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JP4572135B2 - Method for detoxifying cyanide compounds - Google Patents
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Description

本発明は、シアン化合物の無害化方法及びシアン化合物無害化剤に関する。   The present invention relates to a cyanide detoxifying method and a cyanide detoxifying agent.

シアン化合物は、吸入や皮膚呼吸によって動物に取り込まれ、呼吸中枢の麻痺などの症状のシアン中毒を引き起こす毒性化合物である。シアン化合物は、殺虫剤、電気メッキ、医薬の原料などに用いられ、工業排水などに含まれる。   Cyanide compounds are toxic compounds that are taken up by animals by inhalation and skin respiration and cause cyanide poisoning of symptoms such as paralysis of the respiratory center. Cyanide compounds are used in insecticides, electroplating, pharmaceutical raw materials, etc., and are contained in industrial wastewater.

シアン化合物で汚染された土壌、地下水、工業排水の浄化には、酸化分解法、不溶錯体法、煮詰法、熱水反応法、微生物処理法などが利用されている。例えば、シアン汚染土壌の浄化には、土壌に薬剤と水を添加して、化学的又は生物学的にシアンを分解する土壌スラリー法があるが、土壌スラリー法では、浄化後のスラリーの処分(脱水等)が必要であり、またスラリー攪拌施設に多大なコストが必要となる(特許文献1〜6参照)。土壌に薬剤を混合して化学的にシアンを分解する土壌混合処理法は、シアンを直接無害化できる安価な薬剤が存在せず、また薬剤として使用する高アルカリ剤及び酸化剤は環境への負荷が大きい(特許文献7参照)。さらに、土壌に薬剤を混合してシアンを分離する洗浄法も知られているが、この方法は、分級を行った後にシアン含有土壌の処理が必要であり、また洗浄施設に多大なコストが必要である(特許文献8〜10参照)。土壌に薬剤を混入して200〜500℃で加熱する加熱処理法もまた加熱施設に多大なコストが必要である(特許文献11〜13参照)。   For the purification of soil, groundwater and industrial wastewater contaminated with cyanide compounds, oxidative decomposition methods, insoluble complex methods, boiled methods, hydrothermal reaction methods, microbial treatment methods and the like are used. For example, there is a soil slurry method in which cyanide is chemically or biologically decomposed by adding chemicals and water to the soil in order to purify cyan-contaminated soil. Dehydration etc.) is necessary, and a large amount of cost is required for the slurry stirring facility (see Patent Documents 1 to 6). There are no cheap chemicals that can directly detoxify cyanide in the soil mixing method, which mixes chemicals with soil and chemically decomposes cyanide, and high alkaline and oxidizers used as chemicals are an environmental burden. Is large (see Patent Document 7). In addition, there is a known cleaning method that separates cyanide by mixing chemicals in the soil, but this method requires treatment of the cyan-containing soil after classification, and the cleaning facility requires significant costs. (See Patent Documents 8 to 10). A heat treatment method in which a chemical is mixed in soil and heated at 200 to 500 ° C. also requires a large cost for the heating facility (see Patent Documents 11 to 13).

また例えば、シアン汚染地下水の浄化には、シアン汚染地下水を揚水し、薬剤等により凝集沈殿又は化学分的に解する揚水処理法が知られているが、シアン含有汚泥等を処理する必要があり、また地上処理施設には多大なコストが必要である(特許文献14参照)。シアン汚染地下水に酸化・分解剤を注入し、化学的に分解するスパージング法も提唱されているが、使用する酸化・分解剤が土壌環境中の生態系を破壊するおそれがあり、懸念されている(特許文献15参照)。さらにシアン汚染地下水に栄養剤を注入し、シアンを分解する微生物を利用する微生物原位置浄化法が利用されているが、この方法では、シアンを効率的に分解することができる微生物が存在しない場合には有効ではなく、またシアン分解後に生成されるアンモニアを処理する必要がある(特許文献16参照)。   In addition, for example, for the purification of cyan-contaminated groundwater, there is known a pumping treatment method in which cyan-contaminated groundwater is pumped and coagulated by chemicals, etc., or dissolved chemically, but it is necessary to treat cyanide-containing sludge and the like. In addition, the ground treatment facility requires a large cost (see Patent Document 14). A sparging method in which an oxidizing / decomposing agent is injected into cyanogen-contaminated groundwater and chemically decomposed has been proposed, but there is a concern that the oxidizing / decomposing agent used may destroy the ecosystem in the soil environment. (See Patent Document 15). In addition, the in-situ microbial purification method that uses microorganisms that decompose cyanide by injecting nutrients into cyan contaminated groundwater is used, but in this method there are no microorganisms that can efficiently decompose cyanide. Is not effective, and it is necessary to treat the ammonia produced after the cyanide decomposition (see Patent Document 16).

さらに、微生物処理法においては、シアン化合物分解微生物を汚染土壌や汚染水に導入してシアン化合物を分解するが、分解反応が迅速ではないことが多く、またシアン分解後に生成されるアンモニアを処理する必要がある(特許文献17及び18など)。
従って、シアン化合物に汚染された土壌や水を浄化するための改良法が望まれている。
Furthermore, in the microbial treatment method, cyanide-decomposing microorganisms are introduced into contaminated soil and water to decompose cyanide, but the decomposition reaction is often not rapid, and ammonia produced after cyanide decomposition is treated. There is a need (patent documents 17 and 18, etc.).
Therefore, an improved method for purifying soil and water contaminated with cyanide compounds is desired.

特開2004−97962号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2004-97962 特開2004−66195号公報JP 2004-66195 A 特開2004−66193号公報JP 2004-66193 A 特開2003−320366号公報JP 2003-320366 A 特開2003−126838号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2003-126838 特開平10−34124号公報Japanese Patent Laid-Open No. 10-34124 特開2004−58011号公報JP 2004-58011 A 特開2004−57992号公報JP 2004-57992 A 特開2003−88847号公報JP 2003-88847 A 特開2000−157964号公報JP 2000-157964 A 特開2003−181438号公報JP 2003-181438 A 特開2000−157961号公報JP 2000-157961 A 特開2000−157964号公報JP 2000-157964 A 特開2004−81979号公報JP 2004-81979 A 特開2002−254061号公報JP 2002-254061 A 特開2002−273408号公報JP 2002-273408 A 特開2001−245655号公報JP 2001-245655 A 特開2000−312582号公報JP 2000-312582 A

そこで、本発明は、上述した実状に鑑み、効率的かつ簡便な低コストのシアン化合物の無害化方法を提供することを目的とする。   Accordingly, an object of the present invention is to provide an efficient and simple method for detoxifying a cyanide compound at low cost in view of the above-described actual situation.

本発明者は、上記課題を解決するため鋭意検討を行った結果、シアン化合物無害化菌(ロダナーゼ生産細菌)を用いるシアン化合物の無害化方法において、チオ硫酸塩を用いることにより、当該細菌の増殖が促進され、またシアン化合物の無害化も促進されるという知見を得、本発明を完成するに至った。   As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventor has found that the cyanide detoxification bacterium (rhodanase-producing bacterium) is used in the detoxification method of the cyanide compound by using thiosulfate to proliferate the bacteria. The present inventors have obtained the knowledge that the dehydration of the cyanide compound is promoted and the detoxification of the cyanide compound is promoted, and the present invention has been completed.

すなわち、本発明は、以下を包含する。
(a)ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩を用いてシアン化合物を無害化することを特徴とするシアン化合物の無害化方法。
上記シアン化合物の無害化方法においては、さらに窒素及びリンから選択される栄養塩を供給して無害化を行うことが好ましい。また、該シアン化合物の無害化方法においては、無害化を空気の供給の下で行うことが好ましい。さらに、無害化は、pH6〜10において温度15〜35℃で行うことが好ましい。
That is, the present invention includes the following.
(A) A cyanide detoxification method comprising detoxifying a cyanide using a cell of rhodanase-producing bacteria or a culture thereof, or a rhodanase enzyme and thiosulfate.
In the cyanide detoxification method, it is preferable to further detoxify by supplying a nutrient selected from nitrogen and phosphorus. Further, in the method for detoxifying the cyanide compound, it is preferable that the detoxification is performed under supply of air. Furthermore, detoxification is preferably performed at a temperature of 15 to 35 ° C. at a pH of 6 to 10.

(b)ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素と、チオ硫酸塩を含むことを特徴とするシアン化合物無害化剤。
上記シアン化合物無害化剤は、さらに窒素及びリンから選択される栄養塩を含むことが好ましい。
(B) A cyanide detoxifying agent characterized by containing a cell of rhodanase-producing bacteria or a culture thereof or a rhodanase enzyme and thiosulfate.
The cyanide detoxifying agent preferably further contains a nutrient salt selected from nitrogen and phosphorus.

本発明に係るシアン化合物の無害化方法及びシアン化合物無害化剤により、シアン化合物を効率的に、簡便にかつ低コストで無害化することができる。また、本発明に係るシアン化合物の無害化方法及びシアン化合物無害化剤により、シアン化合物に汚染した土壌・水を浄化することができる。   With the cyanide detoxification method and cyanide detoxifying agent according to the present invention, the cyanide compound can be detoxified efficiently, simply and at low cost. Further, the cyanide detoxification method and the cyanide detoxification agent according to the present invention can purify soil and water contaminated with the cyanide.

以下、本発明を詳細に説明する。
1.シアン化合物の無害化方法
本発明に係るシアン化合物の無害化方法(以下、「本方法」ともいう)は、ロダナーゼ生産細菌若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素を用いるシアン化合物の無害化において、チオ硫酸塩を使用することを特徴とするものである。すなわち、チオ硫酸塩は、ロダナーゼ生産細菌の増殖を促進し、またロダナーゼ酵素を生成するために不可欠な電子受容体である。さらに、ロダナーゼ生産細菌により生成されるロダナーゼ酵素は、下記式に示すように、シアンとチオ硫酸塩からチオシアンと亜硫酸塩を生成することによって、シアン化合物を無害化することができる。またこの反応により生じるチオシアンはシアン化合物として検出されない安定した化合物であるため、環境中に安定した物質として固定されることとなる。
Hereinafter, the present invention will be described in detail.
1. Method of detoxifying cyanide compound The method of detoxifying cyanide compound according to the present invention (hereinafter also referred to as “the present method”) is a method for detoxifying cyanide using a rhodanase-producing bacterium or a culture thereof or a rhodanase enzyme. It is characterized by using. That is, thiosulfate is an electron acceptor that is essential for promoting the growth of rhodanase-producing bacteria and for producing the rhodanase enzyme. Furthermore, the rhodanase enzyme produced by the rhodanase-producing bacteria can detoxify cyanide compounds by producing thiocyanate and sulfite from cyanide and thiosulfate, as shown in the following formula. Further, thiocyan produced by this reaction is a stable compound that is not detected as a cyanide compound, and is thus fixed as a stable substance in the environment.

Figure 0004572135
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そのため、ロダナーゼ生産細菌やロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩を併用ことによって、効率的かつ短時間でシアン化合物を無害化することが可能となる。   Therefore, it becomes possible to detoxify the cyanide efficiently and in a short time by using rhodanase-producing bacteria or rhodanase enzyme in combination with thiosulfate.

本方法においては、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素を使用する。本明細書中、「ロダナーゼ生産細菌」とは、チオ硫酸塩を利用して呼吸し、シアン化合物を無害化するロダナーゼ酵素を産生する細菌を意味する。かかる細菌は当技術分野で公知であり、多数の細菌が文献に記載され、報告されている。例えば、チオバチルス属、アゾトバクター属、フェロバチルス属、アシネトバクター属、エシェリヒア属、シゲラ属、シトロバクター属、クレブシエラ属、エンテロバクター属、ハフニア属、シュードモナス属、アシディチオバチルス属、ウォリネラ属に属する細菌が報告されている。より具体的な細菌株としては、限定されるものではないが、チオバチルス・フェロオキシダンス(Thiobacillus ferrooxidans)、チオバチルス・チオオキシダンス(Thiobacillus thiooxidans)、チオバチルス・カルダス(Thiobacillus caldus)、チオバチルス・ノベルス(Thiobacillus novellus)、アゾトバクター・ビネランディ(Azotobacter vinelandii)、フェロバチルス・フェロオキシダンス(Ferrobacillus ferrooxidans)、アシネトバクター・カルコアセティカス(Acinetobacter calcoaceticus)、大腸菌(Escherichia coli)、シゲラ・フレクスネリ・セロバルス(Shigella flexneri serovars)、シトロバクター・フレウンディ(Citrobacter freundi)、ハフニア・アルベイ(Hafnia alvei)、シュードモナス・エスピー(Pseudomonas spp)、アシディチオバチルス・フェロオキシダンス(Acidithiobacillus ferrooxidans)、ウォリネラ・スクシノゲネス(Wolinella succinogenes)が挙げられる(Gardner, M.N. and Rawlings, D.E., Journal of Applied Microbilogy 2000, 89:185-190;Fukumori, Y. et al., FEMS Microbiology Letter 1989, 53:159-163;Cicero, D.O. et al., Int. 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Such bacteria are known in the art, and numerous bacteria have been described and reported in the literature. For example, there are bacteria belonging to the genus Thiobacillus, Azotobacter, Ferrobacillus, Acinetobacter, Escherichia, Shigella, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Pseudomonas, Acidithiobacillus, Warinella It has been reported. More specific bacterial strains include, but are not limited to, Thiobacillus ferrooxidans, Thiobacillus thiooxidans, Thiobacillus caldus, Thiobacillus novels (Thiobacillus). novellus), Azotobacter vinelandii, Ferrobacillus ferrooxidans, Acinetobacter calcoaceticus, Escherichia coli, Shigera flexneri ella flexor Citrobacter freundi, Hafnia alvei, Pseudomonas spp, Acidithiobacillus ferrooxida (Acidithiobacillus ferrooxida) ns), Wolinella succinogenes (Gardner, MN and Rawlings, DE, Journal of Applied Microbilogy 2000, 89: 185-190; Fukumori, Y. et al., FEMS Microbiology Letter 1989, 53: 159 -163; Cicero, DO et al., Int. J. Biol. Macromol. 2003, 33: 193-201; Tabita, R., M. Silver, et al. (1969). Can J Biochem 47 (12): 1141-5; Yoch, DC and ES Lindstrom (1971). J Bacteriol 106 (2): 700-1; Westley, J. (1973). Adv Enzymol Relat Areas Mol Biol 39: 327-68; Silver, M. and DP Kelly (1976). J Gen Microbiol 97 (2): 277-84; Vandenbergh, PA and RS Berk (1980). Can J Microbiol 26 (3): 281-6; Lanyi, B. (1982). J Med Microbiol 15 (2): 263-6; Vennesland, B., PA Castric, et al. (1982). Fed Proc 41 (10): 2639-48; Aird, BA, RL Heinrikson, et al. (1987). J Biol Chem 262 (36): 17327-35; Alexander, K. and M. Volini (1987). J Biol Chem 262 (14): 6595-604; Fukumori, Y., K. Hoshiko, et al. (1989) FEMS Microbiol Lett 53 (1-2): 159-63; A ird, BA and PM Horowitz (1990). Biochim Biophys Acta 1038 (1): 10-7; Pagani, S., G. Sessa, et al. (1993). Biochem Mol Biol Int 29 (4): 595-604 Colnaghi, R., S. Pagani, et al. (1996). Eur J Biochem 236 (1): 240-8; Bordo, D., R. Colnaghi, et al. (1999). 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また、本発明に係るシアン化合物の無毒化方法においては、後述する実施例2において単離された新規なリゾビアレス属(Rhizobiales)TC−2株を使用することも可能である。これらの菌株は、硫黄やチオ硫酸塩を利用して増殖することができ、またシアンに対して耐性がある(最大20mg/lのCNの存在下で生育可能)ため、本方法において使用するのに好ましい。TC−2株は、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター(茨城県つくば市東1丁目1番地1 中央第6)に、受託番号FERM P−20354として平成17年(2005年)1月12日付で寄託されている。 Further, in the method for detoxifying a cyanide compound according to the present invention, it is also possible to use a novel Rhizobiales TC-2 strain isolated in Example 2 described later. These strains may be grown by utilizing sulfur and thiosulfate and also is resistant to cyanide (CN up to 20 mg / l - viable in the presence of a) for use in the method Is preferable. The TC-2 strain was registered in the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology Patent Biological Depositary Center (1st, 1st, 1st East, 1st Street, Tsukuba, Ibaraki Prefecture, January 6, 2005) as the accession number FERM P-20354. Deposited on the 12th.

本方法においては、上記ロダナーゼ生産細菌のうち少なくとも1種を用いる限り、複数種を組み合わせて使用することも可能である。例えば、ロダナーゼ生産細菌の2種以上の組み合わせを用いることができる。   In this method, as long as at least one of the above rhodanase-producing bacteria is used, it is also possible to use a combination of plural types. For example, a combination of two or more rhodanase-producing bacteria can be used.

また本方法においては、上記ロダナーゼ生産細菌の培養物を使用することもできる。ここでロダナーゼ生産細菌の培養物を使用する場合には、培養物は、ロダナーゼ生産細菌を培養することにより調製することができ、その培養条件としては、後述するような培養条件を用いればよい。   In the present method, a culture of the above-mentioned rhodanase-producing bacteria can also be used. Here, when a culture of rhodanase-producing bacteria is used, the culture can be prepared by culturing the rhodanase-producing bacteria, and the culture conditions described below may be used.

また、本方法においては、チオ硫酸塩の存在下にて培養したロダナーゼ生産細菌の培養物を用いてシアン化合物を無害化してもよいし、あるいは、ロダナーゼ生産細菌の培養物とチオ硫酸塩を一緒に用いてシアン化合物を無害化してもよい。   In this method, cyanogen compounds may be detoxified using a culture of rhodanase-producing bacteria cultured in the presence of thiosulfate, or a culture of rhodanase-producing bacteria and thiosulfate may be used together. May be used to render the cyanide harmless.

培養物は、その培養物のまま使用してもよいし、培養物を濾過、遠心分離若しくは抽出等の精製処理を行って使用してもよいし、又は培養物を水等で希釈して使用してもよい。   The culture may be used as it is, or the culture may be used after purification treatment such as filtration, centrifugation or extraction, or the culture is diluted with water or the like. May be.

さらに本方法においては、ロダナーゼ酵素を使用することもできる。ロダナーゼ(rhodanese)は、チオ硫酸塩とシアン化水素からチオシアン塩と亜硫酸への反応を触媒する周知の酵素であり、上記ロダナーゼ生産細菌の他、動物(例えば、ウシ、マウス、ヒツジ、、ヤギ、ブタ、ニワトリ)などのあらゆる生物に存在することが知られている(Aminlari, M. et al., Comp. Biochem. Physiol. B. Biochem. Mol. Biol. 2002, 132:309-313;Miller, D. M., R. Delgado, et al. (1991). J Biol Chem 266(8): 4686-91;Pallini, R., G. C. Guazzi, et al. (1991). Biochem Biophys Res Commun 180(2): 887-93;Miller, D. M., G. P. Kurzban, et al. (1992). Biochim Biophys Acta 1121(3): 286-92;Dooley, T. P., S. K. Nair, et al. (1995). Biochem Biophys Res Commun 216(3): 1101-9;Aita, N., K. Ishii, et al. (1997). Biochem Biophys Res Commun 231(1): 56-60;Aminlari, M., S. Gholami, et al. (2000). Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol 127(3): 369-74;Nandi, D. L., P. M. Horowitz, et al. (2000). Int J Biochem Cell Biol 32(4): 465-73;Nazifi, S., M. Aminlari, et al. (2003). Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol 134(3): 515-8)。従って、ロダナーゼは、生物(例えばロダナーゼ生産細菌)から単離することができる。また、ロダナーゼは、例えばSIGMA社から市販品を入手することができる。   Furthermore, in the present method, a rhodanase enzyme can also be used. Rhodanese is a well-known enzyme that catalyzes the reaction of thiosulfate and hydrogen cyanide to thiocyanate and sulfite. In addition to the above-mentioned rhodanase-producing bacteria, animals (for example, cattle, mice, sheep, goats, pigs, (Aminlari, M. et al., Comp. Biochem. Physiol. B. Biochem. Mol. Biol. 2002, 132: 309-313; Miller, DM, R. Delgado, et al. (1991). J Biol Chem 266 (8): 4686-91; Pallini, R., GC Guazzi, et al. (1991). Biochem Biophys Res Commun 180 (2): 887-93 Miller, DM, GP Kurzban, et al. (1992). Biochim Biophys Acta 1121 (3): 286-92; Dooley, TP, SK Nair, et al. (1995). Biochem Biophys Res Commun 216 (3): 1101-9; Aita, N., K. Ishii, et al. (1997). Biochem Biophys Res Commun 231 (1): 56-60; Aminlari, M., S. Gholami, et al. (2000). Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol 127 (3): 369-74; Nandi, DL, PM Horowitz, et al. (2000 Int J Biochem Cell Biol 32 (4): 465-73; Nazifi, S., M. Aminlari, et al. (2003). Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol 134 (3): 515-8). Thus, rhodanase can be isolated from an organism (eg, rhodanase producing bacteria). Rhodanase is commercially available, for example, from SIGMA.

また、本方法においては、チオ硫酸塩の存在下にて培養したロダナーゼ生産細菌の培養物から得られるロダナーゼ酵素を用いてシアン化合物を無害化させることができる。チオ硫酸塩は、ロダナーゼ生産細菌の増殖を促進し、かつロダナーゼ酵素の生成に必須な電子受容体であるため、ロダナーゼ生産細菌の培養時に添加することによって、ロダナーゼ酵素の産生が増大すると考えられる。あるいは、ロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩を一緒に用いてシアン化合物を無害化してもよい。   Moreover, in this method, a cyanide compound can be detoxified using a rhodanase enzyme obtained from a culture of a rhodanase-producing bacterium cultured in the presence of thiosulfate. Since thiosulfate promotes the growth of rhodanase-producing bacteria and is an electron acceptor essential for the production of rhodanase enzymes, it is considered that the production of rhodanase enzymes increases when added during the cultivation of rhodanase-producing bacteria. Alternatively, the cyanide compound may be rendered harmless using rhodanase enzyme and thiosulfate together.

また本方法においては、チオ硫酸塩を使用する。チオ硫酸塩とは、一般式M I又はMIIで表される化合物であり、アルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩などが含まれる。 In this method, thiosulfate is used. The thiosulfate is a compound represented by the general formula M 2 I S 2 O 3 or M II S 2 O 3 , and includes alkali metal salts, magnesium salts, calcium salts, barium salts and the like.

本方法においては、シアン化合物を含むものであればいかなるものも無害化の対象とすることができる。例えば、シアン化合物で汚染された土壌、地下水、廃水、河川水などが挙げられる。   In this method, any substance containing a cyanide compound can be detoxified. For example, soil contaminated with cyanide, ground water, waste water, river water and the like can be mentioned.

本方法では、シアン化合物に、上述したロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩を適用することで、シアン化合物を無害化することができる。ここで、本方法は、チオ硫酸塩の存在下でシアン化合物と共にロダナーゼ生産細菌の菌体を培養すること、シアン化合物とロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩を混合すること、シアン化合物に、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物とチオ硫酸塩を散布すること、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩を不織布等に接種したものをシアン化合物に静置することなどにより行うことができる。あるいは、無害化の対象となる土壌や水中に既にロダナーゼ生産細菌が存在すると考えられる場合には、単に当該無害化対象にチオ硫酸塩を投入するのみで本方法を実施することができる。   In this method, the cyanide can be detoxified by applying the above-mentioned rhodanase-producing bacteria or the culture thereof or the rhodanase enzyme and thiosulfate to the cyanide. Here, this method involves culturing a cell of a rhodanase-producing bacterium together with a cyanide in the presence of a thiosulfate, a mixture of a cyanide and a rhodanase-producing bacterium or a culture thereof, or a mixture of a rhodanase enzyme and a thiosulfate. Spraying rhodanase-producing bacterial cells or their culture and thiosulfate on cyanide, inoculating non-woven fabric etc. with rhodanase-producing bacterial cells or their culture or rhodanase enzyme and thiosulfate Can be carried out by standing in a cyanide compound. Alternatively, when it is considered that rhodanase-producing bacteria are already present in the soil or water to be detoxified, this method can be carried out simply by adding thiosulfate to the detoxified target.

チオ硫酸塩の存在下でシアン化合物と共にロダナーゼ生産細菌を培養する場合、及びロダナーゼ生産細菌の培養物を調製する場合には、チオ硫酸塩を添加すること以外は通常の培養条件を用いればよい。例えば、培地として、グルコース、デンプン、スクロース等の炭素源、硝酸カリウム、硝酸アンモニウム、酵母エキス、ペプトン等の窒素源を含有し、好ましくは、リン酸カリウム、硝酸マグネシウム、塩化カルシウム等の無機塩類や微量金属類、アミノ酸類、ビタミン類等の微量成分を含有する培地を用いることができる。本方法においては、例えば、ロダナーゼ生産細菌の増殖に必要であり、かつシアン化合物の無害化処理対象となる土壌、地下水などに不足している栄養塩(一般的には窒素及びリン)を添加することが好ましい。栄養塩の添加量は、無害化処理対象物に対して、窒素約0〜500mg/kg、リン約0〜100mg/kgの範囲内とすることができる。また培地は、固体培地及び液体培地のいずれも使用することが好ましい。   When culturing rhodanase-producing bacteria together with cyanide in the presence of thiosulfate, and preparing a culture of rhodanase-producing bacteria, normal culture conditions may be used except for the addition of thiosulfate. For example, the medium contains carbon sources such as glucose, starch and sucrose, nitrogen sources such as potassium nitrate, ammonium nitrate, yeast extract, and peptone, preferably inorganic salts such as potassium phosphate, magnesium nitrate, calcium chloride, and trace metals A medium containing trace components such as amino acids, amino acids and vitamins can be used. In this method, for example, nutrient salts (generally nitrogen and phosphorus) that are necessary for the growth of rhodanase-producing bacteria and that are deficient in soil, groundwater, etc. that are to be detoxified with cyanide are added. It is preferable. The addition amount of the nutrient salt can be within the range of about 0 to 500 mg / kg nitrogen and about 0 to 100 mg / kg phosphorus with respect to the detoxification target. Moreover, it is preferable to use both a solid culture medium and a liquid culture medium.

添加するチオ硫酸塩の種類及び量は、使用するロダナーゼ生産細菌の種類及び存在量、シアン化合物の存在量、無害化処理対象物(土壌、水)等に応じて異なるが、対象物である土壌及び水に対して、約0.01〜約1mg/kgの範囲となるように添加することが好ましい。   The type and amount of thiosulfate added depends on the type and amount of rhodanase-producing bacteria to be used, the amount of cyanide, the detoxification target (soil, water), etc., but the target soil And it is preferable to add so that it may become the range of about 0.01 to about 1 mg / kg with respect to water.

本方法におけるロダナーゼ生産細菌の培養においては、静置培養、振盪培養、通気培養、通気撹拌培養等の各種培養条件を用いて培養を行うことができる。ここで、培養の最適条件に関しては、用いる細菌の種類により異なるため、上記培地及び培養方法は用いる細菌に適するものに適宜選択及び調整され、また、温度、pH、培養期間等のその他の培養条件も適宜選択されて培養が行われることが好ましい。   In the culture of rhodanase-producing bacteria in this method, the culture can be performed using various culture conditions such as stationary culture, shaking culture, aeration culture, and aeration and agitation culture. Here, since the optimum culture conditions vary depending on the type of bacteria used, the above medium and culture method are appropriately selected and adjusted to those suitable for the bacteria used, and other culture conditions such as temperature, pH, culture period, etc. It is preferable that the culture is carried out with appropriate selection.

例えば、培養温度は、細菌の活性を維持するために処理槽の温度を約15〜35℃に維持することが好ましい。また、培養時のpHは、ロダナーゼ生産細菌によるチオ硫酸塩から硫酸塩の生成のためにpHが低下するため、無害化反応中はpH調整剤を使用して、pHが約6〜10の範囲に維持されるように調整することが好ましい。   For example, the culture temperature is preferably maintained at about 15 to 35 ° C. in order to maintain the activity of bacteria. In addition, since the pH during culture is lowered due to the production of sulfate from thiosulfate by rhodanase producing bacteria, a pH adjuster is used during the detoxification reaction, and the pH is in the range of about 6-10. It is preferable to adjust so that it may be maintained.

さらに、ロダナーゼ生産細菌は、空気中の炭酸ガスを炭素源として増殖するものである。従って、無害化処理対象の土壌又は水を掘削操作を行わずに本方法を実施する場合には、土壌吸引法又はエアスパージング法により空気(炭酸ガス)を供給することが好ましい。また、掘削した土壌又は水に対して本方法を適用する場合にも、通気管の使用又は攪拌処理により、土壌又は水に空気(炭酸ガス)を供給することが好ましい。さらに生物処理槽において無害化反応を行う場合には、曝気処理を行うことが好ましい。空気(炭酸ガス)の供給量は、対象土壌及び水1kgに対して、約0.01〜1L/分の範囲となるようにする。   Furthermore, the rhodanase-producing bacterium grows using carbon dioxide in the air as a carbon source. Accordingly, when the present method is performed without excavating soil or water to be detoxified, it is preferable to supply air (carbon dioxide) by a soil suction method or an air sparging method. Moreover, also when applying this method with respect to excavated soil or water, it is preferable to supply air (carbon dioxide gas) to soil or water by use of an air pipe or a stirring process. Furthermore, when a detoxification reaction is performed in a biological treatment tank, it is preferable to perform an aeration process. The supply amount of air (carbon dioxide gas) is set to a range of about 0.01 to 1 L / min with respect to 1 kg of the target soil and water.

上記のような培養条件を用いて、ロダナーゼ生産細菌の培養物を調製することができる。また、ロダナーゼ酵素については、ロダナーゼ生産細菌由来の酵素を用いる場合には、上記の培養方法に従って調製される培養物から、当技術分野で公知のタンパク質精製法(例えば、硫酸アンモニウム沈殿、ゲルクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー等)を使用して、純粋な又は部分的に純粋な酵素を単離することができる。   Using the culture conditions as described above, a culture of rhodanase-producing bacteria can be prepared. Regarding the rhodanase enzyme, when an enzyme derived from a rhodanase-producing bacterium is used, a protein purification method known in the art (for example, ammonium sulfate precipitation, gel chromatography, Pure or partially pure enzyme can be isolated using ion exchange chromatography, affinity chromatography, etc.).

使用するロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素の量は、使用する細菌の種類、シアン化合物の存在量などを考慮して、望ましい結果が得られるように決定しうる。例えば、シアン化合物汚染水の処理におけるシアン化合物の無害化においては、生物処理槽においてロダナーゼ生産細菌が10細胞/ml以上存在することが好ましい。 The amount of the rhodanase-producing bacterium used or its culture or the amount of the rhodanase enzyme can be determined so as to obtain a desired result in consideration of the type of bacterium used, the amount of cyanide present, and the like. For example, in the detoxification of cyanide in the treatment of cyanide-contaminated water, it is preferable that rhodanase-producing bacteria are present at 10 6 cells / ml or more in the biological treatment tank.

また、本方法をシアン化合物汚染の浄化に適用することができ、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩を用いてシアン化合物汚染土壌又は水に含まれるシアン化合物を無害化し、浄化することができる。   In addition, this method can be applied to the purification of cyanide contamination, and harmless cyanide compounds contained in soil or water containing cyanogen-contaminated soil or water using rhodanase-producing bacteria or cultures thereof or rhodanase enzyme and thiosulfate. Can be purified.

ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素によるシアン化合物の無害化の終了後は、処理済の土壌又は水を適切な分離装置、例えば振動篩、膜、ベルトプレス又は遠心分離装置等を用いて、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又は酵素を分離することができる。細菌及び酵素は、事前に動物試験等により安全性を確認されたものを用いるか、あるいは安全性を徹底するために使用後に殺菌処理を行うことが好ましい。   After detoxification of the cyanogen compound by the rhodanase-producing bacteria or the culture thereof or the rhodanase enzyme, the treated soil or water is removed with an appropriate separation device such as a vibrating sieve, membrane, belt press or centrifugal separator. It can be used to isolate rhodanase-producing bacteria or their cultures or enzymes. It is preferable to use bacteria and enzymes whose safety has been confirmed in advance by animal tests or the like, or to sterilize after use in order to ensure safety.

2.シアン化合物無害化剤
本発明に係るシアン化合物無害化剤(以下、「本無害化剤」ともいう)は、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素と、チオ硫酸塩を含むものである。本無害化剤は、ロダナーゼ生産細菌のうちの1種を単独で、又は複数種を組み合わせて含有することができ、また1種又は複数種のロダナーゼ生産細菌から調製された培養物、又は1種以上の生物に由来するロダナーゼ酵素を含有してもよい。ロダナーゼ生産細菌、その培養物及びロダナーゼ酵素は、前項「1.シアン化合物の無害化方法」に記載のように調製することができる。
2. Cyanide detoxifying agent The cyanide detoxifying agent according to the present invention (hereinafter also referred to as “the detoxifying agent”) comprises a cell of a rhodanase-producing bacterium or a culture thereof or a rhodanase enzyme and thiosulfate. The detoxifying agent can contain one kind of rhodanase-producing bacteria alone or in combination of two or more kinds, and is a culture prepared from one or more kinds of rhodanase-producing bacteria, or one kind A rhodanase enzyme derived from the above organisms may be contained. The rhodanase-producing bacterium, the culture thereof, and the rhodanase enzyme can be prepared as described in the previous section “1. Method for detoxifying cyanide compound”.

本無害化剤の形態は特に限定されず、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物のそのままの形態、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素を適当な溶媒中に溶解若しくは懸濁した形態、あるいはロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素を保存可能なように凍結又は乾燥した形態など、任意の形態をとることができる。このような形態は、当技術分野で公知の方法に従って適宜調製することができる。   The form of the detoxifying agent is not particularly limited, and the form of rhodanase-producing bacteria or the culture thereof as it is, the body of rhodanase-producing bacteria or the culture thereof, or the rhodanase enzyme is dissolved or suspended in an appropriate solvent. Any form such as a frozen form or a frozen or dried form so that the rhodanase enzyme can be stored can be taken. Such a form can be appropriately prepared according to a method known in the art.

また、本無害化剤は、他の成分を含んでもよい。他の成分は、菌体又はロダナーゼ酵素のシアン化合物無害化活性を損なわないものであれば特に限定されるものではなく、例えば、ロダナーゼ生産細菌の増殖に必要な栄養塩(窒素及びリン)等が挙げられる。   Further, the present detoxifying agent may contain other components. Other components are not particularly limited as long as they do not impair the cyanide detoxification activity of the bacterial body or rhodanase enzyme. For example, nutrient salts (nitrogen and phosphorus) necessary for the growth of rhodanase-producing bacteria are included. Can be mentioned.

本無害化剤は、シアン化合物に適用することにより使用することができる。例えば、シアン化合物と混合する、シアン化合物に散布する、などにより使用することができる。また、使用量は、使用する細菌の種類、シアン化合物の存在量などを考慮して、望ましい結果が得られるように決定しうる。また、本無害化剤は、シアン化合物汚染の浄化剤として用いることも可能である。   The detoxifying agent can be used by applying it to a cyanide compound. For example, it can be used by mixing with a cyanide compound or spraying on a cyanide compound. The amount used can be determined so as to obtain a desired result in consideration of the type of bacteria used, the amount of cyanide present, and the like. The present detoxifying agent can also be used as a cleaning agent for cyanide contamination.

本方法及び本無害化剤を用いることにより、浄化が望まれているシアン化合物を効率的にかつ低コストで無害化することができる。すなわち、シアン化合物に汚染された土壌又は水に対して、本無害化剤(あるいは、ロダナーゼ生産細菌の菌体若しくはその培養物又はロダナーゼ酵素と、チオ硫酸塩)と、場合によっては空気を供給するのみでシアン化合物を無害化することができる。また、本方法又は本無害化剤により、有害なシアン化合物が酵素反応において無害化されるため、微生物、酵素又は化学物質を単独で使用する場合よりも浄化期間が短く、また環境に対して安全である。   By using the present method and the present detoxifying agent, the cyanide compound desired to be purified can be made harmless efficiently and at low cost. That is, this harmless agent (or a cell of rhodanase-producing bacteria or its culture or rhodanase enzyme and thiosulfate) and, in some cases, air are supplied to soil or water contaminated with cyanide. The cyanide can be detoxified only by this. In addition, because this method or this detoxifying agent detoxifies harmful cyanide compounds in the enzyme reaction, the purification period is shorter than when using microorganisms, enzymes, or chemical substances alone, and it is safe for the environment. It is.

以下、実施例を用いて本方法をより詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれら実施例に限定されるものではない。   Hereinafter, although this method is demonstrated in detail using an Example, the technical scope of this invention is not limited to these Examples.

本実施例においては、エアスパージング工法によるシアン汚染地下水の浄化を行い、シアン化合物を無害化する微生物が存在するか否かを確認した。   In this example, cyan contaminated groundwater was purified by an air sparging method, and it was confirmed whether or not there were microorganisms that detoxify cyan compounds.

約7mg/lのシアンで汚染された地下水(工場跡地のベンゼン及びシアン汚染地下水)にエアスパージングを行った結果、シアン濃度は漸減し、150日間後に約97%のシアンが除去された(図1)。曝気した回収ガス中にはシアンが検出されなかったため、これらのシアンは地盤内で微生物により無害化されたと考えられた。   As a result of air sparging on groundwater contaminated with about 7 mg / l cyanide (benzene and cyanate groundwater in the factory site), the cyan concentration gradually decreased and about 97% of cyanide was removed after 150 days (FIG. 1). ). Since cyan was not detected in the aerated recovered gas, it was considered that these cyanides were detoxified by microorganisms in the ground.

本実施例においては、シアン化合物無害化細菌(ロダナーゼ生産細菌)の単離を行った。   In this example, cyanide detoxifying bacteria (rhodanase producing bacteria) were isolated.

実施例1で使用した汚染サイトの地下水から、シアンを唯一の炭素源とする培地(表1に示す培地成分(250mlの微量元素溶液、10mlのWolfe微量元素溶液及び1mlのビタミン混合溶液)を、1Lの蒸留水でメスアップ後、pHを6N塩酸を用いて7に調整する。それを培養瓶に分注し、121℃にて15分間滅菌する。)を用いて微生物のスクリーニングを行った。その結果、本培地でシアンを低減しながら増殖する楕円状の桿菌(TC−2株)を単離した。TC−2株の形態を図2に示す。また、この菌株の特性決定(以下参照)を行ったところ、16S rRNA解析により、TC−2株はRhizobiales属に属するStarkeya sp.(旧名Thiobacillus novellus)と99.0%の相同性を有したが、明らかな近縁種は存在しないことが判明し、この菌株が新規細菌種であることがわかった。なお、TC−2株は、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター(茨城県つくば市東1丁目1番地1 中央第6)に、受託番号FERM P−20354として平成17年(2005年)1月12日付で寄託されている。   From the groundwater at the contaminated site used in Example 1, a medium containing cyan as the sole carbon source (medium components shown in Table 1 (250 ml of trace element solution, 10 ml of Wolf trace element solution and 1 ml of vitamin mixture solution), After measuring with 1 L of distilled water, the pH was adjusted to 7 with 6N hydrochloric acid, which was dispensed into a culture bottle and sterilized at 121 ° C. for 15 minutes. As a result, an elliptical gonococcus (TC-2 strain) that proliferated while reducing cyanide in this medium was isolated. The form of the TC-2 strain is shown in FIG. Moreover, as a result of characterization (see below) of this strain, TC-2 strain was found to have 99.0% homology with Starkeya sp. (Former name Thiobacillus novellus) belonging to the genus Rhizobiales by 16S rRNA analysis. It was found that there was no obvious related species, and this strain was found to be a novel bacterial species. In addition, TC-2 shares are registered in the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology patent biological depository center (1st, 1st, 1st, 1st, 1st, Tsukuba City, Ibaraki Prefecture, 6th) as accession number FERM P-20354 in 2005. Deposited on January 12th.

TC−2株(FERM P−20354)
(1)形態的性質
a.1〜3μmの短桿菌
b.鞭毛なし
(2)生理学的性質
a.至適生育温度 30℃
b.至適生育pH 7.0
c.シアン資化性あり
(3)化学物理学的性質
a.16S rRNA配列 配列番号1
TC-2 strain (FERM P-20354)
(1) Morphological properties a. 1 to 3 μm bacilli b. No flagella (2) Physiological properties a. Optimal growth temperature 30 ℃
b. Optimal growth pH 7.0
c. Cyan assimilation (3) Chemical physics a. 16S rRNA sequence SEQ ID NO: 1

Figure 0004572135
Figure 0004572135

本実施例においては、チオ硫酸塩のシアン無害化作用について確認した。
チオ硫酸塩にはシアンの無害化作用があることが知られているため、シアン模擬汚染地下水を用いてチオ硫酸塩の無害化作用を調べた。シアン模擬汚染地下水にチオ硫酸を添加し、1時間静置後に全シアン濃度を測定した結果、チオ硫酸塩の添加によりシアンが若干低減したが、チオ硫酸塩の添加濃度を増加させてもシアンの無害化効果は一定範囲にとどまることが確認された(図3)。
In this example, the cyanide detoxification effect of thiosulfate was confirmed.
Since thiosulfate is known to have cyanide detoxification, the detoxification effect of thiosulfate was investigated using cyan simulated contaminated groundwater. Thiosulfuric acid was added to the simulated cyanide groundwater, and the total cyan concentration was measured after standing for 1 hour. As a result, cyan was slightly reduced by adding thiosulfate, but even if the concentration of added thiosulfate was increased, It was confirmed that the detoxification effect remains within a certain range (Fig. 3).

本実施例においては、チオ硫酸塩添加によるシアン化合物無害化細菌の増殖促進効果を確認した。
チオ硫酸塩添加によるシアン化合物無害化細菌の増殖促進効果を確認するため、シアンを含むミネラル培地(チオ硫酸塩無添加;表2に示す培地成分(250mlの微量元素溶液、10mlのWolfe微量元素溶液及び1mlのビタミン混合溶液)を、1Lの蒸留水でメスアップ後、pHを6N塩酸を用いて7に調整する。それを培養瓶に分注し、121℃にて15分間滅菌する。)と同一の培地にチオ硫酸塩を最終濃度で1g/lになるように添加した培地を用いて、実施例2で単離したシアン化合物無害化細菌TC−2株を培養した。その結果、チオ硫酸を添加することによりTC−2株は10倍以上多く増加することが確認された。9日間の培養後、チオ硫酸塩が存在しない培地での全シアン濃度の除去率は約30%であったのに対して、チオ硫酸を添加した培地では大部分のシアンが除去された(図4)。
In this example, the effect of promoting the growth of cyanide-detoxifying bacteria by adding thiosulfate was confirmed.
In order to confirm the growth promotion effect of cyanide detoxified bacteria by addition of thiosulfate, mineral medium containing cyanide (no addition of thiosulfate; medium components shown in Table 2 (250 ml trace element solution, 10 ml Wolfe trace element solution) And 1 ml of vitamin mixture solution) with 1 L of distilled water, adjust the pH to 7 using 6N hydrochloric acid, dispense it into a culture bottle and sterilize at 121 ° C. for 15 minutes. The cyanide detoxified bacterium TC-2 strain isolated in Example 2 was cultured using a medium in which thiosulfate was added to the same medium to a final concentration of 1 g / l. As a result, it was confirmed that the addition of thiosulfuric acid increased the TC-2 strain more than 10 times. After 9 days of culture, the removal rate of the total cyan concentration in the medium without thiosulfate was about 30%, whereas most of the cyanide was removed in the medium with thiosulfate added (Fig. 4).

従って、チオ硫酸塩は、シアン化合物無害化細菌(ロダナーゼ生産細菌)の増殖を促進し、またシアン化合物の無害化を促進することがわかった。   Therefore, it was found that thiosulfate promotes the growth of cyanide detoxifying bacteria (rhodanase producing bacteria) and promotes the detoxification of cyanide compounds.

Figure 0004572135
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本実施例においては、チオ硫酸塩の適正供給範囲について調べた。
チオ硫酸塩の適正供給範囲を把握するため、チオ硫酸塩の添加濃度を段階的に変えてTC−2株を12日間、30℃で培養した。その結果、チオ硫酸塩によるTC−2株の増殖促進効果は、0.01〜1mg/Lの範囲内で確認された(図5)。
In this example, the proper supply range of thiosulfate was examined.
In order to grasp the appropriate supply range of thiosulfate, the TC-2 strain was cultured at 30 ° C. for 12 days while changing the addition concentration of thiosulfate stepwise. As a result, the growth promoting effect of TC-2 strain by thiosulfate was confirmed within the range of 0.01 to 1 mg / L (FIG. 5).

本発明に係るシアン化合物の無害化方法及びシアン化合物無害化剤により、シアン化合物を効率的に、簡便にかつ低コストで無害化することができる。また、本発明に係るシアン化合物の無害化方法及びシアン化合物無害化剤により、シアン化合物に汚染した土壌・水を浄化することができる。   With the cyanide detoxification method and cyanide detoxifying agent according to the present invention, the cyanide compound can be detoxified efficiently, simply and at low cost. Further, the cyanide detoxification method and the cyanide detoxification agent according to the present invention can purify soil and water contaminated with the cyanide.

スパージング実施中の地盤中のシアン濃度の推移を示す図である。It is a figure which shows transition of the cyan density | concentration in the ground under execution of sparging. TC−2株の電子顕微鏡写真である。It is an electron micrograph of TC-2 strain. チオ硫酸塩添加によるシアン濃度変化を示す図である。It is a figure which shows the cyan density | concentration change by thiosulfate addition. チオ硫酸塩添加によるシアン化合物無害化細菌(ロダナーゼ生産細菌)のシアン無害化促進効果を示す図である。It is a figure which shows the cyanogen detoxification promotion effect of cyanide detoxification bacteria (rhodanase producing bacteria) by thiosulfate addition. チオ硫酸塩濃度を変化させて添加した場合のTC−2株の増殖促進効果を示す。The growth promotion effect of the TC-2 strain | stump | stock at the time of changing and adding thiosulfate density | concentration is shown.

Claims (11)

シアン化合物を含む土壌又は水に、ロダナーゼ生産細菌の菌体チオ硫酸塩供給し、該土壌又は水中のシアン化合物を無害化することを特徴とするシアン化合物の無害化方法。 The soil or water containing cyanide, and supplying the bacteria with thiosulphate Rodanaze producing bacteria, the method of detoxifying a cyanide compound, characterized in that detoxifies cyanide of the soil or water. シアン化合物を含む土壌又は水に、ロダナーゼ酵素とチオ硫酸塩とを供給し、該土壌又は水中のシアン化合物を無害化することを特徴とするシアン化合物の無害化方法。A method for detoxifying a cyanide, comprising supplying a rhodanase enzyme and a thiosulfate to soil or water containing the cyanide to detoxify the cyanide in the soil or water. シアン化合物を含む土壌又は水に、チオ硫酸塩の存在下にて培養したロダナーゼ生産細菌の培養物を供給し、該土壌又は水中のシアン化合物を無害化することを特徴とするシアン化合物の無害化方法。Supplying a culture of rhodanase-producing bacteria cultured in the presence of thiosulfate to soil or water containing cyanide and detoxifying cyanide in the soil or water Method. シアン化合物を含み、かつロダナーゼ生産細菌が存在する土壌又は水に、チオ硫酸塩を供給し、該土壌又は水中のシアン化合物を無害化することを特徴とするシアン化合物の無害化方法。A method for detoxifying a cyanide, comprising supplying a thiosulfate to soil or water containing a cyanide and having rhodanase-producing bacteria, thereby detoxifying the cyanide in the soil or water. さらに窒素及びリンから選択される栄養塩を供給して無害化を行う、請求項1又は4に記載の無害化方法。 Furthermore, the detoxification method of Claim 1 or 4 which supplies the nutrient salt selected from nitrogen and phosphorus, and detoxifies. 空気を供給して無害化を行う、請求項1、4及び5のいずれか1項に記載の無害化方法。 The detoxification method according to any one of claims 1 , 4, and 5 , wherein the detoxification is performed by supplying air. pH6〜10において無害化を行う、請求項1〜のいずれか1項に記載の無害化方法。 The detoxification method according to any one of claims 1 to 6 , wherein the detoxification is performed at a pH of 6 to 10. 温度15〜35℃において無害化を行う、請求項1〜のいずれか1項に記載の無害化方法。 The detoxification method according to any one of claims 1 to 7 , wherein the detoxification is performed at a temperature of 15 to 35 ° C. ロダナーゼ生産細菌の菌体又はロダナーゼ酵素と、チオ硫酸塩を含むことを特徴とする、土壌又は水に含まれるシアン化合物無害化剤。 The bacteria or Rodanaze enzyme Rodanaze producing bacteria, characterized in that it comprises a thiosulfate, detoxifying agents of cyanide contained in the soil or water. シアン化合物無害化剤がロダナーゼ生産細菌の菌体を含む場合、あるいは土壌又は水にロダナーゼ生産細菌が存在する場合には、さらに窒素及びリンから選択される栄養塩を含む、請求項記載のシアン化合物無害化剤。 The cyanide according to claim 9 , wherein the cyanide detoxifying agent further includes a nutrient selected from nitrogen and phosphorus when the rhodanase-producing bacteria are contained in the cells or when the rhodanase-producing bacteria are present in the soil or water. Compound detoxifying agent. チオ硫酸塩の存在下にて培養したロダナーゼ生産細菌の培養物を含むことを特徴とする、土壌又は水に含まれるシアン化合物の無害化剤。A detoxifying agent for cyanide contained in soil or water, comprising a culture of rhodanase-producing bacteria cultured in the presence of thiosulfate.
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