DE2515869B2

DE2515869B2 - Method and device for the production of precoated microscope slides

Info

Publication number: DE2515869B2
Application number: DE2515869A
Authority: DE
Inventors: Dieter Dr.Rer.Nat. 6806 Viernheim Berger; Hans 6840 Lampertheim Lange; Heinz 6800 Mannheim Macho; Wolfgang Dr.Rer.Nat. 6800 Mannheim Werner
Original assignee: Boehringer Mannheim GmbH
Current assignee: Roche Diagnostics GmbH
Priority date: 1975-04-11
Filing date: 1975-04-11
Publication date: 1979-03-15
Also published as: JPS51135920A; GB1480575A; DE2515869A1; AT342889B; IE42551L; FI59676C; DK148476A; AU501167B2; SE7602727L; BE840453A; FR2307281A1; DE2515869C3; US4103041A; NL7603627A; FR2307281B1; DD123627A5; AU1267676A; CH598608A5; IT1059618B; ATA261976A

Description

Vorbeschichtete Objektträger sind im Prinzip seit langem bekannt Es sind dies Objektträger, die mit einer Schicht eines Mikroskopierfarbstoffes beschichtet sind. Bringt man auf diese Objektträger einen Tropfen der zu färbenden flüssigen Materialien, so tritt nach gewisser Zeit der Färbevorgang ein.Pre-coated slides have been known in principle for a long time. These are slides with a Layer of a microscopy dye are coated. If you bring a drop of the to this slide coloring liquid materials, the coloring process occurs after a certain time.

Zu den ältesten Beispielen von vorgefärbten Objektträgern gehören die mit Brillant-Kresyl-Blau beschichteten zur sogenannten Supra·Vitalfärbung von Retikulozyten. Sie werden hergestellt, indem man von Hand Objektivträger mit einer 1 %igen Lösung von Brillant-Kresyl-Blau in Alkohol bestreicht und trocknet Auf diesen so behandelten Objektträgern wird ein Tropfen Blut ausgestrichen, der nach etwa 10 Min. Aufbewahrung in einer feuchten Kammer mit einem Deckgläschen versehen und mikroskopiert werden kann (vgl. Pschyrembel, Klinisches Wörterbuch, Berlin 1969, S. 1287). In neuerer Zeit (DE-OS 2153673) wurden vorgefärbte Objektträger beschrieben, die mit Neumethylenblau (Methylenblau N) und Kresyl-Violett-Acetat beschichtet sind. Sie dienen zur Färbung der Egythrozyten und Leukozyten und ergeben das sogenannte Differentialblutbild. In der DE-OS 24 24 955 werden für den gleichen Zweck vorbeschichtete Objektträger mit den Farbstoffen Methylenazurblau, Methylenblau NN, Kresyl-Viofett-Acetat und Toluidinblau O beschrieben.The oldest examples of pre-stained microscope slides include those coated with brilliant cresyl blue for so-called supra vital staining of reticulocytes. They are made by hand The lens carrier is coated with a 1% solution of brilliant cresyl blue in alcohol and dries up A drop of blood is smeared onto these slides treated in this way, which after about 10 minutes of storage Put a cover slip in a humid chamber and can be examined under the microscope (cf. Pschyrembel, Clinical Dictionary, Berlin 1969, p. 1287). In more recent times (DE-OS 2153673) were Pre-stained microscope slides are described using new methylene blue (methylene blue N) and cresyl violet acetate are coated. They are used to stain the egythrocytes and leukocytes and result in the so-called differential blood count. In DE-OS 24 24 955 are for slides precoated for the same purpose with the dyes methylene azure blue, methylene blue NN, Cresyl Viofett Acetate and Toluidine Blue O are described.

In allen diesen Fällen wird der Farbstoff aus organischer oder wäßriger Lösung in einem dünnen Film auf dem Objektträger ausgebreitet und angetrocknet Dieses Verfahren führt aber wegen gelegentlich auftretender mangelnder Benetzung zu Schwierigkeiten. Deshalb wird in der DE-OS 24 24 955 ausdrücklich die zusätzliche Verwendung von oberflächenaktiven Mitteln beansprucht, um solchen Benetzungsschwierigkeiten vorzubeugen. Die Verwendung oberflächenaktiver Mittel ist zwar in dem dort beschriebenen Fall möglich, in anderen Fällen können diese Mittel jedoch Anfärbungsvorgänge empfindlich stören. Lin weiterer Nachteil aller bisher bekannten vorbeschichtetenIn all of these cases the dye is off organic or aqueous solution spread out in a thin film on the slide and dried However, this process leads to difficulties because of the occasional lack of wetting. Therefore, in DE-OS 24 24 955, the additional use of surface-active Means claimed to prevent such wetting difficulties. The use of surfactants Although funds are possible in the case described there, these funds can be used in other cases Disrupt staining processes sensitively. Lin another disadvantage of all previously known pre-coated

Slide consists in the fact that they are so far only in small Quantities could be produced by hand,

wobei naturgemäß erhebliche Qualitätsschwankungen in Kauf genommen werden mußten.Naturally, considerable fluctuations in quality had to be accepted.

It has now been found that precoating is carried out

Objektträger gleichbleibender Qualität einfach und ohne Rücksicht auf Benetzungsschwierigkeiien im technischen Maßstab herstellen kann, indem man die Farbstofflösungen auf die Objektträger in Form einzelner mikrofeiner nicht zusammenfließender Farbstofftröpfchen aufsprüht und unmittelbar nach dem Aufsprühen trocknetSlides of consistent quality easily and regardless of wetting difficulties in the Can produce technical scale by putting the dye solutions on the microscope slide in the form individual microfine non-flowing dye droplets sprayed on and immediately after the Spraying dries

Hierbei entsteht kein geschlossener Farbstoff-Film, sondern eine sehr große Anzahl mikrofeiner Farbstofftröpfchen. Diese mikrofeinen Farbstofftröpfchen kön-This does not result in a closed dye film, but a very large number of microfine dye droplets. These microfine droplets of dye can

JS nen je nach Stärke der Besprühung isoliert voneinander auf dem Objektträger bleiben oder aber auch sich gegenseitig überlagern. Es ist erstaunlich, daß diese Tröpchen auch bei stärkerer Besprühung nicht ineinander laufen und einen geschlossenen Film bilden, so daß dadurch alle Schwierigkeiten beseitigt werden, die normalerweise beim Auftragen eines Flüssigkeitsfilmes durch mangelnde Benetzung auftreten. Es war weiterhin nicht vorhersehbar, daß es mit relativ einfachen Mitteln möglich ist, die aufgesprühte Menge pro Flächeneinheit konstant und homogen zu halten, so daß man mit den vorteschichteten Objektträgern einwandfrei reproduzierbare Anfärbunger. erhältJS nen isolated from each other depending on the strength of the spray remain on the slide or also superimpose one another. It's amazing this Droplets do not run into one another and form a closed film, even when sprayed heavily, so that this eliminates all the difficulties normally associated with applying a film of liquid occur due to insufficient wetting. It was still unpredictable that it would be done with relatively simple means it is possible to keep the sprayed amount per unit area constant and homogeneous, so that one can with the pre-coated slides perfectly reproducible staining. receives

Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit ein Verfahren zur technischen Herstellung von vorbeschichteten Objektträgern, dadurch gekennzeichnet, daß man die Farbstofflösungen auf die Objektträger aufsprüht. Das Aufsprühen kann prinzipiell nach allen bekannten Verfahren zur homogenen Besprühung von Flächen durchgeführt werden. Beim sogenannten Einstoff-Verfahren wird die Lösung unter hohem Druck aus einer Düse versprüht. Beim Zweistoff-Verfahren tritt die Lösung aus der Düse aus und wird dort mit Hilfe komprimierter Gase zerstäubt Der Flüssigkeitsaustritt wird hierbei entweder passiv durch den Sog der komprimierten Gase oder aktiv durch Förderpumpen bzw, pneumatisch bewirkt. Die im Handel befindlichen DUsentypen liefern die verschiedenartigsten geometrischen Sprühbilder. Beim erfindungsgemäßen Verfahren werden solche Düsentypen bevorzugt, die ein nahezu rechteckiges Sprühbild erzeugen, da man unter einer solchen Düse die Objektträger kontinuierlich auf einem stufenlos regelbaren Förderband vorbeiführen kann und nur ein relativ kleiner Teil des Sprühbildes durch eineThe present invention thus provides a process for the industrial production of precoated Slides, characterized in that the dye solutions are applied to the slides sprays on. The spraying can in principle by all known methods for the homogeneous spraying of Surfaces are carried out. In the so-called one-substance process, the solution is under high pressure sprayed from a nozzle. In the two-substance process, the solution emerges from the nozzle and is there with the aid of compressed gases atomized The liquid outlet is either passive through the suction of the compressed gases or actively effected by feed pumps or pneumatically. The ones in the trade DUse types deliver the most varied of geometric spray patterns. In the method according to the invention those types of nozzles are preferred that produce an almost rectangular spray pattern, since one under a such a nozzle can continuously guide the slide past on an infinitely variable conveyor belt and only a relatively small part of the spray pattern through one

Mask must be covered.

Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit auch die Vorrichtung zur Herstellung von vorbeschich'eten Objektträgern, bestehend aus einem stufenlos regelbaren Förderband, einem regelbaren Sprühgerät und einer Maske.Another object of the present invention is thus also the device for producing vorbeschich'eten slides, consisting of a continuously adjustable conveyor belt, an adjustable Sprayer and a mask.

Da die Farbstofflösungen gemäß der vorliegenden Erfindung meist aus niedrig-viskosen Lösungen in sehr feiner und sehr gleichmäßiger Verteilung versprüht werden müssen, wird das Zweistoff-Verfahren bevorzugL Dieses Verfahren besitzt den weiteren Vorteil, daß der Gasstrom die Lösungsmitteldämpfe rasch abführt und somit der Trocknungsvorgang unmittelbar "nach dem Auftreffen auf den Objektträger einsetzt. Es hat sich gezeigt, daß nach diesem Verfahren hergestellte '5 Objektträger keiner weiteren Nachtrocknung bedürfen und unmittelbar am Ende des Förderbandes zur Verpackung entnommen werden können.Since the dye solutions according to the present invention mostly consist of low-viscosity solutions in very must be sprayed finely and very evenly, the two-component method is preferred This process has the further advantage that the gas stream quickly removes the solvent vapors and thus the drying process begins immediately after it hits the slide. It has it has been shown that '5 Slides do not require any further drying and are immediately at the end of the conveyor belt Packaging can be removed.

Selbstverständlich ist es prinzipiell auch möglich, anstelle der Objektträger das Sprühgerät mit konstanter Geschwindigkeit über die vorbereiteten, nebeneinander liegenden Objektträger hinwegzuführen, es ist jedoch technisch wesentlich weniger aufwendig, das Sprühgerät fest zu installieren und die Objektträger auf einem Förderband unter der Düse vorbeizuführen. 2äOf course, it is in principle also possible to use the spray device with a constant instead of the specimen slide Speed over the prepared, side by side carry away lying slides, but it is technically much less expensive to Install the sprayer firmly and move the slides on a conveyor belt under the nozzle. 2ä

Die Menge des aufgesprühten Farbstoffes hängt vom Sprühwinkel, dem Abstand der Düse von den Objektträgern, der Konzentration der Sprühlösung, dem Flüssigkeitsdurchsatz durch die Düse sowie der Geschwindigkeit des Förderbandes ab. Die Tröpfchengröße wird außer durch den Düsentyp vom Gasdruck und der Viskosität der Spinnlösung beeinflußtThe amount of dye sprayed on depends on the spray angle, the distance between the nozzle and the slides, the concentration of the spray solution, the liquid throughput through the nozzle and the speed of the conveyor belt. The droplet size is determined by the type of nozzle and the gas pressure and the Affects the viscosity of the spinning solution

Die für die jeweilige Rezeptur 0[-Jmalen Verhältnisse können somit teilweise vorjusberechr.et, teilweise in einfacher Weise experimentell emv telt werden und sind der jeweiligen Rezeptur anzupassen. Als Farbstoffe kommen praktisch alle für biologische Anfärbungen üblichen Farbstoffe bzw. Farbstoffgemische in Frage. Typische Beispiele sind die Nilblausulfatfärbungen der Heinzschen Innenkörper, die Sternheimer-Malbin-Fär- «o bung (Gentianaviolett und Safranin) des Harnsediments, die Seyderhelmsche Färbung (Trypanblau und Kongorot) zur Leukozytendifferenzierung im Harnsediment, das Blutbild nach Seemann mit Neutralrot und (anusgrün B, die Färbung der Stärke im Magansaft mit « Lugolschen Reagenz (Kaliumjodid-Jod) sowie die Fuchsin-Färbung von Bakterien im Harn. Von ganz besonderem Interesse sind vorbeschich'ete Objektträger mit Neumethylenblau (Methylenblau N) und Kresylviolettacetat zur Anfärbung der Erythrozyten und Leukozyten beim sogenannten Differentialblutbild.The ratios for the respective recipe can thus partially vorjusberechr.et, partially in can easily be determined experimentally and must be adapted to the respective recipe. As dyes Practically all dyes or dye mixtures customary for biological dyeing can be used. Typical examples are the Nile blue sulphate colorations of the Heinz inner bodies, the Sternheimer-Malbin-Fär- «o exercise (gentian violet and safranine) of the urine sediment, Seyderhelm's staining (trypan blue and Congo red) for leukocyte differentiation in the urine sediment, the blood count according to Seemann with neutral red and (anus green B, the coloring of the starch in the magan juice with « Lugol's reagent (potassium iodide-iodine) and the fuchsine staining of bacteria in the urine. Of whole Pre-coated slides with new methylene blue (methylene blue N) and Cresyl violet acetate for staining the erythrocytes and leukocytes in the so-called differential blood count.

Sofern die Färbungen hierdurch nicht beeinflußt werden, können den Sprühlösungen selbstverständlich auch Zusätze wie Antikoagulantien, Puffer, Lösungsvermittler, Konservierungsmittel, oberflächenaktive Stoffe etc. zugesetzt werden. Als Lösungsmittel kommen insbesondere Wasser, niedere Alkohole, Ketone, Ester und Halogenkohlenstoffe sowie Mischungen derselben in Frage. Wichtig allein ist, daß die Farbstoffe bzw. Farbstoffgemische oder die sonstigen Bestandteile so ausreichend löslich sind und die Lösungsmittel anschließend ausreichend schnell verdampfen. Sofern die Farbstoffe nicht ausreichend löslich sind, können auch ultrafeine Dispersionen zum Aufsprühen verwendet werden, wie man sie beispielsweise bei Anwendung von Ultraschall erhält.If the colors are not affected by this, the spray solutions can of course be used also additives such as anticoagulants, buffers, solubilizers, preservatives, surface-active substances etc. are added. In particular, water, lower alcohols, ketones and esters are used as solvents and halocarbons and mixtures thereof. The only important thing is that the dyes or Mixtures of dyes or the other ingredients like that are sufficiently soluble and the solvents then evaporate sufficiently quickly. Unless the Dyes are not sufficiently soluble, ultrafine dispersions can also be used for spraying as they are obtained, for example, when using ultrasound.

Das erfindungsgemäße Verfahren und die erfindungsgemäße Vorrichtung erlauben es im übrigen, verschiedene, Farbstoffe in getrennten Sprühgängen separat aufzubringen, wenn sie beispielsweise in keinem Lösungsmittel ausreichend gemeinsam in Lösung gebracht werden können, oder aber dort bereits zu chemischen Reaktionen bzw. Ausfällungen neigen. In so einem Fall bringt man über dem Fließband mit den Objektträgern hintereinander zwei Sprüh vorrichtungen an, aus denen dann nacheinander die verschiedenen Farbstoffe oder sonstigen Hilfsstoffe aufgetragen werden.The method according to the invention and the device according to the invention also allow various, To apply dyes separately in separate spray coats, for example if they are not in any Solvents can be sufficiently brought into solution together, or else already there chemical reactions or precipitations. In such a case, you bring them over the assembly line Slides one behind the other two spray devices, from which then one after the other the different Dyes or other auxiliaries are applied.

Die fertig besprühten Objektträger können gewünschtenfalls noch nachgetrocknet werden, wobei man vorzugsweise das Förderband noch durch einen Trockentunnel schickt Bei der erfindungsgemäßen Anwendung von Zweistoff-Düsen erübrigt sich dieser Verfahrensschritt jedoch im allgemeinen, so daß die Objektträger am Ende des Förderbandes unmittelbar entnommen und verpackt werden können.The finished sprayed slides can, if desired, be dried again, with the conveyor belt is preferably also sent through a drying tunnel in the case of the invention However, this process step is generally unnecessary using two-fluid nozzles, so that the Slides can be removed and packaged immediately at the end of the conveyor belt.

Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren und mit der erfindungsgemäßen Vorrichtung ist es nunmehr erstmals möglich, vorgefärbte Objektträger in gleichbleibender Qualität kontinuierlich in großen Mengen technisch herzustellen, so daß jetzt endlich die manuellen Anfärbungen durch vorbeschichtete Objektträger ersetzt werden können. Ein weiterer Vorteil des erfindungsgemäßen Verfahrens besteht darin, daß nicht nur gläserne Objektträger, sondern auch Objektträger aus transparenten, aber schwer benetzbaren Kunststoffen zur Anwendung kommen können.It is now the first time after the method according to the invention and with the device according to the invention possible, pre-stained slides of consistent quality continuously in large quantities technically manufactured, so that now, at last, manual staining with pre-coated microscope slides can be replaced. Another advantage of the method according to the invention is that not only glass slides, but also slides made of transparent, but difficult to wet plastics can be used.

Für die einwandfreie Lagerung und Verpackung ist es empfehlenswert, nach dem Aufsprühen an den Enden der rechteckigen Objektträger Etiketten aufzukleben, durch die nicht nur eine einwandfreie Kennzeichnung ermöglicht wird, sondern auch ein Verkleben der Platten oder Verkratzen der Farbstoffschicht verhindert wird. Die erfindungsgemäße Vorrichtung wird deshalb vorzugsweise mit einer Eiikettiervorrichtung sowie einer Verpackungsmaschine gekoppelt. Weiterhin ist es sehr sinnvoll, die Sprüheinheit mit einer herkömmlichen Entstapelungsvorrichtung sowie einer kontinuierlichen Wasch- und Trockeneinheit zu koppeln. Durch die Wascheinheit wird gleichzeitig eine kontinuierliche Reinigung des Transportbandes gewährleistet Die Maske kann im einfachsten Fall aus zwei Blechstreifen bestehen, die möglichst dicht über den Objektträgern angebracht werden. Um die Reinigung der Maske möglichst selten vornehmen zu müssen, kann sie mit einer kleinen Abflußrinne versehen werden. Andere Lösungen bestehen to einem Paar kontinuierlich, wenn auch langsamer laufender Papierstreifen oder Metallbänder. For proper storage and packaging, it is recommended after spraying on the ends Glue labels on the rectangular slide, which not only ensure perfect identification is made possible, but also prevents the plates from sticking or scratching the dye layer will. The device according to the invention is therefore preferably provided with a labeling device as well coupled to a packaging machine. It is also very useful to connect the spray unit with a conventional one To couple the destacking device and a continuous washing and drying unit. Through the The washing unit ensures continuous cleaning of the conveyor belt at the same time In the simplest case, the mask can consist of two metal strips that are as close as possible to the slides be attached. In order to have to clean the mask as rarely as possible, you can use a small drainage channel. Other solutions exist to a couple continuously, though also slower running paper strips or metal bands.

In den folgenden Beispielen wird die Vorrichtung und das Verfahren sowie bevorzugte Ausführungsformen desselben erläutert, ohne daß hierdurch der Umfang der vorliegenden Erfindung beschränkt werden soll.The following examples illustrate the apparatus and method as well as preferred embodiments the same explained without thereby limiting the scope of the present invention.

Example I.

Vorrichtung zur technischen Herstellung von
vorbeschichteten ObjektträgernDevice for the technical production of
pre-coated microscope slides

Von einer bekannten Entstapelungsvorrichtung werden Objektträger quer zur Förderrichtung eines Förderbandes so aufgebracht, d?Q sie praktisch ohne Zwischenraum aneinanderstoßen. Die Geschwindigkeit des Förderbandes ist stufenlos regelbar. Unter der Düse ist über den Objektträgern eine Maske angebracht, die die Breite des zu besprühenden Teils der Objektträger festlegt. Über die Maske ist eine Zweistoff-Breitstrahl-From a known unstacking device, slides are transverse to the conveying direction Conveyor belt applied in such a way that they abut one another with practically no space. The speed of the conveyor belt is infinitely variable. A mask is attached under the nozzle above the microscope slides defines the width of the part of the slide to be sprayed. There is a two-substance broad jet over the mask

düse angebracht, deren Sprühwinkel und Abstand eine Sprühbreite gewährleistet, die etwas größer ist als die Maskenbreite. Vor dem Eintritt in die Sprühzone durchlaufen die Objektträger auf dem Förderband eine Waschzone und eine Luft-Trockenzone. Die aus der Sprühzone austretenden Objektträger werden von einer Etikettiermaschine an beiden Enden etikettiert und gehen von dort unmittelbar in eine herkömmliche Verpackungsmaschine.nozzle attached, the spray angle and distance ensures a spray width that is slightly larger than that Mask width. Before entering the spray zone, the slides pass through a conveyor belt Washing zone and an air-drying zone. The slides emerging from the spray zone are from Labeled at both ends of a labeling machine and from there go directly to a conventional one Packing machine.

Example 2

Es wird eine Lösung folgender Zusammensetzung unter Verwendung chromatographisch reiner Farbstoffe hergestellt (vgL unsere am gleichen Tage eingereichte Anmeldung (int Nr. 2006).A solution of the following composition is obtained using chromatographically pure dyes produced (see our application submitted on the same day (int No. 2006).

Methylenblau N-Hydroritlorid 130 mg
Kresylviolettacetat 270 mgMethylene Blue N-Hydrochloride Chloride 130 mg
Cresyl violet acetate 270 mg

Methanol to 100 ml

Diese Losung wird aus einer 0,5 mm Breitstrahldüse (SS 60 67228—45 der Fa. Spraying System) mit einem Sprühwinkei von ca. 25" im Abstand von 20 cm durch eine Maske in einer Breite von 3 cm au!" Objektträger gesprüht die mit einer Geschwindigkeit von 1,5 m/min, unter der Düse vorbeigeführt werden. Eine zusätzliche Trocknung ist nicht erforderlich.This solution is from a 0.5 mm wide jet nozzle (SS 60 67228-45 from Spraying System) with a Spray angle of approx. 25 "at a distance of 20 cm through a mask in a width of 3 cm au!" Microscope slide sprayed at a speed of 1.5 m / min, can be passed under the nozzle. No additional drying is required.

Sprühdruck: 1,2 atü; Flüssigkeitsdurchsatz durch die Düse: 10 ml/min.Spray pressure: 1.2 atü; Liquid throughput through the Nozzle: 10 ml / min.

Bei einer mittleren Tröpfchengröße von ca. 20 μ beträgt die aufgebrachte Farbstoff menge ca. 3 μg/cm².With an average droplet size of approx. 20 μ, the amount of dye applied is approx. 3 μg / cm ² .

Auf so hergestellte vorgefärbte Objektträger wird ein Blutstropfen von ca. 5—10 μΙ aufgebracht und mit einem Deckglas bedeckt Nach ca. 3—5 Min. wird die Anfärbung unter dem Mikroskop bei ca. 800facher Vergrößerung unter Verwendung eines ölimmersions-Objektivs beurteilt.A drop of blood of approx Cover slip covered After approx. 3-5 min. The staining under the microscope is approx. 800 times Magnification assessed using an oil immersion objective.

Die einzelnen Partikel des Blutes stellen sich in folgender Anfärbung dar:The individual particles of the blood are colored as follows:

Reticulocytes:

purpurfarbenes Netzwerk innerhalb der kaum angefärbten Erythrozyten.purple network within the scarcely stained erythrocytes.

Neutrophils:

purpurfarbener Kern innerhalb eines fein granulierten fast farblosen Plasmas.purple-colored core within a finely granulated, almost colorless plasma.

Eosinophils:

purpurfarbener Kern innerhalb eines grob granulierten gelben Plasmas.purple core within a coarsely granulated yellow plasma.

Basophile:Basophils:

dunkelpurpurfarliener Kern innerhalb eines mittelgroß kompakt granulierten orangerotfarbenen Plasmas.dark purple core within a medium-sized compact granulated orange-red color Plasmas.

Lymphocytes:

purpurfarbener Kern mit hellpurpurfarbenem Plasma. purple core with light purple plasma.

Monozyten:Monocytes:

wie Lymphozyten nur größer und mit mehr Plasma.like lymphocytes only bigger and with more plasma.

Platelets:

kleine purpurfarbene Partikel.small purple colored particles.

Example 3

Eine 1%ige Lösung von Brillantkresylblau in Äthanol wird unter den Bedingungen von Beispiel 2 auf Objektträger aufgesprüht Man erhält einen Farbstoffauftrag von ca, 6 μg/cm^{^}.A 1% solution of brilliant cresyl blue in ethanol is sprayed onto microscope slide under the conditions of Example 2. A dye application of approx. 6 μg / cm ^{^ is obtained} .

Auf so hergestellte vorgefärbte Objektträger wird ein Blutstropfen von ca. 5— 10 μ| aufgebracht und mit einem Deckglas bedecktA Blood drops of about 5–10 μ | upset and with a Cover slip covered

Nach ca. 5 Min. wird die Anfärbung unter dem Mikroskop bei ca. 800facher Vergrößerung beurteilt Hierbei stellen sich die Retikulozyten als Erythrozyten mit dunkelblauem Netzwerk dar.After approx. 5 minutes, the staining is assessed under the microscope at approx. 800x magnification The reticulocytes appear as erythrocytes with a dark blue network.

Verwendet man anstelle von Brillantkresylblau die gleiche Menge Nilblausulfat so werden neben den Retikulozyten auch noch die sogenannten Heinzschen Innenkörper der Erythrozyten blau angefärbtIf you use the same amount of Nile blue sulphate instead of brilliant cresyl blue, in addition to the Reticulocytes also stained the so-called Heinz inner bodies of the erythrocytes blue

Example 4

Unter Beschallung mit Ultraschall wird eine Lösung folgender Zusammensetzung hergestellt:A solution of the following composition is prepared under sonication with ultrasound:

Toluidine Blue O 1000 mg Polyoxyethylene sorbitan

monopalmiitat (Tween 80·) 30 mgmonopalmitate (Tween 80x) 30 mg

dest Wasser ad 100 mldistilled water to 100 ml

Diese Lösung wird unter den Bedingungen von Beispiel 2 auf Objektträger aufgesprüht Farbstoffauftrag ca. 6 μg/cm².This solution is sprayed onto microscope slide under the conditions of Example 2. Dye application approx. 6 μg / cm ² .

Auf so hergestellte vorgefärbte Objektträger wird ein Blutstropfen von ca. 5— 10 μΐ aufgebracht und mit einem Deckglas bedeckt Nach ca. 10 Min. wird die Anfärbung unter dem Mikroskop bei ca. 800facher Vergrößerung mit einem Ölimmersionsobjektiv beurteilt Die Färbungscharakteristiken der Blutpartikel sind identisch mit denen, die in der DE-OS 24 24 955 beschrieben sind.A drop of blood of approx Cover slip covered After approx. 10 min. The staining is finished The coloring characteristics are assessed under the microscope at approx. 800x magnification with an oil immersion objective the blood particles are identical to those described in DE-OS 24 24 955.

Example 5

Eine handelsübliche wäßrige Lösung von Kristallviolett und Alcianblau (Sedicolor®) wird gemäß Beispiel 2 auf Objektträger aufgesprüht Die Objektträger werden mit einem kleinen Tropfen eines aufgerührten Harnsediments versehen und bei 400facher Vergrößerung mikroskopiert.A commercially available aqueous solution of crystal violet and Alcian blue (Sedicolor®) is prepared according to Example 2 sprayed onto microscope slide The microscope slides are stirred with a small drop of urine sediment provided and microscoped at 400x magnification.

Die einzelnen Harnbestandteile sind an ihrer charakteristischen Form und durch folgende Färbungen kenntlich:The individual urine components are characterized by their characteristic shape and the following colors recognizable:

Erythrozyten:Erythrocytes:

blaß rosa bis violettpale pink to purple

Leukozyten, Piattenepithelien: rosa mit violetten bis blauen KernenLeukocytes, pate epithelia: pink with violet to blue cores

Renal epithelia:

violett mit violetten bis blauen Kernenpurple with purple to blue cores

Schleim:Mucus:

hellblau bis petroleumblaulight blue to petroleum blue

Hyaline cylinder:

hellblau bis petroleumblaulight blue to petroleum blue

Wax cylinder:

violett bis purpurrotpurple to crimson

Cellular cylinders:

hellblaue bis petroleumblaue Grundsubstanz mit der charakteristischen Färbung der Zellulärenlight blue to petroleum blue basic substance with the characteristic coloration of the cellular ones

Inclusions [κ B. lrukocytes, etc.)

5555

Claims

Patent claims:

1. A method for the production of precoated microscope slides, characterized in that, that the dye solutions on the slide in the form of individual microfine, not confluent droplets of dye sprayed on and dries immediately after spraying

2. The method according to claim 1, characterized in that that the slides are drawn under a spray nozzle at a constant speed, whose spray pattern is kept rectangular by a mask.

3. The method according to any one of claims I and 2, characterized in that the dye solutions sprayed from a two-substance nozzle

4. The method according to any one of claims 1-3, characterized in that an ultrafine Dye dispersion sprayed

5. The method according to any one of the claims! —4. characterized in that the spray solutions contain other additives.

6. The method according to claim 5, characterized in that as additives anticoagulants, buffers, Solubilizers, preservatives and / or surface-active substances can be used.

7. The method according to any one of claims 1-6, characterized in that two or more Dyes are applied separately in separate spray coats.

8. The method according to any one of claims 1-7, characterized in that after spraying Labels can be stuck to the ends of the rectangular slides.

9. Device for the production of precoated microscope slides according to one of the claims 1–8, consisting of an infinitely variable conveyor belt, an adjustable sprayer and a Mask.

10. The device according to claim 9, characterized in that the sprayer according to the The two-substance process works and delivers an almost rectangular spray pattern