JP4097469B2

JP4097469B2 - Method for decomposing optical brightener

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Publication number: JP4097469B2
Application number: JP2002185373A
Authority: JP
Inventors: 端人仲谷; 政晴吉田
Original assignee: Daiwa Fine Chemicals Co Ltd
Current assignee: Daiwa Fine Chemicals Co Ltd
Priority date: 2001-06-29
Filing date: 2002-06-25
Publication date: 2008-06-11
Anticipated expiration: 2022-06-25
Also published as: JP2003117569A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は蛍光増白剤を分解する方法およびそのための組成物に関する。より詳細には、レドックスメディエーターを蛍光増白剤に作用させる工程、ラッカーゼ（ポリフェノールオキシダーゼ）を蛍光増白剤に作用させる工程、またはレドックスメディエーターおよびラッカーゼ（ポリフェノールオキシダーゼ）の両方を蛍光増白剤に作用させる工程を包含する方法に関する。さらに、本発明は、蛍光増白剤を分解するための、レドックスメディエーター、ラッカーゼ、またはその両方を含有する組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
パルプおよび繊維業界では製品の白さを強調することで製品自体の価値が高まることから、その白さを強調するため蛍光増白剤による過剰な蛍光染色が行われている。また、洗濯用洗剤にも洗いあがりの白い輝きを出すために蛍光増白剤が配合されているものがある。
【０００３】
しかし、この蛍光増白剤は未だ安全性が証明されておらず、薬事法や食品衛生法で一部の製品への使用が制限されている。また、蛍光増白剤は下水処理では十分に分解除去されないまま放出されているのが現状である。そのため東京湾や琵琶湖の海底や相模湾の深さ１，４００メートル以上の海底からも検出され（高田秀重ら、日本水環境学会年会公演集、ＶＯＬ．３３、２９４（１９９９））、環境への影響が心配されている。更に製紙業界においては古紙を利用して紙製品の製造を行う場合、蛍光増白剤を分解あるいは消去する必要が生じる。以上のように蛍光増白剤はその安全性、環境への影響、古紙リサイクル利用などの観点から多くの問題を含んだ物質と言える。
【０００４】
ところで、従来の蛍光の消去方法として、例えば、特開昭６２−９７９９３号公報では解離された古紙を水酸化ナトリウム溶液にてｐＨ１０以上に調整し、ついで次亜塩素酸ナトリウムにて付着した蛍光を消去する方法が開示されている。しかしながらこの方法では蛍光消去は不十分である。
【０００５】
また、特公昭４８−１６９３号公報では４，４’−ジアミノスチルベンスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を含有する古紙をジクロールイソシアヌール酸塩を主としてなる蛍光消去剤処理により蛍光を消去する技術が開示されている。しかし、ジクロールイソシアヌール酸塩は、有機塩素化合物のためにＡＯＸ（吸着性有機ハロゲン化合物）が排水中に多量に発生し、環境保全上問題となる。
【０００６】
この様に開示された従来の蛍光増白剤の分解方法では、分解率が悪いことや環境保全上好ましくないこと等の点で問題がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は従来技術の問題を解決すべく、蛍光増白剤を効率よく消去あるいは／かつ分解できる蛍光増白剤処理方法および処理剤を提供することを目的とする。
【０００８】
本発明者らは、上記の問題を解決すべく研究を重ねた結果、レドックスメディエーターを含有する組成物、ラッカーゼを含有する組成物、またはレドックスメディエーターおよびラッカーゼを含有する組成物を使用することにより蛍光増白剤が容易に分解され、その蛍光が消去されることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明は、試料中の蛍光増白剤を分解する方法に関し、この方法は、レドックスメディエーターを蛍光増白剤に作用させる工程を包含する。
【００１０】
好ましくは、上記レドックスメディエーターは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）、３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノン、アセトバニロン、フェルラ酸、ジメトキシベンジルアルコール、ジメチルアミノ安息香酸、カテキン、エピカテキン、ｐ−ヒドロキシフェニル酢酸、ケルセチン、クロロプロマジン、フェノチアジン、フェノチアジン−１０−プロピオン酸、ナリンジン、プロマジン、ホモバニリン酸、ホモバニリルアルコール、４−アミノ−サリチル酸、シリンガ酸、４−ヒドロキシケイ皮酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸、バニリン酸、イソバニリン酸、カフェー酸、α−レゾルシル酸、β−レゾルシル酸、γ−レゾルシル酸、２，３−ジヒドロキシ安息香酸、３，４−ジヒドロキシ安息香酸、４−ヒドロキシ安息香酸、３−ヒドロキシ安息香酸、２，４，６−トリヒドロキシ安息香酸、安息香酸、ケイ皮酸、安息香酸ナトリウム、サリチル酸、２，５−ジヒドロキシ安息香酸、４−ヒドロキシベンジルアルコール、シンナバリン酸、３−ヒドロキシルアントラニル酸、シナピン、シナピン酸、フェノール、アニリン、４−アミノアンチピリン、オキシフェンブタゾン、ビオルル酸、Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド、オイゲノール、イソオイゲノール、カビベトール、ジンゲロン、コニフェリルアルコール、コニフェリルアルデヒド、ヘスペリチン、ヘスペレチン、ヘスペリジン、２，６−ジメトキシ−１，４−ジヒドロキシベンゼン、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒドロキシ−５−メチルベンゾトリアゾール、バニリン、エチルバニリン、アセトエチルバニロン、フェノキサジン、フェノキサジン−１０−プロピオン酸、７−ヒドロキシクマリン、ハイドロキノン、ベラトリルアルコール、ヘプタモリブドペンタバナドリン酸、２−ニトロソ−１−ナフトール−４−スルホン酸、１−ニトロソ−２−ナフトール−３，６−ジスルホン酸、２，６−ジ−ｔ−ブチル−ｐ−クレゾール、ベンゾトリアゾール、クルクミン、シリンガルダジン、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド、クメンヒドロペルオキシド、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）、ｐ−ヒドロキシベンゼンスルホン酸、および２，４，６−トリ−ｔ−ブチルフェノールからなる群から選択される。
【００１１】
好ましくは、上記蛍光増白剤は、スチルベン基またはアミノ基またはスルホン基またはジアゾ基を有し、かつ紫外線波長２００〜４００ｎｍを吸収し、４２０ｎｍを中心とする、青色ないしは紫色の蛍光を発することを特徴とする。
【００１２】
好ましくは、上記試料は、製紙工場の廃水、繊維工場の廃水、化学工場の廃水、一般家庭の廃水、海水、水環境中で採取された液体、および水環境中に沈殿したスラリーからなる群から選択される。
【００１３】
好ましくは、上記レドックスメディエーターを蛍光増白剤に作用させる工程は、約０．０１ｍｍｏｌ／Ｌよりも大きく約１００ｍｍｏｌ／Ｌまでの濃度のレドックスメディエーターの存在下で、２〜１２の範囲のｐＨ、および常温から７０℃の範囲の温度で行われる。
【００１４】
好ましくは、上記の方法は、ラッカーゼを蛍光増白剤に作用させる工程をさらに包含する。
【００１５】
好ましくは、上記ラッカーゼを蛍光増白剤に作用させる工程は、上記レドックスメディエーターを蛍光増白剤に作用させる工程の後に行われる。
【００１６】
好ましくは、上記ラッカーゼを蛍光増白剤に作用させる工程は、上記レドックスメディエーターを蛍光増白剤に作用させる工程と同時に行われる。
【００１７】
好ましくは、上記ラッカーゼを蛍光増白剤に作用させる工程は、上記レドックスメディエーターを蛍光増白剤に作用させる工程の前に行われる。
【００１８】
好ましくは、上記ラッカーゼは、トラメテスヴィローサ（Ｔｒａｍｅｔｅｓｖｉｌｌｏｓａ）、カワラタケ（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、スエヒロタケ（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍｃｏｍｍｕｎｅ）、ヒイロタケ（Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓ）、ヒラタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）、ベッコウタケ（Ｆｏｍｉｔｅｌｌａｆｒａｘｉｎｅａ）、アラゲカワラタケ（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｈｉｒｓｕｔｕｓ）、ヒトヨタケ（Ｃｏｐｒｉｎｕｓｃｉｎｅｒｅｕｓ）、ミロセシウムヴェルキャリア（Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍｖｅｒｒｕｃａｒｉａ）、リゾクトニアソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ）、シタリディウムサーモフィルム（Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）、ミセリオフトーラサーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）、ピリキュラリアオリゼー（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａｏｒｙｚａｅ）、ボトリチスシネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）、エビタケ（Ｔｒａｃｈｙｄｅｒｍａｔｓｕｎｏｄａｅ）、リギドポラスゾナリス（Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓｚｏｎａｌｉｓ）、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）、およびアスペルギルスニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｄｕｌａｎｓ）からなる群から選択される微生物由来である。
【００１９】
本発明はまた、試料中の蛍光増白剤を分解するための組成物に関し、この組成物は、レドックスメディエーターおよびｐＨ緩衝剤を含有する。
【００２０】
好ましくは、上記組成物はラッカーゼをさらに含有する。
【００２１】
好ましくは、上記レドックスメディエーターは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）、３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノン、アセトバニロン、フェルラ酸、ジメトキシベンジルアルコール、ジメチルアミノ安息香酸、カテキン、エピカテキン、ｐ−ヒドロキシフェニル酢酸、ケルセチン、クロロプロマジン、フェノチアジン、フェノチアジン−１０−プロピオン酸、ナリンジン、プロマジン、ホモバニリン酸、ホモバニリルアルコール、４−アミノ−サリチル酸、シリンガ酸、４−ヒドロキシケイ皮酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸、バニリン酸、イソバニリン酸、カフェー酸、α−レゾルシル酸、β−レゾルシル酸、γ−レゾルシル酸、２，３−ジヒドロキシ安息香酸、３，４−ジヒドロキシ安息香酸、４−ヒドロキシ安息香酸、３−ヒドロキシ安息香酸、２，４，６−トリヒドロキシ安息香酸、安息香酸、ケイ皮酸、安息香酸ナトリウム、サリチル酸、２，５−ジヒドロキシ安息香酸、４−ヒドロキシベンジルアルコール、シンナバリン酸、３−ヒドロキシルアントラニル酸、シナピン、シナピン酸、フェノール、アニリン、４−アミノアンチピリン、オキシフェンブタゾン、ビオルル酸、Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド、オイゲノール、イソオイゲノール、カビベトール、ジンゲロン、コニフェリルアルコール、コニフェリルアルデヒド、ヘスペリチン、ヘスペレチン、ヘスペリジン、２，６−ジメトキシ−１，４−ジヒドロキシベンゼン、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒドロキシ−５−メチルベンゾトリアゾール、バニリン、エチルバニリン、アセトエチルバニロン、フェノキサジン、フェノキサジン−１０−プロピオン酸、７−ヒドロキシクマリン、ハイドロキノン、ベラトリルアルコール、ヘプタモリブドペンタバナドリン酸、２−ニトロソ−１−ナフトール−４−スルホン酸、１−ニトロソ−２−ナフトール−３，６−ジスルホン酸、２，６−ジ−ｔ−ブチル−ｐ−クレゾール、ベンゾトリアゾール、クルクミン、シリンガルダジン、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド、クメンヒドロペルオキシド、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）、ｐ−ヒドロキシベンゼンスルホン酸、および２，４，６−トリ−ｔ−ブチルフェノールからなる群から選択される。
【００２２】
好ましくは、上記ラッカーゼは、トラメテスヴィローサ（Ｔｒａｍｅｔｅｓｖｉｌｌｏｓａ）、カワラタケ（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、スエヒロタケ（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍｃｏｍｍｕｎｅ）、ヒイロタケ（Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓ）、ヒラタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）、ベッコウタケ（Ｆｏｍｉｔｅｌｌａｆｒａｘｉｎｅａ）、アラゲカワラタケ（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｈｉｒｓｕｔｕｓ）、ヒトヨタケ（Ｃｏｐｒｉｎｕｓｃｉｎｅｒｅｕｓ）、ミロセシウムヴェルキャリア（Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍｖｅｒｒｕｃａｒｉａ）、リゾクトニアソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ）、シタリディウムサーモフィルム（Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）、ミセリオフトーラサーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）、ピリキュラリアオリゼー（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａｏｒｙｚａｅ）、ボトリチスシネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）、エビタケ（Ｔｒａｃｈｙｄｅｒｍａｔｓｕｎｏｄａｅ）、リギドポラスゾナリス（Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓｚｏｎａｌｉｓ）、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）、およびアスペルギルスニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｄｕｌａｎｓ）からなる群から選択される微生物由来である。
【００２３】
好ましくは、上記蛍光増白剤は、スチルベン基またはアミノ基またはスルホン基またはジアゾ基を有し、かつ紫外線波長２００〜４００ｎｍを吸収し、４２０ｎｍを中心とする、青色ないしは紫色の蛍光を発することを特徴とする。
【００２４】
本発明はまた、試料中の蛍光増白剤を分解する方法に関し、この方法は、ラッカーゼが作用し得る条件下で、ラッカーゼを蛍光増白剤に作用させる工程を包含する。
【００２５】
本発明はまた、試料中の蛍光増白剤を分解するための組成物に関し、この組成物はラッカーゼおよびｐＨ緩衝剤を含有する。
【００２６】
【発明の実施の形態】
本発明は、試料中の蛍光増白剤を分解する方法に関し、この方法は、レドックスメディエーターを蛍光増白剤に作用させる工程を包含する。
【００２７】
レドックスメディエーターは、適度な酸化還元ポテンシャルや電子移動性を有し、ラジカルを形成する化合物である。本発明に用い得るレドックスメディエーターの例として、具体的には、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）、３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノン、アセトバニロン、フェルラ酸、ジメトキシベンジルアルコール、ジメチルアミノ安息香酸、カテキン、エピカテキン、ｐ−ヒドロキシフェニル酢酸、ケルセチン、クロロプロマジン、フェノチアジン、フェノチアジン−１０−プロピオン酸、ナリンジン、プロマジン、ホモバニリン酸、ホモバニリルアルコール、４−アミノ−サリチル酸、シリンガ酸、４−ヒドロキシケイ皮酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ安息香酸、バニリン酸、イソバニリン酸、カフェー酸、α−レゾルシル酸、β−レゾルシル酸、γ−レゾルシル酸、２，３−ジヒドロキシ安息香酸、３，４−ジヒドロキシ安息香酸、４−ヒドロキシ安息香酸、３−ヒドロキシ安息香酸、２，４，６−トリヒドロキシ安息香酸、安息香酸、ケイ皮酸、安息香酸ナトリウム、サリチル酸、２，５−ジヒドロキシ安息香酸、４−ヒドロキシベンジルアルコール、シンナバリン酸、３−ヒドロキシルアントラニル酸、シナピン、シナピン酸、フェノール、アニリン、４−アミノアンチピリン、オキシフェンブタゾン、ビオルル酸、Ｎ−ヒドロキシアセトアニリド、オイゲノール、イソオイゲノール、カビベトール、ジンゲロン、コニフェリルアルコール、コニフェリルアルデヒド、ヘスペリチン、ヘスペレチン、ヘスペリジン、２，６−ジメトキシ−１，４−ジヒドロキシベンゼン、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒドロキシ−５−メチルベンゾトリアゾール、バニリン、エチルバニリン、アセトエチルバニロン、フェノキサジン、フェノキサジン−１０−プロピオン酸、７−ヒドロキシクマリン、ハイドロキノン、ベラトリルアルコール、ヘプタモリブドペンタバナドリン酸、２−ニトロソ−１−ナフトール−４−スルホン酸、１−ニトロソ−２−ナフトール−３，６−ジスルホン酸、２，６−ジ−ｔ−ブチル−ｐ−クレゾール、ベンゾトリアゾール、クルクミン、シリンガルダジン、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド、クメンヒドロペルオキシド、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）、ｐ−ヒドロキシベンゼンスルホン酸、および２，４，６−トリ−ｔ−ブチルフェノールなどをが挙げられるがこれらに限定されるものではない。蛍光増白剤を分解する限り、任意のレドックスメディエーターを用い得る。好ましくは１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−スルホン酸）、３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノン、フェノチアジン−１０−プロピオン酸、アセトバニロンが好適に用いられる。これらのレドックスメディエーターは単独であるいは併用で使用しても良い。
【００２８】
本発明者らは、これらのレドックスメディエーターが単独で蛍光増白剤の分解を促進することを新たに見出した。また、レドックスメディエーターを、ラッカーゼのような酵素と組み合わせて使用した場合でも、さらに良好な結果が得られることを見出した。
【００２９】
本発明で用いられるラッカーゼは、Ｅ．Ｃ．１．１０．３．２に分類される酵素である。ラッカーゼは芳香族化合物の酸化反応を触媒する酵素であり、それが由来する起源は問わないが、主に真菌類から、特に接合菌亜門、子嚢菌亜門、担子菌亜門、または不完全菌亜門に属するものが好適に用いられる。代表的な起源の例として、ムコール属（Ｍｕｃｏｒ）、ニューロスポラ属（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ）、ポドスポラ属（Ｐｏｄｏｓｐｏｒａ）、コリビア属（Ｃｏｌｌｙｂｉａ）、フォメス属（Ｆｏｍｅｓ）、レンチナス属（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ）、シゾフィルム属（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ）、トラメテス属（Ｔｒａｍｅｔｅｓ）、コリオラス属（Ｃｏｌｉｏｌｕｓ）、サナテフォラス属（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ）、リゾクトニア属（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）、コプリヌス属（Ｃｏｐｒｉｎｕｓ）、プサチレア属（Ｐｓａｔｙｒｅｌｌａ）、ポリポラス属（Ｐｏｌｙｐｏｒｕｓ）、ピクノポラス属（Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ）、フレビア属（Ｐｈｌｅｂｉａ）、ヒグロホロプシス属（Ｈｙｇｒｏｐｈｏｒｏｐｓｉｓ）、アガリクス属（Ａｇａｒｉｃｕｓ）、バスセルム属（Ｖａｓｃｅｌｌｕｍ）、クルシブルム属（Ｃｒｕｃｉｂｕｌｕｍ）、スポロルミエラ属（Ｓｐｏｒｏｒｍｉｅｌｌａ）、プレウロータス属（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ）、グリフォラ属（Ｇｒｉｆｏｒａ）、ガノデルマ属（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ）、レンジテス属（Ｌｅｎｚｉｔｅｓ）、ファネロケーテ属（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ）、セリポリオプシス属（Ｃｅｒｉｐｏｒｉｏｐｓｉｓ）、リギドポラス属（Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ）、フォミテラ属（Ｆｏｍｉｔｅｌｌａ）、トラキデルマ属（Ｔｒａｃｈｙｄｅｒｍａ）、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、アルテルナリア属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）、ボトリチス属（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）、ネクトリア属（Ｎｅｃｔｒｉａ）、ミロセシウム属（Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ）、セラトスファエリア属（Ｃｅｒａｔｏｓｐｈａｅｒｉａ）、ピリキュラリア属（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ）、ミセリオフトラ属（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ）、シタリジウム属（Ｓｃｈｙｔａｌｉｄｉｕｍ）などが挙げられ、具体的には、トラメテスヴィローサ（Ｔｒａｍｅｔｅｓｖｉｌｌｏｓａ）、カワラタケ（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ）、スエヒロタケ（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍｃｏｍｍｕｎｅ）、ヒイロタケ（Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓ）、ヒラタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）、ベッコウタケ（Ｆｏｍｉｔｅｌｌａｆｒａｘｉｎｅａ）、アラゲカワラタケ（Ｃｏｒｉｏｌｕｓｈｉｒｓｕｔｕｓ）、ヒトヨタケ（Ｃｏｐｒｉｎｕｓｃｉｎｅｒｅｕｓ）、ミロセシウムヴェルキャリア（Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍｖｅｒｒｕｃａｒｉａ）、リゾクトニアソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ）、シタリディウムサーモフィルム（Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）、ミセリオフトーラサーモフィラ（Ｍｙｃｅｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）、ピリキュラリアオリゼー（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａｏｒｙｚａｅ）、ボトリチスシネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）、エビタケ（Ｔｒａｃｈｙｄｅｒｍａｔｓｕｎｏｄａｅ）、リギドポラスゾナリス（Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓｚｏｎａｌｉｓ）、アスペルギルスオリゼー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）、アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）、およびアスペルギルスニデュランス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｄｕｌａｎｓ）が挙げられる。これらの微生物由来のラッカーゼは単独であるいは併用して用いても良い。
【００３０】
例えば、上記ラッカーゼの例として、工業的に大量生産され、市販されている、Ｔｒａｍｅｔｅｓ（トラメテス）属由来ラッカーゼ（商品名：ラッカーゼダイワ、大和化成株式会社）などが好適かつ簡便に用いられ得る。また、上記ラッカーゼとして、組換え遺伝子工学技術を用いて生産されたラッカーゼを用いても良い。
【００３１】
あるいは、上記ラッカーゼは、以下に示す指針に従って、上記ラッカーゼの起源となる微生物を培養して調製され得る。
【００３２】
ラッカーゼ生産菌の生育範囲は、ポテトグルコース寒天培地（ポテトエキス末４ｇ、ブドウ糖２０ｇおよび寒天２０ｇを、１リットルの蒸留水中に溶解する）において、約４〜４０℃、ｐＨは約２〜１２であり、生育好適温度は２５〜３５℃、生育好適ｐＨは４．０〜８．０である。
【００３３】
次に、ラッカーゼ生産菌由来のラッカーゼは液体培養または固体培養のいずれでも培養し得る。本菌を生育させる培地としては、特に限定されず、通常の液体培地または固体培地が用いられる。炭素源としては、本菌が同化し得るものならなんでもよく、グルコース、ショ糖、糖蜜等の糖類、澱粉、木粉などが用いられ得る。窒素源としては、ペプトン、酵母エキス、麦芽エキス、肉エキス、大豆分解物、尿素などの有機窒素源の他、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム等の無機窒素源も使用し得る。必要に応じてリン酸塩、硫酸マグネシウム、カリウム、カルシウム、銅、ナトリウム、マンガン、亜鉛等の無機塩類、ビタミン類等が添加され得る。これら培地成分は、本菌の生育を阻害しない濃度であればよく、炭素源は０．１〜２０重量％、好ましくは５〜１０重量％、窒素源は０．０１〜５重量％、好ましくは０．１〜２重量％である。
【００３４】
ラッカーゼはさらに、ラッカーゼをコードするポリヌクレオチド、およびラッカーゼの発現を可能にする因子をコードするポリヌクレオチドを含む組換えベクターを用いて形質転換された宿主細胞を適切な条件で培養する工程、および発現されたラッカーゼを当該分野で周知の方法によって回収する工程を包含する方法によって得られ得る。
【００３５】
以下に、本発明における蛍光増白剤の分解条件について説明する。
【００３６】
本発明における蛍光増白剤は、一般に、スチルベン基、アミノ基、スルホン基、またはジアゾ基のいずれか、またはそれらの組み合わせを有し、かつ紫外波長２００〜４００ｎｍから４２０ｎｍを中心とする、青色ないしは紫色の蛍光を発する物質である。蛍光増白剤の具体例として、ビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体、クマリン誘導体、ピラゾリン誘導体、ナフタルイミド誘導体、ビスベンゾオキサゾリル誘導体、ビススチリルビフェニール誘導体などが挙げられる。
【００３７】
レドックスメディエーターは、好ましくは、約０．０１ｍｍｏｌ／Ｌよりも大きく約１００ｍｍｏｌ／Ｌまでの濃度範囲で用いられ得る。
【００３８】
レドックスメディエーターを含有する組成物と、ラッカーゼ活性を含有する組成物とを併用する場合、それぞれの組成物は、蛍光増白剤を含有する試料液に対し、同時または順次添加され、そして混合されて蛍光増白剤の分解を行い得る。
【００３９】
ラッカーゼの添加量は、試料液中の蛍光増白剤含有量、レドックスメディエーター添加量によって変動し得る。例えば、１ｐｐｍの蛍光増白剤を１ｍｍｏｌ／Ｌの１−ヒドロキシベンゾトリアゾール存在下で分解する場合、ラッカーゼは０．０１〜１２Ｕ／ｍＬの濃度範囲で用いられ得る。また、レドックスメディエーターは、各々単独で用いられか、または２種類以上併用しても良く、各々約１００ｍｍｏｌ／Ｌまでの濃度で、好ましくは、０．０１ｍｍｏｌ／Ｌから１０ｍｍｏｌ／Ｌの濃度範囲で用いられ、それによって蛍光増白剤の分解を促進し得る。通常、蛍光増白剤の分解は、約ｐＨ２〜１２の範囲、好ましくは、約ｐＨ４〜９の範囲で行われ得る。また、通常、蛍光増白剤の分解は、常温から７０℃、好ましくは、４０℃〜６０℃の温度範囲で行われ得る。
【００４０】
なお、ラッカーゼは、４−アミノアンチピリンおよびフェノールとの酸化縮合による呈色反応系において、生成されるキノンイミン色素の５０５ｎｍにおける吸光度を１分間に０．１増加させる酵素活性を１Ｕとする指標を基に添加され得る。
【００４１】
【実施例】
以下、実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明する。以下の実施例は、本発明の例示であって、本発明を何ら限定するものではない。
【００４２】
（実施例１）
５０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に、ビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターである３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノンまたはアセトバニロンを１ｍｍｏｌ／Ｌとなるように加えた。得られた混合液を４０℃で１分間静置した後、５００ｍｍｏｌ／Ｌアジ化ナトリウム（反応系終濃度５０ｍｍｏｌ／Ｌ）を加え、酵素反応を停止した。このときの実験条件を表１に示す。
【００４３】
各試料の蛍光スペクトルを、分光蛍光光度計（株式会社日立製作所製ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒＦ−３０００）を用いて、励起波長を３４０ｎｍに固定して得た。そして、レドックスメディエーター含有組成物を添加する前の蛍光強度に対する試料の蛍光強度の割合を算出して蛍光増白剤の分解率とした。その結果を表２に示した。蛍光増白剤の分解率は、３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノンを用いた場合９６．１％、そしてアセトバニロンを用いた場合、９８．２％であった。
【００４４】
【表１】

【００４５】
【表２】

（実施例２）
５０ｍｍｏｌ／Ｌの酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）にビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターであるフェノチアジン−１０−プロピオン酸または３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノンまたは２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）を１ｍｍｏｌ／Ｌとなるように加えた後、トラメテス属由来のラッカーゼを１，０００Ｕ／ｍＬとなるように加えた。各試料を４０℃で１分間静置した後、５００ｍｍｏｌ／Ｌアジ化ナトリウム（反応系終濃度５０ｍｍｏｌ／Ｌ）を加え、酵素反応を停止した。このときの実験条件を表３に示した。各試料の蛍光スペクトルを、分光蛍光光度計（株式会社日立製作所製ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒＦ−３０００）を用いて、励起波長を３４０ｎｍに固定して得た。ラッカーゼ含有組成物もしくはレドックスメディエーター含有組成物を添加する前の蛍光強度に対する試料の蛍光強度の割合を算出して蛍光増白剤の分解率とした。その結果を表４に示した。蛍光増白剤の分解率は、フェノチアジン−１０−プロピオン酸、３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノン、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）を用いたときそれぞれ１００％、９７．０％、９７．３％であった。
【００４６】
【表３】

【００４７】
【表４】

（実施例３）
５０ｍｍｏｌ／Ｌの酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）にビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターである１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを１ｍｍｏｌ／Ｌとなるように加えた後、トラメテス属由来のラッカーゼを０、１００、５００、１，０００Ｕ／ｍＬとなるように加えた。各試料を常温で１０秒間攪拌した後、５００ｍｍｏｌ／Ｌアジ化ナトリウム（反応系終濃度５０ｍｍｏｌ／Ｌ）を加え、酵素反応を停止した。このときの実験条件を表５に示す。各試料の蛍光スペクトルを分光蛍光光度計によって測定し、実施例２と同様に蛍光増白剤の分解率を算出した。その結果を図１に示した。蛍光増白剤の分解率はラッカーゼを１００、５００、１，０００Ｕ／ｍＬ添加したときそれぞれ２４．１％、６４．１％、９３．２％であった。
【００４８】
【表５】

（実施例４）
５０ｍｍｏｌ／Ｌの酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）にビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターを加えずに、トラメテス属由来のラッカーゼを１，０００Ｕ／ｍＬとなるように加えた。各試料を常温で１０秒間攪拌した後、５００ｍｍｏｌ／Ｌアジ化ナトリウム（反応系終濃度５０ｍｍｏｌ／Ｌ）を加え、酵素反応を停止した。このときの実験条件を表６に示す。各試料の蛍光スペクトルを分光蛍光光度計によって測定し、実施例２と同様に蛍光増白剤の分解率を算出した。その結果を表７に示した。蛍光増白剤の分解率は４４．３％であった。
【００４９】
【表６】

【００５０】
【表７】

（実施例５）
５０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）にビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターである３’，５’−ジメトキシ−４’−ヒドロキシアセトフェノンを１ｍｍｏｌ／Ｌとなるように加えた。その後、ミロセシウム属由来のアルカリラッカーゼを０．２Ｕ／ｍＬとなるように加えた場合と加えない場合で実験を行った。各試料を４０℃で１分間静置した後、５００ｍｍｏｌ／Ｌアジ化ナトリウム（反応系終濃度５０ｍｍｏｌ／Ｌ）を加え、酵素反応を停止した。このときの実験条件を表８に示す。各試料の蛍光スペクトルを分光蛍光光度計によって測定し、実施例２と同様に蛍光増白剤の分解率を算出した。その結果を表９に示した。蛍光増白剤の分解率はラッカーゼを加えない場合、９６．１％、ラッカーゼを加えた場合、９９．７％であった。
【００５１】
【表８】

【００５２】
【表９】

（実施例６）
５０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）にビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターであるアセトバニロンを１ｍｍｏｌ／Ｌとなるように加えた。その後、ミロセシウム属由来のアルカリラッカーゼを０．２Ｕ／ｍＬとなるように加えた場合と加えない場合で実験を行った。各試料を４０℃で１分間静置した後、５００ｍｍｏｌ／Ｌアジ化ナトリウム（反応系終濃度５０ｍｍｏｌ／Ｌ）を加え、酵素反応を停止した。このときの実験条件を表１０に示す。各試料の蛍光スペクトルを分光蛍光光度計によって測定し、実施例２と同様に蛍光増白剤の分解率を算出した。その結果を表１１に示した。蛍光増白剤の分解率はラッカーゼを加えない場合、９８．２％、ラッカーゼを加えた場合、９９．３％となった。
【００５３】
【表１０】

【００５４】
【表１１】

（実施例７）
５０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）にビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターを入れずにミロセシウム属由来のアルカリラッカーゼを０．２Ｕ／ｍＬとなるように加えた場合と、レドックスメディエーターであるホモバニリルアルコール１ｍｍｏｌ／Ｌとなるように添加後、ミロセシウム属由来のアルカリラッカーゼを０．２Ｕ／ｍＬとなるように加えた場合で実験を行った。各試料を４０℃で１分間静置後、５００ｍｍｏｌ／Ｌアジ化ナトリウム（反応系終濃度５０ｍｍｏｌ／Ｌ）を加え、酵素反応を停止した。このときの実験条件を表１２に示した。各試料の蛍光スペクトルを分光蛍光光度計によって測定し、実施例２と同様に蛍光増白剤の分解率を算出した。その結果を表１３に示した。蛍光増白剤の分解率はレドックスメディエーターを加えない場合、８４．７％、レドックスメディエーターを加えた場合、９３．２％であった。
【００５５】
【表１２】

【００５６】
【表１３】

（実施例８）
１００ｍｍｏｌ／Ｌの酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）に、ビス（トリアジニルアミノ）スチルベンジスルホン酸誘導体からなる蛍光増白剤を１００ｐｐｍとなるように加えた。この溶液に、レドックスメディエーターである１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを０．５ｍｍｏｌ／Ｌとなるよう加えた後、トラメテス属由来のラッカーゼを８０Ｕ／ｍＬとなるように加えた。得られた混合液を常温で１０秒間攪拌した後、氷水中で冷却し酵素反応を停止した。このときの実験条件を表１４に示す。試料液の蛍光スペクトルを分光蛍光光度計によって測定し、実施例２と同様に蛍光増白剤の分解率を算出した。あるいは、試料液をＨＰＬＣで分析し、ラッカーゼ含有組成物とレドックスメディエーター含有組成物を添加する前の蛍光強度に対する試料の蛍光強度割合を算出して蛍光増白剤の分解率とした。このときの分析条件を表１５に示す。分光蛍光光度計分析およびＨＰＬＣ分析の実験結果を表１６に示した。
【００５７】
【表１４】

【００５８】
【表１５】

【００５９】
【表１６】

表１６に示されるように、分光蛍光光度計による蛍光スペクトルの測定により得られた分解率と、ＨＰＬＣ分析から得られた分解率とは良く一致した。
【００６０】
（実施例９）
１００ｍｍｏｌ／Ｌの酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）にクマリン誘導体からなる蛍光増白剤を９０ｐｐｍとなるように加えた。この溶液にレドックスメディエーターである１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを１．０ｍｍｏｌ／Ｌとなるように加えた後、トラメテス属由来のラッカーゼを１００Ｕ／ｍＬとなるように加えた。得られた試料液を５０℃で３０分間インキュベートすることにより反応を行い、その後氷水中で冷却し酵素反応を停止した。このときの実験条件を表１７に示す。試料液の蛍光スペクトルを分光蛍光光度計によって測定し、実施例２と同様に蛍光増白剤の分解率を算出した。その結果、蛍光増白剤の分解率は９４．２％であった。
【００６１】
【表１７】

【００６２】
【発明の効果】
環境への悪影響が懸念される蛍光増白剤の分解を促進する方法が提供される。本発明の方法は、レドックスメディエーターを含有する組成物を用いて、蛍光増白剤の効率的な分解を可能にし、これによって環境の浄化が進展することが期待される。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、レドックスメディエーターとして１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを用いた蛍光増白剤分解反応のラッカーゼ添加量依存性を示すグラフである。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a method for decomposing an optical brightener and a composition therefor. More specifically, redox mediator acts on the optical brightener, laccase (polyphenol oxidase) acts on the optical brightener, or both redox mediator and laccase (polyphenol oxidase) act on the optical brightener. It is related with the method including the process to make. Furthermore, the present invention relates to a composition containing a redox mediator, laccase, or both for degrading an optical brightener.
[0002]
[Prior art]
In the pulp and textile industry, emphasizing the whiteness of a product increases the value of the product itself, and excessive fluorescent dyeing with a fluorescent brightener is performed to emphasize the whiteness of the product. Some laundry detergents also contain a fluorescent brightening agent to give a white shine after washing.
[0003]
However, this fluorescent whitening agent has not yet been proved to be safe, and its use in some products is restricted by the Pharmaceutical Affairs Law and the Food Sanitation Law. In addition, the fluorescent whitening agent is currently released without being sufficiently decomposed and removed by sewage treatment. Therefore, it is also detected from the seabed of Tokyo Bay and Lake Biwa and the seabed of 1,400 meters deep in Sagami Bay (Hideshige Takada et al., Annual Meeting of Japan Society on Water Environment, Vol.33, 294 (1999)). I am worried about the impact. Further, in the paper manufacturing industry, when making paper products using waste paper, it is necessary to decompose or erase the fluorescent brightening agent. As described above, the fluorescent whitening agent can be said to be a substance having many problems from the viewpoints of safety, environmental impact, and recycling of used paper.
[0004]
By the way, as a conventional fluorescence erasing method, for example, in JP-A-62-97993, dissociated waste paper is adjusted to a pH of 10 or more with a sodium hydroxide solution, and then the fluorescence adhering to sodium hypochlorite is used. A method of erasing is disclosed. However, this method is not sufficient for eliminating fluorescence.
[0005]
Japanese Patent Publication No. 48-1693 discloses a technique for erasing fluorescence of a used paper containing a fluorescent brightening agent comprising a 4,4′-diaminostilbene sulfonic acid derivative by treatment with a fluorescent quencher mainly composed of dichlorisocyanurate. Is disclosed. However, since dichlor isocyanurate is an organic chlorine compound, a large amount of AOX (adsorptive organic halogen compound) is generated in the waste water, which causes a problem in environmental conservation.
[0006]
The conventional method for decomposing a fluorescent whitening agent disclosed in this way has problems in that the decomposition rate is poor and it is not preferable for environmental conservation.
[0007]
[Problems to be solved by the invention]
In order to solve the problems of the prior art, an object of the present invention is to provide a fluorescent whitening agent processing method and a processing agent capable of efficiently erasing or / and decomposing the optical brightener.
[0008]
As a result of researches to solve the above problems, the present inventors have obtained a fluorescence by using a composition containing a redox mediator, a composition containing a laccase, or a composition containing a redox mediator and a laccase. It has been found that the brightener is easily decomposed and its fluorescence is eliminated, and the present invention has been completed.
[0009]
[Means for Solving the Problems]
The present invention relates to a method for decomposing an optical brightener in a sample, and this method comprises the step of allowing a redox mediator to act on the optical brightener.
[0010]
Preferably, the redox mediator is 1-hydroxybenzotriazole, 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone, acetovanillone , Ferulic acid, dimethoxybenzyl alcohol, dimethylaminobenzoic acid, catechin, epicatechin,p-Hydroxyphenylacetic acid, quercetin, chloropromazine, phenothiazine, phenothiazine-10-propionic acid, naringin, promazine, homovanillic acid, homovanillyl alcohol, 4-amino-salicylic acid, syringic acid, 4-hydroxycinnamic acid, 4- Amino-3-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, isovanillic acid, caffeic acid, α-resorcylic acid, β-resorcylic acid, γ-resorcylic acid, 2,3-dihydroxybenzoic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid, 4- Hydroxybenzoic acid, 3-hydroxybenzoic acid, 2,4,6-trihydroxybenzoic acid, benzoic acid, cinnamic acid, sodium benzoate, salicylic acid, 2,5-dihydroxybenzoic acid, 4-hydroxybenzyl alcohol, cinnavalic acid 3-hydroxyanthranilic acid Sinapine, sinapinic acid, phenol, aniline, 4-aminoantipyrine, oxyphenbutazone, violuric acid, N-hydroxyacetanilide, eugenol, isoeugenol, kabibetol, gingerone, coniferyl alcohol, coniferyl aldehyde, hesperitin, hesperetin, hesperidin, 2,6-dimethoxy-1,4-dihydroxybenzene, N-hydroxyphthalimide, 1-hydroxy-5-methylbenzotriazole, vanillin, ethyl vanillin, acetoethyl vanillon, phenoxazine, phenoxazine-10-propionic acid, 7 -Hydroxycoumarin, hydroquinone, veratryl alcohol, heptamolybdopentavanadate, 2-nitroso-1-naphthol-4-sulfonic acid, 1-nitroso-2- Futoru-3,6-disulfonic acid, 2,6-di -t-Butyl-p-Cresol, benzotriazole, curcumin, syringaldazine,t-Butyl hydroperoxide, cumene hydroperoxide, 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy (TEMPO),p-Hydroxybenzenesulfonic acid and 2,4,6-tri-t-Selected from the group consisting of butylphenol.
[0011]
  Preferably, the optical brightener is a stilbene group.OrAmino groupOrSulfoneBaseIt also has a diazo group, absorbs an ultraviolet wavelength of 200 to 400 nm, and emits blue or violet fluorescence centered at 420 nm.
[0012]
Preferably, the sample is from the group consisting of paper mill wastewater, textile mill wastewater, chemical factory wastewater, general household wastewater, seawater, liquids collected in the water environment, and slurries precipitated in the water environment. Selected.
[0013]
Preferably, the step of causing the redox mediator to act on the optical brightener comprises a pH in the range of 2-12 in the presence of a redox mediator at a concentration greater than about 0.01 mmol / L to about 100 mmol / L, and It is carried out at a temperature ranging from room temperature to 70 ° C.
[0014]
Preferably, the above method further comprises the step of allowing laccase to act on the optical brightener.
[0015]
Preferably, the step of causing the laccase to act on the fluorescent whitening agent is performed after the step of causing the redox mediator to act on the fluorescent whitening agent.
[0016]
Preferably, the step of causing the laccase to act on the optical brightener is performed simultaneously with the step of causing the redox mediator to act on the optical brightener.
[0017]
Preferably, the step of causing the laccase to act on the optical brightener is performed before the step of causing the redox mediator to act on the optical brightener.
[0018]
Preferably, the laccase is Trametes Virosa (Trametes vilosa), Kawaratake (Coriolus versicolor), Suehirotake (Schizophyllum commune), Hilotake (Pycnoporus coccineus), Oyster mushroom (Pleurotus ostereatus), Becko bamboo (Fomitella fraxinea), Alage Kawaratake (Coriorus hirsutus), Hitoyoke (Coprinus cinereus), Milosecium Vercarrier (Myrothecium verrucaria), Rhizoctonia solani (Rhizoctonia solani), Citaridium thermofilm (Cytalidium thermophilum), Misericio Tora Thermophila (Myceliophthora thermophila), Piricularia oryzae (Pyricularia oryzae), Botrytis cinerea (Botrytis cinerea), Shrimp (Trachyderma tsunodae), Rigidporus Zonaris (Rigidoporus zonalis), Aspergillus oryzae (Aspergillus oryzae), Aspergillus niger (Aspergillus niger), And Aspergillus nidulans (Aspergillus nidulans) Derived from a microorganism selected from the group consisting of:
[0019]
The present invention also relates to a composition for degrading an optical brightener in a sample, the composition containing a redox mediator and a pH buffer.
[0020]
Preferably, the composition further comprises laccase.
[0021]
Preferably, the redox mediator is 1-hydroxybenzotriazole, 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone, acetovanillone , Ferulic acid, dimethoxybenzyl alcohol, dimethylaminobenzoic acid, catechin, epicatechin,p-Hydroxyphenylacetic acid, quercetin, chloropromazine, phenothiazine, phenothiazine-10-propionic acid, naringin, promazine, homovanillic acid, homovanillyl alcohol, 4-amino-salicylic acid, syringic acid, 4-hydroxycinnamic acid, 4- Amino-3-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, isovanillic acid, caffeic acid, α-resorcylic acid, β-resorcylic acid, γ-resorcylic acid, 2,3-dihydroxybenzoic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid, 4- Hydroxybenzoic acid, 3-hydroxybenzoic acid, 2,4,6-trihydroxybenzoic acid, benzoic acid, cinnamic acid, sodium benzoate, salicylic acid, 2,5-dihydroxybenzoic acid, 4-hydroxybenzyl alcohol, cinnavalic acid 3-hydroxyanthranilic acid Sinapine, sinapinic acid, phenol, aniline, 4-aminoantipyrine, oxyphenbutazone, violuric acid, N-hydroxyacetanilide, eugenol, isoeugenol, kabibetol, gingerone, coniferyl alcohol, coniferyl aldehyde, hesperitin, hesperetin, hesperidin, 2,6-dimethoxy-1,4-dihydroxybenzene, N-hydroxyphthalimide, 1-hydroxy-5-methylbenzotriazole, vanillin, ethyl vanillin, acetoethyl vanillon, phenoxazine, phenoxazine-10-propionic acid, 7 -Hydroxycoumarin, hydroquinone, veratryl alcohol, heptamolybdopentavanadate, 2-nitroso-1-naphthol-4-sulfonic acid, 1-nitroso-2- Futoru-3,6-disulfonic acid, 2,6-di -t-Butyl-p-Cresol, benzotriazole, curcumin, syringaldazine,t-Butyl hydroperoxide, cumene hydroperoxide, 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy (TEMPO),p-Hydroxybenzenesulfonic acid and 2,4,6-tri-t-Selected from the group consisting of butylphenol.
[0022]
Preferably, the laccase is Trametes Virosa (Trametes vilosa), Kawaratake (Coriolus versicolor), Suehirotake (Schizophyllum commune), Hilotake (Pycnoporus coccineus), Oyster mushroom (Pleurotus ostereatus), Becko bamboo (Fomitella fraxinea), Alage Kawaratake (Coriorus hirsutus), Hitoyoke (Coprinus cinereus), Milosecium Vercarrier (Myrothecium verrucaria), Rhizoctonia solani (Rhizoctonia solani), Citaridium thermofilm (Cytalidium thermophilum), Misericio Tora Thermophila (Myceliophthora thermophila), Piricularia oryzae (Pyricularia oryzae), Botrytis cinerea (Botrytis cinerea), Shrimp (Trachyderma tsunodae), Rigidporus Zonaris (Rigidoporus zonalis), Aspergillus oryzae (Aspergillus oryzae), Aspergillus niger (Aspergillus niger), And Aspergillus nidulans (Aspergillus nidulans) Derived from a microorganism selected from the group consisting of:
[0023]
  Preferably, the optical brightener is a stilbene group.OrAmino groupOrSulfoneBaseIt also has a diazo group, absorbs an ultraviolet wavelength of 200 to 400 nm, and emits blue or violet fluorescence centered at 420 nm.
[0024]
The present invention also relates to a method for degrading a fluorescent whitening agent in a sample, and this method comprises the step of allowing a laccase to act on the fluorescent whitening agent under conditions where the laccase can act.
[0025]
The present invention also relates to a composition for degrading an optical brightener in a sample, the composition containing a laccase and a pH buffer.
[0026]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The present invention relates to a method for decomposing an optical brightener in a sample, and this method comprises the step of allowing a redox mediator to act on the optical brightener.
[0027]
Redox mediators are compounds that have a suitable redox potential and electron mobility and form radicals. Specific examples of redox mediators that can be used in the present invention include 1-hydroxybenzotriazole, 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), 3 ′, 5′-dimethoxy. -4′-hydroxyacetophenone, acetovanillone, ferulic acid, dimethoxybenzyl alcohol, dimethylaminobenzoic acid, catechin, epicatechin,p-Hydroxyphenylacetic acid, quercetin, chloropromazine, phenothiazine, phenothiazine-10-propionic acid, naringin, promazine, homovanillic acid, homovanillyl alcohol, 4-amino-salicylic acid, syringic acid, 4-hydroxycinnamic acid, 4- Amino-3-hydroxybenzoic acid, vanillic acid, isovanillic acid, caffeic acid, α-resorcylic acid, β-resorcylic acid, γ-resorcylic acid, 2,3-dihydroxybenzoic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid, 4- Hydroxybenzoic acid, 3-hydroxybenzoic acid, 2,4,6-trihydroxybenzoic acid, benzoic acid, cinnamic acid, sodium benzoate, salicylic acid, 2,5-dihydroxybenzoic acid, 4-hydroxybenzyl alcohol, cinnavalic acid 3-hydroxyanthranilic acid Sinapine, sinapinic acid, phenol, aniline, 4-aminoantipyrine, oxyphenbutazone, violuric acid, N-hydroxyacetanilide, eugenol, isoeugenol, kabibetol, gingerone, coniferyl alcohol, coniferyl aldehyde, hesperitin, hesperetin, hesperidin, 2,6-dimethoxy-1,4-dihydroxybenzene, N-hydroxyphthalimide, 1-hydroxy-5-methylbenzotriazole, vanillin, ethyl vanillin, acetoethyl vanillon, phenoxazine, phenoxazine-10-propionic acid, 7 -Hydroxycoumarin, hydroquinone, veratryl alcohol, heptamolybdopentavanadate, 2-nitroso-1-naphthol-4-sulfonic acid, 1-nitroso-2- Futoru-3,6-disulfonic acid, 2,6-di -t-Butyl-p-Cresol, benzotriazole, curcumin, syringaldazine,t-Butyl hydroperoxide, cumene hydroperoxide, 2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy (TEMPO),p-Hydroxybenzenesulfonic acid and 2,4,6-tri-t-Butylphenol and the like can be mentioned, but not limited thereto. Any redox mediator can be used so long as it degrades the optical brightener. Preferably 1-hydroxybenzotriazole, 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid), 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone, phenothiazine-10-propionic acid, Acetovanillone is preferably used. These redox mediators may be used alone or in combination.
[0028]
The present inventors have newly found that these redox mediators alone promote the degradation of the optical brightener. Furthermore, it has been found that even better results can be obtained when a redox mediator is used in combination with an enzyme such as laccase.
[0029]
The laccase used in the present invention is E. coli. C. Enzymes classified as 1.10.3.2. Laccase is an enzyme that catalyzes the oxidation reaction of aromatic compounds, regardless of the origin from which it originates, but mainly from fungi, especially zygomycetes, ascomycetes, basidiomycetes, or incomplete Those belonging to Mycota are preferably used. A typical example of the origin is the genus Mucor (Mucor), Neurospora (Neurospora), Podospora (Podospora), Colivia (Collybia), Fomez (Forms), Lentinus genus (Lentinus), Shizo Film genus (Schizophyllum), Trametes (Trametes), Coriolus (Coliolus), Sanatephorus (Thanatephorus), Rhizoctonia (Rhizoctonia), Coprinus (Coprinus), Psachirea (Psatirrella), Polyporus (Polyporus), Picnoporus (Pycnoporus), Flavia (Phlebia), Hygrophopus genus (Hypophoropsis), Agaricus (Agaricus), Baserum (Vasecellum), Kurushiburumu (Crucibulum), Sporormiera (Sorormiella), Pleurotus (Pleurotus), Gryphora (Grifora), Ganoderma (Ganoderma), Rangetes (Lenzites), Funerokete (Phanerochaete), Seripoliopsis (Ceriporiopsis), Rigidoporus (Rigidoporus), Fomitella (Fomitella), Trachyderma (Trachyderma), Aspergillus (Aspergillus), Alternaria (Alternaria), Botrytis (Botrytis), Nectria (Nectria), Milosecium (Myrothecium), Seratosfarea genus (Ceratosphaeria), Piricularia (Pyricularia), Misericiotra (genusMyceliophthora), Citaridium genus (Schytalidium), Specifically, Trametes Virosa (Trametes  vilosa), Kawaratake (Coriolus  versicolor), Suehirotake (Schizophyllum  commune), Hilotake (Pycnoporus  coccineus), Oyster mushroom (Pleurotus  ostreatus), Becko bamboo (Fomitella  fraxinea), Alage Kawaratake (Coriolus  h irsutus), Hitoyoke (Coprinus  cinereus), Milosecium Vercarrier (Myrothecium  verrucaria), Rhizoctonia solani (Rhizoctonia  solani), Citaridium thermofilm (Cytalidium  thermophilum), Misericio Tora Thermophila (Myceliophthora  thermophila), Piricularia oryzae (Pyricularia  oryzae), Botrytis cinerea (Botrytis  cinerea), Shrimp (Trachyderma  tsunodae), Rigidporus Zonaris (Rigidoporus zonalis), Aspergillus oryzae (Aspergillus oryzae), Aspergillus niger (Aspergillus niger), And Aspergillus nidulans (Aspergillus nidulans). These microorganism-derived laccases may be used alone or in combination.
[0030]
For example, as an example of the laccase, industrially mass-produced and marketed,Trametes(Tramethes) genus-derived laccase (trade name: Laccase Daiwa, Daiwa Kasei Co., Ltd.) and the like can be suitably and conveniently used. Moreover, you may use the laccase produced using the recombinant genetic engineering technique as said laccase.
[0031]
Alternatively, the laccase can be prepared by culturing a microorganism that is the origin of the laccase according to the guidelines shown below.
[0032]
The growth range of laccase-producing bacteria is about 4 to 40 ° C. and pH is about 2 to 12 in a potato glucose agar medium (4 g potato extract powder, 20 g glucose and 20 g agar dissolved in 1 liter distilled water). The preferred growth temperature is 25 to 35 ° C., and the preferred growth pH is 4.0 to 8.0.
[0033]
Next, the laccase from the laccase-producing bacterium can be cultured in either liquid culture or solid culture. The medium for growing the bacterium is not particularly limited, and a normal liquid medium or solid medium is used. Any carbon source can be used as long as it can be assimilated, and sugars such as glucose, sucrose, and molasses, starch, and wood flour can be used. As a nitrogen source, in addition to organic nitrogen sources such as peptone, yeast extract, malt extract, meat extract, soybean degradation product and urea, inorganic nitrogen sources such as ammonium nitrate and sodium nitrate can also be used. If necessary, inorganic salts such as phosphate, magnesium sulfate, potassium, calcium, copper, sodium, manganese and zinc, vitamins and the like can be added. These medium components only need to have concentrations that do not inhibit the growth of the bacterium, the carbon source is 0.1 to 20% by weight, preferably 5 to 10% by weight, and the nitrogen source is 0.01 to 5% by weight, preferably 0.1 to 2% by weight.
[0034]
The laccase further comprises culturing a host cell transformed with a recombinant vector comprising a polynucleotide encoding a laccase and a polynucleotide encoding a factor enabling expression of the laccase under appropriate conditions, and expression The obtained laccase can be obtained by a method including a step of recovering by a method well known in the art.
[0035]
Below, the decomposition | disassembly conditions of the optical brightener in this invention are demonstrated.
[0036]
The optical brightener in the present invention generally has either a stilbene group, an amino group, a sulfone group, a diazo group, or a combination thereof, and has a blue or blue color centered on an ultraviolet wavelength of 200 to 400 nm to 420 nm. It is a substance that emits purple fluorescence. Specific examples of the optical brightener include bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivatives, coumarin derivatives, pyrazoline derivatives, naphthalimide derivatives, bisbenzoxazolyl derivatives, bisstyryl biphenyl derivatives and the like.
[0037]
Redox mediators can preferably be used in a concentration range of greater than about 0.01 mmol / L to about 100 mmol / L.
[0038]
When a composition containing a redox mediator and a composition containing laccase activity are used in combination, the respective compositions are added simultaneously or sequentially to a sample solution containing an optical brightener and mixed. Decomposition of the optical brightener can be performed.
[0039]
The amount of laccase added may vary depending on the content of the fluorescent whitening agent in the sample solution and the amount of redox mediator added. For example, if 1 ppm of optical brightener is degraded in the presence of 1 mmol / L 1-hydroxybenzotriazole, laccase can be used in a concentration range of 0.01-12 U / mL. The redox mediators may be used alone or in combination of two or more, and each may be used at a concentration of up to about 100 mmol / L, preferably in a concentration range of 0.01 mmol / L to 10 mmol / L. Thereby facilitating the degradation of the optical brightener. Usually, the degradation of the optical brightener is in the range of about pH 2-12, preferablyaboutIt can be carried out in the range of pH 4-9. In general, the decomposition of the fluorescent brightening agent can be performed in a temperature range from room temperature to 70 ° C, preferably from 40 ° C to 60 ° C.
[0040]
Laccase is based on an index of 1 U, which is an enzyme activity that increases the absorbance at 505 nm by 0.1 for 1 minute in a colored reaction system by oxidative condensation with 4-aminoantipyrine and phenol. Can be added.
[0041]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. The following examples are illustrative of the present invention and do not limit the present invention in any way.
[0042]
Example 1
To a 50 mmol / L phosphate buffer (pH 7.0), an optical brightener composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to 100 ppm. To this solution, 3 ', 5'-dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone or acetovanillone as a redox mediator was added to 1 mmol / L. The resulting mixture was allowed to stand at 40 ° C. for 1 minute, and then 500 mmol / L sodium azide (reaction system final concentration 50 mmol / L) was added to stop the enzyme reaction. Table 1 shows the experimental conditions at this time.
[0043]
The fluorescence spectrum of each sample was obtained using a spectrofluorometer (Fluorescence Spectrophotometer F-3000 manufactured by Hitachi, Ltd.) with the excitation wavelength fixed at 340 nm. And the ratio of the fluorescence intensity of the sample with respect to the fluorescence intensity before adding a redox mediator containing composition was computed, and it was set as the decomposition rate of the fluorescent whitening agent. The results are shown in Table 2. The degradation rate of the optical brightener was 96.1% when 3 ', 5'-dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone was used and 98.2% when acetovanillone was used.
[0044]
[Table 1]

[0045]
[Table 2]

(Example 2)
A fluorescent whitening agent composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to 50 mmol / L acetic acid buffer (pH 5.0) to 100 ppm. 1 mmol of phenothiazine-10-propionic acid or 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone or 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) as a redox mediator was added to this solution. After adding to / L, laccase derived from Trametes was added to 1,000 U / mL. Each sample was allowed to stand at 40 ° C. for 1 minute, and then 500 mmol / L sodium azide (reaction system final concentration 50 mmol / L) was added to stop the enzyme reaction. The experimental conditions at this time are shown in Table 3. The fluorescence spectrum of each sample was obtained by fixing the excitation wavelength at 340 nm using a spectrofluorometer (Fluorescence Spectrophotometer F-3000 manufactured by Hitachi, Ltd.). The ratio of the fluorescence intensity of the sample with respect to the fluorescence intensity before adding the laccase-containing composition or the redox mediator-containing composition was calculated as the decomposition rate of the fluorescent brightener. The results are shown in Table 4. The decomposition rate of the optical brightener is phenothiazine-10-propionic acid, 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone, 2,2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) Were 100%, 97.0%, and 97.3%, respectively.
[0046]
[Table 3]

[0047]
[Table 4]

(Example 3)
A fluorescent whitening agent composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to 50 mmol / L acetic acid buffer (pH 5.0) to 100 ppm. To this solution, 1-hydroxybenzotriazole, which is a redox mediator, was added to 1 mmol / L, and laccase derived from Trametes was added to 0, 100, 500, and 1,000 U / mL. After each sample was stirred at room temperature for 10 seconds, 500 mmol / L sodium azide (reaction system final concentration 50 mmol / L) was added to stop the enzyme reaction. Table 5 shows the experimental conditions at this time. The fluorescence spectrum of each sample was measured with a spectrofluorometer, and the decomposition rate of the fluorescent brightener was calculated in the same manner as in Example 2. The results are shown in FIG. The degradation rate of the optical brightener was 24.1%, 64.1%, and 93.2% when laccase was added at 100, 500, and 1,000 U / mL, respectively.
[0048]
[Table 5]

Example 4
A fluorescent whitening agent composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to 50 mmol / L acetic acid buffer (pH 5.0) to 100 ppm. Without adding a redox mediator to this solution, a laccase derived from Trametes was added to 1,000 U / mL. After each sample was stirred at room temperature for 10 seconds, 500 mmol / L sodium azide (reaction system final concentration 50 mmol / L) was added to stop the enzyme reaction. Table 6 shows the experimental conditions at this time. The fluorescence spectrum of each sample was measured with a spectrofluorometer, and the decomposition rate of the fluorescent brightener was calculated in the same manner as in Example 2. The results are shown in Table 7. The decomposition rate of the optical brightener was 44.3%.
[0049]
[Table 6]

[0050]
[Table 7]

(Example 5)
An optical brightener composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to a 50 mmol / L phosphate buffer (pH 7.0) to a concentration of 100 ppm. To this solution, 3 ', 5'-dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone as a redox mediator was added to 1 mmol / L. Thereafter, experiments were conducted with and without adding alkaline laccase derived from the genus Miloseces to 0.2 U / mL. Each sample was allowed to stand at 40 ° C. for 1 minute, and then 500 mmol / L sodium azide (reaction system final concentration 50 mmol / L) was added to stop the enzyme reaction. Table 8 shows the experimental conditions at this time. The fluorescence spectrum of each sample was measured with a spectrofluorometer, and the decomposition rate of the fluorescent brightener was calculated in the same manner as in Example 2. The results are shown in Table 9. The degradation rate of the optical brightener was 96.1% when laccase was not added and 99.7% when laccase was added.
[0051]
[Table 8]

[0052]
[Table 9]

(Example 6)
An optical brightener composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to a 50 mmol / L phosphate buffer (pH 7.0) to a concentration of 100 ppm. To this solution, acetovanillone as a redox mediator was added to 1 mmol / L. Thereafter, experiments were conducted with and without adding alkaline laccase derived from the genus Miloseces to 0.2 U / mL. Each sample was allowed to stand at 40 ° C. for 1 minute, and then 500 mmol / L sodium azide (reaction system final concentration 50 mmol / L) was added to stop the enzyme reaction. Table 10 shows the experimental conditions at this time. The fluorescence spectrum of each sample was measured with a spectrofluorometer, and the decomposition rate of the fluorescent brightener was calculated in the same manner as in Example 2. The results are shown in Table 11. The decomposition rate of the optical brightener was 98.2% when laccase was not added and 99.3% when laccase was added.
[0053]
[Table 10]

[0054]
[Table 11]

(Example 7)
An optical brightener composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to a 50 mmol / L phosphate buffer (pH 7.0) to a concentration of 100 ppm. In this solution, the alkaline laccase derived from the genus Milesium without adding the redox mediator was added to 0.2 U / mL, and after the addition to 1 mmol / L of homovanillyl alcohol as the redox mediator, The experiment was performed in the case where the derived alkaline laccase was added to 0.2 U / mL. After each sample was allowed to stand at 40 ° C. for 1 minute, 500 mmol / L sodium azide (reaction system final concentration 50 mmol / L) was added to stop the enzyme reaction. The experimental conditions at this time are shown in Table 12. The fluorescence spectrum of each sample was measured with a spectrofluorometer, and the decomposition rate of the fluorescent brightener was calculated in the same manner as in Example 2. The results are shown in Table 13. The decomposition rate of the optical brightener was 84.7% when no redox mediator was added, and 93.2% when a redox mediator was added.
[0055]
[Table 12]

[0056]
[Table 13]

(Example 8)
An optical brightener composed of a bis (triazinylamino) stilbene disulfonic acid derivative was added to 100 mmol / L acetate buffer (pH 5.0) so as to be 100 ppm. To this solution, 1-hydroxybenzotriazole as a redox mediator was added to 0.5 mmol / L, and laccase derived from Trametes was added to 80 U / mL. The resulting mixture was stirred at room temperature for 10 seconds, and then cooled in ice water to stop the enzyme reaction. Table 14 shows the experimental conditions at this time. The fluorescence spectrum of the sample solution was measured with a spectrofluorometer, and the decomposition rate of the fluorescent brightener was calculated in the same manner as in Example 2. Alternatively, the sample solution was analyzed by HPLC, and the fluorescence intensity ratio of the sample with respect to the fluorescence intensity before adding the laccase-containing composition and the redox mediator-containing composition was calculated to obtain the decomposition rate of the fluorescent whitening agent. Table 15 shows the analysis conditions at this time. The experimental results of the spectrofluorophotometer analysis and the HPLC analysis are shown in Table 16.
[0057]
[Table 14]

[0058]
[Table 15]

[0059]
[Table 16]

As shown in Table 16, the decomposition rate obtained by measurement of the fluorescence spectrum with a spectrofluorometer and the decomposition rate obtained from HPLC analysis agreed well.
[0060]
Example 9
A fluorescent whitening agent comprising a coumarin derivative was added to 100 mmol / L acetate buffer (pH 5.0) so as to be 90 ppm. To this solution, 1-hydroxybenzotriazole, which is a redox mediator, was added to 1.0 mmol / L, and laccase derived from Trametes was added to 100 U / mL. Reaction was performed by incubating the obtained sample solution at 50 ° C. for 30 minutes, and then cooling in ice water to stop the enzyme reaction. Table 17 shows the experimental conditions at this time. The fluorescence spectrum of the sample solution was measured with a spectrofluorometer, and the decomposition rate of the fluorescent brightener was calculated in the same manner as in Example 2. As a result, the degradation rate of the optical brightener was 94.2%.
[0061]
[Table 17]

[0062]
【The invention's effect】
Provided is a method for accelerating the degradation of a fluorescent whitening agent that may be adversely affected by the environment. The method of the present invention is expected to enable efficient degradation of the optical brightener using a composition containing a redox mediator, thereby promoting the purification of the environment.
[Brief description of the drawings]
BRIEF DESCRIPTION OF DRAWINGS FIG. 1 is a graph showing the dependence of a fluorescent whitening agent decomposition reaction using 1-hydroxybenzotriazole as a redox mediator on the amount of laccase added.

Claims

A method for decomposing an optical brightener in a sample, comprising the step of causing 3 ', 5'-dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone or acetovanillone to act on the optical brightener.

The fluorescent whitening agent, a stilbene group or an amino group or a sulfonic Motoma other has a diazo group, and absorb ultraviolet radiation, centered at 420 nm, and wherein the fluorescing blue or purple, wherein Item 2. The method according to Item 1.

The sample is selected from the group consisting of paper mill effluent, textile mill effluent, chemical mill effluent, general household effluent, seawater, liquid collected in the water environment, and slurry precipitated in the water environment. The method of any one of Claims 1-2.

The step of allowing the 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone or acetovanilone to act on the optical brightener is a concentration of 3 ′, 5′- greater than about 0.01 mmol / L to about 100 mmol / L. The method according to any one of claims 1 to 3, which is carried out in the presence of dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone or acetovanillone at a pH in the range of 2 to 12 and a temperature in the range of ambient temperature to 70 ° C.

The method of any one of Claims 1-4 which further includes the process of making a laccase act on a fluorescent whitening agent.

The method according to claim 5, wherein the step of causing the laccase to act on the optical brightener is performed after the step of causing the 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone or acetovanillone to act on the optical brightener. .

The method according to claim 5, wherein the step of causing the laccase to act on the optical brightener is performed simultaneously with the step of causing the 3 ', 5'-dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone or acetovanillone to act on the optical brightener. .

6. The step of causing the laccase to act on an optical brightener is performed before the step of causing the 3 ′, 5′-dimethoxy-4′-hydroxyacetophenone or acetovanillone to act on the optical brightener. Method.

The laccase is Trametes Virosa (Trametes villosa), Coriolus versicolor (Coriolus versicolor), Schizophyllum commune (Schizophyllum commune), Hiirotake (Pycnoporus coccineus), oyster mushroom (Pleurotus ostreatus), Bekkoutake (Fomitella fraxinea), Coriolus hirsutus (Coriolus hirsutus), Coprinus ( Coprinus cinereus), Milosecium verrucaria, Rhizoctonia solani, Citaridium thermofilm (Cytaridium thermophile) m), Miseri off Torah thermophila (Myceliophthora thermophila), Pyricularia oryzae (Pyricularia oryzae), Botrytis cinerea (Botrytis cinerea), Ebitake (Trachyderma tsunodae), Rigidoporasu Zonarisu (Rigidoporus zonalis), Aspergillus oryzae (Aspergillus oryzae), Aspergillus niger ( The method according to any one of claims 5 to 8, wherein the method is derived from a microorganism selected from the group consisting of Aspergillus niger and Aspergillus nidulans.

A composition for decomposing an optical brightener in a sample, comprising 3 ', 5'-dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone or acetovanillone, and a pH buffer.

The composition according to claim 10, further comprising a laccase.

The laccase is Trametes Virosa (Trametes villosa), Coriolus versicolor (Coriolus versicolor), Schizophyllum commune (Schizophyllum commune), Hiirotake (Pycnoporus coccineus), oyster mushroom (Pleurotus ostreatus), Bekkoutake (Fomitella fraxinea), Coriolus hirsutus (Coriolus hirsutus), Coprinus ( Coprinus cinereus), Mirocesium verrucaria, Rhizoctonia solani, Citaridium thermofilm, Riofutora thermophila (Myceliophthora thermophila), Pyricularia oryzae (Pyricularia oryzae), Botrytis cinerea (Botrytis cinerea), Ebitake (Trachyderma tsunodae), Rigidoporasu Zonarisu (Rigidoporus zonalis), Aspergillus oryzae (Aspergillus oryzae), Aspergillus niger (Aspergillus niger), and The composition according to claim 11, which is derived from a microorganism selected from the group consisting of Aspergillus nidulans.

The fluorescent whitening agent, a stilbene group or an amino group or a sulfonic Motoma other has a diazo group, and absorb ultraviolet radiation, centered at 420 nm, and wherein the fluorescing blue or purple, wherein Item 13. The composition according to any one of Items 10 to 12.