JP5113038B2 - 癌治療用キットおよび癌治療用医薬組成物 - Google Patents

Description

本発明は、哺乳動物における腫瘍および癌の成長を阻害するためのキットに関し、詳しくは、哺乳動物、特にヒトおよび温血動物における、癌および腫瘍の成長を阻害するための癌治療用キットおよび癌治療用医薬組成物に関する。

癌は動物およびヒトにおける主要死因である。多くのタイプの化学療法剤が癌および腫瘍細胞に対して効果的であることが示されてきたが、残念なことに、これら多くの薬剤は正常細胞をも破壊してしまうという問題があった。癌治療分野における改善にもかかわらず、今日の主な治療法は、外科手術、放射線療法、および化学療法剤によるものである。

化学療法的アプローチは、転移癌または特に進行性の癌に良く効くと言われている。これらの化学療法剤の正確な作用メカニズムは必ずしも知られていない。さらに、ある化学療法剤は治療後に腫瘍塊を有意に減少させる一方、癌が再発したときには残念ながらそれらを同じ患者に投与することができないことがよくある。しかも、化学療法剤は一般に有効量と最大耐用量との幅が狭いので、投与量に細心の注意を払わなければならない。

ところで、今日、レチノイドは、免疫細胞のシグナル伝達系に関与し、様々な免疫応答を引き起こすことが知られ、最近、Ｔ細胞のＴｈ１発現を抑制し、Ｔｈ２発現を増強することが報告されている（非特許文献１）。

また、最近では、抗血管新生剤と化学療法剤との併用が高い効果を発揮することが報告されている（非特許文献２）。
M.Iwata、et al. Retinoic acids exert direct effects on T cells to suppress Th1 development and enhance Th2 development via retinoic acid receptors. International Immunology 15(8), pp. 1017 - 1025, 2003 Sengupta, S. et al. Temporal atrgeting of tumor cells and neovasculature with a nanoscale delivery system. Nature 436, pp. 568 - 572,2005

上記のように、腫瘍細胞に対する特異性を高めるためにレチノイドが様々な免疫応答を引き起こすことや、腫瘍血管を標的とする薬剤と化学療法剤との併用が腫瘍細胞を標的として高い効果を示し、正常細胞に対する毒性を軽減することが期待されている。その一方で、正常細胞には作用せず、腫瘍細胞に対しては細胞毒性をこれまで以上に増強する投与手段が強く望まれている。

そこで本発明の目的は、これまで以上に哺乳動物における腫瘍および癌の成長を阻害するための癌治療用キットおよび癌治療用医薬組成物を提供することにある。

本発明者は、上記課題を解決するために鋭意検討した結果、合成レチノイドが癌および腫瘍の成長を抑制することにおいて特に有用であることを見出し、さらに当該合成レチノイドを、腫瘍の嵩を減少させる（ｄｅｂｕｌｋ）のに有効な他の化学療法剤と組み合わせ連続的に使用するキット製剤とすることで高い効果が得られ、また化学療法剤同士の併用に比べて副作用が弱いことを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は次の（１）〜（１２）に関するものである。
（１）キット形態中に２つの医薬を組み合わせてなる癌治療用キットであって、第１の医薬が、合成レチノイドまたはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を含み、第２の医薬が、癌治療用の化学療法剤を含むことを特徴とする癌治療用キットである。

（２）前記（１）において、前記合成レチノイドが下記式（Ｉ）、

で表される安息香酸誘導体またはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩である癌治療用キットである。

（３）前記（１）または（２）において、前記合成レチノイドが、レチノイン酸受容体（ＲＡＲα、β、γ）またはレチノイド受容体（ＲＸＲα、β、γ）のアゴニストまたはアンタゴニスト、あるいはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩である癌治療用キットである。

（４）前記（１）〜（３）のいずれかにおいて、前記第１の医薬が、ヒトまたは動物一個体あたり０．５〜３０ｍｇの合成レチノイドまたはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を含み、前記第２の医薬がヒトまたは動物一個体あたり１．０〜１０００ｍｇの化学療法剤を含む癌治療用キットである。

（５）前記（１）〜（４）のいずれかにおいて、前記化学療法剤が、ＤＮＡ相互作用剤、代謝拮抗物質、チューブリン相互作用剤、抗癌性抗生物質、酵素阻害剤、増殖促進シグナル阻害剤、および抗ホルモン剤からなる群から選ばれる癌治療用キットである。

（６）前記（５）において、前記化学療法剤が、ステロイド、アスパラギナーゼ、ヒドロキシウレア、シスプラチン、シクロホスファミド、アルトレタミン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、エトポシド、およびテニポシドからなる群から選ばれる癌治療用キットである。

（７）前記（５）において、前記化学療法剤が、メトトレキサート、フルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、アザシチジン、シタラビン、メルカプトプリン、６−チオグアニン、ペントスタチン、およびフルダラビンからなる群から選ばれる癌治療用キットである。

（８）前記（５）において、前記化学療法剤が、ビンカアルカロイド類およびタキサン類からなる群から選ばれる癌治療用キットである。

（９）前記（５）において、前記化学療法剤が、増殖因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤、サイクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、およびＤＮＡメチレーション阻害剤からなる群から選ばれる癌治療用キットである。

（１０）前記（５）において、前記化学療法剤が、ステロイド剤、抗エストロゲン剤または抗アンドロゲン剤である癌治療用キットである。

（１１）前記（１）〜（１０）のいずれかにおいて、前記第１の医薬が１日から２１日用または２８日用の用量の合成レチノイドまたはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を含み、前記第２の医薬が、１日から２１日または２８日の治療用の用量の化学療法剤を含む癌治療用キットである。

（１２）前記（１）〜（１１）のうちいずれかのキットにおける第１の医薬と第２の医薬とが配合されていることを特徴とする癌治療用医薬組成物である。

本発明により、最初に合成レチノイドを投与し、次いで化学療法剤を投与することにより、細胞毒性を示す当該化学療法剤で腫瘍塊の嵩をこれまで以上に減少させるかまたは縮小させることができる。また、合成レチノイドと化学療法剤を同時に投与する方法も有用である。本発明により治療されるべき癌としては、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、多発性骨髄腫、非ホジキンリンパ腫等の血液癌、肺癌、大腸癌、胃癌、肝臓癌、膵臓癌、胆管癌等の消化器癌、乳癌、前立腺癌、卵巣癌および子宮癌等である。

ヒト急性前骨髄球性白血病細胞株ＨＬ−６０におけるＴＭ−４１１とＡｓ_２Ｏ_３の併用による増殖抑制作用の相乗効果を示すグラフである。 ヒト急性前骨髄球性白血病細胞株ＨＬ−６０におけるＴＭ−４１１と５−ＡＺの併用による増殖抑制作用の相乗効果を示すグラフである。 ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１とＭｅｌの併用による増殖抑制作用の相加効果及び相乗効果を示すグラフである。 ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１とＰＳＬの併用による増殖抑制作用の相乗効果を示すグラフである。 ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１とＤＥＸの併用による増殖抑制作用の相乗効果を示すグラフである。 ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１と５−ＡＺの併用による増殖抑制作用の相乗効果を示すグラフである。 ヒト肝細胞がん細胞株ＪＨＨ−７におけるＴＭ−４１１とＶＰＡの併用による増殖抑制作用の相加効果及び相乗効果を示すグラフである。

本発明のキットにおいて、第１の医薬に含まれる合成レチノイドまたはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩としては、安息香酸誘導体またはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を好適に挙げることができ、特に好ましくは下記式（Ｉ）、

で表される安息香酸誘導体またはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩である。

また、合成レチノイドは、レチノイン酸受容体（ＲＡＲα、β、γ）またはレチノイド受容体（ＲＸＲα、β、γ）のアゴニストまたはアンタゴニスト、あるいはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩とすることができる。

次に、本発明のキットにおいて、第２の医薬に含まれる化学療法剤のＤＮＡ相互作用剤としては、アルキル化剤のシクロホスファミド、イソファミド、メルファラン、チオテパ、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、シスプラチン、カルボプラチン等が挙げられる。ＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害剤としては、カンプトテシン、ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、エトポシド、テニポシド、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトキサントロン等が挙げられる。好ましくは、経口投与が可能なＤＮＡ相互作用剤、シクロホスファミド、メルファラン、シスプラチン、カンプトテシン、エトポシド、ドキソルビシンが挙げられる。

化学療法剤の代謝拮抗物質として、ある物は、ＤＮＡ合成の直接の前駆物質であるデオキシリボヌクレオシド三リン酸の生合成を阻害して、ＤＮＡの複製を阻害する。また、ある物は、プリンまたはピリミジンに十分に類似し、同化ヌクレオチド回路（ａｎａｂｏｌｉｃ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐａｔｈｗａｙｓ）中のそれらの代替物となることができる。これらの類似体は、次いで通常のそれらの対応物の代わりにＤＮＡおよびＲＮＡ中に置換され得る。ここでの有用な代謝拮抗物質としては、下記の、葉酸の拮抗物質、例えば、メトトレキサートおよびトリメトレキサートと、ピリミジンの拮抗物質、例えば、５−フルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、アザシチジン（Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）、シタラビンおよびフロクスリジンが挙げられ、プリンの拮抗物質としては、メルカプトプリン、６−チオグアニン、フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ）、ペントスタチン（Ｐｅｎｔｏｓｔａｔｉｎ）が挙げられ、リボヌクレオチド還元酵素阻害剤としては、ヒドロキシウレアが挙げられる。好ましくは、経口投与が可能な、メトトレキセート、５−フルオロウラシル、シタラビン、フルダラビンが挙げられる。また、ＤＮＡメチル化阻害剤として５−アザ−２’−デオキシシチジン（５−Ａｚａ−２’−Ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ、以下「５−ＡＺ」と略記する）が挙げられる。

化学療法剤のチューブリン相互作用剤としては、チューブリン、すなわち重合して細胞の微小管を形成するタンパク質上の特定部位に結合することにより作用するものであり、共にアルカロイドであるビンクリスチンおよびビンブラスチンならびにパクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、ドセタキセルが挙げられる。好ましくは、経口投与が可能である、パクリタキセル、ドセタキセルが挙げられる。

化学療法剤の抗癌性抗生物質としては、ＤＮＡ切断作用を示すブレオマイシン、バイオ還元アルキル化剤のマイトマイシン、ＤＮＡ挿入型剤のドキソルビシン等が挙げられる。好ましくは、ドキソルビシンが挙げられる。また、化学療法剤の抗癌性抗生物質として、抗てんかん剤として使用されているバルプロ酸や、ミトコンドリアの膜透過性を阻害する亜ヒ酸が挙げられる。

化学療法剤の酵素阻害剤としては、サイクロオキシゲナーゼ−２阻害剤のセレコキシブ、ロフェコキシブ、クルクミン等、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤のバルプロ酸、ＦＫ−２２８、ＭＳ−２７５等、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤のＲ１１５７７７、ＢＭＳ２１４６６２等、およびＤＮＡメチル化阻害剤の５−ＡＺ等が挙げられる。好ましくは、経口投与が可能である、セレコキシブ、バルプロ酸、ＦＫ−２２８および５−ＡＺが挙げられる。

化学療法剤の増殖因子シグナル阻害剤としては、ＥＧＦＲのチロシンキナーゼ阻害剤のゲフィニチブ、エルロチニブ、Ｂｃｒ−ａｂｌのチロシンキナーゼ阻害剤のイマニチブ等が挙げられる。好ましくは、経口投与が可能である、ゲフィニチブ、イマニチブが挙げられる。

化学療法剤の黄体形成ホルモン放出ホルモン剤またはゴナドトロピン放出ホルモン拮抗物質は、前立腺癌の治療に主に用いられる。これらは、ロイプロリドアセテート（ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅａｃｅｔａｔｅ）およびゴセレリンアセテートを含む。抗ホルモン剤は、抗エストロゲン剤、例えば、タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）と、抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド（Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）、ビカルタミドと、抗副腎剤、例えば、ミトテンおよびアミノグルテチミド等が挙げられる。好ましくは、経口投与が可能である、タモキシフェン、フルタミド、ビカルタミド、抗副腎剤が挙げられる。また、ホルモン療法に使用されるステロイドとしては、デキサメタゾンがあり、ホルモンまたは抗ホルモン拮抗薬としては、プレドニソロン（Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）が挙げられる。

本発明のキットにおける第１の医薬および第２の医薬は、有効量を経口、経直腸、局所、あるいは非経口的、静脈内または腫瘍内への注射のいずれかにより投与することで、ヒトまたは動物における癌および他の腫瘍の成長を阻害するのに有効である。かかるユニットの各医薬は、丸剤、錠剤、カプセル、リポソーム等の固体またはゲル状、あるいは経口、経直腸、局所的、静注または非経口的投与、若しくは腫瘍内部または付近に注射するのに適した液状でもよい（癌の化学療法ハンドブック「（Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ）第２版、１５〜３４頁、Ａｐｐｌｅｔｏｎ＆Ｌａｎｇｅ（コネチカット、１９９４）」参照）。

本発明のキットにおいては、第１の医薬が１日から２１日用または２８日用の用量の合成レチノイドまたはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を含み、第２の医薬が、１日から２１日または２８日の治療用の用量の化学療法剤を含むことが好ましい。

具体的には、かかるキットにより治療するにあたり、治療される特定の癌または腫瘍のタイプの治療において有効ないかなる適切な量とすることもでき、有効量を適用する方法は、治療する腫瘍によっても変化する。好ましくは合成レチノイドを最初に投与し、癌または腫瘍塊のサイズを縮小させる。通常、これには２週間から８週間かかる。腫瘍または癌細胞の減少は元のレベルの５０％未満である。その後、腫瘍の縮小が見られたときに、化学療法剤を投与する。合成レチノイドは比較的に安全であるために、癌の再成長を減少させる際のその有効性を維持するため、必要に応じて２週間から１年間まで、投与することができる。

以下、本発明を実施例に基づき説明する。なお、下記の実施例は例示的なものであり、本発明を限定するものではないことは勿論である。
（実施例１）
（ヒト乳癌Ｂｒ−１０／ヌードマウスに対する合成レチノイド、タキソテール（ＤＸＬ）、および合成レチノイドとタキソテール（ＤＸＬ）と併用の効果）
合成レチノイドとしては、タミバロテン（以下単に「ＴＭ−４１１」と略記する）を採用した。以下の実施例でも同様である。また、化学療法剤としてはサノフィ・アベンティス株式会社製の一般名タキソテール（以下「ＤＸＬ」と略記する）を用いた。

６週令ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ−ｎｕヌードマウスに、ヒト乳癌Ｂｒ−１０の腫瘍片を背側部皮下にトロカー針を用いて移植した。腫瘍体積が１００〜３００ｍｍ³になった時点から投与を開始した。ＴＭ−４１１は、１ｍｇ／ｋｇを１回／日、連日２８日間経口投与した。ＤＸＬは、７．５ｍｇ／ｋｇを１日目より、４日間隔で３回、静脈内投与した。

ＴＭ−４１１＋ＤＸＬ併用群は、各単剤と同じ投与量、投与法で投与した。投与開始日を１日目とし、投与終了翌日（２９日目）まで、毎日腫瘍径を測定し、増殖抑制の有無を検討した。その結果を下記表１に示す。なお、対照群（コントロール群）として、生理食塩液を各単剤と同じ投与量、投与法で投与した。

＊長径×短径²／２の式から、腫瘍体積（ｍｍ³）を求めた。

ヒト乳癌Ｂｒ−１０／ヌードマウスに対してＴＭ−４１１、ＤＸＬおよびＴＭ−４１１＋ＤＸＬをそれぞれ投与すると、ＴＭ−４１１、ＤＸＬは、腫瘍の増殖を有意に抑制したが、ＴＭ−４１１＋ＤＸＬ併用は単剤での効果を上回り、相乗効果を示した。

（実施例２）
（ヒト肝癌ＪＨＨ−７／ヌードマウスに対するＴＭ−４１１、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）およびＴＭ−４１１と５−ＦＵとの併用の効果）
化学療法剤としては協和発酵工業株式会社製の一般名フルオロウラシル（以下「５−ＦＵ」と略記する）を用いた。

６週令ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ−ｎｕヌードマウスに、ヒト肝癌ＪＨＨ−７の腫瘍片を背側部皮下にトロカー針を用いて移植した。腫瘍体積が１００〜３００ｍｍ³になった時点から投与を開始した。ＴＭ−４１１は、３ｍｇ／ｋｇを１回／日、連日２０日間経口投与した。５−ＦＵは、１５．２ｍｇ／ｋｇを８日目から１２日目の連日５日間経口投与した。

ＴＭ−４１１＋５−ＦＵ併用群は、各単剤と同じ投与量、投与法で投与した。投与開始日を１日目とし、投与終了翌日（２１日目）まで、毎日腫瘍径を測定し、増殖抑制の有無を検討した。その結果を下記表２に示す。なお、対照群（コントロール群）として、生理食塩液を各単剤と同じ投与量、投与法で投与した。

＊長径×短径²／２の式から、腫瘍体積（ｍｍ³）を求める。

ヒト肝癌ＪＨＨ−７／ヌードマウスに対してＴＭ−４１１、５−ＦＵおよびＴＭ−４１１＋５−ＦＵをそれぞれ投与すると、ＴＭ−４１１、５−ＦＵは、腫瘍の増殖を抑制したが、ＴＭ−４１１＋５−ＦＵ併用は単剤での効果を上回り、相乗効果を示した。

（実施例３）
（ヒト肝癌ＨｅＰＧ２／ヌードマウスに対するＴＭ−４１１、ドキソルビシン（ＡＤＲ）およびＴＭ−４１１とＡＤＲとの併用の効果）
化学療法剤としては協和発酵工業株式会社製の一般名ドキソルビシン（以下「ＡＤＲ」と略記する）を用いた。

６週令ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ−ｎｕヌードマウスに、ヒト肝癌ＨｅＰＧ２のおよそ２×２×２ｍｍの腫瘍片を背側部皮下にトロカー針を用いて移植した。移植２日後（１日目とする）から投与を開始した。ＴＭ−４１１は、１ｍｇ／ｋｇを１日目から、連日２０日間経口投与した。ＡＤＲは、５ｍｇ／ｋｇを１日目に単回静脈内投与した。

ＴＭ−４１１＋ＡＤＲ併用群は、各単剤と同じ投与量、投与法で投与した。投与開始日を１日目とし、投与終了日（２０日目）まで、毎日腫瘍径を測定し、増殖抑制の有無を検討した。その結果を下記表３に示す。なお、対照群（コントロール群）として、生理食塩液を各単剤と同じ投与量、投与法で投与した。

＊長径×短径²／２の式から、腫瘍体積（ｍｍ³）を求める。

ヒト肝癌ＨｅＰＧ２／ヌードマウスに対してＴＭ−４１１、ＡＤＲをそれぞれ投与すると、ＴＭ−４１１、ＡＤＲは、腫瘍の増殖を抑制した。また、ＴＭ−４１１＋ＡＤＲ併用は単剤での効果を上回り、相乗効果を示した。

（実施例４）
（ヒト多発性骨髄腫Ｕ２６６／ＮＯＧマウスに対するＴＭ−４１１、プレドニソロンおよびＴＭ−４１１とプレドニソロンとの併用の効果）
化学療法剤としては塩野義製薬株式会社製の一般名プレドニソロン（以下「ＰＳＬ」と略記する）を用いた。

７週令ＮＯＤ／ＳＣＩＤ／γｃ^null（ＮＯＧ）マウスを１０匹ずつ５群（対照群のみ９匹）に分け、全個体に２×１６⁶個の多発性骨髄腫株Ｕ２６６細胞を尾静脈経由で移植した（０日目）。第１群は無処置対照群とし、第２群にはＴＭ−４１１・１ｍｇ／ｋｇを、第３群にはＴＭ−４１１・３ｍｇ／ｋｇを、それぞれ１日目より２８日間、経口投与した。第４群には２１日目より８日間ＰＳＬ７．５ｍｇ／ｋｇを経口投与した。第５群には１日目より２８日間ＴＭ−４１１・１ｍｇ／ｋｇを経口投与したうえで、２１日目より８日間はＴＭ−４１１投与後にＰＳＬ７．５ｍｇ／ｋｇを経口投与した。Ｕ２６６移植６週間後に血中ヒトＩｇＥ濃度を測定した。その結果を下記表４に示す。

上記表４に示すように、ヒト多発性骨髄腫Ｕ２６６／ＮＯＧマウスに対してＴＭ−４１１、ＰＳＬをそれぞれ投与すると、ＴＭ−４１１、ＰＳＬは、血中ヒトＩｇＥ濃度を減少させた。また、ＴＭ−４１１＋ＰＳＬ併用は血中ヒトＩｇＥ濃度の減少に対して相乗効果を示した。

（実施例５）
（ヒト急性前骨髄球性白血病細胞株ＨＬ−６０におけるＴＭ−４１１と亜ヒ酸との併用の効果）
化学療法剤としてはＳｉｇｍａ-ａｌｄｒｉｃｈ Ｊａｐａｎ製の亜ヒ酸（以下「Ａｓ_２Ｏ_３」と略記する）を用いた。

ヒト急性前骨髄球性白血病細胞株ＨＬ−６０を、２０％ウシ胎児血清を加えたＩｓｃｏｖｅ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｅｄｉｕｍ（ＧＩＢＣＯ社）にて培養し、ＴＭ−４１１とＡｓ_２Ｏ_３を添加しＭＴＴ（５％ Ｔｈｉａｚｏｌｙｌ Ｂｌｕｅ Ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ） Ａｓｓａｙを用いて増殖抑制作用における相乗効果を検証した。

図１において、横軸はＴＭ−４１１の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率であり、縦軸はＡｓ_２Ｏ_３の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率である。両軸の１．０を結んだ直線上の場合は相加効果を示し、直線より下側では相乗効果を示す。図１に示すように、ヒト急性前骨髄球性白血病細胞株ＨＬ−６０においてＴＭ−４１１とＡｓ_２Ｏ_３の併用により、増殖抑制作用における相乗効果が得られることが示された。

（実施例６）
（ヒト急性前骨髄球性白血病細胞株ＨＬ−６０におけるＴＭ−４１１とＤＮＡメチル化阻害剤５−ＡＺとの併用の効果）
ＤＮＡメチル化阻害剤としてはＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ製の５−ＡＺを用いた。

実施例５と同様の手法を用いて、ＴＭ−４１１と５−ＡＺ添加時の増殖抑制作用における相乗効果を検討した。

図２において、横軸はＴＭ−４１１の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率であり、縦軸は５−ＡＺの増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率である。両軸の１．０を結んだ直線上の場合は相加効果を示し、直線より下側では相乗効果を示す。図２に示すように、ヒト急性前骨髄球性白血病細胞株ＨＬ−６０においてＴＭ−４１１と５−ＡＺの併用により、増殖抑制作用における相乗効果が得られることが示された。

（実施例７）
（ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１とメルファランとの併用の効果）
化学療法剤としてはメルファラン（以下「Ｍｅｌ」と略記する）を用いた。

ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６を、１０％ウシ胎児血清を加えたＲＰＭＩ１６４０培地にて培養し、ＴＭ−４１１とＭｅｌを添加し増殖抑制作用における相乗効果を検証した。

図３において、横軸はＴＭ−４１１の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率であり、縦軸はＭｅｌの増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率である。両軸の１．０を結んだ直線上の場合は相加効果を示し、直線より下側では相乗効果を示す。図３に示すように、ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６においてＴＭ−４１１とＭｅｌの併用は、増殖抑制作用において相加から相乗効果を示した。

（実施例８）
（ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１とＰＳＬとの併用の効果）
化学療法剤としてはＰＳＬを用いた。

実施例７と同様の手法を用いて、ＴＭ−４１１とＰＳＬを添加し増殖抑制作用における相乗効果を検証した。

図４において、横軸はＴＭ−４１１の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率であり、縦軸はＰＳＬの増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率である。両軸の１．０を結んだ直線上の場合は相加効果を示し、直線より下側では相乗効果を示す。図４に示すように、ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６においてＴＭ−４１１とＰＳＬの併用により、増殖抑制作用における相乗効果が得られることが示された。

（実施例９）
（ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１とデキサメタゾンとの併用の効果）
化学療法剤としてはデキサメタゾン（以下「ＤＥＸ」と略記する）を用いた。

実施例７と同様の手法を用いて、ＴＭ−４１１とＤＥＸを添加し増殖抑制作用における相乗効果を検証した。

図５において、横軸はＴＭ−４１１の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率であり、縦軸はＤＥＸの増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率である。両軸の１．０を結んだ直線上の場合は相加効果を示し、直線より下側では相乗効果を示す。図５に示すように、ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６においてＴＭ−４１１とＤＥＸの併用により、増殖抑制作用における相乗効果が得られることが示された。

（実施例１０）
（ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６におけるＴＭ−４１１とメチル化阻害剤５−ＡＺとの併用の効果）
メチル化阻害剤としては５−ＡＺを用いた。

実施例７と同様の手法を用いて、ＴＭ−４１１と５−ＡＺを添加し増殖抑制作用における相乗効果を検証した。

図６において、横軸はＴＭ−４１１の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率であり、縦軸は５−ＡＺの増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率である。両軸の１．０を結んだ直線上の場合は相加効果を示し、直線より下側では相乗効果を示す。図６に示すように、ヒト多発性骨髄腫細胞株ＲＰＭＩ８２２６においてＴＭ−４１１と５−ＡＺの併用により、増殖抑制作用における相乗効果が得られることが示された。

（実施例１１）
（ヒト肝細胞がん細胞株ＪＨＨ−７におけるＴＭ−４１１とバルプロ酸との併用の効果）
化学療法剤としてはバルプロ酸（以下「ＶＰＡ」と略記する）を用いた。

実施例７と同様の手法を用いて、ＴＭ−４１１とＶＰＡを添加し増殖抑制作用における相加相乗効果を検証した。

図７において、横軸はＴＭ−４１１の増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率であり、縦軸はＶＡＰの増殖抑制曲線におけるＥＤ_５０の濃度を１とした場合の比率である。両軸の１．０を結んだ直線上の場合は相加効果を示し、直線より下側では相乗効果を示す。図７に示すように、ヒト肝細胞がん細胞株ＪＨＨ−７においてＴＭ−４１１とＶＰＡの併用は、増殖抑制作用において相加から相乗効果を示した。

Claims (4)

1. キット形態中に２つの医薬を組み合わせてなる癌治療用キットであって、第１の医薬が、下記式（Ｉ）、
   

   

   で表される安息香酸誘導体またはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を含み、第２の医薬が、ドセタキセル、フルオロウラシル、ドキソルビシン、プレドニソロン、亜ヒ酸、５−アザ−２’−デオキシシチジン、メルファラン、デキサメタゾン、バルプロ酸からなる群から選ばれる癌治療用の化学療法剤を含むことを特徴とする癌治療用キット。
2. 前記第１の医薬が、ヒトまたは動物一個体あたり０．５〜３０ｍｇの前記安息香酸誘導体またはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を含み、前記第２の医薬がヒトまたは動物一個体あたり１．０〜１０００ｍｇの化学療法剤を含む請求項１記載の癌治療用キット。
3. 前記第１の医薬が１日から２８日用の用量の前記安息香酸誘導体またはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩を含み、前記第２の医薬が、１日から２８日の治療用の用量の化学療法剤を含む請求項１または２記載の癌治療用キット。
4. 下記式（Ｉ）、
   

   

   で表される安息香酸誘導体またはその薬剤学的に許容可能な有機または無機の酸付加塩と、ドセタキセル、フルオロウラシル、ドキソルビシン、プレドニソロン、亜ヒ酸、５−アザ−２’−デオキシシチジン、メルファラン、デキサメタゾン、バルプロ酸からなる群から選ばれる癌治療用の化学療法剤とが配合されていることを特徴とする癌治療用医薬組成物。

Images