DE69329544T2

DE69329544T2 - HIV Protease hemmende Verbindungen

Info

Publication number: DE69329544T2
Application number: DE69329544T
Authority: DE
Inventors: Kwan Yuk Hui; Charles David Jones; Louis Nickolaus Jungheim; Pamela Ann Pennington
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 1992-12-22
Filing date: 1993-12-20
Publication date: 2001-05-31
Anticipated expiration: 2013-12-21
Also published as: EP0604182A3; US5502061A; EP0604182A2; EP0604182B1; JPH06234789A; DE69329544D1; ES2150933T3; CA2112038A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen und pharmazeutisch annehmbare Salze hiervon, die die vom humanen Immundefizienz Virus (HIV) Typ 1 (HIV-1) oder Typ 2 (HIV-2) kodierte Protease hemmen. Diese Verbindungen sind bei der Behandlung einer HIV Infektion und/oder der Behandlung des entstehenden erworbenen Immundefizienzsyndroms (AIDS) brauchbar, entweder als Verbindungen, pharmazeutisch annehmbare Salze, pharmazeutische Zusammensetzungsbestandteile einzeln oder in Kombination mit anderen antiviralen Substanzen, Immunmodulatoren, Antibiotika oder ImpfstoffenU.S.ie vorliegende Erfindung betrifft auch Verfahren zur Behandlung von AIDS, Verfahren zur Verhinderung einer HIV Infektion und Verfahren zur Behandlung der HIV Infektion. Die EP 0 361 341 A betrifft Therapeutrika für AIDS, die auf Inhibitoren der HIV Protease basieren.
Ein Retrovirus, der als humaner Immundefizienzvirus (HIV) bezeichnet wird, ist das verursachende Agens für die komplexe Krankheit, die als erworbenes Immundefizienzsyndrom (AIDS) bezeichnet wird, und gehört zur Familie der Lentiviren der Retroviren, M. A. Gonda, F. Wong-Staal, R. C. Gallo, "Sequence Homology and Morphological Similarity of HTLV III and Visna Virus, A Pathogenic Lentivirus", Science, 227, 173, (1985), P. Sonigo, N. Alizon, et al., "Nucleotid Sequence of the Visna Lentivirus: Relationship to the Aids Virus", Cell, 42, 369, (1985). Die komplexe AsS Krankheit schließt die fortschreitende Zerstörung des Immunsystems und die Degeneration des zentralen und peripheren Nervensystems ein. Das HIV Virus war früher als LAV, HTLV-III oder ARV bekannt oder wurde als solches bezeichnet.
Ein gemeinsames Merkmal der Retrovirusreplikation betrifft die posttranslationale Prozessierung der Vorläuferpolyproteine durch eine viral kodierte Protease zur Erzeugung reifer viraler Proteine, die für den viralen Aufbau und die Funktion benötigt werden. Eine Unterbrechung dieser Prozessierung scheint die Bildung des normalerweise infektiösen Virus zu verhindern. Nicht prozessierte Strukturproteine werden auch in Klonen nicht infektiöser HIV Stämme beobachtet, die von Patienten isoliert werden. Die Ergebnisse legen nahe, daß die Hemmung der HIV Protease ein mögliches Verfahren zur Behandlung von AIDS und der Vorbeugung oder Behandlung einer Infektion durch HIV darstellt.
Das HIV Genom kodiert Strukturproteinvorläufer, bekannt als gag und pol, die zur Bildung der Protease, reversen Transkriptase und Endonuklease/Integrase prozessiert werden. Die Protease spaltet weiter gag und gag-pol Polyproteine unter Bildung von reifen Strukturproteinen des Viruskerns.
Beträchtliche Anstrengungen zur Kontrolle von HIV richten sich gegen die Strukturproteinvorläufer, die unter Bildung der retroviralen Protease, reversen Transkriptase und Endonuklease/Integrase prozessiert werden. Beispielsweise ist das momentan verwendete Therapeutikum AZT ein Hemmstoff der viralen reversen Transkriptase, H. Mitsuya, NS. Broder, "Inhibition of the In Vitro Infectivity in Cytopathic Effects of HTLV III", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 1911 (1986).
Forschungsanstrengungen werden auch auf die HIV Proteaseinhibitoren gerichtet. Beispielsweise beschreibt die EP 0346 847 A Verbindungen, wahlweise mit einer Reihe an Heterocyclen als Endgruppen, die als HIV Proteaseinhibitoren von Nutzen sein sollen.
Unglücklicherweise leiden viele der bekannten Verbindungen unter Toxizitätsproblemen, einer mangelnden Bioverfügbarkeit oder kurzen in vivo Halbwertszeiten. Daher wurde, trotz des anerkannten therapeutischen Potentials, das mit einem Proteaseinhibitor verbunden ist, und den bis jetzt aufgewendeten Forschungsanstrengungen bisher kein brauchbares therapeutisches Mittel entwickelt.
Daher ist es ein primäres Ziel der vorliegenden Erfindung neue Proteaseinhibitoren bereitzustellen, die zur Behandlung oder Vorbeugung einer HIV Infektion und/oder dem entstehenden erworbenen Immundefizienzsyndrom (AIDS) brauchbar sind.
Die vorliegende Erfindung liefert eine Verbindung der Formel I
worin
R&sup0; für Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6; Alkoxycarbonyl oder C&sub2;-C&sub6; Alkanoyl steht.
n für 0, 1 oder 2 steht.
R für Aryl, einen Heterocyclus oder einen ungesättigten Heterocyclus (wie später definiert) steht,
R¹ für Aryl (wie später definiert), C&sub5;-C&sub7; Cycloalkyl oder -S-R1x steht, worin R1x für Aryl oder C&sub5;-C&sub7; Cycloalkyl steht.
R² für eine Aminosäureseitenkette (wie später definiert), Cyano(C&sub1;-C&sub4;)-Alkyl, -CH&sub2;SCH&sub3; oder -CH&sub2;C(O)-R2a steht, worin
R2a für C&sub1;-C&sub4; Alkylamino steht,
X für eine Gruppe mit folgender Struktur steht
oder
Y für Aryl steht.
R3a für eine Gruppe mit folgender Struktur steht
1) -C(O)-NR&sup4;R&sup4;
oder
R3b für eine Gruppe mit folgender Struktur steht
oder
p für 4 oder 5 steht,
1 für 3, 4 oder 5 steht.
R&sup4; jeweils unabhängig für Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6; Alkyl oder Hydroxy(C&sub1; -C&sub4;)alkyl steht,
R&sup5; und R&sup6; unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff Hydroxy, C&sub1;-C&sub6; Alkyl, C&sub1;-C&sub6; Alkoxy, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Hydroxy(C&sub1;-C&sub4;)alkyl, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;)alkylcarbamoyl, Aryl, einem Heterocyclus oder einem ungesättigten Heterocyclus (wie später definiert), oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Alle hierin angegebenen Temperaturen sind in Grad Celsius (ºC). Alle hierin verwendeten Maßeinheiten sind Gewichtseinheiten, außer für Flüssigkeiten, die in Volumeneinheiten angegeben sind.
Wie hierin verwendet, steht der Ausdruck "C&sub1;-C&sub6; Alkyl" für eine gerade oder verzweigte Alkylkette mit 1-6 Kohlenstoffatomen. Typische C&sub1;-C&sub6; Alkylgruppen beinhalten Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, sekundäres Butyl, t-Butyl, Pentyl, Neopentyl, Hexyl und dergleichen. Der Ausdruck "C&sub1;-C&sub6; Alkyl" schließt innerhalb seiner Definition den Ausdruck "C&sub1;-C&sub4; Alkyl" ein.
"Halogen" steht für Chlor, Fluor, Brom oder Iod.
"Halogen (C&sub1;-C&sub4;) Alkyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette, die 1-4 Kohlenstoffatome mit 1-3 daran gebundenen Halogenatomen aufweist. Typische Halogen(C&sub1;-C&sub4;) Alkylgruppen beinhalten Chlormethyl, 2-Bromethyl, 1-Chlorisopropyl, 3-Fluorpropyl, 2,3-Dibrombutyl, 3-Chlorisobutyl, Iod-t-Butyl, Trifluormethyl und dergleichen.
"Hydroxy(C&sub1;-C&sub4;)alkyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette mit ein bis vier Kohlenstoffatomen mit einer daran gebundenen Hydroxygruppe. Typische Hydroxy(C&sub1;-C&sub4;)alkylgruppen sind unter anderem Hydroxymethyl, 2-Hydroxyethyl, 2-Hydroxypropyl, 3-Hydroxypropyl, 2-Hydroxyisopropyl, 4-Hydroxybutyl und dergleichen.
"Cyano(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette, die 1-4 Kohlenstoffatome mit einer daran gebundenen Cyanogruppe aufweist. Typische Cyano(C&sub1;-C&sub4;)-Alkylgruppen beinhalten Cyanomethyl. 2-Cyanoethyl, 2-Cyanopropyh 3-Cyanopropyl, 2-Cyanoisopropyl, 4-Cyanobutyl und dergleichen.
"C&sub1;-C&sub4; Alkylthio" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette, die 1-4 Kohlenstoffatome an ein Schwefelatom gebunden aufweist. Typische C&sub1;-C&sub4; Alkylthiogruppen beinhalten Methylthio, Ethylthio, Propylthio. Isopropylthio, Butylthio, sek-Butylthio, t-Butylthio, Pentylthio, Hexylthio und dergleichen.
"C&sub1;-C&sub4; Alkylamino" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylaminokette, die 1-4 Kohlenstoffatome an eine Aminogruppe gebunden aufweist. Typische C&sub1;-C&sub4; Alkylaminogruppen beinhalten Methylamino, Ethylamino. Propylamino, Isopropylamino, Butylamino, sekundäres Butylamino und dergleichen.
"Di(C&sub1;-C&sub6;)Alkylamino" steht für zwei gerade oder verzweigte Alkylketten, die 1 bis 4 Kohlenstoffatome an eine gemeinsame Aminogruppe gebunden aufweisen. Typische Di(C&sub1;-C&sub6;)Alkylaminogruppen beinhalten Dimethylamino, Ethylmethylamino, Methylisopropylamino, Ethylisopropylamino, Butylmethylamino, sek-Butylethylamino und dergleichen.
"C&sub1;-C&sub6; Alkoxy" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette, die 1 bis 6 Kohlenstoffatome an ein Sauerstoffatom gebunden aufweist. Typische C&sub1;-C&sub6; Alkoxygruppen beinhalten Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Isopropoxy. Butoxy, sek-Butoxy, t-Butoxy, Pentoxy, Hexoxy und dergleichen. Der Ausdruck "C&sub1;-C&sub6; Alkoxy" umfaßt innerhalb der Definition den Ausdruck "C&sub1;-C&sub4; Alkoxy".
"C&sub2;-C&sub6; Alkanoyl" steht für eine gerade oder verzeigte Alkylkette mit ein bis fünf Kohlenstoffatomen, die an einen Carbonylrest gebunden sind. Typische C&sub2;-C&sub6; Alkanoylgruppen sind Ethanoyl, Propanoyl, Butanoyl, t-Butanoyl, Pentanoyl, 3-Methylpentanoyl und dergleichen.
"C&sub1;-C&sub6; Alkoxycarbonyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkoxykette, die 1 bis 6 Kohlenstoffatome an einen Carbonylrest gebunden aufweist. Typische C&sub1;-C&sub6; Alkoxycarbonylgruppen beinhalten Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, Butoxycarbonyl, t-Butoxycarbonyl und dergleichen. Der Ausdruck "C&sub1;-C&sub6; Alkoxycarbonyl" beinhaltet innerhalb der Definition den Ausdruck "C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl".
"N-(C&sub1;-C&sub4;)-Alkylcarbamoyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette mit ein bis vier Kohlenstoffatomen, die an das Stickstoffatom eines Carbamoylrests gebunden ist. Typische N(C&sub1;-C&sub4;)-Alkylcarbamoylgruppen sind unter anderem N-Methylcarbamoyl, N-Ethylcarbamoyl, N-Propylcarbacnoyl, N-Isopropylcarbamoyt, N- Butylcarbamoyl und N-t-Butylcarbamoyl und dergleichen.
"Carbamoyl(C&sub1;-C&sub4;)alkyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette, die 1 bis 4 Kohlenstoffatome mit einer daran gebundenen Carbamoylgruppe aufweist. Typische Carbamoyl(C&sub1;-C&sub4;)alkylgruppen beinhalten Carbamoylmethyl, 2-Carbamoylethyl, 3-Carbamoylpropyl, 2-Carbamoylisopropyl, 4-Carbamoylbutyl und dergleichen.
"C&sub5;-C&sub7; Cycloalkyl" steht für eine gesättigte Kohlenwasserstoffringstruktur, die 5 bis 7 Kohlenstoffatome enthält, die unsubstituiert oder substutuiert sind mit 1, 2 oder 3 Substituenten, die unabhängig ausgewählt sind aus Halogen, Halogen(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;- C&sub4;) Alkylcarbamoyl, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Di(C&sub1;-C&sub4;) Alkylamino oder einer Gruppe mit der Struktur -(CH&sub2;)a- R&sup7; worin a für 1, 2, 3 oder 4 steht und R&sup7; für Hydroxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Amino. Carbamoyl, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino oder Di(C&sub1;-C&sub4;)Alkylamino steht. Typische C&sub5;-C&sub7; Cycloalkylgruppen beinhalten Cyclopentyl, Cyclohexyl, Cycloheptyl, 3-Methylcyclopentyl, 4-Ethoxycyclohexyl, 5-Carboxycycloheptyl und 6- Chlorcyclohexyl und dergleichen.
Der Ausdruck "Heterocyclus" steht für einen unsubstituierten oder substituierten stabilen 5-7 gliedrigen monocyclischen oder 7-10 gliedrigen bicyclischen heterocyclischen Ring, der gesättigt ist und der aus Kohlenstoffatomen und 1-3 Heteroatomen besteht, ausgewählt aus der Gruppe, die aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel besteht, und worin die Stickstoff- und Schwefelheteroatome wahlweise oxidiert sein können und das Stickstoffheteroatom wahlweise quaternisiert sein kann und der eine bicyclische Gruppe umfaßt, worin jeder der oben definierten heterocyclischen Ringe mit einem Benzolring fusioniert ist. Der heterocyclische Ring kann an jedes Heteroatom oder Kohlenstoffatom gebunden sein, das zu einer stabilen Struktur führt. Der Heterocyclus ist unsubstituiert oder substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, Halogen(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;) Alkylcarbamoyl, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Di(C&sub1;-C&sub4;) Alkylamino oder einer Gruppe mit der Struktur -(CH&sub2;)a-R&sup7; worin a für 1, 2, 3 oder 4 steht, und R&sup7; für Hydroxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy-Carbonyl, Amino, Carbamoyl, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino oder Di(C&sub1;-C&sub4;)- Alkvlamino steht.
Der Ausdruck "ungesättigter Heterocyclus" steht für einen unsubstituierten oder substituierten stabilen 5-7 gliedrigen monocyclischen oder 7-10 gliedrigen bicyclischen heterocyclischen Ring, der eine oder mehrere Doppelbindungen aufweist und der besteht aus Kohlenstoffatomen und 1 bis 3 Heteroatomen ausgewählt aus der Gruppe, die aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel besteht und worin die Stickstoff und Schwefelheteroatome wahlweise oxidiert sein können, und das Stickstoffheteroatom wahlweise quarternisiert sein kann und eine bicyclische Gruppe enthalten ist, in der jeder der oben definierten heterocyclischen Ringe mit einem Benzolring verschmolzen ist. Der ungesättigte heterocyclische Ring kann an jedes Heteroatom oder Kohlenstoffatom gebunden sein, das zu einer stabilen Struktur führt. Der ungesättigte Heterocyclus ist unsubstituiert oder substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, die unabhängig ausgewählt werden aus Halogen, Halogen(C&sub1;-C&sub4;)Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy. C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;) Alkylcarbamoyl, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Di(C&sub1;-C&sub4;) Alkylamino oder einer Gruppe mit der Struktur -(CH&sub2;)a-R&sup7; worin a für 1, 2, 3 oder 4 steht, und R² für Hydroxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy. Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Amino, Carbamoyl, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino oder Di(C&sub1;-C&sub4;)-Alkylamino steht.
Beispiele für solche Heterocyclen und ungesättigte Heterocyclen sind unter anderem Piperidinyl, Piperazinyl, Azepinyl, Pyrrolyl, 4-Piperidonyl, Pyrrolidinyl, Pyrazolyl, Pyrazolidinyl, Imidazolyl, Imidazolinyl, Imidazolidinyl, Pyridyl, Pyrazinyl, Pyrimidinyl, Pyridazinyl, Oxazolyl, Oxazolidinyl, Isoxazolyl, Isoxazolidinyl, Morpholinyl, Thiazolyl, Tlüazolidinyl, Isothiazolyl, Chinuclidinyl, Isothiazolidinyl, Indolyl, Clünolinyl, Isochinolinyh Benzimidazolyl, Thiadiazolyl, Benzopyranyl, Benzothiazolyl, Benzoazolyl, Furyl, Tetrahydrofuryl, Tetrahydropyranyl, Thienyl, Benzothienyl, Thiamorpholinyl, Thiamorpholinylsulfoxid, Thiamorpholinylsulfon, Oxadiazolyl, Triazolyl, Tetrahydrochinolinyl, Tetrahydroisochinolinyl, 3-Methylimidazolyl, 3-Methoxypyridyl, 4-Chlorchinolinyl, 4- Aminothiazolyl, 8-Methylchinolinyl, 6-Chlorchinoxalinyl, 3-Ethylpyrridyl, 6-Methoxybenzimidazolyl, 4- Hydroxyfuryl, 4-Methylisochinolinyl, 6,8-Dibromchinolinyl, 4,8-Dimethylnaphthyl, 2-Methyl-1,2,3,4- Tetrahydroisochinolinyl, N-Methyl-chinolin-2-yl, 2-t-Butoxycarbonyl-1,2,3,4-isochinolin-7-yl und dergleichen.
"Aryl" steht für einen Phenyl- oder Naphthylring, der wahlweise mit 1, 2 oder 3 Substituenten substituiert ist, unabhängig ausgewählt aus Halogen, Morpholino(C&sub1;-C&sub4;)alkoy, Pyridyl(C&sub1;-C&sub4;)alkoxy, Halogen(C&sub1;-C&sub4;)alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;)Alkylcarbamoyl, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Di(C&sub1;-C&sub4;)-alkylamino oder einer Gruppe der Formel -(CH&sub2;)a-R&sup7; worin a für 1, 2, 3 oder 4 steht, und R&sup7; für Hydroxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Amino, Carbamoyl, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino oder Di(C&sub1;- C&sub4;)alkylamino steht. Typische Arylgruppen beinhalten 4-Methylphenyl, 3-Ethylnaphthyl, 2,5-Dimethylphenyl, 8-Chlornaphthyl, 3-Aminonaphthyl, 4-Carboxyphenyl und dergleichen.
"Heterocyclus(C&sub1;-C&sub4;)alkyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette mit ein bis vier Kohlenstoffatomen, wobei eine Heterocyclusgruppe daran gebunden ist. "Ungesättigter Heterocyclus(C&sub1;-C&sub4;)alkyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette mit ein bis vier Kohlenstoffatomen, wobei eine ungesättigte Heterocyclusgruppe daran gebunden ist. Typische Heterocyclus(C&sub1;-C&sub4;)alkyl- und ungesättigte Heterocyclus(C&sub1;-C&sub4;)alkylgruppen sind unter anderem Pyrrolylmethyl, Chinolinylmethyl, 1-Indolylethyl, 2-Furylethyl, 3-Thien-2-ylpropyl, 1-Imidazoiylisopropyl, 4-Thiazolylbutyl und dergleichen.
"Aryl(C&sub1;-C&sub4;)alkyl" steht für eine gerade oder verzweigte Alkylkette mit ein bis vier Kohlenstoffatomen mit einer daran gebundenen Arylgruppe. Typische Aryl(C&sub1;-C&sub4;)alkylgruppen sind unter anderem Phenylmethyl, 2- Phenylethyl, 3-Naphthylpropyi, 1-Naphthylisopropyl, 4-Phenylbutyl und dergleichen.
Die dritte Gruppe in der Definition von R³ umfaßt unsubstituiertes oder substituiertes Piperidinyl und unsubstituiertes und substituiertes Pyrrolidinyl, worin die Substituenten aus denen ausgewählt sind, die für R&sup5; und R&sup6; definiert sind, so daß die dritte Gruppe eine sterisch machbare stabile Struktur ist.
Der Ausdruck "Aminosäureseitenkette" steht für das bestimmte Atom oder die Gruppe, die an ein a- Kohlenstoffatom gebunden ist und ebenfalls eine Carboxylgruppe und eine Aminogruppe daran gebunden aufweist. Die Seitenketten werden aus denjenigen ausgewählt, die auf den folgenden Aminosäuren gefunden werden:
Alanin Ala
Arginin Arg
Asparagin Asn
Asparaginsäure Asp
Cystein Cys
Glutamin Gln
Glutaminsäure Glu
Glycin Gly
Histidin His
Isoleucin Ile
Leucin Leu
Lysin Lys
Methionin Met
Phenylalanin Phe
Prolin Pro
Serin Ser
Threonin Thr
Tryptophan Trp
Tyrosin Tyr
Valin Val
Der Ausdruck "Aminoschutzgruppe", wie er in der Beschreibung verwendet wird, bezieht sich auf Substituenten der Aminogruppe, die allgemein verwendet werden zum Blockieren oder zum Schutz der Aminofunktion, während andere funktionelle Gruppen der Verbindung umgesetzt werden. Beispiele für solche Aminoschutzgruppen beinhalten Formyl, Trityl, Phthalimido, Trichloracetyl, Chloracetyl, Bromacetyl, Iodacetyl oder Urethan-artige blockierende Gruppen wie Benzyloxycarbonyl, 4-Phenylbenzyloxycarbonyl, 2-Methylbenzyloxycarbonyl, 4-Methoxybenzyloxycarbonyl, 4-Fluorbenzyloxycarbonyl, 4-Chlorbenzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2,4-Dichlorbenzyloxycarbonyl, 4-Brombenzyloxycarbonyl, 3-Brombenzyloxycarbonyl. 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 4-Cyanobenzyloxycarbonyl, 2-(4-Xenyl)isopropoxycarbonyl-1,1-diphenyleth-L-yloxycarbonyl, 1,1-Diphenylprop-1-yloxycarbonyl, 2-Phenylprop-2-yloxycarbonyl, 2-(p-Toluyl)-prop-2-yloxycarbonyl, Cyclopentanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclopentanylorycarbonyl, Cyclohexanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-(4-Toluylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Methylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Triphenylphosphino)ethoxycarbonyl, Fluorenylmethoxycarbonyl ("FMOC"), 2-(Trimethylsilyl)- ethoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)prop-1-enyloxycarbonyl, 5-Benzisoxalylmethoxycarbonyl, 4-Acetoxybenzyloxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Ethinyl-2-propoxycarbonyl, Cyclopropylmethoxycarbonyl, 4-(Decyloxy)benzyloxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl, 1-Piperidyloxycarbonyl und dergleichen, oder Benzoylmethylsulfonyl, 2-Nitrophenylsulfenyl, Diphenylphosphinoxid und ähnliche Aminoschutzgruppen. Die Art der verwendeten Aminoschutzgruppe ist nicht entscheidend, solange die derivatisierte Aminogruppe unter den Bedingungen der folgenden Reaktion(en) an anderen Positionen des Zwischenprodukts stabil ist und selektiv im geeigneten Augenblick entfernt werden kann, ohne den Rest des Moleküls einschließlich aller anderen Aminoschtuzgruppe(n) zu zerstören. Bevorzugte Aminoschutzgruppen sind t-Butoxycarbonyl (t-BOC) und Benzyloxycarbonyl (CbZ). Weitere Beispiele für Gruppen, die mit den obigen Ausdrücken gemeint sind, werden beschrieben von J. W. Barton, "Protective Groups in Organic Chemistry", Herausgeber J. G. W. McOmie, Plenum Press. New York, N. Y., 1973, Kapitel 2 und T. W. Greene "Protective Groups in Organic Synthesis". John Wiley and Sons New York. N. Y., 1981, Kapitel 7.
Der Ausdruck "Carboxyschutzgruppe" wie er in der Beschreibung verwendet wird, bezieht sich auf Substituenten der Carboxygruppe, die herkömmlich zur Blockierung oder zum Schutz der Carboxyfunktion verwendet werden, während andere funktionelle Gruppen der Verbindung umgesetzt werden. Beispiele solcher Carboxyschutzgruppen beinhalten Methyl, p-Nitrobenzyl, p-Methylbenzyl, p-Methoxybenzyl, 3,4-Dimethoxybenzyl, 2,4-Dimethoxybenzyl, 2,4,6-Trimethoxybenzyl, 2,4,6-Trimethylbenzyl, Pentamethylbenzyl, 3,4-Methylen-dioxybenzyl, Benzhydryl, 4,4'-Dimethoxybenzhydryl, 2,2',4,4'-Tetramethoxybenzhydryl, t-Butyl, t-Amyl, Trityl, 4-Methoxytrityl, 4,4'-Dimethoxytrityl, 4,4',4"-Trimethoxytrityl, 2-Phenylprop-2-yl, Trimethylsilyl, t-Butyldimethylsilyl. Phenacyl, 2,2,2-Trichlorethyl, β-(Dibutylmethylsilyl)ethyl, p-Toluolsulfonylethyl, 4-Nitrobenzylsulfonylethyl, Allyl, Cinnamyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)prop-1-en-3-yl und ähnliche Reste. Eine bevorzugte Carboxyschutzgruppe ist Benzhydryl. Weitere Beispiele dieser Gruppen findet man in E. Haslam, "Protective Groups in Organic Chemistry", Herausgeber J. G. W. McOmie, Plenum Press, New York, N. Y., 1973, Kapitel 5, und T. W. Greene. "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley und Sons, New York, N. Y., 1981, Kapitel 5.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können 4 asymmetrische Zentren haben, wie dies durch die Sterne in folgender Formel gezeigt ist:
Als Folge dieser asymmetrischen Zentren, können die Verbindungen der vorliegenden Erfindung als Diastereomerengemische, racemische Gemische und einzelne Enantiomere auftreten. Alle asymmetrischen Formen, einzelne Isomere und Kombinationen hiervon liegen innerhalb des Schutzumfangs der vorliegenden Erfindung.
Wie oben angemerkt, beinhaltet die Erfindung pharmazeutisch annehmbare Salze der in Formel I definierten Verbindungen. Obwohl im allgemeinen neutral, kann eine erfindungsgemäße Verbindung eine ausreichend saure, eine ausreichend basische, oder beide funktionelle Gruppen aufweisen, und folglich mit vielen anorganischen Basen, anorganischen und organischen Säuren reagieren, um ein pharmazeutisch annehmbares Salz zu bilden.
Der Ausdruck "pharmazeutisch annehmbares Salz" wie er hier verwendet wird, bezieht sich auf Salze der Verbindungen der obigen Formel, die im wesentlichen nicht toxisch gegenüber lebenden Organismen sind. Typische pharmazeutisch annehmbare Salze beinhalten die Salze, die durch die Umsetzung der erfindungsgemäßen Verbindungen mit einer Mineralsäure oder organischen Säure oder einer anorganischen Base hergestellt werden. Solche Salze sind als Säureadditions- und Basenadditionssalze bekannt.
Säuren, die im allgemeinen zur Bildung von Säureadditionssalzen verwendet werden, sind anorganische Säuren wie Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Iodwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure und dergleichen, und organische Säuren wie p-Toluolsulfonsäure, Methansulfonsäure, Oxalsäure, p-Bromphenylsulfonsäure, Kohlensäure, Bernsteinsäure, Citronensäure, Benzoesäure, Essigsäure und dergleichen.
Beispiele für solche pharmazeutisch annehmbaren Salze sind Sulfat, Pyrosulfat, Bisulfat, Sulfit, Bisulfit, Phosphat, Monohydrogenphosphat, Dihydrogenphosphat, Metaphosphat, Pyrophosphat, Chlorid, Bromid, Iodid, Acetat, Propionat, Decanoat, Caprylat, Acrylat, Formiat, Isobutyrat, Caproat, Heptanoat, Propiolat, Oxalat, Malonat, Succinat, Suberat, Sebacat, Furnarat, Maleat, Butin-1,4-dioat, Hexin-1,6-dioat, Benzoat, Chlorbenzoat, Methylbenzoat, Dinitrobenzoat, Hydroxybenzoat, Methoxybenzoat, Phthalat, Sulfonat, Xylolsulfonat, Phenylacetat, Phenylpropionat, Phenylbutyrat, Citrat, Laktat, γ-Hydroxybutyrat, Glycolat, Tartrat, Methansulfonat, Propansulfonat. Naphthalin-1-sulfonat, Naphthalin-2-sulfonat, Mandelat und dergleichen. Bevorzugte pharmazeutisch annehmbare Säureadditionssalze sind solche, die mit Mineralsäuren gebildet werden wie Chlorwasserstoffsäure und Bromwasserstoffsäure, und solche die mit organischen Säuren wie Maleinsäure und Methansulfonsäure gebildet werden.
Basenadditionssalze beinhalten solche, die von anorganischen Basen, wie Ammonium- oder Alkali- oder Erdalkalimetallhydroxiden, -carbonaten, -bicarbonaten und dergleichen stammen. Beispiele für Basen, die für die Bildung der Salze dieser Erfindung nützlich sind, beinhalten daher Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Ammoniumhydroxid, Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat, Natriumbicarbonat, Kaliumbicarbonat, Calciumhydroxid, Calciumcarbonat und dergleichen. Die Kalium- und Natriumsalzformen werden besonders bevorzugt.
Es sollte darauf geachtet werden, daß das einzelne Gegenion, das einen Teil jedes Salzes dieser Erfindung bildet, nicht entscheidend ist, so lange das Salz als Ganzes pharmakologisch annehmbar ist und solange das Gegenion keine unerwünschten Eigenschaften für das Salz als Ganzes verursacht.
Bevorzugte erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel
worin
R&sup0; für Wasserstoff oder C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl steht.
R für Aryl oder einen ungesättigten Heterocyclus steht,
R² für -CH(CH&sub3;)&sub2;, -CH&sub2;-C(O)NH&sub2; oder -CH&sub2;-Imidazol-4-yl steht,
R¹ für Aryl oder -S-R1x steht, worin R1x für Aryl steht,
X steht für
und
R3a für -C(O)NH(t-butyl) steht,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Von diesen bevorzugten Verbindungen sind noch bevorzugtere die Verbindungen, worin
R&sup0; für t-Butoxycarbonyl steht,
R für Naphth-1-yl, Phenyl oder Indol-3-yl steht,
R² für -CH&sub2;-C(O)NH&sub2; steht.
R¹ für Phenyl steht, und
Y für Phenyl steht
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Die am meisten bevorzugten Verbindungen sind:
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-phenyl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(imidazol-1-ylmethyl)-9- N(t-butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid, oder
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Die folgende Liste der Verbindungen wird bereitgestellt, um die Verbindungen der Formel I weiter zu erläutern, die innerhalb des Schutzumfangs der Erfindung eingeschlossen sind:
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydrory-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-6,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Eutyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- amino-10-naphth-2-yl] decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-naphthylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9- amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylethyl)-9- amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R* )]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carboxymethyl)-9-amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,6S*)]-N-t-Butyl-2-[2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(methyl)-9-amino-10- naphth-1-yl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylethyl)-9-amino- 10-naphth-1-yl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- amino-10-chinolin-2-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylethyl)-9- amino-10-chinolin-1-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(2-methylpropyl)-9- amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- amino-10-benzothien-2-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(isopropyl)-9-amino-10- benzothien-2-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(cyano)-9-amino-10- benzothien-3-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*.9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-napth-1-ylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(cyano)-9-amino- 10-benzothien-3-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(isopropyl)-9-amino- 10-benzothien-3-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbaxnoylmethyl)-9- amino-10-benzothien-3-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-napthylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carboxynethyl)-9- amino-10-naphdi-1-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-naphthylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carboxymethyl)-9- amino-10-indol-2-yl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- N-(t-butoxycarbonyl)-amino-10-naphth-2-yl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-naphthylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-9-N-(t- butoxycarbonyl)-amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(thiolmethyl)-9-N-(t- butoxycarbonyl)-amino-10-phenyl]decylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- N-(t-butoxycarbonyl)-amino-9-naphth-1-yl]nonylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylpropyl)-9-N- (t-butoxycarbonyl)-amino-9-naphth-1-yl]nonylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-naphthylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(imidazol-4-ylmethyl)-9- N-(t-butoxycarbonyl)-amino-9-indol-3-yl]nonylbenzamid.
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(imidazol-4-ylmethyl)-9- amino-9-naphth-2-yl]nonylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-naphthylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(cyanomethyl)-9-N-(t- butoxycarbonyl)-amino-9-indol-3-yl]nonylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-naphthylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carboxymethyl)-9-N-(t- butoxycarbonyl)-amino-9-indol-3-yl]nonylbenzamid,
[2R-(2R*,3S*,6S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(hydroxymethyl)-9-N- (ethoxycarbonyl)-amino-9-naphth-1-yl]nonylbenzamid, und
[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-naphthylthiomethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-hydroxyethyl)-9- N-(propoxycarbonyl)-amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können gemäß den unten im Reaktionsschema I gezeigten Verfahren hergestellt werden. Reaktionsschema I:
worin
Rb für eine Aminoschutzgruppe steht, und
R, R&sup0;, R¹, R², n und X wie oben für Formel I definiert sind.
Das obige Reaktionsschema I wird durch Ausführen der Reaktionen 1-4 in aufeinanderfolgender Reihenfolge erreicht. Wenn eine Reaktion vollständig ist, kann die Zwischenproduktverbindung erforderlichenfalls durch in der Technik bekannte Verfahren isoliert werden, beispielsweise kann die Verbindung kristallisiert und dann durch Filtration gewonnen werden oder das Reaktionslösemittel kann durch Extraktion, Verdampfung oder Dekantierung entfernt werden. Die Zwischenproduktverbindung kann weiter gereinigt werden, falls gewünscht duch herkömmliche Techniken, wie Kristallisation oder Chromatographie über feste Träger, wie Silicagel oder Aluminiumoxid, bevor der nächste Schritt des Reaktionsschemas ausgeführt wird.
Die Reaktion I.1 ist eine Standardkupplungsreaktion, die bei der Synthese von Peptiden herkömmlich verwendet wird, die durch Umsetzung eines geeignet substituierten Amins der Formel IA mit einem aminogeschützten Aminosäurereaktanden in einem aprotischen Lösemittel oder Lösemittelgemisch ausgeführt wird. Die Reaktion wird in Gegenwart oder in Abwesenheit eines Promotors, vorzugsweise in Gegenwart eines Promotors und in Gegenwart eines Kupplungsmittels durchgeführt. Typische aprotische Lösemittel für diese Reaktion sind Tetrahydrofuran und Dimethylformamid, vorzugsweise ein Gemisch solcher Lösemittel. Die Reaktion wird bei einer Temperatur von etwa -30ºC bis etwa 25ºC durchgeführt. Der Aminreaktand wird im allgemeinen in äquimolaren Mengen relativ zum Carbonsäurereaktanden in Gegenwart einer äquimolaren Menge bis zu einem leichten Überschuß des Kupplungsreagenzes verwendet. Typische Kupplungsreagenzien sind unter anderem die Carbodiimide, wie Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) und N,N'-Diethylcarbodiimid, die Imidazole, wie Carbonyldiimidazol, wie auch Reagentien, wie Bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)phosphinchlorid (BOP-Cl) oder N-Ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydrochinolin (EEDQ). Ein bevorzugtes Kupplungsreagenz für diese Reaktion ist DCC. Es kann ein Promotor für diese Reaktion einbezogen werden, wobei ein bevorzugter Promotor Hydroxybenzotriazolhydrat (HOBT · H&sub2;O) ist.
Die Reaktion I.2 ist eine Standardaminoschutzgruppenabspaltungsreaktion mittels Verfahren und Methoden, die in der Technik bekannt sind. Beispielsweise kann die Aminoschutzgruppe Rb mittels einer staken Säure, vorzugsweise Trifluoressigsäure entfernt werden.
In Reaktion I.3 wird die in Reaktion I.2. hergestellte Aminverbindung an einen Carbonsäurereaktanden der folgenden Formel gekuppelt:
worin n und R&sup0; wie oben in Forme I definiert sind. Die Reaktion I.3 wird im wesentlichen gemäß dem oben in Reaktion I.1 beschriebenen Verfahren ausgeführt.
Die Reaktion I.4. ist eine optionale Aminoschutzgruppenabspaltungsreaktion, die gemäß in der Technik bekannter Verfahren und Methoden ausgeführt wird.
Ein Fachmann ist in der Lage, die Reihenfolge der obigen Reaktionen unter Verwendung der geeigneten Amino- und Carboxyschutzgruppen zu verändern. Beispielsweise kann eine carboxygeschützte Aminosäure, wie sie oben in Reaktion I.1 verwendet wird, mit einem Carbonsäurereaktanden der folgenden Formel im wesentlichen gemäß dem oben beschriebenen Verfahren gekuppelt werden:
worin n, R und R&sup0; wie in Formel I definiert sind. Die entstehende Dipeptidverbindung wird dann vor der Kupplung an den Aminreaktanden IA einer Schutzgruppenabspaltung unterzogen.
Eine alternative Route zu Verbindungen der Formel I kann durch Kupplung eines aminogeschützten Reaktanden mit folgender Struktur
worin
n und R wie oben in Formel I definiert sind und
Rb für eine Aminoschutzgruppe steht,
mit der in Reaktion I.2 hergestellten Verbindung im wesentlichen gemäß dem oben beschriebenen Verfahren, gefolgt von einer Aminoschutzgruppenabspaltung und einer Acylierung mit einem geeigneten Acylhalogenid, Isocyanat oder Chlorformiat, vorzugsweise in Gegenwart eines Säurefängers, wie eines tertiären Amins, erhalten werden. Ein bevorzugter Säurefänger ist Triethylamin. Die Acylierungsreaktion wird bei einer Temperatur von etwa -20ºC bis etwa 25ºC ausgeführt. Typische Lösemittel für diese Reaktion sind unter anderem Ether und chlorierte Kohlenwasserstoffe, vorzugsweise Diethylether, Chloroform oder Methylenchlorid.
Die Verbindungen der Formel IA, worin X für eine Gruppe der folgenden Formel steht
können gemäß den im folgenden Reaktionschema A gezeigten Verfahren hergestellt werden. Reaktionsschema A
worin
Rb, R¹, R3a und Y wie oben definiert sind.
Das obige Reaktionsschema A wird durch Ausführung der obigen chemischen Reaktionen in aufeinanderfolgender Reihenfolge erreicht. Wenn eine Reaktion vollständig ist, kann die Zwischenproduktverbindung erforderlichenfalls durch in der Technik bekannte Verfahren isoliert werden, beispielsweise kann die Verbindung kristallisiert und dann durch Filtration gewonnen werden oder das Reaktionslösemittel kann durch Extraktion, Verdampfung oder Dekantierung entfernt werden. Die Zwischenproduktverbindung kann weiter gereinigt werden, falls gewünscht durch herkömmliche Techniken, wie Kristallisation oder Chromatographie über feste Träger, wie Silicagel oder Aluminiumoxid, bevor der nächste Schritt des Reaktionsschemas ausgeführt wird.
In Reaktion A.1 wird diese Reaktion typischerweise durch Aktivierung ausgeführt, das heißt Umwandlung einer geeignet substituierten Aryl-, Heterocyclus- oder ungesättigten Heterocycluscarbonsäure zum entsprechenden Acylchlorid oder Acylbromid durch die Umsetzung mit Thionylchlorid, Thionylbromid, Phosphortrichlorid. Phosphortribromid, Phosphorpentabromid oder Phosphorpentachlorid gemäß den Verfahren und unter Bedingungen die in der Technik bekannt sind. Geeignete Aryl-, Heterocyclus- oder ungesättigte Heterocycluscarbonsäureverbindungen sind im Handel erhältlich oder können durch in der Technik bekannte Verfahren hergestellt werden.
In Reaktion A.2 wird das Acylchlorid oder Acylbromid, das in Reaktion A.1 hergestellt wurde, mit Ammoniak oder einem primären oder sekundären Amin der Formel
H-NR&sup4;R&sup4;
oder
worin R&sup4;, R&sup5;, R&sup6; und p wie oben für Formel I definiert sind, in einem nicht polaren aprotischen Lösemittel oder Lösemittelgemisch in Gegenwart oder Abwesenheit eines Säurefängers unter Bildung des entsprechenden Amids umgesetzt. Die Reaktion wird typischerweise bei Temperaturen von etwa -20ºC bis etwa 25ºC ausgeführt. Typische Lösemittel für diese Reaktion sind Ether und chlorierte Kohlenwasserstoffe, vorzugsweise Diethylether, Chloroform oder Methylenchlorid. Diese Reaktion wird vorzugsweise in Gegenwart eines Säurefängers, wie einem tertiären Amin, vorzugsweise Triethylamin, ausgeführt.
In Reaktion A.3 wird das in Reaktion A.2 hergestellte Amid mit einer starken Base in Gegenwart eines Solubilisierungsmittels unter Bildung des entsprechenden Anions umgesetzt, das dann in Reaktion A.4 mit einem Acylierungsmittel, wie einem Weinrebamid unter Bildung eines Ketons umgesetzt wird. Die Reaktion A.3 wird in einem aprotischen Lösemittel bei einer Temperatur von etwa -78ºC bis etwa 0ºC ausgeführt. Typische Basen, die in Reaktion A.3 verwendet werden, sind Litiumamidbasen und Alkyllithiumbasen, vorzugsweise C&sub1;-C&sub4; Alkyllithiumbasen und Lithium-di(C&sub1;-C&sub4;)alkylamidbasen. Typische Solubilisierungsmittel für die Reaktion A.3 sind Tetramethyl(C&sub1;-C&sub4;)alkylendiamin, vorzugsweise Tetramethylethylendiamin. Die Reaktion A.4 wird in einem aprotischen Lösemittel bei einer Temperatur von etwa -80ºC bis etwa -40ºC ausgeführt. Typische Lösemittel für die Reaktionen A.3 und A.4 umfassen Ether, vorzugsweise Tetrahydrofuran. In Reaktion A.4 wird das Anion im allgemeinen in einer Menge von etwa äquimolaren Mengen bis etwa einem dreifachen molaren Überschuß des Anions, vorzugsgweise in etwa einem zweifachen molaren Überschuß des Anions relativ zum Weinrebamidreaktanden verwendet.
In Reaktion A.5 wird das in Reaktion A.4 hergestellte Keton unter Verwendung eines geeigneten Reduktionsmittels zum entsprechenden Alkohol reduziert. Die Reaktion wird in einem protischen Lösemittel bei einer Temperatur von etwa -25ºC bis etwa 25ºC ausgeführt. Typische Reduktionsmittel für diese Reaktion sind unter anderem Natriumborhydrid, Lithiumborhydrid, Diisobutylaluminiumhydrid und Natrium(bis(2-methoxyethoxy)aluminiumhydrid. Ein bevorzugtes Reduktionsmittel ist Natriumborhydrid. Typische protische Lösemittel für diese Reaktion sind unter anderem Alkohole, vorzugsweise Ethanol.
Die Reaktion A.6 ist eine Standardaminoschutzgruppenreaktion mittels Verfahren und Methoden, die im Stand der Technik bekannt sind, um das entsprechende Amin der Formel IA zu erhalten, das dann in der Kupplungsreaktion I.1 umgesetzt wird. Der Aminreatand IA kann ohne Reinigung umgesetzt werden, wird aber vorzugsweise zuerst gereinigt.
Die Verbindungen der Formel IA, worin X für eine Gruppe der folgenden Struktur steht
werden gemäß den unten in Reaktionsschema B gezeigten Verfahren hergestellt. Reaktionsschema B
worin
Rb, R¹, Y und R3b wie oben definiert sind.
Das obige Reaktionsschema B wird durch die Ausführung der Reaktionen 1-7 in aufeinanderfolgender Reihenfolge erreicht. Wenn eine Reaktion vollständig ist, kann die Zwischenproduktverbindung erforderlichenfalls durch in der Technik bekannte Verfahren isoliert werden, beispielsweise kann die Verbindung kristallisiert und dann durch Filtration gewonnen werden oder das Reaktionslösemittel kann durch Extraktion. Verdampfung oder Dekantierung entfernt werden. Die Zwischenproduktverbindung kann weiter gereinigt werden, falls gewünscht durch herkömmliche Techniken, wie Kristallisation oder Chromatographie über feste Träger, wie Silicagel oder Aluminiumoxid, bevor der nächste Schritt des Reaktionsschemas ausgeführt wird.
In Reaktion B.1 wird ein geeignet substituiertes Aryl oder ungesättigtes Heterocyclusamin unter Standardbedingungen geschützt, die mit in der Technik bekannten Aminoschutzgruppen verwendet werden. Die Reaktionen B.2 bis B.5 werden im wesentlichen ausgeführt, wie dies oben in Reaktionsschema A.3-A.6 beschrieben ist, mit der Ausnahme, daß in Reaktionsschema B eine zusätzliche Schutzgruppenabspaltungsreaktion, nämlich die Reaktion B.5. notwendig ist, um die in Reaktion B.1 eingeführte Aminoschutzgruppe zu entfernen. Dies ist eine Standardaminoschutzgruppenabspaltungsreaktion mittels in der Technik bekannter Verfahren und Methoden. Beispielsweise kann die in Reaktionsschema B.1 gezeigte Boc-Gruppe mittels einer starken Säure, vorzugsweise Trifluoressigsäure, entfernt werden.
In Reaktion B.6 wird das gezeigte Zwischenprodukt mit einem geeigneten Acylhalogenid, Isocyanat oder Chlorformiat, vorzugsweise in Gegenwart eines Säurefängers, wie eines tertiären Amins, vorzugsweise Triethylamin, acyliert. Die Reaktion wird bei einer Temperatur von etwa -20ºC bis etwa 25ºC ausgeführt. Typische Lösemittel für diese Reaktion sind unter anderem Ether und chlorierte Kohlenwasserstoffe, vorzugsweise Diethylether. Chloroform oder Methylenchlorid.
Die Reaktion B.7 ist eine Standardaminoschutzgruppenabspaltungsreaktion mittels Verfahren und Methoden, die in der Technik bekannt sind, um das entsprechende Amin der Formel IA zu erhalten, das dann in der obigen Reaktion I.1 umgesetzt wird. Der Aminreaktand IA kann ohne Reinigung umgesetzt werden, wird aber vorzugsweise zuerst gereinigt.
Die Reaktion C.7 ist eine Standardaminoschutzgruppenabspaltungsreaktion mittels Verfahren und Methoden, die im Stand der Technik bekannt sind, tun das entsprechende Amin zu erhalten, das in der obigen Reaktion I.1 verwendet werden kann.
Das als Reaktand in der Reaktion A.4 und B.3 verwendete Weinrebamid kann durch Umsetzung einer aminogeschützten Aminosäure mit N-Methoxy-N-methylamin in Gegenwart eines Promotors, eines Säurefängers und eines Kupplungsmittels hergestellt werden. Die Reaktion wird in einem aprotischen Lösemittel oder Lösemittelgemisch bei einer Temperatur von etwa -25ºC bis 25ºC ausgeführt. Ein bevorzugter Promotor für diese Reaktion ist HOBT · H&sub2;O. Bevorzugte Säurefänger sind tertiäre Alkylamine, vorzugsweise Triethylamin oder N- Methylmorpholin. Ein bevorzugtes Kupplungsmittel ist Ethyldimethylaminopropylcarbodiimidhydrochlorid. Das durch diese Reaktion erhaltene Weinrebamid wird vorzugsweise vor der Verwendung in den Reaktionen A.4 und B.3 isoliert.
Die Verbindungen der Formel IA. worin R¹ für eine Gruppe mit der Struktur S-R1x steht, worin R1x für Aryl oder C&sub5;-C&sub7; Cycloalkyl steht, werden mittels eines Weinrebamids in den Reaktionen A.4 und B.3 hergestellt, das die folgende Struktur hat:
worin
R¹ und Rb wie oben definiert sind.
Dieses Weinrebamid kann im wesentlichen gemäß dem in Vederas et al.. J. Am. Chem.Soc., 107, 7105- 7109 (1985) beschriebenen Reaktionsschema hergestellt werden. Genauer gesagt wird dieses Reaktionsschema ausgeführt, indem man erst ein aminogeschütztes Serin mit Triphenylphosphin, Demethylazodicarboxylat (DMAD) oder Diethylazodicarboxylat (DEAD) in einem aprotischen Lösemittel bei einer Temperatur von etwa -80ºC bis 0ºC unter Bildung des entsprechenden β-Lactons ausführt. Die Reaktion wird typischerweise in einem Ether ausgeführt, wie Tetrahydrofuran bei einer Temperatur von etwa -80ºC bis -50ºC. Als nächstes wird der Lactonring unter Bildung einer Verbindung mit der folgenden Struktur
durch die Umsetzung des Lactons mit einem geeignet substituierten Thioanion mit der Struktur -S-R¹ geöffnet, worin R¹ wie oben für Formel I definiert ist. Die Thioanionverbindung wird vorzugsweise durch die Umsetzung des entsprechenden Thiols mit einer starken Base, wie Natriumhydrid oder Kaliumhydrid gebildet. Diese Reaktion wird typischerweise in einem aprotischen Lösemittel bei einer Temperatur von etwa 0ºC bis etwa 40ºC und unter einer inerten Atmosphäre, wie Stickstoff ausgeführt. Typische Lösemittel für diese Reaktion sind unter anderem Ether, vorzugsweise Tetrahydrofuran. Der gewünschte Amidreaktand wird dann durch die Umsetzung des entstehenden Carbonsäurereaktanden mit N-Methoxy-N-methylamin in Gegenwart eines Promotors, eines Säurefängers und eines Kupplungsmittels im wesentlichen so gebildet, wie dies oben beschrieben ist.
Die Carbonsäurereaktanden, welche bei der im Reaktionsschema I.1 beschriebenen Kupplungsreaktion verwendet werden, werden mittels in der Technik bekannter Verfahren hergestellt, sofern sie nicht im Handel erhältlich sind.
Selbstverständlich sollen bei der Durchführung der oben angegebenen Verfahren zweckmäßigerweise chemische Schutzgruppen in die Reaktanden eingeführt werden, um zu verhindern daß sekundäre Reaktionen stattfinden. Alle Amin-, Alkylamin- oder Carboxylgruppen, die in den Reaktanden vorkommen, können durch jede Standard-Amino- oder Carboxyschutzgruppe geschützt werden, die die Fähigkeit des restlichen Moleküls zur Reaktion in der gewünschten Weise nicht nachteilig beinflussen. Bevorzugte Aminoschutzgruppen sind t-Boc und Cbz. Eine bevorugte Carboxyschutzgruppe ist Benzhydryl. Die verschiedenen Schutzgruppen können dann gleichzeitig oder schrittweise mittels Verfahren des Stands der Technik entfernt werden.
Wie oben angemerkt sind alle asymmetrischen Formen, einzelnen Isomere und Kombinationen hiervon Teil dieser Erfindung. Solche Isomere können aus ihren jeweiligen Vorläufern durch die oben angegebenen Verfahren oder durch Trennung der razemischen Gemische oder durch Trennung der Diastereomere hergestellt werden. Diese Trennung kann in Gegenwart eines Trennmittels, durch Chromatographie oder durch wiederholte Kristallisation oder durch Kombinationen dieser Techniken des Stands der Technik ausgeführt werden. Weitere Details in Bezug auf diese Trennungen findet man bei Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions, John Wiley & Sons 1981.
Die als Ausgangsmaterialien bei der Synthese der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendeten Verbindungen sind bekannt und können, sofern sie nicht im Handel erhältlich sind, durch Verfahren des Stands der Technik synthetisiert werden.
Die pharmazeutisch annehmbaren Salze der Erfindung werden typischerweise durch Umsetzung einer Verbindung der Formel I mit einer äquimolaren oder überschüssigen Menge an Säure oder Base gebildet. Die Reaktanden werden im allgemeinen in einem gemeinsamen Lösemittel vereinigt, wie Diethylether oder Benzol für Säureadditionssalze, oder Wasser oder Alkohole für Basenadditionssalze. Die Salze fallen normalerweise etwa innerhalb einer Stunde bis zu etwa 10 Tagen aus der Lösung aus und können durch Filtration oder andere herkömmliche Methoden isoliert werden.
Die folgenden Präparationen und Beispiele erläutern weiterhin spezifische Aspekte der vorliegenden Erfindung. Selbstverständlich dienen diese Beispiele nur der Erläuterung und sollen den Schutzumfang der Erfindung in keinem Aspekt beschränken.
In den folgenden Präparationen und Beispielen werden die Ausdrücke Schmelzpunkt, magnetische Kernresonanzspektroskopie, Elektronenstoßmassenspektroskopie, Felddesorptionsmassenspektroskopie, schnelle Atombeschußmassenspektroskopie, Infrarotspektroskopie, Ultraviolettspektroskopie, Elementaranalyse, Hochleistungsflüssigchromatographie und Dünnschichtchromatographie jeweils folgendermaßen abgekürzt "SMP", "NMR", "EIMS". "MS (FD)". "MS (FAB)", "IR", "UV", "Analyse". "HPLC", und "DC". Ferner sind für die IR Spektren nur die angegebenen Absorptionsmaxima von Interesse, und nicht alle beobachteten Maxima.
Im Zusammenhang mit den NMR Spektren werden die folgenden Abkürzungen verwendet: "s" für Singlett. "d" für Dublett, "dd" für ein Dublett an Dubletts. "t" für Triplett, "q" für Quartett, "m" für ein Multiplett. "dm" für ein Dublett an Multipletts und "br.s", "br.d", "br.t", und "br.m" stehen jeweils für breite Singletts, Dubletts, Tripletts und für Multipletts. "J" steht für die Kopplungskonstante in Hertz (Hz). Falls nichts anderes angegeben ist, beziehen sich die NMR Daten auf die freie Base der untersuchten Verbindung.
Die NMR Spektren werden auf einem Bruker Corp. 270 MHz Gerät oder auf einem General Electric QE- 300 300 MHz Gerät erhalten. Die chemischen Verschiebungen werden in Delta (δ) Werten (Teile pro Million unterhalb von Tetramethylsilan) angegeben. MS(FD) Spektren werden unter Verwendung von Kohlenstoffdendritemittern auf einem Varian-MAT 731 Spektrometer aufgenommen. EIMS Spektren werden auf einem CEC 21-110 Gerät von der Consolidated Electrodynamics Corporation erhalten. MS(FAB) Spektren werden auf einem VG ZAB- 3 Spektrometer erhalten. IR Spektren werden auf einem Perkin-Elmer 281 Gerät erhalten. UV Spektren werden auf einem Cari 118 Gerät erhalten. Die DC wird auf E. Merck Silicagelplatten ausgeführt. Die Schmelzpunkte sind nicht korrigiert.

Präparation 1

A. N-t-Butyl-2-methylbenzamid

Zu einer kalten (0ºC) Lösung aus 139,2 g (0,9 mol) o-Toluoylchlorid in 1200 ml Methylenchlorid werden bei 25ºC unter Stickstoff langsam 180,0 g (1,8 mol) Triethylamin gefolgt von der tropfenweise Zugabe einer Lösung gegeben, die 73,14 g (1,0 mol) t-Butylamin in 200 ml Methylenchlorid enthält. Das entstehende Reaktionsgemisch wird auf Raumtemperatur erwärmt und kann für 2,5 Stunden reagieren. Das Reaktionsgemisch wird dann mit 1800 ml Wasser verdünnt. Die entstehenden organischen und wäßrigen Phasen werden getrennt und die organische Phase wird nacheinander mit 2 N Natriumhydroxid, 1,0 N Chlorwasserstoffsäure und Kochsalzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung von 167,6 g eines nicht ganz weißen Feststoffs bis zur Trockne eingedampft (Smp 77-78ºC).
Ausbeute: 97%
¹H NMR (CDCl&sub3;): δ 1,41 (s, 9H), 2,41 (s, 3H), 5,54 (br s, 1H), 7,13-7,30 (m, 4H)
IR (CHCl&sub3;): 3430, 3011, 2971, 2932, 1661, 1510, 1484, 1452, 1393, 1366, 1304, 1216, 876 cm&supmin;¹.
MS(FD): m/e 191 (M&spplus;) 191 (100).
Analyse für C&sub1;&sub2;H&sub1;&sub7;NO:
Berechnet: C 75,35, H 8,76, N 7,32
Gefunden: C 75,10, H 9,11, N 7,20

B. (S)-N-t-Butyl-2-(3-(N-benzylcarbonyl)amino-2-oxo-4-phenylbutyl)benzamid

Zu einer Lösung aus 7,0 g (36,5 mmol) des Zwischenprodukts von Präparation 1A in 200 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran werden 12,1 ml (80,3 mmol) N,N,N,N'-Tetramethylethylendiamin (TMEDA) über eine Spritze gegeben. Die entstehende Lösung wird auf -78ºC abgekühlt und dann werden 55,9 ml sek-Butyllithium tropfenweise über eine Spritze zugegeben, wobei die Temperatur der Reaktion unter -60ºC gehalten wird. Die entstehende Reaktionslösung kann dann für etwa 1 Stunde bei -78ºC rühren bevor die Zugabe einer Lösung erfolgt, die 5,00 g (14,6 mmol) (S)-N-Methoxy-N-methyl-2-(N-phenylmethyloxycarbonyl)amino-3-phenylpropanamid in 50 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran über eine Kanüle erfolgt, wobei die Reaktionstemperatur unter -65ºC gehalten wird. Das entstehende Reaktionsgemisch wird auf -20ºC erwärmt, mit 20 ml gesättigtem Ammoniumchlorid gestoppt und dann mit 200 ml Diethylether verdünnt. Die entstehenden Phasen werden getrennt und die organische Phase wird nacheinander mit Wasser, 0,2 N Natriumhydrogensulfat und Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung eines farblosen Öls eingedampft. Dieses Öl wird mittels Blitzchromatographie (Eluent 25% Ethylacetat in Methylenchlorid) unter Bildung von 6,08 g eines farblosen Schaums gereinigt.
Ausbeute: 88%
[α]D = -289,26º (c = 0,12, MeOH)
¹H NMR (CDCl&sub3;) δ 1,38 (s, 9H), 2,99 (dd, J = 15,6 Hz, 1H), 3,24 (dd, J = 15,6 Hz. 1H), 3,89 (d, J = 18 Hz, 1H, 4,16 (d, J = 18 Hz, 1H), 4,72 (dd, J = 15,6 Hz, 1H), 5,00-5,09 (m, 2H), 5,56 (d, J = 6 Hz, 1H), 5,93 (br s, 1H), 7,03-7,40 (m, 14H).
IR (CHCl&sub3;): 3431, 3027, 3012, 2973, 1713, 1658, 1511, 1454, 1383, 1366, 1307, 1231, 1046 cm&supmin;¹.
MS(FD): m/e = 172 (M&spplus;) 218 (100).
Analyse für C&sub2;&sub9;H&sub3;&sub2;N&sub2;O&sub4;:
Berechnet: C 73,70, H 6,82, N 5,93.
Gefunden: C 73,41, H 6,98, N 5,83.

C. [2R-(2R*,3S*))-N-t-Butyl-2-(3-(N-benzylcarbonyl)amino-2-hydroxy-4-phenylbutyl)benzamid

Zu einer Lösung aus 6,96 g (14,7 mmol) des Zwischenprodukts von Präparation 1B in 200 ml absolutem Ethanol werden unter Stickstoff 2,78 g (73,5 mmol) Natriumborhydrid gegeben. Wenn die Reaktion im wesentlichen vollständig ist, wie dies durch DC angezeigt wird, wird das Reaktionsgemisch mit 200 ml Ethylacetat verdünnt und durch die tropfenweise Zugabe von 20 ml gesättigtem Ammoniumchlorid gestoppt. Die organischen und wäißrigen Phasen werden getrennt und die organische Phase wird nacheinander mit 1 N Chlorwasserstoffsäure, gesättigter Natriumbicarbonatlösung und Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und dann unter verringertem Druck unter Bildung von 6,4 g eines farblosen Öls eingedampft. Mittels ¹H NMR wird dieses Öl als 9 : 1 Gemisch der Diastereomeren bestimmt. Dieses Öl wird mittels Blitzchromatographie (Gradientenelution von 2-10% Methylenchlorid in Ethylacetat) unter Bildung von 5,12 g des Zwischenprodukts gereinigt.
Ausbeute: 74%
[α]D = +10,38º (c = 0,10, MeOH).
¹H NMR (CDCl&sub3;), δ 1,40 (s, 9H), 2,79 (dd, J = 12,3 Hz. 1H), 2,90-2,98 (m, 2H), 3,04 (44, J = 12, 3 Hz, 1H) 3,70-3,81 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 4,96-5,08 (m, 2H), 5,10 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 6 Hz, 1H), 5,93, (s, 1H), 7,13-7,42 (m, 14H).
IR (CHCl&sub3;): 3431, 3028, 3012, 2971, 1773, 1643, 1515, 1454, 1367, 1229, 1028 cm&supmin;¹.
MS (FD): m/e 475 (M&spplus;), 475 (100).
Analyse für C&sub2;&sub9;H&sub3;&sub4;N&sub2;O&sub4;:
Berechnet: C 73,39, H 7,22, N 5,99.
Gefunden: C 73,12, H 7,48, N 5,62.

D. [2R-(2R*,3S*)]-N-t-Butyl-[2-(3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutyl)benzamid

Es wird eine Suspension hergestellt, die 41,0 g (120 mmol) des Zwischenprodukts von Präparation 1C und 500 mg 10% Palladium auf Kohle in 1560 ml absolutem Ethanol enthält. Diese Suspension wird unter 60 psi Wasserstoff in einem Parr-Schüttelgerät geschüttelt. Die 10% Palladium auf Kohle Katalysator werden dann durch Filtration entfernt. Das entstehende Filtrat wird unter verringertem Druck unter Bildung von 31,1 g eines hellgelben Schaums eingedampft. Dieser Scahum wird ohne weitere Reinigung verwendet.
Ausbeute: 96%.
[α]D = +34,68º (c = 1,0, MeOH).
¹H NMR (CDCl&sub3;): δ 1,46 (s, 9H), 2,71 (dd, J = 13,7, 9,5 Hz, 1H), 2,84 (dd, J = 13,3, 2,51 Hz, 1H), 2,95-3,06 (m, 2H), 3,23-3,29 (m, 1H), 3,84-3,90 (m. 1H), 6,23 (s, 1H), 7,19-7,37 (m, 12H).
IR (CHCl&sub3;): 3440, 3382, 3007, 2970, 2934, 1643, 1516, 1454, 1367, 1213 cm&supmin;¹.
MS(FD): m/e 341 (M&spplus;), 341 (100).

Beispiel 1

A. [2R-(2R*,3S*,6S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4-aza-5-oxo-6-N-(t-butoxycarbonyl)amino-7- methyl]octylbenzamid

Zu einer kalten (-23ºC) Lösung, die 1,34 g (6,18 mmol) (S)-2-N-(t-Butyloxycarbonyl)amino-3- methylbutansäure, 2,00 g (5,88 mmol) des Zwischenprodukts von Präparation 1D und 0,833 g (6,18 mmol) Hydroxybenzotriazolhydrat (HOBT · H&sub2;O) in 20 ml Tetrahydrofuran enthält, werden unter Stickstoff 1,24 g (6,00 mmol) 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) gegeben. Das entstehende Reaktionsgemisch wird dann langsam auf Raumtemperatur erwärmt und kann dann über Nacht reagieren. Das Reaktionsgemisch wird dann auf etwa 0ºC abgekühlt, filtriert, mit Ethylacetat gewaschen und dann unter verringertem Druck unter Bildung eines Rückstands konzentriert. Dieser Rückstand wird zwischen 150 ml Ethylacetat und 25 ml einer gesättigten wäßrigen Kaliumhydrogensulfatlösung aufgeteilt. Die entstehenden Phasen werden getrennt und die organische Phase wird nacheinander mit gesättigten Lösungen aus Natiumbicarbonat und Kochsalz gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung von 3,95 g eines farblosen Schaums eingedampft. Die Hälfte dieses Schaums wird mittels Säulenchromatographie (Siliciumdioxid, Eluent 3% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 1,45 g der gewünschten Untertitelverbindung gereinigt. Die andere Hälfte dieses Schaums wird gemäß dem in Beispiel 1B beschriebenen Verfahren umgesetzt.
Analyse für C&sub3;&sub1;H&sub4;&sub5;N&sub3;O&sub5;:
Berechnet: C 69,12, H 8,23, N 7,80
Gefunden: C 69,38, H 8,43, N 7,96

B. [2R-(2R*,3S*,6S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4-aza-5-oxo-6-amino-7-methyl]octylbenzamid

Eine Lösung aus 2,0 g (max. 3,7 mmol) des Zwischenprodukts von Beispiel 1A und 0,713 g (3,7 mmol) Toluolsulfonylhydroxidhydrat (TosOH · H&sub2;O) in 75 ml absolutem Ethanol wird auf 55ºC erhitzt. Wenn die Reaktion im wesentlichen vollständig ist, wie dies durch DC gezeigt wird, wird das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abgekühlt und unter verringertem Druck unter Bildung eines Rückstands eingedampft. Dieser Rückstand wird zwischen 100 ml Ethylacetat und 50 ml einer 10% wäßrigen Ammoniumhydroxidlösung aufgeteilt. Die entstehenden Phasen werden getrennt und die organische Phase wird mit Kochsalzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung von 1,0 g eines weißen Schaums eingedampft. Dieser Schaum wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid. Gradientenelution mit 2-5% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 0,97 g der gewünschten Untertitelverbindung gereinigt.
Analyse für C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub7;N&sub3;O&sub3;:
Berechnet: C 71,04, H 8,48, N 9,56
Gefunden: C 70,85, H 8,59, N 9,56.

C. [2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl[2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9-N-(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Untertitelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1 A beschriebenen Verfahren mittels 226 mg (0,717 mmol) (S)-2-N-(t-Butoxycarbonyl)amino-3-naphth-1-ylpropansäure, 300 mg (0,683 mmol) des Zwischenprodukts von Beispiel 1B, 97 mg (0,71 mmol) HOBT · H&sub2;O und 144 mg (0,697 mmol) DCC in 4 ml Tetrahydrofuran unter Bildung von 550 mg Material hergestellt. Dieses Material wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid. Eluent 1% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 490 mg eines nicht ganz weißen Schaums gereinigt.
Ausbeute: 98%
MS(FD): m/e 737 (M&spplus;), 737 (100),
Analyse für C&sub4;&sub4;H&sub5;&sub6;N&sub4;O&sub6;:
Berechnet: C 71, 71, H 7,66, N 7,60
Gefunden: C 71,82, H 7,73, N 7,55

Beispiel 2

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 226 mg (0,717 mmol) (R)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-naphth-1-ylpropansäure, 300 mg (0,683 mmol) des Zwischenprodukts von Beispiel 1B, 97 mg (0,71 mmol) HOBT · H&sub2;O und 144 mg (0,697 mmol) DCC in 4 ml Tetrahydrofuran unter Bildung von 540 mg eines weißen Schaums hergestellt. Dieser Schaum wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Eluent 1% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 490 mg eines nicht ganz weißen Schaums gereinigt.
Ausbeute: 98%
MS(FD): m/e 737 (M&spplus;), 737 (100).
Analyse für C&sub4;&sub4;H&sub5;&sub6;N&sub4;O&sub6;:
Berechnet: C 71,71, H 7,66, N 7,60
Gefunden: C 71,41, H 7,90, N 7,68

Beispiel 3

[2R-(2R*,3S*,6S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9-amino- 10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Eine Lösung, die 3 ml Trifluoressigsäure und 200 mg (0,271 mmol) des Zwischenprodukts von Beispiel 1 C in 20 ml Methylenchlorid enthält, kann bei Raumtemperatur reagieren. Wenn die Reaktion im wesentlichen vollständig ist, wie dies durch DC gezeigt wird, wird das Reaktionsgemisch mittels einer gesättigten Natriumbicarbonatlösung basisch gemacht. Die entstehenden Phasen werden getrennt und die organische Phase wird mit einer wäßrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung eines Schaums eingedampft. Dieser Schaum wird in einer Lösung aus 5% Ammoniumhydroxid in Methanol gelöst und kann über Nacht stehen. Das entstehende Gemisch wird dann unter verringertem Druck unter Bildung eines Schaums bis zur Trockne eingedampft, der mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Eluent 5% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 170 mg der gewünschten Titelverbindung als farbloser Schaum gereinigt wird.
Ausbeute: 98%
MS(FD): m/e 636 (M&spplus;), 636 (100).
Analyse für C&sub3;&sub9;H&sub4;&sub8;N&sub4;O&sub4;:
Berechnet: C 73,55, H 7,60, N 8,80
Gefunden: C 74,61, H 7,73, N 8,83

Beispiel 4

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9-amino- 10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 3 beschriebenen Verfahren mittels 3 ml Trifluoressigsäure und 200 mg (0,271 mmol) des Zwischenprodukts von Beispiel 2 in 20 ml Methylenchlorid unter Bildung von 162 mg eines weißen Schaums hergestellt. Dieser Schaum wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Eluent 1% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 490 mg eines nicht ganz weißen Schaums gereinigt.
Ausbeute: 94%
MS(FD): m/e 636 (M&spplus;), 636 (100).
Analye für C&sub3;&sub9;H&sub4;&sub8;N&sub4;O&sub4;:
Berechnet: C 73,55, H 7,60, N 8,80
Gefunden: C 73,46, H 7,75, N 8,93

Beispiel 5

A. [2R-(2R*,3S*,6S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4-aza-5-oxo-6-N-(benzyloxycarbonyl)amino-7- carbamoyl]heptylbenzamid

Die gewünschte Untertitelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1 A beschriebenen Verfahren mittels 2,6 g (10 mmol) (S)-2-N(Benzyloxycarbonyl)amino-3-carbamoylpropansäure, 3,4 g (10 mmol) des Zwischenprodukts von Präparation 1D, 1,48 g (11 mmol) HOBT · H&sub2;O und 2,4 g (11 mmol) DCC in 4 ml Tetrahydrofuran hergestellt, mit der Ausnahme, daß 1,09 ml (10 mmol) N-Methylmorpholin ebenfalls zum Reaktionsgemisch gegeben werden, wobei 4,4 g der gewünschten Untertitelverbindung bereitgestellt werden.
Ausbeute: 76%.

B. [2R-(2R*,3S*,6S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydro-3-phenylmethyl-4-aza-5-oxo-6-amino-7-carbamoyl]heptylbenzamid

Zu einer Suspension aus 0,5 g 5% Paladium auf Kohle in 95 ml Ethanol werden 4 g (6,7 mmol) des Zwischenprodukts von Beispiel 5A gegeben. Das entstehende Reaktionsgemisch wird dann schnell unter 60 psi Wasserstoffgas über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Wenn die Reaktion vollständig ist, wie dies durch DC bestimmt wird, werden die 5% Palladium auf Kohle durch Filtration entfernt und die entstehende Lösung wird unter verringertem Druck unter Bildung von 2,6 g eines Feststoffs bis zur Trockne eingedampft. Dieser Feststoff wird in Diethylether aufgeschlämmt, bis er im wesentlichen gelöst ist und dann unter verringertem Druck unter Bildung eines Rückstands eingedampft. Der Rückstand wird aus einem Ethylacetat / Hexangemisch unter Bildung von 2,4 g eines Feststoffs umkristallisiert.
Ausbeute: 80%.

C. [2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- N-(t-butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Untertitelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1 beschriebenen Verfahren mittels 630 mg (2,0 mmol) (R)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-naphth-1-ylpropansäure, 908 mg (2,0 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 5B, 283 mg (2,1 mmol) HOBT · H&sub2;O und 420 mg (2,04 mmol) DCC in 40 ml Tetrahydrofuran unter Bildung von 1,50 g Material hergestellt. Dieses Material wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Gradientenelution mit 1,5-5% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 920 mg der gewünschten Untertitelverbindung gereingt.
Ausbeute: 60%.
MS(FD): m/e 751 (M&spplus;) 751 (100).
Analyse für C&sub4;&sub3;H&sub5;&sub3;N&sub5;O&sub7;:
Berechnet: C 68, 69, H 7,10, N 9,31.
Gefunden: C 68,66, H 7,22, N 9,27.

Beispiel 6

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[-2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N-(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 630 mg (2,0 mmol) (S)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-naphth-1-ylpropansäure, 908 mg (2,0 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 5B, 283 mg (2,1 mmol) HOBT · H&sub2;O und 420 mg (2,04 mmol) DCC in 40 ml Tetrahydrofuran unter Bildung von 1,37 g Material hergestellt. Dieses Material wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Elution mit 2% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 895 mg der gewünschten Titelverbindung gereinigt.
Ausbeute: 60%.
MS(FD): m/e 751 (M&spplus;), 751 (100).
Analyse für C&sub4;&sub3;H&sub5;&sub3;N&sub5;O&sub7;:
Berechnet: C 68,69, H 7,10, N 9,31.
Gefunden: C 68,58, H 7,11, N 9,01.

Beispiel 7

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 3 beschriebenen Verfahren mittels 3 ml Trifluoressigsäure und 325 mg (0,432 mmol) der Titelverbindung von Beispiel 6 in 20 ml Methylenchlorid hergestellt, mit der Ausnahme, daß der aus dem Extraktionsverfahren isolierte Schaum nicht in einer Lösung aus 5% Ammoniumhydroxid in Methanol gelöst wird. Der Schaum wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Eluent 10% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 248 mg eines weißen Pulvers gereinigt.
Ausbeute: 88%
MS (FD): m/e 652 (m&spplus;), 652 (100).
Analyse für C&sub3;&sub8;H&sub4;&sub5;N&sub5;O&sub5;:
Berechnet: C 70,13, H 6,81, N 10,76
Gefunden: C 70,32, H 7,05, N 10,71

Beispiel 8

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9- amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 3 beschriebenen Verfahren mittels 3 ml Trifluoressigsäure und 325 mg (0,432 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 5C in 20 ml Methylenchlorid unter Bildung eines wießen Schaums hergestellt. Der Schaum wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Eluent 7% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 280 mg eines weißen Schaums gereinigt.
Ausbeute: 100%
Analyse für C&sub3;&sub9;H&sub4;&sub8;N&sub4;O&sub4;:
Berechnet: C 70,13, H 6,81, N 10,76
Gefunden: C 70,38, H 7,01, N 10,79

Beispiel 9

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioio-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10 phenyl]decylbenzamid

Die Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 132,6 mg (0,5 mmol) (S)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-phenylpropansäure und 227 mg (0,5 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 5B und mittels 81 mg (0,5 mmol) Carbonyldiimidazol als Kupplungsmittel in 40 ml Methylenchlorid unter Bildung von 130 mg der gewünschten Titelverbindung hergestellt.
Ausbeute: 38%
Analyse für C&sub3;&sub9;H&sub5;&sub1;N&sub5;O&sub7;
Berechnet: C 66,74, H 7,32, N 9,98
Gefunden: C 65,59, H 7,44, N 9,76

Beispiel 10

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[-2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbomoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-phenyl]decylbenzamid

Die Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 9 beschriebenen Verfahren mittels 136 mg (0,5 mmol) (R)-2-N(t- Butoxycarbonyl)amino-3-phenylpropansäure und 227 mg (0,5 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 58 und mittels 81 mg (0,5 mmol) Carbonyldiimidazol in 40 ml Methylenchlorid unter Bitdung von 100 mg der gewünschten Titelverbindung hergestellt.
Ausbeute: 29%

Beispiel 11

A. [2R-(2R*,3S*,6S*)]-N-t-Butyl-2-[-2-hydroxy-3-phenylmethyl-4-aza-5-oxo-6-N-(benzylcarbonyl)amino-7- imidazol-4-yl]heptylbenzamid

Die gewünschte Untertitelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 1,79 g (6,18 mmol) (S)-2-N-(Benzyloxycarbonyl)amino-3-imidazol-4-ylpropansäure, 2,00 g (5,88 mmol) des Untertitelzwischenprodukts von Präparation 1D, 0,83 g (5,18 mmol) HOBT · H&sub2;O und 1,24 g (6,00 mmol) DCC in 25 ml Tetrahydrofuran mit 2,5 ml Dimethylformamid hergestellt, mit der Ausnahme, daß die Umsetzung bei Umgebungstemperatur ausgeführt wird. Das entstehende Material wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Eluent 3% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 3,46 g eines nicht ganz weißen Schaums isoliert. Dieser Scahum wird ohne weitere Reinigung verwendet.
Ausbeute: 96%
Analyse für C&sub3;&sub5;H&sub4;&sub1;N&sub5;O&sub5;:
Berechnet: C 68,72, H 6,76, N 11,45
Gefunden: C 65,60, H 6,61, N 10,94

B. [2R-(2R*,3S*,6S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4-aza-5-oxo-6-amino-7-imidazol-4- yl]heptylbenzamid

Zu einer Suspension aus 1,9 g 5% Palladium auf Kohle in 65 ml Ethanol werden 3,36 g (5,5 mol) des Untertitelzwischenprodukts von Beispiel 11A gegeben. Das Gemisch wird dann schnell für etwa 3,5 Stunden unter Wasserstoff gerührt. Wenn die Reaktion vollständig ist, wie dies durch DC bestimmt wird, werden die 5% Palladium auf Kohle durch Filtration entfernt und die entstehende Lösung wird unter verringerten Druck unter Bildung eines Öls bis zur Trockne eingedampft, das bei einer Exposition gegenüber Luft zu einem kreideartigen Feststoff wird. Dieser Feststoff wird in einer Lösung aus 5 : 1 Wasser / gesättigtes Kaliumhydrogensulfat gelöst, dann mit Ethylacetat gewaschen, entgast und mittels einer 5 M Ammoniumhydroxidlösung auf pH 9 basisch gemacht. Diese Lösung wird dann mit 50 ml Ethylacetat verdünnt und die entstehenden Phasen werden getrennt, die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung der gewünschten Untertitelverbindung als hellgelber Schaum konzentriert.
Analyse für C&sub2;&sub7;H&sub3;&sub5;N&sub5;O&sub3;:
Berechnet: C 67,90, H 7,39, N 14,66
Gefunden: C 67,94, H 7,50, N 14,36
MS: m/e 478 (M&spplus;).

C. [2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(imidazol-4-ylmethyl)- 9-N(t-butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Untertitelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 330 mg (1,05 mmol) (S)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-naphth-1-ylpropansäure, 500 mg (1,05 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 11B, 149 mg (1,10 mmol) HOBT · WO und 221 mg (1,07 mmol) DCC in 20 ml Tetrahydrofuran unter Bitdung von 1,03 g eines Öls hergestellt. Dieses Öl wird mittels Blitzchromotographie (Siliciumdioxid, Gradientenelution mit 3-10% Methanol in Chloroform) unter Bildung von 612 mg der gewünschten Untertitelverbindung gereinigt.
Ausbeute: 76%
MS (FD): m/e 774 (M&spplus;), 774 (100).
Analyse für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub4;N&sub6;O&sub6;:
Berechnet: C 69,74, H 7,02, N 10,84
Gefunden: C 69,55, H 6,86, N 10,57

Beispiel 12

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(imidazol-4-ylmethyl)-9- N(t-butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 330 mg (1,05 mmol) (R)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-naphth-1-ylpropansäure, 500 mg (1,05 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 11B, 149 mg (1,10 mmol) HOBT · H&sub2;O und 221 mg (1,07 mmol) DCC in 20 ml Tetrahydrofuran unter Bildung von 1,03 g eines Öls hergestellt. Dieses Öl wird mittels Blitzchromatographie (Siliciumdioxid, Gradientenelution mit 3-10% Methanol in Choroform) unter Bildung von 612 mg der gewünschten Titelverbindung gereinigt.
Ausbeute: 76%
MS (FD): m/e 774 (M&spplus;), 774 (100).
Analyse für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub4;N&sub6;O&sub6;:
Berechnet: C 69,74, H 7,02, N 10,84
Gefunden: C 69,75, H 6,98, N 10,88

Beispiel 13

[2R-(2R*,3S*,6R*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[-2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl[decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 79 mg (0,50 mmol) (S)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-naphth-1-ylpropansäure, 114 mg (0,50 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 5B, 35,0 mg (0,525 mmol) HOBT · WO und 51,6 mg (0,50 mmol) DCC in 3 ml Tetrahydrofuran unter Bildung von 177 mg eines Feststoffs hergestellt. Dieser Feststoff wird unter Bildung von 77 mg eines weißen Feststoffs gereinigt.
Ausbeute: 76%
MS (FD): m/e 751 (M&spplus;), 751 (100).
Analyse für C&sub4;&sub3;H&sub5;&sub3;N&sub5;O&sub7;:
Berechnet: C 68, 69, H 7,10, N 9,31
Gefunden: C 68,74, H 7,10, N 9,15

Beispiel 14

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 84 mg (0,276 mmol) (S)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-indol-3-ylpropansäure, 125 mg (0,275 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 5B, 38 mg (0,281 mmol) HOBT · H&sub2;O und 57 mg (0,276 mmol) DCC in 20 ml Tetrahydrofuran hergestellt. Die gewünschte Titelverbindung wird mittels Blitzchromatographie (Gradientenelution von 3-10% Methanol in Methylenchlorid) unter Bildng von 177 mg eines weißen Schaums / Feststoffs gereinigt.
Ausbeute: 87%
¹H NMR (d&sub6;-DMSO) δ 1,29 (s, 9H), 1,36 (s, 9H), 2,40 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 2,60-2,65 (m, 2H), 2,82-3,09 (m, 4H), 3,57-3,61 (m, 1H), 3,79-3,82 (m, 1H), 4,14-4,18 (m, 1H), 4,40-4,47 (m, 1H), 5,88 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 6,92-6,97 (m, 3H), 7,02-7,10 (m, 2H), 7,14-7,19 (m, 6H), 7,23-7,32 (m, 5H), 7,55 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 7,7, 1H), 8,24 (s, 1H), 10,78 (s, 1H).
MS (FD): m/e 740 (M&spplus;-1), (100)
Analyse ihr C&sub4;&sub1;H&sub5;&sub2;N&sub6;O&sub7; · 0,3 EtOAc;
Berechnet: C 66,06, H 7,15, N 10,95
Gefunden: C 66,08, H 7,15, N 10,93

Beispiel 15

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 1A beschriebenen Verfahren mittels 84 mg (0,276 mmol) (R)-2-N(t-Butoxycarbonyl)amino-3-indol-3-ylpropansäure, 125 mg (0,275 mmol) der Untertitelverbindung von Beispiel 5B, 38 mg (0,281 mmol) HOBT · H&sub2;O und 57 mg (0,276 mmol) DCC in 20 ml Tetrahydrofuran hergestellt. Die gewünschte Titelverbindung wird mittels Blitzchromatographie (Gradientenelution von 3-10% Methanol in Methylenchlorid) unter Bildung von 195 mg eines weißen Schaums / Feststoffs gereinigt.
Ausbeute: 96%
¹H NMR (d&sub6;-DMSO) δ 1,30 (s, 9H), 1,36 (s, 9H), 2,30-2,39 (m, 2H), 2,59-2,67 (m, 2H), 2,86-2,94 (m, 2H), 3,03- 3,10 (m, 2H), 3,56-3,60 (m, 1H), 3,80-3,84 (m, 1H), 4,13-4,17 (m, 1H), 4,44-4,48 (m, 1H), 5,91 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,88 (s, 1H), 6,95 (t, 7,2 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,09-7,35 (m, 12H), 7,53-7,59 (m. 2H), 8,24-8,26 (m, 2H), 10,77 (s, 1H).
MS (FD): m/e 741 (M&spplus;), (41), 740 (100)
Analyse für C&sub4;&sub1;H&sub5;&sub2;N&sub6;O&sub7; · H&sub2;O;
Berechnet: C 64,89, H 7,17, N 11,07
Gefunden: C 64,69, H 6,89, N 10,95

Beispiel 16

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-9-phenyl]nonylbenzamid

Zu einer Lösung, die 125,6 mg (0,5 mmol) (S)-2-N-(t-Butoxycarbonyl)amino-2-phenylethansäure und 81 mg (0,5 mmol) Carbonyldiimidazol in 20 ml Methylenchlorid enthält, werden 227 mg (0,5 mmol) des Untertitelzwischenprodukts von Präparation 1D gegeben. Das entstehende Reaktionsgemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur umgesetzt und wird dann unter verringertem Druck unter Erwärmen (35ºC) konzentriert, um einen amorphen Feststoff zu ergeben. Dieser Feststoff wird in 125 ml eines 4 : 1 Ethylacetat / Wasser Gemisches rückgelöst. Die entstehenden Phasen werden getrennt und die organische Phase wird nacheinander mit einer gesättigten Natriumbicarbonatlösung, einer wäßrigen 5% Citronensäurelösung, einer zweiten gesättigten Natriumbicarbonatlösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die entstehende Lösung wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung eines Rückstands eingedampft. Der Rückstand wird in Diethylether aufgeschlämmt, filtriert und dann unter verringertem Druck unter Bildung von 181 mg Material eingedampft. Dieses Material wird mittels Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) (55% Acetonitril / 44% Wasser / 1% Essigsäure) unter Bildung von 90 mg der gewünschten Titelverbindung gereinigt.
Ausbeute: 26%
Analyse für C&sub3;&sub8;H&sub4;&sub9;N&sub5;O&sub7;:
Berechnet: C 66,36, H 7,18, N 10,18
Gefunden: C 65,63, H 7,10, N 10,28

Beispiel 17

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-9-phenyl]nonylbenzamid

Die gewünschte Titelverbindung wird im wesentlichen gemäß dem in Beispiel 16 beschriebenen Verfahren mittels 630 mg (2,0 mmol) (R)-2-N-(t-Butoxycarbonyl)amino-2-phenylethansäure, 454 mg (1 mmol) des Untertitelzwischenprodukts von Präparation 1D, 162 mg (1 mmol) Carbonyldiimidazol in 30 ml Methylenchlorid unter Bildung von 425 mg Material hergestellt. Dieses Material wird mittels HPLC (55% Acetonitril / 44% Wasser / 1% Essigsäure) unter Bildung von 285 mg der gewünschten Titelverbindung gereinigt.
Ausbeute: 38%
Analyse für C&sub3;&sub8;H&sub4;&sub9;N&sub5;O&sub7;:
Berechnet: C 66,36, H 7,18, N 10,18
Gefunden: C 66,20, H 7,23, N 10,31
Wie oben erwähnt, sind die Verbindungen der vorliegenden Erfindung zur Hemmung der HIV Protease brauchbar, die ein Enzym ist, das bei der Bildung der viralen Komponenten und deren Zusammenbau beteiligt ist. Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung oder Verhinderung einer HIV Infektion, das gekennzeichnet ist durch die Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes hiervon an einen behandlungsbedürftigen Primaten. Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung oder Verhinderung von AIDS, das gekennzeichnet ist durch die Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes hiervon an einen behandlungsbedürftigen Patienten. Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Hemmung der HIV Replikation, das gekennzeichnet ist durch die Verabreichung einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel I oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes hiervon an eine HIV infizierte Zelle, an eine gegenüber einer HIV Infektion empfindliche Zelle oder an einen behandlungsbedürftigen Primaten.
Der Ausdruck "wirksame Menge", wie er hierin verwendet wird, meint eine Menge einer Verbindung der Formel I, die zur Hemmung der Bildung und des Aufbaus der viralen Komponenten fähig ist, welche durch die HIV Protease vermittelt werden. Die durch das vorliegende Verfahren beabsichtigte HIV Proteasehemmung beinhaltet sowohl die therapeutische als auch die prophylaktische Behandlung, wie dies geeignet erscheint. Die spezifische Dosis der gemäß der Erfindung verabreichten Verbindung zur Erlangung der therapeutischen und/oder prophylaktischen Wirkungen wird natürlich durch die den einzelnen Fall umgebenden Umstände bestimmt, beispielsweise der verabreichten Verbindung, der Verabreichungsart, des zu behandelnden Zustands und des zu behandelnden Patienten. Eine typische Tagesdosis umfaßt eine Dosismenge von etwa 0,01 mg/kg bis etwa 50 mg/kg Körpergewicht eines erfindungsgemäßen Wirkstoffs. Bevorzugte Tagesdosen betragen im allgemeinen etwa 0,05 mg/kg bis etwa 20 mg/kg und idealerweise etwa 0,1 mg/kg bis etwa 10 mg/kg.
Die Verbindungen können auf eine Vielzahl an Arten verabreicht werden, einschließlich oral, rektal, transdermal, subkutan, intravenös, intramuskulär und intranasal. Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden vorzugsweise vor der Verabreichung formuliert. Daher ist eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung eine pharmazeutische Formulierung, die eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes hiervon und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger, Verdünnungsmittel oder Hilfsstoff hierfür enthält.
Der Wirkstoff umfaßt in solchen Formulierungen 0,1 bis 99,9 Gewichtsprozent der Formulierung. Mit "pharmazeutisch annehmbar" ist gemeint, daß der Träger, das Verdünnungsmittel oder der Hilfsstoff mit den anderen Bestandteilen der Formulierung kompatibel und für den Empfänger hiervon nicht schädlich ist.
Die vorliegenden pharmazeutischen Formulierungen werden mittels bekannter Verfahren und leicht verfügbarer Inhaltsstoffe hergestellt. Bei der Herstellung der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen wird der Wirkstoff gewöhnlich mit einem Träger gemischt oder mit einem Träger verdünnt oder in einem Träger eingeschlossen, der in Form einer Kapsel, eines Sachets, eines Papiers oder eines anderen Behälters vorliegen kann. Wenn der Träger als Verdünnungsmittel dient, kann dies ein festes, halbfestes oder flüssiges Material sein, das als Vehikel, Hilfsstoff oder Medium für den Wirkstoff dient. Daher können die Zusammensetzungen vorliegen in Form von Tabletten, Pillen, Pulvern, Lonzetten, Sachets, Cachets, Elixieren, Suspensionen, Emulsionen, Lösungen, Sirupen, Aerosolen (als Feststoff oder in einem flüssigen Medium), Salben, die beispielsweise bis zu 10 Gewichtsprozent des Wirkstoffs enthalten, Weich- und Hartgelatinekapseln, Zäpfchen, sterilen injizierbaren Lösungen und sterilen verpackten Pulvern.
Die folgenden Formulierungsbeispiele sind nur erläuternd und sollen den Schutzumfang der Erfindung in keiner Weise beschränken. Der Ausdruck "Wirkstoff" meint eine Verbindung gemäß Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.

Formulierung 1

Hartgelatinekapseln werden unter Verwendung folgender Inhaltsstoffe hergestellt:

Menge

(mg/Kapsel)
Wirkstoff 250
Stärke, getrocknet 200
Magnesiumstearat 10
Gesamt 460 mg

Formulierung 2

Eine Tablette wird unter Verwendung der folgenden Inhaltsstoffe hergestellt:

Menge

(mg/Tablette)
Wirkstoff 250
mikrokristalline Cellulose 400
pyrogen hergestelltes Siliciumdioxid 10
Stearinsäure 5
Gesamt 655 mg
Die Bestandteile werden vermischt und unter Bildung von Tabletten gepreßt, wobei jede 665 mg wiegt.

Formulierung 3

Eine Aerosollösung, die die folgenden Bestandteile enthält, wird hergestellt:
Gewicht
Wirkstoff 0,25
Ethanol 25,75
Propellant 22 (Chlordifluormethan) 70,00
Gesamt 100,00
Der Wirkstoff wird mit Ethanol gemischt und das Gemisch wird zu einem Teil Propellant 22 gegeben, auf -30ºC abgekühlt und in ein Abfüllgerät gegeben. Die erforderliche Menge wird anschließend in einen Edelstahlbehälter gefüllt und mit dem Rest des Propellants verdünnt. Die Ventileinheiten werden anschließend am Behälter angebracht.

Formulierung 4

Tabletten, die jeweils 60 mg des Wirkstoffs enthalten, werden folgendermaßen hergestellt:

Menge

(mg/Tablette)
Wirkstoff 60
Stärke 45
Mikrokristalline Cellulose 35
Polyvinylpyrrolidon (als 10% Lösung in Wasser) 4
Natriumcarboxymethylstärke 4,5
Magnesiumstearat 0,5
Talkum 1
Gesamt 150
Der Wirkstoff die Stärke und die Cellulose werden durch ein Nr. 45 Mesh U.S. Sieb gegeben und sorgfältig vermischt. Die wäßrige Lösung, die Polyvinylpyrrolidon enthält, wird mit dem entstehenden Pulver vermischt und das Gemisch wird anschließend durch ein Nr. 14 Mesh U.S. Sieb gegeben. Die so hergestellten Granula werden bei 50ºC getrocknet und durch ein Nr. 18 Mesh U.S. Sieb gegeben. Die Natriumcarboxymethylstärke, das Magnesiumstearat und das Talkum werden, nachdem sie vorher durch ein Nr. 60 Mesh U.S. Sieb gegeben wurden, zu den Granula gegeben und nach dem Mischen in einer Tablettenmaschine unter Bildung von Tabletten geprellt, die jeweils 150 mg wiegen.

Formulierung 5

Kapseln, die jeweils 80 mg des Wirkstoffs enthalten, werden folgendermaßen hergestellt:

Menge

(mg/Kapsel)
Wirkstoff 80 mg
Stärke 59 mg
Mikrokristalline Cellulose 59 mg
Magnesiumstearat 2 mg
Gesamt 200 mg
Der Wirkstoff, die Cellulose, die Stärke und das Magnesiumstearat werden gemischt, durch ein Nr. 45 Mesh U.S. Sieb gegeben und in Hartgelatinekapseln in 200 mg Mengen abgefüllt.

Formulierung 6

Zäpfchen, die jeweils 225 mg des Wirkstoffs enthalten, werden folgendermaßen hergestellt:
Wirkstoff 225 mg
Gesättigte Fettsäureglyceride 2 000 mg
Gesamt 2 225 mg
Der Wirkstoff wird durch ein Nr. 60 Mesh U.S. Sieb gegeben und in den gesättigten Fettsäureglyceriden suspendiert, die vorher bei möglichst geringer Hitze geschmolzen werden. Das Gemisch wird anschließend in eine Zäpfchenform mit einer nominalen Kapazität von 2 g gegossen und abgekühlt.

Formulierung 7

Suspensionen, die jeweils 50 mg des Wirkstoffs pro 5 ml Dosis enthalten, werden folgendermaßen hergestellt:
Wirkstoff 50 mg
Natriumcarboxymethylcellulose 50 mg
Sirup 1,25 ml
Benzoesäurelösung 0,10 ml
Geschmacksstoff q. v.
Farbstoff q.v.
Gereinigtes Wasser auf gesamt 5 ml
Der Wirkstoff wird durch ein Nr. 45 Mesh US. Sieb gegeben und mit Natriumcarboxymethylcellulose und Sirup vermischt, um eine glatte Paste zu erhalten. Die Benzoesäurelösung, der Geschmacksstoff und der Farbstoff werden mit einem Anteil Wasser vermischt, und unter Rühren zugegeben. Anschließend wird ausreichend Wasser zugegeben, um das erforderliche Volumen zu erhalten.

Formulierung 8

Eine intravenöse Formulierung kann folgendermaßen hergestellt werden:
Wirkstoff 100 mg
Isotonische Kochsalzlösung 1 000 ml
Die Lösung der obigen Inhaltsstoffe wird im allgemeinen einem Patienten mit einer Geschwindigkeit von 1 ml pro Minute intravenös verabreicht.
Das folgende Experiment (HIV-1 Proteaseinhibitor-Fluoreszenztest) wird durchgeführt, um die Fähigkeit der Verbindungen der Formel I zu zeigen, die HIV Protease zu hemmen.
Wie hierin verwendet, werden die Abkürzungen folgendermaßen definiert:
BSA - Rinderserumalbumin
BOC - t-Butyloxycarbonyl
BrZ - 2-Brombenzyloxycarbonyl
2-ClZ - 2-Chlorbenzyloxycarbonyl
DCC - Dicyclohexylcarbodiimid
DIEA - Diisopropylethylamin
DTT - Dithiothreit
EDTA - Ethylendiamintetraessigsäure
FITC - Fluoreszeinisothiocarbamyl
HEPES - 4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazin-ethansulfonsäure
MES - 4-Morpholinethansulfonsäure
PAM - Phenylacetimidomedryl
TAPS - 3-[Tris(hydroxymethyl)methyl]amino-1-sulfonsäure
TRIS - Tris(hydroxymethyl)aminomethan
TOS - p-Toluolsulfonyl (Tosyl)

1. Präparation der Protease und Gag Fraktionen

A. Kultur von E. coli K12 L507/pHIP10D

Lyophilisate von E. coli K12 L507/pHP10D werden von dem Northern Regional Research Laboratory, Peoria, Illinois 61604 unter der Hinterlegungsnummer NRRL B-18560 (hinterlegt am 14. November 1989) erhalten. Die Lyophilisate werden in Röhrchen dekantiert, die 10 ml LB Medium enthalten (10 g Bactotrypton, 5 g Bactohefeextrakt und 10 g Natriumchlorid pro Liter, der pH wird auf 7,5 eingestellt und es wird bei 32ºC über Nacht inkubiert).
Ein kleiner Teil der Übernachtkultur wird auf 12,5 ug/ml Tetracyclin enthaltende LB-Agarplatten (LB Medium mit 15 g/l Bacto-Agar) gegeben, um ein Einzelkolonieisolat von E. coli K12 L507/pHP10D zu erhalten. Die erhaltene Einzelkolonie wird in 10 ml LB Medium geimpft, das 12,5 ug/ml Tetracyclin enthält, und über Nacht bei 32ºC unter kräftigem Schütteln inkubiert. Die 10 ml Übernachtkultur wird in ein LB Medium geimpft, das 12,5 ug/ml Tetracyclin enthält, und bei 32ºC unter kräftigem Schütteln inkubiert, bis die Kultur die mittlere logarithmische Wachstumsphase erreicht hat

B. Kultur von E. coli K12 L507/pHGAG

Lyophilisate von E. coli K12 L507/pHGAG werden von der NRRL unter der Hinterlegungsnummer NRRL B-18561 (hinterlegt am 14. November 1989) erhalten. Eine gereinigte Kolonie von E. coli K12 L507/pHGAG wird isoliert und als Impfgut für eine Kultur verwendet, die im wesentlichen gemäß der Beschreibung des obigen Schritts A für E. coli K12 L507/pHP10D bis zur mittleren logarithmischen Wachstumsphase angezogen wird.

C. Präparation einer Proteasefraktion

Eine Kultur von E. coli K12 L507/pHPlOD wird bis zur mittleren logarithmischen Wachstumsphase bei 32ºC in LB Medium angezogen, das 12,5 ug/ml Tetracyclin enthält. Die Kultivierungstemperatur wird schnell auf 40ºC angehoben um die Genexpression zu induzieren, und die Zellen werden für 2,5 Stunden bei dieser Temperatur wachsen gelassen, bevor die Kultur schnell auf Eis abgekühlt wird. Die Zellen werden zentrifugiert und das Zellpellet wird in 20 ml 50 mmol MES Puffer (pH 6,0) resuspendiert, der 1 mmol EDTA, 1 mmol DTT, 1 nimol PMSF und 10% Glycerin ("Puffer A") enthält. Die Zellen werden durch Ultraschall mittels eines Fischer Modell 300 Dismembrators und einer Mikrospitzensonde lysiert. Nach einer anschließenden Zentrifugation bei 27 000 · g, wird der Überstand mit Puffer A auf ein Gesamtvolumen von 60 ml verdünnt und auf eine 2,0 · 19 cm QAE-Sepharosesäule (/ml/min. 4ºC) aufgetragen, die in Puffer A äquilibriert wurde. Die Säule wird isokratisch für 180 min gewaschen und anschließend mit einem Gradienteneluenten von 0-1,0 M wäßrigem Natriumchlorid in Puffer A über 120 min eluiert. Die enzymatische Aktivität wird mit HPLC unter Verwendung des synthetischen Peptids SQNYPIV gemessen, wie dies bei Margolin et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 167, 554-560 (1990) beschrieben wurde, und die Produktion des pl Peptids (SQNY) wird gemessen.
Die aktiven Fraktionen werden vereinigt, auf 1, 2 M Ammoniumsulfat gebracht und auf eine 2,0 · 18 cm Hexylagarosesäule aufgetragen, die im Puffer A äquilibriert wurde, der 1, 2 M Ammoniumsulfat enthält. Die Probe wird mit einer Flußrate von 1 ml/min bei 4ºC aufgetragen, mit einem Äquilibrierungspuffer für 240 min (1 ml/min) gewaschen und anschließend mittels eines umgekehrten linearen Gradienten von 1,2-0 M Ammoniumsulfat in Puffer A für 120 Minuten mit derselben Flußrate eluiert. Die Säule wird anschließend isokratisch in Puffer A für 120 min gewaschen.
Die aktiven Fraktionen werden vereinigt, unter Verwendung einer Amicon Rührzelle mit einer YM-10 Membran auf 10 ml konzentriert und anschließend auf eine Mono 5 Kationenaustauschersäule (1,0 · 10 cm) aufgetragen, die vorher in Puffer A äquilibriert wurde. Die Probe wird bei einer Flußrate von 1 ml/min bei 25ºC aufgetragen. Nach einem isokratischen Waschschritt für 30 min wird die Protease unter Verwendung eines linearen Gradienten von 0-0,45 M Natriumchlorid in Puffer A über 40 min eluiert. Die Säule wird isokratisch in Puffer A für 30 min gewaschen, der 0,45 M wäßriges Natriumchlorid enthält.
Die aktiven Fraktionen werden vereinigt und unter Verwendung einer Amicon Rührzelle und einer YM-10 Membran auf 200 ul konzentriert, und anschließend wird die Protease auf eine Superose 6 Größenausschlußsäule aufgetragen, die in Puffer A äquilibriert wurde, der 0,1M wäßriges Natriumchlorid enthält. Die Säule wird isokratisch in diesem Puffer bei einer Flußrate von 0,5 ml/min gewaschen, wonach die HIV Protease als einzelner Peak eluiert wird.
QAE-Sepharose und Hexylagarose werden von der Sigma Chemical Company bezogen. Superose 6 und Mono S werden von Pharmacia bezogen. Puffer und Reagentien werden von Sigma bezogen.

D. Präparation der Gag Fraktion

Auf analoge Weise wird eine Kultur von E. coli K12 507/pHGA6 bis zur mittleren logarithmischen Wachstumsphase bei 32ºC angezogen, und anschließend für 4 bis 5 Stunden auf 40ºC gebracht. Die Kultur wird auf Eis gekühlt und zentrifugiert, anschließend wird das Pellet in 8 ml Lysepuffer resuspendiert, der 5 mg/ml Lysozym enthält. Der Lysepuffer setzt sich aus 50 mM Tris-HCl (pH 7, 8), 5 mM EDTA, 1 mM DTT. 100 mM NaCl, 1 ug/ml E64 und 2 ug/ml Aprotinin zusammen. Die Kultur wird bei 4ºC für etwa 30 bis 60 Minuten inkubiert, anschließend bei einer Stärke von 60% in einem Branson R Zelldisruptor mit 3 mal 20 Sekunden dauernden Beschallungen kurz beschallt, wobei zwischen jeder Beschallung gekühlt wird. Die Kultur wird anschließend bei 15 000 · g zentrifugiert. Der Überstand, der das nicht prozessierte gag Protein enthält, wird partiell durch Größenausschlußchromatographie auf einer Sephadex G-50 Säule gereinigt und bei -20ºC in 50% Glycerin und Lysepuffer gelagert.

II. Präparation des Substrats: N-α-Biotin-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(N &epsi;-FITC)-OH

A. Präparation von N-α-Biotin-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH

Das geschützte Peptidharz N-α-BOC-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr(BrZ)-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(2-Cl)-OCH&sub2;- PAM-Harz wird auf einem Advanced Chemtech Model 200 Peptidsynthesegerät in einer Menge von 1,5 mmol unter Verwendung des Standarddoppelkupplungsprotokolls synthetisiert. Die aminoterminale BOC Gruppe wird mit 50 % Trifluoressigsäure in Methylenchlorid entfernt, und das entstehende Harz wird mit 5% Di(isopropyl)ethylamin (DIEA) in Methylenchlorid neutralisiert. Anschließend werden 1,1 g (4,5 mmol) Biotin in 20 ml Dimethylsulfoxid zu dem Peptidharz, gefolgt von einer Zugabe von 4,5 mmol Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) in 9 ml Methylenchlorid gegeben. Das entstehende Reaktionsgemisch wird auf 40 ml Gesamtvolumen mit 11 ml Methylenchlorid verdünnt, und kann anschließend für etwa 5 Stunden reagieren. Die Reaktionslösung wird konzentriert, das Harz wird nacheinander mit Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid und Methylenchlorid gewaschen, und anschließend mit 5% DIEA in Methylenchlorid neutralisiert. Diese Reaktion wird zweimal wiederholt, wobei die Reaktionszeit auf 12 Stunden pro Reaktion ausgedehnt wird. Eine Ninhydrinanalyse des Harzes zeigt die vollständige Reaktion des Biotins mit der Glycinaminogruppe an. Das schließliche Peptidharz wird ausführlich mit Dimethylformamid und Methylenchlorid gewaschen und getrocknet, um 4,3 g (98%) bereitzustellen.

B. Schutzgruppenabspaltung

Vom Peptid werden die Schutzgruppen entfernt und es wird vom Harz unter Verwendung von 50 ml Fluorwasserstoffsäure/m-Kresollösung bei 0ºC für 1 Stunde abgespalten. Nach der Entfernung der Fluorwasserstoffsäure durch Vakuumdestillation wird das m-Kresol aus dem Reaktionsgemisch mittels 100 ml Diethylether extrahiert. Das Peptid wird anschließend in 50% wäßriger Essigsäure gelöst, eingefroren und lyophilisiert, um 2,14 g bereitzustellen.

C. Reinigung

Das rohe N α-Biotin-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH wird in 200 ml 5% (wäßriger) Acetonitrillösung gelöst, die 0,1% Trifluoressigsäure enthält, und anschließend durch einen 0,22 um Filter filtriert. Die entstehende Lösung wird auf eine 2,2 · 25 cm Umkehrphasensäule mit Octadecyl-Silica (Vydac C-18) aufgetragen, die mit demselben Puffer äquilibriert wurde. Das Peptid wird mit einem linearen Gradienten von 7,5 bis 25% Acetonitril mit 2 ml/Minute für 855 Minuten eluiert, wobei Fraktionen gesammelt werden. Diese Fraktionen werden mit analytischer HPLC analysiert, die mittels ähnlicher Pufferbedingungen auf einer 4,6 · 250 mm Vydac C-18 Säule durchgeführt wird. Die Fraktionen, die das gewünschte Material enthalten, werden vereinigt, eingefroren und lyophilisiert, um 1,206 g (62%) bereitzustellen.
Eine Aminosäureanalyse des isolierten N-α-Biotin-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH ergibt die folgenden Mengen: Asn 1,1, Ser 0,96, Gln 1,1, Pro 1,1, Gly 2,1, Val 0,80, Ile 0,78, Tyr 1,1, Lys 1,1, wobei dies mit der Theorie übereinstimmt. Die Massenspektrometrie mittels schnellem Atombeschuß ergibt einen Molekularionenmassenpeak von 1288, wobei dies mit der Theorie übereinstimmt.

D. Markierung

Das gereinigte Peptid wird mit einem Fluoreszenzmarker am C-terminalen Ende für die Verwendung im Pandextest markiert. N-α-Biotin-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH (1,206 g, 0,936 mmol) wird in 100 ml 0,1 M Natriumborat pH 9,5 gelöst. Dann wird eine Lösung von 3 g (7,7 mmol) Fluoreszeinisothiocyanat in 15 ml Dimethylsulfoxid zu dem Reaktionsgemisch in 10 gleichen Teilen über 2 Stunden gegeben. Das entstehende Gemisch kann nach der letzten Zugabe für 1 Stunde reagieren. Die Lösung wird auf pH 3 mit 5 N Chlorwasserstoffsäure eingestellt, wobei sich ein Niederschlag bildet, welche durch Zentrifugation entfernt wird.
Die Peptidlösung wird anschließend auf pH 7,8 mit 5 N Natriumhydroxid eingestellt und dann auf 200 ml Gesamtvolumen durch die Zugabe von 0,1 M Ammoniumacetat, pH 7,5 verdünnt. Die entstehende Lösung wird dann durch ein 0,22 um Filter filtriert und auf eine 2,2 · 25 cm Vydac C-18 Säule aufgetragen, die mit 5% Acetonitril in 0,1 M Ammoniumacetat (pH 7,5) äquilibriert wurde. Das Peptid wird von der Säule mit einem linearen Gradienten von 5-25% Acetonitril bei 2 ml/Minute für 855 Minuten eluiert, wobei Fraktionen gesammelt werden. Es wird eine analytische HPLC verwendet, um die Fraktionen zu analysieren. Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthalten, werden vereinigt, eingefroren und unter Bildung von 190,2 mg (12%) lyophilisiert.
Die Aminosäureanalyse des gereinigten Peptids liefert das folgende Ergebnis: Asn 1,1, Ser 1,0, Gln 1,1, Pro 1,1, Gly 2,1, Val 0,8, Ile 0,8, Tyr 1,1, Lys 1,0, was mit der Theorie übereinstimmt. Eine Massenspektrometrie mittels schnellem Atombeschuß ergibt einen Molekularionenmassenpeak von 1678, wobei dies mit der Theorie übereinstimmt.

E. HIV-1 Proteaseinhibitor-Fluoreszenztest

Die folgenden Puffer und Lösungen werden in dem HIV-1 Proteaseinhibitor-Fluoreszenztest verwendet.
MES-ALB Puffer: 0,05 M 4-Morpholinethansulfonsäure, pH 5,5
0,02 M NaCl
0,002 M EDTA
0,001 M DTT
1,0 mg/ml BSA
TBSA Puffer 0,02 M TRIS
0,15 M NaCl
1,0 mg/ml BSA
Lösung mit Avidin beschichteten Kügelchen:
0,1% einer Lösung von Fluoricon Avidin Assay Particles (Avidin an feste Polystyrolkügelchen gebunden, 0,6-0,8 um im Durchmesser in TBSA Puffer)

Enzymlösung:

27 IE/ml der gereinigten HIV-1 Protease in MES-ALB Puffer (1 IE entspricht der Enzymmenge, die zur Hydrolyse von 1 umol Substrat pro Minute bei 37ºC erforderlich ist).
In jede Vertiefung einer Rundbodenplatte mit 96 Vertiefungen werden 20 ul der Enzymlösung, gefolgt von 10 ul der zu testenden Verbindung in einer 20%igen wäßrigen Dimethylsulfoxidlösung gegeben. Die gereinigte HIV-1 Protease wird wie oben beschrieben erhalten. Die entstehende Lösung wird für 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert und anschließend werden 20 ul einer Lösung, die das Substrat N α-Biotin-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile- Val-Gly-Lys(N &epsi;-FITC)-OH in MES-ALB Puffer (1,5 ul/ml) enthält, zu jeder Vertiefung gegeben. Die Lösungen werden dann für 16 Stunden bei Raumtemperatur inkubiert und anschließend wird jede Vertiefung mit 150 ul MES- ALB Puffer verdünnt.
In jede Vertiefung einer zweiten Pandex-Rundbodenplatte mit 96 Vertiefungen werden 25 ul der Lösung mit den Avidin beschichteten Kügelchen gegeben. Dann werden 25 ul der verdünnten Inkubationslösungen, die wie oben hergestellt wurden, in jede Vertiefung gegeben. Die Lösungen werden sorgfältig gemischt und die Platten werden in eine Pandex R Maschine gegeben, gewaschen, evakuiert und ausgewertet. Die Probendetektion erfolgt bei einer Anregung von 485 nm, die Auswertung der entstehenden Epifluoreszenz bei 535 nm.
Die HK&sub5;&sub0; Ergebnisse, die im Fluoreszenzversuch für die erfindungsgemäßen Verbindungen erhalten wurden, werden im folgenden in Tabelle 1 angegeben. Alle Werte wurden auf eine positive Kontrolle normiert, die [1S- (1R*,4R*,5S*)]-N-(1-(2-amino-2-oxoethyl)-2-oxo-3-aza-4-phenylmenylmethyl-5-hydroxy-6-6-(2-(1-t-butylamino-1 - oxomethyl)phenyl)hexyl)-2-chinolinylcarboxamid ist.

Tabelle 1

Hemmende Aktivität der Verbindungen der Formel I

Beispiel Nr. Fluoreszenztest HK&sub5;&sub0; in ng/ml
Kontrolle 1,0
1A -
1B -
1C 1,44
2 3,13
3 0,48
4 2,48
5A -
5B HK&sub4;&sub3; = 1000*
5C 0,53
6 2,4
7 0,95
8 2,28
9 1,76
10 1,67
11A -
11B -
11C 7,78
12 1,6
13 > 10000*
14 0,93
15 1,05
16 106
17 HK&sub2;&sub5; = 100*
*Die Konzentration der Verbindung wird nicht über die angegebene Konzentration erhöht.

Claims

1. Verbindung der Formel I

worin

R&sup0; für Wasserstoff C&sub1;-C&sub6; Alkoxycarbonyl oder C&sub2;-C&sub6; Alkanoyl steht,

n für 0, 1 oder 2 steht.

R für Aryl, einen Heterocyclus oder einen ungesättigten Heterocyclus steht,

R¹ für Aryl, C&sub5;-C&sub7; Cycloalkyl oder -S-R1x steht, worin R1x für Aryl oder C&sub5;-C&sub7; Cycloalkyl steht.

R² für eine Aminosäureseitenkette, Cyano(C&sub1;-C&sub4;)-Alkyl, -CH&sub2;SCH&sub3; oder -CH&sub2;C(O)-R2a steht, worin

R2a für C&sub1;-C&sub4; Alkylamino steht,

X für eine Gruppe mit folgender Struktur steht

oder

Y für Aryl steht.

R3a für eine Gruppe mit folgender Struktur steht

1) -C(O)-NR&sup4;R&sup4;

oder

R3b für eine Gruppe mit folgender Struktur steht

oder

p für 4 oder 5 steht,

1 für 3, 4 oder 5 steht,

R&sup4; jeweils unabhängig für Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6; Alkyl oder Hydroxy(C&sub1;-C&sub4;)alkyl steht,

R&sup5; und R&sup6; unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, Hydroxy, C&sub1;-C&sub6; Alkyl, C&sub1;-C&sub6; Alkoxy, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Hydroxy(C&sub1;-C&sub4;)alkyl, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;)alkylcarbamoyl, Aryl, einem Heterocyclus oder einem ungesättigten Heterocyclus,

oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon

und worin

der Ausdruck "Aryl" für einen Phenyl- oder Naphthylring steht, der wahlweise substituiert ist mit 1, 2 oder 3 Substituenten unabhängig ausgewählt aus Halogen, Morpholino(C&sub1;-C&sub4;)alkoxy, Pyridyl(C&sub1;-C&sub4;)alkoxy, Halogen(C&sub1;- C&sub4;)alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;)Alkylcarbarnoyl. Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Di(C&sub1;-C&sub4;)alkylamino oder einer Gruppe der Struktur-(CH&sub2;)a R&sub7;, worin a für 1, 2, 3 oder 4 steht und R&sub7; für Hydroxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Amino, Carbamoyl, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino oder Di(C&sub1;-C&sub4;)alkylamino steht,

der Ausdruck "Heterocyclus" für einen unsubstituierten oder substituierten stabilen fünf bis siebengliedrigen monocyclischen oder sieben- bis zehngliedrigen bicyclischen heterocyclischen Ring steht, der gesättigt ist und aus Kohlenstoffatomen und ein bis drei Heteroatomen besteht, ausgewählt aus der Gruppe, die besteht aus Stickstoff Sauerstoff oder Schwefel, und worin die Stickstoff und Schwefelheteroatome wahlweise oxidiert sein können und das Stickstoffheteroatom wahlweise quaternär sein kann und eine bicyclische Gruppe einschließt, worin einer der oben definierten heterocyclischen Ringe an einen Benzolring fusioniert ist, wobei der Heterocyclus wahlweise mit 1, 2 oder 3 Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Halogen, Halogen(C&sub1;-C&sub4;)alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;)-Alkylcarbamoyl, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Di(C&sub1;-C&sub4;)alkylamino oder einer Gruppe der Struktur -(CH&sub2;)a-R&sub7;, worin a für 1, 2, 3 oder 4 steht und R&sub7; für Hydroxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Amino, Carbamoyl, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino oder Di(C&sub1;- C&sub4;)alkylamino steht

der Ausdruck "ungesättigter Heterocyclus" für einen unsubstituierten oder substituierten stabilen fünf bis siebengliedrigen monocyclischen oder sieben- bis zehngliedrigen bicyclischen heterocyclischen Ring steht, der eine oder mehrere Doppelbindungen aufweist und aus Kohlenstoffatomen und ein bis drei Heteroatomen besteht, ausgewählt aus der Gruppe, die besteht aus Stickstoff, Sauerstoff oder Schwefel, und worin die Stickstoff und Schwefelheteroatome wahlweise oxidiert sein können und das Stickstoffheteroatom wahlweise quarternär sein kann und eine bicyclische Gruppe einschließt, worin einer der oben definierten heterocyclischen Ringe an einen Benzolring fusioniert ist, der bei einer Substitution 1, 2 oder 3 Substituenten aufweist, die ausgewählt sind aus Halogen, Halogen(C&sub1;- C&sub4;)alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkyl, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Carbamoyl, N-(C&sub1;-C&sub4;)-Alkylcarbamoyl, Amino, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino, Di(C&sub1;-C&sub4;)alkylamino oder einer Gruppe der Struktur-(CH&sub2;)a-R&sub7;, worin a für 1, 2, 3 oder 4 steht und R&sub7; für Hydroxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxy, Carboxy, C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl, Amino, Carbamoyl, C&sub1;-C&sub4; Alkylamino oder Di(C&sub1;-C&sub4;)alkylamino steht,

und der Ausdruck "Aminosäureseitenkette" für das bestimmte Atom oder die Gruppe steht, die an ein α- Kohlenstoffatom gebunden ist, das hieran ebenfalls eine Carboxylgruppe und eine Aminogruppe gebunden aufweist, wobei die Seitenkette aus denen ausgewählt wird, die an den folgenden Aminosäuren gefunden werden:

Alanin Ala

Arginin Arg

Asparagin Asn

Asparaginsäure Asp

Cystein Cys

Glutamin Gln

Glutaminsäure Glu

Glycin Gly

Histidin His

Isoleucin Ile

Leucin Leu

Lysin Lys

Methionin Met

Phenylalanin Phe

Prolin Pro

Serin Ser

Threonin Thr

Tryptophan Trp

Tyrosin Tyr

Valin Val

2. Verbindung nach Anspruch 1 der Formel

worin

R&sup0; für Wasserstoff oder C&sub1;-C&sub4; Alkoxycarbonyl steht,

R für Aryl oder einen ungesättigten Heterocyclus (wie in Anspruch 1 definiert) steht.

R² für -CH(CH&sub3;)&sub2;, -CH&sub2;-C(O)NH&sub2; oder -CH&sub2;-Imidazol-4-yl steht,

R¹ für Aryl oder -S-R1x steht, worin R1x für Aryl steht,

X steht für

und

R3a für -C(O)NH(t-butyl) steht,

oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.

3. Verbindung nach Anspruch 2, worin

R&sup0; für t-Butoxycarbonyl steht,

R für Naphth-1-yl, Phenyl oder Indol-3-yl steht,

R² für -CH&sub2;-C(O)NH&sub2; steht,

R¹ für Phenyl steht, und

Y für Phenyl steht,

oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.

4. Verbindung nach Anspruch 3, die ist

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid.

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(1-methylethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-phenyl]decylbenzamid,

[2R-(2R*,35*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(imidazol-4-ylmethyl)-9- N(t-butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid,

[2R-(2R*,3S*,6S*,9R*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-indol-3-yl]decylbenzamid, oder

[2R-(2R*,3S*,6S*,9S*)]-N-t-Butyl-2-[2-hydroxy-3-phenylmethyl-4,7-diaza-5,8-dioxo-6-(carbamoylmethyl)-9-N(t- butoxycarbonyl)amino-10-naphth-1-yl]decylbenzamid,

oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.

5. Pharmazeutische Formulierung, die als Wirkstoff eine Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon nach einem der Ansprüche 1 bis 4 zusammen mit einem oder mehreren pharmazeutisch annehmbaren Trägern hierfür enthält.

6. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4 zur Verwendung als antivirales Mittel.

7. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4 zur Verwendung bei der Hemmung der HIV Replikation.