JP2551607B2 - メラニン生成抑制物質 - Google Patents
メラニン生成抑制物質Info
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- JP2551607B2 JP2551607B2 JP62304008A JP30400887A JP2551607B2 JP 2551607 B2 JP2551607 B2 JP 2551607B2 JP 62304008 A JP62304008 A JP 62304008A JP 30400887 A JP30400887 A JP 30400887A JP 2551607 B2 JP2551607 B2 JP 2551607B2
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- JP
- Japan
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- substance
- melanin production
- present
- placenta
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- Prior art date
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
- A61K8/981—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of mammals or bird
- A61K8/982—Reproductive organs; Embryos, Eggs
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、牛の妊娠中の胎盤中に存在するメラニン生
成抑制物質に関するものである。
成抑制物質に関するものである。
胎盤中にメラニン生成抑制作用を有する物質があるこ
とにより、同胎盤抽出エキスを皮膚のメラニン色素の生
成抑制、同色素の脱色のために皮膚塗布用外用剤、白美
化粧料に用いることは公知である(特公昭48−30370号
公報)。また、胎盤からメラニン生成を抑制する物質の
抽出法が特公昭48−30370号公報、特開昭58−177918号
公報に開示されている。
とにより、同胎盤抽出エキスを皮膚のメラニン色素の生
成抑制、同色素の脱色のために皮膚塗布用外用剤、白美
化粧料に用いることは公知である(特公昭48−30370号
公報)。また、胎盤からメラニン生成を抑制する物質の
抽出法が特公昭48−30370号公報、特開昭58−177918号
公報に開示されている。
また更に、人の満期胎盤の中のメラニン生成抑制作用
を有する物質が特開昭60−255730号公報により開示され
ている。
を有する物質が特開昭60−255730号公報により開示され
ている。
本発明は人及び動物の胎盤中に含まれるメラニン生成抑
制作用を有する物質で、公知の物質とはメラニン生成抑
制作用の相違する物質を探究し、その物質を単離し、そ
の性質を明確に確認することにより一層有用な物質を得
ることを目的とするものである。
制作用を有する物質で、公知の物質とはメラニン生成抑
制作用の相違する物質を探究し、その物質を単離し、そ
の性質を明確に確認することにより一層有用な物質を得
ることを目的とするものである。
本発明者等は、人を含む各種の哺乳動物の胎盤中に含
まれるメラニン生成抑制物質について、胎盤抽出物中よ
りその物質を単離、精製しその作用機序について研究を
重ねたところ、牛の妊娠中の胎盤に含まれる物質が、公
知の人の満期胎盤に含まれる物質とそのメラニン生成抑
制作用機序が異なり特異なものであることを見出した。
まれるメラニン生成抑制物質について、胎盤抽出物中よ
りその物質を単離、精製しその作用機序について研究を
重ねたところ、牛の妊娠中の胎盤に含まれる物質が、公
知の人の満期胎盤に含まれる物質とそのメラニン生成抑
制作用機序が異なり特異なものであることを見出した。
そこで、この物質の単離、精製を行い、その物質を確
認することができ本発明を完成した。
認することができ本発明を完成した。
本発明は牛の妊娠中の胎盤から得られた全窒素105mg/
100ml、赤外線吸収スペクトル(第1図に示す通り)、
紫外線吸収スペクトル(第2図に示す通り)の性質を有
するメラニン生成抑制物質である。
100ml、赤外線吸収スペクトル(第1図に示す通り)、
紫外線吸収スペクトル(第2図に示す通り)の性質を有
するメラニン生成抑制物質である。
本発明の物質は牛の妊娠中の胎盤を細切して除血した
ものを原料とし、これをミキサー等で機械的に破壊し、
水で約40〜45℃、3〜5時間抽出し、後遠心分離する。
得られた粗製の牛胎盤エキスをpH4〜5に調節し、50〜6
0℃で約10分間加温し、濾紙濾過して生成した沈澱物を
除き濾液を収集し、pH6.0〜7.5に調節することにより得
ることができる。
ものを原料とし、これをミキサー等で機械的に破壊し、
水で約40〜45℃、3〜5時間抽出し、後遠心分離する。
得られた粗製の牛胎盤エキスをpH4〜5に調節し、50〜6
0℃で約10分間加温し、濾紙濾過して生成した沈澱物を
除き濾液を収集し、pH6.0〜7.5に調節することにより得
ることができる。
次に本発明の物質の製造例を示す。
製造例 牛の妊娠中の胎盤を水洗し、1cm角程度に細切し、水
中で圧搾しながら除血し、水切りを充分に行う。この胎
盤40.00Kgを更に細切し、これに精製水80.0l及びパラオ
キシ安息香酸メチル240gを加え、ミキサーで処理し粥状
液とする。この液を40〜45℃で3時間緩やかに攪拌しな
がら抽出を行う。この抽出液を遠心分離(8000r.p.m)
を行い、上澄液を取りpHを4.5に調節し、50℃で10分間
攪拌し、かつ、このpH領域に等電点を有する蛋白質等を
析出せしめ、これを濾紙により濾過する。濾液に10%水
酸化ナトリウム水溶液を加えてpHを7.0に調節し、更に
濾過し本発明の物質80Kgを得る。
中で圧搾しながら除血し、水切りを充分に行う。この胎
盤40.00Kgを更に細切し、これに精製水80.0l及びパラオ
キシ安息香酸メチル240gを加え、ミキサーで処理し粥状
液とする。この液を40〜45℃で3時間緩やかに攪拌しな
がら抽出を行う。この抽出液を遠心分離(8000r.p.m)
を行い、上澄液を取りpHを4.5に調節し、50℃で10分間
攪拌し、かつ、このpH領域に等電点を有する蛋白質等を
析出せしめ、これを濾紙により濾過する。濾液に10%水
酸化ナトリウム水溶液を加えてpHを7.0に調節し、更に
濾過し本発明の物質80Kgを得る。
次に本発明の物質のメラニン生成抑制作用並びに線維
芽細胞増殖作用の試験及びその結果を示す。
芽細胞増殖作用の試験及びその結果を示す。
1.メラニン生成抑制作用試験 本発明の物質を10%牛胎仔血清を含むイーグル(Eage
l)のMEM培地に溶解し、この培地にB16マウスメラノー
マ細胞(以下B16細胞を称す)を培養した。培養5日
後、B16細胞は略完全に白色化した。この白色化したB16
細胞の光顕的観察では、ドーパ(dopa)反応陽性細胞及
びプレメラノソーム(premelanosome)反応陽性細胞の
減少が認められ、また電顕観察ではメラノソーム(mela
nosome)は著しく減少し、形態的変化を起こしたプレメ
ラノソームが多数認められた。
l)のMEM培地に溶解し、この培地にB16マウスメラノー
マ細胞(以下B16細胞を称す)を培養した。培養5日
後、B16細胞は略完全に白色化した。この白色化したB16
細胞の光顕的観察では、ドーパ(dopa)反応陽性細胞及
びプレメラノソーム(premelanosome)反応陽性細胞の
減少が認められ、また電顕観察ではメラノソーム(mela
nosome)は著しく減少し、形態的変化を起こしたプレメ
ラノソームが多数認められた。
本発明の物質を添加した培地で培養したB16細胞のタ
イロシネース アイソザイム(tyrosinase isozyme)の
活性は培養期間と共に徐々に減少し、各分画の電気泳動
的タイロシネース アイソザイムの活性は、T1,T2,T3
共に全般的な減少を見た。
イロシネース アイソザイム(tyrosinase isozyme)の
活性は培養期間と共に徐々に減少し、各分画の電気泳動
的タイロシネース アイソザイムの活性は、T1,T2,T3
共に全般的な減少を見た。
なお、タイロシネースはメラニン生成に関与する重要
な酵素の一つであり、この酵素は生体内で3種のアイソ
ザイムすなわちT1型,T2型,T3型として存在する。この
タイロシネースは、最初生体内でT2型のアイソザイムが
生成し、順次修飾されてT1型、T3型へと変換される。最
終的にメラニンが生成される顆粒(プレメラノソーム)
に存在するアイソザイムはT3型である。
な酵素の一つであり、この酵素は生体内で3種のアイソ
ザイムすなわちT1型,T2型,T3型として存在する。この
タイロシネースは、最初生体内でT2型のアイソザイムが
生成し、順次修飾されてT1型、T3型へと変換される。最
終的にメラニンが生成される顆粒(プレメラノソーム)
に存在するアイソザイムはT3型である。
このように、本発明の物質のメラニン生成抑制作用に
おける特徴はタイロシネース アイソザイムT1,T2,T3
の活性が時間と共に全般的に減少するところにある。
おける特徴はタイロシネース アイソザイムT1,T2,T3
の活性が時間と共に全般的に減少するところにある。
第1図は、本発明のメラニン生成抑制物質の赤外線吸
収スペクトルを示し、第2図は、本発明のメラニン生成
抑制物質の紫外線吸収スペクトルを示す。
収スペクトルを示し、第2図は、本発明のメラニン生成
抑制物質の紫外線吸収スペクトルを示す。
一方、公知の人満期胎盤中に存在するメラニン生成抑
制物質は上述の試験と同様にB16細胞の白色化の試験を
行ったところ、同物質を添加した培地で培養したB16細
胞のタイロシネースの活性は培養期間の早期に、まずT2
型のアイソザイム活性が著しく減少し、その後、培養期
間の延長と共にT1型及びT3型アイソザイム活性が遅れて
減少する。
制物質は上述の試験と同様にB16細胞の白色化の試験を
行ったところ、同物質を添加した培地で培養したB16細
胞のタイロシネースの活性は培養期間の早期に、まずT2
型のアイソザイム活性が著しく減少し、その後、培養期
間の延長と共にT1型及びT3型アイソザイム活性が遅れて
減少する。
この実験結果を第3図および第4図に示した。
第3図は、本発明の牛の満期胎盤のタイロシネースア
イソザイム活性を示す図面であり、第4図は、人の満期
胎盤抽出物(対照)のタイロシネースアイソザイム活性
を示す図面である。
イソザイム活性を示す図面であり、第4図は、人の満期
胎盤抽出物(対照)のタイロシネースアイソザイム活性
を示す図面である。
以上の所見によっても、本発明の物質と公知の人満期
胎盤中の物質との相違によるメラニン生成抑制の性質が
異なることは明らかである。
胎盤中の物質との相違によるメラニン生成抑制の性質が
異なることは明らかである。
2.線維芽細胞増殖作用試験 本発明の物質14mlの凍結乾燥品を3%仔牛血清含有イ
ーグル(Eagle)MEM14mlに溶解し、本発明の物質添加培
地を調製した。この試料を1ユニットとした。
ーグル(Eagle)MEM14mlに溶解し、本発明の物質添加培
地を調製した。この試料を1ユニットとした。
上記培地の1/4,1/8,1/16ユニットをそれぞれ各別にプ
ラスチックシャーレに入れ、この各培地に培養線維芽細
胞(マウス由来Balb/3TI2−3)を0.2×105個播種し、3
7℃ 5%CO2気相下で5日培養した。
ラスチックシャーレに入れ、この各培地に培養線維芽細
胞(マウス由来Balb/3TI2−3)を0.2×105個播種し、3
7℃ 5%CO2気相下で5日培養した。
培養5日後、トリプシン液を用いて細胞を剥離し、PB
Sで希釈した後、細胞数を測定した。
Sで希釈した後、細胞数を測定した。
なお、コントロールとして本発明の物質を添加しない
培地についても同様の試験を行った。
培地についても同様の試験を行った。
本発明の物質の添加濃度における線維芽細胞数を下記
表に示した。
表に示した。
次いで、比較例として、人の満期胎盤の抽出物の線維
芽細胞増殖作用を試験した。
芽細胞増殖作用を試験した。
試料として、人の満期胎盤抽出物を、前記牛胎盤抽出
物と同様の方法で製造した。
物と同様の方法で製造した。
得られた人の満期胎盤抽出物を、上記と同じ方法で線
維芽細胞増殖作用を調べた。
維芽細胞増殖作用を調べた。
その結果を表2に示した。
表2の結果から明らかなように、本発明の物質の線維
芽細胞増殖作用は、人満期胎盤抽出物よりも高いことを
示している。
芽細胞増殖作用は、人満期胎盤抽出物よりも高いことを
示している。
以上の試験結果より明らかな如く、本発明の物質は低
濃度で顕著な線維芽細胞の増殖効果を示すものである。
濃度で顕著な線維芽細胞の増殖効果を示すものである。
本発明の物質は公知の人満期胎盤に含有するメラニン
生成抑制物質とメラニン生成抑制機序が異なり、生体内
のメラニン生成に不可欠な酵素であるタイロシネース
アイソザイムT1,T2,T3型の活性を全般的に顕著に減少
させる極めて有用なメラニン生成抑制物質である。さら
に、人皮膚の細胞賦活性用の指標として用いられる線維
芽細胞に対して顕著な増殖作用を有する物質である。以
上の特有な作用を有する本発明の物質は化粧料を含む外
用剤の有効成分として極めて有用な物質である。このと
き、既知のメラニン生成抑制物質であるコウジ酸、ビタ
ミンC、ビタミンE、ハイドロキノンおよびそれらの誘
導体並びにフラボノイド化合物、霊芝・甘草・桂皮・当
帰等の生薬類と併用するとさらに効果が期待できる。
生成抑制物質とメラニン生成抑制機序が異なり、生体内
のメラニン生成に不可欠な酵素であるタイロシネース
アイソザイムT1,T2,T3型の活性を全般的に顕著に減少
させる極めて有用なメラニン生成抑制物質である。さら
に、人皮膚の細胞賦活性用の指標として用いられる線維
芽細胞に対して顕著な増殖作用を有する物質である。以
上の特有な作用を有する本発明の物質は化粧料を含む外
用剤の有効成分として極めて有用な物質である。このと
き、既知のメラニン生成抑制物質であるコウジ酸、ビタ
ミンC、ビタミンE、ハイドロキノンおよびそれらの誘
導体並びにフラボノイド化合物、霊芝・甘草・桂皮・当
帰等の生薬類と併用するとさらに効果が期待できる。
第1図は本発明のメラニン生成抑制物質の赤外線吸収ス
ペクトルを示す。 第2図は本発明のメラニン生成抑制物質の紫外線吸収ス
ペクトルを示す。 第3図は、本発明のメラニン生成抑制物質のタイロシネ
ースアイソザイム活性を示す図面である。 第4図は、人の満期胎盤抽出物(対照)のタイロシネー
スアイソザイム活性を示す図面である。
ペクトルを示す。 第2図は本発明のメラニン生成抑制物質の紫外線吸収ス
ペクトルを示す。 第3図は、本発明のメラニン生成抑制物質のタイロシネ
ースアイソザイム活性を示す図面である。 第4図は、人の満期胎盤抽出物(対照)のタイロシネー
スアイソザイム活性を示す図面である。
Claims (1)
- 【請求項1】牛の妊娠中の胎盤から得られた全窒素105m
g/100ml、赤外線吸収スペクトル(第1図に示す通
り)、紫外線吸収スペクトル(第2図に示す通り)の性
質を有するメラニン生成抑制物質。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62304008A JP2551607B2 (ja) | 1987-11-30 | 1987-11-30 | メラニン生成抑制物質 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62304008A JP2551607B2 (ja) | 1987-11-30 | 1987-11-30 | メラニン生成抑制物質 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01143887A JPH01143887A (ja) | 1989-06-06 |
| JP2551607B2 true JP2551607B2 (ja) | 1996-11-06 |
Family
ID=17927951
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62304008A Expired - Lifetime JP2551607B2 (ja) | 1987-11-30 | 1987-11-30 | メラニン生成抑制物質 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2551607B2 (ja) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6157291B2 (ja) | 2013-09-11 | 2017-07-05 | キヤノン株式会社 | 撮像装置およびその制御方法、撮像システム、プログラム、記憶媒体 |
| JP6237011B2 (ja) | 2013-09-05 | 2017-11-29 | 富士電機株式会社 | 半導体装置 |
-
1987
- 1987-11-30 JP JP62304008A patent/JP2551607B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6237011B2 (ja) | 2013-09-05 | 2017-11-29 | 富士電機株式会社 | 半導体装置 |
| JP6157291B2 (ja) | 2013-09-11 | 2017-07-05 | キヤノン株式会社 | 撮像装置およびその制御方法、撮像システム、プログラム、記憶媒体 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH01143887A (ja) | 1989-06-06 |
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