JP2801491B2

JP2801491B2 - エピポリチオジオキソピペラジン誘導体およびその製造法

Info

Publication number: JP2801491B2
Application number: JP5010579A
Authority: JP
Inventors: 瑛子松村; 千佳高橋; 敦沼田; 豊村橋; 知津子北川; 秀夫岩木; 宏昌荒木
Original assignee: Fuso Pharmaceutical Industries Ltd
Current assignee: Fuso Pharmaceutical Industries Ltd
Priority date: 1993-01-26
Filing date: 1993-01-26
Publication date: 1998-09-21
Anticipated expiration: 2013-09-21
Also published as: JPH06220065A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はエピポリチオジオキソピ
ペラジン誘導体及びその製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】本発
明は、優れた細胞増殖抑制作用を有するエピポリジオキ
ソピペラジン誘導体を提供することを目的とする。ま
た、本発明は、当該エピポリジオキソピペラジン誘導体
の発酵的製造方法を提供することを目的とする。なおま
た、本発明は、当該エピポリチオジオキソピペラジン誘
導体を有効成分とする細胞増殖抑制剤を提供することを
目的とする。

【０００３】

【課題を解決するための手段】本発明者らは新規な抗腫
瘍活性物質の探索を目的として、海洋に棲息する種々の
微生物を採取し、その代謝産物を探索したところ、レプ
トスフェリア（Leptosphaeria）属やセスキシリウム（S
esquicillium）属に属する微生物の培養物中に、強力な
細胞増殖抑制作用を有する物質が産生されていることを
見出した。本発明者らはこの細胞増殖抑制物質を詳細に
検討した結果、エピポリチオジオキソピペラジン骨格を
有する一連の化合物であることを確認すると共に、それ
らの単離、精製に成功した。

【０００４】本発明の目的物質であるこれらエピポリチ
オキソピペラジン誘導体（以下、ＯＵＰＳ−８０Ｔと総
称する。）は、次の一般式（Ｉ）で表される：

【化４】（式中、Ｒ₁およびＲ₂は同一または異なって低級アルキ
ルまたはヒドロキシ置換低級アルキルであり、Ｒ₃は式
（ａ）

【化５】または式（ｂ）

【化６】であり、Ｒ₄およびＲ₅は同一または異なって低級アルキ
ルまたはヒドロキシ置換低級アルキルであり、ｍおよび
ｎは同一または異なって２〜４の整数である）。上記記
号が示す「低級アルキル」または「ヒドロキシ置換低級
アルキル」の低級アルキル部分は、メチル、エチル、プ
ロピル、ブチルなどであってよい。一般式（Ｉ）には、
公知の物質も含まれており、Ｒ₃が（ａ）であり、かつ
Ｒ₁＝Ｒ₂＝Ｒ₄＝Ｒ₅＝ＣＨ₃である場合のｍ＝ｎ＝２の
化合物、Ｒ₃が（ａ）であり、Ｒ₁＝ＣＨ₂ＯＨであり、
かつＲ₂＝Ｒ₄＝Ｒ₅＝ＣＨ₃である場合のｍ＝ｎ＝２の化
合物、Ｒ₃が（ａ）であり、Ｒ₁＝ＣＨ₂ＯＨであり、か
つＲ₂＝Ｒ₄＝Ｒ₅＝ＣＨ₃である場合のｍ＝２、ｎ＝３の
化合物およびＲ₃が（ａ）であり、Ｒ₁＝Ｒ₄＝ＣＨ₂ＯＨ
であり、かつＲ₂＝Ｒ₅＝ＣＨ₃である場合のｍ＝ｎ＝４
の化合物は、それぞれバーティシリン（Verticillin）
Ａ、バーティシリンＢ、バーティシリンＣおよびケトラ
シン（Chetracin）Ａとして知られている（斎藤孝男
ら、ケミカル・アンド・ファーマシューティカル・ビュ
レタン（Chem．Pharm．Bull.，36(6)1942〜1956（198
8)))。これらを除く物質はいずれも新規物質と考えら
れ、その代表例は第１表に示すとおりである。

【表１】

【表２】

【表３】

【表４】

【表５】

【表６】

【表７】

【表８】

【０００５】本発明目的物質ＯＵＰＳ−８０Ｔを製造す
るには、海洋に生息する微生物であるレプトスフェリア
属またはセスキシリウム属に属するＯＵＰＳ−８０Ｔ生
産菌を培養し、その培養物から当該物質を採取すればよ
い。ここでＯＵＰＳ−８０Ｔの製造に使用されるレプト
スフェリア属微生物の一例としては、和歌山県田辺湾沿
岸で採集した海藻ヨレモクから分離された真菌であるレ
プトスフェリア・エスピー（Leptosphaeria sp．）ＯＵ
ＰＳ−８０があり、これは工業技術院微生物工業技術研
究所に微工研菌寄第１２９０５号(ＦＥＲＭＰ−１２
９０５)として寄託されている。また、セスキシリウム
属微生物の一例としては、大阪湾沿岸で採集したモエギ
イソギンチャクから分離された真菌であるセスキシリウ
ム・カンデラブラム(Sesquicillium canderabrum (Bono
rd.) W. Gams)ＯＵＰＳ−１００が挙げられ、これは工
業技術院微生物工業技術研究所に微工研菌寄第１３２０
１号（ＦＥＲＭＰ−１３２０１）として寄託されてい
る。

【０００６】上記したレプトスフェリア・エスピーＯＵ
ＰＳ−８０の菌学的性質は以下のとおりである。 (ａ)培養物 (１)各培地における生育状態ツアペック寒天培地ツアペック寒天培地上での生育は５℃ではまったく起こ
らず、３０℃では７日間でコロニーの直径が約２ｃｍに
達する。性状は白い綿状である。１４日間の培養でコロ
ニーの直径は３．５〜４ｃｍに達し、表面は白い綿状で
あるが、内部は黄緑色を呈する。裏面は中心部は黒色、
中間部は灰色、円周部は黄色となる。ポテト・ショ糖寒天培地ポテト・ショ糖寒天培地上での生育は５℃ではまったく
起こらない。３０℃では７日間でコロニーの直径が３．
５〜４ｃｍに達する。性状は周辺部は白い綿状で、他の
部分は灰色を呈している。１５日間の培養ではコロニー
の直径は６．５ｃｍに達し、表面は白い綿状を呈し、内
部は黒緑色となる。コロニーの裏面は周辺部は白色、中
心部は黒色である。黒緑色の部分に偽子のう殻の形成が
認められる。マルトエキストラクト寒天培地マルトエキストラクト寒天培地上での生育は５℃ではま
ったく起こらない。３０℃では７日間でコロニーの直径
が２．４〜２．６ｃｍに達する。性状は白い綿状であ
る。コロニーの裏面はポテト・ショ糖寒天培地上のコロ
ニーと同様、周辺部は白色、中心部は黒色を呈する。１
５日間の培養でコロニーの直径は５ｃｍに達し、それに
ともなって全体が湿った状態となる。ブドウ糖・ペプトン・酵母エキス・海水寒天培地ブドウ糖・ペプトン・酵母エキス・海水寒天培地上での
生育は５℃ではまったく起こらない。３０℃では３日間
でコロニーの直径が１ｃｍに達し、白い綿状で中心部が
盛り上がった状態で生育する。コロニーの裏面は黄橙色
を呈する。１５日間の培養でコロニーの直径は４．５ｃ
ｍに達し、裏面は全体が黄土色を呈し、中心部より放射
状に黒いすじ状の皺を生じる。また、偽子のう殻が形成
され、子のうと子のう胞子が多く認められる。

【０００７】(２)生理的、生態的性質最適生育条件ｐＨ６〜７．５温度２７〜３０℃ 生育の範囲ｐＨ４〜８．５温度２０〜４０℃ その他の顕著な特徴ブドウ糖・ペプトン・酵母エキス・海水寒天培地での培
養により、ＯＵＰＳ−８０Ｔを培地中に生産する。 (３)顕微鏡的所見偽子のう殻：孔口は著しくない。埋没性、偏球形で大き
さは１２０〜１５０×２００〜３００μｍである。殻壁：偽柔組織状の厚膜で、褐色を呈する。子のう：多数認められ、こん棒形〜円筒形で、ときに屈
曲している。偽側糸はひも状で、無色である。子のう胞子：紡錘形で、大きさは２０〜２２×４μｍ
で、黄褐色〜淡褐色を呈する。

【０００８】上記菌学的性質を、エー・ムンク、ダンス
ク・ボタニ・アーク(Dansk Botan.Ark.)、(１９５７
年)、アール・ダブリュー・ジー・デニス、ブリティッ
シュ・アスコマイセテス(British Ascomycetes)(１９６
８年)、および椿啓介ら、菌類図鑑(上)(１９７８年)
に照合し、その菌種を検索したところ、本菌株はレプト
スフェリア属に属するものと判断された。本菌株はレプ
トスフェリア・ノドラムに類似するが、レプトスフェリ
ア・ノドラムでは偽子のう殻が球形であるのに対し、本
菌株では偏球形である点が異なる。さらに、レプトスフ
ェリア・ノドラムではフィアロ型分生子を分生子殻中に
形成するが、本菌株ではそれを認めない。以上の結果か
ら、本菌株はレプトスフェリア属に属する新菌種と同定
してレプトスフェリア・エスピーＯＵＰＳ−８０と命名
した。

【０００９】一方、セスキシリウム・カンデラブラムＯ
ＵＰＳ−１００については、ポテト・ショ糖寒天培地、
マルトエキストラクト寒天培地およびツァペック寒天培
地における生育状態、最適生育温度、最適生育ｐＨ範囲
および顕微鏡下における観察結果を検討し、その菌学的
性質をケイ・エッチ・ドムシュら、コンペンディウム・
オブ・ソイル・ファンギ(Compendium of Soil Fungi)
（１９８０年）、奥田徹ら、トランス・マイコル・ソサ
・ジャパン(Trans. mycol. Soc. Japan.)（１９７７
年）、椿啓介ら、「菌類図鑑（下）」（１９７８年）
に照合し、本菌株を公知のセスキシリウム・カンデラブ
ラムと同定した。

【００１０】ＯＵＰＳ−８０Ｔ生産菌の培養に用いられ
る培地としては、当該菌が利用し得る栄養源を含むもの
であれば液状でも固状でもよいが、大量のＯＵＰＳ−８
０Ｔを得るためには液体培地を用いるのが好ましい。こ
の培地には、当該菌が同化し得る炭素源、消化し得る窒
素源および無機物が適宜配合される。炭素源としては、
ブドウ糖、ショ糖、麦芽糖、乳糖、デンプなどが、窒素
源としては、酵母エキス、肉エキス、ペプトン、ポリペ
プトン、マルトエキストラクト、硝酸ナトリウムなどが
用いられる。培地は通常人工海水を用いて調整するの
で、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム
などの塩類が培地に含まれる。初発ｐＨは約７．５の条
件が、また、培養温度は２５〜３０℃の範囲が適当であ
る。

【００１１】ＯＵＰＳ−８０Ｔ生産菌は静止した物体に
付着して増殖する性質があるので静置培養が望ましく、
また、当該菌が付着するような物体、例えばアルミ箔を
液体培地中に入れておくと増殖が促進される。培養期間
は一定しないが、生産さるべきＯＵＰＳ−８０Ｔの濃度
が最大となるまで培養するのが望ましい。これに要する
日数は、液体培地を用いる静置培養の場合、通常３〜４
週間が適当である。

【００１２】得られた培養液は遠心分離または濾過など
の手段により、菌体と培養液とに分離される。この両者
は共に細胞増殖抑制作用を示すが、ＯＵＰＳ−８０Ｔは
菌体により多く含まれている。集められた菌体からＯＵ
ＰＳ−８０Ｔを抽出するには、水と混和する有機溶媒、
例えばメタノール、エタノールなどの低級アルコール
類、アセトン、メチルエチルケトンなどを使用すればよ
い。また、水と混和しない有機溶媒、例えばクロロホル
ム、塩化メチレン、酢酸エチルなどを使用してもよい。
このようにして得られた抽出液から減圧下に溶媒を留去
すれば、ＯＵＰＳ−８０Ｔを含む粗抽出物を得ることが
できる。

【００１３】この粗抽出物からＯＵＰＳ−８０Ｔを単
離、精製するには、通常の脂溶性低分子物質の単離、精
製手段を適用することができる。すなわち、セファデッ
クスＬＨ−２０(ファルマシア社、商標)などを用いるゲ
ル濾過型クロマトグラフィー、シリカゲルなどの吸着剤
を用いる吸着クロマトグラフィー、シリカゲルなどの順
相系担体を用いる高速液体クロマトグラフィーなどを単
独または組み合わせて実施すればよい。セファデックス
ＬＨ−２０を用いる場合は、一般に極性有機溶媒と非極
性有機溶媒との組み合わせ、例えばメタノールとクロロ
ホルムまたは塩化メチレンなどの混合溶媒により溶出さ
れる。シリカゲルを用いる吸着クロマトグラフィーを使
用する場合は、ヘキサンとクロロホルムまたは塩化メチ
レンなどの混合溶媒を溶出溶媒とするのが適している。
シリカゲルを担体とする高速液体クロマトグラフィーの
場合には、塩化メチレンとベンゼンまたはメタノールの
混合溶媒あるいは塩化メチレン単独を溶出溶媒として用
いる。このような精製手段を適用することにより、前記
の第１表にしめされるＯＵＰＳ−８０Ｔの１種またはそ
れ以上が単離される。なお、化合物Ｔ−１とＴ−２は、
それらの物理化学的性質に鑑み、立体異性体であると考
えられる。

【００１４】本発明で得られるＯＵＰＳ−８０Ｔは、一
般に細胞増殖抑制作用を発揮する。例えば後記試験例か
ら明らかなように、マウスやヒトの各種悪性腫瘍細胞に
対して顕著な増殖抑制作用を示す。従って、ＯＵＰＳ−
８０Ｔは白血病抑制剤や抗腫瘍剤として有用である。

【００１５】実施例以下、この発明を実施例および試験例により説明する
が、これらは本発明を制限するものと理解されてはなら
ない。なお、％とあるのは特記しない限り重量％を意味
する。実施例１ＯＵＰＳ−８０Ｔの生産(レプトスフェリア・エスピー
を使用）：ーブドウ糖２％、ポリペプトン１％、酵母エキス０.５％
を含む人工海水培地(ｐＨ７．５)７００ｍｌを、予め内
部に約１〜２ｃｍ幅のアルミ箔をＳ字状に置いた２００
ｍｌの三角フラスコに７０ｍｌずつ分注した。滅菌後、
これらにレプトスフェリア・エスピーＯＵＰＳ−８０
(微工研寄第１２９０５号)を１白金耳量接種し、２７℃
で６日間静置培養した。次に同じ培地１０リットルを、
同様にアルミ箔をＳ字状に置いた２００ｍｌの三角フラ
スコに７０ｍｌずつ分注し、滅菌後上記の種菌を加え、
２７℃で約４週間静置培養を行った。培養後、培養液よ
り菌体を濾取し、これにメタノール５リットルを加え、
撹拌後一夜放置し、濾過して抽出液を得た。減圧下にメ
タノールを留去してメタノールエキス２５ｇを得、これ
にヘキサンを加えてヘキサン可溶部を除き、残渣にメタ
ノール／塩化メチレン(１：１)の混合溶媒を加えて、混
合溶媒可溶部と混合溶媒不溶部に分別した。混合溶媒可
溶部から減圧下に溶媒を留去して、細胞毒性を示す油状
物質１０．２ｇを得た。得られた油状物質はセファデッ
クスＬＨ−２０を用いたゲル濾過型クロマトグラフィー
に付し、メタノール／塩化メチレン(１：１)の混合溶媒
で溶出を行うことにより、細胞毒性を示す画分４ｇを得
た。この画分をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに
付し、ヘキサン、次いでヘキサン／塩化メチレン(８：
２)の混合溶媒で溶出を行って不純物を除去した後、ヘ
キサン／塩化メチレン(６：４)の混合溶媒で溶出を行う
ことにより、Ｔ−１を含む画分１、Ｔ−２およびＴ−１
１を含む画分２、Ｔ−３、Ｔ−４およびＴ−１２を含む
画分３ならびにＴ−５、Ｔ−６およびＴ−１３を含む画
分４を得、次にヘキサン／塩化メチレン(４：６)の混合
溶媒で溶出を行うことにより、Ｔ−７およびＴ−８を含
む画分５、さらに塩化メチレンを溶出溶媒とした溶出に
より、Ｔ−９を含む画分６およびＴ−１０を含む画分７
を得た。各画分はシリカゲル(ナカライテスク社、ＣＯ
ＳＭＯＳＩＬ１０ＳＬ)を用いる順相系の高速液体ク
ロマトグラフィーに付された。画分１〜７は展開溶媒と
して塩化メチレンを用いた結果、画分１からＴ−１(３
ｍｇ)、画分２からＴ−２(７ｍｇ)およびＴ−１１（５
ｍｇ）、画分３からＴ−３(４ｍｇ)、Ｔ−４（５ｍｇ）
およびＴ−１２（３ｍｇ）ならびに画分４からＴ−５
(２４ｍｇ)、Ｔ−６(４ｍｇ)およびＴ−１３（３ｍｇ）
が単一物質として得られた。また、画分５〜７の場合
は、展開溶媒としてメタノール／塩化メチレン(１：９
９)の混合溶媒を用い、画分５からＴ−７(３ｍｇ)およ
びＴ−８(４０ｍｇ)、画分６からＴ−９(１４ｍｇ)なら
びに画分７からＴ−１０(４ｍｇ)を単一物質として得
た。

【００１６】実施例２ＯＵＰＳ−８０Ｔの生産(セスキシリウム・カンデラブ
ラムを使用)：ーブドウ糖２％、ポリペプトン１％、酵母エキス０．５％
を含む人工海水培地(ｐＨ７．５)７００ｍｌを、予め内
部に約１〜２ｃｍ幅のアルミ箔をＳ字状に置いた２００
ｍｌの三角フラスコに７０ｍｌずつ分注した。滅菌後、
これらにセスキシリウム・カンデラブラムＯＵＰＳ−１
００（微工研寄第１３２０１号）を１白金耳量接種し、
２７℃で６日間静置培養した。次に同じ培地２０リット
ルを、同様にアルミ箔をＳ字状に置いた２００ｍｌの三
角フラスコに７０ｍｌずつ分注し、滅菌後上記の種菌を
加え、２７℃で約４週間静置培養を行った。培養後、培
養液より菌体を濾取し、これにメタノール１０リットル
を加え、撹拌後一夜放置し、濾過して抽出液を得た。減
圧下にメタノールを留去してメタノールエキス１２８ｇ
を得、これにヘキサンを加えてヘキサン可溶部を除き、
残渣にメタノール／塩化メチレン(１：１)の混合溶媒を
加えて、混合溶媒可溶部と混合溶媒不溶部に分別した。
混合溶媒可溶部から減圧下に溶媒を留去して、細胞毒性
を示す油状物質１３．７ｇを得た。得られた油状物質は
セファデックスＬＨ−２０を用いたゲル濾過型クロマト
グラフィーに付し、メタノール／塩化メチレン(１：１)
の混合溶媒で溶出を行うことにより、細胞毒性を示す画
分０．８ｇを得た。この画分をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーに付し、ヘキサン、次いでヘキサン／塩化
メチレン(８：２)の混合溶媒で溶出を行って不純物を除
去した後、ヘキサン／塩化メチレン(４：６)の混合溶媒
で溶出を行うことにより、Ｔ−１４およびＴ−１５を含
む画分１を得、次いでヘキサン／塩化メチレン(２：８)
の混合溶媒で溶出を行うことにより、Ｔ−１６を含む画
分２を得た。各画分はシリカゲル(ナカライテスク社、
ＣＯＳＭＯＳＩＬ１０ＳＬ)を用いる順相系の高速液
体クロマトグラフィーに付された。画分１の場合は展開
溶媒としてベンゼン／塩化メチレン(１：９)を用いた結
果、Ｔ−１４（８．６ｍｇ）およびＴ−１５(１１．９
ｍｇ)を単一物質として得た。また、画分２の場合は展
開溶媒としてアセトン／塩化メチレン(３：９７)を用い
た結果、Ｔ−１６(５．３ｍｇ)を単一物質として得た。

【００１７】試験例１ＯＵＰＳ−８０Ｔの細胞増殖抑制(試験管内におけるＰ
３８８マウス白血病細胞増殖抑制作用)：ー化合物Ｔ−１〜１４を終濃度０．００１、０．０１およ
び０．１μｇ／ｍｌになるように添加した１０％ＦＢＳ
含有イーグルＭＥＭ培地を入れたプラスチックプレート
にＰ３８８マウス白血病細胞を１０×１０⁴個／ｍｌに
なるように播き、３７℃で７２時間、５％炭酸ガス培養
器中で培養する。培養終了後、培養液中の細胞を血球計
算盤を用いて計算し、５０％有効量(ＥＤ₅₀)を算出し
た。その成績を第２表に示す。

【表９】

【００１８】試験例２ＯＵＰＳ−８０Ｔの細胞増殖抑制(試験管内におけるマ
ウスおよびヒト腫瘍細胞増殖抑制作用) 各種の腫瘍細胞を２〜１０×１０⁴個／ｍｌになるよう
にそれぞれの細胞に適した培地を入れたプラスチックプ
レートに播き、３７℃で２４時間、５％炭酸ガス培養器
中で培養する。次いで、培養液で希釈した化合物Ｔ−５
またはＴ−９を終濃度０．０１、０．０３、０．１、
０．３および１．０μｇ／ｍｌになるように添加し、３
７℃で４８〜７２時間、５％炭酸ガス培養器中で培養す
る。培養終了後、細胞をトリプシン消化によりプレート
よりはがし、血球計算盤を用いて細胞数を計測し、５０
％増殖抑制濃度(ＩＣ₅₀)を算出した。その成績を第３表
に示す。

【表１０】

【００１９】試験例３ＯＵＰＳ−８０Ｔの胆癌マウスにおける延命効果：ーマウス肉腫サルコーマ(Sarcoma)１８０１０⁶個／マウ
スをＩＣＲ系マウスの腹腔内に移植し、その２４時間後
に化合物Ｔ−５またはＴ−９を０．２５、０．５および
１．０ｍｇ／ｋｇ、５−ＦＵ(陽性対照)１０ｍｇ／ｋｇ
あるいは１０％ＤＭＳＯ含有生理食塩水(陰性対照)を腹
腔内に単回投与し、胆癌マウスの死亡に至るまでの日数
より平均生存日数を算出して陰性対照と比較した。その
結果を第４表に示す。

【表１１】

【００２０】さらに、マウス肉腫サルコーマ(Sarcoma)
１８０の移植の翌日から化合物Ｔ−５の０．０１、０．
０３および１．０ｍｇ／ｋｇ／日を９日間連続腹腔内投
与して得た結果を第５表に示す。

【表１２】

【００２１】試験例４ＯＵＰＳ−８０Ｔの胆癌マウスにおける腫瘍細胞増殖抑
制作用：ーマウス肉腫サルコーマ(Sarcoma)１８０５×１０⁴個／
マウスをＩＣＲ系マウスの背部皮内に移植し、その翌日
から４日に１回の割合で、化合物Ｔ−５の０．２５、
０．５および１．０ｍｇ／ｋｇを腫瘍細胞移植部近傍の
皮下または静脈内に投与し、腫瘍の長径と短径の測定値
から推定腫瘍重量を算出した。さらに、実験最終日(移
植後１８日または１９日後)に腫瘍を摘出し、その湿重
量を秤量した。なお、陽性対照として、５−ＦＵの１０
ｍｇ／ｋｇを、陰性対照として１０％ＤＭＳＯ含有生理
食塩液を用いた。その結果を第６表および第７表に示
す。

【表１３】

【表１４】

【００２２】発明の効果前記試験例からも明らかなように、本発明目的物質ＯＵ
ＰＳ−８０Ｔは、一般に顕著な細胞増殖抑制作用を示
す。従って、白血病細胞やその他の各種悪性腫瘍細胞に
対する増殖抑制剤として有用である。たとえば、ＯＵＰ
Ｓ−８０Ｔは抗腫瘍剤として皮膚癌には局所適用、その
他の癌には静脈内適用可能である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者村橋豊大阪府堺市堀上町282−４ (72)発明者北川知津子奈良県奈良市学園朝日元町２−529−３エクセルハイツＢ104 (72)発明者岩木秀夫兵庫県尼崎市南塚口町３−６−19 (72)発明者荒木宏昌奈良県大和郡山市篠原町１−12 (56)参考文献Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．, 36（６），1942〜1956（1988) (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07D 513/22 A61K 31/495 C12P 17/18 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（Ｉ）：【化１】（式中、Ｒ₁およびＲ₂は同一または異なって低級アルキ
ルまたはヒドロキシ置換低級アルキルであり、Ｒ₃は式
（ｂ）【化２】で示される基であり、ｎは２〜４の整数である。）で表
されるエピポリチオジオキソピペラジン誘導体を製造す
るにあたり、レプトスフェリア属またはセスキシリウム
属に属するエピポリチオジオキソピペラジン誘導体を生
産する能力を有する微生物を培養し、その培養物から当
該誘導体を採取することを特徴とする方法。
【請求項２】レプトスフェリア属に属するエピポリチ
オジオキソピペラジン誘導体を産生する能力を有する微
生物がレプトスフェリア・エスピーである、請求項１記
載の方法。
【請求項３】セスキシリウム属に属するエピポリチオ
ジオキソピペラジン誘導体を生産する能力を有する微生
物がセスキシリウム・カンデラブラムである、請求項１
記載の製造方法。
【請求項４】一般式（Ｉ）：【化３】（式中、Ｒ₁およびＲ₂は同一または異なって低級アルキ
ルまたはヒドロキシ置換低級アルキルであり、Ｒ₃は式
（ｂ）【化４】で示される基であり、ｎは２〜４の整数である。）で表
されるエピポリチオジオキソピペラジン誘導体。
【請求項５】Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂がメチル、ｎが
２である請求項４記載の化合物。
【請求項６】Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂がメチル、ｎが
３である請求項４記載の化合物。
【請求項７】Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂がメチル、ｎが
４である請求項４記載の化合物。
【請求項８】Ｒ₁がエチル、Ｒ₂がメチル、ｎが３であ
る請求項４記載の化合物。
【請求項９】Ｒ₁がエチル、Ｒ₂がメチル、ｎが４であ
る請求項４記載の化合物。
【請求項１０】Ｒ₁とＲ₂がメチル、ｎが４である請求
項４記載の化合物。
【請求項１１】一般式（Ｉ）：【化５】（上記式中、Ｒ₃は式（ａ）【化６】で示される基である。）表されるエピポリチオジオキソ
ピペラジン誘導体であって、次の化合物から選択された
もの：（ｉ）Ｒ₁とＲ₄がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、
ｍが２、ｎが２である化合物；（ii）Ｒ₁とＲ₄がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、ｍ
が２、ｎが３である化合物；（iii）Ｒ₁とＲ₄がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、
ｍが２、ｎが４である化合物；（iv）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが２、ｎが２である化合物；（ｖ）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが２、ｎが３である化合物；（vi）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが２、ｎが４である化合物；（vii）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄が
ヒドロキシメチル、ｍが３、ｎが２である化合物；（viii）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄が
ヒドロキシメチル、ｍが４、ｎが２である化合物；（ix）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが４、ｎが３である化合物。
【請求項１２】次の化合物から選択されるエピポリチオ
ジオキソピペラジン誘導体を有効成分とする細胞増殖抑
制剤：一般式（Ｉ）：【化７】（式中、Ｒ₃は式（ｂ）【化８】で示される基である。）で表されるエピポリチオジオキ
ソピペラジン誘導体であって、（１）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂がメチル、ｎが２である
化合物；（２）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂がメチル、ｎが３である
化合物；（３）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂がメチル、ｎが４である
化合物；（４）Ｒ₁がエチル、Ｒ₂がメチル、ｎが３である化合
物；（５）Ｒ₁がエチル、Ｒ₂がメチル、ｎが４である化合
物；（６）Ｒ₁とＲ₂がメチル、ｎが４である化合物または一
般式（Ｉ）：【化９】（上記式中、Ｒ₃は式（ａ）【化１０】で示される基である。）表されるエピポリチオジオキソ
ピペラジン誘導体であって、（ｉ）Ｒ₁とＲ₄がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、
ｍが２、ｎが２である化合物；（ii）Ｒ₁とＲ₄がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、ｍ
が２、ｎが３である化合物；（iii）Ｒ₁とＲ₄がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、
ｍが２、ｎが４である化合物；（iv）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが２、ｎが２である化合物；（ｖ）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが２、ｎが３である化合物；（vi）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが２、ｎが４である化合物；（vii）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄が
ヒドロキシメチル、ｍが３、ｎが２である化合物；（viii）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄が
ヒドロキシメチル、ｍが４、ｎが２である化合物；（ix）Ｒ₁がイソプロピル、Ｒ₂とＲ₅がメチル、Ｒ₄がヒ
ドロキシメチル、ｍが４、ｎが３である化合物。