JP3888788B2

JP3888788B2 - Multi-capillary electrophoresis device

Info

Publication number: JP3888788B2
Application number: JP31167598A
Authority: JP
Inventors: 良英林崎; 一狭間
Original assignee: Shimadzu Corp; Japan Science and Technology Agency; National Institute of Japan Science and Technology Agency; RIKEN
Current assignee: Shimadzu Corp; Japan Science and Technology Agency; National Institute of Japan Science and Technology Agency; RIKEN
Priority date: 1998-11-02
Filing date: 1998-11-02
Publication date: 2007-03-07
Anticipated expiration: 2018-11-02
Also published as: JP2000137020A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は複数のキャピラリーカラムが配列され、複数の試料が１つずつキャピラリーカラムに注入されて、全てのキャピラリーカラムで同時に電気泳動されるマルチキャピラリーアレイ泳動部、及びマルチキャピラリーアレイ泳動部でキャピラリーに光を照射し、その照射された部分の試料による吸光度や試料からの蛍光を測定する光学的測定部を備えたマルチキャピラリー電気泳動装置に関するものである。
このようなマルチキャピラリー電気泳動装置は、タンパク質の分離やＤＮＡの塩基配列決定に用いられている。ＤＮＡの塩基配列決定のためのマルチキャピラリー電気泳動装置では、サンガー反応を用い、プライマー又はターミネータを蛍光物質で標識したＤＮＡフラグメント(断片)試料を電気泳動させ、泳動途中でＤＮＡフラグメント試料からの蛍光を検出して塩基配列を決定する。
【０００２】
【従来の技術】
ヒトゲノムのような長大な塩基配列をもつＤＮＡの塩基配列決定には、高感度で、高速で、かつ大処理能力をもったＤＮＡシーケンサが必要となる。その１つの方法として、平板状のスラブゲルを用いたものに代わってゲルを充填したキャピラリーカラムを複数本配列したマルチキャピラリーＤＮＡシーケンサが提案されている。キャピラリーカラムは、スラブゲルに比べて、試料の取扱いや注入が容易であるだけでなく、高速に泳動させて高感度で検出できる。つまり、スラブゲルで高電圧を印加すれば、ジュール熱の影響によりバンドが広がったり、温度勾配が生じるなどの問題が生じるが、キャピラリーカラムではそのような問題は少なく、高電圧を印加して高速泳動をさせても、バンドの広がりが少なく高感度検出ができるのである。
【０００３】
キャピラリー電気泳動におけるキャピラリーカラムへの試料導入は、圧力を用いる方法や、電圧を印加する電気泳動的方法が行われている。そのうち、電気泳動的に試料を導入する方法は、装置構成の簡便さ、操作の容易さ、パラメータの制御性の良さの点から広く一般的に採用されている。
【０００４】
図１は試料導入時に印加する電圧と時間の一例を表す図である。縦軸は電圧(ｋＶ)を表し、横軸は時間(秒)を表す。
この例では７．６ｋＶの電圧を３０秒間印加している。従来の試料導入時の電圧印加では、電圧のかけ始めは所定の高電圧が数秒以内にかかるようにし、切る際には数秒以内に高電圧を０に落している。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
キャピラリーカラムに高電圧を印加すると、発熱などによりキャピラリーカラム端に位置するゲルに大きなストレスがかかり、キャピラリーカラムへの試料の導入に支障を来し、泳動分離時に分離できる塩基数が制約を受けるなどの悪影響が出るという問題があった。
また、急激に高電圧を印加すると、電気浸透流によりキャピラリーカラム端からゲルがずり出すことがあり、そのずり出したゲルが損傷を受けると泳動分離状態が悪化するという問題もあった。
【０００６】
そこで本発明は、試料導入時におけるキャピラリーカラム端に位置するゲルのストレスを軽減したり、キャピラリーカラム端からのゲルのずり出しを抑制することによって、マルチキャピラリー電気泳動装置における泳動分離能を向上させることを目的とするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明のマルチキャピラリー電気泳動装置は、複数のキャピラリーカラムが配列され、複数の試料が１つずつキャピラリーカラムに注入されて、全てのキャピラリーカラムで同時に電気泳動されるマルチキャピラリーアレイ泳動部と、マルチキャピラリーアレイ泳動部でキャピラリーに光を照射し、その照射された部分の試料による吸光度や試料からの蛍光を測定する光学的測定部とを備えたマルチキャピラリー電気泳動装置であって、高圧電源により高電圧を印加してキャピラリーカラムに試料を導入する際、高電圧のかけ始めでは電圧を連続的に上げ、高電圧のかけ終りでは電圧を連続的に下げるように高圧電源を制御する印加電圧制御部を備えたものである。
【０００８】
キャピラリーカラムへの試料注入時には、試料導入用の容器にそれぞれ試料を入れ、容器内の試料にそれぞれのキャピラリーカラムの一端を浸す。容器内の試料とキャピラリーカラムの他端側のバッファ液との間に高圧電源により高電圧を印加して試料を電気泳動的にキャピラリーに注入する。このとき、印加電圧制御部により、かけ始めでは電圧を所定の高電圧まで連続的に上げ、かけ終りでは電圧を所定の高電圧から連続的に下げるように高圧電源を制御する。その結果、急激な熱の発生及び減退を抑制してキャピラリーカラム端に位置するゲルのストレスを軽減することができる。さらに、大きな電気浸透流の発生を抑制し、キャピラリーカラム端からのゲルのずり出しを抑制することができる。
【０００９】
【実施例】
図２は、一実施例を表す概略斜視図である。
一対のリザーバ１１０と１２０にそれぞれバッファ液１１２と１２２が収容されており、両バッファ液中にそれぞれ電極１３０と１３２が設けられている。サンプルプレート１００は絶縁性の材質にてなり、平面状の表面と、それにつながるコネクタ部１０６とを備えている。サンプルプレート１００の表面には複数個のウェル１０２が縦方向と横方向にそれぞれ一定間隔で配列されている。ウェル１０２は底をもつ穴であり、各ウェル１０２にはその底からベースプレート表面を経てコネクタ部１０６に至る個別の電極パターンが形成されている。サンプルプレート１００の各ウェル１０２に試料を入れ、コネクタ部１０６に高圧配線ケーブルを接続する。
【００１０】
リザーバ１１０とサンプルプレート１００とは配線が切り換えられるように高圧切換え部１３６で切換え可能に接続され、高圧電源１３４がその高圧切換え部１３６と他方のリザーバ１２０に設けられた電極１３２との間に接続されている。高圧電源１３４には、試料導入用と泳動用の印加電圧及び時間を制御する印加電圧制御部１３８が接続されている。印加電圧制御部１３８はマイコンなどにより実現される。
【００１１】
試料注入時にはキャピラリーアレイ２の一端部２ａはサンプルプレート１００の各ウェル１０２に一本ずつ挿入され、試料注入後はリザーバ１１０に切り換えられて一端部２ａがバッファ液１１２に浸される。キャピラリーアレイ２の他端部２ｂが他方のリザーバ１２０のバッファ液１２２に浸され、その他端側には吸光度や蛍光により試料を検出する光学的測定部１０から測定光や励起光が照射され、吸光度や蛍光が測定される被検出部２ｃが設けられている。
【００１２】
キャピラリーアレイ２は一端側２ａではサンプルプレート１００のウェル１０２の配列に対応した二次元的な配列を持ち、被検出部２ｃではキャピラリーカラムが一列に配列され、そのキャピラリーカラムの配列面に垂直な方向から測定光や励起光が照射される。
【００１３】
キャピラリーカラムは、石英ガラスやホウケイ酸ガラス(例えばパイレックス)等を材質とするものであり、外形が２００〜３００μｍ、内径が７５〜１００μｍのものである。キャピラリーカラムはその外周をＳｉＯ₂など、紫外領域から近赤外領域の励起光によっては蛍光を発生しないか、発生しても蛍光測定の妨げにならない程度である無蛍光材質の被膜により被覆されたものが好ましい。その場合には、被検出部２ｃでも被膜を除去する必要がない。それに対し、キャピラリーカラムが被膜として蛍光を発する樹脂被膜をもったものである場合は、被検出部２ｃではその被膜を除去しておく。キャピラリーアレイ２にはそのようなキャピラリーカラムが複数本配列されている。
【００１４】
キャピラリーカラム内には分離媒体のゲルとして、ポリアクリルアミドゲル、リニアアクリルアミドゲル、ポリエチレンオキサイド(ＰＥＯ)ゲルなどが充填されている。各キャピラリーカラムには末端塩基別に異なる螢光物質ＦＡＭ、ＪＯＥ、ＴＡＭＲＡ、ＲＯＸ、Ｒ６Ｇ、Ｒ−１１０などの螢光物質から選ばれた４種類のそれぞれの蛍光物質により標識され、又は２種類以上の蛍光物質を割合を異ならせて４種類に標識された４種類のＤＮＡフラグメントを含む試料がそれぞれ注入され、同時に電気泳動がなされる。
サンプルプレート１００とリザーバ１１０は移動機構(図２では図示略)によっていずれかが選択的にキャピラリー端２ａと接触するように切り換えて配置される。
【００１５】
次に本実施例の動作を説明する。
サンプルプレート１００のウェル１０２にそれぞれ試料をいれる。ウェル１０２には、すでに処理された試料が入れられる場合だけでなく、ウェル１０２を用いてＰＣＲ(Polymerase Chain Reaction)法により試料を処理した後に、そのウェル１０２内の試料にキャピラリーカラム端を挿入して試料注入を行なうように用いることもできる。ＰＣＲ法はＤＮＡのうちの目的とする一部分のみを大幅に増幅させる方法である。ＰＣＲ法では試料のＤＮＡにプライマーを加え、温度を上げて二本鎖ＤＮＡを一本鎖に解離させ、次に温度を下げてプライマーをＤＮＡ鎖に結合させ、少し温度を上げてＤＮＡを合成させ、さらに温度を上げて一本鎖にする。このように温度を上下に変化させる操作を繰り返すことにより、ＤＮＡの所定部分を大量に増幅合成する方法である。
【００１６】
ウェル１０２に試料をいれた後、サンプルプレート１００のウェル１０２内の試料にキャピラリーカラム端２ａが１本ずつ浸され、リザーバ１２０のバッファ液１２２にキャピラリーカラム端２ｂがまとめて浸される。そして、高圧切換え部１３６を介して、コネクタ１０６及び電極パターンを介してウェル１０２と高圧電源１３４を接続する。
【００１７】
高電圧電源１３４によりウェル１０２とバッファ液１２２との間に高電圧を印加してキャピラリーカラムに試料を注入する。このとき印加される電圧及び時間は印加電圧制御部１３８により制御される。図３は印加電圧制御部により制御される試料導入時に印加する電圧と時間の一例を表す図である。縦軸は電圧(ｋＶ)を表し、横軸は時間(秒)を表す。
印加電圧制御部１３８により高電圧電源１３４を制御して、試料導入の開始から１５秒後に電圧が７．６ｋＶになるように徐々に電圧を上げる。その後１５秒間は７．６ｋＶの電圧を印加する。さらに１５秒をかけて電圧を７．６ｋＶから０Ｖに落して試料導入時の電圧印加を終了する。ここで印加する電圧と時間の積は、図１に示した印加する電圧と時間の積に相当する。ここで、印加する電圧と時間は試料の種類や装置の種類などにより異なるものであり、この例に限定されるものではない。
【００１８】
このように印加する電圧と時間を制御することにより、キャピラリーカラム中のゲルにおける急激な熱の発生及び減退を抑制することができ、キャピラリーカラム端に位置するゲルのストレスを柔らげることができる。さらに、大きな電気浸透流の発生を抑え、キャピラリーカラム端からゲルがずり出すことを抑制することもできる。さらに、高電圧を急激に印加することにより生じる電流のオーバーシュートを抑制することもできる。
上記のようにしてキャピラリーカラムに試料を導入することにより、泳動分離能を向上させることができ、従来１００ベース(塩基)程度の泳動分離能を２００〜３００ベースに向上させることができた。
【００１９】
試料注入後、移動機構によりサンプルプレート１００とリザーバ１１０を動かすことにより、試料側のキャピラリー端２ａをリザーバ１１０のバッファ液１１２中に浸す。その後、両リザーバ１１０と１２０間に高電圧を印加して電気泳動分離を行なう。泳動用の電源電圧は例えば３０ｋＶで、電流容量は１０〜３０ｍＡである。
【００２０】
移動機構はサンプルプレート１００とリザーバ１１０を水平面内で移動させ、キャピラリー端２ａを垂直方向に移動させるようにするものでもよい。
サンプルプレート１１０のウェルの数はキャピラリーアレイの本数に合わせて任意に設定することができる。
また、リザーバ１１０もサンプルプレート１００のように複数のウェルにバッファ液を収容する形式とし、各ウェルに個別の電極パターンを設けることにより、ウェルごとに独立した電圧を印加できるようして、異なる条件での電気泳動を同時に行なうようにしてもよい。
【００２１】
【発明の効果】
本発明のマルチキャピラリー電気泳動装置は、高圧電源により高電圧を印加してキャピラリーカラムに試料を導入する際、印加電圧制御部により高圧電源を制御して高電圧のかけ始めでは電圧を連続的に上げ、高電圧のかけ終りでは電圧を連続的に下げるようしたので、急激な熱の発生及び減退を抑制してキャピラリーカラム端に位置するゲルのストレスを軽減することができる。さらに、急激な電気浸透流の発生を抑制し、キャピラリーカラム端からのゲルのずり出しを抑制することもできる。その結果、泳動分離能を向上させることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】従来の試料導入時に印加する電圧と時間の一例を表す図であり、縦軸は電圧(ｋＶ)を表し、横軸は時間(秒)を表す。
【図２】一実施例を表す概略斜視図である。
【図３】同実施例の印加電圧制御部により制御される試料導入時に印加する電圧と時間の一例を表す図であり、縦軸は電圧(ｋＶ)を表し、横軸は時間(秒)を表す。
【符号の説明】
２キャピラリーアレイ
１０光学的測定部
１００サンプルプレート
１０６コネクタ部
１０２ウェル
１３６高圧切換え部
１３４高圧電源
１３８印加電圧制御部[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
In the present invention, a plurality of capillary columns are arranged, a plurality of samples are injected into the capillary columns one by one, and the capillary is electrophoresed simultaneously in all the capillary columns, and the capillary is irradiated with light in the multi-capillary array electrophoresis unit In addition, the present invention relates to a multi-capillary electrophoresis apparatus including an optical measurement unit that measures the absorbance of the irradiated portion and the fluorescence from the sample.
Such a multi-capillary electrophoresis apparatus is used for protein separation and DNA base sequence determination. In a multicapillary electrophoresis apparatus for determining the base sequence of DNA, a DNA fragment (fragment) sample with a primer or terminator labeled with a fluorescent substance is electrophoresed using a Sanger reaction, and fluorescence from the DNA fragment sample is migrated during the electrophoresis. The base sequence is determined by detection.
[0002]
[Prior art]
In order to determine the base sequence of a DNA having a long base sequence such as the human genome, a DNA sequencer having high sensitivity, high speed, and large throughput is required. As one of the methods, a multicapillary DNA sequencer in which a plurality of capillary columns packed with gels are arranged instead of using a flat slab gel has been proposed. Capillary columns are not only easier to handle and inject samples than slab gels, but also can be migrated at high speed and detected with high sensitivity. In other words, if a high voltage is applied with a slab gel, problems such as band expansion or temperature gradients occur due to the effect of Joule heat, but such problems are few with capillary columns. Even if it is made, it is possible to perform highly sensitive detection with little band spread.
[0003]
Samples are introduced into a capillary column in capillary electrophoresis by a method using pressure or an electrophoretic method in which a voltage is applied. Among them, a method for introducing a sample by electrophoresis is widely and generally adopted from the viewpoint of simplicity of apparatus configuration, ease of operation, and good controllability of parameters.
[0004]
FIG. 1 is a diagram illustrating an example of voltage and time applied when a sample is introduced. The vertical axis represents voltage (kV), and the horizontal axis represents time (seconds).
In this example, a voltage of 7.6 kV is applied for 30 seconds. In the conventional voltage application at the time of sample introduction, a predetermined high voltage is applied within a few seconds at the beginning of voltage application, and the high voltage is reduced to 0 within a few seconds when switching off.
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
When a high voltage is applied to the capillary column, the gel located at the end of the capillary column will be stressed greatly due to heat generation, which will hinder the introduction of the sample into the capillary column and will limit the number of bases that can be separated during electrophoresis separation. There was a problem of getting out.
In addition, when a high voltage is applied suddenly, the gel may be squeezed out from the end of the capillary column due to electroosmotic flow, and the electrophoretic separation state deteriorates if the spilled gel is damaged.
[0006]
Therefore, the present invention improves the electrophoretic separation performance in a multi-capillary electrophoresis apparatus by reducing the stress of the gel located at the end of the capillary column at the time of sample introduction or suppressing the gel from protruding from the end of the capillary column. It is the purpose.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
The multi-capillary electrophoresis apparatus of the present invention includes a multi-capillary array electrophoresis unit in which a plurality of capillary columns are arranged, a plurality of samples are injected into the capillary columns one by one, and electrophoresed simultaneously on all the capillary columns, and a multi-capillary array electrophoresis A multi-capillary electrophoresis device equipped with an optical measurement unit that irradiates the capillary with light and measures the absorbance of the irradiated part and the fluorescence from the sample, and applies a high voltage from a high-voltage power supply. When the sample is introduced into the capillary column, it is equipped with an applied voltage controller that controls the high-voltage power supply so that the voltage is continuously increased at the beginning of high voltage application and continuously reduced at the end of high voltage application. It is.
[0008]
At the time of sample injection into the capillary column, each sample is put into a sample introduction container, and one end of each capillary column is immersed in the sample in the container. A high voltage is applied by a high voltage power source between the sample in the container and the buffer solution on the other end side of the capillary column, and the sample is injected into the capillary electrophoretically. At this time, the applied voltage control unit controls the high-voltage power supply so that the voltage is continuously increased to a predetermined high voltage at the beginning and is continuously decreased from the predetermined high voltage at the end. As a result, it is possible to reduce the stress of the gel located at the end of the capillary column by suppressing rapid heat generation and decline. Furthermore, generation | occurrence | production of a big electroosmotic flow can be suppressed and the gel protrusion from a capillary column end can be suppressed.
[0009]
【Example】
FIG. 2 is a schematic perspective view showing an embodiment.
Buffer liquids 112 and 122 are accommodated in a pair of reservoirs 110 and 120, respectively, and electrodes 130 and 132 are provided in both buffer liquids, respectively. The sample plate 100 is made of an insulating material, and includes a planar surface and a connector portion 106 connected thereto. On the surface of the sample plate 100, a plurality of wells 102 are arranged at regular intervals in the vertical and horizontal directions. Each well 102 is a hole having a bottom, and each well 102 is formed with an individual electrode pattern from the bottom to the connector portion 106 through the surface of the base plate. A sample is put in each well 102 of the sample plate 100, and a high-voltage wiring cable is connected to the connector portion 106.
[0010]
The reservoir 110 and the sample plate 100 are connected so as to be switched by a high-voltage switching unit 136 so that wiring can be switched, and a high-voltage power source 134 is connected between the high-voltage switching unit 136 and an electrode 132 provided in the other reservoir 120. Has been. Connected to the high voltage power supply 134 is an applied voltage control unit 138 for controlling the applied voltage and time for sample introduction and electrophoresis. The applied voltage control unit 138 is realized by a microcomputer or the like.
[0011]
At the time of sample injection, one end portion 2a of the capillary array 2 is inserted into each well 102 of the sample plate 100, and after sample injection, the reservoir 110 is switched and the one end portion 2a is immersed in the buffer solution 112. The other end 2b of the capillary array 2 is immersed in the buffer solution 122 of the other reservoir 120, and the other end is irradiated with measurement light or excitation light from the optical measurement unit 10 that detects the sample by absorbance or fluorescence. And a detected portion 2c for measuring fluorescence.
[0012]
The capillary array 2 has a two-dimensional arrangement corresponding to the arrangement of the wells 102 of the sample plate 100 on one end side 2a, and the capillary column is arranged in a line in the detected portion 2c, and measurement is performed from a direction perpendicular to the arrangement surface of the capillary column. Light or excitation light is irradiated.
[0013]
The capillary column is made of quartz glass, borosilicate glass (for example, Pyrex) or the like, and has an outer shape of 200 to 300 μm and an inner diameter of 75 to 100 μm. Capillary columns are coated with a non-fluorescent material coating, such as SiO ₂ , that does not generate fluorescence by the excitation light from the ultraviolet region to the near-infrared region, such as SiO ₂ , or does not interfere with fluorescence measurement. Is preferred. In that case, it is not necessary to remove the film even in the detected portion 2c. On the other hand, when the capillary column has a resin film that emits fluorescence as a film, the film is removed in the detected portion 2c. A plurality of such capillary columns are arranged in the capillary array 2.
[0014]
The capillary column is filled with polyacrylamide gel, linear acrylamide gel, polyethylene oxide (PEO) gel, or the like as a separation medium gel. Each capillary column is labeled with four kinds of fluorescent substances selected from fluorescent substances such as different fluorescent substances FAM, JOE, TAMRA, ROX, R6G, and R-110 for each terminal base, or two or more fluorescent substances. Samples containing four kinds of DNA fragments labeled with four kinds of substances at different ratios are injected, and electrophoresis is performed at the same time.
The sample plate 100 and the reservoir 110 are selectively switched by a moving mechanism (not shown in FIG. 2) so as to selectively contact the capillary end 2a.
[0015]
Next, the operation of this embodiment will be described.
Samples are placed in the wells 102 of the sample plate 100, respectively. In addition to the case where a sample that has already been processed is placed in the well 102, the sample is processed by PCR (Polymerase Chain Reaction) using the well 102, and then the end of the capillary column is inserted into the sample in the well 102. It can also be used to perform sample injection. The PCR method is a method for greatly amplifying only a desired portion of DNA. In the PCR method, a primer is added to the sample DNA, the temperature is raised to dissociate the double-stranded DNA into single strands, then the temperature is lowered to bind the primer to the DNA strand, and the temperature is raised slightly to synthesize the DNA. Increase the temperature further to make it single-stranded. In this way, by repeating the operation of changing the temperature up and down, a predetermined portion of DNA is amplified and synthesized in large quantities.
[0016]
After putting the sample into the well 102, the capillary column end 2 a is immersed one by one in the sample in the well 102 of the sample plate 100, and the capillary column end 2 b is immersed together in the buffer solution 122 of the reservoir 120. Then, the well 102 and the high voltage power source 134 are connected via the connector 106 and the electrode pattern via the high voltage switching unit 136.
[0017]
A high voltage is applied between the well 102 and the buffer solution 122 by the high voltage power supply 134 to inject the sample into the capillary column. The applied voltage and time are controlled by the applied voltage control unit 138. FIG. 3 is a diagram illustrating an example of voltage and time applied at the time of sample introduction controlled by the applied voltage control unit. The vertical axis represents voltage (kV), and the horizontal axis represents time (seconds).
The applied voltage control unit 138 controls the high voltage power supply 134 and gradually increases the voltage so that the voltage becomes 7.6 kV 15 seconds after the start of sample introduction. Thereafter, a voltage of 7.6 kV is applied for 15 seconds. Further, the voltage is dropped from 7.6 kV to 0 V over 15 seconds, and the voltage application at the time of sample introduction is completed. The product of the applied voltage and time corresponds to the product of the applied voltage and time shown in FIG. Here, the applied voltage and time differ depending on the type of sample and the type of apparatus, and are not limited to this example.
[0018]
By controlling the voltage and time to be applied in this manner, rapid heat generation and decline in the gel in the capillary column can be suppressed, and the stress of the gel located at the end of the capillary column can be softened. Furthermore, generation | occurrence | production of a big electroosmotic flow can be suppressed and it can also suppress that a gel slips out from the capillary column end. Furthermore, it is possible to suppress an overshoot of current that occurs when a high voltage is applied suddenly.
By introducing the sample into the capillary column as described above, the electrophoretic separation ability can be improved, and the electrophoretic separation ability of about 100 bases (bases) can be improved to 200 to 300 bases.
[0019]
After sample injection, the sample plate 100 and the reservoir 110 are moved by a moving mechanism, so that the capillary end 2a on the sample side is immersed in the buffer solution 112 of the reservoir 110. Thereafter, electrophoretic separation is performed by applying a high voltage between the reservoirs 110 and 120. The power supply voltage for electrophoresis is, for example, 30 kV, and the current capacity is 10 to 30 mA.
[0020]
The moving mechanism may move the sample plate 100 and the reservoir 110 in a horizontal plane and move the capillary end 2a in the vertical direction.
The number of wells in the sample plate 110 can be arbitrarily set according to the number of capillary arrays.
In addition, the reservoir 110 also has a format in which a buffer solution is accommodated in a plurality of wells like the sample plate 100, and by providing an individual electrode pattern for each well, an independent voltage can be applied to each well. The electrophoresis may be performed at the same time.
[0021]
【The invention's effect】
In the multi-capillary electrophoresis apparatus of the present invention, when a high voltage is applied by a high voltage power source and a sample is introduced into the capillary column, the applied voltage control unit controls the high voltage power source to continuously increase the voltage at the beginning of applying the high voltage. Since the voltage is continuously lowered at the end of application of the high voltage, it is possible to reduce the stress of the gel located at the end of the capillary column by suppressing rapid heat generation and decline. Furthermore, generation | occurrence | production of a rapid electroosmotic flow can be suppressed and the gel protrusion from a capillary column end can also be suppressed. As a result, the electrophoretic separation ability can be improved.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a diagram illustrating an example of voltage and time applied at the time of conventional sample introduction, where the vertical axis represents voltage (kV) and the horizontal axis represents time (seconds).
FIG. 2 is a schematic perspective view showing an embodiment.
FIG. 3 is a diagram illustrating an example of voltage and time applied at the time of sample introduction controlled by the applied voltage control unit of the embodiment, where the vertical axis represents voltage (kV) and the horizontal axis represents time (second) To express.
[Explanation of symbols]
2 Capillary array 10 Optical measurement unit 100 Sample plate 106 Connector unit 102 Well 136 High voltage switching unit 134 High voltage power source 138 Applied voltage control unit

Claims

A plurality of capillary columns are arranged, and a plurality of samples are injected into the capillary columns one by one, and a multi-capillary array electrophoresis unit is simultaneously electrophoresed on all the capillary columns, and the capillary is irradiated with light in the multi-capillary array electrophoresis unit. In the multi-capillary electrophoresis apparatus having an optical measurement unit for measuring the absorbance of the irradiated part and the fluorescence from the sample,
When a high voltage is applied by a high voltage power source and a sample is introduced into the capillary column, the high voltage power source is controlled so that the voltage is continuously increased at the beginning of high voltage application and continuously decreased at the end of high voltage application. A multi-capillary electrophoresis apparatus comprising an applied voltage control unit.