JP3627026B2

JP3627026B2 - Analysis element and method for producing the same

Info

Publication number: JP3627026B2
Application number: JP29324295A
Authority: JP
Inventors: 久坂本; 好範高橋; 善彦樋口; 武広山口
Original assignee: Arkray Inc
Current assignee: Arkray Inc
Priority date: 1995-10-04
Filing date: 1995-10-04
Publication date: 2005-03-09
Anticipated expiration: 2015-10-04
Also published as: JPH09101297A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、体液試料、つまり、全血、血清、血漿、尿および髄液などに含まれる特定成分を分析するための分析要素及びその作製方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
これまで、体液試料中の特定成分を分析する分析要素は、多くのものが開発されてきた。これらは、例えば血液中のグルコース、コレステロール、蛋白質、ビリルビン、尿酸、又は尿中のｐＨ、グルコース、ケトン体、蛋白質、ビリルビン、ヘモグロビンなどを定量するためのものである。
これらは、紙またはプラスティック材をマトリックスとして試薬類を含有しており、迅速、簡易さの面で湿式化学以上の性能を有するものが得られている。
【０００３】
例えば、特公昭４９−３３８００号には、酸化酵素及び過酸化酵素などを含む検出系をポリマー中に分散させてプラスティックフィルムに塗布した耐水性の分析要素が開示されている。
【０００４】
特開平２−１５０７５１号には、試薬液を塗布および乾燥した多孔性フィルムを、支持体の貫通穴を覆うように配置して、支持体上に固定し、次いで試料保持層を、試薬層を覆うように配置して支持体上に固定することによって製造しうる分析要素が開示されている。ここにおける多孔性フィルムおよび試料保持層の支持体への固定は、例えば、熱可逆性樹脂を用いて熱圧着するか、または両面テープを用いて行うことができる。
【０００５】
特開平２−１５０７５１号に記載されているような従来の分析要素では、２０〜５０μｌの血液を採取する必要がある。これは、かなりの苦痛を伴い、場合によっては傷をつけた指先方向に腕や手のひらをしごき、血液をしぼり出すことも行っている。このようなことから、近年、極めて少量の血液で分析可能な分析要素が望まれている。
【０００６】
多項目化も望まれてきており、これは、例えばグルコース、コレステロール、尿酸、ケトン体などの項目を同時に測定するというものである。
【０００７】
つまり、極めて少量の血液、例えば５〜１０μｌの血液で、多項目を同時に分析することが、究極的に望まれてきた。
【０００８】
分析要素の大きさは、出来る限り小さい方が好ましく、例えば１〜３０ｍｍ^２で作製されるのが好ましい。
【０００９】
従来、分析要素の作製方法は、含浸法やナイフコーター等による塗布法が用いられてきたが、これらの方法では、一度に巨大な面積範囲の分析要素、例えば幅３０〜１００ｃｍで、長さ１０〜４００ｍのような形態で作製される為、比較的小さい範囲の分析要素を作製する方法としては、不適当であった。
【００１０】
特開昭６３−２１８８６３号に、酸化酵素及び過酸化酵素などを含む検出系をポリマー中に分散させてインキ化し、プラスチックフィルム上にスクリーン印刷した分析要素が開示されている。
【００１１】
印刷による分析要素の作製方法には、スクリーン印刷の他に、グラビア印刷、インクジェット印刷などが利用されている。しかし、これらの印刷方法においても、各々、以下のような欠点を有している。
【００１２】
例えば、スクリーン印刷は、試薬液の液性が、一般に１０００センチポイズ以上の高粘度のものであることが要求され、かつアミルアルコールのような高沸点の有機溶剤を含まなければならない。
従って、変成しやすい酵素を含むものには不適当であり、また、一般に、印刷した膜の厚さの均一性、再現性を得るのは非常に困難を要する。
【００１３】
グラビア印刷は、試薬液の粘性により、グラビアロールからフィルムへの転写効率が大きく変化し、転写効率の向上には、試薬液の粘性が低いものであることが要求される。一般的に試験紙の作製において、酸化酵素及び過酸化酵素などを含む検出系をフィルムに固定化する必要性から、試薬液中へのポリマーの添加が不可欠であり、試薬液の粘性は高くなる。
従って、印刷パターンの均一性、再現性を得るのは非常に困難を要する。
【００１４】
インクジェット印刷は、印刷インクを加熱、または帯電々極と電圧による印加することにより、液滴化し、吐出するため、かなりインクに付加が生じる。
従って、分析要素の作製にインクジェット印刷を用いるには、インクである試薬液の液性において、酸化酵素及び過酸化酵素などを含む検出系試薬の耐熱性、例えば１００〜３００℃の加熱により変性しないこと、もしくは帯電電極により簡単に帯電が可能である為の適度な帯電性をもつことなどが要求される。
また、試薬液の液性の粘度、表面張力、濡れ性、比重などが、印刷の精度、均一性、再現性に関与するため、インクの液性仕様の決定は非常に困難を要する。
【００１５】
従って、上記のどの印刷方法についても、試薬液に要求される液性は、酸化酵素及び過酸化酵素などを含む検出系試薬にとってかなり過酷な条件である。
【００１６】
また、特開平２−１５０７５１号における試薬は、光を遮蔽する光反射性不溶性粒子を含有しているが、上記のどの印刷方法においても、赤血球除去あるいは反射性物質としての二酸化チタンや酸化マグネシウムなどの固形物を含ませることは難しい。
なぜならば、これらの固形物は凝集しやすく、スクリーン印刷であれば刷版を、グラビア印刷であればグラビアロールを、インクジェット印刷であればインクジェットノズル及びプリントヘッドを目詰まりさせるため、印刷の精度、均一性、再現性を得ることが困難になるためである。
【００１７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記のような欠点を解決し、小さい試薬面積を持ち、少量の試料で分析が可能な分析要素の作製方法であり、かつ試薬層の面積が小さくても迅速かつ簡易に、しかも精度よく多項目分析が可能な液体試料中の特定成分を分析するための分析要素を提供しようとするものである。
【００１８】
【課題を解決するための手段】
本発明は、体液試料中の特定成分を分析するための分析要素の作製方法において、分析するために必要な試薬を含む試薬液を、ディスペンサーにてフィルム上に滴下または点着した後、試薬表面を平滑な面を有する圧力棒の平滑な面で押し、加圧しながら試薬表面を平滑化し、乾燥させ、乾燥後、圧力棒を試薬面から離すことにより試薬表面を平滑化することを特徴とする分析要素の作製方法である。
また、本発明は、体液試料中の特定成分を分析するための分析要素であって、上記の作製方法によって作製され、平滑な試薬表面を有することを特徴とする分析要素である。
本発明を用いることで上記課題を解決できる。
【００１９】
本発明は、特開平２−１５０７５１号に応用できる方法であり、また、特公昭６１−３６１８１号にも応用できる方法である。
従って、本発明に関わる用具の構成要素は、基本的に特開平２−１５０７５１号の記載に準ずる。また、特公昭６１−３６１８１号の記載にも準ずる。
また、特開平２−１５０７５１号における試料保持層の固定などの応用も可能である。
【００２０】
【発明の実施の形態】
ディスペンサーは、比較的設備も小型で安価であり、試薬液の粘性についても低粘度から高粘度まで広い範囲で使用することができる。
かつ、ディスペンサーは、試薬液を、小さな面積の範囲内に滴下又は点着することができるので、極めて少量の血液、例えば５〜１０μｌの血液で、多項目分析することも可能である。
【００２１】
また、ディスペンサーで用いられる流路は、一般的にインクジェット印刷で用いられる流路よりも大きいため、上記に示した光を遮蔽するための光反射性不溶性粒子、例えば酸化チタンや酸化マグネシウムなどの凝集しやすいものを含有していても、目詰まりを起こしにくい。
【００２２】
試薬液をディスペンサーにてフィルム上に滴下または点着する際において、試薬液の粘性と支持体との関係は、
（１）試薬液の粘性がほとんどなく、フィルムが吸水性の場合
→吸水性フィルムに瞬時に吸収される。
（２）試薬液の粘性がほとんどなく、フィルムが非吸水性の場合
→非吸水性フィルム上にドーム状の液滴になる。
（３）試薬液の粘性があり、フィルムが吸水性の場合
→吸水性フィルムの上に固形物が残る。
（４）試薬液の粘性があり、フィルムが非吸水性の場合
→非吸水性フィルムの上にドーム状又は球状の液滴になり、試薬液が全て残る。
であり、（３）又は（４）が一般的である。
【００２３】
上記のような試薬液を、ディスペンサーを用いて、フィルム上に試薬液を滴下または点着することには問題は生じないが、そのまま乾燥すると、塗布厚の不均一、塗布表面の不均一、及び試薬濃度の不均衡が生じる。これによって、液体試料を分析するための試薬に発色剤を用いて発色させた場合に、ムラ発色の原因にもなる。
【００２４】
これを、先端部分が平滑な圧力棒の平滑部分で加圧し、試薬表面を平滑化することで解決した。つまり、本発明によって、塗布厚、塗布表面の均一な試薬面を作製することができた。
【００２５】
本発明における圧力棒とは、圧力を、滴下または点着した試薬液の表面に与える棒のことであり、硬質なものであれば何でも良い。材質としては、例えば、ガラス、ゴム、プラスティック、ステンレスなどがあげられるが、寸法安定性及び熱安定性の面からステンレスが好適である。
【００２６】
また、圧力棒を試薬層表面から離す際に、乾燥した試薬が剥がれて圧力棒へ付着することを防ぐために、圧力棒の先端部分をテフロンで覆うことが、より好ましい。このことで、圧力棒への試薬の付着を防止することが可能となる。
【００２７】
圧力棒の先端部分は、試薬表面を覆う程度のものでよく、断面積の形状も、円であっても、四角であっても、六角形であっても何でもかまわない。
例えば、試薬表面の面積が直径５ｍｍ程度であれば、圧力棒の先端部分の面積は、直径１０ｍｍ程度でよい。
【００２８】
圧力棒が試薬表面に加える圧力は、好ましくは０．１〜２０ｋｇ／ｃｍ^２、より好ましくは１〜５ｋｇ／ｃｍ^２がよい。
【００２９】
フィルムは、どのようなものでも可能であるが、望ましくは、寸法安定性がよく、試薬液をはじかないもので、乾燥後、試薬が剥離しないものがよい。
例えば、反応に酸素が必要な場合、酸素供給層として、多孔性フィルムを用いることが有用であり、ニュークレポア（ニュークレポア製）、サイクロポア（ワットマン製）、セルガード（ヘキスト製）など多くのものが商品として販売されている。
【００３０】
乾燥方法は、圧力棒自身を熱することによる加熱であってよい。例えば、圧力棒の中に熱線を入れて圧力棒を加熱し、乾燥する方法などがある。
温度は、一般的には、５０℃〜８０℃に設定するが、試薬液に熱に弱い酵素などを含む場合は、比較的低い温度、例えば３５℃〜５０℃に設定する。
【００３１】
また、乾燥方法が、圧力棒で加圧している際における、フィルムの下方からの加熱であってもよい。例えば、フィルムの下方に、熱線を内蔵したステンレス製のブロックを配置し、そのブロック上をフィルムが通過することによって乾燥させる方法などがある。
このブロック温度も、一般的には、５０℃〜８０℃に設定するが、試薬液に熱に弱い酵素などを含む場合は、比較的低い温度、例えば３５℃〜５０℃に設定する。加えて、ブロック温度は、フィルムが溶けない温度に設定する。
【００３２】
あるいは、乾燥方法が、圧力棒で加圧している際における、送風であってもよい。
この送風温度も、一般的には、５０℃〜８０℃に設定するが、試薬液に熱に弱い酵素などを含む場合は、比較的低い温度、例えば３５℃〜５０℃に設定する。
どの方法においても、乾燥後、圧力棒を試薬面から離せば分析要素が作製できる。
【００３３】
また、圧力棒を試薬面から離すタイミングは、十分乾燥後であれば、いつでも構わないが、出来る限り時間をかけて離すのがよい。
【００３４】
以下に実施例を示すが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００３５】
【実施例】
血中グルコースの定量
厚さ１０μｍの多孔性フィルム（ニュークリポア（ニュークリポア製））を、７ｍｍ×７ｍｍに裁断したものを、熱可逆性樹脂でコーティングされ、直径４ｍｍの貫通穴を有するポリエチレンテレフタレート支持体の上に、貫通穴を覆うように重ね、熱圧着した。
図１は、本発明を用いた分析要素の作製方法で、（ａ）から（ｆ）は、その手順を示したものである。
つまり、貫通穴上にある多孔性フィルム部分に、下記の試薬組成を混合した試薬溶液３をディスペンサー４にて３μｌ滴下し、直ちに先端が平滑で、かつ４０℃に加温されたステンレス製圧力棒５で、１．５ｋｇ／ｃｍ^２で加圧しながら、試薬表面を平滑化し、２０分間乾燥させて、分析要素を作製した。

【００３６】
【比較例】
図２は、比較例としてあげた分析要素の作製方法で、（ａ）から（ｄ）は、その手順を示したものである。
つまり、実施例に用いた試薬溶液３を、同様にディスペンサー４にて５μｌ滴下後、圧力棒で加圧せずに、４０℃、２０分間乾燥した分析要素を作製した。
【００３７】
実施例と比較例において作製した各分析要素に、種々のグルコース濃度の全血を２０μｌ滴下し、１分後に支持体の貫通穴を通して、下方より（多孔性フィルム側から）、色差計（（株）日本電色工業 Σ−９０）で６４０ｎｍでの反射率を測定した。
【００３８】
反射率から検量線を作成し、その検量線に基づいて、測定値を濃度換算し、比較を行った。測定結果を、表１に示す。
【００３９】
【表１】

【００４０】
本発明による作製方法を用いた実施例の分析要素では、乾燥後の塗布厚、試薬表面は均一であるため、測定値の再現性もよく、良好な結果が得られた。
しかし、比較例の分析要素では、再現性が悪かった。
【００４１】
【発明の効果】
以上、詳述したように、本発明の分析要素の作製方法を用いると、迅速かつ簡易に、精度良く、特定成分を分析するための分析要素を作製することができる。
しかも、極めて少量の試料で、多項目分析することも可能になる。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例の一連の作製方法を示す図である。
【図２】比較例の一連の作製方法を示す図である。
【符号の説明】
１多孔性フィルム
２支持体
３試薬溶液
４ディスペンサー
５圧力棒[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to an analysis element for analyzing a specific component contained in a body fluid sample, that is, whole blood, serum, plasma, urine, cerebrospinal fluid, and the like, and a method for producing the same.
[0002]
[Prior art]
Until now, many analytical elements for analyzing a specific component in a body fluid sample have been developed. These are for quantifying, for example, glucose, cholesterol, protein, bilirubin, uric acid in blood, pH in urine, glucose, ketone bodies, protein, bilirubin, hemoglobin and the like.
These contain reagents with a paper or plastic material as a matrix, and those having performances higher than wet chemistry in terms of speed and simplicity have been obtained.
[0003]
For example, Japanese Patent Publication No. 49-33800 discloses a water-resistant analytical element in which a detection system containing an oxidase and a peroxidase is dispersed in a polymer and applied to a plastic film.
[0004]
In JP-A-2-150751, a porous film coated with a reagent solution and dried is arranged so as to cover the through-hole of the support, fixed on the support, and then the sample holding layer is attached to the reagent layer. Analytical elements are disclosed that can be manufactured by being placed over and fixed on a support. Here, the porous film and the sample holding layer can be fixed to the support by, for example, thermocompression bonding using a thermoreversible resin or using a double-sided tape.
[0005]
With a conventional analytical element as described in JP-A-2-150751, it is necessary to collect 20 to 50 μl of blood. This is quite painful and in some cases squeezes out the blood by squeezing the arms and palms in the direction of the damaged fingertips. For these reasons, in recent years, an analysis element that can be analyzed with a very small amount of blood has been desired.
[0006]
Multi-itemization has also been desired, and this is to measure items such as glucose, cholesterol, uric acid, and ketone bodies simultaneously.
[0007]
That is, it has been ultimately desired to analyze many items simultaneously with a very small amount of blood, for example, 5 to 10 μl of blood.
[0008]
The size of the analysis element is preferably as small as possible. For example, it is preferable that the analysis element is made with 1 to 30 mm ² .
[0009]
Conventionally, as an analytical element production method, an impregnation method or a coating method using a knife coater or the like has been used. However, in these methods, an analytical element having a huge area range, for example, a width of 30 to 100 cm and a length of 10 Since it is produced in the form of ˜400 m, it is not suitable as a method for producing a comparatively small analytical element.
[0010]
Japanese Patent Application Laid-Open No. 63-218863 discloses an analytical element in which a detection system containing an oxidase, a peroxidase and the like is dispersed in a polymer to be ink-printed and screen-printed on a plastic film.
[0011]
In addition to screen printing, gravure printing, ink jet printing, and the like are used as methods for producing analytical elements by printing. However, these printing methods also have the following drawbacks.
[0012]
For example, screen printing requires that the liquidity of the reagent solution is generally high viscosity of 1000 centipoise or higher and must contain a high boiling point organic solvent such as amyl alcohol.
Therefore, it is unsuitable for those containing enzymes that are easily denatured, and generally it is very difficult to obtain the uniformity and reproducibility of the thickness of the printed film.
[0013]
In the gravure printing, the transfer efficiency from the gravure roll to the film changes greatly depending on the viscosity of the reagent solution, and in order to improve the transfer efficiency, the viscosity of the reagent solution is required to be low. In general, in the preparation of test papers, the addition of a polymer to the reagent solution is indispensable because the detection system containing oxidase and peroxidase must be immobilized on the film, and the viscosity of the reagent solution is increased. .
Therefore, it is very difficult to obtain the uniformity and reproducibility of the printed pattern.
[0014]
Ink-jet printing forms a droplet by ejecting printing ink by heating or charging and applying voltage and voltage, so that ink is considerably added.
Therefore, in order to use ink jet printing for the production of the analysis element, the heat resistance of the detection system reagent including oxidase and peroxidase is not denatured by heating at 100 to 300 ° C. In addition, it is required to have an appropriate charging property so that the charging electrode can be easily charged.
In addition, since the liquid viscosity, surface tension, wettability, specific gravity and the like of the reagent liquid are related to printing accuracy, uniformity, and reproducibility, it is very difficult to determine the ink liquid specifications.
[0015]
Therefore, in any of the above printing methods, the liquidity required for the reagent solution is a considerably severe condition for the detection system reagent containing oxidase, peroxidase and the like.
[0016]
Further, the reagent in JP-A-2-150751 contains light-reflective insoluble particles that shield light, but in any of the printing methods described above, red blood cells are removed or titanium dioxide or magnesium oxide as a reflective substance is used. It is difficult to include the solid matter.
This is because these solid substances are likely to aggregate, clogging the printing plate in the case of screen printing, the gravure roll in the case of gravure printing, and the inkjet nozzle and print head in the case of inkjet printing. This is because it becomes difficult to obtain uniformity and reproducibility.
[0017]
[Problems to be solved by the invention]
The present invention solves the above-mentioned drawbacks, is a method for producing an analytical element having a small reagent area and capable of analyzing with a small amount of sample, and can be quickly and easily even if the reagent layer area is small. It is an object of the present invention to provide an analysis element for analyzing a specific component in a liquid sample capable of accurate multi-item analysis.
[0018]
[Means for Solving the Problems]
The present invention relates to a method for producing an analysis element for analyzing a specific component in a body fluid sample. After a reagent solution containing a reagent necessary for analysis is dropped or spotted on a film with a dispenser , the reagent surface The surface of the pressure bar having a smooth surface is pressed and smoothed by pressurizing and smoothing the reagent surface, and after drying, the reagent surface is smoothed by separating the pressure bar from the reagent surface. This is a method for producing an analysis element.
In addition, the present invention is an analysis element for analyzing a specific component in a body fluid sample, which is produced by the above production method and has a smooth reagent surface.
The above problems can be solved by using the present invention.
[0019]
The present invention is a method that can be applied to Japanese Patent Laid-Open No. 2-150751, and a method that can also be applied to Japanese Patent Publication No. 61-361181.
Therefore, the constituent elements of the tool according to the present invention are basically in accordance with those described in JP-A-2-150751. Further, the same as described in Japanese Patent Publication No. 61-361181.
Further, application such as fixing of a sample holding layer in JP-A-2-150751 is also possible.
[0020]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The dispenser is relatively small in equipment and inexpensive, and the viscosity of the reagent solution can be used in a wide range from low viscosity to high viscosity.
In addition, since the dispenser can drop or spot a reagent solution within a small area, it is possible to perform multi-item analysis with a very small amount of blood, for example, 5 to 10 μl of blood.
[0021]
In addition, since the flow path used in the dispenser is generally larger than the flow path used in ink jet printing, agglomeration of light-reflective insoluble particles, such as titanium oxide and magnesium oxide, for shielding the light shown above. Even if it contains something that is easy to do, clogging is less likely to occur.
[0022]
When the reagent solution is dropped or spotted on the film with a dispenser, the relationship between the viscosity of the reagent solution and the support is as follows:
(1) When there is almost no viscosity of a reagent liquid and a film is water-absorbing-> It is absorbed into a water-absorbing film instantly
(2) When there is almost no viscosity of the reagent solution and the film is non-water-absorbing → dome-shaped droplets are formed on the non-water-absorbing film.
(3) When the reagent solution is viscous and the film is water-absorbing → Solid matter remains on the water-absorbing film.
(4) When the reagent solution is viscous and the film is non-water-absorbing → Dome or spherical droplets are formed on the non-water-absorbing film, and all the reagent solution remains.
(3) or (4) is common.
[0023]
There is no problem in dropping or spotting the reagent solution on the film by using a dispenser as described above, but when dried as it is, the coating thickness is uneven, the coating surface is uneven, and An imbalance in reagent concentration occurs. As a result, when a color developing agent is used as a reagent for analyzing a liquid sample, color unevenness is caused.
[0024]
This was solved by pressurizing with a smooth portion of a pressure bar having a smooth tip portion to smooth the reagent surface. That is, according to the present invention, a uniform reagent surface having a coating thickness and a coating surface could be produced.
[0025]
The pressure bar in the present invention is a bar that applies a pressure to the surface of the dropped or spotted reagent solution and may be anything that is hard. Examples of the material include glass, rubber, plastic, and stainless steel, and stainless steel is preferable in terms of dimensional stability and thermal stability.
[0026]
Further, when the pressure bar is separated from the surface of the reagent layer, it is more preferable to cover the tip of the pressure bar with Teflon in order to prevent the dried reagent from peeling off and adhering to the pressure bar. This makes it possible to prevent the reagent from adhering to the pressure rod.
[0027]
The tip of the pressure rod may be of a size that covers the reagent surface, and the cross-sectional area may be a circle, a square, or a hexagon.
For example, if the area of the reagent surface is about 5 mm in diameter, the area of the tip portion of the pressure rod may be about 10 mm in diameter.
[0028]
The pressure applied to the reagent surface by the pressure bar is preferably 0.1 to 20 kg / cm ² , more preferably 1 to 5 kg / cm ² .
[0029]
Any film can be used, but it is desirable that the film has good dimensional stability, does not repel the reagent solution, and does not peel off the reagent after drying.
For example, when oxygen is required for the reaction, it is useful to use a porous film as the oxygen supply layer. Sold.
[0030]
The drying method may be heating by heating the pressure bar itself. For example, there is a method in which a hot wire is placed in the pressure rod, the pressure rod is heated and dried.
The temperature is generally set to 50 ° C. to 80 ° C., but is set to a relatively low temperature, for example, 35 ° C. to 50 ° C. when the reagent solution contains an enzyme that is sensitive to heat.
[0031]
Further, the drying method may be heating from below the film when pressurizing with a pressure rod. For example, there is a method in which a stainless steel block containing a heat ray is disposed below the film, and the film is dried by passing through the block.
This block temperature is also generally set to 50 ° C. to 80 ° C., but is set to a relatively low temperature, for example, 35 ° C. to 50 ° C. when the reagent solution contains an enzyme that is sensitive to heat. In addition, the block temperature is set to a temperature at which the film does not melt.
[0032]
Or the ventilation in the case of pressurizing with a pressure rod may be sufficient as the drying method.
This blast temperature is also generally set to 50 ° C. to 80 ° C., but is set to a relatively low temperature, for example, 35 ° C. to 50 ° C. when the reagent solution contains an enzyme that is weak against heat.
In any method, after drying, the analytical element can be produced by separating the pressure bar from the reagent surface.
[0033]
Further, the timing of releasing the pressure bar from the reagent surface may be any time as long as it is sufficiently dry, but it is preferable to release it as much as possible.
[0034]
Examples are shown below, but the present invention is not limited thereto.
[0035]
【Example】
Quantitative measurement of blood glucose 10 μm thick porous film (Nucripore (manufactured by Newcripore)) cut to 7 mm x 7 mm, coated with a thermoreversible resin and supported by polyethylene terephthalate having a 4 mm diameter through hole It was piled up on the body so as to cover the through hole and thermocompression bonded.
FIG. 1 is a method for producing an analytical element using the present invention, and FIGS. 1A to 1F show the procedure.
That is, 3 μl of the reagent solution 3 mixed with the following reagent composition is dropped onto the porous film portion on the through hole by the dispenser 4, and the stainless steel pressure bar whose tip is smooth and immediately heated to 40 ° C. 5. While pressurizing at 1.5 kg / cm ² , the reagent surface was smoothed and dried for 20 minutes to produce an analytical element.

[0036]
[Comparative example]
FIG. 2 shows a method for producing an analytical element given as a comparative example, and (a) to (d) show the procedure.
That is, after 5 μl of the reagent solution 3 used in the example was similarly dropped with the dispenser 4, an analytical element was produced by drying for 20 minutes at 40 ° C. without applying pressure with a pressure bar.
[0037]
20 μl of whole blood with various glucose concentrations was dropped on each analytical element prepared in Examples and Comparative Examples, and after 1 minute, through a through hole of the support, from below (from the porous film side), a color difference meter ((Strain ) The reflectance at 640 nm was measured by Nippon Denshoku Industries Σ-90).
[0038]
A calibration curve was created from the reflectance, and the measured values were converted into concentrations based on the calibration curve for comparison. The measurement results are shown in Table 1.
[0039]
[Table 1]

[0040]
In the analytical elements of the examples using the production method according to the present invention, the coating thickness after drying and the reagent surface were uniform, so the reproducibility of the measured values was good and good results were obtained.
However, reproducibility was poor in the analysis element of the comparative example.
[0041]
【The invention's effect】
As described above, by using the method for producing an analysis element of the present invention, an analysis element for analyzing a specific component can be produced quickly and easily with high accuracy.
Moreover, it is possible to perform multi-item analysis with a very small amount of sample.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a diagram showing a series of manufacturing methods according to an embodiment.
FIG. 2 is a diagram showing a series of manufacturing methods of comparative examples.
[Explanation of symbols]
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Porous film 2 Support body 3 Reagent solution 4 Dispenser 5 Pressure bar

Claims

A method for preparing an analysis element for analyzing a specific component in a body fluid sample, and a reagent solution containing a reagent necessary for analysis is dropped or spotted on a film with a dispenser , and then the reagent surface is smoothed. Analytical element characterized in that a reagent surface is smoothed by pressing with a smooth surface of a pressure bar having a smooth surface, pressurizing and drying, and after drying, the reagent surface is smoothed by separating the pressure bar from the reagent surface Manufacturing method.

The pressure applied with the pressure rod is 0.1-20 kg / cm ²² The method for producing an analytical element according to claim 1.

The method for producing an analytical element according to claim 1 or 2, wherein the drying method is heating by heating the pressure bar itself.

The method for producing an analytical element according to claim 1 or 2, wherein the drying method is heating from below the film when pressurizing with a pressure bar.

The method for producing an analytical element according to claim 1 or 2, wherein the drying method is air blowing from below the film when the pressure bar is pressurized.

An analysis element for analyzing a specific component in a body fluid sample, wherein the analysis element is produced by the production method according to claim 1 and has a smooth reagent surface.