JP3934705B2

JP3934705B2 - Cyclodextrin composition

Info

Publication number: JP3934705B2
Application number: JP13234896A
Authority: JP
Inventors: 孝冬室; 清落合; 翠星野路
Original assignee: ノバルティスファーマ株式会社
Priority date: 1995-05-26
Filing date: 1996-05-27
Publication date: 2007-06-20
Anticipated expiration: 2016-05-27
Also published as: JPH0948737A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明はシクロスポリンまたはマクロライド系化合物（以下シクロスポリン等ということがある）の組成物に関する。特に可溶性シクロスポリン組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
シクロスポリン類とは、医薬活性を有する既知の一群の環状ウンデカペプチドを指す。例えば、サンディミュン（ＳＡＮＤＩＭＭＵＮ）という商標で市販されている化合物（シクロスポリンＡ）の他に、ジヒドロシクロスポリンＤおよびシクロスポリンＧ、２−（Ｏ−２−Ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ−Ｄ−ｓｅｒｉｎｅ）−ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ、（Ｓ′−ｋｅｔｏ−Ｂｍｔ１）−（Ｖａｌ２）−Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ等、多くの化合物が知られている（特開平２−１７１２７号公報参照）。この中でも、シクロスポリンＡは、臓器移植における拒否反応の抑制および移植片対宿主病の抑制の用途において、現在臨床で広く使用されている。
【０００３】
また、様々な自己免疫疾患および炎症状態、特に自己免疫要素を含む病因を伴う炎症状態、例えば乾癬、関節炎（例、リウマチ様関節炎、進行性蔓延関節炎および変形性関節炎）、リウマチ疾患および呼吸器系疾患（例、喘息）に対する有用性が臨床上確認されている。
【０００４】
さらに、マラリア、コクシジオイデス症および住血虫症に対する作用、駆虫特に抗原生動物作用、脱毛症に対する作用、多薬品耐性腫瘍に対する作用が確認されている。
【０００５】
一方、マクロライドは大環ラクトンで、環の員数が１２またはそれ以上の化合物の総称である。ラクタム系マクロライドは、ラクトン（エステル）結合に加えて環内にラクタム（アミド）結合を有する興味深い化合物であり、これには、ラパマイシン、アスコマイシン、ＦＫ−５０６などＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ属の微生物が産生するラクタム系マクロライドやその誘導体や類似体が豊富に存在する。これらラクタム系マクロライドは特異な薬理学的特性を有するとされており、特に免疫抑制及び抗炎症作用が注目されている。
【０００６】
ラパマイシンは免疫抑制作用のあるラクタム系マクロライドで、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓにより産生される。ラパマイシンの構造はＫｅｓｓｅｌｅｒ，Ｈ．等により１９９３年に明らかになった（Ｈｅｌｙ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ；７６：１１７）。ラパマイシンの誘導体として、国際公開第９４／０９０１０号パンフレットに公開されている４０−Ｏ−（２−ｈｙｄｒｏｘｙ）ｅｔｈｙｌ−ｒａｐａｍｙｃｉｎなどの４０−Ｏ−ａｌｋｙｌａｔｅｄ誘導体など多くの種類が合成されている。ラパマイシンとその構造類似化合物および誘導体はラパマイシン類と総称される。
【０００７】
アスコマイシン類は異なるクラスのラクタム系マクロライドで、代表的な化合物としてはＦＫ−５０６、アスコマイシンが存在する。これらの多くが強力な免疫抑制および抗炎症作用を有する。ＦＫ−５０６はＭｅｒｃｋＩｎｄｅｘ，１１版（１９８９）のＡｐｐｅｎｄｉｘにＡ５項目としてその構造式が記載されている。アスコマイシンは米国特許第３，２４４，５９２号明細書に記載されている。アスコマイシンとＦＫ−５０６は、ヨーロッパ特許出願公開第４２７６８０号明細書に公開されている３３−ｅｐｉ−ｃｈｌｏｒｏ−３３−ｄｅｓｏｘｙ−ａｓｃｏｍｙｃｉｎなどのハロゲン化誘導体など、多くの誘導体が合成されている。アスコマイシン、ＦＫ−５０６およびこれらの構造類似化合物や誘導体はアスコマイシン類と総称される。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
シクロスポリンもしくはマクロライド系化合物の水に対する溶解度は極めて低いので現在は通常エタノールを含む油性溶液製剤として調製されている。
【０００９】
この様な製剤は水との接触によりシクロスポリン等の結晶を析出しやすく、経口剤、粘膜適用剤には好ましい組成ではなかった。
【００１０】
また、注射剤中には可溶化剤として界面活性剤、すなわちポリオキシエチレンヒマシ油誘導体を配合してシクロスポリン等の析出を防止している。しかしながらポリオキシエチレンヒマシ油誘導体はショック等の重篤な過敏反応を引き起こすことがあるので安全上必ずしも好ましいものではない。
【００１１】
したがって治療上有効量のシクロスポリン等を含みかつ界面活性剤等を使用しなくても十分に可溶性の組成物が望まれていた。
【００１２】
従来の技術においてはα−サイクロデキストリンがシクロスポリン類の溶解性改善に有効であることが知られているが、この用途においてβ−サイクロデキストリン類の効果は認められていなかった。
【００１３】
また、特開昭６４−８５９２１号公報には、シクロスポリンとα−サイクロデキストリンおよび／またはその誘導体とからなる製剤が開示されている。
【００１４】
しかしながら、α−サイクロデキストリンは溶血性が比較的高く外用、特に粘膜には適用できない。したがって溶血性が低くかつ可溶性のシクロスポリン組成物が望まれていた。
【００１５】
【課題を解決するための手段】
本願発明者等は、特開昭６４−８５９５１号公報の教示に反して、β−サイクロデキストリン類とシクロスポリン等の混合により、シクロスポリン等の水に対する溶解性は劇的に増加し、この効果はα−サイクロデキストリンとシクロスポリンの混合物で知られている効果と比較して極めて優れていることを確認した。すなわち、本発明はシクロスポリン等とβ−サイクロデキストリン誘導体とを含む組成物を提供する。
【００１６】
また、本発明者等は特定のα−サイクロデキストリン誘導体は溶血性が比較的低くかつシクロスポリン類の水に対する溶解性を顕著に向上させることも見出した。すなわち、本発明はシクロスポリン類とグルコシル−α−サイクロデキストリンおよび／またはマルトシル−α−サイクロデキストリン（以下α−サイクロデキストリン誘導体ということがある）とを含む組成物を提供する。
【００１７】
本発明で使用するシクロスポリン類としては前述のシクロスポリンＡが好ましい。
【００１８】
また、本発明はマクロライド系化合物と、β−サイクロデキストリン誘導体またはグルコシル−α−サイクロデキストリンおよび／またはマルトシル−α−サイクロデキストリンとを含む組成物も提供する。
【００１９】
本発明で使用するβ−サイクロデキストリン誘導体の例としてはメチル−β−サイクロデキストリン、ジメチル−β−サイクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−サイクロデキストリン、グルコシル−β−サイクロデキストリン、マルトシル−β−サイクロデキストリン、スルホン化−β−サイクロデキストリン、スルホン化アルキルエーテル−β−サイクロデキストリン（例えばＣ_1-4アルキル）等が挙げられ、メチル−β−サイクロデキストリンおよびジメチル−β−サイクロデキストリンが好ましく、ジメチル−β−サイクロデキストリンが特に好ましい。また、これらの化合物にさらなる置換基を導入したβ−サイクロデキストリン類も本発明に使用し得る。
【００２０】
本発明組成物は、粉末状のシクロスポリンとβ−サイクロデキストリン誘導体またはグルコシル−α−サイクロデキストリンおよび／またはマルトシル−α−サイクロデキストリンとを適量の水、または水とアルコール類の混合液等の適当な溶媒を加えて混練することによって製造することができるほか、スプレードライ、凍結乾燥法等で製造することもできる。
【００２１】
本発明組成物は、粉末剤、顆粒剤、錠剤、注射製剤、坐剤、液剤、吸入剤、ドライシロップ剤およびカプセル剤等の当業界で公知のいかなる製剤形態にも製剤化し得る。
【００２２】
シクロスポリン等とβ−サイクロデキストリン誘導体との配合比は０．１：９９．９〜９０：１０、好ましくは０．５：９９．５〜５０：５０、さらに好ましくは１：９９〜２０：８０の範囲である。
【００２３】
シクロスポリン等とα−サイクロデキストリン誘導体との配合比は０．１：９９．９〜９０：１０、好ましくは０．５：９９．５〜７０：３０、さらに好ましくは１：９９〜５０：５０の範囲である。
【００２４】
本発明組成物中には上記成分の他に、一般的に医薬品製剤に添加されている賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、等張化剤、ｐＨ調節剤、保存剤、保湿剤および着色剤等も適宜配合し得る。
【００２５】
本発明組成物は従来シクロスポリンまたはマクロライド系化合物が適用されている全ての疾患に適用し得る。
【００２６】
β−サイクロデキストリン誘導体を含む本発明組成物は経口、静脈内注射、皮下注射、点滴、点眼、局所塗布、吸入等の方法で投与し得るが、特に経口が好ましい。
【００２７】
本発明組成物を使用すると、従来知られているいかなるシクロスポリン製剤よりも活性成分の体内への吸収が向上するので、従来の製剤に較べて活性成分の投与量を減じることが期待できる（約４０−約８０％）。
【００２８】
また、α−サイクロデキストリン誘導体を含む本発明組成物は経口、静脈内注射、皮下注射、点滴、吸入、点眼、点鼻、局所塗布等の方法で投与し得るが、特に吸入、点眼、点鼻が好ましい。
【００２９】
本発明組成物は可溶性でありかつ溶血性が低いという特徴を有しているため、従来知られているシクロスポリン／α−サイクロデキストリンでは不可能であった吸入あるいは点鼻での投与が可能である。
【００３０】
治療上投与される活性成分または製剤の適切な量は、投与条件、投与間隔、活性成分の放出率などの種々の因子によって決定される。例えば、治療上有効な血中濃度を維持するために必要な製剤中の活性成分量、あるいは活性成分の放出率は既知のｉｎ−ｖｉｔｒｏ，ｉｎ−ｖｉｖｏ実験の結果より決定される。
【００３１】
移植患者に対する経口維持用量は一日約３〜約１０ｍｇ（力値）／ｋｇであり、２５〜１００ｍｇのシクロスポリンを含有するカプセルによって投与される。
【００３２】
本発明の分子間相互作用の機構の十分な解明は未だなされていないが、本発明の組合せにおいて、薬物は、サイクロデキストリン類と何らかの結合状態を有しているものと考えられている。
【００３３】
【実施例】
以下実施例を用いて本発明をさらに詳しく説明する。
【００３４】
参考例１
各種サイクロデキストリンのシクロスポリン等の可溶化効果を表１に示す。
【００３５】
【表１】

【００３６】
参考例２
ジメチル−β−サイクロデキストリンとα−サイクロデキストリンのシクロスポリンＡに対する３７℃での可溶化効果の比較を図１に示す。また、ジメチル−β−サイクロデキストリンの２−（Ｏ−２−Ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ−Ｄ−ｓｅｒｉｎｅ）−ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ、（Ｓ′−ｋｅｔｏ−Ｂｍｔ１）−（Ｖａｌ２）−Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ、３３−ｅｐｉ−ｃｈｌｏｒｏ−３３−ｄｅｓｏｘｙ−ａｓｃｏｍｙｃｉｎに対する３７℃での可溶化効果をそれぞれ図２、図３、図４に示す。
【００３７】
実施例１
下記のようにシクロスポリンＡとサイクロデキストリン類とを含むカプセル剤を製造した。
【００３８】
シクロスポリンＡ０．３ｇとジメチル−β−サイクロデキストリン１１．７ｇとを１０分間混合し、水１２ｍｌを加えて３時間混練した。得られた混練物を４０℃で２時間乾燥し、減圧下２４時間さらに乾燥した。その後、６０メッシュの篩で篩別し、粉末剤（剤１）を製造した。
【００３９】
実施例２
水／エタノール＝１／１の混合溶媒１２ｍｌを水１２ｍｌの代りに用いた以外実施例１の方法を繰り返して剤２を製造した。
【００４０】
前述の実施例において、シクロスポリンＡを、４０−Ｏ−（２−ｈｙｄｒｏｘｙ）ｅｔｈｙｌ−ｒａｐａｍｙｃｉｎ、または３３−ｅｐｉ−ｃｈｌｏｒｏ−３３−ｄｅｓｏｘｙ−ａｓｃｏｍｙｃｉｎ等に換えることも可能である。この場合、著しい溶解性の向上が認められた。
【００４１】
比較例１
ジメチル−β−サイクロデキストリンの代りにα−サイクロデキストリンを用いた以外実施例１の方法を繰り返して剤３を製造した。
【００４２】
試験１（インビトロテスト）
剤１〜３を０号ハードゼラチンカプセルに５４０ｍｇ充填し、カプセル製剤とした。これらをパドル法において日局Ｉ液（ｐＨ＝１．２）で、３７℃、１００ｒｐｍで溶出試験（溶出液量５００ｍｌ）を行い、ＨＰＬＣ法を用いて定量した。結果を図５に示す。
【００４３】
図５から明らかな通り本発明組成物を含有するカプセル剤はα−サイクロデキストリンを使用した比較例１のカプセル剤に比較して溶出性に優れる。
【００４４】
試験２（インビボテスト）
剤１を０号ハードゼラチンカプセルに充填したもの、およびサンディミュンカプセル（商標、サンド薬品製）を雄ビーグル犬（生後７ケ月）に、２４時間の断食後、投与する薬物量が同量になるように経口投与し、投与直前、投与後０．５、１、２、４、６、８、２４時間後のシクロスポリンの血中濃度をＨＰＬＣにより測定した。結果を図６に示す。
【００４５】
図６から明らかな通り本発明組成物を含有するカプセル剤を使用するとサンディミュンカプセル（商標）を使用したときに比較してシクロスポリンの血中濃度が高い。
【００４６】
製剤例１（錠剤）
シクロスポリンＡ７５ｇとジメチル−β−サイクロデキストリン１５００ｇとを混合し、精製水３５０ｍｌとメチルセルロース３０ｇを加えて練合した。これを押し出し造粒機で造粒し、乾燥後、整粒を行った。これにトウモロコシデンプン９０ｇおよびカルボキシメチルセルロース７０ｇを加えて混合した。さらにステアリン酸マグネシウム８ｇを混合し、この混合物を打錠して錠剤を得た。
【００４７】
製剤例２（顆粒剤）
シクロスポリンＡ７５ｇとジメチル−β−サイクロデキストリン１５００ｇとを混合し、精製水３５０ｍｌとメチルセルロース３０ｇを加えて練合した。これを押し出し造粒機で造粒し、乾燥後、整粒を行った。さらに篩過を行い、顆粒剤を得た。
【００４８】
製剤例３（液剤）
シクロスポリンＡ１０ｇとジメチル−β−サイクロデキストリン３００ｇとを精製水１ｌに溶解し、さらにパラオキシ安息香酸メチル２ｇとパラオキシ安息香酸プロピル０．２ｇを加えて液剤を得た。
【００４９】
参考例３
各種サイクロデキストリンの溶血性を図７に示す。
【００５０】
参考例４
シクロスポリン飽和濃度下におけるサイクロデキストリン類の溶血性を図８〜１０に示す。
【００５１】
参考例５
各種サイクロデキストリンのシクロスポリンＡ等の可溶化効果を表２に示す。
【００５２】
【表２】

【００５３】
実施例３
下記のようにシクロスポリンＡとサイクロデキストリン類とを含むカプセル剤を製造した。
【００５４】
シクロスポリンＡ０．６ｇとグルコシル−α−サイクロデキストリン１１．４ｇとを１０分間混合し、水１２ｍｌを加えて３時間混練した。得られた混練物を４０℃で２時間乾燥し、減圧下２４時間さらに乾燥した。その後、６０メッシュの篩で篩別し、０号ハードゼラチンカプセルに充填し、カプセル製剤（剤４）を製造した。
【００５５】
この実施例において、シクロスポリンＡを、４０−Ｏ−（２−ｈｙｄｒｏｘｙ）ｅｔｈｙｌ−ｒａｐａｍｙｃｉｎ、または３３−ｅｐｉ−ｃｈｌｏｒｏ−３３−ｄｅｓｏｘｙ−ａｓｃｏｍｙｃｉｎ等に換えることも可能である。
【００５６】
比較例２
グルコシル−α−サイクロデキストリンの代りにα−サイクロデキストリンを用いた以外実施例３の方法を繰り返して剤５を製造した。
【００５７】
試験３（インビボテスト）
剤４および剤５を雄ビーグル犬（生後７ケ月）に、２４時間の絶食後、投与する薬物量が同量となるように経口投与し、投与直前、投与後０．５、１、２、４、６、８、２４時間後のシクロスポリンの血中濃度をＨＰＬＣにより測定した。結果を図１１に示す。
【００５８】
図１１から明らかな通り本発明組成物を含有するカプセル剤を使用するとα−サイクロデキストリンを使用した比較例２のカプセル剤を使用したときに比較してシクロスポリンの血中濃度が高い。
【００５９】
製剤例４（錠剤）
シクロスポリンＡ７５ｇとグルコシル−α−サイクロデキストリン１５００ｇとを混合し、精製水３５０ｍｌとメチルセルロース３０ｇを加えて練合した。これを押し出し造粒機で造粒し、乾燥後、整粒を行った。これにトウモロコシデンプン９０ｇおよびカルボキシメチルセルロース７０ｇを加えて混合した。これにステアリン酸マグネシウム８ｇを混合し、この混合物を打錠して錠剤を得た。
【００６０】
製剤例５（顆粒剤）
シクロスポリンＡ７５ｇとグルコシル−α−サイクロデキストリン１５００ｇとを混合し、精製水３５０ｍｌとメチルセルロース３０ｇを加えて練合した。これを押し出し造粒機で造粒し、乾燥後、整粒を行った。更に篩過を行い、顆粒剤を得た。
【００６１】
製剤例６（吸入剤）
シクロスポリンＡ２５ｇとグルコシル−α−サイクロデキストリン７５ｇとを精製水／イソプロピルアルコール＝１／１の混合溶媒１０ｌに溶解させ、スプレードライヤーによって噴霧乾燥し、微粒子化を行った。これをハードゼラチンカプセルに充填し、粉末吸入剤を得た。
【００６２】
製剤例７（点眼剤）
シクロスポリンＡ２４ｍｇ、グルコシル−α−サイクロデキストリン１０ｇ、リン酸二水素ナトリウム０．５６ｇ、リン酸一水素ナトリウム０．２８ｇおよび塩化ベンザルコニウム１０ｍｇを滅菌精製水１００ｍｌに溶解した。これに塩化ナトリウムを加えて等張化し、点眼剤を得た。
【００６３】
製剤例８（点鼻液）
シクロスポリンＡ２４ｍｇ、グルコシル−α−サイクロデキストリン１０ｇ、リン酸二水素ナトリウム０．５６ｇ、リン酸一水素ナトリウム０．２８ｇおよび塩化ベンザルコニウム１０ｍｇを滅菌精製水１００ｍｌに溶解した。これにグリセリンを加えて等張化し、点鼻液を得た。
【図面の簡単な説明】
【図１】ジメチル−β−サイクロデキストリンとα−サイクロデキストリンのシクロスポリンＡに対する３７℃での可溶化効果のグラフである。サイクロデキストリンと過剰量のシクロスポリンとを１０ｍｌの水に加え、３７℃で３時間撹拌した。その後、遠心分離を行い、上清をＨＰＬＣにより分析した。
【図２】ジメチル−β−サイクロデキストリンの２−（Ｏ−２−ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ−Ｄ−ｓｅｒｉｎｅ）−ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡに対する３７℃での可溶化効果のグラフである。サイクロデキストリンと過剰量のシクロスポリンとを１０ｍｌの水に加え、３７℃で３時間撹拌した。その後、遠心分離を行い、上清をＨＰＬＣにより分析した。
【図３】ジメチル−β−サイクロデキストリンの（Ｓ′−ｋｅｔｏ−Ｂｍｔ１）−（Ｖａｌ２）−Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎに対する３７℃での可溶化効果のグラフである。サイクロデキストリンと過剰量のシクロスポリンとを１０ｍｌの水に加え、３７℃で３時間撹拌した。その後、遠心分離を行い、上清をＨＰＬＣにより分析した。
【図４】ジメチル−β−サイクロデキストリンの３３−ｅｐｉ−ｃｈｌｏｒｏ−３３−ｄｅｓｏｘｙ−ａｓｃｏｍｙｃｉｎに対する３７℃での可溶化効果のグラフである。サイクロデキストリンと過剰量のアスコマイシンとを１０ｍｌの水に加え、３７℃で３時間撹拌した。その後、遠心分離を行い、上清をＨＰＬＣにより分析した。
【図５】各種組成物を含有するカプセル剤のインビトロにおける溶出試験のグラフである。
【図６】各種カプセル剤投与後の経過時間に対するシクロスポリンの血中濃度のグラフである。
【図７】各種サイクロデキストリン／シクロスポリンＡ水溶液の溶血性を示すグラフである。サイクロデキストリンを５ｍｌの０．８５％食塩水に溶解し、０．０５ｍｌのウサギ血液を加え、３７℃で３０分間インキュベートし、遠心分離（５分）後、上清の５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。０．１％食塩水により１００％溶血を算出した。
【図８】シクロスポリン飽和濃度下におけるサイクロデキストリン類の溶血性を示すグラフである。サイクロデキストリンを５ｍｌの０．８５％食塩水に溶解し、シクロスポリンを飽和になるように加え、その後試験溶液に０．０５ｍｌのウサギ血液を加え、３７℃で３０分間インキュベートし、遠心分離（５分）後、上清の５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。０．１％食塩水により１００％溶血を算出した。
【図９】２−（Ｏ−２−Ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ−Ｄ−ｓｅｒｉｎｅ）−ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ飽和濃度下におけるサイクロデキストリン類の溶血性を示すグラフである。サイクロデキストリンを５ｍｌの０．８５％食塩水に溶解し、シクロスポリンを飽和になるように加え、その後試験溶液に０．０５ｍｌのウサギ血液を加え、３７℃で３０分間インキュベートし、遠心分離（５分）後、上清の５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。０．１％食塩水により１００％溶血を算出した。
【図１０】（Ｓ′−ｋｅｔｏ−Ｂｍｔ１）−（Ｖａｌ２）−Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ飽和濃度下におけるサイクロデキストリン類の溶血性を示すグラフである。サイクロデキストリンを５ｍｌの０．８５％食塩水に溶解し、シクロスポリンを飽和になるように加え、その後試験溶液に０．０５ｍｌのウサギ血液を加え、３７℃で３０分間インキュベートし、遠心分離（５分）後、上清の５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。０．１％食塩水により１００％溶血を算出した。
【図１１】種々のカプセル剤を投与後のシクロスポリン血中動態を示すグラフである。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a composition of a cyclosporine or a macrolide compound (hereinafter sometimes referred to as cyclosporine or the like). In particular, it relates to a soluble cyclosporine composition.
[0002]
[Prior art]
Cyclosporine refers to a known group of cyclic undecapeptides having pharmaceutical activity. For example, in addition to the compound commercially available under the trademark SANDIMMUN (cyclosporin A), dihydrocyclosporin D and cyclosporin G, 2- (O-2-Hydroxyethyl-D-serine) -Cyclosporin A, (S ′ Many compounds such as -keto-Bmt1)-(Val2) -Cyclosporin are known (see JP-A-2-17127). Among these, cyclosporin A is currently widely used clinically for the purpose of inhibiting rejection in organ transplantation and graft-versus-host disease.
[0003]
Also, various autoimmune diseases and inflammatory conditions, particularly inflammatory conditions with etiology involving autoimmune elements such as psoriasis, arthritis (eg, rheumatoid arthritis, progressive prevalent arthritis and osteoarthritis), rheumatic diseases and respiratory system Its usefulness against diseases (eg, asthma) has been clinically confirmed.
[0004]
Furthermore, an action against malaria, coccidioidomycosis and schistosomiasis, anthelmintic, particularly an antigenic animal action, an action against alopecia, and an action against a multidrug resistant tumor have been confirmed.
[0005]
On the other hand, macrolide is a macrocyclic lactone and is a general term for compounds having 12 or more ring members. A lactam macrolide is an interesting compound having a lactam (amide) bond in the ring in addition to a lactone (ester) bond, and includes lactams produced by microorganisms of the genus Streptomyces such as rapamycin, ascomycin, and FK-506. There are abundant types of macrolides and their derivatives and analogs. These lactam macrolides are said to have unique pharmacological properties, and in particular, immunosuppression and anti-inflammatory effects are attracting attention.
[0006]
Rapamycin is a lactam macrolide with immunosuppressive action and is produced by Streptomyces hygroscopicus . The structure of rapamycin is described in Kesseler, H. et al. Et al. In 1993 (Hely. Chim. Acta; 76: 117). As the derivatives of rapamycin, many types such as 40-O-alkylated derivatives such as 40-O- (2-hydroxy) ethyl-rapamicin disclosed in WO94 / 09010 pamphlet have been synthesized. Rapamycin and its structurally similar compounds and derivatives are collectively referred to as rapamycins.
[0007]
Ascomycins are different classes of lactam macrolides, and typical compounds include FK-506 and ascomycin. Many of these have strong immunosuppressive and anti-inflammatory effects. The structural formula of FK-506 is described as an A5 item in Appendix of Merck Index, 11th edition (1989). Ascomycin is described in US Pat. No. 3,244,592. Many derivatives of ascomycin and FK-506 have been synthesized, such as halogenated derivatives such as 33-epi-chloro-33-desoxy-asmycin published in European Patent Application Publication No. 427 680. Ascomycin, FK-506, and structurally similar compounds and derivatives thereof are collectively referred to as ascomycins.
[0008]
[Problems to be solved by the invention]
Since the solubility of cyclosporine or macrolide compounds in water is extremely low, it is currently prepared as an oily solution preparation containing ethanol.
[0009]
Such a preparation easily precipitates crystals such as cyclosporine upon contact with water, and is not a preferable composition for oral preparations and mucosal application agents.
[0010]
In addition, a surfactant, that is, a polyoxyethylene castor oil derivative is blended in the injection as a solubilizer to prevent the precipitation of cyclosporine and the like. However, polyoxyethylene castor oil derivatives are not always preferable for safety because they may cause serious hypersensitivity reactions such as shock.
[0011]
Accordingly, a composition that contains a therapeutically effective amount of cyclosporine and the like and is sufficiently soluble without using a surfactant or the like has been desired.
[0012]
In the prior art, it is known that α-cyclodextrin is effective in improving the solubility of cyclosporines, but the effect of β-cyclodextrins has not been recognized in this application.
[0013]
Japanese Patent Application Laid-Open No. 64-85921 discloses a preparation comprising cyclosporine and α-cyclodextrin and / or a derivative thereof.
[0014]
However, α-cyclodextrin has a relatively high hemolytic property and cannot be applied externally, particularly to mucous membranes. Therefore, a cyclosporine composition that has low hemolysis and is soluble has been desired.
[0015]
[Means for Solving the Problems]
Contrary to the teaching of Japanese Patent Application Laid-Open No. 64-85951, the inventors of the present application dramatically increased the solubility of cyclosporine and the like in water by mixing β-cyclodextrins and cyclosporine and the like. -It was found to be very good compared to the effects known for the mixture of cyclodextrin and cyclosporine. That is, the present invention provides a composition comprising cyclosporine or the like and a β-cyclodextrin derivative.
[0016]
The present inventors have also found that specific α-cyclodextrin derivatives have relatively low hemolytic properties and significantly improve the solubility of cyclosporines in water. That is, the present invention provides a composition comprising cyclosporine and glucosyl-α-cyclodextrin and / or maltosyl-α-cyclodextrin (hereinafter sometimes referred to as α-cyclodextrin derivative).
[0017]
As the cyclosporins used in the present invention, the aforementioned cyclosporin A is preferable.
[0018]
The present invention also provides a composition comprising a macrolide compound and a β-cyclodextrin derivative or glucosyl-α-cyclodextrin and / or maltosyl-α-cyclodextrin.
[0019]
Examples of β-cyclodextrin derivatives used in the present invention include methyl-β-cyclodextrin, dimethyl-β-cyclodextrin, hydroxypropyl-β-cyclodextrin, glucosyl-β-cyclodextrin, maltosyl-β-cyclodextrin, Sulfonated-β-cyclodextrin, sulfonated alkyl ether-β-cyclodextrin (eg C _1-4 alkyl) and the like, and methyl-β-cyclodextrin and dimethyl-β-cyclodextrin are preferred, and dimethyl-β- Cyclodextrin is particularly preferred. In addition, β-cyclodextrins in which further substituents are introduced into these compounds can also be used in the present invention.
[0020]
The composition of the present invention comprises a powdery cyclosporine and a β-cyclodextrin derivative or glucosyl-α-cyclodextrin and / or maltosyl-α-cyclodextrin in an appropriate amount of water or a mixture of water and alcohol. It can be produced by adding a solvent and kneading, and can also be produced by spray drying, freeze drying or the like.
[0021]
The composition of the present invention can be formulated into any formulation known in the art such as powders, granules, tablets, injection preparations, suppositories, solutions, inhalants, dry syrups and capsules.
[0022]
The compounding ratio of cyclosporine and the like to the β-cyclodextrin derivative is 0.1: 99.9 to 90:10, preferably 0.5: 99.5 to 50:50, more preferably 1:99 to 20:80. It is a range.
[0023]
The compounding ratio of cyclosporine or the like and the α-cyclodextrin derivative is 0.1: 99.9 to 90:10, preferably 0.5: 99.5 to 70:30, more preferably 1:99 to 50:50. It is a range.
[0024]
In the composition of the present invention, in addition to the above components, excipients, binders, disintegrants, lubricants, isotonic agents, pH adjusters, preservatives, moisturizing agents generally added to pharmaceutical preparations A coloring agent, a coloring agent, and the like can be appropriately blended.
[0025]
The composition of the present invention can be applied to all diseases to which conventional cyclosporine or macrolide compounds have been applied.
[0026]
The composition of the present invention containing a β-cyclodextrin derivative can be administered by a method such as oral, intravenous injection, subcutaneous injection, instillation, eye drop, topical application, inhalation, etc., and oral administration is particularly preferable.
[0027]
When the composition of the present invention is used, the absorption of the active ingredient into the body is improved as compared with any conventionally known cyclosporine preparations. Therefore, the dose of the active ingredient can be expected to be reduced as compared with the conventional preparations (about 40 -About 80%).
[0028]
Further, the composition of the present invention containing an α-cyclodextrin derivative can be administered by a method such as oral, intravenous injection, subcutaneous injection, drip, inhalation, instillation, instillation, topical application and the like. Is preferred.
[0029]
Since the composition of the present invention is soluble and has a low hemolytic property, it can be administered by inhalation or nasal administration, which was impossible with the conventionally known cyclosporine / α-cyclodextrin. .
[0030]
The appropriate amount of active ingredient or formulation to be administered therapeutically is determined by various factors such as dosing conditions, dosing interval, release rate of the active ingredient and the like. For example, the amount of the active ingredient in the preparation necessary for maintaining a therapeutically effective blood concentration, or the release rate of the active ingredient is determined from the results of known in-vitro and in-vivo experiments.
[0031]
The oral maintenance dose for transplant patients is about 3 to about 10 mg (potency) / kg daily and is administered by capsules containing 25 to 100 mg of cyclosporine.
[0032]
Although the mechanism of the intermolecular interaction of the present invention has not yet been fully elucidated, in the combination of the present invention, the drug is considered to have some binding state with cyclodextrins.
[0033]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples.
[0034]
Reference example 1
Table 1 shows the solubilizing effects of various cyclodextrins such as cyclosporine.
[0035]
[Table 1]

[0036]
Reference example 2
A comparison of the solubilizing effect of dimethyl-β-cyclodextrin and α-cyclodextrin on cyclosporin A at 37 ° C. is shown in FIG. Further, 2- (O-2-Hydroxyethyl-D-serine) -Cyclosporin A, (S′-keto-Bmt1)-(Val2) -Cyclosporin, 33-epi-chloro-33-desoxy of dimethyl-β-cyclodextrin. The solubilizing effect at 37 ° C. on -ascomycin is shown in FIG. 2, FIG. 3, and FIG. 4, respectively.
[0037]
Example 1
Capsules containing cyclosporin A and cyclodextrins were prepared as follows.
[0038]
Cyclosporin A 0.3 g and dimethyl-β-cyclodextrin 11.7 g were mixed for 10 minutes, and 12 ml of water was added and kneaded for 3 hours. The obtained kneaded material was dried at 40 ° C. for 2 hours and further dried under reduced pressure for 24 hours. Thereafter, the mixture was sieved with a 60 mesh sieve to produce a powder agent (agent 1).
[0039]
Example 2
Agent 2 was produced by repeating the method of Example 1 except that 12 ml of a mixed solvent of water / ethanol = 1/1 was used instead of 12 ml of water.
[0040]
In the above-described embodiments, cyclosporin A can be replaced with 40-O- (2-hydroxy) ethyl-rapamycin, 33-epi-chloro-33-desoxy-ascomycin, or the like. In this case, a significant improvement in solubility was observed.
[0041]
Comparative Example 1
Agent 3 was prepared by repeating the method of Example 1 except that α-cyclodextrin was used instead of dimethyl-β-cyclodextrin.
[0042]
Test 1 (In vitro test)
540 mg of Agents 1 to 3 were filled into a No. 0 hard gelatin capsule to give a capsule preparation. These were subjected to elution test (eluate volume: 500 ml) at 37 ° C. and 100 rpm using JP I liquid (pH = 1.2) in the paddle method, and quantified using the HPLC method. The results are shown in FIG.
[0043]
As is clear from FIG. 5, the capsule containing the composition of the present invention is superior in dissolution property as compared with the capsule of Comparative Example 1 using α-cyclodextrin.
[0044]
Test 2 (in vivo test)
No. 1 hard gelatin capsule filled with Agent 1 and Sandy Mün capsule (trademark, manufactured by Sand Yakuhin) are administered to male beagle dogs (7 months old) after fasting for 24 hours, the same amount of drug will be administered The blood concentration of cyclosporine was measured by HPLC immediately before administration and 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, and 24 hours after administration. The results are shown in FIG.
[0045]
As is apparent from FIG. 6, when the capsule containing the composition of the present invention is used, the blood concentration of cyclosporine is higher than when Sandimune Capsule (trademark) is used.
[0046]
Formulation Example 1 (tablet)
Cyclosporin A 75 g and dimethyl-β-cyclodextrin 1500 g were mixed, and 350 ml of purified water and 30 g of methylcellulose were added and kneaded. This was granulated with an extrusion granulator, dried and then sized. To this, 90 g of corn starch and 70 g of carboxymethylcellulose were added and mixed. Further, 8 g of magnesium stearate was mixed, and the mixture was tableted to obtain tablets.
[0047]
Formulation Example 2 (granule)
Cyclosporin A 75 g and dimethyl-β-cyclodextrin 1500 g were mixed, and 350 ml of purified water and 30 g of methylcellulose were added and kneaded. This was granulated with an extrusion granulator, dried and then sized. Further, sieving was performed to obtain granules.
[0048]
Formulation Example 3 (Liquid)
10 g of cyclosporin A and 300 g of dimethyl-β-cyclodextrin were dissolved in 1 l of purified water, and 2 g of methyl paraoxybenzoate and 0.2 g of propyl paraoxybenzoate were further added to obtain a solution.
[0049]
Reference example 3
The hemolytic properties of various cyclodextrins are shown in FIG.
[0050]
Reference example 4
The hemolytic properties of cyclodextrins under cyclosporine saturation concentration are shown in FIGS.
[0051]
Reference Example 5
Table 2 shows the solubilizing effect of various cyclodextrins such as cyclosporin A.
[0052]
[Table 2]

[0053]
Example 3
Capsules containing cyclosporin A and cyclodextrins were prepared as follows.
[0054]
0.6 g of cyclosporin A and 11.4 g of glucosyl-α-cyclodextrin were mixed for 10 minutes, and 12 ml of water was added and kneaded for 3 hours. The obtained kneaded material was dried at 40 ° C. for 2 hours and further dried under reduced pressure for 24 hours. Thereafter, the mixture was sieved with a 60-mesh sieve and filled into a No. 0 hard gelatin capsule to produce a capsule preparation (agent 4).
[0055]
In this embodiment, cyclosporin A can be replaced with 40-O- (2-hydroxy) ethyl-rapamycin, 33-epi-chloro-33-desoxy-ascomycin, or the like.
[0056]
Comparative Example 2
Agent 5 was produced by repeating the method of Example 3 except that α-cyclodextrin was used instead of glucosyl-α-cyclodextrin.
[0057]
Test 3 (in vivo test)
Agents 4 and 5 were orally administered to male beagle dogs (7 months old) after fasting for 24 hours so that the amount of drug to be administered would be the same, immediately before administration, 0.5, 1, 2, The blood concentration of cyclosporine after 4, 6, 8, and 24 hours was measured by HPLC. The results are shown in FIG.
[0058]
As is clear from FIG. 11, when the capsule containing the composition of the present invention is used, the blood concentration of cyclosporine is higher than when the capsule of Comparative Example 2 using α-cyclodextrin is used.
[0059]
Formulation Example 4 (tablet)
Cyclosporin A 75 g and glucosyl-α-cyclodextrin 1500 g were mixed, and 350 ml of purified water and 30 g of methylcellulose were added and kneaded. This was granulated with an extrusion granulator, dried and then sized. To this, 90 g of corn starch and 70 g of carboxymethylcellulose were added and mixed. This was mixed with 8 g of magnesium stearate, and this mixture was tableted to obtain tablets.
[0060]
Formulation Example 5 (granule)
Cyclosporin A 75 g and glucosyl-α-cyclodextrin 1500 g were mixed, and 350 ml of purified water and 30 g of methylcellulose were added and kneaded. This was granulated with an extrusion granulator, dried and then sized. Further, sieving was performed to obtain granules.
[0061]
Formulation Example 6 (Inhalant)
25 g of cyclosporin A and 75 g of glucosyl-α-cyclodextrin were dissolved in 10 l of a mixed solvent of purified water / isopropyl alcohol = 1/1, and spray-dried with a spray dryer to form fine particles. This was filled into a hard gelatin capsule to obtain a powder inhalant.
[0062]
Formulation Example 7 (eye drops)
Cyclosporine A 24 mg, glucosyl-α-cyclodextrin 10 g, sodium dihydrogen phosphate 0.56 g, sodium monohydrogen phosphate 0.28 g and benzalkonium chloride 10 mg were dissolved in 100 ml of sterile purified water. Sodium chloride was added thereto to make it isotonic to obtain an eye drop.
[0063]
Formulation Example 8 (Nasal solution)
Cyclosporine A 24 mg, glucosyl-α-cyclodextrin 10 g, sodium dihydrogen phosphate 0.56 g, sodium monohydrogen phosphate 0.28 g and benzalkonium chloride 10 mg were dissolved in 100 ml of sterile purified water. Glycerol was added thereto to make it isotonic to obtain a nasal solution.
[Brief description of the drawings]
1 is a graph of the solubilization effect of dimethyl-β-cyclodextrin and α-cyclodextrin on cyclosporin A at 37 ° C. FIG. Cyclodextrin and an excess amount of cyclosporine were added to 10 ml of water and stirred at 37 ° C. for 3 hours. Thereafter, centrifugation was performed, and the supernatant was analyzed by HPLC.
FIG. 2 is a graph of the solubilization effect of dimethyl-β-cyclodextrin on 2- (O-2-hydroxyethyl-D-serine) -Cyclosporin A at 37 ° C. Cyclodextrin and an excess amount of cyclosporine were added to 10 ml of water and stirred at 37 ° C. for 3 hours. Thereafter, centrifugation was performed, and the supernatant was analyzed by HPLC.
FIG. 3 is a graph of the solubilization effect of dimethyl-β-cyclodextrin on (S′-keto-Bmt1)-(Val2) -Cyclosporin at 37 ° C. Cyclodextrin and an excess amount of cyclosporine were added to 10 ml of water and stirred at 37 ° C. for 3 hours. Thereafter, centrifugation was performed, and the supernatant was analyzed by HPLC.
FIG. 4 is a graph of the solubilizing effect of dimethyl-β-cyclodextrin on 33-epi-chloro-33-desoxy-ascomycin at 37 ° C. Cyclodextrin and an excess amount of ascomycin were added to 10 ml of water and stirred at 37 ° C. for 3 hours. Thereafter, centrifugation was performed, and the supernatant was analyzed by HPLC.
FIG. 5 is an in vitro dissolution test graph of capsules containing various compositions.
FIG. 6 is a graph of blood concentration of cyclosporine versus elapsed time after administration of various capsules.
FIG. 7 is a graph showing the hemolytic properties of various cyclodextrins / cyclosporin A aqueous solutions. Cyclodextrin was dissolved in 5 ml of 0.85% saline, 0.05 ml of rabbit blood was added, incubated at 37 ° C. for 30 minutes, centrifuged (5 minutes), and the absorbance of the supernatant was measured at 540 nm. 100% hemolysis was calculated with 0.1% saline.
FIG. 8 is a graph showing hemolytic properties of cyclodextrins under a cyclosporine saturation concentration. Cyclodextrin is dissolved in 5 ml of 0.85% saline, cyclosporine is added to saturation, then 0.05 ml of rabbit blood is added to the test solution, incubated at 37 ° C. for 30 minutes, and centrifuged (5 minutes ) Thereafter, the absorbance of the supernatant at 540 nm was measured. 100% hemolysis was calculated with 0.1% saline.
FIG. 9 is a graph showing the hemolytic properties of cyclodextrins under a saturated concentration of 2- (O-2-hydroxyethyl-D-serine) -Cyclosporin A. Cyclodextrin is dissolved in 5 ml of 0.85% saline, cyclosporine is added to saturation, then 0.05 ml of rabbit blood is added to the test solution, incubated at 37 ° C. for 30 minutes, and centrifuged (5 minutes ) Thereafter, the absorbance of the supernatant at 540 nm was measured. 100% hemolysis was calculated with 0.1% saline.
FIG. 10 is a graph showing the hemolytic properties of cyclodextrins under a saturation concentration of (S′-keto-Bmt1)-(Val2) -Cyclosporin. Cyclodextrin is dissolved in 5 ml of 0.85% saline, cyclosporine is added to saturation, then 0.05 ml of rabbit blood is added to the test solution, incubated at 37 ° C. for 30 minutes, and centrifuged (5 minutes ) Thereafter, the absorbance of the supernatant at 540 nm was measured. 100% hemolysis was calculated with 0.1% saline.
FIG. 11 is a graph showing the blood kinetics of cyclosporine after administration of various capsules.

Claims

Cyclosporine and methyl-β-cyclodextrin, dimethyl-β-cyclodextrin, hydroxypropyl-β-cyclodextrin, glucosyl-β-cyclodextrin, maltosyl-β-cyclodextrin, sulfonated-β-cyclodextrin and sulfonated A composition comprising an alkyl ether and a β-cyclodextrin derivative selected from the group consisting of β-cyclodextrin.

The composition of claim 1, wherein the β-cyclodextrin derivative is methyl-β-cyclodextrin or dimethyl-β-cyclodextrin.

The composition of claim 2, wherein the β-cyclodextrin derivative is dimethyl-β-cyclodextrin.

The composition according to any one of claims 1 to 3, wherein the cyclosporine is cyclosporin A.

The composition according to any one of claims 1 to 4, which is in the form of an inhalant.