JP4564654B2 - VLA-4 antagonist - Google Patents

Description

の化合物をＶＬＡ−１介在細胞接着の阻害、予防および抑制に有用であるとして記載する。
【０００６】
本発明により、ある新規化合物が、非常に良好なＶＬＡ−４拮抗活性および有用な薬理学的特性を有するとして発見された。
【０００７】
本発明の一つの態様により、式Ｉ
【化７】

〔式中、
Ｒ_１はアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール−融合シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリール−置換アルキル(アラルキル)、アリール−置換アルケニルまたはアルキニル、シクロアルキル−置換アルキル、シクロアルケニル−置換シクロアルキル、ビアリール、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アリール−置換アルコキシ(アラルコキシ)、アリール−置換アルケノキシまたはアルキノキシ、アルキルアミノ、アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、アリール−置換アルキルアミノ、アリール−置換アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、アリールオキシ、アリールアミノ、Ｎ−アルキルウレイド−置換アルキル、Ｎ−アリールウレイド−置換アルキル、アルキルカルボニルアミノ−置換アルキル、アミノカルボニル−置換アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリル−置換アルキル、ヘテロシクリル−置換アミノ、カルボキシアルキル置換アラルキル、オキソカルボシクリル−融合アリール、またはヘテロシクリルアルキル；
Ｒ_２は(ＣＨ_２)_ｑ−Ｖ−(ＣＨ_２)_ｑ'−Ｖ_ｒ−Ｒ_８；
Ｒ_３はＨ、アルキル、アルケニル、アリール、またはヘテロアリール；
Ｒ_４はＨ、アリール、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニルおよびアリール−置換アルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルカルボニル、アミノカルボニル、アミド、モノ−またはジアルキルアミノカルボニル、モノ−またはジアリールアミノカルボニル、アルキルアリールアミノカルボニル、ジアリールアミノカルボニル、モノ−またはジアシルアミノカルボニル、芳香族または脂肪族アシルまたは、所望によりアミノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、モノ−またはジアルキルアミノ、モノ−またはジアリールアミノ、アルキルアリールアミノ、モノ−またはジアシルアミノ、アルコキシ、アルケノキシ、アリールオキシ、チオアルコキシ、チオアルケノキシ、チオアルキノキシ、チオアリールオキシ、およびヘテロシクリルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアルキル；
Ｒ_５はアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリール−置換アルキル、アリール−置換アルケニル、またはアルキニル；所望によりアミノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、モノ−またはジアルキルアミノ、モノ−またはジアリールアミノ、アルキルアリールアミノ、モノ−またはジアシルアミノ、アルコキシ、アルケノキシ、アリールオキシ、チオアルコキシ、チオアルケノキシ、チオアルキノキシ、チオアリールオキシ、およびヘテロシクリルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよいアルキル；
Ｒ_６はアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アラルキル、アリール−置換アルケニルまたはアルキニル、ヒドロキシ−置換アルキル、アルコキシ−置換アルキル、アラルコキシ−置換アルキル、アミノ−置換アルキル、(アリール−置換アルキルオキシカルボニルアミノ)−置換アルキル、チオール−置換アルキル、アルキルスルホニル−置換アルキル、(ヒドロキシ−置換アルキルチオ)−置換アルキル、チオアルコキシ−置換アルキル、アシルアミノ−置換アルキル、アルキルスルホニルアミノ−置換アルキル、アリールスルホニルアミノ−置換アルキル、モルホリノ−アルキル、チオモルホリノ−アルキル、モルホリノカルボニル−置換アルキル、チオモルホリノカルボニル−置換アルキル、[Ｎ−(アルキル、アルケニルまたはアルキニル)−または(Ｎ,Ｎ−ジアルキル、ジアルケニルまたはジアルキニル)−アミノ]カルボニル−置換アルキル、カルボキシル−置換アルキル、ジアルキルアミノ−置換アシルアミノアルキル；またはアルギニン、アスパラギン、グルタミン、Ｓ−メチルシステイン、メチオニンおよび対応するスルフオキシドおよびそのスルホン誘導体、グリシン、ロイシン、イソロイシン、アロ−イソロイシン、tert−ロイシン、ノルロイシン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、プロリン、アラニン、オルニチン、ヒスチジン、グルタミン、バリン、スレオニン、セリン、アスパラギン酸、ベータ−シアノアラニン、およびアロスレオニンから選択されるアミノ酸側鎖；
Ｒ_７およびＲ_８は独立してＨ、アルキル、アルケニル、炭素環式アリール、ヘテロアリール、またはアルキル、アルケニル、炭素環式アリール、またはアミノ、ヒドロキシ、メルカプト、モノ−またはジアルキルアミノ、モノ−またはジアリールアミノ、アルキルアリールアミノ、ジアリールアミノ、モノ−またはジアシルアミノ、アルコキシ、アルケノキシ、アリールオキシ、チオアルコキシ、チオアルケノキシ、チオアルキノキシ、チオアリールオキシ、およびヘテロシクリルからなる群から選択される１−３置換基で置換されているヘテロアリール；
またはＲ_２およびＲ_６は、それらが結合している原子と共にヘテロ環を形成し得る；
ＶはＯ、ＮＨ、Ｓ、ＳＯまたはＳＯ_２；
ＸはＣＯ_２Ｒ_５、ＰＯ_３Ｈ、ＳＯ_２Ｒ_５、ＳＯ_３Ｈ、ＯＰＯ_３Ｈ、ＣＯ_２ＨまたはＣＯＮ(Ｒ_４)_２；
ＷはＣＨまたはＮ；
ＹはＣＯ、ＳＯ_２またはＰＯ_２；
Ｚは(ＣＨ_２)_ｎ'、ＣＨＲ_６、またはＮＲ_７；
ｎおよびｎ'は独立して０−４；
ｍは１−４；
ｐは１−４；
ｑおよびｑ'は独立して１−５；そして
ｒは０または１である〕
の化合物または薬学的に許容されるその塩を提供する。
【０００８】
本発明の化合物、即ち式Ｉの化合物およびその薬学的に許容される塩は、ＶＬＡ−４アンタゴニストであり、細胞接着の予防、抑制または阻害に有用である。このように、それらはＶＬＡ−４介在細胞接着疾病状態、特に炎症および自己免疫疾患に有用である。それらは特に手術、特に移植手術誘導炎症に有用である。本発明の化合物は、単独でまたは他の活性剤と組合わせて、細胞接着の予防、抑制または阻害に使用し得る。
【０００９】
本発明の他の態様は、有効量の本発明の化合物を、所望により薬学的に許容される担体と共に含む医薬組成物、特にＶＬＡ−４拮抗作用のための組成物である。
他の態様において、本発明はまた、医薬として、特にＶＬＡ−４拮抗作用のために使用する本発明の化合物、即ち、式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を含む。
【００１０】
更なる態様において、本発明は、処置を必要とする哺乳動物、好ましくはヒトに、有効量の本発明の化合物を投与することを含む、哺乳動物のＶＬＡ−４を拮抗する方法を提供する。
更に別の態様において、本発明はＶＬＡ−４により介在される疾病の処置のための医薬の製造における本発明の化合物の使用を提供する。
【００１１】
好ましい本発明の化合物は、式Ｉａ
【化８】

〔式中、
Ｒ₂はＣ_1-4アルキル−オキシ−Ｃ_1-8アルキル；
Ｒ₄はＨ、アルキル、アルケニル、炭素環式アリール、またはヘテロアリール；
ＸはＣＯ₂ＨまたはＣＯ₂アルキル；
そして他の記号は式Ｉで定義のものである〕
の化合物または薬学的に許容されるその塩である。
【００１２】
より好ましい本発明の化合物は、式中、Ｒ₁がアリール；Ｒ₂がメトキシ−ｎ−プロピル；Ｒ₃がＨ；Ｒ₄がアルケニルまたはアリール；ＸがＣＯ₂Ｈ；ｎが０；そしてＷがＣＨである式Ｉａの化合物または薬学的に許容されるその塩である。
【００１３】
本発明の具体的な態様は、式Ｉｂ
【化９】

〔式中、
Ｒ_１はＮ−アリールウレイドフェニル；
Ｒ_２はＣ_１−Ｃ_４−アルキル−オキシ−Ｃ_２−Ｃ_４−アルキル；
Ｒ_３はＨ；
Ｒ_４はＨ、Ｃ_１−Ｃ_４−アルキル、Ｃ_２−Ｃ_４−アルケニルまたは炭素環式アリール；
ｎは１または２；
ｍは１、２または３；
ＸはＣＯＯＨまたはＣＯ_２Ｒ_５；そして
Ｒ_５は所望により置換されていてもよい低級アルキル〕
の化合物または薬学的に許容されるその塩に関する。
【００１４】
好ましいのは、式中、
Ｒ₁がＮ−(所望により置換されていてもよいフェニル)−ウレイドフェニル；
Ｒ₂がメトキシプロピル；
Ｒ₂がＨ；
Ｒ₄がＣ₂−Ｃ₄−アルケニルまたは所望により置換されていてもよいフェニル；
ｎが１；
ｍが１；そして
ＸがＣＯＯＨ
である式Ｉｂの化合物または薬学的に許容されるその塩である。
【００１５】
最も好ましい本発明の化合物は、式Ｉｃ
【化１０】

〔式中、
Ｒ_aはＨ、ＣＨ₃、ＣｌまたはＮＨ₂；
Ｒ₂は(ＣＨ₂)₃ＯＣＨ₃または(ＣＨ₂)₄ＯＣＨ₃；
Ｒ₄は−(ＣＨ)＝(ＣＨ)−ＣＨ₃、フェニル、４−メトキシフェニルまたは３,４−ジメトキシフェニル；そして
ＴはＮＨまたはＣＨ₂である〕
の化合物または薬学的に許容されるその塩である。
【００１６】
“アルキル”なる用語は、１個から１０個、好ましくは１個から６個、より好ましくは１個から４個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。このような基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシル、およびデシルである。
【００１７】
“アルケニル”は、２個から１０個、好ましくは２個から６個およびより好ましくは２個から４個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルケニル基を意味する。このような基の例は、エテリル、Ｅ−およびＺ−プロペニル、イソプロペニル、Ｅ−およびＺ−ブテニル、Ｅ−およびＺ−イソブテニル、Ｅ−およびＺ−ペンテニルおよびデセニルを含む。
【００１８】
上記用語と関連した“低級”なる用語は、該基が６個までの炭素原子を含むことを意味する。
上記用語と関連した“置換”なる用語は、該基が、例えば、アミノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、モノ−またはジアルキルアミノ、モノ−またはジ−アリールアルキルアミノ、モノ−またはジアリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、アリール、チオアリールオキシ、チオアルコキシまたはヘテロシクリルで置換されていることを意味する。
【００１９】
“アルキニル”なる用語は、２個から１０個、好ましくは２個から６個およびより好ましくは２個から４個の他の原子を含む直鎖または分枝鎖アルキニル基を意味する。このような基の例は、エチニル(アセチレニル)、プロピニル、プロパルギル、ブチニル、ヘキシニルおよびデシニルを含む。
“シクロアルキル”なる用語は、３個から８個、好ましくは３個から６個の炭素原子を含む環状アルキル基を意味する。このようなシクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロプロピルメチルを含む。
【００２０】
“シクロアルケニル”は、４個から８個、好ましくは５個から６個の炭素原子および１個またはそれ以上の２重結合を含む環状炭素環を意味する。このようなシクロアルケニル基の例は、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロペンタジエニルおよび２−メチル−２−ブテニルである。
アリールは、炭素環式またはヘテロ環式アリール(ヘテロアリール)を意味する。
【００２１】
“アリール”(炭素環式アリールおよびヘテロアリール)は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される０−３個のヘテロ原子を含む５−または６−員炭素環式芳香族またはヘテロ芳香族；Ｏ、ＮおよびＳから選択される０−３個のヘテロ原子を含む２環９−または１０−員芳香族またはヘテロ芳香族環系；またはＯ、ＮおよびＳから選択される０−３個のヘテロ原子を含む３環１３−または１４−員芳香族またはヘテロ芳香族環系である；環は、各々、例えば、低級アルキル、アルケニル、アルキニル、置換低級アルキル、置換アルケニル、置換アルキニル、＝Ｏ、ＮＯ₂、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、シアノ、−ＮＲ'Ｒ'、アシルアミノ、フェニル、ベンジル、フェノキシ、ベンジルオキシ、ヘテロアリール、およびヘテロアリールオキシ(該フェニル、ベンジル、フェノキシ、ベンジルオキシ、ヘテロアリール、およびヘテロアリールの各々は、例えば、低級アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、シアノ、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、カルボキシ、カルボアルコキシ、カルボキシアミド、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ＮＯ₂および−ＮＲ'Ｒ'から選択される１−３個の置換基で置換されていてもよく、Ｒ'はＨまたは低級アルキルである)から選択される１−３個の置換基で、所望により置換されていてもよい。炭素環式芳香族環系は、フェニル、ナフチル、インデニル、インダニル、アズレニル、フルオレニル、アントラセニルを含む。ヘテロ環式芳香族環系は、フリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、２−ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、１,２,３−オキサジアゾリル、１,２,３−トリアゾリル、１,３,４−チアジアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１,３,５−トリアジニル、１,３,５−トリチアニル、インドリジニル、インドリル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、インドリニル、ベンゾ[ｂ]フラニル、２,３−ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾ[ｂ]チオフェニル、１Ｈ−インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、１,８−ナフチリジニル、プテリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニルおよびフェノキサジニルである。
【００２２】
“アリール”なる用語は、それが上記式の基Ｒ_１に関する限り、炭素環式またはヘテロ環式アリール、特に、例えば、所望によりハロ、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、シアノ、カルボキシ、カルボアルコキシ、Ａｒ'−置換アルキル、Ａｒ'−置換アルケニルまたはアルキニル、１,２−ジオキシメチレン、１,２−ジオキシエチレン、アルコキシ、アルケノキシまたはアルキノキシ、Ａｒ'−置換アルコキシ、Ａｒ'−置換アルケノキシまたはアルキノキシ、アルキルアミノ、アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、Ａｒ'−置換アルキルアミノ、Ａｒ'−置換アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、Ａｒ'−置換カルボニルオキシ、アルキルカルボニルオキシ、脂肪族または芳香族アシル、例えば、アルカノイル、Ａｒ'−置換アルカノイルまたはＡｒ'−置換カルボニル、Ａｒ'−置換アルキルカルボニルオキシ、Ａｒ'−置換カルボニルアミノ、Ａｒ'−置換アミノ、Ａｒ'−置換オキシ、アルキルカルボニルアミノ、Ａｒ'−置換アルキルカルボニルアミノ、Ａｒ'−置換アミノカルボニルアルキル、アルコキシ−カルボニルアミノ、Ａｒ'−置換アルコキシカルボニル−アミノ、Ａｒ'−オキシカルボニルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、モノ−またはビス−(Ａｒ'−スルホニル)アミノ、Ａｒ'−置換アルキル−スルホニルアミノ、モルホリノカルボニルアミノ、チオモルホリノカルボニルアミノ、Ｎ−アルキルグアニジノ、Ｎ−Ａｒ'グアニジノ、Ｎ−Ａｒ'シアノ−グアニジノ、Ｎ-Ｎ−(Ａｒ'−,アルキル)グアニジノ、Ｎ,Ｎ−(Ａｒ',Ａｒ')グアニジノ、Ｎ,Ｎ−ジアルキルグアニジノ、Ｎ,Ｎ,Ｎ−トリアルキルグアニジノ、Ｎ−アルキル−ウレイド、Ｎ−ジアルキル−ウレイド、Ｎ−Ａｒ'−ウレイド、Ｎ−(Ａｒ',アルキル)ウレイドおよびＮ,Ｎ−(Ａｒ')_２ウレイドから独立して選択される１個から３個の置換基で置換されていてもよいフェニル；アシルカルボニルアミノ；Ａｒ'−置換アリール；芳香族アシル−置換芳香族または脂肪族アシル；Ａｒ'−置換ヘテロシクリル；Ａｒ'−置換シクロアルキルまたはシクロアルケニル；ヘテロシクリルアルコキシ；Ｎ,Ｎ−(Ａｒ'，ヒドロキシル)ウレイド；Ａｒ'−置換シクロアルキルおよびシクロアルケニル；Ａｒ'−置換ビアリール；Ａｒ'−置換アミノカルボニルアミノ；Ａｒ'−メルカプト−置換アルキル；Ａｒ'−アミノ−置換アリール；Ａｒ'−オキシ−置換アルキル；Ａｒ'−置換アミノシクロアルキルおよびシクロアルケニル；アラルキルアミノスルホニル；アラルコキシアルキル；Ｎ−Ａｒ'−置換チオウレイド；Ｎ−アラルコキシウレイド；Ｎ−ヒドロキシルウレイド；Ｎ−アルケニルウレイド；Ｎ,Ｎ−(アルキル、ヒドロキシル)ウレイド；ヘテロシクリル；チオアリールオキシ−置換アリール；Ｎ,Ｎ−(アリール,アルキル)ヒドラジノ；Ａｒ'−置換スルホニルヘテロシクリル；アラルキル−置換ヘテロシクリル；シクロアルキルおよびシクロアルケニル−置換ヘテロシクリル；シクロアルキル−融合アリール；アリールオキシ−置換アルキル；ヘテロシクリルアミノ；Ａｒ'−置換アリールアミノスルホニル；Ａｒ'−置換アルケノイル；脂肪族または芳香族アシルアミノカルボニル；脂肪族または芳香族アシル−置換アルケニル；Ａｒ'−置換アミノカルボニルオキシ；Ａｒ',Ａｒ'−ジ置換アリール；脂肪族または芳香族アシル−置換アシル；ベンゾ融合−ヘテロシクリルカルボニルアミノ；Ａｒ'−置換ヒドラジノ；Ａｒ'−置換アミノスルホニル；Ａｒ'−置換アルキルアミノ；Ａｒ'−置換ヘテロシクリル；Ａｒ',Ａｒ'−ジ置換アルカノイルアミノ；Ａｒ'−置換シクロアルカノイルアミノ；ヘテロシクリルアルコキシ；Ｎ,Ｎ−Ａｒ',ヒドロキシルウレイド；Ｎ,Ｎ'−Ａｒ',ヒドロキシルウレイド；ヘテロシクリルカルボニルアミノ；Ａｒ'−置換アミノカルボニルヘテロシクリル；Ａｒ'−置換アミノカルボニル；Ａｒ'−置換カルボニルアミノ；Ａｒ'−置換アミノスルホニルアミノ；Ａｒ'−置換メルカプトアルキル；Ａｒ'−アミノ置換ビアリール；アラルキルアミノアルコキシ；アルキル−およびアリールオキシ−置換アルコキシ；ヘテロシクリルカルボニル；Ａｒ'−置換スルホニルアルキル；Ａｒ'−アミノカルボシクリル；アラルキルスルホニル；アリール−置換アルケニル；ヘテロシクリルアルキルアミノ；ヘテロシクリルアルキルアミノカルボニル；Ａｒ'−置換スルホニルアミノアルキル；Ａｒ'−置換シクロアルキル；チオアリールオキシアルキル；チオアリールオキシメルカプト；シクロアルキルカルボニルアルキル；シクロアルキル−置換アミノ；Ａｒ'−置換アリールアミノ；アリールオキシカルボニルアルキル；ホスホロジアミジル酸またはエステル；アリールオキシジメチルシロキシ；１,３−インダジノイルカルボニルアルキル；１,３−インダジノイルカルボニル；オキシアミジル；ヘテロシクリルアルキリデニル；ホルムアミジニル；ベンザリジニル；ベンザルヒドラジノ；アリールスルホニルウレイド；ベンジリルアミノ；４−(Ｎ−２−カルボキシアルキル−１−(１,３−ベンゾジオキサル−５−イル)−アミノ−Ｎ−ロイシニルアルキルアミジルアリール尿素)；Ａｒ'−カルバモイルオキシおよびアルキル−およびアリールオキシ−置換ウレイドである；ここで、“Ａｒ'”は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、１,２−ジオキシメチレン、１,２−ジオキシエチレン、アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アルキルアミノ、アルケニルアミノまたはアルキニルアミノ、アルキルカルボニルオキシ、脂肪族または芳香族アシル、アルキルカルボニルアミノ、アルコキシカルボニルアミノ、アルキルスルホニルアミノ、Ｎ−アルキルまたはＮ,Ｎ−ジアルキルウレイドから選択される１個から３個の置換基を有する上記で定義の炭素環式またはヘテロ環式アリール基である。
【００２３】
“アルコキシ”はアルキルエーテル基である。アルキルエーテル基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、sec−ブトキシ、およびtert−ブトキシである。“アルケノキシ”は、アルケニル−Ｏ−を意味するが、この基はエノールエーテルではない。アルケノキシ基の例はアリルオキシおよびＥ−およびＺ−３−メチル−２−プロペンオキシを含む。“アルキニルオキシ”は、アルキニル−Ｏ−を意味するが、この基はイノールエーテルではない。アルキノキシ基の例は、プロパルギルオキシおよび２−ブチニルオキシを含む。“チオアルコキシ”は、式アルキル−Ｓ−のチオエーテル基を意味する、“アルキルアミノ”は、モノ−またはジ−アルキル−置換アミノ基(即ち、アルキル−ＮＨ−または(アルキル)_２−Ｎ−の基)を意味する。アルキルアミノ基の例は、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔ−ブチルアミノ、およびＮ,Ｎ−ジエチルアミノを含む。“アルケニルアミノ”は、式アルケニル−ＮＨ−または(アルケニル)_２Ｎ−を意味するが、この基はエナミンではない。アルケニルアミノ基は、アリルアミノ基である。“アルキニルアミノ”は、式アルキニル−ＮＨ−または(アルキニル)_２Ｎ−の基を意味するが、この基はイナミンではない。アルキニルアミノ基の例は、プロパルギルアミノ基である。“アリールオキシ”は、式アリール−Ｏ−の基を意味する。アリールオキシ基の例は、フェノキシ、ナフトキシ、およびピリジルオキシを含む。“アリールアミノ”は、式アリール−ＮＨ−を意味する。アリールアミノ基の例は、フェニルアミノ(アニリド)、ナフチルアミノ、２−、３−または４−ピリジルアミノを含む。“ビアリール”は、式アリール−アリール−の基を意味する。“チオアリール”は、式アリール−Ｓ−を意味する。チオアリール基の例は、チオフェニル基である。“アリール−融合シクロアルキル”は、二つの隣接原子をアリール基と共有するシクロアルキル基を意味する。アリール−融合シクロアルキル基の例は、ベンゾ融合シクロブチル基である。“脂肪族アシル”は、カルボン酸由来の式アルキル−ＣＯ−、アルケニル−ＣＯ−またはアルキニル−ＣＯ−を意味する。脂肪族アシル基の例は、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、４−メチルバレリル、アクリロイル、クロチル、プロピオリルおよびメチルプロピオリルを含む。“芳香族アシル”は、式アリール−ＣＯ−を意味する。芳香族アシル基の例は、ベンゾイル、４−ハロベンゾイル、４−カルボキシベンゾイル、ナフトイル、およびピリジルカルボニルを含む。“モルホリノカルボニル”および“チオモルホリノカルボニル”は、Ｎ−カルボニル化モルホリノおよびＮ−カルボニル化チオモルホリノ基を各々意味する。“アルキルカルボニルアミノ”は、式アルキル−ＣＯＮＨ−を意味する。“アルコキシカルボニルアミノ”は、式アルキル−ＯＣＯＮＨ−の基を意味する。“アルキルスルホニルアミノ”は、式アルキル−ＳＯ_２ＮＨ−を意味する。“アリールスルホニルアミノ”は、式アリール−ＳＯ_２ＮＨ−を意味する。“Ｎ−アルキル尿素”または“Ｎ−アルキルウレイド”は、式アルキル−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−を意味する。“Ｎ−アリール尿素”または“Ｎ−アリールウレイド”は、式アリール−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−を意味する。“ハロゲン”または“ハロ”なる用語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を意味する。“ヘテロ環”は、本明細書で違う定義をしない限り、飽和または不飽和であり、所望によりベンゾ融合していてもよい３−７員単環式ヘテロ環式環または８−１１員二環式ヘテロ環式環を意味する。各ヘテロ環は、１個またはそれ以上の炭素原子および窒素、酸素および硫黄、および窒素および硫黄の酸化形および塩基性窒素の４級形から選択された１個から４個のヘテロ原子を含む。環窒素は、所望により、式Ｉの化合物で定義のＲ_４で置換されていてもよい。ヘテロ環は、安定な構造の製造をもたらす環内炭素またはヘテロ原子で結合し得る。好ましいヘテロ環は、５−７員単環式ヘテロ環および８−１０員二環式ヘテロ環である。ヘテロ環は、所望により、１−３環位置でオキソ−置換され得、所望により独立して１−４アリール置換基で置換され得る。本明細書に記載のヘテロアリール基およびピペリジン、モルホリン、ピロリジン、チアゾリジン、ピペラジン等の飽和ヘテロ環が含まれる。
【００２４】
具体的な分子における置換基および記号の定義は、分子の他の場所での定義と独立していることが意図される。したがって、例えば、−Ｎ(Ｒ₄)₂は−ＮＨ₂、−ＮＨＣＨ₃、−Ｎ(ＣＨ₃)₂等を意味する。
【００２５】
本明細書に記載のいくつかの化合物は、１個またはそれ以上の非対称中心を有し、したがって、エナンチオマー、ジアステレオマーおよび他の立体異性体が発生し、これらは絶対立体化学で(Ｒ)または(Ｓ)、またはアミノ酸に関しては(Ｄ)または(Ｌ)と定義され得る。本発明は、このような可能性のあるジアステレオマーすべておよびそのラセミ体および光学的に純粋な形を含むと意図される。光学的に活性な(Ｒ)および(Ｓ)または(Ｄ)および(Ｌ)異性体は、キラルシントンまたはキラル試薬を使用して製造し得、または慣用法を使用して分割し得る。本明細書に記載の化合物がオレフィン性２重結合または幾何非対称の他の中心を有するとき、そして、特記しない限り、ＥおよびＺの両方の異性体を含むと意図される。同様に、全ての互変体を含むと意図される。
【００２６】
本発明の化合物の好ましいグループにおいて、式ＩのＷがＣＨである場合、その炭素原子での立体化学は(Ｓ)であり、即ち化合物は式
【化１１】

〔式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ｍ、ｎおよびｐは式Ｉで定義の通り〕
の化合物およびその薬学的に許容される塩である。
【００２７】
本発明の医薬組成物は、活性成分として式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を含み、また薬学的に許容される担体および、所望により、他の治療剤を含み得る。“薬学的に許容される塩”なる用語は、有機および無機酸および塩基を含む、薬学的に許容される非毒性酸または塩基から製造する。
【００２８】
本発明の化合物が酸性である場合、塩は薬学的に許容される非毒性塩基から製造し得る。塩は、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛等を含む無機塩基の全ての安定な形に由来する。特に好ましいのは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウムおよびナトリウム塩である。薬学的に許容される有機非毒性塩基由来の塩は、１級、２級および３級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環式アミンおよび塩基性イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルコサミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン等の塩を含む。
【００２９】
本発明の化合物が塩基性であるとき、塩は薬学的に許容される非毒性酸から製造し得る。このような酸は、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモン酸(pamoic acid)、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸等を含む。特に好ましいのは、クエン酸、臭化水素酸、マレイン酸、リン酸、硫酸および酒石酸である。塩基性塩はまたアンモニウム、アルカリ金属、およびアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン塩のような有機塩基との塩およびアルギニンおよびリジンのようなアミノ酸との塩も含む。また、塩基性窒素含有基は、メチルクロライドのような低級アルキルハライド、ジメチル硫酸のようなジアルキル硫酸、ステアリルクロライドのような長鎖ハライドおよびベンジルクロライドのようなアラルキルハライドのような薬剤と４級化できる。
【００３０】
本発明の化合物は、哺乳動物において、ＶＬＡ−４アンタゴニストとして、およびＶＬＡ−４関連細胞接着の阻害剤として特に有用である。
【００３１】
式Ｉの化合物が、ＶＬＡ−４関連細胞接着を阻害する能力により、それらは種々の炎症、免疫および自己免疫疾患の処置、軽減または予防のために有用である。好ましくは、本発明の方法で処置する疾病は、呼吸器疾患(喘息のような)、関節炎、乾癬、移植拒絶、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病および炎症性腸疾患、幹細胞移動およびエングラフメント(engraphment)および鎌状赤血球貧血から選択される。式Ｉの化合物はまた移植手術；特に、慢性および急性両方の異種移植および同種移植拒絶の処置に有用である。
【００３２】
呼吸器疾患に関して、本発明の化合物は炎症性気道疾患の対症的および予防的処置の薬剤として有用である。このような疾病は、内因性(非アレルギー性)喘息および特に外因性(アレルギー性)喘息の両方を含むいかなるタイプまたは起源の喘息を含む。それらは気管支喘息、運動誘発喘息、職業性喘息、細菌感染に続いて誘導される喘息および他の非アレルギー性喘息の処置に有用である。喘息の処置はまた、特に、夜に喘鳴症状を示す、および“ゼーゼーいう幼児(wheezy infants)”と診断されたまたは診断可能な、４または５才より小さい患者の処置を含むと理解される。
【００３３】
喘息の処置における予防効果は、症状の発作の頻度の減少または重症度の減少、肺機能の改善または気道過敏症の改善により明白であり得る。更に、対症療法、即ち、症状の発作がおきたときに限定するまたは止めるための、またはそれを意図した治療、例えば、コルチコステロイドを使用した抗炎症治療の必要性の減少によりまた明白である。
【００３４】
本発明の化合物で処置する他の炎症性気道疾患は、例えば、アルミニウム症、石綿症、石粉症、鉄症、珪肺症、タバコ症および綿繊維肺沈着症を含む、塵肺(炎症性、一般に職業上の、粉塵の反復吸入により引き起こされる肺の疾病)を含む。
【００３５】
本発明の化合物で処置し得る更なる炎症性気道疾病は、成人呼吸窮迫症候群(ARDS)、悪化相の慢性閉塞性肺疾患(COPD)および医薬治療、例えば、アスピリンまたはｂ−アゴニスト気管支拡張剤治療の後の気道亢進の悪化を含む。
【００３６】
抗炎症活性、特に、好酸球活性化の阻害の観点から、本発明の化合物はまた気道の関連疾患、例えば、好酸球増加症、ハイパーエオシノフィリア、酸球性肺炎、寄生虫侵襲(熱帯性好酸球増加症を含む)、気管支肺アスペルギルス症、結節性多発動脈炎、好酸球性肉芽腫および医薬反応によりもたらされる気道に影響する好酸球関連疾病の処置にも有用である。
本発明の化合物は、アレルギー性鼻炎のようなアレルギー性炎症性疾患の処置にも使用し得る。
【００３７】
前記にしたがって、本発明は：
(Ａ)炎症、免疫または自己免疫疾患、特に関節炎、移植拒絶反応または炎症性気道疾患、特に喘息の処置のための医薬の製造における、前記の本発明の化合物、即ち、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩の使用；および
(Ｂ)処置を必要とする哺乳動物、特にヒトに前記の本発明の化合物を投与することを含む、炎症、免疫または自己免疫疾患、特に関節炎、移植拒絶反応または炎症性気道疾患、特に喘息の処置の方法
を含む。
【００３８】
インビトロの投与量は、約１０^-6から１０^-10モル濃度の間の範囲、好ましくは、約１０^-7から１０^-9モル濃度の間であり得る。
【００３９】
本発明の化合物の予防的または治療的投与量の大きさは、関与する哺乳動物の処置する状態の性質および重症度および本発明の具体的な化合物およびその投与経路に依存して変化する。一般に、１日投与量は、１回投与または分割投与で、２００から０.００１mg／kg哺乳動物体重、好ましくは５０から０.０５mg／kg、もっとも好ましくは１.０から０.１mg／kgの範囲である。ある場合、これらの範囲を超える投与量の使用が必要であり得る。静脈投与用組成物を使用するとき、適当な１日量は、体重kgあたり、本発明の化合物約５０から０.０００５mg(好ましくは２０から０.０１mg)の範囲である。経口投与用組成物を使用するとき、適当な１日量は、体重kgあたり、本発明の化合物約２０から０.００１mg(好ましくは１０から０.０１mg)の範囲である。眼投与用組成物を使用するとき、適当な１日量は、眼科的に許容される製剤中の本発明の化合物の溶液または懸濁液の重量当たり、本発明の化合物、約１０−０.０１％(好ましくは５.０−０.５％、典型的には２.０−０.１％)の範囲である。
【００４０】
本発明の化合物は、また他の薬理活性成分と組み合わせて使用し得る。例えば、典型的眼用製剤は、本化合物を単独で、またはマレイン酸チモロールのようなｂ−アドレナリン作動性遮断剤またはピロカルピンのような副交感神経作用剤と組合わせて含む。組合わせて使用したとき、二つの活性成分は、ほぼ等量部で存在する。
【００４１】
哺乳動物、特にヒトに有効量の本発明の化合物を投与するのに、投与の適当な経路を用い得る。例えば、経口、経直腸、局所、非経腸、眼、肺、鼻等の経路を用い得る。投与形は、錠剤、トローチ、分散剤、懸濁液、溶液、カプセル、クリーム、軟膏、エアロゾル等を含む。
【００４２】
本発明の医薬組成物は、活性成分として式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を含み、また、薬学的に許容される担体および所望により、他の治療的活性成分を含み得る。本発明は、炎症、免疫または自己免疫疾患、特に関節炎、移植拒絶反応または炎症性気道疾患、特に喘息の処置に使用するためのこのような組成物を含む。
【００４３】
本組成物は、経口、経直腸、局所(経皮デバイス、エアロゾル、クリーム、軟膏、ローションおよび散布剤を含む)、非経腸(皮下、筋肉内および静脈内を含む)、眼(眼病用)、肺(鼻またはバッカル吸入)または経鼻投与に適当な組成物を含む；もっとも、ある場合の最も適当な経路は、処置する状態の性質および重症度ならびに活性成分の性質に非常に依存する。それらは、簡便には単位投与形で存在し得、調剤の分野で既知の方法により製造し得る。
【００４４】
例えば、気道疾病の処置において、本発明の化合物は、経口で、例えば、錠剤形で、または吸入により、例えば、エアロゾルまたは他の霧化可能な製剤、または乾燥粉末製剤で、当分野で既知のような適当な吸入器を使用して投与し得る。アレルギー性鼻炎の処置への使用に関して、本発明の化合物はまた経鼻的に投与し得る。
【００４５】
本発明の化合物は、慣用の医薬調剤法に従った、活性成分の完全な混合物として組合わせ得る。担体は、所望の投与、即ち、経口、非経腸などの調製物の性質に依存して種々の形を取り得る。経口投与形の製剤において、経口液体製剤(例えば、懸濁液、エリキシル剤および溶液)の場合、水、グリコール、油、アルコール、香味剤、防腐剤、色素等のような通常の医薬媒体；または粉末、カプセル、錠剤のような経口固体製剤の場合、澱粉、糖、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等を使用し得る。固体経口製剤は液体経口製剤より好ましい。その投与の容易さのため、錠剤およびカプセルは好ましい経口投与単位形である。所望により、カプセルを標準水性または非水性法により被覆し得る。
【００４６】
上記の投与形に加えて、本発明の化合物は制御放出手段およびデバイスにより投与し得る。
【００４７】
経口投与に適した本発明の医薬組成物は、各々粉末または顆粒形の予定された量の活性成分を含むカプセル、カシェ剤または錠剤のような別個の単位、または水性または非水性液体中の溶液または懸濁液、もしくは水中油型または油中水型エマルジョンとして製造し得る。このような組成物は、調剤の分野で既知の方法により製造し得る。一般に、本組成物は、活性成分を液体担体、微細固体担体、またはその両方と均質におよび完全に混合し、次いで、所望により、生産物を所望の形に形作ることにより製造する。例えば、錠剤は、所望により１個またはそれ以上の付加成分と共に、圧縮または成形により製造し得る。圧縮錠剤は、適当な機械中、粉末または顆粒のような自由に流れる形の活性成分を、所望により、結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤または界面活性剤または分散剤と共に圧縮することにより製造し得る。成形錠剤は、適当な機械中、不活性な液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を成形することにより製造し得る。眼科用インサートは、活性成分の粉末化混合物とＨＰＣを１２,０００lbs(ゲージ)の圧縮力に、１４９℃で１−４分付すことにより、Carver Pressで製造した圧縮成形フィルムから製造する。フィルムを圧盤中を冷却水を循環させることにより、圧力下冷却する。次いで、インサートを個々に、フィルムから棒状形穴あけ器でフィルムから切断する。各インサートをバイアル中に入れ、次いで、それを加湿キャビネット(３０℃で相対湿度８８％)に２−４日置く。キャビネットから除去後、バイアルに蓋をし、次いで１２１℃で０.５時間、オートクレーブする。
【００４８】
本発明の化合物を含む組成物は、また、コルチコステロイド、気管支拡張薬、抗喘息薬(肥満細胞安定化剤)、抗炎症剤、抗リウマチ薬、免疫抑制剤、代謝拮抗薬、免疫調節剤、抗乾癬薬および抗糖尿病薬からなる群から選択される更なる薬剤を含み得る。具体的な化合物は、テオフィリン、スルファサラジンおよびアミノサリチル酸(抗炎症剤)；シクロスポリン、ＦＫ−５０６およびラパマイシン(免疫抑制剤)；シクロフォスファミドおよびメトトレキサート(代謝拮抗薬)；およびインターフェロン(免疫調節剤)を含む。
【００４９】
本発明は、吸入可能形の前記の本発明の化合物および吸入可能形のこのような化合物を吸入可能形の薬学的に許容される担体と共に含む吸入可能医薬を含む。
【００５０】
吸入可能形は、本発明の化合物を溶液中に含むエアロゾルのような霧化可能組成物または、水性、有機または水性／有機媒体中に本発明の化合物を含む推進剤または霧化可能組成物の分散剤、または本発明の化合物を、所望により粉砕形の薬学的に許容される担体と共に含む粉砕粒状形であり得る。
【００５１】
吸入可能形での使用に適したエアロゾル組成物は、当分野で既知の推進剤から選択される推進剤中の溶液中または分散剤中に本発明の化合物を含み得る。適当なこのような推進剤は、ｎ−プロパン、ｎ−ブタンまたはイソブタンのような炭化水素、またはこのような炭化水素の２個またはそれ以上の混合物、およびハロゲン置換炭化水素、例えば、フッ素置換メタン、エタン、プロパン、ブタン、シクロプロパンまたはシクロブタン、特に１,１,１,２−テトラフルオロエタン(HFA134a)およびヘプタフルオロプロパン(HFA227)、またはこのようなハロゲン置換炭化水素の２個またはそれ以上の混合物を含む。本発明の化合物が推進剤中の分散剤に存在する場合、即ち、推進剤に分散した特定の形で存在するとき、エアロゾル組成物はまた滑沢剤および界面活性剤を含み得、これらは当分野で既知の滑沢剤および界面活性剤から選択される。エアロゾル組成物は、推進剤の重量を基本にして、約５重量％まで、例えば、０.００２から５重量％、０.０１から３重量％、０.０１５から２重量％、０.５から２重量％、または０.５から１重量％の本発明の化合物を含み得る。存在するとき、滑沢剤および界面活性剤は、エアロゾル組成物の各々５％から０.５重量％までであり得る。エアロゾル組成物はまた、特に加圧計量用量吸入装置から投与するとき、本発明の組成物の３０重量％までの量で共溶媒としてエタノールを含み得る。
【００５２】
吸入可能形としての使用が適した粉砕粒子形、即ち、乾燥粉末は、粉砕粒子形の本発明の化合物を、所望により、乾燥粉末吸入組成物の担体として既知の物質、例えば、アラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノース、スクロース、ラクトース、マルトース、澱粉またはデキストランのようなモノサッカライド、ジサッカライドおよびポリサッカライドを含むサッカライドから選択し得る粉砕粒子担体と含む。特に好ましい担体はラクトースである。乾燥粉末は、好ましくは、活性成分５μgから４０mgの投与単位で乾燥粉末吸入器での使用のためのゼラチンまたはプラスチックのカプセル中、または発疱剤中にあり得る。あるいは、乾燥粉末は多数回投与乾燥粉末吸入装置中の貯蔵部として含まれ得る。
【００５３】
粉砕粒子形および本発明の化合物が粒子形で存在するエアロゾル組成物において、本発明の化合物は約１０μm、例えば、１から５μmの平均粒子直径を有し得る。本発明の化合物および、乾燥粉末組成物に存在する固体担体の粒子サイズは、慣用法で、例えば、エアージェットミル、ボールミルまたはバイブレーターミル、微小沈殿、噴霧乾燥、凍結乾燥または超臨界媒体からの再結晶により、所望のサイズまで減少できる。
【００５４】
吸入可能医薬は、吸入可能形に適した吸入装置を使用して投与し得、このような装置は当分野で既知である。したがって、本発明はまた前記のような吸入可能形の本発明の化合物を含む医薬製品を、吸入装置に関連して提供する。更なる態様において、本発明は前記のような吸入可能形の本発明の化合物を含む吸入装置を提供する。
【００５５】
吸入可能形がエアロゾル組成物であるとき、吸入装置は、組成物の１０から１００μl、例えば、２５から５０μlのような測定された投与量を送達するのに適したバルブを有したエアロゾルバイアルであり得る。適当なこのようなバイアルおよび圧力下それにエアロゾル組成物を包含させる方法は、吸入治療の分野の当業者には既知である。吸入可能形が霧化可能水性、有機または水性／有機分散剤であるとき、吸入装置は、既知のネブライザー、例えば、１から５０ml、一般に１から１０mL分散剤を含む例えば、エアージェットネブライザーような慣用の含気性ネブライザーまたは超音波ネブライザー；または慣用のネブライザーよりも少量、例えば、１０から１００μlの噴霧用量を可能にした、AERx(Aradigm, USから販売)またはBINEB(Boehringer Ingelheim)ネブライザーのような手持ちネブライザーであり得る。吸入可能形が粉砕粒子形であるとき、吸入装置は、乾燥粉末の投与単位を含むカプセルまたはブリスターからの乾燥粉末の送達に適した乾燥粉末吸入装置または作動当たり、例えば、２５mgの乾燥粉末の送達に適した多数回投与量乾燥粉末吸入装置であり得る。適当なこのような乾燥粉末吸入装置は既知である。
【００５６】
本発明の化合物の活性およびＶＬＡ−４特異性は、インビトロおよびインビボアッセイを使用して測定し得る。
【００５７】
これらの化合物の細胞接着阻害活性は、ＶＬＡ−４−発現細胞のフィブロネクチン−、ＣＳ１−またはＶＣＡＭ−Ｉ−被覆プレートへの結合の阻害に必要な阻害剤の濃度の測定により測定し得る。このアッセイにおいて、マイクロタイターウェルをフィブロネクチン(ＣＳ−１配列を含む)またはＣＳ−１またはＶＣＡＭ−Ｉでコートする。ＣＳ−１を使用するとき、それは、ウェルに結合するためにウシ血清アルブミンのような担体タンパク質と接合していなければならない。ウェルをコートしたら、種々の濃度の試験化合物を、ついで適当に標識したＶＬＡ−４発現細胞と共に添加する。あるいは、試験化合物を最初に添加し、細胞の添加前にコートしたウェルでインキュベートする。細胞をウェル中で少なくとも３０分インキュベートさせる。インキュベーションに続き、ウェルを空にし、洗浄する。結合の阻害を、種々の濃度の試験化合物の各々のプレートに結合した、ならびに試験化合物を含まないコントロールの蛍光または放射活性の定量により測定する。アッセイで使用し得るＶＬＡ−４発現細胞は、ラモス細胞、ジャーカット細胞、A375メラノーマ細胞、ならびにヒト末梢血リンパ球(PBL)を含む。本アッセイで使用する細胞は、蛍光的にまたは放射活性的に標識し得る。
【００５８】
直接結合アッセイは、本発明の化合物の阻害活性の定量にも用い得る。本アッセイにおいて、ＩｇＧ１分子の蝶番領域の上に結合したＶＣＡＭ(Ｄ１Ｄ２)の最初の２つの免疫グロブリンドメインを含むＶＣＡＭ−ＩｇＧ融合タンパク質(ＶＣＡＭ ２Ｄ−ＩｇＧ)を、アルカリホスファターゼ(ＡＰ)のようなマーカー酵素に接合する。ＶＣＡＭ−ＩｇＧ融合物の合成は、ＰＣＴ公開ＷＯ９０／１３３００に記載されている。この融合物のマーカー酵素への接合は、既知の架橋法により達成される。ＶＣＡＭ−ＩｇＧ酵素接合体を、次いで、Millipore Multiscreen Assay System(Millipore Corp., Bedford, MA)に含まれるような多ウェル濾過プレートのウェルに入れる。次いで、試験阻害化合物の種々の濃度を添加し、続いてＶＬＡ−４−発現細胞を添加する。細胞、化合物およびＶＣＡＭ−ＩｇＧ酵素接合体を共に混合し、室温でインキュベートさせる。インキュベーションに続いて、ウェルを、細胞および結合ＶＣＡＭを残して、真空排出する。結合ＶＣＡＭの定量を、ＶＣＡＭ−ＩｇＧに接合した酵素の適当な比色基質の添加により測定し、反応細胞接着阻害活性の量を測定する。
【００５９】
実施例の化合物は、１ナノモルほど低い桁のＶＬＡ−４結合の測定ＩＣ５０値を有する。
【００６０】
本発明の化合物のＶＬＡ−４阻害特異性の評価のために、インテグリンの他の主要なグループ、例えば、β２およびβ３、ならびにＶＬＡ−５、ＶＬＡ−６およびα４β７のような他のβ１インテグリンのアッセイを行う。これらのアッセイは、上記の接着阻害および直接結合アッセイと同様であり、適当なインテグリン発現細胞および対応リガンドを変える。例えば、多形核細胞(ＰＭＮ)はβ２インテグリンをその表面に発現し、ＩＣＡＭに結合する。β３インテグリンは血小板凝集に関与し、阻害は標準血小板凝集アッセイで測定し得る。ＶＬＡ−５は、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列に特異的に結合するが、ＶＬＡ−６はラミニンに結合する。実施例の化合物は、ＶＬＡ−４に対する関連インテグリンに選択性が見られる。
【００６１】
動物の接触過敏症の阻害を試験するインビボアッセイは、P.L. Chisholm et aL, Eur. J. Immunol., vol. 23, pp. 682-688(1993)に記載されている。
【００６２】
回虫抗原誘導後期相気道反応および喘息ヒツジの気道反応亢進は、W. M. Abraham et al., J. Clin. Invest., vol. 93, pp. 776-87(1994)に記載されている。
本発明の化合物は、また以下のアッセイで試験し得る。
【００６３】
マウスの抗原誘導肺好酸球増加症
マウスの感作：雄B6D2F1/Jマウスを、食塩水媒体中の２mgの水酸化アルミニウムゲルに吸着された８μgのオブアルブミン(ＯＶＡ)を含む０.５mL明礬沈殿抗原の注射により感作する。５日後、マウスにＯＶＡ／明礬の追加注射をする。コントロール動物を明礬のみで感作する。１０匹のマウスを各々のグループに使用する。
【００６４】
攻撃および医薬投与：マウスを１２×１４×１０インチのプレクシグラスチャンバーに入れ、実験の最初(ｔ＝０)および５時間後に、霧化ＯＶＡ(食塩水中０.５％)に１時間曝す。低分子量アンタゴニストを２％ＤＭＳＯおよび１５０ｍＭ トリス、ｐＨ８.８に溶解する。溶媒コントロールを各実験に包含させる。医薬を蛍光でＯＶＡ曝露３０分前に、および最初のＯＶＡ曝露６時間後に投与する。
【００６５】
ＢＡＬ液体回収および分析：動物をＣＯ₂窒息により、最初の抗原攻撃後２４時間後に殺す。気管を曝露し、カニューレ挿入する。肺を０.６mL緩衝液(１０mM HEPES、０.５％ＢＳＡおよび１０Ｕ／mLヘパリン含有ハンクス緩衝化食塩水)で洗浄する。洗浄液中の好酸球の数を、各サンプルの白血球の全数および好中球の割合を計数することにより評価する。
【００６６】
阻害％を式
【数１】

〔式中、Ｅｏｓ＝好酸球の平均値、ＯＡ＝攻撃したおよびＯＡ無し＝非攻撃マウス〕
により計算する。
【００６７】
本アッセイにおいて、３０mg／kgで投与した実施例の化合物は、７７％までの好酸球値の阻害割合を示した。
【００６８】
本発明の化合物は、既知の方法を使用して合成し得る。例えば、アナログ化合物の合成を教示する、本明細書に引用して包含させるＷＯ９６／２２９６６参照。本発明は、更に、説明を意図し、限定するものではない以下の実施例を参照して更に詳述する。例えば、ＷがＣＨである式Ｉの化合物は、式II
Ｒ_１−(ＣＨ_２)_ｐ−Ｙ−ＯＨ (II)
〔式中、Ｒ_１、ｐおよびＹが上記で定義の意味〕
の化合物またはその反応性官能性誘導体を、式III
【化１２】

〔式中、
カルボキシル基は保護形であり、Ｒ_２−Ｒ_４、Ｚ、ｎおよびｍは上記で定義の意味を有する〕
の化合物と反応させ、所望により、このようにして得た化合物を本発明の他の化合物に変換することを含む。縮合は、アミド形成の分野で既知の方法にしたがって、例えば、１−[３−(ジメチルアミノ)プロピル]−３−エチルカルボジイミド塩酸塩およびジイソプロピルエチルアミンのような塩基などの縮合剤の存在下、不活性溶媒(塩化メチレンのような)中、好ましくは室温で行う。
【００６９】
所望により置換されていてもよいフェニルウレイドフェニル酢酸のような式IIの出発物質は、次ぎに、当分野で既知であるか、または当分野で既知の方法にしたがって、例えば、ｐ−アミノフェニル酢酸エステルと適当なアリールイソシアネートの縮合により対応するフェニルウレイドフェニル酢酸エステルを得、得られたエステルを加水分解して製造する。
【００７０】
式IIIの出発物質は、次ぎに、式IV
【化１３】

〔式中、カルボキシル基は保護形(例えば、アルキルエステルとして)であり、Ｒ₃、Ｒ₄およびｍは上記で定義の意味である〕
の化合物と、好ましくは反応性官能性誘導体である式Ｖ
Ｌ−Ｚ−(ＣＨ₂)_n−ＣＯＯＨ (Ｖ)
〔式中、Ｚは(ＣＨ₂)_n'またはＣＨＲ₆、およびｎ，ｎ'およびＲ₆は上記で定義の意味およびＬはハロまたは(アルキルまたはアリール)−スルホニルオキシのような脱離基〕
の化合物と、トリエチルアミンのような塩基の存在下反応させ、式VI
【化１４】

〔式中、カルボン酸は保護形(例えば、アルキルエステルとして)、およびＬ、Ｒ₁、Ｒ₂およびＺは上記で定義の意味〕
の化合物を得、これを次ぎに式IX
Ｒ₂−ＮＨ₂ (VII)
〔式中、Ｒ₂は上記で定義の意味〕
のアミンと当分野で既知の条件下で反応させ、式IIIの出発物質を保護形(例えば、アルキルエステルとして)で得る。例えば、水性水酸化リチウムのような塩基との加水分解は、式IIIの出発物質を提供する。
【００７１】
引用した方法において上記のように、それ自体行い得るが、必要により、妨害する反応基を一時的に保護し、次いで得られる本発明の化合物を遊離させる。本発明の化合物に記載の方法で変換される出発化合物および中間体において、カルボキシル、アミノおよびヒドロキシ基のような存在する官能基は、所望により調合有機化学で一般的な慣用の保護基で保護する。既知の保護基およびその挿入は、例えば、J.F.W. McOmie, “Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, London, New York, T.W. Greene, “Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley, New Yorkに記載されている。例えば、ヒドロキシ基は、有利には、ベンジルエーテルの形で保護し、それは触媒的水素化により開裂でき、ヒドロキシ置換生産物を得る。
【００７２】
Ｘがエステル化カルボキシ(ＣＯＯＲ₅)である得られる式Ｉの化合物は、対応する酸に、例えば、当分野で既知の加水分解により変換できる。
【００７３】
以下の実施例で使用する略語は、示す意味を有する：
conc.＝濃縮
ＤＥＩＡ＝ジ−イソプロピルエチルアミン
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルフォキシド
ＥＤＡＣ＝１−[３−(ジメチルアミノ)プロピル]−３−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＨＯＢＴ＝ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＯＳｕ＝ヒドロキシスクシンアミド
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー
ＭＳ＝質量分析法
ＮＭＲ＝核磁気共鳴
ＯＲ＝旋光度
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー
トリス＝トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン
【００７４】
実施例１
(Ｓ)−β−[３−メトキシプロピル)[[４−[(２−メチルフェニルアミノカルボニルアミノ)フェニル]アセチル]アミノ]アセチルアミノ−ベンゼンプロパン酸
段階１
【化１５】

４５mL ＣＨ₂Ｃｌ₂に、１ｇ(４.５mmol)(３Ｓ)−３−アミノ−３−フェニルプロパン酸１,１−ジメチルエチルを添加する。次いで、０.７２０mL(５.１７mmol)ＴＥＡを添加する。混合物を１０分撹拌し、０℃に冷却する。この混合物に、０.４５０mL(５.１７mmol)ブロモアセチルブロマイドの５mL ＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を１５分滴下する。混合物を３時間にわたり撹拌し、室温に冷却させる。５０％酢酸エチル／５０％ヘキサンを使用したＴＬＣを、反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、３０ｇシリカゲル、Merck、グレード９３８５、２３０−４００メッシュ、６０Ａを使用し、２５％酢酸エチル／７５％ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーに付し、１.７５ｇ濃黄色油状物を産生し、それはＴＬＣで１スポットを示す。生産物を次段階に使用する。
【００７５】
段階２
【化１６】

５０mL ＤＭＦに１.５ｇ Ａおよび１.０ｇ(１１mmol)３−メトキシ−プロピルアミンを添加する。室温で、０.７４mL(５.３mmol)トリエチルアミンを添加する。混合物を１６時間、室温で撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／９０％ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、４５ｇシリカゲルを使用し、２％で出発し、徐々に４％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂まで上昇させたフラッシュクロマトグラフィーで、１.６ｇ黄色油状物を得、それはＴＬＣで１スポットを示す。本生産物を次段階に使用する。
【００７６】
段階３
【化１７】

５０mL ＣＨ_２Ｃｌ_２に１.５ｇ Ｂを添加する。次いで、１.４ｇ(４.８mmol)Ｎ−(２−メチル)−Ｎ'−(４'−酢酸)ジフェニル尿素(一部のみ可溶性)および０.７４mL(５.３mmol)ＤＩＥＡを添加する。混合物を１５分、室温で撹拌し、透明黄色溶液を得る。０.９８ｇ(４.８mmol)ＥＤＡＣを添加し、混合物を３時間撹拌する。１０％ＣＨ_３ＯＨ／９０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、９０ｇシリカゲルを使用し、１％で出発し、５％ＣＨ_３ＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２まで上昇させたフラッシュクロマトグラフィーに付し、１.９３ｇ白色泡状物を得る。
【００７７】
段階４
【化１８】

３５mL ＣＨ₂Ｃｌ₂に、室温で１.７ｇ Ｃを添加する。次いで、８mL ＴＦＡ酸を５mL ＣＨ₂Ｃｌ₂と共に滴下する。混合物を２時間撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／９０％ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させる。新たなＣＨ₂Ｃｌ₂を数回添加し、全ＴＦＡを除去する。生産物を、５０ｇシリカゲルおよび２％から５％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したフラッシュクロマトグラフィーに付し、１.５ｇの標題化合物を白色粉末として得る。
ｍｐ：１２５−１２７℃
ＯＲ：−２７.４°、ＤＭＳＯ(１０mg／mL)
【００７８】
実施例２
(Ｓ)−[３−メトキシプロピル)[[４−[(２−メチルフェニルアミノカルボニルアミノ)フェニル]アセチル]アミノ]アセチルアミノ−４−ヘキセン酸
段階１
【化１９】

実施例１の段階１の方法に従うが、０.８３４ｇ(４.５mmol)(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヘキセン酸１,１−ジメチルエチルを使用して出発し、０１.４６ｇの濃黄色油状物を得、それはＴＬＣで１スポットを示す。本生産物を次段階に使用する。
【００７９】
段階２
【化２０】

１０mL ＤＭＦに、０.３１ｇ(１mmol)Ａを添加する。次いで、０.１８ｇ(２mmol)３−メトキシプロピルアミンを添加する。室温で、０.２３mL(２mmol)ＴＥＡを添加する。混合物を１６時間室温で撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／９０％ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、１２ｇシリカを使用し、２％から出発して徐々に４％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂まで増加させたフラッシュクロマトグラフィーに付して、０.１ｇ黄色油状物を得、それはＴＬＣで１スポットを示す。本生産物を次段階に使用する。
【００８０】
段階３
【化２１】

５０mL ＣＨ₂Ｃｌ₂に、１.４ｇ(４.４mmol)Ｂを添加する。次いで、１.４ｇ(４.８mmol)Ｎ−(２−メチル)−Ｎ'−(４'−酢酸)ジフェニル尿素(一部のみ可溶性)および０.７４mL(５.３mmol)ＤＩＥＡを添加し、混合物を１５分撹拌して透明黄色溶液とする。０.９８ｇ(４.８mmol)ＥＤＡＣを添加し、混合物を３時間撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、９０ｇシリカゲルを使用し、１％で出発し、５％ＣＨ₃ＯＨのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液まで増加させたフラッシュクロマトグラフィーに付して、１.８ｇ白色泡状物を得る。
【００８１】
段階４
【化２２】

３５mL ＣＨ₂Ｃｌ₂に室温で１.７ｇ Ｃを添加する。次いで、８mL ＴＥＡを、５mL ＣＨ₂Ｃｌ₂と共に滴下する。混合物を２時間撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／９０％ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させる。新たなＣＨ₂Ｃｌ₂を数回添加し、全ＴＥＡを除去する。生産物を５０ｇシリカゲルおよび２％から５％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したフラッシュクロマトグラフィーに付し、１.５ｇの標題化合物を白色粉末として得る。
ｍｐ：８８−９０℃
【００８２】
実施例３
(Ｓ)−β−[３−メトキシプロピル)[[４−[(２−メチルフェニルアミノカルボニルアミノ)フェニル]アセチル]アミノ]アセチルアミノ−３,４−ジメトキシ−ベンゼンプロパン酸段階１
【化２３】

３００mL ＣＨ_３ＯＨに３０ｇ(１４４.２mmol)３,４−ジメトキシ桂皮酸を添加する。Ｈ_２ＳＯ_４ ４滴を添加し、混合物を４時間還流する。７０／３０酢酸エチル／ヘキサンを使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、２０％酢酸エチル８０％ヘキサン、３５０ｇシリカゲル、グレード６０、７０−２３０メッシュを使用したフラッシュクロマトグラフィーに付し、１４.１４ｇ Ａを得る。
【００８３】
段階２
【化２４】

２００mL ＴＨＦに１１.８ｇ(５５.８mmol)(Ｒ)−(＋)−Ｎ−ベンジルα−メチルベンジルアミンを添加する。混合物を０℃に冷却し、３４.９mL(５５.８mmoL)ｎ−ＢｕＬｉ(１.６Ｍヘキサン溶液)を３０分にわたり滴下する。混合物を更に３０分撹拌する。反応を−７８℃に冷却する。次いで、６.２ｇ(２７.９mmol)３,４−ジメチルオキシ桂皮酸メチルの１５０mLＴＨＦ溶液を、１時間にわたり滴下する。混合物を３０分、−７８℃で撹拌し、ゆっくり、−７８℃に維持しながら２５mL飽和ＮＨ₄Ｃｌ溶液を添加し、混合物を室温に温め、食塩水で洗浄し、乾燥状態まで減少させる。５０／５０酢酸エチル／ヘキサンを使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を１８０ｇシリカゲル、Merck、グレード９３８５、２３０−４００メッシュ、６０Ａのフラッシュクロマトグラフィーに付し、１０.５ｇの濃黄色油状物を得る。
【００８４】
段階３
【化２５】

５.０ｇ(１１.５mmol)Ｂを２５０mL ＣＨ₃ＯＨ、２５mL Ｈ₂Ｏおよび７.５mL ＨＯＡｃに添加する。１ｇパールマン触媒(Ｐｄ(ＯＨ)₂)を添加する。風船を使用して、混合物をＨ₂雰囲気中、１６時間室温で還流させる。５％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物をセライトを通して濾過し、ＣＨ₃ＯＨで洗浄し、乾燥状態まで濃縮させる。乾燥生産物にＣＨ₂Ｃｌ₂を添加し、それを食塩水で洗浄して飽和ＮａＨＣＯ₃で塩基性とする。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、１５０ｇシリカゲル、２３０−４００メッシュ、１から４％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂でのフラッシュクロマトグラフィーにより、１.５４ｇ黄色油状物を得る。
【００８５】
段階４
【化２６】

９mL ＣＨ₂Ｃｌ₂に、０.２ｇ(０.８mmol)Ｃおよび０.１３mL(０.９mmol)ＴＥＡを添加する。混合物を１０分撹拌し、混合物を０℃に冷却する。０.０８mL(０.９mmol)ブロモアセチルブロマイドの１mL ＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を１５分にわたり滴下する。混合物を３時間にわたり撹拌し、混合物を室温にさせる。５０％酢酸エチル／５０％ヘキサンを使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、３０ｇシリカゲル、Merck、グレード９３８５、２３０−４００メッシュ、６０Ａを使用し、２５％酢酸エチル／７５％ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーにより、０.２３７ｇの濃黄色油状物を得、それはＴＬＣで１スポットを示す。本生産物を次段階に使用する。
【００８６】
段階５
【化２７】

１０mL ＤＭＦに、０.３６ｇ(１mmol)Ｄおよび０.１８ｇ(２mmol)３−メトキシプロピルアミンを添加する。室温で０.２３mL ＴＥＡを添加する。混合物を１６時間、室温で撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／９０％ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、１２ｇシリカゲルを使用し、２％で出発して徐々に４％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したフラッシュクロマトグラフィーに付し、０.１ｇ黄色油状物を得、それはＴＬＣで１スポットを示す。本生産物を次段階に使用する。
【００８７】
段階６
【化２８】

５mL ＣＨ₂Ｃｌ₂に、０.１ｇ(０.２７mmol)Ｅおよび０.０８５３ｇ(０.３０mmol)Ｎ−(２−メチル)−Ｎ'−(４'−酢酸)ジフェニル尿素(これは一部のみ可溶性)、０.０５６mL(０.３４mmol)ＤＩＥＡを添加し、混合物を１５分、室温で撹拌して透明黄色溶液を得る。０.０５８ｇ(０.３０mmol)ＥＤＡＣを添加し、混合物を３時間撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／９０％ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、９０ｇシリカゲルを使用し、１％から５％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂まで増加させたフラッシュクロマトグラフィーに付し、０.１１３ｇ白色泡状物を得る。
【００８８】
段階７
【化２９】

２１mL ＴＨＥおよび８mL Ｈ₂Ｏに、０.３６ｇ(０.５７mmol)Ｆを添加する。０.３６ｇ(０.８６mmol)ＬｉＯＨの１mL Ｈ₂Ｏ溶液を５分にわたり滴下し、混合物を２時間、室温で撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、２０ｇシリカゲル、１００％ＣＨ₂Ｃｌ₂から５％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したフラッシュクロマトグラフィーに付し、０.３６ｇの標題化合物を白色粉末として得る。
ｍｐ：１１８−１２０℃
ＯＲ：＝−３３.６°、ＤＭＳＯ(１０mg／mL)
【００８９】
実施例４
(Ｓ)−β−[３−メトキシプロピル)[[４−[(２−メチルフェニルアミノカルボニルアミノ)フェニル]アセチル]アミノ]アセチルアミノ−４−メトキシ−ベンゼンプロパン酸、ナトリウム塩
段階１
【化３０】

２５０mL ＣＨ_３ＯＨに、５０ｇ(２８０.８mmol)４−ジメトキシ桂皮酸および２mL conc. Ｈ_２ＳＯ_４を添加する。混合物を６時間還流させる。７０／３０酢酸エチル／ヘキサンを使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。約３０mL ＣＨ_３ＯＨを回収する。混合物を室温に冷却し、次いで結晶化し、濾過し、Ｈ_２Ｏで洗浄し、乾燥させて４９.２３ｇの所望の生産物を得る。
【００９０】
段階２
【化３１】

３００mL ＴＨＦに、１０.９９ｇ(５２mmol)(Ｒ)−(＋)−Ｎ−ベンジル−α−メチルベンジルアミンを添加する。混合物を０℃に冷却し、３２.５mL(５２mmol)ｎ−ＢｕＬｉ(１.６Ｍヘキサン溶液)を３０分にわたり滴下する。混合物を更に３０分撹拌する。反応を−７８℃に冷却する。次いで、５ｇ(２６mmol)４−メトキシ桂皮酸メチルの１００mL ＴＨＦ溶液を１時間にわたり滴下する。混合物を３０分、−７８℃で撹拌し、ゆっくり、−７８℃に維持しながら２５mL飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液を添加し、混合物を室温に温め、食塩水で洗浄し、乾燥状態まで濃縮させる。５０／５０酢酸エチル／ヘキサンを使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を１８０ｇシリカゲル、Merck、グレード９３８５、２３０−４００メッシュ、６０Åのフラッシュクロマトグラフィーに付し、９.７３８ｇの濃い薄黄色油状物(ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶し、白色結晶を得る)を得る。
【００９１】
段階３
【化３２】

７.７４ｇ(１９.２mmol)Ｂを２５０mL ＣＨ_３ＯＨ、２５mL Ｈ_２Ｏおよび７.５mL ＨＯＡｃに添加する。１ｇパールマン触媒を添加する。水素風船を使用して、混合物をＨ_２雰囲気下、１６時間、室温で還流させる。５％ＣＨ_３ＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物をセライトを通して濾過し、ＣＨ_３ＯＨで洗浄し、乾燥状態まで濃縮させる。乾燥生産物に、ＣＨ_２Ｃｌ_２を添加し、それを食塩水で洗浄して、ＮａＨＣＯ_３で塩基性とする。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、１５０ｇシリカゲルを使用し、２３０−４００メッシュを使用して、１から４％ＣＨ_３ＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２を使用して３.４ｇの濃い薄黄色油状物(ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶し、白色結晶を得る)を得る。
【００９２】
段階４
【化３３】

２５mL ＣＨ_２Ｃｌ_２に、０.８ｇ(３.８２mmol)Ｃおよび０.６２mL(４.４mmol)ＴＥＡを添加する。混合物を１０分撹拌し、混合物を０℃に冷却する。０.３８mL(４.４mmol)ブロモアセチルブロマイドの５mL ＣＨ_２Ｃｌ_２溶液を１５分にわたり滴下する。混合物を３時間撹拌する。混合物を室温にする。５０％酢酸エチル／５０％ヘキサンを使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、３０ｇシリカゲル、Merck、グレード９３８５、２３０４００メッシュ、６０Åを使用し、２５％酢酸エチル／７５％ヘキサンを使用したフラッシュクロマトグラフィーに付し、１.３ｇの濃い黄色油状物を得、それはＴＬＣで１スポットを示す。本生産物を次段階に使用する。
【００９３】
段階５
【化３４】

７０mL ＤＭＦに１.３ｇ(３.９４mmol)Ｄおよび０.６６７ｇ(７.４９mmol)３−メトキシプロピルアミンを添加する。室温で、１.０５mL(７.４９mmol)ＴＥＡを添加する。混合物を１−６時間、室温で撹拌する。１０％ＣＨ_３ＯＨ／９０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、７５ｇシリカゲルを使用し、２％から出発し、４％ＣＨ_３ＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２に徐々に増加させたフラッシュクロマトグラフィーに付し、１.２９ｇ黄色油状物を得、それはＴＬＣで１スポットを示す。本生産物を次段階に使用する。
【００９４】
段階６
【化３５】

３０mL ＣＨ₂Ｃｌ₂に０.７２ｇ(２.１mmol)Ｅおよび０.７３９ｇ(２.６mmol)Ｎ−(２−メチル)−Ｎ'−(４'−酢酸)ジフェニル尿素(これは一部のみ可溶性)、０.４６mL(２.６mmol)ＤＩＥＡを添加し、混合物を１５分、室温で撹拌し、透明黄色溶液を得る。０.４９９ｇ(２.６mmol)ＥＤＡＣを添加し、混合物を３時間撹拌する。１０％ＣＨ₃ＯＨ／９０％ＣＨ₂Ｃｌ₂を使用したＴＬＣを反応の追跡に使用する。混合物を乾燥状態まで濃縮させ、９０ｇシリカゲルを使用し、１％から５％ＣＨ₃ＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂に増加させたフラッシュクロマトグラフィーに付し、０.９２０ｇ白色泡状物を得る。
【００９５】
段階７
【化３６】

３０mL ＥｔＯＨおよび８mL Ｈ₂Ｏに、０.９０ｇ(１.４９mmol)Ｆを添加する。この混合物に、０.０５７ｇ(１.４２mmol)ＮａＯＨの１mL Ｈ₂Ｏを添加する。混合物を３.５時間、室温で撹拌する。混合物を濾過し、乾燥させて０.７２０ｇの標題化合物を白色固体として得る。
ｍｐ：２１６−１１８℃(分解)
ＯＲ：ＤＭＳＯ(５.３mg／ｍＬ)中−２１.０６９°
【００９６】
実施例５
先の実施例と同様にして、以下の式の化合物を製造する
【化３７】

[0001]
The present invention relates to organic compounds that are VLA-4 antagonists, the preparation of such compounds and their use as pharmaceuticals.
[0002]
Cell adhesion (ie, the process by which cells bind to each other, migrate towards specific targets, or localize in the extracellular matrix) is the basis of many biological phenomena. Cell adhesion results in adhesion of hematopoietic cells to endothelial cells and migration of these hematopoietic cells out of blood vessels and into the site of the wound, thus playing a role in mammalian pathology such as inflammation and immune response .
[0003]
Various cell surface macromolecules (known as cell adhesion receptors) mediate cell-cell and cell-matrix interactions. For example, integrins are important mediators of adhesive interactions between hematopoietic cells and other cells. Integrins are non-covalent heterodimer complexes composed of two subunits, α and β. Depending on the type of its α and β subunits, each integrin molecule is divided into its own subfamily. At least 12 different α subunits (α1-α6, α-L, α-M, α-X, α-IIB, α-V and α-E) and at least 9 different β subunits (β1-β9) )
[0004]
Late-stage antigen-4 (VLA-4), also known as α4β1 integrin or CD49d / CD29, is a leukocyte cell surface receptor that participates in various cell-cell and cell-matrix adhesions. It is a receptor for both cytokine-inducible endothelial cell surface protein, vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) and extracellular matrix protein fibronectin (FN). Anti-VLA-4 monoclonal antibody (mAb) inhibits VLA-4 dependent adhesion interactions both in vitro and in vivo. This inhibition of VLA-4 dependent cell adhesion may prevent or inhibit some inflammation and autoimmune pathologies.
[0005]
WO96 / 22966 has the formula
[Chemical 6]

Are described as being useful for the inhibition, prevention and suppression of VLA-1 mediated cell adhesion.
[0006]
In accordance with the present invention, certain novel compounds have been discovered as having very good VLA-4 antagonistic activity and useful pharmacological properties.
[0007]
  According to one embodiment of the present invention, the compound of formula I
[Chemical 7]

[Where,
R₁Is alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, aryl-fused cycloalkyl, cycloalkenyl, aryl, aryl-substituted alkyl (aralkyl), aryl-substituted alkenyl or alkynyl, cycloalkyl-substituted alkyl, cycloalkenyl-substituted cycloalkyl, biaryl , Alkoxy, alkenoxy, alkynoxy, aryl-substituted alkoxy (aralkoxy), aryl-substituted alkenoxy or alkynoxy, alkylamino, alkenylamino or alkynylamino, aryl-substituted alkylamino, aryl-substituted alkenylamino or alkynylamino, aryloxy, aryl Amino, N-alkylureido-substituted alkyl, N-arylureido-substituted alkyl, alkylcarbonylamino-substituted Alkyl, aminocarbonyl-substituted alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl-substituted alkyl, heterocyclyl-substituted amino, carboxyalkyl substituted aralkyl, oxocarbocyclyl-fused aryl, or heterocyclylalkyl;
R₂Is (CH₂)_q-V- (CH₂)_{q '}-V_r-R₈;
R₃Is H, alkyl, alkenyl, aryl, or heteroaryl;
R₄Is H, aryl, alkyl, cycloalkyl, alkenyl, cycloalkenyl, alkynyl and aryl-substituted alkyl, heterocyclyl, heterocyclylcarbonyl, aminocarbonyl, amide, mono- or dialkylaminocarbonyl, mono- or diarylaminocarbonyl, alkylarylaminocarbonyl Diarylaminocarbonyl, mono- or diacylaminocarbonyl, aromatic or aliphatic acyl or optionally amino,Halo,Hydroxy, mercapto, mono- or dialkylamino, mono- or diarylamino, alkylarylaminoTheAlkyl optionally substituted with a substituent selected from the group consisting of no- or diacylamino, alkoxy, alkenoxy, aryloxy, thioalkoxy, thioalkenoxy, thioalkynoxy, thioaryloxy, and heterocyclyl;
R₅Is alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, cycloalkenyl, aryl, aryl-substituted alkyl, aryl-substituted alkenyl, or alkynyl; optionally amino, halo, hydroxy, mercapto, mono- or dialkylamino, mono- or diarylamino, Alkyl optionally substituted with a substituent selected from the group consisting of alkylarylamino, mono- or diacylamino, alkoxy, alkenoxy, aryloxy, thioalkoxy, thioalkenoxy, thioalkynoxy, thioaryloxy, and heterocyclyl;
R₆Is alkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, cycloalkenyl, aralkyl, aryl-substituted alkenyl or alkynyl, hydroxy-substituted alkyl, alkoxy-substituted alkyl, aralkoxy-substituted alkyl, amino-substituted alkyl, (aryl-substituted alkyloxycarbonylamino ) -Substituted alkyl, thiol-substituted alkyl, alkylsulfonyl-substituted alkyl, (hydroxy-substituted alkylthio) -substituted alkyl, thioalkoxy-substituted alkyl, acylamino-substituted alkyl, alkylsulfonylamino-substituted alkyl, arylsulfonylamino-substituted alkyl , Morpholino-alkyl, thiomorpholino-alkyl, morpholinocarbonyl-substituted alkyl, thiomorpholinocarbonyl-substituted alkyl, [N- (alkyl Alkenyl or alkynyl) - or(N, N-Alkyl, dialkenyl or dialkynyl) -amino] carbonyl-substituted alkyl, carboxyl-substituted alkyl, dialkylamino-substituted acylaminoalkyl; or arginine, asparagine, glutamine, S-methylcysteine, methionine and the corresponding sulfoxide andThatSulfone derivatives, glycine, leucine, isoleucine, allo-isoleucine, tert-leucine, norleucine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, proline, alanine, ornithine, histidine, glutamine, valine, threonine, serine, aspartic acid, beta-cyanoalanine, and An amino acid side chain selected from arosleonine;
R₇And R₈Is independently H, alkyl, alkenyl, carbocyclic aryl, heteroaryl, or alkyl, alkenyl, carbocyclic aryl, or amino, hydroxy, mercapto, mono- or dialkylamino, mono- or diarylamino, alkylarylamino Heteroaryl substituted with 1-3 substituents selected from the group consisting of:, diarylamino, mono- or diacylamino, alkoxy, alkenoxy, aryloxy, thioalkoxy, thioalkenoxy, thioalkynoxy, thioaryloxy, and heterocyclyl;
Or R₂And R₆Can form a heterocycle with the atoms to which they are attached;
V is O, NH, S, SO or SO₂;
X is CO₂R₅, PO₃H, SO₂R₅, SO₃H, OPO₃H, CO₂H or CON (R₄)₂;
W is CH or N;
Y is CO, SO₂Or PO₂;
Z is (CH₂)_{n '}, CHR₆Or NR₇;
n and n ′ areIndependently0-4;
m is 1-4;
p is 1-4;
q and q ′ areIndependently1-5; and
r is 0 or 1]
Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0008]
The compounds of the present invention, i.e. compounds of formula I and pharmaceutically acceptable salts thereof, are VLA-4 antagonists and are useful for the prevention, suppression or inhibition of cell adhesion. Thus, they are useful for VLA-4 mediated cell adhesion disease states, particularly inflammation and autoimmune diseases. They are particularly useful for surgery, especially transplant surgery-induced inflammation. The compounds of the present invention can be used alone or in combination with other active agents for the prevention, suppression or inhibition of cell adhesion.
[0009]
Another aspect of the present invention is a pharmaceutical composition, particularly a composition for VLA-4 antagonism, comprising an effective amount of a compound of the present invention, optionally with a pharmaceutically acceptable carrier.
In other embodiments, the invention also includes a compound of the invention for use as a medicament, particularly for VLA-4 antagonism, ie a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0010]
In a further aspect, the present invention provides a method of antagonizing VLA-4 in a mammal comprising administering to a mammal in need of treatment, preferably a human, an effective amount of a compound of the present invention.
In yet another aspect, the invention provides the use of a compound of the invention in the manufacture of a medicament for the treatment of a disease mediated by VLA-4.
[0011]
Preferred compounds of the invention are those of formula Ia
[Chemical 8]

[Where,
R₂Is C_1-4Alkyl-oxy-C_1-8Alkyl;
R_FourIs H, alkyl, alkenyl, carbocyclic aryl, or heteroaryl;
X is CO₂H or CO₂Alkyl;
And other symbols are defined in Formula I)
Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0012]
More preferred compounds of the invention are those wherein R₁Is aryl; R₂Is methoxy-n-propyl; R_ThreeIs H; R_FourIs alkenyl or aryl; X is CO₂H; a compound of Formula Ia, wherein n is 0; and W is CH, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0013]
  A particular embodiment of the invention is a compound of formula Ib
[Chemical 9]

[Where,
R₁Is N-arylureidophenyl;
R₂Is C₁-C₄-Alkyl-oxy-C₂-C₄-Alkyl;
R₃Is H;
R₄H, C₁-C₄-Alkyl, C₂-C₄-Alkenyl or carbocyclic aryl;
n is 1 or 2;
m is 1, 2 or 3;
X is COOH or CO₂R₅And
R₅May be optionally substitutedLowGrade alkyl)
Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0014]
Preference is given to:
R₁N- (optionally substituted phenyl) -ureidophenyl;
R₂Is methoxypropyl;
R₂Is H;
R_FourIs C₂-C_Four-Alkenyl or optionally substituted phenyl;
n is 1;
m is 1; and
X is COOH
Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0015]
The most preferred compounds of the invention are of formula Ic
Embedded image

[Where,
R_aIs H, CH_Three, Cl or NH₂;
R₂Is (CH₂)_ThreeOCH_ThreeOr (CH₂)_FourOCH_Three;
R_FourIs-(CH) = (CH) -CH_ThreePhenyl, 4-methoxyphenyl or 3,4-dimethoxyphenyl; and
T is NH or CH₂Is)
Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0016]
The term “alkyl” refers to a straight or branched chain alkyl group containing 1 to 10, preferably 1 to 6, more preferably 1 to 4 carbon atoms. Examples of such groups are methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, isoamyl, hexyl and decyl.
[0017]
“Alkenyl” means a straight or branched alkenyl group containing 2 to 10, preferably 2 to 6, and more preferably 2 to 4 carbon atoms. Examples of such groups include ethenyl, E- and Z-propenyl, isopropenyl, E- and Z-butenyl, E- and Z-isobutenyl, E- and Z-pentenyl and decenyl.
[0018]
The term “lower” in conjunction with the above terms means that the group contains up to 6 carbon atoms.
The term “substituted” in relation to the above term refers to a group wherein, for example, amino, halo, hydroxy, mercapto, mono- or dialkylamino, mono- or di-arylalkylamino, mono- or diarylamino, alkoxy, aryl It means substituted with oxy, aryl, thioaryloxy, thioalkoxy or heterocyclyl.
[0019]
The term “alkynyl” refers to a straight or branched alkynyl group containing 2 to 10, preferably 2 to 6, and more preferably 2 to 4 other atoms. Examples of such groups include ethynyl (acetylenyl), propynyl, propargyl, butynyl, hexynyl and decynyl.
The term “cycloalkyl” refers to cyclic alkyl groups containing from 3 to 8, preferably from 3 to 6, carbon atoms. Examples of such cycloalkyl groups include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and cyclopropylmethyl.
[0020]
“Cycloalkenyl” means a cyclic carbocycle containing 4 to 8, preferably 5 to 6, carbon atoms and one or more double bonds. Examples of such cycloalkenyl groups are cyclopentenyl, cyclohexenyl, cyclopentadienyl and 2-methyl-2-butenyl.
Aryl means carbocyclic or heterocyclic aryl (heteroaryl).
[0021]
“Aryl” (carbocyclic aryl and heteroaryl) is a 5- or 6-membered carbocyclic aromatic or heteroaromatic group containing 0-3 heteroatoms selected from O, N and S; A bicyclic 9- or 10-membered aromatic or heteroaromatic ring system containing 0-3 heteroatoms selected from N and S; or 0-3 heteroatoms selected from O, N and S A 3-ring 13- or 14-membered aromatic or heteroaromatic ring system comprising: each ring is, for example, lower alkyl, alkenyl, alkynyl, substituted lower alkyl, substituted alkenyl, substituted alkynyl, = O, NO₂, Halogen, hydroxy, alkoxy, cyano, —NR′R ′, acylamino, phenyl, benzyl, phenoxy, benzyloxy, heteroaryl, and heteroaryloxy (the phenyl, benzyl, phenoxy, benzyloxy, heteroaryl, and heteroaryl Each of, for example, lower alkyl, alkenyl, alkynyl, halogen, hydroxy, alkoxy, cyano, phenyl, phenoxy, benzyl, benzyloxy, carboxy, carboalkoxy, carboxyamide, heteroaryl, heteroaryloxy, NO₂Optionally substituted with 1-3 substituents selected from —NR′R ′, wherein R ′ is H or lower alkyl). May be substituted. Carbocyclic aromatic ring systems include phenyl, naphthyl, indenyl, indanyl, azulenyl, fluorenyl, anthracenyl. Heteroaromatic ring systems are furyl, thienyl, pyridyl, pyrrolyl, oxazolyl, thiazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, 2-pyrazolinyl, pyrazolidinyl, isoxazolyl, isothiazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,3-triazolyl 1,3,4-thiadiazolyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, 1,3,5-triazinyl, 1,3,5-trithianyl, indolizinyl, indolyl, isoindolyl, 3H-indolyl, indolinyl, benzo [b] furanyl, 2 , 3-dihydrobenzofuranyl, benzo [b] thiophenyl, 1H-indazolyl, benzimidazolyl, benzthiazolyl, purinyl, 4H-quinolidinyl, quinolinyl, isoquinolinyl, cinnolinyl, phthalazinyl, quinazolinyl, quinoxalinyl, , 8-naphthyridinyl, pteridinyl, carbazolyl, acridinyl, phenazinyl, a phenothiazinyl and phenoxazinyl.
[0022]
  The term “aryl” refers to the group R as defined above.₁As far as carbocyclic or heterocyclic aryl, in particular, for example, optionally halo, hydroxyl, amino, nitro, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, alkyl, alkenyl, alkynyl, cyano, carboxy, carboalkoxy, Ar'- Substituted alkyl, Ar′-substituted alkenyl or alkynyl, 1,2-dioxymethylene, 1,2-dioxyethylene, alkoxy, alkenoxy or alkynoxy, Ar′-substituted alkoxy, Ar′-substituted alkenoxy or alkynoxy, alkylamino, Alkenylamino or alkynylamino, Ar′-substituted alkylamino, Ar′-substituted alkenylamino or alkynylamino, Ar′-substituted carbonyloxy, alkylcarbonyloxy, aliphatic or aromatic acyl, for example Noyl, Ar′-substituted alkanoyl or Ar′-substituted carbonyl, Ar′-substituted alkylcarbonyloxy, Ar′-substituted carbonylamino, Ar′-substituted amino, Ar′-substituted oxy, alkylcarbonylamino, Ar′-substituted alkyl Carbonylamino, Ar′-substituted aminocarbonylalkyl, alkoxy-carbonylamino, Ar′-substituted alkoxycarbonyl-amino, Ar′-oxycarbonylamino, alkylsulfonylamino, mono- or bis- (Ar′-sulfonyl) amino, Ar '-Substituted alkyl-sulfonylamino, morpholinocarbonylamino, thiomorpholinocarbonylamino, N-alkylguanidino, N-Ar'guanidino, N-Ar'cyano-guanidino, N-N- (Ar'-, alkyl) guanidino, N , N- (Ar ′, Ar ′) guani N, N-dialkylguanidino, N, N, N-trialkylguanidino, N-alkyl-ureido, N-dialkyl-ureido, N-Ar'-ureido, N- (Ar ', alkyl) ureido and N, N- (Ar ′)₂From UreidIndependentlyPhenyl optionally substituted with 1 to 3 substituents selected; acylcarbonylamino; Ar′-substituted aryl; aromatic acyl-substituted aromatic or aliphatic acyl; Ar′-substituted heterocyclyl; Ar ′ -Substituted cycloalkyl or cycloalkenyl; heterocyclylalkoxy; N, N- (Ar ',Ar′-substituted cycloalkyl and cycloalkenyl; Ar′-substituted biaryl; Ar′-substituted aminocarbonylamino; Ar′-mercapto-substituted alkyl; Ar′-amino-substituted aryl; Ar′-oxy-substituted. Ar'-substituted aminocycloalkyl and cycloalkenyl; aralkylaminosulfonyl; aralkoxyalkyl; N-Ar'-substituted thioureido; N-aralkoxyureido; N-hydroxylureido; N-alkenylureido; -(Alkyl, hydroxyl) ureido; heterocyclyl; thioaryloxy-substituted aryl; N, N- (aryl, alkyl) hydrazino; Ar'-substituted sulfonylheterocyclyl; aralkyl-substituted heterocyclyl; cycloalkyl and cycloalkenyl-substituted Cycloalkyl-fused aryl; aryloxy-substituted alkyl; heterocyclylamino; Ar'-substituted arylaminosulfonyl; Ar'-substituted alkenoyl; aliphatic or aromatic acylaminocarbonyl; aliphatic or aromatic acyl-substituted alkenyl; Ar′-substituted aminocarbonyloxy; Ar ′, Ar′-disubstituted aryl; aliphatic or aromatic acyl-substituted acyl; benzofused-heterocyclylcarbonylamino; Ar′-substituted hydrazino; Ar′-substituted aminosulfonyl; Ar'-substituted heterocyclyl; Ar ', Ar'-disubstituted alkanoylamino; Ar'-substituted cycloalkanoylamino; heterocyclylalkoxy; N, N-Ar', hydroxylureido; N, N'-Ar ' , Hydroxylureido; hetero Ar′-substituted aminocarbonylheterocyclyl; Ar′-substituted aminocarbonyl; Ar′-substituted carbonylamino; Ar′-substituted aminosulfonylamino; Ar′-substituted mercaptoalkyl; Ar′-amino-substituted biaryl; Alkyl- and aryloxy-substituted alkoxy; heterocyclylcarbonyl; Ar'-substituted sulfonylalkyl; Ar'-aminocarbocyclyl; aralkylsulfonyl; aryl-substituted alkenyl; heterocyclylalkylamino; heterocyclylalkylaminocarbonyl; Substituted sulfonylaminoalkyl; Ar′-substituted cycloalkyl; thioaryloxyalkyl; thioaryloxymercapto; cycloalkylcarbonylalkyl; Ar'-substituted arylamino; aryloxycarbonylalkyl; phosphorodiamidic acid or ester; aryloxydimethylsiloxy; 1,3-indazinoylcarbonylalkyl; 1,3-indazinoylcarbonyl; oxyamidyl Heterocyclylalkylidenyl; formamidinyl; benzalidinyl; benzalhydrazino; arylsulfonylureido; benzylylamino; 4- (N-2-carboxyalkyl-1- (1,3-benzodioxal-5-yl) -amino-N -Leucinylalkylamidylarylurea); Ar'-carbamoyloxy and alkyl- and aryloxy-substituted ureides; where "Ar '" is hydrogen, halogen, hydroxyl, amino, nitro, trifluoromethyl, Trifle Olomethoxy, alkyl, alkenyl, alkynyl, 1,2-dioxymethylene, 1,2-dioxyethylene, alkoxy, alkenoxy, alkynoxy, alkylamino, alkenylamino or alkynylamino, alkylcarbonyloxy, aliphatic or aromatic acyl, 1 to 3 substitutions selected from alkylcarbonylamino, alkoxycarbonylamino, alkylsulfonylamino, N-alkyl or N, N-dialkylureidoBaseA carbocyclic or heterocyclic aryl group as defined above having
[0023]
  “Alkoxy” is an alkyl ether group. Examples of alkyl ether groups are methoxy, ethoxy, n-propoxy, iso-propoxy, n-butoxy, iso-butoxy, sec-butoxy and tert-butoxy. “Alkenoxy” means alkenyl-O—, but this group is not an enol ether. Examples of alkenoxy groups include allyloxy and E- and Z-3-methyl-2-propeneoxy. “Alkynyloxy” means alkynyl-O—, wherein the group is not an inol ether. Examples of alkynoxy groups include propargyloxy and 2-butynyloxy. “Thioalkoxy” means a thioether group of the formula alkyl-S—, “Alkylamino” means a mono- or di-alkyl-substituted amino group (ie alkyl-NH— or (alkyl)₂-N-Base)Means. Examples of alkylamino groups include methylamino, ethylamino, propylamino, isopropylamino, t-butylamino, and N, N-diethylamino. “Alkenylamino” has the formula alkenyl-NH— or (alkenyl)₂By N- this group is not an enamine. An alkenylamino group is an allylamino group. “Alkynylamino” has the formula alkynyl-NH— or (alkynyl)₂Refers to the group N-, which is not inamine. An example of an alkynylamino group is a propargylamino group. “Aryloxy” means a radical of the formula aryl-O—. Examples of aryloxy groups include phenoxy, naphthoxy, and pyridyloxy. “Arylamino” refers to the formula aryl-NH—. Examples of arylamino groups include phenylamino (anilide), naphthylamino, 2-, 3- or 4-pyridylamino. “Biaryl” means a radical of the formula aryl-aryl-. “Thioaryl” refers to the formula aryl-S—. Examples of thioaryl groups are thiophenyLe groupIt is. “Aryl-fused cycloalkyl” refers to a cycloalkyl group that shares two adjacent atoms with an aryl group. An example of an aryl-fused cycloalkyl group is a benzo-fused cyclobutyl group. “Aliphatic acyl” refers to the formula alkyl-CO—, alkenyl-CO— or alkynyl-CO— derived from carboxylic acids. Examples of aliphatic acyl groups are acetyl, propionyl, butyryl, valeryl, 4-methylvaleryl,Including acryloyl, crotyl, propioyl and methylpropioyl. “Aromatic acyl” refers to the formula aryl-CO—. Examples of aromatic acyl groups include benzoyl, 4-halobenzoyl, 4-carboxybenzoyl, naphthoyl, and pyridylcarbonyl. “Morpholinocarbonyl” and “thiomorpholinocarbonyl” refer to N-carbonylated morpholino and N-carbonylated thiomorpholino groups, respectively. “Alkylcarbonylamino” refers to the formula alkyl-CONH—. “Alkoxycarbonylamino” means a radical of the formula alkyl-OCONH—. “Alkylsulfonylamino” has the formula alkyl-SO₂NH- is meant. “Arylsulfonylamino” has the formula aryl-SO₂NH- is meant. “N-alkylurea” or “N-alkylureido” refers to the formula alkyl-NH—CO—NH—. “N-arylurea” or “N-arylureido” refers to the formula aryl-NH—CO—NH—. The term “halogen” or “halo” refers to fluorine, chlorine, bromine and iodine. “Heterocycle”, unless otherwise defined herein, is a 3-7 membered monocyclic heterocyclic ring or an 8-11 membered bicyclic ring that is saturated or unsaturated and optionally benzo-fused. Means a heterocyclic ring. Each heterocycle contains one or more carbon atoms and from 1 to 4 heteroatoms selected from nitrogen, oxygen and sulfur, and oxidized forms of nitrogen and sulfur and quaternary forms of basic nitrogen. Ring nitrogen is optionally R as defined for compounds of formula I₄May be substituted. HeteroRingMay be attached at an endocyclic carbon or heteroatom that results in the creation of a stable structure. Preferred heterocycles are 5-7 membered monocyclic heterocycles and 8-10 membered bicyclic heterocycles. Heterocycles can be optionally oxo-substituted at the 1-3 ring positions and optionally independently substituted with 1-4 aryl substituents. Heteroaryl group and piperidine, morpholine, pyrrolidine, thiazolidine, piperazine, etc. described in this specificationSaturated heterocycleIs included.
[0024]
Definitions of substituents and symbols in a particular molecule are intended to be independent of definitions elsewhere in the molecule. Thus, for example, -N (R_Four)₂Is -NH₂, -NHCH_Three, -N (CH_Three)₂Etc.
[0025]
  Some of the compounds described herein have one or more asymmetric centers, thus generating enantiomers, diastereomers, and other stereoisomers that are (R) in absolute stereochemistry. Or (S), or with respect to amino acids, can be defined as (D) or (L). The present invention has such a possibilityDiastereomerIt is intended to include all and its racemic and optically pure forms. Optically active (R) and (S) or (D) and (L) isomers can be prepared using chiral synthons or chiral reagents, or resolved using conventional methods. When a compound described herein has an olefinic double bond or other center of geometric asymmetry, and unless otherwise specified, it is intended to include both E and Z isomers. Likewise, all tautomeric forms are intended to be included.
[0026]
In a preferred group of compounds of the invention, when W in formula I is CH, the stereochemistry at that carbon atom is (S), ie the compound has the formula
Embedded image

[In the formula, R₁, R₂, R_Three, R_Four, X, Y, Z, m, n and p are as defined in Formula I)
And pharmaceutically acceptable salts thereof.
[0027]
  The pharmaceutical compositions of the present invention comprise a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient, and may comprise a pharmaceutically acceptable carrier and optionally other therapeutic agents. The term “pharmaceutically acceptable salts” refers to pharmaceutically acceptable non-toxic, including organic and inorganic acids and basesacidOr produced from a base.
[0028]
  When the compound of the present invention is acidic, the salt is a pharmaceutically acceptable non-toxic saltBaseCan be manufactured from. Salts are derived from all stable forms of inorganic bases including aluminum, ammonium, calcium, copper, iron, lithium, magnesium, manganese, potassium, sodium, zinc and the like. Particularly preferred are the ammonium, calcium, magnesium, potassium and sodium salts. Salts derived from pharmaceutically acceptable organic non-toxic bases include primary, secondary and tertiary amines, substituted amines including naturally occurring substituted amines, cyclic amines and basic ion exchange resins such as arginine, betaine , Caffeine, choline, N, N′-dibenzylethylenediamine, diethylamine, 2-diethylaminoethanol, 2-dimethylaminoethanol, ethanolamine, ethylenediamine, N-ethylmorpholine, N-ethylpiperidine, glucamine, glucosamine, histidine, isopropyl Including salts of amine, lysine, methylglucosamine, morpholine, piperazine, piperidine, polyamine resin, procaine, purine, theobromine, triethylamine, trimethylamine, tripropylamine and the like.
[0029]
  When the compound of the present invention is basic, salts can be prepared from pharmaceutically acceptable non-toxic acids. Such acids are acetic acid, benzenesulfonic acid, benzoic acid, camphorsulfonic acid, citric acid, ethanesulfonic acid, formic acid, gluconic acid, glutamic acid, hydrobromic acid, hydrochloric acid, isethionic acid, lactic acid, maleic acid, mandelic acid , Methanesulfonic acid, mucoic acid, nitric acid, pamoic acid, pantothenic acid, phosphoric acid, succinic acid, sulfuric acid, tartaric acid, p-tolueneContains sulfonic acid and the like. Particularly preferred are citric acid, hydrobromic acid, maleic acid, phosphoric acid, sulfuric acid and tartaric acid. basesexSalts also include salts with ammonium, alkali metal, and alkaline earth metal salts, organic bases such as dicyclohexylamine salts, and amino acids such as arginine and lysine. Basic nitrogen-containing groups are quaternized with drugs such as lower alkyl halides such as methyl chloride, dialkyl sulfates such as dimethyl sulfate, long chain halides such as stearyl chloride, and aralkyl halides such as benzyl chloride. it can.
[0030]
The compounds of the invention are particularly useful in mammals as VLA-4 antagonists and as inhibitors of VLA-4 associated cell adhesion.
[0031]
Due to the ability of the compounds of formula I to inhibit VLA-4 associated cell adhesion, they are useful for the treatment, reduction or prevention of various inflammatory, immune and autoimmune diseases. Preferably, the disease to be treated by the method of the invention is a respiratory disease (such as asthma), arthritis, psoriasis, transplant rejection, multiple sclerosis, type I diabetes and inflammatory bowel disease, stem cell migration and engraftment (engraphment) and sickle cell anemia. The compounds of formula I are also useful for the treatment of transplantation surgery; in particular, both chronic and acute xenotransplantation and allograft rejection.
[0032]
With respect to respiratory diseases, the compounds of the present invention are useful as agents for the symptomatic and prophylactic treatment of inflammatory airway diseases. Such diseases include any type or origin of asthma, including both endogenous (non-allergic) asthma and especially exogenous (allergic) asthma. They are useful for the treatment of bronchial asthma, exercise-induced asthma, occupational asthma, asthma induced following bacterial infection and other non-allergic asthma. Treatment of asthma is also understood to include, in particular, the treatment of patients younger than 4 or 5 years who present with wheezing symptoms at night and have been diagnosed or diagnosed as “wheezy infants”.
[0033]
  A prophylactic effect in the treatment of asthma may be evident by reducing the frequency or severity of symptom attacks, improving lung function or improving airway hypersensitivity. More,versusTreatmentLaw,That is, when a symptom attack occursTo limit or stop it orIntentiondidTreatment, eg anti-inflammatory treatments using corticosteroidsNeed ofThe decrease is also evident.
[0034]
Other inflammatory airway diseases treated with the compounds of the present invention include pneumoconiosis (inflammatory, generally occupational, including aluminosis, asbestosis, asbestosis, iron disease, silicosis, tobaccosis and cotton fibrosis) Above, lung disease caused by repeated inhalation of dust).
[0035]
Further inflammatory airway diseases that can be treated with the compounds of the present invention include adult respiratory distress syndrome (ARDS), exacerbated chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and pharmaceutical treatments such as aspirin or b-agonist bronchodilator therapy Including exacerbation of later airway hypertension.
[0036]
In view of their anti-inflammatory activity, especially the inhibition of eosinophil activation, the compounds of the present invention are also used in airway related diseases such as eosinophilia, hypereosinophilia, eosinophil pneumonia, parasite invasion ( (Including tropical eosinophilia), bronchopulmonary aspergillosis, polyarteritis nodosa, eosinophilic granuloma, and eosinophil-related diseases that affect the airways caused by drug reactions .
The compounds of the present invention may also be used for the treatment of allergic inflammatory diseases such as allergic rhinitis.
[0037]
In accordance with the foregoing, the present invention provides:
(A) A compound of the invention as described above, ie a compound of formula I or a compound thereof, in the manufacture of a medicament for the treatment of inflammation, immune or autoimmune diseases, in particular arthritis, transplant rejection or inflammatory airway diseases, in particular asthma The use of pharmaceutically acceptable salts; and
(B) Inflammation, immune or autoimmune disease, particularly arthritis, transplant rejection or inflammatory airway disease, particularly asthma, comprising administering to a mammal, particularly a human in need of treatment, a compound of the invention as described above Treatment method
including.
[0038]
The in vitro dose is about 10^-6To 10^-TenRange between molar concentrations, preferably about 10^-7To 10^-9It can be between molar concentrations.
[0039]
  The size of the prophylactic or therapeutic dose of the compounds of the inventionBabyIt will vary depending on the nature and severity of the condition being treated in the mammal and the particular compound of the invention and its route of administration. In general, the daily dose is 200 to 0.001 mg / kg mammal body weight, preferably 50 to 0.05 mg / kg, most preferably 1.0 to 0.1 mg / kg, in a single dose or in divided doses. It is a range. In some cases, it may be necessary to use dosages outside these ranges. When using a composition for intravenous administration, a suitable daily dose is in the range of about 50 to 0.0005 mg (preferably 20 to 0.01 mg) of a compound of the invention per kg body weight. When using compositions for oral administration, a suitable daily dose is in the range of about 20 to 0.001 mg (preferably 10 to 0.01 mg) of a compound of the invention per kg body weight. When an ophthalmic composition is used, the appropriate daily dose is determined according to the compound of the invention in an ophthalmically acceptable formulation.Solution ofOr about 10-0.01% (preferably 5.0-0.5%, typically 2.0-0.1%) of the compound of the invention per weight of suspension.Is in the range.
[0040]
The compounds of the present invention may also be used in combination with other pharmacologically active ingredients. For example, typical ophthalmic formulations contain the present compounds alone or in combination with a b-adrenergic blocker such as timolol maleate or a parasympathomimetic agent such as pilocarpine. When used in combination, the two active ingredients are present in approximately equal parts.
[0041]
Any suitable route of administration may be employed for administering an effective amount of a compound of the invention to a mammal, particularly a human. For example, routes such as oral, rectal, topical, parenteral, ocular, pulmonary, and nasal can be used. Dosage forms include tablets, troches, dispersions, suspensions, solutions, capsules, creams, ointments, aerosols and the like.
[0042]
The pharmaceutical compositions of the present invention comprise a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient, and may contain a pharmaceutically acceptable carrier and optionally other therapeutically active ingredients. The present invention includes such compositions for use in the treatment of inflammation, immune or autoimmune diseases, particularly arthritis, transplant rejection or inflammatory airway diseases, particularly asthma.
[0043]
This composition is oral, rectal, topical (including transdermal devices, aerosols, creams, ointments, lotions and sprays), parenteral (including subcutaneous, intramuscular and intravenous), ophthalmic (for ophthalmic use) Including compositions suitable for pulmonary (nasal or buccal inhalation) or nasal administration; however, the most suitable route in some cases is highly dependent on the nature and severity of the condition being treated and the nature of the active ingredient. They can conveniently be present in unit dosage form and can be prepared by methods known in the pharmaceutical arts.
[0044]
For example, in the treatment of airway diseases, the compounds of the invention are known in the art, orally, for example, in tablet form, or by inhalation, for example, aerosols or other nebulizable formulations, or dry powder formulations. Such an appropriate inhaler can be used for administration. For use in the treatment of allergic rhinitis, the compounds of the invention can also be administered nasally.
[0045]
The compounds of the present invention may be combined as a complete mixture of the active ingredients according to conventional pharmaceutical preparation methods. The carrier may take a wide variety of forms depending on the desired administration, ie, the nature of the preparation, such as oral, parenteral and the like. In oral dosage forms, in the case of oral liquid preparations (eg, suspensions, elixirs and solutions), conventional pharmaceutical media such as water, glycols, oils, alcohols, flavoring agents, preservatives, dyes, etc .; or In the case of oral solid preparations such as powders, capsules and tablets, starch, sugar, microcrystalline cellulose, diluents, granulating agents, lubricants, binders, disintegrating agents and the like can be used. Solid oral formulations are preferred over liquid oral formulations. Because of their ease of administration, tablets and capsules are the preferred oral dosage unit forms. If desired, capsules can be coated by standard aqueous or non-aqueous methods.
[0046]
In addition to the dosage forms described above, the compounds of the invention may be administered by controlled release means and devices.
[0047]
  Pharmaceutical compositions of the present invention suitable for oral administration are discrete units, such as capsules, cachets or tablets, each containing a predetermined amount of the active ingredient in powder or granular form, or a solution in an aqueous or non-aqueous liquid Alternatively, it can be prepared as a suspension, or as an oil-in-water or water-in-oil emulsion. Such compositions can be prepared by methods known in the pharmaceutical arts. In general, the compositions are prepared by intimately and thoroughly mixing the active ingredient with a liquid carrier, a fine solid carrier, or both, and then optionally shaping the product into the desired shape. For instance, a tablet may be made by compression or molding, optionally with one or more accessory ingredients. Compressed tablets are made by compressing the free-flowing active ingredient, such as powders or granules, in a suitable machine, optionally with a binder, lubricant, inert diluent or surfactant or dispersant. Can be manufactured. Molded tablets are placed in a suitable machineInactiveIt can be produced by molding a mixture of powder compounds moistened with a liquid diluent. Ophthalmic inserts are made from compression molded films made at Carver Press by subjecting the powdered mixture of active ingredients and HPC to a compressive force of 12,000 lbs (gauge) at 149 ° C. for 1-4 minutes. The film is cooled under pressure by circulating cooling water through the platen. The inserts are then individually cut from the film with a rod-shaped punch. Each insert is placed in a vial and then it is placed in a humid cabinet (30 ° C., 88% relative humidity) for 2-4 days. After removal from the cabinet, the vial is capped and then autoclaved at 121 ° C. for 0.5 hour.
[0048]
The composition containing the compound of the present invention is also a corticosteroid, bronchodilator, anti-asthma drug (mast cell stabilizer), anti-inflammatory drug, anti-rheumatic drug, immunosuppressant, antimetabolite, immunomodulator. And further agents selected from the group consisting of anti-psoriatic agents and anti-diabetic agents. Specific compounds include theophylline, sulfasalazine and aminosalicylic acid (anti-inflammatory agents); cyclosporine, FK-506 and rapamycin (immunosuppressive agents); cyclophosphamide and methotrexate (antagonists); and interferons (immunomodulators) including.
[0049]
  The present invention relates to an inhalable form of a compound of the invention as described above and inhalationPossibleInhalable medicaments comprising such a form of the compound together with a pharmaceutically acceptable carrier in inhalable form.
[0050]
  Inhalable forms are nebulizable compositions, such as aerosols, containing the compounds of the invention in solution, or aqueous, organic or aqueous / organic mediaDuring ~Can be in propellant or dispersion of an atomizable composition comprising a compound of the present invention, or in a milled granular form comprising a compound of the present invention optionally in a milled pharmaceutically acceptable carrier.
[0051]
  InhalationPossibleAerosol compositions suitable for use in formThisIn propellants selected from propellants known in the fieldIn solution orA dispersant of the present invention may be included. Suitable such propellants are hydrocarbons such as n-propane, n-butane or isobutane, or mixtures of two or more such hydrocarbons, and halogen-substituted hydrocarbons such as fluorine-substituted methane , Ethane, propane, butane, cyclopropane or cyclobutane, in particular 1,1,1,2-tetrafluoroethane (HFA134a) and heptafluoropropane (HFA227), or two or more of such halogen-substituted hydrocarbons Contains a mixture. When the compound of the present invention is present in the dispersant in the propellant, i.e.ConstantWhen present in the form of an aerosol composition, the aerosol composition may also contain a lubricant and a surfactant.ThisAre selected from lubricants and surfactants known in the art. The aerosol composition is based on the weight of the propellant, up to about 5% by weight, for example 0.002 to 5% by weight, 0.01 to 3% by weight, 0.015 to 2% by weight, 0.5 to It may contain 2% by weight, or 0.5 to 1% by weight of a compound of the invention. When present, lubricant and surfactant are each 5% of the aerosol composition.FromIt can be up to 0.5% by weight. The aerosol composition may also include ethanol as a co-solvent in an amount up to 30% by weight of the composition of the present invention, particularly when administered from a pressurized metered dose inhaler.
[0052]
A milled particle form suitable for use as an inhalable form, i.e., a dry powder, may comprise a compound of the present invention in milled particle form, optionally a substance known as a carrier for a dry powder inhalation composition, such as arabinose, glucose, And a ground particle carrier, which may be selected from saccharides including monosaccharides such as fructose, ribose, mannose, sucrose, lactose, maltose, starch or dextran, disaccharides and polysaccharides. A particularly preferred carrier is lactose. The dry powder may preferably be in gelatin or plastic capsules for use in a dry powder inhaler, or in a blister, with a dosage unit of 5 μg to 40 mg of active ingredient. Alternatively, the dry powder can be included as a reservoir in a multidose dry powder inhaler device.
[0053]
  In ground particle forms and aerosol compositions in which the compounds of the invention are present in particulate form, the compounds of the invention may have an average particle diameter of about 10 μm, for example 1 to 5 μm. Compound of the present invention and dry powderCompositionThe particle size of the solid support present in can be reduced to the desired size by conventional methods, for example by air jet mill, ball mill or vibrator mill, microprecipitation, spray drying, freeze drying or recrystallization from a supercritical medium.
[0054]
  Inhalable medicaments may be administered using inhalation devices suitable for inhalable forms, such devices are known in the art. Accordingly, the present invention also provides a pharmaceutical product comprising a compound of the present invention in inhalable form as described above.apparatusProvide in connection with. In a further aspect, the present invention provides an inhalation device comprising an inhalable form of a compound of the present invention as described above.
[0055]
When the inhalable form is an aerosol composition, the inhalation device is an aerosol vial with a valve suitable for delivering a measured dose, such as 10 to 100 μl, eg 25 to 50 μl of the composition obtain. Appropriate such vials and methods of including aerosol compositions under pressure are known to those skilled in the art of inhalation therapy. When the inhalable form is an atomizable aqueous, organic or aqueous / organic dispersion, the inhalation device comprises a known nebulizer, eg a conventional one such as an air jet nebulizer containing 1 to 50 ml, generally 1 to 10 mL of a dispersant. An aerated nebulizer or ultrasonic nebulizer, or a hand-held nebulizer, such as the AERx (sold from Aradigm, US) or BINEB (Boehringer Ingelheim) nebulizer, which allowed a spray dose of 10 to 100 μl in smaller quantities than conventional nebulizers, for example It can be. When the inhalable form is in pulverized particle form, the inhaler device delivers a dry powder inhaler suitable for delivery of dry powder from a capsule or blister containing a dry powder dosage unit or delivery, eg 25 mg dry powder. Multi-dose dry powder inhalation device suitable for Suitable such dry powder inhalation devices are known.
[0056]
The activity and VLA-4 specificity of the compounds of the present invention can be measured using in vitro and in vivo assays.
[0057]
  The cell adhesion inhibitory activity of these compounds can be measured by measuring the concentration of inhibitor required to inhibit binding of VLA-4-expressing cells to fibronectin-, CS1- or VCAM-I-coated plates. In this assay, microtiter wells are coated with fibronectin (containing the CS-1 sequence) or CS-1 or VCAM-I. When using CS-1, it must be conjugated to a carrier protein such as bovine serum albumin in order to bind to the well. Once the wells are coated, various concentrations of test compound are then added along with appropriately labeled VLA-4 expressing cells. Alternatively, test compounds are added first and coated wells prior to addition of cellssoIncubate. Cells are allowed to incubate in the well for at least 30 minutes. Following incubation, the wells are emptied and washed. Inhibition of binding is measured by quantification of fluorescence or radioactivity of controls bound to each plate of various concentrations of test compound, as well as no test compound. VLA-4 expressing cells that can be used in the assay are Ramos cells,YakaCells, A375 melanoma cells, and human peripheral blood lymphocytes (PBL). Cells used in this assay can be fluorescently or radioactively labeled.
[0058]
  Direct binding assays can also be used to quantify the inhibitory activity of the compounds of the invention. In this assay, a VCAM-IgG fusion protein (VCAM 2D-IgG) comprising the first two immunoglobulin domains of VCAM (D1D2) bound on the hinge region of an IgG1 molecule is labeled with a marker such as alkaline phosphatase (AP). Conjugate to enzyme. The synthesis of VCAM-IgG fusions is described in PCT Publication WO 90/13300. Conjugation of this fusion to the marker enzyme is accomplished by known cross-linking methods. The VCAM-IgG enzyme conjugate is then placed in the wells of a multi-well filtration plate as included in the Millipore Multiscreen Assay System (Millipore Corp., Bedford, Mass.). Various concentrations of test inhibitory compound are then added followed by VLA-4-expressing cells. Cells, compounds and VCAM-IgG enzyme conjugate are mixed together and allowed to incubate at room temperature. Following incubation, the wellTheCell and bound VCAMLeave the vacuum exhaustTo do. Quantification of bound VCAM is measured by the addition of an appropriate colorimetric substrate for the enzyme conjugated to VCAM-IgG, and the amount of reactive cell adhesion inhibitory activity is determined.
[0059]
The compounds of the examples have measured IC50 values for VLA-4 binding on the order of 1 nanomolar.
[0060]
For the assessment of VLA-4 inhibition specificity of the compounds of the invention, other major groups of integrins, for example β2 and β3, and other β1 integrins such as VLA-5, VLA-6 and α4β7 are assayed. I do. These assays are similar to the adhesion inhibition and direct binding assays described above, varying the appropriate integrin-expressing cells and the corresponding ligand. For example, polymorphonuclear cells (PMN) express β2 integrin on their surface and bind to ICAM. β3 integrin is involved in platelet aggregation and inhibition can be measured with a standard platelet aggregation assay. VLA-5 binds specifically to the Arg-Gly-Asp sequence, whereas VLA-6 binds to laminin. The compounds of the examples show selectivity for related integrins against VLA-4.
[0061]
An in vivo assay for testing the inhibition of animal contact hypersensitivity is described in P.L. Chisholm et aL, Eur. J. Immunol., Vol. 23, pp. 682-688 (1993).
[0062]
The late phase airway response induced by roundworm antigen and the airway response enhancement of asthmatic sheep are described in W. M. Abraham et al., J. Clin. Invest., Vol. 93, pp. 776-87 (1994).
The compounds of the invention can also be tested in the following assays.
[0063]
  Antigen-induced pulmonary eosinophilia in mice
Mice sensitization: Male B6D2F1 / J mice are sensitized by injection of 0.5 mL alum-precipitated antigen containing 8 μg ovalbumin (OVA) adsorbed on 2 mg aluminum hydroxide gel in saline medium. Five days later, the mice are given an additional injection of OVA / lucid. Sensitize control animals with alum only. Ten mice are used for each group.
[0064]
Challenge and drug administration: Mice are placed in a 12 × 14 × 10 inch plexiglass chamber and exposed to nebulized OVA (0.5% in saline) for 1 hour at the beginning (t = 0) and 5 hours after the experiment. The low molecular weight antagonist is dissolved in 2% DMSO and 150 mM Tris, pH 8.8. A solvent control is included in each experiment. The drug is administered fluorescently 30 minutes before OVA exposure and 6 hours after the first OVA exposure.
[0065]
BAL liquid recovery and analysis: animals are CO₂Kill by suffocation 24 hours after the first antigen challenge. The trachea is exposed and cannulated. Lungs are lavaged with 0.6 mL buffer (Hanks buffered saline containing 10 mM HEPES, 0.5% BSA and 10 U / mL heparin). The number of eosinophils in the lavage fluid is assessed by counting the total number of white blood cells and the percentage of neutrophils in each sample.
[0066]
% Inhibition formula
[Expression 1]

[Where Eos = mean value of eosinophils, OA = attacked and no OA = non-attacked mice]
Calculate according to
[0067]
In this assay, the example compounds administered at 30 mg / kg showed an inhibition rate of eosinophil values of up to 77%.
[0068]
  The compounds of the present invention can be synthesized using known methods. See, for example, WO 96/22966, incorporated herein by reference, which teaches the synthesis of analog compounds. The invention is further described in detail with reference to the following examples, which are intended to be illustrative and not limiting. For example, a compound of formula I wherein W is CH is a compound of formula II
R₁-(CH₂)_p-Y-OH (II)
[In the formula, R₁, P and Y are as defined above]
Or a reactive functional derivative thereof of formula III
Embedded image

[Where,
The carboxyl group is protected and R₂-R₄, Z, n and m have the meanings as defined above.
And optionally converting the compound thus obtained to another compound of the present invention. The condensation is carried out according to methods known in the field of amide formation, for example bases such as 1- [3- (dimethylamino) propyl] -3-ethylcarbodiimide hydrochloride and diisopropylethylamine.Condensing agent such asIn an inert solvent (such as methylene chloride), preferably at room temperature.
[0069]
Starting materials of formula II, such as optionally substituted phenylureidophenylacetic acid, are then known in the art or according to methods known in the art, for example, p-aminophenylacetic acid The corresponding phenylureidophenylacetic acid ester is obtained by condensation of the ester with a suitable aryl isocyanate and the resulting ester is prepared by hydrolysis.
[0070]
The starting material of formula III is then formula IV
Embedded image

Wherein the carboxyl group is in protected form (eg as an alkyl ester) and R_Three, R_FourAnd m are as defined above.]
And a compound of formula V, preferably a reactive functional derivative
L-Z- (CH₂)_n-COOH (V)
[Where Z is (CH₂)_{n '}Or CHR₆, And n, n ′ and R₆Is as defined above and L is a leaving group such as halo or (alkyl or aryl) -sulfonyloxy]
Is reacted with a compound of formula VI in the presence of a base such as triethylamine.
Embedded image

Wherein the carboxylic acid is in protected form (eg as an alkyl ester) and L, R₁, R₂And Z are as defined above.
Which is followed by the formula IX
R₂-NH₂        (VII)
[In the formula, R₂Means the above definition)
To obtain the starting material of formula III in protected form (eg, as an alkyl ester). For example, hydrolysis with a base such as aqueous lithium hydroxide provides a starting material of formula III.
[0071]
As can be done as described above in the cited method, if necessary, the interfering reactive groups are temporarily protected and then the resulting compounds of the invention are liberated. In the starting compounds and intermediates converted by the methods described in the compounds of the present invention, existing functional groups such as carboxyl, amino and hydroxy groups are optionally protected with conventional protecting groups common in formulated organic chemistry. . Known protecting groups and their insertions are described, for example, in JFW McOmie, “Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, London, New York, TW Greene, “Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley, New York. . For example, the hydroxy group is advantageously protected in the form of a benzyl ether, which can be cleaved by catalytic hydrogenation to give a hydroxy substituted product.
[0072]
X is esterified carboxy (COOR_FiveThe resulting compound of formula I can be converted to the corresponding acid, for example by hydrolysis known in the art.
[0073]
Abbreviations used in the following examples have the meanings indicated:
conc. = concentration
DEIA = di-isopropylethylamine
DMSO = dimethyl sulfoxide
EDAC = 1- [3- (dimethylamino) propyl] -3-ethylcarbodiimide hydrochloride
HOBT = hydroxybenzotriazole
HOSu = hydroxysuccinamide
HPLC = high performance liquid chromatography
MS = mass spectrometry
NMR = nuclear magnetic resonance
OR = optical rotation
TEA = triethylamine
TLC = thin layer chromatography
Tris-Tris (hydroxymethyl) aminomethane
[0074]
Example 1
(S) -β- [3-methoxypropyl) [[4-[(2-methylphenylaminocarbonylamino) phenyl] acetyl] amino] acetylamino-benzenepropanoic acid
Stage 1
Embedded image

45mL CH₂Cl₂To this is added 1 g (4.5 mmol) (3S) -3-amino-3-phenylpropanoic acid 1,1-dimethylethyl. Then 0.720 mL (5.17 mmol) TEA is added. The mixture is stirred for 10 minutes and cooled to 0 ° C. To this mixture was added 0.450 mL (5.17 mmol) bromoacetyl bromide in 5 mL CH.₂Cl₂The solution is added dropwise for 15 minutes. The mixture is stirred for 3 hours and allowed to cool to room temperature. TLC using 50% ethyl acetate / 50% hexane is used to follow the reaction. The mixture was concentrated to dryness and subjected to flash chromatography using 30 g silica gel, Merck, grade 9385, 230-400 mesh, 60A, 25% ethyl acetate / 75% hexane, 1.75 g dark yellow oil. Product, which shows one spot on TLC. Use the product in the next stage.
[0075]
Stage 2
Embedded image

To 50 mL DMF is added 1.5 g A and 1.0 g (11 mmol) 3-methoxy-propylamine. At room temperature, 0.74 mL (5.3 mmol) triethylamine is added. The mixture is stirred for 16 hours at room temperature. 10% CH_ThreeOH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness, using 45 g silica gel, starting at 2% and gradually 4% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂Flash chromatography raised to 1.6 g gave 1.6 g yellow oil, which shows one spot on TLC. Use this product in the next step.
[0076]
Stage 3
Embedded image

  50mL CH₂Cl₂To this is added 1.5 g B. Then 1.4 g (4.8 mmol) N- (2-methyl) -N ′-(4′-acetic acid) diphenylurea (partially soluble) and 0.74 mL (5.3 mmol) DIEA are added. The mixture is stirred for 15 minutes at room temperature to give a clear yellow solution. 0.98 g (4.8 mmol) EDAC is added and the mixture is stirred for 3 hours.Stir.10% CH₃OH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness, using 90 g silica gel, starting at 1% and 5% CH₃OH / CH₂Cl₂Flash chromatography raised to 1.93 g white foam.
[0077]
Stage 4
Embedded image

35mL CH₂Cl₂To this is added 1.7 g C at room temperature. 8 mL TFA acid is then added to 5 mL CH₂Cl₂Dripping together. The mixture is stirred for 2 hours. 10% CH_ThreeOH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness. New CH₂Cl₂Is added several times to remove all TFA. The product is mixed with 50 g silica gel and 2% to 5% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂To give 1.5 g of the title compound as a white powder.
mp: 125-127 ° C
OR: -27.4 °, DMSO (10 mg / mL)
[0078]
Example 2
(S)-[3-methoxypropyl) [[4-[(2-methylphenylaminocarbonylamino) phenyl] acetyl] amino] acetylamino-4-hexSEAcid
Stage 1
Embedded image

  Follow the procedure of Example 1, Step 1, but with 0.834 g (4.5 mmol) (3S) -3-amino-4-hex.SEStarting with 1,1-dimethylethyl acid, 01.46 g of a dark yellow oil was obtained, which shows one spot on TLC. Use this product in the next step.
[0079]
Stage 2
Embedded image

To 10 mL DMF is added 0.31 g (1 mmol) A. Then 0.18 g (2 mmol) 3-methoxypropylamine is added. At room temperature, 0.23 mL (2 mmol) TEA is added. The mixture is stirred for 16 hours at room temperature. 10% CH_ThreeOH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness, using 12 g silica, starting from 2% and gradually 4% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂Flash chromatography increased to 0.1 g yielding 0.1 g yellow oil, which shows one spot on TLC. Use this product in the next step.
[0080]
Stage 3
Embedded image

50mL CH₂Cl₂To this, 1.4 g (4.4 mmol) B is added. Then 1.4 g (4.8 mmol) N- (2-methyl) -N ′-(4′-acetic acid) diphenylurea (partially soluble) and 0.74 mL (5.3 mmol) DIEA were added and the mixture Is stirred for 15 minutes to give a clear yellow solution. 0.98 g (4.8 mmol) EDAC is added and the mixture is stirred for 3 hours. 10% CH_ThreeOH CH₂Cl₂TLC using the solution is used to follow the reaction. The mixture is concentrated to dryness, using 90 g silica gel, starting at 1% and 5% CH_ThreeOH CH₂Cl₂Flash chromatography increased to solution gives 1.8 g white foam.
[0081]
Stage 4
Embedded image

35mL CH₂Cl₂1.7 g C at room temperature. 8 mL TEA is then added to 5 mL CH₂Cl₂Dripping together. The mixture is stirred for 2 hours. 10% CH_ThreeOH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness. New CH₂Cl₂Is added several times to remove all TEA. 50 g silica gel and 2% to 5% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂To give 1.5 g of the title compound as a white powder.
mp: 88-90 ° C
[0082]
Example 3
(S) -β- [3-methoxypropyl) [[4-[(2-methylphenylaminocarbonylamino) phenyl] acetyl] amino] acetylamino-3,4-dimethoxy-benzenepropanoic acid Step 1
Embedded image

  300mL CH₃30 g (144.2 mmol) 3,4-dimethoxycinnamic acid is added to OH. H₂SO₄  4 drops are added and the mixture is refluxed for 4 hours.70/30TLC using ethyl acetate / hexane is used to follow the reaction. The mixture is concentrated to dryness and subjected to flash chromatography using 20% ethyl acetate 80% hexane, 350 g silica gel, grade 60, 70-230 mesh to give 14.14 g A.
[0083]
Stage 2
Embedded image

To 200 mL THF is added 11.8 g (55.8 mmol) (R)-(+)-N-benzyl α-methylbenzylamine. The mixture is cooled to 0 ° C. and 34.9 mL (55.8 mmol) n-BuLi (1.6 M hexane solution) is added dropwise over 30 minutes. The mixture is stirred for another 30 minutes. The reaction is cooled to -78 ° C. Then 6.2 g (27.9 mmol) methyl 3,4-dimethyloxycinnamate in 150 mL THF is added dropwise over 1 hour. The mixture was stirred for 30 minutes at -78 ° C and slowly maintained at -78 ° C while maintaining 25 mL saturated NH._FourCl solution is added and the mixture is warmed to room temperature, washed with brine and reduced to dryness. TLC using 50/50 ethyl acetate / hexane is used to follow the reaction. The mixture is subjected to flash chromatography on 180 g silica gel, Merck, grade 9385, 230-400 mesh, 60A to give 10.5 g of a dark yellow oil.
[0084]
Stage 3
Embedded image

5.0 g (11.5 mmol) B in 250 mL CH_ThreeOH, 25 mL H₂Add to O and 7.5 mL HOAc. 1g Perlman catalyst (Pd (OH)₂) Is added. Using balloons, mix the mixture with H₂Reflux at ambient temperature for 16 hours in atmosphere. 5% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is filtered through celite and CH._ThreeWash with OH and concentrate to dryness. CH on dry product₂Cl₂Is washed with brine and saturated NaHCO 3 is added._ThreeTo make basic. Concentrate the mixture to dryness, 150 g silica gel, 230-400 mesh, 1 to 4% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂Flash chromatography on yields 1.54 g yellow oil.
[0085]
Stage 4
Embedded image

9mL CH₂Cl₂To this are added 0.2 g (0.8 mmol) C and 0.13 mL (0.9 mmol) TEA. The mixture is stirred for 10 minutes and the mixture is cooled to 0 ° C. 0.08 mL (0.9 mmol) 1 mL CH of bromoacetyl bromide₂Cl₂The solution is added dropwise over 15 minutes. The mixture is stirred for 3 hours and the mixture is allowed to come to room temperature. TLC using 50% ethyl acetate / 50% hexane is used to follow the reaction. The mixture was concentrated to dryness and flash chromatographed using 30 g silica gel, Merck, grade 9385, 230-400 mesh, 60A, 25% ethyl acetate / 75% hexane, 0.237 g of a dark yellow oil. Which gives 1 spot on TLC. Use this product in the next step.
[0086]
Stage 5
Embedded image

To 10 mL DMF, 0.36 g (1 mmol) D and 0.18 g (2 mmol) 3-methoxypropylamine are added. Add 0.23 mL TEA at room temperature. The mixture is stirred for 16 hours at room temperature. 10% CH_ThreeOH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. Concentrate the mixture to dryness, use 12 g silica gel and start with 2% and gradually 4% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂Was subjected to flash chromatography using 0.1 to give 0.1 g yellow oil, which shows one spot on TLC. Use this product in the next step.
[0087]
Stage 6
Embedded image

5mL CH₂Cl₂0.1 g (0.27 mmol) E and 0.0853 g (0.30 mmol) N- (2-methyl) -N ′-(4′-acetic acid) diphenylurea (which is only partially soluble), 056 mL (0.34 mmol) DIEA is added and the mixture is stirred for 15 minutes at room temperature to give a clear yellow solution. 0.058 g (0.30 mmol) EDAC is added and the mixture is stirred for 3 hours. 10% CH_ThreeOH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness, using 90 g silica gel, 1% to 5% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂Flash chromatography increased to 0.101 g white foam is obtained.
[0088]
Stage 7
Embedded image

21 mL THE and 8 mL H₂To O, 0.36 g (0.57 mmol) F is added. 0.36 g (0.86 mmol) LiOH in 1 mL H₂The O solution is added dropwise over 5 minutes and the mixture is stirred for 2 hours at room temperature. 10% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness and 20 g silica gel, 100% CH₂Cl₂To 5% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂To 0.36 g of the title compound as a white powder.
mp: 118-120 ° C
OR: = − 33.6 °, DMSO (10 mg / mL)
[0089]
Example 4
(S) -β- [3-methoxypropyl) [[4-[(2-methylphenylaminocarbonylamino) phenyl] acetyl] amino] acetylamino-4-methoxy-benzenepropanoic acid, sodiumsalt
StepsFloor 1
Embedded image

  250mL CH₃To OH, 50 g (280.8 mmol) 4-dimethoxycinnamic acid and 2 mL conc. H₂SO₄Add. The mixture is refluxed for 6 hours. TLC using 70/30 ethyl acetate / hexane is used to follow the reaction. About 30mL CH₃OH is recovered. The mixture is cooled to room temperature, then crystallized, filtered and H₂Wash with O and dry to obtain 49.23 g of the desired product.
[0090]
Stage 2
Embedded image

  To 300 mL THF is added 10.99 g (52 mmol) (R)-(+)-N-benzyl-α-methylbenzylamine. The mixture is cooled to 0 ° C. and 32.5 mL (52 mmol) n-BuLi (1.6 M hexane solution) is added dropwise over 30 minutes. The mixture is stirred for another 30 minutes. The reaction is cooled to -78 ° C. Then 5 g (26 mmol) methyl 4-methoxycinnamate in 100 mL THF is added dropwise over 1 hour. The mixture was stirred for 30 minutes at -78 ° C and slowly maintained at -78 ° C while maintaining 25 mL saturated NH.₄ClsolutionIs added and the mixture is warmed to room temperature, washed with brine and concentrated to dryness. TLC using 50/50 ethyl acetate / hexane is used to follow the reaction. The mixture is subjected to 180 g silica gel, Merck, grade 9385, 230-400 mesh, 60 メ ッ シ ュ flash chromatography to give 9.738 g of a dark pale yellow oil (recrystallized from EtOAc / hexanes to give white crystals).
[0091]
Stage 3
Embedded image

  7.74 g (19.2 mmol) B in 250 mL CH₃OH, 25 mL H₂Add to O and 7.5 mL HOAc. Add 1 g Perlman catalyst. Using a hydrogen balloon, mix the mixture with H₂Reflux at room temperature for 16 hours under atmosphere. 5% CH₃OH / CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is filtered through celite and CH.₃Wash with OH and concentrate to dryness. To dry product, CH₂Cl₂Is added, it is washed with brine and NaHCO 3 is added.₃To make basic. The mixture is concentrated to dryness, using 150 g silica gel, using 230-400 mesh, 1 to 4% CH.₃OH / CH₂Cl₂3.4 g dark pale yellow oil (recrystallized from EtOAc / hexanes to give white crystals)Get.
[0092]
Stage 4
Embedded image

  25mL CH₂Cl₂To this is added 0.8 g (3.82 mmol) C and 0.62 mL (4.4 mmol) TEA. The mixture is stirred for 10 minutes and the mixture is cooled to 0 ° C. 0.38 mL (4.4 mmol) bromoacetyl bromide in 5 mL CH₂Cl₂The solution is added dropwise over 15 minutes. The mixture is stirred for 3 hours. Allow the mixture to come to room temperature. TLC using 50% ethyl acetate / 50% hexane is used to follow the reaction. The mixture was concentrated to dryness and subjected to flash chromatography using 30 g silica gel, Merck, grade 9385, 230400 mesh, 60Å, using 25% ethyl acetate / 75% hexane.1.3 g of a dark yellow oil is obtained, which shows one spot on TLC. Use this product in the next step.
[0093]
Stage 5
Embedded image

  To 70 mL DMF is added 1.3 g (3.94 mmol) D and 0.667 g (7.49 mmol) 3-methoxypropylamine. At room temperature1Add .05 mL (7.49 mmol) TEA. The mixture is stirred for 1-6 hours at room temperature.10% CH₃OH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness, using 75 g silica gel, starting from 2% and 4% CH₃OH / CH₂Cl₂Gradually increase flash chromatography to give 1.29 g yellow oil, which shows one spot on TLC. Use this product in the next step.
[0094]
Stage 6
Embedded image

30mL CH₂Cl₂0.72 g (2.1 mmol) E and 0.739 g (2.6 mmol) N- (2-methyl) -N ′-(4′-acetic acid) diphenylurea (this is only partially soluble), 0.46 mL (2.6 mmol) DIEA is added and the mixture is stirred for 15 minutes at room temperature to give a clear yellow solution. 0.499 g (2.6 mmol) EDAC is added and the mixture is stirred for 3 hours. 10% CH_ThreeOH / 90% CH₂Cl₂TLC using is used to track the reaction. The mixture is concentrated to dryness, using 90 g silica gel, 1% to 5% CH_ThreeOH / CH₂Cl₂Flash chromatography increased to 0.920 g white foam.
[0095]
Stage 7
Embedded image

30 mL EtOH and 8 mL H₂To O, 0.90 g (1.49 mmol) F is added. To this mixture was added 0.057 g (1.42 mmol) NaOH in 1 mL H.₂Add O. The mixture is stirred for 3.5 hours at room temperature. The mixture is filtered and dried to give 0.720 g of the title compound as a white solid.
mp: 216-118 ° C (decomposition)
OR: -21.069 ° in DMSO (5.3 mg / mL)
[0096]
Example 5
In the same manner as in the previous examples, a compound of the following formula is produced.
Embedded image

Claims (3)

Formula I c ′

[Where
Ra is hydrogen, C _1-6 alkyl, halogen or amino;
R ₂ is C _1-5 alkoxy (C _1-5 ) alkyl ;
R ₄ is phenyl optionally substituted by C _2-6 alkenyl or C _1-6 alkoxy ; T is NH or CH ₂ ; and X is COOH or COO—C _1-6 alkyl ]
In the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof represented. Formula Ic

[Where
Ra is H, CH ₃ , Cl or NH ₂ ;
R ₂ is (CH ₂ ) ₃ OCH ₃ or (CH ₂ ) ₄ OCH ₃ ;
R ₄ is — (CH) ═ (CH) —CH ₃ , phenyl, 4-methoxyphenyl or 3,4-dimethoxyphenyl; and T is NH or CH ₂ ]
In the indicated Ru compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The compound according to claim 1 or 2 or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use as a medicament.