DE2058973B2

DE2058973B2 - Method for determining the coagulation time of liquid samples

Info

Publication number: DE2058973B2
Application number: DE2058973A
Authority: DE
Inventors: Stanford L. Monsey N.Y. Adler (V.St.A.)
Original assignee: Technicon Instruments Corp
Current assignee: Bayer Corp
Priority date: 1969-12-04
Filing date: 1970-12-01
Publication date: 1974-07-11
Also published as: US3650698A; BE759811A; DE2058973C3; GB1325730A; NL7016252A; USRE27866E; DE2058973A1; FR2072819A5; GB1340829A; CH561422A5; CA959741A

Description

Die Erfindung bezieht sich :iuf ein Verfahren zum Bestimmen der Koagulationszeit von Flüssigkeitsproben, bei dem die Flüssigkeitsprobe mit einem Koagulationsmittel und einem zahlreiche fein verteilte und praktisch chemisch inerte Partikel enthaltenden Reaktionsintensivierungsmittel gemischt und der Endpunkt der Reaktiv festgestellt wird.The invention relates to a method for determining the coagulation time of liquid samples, in which the liquid sample with a coagulant and a numerous finely divided and reaction intensifying agents containing practically chemically inert particles and the end point of the reactive is determined.

Ein derartiges Verfahren ist seiner grundsätzlichen Art nach beispielsweise aus der deutschen Auslegeschrift 1 266 998 bekannt und dient im allgemeinen für diagnostische Zwecke, insbesondere zum Bestimmen der Prothrombinzeit von Blutplasmaproben. Bei dem Verfahren nach der genannten deutschen Auslegeschrift wird als Reaktionsintensivierungsmittel ein für Blutgerinnungsteste bestimmtes Blutblättchenfaktor-Reagenz in Form eines durch Wasserzjgabe wieder aufschwemmbaren lyophilisierten Präparats mit einem Blutblättchenfaktor-ErsatzstolT verwendet. Das Reagenz enthält feinverteilte, diskrete, neutrale Partikel, die als Aktivator dienen. Gleichermaßen ist es zum Feststellen der Koagulationszeit von Gesamtblutproben aus der Fachzeitschrift »Journal of the American Medical Association«, Volumn 196, Heft 5, 1966, Seite 436, bekannt, zur Kontaktaktivierung des Plasmas zahlreiche inerte Partikel zu verwenden. Die Aufgabe dieser Aktivierungs- und Intensivierungsmittel besteht darin, die Reaktionswirkung des Koaguiationsreaktionsmittels zu fördern, um eine geringere Koagulationszeit und höhere Reproduzierbarkeit zu erreichen. Trotz der Zugabe eines Intensivierungsmittels der beschriebenen Art ist es bei diesen bekannten Verfahren schwierig, den Endpunkt der Reaktion, beispielsweise beim ersten Sichtbarwerden von Fibrinfibrillen, mit dem Auge zu bestimmen.Such a method is in its fundamental nature, for example, from the German Auslegeschrift 1,266,998 and is generally used for diagnostic purposes, in particular for determination the prothrombin time of blood plasma samples. In the case of the procedure according to the aforementioned German interpretative document used as a reaction intensifier, a platelet factor reagent intended for use in blood coagulation tests in the form of a lyophilized preparation that can be re-flooded by adding water used with a platelet factor substitute. The reagent contains finely divided, discrete, neutral Particles that act as an activator. It is also used to determine the coagulation time of whole blood samples from the journal "Journal of the American Medical Association", Volume 196, Issue 5, 1966, page 436, known to use numerous inert particles for contact activation of the plasma. the The task of these activating and intensifying agents is to reduce the reaction effect of the coagulation reactant to promote a lower coagulation time and higher reproducibility to reach. Despite the addition of an intensifying agent of the type described, these are known Procedure difficult to determine the end point of the reaction, for example when it first becomes visible of fibrin fibrils, to be determined by eye.

Zu diesem Stand der Technik wird ergänzend auf ein ebenfalls mit dem Auge beobachtetes Verfahren nach Dr. A. J. Quick verwiesen, das in einer Informationsbroschüre mit dem Titel »Coagulation Procedures«, herausgegeben von Dade Reagents Inc., Miami, Florida, Januar 1966, beschrieben ist. Dieses Verfahren weist wie alle von Hand ausgeführten klassischen Prothrornbinzeitbestimmungsverfahren eine Reihe von Nachteilen auf, beispielsweise einen hohen Zeitaufwand, Ungenauigkeit durch eine ungenaue Anzeige des Koagulationsreaktionsendpunktes, Fehler und Irrtümer der Laboranten, Unaufmerksamkeit und Unachtsamkeit sowie einen hohen Verbrauch des teueren Thrornboplastinreaktionsmittels. Um einen Teil dieser Schwierigkeiten zu überwinden, sind aus der französischen Patentschrift 1 240 524 und aus der deutschen Offenlegungsschrift 1 804 292 bereits Anordnungen bekannt, die mm Bestimmen der Koagulationszeit die durch die Reaktion hervorgerufene zunehmende Viskosität des Flüssigkeitsgemischs ausnutzen. So ist es zu diesem Zweck bekannt, die Bewegung eines drehbaren magnetischen Rührstabs auf eine konstante Winkelgeschwindigkeit in der untersuchten Flüssigkeitsprobe einzustellen und danach während der Reaktion die Änderung dieser Geschwindigkeit infolge des Anstiegs der Viskosität der Flüssigkeit festzustellen Diese teilweise automatisch oder halbautomatisch aiüeicenden Vorrichtungen haben jedoch den Nachteil, daß beim Endzeitpunkt der Koagulationsreaktion keine starkeThis prior art is supplemented by a method that is also observed with the eye according to Dr. A. J. Quick, referenced in an information booklet entitled "Coagulation Procedures" edited by Dade Reagents Inc., Miami, Florida, January 1966. This Method has like all hand-performed classical prothrornbin time determination methods has a number of disadvantages, for example a high expenditure of time, inaccuracy due to an inaccurate Display of the end point of the coagulation reaction, mistakes and errors of the laboratory technicians, inattentiveness and carelessness and high consumption of the expensive thromboplastin reagent. In order to overcome some of these difficulties, French patent specification 1,240,524 and from the German Offenlegungsschrift 1 804 292 already known arrangements which determine mm the coagulation time, the increasing viscosity of the liquid mixture caused by the reaction exploit. So it is known for this purpose, the movement of a rotatable magnetic Set the stirring rod to a constant angular velocity in the examined liquid sample and thereafter, during the reaction, the change in this rate due to the increase in viscosity determine the liquid These partially automatically or semi-automatically aiüeicenden devices however, have the disadvantage that at the end of the coagulation reaction there is no strong reaction

ao und drastische Änderung in einem Kennwert oder in einer Eigenschaft des Flüssigkeitsgemischs auftritt, so daß die gemessenen Zeiten ungenau sind. Darüber hinaus benötigt man ebenfalls große Mengen des im allgemeinen kostbaren Koagulationsreaktionsmittelsao and drastic change in a characteristic value or in a property of the liquid mixture occurs so that the times measured are inaccurate. About that in addition, large amounts of the generally valuable coagulation reactant are also required

s5 ^e- "ießlich ist es noch aus Pflügers Archiv. Band i4J, 1939. Seite 54 bis 64, und aus der USA.-Patentschrift 2 878 715 bekannt, den Koagulationszeitpunkt durch optische Feststellung der Trübung des Koagulationsgemisches zu bestimmen. Dabei wird die bei der Koagulation auftretende Trübungsänderung des Gemisches durch ein zugegebenes chemisch reagierendes Mittel erreicht. Die Trübungsänderung ist jedoch in zahlreichen Fällen unzureichend und erfolgt nicht schlagartig, sondern allmählich. Dies führt zu ungenauen Meßergebnissen. In der USA.-Patentschrift 2 878 715 wird daher angeregt, die Untersuchung mindestens zweimal durchzuführen und den Mittelwert der MeiJergebnisse zu verwenden.s5 ^e - "is known there from Pflügers Archive band i4J, 1939. page 54 to 64, and from the USA. Patent 2,878,715 ießlich to determine the Koagulationszeitpunkt by optical detection of the turbidity of the Koagulationsgemisches Here, the at.. The change in turbidity of the mixture occurring during coagulation is achieved by an added chemically reacting agent. However, the change in turbidity is insufficient in many cases and does not take place suddenly, but gradually. This leads to inaccurate measurement results. US Pat. No. 2,878,715 therefore suggests that Carry out the examination at least twice and use the mean value of the measurement results.

Bei allen bekannten Verfahren zum Bestimmen der Prothrombinzeit tritt beim Endzeitpunkt der Koagulationsreaktion keine starke und drastische Änderung in einem Kennwert oder in einer Eigenschaft des Blutplasmaproben-Thromboplastinreagenz-Gcmisches auf. Diese Unzulänglichkeit ist daraui zurückzuführen, daß bis; heute keine Mittel bekannt geworden sind, die die Reaktion derart intensivieren und steigern könnten, daß eine drastische Eigenschaftsänderung auftritt, die dann vollautomatisich nachgewiesen werden könnte. Diese Unzulänglichkeil macht sich zum Bestimmen der Prothrombinzeit bei verdünnten Blutplasmaproben noch stärker bemerkbar. Verdünnte Blutpiasrnaproben können daher bei der Diagnose zum Überwachen von wesentlichen Antigerinnungsdosierungfieinstellungen bisher nicht verwendet werden.In all known methods for determining the prothrombin time, the coagulation reaction occurs at the end time no strong and drastic change in a characteristic value or in a property of the blood plasma sample-thromboplastin reagent mixture on. This inadequacy is due to the fact that up to; no funds known today which could intensify and increase the reaction to such an extent that a drastic change in properties occurs, which could then be detected fully automatically. This inadequate wedge becomes even more noticeable for determining the prothrombin time in the case of diluted blood plasma samples. Diluted blood plasma samples can therefore be used for monitoring essential in the diagnosis Anticoagulant dosage settings have not yet been used.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, unter Beachtung eines geringen Verbrauchs des Koagulationsreaktionsmittels ein Verfahren zum schnellen und äußerst genauen Bestimmen der Koagulationszeit anzugeben.The invention is based on the object, taking into account a low consumption of the coagulation reactant to specify a method for the rapid and extremely accurate determination of the coagulation time.

Zur Lösung dieser Aufgabe ist das eingangs beschriebene Verfahren nach der Erfindung dadurch gekennzeichnet, daß eine Trübung des Gemisches hervorrufende ferromagnetische Partikel verwende werden und das Gemisch mindestens bis zur Koagulation der Flüssigkeitsprobe einem sich bewegenden Magnetfeld ausgesetzt wird und daß der Endpunkt des Koagulationiivorgangs durch Nachwei:To solve this problem, that is described at the beginning Process according to the invention, characterized in that the mixture becomes cloudy causing ferromagnetic particles are used and the mixture at least until coagulation the liquid sample is exposed to a moving magnetic field and that the end point of the coagulation process through detection:

liner scharfen Änderung in der Trübung des G.'-nisches optisch festgestellt wird.liner sharp change in the opacity of the niche is determined optically.

Bei diesem Verfahren tritt somit bei Beendigung .ler Koagulationsreaktion eine drastische und leicht nachweisbare Änderung in der optischen Eigenschaft Jes Flüssigkeitsgemisches auf. Das bei dem erfin-Jungsgemäßen Verfahren verwendete Reaktionsintensivierungsmittel fördert nämlich nicht nur den Koagulationsreaktionsablauf, sondern sorgt auch am Ende des Koagulationsvorganges dafür, daß das vorher trübe und damit undurchsichtige Gemisch schlagartig hell und durchsichtig wird. Dies ist darauf zurückzuführen, daß gegen Ende der Koagulationsreaktion die sich bildenden Fibrnfasern von den /ahlreichen sich drehenden ferromagnetischen Parlikeln gesammelt und zu einem verhältnismäßig -loßen Kügelchen verflochten werden, in dem alle Partikel gefangen sind. Der damit verbundene Umv.hlag in der Lichtdurchlässigkeit des Flüssigkeits-Lii-mischcs kann sehr leicht fotoelektrseh gemessen und automatisch ausgewertet werden. Das erhndungs- ^•mäße Verfahren eignet sich auch zum Bestimmen _L';r Prothrombinzeit in verdünnten Blutplasmaproben: hierbei ist der Thromboplastinreakiionsmittel-'. .rhrauch nur gering.In this process, when the coagulation reaction ends, there is a drastic and easily detectable change in the optical property of the liquid mixture. The reaction intensifier used in the process according to the invention not only promotes the coagulation reaction process, but also ensures at the end of the coagulation process that the previously cloudy and thus opaque mixture suddenly becomes light and transparent. This is due to the fact that, towards the end of the coagulation reaction, the fibrous fibers that are formed are collected by the many rotating ferromagnetic parallels and interwoven to form a relatively loose bead in which all the particles are trapped. The associated change in the light permeability of the liquid Lii-mixer can be measured very easily photoelectrically and evaluated automatically. The erhndungs- ^ • Permitted method is also suitable for determining _L 'r prothrombin time in the diluted blood plasma samples: this is the Thromboplastinreakiionsmittel-'. . Little incense.

Als ferromagnetische Partikel werden vorzugsweise magnetisches Eisenoxid, Nickeloxid oder Kobaltoxid verwendet.Magnetic iron oxide, nickel oxide or cobalt oxide are preferably used as ferromagnetic particles used.

Die Erfindung wird im folgenden durch dL Beschreibung der Prothrombinzeit-Bestimmung von rUutplasmaproben unter Verwendung einer automa- ;ischen Vorrichtung an Hand von Zeichnungen er läutert. Es zeigtThe invention is described below by dL the prothrombin time determination of blood plasma samples using an automatic ; ical device on the basis of drawings he explains. It shows

Fig. 1 ein Flußdiagramm einer automatisch arbeitenden Vorrichtung zur Prothrombinzeit-Bestimmung. Fig. 1 is a flow chart of an automatic working device for prothrombin time determination.

F i g. 2 einen Teil eines Folienstreifentriigers der in der F i g. 1 dargestellten Vorrichtung und die Lage von Reaktionsiritensivierungsmitteiflecken auf dem Foüenstreifen,F i g. 2 part of a film strip trigger of in FIG. 1 and the location of the reactant intensification agent patches on the Foüen strips,

Fig. 3 einen Teil des Folienstreifens und die Ar! und Weise, wie das Reaktionsintensivierungsmittel die Durchmischung der Blutplasmaprobe mit dem Thromboplastinreagenz fördert, undFig. 3 part of the film strip and the Ar! and the manner in which the reaction intensifier mixes the blood plasma sample with the Thromboplastin reagent promotes, and

Fi g. 4 und 5 die starke und intensive änderung in der Trübung dtjs aus der Blutplasmaprobe dem Thromboplastinreagenz und dem Reaktionsintensivierungsmittel besiehenden Reaktionsgemisches bei Beendigung der Koagulationsreaktion.Fi g. 4 and 5 the strong and intense change in the turbidity dtjs from the blood plasma sample, the thromboplastin reagent and the reaction intensifier containing reaction mixture upon termination of the coagulation reaction.

In der F i g. 1 ist eine Probenzufuhrvorrichtung H) mit auf einem Drehtisch 12 kreisförmig angeordneten Blutplasmaprobenbehältern 14, einer Probenentnahmevorrichtung 16, enthaltend einen Probennehmer oder eine Probensonde 18 und eine P.obennehmerbetätigungseinrichtung 20, dargestellt. Neben dem Drehtisch 12 ist ein Waschflüssigkeitsbehälter 22 vorgesehen. Eine Probenzufuhrvorrichtung-Antriebsvorrichtung 24 treibt den Drehtisch 12 und die Probennehmerbetätigungsvorrichtung 20 an. Dies ist in der Figur durch gestrichelte Linien angedeutet.In FIG. 1 shows a sample feed device H) with blood plasma sample containers 14 arranged in a circle on a turntable 12, a sample removal device 16 containing a sampler or a sample probe 18 and a sample receiver actuation device 20. A washing liquid container 22 is provided next to the turntable 12. A sample feeder drive device 24 drives the turntable 12 and the sampler actuator 20. This is indicated in the figure by dashed lines.

Der Probennehmer 18 liefert eine Strömung aus aufeinanderfolgenden volumenmäßig bestimmten Blutplasmaprobe ,1, die jeweils durch einen Luftschub, einen Waschflüssigkeitsschub der im Waschflüssigkeitsbehäl'sr 22 enthaltenen Waschflüssigkeit und einen weiteren Luftschub getrennt sind.The sampler 18 delivers a flow of successive volume determined Blood plasma sample, 1, each by an air thrust, a washing liquid thrust in the washing liquid container 22 contained washing liquid and a further burst of air are separated.

Eine Quetschschlauchpurnpe 26, enthaltend mehrere elastische, zusammenquetschbare Pumpenschlä'iche 28, 30, 32 und 34, dient diem Weitertransport der Probenströmung durch den Pumpemcblauch 30 in die Blutplasma-Zufuhrleitung 38, der Zufuhr von aus der Atmosphäre angesaugter Luft über denA squeeze hose pump 26 containing several elastic, squeezable pump tubes 28, 30, 32 and 34, are used to transport the sample flow through the pump tube 30 into the blood plasma supply line 38, the supply of air drawn in from the atmosphere via the

Pumpenschlauch 28, das Dreiwegventil 40, 42, 44 und die Verbindungsleitung 36, ferner der Zufuhr eines Thromboplastinreagenz 48 aus dem Vorratsbehälter 46 über die Reagenzzufuhrleitung SO und den Pumpenschlauch 32. Die Reagenzströmung führtPump hose 28, the three-way valve 40, 42, 44 and the connecting line 36, as well as the supply a thromboplastin reagent 48 from the reservoir 46 via the reagent supply line SO and the Pump hose 32. The reagent flow leads

ίο dann wetter über eine Verbindungsleitung 52 und eine Reagenzabgabeleitung 54 zu einer in einem Temperaturregelbad 60 sich befindenden Heizschlange 58. An die Verbindungsleitung 52 ist eine Reagenzparallel- und Reagenzrückführleitung 56 undίο then weather over a connecting line 52 and a reagent delivery line 54 to a heating coil located in a temperature control bath 60 58. A reagent parallel and reagent return line 56 and is connected to the connecting line 52

is an die Reagenzabgabeleitung 54 eine über den Pumpenschlauch 34 zur Reagenzrückleitung 64 führende Saugleitung 62 angeschlossen.is to the reagent delivery line 54 via the pump hose 34 connected to the reagent return line 64 leading suction line 62.

Eir.e Vorratsrolle aus einem Folienstreifen 66 ist auf einer drehbaren Haltenr.gsvorrichtung 68 angeordnet. Bei der Folie kann es sich um irgendein geeignetes Material handeln, das die erforderliche Festigkeit und Lichtdurchlässigkeit aufweist und chemisch inert ist. Wie man am besten in der Fi g. 2 sieht, sind in etwa gleichmäßigen Abständen auf derA supply roll made of a film strip 66 is arranged on a rotatable holding device 68. The film can be any suitable material that will meet the requirements Has strength and light transmission and is chemically inert. As best shown in fig. 2 sees are roughly evenly spaced on the

as Oberfläche des Folienstreifens 66 abgemessene Mengen oder Flecken 70 einer getrockneten Suspension eines Reaktionsintensivierungsmittels aufgebracht. Bei denn vorliegenden Anwendungsbeispiel zum automatischen aufeinanderfolgenden Bestimmen der Prothrombinzeiten von zahlreichen aufeinanderfolgenden Blutplasmaproben enthält das Reaktionsintensivierungsmittel im wesentlichen undurchsichtige Teilchen aus einem ferromagnetischen Material, beispielsweise magnetische Eisenoxidteilchen von der Art, wie sie zur Herstellung von magnetischen Aufzeichnungsbändern benutzt werden. Vor dem Trocknen sind die Teilchen in einer Trägerlösung fein verteilt oder homogen suspendiert. Die Magneteisenoxidteilchen der beschriebenen Art sind im allgemeinen nadel-The surface of the film strip 66 measured amounts or patches 70 of a dried suspension of reaction intensifier applied. In the present application example for the automatic sequential determination of the prothrombin times of numerous consecutive blood plasma samples, the reaction intensifier contains substantially opaque particles of a ferromagnetic material, for example magnetic iron oxide particles of the type used in the manufacture of magnetic recording tapes to be used. Before drying, the particles are finely divided or in a carrier solution homogeneously suspended. The magnetic iron oxide particles of the type described are generally acicular

4Q förmig und haben Längsabmessunoen in der Größenordnung von 0,40 bis 0,60 Mikrometer. Bei den verwendeten Teilchen kann es sich aber auch um Kobalt- oder Nickeloxidteilchen handeln.
Zum Intensivieren oder Steigern der Blutplasma-4Q shaped and have longitudinal dimensions on the order of 0.40 to 0.60 micrometers. The particles used can, however, also be cobalt or nickel oxide particles.
To intensify or increase the blood plasma

proben-Thromboplastin-Reaktion eignen sich Reaktionsinlensivierungsmittel, bei denen es sich um eine Suspension von etwa 50 Grammprozent magnetischen Eisenoxidteilchen in einer etwa 25prozentigen PoIyvinylpyrolidonlösung handelt, die etwa 5 "Ί> Glycerinsample thromboplastin reaction are suitable reaction inlensivants, which is a suspension of about 50 gram percent magnetic iron oxide particles in about 25 percent polyvinylpyrolidone solution is about 5 "Ί> glycerin

jo enthält. Zum Herstellen der Flecken 70 kann diese Suspension in irgendeiner Weise, beispielsweise durch bekannte Siebdruck- oder Seidenrasterdruckverfahren, auf den Folienstreifen 66 aufgebracht werden. Falls notwendig wird der pH-Wert des Reaktionsintensivirrungsmittels eingestellt, um sicherzustellen, daß das Mittel beim Mischen mit dem Thromboplastinreagenz nicht reagiert.jo contains. To produce the spots 70 can this Suspension in any way, for example by known screen printing or silk screen printing processes, are applied to the film strip 66. If necessary, the pH of the reaction intensifier is adjusted adjusted to ensure that the agent is mixed with the thromboplastin reagent not reacted.

Die besonderen Polyvinylpyrolidon- und Glycerinbestandteile der Magneteisenoxidteilchensuspension und die angegebenen relativen Prozentwerte der Eiscnoxidieilchen und der Polyvinylpyrolidon- und Glyccirinbestandteile in dem Reaktionsintensivierungsmittel eignen sich besonders gut, um beim Mischen mit den Blutplasmaproben die gewünschte, nahezu momentane Wiedersuspension der Eisenoxidteilchen in einer wäßrigen Lösung sicherzustellen. Es können aber auch andere und verschiedene Suspensionen von magnetischen Eisenoxidteilcheri mit anderen undThe special polyvinylpyrolidone and glycerine components of the magnetic iron oxide particle suspension and the relative percentages given of the ice oxide particles and the polyvinylpyrolidone and Glyccirin components in the reaction intensifier are particularly suitable for getting the desired, almost to ensure instant resuspension of the iron oxide particles in an aqueous solution. It can but also other and different suspensions of magnetic iron oxide particles with others and

verschiedenen relativen Prozentwerten bezüglich der genannten Polyvinylpyrolidon- und Glycerinbestandteile und/oder mit anderen und verschiedenen Suspendiermitteln verwendet werden.different relative percentages with respect to the named polyvinylpyrolidone and glycerin components and / or used with other and various suspending agents.

Wie man der Fi g. 2 entnimmt, sind in den Folienstreifen 66 Begrenzungseinrichtungen 72 eingepreßt oder eingeprägt, die das Reaktionsintensivierungsmittel und die entsprechenden Blutplasmaproben aufnehmen und umgeben, wenn das Intensivierungsmittel in der Plasmaprobe erneut suspendiert wird. How to get the Fi g. 2 removed are in the foil strip 66 limiting devices 72 pressed in or embossed, which the reaction intensifier and receive and surround the corresponding blood plasma samples when the intensifier is resuspended in the plasma sample.

Der Folienstreifen 66 wird über eine Wärmesenke 74 mit einer etwa flachen und ebenen oberen Oberfläche geführt. Bei der unteren Oberfläche der Wärmesenke ist eine Heizspule 76 angeordnet, die die Wärmesenke auf einer vorgegebenen Temperatur hält. In der Wärmesenke 74 ist ein Spiegel 78 in der gezeigten Weise derart angeordnet, daß die obere Spiegeloberfläche mit der oberen Oberfläche der Wärmesenke bündig abschließt.The film strip 66 is over a heat sink 74 with an approximately flat and level upper surface guided. A heating coil 76 is disposed on the lower surface of the heat sink, the keeps the heat sink at a predetermined temperature. In the heat sink 74, a mirror 78 is in the arranged in such a way that the upper mirror surface with the upper surface of the Flush with the heat sink.

Eine Folienstreifenführungs- und -antriebsvorrichtung enthält eine Leerlaufrolle 80, eine Folienstreifenantriebsrolle 82 und eine Folienstreifenandruckrolle 84. Die von einem Antriebsmotor 86 im Gegenuhrzeigersinn schrittweise weitergedrehte Antriebsrolle 82 schiebt den Folienstreifen 66 schrittweise vor. Dabei wickelt sich der Folienstreifen von der Vorratsrolle ab, läuft unter der Leerlaufrolle 80 hindurch, läuft eng berührend über die obere Oberfläche der Wärmesenke 74 und läuft schließlich zwischen der Folienstreifenantriebsrolle 82 und der Folienstreifenandrucksrolle 84 hindurch.A film strip guide and drive device includes an idler roller 80, a film strip drive roller 82 and a film strip pressure roller 84. The counterclockwise one driven by a drive motor 86 Drive roller 82, which is rotated further step by step, pushes the film strip 66 step by step before. The film strip unwinds from the supply roll, runs under the idle roll 80, runs tightly over the top surface of the heat sink 74 and eventually runs between the film strip drive roller 82 and the film strip pressure roller 84 therethrough.

Eine lichtempfindliche oder fotoleitfähige Fühloder Detektoreinrichtung 88 weist ein zylindrisches undurchsichtiges Gehäuse 90 mit einer darin angeordneten Fokussierlinse 92 auf. Eine Lichtquelle 94 und ein Lichtdetektor, beispielsweise eine lichtelektrisch leitende Zelle 96, sind in der dargestellten Weise derart innerhalb des Gehäuses 90 angeordnet, daß der von der Lichtquelle 94 kommende Lichtstrahl von der Fokussierlinse 92 auf den Spiegel 78 geworfen wird und der von dem Spiegel reflektierte Strahl von der Fokussierlinse 92 auf die aktive Oberfläche der lichtelektrischen Zeile 96 fokussiert wird.A light-sensitive or photoconductive sensor or detector device 88 has a cylindrical shape opaque housing 90 with a focusing lens 92 arranged therein. A light source 94 and a light detector, such as a photo-conductive cell 96, is shown in FIG Way so arranged within the housing 90 that the light beam coming from the light source 94 is thrown from the focusing lens 92 onto the mirror 78 and that reflected from the mirror Beam from focusing lens 92 focused on the active surface of photoelectric row 96 will.

Eine Taktgeber- und Druckereinrichtung 98 arbeitet mit der lichtelektrischen Zelle 96 zusammen, um für die Reakticnstaktgabe zu sorgen und das Ausdrucken auf einem Band 99 vorzunehmen.A clock and printer device 98 cooperates with the photoelectric cell 96 to to take care of the reactivity and to print it out on a tape 99.

Ein Stabmagnet 100 geeigneter Feldstärke ist drehbar gelagen und wird von einem Antriebsmotor 102 mit einer passenden Geschwindigkeit angetrieben, so daß ein magnetisches Drehfeld erzeugt wird. Die Kraftlinien des Magnetfelds erstrecken sich durch die Wärmesenke bis über deren obere Oberfläche hinaus. Der Stabmagnet 100 ist bezüglich des Spiegels 78 vorzugsweise in einer solchen Weise angeordnet, daß die Mittelpunkte dieser Bauteile etwa auf einer vertikalen Linie liegen, wie es aus der F i g. 1 hervorgeht. Dadurch fällt die Mitte oder das Zentrum des durch Drehbewegung des Stabmagneten 100 erzeugten magnetischen Drehfelds mit der Mitte oder dem Zentrum des Spiegels 78 zusammen.A bar magnet 100 of suitable field strength is rotatably positioned and is driven by a drive motor 102 driven at a suitable speed so that a rotating magnetic field is generated. the Lines of force of the magnetic field extend through the heat sink to above its upper surface. The bar magnet 100 is preferably arranged with respect to the mirror 78 in such a manner that the centers of these components lie approximately on a vertical line, as shown in FIG. 1 shows. As a result, the center or the center of the magnetic generated by the rotating movement of the bar magnet 100 falls Rotating field with the center or the center of the mirror 78 together.

Ein Mehrelement-Kippsperrorgan 104 mit Schläuchen 106, 18, 110, einem Betätigungsglied 111 und stabfönnigen Körpern ¹12, 114, 116 ist zum Steuern der Mediumströmung in der Reagenzparallel- und -rückführleitung 56, der Reagenzabgabeleitung 54 und der Reagenzsaugleitung 62 vorgesehen.A multi-element tilting valve 104 with hoses 106, 18, 110, an actuating member 111 and rod-shaped bodies ¹ 12, 114, 116 is provided for controlling the medium flow in the reagent parallel and return line 56, the reagent delivery line 54 and the reagent suction line 62.

Ein Blutplasmaprobenabgeber 120 ist mit seinem Einlaßende an das Auslaßende der Blutplasmaprobenzufuhrleitung 38 angeschlossen. Der Probenabgeber 120 wird nahe bei seinem Auslaßende von einem Arm 122 einer Blutplasmaprobenabgebur-Antriebsvorrichtung 124 gehaltert. Die Blutplasmaprobenabgeber-Antriebsvorrichtiing 124 wird von einem Antriebsmotor 126 derart angetrieben, daß der Probenabgeber 120 auf einem Bogen zwischen zweiA blood plasma sample dispenser 120 has its inlet end attached to the outlet end of the blood plasma sample supply line 38 connected. The sampler 120 is supported near its outlet end by an arm 122 of a blood plasma specimen abortion drive device 124 held. The blood plasma sampler drive device 124 is driven by a drive motor 126 such that the Sampler 120 on a sheet between two

ίο Stellungen hin- und hergeschwenkt wird, die in der F i g. 1 durch ausgezogene Linien und gestrichelte Linien eingezeichnet sind. In der ersten Stellung ist das Auslaßende des Abgaberohres 120 etwa senkrecht mit einer abgemessenen Länge oder einem vorgegebenen Fleck 70 des Reaktionsintensivierungsmittels auf der oberen Oberfläche des Folienstreifens 66 ausgerichtet. Dabei befindet sich der Folienstreifen ebenfalls in einer besonderen Stellung. In der zweiten Stellung ist das Auslaßende des Probenabgebers 120ίο positions are swung back and forth that are in the F i g. 1 are shown by solid lines and dashed lines. Is in the first position the outlet end of the dispensing tube 120 is approximately perpendicular with a measured length or a predetermined one Reaction intensifier spot 70 on the top surface of the film strip 66 aligned. The film strip is also in a special position. In the second Position is the outlet end of the sampler 120

ao mit einem Blutplasmaproben- und Waschflüssigkeitssammelbehälter 126 ausgerichtet, der zum Abfluß führt.ao with a blood plasma sample and wash liquid collection container 126 aligned, which leads to the drain.

Eine Programm- oder Steuereinrichtung 128, bei der es sich beispielsweise um eine nockengesteuerteA program or control device 128, which is, for example, a cam-controlled

»5 oder kurvenscheibegesteuerte elektrische Programmeinrichtung handeln kann, ist arbeitsmäßig mit dem Probenzufuhrvorrichtungs-Antriebsmotor 24, dem Dreiwegsperrorgan 40, dem Kippsperrorgan 104, dem Antriebsmotor 126 des Blutplasmaprobenabgebers, dem Antriebsmotor 86 der Folienstreifenantriebsrolle, der lichtelektrischen Zelle 96 und derTaktgabe- und Druckervorrichtung 98 verbunden, wie es in der Figur durch die gestrichelten Linien angedeutet ist.
Zur automatischen aufeinanderfolgenden Bestimmung der Prothrombinzeit von mehreren Blutplasmaproben unter Verwendung der in der F i g. 1 dargestellten Vorrichtung wird Wie folgt verfahren.»5 or cam-controlled electrical program device is operationally connected to the sample feeder drive motor 24, the three-way locking element 40, the tilting locking element 104, the drive motor 126 of the blood plasma sample dispenser, the drive motor 86 of the film strip drive roller, the photoelectric cell 96 and the clocking and printing device 98, as indicated in the figure by the dashed lines.
For the automatic sequential determination of the prothrombin time of several blood plasma samples using the in FIG. The device shown in FIG. 1 is proceeded as follows.

Jeder der Blutplasmaprobenbehälter 14 enthält eine unverdünnte Blutplasmaprobe von jeweils einem anderen Patienten. Unmittelbar nach der Entnahme vom Patienten sind die Proben in herkömmlichei Weise mit einem Fixiermittel behandelt worden, bei dem es sich beispielsweise um oxalsaures odei zitronensaures Natrium handeln kann. In den Blutplasmaprobenbehältern 14 werden die Proben vorzugsweise bei einer Temperatur von 4 bis 5° C gehalten, um eine Verschlechterung des Gerinnungsfaktors zu verhindern. Dazu wird eine nichtgezeigtc Kühlvorrichtung benutzt, die betriebsmäßig dei Probenzufuhrvorrichtung 10 zugeordnet ist.Each of the blood plasma sample containers 14 contains an undiluted blood plasma sample of one at a time other patients. Immediately after collection from the patient, the samples are in conventional egg Way has been treated with a fixative, which is for example oxalic acid or Sodium Lemonate can act. In the blood plasma sample container 14 the samples are preferably kept at a temperature of 4 to 5 ° C in order to avoid a deterioration in the coagulation factor to prevent. For this purpose, a cooling device, not shown, is used, which is operationally the Sample feed device 10 is assigned.

Das Dreiwegsperrorgan 40 wird unter der Steuerung der Programmeinrichtung 128 derart betrieben daß es sich in seiner zweiten Stellung nur dann befindet und der durch die Verbindungsleitung 36 strö· menden Blutplasmaproben-Waschflüssigkeits-Luft Strömung nur dann Luft zuführt, wenn die Wasch flüssigkeitsschübe durch die Verbindungsleitunj strömen, so daß jeder Waschflüssigkeitsschub durcf weitere Luftschübe unterteilt wird, um die Reini· gungswirkung des Waschflüssigkeitsschubs zu er höhen. Den angesaugten Blutplasmaproben werder keine Luftschübe zugeführt, so daß die Proben al: kontinuierliche Blutplasmaprobenschübe zu den Probenabgeber 120 gelangen. Der Reagenzvorrats behälter 46 enthält einen Thromboplastinreagenzvor rat 48, der zur Bestimmung der Prothrombinzeit voi allen Blutplasmaproben ausreicht, die von de Probenzufuhrvorrichtung 10 zugeführt werden.The three-way blocking element 40 is operated under the control of the program device 128 in this way that it is only then in its second position and that it flows through the connecting line 36 supplying blood plasma sample washing liquid air Flow only supplies air when the washing liquid thrusts through the connecting lines so that each washing liquid thrust is subdivided by further air thrusts in order to effect of the washing liquid thrust to heighten. The aspirated blood plasma samples no air bursts supplied, so that the samples al: continuous blood plasma sample bursts to the Sampler 120 arrive. The reagent reservoir 46 contains a thromboplastin reagent rat 48, which is sufficient to determine the prothrombin time of all blood plasma samples used by de Sample supply device 10 are supplied.

Der Folienstrcifenantiiebsmotor 86 treibt die Folienstreifenantriebsrolle 82 unter der Steuerung der Programmeinrichtung 128 derart an, daß der Folienstreifen 66 bezüglich des Brennpunkts der Linse 92, des Auslaßendes der Reagenzabgabeleitung und i;s Auslaßendes des Blutplasmaprobenabgcbers 120 abwechselnd und schrittweise in zwei Stellungen gebracht wird. Dadurch ist es möglich, daß der Folienstreifen für unterschiedliche vorbestimmte Zeitperioden in jeder der Stellungen gehalten wird, ic Es wird unterstellt, daß der Folienstreif en zunächst von der Antriebsrolle in die in der F i g. 1 gezeigte " --'-·■ -■'—^A '" riip«p.r Stellune befindet daß das Blutplasmaproben-Abgaberohr 120 nur wähda» y ^ ^ ^ ^ ^ ^. The film strip anti-drive motor 86 drives the film strip drive roller 82 under the control of the program device 128 such that the film strip 66 is alternately and incrementally placed in two positions with respect to the focus of the lens 92, the outlet end of the reagent dispensing line, and the outlet end of the blood plasma sample dispenser 120. This makes it possible for the film strip to be held in each of the positions for different predetermined periods of time. It is assumed that the film strip is first moved from the drive roller into the position shown in FIG. 1 shown "--'- · ■ - ■ '- ^A '" riip "pr Stellune is that the blood plasma sample delivery tube 120 only while there" y ^ ^ ^ ^ ^ ^.

rena ^^ ^ ^ ^ _Fo, _{t en} rena ^^ ^^^ _Fo , _{t en}

«ei u £g ^ ^^ _{wobei h} «Ei u £ g ^ ^^ _{where h}

Sgmessene Menge oder ein Fleck 70 des Reaktionsfjgem B^ ^ ^ _StMmgA _{b findet}. ZuA measured amount or a spot 70 of the reaction area B ^ ^ ^ _StMmgA _{b is found} . to

_allen anderen Zeiten befindet sich das Blutplasmaj£_ben__Abgaberohr 120 in der in der F ig. !gepm _icnneten Stellung, in der der Rest jeder Blutpilsmaprobe, der nicht für den Test bejea μ H _zugeordneten Zwischenproben_{kdtsschübe dem} Abflußbehälter 126 zu- _a cases other times there is the Blutplasmaj £ _ _ben _Abgaber ear 120 in the strength in the F. gepm _icnne th position in which the remainder of each Blutpilsmaprobe who does not _{Settings Associated} for the test bejea μ H eten between samples _{kdtsschübe the} drain tank 126! to-

durchmischt und erneut suspendiert sowie mitmixed and resuspended as well as with

genau vorgegebenen Menge ^des Thrombop^asjn reagen/ durchsetzt. Die nächste .^ode' ™^°^ abgemessene Menge 70 des Reaktion, ntens.v erung^ miltels befindet sich an der Stelle A direkl unte ^em Auslaßende des sich in der Abgabesteüung befinden den Blutplasmaprobenabgebers 120. Der_ß Abstand^ (F i g. 2) zwischen den gemessenen Mengen ode Flcckcn70 des Reaktionsintensiyierungsmittels aut der oberen Oberfläche des Fotenstreifens 66 cn spricht daher einer vorgegebenen Strecke ακ: dem Abstand zwischen dem Brennpunkt der Fokus sicrlinse auf dem Spiegel 78 und demjenigen Punk auf der Wärmesenke 74 übereinst.mmt, dei^nkreem unter dem AuslaBende des Biutplasmaprobenabgebersprecisely predetermined amount it Thrombop ^d ^ asjn reagen / interspersed. The next . ^ode '™ ^ ° ^ metered amount 70 of the reaction ntens.v augmentation ^ miltels is located at the point A direkl unte ^ em outlet end of the in the Abgabesteüung are the Blutplasmaprobenabgebers 120. (F i g. 2) The distance _ß ^ between the measured quantities or spots 70 of the reaction intensifier on the upper surface of the photographic strip 66 cn therefore speaks a predetermined distance ακ: the distance between the focal point of the focus lens on the mirror 78 and that point on the heat sink 74 corresponds, which is less than that the outlet of the blood plasma sample dispenser

120 liegt. Bei der zweiten Stellung in du: der Fo en st,eifen66 durch Betätigung der ^«^ns^«ⁿ _ct antriebsrolle 82 schrittweise geschalte wird befind* sich die gemessene Menge oder-der^ Fleck 70 des Reaktionsintensivierungsmittels, der vornei Steile /i war, senkrecht unter dem Auslaßende^ ^ R-.-agcnzabgabeleitung 54 an der in der F ig. IJ bezeichneten Stelle. In dieser Stellung des FoUen sireifens ist keine der abgemessenen Mengen 70 des I·. aktionsintensivierungsmittels an der ateiie120 is located. In the second position to you: the Fo en st, eifen66 stepwise by pressing the ^ ^"ns ^" ⁿ _ct drive roller 82 peeled is befind *, the measured amount or-the ^ spot 70 of reaction intensifying agent, which vornei Steep / was i, vertically below the outlet end ^ ^ R -.- agcnzabgabeleitung 54 at the in the F ig. IJ designated point. In this position of the foaming, none of the measured amounts 70 of the I · is. action intensifier at the file

oder C. _{104 wird U}nteror C. _{104 becomes U} nter

Das Mehrelement-KippspcrrorganlM w^ unterThe multi-element KippspcrrorganlM w ^ under

der Steuerung der Programmemnchu |1Z8 ^r angetrieben, daß es sich in seiner^zweiten^SteHujg, um eine Reagenzströmung von der ^^ε"^ΖΖ"^2 32 über den zusammenquetschbaren ScWauchar» schnitt 108 zu der Reagenzabgabeleitung 54^ zu^e möglichen, nur während einer vorgegebener Z«rt Periode befindet, die etwa mit^derjen gen Zeitperu^a zusammenfällt, während der der ™™*™™™2 seiner zweiten Stellung e^J^^^Sk ein Fleck 70 des Reaktionsinte"sm« B senkrecht unter dem Auslaßende der Reagenzabgabe leitung 54 befindet. Zu allen anderen Ze ten ,st aa Mehrelement-Kippsperrorgan 104 in seiner ersten Stellung, in der ein Medium ledigli ch dwchd ie zu sammenquetschbaren Schlauchabschn.tte 106 und 110 strömen kann. Das in der Reage^abgabelertung 54 angeordnete Temperaturregelbad 60 halt d^e 1 ern peratur der Temperaturregelschlange 58 etwa a 37^CC, so daß das Thromboplast.nreagenz etwa dieser Temperatur abgegeben wird Die Blutplasmaprotenabgeb^-Antnebsvorn«the control of the programmemnchu | 1Z8 ^ r that it is possible in its ^ second ^ SteHujg, a reagent flow from the ^ ^ε " ^ΖΖ " ^ 2 32 over the squeezable ScWauchar »cut 108 to the reagent delivery line 54 ^ to ^ e possible, only during a predetermined Z "rt period is that approximately coincides with derjen ^ gen time Peru ^ a, during which the ™™ * 2 ™™™ its second position e ^ J ^^^ Sk, a spot 70 of the Reaktionsinte" sm "B is located vertically below the outlet end of the reagent dispensing line 54. At all other times, the multi-element tilting valve 104 is in its first position, in which a medium can only flow through the squeezable hose sections 106 and 110 ^ Ababerung 54 arranged temperature control bath 60 holds the temperature of the temperature control coil 58 about 37 ^C C, so that the thromboplast reagent is released about this temperature.

124 wird unter der Steuerung der ^J^J™«™* tung 128 von dem Antriebsmotor 126 derart betaig , _{ha b£}. _{der sjch abgemessene} Meng ^^ _{?() des R€aktio}„_si„_te„_slv,erungsmittels an den Stellen A und C befinden Das Blut_aproben-Abgaberohr 120 ha,: gerade die in aus-124 is under the control of ^ J ^ J ™ "™ * tung 128 from the drive motor 126 such betaig, _{ha b £.} _{The measured amount of} _{the R € aktio} " _si " _t e " _sl v, is located at the points A and C The blood _sample n-delivery tube 120 ha,: just the

PJ _{Unien eingezeich}nete Stellung erreicht, g g ^ _{beginn( d} , _kontl.PJ _{Unien marked} position reached, gg ^ _{beginning (d} , _cont .

Strömung aus dem Abgaberohr 120 au_{ömen und auf einem der} abgemessenen Reakerungsmittelflecken 7(9 an der Stelle/1 _aufzufa„_{en Dic Buffa},_le„de Probe mischt sich mit Reaktionsintensivierungsmittel, wöbe, eine _momentane erneute Suspension der ferro_{ischen Eis}enoxidteiichen in der Probe statts ^ ^^^ _{momentan auftre}tende Wiede _{n und der gleichzeitige} Beginn der vol- ^g_6n Mischung der Eisente.lchen m der Blut_plasmlprobe werden durch die Wirkung des durch P _Dr^_{hbewegung des} Stabmagneten 100 erzeugten ^^.^ _Drehfei_des auf die EisenoxidteiichenFlow from the delivery tube 120 au _{ömen and} _aufzufa _{on one of the} metered Reakerungsmittelflecken 7 (9 at the location / 1 _{"s Dic Buffa,} _le" de sample mixes with reaction intensifying agent, wöbe, a _momentary re-suspension of the ferro _{regard ice} enoxidteiichen in the sample the Movement ^ ^^^ _{currently occurring defects} tend re _{n, and the simultaneous} start of the mixture by volume ^ _6n g of m Eisente.lchen blood _plas mlprobe by the action of the by _Dr P ^ _{of the} bar magnet generated _hbewegung 100 ^^. ^ i _Drehfe _des on the iron oxide particles

beachtlichem Maße gesteigert.increased considerably.

_{Nach Abjauf dner vorgegeb}enen Zeitspanne die _{After the specified} period of time, the

beispielsweise eine Dauer von etwa 15 bis 2 Sekun- ^_{n kann>
wahren}d der eine gewünschte ^ _{Blutplasmaprobe} abgegeben wird wird ^ s BIutplasmaprobenabgeber-Antnebseinnchtungfor example, a period _may ^ _n from about 15 to 2 _{seconds' true} d is given a desired _{blood plasma sample} is ^ ^ s BIutplasmaprobenabgeber-Antnebseinnchtung

betätigt, um das Proben-Abgaberohr in seine zweite J _{u brf nd zwar direkt u}ber den Wasch-is actuated to bring the sample delivery tube into its second _{junction directly} via the washing

fl_üssigkeitssammelbehälter 126, so daß der Rest der B_asmaprobe in diesen Behalter strömt Der nachfolgende Luftschub, der Iu »unterteiltei Wasch_k^_itsschub und der sich daran anschließende _Lufts ^B _{chub stellen eine} vollkommene und vollständige _Reinigung der Blutplasmaproben-Abgabevomchtung _sicher ⁶ _{und verhind}ern auf diese Weise, daß die nachfolgende Blutplasmaprobe von den Ruckstanden der gerade abgegebenen Blutplasmaprobe verschmutztfl _uous keitssammelbehälter 126 so that the rest of the B _asmaprobe in these container flows The following air thrust Iu "unterteiltei washing _k ^ _itsschub and the adjoining _Lufts ^B _{chub provide a} perfect and complete _cleaning of the blood plasma sample Abgabevomchtung _sure ⁶ _{and verhind} ern in this way that the subsequent blood plasma sample is contaminated by the residues of the blood plasma sample just released

oder verunreinigt wird. , _J. _c .. -_f or becomes contaminated. , _J. _c .. - _f

^ ^^ _{Betriebszustand} wird dieFol.enstreifen- ^ ^^ The _{operating condition} is the

_{Antriebsrolle 82} vorzugsweise fur 55 Sekunden n-.cht ^ ^ ^.^ _{m e} _{Drive roller 82} preferably n-.cht ^ ^ ^. ^ _{Me for 55 seconds}

B _w„_{hrend dner Zeitpeno}de zu halten, die g ^ _{die abgegebene} Blutplasmaprobe und _{ab messene} Reaktionsintens.vierungsm.ttelmenge ^^ _{bevQrzugte Testter}nperatur von etwa 37° C _und ^ _{der notwendlgen} i_nkubat.on derTo keep B _w _{"while dner Zeitpeno} de, g ^ which _{the discharged} blood plasma sample and _{from metered} Reaktionsintens.vierungsm.ttelmenge ^^ _{bevQrzugte Testter} nperatur of about 37 ° C _and _{the notwendlgen} ^ i _nkuba the t.on

_Blutp_lar_maprobe zu beginnen. _Blood p _la r _m aprobe to begin.

_{Nach dieser Anha}lteperiode wird die Folien_{dfenantnebsroUe 82} betätigt, um den Foliens «i- _{After this} pause period, the foil _{dfenantnebsroUe 82 is} actuated in order to

_{fen 66 in seine} zweite Stellung vorzurücken. Die jetzt _{fen 66 to} advance to its second position. The now

vollkommen durchmischte Blutplasmaprobe und der genau an der Stelle C zum Stillstand kommt, kann abgemessene Reaktionsintcnsivicrungsmittelflcck 70 man zusätzlich ein weiteres von der lichtelektrischen befinden sich jetzt in der Stellung B direkt unter dem Zelle 96 zu der Programmeinrichtung 128 übertrage-Auslaßende der Reagenzabgabeleitung 54. Gleich- nes Eingangssignal benutzen, urn zu gewährleisten, zeitig wird das Mehrelcmenle-Kippsperr'Mg₁Hi 104 5 daß dies geschieht. Da die zur Stelle C kommende äußerst schnell in seine zweite Stellung gekippt, um Reaktions-Mischung noch weitgehend undurchsichüber die Reagcnzabgaoeleitung 54 bei 37" C mit der tig oder trübe ist, und zwar infolge der weiten VerAbgabe einer genau vorgegebenen Reagenzmengc zu teilung der undurchsichtigen Eisenoxidteilchen, beginnen. Wenn das auf diese Weise abgegebene unterbricht die Bewegung der Mischung in die Stel-Rcagenz auf der Blutplasmaprobe und den wieder io lung C die Bahn des von der Lichtquelle 34 kommensuspendierten Eisenoxidteilchen auftrifft, beginnt die den und zu der fotoelektrischen Zelle reflektierten gewünschte Reaktion zwischen der Blutplasmaprobe Lichtstrahls, so daß man unter Ausnutzung dieser und dem Thromboplastinreagenz. Dabei wird die Tatsache ein Steuersignal erzeugen kann, das der gute Durchmischung durch die von dem magneti- Programmeinrichtung 128 zugeführt wird, um den sehen Drehfcld auf die Eisenoxidteilchen ausgeübte 15 die Folienstreifenantriebsrolle antreibenden Antriebs-Wirkung gesteigert. Bei einer Anhaltezeit des Folien- motor 86 sofort abzuschalten.completely mixed blood plasma sample and which comes to a standstill exactly at point C, measured reaction intensifier flask 70 and another from the photoelectric are now in position B directly under the cell 96 to the program device 128 transfer-outlet end of the reagent delivery line 54. Use an input signal to ensure that the Mehrelcmenle-Kippsperr'Mg ₁ Hi 104 5 is timely that this happens. Since the one coming to point C is tilted extremely quickly into its second position, the reaction mixture is still largely opaque via the reagent discharge line 54 at 37 ° C with the opaque iron oxide particles as a result of the wide distribution of a precisely predetermined amount of reagent When the released in this way interrupts the movement of the mixture into the Stel-Rcagenz on the blood plasma sample and again hits the path of the iron oxide particle suspended from the light source 34, the desired reaction begins and is reflected to the photoelectric cell light beam between the blood plasma sample, so that one can utilize this and the thromboplastin reagent. In doing so, a control signal can be generated which is fed to thorough mixing by the film strip drive roller exerted by the magnetic program device 128 to see the rotation on the iron oxide particles driving effect increased. If the film motor 86 pauses, switch it off immediately.

Streifens 66 in der zweiten Stellung von etwa 2 Se- In der Stellung C wird die vollkommene Durchkunden, kann man eine Rcagenzabgabezeit von 1,5 mischung der Reaktions-Mischung durch die unter bis 2 Sekunden nutzen. Zum Bestimmen der Pro- dem Einfluß des durch den sich drehenden Stabthrombinzeit der in Frage stehenden Blutplasmaprobe 20 magneten 100 erzeugten magnetischen Drehfelds kann man den Umschalt- oder Kippzeitpunkt des hervorgerufene Bewegung der Eisenoxidteilchen be-Mehrelement-Kippsperrorgans 104 in seine zweite achtlich gesteigert. Zur besseren Erläuterung der Stellung als den Zeitpunkt 0 annehmen und ihn über Durchmischung sind in der Fig. 3 einige der nadeldie Programmeinrichtung 128 zu der Zeitgeber- oder förmigen Magnetteilchen dargestellt. Das Magnet-Taktgeber- und Druckvorrichtung 98 übermitteln. 35 feld hat die Wirkung, daß sich die magnetischen Teil-Dieser Zeitpunkt 0 fällt nämlich mit demjenigen Zeit- chen zum einen um ihr« eigene Achse und zum punkt zusammen, bei dem das Thromboplastin- anderen um den Mittelpunkt oder das Zentrum reagenz zum erstenmal die Blutplasmaprobc berührt der Mischung drehen, wie es in der F i g. 3 durch die und die Koagulationsreaktion beginnt. eingezeichneten Drehpfeile dargestellt ist. DadurchStripe 66 in the second position of about 2 Se- In position C the perfect through-customer, one can achieve a Rcagenzabgabezeit of 1.5 mixing the reaction mixture through the under use up to 2 seconds. To determine the pro- the influence of the rotating rod thrombin time the blood plasma sample in question 20 magnets 100 generated magnetic rotating field one can be the changeover or tilting time of the movement of the iron oxide particles caused by the multi-element tilting barrier 104 increased eighth in his second. For a better explanation of the position than assume the time 0 and mix it through, some of the needles are shown in FIG Program device 128 to the timer or shaped magnetic particles shown. The magnetic clock generator and print device 98 transmit. 35 field has the effect that the magnetic part of this Time 0 coincides with that little time on the one hand around its own axis and on the one hand point together at which the thromboplastin- another around the midpoint or center Reagent for the first time the blood plasma probe touches the mixture rotate as shown in the fig. 3 through the and the coagulation reaction begins. indicated rotating arrows is shown. Through this

Nach Ablauf einer vorgegebenen Zeitperiode, die 30 wird die Reaktion zwischen der Blutplasmaprobe zur Abgabe der gewünschten Thromboplastinreagenz- und dem Thromboplastin gefördert.
menge über die Reagenzabgabe leitung 54 ausreicht, Bei fortschreitender Koagullationsreaktion findet wird das Mehrelement-Kippsperrorgan 104 schlag- die Polymerisation des in der Blutplasmaprobe vorartig in seine erste Stellung geschaltet, in der eine handenen Fibrinogen in Fibrinfasern statt, und die weitere Reagenzströmung von der Reagenzabgabe- 35 Fibrinfasern werden von den zahlreichen sich fortleitung 32 durch das abrupte Verschließen des zu- während drehenden Eisenoxidteilchen gesammelt, sammenquetschbaren Schlauchstücks 108 unter- > Beim weiteren Sammeln verflechten sich die Fibrinbrochen wird, so daß die über den Pumpenschlauch fasern und es entstehen ein oder mehrere verhältnis-32 weiterhin gepumpte Reagenzströmung über die mäßig große Kügelchen oder Agglomerate von jetzt offene Reagenzparallel- und Reagenzrückführ- 40 Fibrinfasern. Diese Agglomeratbildung deutet an, leitung 56 zu dem Reagenzvorratsbehälter 46 zurück- daß das Ende der Reaktionszeilt oder der Blutplasmakehrt. Weiterhin wird beim Umkippen des Mehr- probengerinnung erreicht worden ist.
element-Kippsperrorgans in seine zweite Stellung der Im folgenden wird insbesondere auf die Fig. 4 zusammenquetschbare Schlauchabschnitt 110 geöff- und 5 Bezug genommen. Die F i g. 4 zeigt eine gerade net, so daß jetzt infolge der Pumpwirkung am 45 in die Stellung C gebrachte Reaktions-Mischung. Wie Schlauchabschnitt 34 die Saugleitung 62 eine beacht- man deutlich sieht, ist zu diesem Zeitpunkt die Miliche Saugleistung aufweist, um sicherzustellen, daß schung trübe oder undurchsichtig. Dies ist auf die nach Beendigung der Reagenzabgabe im Auslaßende zahlreichen gleichmäßig verteilten Eisenoxidteilchen der Reagenzabgabeleitung 54 möglicherweise ver- zurückzuführen. Wenn jedoch mit fortschreitender bliebene Thromboplastinreagenzreste über die Saug- so Koagulationsreaktion das Ende der Reaktionszeit leitung 62 abgesaugt und über die Reagenzrücklei- oder der Gerinnungszeit erreicht wird, geschieht intung 64 dem Reagenzvorratsbehälter 46 zugeführt folge des Zusammenwirkens der Fibrinfasern mit den werden. magnetischen Eisenoxidteilchen und infolge des da-After a predetermined period of time has elapsed, the reaction between the blood plasma sample for the delivery of the desired thromboplastin reagent and the thromboplastin is promoted.
The amount via the reagent delivery line 54 is sufficient. As the coagulation reaction progresses, the multi-element tilting device 104 is suddenly switched to its first position, in which the fibrinogen in the fibrin fibers is present in the blood plasma sample, and the further flow of reagent from the reagent delivery- 35 Fibrin fibers are collected by the numerous conveying lines 32 by the abrupt closure of the iron oxide particles, which can be squeezed together while the iron oxide particles are being closed-> As the collection continues, the fibrin is interlaced, so that the fibers over the pump hose result in one or more ratios -32 continued pumped reagent flow over the moderately large spheres or agglomerates of now open reagent parallel and reagent return 40 fibrin fibers. This agglomerate formation indicates, line 56 back to the reagent reservoir 46, that the end of the reaction line or the blood plasma is reversing. Furthermore, when the multiple sample is tipped over, coagulation has been achieved.
element tilting lock member in its second position. In the following, reference is made in particular to FIG. The F i g. 4 shows a straight line, so that the reaction mixture is now brought into position C as a result of the pumping action on 45. As the hose section 34 clearly shows the suction line 62, at this point in time the milk has suction power in order to ensure that the schung is cloudy or opaque. This is possibly due to the numerous evenly distributed iron oxide particles of the reagent delivery line 54 in the outlet end after the reagent delivery has ended. However, if, as the thromboplastin reagent residue progresses, the end of the reaction time line 62 is sucked off via the suction so coagulation reaction and is reached via the reagent return or the coagulation time, intung 64 happens to the reagent storage container 46 as a result of the interaction of the fibrin fibers with the. magnetic iron oxide particles and as a result

Nach Ablauf der Anhalteperiode von etwa 2 Se- mit verbundenen Sammelvorgangs der Fasern und künden wird die Folienstreifenantriebsrolle 82 be- 55 Teilchen in einem einzigen oder mehreren verhältnistätigt, um den Folienstreifen 66 wiederum in eine mäßig großen Kügelchen, wie es an der Stelle 73 in erste Stellung zu bringen, bei der sich dann die in der Fig. 5 gezeigt ist, eine äußerst schnelle und Frage stehende Mischung aus Blutplasmaprobe, drastische Änderung der optischen Eigenschaften der Reagenz- und Reaktionsintensivierungsmittel in der in Frage stehenden Mischung. Dabei ballen sich die StellungC befindet, also im Brennpunkt der Fokus- ⁶° Fibrin-Eisenoxidteilchen-Kügelchen in der Mitte dei sierlinse 92 auf dem Spiegel 78. Obwohl durch d^ Mischung zusammen, so daß die zuvor trübe oder bezüglich des Abstandes zwischen dem Brennpunkt undurchsichtige Mischung nahezu schlagartig lichtder Brennlinse und dem Auslaßende des sich in seiner durchlässig wird.After the stopping period of about 2 seconds has elapsed, the film strip drive roller 82 is actuated to convert the film strip 66 into a moderately large bead, as is the case at point 73 in the first To bring a position in which that is then shown in FIG. 5, an extremely fast and questionable mixture of blood plasma sample, drastic change in the optical properties of the reagent and reaction intensifier in the mixture in question. Here, the StellungC bale is, ⁶ ° fibrin-iron oxide beads in the center sierlinse dei thus the focal point of focus 92 on the mirror 78. Although together by d ^ mixture so that the cloudy above or with respect to the distance between the focal point opaque mixture almost suddenly lichtder the focal lens and the outlet end of which is permeable in its.

Reagenzabgabestellung befindlichen Blutplasma- Dieser Umschlag in der Lichtdurchlässigkeit deiBlood plasma located in the reagent delivery position- This envelope in the light permeability of the

proben-Abgaberohrs 120 passend gewählten Ab- 65 Mischung wird von deir lichtelektrischen Zelle 9isample delivery tube 120 appropriately selected sample 65 mixture is taken from the photoelectric cell 9i

stand zwischen den einzelnen vorgegebenen Reak- sofort wahrgenommen. Dies ist deshalb möglichstood between the individual given reac- noticed immediately. This is therefore possible

iionsir«ensivierungsmittelflecken70 sichergestellt weil die sich zuvor in der Lichtbahn befindlichIonizing agent stains70 ensured because they were previously in the light path

_W!rd daß die jeweils in Frage stehende Mischung Unterbrechung plötzlich beseidgt wird. Die licht _W ! Rd that the mixture in question will suddenly be avoided. The light

elektrische Zelle 96 gibt daraufhin ein Signal an die Zeitgeber- und Druckervorrichtung 98 ab, um den Zeit- oder Taktgeber anzuhalten. Kn diesem Zusammenhang wird erwähnt, daß der Zeitgeber zum Zeitpunkt 0 in Betrieb gesetzt wurde, als das Mehrelement-Kippsperrorgan 104 in seine zweite Stellung kippte und die Zugabe des Thromboplastinreagenzes zu der Blutplasmaprobe begann. Die Druckervorrichtung druckt die auf diese Weise bestimmte Pro-Ihrombinzeit der in Frage stehenden Blutplasmaprobe auf dem Band 99 in Sekunden aus. Danach wird die Zeitgeber- und Druckervorrichtung 98 zurückgesetzt, so daß sie zur Bestimmung der Prothrombinzeit der nächsten Blutplasmaprobe bereit ist.electrical cell 96 then outputs a signal to the timer and printer device 98 to stop the timer. In this connection it is mentioned that the timer was put into operation at time 0, when the multi-element tilting locking element 104 tilted into its second position and the addition of the thromboplastin reagent to the blood plasma sample began. The printer device prints out the pro-yourombin time of the blood plasma sample in question, determined in this way, on the tape 99 in seconds. Thereafter, the timer and printer device 98 is reset so that it is ready to determine the prothrombin time of the next blood plasma sample.

Gleichzeitig mit dem Vorrücken der Reaktionsmischung in die Stellung C gelangt der nächste Reaktionsintensivierungsmittelfleck 70 auf dem Folienstreifen 66 in die Stellung A. In dieser Stellung wird dem nachfolgenden vorgegebenen Fleck 70 die Blutplasmaprobe über das Blutplasmaproben-Abgaberohr 120 zugegeben. Gleichzeitig beginnen zu diesem Zeitpunkt die etwa 55 Sekunden lange Inkubationsperiode der nachfolgenden Blutplasmaprobe. Simultaneously with the advance of the reaction mixture into position C, the next reaction intensifier spot 70 on film strip 66 moves into position A. In this position, the blood plasma sample is added to the following predetermined spot 70 via the blood plasma sample delivery tube 120. At the same time, the approximately 55-second incubation period for the subsequent blood plasma sample begins at this point in time.

Die beschriebene Arbeitsweise wird automatisch fortgeführt, bis die Prothrombinzeit von allen von der Probenzufuhrvorrichtung 10 zugelführten Blutplasmaproben bestimmt ist. Auf dem Drehtisch 12 können beispielsweise 60 Blutplasmaproben angeordnet sein, die alle aufeinanderfolgend bearbeitet werden. Die Bestimmung der Prothrombinzeit von allen diesen Blutplasmaproben beträgt nur etwa 1 Stunde.The procedure described is continued automatically until the prothrombin time of all blood plasma samples supplied by the sample supply device 10 has been determined. For example, 60 blood plasma samples can be arranged on the turntable 12, all of which are processed in succession. The determination of the prothrombin time of all of these blood plasma samples is only about 1 hour.

Bei der Verwendung des beschriebenen Geräts zur Bestimmung der Prothrombinzeit von zahlreichen aufeinanderfolgenden Blutplasmaproben ergibt sich der besondere Vorteil, daß die verbrauchte oder benötigte Menge des teuren Thromboplastinreagenzes minimal ist. Durch die Verwendung der Dosierpumpe 26, des schnellschaltenden Mehrelement-Kippsperrorgans 104, der Reagenzabgabeleitung 54, der Reagenzparallel- und -rückführleitung 56 und der Absaugleitung 62 wird erreichii, daß lediglich eine genau dosierte ThromboplastinreagenznKi'.ge abgegeben wird, die für den Test notwendig ist, und daß kein Tropfen des Reagenzes vergeudet wird. Die beschriebene Vorrichtung macht eine genaue und automatische Bestimmung der Prothrombinzeit von unverdünnten Blutplasmaproben bei Verwendung von nur 0,02 ml Thromboplastinreagenz auf 0,01 ml jeder Blutplasmaprobe möglich. Bei den herkömmliehen Verfahren benötigt man etwa 0,2 ml Thromboplastinreagenz auf 0,1 ml jeder Blutplasmaprobe. Die beschriebene Vorrichtung ermöglicht also bei der Bestimmung der Prothrombinzeit einer Blutplasmaprobe eine Einsparung von 90 Va des teuren Throm-When using the device described for determining the prothrombin time of numerous successive blood plasma samples there is the particular advantage that the amount of expensive thromboplastin reagent consumed or required is minimal. By using the metering pump 26, the fast-switching multi-element tilting valve 104, the reagent delivery line 54, the reagent parallel and return line 56 and the suction line 62, it is achieved that only a precisely dosed thromboplastin reagent is delivered which is necessary for the test and that not a drop of reagent is wasted. The device described enables an accurate and automatic determination of the prothrombin time of undiluted blood plasma samples using only 0.02 ml of thromboplastin reagent for 0.01 ml of each blood plasma sample. Conventional methods require approximately 0.2 ml of thromboplastin reagent for 0.1 ml of each blood plasma sample. When determining the prothrombin time of a blood plasma sample, the described device enables a saving of 90 Va of the expensive thrombus

ao boplastinreagenzes.ao boplastin reagent.

Weiterhin können infolge der vollautomatischen Arbeitsweise die bei den herkömmlichen Verfahren von den Laboranten verursachten Fehler und Irrtümer nicht auftreten.Furthermore, as a result of the fully automatic mode of operation, the conventional methods Errors and mistakes caused by the laboratory technicians do not occur.

»5 Das vorstehend an Hand der Prothrombinzeit-Bestimmung unter Verwendung einer automatischen Vorrichtung erläuterte erfindungsgemäße Verfahren kann man z. B. auch zur Bestimmung der Teilthrornboplastinzeit von Blutproben anwenden oder»5 The above on the basis of the prothrombin time determination methods according to the invention explained using an automatic device you can z. B. also apply or to determine the partial thromboplastin time of blood samples

zum Bestimmen des Endzeitpunkts einer polymerisationsartigen Reaktion, der mit einer abrupten Änderung in der Viskosität verbunden ist, in zahlreichen Flüssigkeiten. Auch zum Bestimmen des Encfoeitpunkts von Ausflockungs- oder Agglutina-to determine the end time of a polymerization-type reaction, which begins with an abrupt Change in viscosity is associated in numerous liquids. Also for determining the Encfo time of flocculation or agglutin

tionsreaktionen ist das Verfahren anwendbar.tion reactions, the procedure can be used.

Hierzu 1 Blatt Zeichnungen1 sheet of drawings

Claims

Patent claims:

1. Method for determining the coagulation time of liquid samples in which the Liquid sample with a coagulation reactant and a large number of finely dispersible ones and reaction intensifying agents containing practically chemically inert particles and the end point of the reaction is determined, characterized in that a turbidity ferromagnetic particles causing the mixture are used and the mixture a moving magnetic field at least until the liquid sample coagulates is exposed and that the end point of the coagulation process by detection of a sharp change in the turbidity of the mixture is visually observed.

2. The method according to claim 1, characterized in that that consisting of magnetic iron oxide, nickel oxide or cobalt oxide particles are used.