JP5080973B2 - Ｒｎａ依存性ｒｎａウイルスの感染を処置するためのヌクレオシドアリールホスホルアミダート - Google Patents

Description

本発明は、ヌクレオシドアリールホスホルアミダート、この合成、および、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体としてのこの使用に関する。本発明の化合物は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製の阻害剤に対する前駆体であり、従って、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するために有用である。本発明の化合物は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）のＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として、また、ＨＣＶの複製の阻害剤に対する前駆体として、また、Ｃ型肝炎の感染を処置するために特に有用である。

Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）の感染は、世界人口の２％から１５％であると推定されるが、相当数の感染者において慢性的な肝臓疾患（例えば、肝硬変および肝細胞ガンなど）を引き起こす大きな健康上の問題である。米国疾病対策センターによれば、合衆国だけで４５０万人の感染者が推定される。世界保険機構によれば、２億人を越える感染者が世界中には存在し、少なくとも３００万人から４００万人が毎年感染している。ひとたび感染すると、約２０％の人々はウイルスを消失させるが、残りの人々はこの後の彼らの生涯にわたってＨＣＶを保有する。１０パーセントから２０パーセントの慢性的感染者は最終的には、肝臓を破壊する肝硬変またはガンを発症する。このウイルス疾患は、汚染された血液および血液製剤、汚染された注射針によって非経口的に伝染するか、または、感染した母親または保因者の母親からこの子孫に性的および垂直的に伝染する。ＨＣＶ感染に対する現在の処置は、組換えインターフェロン−αを単独で用いるか、または、ヌクレオシドアナログのリバビリンとの組合せで用いる免疫療法に限られるので、臨床的利益が限定されている。さらに、ＨＣＶのためのワクチンは１つも確立されていない。従って、慢性的なＨＣＶ感染と効果的に闘う改善された治療剤が緊急に求められている。ＨＣＶ感染の処置における最新技術が総説されており、下記の刊行物が参照される：Ｂ．Ｄｙｍｏｃｋら、「Ｃ型肝炎ウイルス感染の処置に対する新規な方法」、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、１１：７９−９６（２０００）；Ｈ．Ｒｏｓｅｎら、「Ｃ型肝炎ウイルス：現在の理解および将来の治療法についての見通し」、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｔｏｄａｙ、５：３９３−３９９（１９９９）；Ｄ．Ｍｏｒａｄｐｏｕｒら、「Ｃ型肝炎についての現在の治療法および進化する治療法」、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．Ｈｅｐａｔｏｌ．、１１：１１８９−１２０２（１９９９）；Ｒ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ、「Ｃ型肝炎ウイルス特異的な抗ウイルス治療のための候補となる標的」、Ｉｎｔｅｒｖｉｒｏｌｏｇｙ、４０：３７８−３９３（１９９７）；Ｇ．Ｍ．ＬａｕｅｒおよびＢ．Ｄ．Ｗａｌｋｅｒ、「Ｃ型肝炎ウイルス感染」、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３４５：４１−５２（２００１）；Ｂ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋら、「Ｃ型肝炎ウイルス感染のための新しい治療法」、Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ、６：１３−４２（２００１）；Ｃ．Ｃｒａｂｂら、「苦労して得た進歩はＣ型肝炎についての興奮を呼び起こす」、Ｓｃｉｅｎｃｅ：５０６−５０７（２００１）；これらすべての内容はこの全体が参照により本明細書中に組み込まれる。

ＨＣＶ治療に対する種々の取り組みが取られており、これらには、ウイルスのセリンプロテイナーゼ（ＮＳ３プロテアーゼ）、ヘリカーゼおよびＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＮＳ５Ｂ）の阻害剤、ならびに、ワクチンの開発が含まれる。

ＨＣＶビリオンは、約３，０１０アミノ酸のポリタンパク質をコードする約９６００塩基の１つだけのオリゴリボヌクレオチドゲノム配列を有する、エンベロープで包まれたプラス鎖ＲＮＡウイルスである。ＨＣＶ遺伝子のタンパク質産物は構造タンパク質（Ｃ、Ｅ１およびＥ２）および非構造タンパク質（ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４ＡおよびＮＳ４Ｂ、ならびに、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂ）からなる。非構造（ＮＳ）タンパク質は、ウイルス複製のための触媒装置を提供すると考えられている。ＮＳ３プロテアーゼはＮＳ５Ｂ（ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ）をポリタンパク質鎖から放出させる。ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼは、ＨＣＶの複製サイクルにおけるテンプレートとして役立つ一本鎖ウイルスＲＮＡからの二本鎖ＲＮＡの合成のために要求される。従って、ＮＳ５Ｂポリメラーゼは、ＨＣＶ複製複合体における必須成分であると見なされている［Ｋ．Ｉｓｈｉら、「Ｃ型肝炎ウイルスのＮＳ５Ｂタンパク質の発現：このＲＮＡポリメラーゼ活性およびＲＮＡ結合の特徴づけ」、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２９：１２２７−１２３５（１９９９）；Ｖ．Ｌｏｈｍａｎｎら、「Ｃ型肝炎ウイルスのＮＳ５Ｂ ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼの生化学的分析および速度論的分析」、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、２４９：１０８−１１８（１９９８）を参照のこと］。ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害は二重鎖のＨＣＶ ＲＮＡの形成を妨げ、従って、ＨＣＶ特異的な抗ウイルス治療法の開発に対する注目される取り組みとなっている。

ＨＣＶ感染の処置についての可能性を有する、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤の開発が、Ｍ．Ｐ．Ｗａｌｋｅｒら、「慢性Ｃ型肝炎の処置のための有望な候補」、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ、１２：１２６９−１２８０（２００３）に、また、Ｐ．Ｈｏｆｆｍａｎｎら、「Ｃ型肝炎ウイルス感染についての実験的治療に関する最近の特許（１９９９−２００２）」、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ、１３：１７０７−１７２３（２００３）に総説されている。ＨＣＶポリメラーゼに対するプリンリボヌクレオシドの活性が、Ａ．Ｅ．Ｅｌｄｒｕｐら、「ＨＣＶのＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼの阻害についてのプリンリボヌクレオシドの構造−活性関係」、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、４７：２２８３−２２９５（２００４）によって報告された。ＨＣＶポリメラーゼの阻害剤としての構造的に多様なヌクレオシド誘導体がＨＣＶ治療のための治療的取り組みとして引き続き求められている。

今回、本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートが、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製（具体的には、ＨＣＶの複製）の強力な阻害剤に対する前駆体であることが見出されている。本発明のホスホルアミダートは、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼ（具体的には、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼ）の阻害剤である対応するヌクレオシド５’−トリホスファート誘導体に変換されるこのヌクレオシド５’−ホスファート（ヌクレオチド）誘導体にインビボで変換される。本発明のヌクレオシドスホルアミダートは、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染（具体的には、ＨＣＶ感染）を処置するために有用である。

従って、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として、具体的には、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として有用であるヌクレオシドアリールホスホルアミダートを提供することが本発明の目的の１つである。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製の阻害剤に対する前駆体として、具体的には、Ｃ型肝炎ウイルスの複製の阻害剤に対する前駆体として有用であるヌクレオシドアリールホスホルアミダートを提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染の処置において、具体的には、ＨＣＶ感染の処置において有用であるヌクレオシドアリールホスホルアミダートを提供することが本発明の別の目的である。

本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートを医薬的に許容されるキャリアと一緒に含む医薬組成物を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として、具体的には、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として使用される、本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートを含む医薬組成物を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製の阻害剤に対する前駆体として、具体的には、ＨＣＶの複製の阻害剤に対する前駆体として使用される、本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートを含む医薬組成物を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染の処置において、具体的には、ＨＣＶ感染の処置において使用される、本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートを含む医薬組成物を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対して、具体的には、ＨＣＶに対して活性な他の薬剤との組合せで本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートを含む医薬組成物を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼを阻害するための方法、具体的には、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼを阻害するための方法を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製を阻害するための方法、具体的には、ＨＣＶの複製を阻害するための方法を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するための方法、具体的には、ＨＣＶ感染を処置するための方法を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対して活性な他の薬剤との組合せでＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するための方法、具体的には、ＨＣＶに対して活性な他の薬剤との組合せでＨＣＶ感染を処置するための方法を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製の阻害、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染の処置のための医薬品として、具体的には、ＨＣＶの複製の阻害および／またはＨＣＶ感染の処置のための医薬品として使用されるヌクレオシドアリールホスホルアミダートおよびこの医薬組成物を提供することが本発明の別の目的である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製の阻害、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染の処置のための医薬品、具体的には、ＨＣＶの複製の阻害および／またはＨＣＶ感染の処置のための医薬品を製造するための、本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートおよびこの医薬組成物の使用を提供することが本発明の別の目的である。

これらの目的および他の目的が下記の詳細な記載から容易に明らかになる。

本発明は、示された立体化学的立体配置の下記の構造式Ｉの化合物またはこの医薬的に許容される塩に関連する：

式中、
ＹはＣＲ^９またはＮであり；
Ａｒは非置換フェニルであるか、または、ハロゲン、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−４アルキル）アミノ、Ｃ_１−４アルキルカルボニル、Ｃ_１−４アルキルカルボニルオキシおよびＣ_１−４アルキルオキシカルボニルからなる群から独立して選択される１個から３個の置換基により置換されたフェニルであり；
Ｒ^１は、水素、フルオロ、アジド、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ_１−３アルコキシ、メルカプトおよびＣ_１−３アルキルチオからなる群から選択され；
Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれが独立して、水素、メチル、Ｃ_１−１６アルキルカルボニル、Ｃ_２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ_１−１０アルキルオキシカルボニル、Ｃ_３−６シクロアルキルカルボニルおよびＣ_３−６シクロアルキルオキシカルボニルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、水素、ハロゲン、メチル、アジドまたはアミノであり；
Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれが独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシ、アミノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−４アルキル）アミノ、Ｃ_３−６シクロアルキルアミノ、ジ（Ｃ_３−６シクロアルキル）アミノ、ベンジルアミノ、ジベンジルアミノまたはＣ_４−６ヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、この場合、アルキル、シクロアルキル、ベンジルおよびヘテロシクロアルキルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ_１−４アルキルおよびＣ_１−４アルコキシからなる群から独立して選択される１個から５個の基により置換され；
Ｒ^７は、水素、Ｃ_１−５アルキル、フェニルまたはベンジルであり、
この場合、アルキルは非置換であるか、または、ヒドロキシ、メトキシ、アミノ、カルボキシ、カルバモイル、グアニジノ、メルカプト、メチルチオ、１Ｈ−イミダゾリルおよび１Ｈ−インドール−３−イルからなる群から選択される１個の置換基により置換され、フェニルおよびベンジルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシおよびメトキシからなる群から独立して選択される１個から２個の置換基により置換され；
Ｒ^８は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、フェニルまたはベンジルであり、
この場合、アルキルおよびシクロアルキルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、Ｃ_１−４アルコキシからなる群から独立して選択される１個から３個の置換基により置換され、フェニルおよびベンジルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ_１−４アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択される１個から３個の置換基により置換され；
Ｒ^９は、水素、フッ素、シアノ、Ｃ_１−３アルキル、ＮＨＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＲ^１０Ｒ^１０、ＣＳＮＲ^１０Ｒ^１０、ＣＯＯＲ^１０、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、ヒドロキシ、Ｃ_１−３アルコキシ、アミノ、Ｃ_１−４アルキルアミノおよびジ（Ｃ_１−４アルキル）アミノからなる群から選択され；
各Ｒ^１０は独立して、水素またはＣ_１−６アルキルであり；および
Ｒ^１１は水素またはメチルである。

式Ｉの化合物は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼ（具体的には、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼ）の阻害剤に対する前駆体として有用である。式Ｉの化合物はまた、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製（具体的には、ＨＣＶの複製）の阻害剤に対する前駆体であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するために、具体的には、ＨＣＶ感染を処置するために有用である。

この作用機構に関して限定されないが、本発明のアリールホスホルアミダートは、対応するヌクレオシド５’−モノホスファートのプロドラッグとして作用する。内因性のキナーゼ酵素により、この５’−モノホスファートは、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼの阻害剤であるこの５’−トリホスファート誘導体に変換される。従って、本発明のアリールホスホルアミダートは、ヌクレオシドこれ自体よりも効率的な標的細胞浸透を提供する場合があり、また、代謝的分解をより受けにくくなる場合があり、また、特定の組織（例えば、肝臓など）を標的化する能力を有する場合があり、これらにより、抗ウイルス剤の全体的な用量を低下させることを可能にするより広い治療指数をもたらす。

また、本発明の化合物を単独で含有するか、または、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対して、具体的には、ＨＣＶに対して活性な他の薬剤との組合せで含有する医薬組成物、ならびに、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製を阻害するための方法、および、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するための方法も本発明に包含される。

本発明は、示された立体化学的立体配置の下記の構造式Ｉの化合物またはこの医薬的に許容される塩に関連する：

式中、
ＹはＣＲ^９またはＮであり；
Ａｒは非置換フェニルであるか、または、ハロゲン、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４アルキルチオ、シアノ、ニトロ、アミノ、カルボキシ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−４アルキル）アミノ、Ｃ_１−４アルキルカルボニル、Ｃ_１−４アルキルカルボニルオキシおよびＣ_１−４アルキルオキシカルボニルからなる群から独立して選択される１個から３個の置換基により置換されたフェニルであり；
Ｒ^１は、水素、フルオロ、アジド、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ_１−３アルコキシ、メルカプトおよびＣ_１−３アルキルチオからなる群から選択され；
Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれが独立して、水素、メチル、Ｃ_１−１６アルキルカルボニル、Ｃ_２−１８アルケニルカルボニル、Ｃ_１−１６アルキルオキシカルボニル、Ｃ_３−６シクロアルキルカルボニルおよびＣ_３−６シクロアルキルオキシカルボニルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、水素、ハロゲン、メチル、アジドまたはアミノであり；
Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれが独立して、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシ、アミノ、Ｃ_１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１−４アルキル）アミノ、Ｃ_３−６シクロアルキルアミノ、ジ（Ｃ_３−６シクロアルキル）アミノ、ベンジルアミノ、ジベンジルアミノまたはＣ_４−６ヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、この場合、アルキル、シクロアルキル、ベンジルおよびヘテロシクロアルキルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ_１−４アルキルおよびＣ_１−４アルコキシからなる群から独立して選択される１個から５個の基により置換され；
Ｒ^７は、水素、Ｃ_１−５アルキル、フェニルまたはベンジルであり、
この場合、アルキルは非置換であるか、または、ヒドロキシ、メトキシ、アミノ、カルボキシ、カルバモイル、グアニジノ、メルカプト、メチルチオ、１Ｈ−イミダゾリルおよび１Ｈ−インドール−３−イルからなる群から選択される１個の置換基により置換され、フェニルおよびベンジルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシおよびメトキシからなる群から独立して選択される１個から２個の置換基により置換され；
Ｒ^８は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、フェニルまたはベンジルであり、
この場合、アルキルおよびシクロアルキルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、Ｃ_１−４アルコキシからなる群から独立して選択される１個から３個の置換基により置換され、フェニルおよびベンジルは非置換であるか、または、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、Ｃ_１−４アルコキシおよびトリフルオロメチルからなる群から独立して選択される１個から３個の置換基により置換され；
Ｒ^９は、水素、フッ素、シアノ、Ｃ_１−３アルキル、ＮＨＣＯＮＨ_２、ＣＯＮＲ^１０Ｒ^１０、ＣＳＮＲ^１０Ｒ^１０、ＣＯＯＲ^１０、Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、ヒドロキシ、Ｃ_１−３アルコキシ、アミノ、Ｃ_１−４アルキルアミノおよびジ（Ｃ_１−４アルキル）アミノからなる群から選択され；
各Ｒ^１０は独立して、水素またはＣ_１−６アルキルであり；および
Ｒ^１１は水素またはメチルである。

式Ｉの化合物は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として有用である。式Ｉの化合物はまた、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製の阻害剤に対する前駆体であり、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するために有用である。

本発明の化合物の１つの実施態様において、ＹがＮであり、Ｒ^１が水素またはフルオロであり、Ｒ^２およびＲ^３が水素である。この実施態様の１つのクラスにおいて、Ｒ^４が水素である。

本発明の化合物の第２の実施態様において、ＹがＣＲ^９であり、Ｒ^１が水素またはフルオロであり、Ｒ^２およびＲ^３が水素である。この実施態様の１つのクラスにおいて、Ｒ^９が水素またはフルオロである。このクラスの１つのサブクラスにおいて、Ｒ^４が水素である。

本発明の化合物の第３の実施態様において、Ａｒが非置換フェニルである。

本発明の化合物の第４の実施態様において、Ｒ^１１が水素であり、Ｒ^７が、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、イソブチル、２−メチル−１−プロピル、ヒドロキシメチル、メルカプトメチル、カルボキシメチル、カルバモイルメチル、１−ヒドロキシエチル、２−カルボキシエチル、２−カルバモイルエチル、２−メチルチオエチル、４−アミノ−１−ブチル、３−アミノ−１−プロピル、３−グアニジノ−１−プロピル、１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル、フェニル、４−ヒドロキシベンジルおよび１Ｈ−インドール−３−イルメチルからなる群から選択される。この実施態様の１つのクラスにおいて、Ｒ^７がメチルまたはベンジルである。

本発明の化合物の第５の実施態様において、Ｒ^８が、Ｃ_１−６アルキル、シクロヘキシル、フェニルまたはベンジルである。この実施態様の１つのクラスにおいて、Ｒ^８がメチルである。

本発明の化合物の第６の実施態様において、Ａｒが非置換フェニルであり、Ｒ^７がメチルまたはベンジルであり、Ｒ^８がメチルであり、Ｒ^１１が水素である。

ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として有用である構造式Ｉの本発明の化合物の例示的ではあるが、非限定的な例には、下記の化合物がある：

またはこの医薬的に許容される塩。

本発明の１つの実施態様において、本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートは、プラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼの阻害剤に対する前駆体として、プラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製の阻害剤に対する前駆体として、および／または、プラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するために有用である。この実施態様の１つのクラスにおいて、プラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスはフラビウイルス科のウイルスおよびピコルナウイルス科のウイルスである。このクラスの１つのサブクラスにおいて、ピコルナウイルス科のウイルスは、ライノウイルス、ポリオウイルスまたはＡ型肝炎ウイルスである。このクラスの第２のサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスは、Ｃ型肝炎ウイルス、黄熱ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、日本脳炎ウイルス、バンジウイルスおよびウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）からなる群から選択される。このサブクラスの１つのサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスはＣ型肝炎ウイルスである。

本発明の別の態様は、この必要性のある哺乳動物において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼを阻害するための方法、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製を阻害するための方法、および／または、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染を処置するための方法に関連し、この場合、これらの方法は、治療効果的な量の構造式Ｉの化合物をこのような哺乳動物に投与することを含む。

本発明のこの態様の１つの実施態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼはプラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼである。この実施態様の１つのクラスにおいて、プラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼはフラビウイルス科のウイルスのポリメラーゼまたはピコルナウイルス科のウイルスのポリメラーゼである。このクラスの１つのサブクラスにおいて、ピコルナウイルス科のウイルスのポリメラーゼは、ライノウイルスのポリメラーゼ、ポリオウイルスのポリメラーゼまたはＡ型肝炎ウイルスのポリメラーゼである。このクラスの第２のサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスのポリメラーゼは、Ｃ型肝炎ウイルスのポリメラーゼ、黄熱ウイルスのポリメラーゼ、デングウイルスのポリメラーゼ、ウエストナイルウイルスのポリメラーゼ、日本脳炎ウイルスのポリメラーゼ、バンジウイルスのポリメラーゼおよびウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）のポリメラーゼからなる群から選択される。このサブクラスの１つのサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスのポリメラーゼはＣ型肝炎ウイルスのポリメラーゼである。

本発明のこの態様の第２の実施態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製はプラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製である。この実施態様の１つのクラスにおいて、プラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製はフラビウイルス科のウイルスの複製またはピコルナウイルス科のウイルスの複製である。このクラスの１つのサブクラスにおいて、ピコルナウイルス科のウイルスの複製は、ライノウイルスの複製、ポリオウイルスの複製またはＡ型肝炎ウイルスの複製である。このクラスの第２のサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスの複製は、Ｃ型肝炎ウイルスの複製、黄熱ウイルスの複製、デングウイルスの複製、ウエストナイルウイルスの複製、日本脳炎ウイルスの複製、バンジウイルスの複製およびウシウイルス性下痢ウイルスの複製からなる群から選択される。このサブクラスの１つのサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスの複製はＣ型肝炎ウイルスの複製である。

本発明のこの態様の第３の実施態様において、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染はプラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染である。この実施態様の１つのクラスにおいて、プラスセンスの一本鎖ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染はフラビウイルス科のウイルスの感染またはピコルナウイルス科のウイルスの感染である。このクラスの１つのサブクラスにおいて、ピコルナウイルス科のウイルスの感染は、ライノウイルスの感染、ポリオウイルスの感染またはＡ型肝炎ウイルスの感染である。このクラスの第２のサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスの感染は、Ｃ型肝炎ウイルスの感染、黄熱ウイルスの感染、デングウイルスの感染、ウエストナイルウイルスの感染、日本脳炎ウイルスの感染、バンジウイルスの感染およびウシウイルス性下痢ウイルスの感染からなる群から選択される。このサブクラスの１つのサブクラスにおいて、フラビウイルス科のウイルスの感染はＣ型肝炎ウイルスの感染である。

本出願明細書全体を通して、下記の用語は、示された意味を有する：
上記で指定されたアルキル基は、直鎖形態または分枝形態のいずれかである示された長さのこのようなアルキル基を包含することが意図される。このようなアルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、第三級ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルおよびイソヘキシルなどがある。

用語「アルケニル」は、２個から６個の総炭素原子、すなわち、この範囲内の任意の数の総炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルケン（例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニルなど）を意味するものとする。

用語「アルキニル」は、２個から６個の総炭素原子、すなわち、この範囲内の任意の数の総炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキン（例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニルなど）を意味するものとする。

用語「シクロアルキル」は、３個から８個の総炭素原子、すなわち、この範囲内の任意の数の総炭素原子を有する環状環のアルキル（すなわち、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチル）を意味するものとする。

用語「シクロヘテロアルキル」は、窒素、酸素およびイオウから選択される１個または２個のヘテロ原子を含有する非芳香族の複素環を包含することが意図される。４員から６員のシクロヘテロアルキルの例には、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、チアモルホリニル、イミダゾリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオフェニルおよびピペラジニルなどが含まれる。

用語「アルコキシ」は、指定された数の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルコキシド（例えば、Ｃ_１−４アルコキシ）、すなわち、この範囲内の任意の数の炭素原子のアルコキシド［すなわち、メトキシ（ＭｅＯ−）、エトキシ、イソプロポキシなど］を示す。

用語「アルキルチオ」は、指定された数の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキルスルフィド（例えば、Ｃ_１−４アルキルチオ）、すなわち、この範囲内の任意の数の炭素原子のアルキルスルフィド［すなわち、メチルチオ（ＭｅＳ−）、エチルチオ、イソプロピルチオなど］を示す。

用語「アルキルアミノ」は、指定された数の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキルアミン（例えば、Ｃ_１−４アルキルアミノ）、すなわち、この範囲内の任意の数の炭素原子のアルキルアミン［すなわち、メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔ−ブチルアミノなど］を示す。

用語「アルキルスルホニル」は、指定された数の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキルスルホン（例えば、Ｃ_１−６アルキルスルホニル）、すなわち、この範囲内の任意の数の炭素原子のアルキルスルホン［すなわち、メチルスルホニル（ＭｅＳＯ_２−）、エチルスルホニル、イソプロピルスルホニルなど］を示す。

用語「アルキルオキシカルボニル」は、指定された数の炭素原子を有する、本発明のカルボン酸誘導体の直鎖または分枝鎖のエステル（例えば、Ｃ_１−４アルキルオキシカルボニル）、すなわち、この範囲内の任意の数の炭素原子のこのようなエステル［すなわち、メチルオキシカルボニル（ＭｅＯＣＯ−）、エチルオキシカルボニルまたはブチルオキシカルボニル］を示す。

用語「ハロゲン」は、ハロゲン原子のフッ素、塩素、臭素およびヨウ素を包含することが意図される。

用語「ホスホリル」は−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２を示す。

用語「ジホスホリル」は、下記の構造を有する基を示す：

用語「トリホスホリル」は、下記の構造を有する基を示す：

用語「置換された（される）」は、示された置換基による様々な多重度の置換を包含すると見なされるものとする。多数の置換基成分が開示または特許請求される場合、置換された化合物は、開示または特許請求された置換基部分の１つまたは複数によって１回または複数回、独立して置換され得る。

用語「５’−トリホスファート」は、下記の一般構造式ＩＩを有する本発明のヌクレオシド化合物の５’−ヒドロキシル基の三リン酸エステル誘導体を示す：

（式中、ＹおよびＲ^１からＲ^６は上記で定義される通りである）。

用語「組成物」は、「医薬組成物」でのように、有効成分と、キャリアを構成する不活性な成分とを含む製造物、ならびに、この成分のいずれか２つ以上の組合せ、複合体化または集成から、または、この成分の１つまたは複数を分離することから、または、この成分の１つまたは複数の他のタイプの反応または相互作用から、直接的または間接的に生じる任意の製造物を包含することが意図される。従って、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物と、医薬的に許容されるキャリアとを混合することによって作製される任意の組成物を包含する。

化合物「の投与」および化合物「を投与する」の用語は、本発明の化合物または本発明の化合物のプロドラッグを必要性のある個体に与えることを意味することを理解しなければならない。

本発明の別の態様は、本発明の化合物を、ＨＣＶ感染を処置するために有用な１つまたは複数の薬剤との組合せで用いて、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼを阻害する方法、ＨＣＶの複製を阻害する方法、または、ＨＣＶ感染を処置する方法に関する。ＨＣＶに対して活性なこのような薬剤には、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、チモシンα−１、インターフェロン−β、インターフェロン−α、ペグ化インターフェロン−α（ペグインターフェロン−α）、インターフェロン−αおよびリバビリンの組合せ、ペグインターフェロン−αおよびリバビリンの組合せ、インターフェロン−αおよびレボビリンの組合せ、ならびに、ペグインターフェロン−αおよびレボビリンの組合せが含まれるが、これらに限定されない。インターフェロン−αには、組換えインターフェロン−α２ａ（例えば、Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ（Ｎｕｔｌｅｙ、ＮＪ）から入手可能なＲｏｆｅｒｏｎインターフェロンなど）、ペグ化インターフェロン−α２ａ（Ｐｅｇａｓｙｓ（商標））、インターフェロン−α２ｂ（例えば、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐ．（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ、ＮＪ）から入手可能なＩｎｔｒｏｎ−Ａインターフェロンなど）、ペグ化インターフェロン−α２ｂ（ＰｅｇＩｎｔｒｏｎ（商標））、組換えコンセンサスインターフェロン（例えば、インターフェロンアルファコン−１など）、および、精製インターフェロン−α製剤が含まれるが、これらに限定されない。Ａｍｇｅｎの組換えコンセンサスインターフェロンはＩｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）の商品名を有する。レボビリンは、リバビリンと類似する免疫調節活性を示しているリバビリンのＬ−エナンチオマーである。ビラミジンは、国際特許出願公開ＷＯ０１／６０３７９（ＩＣＮ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓに譲渡）に開示されるリバビリンのアナログを表す。本発明のこの方法によれば、組合せの個々の構成成分は治療経過の期間中の異なる時間で別々に投与することができ、または、分割または１回の組合せ形態で同時に投与することができる。従って、本発明は、同時処置または交互処置のこのような様式のすべてを包含するとして理解しなければならず、用語「投与する」はそれに応じて解釈されなければならない。ＨＣＶ感染を処置するために有用な他の薬剤との本発明の化合物の組合せの範囲は、原理的には、ＨＣＶ感染を処置するための任意の医薬組成物との任意の組合せを包含することが理解される。本発明の化合物またはこの医薬的に許容される塩が、ＨＣＶに対して活性な第２の治療剤との組合せで使用されるとき、それぞれの化合物の用量は、化合物が単独で使用されるときの用量と同じであり得るか、または、化合物が単独で使用されるときの用量と異なり得るかのいずれかである。

ＨＣＶ感染の処置のために、本発明の化合物はまた、ＨＣＶのＮＳ３セリンプロテアーゼの阻害剤である薬剤との組合せで投与することができる。ＨＣＶのＮＳ３セリンプロテアーゼは必須のウイルス酵素であり、ＨＣＶの複製を阻害するための優れた標的であることが記載されている。ＨＣＶのＮＳ３プロテアーゼ阻害剤の基質型および非基質型の両方の阻害剤が、国際特許出願公開ＷＯ９８／２２４９６、同ＷＯ９８／４６６３０、同ＷＯ９９／０７７３３、同ＷＯ９９／０７７３４、同ＷＯ９９／３８８８８、同ＷＯ９９／５０２３０、同ＷＯ９９／６４４４２、同ＷＯ００／０９５４３、同ＷＯ００／５９９２９、ＧＢ−２３３７２６２、国際特許出願公開ＷＯ０２／４８１１６、同ＷＯ０２／４８１７２、および米国特許第６，３２３，１８０号に開示される。ＨＣＶの複製の阻害剤を開発するための、また、ＨＣＶ感染を処置するための標的としてのＨＣＶのＮＳ３プロテアーゼが、Ｂ．Ｗ．Ｄｙｍｏｃｋら、「Ｃ型肝炎ウイルス感染のための新しい治療法」、Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｄｒｕｇｓ、６：１３−４２（２００１）において議論される。

リバビリン、レボビリンおよびビラミジンは、細胞内酵素のイノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）の阻害によってグアニンヌクレオチドの細胞内プールを調節することによってこの抗ＨＣＶ効果を発揮し得る。ＩＭＰＤＨは、デノボでのグアニンヌクレオチド生合成における生合成経路での律速酵素である。リバビリンは細胞内で容易にリン酸化され、このモノホスファート誘導体がＩＭＰＤＨの阻害剤である。このように、ＩＭＰＤＨの阻害は、ＨＣＶの複製の阻害剤を発見するための別の有用な標的を表す。従って、本発明の化合物はまた、ＩＭＰＤＨの阻害剤（例えば、国際特許出願公開ＷＯ９７／４１２１１および同ＷＯ０１／００６２２（Ｖｅｒｔｅｘに譲渡）に開示されるＶＸ−４９７など）との組合せで、または、別のＩＭＰＤＨ阻害剤（例えば、国際特許出願公開ＷＯ００／２５７８０（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂに譲渡）に開示されるＩＭＰＤＨ阻害剤など）との組合せで、または、ミコフェノラートのモフェチル［Ａ．Ｃ．ＡｌｌｉｓｏｎおよびＥ．Ｍ．Ｅｕｇｕｉ、Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎ、４４（Ｓｕｐｐｌ．）：１６５（１９９３）を参照のこと］との組合せで投与することができる。

ＨＣＶ感染の処置のために、本発明の化合物はまた、抗ウイルス剤のアマンタジン（１−アミノアダマンタン）との組合せで投与することができる［この薬剤の包括的な記載については、Ｊ．Ｋｉｒｓｃｈｂａｕｍ、Ａｎａｌ．Ｐｒｏｆｉｌｅｓ Ｄｒｕｇ Ｓｕｂｓ．、１２：１−３６（１９８３）を参照のこと］。

本発明の化合物はまた、ＨＣＶ感染の処置のために、Ｒ．Ｅ．Ｈａｒｒｙ−Ｏ’ｋｕｒｕら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、６２：１７５４−１７５９（１９９７）；Ｍ．Ｓ．Ｗｏｌｆｅら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．、３６：７６１１−７６１４（１９９５）；米国特許第３，４８０，６１３号（１９６９年１１月２５日）；国際特許出願公開ＷＯ０１／９０１２１（２００１年１１月２９日）；国際特許出願公開ＷＯ０１／９２２８２（２００１年１２月６日）；および国際特許出願公開ＷＯ０２／３２９２０（２００２年４月２５日）；および国際特許出願公開ＷＯ０４／００２９９９（２００４年１月８日）；および国際特許出願公開ＷＯ０４／００３０００（２００４年１月８日）；および国際特許出願公開ＷＯ０４／００２４２２（２００４年１月８日）に開示される様々な抗ウイルス性の２’−Ｃ−分岐型リボヌクレオシドと組み合わせることができる（これらのそれぞれの内容はこの全体が参照により組み込まれる）。このような２’−Ｃ−分岐型リボヌクレオシドには、２’−Ｃ−メチルシチジン、２’−Ｃ−メチルウリジン、２’−Ｃ−メチルアデノシン、２’−Ｃ−メチルグアノシンおよび９−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−２，６−ジアミノプリン、ならびに、リボースのＣ−２’ヒドロキシル、Ｃ−３’ヒドロキシルおよびＣ−５’ヒドロキシルの対応するアミノ酸エステル、ならびに、５’−ホスファート誘導体の対応する場合により置換された環状１，３−プロパンジオールエステルが含まれるが、これらに限定されない。

本発明の化合物はまた、ＨＣＶ感染の処置のために、抗ＨＣＶ性質を有する他のヌクレオシドと組み合わせることができ、例えば、国際特許出願公開ＷＯ０２／５１４２５（２００２年７月４日）（Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ Ｐｈａｒｍａ Ｃｏｒｐ．に譲渡）；国際特許出願公開ＷＯ０１／７９２４６、同ＷＯ０２／３２９２０および同ＷＯ０２／４８１６５（２００２年６月２０日）（Ｐｈａｒｍａｓｓｅｔ，Ｌｔｄ．に譲渡）；国際特許出願公開ＷＯ０１／６８６６３（２００１年９月２０日）（ＩＣＮ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓに譲渡）；国際特許出願公開ＷＯ９９／４３６９１（１９９９年９月２日）；国際特許出願公開ＷＯ０２／１８４０４（２００２年３月７日）（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅに譲渡）；米国特許公開第２００２／００１９３６３号（２００２年２月１４日）；国際特許出願公開ＷＯ０２／１００４１５（２００２年１２月１９日）；国際特許出願公開ＷＯ０３／０２６５８９（２００３年４月３日）；国際特許出願公開ＷＯ０３／０２６６７５（２００３年４月３日）；国際特許出願公開ＷＯ０３／０９３２９０（２００３年１１月１３日）：米国特許公開第２００３／０２３６２１６号（２００３年１２月２５日）；米国特許公開第２００４／０００６００７号（２００４年１月８日）；国際特許出願公開ＷＯ０４／０１１４７８（２００４年２月５日）；国際特許出願公開ＷＯ０４／０１３３００（２００４年２月１２日）；米国特許公開第２００４／００６３６５８号（２００４年４月１日）；および国際特許出願公開ＷＯ０４／０２８４８１（２００４年４月８日）に開示されるヌクレオシドなどと組み合わせることができる。

本発明の化合物はまた、ＨＣＶの処置のために、ＨＣＶポリメラーゼの非ヌクレオシド阻害剤と組み合わせることができ、例えば、国際特許出願公開ＷＯ０１／７７０９１（２００１年１０月１８日）（Ｔｕｌａｒｉｋ，Ｉｎｃ．に譲渡）；国際特許出願公開ＷＯ０１／４７８８３（２００１年７月５日）（日本たばこ産業に譲渡）；国際特許出願公開ＷＯ０２／０４４２５（２００２年１月１７日）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍに譲渡）；国際特許出願公開ＷＯ０２／０６２４６（２００２年１月２４日）（Ｉｓｔｉｔｕｔｏ ｄｉ Ｒｉｃｅｒｃｈｅ ｄｉ Ｂｉｏｌｏｇｉａ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐ．Ａｎｇｅｌｅｔｔｉ Ｓ．Ｐ．Ａ．に譲渡）；および国際特許出願公開ＷＯ０２／２０４９７（２００２年３月３日）に開示される非ヌクレオシド阻害剤などと組み合わせることができる。

「医薬的に許容される」によって、キャリア、希釈剤または賦形剤が配合物のそれ以外の成分との適合性を有しなければならず、および、この被投与者に対して有害であってはならないことが意味される。

本発明にはまた、本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートを医薬的に許容されるキャリアと一緒に含む医薬組成物が含まれる。本発明の別の一例が、上記で記載された化合物のいずれかと、医薬的に許容されるキャリアとを組み合わせることによって作製される医薬組成物である。本発明の別の例示が、上記で記載された化合物のいずれかと、医薬的に許容されるキャリアとを組み合わせることを含む、医薬組成物を作製するための方法である。

本発明にはまた、効果的な量の本発明の化合物と、医薬的に許容されるキャリアとを含む、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼ（具体的には、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼ）を阻害するために有用な医薬組成物が含まれる。ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染（具体的には、ＨＣＶ感染）を処置するために有用な医薬組成物もまた、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスのポリメラーゼ（具体的には、ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼ）を阻害する方法、および、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製（具体的には、ＨＣＶの複製）を処置する方法と同様に、本発明によって包含される。加えて、本発明は、治療効果的な量の本発明の化合物を、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対して活性な別の薬剤、具体的には、ＨＣＶに対して活性な別の薬剤の治療効果的な量との組合せで含む医薬組成物に関する。ＨＣＶに対して活性な薬剤には、リバビリン、レボビリン、ビラミジン、チモシンα−１、ＨＣＶのＮＳ３セリンプロテアーゼの阻害剤、インターフェロン−α、ペグ化インターフェロン−α（ペグインターフェロン−α）、インターフェロン−αおよびリバビリンの組合せ、ペグインターフェロン−αおよびリバビリンの組合せ、インターフェロン−αおよびレボビリンの組合せ、ならびに、ペグインターフェロン−αおよびレボビリンの組合せが含まれるが、これらに限定されない。インターフェロン−αには、組換えインターフェロン−α２ａ（例えば、Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ（Ｎｕｔｌｅｙ、ＮＪ）から入手可能なＲｏｆｅｒｏｎインターフェロンなど）、インターフェロン−α２ｂ（例えば、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐ．（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ、ＮＪ）から入手可能なＩｎｔｒｏｎ−Ａインターフェロンなど）、コンセンサスインターフェロン、および、精製インターフェロン−α製剤が含まれるが、これらに限定されない。リバビリンおよびＨＣＶに対するこの活性の議論については、Ｊ．Ｏ．ＳａｕｎｄｅｒｓおよびＳ．Ａ．Ｒａｙｂｕｃｋ、「イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ：構造、速度論および治療的可能性の検討」、Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３５：２０１−２１０（２０００）を参照のこと。

本発明の別の態様は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製（具体的には、ＨＣＶの複製）を阻害するための医薬品、および／または、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染（具体的には、ＨＣＶ感染）を処置するための医薬品を製造するための、ヌクレオシドアリールホスホルアミダートおよびこの医薬組成物の使用を提供する。さらに、本発明のさらなる態様は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの複製（具体的には、ＨＣＶの複製）を阻害するための医薬品、および／または、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスの感染（具体的には、ＨＣＶ感染）を処置するための医薬品として使用するためのヌクレオシドアリールホスホルアミダートおよびこの医薬組成物を提供する。

本発明の医薬組成物は、有効成分としての構造式Ｉの化合物、または、この医薬的に許容される塩を含み、および、医薬的に許容されるキャリアと、場合により、他の治療用成分とを含むことができる。

組成物には、経口投与、直腸投与、局所的投与、非経口的投与（皮下、筋肉内および静脈内を含む）、眼（眼科用）、肺（鼻腔吸入または口内吸入）または鼻腔投与のために好適な組成物が含まれ、だが、任意の所与の場合における最も好適な経路は、処置されている状態の性質および重篤度、ならびに、有効成分の性質に依存する。組成物は、好都合には、単位投薬形態物で提供することができ、製薬分野で周知の方法のいずれかによって調製することができる。

実用的な使用において、構造式Ｉの化合物は、従来の薬学的配合技術に従って、医薬用キャリアと十分に混合されて有効成分として組み合わせることができる。キャリアは、投与（例えば、経口または非経口（静脈内を含む）など）のために所望される調製物の形態に依存して、広範囲の様々な形態を取ることができる。経口用投薬形態物のための組成物を調製する際、通常的な医薬用媒体のいずれかを用いることができる。例えば、水、グリコール、オイル、アルコール、矯味矯臭剤、保存剤および着色剤などを経口用の液体調製物（例えば、懸濁物、エリキシル剤および溶液など）の場合において用いることができ、または、デンプン、糖、微結晶セルロース、希釈剤、造粒剤、滑剤、結合剤、崩壊剤などのキャリアを経口用の固体調製物（例えば、粉末剤、ハードカプセルおよびソフトカプセル、ならびに、錠剤など）の場合において用いることができ、固体の経口用調製物が液体調製物よりも好まれる。

それらの容易な投与のために、錠剤およびカプセルは最も好都合な経口用の投薬形態物であり、このような場合、固体の医薬用キャリアが明らかに用いられる。所望されるならば、錠剤は標準的な水性技術または非水性技術によって被覆することができる。このような組成物および調製物は少なくとも０．１パーセントの活性な化合物を含有することが望ましい。このような組成物における活性な化合物の割合は、当然のことではあるが、変化させることができ、好都合には単位物の重量の約２パーセントから約６０パーセントにすることができる。このような治療的に有用な組成物における活性な化合物の量は、効果的な投薬が得られるようにされる。活性な化合物はまた、例えば、液体滴剤またはスプレー剤として鼻腔内に投与することができる。

錠剤、ピルおよびカプセルなどはまた、結合剤（例えば、トラガカントゴム、アラビアゴム、トウモロコシデンプンまたはゼラチンなど）、賦形剤（例えば、リン酸二カルシウムなど）、崩壊剤（例えば、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸など）、滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウムなど）、および、甘味剤（例えば、スクロース、ラクトースまたはサッカリンなど）を含有することができる。投薬単位形態物がカプセルであるとき、カプセルは、上記タイプの物質に加えて、液体キャリア（例えば、脂肪油など）を含有することができる。

様々な他の物質を、被覆剤として、または、投薬単位物の物理的形態を改変するために存在させることができる。例えば、錠剤をセラックまたは糖または両方で被覆することができる。シロップまたはエリキシル剤は、有効成分に加えて、甘味剤としてのスクロース、保存剤としてのメチルパラベンおよびプロピルパラベン、色素および着香剤（例えば、サクランボ香料またはオレンジ香料など）を含有することができる。

構造式Ｉの化合物はまた、非経口投与によって投与することができる。これらの活性な化合物の溶液または懸濁物を、界面活性剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロースなど）と好適に混合された水において調製することができる。分散物もまた、グリセロール、液状のポリエチレングリコール、および、オイルにおけるこの混合物において調製することができる。通常の貯蔵条件および使用条件のもとでは、これらの調製物は、微生物の成長を防止するための保存剤を含有する。

注射使用のために好適な医薬用形態物には、無菌の注射可能な溶液または分散物をこの場で即座に調製するための無菌の水性の溶液または分散物および無菌の粉末が含まれる。すべての場合において、形態物は無菌でなければならず、および、容易なシリンジ注入性が存在する程度に流動性でなければならない。形態物は製造および貯蔵の条件のもとで安定でなければならず、および、微生物（例えば、細菌および菌類など）の混入作用に対抗して保存されなければならない。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液状ポリエチレングリコール）、この好適な混合物、および、植物油を含有する溶媒または分散媒体であり得る。

任意の好適な投与経路を、哺乳動物（特に、ヒト）に本発明の化合物の効果的な投薬量を与えるために用いることができる。例えば、経口、直腸、局所的、非経口、眼、肺および鼻腔などを用いることができる。投薬形態物には、錠剤、トローチ剤、分散物、懸濁物、溶液、カプセル、クリーム、軟膏およびエアロゾルなどが含まれる。好ましくは、構造式Ｉの化合物は経口投与される。

ヒトへの経口投与については、投薬量範囲は分割服用での０．０１ｍｇ／ｋｇ体重から１０００ｍｇ／ｋｇ体重である。１つの実施態様において、投薬量範囲は分割服用での０．１ｍｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重である。別の実施態様において、投薬量範囲は分割服用での０．５ｍｇ／ｋｇ体重から２０ｍｇ／ｋｇ体重である。経口投与については、組成物は、好ましくは、１．０ミリグラムから１０００ミリグラムの有効成分を含有する錠剤またはカプセルの形態で提供され、具体的には、処置される患者に対する投薬量の症状による調節のために、１ミリグラム、５ミリグラム、１０ミリグラム、１５ミリグラム、２０ミリグラム、２５ミリグラム、５０ミリグラム、７５ミリグラム、１００ミリグラム、１５０ミリグラム、２００ミリグラム、２５０ミリグラム、３００ミリグラム、４００ミリグラム、５００ミリグラム、６００ミリグラム、７５０ミリグラム、８００ミリグラム、９００ミリグラムおよび１０００ミリグラムの有効成分を含有する錠剤またはカプセルの形態で提供される。

用いられる有効成分の効果的な投薬量は、用いられる特定の化合物、投与様式、処置されている状態、および、処置されている状態の重篤度に依存して変化し得る。このような投薬量は当業者によって容易に確認することができる。このような投薬様式は、最適な治療的応答をもたらすために調節することができる。

本発明の化合物は１つまたは複数の不斉中心を含有しており、従って、ラセミ体およびラセミ混合物として、単一のエナンチオマーとして、ジアステレオマー混合物および個々のジアステレオマーとして存在し得る。Ｒ^１１が水素であり、構造式Ｉにおいてリン原子に結合したアミノアシル残基におけるＲ^７が下記の式において水素以外であるとき、

アミノ酸残基は不斉中心を含有し、個々のＲ−立体異性体およびＳ−立体異性体、ならびに、ＲＳ−立体異性体混合物を包含することが意図される。１つの実施態様において、ステレオジェン性（ｓｔｅｒｅｏｇｅｎｉｃ）炭素における立体化学はＳ−アミノ酸の立体化学（すなわち、天然に存在するα−アミノ酸の立体化学）に対応する。

構造式Ｉの化合物における四置換されたリンは別の不斉中心を構成しており、本発明の化合物は、リン原子における両方の立体化学的立体配置を包含することが意図される。

本発明は、下記の構造式において示されるような５員フラノース環についてβ−Ｄの立体化学的立体配置を有するヌクレオシドアリールホスホルアミダート、すなわち、５員フラノース環のＣ−１およびＣ−４における置換基がβ−立体化学的立体配置（太線によって示されるような「上向き」配向）を有するアリールホスホルアミダートを包含することが意味される。

本明細書中に記載される化合物のいくつかはオレフィン性二重結合を含有し、別途指定されない限り、Ｅ型およびＺ型の両方の幾何異性体を包含することが意味される。

本明細書中に記載される化合物のいくつかは互変異性体（例えば、ケト−エノール互変異性体など）として存在する場合がある。個々の互変異性体ならびにこの混合物が構造式Ｉの化合物により包含される。本発明の化合物に包含されることが意図されるケト−エノール互変異性体の例が下記に例示される：

構造式Ｉの化合物は、例えば、好適な溶媒（例えば、メタノールまたは酢酸エチルまたはこの混合物）からの分別結晶化によって、または、光学活性な定常相を使用するキラルなクロマトグラフィーによってこの個々のジアステレオマーに分割することができる。

または、構造式Ｉの化合物の任意の立体異性体を、配置が公知の光学的に純粋な出発物質または試薬を使用して立体特異的な合成によって得ることができる。

本発明の化合物は医薬的に許容される塩の形態で投与することができる。用語「医薬的に許容される塩」は、医薬的に許容される非毒性の塩基または酸（無機塩基または有機塩基および無機酸または有機酸を含む）から調製される塩を示す。用語「医薬的に許容される塩」に包含される塩基性化合物の塩は、遊離塩基を好適な有機酸または無機酸と反応することによって一般に調製される、本発明の化合物の非毒性の塩を示す。本発明の塩基性化合物の代表的な塩には、下記の塩が含まれるが、それらに限定されない：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、カムシラート、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシラート、エストラート、エシラート、フマル酸塩、グルセプタート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、メチルブロミド、メチルニトラート、メチル硫酸塩、粘液酸塩、ナプシラート、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（エムボナート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクラート、トシラート、トリエチオジドおよび吉草酸塩。さらに、本発明の化合物が酸性部分を有する場合、この好適な医薬的に許容される塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、第二マンガン、第一マンガン、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛などを含む無機塩基に由来する塩が含まれるが、これらに限定されない。特に好ましいものは、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩およびナトリウム塩である。医薬的に許容される有機の無毒性塩基に由来する塩には、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂の塩、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン化合物、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミンおよびトロメタミンなどの塩が含まれる。

また、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）またはヒドロキシル基が本発明の化合物に存在する場合、カルボン酸誘導体の医薬的に許容されるプロドラッグエステル（例えば、リボースのＣ−２’ヒドロキシル、Ｃ−３’ヒドロキシルおよびＣ’−５ヒドロキシルのメチルエステル、エチルエステルまたはピバロイルオキシメチルエステルまたはプロドラッグのアシル誘導体など、例えば、Ｏ−アセチル、Ｏ−ピバロイル、Ｏ−ベンジルおよびＯ−アミノアシルなど）を用いることができる。生物利用能、組織分布、溶解性および加水分解の特性を持続放出配合物またはプロドラッグ配合物としての使用のために改変するために当分野で公知のこのようなエステルおよびアシル基が含まれる。意図された誘導体は、要求される化合物にインビボで容易に変換可能である。従って、本発明の処置方法において、用語「投与する」および用語「投与」は、具体的に開示された化合物を用いた、または、具体的に開示され得ないが、哺乳動物（ヒト患者を含む）への投与の後でインビボで、指定された化合物に変換する化合物を用いた、記載されるウイルス感染の処置を包含することが意図される。好適なプロドラッグ誘導体の選択および調製についての通常的な手順が、例えば、「Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」（Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ編、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５）に記載される（これはこの全体が参照により本明細書中に組み込まれる）。

本発明のアリールホスホルアミダートの調製：
リン酸化反応のためのヌクレオシド中間体の調製が国際特許出願公開ＷＯ０２／０５７２８７（２００２年７月２５日）および同ＷＯ０２／５７４２５（２００２年７月２５日）に記載される。リン酸化反応のためのアリールホスホロクロリダートを、米国特許第６，４５５，５１３号に記載される方法に従って調製した（この内容はこの全体が参照により本明細書中に組み込まれる）。本発明のアリールホスホロアミダートを作製するためのリン酸化反応を、米国特許第６，４５５，５１３号およびＣ．ＭｃＧｕｉｇａｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３６：１０４８（１９９３）に記載される方法に従って行った。

下記の実施例は、本発明の化合物を調製するために使用された条件の例示を提供する。これらの実施例は、本発明の範囲に対する限定であることは決して意図されず、また、このように解釈してはならない。ヌクレオシド合成およびヌクレオチド合成の当業者は、下記の調製手順の条件およびプロセスの様々な公知の変化が、本発明のこれらの化合物および他の化合物を調製するために使用され得ることを容易に理解する。温度はすべて、別途記されない限り、摂氏度である。

（実施例１および実施例２）
２’−Ｃ−メチルアデノシン５’−［フェニル メトキシ−（Ｓ）−アラニルホスファート］

２’−Ｃ−メチルアデノシン（５００ｍｇ）、フェニル＝メトキシ−（Ｓ）−アラニルホスホロクロリダート［１．３ｇ、これはＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、３６：１０４８（１９９３）に従って調製された］、Ｎ−メチルイミダゾール（０．８ｍＬ）および１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）の溶液を周囲温度で１８時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液に溶解し、クロロホルムにより３回抽出した。クロロホルム抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して、黄褐色の固体を得た。所望する生成物を、１０％メタノール／塩化メチレンを溶出液として使用するシリカゲルでのクロマトグラフィーによって精製し、この後、凍結乾燥して、リン原子におけるジアステレオマーの混合物として得られた無色の固体を得た。ジアステレオマーを、逆相液体クロマトグラフィー（Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ８、４．６ｘ２５０ｍｍ、１５分間にわたる２０％から５０％のアセトニトリル／０．１％トリフルオロ酢酸水溶液のグラジエント、１．５ｍＬ／分）を使用して分割し、各ジアステレオマーを無色の固体として得た。質量スペクトル：ｍ／ｚ＝５２３（各異性体について）。

（実施例３および実施例４）
２’−Ｃ−メチルグアノシン５’−［フェニル メトキシ−（Ｓ）−アラニルホスファート］

２’−Ｃ−メチルグアノシン（４０ｍｇ）、１，４−ジオキサン（２ｍＬ）、Ｎ−メチルイミダゾール（７０μＬ）およびホスホロクロリダート（７３ｍｇ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。混合物を濃縮して、ジオキサンを除き、飽和重炭酸ナトリウム水溶液とクロロホルムとの間で分配した。所望する生成物は水性画分に残留した。ジアステレオマー混合物の水溶液を逆相液体クロマトグラフィー（Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ８、４．６ｘ２５０ｍｍ、１５分間にわたる２０％から５０％のアセトニトリル／０．１％トリフルオロ酢酸水溶液のグラジエント、１．５ｍＬ／分）に供し、各ジアステレオマーを無色の固体として得た。質量スペクトル：ｍ／ｚ＝５３９（各異性体について）。

（実施例５および実施例６）
４−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン５’−［フェニル メトキシ−（Ｓ）−アラニルホスファート］

実施例５および実施例６を実施例１および実施例２と同じ様式で４−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンから調製し、ジアステレオマー混合物を得て、これを、実施例１および実施例２の場合のような条件を使用する逆相液体クロマトグラフィーによって分割した。質量スペクトル：ｍ／ｚ＝５２２（各異性体について）。
^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：異性体Ａ：δ０．８０（ｓ，３Ｈ），１．３０（ｄ，３Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），および６．３０（ｓ，１Ｈ）；異性体Ｂ：δ０．８４（ｓ，３Ｈ），１．３４（ｄ，３Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），および６．２８（ｓ，１Ｈ）。

（実施例７および実施例８）
２−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン５’−［フェニル メトキシ−（Ｓ）−アラニルホスファート］

実施例７および実施例８を、２−アミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンから、実施例３および実施例４の調製のための手順に従ってジアステレオマーとして調製した。ジアステレオマー混合物を、実施例３および実施例４についての条件を使用する逆相液体クロマトグラフィーによって分割した。質量スペクトル：ｍ／ｚ＝５３８（各異性体について）。
^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：異性体Ａ：δ０．８５（ｓ，３Ｈ），１．３１（ｄ，３Ｈ），３．６７（ｓ，３Ｈ），および６．１０（ｓ，１Ｈ）；異性体Ｂ：δ０．８７（ｓ，３Ｈ），１．３５（ｄ，３Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），および６．０５（ｓ，１Ｈ）。

（実施例９および実施例１０）
２，４−ジアミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン５’−［フェニル メトキシ−（Ｓ）−アラニルホスファート］

実施例９および実施例１０を実施例１および実施例２と同じ様式で２，４−ジアミノ−７−（２−Ｃ−メチル−β−Ｄ−リボフラノシル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンから調製して、ジアステレオマー混合物として得て、これを、実施例１および実施例２の場合のような条件を使用する逆相液体クロマトグラフィーによって分割した。質量スペクトル：（Ｍ＋１）ｍ／ｚ＝５３７（各異性体について）。
^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：異性体Ａ：δ０．８９（ｓ，３Ｈ），１．３２（ｄ，３Ｈ），３．６４（ｓ，３Ｈ），および６．１２（ｓ，１Ｈ）；異性体Ｂ：δ０．９１（ｓ，３Ｈ），１．３５（ｄ，３Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），および６．１０（ｓ，１Ｈ）。

生物学的アッセイ
ＨＣＶのＮＳ５ＢポリメラーゼおよびＨＣＶの複製の阻害を測定するために用いたアッセイを下記に記載する。

ＨＣＶのＮＳ５ＢのＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＲｄＲｐ）の阻害剤としての本発明の化合物の有効性を下記のアッセイで測定した。

Ａ．ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害についてのアッセイ：
このアッセイは、ヘテロマーＲＮＡテンプレートに対するＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）のＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＮＳ５Ｂ）の酵素活性を阻害する本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートの能力を測定するために使用された。

手順：
アッセイ緩衝液条件（５０μＬ総量／反応）
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．５）
５０μＭ ＥＤＴＡ
５ｍＭ ＤＴＴ
２ｍＭ ＭｇＣｌ_２
８０ｍＭ ＫＣｌ
０．４Ｕ／μＬのＲＮＡｓｉｎ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ストック溶液は４０ユニット／μＬである）
０．７５μｇのｔ５００（Ｃ型肝炎ゲノムのＮＳ２／３領域からの配列を用いてＴ７ランオフ転写を使用して作製された５００ｎｔのＲＮＡ）
１．６μｇの精製されたＣ型肝炎ＮＳ５Ｂ（２１アミノ酸がＣ末端から短縮された形態）
１μＭのＡＴＰ／ＣＴＰ／ＵＴＰ／ＧＴＰ（ヌクレオシド三リン酸のミックス）
［α−^３２Ｐ］−ＧＴＰまたは［α−^３３Ｐ］−ＧＴＰ
化合物を１００μＭまでの最終濃度の様々な濃度で調べた。

酵素およびテンプレートのｔ５００を含む適切な体積の反応緩衝液を作製した。本発明のヌクレオシド誘導体を９６ウエルプレートのウエルにピペットで加えた。ヌクレオシド三リン酸（ＮＴＰｓ）の混合物（放射能標識されたＧＴＰを含む）を作製し、９６ウエルプレートのウエルにピペットで加えた。反応を酵素−テンプレート反応液の添加によって開始させ、室温で１時間から２時間進行させた。

反応を２０μＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）の添加によって停止させた。停止溶液が反応緩衝液の添加の前にＮＴＰｓに添加されたブランク反応を含めた。

５０μＬの停止させた反応液をＤＥ８１フィルターディスク（Ｗｈａｔｍａｎ）にスポットし、３０分間乾燥させた。フィルターを０．３Ｍギ酸アンモニウム（ｐＨ８）で洗浄した（１５０ｍＬ／洗浄、１ｍＬの洗浄液におけるｃｐｍが１００未満になるまで、通常の場合には６回）。フィルターを５ｍＬのシンチレーション液においてシンチレーションカウンターで計数した。

阻害率を下記の式に従って計算した：
％阻害＝［１−（試験反応でのｃｐｍ−ブランクでのｃｐｍ）／（コントロール反応でのｃｐｍ−ブランクでのｃｐｍ）］ｘ１００。

ＨＣＶのＮＳ５Ｂポリメラーゼのアッセイで調べられた代表的な化合物は１００マイクロモル濃度未満のＩＣ_５０を示した。

Ｂ．ＨＣＶのＲＮＡ複製の阻害についてのアッセイ：
本発明の化合物はまた、サブゲノムのＨＣＶレプリコンを含有する培養された肝ガン（ＨｕＨ−７）細胞におけるＣ型肝炎ウイルスＲＮＡの複製に影響を及ぼすこの能力についても調べられた。アッセイの詳細を下記に記載する。このレプリコンアッセイは、Ｖ．Ｌｏｈｍａｎｎ、Ｆ．Ｋｏｒｎｅｒ、Ｊ−Ｏ．Ｋｏｃｈ、Ｕ．Ｈｅｒｉａｎ、Ｌ．ＴｈｅｉｌｍａｎｎおよびＲ．Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ、「肝ガン細胞株におけるサブゲノムのＣ型肝炎ウイルスＲＮＡの複製」、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２８５：１１０（１９９９）に記載されるアッセイの改変である。

プロトコル：
このアッセイは、インシトゥーリボヌクレアーゼ保護、シンチレーション近接に基づくプレートアッセイ（ＳＰＡ）である。１０，０００個から４０，０００個の細胞を、９６ウエルのｃｙｔｏｓｔａｒプレート（Ａｍｅｒｓｈａｍ）で、０．８ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含有する１００μＬから２００μＬの培地において置床した。化合物を、０時間から１８時間の時間で、１％ＤＭＳＯにおける１００μＭまでの様々な濃度で細胞に加え、この後、２４時間から９６時間培養した。細胞を固定し（２０分間、１０％ホルマリン）、予備透過処理し（２０分間、０．２５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００／ＰＢＳ）、ＲＮＡウイルスゲノムに含有される（＋）鎖ＮＳ５Ｂ（または他の遺伝子）に対して相補的な一本鎖の^３３Ｐ−ＲＮＡプローブを用いてハイブリダイゼーションした（一晩、５０℃）。細胞を洗浄し、ＲＮＡｓｅで処理し、洗浄し、６５℃に加熱し、Ｔｏｐ−Ｃｏｕｎｔで計数した。複製の阻害をカウント／分（ｃｐｍ）での減少として読み取った。

ヒトＨｕＨ−７肝ガン細胞（これは、サブゲノムのレプリコンを含有するように選択された）は、ＨＣＶの５’非翻訳領域（ＮＴＲ）、ネオマイシン選択マーカー、ＥＭＣＶのＩＲＥＳ（内部リボソーム進入部位）およびＨＣＶの非構造タンパク質（ＮＳ３からＮＳ５Ｂ）、それに続く３’ＮＴＲからなる細胞質ＲＮＡを有する。

この複製アッセイで調べられた代表的な化合物は１００マイクロモル濃度未満のＥＣ_５０を示した。

Ｃ．細胞内代謝についてのアッセイ：
本発明の化合物はまた、ヒト肝ガン細胞株の中に入り、対応するヌクレオシド５’−モノホスファート、ヌクレオシド５’−ジホスファートおよびヌクレオシド５’−トリホスファートに細胞内で変換されるこの能力についても評価された。

２つの細胞株（ＨｕＨ−７およびＨＢＩ１０Ａ）を本発明の化合物の細胞内代謝研究のために使用した。ＨｕＨ−７はヒト肝ガン細胞株であり、ＨＢＩ１０Ａは、ＨＣＶの二シストロン性レプリコンを有するＨｕＨ−７細胞由来のクローン株を示す。ＨｕＨ−７細胞を、細胞が化合物添加時に８０％のコンフルエンスになるように１．５ｘ１０^６細胞／６０ｍｍディッシュで、１０％のウシ胎児血清を含有する完全ダルベッコ改変イーグル培地に置床し、ＨＢＩ１０Ａ細胞を、Ｇ４１８（０．８ｍｇ／ｍＬ）を含有する同じ培地において同じ密度で置床した。トリチウム化された化合物を細胞培地において２μＭで３時間から２３時間インキュベーションした。細胞を集め、リン酸塩緩衝化生理的食塩水により洗浄し、計数した。この後、細胞を７０％メタノール、２０ｍＭ ＥＤＴＡ、２０ｍＭ ＥＧＴＡにおいて抽出し、遠心分離した。ライセートを乾燥し、放射能標識されたヌクレオチドを、インラインβ−ＲＡＭシンチレーション検出器（ＩＮ／ＵＳ Ｓｙｓｔｅｍｓ）に接続されたＷａｔｅｒｓ Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍシステムでのイオンペア逆相（Ｃ−１８）ＨＰＬＣを使用して分析した。ＨＰＬＣ移動相は、（ａ）２ｍＭの水酸化テトラブチルアンモニウムを伴う１０ｍＭのリン酸カリウム、および（ｂ）１０ｍＭのリン酸カリウムを２ｍＭの水酸化テトラブチルアンモニウムとともに含有する５０％のメタノールからなった。ピーク同定を標準物に対する保持時間の比較によって行った。活性が、１０^６個のＨｕＨ−７細胞またはＨＢＩ１０Ａ細胞で検出されたヌクレオチドのピコモル数として表される。

本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートはまた、下記に記載されるカウンタースクリーニングにおいて細胞毒性および抗ウイルス特異性についても評価された。

Ｃ．カウンタースクリーニング：
ヒトのＤＮＡポリメラーゼを阻害する本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートの能力を下記のアッセイで測定した。

ａ．ヒトＤＮＡポリメラーゼαおよびβの阻害：
反応条件：
５０μＬの反応体積
反応緩衝液の構成成分：
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）
２００μｇ／ｍＬ ウシ血清アルブミン
１００ｍＭ ＫＣｌ
２ｍＭ β−メルカプトエタノール
１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２
１．６μＭのｄＡＴＰ／ｄＧＴＰ／ｄＣＴＰ／ｄＴＴＰ
α−^３３Ｐ−ｄＡＴＰ
酵素およびテンプレート：
０．０５ｍｇ／ｍＬのギャップ化処理されたサカナ精子ＤＮＡテンプレート
０．０１Ｕ／μＬのＤＮＡポリメラーゼαまたはβ
ギャップ化処理されたサカナ精子ＤＮＡテンプレートの調製：
５μＬの１Ｍ ＭｇＣｌ_２を５００μＬの活性化されたサカナ精子ＤＮＡ（ＵＳＢ７００７６）に加える；
３７℃に加温し、３０μＬの６５Ｕ／μＬのエキソヌクレアーゼＩＩＩ（ＧｉｂｃｏＢＲＬ１８０１３−０１１）を加える；
３７℃で５分間インキュベーションする；
反応を６５℃での１０分間の加熱によって停止させる；
５０μＬから１００μＬの量を、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）で平衡化されたＢｉｏ−ｓｐｉｎ６クロマトグラフィーカラム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ７３２−６００２）に負荷する；
１，０００Ｘｇでの４分間の遠心分離によって溶出する；
溶出液をプールし、吸光度を２６０ｎｍで測定して、濃度を求める。

ＤＮＡテンプレートを適切な体積の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）に希釈し、酵素を、２ｍＭのβ−メルカプトエタノールおよび１００ｍＭのＫＣｌを含有する適切な体積の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）に希釈した。テンプレートおよび酵素を微量遠心チューブまたは９６ウエルプレートにピペットで入れた。酵素を含まないブランク反応液、および、試験化合物を含まないコントロール反応液もまた、酵素希釈緩衝液および試験化合物溶媒をそれぞれ使用して調製した。反応を、上記で示されたような構成成分を伴う反応緩衝液により開始した。反応液を３７℃で１時間インキュベーションした。反応を２０μＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡの添加によって停止させた。５０μＬの停止させた反応液をＷｈａｔｍａｎ ＤＥ８１フィルターディスクにスポットし、風乾した。フィルターディスクを、１ｍＬの洗浄液が１００ｃｐｍ未満になるまで、１５０ｍＬの０．３Ｍギ酸アンモニウム（ｐＨ８）により繰り返し洗浄した。ディスクを１５０ｍＬの無水アルコールにより２回洗浄し、次いで１５０ｍＬの無水エーテルにより１回洗浄し、乾燥し、５ｍＬのシンチレーション液において計数した。

阻害率を下記の式に従って計算した：％阻害＝［１−（試験反応でのｃｐｍ−ブランクでのｃｐｍ）／（コントロール反応でのｃｐｍ−ブランクでのｃｐｍ）］ｘ１００。

ｂ．ヒトＤＮＡポリメラーゼγの阻害：
ヒトＤＮＡポリメラーゼγの阻害についての可能性を、０．５ｎｇ／μＬの酵素；１０μＬのｄＡＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＣＴＰおよびＴＴＰ；２μＣｉ／反応の［α−^３３Ｐ］−ｄＡＴＰ、および、０．４μｇ／ｍＬの活性化されたサカナ精子ＤＮＡ（ＵＳ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓから購入）を、２０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ８）、２ｍＭのβ−メルカプトエタノール、５０ｍＭのＫＣｌ、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２および０．１μｇ／ｍＬのＢＳＡを含有する緩衝液に含む反応液において測定した。反応を３７℃で１時間行わせ、０．５Ｍ ＥＤＴＡを１４２ｍＭの最終濃度に加えることによって停止させた。生成物の形成を、アニオン交換フィルターへの結合およびシンチレーション計数によって定量した。化合物を５０μＭまでの濃度で調べた。

阻害率を下記の式に従って計算した：％阻害＝［１−（試験反応でのｃｐｍ−ブランクでのｃｐｍ）／（コントロール反応でのｃｐｍ−ブランクでのｃｐｍ）］ｘ１００。

ＨＩＶの感染性およびＨＩＶの拡大を阻害する本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートの能力を下記のアッセイで測定した。

ｃ．ＨＩＶ感染性アッセイ
アッセイを、低いバックグラウンドのβ−ガラクトシダーゼ（β−ｇａｌ）発現のために選択された、ＣＸＣＲ４およびＣＣＲ５の両方を発現するＨｅＬａ Ｍａｇｉ細胞の変化体を用いて行った。細胞を４８時間感染させ、組み込まれているＨＩＶ−１のＬＴＲプロモーターからのβ−ｇａｌ産生を、化学発光基質（Ｇａｌａｃｔｏｌｉｇｈｔ Ｐｌｕｓ、Ｔｒｏｐｉｘ、Ｂｅｄｆｏｒｄ、ＭＡ）を用いて定量した。阻害剤を、１００μＭから出発する２倍連続希釈物において（二連で）力価測定した。各濃度における阻害率をコントロールの感染に関して計算した。

ｄ．ＨＩＶ拡大の阻害
ヒト免疫不全症ウイルス（ＨＩＶ）の拡大を阻害する本発明の化合物の能力を、米国特許第５，４１３，９９９号（１９９５年５月９日）およびＪ．Ｐ．Ｖａｃｃａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、９１：４０９６−４１００（１９９４）（これらはこの全体が参照により組み込まれる）に記載される方法によって測定した。

本発明のヌクレオシドアリールホスホルアミダートはまた、下記のアッセイにおいて記載されるようなＭＴＳ細胞型アッセイで、サブゲノムのＨＣＶレプリコンを含有する培養された肝ガン（ＨｕＨ−７）細胞に対する細胞毒性についてもスクリーニングされた。

ｅ．細胞毒性アッセイ：
細胞培養物を、３日間のインキュベーションでの懸濁培養物については約１．５ｘ１０^５細胞／ｍＬの濃度で、また、３日間のインキュベーションでの接着性培養物については５．０ｘ１０^４細胞／ｍＬの濃度で適切な培地において調製した。９９μＬの細胞培養物を９６ウエルの組織培養処理プレートのウエルに移し、ＤＭＳＯにおける１００倍の最終濃度の試験化合物の１μＬを加えた。プレートを指定された期間にわたって３７℃および５％ＣＯ_２でインキュベーションした。インキュベーション期間の後、２０μＬのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ ９６ Ａｑｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ試薬（ＭＴＳ）（Ｐｒｏｍｅｇａ）を各ウエルに加え、プレートを３時間までのさらなる期間にわたって３７℃および５％ＣＯ_２でインキュベーションした。プレートを振とうして十分に混合し、４９０ｎｍにおける吸光度を、プレートリーダーを使用して読み取った。懸濁培養細胞の標準曲線を、ＭＴＳ試薬添加直前の既知の細胞数を用いて調製した。代謝活性な細胞はＭＴＳをホルマザンに還元する。ホルマザンは４９０ｎｍで吸収する。化合物の存在下での４９０ｎｍにおける吸光度を、化合物が何ら添加されていない細胞における吸光度と比較した。
参考文献：Ｃｏｒｙ，Ａ．Ｈ．ら、「培養での細胞成長アッセイのための水溶性テトラゾリウム／ホルマザンアッセイの使用」、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｏｍｍｕｎ．、３：２０７（１９９１）。

下記のアッセイを、他のＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスに対する本発明の化合物の活性を測定するために用いた。

ａ．ライノウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（細胞変性作用阻害アッセイ）：
アッセイ条件が、ＳｉｄｗｅｌｌおよびＨｕｆｆｍａｎ、「抗ウイルス誘導研究およびインターフェロン誘導研究のための使い捨てミクロ組織培養プレートの使用」、Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．、２２：７９７−８０１（１９７１）による論文に記載される。

ウイルス：
ライノウイルス２型（ＲＶ−２）（ＨＧＰ株）を、ＳｉｄｗｅｌｌおよびＨｕｆｆｍａｎの参考文献で述べられたようにＫＢ細胞および培地（０．１％ＮａＨＣＯ_３、抗生物質なし）とともに使用した。このウイルスは、ＡＴＣＣから得られたが、軽度の急性熱性上部気道疾患の成人男性の咽頭スワブ物に由来した。

ライノウイルス９型（ＲＶ−９）（２１１株）およびライノウイルス１４型（ＲＶ−１４）（Ｔｏｗ株）もまた、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｏｎ（ＡＴＣＣ）（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ）から得た。ＲＶ−９はヒト咽頭洗浄物に由来し、ＲＶ−１４は上部気道疾患の若い成人の咽頭スワブ物に由来した。これらのウイルスはともに、ヒト子宮頸部類上皮ガン細胞であったＨｅＬａ Ｏｈｉｏ−１細胞（Ｆｒｅｄ Ｈａｙｄｅｎ博士、Ｕｎｉｖ．ｏｆ ＶＡ）とともに使用された。５％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）および０．１％のＮａＨＣＯ_３を伴うＭＥＭ（イーグル最少必須培地）を成長培地として使用した。

３つすべてのウイルスタイプについての抗ウイルス試験培地は、５％のＦＢＳ、０．１％のＮａＨＣＯ_３、５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシンおよび１０ｍＭのＭｇＣｌ_２を伴うＭＥＭであった。

２０００μｇ／ｍＬが、本発明の化合物をアッセイするために使用された最高濃度であった。ウイルスを試験化合物の約５分後にアッセイプレートに加えた。適切なコントロールもまた処理された。アッセイプレートを、加湿空気および５％ＣＯ_２を用いて３７℃でインキュベーションした。細胞毒性を形態学的変化について顕微鏡でコントロール細胞においてモニターした。ウイルスＣＰＥデータおよび毒性コントロールデータの回帰分析により、ＥＤ５０（５０％有効用量）およびＣＣ５０（５０％細胞毒性濃度）を得た。選択性指数（ＳＩ）を、ＳＩ＝ＣＣ５０／ＥＤ５０の式によって計算した。

ｂ．デングウイルス、バンジウイルスおよび黄熱ウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ＣＰＥ阻害アッセイ）
アッセイの詳細は上記のＳｉｄｗｅｌｌおよびＨｕｆｆｍａｎの参考文献に示される。

ウイルス：
デングウイルス２型（Ｎｅｗ Ｇｕｉｎｅａ株）を疾病対策センターから得た。２系統のアフリカミドリザル腎臓細胞を使用して、ウイルスを培養し（Ｖｅｒｏ）、また、抗ウイルス試験を行った（ＭＡ−１０４）。黄熱ウイルス（１７Ｄ株）（これは感染マウスの脳から調製された）およびバンジウイルス（Ｈ３３６株）（これは南アフリカにおける熱病少年の血清から単離された）の両方をＡＴＣＣから得た。Ｖｅｒｏ細胞を、これらのウイルスの両方とともに、また、アッセイのために使用した。

細胞および培地：
ＭＡ−１０４細胞（ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ，Ｉｎｃ．、Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ）およびＶｅｒｏ細胞（ＡＴＣＣ）を、５％のＦＢＳおよび０．１％のＮａＨＣＯ_３を伴い、および、抗生物質を伴わない培地１９９において使用した。
デングウイルス、黄熱ウイルスおよびバンジウイルスについてのアッセイ培地は、２％のＦＢＳ、０．１８％のＮａＨＣＯ_３および５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを伴うＭＥＭであった。

本発明の化合物の抗ウイルス試験をＳｉｄｗｅｌｌおよびＨｕｆｆｍａｎの参考文献に従って行った。この試験は上記のライノウイルス抗ウイルス試験と同様であった。適切な細胞変性作用（ＣＰＥ）の読み取りをこれらのウイルスのそれぞれについて５日後から６日後に達成した。

ｃ．ウエストナイルウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ＣＰＥ阻害アッセイ）
アッセイの詳細は、上記で引用されたＳｉｄｗｅｌｌおよびＨｕｆｆｍａｎの参考文献に示される。ウエストナイルウイルス（カラスの脳に由来するＮｅｗ Ｙｏｒｋ単離体）を疾病対策センターから得た。Ｖｅｒｏ細胞を上記のように成長させ、使用した。試験培地は、１％のＦＢＳ、０．１％のＮａＨＣＯ_３および５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシンを伴うＭＥＭであった。

本発明の化合物の抗ウイルス試験を、ライノウイルス活性についてアッセイするために使用された方法と類似するＳｉｄｗｅｌｌおよびＨｕｆｆｍａｎの方法に従って行った。適切な細胞変性作用（ＣＰＥ）の読み取りを５日後から６日後に達成した。

ｄ．ライノウイルス、黄熱ウイルス、デングウイルス、バンジウイルスおよびウエストナイルウイルスに対する化合物のインビトロ抗ウイルス活性の測定（ナチュラルレッド取り込みアッセイ）
上記のＣＰＥ阻害アッセイを行った後、「インターフェロンについてのマイクロタイターアッセイ：細胞変性作用の微量分光光度法による定量」、Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．、３１：３５−３８（１９７６）に記載されるさらなる細胞変性検出法を使用した。Ｍｏｄｅｌ ＥＬ３０９マイクロプレートリーダー（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．）を使用して、アッセイプレートを読み取った。ＥＤ５０およびＣＤ５０を上記のように計算した。

（医薬配合物の実施例）
本発明の化合物の経口用配合物の１つの具体的な実施態様として、５０ｍｇの実施例１または実施例２の化合物が、５８０ｍｇから５９０ｍｇの総量を提供するための十分に細かく分割されたラクトースを用いて配合され、サイズＯのハードゼラチンカプセルに充填される。

本発明がこの具体的な実施態様を参照して記載および例示されているが、当業者は、様々な変化、改変および代用が、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、このような実施態様において行われ得ることを理解する。例えば、本明細書中上記で示されるような好ましい用量とは異なる効果的な投与量が、ＨＣＶ感染の重篤度のために、処置されているヒトの応答性における変動の結果として適用可能となる場合がある。同様に、観測された薬理学的応答は、選択された特定の活性な化合物、または、医薬用キャリアが存在するかどうか、ならびに、用いられた配合物のタイプおよび投与様式、および、本発明の目的および実施に従って意図される結果におけるこのような予測される変動または違いに従って、また、それらに依存して変化し得る。従って、本発明は下記の請求項の範囲によってのみ限定されるだけであり、また、このような特許請求の範囲は、妥当であるほど広く解釈されることが意図される。

Claims (6)

1. 構造式Ｉ：
   

   

   ［式中、
   Ｙは、Ｎであり；
   Ａｒは、非置換フェニルであり；
   Ｒ^１は、水素であり；
   Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれ、水素であり；
   Ｒ^４は、水素であり；
   Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれが独立して、水素、ヒドロキシ、Ｃ _１−４ アルコキシ、および、アミノからなる群から選択され；
   Ｒ^７は、水素、またはＣ _１−５ アルキルであり；
   Ｒ^８は、Ｃ _１−６ アルキルであり；および
   Ｒ^１１は水素またはメチルである］の化合物、またはこの医薬的に許容される塩。
2. Ｒ^１１が水素であり、ならびにＲ^７がメチルである、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ^８がメチルである、請求項２に記載の化合物。
4. 下記の化合物からなる群から選択される、請求項３に記載の化合物
   

   

   またはこの医薬的に許容される塩。
5. 請求項１に記載の化合物と、医薬的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
6. 哺乳動物におけるＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療するための、請求項５に記載の医薬組成物。