JP6216298B2 - 自動分析装置及びそれを用いた分析方法 - Google Patents
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Description
自動分析装置では、前記特許文献1で述べられているように、複数の反応セルを有するセルブロックを用いるなどして、多数の反応セルを自動分析装置に配置する。以下では、分かりやすく説明するために一個の反応セルについて説明する。
コーティング処理をする反応セルの基材として、ポリシクロオレフィンを用いた。なお、本実施例ではセルの壁面を模擬した厚さ1mmの平板状の材料を用いたが、前記したセル形状においても、実施可能である。以下に(1)親水化処理、(2)防汚膜形成、(3)剥離方法について述べる。
表面が疎水性のポリシクロオレフィン平板に対して、エキシマ光(波長172nm)を照射し、表面を親水化した。この親水化により、ポリシクロオレフィン平板表面の水の接触角は、95度から75度に低下した(詳細後述)。この例では、平板状の材料を処理するために、エキシマ光を用いたが、実際のセル形状では、部分的に親水化処理できる公知の方法を実施することができる。たとえば前記特許文献1で開示されているコロナ放電処理による親水化方法がある。エキシマ光照射、コロナ放電処理いずれの処理においても疎水性の合成樹脂表面に親水性の官能基が導入される。
ポリシクロオレフィン平板を、アルカリ洗浄剤に1分間浸漬した後、水でリンスした。以上によりポリシクロオレフィン平板を清浄化した。コート剤として、平均分子量5,000のアミノ末端基を有するポリエチレングリコール(以下、PEG)を用いた。ポリシクロオレフィン平板を濃度1wt%のPEG水溶液に10秒間浸漬した後、水でリンスした。
防汚膜を形成後の平板を剥離液に浸漬し、防汚膜の剥離性を評価した。剥離法としてイオン、またはアルカリによる以下2通りの方法で評価した。
(3−1)生理食塩水処理(イオン)
生理食塩水(濃度0.9w/v%の塩化ナトリウム水溶液)に10分間浸漬した後、水でリンスした。
(3−2)アルカリ洗浄剤処理(アルカリ)
アルカリ洗浄剤に1分間浸漬した後、水でリンスした。
上記親水化処理、防汚膜形成、防汚膜剥離による表面の濡れ性変化を水の接触角で分析した。表面に純水を0.5μl滴下し、θ/2法で面内3点の接触角平均値を得た。測定は同一平板を用いて、上記親水化処理、防汚膜形成、防汚膜剥離の各処理それぞれが終了した後の表面に対して行った。
上記に説明した例の(2)においてコート剤を平均分子量630、000のポリビニルピロリドン(以下PVP)とした以外は、上記に説明した例における(1)乃至(3)と同様の操作を行った。表2に水の接触角測定結果を示す。PVPにおいても、PEGと同様に、親水化したポリシクロオレフィンに防汚膜形成が可能であること(コーティング処理により接触角が低下)、生理食塩水処理で防汚膜が剥離しないこと(生理食塩水処理では接触角不変)、アルカリ洗浄剤処理で防汚膜が剥離可能なこと(アルカリ洗浄剤処理で接触角がコーティング処理前に戻ること)を確認した。
表面に防汚処理を施した試料(センサチップ)の防汚効果の評価に表面プラズモン共鳴(SPR)測定装置を用いた。SPR測定装置は、センサチップ表面近傍の屈折率変化を液中で光学的に測定する装置である。センサチップ表面に蛋白質などの有機物が吸着した場合、吸着した物質の質量に応じて表面近傍の屈折率が変化する。屈折率変化と質量変化の相関は既知であり、屈折率変化量から吸着物の質量を知ることができる。
(21)センサチップ表面への合成樹脂の成膜
最表面が金のセンサチップ表面を、前記エキシマ光を1分間照射して清浄化した。清浄化したセンサチップ表面に、有機溶剤に溶解したポリシクロオレフィン溶液をスピンコートで塗布した。以上により最表面にポリシクロオレフィン層303が形成されたセンサチップ304を得た。
ポリシクロオレフィン層303が成膜されたセンサチップ304に対して、エキシマ光(波長172nm)を照射して、ポリシクロオレフィン表面を親水化した。
上記で得られたセンサチップ304をSPR測定装置に搭載した。なお、SPR装置のセンサチップ304への送液流速は常に20μl毎分とした。まず、SPR測定装置の検出信号(以下、SPRシグナルと記す)が安定化するまでセンサチップ304の表面に水を送液した。SPRシグナルが安定化した後、アルカリ洗浄剤を5分間、計100μl送液してセンサチップ304のポリシクロオレフィン層303の表面を清浄化した後、その後再度水を送液した。
ポリシクロオレフィン層303の表面の清浄化処理が終了し、SPRシグナルが安定化した後、コート剤として濃度1wt%のPEGを5分間、計100μlセンサチップ304のポリシクロオレフィン層303の表面に送液し、その後、再度水を送液した。
防汚膜形成後、リン酸緩衝液(PBS)を送液した。SPRシグナルが安定化した後、モデル汚染(詳細後述)を5分間、計100μl送液した。モデル汚染を送液した後、再度リン酸緩衝液を送液した。その後、アルカリ洗浄剤を5分間、計100μl送液した後、再度リン酸緩衝液を送液した。リン酸緩衝液の送液開始5分後のSPRシグナルと、モデル汚染送液直前のSPRシグナルの差により、センサチップ表面の汚染吸着量を求めた。
モデル汚染として、蛋白質汚染を模擬したウシ血清アルブミン(以下、BSA)を濃度40mg/ml溶解したリン酸緩衝液を用いた。また、ラテックス試薬汚染を模擬するため、表面をアミノ基で修飾した粒径0.1μmのポリスチレンラテックの2.5w/v%懸濁液(以下アミノラテックス)を用いた。評価に用いるセンサチップはコート剤、モデル汚染の種類を変えるごとに交換した。
上記に説明したPEGによる防汚効果の評価における(24)の防汚膜形成2でコート剤をPVPとした以外は、PEGによる防汚効果の評価における(21)乃至(26)と同様の操作を行って、センサチップ表面の汚染吸着量を求めた。
PEGによる防汚とPVPによる防汚との効果を評価するために、比較例として、センサチップ304を用いて、上記した(23)の防汚膜形成2<コーティング処理>を実施しないこと以外は、PEGによる防汚効果の評価における(21)乃至(26)と同様の操作を行った。
BSAをモデル汚染とした場合、PEGによる防汚とPVPによる防汚の効果は、いずれも吸着量が0.01ng/mm2未満(SPR測定装置の検出下限以下)であった。一方比較例1では、吸着量が0.13ng/mm2であった。
図6Aに示した自動分析装置100は、概略、サンプルディスク機構1、サンプルノズル27を備えたサンプル供給用分注機構2、反応ディスク3、試薬ディスク機構5、試薬用ノズル28を備えた試薬ピペッティング機構7、及びインターフェース23を介して全体を制御するコンピュータ19を備えて構成されている。
操作パネル24は操作者からの分析依頼情報の入力を受け、コンピュータ19内のメモリに分析依頼情報が記憶されて自動分析装置100の動作が開始する。
本実施例においては、実施例1におけるコート剤供給・回収部33に変えて、コート剤を試薬ディスク機構5の試薬容器6のうちの一部の試薬容器331に入れて供給する構成とした。試薬容器331に入れたコート剤は、試薬供給用分注機構7により反応セル4内に供給させることができる。この場合、コート剤は、あらかじめ特定の分析項目の試薬に混合させておき、コート剤は、特定の分析項目の試薬とともに反応セル4内に分注できる。
本実施例では、試薬容器331に入れたコート剤を試薬供給用分注機構7により反応セル4内に供給する例を示したが、他の機構を用いて供給させてもよい。たとえば、反応容器洗浄機構11から供給させてもよい。このとき、コート剤を反応容器洗浄機構11から反応セル4に単独に供給させてもよいし、洗浄剤にあらかじめコート剤を含有(混合)させたものを反応セル4に供給するようにしてもよい。また、ブランク水にあらかじめコート剤を含有させておき、図示しないブランク水供給用ノズルから反応セル4に供給させてもよい。
Claims (12)
- 複数の反応セルを収納する反応ディスクと、
試薬を収容する試薬容器を収納する試薬ディスク機構と、
検査対象であるサンプルを収容するサンプルセルに収容されたサンプルを吸引して前記反応ディスクの反応セルに所定量供給するサンプルノズルを備えたサンプル供給用分注機構と、
前記試薬ディスク機構の試薬容器に収容された試薬を吸引して前記反応ディスクの反応セルに所定量供給する試薬用分注ノズルを備えた試薬供給用分注機構と、
前記サンプル供給用分注機構により供給されたサンプルと前記試薬供給用分注機構により供給された試薬との混合液が形成された前記反応セルに光を照射して前記反応セルを透過した光を検出して前記混合液の光学特性を検出する検出部と、
前記反応ディスク上で、前記サンプルと前記試薬とが供給された前記反応セルの内壁面が前記サンプルまたは前記試薬又は前記サンプルと前記試薬との混合液により汚染されるのを防止するための防汚液を前記反応セルに供給し、前記反応セルの内壁面に防汚膜を形成後に前記防汚液を前記反応セルから排出する防汚膜形成機構と、
前記反応ディスク上で、前記防汚膜が形成された前記反応セルに前記防汚膜を前記反応セルの内壁面から剥離させるための剥離液を前記反応セルに供給し、前記防汚膜を前記反応セルの内壁面から剥離させた剥離液を前記反応セルから排出する防汚膜剥離機構と、
全体を制御するコンピュータと、
該コンピュータに分析に関する情報を入力する操作パネルと、
を備えたことを特徴とする自動分析装置。 - 請求項1記載の自動分析装置であって、前記コンピュータは、前記サンプル供給用分注機構により前記反応セルに供給する前記サンプル及び前記試薬供給用分注機構により前記反応セルに供給する前記試薬の種類に応じて前記防汚膜形成機構を制御して、前記反応ディスクに収納された複数の反応セルのうちから選択した反応セルに前記防汚液を供給して前記反応セルの内壁面に防汚膜を形成することを特徴とする自動分析装置。
- 請求項2記載の自動分析装置であって、前記コンピュータは、前記操作パネルから入力された情報に基づいて前記防汚膜形成機構を制御して、前記反応ディスクに収納された複数の反応セルのうちから選択した反応セルに前記防汚液を供給して前記反応セルの内壁面に防汚膜を形成することを特徴とする自動分析装置。
- 請求項1記載の自動分析装置であって、前記コンピュータは、前記試薬供給用分注機構により前記反応セルに供給する前記サンプル及び前記試薬供給用分注機構により前記反応セルに供給する前記試薬の種類に応じて前記防汚膜剥離機構を制御して、前記反応ディスクに収納された複数の反応セルのうちから選択した反応セルに前記剥離液を供給して前記反応セルの内壁面に形成された防汚膜を剥離することを特徴とする自動分析装置。
- 請求項4記載の自動分析装置であって、前記コンピュータは、前記操作パネルから入力された情報に基づいて前記防汚膜剥離機構を制御して、前記反応ディスクに収納された複数の反応セルのうちから選択した反応セルに前記剥離液を供給して前記反応セルの内壁面に形成された防汚膜を剥離することを特徴とする自動分析装置。
- 請求項1記載の自動分析装置であって、前記防汚膜形成機構は、前記防汚液として水溶性樹脂であるポリエチレングリコール(PEG)の水溶液又はポリビニルピロリドン(PVP)の水溶液を前記反応セルに供給することを特徴とする自動分析装置。
- 請求項1記載の自動分析装置であって、前記防汚膜剥離機構は、剥離液として水系洗浄剤を前記反応セルに供給することを特徴とする自動分析装置。
- サンプルセルに収容されたサンプルをサンプル供給用分注機構のサンプルノズルで吸引し、
該サンプルノズルで吸引したサンプルを反応ディスクに収納された反応セルに供給し、試薬ディスク機構の試薬容器に収容された試薬を試薬供給用分注機構の試薬用分注ノズルで吸引し、
該試薬用分注ノズルで吸引した試薬を前記反応ディスクに収納された反応セルに供給し、
前記供給された前記サンプルと前記試薬との混合液が形成された前記反応セルに光を照射して前記反応セルを透過した光を検出して得た信号に基づいて前記サンプルを分析する自動分析装置を用いた分析方法であって、
前記サンプルノズルで吸引したサンプルを前記反応ディスクに収納された反応セルに供給する前に前記反応セルに防汚液を供給して前記反応セルの内壁面に防汚膜を形成し、
前記サンプルを分析したのちに前記反応セルから前記混合液を排出し、
該混合液を排出した前記反応セルに剥離液を供給して前記反応セルの内壁面に形成した防汚膜を剥離する
ことを特徴とする自動分析装置を用いた分析方法。 - 請求項8記載の自動分析装置を用いた分析方法であって、前記サンプルノズルで吸引した前記サンプルを前記反応ディスクに収納された反応セルに供給する前に前記反応セルに前記防汚液を供給して前記反応セルの内壁面に前記防汚膜を形成することを、前記サンプル供給用分注機構により前記反応セルに供給する前記サンプル及び前記試薬供給用分注機構により前記反応セルに供給する前記試薬の種類に応じて前記反応ディスクに収納された複数の反応セルのうちから選択した反応セルに前記防汚液を供給して前記反応セルの内壁面に前記防汚膜を形成することを特徴とする自動分析装置を用いた分析方法。
- 請求項8記載の自動分析装置を用いた分析方法であって、前記反応ディスクに収納された複数の前記反応セルのうちから選択した反応セルに前記剥離液を供給して前記反応セルの内壁面に形成された前記防汚膜を剥離することを、前記サンプル供給用分注機構により前記反応セルに供給するサンプル及び前記試薬供給用分注機構により前記反応セルに供給する前記試薬の種類に応じて前記反応ディスクに収納された複数の反応セルのうちから選択した反応セルに前記剥離液を供給して前記反応セルの内壁面に形成された防汚膜を剥離することを特徴とする自動分析装置を用いた分析方法。
- 請求項8記載の自動分析装置を用いた分析方法であって、前記防汚液として水溶性樹脂であるポリエチレングリコール(PEG)の水溶液又はポリビニルピロリドン(PVP)の水溶液を前記反応セルに供給することを特徴とする自動分析装置を用いた分析方法。
- 請求項8記載の自動分析装置を用いた分析方法であって、前記剥離液として水系洗浄剤を前記反応セルに供給することを特徴とする自動分析装置を用いた分析方法。
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