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JP4520176B2 - Resin-degrading microbial culture - Google Patents
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JP4520176B2 - Resin-degrading microbial culture - Google Patents

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Description

本発明は、樹脂分解微生物培養物に関する。さらに詳しくは、本発明は、樹脂、具体的には、ポリエステル化合物及び/又は、スチレンアクリル化合物を分解する微生物培養物、樹脂、具体的には、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解用組成物、並びに廃棄物中の金属又は色素の回収方法に関する。   The present invention relates to a resin-degrading microbial culture. More specifically, the present invention relates to a resin, specifically a microbial culture that decomposes a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, a resin, specifically a composition for decomposing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound. And a method for recovering metals or pigments in waste.

現在、コピー機やプリンターの使用の際に生じる樹脂類含有使用済みトナー等の廃棄物の処理には、焼却炉等での焼却処分が行われている。しかしながら、樹脂類の焼却による処理は、有用資源の回収が困難になる場合がある。また、樹脂類の焼却による処理は、高いエネルギーの発生に伴う焼却炉等の破損の発生、CO2の発生等の欠点がある。 Currently, incineration in an incinerator or the like is performed for the disposal of wastes such as resin-containing used toner generated when using a copier or printer. However, the treatment by incineration of resins may make it difficult to recover useful resources. Further, the treatment by incineration of resins has drawbacks such as the occurrence of breakage of an incinerator associated with the generation of high energy, the generation of CO 2 and the like.

そのため、ポリヒドロキシアルカノエート等の生分解性プラスチック樹脂も開発されている(特許文献1)。しかしながら、かかる生分解性プラスチック樹脂は、未だ、化学合成された樹脂(合成樹脂という)に比べ、高価であり、強度が劣る場合もあるという欠点がある。   Therefore, biodegradable plastic resins such as polyhydroxyalkanoates have also been developed (Patent Document 1). However, such a biodegradable plastic resin still has the disadvantages that it is expensive and sometimes inferior in strength compared to a chemically synthesized resin (referred to as a synthetic resin).

一方、合成樹脂を分解する微生物として、ポリカプロラクトンやポリ(3−ヒドロキシ酪酸−3−ヒドロキシ吉草酸)共重合体を含む廃棄物を分解処理しうる、シュードモナス(Pseudomonas)属細菌(例えば、特許文献2及び特許文献3を参照のこと)、脂肪族ポリエステルを分解しうる、嫌気性細菌バクテロイデス(Bacteroides)属細菌(特許文献4)、脂肪族ポリエステル樹脂を分解しうる、ムーコル(Mucor)属、フミコラ(Humicola)属、テルモミセス(Thermomyces)属、タラロミセス(Talaromyces)属、ケトミウム(Chaetomium)属、トルラ(Torula)属、スポロトリクム(Sporotrichum)属またはマルブランケア(Malbranchea)属に属する糸状菌(特許文献5)等が知られている。   On the other hand, Pseudomonas bacteria (for example, patent documents) capable of decomposing waste containing polycaprolactone or poly (3-hydroxybutyric acid-3-hydroxyvaleric acid) copolymer as microorganisms that degrade synthetic resins. 2 and Patent Document 3), anaerobic bacteria Bacteroides genus bacteria (Patent Document 4) capable of degrading aliphatic polyesters, Mucor genus and Humicola capable of degrading aliphatic polyester resins. (Humicola), Thermomyces, Talaromyces, Chaetomium, Torula, Sporotrichum or Malbranke hea) filamentous fungus (Patent Document 5), and the like belonging to the genus.

しかしながら、前記特許文献2〜4に開示された微生物では、ポリエステル樹脂の分解は、例えば、プラスチックシートを土中に埋設した後、数か月かかる場合があるという欠点がある。また、前記特許文献5に記載の微生物による脂肪族ポリエステル樹脂の分解は、高温条件下で行なわれることが前提とされるものである。また、これらの微生物による分解では、安定性の向上を図ることが困難な場合があり、分解可能な樹脂の種類が限定される場合がある。
国際公開第99/42527号パンフレット 特開平6−319532号公報 特開平6−319533号公報 特開平6−253865号公報 特開平10−117768号公報
However, in the microorganisms disclosed in Patent Documents 2 to 4, there is a drawback that the decomposition of the polyester resin may take several months after, for example, embedding a plastic sheet in the soil. In addition, the decomposition of the aliphatic polyester resin by the microorganism described in Patent Document 5 is assumed to be performed under high temperature conditions. In addition, degradation by these microorganisms may make it difficult to improve stability, and the types of resins that can be degraded may be limited.
WO99 / 42527 pamphlet JP-A-6-319532 JP-A-6-319533 JP-A-6-253865 JP-A-10-117768

本発明の1つの側面は、樹脂、具体的には、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を効率よく分解すること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を安定的に分解すること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解に基づくCO2の発生が実質的にないこと、少なくとも2種の微生物が互いに協調的に作用すること、少なくとも2種の微生物により、協調的にポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解すること、廃棄物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することにより、該廃棄物中の金属又は色素の回収を容易にすること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物で作成した型枠に材料を入れ成型後、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を微生物で分解することにより、目的の成型物の回収を容易にすること等の少なくとも1つを達成しうる、微生物培養物を提供することにある。 One aspect of the present invention is to efficiently decompose a resin, specifically, a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, to stably decompose a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, a polyester compound, and / or Alternatively, there is substantially no generation of CO 2 based on decomposition of the styrene acrylic compound, at least two microorganisms act cooperatively with each other, and the polyester compound and / or styrene acrylic are coordinated by at least two microorganisms. Decomposing compounds, facilitating recovery of metals or pigments in waste by decomposing polyester compounds and / or styrene acrylic compounds in waste, made with polyester compounds and / or styrene acrylic compounds Polyester after putting the material into the molded form By the compound and / or a styrene acrylic compound decomposes microorganisms, capable of achieving at least one of such to facilitate the recovery of the molded product of interest is to provide a microbial culture.

本発明の別の側面は、上記微生物培養物と同様の課題の少なくとも1つを解決しうる、分解用組成物を提供することにある。   Another aspect of the present invention is to provide a composition for degradation that can solve at least one of the same problems as those of the microorganism culture.

本発明の他の側面は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を効率よく分解すること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を安定的に分解すること、種々のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解すること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を安価に分解すること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を周辺環境に対し低影響で分解すること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解に基づくCO2の発生が実質的にないこと、廃棄物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することにより、該廃棄物中の金属又は色素の回収を容易にすること、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物で作成した型枠に材料を入れ成型後、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を微生物で分解することにより、目的の成型物の回収を容易にすること等の少なくとも1つを達成しうる、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解方法を提供することにある。 Another aspect of the present invention is to efficiently decompose a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, to stably decompose a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, various polyester compounds and / or styrene acrylic compounds. Decomposing, decomposing polyester compounds and / or styrene acrylic compounds at low cost, decomposing polyester compounds and / or styrene acrylic compounds with low impact on the surrounding environment, and decomposing polyester compounds and / or styrene acrylic compounds Substantially no generation of CO 2 , facilitating recovery of metals or pigments in the waste by decomposing the polyester and / or styrene acrylic compounds in the waste, polyester compounds and / or Or styrene After the material is put into a mold made of a copper compound and molded, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be decomposed by microorganisms to achieve at least one of making it easy to recover the desired molded product. Another object of the present invention is to provide a method for decomposing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound.

本発明のさらに他の側面は、廃棄物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することにより、該廃棄物中の金属又は色素の回収を容易にすること、廃棄物中の金属又は色素を安価に回収すること、廃棄物中の金属又は色素をポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を周辺環境に対し低影響で回収すること等の少なくとも1つを達成しうる、廃棄物中の金属又は色素の回収方法を提供することにある。   Still another aspect of the present invention is to facilitate recovery of a metal or a dye in the waste by decomposing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound in the waste, a metal or a dye in the waste The metal in the waste, or at least one of recovering the polyester or compound and / or the styrene acrylic compound with a low influence on the surrounding environment. It is to provide a method for recovering a dye.

本発明は、前記課題に鑑みてなされたものであり、即ち、本発明の要旨は、
〔1〕 ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する少なくとも2種の微生物を含有してなる微生物培養物であって、前記少なくとも2種の微生物
i)シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)、クラビバクター キシリ サブスピーシーズ シノドンティス(Clavibacter xyli subsp. cynodontis)及びアルカリジェネス スピーシーズ(Alcaligenes sp.)からなる微生物混合物であるか、又は
ii)シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)及びスフィンゴモナス パウシモビリス(Sphingomonas paucimobilis)からなる微生物混合物である、微生物培養物、
〔2〕 前記〔1〕記載の微生物培養物を含有してなる、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解用組成物、
〔3〕 ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む生産物若しくは廃棄物と、前記〔1〕記載の微生物培養物又は前記〔2〕記載の分解用組成物とを接触させることを特徴とする、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解方法、ならびに
〔4〕 (A)ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物と金属若しくは色素とを含む廃棄物と、(B)前記〔1〕記載の微生物培養物又は前記〔2〕記載の分解用組成物とを接触させることを特徴とする、廃棄物中の金属又は色素の回収方法、
に関する。
The present invention has been made in view of the above problems, that is, the gist of the present invention is as follows.
[1] A microorganism culture Do that contain at least two microorganisms exhibiting biodegradability of the polyester compound and / or a styrene acrylic compounds, at least two kinds of microorganisms
i) a microorganism consisting of Pseudomonas aeruginosa, Clavibacter xyli subsp. cynodontis and a microorganism consisting of Alkagenes sp. or a mixture of Alcaligenes sp.
ii) a microbial culture, which is a microbial mixture consisting of Pseudomonas aeruginosa and Sphingomonas paucimobilis,
[2] A composition for decomposing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, comprising the microorganism culture according to [1],
[3] A product or waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound is contacted with the microorganism culture according to [1] or the decomposition composition according to [2], Decomposition method of polyester compound and / or styrene acrylic compound, and [4] (A) waste containing polyester compound and / or styrene acrylic compound and metal or pigment, and (B) microbial culture according to [1] Or a method for recovering a metal or pigment in waste, which comprises contacting the composition for decomposition according to [2] above,
About.

本発明の微生物培養物及び分解用組成物は、樹脂、具体的には、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を効率よく安定的に分解することができるという優れた効果を奏する。また、本発明の微生物培養物及び分解用組成物によれば、前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解に基づくCO2の発生を実質的に抑制して、周辺環境に対し低影響で該ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することができるという優れた効果を奏する。さらに、本発明の微生物培養物及び分解用組成物によれば、少なくとも2種の微生物が互いに協調的に作用して安定的になり、協調的に、前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することができるという優れた効果を奏する。したがって、本発明の微生物培養物及び分解用組成物によれば、廃棄物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することにより、該廃棄物中の金属又は色素の回収を容易にすることができるという優れた効果を奏する。また、本発明の微生物培養物及び分解用組成物によれば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物で作成した型枠に材料を入れ成型後、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を微生物で分解することにより、目的の成型物の回収を容易にすることができる。 The microorganism culture and decomposition composition of the present invention have an excellent effect of being able to efficiently and stably decompose a resin, specifically, a polyester compound and / or a styrene acrylic compound. Further, according to the microorganism culture and decomposition composition of the present invention, the generation of CO 2 based on the decomposition of the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is substantially suppressed, and the influence on the surrounding environment is low. There is an excellent effect that the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be decomposed. Furthermore, according to the microorganism culture and degradation composition of the present invention, at least two types of microorganisms act in a coordinated manner to become stable, and the polyester compound and / or the styrene acrylic compound are degraded in a coordinated manner. There is an excellent effect of being able to. Therefore, according to the microorganism culture and decomposition composition of the present invention, it is possible to facilitate recovery of metals or pigments in the waste by decomposing the polyester compound and / or the styrene acrylic compound in the waste. There is an excellent effect of being able to. In addition, according to the microorganism culture and decomposition composition of the present invention, the material is put into a mold made of a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, and then the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is decomposed by a microorganism. Thus, it is possible to easily collect the target molded product.

本発明のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解方法によれば、種々のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を、効率よく、安定的に、安価に、分解に基づくCO2の発生が実質的に抑制して周辺環境に対し低影響で分解することができるという優れた効果を奏する。また、本発明の分解方法によれば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む廃棄物中の金属又は色素の回収を容易に行なうことができるという優れた効果を奏する。また、本発明の分解方法によれば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物で作成した型枠に材料を入れ成型後、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を微生物で分解することにより、目的の成型物の回収を容易にすることができるという優れた効果を奏する。 According to the method for decomposing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound of the present invention, various polyester compounds and / or styrene acrylic compounds can be effectively and stably produced at low cost, and the generation of CO 2 based on the decomposition is substantially reduced. It has an excellent effect of being able to be decomposed with a low influence on the surrounding environment. Moreover, according to the decomposition | disassembly method of this invention, there exists an outstanding effect that the collection | recovery of the metal or pigment | dye in the waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound can be performed easily. In addition, according to the decomposition method of the present invention, after molding the material into a mold made of a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is decomposed by microorganisms to obtain the desired molding. There is an excellent effect that the collection of the object can be facilitated.

本発明の廃棄物中の金属又は色素の回収方法によれば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む廃棄物中の金属又は色素を、容易に、安価に、周辺環境に対し低影響で回収することができ、かつ回収を容易に行なうことができるという優れた効果を奏する。   According to the method for recovering metal or pigment in waste of the present invention, the metal or pigment in waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound can be easily and inexpensively recovered with a low impact on the surrounding environment. It has an excellent effect that it can be collected and can be easily collected.

本発明の1つの側面は、樹脂、具体的には、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する少なくとも2種の微生物を含有した微生物培養物である。   One aspect of the present invention is a microbial culture containing at least two microorganisms that exhibit the biodegradability of resins, specifically polyester compounds and / or styrene acrylic compounds.

なお、本明細書においては、前記「微生物培養物」は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する自然界から分離された微生物群又は該微生物群と同等の生分解能を呈する混合微生物を包含する概念である。   In the present specification, the “microorganism culture” refers to a group of microorganisms separated from nature exhibiting the biodegradability of a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, or a mixed microorganism exhibiting a biodegradability equivalent to the microorganism group. It is a concept to include.

本発明の微生物培養物は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する少なくとも2種の微生物を含有することに1つの大きな特徴がある。   The microorganism culture of the present invention has one major characteristic in that it contains at least two kinds of microorganisms exhibiting the biodegradability of polyester compounds and / or styrene acrylic compounds.

本発明の微生物培養物は、1つの側面では、本発明者らが見出した少なくとも2種の微生物種を含む微生物群であり、かかる微生物群によれば、コピー機やプリンターのトナーに使用されている難分解性樹脂の生分解を可能にするという優れた性質を発現する。   In one aspect, the microorganism culture of the present invention is a group of microorganisms including at least two types of microorganisms found by the present inventors. According to such a group of microorganisms, the microorganism culture is used in toners for copying machines and printers. It exhibits an excellent property of enabling biodegradation of the hardly decomposable resin.

本発明の微生物培養物は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する少なくとも2種の微生物を含有しているため、前記微生物を単独で用いる場合に比べ、5週間培養時点において、少なくとも1.1倍、具体的には、1.1倍〜1.5倍の高いポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を発現する。さらに、本発明の微生物培養物においては、少なくとも2種の前記微生物が協調的に作用しうるため、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物に対して、安定的に、高い生分解能が維持されうるという優れた効果を発揮する。また、本発明の微生物培養物においては、微生物が安定的に維持される。したがって、本発明の微生物培養物によれば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する少なくとも2種の微生物が協調的に作用し、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を効率よく安定的に分解することができる。   Since the microorganism culture of the present invention contains at least two kinds of microorganisms exhibiting the biodegradability of a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, at least at the time of cultivation for 5 weeks, compared to the case of using the microorganism alone. 1.1 times, specifically, 1.1 times to 1.5 times higher polyester compound and / or styrene acrylic compound biodegradability. Furthermore, in the microorganism culture of the present invention, at least two kinds of the microorganisms can act cooperatively, so that high biodegradability can be stably maintained with respect to the polyester compound and / or the styrene acrylic compound. Exhibits excellent effects. Moreover, in the microorganism culture of this invention, microorganisms are stably maintained. Therefore, according to the microorganism culture of the present invention, at least two kinds of microorganisms exhibiting the biodegradability of the polyester compound and / or the styrene acrylic compound act cooperatively, and the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be efficiently and stably stabilized. Can be broken down into

また、本発明の微生物培養物は、前記微生物を含有しているため、前記樹脂の分解に基づくCO2の発生が、実質的に抑制される。また、本発明の微生物培養物によれば、前記微生物を少なくとも2種含有しているため、前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を協調的に分解し、それぞれの生育における栄養素として用いることができる。したがって、本発明の微生物培養物によれば、周辺環境に対し低影響で前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することができる。 In addition, since the microorganism culture of the present invention contains the microorganism, the generation of CO 2 based on the decomposition of the resin is substantially suppressed. Moreover, according to the microorganism culture of the present invention, since the microorganism contains at least two kinds, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be decomposed cooperatively and used as nutrients in each growth. . Therefore, according to the microorganism culture of the present invention, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be decomposed with a low influence on the surrounding environment.

本発明の微生物培養物により分解できるポリエステル化合物としては、アルキド樹脂、不飽和ポリエステル樹脂、熱可塑性ポリエステル樹脂等が挙げられ、具体的には、例えば、無水フタル酸、イソフタル酸、テトラクロロ無水フタル酸、ヘキサクロロエンドメチレンテトラヒドロフタル酸無水物、ジメチレンテトラヒドロフタル酸無水物、アジピン酸、セバチン酸等の飽和多塩基酸と、無水マレイン酸、フマル酸等の不飽和多塩基酸と、エチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、1,3−ブチレングリコール、2,3−ブチレングリコール、1,4−ブチレングリコール等の多価アルコールとを重縮合させて、不飽和アルキドを生成させ、スチレン、ビニルトルエン、ジアリルフタレート、メタクリル酸等の重合性単量体を添加し、架橋して硬化させて得られる不飽和ポリエステル樹脂;無水フタル酸、イソフタル酸、テトラクロロ無水フタル酸、ヘキサクロロエンドメチレンテトラヒドロフタル酸無水物、ジメチレンテトラヒドロフタル酸無水物、アジピン酸、セバチン酸等の飽和多塩基酸と、エチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、1,3−ブチレングリコール、2,3−ブチレングリコール、1,4−ブチレングリコール等の多価アルコールとを重縮合させて得られたアルキド樹脂;テレフタル酸等の化合物と、エチレングリコール、ブチレングリコール等の化合物とを縮合させて得られる熱可塑性ポリエステル等が挙げられる。   Examples of the polyester compound that can be decomposed by the microorganism culture of the present invention include alkyd resins, unsaturated polyester resins, thermoplastic polyester resins, and the like. Specifically, for example, phthalic anhydride, isophthalic acid, tetrachlorophthalic anhydride , Saturated polybasic acids such as hexachloroendomethylenetetrahydrophthalic anhydride, dimethylenetetrahydrophthalic anhydride, adipic acid and sebacic acid, unsaturated polybasic acids such as maleic anhydride and fumaric acid, ethylene glycol, propylene Polystyrene and polyhydric alcohols such as glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, 1,3-butylene glycol, 2,3-butylene glycol, and 1,4-butylene glycol are polycondensed to produce unsaturated alkyd, and styrene, vinyl Toluene, diallylphthale Unsaturated polyester resin obtained by adding a polymerizable monomer such as methacrylic acid, crosslinking and curing; phthalic anhydride, isophthalic acid, tetrachlorophthalic anhydride, hexachloroendomethylenetetrahydrophthalic anhydride, Saturated polybasic acids such as dimethylenetetrahydrophthalic anhydride, adipic acid and sebacic acid, ethylene glycol, propylene glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, 1,3-butylene glycol, 2,3-butylene glycol, 1,4 -Alkyd resins obtained by polycondensation with polyhydric alcohols such as butylene glycol; thermoplastic polyesters obtained by condensing compounds such as terephthalic acid and compounds such as ethylene glycol and butylene glycol.

具体的には、前記ポリエステル化合物としては、マレイン酸樹脂、ポリカーボネート(例えば、ポリ乳酸等)、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート等が挙げられる。   Specifically, examples of the polyester compound include maleic acid resin, polycarbonate (for example, polylactic acid), polyethylene terephthalate, polybutylene terephthalate, and the like.

本発明の微生物培養物により分解できるスチレンアクリル化合物としては、アクリル酸 n−ブチルエステル等のアクリル酸化合物とスチレンとを重縮合させて得られる化合物が挙げられる。
具体的には、前記スチレンアクリル化合物としては、特に限定されないが、アクリロニトリルアクリレートスチレン、スチレンブチルアクリレート等が挙げられる。
Examples of the styrene acrylic compound that can be decomposed by the microorganism culture of the present invention include compounds obtained by polycondensation of an acrylic acid compound such as acrylic acid n-butyl ester and styrene.
Specifically, the styrene acrylic compound is not particularly limited, and examples thereof include acrylonitrile acrylate styrene and styrene butyl acrylate.

なお、前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の平均分子量、重合度等は、本発明の微生物培養物による生分解能を呈する範囲であればよい。   In addition, the average molecular weight of the said polyester compound and / or a styrene acrylic compound, a polymerization degree, etc. should just be the range which exhibits the biodegradation by the microorganism culture of this invention.

他の側面では、本発明の微生物培養物は、シュードモナス属、スフィンゴモナス属、クラビバクター属及びアルカリジェネス属からなる群より選ばれた属に属する少なくとも2種のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する微生物を含有することを1つの大きな特徴とする。好ましくは、本発明の微生物培養物は、シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)(図5中、D−1及びR−1)、スフィンゴモナス パウシモビリス(Sphingomonas paucimobilis)(図5中、D−2)、アルカリジェネス スピーシーズ(Alcaligenes sp.)(図5中、R−3)及びクラビバクター キシリ サブスピーシーズ シノドンティス(Clavibacter xyli subsp. cynodontis)(図5中、R−2)若しくはそれらに進化系統樹上近い位置にある菌からなる群より選ばれた少なくとも2種の微生物を含有する。なお、これらの微生物は、本出願時点において、近畿大学農学部農芸化学科応用微生物研究室(郵便番号:631−8505 奈良県奈良市中町3327−204)に保存されており、必要に応じ、「独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターが行う特許出願に係る微生物の寄託等に関する規程」に準じ、分譲され、入手可能である。   In another aspect, the microorganism culture of the present invention comprises at least two polyester compounds and / or styrene acrylic compounds belonging to a genus selected from the group consisting of Pseudomonas, Sphingomonas, Krabibacter, and Alkaligenes. One major feature is the inclusion of microorganisms that exhibit biodegradability. Preferably, the microorganism culture of the present invention comprises Pseudomonas aeruginosa (D-1 and R-1 in FIG. 5), Sphingomonas paucimobilis (D-2 in FIG. 5), Alkaline Genes. Alcaligenes sp. (R-3 in FIG. 5) and Clavibacter xyli subsp. Cynodontis (R-2 in FIG. 5) or bacteria that are close to the evolutionary tree At least two microorganisms selected from the group consisting of: In addition, these microorganisms are preserve | saved at the time of this application in the Kinki University Faculty of Agriculture Department of Agricultural Chemistry Department of Applied Microbiology (Postal Code: 631-8505 Nakamachi, Nara City, 3327-204). According to the “Regulations for Deposit of Microorganisms Related to Patent Applications” filed by the Patent Organism Depositary of the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST).

前記シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa) D−1株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌の性質は、短桿菌、グラム陰性、運動性:有り、コロニーの特徴:蛍光物質生産の形態学的性質を有する。前記D−1株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌の生理学的性質は、生育pH範囲:6.0〜7.5、生育温度範囲:10〜40℃、オキシダーゼ活性 有、β−ガラクトシダーゼ活性 無、アルギニンジヒドロラーゼ活性 有、リジンデカルボキシラーゼ活性 有、オルニチンデカルボキシラーゼ活性 無、ウレアーゼ活性 無、トリプトファンデアミナーゼ活性 無、ゼラチナーゼ活性 無、クエン酸資化性 有、H2Sの産生 無、インドールの産生 無、アセトインの産生 有、グルコース資化性 有、D−マンニトール資化性 無、イノシトール資化性 無、D−ソルビトール資化性 無、L−ラムノース資化性 無、サッカロース資化性 無、D−メリビオース資化性 有、D−アミグダリン資化性 無、L−アラビノース資化性 無、である。 The properties of Pseudomonas aeruginosa D-1 strain or bacteria close to it in the evolutionary tree are: short bacillus, gram-negative, motility: yes, colony characteristics: morphological properties of fluorescent substance production Have. Physiological properties of the D-1 strain or the bacteria close to it in the evolutionary tree are: growth pH range: 6.0 to 7.5, growth temperature range: 10 to 40 ° C., oxidase activity, β-galactosidase activity Mu, arginine dihydrolase activity Yes, lysine decarboxylase activity Yes, Mu ornithine decarboxylase activity, urease activity Mu, Mu tryptophan deaminase activity, gelatinase activity Mu, citric Sansi resistance Yes, Mu production of H 2 S, the indole No production, Acetoin production Yes, Glucose assimilation Yes, D-mannitol assimilation No, Inositol assimilation No, D-sorbitol assimilation No, L-Rhamnose assimilation No, Saccharose assimilation No, D-melibiose assimilation Yes, D-amygdalin assimilation not available, L-arabinose assimilation not available.

前記スフィンゴモナス パウシモビリス(Sphingomonas paucimobilis) D−2株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌は、球菌、グラム陰性、運動性有り、コロニーの特徴:白色の形態学的性質を有する。前記D−2若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌の生理学的性質は、生育pH範囲:6.0〜7.8、生育温度範囲:20〜40℃、オキシダーゼ活性 無、β−ガラクトシダーゼ活性 有、アルギニンジヒドロラーゼ活性 無、リジンデカルボキシラーゼ活性 無、オルニチンデカルボキシラーゼ活性 無、ウレアーゼ活性 無、トリプトファンデアミナーゼ活性 無、ゼラチナーゼ活性 無、クエン酸資化性 無、H2Sの産生 無、インドールの産生 無、アセトインの産生 有、グルコース資化性 有、D−マンニトール資化性 無、イノシトール資化性 無、D−ソルビトール資化性 無、L−ラムノース資化性 無、サッカロース資化性 無、D−メリビオース資化性 無、D−アミグダリン資化性 無、L−アラビノース資化性 無、である。 The Sphingomonas paucimobilis strain D-2 or a bacterium that is close to the evolutionary tree has cocci, gram-negative, motility, and colony characteristics: white morphological properties. Physiological properties of the fungus in the position close to D-2 or its evolutionary tree are as follows: growth pH range: 6.0 to 7.8, growth temperature range: 20 to 40 ° C., no oxidase activity, β-galactosidase activity Yes, Arginine dihydrolase activity No, Lysine decarboxylase activity No, Ornithine decarboxylase activity No, urease activity No, tryptophan deaminase activity No, gelatinase activity No, citric acid assimilation No, H 2 S production No, indole production No, production of acetoin Yes, glucose assimilation Yes, D-mannitol assimilation No, inositol assimilation No, D-sorbitol assimilation No, L-rhamnose assimilation No, saccharose assimilation No, D -No meribiose assimilation, D-amygdalin assimilation, no L-arabinose assimilation

前記シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa) R−1株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌は、短桿菌、グラム陰性、運動性有り、コロニーの特徴:蛍光物質生産の形態学的性質を有する。前記R−1株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌の生理学的性質は、生育pH範囲:6.0〜7.5、生育温度範囲:10〜40℃、オキシダーゼ活性 有、β−ガラクトシダーゼ活性 無、アルギニンジヒドロラーゼ活性 有、リジンデカルボキシラーゼ活性 無、オルニチンデカルボキシラーゼ活性 無、ウレアーゼ活性 無、トリプトファンデアミナーゼ活性 無、ゼラチナーゼ活性 無、クエン酸資化性 有、H2Sの産生 無、インドールの産生 無、アセトインの産生 無、グルコース資化性 有、D−マンニトール資化性 無、イノシトール資化性 無、D−ソルビトール資化性 無、L−ラムノース資化性 無、サッカロース資化性 無、D−メリビオース資化性 無、D−アミグダリン資化性 無、L−アラビノース資化性 無、である。 The Pseudomonas aeruginosa R-1 strain or a bacterium that is close to the evolutionary tree is a short bacillus, gram-negative, motility, colony characteristics: morphological properties of fluorescent substance production. Physiological properties of the R-1 strain or a fungus close to it in the evolutionary tree are: growth pH range: 6.0 to 7.5, growth temperature range: 10 to 40 ° C., oxidase activity, β-galactosidase activity Mu, arginine dihydrolase activity Yes, Mu lysine decarboxylase activity, Mu ornithine decarboxylase activity, urease activity Mu, Mu tryptophan deaminase activity, gelatinase activity Mu, citric Sansi resistance Yes, H 2 Mu S production, the indole Production None, Acetoin Production None, Glucose Utilization Available, D-Mannitol Utilization None, Inositol Utilization None, D-Sorbitol Utilization None, L-Rhamnose Utilization None, Saccharose Utilization None, No D-melibiose assimilation, D-amygdalin assimilation, L-arabinose assimilation.

クラビバクター キシリ サブスピーシーズ シノドンティス(Clavibacter xyli subsp. cynodontis)R−2株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌は、短桿菌、グラム陽性、運動性有り、コロニーの特徴:中心褐色の形態学的性質を有する。前記R−2株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌の生理学的性質は、生育pH範囲:6.0〜7.5、生育温度範囲:20〜37℃、オキシダーゼ活性 無、β−ガラクトシダーゼ活性 有、アルギニンジヒドロラーゼ活性 有、リジンデカルボキシラーゼ活性 無、オルニチンデカルボキシラーゼ活性 無、ウレアーゼ活性 無、トリプトファンデアミナーゼ活性 無、ゼラチナーゼ活性 無、クエン酸資化性 無、H2Sの産生 無、インドールの産生 無、アセトインの産生 有、グルコース資化性 無、D−マンニトール資化性 無、イノシトール資化性 無、D−ソルビトール資化性 無、L−ラムノース資化性 無、サッカロース資化性 無、D−メリビオース資化性 無、D−アミグダリン資化性 無、L−アラビノース資化性 無、である。 Clavibacter xyli subsp. Cynodontis R-2 strain or bacteria close to it in the evolutionary tree are short bacillus, gram positive, motility, colony characteristics: central brown morphological Has properties. Physiological properties of the R-2 strain or bacteria close to the evolutionary tree are as follows: growth pH range: 6.0-7.5, growth temperature range: 20-37 ° C., no oxidase activity, β-galactosidase activity Yes, arginine dihydrolase activity Yes, Mu lysine decarboxylase activity, Mu ornithine decarboxylase activity, urease activity Mu, Mu tryptophan deaminase activity, gelatinase activity Mu, Mu citric Sansi resistance, Mu production of H 2 S, the indole Production None, Production of acetoin Yes, Glucose assimilation None, D-mannitol assimilation None, Inositol assimilation None, D-sorbitol assimilation None, L-Rhamnose assimilation None, Sucrose utilization No D-melibiose assimilation, D-amygdalin assimilation, L-arabinose assimilation.

アルカリジェネス スピーシーズ(Alcaligenes sp.) R−3若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌は、球菌、グラム陰性、運動性有り、コロニーの特徴:白色の形態学的性質を有する。前記R−3株若しくはそれに進化系統樹上近い位置にある菌の生理学的性質は、生育pH範囲:6.0〜7.5、生育温度範囲:20〜40℃、オキシダーゼ活性 無、β−ガラクトシダーゼ活性 無、アルギニンジヒドロラーゼ活性 有、リジンデカルボキシラーゼ活性 無、オルニチンデカルボキシラーゼ活性 無、ウレアーゼ活性 有、トリプトファンデアミナーゼ活性 有、ゼラチナーゼ活性 無、クエン酸資化性 有、H2Sの産生 無、インドールの産生 無、アセトインの産生 有、グルコース資化性 無、D−マンニトール資化性 無、イノシトール資化性 無、D−ソルビトール資化性 無、L−ラムノース資化性 無、サッカロース資化性 無、D−メリビオース資化性 無、D−アミグダリン資化性 無、L−アラビノース資化性 無、である。 Alkaline genes sp. Alkalinenes sp. R-3 or bacteria in a position close to the evolutionary tree have cocci, gram negative, motility, colony characteristics: white morphological properties. Physiological properties of the R-3 strain or bacteria close to the evolutionary tree are as follows: growth pH range: 6.0 to 7.5, growth temperature range: 20 to 40 ° C., no oxidase activity, β-galactosidase activity Mu, arginine dihydrolase activity Yes, Mu lysine decarboxylase activity, Mu ornithine decarboxylase activity, urease activity Yes, tryptophan deaminase activity Yes, gelatinase activity Mu, citric Sansi resistance Yes, H 2 Mu S production, the indole Production None, Production of acetoin Yes, Glucose assimilation None, D-mannitol assimilation None, Inositol assimilation None, D-sorbitol assimilation None, L-Rhamnose assimilation None, Sucrose utilization No D-melibiose assimilation, D-amygdalin assimilation, L-arabinose assimilation.

本発明の微生物培養物としては、具体的には、前記D−1株、D−2株、R−1株、R−2株及びR−3若しくはそれらに進化系統樹上近い位置にある菌からなる群より選ばれた少なくとも2種を含有した混合微生物、具体的には、AMOC001と命名・表示された混合微生物(かかる混合微生物は、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターによる寄託外微生物である);前記R−1株とR−2株とR−3株とを含有する微生物群;前記D−1株とD−2株とR−1株とR−2株とR−3株とを含有する微生物群等が挙げられる。安定的に高い生分解能を十分に発揮させる観点から、好ましくは、前記混合微生物AMOC001、前記R−1株とR−2株とR−3株とを含有する微生物群、前記D−1株とD−2株とR−1株とR−2株とR−3株とを含有する微生物群が望ましい。   Specifically, as the microorganism culture of the present invention, the D-1 strain, the D-2 strain, the R-1 strain, the R-2 strain, and the R-3 strain or the bacteria that are close to the evolved phylogenetic tree. A mixed microorganism containing at least two species selected from the group consisting of, specifically, a mixed microorganism named and displayed as AMOC001 (this mixed microorganism is deposited by the Patent Organism Depositary, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology) A microorganism group comprising the R-1 strain, the R-2 strain, and the R-3 strain; the D-1 strain, the D-2 strain, the R-1 strain, the R-2 strain, and the R -3 strains of microorganisms and the like. From the viewpoint of sufficiently exhibiting high biodegradability stably, preferably, the mixed microorganism AMOC001, the microorganism group containing the R-1 strain, the R-2 strain, and the R-3 strain, the D-1 strain, A microorganism group containing the D-2 strain, the R-1 strain, the R-2 strain, and the R-3 strain is desirable.

本発明の微生物培養物によれば、例えば、前記D−1、D−2、R−1、R−2及びR−3それぞれを単独で用いた場合に比べ、少なくとも約1.1倍、具体的には、約1.1〜1.5倍のポリエステル化合物生分解能を発現するという優れた効果を発揮する。   According to the microorganism culture of the present invention, for example, at least about 1.1 times, compared to the case where each of the D-1, D-2, R-1, R-2 and R-3 is used alone, Specifically, it exhibits an excellent effect of developing a polyester compound biodegradability of about 1.1 to 1.5 times.

本発明の微生物培養物によるポリエステル化合物及びスチレンアクリル化合物それぞれの生分解能は、例えば、
− 終濃度10g/lのポリエステル化合物又は終濃度15g/lのスチレンアクリル化合物を含むE培地〔組成:NH4Cl 0.25重量%、KH2PO4 0.1重量%、K2HPO4 0.05重量%、MgSO4・7H2O 0.05重量%、NaCl 0.2重量%、ZnCl2 0.001重量%、FeSO4・7H2O 0.001重量%、CaCl2 0.001重量%、pH7.0〕 5mlを入った試験管中、37℃で1週間、125ストローク/分の条件下で、微生物培養物を培養し、
− 得られた培養液5mlに内部標準として、ステアリルアルコールを終濃度 3.7mMとなるように添加し
− 得られた混合物 6mlに、ジクロロメタン5mlを添加して、培養液中のポリエステル化合物又はスチレンアクリル化合物及び該ポリエステル化合物に由来する分解産物又はスチレンアクリル化合物に由来する分解産物等を抽出し、
− 得られた培養液−ジクロロメタン二相系の上清を得、乾固させ、
− 得られた産物にジクロロメタン 5mlを添加して得られた試料のうち1μlを、TLCロッド、例えば、商品名:クロマロッド−SIII(100mm×0.5mm)上にスポットし、
− 得られたTLCロッドを、n−ヘキサン:トルエン=2:8(v/v)の展開溶液が入った展開槽中、40℃で7cm展開させ、乾燥後のロッドについて、内部標準が見えるまでFID分析を行ない、
− 前記ロッドを、ジクロロメタン:メタノール/95:5の展開溶液が入った展開槽中、10cm展開させ、乾燥後のロッドについて、FID分析を行ない、
樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として分解率を算出することにより評価されうる。なお、前記FID分析における分析条件としては、例えば、株式会社ヤトロン製、商品名:イアトロスキャンMk−6sを用いた場合、水素ガス 160/ml、空気 2.0l/分、スキャンスピード 30秒/スキャンの条件が挙げられる。
The biodegradability of each of the polyester compound and the styrene acrylic compound by the microorganism culture of the present invention is, for example,
-E medium containing a polyester compound with a final concentration of 10 g / l or a styrene acrylic compound with a final concentration of 15 g / l [Composition: NH 4 Cl 0.25 wt%, KH 2 PO 4 0.1 wt%, K 2 HPO 40 0.05% by weight, MgSO 4 .7H 2 O 0.05% by weight, NaCl 0.2% by weight, ZnCl 2 0.001% by weight, FeSO 4 .7H 2 O 0.001% by weight, CaCl 2 0.001% by weight PH 7.0] Incubate the microbial culture in a test tube containing 5 ml at 37 ° C. for 1 week at 125 strokes / minute,
-Stearyl alcohol was added as an internal standard to 5 ml of the obtained culture solution so that the final concentration was 3.7 mM.-5 ml of dichloromethane was added to 6 ml of the obtained mixture, and the polyester compound or styrene acrylic in the culture solution was added. Extracting a compound and a degradation product derived from the polyester compound or a degradation product derived from a styrene acrylic compound,
-Obtained the culture broth-dichloromethane two-phase supernatant, dried,
-1 μl of the sample obtained by adding 5 ml of dichloromethane to the resulting product is spotted on a TLC rod, eg trade name: Chromarod-SIII (100 mm × 0.5 mm),
-The obtained TLC rod was developed for 7 cm at 40 ° C in a developing tank containing a developing solution of n-hexane: toluene = 2: 8 (v / v) until the internal standard was visible on the rod after drying. Perform FID analysis,
-The rod is developed for 10 cm in a developing tank containing a dichloromethane: methanol / 95: 5 developing solution, and the dried rod is subjected to FID analysis.
It can be evaluated by calculating the decomposition rate when the peak area of the resin component is zero. As analysis conditions in the FID analysis, for example, when using a product name: Iatroscan Mk-6s manufactured by Yatron, hydrogen gas 160 / ml, air 2.0 l / min, scan speed 30 seconds / Scan conditions are listed.

本発明の微生物培養物は、例えば、土壌(例えば、近畿大学農学部構内土壌)やコンポストから、上記生分解能の評価手法により、選別されうる。   The microbial culture of the present invention can be selected from, for example, soil (for example, soil at the Kinki University Department of Agriculture) or compost by the biodegradation evaluation method described above.

なお、本発明の微生物培養物は、必要により、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解により生じた産物を捕捉若しくは資化しうる他の微生物をさらに含有してもよい。   The microorganism culture of the present invention may further contain other microorganisms that can capture or assimilate the products produced by the degradation of the polyester compound and / or the styrene acrylic compound, if necessary.

本発明の微生物培養物は、例えば、窒素源として、0.2〜2.0重量%、好ましくは、0.75〜1.25重量% NH4Cl、(NH42SO4、NH4NO3、(NH42CO、(NH42HPO4、(NH4)H2PO4等の少なくとも1つを含有し、炭素源/窒素源量比(C/N比)が、4〜100、好ましくは、6〜75、特に好ましくは、12〜50であり、pH5.0〜8.0、好ましくは、6.5〜7.5の培地、例えば、前記E培地、F培地〔組成:NH4Cl 1重量%、KH2PO4 0.1重量%、K2HPO4 0.05重量%、MgSO4・7H2O 0.05重量%、NaCl 0.2重量%、ZnCl2 0.001重量%、FeSO4・7H2O 0.001重量%、CaCl2 0.001重量%、pH7.0〕等により、25〜45℃、好ましくは、33〜40℃の条件下に、必要により、90〜140ストローク/分、好ましくは110〜130ストローク/分培養することにより維持されうる。なお、前記培地は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能をより安定的に十分に発揮させる観点から、任意に、終濃度0.01〜0.5重量%、好ましくは、0.1重量% 酵母エキスを含有していてもよい。 The microorganism culture of the present invention is, for example, 0.2 to 2.0% by weight, preferably 0.75 to 1.25% by weight, NH 4 Cl, (NH 4 ) 2 SO 4 , NH 4 as a nitrogen source. It contains at least one of NO 3 , (NH 4 ) 2 CO, (NH 4 ) 2 HPO 4 , (NH 4 ) H 2 PO 4 , and the carbon source / nitrogen source amount ratio (C / N ratio) is 4 to 100, preferably 6 to 75, particularly preferably 12 to 50, pH 5.0 to 8.0, preferably 6.5 to 7.5, for example, E medium, F medium [Composition: NH 4 Cl 1 wt%, KH 2 PO 4 0.1 wt%, K 2 HPO 4 0.05 wt%, MgSO 4 .7H 2 O 0.05 wt%, NaCl 0.2 wt%, ZnCl 2 0.001 wt%, FeSO 4 · 7H 2 O 0.001 wt%, CaCl 2 0.001 wt%, pH 7.0 Or the like by, 25 to 45 ° C., preferably, under conditions of 33 to 40 ° C., if necessary, 90 to 140 strokes / min, preferably may be maintained by 110-130 strokes / min incubation. In addition, the said culture medium is arbitrarily made into a final concentration of 0.01 to 0.5% by weight, preferably 0.1% from the viewpoint of more stably and sufficiently exhibiting the biodegradability of the polyester compound and / or the styrene acrylic compound. Weight% Yeast extract may be contained.

本発明の微生物培養物によれば、廃棄物中の樹脂、具体的には、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することができる。したがって、本発明の微生物培養物によれば、廃棄物中に含まれる金属又は色素の回収の容易化を図ることができる。   According to the microorganism culture of the present invention, the resin in the waste, specifically, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be decomposed. Therefore, according to the microorganism culture of the present invention, it is possible to facilitate the recovery of the metal or pigment contained in the waste.

また、本発明の微生物培養物によれば、樹脂で作成した型枠に材料を入れ成型後、樹脂を微生物で分解することにより、目的の成型物の回収を容易にすることができる。   In addition, according to the microorganism culture of the present invention, the material can be easily recovered by decomposing the resin with microorganisms after putting the material into a mold made of resin and molding.

本発明の別の側面は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解用組成物である。   Another aspect of the present invention is a composition for decomposing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound.

本発明の分解用組成物は、本発明の微生物培養物を含有することに1つの大きな特徴がある。したがって、本発明の分解用組成物によれば、種々のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を効率よく、安定的に、安価に、周辺環境に対し低影響で分解することができる。   The degradation composition of the present invention has one major feature in that it contains the microorganism culture of the present invention. Therefore, according to the composition for decomposition of the present invention, various polyester compounds and / or styrene acrylic compounds can be decomposed efficiently, stably and inexpensively with a low influence on the surrounding environment.

また、本発明の分解用組成物によれば、本発明の微生物培養物を含有しているため、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解に用いた場合、分解に基づくCO2の発生が実質的に抑制される。また、本発明の分解用組成物によれば、本発明の微生物培養物を含有しているため、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解に用いた場合、前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解し、生育における栄養源として用いることができる。したがって、本発明の分解用組成物によれば、周辺環境に対し低影響でポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することができる。 In addition, since the decomposition composition of the present invention contains the microbial culture of the present invention, when used for the decomposition of a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, the generation of CO 2 due to the decomposition is substantially reduced. Is suppressed. In addition, according to the decomposition composition of the present invention, since the microorganism culture of the present invention is contained, when the polyester compound and / or styrene acrylic compound is used for decomposition, the polyester compound and / or styrene acrylic compound is used. Can be decomposed and used as a nutrient source for growth. Therefore, according to the decomposition composition of the present invention, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be decomposed with a low influence on the surrounding environment.

本発明の分解用組成物には、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する微生物を安定に維持し、生存せしめる種々の試薬等を含有していてもよい。   The decomposing composition of the present invention may contain various reagents and the like that stably maintain and survive microorganisms exhibiting the biodegradability of the polyester compound and / or styrene acrylic compound.

前記微生物を安定に維持し、生存せしめる試薬としては、例えば、前記微生物の生育及び培養に適した培地、前記微生物を固定化又は保持しうる担体等が挙げられる。   Examples of the reagent that stably maintains the microorganism and allows it to survive include a medium suitable for the growth and culture of the microorganism, a carrier that can immobilize or hold the microorganism, and the like.

前記培地における窒素源としては、0.2〜2.0重量%、好ましくは、0.75〜1.25重量% NH4Cl、(NH42SO4、NH4NO3、(NH42CO、(NH42HPO4、(NH4)H2PO4等が挙げられ、炭素源/窒素源量比(C/N比)が、5〜100、好ましくは、10〜70、特に好ましくは、12〜50であることが望ましい。 The nitrogen source in the medium is 0.2 to 2.0% by weight, preferably 0.75 to 1.25% by weight NH 4 Cl, (NH 4 ) 2 SO 4 , NH 4 NO 3 , (NH 4 ) 2 CO, (NH 4 ) 2 HPO 4 , (NH 4 ) H 2 PO 4, etc., and the carbon source / nitrogen source amount ratio (C / N ratio) is 5 to 100, preferably 10 to 70 Especially preferably, it is desirable that it is 12-50.

具体的には、例えば、前記E培地、F培地〔組成:NH4Cl 1重量%、KH2PO4 0.1重量%、K2HPO4 0.05重量%、MgSO4・7H2O 0.05重量%、NaCl 0.2重量%、ZnCl2 0.001重量%、FeSO4・7H2O 0.001重量%、CaCl2 0.001重量%、pH7.0〕等が挙げられる。なお、前記培地は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能をより安定的に十分に発揮させる観点から、任意に、終濃度0.01〜0.5重量%、好ましくは、0.1重量% 酵母エキスを含有していてもよい。 Specifically, for example, the E medium, F medium [composition: NH 4 Cl 1 wt%, KH 2 PO 4 0.1 wt%, K 2 HPO 4 0.05 wt%, MgSO 4 .7H 2 O 0 0.05 wt%, NaCl 0.2 wt%, ZnCl 2 0.001 wt%, FeSO 4 .7H 2 O 0.001 wt%, CaCl 2 0.001 wt%, pH 7.0] and the like. In addition, the said culture medium is arbitrarily made into a final concentration of 0.01 to 0.5% by weight, preferably 0.1% from the viewpoint of more stably and sufficiently exhibiting the biodegradability of the polyester compound and / or the styrene acrylic compound. Weight% Yeast extract may be contained.

前記微生物を固定化又は保持しうる担体としては、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する微生物の生育を安定的に維持し、該生分解能を阻害しない担体であればよく、不溶性担体、例えば、多孔質担体、不織布,活性炭等が挙げられる。本発明の分解用組成物においては、本発明の微生物培養物を前記不溶性担体の表面に固定化してもよく、内部に固定化若しくは保持させてもよい。本発明の微生物培養物を、かかる担体の内部に固定化若しくは保持させる場合、前記微生物の生育に必要な各種栄養素、分解対象のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物等の授受が可能な担体であることが望ましい。   The carrier that can immobilize or hold the microorganism may be any carrier that can stably maintain the growth of microorganisms exhibiting the biodegradability of the polyester compound and / or styrene acrylic compound and does not inhibit the biodegradation. Examples thereof include a porous carrier, a nonwoven fabric, activated carbon and the like. In the composition for decomposition of the present invention, the microorganism culture of the present invention may be immobilized on the surface of the insoluble carrier, or may be immobilized or held inside. When the microorganism culture of the present invention is immobilized or held inside such a carrier, it is a carrier capable of giving and receiving various nutrients necessary for the growth of the microorganism, a polyester compound to be decomposed, and / or a styrene acrylic compound, etc. It is desirable.

本発明の分解用組成物における微生物の細胞数は、特に限定されないが、例えば、担体の種類、取り扱い方法等に応じて適宜設定されうる。   The number of microbial cells in the decomposing composition of the present invention is not particularly limited, and may be appropriately set according to, for example, the type of carrier, handling method, and the like.

なお、本発明の分解用組成物は、必要により、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解により生じた産物を捕捉しうる化合物、試薬、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解により生じた産物を捕捉若しくは資化しうる他の微生物をさらに含有してもよい。   The decomposition composition of the present invention is a compound, reagent, polyester compound and / or product produced by decomposition of a styrene acrylic compound capable of capturing a product produced by decomposition of a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, if necessary. It may further contain other microorganisms that can capture or assimilate.

本発明の分解用組成物によれば、廃棄物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することができる。したがって、本発明の分解用組成物は、廃棄物中に含まれる金属又は色素の回収の容易化にも用いることができる。   According to the decomposition composition of the present invention, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound in the waste can be decomposed. Therefore, the decomposition composition of the present invention can also be used for facilitating recovery of metals or pigments contained in waste.

本発明の分解用組成物によれば、樹脂で作成した型枠に材料を入れ成型後、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を微生物で分解することによる、目的の成型物の回収の容易化にも用いることができる。   According to the composition for decomposition of the present invention, after putting a material into a mold made of resin and molding, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is decomposed by microorganisms to facilitate recovery of the target molded product. Can also be used.

本発明の他の側面は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む生産物若しくは廃棄物と、本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物とを接触させることを特徴とする、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解方法である。   Another aspect of the present invention is a polyester characterized by contacting a product or waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound with the microbial culture of the present invention or the decomposition composition of the present invention. This is a method for decomposing a compound and / or a styrene acrylic compound.

本発明の分解方法は、本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物が用いられていることに1つの大きな特徴がある。したがって、本発明の分解方法によれば、種々のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を、効率よく、安定的に、安価に分解することができる。   The degradation method of the present invention has one major feature in that the microorganism culture of the present invention or the degradation composition of the present invention is used. Therefore, according to the decomposition method of the present invention, various polyester compounds and / or styrene acrylic compounds can be decomposed efficiently, stably and inexpensively.

また、本発明の分解方法は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む生産物若しくは廃棄物と、本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物とを接触させることに1つの大きな特徴がある。したがって、本発明の分解方法によれば、分解に基づくCO2の発生が実質的に抑制され、前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物が分解された際に生じる産物が、本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物中に含まれる微生物の生育における栄養素として用いられうるため、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を周辺環境に対し低影響で分解することができる。 In addition, the degradation method of the present invention has one major feature in that the product or waste containing the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is brought into contact with the microbial culture of the present invention or the degradation composition of the present invention. There is. Therefore, according to the decomposition method of the present invention, the generation of CO 2 due to decomposition is substantially suppressed, and the product produced when the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is decomposed is the microbial culture of the present invention. Or since it can be used as a nutrient in the growth of microorganisms contained in the composition for decomposition of the present invention, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be decomposed with a low influence on the surrounding environment.

前記生産物としては、成型用の型枠等が挙げられる。   Examples of the product include a mold for molding.

前記廃棄物としては、例えば、トナー、缶ラミネート、電子機器類の絶縁体、家電・自動車の廃棄物、産業廃棄物等が挙げられる。   Examples of the waste include toners, can laminates, insulators for electronic devices, home appliance / car waste, industrial waste, and the like.

本発明の分解方法において、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む生産物若しくは廃棄物と、本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物との接触は、例えば、
1) 本発明の微生物培養物を、該生産物若しくは廃棄物の存在下に培養すること、
2) 本発明の分解用組成物を、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する微生物の生育に適した条件下、該生産物若しくは廃棄物に散布若しくは混合し、維持すること
等が挙げられる。
In the decomposition method of the present invention, the contact between the product or waste containing the polyester compound and / or the styrene acrylic compound and the microorganism culture of the present invention or the decomposition composition of the present invention is, for example,
1) culturing the microorganism culture of the present invention in the presence of the product or waste,
2) The composition for decomposition of the present invention may be sprayed or mixed and maintained on the product or waste under conditions suitable for the growth of microorganisms exhibiting the biodegradability of polyester compounds and / or styrene acrylic compounds. Can be mentioned.

前記廃棄物は、必要に応じ、適切な手段で粉砕して粉末状にしてもよい。   If necessary, the waste may be pulverized by an appropriate means into a powder form.

前記「ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する微生物の生育に適した条件」は、本発明の微生物培養物の維持に適用される条件と同様であればよい。   The “conditions suitable for the growth of microorganisms exhibiting the biodegradability of the polyester compound and / or styrene acrylic compound” may be the same as the conditions applied to the maintenance of the microorganism culture of the present invention.

また、本発明の分解方法によれば、成型加工等の際に利用した場合、例えば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む産物(樹脂)で作成した型枠に材料を入れ、成型させた場合、該産物(樹脂)と本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物とを接触させて、該産物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分解することにより、目的の成型物の回収を容易にすることができる。   Further, according to the decomposition method of the present invention, when used in molding processing, the material is put into a mold made of a product (resin) containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound and molded. In this case, the product (resin) and the microorganism culture of the present invention or the decomposition composition of the present invention are brought into contact with each other to decompose the polyester compound and / or the styrene acrylic compound in the product, thereby obtaining the desired molded product. Can be easily recovered.

本発明の分解方法によれば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む廃棄物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を効率よく分解するため、該廃棄物中の金属、色素等の他の成分が残渣となる。したがって、本発明の分解方法は、前記廃棄物中の金属、色素等の回収の容易化を図ることができる。   According to the decomposition method of the present invention, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound in the waste containing the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is efficiently decomposed. The component becomes a residue. Therefore, the decomposition method of the present invention can facilitate recovery of metals, pigments and the like in the waste.

本発明のさらに他の側面は、(A)ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物と金属若しくは色素とを含む廃棄物と、(B)本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物とを接触させることを特徴とする、廃棄物中の金属又は色素の回収方法である。   Still another aspect of the present invention provides (A) a waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound and a metal or a pigment, and (B) a microorganism culture of the present invention or a decomposition composition of the present invention. It is a method for recovering metals or pigments in waste, which is characterized by contacting them.

本発明の回収方法は、(B)本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物が用いられていることに1つの大きな特徴がある。したがって、本発明の回収方法によれば、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む廃棄物中の金属又は色素を、容易に、安価に回収することができる。   The recovery method of the present invention has one major feature in that (B) the microorganism culture of the present invention or the decomposition composition of the present invention is used. Therefore, according to the recovery method of the present invention, the metal or the pigment in the waste containing the polyester compound and / or the styrene acrylic compound can be easily and inexpensively recovered.

また、本発明の回収方法は、(A)ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物と金属若しくは色素とを含む廃棄物と、(B)本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物とを接触させることに1つの大きな特徴がある。したがって、本発明の回収方法によれば、廃棄物中のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解に基づくCO2の発生が実質的に抑制され、前記ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物が分解された際に生じる産物が、本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物中に含まれる微生物の生育における栄養素として用いられうるため、廃棄物中の金属又は色素を周辺環境に対し低影響で回収することができる。 Further, the recovery method of the present invention comprises (A) a waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound and a metal or a pigment, and (B) the microorganism culture of the present invention or the decomposition composition of the present invention. There is one major feature in contacting. Therefore, according to the recovery method of the present invention, the generation of CO 2 based on the decomposition of the polyester compound and / or the styrene acrylic compound in the waste is substantially suppressed, and the polyester compound and / or the styrene acrylic compound is decomposed. The products produced in the process can be used as nutrients in the growth of microorganisms contained in the microorganism culture of the present invention or the decomposition composition of the present invention, so that the metal or pigment in the waste has a low impact on the surrounding environment. Can be recovered.

(A)ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物と金属若しくは色素とを含む廃棄物と、(B)本発明の微生物培養物又は本発明の分解用組成物との接触は、本発明の分解方法と同様である。   The contact between (A) a waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound and a metal or a pigment, and (B) the microorganism culture of the present invention or the decomposition composition of the present invention is the same as the decomposition method of the present invention. It is the same.

ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を分化した後の産物は、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物から構成される成分が実質的に除去されているため、回収対象の金属又は色素を、慣用の分画法、酸アルカリ処理、沈殿、有機溶媒抽出、遠心分離、各種クロマトグラフィー等で容易に回収することができる。   In the product after differentiation of the polyester compound and / or styrene acrylic compound, the components composed of the polyester compound and / or styrene acrylic compound are substantially removed. It can be easily recovered by fractionation, acid-alkali treatment, precipitation, organic solvent extraction, centrifugation, various chromatography, and the like.

以下、本発明を実施例により説明するが、本発明は、かかる実施例により何ら限定されるものではない。   EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention, this invention is not limited at all by this Example.

自然界から、土壌、コンポスト、汚泥、海水等をサンプリングした。なお、固体試料には、生理食塩水に懸濁し、超音波処理で均一に分散させ、得られた試料を以下の操作に用いた。また、海水等の液体試料は、そのまま以下の操作に用いた。   Soil, compost, sludge, seawater, etc. were sampled from nature. The solid sample was suspended in physiological saline and uniformly dispersed by ultrasonic treatment, and the obtained sample was used for the following operations. Moreover, liquid samples, such as seawater, were used for the following operations as they were.

サンプリングされた試料について、トナーインクに使用されている微粉末樹脂であるポリエステル化合物及びスチレンアクリル化合物それぞれを分解する活性を指標として、以下のようにスクリーニングした。   The sampled samples were screened as follows using the activity of decomposing each of the polyester compound and the styrene acrylic compound, which are fine powder resins used in the toner ink, as indices.

トナーインク用微粉末ポリエステル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕及びトナーインク用微粉末スチレンアクリル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕を、ジクロロメタンに溶解させ、試験管に分注し、風乾させた。その後、ポリエステル化合物の終濃度が、10g/l、スチレンアクリル化合物の終濃度が、15g/lとなるように、E培地〔組成:NH4Cl 0.25重量%、KH2PO4 0.1重量%、K2HPO4 0.05重量%、MgSO4・7H2O 0.05重量%、NaCl 0.2重量%、ZnCl2 0.001重量%、FeSO4・7H2O 0.001重量%、CaCl2 0.001重量%、pH7.0〕 5mlを前記試験管に添加した。その後、前記培地の入った試験管を121℃で20分間高圧滅菌した。 Fine powder polyester resin for toner ink (supplied by Mikasa Sangyo Co., Ltd.) and fine powder styrene acrylic resin for toner ink (supplied by Mikasa Sangyo Co., Ltd.) were dissolved in dichloromethane, dispensed into test tubes, and air-dried. Thereafter, the E medium [composition: NH 4 Cl 0.25 wt%, KH 2 PO 4 0.1 so that the final concentration of the polyester compound is 10 g / l and the final concentration of the styrene acrylic compound is 15 g / l. Wt%, K 2 HPO 4 0.05 wt%, MgSO 4 .7H 2 O 0.05 wt%, NaCl 0.2 wt%, ZnCl 2 0.001 wt%, FeSO 4 · 7H 2 O 0.001 wt% %, CaCl 2 0.001 wt%, pH 7.0] was added to the test tube. Thereafter, the test tube containing the medium was autoclaved at 121 ° C. for 20 minutes.

商品名:ハイドロボール(ヨンキッド社製,オランダ) 0.2gを、前記培地に添加し、ついで、前記試料 500μlを添加し、37℃で1週間、125ストローク/分の条件下で集積培養を行なった。   Product name: Hydroball (Yonkid, Netherlands) 0.2 g was added to the medium, and then 500 μl of the sample was added, and the culture was concentrated at 37 ° C. for 1 week at 125 strokes / minute. It was.

培養後、試験管壁に付着していたポリエステル化合物又はスチレンアクリル化合物が培地中に分散し、前記ポリエステル化合物を含有したE培地又はスチレンアクリル化合物を含有したE培地が白濁することを、試料中にポリエステル化合物を分解する微生物群又はスチレンアクリル化合物を分解する微生物群が存在することの指標として、微生物の生育が良好である集積培養液を選抜した。   After the culture, the polyester compound or styrene acrylic compound adhering to the test tube wall is dispersed in the medium, and the E medium containing the polyester compound or the E medium containing the styrene acrylic compound becomes cloudy in the sample. As an indicator of the presence of a microorganism group that degrades the polyester compound or a microorganism group that degrades the styrene acrylic compound, an enriched culture solution with good growth of microorganisms was selected.

その後、集積培養液の一部を、商品名:ハイドロボール〔ヨンキッド社製〕 0.2gの存在下、37℃で125ストローク/分の条件で、前記ポリエステル化合物を含有したE培地及び/又はスチレンアクリル化合物を含有したE培地 5mlを用いて、1週間培養を行なった。得られた培養液を観察した結果を図1に示す。   Thereafter, a part of the enriched culture broth was used as an E medium and / or styrene containing the polyester compound under the condition of 125 g / min at 37 ° C. in the presence of 0.2 g of a trade name: Hydroball (manufactured by Yonkid). Culture was performed for 1 week using 5 ml of E medium containing an acrylic compound. The result of observing the obtained culture solution is shown in FIG.

その結果、図1のパネル(A)及びパネル(B)に示されるように、ポリエステル化合物を分解しうる微生物群及びスチレンアクリル化合物を分解しうる2種の微生物群〔微生物群A(コンポスト由来)及び微生物群F(AMOC001)(近畿大学農学部構内土壌由来)〕が得られた。   As a result, as shown in the panel (A) and panel (B) of FIG. 1, a microorganism group capable of degrading a polyester compound and two microorganism groups capable of degrading a styrene acrylic compound [microorganism group A (derived from compost) And microorganism group F (AMOC001) (derived from the soil on the campus of the Faculty of Agriculture, Kinki University)].

前記実施例1で得られた各微生物群A及び微生物群Fそれぞれについて、継代回数によるポリエステル化合物又はスチレンアクリル化合物の分解率への影響を調べた。   For each microorganism group A and microorganism group F obtained in Example 1, the influence of the number of passages on the degradation rate of the polyester compound or styrene acrylic compound was examined.

前記実施例1と同様に、商品名:ハイドロボール〔ヨンキッド社製〕0.2gと終濃度10g/l ポリエステル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕又は終濃度15g/l スチレンアクリル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕とを含むE培地 5ml中、37℃で125ストローク/分の条件で微生物群Aを培養した。   As in Example 1, trade name: Hydroball [manufactured by Yonkid] 0.2 g and final concentration 10 g / l polyester resin [supplied by Mikasa Sangyo Co., Ltd.] or final concentration 15 g / l styrene acrylic resin [Mikasa Sangyo Co., Ltd.] The microorganism group A was cultured under conditions of 125 strokes / minute at 37 ° C. in 5 ml of E medium containing

商品名:ハイドロボール〔ヨンキッド社製〕0.2gと終濃度10g/l ポリエステル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕とを含むE培地 5ml中、37℃で125ストローク/分の条件で微生物群Aを4本(5ml/本)培養した。   Product name: Hydroball (manufactured by Yonkid) 0.2 g and final concentration 10 g / l Polyester resin [supplied by Mikasa Sangyo Co., Ltd.] E medium 5 ml Four (5 ml / tube) were cultured.

1週間毎に継代培養を行ない、継代培養を行なう毎に、培養液4本から3本を定量用試料としてサンプリングした。   Subculture was performed every week, and 4 to 3 culture solutions were sampled as quantitative samples each time subculture was performed.

得られた培養液5mlに内部標準として、ステアリルアルコール(ナカライテスク社製)を終濃度 3.7mMとなるように添加した。得られた混合物 6mlに、ジクロロメタン5mlを添加して、培養液中のポリエステル化合物又はスチレンアクリル化合物及び該ポリエステル化合物に由来する分解産物又はスチレンアクリル化合物に由来する分解産物等を抽出した。得られた培養液−ジクロロメタン二相系を、2385×g、10分間遠心分離して上清を得た。ジクロロメタンで抽出する操作をもう一度繰り返してから抽出物をあわせた。その後得られた抽出物を、エバポレーターを用いて、乾固させた。   As an internal standard, stearyl alcohol (manufactured by Nacalai Tesque) was added to 5 ml of the obtained culture broth to a final concentration of 3.7 mM. To 6 ml of the obtained mixture, 5 ml of dichloromethane was added to extract a polyester compound or a styrene acrylic compound, a degradation product derived from the polyester compound, a degradation product derived from the styrene acrylic compound, and the like in the culture solution. The obtained culture broth-dichloromethane two-phase system was centrifuged at 2385 × g for 10 minutes to obtain a supernatant. The extraction with dichloromethane was repeated once more, and the extracts were combined. Thereafter, the obtained extract was dried using an evaporator.

得られた産物にジクロロメタン 5mlを添加した。得られた試料について、以下のように、株式会社ヤトロン製、商品名:イアトロスキャンMk−6sを用いた薄層クロマトグラフィー/水素炎イオン化検出器法〔以下、TLC/FID〕で分析した。なお、分析条件は、水素ガス 160/ml、空気 2.0l/分、スキャンスピード 30秒/スキャンとした。   To the resulting product was added 5 ml of dichloromethane. The obtained sample was analyzed by a thin layer chromatography / hydrogen flame ionization detector method (hereinafter referred to as TLC / FID) using a product name: Iatroscan Mk-6s manufactured by Yatron Co., Ltd. as follows. The analysis conditions were hydrogen gas 160 / ml, air 2.0 l / min, and scan speed 30 seconds / scan.

前記試料1μlをクロマロッド−SIII(100mm×0.5mm)上にスポットし、恒湿槽内で10分間放置した。その後、ロッドを、n−ヘキサン:トルエン=2:8(v/v)の展開溶液が入った展開槽内に入れ、40℃で7cm展開させた。ついで、溶媒を除去した後、ロッドを乾燥させた。内部標準が見えるまでFID分析を行なった後、ロッドを恒湿槽内で10分間放置した。その後、ロッドを、ジクロロメタン:メタノール/95:5の展開溶液が入った展開槽内に入れ、10cm展開させた。展開後、ロッドを室温で乾燥させ、FID分析を行なった。結果を図2に示す。図2中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。 1 μl of the sample was spotted on Chromarod-SIII (100 mm × 0.5 mm) and left in a constant humidity bath for 10 minutes. Thereafter, the rod was placed in a developing tank containing a developing solution of n-hexane: toluene = 2: 8 (v / v) and developed at 40 ° C. for 7 cm. Then, after removing the solvent, the rod was dried. After performing the FID analysis until the internal standard was seen, the rod was left in a constant humidity bath for 10 minutes. Thereafter, the rod was placed in a developing tank containing a developing solution of dichloromethane: methanol / 95: 5 and developed for 10 cm. After development, the rod was dried at room temperature and subjected to FID analysis. The results are shown in FIG. In FIG. 2, the decomposition rate is 100% when the peak area of the resin component is zero.

その結果、図2に示されるように、微生物群A(図中、丸印)及び微生物群F(図中、三角印)は、12代以上継代培養すると、継代培養による影響を実質的に受けず、安定して約70〜80%の分解率でポリエステルを分解することがわかる。   As a result, as shown in FIG. 2, the microorganism group A (circle in the figure) and the microorganism group F (triangle in the figure) are substantially affected by subculture when subcultured for 12 generations or more. It can be seen that the polyester is stably decomposed at a decomposition rate of about 70 to 80%.

一方、図2に示されるように、微生物群A(図中、四角印)は、3回の継代培養まで、スチレンアクリルを分解することがわかる。   On the other hand, as shown in FIG. 2, it can be seen that the microorganism group A (indicated by squares in the figure) decomposes styrene acrylic until the third subculture.

微生物群Aについて、スチレンアクリルの分解に適した培養条件を検討した。   For microorganism group A, the culture conditions suitable for the degradation of styrene acrylic were examined.

トナーインク用微粉末スチレンアクリル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕を、ジクロロメタンに溶解させ、試験管に分注し、風乾させた。その後、スチレンアクリル化合物の終濃度が、15g/lとなるように、F培地〔組成:NH4Cl 1重量%、KH2PO4 0.1重量%、K2HPO4 0.05重量%、MgSO4・7H2O 0.05重量%、NaCl 0.2重量%、ZnCl2 0.001重量%、FeSO4・7H2O 0.001重量%、CaCl2 0.001重量%、pH7.0〕 5mlを前記試験管に添加した。その後、前記培地の入った試験管を121℃で20分間高圧滅菌した。なお、前記F培地は、前記E培地に比べ、NH4Clの濃度を4倍に高めた培地である。 Fine powder styrene acrylic resin for toner ink (supplied by Mikasa Sangyo Co., Ltd.) was dissolved in dichloromethane, dispensed into a test tube, and air-dried. Thereafter, F medium [composition: NH 4 Cl 1 wt%, KH 2 PO 4 0.1 wt%, K 2 HPO 4 0.05 wt%, so that the final concentration of styrene acrylic compound is 15 g / l, MgSO 4 .7H 2 O 0.05 wt%, NaCl 0.2 wt%, ZnCl 2 0.001 wt%, FeSO 4 .7H 2 O 0.001 wt%, CaCl 2 0.001 wt%, pH 7.0 ] 5 ml was added to the test tube. Thereafter, the test tube containing the medium was autoclaved at 121 ° C. for 20 minutes. The F medium is a medium in which the concentration of NH 4 Cl is increased four times compared to the E medium.

商品名:ハイドロボール〔ヨンキッド社製〕 0.2gの存在下、前記スチレンアクリル化合物を含有したF培地中、37℃で125ストローク/分の条件で微生物群Aを4本培養し、1週間毎に、培養液3本をサンプリングした。   Product name: Hydroball (manufactured by Yonkid) In the presence of 0.2 g, four microorganism groups A are cultured in the F medium containing the styrene acrylic compound at 37 ° C. and 125 strokes / minute, every week. Three cultures were sampled.

得られた培養液5mlに内部標準として、ステアリルアルコール(ナカライテスク社製)を終濃度 3.7mMとなるように添加した。得られた混合物 6mlに、ジクロロメタン5mlを添加して、培養液中のスチレンアクリル化合物又は該スチレンアクリル化合物に由来する分解産物を抽出した。得られた培養液−ジクロロメタン二相系を、2385×g、10分間遠心分離して上清を得た。ジクロロメタンで抽出する操作をもう一度繰り返してから抽出物をあわせた。その後、得られた抽出物を、エバポレーターを用いて、乾固させた。   As an internal standard, stearyl alcohol (manufactured by Nacalai Tesque) was added to 5 ml of the obtained culture broth to a final concentration of 3.7 mM. To 6 ml of the obtained mixture, 5 ml of dichloromethane was added to extract a styrene acrylic compound or a decomposition product derived from the styrene acrylic compound in the culture solution. The obtained culture broth-dichloromethane two-phase system was centrifuged at 2385 × g for 10 minutes to obtain a supernatant. The extraction with dichloromethane was repeated once more, and the extracts were combined. Thereafter, the obtained extract was dried using an evaporator.

得られた産物にジクロロメタン 5mlを添加した。得られた産物について、前記実施例2と同様に、TLC/FIDで解析した。結果を図3のパネル(A)に示す。図3のパネル(A)中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。   To the resulting product was added 5 ml of dichloromethane. The obtained product was analyzed by TLC / FID in the same manner as in Example 2. The results are shown in panel (A) of FIG. In the panel (A) of FIG. 3, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin component is zero.

その結果、図3のパネル(A)に示されるように、培地中におけるNH4Clの濃度をE培地の場合の4倍にすることにより、長期間培養しても分解率を維持できることがわかる。 As a result, as shown in the panel (A) of FIG. 3, it is understood that the decomposition rate can be maintained even if cultured for a long period of time by increasing the concentration of NH 4 Cl in the medium to 4 times that in the E medium. .

ついで、前記と同様の培地 5mlを用い、37℃で125ストローク/分の条件で微生物群Aを4本培養し、1週間毎に継代培養を行なった。継代培養毎に培養液3本をサンプリングし、前記と同様に、スチレンアクリル化合物の分解率をTLC/FIDで解析した。結果を図3のパネル(B)に示す。図3のパネル(B)中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。   Next, 4 microorganism groups A were cultured under the condition of 125 strokes / minute at 37 ° C. using 5 ml of the same medium as described above, and subcultured every week. Three culture solutions were sampled for each subculture, and the decomposition rate of the styrene acrylic compound was analyzed by TLC / FID in the same manner as described above. The results are shown in panel (B) of FIG. In the panel (B) of FIG. 3, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin component is zero.

その結果、図3のパネル(B)に示されるように、培地中におけるNH4Clの濃度をE培地の場合の4倍にすることにより、継代培養を行なっても、分解能を維持できることがわかる。 As a result, as shown in the panel (B) of FIG. 3, by increasing the concentration of NH 4 Cl in the medium to 4 times that in the E medium, the resolution can be maintained even when subculture is performed. Recognize.

さらに、前記スチレンアクリルを含有したF培地に、終濃度0.1重量%となるように酵母エキス〔ディフコラボラトリー(Difco Lab.)製〕を添加し、前記と同様に、継代培養を行ない、スチレンアクリル化合物の分解率をTLC/FIDで解析した。結果を図4のパネル(A)に示す。図4のパネル(A)中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。   Further, yeast extract (manufactured by Difco Laboratories) was added to the F medium containing styrene acrylic so as to have a final concentration of 0.1% by weight, and subculture was performed in the same manner as described above. The decomposition rate of the styrene acrylic compound was analyzed by TLC / FID. The results are shown in panel (A) of FIG. In the panel (A) of FIG. 4, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin component is zero.

その結果、図4のパネル(A)に示されるように、酵母エキスを含有した培地を用いることにより、継代培養を行なっても、平均30%の分解率を維持できることがわかる。   As a result, as shown in panel (A) of FIG. 4, it can be seen that by using a medium containing yeast extract, an average 30% degradation rate can be maintained even when subculture is performed.

さらに、酵母エキス濃度を、0.1、0.25又は0.5重量%に設定し、37℃で125ストローク/分、1週間、微生物群Aを培養した。結果を図4のパネル(B)に示す。図4のパネル(B)中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。   Furthermore, the yeast extract concentration was set to 0.1, 0.25, or 0.5% by weight, and the microorganism group A was cultured at 37 ° C. for 125 strokes / minute for 1 week. The results are shown in panel (B) of FIG. In the panel (B) of FIG. 4, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin component is zero.

その結果、図4のパネル(B)に示されるように、0.1重量% 酵母エキスを含有した培地を用いることにより、約70%の分解率で、スチレンアクリルを分解できることがわかる。   As a result, as shown in the panel (B) of FIG. 4, it can be seen that styrene acrylic can be decomposed at a decomposition rate of about 70% by using a medium containing 0.1 wt% yeast extract.

微生物群A及びFを、滅菌生理食塩水で段階希釈した。得られた各希釈物を、商品名:R2A平板培地〔ディフコラボラトリー(Difco Lab.)製〕に塗布し、37℃でコロニーが出現するまで培養した。出現したコロニーのなかから、形態が異なるコロニーを選出し、再度、前記R2A培地に塗布した。その結果、微生物群Aから、3種の微生物(R−1、R−2、R−3)及び微生物群Fから2種の微生物(D−1、D−2)の単一コロニーが単離された。各単離微生物について、位相差顕微鏡(Nikon社製)で形態、運動性を調べた。各単離微生物の形態学的特徴を図5に示す。   Microbial groups A and F were serially diluted with sterile saline. Each of the obtained dilutions was applied to a trade name: R2A plate medium (manufactured by Difco Laboratories) and cultured at 37 ° C. until colonies appeared. Colonies with different morphologies were selected from the emerged colonies and applied again to the R2A medium. As a result, single colonies of three types of microorganisms (R-1, R-2, R-3) and two types of microorganisms (D-1, D-2) were isolated from the microorganism group A. It was done. About each isolated microorganism, the form and the mobility were investigated with the phase-contrast microscope (made by Nikon). The morphological characteristics of each isolated microorganism are shown in FIG.

ついで、各単離微生物について、グラム染色、オキシダーゼテストを常法で行ない、その他の生理・生化学的性状を、ビオメリオー(BioMerieux)社製、商品名:Api20E同定キットを用いて調べた。結果を表1に示す。   Each isolated microorganism was then subjected to Gram staining and oxidase test by conventional methods, and other physiological and biochemical properties were examined using a product name: Api20E identification kit manufactured by BioMerieux. The results are shown in Table 1.

Figure 0004520176
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また、各単離微生物について、慣用の方法によりDNAを抽出し、得られたDNAを鋳型として、PCR法により、16S rDNAを増幅し、該16S rDNAの塩基配列を解析した。前記PCR法による増幅において、10×Gold Taq buffer〔アプライドバイオシステムズ社製〕 5μl、dNTP mixture〔アプライドバイオシステムズ社製、各2.0mM〕 5μl、25mM MgCl2 6μl、PCRプライマー対〔東亜合成株式会社供給、各10pmol/μl〕 各1μl、試料及び超純水 31.5μl、AmpliTaq Gold〔アプライドバイオシステムズ社製、5U/μl〕の反応系(50μl)を用いた。なお、PCRプライマー対は、配列番号:1に示される塩基配列のフォワードプライマー及び配列番号:2に示される塩基配列のリバースプライマーである。 For each isolated microorganism, DNA was extracted by a conventional method, 16S rDNA was amplified by PCR using the obtained DNA as a template, and the base sequence of the 16S rDNA was analyzed. In amplification by the PCR method, 10 × Gold Taq buffer (Applied Biosystems) 5 μl, dNTP mixture (Applied Biosystems, 2.0 mM each) 5 μl, 25 mM MgCl 2 6 μl, PCR primer pair [Toa Gosei Co., Ltd. Supply, 10 pmol / μl each] 1 μl each, sample and ultrapure water 31.5 μl, AmpliTaq Gold [Applied Biosystems 5U / μl] reaction system (50 μl) was used. The PCR primer pair is a forward primer having the base sequence shown in SEQ ID NO: 1 and a reverse primer having the base sequence shown in SEQ ID NO: 2.

PCR条件は、94℃7分間のプレラン後、94℃1分と65℃1分(1サイクル毎に0.5℃ずつ下げる)と72℃2分とを1サイクルとする20サイクルの反応を行ない、ついで、94℃1分と55℃1分と72℃2分とを1サイクルとする15サイクルの反応を行ない、72℃10分間のポストランを行なう条件とした。   PCR conditions are as follows: after a pre-run at 94 ° C. for 7 minutes, a reaction of 20 cycles of 94 ° C. for 1 minute, 65 ° C. for 1 minute (down 0.5 ° C. every cycle) and 72 ° C. for 2 minutes is performed Then, the reaction was carried out for 15 cycles of 94 ° C. for 1 minute, 55 ° C. for 1 minute, and 72 ° C. for 2 minutes, and post-run at 72 ° C. for 10 minutes.

得られた各増幅産物を、それぞれ、1重量% 低融点アガロースゲル〔バイオプロダクツ社製、商品名:SeaPlaque GTG agarose〕で精製し、塩基配列解析用試料を得た。得られた塩基配列解析用試料と配列番号:3〜10のそれぞれに示される塩基配列の8種のプライマーと商品名:DYEnamic ET Terminator Cycle Sequencing Kit〔アマシャムバイオサイエンシーズ社製〕とを用いてシークエンス反応を行なった。その後、得られた産物について、DNAシークエンサー〔アプライドバイオシステムズ社製、商品名ABI PRISM 3100 DNAシークエンサー〕で解析した。判明した16S rDNAの塩基配列について、DNA Data Bank of Japan(DDBJ)に登録されているデータベースを利用してホモロジーサーチを行なった。   Each obtained amplification product was purified by 1 wt% low melting point agarose gel (manufactured by Bioproducts, trade name: SeaPlaque GTG agarose) to obtain a sample for base sequence analysis. Using the obtained sample for base sequence analysis, 8 primers of the base sequences shown in SEQ ID NOs: 3 to 10, and a product name: DYEamic ET Terminator Cycle Sequencing Kit (manufactured by Amersham Biosciences) Reaction was performed. Thereafter, the obtained product was analyzed with a DNA sequencer [manufactured by Applied Biosystems, trade name: ABI PRISM 3100 DNA sequencer]. Using the database registered in DNA Data Bank of Japan (DDBJ), a homology search was performed on the base sequence of the 16S rDNA that was found.

図5に示す結果、表1に示す結果及び16sRNAの解析の結果より、D−1は、シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)、D−2は、スフィンゴモナス パウシモビルス(Sphingomonas paucimobills)、R−1は、シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)、R−2は、クラビバクター キシリ サブスピーシーズ シノドンティス(Clavibacter xyli subsp. cynodontis)、R−3は、アルカリジェネス スピーシーズ(Alcaligenes sp.)であることが推測された。   From the results shown in FIG. 5, the results shown in Table 1, and the results of 16sRNA analysis, D-1 is Pseudomonas aeruginosa, D-2 is Sphingomonas paucimobils, and R-1 is Pseudomonas. Elginosa (Pseudomonas aeruginosa), R-2 is Clavibacter xyli subsp. Cynodontis, R-3 is Alkaline Genes sp.

単離微生物R−1とR−2とR−3とD−1とD−2について、ポリエステルの分解率を調べた。   For the isolated microorganisms R-1, R-2, R-3, D-1, and D-2, the polyester degradation rate was examined.

各単離微生物を、商品名:ハイドロボール〔ヨンキッド社製〕 0.2gと終濃度10g/l ポリエステル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕とを含むF培地 5ml中、37℃で125ストローク/分の条件で培養し、得られた培養物について、前記実施例2と同様に、TLC/FID法によりポリエステル化合物の分解率を解析した。結果を図6のパネル(A)に示す。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。   Each isolated microorganism was treated with 125 strokes / minute at 37 ° C. in 5 ml of F medium containing 0.2 g of a product name: Hydroball (manufactured by Yonkid) and a final concentration of 10 g / l polyester resin (supplied by Mikasa Sangyo Co., Ltd.). The culture was performed under conditions, and the degradation rate of the polyester compound was analyzed by the TLC / FID method in the same manner as in Example 2. The results are shown in panel (A) of FIG. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

また、単離微生物であるR−1とR−2とR−3とを、それぞれマクファーランド4の濁度に調整した菌懸濁液を1:1:1の割合で混合し、微生物混合産物を得た。また、D−1とD−2とを、それぞれマクファーランド4の濁度に調整した菌懸濁液を1:1の割合で混合し、微生物混合産物Dを得た。また、R−1とR−2とR−3とD−1とD−2とを混合して、微生物混合産物RDを得た。   In addition, the isolated microorganisms R-1, R-2, and R-3 were mixed at a ratio of 1: 1: 1, respectively, to a suspension of microorganisms adjusted to the turbidity of McFarland 4, and mixed with microorganisms. The product was obtained. Further, D-1 and D-2 were mixed at a ratio of 1: 1, respectively, to a microbial suspension in which the turbidity of McFarland 4 was adjusted to obtain a microbial mixed product D. Moreover, R-1, R-2, R-3, D-1, and D-2 were mixed to obtain a microorganism mixed product RD.

前記微生物混合産物、微生物群A及び微生物群Fを、商品名:ハイドロボール〔ヨンキッド社製〕 0.2gと終濃度10g/l ポリエステル樹脂〔三笠産業株式会社供給〕とを含むF培地 5ml中、37℃で125ストローク/分の条件で4本培養した。なお、培養開始から1週目及び5週目に培養液 3本をサンプリングし、実施例2と同様に、TLC/FID法によりポリエステル化合物の分解率を解析した。結果を図6のパネル(B)に示す。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。   In 5 ml of F medium containing 0.2 g of the product name: Hydroball (manufactured by Yonkid) and a final concentration of 10 g / l polyester resin (supplied by Mikasa Sangyo Co., Ltd.) Four cultures were performed at 37 ° C. under the condition of 125 strokes / minute. Three culture solutions were sampled at the first week and the fifth week from the start of the culture, and the degradation rate of the polyester compound was analyzed by the TLC / FID method in the same manner as in Example 2. The results are shown in panel (B) of FIG. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

その結果、図6に示されるように、各単離微生物を組み合わせて培養することにより、各単離微生物それぞれを単独で培養する場合に比べ、ポリエステル化合物の分解率が同等又はそれ以上に上昇することがわかる。また、R−1とR−2とR−3とを混合した微生物混合産物Rによる分解率と、分離源である微生物群Aによる分解率とは同等であることがわかる。さらに、D−1とD−2とを混合した微生物混合産物Dによる分解率と、分離源である微生物群Fによる分解率とは同等であることがわかる。また、R−1とR−2とR−3とD−1とD−2とを混合した微生物混合産物RDによる分解率は、微生物群A及び微生物群Fそれぞれによる分解率と同等であることがわかる。   As a result, as shown in FIG. 6, by culturing the isolated microorganisms in combination, the degradation rate of the polyester compound is increased to the same or more than when each isolated microorganism is cultured alone. I understand that. Moreover, it turns out that the degradation rate by the microorganism mixed product R which mixed R-1, R-2, and R-3 and the degradation rate by the microorganism group A which is a separation source are equivalent. Furthermore, it turns out that the decomposition rate by the microorganism mixed product D which mixed D-1 and D-2 and the decomposition rate by the microorganism group F which is a separation source are equivalent. Moreover, the degradation rate by the microorganism mixed product RD obtained by mixing R-1, R-2, R-3, D-1, and D-2 is equal to the degradation rate by the microorganism group A and the microorganism group F, respectively. I understand.

微生物群Aを用い、ポリエチレンテレフタレートの分解を調べた。   Using microorganism group A, degradation of polyethylene terephthalate was examined.

ポリエチレンテレフタレートを細断し、試験管に入れ、1,1,1,3,3,3−ヘキサフルオロ−2−プロパノール〔ナカライテスク社製〕により溶解させた。風乾させた後、F培地 5mlを前記試験管に添加した。その後、前記培地の入った試験管を121℃で20分間高圧滅菌した。   Polyethylene terephthalate was chopped, put into a test tube, and dissolved with 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol (manufactured by Nacalai Tesque). After air drying, 5 ml of F medium was added to the test tube. Thereafter, the test tube containing the medium was autoclaved at 121 ° C. for 20 minutes.

商品名:ハイドロボール〔ヨンキッド社製〕 0.2gの存在下、前記ポリエチレンテレフタレートを含有したF培地中、37℃で125ストローク/分の条件で微生物群Aを1週間培養した。得られた培養液を観察した結果を図7の上部パネルに示す。   Product name: Hydroball (manufactured by Yonkid) In the presence of 0.2 g, the microorganism group A was cultured for 1 week at 37 ° C. under the condition of 125 strokes / minute in F medium containing polyethylene terephthalate. The result of observing the obtained culture solution is shown in the upper panel of FIG.

得られた培養液5mlに内部標準として、ステアリルアルコール(ナカライテスク社製)を終濃度 3.7mMとなるように添加した。得られた混合物 6mlに、1,1,1,3,3,3−ヘキサフルオロ−2−プロパノール5mlを添加して、ポリエチレンテレフタレート及び該ポリエチレンテレフタレートに由来する分解産物を抽出した。得られた培養液−1,1,1,3,3,3−ヘキサフルオロ−2−プロパノール二相系を、2385×g、10分間遠心分離して上清を得た。その後、得られた抽出物を、エバポレーターを用いて、乾固させた。   As an internal standard, stearyl alcohol (manufactured by Nacalai Tesque) was added to 5 ml of the obtained culture broth to a final concentration of 3.7 mM. To 6 ml of the resulting mixture, 5 ml of 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol was added to extract polyethylene terephthalate and degradation products derived from the polyethylene terephthalate. The obtained culture solution-1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol two-phase system was centrifuged at 2385 × g for 10 minutes to obtain a supernatant. Thereafter, the obtained extract was dried using an evaporator.

得られた産物に1,1,1,3,3,3−ヘキサフルオロ−2−プロパノール5mlを添加した。得られた産物について、前記実施例2と同様に、TLC/FIDで解析した。結果を図7の下部パネルに示す。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。   To the obtained product, 5 ml of 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol was added. The obtained product was analyzed by TLC / FID in the same manner as in Example 2. The results are shown in the lower panel of FIG. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

その結果、図7に示されるように、微生物群Aにより、ポリエチレンテレフタレートを分解できることがわかる。   As a result, it is understood that polyethylene terephthalate can be decomposed by the microorganism group A, as shown in FIG.

本発明によれば、トナー等に代表される廃棄物の処理の際のポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の安価で、かつ環境に対して低影響な処理を可能にする。また、本発明によれば、廃棄物中の金属又は色素の安価でかつ環境に対して低影響な回収を可能にする。   According to the present invention, the polyester compound and / or the styrene acrylic compound at the time of processing of waste represented by toner and the like can be processed at low cost and with low influence on the environment. In addition, according to the present invention, it is possible to recover metals or pigments in waste at low cost and with low impact on the environment.

図1は、ポリエステル化合物又はスチレンアクリル化合物を分解しうる微生物のスクリーニング結果を示す図である。パネル(A)は、ポリエステル化合物、パネル(B)は、スチレンアクリル化合物を含有する培地を1週間培養後に観察した結果を示す。FIG. 1 is a diagram showing a screening result of microorganisms that can degrade a polyester compound or a styrene acrylic compound. Panel (A) shows the result of observing a polyester compound and panel (B) after culturing a medium containing a styrene acrylic compound for 1 week.

図2は、微生物群A及び微生物群Fの継代回数の影響を調べた結果を示す図である。図中、丸印は、微生物群A、三角印は、微生物群Fによるポリエステル化合物の分解率を示す。また、図中、四角印は、微生物群Aによるスチレンアクリル化合物の分解率を示す。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。FIG. 2 is a diagram showing the results of examining the influence of the number of passages of microorganism group A and microorganism group F. In the figure, circles indicate the degradation rate of the polyester compound by the microorganism group A, and triangles indicate the decomposition rate of the polyester compound by the microorganism group F. In the figure, the square marks indicate the decomposition rate of the styrene acrylic compound by the microorganism group A. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

図3は、微生物群Aによるスチレンアクリル化合物の分解率に対する窒素源の影響を調べた結果を示す図である。パネル(A)は、培養時間、パネル(B)は、継代回数による差異を示す図である。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。FIG. 3 is a diagram showing the results of examining the influence of the nitrogen source on the decomposition rate of the styrene acrylic compound by the microorganism group A. Panel (A) shows the difference in culture time, and panel (B) shows the difference depending on the number of passages. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

図4は、微生物群Aによるスチレンアクリル化合物の分解率に対する酵母エキスの影響を調べた結果を示す図である。パネル(A)は、継代回数、パネル(B)は、酵母エキス濃度による差異を示す図である。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。FIG. 4 is a graph showing the results of examining the effect of yeast extract on the degradation rate of styrene acrylic compounds by microorganism group A. Panel (A) shows the number of passages and panel (B) shows the difference depending on the yeast extract concentration. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

図5は、単離微生物の形態学的性質を示す図である。FIG. 5 is a diagram showing the morphological properties of isolated microorganisms.

図6は、単離微生物及びその組み合わせ、並びに微生物群によるポリエステルの分解率を調べた結果を示す図である。パネル(A)は、各単離微生物単独での分解率を示す。パネル(B)は、単離微生物の組み合わせによる分解率と微生物群による分解率とを比較した結果を示す図である。図中、Aは、微生物群A、Rは、微生物混合産物R、Fは、微生物群F、Dは、微生物混合産物D、RDは、微生物混合産物RDを示す。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。FIG. 6 is a diagram showing the results of examining the degradation rate of polyesters by isolated microorganisms and combinations thereof, and microorganism groups. Panel (A) shows the degradation rate of each isolated microorganism alone. Panel (B) is a diagram showing the results of comparing the degradation rate by the combination of isolated microorganisms with the degradation rate by the microorganism group. In the figure, A represents the microorganism group A, R represents the microorganism mixture product R, F represents the microorganism group F, D represents the microorganism mixture product D, and RD represents the microorganism mixture product RD. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

図7は、微生物群によるポリエチレンテレフタレートの分解を調べた結果を示す図である。図中、分解率は、樹脂分のピーク面積がゼロの場合を100%として示す。FIG. 7 is a diagram showing the results of examining the degradation of polyethylene terephthalate by microorganisms. In the figure, the decomposition rate is shown as 100% when the peak area of the resin is zero.

配列番号:1は、フォワードプライマー27fの配列である。   SEQ ID NO: 1 is the sequence of forward primer 27f.

配列番号:2は、リバースプライマー1492rの配列である。   SEQ ID NO: 2 is the sequence of reverse primer 1492r.

配列番号:3は、フォワードプライマーf1Lの配列である。   SEQ ID NO: 3 is the sequence of forward primer f1L.

配列番号:4は、フォワードプライマーf2Lの配列である。   SEQ ID NO: 4 is the sequence of forward primer f2L.

配列番号:5は、フォワードプライマーf3Lの配列である。   SEQ ID NO: 5 is the sequence of forward primer f3L.

配列番号:6は、リバースプライマーr1Lの配列である。   SEQ ID NO: 6 is the sequence of reverse primer r1L.

配列番号:7は、リバースプライマーr2Lの配列である。   SEQ ID NO: 7 is the sequence of reverse primer r2L.

配列番号:8は、リバースプライマーr3Lの配列である。   SEQ ID NO: 8 is the sequence of reverse primer r3L.

配列番号:9は、リバースプライマーr4Lの配列である。   SEQ ID NO: 9 is the sequence of reverse primer r4L.

配列番号:10は、リバースプライマーrE1Lの配列である。   SEQ ID NO: 10 is the sequence of reverse primer rE1L.

Claims (4)

ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の生分解能を呈する少なくとも2種の微生物を含有してなる微生物培養物であって、前記少なくとも2種の微生物
i)シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)、クラビバクター キシリ サブスピーシーズ シノドンティス(Clavibacter xyli subsp. cynodontis)及びアルカリジェネス スピーシーズ(Alcaligenes sp.)からなる微生物混合物であるか、又は
ii)シュードモナス エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)及びスフィンゴモナス パウシモビリス(Sphingomonas paucimobilis)からなる微生物混合物である、微生物培養物。
A microbial culture Do that contain at least two microorganisms exhibiting biodegradability of the polyester compound and / or a styrene acrylic compounds, at least two kinds of microorganisms
i) a microorganism consisting of Pseudomonas aeruginosa, Clavibacter xyli subsp. cynodontis and a microorganism consisting of Alkagenes sp. or a mixture of Alcaligenes sp.
ii) A microbial culture, which is a microbial mixture consisting of Pseudomonas aeruginosa and Sphingomonas paucimobilis.
請求項1記載の微生物培養物を含有してなる、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解用組成物。   A composition for decomposing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound, comprising the microorganism culture according to claim 1. ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物を含む生産物若しくは廃棄物と、請求項1記載の微生物培養物又は請求項2記載の分解用組成物とを接触させることを特徴とする、ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物の分解方法。   A polyester compound and / or a product or waste containing a polyester compound and / or a styrene acrylic compound is contacted with the microorganism culture according to claim 1 or the degradation composition according to claim 2. A method for decomposing styrene acrylic compounds. (A)ポリエステル化合物及び/又はスチレンアクリル化合物と金属若しくは色素とを含む廃棄物と、(B)請求項1記載の微生物培養物又は請求項2記載の分解用組成物とを接触させることを特徴とする、廃棄物中の金属又は色素の回収方法。   (A) A waste comprising a polyester compound and / or a styrene acrylic compound and a metal or a pigment, and (B) the microorganism culture according to claim 1 or the decomposition composition according to claim 2 are brought into contact with each other. A method for recovering metals or pigments in waste.
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