JP6291502B2 - ピラゾロピリダジンならびに網膜変性疾患およびアッシャー症候群に伴う聴力損失を処置するための方法 - Google Patents

Description

本出願は、２０１２年１０月２５日に出願された米国仮出願第６１／７１８，６１１号および２０１３年３月８日に出願された米国仮出願第６１／７７５，４０２号の利益を主張し、これらの仮出願のそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

アッシャー症候群は、希な遺伝的障害であり、難聴および失明の主な原因であって、１０個の遺伝子のいずれか１個の変異に関連している。この症候群に対する他の名称としては、Ｈａｌｌｇｒｅｎ症候群、Ｕｓｈｅｒ−Ｈａｌｌｇｒｅｎ症候群、ＲＰ−Ｄｙｓａｃｕｓｉｓ症候群、およびＤｙｓｔｒｏｐｈｉａ Ｒｅｔｉｎａｅ Ｄｙｓａｃｕｓｉｓ症候群が挙げられる。

アッシャー症候群は、難聴および徐々の視力損失を特徴とする。聴力損失は内耳欠陥に伴うが、一方で視力損失は、網膜細胞の変性である網膜色素変性（ＲＰ）に伴う。通常、網膜の桿体細胞が最初に影響を受け、初期の夜盲症および周辺視の徐々の損失をもたらす。一部の場合は、黄斑の錐体細胞の初期変性に伴い、中心視（ｃｅｎｔｒａｌ ａｃｕｉｔｙ）の損失をもたらす。一部の場合、患者の中心窩視力がなしで済まされ、「ドーナツ型の視覚（ｄｏｕｇｈｎｕｔ ｖｉｓｉｏｎ）」をもたらし、ここでは、中心および周辺の視覚は損なわれないままであるが、失明の輪（ｒｉｎｇ ｏｆ ｂｌｉｎｄｎｅｓｓ）によって妨げられる。

アッシャー症候群は、Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩと示される、３つの臨床サブタイプを有する。アッシャーＩの対象は、重度に難聴に生まれ、１０年以内に視力を失い始め、平衡困難性を示す。彼らは、前庭異常のために、子供として歩行するのを習得することが遅い。アッシャーＩＩの対象は、聴力損失をあまり受けず、身体的平衡異常を受けず、思春期に視力を失い始める。彼らの聴力の多くは、中年まで保存され得る。アッシャーＩＩＩの対象は、聴力および視力の徐々の損失を受け、身体的平衡異常を受けることがあり得る。

アッシャー症候群は、変わりやすい状態であり；重症度の程度は、サブタイプと緊密には結び付けられない。例えば、アッシャーＩＩＩの対象は、小児期に無症候性であるが、成人早期から中期までに重度の聴力および視力の損失を発症することがある。５０歳前の実質的な視力障害は、アッシャーＩＩＩの対象によく見られる。他方で、アッシャーＩの対象は、生まれたときから難聴であるが、良好な中心視力を老年まで維持することがある。

（発明の要旨）
本発明は、式Ｉ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_１は、

であり；
Ｒ_２は、

であり；
ａは、０．１、または２である。）を提供する。

本発明はまた、式ＩＩ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_３は、

であり；
ｂは、０または１であり；
ｃは、１または２である。）を提供する。

本発明は追加的に、式ＩＩＩ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_４は、

である。）を提供する。

本発明はさらに、式ＸＩＩＩ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_５は、

であり；
Ｒ_６は、

であり；
ａは、０、１、または２である。）を提供する。

本発明はまた、式ＸＩＶ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_７は、

であり；
ｂは、０または１であり；
ｃは、１または２である。）を提供する。

本発明はまた、式ＸＶ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_８は、

である。）を提供する。

本発明はさらに、以下のピラゾロピリダジン化合物：

；および医薬として許容されるこれらの塩を提供する。

式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＸＩＩＩ、もしくは式ＸＩＶの化合物、化合物２０−化合物３０もしくは化合物３１、または医薬として許容されるこれらの塩（「ピラゾロピリダジン化合物」または「本発明の化合物」）は、網膜変性疾患またはアッシャー症候群に伴う聴力損失を処置するために有用である。

本発明はさらに、有効量のピラゾロピリダジン化合物、および医薬として許容される担体またはビヒクルを含む組成物を提供する。この組成物は、網膜変性疾患またはアッシャー症候群に伴う聴力損失を処置するために有用である。

本発明はさらに、網膜変性疾患を処置するための方法であって、これを必要としている対象に有効量のピラゾロピリダジン化合物を投与することを含む方法を提供する。

本発明はなおさらに、アッシャー症候群に伴う聴力損失を処置するための方法であって、これを必要としている対象に有効量のピラゾロピリダジン化合物を投与することを含む方法を提供する。

細胞におけるＮ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１発現の密度を示す図である。

本発明は、本発明の化合物、本発明の化合物を含む組成物、および網膜変性疾患またはアッシャー症候群に伴う聴力損失を処置するための方法であって、ピラゾロピリダジン化合物または医薬として許容されるこの塩を投与することを含む方法を提供する。

本発明の化合物
数値に直ぐ先立つ場合の「約」という語は、その値のプラスまたはマイナス１０％の範囲を意味し、例えば、「約１００ｍｇ」は、９０ｍｇから１１０ｍｇ、「約３００ｍｇ」は、２７０ｍｇから３３０ｍｇを意味するなどである。

略語：
ＡＰＣＩ 大気圧化学イオン化
ＤＡＰＩ ４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥＭ ダルベッコ変性イーグル培地
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＥＤＡＣ １−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＳＩ エレクトロスプレーイオン化
ＥＳＩ−ＴＯＦ エレクトロスプレーイオン化−飛行時間
ＨＡＴＵ ２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＰＯ ２−ヒドロキシピリジン−Ｎ−オキシド
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィー−質量分析
ＬＤＡ リチウムジイソプロピルアミド
ｍ／ｚ 質量対電荷比
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ マトリックス補助レーザ脱着イオン化−飛行時間
ＭＳ 質量分析
ＰＢＳ リン酸緩衝生理食塩水
Ｒｔ 保持時間
ＳＤＳ ドデシル硫酸ナトリウム
ＴＨＦ テトラヒドロフラン

式Ｉの化合物
一実施形態において、ピラゾロピリダジン化合物は、式Ｉ：

の化合物または医薬として許容されるこの塩
（式中、Ｒ_１は、

であり、
Ｒ_２は、

であり、
ａは、０、１、または２である。）である。

特定の実施形態において、Ｒ_１は、−Ｉである。他の実施形態において、Ｒ_１は、−Ｈである。さらに他の実施形態において、Ｒ_１は、−ＣＨ_３である。ある実施形態において、Ｒ_１は、−ＣＦ_３である。

さらに他の実施形態において、Ｒ_１は、

である。ある実施形態において、Ｒ_１は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_１は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_１は、

である。他の実施形態において、Ｒ_１は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_１は、

である。ある実施形態において、Ｒ_１は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_１は、

である。ある実施形態において、Ｒ_１は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_１は、

である。他の実施形態において、Ｒ_１は、

である。

さらに他の実施形態において、Ｒ_１は、

である。ある実施形態において、Ｒ_１は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_１は、

である。他の実施形態において、Ｒ_１は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_１は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_１は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_１は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_２は、−Ｈである。さらに他の実施形態において、Ｒ_２は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_２は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_２は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_２は、

であり、ａ＝１であり、Ｈａｌは、−Ｆである。

ある実施形態において、Ｒ_２は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_２は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_２は、

である。他の実施形態において、Ｒ_２は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_２は、

である。ある実施形態において、Ｒ_２は、

である。

さらなる実施形態において、ａが２である場合、それぞれのＨａｌは、同一でありまたは異なる。

式Ｉの例証的な化合物は、

；および医薬として許容されるこれらの塩である。

式ＩＩの化合物
本発明はまた、式ＩＩ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_３は、

であり；
ｂは、０または１であり；
ｃは、１または２である。）を提供する。

特定の実施形態において、ｂは０である。他の実施形態において、ｂは１であり、−Ｆは、ピラゾロピリダジノ環系に対してメタ位にある。さらに他の実施形態において、ｂは１であり、−Ｆは、ピラゾロピリダジノ環系に対してパラ位にある。

特定の実施形態において、Ｒ_３は、−ＣＦ_３である。ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

であり、ｃ＝１である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

であり、ｃ＝２である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

式ＩＩの例証的な化合物は、

；および医薬として許容されるこれらの塩である。

式ＩＩＩの化合物
本発明は追加的に、式ＩＩＩ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_４は、

である。）を提供する。

ある実施形態において、Ｒ_４は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_４は、

である。他の実施形態において、Ｒ_４は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_４は、

である。

式ＩＩＩの例証的な化合物は、

；および医薬として許容されるこれらの塩である。

式ＸＩＩＩの化合物
本発明は、式ＸＩＩＩ：

および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_５は、

であり；
Ｒ_６は、

であり；
ａは、０、１、または２である。）を提供する。

特定の実施形態において、Ｒ_５は、−Ｉである。他の実施形態において、Ｒ_５は、−Ｈである。さらに他の実施形態において、Ｒ_５は、−ＣＨ_３である。ある実施形態において、Ｒ_５は、−ＣＦ_３である。

さらに他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_５は、

である。他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_５は、

である。ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。

さらに他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_５は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_５は、

さらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_５は、

である。

さらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_５は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_５は、

である。

さらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_５は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_５は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_６は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_６は、

であり、ａ＝０である。他の実施形態において、Ｒ_６は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_６は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_６は、

である。ある実施形態において、Ｒ_６は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_６は、

である。他の実施形態において、Ｒ_６は、

である。ある実施形態において、Ｒ_６は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_６は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_６は、

である。

さらなる実施形態において、Ｒ_６は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_６は、

である。他の実施形態において、Ｒ_６は、

である。ある実施形態において、Ｒ_６は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_６は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_６は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_６は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_６は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_６は、

である。他の実施形態において、Ｒ_６は、

である。

さらなる実施形態において、ａが２である場合、それぞれのＨａｌは、同一でありまたは異なる。

式ＸＩＩＩの例証的な化合物は、

；および医薬として許容されるこれらの塩である。

式ＸＩＶの化合物
本発明はまた、式ＸＩＶ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_７は、

であり、
ｂは、０または１であり、
ｃは、１または２である。）を提供する。

特定の実施形態において、ｂは０である。他の実施形態において、ｂは１であり、−Ｆは、ピラゾロピリダジノ環系に対してメタ位にある。さらに他の実施形態において、ｂは１であり、−Ｆは、ピラゾロピリダジノ環系に対してパラ位にある。

特定の実施形態において、Ｒ_３は、−ＣＦ_３である。ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_３は、

であり、ｃ＝１である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_３は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

であり、ｃ＝２である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

ある実施形態において、Ｒ_３は、

である。他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_３は、

である。

式ＸＩＶの例証的な化合物は、

および医薬として許容されるこの塩である。

式ＸＶの化合物
本発明はまた、式ＸＶ：

の化合物および医薬として許容されるこれらの塩
（式中、Ｒ_８は、

である。）を提供する。

特定の実施形態において、Ｒ_８は、

である。ある実施形態において、Ｒ_８は、

である。他の実施形態において、Ｒ_８は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_８は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_８は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_８は、

である。特定の実施形態において、Ｒ_８は、

である。

特定の実施形態において、Ｒ_８は、

である。ある実施形態において、Ｒ_８は、

である。他の実施形態において、Ｒ_８は、

である。さらに他の実施形態において、Ｒ_８は、

である。さらなる実施形態において、Ｒ_８は、

である。なおさらなる実施形態において、Ｒ_８は、

である。

式ＸＶの例証的な化合物は、

；および医薬として許容されるこれらの塩である。

追加のピラゾロピリダジン化合物
本発明はさらに、以下のピラゾロピリダジン化合物：

；および医薬として許容されるこれらの塩を提供する。

本明細書で開示される化合物の一部、例えば、化合物Ｉｐ、Ｉｑ、Ｉｔ、ＩＩｊ、ＩＩｔ、ＩＩｕ、ＩＩｘ、ＩＩｙ、ＸＩＩＩｅ、ＸＩＩＩｆ、ＸＩＩＩｇ、ＸＩＩＩｈ、ＸＩＩＩｉ；ＸＩＩＩｖ、およびＸＩＩＩｗは、絶対立体化学を示す、ボールド体またはハッチ型ウェッジを有して描かれている。

いずれの特定の機構によっても拘束されることなく、ピラゾロピリダジン化合物のビスフェニルピラゾロピリダジン部分は、アッシャーＩＩＩ症候群で変異した遺伝子によってコードされたタンパク質であるＣｌａｒｉｎ Ｉの活性およびトラフィッキング（ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ）の回復に関与していると考えられる（Ａｄａｔｏら、Ｅｕｒ Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ、２００２年６月；１０（６）：３３９−５０頁）。

本発明の化合物は、塩の形態であり得る。一部の実施形態において、塩は、医薬として許容される塩である。医薬として許容される塩には、例えば、酸付加塩および塩基付加塩が含まれる。酸付加塩を形成する酸は、有機酸または無機酸であり得る。塩基付加塩を形成する塩基は、有機塩基または無機塩基であり得る。一部の実施形態において、医薬として許容される塩は、金属塩である。一部の実施形態において、医薬として許容される塩は、アンモニウム塩である。

酸付加塩は、本発明の化合物の遊離塩基形態への酸の付加から生じ得る。一部の実施形態において、酸は有機である。一部の実施形態において、酸は無機である。好適な酸の非限定的な例には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、亜硝酸、硫酸、亜硫酸、リン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、乳酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、酒石酸、アスコルビン酸、ゲンチシン酸、グルコン酸、グルカロン酸、サッカリン酸、ギ酸、安息香酸、グルタミン酸、パントテン酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、フマル酸、コハク酸、クエン酸、シュウ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、グリコール酸、リンゴ酸、桂皮酸、マンデル酸、２−フェノキシ安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、エンボン酸、フェニル酢酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、２−ホスホグリセリン酸、３−ホスホグリセリン酸、グルコース−６−リン酸、およびアミノ酸が含まれる。

好適な酸付加塩の非限定的な例には、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、亜硝酸塩、硫酸塩、亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、リン酸二水素塩、炭酸塩、重炭酸塩、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、４−アミノサリチル酸塩、酒石酸塩、アスコルビン酸塩、ゲンチシン酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、パントテン酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、メチルマレイン酸塩、グリコール酸塩、リンゴ酸塩、桂皮酸塩、マンデル酸塩、２−フェノキシ安息香酸塩、２−アセトキシ安息香酸塩、エンボン酸塩、フェニル酢酸塩、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、エタン−１，２−ジスルホン酸塩、４−メチルベンゼンスルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸塩、２−ホスホグリセリン酸塩、３−ホスホグリセリン酸塩、グルコース−６−リン酸塩、およびアミノ酸塩が含まれる。

金属塩は、カルボキシル基を有する本発明の化合物への無機塩基の付加から生じ得る。無機塩基は、塩基性対イオン、例えば、水酸化物イオン、炭酸イオン、重炭酸イオン、またはリン酸イオンなどと対になった金属カチオンからなる。金属は、アルカリ金属、アルカリ土類金属、遷移金属、または典型金属であり得る。好適な金属の非限定的な例には、リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウム、セリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、カルシウム、ストロンチウム、コバルト、チタン、アルミニウム、銅、カドミウム、および亜鉛が含まれる。

好適な金属塩の非限定的な例には、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、セシウム塩、セリウム塩、マグネシウム塩、マンガン塩、鉄塩、カルシウム塩、ストロンチウム塩、コバルト塩、チタン塩、アルミニウム塩、銅塩、カドミウム塩、および亜鉛塩が含まれる。

アンモニウム塩は、カルボキシル基を有する本発明の化合物へのアンモニアまたは有機アミンの付加から生じ得る。好適な有機アミンの非限定的な例には、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、ピペリジン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ジベンジルアミン、ピペラジン、ピリジン、ピラゾール、イミダゾール、ピラジン、ピピラジン、エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、プロカイン、クロロプロカイン、コリン、ジシクロヘキシルアミン、およびＮ−メチルグルカミンが含まれる。

好適なアンモニウム塩の非限定的な例には、トリエチルアンモニウム塩、ジイソプロピルアンモニウム塩、エタノールアンモニウム塩、ジエタノールアンモニウム塩、トリエタノールアンモニウム塩、モルホリニウム塩、Ｎ−メチルモルホリニウム塩、ピペリジニウム塩、Ｎ−メチルピペリジニウム塩、Ｎ−エチルピペリジニウム塩、ジベンジルアンモニウム塩、ピペラジニウム塩、ピリジニウム塩、ピラゾリウム塩、イミダゾリウム塩、ピラジニウム塩、エチレンジアンモニウム塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアンモニウム塩、プロカイン塩、クロロプロカイン塩、コリン塩、ジシクロヘキシルアンモニウム塩、およびＮ−メチルグルカミン塩が含まれる。

治療上の使用
本発明の化合物は、これを必要としている対象に網膜変性疾患の処置のために投与され得る。網膜変性疾患の非限定的な例には、網膜色素変性、レーバー先天性黒内障、症候性網膜変性、滲出型および萎縮型加齢黄斑変性を含む加齢黄斑変性、およびアッシャー症候群が含まれる。一部の実施形態において、アッシャー症候群はアッシャー症候群のサブタイプである。一部の実施形態において、サブタイプはアッシャーＩである。一部の実施形態において、サブタイプは、アッシャーＩＩである。一部の実施形態において、サブタイプはアッシャーＩＩＩである。

本発明のさらなる実施形態において、本発明の化合物は、これを必要としている対象にアッシャー症候群に伴う聴力損失の処置のために投与され得る。一部の実施形態において、アッシャー症候群は、アッシャー症候群のサブタイプである。一部の実施形態において、サブタイプは、アッシャーＩである。一部の実施形態において、サブタイプは、アッシャーＩＩである。一部の実施形態において、サブタイプは、アッシャーＩＩＩである。

「対象」は、哺乳動物、例えば、ヒト、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、または非ヒト霊長類、例えば、サル、チンパンジー、ヒヒもしくは赤毛猿である。一実施形態において、対象はヒトである。

本発明の化合物は、医薬として許容される担体またはビヒクルを含む組成物の成分として対象に投与され得る。好適な医薬担体またはビヒクルの非限定的な例には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール、緩衝水、およびリン酸緩衝生理食塩水が含まれる。これらの組成物は、例えば、ドロップ剤、溶液剤、懸濁剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、および持続放出性製剤として投与され得る。一部の実施形態において、組成物は、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアガム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水シロップ、メチルセルロース、メチルおよびプロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ならびに鉱油を含む。組成物は、滑沢剤、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、保存剤、甘味剤、または香味剤を追加的に含み得る。

組成物は、有効量の本発明の化合物を含み得る。本発明の化合物の「有効量」は、対象における網膜変性疾患またはアッシャー症候群に伴う聴力損失を処置するために有効である量である。組成物は、有効量の本発明の化合物を含む単位剤形で製剤化され得る。一部の実施形態において、組成物は、例えば、約１ｎｇから約１，０００ｍｇの本発明の化合物を含む。一部の実施形態において、組成物は、約１００ｍｇから約１，０００ｍｇの本発明の化合物を含む。一部の実施形態において、組成物は、約１００ｍｇから約５００ｍｇの本発明の化合物を含む。一部の実施形態において、組成物は、約２００ｍｇから約３００ｍｇの本発明の化合物を含む。

本発明の化合物の投与量は、対象の症状、年齢、および体重、網膜変疾患またはアッシャー症候群に伴う聴力損失の性質および重症度、投与の経路、ならびに組成物の形態に依存して変わり得る。本明細書で記載される組成物は、単回用量または分割用量で投与され得る。一部の実施形態において、本発明の化合物の投与量は、対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１ｎｇから約１０ｇ、１ｋｇ当たり約１ｎｇから約０．１ｇ、または１ｋｇ当たり約１００ｎｇから約１０ｍｇの範囲である。

投与は、例えば、局所、耳内、眼内、非経口、静脈内、動脈内、皮下、筋内、頭蓋内、眼窩内、脳室内、嚢内、脊髄内、槽内、腹腔内、鼻腔内、エアゾール、坐剤、または経口であり得る。経口使用のための製剤には、非毒性の、医薬として許容される賦形剤との混合物中に本発明の化合物を含有する錠剤が含まれる。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤または充填剤（例えば、スクロースおよびソルビトール）、滑沢剤、流動促進剤、および抗接着剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、シリカ、水素化植物油、またはタルク）であり得る。眼に使用するための製剤は、点眼剤の形態であり得る。

本発明の化合物またはこの組成物は、非経口、皮下、皮内、筋内、または静脈内投与のために、例えば、等張緩衝液、水性緩衝液または生理食塩緩衝液中で再構成するための凍結乾燥形態で提供され得る。本発明の組成物はまた、経口、耳内、経鼻、または舌下投与に有用な液体調製物、例えば、懸濁剤、シロップ剤またはエリキシル剤の形態であり得る。本発明の組成物はまた、経口投与に適した形態、例えば、カプセル剤、錠剤、丸剤、およびチュアブル固体製剤であり得る。本発明の組成物はまた、液体、粘性液体、ペースト、または粉末として、経皮投与のためのクリーム剤として調製され得る。本発明の組成物はまた、エアゾール性成分の有無にかかわらず、肺投与のための散剤として調製され得る。

組成物は、血液脳関門を横切ることができることに加えて、経口、耳内、鼻腔内、舌下、十二指腸内、皮下、頬側、結腸内、直腸、経膣、粘膜、肺、経皮、皮内、非経口、静脈内、筋内、および眼用剤形であり得る。

本発明の組成物は、当技術分野で公知の様々な手段によって投与され得る。例えば、本発明の組成物は、経口投与され得、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤またはシロップ剤として製剤化され得る。代替として、本発明の組成物は、注射剤（例えば、静脈内、筋内または皮下）、ドロップ注入（ｄｒｏｐ ｉｎｆｕｓｉｏｎ）調製物または坐剤として非経口投与され得る。眼科用途のために、本発明の組成物は、点眼剤または眼軟膏剤として製剤化され得る。耳用組成物は、内部的または表面的のいずれかで、耳への適用のために点耳剤、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、クリーム剤、液剤、ゲル剤、または膏薬（ｓａｌｖｅ）として製剤化され得る。これらの製剤は、従来の手段で調製され得、組成物は、任意の従来の添加剤、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、可溶化剤、懸濁助剤、乳化剤、またはコーティング剤と混合され得る。

本発明の組成物は、湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、着色剤、離型剤、コーティング剤、香味剤および賦香剤、保存剤ならびに抗酸化剤を含み得る。

組成物は、例えば、経口、耳内、眼内、経鼻、局所（頬側および舌下を含む）、直腸、経膣、エアゾールおよび／または非経口投与に適切であり得る。組成物は、単位剤形で提供され得、当技術分野で公知の任意の方法により調製され得る。

経口投与に適した製剤は、カプセル剤、カシェ剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤、散剤、顆粒剤の形態で、または水性もしくは非水性液体中溶液剤もしくは懸濁剤として、または水中油型もしくは油中水型の液体乳剤として、またはエリキシル剤もしくはシロップ剤として、またはパステル剤（不活性基剤、例えば、ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアを用いる）としての形態であってもよい。本発明の組成物はまた、ボーラス剤、舐剤、またはペースト剤として投与され得る。

医薬として許容される担体またはビヒクルの追加の例には、（１）充填剤または増量剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／またはケイ酸；（２）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、および／またはアカシア；（３）保湿剤、例えば、グリセロール；（４）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、バレイショまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム；（５）溶解遅延剤、例えば、パラフィン；（６）吸収促進剤、例えば、第四級アンモニウム化合物；（７）湿潤剤、例えば、アセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール；（８）吸収剤、例えば、カオリンおよびベントナイトクレー；（９）滑沢剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびこれらの混合物；（１０）着色剤；ならびに（１１）緩衝剤が含まれる。類似の組成物を、軟質または硬質のゼラチン充填カプセル中で充填剤として用いることができる。

経口投与のための液体剤形は、医薬として許容される乳剤、マイクロエマルション、ゲル剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、およびエリキシル剤が含まれる。液体剤形は、当技術分野で一般に用いられる不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸ジエチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油、例えば、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにこれらの混合物を含有し得る。

懸濁剤形は、懸濁している、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカント、ならびにこれらの混合物を含有し得る。

主題組成物の経皮投与のための剤形には、ドロップ剤、散剤、スプレー剤、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、溶液剤、およびパッチ剤が含まれる。軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、およびゲル剤は、賦形剤、例えば、動物および植物脂肪、油、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛、またはこれらの混合物を含有し得る。

散剤およびスプレー剤は、賦形剤、例えば、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、ポリアミド粉末、またはこれらの混合物を含有し得る。スプレー剤は、慣例の噴射剤、例えば、クロロフルオロヒドロカーボン、および揮発性非置換炭化水素、例えば、ブタンおよびプロパンを追加的に含有してもよい。

組成物は、固体粒子のエアゾールで投与され得る。非水性（例えば、フルオロカーボン噴射剤）懸濁剤が使用され得る。超音波ネブライザが使用され得るが、それらが分解を引き起こし得る剪断への暴露を最小限にするからである。

水性エアゾールは、本発明の化合物の水溶液または水性懸濁液を、非イオン性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎｓ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、またはポリエチレングリコール）；タンパク質、例えば、血清アルブミン；ソリビタンエステル；脂肪酸；レシチン；アミノ酸；緩衝剤；塩；糖；または糖アルコールのような任意の従来の医薬として許容される担体またはビヒクルと一緒に製剤化することによって作製され得る。

非経口投与に適した組成物は、本発明の化合物、および１種以上の医薬として許容される滅菌の等張性水性または非水性の溶液剤、分散液剤、懸濁剤、もしくは乳剤、または抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、もしくは製剤を対象の血液と等張性にさせる溶質を含有し得る、滅菌の注射可能な溶液剤もしくは分散液剤中に使用直前に再構成され得る滅菌の散剤、ならびに懸濁化剤または増粘剤を含む。

特定の実施形態を参照して本発明を説明してきたが、他の実施形態が本明細書の考察から当業者に明らかとなる。本発明は、以下の実施例への参照によりさらに明らかにされる。材料および方法の両方への多くの変更が、本発明の範囲から逸脱することなく実施されてもよいことが当業者に明らかである。

一般合成方法
標準酸性ＬＣ−ＭＳ条件：（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）

０．１％（Ｖ／Ｖ）ギ酸を有するアセトニトリル（遠ＵＶ等級）：０．１％ギ酸を有する水（ＰｕｒｅＬａｂ Ｏｐｔｉｏｎユニットによる高純度）の勾配を使用するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５μｍＣ１８（２）、１００×４．６ｍｍ（プラスガードカートリッジ）カラムを使用した。流量は２ｍＬ／分であった。ＵＶ検出は、Ｗａｔｅｒｓダイオードアレー検出器（開始レンジ２１０ｎｍ、終了レンジ４００ｎｍ、レンジ間隔４ｎｍ）を使用して行った。質量検出は、単一四重極ＬＣ−ＭＳ装置によって行った。イオン化は、化合物の種類に応じてＥＳＩまたはＡＰＣＩのいずれかである。使用した勾配は、０．００分の時点で水性溶媒９５％から、３．５０分の時点で水性溶媒５％まで及んだ。次いで、このパーセンテージをさらに２分間保持した。

標準塩基性ＬＣ−ＭＳ条件：（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）
アセトニトリル（遠ＵＶ等級）：１０ｍＭの重炭酸アンモニウム（炭酸水素アンモニウム）を有する水（ＰｕｒｅＬａｂ Ｏｐｔｉｏｎユニットによる高純度）の勾配を使用するＷａｔｅｒｓ Ｘｔｅｒｒａ ＭＳ ５μｍＣ１８、１００×４．６ｍｍ（プラスガードカートリッジ）を使用した。流量は２ｍＬ／分であった。ＵＶ検出は、Ｗａｔｅｒｓダイオードアレー検出器（開始レンジ２１０ｎｍ、終了レンジ４００ｎｍ、レンジ間隔４ｎｍ）を使用して行った。質量検出は、単一四重極ＬＣ−ＭＳ装置によって行った。イオン化は、化合物の種類に応じてＥＳＩまたはＡＰＣＩのいずれかである。使用した勾配は、０．００分の時点で水性溶媒９５％から、４．０分の時点で水性溶媒５％まで及んだ。次いで、このパーセンテージをさらに１．５分間保持した。

標準酸性ＨＰＬＣ条件：（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＣＬ＿ＣＨ３ＣＮ）

０．１％（Ｖ／Ｖ）ギ酸を有するアセトニトリル（遠ＶＵ等級）：０．１％ギ酸を有する水（ＰｕｒｅＬａｂ Ｏｐｔｉｏｎユニットによる高純度）の勾配を使用するＨｉｃｈｒｏｍ ＡＣＥ３Ｃ１８−ＡＲ混合モード １００×４．６ｍｍカラムを使用した。流量は１ｍＬ／分であった。ＵＶ検出は、Ａｇｉｌｅｎｔダイオードアレー検出器（３００ｎｍ、バンド幅２００ｎｍ；基準４５０ｎｍ、バンド幅１００ｎｍ）を使用して行った。使用した勾配は、０．００分から３．００分まで水性溶媒９８％から、１２．００分の時点で水性溶媒１００％まで及んだ。次いで、このパーセンテージをさらに２．４分間保持した。

標準塩基性ＨＰＬＣ条件：（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ）
アセトニトリル（遠ＵＶ等級）：１０ｍＭ重炭酸アンモニウムを有する水（ＰｕｒｅＬａｂ Ｏｐｔｉｏｎユニットによる高純度）の勾配を使用するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、ＧｅｍｉｎｉＮＸ、３μｍＣ１８、１５０×４．６ｎｍカラムを使用した。流量は、１ｍＬ／分であった。ＵＶ検出は、Ａｇｉｌｅｎｔダイオードアレー検出器（３００ｎｍ、バンド幅２００ｎｍ；基準４５０ｎｍ、バンド幅１００ｎｍ）を使用して行った。使用した勾配は、０．００分の時点で水性溶媒９５．５％から９．００分の時点で水性溶媒０％まで及んだ。次いで、このパーセンテージをさらに４．５分間保持した。

合成スキーム

ピラゾロピリダジン化合物を合成するのに有用である合成スキームの非限定的な例には、以下が含まれる。
スキームＩ：式Ｉの化合物を合成するための一般スキーム

実施例１
４−クロロ−３−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾロ−４−イル）−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｃ）
工程１：Ｎ−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド

１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（５０ｇ、０．６０２ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（１６０ｍＬ、１．４４ｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２Ｌ）中溶液に、塩化アセチル（９９ｍＬ、１．３８ｍｏｌ）を窒素の雰囲気下０℃で滴下した。この反応混合物を室温で１日間撹拌した。一部のジアセチル化生成物をＬＣＭＳで観察した。反応混合物を真空中で濃縮し、得られた固体をＭｅＯＨ（２Ｌ）に懸濁させ、０℃に冷却した。４Ｍ ＮａＯＨ溶液（水性、４４０ｍＬ、１．７５ｍｏｌ）をゆっくりと添加し、この混合物を１．５時間かけて室温に加温させた。ＭｅＯＨを真空中で除去し、固体をろ過により収集し、最小限の冷水で洗浄し、真空中で乾燥させて、表題化合物を固体（６０ｇ）として得た。

工程２：Ｎ−（４−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド

Ｎ−（１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド（６０ｇ、０．４８ｍｏｌ）、ヨウ素酸（２１．１ｇ、０．１２ｍｏｌ）およびヨウ素（６１ｇ、０．２４ｍｏｌ）のエタノール（１．６Ｌ）中懸濁液を６０℃で１．５時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチルおよび２Ｍ Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３水溶液間に分配した。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮して、表題化合物を固体（１０５ｇ）として得た。

工程３：Ｎ−（４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド

Ｎ−（４−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド（３０ｇ、１２０ｍｍｏｌ）、炭素上１０％パラジウム（５０％水、７．４ｇ、３ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１．１４ｇ、６ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（６．３ｇ、２４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５０ｍＬ、３６０ｍｍｏｌ）のエタノール（６００ｍＬ）中懸濁液を通して窒素を２０分間泡立てた。フェニルアセチレンを添加し、この混合物を通して窒素をさらに２５分間泡立てた。次いで、この反応混合物を加熱し、窒素の雰囲気中還流条件下で３日間撹拌し、室温に冷却した。反応混合物をセライトに通してろ過し、ろ液を真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル９：１から０：１）により精製し、表題化合物を固体（１７．６ｇ）として得た。

工程４：１−（１−エトキシエチル）−４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン

Ｎ−（４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド（１７．６ｇ、７８ｍｍｏｌ）、エトキシエテン（１１．２ｍＬ、１１７ｍｍｏｌ）および１，４−ジオキサン中ＨＣｌ（１ｍＬ、４ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（５２０ｍＬ）中溶液を室温で１時間撹拌し、真空中で濃縮した。残渣をエタノール（２６０ｍＬ）および２５％ＮａＯＨ水溶液（２６０ｍＬ）に溶解させ、この反応混合物を７５℃に４時間加熱し、室温に冷却した。エタノールを真空中で部分濃縮し、得られた固体をろ過により収集し、水および最小限の冷エタノールで洗浄し、真空中で乾燥させて、表題化合物を固体（１６ｇ）として得た。

工程５：４−クロロ−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン

亜硝酸ナトリウム（４．３ｇ、６３ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（３１４ｍＬ）に−１５℃で添加し、１０分間撹拌した。１−（１−エトキシエチル）−４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（３ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を−１０℃で１０分間および室温で１日間撹拌した。この反応混合物を０℃に冷却し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２５０ｍＬ）を添加した。激しい撹拌下で、Ｎａ_２ＣＯ_３（１６０ｇ）、続いて飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を、ｐＨが７になるまで２時間にわたって注意深く添加し、さらなる塩基の添加後にはもはや泡立ちはなかった。層を分離し、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。合わせた有機層を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／ジエチルエーテル１：０から０：１）により精製し、表題化合物を固体（３．４３ｇ）として得た。

工程６：４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン

４−クロロ−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（２．４４ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）およびＮ−ヨードスクシンイミド（３．５８ｇ、１５．９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０６ｍＬ）中懸濁液を還流において１日間加熱した。黄色の固体を温かい間にろ過により収集して、表題化合物および出発原料の混合物（９：１、４ｇ）を得た。

工程７：４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉａ）、４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｂ）および４−クロロ−３−ヨード−２−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−２Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２０）

４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび４−クロロ−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（９：１、１．４ｇ）、２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エタノール（１．１３ｇ、７．８ｍｍｏｌ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（１．３７ｇ、７．８ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２．０７ｇ、７．９ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２６ｍＬ）中溶液を８５℃に１時間加熱し、次いで、室温に冷却し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル１：０から０：１で開始し、酢酸エチル／ＭｅＯＨ中４Ｍ ＮＨ_３１：０から９：１で終了する）により部分的に精製した。残渣を分取クロマトグラフィーにより精製して、化合物Ｉａ、化合物Ｉｂおよび化合物２０を得た。

４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン （化合物Ｉａ）

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７５ (２ H, m), ７.５７-７.４９ (３ H, m), ４.８７ (２ H, t), ３.０１ (２ H, t), ２.６１ (４ H, br s), ２.３４ (４ H, br s), ２.２３ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．６７分；ｍ／ｚ ４８３［Ｍ＋Ｈ］９７．６５％純度。

４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｂ）

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.２１ (１ H, s), ７.８４-７.８１ (２ H, m), ７.５６-７.４７ (３ H, m), ４.８９ (２ H, t), ３.０３ (２ H, t), ２.６２ (４ H, br s), ２.３５ (４ H, br s), ２.２３ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．４８分；ｍ／ｚ ３５７［Ｍ＋Ｈ］９９．７３％純度。

４−クロロ−３−ヨード−２−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−２Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２０）

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８３ (２ H, m), ７.５６-７.４７ (３ H, m), ４.７８ (２ H, t), ３.１０ (２ H, t), ２.６６ (４ H, br s), ２.４７ (４ H, br s), ２.３０ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．０７分；ｍ／ｚ ４８３［Ｍ＋Ｈ］９４．５３％純度。

工程８：４−クロロ−３−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾロ−４−イル）−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｃ）

４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（７５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（３７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＫ_３ＰＯ_４（９９ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．２ｍＬ）および水（０．４ｍＬ）中懸濁液を通して窒素を２０分間泡立てた。１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン錯体（１３ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を添加し、管を密封し、マイクロ波照射を用いて６０℃に３０分間加熱した。粗反応混合物をろ過し、分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物Ｉｃ（４２ｍｇ）を得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.００ (１ H, s), ７.８９ (１ H, s), ７.７８-７.７５ (２ H, m), ７.５６-７.４７ (３ H, m), ４.８９ (２ H, t), ４.００ (３ H, s), ３.０４ (２ H, t), ２.７０-２.５８ (４ H, m), ２.４４-２.３０ (４ H, m), ２.２４ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．４７分；ｍ／ｚ ４３７［Ｍ＋Ｈ］９８．８８％純度。

実施例２
（３−（４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−３−イル）フェニル）（ピロリジン−１−イル）メタノン（化合物Ｉｄ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（３−（ピロリジン−１−カルボニル）フェニル）ボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｄを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.４４ (１ H, t), ７.８４-７.７５ (３ H, m), ７.６２ (１ H, dt), ７.５６-７.４６ (４ H, m), ４.９４ (２ H, t), ３.６８ (２ H, t), ３.４９ (２ H, t), ３.０７ (２ H, t), ２.６５ (４ H, br s), ２.３７ (４ H, br s), ２.２４ (３ H, s), ２.０１-１.８５ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ９．９分；ｍ／ｚ ５３０［Ｍ＋Ｈ］９２．５６％純度。

実施例３
４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−３−（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｅ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）ボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｅを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.８８ (１ H, d), ８.１９ (１ H, s), ７.９８ (１ H, dd), ７.８１-７.７７ (２ H, m), ７.５７-７.５１ (３ H, m), ４.９９ (２ H, t), ３.１２ (２ H, t), ２.８０ (４ H, br s), ２.６２ (４ H, br s), ２.４０ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．８５分；ｍ／ｚ ５０２［Ｍ＋Ｈ］９０．６４％純度。

実施例４
４−クロロ−３−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｆ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに２−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランを用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｆを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.６８-７.６４ (２ H, m), ７.４５-７.３６ (３ H, m), ６.２３-６.２０ (１ H, m), ４.７６ (２ H, t), ４.２９ (２ H, m), ３.８９ (２ H, t), ２.９２ (２ H, t), ２.６８-２.５２ (６ H, m), ２.３０ (４ H, br s), ２.１７ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ９．０６分；ｍ／ｚ ４３９［Ｍ＋Ｈ］９３．３％純度。

実施例５
（Ｅ）−４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−３−スチリル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｇ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（Ｅ）−スチリルボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｇを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ７.８５-７.７５ (５ H, m), ７.７０-７.５６ (４ H, m), ７.５２-７.４５ (２ H, m), ７.４４-７.３８ (１ H, m), ４.９２ (２ H, t), ３.０１ (２ H, t), ２.５７-２.５４ (４ H, m), ２.３２-２.２０ (４ H, m), ２.１５ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．０１分；ｍ／ｚ ４５９［Ｍ＋Ｈ］９６．９８％純度。

実施例６
４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−３−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｈ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）ボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｈを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ９.２６ (１ H, d), ８.６０ (１ H, dd), ８.１７ (１ H, d), ７.８２ (２ H, m), ７.６７-７.５８ (３ H, m), ５.０１ (２ H, t), ３.０４ (２ H, t), ２.５７-２.５４ (４ H, br s), ２.７６ (４ H, br s), ２.１５ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．８６分；ｍ／ｚ ５０２［Ｍ＋Ｈ］９７．３１％純度。

実施例７
（Ｅ）−４−クロロ−３−（３−メトキシプロパ−１−エン−１−イル）−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｉ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（Ｅ）−２−（３−メトキシプロパ−１−エン−１−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランを用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｉを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ７.８０-７.７７ (２ H, m), ７.６７-７.５７ (３ H, m), ７.２３ (１ H, dt), ６.８０ (１ H, dt), ４.８８ (２ H, t), ４.２１ (２ H, dd), ３.４０ (３ H, s), ２.９７ (２ H, t), ２.５７-２.５４ ((４ H, ), ２.２４ (４ H, br s), ２.１４ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．６８分；ｍ／ｚ ４２７［Ｍ＋Ｈ］９６．８３％純度。

実施例８
３−（ベンゾフラン−２−イル）−４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｊ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりにベンゾフラン−２−イルボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｊを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８３ (２ H, m), ７.７２ (１ H, d), ７.６４ (１ H, d), ７.５７ (３ H, m), ７.５０ (１ H, s), ７.４２ (１ H, t), ７.３３ ((１ H, t), ５.０２ (２ H, t), ３.１２ (２ H, t), ２.６８ (４ H, br s), ２.４０ (４ H, br s), ２.２６ ((３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．３９分；ｍ／ｚ ４７３［Ｍ＋Ｈ］９３．８３％純度。

実施例９
４−クロロ−３−（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｋ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに１−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロールを用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｋを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８ (２ H, m), ７.５５-７.４９ (３ H, m), ６.８２ (１ H, t), ６.５８ (１ H, dd), ６.２６ (１ H, dd), ４.９１ (２ H, t), ３.７１ (３ H, s), ３.０８ (２ H, t), ２.７４ (４ H, br s), ２.５２ (４ H, br s), ２.３４ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．７９分；ｍ／ｚ ４３６［Ｍ＋Ｈ］９６．５％純度。

実施例１０
４−クロロ−３−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物１ｌ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）ボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｌを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７５ (２ H, m), ７.５８ (１ H, s), ７.５４-７.４７ (４ H, m), ６.９０ (１ H, d), ４.９１ (２ H, t), ４.６６ (２ H, t), ３.３０ (２ H, t), ３.０８ (２ H, t), ２.７２ (４ H, br s), ２.５０ (４ H, br s), ２.３２ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ９．８６分；ｍ／ｚ ４７５［Ｍ＋Ｈ］９６．９２％純度。

実施例１１
４−クロロ−３−（１Ｈ−インドール−２−イル）−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｍ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インドール−２−イル）ボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従ってｔｅｒｔ−ブチル２−（４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−３−イル）−１Ｈ−インドール−カルボキシレートを合成し、このｔｅｒｔ−ブチル２−（４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−３−イル）−１Ｈ−インドール−カルボキシレートを以下のとおりに脱保護して、化合物Ｉｍを得た。

ｔｅｒｔ−ブチル２−（４−クロロ−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−３−イル）−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（２９ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）中溶液とトリフルオロ酢酸（０．８ｍＬ）を室温で１日間撹拌した。固体ＮａＨＣＯ_３を気体が発生しなくなるまで添加し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液およびＣＨ_２Ｃｌ_２を添加した。層を分離し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、合わせた有機物を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をアセトニトリルおよび水から凍結乾燥させて、化合物Ｉｍを固体として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ９.１４ (１ H, s), ７.７９ (２ H, m), ７.７０ (１ H, d), ７.６０-７.５０ (３ H, m), ７.４９-７.４２ (２ H, m), ７.２９ (１ H, t), ７.１５ (１ H, t), ４.９２ (２ H, t), ３.１４ (２ H, t), ２.８７ (８ H, br s), ２.５６ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．６８分；ｍ／ｚ ４７２［Ｍ＋Ｈ］９５．８５％純度。

実施例１２
２−（４−クロロ−３−（シクロペンタ−１−エン−１−イル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン（化合物Ｉｎ）

工程６を通して実施例１に従って、４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンを合成した。水素化ナトリウム（鉱油中６０％、３２ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（４００ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）および２−クロロ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン（５４ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（７．５ｍＬ）中溶液に室温で添加した。室温で１．５時間後、さらに水素化ナトリウム（鉱油中６０％、２７ｍｇ）を添加し、この懸濁液を２時間撹拌した。４％ＬｉＣｌ水溶液および酢酸エチルを添加した。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル１：０から０：１）により部分的に精製した。得られた固体を最小限のＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解させ、ジエチルエーテルを固体が沈殿するまで添加した。固体をろ過により収集して、２−（４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン（２４６ｍｇ）を得た。

４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンの代わりに２−（４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）−１−（ピロリジン−１−イル）エタノンを用いたこと、および１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに２−（シクロペンタ−１−エン−１−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランを用いたことを除いて、実施例１工程８に従って化合物Ｉｎを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７３ (２ H, m), ７.５４-７.４７ (３ H, m), ６.５８ (１ H, m), ５.４８ (２ H, s), ３.６３ (２ H, t), ３.５２ (２ H, t), ２.９６ (２ H, m), ２.６５-２.５９ (２ H, m), ２.１１-２.０１ (４ H, m), １.９４-１.８７ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．５２分；ｍ／ｚ ４０８［Ｍ＋Ｈ］９７．９７％純度。

実施例１３
４−クロロ−３−（５−メチル−２−フリル）−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｏ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（５−メチル−２−フリル）ボロン酸を用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｏを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７６ (２ H, m), ７.５５-７.４９ (３ H, m), ６.９７ (１ H, d), ６.１７ (１ H, d), ４.９２ (２ H, t), ３.０５ (２ H, t), ２.６４ (４ H, bs), ２.４４ (３ H, s), ２.３６ (４ H, bs), ２.２４ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．８７分；ｍ／ｚ ４３７［Ｍ＋Ｈ］９６．２６％純度。

実施例１４
４−クロロ−１−［２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３−ヨード−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｐ）
工程１：２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノール

２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノールを以下のとおりに合成した：（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン塩酸塩（１ｇ、８ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２中懸濁液を０℃に冷却した。トリエチルアミン（２．７９ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）およびメチルブロモアセテート（０．８３ｍＬ、８．８ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２および水で希釈した。層を分離し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。合わせた有機相を脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮し、メチル２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］アセテートを得、これをさらに精製することなしに次の工程に用いた（１．２９ｇ）。水素化アルミニウムリチウムのＴＨＦ中溶液（２Ｍ、８ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を、メチル２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］アセテート（１．２９ｇ、８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７２ｍＬ）中溶液にゆっくりと添加した。この反応混合物を７０℃で２時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、氷冷１０％ＫＯＨ水溶液をゆっくりと添加した。この反応混合物をろ過し、固体を１０％ＫＯＨ水溶液および高温酢酸エチルで洗浄した。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮し、２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノールを油（７７９ｍｇ）として得た。

工程２：４−クロロ−１−［２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３−ヨード−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｐ）

工程７において２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エタノールの代わりに２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノールを用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｐを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７４ (２ H, m), ７.５７-７.４７ (３ H, m), ５.１８-５.０１ (１ H, m), ４.９１-４.８４ (２ H, m), ３.２３-３.１５ (２ H, m), ２.９９-２.８５ (３ H, m), ２.６６ (１ H, q), ２.０９-１.９５ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．６５分；ｍ／ｚ ４７２［Ｍ＋Ｈ］９４．２１％純度。

実施例１５
４−クロロ−３−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−［２−（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｑ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５，−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに２−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランおよび４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンの代わりに４−クロロ−１−［２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３−ヨード−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンを用いることを除いて、実施例１に従って化合物Ｉｑを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７７-７.７３ (２ H, m), ７.５５-７.４６ (３ H, m), ６.３３-６.３１ (１ H, m), ５.２２-５.０４ (１ H, m), ４.８８ (２ H, t), ４.３９ (２ H, q), ３.９９ (２ H, t), ３.２０ (２ H, t), ２.９８-２.８９ (３ H, m), ２.７６-２.６３ (３ H, m), ２.１２-１.９３ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．５６分；ｍ／ｚ ４２８［Ｍ＋Ｈ］９０．４３％純度。

実施例１６
４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｒ）

工程７において２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エタノールの代わりに２−ピロリジン−１−イルエタノールを用いて、工程７を通して実施例１に従って、化合物Ｉｒを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７５ (２ H, m), ７.５７-７.４９ (３ H, m), ４.８９ (２ H, t), ３.１４ (２ H, t), ２.６６-２.６０ (４ H, m), １.７６-１.７１ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．６６分；ｍ／ｚ ４５４［Ｍ＋Ｈ］９９．４４％純度。

実施例１７
４−クロロ−３−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−５−フェニル−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物１ｓ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに２−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランおよび４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンの代わりに４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンを用いて、実施例１に従って化合物Ｉｓを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７６-７.７３ (２ H, m), ７.５５-７.４６ (３ H, m), ６.３６-６.２７ (１ H, m), ４.８９ (２ H, t), ４.４０-４.３７ (２ H, m), ３.９９ (２ H, t), ３.１７ (２ H, t), ２.７５-２.６３ (６ H, m), １.７７ (４ H, bs).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．５８分；ｍ／ｚ ４１０［Ｍ＋Ｈ］９９．４５％純度。

実施例１８
２−（４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）−１−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノン（化合物Ｉｔ）
工程１：２−クロロ−１−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノン

クロロアセチルクロリド（６３２μＬ、７．９４ｍｍｏｌ）を、（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン（１ｇ、７．９４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．２ｍＬ、１５．９ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）中溶液に５℃で滴下した。この反応混合物を室温で１時間撹拌した。水およびＣＨ_２Ｃｌ_２を添加した。層を分離し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。合わせた有機物を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮して、２−クロロ−１−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノン（４．７ｇ）を得た。

工程２：２−（４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）−１−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノン（化合物Ｉｔ）

水素化ナトリウム（鉱油中６０％、２４０ｍｇ、６ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１．０６ｇ、３ｍｍｏｌ）および２−クロロ−１−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エタノン（７４０ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に室温で添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。４％ＬｉＣｌ水溶液および酢酸エチルを添加した。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル１：０から３：７）により部分的に精製した。得られた固体を最小限のＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解させ、固体が沈殿するまでジエチルエーテルを添加した。固体をろ過により収集して、化合物Ｉｔを固体（８４６ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７６-７.７２ (２ H, m), ７.５６-７.４９ (３ H, m), ５.６１-５.４５ (２ H, m), ５.３６-５.２０ (１ H, m), ３.９７-３.７５ (３ H, m), ３.６７-３.５３ (１ H, m), ２.５５-１.９０ (１ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．２１分；ｍ／ｚ ４８６［Ｍ＋Ｈ］９５．１１％純度。

スキームＩＩ：式Ｉの化合物を合成するための追加の一般スキーム

実施例１９
４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｕ）
工程１：Ｎ−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド

塩化アセチル（４１ｇ、０．５３０ｍｏｌ）を、３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（２５．６ｇ、０．２６４ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（５８ｍＬ、０．５３０ｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２５０ｍＬ）中溶液に窒素の雰囲気下０℃で滴下した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物に水を添加し、有機層を真空中で濃縮した。残渣をＭｅＯＨ／ＴＨＦ（１００ｍＬ／１００ｍＬ）の混合物に溶解させ、１０℃に冷却し、１Ｍ ＮａＯＨ溶液で処理した。この反応混合物を０．２５時間撹拌し、ｐＨ５に酸性化し、有機溶媒を真空中で除去した。得られた沈殿物をろ過し、洗浄し（水、ジエチルエーテル）、乾燥させて、表題化合物を白色の固体（２９．６ｇ）として得た。

工程２：Ｎ−（４−ヨード−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド

Ｎ−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド（２９．６ｇ、０．２１３ｍｏｌ）、ヨウ素酸（９．３ｇ、０．０５３ｍｏｌ）およびヨウ素（３２．５ｇ、０．１２８ｍｏｌ）のエタノール（３００ｍＬ）中懸濁液を５０℃で３時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチルに溶解させた。この溶液を２Ｍ Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３、続いてブライン溶液で２回洗浄した。有機層を脱水し（硫酸マグネシウム）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をジエチルエーテルから粉砕し、ろ過し、乾燥させて、表題化合物を白色の固体（３２．５ｇ）として得た。

工程３：Ｎ−（３−メチル−４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド

Ｎ−（４−ヨード−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド（３２．５ｇ、０．１２２ｍｏｌ）、フェニルアセチレン（２５．０ｇ、０．２４５ｍｏｌ）、トリエチルアミン（３００ｍＬ）およびＤＭＦ（１００ｍＬ）の混合物を通して窒素を１５分間泡立てた。ヨウ化銅（２．３ｇ、１２ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（４．２ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を窒素下９０℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル５：１から１：１）により精製し、表題化合物を固体（１５ｇ）として得た。

工程４：３−メチル−４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン

Ｎ−（３−メチル−４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド（１５ｇ、６３ｍｍｏｌ）、エタノール（５０ｍＬ）および２５％ＮａＯＨ水溶液（５０ｍＬ）の混合物を９０℃で１時間撹拌し、室温に冷却した。この反応混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣にジエチルエーテルを添加し、固体をろ過により収集し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空中で乾燥させて、表題化合物を固体（３．３ｇ）として得た。

工程５：４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｕ）

亜硝酸ナトリウム（２．３ｇ、３３．８ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（３３ｍＬ）に−１５℃で少しずつ添加し、１５分間撹拌した。３−メチル−４−（フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（３．３ｇ、１６．９ｍｍｏｌ）を固体として添加し、続いて、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）を添加した。この反応混合物を加温させ、室温で１時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（２８ｍＬ）で希釈し、ＮａＣｌ（１．０ｇ）を添加した。この反応混合物を５０℃に１６時間加熱し、次いで、室温に冷却し、水およびＣＨ_２Ｃｌ_２間に分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２／酢酸エチル９：１）により精製し、化合物Ｉｕを淡黄色の固体（１．９ｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): １１.７９ (１ H, s), ７.８０-７.７７ (２ H, m), ７.５７-７.４８ (３ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ９．５６分；ｍ／ｚ ２４５［Ｍ＋Ｈ］９５．６１％純度。

実施例２０
Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順
４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（０．３３ｍｍｏｌ）、そのアルコール（０．６５ｍｍｏｌ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（１１４ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１７１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中混合物を、８５から１２０℃の温度に３０から９０分間マイクロ波照射を用いて加熱した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物を得た。

実施例２１
４−クロロ−３−メチル−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｖ）

上記Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エタノールから化合物Ｉｖを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８０-７.７７ (２ H, m), ７.５６-７.４８ (３ H, m), ４.８０ (２ H, t), ２.９９ (２ H, t), ２.８０ (３ H, s), ２.６４ (４ H, br s), ２.４０ (４ H, br s), ２.２６ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．５３分；ｍ／ｚ ３７１［Ｍ＋Ｈ］９９．２５％純度。

実施例２２
２−（４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）−１−ピロリジン−１−イル−エタノン（化合物Ｉｗ）

上記Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−ヒドロキシ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノンから化合物Ｉｗを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７４ (２ H, m), ７.５４-７.５０ (３ H, m), ５.４４ (２ H, s), ３.６３ (２ H, t), ３.５２ (２ H, t), ２.８１ (３ H, s), ２.０７ (２ H, q), １.９０ (２ H, q).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．１５分；ｍ／ｚ ３５６［Ｍ＋Ｈ］９８．９８％純度。

実施例２３
４−クロロ−３−シクロプロピル−１−（２−メチルスルホニルエチル）−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｘ）
工程１：４−クロロ−３−シクロプロピル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン

３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミンの代わりに３−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミンを用いることを除いて、実施例１９に従って４−クロロ−３−シクロプロピル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンを合成した。

工程２：４−クロロ−３−シクロプロピル−１−（２−メチルスルホニルエチル）−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｘ）

上記Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３−シクロプロピル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−（メチルスルホニル）エタノールから化合物Ｉｘを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７５ (２ H, m), ７.５７-７.５０ (３ H, m), ５.１３ (２ H, t), ３.７６ (２ H, t), ２.９８ (３ H, s), ２.６０-２.５５ (１ H, m), １.１６-１.１０ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．３７分；ｍ／ｚ ３７７［Ｍ＋Ｈ］９９．７％純度。

実施例２４
４−クロロ−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−３−（２−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｙ）

４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．４ｍＬ）中混合物を通して窒素を１０分間泡立てた。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２４ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物中で窒素をさらに１０分間泡立てた。２−（トリブチルスタニル）ピリジンを添加し、窒素をさらに１０分間泡立てた。管を密封し、マイクロ波照射を用いて１００℃に１時間、１２０℃に１時間、１３０℃に２時間、次いで、１４０℃に３時間加熱した。この粗反応混合物をろ過し、分取ＨＰＬＣにより部分的に精製した。残渣をＤＭＳＯ（２ｍＬ）に溶解させ、水を添加した。固体をろ別し、水で洗浄し、乾燥させて、化合物Ｉｙを固体（１０ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.８１-８.７７ (１ H, m), ７.９０-７.７８ (４ H, m), ７.５５-７.４６ (３ H, m), ７.３９ (１ H, m), ４.９７ (２ H, t, J = ６.７ Hz), ３.０８ (２ H, t, J = ６.７ Hz), ２.７０-２.５５ (４ H, br s), ２.３６ (４ H, br s), ２.２３ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ８．９８分；ｍ／ｚ ４３４［Ｍ＋Ｈ］９６．６％純度。

実施例２５
４−クロロ−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−３−ピロリジン−１−イル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｚ）

工程１：３−ヨード−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール

４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１４０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（３ｍＬ）およびＮａＯＨ水溶液（４Ｍ、３ｍＬ）中懸濁液を５０℃に２．５時間加熱した。この混合物を放置して、室温に冷却させ、次いで、ＳＣＸ（１０ｇ）カートリッジ上に負荷する前にｐＨ２−３に中和した。カートリッジをＭｅＯＨ、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（１：１）で溶離させ、最後にＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（１：１）中１０％メタノール性アンモニア（７Ｎ）で生成物を放出させた。溶媒を蒸発させることにより、表題化合物（１００ｍｇ）を得た。

工程２：１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−３−ピロリジン−イル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール

３−ヨード−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール（１２０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）のジオキン（１．７ｍＬ）およびＤＭＳＯ（０．９ｍＬ）中溶液に、ピロリジン（２３３μＬ、２．８ｍｍｏｌ）およびナトリウムｔ−ブトキシド（３７ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物中で窒素を３０分間泡立てた。次いで、Ｐｄ_２ｄｂａ_３（２４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（９ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を添加し、管を窒素でフラッシュし、密封し、１００℃に５時間加熱した。ピロリジン（４０μＬ、０．４９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２ｄｂａ_３（２４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（９ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１００℃にさらに１時間加熱した。混合物を放置して、室温に冷却させ、次いで、ＳＣＸ（１０ｇ）カートリッジ上に負荷する前にｐＨ２−３に中和した。カートリッジをＭｅＯＨ、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（１：１）で溶離させ、最後にＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（１：１）中１０％メタノール性アンモニア（７Ｎ）で生成物を放出させた。溶媒を蒸発させることにより、表題化合物を黄色のガラス（９４ｍｇ）として得、この表題化合物を次の工程でそのまま反応させた。

工程３：４−クロロ−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−３−ピロリジン−１−イル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｚ）

１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−５−フェニル−３−ピロリジン−１−イル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール（９０ｍｇ）のＰＯＣｌ_３（６ｍＬ）およびＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）中懸濁液を６０℃に２．５時間加熱した。この混合物を真空中で濃縮し、残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液間に分配した。層を分離し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、合わせた有機物を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物Ｉｚ（１２ｍｇ）を得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７５-７.７１ (２ H, m), ７.５３-７.４３ (３ H, m), ４.６９ (２ H, t, J = ６.８ Hz), ３.６２-３.５５ (４ H, m), ２.９４ (２ H, t, J = ６.８ Hz), ２.６３ (４ H, br s), ２.４０ (４ H, br s), ２.２６ (３ H, s), ２.０２-１.９７ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿ギ酸＿ＡＳＣＥＮＴＩＳ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ７．８６分；ｍ／ｚ ４２６［Ｍ＋Ｈ］９４．３％純度。

実施例２６
２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（トリフルオロメチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］−１−ピロリジン−１−イル−エタノン（化合物Ｉａａ）

工程１：Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾロ−５−イル］アセトアミドの合成

塩化アセチル（７．７ｍｌ、１０８ｍｍｏｌ）を、３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（６．５ｇ、４３ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（１２．３ｍｌ、１１２ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１６０ｍｌ）中溶液に、氷浴中で冷却しながら４５分間にわたって添加した。この反応物を室温に加温させ、１６時間撹拌し、溶媒を真空中で除去し、残渣をメタノール（１５０ｍｌ）に溶解させた。この溶液を氷浴中で冷却し、２５％水性ＮａＯＨ（７．３ｍｌ、６５ｍｍｏｌ）を添加した。３．２５時間後、２５％水性ＮａＯＨ（０．５ｍｌ、４．４ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物をさらに１．５時間撹拌した。２Ｎ ＨＣｌ（２０ｍｌ）を添加し、有機溶媒を真空中３５℃未満で除去した。水を添加し、次いで粗製物をＥｔＯＡＣ（×２）で抽出し、抽出物を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。得られた残渣を撹拌しながらＣＨ_２Ｃｌ_２に懸濁させた。固体をろ過し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２×３ｍｌ）で洗浄し、真空中で乾燥させて、表題化合物を白色の固体（７．３ｇ）として得、この表題化合物をその後の工程で用いた。

工程２：Ｎ−［４−ヨード−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミドの合成

Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド（７．３ｇ、３８ｍｍｏｌ）のエタノール（１２０ｍＬ）中溶液に、ヨウ素酸（１．６５ｇ、９．４ｍｍｏｌ）およびヨウ素（４．８ｇ、１８．９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を６５℃で３．２５時間撹拌した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を撹拌しながら高温ＣＨ_２Ｃｌ_２（１５０ｍｌ）に懸濁させ、固体をろ過し、高温ＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍｌ）に再懸濁させ、ろ過し、真空中で乾燥させて、表題化合物を白色の固体（８．９ｇ）を得、この表題化合物をその後の工程で用いた。

工程３：Ｎ−［４−（２−フェニルエチニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミドの合成

フェニルアセチレン（３．９ｍｌ、３５ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（３６ｍＬ）のＤＭＦ（１３．５ｍＬ）中脱気溶液を、Ｎ−［４−ヨード−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド（４．５ｇ、１４ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（５３０ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）およびＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２（９８０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）にＮ_２の雰囲気下で添加した。次いで、この反応物を８５℃に３．５時間加熱した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン１：９から１：０）により精製し、表題化合物を茶色の油（３ｇ）として得、この表題化合物をその後の工程で用いた。

工程４：４−（２−フェニルエチニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミンの合成

Ｎ−［４−（２−フェニルエチニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド（９００ｍｇ、３．０７ｍｍｏｌ）のエタノール（１２ｍＬ）および２５％ＮａＯＨ（９ｍＬ）中溶液を７０℃で１．５時間加熱した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（×２）で抽出した。合わせた有機物を水で洗浄し、この洗浄物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機物をＭｇＳＯ_４で脱水し、ろ過し、蒸発させ、表題化合物を赤色の油（６５２ｍｇ）として得、この表題化合物をその後の工程で用いた。

工程５：４−クロロ−５−フェニル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンの合成

亜硝酸ナトリウム（５４０ｍｇ、７．８ｍｍｏｌ）の濃ＨＣｌ（２０ｍＬ）中冷却（冷却浴−１５℃）撹拌懸濁液に、４−（２−フェニルエチニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（６５２ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）中溶液を添加した。冷却浴を取り除き、この反応混合物を室温で１時間撹拌した。ＮａＣｌ（９００ｍｇ）を添加し、この反応物を５０℃で１６時間加熱した。冷却したこの反応混合物にＣＨ_２Ｃｌ_２を添加した。水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で２回抽出し、有機相を合わせ、ＭｇＳＯ_４で脱水し、ろ過し、蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン１：９から１：０）により精製し、表題化合物を黄色のガラス（１１５ｍｇ）として得、この表題化合物をその後の工程で用いた。

工程６：２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（トリフルオロメチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］−１−ピロリジン−１−イル−エタノン（化合物Ｉａａ）の合成

水素化ナトリウム（１８ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−５−フェニル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１１５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）および２−クロロ−１−ピロリジン−１−イル−エタノン（８１ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１．５ｍｌ）中溶液に添加し、この反応物を２１時間撹拌した。水およびＣＨ_２Ｃｌ_２を添加し、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機相を合わせて、ＭｇＳＯ_４で脱水し、ろ過し、蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン２：８から１：０）、続いて分取ＨＰＬＣにより精製し、化合物Ｉａａを白色の固体（２３ｍｇ）として得た。

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．６４分；ｍ／ｚ ４１０［Ｍ＋Ｈ］９７．５４％純度。

実施例２７
３−ブロモ−４−クロロ−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｂｂ）

４−クロロ−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１５５ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、臭素（５１μＬ、１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（９８μＬ、０．７ｍｍｏｌ）のクロロホルム（４ｍＬ）中混合物を室温で１時間撹拌した。追加の臭素（２５μＬ）およびクロロホルム（４ｍＬ）を添加し、この反応混合物を室温で４時間撹拌した。さらに臭素（２５μＬ）およびトリエチルアミン（９８μＬ）を添加し、この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２および重炭酸ナトリウム溶液で希釈した。水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、合わせた有機相を脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。得られた残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン０：１から１：１）を用いて精製して、化合物Ｉｂｂを固体（９７ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): １１.７５ (１ H, s), ７.７９-７.７０ (２ H, m), ７.５９-７.５１ (３ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．２７分；ｍ／ｚ ３０９［Ｍ＋Ｈ］９８．０７％純度。

実施例２８
４−クロロ−１−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル］−３−（５−メチル−２−エチニル）−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｃｃ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに（５−メチルチオフェン−２−イル）ボロン酸を用いることを除いて、実施例１に概略した同様の手順に従って化合物Ｉｃｃを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.６７ (２ H, m), ７.４３ (３ H, m), ７.３６ (１ H, m), ６.７２ (１ H, s), ４.７９ (２ H, t), ２.９６ (２ H, t), ２.６１ (４ H, br s), ２.５０-２.３８ (７ H, m), ２.２３ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．９２分；ｍ／ｚ ４５３［Ｍ＋Ｈ］９０．９８％純度。

実施例２９
４−クロロ−３−シクロプロピル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物Ｉｄｄ）

３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミンの代わりに３−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミンを用いることを除いて、実施例１９に従って化合物Ｉｄｄを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): １０.７１ (１ H, s), ７.８０-７.７６ (２ H, m), ７.５７-７.４９ (３ H, m), ２.６４-２.５６ (１ H, m), １.１７-１.１１ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．７６分；ｍ／ｚ ２７１［Ｍ＋Ｈ］９８．２２％純度。

実施例３０
２−（４−クロロ−３−シクロプロピル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）−１−ピロリジン−１−イル−エタノン（化合物Ｉｅｅ）

水素化ナトリウム（鉱油中６０％、１８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−３−シクロプロピル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）および２−クロロ−１−（ピロリジン−１−イル）エタノン（８２ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）中溶液に室温で１６時間添加した。この反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機層を水で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ジエチルエーテル８：２）により精製して、化合物Ｉｅｅを固体（６５ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７６ (２ H, m), ７.５６-７.４５ (３ H, m), ５.３９ (２ H, s), ３.６５-３.５７ (２ H, m), ３.５４-３.４５ (２ H, m), ２.６１-２.５３ (１ H, m), ２.１１-２.０１ (２ H, m), １.９４-１.８４ (２ H, m), １.２０-１.０４ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．４４分；ｍ／ｚ ３８２［Ｍ＋Ｈ］９７．４７％純度。

実施例３１
２−（４−クロロ−３−シクロプロピル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）エタノール（化合物Ｉｆｆ）

工程１においてエチル２−（５−アミノ−３−フェニル−ピラゾール−１−イル）アセテートの代わりにエチル２−（５−アミノ−３−シクロプロピル−ピラゾール−１−イル）アセテートを用いることを除いて、以下に記載されるとおりに、実施例５５、工程４に従って化合物Ｉｆｆを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７５ (２ H, m), ７.５７-７.４９ (３ H, m), ４.７９ (２ H, t), ４.２１-４.１５ (２ H, m), ３.１８ (１ H, t), ２.６１-２.５６ (１ H, m), １.１４-１.０９ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．０６分；ｍ／ｚ ３１５［Ｍ＋Ｈ］９０．２％純度。

実施例３２
２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］−Ｎ−（２−ジメチルアミノエチル）アセトアミド（化合物Ｉｇｇ）

工程１：メチル２−［５−アミノ−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］アセテート

３−オキソ−３−ピリジン−３−イルプロパンニトリル（１．３１ｇ、９ｍｍｏｌ）、エチルヒドラジノアセテート塩酸塩（１．３９ｇ、９ｍｍｏｌ）のメタノール（９ｍＬ）中混合物をマイクロ波照射下１２０℃で１時間加熱した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル）により精製し、表題化合物を固体（５１０ｍｇ）として得た。

工程２：メチル２−［５−アセトアミド−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］アセテート

無水酢酸（４３１μＬ、４．４ｍｍｏｌ）を、メチル２−［５−アミノ−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］アセテート（５１０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）のピリジン（１．７ｍＬ）中溶液に窒素の雰囲気下０℃で滴下した。添加完了後、この反応混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、固体をジエチルエーテルで洗浄して、表題化合物を白色の固体（４３０ｍｇ）として得た。

工程３および工程４：メチル２−［５−アセトアミド−４−（２−フェニルエチニル）−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］アセテート
メチル２−［５−アセトアミド−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］アセテートを用いることを除いて、以下に記載するとおりに、実施例５５、工程２および工程３に従って、メチル２−［５−アセトアミド−４−（２−フェニルエチニル）−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］アセテートを合成した。

工程５：２−［５−アミノ−４−（２−フェニルエチニル）−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］酢酸

エチル２−［５−アセトアミド−４−（２−フェニルエチニル）−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］アセテート（４１０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍＬ）中懸濁液に、２５％ＮａＯＨ水溶液（６．５ｍＬ）を添加した。この反応混合物を８５℃で６時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、エタノールを真空中で蒸発させた。得られた水性懸濁液をろ過し、固体をアセトニトリルで洗浄し、乾燥させ、２３５ｇの２−［５−アミノ−４−（２−フェニルエチニル）−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］酢酸を得た。

工程６：２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］酢酸

亜硝酸ナトリウム（１８５ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（５ｍＬ）に０℃で少しずつ添加し、２０分間撹拌した。２−［５−アミノ−４−（２−フェニルエチニル）−３−（３−ピリジル）ピラゾール−１−イル］酢酸（２８５ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を固体として添加した。この反応混合物を加温させ、室温で１６時間撹拌した。反応混合物をろ過し、水性母液のｐＨを重炭酸ナトリムおよび１Ｎ ＨＣｌで２に調整した。水性母液をＣＨ_２Ｃｌ_２で３回抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ_４で脱水し、ろ過し、蒸発させた。残渣をジエチルエーテルから粉砕し、ＬＣ／ＭＳにより推定３５％純度で２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］酢酸からなる８８ｍｇの固体を得、この固体を次の工程でそのまま用いた。

工程７：２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］−Ｎ−（２−ジメチルアミノエチル）アセトアミド（化合物Ｉｇｇ）

２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］酢酸（８８ｍｇ、３５％純粋、０．０８４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６７μＬ、０．３８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１１２ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）および２−（ジメチルアミノ）エチルアミン（３２μＬ、０．３０ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２中混合物を室温で１時間撹拌した。この反応混合物を水で希釈した。相を分離し、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。合わせた有機層を脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物Ｉｇｇ（８ｍｇ）を得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ９.０５ (１ H, d), ８.７２ (１ H, dd), ８.４８ (１ H, s), ８.１３ (１ H, dt), ７.７５-７.７１ (２ H, m), ７.５６-７.４７ (３ H, m), ７.４４ (１ H, dd), ５.５３ (２ H, s), ３.６７-３.５９ (２ H, m), ２.９８ (２ H, t), ２.６４ (６ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．７９分；ｍ／ｚ ４３６［Ｍ＋Ｈ］９５．２４％純度。

実施例３３
２−（４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）エタノール（化合物Ｉｈｈ）

工程１においてエチル２−（５−アミノ−３−フェニル−ピラゾール−１−イル）アセテートの代わりにエチル２−（５−アミノ−３−メチル−ピラゾール−１−イル）アセテートを用いることを除いて、以下に記載するとおりに、化合物Ｉｈｈは実施例５５、工程４に従った。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７５ (２ H, m), ７.５６-７.４９ (３ H, m), ４.８５-４.８０ (２ H, m), ４.２４-４.１８ (２ H, m), ３.１３-３.０８ (１ H, m), ２.８１ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．３５分；ｍ／ｚ ２８９［Ｍ＋Ｈ］９５．２３％純度。

実施例３４
２−［４−クロロ−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ［０］］ピリダジン−１−イル］エタノール（化合物Ｉｉｉ）

工程３においてメチルヒドラジンの代わりに２−ヒドロキシエチルヒドラジンを用いることを除いて、以下に示すとおりに、実施例６９に従って化合物Ｉｉｉを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ９.０４ (１ H, s), ８.７３ (１ H, m), ８.１１ (１ H, m), ７.７６ (２ H, m), ７.５４ (３ H, m), ７.４５ (１ H, m), ５.０１ (２ H, m), ４.３１ (２ H, m), ２.９２ (１ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．１分；ｍ／ｚ ３５２［Ｍ＋Ｈ］９８．４４％純度。

スキームＩＩＩ：式ＩＩの化合物を合成するための一般スキーム

実施例３５
４−クロロ−１−［（３−メチルイミダゾール−４−イル）メチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩａ）
工程１：Ｎ−（２−アセチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）アセトアミド

５−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−３−アミン（１８．６ｇ、０．１１７ｍｏ）およびＮ−メチルモルホリン（３０．８ｍＬ、０．２８１ｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２５０ｍＬ）中溶液に、塩化アセチル（２０ｍＬ、０．２８１ｍｏｌ）を窒素の雰囲気下０℃で滴下した。この反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２および水で希釈した。層を分離し、有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣にジエチルエーテルを添加し、固体をろ過により収集し、表題化合物を固体（２５．１ｇ）として得た。

工程２：Ｎ−（２−アセチル−４−ヨード−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）アセトアミド

Ｎ−（２−アセチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）アセトアミド（２５．１ｇ、０．１０３ｍｏｌ）、ヨウ素酸（４．５ｇ、０．０２６ｍｏｌ）およびヨウ素（１５．７ｇ、０．０６２ｍｏｌ）のエタノール（２５０ｍＬ）中懸濁液を５０℃で３時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を真空中で濃縮し、ＣＨ_２Ｃｌ_２および２Ｍ Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３水溶液間に分配した。層を分離し、有機層をブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮して、表題化合物および出発物質の混合物（２．２：１、３０．３ｇ）を得た。この混合物をエタノール（２５０ｍＬ）中ヨウ素酸（１．６ｇ、９．６ｍｍｏｌ）およびヨウ素（９．７ｇ、０．０３８ｍｏｌ）を用いて同じ条件下で再び反応させて、表題化合物を固体（３１．９ｇ）として得た。

工程３：Ｎ−［３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド

Ｎ−（２−アセチル−４−ヨード−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）アセトアミド（３１．８７ｇ、８６．４ｍｍｏｌ）、フェニルアセチレン（１７．６ｇ、１７３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２００ｍＬ）およびＤＭＦ（１００ｍＬ）の混合物を通して窒素を１５分間泡立てた。ヨウ化銅（１．６４ｇ、８．６ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３．０ｇ、４．３ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を窒素下９０℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル５：１から１：１）により精製し、表題化合物を固体（１２．５ｇ）として得た。

工程４：３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン

Ｎ−［３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド（１２．５ｇ、４２ｍｍｏｌ）、エタノール（１００ｍＬ）および２５％ＮａＯＨ水溶液（１００ｍＬ）の混合物を撹拌し、９０℃に１時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣にジエチルエーテルを添加し、固体をろ過により収集し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空中で乾燥させて、表題化合物を固体（５．４ｇ）として得た。

工程５：４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン

亜硝酸ナトリウム（２．８８ｇ、４２ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（３１４ｍＬ）に−１５℃で少しずつ添加し、１５分間撹拌した。３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（５．４ｇ、２１ｍｍｏｌ）を固体として添加し、続いて、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）を添加した。この反応混合物を加温させ、室温で１時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（４４ｍＬ）で希釈し、ＮａＣｌ（２．７ｇ）を添加した。この反応混合物を５０℃に１日間加熱した。層を分離し、有機層を水で洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル４：１、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２／酢酸エチル１：０から４：１）により精製し、表題化合物を固体（３．０ｇ）として得た。

工程６：４−クロロ−１−［（３−メチルイミダゾール−４−イル）メチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩａ）

４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メタノール（７３ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（１１４ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１７１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中混合物を、マイクロ波照射を用いて１００℃に３０分間加熱した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物ＩＩａ（４６ｍｇ）を得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７７-７.７０ (４ H, m), ７.５６-７.４６ (７ H, m), ７.３７ (１ H, s), ５.９７ (２ H, s), ３.９１ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．８８分；ｍ／ｚ ４０１［Ｍ＋Ｈ］９４．６２％純度。

実施例３６
Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順：
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（０．３３ｍｍｏｌ）、そのアルコール（０．６５ｍｍｏｌ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（１１４ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１７１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中混合物を、マイクロ波照射を用いて８５から１２０℃の温度に３０から９０分間加熱した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物を得た。

実施例３７
１−［２−（４−クロロ−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）エチル］ピロリジン−２−オン（化合物ＩＩｂ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび１−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン−２−オンから化合物ＩＩｂを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７３ (４ H, m), ７.５６-７.４８ (６ H, m), ４.９８ (２ H, t), ３.９５ (２ H, t), ３.４９ (２ H, t), ２.１６ (２ H, t), ２.０１-１.９０ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．１６分；ｍ／ｚ ４１８［Ｍ＋Ｈ］９９．６９％純度。

実施例３８
４−クロロ−１−（２−イミダゾール−１−イルエチル）−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｃ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノールから化合物ＩＩｃを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７６-７.７１ (４ H, m), ７.５５-７.４８ (６ H, m), ７.３１ (１ H, s), ６.９８ (１ H, d), ６.９６ (１ H, d), ５.１６ (２ H, t), ４.７２ (２ H, t).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．３８分；ｍ／ｚ ４０１［Ｍ＋Ｈ］９８．０８％純度。

実施例３９
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−（３，３，３−トリフルオロプロピル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｄ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび３，３，３−トリフルオロプロパン−１−オールから化合物ＩＩｄを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７４ (４ H, m), ７.５６-７.４７ (６ H, m), ５.０９ (２ H, t), ３.０７-２.９４ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １３．００分；ｍ／ｚ ４０３［Ｍ＋Ｈ］９７．２４％純度。

実施例４０
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−テトラヒドロピラン−４−イル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｅ）

Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オールから化合物ＩＩｅを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８０-７.７５ (４ H, m), ７.５６-７.４６ (６ H, m), ５.５２-５.４６ (１ H, m), ４.２３-４.１９ (２ H, m), ３.７１ (２ H, td), ２.６０-２.５４ (２ H, m), ２.１８-２.１４ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １３．０６分；ｍ／ｚ ３９１［Ｍ＋Ｈ］９６．１２％純度。

実施例４１
４−クロロ−１−［（３−メチルオキセタン−３−イル）メチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｆ）

Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび（３−メチルオキセタン−３−イル）メタノールから化合物ＩＩｆを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７４ (４ H, m), ７.５６-７.４８ (６ H, m), ５.０２ (２ H, s), ４.９５ (２ H, d), ４.５０ (２ H, d), １.４０ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．１９分；ｍ／ｚ ３９１［Ｍ＋Ｈ］９４．８６％純度。

実施例４２
４−クロロ−１−［（１−メチルピラゾール−４−イル）メチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｇ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メタノールから化合物ＩＩｇを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７３ (４ H, m), ７.６７ (１ H, s), ７.６４ (１ H, s), ７.５５-７.４６ (６ H, m), ５.８６ (２ H, s), ３.８５ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １２．２６分；ｍ／ｚ ４０１［Ｍ＋Ｈ］９５．２２％純度。

実施例４３
４−［（４−クロロ−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）メチル］オキサゾール（化合物ＩＩｈ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびオキサゾール−４−イルメタノールから化合物ＩＩｈを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８５ (１ H, s), ７.８３ (１ H, d, J = １.１２ Hz), ７.７９-７.７５ (４ H, m), ７.５６-７.４６ (６ H, m), ５.９７ (２ H, s).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．８１分；ｍ／ｚ ３８８［Ｍ＋Ｈ］９３．５８％純度。

実施例４４
４−クロロ−１−（シクロプロピルメチル）−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｉ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびシクロプロピルメタノールから化合物ＩＩｉを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８１-７.７６ (４ H, m), ７.５５-７.４５ (６ H, m), ４.６９ (２ H, d), １.６２-１.５８ (１ H, m), ０.６５-０.６１ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．７７分；ｍ／ｚ ３６１［Ｍ＋Ｈ］９６．２５％純度。

実施例４５
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−［［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イル］メチル］ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｊ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびＲ）−（テトラヒドロフラン−２−イル）メタノールから化合物ＩＩｊを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８０-７.７６ (４ H, m), ７.５５-７.４４ (６ H, m), ４.９７ (１ H, dd), ４.７８-４.６４ (２ H, m), ３.９９ (１ H, q), ３.８３-３.７４ (１ H, m), ２.１６-２.０３ (１ H, m), ２.０３-１.８０ (３ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １２．９３分；ｍ／ｚ ３９１［Ｍ＋Ｈ］９２．２３％純度。

実施例４６
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｋ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２，２，２−トリフルオロエタノールから化合物ＩＩｋを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８１-７.７５ (４ H, m), ７.５８-７.５０ (６ H, m), ５.４０ (２ H, q).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １２．８９分；ｍ／ｚ ３８９［Ｍ＋Ｈ］９７．０９％純度。

実施例４７
４−クロロ−１−（２−フルオロエチル）−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｌ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−フルオロエタノールから化合物ＩＩｌを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８０-７.７５ (４ H, m), ７.５６-７.４９ (６ H, m), ５.１８-５.０７ (３ H, m), ５.０１ (１ H, t).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．０５分；ｍ／ｚ ３５３［Ｍ＋Ｈ］９６．０３％純度。

実施例４８
４−（４−クロロ−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）ブタン−２−オン（化合物ＩＩｍ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび４−ヒドロキシブタン−２−オンから化合物ＩＩｍを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７３ (４ H, m), ７.５６-７.４５ (６ H, m), ５.０９ (２ H, t), ３.３４ (２ H, t), ２.２６ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １２．５分；ｍ／ｚ ３７７［Ｍ＋Ｈ］９５．０７％純度。

実施例４９
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−（３−ピリジルメチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｎ）

Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびピリジン−３−イルメタノールから化合物ＩＩｎを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.８５ (１ H, d), ８.５７ (１ H, dd), ７.９３ (１ H, dt), ７.７９-７.７３ (４ H, m), ７.５６-７.４８ (６ H, m), ７.３１-７.２７ (１ H, m), ６.００ (２ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．０３分；ｍ／ｚ ３９８［Ｍ＋Ｈ］９７．３１％純度。

実施例５０
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−（４−ピリジルメチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｏ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびピリジン−４−イルメタノールから化合物ＩＩｏを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.６０ (２ H, dd), ７.７９-７.７５ (４ H, m), ７.５６-７.４８ (６ H, m), ７.３９ (２ H, d), ５.９８ (２ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．７７分；ｍ／ｚ ３９８［Ｍ＋Ｈ］９７．２％純度。

実施例５１
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−（２−ピリジルメチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｐ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびピリジン−２−イルメタノールから化合物ＩＩｐを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.６０-８.５７ (１ H, m), ７.８０-７.７５ (４ H, m), ７.６８-７.６２ (１ H, m), ７.５５-７.４６ (７ H, m), ７.２３-７.２０ (１ H, m) ６.１５ (２ H, s).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．０５分；ｍ／ｚ ３９８［Ｍ＋Ｈ］９５．９２％純度。

実施例５２
４−クロロ−１−（２−メチルスルホニルエチル）−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｑ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−（メチルスルホニル）エタノールから化合物ＩＩｑを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７４ (４ H, m), ７.５６-７.４８ (６ H, m), ５.３４-５.２９ (２ H, m), ３.８８ (２ H, t), ３.０５ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．１３分；ｍ／ｚ ４１３［Ｍ＋Ｈ］９７．３１％純度。

スキームＩＶ：式ＩＩの化合物を合成するための一般スキーム

実施例５３
１−［２−［４−クロロ−３−（３−フルオロフェニル）−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］エチル］ピロリジン−２−オン（化合物ＩＩｒ）
工程１：Ｎ−［３−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド

３−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（６．５ｇ、３６ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（９．７ｍＬ、８８ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１５０ｍＬ）中溶液に、塩化アセチル（６ｍＬ、８５ｍｍｏｌ）を窒素の雰囲気下０℃で滴下した。この反応混合物を室温で１日間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣に０℃でＭｅＯＨ（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）を添加し、続いてＮａＯＨ溶液（水性２．５Ｍ、４２．５ｍＬ）を０℃で添加した。この反応混合物を室温で１５分間撹拌し、ｐＨが約６に達するまでＨＣｌ溶液を添加した。有機溶媒を真空中で蒸発させた。得られた水性懸濁液から固体をろ過により収集し、表題化合物を固体（７．６ｇ）として得た。

工程２：Ｎ−［３−（３−フルオロフェニル）−４−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド

Ｎ−［３−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド（７．６ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）、ヨウ素酸（１．５ｇ、８．５ｍｍｏｌ）およびヨウ素（４．４ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）のエタノール（２００ｍＬ）中懸濁液を６０℃で１時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を真空中で濃縮し、ＣＨ_２Ｃｌ_２および２Ｍ Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３水溶液間に分配した。層を分離し、有機層をブラインで洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮して、表題化合物を固体（１０．８ｇ）として得た。

工程３：Ｎ−［３−（３−フルオロフェニル）−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド

Ｎ−［３−（３−フルオロフェニル）−４−ヨード−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド（１０．８ｇ、４４ｍｍｏｌ）、フェニルアセチレン（１２．５ｇ、１２３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１００ｍＬ）およびＤＭＦ（４０ｍＬ）の混合物を通して窒素を１５分間泡立てた。ヨウ化銅（８４０ｍｇ、４．４２ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（１．５ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を窒素下９０℃で６時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル１：０から０：１）により精製し、表題化合物を固体（４ｇ）として得た。

工程４：３−（３−フルオロフェニル）−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン

Ｎ−［３−（３−フルオロフェニル）−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル］アセトアミド（２ｇ、６．２ｍｍｏｌ）、エタノール（２２ｍＬ）および２５％ＮａＯＨ水溶液（２２ｍＬ）の混合物を８０℃に１時間撹拌および加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮して、表題化合物を固体（１．２ｇ）として得た。

工程５：４−クロロ−３−（３−フルオロフェニル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン

亜硝酸ナトリウム（７４０ｍｇ、１０．７ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（２４ｍＬ）に−１５℃で少しずつ添加し、１５分間撹拌した。３−（３−フルオロフェニル）−４−（２−フェニルエチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（１ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を固体として添加し、続いてＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）を添加した。この反応混合物を加温させ、室温で１．５時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）で希釈し、ＮａＣｌ（０．５ｇ）を添加した。この反応混合物を５０℃に１日間加熱した。層を分離し、有機層を水で洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン０：１から７：３）により精製し、表題化合物を固体（５００ｍｇ）として得た。

工程６：１−［２−［４−クロロ−３−（３−フルオロフェニル）−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル］エチル］ピロリジン−２−オン（化合物ＩＩｒ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３−（３−フルオロフェニル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび１−（２−ヒドロキシエチル）ピロリジン−２−オンから化合物ＩＩｒを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７７-７.７４ (２ H, m), ７.５９-７.５１ (４ H, m), ７.５１-７.４３ (２ H, m), ７.２２-７.１６ (１ H, m), ４.９８ (２ H, t), ３.９４ (２ H, t), ３.５１ (２ H, t), ２.１４ (２ H, t), ２.０２-１.９２ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．９２分；ｍ／ｚ ４３６［Ｍ＋Ｈ］９９．４９％純度。

実施例５４
４−クロロ−３−（３−フルオロフェニル）−１−（２−イミダゾール−１−イルエチル）−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｓ）

上記のとおりのＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３−（３−フルオロフェニル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノールから化合物ＩＩｓを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７７-７.７３ (２ H, m), ７.５５-７.４６ (６ H, m), ７.３６ (１ H, s), ７.３１-７.２３ (１ H, m), ７.０１-６.９９ (１ H, m), ６.９７ (１ H, s), ５.１７ (２ H, t,), ４.７２ (２ H, t).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．８５分；ｍ／ｚ ４１９［Ｍ＋Ｈ］９２．９７％純度。

実施例５５
４−クロロ−１−［２−［（３Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｔ）

工程１：エチル２−（５−アセトアミド−３−フェニル−ピラゾール−１−イル）アセテート

無水酢酸（１２．７ｍＬ、１３４．８ｍｍｏｌ）を、エチル２−（５−アミノ−３−フェニル−ピラゾール−１−イル）アセテート（３１．５ｇ、１２８．４ｍｍｏｌ）のピリジン（２００ｍＬ）中溶液に窒素の雰囲気下０℃で滴下した。添加完了後、この反応混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮した。残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２（２５０ｍＬ）中に希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をジエチルエーテルから粉砕し、ろ過し、乾燥させて、表題化合物を白色の固体（３４．８１ｇ）として得た。

工程２：エチル２−（５−アセトアミド−４−ヨード−３−フェニル−ピラゾール−１−イル）アセテート

エチル２−（５−アセトアミド−３−フェニル−ピラゾール−１−イル）アセテート（３４．８１ｇ、６０．６ｍｍｏｌ）、ヨウ素酸（５．３３ｇ、３０．３ｍｍｏｌ）およびヨウ素（１５．３７ｇ、６０．６ｍｍｏｌ）のエタノール（２５０ｍＬ）中懸濁液を５０℃で１．５時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２（２５０ｍＬ）に溶解させた。この溶液を２Ｍ Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３、続いてブライン溶液で２回洗浄した。有機層を脱水し（硫酸マグネシウム）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をジエチルエーテルから粉砕し、ろ過し、乾燥させて、表題化合物を固体（４４．１３ｇ）として得た。

工程３：エチル２−［５−アセトアミド−３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−１−イル］アセテート

エチル２−（５−アセトアミド−４−ヨード−３−フェニル−ピラゾール−１−イル）アセテート（３４．９５ｇ、８４．５８ｍｍｏｌ）、フェニルアセチレン（１８．６ｍＬ、１６９．１６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３００ｍＬ）およびＤＭＦ（１２０ｍＬ）の混合物を通して窒素を１．５時間泡立てた。ヨウ化銅（１．６１ｇ、８．４６ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３ｇ、４．２３ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を窒素下９０℃で２時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣をトルエンと共蒸発させて、過剰のＤＭＦを除去した。残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層をセライトに通してろ過し、水およびブラインで洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチルから粉砕し、表題化合物を固体（２５．６７ｇ）として得た。

工程４：２−［５−アセトアミド−３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−１−イル］エタノール

エチル２−［５−アミノ−３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−１−イル］アセテート（２２．４ｇ、５８ｍｍｏｌ）のエタノール（２９０ｍＬ）中懸濁液に、水素化ホウ素ナトリウム（１１ｇ、２８９ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物を室温で１６時間撹拌した。この反応混合物を最終容量２５０ｍＬに部分的に濃縮した。２５％ＮａＯＨ（２５０ｍＬ）を添加し、この反応混合物を８０℃で４時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、２相を分離した。水相を酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、ＭｇＳＯ_４で脱水し、ろ過し、蒸発させた。残渣をジエチルエーテル（２０ｍＬ）から粉砕し、生成物をろ過し、真空中で乾燥させて、表題化合物をオフホワイトの固体（９．９６ｇ）として得た。母液を真空中で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配０から１００％の酢酸エチル／イソヘキサン）により精製し、表題化合物をさらに１．７９ｇ得た。

工程５：２−（４−クロロ−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）エタノール

亜硝酸ナトリウム（３．４２ｇ、４９．５ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（１６５ｍＬ）に−１０℃で少しずつ添加し、２０分間撹拌した。２−［５−アミノ−３−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−１−イル］エタノール（５ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）を固体として添加した。反応混合物を加温させ、５分間超音波処理し、次いで、室温で２時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２および水で希釈し、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機相を合わせ、ＭｇＳＯ_４で脱水し、ろ過し、蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配０から１００％の酢酸エチル／イソヘキサン）により部分的に精製した。次いで、得られた残渣をジエチルエーテルから粉砕し、表題化合物を固体（９５６ｍｇ）として得た。

工程６：４−クロロ−１−（２−ヨードエチル）−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン

トリフェニルホスフィン（１６０ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）、イミダゾール（４２ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）およびヨウ素（１６０ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を、２−（４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−１−イル）エタノール（１８１ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（６ｍＬ）中溶液に添加した。周囲温度で１時間撹拌後、反応物をろ過し、溶媒を真空中で除去した。クロマトグラフィー（シリカゲル、勾配１０から６０％の酢酸エチル／イソヘキサン）を用いて精製することにより、４−クロロ−１−（２−ヨードエチル）−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンを透明な油（２０２ｍｇ）として得、この４−クロロ−１−（２−ヨードエチル）−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンをその後の工程でそのまま用いた。

工程７：４−クロロ−１−［２−［（３Ｓ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｔ）

４−クロロ−１−（２−ヨードエチル）−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（９０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）中溶液を、（Ｓ）−３−フルオロピロリジン塩酸塩（１２６ｍｇ、１ｍｍｏｌ）に添加し、ＤＩＰＥＡ（０．２１ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物を２日間撹拌した。さらにＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）、（Ｓ）−３−フルオロピロリジン塩酸塩（１２６ｍｇ、１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．２１ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物をさらに７日間撹拌した。得られた残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配２０から１００％の酢酸エチル／イソヘキサン）、続いて分取ＨＰＬＣを用いて精製して、化合物ＩＩｔを白色の固体（２５ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ７.７６-７.７０ (２ H, m), ７.７０-７.６６ (２ H, m), ７.５３-７.４３ (６ H, m), ５.１５-５.０１ (１ H, m), ４.８３ (２ H, t), ３.０７ (２ H, t), ２.９３-２.７７ (２ H, m), ２.７４-２.５８ (１ H, m), ２.４１-２.４５ (１ H, m), ２.０７-１.９０ (１ H, m), １.８２-１.６８ (１ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．２７分；ｍ／ｚ ４２２［Ｍ＋Ｈ］９８．１５％純度。

実施例５６
４−クロロ−１−［２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｕ）

（Ｓ）−３−フルオロピロリジン塩酸塩の代わりに（Ｒ）−３−フルオロピロリジン塩酸塩を用いることを除いて、実施例５５に従って化合物ＩＩｕを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ７.７６-７.７０ (２ H, m), ７.７０-７.６６ (２ H, m), ７.５３-７.４３ (６ H, m), ５.１５-５.０１ (１ H, m), ４.８３ (２ H, t), ３.０７ (２ H, t), ２.９３-２.７７ (２ H, m), ２.７４-２.５８ (１ H, m), ２.４１-２.４５ (１ H, m), ２.０７-１.９０ (１ H, m), １.８２-１.６８ (１ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ２．８４分；ｍ／ｚ ４２２［Ｍ＋Ｈ］９８．０６％純度。

実施例５７
４−クロロ−１−［２−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）エチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｖ）

４−クロロ−１−（２−ヨードエチル）−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（９１ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）中溶液を、３，３−ジフルオロピロリジン塩酸塩（１４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）に添加し、ＤＩＰＥＡ（０．２ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物を５日間撹拌した。得られた残渣を、クロマトグラフィー（シリカゲル、勾配２０から５０％の酢酸エチル／イソヘキサン、続いて分取ＨＰＬＣを用いて精製して、化合物ＩＩｖを白色の固体（２４．５ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ７.７４-７.７０ (２ H, m), ７.７０-７.６５ (２ H, m), ７.５２-７.４１ (６ H, m), ４.８４ (２ H, t), ３.０７ (２ H, t), ２.９７ (２ H, t), ２.７５ (２ H, t), ２.１６-２.０３ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．４５分；ｍ／ｚ ４４０［Ｍ＋Ｈ］９９．４％純度。

実施例５８
４−クロロ−１−［２−（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）エチル］−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｗ）

３，３−ジフルオロピロリジン塩酸塩の代わりに３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩を用いることを除いて、実施例５７に従って化合物ＩＩｗを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ７.７４-７.７０ (２ H, m), ７.７０-７.６６ (２ H, m), ７.５３-７.４３ (６ H, m), ４.７４ (２ H, t), ３.５６ (４ H, t), ３.１５ (２ H, t).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．３５分；ｍ／ｚ ４２６［Ｍ＋Ｈ］９５．４％純度。

実施例５９
４−クロロ−３−（３−フルオロフェニル）−１−［２−（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｘ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに３−フルオロフェニルボロン酸および４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンの代わりに４−クロロ−１−［２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３−ヨード−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンを用いて、実施例１に従って化合物ＩＩｘを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７５ (２ H, m), ７.６０-７.４４ (６ H, m), ７.１８ (１ H, tdd), ５.２２-５.０４ (１ H, m), ４.９６ (２ H, t), ３.２５ (２ H, t), ３.０１-２.９１ (３ H, m), ２.６８ (１ H, q), ２.１３-１.９６ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．３２分；ｍ／ｚ ４４０［Ｍ＋Ｈ］９６．２４％純度。

実施例６０
４−クロロ−３−（４−フルオロフェニル）−１−［２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−５フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩｙ）

工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに４−フルオロフェニルボロン酸および４−クロロ−３−ヨード−１−（２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンの代わりに４−クロロ−１−［２−［（３Ｒ）−３−フルオロピロリジン−１−イル］エチル］−３−ヨード−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンを用いることを除いて、実施例１に従って化合物ＩＩｙを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.７３ (４ H, m), ７.５５-７.４６ (３ H, m), ７.２３-７.１５ (２ H, m), ５.２１-５.０３ (１ H, m), ４.９５ (２ H, t), ３.２４ (２ H, t), ３.０１-２.９１ (３ H, m), ２.６８ (１ H, q), ２.１２-１.９６ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．２９分；ｍ／ｚ ４４０［Ｍ＋Ｈ］９３．５５％純度。

スキームＶ：式ＩＩＩの化合物を合成するための一般スキーム

実施例６１
４−クロロ−５−ヨード−１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩＩａ）
工程１：Ｎ−（１−メチル−３−フェニル−４−（（トリメチルシリル）エチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド

Ｎ−（４−ヨード−１−メチル−３−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ−５−イル）アセトアミド（５ｇ、１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）およびトリエチルアミン（３５ｍＬ）中混合物を通して窒素を１５分間泡立てた。ヨウ化銅（０．５６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．５３ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびエチニルトリメチルシラン（３．０ｇ、３０ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を密封管中で窒素素下９０℃にて３時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル５：１から１０：３）により精製し、表題化合物を固体（２．３ｇ）として得た。

工程２：１−（５−アミノ−１−メチル−３−フェニル−ピラゾール−４−イル）エタノン

Ｎ−（１−メチル−３−フェニル−４−（（トリメチルシリル）エチニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミド（２．３ｇ、７．４ｍｍｏｌ）、エタノール（２０ｍＬ）および２５％ＮａＯＨ水溶液（２０ｍＬ）の混合物を９０℃で６時間撹拌しながら加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配０から４０％の酢酸エチル／ＣＨ_２Ｃｌ_２）を用いて精製し、続いて、ジエチルエーテル中で粉砕して、表題化合物を白色の固体（７２４ｍｇ）として得た。

工程３：１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール

１−（５−アミノ−１−メチル−３−フェニル−ピラゾール−４−イル）エタノン（２４１ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）の濃ＨＣｌ（６．７ｍＬ）および水（１ｍＬ）中懸濁液を−５℃に冷却した。亜硝酸ナトリウム（１５５ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）の水（０．６ｍＬ）中溶液を添加し、この反応混合物を−５℃で２０分間、次いで室温で１０分間、次いで６５℃で３０分間撹拌し、最後に室温に冷却した。反応混合物をろ過し、固体を濃ＨＣｌ（２ｍＬ）で洗浄し、ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２（９：１）に懸濁させ、ろ過し、乾燥させて、表題化合物を固体（１２５ｍｇ）として得た。

工程４：５−ヨード−１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール

フェニル［ビス（２，２，２−トリフルオロアセトキシ）］−λ^３−ヨーダン（１９０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を、１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール（１６６ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３．７ｍＬ）中懸濁液に添加し、続いてヨウ素（１１１ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）およびピリジン（７１μＬ）を添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いでろ過した。収集した固体をＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄し、乾燥させて、表題化合物（１６０ｍｇ）を得た。

工程５：４−クロロ−５−ヨード−１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩＩａ）

オキシ塩化リン（０．６ｍｌ）中５−ヨード−１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール（１６０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を１２０℃に１０分間加熱した。この反応混合物を室温に冷却し、この懸濁液をろ過した。収集した固体をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解させ、水で洗浄した。有機相を脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮して、化合物ＩＩＩａ（１３０ｍｇ）を得た。

^１H NMR δ (ppm)(DMSO-d_６): ７.８０-７.７６ (２ H, m), ７.６２-７.５６ (３ H, m), ４.４３-４.３５ (３ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．５２分；ｍ／ｚ ３７１［Ｍ＋Ｈ］９７．７３％純度。

実施例６２
４−クロロ−５−（シクロペンテン−１−イル）−１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩＩｂ）

４−クロロ−５−ヨード−１−メチル−３−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（６０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、２−（シクロペンテン−１−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（３５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＫ_３ＰＯ_４（１０３ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）および水（０．３ｍＬ）中懸濁液を通して窒素を１５分間泡立てた。１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン錯体（１３ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を添加し、管を密封し、３０℃に１６時間加熱した。この反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２および水で希釈した。水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、合わせた有機相を脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。得られた残渣をクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２／イソヘキサン１：１から１：０）を用いて精製して、化合物ＩＩＩｂを固体（１０ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７５-７.６９ (２ H, m), ７.５２-７.４６ (３ H, m), ６.６２-６.５９ (１ H, m), ４.３９ (３ H, s), ３.１１-３.０４ (２ H, m), ２.７１-２.６４ (２ H, m), ２.１４-２.０４ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．７５分；ｍ／ｚ ３１１［Ｍ＋Ｈ］９３．１５％純度。

実施例６３
４−クロロ−１−メチル−３−フェニル−５−（３−チエニル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩＩｃ）

工程２においてＮ−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミドの代わりにＮ−（２−メチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）アセトアミドを用いることおよび工程３においてフェニルアセチレンの代わりに３−エチニルチオフェンを用いることを除いて、実施例１９に従って化合物ＩＩＩｃを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.０１ (１H, dd), ７.７９-７.７５ (３H, m), ７.５３-７.４９ (３H, m), ７.４６ (１H, dd), ４.４４ (３H, s).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿ギ酸＿ＡＳＣＥＮＴＩＳ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．６５分；ｍ／ｚ ３２７［Ｍ＋Ｈ］９８．３２％純度。

実施例６４
４−クロロ−１−メチル−３−フェニル−５−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＩＩＩｄ）

工程２においてＮ−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミドの代わりにＮ−（２−メチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）アセトアミドを用いることおよび工程３においてフェニルアセチレンの代わりに３−エチニルピリジンを用いることを除いて、実施例１９に従って化合物ＩＩＩｄを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ９.０６ (１ H, s), ８.７４ (１ H, s), ８.１４ (１ H, dt), ７.７９-７.７４ (２ H, m), ７.５５-７.４３ (４ H, m), ４.４７ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿ギ酸＿ＡＳＣＥＮＴＩＳ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ８．９９分；ｍ／ｚ ３２２［Ｍ＋Ｈ］９８．０２％純度。

実施例６５
４−クロロ−３−シクロプロピル−１−メチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２１）

工程２においてＮ−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミドの代わりにＮ−（５−シクロプロピル−２−メチル−ピラゾール−３−イル）アセトアミドを用いることを除いて、実施例１９に従って化合物２１を合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８ (２ H, m), ７.５７-７.４７ (３ H, m), ４.２６ (３ H, s), ２.６１-２.５２ (１ H, m), １.１３-１.０８ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．７９分；ｍ／ｚ ２８５［Ｍ＋Ｈ］９９．５１％純度。

実施例６６
４−クロロ−１，３−ジメチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２２）

Ｖａｓｉｌｅｖｓｋｙ，Ｓ．Ｆ．およびＴｒｅｔｙａｋｏｖ，Ｅ．Ｖ．（１９９５年）、「Ｃｉｎｎｏｌｉｎｅｓ ａｎｄ ｐｙｒａｚｏｌｏｐｙｒｉｄａｚｉｎｅｓ：Ｎｏｖｅｌ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｉｃｈｔｅｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ」、Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．／Ｒｅｃｌ．、１９９５年：７７５−７７９頁に従って、化合物２２を合成することができる。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７５ (２ H, m), ７.５６-７.４７ (３ H, m), ４.３０ (３ H, s), ２.８０ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．６９分；ｍ／ｚ ２５９［Ｍ＋Ｈ］９９．３２％純度。

実施例６７
４−ブロモ−１，３−ジメチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２３）

Ｖａｓｉｌｅｖｓｋｙ，Ｓ．Ｆ．およびＴｒｅｔｙａｋｏｖ，Ｅ．Ｖ．（１９９５年）、「Ｃｉｎｎｏｌｉｎｅｓ ａｎｄ ｐｙｒａｚｏｌｏｐｙｒｉｄａｚｉｎｅｓ：Ｎｏｖｅｌ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｔｉｃ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｉｃｈｔｅｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ」、Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎ．／Ｒｅｃｌ．、１９９５年：７７５−７７９頁に従って、化合物２３を合成することができる。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７３-７.７０ (２ H, m), ７.５５-７.４６ (３ H, m), ４.３０ (３ H, s), ２.８０ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．７４分；ｍ／ｚ ３０３［Ｍ＋Ｈ］９９．１５％純度。

実施例６８
４−フルオロ−１，３−ジメチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２４）

４−クロロ−１，３−ジメチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（４４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、フッ化カリウム（５０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１ｍＬ）中懸濁液を１２０℃で１６時間撹拌した。この反応混合物を分取ＨＰＬＣにより精製して、化合物２４（１２ｍｇ）を得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.０４-８.００ (２ H, m), ７.５８-７.４６ (３ H, m), ４.３１ (３ H, s), ２.７５ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １０．２５分；ｍ／ｚ ２４３［Ｍ＋Ｈ］９１．６４％純度。

実施例６９
４−クロロ−５−（３−フルオロフェニル）−１，３−ジメチル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２５）

工程２においてＮ−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）アセトアミドの代わりにＮ−（２，５−ジメチルピラゾール−３−イル）アセトアミドを用いることおよび工程３においてフェニルアセチレンの代わりに３−フルオロフェニルアセチレンを用いることを除いて、実施例１９に従って化合物２５を合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.５９-７.４６ (３ H, m), ７.２３-７.１７ (１ H, m), ４.３１ (３ H, s), ２.８０ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．０１分；ｍ／ｚ ２７７［Ｍ＋Ｈ］９９．４６％純度。

実施例７０
４−クロロ−１−メチル−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２６）

工程１：（３，５−ジクロロ−６−フェニル−ピリダジン−４−イル）−（３−ピリジル）メタノール

４，６−ジクロロ−３−フェニル−ピリダジン（２．２７ｇ、０．０１ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）中溶液に、ピリジン−３−カルバルデヒド（１．３ｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を−７８℃まで冷却し、ＬＤＡの溶液（２Ｎ、２２ｍｌ）を滴下し、内部温度を−５０℃未満に保った。この反応混合物を３時間撹拌し、次いで、水および酢酸エチルを添加した。相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル９：１から８：２）により精製し、表題化合物を固体（４．１ｇ）として得た。

工程２：（３，５−ジクロロ−６−フェニル−ピリダジン−４−イル）−（３−ピリジル）メタノン

３，５−ジクロロ−６−フェニル−ピリダジン−４−イル）−（３−ピリジル）メタノール（８５０ｍｇ、２．５７ｍｍｏｌ）および二酸化マンガン（１．１ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）のトルエン（２０ｍＬ）中混合物をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置中で還流において２時間撹拌した。この反応混合物をろ過し、収集した固体をＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄した。ろ液を真空中で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル８：２）により精製し、表題化合物を固体（３６０ｍｇ）として得た。

工程３：４−クロロ−１−メチル−５−フェニル−３−（３−ピリジル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２６）

（３，５−ジクロロ−６−フェニル−ピリダジン−４−イル）−（３−ピリジル）メタノン（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）およびメチルヒドラジン（１９．５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）のエタノール（１．５ｍＬ）中混合物を密封管中で６０℃にて３時間撹拌した。この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル９：１から８：２）により精製し、化合物２６を固体（３０ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ９.０５ (１ H, m), ８.７３ (１ H, dd), ８.１２ (１ H, dt), ７.７９-７.７６ (２ H, m), ７.５７-７.４８ (３ H, m), ７.４６ (１ H, dd), ４.４８ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．６分；ｍ／ｚ ３２２［Ｍ＋Ｈ］９８．７２％純度。

実施例７１
４−クロロ−３−シクロペンチル−１−メチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２７）

工程１においてピリジン−３−カルバルデヒドの代わりにシクロペンタンカルボキサルデヒドを用いることを除いて、実施例７０に従って化合物２７を合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７７ (２ H, m), ７.５７-７.４７ (３ H, m), ４.３０ (３ H, s), ３.８７-３.７７ (１ H, m), ２.２２-２.１４ (２H, m), ２.０６-１.９３ (２ H, m), １.９５-１.８３ (２ H, m), １.８０-１.７１ (２ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＧｅｍｉｎｉＮＸ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ １１．９７分；ｍ／ｚ ３１３［Ｍ＋Ｈ］９８．１４％純度。

実施例７２
４−クロロ−２−メチル−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２８）

工程１：２−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン（６ｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）、無水フタル酸（５．６ｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）の酢酸（６０ｍＬ）中混合物を１００℃で２時間および１２０℃で２時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を水で希釈し、この懸濁液をろ過した。収集した固体を水で洗浄し、乾燥させ、表題化合物を固体（１０ｇ）として得た。

工程２：２−（２−メチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

水素化ナトリウム（８３０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を、２−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（５ｇ、０．０１７３ｍｏｌ）およびヨウ化メチル（１．５ｍＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８０ｍＬ）中混合物に１０℃で少しずつ添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン１：１９から２：８）により精製し、表題化合物および位置異性体２−（２−メチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオンの混合物（８５０ｍｇ、５：１）を得た。

工程３：２−（４−ヨード−１−メチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

２−（２−メチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（８５０ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）、ヨウ素酸（１２３ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）およびヨウ素（４２７ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍＬ）中懸濁液を５０℃で２時間加熱し、室温に冷却した。この反応混合物を真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２）により部分的に精製し、次いで、ジエチルエーテルで粉砕し、表題化合物を固体（６６０ｍｇ）として得た。

工程４：２−［１−メチル−５−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−３−イル］イソインドリン−１，３−ジオン

２−（４−ヨード−１−メチル−５−フェニル−ピラゾール−３−イル）イソインドリン−１，３−ジオン（６６０ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）、フェニルアセチレン（１８２ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（８ｍＬ）およびＤＭＦ（３ｍＬ）の混合物を通して窒素を１５分間泡立てた。ヨウ化銅（２８ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（５２ｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を窒素下９０℃で３時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル８：２から６：４）により精製し、表題化合物を固体（６００ｍｇ）として得た。

工程５：１−メチル−５−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−３−アミン

２−［１−メチル−５−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−３−イル］イソインドリン−１，３−ジオン（３００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、エタノール（５ｍＬ）およびヒドラジン水和物（５６μＬ、１．１１ｍＬ）の混合物を密封管中で９０℃にて１時間撹拌し、室温に冷却した。この反応混合物をろ過した。ろ液を真空中で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、イソヘキサン／酢酸エチル７：３から１：１）により精製し、表題化合物を固体（１５０ｍｇ）として得た。

工程６：４−クロロ−２−メチル−３，５−ジフェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物２８）

亜硝酸ナトリム（５７ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を、１−メチル−５−フェニル−４−（２−フェニルエチニル）ピラゾール−３−アミン（１５０ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）の濃ＨＣｌ（５ｍＬ）中混合物に０℃で少しずつ添加し、この反応混合物を室温に加温させ、１６時間撹拌した。

反応混合物を炭酸ナトリウム溶液上に注ぎ、水相を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を脱水し（相分離カートリッジ）、真空中で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン２：８から４：６）により精製し、化合物２８を固体（７６ｍｇ）として得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.８４-７.８０ (２ H, m), ７.６０-７.５５ (３ H, m), ７.５３-７.４４ (５ H, m), ４.２１ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．４７分；ｍ／ｚ ３２１［Ｍ＋Ｈ］９７．０５％純度。

実施例７３
１−［（８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］−４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＸＩＩＩａ）

実施例２０に記載したＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよびノルトロピンから化合物ＸＩＩＩａを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ８.６２ (１ H, s), ７.７７ (２ H, m), ７.５７-７.４８ (３ H, m), ５.６２-５.５２ (１ H, m), ４.１４ (２ H, s), ２.７９ (３ H, s), ２.７３ (２ H, m), ２.３２ (２ H, m), ２.１９-２.０６ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１５ｃｍ＿ギ酸＿ＡＳＣＥＮＴＩＳ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ７．７分；ｍ／ｚ ３５４［Ｍ＋Ｈ］９３．８９％純度。

実施例７４
４−クロロ−１−［（３−メチルイミダゾール−４−イル）メチル］−３−（１−メチルピロール−２−イル）−５−フェニル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＸＩＩＩｂ）

工程７において２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エタノールの代わりに（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）メタノールおよび工程８において１−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールの代わりに１−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロールを用いて、実施例１（化合物Ｉｃ）の同様の手順に従って化合物ＸＩＩＩｂを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７６-７.７３ (２ H, m), ７.５５-７.４６ (３ H, m), ７.４３ (１ H, s), ７.３１ (１ H, s), ６.８１ (１ H, t), ６.５７ (１ H, dd), ６.２５ (１ H, dd), ５.９４ (２ H, s), ３.８６ (３ H, s), ３.６８ (３ H, s).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ９．８１分；ｍ／ｚ ４０４［Ｍ＋Ｈ］９２．０３％純度。

実施例７５
４−クロロ−１−メチル−５−フェニル−３−ピロリジン−１−イル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＸＩＩＩｃ）

工程１：４−クロロ−３−ヨード−１−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン

水素化ナトリウム（鉱油中６０％、６７４ｍｇ、１６．９ｍｍｏｌ）を、４−クロロ−３−ヨード−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（３ｇ、８．４ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（４２ｍＬ）中懸濁液に添加し、次いで、ヨウ化メチル（１．０５ｍＬ、１６．９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を２時間撹拌した。ＬｉＣｌ溶液（水中４％）および酢酸エチルを添加し、水相を酢酸エチルで抽出した。有機相を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル／イソヘキサン０：１から１：１）により精製し、中間体を固体（１．５１ｇ）として得た。

工程２：３−ヨード−１−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール

４−クロロ−３−ヨード−１−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（１．５ｇ、４．０５ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ水溶液（４Ｍ、２ｍＬ）のＤＭＳＯ（６ｍＬ）およびジオキサン（６ｍＬ）中混合物を５０℃に２．５時間加熱した。混合物を放置して、室温に冷却させ、沈殿物が形成した場合はｐＨ２−３に中和した。固体をろ過し、水で洗浄し、乾燥させて、１．３３ｇの中間体を得た。

工程３：１−メチル−５−フェニル−３−（ピロリジン−１−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール

３−ヨード−１−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール（１００ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（１１ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）、Ｌ−プロリン（１３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（１９３ｍｍｏｌ、１．４ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（５．６ｍＬ）中混合物を、窒素を１０分間泡立て通すことによって脱気し、次いで１１０℃に２０時間加熱した。混合物を放置して、室温に冷却させ、次いで酢酸エチルおよび水間に分配し、水相を酢酸エチルで抽出した。有機相を合わせ、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、蒸発させた。残渣（１１７ｍｇ）を次の工程でそのまま用いた。

工程４：４−クロロ−１−メチル−５−フェニル−３−ピロリジン−１−イル−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＸＩＩＩｃ）

１−メチル−５−フェニル−３−（ピロリジン−１−イル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン−４−オール（１１７ｍｇ）のＰＯＣｌ_３（１．９ｍＬ）中懸濁液を６０℃に２．５時間加熱した。この混合物を真空中で濃縮し、残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液間に分配した。層を分離し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、合わせた有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、ろ過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル上でクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（８１ｍｇ）を得た。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７４-７.７０ (２ H, m), ７.５３-７.４４ (３ H, m), ４.１８ (３ H, s), ３.６２-３.５６ (４ H, m), ２.０５-１.９７ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿ギ酸＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ４．５５分；ｍ／ｚ ３１４．０４［Ｍ＋Ｈ］９７．２１％純度。

実施例７６
４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＸＩＩＩｄ）

実施例２０に記載したＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３−メチル−５−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−（ピロリジン−１−イル）エタノールから化合物ＸＩＩＩｄを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７９-７.７６ (２ H, m), ７.５６-７.４７ (３ H, m), ４.８２ (２ H, t), ３.１１ (２ H, t), ２.８０ (３ H, s), ２.６４ (４ H, m), １.７８-１.７２ (４ H, m).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ギ酸＿ＡＣＥ３Ｃ１８ＡＲ＿ＨＰＬＣ＿ＣＨ３ＣＮ）Ｒｔ ９．０７分；ｍ／ｚ ３４２［Ｍ＋Ｈ］９１．７７％純度。

実施例７７
４−クロロ−３，５−ジフェニル−１−（２−ピラゾール−１−イルエチル）ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジン（化合物ＸＩＶａ）

実施例２０に記載したＭｉｔｓｕｎｏｂｕ反応のための一般手順に従って、４−クロロ−３，５−ジフェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリダジンおよび２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エタノールから化合物ＸＩＶａを合成した。

^１H NMR δ (ppm)(CHCl_３-d): ７.７８-７.６９ (４ H, m), ７.５５-７.４６ (７ H, m), ７.２５ (１ H, m), ６.１７ (１ H, t), ５.２５ (２ H, t), ４.８７ (２ H, t).

ＬＣＭＳ（１０ｃｍ＿ＥＳＣＩ＿Ｂｉｃａｒｂ＿ＭｅＣＮ）Ｒｔ ３．６７分；ｍ／ｚ ４０１［Ｍ＋Ｈ］９９．６％純度。

スキームＶＩ：式ＸＩＩＩの化合物を合成するための一般スキーム

スキームＶＩＩ：式ＸＶの化合物を合成するための一般スキーム

スキームＶＩＩＩ：化合物Ｉｋから化合物２９−化合物３１を合成するためのスキーム：

実施例７８
Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１の発現を回復する本発明の化合物の活性を示すアッセイ法（２４時間インキュベーション）

Ｃｌａｒｉｎ−１は、アッシャーＩＩＩ症候群において変異した遺伝子によってコードされたタンパク質である（Ａｄａｔｏら、２００２年）。北米でＣｌａｒｉｎ−１において最もよく見られる変異はＮ４８Ｋであり、この変異は、グリコシル化の消失およびトラフィッキング障害を引き起こすことが報告されている（Ｔｉａｎら、２００９年）。結果として、Ｎ４８Ｋタンパク質は、原形質膜に到達せず、プロテアソームにより分解される。したがって、Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１の細胞表面へのトラフィッキングの回復は、アッシャーＩＩＩ症候群への介入の手段を与えると考えられている。

Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１の発現を回復する本発明の化合物の有用性を実証する有用な細胞モデルは、ＨＥＫ２９３−Ｃｌａｒｉｎ−１ Ｎ４８Ｋ−ＨＡ Ｄ９細胞系である（Ｔｉａｎら、２００９年）。典型的な実験において、３７℃、５％ＣＯ_２で加湿インキュベータにおいて１０％ウシ胎児血清を含有するダルベッコ変性イーグル培地（ＤＭＥＭ）中１ウェル当たり２０，０００個の細胞の細胞密度でコラーゲン被覆９６−ウェルプレート上に、これらの細胞を播種した。インキュベーション一晩後、３７℃、５％ＣＯ_２で加湿インキュベータにおいて１０％ウシ胎児血清を含有するＤＭＥＭ培地中に２４時間インキュベーションのために化合物を添加した。負対照として、ＤＭＳＯを０．２５％最終濃度で使用した。化合物を典型的には３通り方式で試験した。化合物と一緒にインキュベーション２４時間後、１０％緩衝ホルマリンの添加により細胞をウェルに固定して、最終濃度４％ホルマリンを得た。室温で固定２０分後、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（０．０２リン酸塩、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００）でウェルを３回洗浄した。

ＨＡタグ付きＮ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１を、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳ中１：１０００の希釈でＨＡタグに対する抗体（ＨＡ．１１ Ｃｌｏｎｅ １６Ｂ１２モノクローナル抗体、Ｃｏｖａｎｃｅ ＃ＭＭＳ−１０１Ｐ）によって検出した。インキュベーション９０分後、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳでウェルを３回洗浄し、このウェルに二次抗体（ヤギ抗マウスＩｇＧ−Ｃｙ３（１．５ｍｇ／ｍｌ）、Ｊａｃｋｓｏｎ ＩＲ Ｅｕｒｏｐｅ＃１１５１６５００３）を、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳ中１：２５０の希釈で４５分間添加した。その後、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳでウェルを３回洗浄し、核に対する最終の染色を１：１０，０００の希釈でＤＡＰＩ（４’、６−ジアミジノ−２−フェニルインドール）の添加により行った。染色細胞の画像化は、ＩｎＣｅｌｌ １０００Ｈｉｇｈ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｉｍａｇｅｒ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）上で行い、Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１に対してＣｙ３チャネルおよび核に対してＤＡＰＩチャネルを読み出した。特定のアルゴリズムを用いて画像を分析および定量化した。このアルゴリズムにより、ＤＡＰＩシグナルの追加の核セグメンテーションに基づいてそれぞれの細胞についてのＨＡ−Ｃｌａｒｉｎ−１染色が測定された（図１）。このアルゴリズムにより、細胞１個当たりの強度が測定され、したがって、細胞数の変化に対してあまり感度が高くない。ウェル１つ当たり、およそ２，０００個の細胞を測定して、細胞１個当たりの平均密度測定値を得た。

実施例７９
Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１の発現を回復する本発明の化合物の活性を示すアッセイ法（２時間インキュベーション）

Ｃｌａｒｉｎ−１は、アッシャーＩＩＩ症候群において変異した遺伝子によりコードされたタンパク質である（Ａｄａｔｏら、２００２年）。北米でＣｌａｒｉｎ−１において最もよく見られる変異はＮ４８Ｋであり、この変異は、グリコシル化の消失およびトラフィッキング障害を引き起こすことが報告されている（Ｔｉａｎら、２００９年）。結果として、Ｎ４８Ｋタンパク質は、原形質膜に到達せず、プロテアソームにより分解される。したがって、Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１の細胞表面へのトラフィッキングの回復は、アッシャーＩＩＩ症候群への介入の手段を与えると考えられている。

Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１の発現を回復する本発明の化合物の有用性を実証する有用な細胞モデルは、ＨＥＫ２９３−Ｃｌａｒｉｎ−１ Ｎ４８Ｋ−ＨＡ Ｄ９細胞系である（Ｔｉａｎら、２００９年）。典型的な実験において、３７℃、５％ＣＯ_２で加湿インキュベータにおいて１０％ウシ胎児血清を含有するダルベッコ変性イーグル培地（ＤＭＥＭ）中１ウェル当たり２０，０００個の細胞の細胞密度でコラーゲン被覆９６−ウェルプレート上に、これらの細胞を播種した。インキュベーション一晩後、３７℃、５％ＣＯ_２で加湿インキュベータにおいて１０％ウシ胎児血清を含有するＤＭＥＭ培地中に２時間インキュベーションのために化合物を添加した。負対照として、ＤＭＳＯを０．２５％最終濃度で使用した。化合物を典型的には３通り方式で試験した。化合物と一緒にインキュベーション２時間後、細胞を新鮮な培地中で２２時間インキュベートした。次いで、１０％緩衝ホルマリンの添加により細胞をウェルに固定して、最終濃度４％ホルマリンを得た。室温で固定２０分後、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（０．０２リン酸塩、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００）でウェルを３回洗浄した。

ＨＡタグ付きＮ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１を、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳ中１：１０００の希釈でＨＡタグに対する抗体（ＨＡ．１１ Ｃｌｏｎｅ １６Ｂ１２モノクローナル抗体、Ｃｏｖａｎｃｅ ＃ＭＭＳ−１０１Ｐ）によって検出した。インキュベーション９０分後、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳでウェルを３回洗浄し、このウェルに二次抗体（ヤギ抗マウスＩｇＧ−Ｃｙ３（１．５ｍｇ／ｍｌ）、Ｊａｃｋｓｏｎ ＩＲ Ｅｕｒｏｐｅ＃１１５１６５００３）を、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳ中１：２５０の希釈で４５分間添加した。その後、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含有するＰＢＳでウェルを３回洗浄し、核に対する最終の染色を１：１０，０００の希釈でＤＡＰＩ（４’、６−ジアミジノ−２−フェニルインドール）の添加により行った。染色細胞の画像化は、ＩｎＣｅｌｌ １０００Ｈｉｇｈ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｉｍａｇｅｒ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）上で行い、Ｎ４８Ｋ Ｃｌａｒｉｎ−１に対してＣｙ３チャネルおよび核に対してＤＡＰＩチャネルを読み出した。特定のアルゴリズムを用いて画像を分析および定量化した。このアルゴリズムにより、ＤＡＰＩシグナルの追加の核セグメンテーションに基づいてそれぞれの細胞に対するＨＡ−Ｃｌａｒｉｎ−１染色が測定された（図１）。このアルゴリズムにより、細胞１個当たりの強度が測定され、したがって、細胞数の変化に対してあまり感度が高くない。ウェル１つ当たり、およそ２，０００個の細胞を測定して、細胞１個当たりの平均密度測定値を得た。

実施例８０
本発明の例証化合物についてのＩＣ_５０データ

本発明の例証ピラゾロピリダジン化合物についてのＩＣ_５０データを、実施例７８のアッセイ法に従って得た。結果を以下の表１に示す。

本発明の例証ピラゾロピリダジン化合物についてのＩＣ_５０値を、アッセイ法実施例７９に従って得た。結果を以下の表２に示す。

本出願で開示されたそれぞれの参考文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

Claims (22)

1. 式Ｉ：
   

   

   の化合物または医薬として許容されるこの塩。
   （式中、Ｒ_１は、
   

   

   であり；
   Ｒ_２は、
   

   

   
   であり；
   Ｈａｌは、ハロゲンであり；および
   ａは、０、１、または２である。）
2. 式ＩＩ：
   

   

   の化合物または医薬として許容されるこの塩。
   （式中、Ｒ_３は、
   

   

   
   であり；
   ｂは、０または１であり；
   ｃは、１または２である。）
3. 式ＸＩＩＩ：
   

   

   の化合物または医薬として許容されるこの塩。
   （式中、Ｒ_５は、
   

   

   であり；
   Ｒ_６は、
   

   

   
   であり；
   Ｈａｌは、ハロゲンであり；および
   ａは、０、１、または２である。）
4. 式ＸＩＩＩ：
   

   

   の化合物または医薬として許容されるこの塩。
   （式中、Ｒ_５は、
   

   

   であり、
   Ｒ_６は、
   

   

   
   
   であり、
   Ｈａｌは、ハロゲンであり；および
   ａは、０、１、または２である。）
5. 構造：
   

   

   
   を有する化合物；または医薬として許容されるこの塩。
6. 構造
   

   

   

   

   

   
   を有する請求項１に記載の化合物；または医薬として許容されるこの塩。
7. 構造
   

   

   
   を有する請求項２に記載の化合物；または医薬として許容されるこの塩。
8. 構造
   

   

   

   
   を有する請求項３に記載の化合物；または医薬として許容されるこの塩。
9. 構造
   

   

   を有する請求項４に記載の化合物；または医薬として許容されるこの塩。
10. 有効量の、請求項１〜９のいずれかに記載の化合物、または請求項１〜９のいずれかに記載の医薬として許容されるこの化合物の塩、並びに医薬として許容される担体またはビヒクルを含む、網膜変性疾患の治療のための医薬組成物。
11. 有効量の、請求項１〜９のいずれかに記載の化合物、または請求項１〜９のいずれかに記載の医薬として許容されるこの化合物の塩、並びに医薬として許容される担体またはビヒクルを含む、アッシャー症候群に伴う聴力損失の治療のための医薬組成物。
12. 網膜変性疾患が、網膜色素変性、レーバー先天性黒内障、症候性網膜変性、加齢性黄斑変性およびアッシャー症候群から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
13. 網膜変性疾患が、アッシャー症候群であり、アッシャー症候群が、アッシャーＩ症候群、アッシャーＩＩ症候群、またはアッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１２に記載の医薬組成物。
14. 網膜変性疾患が、アッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１３に記載の医薬組成物。
15. アッシャー症候群が、アッシャーＩ症候群、アッシャーＩＩ症候群、またはアッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１１に記載の医薬組成物。
16. アッシャー症候群が、アッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１５に記載の医薬組成物。
17. 有効量の、式ＸＩＩＩ：
    

    

    （式中、Ｒ_５は、
    

    

    であり；
    Ｒ_６は、
    

    

    
    であり；
    Ｈａｌは、ハロゲンであり；および
    ａは、０、１、または２である。）
    の化合物若しくは医薬として許容されるこの化合物の塩、または、請求項３に記載の化合物の医薬として許容される塩、並びに医薬として許容される担体またはビヒクルを含む、網膜変性疾患またはアッシャー症候群に伴う聴力損失の治療のための医薬組成物。
18. 網膜変性疾患が、網膜色素変性、レーバー先天性黒内障、症候性網膜変性、加齢性黄斑変性およびアッシャー症候群から選択される、請求項１７に記載の医薬組成物。
19. 網膜変性疾患がアッシャー症候群であり、ここで、アッシャー症候群が、アッシャーＩ症候群、アッシャーＩＩ症候群、またはアッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１８に記載の医薬組成物。
20. 網膜変性疾患が、アッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１９に記載の医薬組成物。
21. アッシャー症候群が、アッシャーＩ症候群、アッシャーＩＩ症候群、またはアッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１７に記載の医薬組成物。
22. アッシャー症候群が、アッシャーＩＩＩ症候群である、請求項１７に記載の医薬組成物。
    

Images