JP4071466B2

JP4071466B2 - Novel orcinol derivatives

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Publication number: JP4071466B2
Application number: JP2001267815A
Authority: JP
Inventors: 進北中; 直樹岩田
Original assignee: Nihon University
Current assignee: Nihon University
Priority date: 2000-10-06
Filing date: 2001-09-04
Publication date: 2008-04-02
Anticipated expiration: 2021-09-04
Also published as: JP2002265463A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、エゾムラサキツツジの地上部（枝及び葉）の抽出物である新規なオルシノール誘導体及びこれを有効成分として有する組成物、抗アレルギー剤に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
気管支喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、花粉症などのアレルギー疾患が増え続けている。これらのアレルギー疾患は、主にＩ型アレルギー反応によるものであり、多量に生じた、アレルゲンに対する免疫グロブリンＥ抗体が、肥満細胞の表面でアレルゲンと結合することにより起こる化学伝達物質の遊離によって引き起こされることが知られている。
【０００３】
従来、これらのアレルギー疾患に対する治療剤として、クロモグリク酸ナトリウム、トラニスト、オキサトミド等が開発されているが、これらの薬剤は消化器系や中枢系に対して副作用を伴うことがある。また、近年社会問題になっているアトピー性皮膚炎は、何等かのアレルゲンに対するアレルギー反応の結果起こる疾患で、未だに根本的な治療方法がないことから、上記の抗アレルギー剤を用いるか、炎症を抑えるために、ステロイド剤（副腎皮質ホルモン剤）が外用されている。しかしながら、ステロイド剤は副作用が大きいことが多く、慎重な適用が必要とされている。
【０００４】
一方、エゾムラサキツツジ（学名：ＲｈｏｄｏｄｅｎｄｒｏｎｄａｕｒｉｃｕｍＬ．）は、ツツジ科の植物であり、北海道からアジア東北部に分布する低木で、山地の林床・林縁に生えるものである。このエゾムラサキツツジは、中国において、慢性気管支炎、気管支喘息等のアレルギー疾患に対する薬用植物として用いられており、鎮咳作用、去痰作用等を有することが知られている。
【０００５】
しかしながら、エゾムラサキツツジが有する抗アレルギー性成分に対する解明はされていなかった。
【０００６】
そこで、本発明は、エゾムラサキツツジから抽出された抗アレルギー性に効果がある有効成分を提供することを目的とする。さらに、本発明の他の目的は、そのような有効成分を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明は、下記化学式（１）で示される、テルペノイド側鎖を有する新規なオルシノール誘導体を提供することにより、前記目的を達成したものである。
【０００８】
【化１８】

（１）
【０００９】
また、本発明は、下記化学式（１）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００１０】
【化１９】

（１）
【００１１】
また、本発明は、下記化学式（２）で示される新規なオルシノール誘導体を提供することによっても、前記目的を達成したものである。
【００１２】
【化２０】

（２）
【００１３】
また、本発明は、下記化学式（２）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００１４】
【化２１】

（２）
【００１５】
また、本発明は、下記化学式（３）で示されるオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００１６】
【化２２】

（３）
【００１７】
また、本発明は、下記化学式（４）で示される新規なオルシノール誘導体を提供することによっても、前記目的を達成したものである。
【００１８】
【化２３】

（４）
【００１９】
また、本発明は、下記化学式（４）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００２０】
【化２４】

（４）
【００２１】
また、本発明は、下記化学式（５）で示される新規なオルシノール誘導体を提供することによっても、前記目的を達成したものである。
【００２２】
【化２５】

（５）
【００２３】
また、本発明は、下記化学式（５）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００２４】
【化２６】

（５）
【００２５】
また、本発明は、下記化学式（６）で示される新規なオルシノール誘導体を提供することによっても、前記目的を達成したものである。
【００２６】
【化２７】

（６）
【００２７】
また、本発明は、下記化学式（６）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００２８】
【化２８】

（６）
【００２９】
また、本発明は、下記化学式（７）で示される新規なオルシノール誘導体を提供することによっても、前記目的を達成したものである。。
【００３０】
【化２９】

（７）
【００３１】
また、本発明は、下記化学式（７）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００３２】
【化３０】

（７）
【００３３】
また、本発明は、下記化学式（８）で示される新規なオルシノール誘導体を提供することによっても、前記目的を達成したものである。
【００３４】
【化３１】

（８）
【００３５】
また、本発明は、下記化学式（８）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００３６】
【化３２】

（８）
【００３７】
また、本発明は、下記化学式（９）で示される新規なオルシノール誘導体を提供することによっても、前記目的を達成したものである。
【００３８】
【化３３】

（９）
【００３９】
また、本発明は、下記化学式（９）で示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤を提供するものである。
【００４０】
【化３４】

（９）
【００４１】
【発明の実施の形態】
以下、本発明の新規なオルシノール誘導体について詳細に説明する。
【００４２】
本発明のオルシノール誘導体は、前記化学式（１）、（２）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）及び（９）それぞれで示される構造の新規物質である。
【００４３】
本発明のオルシノール誘導体は、エゾムラサキツツジの地上部（例えば、枝、葉等）を乾燥又は未乾燥の状態で粗切し、水及び／又は有機溶媒を加えた後濃縮した抽出エキスの状態又はこれをクロマトグラフィや再結晶等により精製した結晶若しくは油状物質の状態で得られる。
【００４４】
エゾムラサキツツジの抽出エキスは、上記の乾燥粉末を溶媒によって抽出し、抽出液から溶媒を減圧濃縮などにより除去して得ることが出来る。この溶媒としては、水、メタノール、エタノールなどのアルコール、アセトン、および、これらの混合物が使用できる。好ましくは、アルコールまたはアセトンが使用される。
【００４５】
抽出溶媒の使用量は、エゾムラサキツツジ１重量部に対して、抽出溶媒として水及び／又は有機溶媒を５〜２０重量部とすることが好適である。
【００４６】
抽出エキスは、必要により、さらに、カラムクロマトグラフィなどの常用の手段を用いて精製してもよい。
【００４７】
また、地上部、例えば、枝又は葉を乾燥した後、粉砕して、乾燥粉末とすることもできる。この際、乾燥及び粉砕は常法によって行えばよい。乾燥は、熱を加えない自然乾燥が好ましい。粉砕の程度は、剤形に合わせて適宜選択される。
【００４８】
次に、本発明の、前記化学式（１）、（２）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）及び（９）それぞれで示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物について詳細に説明する。
【００４９】
本発明の組成物は、前記化学式（１）、（２）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）及び（９）それぞれで示される新規なオルシノール誘導体を有効成分として有するものである。本発明の組成物としては、特に抗アレルギー剤として用いることが好適である。以下、本発明の組成物が抗アレルギー剤である場合について説明する。
【００５０】
前記オルシノール誘導体を含む本発明の抗アレルギー剤は、通常、従来の方法にしたがって製剤化される。製剤化の際には、医薬用に使用されている種々の補助剤、すなわち、蒸留水、白色ワセリンなどの担体やその他の助剤、例えば、安定剤、防腐剤、乳化剤などを必要に応じて使用する。剤形の例としては、錠剤、散剤、顆粒剤、液剤、ローション、懸濁剤、クリーム、軟膏、噴霧液、入浴剤などがあり、これらの剤形は投与方法に合わせ適宜選択される。例えば、外用剤の場合、液剤、ローション、懸濁剤、クリーム、軟膏、噴霧液、入浴剤などの剤形が選択される。
【００５１】
本発明の抗アレルギー剤（製剤）への前記オルシノール誘導体の配合量は、該誘導体を抽出エキスの状態で配合する場合、通常、１〜３０重量％、好ましくは２〜１５重量％であり、該誘導体を精製した物質として粉末状で配合する場合、通常、１〜２０重量％、好ましくは２〜１０重量％である。
【００５２】
本発明の抗アレルギー剤は、通常、経口、外用（局所）、吸入ないし通気、および、これらの組み合わせにより投与され、好ましくは、外用により投与される。投与量は、投与方法によって異なるが、例えば、局所投与の場合、乾燥粉末を５〜１５重量％含有する製剤を１日１回ないし数回塗布する。また、経口投与の場合、通常、成人で、乾燥粉末では０．３〜０．５ｇを１日１回ないし数回投与する。
【００５３】
なお、上記の用量および用法は、患者の年齢、性別、症状および重傷度ならびに、他の薬剤の使用などの条件により変化するものであり、上記の範囲にとらわれることなく変更することが可能である。
【００５４】
本発明の抗アレルギー剤では、特に、慢性気管支炎、気管支喘息に対する治療効果が著しい。その効果は、肥満細胞を用いたヒスタミン遊離抑制試験によってヒスタミン遊離抑制活性が確認されている。したがって、慢性気管支炎、気管支喘息に限らず、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、花粉症等の何れのアレルギー疾患にも適用できると期待される。
【００５５】
なお、エゾムラサキツツジの地上部（特に枝及び葉）の煎じ液は、古くから飲用されており、その安全性は確認されている。
【００５６】
前述の新規なオルシノール誘導体を有する本発明の組成物は、抗アレルギー剤として特に好適であるが、その他の医薬品、医薬部外品、化粧品、食品等として用いることができる。
【００５７】
次に、本発明の、前記化学式（３）で示されるオルシノール誘導体を有する組成物について説明する。本発明の組成物は、前記化学式（３）で示されるオルシノール誘導体を有効成分とする以外は、前記化学式（１）、（２）、（４）〜（９）それぞれで示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物と同様のものである。従って、本発明の項において、特に詳述しない点については、前述の組成物における記載が適宜適用される。例えば、本発明の組成物も、特に抗アレルギー剤として用いることが好適である。
【００５８】
本発明の組成物は、前記化学式（３）で示されるオルシノール誘導体を、前述したオルシノール誘導体と同様にしてエゾムラサキツツジの地上部から単離し、これに必要に応じて他の成分を添加して製剤することにより得ることができる。尚、この化学式（３）で示されるオルシノール誘導体は、グリフォリン（Grifolin）という化合物である（Journal of Natural Products Vol.58(2),324-328(1995) V. Malhiou et al.等参照）。
【００５９】
本発明の組成物（好ましくは抗アレルギー剤）への前記化学式（３）で示される化合物の配合量、及び本発明の組成物（好ましくは抗アレルギー剤）の投与量については、前述した前記化学式（１）、（２）、（４）〜（９）それぞれで示される新規なオルシノール誘導体を有する組成物の場合と同様である。
【００６０】
【実施例】
以下、実施例を挙げて、本発明を更に詳細に説明する。しかしながら、本発明はこれらの実施例に何等限定されるものではない。
【００６１】
（実施例１）
中国遼寧省産のエゾムラサキツツジ（学名：ＲｈｏｄｏｄｅｎｄｒｏｎｄａｕｒｉｃｕｍＬ．）の地上部（枝及び葉）を６０％エタノールにより１５Ｌの溶液とし、これを２回温浸した後、減圧下で濃縮して４１５．８２２ｇのエキスを得た。これを水２Lに溶解し、ｎ−ヘキサン、酢酸エチル、及びブタノールの各２Ｌで、順次それぞれ３回ずつ抽出した。これらを減圧濃縮し、ｎ−へキサン画分からは１８．８３３ｇ、酢酸エチル画分からは６５．４６０ｇ、ブタノール画分からは１４８．４６ｇを得た。
【００６２】
上記各画分のうち、ｎ−へキサン画分の濃縮エキス１８．３５８ｇをシリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−２００、和光純薬社製、６．５×１５ｃｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１の展開溶媒２０Ｌで１Ｌずつ溶出して、１〜２０Ｌの各画分からなる溶出液（Ａ）を得た。これらのうち、８〜１０の各画分について、その減圧濃縮物をＨＰＬＣにより分離した。カラムは、Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×１５０ｍｍ）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝２０：１を用い、流速８ｍＬ／ｍｉｎ（室温）で溶出させ、保持時間１１分２４秒に溶出するピークをＲＩ（示差屈折計）を用いて分取した。この画分を減圧濃縮し、ｎ−へキサンから再結晶を行い、化合物１（保持時間１１分２４秒、９．３ｍｇ）の白色粉末を得た。
【００６３】
（実施例２）
実施例１で得た溶出液（Ａ）のうち、１２〜１４Ｌの画分について、シリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−３００、和光純薬社製、３．０×２０ｃｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５、９３：７、９０：１０、８０：２０、７０：３０、６０：４０、５０：５０、０：１００でそれぞれ１Ｌずつ溶出し、それらのうち、ヘキサン：酢酸エチル＝９３：７、９０：１０の溶出画分を集め（１．２５０８ｇ）、その減圧濃縮物をＨＰＬＣにより分離した。カラムはＣＳ−３１０、移動相は９０％アセトニトリル（アセトニトリル：水＝９０：１０）を用い、流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ（室温）で溶出させ、保持時間１５分９秒に溶出するピークをＲＩ（示差屈折計）を用いて分取した。この画分（３３０ｍｇ）を再びＨＰＬＣにより、カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×５０ｍｍ）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝９０：１０を用い、流速３．０ｍＬ／ｍｉｎ（室温）で溶出させ、保持時間９分２８秒に溶出するピークをＵＶ（２１０ｎｍ）を用いて分取した。この画分を減圧濃縮し、化合物２（保持時間９分２８秒、１４２．０ｍｇ）の黄色油状物質を得た。
【００６４】
（実施例３）
実施例１で得た溶出液（Ａ）のうち、１６〜１８Ｌの画分について、シリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−３００、和光純薬社製、３.０×２０ｃｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５、９３：７、９０：１０、８０：２０、７０：３０、６０：４０、５０：５０、０：１００でそれぞれ１Ｌずつ溶出し、そのうちヘキサン：酢酸エチル＝９５：５の溶出画分を集め（１.０８７０ｇ）、その減圧濃縮物をＨＰＬＣにより分離した。カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×１５０ｍｍ）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝２０：１を用い、流速６ｍＬ／ｍｉｎ（室温）で溶出させ、保持時間１５分１３秒に溶出するピークをＲＩ（示差屈折計）を用いて分取した。この画分（４１８ｍｇ）を再びＨＰＬＣにより、カラムはＣＳ−３１０、移動相は９０％メタノール（メタノール：水＝９０：１０）を用い、流速１.０ｍＬ／ｍｉｎ（室温）で溶出させ、保持時間２７分４４秒に溶出するピークをＲＩ（示差屈折計）を用いて分取した。
【００６５】
この画分を減圧濃縮し、化合物３（保持時間２７分４４秒、４６.３ｍｇ）の茶色油状物質を得た。
【００６６】
（実施例４）
実施例１で得た溶出液（Ａ）のうち、４〜６Ｌの画分について、シリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−３００、和光純薬社製、２.２×２２ｃｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１〜０：１００でそれぞれ１Lずつ溶出し、そのうち、ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１の溶出画分（１５０．０ｍｇ）を減圧濃縮し、ＨＰＬＣにより分離した。カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×５０ｍｍ２本）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝３０：１を用い、流速６．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出させ、保持時間８分１７秒に溶出するピークをＲＩを用いて分取した。この画分（５２．１mg）を再びＨＰＬＣにより、カラムは逆相（ＦｌｕｏｆｉｘＩＮＷ１２５１０×２００ｍｍ）、移動相は８０％メタノール（メタノール：水＝８０：２０）で、流速３．０ｍＬ／ｍｉｎとして溶出させ、保持時間９分４８秒に溶出するピークをＵＶを用いて分取した。
【００６７】
この画分を減圧濃縮し、化合物４（１７．５ｍｇ）の淡黄色油状物質を得た。
【００６８】
（実施例５及び６）
実施例１で得た溶出液（Ａ）のうち、１９〜２０Ｌの画分について、シリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−３００、和光純薬社製、３.０×２０ｃｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝９：１〜０：１でそれぞれ１Lずつ溶出した。そのうち、ヘキサン：酢酸エチル＝９：１溶出画分（２５３．２mg）を減圧濃縮し、沈殿物を濾過し、そのろ液（１０５．７ｍｇ）についてＨＰＬＣにより分離した。カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×５０ｍｍ２本）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝５：１を用い、流速６．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出させ、保持時間６分２３秒と６分５３秒に溶出するピークをＵＶを用いて分取した。
【００６９】
前者の画分（２３．０mg）を再びＨＰＬＣにより、カラムは逆相（ＦｌｕｏｆｉｘＩＮＷ１２５１０×２００ｍｍ）、移動相は７０％メタノール（メタノール：水＝７０：３０）で、流速３．０ｍＬ／ｍｉｎとして溶出させ、保持時間９分２４秒に溶出するピークをＵＶを用いて分取した。この画分を減圧濃縮し、化合物５（１２．６ｍｇ）の淡黄色油状物質を得た。
【００７０】
また、後者の画分（２０．８mg）を再びＨＰＬＣにより、カラムは逆相（ＦｌｕｏｆｉｘＩＮＷ１２５１０×２００ｍｍ）、移動相は７０％メタノール（メタノール：水＝７０：３０）で、流速３．０ｍＬ／ｍｉｎとして溶出させ、保持時間９分２４秒に溶出するピークをＵＶを用いて分取した。この画分を減圧濃縮し、化合物６（１４．７ｍｇ）の淡黄色油状物質を得た。
【００７１】
（実施例７及び８）
実施例１で得た溶出液（Ａ）のうち、１９〜２０Ｌの画分について、シリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−３００、和光純薬社製、３.０×２０ｃｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝９：１〜０：１でそれぞれ１Lずつ溶出した。そのうち、ヘキサン：酢酸エチル＝８：１、７：１、６：１溶出画分（４８３．１mg）を減圧濃縮し、逆相カラム（Ｃｏｓｍｏｓｉｌ、３．０×１５ｃｍ）に付し、８０％メタノール（メタノール：水＝８０：２０）でそれぞれ１Ｌずつ溶出し、５〜６Ｌ（１２６．４ｍｇ）の画分についてＨＰＬＣにより分離した。カラムは逆相（ＦｌｕｏｆｉｘＩＮＷ１２５１０×２００ｍｍ）、移動相は７０％メタノール（メタノール：水＝７０：３０）で、流速３．０ｍＬ／ｍｉｎとして溶出させ、保持時間１７分２３秒に溶出するピークをＵＶを用いて分取した。この画分（４６．０ｍｇ）を更にＨＰＬＣにより分離した。カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×５０ｍｍ２本）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝３：１を用い、流速６．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出させ、保持時間２７分３４秒、３９分５０秒にそれぞれ溶出するピークをＵＶを用いて分取した。それぞれの画分を減圧濃縮し、化合物７（６．０ｍｇ）の淡黄色油状物質、及び化合物８（６．０ｍｇ）の淡黄色油状物質を得た。
【００７２】
（実施例９、１０及び１１）
実施例１で得たｎ−ヘキサン画分の濃縮エキス５．３５２９ｇをシリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−３００、和光純薬社製、３０×２００ｍｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝９：１の展開溶媒で２Lずつ流し、フラクション１〜３の３つの画分を得、このうちフラクション１について、その減圧濃縮物（６７２．６ｍｇ）を再びシリカゲルカラム（ＷａｋｏｇｅｌＣ−３００、和光純薬社製、３０×１５０ｍｍ）に付し、ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１の展開溶媒で１Lずつ流し、フラクション１−１〜１−４の４つの画分を得た。
【００７３】
フラクション１−１の減圧濃縮物（２３６．９ｍｇ）をＨＰＬＣにより分離した。カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×１５０ｍｍ）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝５０：１を用い、流速６．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出させ、ＵＶ検出器を用いて、保持時間１５分２４秒に溶出するピークを分取した。この画分を減圧濃縮し、化合物９（１３．４ｍｇ）の淡黄色油状物質を得た。
【００７４】
また、フラクション１−２の減圧濃縮物（７０．６ｍｇ）をＨＰＬＣにより分離した。カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×１５０ｍｍ）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝３０：１を用い、流速６．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出させ、ＵＶ検出器を用いて、保持時間１８分２２秒に溶出するピークを分取した。この画分を減圧濃縮し、化合物１０（３１．２ｍｇ）の淡黄色油状物質を得た。
【００７５】
また、フラクション１−３の減圧濃縮物（１３０．２ｍｇ）をＨＰＬＣにより分離した。カラムはＳｉｌｉｃａｇｅｌ（ＹＭＣ−ＰａｃｋＳＩＬ−０６、ＹＭＣ社製、２０×１５０ｍｍ）、移動相はヘキサン：酢酸エチル＝３０：１を用い、流速６．０ｍＬ／ｍｉｎで溶出させ、ＵＶ検出器を用いて、保持時間２５分００秒に溶出するピークを分取した。この画分を減圧濃縮し、化合物１１（２５．３ｍｇ）の白色粉末を得た。
【００７６】
（化合物１〜１１の同定）
実施例１、２及び４〜１１で得られた化合物１、２及び４〜１１それぞれの性状その他の物性等のデータを表１〜３に示す。
【００７７】
【表１】

【００７８】
【表２】

【００７９】
【表３】

【００８０】
また、実施例１〜１１で得られた化合物１〜１１それぞれの核磁気共鳴スペクトル（^１３Ｃ−ＮＭＲ及び^１Ｈ−ＮＭＲ）のデータを表４〜７に示す。
【００８１】
【表４】

【００８２】
【表５】

【００８３】
【表６】

【００８４】
【表７】

【００８５】
表１〜７の結果、並びに化合物３にあっては更に質量分析装置（ＭＳ）による分析結果から、化合物１〜１１は、それぞれ下記〔化３５〕に示す構造式の化合物であることが明らかとなった。尚、各構造式中の番号は、表４〜７のＮＭＲにおけるケミカルシフトが現れる炭素原子又は水素原子（プロトン）が結合する炭素原子の位置（Ｐｏｓｉｔｉｏｎ）に相当する。
【００８６】
【化３５】

【００８７】
従って、化合物１、２及び４〜８は、それぞれ前記化学式（１）、（２）及び（４）〜（８）で示される新規なオルシノール誘導体であることが確認された。また、化合物９は、前記化学式（１）で示される新規なオルシノール誘導体（化合物１の立体異性体）であり、化合物１０は、前記化学式（４）で示される新規なオルシノール誘導体（化合物４の立体異性体）であることが確認された。また、化合物１１は、前記化学式（９）で示される新規なオルシノール誘導体であることが確認された。また、化合物３は、前記化学式（３）で示されるオルシノール誘導体であることが確認された。
【００８８】
（実施例１２）
Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０刺激によるマスト細胞からヒスタミン遊離における、実施例１〜１１で得られた化合物１〜１１（エゾムラサキツツジから単離したオルシノール誘導体）それぞれのヒスタミン遊離抑制効果としての阻害率を下記試験法に従って求めた。そして、この阻害率から、ＩＣ_５０（ヒスタミンを５０％抑制するときの濃度）（μｇ／ｍＬ）及びそれに対応するモル濃度（μＭ）を求めることにより、ヒスタミン遊離抑制効果を評価した。ＩＣ_５０及びモル濃度の結果を表８に示す。尚、化合物１、４、９及び１０については、その濃度の測定の代りに、１００μｇ／ｍＬで測定した結果を示す。
【００８９】
〔ヒスタミン遊離抑制効果試験法（阻害率測定法）〕
７〜８週齢のＷｉｓｔｅｒ系ラットを断頭後放血させ、腹腔内に冷タイロード液を注入し、公知の方法により肥満細胞を単離し、１〜２×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように０．１％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むタイロード液に懸濁し、細胞浮遊液を調製した。各化合物の終濃度が０．３〜１００μｇ／ｍｌになるように試料溶液を調整し、上記細胞浮遊液を加えて３７℃、５分間インキュベートを行い、脱顆粒誘発剤としてＣｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０を加え、３７℃、１０分間インキュベートを行う。これらの反応液は氷冷して反応停止、遠心分離した上澄に０．１Ｎ塩酸を加えた後、ヒスタミン量をＯｎｄａら（J. Med. Sci, 27, 93 (1978)）の方法に準じて高速液体クロマトグラフィにより測定した。
【００９０】
この結果から、阻害率を次式により算出した。
阻害率（％）＝｛１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｂ）｝× １００
Ａ：単離化合物の存在下でcompound 48/80により遊離されるヒスタミン量
Ｂ：自発的に遊離されるヒスタミン量
Ｃ：compound 48/80により遊離されるヒスタミン量
【００９１】
【表８】

【００９２】
表８に示す結果より、本発明に係る化合物１〜１１を用いた場合には、全てヒスタミン遊離抑制効果を示すことが判る。これにより、化合物１〜１１は、抗アレルギー剤として有用であることが明らである。
【００９３】
【発明の効果】
本発明によれば、副作用の少ない、抗アレルギー物質としての新規なオルシノール誘導体が提供される。さらに、本発明によれば、そのような新規なオルシノール誘導体又は特定のオルシノール誘導体を有する組成物、特に抗アレルギー剤が提供される。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a novel orcinol derivative that is an extract of the above-ground part (branches and leaves) of Ezomura zalea, a composition having this as an active ingredient, and an antiallergic agent.
[0002]
[Prior art and problems to be solved by the invention]
Allergic diseases such as bronchial asthma, atopic dermatitis, allergic rhinitis and hay fever continue to increase. These allergic diseases are mainly due to type I allergic reactions, and are caused by the release of chemical messengers caused by the binding of allergens to immunoglobulin E antibodies against allergens that occur in large quantities on the surface of mast cells. It is known.
[0003]
Conventionally, cromoglycate sodium, tranist, oxatomide, and the like have been developed as therapeutic agents for these allergic diseases, but these drugs may have side effects on the digestive system and central system. In addition, atopic dermatitis, which has become a social problem in recent years, is a disease that occurs as a result of an allergic reaction to any allergen, and since there is still no fundamental treatment method, the above-mentioned antiallergic agents are used or inflammation is caused. In order to suppress this, steroids (corticosteroids) are used externally. However, steroids often have significant side effects and require careful application.
[0004]
On the other hand, Ezomura Azalea (scientific name: Rhodoendron dauricum L.) is a plant belonging to the family Azalea, and is a shrub distributed from Hokkaido to the northeastern part of Asia, and grows on the forest floor and forest edge of mountainous areas. This Ezomura Azalea is used as a medicinal plant for allergic diseases such as chronic bronchitis and bronchial asthma in China, and is known to have antitussive action, expectorant action and the like.
[0005]
However, no elucidation has been made on the anti-allergic components possessed by Ezomura Sekizae.
[0006]
Then, an object of this invention is to provide the active ingredient effective in the antiallergic property extracted from the Ezomura sakura azalea. Furthermore, another object of the present invention is to provide a composition having such an active ingredient, particularly an antiallergic agent.
[0007]
[Means for Solving the Problems]
The present invention achieves the object by providing a novel orcinol derivative having a terpenoid side chain represented by the following chemical formula (1).
[0008]
Embedded image

(1)
[0009]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (1), particularly an antiallergic agent.
[0010]
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(1)
[0011]
Moreover, this invention achieves the said objective also by providing the novel orcinol derivative shown by following Chemical formula (2).
[0012]
Embedded image

(2)
[0013]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (2), particularly an antiallergic agent.
[0014]
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(2)
[0015]
Moreover, this invention provides the composition which has an orcinol derivative shown by following Chemical formula (3), especially an antiallergic agent.
[0016]
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(3)
[0017]
Moreover, this invention achieves the said objective also by providing the novel orcinol derivative shown by following Chemical formula (4).
[0018]
Embedded image

(4)
[0019]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (4), particularly an antiallergic agent.
[0020]
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(4)
[0021]
Moreover, this invention achieves the said objective also by providing the novel orcinol derivative shown by following Chemical formula (5).
[0022]
Embedded image

(5)
[0023]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (5), particularly an antiallergic agent.
[0024]
Embedded image

(5)
[0025]
Moreover, this invention achieves the said objective also by providing the novel orcinol derivative shown by following Chemical formula (6).
[0026]
Embedded image

(6)
[0027]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (6), particularly an antiallergic agent.
[0028]
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(6)
[0029]
Moreover, this invention achieves the said objective also by providing the novel orcinol derivative shown by following Chemical formula (7). .
[0030]
Embedded image

(7)
[0031]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (7), particularly an antiallergic agent.
[0032]
Embedded image

(7)
[0033]
Moreover, this invention achieves the said objective also by providing the novel orcinol derivative shown by following Chemical formula (8).
[0034]
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(8)
[0035]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (8), particularly an antiallergic agent.
[0036]
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(8)
[0037]
Moreover, this invention achieves the said objective also by providing the novel orcinol derivative shown by following Chemical formula (9).
[0038]
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(9)
[0039]
The present invention also provides a composition having a novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (9), particularly an antiallergic agent.
[0040]
Embedded image

(9)
[0041]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Hereinafter, the novel orcinol derivative of the present invention will be described in detail.
[0042]
The orcinol derivative of the present invention is a novel substance having a structure represented by each of the chemical formulas (1), (2), (4), (5), (6), (7), (8) and (9). .
[0043]
The orcinol derivative of the present invention can be obtained by subjecting the above-ground parts (eg, branches, leaves, etc.) of Ezomura azalea to a dried or undried state, adding water and / or an organic solvent, and then concentrating the extract. Can be obtained in the form of crystals or oily substance purified by chromatography, recrystallization or the like.
[0044]
An extract of Ezomura azalea can be obtained by extracting the above dry powder with a solvent and removing the solvent from the extract by vacuum concentration or the like. As this solvent, water, alcohols such as methanol and ethanol, acetone, and mixtures thereof can be used. Preferably alcohol or acetone is used.
[0045]
The use amount of the extraction solvent is preferably 5 to 20 parts by weight of water and / or organic solvent as the extraction solvent with respect to 1 part by weight of Ezomura Sekiza Azalea.
[0046]
If necessary, the extract may be further purified using a conventional means such as column chromatography.
[0047]
Moreover, after drying an above-ground part, for example, a branch or a leaf, it can also grind | pulverize and can also be set as dry powder. At this time, drying and pulverization may be performed by conventional methods. The drying is preferably natural drying without applying heat. The degree of pulverization is appropriately selected according to the dosage form.
[0048]
Next, the present invention has a novel orcinol derivative represented by each of the chemical formulas (1), (2), (4), (5), (6), (7), (8) and (9). The composition will be described in detail.
[0049]
The composition of the present invention effectively utilizes the novel orcinol derivatives represented by the chemical formulas (1), (2), (4), (5), (6), (7), (8) and (9), respectively. It has as a component. The composition of the present invention is particularly preferably used as an antiallergic agent. Hereinafter, the case where the composition of the present invention is an antiallergic agent will be described.
[0050]
The antiallergic agent of the present invention containing the orcinol derivative is usually formulated according to a conventional method. When formulating, various adjuvants used for pharmaceuticals, that is, carriers such as distilled water and white petrolatum and other auxiliary agents such as stabilizers, preservatives, emulsifiers, etc., as necessary. use. Examples of dosage forms include tablets, powders, granules, solutions, lotions, suspensions, creams, ointments, sprays, bathing agents, and the like, and these dosage forms are appropriately selected according to the administration method. For example, in the case of an external preparation, a dosage form such as a liquid, lotion, suspension, cream, ointment, spray, bathing agent and the like is selected.
[0051]
The compounding amount of the orcinol derivative in the antiallergic agent (formulation) of the present invention is usually 1 to 30% by weight, preferably 2 to 15% by weight, when the derivative is blended in the form of an extract. When the derivative is blended in the form of powder as a purified substance, it is usually 1 to 20% by weight, preferably 2 to 10% by weight.
[0052]
The antiallergic agent of the present invention is usually administered orally, externally (topical), inhalation or aeration, and a combination thereof, and preferably externally. The dosage varies depending on the administration method. For example, in the case of topical administration, a preparation containing 5 to 15% by weight of a dry powder is applied once to several times a day. In the case of oral administration, it is usually an adult, and 0.3 to 0.5 g of a dry powder is administered once to several times a day.
[0053]
In addition, the above dose and usage vary depending on the patient's age, sex, symptom, severity of serious injury and use of other drugs, and can be changed without being restricted by the above range. .
[0054]
The antiallergic agent of the present invention is particularly effective for treating chronic bronchitis and bronchial asthma. As for the effect, histamine release inhibitory activity has been confirmed by a histamine release inhibition test using mast cells. Therefore, it is expected to be applicable not only to chronic bronchitis and bronchial asthma but also to allergic diseases such as atopic dermatitis, allergic rhinitis, and hay fever.
[0055]
In addition, the decoction of the above-ground part (especially branch and leaf) of the Ezomura Azalea has been drunk for a long time, and its safety has been confirmed.
[0056]
The composition of the present invention having the aforementioned novel orcinol derivative is particularly suitable as an antiallergic agent, but can be used as other pharmaceuticals, quasi drugs, cosmetics, foods and the like.
[0057]
Next, the composition having an orcinol derivative represented by the chemical formula (3) according to the present invention will be described. The composition of the present invention is a novel orcinol derivative represented by each of the chemical formulas (1), (2), (4) to (9) except that the orcinol derivative represented by the chemical formula (3) is an active ingredient. It is the same as the composition having Therefore, in the section of the present invention, the description in the above-described composition is appropriately applied to points not specifically described in detail. For example, the composition of the present invention is also particularly suitable for use as an antiallergic agent.
[0058]
The composition of the present invention is prepared by isolating the orcinol derivative represented by the chemical formula (3) from the above-ground part of Ezomura azalea in the same manner as the above-described orcinol derivative, and adding other components to this as necessary. Can be obtained. The orcinol derivative represented by this chemical formula (3) is a compound called Grifolin (see Journal of Natural Products Vol. 58 (2), 324-328 (1995) V. Malhiou et al., Etc.).
[0059]
About the compounding quantity of the compound shown by said Chemical formula (3) to the composition (preferably antiallergic agent) of this invention, and the dosage of the composition (preferably antiallergic agent) of this invention, it is said chemical formula mentioned above. This is the same as the case of the composition having the novel orcinol derivative represented by each of (1), (2) and (4) to (9).
[0060]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. However, the present invention is not limited to these examples.
[0061]
Example 1
The above-ground part (branches and leaves) of Ezomura Sekizatsu (Scientific name: Rhodoendron dauricum L.) produced in Liaoning Province, China was made into a 15 L solution with 60% ethanol, and this was digested twice and concentrated under reduced pressure to obtain 415. 822 g of extract was obtained. This was dissolved in 2 L of water, and extracted 3 times in sequence with 2 L each of n-hexane, ethyl acetate, and butanol. These were concentrated under reduced pressure to obtain 18.833 g from the n-hexane fraction, 65.460 g from the ethyl acetate fraction, and 148.46 g from the butanol fraction.
[0062]
Among the above fractions, 18.358 g of the concentrated extract of the n-hexane fraction was applied to a silica gel column (Wako gel C-200, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, 6.5 × 15 cm), and hexane: ethyl acetate = 1 L was eluted with 20 L of 20: 1 developing solvent to obtain an eluate (A) consisting of 1 to 20 L of each fraction. Among these, about 8-10 each fraction, the vacuum concentrate was isolate | separated by HPLC. The column is silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 150 mm), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 20: 1, and the elution is performed at a flow rate of 8 mL / min (room temperature). The peak eluting at 24 minutes was fractionated using RI (differential refractometer). This fraction was concentrated under reduced pressure and recrystallized from n-hexane to obtain a white powder of Compound 1 (retention time 11 minutes 24 seconds, 9.3 mg).
[0063]
(Example 2)
Among the eluate (A) obtained in Example 1, the 12-14 L fraction was subjected to a silica gel column (Wako gel C-300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, 3.0 × 20 cm), and hexane: acetic acid. 1 L each was eluted with ethyl = 95: 5, 93: 7, 90:10, 80:20, 70:30, 60:40, 50:50, 0: 100, of which hexane: ethyl acetate = 93 : 7, 90:10 elution fractions were collected (1.2508 g) and the vacuum concentrate was separated by HPLC. The column was CS-310, the mobile phase was 90% acetonitrile (acetonitrile: water = 90: 10), eluted at a flow rate of 1.0 mL / min (room temperature), and the peak eluting at a retention time of 15 minutes 9 seconds was detected by RI ( The sample was collected using a differential refractometer. This fraction (330 mg) was again subjected to HPLC, the column was Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 50 mm), the mobile phase was hexane: ethyl acetate = 90: 10, and the flow rate was 3.0 mL. Was eluted at / min (room temperature), and a peak eluting at a retention time of 9 minutes and 28 seconds was fractionated using UV (210 nm). This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a yellow oily substance of Compound 2 (retention time 9 minutes 28 seconds, 142.0 mg).
[0064]
(Example 3)
Of the eluate (A) obtained in Example 1, a fraction of 16 to 18 L was applied to a silica gel column (Wakogel C-300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, 3.0 × 20 cm), and hexane: ethyl acetate. = 95: 5, 93: 7, 90:10, 80:20, 70:30, 60:40, 50:50, 0: 100, 1 L each, of which hexane: ethyl acetate = 95: 5 Fractions were collected (1.0870 g) and the vacuum concentrate was separated by HPLC. The column is Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 150 mm), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 20: 1, and the flow rate is 6 mL / min (room temperature), and the retention time is 15 minutes. The peak eluting at 13 seconds was fractionated using RI (differential refractometer). This fraction (418 mg) was eluted again by HPLC, the column was CS-310, the mobile phase was 90% methanol (methanol: water = 90: 10), and the flow rate was 1.0 mL / min (room temperature). The peak eluting at 27 minutes and 44 seconds was fractionated using RI (differential refractometer).
[0065]
This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a brown oily substance of Compound 3 (retention time 27 minutes 44 seconds, 46.3 mg).
[0066]
Example 4
Of the eluate (A) obtained in Example 1, the 4 to 6 L fraction was subjected to a silica gel column (Wako gel C-300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 2.2 × 22 cm), and hexane: acetic acid. 1 L each was eluted with ethyl = 10: 1 to 0: 100. Among them, an elution fraction (150.0 mg) of hexane: ethyl acetate = 10: 1 was concentrated under reduced pressure and separated by HPLC. The column is Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 50 mm x 2), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 30: 1, eluted at a flow rate of 6.0 mL / min, and the retention time is 8 minutes. The peak eluting at 17 seconds was fractionated using RI. This fraction (52.1 mg) was again eluted with HPLC, the column was in reverse phase (Fluofix INW125 10 × 200 mm), the mobile phase was 80% methanol (methanol: water = 80: 20), and the flow rate was 3.0 mL / min. The peak eluting at a retention time of 9 minutes 48 seconds was fractionated using UV.
[0067]
This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a pale yellow oily substance of Compound 4 (17.5 mg).
[0068]
(Examples 5 and 6)
Of the eluate (A) obtained in Example 1, the 19-20 L fraction was applied to a silica gel column (Wako gel C-300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 3.0 × 20 cm), and hexane: acetic acid. 1 L each was eluted with ethyl = 9: 1 to 0: 1. Among them, the fraction eluted with hexane: ethyl acetate = 9: 1 (253.2 mg) was concentrated under reduced pressure, the precipitate was filtered, and the filtrate (105.7 mg) was separated by HPLC. The column is Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 50 mm x 2), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 5: 1, and the elution is performed at a flow rate of 6.0 mL / min, the retention time is 6 minutes. Peaks eluting at 23 seconds and 6 minutes 53 seconds were collected using UV.
[0069]
The former fraction (23.0 mg) was again subjected to HPLC, the column was in reverse phase (Fluofix INW125 10 × 200 mm), the mobile phase was 70% methanol (methanol: water = 70: 30), and the flow rate was 3.0 mL / min. The peak eluted at a retention time of 9 minutes 24 seconds was fractionated using UV. This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a pale yellow oily substance of Compound 5 (12.6 mg).
[0070]
The latter fraction (20.8 mg) was again subjected to HPLC, the column was in reverse phase (Fluofix INW125 10 × 200 mm), the mobile phase was 70% methanol (methanol: water = 70: 30), and the flow rate was 3.0 mL / Elution was performed as min, and a peak eluting at a retention time of 9 minutes and 24 seconds was collected using UV. This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a pale yellow oily substance of compound 6 (14.7 mg).
[0071]
(Examples 7 and 8)
Of the eluate (A) obtained in Example 1, the 19-20 L fraction was applied to a silica gel column (Wako gel C-300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 3.0 × 20 cm), and hexane: acetic acid. 1 L each was eluted with ethyl = 9: 1 to 0: 1. Among them, hexane: ethyl acetate = 8: 1, 7: 1, 6: 1 elution fractions (483.1 mg) were concentrated under reduced pressure, applied to a reverse phase column (Cosmosil, 3.0 × 15 cm), and 80% methanol. 1 L each was eluted with (methanol: water = 80: 20), and 5 to 6 L (126.4 mg) fractions were separated by HPLC. The column was eluted in reverse phase (Fluofix INW125 10 × 200 mm), the mobile phase was 70% methanol (methanol: water = 70: 30), and eluted at a flow rate of 3.0 mL / min, with a peak eluting at a retention time of 17 minutes 23 seconds. Sorted using UV. This fraction (46.0 mg) was further separated by HPLC. The column is Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 50 mm x 2), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 3: 1, and the elution is performed at a flow rate of 6.0 mL / min, the retention time is 27 minutes. Peaks eluting at 34 seconds and 39 minutes and 50 seconds were separated using UV. Each fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a pale yellow oily substance of Compound 7 (6.0 mg) and a pale yellow oily substance of Compound 8 (6.0 mg).
[0072]
(Examples 9, 10 and 11)
A concentrated extract of 5.3529 g of the n-hexane fraction obtained in Example 1 was applied to a silica gel column (Wako gel C-300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, 30 × 200 mm), and hexane: ethyl acetate = 9: 1. Flowing 2 L at a time with a developing solvent, three fractions of fractions 1 to 3 were obtained. Among these, for fraction 1, the reduced-pressure concentrate (672.6 mg) was again added to a silica gel column (Wako gel C-300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). , 30 × 150 mm), and 1 L each was poured with a developing solvent of hexane: ethyl acetate = 20: 1 to obtain four fractions 1-1 to 1-4.
[0073]
The vacuum concentrate (236.9 mg) of fraction 1-1 was separated by HPLC. The column is Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 150 mm), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 50: 1, eluted at a flow rate of 6.0 mL / min, and a UV detector is used. Thus, a peak eluting at a retention time of 15 minutes and 24 seconds was collected. This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a pale yellow oily substance of Compound 9 (13.4 mg).
[0074]
Moreover, the vacuum concentrate (70.6 mg) of fraction 1-2 was separated by HPLC. The column is Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 150 mm), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 30: 1, the elution is performed at a flow rate of 6.0 mL / min, and the UV detector is used. The peak eluting at a retention time of 18 minutes and 22 seconds was collected. This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a pale yellow oily substance of compound 10 (31.2 mg).
[0075]
Moreover, the vacuum concentrate (130.2 mg) of fraction 1-3 was separated by HPLC. The column is Silica gel (YMC-Pack SIL-06, YMC, 20 × 150 mm), the mobile phase is hexane: ethyl acetate = 30: 1, the elution is performed at a flow rate of 6.0 mL / min, and the UV detector is used. Thus, a peak eluting at a retention time of 25:00 seconds was collected. This fraction was concentrated under reduced pressure to obtain a white powder of compound 11 (25.3 mg).
[0076]
(Identification of compounds 1-11)
Tables 1 to 3 show data such as properties and other physical properties of the compounds 1, 2 and 4 to 11 obtained in Examples 1, 2 and 4 to 11.
[0077]
[Table 1]

[0078]
[Table 2]

[0079]
[Table 3]

[0080]
Further, the data of the nuclear magnetic resonance spectrum of each compound 1 to 11 obtained in Example 1-11 ⁽¹³ C-NMR and ¹ H-NMR) are shown in Table 4-7.
[0081]
[Table 4]

[0082]
[Table 5]

[0083]
[Table 6]

[0084]
[Table 7]

[0085]
From the results of Tables 1 to 7 and the results of analysis by mass spectrometer (MS) for compound 3, it is clear that compounds 1 to 11 are compounds of the structural formula shown in [Chemical Formula 35] below. became. In addition, the number in each structural formula is equivalent to the position (Position) of the carbon atom which the chemical shift in NMR of Tables 4-7 appears, or the hydrogen atom (proton) couple | bonds.
[0086]
Embedded image

[0087]
Therefore, it was confirmed that the compounds 1, 2 and 4-8 are novel orcinol derivatives represented by the chemical formulas (1), (2) and (4) to (8), respectively. Compound 9 is a novel orcinol derivative (stereoisomer of compound 1) represented by the chemical formula (1), and compound 10 is a novel orcinol derivative (stereoisomer of compound 4) represented by the chemical formula (4). Isomer). Moreover, it was confirmed that the compound 11 is a novel orcinol derivative represented by the chemical formula (9). Moreover, it was confirmed that the compound 3 is an orcinol derivative represented by the chemical formula (3).
[0088]
(Example 12)
According to the following test method, the inhibition rate as a histamine release inhibitory effect of each of compounds 1 to 11 (orcinol derivatives isolated from Ezomura azalea) obtained in Examples 1 to 11 in histamine release from mast cells by Compound 48/80 stimulation Asked. From this inhibition rate, by determining the IC 50 _{(concentration} at which histamine 50% inhibition) (μg / mL) and molar concentration corresponding thereto ([mu] M), were evaluated histamine release inhibiting effect. The results for IC ₅₀ and molarity are shown in Table 8. In addition, about the compound 1, 4, 9, and 10, the result measured at 100 microgram / mL instead of the measurement of the density | concentration is shown.
[0089]
[Histamine release inhibitory effect test method (inhibition rate measurement method)]
A 7-8 week old Wister rat was exsanguinated after decapitation, a cold tyrode solution was injected into the abdominal cavity, and mast cells were isolated by a known method, and 0 to 2 to 10 × 10 ⁶ cells / mL. A cell suspension was prepared by suspending in a Tyrode solution containing 1% bovine serum albumin (BSA). Adjust the sample solution so that the final concentration of each compound is 0.3-100 μg / ml, add the cell suspension above, incubate at 37 ° C. for 5 minutes, add Compound 48/80 as a degranulation inducer, Incubate at 37 ° C. for 10 minutes. These reaction solutions were ice-cooled to stop the reaction, and after adding 0.1N hydrochloric acid to the centrifuged supernatant, the amount of histamine was determined according to the method of Onda et al. (J. Med. Sci, 27, 93 (1978)). And measured by high performance liquid chromatography.
[0090]
From this result, the inhibition rate was calculated by the following equation.
Inhibition rate (%) = {1− (A−B) / (C−B)} × 100
A: Amount of histamine released by compound 48/80 in the presence of isolated compound B: Amount of histamine released spontaneously C: Amount of histamine released by compound 48/80
[Table 8]

[0092]
From the results shown in Table 8, it can be seen that when the compounds 1 to 11 according to the present invention are used, they all show an inhibitory effect on histamine release. Thereby, it is clear that the compounds 1 to 11 are useful as antiallergic agents.
[0093]
【The invention's effect】
According to the present invention, a novel orcinol derivative as an antiallergic substance with few side effects is provided. Furthermore, according to the present invention, a composition having such a novel orcinol derivative or a specific orcinol derivative, particularly an antiallergic agent, is provided.

Claims

A novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (1).

A novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (4).

A novel orcinol derivative represented by the following chemical formula (9).