< · • ·
183
6-pyridin-4-yl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-xarbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(i) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). ’ή NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,42 (s, 1H) , 8,68 (dd, 2H, J = 4,5,
1,6 Hz), 8,35 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,92 (s, 1H), 7,86 (s, 1H),
7,82 (dd, 2H, J = 4,5, 1,7 Hz), 7,74-7,51 (m, 4H) , 7,43 (t,
1H, J = 7,8 Hz), 7,37-7,21(m, 1H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno
332, změřeno 332. Anal. výpočet: C (72,40), H (4,25), N (12,67). Změřeno: C (72,52), H (4,28), N (12,57).
Příklad 29 (j)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2-methylthiazol-4-yl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29 (j) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2.9 (a) . XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,38 (s, 1H) , 8,67 (dd, 2H, J = 4,5,
1,6 Hz), 8,25 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,92 (s, 1H), 7,81 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 7,70-7,50 (m, 4H) , 2,72 (s, 3H) . MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 319, změřeno 319. Analyzováno s 0,15 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (65,51), H (4,25), N (16,70). Změřeno: C (65,56), H (4,37), N 16,53).
Příklad 29(k)
6-pyr i d - 4 - y 1 - 3 - E - [ 2 - (n a f t a 1 e n - 2 - y 1) e t h e n. y 1 ] -1H - i n d a z o 1 • · · · • · • fcfcfc • fc • ·
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -1H-tndazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(k) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a) . 1H
NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,40 (s, 1H) , 8,68 (dd, 2H, J = 4,6,
1,4 Hz), 8,39 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 8,17 (s, 1H), 8,09-7,89 (m,
8H), 7,83 (dd, 2H, J = 4,6, 1,6 Hz), 7,74 (s, 2H), 7,65 (dd,
1H, J = 8,5, 1,4 Hz), 7,60-7,46 (m, 4H) . MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 348, změřeno 348. Analyzováno s 1,05 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (67,10), H (3,89), N (9,00). Změřeno: C (67,20), H (3,93), N (9,05).
Příklad 29(1)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2,3-difluorfenyl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(1) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a).
NMR (300 MHz, CDC13 + MeOH-d.4) δ 8,68 (d, 2H, J - 5,6 Hz,), 8,02 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,70 (s, 1H) , 7,58 (dd, 2H, J = 4,8, 1,5 Hz), 7,57-7,39 (m, · 3H) , 7,38-7,31 (m, 1H) , 7,06-6, 96 (m, 2H) . MS (FAB; [M+H]/z vypočteno 334 , změřeno 334. Analyzováno s 0,80 H2O, vypočteno: C (38,08), H (4,23), N (12,08). Změřeno: C (68,77), H (3,53; , N (li,85) .
• · · · • · • · · · · ·· ··· · » · · • · ·
Příklad 29 (m)
6-pyrid-4-yl-3-E -[2-(3,5-difluorfenyl)ethenyl]-1H-indazol
6-pyridin-4~yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(m) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a). XH NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,69 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 8,34 (d, 1H,
J = 8,5 Hz), 7,97 (s, 1H) , 7,97 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 7,71 (d,
IH, J = 10,0 Hz), 7,62 (s 1H), 7,60 (s, 1H), 7,36 (d, 1H, J =
II, 11), 6, 95-6, 89 (m, 1H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 334, změřeno 334. Anal. výpočet: C (72,06), H (3,93), N (12,61). Změřeno: C (72,20), H (4,01), N (12,58).
Příklad 29(n)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(bifenyl-3-yl)ethenyl] -lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(n) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (x) . XH
NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 8,68 (d, 2H, J
J - 8,5), 8,04 (s, IH) , 7,92 (s, 1H)
Hz), 7,59-7,37 (m, 1757). MS (ES) změřen·, 374. Anal. výpočet:
6, 1 Hz), 8,3 9 (o, IH, 7,82 (d, 2H, J - 6,2 (ES) [M+H]/z vypočteno 374, (83,62), H (5,13), N (5,1,25).
.měřeno: C (83, 47), H (5,08), N (11,32).
• · • · · · · · • · · • · · · • · > · · ř · · ·· ··
186
Příklad 29(o)
6-oyrid-4-yl-3-E-· [2- (2,6-difluorfenyl) ethenyl] -lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(o) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a). 1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,69 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 8,21 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,97 (s, 1H) , 7,88 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 7,83 (d, 1H, J = 17,1 Hz), 7,71 (1H, J = 8,6 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 17,1 Hz), 7,40-7,35 (m, 1H) , 7,13-7,08 (m, 2H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 334, změřeno 334. Analyzováno s 0,1 H2O, vypočteno: C (71,67), H (3,97), N (12,54). Změřeno: C (71,37), H (3,90), N (12,31).
Příklad 29 (p)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(3-trifluormethoxyfenyl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyridin-4-yl-1- (2-trimethylsilanylethoxymet.hyl) -lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(p) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a). 'Ή
-d (300 MHz, DMSO.....d6) δ 8,34 (cl, 2H, J - 6,4 Hz), 8,41 (d, 10,
- 8,5 tz) , 8,19 (d, 2H, J - 6,4 Hz , 8,07 (s, n I) , /,81-7,27
m, 5H), 7,7 8 (s, 1H) . MS (ES) [M+H] /z vypočteno 382, změřeno
·· ···« ft · · • · ·· • ♦
187
382. Analyzováno s 1,0 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (55,76), H (3,05), N (8,48). Změřeno: C (55,84), H (3,09), N (8,45).
Příklad 29 (q)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(benzimidazol-2-yl)ethenyl]-IH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29 (q) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 8,69 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 8,25 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 8,03 (d, 1H, J = 16,7 Hz), 7,97 (s, 1H) , 7,84 (d, 2H, J = 6,2), 7,72 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,60-7,57 (m, 2H) ,
7,53 (d, 1H, J = 16,7 Hz), 7,22-7,19 (m, 2H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 338, změřeno 338. Analyzováno s 2,0 trifluoroctovou kyselinou, 0,2 H2O, vypočteno: C (52,77), H (3,08), N (12,31). Změřeno: C (52,59), H (3,17), N (12,18).
Příklad 29(r)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethenyl]-lH-indazol
-p y rid i n-4 -y1-1-(2-1 r ime t hy1si1a ny1e thoxyme t hy1)-1H-inda zol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu • ·
188
29(r) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). XH NMR (300 MHz, PMSO-d6) δ 8,67 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 8,30 (d, IH, J - 8,5 Hz), 7,89 (s, IH) , 7,81 (d, 2H, J - 6,1 Hz), 7,61 (d, IH, J = 9,9 Hz), 7, 46-7,42 (m, 3H) , 7,18 (d, IH, J = 9,6 Hz), 6,95 (d, IH, 8,0 Hz), 6,05 (s, 2H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 342, změřeno 342. Anal. výpočet: C (73,89), H (4,43), N (12,31). Změřeno: C (73,74), H (4,52), N (12,40).
Příklad 29(s)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2,5-difluorfenyl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l~(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-IH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(s) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a). ΧΗ NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,53 (d, 2H, J = 6,0 Hz), 8,03 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,60 (d, 2H, J,2 Hz), 7,56-7,35 (m, 3H) , 7,347,26 (m, IH) , 7,03-6,93 (m, IH) , 6,90-6,81 (m, IH) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 334, změřeno 334. Analyzováno s 0,30 H2O, vypočteno: C (70,91), H (4,05), N (12,37). Změřeno: C (70,97), H (4,17), N (12,37).
Příklad 29(t)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(lH-pyrol-2-yl)ethenyl] - lH-indazol
• to to ·
9
999 9 99 ·· • · · 9 9 9
999 · · ··· < · · · · · to to · · ·
6-pyridin-4-yl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-IH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29 (t) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). ΧΗ NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,60 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 8,13 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,86 (s, IH) , 7,79 (d, 2H, J = 6,2 Hz), 7,57 (dd, IH, JI = 8,5 Hz, J2 - 1,5 Hz), 7,40 (d, IH, J = 16,8 Hz), 7,09 (d, IH, J = 16,7 Hz), 6, 87-6, 82 (m, IH) , 6,40-6,35 (m, IH) , 6,16 (t, IH, J = 2,9 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 287, změřeno 287. Analyzováno s 0,5 ethylacetátem, 0,3 tetrahydrofuranem, 0,1 hexanem, 0,1 ethylendiaminem, vypočteno: C (72,07), H (6,21), N (16,05). Změřeno: C (71,95), H (6,20), N (15,76).
Výchozí látka byla připravena takto:
9t
MT« (i) Roztok 9,5 g (100 mmol) lH-pyrol-2-karbaldehydu a 500 ml THF byl ochlazen v ledové lázni. Bylo přidáno 19,2 g (200 mmol) Bufc0Na a reakční směs byla míchána při teplotě 0 °C po dobu 1 hodiny. Pak bylo přidáno 32,7 g (150 mmol) MtsCl. Reakční směs byla ponechána ohřát se na teplotu místnosti a udržována po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Roztok pak byl podroben působení 100 ml saturovaného vodného NH4C1 a směs byla nalita do 2 1 solanky. Směs byla extrahována 3 x 300 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Výsledný olej byl purifikován chromatografií na silikagelu za vzniku 15,7 g ( 57 '? ) 1-(2,4, 6-trimethylbenzensulfonyl) -lH-pyrol-2-karbaldehudu jako světle žlutého oleje. XH NMR (CDCli) Ó 9,50 (s,
IH) .. 7,79-7, 74 (rn, IH) , 7,12 (dd, IH, J - 3,7, 1,8 Hz), 6,91 (s, 2H), 6,38 (t, IH, J = 3,4 Hz), 2,50 (s, 6H) , 2, (s, • · • ·*· · • · • · ·· • ♦ • · · ·
190
(ii) 2,77 g (10 mmol) 1-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-1Hpyrol-2-karbaldehydu ve 100 ml THF bylo podrobeno působení 0,44 g (20 mmol) LiBH4 při teplotě místnosti. Výsledný roztok byl udržován při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Pak bylo přidáno 10 ml MeOH a výsledná směs byla nalita do 600 ml solanky a extrahována 3 x 200 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Výsledný olej pak byl purifikován na koloně se silikagelem za vzniku 2,43 g (870) [1-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-pyrol-2-yl]methanolu jako světle hnědého oleje. ΧΗ NMR (CDC13) δ 7,17 (dd, IH, J = 3,3, 1,8 Hz), 6,99 (s, 2H), 6,28-6,23 (m, IH), 6,18 (t, IH, J = 3,3 Hz), 4,42 (s,
2H), 2,50 (s, 6H, 2,30 (s, 3H).
Cl
(iii) Roztok 1,4 g (5,0 mmol) [1-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl.)-lH-pyrol-2-yl) methanolu ve 25 ml CHC13 byl ochlazen v ledové lázni. Bylo pomalu přidáno 1,1 ml (15 mmol) SOC12. Roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti a udržován dalších 45 minut. Roztok pak byl koncentrován při sníženém tlaku. Bylo získáno 1,5 g (100 %) 2-chlormethyl-l-(2,4,6trimethylbenzensulfonyl)-IH-pyrolu jako hnědé pevné látky. Ů-I NMR (CDC13) δ 7,28 (dd, IH, J = 3,3, 1,7 Hz), 6,98 (s, 2H) , 6,38-6, 34 (m, IH), 6,19 (t, IH, J - 3,4 Hz), 4,58 (s, 2H) , 2,50 (s, 6H), 2,30 (s, 3H).
·· ΦΦΦ· • φ φφφφ • Φ φφ φ φ φ • φφφφ • φ φ φ φ φ φ φ • · · φ
Φ· φφ • · φ · φ · * • * * • · φ φφ ····
191
Příklad 29 (u)
6~pyríd-4-yl~3-E- [2- (3-mel hyl karbamoylmethoxyf enyl) ethenyl) lH-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29 (u) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29 (a) . '’ή
NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,68 (d, 2H, J = 5,9 Hz), 8,51 (š s,
1H) , 8,37 (d, 1H, J = 8,5. Hz), 8,19 (s, 1H) , 7,93 (s, 1H) , 7,87 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 7,85 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 7,62 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,65-7,63 (m, 3H) , 7,51 (t, 1H, J = 7,6 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 355, změřeno 355. Analyzováno s 0,4 trifluoroctovou kyselinou, 0,50 H2O, vypočteno: C (69,67), H (4,98), N (14,26). Změřeno: C (69,78), H (5,18), N (14,08).
Příklad 30(a)
6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(thien-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 30(a) byla připravena podobným
způsobem jako v pří kladu 6 (a) kromě toho, že (E)-3-thiofen-2-
y 1. a 3 r y 1 o y 1 c h 1 o r i. d byl použit namísto 3-(4-chlorfeny1)-
akryloylch]oridu v } <; -a ku (i) . Ti NMR (DMSO.....de) 3 13,05 (o, 1H),
IQ,33 (s, 1H), 8,19 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,9/ ’ (d, 2H, J = 6, 9
Hz), 1,1:; (d, 1Η, J = 1 .6,5 Hz), 7, 65-7,49 ( m, 6.H) , 7,4 0 (t,
«4 » 4 4 « ► 4 <
444 · • 4
4 44
4 4 4 4 4
192
1H, J = 8,1 Hz), 7,35 (s, 1H, s jemným dělením), 7,20 (d, 1H, J - 16,5 Hz), 7,10 (m, 1H) , 7,04 (s, 1H) , 6,98 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 6,86 (e, 1H, J = 9,8 Hz). Anal. výpočet pro C26H19N3O2S ·
0,6 H20: C, 69, 65, H, 4,54, N, 9,37, S, 7,15. Změřeno: C,
69,77, H, 4,45, N, 9,52, S, 7,02.
Příklad 30 (b)
6-[3- (l-acetylpiperidin-4-ylkarboxamido)fenoxy]-3-E-[2-(4· chlorfenyl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 30(b) byla připravena podobným způsobem, jako byl popsán pro příklad 6 (a) kromě toho, že l-acetylpiperidin-'4-karboxylová kyselina a HATU byly použity namísto benzoylchloridu v kroku (ii). 1H NMR (DMSO-dg) (J =8,6 Hz) δ 7,76, (d, J = 8,6 Hz), 7,53 (d, J = 6,2 Hz), 7,46 (d, J =
8,4 Hz), 7,37 (m, 3H) , 7,01 (s, 1H, s jemným dělením), 6,97 (d, J = 8,8 Hz), 6,78 (d, J = 7,7 Hz), 4,38 (m, 1H) , 3,85 (m,
1H) , 3,09-2,96 (m, 1H) , 2,58 (m, 2H) , 1,99 (s, 3H) , 1,77 (m,
2H) , 1,55 (m, 1H) , 1,37 (m, 1H) . Anal. výpočet pro C29H27CIN4O3 • 1,3 H2O: C, 64,69, H, 5,54, N, 10,41. Změřeno: C, 64,64, H,
5,51, N, 10,23.
Příklad 30(c)
6- [3-benzamídofenoxy]-3-E- [2- (fur-z-yl) ethenyl] ··· IH-indazor
0000
I 4 · • 0 • ♦··
0 <
• 0 ·0
4 0 ·
0 *
0 0
0 0 ·0»0
193
Sloučenina z příkladu 30 (c) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 6 (a) kromě toho, že (E)-3-furan-2ylakryloylchlorid, připravený podle Comrn., 52, 409-24, 1987), byl
Collect, Czech. Chem. použit namísto 3-(4chlorfenyl)akryloylchloridu v kroku (i). 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,00 (s, 1H) , 10,32 (s, 1H) , 8,14 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,91 (d, 2H, J = 7,0 Hz), 7,73 (s, 1H), 7,70-7,51 (m, 5H), 7,40 (t, 1H, J = 8,4 Hz), 7,30 (AB, 2H, J = 15,7 Hz), 7,04 (s, 1H) , 6,98 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,65 (s, 1H, s jemným dělením), 6,60 (s, 1H, s jemným dělením). Anal. výpočet pro C26H19N3O2 · 0,7 H2O: C, 71,94, H, 4,74, N, 9,68. Změřeno: C, 72,17, H, 4,83, N, 9,44.
Příklad 30(d)
6-[3-(indol-4-ylkarboxamido)fenoxy]-3-E-styrylindazol
Sloučenina z příkladu 30(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30 (a) s použitím 3- (styryl-lH-j ndazol-6-yloxy)fenylaminu namísto 3-(3-styryl4,5-dihydro-1H-indazol-6-yloxy)fenylaminu a lH-indol-4-karboxylové kyseliny namísto benzoové kyseliny v kroku (ii) . 1H NMR :CMSC-d&) 5 13,99 (s, 1H) , 11,33 (s, 1H) , 10,21 (s, 1H) , 8,32 (d, JH, J - 3,7 Hz), 7,72-7,38 (m, 10H), 7,30 (d, 1+, a = 7,1
H/.) , 7,19 (m, 3H) , 7,04 (m, 3H) , 6,82 Hn, 2H) . Anal. výpočet
Μ ·· ·· ·· *««« • ·
pro C.30H22N4O2 · 0,6 H20: C, 74,3 6, H, 4,86, N,
C, 74,90, H, 5,01, N, 11,33.
11,64. Změřeno:
Příklad 30(e)
6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazo±-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3E-styrylindazol
Sloučenina z příkladu 30 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30 (a) s použitím 3-(styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenylaminu namísto 3-(3-styryl4,5-dihydro-lH-indazol-6-yloxy)fenylaminu a l-ethyl-3-methyllH-pyrazol-5-karboxylové kyseliny namísto benzoové kyseliny v kroku (li).
Příklad 31(a)
6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
K míchanému roztoku 492 mg (1,13 mmol) 6-[3-benzamidofenoxy] -3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-4,5-dihydro-lH-indazolu v 15 ml 1,4-dioxanu bylo přidáno 386 mg (1,7 mmol) 2,3-dichlor-5,6-dikyano-l,i-benzochinonu (DDQ). Reakční směs byla míchána po dobu m minut při teplotě místnosti, pak byía naluta do sa Sumovaného roztoku NaHCO3 a EtOAc. Vrstvy byuy odděleny a vodná vrstva byla opět extrahována EtOAc. Spojené ► 9 9999
9« 999· • 9 • 9 99 »9 Μ • * ·
9 9 9 9 • 9 9 9 9 9
9 9 9
195 organické vrstvy byly promyty postupně saturovaným roztokem NaHCO3 a saturovaným roztokem NaCl, usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce sme s i
CH2Cl2/zEtOAc: MeOH (1:1:0,1). Získaný olej byl triturován ze (86 %) sloučeniny Či NMR (DMSO-d6) δ směsi EtOAc a hexanu za vzniku 420 mg uvedené v názvu jako žlutohnědé pevné látky 13,12 (s, 1H) , 10,30 (s, 1H) , 8,60 (d, 1H, J = 3,8 Hz), 8,22 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,93 (m, 3H) , 7,82 (t, 1H, J = 7,7 Hz),
7,68-7,49 (m, 7H) , 7,40 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 7,27 (m, 1H) ,
7,08 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,03 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,87 (d, 1H, J = 8,1 Hz, s jemným dělením) . Anal. výpočet pro C27H20N4O2 0,65 EtOAc: C, 72,59, H, 5,19, N, 11,44. Změřeno: C, 72,34, H, 5,11, N, 11,82.
Výchozí látka byla připravena takto:
Krok (i)
1) UHMDS
2) hydrochlorid (E)-3-pyridin-2ylakroylchloridu
3) N2H4 H2O
Roztok 4,00 g (10,9 mmol) 3-[3-(benzhydrylidenamino)fenoxy)cyklohex-2-enonu ve 20 ml THF byl přidán pomalu k roztoku 36 ml LiHMDS (l,0M roztok v THF) při teplotě -78 °C. 15 minut poté, co bylo přidávání ukončeno, byl přidán hydrochlorid (E)-3-pyridin-2-ylakryloy.lchloridu a míchání pokračovalo v 78 °C po dobu 30 minut. Reakce byla zastavena saturovaným roztokem NH4CI a extrahována 3 x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl.., usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a HkOAc (2:8). Vhodné frakce byly » ···· • · » · »· i 9 6 «« ·· • « * · • · · • · · • · · ·· ♦·♦· koncentrovány při sníženém tlaku a rozpuštěny v 8 ml směsi EtOH a HOAc (1:1). K tomuto roztoku bylo v 80 °C přidáno 3,4 ml (70,0 mmol·) hydrátu hydrazinu. Po 15 minutách byla veškerá výchozí látka zpracována a reakční směs byla opatrně nalita oo saturovaného NaHCO3 a extrahována 2 x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografií na silikagelu za eluce směsí CH2Cl2/MeOH (9:1) za vzniku 676 mg (19 %) 6-(3-aminofenoxy)-3E- [2-(pyridin-2-yl)ethenyl)-4,5-dihydro-lH-indazolu. 1H NMR (DMSO-dg) 1H, J = 6,35 (d, 2,1 Hz), 2,95 (t,
6 12,51 (s, 1H), 8 ,57 (d, 1H, J = = 3,8 Hz), 7,78 (t,
7,8 Hz), 7,51 (m r 2H) , 7 ,25 (m, 1H), 7,05 (m, 2H) ,
1H, J = 7,9 Hz, S jemným dělením) , 6,32 (t, 1H, J =
6,23 (d, 1H, J = 7, 9 Hz) , 5,54 . (s, 1H), 5,23 (s, 2H),
2H, J = 8,2 Hz), 2, 60 (t, 2H, J = 8,2 Hz), MS [M+H]/z
vypočteno 331. Změřeno: H20: C, 72,12, H, 5,54, N, 16,61.
331. Anal. výpočet N, 16,82. Změřeno:
pro C20H18N4O C, 72,11, H,
0,15
5,55,
Krok (ii)
K míchanému roztoku 350 mg (1,06 mmol) dihydroanilinu a 776 mg (6,36 mmol) benzoové kyseliny v 15 m.l DMF bylo přidáno
2,42 g (6,36 mmol) HATĚ a 1,8 ml (12,71 mmol) NEt3. Reakční směs byla zahřívána v 50°C po dobu 1,5 hodiny, ochlazena a nalita do směsí ledu a saturovaného roztoku NaCl. Ppt byl sbírán vakuovou filtrací, promyt H20 a ususen na vzduchu.
K tomuto filtračnímu koláči rozpuštěnému v 10 ml směsi MeOH a
THF (1:1) bylo přidáno 650 mg K2CO3 a 1 ml H2O. Po 1 hodině .· .... .· »· ·· ·· . · * ··· · ;♦ * • ··* » · »·« · · * • · · · ·· · · · · · • ♦ · · · * · · · »··· ··· ·* ** ·· ··*· byla reakční směs nalita do saturovaného roztoku NaCl a extrahována 2 x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce směsí CH2Cl2/EtOAc/MeOH (1:1:0,1) za vzniku 333 mg (72 %) 6-[3-benzamidofenoxy]-3-E[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-4,5-dihydro-lH-indazolu . XH NMR (DMSO-d6) δ 12,58 (š s, 1H) , 10,34 (s, 1H) , 8,57 (d, 1H, J =
3,8 Hz), 7,95 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,81-7,70 (m, 2H) , 7,637,50 (m, 6H), 7,40 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 7,25 (m, 1H) , 7,09 (d, 1H, J = 16,3 Hz), 6,89 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 5,64 (s, 1H) , 2,99 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 2,66 (t, 2H, J = 8,1 Hz). Anal. výpočet pro C27H22N4O2 · 0,1 CH2C12: C, 73,48, H, 5,05, N, 12,65.
Změřeno: C, 73,48, H, 5,05, N, 12,48.
Příklad 31(b)
6-[3-((1,5-dimethyl-lH-pyrazol-3-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 31 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31(a) kromě toho, že 1,5-dimethyl-lH-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v kroku (ii) . XH NMR (DMSO-d6) δ
13,13 (s, 1H), 10,07 (s, 1H) , 8,60 (d, 1H, J = 4 ,3 Hz), 8,21
(d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,93 (b, 1H, J - 16,3 I- Iz), 7, 82 (t, 1H, J
- 7,4 Hz) , 7,-9 (m, 5H), 7,5 6 (d, 1K, J = 16,3 H z) , 7,32 (m,
2H) , 7,05 (v Γ9), 7,01 (d, 1H, J - 3,7 í 4 z ' , 6 , 3 0 (m, 1H),
6,52 (s, IR), 3,81 (s, : 4H) 2,29 (s, 3H). Anal . vý počer pro
4« ·· ·*»· • 4 4 • · ·♦
4
4 ···· ··»
4«
198
444 •
«4
4 4 4 « *
4 4 4
4 4
4444
C26H22N6O2 · 0,1 CH2C12/G,1 hexan: C,
Změřeno: C, 68,26, H, 5,25, N, 17,61
68,58, H, 5,09
N, 17,97.
Příklad 31(c)
6- [ 3 - ((5-mechy1sulfonyIthlen-2-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 31 (c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31 (a) kromě toho, že 5-methansulfonyl-thiofen-2-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v kroku (ii) . ΧΗ NMR (DMSO-ds) δ 13,17 (s, IH), 10,58 (s, IH), 8,61 (d, IH, J = 4,0 Hz), 8,24 (d, IH, J = 8,8 Hz), 8,05 (d, IH, J = 4,1 Hz), 7,97-7,79 (m,
3H), 7,68 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,60-7,48 (m, 3H) , 7,43 (t, IH,
J = 8,2 Hz), 7,28 (m, IH) , 7,10 (s, IH, s jemným dělením), 7,00 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,92 (d, IH, J = 8,1 Hz, s jemným dělením), 3,41 (s, 3H) . Anal. výpočet pro C26H2oN404S2 · 0,4
EtOAc: C, 60,07, H, 4,24, N, 10,15, S, 11,62. Změřeno: C, 60,22, H, 4,48, N, 10,05, S, 11,49.
Příklad 31(d)
6-[3-((1-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yi) karboxamido)fenoxy]
E- i.2 - (pyridin-2-yl) ethenyl ] -lH-indazol fct »»»· • fc • fcfcfc fcfc
Sloučenina. z příkladu 31 (d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31(a) kromě toho, že
l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina byla NMR
použita namísto benzoové i kyseliny v kroku (ii) XH
(DMSO-dg) δ 13,15 (s, 1H), 10,18 (s, 1H), 8,61 (d, 1H , J = 3,7
Hz), 8, 22 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,94 (d, 1H, J = 16, 3 Hz) , 7,82
(t, 1H, J = 7,5 Hz), 7,67 (d, 1H, J = 7,7 Hz) , 7,55 (m, 3H) ,
7,40 (t , 1H, J = 8,1 Hz), 7,28 (m, 1H), 7,06 (s, 1H) , 7,01 (d,
1H, J = 8,8 Hz), 6,89 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 6,7 8 (s, 1H) , 4,38
(q, 2H, J = 7, 1 Hz) , 2,19 (s, 3H) , 1,29 (t, 3H, J = 7,1 Hz) .
Anal. výpočet pro C27H24N6O2 · 0,6 EtOAc: C, 68,25, H, 5,61, N,
16,24. Změřeno: C, 68,28, H, 5,88, N, 16,01.
Příklad 31(e)
6-[3-((l-methylimidazol-2-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z přikladu 31 (e) byla připravena podobným
způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31 (a) kromě toho f že
'1 . J-. -methyl-lH-imida z01- 2 - kar boxylová kyselí na byla použito
n; er. Lsto benzoové kyselin· v krok i (ii) XH NMR (RMSO-d6) δ
j. , 13 (s, 1H), 10,41 (s, 1H) , 8 , 1' 0 (d, 1H, J - 3,9 Hz), 8,21
1, 12, J - 8,7 Hz), 7,93 (d, 1H, J - 16,3 Hz) , 7,82 (t, 12, J
00 ·· ···· -·*- «·· ·**· ·**« ··· · · · · ·· ϊ • ··· · · ··*« . ! ί ·* • ··· ·· ··· · · . · ···· · · · ······· »« ·· ·· ····
=7,6 Hz) , 7,65 (m, 3 H) , 7 , 56 (d, 1H, T _ u — 16, 3 Hz) , 7 , 43 (s,
1H), 7,37 (t, 1H, J = 8,1 Hz) , 7,2 8 (m, ÍH), 7,04 (m, 3H) ,
6,84 (d, ÍH, J = 7,7 Hz) , 3, s 5 ( S , 3H) . Anal. výpočet pro
C25E20N6O2 • 0,4 H2O: C, 67, 49, Η, 4,80 , N, 18,60. Změřeno : C,
6 7 , 68 , Η, 4,73, N, 18,94
Příklad 31(f)
6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]3-E-[2-(1,2-dimethyl-lH-imidazol-4-yl)ethenyl]-IH-indazol
Sloučenina z příkladu 31 (f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31(a) kromě toho, že hydrochlorid (E)-3- (1,2-dimethyl-ÍH-imidazol-4-yl)akryloylchlorid byl použit namísto hydrochloridu (E)-3-pyridin-2~ ylakryloylchloridu v kroku (i) a l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol5-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v kroku (ii). XH NMR (DMSO-dg) δ 12,82 (s, ÍH) , 10,17 (s, ÍH) , 8,05 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,58 (d, ÍH, J = 8,4 Hz), 7,48 (s,
1H) , 7,38 (t, ÍH, u 7 = 8,1 Hz), 7,25 (s, 2H) , 7,20 (s, 1H) ,
7,01 (s, ÍH), 6,92 (d, ÍH, J = 8,7 Hz) , 6,85 (d, ÍH, J = 8,7
Hz), 6,78 (s, 1H) , 4,37 (q, 2H, J = 7,0 Hz), 3,56 (s, . 3H) ,
2,31 (s, 3H), 2,19 (s, 3H) , 1,29 (t, 3H, J = 7,0 Hz) . Anal.
výpočet pro C27H27N7O2 1,0 H2O · 0,3 EtOAc: C, 64,39, H, 6,02,
N, 18,64. Změřeno: C , 64,52, H, 5,98, N, 18,52.
• · • ·
201
Příklad 32 (a)
6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(lH-imidazol-4-yl)ethenyl]-1Híndazol
K míchanému roztoku 213 mg (0,39 mmol) 6-(3-benzamidofenoxy) -3-E-[2-(1-(2-trimethylsilanylethoxy)methyl-imidazol-4yl) ethenyl]-ΙΗ-indazolu v 5 ml THF bylo přidáno 6,0 ml (6,0 mmol) l,0M TBAF v THF a 0,26 ml (3,86 mmol) ethylendiaminu. Po zahřívání v 70 °C po dobu 18 hodin byla reakční směs ochlazena, naředěna EtOAc a promyta opakovaně saturovaným roztokem NaHCO3. Organická vrstva byla usušena nad MgSO4 a koncentrována při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce směsí CH2CI2: EtOAc: MeOH (1:1:0,2). Získaný olej byl triturován ze směsi EtOAc a hexanu za vzniku 65 mg (40 %) AG13853. 1H NMR (DMSO-dg) δ 12,90 (s, 1H) , 12,35 (s, 1H) , 10,32 (s, 1H) , 8,08 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,91 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,81 (s, 1H) , 7,64-7,49 (m, 5H) , 7,42-7,31 (m, 4H) , 7,03 (s, 1H) , 6,96 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,85 (d, 1H, J = 8,1 Hz). Anal. výpočet pro C25H19N5O2 · 0,7 H2O 4,4 EtOAc: C, 68,07, H, 5,07, N, 14,92.
Změřeno: C, 67,93, H, 4,89, N, 15,06.
Výchozí látka byla připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31(a) kromě toho, že hydrochlorid (E)-[l(2-trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-lH-imidazol-4-yl]akryloylchlorid byl použit namísto hydrochloridů (E)-3-pyridin-2ylakryloylchloridu v kroku (i) .
• · • · ·
202
Příklad 32 (b)
6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3E-[2-(lH-imidazol-4-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 32 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 32 (a) kromě toho, že l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v kroku (ii). 1H NMR (DMSO-dg) δ 12,89 (s, 1H) , 12,37 (s, 1H) , 10,18 (s, 1H) , 8,07 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 7,74 (s, 1H) , 7,58 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,49 (s, 1H) , 7,44-732 (m, 3H) , 7,28 (s, 1H) , 7,01 (s, 1H) ,
6,95 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 6,78 (s, 1H) , 4,38 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 2,19 (s, 3H), 1,29 (t, 3H, J = 7,1 Hz). Anal. výpočet pro C25H23N7O2 · 0,8 H2O · 0,1 EtOAc: C,
63,99, H, 5,37, N, 20,57. Změřeno: C, 63,72, H, 5,12, N, 20,25.
Příklad 32(c)
6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3E-[2-(2-methylimidazol-4-yl)ethenyl]-lH-indazol
• · · · · · ···« · ···· · • · . · · · · · · · · • · · · · · ♦·· .z..... .· ........
203
Sloučenina z příkladu 32 (c) byla připravena podobným způsobem, jako byl popsán pro příklad 32(b) kromě toho, že hydrochlorid (E)-3-[2-methyl-l-(2-trimethylsilanyl)ethoxymethyl) -lH-imidazol-4-yl] akryloylchlorid byl použit namísto hydrochloridu (E)-3-[1-(2-trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-1Himidazol-4-yl] akryloylchloridu v kroku (i). 1H NMR (DMSO-d6) δ 12,85 (š s, 1H) , 11,80 (š s, 1H) , 10,18 (s, 1H) , 8,05 (d, 1H,
J = 8,7 Hz), 7,58 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,48 (s, 1H), 7,39 (t,
1H, J = 8,2 Hz), 7,33-7,05 (m, 3H), 7,00 (s, 1H) , 6,93 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,86 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,78 (s, 1H), 4,38 (q,
2H, J = 7,1 Hz), 2,31 (s, 3H), 2,19 (s, 3H) , 1,29 (t, 3H, J =
7,1 Hz). Anal. výpočet pro C26H25N7O2 · 0,9 H2O · 0,4 EtOAc: C,
63,87, H, 5,83, N, 18,89. Změřeno: C, 63,64, H, 5,76, N, 18,85.
Příklad 33(a)
6-[2-(methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]indazol
Sloučenina z příkladu 33 (a) byla připravena z 6—[2 — (methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-IH-indazolu podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. Rf sm 0,8, p 0,15 (ethylacetát), ΧΗ NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,45 (s, 1H) , 8,72 (d, 1H, J = 3,9 Hz), 8,47 (m, 1H) , 8,31 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 8,06 (d, 1H, J - 16,4 Hz), 7,92 (dt, 1H, J = 1,7, 7,6 Hz), 7,78 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,71 (s, 1H) , 7,68 (d, 1H, J = 16,5 Hz), 7,61 (dd, 1H, J = 1,7, 7,2 Hz), 7,45-7,36 (m, 3H) , 7,31 • · • · ·
444 4 ···
204 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,17 (m, 1H) , 2,89 (d, 3H, J = 4,6 Hz), 13C NMR (75 MHz, DMSO-dg) δ 167,8, 154,8, 149,5, 141, 9, 141,8, 137,0, 136,8, 135,4, 132,5, 130,2, 130,0, 129,2, 127,7, 126,1,
125,4, 123,5, 122,5, 122,4, 121,6, 1202, 114,5, LCMS (100% oblast) Rt = 3,5 minut (poz) [M+H]/z vypočteno 387, změřeno 387. Analyzováno s 0,1 H2O, 0,1 EtOAc vypočteno: C (67,78), H (4,82), N (14,11), S (8,08). Změřeno: C (67,78), H (4,77), N (14,06), S (8,08).
(i)
Výchozí látka byla připravena takto:
V argonové atmosféře bylo 30,0 g (62,9 mmol) 6-jod-3styryl-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu, připraveného v příkladu 14, krok (i), rozpuštěno ve 375 ml dichlormethanu a bylo ochlazeno na -42 °C v lázni s acetonitrilem a suchým ledem. Směsí pak byl probubláván ozón (1 1/min, 60 V, 1,8 A) po dobu 45 minut. Standardní indikátory neudávaly jasnou změnu barvy kvůli barvě pozadí roztoků. Aby se zabránilo nadměrné oxidaci, byl postup reakce monitorován TLC (1:9 směs EtOAc a hexanu). Přidávání ozónu bylo zastaveno a baňka byla naplněna argonem. Pak bylo přidáno 30 ml dimethylsulfidu a směs byla ponechána ohřát se na 23 °C. Tato směs byla míchána po dobu 4 hodin a byla koncentrována při sníženém tlaku. Olej byl vložen do vysokého vakua po dobu 16 hodin. Zbytek byl rozpuštěn v 15 ml dichlormethanu a byl naředěn 100 ml hexanu za vzniku několika krystalů (nebyl požadovaný produkt). Směs byla filtrována a filtrát byl koncentrován. Zbytek byl rozpuštěn v 250 ml směsi 8:2 hexanu a EtOAc, podroben působení 50 ml silikagelu, filtrován a koncentrován. Po 72 hodinách za vysokého vakua vzniklo 24,17 g • 4 • · 4 4 • · • ·
4 • 4 4 • · 4 4
444
4
205 (~95% čisté dle NMR, 91% výtěžek) 6-jod-3-karboxaldehyd-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu jako žluté pevné látky: Rf sm 0,34, p 0,29 (směs ethylacetátu a hexanu 1:9), XH
NMR (300 MHz, 1H), 7,80 (d,
0,0 (s, 9H).
CDC13) δ 10,25 (s, 1H) , 8,09 (s, 1H) , 8,05 (d, 1H) , 5,88 (s, 2H) , 3,71 (t, 2H) , 0,93 (t, 2H) , (ii)
24,0 g (59,7 mmol) 6-jod-3-karboxaldehyd-l-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl] -lH-indazolu bylo rozpuštěno ve 350 ml THF a bylo ochlazeno na 5 °C. K této směsi bylo přidáno 45,7 g (100 mmol, 1,68 ekv.) pevného 2-pikolyltrienylfosfoniumchloridu/hydridu draselného. Reakční směs byla ponechána za míchání po dobu 4 5 minut. Ke směsi bylo přidáno 20 ml 3N HCl, následováno 50 ml saturovaného vodného hydrouhličitanu sodného za dosažení pH 6. Nadbytek THF byl odstraněn při sníženém tlaku a zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a vodu. Organické vrstvy byly promyty saturovaným vodným hydrouhličitanem sodným, vodou a organická vrstva byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Zbytek byl nabrán do směsi ethylacetátu a hexanu 1:9 a byl filtrován. Filtrát byl purifikován chromatografií na silikagelu (2 1 silikagelu, 20 až 30 až 50% směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 18,9 g (66% výtěžek) 6-jod-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazolu: Rf sm 0,52, p 0,25 (směs ethylacetátu a hexanu 2:8), XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,64 (m, 1H) , 8,00 (d, 1H, J = 0,7 ► 4 · 4 · • 4
4 44 « 4
4
4 44
4444
206
Hz) , 7,87 (d, IH, J = 16,4 Hz) , 7,80 (d, IH, J = 8,5 Hz) , 7,69
(td, IH, J = 7,7 , 1,8 Hz) , 7,55 (d, IH, J = 16,4 Hz) , 7,55
(dd, IH, J = 8,5, 1,3 Hz), 7,47 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,18 (dd,
IH, J = 1,1, 4,8 Hz), 5,70 (s, 2H), 3,59 (t, 2H, J = = 8,2 Hz) ,
0, 90 (t, 2H, J = = 8,2 Hz) , -0,04 (s, 9H) , 13C NMR (75 MHz,
CDC13) δ 156,8, 151,2, 144,2, 143,6, 138,0, 132,3, 132,2,
124,4, 124,0, 123,8, 123,7, 123,5, 120,7, 94,1, 79,4, 68,1,
19,17, 0,0.
(iii)
V baňce s kulatým dnem o objemu 200 ml bylo odváženo 13,7 g (41,9 mmol, 2,5 ekv.) uhličitanu česného a tato sůl byla usušena za vysokého vakua a zahřívání horkovzdušnou pistolí. Pak bylo přidáno 1,37 g (1,68 mmol, 0,1 ekv.) katalyzátoru [Pd (dppf) C12-CH2C12] a 8,0 g (16,76 mmol) 6-j od-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-1Hindazolu a směs byla nabrána do 71 ml DMF. K této směsi bylo přidáno 4,62 ml (33,5 mmol, 2,0 ekv.) methylthiosalicylátu a nádoba byla zahřívána na 85 °C po dobu 4,5 hodiny. Tato směs byla ochlazena na 23 °C, byla rozdělena mezi 350 ml ethylacetátu a 300 ml 50% saturovaného vodného hydrouhličitanu sodného. Organické vrstvy byly promyty 200 ml 10% bisulfitu sodného, solankou a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografii na silikagelu (500 ml silikagelu, 30 až 40 až 50% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 6,44 g (74 %) 6-[(2methoxykarbonylfenyl)sulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]• · ·· • · ·
207
1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu: Rf sm 0,52, p 0,19 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), FTIR (tenký film) 2950, 2887, 2356, 1713, 1585, 1464, 1433, 1250, 1076, 837 cm'1,
NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,70 (d, 1H) , 8,12 (d, 1H), 8,04 (d,
1H) , 7,99 (d, 1H, J = 16,4 Hz) , 7,90 (s, 1H), 7,88 (t, 1H) ,
7,76 (d, 1H, J = 16,4 Hz) , 7,62 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,30-
7,15 (m, 3H) , 6,92 (d, 1H) , 5,80 (s, 2H), 4,01 (s, 3H) , 3,78
(t, 2H) , 0,96 (t, 2H), -0,03 (s, 9H) , 13C NMR (7J 5 MHz, CDCI3) δ
168,3, 156,8, 151,2, 144,3, 144,2, 143,2, 138,0, 133,8, 133,6,
132.5, 132,4, 129,9, 129,3, 128,5, 126,0, 124,7, 124,6, 123,8,
123.5, 118,3, 79,4, 68,2, 53,7, 19,2, 0,0, LCMS (100% oblast)
Rt = 4,4 minutách (poz) [M+H]/z vypočteno 518,2, změřeno
518,2.
(iv)
K 8,50 g (16,4 mmol) 6-[(2-methoxykarbonylfenyl)sulfanyl)3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl] -lH-indazolu bylo přidáno 120 ml THF, 120 ml methanolu, 120 ml vody a 15,9 g (115 mmol, 7,0 ekv.) uhličitanu draselného. Tato směs byla zahřívána na 67 °C a byla míchána po dobu 22 hodin. Směs byla ochlazena a nadbytek rozpouštědla byl odstraněn. Zbytek byl rozdělen mezi 300 ml ethylacetátu a 250 ml vody. Vodná vrstva byla acidifikována 20% kyselinou citrónovou na pH 5 (~70 ml) a vodná vrstva byla odčerpána.
Organická vrstva byla promyta 50 ml vody a bylo přidáno 100 ml hexanu, aby se pomohlo precipitaci krystalů, které byly vytvořeny v ethylacetátové vrstvě. Pevná látka byla filtrována a usušena za vzniku 7,56 g (91 %) 6-[ (2-karboxyfenyl)«Β 4444
Β · 4
4 44 • ·
4· ·* ··
4 4 4 4 4
4·· 4· ·
4 4 4 4 4 4
4 4 4 4 ·
4· 44 4444
208 sulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl]-ΙΗ-indazolu: Rf sm 0,67, p 0,41 (směs ethylacetátu a hexanu 8:2), 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,60 (m, 1H), 8,10 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,04 (dd, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,85 (d, 1H, J = 16,5 Hz), 7,83 (s, 1H) , 7,70 (dt, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,59 (d, 1H, J = 16,5 Hz), 7,52 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,38 (dd, 1H, J = 1,3, 8,4 Hz), 7,22-7,10 (m, 3H), 6,80 (dd, 1H, J = 1,0, 8,0 Hz), 3,59 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,85 (t, 2H, J = 8,81 Hz), -0,1 (s, 9H).
(v)
820 mg (1,63 mmol) 6-[(2-karboxyfenyl)sulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]ΙΗ-indazolu bylo rozpuštěno v 5 ml DMF a bylo podrobeno působení 4,1 ml (8,13 mmol, 50 ekv.) methylaminu (2M v THF a 929 mg (2,44 mmol, 1,5 ekv.) HATU. Tato směs byla míchána po dobu 30 minut, byla rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný vodný hydrouhličitan sodný a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu (50 ml silikagelu, 60 až 70% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 795 mg (94 %) 6-[2-(methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1-[2-(trimethylsilanyl) ethoxymethyl] -lH-indazolu jako pevné látky: Rf sm 0,35, p 0,23 (směs ethylacetátu a hexanu 6:4), FTIR (tenký film)
3306, 2951, 1643, 1606, 1587, 1563, 1469, 1433, 1410, 1303,
1249, 1217, 1075, 836 cm1, XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,70 (m,
4* Μ·« • ·
209
1H), 8,06 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,94 (d, 1H, J = 16,3 Hz), 7,74 (dt, 1H, J = 1,8, 7,7 Hz), 7,70-7,60 (m, 3H) , 7,52 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,35-7,20 (m, 5H), 6,45 (š s, 1H) , 5,80 (s, 2H), 3,62 (t, 2H) , 3,00 (d, 3H) , 0,93 (t, 2H) , -0,05 (s, 9H) , 13C NMR (75
MHz, CDC13) δ 179,7, 169,9, 156,8, 151,1, 144,2, 143,0, 138,1,
136.1, 135,4, 133,2, 132,2, 132,1, 130,2, 128,5, 127,2, 124,7,
124.1, 123,8, 123,5, 123,3, 114,9, 68,1, 28,2, 19,2, 0,00,
LCMS (100% oblast) Rt = 4,15 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno
517.2, změřeno 517,2.
Příklad 33 (b)
6-[2-(2-methylchinol-6-ylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 33(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33 (a) kromě toho, že v kroku (v) , 6-amino-2-methylchinolin byl použit namísto methylaminu: XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,2 (š s, 1H) , 8,64 (m, 1H) , 8,40 (s, 1H) , 8,23 (s, 1H), 7,98-7,80 (m, 4H), 7,69 (dt, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,55-7,40 (m, 7H) , 7,25-7,16 (m, 3H) , 2,71 (s, 3H).
Příklad 33(c)
6-[2-(fenylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 33(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že v kroku (v), anilin byl použit namísto methylaminu: 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,35 (s, 1H) , 10,53 (s, 1H) , 8,67 (m, 1H) , 8,22 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 7,99 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,85 (dt, 1H, J = 1,8, 7,6 Hz), 7,80-7,55 (m, 5H) , 7,45-7,10 (m, 9H) ,
LCMS (100% oblast) Rt = 3,86, (poz) [M+H]/z vypočteno 449,1, změřeno 449,1. Analyzováno s 0,41 H2O, vypočteno: C (71,13), H (4,60), N (12,29), S (7,03). Změřeno: C (71,04), H (4,62), N (12,31), S (7,01) .
Příklad 33(d)
6-[2-(3-chlorfenylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 33(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33 (a) kromě toho, že v kroku (v) , 3-chloranilin byl použit namísto methylaminu: 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,53 (m, 1H) , 7,92 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,77 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,68 (dt, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,64-7,56 (m, 2H), 7,51-7,43 (m, 3H), 7,35-7,28 (m, 4H), 7,197,12 (m, 3H) , 7,02 (m, 1H), LCMS (100% oblast) Rt 3,98 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 483,1, změřeno 483,1. Analyzováno
211 s 0,3 H2O, vypočteno: C (66,40), H (4,05), N (11,47), S (6,57). Změřeno: C (66,36), H (4,08), N (11,49), S (6,55).
Příklad 33(e)
6-[2-(cyklopropylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 33 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33 (a) kromě toho, že v kroku (v) , cyklopropylamin byl použit namísto methylaminu: 1H
NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,45 (s, 1H) , 8,73 (d , 1H, • J = 3,9
Hz) , 8,56 (d, 1H, J = 4,3 Hz), 8,31 (d, 1H, J = 8,5 Hz) z 8,08
(d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,91 (dt, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz) , 7, 78 (d,
1H, J = 7,8 Hz), 7,70 (m, 2H) , 7,57 (m, 1H, ) , 7,40 (m z 3H) ,
7,30 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 7,20 (d, 1H, J = 7,8 Hz) , 2, 94 (m,
1H) , 0,80 (m, 2H) , 0,65 (m, 2H) , LCMS (100% oblast) Rt 3,51 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 413,1, změřeno 413,1.
Příklad 33(f)
6-[2-(2,2,2-trifluorethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
φφ ···· · φ ·· ·· · · ··· ΦΦΦ φφφφ φφφφ φ φφφφ φ · · • ΦΦΦ φφ ΦΦΦ · φ • φ φφφφ ΦΦΦ • ΦΦΦ ΦΦΦ φφ φφ φφ φφφφ
212
Sloučenina z příkladu 33(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že v kroku (v), 2,2,2-trifluorethylamin byl použit namísto methylaminu: NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,5 (s, 1H) , 9,29 (t,
1H, J = 6,3 Hz), 8,74 (m, 1H), 8,37 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,10 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,94 (dt, 1H, J = 1,8, 7,6 Hz), 7,80 (d,
1H, J = 7,9 Hz), 7,75-7,65 (m, 3H) , 7,55-7,40 (m, 3H) , 7,33 (d, 1H) , 7,22 (d, 1H) , 4,22 (m, 2H) , LCMS (100% oblast) Rt = 3,70 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 455,1, změřeno 455,1.
Příklad 33(g)
Tetrabutylamonium-6-[2-(karboxy)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazolu
Sloučenina z příkladu 33 (g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že byl vynechán krok (v): Rf srn 0,41, p 0,0 (směs ethylacetátu a hexanu 8:2), XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,75 (m, 1H) , 8,25 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 8,05 (d, 1H, 16,4 Hz), 7,88 (dt, 1H, J = 1,8, 7,8 Hz), 7,83-7,60 (m, 4H) , 7,33 (m, 2H) , 7,16 (m, 2H) , 6,70 (m, 1H), 3,30 (m, 8H) , 1,70 (m, 8H) , 1,42 (m, 8H) , 1,05 (t, 12H) , LCMS (100% oblast) Rt 3,24 (poz) [M+H (kyselá složka pouze)]/z vypočteno 374,1, změřeno 374,1. Analyzováno s 0,1 H2O, vypočteno: C (72,07), H (8,21), N (9,09), S (5,20). Změřeno: C (72,04), H (8,29), N (9,06), S (5,12).
• · · ·· · · · ·· ·· fc· ··· ··· ···· • · ·· · ···· · · · • · · · · · ··· · · • · · · · · · · · ···· ··· ·· ·· ·· ····
213
Příklad 33<h)
6-[2-(3-chlorfenylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-Z-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 33(h) byla připravena stejnou reakcí jako sloučenina z příkladu 33(d). Je nutné poznamenat, že ačkoliv tato sloučenina byla izolována a charakterizována jako čistá, bylo zjištěno, že vytvářela izomer k příkladu 33 (d) v podmínkách testu. 1H NMR (300 MHz, CDC13, ) δ 8,82 (m, IH) , 8,31 (s, IH), 7,86 (m, 2H), 7,77 (m, 2H) , 7,61 (t, IH, J = 2,0 Hz), 7,46 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,33 (m, 5H), 7,21 (t, IH, J = 8,0 Hz), 7,13 (dd, IH, J = 1,5, 8,1 Hz), 7,08 (m, IH) , 6,98 (d, IH, J = 13,0 Hz), 6,66 (d, IH, J = 13,1 Hz), LCMS (100% oblast) Rt 4,40 minuty (poz) (M+H]/z vypočteno 483,1, změřeno
483,1. Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (66,40), H (4,05), N (11,47), S (6,57). Změřeno: C (66,36), H (4,08), N (11,49), S (6,55) .
Příklad 34
6-[2-((RS-(trans-2-fenylcyklopropyl)karbamoyl)fenylsulfanyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-IH-indazol
H cr“ 37* H u
Sloučenina z příkladu 33(g) byla konvertována na
sloučeninu z příkladu 34 podobným způsobem, jak bylo popsáno
214 v příkladu 33(a), krok (v), kromě toho, že trans-2fenylcyklopropylamin byl použit namísto methylaminu: FTIR (tenký film) 1704, 1638, 1584, 1559, 1530, 1497, 1460, 1430,
1339, 1306, 1269, 1223, 1152, 1086, 1061, 966, 844 cm-1, XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 13,3 (s, 1H) , 8,71 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 8,61 (d, 1H, J = 3,9 Hz), 8,20 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,96 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,81 (dt, 1H, J = 1,7, 7,6 Hz), 7,66 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,59-7,50 (m, 3H) , 7,37-7,25 (m, 5H) , 7,21-7,08 (m,
5H) , 3,01 (m, 1H), 2,03 (m, 1H) , 1,25 (m, 2H) , LCMS (100% oblast) Rt = 3,72 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 489,2, změřeno 489,2. Analyzováno s 0,6 MeOH, 0,16 CH2CI2 vypočteno: C (70,86), H (5,17), N (10,75), S (6,15). Změřeno: C (70,87), H (5,18), N (10,75), S (5,96).
Příklad 35(a)
6-[2-(n-propylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
mg (0,1112 mmol) 6-[2-(pentafluorfenoxykarbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-IH-indazolu bylo rozpuštěno v 0,8 ml DMF, podrobeno působení 11 μΐ (0,1335 mmol) n-propylaminu a mícháno při teplotě místnosti. HPLC analýza po 15 minutách prokázala, že všechna výchozí látka byla spotřebována. Reakční směs byla koncentrována na rotační odparce za vysokého vakua, za vzniku pevné látky. Pevná látka byla sonikována s CH2C12 za vzniku jemné suspenze, která byla filtrována a promyta CH2C12 za vzniku 40 mg (87% výtěžek) sloučeniny uvedené v názvu. XH NMR (DMSO-dg) δ 13,31 (s, 1H) ,
ΦΦΦ·
Φ · 1 φ φ
215
8,60 (d, J = 4,0 Hz, 1Η), 8,41 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,94 (m, 3H) , 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,66 (t, J 8,7 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H) , 7,47 (m, 1H) , 7,30 (m, 3H), 7,18 (d, T = 8,3 Hz, 1H) , 3,20 (q, J = 6,0 Hz, 2H) , 1,55 (septet, J = 5,9 Hz, 2H) , 0,92 (t, J = 6,0 Hz, 3H) . Anal. výpočet pro C24H22N4OS · (1,5 H20, 0,8 DMF): C, 63,41, H, 6,17,
N, 13,45, S, 6,41. Změřeno: C, 63,37, H, 5,68, N, 13,44, S, 6, 32.
Roztok 615 mg (1,0 mmol) tetrabutylamonium-6-(2karboxyfenylsulfanyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazolu rozpuštěné v 10,0 ml suchého DMF byl podroben působení 89 μΐ (1,1 mmol) pyridinu a 206 μΐ (1,2 ekv.) pentafluorfenyltrifluoracetátu, při teplotě místnosti, v argonové atmosféře. HPLC analýza po 45 minutách prokázala hlavně nezreagovanou karboxylovou kyselinu, takže bylo přidáno dalších 89 μΐ (1,1 mmol) pyridinu a 206 μΐ (1,2 ekv.) pentafluorfenyltrifluoracetátu. HPLC analýza 15 minut později ukázala, že výchozí kyselina byla zcela spotřebována. Reakční směs byla koncentrována za vysokého vakua na rotační odparce, pak triturována CH2CI2 (~1 ml) , což způsobilo vytvoření krystalů, které byly sbírány filtrací, promyty dalším CH2CI2 a usušeny. Hmotnost jasně žlutých krystalů byla 336 mg. Zbylý filtrát byl koncentrován a purifikován velmi rychlou chromatografií (10% směs acetontrilu a CH2CI2 až 80% směs acetonitrilu a CH2CI2) , poskytující dalších 70 mg pevné látky. Celkový výtěžek 6-[2(pentafluorfenoxykarbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2•· · 00 *
0 ·· • · · 0 0 0 000 ••00 000 ·· ·· ·· 0000
216 yl)ethenyl]-lH-indazolu bylo 406 mg neboli 89 %. 1H NMR (CDCI3) δ 10,22 (1H, bs), 8,66 (1H, d, J = 4,5 Hz), 8,28 (2H, dd, J =
7,7. 1,5 Hz), 8,15 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,97 (1H, d, J = 16,2 Hz), 7,79 (1H, s), 7,15-7,75 (7H, m) , 6,92 (1H, d, J = 8,1 Hz) .
Příklad 35(b)
6-[2-(i-propylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl-lH-indazol
z příkladu
Sloučenina
35(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že isopropylamin byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,30 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 4,5 Hz, 1H) , 8,26 (d, J = 7,34 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,66 (d, J = 7,7 Hz, 1H) , 7,56 (m, 2H) , 7,45 (m, 1H) , 7,30 (m, 3H) , 7,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,08 (m, 1H), 4,04 (septet, J = 7,4 Hz, 1H), 1,15 (d, J = 6,6 Hz, 6H) . Anal. výpočet pro C24H22N4OS · 1,7 H2O: C,
64,75, H, 5,75, N, 12,59, S, 7,20. Změřeno: C, 64,79, H, 5,36, N, 12,74, S, 7,08.
Příklad 35(c)
6-[2-(cyklobutylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol ··
4 ·· «4
4 4 4 4
Sloučenina z příkladu způsobem, jak bylo popsáno cyklobutylamin byl použit (c) byla připravena v příkladu 35(a) kromě namísto n-propylaminu podobným toho, že XH NMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, IH) , 8,62 (m, 2H) , 8,19 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,94 (m, 2H) , 7,80 (dt = 1,7, 7,5 Hz, IH) , 7,65 (t, J = 8,1 Hz, IH) , 7,56 (s, IH) , 7,47 (m, IH) , 7,30 (m, 3H) , 7,17 (d, J = 8,3 Hz, IH) , 4,36 (septet, J = 8,1 Hz, IH) , 2,22 (m,
2H) , 2,03 (m, 2H) , 1,67 (m, 2H) . Anal. výpočet pro C25H22N4OS · (0,5 H2O, 0,9 DMF): C, 66, 36, H, 5,89, N, 13,69, S, 6,40. Změřeno: C, 66,21, H, 5,78, N, 13,82, S, 6,36.
Příklad 35(d)
6-(2-karbamoylfenylsulfanyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1Hindazol
Sloučenina z příkladu 35(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že čpavek byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-d6) δ
8,60 (d, J = 4,9 Hz, IH), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, IH) , 7,94 (m,
3H) , 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,60 (m, 4H), 7,48 (š s,
IH) , 7,25 (m, 4H) , 7,0 (m, IH) . Anal. výpočet pro C21H16N4OS ·
0,25 H2O: C, 66,91, H, 4,41, N, 14,86, S, 8,51. Změřeno: C,
66,99, H, 4,40, N, 15,10, S, 8,49.
·» • · ··· · • 9
• · · • · · 9· • 9 99 ♦ 9 9 · • · · • « · • · ·· 9 9 99 9 9
218
Příklad 35(e)
6- [2-((l-methylpyrol-2-ylhydrazido)karbonyl)fenylsulfanyl]-3E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že l-methylpyrol-2-ylhydrazid byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-dg) δ 13,34 (s, 1H) , 10,25 (s, 1H) , 10,45 (s, 1H) ,
8,60 (d, J = 4,5 Hz, 1H) , 8,22 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (m, 3H) , 7,57 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 7,43-7,18 (m, 4H) , 7,07 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,00 (d, J - 3,4 Hz, 2H) , 6,07 (t, J = 3,2 Hz, 1H) , 3,88 (s, 3H) . Anal. výpočet pro C27H22N6O2S · 0,6 H2O: C, 64,17, H, 4,63, N, 16,63, S, 6,34. Změřeno: C, 64,24, H, 4,48, N, 16,56, S, 6,28.
Příklad 35(f)
6-[2-((2-fluorbenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E- [2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že
2-fluorbenzylamin byl použit namísto n-propylaminu. ΧΗ NMR
9» ··· · • •fc ··· «fcfc·
« • • · · fc ·
219
(DMSO -d6) δ 13,31 (s, 1H), 8,99 (t, J = 5,8 Hz , 1H) , 8,61 (d, ,
= 4,5 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 16,2 Hz
1H) , 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H)
7,56 (m, 3H), 7,47 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,31 (m, 4 Η) , 7,15 (m
4H) , 4,51 (d, J = 5,7 Hz, 2H) . Anč il. výpočet pro C28H2iFN4OS
0,25 H2O: C, 69,33, H, 4,47, N, 1 1,55, S, 6 ,61. Změřeno: C
69, 32 , H, 4,41, N, 11,58, S, 6,59.
Příklad 35(g)
6-[2-((4-methoxybenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E- [2-
Sloučenina z příkladu 35(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že
4-methoxybenzylamin byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, 1H) , 8,90 (t, J = 5,5 Hz, 1H) , 8,60 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 83 Hz, 1H) , 7,95 (d, J = 16,3 Hz, 1H) , 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,55 (m, 3H) , 7,30 (m, 5H), 7,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 6,0 Hz, 2H) , 3,72 (s, 3H) . Anal. výpočet pro C29H24N4O2S · 0,6 H20: C, 69,19, H, 5,05, N, 11,13, S, 6,37. Změřeno: C, 69,12, H, 4,85, N, 11,24, S, 6,35.
Příklad 35(h)
6-[2-((5-methylfur-2-yl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol tt 444 4 ·· ·» ·· 44
44« 444 4 44«
4444 · 4444 4 4 4
444 4 4 · · 4 4 4 • 4 4 4 4 4 «44
220
Sloučenina z příkladu 35(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že
5-methylfur-2-ylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR
(DMSO-d6) δ 13,31 (s, 1H), 8,88 (t, J = 5,3 Hz, 1H) , 8,60 (d, J
= 4,3 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 16,3 Hz,
1H), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H),
7,54 (m, 3H), 7,30 (m, 4H), 7,18 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 8,1 Hz, 3H) . Anal. výpočet, pro C27H22N4O2S · 0,4 H2O: C, 68,45, H, 4,85, N, 11,83, S, 6,77. Změřeno: C, 68,35, H, 4,80, N, 11,85, S, 6,68.
Příklad. 35({)
6-[2-(benzyloxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že O-benzylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR
(DMSO-dg) δ 13,31 (s, 1H) , 11,64 (s, 1H) , 8,90 (t, J = 5,5 Hz,
1H) , 8,60 (d, J = = 4,1 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,95
(d, J = 16,3 Hz, 1H) , 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d,
J = 7,9 Hz, 1H) , 7,56 (m, 2H), 7,50- 7,24 (m, 9H), 7,17 (t, J =
8,5 Hz, 2H) , 4,94 (s, 2H) . Anal. výpočet pro C28H22N4O2S · 0,8 »· tttt • · • · ·· • · · ♦ · · • · · · • · · · » · · φ • ·· · * · · · • · · · « · · tt · » · · ····
221
H20: C, 68,22, H, 4,83, N, 11,37, S, 6,50. Změřeno: C, 68,08,
H, 4,65, N, 11,41, S, 6,47.
Příklad 35(j)
6-[2-(allyloxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že O-allylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,32 (s, 1H) , 11,56 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H) , 7,48-7,24 (m, 5H), 7,16 (m, 2H) , 6,00 (m, 1H) , 5,37 (d, J = 18,3 Hz, 1H) , 5,27 (d, J = 11,3 Hz, 1H) , 4,42 (d, J = 6,0 Hz, 1H) . Anal. výpočet pro C24H20N4O2S · (0,2 H20, 0,2 CH2C12: C,
65,35, H, 4,96, N, 12,10, S, 6,92. Změřeno: C, 65,24, H, 4,50, N, 12,56, S, 7,17.
Příklad 35(k)
6-[2-(isopropoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
· 4 ·
44 44 • 4 * · 4 ·♦· 4 4 4 • 4 · · 4 4
4 4 4 4 • 4 4· 4444
222
Sloučenina z příkladu 35 (k) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že O-isopropylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. 1H
NMR (DMSO-d6) δ 13,30 (s, 1H) , 11,33 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 8,19 (d, J 8,3 Hz, 1H) , 7,95 (d, J = 16,5 Hz, 1H) ,
7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 11, 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,55 (m, 2H) , 7,48-7,24 (m, 4H) , 7,17 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 4,12 (septet, J = 5,7 Hz, 1H) , 1,21 (d, J = 6,2 Hz, 6H. Anal.
výpočet pro C24H22N4O2S · (0,4 H2O, 0,7 CH2C12) : C, 59, 67, H, 4,91, N, 11,27, S, 6,45. Změřeno: C, 59,61, H, 4,81, N, 11,42,
S, 6,45.
Příklad 35(1)
6-[2-((4-aminobenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Příklad 35(1) byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 4-aminobenzylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, 1H) ,
8,78 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,60 (d, J = 4,3 Hz, 1H) , 8,19 (d, J
= 8,1 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,85 (š s, 1H), 7,81
(dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,66 (d, J = 7,9 Hz , 1H), 7,59 (s,
1H) , 7,51 (m, 2H), 7,30 (m, 3H) , 7,1^ (d, J = 8,7 Hz, 1H) ,
7,05 (m, 3H) , 6,56 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 8,5 Hz,
2H) , 4,29 (d, J = 6,0 Hz , 2H) . Anal. výpočet pro C28H23N5OS ·
toto ···« • to to · ·>
·· toto ·· ·« ··· to · to · • · to«· ·· * • ·· >·· · ·
223
0,6 H2O: C, 68,86, H, 4,99, N, 14,34, S, 6,57. Změřeno: C, 68,83, H, 4,80, N, 14,16, S, 6,52.
Příklad 35 (m)
6-[2-((thien-2-ylhydrazido)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(m) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že thien-2-ylhydrazid byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-de) δ 13,49 (š s, IH), 10,64 (s, IH), 10,47 (s, IH), 8,66 (d, J = 4,0 Hz, IH, 8,22 (d, J = 85 Hz, IH) , 8,08-7,82 (m,
5H), 7,66 (m, 3H) , 7,39 (m, 3H) , 7,24 (m, 2H) , 7,09 (d, J = 8,1 Hz, IH), 7,00 (d, J = 3,4 Hz, 2H) , 6,07 (t, J = 3,2 Hz, IH) , 3,88 (s, 3H) . Anal. výpočet pro C26H19N5O2S2 · 1,5 H2O: C,
59,52, H, 4,23, N, 13,35, S, 12,22. Změřeno: C, 59,56, H,
4,42, N, 13,33, S, 11,75.
Příklad 35(n)
6- [2- (N2-(pyrid-2-ylhydrazino)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl)-lH-indazol
H
44
4 4 4
4 4
4 4
4 4
4444
Sloučenina z příkladu 35 (n) byla připravena podobným • 4 4444 44 4«
4 4 4 4 4
4444 4 4444
224
způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že
2-hydrazinopyridin byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR
(DMSO) δ 13,31 (s, 1H) , 10,30 (s, 1H), 8,60 (d, J = 4,4 Hz,
1H), 8,48 (s, 1H), 8,21 (d, J = 8,5 Hz, 1H) , 8,09 (d, J = 4,9
Hz, 1H), 7,94 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,67 (m, 1H), 7,62-7,47 (m, 3H), 7,40 (m, 2H), 7,31 7,12 (m, 3H) , 6,73 (m, 2H) . Anal. výpočet pro C26H2oN6OS · 0,3 H2O:
C, 66,45, H, 4,42, N, 17,88, S, 6,82. Změřeno: C, 66,33, H, 4,50, N, 17,78, S, 6,60.
Příklad 35(o)
6-[2-(N-hydroxy-N-methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (o) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že N-methylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR
(DMSO-d5) δ 13,24 (s, 1H), 9,94 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 4,0 Hz,
1H), 8,14 l (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7 ,92 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,80
(dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 7,54 (d,
J - 16,5 Hz, 1H), 7,47 -7,24 (m, 6H) , 7,16 (d, J = 8,5 Hz, 1H) ,
3,24 (š s, 1H) . Anal. výpočet pro C22Hi8N4O2S · (0,5 H2O, 0,3
CH2C12) : C, 61,29 , H, 4,52, N, 12, 82, S, 7,34. Změřeno: : C,
61,24, H, 4,33, N, 12,67, S, 7,34.
• 4 44 • * · 4 · ·
4444 • ·
4 44 « 4
4« 4444
225
Příklad 35(ρ) β-[2-((pyrid-4-yl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(p) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že
4-aminomethylpyridin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,31 (š s, 1H), 9,07 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 8,60 (d,
J = 4,2 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 5,0 Hz, 1H) , 8,19 (d, J = 8,7
Hz, 1H), 7,95 (d, J = 16,4 Hz, 1H) , 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz,
1H), 7,68-7,52 (m, 3H) , 7,42 (m, 2H), 7,39-7,31 (m, 3H), 7,27 (m, 1H), 7,20 7,10 (m, 2H), 4,48 (d, J = 6,2 Hz, 2H).
Příklad 35(q)
6-[2-((2-methylfenylhydrazido)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(q) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-methylfenylhydrazid byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,43 (š s, 1H), 10,45 (s, 1H) , 10,28 (s, 1H), 8,64 (d, J = 4,0 Hz, 1H) , 8,22 (d, J = 8,2 Hz, 1H) , 8,01 (d, J =
16,6 Hz, 1H), 7,92 (m, 1H) , 7,81 (m, 1H) , 7,69 (m, 1H) , 7,60
9999
9
9 99
99 99 ·· • · · 9 · · · • 9 999 9 9 9
999 99 999 · · • 9 9 9 9 9 9 9 9
9999 999 99 99 99 9999
226 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 7,50-7,22 (m, 8H) , 7,07 (d, J = 7,7 Hz,
1H), 2,45 (s, 3H).
Příklad 35(r)
6-[2-(methoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (r) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že O-methylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR (DMSO-dg) δ 13,32 (s, 1H) , 11,60 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H), 7,47 (dd, J = 7,4, 1,7 Hz, 1H), 7,43-7,24 (m, 3H), 7,17 (m, 2H) , 3,72 (s, 3H) . Anal. výpočet pro C22Hi8N4O2S · 0,6 CH2C12: C, 59, 86, H, 4,27, N, 12,36, S, 7,07. Změřeno: C, 59,94, H, 4,40, N, 12,00, S, 6,80.
Příklad 35(s)
6-[2-((cyklopropyl)methoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
«4 • 4 ·«»· • · • · 44 • 4 ··
4 · • · 44« • 4 · 4 · 4 9 4
44 »4 4444
227
Sloučenina z příkladu 35 (s) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že O-cyklopropylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. 1H
NMR (DMSO-dg) δ 13,38 (s, ÍH) , 11,51 (s, ÍH ), 8, 64 (d , J = 3,8
Hz, ÍH), 8,18 (d, J = 8,4 Hz ÍH), 8,00 (d, , J = 16, 4 Hz, 1H) ,
7,86 (m, 2H), 7,63-7,52 (m, 2H), 7,49-7,29 (m, 4H) , 7,17 (m,
2H), 3,70 (d, J = 7,2 Hz, ÍH) , 1,10 (m, ÍH) , 0,53 (m, 2H) ,
0,27 (m, 2H). Anal. výpočet pro C25H22N4O2S 1,6 H2O: C, 63 ,70,
H, 5,39, N, 11,89, S, 6,80 . Změřeno: C, 63,58 , H, 4,95, , N,
11,71, S, 6,66.
Příklad 35(t)
6-[2-(n-propoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-IH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (t) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že O-n-propylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR (DMSO-de) δ 13,31 (s, ÍH) , 11,48 (s, ÍH) , 8,60 (d, J = 3,8 Hz,
ÍH), 8,19 (d, J = 8,4 Hz, ÍH), 7,95 (d, J = 16,2 Hz, ÍH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, ÍH), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, ÍH), 7,60-7,52 (m, 2H), 7,49-7,24 (m, 4H), 7,17 (m, 2H) , 3,84 (t, J = 6,6 Hz,
2H) , 1,62 (septet, J = 6,4 Hz, 2H), 0,92 (t, J = 6,1 Hz, 3H) .
Anal. výpočet pro C24H22N4O2S · (0,5 H2O, 0,25 CH2C12) : C, 63,21,
H, 5,14, N, 12,16, S, 6,96. Změřeno: C, 63,15, H, 5,13, N,
12,17, S, 6,99.
«4 ··*· »* ·» ·· ·♦ ·*· · » · ·«·· • ··· t » ·«· · · * • · * · ·· 9 9 9 9 9
9 9999 999
9999 999 99 9· 99 9999
228
Příklad 35(u)
6-[2-(allylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(u) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že allylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, IH) , 8,60 (m, 2H) , 8,19 (d, J = 8,5 Hz, IH) , 7,93 (d, J = 16,3 Hz, 3H) ,. 7,79 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH) , 7,64 (m, IH, 7,60-7,48 (m, 3H), 7,37-7,23 (m, 3H) , 7,17 (d, J = 8,5 Hz, IH) , 7,07 (m, IH) , 5,87 (m, IH), 5,25 (dq, J = 17,33, 1,9 Hz, IH) , 5,09 (dq, J = 10,2, 1,9 Hz, IH) , 3,87 (m, 2H) . Anal. výpočet pro C24H20N4OS « 0,8 CH2C12: C, 62,00, H, 4,53, N, 11,66, S, 6,67. Změřeno: C, 62,08, H, 4,73, N, 11,99, S, 6,66. MALDI FTMS (MH+) vypočteno: 413,1431, změřeno 413,1449.
Příklad 35(v)
6-[2-(cyklopropylmethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(v) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že cyklopropylmethylamin byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,30 (s, 1Η) , 8,60 (d, J = 4,0 Hz, 1H) , 8,48 (t, J ···· ·< ** *· • · · ··· · · · · • ··« · · ··* · · · • ········· * • β · · · · ··· ··«· ··« ·· *· ·· ····
229 = 5,3 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 8,7 Hz, 1H) , 7,90 (d, J = 16,4 Hz,
1H) , 7,80 (dt, J = 1,7, 7, 5 Hz, 1H), 7,67-7,45 (m, 4H), 733
7,23 (m, 3H) , 7,18 (d, J = 83 Hz, . 1H) , 7,06 (m, 1H), 3,13 (t
J = 6,2 Hz, 2H) , 1,00 (m, , 1H) , 0,41(m, 1H), 0,24 (m, 1H)
Anal. výpočet pro C25H22N4OS • 0,5 CH2C12: C, 65, 30, H, 4,94, N
11, 95 , S, 6,84 . Změřeno: C, 65,10 , H, 4,93, N, 12,04, S, 6,82
MALDI FTMS (MH+) vypočteno 427,1587, změřeno 427,1605.
Příklad 35 (w)
6-[2-(kyanomethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(w) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že aminoacetonitril byl použit namísto n-propylaminu. XH NMR
(DMSO-dg) δ 13,35 (s, 1H), 9,19 (t, J = 5 ,3 Hz, 1H) , 8,60 (d, J
= 4,8 Hz, 1H) , 8,20 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 16,4 Hz,
3H), 7,79 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,' 70-7,50 (m, 4H), 7,41-
7,23 (m, 3H) , 7,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H) , 7,06 (d, J = 6,6 Hz,
1H) , 4,32 (d, J = 5,5 Hz, 2H) . MALDI FTMS (MH+) vypočteno
412,1227, změřeno 412,1215.
Příklad 35 (x)
6-[2-(ethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol • · · ·
Sloučenina z příkladu 35(x) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že ethylamin byl použit namísto n-propylaininu. 1H NMR (DMSO-d6) δ 8,60 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,40 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,94 (m, 3H) , 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,68-7,44 (m, 3H) , 7,56 (m, 2H) , 7,30 (m, 3H) , 7,17 (dd, J = 8,1, 1,8 Hz, 1H), 7,06 (m, 1H), 3,24 (m, 2H) , 1,11 (t, J = 7,0 Hz, 3H) . Anal. výpočet pro C23H20N4OS · (1,75 H2O, 1,0 DMF): C, 61,82, H, 6,09, N, 13,87, S, 6,35. Změřeno: C, 61,58, H, 5,66, N, 13,96, S, 5,93. MALDI FTMS (MH+) vypočteno 401,1431, změřeno 401,1417.
Příklad 35 (y)
6-[2-(thiazol-2-ylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(y) byla připravena způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě 2-aminothiazol byl použit namísto n-propylaminu podobným toho, že XH NMR
(DMSO-d6) δ 13 ,32 (s, 1H], 12,67 (s, 1H), 8. 60 (d, J = 4,1 Hz,
1H) , 8,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7 ,93 (d, J = 16,3 Hz, 1H) , 7,80
(dt, J - 1,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,65 (d,
J = 8,3 Hz, 1H) , 7,60-7, 51 (m, 3H) , 7,49-7,34 (m, 2H) , 7,26
• ·
231 (m, 2H) , 7,18 (m, 2H) . Anal. výpočet pro C24H17N5OS2 · 0,75 H2O:
C, 61,45, H, 3,98, N, 14,93, S, 13,67. Změřeno: C, 61,35, H, 4,10, N, 14,96, S, 13,68.
Příklad 35(z)
6-[2-(2-(ethoxy)ethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (z) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-ethoxyethylamin byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,30 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 4,0 Hz, 1H) , 8,45 (t, J = 6,2 Hz, 1H) , 8,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H) , 7,93 (m, 2H) , 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 7,7 Hz, 1H) , 7,60-7,45
(m, 3H), 7,36-7,23 (m, 3H) , 7,17 (d, J = = 8,3 Hz, 1H), 7,07 (m,
1H), 3,50 (m, 6H), 1,10 (d, J = 7,0 Hz, 3H) . Anal. výpočet pro
CH2,N4O2S0,5 CH2C12: C, 62, 89, H, 5,17 , N, 11,50, S, 6, 58.
Změřeno: C, 62,45, H, 5,33, N, 11,25, S, 6,55
Příklad 35(aa)
6-[2-((3-methoxybenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E- [2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
CH3
4 • · · · · · • · • 4 4 4
232
Sloučenina z příkladu způsobem, jak bylo popsáno 3-methoxybenzylamin byl použit (DMSO-d6) δ 13,30 (s, IH) , 8,97 =4,2 Hz, IH), 8,18 (d, J IH), 7,80
7,60-7,51 2H), 6,80 3,71 (s,
H, 4,50,
17,42, S, (aa) byla připravena podobným v příkladu 35(a) kromě toho, že namísto n-propylaminu. 1H NMR (t, J = 5,5 Hz, IH), 8,60 (d, J Hz, IH) , 7,93 (d, J = 16,3 Hz, IH), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, IH), 5H) , 7,08 (m, IH) , 6,94 (m, = 8,7 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, (m, 3H), 7,38-7,15 (m, (dd, J = 8,1, 1,5 Hz, :
3H) . Anal. výpočet pro C29H24N4O2S · 0,4 H2O: C, 60,25, N, 17,57, S, 8,04. Změřeno: C, 60,14, H, 4,47, N, 8,00.
Příklad 35(bb)
6-[2-((fur-2-yl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E- [2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(bb) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že 2-aminomethylfuran byl použit namísto n-propylaminu. 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, IH) , 8,93 (t, J = 5,7 Hz, IH) , 8,60 (d, J
= 4,3 Hz, IH), 8, 19 (d, J = 8,0 Hz, IH), 7,93 (d, J = 16,5 Hz,
IH), 7,80 (dt, J = 1,9, 7,4 Hz, IH) , 7,66 (d, J = 7,7 Hz, IH),
7,59-7,48 (m, 4H) , 7,30 (m, 4H) , 7, 37-7,24 (m, 3H), 7, 18 (d, J
= 9,2 Hz, IH) , 7,06 (d, J = 8,1 Hz, IH) , 6,40 (m, IH) , 6,31 (m, IH) , 4,44 (d, J = 5,3 Hz, 2H) . Anal. výpočet. Nebo
C26H20N4O2S · (0,1 H2O, 0,75 CH2C12) : C, 62,02, H, 4,22, N,
10,82, S, 6,19. Změřeno: C, 61,58, H, 4,30, N, 10,55, S, 6,12.
• · • · • · · • · • · 0 0 « 0 · · · ·
233
Příklad 35(cc)
6-[2-(2-propynylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35 (cc) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že propargylamin byl použit namísto propylaminu (76 %) : 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,56 (m, 1H) , 7,96 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,81 (d, 1H, 16,4 Hz), 7,68 (dt, 1H, J = 1,8, 7,8 Hz), 7,6 (m, 1H), 7,52-7,45 (m, 3H) , 7,3-7,23 (m, 3H) , 7,16 (m, 2H) , 4,10 (m,
2), 2,20 (t, 1H. J = 2,6 Hz). LCMS (100% oblast) Rt = 3,36 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 411,1, změřeno 411,1. Analyzováno s 0,2 H2O, 0,17 DMF, 1,2 dichlormethan, vypočteno: C (58,44), H (4,19), N (11,05), S (6,07). Změřeno: C (58,18), H (4:11), N (10,98), S (6,05).
Příklad 35(dd)
6-[2-(ethoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(dd) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že ethoxyamin byl použit namísto propylaminu: 1H NMR (300 MHz,
CDC13) δ 11,60 (s, 1H), 8,71 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 8,30 (d, 1H,
J = 7,7 J = 2H, Rt =
8,5 Hz), 8,05 Hz), 7,76 (d, 1,8, 7,3 Hz)
J = 7,0 Hz),
3,28 minuty
234
(d, 1H, J = 16, 4 Hz), 7,91 (dt , 1H, J = 1,7,
1H, J = 7,8 Hz) , 7,67 (m, 2H) , 7,56 (dd, 1H,
, 7, 52-7 ,36 (m, 3H), 7,28 (m, 2H) , 4,06 (q,
1,31 (t, 2H, J =7,0 Hz), LCMS (100 % oblast)
(poz) [M+H]/z vypočteno 417,1, změřeno 417,1.
Analyzováno s 0,2 H2O, vypočteno: C (65,53), H (4,98), N (13,05), S (7,48). Změřeno: C (65,66), H (4,91), N (12,75), S (7,44) .
Příklad 35(ee)
6-[2-(2-methyl-2-propenylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(ee) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-methylallylamin byl použit namísto propylaminu: XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,56 (m, 1H) , 7,98 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,69 (dt, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,60 (m, 1H), 7,53-7,42 (m, 3H), 7,32-7,24 (m, 3H) , 7,16 (m, 2H), 6,72 (m, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,81 (s, 1H), 3,90 (d, 2H, J = 5,5 Hz), 1,71 (s, 3H). LCMS (100% oblast) Rt = 3,37 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 427,1, změřeno 427,1. Analyzováno s 0,7 H2O,
0,1 dichlormethan, vypočteno C (67,35), H (5,31), N (12,52), S (7,16). Změřeno: C (67,55), H (5,39), N (12,35), S (7,15).
• · • · t · • · • · · » ·· · ·
235
Příklad 35(ff)
6-[2-((3-fluorbenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2 yl)ethenyl]-lH-indazol
F
Sloučenina z příkladu 35(ff) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že 3-fluorbenzylamin byl použit namísto propylaminu: 1H NMR (300
4,51 (d, 2H, J = 5,7 Hz), LCMS (100% oblast) Rt = 3,55 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 481,1, změřeno 481,1. Analyzováno s 0,7 H2O, 0,5 dichlormethan, vypočteno: C (63,91), H (4,40), N (10,46), S (5,99). Změřeno: C (63,80), H (4,34), N (10,34), S (5,98) .
Příklad 35(gg)
6-[2-(2-(methylamino)ethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(gg) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a) kromě toho, že
N-methylethylendiamin byl použit namísto propylaminu: ΧΗ NMR » « • 444 • 4 4 4
236 (300 MHz, CDC13) δ 8,60 (m, 1H) , 7,98 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,69 (dt, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,52 (m, 1H), 7,50-7,40 (m, 3H) , 7,30-7,20 (m, 3H), 7,16 (m, 2H) , 3,45 (t, 2H), 2,69 (t, 2H), 2,15 (š s, 3H), LCMS (100% oblast) Rt = 3,16 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 430,1, změřeno 430,1. Analyzováno s 0,2 H2O, 0,6 dichlormethan, 0,06 hexan, vypočteno: C (61,28), H (5,24), N (14,31), S (6,55). Změřeno: C (61,26), H (5,14), N (14,22), S (6,56).
Příklad 35(hh)
6-[2-(2-(thien-2-yl)ethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 35(hh) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-(2-aminoethyl)thiofen byl použit namísto propylaminu: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,56 (m, 1H), 7,98 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,81 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,69 (dt, 1H, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,60 (m, 1H), 7,53-7,42 (m, 3H) , 7,32-7,24 (m, 3H), 7,16 (m, 2H) , 6,72 (m, 1H), 6,63 (m, 1H) , 6,52 (m, 1H) , 3,45 (q, 2H) , 3,00 (t, 2H) . Analyzováno s 0,5 H2O, 0,07 dichlormethan, vypočteno, C (65,35), H (4,69), N (11,26), S (12,82). Změřeno: C (65,49), H (4,80), N (11,21), S (12,77).
Příklad 35(ii)
6-(2-(aminokarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol • · toto ·· toto ·· ·· • · · · · to to · · · to to « ··· tototo •to to · toto*·
237
Sloučenina z příkladu 35 (ii) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že hydrazin byl použit namísto propylaminu: ΧΗ NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,3 (s, IH) , 9,57 (s, IH) , 8,54 (d, IH, J = 3,9 Hz), 8,14 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,89 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,73 (dt, IH, J = 1,7, 7,6 Hz), 7,60 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,50 (m, 2H), 7,40 (dd, IH, J = 1,8, 7,1 Hz), 7,3-7,1 (m, 4H) , 7,0 (m, IH). LCMS (100% oblast) Rt = 0,55 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 388,1, změřeno 388,1. Analyzováno s 0,1 DMF, 0,55 EtOAc, 0,12 toluen (NMR) a 0,15 H2O, vypočteno: C (63,98), H (5,15), N (15,63), S (7,02). Změřeno: C (63,99), H (5,07), N (15,75), S (6,89).
Příklady 35(jj)-35(nn) mohou být připraveny podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a).
Příklad 35 (jj)
φ· φ φ φ φ ♦ • · • · φ φ · · • φ φφφφ
239 φφφ φ φ φφφφ
Příklad 36(a) β- [2- (Ν2-(l-methylimidazol-2-ylmethyliden)hydrazino)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
mg (0,103 mmol) sloučeniny připravené v příkladu 35 (ii) bylo podrobeno působení 29 mg (0,258 mmol, 2,5 ekv.) 1-methyl2-imidazolkarboxaldehydu v ethanolu za vzniku sloučeniny z příkladu 36 (a): XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 8,60 (m, 2H) , 8,31 (s, 1H) , 8,18 (d, 1H) , 8,02 (d, 1H) , 7,98 (d, 1H) , 7,80 (m, 2H), 7,63 (m, 2H) , 7,40 (m, 3H) , 7,30 (m, 1H) , 7,20 (m, 1H), 7,02 (m, 2H), 6,93 (s, 1H) , 4,00 (s, 3H) , LCMS (100% oblast) Rt = 4,0 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 480,2, změřeno 480,2. Analyzováno s 1,45 H2O, vypočteno: C (61,76), H (4,76), N (19,39), S (6,34). Změřeno: C (61,78), H (4,67), N (19,34), S (6,39) .
Příklad 36(b)
6- [2- (N2-(pyrid-2-ylmethyliden)hydrazino)karbonyl)fenylsulfanyl] -3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 36(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 36 (a) kromě toho, že
2-pyridylkarboxaldehyd byl použit namísto l-methyl-2-imidazolkarboxaldehydu: *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,57 (m, 2H) , 8,45 ·♦ ♦ fc · · · · • · • · ·· • fc
240 (m, 2H), 8,22 (d, IH) , 8,10 (s, IH) , 7,93 (d, IH) , 7,83 (d,
IH), 7,8-7,1 (m, 11H), LCMS (100% oblast) Rt = 4,0 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 477,1, změřeno 477,1. Analyzováno s 0,85 H2O, vypočteno: C (65,93), H (4,45), N (17,09), S (6,52). Změřeno: C (66,02), H (4,42), N (16,95), S (6,38).
Příklad 36(c)
6- [2- (N2-(2,2,2-trifluroethyliden)hydrazino)karbonyl)fenylsulfanyl] -3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl)-IH-indazol
Sloučenina z příkladu 36(c) byla způsobem, jak bylo popsáno v příkladu trifluoracetaldehyd byl použit namísto připravena podobným 36 (a) kromě toho, že
1-methy1-2-imidazolkarboxaldehydu: 1H NMR (300 MHz, (m, IH) , 8,02 (d, IH), 7,90 (dt, (100% oblast) Rt = 5,64 minuty
DMSO-d6) δ 8,70 (m, IH) , 8,25
IH) , 7,80-7,20 (m, 10H) . LCMS (poz) [M+H]/z vypočteno 468,1, změřeno 468,0. Analyzováno s 0,75 H2O, vypočteno: C (57,39), H (3,67), N (14,56), S (6,67). Změřeno: C (57,44), H (3,67), N (14,56), S (6, 67) .
Příklad 37(a)
6-[6-fluor-2-(ethoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin2-yl)ethenyl]-lH-indazol <4
4 4 ·
4 ♦ •4 4444 » 4 4
Sloučenina z příkladu 37 (a) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že byla použita výchozí látka popsaná níže a že ethoxyamin byl použit namísto propylaminu: XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,59 (m,
1H) , 8,08 (d, 1H) , 7,88 (d, 1H, J = 16, 4 Hz), 7,79 (t, 1H) ,
7,65 (d, 1H) , 7,60 (m, 1H) , 7,50 (d, 1H, J = 16,4 Hz) , 7,40
(t, 1H) , 7,36 (d, 1H) , 7,28 (s, 1H) , 7,23 (m, 1H) , 7,10 (d,
1H) , 3, 90 (q. 2H) , 1,19 (t, 3H) . LCMS (100 % oblast) Rt = 4,85
minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 435,1, změřeno 435,1, (neg) [ΜΗ] /z vypočteno 433,1, změřeno 433,1. Analyzováno s 0,35 H2O, 0,07 EtOAc vypočteno: C (62,56), H (4,57), N (12,54), S (7,17). Změřeno: C (62,61), H (4,55), N (12,49), S (7,11).
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Roztok 1,07 g (5,75 mmol) ethyl-2,3-difluorbenzoátu v 10 ml DMF byl podroben působení 896 mg (11,5 mmol, 2,0 ekv.) sulfidu sodného ve 23 °C. Směs byla míchána v argonové atmosféře po dobu 10 hodin. Roztok byl naředěn 50 ml ethylacetátu a 50 ml vody a 5 ml 10% kyseliny citrónové. Organická vrstva byla promyta saturovaným vodným hydrouhličitanem sodným, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku ethylesteru 3-fluor-2-merkaptobenzoové kyseliny: ΧΗ NMR (300 »9 ··«·
9
9 99
9»9 9·9·
9 999 99 9 · · 9 9 9 * ’ *'· 99 9 9 99 «··· ··· ·* ·· 99 <999
242
MHz, CDC13) δ 7,71 (t, 1H), 7,38 (m, Η) , 7,12 (m, 1H), 4,41 (q,
2H) , 1,40 (t, 3H) , LCMS (100% oblast) Rt = 4,53 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 201,0, změřeno 200,9.
(ii)
320 mg (39 %) výše uvedeného thioetheru bylo připraveno podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (iii), kromě toho, že ethylester 3-fluor-2-merkaptobenzoové kyseliny byl použit namísto thiosalicylátu: FTIR (tenký film) 2952, 1727, 1607, 1586, 1564, 1469, 1433, 1366, 1292, 1249,
182, 1141 , 10 74, 836 cm-1, 1H NMR (300 MHz, CDC :i3) δ 8,62 (m,
1H) , 7,90 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,85 (d, 1H, J = 16, 4 Hz) , 7,67
(dt, 1H, J = 1,8, 7, 7 Hz), 7,57-7,38 (m, 5H) , 7,23-7,10 (m,
3H) , 5, 65 (s, 2H), 4, 34 (q, 2H, J = 7,1 Hz) , 3, 56 (t, 2H, J =
8,2 Hz) , 1,30 (t, 3H, J = 7,1 Hz) , 0,88 (t, 2H, J = 8,2 Hz) , -
0,06 (s, 9H) , LCMS (100% oblast) Rt = 4,44 minuty (poz)
[M+H]/z vypočteno 549,2, změřeno 549,2.
(iii)
303 mg (99 %) karboxylové kyseliny uvedené výše bylo připraveno podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
33(a), krok (iv): FTIR (tenký film) 2953, 2496, 1715, 1643,
4444
4
4 4 4
243
1607, 1567, 1470, 1434, 1300, 1250, 1221, 1075, 967, 932, 836
cm'1, 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,81 (m, IH) , 7,87 (m, 2H), 7,79
(m, 3H), 7,65 (m, 2H) , 7,56 (m, IH) , 4,40 (m, IH) , 7,30 (m,
IH) , 7,00 (dd, IH, J = 1,4, 8,5 Hz), 5,58 (s, 2H) , 3,59 (t,
2H, J = 8,2 Hz), 0,93 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0, 01 (s, 9H). LCMS
(100% oblast) Rt = 10,47 minutách (poz) [M+H]/z vypočteno
522,2, změřeno 522,2.
(iv)
Výše uvedená sůl byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(g): 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,2
(s, IH) r 8,68 (m, IH) , 8,12 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,98 (d, IH,
J = 16, 4 Hz) , 7,88 (dt, IH, J = 1,8, 7,6 Hz), 7,73 (d, IH, J =
7,9 Hz) t 7,61 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,43-7,32 (m, 3H) , 7,20
(m, 2H) r 7,07 (t, IH) , 3,23 (m, 8H) , 1,68 (m, 8H) , l,41(m,
8H) , 1, 04 (t, 12H) .
(v)
Výše uvedený pentafluorfenylester byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a), krok (i): LCMS (100% oblast) Rt = 10,53 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 558,1, změřeno 558,1.
4444 * 4 4 4 44
99
9 9
9 999
9 9 9
9 9
99
9 9 ·
9 · • 4 4
4 4
4444
244
Příklad 37(b)
6-[6-fluor-2-(cyklopropylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 37 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 37(a) kromě toho, že cyklopropylamin byl použit namísto ethoxyaminu: 1H NMR (300
MHz, DMSO-d6) δ 8,42 (m, 1H) , 8,28 (d, 1H) , 7,83 (d, 1H) , 7,75 (m, 2H) , 7,60 (m, 1H) , 7,31 (m, 2H) , 7,15 (m, 4H) , 6,86 (d,
1H) , 2,58 (m, 1H) , 0,42 (m, 2H) , 0,23 (m, 2H) . LCMS (100% oblast) Rt = 4,91 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 431,1, změřeno 431,1, (neg) [M-H]/z vypočteno 429,1, změřeno 429,2. Analyzováno s 0,55 H2O, vypočteno: C (65,46), H (4,60), N (12,72), S (7,28). Změřeno: C (65,52), H (4,58), N (12,64), S (7,06) .
Příklad 37(c)
6-[6-fluor-2-(isopropoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E- [2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 37(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 37 (a) kromě toho, že isopropoxyamin byl použit namísto ethoxyaminu: XH NMR (300 MHz, • fc fcfcfc · • ·
245
CDC13) δ 9,50 (š s, 1H) , 8,47 (m, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,68 (d,
1H, J = 16, 4 Hz), 7,54 (dt, 1H) , 7,35 (m, 4H) , 7,20 (m, 4H) ,
4,03 (m, 1H) , , 1,07 (d, 6H), LCMS (100% oblast) Rt = 4,90
minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 449,1, změřeno 449,1.
Analyzováno s 0,1 DMF, 0,3 H2O, vypočteno: C (63,28), H (4,87), N (12,45), S (6,95). Změřeno: C (63,22), H (4,84), N (12,37), S (6,91) .
Příklad 37(d)
6-[6-fluor-2-(methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 37(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 37(a) kromě toho, že methylamin byl použit namísto ethoxyaminu: 1H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 8,37 (m, 1H) , 8,18 (m, 1H) , 7,87 (d, 1H) , 7,67 (d,
1H, J = 16,4 Hz), 7,59 (dt, 1H) , 7,40 (d, 1H) , 7,30 (m, 2H) ,
7,20 (m, 4H) , 6,85 (d, 1H) , 2,49 (d, 3H) , LCMS (100% oblast)
Rt = 4,63 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 405,1, změřeno 405,2, (neg) [M-H]/z vypočteno 403,1, změřeno 403,1. Analyzováno s 0,2 DMF, 0,3 CH2C12 (nmr) , 0,3 H2O, vypočteno: C (61,13), H (4,39), N (13,07), S (7,13). Změřeno: C (61,08), H (4,35), N (13,14), S (7,22).
Příklad 38(a)
6-[2-(2-methylchinol-6-ylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-(2styryl)-lH-indazol
246
Sloučenina z příkladu 38(a) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(b) kromě toho, že kroky (i) a (ii) byly vynechány: ΧΗ NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,58 (s, 1H) , 8,13 (s, 1H) , 7,80 (m, 3H) , 7,67 (t, 1H) , 7,43 (m,
2H), 7,34-7,16 (m, 9H) , 7,13 (d, 1H) , 7,07 (d, 1H) , 2,60 (s,
3H). LCMS (100% oblast) Rt = 3,87 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 513,1, změřeno 513,2.
Příklad 38(b)
6-[2-((4-piperazin-l-yl-3-trifluormethylfenyl)karbamoyl)fenylsulfanyl] -3-E-(2-styryl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 38 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 38 (a) kromě toho, že
3-trifluormethyl-4-piperazin-l-yl-fenylamin byl použit namísto
6-amino-2- -methylchinolinu : 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,75 (s,
1H), 7,95 (d, 1H), 7,77 (m, 2H), 7,69 (s, 1H), 7,55 (m, 3H) ,
7,40-7,25 (m, 9H) , 7,20 (d, 1H), 3,00, (m, 4H), 2,83 (m, 4H) .
LCMS (100 % oblast) Rt = 3,94 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno
600,2, změřeno 600,2. Analyzováno s 0,1 hexan (nmr), 1,4 H2O, vypočteno: C (63,71), H (5,12), N (11,06), S (5,06). Změřeno:
C (63,67), H (5,06), N (10,98), S (5,00).
»· ··»·
247 • 4 • 444
4« 44 • · · • 4 ···
4« ·· • · · · • 4 <
• 4 ·
4 4
4« 4444
Příklad 39(a)
6-[2-(methylkarbamoyl)fenylamino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Roztok 39 mg (0,07820 mmol) N-methyl-2-[3-((E)-2-pyridin2-ylvinyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6ylamino]benzamidu (syntéza popsaná níže), 21 μΐ (0,3128 mmol) ethylendiaminu a 0,63 ml (0,6256 mmol) 1M TBAF v THF byl míchán v olejové lázni v 90 °C po dobu 2 hodin. Surová reakční směs byla naředěna 50 ml ethylacetátu, extrahována 2 x 20 ml 1M roztoku hydrouhličitanu sodného, 5 x 20 ml solanky, usušena nad sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována na pevnou látku. Pevná látka byla rozpuštěna v THF, koncentrována na olej, pak triturována směsí CH2C12 a Et2O, což způsobilo precipitaci prášku. Prášek byl sbírán filtrací, promyt Et2O a usušen za vysokého vakua. Hmotnost sebrané pevné látky byla 20 mg (70 % výtěžek). XH NMR (DMSO-d6) δ 12,91 (š s, 1H) , 9,86 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 4,0 Hz, 1H) , 8,52 (m, 1H) , 8,08 (d, J = 8,5
Hz, 1H), 7,90 (d, J = 16,4 Hz, 1H) , 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz,
1H) , 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H) , 7,51 (d, J = 16,1 Hz, 1H) ,
7,47-7,34 (m, 2H) , 7,25 (m, 2H) , 7,00 (d, J = 9,6 Hz, 1H) ,
6,89 (t, J = 7,0 Hz, 1H) , 2,79 (d, J = 4,7 Hz, 3H) . Anal.
výpočet pro C^HigNsO · 0,5 CH2C12: C, 65,61, H, 4,89, N, 17,00.
Změřeno: C, 65,52, H, 5,08, N, 16,78.
Výchozí látka byla připravena takto:
• 9
248 (i)
CHa
Roztok 191 mg (0,4 mmol) 6-jod-3-karboxaldehyd-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu (z příkladu 33(a), krok (ii)), 120,1 mg (0,8 mmol) methylantranilátu, 28 mg (0,08 mmol) 2-(dicyklohexylfosfino)bifenylu, 18,4 mg (0,02 mmol) Pd2(dba)3, 212,3 mg (1,0 mmol) K3PO4, rozpuštěný v 1,0 ml suchého DME, byl ve vakuu 3 x probublán argonem, pak míchán v argonové atmosféře po dobu 3 dnů v olejové lázni v 80 °C. Surová směs byla filtrována přes krátký sloupec SiO2 za eluce ethylacetátem, a pak purifikována chromatografii na chromatotronu s kruhovou deskou za eluce směsí 25% CH3CN a CH2CI2. Hmotnost čistých frakcí byla 42 mg. Bylo také sebráno dalších 120 mg produktu, který byl čistý ~90 %. Celkový výtěžek N-methyl-2-[3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-1-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-ylamino]benzamidu bylo 162 mg neboli ~81 %.
Příklad 39(b)
6-[2-(prop-2-ynylkarbamoyl)fenylamino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 39 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 39 (a) kromě toho, že ·· « «to • · • to ···· to <· • to·· • · • · «« ·· • toto • ·«·· •to to to • · · • to ·· «>· ····
249 propargylamin byl použit namísto methylaminu. XH NMR (CDC13) δ 9,50 (s, IH), 8,64 (d, J = 4,5 Hz, IH) , 7,98 (d, J = 8,9 Hz,
IH), 7,90 (d, J = 16,4 Hz, IH) , 7,70 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz,
IH), 7,57 (d, J = 16,3 Hz, IH) , 7,52-7,43 (m, 3H), 7,34 (dt, J = 1,5, 7,2 Hz, IH), 7,26 (m, 3H), 7,34 (ddd, J = 1,0, 4,9, 7,5
Hz, IH), 7,09 (dd, J = 1,7, 9,0 Hz, IH) , 6,85 (dt, J = 1,0,
7,0 Hz, IH), 6,33 (š s, IH) , 4,24 (dd, J = 2,6, 5,3 Hz, 2H) , 2,30 (t, J = 5,5 Hz, IH) . Anal. výpočet pro C24H19N5O · 0,25 CH2C12: C, 70,24, H, 4,74, N, 16,89. Změřeno: C, 70,72, H, 4,96, N, 16,55.
Příklad 40(a)
6- (3-aminobenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 40 (a) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. XH NMR (300 MHz,
DMSO-d6) δ 13,5 (s, IH) , 8,62 (d, IH, J = 3,86 Hz), 8,34 (d,
IH, J = 8,5 Hz), 8,01 (d, IH, J = 16,36 Hz), 7,87 (s, IH) ,
7,83 (td, IH, J = 7,69 Hz, J = 1,81 Hz) , 7,58-7,71 (m, 3H) ,
7,29 (qd, IH, J = 7,39 Hz, J = 0,98 Hz) , 7,21 (t, IH, J =
7,77), 7,00 (t, IH, J = 1,86 Hz), 6,90 (dt, IH, J = 6, 15 Hz, J
= 1,40 Hz), 6,86 (m, IH) , 5,40 (š s, 2H) . MS (ESI+) [M+H]/z
vypočteno 446, změřeno 446. Vypočteno: C, 74,10, H, 4,74, N,
16,46. Změřeno: C, 72,72, H, 4,87, N, 16,02.
Výchozí látka byla připravena takto:
250 (i)
K 8,22 g (60 mmol) m-aminofenylboronové kyseliny v 60 ml dimethylformamidu ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 10 ml (72 mmol) triethylaminu a 0,366 g (3 mmol) 4-(dimethylamino)pyridinu. Výsledný roztok byl zahříván na 50 °C. Bylo přidáno 20,4 g (72 mmol) 4-nitrofenylester-2-trimethylsilanylethylesteru kyseliny uhličité v 5 dávkách po 4 g po dobu 18 hodin. Po 44 hodinách bylo přidáno 3,4 g (12 mmol)
4-nitrofenylester-2-trimethylsilanylethylesteru uhličité kyseliny následováno 1,7 ml (12 mmol) triethylaminu. Po 63 hodinách reakční směs byla koncentrována na olej. Purifikace chromatografií na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a hexanu 3:7 až 7:3 poskytla 8,12 g (48 %) 2-trimethylsilanylethylesteru (3-boronfenyl)karbamové kyseliny: Rf sm 0,067, p 0,33 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7,64 (s, 1H) , 7,49 (d, 1H, J = 8,94 Hz), 7,26 (m, 2H), 4,23 (t, 2H, J = 8,28 Hz), 1,06 (t, 2H, J = 8,21 Hz) 0,72 (s, 9H). MS (ESI) [M+Na]/z vypočteno 304, změřeno 304.
Směs 7,1 g (14,8 mmol) 6-jod-3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu, 8,32 g (29,6 mmol) 2-trimethylsilanylethylesteru (3-boronová kyselinafenyl)karbamové kyseliny, 312 mg (0,44 mmol) dichlorbis• ·
I · · • · · · • ·
251 (trifenylfosfin)palladia(II), 6,13 g (44,4 mmol) uhličitanu draselného a 2,1 ml (14,8) triethylaminu v 60 ml anisolu byla zahřívána na 80 °C v atmosféře oxidu uhelnatého. Po 24 hodinách bylo přidáno dalších 2,1 ml (14,8 mmol) triethylaminu. Po 33 hodinách bylo zjištěno analýzou TLC, že reakce byla ukončena (směs ethylacetátu a hexanu 7:3). Reakční směs byla ochlazena na 23 °C, a pak naředěna 40 ml saturovaného vodného NaHCCb a 300 ml ethylacetátu. Fáze byly odděleny a vodná fáze byla extrahována 2 x 100 ml ethylacetátu. Sloučené ethylacetátové vrstvy byly promyty 100 ml solanky, a usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 7,22 g (79 %) 2-trimethylsilanylethylesteru (3-{1-[3-(2-pyridin-2-ylethyl)1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-yl]methanoyl}fenyl)karbamové kyseliny jako žlutého skla. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,65 (d, ÍH, J = 3,93 Hz), 8,10 (d, 1H, J = 8,54 Hz), 8,04 (s, 1H), 7,94 (d, ÍH, J = 16,33 Hz), 7,82 (s, ÍH), 7,667,77 (m, 3H), 7,61 (d, ÍH, J = 16,35 Hz), 7,40-7,51 (m, 3H) ,
7,19 (m, ÍH), 7,00 (s, ÍH) , 5,77 (s, 2H) , 4,25 (t, 2H, J =
6,93 Hz), 3,60 (t, 2H, J = 8,10 Hz), 1,04 (t, 2H, J = 6,79
Hz), 1,00 (t, 2H, J = 8,13 Hz), 0,04 (s, 9H) , 0,0 (s, 9H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 615, změřeno 615.
Příklad 40(b)
6-(3-amino-4-methylbenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1Hindazol
• ·
252
Sloučenina z příkladu 40 (b) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 40 (a) kromě toho, že v kroku (i) 4-methyl-3-aminofenylboronová kyselina, připravená jak popsáno níže, byla použita namísto m-aminofenylboronové kyseliny. XH NMR (DMSO-de) δ 13,6 (s, 1H) , 8,62 (d, 1H, J = 3,81 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 8,47 Hz), 8,01 (d, 1H, J = 16,36 Hz), 7,85 (s,
1H), 7,82 (dd, 1H, J = 7,60 Hz, J = 1,80 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 7,81 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 16,36 Hz), 7,57 (dd, 1H, J = 8,47 Hz, J = 1,2 Hz), 7,29 (m, 1H), 7,12 (d, 1H, J = 7,82 Hz), 7,09 (d, 1H, J = 1,64 Hz), 6,90 (dd, 1H, J = 7,59 Hz, J = 1,65 Hz),
5,16 (š s, 1H), 2,16 (s, 1H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 355, Anal. výpočet: C, 74,56, H, 5,12, N, 15,81. Změřeno: C, 73,86, H, 5,25, N, 15,34.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Směs 3,34 g (18,45 mmol) 4-methyl-3-nitrofenylboronové kyseliny a 334 mg 10% Pd/C ve 30 ml MeOH byl hydrogenována 101.325 kPa (1 atm) ve 23 °C. Po 22 hodinách byla reakční směs filtrována přes celit a koncentrována za vzniku 2,53 g (91 %) 3-amino-4-methylfenylboronové kyseliny. XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,21 (s, 1H) , 7,08 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 6,92 (d, 1H, J = 7,46 Hz), 4,81 (š s, 2H) , 2,09 (s, 3H) . MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 152, změřeno 152.
Příklad 40(c)
6-(5-amino-2,4-dimethylbenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]lH-indazol • · • · • · · ·· · · · · ·
• · · • · • · • · ·· · ·
Sloučenina z přikladu 40(c) byla připravena podobným způsobem jako v přikladu 40 (a) kromě toho, že v kroku (i) 2,4dimethyl-3-aminofenylboronová kyselina (připravená jak popsáno níže) byla použita namísto m-aminofenylboronové kyseliny: •’ή
NMR (DMSO-d6) δ 8,62 (d, 1H, J = 3,78 Hz), 8,32 (d, 1H, J = 8,48 Hz), 7,99 (d, 1H, J = 16,35 Hz), 7,83 (td, 1H, J = 7,68 Hz, J = 1,8 Hz), 7,80 (s, 1H) , 7,69 (d, 1H, J = 7,80 Hz), 7,64
(dd, 1H, J = 8,47 Hz, J = 1,27 Hz), 7,62 (d, 1H, J - 16,36
Hz), 7,29 (m, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,87 (š s, 2H),
2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H) . LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 369,
změřeno 369. Anal výpočet: C, 74,98, H, 5,47, N, 15,21.
Změřeno: C, 73,85, H, 5,56, N, 14 ,49.
Výchoz! látka byla připravena takto:
(i)
B(OH)a
2,4-dimethylfenylboronová kyselina byla vytvořena podobným způsobem, jako v přikladu 24 (a), krok (vii), kromě toho, že
2,4-dimethylbrombenzen byl použit jako výchoz! látka. NMR (CD3OD) δ 7,13 (d, 1H, J = 7,43 Hz), 7,00 (s, 1H) , 6,97 (d, 1H, J = 7,49 Hz), 2,28 (s, 3H), 2,28 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 151, změřeno 151.
• ·
254 • · · · · · • · · • · · · • · · • · ···· ··· «· ·· ·· • · · * · · • ··· · · · • · · · · · · • · · · · · «· ·· ···· (ϋ)
K 1 ml dýmavé kyselině dusičné ochlazené na -40 °C byl přidán 1 ml TFA. Výsledná směs byla ponechána ohřát se trochu na -35 °C a v jedné dávce bylo přidáno 150 mg (1 mmol)
2,4-dimethylfenylboronové kyseliny. Po 1 hodině byl přidán led a heterogenní směs byla filtrována. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a extrahována 1 ml 3N vodného NaOH, pak 2 ml vody. Vodná fáze byla acidifikována 1 ml 3N vodné HCl a opět extrahována 3 x 5 ml EtOAc. Sloučené organické vrstvy byly promyty solankou, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány za vzniku 93 mg (47 %) 2,4-dimethyl-5-nitrofenylboronové kyseliny. LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 196, změřeno 196.
(iii)
B(OH)a
3-amino-4,6-dimethylfenylboronová kyselina byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 40(b), krok (i). XH NMR (CD3OD) δ 6,83 (s, 2H) , 6,64 (s, 1H) , 2,17 (s, 3H) ,
2,13 (s, 3H).
Příklad 41(a)
6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol ·· ·· » · · ( ► · • · • · · · • · • · ··
K roztoku 323 mg (2,1 mmol, 2,1 ekv.) 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny v 5 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 365 μΐ (2,1 mmol, 2,1 ekv.) diisopropylethylaminu, 798 mg (2,1 mmol, 2,1 ekv.) HATU a katalytické množství DMAP. K výslednému roztoku bylo přidáno 340 mg (1 mmol, 1 ekv.) 6-(3-aminobenzoyl)-3-E-(2-pyridin-2yl)ethenyl)-ΙΗ-indazolu (příklad 40(a)). Reakce pak byla sledována HPLC, dokud nebyl všechen výchozí analin (což poskytlo směs mono a bis Reakční směs byla zastavena
NaHCO3, pak naředěna vodou a extrahována ethylacetátem. Sloučené EtOAc vrstvy byly promyty vodou, solankou, usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány na olej. Olej byl rozpuštěn v 10 ml methanolu, bylo přidáno 290 mg (2,1 mmol, 2,1 ekv.) K2CO3 a výsledná směs byla míchána ve 23 °C, dokud nebyla spotřebována bis-acylovaná sloučenina (~30 minut). Reakční směs byla koncentrována na olej, pak rozdělena Organické fáze byly promyty solankou, filtrovány a koncentrovány. Purifikace silikagelu (1:1-8:2 ethylacetatedichlormethan) poskytla sloučeninu z příkladu 41(a). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,6 (s, IH) , 10,3 (s, IH) , 8,62 (d, IH, J = 3,88 Hz), 8,38 (d, IH, J = 8,51 Hz), 8,20 (s, IH) , 8,12 (td, IH, J = 7,58 Hz, J = 1,78 Hz), 8,02 (d, IH, J = 16,36 Hz),
7,93 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,61 Hz, J = 1,7 Hz), 7,70 (d,
IH, J = 7,78 Hz), 7,65 (d, IH, J = 16,23 Hz), 7,65-7,53 (m,
3H) , 7,30 (m, IH) , 4,43 (q, 2H, J = 7,07 Hz), 2,21 (s, 3H) ,
1,31 (t, 3H, J = 7,07 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 477, spotřebován, ~2 hodiny acylovaných sloučenin). saturovaným mezi vodu a EtOAc usušeny nad Na2SO4, chromatografii na ·· · ·
256 změřeno 477. Anal. výpočet: C, 70,57, H, 5,08, N, 7,64. Změřeno: C, 70,46, H, 5,11, N, 17,61.
Příklad 41(b)
6-[3-(pyridin-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a) kromě toho, že isonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-
2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ
8,74 (d, 2H, J = 6,04 Hz ) , 8,56 (d, 1H, J = 4,14 Hz) , 8,27 (m,
2H) , 8,05 (dt, 1H, J = 7,97 Hz, J = 1,64 Hz) , 8,02 (s, 1H),
7,95 (d, 1H, J = 16,55 Hz), 7,83-7,91 (m, 3H) , 7,73 (m, 2H) ,
7,56-7,67 (m, 3H) , 7,32 (m, 1H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno
446, změřeno 446. Anal. výpočet: C, 72,80, H, 4,30, N, 15,72. Změřeno: C, 71,59, H, 4,43, N, 15,33.
Příklad 41(c)
6-(3-krotonylamidobenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1H-
Sloučenina z příkladu 41 (c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že
4 4444 ·
4· · ·
4 4 4 4 • 4 ·· • 4 4 4 · ·
4 4
4 4 · 4 4 4 4
257 krotonová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,6 (s, 1H), 10,2 (s, 1H) , 8,63 (d, 1H, J = 3,81 Hz), 8,37 (d, 1H, J = 8,49 Hz), 8,12 (s, 1H) , 8,02 (d, 1H, J = 16,34
Hz) , 7,99 (d, 1H, J = 7,88 Hz), 7,83 (td, 1H, J = 7,67 Hz, J =
1,78 Hz) , 7,70 (d, 1H, J = 7,85 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 16,40
Hz) , 7, 63 (dd, 1H, J = 8,43 Hz, J = 1,23 Hz), 7,47-7,56 (m,
2H) , 7,29 (qd, 1H, J = 7,39 Hz, J = 0,99 Hz), 6,82 (m, 1H, J =
6, 9 Hz) , 6 ,11 (dd, J = 15,21 Hz, J = 1,68 Hz), 1,87 (d, 3H, J
- 6,89 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 409, změřeno 409. Anal. výpočet: C, 73,51, H, 4,94, N, 13,72. Změřeno: C, 72,15, H, 4,97, N, 13,39.
Příklad 41(d)
6-[3-(indol-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že 1Hindol-4-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 484, změřeno 484.
Příklad 41(e)
6-[3-((5-acetylthien-2-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
9 999 ·
9 9 9 99
Sloučenina z příkladu 41 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že
5- acetylthiofen-2-karboxylová kyselina byla použita namísto
2-ethyl-5-methyl-2H pyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,6 (s, 1H) , 10,6 (s, 1H) , 8,63 (d, 1H, J =
3,83 Hz), 8,39 (d, 1H, J = 8,51 Hz), 8,20 (s, 1H) , 8,14 (dt,
1H, J = 7,25 Hz, J = 2,05 Hz), 8,07 (d, 1H, J = 4,09 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 16,42 Hz), 8,00 (d, 1H, J = 4,01 Hz), 7,94 (s,
1H), 7,83 (td, 1H, J = 7,69 Hz, J = 1,78 Hz), 7,59 7,65 (m,
5H), 7,30 (qd, 1H, J = 7,40 Hz, J = 0,96 Hz), 2,58 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 493, změřeno 493. Anal. výpočet: C, 68,28, H, 4,09, N, 11,37, S, 6,51. Změřeno: C, 66,07, H, 4,34, N, 10,91, S, 6,14.
Příklad 41 (£)
6- [3-(3,5-difluorfenylacetamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-lH-indazol
(d, 1H, J
Sloučenina z příkladu 41(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že (3,5-difluorfenyl)octová kyselina byla použita namísto 2ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (300
MHz, DMSO-d6) δ 13,6 (š s, 1H) , 10,5 (s, 1H) , 8,62 • ·
I · · · φ φ φ φφφφ
259
4,02 Ηζ), 8,36 (d, 1Η, J = 8,51 Hz), 8,05 (s, 1Η) , 8,01 (d, 1H, J = 16,38 Hz), 7,93 (d, 1H, J = 7,88 Hz), 7,90 (s, 1H) ,
7,83 (td, 1H, J = 7,61 Hz, J = 1,77 Hz), 7,70 (d, 1H, J - 7,85 Hz), 7,64 (d, 1H, J = 16,33 Hz), 7,61 (dd, 1H, J = 8,45 Hz, J = 1,15 Hz), 7,48-7,57 (m, 2H), 7,15-7,31(m, 5H) , 3,77 (s, 2H).
MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 495, změřeno 495.
Příklad 41(g)
6-[3-((5-methyl-lH-pyrazol-3-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a) kromě toho, že 5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny, ΧΗ NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,6 (š s, 1H) , 13,0 (š s, 1H) , 10,3 (š s, 1H) , 8,63 (d, 1H, J = 3,95 Hz), 8,37 (d, 1H, J = 8,66 Hz), 8,36 (s, 1H) , 8,16 (d, 1H, J = 7,55 Hz), 8,02 (d, 1H, J =
16,37 Hz), 7,93 (s, 1H) , 7,83 (dt, 1H, J = 7,61 Hz, J = 1,73 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 7,82 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 16,36 Hz),
7,65 (dd, 1H, J = 8,55 Hz, J = 1,12 Hz), 7,52 (m, 2H) , 7,29 (m, 1H), 6,50 (s, 1H), 2,29 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 449, změřeno 449. Anal. výpočet: C, 69,63, H, 4,49,
N, 18,74. Změřeno: C, 68,53, H, 4,95, N, 17,47.
4 4 ♦ · 4· · 4
4
4 44
4
260
Příklad 41(h)
6-[3-((2-RS-trans-methylcyklopropyl)karboxamido)benzoyl]-3-E[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2-methyl-cyklopropankarboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. Rf srn 0,32,
Rf p 0,42 (směs ethylacetátu a dichlormethanu 8:2) , XH NMR (300
MHz, DMSC >-d6) δ 13,6 (s, 1H) , 10,4 (s, 1H) , 8,62 (dd, 1H, J =
4,75 Hz, J = 0,96 Hz), 8,36 (d, 1H, J = 8,47 Hz), 8,06 (t, 1H,
J = 1,67 Hz), 8,01 (d, 1H, J = 16,37 Hz), 7,90 (m, 2H) , 7,83
(td, 1H, J = 7,68 Hz, J = 1,79 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 7,84 Hz) ,
7,64 (d, 1H, J = 16,35 Hz), 7,61 (dd, 1H, J = 8,47 Hz, J =
1,32 Hz), 7,51 (t, 1H, J = 7,69 Hz), 7,45 (dt, 1H, J = 7,68
Hz, J = 1,50 Hz), 7,29 (dq, 1H, J = 7,41 Hz, J = 1,04 Hz) ,
1,51 (m, 1H), 1,23 (m, 1H), 1,09 (d, 3H, J = 5, 93), 1,01 (m,
1H) , 0,65 (m, 1H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 423, změřeno 423. Anal. výpočet: C, 73,92, H, 5,25, N, 13,26. Změřeno: C, 71,41, H, 5,56, N, 13,27.
Příklad 41(i)
6-[3-((1,5-dimethyl-lH-pyrazol-3-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
• fc ·· fc · · fcfc fcfc· ♦ • fc • fcfcfc • fcfc fc ·· ·
261
Sloučenina z příkladu 41 (i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a) kromě toho, že 1,5-dimethyl-lH-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,6 (s, 1H) , 10,2 (s, 1H) , 8,63 (d,
1H, J = 3,87 Hz), 8,37 (d, 1H, 3 = 8,49 Hz), 8,34 (d, 1H, J = 1,63 Hz), 8,16 (td, 1H, J = 7,43 Hz, J = 1,96 Hz), 8,02 (d,
1H, J = 16,35 Hz), 7,92 (s, 1H), 7,83 (dt, 1H, J = 7,68 Hz, J = 1,79 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 7,84 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 16,35 Hz), 7,65 (dd, 1H, J = 8,52 Hz, J = 1,2 Hz), 7,52 (m, 2H) ,
7,29 (m, 1H) , 6,55 (s, 1H) , 3,83 (s, 3H) , 2,30 (s, 3H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 463, změřeno 463. Anal. výpočet: C, 70,12, H, 4,79, N, 18,17. Změřeno: C, 69, 59, H, 4,88, N,
17:86.
Příklad 41(j)
6-[3-((3-methylpyridin-4-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a) kromě toho, že 3-methylisonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. ΤΗ NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,6 (s, 1H), 10,7 (s, 1H) , 8,62 (dd, 1H, J = 4,72
Hz, J = 0,86 Hz), 8,57 (s, 1H) , 8,55 (d, 1H, J = 4,91 Hz),
8,37 (d, 1H, J = 8,46 Hz), 8,20 (s, 1H) , 8,07 (dt, 1H, J = 7,27 Hz, J = 1,99 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 16,37 Hz), 7,93 (s,
1H), 7,83 (td, 1H, J = 7,69 Hz, J = 1,79 Hz), 7,70 (d, 1H, J =
7,84 Hz), 7,64 (d, 1H, J = 16,27 Hz), 7,55-7,65 (m, 3H), 7,48
4444
4 4 4 44
262 (d, 1H, J = 4,99 Hz), 7,30 (qd, 1H, J = 7,39 Hz, 3 = 1,02 Hz),
2,38 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 460, změřeno 460.
Příklad 41 (k)
6-[3-(cyklopropylkarboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(k) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že cyklopropankarboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. 1H NMR (CDCls/MeOD) δ 8,52 (d,
1H, J = 3,9 Hz), 8,09 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,93 (s, 1H) , 7,857,80 (m, 3H), 7,71-7,63 (m, 2H), 7,55-7,48 (m, 3H), 7,39 (1H, t, J = 7,8 Hz), 7,16 (1H, qd, J = 6,3,1,5 Hz), 1,62-1,57 (m, 1H), 1,25-1,84 (m, 2H), 0,87-0,81 (m, 2H) . HRMS (MALDI) C25H20N4O2 [M+H]+/z vypočteno 409, 1659, změřeno 409, 1660.
Příklad 41(1)
6-[3- ((2-RS-trans-fenylcyklopropyl)karboxamido)benzoyl]-3-E[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu způsobem, jako v příkladu fenylcyklopropankarboxylová (1) byla připravena podobným
41(a) kromě toho, že (lS,2S)-2kyselina byla použita namísto 299 99 · · « · ·
9 9 ·«·♦ • i · ♦* * 9
9 9
4 ··« • ··«··* • · · * 9 9 ···« ··· ·<^ ··
263 ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové (CDCl3/MeOD) δ 8,60 (d, IH, J = 4,2 Hz), kyseliny. XH 8,17 (d, IH, J
NMR
8,4
Hz) , 8,02 (s, IH) , 7,91 (t, 3H, J = 8,1 Hz), 7,78-7,71 (m,
2H) , 7,63- -7,56 (m, 3H), 7 ,47 (t, IH), 7,32-7,12 (m, 5H), 2,60-
2,54 (m, IH) , 1,94 -1,90 (m, 1H) , 1,69 (q, IH, J = 4,8 Hz),
1,37- -1, 32 (m, IH) . HRMS C31H24N4O2 vypočteno (M+H+)/z 485,1993,
změřeno 485,1995.
Příklad 41 (xn)
6-[3-((3-methylisoxazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(m) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 3-methylisoxazol-5-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (DMSO-d6) δ 10,95 (IH, s), 8,68 (IH, d, J 4,2 Hz), 8,44 (d, IH, J = 8,7 Hz), 8,35 (s, IH), 8,21-8,18 (m, IH) , 8,08 (d, IH, J = 16,2 Hz), 7,98 (s, IH), 7,87 (td, IH, J = 7,5, 1,8 Hz), 7,767,64 (m, 6H), 7,37-7,33 (m, IH) , 6,72 (s, IH) 3,36 (s, 3H) . HRMS (MALDI) C26H19N5O3 [M+H+]/z: vypočteno 450,1561, změřeno 450,1570.
Příklad 41(n)
6-[3-((3-t-butyl-l-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol • · · • · · • · · · · · • · · · · · • · * · • · · · · • · · · • · · • · · · · · ·
264
Sloučenina z příkladu 41(n) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 5-terc-butyl-2methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. ΧΗ NMR (CDCl3/MeOD) δ 8,59 (d, IH, J = 4,8 Hz), 8,14 (d, IH, J = 8,4
Hz), 8,08-8,04 (m, IH,), 7,98-7,92 (m, 3H) , 7,75 (td, IH, J =
7,8, 1,8 Hz), 7,68 (dd, IH, J = 8,4 Hz), 7,61-7,56 (m, 3H) , 7,52 (t, IH, J = 8,70 Hz), 7,25-7,21 (m, IH,), 6,75 (s, IH, ) ,
4,12 (s, 3H) , 1,30 (s, 9H) . HRMS (MALDI) C3oH28N602 [M+H+]/z: vypočteno 505,2347, změřeno 505,2353.
Příklad 41(o)
6-[3-((5-chlorthien-2-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-
2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Λ
O
Sloučenina z příkladu 41(o) byla připravena podobným
způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 5-chlor-
thiofen-2-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-
methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. NMR (DMSO-d6) δ
10,58 (s, IH), 8,68 (d, IH, J = 4,2 Hz), 8,43 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,22 (s, IH,), 8,15 (dt, IH, J = 7,5, 2,0 Hz), 8,08 (d, IH, J = 16,4 Hz), 8,00-7,98 (m, 3H) , 7,88 (td, IH, J = 7,7, 1,9 Hz), 7,78-7,62 (m, 4H, ) , 7,33 (d, 2H, J = 4,1 Hz). HRMS
265 (MALDI) C26H17N4O2CIS [M+H+]/z: vypočteno 485,0843, změřeno 485,0853.
Příklad 41 (p)
6-[3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E[2-(pyridin 2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (p) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2,5-dimethyl2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 3,90 minut (100% oblast). XH NMR (CDC13) δ 8,52 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 8,10 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,98 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,93 (s, 1H,), 7,88-7,80 (m, 3H), 7,71-7,62 (m, 2H), 7,56-7,49 (m,
4H), 7,44 (t, 1H, J - 7,8 Hz), 7,16 (dd, 1H, J = 7,1, 4,8 Hz). HRMS (MALDI) C27H22N6O2. [M+H+]/z: vypočteno 463, 1877, změřeno
465,1889.
Příklad 41 (q)
6-[3-((2-chlor-6-methylpyridin-4-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E[2- (pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Cl
Λ o • · « · · · •··· ···
266
Sloučenina z příkladu 41 (q) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2-chlor-6methylisonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,11 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO-dg) δ 10,77 (s, 1H) , 8,68 (d, 1H, J = 3,9 Hz), 8,44 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,28 (s, 1H) , 8,21 (dt, 1H, J = 6,9, 2,1 Hz), 8,08 (d, 1H, J = 16,2 Hz), 7,98 (s, 1H) , 7,92-7,64 (m, 9H) , 7,35 (dd, 1H, J = 6,6, 4,8 Hz), 2,61 (s,
Příklad 41(x)
6-[3-((l-n-propyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(r) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 5-methyl-2propyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 1H NMR
(t, 3H, 7,5 Hz). HRMS (MALDI) C28H2oC1N502 . [M+H+]/z: vypočteno
491,2190, změřeno 491,2203.
• · · · • · • · · · • ♦ ·· ·· • · · · • · * • · · • · · • » · · · ·
267
Příklad 41(s)
6-[3-(4-t-butylbenzamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(s) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 4-tercbutylbenzoová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,67 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO) δ 10,45 (s, 1H) , 8,44 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,32 (s, 1H), 8,22 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 8,07 (d, 1H, J = 16,5 Hz), 7,99-7,95 (m, 3H), 7,88 (td, 1H, J = 7,7, 1,5 Hz),
7,69-7,59 (m, 7H), 7,38 (dd, 1H, 13,5, 5,1 Hz), 1,36 (s, 9H).
Příklad 41(t)
6-[3-((l-allyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (t) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 2-allyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,11 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO) δ 10,46 (s, 1H) , 8,74 (t, 1H, J = 5,1 Hz), 8,48 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,28 (s, 1H) ,
268
8,22 (t, IH, J = 5,4, 2,1 Hz), 8,15-8,01 (m, 3H) , 7,39 (td, IH, J = 7,8, 1,8 Hz), 7,82-7,63 (m, 6H) , 7,39 (td, IH, J = 7,7, 1,5 Hz), 6,14-6,02 (m, IH) , 5,22-5,03 (m, 4H) , 2,38 (s,
3H) . HRMS (MALDI) C29H24N6O2 (M+H+)/z: vypočteno 489,2034, změřeno 489,2035.
Příklad 41 (u)
6-[3-((2-chlor-6-methoxypyridin-4-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
o<
h 1 H H Γ fl*
VA,
O
IssřN
Sloučenina z příkladu 41(u) byla připravena podobným
způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 2-chlor-6-
methoxyisonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-
methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt = 4,37 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO-d6) δ 10,74 (s, IH), 8,68 (d, IH, J = 3,6 Hz), 8,44 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,28 (s, IH), 8,20 (td, IH, J = 6,6, 2,4 Hz), 8,07 (d, IH, J = 16,2 Hz), 7,98 (s, IH), 7,89 (td, IH, J = 7,7, 1,8 Hz), 7,77-7,62 (m, 6H) , 7,38 (s, IH), 7,35 (dd, IH, J = 6,9, 1,8 Hz), 3,98 (s, 3H).
Příklad 41(v)
6—[3—((3-ethyl-l-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido]benzoyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol « *
• · · · • · · • · · • · · • · ·
Sloučenina z příkladu 41(v) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 5-ethyl-2methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto
2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3~karboxylové kyseliny. Rt 4,16 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO-dg) δ 10,44 (s, ÍH), 8,73 (d, ÍH, J = 3,0 Hz), 8,78 (d, ÍH, 8,7 Hz), 8,30 (s, ÍH), 8,23 (d,
ÍH, J = 6,9 Hz), 8,14-8,03 (m, 2H) , 7,93 (t, ÍH, 6,9 Hz),
7,82-7,63 (m, 6H) , 7,40 (t, ÍH, J = 6,3 Hz), 7,01 (s, ÍH) ,
4,12 (s, ÍH), 2,68 (q, 2H, 7,8 Hz), 1,30 (t, 3H, J = 7,5 Hz). HRMS (MALDI) C28H24N6O2 [M+H]+/z: vypočteno 477,2034, změřeno
477,2054.
Příklad 41 (w)
6-[3-((2-chlorpyridin-4-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-IH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(w) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2-chlorisonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt = 3,99 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO-d6) δ 10,88 (s, ÍH) , 7,33 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 8,49 (d, ÍH, J = 8,4 Hz), 8,33 (s, 1H) , 8,26 (td, ÍH, J = »· *· ·· *· ··· ·
270
6,9, 3,0 Hz), 8,12-7,91 (m, 5H) , 7,82-7,63 (m, 5H) , 7,40 (t,
1H, J = 4,8 Hz).
Příklad 41(x)
6-[3-((l-isopropyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(x) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 2-isopropyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,19 minut (100% oblast). τΗ NMR (DMSO) δ 10,46 (s, 1H), 8,72 (t, 1H, J = 4,80 Hz), 8,48 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 8,31 (s, 1H) ,
8,21 (td, 1H, J = 9,6, 2,1 Hz), 8,15-7,98 (m, 2H), 7,96-7,84 (m, 1H), 7,82-7, 65 (m, 5H) , 7,42-7,38 (m, 1H) , 6,88 (s, 1H) ,
5,64-5, 38 (m, 1H) , 2,32 (s, 3H) , 1,48 (d, 1H, J = 6,6 Hz).
HRMS (MALDI) Ο29Η25Ν6Ο2 [M+H]+/z, vypočteno 491,2190, změřeno 491,2194 .
Příklad 41(y)
6-[3-(isopropoxykarbonylamino)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
O
···· ···
271
Sloučenina z příkladu 41(y) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že isopropylchloroformiát byl použit namísto 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. 1H NMR (DMSO-d6) δ 9,97 (s, 1H), 8,72 (t, 2H, J = 4,8 Hz), 8,47 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 8,347,96 (m, 3H), 8,01-7,87 (m, 2H), 7,82-7,69 (m, 2H), 7,52 (dt, 1H, J = 7,5, 1,2 Hz), 7,42-7,36 (m, 2H) , 3,68 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 2,02 (m, 1H), 1,02 (d, 6H, J = 6,6 Hz). HRMS (MALDI)
C26H24N4O3 [M+H]+/z: vypočteno 441, 1921, změřeno 441,1937.
Příklad 41(z)
6-[3-((4-chlorpyridin-2-yl)karboxamido)benzoyl)-3-E-[2(pyridin 2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (z) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 4-chlorpyridin2-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt = 4,40 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO-d6) δ 10,99 (s, 1H) , 8,72 (d, 1H, J = 5,4
Hz), 8,63 (d, 1H, J = 3,9 Hz), 8,44 (s, 1H), 8,38 (d, 1H, J =
8,4 Hz), 8,25 (dt, 1H, J = 6,6, 2,4 Hz), 8,16 (d, 1H, J = 1,8
Hz), 8,02 (d, 1H, J = 16,2 Hz), 7,94 (s, 1H) , 7,86-7,80 (m, 2H), 7,72-7,58 (m, 5H), 7,29 (dd, 1H, J = 6,9, 6,0 Hz).
Příklad 41(aa)
6-[3-(pyridin-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol » · * · * • 4
4·· • · • · • ···
272
Sloučenina z příkladu 41(aa) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že pyridin-2-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. ΧΗ NMR (300 MHz, DMFd6) δ 10,9 (s, IH) , 8,74 (m, IH) , 8,63 (dd, IH, J = 4,78 Hz,
0,94 Hz), 8,46 (s, IH), 8,38 (d, IH, J = 8,48 Hz), 8,25 (dt,
IH, J = 7,17 Hz, J = 2,05 Hz), 8,16 (dt, IH, J = 7,73 Hz, J = 1,04 Hz), 8,07 (td, IH, J = 7,56 Hz, J = 1,67 Hz), 8,02 (d,
IH, J = 16,28 Hz), 7,95 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,65 Hz, J = 1,81 Hz), 7,22-7,66 (m, 4H), 7,30 (qd, IH, J = 7,40 Hz, J = 1,02 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 446, změřeno 446.
Příklad 41(bb)
6-[3-(3-methoxybenzamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(bb) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 3-methoxybenzoová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (DMSO-d6) δ 10,50 (s,
IH) , 8,67 (d, IH, J = 3, 9 Hz) , 8,46 (d, IH, J = 8,7 Hz) , 8,33
(s, IH) , 8,22 (dt, IH, J = 7,8, 1,8), 8,08 (d, IH, J = 15,0
Hz) , 8,00 (s, IH,) , 7,78-7,54 (m, 8H), 7,51 (t, IH, 7,8 Hz) ,
7,38 -7,33 (m, IH), 7,23 (dd, IH, J = 7,5, 1,5 Hz), 3,90 (s,
· • 000 • · • 0 · » • 0
0·0·
0 <
0 <
273
3H) . HRMS (MALDI) C29H22N4O3. [M+H]+/z: vypočteno 475,1765, změřeno 475,1763.
Příklad 41(cc)
6-[3-(fenoxyamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1Hindazol
Sloučenina z příkladu 41(cc) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a) kromě toho, že fenylchloroformiát byl použit namísto 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. Tt 212-217 °C, ΤΗ NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,63 (s, 1H) , 10,51 (s, 1H) , 8,62 (d, 1H, J = 4,3
Hz), 8,36 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 8,04-7,81 (m, 5H) , 7,71-7,40 (m, 7H), 7,31-7,22 (m, 4H). ESIMS m/z 461 [M+H]+. Anal. vypočteno pro C28H20N4O3 · 0,3 H2O 465,9 g mol-1): C, 72,18, H,
4,46, N, 11,33. Změřeno: C, 72,41, H, 4,63, N, 1157.
Příklad 41(dd)
6-[3-(3,3-dimethylakrylamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(dd) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že 3,3-dimethylakrylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5274 methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,6 (s, 1H) , 10,2 (s, 1H) , 8,63 (d, 1H, J = 3,81
Hz), 8,37 (d, 1H, J = 8,49 Hz), 8,12 (s, 1H) , 8,02 (d, 1H, J = 16,34 Hz), 7,99 (d, 1H, J = 7,88 Hz), 7,83 (td, 1H, J = 7,67 Hz, J = 1,78 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 7,85 Hz), 7,63 (dd, 1H, J = 8,43 Hz, J = 1,23 Hz), 7,47-7,56 (m, 2H) , 7,29 (qd, 1H, J =
7,39 Hz, J = 0,99 Hz), 6,82 (m, 1H, J = 6,9 Hz), 5,85 (s, 1H), 2,12 (s, 3H) , 1,85 (s, 3H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 409, změřeno 409. Anal. vypočteno pro C26H22N4O2 0,33 TBME: C,
73,54, H, 5,80, N, 12,41. Změřeno: C, 73,26, H, 5,76, N, 12,36.
Příklad 41(ee)
6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4methylbenzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(ee) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 40(b) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 40 (a). XH NMR (DMSO-d6) δ 13,6 (s, 1H) , 9,94 (s, 1H) , 8,62 (d,
1H, J = 3,8 Hz), 8,36 (d, 1H, J = 8,51 Hz), 8,01 (d, 1H, J =
16,36 Hz), 7,91 (s, 1H) , 7,84 (dd, 1H, J = 7,66 Hz, J = 1,74
Hz), 7,81 (s, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,64 (d, 1H, J =
16,45 Hz), 7,62 (m, 2H) , 7,50 (d, 1H, J = 7,83 Hz), 7,29 (m,
1H) , 6,82 (s, 1H), 4,42 (q, 2H, J = 7,06 Hz), 2,36 (s, 3H) , 2,21 (s, 3H) , 1,30 (t, 3H, J = 7,09 Hz). MS (ESI + ) [M+H]/z vypočteno 491, změřeno 491. Anal. výpočet: C, 71,00, H, 5,34, N, 17,13. Změřeno: C, 70,80, H, 5,38, N, 17,00.
275
Příklad 41(ff)
6-[3-((l-allyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4methylbenzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(ff) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(ee) kromě toho, že 2-allyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,6 (s, 1H) , 9,98 (s, 1H) , 8,62 (d, 1H, J = 4,60 Hz), 8,36 (d, 1H, J = 8,46 Hz), 8,01 (d, 1H,
J = 16,37 Hz), 7,91 (s, 1H) , 7,83 (td, 1H, J = 7,69 Hz, J =
1,77 Hz), 7,78 (d, 1H, J = 1,73), 7,70 (d, 1H, J = 7,78 Hz),
7,59-7,70 (m, 3H) , 7,50 (d, 1H, J = 8,01 Hz), 7,29 (qd, 1H, J = 7,46 Hz, J = 1,02 Hz), 6,86 (s, 1H), 5,95 (m, 1H), 4,93-5,10 (m, 4H) , 2,34 (s, 3H) , 2,22 (s, 3H) . LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 503, změřeno 503. Anal. výpočet: C, 71,70, H, 5,21, N, 16,72. Změřeno: C, 70,98, H, 5,42, N, 15,94.
Příklad 41(gg)
6-(3-acetamido-4-methylbenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]lH-indazol
99·9
9
99
276
Sloučenina z příkladu 41 (gg) byla připravena podobným, způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (ee) kromě toho, že acetylchlorid byl použit namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol3-karboxylové kyseliny. XH NMR (CD3OD) δ 8,57 (d, 1H, J = 4,90 Hz), 8,13 (d, 1H, J = 8,49 Hz), 7,99 (s, 1H) , 7,95 (d, 1H, J =
16,53 Hz) , 7,89 (d, 1H, J = 1,46 Hz), 7,86 (td, 1H, J = 7,64
Hz, J = 1,73 Hz), 7,73 (d, 1H, J = 7,05 Hz), 7,62-7,69 (m,
2H), 7,65 (d, 1H, J = 16,48 Hz), 7,44 • (d, 1H, J = 7,97 Hz) ,
7,32 (qd, 1H, J = 7,44 Hz, J = 1,03 Hz) , 2,38 (s, 3H) , 2,18
(s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 397, změřeno 397. Anal.
výpočet: C, 72,71, H, 5,08, N, 14,13. Změřeno: C, 72,29, H, 5,09, N, 13,98.
Příklad 41(hh)
6-[3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4-methylbenzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(hh) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (ee) kromě toho, že 2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt = 3,92 minut (100% oblast). 1H NMR (DMSO) δ 10,02 (s, 1H), 8,74 (d, 1H, J = 3,6 Hz), 8,49 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,13 (d, 1H, J = 16,3 Hz), 8,03 (s, 1H) , 7,96-7,93 (m, 2H) , 7,847,72 (m, 4H), 7,63 (d, 1H, 8,1 Hz), 7,42 (dd, 1H, J = 6,8, 1,5
Hz), 6,95 (s, 1H), 4,11 (s, 1H), 2,48 (s, 1H) , 2,32 (s, 1H).
♦ Φ φφφφ φ φ φφφφ • Φ
Φ Φ·* • Φ
Φ • Φ Φ
Φ · Φ
Φ· ΦΦΦ·
ΦΦ
277
Příklad 41(ii) β-[3-((l-n-propyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4methylbenzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(ii) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(ee) kromě toho, že 5-methyl-2-propyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,16 minut (100% oblast). XH NMR (DMSO-dg) δ
10,29 (s, 1H), 8,58 (d, 1H, 3,9 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 8,4 Hz) ,
8,13 (s, 1H), 8,10 (dt, 1H, J = 5,4, 2,1 Hz), 7,96 (d, 1H, J =
16,5 Hz) , 7,87 (s, 1H), 7,78 (td, 1H, J = 7, 5, 1,5 Hz) , 7 ,61-
7,49 (m, 6H), 7,24 (dd, 1H, J = 6,9, 1,8 Hz), 4,32 (t, 2H, J =
6, 90 Hz) , 2,58 (s, 3H) , 2,22 (s, 3H), 1,69 (q, 2H, J = 7,2
Hz) , 0,77 (t, 3H, 7,5 Hz) . HRMS (MALDI) CsoHsgNgOs [M+H] 7z:
vypočteno 505,2347, změřeno 505,2343.
Příklad 41(jj)
6-[3-((3-ethyl-l-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4-methylbenzoyl]-3-E-[2-.(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
O • 9
9999 • 9 • 9 99 ♦ ♦ · • · • 999 ·*· • · 9 · • · 9 ·
9* 99
9 · ·
·
9
9·
278
Sloučenina z příkladu 41(jj) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (ee) kromě toho, že 5-ethyl-2-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (DMSO-d6) δ 10,78 (s, 1H) , 9,43 (d, 1H, J = 3,0 Hz), 9,15 (t, 1H, J = 9,6 Hz), 8,82 (dd, 1H, J = 16,4, 1,5 Hz), 8,72-8,61 (m, 2H) , 8,52-8,30 (m, 4H) , 8,10 (dd, 1H, J = 6,9, 5,7), 7,93-7,89 (m, 1H), 7,72-7,69 (m, 1H), 4,85 (s, 3H),
3,39 (q, 2H, J = 7,8 Hz), 3,17 (s, 3H) , 2,10 (t, 3H, J = 7,5 Hz). HRMS (MALDI) C29H26N6O2 (M+H+) m/z: vypočteno 491,2190, změřeno 491,2211.
Příklad 41(kk)
6-[3-((l-isopropyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4methylbenzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(kk) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(ee) kromě toho, že 2-isopropyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové
kyseliny. HPLC : Rt 4,11 minut (100% oblast) . XH NMR (DMSO-d6) δ
9,99 (s, 1H), 8, 68 (d, 1H, J = 3,6 Hz), 8,42 (d, 1H, J = 8,7
Hz), 8,07 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,98 (s, 1H) , 7,67-7,86 (m,
2H), 7,77-7,65 (m, 4H) , 7,56 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,37-7,33
(m, 1H) , 6,82 (s, 2H) , 5, 44-5,36 (m, 1H) , 2,42 (s, 3H) , 2,28
(s, 3H) , 1,42 (d, 6H, J — 6,6 Hz) . Anal. (C30H28N6O2 ' 0,2H20)
vypočteno: C, 5,63 , N, 16,54, změřeno C, 70,57, H, 5,70, N,
16,35.
4« 4444
4 4
4 44
4 • 4 44
4 4 4 44 4 4
4
44 ·
4
4
4 4
279
Příklad 41(11) β-[2,4-dimethyl-5-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido) benzoyl] -3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(11) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 40(c) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 40 (a). XH NMR (DMSO-d6) δ 13,6 (s, 1H) , 9,82 (s, 1H) , 8,63 (d, 1H, J = 3,84 Hz), 8,35 (d, 1H, J = 8,54 Hz), 8,00 (d, 1H, J = 16,37 Hz), 7,83 (s, 1H), 7,83 (td, 1H, J = 7,65 Hz, J = 1,82
Hz), 7,69 (d, 1H, J = 7,89 Hz), 7,65 (dd, 1H, J = 8,52 Hz, J =
1,36 Hz), 7,62 (d, 1H, J = 16,34 Hz), 7,35 (s, 1H) , 7,32 (s, í, J = 7,42 Hz, J = 1,09 Hz), 6,78 (s, 1H) ,
4,39 (q, 2H, J = 7,15 Hz), 2,30 (s, 3H) , 2,25 (s, 3H) , 2,19 )s, 3H) , 1,27 (t, 3H, J = 7,15 Hz). LCMS (ESI+) [M+H]/z
Hz) , 7, 69 (d, 1
1,36 Hz) , 7,62
1H) , 7,29 (qd,
4,39 (q. 2H, J
(s, 3H) , 1,27
vypočteno 505,
Příklad 41(mm)
6- [2, 4-dimethyl-
benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(mm) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(11) kromě toho, že
2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita • 4 • ♦ · « ·· ···· • ♦
280 ·« ·» » · * » · 4 ·· ·· namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,6 (s, 1H) , 9,81 (s, 1H) , 8,62 (d, 1H, J =
3,81 Hz), 8,35 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 8,00 (d, 1H, J = 16,36
Hz), 7,83 (dt, 1H, J = 7,65 Hz, J = 1,8 Hz), 7,8 (s, 1H) , 7,69 (d, 1H, J = 7,88 Hz), 7,65 (dd, 1H, J = 8,53 Hz, J = 1,36 Hz), 7,62 (d, 1H, J = 16,35 Hz), 7,36 (s, 1H) , 7,32 (s, 1H) , 7,29 (qd, 1H, J = 7,41 Hz, J = 1,03 Hz), 6,79 (s, 1H) , 3,96 (s, 3H) , 2,30 (s, 3H) , 2,25 (s, 3H) , 2,18 (s, 3H) . LCMS (ESI + ) [M+H]/z vypočteno 491, změřeno 491. Anal. výpočet: C, 71,00, H, 5,34, N, 17,13. Změřeno: C, 70,69, H, 5,57, N, 16,26.
Příklad 41(nn)
6-(5-acetamido-2,4-dimethylbenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 41(nn) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(11) kromě toho, že acetylchlorid byl použit namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol3-karboxylové kyseliny. XH NMR (DMSO-de) δ 13,6 (š s, 1H) , 9,34 (s, 1H) , 8,62 (d, 1H, J = 4,15 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,86 (d, 1H, J = 16,36 Hz), 7,83 (td, 1H, J = 7,71 Hz, J = 1,82 Hz), 7,81 (s, 1H) , 7,69 (d, 1H, J = 7,84 Hz), 7,64 (dd,
1H, J = 1,38 Hz), 7,62 (d, 1H, J = 16,46 Hz), 7,48 (s,H), 7,29 (qd, 1H, J = 7,44 Hz, J = 1,02 Hz), 7,24 (s, 1H) , 2,27 (s,
3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno
411, změřeno 411.
•4 «444
4 4
4 44 ♦ « 4 «
444 4 *44
4*
4 4
4 4 44
4 4 · · 4 4 • 4 4· ·4 * · · • 4 4
4 4
4 4
4444
281
Příklady 41(oo)-41(111) mohou být připraveny podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a).
Příklad 41(oo)
Příklad 41 (pp)
J • fc fcfcfc* fcfc fcfc fcfc ·* • fcfc fcfcfc fcfcfc· fc ··« · fc fcfcfc · · * • fcfcfc fcfc fcfcfc · · • ······*· • fcfcfc fc·· fcfc fc· ·· ··*·
282
Příklad 41(ss)
Příklad 41(tt)
Příklad 41(uu)
O • 4 44 · 4 4
4 4
4 4
4444
4··· ♦ »4 • 444 • 4 • ·
283
Příklad 41(ww)
Příklad 41(zz)
4* ·*
4 444
4 4 4
4·
284
Příklad 41(aaa}
Příklad 41(bbb)
Příklad 41(ccc)
Příklad 41(ddd)
• ·
O • *
285
Příklad 41(eee)
Příklad 41(fff)
Příklad 41(ggg)
Příklad 41(hhh)
O
286
Příklad 41(iii)
Příklad 41(jjj)
Příklad 41(111)
O
4· 44··
287
Příklad 42(a) β-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
0,58 g (80,6%) sloučeniny z příkladu 42(a) bylo připraveno z 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-ΙΗ-indazolu podobným způsobem, jako v příkladu 12. HPLC 4,13 minut (98% oblast). 1H NMR(CDC13) δ 8,66 (d, ÍH, J = 4,1 Hz), 8,24 (d, ÍH, J = 8,5 Hz), 8,11-8,10 (m, 3H), 8,01-7,98 (m, 4H) , 7,83 (t, 2H, J = 7,1 Hz), 7,727,53 (m, 7H), 7,30 (qd, ÍH, J = 52, 1,1 Hz). HRMS (MALDI) C28H20N4O2. [M+H+]/z: vypočteno 445,1664, změřeno 445,1659. Anal.
(C26H19N5O2 · 0,2EtOAc): C, 75,87, H, 4,78, N, 12,39.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
K míchanému roztoku 4,00 g (8,40 mmol) 6-jod-3( (E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu z příkladu 14, krok (i), v 48 ml anisolu v argonové atmosféře bylo 176 mg (0,25 mmol)přidáno bis(trifenylfosfin)palladiumdichloridu, 288 mg (1,0 mmol) TBACI, 1,54 ml (16,8 mmol) 2-butanolu a 3,48 g (25,2 mmol) uhličitanu draselného. Výsledná směs byla míchána v atmosféře oxidu uhelnatého v 80 °C po dobu 100 hodin. Po odstranění rozpouštědla
I « · · * · ·
288 koncentrací ve vakuu byl získaný zbytek naředěn 400 ml EtOAc a extrahován 2 x 150 ml saturovaného NaCl, 2 x 50 ml saturovaného NaHCO3 a 2 x 50 ml vody, pak byla organická vrstva filtrována přes 20 ml silikagelu. Organický filtrát pak byl koncentrován ve vakuu za vzniku jantarového oleje. Purifikace velmi rychlou chromatografií se směsí hexanu a EtOAc (7:3) poskytla po koncentraci 2,38 g (61 % výtěžek) 6-(3-aminobenzoyl)-3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-1Hindazolu jako jantarového oleje. 1H NMR (CDC13) δ 8,84 (dd, 1H, J = 8,70, 0,90 Hz), 8,02 (s, 1H), 7,77 (dd, 1H, J = 8,40, 1,50 Hz), 7,62-7,59 (m, 2H), 7,40 (t, 2H, J = 7,20 Hz), 7,38-7,24 (m, 4H), 7,22-7,19 (m, 3H) , 6,98 (dq, 1H, J = 8,30, 0,90 Hz), 3,83 (š s, 2H, ) , 3,61 (t, 2H, J = 8,10 Hz), 0,91 (t, 2H, J =
7,20 Hz), -0,17 (s, 9H).
(ii)
K míchanému roztoku 3,22 g (6,87 mmol) 6-(3-aminobenzoyl)3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu v 10 ml methylenchloridu v argonové atmosféře bylo přidáno 0,95 ml (8,37 mmol) benzoylchloridu a 0,67 ml (3,22 mmol) pyridinu. Po 2 hodinách byl roztok naředěn 100 ml EtOAc a promyt 1 x 50 ml saturovaného NaCl, 2 x 50 ml kyseliny citrónové (IM, pH 2,5) a 2 x 50 ml směsi NaHCO3 a vody (50:50). Organická vrstva byla usušena nad Na2SO4 a filtrována přes 20 ml silikagelu. Organická vrstva byla koncentrována ve vakuu, za vzniku produktu jako žluté pevné látky. Purifikace s použitím velmi rychlé chromatografíe na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (7:3) poskytla 3,22 g (85,1% výtěžek)
289
6-(3-benzamidobenzoyl)-3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazolu jako žluté pěny. XH NMR (CDC13) δ 8,19 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 8,16 (s, 1H, ) , 8,11-8,10 (m, 2H) ,
8,03-7,93 (m, 3H) , 7,82 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,70-7,67 (m, 3H) , 7,64-7,54 (m, 5H) , 7,48 (t, 2H, J = 14,1 Hz) 7,39 (1H, d, J = 7,2 Hz).
Míchaný roztok 2,35 g (4,07 mmol) 6-(3-benzamidobenzoyl)3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu v 45,6 ml methylenchloridu byl ochlazen na -45 °C s použitím lázně se směsí acetonitrilu a pevného oxidu uhličitého. Roztokem pak byl probubláván ozón rychlostí 1,5 1/m, 60 A po dobu 15 minut. Reakční směs byla zastavena přidáním 2,5 ml sirovodíku a zahřáta na 25 °C. Odstranění methylenchloridu bylo uskutečněno pomocí koncentrace ve vakuu. Zbytek byl purifikován na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (7:3) za vzniku 1,74 g (85% výtěžek) 6-(3-benzamidobenzoyl)-1-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karboxaldehydu jako špinavě bílé pěny. HPLC 3,78 minut (100% oblast), XH NMR (DMSO-d6) δ 10,77 (s, 1H) , 10,42 (s, 1H) , 8,46-8,39 (m, 2H) ,
8,31 (dt, 1H, J = 6,0, 1,8 Hz), 8,19 (s, 1H, ) , 8,11-8,07 (m, 2H, ) , 7,91 (dd, 1H, J = 6,0, 1,2 Hz), 7,70-7,64 (m, 5H), 5,81 (s, 2H) 3,68 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 0,98 (t, 2H, J =
0,02 (s, 9H).
6,7 Hz), • · • · ·· • · · · • ·
290 (iv)
K míchanému roztoku 2,23 g (4,91 mmol) 2-pikolytrifenylfosfoniumchloridu/hydridu sodného ochlazenému na -78 °C bylo přidáno 1,26 g (2,46 mmol) 6-(3-benzamidobenzoyl)-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazol-3-karboxaldehydu v 5 ml bezvodého THF v argonové atmosféře a roztok byl míchán po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a zastaven směsí CH3COOH a MeOH (1:1,1 ml). Reakční směs byla naředěna 100 ml EtOAc a rozdělena mezi 1 x 50 ml saturovaného NaCl a 2 x 50 ml saturovaného NaHCO3, pak byla organická vrstva usušena nad Na2SO4 a filtrována přes krátký sloupec 20 ml silikagelu (směs trans/cis 3:1). Purifikace na kruhové desce se 4 mm silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1) poskytla po koncentraci 1,05 g (62 %) 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -ΙΗ-indazolu jako žluté pevné látky. TH NMR (CDC13) δ 8,62 (d, 1H, J = 4,1 Hz),
8,22 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 8,11-8,10 (m, 3H) , 8,01-7,98 (m, 4H), 7,83 (t, 2H, J = 7,1 Hz), 7,72-7,53 (m, 7H) , 7,30 (qd, 1H, J = 5,2, 1,1 Hz), 5,81 (s, 2H) , 3,68 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 0,98 (t, 2H, J = 6,7 Hz), 0,02 (s, 9H) .
Příklad 42 (b)
6- (3-benzamidobenzoyl)-3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol
O
291
Sloučenina z příkladu 42 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 42(a) kromě toho, že krok (iv) byl nahrazen následujícím: k aldehydu připravenému v příkladu 42(a), krok (iii), bylo přidáno 0,011 g (0,11 mmol) 1,2-diaminobenzenu, 0,4 g (0,1201 mmol) elementární síry, (čistota dle lékopisu USA) , 2 ml bezvodého DMF a směs byla zahřáta na 90 °C po dobu 18 hodin a ochlazena na 25 °C. Reakční směs byla naředěna 10 ml ethylacetátu a byla promyta 1 x 10 ml saturovaného NaCl, 1 x 10 ml NaHCO3 a 10 ml vody, usušena nad NaSO4 a filtrována přes teflonový filtr 0,22 μΜ a koncentrována za vzniku jantarového oleje. Purifikace chromatografií s kruhovou deskou následovaná precipitaci ze 2 ml methylenchloridu a 2 ml hexanu poskytla meziprodukt jako bílý precipitát. 1H NMR (aceton-d6) δ 8,81 (d, 1H, J = 8,6),
8,30-8,25 (m, 2H) , 8,11 (s, 1H) , 8,02-7,99(m, 2H) , 7,79 (td, 2H, J =12,2, 1,2 Hz), 7, 63-7,47 (m, 7H) , 7,28-7,40 (m, 2H) . HRMS (MALDI) m/z C28H19N5O2 vypočteno (M+H+) : 458,1617, změřeno
458,1632.
Příklad 42(c)
6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(2-methylthiazol-4-yl)ethenyl]lH-indazol
Sloučenina z příkladu 42(c) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 42 (a) kromě toho, že 4-(2-methylthiazyl)methyltrifenylfosfoniumchlorid byl použit namísto
2-pikolytrifenyfosfoniumchloridu v kroku (iv) . ’ή NMR (DMSO) δ
8,11-8,01 (m, 4H), 7,92 (d, 2H, J = 6,9 Hz), 7,76-7,71 (m, « ·
292
2H), 7,65-7,62 (m, IH) , 7,56-7,48 (m, 5H, ) , 7,15 (s, IH,) ,
2,81 (s, 3H) . HRMS (MALDI) C27H20N4O2S [M+H+]/z: vypočteno (M+H+) 465,1380, změřeno 465,1373.
Příklad 42(d)
6- (3-benzamidobenzoyl)-3-(3H-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1Hindazol
Sloučenina z příkladu 42(d) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 42(b) kromě toho, že 1,2-diamin-2pyridin byl použit namísto 1,2-diaminbenzenu. HPLC: 3,88 minut (95% oblast), XH NMR (DMSO-ds) δ 10,62 (s, IH), 8,83 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,53 (s, IH), 8,43 (s, IH), 8,32 (dt, IH, J = 6,9,
1,8 Hz), 8,15 (d, IH, J = 12,9 Hz), 8,11-8,10 (m, 2H) , 7,91 (d, IH, J = 9,0 Hz), 7,72-7,65 (m, 6H), 7,43 (dd, IH, J = 6,3, 4,5 Hz). HRMS (MALDI) m/z C27HX8N6O2 vypočteno (M+H+) : 459,1564, změřeno 459, 1558. Anal. (C27Hi8N6O2 · 0,4 CH2C12) : vypočteno C,
66, 83, H, 3,85, N, 17,07. Změřeno: C, 66, 93, H, 4,04, N, 16,68.
Příklad 42(e)
6- (3-benzamidobenzoyl)-3-E-[N-(4H-1,2,4-triazol-4-yl)iminomethyl]-lH-indazol ·♦ • · « 0
00·
293
Sloučenina z příkladu 42 (e) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 42 (a) kromě toho, že 4-amino-l,2,4triazol a PPTS byly použity v 80 °C namísto 2-pikolytrifenyfosfoniumchloridu/hydridu draselného ve 23 °C. HPLC: Rt = 4,05 minut (96% oblast), 1H NMR (DMSO-dg) δ 10,58 (s, 1H) , 9,53 (s, 1H), 9,40 (s, 2H), 8,56 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,38 (s, 1H), 8,26 (dt, 1H, J = 7,2, 2,1 Hz), 8,13 (s, 1H), 8,08-8,05 (m, 2H) , 7,73-7,67 (m, 5H) . HRMS (MALDI) C24Hi7N7O2 [M+H+]/z.
Vypočteno 436, 1516, změřeno 436, 1510. Anal. (C24Hi7N7O2 · 0,4 hexan) vypočteno C, 66,18, H, 4,67, N, 20,47. Změřeno: C, 65,78, H, 4,87, N, 20,47.
Příklad 43
6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(2-formamidofenyl)ethenyl]-1Hindazol
mg (36 %) sloučeniny z příkladu 43 bylo připraveno z 6(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2-formamidofenyl)ethenyl-1-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. HPLC: Rt = 4,19 minut 1H NMR (CDC13) δ 8,43-7,92 (m, 6H) , 7,68-7,49 (m, 4H) 7,39-7,36 (m,
3H), 7,32-7,21 (m, 2H), 7,09-7,00 (m, 2H), 6,91-6,84 (m, 1H).
HRMS (MALDI) C3oH22N403 [M+Na]/z: vypočteno 509,1590, změřeno · 4 4 4 4
4· •4 ·* ·♦
44» 444
444 4 · 444 · 4 » 444 44 4 · 4 ·
294
509, 1580. Anal. (C30H22N4O3 · 0,3H2O) vypočteno: C, 73,25, H,
4,63, N, 11,39. Změřeno: C, 73,10, H, 4,58, N, 11,28.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
6-(3-benzamidobenzoyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)lH-indazol-3-karboxaldehyd (připravený v příkladu 42(a), krok (iii)) byl konvertován na 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2nitrofenyl)ethenyl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)ΙΗ-indazol podobným způsobem jako v příkladu 42 (a), krok (iv) , kromě toho, že monohydrát (2-nitrobenzyl)trifenylfosfoniumbromidu byl použit namísto 2-pikolytrifenyfosfoniumchloridu (0,19 g, 79 %) . XH NMR (CDC13) δ 8,15-7,93 (m, 5H) , 7,89-7,86 (m, 3H) , 7,54-7,41 (m, 6H) , 7,36-7,35 (m, 2H), 7,21-7,18 (m, 2H) , 7,03-6,91(m, 1H) , 3, 64-3,46 (m, 2H) , 0,96-0,79 (m, 2H), -0,06 (s, 9H).
(ii)
0,19 (0,32 mmol) 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2-nitrofenyl)ethenyl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu bylo rozpuštěno ve 3 ml DMF, podrobeno působení 0,26 g (1,40 mmol) SnCl2 a 0,037 ml (1,87 mmol) vody a bylo mícháno po dobu ♦ 9 99 • · · 9
9 ·
9 *
295 hodin v 50 °C. Reakce byla zastavena v 25 °C s 0,5 ml 3N NaOH a precipitát byl odstraněn filtrací přes celit. Roztok pak byl rozdělen mezi 2 x 30 ml směsi saturovaného NaHCO3 a vody (50/50) a organická vrstva byla filtrován přes krátký sloupec silikagelu za vzniku 0,17 g (92 %) 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2-aminofenyl)ethenyl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazolu, jako jantarového oleje. Produkt byl použit bez další purifikace.
(iii)
0,17 (0,28 mmol) 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2-aminofenyl) ethenyl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu bylo rozpuštěno ve 3 ml methylenchloridu. K tomuto roztoku bylo po kapkách přidáno 0,12 g (0,56 mmol) pentafluorfenylesteru kyseliny mravenčí. Po 3 hodinách byla reakční směs naředěna 4 0 ml EtOAc a byla promyta 2 x 30 ml 50/50 NaHCO3 a organická vrstva byla filtrována přes krátký sloupec silikagelu. Zbytek byl purifikován chromatografií s kruhovou deskou na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc a CH2C12 (1:1:1), která poskytla 63 mg (40 %)6-(3-benzamidobenzoyl)-3E-(2-formamidofenyl)ethenyl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazolu jako čirého oleje. 1H NMR (CDC13) δ 8,488,36 (m, 1H), 8,20-7,84 (m, 4H), 7,61-7,52 (m, 5H), 7,41-7,32 (m, 4H) , 7,26-7,01 (m, 4H) , 6,82 (t, 1H, J = 14,2 Hz), 3,483,23 (m, 2H), 0,95-0,87 (m, 2H), -0,05 (s, 9H).
• fc ·· *· I · · • fc fcfcfc·
296
Příklad 44
6-(3-aminobenzoyl)-3-E-[N-(pyrol-l-yl)iminomethyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 44 byla připravena z výchozí látky popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12. Rf sm 0,6, p 0,5 (ethylacetát): XH NMR (300 MHz, CDC13.) δ
8,8 (s, 1H), 8,5 (d, 1H), 7,95 (s, 1H) , 7,75 (d, 1H) , 7,45-7,3 (m, 7H), 7,2 (m, 1H), 6,40 (s, 2H).
Výchozí látka byla připravena takto: (i)
204 mg (0,507 mmol) aldehydu připraveného v příkladu 33 (a), krok (i), a 67 μΐ (0,66 mmol, 1,3 ekv.) 1-aminopyrolu bylo mícháno společně ve 2 ml toluenu. K této směsi byl přidán 1 mg PPTS a roztok byl zahříván na 80 °C po dobu 1 hodiny. Směs byla ochlazena a byla rozdělena mezi 2:8 směs ethylacetátu a hexanu a vodu. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. 215,7 mg (91 %) produktu bylo krystalizováno z 0,5 ml dichlormethanu a 2 ml methanolu: 1H NMR (300 MHz, C6D6) δ 8,71 (s, 1H), 8,25 (d, l.H, J = 8,5 Hz), 8,08 (s, 1H) , 7,75 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,35 (s, 2H), 5,85 (s, 2H).
• 4 • 4 · • 4 444 4 • ·
297 (ϋ)
NH2
Směs 535 mg (1,15 mmol, 1 ekv.) výše uvedeného jodidu, 236 mg (1,72 mmol, 1,5 ekv.) 3-aminofenylboronové kyseliny, 24 mg (0,034 mmol, 0,03 ekv.) PdCl2(PPh3)2 a uhličitanu draselného byla nabrána do 6,7 ml anisolu v atmosféře oxidu uhelnatého, 101.325 kPa (1 atm) . Směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 14 hodin. Směs byla ochlazena, rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organické vrstvy byly promyty saturovaným vodným hydrouhličitanem sodným, vodou a solankou a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografii na silikagelu (50 ml silikagelu, 2:8 až 3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 331 mg (63 %) anilinu jako pevné látky: Rf sm 0,60, p 0,21 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,75 (s, IH), 8,51 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,06 (s, IH), 7,76 (dd, IH, J = 1,3, 8,4 Hz), 7,26 (m, 3H), 7,17 (m, 2H), 6,92 (m, IH), 6,31 (t, IH, J = 2,3 Hz), 5,79 (s, 2H) , 3,84 (š s, 2H) , 3,60 (t, 2H, J = 8,2 H2) , 0,91 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,08 (s, 9H). LCMS 4,98 minut (poz) [M+H]/z vypočteno 460, změřeno 460.
Příklad 45(a)
6-[3-(indol-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-[N-(pyrol-1yl)iminomethyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 45(a) byla připravena podle příkladu 44 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12 (d) kromě toho, že indol-4-karboxylová kyselina byla použita namísto
5-methylthiazol-2-karbo: xylové kyseliny : Rf sm 0,0, p 0,2 (směs
ethylacetátu a benzenu 1:3) , XH NMR ( 300 MHz , DMSO-d6) δ 9,84
(s, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8 ,39 (d, 1H, J = 8,5 Hz) ,
8,02 (s, 1H) , 7,86 (m, 2H) , 7,66 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,52-
7,40 (m, 4H), 7,27-7,07 (m, 5H) , 6,83 (s, 1H) , 6,21 (s, 2H ) ·
Příklad 45(b)
6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[N-(pyrol-l-yl)iminomethyl]-1Hindazol
Sloučenina z přikladu 45 (b) byla připravena podle příkladu 44 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12(d) kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny a HATU: H s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,43 (s, 7,99 (s, 1H) , 7,9-7,8 (m, 4H), (t, 2H, J = 7,8 Hz), 7,42-735 6,28 (t, 2H, J = 2,2 Hz).
NMR (300 MHz, CDC13, ) δ 11, 9 (š
1H) , 8,39 (d, 1H, J = : 8,4 Hz) ,
7, 65 (d, 1H, J = 8,4 Hz) , 7,48
(m, 3H) , 7,20 (t, 2H, 2,2 Hz) ,
·· ♦ ··· ·· ·* • · 4 4 · 4
444 4 · 444 • » 4 4 4 4 4 • 4 4 4 ··
44«· ·4· ·« ·· »4 ·· « · · · • · *
4 · · · · •· 4444
299
Příklad 46 β-[Ν-(3-aminofenyl)amino]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 46 byla připravena z výchozí látky popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 13 (i). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,6 (s, IH) , 8,07 (s, IH) ,
7.97 (d, IH, J = 8,73 Hz), 7,69 (d, IH, J = 8,49 Hz), 7,40 (m, 4H), 7,28 (m, IH), 7,06 (d, IH, J = 1,49 Hz), 6,44 (t, IH, J =
1.98 Hz), 6,34 (m, IH) , 6,14 (dd, IH, J = 7,88 Hz, J = 1,26 Hz), 5,01 (š s, 2H).
(i)
NO2
Sloučenina připravená v příkladu 11, krok (v), byla konvertována na 6-[N-(3-nitrofenyl)amino]-3-E-styryl-lH-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,0 (m, 2H) , 7,77 (m, IH), 7,64 (d, 2H, J = 7,86 Hz), 7,41-7,56 (m, 6H) , 7,33 (m, 2H) , 7,08 (d, IH, J = 8,67 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 357, změřeno 357. Vypočteno: C, 70,77, H, 4,53, N, 15,72. Změřeno: C, 69,18, H, 4,51, N, 15,30.
Příklad 47
6-[N-(3-benzamido-4-fluorfenyl)amino]-3-E-styryl-lH-indazol
90 · ·
9
6-[N-(3-benzamido-4-fluorfenyl)amino]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl-3-E-styryl-lH-indazol byl konvertován na sloučeninu z příkladu 47 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. XH NMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 12,6 (s, 1H) , 10,0 (s, 1H), 8,38 (š s, 1H), 8,02 (d, 1H, J = 8,78), 7,98 (d, 2H, J = 6,87 Hz), 7,69 (d, 2H, J = 7,27 Hz), 7,48-7,61 (m, 4H) , 7,45 (s, 2H), 7,40 (t, 2H, J = 7,28 Hz), 7,53-7,30 (t, 2H, J = 7,28 Hz), 7,53-7,30 m, 2H) , 7,07 (d, 1H, J = 1,55 Hz), 7,03 (m, 1H) , 6,95 (dd, 1H, J = 8,79 Hz, J = 1,85 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 449, změřeno 449. Anal. výpočet: C, 74,98. H, 4,72. N, 12,49. Změřeno: C, 74,29. H, 4,76. N, 12,12.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
K roztoku 3,12 g (20 mmol) 2-fluor-5-nitrofenylaminu ve 20 ml dichlormethanu ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 1,94 ml (24 mmol) pyridinu a 2,8 ml (24 mmol) benzoylchloridu. Po 45 minutách byl vytvořen bílý precipitát. Reakční směs byla koncentrována ve vakuu, pak byla naředěna vodou a filtrována za vzniku bílé pevné látky, která byla resuspendována v MeOH a opět filtrována za vzniku 4,86 g (93 %) N-(2-fluor-5-nitrofenyl) benzamidu. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,48 (dd, 1H, J =
6,8 Hz, J = 2,81 Hz), 8,17 (š s, 1H) , 8,03 (m, 1H) , 7,92 (m, 2H), 7,52-7,65 (m, 3H), 7,31 (d, 1H, J = 9,2 Hz).
4 • »
301 (ϋ)
Směs 4,86 g (18,7 mmol) N-(2-fluor-5-nitrofenyl)benzamidu a 486 mg 10% Pd/C v 80 ml směsi 1:1 THF a MeOH byla sycena vodíkem ve 23 °C. Po 2,5 hodinách byla reakční směs filtrována přes celit a koncentrována za vzniku 3,92 g (91 %) N-(5-amino2-fluorfenyl)benzamidu. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 231, změřeno 231.
Cítí)
6-[N-(3-benzamido-4-fluorfenyl)amino]-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl-3-E-styryl-lH-indazol byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 48 (a), krok (iii), kromě toho, že N-(5-amino-2-fluorfenyl)benzamid a sloučenina připravená v příkladu 14, krok (i), byly použity jako výchozí
látky . XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,38 (dd, 1H, J = 6 ,84 Hz , J =
2,73 Hz) , 8,09 (d, 1H, J = 3, 08 Hz), 7,86-7,91 (m, 3H) , 7,48-
7,61 (m, 5H) , 7,28-7,45 (m, 4H), 7,19 (d, 1H, J = 1,7 Hz) ,
7,08 (dd, . 1H, J = 10,48 Hz), 6, 90-6, 96 (m, 2H) , 6,03 (š s,
1H) , 5, 66 (s, 2H), 3,62 (t, 2H, J = 8,14 Hz), 0,91 (t, 2H , J =
8,32 Hz) z 0, 0 (s, 9H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 579,
změřeno 579. Anal. výpočet: C, 70,56. H, 6,10, N, 9, 68 .
Změřeno: C, 20 ,26. H, 6,08. N, 9,16.
» · · · · • · • ··· ·· ·· » · · » · · · ·
302
Příklad 48(a) β-[N-(5-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-2fluor-4-methylfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1Hindazol
Sloučenina z příkladu 48 (a) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a), z výchozí látky popsané níže. 7 NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,54 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 7,95 (d,
1H, j = 9,49 Hz) i, 7,84 (td, 1H, J = 7,71 Hz, J = 1,78 Hz) ,
7,70 (d, . 1H, J = = 7,95 Hz), 7,53 (d, 1H, J = 16,59 Hz) , 7,40
(d, 1H, J = 7,92 Hz), 7,29 (qd, 1H , J = 7,45 Hz, J = 1,07 Hz) ,
7,11 (d, 1H, J = 11,8), 7,03-7,06 (m, 2H), 6,71 (s, 1H) , 4,50
(q, 2H, J = 7,16 Hz), 2,27 (s, 3H) , 2, 26 (s, 3H), 1, 38 (t, . 3H,
J = 7,11 Hz). MS (ESI + ) [M+H]/z vypočteno 496, změřeno 496. Anal. výpočet: C, 67,86, H, 5,29, N, 19,79. Změřeno: C, 66,24, H, 5,50, N, 18,61.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Směs 1,0 g (5 mmol) 1-fluor-5-methyl-2,4-dinitrobenzenu a 200 mg 10% Pd/C ve 20 ml MeOH byla sycena vodíkem ve 23 °C po dobu 24 hodin. Reakční směs byla filtrována přes celit a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (1:1 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 613 mg (87 %) 4-fluor-6methylbenzen-1,3-diaminu.
• · ··
K roztoku 566 mg (2 mmol) 4-nitrofenylester-2-trimethylsilanylethylesteru uhličité kyseliny ve 4 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 12 mg (0,1 mmol) DMAP, 0,35 ml (2 mmol) DIEA a 4-fluor-6-methylbenzen-l,3-diamin. Výsledný roztok byl zahříván na 50 °C po dobu 48 hodin. Reakční směs byla zastavena saturovaným vodným NaHCO3, a extrahována 3 x 20 ml EtOAc. EtOAc byl odstraněn ve vakuu a zbytek byl opět rozpuštěn v Et2O, pak promyt 3N vodným NaOH, vodou, solankou, usušen nad Na2SO4, filtrován a koncentrován. Purifikace chromatografií na silikagelu (2:8 až 7:3 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 160 mg (28 %) 2-trimethylsilanylethylesteru (5-amino-4-fluor-2-methylfenyl)karbamové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 634, změřeno 634.
(iii)
Ke směsi 224 mg (0,47 mmol) 6-jod-3-((E)-2-pyridin-2ylvinyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu, 160 mg (0,56 mmol) 2-trimethylsilanylethylesteru 5-amino-4-fluor2-methylfenyl)karbamové kyseliny, 214 mg (0,66 mmol) Cs2CO3, 5,4 mg, (0,0059 mmol) PdCl2(PPh3)2 a 10 mg (0,0176 mmol) BINAP v argonové atmosféře ve 23 °C bylo přidáno 0,5 ml toluenu. Výsledná směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 16 hodin.
• · · · · · • · · ···· ···
304
Reakční směs byla ochlazena na 23 °C, a pak naředěna 20 ml vody a extrahována 3 x 50 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 30 ml vody, 30 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány na pěnu. Chromatografíe na koloně se silikagelem (3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 98 mg (33 %) 2-trimethylsilanylethylesteru {4-fluor-2-methyl-5-[3( (E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)lH-indazol-6-ylamino]fenyl}karbamové kyseliny
TLC (7:3 směs hexanu a ethylacetátu)
Rf srn 0,42, Rf p 0,23.
ΧΗ NMR (CDC13) δ
8,64 (dd, 1H, J = 4,79 Hz, J = 0,86 Hz; >z 7, 94 (d z 1H, J = 8,71
Hz) , 7,91 (š s, 1H), 7,86 (d, 1H, J 16,41 Hz) , 7,69 (td, 1H,
J = 7,72 Hz, J = 1,8 Hz), 7,55 (d, 1 H, J = 16, 44 Hz) , 7,49 (d,
1H, J = 7,91 Hz), 7,17 (qd, 1H, J = 7,44 Hz, J = 0,98 Hz) ,
6,99 (dd, 1H, J = 8,67 Hz, J = 1,89 Hz; > z 6, 93 (d , 1H, J = 11,2
Hz) , 6,25 (š s, 1H), 5,95 (d, 1H, J = 1, 97 Hz) , 5,70 (s, 2H) ,
4,25 (t, 2H, J = 8,53 Hz), 3,6 0 (t, 2H, r J = 8,24 Hz) , 2,22 (s,
3H) , 1,04 (t, 2H, J = 8,54 Hz) , 0,9 (t, r 2H, J = 8,25 Hz) , 0,05
(s, 9H) , 0,0 (s, 9H) . 13C NMR (CDC1 3 z 75 M) Hz) δ 156, 0, 15 4,4,
149,8, 142,9, 142, 8, 142,5, 136
128,5, 124,3, 122, 2, 122,0, 121
95,2, 77,6, 77,4, 66,5, 63,7,
3326, 2947, 1716, 1617, 1534,
[M+H]/z vypočteno 634, změřeno
6, 132,1, 130,1, 130 ,5, 128,7,
8, 118,2, 117,3, 117 z0, 115,1,
17,9, 17,2, -1,3. FTIR cm1:
1514, 1244, 1057. MS (ESI+)
(iv)
Výše uvedený anilin byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 11. XH NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,54 (m, 1H) , 7,91 (dd, 1H, J = 8,74 Hz, J = 0,58 Hz), 7,83 (td, 1H, J = 7,72 Hz,
305
J = 1,79 Hz), 7,80 (d, IH, J = 16,52 Hz), 7,69 (d, IH, J =
7,98 Hz) , 7,52 (d, IH, J = 16,58 Hz), 7,29 (qd, IH, J = 7,43
Hz, J = 1,07 Hz), 6, 94-6, 99 (m, 2H) , 6,83 (d, IH, J = 11,98
Hz) , 6,82 (d, IH, J = 7,49 Hz), 2,15 (s, 3H) . MS (ESI + )
[M+H]/z vypočteno 360, změřeno 360.
Příklad 48(b)
6-[N-(5-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-2-fluor-4methylfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 48(b) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 48(a) kromě toho, že 2,5-dimethyl2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 1H NMR (300
MHz, DMSO-d6) δ 12,8 (s, IH) , 9,71 (s, IH) , 8,59 (m, IH), 8, 11
(s, IH) , 8,00 (d, IH, J = 8,75 Hz), 7,87 (d, IH, J = 16, 37
Hz) , 7,80 (td, IH, J = 7,66 Hz, J = 1, 81 Hz) , 7, 64 (d, IH, J
7,88 Hz), 7,49 (d, IH, J = 16,38 Hz) , 7,34 (d, IH, J = 8, 16
Hz) , 7,26 (m, IH), 7,21 (d, IH, J = 12 ,14 Hz ), 6 ,97 (dd, IH, J
= 8, 76 Hz) , 6,88 (s, IH), 6, 79 (s, IH) , 3,98 (s, 3H), 2,20 ( s,
3H) , 2,19 (s, 3H) . MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 482, změřeno 482. Anal. výpočet: C, 67,35, H, 5,02, N, 20,36. Změřeno: C, 66,83, H, 5,25, N, 19,68.
Příklad 49(a)
6- [N-(3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4fluorfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
306
Sloučenina způsobem, jako z příkladu v příkladu dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylová namísto v kroku
49(a) byla připravena podobným 48(a) kromě následujícího: 2,5kyselina byla použita
2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny, (iii), 2-trimethylsilanylethylester (5-amino-2fluorfenyl)karbamové kyseliny, připravený jak popsáno níže, byl použit namísto 2-trimethylsilanylethylesteru (5-amino-4fluor-2-methylfenyl)karbamové kyseliny, rozpouštědlo bylo DME a jako ligand byl použit bifenyl-2-yldicyklohexylfosfan. XH NMR
(300 MHz, CD3OD) δ 12,7 (s, 1H), 9, 94 (s, 1H) , 8,48 (m, 1H) ,
8,40 (s, 1H), 8,02 (d, 1H, J = 6,77 Hz), 7,87 (d, 1H, J =
16,37 Hz), 7,80 (d, 1H, J = 7,63 Hz, J = 1,81 Hz), 7, 64 (d,
1H, J = 7,88 Hz) , 7 ,49 (d, 1H, J = 16, 39 Hz), 7,42 (dd, 1H, J
= 6, 65 Hz, J = 2,68 Hz) , 7,24 (m, 2H) , 7,06 (m, 2H), 6, 96 (dd,
1H, J = 8,81 Hz, J = 1,82 Hz), 6,85 (s, 1H), 4,0 (s, 3H), 2,20 (s, 3H) . MS (ESI + ) [M+H]/z vypočteno 468, změřeno 468. Anal.
výpočet: C, 66,80, H, 4,74, N, 20,97. Změřeno: C, 66,01, H, 4,72, N, 20,81.
(i)
K roztoku 9,82 g (54 mmol) 1-fluor-2-isokyanato-4-nitrobenzenu ve 40 ml THF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 7,72 ml (54 mmol) 2-trimethylsilanylethanolu. Výsledná směs byla míchána po dobu 11 hodin, a pak zahřívána na 50 °C • •44
4
4
4 4·
307 po dobu 2 hodin. Reakční směs byla ponechána vychladnout na 23 °C, zastavena saturovaným vodným NaHCO3 a extrahována 3 x 100 ml EtOAc. Sloučené ethylacetátové vrstvy byly promyty 2 x 90 ml IN vodné HCl, 90 ml vody a 90 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány na žlutou pevnou látku. Chromatografie na silikagelu (2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 12,3 g (77 %) 2-trimethylsilanylethylesteru (2-fluor5-nitrofenyl)karbamové kyseliny. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,06 (dd, IH, J = 6,89 Hz, J = 2,63 Hz), 7,89 (m, IH) , 7,20 (m, IH), 6,91 (š s, IH), 4,31 (t, 2H, J = 8,67 Hz), 1,06 (t, 2H, J = 8,67 Hz), 0,05 (s, 9H) . LCMS (ESI-) [M+H]/z vypočteno 299, změřeno 299.
(ii)
NHa
Směs 3,00 g (10 mmol) 2-trimethylsilanylethylesteru (2-fluor-5-nitrofenyl)karbamové kyseliny a 300 mg 10% Pd/C ve 30 ml methanolu byla sycena vodíkem ve 23 °C. Výsledná směs byla míchána po dobu 24 hodin. Reakční směs byla filtrována přes celit a koncentrována za vzniku 2,62 g (97 %) 2trimethylsilanylethylesteru (5-amino-2-fluorfenyl)karbamové kyseliny. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,52 (m, IH) , 6,85 (dd, IH, J = 10,8, Hz, 1 = 8,69 Hz), 6,73 (š s, IH) , 6,28 (m, IH), 4,27 (t, 2H, J = 8,57 Hz), 3,0-4,4 (š s, 2H) , 1,06 (t, 2H, J = 8,58 Hz), 0,07 (s, 9H).
fcfc 9 99 9 ·
• ··♦ • fc fc ··· • « • « • fc
308
Příklad 49(b)
6-[N-(3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4-methylfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-IH-indazol
Sloučenina z příkladu 49(b) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 49(a) kromě toho, že l-methyl-2isokyanato-4-nitrobenzen byl použit namísto l-fluor-2isokyanato-4-nitrobenzenu v kroku (i) . XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,59 (m, 1H) , 8,35 (s, 1H) , 8,00 (d, 1H, J = 8,73 Hz), 7,87 (d, 1H, J = 16,38 Hz), 7,80 (td, 1H, J = 7,66 Hz, J = 1,85 Hz), 7,64 (d, 1H, J = 7,85 Hz), 7,49 (d, 1H, J = 16,35 Hz), 7,26 (m, 1H), 7,19 (m, 2H) , 7,09 (d, 1H, J = 1,48 Hz), 7,02 (dd, 1H, J = 8,17 Hz, J = 2,24 Hz), 6,97 (dd, 1H, J = 8,79 Hz, J = 1,80 Hz), 6,81 (š s, 1H), 4,00 (s, 3H) , 2,20 (s, 3H) , 2,18 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 464, změřeno 464.
Příklad 49 (c)
6- [N-(3-acetamido-4-fluorfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 49(c) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 49(a) kromě toho, že acetanhydrid byl použit namísto 2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny: XH NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,44 (m, 1H) , 7,82 (d, 1H) , 7,70 (m,
3H), 7,55 (d, 1H) , 7,41 (d, 1H, J = 16,4 Hz), 7,19 (m, 1H) ,
• fc fcfcfc· ♦· ·· • fcfc fcfcfc .····..:
* · · · · · • fcfcfc fcfcfc ·· ··
309
7,03 (s, 1H) , 6,94 (m, 1H) , 6,87 (m, 2H) , 2,11 (s, 3H) . LCMS (100% oblast) Rt = 4,53 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 388,4, změřeno 388,4.
Příklady 49(d)-49(x) mohou být připraveny podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 49(a).
Příklad 49(d)
Příklad 49(e)
Příklad 49(f)
F ·· ···· • ♦ • · ·· • ·
310
Příklad 49 (g)
Příklad 49(í)
Příklad 49(j)
O > · · • · • ···
49
Φ Φ » Φ 4 44Φ
311
Příklad 49(k)
Příklad 49(1)
Příklad 49(η)
F
Φ · · • 4 44 4 · ·
•ΦΦΦ 444
4 4
4 4 99 • 4 4 ·
4 4 4
44
4 4
4444 «· ·**· « * « « ♦ · * • · ·<· • · · · • · · · ·· ··
312 • · · • ··· • · · • · • ··· ··* • · · · • · * • · * »♦ ····
Příklad 49 (p)
Příklad 49(r)
O
313
Příklad 49 (s)
Příklad 49(u)
1*0 ·**· • · · • · »· » · • · • 000 ··«
0* 00 · ♦ · · «« • 0 0 · • 0 0 · »0 «·
0» • · • 9 ♦
« <
«·
0» « « »
• 00 0 • · ···· · · · · · · • · · ··· · ···· · ···· · · • · ·· · <
Příklad 50 β-[3-(5-amino-2-fluorfenyl)karbamoyl-5-methyl-2-ethyl-2Hpyrazol-4-yl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 50 byla připravena z výchozí látky popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 482, změřeno 482. Vypočteno: C, 67,35, H, 5,02, N, 20,36. Změřeno: C, 66, 70, H, 5,09, N, 19,95.
• · • ·
315 (i)
(2-fluor-5-nitrofenyl)amid 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 47, krok (i), kromě toho, že 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylová kyselina a HATU byly použity namísto benzoylchloridu. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 293, změřeno 293.
(ii)
(2-fluor-5-nitrofenyl)amid 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 40(b), krok (i). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 263, změřeno 263.
(iii) fc · • · ···· fc·· •fcfcfc fcfcfc fcfc ·· ·· ····
316
6-[3-(5-amino-2-fluorfenyl)karbamoyl-5-methyl-2-ethyl-2Hpyrazol-4-yl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 48(a) , krok (iii), kromě toho, že (5-amino-2-fluorfenyl)amid 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny byl použit jako výchozí látka. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 612, změřeno 612.
Příklad 51
6-pyrid-4-yl-3-E-(N-(pyrol-l-yl)iminomethyl)-lH-indazol
6-pyrid-4-yl-3-E-(N-(pyrol-l-yl)iminomethyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl-lH-indazol byl konvertován na 6-pyrid-4-yl-3-E-(N-(pyrol-l-yl)iminomethyl)-lH-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,76 (s, IH) , 8,67 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 8,53 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,74 (s, IH) , 7,61 (d, 2H, J = 6,2 Hz),
7,54 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,27-7,25 (m, 2H) , 6,31-6,29 (m,
2H) . MS (ES) [M+H]/z vypočteno 288, změřeno 288. Anal.
výpočet: C (71,07), H (456), N (24,37). Změřeno: C (70,81), H (4,57), N (24,14).
Výchozí látka byla připravena takto:
• · · ·
I · · fc · · · · • · · · • · • · · · • · · · · ·
317 fc · · « • · · *
Roztok 208 mg (0,59 mmol) 6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu, 145 mg (1,76 mmol) N-aminopyrolu a 5,8 μΐ octové kyseliny v 1 ml ethanolu byl udržován v 95 °C po dobu 16 hodin. Roztok pak byl evaporován při sníženém tlaku a purifikován chromatografii na silikagelu za vzniku 140 mg (57 %) 6-pyrid-4-yl-3-E-(N-(pyrol1-yl)iminomethyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-inda-
zolu jako oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,08 (s, 1H) , 8,71
(d, 2H, J = 6,1 Hz) , 8,46 (d, 1H, J = 8,5 Hz) , 8,34 (s, 1H) ,
7,85 (d, 2H, J = 6,2 Hz) , 7,80 (d, 1H, J = 8,5 Hz) , 7,56 (t,
2H, J = 2,3 Hz), 6,25 (t, 2H, J = 2,3 Hz), 5, 93 (s, 1H) , 5,74
(s, 2H) , 3,64 (t , 2H, J = 7,9 Hz) , 0,86 (t , 2H, J = 7,9 Hz) ,
0,00 (s, 9H).
Příklad 52(a)
6- (7-azaindazol-4-yl)-3-E-styryl-lH-indazol
SEM-sloučenina z příkladu 52 (a) byla konvertována na sloučeninu z příkladu 52(a) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27 (a) . XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,63 (d,
1H, J = 4,8 Hz), 8,41 (d, 1H, J = 85 Hz), 8,37 (s, 1H) , 7,99 (s, 1H) , 7,76 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,60-7,85 (m, 6H) . HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 338,1400, změřeno 338,1389. Analyzováno s 1,1 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (60,21), H (3,51), N (15,13). Změřeno: C (59,93), H (3,59), N (14,86).
Výchozí látka byla připravena takto:
I * i'' · · · • ··· 9 · ·<
318 (i)
Roztok 1,0 g (1,90 mmol) 3-styryl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -6-trimethylstannyl-lH-indazolu, 0,56 g (1,90 mmol) 1-(4-jodpyrazolo[3,4-b]pyridin-l-yl)ethanonu, 116 mg (0,38 mmol) AsPh3 a 87 mg (0,09 mmol) Pd2dba3 v 10 ml odplyněného dioxanu byl zahříván ve 110 °C po dobu 3 hodin. Roztok pak byl naředěn 50 ml ethylacetátu, promyt 2 x 10 ml solanky, usušen nad MgSO4 a koncentrován při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 412 mg (46 %) sloučeniny z příkladu 52(a) jako bílé pevné látky. 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,82 (d, 1H, J = 5,8 Hz), 8,52 (s, 1H) , 8,29 (d,
1H, J = 8,2 Hz), 8,05 (s, 1H) , 7,73-7,32 (m, 10H) , 5,86 (s, 2H), 3,69 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,97 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,03 (s, 9H) .
(ii)
SnMe3
Roztok 2,90 g (6,10 mmol) 6-jod-3-styryl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazolu, 2,00 g (6,12 mmol) hexamethyldicínu a 282 mg (0,24 mmol) Pd(PPh3)4 v 10 ml odplyněného dioxanu byl zahříván ve 110 °C po dobu 3 hodin. Roztok pak byl naředěn 200 ml ethylacetátu, promyt 2 x 20 ml solanky, usušen nad MgSO4 a evaporován při sníženém tlaku. Purifikace * · φ · φ · · · · · 4 · • · a · a a •φφφ · ····
319 chromatografií na silikagelu poskytla 3 g (96 %) 3-styryl-l(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-6-trimethylstanný1-lH-indazolu jako žlutého oleje. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,02 (d, IH, J = 7,4 Hz), 7,71 (s, IH), 7,71-7,29 (m, 8H) , 5,77 (s, 2H) ,
3,65 9H) , (t, 2H, J = 16,3 -0,03 (s, 9H). Hz), 0,95 (t, 2H, J = 16,4 Hz), 0,38 (s,
(iii)
1 Λ
V v
Směs 820 mg (5,30 mmol) 4-chlor-lH-pyrazolo[3,4-
b]pyridinu, 2,4 mg (16,0 mmol) jodidu sodného a 0,8 mi
acetylchloridu v 6 ml acetonitrilu byla zahřívána k varu pod
zpětným chladičem 8 hodin. Směs pak byla podrobena působení 10 ml 10% vodného roztoku NaCO3 a 10 ml 10% vodného roztoku NaHSO3 a udržována 10 minut. Směs byla extrahována 50 ml ethylacetátu a organické vrstvy byly promyty 10 ml solanky, usušeny nad MgSO4 a evaporovány při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 650 mg (42 %) l-(4-jodpyrazolo[3,4-b]pyridin-l-yl)ethanonu jako hnědé pevné látky. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,39 (d, IH, J = 5,0 Hz), 8,04 (s, IH) , 7,76 (d, IH, J = 5,0 Hz), 2,88 (s, 3H).
(iv)
• · ·· · ·
320
1,2 g {8,8 mmol) 1,7-dihydropyrazolo[3,4-b]pyridin-4-onu, (Dorn, H. Et al. , Prakt. Chem., 324, 557-62, 1982) v 15 ml
POCl3při teplotě 0 °C bylo podrobeno působení 2,5 mg (0,01 mmol) PC15. Roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti po dobu 1 hodiny, pak byl zahříván na 90 °C a udržován 3 hodiny. Roztok byl koncentrován při sníženém tlaku, pak podroben působení 50 ml ledu a extrahována 100 ml ethylacetátu vody. Výsledná směs byla a organická vrstva byla promyta 30 ml saturovaného vodného roztoku hydrouhličitanu sodného. Organická vrstva byla evaporována při sníženém tlaku usušena nad MgSO4, pak za vzniku 820 mg (60 %)
4-chlor-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridinu jako žluté pevné látky. XH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,57 (d, 1H, J = 5,2 Hz), 8,25 (s, 1H) ,
7,28 (d, 1H, J = 5,2 Hz).
Příklad 52(b)
6-(7-azaindol-4-yl)-3-E-styryl-lH-indazol
SEM-jodindazol byl konvertován na sloučeninu z příkladu 52 (b) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27 (a) . 1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,40 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 8,53 (d, 1H, J = 6 Hz), 7,74-7,35 (m, 10H) , 6,90 (s, 1H) . HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 337,1448, změřeno 337,1457. Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (77,31), H (4,90), N (16,39). Změřeno: C (77,51), H (4,88), N (16,27).
Výchozí látka byla připravena takto:
0· • 0 • 0·0
321 (i) co
4-chlor-lH-pyrolo[2,3-b]pyridin (Clark, B. A. Et al., J. Chem. Soc. Pl, 2270-74, 1974) byl- konvertován na 4-jod-lHpyrolo[2,3-b]pyridin podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 52 (a). 1H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,10 (m, 1H) , 7,89 (d, 1H, J = 5,0 Hz), 7,58 (m, 1H) , 7,50 (d, 1H, J = 5,0 Hz), 6,26 (š s, 1H).
Příklad 53(a)
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6karboxamid
K roztoku 208 mg (0,7 mmol) 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1Hindazol-6-karboxylové kyseliny v 6 ml suchého dimethylformamidu bylo přidáno 82 mg (0,7 mmol) 4-aminofenolu, následováno 312 mg (0,8 mmol) HATU, a pak bylo přidáno 20 kapek triethylaminu. Reakce byla míchána přes noc při teplotě místnosti. LC/MS prokázala požadovaný produkt jako hlavní složku. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbylý zbytek byl nabrán do vody a ethylacetátu. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v 10 ml methanolu a polovina tohoto roztoku byla purifikována HPLC s použitím gradientu 5% acetonitril/voda až 55% acetonitril/voda po dobu 60 minut s 0,1% trifluoroctovou • fcfcfc fcfc ··· · fcfc ·fc • · · · · fc • ··· · · ···
322 kyselinou ve vodě. Sloučenina uvedená v názvu byla izolována jako 20 mg pevné látky. 1H NMR (methanol-d4) δ 6,87 (2H, d, 8,8
Hz), 7,55 (2H, d, 8,7 Hz), 7,61 (2H, m), 7,87 (2H, br s), 8,00 (1H, d, 8,4 Hz), 8,35 (1H, s) , 8,52 (1H, d, 8,6 Hz). MS (APCI poz) 370,1.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
K 2,0 g (12,42 mmol) lH-indol-6-karboxylové kyseliny ve 100 ml vody bylo přidáno 8,56 g (124,2 mmol) NaNO2. K této suspenzi pak bylo pomalu po kapkách přidáváno adiční nálevkou 16 ml 6N HCI. Výsledná suspenze byla ponechána za míchání při teplotě místnosti přes noc. Pevný precipitát byl filtrován a promyt 50 ml vody za vzniku 2,35 g (100 %) 3-formyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny. 1H NMR (DMSO-dg) δ 14,46 (1H, s),
10,21 (1H, s), 8,26 (1H, s), 8,20 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,90 (1H, d, J = 8,3 Hz). MS (APCI pozitivní) 205 (methylester).
(ii)
K 2,35 g (12,42 mmol) 3-formyl-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny v 60 ml DMF bylo přidáno 1,34 g (12,42 mmol) 1,2fenylendiaminu a 13,66 mmol (1,1 ekv.) práškové síry. Tato směs pak byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 6 ··
• · · * • · · • · ····
323 hodin. Reakce byla sledována TLC a LC-MS. Po ochlazení bylo přidáno 50 ml vody do reakce a hnědý precipitát, který byl vytvořen, byl filtrován a sbírán za vzniku 3,1 g (90 %) 3-(lHbenzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny. 1H NMR (DMSO-d6) δ 14,01 (1H, s) , 8,58 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,24 (1H, s), 7,87 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,64 (2H, m) , 7,25 (2H, m) . MS (APCI pozitivní) 279.
Příklad 53(b)
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-N-cyklopropyl-lH-indazol-6-karboxamid
Ke 200 mg (0,719 mmol) 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve 30 ml DMF bylo přidáno 98 mg (0,719 mmol) cyklopropylaminu, 273 mg (0,719 mmol) HATU a 0,1 ml (0,726 mmol) triethylaminu. Tento roztok byl ponechán za míchání při teplotě místnosti přes noc. Reakce byla zpracována promytím vodou a extrakcí 3 x 50 ml ethylacetátu. Organická vrstva pak byla usušena nad MgSO4, filtrována a koncentrována za vzniku tmavého oleje. Velmi rychlá chromatografie na koloně (30-70% ethylacetát/petrolether) poskytla 0,130 g (57 %) 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-N-cyklopropyl-lH-indazol-6-karboxamidu jako žluté pevné látky. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,88 (1H, s) ,
8,63 (1H, m) , 8,51 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,09 (1H, s) , 7,75 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,63 (2H, br s) , 7,21 (2H, m) , 2,89 (1H,
m) , 0,72 (2H, m), 0,63 (2H, m) . MS (APCI pozitivní) 318,1.
• 4 ι» 4 44 4 • 4 4 4 44
44 ·4
4 4 4
4444 4
4 4 · 4 4
4 4 4 4 ·· ♦♦
324
Příklad 53(c)
3- (lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxy-3-methylfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53 (c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53(a), kromě toho, že 3-methyl-4-aminofenol byl použit namísto 4-aminofenolu. 1H NMR, (DMSO-de) δ 8,59 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,25 (1H, s), 7,89 (1H, dd, J = 1,3, 8,5 Hz), 7,68 (2H, br s) , 7,28 (2H, m), 7,14 (1H, d, J = 8,5 Hz), 6,74 (1H, s), 6,68 (2H, dd, J = 3,0, 8,3 Hz).
MS (APCI pozitivní) 384,1.
Příklad 53(d)
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxy-2,3-dimethylfenyl)-1Hindazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53 (d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53 (a) kromě toho, že
2,3-dimethyl-4-aminofenol byl použit namísto 4-aminofenolu. XH
NMR (DMSO-d6) δ 9,93 (1H, s) , 9,22 (1H, s) , 8,56 (1H, d, J =
5,5 Hz), 8,25 (1H, s) , 7,90 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,73 (1H, br
s), 7,53 (1H, br s), 7,23 (2H, br s) , 6,92 (1H, d, J = 8,3 ··
4 4 · * · » 44
4 • 4 44 ···· · ·
4 44
325
Hz), 6,68 (1H, d, J pozitivní) 398,4.
8,5 Hz), 2,09 (6H, br s) . MS (APCI
Příklad 53(e)
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53(a) kromě toho, že 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazan byl použit namísto 4-amino-
13,91 ( 1H, s), 13,04 (1H, s), 8,52
(1H, br s) , 8,15 (1H, s), 7,81 (1H,
d, J = 6, 6 Hz), 7,51 (2H, m) , 7,21
(2H, m). MS (APCI pozitivní) 278,1.
Příklad 53(f)
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-N-benzyloxy-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53(a) kromě toho, že O-benzylhydroxylamin byl použit namísto 4-aminofenolu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,94 (1H, s), 13,06 (1H, s), 11,97 (1H, s), 8,55 (1H, d, J = 8,8 Hz), 8,02 (1H, s), 7,78 (1H, d, J = 8,3 Hz),
9*99 • 9 9 999 •9 99 ·9 « 9 9 9 9 9 9 • 9 999 99 9
326
7,52 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,50 (3H, m) , 7,40 (3H, m) , 7,22 (2H, m), 4,97 (2H, s). MS (APCI pozitivní) 384,2.
Příklad 53(g)
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-N-(3-fluor-4-hydroxyfenyl)-IH-indazol-6-karboxamid
F
Sloučenina z příkladu 53(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53 (a) kromě toho, že 3-fluor-4-aminofenol byl použit namísto 4-aminofenolu. 1H NMR (CH3OD) δ 8,58 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,20 (1H, s), 7,84 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,68 (2H, br s), 7,63 (1H, dd, J = 2,4, 13 Hz), 7,29 (3H, m) , 6,92 (1H, t, J = 9,2 Hz). MS (APCI pozitivní)
388,3.
Příklad 54(a)
3-(5,6-difluor-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-1Hindazol-6-karboxamid
S použitím stejného postupu jako pro syntézu 3-(lHbenzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny v příkladu 53(a), krok (ii), N-(4-hydroxyfenyl)-3-formyl-lH• 4 4 44 4
»4 44 44 ·4
4 4 4 4 4 4
4 444 4 4 ·
327 indazol-6-karboxamid a 4,5-difluor-l,2-fenylendiamin poskytly 3-(5,6-difluor-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-1Hindazol-6-karboxamid jako žlutohnědou pevnou látku. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,99 (1H, s) , 13,27 (1H, s) , 10,21 (1H, s) , 9,25 (1H, s), 8,52 (1H, d, J = 8,7 Hz), 8,21 (1H, s) , 7,85 (1H, d, J = 9,0 Hz), 7,80 (1H, t, J = 9,8 Hz), 7,55 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,47 (1H, t, J = 9,8 Hz), 6,75 (2H, d, J = 8,7 Hz). MS (APCI pozitivní) 406.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
K roztoku 1,6 g (8,4 mmol) 3-formyl-lH-indazol-6karboxylové kyseliny a 1,8 g (16,8 mmol) 4-aminofenolu v 35 ml suchého dimethylformamidu bylo přidáno 3,8 g (16,8 mmol) HATU následováno 1,4 ml (10,1 mmol) triethylaminu. Reakce byla míchána při teplotě místnosti a monitorována TLC a LC/MS. Po dvou hodinách byla reakce kompletní. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na koloně s použitím směsi ethylacetátu a petroletheru 1:1 až čistého ethylacetátu. N-(4-hydroxyfenyl)3-formyl-lH-indazol-6-karboxamid byl izolován jako žlutohnědě zbarvená pevná látka. ΧΗ NMR (DMSO-d6) δ 6,79 (2H, d, 8,9 Hz),
7,59 (2H, d, 8,9 Hz), 7,94 (1H, d, 9,8 Hz), 8,24 (1H, d, 8,2
Hz), 8,31 (1H, s) , 9,31 (2H, br s) , 10,27 (2H, s) . MS (APCI poz) 282,1.
··» · • · • · ·· *· ·* • · · • · 449
4 4 9
94
94
9 4 4
4 « • · · • · · ·· ····
328
Příklad 54 (b)
3-(5,6-dichlor-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-1Hindazol-6-karboxamid
Cl
Sloučenina z příkladu 54 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že
4,5-dichlor-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor1,2-fenylendiaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 14,08 (ÍH, s), 13,38 (ÍH, s), 10,22 (ÍH, s), 9,27 (ÍH, s) , 8,52 (ÍH, d, J = 8,7
Hz), 8,23 (ÍH, s), 8,02 (ÍH, s) , 7,86 (ÍH, d, J = 8,7 Hz),
7,70 (ÍH, s), 7,55 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,75 (2H, d, J = 8,7
Hz). MS (APCI pozitivní) 438.
Příklad 54(c)
3-(5-methoxy-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54 (a) kromě toho, že 4-methoxy-1,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2 fenylendiaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,76 (ÍH, s) , 12,77 (ÍH,
s), 10,13 (ÍH, s), 9,17 (1H, s) , 8,45 (ÍH, d, J = 8,3 Hz), 8,11 (ÍH, s), 7,75 (ÍH, d, J = 8,6 Hz), 7,46 (2H, d, J = 8,7
329
Hz), 7,32 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,91. (1H, s) , 6,77 (1H, m) , 6,67 (2H, d, J = 8,7 Hz), 3,72 (3H, s) . MS (APCI pozitivní) 400.
Příklad 54(d)
3-[lH-nafto(2,3-d)imidazol-2-yl]-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že
2,3-naftalendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-1,2-
fenylendiaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 14,11 (1H, s), 13,10 (1H,
s), 10,24 (1H, s) , 9,27 (1H, s), 8,64 (1H, d, J = 8,7 Hz) ,
8,28 (1H, s), 8,25 (1H, S), 7,97 (2H, m) , 7,73 (1H, br s) ,
7,89 (1H, d, J = 8, 6 Hz) , 7,56 (2H , d, J = 8,7 Hz), 7,38 (2H,
b), 6,76 (2H, d, J = = 8,7 Hz). MS (APCI pozitivní) 420.
Příklad 54(e)
3-[lH-nafto(1,2-d)imidazol-2-yl]-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
c · • · · ·
330
Sloučenina z příkladu 54 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že
1,2-naftalendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-1,2-
fenylendiaminu. XH NMR (DMSO-dg) δ 13, 93 (1H, s), 18 5,38 (1H,
s), 10,23 (1H, s), 9,27 (1H, s), 8,70 (2H, m) , 8,22 (1H z s) ,
8,00 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,87 (1H, m) , 7,72 (3H, m) , 7,57
(2H, d, J = 8,7 Hz), 6,76 (2H, d, J = 8,6 Hz) : MS (APCI
pozitivní) 420.
Příklad 54(f)
3-(4,5-dimethyl-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-1H-
Sloučenina z příkladu 54(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54 (a) kromě toho, že 3,4-dimethyl-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor1,2-fenylendiaminu. XH NMR (DMSO-d6) δ 13,77 (1H, d, tautomery), 12,70 (1H, d, tautomery), 10,11 (1H, s), 9,16 (1H,
s), 8,48 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,09 (1H, s) , 7,73 (1H, d, J =
8,6 Hz), 7,47 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,10 (1H, d, J = 8,3 Hz),
6,93 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,65 (2H, d, J = 8,7 Hz), 2,49 (3H,
s), 2,24 (3H, s). MS (APQ pozitivní) 398,4.
Příklad 54(g)
3-(5-terc-butyl-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-1Hindazol-6-karboxamid • · · · · ·
331
Sloučenina z příkladu 54 (g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54 (a) kromě toho, že 4-terc-butyl-l, 2 fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor1,2-fenylendiaminu. ΧΗ NMR (aceton-dg) δ 12,88 (IH, s) , 9,47 (IH, s), 8,63 (IH, d, J = 8,7 Hz), 8,18 (IH, s), 7,82 (IH, d, J = 8,3 Hz), 7,57 (4H, m), 7,26 (IH, d, J = 8,4 Hz), 6,74 (IH, d, J = 8,3 Hz), 1,31 (9H, s). MS (APCI pozitivní) 426.
Příklad 54(h)
3-(5-trifluormethyl-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54 (a) kromě toho, že 4-trifluormethyl-1,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5difluor-1,2-fenylendiaminu. 1H NMR (methanol-d4) δ 6,86 (2H, d,
8,9 Hz), 7,54 (2H, d, 8,9 Hz), 7,6 (IH, dd, 8,5 Hz), 7,83 (IH, d, 83 Hz), 7,89 (IH, dd, 8,6 Hz), 8,04 (IH, br s), 8,25 (IH,
s), 8,61 (IH, d, 8,6 Hz). MS (APCI poz) 438,1.
• · • · · ·
332
Příklad 54(i)
3-(5-fluor-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54 (i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu. 54(a) kromě toho, že 4-fluor-1,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2fenylendiaminu. 1H NMR (aceton-dg) δ 13,40 (1H, b) , 12,47 (1H,
b), 9,74 (1H, s), 8,67 (1H, d, J = 8,6 Hz) , 8,66 (1H, s), 8,29
(1H, s), 7,94 (1H, d, J = 8,5 Hz) , 7,67 (2H, J = 8,4 Hz), 7,64
(1H, m), 7,40 (1H, m), 7,05 (1H, t, J = 8,5 Hz) , 6,83 (2H, d,
J = 8,4 Hz). MS (APCI poz) 388.
Příklad 54(j)
3-(5H-[1,3]dioxolo[4,5-f]benzimidazol-6-yl)-N-(4-hydroxyfenyl) -lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54 (j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54 (a) kromě toho, že
4,5-methylendioxy-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5difluor-1,2-fenylendiaminu. 1H NMR (methanol-d4) δ 6,85 (2H, d,
8,9 Hz), 7,15 (2H, s) , 7,54 (2H, d, 8,9 Hz), 7,86 (1H, dd, 8,6 Hz), 8,23 (1H, s), 8,55 (1H, dd, 8,5 Hz). MS (APCI poz) 414,1.
• ···
333
Příklad 54(k)
3-(5,6-dimethoxy-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-1Hindazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(k) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54 (a) kromě toho, že
4,5-dimethoxy-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5difluor-1,2-fenylendiaminu. ΧΗ NMR (methanol-d4) δ 3,98 (6H,
s), 6,85 (2H, d, 8,78 Hz), 7,29 (2H, br s), 7,54 (2H, d, 8,73 Hz), 7,86 (1H, d, 8,57 Hz), 8,24 (1H, s) , 8,57 (1H, d, 8,58
Hz). MS (APCI poz) 430,1.
Příklad 54(1)
3-(5-chlor-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(1) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že 4-chlor-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-1,2fenylendiaminu. 1H NMR (methanol-d4) δ 8,62 (1H, d, J = 8,6
Hz), 8,30 (1H, s) , 7,90 (1H, dd, Jl = 8,6 Hz, J2 = 1,3 Hz),
7,69 (b, 2H) , 7,56 (2H, d, J = 6,89 Hz),
7,33 (1H, dd, Jl • ·
8,59, J2 = 1,97 Hz), 6,88 (2H, d, J = 6,89 Hz). MS (APCI poz)
404,1.
334
Příklad 55
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-pyridin-4-yl-lH-indazol
SEM-sloučenina z příkladu 55 byla konvertována na sloučeninu z příkladu 55 podobným způsobem, jak bylo popsáno
v příkladu 27(a). 1H NMR (300 MHz, CDC1 3 + MeOH-d4 + DMSO-d6) δ
8,71-8,64 (m, 3H) , 8,03 (s, IH) , 7,86 (dd, 2H, J = 4,7, 1,6
Hz), 7,77-7,72 (m, 3H), 7,32 (dd, 2H, J = 6,0, 3,1 Hz). HRMS
(FAB) [M+H]/z vypočteno 312 , 1244 , změřeno 312,1253.
Analyzováno s 1,40 H2O, vypočteno: C (67,80), H (4,73), N (20,81). Změřeno: C (68,06), H (4,45), N (20,68).
Výchozí látka byla připravena takto:
Roztok 0,70 g (2,0 mmol) 6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu, 0,26 g (2,4 mmol) benzen-1,2-diaminu a 77 mg (2,4 mmol) síry v 10 ml DMF byl zahříván v olejové lázni v 90 °C přes noc. Výsledná směs byla nalita do 200 ml solanky, a pak extrahována 3 x 60 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Výsledný olej byl
335 purifikován chromatografií na silikagelu za vzniku 0,75 g (65 %) 6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3- [1(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-benzimidazol-2-yl]-1Hindazolu jako světle hnědého oleje. 1H NMR(CDCl3) δ 8,82 (d,
1H, J = 8,5 Hz), 8,73 (d, 1H, J = 5,8 Hz), 7,94-7,89 (m, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,69-7,62 (m, 4H), 7,40-7,34 (m, 2H), 3,70-3,49 (m, 4H), 0,94 (t, 2H, J = 8,3 Hz), 0,67 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,03 (s, 9H), -0,13 (s, 9H) .
Příklad 56
6-[3-(propyn-3-ylkarbamoyl)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Roztok 55,4 mg (0,15 mmol, syntéza popsaná níže) 2-{l-[3((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]methanoyl}benzoové kyseliny, 15,4 μΐ (0,225 mmol) propargylaminu a 41,8 μΐ (0,30 mmol) triethylaminu, rozpuštěný v 1,5 ml DMF, byl podroben působení 62,7 mg (0,165 mmol) 0-(7-azabenzotriazol-l-yl)~ N,Ν,Ν',N'-tetramethyluroniumhexafluorfosfátu. Po míchání po dobu jedné hodiny byla směs koncentrována za vysokého vakua a purifikována preparativní chromatografií s převráceným poměrem fází na koloně C18. Výsledných 40 mg produktu bylo dále purifikováno chromatografií na chromatotronu s kruhovou deskou za eluce směsí 25% CH3CN a CH2CI2, za vzniku 16,5 mg produktu jako bílé pevné látky (27% výtěžek) . 1H NMR (DMSO-dg) δ 13,30 (s, 1H) , 8,58 (d, J = 5,00 Hz, 1H) , 8,05 (d, J = 8,29 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 7,79 (m, 3H) , 7,63 (d, J = 8,25 Hz, 1H) , 7,53 (m, 3H) , 7,32 (s, 1H) , 7,27 (m, 2H) , 6,89 (d, J = <· • · · · · · • ·
336
8,48 Hz, 1H) . Anal. výpočet, pro C25H18N4O2 · 0,5 H2O: C, 72,27, H, 4,61, N, 13,49. Změřeno: C, 72,39, H, 4,62, N, 13,69.
(i)
Syntéza 2-{1-[3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-lH-indazol-6yl]methanoylJbenzoové kyseliny. Roztok 402 mg (0,805 mmol, syntéza popsaná níže) 2-{1-[3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-1- (2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-yl]methanoyl}benzoové kyseliny, 215 μΐ (3,22 mmol) ethylendiaminu a 6,44 ml (6,44 mmol) 1M TBAF v THF byl míchán v 90 °C v olejové lázni po dobu 4 hodin. Surová reakční směs byla zastavena 38 6 μΐ (6,44 mmol) octové kyseliny, naředěna 100 ml ethylacetátu, extrahována 2 x 20 ml 1M roztoku hydrouhličitanu sodného, 5 x 20 ml solanky, usušena nad sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována na objem 3 ml. Výsledná surová látka byla purifikována preparativní chromatografií s převráceným poměrem fází na koloně C18 za vzniku 211 mg sloučeniny uvedené v názvu jako žluté pevné látky (71 % výtěžek). 1H NMR (DMSO-dg) δ 13,50 (š s, 1H), 8,68 (d, J = 5,27 Hz, 1H) , 8,29 (d, J = 8,86 Hz, 1H), 8,13-7,90 (m, 4H), 7,81-7,43 (m, 7H).
(ii)
*·
0 0 • 0 • 0 • · 0 0 0 0
0 0 0
337
Syntéza 2—{1—[3—((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazol-6-yl]methanoyl}benzoové kyseliny. Roztok 477 mg (1,0 mmol) 6-jodindazolu, rozpuštěno v 10 ml THF, v -100 °C byl po kapkách podroben působení 440 μΐ (1,10 mmol) 2,5M n-butyllithia v hexanu, mícháno po dobu 5 minuty v této teplotě, a pak byl podroben působení roztoku 222 mg (1,5 mmol) anhydridu kyseliny ftalové v 1,0 ml THF. Výsledná směs byla ponechána ohřát se pomalu na teplotu místnosti, kde byla zbavena THF, naředěna ethylacetátem, extrahována IN kyselinou citrónovou, extrahována solankou, usušena nad sulfátem hořečnatým a koncentrována na olej. Olej byl triturován methylenchloridem a diethyletherem za vzniku 484 mg (81% výtěžek) sloučeniny uvedené v názvu jako bílé pevné látky. XH NMR (DMSO-dg) δ 8,67 (d, J = 5,09 Hz, 1H) , 8,31 (d, J = 8,85 Hz, 1H) , 8,08-7,55 (m, 4H) , 7,50-7,37 (m, 2H) , 5,81 (s, 2H), 3,53 (t, J = 8,10 Hz, 2H), 0,78 (t, J = 8,15 Hz, 2H), -0,12 (s, 9H).
Příklad 57
6-[3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 57 byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 58. 1H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,15 (s, 1H) ,
99 » 9 9 <
» 9 <
9 • · 9 9 9 ·
9
9 99
338
1,9 Hz), 6,79 (s, 1H), 3,96 (s, 3H) , 2,17 (s, 3H) , ESIMS m/z
451 [M+H]+. Anal. vypočteno pro C26H22N6O2 x 0,5 H2O x 0,4 hexan (494,0 g/mol): C, 69,05, H, 5,84, N, 17,01. Změřeno: C, 68,78, H, 5,55, N, 17,05.
Příklad 58
6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3E-[2-(lH-imidazol-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Roztok 7,5 ml (7,5 mmol, 15,0 ekv.) l,0M tetrabutylamoniumfluoridu v THF a 0,33 ml (5,0 mmol, 10 ekv.) 1,2diaminoethanu bylo přidáno k 360 mg (0,5 mmol, 1,0 ekv.) [2-methyl-5-(1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-{(E)-2-[1(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol-2-yl]vinyl}-1Hindazol-6-yloxy)fenyl]amidu 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny v 5 ml 1,4-dioxanu a reakční směs byla zahřívána na 90 °C po dobu 18 hodin. Na konci této doby byla reakce koncentrována při sníženém tlaku a výsledný oranžový olej byl naředěn 50 ml ethylacetátu. Organická vrstva byla důkladně promyta 5 x 50 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného, solankou, usušena nad sulfátem hořečnatým a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku 287 mg žluté pevné látky. Surový produkt byl purifikován chromatografií s kruhovou deskou na silikagelu s použitím směsi 5% methanolu a chloroformu s 0,1% hydroxidem amonným (Rf 0,1) jako eluentu za vzniku 140 mg (61 %) (5-{3-[(E)-2-(lH-imidazol-2-yl)vinyl]-1Hindazol-6-yloxy}2-methylfenyl)amidu 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny jako světle žluté pevné látky:
•4 4444 ·
4 44
44 44 44 « 4 4 4 4 4
44444 44 ·
339
HPLC Rt = 11,8 minut, TLC Rf = 0,8 (10% směs methanolu a chloroformu s 0,1% hydroxidem amonným), XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,03 (s, 1H) , 12,30 (š s, 1H) , 9,78 (s, 1H) , 8,00 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,54 (d, 1H, J = 16,8 Hz), 7,32 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,27 (d, 1H, J = 16,9 Hz), 7,13-7,12 (m, 3H), 7,006,94 (m, 3H), 6,78 (s, 1H), 4,39 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 2,23 (s, 3H) , 2,19 (s, 3H), 1,28 (t, 3H, J - 7,1 Hz). Anal. vypočteno pro C26H25N7O2 · 0,5 H2O · 0,4 hexan (511,0 g/mol): C, 66, 75, H, 6,23, N, 19,19. Změřeno: C, 66,95, H, 6,25, N, 18,83.
Výchozí látky byly připraveny takto:
(i) Příprava 1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazolu
2,0 g (29,4 mmol, 1,0 ekv.) ΙΗ-imidazolu v 70 ml THF byly přidány při teplotě 0 °C k suspenzi 1,5 g (38,2 mmol, 1,3 ekv.) hydridu sodného (60% v minerálním oleji) ve 30 ml THF. Poté, co ustal vývoj plynu, byla směs zahřáta na teplotu místnosti po dobu 45 minut, a pak opět ochlazena na 0 °C. Bylo přidáno 5,4 ml (30,2 mmol, 1,0 ekv.) [2-(trimethylsilyl)ethoxy]methylchloridu a směs byla zahřáta přes noc na teplotu místnosti. Reakce byla zastavena saturovaným hydrouhličitanem sodným, THF · bylo odstraněno při sníženém tlaku a výsledná béžová suspenze byla extrahována ethylacetátem. Extrakty byly spojeny, promyty solankou, usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány za vzniku 6,9 g jantarového oleje. Olej byl purifikován velmi rychlou chromatografii na silikagelu s použitím 2% směsi methanolu a chloroformu jako eluentu za vzniku 4,7 g (81 %) 1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-imidazolu jako světle jantarového oleje: TLC Rf = 0,3 (5% směs methanolu a chloroformu), XH NMR (300 MHz,
DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H) , 7,26 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 6,93 (s, • · • · · · · · « · • fcfcfc * · «
IH) , 5,32 (s, 2H) , 3,45 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 0,83 (t, 2H, J fc fc • · fcfc · ·
340
8,0 Hz), -0,05 (s, 9H), 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6) δ 137,9,
128,8, 119,6, 74,8, 65,1, 17,1, -1,4.
(ii) Příprava (l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol2-yl]methanolu
3,0 g (15,4 mmol, 1,0 ekv.) 1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-imidazolu bylo rozpuštěno ve 150 ml THF a ochlazeno na -78 °C. Bylo přidáno 10,6 ml(16,9 mmol, 1,1 ekv.) n-BuLi, 1,6M v hexanu, a teplota byla ponechána zvýšit se na -40 °C po dobu 15 minut. Světle žlutý roztok byl míchán dalších 30 minut v -40 °C, pak byl anion zastaven 1,3 ml (16,9 mmol, 1,1 ekv.) DMF. Reakční směs byla přes noc zahřáta na teplotu místnosti, a pak zastavena vodou. Rozpouštědlo bylo odstraněno a směs byla extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta vodou, usušena nad solankou a sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována za vzniku 3,5 g surového produktu, TLC Rf = 0,5 (5% směs methanolu a chloroformu). Podle protonového NMR spektra je aldehydový proton přítomen v 9,73 ppm (300 MHz, DMSO-d6) . Surový produkt byl rozpuštěn v 15 ml methanolu, ochlazen na 0 °C a podroben působení 1,2 g (30,8 mmol, 2,0 ekv.) borohydridu sodného. Reakční směs byla přes noc zahřáta na teplotu místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno a surový produkt byl naředěn chloroformem, promýt vodou, usušen nad solankou a sulfátem hořečnatým, filtrován a koncentrován za vzniku 3,6 g čirého oleje. Olej byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu s použitím 3-6% směsi methanolu a chloroformu s 0,1% hydroxidem amonným jako eluentu za vzniku 1,4 g (41 %, 2 ·· ·· ► · * 1 ·· ···· • · • · ·· ·· «· ♦ * ♦ • · · · · »· ··· ·
341 kroky) [1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol-2yl]methanolu jako bílé pevné látky: TLC Rf = 0,4 (8% směs methanolu a chloroformu), XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,22 (d,
1H, J = 1,1 Hz), 6, ,81 (d, 1H, J = 1,0 Hz), 5,36 (s, 2H), 5,31
(br t, 1H, J = 5,2 Hz), 4, 50 (d, 2H, J =4,8 Hz), 3,48 (t, 2H,
J = 8,0 Hz), 0,83 (t, 2H, J = 8, ,0 Hz) , -0,05 (s, 9H), 13C NMR
(75 MHz, DMSO-d6) δ 148,9, 127,8, 122,5 , 75,5, 66, 5, 56, 9,18,5,
0,0.
(iii) Příprava hydrochloridu 2-chlormethyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -IH-imidazolu
I
Roztok 0,87 ml (12,0 mmol, 3,0 ekv.) thionylchloridu v 8 ml chloroformu byl ochlazen na 0 °C a podroben působení roztoku 0,92 g (4,0 mmol, 1,0 ekv.) [1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-imidazol-2-yl] methanolu ve 2 ml chloroformu, čirý roztok byl míchán při teplotě 0 °C po dobu 30 minut, a pak při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno a produkt byl postupně suspendován a koncentrován s použitím chloroformu, toluenu a cyklohexanu za vzniku 1,1 g (97 %) hydrochloridu 2-chlormethyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -IH-imidazolu jako béžové pevné látky: XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,85 (d, 1H, J = 1,9 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 1,9
Hz) , 5, 62 (s, 2H) , 5,14 (s, 2H), 3,57 (t, 2H, J = 8,3 Hz) ,
0,90 (t, 2H, J = 8,3 Hz), -0,02 (s, 9H) , 13C NMR (75 MHz,
DMSO- -d6) δ 142, 1, 123,2, 120,2, 76,5, 66,8, 31,7, 17,3, -i, 4.
(iv) Příprava 3-amino-4-methylfenolu • · ··♦· ·
9 99 ·9 ·· ··
9 9 9 9 9 9
9 999 9 9 ·
Černá pevná látka (95 %), HPLC Rt = 4,4 minut, XH NMR (300
MHz, DMSO- d6) δ 8,61 (s, 1H), 6,64 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,05
(d, 1H, J = 2,4 Hz) , 5,8 8 (dd, 1H, J = 8,0, 2,4 Hz), 4,64 (š
s, 2H), 1, 92 (s, 3H) , 13C NMR (75 MHz, DMSO-dg) δ 156, 1, 147,2,
130,2, 111,7, 103,3, 101,1, 16,6.
(v)
Příprava 3-(benzhydrylidenamino)-4-methylfenolu
Žlutá pevná látka (49 %) , tt 106-108 °C, HPLC Rt = 15,3 minut, TLC Rf = 0,2 (10% směs ethylacetátu a cyklohexanu), 1H
NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,91 (s, 1H) , 7,67-7,56 (m, 2H), 7,537,43 (m, 3H), 7,35-7,31 (m, 3H) , 7,13-7,10 (m, 2H) , 6,82 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,22 (dd, 1H, J = 8,1, 2,5 Hz), 5,88 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 1,97 (s, 3H), 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6) δ 165,4, 155,2, 150,6, 138,9, 136,0, 130,8, 130,2, 128,7, 128,4, 128,2, 128,0, 1173, 109,9, 106,2, 17,0.
(vi) Příprava benzhydryliden-{2-methyl-5-[3-((E)styryl)-1-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-yloxy]fenyl}aminu
•h « 4 4 4 4
4
4 44
44 ·· ··
4 4 4 4 4 · * · ·** · * »*
4 4 4 4 4 4 ·· »4 4» 4444
343
Do baňky s kulatým dnem bylo vloženo 5,5 g (26,0 mmol, 2,0 ekv.) fosfátu draselného, 3,9 g (13,6 mmol, 1,1 ekv.) 3-(benzhydrylidenamino)-4-methylfenolu, 6,2 g (13,0 mmol, 1,0 ekv.) 6-jod-3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-1Hindazolu a 130 ml o-xylenu. Výsledná suspenze byla odplyněna, probublána argonem a podrobena působení 916 mg (1,1 mmol, 8 mol%) směsi tris(dibenzylidenaceton)dipalladia(0) a 656 mg (2,2 mmol, 16 mol%) bifenyl-2-yl-di-terc-butylfosfanu. Baňka byl ponořena do olejové lázně a míchána v 100 °C po dobu 18 hodin, černá suspenze byla ochlazena na teplotu místnosti, filtrována přes celit a koncentrována. černý olej byl rozpuštěn v chloroformu, promyt vodou, solankou, usušen nad sulfátem hořečnatým, filtrován a koncentrován za vzniku 12,1 g černého oleje. Surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu s použitím 10-15% směsi etheru a cyklohexanu jako eluentu za vzniku 1,4 g (16 %) benzhydryliden-{2-methyl-5-[3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazol-6-yloxy] fenyl } aminu jako žluté pěny z etheru: HPLC Rt = 24,3 minut, TLC Rf = 0,5 (20% směs etheru a cyklohexanu), 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,10 (d, IH,
J = 8,8 Hz), 7,75-7,66 (m, 4H) , 7,53-7,31(m, 11H) , 7,14-7,08 (m, 4H), 6,62 (dd, IH, J = 8,8, 2,0 Hz), 6,55 (dd, IH, J = 8,2, 2,5 Hz), 6,20 (d, IH, J = 2,4 Hz), 5,64 (s, 2H) , 3,51 (t, 2H, J = 7,8 Hz), 2,12 (s, 3H), 0,78 (t, 2H, J = 7,7 Hz), -0,14 (s, 9H) .
(vii) Příprava 2-methyl-5-[3-((E)styryl)-1-(2-trimethyl~ silanylethoxymethyl-lH-indazol-6-yloxy]fenylaminu • · · · · « · ·« ·· ·· ····
Jantarový olej (80 %) , HPLC Rt = 21,0 minut, TLC Rf = 0,4 (20% směs ethylacetátu a cyklohexanu) , XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 8,18 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,74-7,71 (m, 2H) , 7,52 (s, 2H), 7,43-7,38 (m, 2H) , 7,33-7,28 (m, 1H), 7,20 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 6,97-6,90 (m, 2H), 6,33 (d, 1H, J = 2,4 Kz), 6,16 (dd, 1H, J = 8,0, 2,5 Hz), 5,66 (s, 2H), 5,01 (š s, 2H) , 3,52 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 2,03 (s, 3H), 0,80 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 0,11 (s, 9H).
(viii) Příprava {2-methyl-5-[3-((E)styryl)-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl) -lH-indazol-6-yloxy]fenyljamidu 2-ethyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny
Bílá pěna (85 %), HPLC Rt = 21,5 minut, TLC Rf = 0,2 (20% směs ethylacetátu a cyklohexanu), XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ
9,75 (s, 1H), 8,24 ( d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,74-7,72 (m, 2H) ,
7,53 (s, 2H), 7,43-7, 38 (m, 2H), 7,34-7,28 (m, 3H) , 7,12 (d,
1H, J = 2,6 Hz), 7,00 (dd, 1H, J = 8,8, 2,0 Hz), 6,92 (dd, 1H,
J = 8,3, 25 Hz), 6,78 (s, 1H), 5,69 (s, 2H) , 4,40 (q, 2H, J =
7,1 Hz) , 3,53 (t, 2H, J = 7,9 Hz), 2,22 (s, 3H), 2,19 (s, 3H) ,
·· ♦ · 4 4
4 4
4 ·♦»· • ·
4*4 • · • «·· •' 4 4 4 4 4 4 4 4 ···* 444 *· 44 44 44*4
345
1,27 (t, 3H, J = 7,1 Hz), 0,78 (t, 2H, J = 7,9 Hz), -0,15 (s, 9H) .
(ix) Příprava {5-[3-formyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)lH-indazol-6-yloxy]-2-methylfenyl}amidu 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny
Roztok 774 mg (1,28 mmol, 1,0 ekv.) {2-methyl-5-[3((E)styryl)-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6yloxy]fenyl}amidu 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny v 8 ml 1,4-dioxanu a 2 ml vody byl podroben působení 7 mg (0,03 mmol, 0,02 ekv.) oxidu osmičelého. Roztok byl míchán po dobu 5 minut, a pak byl podroben působení 822 mg (3,84 mmol, 3,0 ekv.) jodistanu sodného. Výsledná hustá žlutohnědá suspenze byla míchána přes noc při teplotě místnosti, nalita do 100 ml 15% Na2S2O3 a extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta saturovaným hydrouhličitanem sodným, solankou, usušena nad sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována za vzniku 902 mg jantarového oleje. Surový produkt byl purifikován chromatografií s kruhovou deskou na silikagelu s použitím 1050% směsi ethylacetátu a cyklohexanu jako eluentu za vzniku 590 mg (86 %) {5-[3-formyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)lH-indazol-6-yloxy]-2-methylfenyl}amidu 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny jako béžové pevné látky z etheru: HPLC Rt = 18,9 minut, TLC Rf = 0,2 (40% směs ethylacetátu a cyklohexanu), XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 10,16 (s, 1H, 9,75 (s, 1H), 8,14 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,48 (d, 1H, J
44·· • ·
4 44
44 ·4 ··
9 9 9 9 9 9
4 4 44 9 4 9
9 9 9 9 9 9 4
346
= i, 8 Hz), 7, 32 (d, 1H, , J = 8,5 Hz), 7,16-7,13 (m, 2H) , 6,93
(dd, 1H, J = 8,3, 2,6 Hz) , 6,78 (s, 1H), 5,84 (s, 2H) , 4,39
(q. 2H, J = 7 , 1 Hz) , 3 55 (t, 2H, J = 7,8 Hz), 2,23 (s, 3H) ,
2,19 (s, 3H), 1,27 (t, 3H, J = 7,2 Hz) , 0,79 (t , 2H z j = = 7,8
Hz) , -0,15 (s, 9H) .
(x) Příprava 2-methyl-5-(1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3((E)-2-[1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol-2yl]vinyl}-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]amidu 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny
Roztok 344 mg (1,22 mmol, 2,0 ekv.) hydrochloridu 2-chlormethyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazolu ve 20 ml chloroformu byl převeden na formu volné báze saturovaným hydrouhličitanem sodným. Organická vrstva byla usušena nad solankou a sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována za vzniku 301 mg (100 %) jantarového oleje. Výsledný olej byl rozpuštěn ve 12 ml acetonitrilu, byl podroben působení 304 mg (1,16 mmol, 1,9 ekv.) trifenylfosfinu a zahříván na 7 0 °C po dobu 18 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno a surový l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-2[ (trifenyl-X5-fosfanyl)methyl]-lH-imidazolchlorid byl rozpuštěn ve 12 ml THF, ochlazeného na -78 °C a podroben působení 1,2 ml (1,22 mmol, 2,0 ekv.) terc-butoxidu draselného, l,0M v THF. Po 15 minutách bylo přidáno 325 mg (0,61 mmol, 1,0 ekv.) {5—[3— formyl-1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-yloxy]2-methylfenyl}amidu 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové ·· ·♦ * · · «
I ···· • · • · ·« ·· ·*··
347 kyseliny v 1 ml THF k ylidu v -78 °C. čirý žlutý roztok byl přes noc zahřát na teplotu místnosti, zastaven vodou a extrahován ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta solankou, usušena koncentrována za jantarového oleje.
filtrována a produktu jako nad sulfátem hořečnatým, vzniku 1,0 g surového Surový produkt byl purifikován další chromatografii s kruhovou deskou na silikagelu s použitím 0-5% směsi methanolu a chloroformu jako eluentu za vzniku 390 mg (88 %) [2-methyl-5-(1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-{(E)2-[1-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol-2-yl]vinyl}lH-indazol-6-yloxy)fenyl]amidu 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny jako žlutohnědé pevné látky po stání přes noc: HPLC Rt = 20,6 minut, TLC Rf = 0,4 (4% směs methanolu a dichlormethanu), 1H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 9,75 (s, IH) , 8,14 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,64 (d, IH, J = 16,2 Hz), 7,42 (d, IH, J = 16,3 Hz), 7,39-7,35 (m, 3H) , 7,30 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,12 (d, IH, J = 2,5 Hz), 7,03 (s, IH) , 6,99 (dd, IH, J = 8,8, 1,9 Hz), 6,78 (s, IH) , 5,70 (s, 2H) , 5,55 (s, 2H) , 4,40 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 3,55-3,48 (m, 4H), 2,22 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,27 (t, 3H, J = 7,1 Hz), 0,84 (t, 2H, J = 7,9 Hz), 0,77 (t, 2H, J = 7,9 Hz), -0,11 (s, 9H), -0,15 (s, 9H) .
Příklad 59(a)
Hydrochlorid 6- [3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazolu
4,57 g (9,59 mmol, 1 ekv.) sloučeniny z příkladu 41 (a) bylo nabráno do 96 ml methanolu a chráněno před světlem fcfc ···· • fc « fc ·· • fc ·· ·· fc· • fcfc fcfcfcfc • ···· fc fc fc • ········ + · • · fcfcfcfc fcfcfc •fcfcfc ··· fcfc fcfc ·· fcfcfcfc
348 aluminiovou folií. Druhá baňka s 20 ml methanolu byla podrobena působení 684 μΐ (1,00 ekv.) acetylchloridu po dobu 5 minut. Roztok kyseliny pak byl přidán k první směsi a směs byla několikrát promyta -20 ml methanolu. Těkavá látka byla odstraněna při sníženém tlaku a zbytek byl triturován 1:1 směsí ethylacetátu a hexanu za vzniku 4,82 g (98 %) žlutého prášku po filtraci a usušeni: analyzováno s 1,0 H2O, vypočteno:
C (61,85), H (5,07), N (15,46). Změřeno: C (61,15), H (5,15),
N (15,38) .
Příklad 59(b)
Hydrochlorid 6-[3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido) benzoyl] -3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazolu
A cAy γϋ- HCI
Sloučenina z příkladu 59 (b) byla připravena podobným
způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě toho, že sloučenina
z příkladu 41(p) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41 (a). HPLC: 3,92 minut (100% oblast), XH NMR (DMSO) δ 10,45 (s, 1H), 8,85 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 8,49 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 8,38-8,30 (m, 4H) , 8,21 (dt, 1H, J = 7,5, 2,1 Hz), 8,01 (s, 1H), 7,90-7,79 (m, 2H), 7,72-7,64 (m, 3H) , 6,70 (s, 1H), 4,30 (s, 3H) , 2,33 (s, 3H) . Anal. (C27H20N4O2S · 1,3 H2O · 0,2 EtOAc): vypočteno C, 62,15, H, 5,18, N, 15,64, změřeno C, 61,81, H, 5,01, N, 15,64.
·4 • 4 ·
4« ···· • · 4 • 4 44 • 4 • 4
4*
4 4 • · 4 · · « » ·
44
444 4
349
Příklad 59(c)
Hydrochlorid 6-[N-(5-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-2-fluor-4-methylfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2yl)ethenyl]-IH-indazolu
Sloučenina z příkladu 59(c) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 48 (a) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41(a). Anal. výpočet: C, 63,21, H, 5,12, N, 38,43, Cl, 6,66. Změřeno: C, 60,86, H, 5,38, N, 17,28, Cl, 6,52.
Příklad 59(d)
Hydrochlorid 6-[N-(3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido) -4-fluorfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1Hindazolu
Sloučenina z příkladu 59(d) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59 (a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 49(a) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41 (a). XH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,2 (b, 1H) , 9,97 (s, 1H) , 8,75 (d, 1H, J = 5,44 Hz), 8,51 (š s, 1H) , 8,35 (m, 2H), 8,20 (d, 1H, J = 16,59 Hz), 8,06 (d, 1H, J = 8,81 Hz), 7,71 (d, 1H, J = 16,59 Hz), 7,70 (m, 1H) , 7,44 (dd, 1H, J = 6,65 Hz, J = 2,67 Hz), 7,24 (t, 1H, J = 9,54 Hz), 7,12 (d, 1H, J = 1,46 ·· ···· « · * • ··· •· • · • ··· ·♦ ·» • · t • «
9 9 >· • · 0 • · · ft· 9999
350
Hz), 7,05 (m, 2H) , 6,86 (s, 1H) , 4,0 (s, 3H) , 3,84 (š s, 1H,
2,20 (s, 3H).
Příklad 59(e)
Hydrochlorid 6-[3-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido) fenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazolu
Sloučenina z příkladu 59 (e) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59 (a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 31(d) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41(a). XH NMR (DMSO-dg) δ 13,53 (s, 1H) , 10,23 (s, 1H) , 8,78
(d, 1H, J - = 5,5 Hz), 8,30 (m, 4H), 7,80 (m, 2H) , 7,59 (d, 1H,
J = : 7,7 Hz ), 7,55 (s, 1H), 7,41 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 7,11 (s,
2H) , 6, 88 (d, 1H, J = 6,7 Hz), 6,81 (s, 1H) , 4,38 (q, 2H, J =
7,0 Hz) , 3 ,75 (š s, 1H) , 2,19 (s, 3H), 1,29 (t, 3H, J = 7,0
Hz) . An ial. výpočet pro C27 H25C1N6O2 · 1, 7 H2O • 0,1 EtOAc: c,
60, 89, H, 5,45, N, 15,55 . Změřeno: C , 60, 88, H, 5,51, N,
15, 27 .
Příklad 59(f)
Hydrochlorid 6-[2-(methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]indazolu
• · · • · · · · • · · 4
351
Sloučenina z příkladu 59(f) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 33(a) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41(a). Analyzováno s 2,0 H2O, vypočteno C, 57,58, H, 5,05, N, 12,21, Cl, 6,99. Změřeno: C, 57,24, H, 5,048, N, 11,91: Cl, 6, 63.
Příklady sloučenin popsaných výše mohou být testovány na aktivitu s použitím testů popsaných níže.
Biologické testování: enzymové testy
Stimulace buněčné proliferace růstovými faktory, jako je například VFFG, FGF a další, závisí na jejich indukci autofosforylace každého z jejich příslušných receptorů tyrozinkináz.Tudíž schopnost inhibitoru proteinkinázy blokovat autofosforylaci může být měřena inhibici peptidových substrátů. Pro měření proteinkinázové inhibiční aktivity sloučenin byly navrženy následující konstrukty.
Konstrukt VEGF-R2 pro test:
Tento konstrukt zjišťuje schopnost testované sloučenina inhibovat cytosolové aktivitu tyrozinkinázy. Konstrukt (VEGF-R2A50) domény receptoru 2 humánního vaskulárního endotelového růstového faktoru (VEGF-R2) s chybějícími 50 centrálními zbytky ze 68 zbytků inzerční kinázové domény byl • · · · · · ► · · • · · · • · » · · · · » · · « > · · « ·· ··
352 exprimován v systému bakulovirus/hmyzí buňky. Ze 1356 zbytků kompletního VEGF-R2 obsahuje VEGF-R2A50 zbytky 806 až 939 a 990 až 1171, a také jednu bodovou mutaci (E990V) v inzerční kinázové doméně relativně k VEGF-R2 divokého typu. Autofosforylace purifikovaňého konstruktu byla prováděna inkubací enzymu v koncentraci 4 μΜ v přítomnosti 3 mM ATP a 40mM MgCl2 ve lOOmM HEPES, pH 7,5, obsahujícím 5% glycerol a 5mM DTT, ve 4 °C po dobu 2 hodin. Po autofosforylaci bylo ukázáno, že tento konstrukt má katalytickou aktivitu v podstatě totožnou s konstruktem obsahuj ícím typu. (viz autofosforylovanou kinázovou doménou divokého Parast et al., Biochemistry, 37, 16788-16801, 1998).
Konstrukt FGF-R1 pro test:
Intracelulární kinázová doména humánního FGF-R1 byla exprimována s použit i m bakulovirového vektorového axpresrd-hosystému počínaje endogenním methioninovým zbytek 456 ke glutamátu 766, podle systému číslování zbytků podle autorů Mohammadi et al. (Mol. Cell. Biol., 16, 977-989, 1996). Kromě toho konstrukt také má následující substituce 3 aminokyselin: L457V, C488A a C584S.
Konstrukt LCK pro test:
LCK tyrozinkináza byla exprimována v hmyzích buňkách jako N-koncová delece počínaje aminokyselinovým zbytkem 223 ke konci proteinu ve zbytku 509, s následujícími substitucemi dvou aminokyselin v N-koncové části: P233M a C224D.
Konstrukt CHKl pro test:
Kompletní humánní CHKl (FL-CHK1) se značkou His na C-koncové části byl exprimován s použitím systému • · · · · · • ·
353 bakulovirus/hmyzí buňky. Obsahuje 6 histidinových zbytků (6 x značka His) v C-koncové části 476 aminokyselin humánního CHK1. Protein byl purifikován obvyklými chromatografickými technikami.
Konstrukt CDK2/cyklin A pro test:
CDK2 byl purifikován s použitím publikované metody (Rosenblatt et al., J. Mol. Biol., 230, 1317-1319, 1993) z hmyzích buněk, které byly infikovány bakulovirovým expresním vektorem. Cyklin A byl purifikován z buněk E. Coli exprimujících kompletní rekombinantní cyklin A a zkrácený konstrukt s cyklinem A byl vytvořen limitovanou proteolýzou a purifikován, jak bylo popsáno dříve (Jeffrey et al., Nátuře, 376, 313-320, 1995).
Konstrukt CDK4/cyklinD pro test: .................. ...........
Komplex humánního CDK4 a cyklinu D3 nebo komplex cyklinu Dl a fúzního proteinu humánního CDK4 a glutathion-Stransferázy (GST-CDK4), byl purifikován s použitím tradičních biochemických chromatografických technik z hmyzích buněk, které byly současně infikovány (koinfikovány) odpovídajícími bakulovirovými expresními vektory.
Konstrukt FAK pro test:
Katalytická doména humánního FAK (FAKcd409) byla exprimována s použitím bakulovirového vektorového expresního systému. Exprimovaná doména s 280 aminokyselinami obsahuje zbytky methionin 409 až glutamát 689. Existuje jedna aminokyselinová substituce (P410T) relativně k přístupovému číslu sekvence L13616, publikováno autory Whithey, G.S. Et al.
• · · · · · • ·
354 (DNA Cell Biol, 9, 823-30, 1993) . Protein byl purifikován s použitím techniky klasické chromatografie.
Konstrukt TIE-2 (TEK) pro test:
Doména tyrozinkinázy TIE-2 byla exprimována v hmyzích buňkách jako N-koncová delece počínaje aminokyselinovým zbytkem 774 ke konci proteinu ve zbytku 1124. Tento konstrukt také nese mutaci R774M, která slouží jako iniciační methioninový zbytek při translaci.
Test VEGF-R2
Spřažený spektrofotometrický (FLVK-P) test
Produkce ADP z ATP, která doprovází transfer fosfátu byla spřažena s oxidací NADH využitím fosfoenolpyruvátu (PEP) a systému s pyruvátkinázou (PK) a.....laktátdehydrogenázou____(iDHJ-.Oxidace NADH byla monitorována poklesem absorbance při 340 nm (e34o = 6,22 cm-1 mM1) s použitím spektrofotometru Beckman DU 650. Podmínky testu pro fosforylovaný VEGF-R2A50 (označen jako FLVK-P v tabulkách uvedených níže) byly následující: lmM PEP, 250μΜ NADH, 50 jednotek LDH/ml, 20 jednotek PK/ml, 5mM DTT, 5, lmM poly(E4Yi), lmM ATP a 25 mM MgCl2 v 200 mM HEPES, pH 7,5. Podmínky testu pro nefosforylovaný VEGF-R2Á50 (označen jako FLVK v tabulkách) byly následující: lmM PEP, 250μΜ NADH, 50 jednotek LDH/ml, 20 jednotek PK/ml, 5mM DTT, 20mM poly^Yx), 3mM ATP a 60mM MgCl2 a 2mM MnCl2 ve 200mM HEPES, pH 7,5. Testy byly iniciovány s 5 až 40 nM enzymu. Hodnoty Kx byly zjišťovány měřením enzymové aktivity v přítomnosti měnící se koncentrace testované sloučeniny. Data byla analyzována s použitím software Enzyme Kinetic a Kaleidagraph.
• · 4 4
4· 4444
355
Test ELISA
Tvorba fosfogastrinu byla monitorována s použitím biotinylovaného peptidů gastrinu (1-17) jako substrátu. Biotinylovaný fosfogastrin byl imobilizován s použitím streptavidinem potažených 96 jamkových mikrotitračních destiček, pak následovala detekce s použitím protilátky antifosfotyrozin konjugované s křenovou peroxidázou. Aktivita křenové peroxidázy byla monitorována s použitím diamonné soli 2,2'-azinodi[3-ethylbenzathiazolinsulfonátu(6)] (ABTS).
Typické roztoky testu obsahovaly: 2μΜ biotinylovaný peptid gastrin, 5mM DTT, 20μΜ ATP, 26mM MgCl2 a 2mM MnCl2 ve 200mM HEPES, pH 7,5. Test byl iniciován s 0,8 nM fosforylovaného VEGF-R2A50. Aktivita křenové peroxidázy byla testována s použitím lOmM ABTS. Reakce křenové peroxidázy byla zastavena přidáním kyseliny (H2SO4) , pak následovalo odečítáni absorbance ve 405 nm. Hodnoty K± byly zjišťovány měřením enzymové aktivity v^řlf:dmhíošf3~měřilči~fe koncentrace testované sloučeniny. Data byla analyzována s použitím software Enzyme Kinetic a Kaleidagraph.
Test FGF-R
Spektrofotometrický test byl prováděn, jak bylo popsáno výše pro VEGF-R2, kromě následujících změn koncentrace: FGF-R = 50 nM, ATP = 2 mM a poly(E4Yl) = 15 mM.
Test LCK
Spektrofotometrický test byl prováděn, jak bylo popsáno výše pro VEGF-R2, kromě následujících změn koncentrace: LCK = nM, MgCl2 = 0 mM, poly(E4Yl) mM.
• 9 «9
9 9 9
9 9
356
Test CHK1
Produkce ADP z ATP, která doprovází přenos fosfátu na syntetický substrátový peptid Syntide-2 (PLARTLSVAGLPGKK) byla spřažena s oxidací NADH s použitím fosfoenolpyruvátu (PEP) prostřednictvím působení pyruvátkinázy (PK) a laktátdehydrogenázy (LDH). Oxidace NADH byla monitorována poklesem absorbance v 340 nm (e340 = 6,22 cm-1 mM'1) s použitím spektrofotometru HP8452. Typické roztoky testu obsahovaly: 4mN PEP, 0,15mM NADH, 28 jednotek LDH/ml, 16 jednotek PK/ml, 3mM DTT, 0,125 mM Syntide-2, 0,15mM ATP, 25mM MgCl2 v 50mM TRIS, pH 7,5 a 400mM NaCl. Testy byly iniciovány s lOnM FL-CHK1. Hodnoty Ki byly zjišťovány měřením počáteční enzymové aktivity v přítomnosti měnících se koncentrací testovaných sloučenin. Data byla analyzována s použitím software Enzyme Kinetic a Kaleidagraph.
Testy CDK2/cyklinu A a CDK4/cyklinu D
Kinázová aktivita závislá na cyklinu byla měřená kvantifikací enzymem katalyzované, na čase závislé inkorporace radioaktivního fosfátu z [32P]ATP do rekombinantního fragmentu retinoblastomového proteinu. Není-li uvedeno jinak, byly testy prováděny na 96 jamkových destičkách v celkovém objemu 50 μΐ, v přítomnosti 10 mM HEPES (N-[2-hydroxyethyl]piperazin-N'-[2(pH 7,4), lOmM MgCl2, 25μΜ 1 mg/ml ovalbuminu, 5 μg/ml leupeptinu, lmM dithiothreitolu, lOmM β-glycerofosfátu, 0,lmM vanadičnanů sodného, lmM fluoridu sodného, 2,5mM ethylenglykol-bis(β-aminoethylether)-N,N,Ν' ,Ν' -tetraoctové kyseliny (ÉGTA), 2% (objem/objem) dimethylsulfoxidu a 0,03 až 0,2μΟί [32P]ATP. Substrát (0,3-0,5 μg) byl purifikovaný fragment rekombinantního retinoblastomového proteinu (Rb) ethansulfonová kyselina]) adenosintrifosfátu (ATP), • fc ·· ♦ fcfc ·
fc · • fcfcfc • fc
357 (zbytky 386-928 nativního retinoblastomového proteinu, 62,3 kD, obsahující většinu fosforylačních míst zjištěných v nativním proteinu o velikosti 106 kD, a také značku šesti histidinových zbytků pro snadnou purifikaci). Reakce byly iniciovány s CDK2 (150 nM komplexu CDK2/cyklin A) nebo CDK4 (50 nM komplexu CDK4/cyklin D3), ínkubovány ve 30 °C a ukončeny po 20 minutách přidáním ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA) do koncentrace 250 mM. Fosforylovaný substrát pak byl zachycen na nitrocelulózové membráně s použitím filtračního zařízení pro 96jamkové destičky a neinkorporovaná radioaktivita byla odstraněna opakovaným promytím 0,85% kyselinou fosforečnou. Radioaktivita byl kvantifikována expozicí suché nitrocelulózové membrány pomocí zobrazovacího zařízení Phosphoimager. Zjevné hodnoty Ki byly měřeny testováním enzymové aktivity v přítomnosti různých koncentrací sloučeniny a odečtením radioaktivity pozadí měřené bez enzymu. Kinetické parametry (kcat, Km pro ATP) byly měřeny pro každý enzym v obvyklých testovacích podmínkách určením závislosti počátečních rychlostí na koncentraci ATP. Data byla proložena závislostí pro kompetitivní inhibici s použitím software Kaleidagraph (Synergy Software) nebo byla proložena závislostí pro kompetitivní inhibici s těsnou vazbou použitím software KineTic (BioKin, Ltd.). Změřené hodnoty Ki pro známé inhibitory CDK4 a CDK2 souhlasily s publikovanými hodnotami IC50. Specifická aktivita CDK4 byla stejná, ať v komplexu s konstruktem kompletního cyklinu D3 nebo zkráceného cyklinu D3, oba komplexy také poskytly velmi podobné hodnoty Ki pro vybrané inhibitory.
Test FAK
Pro FAK HTS byl použit test fluorescenční polarizace poskytnutý firmou LJL Biosystems. Kinázová reakce obsahovala: lOOmM Hepes pH 7,5, lOmM MgCl2, lmM DTT, lmM ATP a 1 mg/ml póly
9
999
999
358
Glu-Tyr (4:1). Reakce byla iniciována přidáním 5nM FAKcd409. Reakce byla ukončena přidáním EDTA, pak následovalo přidání peptidů značeného fluorem a anti-fosfotyrozinové protilátky, poskytnuto firmou LJL Biosystémy. Výsledky inhibice byly odečítány na detektoru Analyst (LJL).
Spektrofotometrický test TIE-2
Kinázou katalyzovaná produkce ADP z ATP, která doprovází přenos fosfátu na náhodný kopolymer póly(Glu4Tyr) byla spřažena s oxidací NADH s použitím aktivity pyruvátkinázy (PK) a laktátdehydrogenázy (LDH) . NADH konverze na NAD+ byla monitorována poklesem v absorbance ve 340 nm (ε = 6,22 cm mM-1) s použitím spektrofotometru Beckman DU650. Typické reakční roztoky obsahovaly lmM fosfoenolpyruvát, 0,24mM NADH, 40mM MgCl2, 5mM DTT, 2,9 mg/ml póly (Glu4Tyr) , 0,5mM ATP, 15 jednotek/ml PK, 15 jednotek/ml LDH ve lOOmM HEPES,___pH 7,5.
Testy byly iniciovány přidáním 4 až 12 nM fosforylované Tie-2 (aa 775 až 1122) . Procento inhibice bylo zjišťován v trojím opakování při ΙμΜ hladině inhibitoru.
Test TIE-2 DELFIA
Tvorba fosfotyrozinu byla monitorována s použitím biotinylovaného p34cdc2 (aa 6 až 20 = KVEKIGEGTYGVVYK) peptidů jako substrátu. Biotinylovaný peptid byl imobilizován s použitím NeutrAvidinem™ potažených 96 jamkových mikrotitračních destiček, pak následovala detekce s použitím protilátky anti-fosfotyrozin (PY20) konjugované s europium NI chelátem. Typické roztoky pro test obsahovaly: ΙμΜ biotinylovaný peptid p34cdc2, 150μΜ ATP, 5mM MgCl2, lmM DTT, 0,01% BSA, 5% glycerol, 2% DMSO, 25mM HEPES, pH 7,5. Test byl iniciován na destičce NeutrAvidin s 50nM intracelulární domény ·· ···· fc ·
359
TIE2. Kinázová reakce byla ukončena 50mM EDTA. Destičky pak byly promyty a byla přidána protilátka s europiem. Po inkubaci byly destičky opět promyty a byl přidán zesilovací roztok DELFIA™. Destičky byly odečítány ve standardním nastavení pro detekci europia (ex 340 nm, em 615 nm, zpoždění 400 μεεο, okno 400 μεεο). Procento inhibice bylo vypočteno s použitím referenčních jamek na destičce, do kterých bylo přidáno DMSO a ne sloučenina v DMSO, a pozadí bylo odečteno od experimentálních i kontrolních jamek se vztahem k referenčním jamkám na destičce, do kterých byla přidána EDTA před přidáním enzymu.
Test proliferace buněk HUVEC
Tento test určoval schopnost testované sloučeniny inhibovat růstovými faktory stimulovanou proliferaci endotelovýchbuněk lidské umbilikální_____žíly („HUVEC)______HUVEC buňky (pasáž 3-4, Clonetics, Corp.) byly rozmraženy do kultivačního média EGM2 (Clonetics Corp) v lahvích T75. O 24 hodin později bylo do lahví přidáno čerstvé médium EGM2. Čtyři nebo pět dnů později byly buňky vystaveny dalšímu kultivačnímu médiu (médium F12K doplněné 10% fetálním bovinním sérem (FBS), 60 pg/ml růstovým doplňkem pro endotelové buňky (ECGS) a 0,1 mg/ml heparinu). Exponenciálně narůstající buňky HUVEC potom byly použity v experimentech. Deset až dvanáct tisíc buněk HUVEC bylo naneseno na 96 jamkové destičky ve 100 μΐ bohatého kultivačního média (popsaného výše). Buňky byly ponechány přichytit se po dobu 24 hodin v tomto médiu. Médium pak bylo odstraněno odsátím a do každé jamky bylo přidáno 105 μΐ deficitního („hladovění) media (F12K+1% FBS). Po 24 hodinách bylo přidáno 15 μΐ testovaného činidla rozpuštěného v 1% DMSO v deficitním médiu nebo v tomto vehikulu samotném ke každé ošetřené jamce, konečná DMSO koncentrace byla 0,1 %. Jednu ·· »· ·· • · · • · ··· ·· ···· • » • ···
4 4 • · • · • · ·
·· ··
360 hodinu později bylo přidáno 30 μΐ VEGF (30 ng/ml) v deficitním médiu do všech jamek, kromě těch, co obsahovaly neošetřené kontroly, konečná VEGF koncentrace byla 6 ng/ml. Buněčná proliferace byla kvantifikována 72 hodin později redukcí barviva MTT, v tomto okamžiku byly buňky exponovány po dobu 4 hodin MTT (Promega Corp.). Redukce barviva byla zastavena přidáním zastavovacího roztoku (Promega Corp.) a byla zjišťována absorbance v 595 λ na spektrofotometrickém čtecím zařízení pro 96 jamkové destičky.
Hodnoty IC50 byly vypočteny prokládáním křivky reakce A595 na různé koncentrace testovaného činidla, typicky bylo použito sedm koncentrací odstupňovaných po 0,5 log, s trojím opakováním jamek v každé koncentraci. Pro screening destiček s knihovnou sloučenin byla použita jedna nebo dvě koncentrace (jedna jamka na koncentraci) a % inhibice bylo vypočteno z následujícího vzorce:
% inhibice = (kontrola - test) = (kontrola - hladovění)
Kde
Kontrola = A595, když je VEGF přítomný bez testovaného činidla Test = A595, když je VEGF přítomný s testovaným činidlem Hladovění = A595, když chybí VEGF i testované činidlo.
Test proliferace buněk karcinomu (MV522)
Protokol pro stanovení buněčné proliferace v karcinomových buňkách je podobný testu použitému pro hodnocení HUVEC buněk. Dva tisíce buněk plicního karcinomu (linie MV522, získaná od American Tissue Cultural Collection) bylo nasazeno do růstového média (médium RPMI1640 doplněné 2mM glutaminem a 10% FBS) . Buňky byly ponechány přichytit se po dobu 1 dne před přidáním testovaných činidel a/nebo vehikul. Buňky byly ošetřeny současně stejnými testovanými činidly použitými v »· ♦· • · * • · ·♦· • · * · • · * · ·· ♦♦ •e ···« • · ♦
44
9 4 · · ·
9 · · • * · ·· 4444
361
HUVEC testu. Buněčná proliferace byla kvantifikována redukčním testem barviva MTT 72 hodin po expozici testovaným činidlům. Celková délka testu je 4 dny proti 5 dnům pro buňky HUVEC, protože MV522 buňky nebyly vystaveny deficitnímu médiu (hladovění).
Test PK na myších
Farmakokinetika (např. absorpce a eliminace) léků v myších byla analyzována s použitím následujícího experimentu. Testované sloučeniny byly formulovány jako roztok nebo suspenze v 30:70 (PEG 400: acidifikován H2O) vehikulu nebo jako suspenze v 0,5% CMC. Toto bylo podáváno perorálně (p.o.) a intraperitoneálně (i.p.) ve variabilních dávkách dvěma různým skupinám (n = 4) samic myší B6. Krevní vzorky byly odebírány z orbitální vény v časových bodech: 0 hodin (před dávkou), 0,5 hodiny, 1,0 hodina, 2,0 hodiny a 4,0 hodiny a 7,0 hodin po dávce. Plazma byla získána z každého vzorku centrifugací v 2500 rpm po dobu 5 minut. Testovaná sloučenina byla extrahována z plazmy metodou organické precipitace proteinu. Pro každý časový odběr bylo 50 μΐ plazmy smícháno s 1,0 ml acetonitrilu, vortexováno (prudce třepáno na mikrotřepačce) po dobu 2 minut, a pak stočeno ve 4000 rpm po dobu 15 minut, aby se protein precipitoval a extrahoval od testované sloučeniny. Potom byl acetonitrilový supernatant (extrakt obsahující testovanou sloučeninu) nalit do nových testovacích zkumavek a evaporován na horké destičce (25 °C) ve výparech plynu N2. Do každé zkumavky obsahující usušený extrakt testované sloučeniny bylo přidáno 125 μΐ mobilní fáze (60:40, 0,025M NH4H2PO4 + 2,5 ml/1 TEA:acetonitril). Testovaná sloučenina byla resuspendována v mobilní fázi vortexováním a další protein byl odstraněn centrifugací ve 4000 rpm po dobu 5 minut. Každý vzorek byl nalit do HPLC lahvičky pro analýzu testované • fc «fcfcfc fcfc • · fc · · • fcfcfc · · • fcfc·· • ♦ · · fc··· *·· fcfc
362 • fc fcfc *· • · fc * · ··« · · · • · · 9 · 9
9 9 9· ·· ··*· sloučeniny na přístroji „Hewlett Packard 1100 series HPLC s UV detekcí. Z každého vzorku bylo 95 μΐ injikováno na kolonu Fenomenex-Prodigy s reverzní fází C-18, 150 x 3,2 mm, a bylo eluováno gradientem 45-50% acetonitrilu po dobu 10 minut. Plazmatické koncentrace testované sloučeniny (pg/ml) byly zjišťovány ve srovnání se standardní křivkou (oblast vrcholu proti koncentraci v pg/ml) s použitím známých koncentrací testované sloučeniny extrahované z plazmatických vzorků způsobem popsaným výše. Spolu se standardy a neznámými byly testovány tři skupiny (n = 4) kontroly kvality (0,25 pg/ml, 1,5 pg/ml, a 7,5 pg/ml), aby se zajistila konzistentnost analýz. Standardní křivka měla R2>0,99 a kontroly kvality byly všechny v 10 % očekávaných hodnot. Kvantifikované testované vzorky byly vyneseny do grafu pro vizuální zobrazení s použitím software Kalidagraph a jejich farmakokinetické parametry byly zjišťovány s použitím software WIN NONLIN. Příklad l(a) —paskytl-ná^leTduýícA-v^šl^dkyú^TJ^e^ůmysr^K/^UČTUďpT^ig^/nďLy,
0,33 (myší pK, AUC, po, pg-h/ ml.
Test mikrozómů lidských jater (HLM)
Metabolismus sloučenin v mikrozómech lidských jater byl měřen postupy analytického testu LC-MS následovně. Nejdříve mikrozómy lidských jater (HLM) byly rozmraženy a naředěny na 5 mg/ml chladným pufrem, lOOmM fosfátem draselným (KPO4) . Vhodná množství KPO4 pufru, NADPH regeneračního roztoku (obsahujícího B-NADP, glukózo-6-fosfát, glukózo-6-fosfátdehydrogenázu a MgClž) a HLM byla preinkubována ve skleněných zkumavkách 13 x 100 mm ve 37 °C po dobu 10 minut (3 zkumavky na testovanou sloučeninu - trojí opakování). Testovaná sloučenina (konečná koncentrace 5 pM) bylá přidána do každé zkumavky, aby se zahájila reakce a byla míchána mírným vortexováním, následovala inkubace ve 37 °C. V časových bodech t = 0, 2 ♦ * ···♦ • 0 • 090
9909 999 ** » · « » · 009 ** ř · * ·
I 0 0
Β * ·
Β · » «· ····
363 hodiny, byl z každé inkubační zkumavky odstraněn vzorek 250 μΐ do samostatné skleněné zkumavky 12 x 75 mm obsahující 1 ml ledově chladného acetonitrilu s 0,05μΜ reserpinem. Vzorky byly stočeny ve 4000 rpm po dobu 20 minut, aby se precipitovaly proteiny a sůl (Beckman Allegra 6KR, S/N ALK98D06, #634). Supernatant byl přenesen do nových skleněných zkumavek 12 x 75 mm a evaporován na centrifugační vakuové odparce Speed-Vac. Vzorky byly rekonstituovány ve 200 μΐ směsi 0,1% mravenčí kyseliny a acetonitrilu (90/10) a vortexovány důkladně do rozpuštění. Vzorky byly pak přeneseny do samostatných polypropylenových mikrocentrifugačních zkumavek a stočeny ve 14000 x g po dobu 10 minut (Fisher Micro 14, S/N M0017580) . Pro každý replikát (č. 1 až 3) v každém časovém bodu (0 a 2 hodiny) byl alikvot vzorku každé testované sloučeniny spojen do jedné HPLC viálky (6 celkových vzorků) pro analýzu LC-MS, která je popsána níže.
7-žo^y--s^oj-ěnýcbšďduče“hTA_byiyiA3ikováAyr^o~”šystérmr~LČMS, složeného z HPLC Hewlett-Packard HP1100 s diodovým čidlem a hmotnostního spektrometru Micromass Quattro II triple quadruple pracujícího v modu pozitivního elektrospreje SIR (programovaného tak, aby skenoval specificky molekulární ion každé testované sloučeniny). Vrchol křivky pro každou testovanou sloučeninu byl integrován v každém časovém bodě. Pro každou sloučeninu byla oblast vrcholu v každém časovém bodě (n = 3) zprůměrována a tato průměrná hodnota plochy vrcholu ve 2 hodinách byla dělena průměrnou plochou vrcholu v čase 0 hodin, aby se získalo procento testované sloučeniny zůstávající ve 2 hodinách.
Výsledky testování sloučenin s použitím různých testů jsou shrnuty v tabulce níže, kde označení inhibice v uvedené koncentraci, „% ukazuje procento hodnoty představují Ki *
rt rt (nM) nebo % inhibice při koncentraci sloučeniny 1 μΜ pro * nebo • · · · • · · « • * ♦ • » · · · • · * nM pro **, není-li uvedeno jinak. „NI označuje nevýznamnou inhibici.
364
Tabulka 1
Př.č. FLVK *· FLVK -P** Lck- P* CHK -1* FGF- p· CDK2 9 CDK4 * HUVEC IC50 (ΠΜ) HUVEC + album! η IC50 (ηΜ) MV522 1CS0 (μΜ) % zbytku (HLM 2 hod)
2(b) 300 425 549 228 UM .2 200 8000
2(c) 2600 50 μΜ 26 μΜ
1(8) 0,3 2 88 5,2 27 19 13 54 0,35 98
3 6,6 65 37% 4,8 112 16 23 930 2.2
8(a) 3,2 23 43% 530 42 >100 μΜ >100 μΜ >1000 >10
8{b) 72 12% ©50 UM
2(d) 3,7 43% 91 68 53 53 450 0.18
1{c) 1,4 V 46% 78 560 670 >1000 >10
2(a) 40 61% @20 μΜ 610 1600 >1000 0,58
1(b) 2,2 1400 4000 1300 >1000 >10
8(c) 2,6 16 34% >10 000 >100 μΜ >100 μΜ 280 >10
2,4 -16 16R >ΙΛΛ 1ΤΠΠ
•mu ζυυ ο/ν ->Τϋ
9(b) 24 448
2(0 40 5% @ 20 μΜ
18 0 9100 >700 >10
20(a) 29 12,7 200 9,4 52
20(b) 1,θ 8 23% 28% 8,2 Ca.10
14 15 12% @25 μΜ
7 18 1 300
17 11 532
8<d) 11 82 000
4(aj 0,65 1,4 68% NI 15.4 NI 19% 3 30 6,3 35
23 1,6 2,1 12% NI 14% NI 17% 9,5 106 6,7 74
21 4,6 >700
11 12 34.000
22(b) 0,63 1,2 21.5 4,8 8,5
22(a) 0,22 0,2 12 >10
22(0 0,64 38
4(b) 2,7 1,9 13% & } μΜ 4.9 25 205 3,2 63
12(31 1,8 6,9 17% 19 6 87 2J 59
« ·
365
12(b) 0,48 1,8 32% 31 4,8 44 >10 29
18 12,5
19(b) 0,49 6,6 58% NI 60% NI 11% 2,9 27 4,3 137
19(a) 13,8 6,8 16% @ 1 μ,Μ 92% 44
19(c) 5,9 50% 68% 17
12(c) 1,6
19(d) 0,72 33% 39% 6,8 34 >10 36
5(a) 0,03 28% 10,4 12 9,6
12{d) 0,39 31% 61% θ,1 >10 51
13 1,3 61% 74% 3,9 28 >10 69
15 15
16(a) -0,08 28% NI 65% NI NI 4,5 112 8 7*
6(a) 0,74 33% 67% 8,5 50 3,5 69*
5<b) 0,9 78% 14 3,7 33 8,5
16(b) 0,34 22% 73% 47 140 >10 50
16(c) 13 100- 1000 >10
16(d) 0,43 33% 90% 11 >10
16(e) 1,3 8% 59% 4,9 106 >10 40
6(b) 0,15 81% 95% 8 60 4 128
£8 >30 >10
19(e) 20 >300
30(a) V 45% 94% 1,6 22 5,7 64
19(f) 0,18 52% 58% 2,3 16 3,9 98
46 3,5
19(g)
30(b) 2,2 90
19(q) 0,86 19% 59% 18 1920 90
30(c) 0,83 44% 82% 2,5 21 54
19íhl 5,9 600 7,9
44 θ£ >700
38(a) 0,22 77% 74% 4,5- 20 10,7 72
45(b) 99% 86% 79% 1,9 11,5 4,4 97
45(a) 0,062 3,1 ca. 15 3,5 97
liíOJ 4,7 >300
42fa} 0,046 79% 53 65 0,8 8 5,5 92
38(b) 72% 79
190) 0,33 23% 44% 2,2 50 >10 66
42íbl 0,35 75% 27% 2,1 29 2,1 81
19(k) 100% 37% 41% 2,6 28 4 í 58
33(b) 0,66 76% 63% 77% 0,8 11,5 15 i 45
26 JUL θ£ 3,2
ISflL 0,72 36% 88% 6,8 100 3,8 I
•4 444·
366
19{m) 0,68 35% 23% 94 >10 61
3 3( a) 3,8 42% 9% 0 56 2% 7% 0,5 2,7 >10 29
19(n) 0,54 26% 48% 3χ£ 23 2.9
33(c) 0,28 26% 76% 6,6 >10 16
33(d) 0,14 55% 24 >300 8 22
40(a) 17,9
41 (aa) 0,11 49% 37% 1 5,2 >10 100
41{b) 0,26 24% 31% 2 9,8 >10 80 (UV)
42(e) 1,1 95
42(d) 1,7 44 >10
43 2,6 56% 24 2
19(0) 89% 20
41(c) 0,22 83% 36% 77% 0,4 5,3 68
41(d) 0,093 0,9 6,4
41(a) 0,03 94% 50% 0 20 0 6% 0,48 4,4 >10 96
19(p) 1,5
41(e) 0,22 21% 31% 0,15 5,6, 8J 22
41(f) 0,11 84% 65% 92% 0,45 20 59
41(9) 0,1 36% 95% 0,9 >10 52
30(d) 0,37 3,8
30(e) 0,37 62% 92% 29
33(e) 1,7 70% 2% 68% 0,46 5 >10 54
33(1) « ^,7 31
41(h) 90% 30% 2 25 8
47 0,25 50% 88%
31(a) 0,29 77%* 95% 0,7 10 58
41(1) 0,04 38%* 76% 0,25 3,3 48
35(u) 79% 2,8 27
32(a) <0,1 86%* 96% 0,16 4,5 2
41(k) 2,95 20% 49% 48
41(1) 0,24 63%* 66% 386
41 (m) 0,75 40% 67% 23 0
41(n) 0,2 66%* 87% 28 70
31(b) <0,1 66% 97% 5,6 2
41(0) 0,05 77% 74% 10 94
31(c) <0,1 81% 98% 11,4 87
35(gg) 23% >100
33(g) 15%
34 97% 78% 95% 15 28
50
35(v) 72% 11% 59% 22 26
• ♦ ···· ·· ·» ee ·· e e e · « e » ♦ · » • · ·· · · · ·· · · · • ··· · e · · · · e • · · · · · ··· ···· ··· ·· ·· ·· ····
367
35(w) 59% 35
35(X) 75% 2 37
35(a) 76% 12% 59% 2,1 33
35(b) 49% 12% 59% 35
35(c) 76% 11% 42% 6,3 - 17
41(p) 0,06 49% 0 90 6% 3% 0,27 2,6 >10 62
42(c) 95% 1to3
41 (dd) 98% 50% 69% 5,8 7
41(bb) 99% 7é% 88% 1to3 110
35(y) 99% 29% 82% 1 to 3 7
35(d) 76% >100
31{d) 96% 52% 0 14 5% 9% ca. 13 ¥ 110
41 (q) 100% 53% 91% 2/7
35(0 99% 56% 69% 4,8 >10 34
35(f) 100% 8 15
35(g) 100% ca. 15 53
35(h) 100% 3,6 9
35(1) 100% 4,7
35(1) 99% 1|5 5
35(k) 85% 6% 0 34% 8% 7% 2,2 >10 14
41 (ee) 0,13 13% 0 94% 0 2% 0,24 4,3. 2,7 9,4. 47
35(2) 95% 2
35(aa) 99% 5 15
41(r) 100 % 55% 0 92% 0 5% 11 83
41(CC) 97% 41% 95% >100
35(l) 90% 12
35(cc) 89% 15% 0 74% 5% 6% 0,05 1,6 31
35(ee) 82% 3 13
35(ff) 0,11 25% 75% 5,8 31
35{dd) 0,6 17% 0 75 7% 8% 0,18 2,9 >10 26
35{bb) 87% 4,1 8
32(b) 0,08 70% 95% 21 >10
35{hh) 100% 34% 73% 7
35(m) 0,04 61% 82% 35
48(a) 0,37 13% 0 14 0 0 8,8 55
39(a) 53% 1,4 ca. 50 70
35(n) 0,83 58% 23% 92 4% 10% 0,11 11 5/1 47
41 (s) 0,23 53% 86%
·» ··· · • · ·· ·· ·· ··· · · β · · · · • · · · · · · · · * · » · · · ·· · · · · · • 4 4 4 · 4 ··· ···· 444 4· «4 4· 4···
368
35(0) 39% 17% 44% >100
41(1) 0,06 51% 0 85% 1% 2% 3,8 87
32(0) 0,27 52% 96% >30
36(b) 85% 22% 43% >30
37{d) 26% 10% 38% >100
37(c) 83% 12% 39% 12 21
37(b) 48% 8% 36% 30- 100
59(a)
41(u) 0,08 54% 74% 7,9
41(hh) 98% 13% 74% 3,9 72
36(0) 89% 28% 60% >30
36(a) 87% 19% 38% 19 58
35(p) 62% 5% 11% >30
35M 92% 42% 51% 18
40(b) 89% 32% 92%
41íffl 98% 15% 12 5,6 68
37(a) 57% 6% 35% 15 21
41(v) 68% -* 52% 68% 12
41(11) 57% 18% 11 13 85
35(r) 0,11 16% 20 0,36 2,3 >10 51
35{s) 60% 18% 64% 4,8 16
35(1) 59% 4 12% 63% 4 7
41(11) 95% 14% 91% 23
41 (w) 97% 49% 67% ca. 10
41(x) 98% 66% 3,4 4,6 100
41 (mm) 93% 6% 46% 1,3 14,4 94
41(Ji) 87% 19% 81% 21
4i(y) 98% 61% 86% 30' 100
31(e) 0,02 43% 62% 6,2 8,6 49
40(c) 24% 28% 59%
41(gg) 84% 27% 3,5 9,5 50
41(nn) 57% 7% 91% >100
Ulit 98% 16% 41% 7,7
48(bl 97% 6% 77% ca. 8
41(2) 100% 54% 74% 7,5
41(kk) 100% 26% 97% 16 63
39(b) 2,8 10% 50% >10 67
31(1) 97% 62% 99% >10
tť 0 0 0 ·
369
59(b)
49(a) 0.04 11% 79 ca. 4 8,4
59(c)
49(b) 98% 9% 80% ca. 10
56 5%
35(il) 44%
59(d)
57 100% 30% 89%
59(e)
58 98% 19% 98%
Tabulka 2
Pfíkl. &. CDK2* CDK4* CHK1* FLVK-P* Lek* FGF* HCT-116 ÍC50 (μΜ)
24(a) 0,017 0,0051 0,028 0,0983 67% 72% 0,23
24(b) 0,021 0,0032 0,02 0,0331 96% 88% 0,37
24(c) 0,0034 0,0015 0,044 0,0142 93% 89% 0,44
24(m) 17% 16% NI @ 20 μΜ
24(l) 0,086 0,071 62% @ 20 μΜ 3,8
24(d) 0,083 0,017 0,056 0,125 51% ~ 66% “<5023
24(e) 0,03 0,0044 75% 52% 0,15
24(f) 0,0072 0,0074 97% 89% 1,5
24(g) 0,13 0,029 1,67 0,194 >5
24(o) 0,029 0,2 2,2
24(h) 0,054 0,053 3,6
24(l) 0,055 0,013 1,7
240) 2,1 0,32
24(k) 0,056 0,0072 81% 89% 0,16 0,2
25(a) 0,08 0,021 49% 44% 62% 0,051
24(n) 0,035 0,019 1,5
25(b) 0,112 0,048 83% 87% 87% 2,1
25{C) 0,233 0,0155 90% 96% 0,25
25(d) 0,16 0,098 87% 60% 80%
25(e) 0,477 0,181 16% 13% 26%
25(0 0,39 1 NI 58% 56% 0,098
25(g) 0,08 0,021 21% 76% 82% 2
25(h) 0,17 0,024 86% 87 91 0,32
• ·· ·
370
25(1) 0,021 0,02 | >5
24(p) 0,089 0,092 0,44
25(j) 0,079 0,016 I 70 0,0083
* hodnoty představují Ki (μΜ) nebo % inhibice při koncentraci sloučeniny 1 μΜ, není-li uvedeno jinak. NI označuje nevýznamnou inhibici
Tabulka 3
Příklad δ. CHK-1’ CDK1* CDK2’ CDK4* FLVK*
28(d) 0,018 93% 66% 87%
27(j) 15% @ 50uM
27(a) 0,198 NI @ 1 μΜ NI @ 100 μΜ 28% @ 5 μΜ 71%
27(b) 28% @ 50 μΜ
28(a) 0,108 77% 75% 79% 84%
27(c) 11% @5 μΜ
28(b) 0,0143 97% 98% 96%
27(d) 14% @ 10 μΜ
27(e) 0,757 34%
27(1) 0,227 85% 73% 92%
27(f) 0,35 0,223 3,3 0,78 49%
27(h) 0,311 84%
27(k) 24
28(c) 1,14 34%
27(g) 0,85
52(b) 0,08 0,041 0,241 0,117 94%
371 • 44 · • · ·
4 44 • · • 444 • · • · • 4 • 4 44 • · 4 4 *4 4
4· 4 • 4 4
4444
55 10
52(a) 0,263 39% 60%
53(a) 0,301 24 13% @ 5 μΜ 28% @ 5 μΜ
29(b) 0,138 0,9 3 3,9
29(a) NI @ 25]iM
29(c) 0,174 56% 2,2 2
29(d) 10
29(e) 0,074 0,593 1,4 2 33%
29(f) 0,418
51 0,087 0,146 84% 79%
29« 0,072 0,066 1,3 1,1
29(g) 0,068 0,39 1,4 1,1
29(h) 0,14 1,3 3 2,2
54(d) 0,68 NI @ 1μΜ
54(b) 3,1
29(1) 0,104 . 26% 3,1 5
_____53(d)___ NI @ 100 μΜ --...........-----.................- -----------------~ ----------------------- --------------------------------
54(e) 0,342 NI @ 1μΜ
54(a) 0,896 1%
53(c) 1,1
29© 0,533 31%
29(q) 11 11%
29(p) 0,232 6%
53(b) 1,4
29(k) 1,3
54(f) 2,9
54(c) 0,125 NI
54(g) 0,195 3%
29(0) 46
53(e) 0,886 13%
29(1) 1,4 7%
29{n) 16
• ··· · · ·· • · · · • ·· · · ··· ·· ·· • 4 4 9
4 · · ·
372
29(m) 1 54%
53(f) 7,3
54(h) 1
29(s) 11
54ffi 0,424
54(1) 0,461
29(t) 0,072
29(u) 0,151
53(g) 1,5
54(1) 0,99
54(k) Ί
* hodnoty představují Ki (μΜ) nebo % inhibice při koncentraci sloučeniny 1 μΜ, není-li uvedeno jinak. NI označuje nevýznamnou inhibici t
Příklad knihovny I
Tři stavební bloky knihovny („aminové templáty’) 6—(3— aminofenoxy)-3-E-styryl-lH-indazol (Y=0), 6-(3-aminobenzoyl)3-E-styryl-lH-indazol (Y = CO) a 6-(3-aminofenyl)amino-3-Estyryl-lH-indazol (Y = NH) byly připraveny, jak bylo popsáno v příkladu 7, příkladu 18 a příkladu 46, v daném pořadí. O,1M roztoky kyselin, aminového templátu, o-(7-azabenzotriazol-lyl)-Ν,Ν,Ν',N'-tetra-methyluroniumhexafluorfosfátu a triethylaminu byly připraveny odděleně v bezvodém DMF. Do každé zkumavky v seskupení 8x11 kultivačních zkumavek (10x75 mm) bylo přidáno 105 μΊ6 (0,0105 mmol) odlišné kyseliny. K tomu ·· ··· · • to ·· ·· to· ·· to · · ···· ··>·· ·· to • ·· ··· · » • ·· · to · · to· ·· to· ····
373 bylo přidáno 100 μΐ (0,01 mmol) roztoku aminu, 105 μΐ (0,0105 mmol) roztoku triethylaminu, následováno 105 μΐ (0,0105 mmol) roztoku o-(7-azabenzotriazol-l-yl)-Ν,Ν,Ν',Ν'-tetra-methyluroniumhexafluorfosfátu. Reakce byly míchány ve vyhřívaném bloku v 50 °C po dobu 3 hodin. Reakční směsi byly přeneseny na ml 96 jamkové destičky s použitím multipipety. Rozpouštědla byla odstraněna s použitím přístroje SpeedVac™ a hrubé reakční směsi byly opět rozpuštěny v DMSO za vzniku konečné teoretické koncentrace 10 mM.
Sloučeniny v tabulce byly testovány na inhibici proliferace HUVEC v nominální koncentraci 10 nM a výsledky jsou uvedeny v tabulce I níže, vypočtené ze vzorce:
% inhibice = (kontrola - ošetřeno)/(kontrola - hladovění) x
100
V těchto testovacích podmínkách je >50% inhibice považována za významnou.
♦ fcfc • · fcfcfcfc · · fcfc fcfcfc fcfcfc • fcfcfc · fcfcfcfc fc fc · • fcfcfc fcfc fcfcfc fc fc • · fcfcfcfc fcfcfc fcfcfcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc fcfcfcfc
374
Tabulka knihovny I
R* Y= Y = O Y =
CO NH
CH, 134 127 135
Hs<? ΚχΧ, y n3v 124 145 118
H,C^ 128 94 115
H H,C
R* Y= Y = OY =
CO NH
134 138 112
0^ 3 56 111
30' 91 109
cf 101 157 105
• · ·*· · • Φ • φ φφ ► ♦ φ ► φφφφ φ φ φφ ► φ φ ► φ
375
Λ>' -62 5 105
ϊξδΓ čr 108 115 104
124 147 103
125 124 103
(/· F 158 131 101
CHj 142 101 98
- Η,Ο^Υ^ ν-ν h3c 137 137 95
7 131 68 94
58 68 94
75 78 87
Ν-Ν Η 113 150 86
{«3. h3c^c/^x' 72 87 85
0\χΧ, 128 92 81
Ου, Η3Ο'θ 113 30 80
η3ο„χη, σ 51 35 79
125 122 78
ρΧΧ^χ, 87 80 η
H.C HřyX «/ 26 52 76
<?h3 ch3 JyVx, 99 52 75
4444
44
4 4
4 444 • · ♦ 4 4 • · 94
4 4 4
44
4· 4·
4 4 4
4 4
4 4
4444
376
ζ„ σ' 54 85 71
F 80 91 64
ch3^ 71 52 60
Ο^Χι 21 76 43
OŮ F 81 93 40
Η,%ΧΧχΧ, 37 86 34
<?η3 S 25 70 32
2 52 30
<?Η3 24 96 30
35 64 30
η<5^7^ 37 48 30
rr' 57 70 29
ch3 cr* 52 42 27
CHj OH 47 69 25
h3c^ch3 51 71 25
Η30γΧ, ch3 35 57 24
a 18 51 23
ΟγΧ, 0 45 57 23
HjC cr'''^^ 19 22 20
H v V/· 32 32 20
·· ··♦· ·Φ ·· ·· 94 ··♦ · · · 4 9 4 4
444 94444 44 4
494 44 444 9 4 • · ······»
9944 449 49 44 44 4444
377
O-YJX' H,C 10 24 20
HS Ά*. HaC 24 45 19
-13 18 17
ΟγΝγΧ. Ύ -36 -6 17
Ί -2 25 17
Η,(/γ H3CyJ Ϊη, 3 24 16
F 5 25 16
Η -1 30 15
ο <ΎΧ' CH, 33 42 13
Ο 3 36 13
„ Η ΗΥ 0 14 90 12
ΟΥ -37 25 11
Η,<γχγΧ, CH, 0 81 64 11
χ £ ί ι . I 47 17 10
^Χ, H,C = * ΟΗ 27 30 10
H,C κ,Ογ H3C 5 23 7
Η ν *<Υ Ν-4 Η 21 40 Ί
HaC-YY*’ Ο-Ν 50 112 6
9999 99 99 99 ··
9*9 999 9999
9999 9 9999 9 9 9
999 99 999 9 9
9 9999 999 •••9 999 99 99 99 9999
378
96 134 6
42 13 6
HOX -20 25 6
h^5tx’ 44 82 5
CH, ÓH 33 32 3
0 4 2
20 43 0
<?HS íT 8 23 0
ÍH’ Η1Ο>ΐίΝ'Ο'γ'Χι CH, 28 80 -1
o^CH. črXl 10 19 -2
12 40 -3
Qu CH3 ^CH3 3 46 -3
no čr*1 39 -4
O^CH3 ČT 37 20 -5
-11 52 -7
xr 10 -59- -7
0 27 48 -8
v CH, 64 83 -8
CH£ 35 42 -9
-%x, H 27 52 -9
*4 44 »4 • 44 4 4 4 4444 • 4 44 4 4444 4 4 4
444 44 444 4 4
4 4444 444
4444 444 44 44 44 4444
379
/=N •vaaa 31 20 -17
56 17 -17
HsC'0 -20 18 -18
OH 64 38 -20
Příklad.knihovny II (a) když Y = S ve vzorci I
6-[2-(pentafluorfenoxykarbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol (Y = S) byl připraven, jak bylo popsáno v příkladu 35 (a). Ι,δμιηοΐ roztoky 261 aminů a 0, 1393 μΐ (1,0 μιαοί) Et3N, rozpuštěné v 15 μΐ DMF, byly rozděleny do jamek 96 jamkové destičky. V případech, kde byl amin použit jako hydrochlorid, bylo přidáno dalších 0,4179 μΐ ··«« 99 99 ·· ·· • · 9 999 9999
9999 9 #9 99 9 9 9
999 99 999 9 9
9 9999 999
9999 999 99 99 99 99·9
380 (3,0 μπιοί) EtsN k uvolnění volné báze. Každá jamka byla podrobena působení roztoku 0, 5395 mg (1,0 jjmoí) pentafluorfenylesteru (rozpuštěného ve 30 μΐ DMF, a pak byla destička třepána po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Surové reakční směsi byly koncentrovány s použitím přístroje GeneVac™, a pak naředěny DMSO na konečnou koncentraci 10 mM.
(b) když Y = NH ve vzorci I
R-NH;,
DMF, EtaN, HATU,24h
2,0 μπιοί roztoků 263 aminů a 0,4181 μΐ (3,0 μιαοί) Et3N bylo rozpuštěno ve 20 μΐ DMF a rozděleno do jamek 96 jamkové destičky. V případech, kde byl amin použit jako hydrochlorid, bylo přidáno dalších 0,5575......μΐ (4,0 μηοΐ) Et2N k uvolnění volné báze. Každá jamka byla podrobena působení roztoku 0,447 mg (0,75 μιαοί) 6-[2-karboxyfenylamino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazolu rozpuštěného ve 20 μΐ DMF, následováno 0,57 0 mg (1,5 pmol) roztoku HATU rozpuštěného v 10 μΐ DMF, a pak byla destička třepána po dobu 72 hodin při teplotě Hrubé reakční směsi byly koncentrovány s použitím a pak naředěny DMSO na konečnou místnosti přístroj e
GeneVac™, koncentraci 10 mM.
Sloučeniny v tabulce byly testovány na inhibici proliferace HUVEC v nominální koncentraci 0,5 a 2 nM pro Y = S a výsledky jsou uvedeny níže, jak byly vypočteny ze vzorce:
% inhibice = (kontrola - ošetřeno)/(kontrola - hladovění) x
100
94 • · · ·
· ·
4 4
994 podmínkách je >50%
381 ·· 0·4 · • * • ···
4
94
V těchto testovacích považována za významnou.
inhibice
Tabulka knihovny II
R’ 0.5 nM 2 nM
19 89
A xf ™ 38 2
y 37 16
/ch»ch ( PH» 39 15
QHw H,C-4-N CH3 (Λ CH3 xf 35 10
NH, 32 31
rO xf 5 14
ycH, xf 14 55
y 23 44
xT 25 35
H3C-nQ 30 23
*!
<? 5 19
*r
70 105
25 15
? 44 19
r+CH3 X( CH, 38 5
OH Λ 23 6
?
μ «*<· ·# ·· • · · · · · ···· • *«U φ · ··· · · · • « · · · · 9 9 9 · 9 • ········ ·»·· ··» «* ·· ·· ···«
382
0 y-OH Z 4 20
O-OH, Z 21 60
/4-p x/ F 34 61
z° 23 23
H*N< X°) 0 xf 1 26 37
P«a H,C^ Z z 2 6
CH. 32 24
χ/ OH 32 6
HO-X xf <* 48 8
*1 45 88
,0 Η°-\χ xf NHa 17 4
CH3 >q 8 21
h /CH’ x,' 15 27
°^^Ν( 22 I 24
HO^. Xf CH3 22 23
Z Z 16 20
Z“ -Z, 10 24
0 z 28 22
37 12
0 \=N xf 49 91
0 z 40 31
to* ···· toto toto toto toto • · · tototo to · · to • ··<> · · ··> ·· · to ·····*·· to to • · ···· tototo ···· ··· ·* to· ·· ·«<«
383
H.c r0 3 T 18 32
„<0 6 43
30 78
,rO 34 58
.—OH χΓ«Η 22 20
HC Ά 19 28
PH, J CH3 xí 6 1
Η·>η, xf 20 10
ch3 rrNH2 x/ ch3 31 3
h3c^ /—N H3c 32 10
/~CH3 /—N 31 -1
JIH, 6 4
CH, xf^’ 4 29
A 23 61
OH Z 18 24
H-\o /X 21 15
K-ch3 x9° -1 26
/^N H,C-N i i -6 0
(CH3 N—. 18 5
xf 23 17
• · ···· · · · · • · · · · · ···· · ···· ·· ·· ·· ····
384
rO Z 20 2
Z CH, 7 CH, xf 37 15
/VcH, 0 4
xí 5 1
Vnh2 Xi 8 18
»FyJ 3 15
h’VCHs z 23 16
*yc«. Z 42 22
χΛ^ΟΗ, -9 1
<Z xf 25 -5
z° x( 16 7
z 27 2
Z 0. /“A Z'0 49 >9
Z 18 40
N-OH Z°h 5 9
A” z° 8 23
Ctes-OH Z 16 21
γ-CH, . Z* 13 23
,OH r+CH, Xf CH, 8 22
h3c-^ N.n—CH, xf 2 -19
·· ···· ·· fcfc ·· ·· • fc fcfcfc ···· •fcfcfc · · · fcfc · fc · • fcfcfc fcfc fcfcfc · · • · fcfcfcfc fcfcfc • fcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc fcfcfcfc
385
?HS x,' 17 1
m, Λ 7 -1
ch3 r+CH3 xf ch3 x; vr,-i 5 -6
x( OH 26 -19
23 -32
rf° *· o 2 -3
9 h,c-n x,' 18 25
%*° O x/ 1 13
z *( 4 4
5 13 22
H-X1 9 30
H0< X 7 25
16 17
hZ^x, 13 31
95 106
59 97
30 86
Z h/ x> 22 43
33 64
28 29
r· 1U+*S 31 20
42 80
<n 25 53
CH, 65 110
• · 4 · •4 44 44 44
4 4 4 4 4 4
4444 4 4 4
386
CH, 29 58
52 107
OH. 31 36
°xs 4 10
8 23
ΗΟχΧ, 13 20
33 18
20 25
χθν H,cr> 62 99
(Λ 6 16
75 VNxY η 17 13
/** νΆ, 19 22
Λ*-1? <Α 39 18
44 5
α, 43 96
<*» 19 55
29 92
—> 49 109
>-οη, 25 14
Η,σ^^χ, 24 84
CH, 19 24
Γ3 Η,σ'^^ζ 47 107
35 40
Η>%^> 26 31
—^χ, 53 75
0 8 21
CP 70 112
72 109
<χ 0 X, 26 31
• · * · ♦ ·
387
/°N Ήλ 28 14
Μ -6 41
Q, 12 76
et, 33 94
Os 27 17
α, 44 28
ΛΑ 55 50
χ 21 90
Λ 12 53
Λ*! <Α 21 64
<Υ> \—ο 35 63
CH, 21 -5
Γ 1 65
28 103
51 105
44 97
7 HO. xk Ός 44 40
•VyCH, 47 -4
Η,Λγ^-χ, °'CH, 47 89
•VS S 42 29
44 100
Λχ 35 69
16 2
|^γΝ> 32 92
92 103
• · · · • · • · · · ·· «· » * · • · · ·
388
9 1
H3C 56 96
CH, z 26 2
39 13
19 5
24 31
CH, 35 106
H3C K 15 36
ά, 69 59
k\ -11 42
16 42
15 95
20 92
Yk 19 -1
^CH, 31 30
-1 14
9 34
CH. 6 44
1 52
HsXzCH, Yv Ol, 18 -2
k 9 -9
0 40 94
389
0 ···· 0· ·· 0 0 0 0 ··· · · · · · 0 ·
0000 0 ·00· 0 0 0
000 00 000 0 0
0 »000 000 0000 000 0· 00 0· 0000
38 68
25 40
34 99
30 94
24 99
*(Γ 19 101
AT- 20 92
cx~. 15 99
σ' 16 37
Os 17 23
cv. 70 111
0 60 99
ČT' 75 114
ΊΧ' 81 95
24 86
Ač? -3 64
26 71
tx 14 60
51 108
8 37
<Y> CH, 15 23
ΛΛ 20 32
35 63
► 9 99· • 9
9 99
99
9 9 9 · · ·*
390
28 47
26 16
9% 18 11
/..... r° _x 13 7
Z+' 28 69
18 43
11 47
0^* 19 86
0' 26 83
50 111
.5 45 103
53 95
Oys, 0 31 108
ó 69 104
*X' 36 106
58 100
hUX’ 63 104
b 12 55
QO'' 16 73
391
“τ Η<%ς r*,- -η 18 -3
16 17
32 35
36 66
Λ7
68 49
°ν%ς 26 39
W
<Η
V04· 15 4
Λ 25 31
<ν< 0 65 90
α 21 39
10 29
/Η, >Ν 16 2
-ΑΧ- 22 36
as 18 29
25 25
σ' 27 80
£ 30 70
10 23
ΟρΛ 50 40
51 67
^yCT' 23 51
• · · · · · • · • · ·· ·· ·· ·· ·· • · · fcfc·· ····· · · ·
392 • · ···· «fcfc fcfcfc ··· ·· ·· ·· fcfc··
onr* 31 66
VS 86 107
46 103
ce 26 59
*ys 30 61
Vys CH, O 41 16
P?S CH, 15 8
CU, 74 101
78 60
a ^OH 58 37
34 90
ors 34 69
19 35
15 -1
11 15
15 -9
vř 12
H,C H3C\L 8
Ύί 38
• · ···♦ ·♦ ·· • · · · » · • · ·· · » · ·· ·· ·· • · * » • · ·
393
a 48
R-Nbfe
DMF. EtjjN, HATU,24h
O,1M roztoky aminů, triethylaminu a 4-dimethylaminopyridinu byly připraveny odděleně v bezvodém DMF a přeneseny do bezpečnostního boxu. O,1M roztok 6—[2— (karboxy)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazolu, příklad 33(g), tetrabutylamonná sůl a o-(7azabenzotriazol-l-yl)-Ν,Ν,Ν',N'-tetra-methyluroniumhexafíuorfosfát byly připraveny v bezpečnostním boxu. Do každé zkumavky v seskupení 8x11 kultivačních zkumavek (10x75 mm) v bezpečnostním boxu bylo přidáno 100 μΐ (0,01 mmol) odlišných roztoků aminu, následováno přidáním roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) tetrabutylamonium-2-{3-[(E)-2-(2-pyridinyl)ethylyl]-lH-indazol-6-yl}sulfanyl)benzoátu, roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) triethylaminu, roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) 4-dimethylaminopyridinu a roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) o-(7-azabenzotriazol-lyl)-Ν,Ν,Ν',N'-tetra-methyluroniumhexafluorfosfátu. Reakce byly míchány ve vyhřívaném bloku v 50 °C po dobu 1 hodiny. Reakce reakční směsi byly přeneseny na 1 ml 96 jamkové destičky s použitím multipipety. Rozpouštědla byla odstraněna s použitím přístroje SpeedVac™ a hrubé reakční směsi byly opět rozpuštěny v DMSO za vzniku konečné teoretické koncentrace 10 mM.
• w 999 9 ·
• · · · »· ·· • 9 9 * • · ·
9999 999 99 99 99 9999
394
Sloučeniny v tabulce byly testovány na inhibici proliferace HUVEC v nominální koncentraci 0,5 nM a výsledky jsou uvedeny v tabulce III níže, jak byly vypočteny ze vzorce:
% inhibice = (kontrola - ošetřeno)/(kontrola - hladovění) x 100
V těchto testovacích považována za významnou.
podmínkách je >30% inhibice
Tabulka knihovny III
R % inhibice
ó -1
§ -17
HO H
i 4
’ύ '17
CH, 6
R % inhibice
22
°'CH, -19
F 9
Ϊ’ 2
šb z i 5
• 9 99 99 ··
9 · 9 9 9 9
9 9·· 9 · ·
395 • 9 99« 9 • · • 9 99 ·· ·· 99 99 9 9
η2ν-Α^ 0 15
TQ x, -22
Xi -19
£ H,C^O CH, -9
í ojj H8C'NH -11
co Xn -17
& -6
0 Jt H,C^oKU H -11
-1
'“Λ, 12
9
ψό r° CH, 7
i OH -32
F -22
CH, -15
φφ φφ φ · φ * φ φ * φφφ • · ·Μ· *φ ·· φ φ φ φ φφφφ •· Μ·· • « • · ·· ·· · ·
396
7 1
F -38
ί ί η -36
7 CH, -11
Η,<Τ -14
V=N -20
ΧΟς -5
4· 44··
4
444
44 > 4 4 » 4 4 4 4
444«
397
Cl -43
H=»C CH, -5
Λ F 0
4 6
A CH, 0
Λ Hl/Sí Ν N -28
f. N^ó -13
A «ΑΖ η h3Zch3 -21
Η -15
cr-ύ-α 0
KoAřT^OH -18
o O=N* 1 0 -15
,X0 -1
-11
¢9 9*·· 99 99 ·· ··
999 · · · · « 9 9
999 9 9 999 99 9
999 99 999 9 9
9 4 9 9 9 9 9 9
9999 999 99 99 «9 9999
398
¢9 X, 3
Η,Ο'ΧΗ. 1
i π CH, -27
<Γ -47
QO. OH 33
A cAN 17
6 F—j—F F 20
P -29
-17
•nik -7
i h3c H 0
0 H,C -1
í K Jl J H N 4
<ά N^N^OH -43
399
9* 4··· ♦ · 4· *· ·*
4« ··» 4*44 • »·« · * 444 4 4 ·
4*4 44 444 4 ·
4 4444 444 <444 *44 4* 4« 44 4**4
ϊ’ 'tr -31
i ΗΝν Ύ -3
0 H3C—CH, ch3 0
Λ H3C—|—CH3 ΟΗ 3
ft 'ό ch3 13
h3c° 0
U Ν -113
• Φ «··* 99 99 ·* *· «·· * · 9 9 9 9 9
999 9 9 999 9 9 9 • 9 9999 999
9999 999 99 99 99 9999
400
l1 CkvS 2
7 Cl 4
Η30'0Υ^' h3c'° 20
.ý α 2
¢0 X, -3
ΐ1 7 -9
ί’ h3c, J ό -9
7, -1
OH Xi 4
*, Η3°ηΑ · OH 12
7 H,C'°Y^ H3C'° 9
........-.....-V - ...... -6
ύ
I’ ó O^NH2 -2
f’ HaC^jO 0 5
• ·
401
6
cAch,
18
Λ ch3 20
-23
/5 CHa -12
f, «aC^J ÓH 22
-4 9
ν-ΛΑ, 7
χ °> I -4
OH 4
i 7
0 f, o*y> *1=1 7 .
ř «Λ jj-V 18
Ϊ’ ' ΎΧ ιΝ'Χΐ 11
X -31
402 • · 0 0 0 0 • · · • · · ·
0
0000 000 00 00 00 0000
ό 0^0 ch3 -22
“ά -5
«Λ £ -1
X, H,C—t—CH, -7
“Λ. -22
«# Π»0 CHj -3
ϊ’ HOsA_.CH3 V 11
X, 4
4 ΟΗ 20
Ά 15
* CI\Azcl v -45
«.ϊ, ν'γγ'π. «37
• Ť Η3°γ4^ζ·ΟΗ3 -20
£ • ο -4
f. h5?tch· hÓ< H3C CH, 0
9 9999 • · • · ··
403
h3c-4-ch3 h3ct -29 1
CI^J^CH, V CH, -26
3
H,C'°x|j^'CH3 8
X 12
± H,C-4—CH, (Λθ CH, 6
Η,ο'α^γ0'0^ -57
X, h,c-hch, -25
HaC -41
o> -21
VP HA>-N H3cCH3 -28
i o )—N HaC -20
i z -20
3
11
·· ·· · · ····
404
Z ““Z 1
•‘Ά, CH3 -5
Λ CH, CH, -60
S, <Zo ÓH, -46
z -22
xA -20
Z -7
A J OH CH, -28
OH -10
£ rž -13
13
ZA ^chÍh -7
-13
Λ CH, -45
4 Φ·4<
» Φ · ► 4 4 • Φ ΦΦΦΦ
Φ Φ ·· » Φ ΦΦΦΦ
405
X. h3cJ °” -40
Η,οΑίξ” -2
y HaC^Oy! £ -11
/ HO -31
JHaX, X -30
OH τ ch3 -11
f1 H3C—r-CHj HO^ -2
H3C'S 18
rs ch3 7
3 Λ . CH, CHa 1
¥. h°A ho'n Y ch3 0
Ϊ’ H5cYCH! h3c'° 0
v, F 24
• · · · · · ► ♦ · • · ·· • · fcfc ► « · » · · · ·
406 • fc fcfc • fcfc · • · fc • fcfc • · fcfcfcfc
HO J OH HO 14
HHO^ Χ°Η’ 61
HCyk^CH, ho'n ^ch, 9
,£ů 1
% 1
z 4
co x, 1
z Cl β
Z -15
Cl -12
OH 52
o '—' \ 19
”ť) 13
-7
ZZxZ OH -26
• to ··· · ·· ·· ·· ·· ·· ··· ···· ···· · ···· · · · • ··· ·· ·>· to · • ···* ··>
·· ··· ♦· ·· ·· ····
407
HN 7
£ V-0 9
:xo 18
Λ F CH, 10
CQ x, -37
-2
& Vnh 43
F-J-F F 5
& 1
F—F F -3
-13
hAh, -1
• fc ·· fc fcfc • fcfc·· • fc fcfc fcfc ··· · • · • · fcfc • fc fcfc fcfc fcfcfcfc
408
Z 10
z -18
1 -9
k 29
ςο ..............x, 1
Xi 10
- Ť H,C 0
cA 9
944· 44 49 44 44
4 4 4 4 9 4 9 9 9
9994 9 9499 9 4 4
444 99 449 4 4
4 9 4 4 4 4 4 4
4449 444 44 44 44 4999
409
¢/- -3
ď -11
n-nh 22
9
f. -5
x, CH, OH -19
CF -6
cA -12
X, HOň Ó“ -1
'n-nh -7
HO, J 0 2
X, HO^J -34
XO -13
HA0XX, CH, 13
• · « ♦ * ·
410 • tttt 9 · tt • tttttt · tttttt· • tt tttt tttt · • · ···· tttt·· «·· «tt tt· • tt tttt • tttt tt • · · • tttt • · · · · ·
X Cl 48
Ť S^S 36
z -8
-11
H3%Xp. °*ch3 1
-4
Ť v H3C'° 10
A A/N -1
x, -33
X OH -19
ch3 -6
X °'ch3 2
A NyJ Cl -21
,7 Cl -16
• 9 *9 • · ·
411 • · *
9 »9» 9 9 9 • · ···· 999 ··· ··· 9* 99 99 9999 •f 94·· • 9 • 9 9«
Jl 0 0 h3ct -25
γνί CH, CH, -9
X OH 1
4-
h’c'°W H,C'° 37
.2 -12
• · · · ·>
• · · • · · ·
412
ch, -6
CH, 13
J, ó CH, -1
Ť O h,ct -11
11
y, 15
-8
χ,'γΧΖΧ^ CH, 1
Ť v F 3
J' HČ^ 9
χΑ 2
8
3 15
• · • * • ·
413 • · · · · · • · · • fcfcfc • · • fcfcfc
ό N 6
0 & 2
0-0 y=\ “x o>~O~x i .......... -1
3
oů 18
o\ -17
-8
3
• · ··
414 • · · · · · • · · • · · · • · • · ···· ··· • * ♦ • fcfc·· • · · · • · · * ·· ··
η°ί5 0
H3C'N'CH3 18
NH2 *, v 7
JÓ -6
2
Ji o 3
14
OH I
• « · W » · · • · ·· ’ · · • · · · ··· · ···
415
ď XH, -9
46
2
ř ď- 23
cc. 11
X Vfig i 1 o
Η,Ο^ΝΗ T 0 -4
·· ·· » · ·
Β · · · · • · · · · · > · · • ···
416
od' 7
od) 9
10
ý HN T kNH 0 15
I’ Ó Her -18
-3
/ HO -2
5
N^S H.0-O -13
JL h3c -9
Λ Ó °=Λ ch3 ch3 ’ “ -2
ř Ó H,C CH, -6
Λ SýN S > h3c 17
• · · · • ·
417
4444 444 ··
4 4
4 4 4 4 • 4 4 4 4 • 4 · · ·· · · ·
Λ w Hac 19
χ. Λ 18
V OH
Ý 0^0 η3ο -24
Ť ó ca 0
ύ -6
ή HO NECH 3
-—--- Λ N^N HaC^YN CH, -20
i1 V r° ch3 -16
c ch3 -19
1
HM o 3
Λ h3cA^n · 6
J’ 18
ró
• · • · · · • ·
4 ·4 • 4 *
4
444
418
£ H~ch, HO L OH -18
ψΑ' h3c'° -9
04 2
14
-10
Ϊ’ T h3c'š -7
ΰ· 4
ch9 11
ά h3c H 11
A CHa 8
CHj 23
1
Xf^CH3 -20
0
·· ···· * ·
419
• φ · · * · φ φ φ φ ·· • φ φ ΦΦΦ ΦΦΦ φφφφ φ φφφφ φ φ φ ΦΦΦ φφ ΦΦΦ φ φ φφφφφφφ φφφφφφφ φφ φφ φφ φ
420
Tabulka 4
0 NL 1
«ΑΧ κ>
R 0ΗΚ-1@20μΜ
CT 30,6
α 28,3
22,5
Ο' 21,7
χτ 40
«γθ NHj 27,8
20,2
57,7
35,5
·· ···· • * • · ··
=°>(Z 24,2
Ό 31,1
ΖχΧι 13,7
z 23,9
43,6
HOx/C/X» 19,5
ΧΪΧ 32,3
Za 24,9
NH, z 25,8
„z 94,9
•ay 38,7
72
• ·
422 ·9ΐ·
9 9
9 91 9 · · ·
9111 199 ·« • 19
9 ···
9 9 · *
9 9 9 • 9 9·
9
G 21,1
σΤ 31,4
«-Ο, 28,3
Jp CH, 28,5
σ' 28,1
kj=- 25,7
23,9
σ' 36,3
Ο 45,4
32,7
24,7
423 • · to toto to · to toto toto ·*· · · to · t · • · · · · ···· to to • to·· ·· ··· · • · ···· · » · ···· ·«· ·· ·* ·· ·
9». ^x. i, lyd 52,7
/=:N W 38,6
23,6
39,8
28,1
33
<r 52,4
m-CT 38,6
yy ch3 32,3
42,9
24,1
HjC·. °kr —,--- 31,6
fcfc fcfcfcfc fc* 99 fcfc • · · fcfcfc fcfcfc • fcfcfc · fcfcfcfc · · • fcfcfc fcfc fcfcfc · • ······· • fcfcfc fcfcfc ·· fcfc fcfc ·
424
Tabulka 5
% inhibice @ 1 μΜ
Příklad č. Tie2-P FAK
41(a) 50 5
41(ee) 41 7
41(p) 49 9
41(r) 56 5
41(t) 51 9
48(a) 52 11
31(d) 46 6
33(a) 35 12
35(k) 55 7
35(dd) 48 4
35<n) 82 1
35<cc) 47 7
»* ·®φ· • φ • φφφ
425
l(a) 95* 69*
3 NI* 26*
8(a) 55* 3*
2(d) 90* NI*
8(c) 31* 15*
9(b) 88* NI*
10 20* NI*
17 50 ..............................................
4{a) 69
11 40
4(0 29
2(0 NI
22(a) 8
23 5
·· ···· • · • · · · • fc ·· • · · • · ··· ·· • ♦ · • · ·· • · • fc ·<
426
22(b) NI
21 27
12(a) NI
19(a) 18
19(c) NI
12(c) 17
19(d) 15
5(a) 44
16(a) 10
16(b) 52
24(a) 91*
24{b) 92*
24(c) 94
30(a) 19
·«♦<· 99 19 19
119 9 11 9 9 9
119 1 9 919 1 · • 9 11 11 9 11 1
1111111 ···· 191 19 11 11 ·
427
8(d) 10
* sloučenina testovaná v koncentraci 10 μΜ
Hodnoty uvedené tučným písmem se týkají výsledků spektrofotometrických testů, hodnoty uvedené netučným písmem byly získány v testu DELFIA
Stanovení koncentrace inhibitoru v myší plazmě po intraperitoneálním a perorálním podávání dávky
Dávkovači roztok se skládal z inhibitoru rozpuštěného v jednom z následujících vehikul: buď 30% nebo 60% vodný roztok polypropylenglykolu s molárním ekvivalentem HCl ve vodě nebo 0,5% karboxymethylcelulóza ve vodě. Konečná koncentrace byla normálně 5 mg/ml s dávkovacím objemem 5 nebo 10 ml/kg. Samicím myší od firmy Taconic (Germantown, NY) byla podávána dávka jako funkce hmotnosti sloučeniny k tělesné hmotnosti, obvykle 50 nebo 25 mg/kg. Krevní odběry byly prováděny z oční žíly v 0,5, 1, 4 hodinách s konečným časovým bodem 7 hodin, kdy byla krev odebíraná intrakardiální punkcí. Krev byla stočena, aby se sebrala plazma, která pak byla uložena v -80 °C do provádění analýzy. Vzorky byly připraveny pro analýzu s použitím vnitřního standardu a hydroxidu sodného. Po vortexování byl přidán ethylacetát a míchán po dobu 15-20 minut při teplotě místnosti. Po centrifugaci byla výsledná organická vrstva evaporována a pak rekonstituována v acetonitrilu a pufru. Vzorky pak byly analyzovány prostřednictvím HPLC nebo LC-MS.
Hladiny sloučeniny byly kvantifikovány pomocí standardní křivky známé koncentrace sloučeniny v myší plazmě. Hladiny ··»· «9 ·*· 4 • · · · · · · · 9 • ··· · · *>·· · 9 • « «··· S»J ·«·· ··· «· «« ·« *«
428 sloučeniny byly vyneseny do grafu jako funkce času a analyzovány určením plochy pod křivkou koncentrace (AUC ng*hr/ml), maximální koncentrace (Cmax ng/ml), minimální koncentrace (Cmin nebo za 7 hodin ng/ml) a konečný biologický poločas (Tl/2 hodin). Výsledky jsou ukázány v tabulce 6.
• · · · • · • · · ·
429 • · • ·« • «
Tabulka 6
Příklad Č. Způsob Dávka mg/kg AUCposlední (ng*hr/ml) Cmax (ng/ml) Cmin (7 h konc.) (ng/ml) Τχ/2 8 (h) Vehikulum PEG400:H20 pH 2,3
1 (a) IP 50 691 283 2,4 30:70
19 (b) PO 50 NA 30 • 60:40
19 Q) IP 25 23205 5764 456 1,6 60:40
19(1) PO 50 5889 1937 63 1,2 60:40
19 (k) IP 25 428 149 15 2,2 60:40
19 (k) PO 50 19 8 4 2,2 60:40
31 (a) IP 25 47538 13018 1906 2,4 30:70
31 (a) PO 50 40863 14499 834 1,6 30:70
31 (b) IP 25 >7037 >2000 177 1,7 30:70
31 (b) PO 50 2071 1100 15 1,0 30:70
31 (d) IP 25 237784 64184 15073 5,3 30:70
31 (d) PO 10 49120 9740 2022 3,1 30:70
31(d). PO 25. 203860 50810 3801 1,9 30:70
31 Cd) PO 50 430683 76915 42478 39,3 30:70
31 (a) PO 25 >30339 >5000 2952 13,1 30:70
31(0 PO 25 >244545 >50000 9521 2.6 30:70
32 (a) IP 25 >20554 >4000 1273 3,7 30:70
32 (a) PO 50 4190 1746 40 1,1 30:70
32 (b) PO 25 490 179 - 18 2,1 30:70
32(0 PO 25 388 161 10 2,4 30:70
33 (a) IP 25 13813 13794 54 1,1 30:70
33 (a) PO 100 3556 90 0.5% CMC
33 (a) PO 25 721 66 0.5% CMC
33 (a) PO 50 19067 23562 25 0,8 30:70
33 (b) IP 25 11245 1990 902 3,0 60:40
33 (b) PO 50 3925 1496 76 3,0 60:40
33(0 IP 25 697 505 7 1,2 30:70
33(0 PO 50 183 94 5 3,0 30:70
33(0 IP 25 5080 1738 113 1,6 60:40
33 td) PO 50 4744 1614 8 0,9 60:40
33(0 IP 25 14323 9938 94 1,0 30:70
33 (a) PO 50 13290 9967 12 0,7 30:70
33 (f) IP 25 1887 1699 6 30:70
430
33<f) PO 50 1436 1186 3 0,7 30:70
35 (a) IP 25 2032 2138 24 JA 30:70
35 (a) PO 50 2445 1780 • 10 0,9 30:70
35 (aa) PO 25 4036 4168 106 2,1 30:70
35 (b) IP 25 2840 1509 12 0,8 30:70
35 (b) PO 50 4048 5595 13 0,8 30:70
35 (c) IP 25 9408 1976 465 3,2 30:70
35 (c) PO 50 4744 909 321 4,9 30:70
35 (cc) IP 25 2223 3183 6 1,4 30:70
35 (cc) PO 50 1718 1439 5 0,9 30:70
35 (dd) IP 25 >23046 >4000 1364 4,1 30:70
35 (dd) PO 25 1360 444 58 2,0 0,5% CMC
35 (dd) PO 25 >6521 >4000 114 1,4 30:70
35 (e) IP 25 2409 1272 65 1,8 30:70
35 (e) PO 50 1503 1043 6 0,9 30:70
35 (ee) IP 25 546 579 2 1,5 30:70
35 (ee) PO 25 157 77 9 14,6 30:70
35.(fA IP 25 397 131 25 3,8 30:70
35 (f) PO 50 358 93 27 3,6 30:70
35 (ff) IP 25 >6301 >4000 72 1,7 30:70
35 (ff) PO 25 Blq Blc blq blq 30:70
35(g} PO 25 231 61 28 16,1 30:70
35 (h) IP 25 59 46 1 1,5 30:70
35 (h) PO 50 26 7 2 • 30:70
35 (tíh) ΈΟ 25 292 221 5 v — 30:70
35(1) PO 25 30:70
35 QL. IP 25 9531 8606 52 1,3 30:70
35(1) PO 50 1328 2176 5 4,5 30:70
35 (k) IP 25 2640 2189 35 1,4 30:70
35 (k) PO 50 5529 4524 33 1,4 30:70
35 (m) IP 25 226 58 17 4,0 30:70
35 (m) PO 25 10 7 0 * 30:70
35 (n) PO 25 4818 3545 55 1,4 30:70
35 (o). PO 25 683 486 3 1,0 30:70
35 (Pí PO 25 1435 1958 5 1,3 30:70
35 (r) PO 25 4261 2601 67 1,3 30:70
35 (s) PO 25 7425 3371 86 2,2 30:70
35 (t) PO 25 3199 2801 41 1,1 30:70
35 (u) PO 25 30:70
35 (v) IP 25 4865 2215 16 0,9 30:70
35 (v) PO 50 >2946 >2000 26 1,0 30:70
35 (X). IP 25 951 781 48 3,2 30:70
35 (x) PO 50 3516 2313 16 0,9 30:70
35 (y). IP 25 159 135 2 1,2 30:70
35(ZL PO 50 58 45 1 Jxl 30:70
·· ···· · · · · • · ♦ · · · ···· · ···· • · « · · «
431
35(2) IP 25 837 556 22 JA 30:70
35(2) PO 50 1001 806 14 1,6 30:70
36 (a) PO 25 605 445 17 1,5 30:70
37 (a) PO 25 30:70
37 (c) PO I 25 2419 2338 9 1,2 30:70
39 (a) PO 25 >14848 >4000 219 1,4 30:70
39 (b) PO 25 >30972 >5000 3148 11,8 30:70
4(a) PO 50 NA 50 NA 60:40
41 (a) IP 25 92823 32202 3856 2,9 30:70
41 (a) PO 50 48998 18433 2462 3,4 30:70
41 (aa) ÍP 25 6659 2427 124 2,1 60:40
41 (aa) PO 50 289 259 5 0,9 60:40
41 (b) IP 25 >5868 >1000 412 V 60:40
41 <b) PO 50 759 532 6 1,1 60:40
41(bb) PO 50 2178 596 75 2,0 30:70
41(0 IP 25 3397 2068 57 1,7 60:40
41(0 PO 50 3182 1296 104 2,6 60:40
41 (d) IP 25 10324 2787 573 2,8 60:40
41 (d) PO 50 7072 2954 150 JA 60:40
41 (dd) PO 25 654 542 1 CD So 30:70
41 (e) IP 25 4900 1154 301 1,6 60:40
41(e) PO 50 302 113 7 1,6 60:40
41 (ea) IP 25 >28434 >5000 1670 4,0 30:70
41 (ee) PO 50 >25294 >5000 1214 3,4 30:70
41 (ff) PO 25 9176 2784 —410 2,0 — 30:70--
41(9) IP 25 1925 1583 0 0,3 60:40
41 (g) PO 50 508 842 1 0,7 60:40
41 (gg) PO 25 2692 2079 29 1,1 30:70
41 Ch) IP 25 26911 16005 300 1,2 30:70
41 (h) PO 50 4677 4080 7 0,7 30:70
41 (hh) PO 25 5601 1526 405 7,9 30:70
41 <0 IP 25 1854 623 102 3,1 30:70
41 (I) PO 50 212 104 0 0,5 30:70
41 (ϋ) PO 25 7094 1826 346 2,3 30:70
41 (i) PO 25 1476 1008 17 1,3 30:70
41 (kk) PO 25 11612 3709 415 2,0 30:70
41 (m) IP 25 1864 501 54 2,3 30:70
41 (m) PO 50 9 5 0 blq 30:70
41 (mm) PO 25 2261 852 127 2,5 30:70
41 (0 IP 25 9408 1976 465 3,2 30:70
41 (n) PO 50 9066 2245 253 1,9 30:70
41(o) IP 25 >33750 >5000 >5000 • 30:70
41(0) PO 50 14717 4776 427 1,7 30:70
41 (P) IP 25 4150 866 380 5,5 30:70
41 (0 IP 25 >27000 >4000 >4000 • 30:70
• · fcfc
I fc · » · · · ·
432
41 (Q) PO 25 8572 1901 457 5,2 30:70
41 (r) IP 25 > 23752 >5000 >5000 * 30:70
..ÍHO- PO 50 >17789 >5000 >5000 * 30:70
41 (t) PO 25 >22498 >4000 1350 4,0 30:70
41 (u) PO 25 875 224 . 51 5,6 30:70
41 (v) PO 25 10949 2338 749 4,4 30:70
41 (x) PO 25 24174 4587 1268 4,2 30:70
41 (y) PO 25 Biq Blq biq blq 30:70
42 (a) IP 25 19899 4027 1639 5,0 60:40
42 (a) PO 50 8384 3264 341 2,0 60:40
42 (b) IP 25 3207 953 211 3,0 60:40
42 (b) PO 50 4747 2589 46 3,0 60:40
42 (d) IP 25 1774 886 . 31 1,4 60:40
42 (d) PO 50 46 28 18 BLQ 60:40
45 (b) IP 25 11361 2636 1123 2,0 60:40
45 (b) PO 50 1636 427 102 3,0 60:40
47 IP 25 236 39 29 19,9 30:70
47 PO 50 327 84 25 3,4 30:70
59(a) PO 25 50780 15878 1205 1,6 0,5% CMC
48 (a) IP 25 27000 4000 4000 * 30:70
48 (a) PO 25 26636 4000 3857 * 30:70
48 (b) PO 25 2191 476 136 4 30:70
49 (a) PO 25 712 342 15 30:70
49 (b) PO 25 33750 5000 5000 30:70
5{b) PO 10 61 12 3,1 60:40
59 (a) PO 8 7707 2489 122— ~i,s VÓ,5%“CMC
59 (a) PO 40 57240 13798 1879 2,4 0,5% CMC
59 (a) PO 200 156153 29975 12117 9,4 0,5% CMC
59 (b) PO 50 276467 50000 26880 CMC
59(cL PO 25 327135 50000 43090 CMC
59 (d) PO 8 > 24696 >5000 1902 0,5% CMC
59(dk PO 40 >32297 >5000 4135 0,5% CMC
59 (d) PO 200 >123206 >20000 12743 0,5% CMC
59 (e) PO 25 12510 28834 2135 21 0,5% CMC
In vivo test rozvoje retinální vaskularizace u neonatálních laboratorních potkanů
Rozvoj retinální vaskularizace u neonatálních laboratorních potkanů se děje od 1. Postnatálního dne do 14. Postnatálního dne (P1-P14). Tento proces je závislý na aktivitě VEGF (J. Stone, et al., J. Neurosci., 15, 4738,
1995). Dřívější práce prokázaly, že VEGF také působí jako faktor přežití pro cévy retiny během časného rozvoje vaskularizace (Alon, et. al, Nat. Med., 1, 1024, 1995). Pro
4
4 · 4
4
4 4 4 • «
4
4 4 4
433 stanovení schopnosti specifických sloučenin inhibovat aktivitu VEGF in vivo byly sloučeniny formulovány ve vhodném vehikulu, obvykle 50% polyethylenglykolu, průměrné molekulové hmotnosti 400 daltonů, a 50% roztoku 300 mM sacharózy v deionizované vodě. Typicky byly injikovány dva mikrolitry (2 μΐ) roztoku léčiva na středu sklivce oka mláďat laboratorního potkana 8. Nebo 9. Postnatální den. Šest dnů po injekci do sklivce byla zvířata utracena a retiny byly řezem uvolněny od ostatní oční tkáně. Izolované retiny pak byly podrobeny protokolu histochemického značení, které barví specificky endotelové buňky (Lutty a McLeod, Arch. Ophthalmol., 110, 267, 1992), a tak odhaluje vaskularizaci ve vzorku tkáně. Jednotlivé retiny pak byly fixovány na podložních sklíčkách a vyšetřeny, aby se určil rozsah vaskularizace. Účinné sloučeniny inhibovaly další rozvoj retinální vaskularizace a indukovaly regresi všech cév, kromě těch největších, v retině. Stupeň cévní regrese byl použit ke stanovení relativní účinnosti sloučenin po in vivo podávání. Cévní regrese je odstupňována podle subjektivní stupnice jedním až třemi křížky, přičemž jeden křížek znamená detekovatelnou regresi usuzovanou na přibližně 25 procent nebo méně, dva křížky jsou přisouzeny přibližně 25-75 % regresi a tři křížky jsou dávány retinám s téměř celkovou regresí (přibližně 75% nebo větší).
Pro přesnější kvantitativní analýzu regrese byly obrazy ADPázou značených fixovaných retin nasnímány digitální kamerou připojenou k mikroskopu. Obrazy retiny pak byly importovány do softwaru pro analýzu obrazu (Image Pro Plus 4,0, Media Cybernetics, Silver Spring, MD) . Software byl použit k určení procenta oblasti retiny, která obsahovala obarvené cévy. Tato hodnota pro experimentální oko byla srovnána s hodnotou změřenou pro injikované vehikulum kontralaterálního oka téhož zvířete. Redukce vaskulární oblasti pozorovaná v oku, které dostalo sloučeninu ve srovnání s okem injikovaným vehikulem, ♦ · · · ·· ·* ·· ·· • * · · · φ · · φ ♦ φφφφ · φφφφ · · · • φφφ φφ φφφφ · • φ · · · · φ · φ ···· φφφ ·· ·· φ* φφφφ
434 pak byla exprimována jako „procento regrese pro daný vzorek.
Hodnoty procent regrese byly zprůměrněny pro skupiny 5 až 8 zvířat.
Ve vzorcích, ve kterých pozorování mikroskopem ukázalo téměř úplnou regresi, byla rutinně měřena hodnota procenta regrese 65-70 %. To bylo způsobeno barvením deposit v záhybech retiny, záhyby byly indukovány vehikulem použitým pro injekce léčiva. Software pro analýzu obrazu interpretovalo tyto záhyby obsahující barvivo jako cévy. Nebyl učiněn žádný pokus korekce těchto záhybů, protože se měnily od oka k oku. Je tedy nutné poznamenat, že hodnoty procenta regrese se týkají výsledku konzervativního měřeni, které sice přesně určuje pořadí sloučenin, ale podceňuje jejich absolutní účinnost.
In vivo test rozvoje retinální vaskularizace v modelu retinopatie nedonošených neonatálních laboratorních potkanů
Druhý model na VEGF závislé retinální neovaskularizace byl použit k vyhodnocení aktivit této řady sloučenin. V tomto modelu (Penn et. al, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 36, 2063,
1995) jsou mláďata laboratorního potkana (n = 16) se svými matkami vložena do počítačem řízené komory, která reguluje koncentraci kyslíku. Zvířata jsou exponována po dobu 24 hodin koncentraci 50% kyslík, pak následuje 24 hodin v koncentraci 10% kyslíku. Tento střídavý cyklus hyperoxie následované hypoxií je opakován 7 krát, a pak jsou zvířata přenesena do vzduchu místnosti (P14). Sloučeniny jsou podávány injekcí do sklivce po přenesení do vzduchu místnosti a zvířata byla usmrcena 6 dnů později (P20). Izolované retiny pak byly izolovány, obarvené na sklíčku a analyzovány, jak uvedeno v detailu výše v modelu rozvoje, účinnost byl také hodnocena tak, jak je popsáno pro model rozvoje.
« · ·« • · · • · · » · · • · · « • · ·· * ·· « ♦ ·» tttt • · · ·
435
Tabulka 7
Příklad c. Model Počáteční hodnocení % inhibice Konc. (mg/ml) Vehikulum I PEG/voda J
16(0) ROP 36% 5 70:30 '
16<e) ROP +++ 54% 10 70:30
16(0) ROP ···· ++......... 37% 5 70:30
16(9) ROP +/- 16% 1 70:30
19(b) ROP ++ 10 70:30
19(0 P8 +/++ 5 50:50
19(1) ROP ř/· 10 70:30
19(8 ROP - 1 70:30
W) ROP 10 70:30
19(k) ROP ·»· 1 70:30
30(a) ROP ++ 10 70:30
30(a) ROP ++ 48% 10 70:30
3l(a) P8 46% 5 70:30
31(b) P8 32% 5 50:50
···«·· ·· ·· ·· ·· • · · ··· · · · · • · · · · · · a · · · · • · · · · · · · · · « • · ···· · · · ·«·· a·· ·« «· ·· ···»
436
31(c) P8 +/++ var. 5 50:50
31(d) P8 12% 5 50:50
31(e) P8 - 24% 5 50:50
32(a) P9 20% 5 50:50
33(b) ROP ++ 55% 10 70:30
33(b) ROP +/- 14% 1 70:30
33(b) P6-P10 37% IP* 70:30 .
33(e) P8 22% 5 70:30
33(f) P8 20% 5 50:50
35(a) P8 4% 5 50:50
35(aa) P8 . - 5 50:50
35(c) P8 0% 5 50:50
35(cc) P8 +/++ 5 50:50
35(dd) P8 ++/+++ var. -..........................----- 5 50:50____
35(ee) pa +/++ 5 50:50
35(h) P8 +/- 5 50:50
35(i) P8 +/++ 5 50:50
35(j) P8 7% 5 50:50
35(k) P8 - 5 50:50
35(k) P8 Ή 5 50:50
35(v) . P8 20% 5 50:50
38(a) ROP +++ 55% 10 70:30
38(a) ROP 4· 16% 1 70:30
39(b) P8 9% 5 50:50
• 9
9 · · · ·
9 9
9 ·9 • · « ·
9 9 · • 9 9
9 9
9999
437
4(a) ROP ++ 10 70:30
41(a) ROP ++4· 64% 10 70:30
41 (a) P8 0%. 0.5 50:50
41(a) P8 4% 1 50:50
41(a) P8 ++/+++ 5 50:50
41(C) ROP +++ 54% 10 70:30
41(0 ROP +/- 16% 1 70:30
41(0 P8 ++ —* 5 50:50
41(0 ROP +++ 59% 10 70:30
41(0 ROP 0% 1 70:30
41{a) P8 8% 5 50:50
41 (ee) P8 +/++ var. 5 50:50
41(g) P8 37% 5 50:50
41 (h) P8 ............-............-..... 0% -—5 —70:30—
410) P8 +/++ 5 50:50
41(k) P8 1% 5 50:50
41(1) P8 28% 2.5 70:30
41 (m) P8 10% 5 .50:50
41 (mm) P8 + 5 50:50
41(0 P8 2% 5 50:50
41(o) P8 2% 5 50:50
41(p) P8 35% 5 50:50
41{r) P8 +/++ var. 5 50:50
42« ROP +++ 23% 10 70:30
• · ·»· · · · · · · · · · • · · fcfcfc ···· • ·fcfc · · fc · fc · · · « · fc · fcfc · · fc fc · • · fcfc·· fcfcfc • fcfcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc fcfcfc·
438
42(a) ROP 1% 1 70:30
42(a) ROP + 10 70:30
42(a) P9 55% 10 70:30
42(a) P6-P10 61% IP* 70:30
42(a) P8 +/++ 5 50:50
42{b) P9 40% 10 70:30
42(c) P8 36% 5 50:50
45(b) ' ROP 60% 10 70:30
45(b) ROP +/- 25% 1 70:30
49(a) P8 54% 5 50:50
49(b) P8 5% 5 50:50
5(b) ROP ++ 45% 5 70:30
59(a) ROP 41% 10 0.5%CMC
59(a) ROP 19% 1 0.5%CMC
6(a) ROP 5 65:35
6(b) ROP ++ 10 70:30
Kináza fosforylázy
Konstrukt kinázy fosforylázy pro test
Zkrácená katalytická podjednotka (podjednotka gama) kinázy fosforylázy (aminokyseliny 1 až 298) byla exprimována v E. Coli a izolována z inkluzních tělísek. Kináza fosforyláza pak byl znovu složena a uložena v glycerolu v -20 °C.
0 ·· · · ·* 0 0 00 0 0 • 00 000 0·0·
0000 0 0000 · 0 9
000 00 000 0 0
0 0000 000 0000 000 00 ·0 ♦· 0000
439
Test kinázy fosforylázy.
V testu byla použita purifikovaná katalytická podjednotka k fosforylaci fosforylázy b s použitím radioaktivně značeného ATP. Stručně, 1,5 mg/ ml fosforylázy b bylo inkubováno s lOnM kinázy fosforylázy v lOmM MgCl2, 50mM Hepes, pH 7,4, ve 37 °C. Reakce byla spuštěna přidáním ATP do 100 μΜ a inkubována po dobu 15 minut v 25 °C nebo 37 °C. Reakce byla ukončena a proteiny byly precipitovány přidáním TCA do 10% konečné koncentrace. Precipitované proteiny byly izolovány na 96 jamkových filtračních destičkách Millipore MADP NOB. Filtrační destičky pak byl důkladně promyty 2 0% TCA a usušeny. Pak byla na destičky přidána scintilační tekutina a inkorporovaná radioaktivní značka byla počítána na Wallacově mikropočítači beta impulzů. % inhibice transferu fosfátu z ATP na fosforylázu b v přítomnosti 10 μΜ sloučeniny je ukázáno v tabulce 8 níže.
Tabulka 8
Příklad č. % inhibice @ 10 μΜ
52 (b) 92
27 (f) 90
27 (a) 37
Příklady sloučenin popsaných výše mohou být formulovány do farmaceutických přípravků podle následujících obecných příkladů.
fcfc ···· ·· ·»
9 9 9 9 9
9 99 9 9 9 99
9 9 9
9 ·
440
Příklad 1
Parenterální přípravek
Aby se připravil parenterální farmaceutický přípravek vhodný pro podávání injekcí, bylo rozpuštěno 100 mg ve vodě rozpustné soli sloučeniny vzorce I v DMSO, a pak smícháno s 10 ml 0,9% sterilního fyziologického roztoku. Směs je formulována do jednotkové dávkové formy vhodné pro podávání injekcí.
Příklad 2
Perorální přípravek
Aby se připravil farmaceutický přípravek pro perorální podávání, bylo smícháno 100 mg sloučeniny vzorce I se 750 mg laktózy. Směs byla formulována do perorální dávkové jednotky, jako je například tvrdá želatinová tobolka, která je vhodná pro perorální podávání.
Příklad 3
Intraoční přípravek
Tiby se připravil farmaceutický přípravek s prodlouženým uvolňováním pro intraoční podávání, byla sloučenina vzorce I suspendována v neutrálním, isotonickém roztoku hyaluronové kyseliny (1,5% konc.) ve fosfátovém pufru (pH 7,4) za vzniku 1% suspenze.
Je třeba rozumět, že předchozí popis je uveden jako příklad a vysvětlení výhodných provedení vysvětlující povahy a ·· · · • 4 «« ♦···<· 4 • · · 4 4 4 · 4 4 ···· ··· 44 ·· 4444
441 je zamýšlen pro ilustraci vynálezu a jeho výhodných provedení.
Na základě rutinních experimentů odborník snadno najde modifikace a variace, které mohou být vytvořeny bez odchýlení se od vynálezecké myšlenky. Předpokládá se tedy, že rozsah vynálezu není definován výše uvedeným popisem, ale připojenými patentovými nároky a jejich ekvivalenty.

Claims (16)

  1. PATENTOVÉ
    NÁROKY
    9 9 9999 999
    999 999 99 99 99 9999
    442
    1. Sloučenina vzorce I:
    (I)
    R1 je nesubstituovaná arylová nesubstituovaná heteroarylová
    CH=CH-R nebo
    CH=N-R3, kde skupina nebo substituovaná nebo skupina nebo skupina vzorce R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová. skupina, alkenylová.........skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a
    R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina nebo skupina Y-X, kde Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=0, S=0, S02, alkylidenová skupina, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a X je substituovaná nebo nesubstituovaná Ar, heteroarylová skupina, NH-alkylová skupina, NH-cykloalkylová skupina, NH-heterocykloalkylová skupina, NH-arylová skupina, NH-heteroarylová skupina, NH-alkoxyskupina nebo NH-dialkylamidoskupina, přičemž Ar je arylová skupina, nebo její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl.
    • 4
    44 *44 4 *4 44 ·4
    4 4 4 4 4 4 4
    4444 4 «444 4 4 ·
    4 «44 «4 444 4 4
    4 · 4 4 4 4 444 • 444 444 4« 44 44 4444
    443
  2. 2. Sloučenina vzorce I (a) :
    (I(a) ) kde:
    R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a
    R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo skupina Y-Ar, kde Y jě atom 0, S, skupina C=CH2,.....skupina C=Ó, skupina S=0, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a Ar je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, nebo její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl.
  3. 3. Sloučenina vzorce II:
    H (II) • 4 4 · · 4 • 4 • «
  4. 4« 44 44 • 44 4 4 4 ·
    4 444 4 4 444 4 4 ·
    4 444 94 444 4 4
    4 4 4 4 4 4 4 4
    4« 444 «4 44 44 4444
    444 kde:
    R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
    R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, aryloxyskupina, thioarylová skupina, skupina CH2-OH, CH2-0-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku v alkylové části, CH2-O-arylová skupina, CH2-S-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku v alkylové části nebo CH2-S-arylová skupina,
    R5 a R6 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, Z-alkylová skupina,. Z-arylová skupina nebo skupina Z-CH2CH=CH2, kde Z je atom 0, S, skupina NH nebo skupina CH2 a alkylová skupina a arylová skupina ze Z-alkylové skupiny a Zarylové skupiny je každá volitelně substituovaná, nebo její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl.
    4. Sloučenina, její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 3, kde:
    R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, ·· ··*» ·· ·« ·« ·* ♦ · # · · · · · · · • •φ· * ♦ · ·· · · · • ···»····· · • ··♦····· ···« ··· ·* ·· ·· ····
    445
    R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a
    R5 a R6 jsou každý nezávisle atom halogenu, Z-alkylová skupina nebo skupina Z-CH2CH=CH2, kde Z je atom 0 nebo S a alkylová skupina je volitelně substituovaná.
  5. 5. Sloučenina vzorce III:
    Η H (III) kde:
    R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je subs-tituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
    Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina S=0, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
    R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina nebo aryloxyskupina,
    R10 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a nižší alkylová skupina, φ» φφφφ ·· φφ φφ φφ
    ΦΦΦ φ · · 9 9··
    ΦΦΦΦ Φ Φ ΦΦΦ φ Φ Φ • 9 · Φ 9 9 9 9 9 9 · • Φ ΦΦ»Φ Φ 9 9 • ΦΦΦ ΦΦΦ ΦΦ «Φ ΦΦ ΦΦΦΦ
    446 nebo její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl.
  6. 6. Sloučenina, její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 5, kde:
    R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
    Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
    R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, alkylová skupina a alkenylová skupina a R10 je atom vodíku nebo atom halogenu.
  7. 7. Sloučenina vzorce III(a) kde:
    R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová
    ΦΦ ΦΦΦΦ ·· Φφ ΦΦ <Φ
    ΦΦΦ ΦΦΦ φφφφ φ ΦΦΦ φ · ΦΦΦ φ φ φ φ ΦΦΦ φφ φφφ φ φ φ φ φφφφ φφφ φφφφ φφφ φφ φφ φφ φφφφ
    447 skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
    Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina S=0, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
    R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina nebo aryloxyskupina, nebo její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl.
  8. 8. Sloučenina, její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo.....farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 7, kde:
    R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
    Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a
    R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, alkylová skupina nebo alkenylová skupina. 9
  9. 9. Sloučenina, její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 7, kde:
    • 4 4*44 ·« »4 ·♦ «· • 4 « 4 · 4 44··
    4 ··· 4 · 444 4 4 4 • 4 4 4 »4 444 4 4 • 4 4444 ··· • 444 ··· ·* 44 44 4444
    448
    R1 je CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituované arylová skupina,
    Y je atom O nebo S a
    R8 je substituovaná nebo nesubstituované arylová skupina nebo heteroarylová skupina.
    (IV) arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituované alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
    Y je atom 0, S, skupina C=CH2, skupina C=0, skupina S=O, skupina S02, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
    R9 je substituovaná nebo nesubstituované alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, cykloalkoxyskupina, NH-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, NH-arylová skupina, NH-heteroarylová skupina, N=CH-alkylová skupina, skupina NH(C=0)R11 nebo skupina NH2, kde R11 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, *· 4499
    9 4 • ···
    99 99 99 99
    9 9 9 9 9 9 9
    9 9 999 9 9 4 • 9 9 9 9 9 9 9 9 · · • ····»··· 9999 994 99 99 94 ··*·
    449 substituovaná nebo nesubstituované alkylová skupina, cykloalkylové skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina a heteroarylové skupina a
    R10 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a nižší alkylová skupina, nebo její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl.
  10. 11. Sloučenina, její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 10, kde:
    R1 je skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituované arylová skupina nebo heteroarylové skupina,
    Y je atom S nebo skupina NH, a
    R9 je substituovaná nebo nesubstituované alkylová skupina, alkoxyskupina nebo NH-heteroarylová skupina.
  11. 12. Sloučenina, její farmaceuticky přijatelný prekurzor, farmaceuticky aktivní metabolit nebo farmaceuticky přijatelná sůl, vybrané ze skupiny, kterou tvoří:
    ·· ···« • · • ··· ·· *· • · · • · • · • ·· <
    • · <
    451 • · · · to · · · · · ···· · · · · ·
    VY
    F
    O fcfc fcfcfcfc • · • 0 0000 • » • · · «
    9» 00 • · · » • · · · · 0 0
    0 0 0 0 ·
    00 0004
    453
  12. 13. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že obsahuje:
    (a) terapeuticky účinné množství sloučeniny, jejího farmaceuticky přijatelného prekurzoru, farmaceuticky aktivního metabolitu nebo farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 1 a (b) farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo vehikulum.
  13. 14. Způsob léčení chorobného stavu savce zprostředkovaného proteinkinázovou aktivitou vyznačující se tím, že zahrnuje podávání savci, který to potřebuje, terapeuticky účinné množství sloučeniny, farmaceuticky přijatelného prekurzoru, farmaceuticky aktivního metabolitu nebo farmaceuticky přijatelné soli, jak je definováno v nároku 13.
  14. 15. Způsob podle nároku 14 vyznačující se tím, že chorobný stav savce je sdružen s růstem nádoru, buněčnou proliferaci nebo angiogenezí.
  15. 16. Způsob modulace aktivity proteinkinázového receptoru vyznačující se tím, že zahrnuje kontakt kinázového receptoru s účinným množstvím sloučeniny, jejího farmaceuticky přijatelného prekurzoru, farmaceuticky aktivního metabolitu nebo farmaceuticky přijatelné soli, jak jsou definovány v nároku 13.
  16. 17. Způsob podle nároku 16 vyznačující tím, že proteinkinázový receptor je receptor VEGF.
CZ20014634A 1999-07-02 2000-06-30 Derivát indazolu a farmaceutický prípravek s jeho obsahem pro inhibici proteinkináz CZ301667B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14213099P 1999-07-02 1999-07-02

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20014634A3 true CZ20014634A3 (cs) 2002-09-11
CZ301667B6 CZ301667B6 (cs) 2010-05-19

Family

ID=22498654

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20014634A CZ301667B6 (cs) 1999-07-02 2000-06-30 Derivát indazolu a farmaceutický prípravek s jeho obsahem pro inhibici proteinkináz

Country Status (51)

Country Link
EP (2) EP1218348B1 (cs)
JP (2) JP3878849B2 (cs)
KR (1) KR100529639B1 (cs)
CN (2) CN1137884C (cs)
AP (1) AP1486A (cs)
AR (2) AR035554A1 (cs)
AT (1) ATE376543T1 (cs)
AU (1) AU777701B2 (cs)
BE (1) BE2013C015I2 (cs)
BG (1) BG66070B1 (cs)
BR (1) BRPI0012352B8 (cs)
CA (1) CA2383630C (cs)
CO (1) CO5190686A1 (cs)
CR (2) CR6517A (cs)
CY (3) CY1107148T1 (cs)
CZ (1) CZ301667B6 (cs)
DE (2) DE60036879T2 (cs)
DK (2) DK1218348T3 (cs)
DZ (1) DZ3191A1 (cs)
EA (1) EA004460B1 (cs)
EE (1) EE05585B1 (cs)
ES (2) ES2293906T3 (cs)
FR (1) FR13C0010I2 (cs)
GE (1) GEP20063885B (cs)
GT (1) GT200000107A (cs)
HR (1) HRP20020109B1 (cs)
HU (1) HU228502B1 (cs)
IL (1) IL146710A0 (cs)
IS (1) IS2791B (cs)
JO (1) JO2319B1 (cs)
LU (1) LU92154I2 (cs)
MA (1) MA26803A1 (cs)
ME (1) MEP45108A (cs)
MX (1) MXPA01012795A (cs)
MY (2) MY139999A (cs)
NO (3) NO322507B1 (cs)
NZ (1) NZ516676A (cs)
OA (1) OA11980A (cs)
PA (1) PA8498001A1 (cs)
PE (1) PE20010306A1 (cs)
PL (1) PL212108B1 (cs)
PT (2) PT1614683E (cs)
RS (1) RS50339B (cs)
SI (2) SI1218348T1 (cs)
SK (1) SK286936B6 (cs)
SV (1) SV2002000121A (cs)
TN (1) TNSN00146A1 (cs)
UA (1) UA66933C2 (cs)
UY (1) UY26231A1 (cs)
WO (1) WO2001002369A2 (cs)
ZA (1) ZA200110061B (cs)

Families Citing this family (378)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT1154774E (pt) 1999-02-10 2005-10-31 Astrazeneca Ab Derivados de quinazolina como inibidores de angiogenese
PE20010306A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa
WO2001047922A2 (en) 1999-12-24 2001-07-05 Aventis Pharma Limited Azaindoles
DK1268472T3 (da) 2000-02-07 2004-12-06 Bristol Myers Squibb Co 3-aminopyrazolinhibitorer af cyclinafhængige kinaser
AU2001241128A1 (en) * 2000-03-14 2001-09-24 Fujisawa Pharmaceutical Co. Ltd. Novel amide compounds
JP2004507455A (ja) 2000-04-25 2004-03-11 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー サイクリン依存性キナーゼ阻害剤としての、５−チオ−、スルフィニル−およびスルホニルピラゾロ［３，４−ｂ］−ピリジンの用途
WO2002012228A1 (en) 2000-08-09 2002-02-14 Astrazeneca Ab Cinnoline compounds
WO2002012226A1 (en) 2000-08-09 2002-02-14 Astrazeneca Ab Quinoline derivatives having vegf inhibiting activity
ATE448226T1 (de) 2000-09-01 2009-11-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Aza heterocyclische derivate und ihre therapeutische verwendung
DE60115069T2 (de) 2000-09-11 2006-08-03 Chiron Corp., Emeryville Chinolinonderivate als tyrosin-kinase inhibitoren
AU9598601A (en) 2000-10-20 2002-04-29 Eisai Co Ltd Nitrogenous aromatic ring compounds
TWI243164B (en) 2001-02-13 2005-11-11 Aventis Pharma Gmbh Acylated indanyl amines and their use as pharmaceuticals
GB0115109D0 (en) 2001-06-21 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
US7642278B2 (en) 2001-07-03 2010-01-05 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Indazole benzimidazole compounds
US7064215B2 (en) 2001-07-03 2006-06-20 Chiron Corporation Indazole benzimidazole compounds
WO2003024969A1 (en) 2001-09-14 2003-03-27 Merck & Co., Inc. Tyrosine kinase inhibitors
US6897208B2 (en) * 2001-10-26 2005-05-24 Aventis Pharmaceuticals Inc. Benzimidazoles
FR2831537B1 (fr) * 2001-10-26 2008-02-29 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation
FR2831536A1 (fr) * 2001-10-26 2003-05-02 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation notamment comme inhibiteurs de kdr
BR0213562A (pt) * 2001-10-26 2004-08-31 Aventis Pharma Inc Benzimidazóis e análogos e seu uso como inibidores de cinases de proteìna
SI1474420T1 (sl) 2002-02-01 2012-06-29 Astrazeneca Ab Spojine kinazolina
US7166293B2 (en) * 2002-03-29 2007-01-23 Carlsbad Technology, Inc. Angiogenesis inhibitors
US20050119278A1 (en) * 2002-05-16 2005-06-02 Che-Ming Teng Anti-angiogenesis methods
EP1545515A1 (en) 2002-08-12 2005-06-29 Sugen, Inc. 3-pyrrolyl-pyridopyrazoles and 3-pyrrolyl-indazoles as novel kinase inhibitors
EP1539754A4 (en) 2002-08-23 2009-02-25 Novartis Vaccines & Diagnostic BENZIMIDAZOCHINOLINONE AND ITS USE
EP1582211A1 (en) * 2002-12-03 2005-10-05 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Jnk inhibitor
WO2004056806A1 (en) 2002-12-19 2004-07-08 Pfizer Inc. 2-(1h-indazol-6-ylamino)-benzamide compounds as protein kinases inhibitors useful for the treatment of ophtalmic diseases
US7192976B2 (en) 2002-12-21 2007-03-20 Angion Biomedica Corporation Small molecule modulators of hepatocyte growth factor (scatter factor) activity
US7135575B2 (en) 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
US7521447B2 (en) 2003-03-03 2009-04-21 Array Biopharma Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
AU2004226586B2 (en) * 2003-04-03 2008-12-11 Pfizer Inc. Dosage forms comprising AG013736
WO2004092217A1 (en) * 2003-04-17 2004-10-28 Pfizer Inc. Crystal structure of vegfrkd: ligand complexes and methods of use thereof
FR2854159B1 (fr) * 2003-04-25 2008-01-11 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de l'indole, leur preparation a titre de medicaments, compositions pharmaceutiques et notamment comme inhibiteurs de kdr
TWI372050B (en) 2003-07-03 2012-09-11 Astex Therapeutics Ltd (morpholin-4-ylmethyl-1h-benzimidazol-2-yl)-1h-pyrazoles
CA2532965C (en) 2003-07-22 2013-05-14 Astex Therapeutics Limited 3, 4-disubstituted 1h-pyrazole compounds and their use as cyclin dependent kinases (cdk) and glycogen synthase kinase-3 (gsk-3) modulators
EP1648455A4 (en) * 2003-07-23 2009-03-04 Exelixis Inc MODULATORS OF ALK PROTEIN (ANAPLASTIC LYMPHOMA KINASE) AND METHODS OF USE
AU2004260756B2 (en) * 2003-07-30 2010-03-25 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Indazole derivatives
AU2004260759B2 (en) * 2003-07-30 2010-04-22 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Protein kinase inhibitors
WO2005025568A1 (en) * 2003-09-04 2005-03-24 Merck & Co., Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
WO2005028624A2 (en) * 2003-09-15 2005-03-31 Plexxikon, Inc. Molecular scaffolds for kinase ligand development
WO2005039564A1 (en) * 2003-10-02 2005-05-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Phthalimide compounds useful as protein kinase inhibitors
US20050209247A1 (en) 2003-11-07 2005-09-22 Chiron Corporation Pharmaceutically acceptable salts of quinolinone compounds having improved pharmaceutical properties
US7683172B2 (en) 2003-11-11 2010-03-23 Eisai R&D Management Co., Ltd. Urea derivative and process for preparing the same
US20060004043A1 (en) * 2003-11-19 2006-01-05 Bhagwat Shripad S Indazole compounds and methods of use thereof
GB0330002D0 (en) 2003-12-24 2004-01-28 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
RU2006134022A (ru) * 2004-02-27 2008-04-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) Производные индазола и содержащие их фармацевтические композиции
JP2007526324A (ja) * 2004-03-02 2007-09-13 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション Ａｋｔ活性のある阻害剤
JPWO2005094823A1 (ja) * 2004-03-30 2007-08-16 協和醗酵工業株式会社 Ｆｌｔ−３阻害剤
JPWO2005108370A1 (ja) * 2004-04-16 2008-03-21 味の素株式会社 ベンゼン化合物
EP1742627A4 (en) 2004-05-06 2009-08-26 Plexxikon Inc PDE4B HEMMER AND ITS USE
KR20070027584A (ko) * 2004-06-17 2007-03-09 와이어쓰 고나도트로핀 방출 호르몬 수용체 길항제
AU2005264998A1 (en) * 2004-06-17 2006-01-26 Wyeth The present invention relates to methods of making Gonadotropin Releasing Hormone ('GnRH') (also known as Leutinizing Hormone Releasing Hormone) receptor antagonists
EP1786777A1 (en) * 2004-08-26 2007-05-23 Pfizer, Inc. Aminoheteroaryl compounds as protein tyrosine kinase inhibitors
WO2006026754A2 (en) * 2004-09-03 2006-03-09 Plexxikon, Inc. Bicyclic heteroaryl pde4b inhibitors
ATE428421T1 (de) 2004-09-17 2009-05-15 Eisai R&D Man Co Ltd Medizinische zusammensetzung mit verbesserter stabilität und reduzierten gelierungseigenschaften
EP1647549A1 (en) * 2004-10-14 2006-04-19 Laboratoire Theramex Indazoles, benzisoxazoles and benzisothiazoles as estrogenic agents
MX2007005273A (es) * 2004-11-02 2007-07-19 Pfizer Formas polimorficas de 6-[2-(metilcarbamoil)fenilsulfanil]-3- e-[2-(piridin-2-il)etenil]indazol.
CA2591313A1 (en) * 2004-11-02 2006-05-11 Pfizer Inc. Methods for preparing indazole compounds
KR20070058689A (ko) * 2004-11-02 2007-06-08 화이자 인코포레이티드 인다졸 화합물의 제조 방법
EP1831225A2 (en) 2004-11-19 2007-09-12 The Regents of the University of California Anti-inflammatory pyrazolopyrimidines
FR2878442B1 (fr) * 2004-11-29 2008-10-24 Aventis Pharma Sa THIENO(2,3-c)PYRAZOLES SUBSTITUES, PROCEDE DE PREPARATION, COMPOSITIONS LES CONTENANT ET UTILISATION
US20060142247A1 (en) * 2004-12-17 2006-06-29 Guy Georges Tricyclic heterocycles
MX2007008008A (es) 2004-12-30 2007-11-12 Astex Therapeutics Ltd Compuestos de pirazol que modulan la actividad de las cinasas cdk, gsk y aurora.
US7622583B2 (en) 2005-01-14 2009-11-24 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl sulfonamides and CCR2
AR054425A1 (es) 2005-01-21 2007-06-27 Astex Therapeutics Ltd Sales de adicion de piperidin 4-il- amida de acido 4-(2,6-dicloro-benzoilamino) 1h-pirazol-3-carboxilico.
MX2007008781A (es) 2005-01-21 2007-09-11 Astex Therapeutics Ltd Compuestos farmaceuticos.
CN101146532B (zh) 2005-01-21 2012-05-09 阿斯泰克斯治疗有限公司 药物化合物
US8404718B2 (en) 2005-01-21 2013-03-26 Astex Therapeutics Limited Combinations of pyrazole kinase inhibitors
ATE451363T1 (de) * 2005-01-26 2009-12-15 Schering Corp 3-(indazol-5-yl)-(1,2,4)triazinderivate und verwandte verbindungen als proteinkinaseinhibitoren zur behandlung von krebs
ES2426482T3 (es) * 2005-01-27 2013-10-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Inhibidor de IGF-1R
US7582634B2 (en) 2005-02-18 2009-09-01 Wyeth 7-substituted imidazo[4,5-c]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
US7538113B2 (en) 2005-02-18 2009-05-26 Wyeth 4-substituted imidazo[4,5-c]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
US7534796B2 (en) 2005-02-18 2009-05-19 Wyeth Imidazo[4,5-b]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
EP2465857B1 (en) 2005-05-17 2014-06-04 Novartis AG Methods for synthesizing heterocyclic compounds
US7531542B2 (en) 2005-05-18 2009-05-12 Wyeth Benzooxazole and benzothiazole antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
WO2006123223A1 (en) * 2005-05-19 2006-11-23 Pfizer Inc. Pharmaceutical compostions comprising an amorphous form of a vegf-r inhibitor
EP2354140A1 (en) * 2005-05-20 2011-08-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrrolopyridines useful as inhibitors of protein kinase
US7582636B2 (en) 2005-05-26 2009-09-01 Wyeth Piperazinylimidazopyridine and piperazinyltriazolopyridine antagonists of Gonadotropin Releasing Hormone receptor
WO2006130673A1 (en) 2005-05-31 2006-12-07 Janssen Pharmaceutica, N.V. 3-benzoimidazolyl-pyrazolopyridines useful in treating kinase disorders
US7888381B2 (en) 2005-06-14 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity, and use thereof
JP4989476B2 (ja) 2005-08-02 2012-08-01 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 血管新生阻害物質の効果を検定する方法
NZ567550A (en) 2005-11-29 2011-08-26 Novartis Ag Formulations of lactic acid salts of 4-amino-5-fluoro-3-[6-(4-methyl-piperazin-1-yl)-1 H-benzimidazol-2-yl]1H-quinolin-2-one
TW200732305A (en) * 2005-12-23 2007-09-01 Yung Shin Pharmaceutical Ind Cancer chemotherapy
RS52298B (sr) 2006-01-31 2012-12-31 Array Biopharma Inc. Inhibitori kinaze i postupak njihove upotrebe
JP2009530337A (ja) * 2006-03-23 2009-08-27 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 置換インダゾール誘導体、その製造方法、及びその薬剤としての利用法
WO2007114926A2 (en) 2006-04-04 2007-10-11 The Regents Of The University Of California Kinase antagonists
CN104706637A (zh) 2006-05-18 2015-06-17 卫材R&D管理有限公司 针对甲状腺癌的抗肿瘤剂
US20120329794A1 (en) 2006-06-30 2012-12-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Ab1 KINASE INHIBITORS
EP2036894A4 (en) 2006-06-30 2011-01-12 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd AURORA INHIBITOR
US8519135B2 (en) 2006-07-14 2013-08-27 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl sulfonamides and CCR2/CCR9
JPWO2008020606A1 (ja) * 2006-08-16 2010-01-07 協和発酵キリン株式会社 血管新生阻害剤
WO2008026748A1 (en) 2006-08-28 2008-03-06 Eisai R & D Management Co., Ltd. Antitumor agent for undifferentiated gastric cancer
CL2007002617A1 (es) 2006-09-11 2008-05-16 Sanofi Aventis Compuestos derivados de pirrolo[2,3-b]pirazin-6-ilo; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso para tratar inflamacion de las articulaciones, artritis reumatoide, tumores, linfoma de las celulas del manto.
CA2676796C (en) 2007-01-29 2016-02-23 Eisai R & D Management Co., Ltd. Composition for treatment of undifferentiated gastric cancer
EP2133095A4 (en) 2007-03-05 2012-09-26 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd PHARMACEUTICAL COMPOSITION
WO2008113255A1 (fr) * 2007-03-16 2008-09-25 The Institute Of Radiation Medicine, Academy Of Military Medical Sciences, Pla Dérivés de benzamide avec activité antiproliférative, leurs préparations pharmaceutiques
NZ580126A (en) * 2007-04-05 2012-03-30 Pfizer Prod Inc Crystalline forms of 6- [2- (methylcarbamoyl) phenylsulfanyl] -3-e- [2- (pyridin-2-yl) ethenyl] indazole suitable for the treatment of abnormal cell growth in mammals
DE602008003055D1 (de) 2007-05-31 2010-12-02 Nerviano Medical Sciences Srl Zyklokondensierte Azaindole, die als Kinase-Hemmer wirken
JP5306344B2 (ja) 2007-07-12 2013-10-02 ケモセントリックス， インコーポレイテッド 炎症の治療のためのｃｃｒ２モジュレーターとしての縮合ヘテロアリールピリジルおよびフェニルベンゼンスルホンアミド
GB2467670B (en) 2007-10-04 2012-08-01 Intellikine Inc Chemical entities and therapeutic uses thereof
KR20100075631A (ko) * 2007-10-11 2010-07-02 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 전압­개폐 나트륨 채널의 억제제로서 유용한 아릴 아미드
TW200924762A (en) 2007-11-02 2009-06-16 Vertex Pharma Kinase inhibitors
US8952035B2 (en) 2007-11-09 2015-02-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Combination of anti-angiogenic substance and anti-tumor platinum complex
MX2010007419A (es) 2008-01-04 2010-11-12 Intellikine Inc Ciertas entidades quimicas, composiciones y metodos.
US8193182B2 (en) 2008-01-04 2012-06-05 Intellikine, Inc. Substituted isoquinolin-1(2H)-ones, and methods of use thereof
US8993580B2 (en) 2008-03-14 2015-03-31 Intellikine Llc Benzothiazole kinase inhibitors and methods of use
EP2252293B1 (en) 2008-03-14 2018-06-27 Intellikine, LLC Kinase inhibitors and methods of use
CN104710365A (zh) 2008-04-28 2015-06-17 旭化成制药株式会社 苯丙酸衍生物及其用途
US20110224223A1 (en) 2008-07-08 2011-09-15 The Regents Of The University Of California, A California Corporation MTOR Modulators and Uses Thereof
BRPI0915231A2 (pt) 2008-07-08 2018-06-12 Intellikine Inc compostos inibidores de quinase e métodos de uso
CN102149379A (zh) 2008-07-10 2011-08-10 安吉翁生物医药有限公司 调节肝细胞生长因子(分散因子)活性的方法和肝细胞生长因子(分散因子)活性的小分子调节剂组合物
CA2738429C (en) 2008-09-26 2016-10-25 Intellikine, Inc. Heterocyclic kinase inhibitors
EP2358720B1 (en) 2008-10-16 2016-03-02 The Regents of The University of California Fused ring heteroaryl kinase inhibitors
US8476431B2 (en) 2008-11-03 2013-07-02 Itellikine LLC Benzoxazole kinase inhibitors and methods of use
MY159575A (en) 2009-04-02 2017-01-13 Merck Serono Sa Dihydroorotate dehydrogenase inhibitors
JP5789252B2 (ja) 2009-05-07 2015-10-07 インテリカイン， エルエルシー 複素環式化合物およびその使用
CN105037355B (zh) 2009-08-10 2017-06-06 萨穆梅德有限公司 Wnt信号传导途径的吲唑抑制剂及其治疗用途
MY162940A (en) 2009-08-19 2017-07-31 Eisai R&D Man Co Ltd Quinoline derivative-containing pharmaceutical composition
WO2011047384A2 (en) 2009-10-16 2011-04-21 The Regents Of The University Of California Methods of inhibiting ire1
WO2011073521A1 (en) 2009-12-15 2011-06-23 Petri Salven Methods for enriching adult-derived endothelial progenitor cells and uses thereof
LT3001903T (lt) 2009-12-21 2018-01-10 Samumed, Llc 1h-pirazolo[3,4-b]piridinai ir jų terapinis panaudojimas
WO2011090738A2 (en) 2009-12-29 2011-07-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Type ii raf kinase inhibitors
UY33236A (es) 2010-02-25 2011-09-30 Novartis Ag Inhibidores dimericos de las iap
US8987275B2 (en) * 2010-03-16 2015-03-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Indazole compounds and their uses
CA2799579A1 (en) 2010-05-21 2011-11-24 Intellikine, Inc. Chemical compounds, compositions and methods for kinase modulation
CN102958523B (zh) 2010-06-25 2014-11-19 卫材R&D管理有限公司 使用具有激酶抑制作用的组合的抗肿瘤剂
EP2596026B1 (en) 2010-07-23 2020-04-08 Trustees of Boston University Anti-despr inhibitors as therapeutics for inhibition of pathological angiogenesis and tumor cell invasiveness and for molecular imaging and targeted delivery
JP2013545749A (ja) 2010-11-10 2013-12-26 インフィニティー ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 複素環化合物及びその使用
EP2651917A1 (en) 2010-12-13 2013-10-23 Novartis AG Dimeric iap inhibitors
UY33794A (es) 2010-12-13 2012-07-31 Novartis Ag Inhibidores diméricos de las iap
US8754114B2 (en) 2010-12-22 2014-06-17 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of FGFR3
ES2637113T3 (es) 2011-01-10 2017-10-10 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Procedimientos para preparar isoquinolinonas y formas sólidas de isoquinolinonas
US9295673B2 (en) 2011-02-23 2016-03-29 Intellikine Llc Combination of mTOR inhibitors and P13-kinase inhibitors, and uses thereof
BR112013025142A2 (pt) * 2011-04-01 2019-09-24 Univ Utah Res Found análogos de 3-(1h-benzo{d}imidazol-2-il)-1h-indazol substituído como inibidores da cinase pdk1
CN103402519B (zh) 2011-04-18 2015-11-25 卫材R&D管理有限公司 肿瘤治疗剂
JP6038128B2 (ja) 2011-06-03 2016-12-07 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 レンバチニブ化合物に対する甲状腺癌対象及び腎臓癌対象の反応性を予測及び評価するためのバイオマーカー
HK1198443A1 (en) 2011-07-19 2015-04-24 无限药品股份有限公司 Heterocyclic compounds and uses thereof
AR088218A1 (es) 2011-07-19 2014-05-21 Infinity Pharmaceuticals Inc Compuestos heterociclicos utiles como inhibidores de pi3k
US8575336B2 (en) 2011-07-27 2013-11-05 Pfizer Limited Indazoles
MX2014002542A (es) 2011-08-29 2014-07-09 Infinity Pharmaceuticals Inc Compuestos heterociclicos y usos de los mismos.
CA2846496C (en) 2011-09-02 2020-07-14 The Regents Of The University Of California Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidines and uses thereof
CN102432595B (zh) * 2011-09-14 2013-09-25 湖南有色凯铂生物药业有限公司 N-吲哚-1-酰胺类化合物及作为抗癌药物的应用
IN2014CN02646A (cs) 2011-09-14 2015-08-07 Samumed Llc
BR112014007310A2 (pt) 2011-09-27 2017-04-04 Novartis Ag 3-pirimidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inibidores de idh mutante
US9382239B2 (en) 2011-11-17 2016-07-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of c-Jun-N-terminal kinase (JNK)
EP2788330A1 (en) 2011-12-05 2014-10-15 Novartis AG Cyclic urea derivatives as androgen receptor antagonists
FR2985257B1 (fr) * 2011-12-28 2014-02-14 Sanofi Sa Composes dimeres agonistes des recepteurs des fgfs (fgfrs), leur procede de preparation et leur application en therapeutique
EP2802658A2 (en) 2012-01-09 2014-11-19 Novartis AG Rnai agents to treat beta-catenin related diseases
UY34591A (es) 2012-01-26 2013-09-02 Novartis Ag Compuestos de imidazopirrolidinona
PH12017500997A1 (en) 2012-04-04 2018-02-19 Samumed Llc Indazole inhibitors of the wnt signal pathway and therapeutic uses thereof
US8940742B2 (en) 2012-04-10 2015-01-27 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
NZ629282A (en) 2012-05-04 2017-04-28 Samumed Llc 1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
RS58514B1 (sr) 2012-06-13 2019-04-30 Incyte Holdings Corp Supstituisana triciklična jedinjenja kao inhibitori fgfr
JP6231262B2 (ja) * 2012-06-20 2017-11-15 大日本印刷株式会社 ピタバスタチンカルシウムの前駆体の製造法
US8828998B2 (en) 2012-06-25 2014-09-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of lupus, fibrotic conditions, and inflammatory myopathies and other disorders using PI3 kinase inhibitors
US9388185B2 (en) 2012-08-10 2016-07-12 Incyte Holdings Corporation Substituted pyrrolo[2,3-b]pyrazines as FGFR inhibitors
JP2015532287A (ja) 2012-09-26 2015-11-09 ザ・リージエンツ・オブ・ザ・ユニバーシテイー・オブ・カリフオルニア Ｉｒｅ１の調節
EP2909194A1 (en) 2012-10-18 2015-08-26 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7)
USRE48175E1 (en) 2012-10-19 2020-08-25 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hydrophobically tagged small molecules as inducers of protein degradation
WO2014063054A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bone marrow on x chromosome kinase (bmx) inhibitors and uses thereof
AU2013337717B2 (en) 2012-11-01 2018-10-25 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cancers using PI3 kinase isoform modulators
CN103804349A (zh) * 2012-11-01 2014-05-21 杨子娇 一类治疗青光眼的化合物及其用途
US9266892B2 (en) 2012-12-19 2016-02-23 Incyte Holdings Corporation Fused pyrazoles as FGFR inhibitors
KR20150098605A (ko) 2012-12-21 2015-08-28 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 퀴놀린 유도체의 비정질 형태 및 그의 제조방법
EP2943198B1 (en) 2013-01-08 2019-07-17 Samumed, LLC 3-(benzoimidazol-2-yl)-indazole inhibitors of the wnt signaling pathway and therapeutic uses thereof
CN104370889A (zh) * 2013-01-24 2015-02-25 韩冰 一类降低眼压的化合物及其制备方法和用途
RU2671212C2 (ru) * 2013-02-02 2018-10-30 Чиа Тай Тяньцин Фармасьютикал Груп Ко., Лтд Замещенный 2-аминопиридин в качестве ингибитора протеинкиназы
ES2671516T3 (es) 2013-02-19 2018-06-06 Novartis Ag Derivados de benzotiofeno y composiciones de los mismos como degradantes selectivos de los receptores de estrógeno
AU2014229283B2 (en) 2013-03-14 2016-07-28 Novartis Ag 3-pyrimidin-4-yl-oxazolidin-2-ones as inhibitors of mutant IDH
JP6387360B2 (ja) 2013-03-14 2018-09-05 ノバルティス アーゲー 変異ｉｄｈの阻害薬としての３−ピリミジン−４−イル−オキサゾリジン−２−オン
US9481667B2 (en) 2013-03-15 2016-11-01 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Salts and solid forms of isoquinolinones and composition comprising and methods of using the same
WO2014147586A1 (en) 2013-03-22 2014-09-25 Novartis Ag 1-(2-(ethylamino)pyrimidin-4-yl)pyrrolidin-2-ones as inhibitors of mutant idh
PH12015502383B1 (en) 2013-04-19 2023-02-03 Incyte Holdings Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
NZ714049A (en) 2013-05-14 2020-05-29 Eisai R&D Man Co Ltd Biomarkers for predicting and assessing responsiveness of endometrial cancer subjects to lenvatinib compounds
US20150018376A1 (en) * 2013-05-17 2015-01-15 Novartis Ag Pyrimidin-4-yl)oxy)-1h-indole-1-carboxamide derivatives and use thereof
CN103387565B (zh) * 2013-07-29 2014-10-29 苏州明锐医药科技有限公司 阿西替尼的制备方法
US9751888B2 (en) 2013-10-04 2017-09-05 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
PT3052485T (pt) 2013-10-04 2021-10-22 Infinity Pharmaceuticals Inc Compostos heterocíclicos e suas utilizações
WO2015058126A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 Syros Pharmaceuticals, Inc. Heteroaromatic compounds useful for the treatment of prolferative diseases
EP3057956B1 (en) 2013-10-18 2021-05-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Polycyclic inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7)
CN103570696B (zh) * 2013-11-06 2016-02-24 湖南欧亚生物有限公司 一种阿西替尼中间体的制备方法以及在制备阿西替尼中的应用
WO2015067224A1 (en) 2013-11-08 2015-05-14 Zentiva, K.S. Salts of 6-[2-(methylcarbamoyl)phenylsulfanyl]-3-e-[2-(pyridin-2-yl)ethanyl] indazole
WO2015092634A1 (en) 2013-12-16 2015-06-25 Novartis Ag 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline compounds and compositions as selective estrogen receptor antagonists and degraders
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
ES2699351T3 (es) 2014-01-17 2019-02-08 Novartis Ag Derivados de 1-piridazin/triazin-3-il-piper(-azina)/idina/pirolidina y composiciones de las mismas para inhibir la actividad de SHP2
WO2015107494A1 (en) 2014-01-17 2015-07-23 Novartis Ag 1 -(triazin-3-yi_/pyridazin-3-yl)-piper(-azine)idine derivatives and compositions thereof for inhibiting the activity of shp2
MX382033B (es) 2014-03-19 2025-03-13 Infinity Pharmaceuticals Inc Compuestos heterocíclicos para utilizarlos en el tratamiento de trastornos mediados por pi3k-gamma.
US9617222B1 (en) 2014-03-31 2017-04-11 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Alkynyl indazole derivative and use thereof
WO2015160975A2 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
US9862688B2 (en) 2014-04-23 2018-01-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hydrophobically tagged janus kinase inhibitors and uses thereof
WO2015164614A1 (en) 2014-04-23 2015-10-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Janus kinase inhibitors and uses thereof
KR20170005492A (ko) 2014-05-28 2017-01-13 아이데닉스 파마슈티칼스 엘엘씨 암의 치료를 위한 뉴클레오시드 유도체
CN104072484B (zh) * 2014-07-07 2016-07-06 渤海大学 氮-(4-(芳巯基)-1氢-吲唑-3-基)-1-(芳杂环取代)甲基亚胺类化合物及其药学上可接受的盐及其制备方法和应用
AR101196A1 (es) 2014-07-16 2016-11-30 Gruenenthal Gmbh Compuestos de pirimidina sustituidos
AR101198A1 (es) 2014-07-16 2016-11-30 Gruenenthal Gmbh Pirimidinas 2,5-sustituidas como inhibidores de pde4b
PT3524595T (pt) 2014-08-28 2022-09-19 Eisai R&D Man Co Ltd Derivado de quinolina altamente puro e método para produção do mesmo
WO2016040182A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 2-(1h-indazol-3-yl)-1h-imidazo[4,5-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040193A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040181A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040190A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040185A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 2-(1h-indazol-3-yl)-3h-imidazo[4,5-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040188A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040180A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-benzo[d]imidazol-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040184A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
EP3194387B1 (en) 2014-09-17 2019-07-31 Celgene Quanticel Research, Inc. Histone demethylase inhibitors
WO2016054491A1 (en) 2014-10-03 2016-04-07 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
US10508108B2 (en) 2014-12-05 2019-12-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic compounds as inhibitors of mutant IDH enzymes
EP3226688B1 (en) 2014-12-05 2020-07-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic compounds as inhibitors of mutant idh enzymes
US10086000B2 (en) 2014-12-05 2018-10-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic compounds as inhibitors of mutant IDH enzymes
MA41140A (fr) 2014-12-12 2017-10-17 Cancer Research Tech Ltd Dérivés de 2,4-dioxo-quinazoline-6-sulfonamide en tant qu'inhibiteurs de la parg
MA41179A (fr) * 2014-12-19 2017-10-24 Cancer Research Tech Ltd Composés inhibiteurs de parg
JP6854762B2 (ja) 2014-12-23 2021-04-07 ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート， インコーポレイテッド サイクリン依存性キナーゼ７（ｃｄｋ７）の阻害剤
CN107530430A (zh) 2015-01-13 2018-01-02 国立大学法人京都大学 用于预防和/或治疗肌萎缩性侧索硬化症的药剂
US9580423B2 (en) 2015-02-20 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
TWI712601B (zh) 2015-02-20 2020-12-11 美商英塞特公司 作為fgfr抑制劑之雙環雜環
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
LT3263106T (lt) 2015-02-25 2024-01-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Chinolino darinių kartumo sumažinimo būdas
KR102662228B1 (ko) 2015-03-04 2024-05-02 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 암을 치료하기 위한 pd-1 길항제 및 vegfr/fgfr/ret 티로신 키나제 억제제의 조합
USRE50776E1 (en) 2015-03-27 2026-02-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinases
US9580406B2 (en) 2015-04-28 2017-02-28 Signa S.A. De C.V. Processes for the preparation of axitinib
US10815264B2 (en) 2015-05-27 2020-10-27 Southern Research Institute Nucleotides for the treatment of cancer
KR20260025887A (ko) 2015-06-06 2026-02-24 클라우드브레이크 테라퓨틱스, 엘엘씨 익상편을 치료하기 위한 조성물 및 방법
WO2016201370A1 (en) 2015-06-12 2016-12-15 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Combination therapy of transcription inhibitors and kinase inhibitors
MX373231B (es) 2015-06-16 2020-05-08 Eisai R&D Man Co Ltd Agente anticancerigeno.
US10287266B2 (en) 2015-06-19 2019-05-14 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of SHP2
WO2016203405A1 (en) 2015-06-19 2016-12-22 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
EP3310779B1 (en) 2015-06-19 2019-05-08 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
GB201511382D0 (en) 2015-06-29 2015-08-12 Imp Innovations Ltd Novel compounds and their use in therapy
GB201511790D0 (en) 2015-07-06 2015-08-19 Iomet Pharma Ltd Pharmaceutical compound
WO2017023980A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023972A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10329309B2 (en) 2015-08-03 2019-06-25 Samumed, Llc 3-(3H-imidazo[4,5-B]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023989A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-benzo[d]imidazol-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023996A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10383861B2 (en) 2015-08-03 2019-08-20 Sammumed, LLC 3-(1H-pyrrolo[2,3-C]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
US10519169B2 (en) 2015-08-03 2019-12-31 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[2,3-C]pyridin-2-yl)-1 H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
US10226453B2 (en) 2015-08-03 2019-03-12 Samumed, Llc 3-(1H-indol-2-yl)-1H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023987A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023984A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023986A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-indol-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
US10463651B2 (en) 2015-08-03 2019-11-05 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-YL)-1H-indazoles and therapeutic uses thereof
WO2017024004A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024003A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10350199B2 (en) 2015-08-03 2019-07-16 Samumed, Llc 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
WO2017023988A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(3h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10166218B2 (en) 2015-08-03 2019-01-01 Samumed, Llc 3-(1H-indol-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
KR102222186B1 (ko) 2015-08-13 2021-03-03 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Sting 효능제로서 시클릭 디-뉴클레오티드 화합물
US11453697B1 (en) 2015-08-13 2022-09-27 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
US12220398B2 (en) 2015-08-20 2025-02-11 Eisai R&D Management Co., Ltd. Tumor therapeutic agent
AU2016319125B2 (en) 2015-09-09 2021-04-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinases
WO2017048702A1 (en) 2015-09-14 2017-03-23 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Solid forms of isoquinolinone derivatives, process of making, compositions comprising, and methods of using the same
US10736885B2 (en) * 2015-10-07 2020-08-11 Aiviva Biopharma, Inc. Compositions and methods of treating dermal fibrotic disorders
WO2017068064A1 (en) * 2015-10-22 2017-04-27 Selvita S.A. Pyridone derivatives and their use as kinase inhibitors
MX380092B (es) 2015-11-06 2025-03-11 Samumed Llc Tratamiento de la osteoartritis.
WO2017106062A1 (en) 2015-12-15 2017-06-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
WO2017161116A1 (en) 2016-03-17 2017-09-21 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Isotopologues of isoquinolinone and quinazolinone compounds and uses thereof as pi3k kinase inhibitors
AR108325A1 (es) 2016-04-27 2018-08-08 Samumed Llc Isoquinolin-3-il carboxamidas y preparación y uso de las mismas
DK3452465T3 (da) 2016-05-04 2021-02-08 Genoscience Pharma Substituerede 2,4-diaminoquinolinderivater til anvendelse til behandling af proliferative sygdomme
MX390577B (es) 2016-06-01 2025-03-20 Samumed Llc Proceso de preparación de n-(5-(3-(7-(3-fluorofenil)-3h-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-1h-indazol-5-il)piridin-3-il)-3-metilbutanamida.
AU2017274195B2 (en) 2016-06-02 2022-04-07 Ads Therapeutics Llc Compositions and methods of using nintedanib for improving glaucoma surgery success
WO2017214269A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2017216706A1 (en) 2016-06-14 2017-12-21 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
SG11201811237WA (en) 2016-06-24 2019-01-30 Infinity Pharmaceuticals Inc Combination therapies
PT3523287T (pt) 2016-10-04 2021-10-06 Merck Sharp & Dohme Compostos de benzo[b]tiofeno como agonistas de sting
JP2019535672A (ja) 2016-10-21 2019-12-12 サミュメッド リミテッド ライアビリティ カンパニー インダゾール−３−カルボキサミドの使用方法およびｗｎｔ／β−カテニンシグナル伝達経路阻害剤としてのそれらの使用
MA46696A (fr) 2016-11-07 2019-09-11 Samumed Llc Formulations injectables à dose unique prêtes à l'emploi
US20190365788A1 (en) 2016-11-21 2019-12-05 Idenix Pharmaceuticals Llc Cyclic phosphate substituted nucleoside derivatives for the treatment of liver diseases
RU2765737C2 (ru) 2016-11-23 2022-02-02 Хемоцентрикс, Инк. Способ лечения фокально-сегментарного гломерулосклероза
US11021511B2 (en) 2017-01-27 2021-06-01 Janssen Biotech, Inc. Cyclic dinucleotides as sting agonists
CN110234403A (zh) 2017-01-27 2019-09-13 詹森生物科技公司 作为sting激动剂的环状二核苷酸
US12303505B2 (en) 2017-02-08 2025-05-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. Tumor-treating pharmaceutical composition
US20190388407A1 (en) 2017-02-12 2019-12-26 Aiviva Biopharma, Inc. Multikinase inhibitors of vegf and tfg beta and uses thereof
EP3584241B1 (en) 2017-02-14 2023-04-26 FUJIFILM Corporation Method for producing indazole compound, and indazole compound
US11466047B2 (en) 2017-05-12 2022-10-11 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
RU2019134940A (ru) 2017-05-16 2021-06-16 Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. Лечение гепатоцеллюлярной карциномы
CN108947961B (zh) * 2017-05-18 2021-06-04 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
JP2020530838A (ja) 2017-08-04 2020-10-29 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーションＭｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ． がん治療のためのベンゾ［ｂ］チオフェンＳＴＩＮＧアゴニスト
RU2020109328A (ru) 2017-08-04 2021-09-06 Мерк Шарп И Доум Корп. Комбинации антагонистов pd-1 и бензо[b]тиофеновых агонистов sting для лечения рака
KR102665710B1 (ko) 2017-08-24 2024-05-14 노보 노르디스크 에이/에스 Glp-1 조성물 및 그 용도
JP7447002B2 (ja) 2017-09-11 2024-03-11 クルーゾン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ＳＨＰ２のオクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロールのアロステリック阻害剤
WO2019067332A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Merck Sharp & Dohme Corp. COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING CANCER THROUGH A COMBINATION OF PROGRAMMED DEATH ANTIBODY ANTIBODIES (PD-1) AND A CXCR2 ANTAGONIST
RU2020113612A (ru) 2017-10-11 2021-11-12 Хемоцентрикс, Инк. Лечение фокально-сегментарного гломерулосклероза антагонистами ccr2
WO2019089412A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted tetrahydroquinolin compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) inhibitors
KR102718287B1 (ko) 2017-11-14 2024-10-16 머크 샤프 앤드 돔 엘엘씨 인돌아민 2,3-디옥시게나제 (ido) 억제제로서의 신규 치환된 비아릴 화합물
WO2019099294A1 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted biaryl compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) inhibitors
CN111712509A (zh) 2017-12-15 2020-09-25 詹森生物科技公司 作为sting激动剂的环状二核苷酸
EP3727401A4 (en) 2017-12-20 2022-04-06 Merck Sharp & Dohme Corp. CYCLIC DI-NUCLEOTIDE COMPOUNDS AS STING AGONISTS
EP3765006A4 (en) 2018-03-13 2022-02-23 Merck Sharp & Dohme Corp. ARGINASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
EP3774765A4 (en) 2018-04-03 2021-12-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Aza-benzothiophene compounds as sting agonists
JP7326319B2 (ja) 2018-04-03 2023-08-15 メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー Ｓｔｉｎｇアゴニストとしてのベンゾチオフェン類及び関連する化合物
EP3781687A4 (en) 2018-04-20 2022-02-09 Merck Sharp & Dohme Corp. NEW RIG-I SUBSTITUTED AGONISTS: COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF
HRP20241288T1 (hr) 2018-05-04 2024-12-06 Incyte Corporation Čvrsti oblici fgfr inhibitora i postupci za njihovu proizvodnju
AU2019262579B2 (en) 2018-05-04 2024-09-12 Incyte Corporation Salts of an FGFR inhibitor
CN110452176A (zh) * 2018-05-07 2019-11-15 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
WO2019231870A1 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted [1.1.1] bicyclo compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
WO2019245890A1 (en) 2018-06-20 2019-12-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Arginase inhibitors and methods of use
EP3810132A4 (en) 2018-06-25 2022-06-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. TAIRE FAMILY KINASE INHIBITORS AND RELATED USES
CN112839652A (zh) 2018-08-15 2021-05-25 艾葳生物科技有限公司 VEGF和TGFβ的多激酶抑制剂及其用途
CR20210175A (es) 2018-09-18 2021-06-01 Nikang Therapeutics Inc Derivados de anillo tricíclico condensado como inhibidores de la fosfatasa de homología a src 2 (shp2)
US20220041613A1 (en) 2018-09-25 2022-02-10 Black Diamond Therapeutics, Inc. Tyrosine kinase inhibitor compositions, methods of making and methods of use
JP2022502495A (ja) 2018-09-25 2022-01-11 ブラック ダイアモンド セラピューティクス，インコーポレイティド チロシンキナーゼ阻害剤としてのキナゾリン誘導体、組成物、それらの作製方法、およびそれらの使用
IL305106B2 (en) 2018-09-29 2025-08-01 Novartis Ag Process of manufacture of a compound for inhibiting the activity of shp2
EP3873464B1 (en) 2018-11-01 2025-07-30 Merck Sharp & Dohme LLC Novel substituted pyrazole compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
WO2020096871A1 (en) 2018-11-06 2020-05-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted tricyclic compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
CN111205227A (zh) * 2018-11-22 2020-05-29 四川大学 3-乙烯基吲唑类衍生物及其制备方法和用途
EP3886845B1 (en) 2018-11-28 2024-09-04 Merck Sharp & Dohme LLC Novel substituted piperazine amide compounds as indoleamine 2, 3-dioxygenase (ido) inhibitors
EP3897622B1 (en) 2018-12-18 2026-01-14 Merck Sharp & Dohme LLC Arginase inhibitors and methods of use
US12281126B2 (en) 2018-12-28 2025-04-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 and uses thereof
TWI834795B (zh) 2019-01-08 2024-03-11 日商杏林製藥股份有限公司 15-pgdh抑制劑
EP3917911A1 (en) * 2019-01-31 2021-12-08 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 15-pgdh inhibitors
US11628162B2 (en) 2019-03-08 2023-04-18 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an FGFR inhibitor
WO2020205688A1 (en) 2019-04-04 2020-10-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of histone deacetylase-3 useful for the treatment of cancer, inflammation, neurodegeneration diseases and diabetes
EP3927702A4 (en) 2019-04-11 2022-05-11 Angion Biomedica Corp. SOLID FORMS OF (E)-3-[2-(2-THIENYL)VINYL]-1H-PYRAZOLE
WO2020212253A1 (en) 2019-04-18 2020-10-22 Synthon B.V. Process for preparing axitinib, process for purifying the intermediate 2-((3-iodo-1h-indazol-6-yl)thio)-n-methylbenzamide, process for purifying axitinib via the axitinib hcl salt, solid form of the axitinib hcl salt
EA202193065A1 (ru) 2019-05-09 2022-03-02 Синтон Б.В. Фармацевтическая композиция, содержащая акситиниб
EP3990635A1 (en) 2019-06-27 2022-05-04 Rigontec GmbH Design method for optimized rig-i ligands
US11591329B2 (en) 2019-07-09 2023-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
JP7843695B2 (ja) 2019-08-02 2026-04-10 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド がんの処置用のＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子刺激因子）アゴニストとしてのビス－［Ｎ－（（５－カルバモイル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）－ピラゾール－５－カルボキサミド］誘導体および関連化合物
AU2020328598A1 (en) 2019-08-15 2022-03-03 Black Diamond Therapeutics, Inc. Alkynyl quinazoline compounds
AU2020338490B2 (en) * 2019-08-30 2025-09-18 Risen (Suzhou) Pharma Tech Co., Ltd. Prodrugs of the tyrosine kinase inhibitor for treating cancer
CN112442011B (zh) * 2019-08-30 2023-11-14 润佳（苏州）医药科技有限公司 一种前药化合物及其在治疗癌症方面的应用
CN112442010B (zh) * 2019-08-30 2023-10-03 润佳（苏州）医药科技有限公司 一类前药化合物及其在治疗癌症方面的应用
WO2021067374A1 (en) 2019-10-01 2021-04-08 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CA3157361A1 (en) 2019-10-14 2021-04-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2021076728A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CN112694474B (zh) * 2019-10-23 2022-03-18 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
EP4048664A1 (en) 2019-10-25 2022-08-31 Gilead Sciences, Inc. Glp-1r modulating compounds
JP7832891B2 (ja) 2019-12-04 2026-03-18 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤の誘導体
CA3163875A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
EP4069683A1 (en) 2019-12-06 2022-10-12 Mersana Therapeutics, Inc. Dimeric compounds as sting agonists
US20220396577A1 (en) 2019-12-17 2022-12-15 Merck Sharp & Dohme Llc Novel substituted 1,3-8-triazaspiro[4,5] decane-2,4-dione compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) and/or tryptophan 2,3-dioxygenase (tdo) inhibitors
EP4087583B1 (en) 2020-01-07 2026-04-22 Merck Sharp & Dohme LLC Arginase inhibitors and methods of use
US12012409B2 (en) 2020-01-15 2024-06-18 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
CN111829859B (zh) * 2020-01-20 2024-01-05 北京林业大学 一种高效杨树种子透明染色及其三维成像的方法
ES3016132T3 (en) 2020-01-29 2025-05-08 Gilead Sciences Inc Glp-1r modulating compounds
JP7761567B2 (ja) 2020-02-18 2025-10-28 ノヴォ ノルディスク アー／エス 医薬製剤
BR102020005423A2 (pt) * 2020-03-18 2021-09-28 Faculdades Catolicas Compostos n-acil-hidrazônicos, uso no tratamento de agregopatias degenerativas amiloides e não-amiloides, e composição farmacêutica
WO2021195206A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Black Diamond Therapeutics, Inc. Polymorphic forms and related uses
IL296901A (en) 2020-04-02 2022-12-01 Mersana Therapeutics Inc Antibody-drug conjugates comprising sting agonists
CR20220565A (es) 2020-05-06 2023-01-13 Merck Sharp & Dohme Llc Inhibidores de il4i1 y métodos de uso
WO2021232367A1 (zh) * 2020-05-21 2021-11-25 四川大学 3-乙烯基吲唑类衍生物及其制备方法和用途
CN113943271B (zh) * 2020-07-15 2023-11-14 鲁南制药集团股份有限公司 一种阿昔替尼晶型及其制备方法
CN112028831A (zh) * 2020-09-24 2020-12-04 山东大学 一种苯并吡唑类化合物、其制备方法及作为抗肿瘤药物的应用
EP4247804A1 (en) 2020-11-20 2023-09-27 Gilead Sciences, Inc. Polyheterocyclic glp-1 r modulating compounds
JP7746384B2 (ja) * 2020-12-08 2025-09-30 ディスアーム セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｓａｒｍ１のベンゾピラゾール阻害剤
WO2022140472A1 (en) 2020-12-22 2022-06-30 Nikang Therapeutics, Inc. Compounds for degrading cyclin-dependent kinase 2 via ubiquitin proteosome pathway
AU2022207648A1 (en) 2021-01-13 2023-07-27 Monte Rosa Therapeutics Ag Isoindolinone compounds
WO2022170052A1 (en) 2021-02-05 2022-08-11 Black Diamond Therapeutics, Inc. Quinazoline derivatives, pyridopyrimidine derivatives, pyrimidopyrimidine derivatives, and uses thereof
WO2022221170A1 (en) 2021-04-12 2022-10-20 Incyte Corporation Combination therapy comprising an fgfr inhibitor and a nectin-4 targeting agent
WO2022219412A1 (en) 2021-04-14 2022-10-20 Monte Rosa Therapeutics Ag Isoindolinone amide compounds useful to treat diseases associated with gspt1
EP4323350A1 (en) 2021-04-14 2024-02-21 Monte Rosa Therapeutics AG Isoindolinone compounds
IL306110A (en) 2021-04-21 2023-11-01 Gilead Sciences Inc Carboxy-benzimidazole glp-1r modulating compounds
WO2022227015A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Il4i1 inhibitors and methods of use
US11939331B2 (en) 2021-06-09 2024-03-26 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as FGFR inhibitors
CA3220155A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
TW202317589A (zh) 2021-07-14 2023-05-01 美商尼坎醫療公司 作為ｋｒａｓ抑制劑的伸烷基衍生物
CN115701423B (zh) * 2021-08-02 2025-03-25 沈阳化工大学 三氟乙基硫醚（亚砜）取代苯类化合物的制备方法及其中间体
MX2024011545A (es) 2022-03-23 2024-09-26 Ideaya Biosciences Inc Compuestos de indazol sustituidos con piperazina como inhibidores de parg.
CN119053595A (zh) 2022-03-28 2024-11-29 尼坎治疗公司 作为细胞周期蛋白依赖性激酶2抑制剂的磺酰氨基衍生物
EP4282415A1 (en) 2022-05-26 2023-11-29 Genepharm S.A. A stable tablet composition of axitinib
CN119790053A (zh) 2022-06-08 2025-04-08 霖康疗法公司 作为细胞周期蛋白依赖性激酶2抑制剂的磺酰胺衍生物
US20260049071A1 (en) * 2022-08-08 2026-02-19 Beyang Therapeutics Co., Ltd. Protein tyrosine kinase inhibitor and medical use thereof
WO2024052685A1 (en) 2022-09-09 2024-03-14 MyricX Pharma Limited Cytotoxic imidazo[1,2-a]pyridine compounds and their use in therapy
AU2023375457A1 (en) 2022-11-11 2025-05-01 Nikang Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds containing 2,5-substituted pyrimidine derivatives for degrading cyclin-dependent kinase 2 via ubiquitin proteasome pathway
AR132248A1 (es) 2023-03-29 2025-06-11 Merck Sharp & Dohme Llc Inhibidores de il4i1 y métodos para su uso
CN121443321A (zh) 2023-06-30 2026-01-30 默沙东有限责任公司 治疗组合及其用途和治疗方法
WO2025072462A1 (en) 2023-09-27 2025-04-03 Nikang Therapeutics, Inc. Sulfonamide derivatives as cyclin-dependent kinase 2 inhibitors
WO2025082316A1 (zh) * 2023-10-17 2025-04-24 苏州必扬医药科技有限公司 一种眼用制剂及其制备方法和应用
TW202527955A (zh) 2023-11-27 2025-07-16 美商尼坎醫療公司 用於經由泛素蛋白酶體途徑降解週期蛋白依賴性激酶２和週期蛋白依賴性激酶４的含有２，５－取代的嘧啶衍生物的雙功能化合物
WO2025117981A1 (en) 2023-12-02 2025-06-05 Nikang Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds containing 2,5-substituted pyrimidine derivatives for degrading cyclin-dependent kinase 2 via ubiquitin proteasome pathway
WO2025212828A1 (en) 2024-04-03 2025-10-09 Nikang Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds containing 2,5-substituted pyrimidine derivatives for degrading cyclin-dependent kinase 2 and cyclin-dependent kinase 4 via ubiquitin proteasome pathway
WO2025240536A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Nikang Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds containing 2,5-substituted pyrimidine derivatives for degrading cyclin-dependent kinase 2 and/or cyclin-dependent kinase 4 via ubiquitin proteasome pathway
WO2025253311A1 (en) 2024-06-04 2025-12-11 Hetero Labs Limited 1,2-dicarboxamide compounds as kinase inhibitors
CN118994101B (zh) * 2024-08-08 2025-10-31 安徽医科大学 一种芳基吲唑环类化合物、制备方法、药物组合物及用途
EP4707274A1 (en) * 2024-09-10 2026-03-11 Universidad Autónoma de Madrid Sp3-analogues of axitinib and medical uses thereof
WO2026074526A1 (en) 2024-10-04 2026-04-09 Hetero Labs Limited 1,2-dicarboxamide compounds as kinase inhibitors

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5625031A (en) * 1994-02-08 1997-04-29 Bristol-Myers Squibb Company Peptide inhibitors of the p33cdk2 and p34cdc2 cell cycle regulatory kinases and human papillomavirus E7 oncoprotein
US5631156A (en) * 1994-06-21 1997-05-20 The University Of Michigan DNA encoding and 18 KD CDK6 inhibiting protein
WO1996014843A2 (en) * 1994-11-10 1996-05-23 Cor Therapeutics, Inc. Pharmaceutical pyrazole compositions useful as inhibitors of protein kinases
ZA951822B (en) * 1994-12-23 1996-09-26 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
US5710173A (en) * 1995-06-07 1998-01-20 Sugen, Inc. Thienyl compounds for inhibition of cell proliferative disorders
US5733920A (en) * 1995-10-31 1998-03-31 Mitotix, Inc. Inhibitors of cyclin dependent kinases
US5760028A (en) * 1995-12-22 1998-06-02 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Integrin receptor antagonists
AU2103097A (en) * 1996-03-15 1997-10-10 Zeneca Limited Cinnoline derivatives and use as medicine
JP4373497B2 (ja) * 1996-06-19 2009-11-25 ローン−プーラン・ロレ・リミテツド 置換されたアザビシクロ化合物、ならびにｔｎｆおよびサイクリックａｍｐホスホジエステラーゼ産生の阻害剤としてのそれらの使用
EA002113B1 (ru) * 1996-09-04 2001-12-24 Пфайзер Инк. Производные индазола и их использование в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы (фдэ) типа iv и продуцирования фактора некроза опухоли (фно)
PL342447A1 (en) * 1997-10-27 2001-06-04 Agouron Pharma Substituted 4-amino thiazol-2-yl compounds as inhibitors of cyclin-dependent kinases
IL135900A0 (en) * 1997-11-04 2001-05-20 Pfizer Prod Inc Indazole bioisostere replacement of catechol in therapeuticaly active compounds
IL135714A0 (en) * 1997-11-04 2001-05-20 Pfizer Prod Inc Therapeutically active compounds based on indazole bioisostere replacement of catechol in pde4 inhibitors
PE20010306A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa

Also Published As

Publication number Publication date
HK1048813A1 (en) 2003-04-17
TNSN00146A1 (fr) 2005-11-10
EP1614683A1 (en) 2006-01-11
DZ3191A1 (fr) 2001-01-11
CY1107148T1 (el) 2012-01-25
KR20020027379A (ko) 2002-04-13
MA26803A1 (fr) 2004-12-20
EP1614683B1 (en) 2007-11-21
DK1614683T3 (da) 2008-03-25
AR065937A2 (es) 2009-07-15
PL212108B1 (pl) 2012-08-31
BRPI0012352B1 (pt) 2016-08-16
AU5785200A (en) 2001-01-22
DE60036879T2 (de) 2008-02-14
SI1218348T1 (sl) 2008-02-29
CZ301667B6 (cs) 2010-05-19
MY137622A (en) 2009-02-27
AP1486A (en) 2005-11-01
PT1218348E (pt) 2007-12-14
HU228502B1 (en) 2013-03-28
FR13C0010I1 (cs) 2013-03-22
NO20015797L (no) 2002-03-01
UA66933C2 (uk) 2004-06-15
CA2383630A1 (en) 2001-01-11
CO5190686A1 (es) 2002-08-29
IS6207A (is) 2001-12-19
EP1218348A2 (en) 2002-07-03
CY2013009I2 (el) 2016-04-13
MXPA01012795A (es) 2002-09-02
EE200100717A (et) 2003-02-17
CY1107147T1 (el) 2012-10-24
EA004460B1 (ru) 2004-04-29
JP3878849B2 (ja) 2007-02-07
CA2383630C (en) 2008-11-18
LU92154I2 (fr) 2013-04-22
DE60037211D1 (de) 2008-01-03
HRP20020109A2 (en) 2003-12-31
JP3969669B2 (ja) 2007-09-05
WO2001002369A3 (en) 2002-04-25
KR100529639B1 (ko) 2006-01-16
EP1218348B1 (en) 2007-10-24
AR035554A1 (es) 2004-06-16
SK286936B6 (sk) 2009-07-06
NO322507B1 (no) 2006-10-16
JP2006348043A (ja) 2006-12-28
CN1495171A (zh) 2004-05-12
BR0012352A (pt) 2002-05-14
CR6517A (es) 2006-09-21
SI1614683T1 (sl) 2008-02-29
EA200200120A1 (ru) 2002-08-29
CN1234693C (zh) 2006-01-04
PT1614683E (pt) 2008-01-24
DE60036879D1 (de) 2007-12-06
ES2293906T3 (es) 2008-04-01
DE60037211T2 (de) 2008-12-11
CR10194A (es) 2008-09-30
BRPI0012352B8 (pt) 2021-05-25
SK19252001A3 (sk) 2002-11-06
SV2002000121A (es) 2002-12-02
ES2296014T3 (es) 2008-04-16
WO2001002369A2 (en) 2001-01-11
JO2319B1 (en) 2005-09-12
ZA200110061B (en) 2003-02-06
CY2013009I1 (el) 2016-04-13
PL355757A1 (en) 2004-05-17
NO2013004I1 (no) 2013-03-18
BG106380A (bg) 2002-09-30
HK1085470A1 (en) 2006-08-25
BE2013C015I2 (cs) 2019-05-21
GEP20063885B (en) 2006-08-10
AP2002002392A0 (en) 2002-03-31
FR13C0010I2 (fr) 2013-08-16
BG66070B1 (bg) 2011-01-31
PA8498001A1 (es) 2002-08-26
HK1065037A1 (en) 2005-02-08
NO2013004I2 (no) 2014-06-02
HUP0202490A3 (en) 2003-01-28
IL146710A0 (en) 2002-07-25
ATE376543T1 (de) 2007-11-15
GT200000107A (es) 2001-12-21
UY26231A1 (es) 2001-01-31
NO20060596L (no) 2002-03-01
IS2791B (is) 2012-06-15
HUP0202490A2 (hu) 2002-11-28
JP2003503481A (ja) 2003-01-28
CN1137884C (zh) 2004-02-11
EE05585B1 (et) 2012-10-15
HRP20020109B1 (en) 2008-07-31
AU777701B2 (en) 2004-10-28
ME00385B (me) 2011-05-10
RS50339B (sr) 2009-11-10
PE20010306A1 (es) 2001-03-29
DK1218348T3 (da) 2008-02-25
YU92901A (sh) 2004-09-03
NO20015797D0 (no) 2001-11-28
NZ516676A (en) 2003-09-26
OA11980A (en) 2006-04-18
CN1374950A (zh) 2002-10-16
MEP45108A (en) 2011-05-10
MY139999A (en) 2009-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20014634A3 (cs) Indazolové sloučeniny a farmaceutické přípravky pro inhibici proteinkináz a způsoby jejich použití
US6531491B1 (en) Indazole compounds and pharmaceutical compositions for inhibiting protein kinases, and methods for their use
EP1585743B1 (en) 2-(1h-indazol-6-ylamino)- benzamide compounds as protein kinases inhibitors useful for the treatment of ophthalmic diseases
HK1085470B (en) Indazole compounds and pharmaceutical compositions for inhibiting protein kinases, and methods for their use

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20250630