JP6306504B2 - 液体洗剤組成物 - Google Patents

Description

配列リストの参照
本出願は、コンピューター可読形式の配列リストを包含する。

本発明は、液体洗剤中のスブチリシンの安定化に関する。

液体洗剤を配合する場合、タンパク質汚れの除去を向上させるために、スブチリシン型プロテアーゼを含むことが一般的である。また、他の汚れに対する洗浄力を向上させるために、第２の非スブチリシン酵素（たとえばアミラーゼまたはリパーゼ）を含むこともある。スブチリシンおよび第２の酵素（存在する場合）の貯蔵安定性が問題になることがあり、先行技術には種々の解決策が開示されている。

液体洗剤中のスブチリシンの安定化剤として種々のホウ素化合物が周知である（たとえば国際公開第９６／４１８５９号パンフレット）。しかしながら、ホウ酸の最近のＥＵ ＲＥＡＣＨ分類によればホウ酸は生殖毒性であるので、無ホウ素洗剤を目指す傾向が始まっている。

国際公開第２００７／１４１７３６号パンフレット、国際公開第２００７／１４５９６３号パンフレット、および国際公開第２００９／１１８３７５号パンフレットには、スブチリシンおよび任意の第２の酵素を安定化させるためにペプチドアルデヒドを使用可能であることが開示されている。国際公開第９８／１３４５９号パンフレットには、ペプチドアルデヒドとカルシウムイオンとの組合せが相乗的プロテアーゼ阻害剤効果を提供するように作用することが開示されている。

しかしながら、高レベルのカルシウムイオンは、ビルダーおよび界面活性剤との錯体化に起因して液体洗剤の配合時に問題を引き起こすことがあり、しかも洗浄／洗濯時には組み込まれたビルダー系の有効性を低減するおそれがあり、かつ石鹸に錯体化して石鹸カスとして知られる白色沈澱物を形成することにより泡立ちを低減するおそれがある。

本発明者らは、ペプチドアルデヒド（またはヒドロ亜硫酸付加物）プロテアーゼ阻害剤と、一価カチオンと一価有機アニオンとの塩と、の組合せが、スブチリシンと任意選択で他の（非スブチリシン）酵素とを含む液体洗剤中で相乗的酵素安定化効果を有することを見いだした。これは、最も豊富なアニオン性界面活性剤がより安価な線状もしくは分岐状のアルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳもしくはＢＡＢＳ）および／またはアルキルスルフェート（ＡＳ）である希薄液体洗剤または液体洗剤では、とくに興味深い。なぜなら、そのような洗剤では、酵素安定性が厄介な問題になることがあり、いくつかの場合には、酵素の安定性が低すぎて、石鹸製造業者が酵素のクリーニング力の利点を生かせないことがあるからである。

したがって、本発明は、
ａ）線状アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳ）と、
ｂ）スブチリシンと、
ｃ）ペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物であるスブチリシン阻害剤と、
ｄ）一価カチオンと１〜６個の炭素の一価有機アニオンとの塩と、
ｅ）少なくとも１０％（ｗ／ｗ）の水と、
を含み、
アルキルエトキシエーテルスルフェート（ＡＥＳ）とメチルエステルスルホネート（ＭＥＳ）との全含有量よりも多い、線状アルキルベンゼンスルホネートと分岐状アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳとＢＡＢＳ）とアルキルスルフェート（ＡＳ）との全含有量を有する、
無ホウ素液体洗剤組成物を提供する。

スブチリシン
スブチリシンは、セリンプロテアーゼのサブグループである。セリンプロテアーゼは、ペプチド結合の加水分解を触媒するかつ活性部位に必須のセリン残基が存在する酵素である（Ｗｈｉｔｅ，Ｈａｎｄｌｅｒ ａｎｄ Ｓｍｉｔｈ，１９７３“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，”Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｂｏｏｋ Ｃｏｍｐａｎｙ，ＮＹ，ｐｐ．２７１−２７２）。スブチリシンは、Ｓｉｅｚｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｎｇ．４（１９９１）７１９−７３７およびＳｉｅｚｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ６（１９９７）５０１−５２３により定義されるＩ−Ｓ１およびＩ−Ｓ２サブグループを含み、好ましくはそれらで構成される。セリンプロテアーゼの活性部位の構造が高度に保存されるので、本発明に係るスブチリシンは、Ｓｉｅｚｅｎ ｅｔ ａｌ．（ｓｕｐｒａ）により提案されたサブグループで表されるスブチラーゼと機能的に等価でありうる。

スブチリシンは、化学修飾または遺伝子修飾された突然変異体（タンパク質工学操作された変異体）を含めて、動物起源、植物起源、または微生物起源でありうる。それは、セリンプロテアーゼ、好ましくは微生物アルカリプロテアーゼでありうる。スブチリシンの例は、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）に由来するもの、たとえば、スブチリシンノボ、スブチリシンカールスバーグ、スブチリシンＢＰＮ’、スブチリシン３０９、スブチリシン１４７、およびスブチリシン１６８（国際公開第８９／０６２７９号パンフレットに記載）、ならびにプロテアーゼＰＤ１３８（国際公開第９３／１８１４０号パンフレット）である。例は、国際公開第９８／０２０１１５号パンフレット、国際公開第０１／４４４５２号パンフレット、国際公開第０１／５８２７５号パンフレット、国際公開第０１／５８２７６号パンフレット、国際公開第０３／００６６０２号パンフレット、および国際公開第０４／０９９４０１号パンフレットに記載されている。トリプシン様プロテアーゼの例は、トリプシン（たとえば、ブタ起源またはウシ起源のもの）ならびに国際公開第８９／０６２７０号パンフレットおよび国際公開第９４／２５５８３号パンフレットに記載のフザリウム属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）のプロテアーゼである。他の例は、国際公開第９２／１９７２９号パンフレット、国際公開第８８／０８０２８号パンフレット、国際公開第９８／２０１１５号パンフレット、国際公開第９８／２０１１６号パンフレット、国際公開第９８／３４９４６号パンフレット、国際公開第２０００／０３７５９９号パンフレット、国際公開第２０１１／０３６２６３号パンフレットに記載の変異体およびプロテアーゼの混合物である。

市販のスブチリシンの例としては、Ｋａｎｎａｓｅ（商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（商標）、Ｒｅｌａｓｅ（商標）、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（商標）、Ａｌｃａｌａｓｅ（商標）、Ｄｕｒａｚｙｍ（商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（商標）、Ｏｖｏｚｙｍｅ（商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（商標）、Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ（商標）、Ｐｙｒａｓｅ（商標）、Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ Ｔｒｙｐｓｉｎ ＮＯＶＯ（ＰＴＮ）、Ｂｉｏ−Ｆｅｅｄ（商標）ＰｒｏおよびＣｌｅａｒ−Ｌｅｎｓ（商標）Ｐｒｏ、Ｂｌａｚｅが挙げられる（すべてＮｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ，Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋから入手可能）。他の市販のプロテアーゼとしては、Ｒｏｎｏｚｙｍｅ（商標）Ｐｒｏ、Ｍａｘａｔａｓｅ（商標）、Ｍａｘａｃａｌ（商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（商標）、Ｏｐｔｉｃｌｅａｎ（商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（商標）、Ｐｕｒａｆａｓｔ（商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ Ｏｘ（商標）、Ｐｕｒａｆａｃｔ Ｐｒｉｍｅ（商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（商標）、ＦＮ２（商標）、ＦＮ３（商標）、およびＦＮ４（商標）が挙げられる（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．、Ｇｉｓｔ−Ｂｒｏｃａｄｅｓ、ＢＡＳＦ、またはＤＳＭから入手可能）。他の例は、Ｐｒｉｍａｓｅ（商標）およびＤｕｒａｌａｓｅ（商標）である。Ｈｅｎｋｅｌから入手可能なＢｌａｐ Ｒ、Ｂｌａｐ Ｓ、およびＢｌａｐ Ｘもまた、例である。

第２の酵素
スブチリシンに加えて、洗剤組成物は、任意選択で、リパーゼ、クチナーゼ、アミラーゼ、カルボヒドラーゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、アラビナーゼ、ガラクタナーゼ、キシラナーゼ、オキシダーゼ、ラッカーゼ、および／またはペルオキシダーゼなどの第２の酵素を含んでいてもよい。液体洗剤は、１種、２種、またはそれ以上の非スブチリシン酵素を含有していてもよい。

リパーゼおよびクチナーゼ
好適なリパーゼおよびクチナーゼとしては、細菌起源または菌類起源のものが挙げられる。化学修飾またはタンパク質工学操作された突然変異体が包含される。例としては、サーモマイセス属（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）由来のリパーゼ、たとえば、欧州特許第２５８０６８号明細書および欧州特許第３０５２１６号明細書に記載のＴ．ラヌギノサス（Ｔ．ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ）（旧名フミコラ・ラヌギノサ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ））由来のリパーゼ、フミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）由来のクチナーゼ、たとえば、国際公開第９６／１３５８０号パンフレットに記載のＨ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）由来のクチナーゼ、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）のリパーゼ、たとえば、Ｐ．アルカリゲネス（Ｐ．ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）またはＰ．シュードアルカリゲネス（Ｐ．ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）（欧州特許第２１８２７２号明細書）、Ｐ．セパシア（Ｐ．ｃｅｐａｃｉａ）（欧州特許第３３１３７６号明細書）、Ｐ．スツッツェリ（Ｐ．ｓｔｕｔｚｅｒｉ）（英国特許第１，３７２，０３４号明細書）、Ｐ．フルオレッセンス（Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）の種の株ＳＤ７０５（国際公開第９５／０６７２０号パンフレットおよび国際公開第９６／２７００２号パンフレット）、Ｐ．ウィスコンシネンシス（Ｐ．ｗｉｓｃｏｎｓｉｎｅｎｓｉｓ）（国際公開第９６／１２０１２号パンフレット）由来のリパーゼ、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）のリパーゼ、たとえば、Ｂ．サブチリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）（Ｄａｒｔｏｉｓ ｅｔ ａｌ．，１９９３，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ，１１３１：２５３−３６０）、Ｂ．ステアロサーモフィラス（Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）（特開昭６４−７４４９９２号公報）、またはＢ．プミラス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）（国際公開第９１／１６４２２号パンフレット）由来のリパーゼが挙げられる。

他の例は、リパーゼ変異体、たとえば、国際公開第９２／０５２４９号パンフレット、国際公開第９４／０１５４１号パンフレット、欧州特許第４０７２２５号明細書、欧州特許第２６０１０５号明細書、国際公開第９５／３５３８１号パンフレット、国際公開第９６／００２９２号パンフレット、国際公開第９５／３０７４４号パンフレット、国際公開第９４／２５５７８号パンフレット、国際公開第９５／１４７８３号パンフレット、国際公開第９５／２２６１５号パンフレット、国際公開第９７／０４０７９号パンフレット、国際公開第９７／０７２０２号パンフレット、国際公開第００／０６００６３号パンフレット、国際公開第２００７／０８７５０８号パンフレット、および国際公開第２００９／１０９５００号パンフレットに記載のものである。

好ましい市販のリパーゼ酵素としては、Ｌｉｐｏｌａｓｅ（商標）、Ｌｉｐｏｌａｓｅ Ｕｌｔｒａ（商標）、およびＬｉｐｅｘ（商標）、Ｌｅｃｉｔａｓｅ（商標）、Ｌｉｐｏｌｅｘ（商標）、Ｌｉｐｏｃｌｅａｎ（商標）、Ｌｉｐｏｐｒｉｍｅ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）が挙げられる。他の市販のリパーゼとしては、Ｌｕｍａｆａｓｔ（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔ Ｉｎｃ）、Ｌｉｐｏｍａｘ（Ｇｉｓｔ−Ｂｒｏｃａｄｅｓ／Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔ Ｉｎｃ）、およびＳｏｌｖａｙ製のバチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の種のリパーゼが挙げられる。

アミラーゼ
好適なアミラーゼ（αおよび／またはβ）としては、細菌起源または菌類起源のものが挙げられる。化学修飾またはタンパク質工学操作された突然変異体が包含される。アミラーゼとしては、たとえば、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）から取得されるα−アミラーゼ、たとえば、より詳細には英国特許第１，２９６，８３９号明細書に記載されるバチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の特定の株から取得されるものが挙げられる。

有用なアミラーゼの例は、国際公開第９４／０２５９７号パンフレット、国際公開第９４／１８３１４号パンフレット、国際公開第９６／２３８７３号パンフレット、および国際公開第９７／４３４２４号パンフレットに記載の変異体、特定的には、次の位置、すなわち、１５、２３、１０５、１０６、１２４、１２８、１３３、１５４、１５６、１８１、１８８、１９０、１９７、２０２、２０８、２０９、２４３、２６４、３０４、３０５、３９１、４０８、および４４４の１つ以上に置換を有する変異体である。

市販のアミラーゼは、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ Ｐｌｕｓ、Ｄｕｒａｍｙｌ（商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ（商標）、Ｔｅｒｍａｍｙｌ Ｕｌｔｒａ、Ｎａｔａｌａｓｅ、Ｆｕｎｇａｍｙｌ（商標）、およびＢＡＮ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｒａｐｉｄａｓｅ（商標）およびＰｕｒａｓｔａｒ（商標）（Ｇｅｎｅｎｃｏｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃ．製）である。

リアーゼ
リアーゼは、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）に由来するペクチン酸リアーゼ、特定的には、Ｂ．リケルニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｒｎｉｆｏｒｍｉｓ）もしくはＢ．アガラドヘレンス（Ｂ．ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）に由来するものまたはこれらのいずれかに由来する変異体、たとえば、米国特許第６，１２４，１２７号明細書、国際公開第１９９９／０２７０８３号パンフレット、国際公開第１９９９／０２７０８４号パンフレット、国際公開第２００２／００６４４２号パンフレット、国際公開第２００２／０９２７４１号パンフレット、国際公開第２００３／０９５６３８号パンフレットに記載のものであってもよい。市販のペクチン酸リアーゼは、ＸＰｅｃｔ、Ｐｅｃｔａｗａｓｈ、およびＰｅｃｔａｗａｙ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）である。

マンナナーゼ
マンナナーゼは、ファミリー５または２６のアルカリマンナナーゼであってもよい。それは、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）またはフミコラ属（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）に由来する野生型、特定的には、Ｂ．アガラドヘレンス（Ｂ．ａｇａｒａｄｈａｅｒｅｎｓ）、Ｂ．リケニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．ハロデュランス（Ｂ．ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．クラウシー（Ｂ．ｃｌａｕｓｉｉ））、またはＨ．インソレンス（Ｈ．ｉｎｓｏｌｅｎｓ）に由来するものであってもよい。好適なマンナナーゼは、国際公開第１９９９／０６４６１９号パンフレットに記載されている。市販のマンナナーゼは、Ｍａｎｎａｗａｙ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）である。

セルラーゼ
好適なセルラーゼは、細菌起源または菌類起源でありうる。化学修飾または遺伝子修飾された突然変異体が包含される。それは、フミコラ・インソレンス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ ｉｎｓｏｌｅｎｓ）（米国特許第４，４３５，３０７号明細書）に由来する、またはトリコデルマ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、たとえば、Ｔ．リーセイ（Ｔ．ｒｅｅｓｅｉ）もしくはＴ．ビリデ（Ｔ．ｖｉｒｉｄｅ）に由来する、菌類のセルラーゼであってもよい。セルラーゼの例は、欧州特許第０４９５２５７号明細書に記載されている。市販のセルラーゼとしては、Ｃａｒｅｚｙｍｅ（商標）、Ｃｅｌｌｕｚｙｍｅ（商標）、Ｃｅｌｌｕｃｌｅａｎ（商標）、Ｃｅｌｌｕｃｌａｓｔ（商標）、およびＥｎｄｏｌａｓｅ（商標）、Ｒｅｎｏｚｙｍｅ、Ｗｈｉｔｅｚｙｍｅ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）、Ｐｕｒａｄａｘ、Ｐｕｒａｄａｘ ＨＡ、およびＰｕｒａｄａｘ ＥＧ（Ｇｅｎｅｎｃｏｒから入手可能）が挙げられる。

ペプチドアルデヒド（ヒドロ亜硫酸塩）阻害剤
ペプチドアルデヒド
ペプチドアルデヒドは、式Ｘ−Ｂ¹−Ｂ⁰−Ｈを有しうる。式中の基は、以上のように定義され、Ｂ⁰は、式：ＮＨ−ＣＨＲ−ＣＯを有するＬ配置またはＤ配置の単一のアミノ酸残基である。

ペプチドアルデヒドは、式Ｘ−Ｂ¹−Ｂ⁰−Ｈを有しうる。式中の基は、以下の意味を有する。すなわち、
ａ）Ｈは、水素であり、
ｂ）Ｂ⁰は、Ｌ配置またはＤ配置を有する単一のアミノ酸残基であり、
ｃ）Ｂ¹は、単一のアミノ酸残基であり、かつ
ｄ）Ｘは、１個以上のアミノ酸残基（好ましくは１個または２個）で構成され、任意選択でＮ末端保護基を含んでいてもよい。

ＮＨ−ＣＨＲ−ＣＯ（Ｂ⁰）は、ＬまたはＤ−アミノ酸残基である。ただし、Ｒは、脂肪族または芳香族の側鎖、たとえば、ベンジルなどのアラルキルであってもよく、Ｒは、任意選択で置換されていてもよい。より特定的には、Ｂ⁰残基は、嵩高、中性、極性、疎水性、および／または芳香族であってもよい。例は、Ｄ形またはＬ形のＴｙｒ（ｐ−チロシン）、ｍ−チロシン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、ノルバリン（Ｎｖａ）、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはノルロイシン（Ｎｌｅ）である。

以上の式Ｘ−Ｂ¹−Ｂ⁰−Ｈ中、Ｂ¹残基は、特定的には、小型、脂肪族、疎水性、および／または中性であってもよい。例は、アラニン（Ａｌａ）、システイン（Ｃｙｓ）、グリシン（Ｇｌｙ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、バリン（Ｖａｌ）、ノルバリン（Ｎｖａ）、およびノルロイシン（Ｎｌｅ）、特定的には、アラニン、グリシン、またはバリンである。

Ｘは、特定的には、任意選択のＮ末端保護基を有していてもよい１個または２個のアミノ酸残基でありうる（すなわち、この化合物は、保護基を有していても有していなくてもよいトリまたはテトラペプチドアルデヒドである）。したがって、Ｘは、Ｂ²、Ｂ³−Ｂ²、Ｚ−Ｂ²、またはＺ−Ｂ³−Ｂ²でありうる。ただし、Ｂ³およびＢ²は、それぞれ、１個のアミノ酸残基を表し、かつＺは、Ｎ末端保護基である。Ｂ²残基は、特定的には、小型、脂肪族、および／または中性であってもよく、たとえば、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、またはＶａｌである。Ｂ³残基は、特定的には、嵩高、疎水性、中性、および／または芳香族であってもよく、たとえば、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、フェニルグリシン、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｎｖａ、Ｎｌｅ、またはＩｌｅである。

Ｎ末端保護基Ｚ（存在する場合）は、ホルミル基、アセチル基、ベンゾイル基、トリフルオロアセチル基、フルオロメトキシカルボニル基、メトキシスクシニル基、芳香族および脂肪族のウレタン保護基、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、アダマンチルオキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンジルカルボニル（ＭＯＺ）基、ベンジル（Ｂｎ）基、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）基もしくはｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）基、メトキシカルボニル（Ｍｏｃ）基、メトキシアセチル（Ｍａｃ）基、メチルカルバメート基、またはメチルアミノカルボニル基／メチルウレア基から選択されうる。保護基を有するトリペプチドアルデヒド（すなわちＸ＝Ｚ−Ｂ²）の場合、Ｚは、好ましくは、小型の脂肪族基、たとえば、ホルミル基、アセチル基、フルオロメトキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、メトキシカルボニル（Ｍｏｃ）基、メトキシアセチル（Ｍａｃ）基、メチルカルバメート基、またはメチルアミノカルボニル基／メチルウレア基である。保護基を有するトリペプチドアルデヒド（すなわちＸ＝Ｚ−Ｂ³−Ｂ²）の場合、Ｚは、好ましくは、嵩高い芳香族基、たとえば、ベンゾイル、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルカルボニル（ＭＯＺ）、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、またはｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ）である。

好適なペプチドアルデヒドは、国際公開第９４／０４６５１号パンフレット、国際公開第９５／２５７９１号パンフレット、国際公開第９８／１３４５８号パンフレット、国際公開第９８／１３４５９号パンフレット、国際公開第９８／１３４６０号パンフレット、国際公開第９８／１３４６１号パンフレット、国際公開第９８／１３４６１号パンフレット、国際公開第９８／１３４６２号パンフレット、国際公開第２００７／１４１７３６号パンフレット、２００７／１４５９６３、国際公開第２００９／１１８３７５号パンフレット、国際公開第２０１０／０５５０５２号パンフレット、および国際公開第２０１１／０３６１５３号パンフレットに記載されている。より特定的には、ペプチドアルデヒドは、Ｃｂｚ−ＲＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＧＡＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＬ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＶＡＬ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＦ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＶ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＧＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＧＦ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＲＶＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＬＶＹ−Ｈ、Ａｃ−ＬＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＹＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＬ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＦ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＶＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＭ−Ｈ、Ａｃ−ＷＬＶＹ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＶＡＬ−Ｈ、ＭｅＮＣＯ−ＶＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＦＧＡＦ−Ｈ、ＭｅＳＯ₂−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＭｅＳＯ₂−ＶＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＶＡＬ−Ｈ、ＥｔＳＯ₂−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂ＳＯ₂−ＶＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＬＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＦＡＬ−Ｈ、またはＭｅＯ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＬＧＡＬ−Ｈである。ここで、Ｃｂｚは、ベンジルオキシカルボニルであり、Ｍｅは、メチルであり、Ｅｔは、エチルであり、Ａｃは、アセチルであり、Ｈは、水素であり、かつ他方文字は、標準的一文字表記（たとえば、Ｆ＝Ｐｈｅ、Ｙ＝Ｔｙｒ、およびＬ＝Ｌｅｕ）により記されたアミノ酸残基を表す。

他の選択肢として、ペプチドアルデヒドは、国際公開第２０１１／０３６１５３号パンフレットに記載の式：
Ｐ−Ｏ−（Ａ_i−Ｘ’）_n−Ａ_n+1−Ｑ
（式中、
Ｑは、水素、ＣＨ₃、ＣＸ₃、ＣＨＸ₂、またはＣＨ₂Ｘであり、ここで、Ｘは、ハロゲン原子であり、
１つのＸ’は、「ダブルＮキャッピング基」ＣＯ、ＣＯ−ＣＯ、ＣＳ、ＣＳ−ＣＳ、またはＣＳ−ＣＯであり、最も好ましいのはウリド（ＣＯ）であり、他のＸ’は、存在せず、
ｎ＝１〜１０、好ましくは２〜５、最も好ましくは２、
Ａ_iおよびＡ_n+1のそれぞれは、構造：
Ｘ＝−ＣＯ−の右側の残基に対しては−ＮＨ−ＣＲ−ＣＯ−、または
Ｘ＝−ＣＯ−の左側の残基に対しては−ＣＯ−ＣＲ−ＮＨ−
を有するアミノ酸残基であり、
Ｒは、Ｈ−または任意選択で置換されていてもよいアルキル基もしくはアルキルアリール基であり、任意選択でヘテロ原子を含んでいてもよく、任意選択でＮ原子に結合されていてもよく、かつ
Ｐは、水素または任意のＣ末端保護基である）
を有しうる。そのようなペプチドアルデヒドの例としては、α−ＭＡＰＩ、β−ＭＡＰＩ、Ｆ−尿素−ＲＶＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＧＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＦ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＬ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡ−Ｎｖａ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡ−Ｎｌｅ−Ｈ、Ｙ−尿素−ＲＶＹ−Ｈ、Ｙ−尿素−ＧＡＹ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＲＶＦ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＲＶＹ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＧＡＹ−Ｈ、アンチパイン、ＧＥ２０３７２Ａ、ＧＥ２０３７２Ｂ、キモスタチンＡ、キモスタチンＢ、およびキモスタチンＣが挙げられる。ペプチドアルデヒドのさらなる例は、国際公開第２０１０／０５５０５２号パンフレットおよび国際公開第２００９／１１８３７５号パンフレット、国際公開第９４／０４６５１号パンフレット、国際公開第９８／１３４５９号パンフレット、国際公開第９８／１３４６１号パンフレット、国際公開第９８／１３４６２号パンフレット、国際公開第２００７／１４５９６３号パンフレット（Ｐ＆Ｇ）に開示されている（参照により本明細書に組み込まれる。

ヒドロ亜硫酸付加物
ペプチドアルデヒドに代わる選択肢として、プロテアーゼ阻害剤は、式Ｘ−Ｂ¹−ＮＨ−ＣＨＲ−ＣＨＯＨ−ＳＯ₃Ｍ（式中、Ｘ、Ｂ¹、およびＲは、以上のように定義され、かつＭは、Ｈまたはアルカリ金属、好ましくはＮａまたはＫである）を有するヒドロ亜硫酸付加物であってもよい。

ペプチドアルデヒドは、Ｍａｒｃｈ，Ｊ．Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｆｏｕｒｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，ＵＳ １９９２，ｐ８９５などの書籍に記載されるように、重亜硫酸ナトリウムとの反応により水溶性ヒドロ亜硫酸付加物に変換しうる。

重亜硫酸付加物の水性溶液は、公知の方法で、たとえば、国際公開第９８／４７５２３号パンフレット、米国特許第６，５００，８０２号明細書、米国特許第５，４３６，２２９号明細書、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９７８）１００，１２２８、Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．，Ｃｏｌｌ．ｖｏｌ．７：３６１に記載の方法で、対応するペプチドアルデヒドと重亜硫酸ナトリウム（亜硫酸水素ナトリウムＮａＨＳＯ₃）、重亜硫酸カリウム（ＫＨＳＯ₃）の水性溶液との反応により調製されうる。

塩
液体洗剤で使用される塩は、一価カチオンと１〜６個の炭素の一価有機アニオンとの塩である。好ましくは、一価有機アニオンは、１〜６個の炭素の小型のモノカルボン酸である。一価有機アニオンは、好ましくは、ギ酸イオン、酢酸イオン、プロピオン酸イオン、および乳酸イオンの中から選択される。カチオンは、Ｎａ⁺、Ｋ⁺、またはＮＨ₄ ⁺であってもよく、塩は、特定的には、ギ酸ナトリウムであってもよい。

量
スブチリシンおよび任意選択の第２の酵素は、それぞれ、０．０００１％（ｗ／ｗ）〜５％（ｗ／ｗ）の範囲内の量で液体洗剤中に存在しうる。典型的な量は、液体洗剤組成物の０．０１重量％〜２重量％の範囲内である。

ペプチドアルデヒド（またはヒドロ亜硫酸付加物）対プロテアーゼのモル比は、少なくとも１：１または１．５：１でありうるし、かつ１０００：１未満、より好ましくは５００：１未満でありうる。さらにより好ましいのは、１００：１〜２：１または２０：１〜２：１であり、最も好ましいのは、モル比が１０：１〜２：１である。

塩は、少なくとも０．１％ｗ／ｗまたは０．５％ｗ／ｗ、たとえば、少なくとも１．０％、少なくとも１．２％、または少なくとも１．５％の量で液体洗剤中に存在しうる。塩の量は、典型的には、５％ｗ／ｗ未満、４％未満、または３％未満である。

洗剤組成物
液体洗剤は、固体（またはガス）ではない物理形態を有する。それは、注加可能な液体、注加可能なゲル、または注加不能なゲルでありうる。それは、等方性または構造性のいずれか、好ましくは等方性でありうる。それは、自動洗浄／洗濯機による洗浄／洗濯または手による洗浄／洗濯に有用な配合物でありうる。

洗剤成分は、水溶性パウチの区画により互いに物理的に分離することが可能である。それにより、成分間の貯蔵時有害相互作用を回避することが可能である。また、各区画の異なる溶解プロファイルにより、洗浄／洗濯溶液中の所定の成分の遅延溶解を引き起こすことが可能である。

洗剤組成物は、単位用量製品の形態を取りうる。単位用量製品は、再使用不能な容器中の単回用量のパッケージである。それは、衣類洗濯用および食器洗浄用の洗剤でますます使用されるようになっている。洗剤単位用量製品は、１回の洗浄／洗濯に使用される洗剤量のパッケージ（たとえば、水溶性フィルムから作製されたパウチの形態）である。

パウチは、組成物の保持に好適な任意の形態、形状、および材料でありうる。たとえば、水に接触する前にパウチから組成物を放出させないものでありうる。パウチは、内部空間を取り囲む水溶性フィルムから作製される。前記内部空間は、パウチの区画に分割することが可能である。好ましいフィルムは、高分子材料、好ましくはフィルム状またはシート状に形成されたポリマーである。好ましいポリマー、コポリマー、またはそれらの誘導体は、所定のポリアクリレートおよび水溶性アクリレートコポリマー、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ナトリウムデキストリン、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マルトデキストリン、ポリメタクリレート、最も好ましくはポリビニルアルコールコポリマーおよびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）である。好ましくは、フィルム中のポリマーたとえばＰＶＡのレベルは、少なくとも約６０％である。好ましい平均分子量は、典型的には、約２０，０００〜約１５０，０００であろう。フィルムはまた、グリセロール、エチレングリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、およびそれらの混合物のような可塑剤が加えられたポリアクチドおよびポリビニルアルコール（Ｃｈｒｉｓ Ｃｒａｆｔ Ｉｎ．Ｐｒｏｄ．Ｏｆ Ｇａｒｙ，Ｉｎｄ．，ＵＳにより販売されているＭ８６３０という商品名で知られる）などの加水分解性かつ水溶性のポリマーブレンドを含むブレンド組成物であってもよい。パウチは、水溶性フィルムにより分離された固体衣類クリーニング組成物もしくは部分成分および／または液体クリーニング組成物もしくは部分成分を含んでいてもよい。液体成分用の区画は、固体を含有する区画と組成が異なっていてもよい（たとえば、米国特許出願公開第２００９／００１１９７０号明細書を参照されたい）。

洗剤成分の選択は、テキスタイルの保護のために、クリーニングされるテキスタイルのタイプ、汚れのタイプおよび／または程度、クリーニングが行われる温度、ならびに洗剤製品の配合を考慮することを含みうる。以下に挙げられた成分は、特定の機能に従って一般的な見出しにより分類されているが、これは、当業者であればわかるであろうが、成分が追加の機能を含みうるので、限定要件とみなすべきはでない。

界面活性剤
本明細書では、アニオン性界面活性剤は、酵素（スブチリシンおよび任意選択の第２の酵素）の安定性に有害な影響を及ぼす傾向がある第１のグループと、これらの酵素の安定性にそれほど有害な影響を及ぼす傾向がない第２のグループと、に分類される。液体洗剤は、第２の（それほど有害でない）グループの全含有量よりも多い第１の（有害な）グループの界面活性剤の全含有量を有する。したがって、本発明は、そのままでは界面活性剤配合物がかなり不十分な酵素安定性を生じるおそれがある液体洗剤中の酵素安定性の向上に関する。

第１のグループは、線状および分岐状のアルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳおよびＢＡＢＳ）ならびにアルキルスルフェート（ＡＳ）で構成される。第２のグループは、アルキルエトキシエーテルスルフェート（ＡＥＳ）およびメチルエステルスルホネート（ＭＥＳ）を含む。

第１のグループは、ＬＡＳおよび分岐状アルキルベンゼンスルホネート（ＢＡＢＳ）およびフェニルアルカンスルホネートの異性体をも含む。アルキルスルフェート（ＡＳ）は、ナトリウムドデシルスルフェート（ＳＤＳ）または脂肪アルコールスルフェート（ＦＡＳ）、第一級アルコールスルフェート（ＰＡＳ）を含みうる。

第２のグループ中、アルコールエーテルスルフェート（ＡＥＳ）はまた、ナトリウムラウリルエーテルスルフェート（ＳＬＥＳ）を含めて、アルコールエトキシスルフェート（ＡＥＯＳ）または脂肪アルコールエーテルスルフェート（ＦＥＳ）としても知られる。α−スルホ脂肪酸メチルエステル（ＭＥＡ、α−ＳＦＭｅ、またはＳＥＳ）。

液体洗剤は、たとえば、１〜３０重量％たとえば約１〜１５％の量でＬＡＳを含有し、１〜５０重量％たとえば２〜３０％の量で第１のグループの界面活性剤を含有しうるし、第１のグループの量未満たとえば１〜２５重量％の量で第２のグループの界面活性剤を含有しうる。

液体洗剤は、さらに、他のアニオン性界面活性剤、たとえば、石鹸およびまたは脂肪酸、α−オレフィンスルホネート（ＡＯＳ）、ドデセニル／テトラデセニルコハク酸（ＤＴＳＡ）、アミノ酸の脂肪酸誘導体、スルホ−コハク酸または石鹸のジエステルおよびモノエステル、ならびにそれらの組合せを含有していてもよい。

液体洗剤はまた、非イオン性界面活性剤、たとえば、アルコールエトキシレート（ＡＥまたはＡＥＯ）、アルコールプロポキシレート、プロポキシル化脂肪アルコール（ＰＦＡ）、アルコキシル化脂肪酸アルキルエステル、たとえば、エトキシル化および／またはプロポキシル化脂肪酸アルキルエステル、アルキルフェノールエトキシレート（ＡＰＥ）、ノニルフェノールエトキシレート（ＮＰＥ）、アルキルポリグリコシド（ＡＰＧ）、アルコキシル化アミン、脂肪酸モノエタノールアミド（ＦＡＭ）、脂肪酸ジエタノールアミド（ＦＡＤＡ）、エトキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＥＦＡＭ）、プロポキシル化脂肪酸モノエタノールアミド（ＰＦＡＭ）、ポリヒドロキシアルキル脂肪酸アミド、メチルエステルエトキシレート、ポリエチル化ポリオキシプロピレングリコール、ソルビトールエステル、ポリオキシエチレン化ソルビトールエステル、アルカノールアミド、Ｎ−アルキルピロリドン（国際公開第２００７／１４１７３６号パンフレット）、またはグルコサミンのＮ−アシルＮ−アルキル誘導体（グルカミドＧＡまたは脂肪酸グルカミドＦＡＧＡ）、さらにはＳＰＡＮおよびＴＷＥＥＮという商品名で入手可能な製品、ならびにそれらの組合せを含有していてもよい。

洗剤は、その中に含む場合、通常、約０．１重量％〜約７０重量％、たとえば約０．５％〜約３０％、特定的には約１％〜約２０％、約２％〜約１５％、または３０〜６０％の非イオン性界面活性剤を含有するであろう。

任意選択の追加の酵素安定化剤
任意選択で、液体洗剤は、追加の酵素安定化剤、たとえば、プロピレングリコール（ＭＰＧ）、ソルビトール、またはグリセロールなどのポリオールを、たとえば、０．５〜１０％ｗ／ｗの量で含んでいてもよい。

溶媒
任意選択で、洗剤は、０〜１０％のエタノールたとえば０〜５％のエタノールを含有してもよく、それに加えて、ポリオールが任意選択で存在していてもよい。水性液体洗剤は、ＥｔＯＨおよびポリオールを含めて０〜３０％の有機溶媒を含有していてもよい。

ビルダーおよび緩衝系
液体洗剤は、クエン酸ナトリウムやクエン酸などのビルダーを、たとえば、約０．１〜２％などの０〜５％ｗ／ｗの量で含んでいてもよい。他の緩衝系は、０．１〜５％のレベルでモノ、ジ、またはトリエタノールアミン（ＭＥＡ、ＤＥＡ、またはＴＥＡ）などのアルカノールアミンを含んでいてもよい。

ｐＨ
液体洗剤のｐＨは、６．０〜１０、特定的には６．５〜９．５または７〜９の範囲内でありうる。ｐＨは、洗剤中で直接測定しうるか、または５％水溶液中で測定しうる。

他の成分
液体洗剤はまた、副成分、たとえば、ポリマー、粘度調整剤（たとえばＮａＣｌまたはポリマー）、保存剤、染料転写防止剤、香料、乳白剤、布染色剤、および消泡剤を含有していてもよい。

液体洗剤は、ホウ素化合物を本質的に含まず、かつ低レベルのカルシウムを有する。したがって、ホウ素含有量は、５００ｐｐｍ Ｂ未満（重量基準）であり、かつカルシウム含有量は、５００ｐｐｍ（Ｃａ）未満でありうる。

水含有量
液体洗剤は、水性であり、少なくとも１０重量％かつ９５％までの水、たとえば、２０〜９０％の水、４０〜８０％の水、または少なくとも５０％（超）の水を含有する。

液体洗剤組成物
第１の態様では、本発明は、
ａ）線状アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳ）と、
ｂ）スブチリシンと、
ｃ）ペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物であるスブチリシン阻害剤と、
ｄ）一価カチオンと１〜６個の炭素の一価有機アニオンとの塩と、
ｅ）少なくとも１０％の水と、
を含み、
アルキルエトキシエーテルスルフェート（ＡＥＳ）とメチルエステルスルホネート（ＭＥＳ）との全含有量よりも多い、線状アルキルベンゼンスルホネートと分岐状アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳとＢＡＢＳ）とアルキルスルフェート（ＡＳ）との全含有量を有する、
無ホウ素液体洗剤組成物を提供する。

一実施形態では、阻害剤は、式Ｘ−Ｂ¹−Ｂ⁰−Ｈで示されるペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物であり、ただし、式中、
ａ）Ｈは、水素であり、
ｂ）Ｂ⁰は、単一のＤまたはＬ−アミノ酸残基であり、
ｃ）Ｂ¹は、単一のアミノ酸残基であり、かつ
ｄ）Ｘは、１個以上のアミノ酸残基（好ましくは１個または２個）で構成され、任意選択でＮ末端保護基を含んでいてもよい。

好ましくは、Ｂ⁰は、Ｔｙｒ、ｍ−チロシン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｎｖａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅのＬまたはＤ−アミノ酸残基である。

好ましくは、Ｂ¹は、任意選択で置換されていてもよい小型の脂肪族側鎖を有する残基、好ましくは、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｎｖａ、またはＮｌｅである。

好ましくは、Ｘは、Ｂ²、Ｂ³−Ｂ²、Ｚ−Ｂ²、Ｚ−Ｂ³−Ｂ²である。ただし、Ｂ²およびＢ³は、それぞれ、１個のアミノ酸残基を表し、かつＺは、Ｎ末端保護基である。

好ましくは、Ｂ²は、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、またはＴｈｒの単一の残基である。

好ましくは、Ｂ³は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、フェニルグリシン、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｎｖａ、Ｎｌｅ、またはＩｌｅである。

より好ましくは、阻害剤は、次のペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物、すなわち、Ｃｂｚ−ＲＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＧＡＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＬ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＶＡＬ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＦ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＶ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＧＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＧＦ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＲＶＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＬＶＹ−Ｈ、Ａｃ−ＬＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＹＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＬ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＦ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＶＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＭ−Ｈ、Ａｃ−ＷＬＶＹ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＶＡＬ−Ｈ、ＭｅＮＣＯ−ＶＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＦＧＡＦ−Ｈ、ＭｅＳＯ₂−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＭｅＳＯ₂−ＶＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＶＡＬ−Ｈ、ＥｔＳＯ₂−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂ＳＯ₂−ＶＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＬＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＦＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＬＧＡＬ−Ｈ、α−ＭＡＰＩ、β−ＭＡＰＩ、Ｆ−尿素−ＲＶＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＧＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＦ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＬ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡ−Ｎｖａ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡ−Ｎｌｅ−Ｈ、Ｙ−尿素−ＲＶＹ−Ｈ、Ｙ−尿素−ＧＡＹ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＲＶＦ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＲＶＹ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＧＡＹ−Ｈ、アンチパイン、ＧＥ２０３７２Ａ、ＧＥ２０３７２Ｂ、キモスタチンＡ、キモスタチンＢ、またはキモスタチンＣの１つである。

一実施形態では、一価有機アニオンは、ギ酸イオン、酢酸イオン、プロピオン酸イオン、または乳酸イオン、好ましくはギ酸イオンである。一実施形態では、一価カチオンは、Ｎａ、Ｋ、またはＮＨ₄である。好ましい実施形態では、塩は、ギ酸ナトリウムである。より好ましくは、塩は、全組成物の少なくとも０．１重量％の量で存在する。

一実施形態では、液体洗剤組成物は、第２の酵素、特定的には、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、アミラーゼ、またはリパーゼをさらに含む。

一実施形態では、液体洗剤組成物は、ポリオールをさらに含む。

一実施形態では、液体洗剤組成物は、少なくとも５０重量％の水を含む。

一般的実験の詳細： Ｓａｖｉｎａｓｅ １６ＬおよびＸ−Ｂ¹−Ｂ⁰−ＨもしくはＸ−Ｂ¹−ＮＨ−ＣＨＲ−ＣＨＯＨ−ＳＯ₃Ｎａのいずれか、またはＳａｖｉｎａｓｅ １６Ｌを含有する洗剤を、−１８℃、３５℃、および４０℃で密閉ガラス容器内に配置する。さまざまな時間の後、標準的分析方法を用いてプロテアーゼおよびリパーゼの残存活性を測定する（プロテアーゼは、４０℃、ｐＨ８．３でＮ，Ｎ−ジメチルカゼインの加水分解により、およびリパーゼは、４０℃、ｐＨ７．７でｐＮｐ−バレレートの加水分解により）。また、阻害剤およびプロテアーゼを個別に洗剤に添加してもよい。

実施例１
スブチリシンとペプチドアルデヒドまたはペプチドアルデヒドヒドロ亜硫酸付加物とを含む安定化スブチリシン配合物の調製
市販のＳａｖｉｎａｓｅ １６Ｌ（商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ，Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ）に０．７５％のＸ−Ｂ¹−Ｂ⁰−Ｈまたは０．９％のＸ−Ｂ¹−ＮＨ−ＣＨＲ−ＣＨＯＨ−ＳＯ₃Ｎａを添加する。阻害剤は、固体としてまたは液体溶液として添加される。好ましい例としては、Ｘ＝Ｃｂｚ−Ｇｌｙ−、Ｂ¹＝Ａｌａ、Ｂ⁰＝Ｔｙｒ、Ｒ＝ＣＨ₂（Ｃ₆Ｈ₄）ＯＨが挙げられる。

実施例２
液体洗剤中の酵素安定性
安定化スブチリシン配合物を含む液体洗剤の例として、表１に記載の組成物を作製した。

表２に示されるように、洗剤を３５℃および４０℃で貯蔵し、２週間後、残存するプロテアーゼ活性およびリパーゼ活性（初期活性に対する％で表される）を測定した。

最初の４行の比較から、残存するプロテアーゼ活性／リパーゼ活性は、いかなる安定化剤も用いないと１％／１％であることが示される。ギ酸ナトリウム単独の添加により、これは、１％／３％に向上し、ペプチドアルデヒド単独の添加により、２％／１３％に向上するが、ギ酸ナトリウムとペプチドアルデヒドとの組合せにより、残存活性は、４９％／３０％に増加することから、相乗的酵素安定化効果が明確に実証される。他のペプチドアルデヒドに対しておよびヒドロ亜硫酸付加物に対して、類似の相乗効果が以上の表で実証される。

実施例３
安定化スブチリシン配合物および界面活性剤系を含む洗剤の調製。
安定化スブチリシン配合物を含む洗剤の他の例として、表３に記載の組成物を作製した。

表４に示されるように、洗剤を３５℃で貯蔵し、２週間後および４週間後、残存するプロテアーゼ活性およびリパーゼ活性（初期活性に対する％で表される）を測定した。

ギ酸ナトリウム（一価有機アニオンと一価カチオンとの塩）をペプチドアルデヒド（またはヒドロ亜硫酸付加物）プロテアーゼ阻害剤と組み合わせることにより酵素安定化効果が有意に増大されることが、データから明確に実証される。

Claims (22)

1. ａ）１〜３０％ｗ/ｗの線状アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳ）と、
   ｂ）０．０００１〜５％ｗ/ｗのスブチリシンと、
   ｃ）ペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物であるスブチリシン阻害剤であって、前記ペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物と、前記スブチリシンとのモル比が、少なくとも１：１であり、そして１０００：１未満であり、
   ｄ）０．１〜５％ｗ/ｗの一価カチオンと１〜６個の炭素の一価有機アニオンとの塩と、
   ｅ）１０〜９５％ｗ/ｗの水と、
   を含み、
   アルキルエトキシエーテルスルフェート（ＡＥＳ）とメチルエステルスルホネート（ＭＥＳ）との全含有量よりも多い、線状アルキルベンゼンスルホネートと分岐状アルキルベンゼンスルホネート（ＬＡＳとＢＡＢＳ）とアルキルスルフェート（ＡＳ）との全含有量を有する、
   無ホウ素液体洗剤組成物。
2. 前記阻害剤が、式Ｘ−Ｂ¹−Ｂ⁰−Ｈで示されるペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物であり、式中、
   ａ）Ｈが、水素であり、
   ｂ）Ｂ⁰が、単一のＤまたはＬ−アミノ酸残基であり、
   ｃ）Ｂ¹が、単一のアミノ酸残基であり、かつ
   ｄ）Ｘが、１又は２個のアミノ酸残基で構成され、任意選択でＮ末端保護基を含んでいてもよい、
   請求項１に記載の液体洗剤組成物。
3. Ｂ⁰が、Ｔｙｒ、ｍ−チロシン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｎｖａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＮｌｅのＬまたはＤ−アミノ酸残基である、請求項２に記載の液体洗剤組成物。
4. Ｂ ⁰ が、ＴｙｒのＬ又はＤ-アミノ酸残基である、請求項２に記載の液体洗剤組成物。
5. Ｂ¹が、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｎｖａ、またはＮｌｅである、請求項２〜４のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
6. Ｘが、Ｂ²、Ｂ³−Ｂ²、Ｚ−Ｂ²、Ｚ−Ｂ³−Ｂ²であり、Ｂ²およびＢ³が、それぞれ、１個のアミノ酸残基を表し、かつＺが、Ｎ末端保護基である、請求項２〜５のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
7. Ｘが、Ｚ−Ｂ ² 又はＺ−Ｂ ³ −Ｂ ² であり、ここでＢ ² 及びＢ ³ は、各々１のアミノ酸残基を表し、かつＺが、Ｎ末端保護器である、請求項２〜５のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
8. Xが、Ｚ−Ｂ ² であり、ここでＢ ² は１のアミノ酸残基を表し、かつＺが、Ｎ末端保護器である、請求項２〜５のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
9. Ｂ²が、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、またはＴｈｒの単一の残基である、請求項６〜８のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
10. Ｂ ² が、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、またはＬｅｕの単一の残基である、請求項６〜８のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
11. Ｂ³が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、フェニルグリシン、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｎｖａ、Ｎｌｅ、またはＩｌｅである、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
12. Ｂ ³ が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、またはＬｅｕである、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
13. 前記阻害剤が、次のペプチドアルデヒドまたはそのヒドロ亜硫酸付加物、すなわち、Ｃｂｚ−ＲＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＧＡＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＬ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＶＡＬ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＦ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＡＶ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＧＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＧＧＦ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＲＶＹ−Ｈ、Ｃｂｚ−ＬＶＹ−Ｈ、Ａｃ−ＬＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＹＧＡＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＬ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＦ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＶＹ−Ｈ、Ａｃ−ＦＧＡＭ−Ｈ、Ａｃ−ＷＬＶＹ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＶＡＬ−Ｈ、ＭｅＮＣＯ−ＶＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ−ＣＯ−ＦＧＡＦ−Ｈ、ＭｅＳＯ₂−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＭｅＳＯ₂−ＶＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＶＡＬ−Ｈ、ＥｔＳＯ₂−ＦＧＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂ＳＯ₂−ＶＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＬＡＬ−Ｈ、ＰｈＣＨ₂Ｏ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＦＡＬ−Ｈ、ＭｅＯ（ＯＨ）（Ｏ）Ｐ−ＬＧＡＬ−Ｈ、α−ＭＡＰＩ、β−ＭＡＰＩ、Ｆ−尿素−ＲＶＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＧＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＦ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＹ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡＬ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡ−Ｎｖａ−Ｈ、Ｆ−尿素−ＧＡ−Ｎｌｅ−Ｈ、Ｙ−尿素−ＲＶＹ−Ｈ、Ｙ−尿素−ＧＡＹ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＲＶＦ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＲＶＹ−Ｈ、Ｆ−ＣＳ−ＧＡＹ−Ｈ、アンチパイン、ＧＥ２０３７２Ａ、ＧＥ２０３７２Ｂ、キモスタチンＡ、キモスタチンＢ、またはキモスタチンＣの１つである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
14. 前記アニオンが、ギ酸イオン、酢酸イオン、プロピオン酸イオン、または乳酸イオンである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
15. 前記アニオンが、ギ酸イオンである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
16. 前記カチオンが、Ｎａ、Ｋ、またはＮＨ₄である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
17. 前記塩がギ酸ナトリウムである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
18. 前記塩が、全組成物の少なくとも０．１重量％の量で存在する、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
19. 第２の酵素をさらに含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
20. さらに、ペクチン酸リアーゼ、マンナナーゼ、アミラーゼ、またはリパーゼをさらに含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
21. ポリオールをさらに含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。
22. 少なくとも５０重量％の水を含む、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の液体洗剤組成物。