JP4595115B2

JP4595115B2 - DNA content

Info

Publication number: JP4595115B2
Application number: JP2005043510A
Authority: JP
Inventors: 弓子宗像
Original assignee: 独立行政法人国立印刷局
Priority date: 2005-02-21
Filing date: 2005-02-21
Publication date: 2010-12-08
Anticipated expiration: 2025-02-21
Also published as: JP2006223241A

Description

本発明は、ＤＮＡ含有物に関するものであり、特に、真偽判別、偽造防止技術に用いられるマーカー物質を用いたＤＮＡ含有物で、さらに、耐光性に優れたＤＮＡ含有物を提供する。 The present invention relates to a DNA-containing material. In particular, the present invention provides a DNA-containing material that uses a marker substance used for authenticity determination and anti-counterfeiting technology, and further has excellent light resistance.

従来より、ＤＮＡ（デオキシリボ核酸）は、他の物質と高度に特異的・選択的な相互作用を示す働きがあることから、機能物質への展開が期待されている。しかし、ＤＮＡは、水溶性のため、その構造を安定に保つことが難しく、そのため利用分野が限られていた。 Conventionally, DNA (deoxyribonucleic acid) has a function of highly specific / selective interaction with other substances, and is expected to be developed into functional substances. However, since DNA is water-soluble, it is difficult to keep its structure stable, and thus the field of use has been limited.

ひとつの利用分野として、偽造防止、真偽判別等にＤＮＡが用いられており、偽造防止用、真偽判別用及び個別情報識別用などの画像の形成のためのインキとしてＤＮＡ等を含有するインキが提案されており、該インキを用いて各種の印刷を行っている（例えば、特許文献１参照。）。また、これらの印刷物の判別、識別などは、画像が形成されたシートを裁断し、所定のバッファー中に懸濁及び攪拌し、ＤＮＡを抽出して、抽出されたＤＮＡを分析することにより行っている。 As an application field, DNA is used for anti-counterfeiting, authenticity discrimination, etc., and ink containing DNA as ink for image formation for anti-counterfeiting, authenticity discrimination, and individual information identification Have been proposed, and various types of printing are performed using the ink (see, for example, Patent Document 1). In addition, discrimination and identification of these printed materials are performed by cutting a sheet on which an image is formed, suspending and stirring in a predetermined buffer, extracting DNA, and analyzing the extracted DNA. Yes.

また、ＤＮＡは水溶性であることから、ＤＮＡを水溶性溶液に溶解し、このような溶液を、偽造防止ラベルとして製品の表面上に適用しているが、この水溶性溶液が、樹脂、ガラス容器等に密着することができないという欠点があり、この水溶性の偽造防止ラベルは、容易に剥がれてしまい、同定することができないという問題があった。 Further, since DNA is water-soluble, DNA is dissolved in a water-soluble solution, and such a solution is applied on the surface of the product as a forgery prevention label. There is a drawback that it cannot be adhered to a container or the like, and this water-soluble anti-counterfeit label is easily peeled off and cannot be identified.

また、一方で、ＤＮＡは、紫外線によりダメージを受けやすいことが問題となっている。それは、ＤＮＡ内部の核酸基チミンが２７０ｎｍの紫外線を吸収することが主要因によるものとされているが、単に紫外線の吸収が問題となるのではなく、紫外線の吸収によりＤＮＡの構造変化が生じることが問題となっており、ＤＮＡの耐光性の向上が図れる手法が求められていた。 On the other hand, there is a problem that DNA is easily damaged by ultraviolet rays. The main reason is that the nucleic acid group thymine in DNA absorbs 270 nm UV light, but it does not simply cause UV light absorption, but the structure of DNA changes due to UV light absorption. Therefore, there is a need for a technique that can improve the light resistance of DNA.

しかし、一般に、ＤＮＡは高価であり、例えば、貴重印刷物や用紙に用いて、真偽判別、偽造防止技術に使用するためには、ある程度の多量のＤＮＡを必要とする、という問題があった。 However, in general, DNA is expensive, and there is a problem that a certain amount of DNA is required for use in, for example, precious printed matter and paper, and for use in authenticity determination and anti-counterfeiting techniques.

さらに、耐光性の問題として、紫外線によるダメージ分を想定して、その分のＤＮＡの添加量を増やしているため、更にコストが高くなるという問題があった。 Further, as a problem of light resistance, there is a problem that the cost is further increased because the amount of DNA added is increased by assuming damage due to ultraviolet rays.

特開２００２−０７０９５１号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2002-070951

以上詳述したように、現在用いられている方法においては、ＤＮＡの量が多量に必要になるため、単価が高くなるという問題、また、対紫外線に対する対策の問題等があり、本発明はこのような問題を解決するためになされたものであり、本発明者は、ＤＮＡが水溶性であるということに対して、ＤＮＡを水溶性媒体と混合することで、ＤＮＡを媒体で包埋してから固化することによりＤＮＡ含有物を作製することで、現在用いられている方法では得ることができない、付加的成分が練り込みやすい媒体に封じ込めたＤＮＡを固形物にして用いるため、極めて少量のＤＮＡを用いても効果が期待できる。さらにマーカー物質や耐光性向上剤を組み込むことで、偽造防止や耐光性に対して優れたＤＮＡ含有物を提供することを目的としている。また、本発明のＤＮＡ含有物を用紙に透き込むことで、真偽判別及び／又は偽造防止用紙として用いることを可能とする。 As described in detail above, the currently used method requires a large amount of DNA, and thus has a problem that the unit price is high, and there is a problem of countermeasures against ultraviolet rays. In order to solve such a problem, the present inventor embeds DNA in a medium by mixing DNA with a water-soluble medium in contrast to the fact that DNA is water-soluble. Since a DNA-containing material is prepared by solidifying from a solid, the DNA contained in a medium in which additional components are easily kneaded, which cannot be obtained by a currently used method, is used as a solid, so that a very small amount of DNA is used. The effect can be expected even if is used. Furthermore, it aims at providing the DNA containing material excellent in forgery prevention and light resistance by incorporating a marker substance and a light resistance improver. In addition, by allowing the DNA-containing material of the present invention to penetrate into the paper, it can be used as a paper for authenticating and / or preventing forgery.

本発明者は今般、ＤＮＡと媒体、例えば水溶性高分子を混合することで、ＤＮＡが水溶性高分子で包まれた状態となり、更に液状であるので、付加的成分を練り込みやすくなり、このようにした混合物をシート状に展延し、乾燥させることで有用性のあるＤＮＡ含有物を作製することが可能であり、更に得られたＤＮＡ含有物を粉砕及び／又は裁断して使用することにより、少量の固形物、すなわち、少量のＤＮＡの使用で効果を奏するとの知見を得た。 The present inventor has now mixed DNA and a medium, for example, a water-soluble polymer, so that the DNA is encased in the water-soluble polymer and is further liquid, so that additional components can be easily kneaded. It is possible to produce a useful DNA-containing material by spreading the resulting mixture into a sheet and drying it, and further crushing and / or cutting the obtained DNA-containing material. As a result, it was found that the use of a small amount of solid substance, that is, a small amount of DNA was effective.

さらに、ＤＮＡを含む媒体に紫外線吸収剤、光安定剤及び紫外線散乱剤からなる群から選ばれた少なくとも１種を混合することで、ＤＮＡの耐光性が向上した含有物を作製できるとの知見も得た。 Furthermore, there is also a finding that inclusions with improved light resistance of DNA can be produced by mixing at least one selected from the group consisting of ultraviolet absorbers, light stabilizers and ultraviolet scattering agents into a medium containing DNA. Obtained.

すなわち、本発明のＤＮＡ含有物は、ＤＮＡと媒体を混合して固化することにより得られた硬化物を粉砕及び／又は裁断して成るものである。 That is, the DNA-containing material of the present invention is obtained by crushing and / or cutting a cured product obtained by mixing and solidifying DNA and a medium.

また、ＤＮＡと媒体の混合物に紫外線吸収剤、光安定剤及び紫外線散乱剤からなる群から選ばれた少なくとも１種を、ＤＮＡを含む媒体に対して０．１〜２０％の割合で混合して成るものである。 Further, at least one selected from the group consisting of an ultraviolet absorber, a light stabilizer and an ultraviolet scattering agent is mixed in a mixture of DNA and medium at a ratio of 0.1 to 20% with respect to the medium containing DNA. It consists of.

また、ＤＮＡと媒体の混合物にマーカー物質を混合して固化することにより得られた硬化物を粉砕及び／又は裁断して成るものである。 In addition, a cured product obtained by mixing and solidifying a marker substance in a mixture of DNA and medium is pulverized and / or cut.

また、ＤＮＡ含有物を用紙に透き込むことにより、真偽判別及び／又は偽造防止用紙として使用するものである。 Further, by using a DNA-containing material transparently in the paper, it is used as a paper for authenticating and / or preventing forgery.

本発明によれば、付加的成分が練り込みやすい媒体に封じ込めたＤＮＡを固化することにより得られた硬化物を粉砕及び／又は裁断して用いるため、極めて少量のＤＮＡを用いても効果を期待できる。さらに、ＤＮＡを含む媒体に耐光性向上剤やマーカー物質を混合し、固化し、粉砕及び／又は裁断することにより、偽造防止や耐光性の優れたＤＮＡ含有物を得ることができた。また、本発明のＤＮＡ含有物を用紙に透き込むことで、真偽判別及び／又は偽造防止用紙として用いることが可能となり、可視識別、不可視識別の２段階識別が簡単に、低コストで可能となる。 According to the present invention, a cured product obtained by solidifying DNA contained in a medium in which additional components are easily kneaded is pulverized and / or cut and used, so that even if a very small amount of DNA is used, an effect is expected. it can. Furthermore, by mixing a light resistance improver and a marker substance in a medium containing DNA, solidifying, pulverizing and / or cutting, a DNA-containing material excellent in forgery prevention and light resistance could be obtained. In addition, by transcribing the DNA-containing material of the present invention into a sheet, it can be used as a sheet for authenticity discrimination and / or anti-counterfeiting, and two-stage identification of visible identification and invisible identification can be easily performed at low cost. Become.

以下、本発明を実施の形態に基づき説明するが、本発明は、これら実施例によって限定されるものではない。
本発明において、ＤＮＡ含有物とは、ＤＮＡと高分子を単に混ぜ合わせたものではなく、ＤＮＡを媒体によって周囲を包み込まれた状態してから固化し、粉砕及び／又は裁断しているので、ＤＮＡは周囲を媒体によって包まれた状態となっている。 Hereinafter, although the present invention is explained based on an embodiment, the present invention is not limited to these examples.
In the present invention, the DNA-containing material is not simply a mixture of DNA and a polymer, but is solidified after being surrounded by a medium and then solidified, crushed and / or cut. Is surrounded by a medium.

本実施例に用いるＤＮＡ含有物の作製方法の実施例について説明する。
１ＤＮＡ含有物の作製
本実施例に用いられるＤＮＡとしては、市販のもので良く、本実施例においては、タカラバイオ社製のラットの遺伝子断片（塩基鎖長３００）をＩＣＡＮ法により増幅したものを用いた。 An example of a method for producing a DNA-containing material used in this example will be described.
1 Preparation of DNA-containing material The DNA used in this example may be a commercially available DNA. In this example, a rat gene fragment (base chain length 300) manufactured by Takara Bio Inc. was amplified by the ICAN method. Was used.

また、媒体としては、用いるＤＮＡが水溶性であるので、水溶性であるのが好ましい。特に水溶性高分子であればさらに良く、ＤＮＡの媒体として付与するものであり、ＰＶＡ、ゼラチンなどがあげられる。本実施例においては、ＰＶＡ（ゴーセノールＮ３００日本合成化学工業製：商標名）を用いた。 The medium is preferably water-soluble because the DNA used is water-soluble. In particular, a water-soluble polymer is better and is given as a DNA medium, and examples thereof include PVA and gelatin. In this example, PVA (GOHSENOL N300 manufactured by Nippon Synthetic Chemical Industry: trade name) was used.

（実施例１）表１に示す材料を用い、それぞれ表に示した配合割合で処方し、スターラーを用いて混合し、混合液をガラス板上に広げて、室温で乾燥を行い、ＤＮＡシートを作製した。このシートをはさみを用いて破断し、ＤＮＡ含有物１を得た。はさみは、一例であり、シートを破断できるものであれば、はさみに限らない。 (Example 1) Using the materials shown in Table 1, each was formulated at the blending ratio shown in the table, mixed using a stirrer, the mixture was spread on a glass plate, dried at room temperature, and the DNA sheet was Produced. This sheet was broken with scissors to obtain DNA-containing product 1. The scissors are an example and are not limited to scissors as long as the sheet can be broken.

（表１）ＤＮＡ含有物１を得るための処方
ＰＶＡ（４.５％溶液）９９重量％
ＤＮＡ０．００３重量％ (Table 1) Formula for obtaining DNA-containing substance 1
PVA (4.5% solution) 99% by weight
0.003% by weight of DNA

（実施例１−１）次に、得られたＤＮＡ含有物１と調合紙料とを、表２に示す配合割合で混合し、JIS−P 8209（パルプ試験用手すき紙調製方法）に準じて６０グラム／ｍ^２の手すき紙１を作製した。 (Example 1-1) Next, the obtained DNA-containing material 1 and the blended paper stock were mixed at a blending ratio shown in Table 2, and according to JIS-P 8209 (Paper Test Handsheet Preparation Method). A handsheet 1 having a weight of 60 grams / m ² was produced.

（表２）手すき紙１を得るための処方
調合紙料１００重量％
ＤＮＡ含有物１３重量％ (Table 2) Prescription for obtaining handsheet 1
Formulation fee 100% by weight
DNA content 1 3% by weight

（比較例１）次に、比較用として、比較用ＤＮＡ含有物２を作製する。媒体として、水溶性高分子ではない飽和ポリエステル樹脂、ポリエスターＴＰ２３６（日本合成化学工業製：商標名）を用いた。 (Comparative Example 1) Next, a comparative DNA-containing material 2 is prepared for comparison. As a medium, a saturated polyester resin that is not a water-soluble polymer, Polyester TP236 (manufactured by Nippon Synthetic Chemical Industry, trade name) was used.

表３に示す材料を用い、それぞれ表に示した配合割合で処方し、スターラーを用いて混合したが、ＤＮＡが分離し、ＤＮＡシートを作製することができなかったため、比較用ＤＮＡ含有物２を得ることができなかった。このことからも媒体としては、水溶性高分子であることが好ましい。 Using the materials shown in Table 3, each was formulated at the blending ratio shown in the table and mixed using a stirrer, but DNA was separated and a DNA sheet could not be prepared. Couldn't get. Therefore, the medium is preferably a water-soluble polymer.

（表３）比較用ＤＮＡ含有物２を得るための処方
飽和ポリエステル樹脂（４.５％溶液）９９重量％
ＤＮＡ０．００３重量％ (Table 3) Formula for obtaining DNA-containing material 2 for comparison
Saturated polyester resin (4.5% solution) 99% by weight
0.003% by weight of DNA

２手すき紙１からのＤＮＡの確認
確認方法としては、対象から確認物質を取り出し、次いで溶媒を使用して該確認物質からＤＮＡを抽出し、最終的にＰＣＲ反応によってＤＮＡを増幅することにより、対象の真偽を判別することができる。 2. Confirmation of DNA from handsheet 1 As a confirmation method, the confirmation substance is taken out from the object, then the DNA is extracted from the confirmation substance using a solvent, and finally amplified by PCR reaction, thereby subjecting the object Can be discriminated.

（実施例１−１）で得られた手すき紙１を、５ｍｍφに打ち抜き、非イオン性の界面活性剤とエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム水塩（ＥＤＴＡ）を使用して抽出を行った。この抽出物をＤＮＡに対応する所定のプライマーを用いてＰＣＲ（Polymerase Chain Reaction)による増幅反応を行い、ＤＮＡの増幅を行った。得られたＰＣＲ産物、分子量マーカー、及びＤＮＡに対して電気泳動を行い、エチジウムプロミド染色液を用いて染色し、紫外線下でゲルを観察し、電気泳動パターンを得た。 The handsheet 1 obtained in (Example 1-1) was punched out to 5 mmφ, and extracted using a nonionic surfactant and ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt (EDTA). This extract was subjected to an amplification reaction by PCR (Polymerase Chain Reaction) using a predetermined primer corresponding to the DNA, to thereby amplify the DNA. The obtained PCR product, molecular weight marker, and DNA were subjected to electrophoresis, stained with ethidium promide staining solution, and the gel was observed under ultraviolet light to obtain an electrophoresis pattern.

図1に、手すき紙1の電気泳動パターンを示す。図１のレーン１は分子量マーカー、レーン２はＤＮＡ、レーン３はＤＮＡ含有物１、レーン４は手すき紙１からの抽出物のＰＣＲ産物である。 FIG. 1 shows an electrophoresis pattern of the handsheet 1. In FIG. 1, lane 1 is a molecular weight marker, lane 2 is DNA, lane 3 is DNA-containing material 1, and lane 4 is a PCR product of an extract from handsheet 1.

この図から、ＤＮＡ含有物1から抽出したＰＣＲ産物、手すき紙1より抽出したＰＣＲ産物の電気泳動パターンは、用いたＤＮＡの電気泳動パターンと同一であることが分かる。さらに、レーン１の分子量マーカーを参照に用いると、前記ＤＮＡ含有物1から抽出したＰＣＲ産物、手すき紙1からの抽出物のＰＣＲ産物のＤＮＡ鎖長が、ＰＶＡに混入したＤＮＡと同じ、塩基鎖長３００であることが分かり、破断、粉砕され微小となったＤＮＡ含有物中に確実にＤＮＡが存在していることが確認された。 From this figure, it can be seen that the electrophoresis patterns of the PCR product extracted from the DNA-containing material 1 and the PCR product extracted from the handsheet 1 are the same as the electrophoresis pattern of the DNA used. Further, when the molecular weight marker in lane 1 is used as a reference, the DNA chain length of the PCR product extracted from the DNA-containing product 1 and the PCR product of the extract from handsheet 1 is the same as that of the DNA mixed in PVA. It was found that the length was 300, and it was confirmed that the DNA was surely present in the DNA-containing material which was broken and crushed into fine particles.

３紫外線吸収剤、光安定剤及び紫外線散乱剤からなる群から選ばれた少なくとも１種を含むＤＮＡ含有物の作製 3. Preparation of DNA-containing material containing at least one selected from the group consisting of ultraviolet absorbers, light stabilizers and ultraviolet scattering agents

紫外線吸収剤は、高エネルギーをもつ紫外線を吸収し、無害のエネルギーに転換し、再輻射することによって紫外線遮蔽効果をもたらし、耐光性や耐候性を向上させるもので、ベンゾフェノン系、ベンゾトリアゾール系などがあげられる。また、紫外線散乱剤は、紫外線を散乱させることによって紫外線遮蔽効果をもたらす材料であり、主に金属酸化物粉末などの無機系材料が用いられ、二酸化チタン、酸化亜鉛などを微粒子化した粉体などがあげられる。また、光安定剤としては、ヒンダードアミン系のような、耐光性や耐候性を向上させるものがあげられる。 Ultraviolet absorbers absorb ultraviolet rays with high energy, convert them to harmless energy, re-radiate them to provide UV shielding effect, improve light resistance and weather resistance, such as benzophenone series, benzotriazole series, etc. Can be given. Ultraviolet scattering agents are materials that provide an ultraviolet shielding effect by scattering ultraviolet rays. Inorganic materials such as metal oxide powders are mainly used, and powders obtained by atomizing titanium dioxide, zinc oxide, etc. Can be given. Moreover, as a light stabilizer, what improves light resistance and a weather resistance like a hindered amine type | system | group is mention | raise | lifted.

本実施例においては、これらの紫外線遮蔽材料は単独で用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。これらの紫外線遮蔽材料の添加量は、０．１〜２０重量％で、好ましくは１〜１０重量％であり、２種以上を組み合わせて用いる場合は、全体の添加量がこの範囲を超えないものとする。 In this embodiment, these ultraviolet shielding materials may be used alone or in combination of two or more. The addition amount of these ultraviolet shielding materials is 0.1 to 20% by weight, preferably 1 to 10% by weight. When two or more kinds are used in combination, the total addition amount does not exceed this range. And

また、媒体に配合する紫外線吸収剤としては、市販のもので良く、ＤＡＮ含有物の耐光性を向上させるために付与するものであり、ベンゾトリアゾール系、ベンゾフェノン系があげられる。本実施例においては、ベンゾトリアゾール系のチヌビン３２８（チバ・ガイギー社製：商標名）を用いた。紫外線吸収剤の添加量は、０．１〜２０重量％で、好ましくは１〜１０重量％である。 Moreover, as an ultraviolet absorber mix | blended with a medium, a commercially available thing may be sufficient and it provides in order to improve the light resistance of a DAN containing material, and a benzotriazole type and a benzophenone type are mention | raise | lifted. In this example, benzotriazole-based tinuvin 328 (manufactured by Ciba-Geigy: trade name) was used. The addition amount of the ultraviolet absorber is 0.1 to 20% by weight, preferably 1 to 10% by weight.

また、媒体に配合する光安定剤としては、ヒンダードアミン系があげられる。本実施例においては、ヒンダードアミン系のチヌビン１２３（チバ・ガイギー社製：商標名）を用いた。光安定剤の添加量は、０．１〜２０重量％で、好ましくは１〜１０重量％である。 Moreover, a hindered amine type | system | group is mention | raise | lifted as a light stabilizer mix | blended with a medium. In this example, hindered amine tinuvin 123 (manufactured by Ciba-Geigy: trade name) was used. The addition amount of the light stabilizer is 0.1 to 20% by weight, preferably 1 to 10% by weight.

また、媒体に配合する紫外線散乱剤としては、酸化チタンを用いても良好な結果を得ることができた。この場合の酸化チタンの添加量は、０．１〜２０重量％で、好ましくは１〜１０重量％である。 Moreover, good results could be obtained even when titanium oxide was used as the ultraviolet scattering agent to be blended in the medium. In this case, the amount of titanium oxide added is 0.1 to 20% by weight, preferably 1 to 10% by weight.

また、媒体に配合する紫外線吸収剤、光安定剤及び紫外線散乱剤を混合しても良好な結果を得ることができた。この場合の紫外線吸収剤、光安定剤及び紫外線散乱剤の添加量は、総量で０．１〜２０重量％で、好ましくは１〜１０重量％である。 Also, good results could be obtained even when an ultraviolet absorber, a light stabilizer and an ultraviolet scattering agent blended in the medium were mixed. In this case, the total amount of the ultraviolet absorber, light stabilizer and ultraviolet scattering agent is 0.1 to 20% by weight, preferably 1 to 10% by weight.

（実施例２）表４に示す材料を用い、それぞれ表に示した配合割合で処方し、スターラーを用いて混合し、混合液をガラス板上に広げて、室温で乾燥を行い、紫外線吸収剤入りＤＮＡシートを作製した。このシートをはさみを用いて破断し、紫外線吸収剤を含むＤＮＡ含有物３を得た。 (Example 2) Using the materials shown in Table 4, each was formulated at the blending ratio shown in the table, mixed using a stirrer, the mixture was spread on a glass plate, dried at room temperature, and an ultraviolet absorber. A contained DNA sheet was prepared. This sheet was broken with scissors to obtain a DNA-containing material 3 containing an ultraviolet absorber.

（表４）ＤＮＡ含有物３を得るための処方
ＰＶＡ（４.５％溶液）９９重量％
紫外線吸収剤１重量％
ＤＮＡ０．００３重量％ (Table 4) Formula for obtaining DNA-containing material 3
PVA (4.5% solution) 99% by weight
1% by weight of UV absorber
0.003% by weight of DNA

（実施例２−１）次に、得られたＤＮＡ含有物３と調合紙料とを、表５に示す配合割合で混合し、JIS−P 8209（パルプ試験用手すき紙調製方法）に準じて６０グラム／ｍ^２の手すき紙２を作製した。 (Example 2-1) Next, the obtained DNA-containing material 3 and the blended paper stock were mixed at the blending ratio shown in Table 5, and according to JIS-P 8209 (Paper Test Handsheet Preparation Method). A handsheet ² of 60 grams / m ² was prepared.

（表５）紫外線吸収剤を含む手すき紙２を得るための処方
調合紙料１００重量％
ＤＮＡ含有物３３重量％ (Table 5) Formula for obtaining handsheet 2 containing an ultraviolet absorber
Formulation fee 100% by weight
DNA content 3 3% by weight

（比較例２）比較用として表６に示す材料を用い、それぞれ表に示した配合割合で処方し、スターラーを用いて混合し、混合液をガラス板上に広げて、室温で乾燥を行い、紫外線吸収剤を含まない比較用ＤＮＡシートを作製した。このシートをはさみを用いて破断し、比較用ＤＮＡ含有物４を得た。 (Comparative Example 2) Using the materials shown in Table 6 for comparison, each was formulated at the blending ratio shown in the table, mixed using a stirrer, the mixture was spread on a glass plate, and dried at room temperature. A comparative DNA sheet containing no UV absorber was prepared. The sheet was broken with scissors to obtain a comparative DNA-containing material 4.

（表６）比較用ＤＮＡ含有物４を得るための処方
ＰＶＡ（４.５％溶液）９９重量％
ＤＮＡ０．００３重量％ (Table 6) Formula PVA (4.5% solution) for obtaining DNA-containing material 4 for comparison 99% by weight
0.003% by weight of DNA

（比較例２−１）次に、得られた比較用ＤＮＡ含有物４と調合紙料とを、表７に示す配合割合で混合し、JIS−P 8209（パルプ試験用手すき紙調製方法）に準じて６０グラム／ｍ^２の手すき紙３を作製した。 (Comparative Example 2-1) Next, the obtained comparative DNA-containing material 4 and the blended paper stock were mixed at the blending ratios shown in Table 7, and the JIS-P 8209 (pulp test handsheet preparation method) was used. According to this, a handsheet 3 of 60 g / m ² was produced.

（表７）紫外線吸収剤を含まない比較用手すき紙３を得るための処方
調合紙料１００重量％
比較用ＤＮＡ含有物４３重量％ (Table 7) 100% by weight of prescription blended paper for obtaining comparative handsheet 3 containing no UV absorber
Comparative DNA content 4 3% by weight

（実施例３）次に、光安定剤を含むＤＮＡ含有物５を作製する。ここで、紫外線安定剤の代わりに光安定剤を使用する以外は、（実施例２）の紫外線吸収剤を含むＤＮＡ含有物３と同様にして光安定剤を含むＤＮＡ含有物５を作製した。 (Example 3) Next, a DNA-containing material 5 containing a light stabilizer is prepared. Here, a DNA-containing product 5 containing a light stabilizer was prepared in the same manner as the DNA-containing product 3 containing an ultraviolet absorber in Example 2 except that a light stabilizer was used instead of the ultraviolet stabilizer.

（実施例３−１）この光安定剤を含むＤＮＡ含有物５を使用して、（実施例２−１）の紫外線吸収剤を含む手すき紙２と同様にして光安定剤を含む手すき紙４を作製する。 (Example 3-1) Using the DNA-containing material 5 containing the light stabilizer, the handsheet 4 containing the light stabilizer in the same manner as the handsheet 2 containing the ultraviolet absorber of (Example 2-1). Is made.

（実施例４）次に、光安定剤と光散乱剤を含むＤＮＡ含有物６を作製する。表８に示す材料を用い、それぞれ表に示した配合割合で処方し、スターラーを用いて混合し、混合液をガラス板上に広げて、室温で乾燥を行い、光安定剤と光散乱剤入りＤＮＡシートを作製した。このシートをはさみを用いて破断し、光安定剤と光散乱剤を含むＤＮＡ含有物６を得た。 (Example 4) Next, a DNA-containing material 6 containing a light stabilizer and a light scattering agent is prepared. Using the materials shown in Table 8, formulated in the proportions shown in the table, mixing with a stirrer, spreading the mixture on a glass plate, drying at room temperature, containing light stabilizer and light scattering agent A DNA sheet was prepared. The sheet was broken with scissors to obtain a DNA-containing material 6 containing a light stabilizer and a light scattering agent.

（表８）ＤＮＡ含有物６を得るための処方
ＰＶＡ（４.５％溶液）９９重量％
光安定剤１重量％
光散乱剤１重量％
ＤＮＡ０．００３重量％ (Table 8) Formula for obtaining DNA-containing material 6
PVA (4.5% solution) 99% by weight
1% by weight light stabilizer
1% light scattering agent
0.003% by weight of DNA

（実施例４−１）この光安定剤と光散乱剤を含むＤＮＡ含有物６を使用して、（実施例２−１）の紫外線吸収剤を含む手すき紙２と同様にして光安定剤と光散乱剤を含む手すき紙５を作製する。 (Example 4-1) Using the DNA-containing material 6 containing the light stabilizer and the light scattering agent, the light stabilizer and the handsheet 2 containing the ultraviolet absorber of (Example 2-1) A handsheet 5 containing a light scattering agent is prepared.

４手すき紙の耐光性試験
得られた紫外線吸収剤を含む手すき紙２、紫外線吸収剤を含まない比較用手すき紙３、光安定剤を含む手すき紙４、光安定剤と光散乱剤を含む手すき紙５について耐光性試験を行った。JIS−K 7360-2（プラスチック-実験室光源による曝露試験方法第２部：キセノンアーク光源）に準じて、相対湿度50％、ブラックパネル温度６３℃、紫外線放射照度１８０Ｗ/ｍ^２の条件下で１時間〜４０時間の紫外線の照射を行い、耐光性試験を行った。このときの放射露光量は６２０Ｊ/ｍ^２〜２５６７０Ｊ/ｍ^２であった。 4 Light resistance test of handsheets obtained Handsheet 2 containing UV absorber, handsheet 3 for comparison not containing UV absorber, handsheet 4 containing light stabilizer, handsheet containing light stabilizer and light scattering agent The paper 5 was subjected to a light resistance test. In accordance with JIS-K 7360-2 (Plastic-Laboratory light source exposure test method Part 2: Xenon arc light source) under conditions of relative humidity 50%, black panel temperature 63 ° C, UV irradiance 180W / m ² Ultraviolet rays were irradiated for 1 to 40 hours, and a light resistance test was conducted. The radiation exposure at this time was 620 J / m ^{2 to} 25670 J / m ² .

５．手すき紙からのＤＮＡの確認
耐光性試験を行った紫外線吸収剤を含む手すき紙２、紫外線吸収剤を含まない比較用手すき紙３、光安定剤を含む手すき紙４、光安定剤と光散乱剤を含む手すき紙５のそれぞれを、5ｍｍφに打ち抜き、非イオン性の界面活性剤とエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム水塩（ＥＤＴＡ）を使用して抽出を行った。この抽出物をＤＮＡに対応する所定のプライマーを用いてＰＣＲ（Polymerase Chain Reaction）による増幅反応を行い、ＤＮＡの増幅を行った。得られたＰＣＲ産物、分子量マーカー及びＤＮＡに対して電気泳動を行い、エチジウムプロミド染色液を用いて染色し、紫外線下でゲルを観察し、電気泳動パターンを得た。 5). Confirmation of DNA from handsheets Handsheets 2 containing UV absorbers tested for light resistance, comparative handsheets 3 containing no UV absorbers, handsheets 4 containing light stabilizers, light stabilizers and light scattering agents Each of the handsheets 5 containing 5 was punched to 5 mmφ and extracted using a nonionic surfactant and ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt (EDTA). This extract was subjected to an amplification reaction by PCR (Polymerase Chain Reaction) using a predetermined primer corresponding to DNA, to thereby amplify the DNA. The obtained PCR product, molecular weight marker and DNA were subjected to electrophoresis, stained with ethidium promide staining solution, and the gel was observed under ultraviolet light to obtain an electrophoresis pattern.

図２に、紫外線吸収剤を含む手すき紙２の電気泳動パターンを示す。図２のレーン５及びレーン１２は分子量マーカー、レーン６は用いたＤＮＡ、レーン７はＤＮＡ含有物２からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン８は紫外線照射を行わないときの手すき紙２からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン９は紫外線を１０時間照射した後の手すき紙２からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン１０は紫外線を２０時間照射した後の手すき紙２からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン１１は紫外線を４０時間照射した後の手すき紙２からの抽出物のＰＣＲ産物である。 FIG. 2 shows an electrophoresis pattern of the handsheet 2 containing the ultraviolet absorber. Lane 5 and lane 12 in FIG. 2 are molecular weight markers, lane 6 is the DNA used, lane 7 is the PCR product of the extract from DNA-containing material 2, lane 8 is the extraction from handsheet 2 when UV irradiation is not performed. Lane 9 is the PCR product of the extract from handsheet 2 after UV irradiation for 10 hours, Lane 10 is the PCR product of the extract from handsheet 2 after UV irradiation for 20 hours, Lane 11 is the PCR product of the extract from the handsheet 2 after irradiation with ultraviolet rays for 40 hours.

この図から、ＤＮＡ含有物３から抽出したＰＣＲ産物、手すき紙２より抽出したＰＣＲ産物の電気泳動パターンはＤＮＡの電気泳動パターンと同一であることが分かる。さらに、レーン５及びレーン１２の分子量マーカーを参照に用いると、前記ＤＮＡ含有物３から抽出したＰＣＲ産物、手すき紙２からの抽出物のＰＣＲ産物のＤＮＡ鎖長が、ＰＶＡに混入したＤＮＡと同じ、塩基鎖長３００であることが分かる。 From this figure, it can be seen that the electrophoresis patterns of the PCR product extracted from the DNA-containing material 3 and the PCR product extracted from the handsheet 2 are the same as the DNA electrophoresis pattern. Furthermore, when the molecular weight markers in lanes 5 and 12 are used as a reference, the DNA chain length of the PCR product extracted from the DNA-containing material 3 and the PCR product extracted from the handsheet 2 is the same as the DNA mixed in PVA. It can be seen that the base chain length is 300.

図３に、紫外線吸収剤を含まない比較用手すき紙３の電気泳動パターンを示す。図３のレーン１３及びレーン２０は分子量マーカー、レーン１４は用いたＤＮＡ、レーン１５は比較用ＤＮＡ含有物４からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン１６は紫外線照射を行わないときの比較用手すき紙３からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン１７は紫外線を１０時間照射した後の比較用手すき紙３からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン１８は紫外線を２０時間照射した後の比較用手すき紙３からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン１９は紫外線を４０時間照射した後の比較用手すき紙３からの抽出物のＰＣＲ産物である。 FIG. 3 shows an electrophoresis pattern of the comparative handsheet 3 that does not contain an ultraviolet absorber. Lane 13 and lane 20 in FIG. 3 are molecular weight markers, lane 14 is the DNA used, lane 15 is the PCR product of the extract from comparative DNA-containing material 4, and lane 16 is a comparison handsheet when UV irradiation is not performed. PCR product of the extract from No. 3, lane 17 is the PCR product of the extract from comparative handsheet 3 after irradiation with ultraviolet rays for 10 hours, Lane 18 is from the comparative handsheet 3 after irradiation with ultraviolet rays for 20 hours The lane 19 is the PCR product of the extract from the comparative handsheet 3 after irradiation with ultraviolet rays for 40 hours.

紫外線吸収剤を含まない比較用手すき紙３についても、得られたＰＣＲ産物の電気泳動パターンがＤＮＡの電気泳動パターンと同一であることを確認した。さらに、分子量マーカーを参照に用いることで、比較用ＤＮＡ含有物４、比較用手すき紙３からの抽出物のＰＣＲ産物のＤＮＡ鎖長が、ＰＶＡに混入したＤＮＡと同じ塩基鎖長３００であることが確認された。しかし、レーン１８、レーン１９から明らかなように、紫外線の照射時間が20時間を超えると耐光性がおちているのがわかる。 Also for the comparative handsheet 3 containing no UV absorber, it was confirmed that the electrophoresis pattern of the obtained PCR product was the same as the electrophoresis pattern of the DNA. Furthermore, by using the molecular weight marker as a reference, the DNA chain length of the PCR product of the extract from the comparative DNA-containing material 4 and the comparative handsheet 3 is the same base chain length 300 as the DNA mixed in PVA. Was confirmed. However, as is apparent from Lanes 18 and 19, it can be seen that the light resistance decreases when the irradiation time of ultraviolet rays exceeds 20 hours.

図４に、光安定剤を含む手すき紙４の電気泳動パターンを示す。
図４のレーン２１及びレーン２８は分子量マーカー、レーン２２はＤＮＡ、レーン２３はＤＮＡ含有物５からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン２４は紫外線照射を行わないときの手すき紙４からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン２５は紫外線を１０時間照射した後の手すき紙４からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン２６は紫外線を20時間照射した後の手すき紙４からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン２７は紫外線を40時間照射した後の手すき紙４からの抽出物のＰＣＲ産物である。 FIG. 4 shows an electrophoresis pattern of the handsheet 4 containing the light stabilizer.
Lanes 21 and 28 in FIG. 4 are molecular weight markers, lane 22 is DNA, lane 23 is a PCR product of an extract from DNA-containing material 5, lane 24 is an extract of handsheet 4 when UV irradiation is not performed. PCR product, lane 25 is the PCR product of the extract from handsheet 4 after irradiation with ultraviolet rays for 10 hours, lane 26 is the PCR product of the extract from handsheet 4 after irradiation with ultraviolet rays for 20 hours, lane 27 is It is a PCR product of the extract from the handsheet 4 after irradiation with ultraviolet rays for 40 hours.

図５に、光安定剤と光散乱剤を含む手すき紙５の電気泳動パターンを示す。
図５のレーン２９及びレーン３６は分子量マーカー、レーン３０はＤＮＡ、レーン３１はＤＮＡ含有物６からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン３２は紫外線照射を行わないときの手すき紙５からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン３３は紫外線を１０時間照射した後の手すき紙５からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン３４は紫外線を20時間照射した後の手すき紙５からの抽出物のＰＣＲ産物、レーン３５は紫外線を40時間照射した後の手すき紙５からの抽出物のＰＣＲ産物である。 FIG. 5 shows an electrophoresis pattern of the handsheet 5 containing the light stabilizer and the light scattering agent.
Lane 29 and lane 36 in FIG. 5 are molecular weight markers, lane 30 is DNA, lane 31 is a PCR product of an extract from DNA-containing material 6, lane 32 is an extract from handsheet 5 when UV irradiation is not performed. PCR product, lane 33 is the PCR product of the extract from handsheet 5 after irradiation with ultraviolet rays for 10 hours, lane 34 is the PCR product of the extract from handsheet 5 after irradiation with ultraviolet rays for 20 hours, lane 35 is It is a PCR product of the extract from the handsheet 5 after irradiation with ultraviolet rays for 40 hours.

図２、図３、図４及び図５に示した電気泳動パターンから、ＰＣＲ産物のＤＮＡのバンド濃度を目視で比較することで、手すき紙からの抽出物のＰＣＲ増幅が可能であるかを比較した結果を表９に示す。 From the electrophoresis patterns shown in FIG. 2, FIG. 3, FIG. 4 and FIG. 5, by comparing the DNA band concentration of the PCR product visually, it is compared whether the PCR amplification of the extract from the handsheet is possible. The results are shown in Table 9.

（表９）

○：増幅できた、×：増幅できない (Table 9)

○: Can be amplified, ×: Cannot be amplified

表９に示すように、本実施例において、ＤＮＡの耐光性が飛躍的に増大することが確認できた。 As shown in Table 9, it was confirmed that the light resistance of DNA was dramatically increased in this example.

５マーカー物質を含む用紙の作製及び確認
マーカー物質としては、紫外線吸収物質、光安定物質、光散乱物質、機能性色素、磁気特性を有する物質等の一般的に用いられている物質があり、機能性色素としては、蛍光又はりん光を発光する物質、サーモクロミズムを起こす物質、化学変化を起こす物質等がある。本実施例においては、マーカー物質として、化学変化を起こす物質であるＰＨ指示薬のうちのフェノールフタレインを用いて説明するが、他のマーカー物質についても、それぞれのマーカー物質の性質に基いて同様に作製し、確認を行う。 5. Preparation and confirmation of paper containing marker substances Marker substances include commonly used substances such as UV-absorbing substances, light-stable substances, light-scattering substances, functional dyes, and substances having magnetic properties. Examples of sex dyes include substances that emit fluorescence or phosphorescence, substances that cause thermochromism, substances that cause chemical changes, and the like. In this example, the marker substance is described using phenolphthalein among PH indicators that are substances that cause a chemical change. However, other marker substances are similarly used based on the properties of the marker substances. Make and confirm.

（実施例５）マーカー物質として、ＰＨ指示薬であるフェノールフタレインを含むＤＮＡ含有物７を作製する、表１０に示す材料を用い、それぞれ表に示した配合割合で処方し、スターラーを用いて混合し、混合液をガラス板上に広げて、室温で乾燥を行い、ｐＨ指示薬入りＤＮＡシートを作製した。このシートをはさみを用いて破断し、ｐＨ指示薬を含むＤＮＡ含有物７を得た。 (Example 5) As a marker substance, a DNA-containing material 7 containing phenolphthalein, which is a PH indicator, is prepared. The materials shown in Table 10 are used, formulated at the blending ratios shown in the table, and mixed using a stirrer. The mixture was spread on a glass plate and dried at room temperature to prepare a DNA sheet with a pH indicator. This sheet was broken with scissors to obtain a DNA-containing material 7 containing a pH indicator.

（表１０）ＤＮＡ含有物７を得るための処方
ＰＶＡ（４．５％溶液）９９重量％
フェノールフタレイン（１０％溶液）１重量％
ＤＮＡ０．００３重量％ (Table 10) Formula for obtaining DNA-containing material 7
PVA (4.5% solution) 99% by weight
Phenolphthalein (10% solution) 1% by weight
0.003% by weight of DNA

（実施例５−１）次に、得られたＤＮＡ含有物７と調合紙料とを、表１１に示す配合割合で混合し、JIS−P 8209（パルプ試験用手すき紙調製方法）に準じて６０グラム／ｍ^２の手すき紙６を作製した。 (Example 5-1) Next, the obtained DNA-containing material 7 and the blended paper stock were mixed at a blending ratio shown in Table 11, and according to JIS-P 8209 (Paper Test Handsheet Preparation Method). 60 g / m ² of handsheet 6 was prepared.

（表１１）ｐＨ指示薬を含む手すき紙６を得るための処方
調合紙料１００重量％
ＤＮＡ含有物７３重量％ (Table 11) Formula for obtaining handsheet 6 containing pH indicator
Formulation fee 100% by weight
DNA content 7 3% by weight

上記で作製した手すき紙６と［比較例２−１］で作製した比較用手すき紙３に４％水酸化ナトリウム溶液を滴下し、ＤＮＡ含有物部分の変色を観察した。手すき紙６に含まれる、フェノールフタレインを含むＤＮＡ含有物の部分のみが紅色に変化することが確認でき、手すき紙３のＤＮＡ含有物部分には、色変化は認められなかった。 A 4% sodium hydroxide solution was dropped onto the handsheet 6 prepared above and the comparative handsheet 3 prepared in [Comparative Example 2-1], and the discoloration of the DNA-containing portion was observed. It was confirmed that only the portion of the DNA-containing material containing phenolphthalein contained in the handsheet 6 changed to a red color, and no color change was observed in the DNA-containing portion of the handsheet 3.

次に、手すき紙６、比較用手すき紙３を、５ｍｍφに打ち抜き、非イオン性の界面活性剤とエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム水塩（ＥＤＴＡ）を使用して抽出を行った。この抽出物をＤＮＡに対応する所定のプライマーを用いてＰＣＲによる増幅反応を行い、ＤＮＡの増幅を行った。得られたＰＣＲ産物、分子量マーカー及びＤＮＡに対して電気泳動を行い、エチジウムプロミド染色液を用いて染色し、紫外線下でゲルを観察し、電気泳動パターンを得た。 Next, the handsheet 6 and the comparative handsheet 3 were punched out to 5 mmφ, and extraction was performed using a nonionic surfactant and ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt (EDTA). This extract was subjected to an amplification reaction by PCR using a predetermined primer corresponding to DNA, and DNA was amplified. The obtained PCR product, molecular weight marker and DNA were subjected to electrophoresis, stained with ethidium promide staining solution, and the gel was observed under ultraviolet light to obtain an electrophoresis pattern.

得られた電気泳動パターンから、手すき紙６から抽出したＰＣＲ産物電気泳動パターンはＤＮＡの電気泳動パターンと同一であることが分かった。さらに、分子量マーカーを参照に用いると、手すき紙６から抽出したＰＣＲ産物のＤＮＡ鎖長が、ＰＶＡに混入したＤＮＡと同じ、塩基鎖長３００であることが分かる。 From the obtained electrophoresis pattern, it was found that the PCR product electrophoresis pattern extracted from the handsheet 6 was identical to the DNA electrophoresis pattern. Furthermore, when the molecular weight marker is used as a reference, it can be seen that the DNA chain length of the PCR product extracted from the handsheet 6 is the same as the base chain length 300 of the DNA mixed in PVA.

以上の結果から、上記実施例で得られたＤＮＡ含有物自体が偽造防止機能を持つマーカー物質であることが分かる。このようなＤＮＡ含有物は、あらゆる種類の真偽判別、偽造防止製品を製造するために使用することが可能となる。その結果、該ＤＮＡ含有物が入った手すき紙から、用いたＤＮＡを同定することが可能であること、耐光性向上剤を添加することにより、耐光性の飛躍的な増大を図ることが可能であること及びマーカー物質として、上記実施例のＰＨ指示薬を含んだＤＮＡ含有物が入った手すき紙と比較例で得られた手すき紙からＤＮＡを含有しているか否かを調べることにより識別が可能であることが確認された。 From the above results, it can be seen that the DNA-containing product itself obtained in the above example is a marker substance having a forgery preventing function. Such a DNA-containing material can be used to manufacture all kinds of authenticity / anti-counterfeit products. As a result, it is possible to identify the DNA used from handsheets containing the DNA-containing material, and it is possible to dramatically increase light resistance by adding a light resistance improver. It can be identified by examining whether or not it contains DNA as a marker substance from handsheets containing the DNA-containing material containing the PH indicator of the above examples and handsheets obtained in Comparative Examples. It was confirmed that there was.

上記のＤＮＡ含有物の同定方法としては、対象から該ＤＮＡ含有物の一部分を取り出し、次いで溶媒を用いて、該ＤＮＡ含有物中の既知の塩基鎖長をもつＤＮＡを、該一部分から抽出することにより、該ＤＮＡ含有物を再生するものであり、ＤＮＡの組成は、所定のＰＣＲプライマーを用いることにより同定できる特定の長さ及び配列に設計される。したがって、検査対象から取り出したＤＮＡ含有物が、元のＤＮＡ含有物を含まない場合には、増幅ＤＮＡ生成物が存在しない。したがって、ＰＣＲ生成物のＤＮＡ鎖長を比較することで、検査対象の真偽を確認することができる。 As the method for identifying the DNA-containing material, a part of the DNA-containing material is taken out from the target, and then a DNA having a known base chain length in the DNA-containing material is extracted from the part using a solvent. Thus, the DNA-containing material is regenerated, and the DNA composition is designed to have a specific length and sequence that can be identified by using predetermined PCR primers. Therefore, when the DNA-containing material taken out from the test object does not contain the original DNA-containing material, there is no amplified DNA product. Therefore, the authenticity of the test object can be confirmed by comparing the DNA chain lengths of the PCR products.

次に、本実施例で得られたＤＮＡ含有物を抄き込んだ用紙を、偽造防止用紙及び／又は真偽判別用紙として用いた一実施例を説明する。
前述したように、本発明のＤＮＡ含有物は、それ自体でも偽造防止機能を有するが、更に何らかの識別物を含有させることにより、２段階識別を可能とする偽造防止用紙及び／又は真偽判別用紙を提供するものである。ＤＮＡを水溶性高分子が包み込んだ状態となっているので、用紙を抄造する場合に、繊維状物に固着し離脱することがないので、歩留まりがよい。また、これにより紙層強度を損なわしめるものでない。すなわち、添加したマーカー物質等の1段階識別、更に機能をあげて確認が必要な場合には、用いたＤＮＡの同定をすることで識別される２段階識別が可能となる。本実施例で得られる偽造防止用紙及び／又は真偽判別用紙は、有価証券、証券等の貴重印刷物、旅券、運転免許証等の偽造防止及び／又は真偽判別技術が必要とされる用紙として使用することが可能となる。 Next, an embodiment will be described in which the paper containing the DNA-containing material obtained in the present embodiment is used as a forgery prevention paper and / or an authenticity judgment paper.
As described above, the DNA-containing material of the present invention itself has an anti-counterfeit function, but by further containing some identification object, the anti-counterfeit paper and / or the authenticity determination paper that enables two-stage identification. Is to provide. Since the DNA is in a state where the water-soluble polymer is wrapped, when the paper is made, it does not adhere to the fibrous material and does not come off, so the yield is good. Moreover, this does not impair the paper layer strength. That is, one-step identification of the added marker substance or the like, and further confirmation of the function, it is possible to identify two-stage identification by identifying the DNA used. The anti-counterfeit paper and / or authenticity determination paper obtained in this embodiment is a paper that requires anti-counterfeiting and / or authenticity determination technology such as valuable prints such as securities, securities, passports, driver's licenses, etc. Can be used.

（実施例６）一般に用紙を得るための公知の紙料調製をした中に、前述したような方法で調製したマーカー物質としてＰＨ指示薬のフェノールフタレインを含んだＤＮＡ含有物を添加し、長網抄紙機や丸網抄紙機等の公知の抄紙機を使用して抄紙する。このようにして製造した偽造防止用紙に所定の印刷を施し偽造防止印刷物を得た。 (Example 6) In general, a known stock for preparing paper was prepared, and a DNA-containing material containing phenol indicator, a PH indicator, was added as a marker substance prepared by the method described above. Paper making is performed using a known paper machine such as a paper machine or a round net paper machine. The anti-counterfeit paper thus manufactured was subjected to predetermined printing to obtain an anti-counterfeit printed matter.

上記で作製した偽造防止印刷物に４％水酸化ナトリウム溶液を綿棒を用いて塗布し、ＤＮＡ含有物部分の変色を観察した。偽造防止印刷物に含まれる、フェノールフタレインを含むＤＮＡ含有物の部分のみが紅色に変化することが確認でき、それ以外の部分には、色変化は認められなかった。 A 4% sodium hydroxide solution was applied to the anti-counterfeit printed matter produced above with a cotton swab, and the discoloration of the DNA-containing portion was observed. It was confirmed that only the portion of the DNA-containing material containing phenolphthalein contained in the anti-counterfeit printed matter changed to red, and no color change was observed in the other portions.

次に、上記で色変化を認められた、フェノールフタレインを含むＤＮＡ含有物の部分に塩酸（１+１１）溶液を綿棒を用いて塗布し、ＤＮＡ含有物部分の変色を観察した。偽造防止印刷物に含まれる、フェノールフタレインを含むＤＮＡ含有物の部分の紅色が消失することが確認でき、それ以外の部分には、色変化は認められなかった。 Next, a hydrochloric acid (1 + 11) solution was applied to the portion of the DNA-containing material containing phenolphthalein in which the color change was recognized as described above, and the discoloration of the DNA-containing material portion was observed. It was confirmed that the red color of the portion of the DNA-containing material containing phenolphthalein contained in the anti-counterfeit printed matter disappeared, and no color change was observed in the other portions.

以上のようにして、偽造防止印刷物の1段階識別が可能である。本実施例で使用した、４％水酸化ナトリウム溶液／塩酸（１+１１）溶液は一例であり、ｐＨをフェノールフタレインの変色領域に変化できるものであれば、これに限らない。また、４％水酸化ナトリウム溶液／塩酸（１+１１）溶液の塗布方法も、塗布できるものであれば、綿棒に限らない。 As described above, one-step identification of a forgery-preventing printed matter is possible. The 4% sodium hydroxide solution / hydrochloric acid (1 + 11) solution used in this example is an example, and the present invention is not limited to this as long as the pH can be changed to the discoloration region of phenolphthalein. Further, the application method of 4% sodium hydroxide solution / hydrochloric acid (1 + 11) solution is not limited to a cotton swab as long as it can be applied.

さらに、必要ならば、用いたＤＮＡの同定をすることで識別される２段階識別を実施する。 Further, if necessary, a two-step identification is performed by identifying the DNA used.

偽造防止印刷物に含まれるＤＮＡ含有物部分を、５ｍｍφに打ち抜き、非イオン性の界面活性剤とエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム水塩（ＥＤＴＡ）を使用して抽出を行った。この抽出物をＤＮＡに対応する所定のプライマーを用いてＰＣＲによる増幅反応を行い、ＤＮＡの増幅を行った。得られたＰＣＲ産物、分子量マーカー、及びＤＮＡに対して電気泳動を行い、エチジウムプロミド染色液を用いて染色し、紫外線下でゲルを観察し、電気泳動パターンを得た。 The DNA-containing part contained in the anti-counterfeit printed matter was punched out to 5 mmφ, and extracted using a nonionic surfactant and ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt (EDTA). This extract was subjected to an amplification reaction by PCR using a predetermined primer corresponding to DNA, and DNA was amplified. The obtained PCR product, molecular weight marker, and DNA were subjected to electrophoresis, stained with ethidium promide staining solution, and the gel was observed under ultraviolet light to obtain an electrophoresis pattern.

得られた電気泳動パターンから、偽造防止印刷物から抽出したＰＣＲ産物電気泳動パターンはＤＮＡの電気泳動パターンと同一であることが分かった。さらに、分子量マーカーを参照に用いると、偽造防止印刷物から抽出したＰＣＲ産物のＤＮＡ鎖長が、ＰＶＡに混入したＤＮＡと同じ、塩基鎖長３００であることが分かる。 From the obtained electrophoresis pattern, it was found that the PCR product electrophoresis pattern extracted from the anti-counterfeit print was the same as the electrophoresis pattern of DNA. Further, when the molecular weight marker is used as a reference, it can be seen that the DNA chain length of the PCR product extracted from the anti-counterfeit printed material is the same as the base chain length 300 of the DNA mixed in PVA.

以上の結果から、上記実施例で得られた偽造防止用紙に印刷された偽造防止印刷物が、添加したマーカー物質等の1段階識別、更に機能をあげて確認が必要な場合には、用いたＤＮＡの同定をすることで識別される２段階識別が可能であることが分かる。 From the above results, when the anti-counterfeit printed matter printed on the anti-counterfeit paper obtained in the above example needs one-step identification of the added marker substance, etc., and further confirmation is required, the DNA used It can be seen that two-stage identification is possible by identifying the above.

実施例１−１の手すき紙のＤＮＡの電気泳動パターンを示す図である。It is a figure which shows the electrophoresis pattern of DNA of the handsheet of Example 1-1. 紫外線吸収剤を含む手すき紙のＤＮＡの電気泳動パターンを示す図である。It is a figure which shows the electrophoresis pattern of DNA of the handsheet containing a ultraviolet absorber. 紫外線吸収剤を含まない比較用手すき紙のＤＮＡの電気泳動パターンを示す図である。It is a figure which shows the electrophoresis pattern of DNA of the handsheet for a comparison which does not contain a ultraviolet absorber. 光安定剤を含む手すき紙のＤＮＡの電気泳動パターンを示す図である。It is a figure which shows the electrophoresis pattern of DNA of the handsheet containing a photostabilizer. 光安定剤と光散乱剤を含む手すき紙のＤＮＡの電気泳動パターンを示す図である。It is a figure which shows the electrophoresis pattern of DNA of the handsheet containing a light stabilizer and a light-scattering agent.

Claims

The following 1) to 3)
1) DNA itself 2) Water-soluble polymer 3) At least one selected from the group consisting of UV absorbers, light stabilizers and UV scattering agents, and / or substances that emit fluorescence or phosphorescence, chemical changes It is a cured product obtained by solidifying a liquid mixture containing all the marker substances selected from the group consisting of substances that cause substances, substances that cause thermochromism, and substances that have magnetic properties, and the DNA itself is water-soluble. A DNA-containing product comprising a cured product encased in a polymer.

The DNA-containing product according to claim 1, which is obtained by pulverizing and / or cutting the cured product.

The DNA-containing product according to claim 1 or 2, wherein the water-soluble polymer is a synthetic polymer and / or a natural polymer.

The at least 1 sort (s) chosen from the group which consists of the said ultraviolet absorber, a light stabilizer, and a ultraviolet scattering agent is mixed in the ratio of 0.1-20% with respect to the medium containing the said DNA itself. 2. The DNA-containing material according to 2 or 3.

A paper containing the DNA-containing material according to any one of claims 1 to 4.

Use of the paper according to claim 5 as anti-counterfeit paper and / or authenticity judgment paper.