JP4658348B2 - Collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, estrogen-like agent, and skin cosmetics - Google Patents
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Description
【0001】
【発明の属する技術分野】
本発明は、線維芽細胞によるコラーゲンの産生を促進する作用を有するコラーゲン産生促進剤、コラーゲンの減少・変性に関与するコラゲナーゼ活性を阻害するコラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞を増殖させる作用を有する線維芽細胞増殖作用剤、エラスチンの減少・変性に関与するエラスターゼ活性を阻害するエラスターゼ阻害剤、及び女性ホルモンの一種であるエストロゲンと同様の作用を有するエストロゲン様作用剤に関するものである。また、本発明は、皮膚の老化予防・改善作用を付与した皮膚化粧料及び美容作用を付与した飲食品に関するものである。
【0002】
【従来の技術】
皮膚の表皮及び真皮は、表皮細胞、線維芽細胞及びこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の細胞外マトリックスにより構成されている。若い皮膚においては、これら皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことにより水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
【0003】
ところが、紫外線の照射、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、ある種の外的因子の影響があったり、加齢が進んだりすると、細胞外マトリックスの主要構成成分であるエラスチンは分解・変質を起こし、また、コラーゲンの産生量が減少するとともに架橋による弾力低下を起こす。その結果、皮膚は保湿機能や弾力性が低下し、角質は異常剥離を始めるから、肌は張りや艶を失い、荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。
【0004】
このように、皮膚の老化に伴う変化、即ち、シワ、くすみ、きめの消失、弾力性の低下等には、コラーゲン、エラスチン等の真皮細胞外マトリックス成分の減少、変性が関与している。
【0005】
近年、この変化を誘導する因子として、特にマトリックス系プロテアーゼの関与が指摘されている。マトリックス系プロテアーゼの中でも、コラゲナーゼ、即ちMMP−1(マトリックスメタロプロテアーゼ)は、皮膚の真皮細胞外マトリックスの主な構成成分であるタイプI,III コラーゲンを分解する酵素として知られるが、その発現は紫外線の照射により大きく増加し、紫外線によるコラーゲンの減少・変性の一因となり、皮膚のシワの形成等の大きな要因となることが考えられる。従って、コラーゲン産生の促進や、コラゲナーゼ活性の阻害は、皮膚の老化を防止・改善する上で重要である。
【0006】
上述のような機構による皮膚の老化を防止・改善するために最も普通に行われているのは、天然保湿因子(NMF)である糖、アミノ酸、有機酸、ピロリドンカルボン酸塩、コラーゲン、ヒアルロン酸等のムコ多糖類、グリセリン、1,3−ブチレングリコール等の保湿作用を有する物質を塗布して皮膚の保湿性を高めることである。
【0007】
しかしながら、保湿剤は表皮の角質の状態を改善するだけのものであって、真皮内の張力保持機構まで改善することは期待できない。また、保湿剤は皮膚からの水分蒸発を遅くするものであるから概して使用感が悪く、長期間使用すると皮膚障害を起こすことさえある。
【0008】
一方、加齢に伴う皮膚老化の一因は、女性ホルモンの一種であるエストロゲンの分泌が減退することである。すなわち、エストロゲンは成人女性の健康維持に深く関わっていて、その分泌不足は種々の内科的疾患を招くほか、肌の過敏症、弾力性低下、潤いの減少等、好ましくない肌の変化の原因となることが知られている。
【0009】
そこで、エストロゲンの分泌が衰える更年期以降の女性に対してエストロゲンと同様の作用をする物質を経皮的又は経口的に投与することが行われている。そのためのエストロゲン様作用剤としては、従来より、ステロイド系エストロゲン、非ステロイド系エストロゲン、フラボン系化合物等が使われている。
【0010】
また、若い皮膚においては、線維芽細胞の増殖は活発であり、線維芽細胞やコラーゲン等の皮膚構成組織の相互作用が恒常性を保つ上で線維芽細胞の賦活化は重要な役割を担っている。
【0011】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の第一の目的は、真皮層線維芽細胞におけるコラーゲンの産生を促進して皮膚の老化を防止及び/又は改善し得る物質を見出し、それを有効成分として含有するコラーゲン産生促進剤を提供することにある。
【0012】
本発明の第二の目的は、コラゲナーゼ阻害作用を通じてコラーゲンの減少・変性を抑制し、皮膚の老化を防止及び/又は改善し得る物質を見出し、それを有効成分として含有するコラゲナーゼ阻害剤を提供することにある。
【0013】
本発明の第三の目的は、線維芽細胞増殖作用を通じて線維芽細胞を賦活化し、皮膚の老化を防止及び/又は改善し得る物質を見出し、それを有効成分として含有する線維芽細胞増殖作用剤を提供することにある。
【0014】
本発明の第四の目的は、エラスターゼ阻害作用を通じてエラスチンの減少・変性を抑制し、皮膚の老化を防止及び/又は改善し得る物質を見出し、それを有効成分として含有するエラスターゼ阻害剤を提供することにある。
【0015】
本発明の第五の目的は、エストロゲン様作用を通じて皮膚の老化を防止及び/又は改善し得る物質を見出し、それを有効成分として含有するエストロゲン様作用剤を提供することにある。
【0016】
本発明の第六の目的は、コラーゲン産生促進作用、エストロゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用及び/又はエラスターゼ阻害作用を有し、皮膚の老化の防止及び/又は改善に有用な皮膚化粧料を提供することにある。
【0017】
本発明の第七の目的は、コラーゲン産生促進作用、エストロゲン様作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用及び/又はエラスターゼ阻害作用を有し、皮膚の老化を防止及び/又は改善に有用な美容用飲食品を提供することにある。
【0018】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤は、五斂子(Averrhoa carambola L.)の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とし、本発明の皮膚化粧料及び美容用飲食品は、五斂子(Averrhoa carambola L.)の葉部からの抽出物を含有することを特徴とする。
【0019】
【発明の実施の形態】
本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤の有効成分である「五斂子の葉部からの抽出物」には、抽出処理によって五斂子の葉部から得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【0020】
抽出処理の際に抽出原料として使用するものは、五斂子(学名:Averrhoa carambola L.、生薬名:陽桃)の葉部である。葉部には、完全葉の他、葉の一部(例えば葉身、葉柄、托葉など)が含まれる。また、五斂子の茎部も抽出原料として使用することができるので、茎部を葉部とともに抽出原料とすることや、茎部のみを抽出原料とすることも可能である。
【0021】
五斂子はカタバミ科に属し、新鮮な果実は食用される。五斂子は、中国では紀元前から文献に記載され、その果実は断面が星形のことからスターフルーツとも呼ばれている。五斂子は沖縄、中国東南部や雲南その他熱帯各地で栽培されており、これらの地域から容易に入手することができる。
【0022】
抽出原料として使用する五斂子の葉部は、採取後ただちに乾燥し粉砕したものが適当である。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥器を用いて行ってもよい。五斂子の葉部は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、五斂子の葉部の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【0023】
抽出処理の際には、抽出溶媒として極性溶媒を使用するのが好ましい。五斂子の葉部に含まれるコラーゲン産生促進作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用、エラスターゼ阻害作用又はエストロゲン様作用を示す成分は、極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって容易に抽出することができる。
【0024】
好適な抽出溶媒の具体例としては、水、低級脂肪族アルコール、含水の低級脂肪族アルコール等を例示でき、これらを単独で、又はこれら2種以上の混合物として使用することができる。好適な低級脂肪族アルコールの具体例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、1,3−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、イソプレングリコール等を例示することができる。
【0025】
抽出溶媒として使用し得る水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【0026】
2種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比を7:3〜2:8(重量比)とすることができる。
【0027】
抽出処理は、五斂子の葉部に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に従って行うことができる。抽出処理の際には、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下において任意の装置を使用することができる。
【0028】
例えば、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料を投入し、ときどき攪拌しながら可溶性成分を溶出させる。この際、抽出条件は抽出原料等に応じて適宜調整し得るが、抽出溶媒量は通常、抽出原料の5〜15倍量(重量比)であり、抽出時間は通常1〜3時間であり、抽出温度は通常、常温〜95℃である。
【0029】
抽出処理により可溶性成分を溶出させた後、ろ過して抽出残渣を除くことによって、抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【0030】
得られた抽出液はそのままでもコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤として使用することができるが、濃縮液またはその乾燥物としたものの方が利用しやすい。抽出液の乾燥物を得るにあたっては、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリン等のキャリアーを添加してもよい。
【0031】
また、五斂子の葉部は特有の匂いと味を有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、化粧料や美容用飲食品に添加する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
精製は、具体的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができる。
【0032】
以上のようにして得られる五斂子の葉部からの抽出物は、コラーゲン産生促進作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用、エラスターゼ阻害作用及びエストロゲン様作用を有する。
【0033】
五斂子の葉部からの抽出物は、そのままでもコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤として使用することができるが、常法に従って製剤化して使用することもできる。製剤化する場合、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任意の助剤を添加することができる。五斂子の葉部からの抽出物は、製剤化により粉末状、顆粒状、錠剤状等、任意の剤形とすることができる。
【0034】
本発明のコラーゲン産生促進剤は、経皮的に吸収されて線維芽細胞に達し、コラーゲン産生を活発化して真皮層に十分なコラーゲンを補給することによって、皮膚の老化を防止及び/又は改善することができる。また、本発明のコラーゲン産生促進剤は、コラーゲン産生促進作用と共にエストロゲン様作用剤を併用するので、皮膚の老化防止と改善に多面的に作用して皮膚の老化を防止及び/又は改善することができる。
【0035】
本発明のコラゲナーゼ阻害剤は、コラゲナーゼ阻害作用を通じてコラゲナーゼによるコラーゲンの減少、変性等を抑制し、コラーゲンの減少、変性等によって生じる皮膚の老化を防止及び/又は改善することができる。
【0036】
本発明の線維芽細胞増殖作用剤は、線維芽細胞の賦活化によって光老化及び加齢等によって生じる皮膚の老化を防止及び/又は改善することができる。
【0037】
本発明のエラスターゼ阻害剤は、エラスターゼ阻害作用を通じてエラスターゼによるエラスチンの減少、変性等を抑制し、エラスチンの減少、変性等によって生じる皮膚の老化を防止及び/又は改善することができる。
【0038】
本発明のエストロゲン様作用剤は、エストロゲン様作用を通じてエストロゲン分泌の衰えによる皮膚の老化を防止及び/又は改善することができる。
【0039】
〔皮膚化粧料〕
五斂子の葉部からの抽出物は、コラーゲン産生促進作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用、エラスターゼ阻害作用及びエストロゲン様作用を有しており、皮膚の老化を防止及び/又は改善することができると共に、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れているため、皮膚化粧料に配合するのに好適である。したがって、本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤のいずれか1種または2種以上を皮膚化粧料に配合することにより、皮膚の老化を防止及び/又は改善する作用を皮膚化粧料に付与することができる。
【0040】
本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤を配合し得る皮膚化粧料は特に限定されないが、その具体例としては、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、入浴剤等を例示することができる。
【0041】
本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤の配合量は、皮膚化粧料の種類や抽出物の生理活性等によって適宜調整することができるが、好適な配合率は標準的な五斂子葉部抽出物に換算して約0.01〜10重量%である。
【0042】
本発明の皮膚化粧料には、コラーゲン産生促進作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用、エラスターゼ阻害作用及びエストロゲン様作用の妨げにならない限り、皮膚化粧料の製造に通常使用される各種主剤及び助剤、その他任意の助剤を配合することができ、皮膚の老化防止・改善に関し、本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤のみが主剤となるものに限られるわけではない。
【0043】
本発明の皮膚化粧料において、本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤と共に構成成分として利用可能なものとしては、具体的に挙げると次のとおりである。なお、五斂子の葉部からの抽出物とともに以下の構成成分を併用した場合、五斂子の葉部からの抽出物と、併用された構成成分との間の相乗作用が、通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。
【0044】
収斂剤:クエン酸またはその塩類、酒石酸またはその塩類、乳酸またはその塩類、塩化アルミニウム、硫酸アルミニウム・カリウム、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、パラフェノールスルホン酸亜鉛、硫酸亜鉛、チユエキス、エイジツエキス、ハマメリスエキス、ゲンノショウコエキス、チャカテキン類、ガイヨウエキス、オドリコソウエキス、オトギリソウエキス、ダイオウエキス、ヤグルマソウエキス、スギナエキス、キズタエキス、キューカンバーエキス、マロニエエキス、サルビアエキス、メリッサエキス等。
【0045】
殺菌・抗菌剤:安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ジステアリルメチルアンモニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化アルキルジアミノエチルグリシン液、塩酸クロルヘキシジン、オルトフェニルフェノール、感光素101号、感光素201号、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、ソルビン酸、ハロカルバン、レゾルシン、パラクロロフェノール、フェノキシエタノール、ビサボロール、ヒノキチオール、メントール、キトサン、キトサン分解物、ジユエキス、クジンエキス、エンメイソウエキス、ビワエキス、ウワウルシエキス、ホップエキス、ユッカエキス、アロエエキス、ケイヒエキス、ガジュツエキス等。
【0046】
美白剤:アスコルビン酸およびその誘導体、イオウ、エラグ酸およびその誘導体、コウジ酸およびその誘導体、グルコサミンおよびその誘導体、アゼライおよびその誘導体、アルブチンおよびその誘導体、ヒドロキシケイヒ酸およびその誘導体、グルタチオン、アルニカエキス、オウゴンエキス、センキュウエキス、ソウハクヒエキス、サイコエキス、ボウフウエキス、ハマボウフウエキス、マンネンタケ菌糸体培養物またはその抽出物、ギムネマエキス、シナノキエキス、モモ葉エキス、エイジツエキス、クジンエキス、ジユエキス、トウキエキス、ヨクイニンエキス、カキ葉エキス、ダイオウエキス、ボタンピエキス、ハマメリスエキス、マロニエエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、油溶性カンゾウエキス(カンゾウ疎水性フラボン、グラブリジン、グラブレン、リコカルコンA)等。
【0047】
紫外線吸収剤:β-イソプロピルフラノン誘導体、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、オキシベンゾン、オキシベンゾンスルホン酸、テトラヒドロキシベンゾフェノン、ジヒドロキシジメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシベンゾフェノン、シノキサート、ジイソプロピルケイヒ酸メチル、メトキシケイヒ酸オクチル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラジメチルアミノ安息香酸アミル、パラジメチル安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸エチル、ブチルメトキシジベンゾイルメタン、酸化チタン、β-カロチン、γ-オリザノール、コメヌカエキス、アロエエキス、カバノキエキス、シラカンバエキス、カミツレエキス、コゴメグサエキス、セイヨウサンザシエキス、ヘンナエキス、チョウチグルミエキス、マロニエエキス、イチョウ葉エキス、カミツレエキス、セイヨウサンザシエキス、油溶性カンゾウエキス等。
【0048】
保湿剤:セリン、グリシン、スレオニン、アラニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ヒドロネクチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ローヤルゼリー、コンドロイチン硫酸ヘパリン、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、リノール酸またはそのエステル類、エイコサペンタエン酸またはそのエステル類、ペクチン、アルゲコロイド、ビフィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体培養物またはその抽出物、小麦胚芽油、アボガド油、米胚芽油、ホホバ油、ダイズリン脂質、γ-オリザノール、ビロウドアオイエキス、ヨクイニンエキス、ジオウエキス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエキス、ゴボウエキス、マロニエエキス、マンネンロウエキス、アルニカエキス、小麦フスマ、コメヌカエキス等。
【0049】
細胞賦活剤:リボフラビン又はその誘導体、ピリドキシン又はその誘導体、ニコチン酸又はその誘導体、パントテン酸又はその誘導体、α−トコフェロール又はその誘導体、アルニカエキス、ニンジンエキス、ナタネニンジンエキス、エゾウコギエキス、ヘチマエキス(サポニン)、シコンエキス、シラカンバエキス、オウバクエキス、ボタンピエキス、シャクヤクエキス、ムクロジエキス、ベニバナエキス、アシタバエキス、ビワ葉エキス、ヒキオコシエキス、ユキノシタエキス、黄杞エキス、サルビアエキス、ニンニクエキス、マンネンロウエキス等。
【0050】
消炎・抗アレルギー剤:アズレン、アラントイン、アミノカプロン酸、インドメタシン、塩化リゾチーム、イプシロンアミノカプロン酸、オキシベンゾン、グリチルリチン酸又はその誘導体、グリチルレチン酸又はその誘導体、感光素301号、感光素401号、塩酸ジフェンヒドラミン、トラネキサム酸又はその誘導体、アデノシンリン酸、エストラジオール、エストロン、エチニルエストラジオール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プロゲステロン、コルチコステロン、アルニカエキス、インチンコウエキス、サンシシエキス、ジュウヤクエキス、セイヨウトチノキエキス、カンゾウエキス、トウキエキス、ヨモギエキス、ワレモコウエキス、リンドウエキス、サイコエキス、センキュウエキス、ボウフウエキス、セイヨウノコギリソウエキス、オウレンエキス、シソエキス等。
【0051】
抗酸化・活性酸素消去剤:ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没子食酸プロピル、バイカリン、バイカレイン、スーパーオキサイドディスムターゼ、カタラーゼ、ローズマリーエキス、メリッサエキス、オウゴンエキス、エイジツエキス、ビワ葉エキス、ホップエキス、ハマメリスエキス、シャクヤクエキス、セージエキス、キナエキス、カミツレエキス、ユーカリエキス、シソエキス、イチョウ葉エキス、タイムエキス、カルダモンエキス、キャラウェイエキス、ナツメグエキス、メースエキス、ローレルエキス、クローブエキス、ターメリックエキス、ヤナギタデエキス等。
【0052】
油脂類:大豆油、アマニ油、キリ油、ゴマ油、ヌカ油、綿実油、ナタネ油、サフラワー油、トウモロコシ油、オリーブ油、ツバキ油、アーモンド油、ヒマシ油、落花生油、カカオ油、モクロウ、ヤシ油、パーム核油、牛脂、ミンク油、卵黄油、ホホバ油、月見草油、馬油等。
【0053】
ロウ類:カルナウバロウ、キャンデリラロウ、蜜ロウ、サラシ蜜ロウ、鯨ロウ、セラックス、ラノリン類等。
【0054】
炭化水素類:流動パラフィン、ワセリン、マイクロスリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ポリエチレン末。
【0055】
脂肪酸類:ステアリン酸、リノール酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ヘベニン酸、ラノリン酸、オレイン酸、ウンデシレン酸、イソステアリン酸。
【0056】
アルコール類:ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ラノリンアルコール、水添ラノリンアルコール、オレイルアルコール、ヘキサデシルアルコール、2−オクチルドデカノール、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、1,3−ブチレングリコール、エチレングリコール又はその重合体、ブドウ糖、白糖、コレステロール、フィトステロール、セトステアリルアルコール。
【0057】
エステル類:オレイン酸デシル、ステアリン酸ブチル、ミリスチン酸ミリスチル、ラウリン酸ヘキシル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、ジオレイン酸プロピレングリコール、フタル酸ジエチル、モノステアリン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸グリセリン、トリミリスチン酸グリセリン、酢酸ラノリン、乳酸セチル。
【0058】
界面活性剤:陰イオン性界面活性剤、陽イオン界面活性剤、両イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤。
【0059】
香料:メントール、カルボン、オイゲノール、アネトール、ハッカ油、スペアミント油、ペパーミント油、ユーカリ油、アニス油。
【0060】
〔美容用飲食品〕
本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤は、それぞれの作用を通じて皮膚の老化を防止及び/又は改善することができるので、美容用飲食品に配合するのに好適である。ここで、「美容用飲食品」とは、美肌又は皮膚の老化防止・改善を図ることを目的とした飲食物を意味する。
【0061】
本発明の美容用飲食品は、本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤をその活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤を主成分とする栄養補助食品であってもよい。
【0062】
本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤を配合して飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類;ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質;アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類;セルロース、アラビアゴム等の多糖類;大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類等の任意の助剤を添加して任意の剤形に製剤化することができる。
【0063】
本発明の美容用飲食品におけるコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤の配合量は、添加対象飲食品の一般的な摂取量を考慮して成人一日当たり五斂子葉部抽出物の摂取量が1日当たり約1〜1000mg程度となるように調整することが好ましい。
【0064】
本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料(これら飲料の濃縮液及び調整用粉末を含む);アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の氷菓;そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、シュウマイの皮、中華麺、即席麺等の麺類;飴、キャンディー、ガム、チョコレート、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類;かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品;加工乳、発酵乳等の乳製品;サラダ油、天ぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品;ソース、たれ等の調味料;錠剤状、顆粒状等の種々の形態の健康・栄養補助食品類;その他スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物等を例示することができる。
【0065】
以上説明した本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤、エストロゲン様作用剤、皮膚化粧料及び美容用飲食品は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【0066】
【実施例】
以下、実施例を示して本発明を更に詳細に説明する。なお、本発明の範囲はこれらの実施例等に限定されるものではない。
【0067】
〔製造例1〕
五斂子(学名:Averrhoa carambola L.)の葉部の粗粉砕物300gを抽出溶媒2000mlに投入し、穏やかに攪拌しながら3時間、70℃に保った。その後ろ過し、ろ液を40℃で減圧下にて濃縮し、さらに減圧乾燥機で乾燥して五斂子の葉部からの抽出物を得た。4種類の抽出溶媒を用いて上記抽出処理を行ったところ、抽出物の収率は表1のとおりであった。なお、抽出溶媒が混合物の場合、以下に示す混合比は重量基準によるものである。
【0068】
【0069】
〔製造例2〕
製造例1で用いたものと同じ五斂子葉の粗粉砕物300gを抽出溶媒2000mlに投入し、攪拌しながら80℃で3時間保持した後、ろ過して抽出液を得た。3種類の抽出溶媒を用いて上記と同様に抽出を行い、表2に示した固形分濃度の抽出液約1500mlを得た。なお、抽出溶媒が混合物の場合、以下に示す混合比は重量基準によるものである。
【0070】
【0071】
〔試験例1〕コラーゲン産生促進作用の試験
製造例1および2で得られた試料1〜7について、Websterらの方法(Anal.Biochem.,Vol.96,220,1979)に準拠して試験を行った。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【0072】
ヒトの線維芽細胞を24穴プレートに播種し、37℃、5%CO2-95%airの下にて、試料添加培地(試料濃度:50ppm、12.5ppm)で数日間培養した後、β−アミノプロピオニトリルと[3H]−プロリンとを添加し、更に24時間培養した。当該培養液全体にペプシン/酢酸溶液を加えて4℃下で16時間消化し、次いでこの消化液にキャリアーを加えて0.7mol/L食塩水溶液で沈殿させ、更に中性条件下で再溶解させて、4.2mol/L食塩水溶液で再沈殿させた。得られた沈殿物を20%エタノールで洗浄した後、その沈殿物の放射活性を測定した。
【0073】
コラーゲン産生促進率は、試料無添加時の放射活性を100%として算出した。
各試料のコラーゲン産生促進率(%)を表3に示す。なお、試料が製造例2による抽出液の場合、「試料濃度」は固形分換算濃度である。
【0074】
【0075】
表3に示すように、各種抽出溶媒を用いて得られた五斂子の葉部からの抽出物は、いずれも濃度依存的にコラーゲン産生促進作用を示した。特に、抽出溶媒として水(試料1)、エタノール/水(1/1)(試料2)、エタノール(試料3)を用いて得られた抽出物は、優れたコラーゲン産生促進作用を示した。
【0076】
〔試験例2〕コラゲナーゼ阻害作用の試験
製造例1および2で得られた試料1〜7について、コラゲナーゼ阻害作用を試験した。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【0077】
試料溶液(溶媒:トリス塩酸緩衝液)50μL、コラゲナーゼ溶液50μLおよび基質溶液400μLを混合し、37℃で30分間インキュベーションした。次いで25mMクエン酸溶液1mLで反応を停止し、酢酸エチル5mLで抽出した。得られた抽出液について、波長320nmの吸光度(対照液:酢酸エチル)を測定した。上記と同様の酵素反応と吸光度測定を、試料溶液の代わりに試料溶液と等量の緩衝液を添加して行った。さらに、それぞれの場合について、コラゲナーゼ溶液の代わりに緩衝液を添加して同じ操作と測定を行った。
【0078】
なお、コラゲナーゼ溶液はシグマ社のコラゲナーゼTypeIVを緩衝液1mLに溶解させ、使用時に50倍に希釈したものを使用した。また、基質溶液には、20mmol/Lの塩化カルシウムを含有するトリス塩酸緩衝液にBACHEM Fenichemikalien AG社Pz−ペプチドを濃度が0.5mol/Lになるように溶解して使用した。
測定結果より、次式に基づきコラゲナーゼ阻害率(%)を算出した。
【0079】
【式1】
コラゲナーゼ阻害率(%)=〔1−(A−B)/(C−D)〕×100
【0080】
上記式中、「A」は試料溶液添加・酵素添加時の吸光度、「B」は試料溶液添加・酵素無添加時の吸光度、「C」は試料無添加・酵素添加時の吸光度、「D」は試料無添加・酵素無添加時の吸光度を表す。
【0081】
試料濃度を段階的に減少させて上記阻害率の測定を行い、コラゲナーゼの活性を50%阻害する試料溶液濃度を内挿法により求めた。
試験の結果を表4に示す。
【0082】
【0083】
表4に示すように、各種抽出溶媒を用いて得られた五斂子の葉部からの抽出物は、いずれも濃度依存的にコラゲナーゼ阻害作用を示した。特に、抽出溶媒としてグリセリン/水(1/1)(試料6)、プロピレングリコール/水(1/1)(試料7)を用いて得られた抽出物は、優れたコラゲナーゼ阻害作用を示した。
【0084】
〔試験例3〕線維芽細胞増殖作用の試験
製造例1および2で得られた試料1〜7について、線維芽細胞増殖作用をMTT法(J.Immunol.Method 93,157,1986)に準拠して試験した。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【0085】
25cm2の培養フラスコに入れた10%FBS含有培地(α-MEM培地:GIBCO BLR社製品,PH7.2)にヒト正常新生児皮膚線維芽細胞(NBIRGB)1×106個を播種し、37℃、5%CO2-95%airの下で4日間培養した。次いでトリプシン処理し、遠心分離して細胞を集めた。沈殿として得られた細胞を5%FBS含有培地(α-MEM培地:GIBCO BLR社製品,PH7.2)に懸濁し、96ウェルプレートの1穴につき7×103個ずつ分注した。24時間培養後、試料を溶解した5%FBS含有培地を1穴につき100μLずつ加え、37℃、5%CO2-95%airの下で3日間培養した。培養後、培地を1穴につき100μLずつ除去し、MTT試薬(3-(4,5-dimethy1-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide, 5mg/mL PBS(-)溶液)20μLを添加し、4.5時間インキュベーションした(増殖した細胞中のミトコンドリア由来の活性酸素がMTT試薬と反応し、黄色であった試薬の色が570nmに吸収のピークを有する青黄色に変わる。)。その後、各穴に10重量%ドデシル硫酸ナトリウム−0.02mol/L硫酸溶液を100μLずつ分注し、18時間インキュベーションした。インキュベーション終了後、マイクロプレートリーダーを用いて570nmの吸光度を測定した。別に、試料だけでもブランクをとり、同様の操作を行い吸光度の測定を行った。
【0086】
また、各吸光度測定値は、同時に測定した650nmの吸光度を差し引いて、増殖した細胞による濁度の影響を補正した。補正後の各吸光度より次式に基づき細胞増殖促進率(%)を求めた。
【0087】
【式2】
細胞増殖促進率(%)=〔(A−C)−(B−D)〕/(B−D)×100
【0088】
上記式中、「A」は試料添加時の吸光度、「B」は試料無添加時の吸光度、「C」は試料添加・細胞無添加時の吸光度、「D」は試料無添加・細胞無添加時の吸光度を表す。
【0089】
試料濃度を段階的に減少させて上記阻害率の測定を行い、線維芽細胞増殖作用を試験した。
試験の結果を表5に示す。
【0090】
【0091】
表5に示すように、各種抽出溶媒を用いて得られた五斂子の葉部からの抽出物は、いずれも濃度依存的に線維芽細胞増殖作用を示した。特に、抽出溶媒として水(試料1)、エタノール/水(1/1)(試料2)を用いて得られた抽出物は、優れた線維芽細胞増殖作用を示した。
【0092】
〔試験例4〕エラスターゼ阻害作用の試験
製造例1および2で得られた試料1〜7について、エラスターゼ阻害作用を試験した。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【0093】
96ウェルプレートを用意し、1穴に対して試料溶液(溶媒:DMSO+水)50μLおよびエラスターゼ溶液50μLを添加し、さらに基質溶液100μLを添加し混合した。25℃で15分間反応させた後、波長415nmの吸光度を測定した。上記と同様の酵素反応と吸光度測定を、試料溶液の代わりに試料溶液と等量の溶媒のみを添加して行った。さらに、それぞれの場合について、エラスターゼ溶液の代わりに緩衝液を添加して同じ操作と測定を行った。
【0094】
なお、エラスターゼ溶液はシグマ社・エラスターゼTypeIII 5mgをpH8の0.2mol/Lトリス塩酸緩衝液1mLに溶解し使用時に250倍に希釈したものを使用した。基質溶液として、シグマ社のN−SUCCINYL−ALA−ALA−ALA p-NITROANILIDEをDMSOに溶解した濃度45.14mg/mLの溶液を上記トリス塩酸緩衝液で100倍に希釈して使用した。
測定結果より、次式に基づきエラスターゼ阻害率(%)を求めた。
【0095】
【式3】
エラスターゼ阻害率(%)=〔1-(A−B)/(C−D)〕×100
【0096】
上記式中、「A」は試料溶液添加・酵素添加時の吸光度、「B」は試料溶液添加・酵素無添加時の吸光度、「C」は試料無添加・酵素添加時の吸光度、「D」は試料無添加,酵素無添加時の吸光度を表す。
【0097】
試料濃度を段階的に減少させて上記阻害率の測定を行い、エラスターゼの活性を50%阻害する試料溶液濃度を内挿法により求めた。
試験の結果を表6に示す。
【0098】
【0099】
表6に示すように、各種抽出溶媒を用いて得られた五斂子の葉部からの抽出物は、いずれも濃度依存的にエラスターゼ阻害作用を示した。特に、抽出溶媒としてエタノール/水(1/1)(試料2)、エタノール(試料3)、プロパノール/水(1/1)(試料4)を用いて得られた抽出物は、優れたエラスターゼ阻害作用を示した。
【0100】
〔試験例5〕エストロゲン様作用の試験
エストロゲン依存性細胞の増殖に対する影響を調べるThomasらの方法(In vitro cell.Dev.Biol. 28A, 595-602, 1992)に準拠して試験を行った。具体的には、以下のようにして試験を行った。
【0101】
ヒト乳ガン由来のMCF-7細胞を75cm2フラスコでコンフルエント様になるまで培養し、トリプシン処理によりこのMCF-7細胞を集め、10%FBS(活性炭処理済み)、1%NEAAおよび1mMピルビン酸ナトリウムを含みフェノールレッドを含まないMEM培地(以下、「MEM培地」と略す)を用いて、3×104cells/mLに調製した。調製したMCF-7細胞を24穴プレートに0.9mLずつ播種し、これを定着させるために37℃、5%CO2-95%airの下で培養した。6時間後(0日日)、MEM培地で終濃度の10倍の濃度(12.5ppm、6.25ppm、3.1ppm)に調製した試料溶液100μLを上記プレートに添加し、培養を続けた。培養開始から6日目、培地を0.97mmol/L MTTを含むMEM培地に交換し、2時間培養後、培地をイソプロパノールに交換して細胞内に生成したブルーホルマザンを抽出した。溶出したブルーホルマザンを含有するイソプロパノールについて、ブルーホルマザンの吸収極大点がある570nmの吸光度を測定した。
【0102】
なお、付着細胞の影響を補正するため、同時に650nmの吸光度も測定し、両吸光度の差をもってブルーホルマザンの生成量に比例する値とした(下記の計算式における吸光度はこの補正済み吸光度である)。
陽性対照としては、0.02ppmエチニルエストラジオールを使用した。
エストロゲン様作用(エストロゲン依存性増殖作用)の強さは、試料無添加時の吸光度を100%として次式に基づき算出した。
試験の結果を表7に示す。
【0103】
【式4】
エストロゲン様作用(%)=A/B×100
【0104】
上記式中、「A」は試料添加の場合の吸光度、「B」は試料無添加の場合の吸光度を表す。
【0105】
【0106】
表7に示すように、各種抽出溶媒を用いて得られた五斂子の葉部からの抽出物は、いずれも濃度依存的にエストロゲン様作用を示した。特に、抽出溶媒として水(試料1)、エタノール/水(1/1)(試料2)、エタノール(試料3)を用いて得られた抽出物は、優れたエストロゲン様作用を示した。
【0107】
〔試験例6〕肌荒れ改善作用(皮膚の老化防止・改善作用)の試験
製造例1で得られた五斂子の葉部からの50%エタノール抽出物(試料2)を配合した乳液(以下「実施例乳液」という。)を常法に従って調製した。実施例乳液の組成を以下に示す。
【0108】
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料2) 0.1g
セチルアルコール 0.5g
ミツロウ 2.0g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(10E.0) 1.0g
モノステアリン酸グリセリル 1.0g
ヒアルロン酸 0.1g
プロピレングリコール 5.0g
エタノール 3.0g
パラオキシ安息香酸メチル 0.3g
香料 0.03g
精製水 残部(全量を100mlとする)
【0109】
実施例乳液と、五斂子の葉部からの抽出物を含まないほかは実施例乳液と同じ組成からなる比較例乳液とについて、下記の評価試験を行った。
被験者:22〜43歳の女性多数の中から、皮溝・皮丘が消え、広範囲の角質がめくれている(表8に示す評価が1)、又は皮溝・皮丘が不鮮明で、角質が部分的にめくれている(表8に示す評価が2)、肌荒れと判定された20名を選抜して被験者とした。
塗布試験:各被験者に、顔の右半分には実施例乳液を、左半分には比較例乳液を、朝夕各1回、30日間塗布させた。
【0110】
【0111】
[判定1:肌荒れ改善効果]
塗布試験終了後、シルフロ(FLEXICL DEVELOPMENTS LTD製)によるレプリカ法を用いて顔のレプリカをとり、50倍の顕微鏡で皮紋の状態及び角質剥離の状態を観察し、表8に示す評価基準で肌の状態を判定した。判定結果を表9に示す。
【0112】
【0113】
表9に示されるように、実施例乳液を塗布した領域は、比較例乳液を塗布した領域に比べて顕著に肌荒れ(皮膚の老化)が改善された。
【0114】
[判定2・官能評価]
使用感と肌への効果について、実施例乳液と比較例乳液とを比較した場合の優劣を被験者全員に質問した。回答の集計結果を表10に示す。
【0115】
【0116】
表10に示される結果より、官能評価によっても、上記判定1と同様の効果と、優れた使用感とが確認された。
【0117】
判定1及び2の結果より五斂子の葉部からの抽出物を配合した皮膚化粧料が皮膚の老化防止・改善作用(肌荒れ改善作用)を有するとともに、皮膚に適用した場合の使用感と安全性に優れていることが確認された。
【0118】
〔配合例1〕
下記の組成の乳液を常法により製造した。
ホホバオイル 4g
オリーブオイル 2g
スクワラン 2g
セタノール 2g
モノステアリン酸グリセリル 2g
ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.0) 2.5g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) 2g
1,3−ブチレングリコール 3g
アスコルビン酸リン酸マグネシウム 0.1g
カミツレ抽出物 0.1g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1g
黄杞抽出物 0.1g
シャクヤク抽出物 0.1g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
香料 0.05g
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料3) 0.1g
五斂子葉部抽出物(製造例2の試料5) 1g
精製水 残部(全量を100gとする)
【0119】
〔配合例2〕
下記の組成の化粧水を常法により製造した。
グリセリン 3g
1,3−ブチレングリコール 3g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) 0.5g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
クエン酸 0.1g
クエン酸ソーダ 0.1g
油溶性甘草抽出物 0.05g
酢酸トコフェロール 0.05g
アロエ抽出物 0.1g
マロニエエキス 0.1g
クジン抽出物 0.1g
シラカバ抽出物 0.1g
香料 0.05g
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料1) 0.2g
五斂子葉部抽出物(製造例2の試料5) 2g
精製水 残部(全量を100gとする)
【0120】
〔配合例3〕
下記の組成のクリームを常法により製造した。
流動パラフィン 5g
サラシミツロウ 4g
セタノール 3g
スクワラン 10g
ラノリン 2g
ステアリン酸 1g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.0) 1.5g
モノステアリン酸グリセリル 3g
1,3−ブチレングリコール 6g
パラオキシ安息香酸メチル 1.5g
コンキオリン加水分解物 0.1g
ニンジンエキス 0.1g
香料 0.1g
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料3) 0.1g
五斂子葉部抽出物(製造例2の試料5) 1g
精製水 残部(全量を100gとする)
【0121】
〔配合例4〕
下記の組成のパックを常法により製造した。
ポリビニルアルコール 15g
ポリエチレングリコール 3g
プロピレングリコール 7g
エタノール 10g
パラオキシ安息香酸エチル 0.05g
チンピ抽出液 0.1g
ローヤルゼリー抽出液 0.1g
ソウハクヒエキス 0.1g
コメヌカ抽出液 0.1g
香料 0.05g
五斂子葉部抽出物(製造例2の試料5) 5g
精製水 残部(全量を100gとする)
【0122】
〔配合例5〕
下記の混合物を打錠して、錠剤状健康・栄養補助食品を製造した。
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料1) 100重量部
コラーゲン 30重量部
ムコ多糖・タンパク(コンドロイチン) 10重量部
ヒアルロン酸 1重量部
ハス胚芽抽出物 20重量部
月桃葉茎抽出物 20重量部
黒米抽出物 20重量部
甘草抽出物(グリチルリチンを含む) 10重量部
ミルク蛋白加水分解物(アミノ酸、低分子ペプチドを含む)10重量部
ビタミンB群混合粉末(全ビタミンB群を含む) 4重量部
ビタミンC 10重量部
粉糖(ショ糖) 53重量部
グリセリン脂肪酸エステル 12重量部
【0123】
〔配合例6〕
下記の混合物を顆粒状に形成して健康・栄養補助食品を製造した。
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料2) 200重量部
ハス胚芽抽出物 50重量部
真珠蛋白加水分解(各種アミノ酸、ペプチドを含む) 15重量部
シルク蛋白加水分解物(各種アミノ酸、ペプチドを含む)15重量部
大豆イソフラボン 10重量部
紫米抽出物 50重量部
赤ワインエキスパウダー(プロシアニジンを含む) 30重量部
酵母エキス 10重量部
(グルタチオン、核酸、アミノ酸、ビタミンを含む)
ザクロ種子抽出物 10重量部
小麦胚芽抽出物 10重量部
(ビタミン、クロム、セレン、モリブデンを含む)
DNA 30重量部
ビートオリゴ糖 1060重量部
ステビア抽出物 10重量部
【0124】
〔配合例7〕
下記の混合物をゼラチンカプセル化して、錠剤状健康・栄養補助食品を製造した。
五斂子葉抽出物(製造例1の試料1) 50重量部
ハス胚芽抽出物 15重量部
セラミド 30重量部
リン脂質(レシチン) 10重量部
ビタミンE(トコフェロール) 17重量部
マルチカロチン(α及びβカロチン、ルテイン、リコペン)10重量部
赤米抽出物(シクロアルテノールエステルを含む) 15重量部
オクタコサノール 1重量部
植物ステロール 5重量部
シソの実油(αリノレン酸を含む) 20重量部
精製魚油(DHA、EPAを含む) 20重量部
ごま油(リグナン化合物を含む) 20重量部
オリーブ油 10重量部
大豆、菜種混合油 65重量部
グリセリン脂肪酸エステル 12重量部
【0125】
〔配合例8〕
下記の混合物を常法に従い混合し清涼飲料水を製造した。
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料1) 1重量部
ハス胚芽抽出物 1重量部
ローヤルゼリー 3重量部
水溶性コラーゲン 8重量部
ハトムギエキス 1重量部
高麗ニンジンエキス 1重量部
プラセンタ(胎盤)エキス 1重量部
プエラリアエキス 1重量部
パープルヤムエキス 1重量部
オリゴ糖 5重量部
ショ糖 10重量部
プルーン果汁 2重量部
ザクロ果汁 5重量部
グレープフルーツ果汁 10重量部
ビタミンC 1重量部
グレープフルーツフレーバー 0.7重量部
水 残部(全量を100重量部とする)
【0126】
〔配合例9〕
下記の混合物を常法に従い混合しキャンディーを製造した。
五斂子葉部抽出物(製造例1の試料2) 2重量部
ハス胚芽抽出物 1重量部
水あめ 30重量部
甘草エキス 3重量部
甜茶エキス 1重量部
ブルーベリーエキス 1重量部
ストロベリー1/5濃縮果汁 1重量部
赤キャベツ色素 0.05重量部
レモン果汁 0.5重量部
水 5重量部
【0127】
【発明の効果】
本発明により、コラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤が提供される。本発明のコラーゲン産生促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、繊維芽細胞増殖作用剤、エラスターゼ阻害剤及びエストロゲン様作用剤は皮膚の老化を防止及び/又は改善するのに有用である。
また、本発明により、コラーゲン産生促進作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用、エラスターゼ阻害作用及びエストロゲン様作用が付与された皮膚化粧料が提供される。本発明の皮膚化粧料は、コラーゲン産生促進作用、コラゲナーゼ阻害作用、線維芽細胞増殖作用、エラスターゼ阻害作用及びエストロゲン様作用を有しており、しかも皮膚の適用した場合の使用感と安全性に優れているので、皮膚の老化を防止及び/又は改善するのに有用である。
さらに、本発明により、コラーゲン産生促進作用、コラゲナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖作用、エラスターゼ阻害作用及びエストロゲン様作用が付与された美容用飲食品が提供される。本発明の美容用飲食品は、皮膚の老化を防止及び/又は改善するのに有用である。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to a collagen production promoter having an action of promoting the production of collagen by fibroblasts, a collagenase inhibitor that inhibits collagenase activity involved in collagen reduction / denaturation, and a fibroblast having an action of growing fibroblasts. The present invention relates to a cell growth agent, an elastase inhibitor that inhibits elastase activity involved in elastin reduction / denaturation, and an estrogen-like agent having the same action as estrogen, which is a kind of female hormone. Moreover, this invention relates to the food / beverage products which provided the skin cosmetics which gave the skin aging prevention and improvement effect | action, and the cosmetics effect | action.
[0002]
[Prior art]
The epidermis and dermis of the skin are composed of epidermal cells, fibroblasts, and extracellular matrices such as elastin and collagen that are outside these cells and support the skin structure. In young skin, moisture retention, flexibility, elasticity and the like are ensured by maintaining the constancy of the interaction between these skin tissues, and the skin is maintained in a fresh and fresh state.
[0003]
However, elastin, a major component of the extracellular matrix, degrades and deteriorates when it is affected by certain external factors such as ultraviolet irradiation, drastic air drying, and excessive skin washing, or when aging progresses. In addition, as the amount of collagen produced decreases, the elasticity decreases due to crosslinking. As a result, the skin's moisturizing function and elasticity are lowered, and the keratin begins to exfoliate abnormally, so the skin loses its tension and gloss, and exhibits aging symptoms such as roughness and wrinkles.
[0004]
As described above, changes associated with skin aging, that is, wrinkles, dullness, disappearance of texture, decrease in elasticity, and the like involve reduction and degeneration of dermal extracellular matrix components such as collagen and elastin.
[0005]
In recent years, involvement of matrix proteases has been pointed out as a factor inducing this change. Among the matrix proteases, collagenase, that is, MMP-1 (matrix metalloprotease) is known as an enzyme that degrades type I and III collagen, which is the main component of the dermal extracellular matrix of the skin. It is considered that it is greatly increased by irradiation of UV rays, contributes to decrease / denaturation of collagen by ultraviolet rays, and is a major factor such as the formation of wrinkles on the skin. Therefore, promotion of collagen production and inhibition of collagenase activity are important in preventing and improving skin aging.
[0006]
In order to prevent and improve skin aging due to the above-mentioned mechanism, the most commonly used is the natural moisturizing factor (NMF) sugar, amino acid, organic acid, pyrrolidone carboxylate, collagen, hyaluronic acid It is to apply a substance having a moisturizing action such as mucopolysaccharide, glycerin, 1,3-butylene glycol, etc. to enhance the moisturizing property of the skin.
[0007]
However, the moisturizing agent only improves the keratinous state of the epidermis and cannot be expected to improve the tension holding mechanism in the dermis. In addition, the moisturizing agent slows the evaporation of moisture from the skin, so that the feeling of use is generally poor, and even when used for a long period of time, the skin may be damaged.
[0008]
On the other hand, one cause of skin aging accompanying aging is a decrease in the secretion of estrogen, a type of female hormone. In other words, estrogen is deeply involved in maintaining the health of adult women, and its lack of secretion leads to various medical illnesses, as well as the cause of unfavorable skin changes such as skin irritability, decreased elasticity, decreased moisture, etc. It is known to be.
[0009]
Therefore, a substance having the same action as estrogen is administered transcutaneously or orally to women in the menopause or later period in which estrogen secretion declines. For this purpose, steroidal estrogens, nonsteroidal estrogens, flavone compounds, and the like have been used as estrogen-like agents.
[0010]
In young skin, fibroblasts are actively proliferating, and activation of fibroblasts plays an important role in maintaining the homeostasis of the interaction of skin constituents such as fibroblasts and collagen. Yes.
[0011]
[Problems to be solved by the invention]
The first object of the present invention is to provide a collagen production promoter containing a substance capable of preventing and / or improving skin aging by promoting collagen production in dermal fibroblasts and containing it as an active ingredient There is to do.
[0012]
A second object of the present invention is to provide a collagenase inhibitor containing a substance capable of suppressing and / or improving skin aging by inhibiting collagen decrease / denaturation through a collagenase inhibitory action and containing it as an active ingredient. There is.
[0013]
The third object of the present invention is to find a substance capable of activating fibroblasts through fibroblast proliferation action, preventing and / or improving skin aging, and containing it as an active ingredient Is to provide.
[0014]
The fourth object of the present invention is to provide a substance capable of suppressing and reducing elastin through elastase inhibitory action, preventing and / or improving skin aging, and containing it as an active ingredient. There is.
[0015]
The fifth object of the present invention is to find a substance capable of preventing and / or improving skin aging through an estrogenic effect and to provide an estrogenic agent containing it as an active ingredient.
[0016]
The sixth object of the present invention is a skin useful for preventing and / or improving skin aging, which has a collagen production promoting action, an estrogen-like action, a collagenase inhibitory action, a fibroblast proliferation action and / or an elastase inhibitory action. It is to provide cosmetics.
[0017]
The seventh object of the present invention is a cosmetic that has a collagen production promoting action, an estrogen-like action, a collagenase inhibitory action, a fibroblast proliferation action and / or an elastase inhibitory action, and is useful for preventing and / or improving skin aging. It is to provide food and drink.
[0018]
[Means for Solving the Problems]
In order to achieve the above object, the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention are obtained from the leaves of Averrhoa carambola L. The skin cosmetics and cosmetic foods and beverages of the present invention are characterized by containing an extract from the leaves of Averrhoa carambola L. To do.
[0019]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The extract from the leaves of the quince which is an active ingredient of the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention is extracted by an extraction treatment. Any of the extract obtained from the leaves of pentagon, a diluted or concentrated solution of the extract, a dried product obtained by drying the extract, or a crude product or a purified product thereof is included.
[0020]
What is used as an extraction raw material in the extraction process is a leaf part of Goshiko (scientific name: Averrhoa carambola L., herbal medicine name: yang peach). In addition to the complete leaf, the leaf part includes a part of the leaf (for example, a blade, a petiole, a cocoon leaf, etc.). Moreover, since the stem part of a quince can also be used as an extraction raw material, it is also possible to use the stem part together with the leaf part as an extraction raw material, or to use only the stem part as an extraction raw material.
[0021]
Goshiko belongs to the family Oxalis, and fresh fruits are edible. Goshiko has been described in Chinese literature since BC, and its fruit is also called star fruit because of its star-shaped cross section. Goshiko is cultivated in Okinawa, southeastern China, Yunnan and other tropical regions, and can be easily obtained from these regions.
[0022]
The leaf portion of the quince used as the extraction raw material is suitably dried and pulverized immediately after collection. Drying may be performed in the sun, or may be performed using a commonly used dryer. The coconut leaf part may be used as an extraction raw material after pretreatment such as degreasing with a nonpolar solvent such as hexane or benzene. By performing pretreatment such as degreasing, the extraction treatment with the polar solvent of the leaves of the quince can be performed efficiently.
[0023]
In the extraction process, it is preferable to use a polar solvent as the extraction solvent. Ingredients that promote collagen production, collagenase inhibition, fibroblast proliferation, elastase inhibition or estrogen-like activity contained in the leaves of quince are easily extracted by extraction using a polar solvent as the extraction solvent. be able to.
[0024]
Specific examples of suitable extraction solvents include water, lower aliphatic alcohols, hydrous lower aliphatic alcohols, and the like, and these can be used alone or as a mixture of two or more thereof. Specific examples of suitable lower aliphatic alcohols include methanol, ethanol, propanol, 1,3-butylene glycol, glycerin, propylene glycol, isoprene glycol and the like.
[0025]
Water that can be used as the extraction solvent includes pure water, tap water, well water, mineral spring water, mineral water, hot spring water, spring water, fresh water, and the like, as well as those subjected to various treatments. Examples of the treatment applied to water include purification, heating, sterilization, sterilization, filtration, ion exchange, adjustment of osmotic pressure, buffering, and the like. Therefore, the water that can be used as the extraction solvent in the present invention includes purified water, hot water, ion-exchanged water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, and the like.
[0026]
When using the liquid mixture of 2 or more types of polar solvents as an extraction solvent, the mixing ratio can be adjusted suitably. For example, when using the liquid mixture of water and a lower aliphatic alcohol, the mixing ratio of water and a lower aliphatic alcohol can be 7: 3 to 2: 8 (weight ratio).
[0027]
The extraction treatment is not particularly limited as long as the soluble component contained in the leaves of the pentagon can be eluted in the extraction solvent, and can be performed according to a conventional method. In the extraction process, it is not necessary to adopt a special extraction method, and any apparatus can be used at room temperature or under reflux heating.
[0028]
For example, the extraction raw material is put into a treatment tank filled with the extraction solvent, and the soluble components are eluted with occasional stirring. At this time, although the extraction conditions can be appropriately adjusted according to the extraction raw material and the like, the amount of the extraction solvent is usually 5 to 15 times (weight ratio) of the extraction raw material, and the extraction time is usually 1 to 3 hours. The extraction temperature is usually from room temperature to 95 ° C.
[0029]
An eluate can be obtained by eluting soluble components by extraction and then filtering to remove the extraction residue. The obtained extract is diluted, concentrated, dried, purified, etc. according to a conventional method in order to obtain a diluted or concentrated solution of the extract, a dried product of the extract, or a crude purified product or a purified product thereof. Processing may be performed.
[0030]
The obtained extract can be used as it is as a collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, and estrogen-like agent. Is easy to use. In obtaining a dried extract, a carrier such as dextrin or cyclodextrin may be added to improve hygroscopicity.
[0031]
In addition, since the leaves of the quince have a unique odor and taste, it is possible to perform purification for the purpose of decolorization, deodorization, etc. within a range that does not cause a decrease in the physiological activity. Since it is not used in large quantities when added to foods or cosmetics, it is not practically hindered even if it is not purified.
Specifically, purification can be performed by activated carbon treatment, adsorption resin treatment, ion exchange resin treatment, or the like.
[0032]
The extract from the leaves of the pentagon obtained as described above has a collagen production promoting action, collagenase inhibitory action, fibroblast proliferation action, elastase inhibitory action and estrogen-like action.
[0033]
The extract from the leaves of the quince can be used as it is as a collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent. It can also be used. In the case of formulating, a pharmaceutically acceptable carrier such as dextrin and cyclodextrin and other optional auxiliaries can be added to facilitate storage and handling. The extract from the leaves of the pentagon can be made into any dosage form such as powder, granule, tablet, etc. by formulation.
[0034]
The collagen production promoter of the present invention prevents and / or improves skin aging by percutaneously absorbed to reach fibroblasts, activating collagen production and supplying sufficient collagen to the dermis layer. be able to. In addition, since the collagen production promoter of the present invention uses an estrogen-like agent in combination with the collagen production promoting action, it can act in a multifaceted manner to prevent and / or improve skin aging. it can.
[0035]
The collagenase inhibitor of the present invention can suppress the decrease or degeneration of collagen by collagenase through the collagenase inhibitory action, and can prevent and / or improve skin aging caused by the decrease or degeneration of collagen.
[0036]
The fibroblast proliferating agent of the present invention can prevent and / or improve skin aging caused by photoaging, aging, and the like by activating fibroblasts.
[0037]
The elastase inhibitor of the present invention can suppress and / or improve skin aging caused by elastin reduction, degeneration, and the like by suppressing elastin decrease and degeneration by elastase through an elastase inhibitory action.
[0038]
The estrogenic agent of the present invention can prevent and / or improve skin aging due to a decrease in estrogen secretion through an estrogenic effect.
[0039]
[Skin cosmetic]
The extract from the leaves of pentagonal has a collagen production promoting effect, collagenase inhibitory effect, fibroblast proliferation effect, elastase inhibitory effect and estrogen-like effect to prevent and / or improve skin aging. In addition, it is suitable for blending into skin cosmetics because of its excellent usability and safety when applied to the skin. Therefore, by incorporating one or more of the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention into the skin cosmetic, An effect of preventing and / or improving aging can be imparted to the skin cosmetic.
[0040]
The skin cosmetics that can contain the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferating agent, elastase inhibitor, and estrogen-like agent of the present invention are not particularly limited. Specific examples thereof include ointments, creams, Examples include emulsions, lotions, packs, bathing agents, and the like.
[0041]
The amount of the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, and estrogen-like agent of the present invention can be adjusted as appropriate depending on the type of skin cosmetic, physiological activity of the extract, and the like. However, a suitable blending ratio is about 0.01 to 10% by weight in terms of a standard pentacot extract.
[0042]
The skin cosmetics of the present invention include various main agents ordinarily used in the production of skin cosmetics as long as they do not interfere with collagen production promoting action, collagenase inhibitory action, fibroblast proliferation action, elastase inhibitory action and estrogen-like action. Auxiliary agents and other optional auxiliary agents can be blended, and the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferating agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention are related to the prevention and improvement of skin aging. It is not necessarily limited to only the main agent.
[0043]
Specific examples of the skin cosmetic of the present invention that can be used as a component together with the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, and estrogen-like agent of the present invention are specifically mentioned. It is as follows. In addition, when the following constituents are used in combination with an extract from the quince leaf, synergism between the extract from the quince leaf and the combined component is normally expected. It may cause an excellent use effect.
[0044]
Astringent: Citric acid or salts thereof, tartaric acid or salts thereof, lactic acid or salts thereof, aluminum chloride, aluminum sulfate / potassium sulfate, allantoinchlorohydroxyaluminum, allantoindihydroxyaluminum, zinc paraphenolsulfonate, zinc sulfate, thiu extract, agez extract, Clam essence extract, Ganoderma biloba extract, Chacatechins, Gaiyo extract, Oyster extract, Hypericum extract, Diou extract, Cornflower extract, Horsetail extract, Kizuta extract, Cucumber extract, Maronier extract, Salvia extract, Melissa extract, etc.
[0045]
Bactericidal and antibacterial agents: benzoic acid, sodium benzoate, paraoxybenzoic acid ester, distearylmethylammonium chloride, benzethonium chloride, alkyldiaminoethylglycine chloride solution, chlorhexidine hydrochloride, orthophenylphenol, photosensitizer 101, photosensitizer 201, Salicylic acid, sodium salicylate, sorbic acid, halocarban, resorcin, parachlorophenol, phenoxyethanol, bisabolol, hinokitiol, menthol, chitosan, chitosan degradation product, jellyfish extract, cucumber extract, hemlock extract, loquat extract, walnut extract, hop extract, yucca extract, Aloe extract, Keihi extract, Gajutsu extract, etc.
[0046]
Whitening agents: ascorbic acid and its derivatives, sulfur, ellagic acid and its derivatives, kojic acid and its derivatives, glucosamine and its derivatives, azerai and its derivatives, arbutin and its derivatives, hydroxycinnamic acid and its derivatives, glutathione, arnica extract, Ougon extract, Senkyu extract, Sakuhakuhi extract, Psycho extract, Bowfu extract, Hamaboufu extract, Mannen mycelium culture or its extract, Gymnema extract, Linden extract, Peach leaf extract, Ages extract, Kuzin extract, Jiuyu extract, Toki extract, Yakuinin extract , Oyster leaf extract, Daio extract, Buttonpi extract, Hamamelis extract, Maronnier extract, Hypericum extract, Odori extract, Oil-soluble Licorice extract Sex flavones, glabridin, glabrene, licochalcone A) and the like.
[0047]
UV absorber: β-isopropylfuranone derivative, urocanic acid, ethyl urocanate, oxybenzone, oxybenzonesulfonic acid, tetrahydroxybenzophenone, dihydroxydimethoxybenzophenone, dihydroxybenzophenone, cinoxalate, methyl diisopropylcinnamate, octyl methoxycinnamate, glyceryl paraaminobenzoate Amyl paradimethylaminobenzoate, octyl paradimethylbenzoate, paraaminobenzoic acid, ethyl paraaminobenzoate, butylmethoxydibenzoylmethane, titanium oxide, β-carotene, γ-oryzanol, rice bran extract, aloe extract, birch extract, birch extract , Chamomile extract, scallop extract, hawthorn extract, henna extract, butterfly extract, maroni Extract, ginkgo leaf extract, chamomile extract, hawthorn extract, oil-soluble licorice extract, and the like.
[0048]
Moisturizer: serine, glycine, threonine, alanine, collagen, hydrolyzed collagen, hydronectin, fibronectin, keratin, elastin, royal jelly, chondroitin sulfate heparin, glycerophospholipid, glyceroglycolipid, sphingophospholipid, glycosphingolipid, linoleic acid or Its esters, eicosapentaenoic acid or its esters, pectin, algae colloid, bifidobacteria fermented product, lactic acid fermented product, yeast extract, litchi mycelium culture or extract thereof, wheat germ oil, avocado oil, rice germ oil , Jojoba oil, soybean phospholipid, γ-oryzanol, bellows oyster extract, yokuinin extract, sage extract, taisou extract, diatom extract, kidachi aloe extract, burdock extract, maronier extract, mannen wax extract, a Nikaekisu, wheat bran, rice bran and the like.
[0049]
Cell activating agent: riboflavin or derivative thereof, pyridoxine or derivative thereof, nicotinic acid or derivative thereof, pantothenic acid or derivative thereof, α-tocopherol or derivative thereof, arnica extract, carrot extract, rapeseed extract, sorghum extract, loofah extract (saponin ), Shikon extract, birch extract, buckwheat extract, button pea extract, peony extract, mugwort extract, safflower extract, ashitaba extract, loquat leaf extract, shrimp extract, saxifrage extract, jaundice extract, salvia extract, garlic extract, mannen wax extract and the like.
[0050]
Anti-inflammatory / anti-allergic agents: azulene, allantoin, aminocaproic acid, indomethacin, lysozyme chloride, epsilon aminocaproic acid, oxybenzone, glycyrrhizic acid or its derivatives, glycyrrhetinic acid or its derivatives, photosensitizer 301, photosensitizer 401, diphenhydramine hydrochloride, tranexam Acid or its derivatives, adenosine phosphate, estradiol, estrone, ethinyl estradiol, cortisone, hydrocortisone, prednisone, progesterone, corticosterone, arnica extract, inchinko extract, sanshi extract, jujube extract, horse chestnut extract, licorice extract, toki extract , Mugwort extract, bitumen extract, gentian extract, psycho extract, senkyu extract, bowfish extract, corn Risouekisu, Coptis extract, mint extract and the like.
[0051]
Antioxidant / active oxygen scavenger: dibutylhydroxytoluene, butylhydroxyanisole, propyl gallate, baicalin, baicalein, superoxide dismutase, catalase, rosemary extract, melissa extract, oxon extract, age extract, loquat leaf extract, hop Extract, Hamamelis extract, Peonies extract, Sage extract, Kina extract, Chamomile extract, Eucalyptus extract, Perilla extract, Ginkgo biloba extract, Thyme extract, Cardamom extract, Callaway extract, Nutmeg extract, Mace extract, Laurel extract, Clove extract, Turmeric extract, Yanagitade Extracts etc.
[0052]
Fats and oils: soybean oil, linseed oil, tung oil, sesame oil, nutca oil, rapeseed oil, rapeseed oil, safflower oil, corn oil, olive oil, camellia oil, almond oil, castor oil, peanut oil, cacao oil, molasses, palm oil , Palm kernel oil, beef tallow, mink oil, egg yolk oil, jojoba oil, evening primrose oil, horse oil, etc.
[0053]
Wax: Carnauba wax, candelilla wax, beeswax, salasy beeswax, whale wax, serax, lanolin, etc.
[0054]
Hydrocarbons: liquid paraffin, petrolatum, microlistin wax, ceresin, squalane, polyethylene powder.
[0055]
Fatty acids: stearic acid, linoleic acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, hebenic acid, lanolinic acid, oleic acid, undecylenic acid, isostearic acid.
[0056]
Alcohols: lauryl alcohol, cetyl alcohol, stearyl alcohol, lanolin alcohol, hydrogenated lanolin alcohol, oleyl alcohol, hexadecyl alcohol, 2-octyldodecanol, glycerin, sorbitol, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, ethylene glycol or Its polymer, glucose, sucrose, cholesterol, phytosterol, cetostearyl alcohol.
[0057]
Esters: Decyl oleate, butyl stearate, myristyl myristate, hexyl laurate, isopropyl palmitate, isopropyl myristate, octyldodecyl myristate, hexyl decyl dimethyloctanoate, propylene glycol dioleate, diethyl phthalate, monostearic acid Propylene glycol, ethylene glycol monostearate, glyceryl monostearate, glyceryl trimyristate, lanolin acetate, cetyl lactate.
[0058]
Surfactant: Anionic surfactant, cationic surfactant, amphoteric surfactant, nonionic surfactant.
[0059]
Perfume: menthol, carvone, eugenol, anethole, peppermint oil, spearmint oil, peppermint oil, eucalyptus oil, anise oil.
[0060]
[Beauty food and drink]
Since the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention can prevent and / or improve skin aging through their respective actions, It is suitable for blending into food and drink. Here, “beauty food and drink” means food and drink intended to prevent or improve the aging of skin or skin.
[0061]
The cosmetic food / beverage product of the present invention contains the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention in any food / beverage product that does not interfere with its activity. Or a dietary supplement mainly composed of the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, and estrogen-like agent of the present invention.
[0062]
When a food / beverage product is produced by blending the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention, for example, sugars such as dextrin and starch; gelatin Proteins such as soy protein and corn protein; Amino acids such as alanine, glutamine and isoleucine; Polysaccharides such as cellulose and gum arabic; Oils and fats such as soybean oil and medium chain fatty acid triglyceride It can be formulated into any dosage form.
[0063]
The amount of collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferating agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent in the cosmetic food and drink of the present invention is determined in consideration of the general intake of the food and drink to be added. Thus, it is preferable to adjust so that the intake amount of the extract of five coconut leaves per day is about 1-1000 mg per day.
[0064]
There are no particular limitations on foods and drinks that can contain the collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, and estrogen-like agent of the present invention. Specific examples thereof include soft drinks and carbonated drinks. , Drinks such as nutritional drinks, fruit drinks, lactic acid drinks (including concentrates and powders for preparation of these drinks); ice cream such as ice cream, ice sherbet, shaved ice; Noodles such as Chinese noodles and instant noodles; sweets such as candy, candy, gum, chocolate, snack confectionery, biscuits, jelly, jam, cream, baked confectionery; fishery and livestock processed foods such as kamaboko, ham, sausage; processed milk Dairy products such as fermented milk; salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, shortening, whipped cream Fats and oils and processed foods such as dressings; seasonings such as sauces and sauces; various forms of health and nutritional supplements such as tablets and granules; other soups, stews, salads, prepared dishes, pickles, etc. Can do.
[0065]
The collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, estrogen-like agent, skin cosmetic and cosmetic food and drink of the present invention described above are suitably applied to humans. However, it can be applied to animals other than humans as long as the respective effects are exhibited.
[0066]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples. The scope of the present invention is not limited to these examples.
[0067]
[Production Example 1]
300 g of coarsely pulverized leaves of Goshiko (scientific name: Averrhoa carambola L.) was added to 2000 ml of extraction solvent and kept at 70 ° C. for 3 hours with gentle stirring. Thereafter, the mixture was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure at 40 ° C., and further dried with a vacuum drier to obtain an extract from the leaves of quince. When the above extraction treatment was performed using four types of extraction solvents, the yield of the extract was as shown in Table 1. When the extraction solvent is a mixture, the mixing ratio shown below is based on weight.
[0068]
[0069]
[Production Example 2]
300 g of the same coarsely crushed coconut leaves as used in Production Example 1 were put into 2000 ml of an extraction solvent, held at 80 ° C. for 3 hours with stirring, and then filtered to obtain an extract. Extraction was performed in the same manner as described above using three types of extraction solvents, and about 1500 ml of an extract having a solid content concentration shown in Table 2 was obtained. When the extraction solvent is a mixture, the mixing ratio shown below is based on weight.
[0070]
[0071]
[Test Example 1] Test for promoting collagen production
The samples 1 to 7 obtained in Production Examples 1 and 2 were tested according to the method of Webster et al. (Anal. Biochem., Vol. 96, 220, 1979). Specifically, the test was conducted as follows.
[0072]
Human fibroblasts are seeded in 24-well plates, 37 ° C, 5% CO 2 After culturing for several days in a sample-added medium (sample concentration: 50 ppm, 12.5 ppm) under -95% air, β-aminopropionitrile and [ Three H] -proline was added and further cultured for 24 hours. A pepsin / acetic acid solution is added to the whole culture solution, digested at 4 ° C. for 16 hours, then a carrier is added to the digested solution, precipitated with a 0.7 mol / L saline solution, and redissolved under neutral conditions. Then, the solution was reprecipitated with a 4.2 mol / L saline solution. The obtained precipitate was washed with 20% ethanol, and then the radioactivity of the precipitate was measured.
[0073]
Collagen production promotion rate was calculated with the radioactivity when no sample was added as 100%.
Table 3 shows the collagen production promotion rate (%) of each sample. When the sample is an extract according to Production Example 2, the “sample concentration” is a solid content equivalent concentration.
[0074]
[0075]
As shown in Table 3, all the extracts from the leaves of pentagon obtained using various extraction solvents exhibited a collagen production promoting action in a concentration-dependent manner. In particular, the extracts obtained using water (sample 1), ethanol / water (1/1) (sample 2), and ethanol (sample 3) as the extraction solvent showed excellent collagen production promoting action.
[0076]
[Test Example 2] Test for collagenase inhibitory action
The samples 1 to 7 obtained in Production Examples 1 and 2 were tested for collagenase inhibitory action. Specifically, the test was conducted as follows.
[0077]
A sample solution (solvent: Tris-HCl buffer) 50 μL, a collagenase solution 50 μL and a substrate solution 400 μL were mixed and incubated at 37 ° C. for 30 minutes. The reaction was then quenched with 1 mL of 25 mM citric acid solution and extracted with 5 mL of ethyl acetate. About the obtained extract, the light absorbency (control liquid: ethyl acetate) of wavelength 320nm was measured. The same enzyme reaction and absorbance measurement as described above were performed by adding an equal amount of buffer solution to the sample solution instead of the sample solution. Further, in each case, the same operation and measurement were performed by adding a buffer instead of the collagenase solution.
[0078]
The collagenase solution used was a solution obtained by dissolving Sigma's collagenase Type IV in 1 mL of buffer and diluting it 50 times at the time of use. The substrate solution was prepared by dissolving BACHEM Fenichemikalien AG Pz-peptide at a concentration of 0.5 mol / L in Tris-HCl buffer containing 20 mmol / L calcium chloride.
From the measurement results, the collagenase inhibition rate (%) was calculated based on the following formula.
[0079]
[Formula 1]
Collagenase inhibition rate (%) = [1− (A−B) / (C−D)] × 100
[0080]
In the above formula, "A" is the absorbance when the sample solution is added and the enzyme is added, "B" is the absorbance when the sample solution is added and no enzyme is added, "C" is the absorbance when no sample is added and the enzyme is added, and "D" Represents the absorbance when no sample was added and no enzyme was added.
[0081]
The inhibition rate was measured by gradually reducing the sample concentration, and the concentration of the sample solution that inhibits collagenase activity by 50% was determined by interpolation.
Table 4 shows the test results.
[0082]
[0083]
As shown in Table 4, all the extracts from the leaves of the pentagon obtained using various extraction solvents exhibited collagenase inhibitory action in a concentration-dependent manner. In particular, the extract obtained by using glycerin / water (1/1) (sample 6) and propylene glycol / water (1/1) (sample 7) as the extraction solvent showed excellent collagenase inhibitory action.
[0084]
[Test Example 3] Test of fibroblast proliferation action
The samples 1 to 7 obtained in Production Examples 1 and 2 were tested for fibroblast proliferation action according to the MTT method (J. Immunol. Method 93, 157, 1986). Specifically, the test was conducted as follows.
[0085]
25cm 2 10% FBS-containing medium (α-MEM medium: GIBCO BLR, PH7.2) in a normal culture flask of human normal neonatal skin fibroblasts (NBIRGB) 1 × 10 6 Seeded pieces, 37 ° C, 5% CO 2 Cultured for 4 days under -95% air. Cells were then collected by trypsinization and centrifugation. Cells obtained as a precipitate are suspended in a medium containing 5% FBS (α-MEM medium: GIBCO BLR, PH7.2), and 7 × 10 6 per well of a 96-well plate. Three Dispensed one by one. After culturing for 24 hours, add 100 μL / well of 5% FBS-containing medium in which the sample is dissolved. 2 The cells were cultured for 3 days under -95% air. After incubation, remove 100 μL of medium per well, and 20 μL of MTT reagent (3- (4,5-dimethy1-2-thiazolyl) -2,5-diphenyl-2H tetrazolium bromide, 5 mg / mL PBS (-) solution) Was added and incubated for 4.5 hours (reactive oxygen derived from mitochondria in the grown cells reacted with the MTT reagent, and the color of the reagent that was yellow turns blue-yellow with an absorption peak at 570 nm). Thereafter, 100 μL of 10 wt% sodium dodecyl sulfate-0.02 mol / L sulfuric acid solution was dispensed into each well and incubated for 18 hours. After completion of the incubation, absorbance at 570 nm was measured using a microplate reader. Separately, a blank was taken with only the sample, and the absorbance was measured by the same operation.
[0086]
In addition, each absorbance measurement value was corrected by subtracting the 650 nm absorbance measured at the same time to correct the influence of turbidity caused by the grown cells. The cell growth promotion rate (%) was determined from the corrected absorbance based on the following formula.
[0087]
[Formula 2]
Cell growth promotion rate (%) = [(A−C) − (B−D)] / (B−D) × 100
[0088]
In the above formula, “A” is the absorbance when the sample is added, “B” is the absorbance when the sample is not added, “C” is the absorbance when the sample is added and cells are not added, and “D” is the sample added and no cells are added It represents the absorbance at the time.
[0089]
The inhibition rate was measured by gradually decreasing the sample concentration, and the fibroblast proliferation effect was tested.
The test results are shown in Table 5.
[0090]
[0091]
As shown in Table 5, all the extracts from the leaves of the quince obtained using various extraction solvents exhibited a fibroblast proliferation action in a concentration-dependent manner. In particular, the extract obtained using water (sample 1) and ethanol / water (1/1) (sample 2) as the extraction solvent showed excellent fibroblast proliferation action.
[0092]
[Test Example 4] Test of elastase inhibitory action
Samples 1 to 7 obtained in Production Examples 1 and 2 were tested for elastase inhibitory action. Specifically, the test was conducted as follows.
[0093]
A 96-well plate was prepared, and 50 μL of the sample solution (solvent: DMSO + water) and 50 μL of the elastase solution were added to each well, and further 100 μL of the substrate solution was added and mixed. After reacting at 25 ° C. for 15 minutes, absorbance at a wavelength of 415 nm was measured. The same enzyme reaction and absorbance measurement as described above were carried out by adding only the same amount of solvent as the sample solution instead of the sample solution. Further, in each case, the same operation and measurement were performed by adding a buffer instead of the elastase solution.
[0094]
The elastase solution used was a solution obtained by dissolving 5 mg of elastase Type III from Sigma in 1 mL of 0.2 mol / L Tris-HCl buffer at pH 8 and diluting 250 times at the time of use. As a substrate solution, a solution having a concentration of 45.14 mg / mL in which N-SUCCINYL-ALA-ALA-ALA p-NITROANILIDE (Sigma) was dissolved in DMSO was diluted 100 times with the above Tris-HCl buffer.
From the measurement results, the elastase inhibition rate (%) was determined based on the following formula.
[0095]
[Formula 3]
Elastase inhibition rate (%) = [1- (A−B) / (C−D)] × 100
[0096]
In the above formula, "A" is the absorbance when the sample solution is added and the enzyme is added, "B" is the absorbance when the sample solution is added and no enzyme is added, "C" is the absorbance when no sample is added and the enzyme is added, and "D" Represents the absorbance when no sample was added and no enzyme was added.
[0097]
The inhibition rate was measured by gradually reducing the sample concentration, and the concentration of the sample solution that inhibits the elastase activity by 50% was determined by interpolation.
The results of the test are shown in Table 6.
[0098]
[0099]
As shown in Table 6, all the extracts from the leaves of pentagon obtained using various extraction solvents exhibited an elastase inhibitory action in a concentration-dependent manner. In particular, the extract obtained using ethanol / water (1/1) (sample 2), ethanol (sample 3), and propanol / water (1/1) (sample 4) as the extraction solvent has excellent elastase inhibition. The effect was shown.
[0100]
[Test Example 5] Estrogen-like action test
The test was conducted according to the method of Thomas et al. (In vitro cell. Dev. Biol. 28A, 595-602, 1992), which examines the effect on the growth of estrogen-dependent cells. Specifically, the test was conducted as follows.
[0101]
75cm of MCF-7 cells derived from human breast cancer 2 Cultivate in a flask until confluent, collect the MCF-7 cells by trypsin treatment, and add 10% FBS (activated charcoal), 1% NEAA, and 1 mM sodium pyruvate without MEM medium (hereinafter referred to as phenol red). Abbreviated as “MEM medium”), 3 × 10 Four Prepared to cells / mL. Inoculate 0.9 mL of the prepared MCF-7 cells into a 24-well plate, and in order to establish this, 37 ° C, 5% CO 2 -Cultured under -95% air. Six hours later (Day 0), 100 μL of a sample solution prepared to a concentration 10 times the final concentration (12.5 ppm, 6.25 ppm, 3.1 ppm) in MEM medium was added to the plate, and the culture was continued. On the sixth day from the start of the culture, the medium was replaced with a MEM medium containing 0.97 mmol / L MTT. After culturing for 2 hours, the medium was replaced with isopropanol, and blue formazan produced in the cells was extracted. For the isopropanol containing the eluted blue formazan, the absorbance at 570 nm where the absorption maximum of blue formazan is present was measured.
[0102]
In addition, in order to correct the influence of adherent cells, the absorbance at 650 nm was also measured at the same time, and the difference between both absorbances was taken as a value proportional to the amount of blue formazan produced (the absorbance in the formula below is this corrected absorbance) .
As a positive control, 0.02 ppm ethinylestradiol was used.
The strength of the estrogen-like action (estrogen-dependent proliferation action) was calculated based on the following formula, assuming that the absorbance when no sample was added was 100%.
The test results are shown in Table 7.
[0103]
[Formula 4]
Estrogen-like action (%) = A / B x 100
[0104]
In the above formula, “A” indicates the absorbance when the sample is added, and “B” indicates the absorbance when the sample is not added.
[0105]
[0106]
As shown in Table 7, all the extracts from the leaves of pentagon obtained using various extraction solvents exhibited an estrogen-like action in a concentration-dependent manner. In particular, the extracts obtained using water (sample 1), ethanol / water (1/1) (sample 2), and ethanol (sample 3) as the extraction solvent exhibited excellent estrogenic effects.
[0107]
[Test Example 6] Test of rough skin improving action (preventing and improving skin aging)
A milky lotion (hereinafter referred to as “Example milky lotion”) in which a 50% ethanol extract (sample 2) from the leaves of the pentagon obtained in Production Example 1 was prepared was prepared according to a conventional method. The composition of the example emulsion is shown below.
[0108]
Five coconut leaf extract (Sample 2 of Production Example 1) 0.1 g
Cetyl alcohol 0.5g
Beeswax 2.0g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (10E.0) 1.0g
1.0g glyceryl monostearate
Hyaluronic acid 0.1g
Propylene glycol 5.0g
Ethanol 3.0g
Methyl paraoxybenzoate 0.3g
Perfume 0.03g
Purified water remainder (total volume is 100 ml)
[0109]
The following evaluation tests were conducted on the Example emulsion and the Comparative Example emulsion having the same composition as the Example emulsion except that it did not contain an extract from the leaves of the quince.
Test subject: Of many women aged 22 to 43, the skin groove / cutaneous skin has disappeared, and a wide range of keratin is turned over (the evaluation shown in Table 8 is 1), or the skin groove / cutaneous skin is unclear and the horny skin is Twenty persons who were partially turned up (the evaluation shown in Table 8 was 2) and were judged to be rough were selected as subjects.
Application test: Each subject was allowed to apply the example latex on the right half of the face and the comparative emulsion on the left half once every morning and evening for 30 days.
[0110]
[0111]
[Judgment 1: Effect of improving rough skin]
After the application test was completed, a replica of the face was taken using the replica method by Silfro (manufactured by FLEXICL DEVELOPMENTS LTD). The state of was judged. Table 9 shows the determination results.
[0112]
[0113]
As shown in Table 9, the area to which the example emulsion was applied had markedly improved skin roughness (skin aging) compared to the area to which the comparative example emulsion was applied.
[0114]
[Decision 2: Sensory evaluation]
About the feeling of use and the effect on skin, all subjects were asked about superiority or inferiority when the Example emulsion and the Comparative Example emulsion were compared. Table 10 shows the results of the responses.
[0115]
[0116]
From the results shown in Table 10, the same effect as in the above-described determination 1 and excellent usability were confirmed by sensory evaluation.
[0117]
Based on the results of Judgment 1 and 2, skin cosmetics containing an extract from the leaves of pentagonal have anti-aging / improving action on skin (roughness-improving action), and feel and safety when applied to the skin It was confirmed that it was excellent in performance.
[0118]
[Formulation Example 1]
An emulsion having the following composition was produced by a conventional method.
Jojoba oil 4g
2g olive oil
Squalane 2g
Cetanol 2g
2g glyceryl monostearate
Polyoxyethylene cetyl ether (20E.0) 2.5g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.0) 2g
1,3-butylene glycol 3g
Ascorbic acid magnesium phosphate 0.1g
Chamomile extract 0.1g
0.1g dipotassium glycyrrhizinate
Jaundice extract 0.1g
Peony extract 0.1g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Fragrance 0.05g
Five coconut leaf extract (Sample 3 of Production Example 1) 0.1 g
5 ginseng extract (Sample 5 of Production Example 2) 1 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0119]
[Formulation Example 2]
A lotion having the following composition was produced by a conventional method.
Glycerin 3g
1,3-butylene glycol 3g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.0) 0.5g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Citric acid 0.1g
Sodium citrate 0.1g
Oil-soluble licorice extract 0.05g
Tocopherol acetate 0.05g
Aloe extract 0.1g
Maronier extract 0.1g
Cousin extract 0.1g
Birch extract 0.1g
Fragrance 0.05g
0.2 g of Gothic leaf extract (Sample 1 of Production Example 1)
5 coconut leaf extract (Sample 5 of Production Example 2) 2 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0120]
[Composition Example 3]
A cream having the following composition was produced by a conventional method.
Liquid paraffin 5g
Salami beeswax 4g
Setanol 3g
Squalane 10g
Lanolin 2g
Stearic acid 1g
1.5 g of polyoxyethylene sorbitan oleate (20E.0)
3g glyceryl monostearate
1,3-butylene glycol 6g
1.5 g of methyl paraoxybenzoate
Conchiolin hydrolyzate 0.1g
Carrot extract 0.1g
Fragrance 0.1g
Five coconut leaf extract (Sample 3 of Production Example 1) 0.1 g
5 ginseng extract (Sample 5 of Production Example 2) 1 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0121]
[Formulation Example 4]
A pack having the following composition was produced by a conventional method.
Polyvinyl alcohol 15g
Polyethylene glycol 3g
7g of propylene glycol
Ethanol 10g
0.05 g ethyl paraoxybenzoate
Chimp extract 0.1g
Royal jelly extract 0.1g
Sowakuhi extract 0.1g
Rice bran extract 0.1g
Fragrance 0.05g
5 g of coconut leaf extract (Sample 5 of Production Example 2) 5 g
Purified water remainder (total amount is 100 g)
[0122]
[Formulation Example 5]
The following mixture was tableted to produce a tablet-like health / nutritional supplement.
100 parts by weight of Gothia leaf extract (Sample 1 of Production Example 1)
30 parts by weight of collagen
10 parts by weight of mucopolysaccharide / protein (chondroitin)
1 part by weight of hyaluronic acid
Lotus germ extract 20 parts by weight
Moon peach leaf stem extract 20 parts by weight
20 parts by weight of black rice extract
Licorice extract (including glycyrrhizin) 10 parts by weight
Milk protein hydrolyzate (including amino acids and low molecular weight peptides) 10 parts by weight
4 parts by weight of mixed powder of B vitamins (including all B vitamins)
Vitamin C 10 parts by weight
53 parts by weight of powdered sugar (sucrose)
Glycerin fatty acid ester 12 parts by weight
[0123]
[Composition Example 6]
The following mixture was formed into granules to produce health and nutritional supplements.
200 parts by weight of pentacot extract (Sample 2 of Production Example 1)
Lotus germ extract 50 parts by weight
Pearl protein hydrolysis (including various amino acids and peptides) 15 parts by weight
Silk protein hydrolyzate (including various amino acids and peptides) 15 parts by weight
Soybean isoflavone 10 parts by weight
Purple rice extract 50 parts by weight
30 parts by weight of red wine extract powder (including procyanidins)
10 parts by weight of yeast extract
(Including glutathione, nucleic acids, amino acids, vitamins)
Pomegranate seed extract 10 parts by weight
10 parts by weight of wheat germ extract
(Including vitamins, chromium, selenium, molybdenum)
30 parts by weight of DNA
1060 parts by weight of beet oligosaccharide
Stevia extract 10 parts by weight
[0124]
[Formulation Example 7]
The following mixture was gelatin-encapsulated to produce a tablet-like health / nutritional supplement.
Five coconut leaf extract (Sample 1 of Production Example 1) 50 parts by weight
Lotus germ extract 15 parts by weight
Ceramide 30 parts by weight
Phospholipid (lecithin) 10 parts by weight
17 parts by weight of vitamin E (tocopherol)
10 parts by weight of multi carotene (α and β carotene, lutein, lycopene)
Red rice extract (including cycloartenol ester) 15 parts by weight
Octacosanol 1 part by weight
5 parts by weight of plant sterol
Perilla seed oil (including α-linolenic acid) 20 parts by weight
Refined fish oil (including DHA and EPA) 20 parts by weight
Sesame oil (including lignan compound) 20 parts by weight
10 parts by weight of olive oil
Soybean / rapeseed oil 65 parts by weight
Glycerin fatty acid ester 12 parts by weight
[0125]
[Formulation Example 8]
The following mixture was mixed according to a conventional method to produce a soft drink.
Five coconut leaf extract (Sample 1 of Production Example 1) 1 part by weight
Lotus extract 1 part by weight
Royal Jelly 3 parts by weight
8 parts by weight of water-soluble collagen
1 part by weight of pearl barley extract
Carrot extract 1 part by weight
Placenta (placenta) extract 1 part by weight
Pueraria extract 1 part by weight
Purple Yam Extract 1 part by weight
5 parts by weight of oligosaccharide
10 parts by weight of sucrose
2 parts by weight of prune juice
Pomegranate juice 5 parts by weight
Grapefruit juice 10 parts by weight
1 part by weight of vitamin C
Grapefruit flavor 0.7 parts by weight
Remaining water (total amount is 100 parts by weight)
[0126]
[Formulation Example 9]
The following mixture was mixed according to a conventional method to produce a candy.
Five coconut leaf extract (Sample 2 of Production Example 1) 2 parts by weight
Lotus extract 1 part by weight
30 parts by weight of water candy
Licorice extract 3 parts by weight
1 part by weight of green tea extract
1 part by weight of blueberry extract
Strawberry 1/5 concentrated fruit juice 1 part by weight
Red cabbage pigment 0.05 parts by weight
Lemon juice 0.5 parts by weight
5 parts by weight of water
[0127]
【The invention's effect】
According to the present invention, a collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor, and estrogen-like agent are provided. The collagen production promoter, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation agent, elastase inhibitor and estrogen-like agent of the present invention are useful for preventing and / or improving skin aging.
In addition, according to the present invention, there is provided a skin cosmetic to which a collagen production promoting action, collagenase inhibitory action, fibroblast proliferation action, elastase inhibitory action and estrogen-like action are imparted. The skin cosmetic of the present invention has a collagen production promoting action, collagenase inhibitory action, fibroblast proliferation action, elastase inhibitory action and estrogen-like action, and is excellent in usability and safety when applied to the skin. Therefore, it is useful for preventing and / or improving skin aging.
Furthermore, the present invention provides a cosmetic food and drink provided with collagen production promoting action, collagenase inhibitor, fibroblast proliferation action, elastase inhibition action and estrogen-like action. The cosmetic food and drink of the present invention is useful for preventing and / or improving skin aging.
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