JP6610550B2 - Magnetic carrier particle cleaning method, magnetic carrier particle cleaning device, and immunological measurement method using magnetic carrier particles - Google Patents
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Description
本発明は、免疫学的測定方法において担体として用いる磁性担体粒子の洗浄方法、磁性担体粒子の洗浄装置、及び磁性担体粒子を用いる免疫学的測定方法に関する。 The present invention relates to a method for washing magnetic carrier particles used as a carrier in an immunological measurement method, a washing device for magnetic carrier particles, and an immunological measurement method using magnetic carrier particles.
従来、磁化可能な粒子または磁気的に引き付け可能な粒子、例えば、磁性担体粒子を処理するためのデバイスおよび方法が知られている(例えば、特許文献1参照)。 Conventionally, devices and methods for processing magnetizable particles or magnetically attractable particles such as magnetic carrier particles are known (see, for example, Patent Document 1).
免疫測定法では、先ず最初に、反応容器に磁性担体粒子を含有した試薬、第1抗体を含有した試薬、及び検体を添加し、磁性担体粒子上に、第1抗体、及び測定対象成分の免疫複合体を形成させ、該免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の、例えば、磁性担体粒子に結合していない第1抗体等を洗浄液を用いて除去する。
その後、第1抗体、及び測定対象成分の免疫複合体が残された反応容器に、標識化第2抗体を含有する試薬を添加して、磁性担体粒子上に、第1抗体、測定対象成分、及び標識化第2抗体の免疫複合体を形成させ、この免疫複合体中の標識化第2抗体の標識量を測定することにより、検体中の測定対象成分の測定が行われている。In the immunoassay method, firstly, a reagent containing magnetic carrier particles, a reagent containing a first antibody, and a specimen are added to a reaction container, and the first antibody and the immunity of the measurement target component are added to the magnetic carrier particles. A complex is formed, and for example, the first antibody not bound to the magnetic carrier particles other than the magnetic carrier particles carrying the immune complex, for example, is removed using a washing solution.
Thereafter, a reagent containing a labeled second antibody is added to the reaction container in which the immune complex of the first antibody and the measurement target component remains, and the first antibody, the measurement target component, Then, an immunocomplex of the labeled second antibody is formed, and the amount of the labeled second antibody in the immune complex is measured to measure the component to be measured in the sample.
ところで、磁性担体粒子に結合していない第1抗体等を洗浄液を用いて除去する場合、反応容器に洗浄液を添加して免疫複合体が担持された磁性担体粒子が含まれた試薬を懸濁し、その後、反応容器の側面に磁石を配置して、該免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁性担体粒子に結合していない第1抗体等が含まれた洗浄液を吸引等して除去する。 By the way, when removing the first antibody and the like that are not bound to the magnetic carrier particles using a washing liquid, the washing liquid is added to the reaction vessel to suspend the reagent containing the magnetic carrier particles carrying the immune complex, Thereafter, a magnet was placed on the side surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the immune complex were collected on the inner surface of the reaction vessel, and the first antibody that was not bound to the magnetic carrier particles was included. Remove the cleaning solution by suction.
しかしながら、磁石の高さよりも洗浄液の液面が高い場合には、洗浄液の上部に磁石の磁力が届き難く、洗浄液中の該免疫複合体が担持された磁性担体粒子を集磁し難くなり、該免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率が低下する。免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率が低下すると、検体中の測定対象成分を正確に測定することが出来なくなる。
また、洗浄液で洗浄された、該免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含む反応容器に標識化第2抗体を含む試薬等を添加した後、全体を攪拌して該磁性担体粒子を標識化第2抗体を含む試薬等に懸濁させる場合、該磁性担体粒子を集磁する磁石の高さが、標識化第2抗体を含む試薬等を反応容器に添加して、全体を攪拌する際の液面の上端の高さよりも高い場合には、該液面の上端の高さよりも高い位置で集磁された磁性担体粒子は攪拌しても標識化第2抗体を含む試薬等に懸濁されず、その結果、磁性担体粒子の標識化第2抗体を含む試薬等への分散性が悪くなり、検体中の測定対象成分を正確に測定することが出来なくなる。However, when the level of the cleaning liquid is higher than the height of the magnet, it is difficult for the magnetic force of the magnet to reach the upper part of the cleaning liquid, and it is difficult to collect magnetic carrier particles carrying the immune complex in the cleaning liquid, The recovery efficiency of the magnetic carrier particles carrying the immune complex is reduced. If the recovery efficiency of the magnetic carrier particles carrying the immune complex is lowered, it becomes impossible to accurately measure the component to be measured in the specimen.
In addition, a reagent containing a labeled second antibody is added to a reaction vessel that is washed with a washing solution and contains magnetic carrier particles carrying the immune complex, and then the whole is stirred to label the magnetic carrier particles. When suspended in a reagent containing the second antibody, the height of the magnet that collects the magnetic carrier particles is the same as that when the reagent containing the labeled second antibody is added to the reaction vessel and the whole is stirred. When the height is higher than the upper end of the liquid surface, the magnetic carrier particles collected at a position higher than the upper end of the liquid surface are suspended in the reagent containing the labeled second antibody even if stirred. As a result, the dispersibility of the magnetic carrier particles in the reagent containing the labeled second antibody is deteriorated, and the measurement target component in the sample cannot be accurately measured.
本発明は上記事実を考慮し、検体中の測定対象成分の正確な測定を可能とする磁性担体粒子の洗浄方法、磁性担体粒子の洗浄装置、及び免疫学的測定方法を提供することを課題とする。 In view of the above facts, the present invention has an object to provide a magnetic carrier particle cleaning method, a magnetic carrier particle cleaning device, and an immunological measurement method capable of accurately measuring a measurement target component in a specimen. To do.
第1の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試
薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
The magnetic carrier particle cleaning method according to the first aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method for a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, and the following steps are sequentially performed. It is characterized by performing.
Step (1): Add a sample, a reagent containing a first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles to the reaction container, or bind to the component to be measured in the sample. Adding a reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody;
A step of performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the first antibody and the measurement target component.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a height lower than that of the magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel so that the first immune complex is supported. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
第1の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体と測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできる。また、反応容器の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the first aspect, in step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles. Or a reagent containing magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to a component to be measured in a specimen is added, and an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction container, and the first antibody, the component to be measured and A reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex consisting of is obtained.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization is performed. The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (3), the solution containing the substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In step (5), the first immune complex was supported on the side surface of the reaction vessel by bringing a magnet having a height lower than that of the magnet when the magnetic carrier particles were collected immediately before the reaction container. After collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel, the cleaning liquid is removed from the reaction vessel.
As a result, a high cleaning effect is obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the first immune complex and collected on the inner surface of the reaction vessel can be reduced. In addition, since the height of the magnetic carrier particles collected on the inner surface of the reaction vessel on which the first immune complex is supported can be lowered, a reagent or the like is then added to support the first immune complex. When suspending the magnetic carrier particles, the amount of the reagent can be reduced, and even if the amount of the reagent is small, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex can be reliably dispersed. It becomes possible.
第2の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第1の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(5)の後に、さらに、以下の工程を行うことを特徴とする。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。
The magnetic carrier particle cleaning method according to the second aspect is characterized in that, in the magnetic carrier particle cleaning method according to the first aspect, the following steps are further performed after the step (5).
Step (6): A step of sequentially repeating steps (4) and (5) once or a plurality of times.
第2の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(5)の後に、工程(6)が行われる。
工程(6)では、工程(4)及び工程(5)を、1回または複数回順次繰り返す。このように、洗浄液の添加、及び除去を繰り返すことで、洗浄効果が向上し、また、反応容器の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるの
で、その後に、試薬等を添加して第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the magnetic carrier particle cleaning method according to the second aspect, step (6) is performed after step (5).
In the step (6), the step (4) and the step (5) are sequentially repeated once or a plurality of times. Thus, by repeating the addition and removal of the washing liquid, the washing effect is improved, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the first immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel is lowered. After that, when adding the reagent or the like and suspending the magnetic carrier particles carrying the first immune complex, the amount of the reagent or the like can be reduced, and even if the amount of the reagent is small The magnetic carrier particles carrying the first immune complex can be reliably dispersed.
第3の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a third aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method of a measurement target component in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1): A reagent, a reagent containing a first antibody that binds to a measurement target component in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the reaction container, or the sample and the measurement target component in the sample A reagent containing magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to the antibody is added, an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction container, and a first immune complex comprising the first antibody and the measurement target component is carried A step of obtaining a reaction liquid containing magnetic carrier particles.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the first immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (6): A step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (2). .
第3の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体と測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
工程(6)は、工程(4)及び工程(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済
み、かつ、少ない試薬等であっても、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the third aspect, in step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing the first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles. Or a reagent containing a sample and a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to a component to be measured in the sample is added, and an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction vessel to measure the first antibody A reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the target component is obtained.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization is performed. The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (3), the solution containing the substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (5), the magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and the magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the first immune complex is After collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel, the cleaning liquid is removed from the reaction vessel.
Step (6) is a step in which step (4) and step (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is higher than the height of the magnet in step (2). Low.
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the first immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be lowered. When the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are suspended, the amount of the reagent etc. is small, and even if the amount of the reagent is small, the first immune complex is carried. It becomes possible to reliably disperse the magnetic carrier particles.
第4の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第2の態様または第3の態様の磁性担体粒子の洗浄方法において、最後の洗浄工程における磁石の高さが、前記測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されている。 The magnetic carrier particle cleaning method according to the fourth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to the second aspect or the third aspect, wherein the magnet height in the final cleaning step is combined with the measurement target component. The reagent containing the second antibody is set to the same height as the upper end of the liquid surface when the reagent is added to the reaction vessel after step (6) and stirred.
第4の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、最後の洗浄工程における磁石の高さが、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されているため、集磁された磁性担体粒子の上端の位置が、第2抗体を含む試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さとなり、第2抗体を含む試薬を撹拌した際に、集磁された磁性担体粒子が反応容器の内面に残存することなく、第2抗体を含む試薬に確実に分散させることができる。 In the method for washing magnetic carrier particles according to the fourth aspect, a reagent containing a second antibody whose magnet height in the last washing step binds to the component to be measured is added to the reaction vessel after step (6). Therefore, the position of the upper end of the magnetized magnetic carrier particles is set to the same level as the upper end of the liquid surface when stirred, and the reagent containing the second antibody is added to the reaction after step (6). When the reagent is added to the container and stirred, the height becomes the same as the upper end of the liquid surface, and when the reagent containing the second antibody is stirred, the magnetically collected magnetic carrier particles do not remain on the inner surface of the reaction container. It can be reliably dispersed in a reagent containing two antibodies.
第5の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第1の態様〜第4の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じである。 Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the fifth aspect, in the cleaning method of any one of the magnetic carrier particles of the first to fourth embodiments, the height of the magnet in the step (2), the step (1 ) Or the height of the liquid surface of the suspension obtained by adding the washing liquid to the reaction liquid in the step (1).
第5の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じであるため、反応容器内の反応液、又は、懸濁液の上下方向全体に磁石の磁力を作用させて、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に集磁して回収することができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the fifth aspect, the height of the magnet in step (2) is obtained by adding the cleaning liquid to the reaction liquid in step (1) or the reaction liquid in step (1). Since the liquid level is the same as the liquid level of the suspension, the magnetic support particles are collected efficiently and reliably by applying the magnetic force of the magnet to the reaction liquid in the reaction vessel or the entire vertical direction of the suspension. It can be recovered magnetically.
第6の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第1の態様〜第5の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置される。 A magnetic carrier particle cleaning method according to a sixth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to any one of the first aspect to the fifth aspect, wherein the magnet is used for each magnetic collection of the magnetic carrier particles. It is alternately arranged at the position facing each other across the.
第6の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置されているため、磁性担体粒子は、確実に分散された後に反応容器の一方側と他方側とに交互に集磁されるため、磁性担体粒子の洗浄効果が向上する。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the sixth aspect, the magnets are alternately arranged at positions facing each other across the reaction vessel for each magnetic collection of the magnetic carrier particles, so that the magnetic carrier particles are reliably Since the magnetic flux is alternately collected on one side and the other side of the reaction container after being dispersed, the cleaning effect of the magnetic carrier particles is improved.
第7の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に、前記測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(5):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(6):分離された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(7):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(8):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a seventh aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method of a measurement target component in a specimen, using the magnetic carrier particle as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1): A reagent, a reagent containing a first antibody that binds to a measurement target component in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the reaction container, or the sample and the measurement target component in the sample A reagent containing magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to the antibody is added, an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction container, and a first immune complex comprising the first antibody and the measurement target component is carried A step of obtaining a reaction liquid containing magnetic carrier particles.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): A reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured is added to the reaction container,
Performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a second immune complex composed of the first antibody, the measurement target component, and the second antibody.
Step (5): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (6): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated second immune complex.
Step (7): Add a cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove a magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add a washing solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (8): A magnet having a lower height than the magnet when the magnetic carrier particles were collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the second immune complex is supported. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
第7の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体と測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(5)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(6)では、分離された第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(7)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(8)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the seventh aspect, in step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing the first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles. Or a reagent containing a sample and a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to a component to be measured in the sample is added, and an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction vessel to measure the first antibody A reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the target component is obtained.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization is performed. The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (3), the solution containing the substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex is removed.
In the step (4), a reagent containing a second antibody that binds to the measurement target component is added to the reaction container, and an antigen-antibody reaction is performed in the reaction container. From the first antibody, the measurement target component, and the second antibody, A reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the second immune complex is obtained.
In step (5), a magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (6), a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated second immune complex is removed.
In step (7), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a cleaning solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (8), a magnet having a lower height than the magnet when the magnetic carrier particles were collected immediately before was relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the second immune complex was supported. After collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel, the cleaning liquid is removed from the reaction vessel.
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be lowered. When the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are suspended, the amount of the reagent etc. is small, and even if the amount of the reagent is small, the second immune complex is carried. It becomes possible to reliably disperse the magnetic carrier particles.
第8の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第7の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(8)の後に、さらに、以下の工程を行うことを特徴とする。
工程(9):工程(7)及び(8)を、1回または複数回順次繰り返す工程。
The magnetic carrier particle cleaning method according to the eighth aspect is characterized in that, in the magnetic carrier particle cleaning method according to the seventh aspect, the following steps are further performed after the step (8).
Step (9): A step of sequentially repeating steps (7) and (8) once or a plurality of times.
第8の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(8)の後に、工程(9)が行われる。工程(9)では、工程(7)及び(8)を、1回または複数回順次繰り返す。
このように、洗浄液の添加、及び除去を繰り返すことで、洗浄効果が向上し、また、反応容器の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the magnetic carrier particle cleaning method according to the eighth aspect, step (9) is performed after step (8). In the step (9), the steps (7) and (8) are sequentially repeated once or a plurality of times.
Thus, by repeating the addition and removal of the washing liquid, the washing effect is improved, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel is lowered. After that, when adding the reagent or the like to suspend the magnetic carrier particles carrying the second immune complex, the amount of the reagent or the like can be reduced and even if the amount of the reagent is small The magnetic carrier particles carrying the second immune complex can be reliably dispersed.
第9の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に、前記測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(5):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(6):分離された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(7):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(8):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(9):工程(7)及び(8)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(5)における磁石の高さよりも低い工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a ninth aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method for a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1): A reagent, a reagent containing a first antibody that binds to a measurement target component in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the reaction container, or the sample and the measurement target component in the sample A reagent containing magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to the antibody is added, an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction container, and a first immune complex comprising the first antibody and the measurement target component is carried A step of obtaining a reaction liquid containing magnetic carrier particles.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): A reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured is added to a reaction container, an antigen-antibody reaction is performed in the reaction container, and the first antibody, the component to be measured, and the first A step of obtaining a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a second immune complex comprising two antibodies.
Step (5): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (6): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated second immune complex.
Step (7): Add a cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove a magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add a washing solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (8): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or a low height are brought relatively close to the side surface of the reaction vessel, so that the second immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (9): A step in which steps (7) and (8) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (5). .
第9の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体と測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(5)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(6)では、分離された第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(7)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(8)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(9)は、工程(7)及び(8)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(5)における磁石の高さよりも低い。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the ninth aspect, in step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles. Or a reagent containing a sample and a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to a component to be measured in the sample is added, and an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction vessel to measure the first antibody A reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the target component is obtained.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization is performed. The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (3), the solution containing the substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex is removed.
In the step (4), a reagent containing a second antibody that binds to the measurement target component is added to the reaction container, and an antigen-antibody reaction is performed in the reaction container. From the first antibody, the measurement target component, and the second antibody, A reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the second immune complex is obtained.
In step (5), a magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (6), a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated second immune complex is removed.
In step (7), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a cleaning solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (8), a magnet when the magnetic carrier particles are magnetized immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the second immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (9) is a step in which steps (7) and (8) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the magnet height in the final washing step is lower than the magnet height in step (5). .
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be lowered. When the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are suspended, the amount of the reagent etc. is small, and even if the amount of the reagent is small, the second immune complex is carried. It becomes possible to reliably disperse the magnetic carrier particles.
第10の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第8の態様または第9の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法において、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を、工程(9)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されている。 The magnetic carrier particle cleaning method according to the tenth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to the eighth aspect or the ninth aspect, wherein the height of the magnet in the final cleaning step is the detection reagent 9) It is set to the same height as the upper end of the liquid level when added to the subsequent reaction vessel and stirred.
第10の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を、工程(9)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されているため、集磁された磁性担体粒子の上端の位置が、検出試薬を、工程(9)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さとなり、検出試薬を撹拌した際に、集磁された磁性担体粒子が反応容器の内面に残存することなく、検出試薬に確実に分散させることができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the tenth aspect, the height of the magnet in the final cleaning step is such that the detection reagent is added to the reaction vessel after step (9) and stirred at the upper end of the liquid level. Therefore, the position of the upper end of the magnetically collected magnetic carrier particles is the same as the upper end of the liquid level when the detection reagent is added to the reaction vessel after step (9) and stirred. When the detection reagent is stirred at the same height, the collected magnetic carrier particles can be reliably dispersed in the detection reagent without remaining on the inner surface of the reaction vessel.
第11の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第7の態様〜第10の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じである。 The magnetic carrier particle cleaning method according to the eleventh aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to any one of the seventh aspect to the tenth aspect, wherein the height of the magnet in the step (2) is the step (1 ) Or the height of the liquid surface of the suspension obtained by adding the washing liquid to the reaction liquid in the step (1).
第11の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じであるため、反応容器内の反応液、又は、懸濁液の上下方向全体に磁石の磁力を作用させて、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に集磁して回収することができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the eleventh aspect, the height of the magnet in step (2) is obtained by adding the cleaning liquid to the reaction liquid in step (1) or the reaction liquid in step (1). Since the liquid level is the same as the liquid level of the suspension, the magnetic support particles are collected efficiently and reliably by applying the magnetic force of the magnet to the reaction liquid in the reaction vessel or the entire vertical direction of the suspension. It can be recovered magnetically.
第12の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第7の態様〜第11の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(5)における磁石の高さが、工程(4)の反応液、又は、工程(4)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと
同じである。
The magnetic carrier particle cleaning method according to a twelfth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to any one of the seventh aspect to the eleventh aspect, wherein the height of the magnet in the step (5) is the step (4 ) Or the liquid level of the suspension obtained by adding the washing liquid to the reaction liquid in the step (4).
第12の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(5)における磁石の高さが、工程(4)の反応液、又は、工程(4)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じであるため、反応容器内の反応液、又は、懸濁液の上下方向全体に磁石の磁力を作用させて、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に集磁して回収することができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the twelfth aspect, the height of the magnet in the step (5) is obtained by adding the cleaning solution to the reaction solution in the step (4) or the reaction solution in the step (4). Since the liquid level is the same as the liquid level of the suspension, the magnetic support particles are collected efficiently and reliably by applying the magnetic force of the magnet to the reaction liquid in the reaction vessel or the entire vertical direction of the suspension. It can be recovered magnetically.
第13の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第7の態様〜第12の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置される。 A magnetic carrier particle cleaning method according to a thirteenth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to any one of the seventh aspect to the twelfth aspect, wherein the magnet is used for each magnetic collection of the magnetic carrier particles. It is alternately arranged at the position facing each other across the.
第13の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置されているため、磁性担体粒子は、確実に分散された後に反応容器の一方側と他方側とに交互に集磁されるため、磁性担体粒子の洗浄効果が向上する。 In the cleaning method of the magnetic carrier particles according to the thirteenth aspect, the magnets are alternately arranged at positions facing each other across the reaction vessel for each magnetic collection of the magnetic carrier particles, so that the magnetic carrier particles are reliably Since the magnetic flux is alternately collected on one side and the other side of the reaction container after being dispersed, the cleaning effect of the magnetic carrier particles is improved.
第14の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬と、検体中の測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬と、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a fourteenth aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method of a measurement target component in a specimen, using the magnetic carrier particle as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1): In a reaction container, a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample, a reagent that contains magnetic carrier particles, and a second antibody that binds to the component to be measured in the sample. A reagent containing a sample, a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured. Performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction liquid containing magnetic carrier particles carrying the first antibody, the component to be measured, and the second immune complex composed of the second antibody.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the second immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a lower height than that of the magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the second immune complex is supported. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
第14の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬と、検体中の測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬と、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質
が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the magnetic carrier particle cleaning method according to the fourteenth aspect, in the step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles. And a reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured in the sample, or a reagent and a reagent comprising magnetic carrier particles carrying the first antibody that binds to the component to be measured in the sample; A reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured is added, an antigen-antibody reaction is performed in the reaction container, and the second immune complex comprising the first antibody, the component to be measured, and the second antibody is carried. A reaction solution containing magnetic carrier particles is obtained.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (3), the solution containing the separated substance other than the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (5), a magnet having a height lower than that when the magnetic carrier particles were collected immediately before was relatively brought close to the side surface of the reaction vessel to carry the second immune complex. After collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel, the cleaning liquid is removed from the reaction vessel.
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be lowered. When the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are suspended, the amount of the reagent etc. is small, and even if the amount of the reagent is small, the second immune complex is carried. It becomes possible to reliably disperse the magnetic carrier particles.
第15の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第14の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(5)の後に、さらに、以下の工程を行うことを特徴とする。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。
The magnetic carrier particle cleaning method according to the fifteenth aspect is characterized in that, in the magnetic carrier particle cleaning method according to the fourteenth aspect, the following steps are further performed after the step (5).
Step (6): A step of sequentially repeating steps (4) and (5) once or a plurality of times.
第15の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(5)の後に、工程(6)が行われる。
工程(6)では、工程(4)及び工程(5)を、1回または複数回順次繰り返す。
このように、洗浄液の添加、及び除去を繰り返すことで、洗浄効果が向上し、また、反応容器の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the magnetic carrier particle cleaning method according to the fifteenth aspect, step (6) is performed after step (5).
In the step (6), the step (4) and the step (5) are sequentially repeated once or a plurality of times.
Thus, by repeating the addition and removal of the washing liquid, the washing effect is improved, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel is lowered. After that, when adding the reagent or the like to suspend the magnetic carrier particles carrying the second immune complex, the amount of the reagent or the like can be reduced and even if the amount of the reagent is small The magnetic carrier particles carrying the second immune complex can be reliably dispersed.
第16の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬と、検体中の測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬と、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a sixteenth aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method for a component to be measured in a specimen, using the magnetic carrier particle as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1): In a reaction container, a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample, a reagent that contains magnetic carrier particles, and a second antibody that binds to the component to be measured in the sample. A reagent containing a sample, a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured. Performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction liquid containing magnetic carrier particles carrying the first antibody, the component to be measured, and the second immune complex composed of the second antibody.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the second immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the second immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (6): A step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (2). .
第16の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬と、検体中の測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬と、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
工程(6)は、工程(4)及び工程(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the sixteenth aspect, in step (1), the reaction vessel contains a sample, a reagent containing the first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles. And a reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured in the sample, or a reagent and a reagent comprising magnetic carrier particles carrying the first antibody that binds to the component to be measured in the sample; A reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured is added, an antigen-antibody reaction is performed in the reaction container, and the second immune complex comprising the first antibody, the component to be measured, and the second antibody is carried. A reaction solution containing magnetic carrier particles is obtained.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In the step (3), the solution containing the separated substance other than the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (5), a magnet when the magnetic carrier particles are magnetized immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the second immune complex is After collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel, the cleaning liquid is removed from the reaction vessel.
Step (6) is a step in which step (4) and step (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is higher than the height of the magnet in step (2). Low.
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be lowered. When the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are suspended, the amount of the reagent etc. is small, and even if the amount of the reagent is small, the second immune complex is carried. It becomes possible to reliably disperse the magnetic carrier particles.
第17の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第15の態様または第16の態様の磁性担体粒子の洗浄方法において、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されている。 The magnetic carrier particle washing method according to the seventeenth aspect is the magnetic carrier particle washing method according to the fifteenth aspect or the sixteenth aspect, wherein the height of the magnet in the final washing step is stirred by adding a detection reagent. Is set to the same height as the top of the liquid level.
第17の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を、反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されているため、集磁された磁性担体粒子の上端の位置が、検出試薬を、反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さとなり、検出試薬を撹拌した際に、集磁された磁性担体粒子が反応容器の内面に残存することなく、検出試薬に確実に分散させることができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the seventeenth aspect, the height of the magnet in the final cleaning step is set to the same height as the upper end of the liquid surface when the detection reagent is added to the reaction vessel and stirred. For this reason, the position of the upper end of the magnetically collected magnetic carrier particles is the same height as the upper end of the liquid level when the detection reagent is added to the reaction vessel and stirred. The magnetized magnetic carrier particles can be reliably dispersed in the detection reagent without remaining on the inner surface of the reaction vessel.
第18の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第14の態様〜第17の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じである。 The magnetic carrier particle cleaning method according to an eighteenth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to any one of the fourteenth aspect to the seventeenth aspect, wherein the height of the magnet in the step (2) is the step (1 ) Or the liquid level of the suspension obtained by adding the washing liquid to the reaction liquid in the step (1).
第18の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じであるため、反応容器内の反応液、又は、懸濁液の上下方向全体に磁石の磁力を作用させて、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に集磁して回収することができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the eighteenth aspect, the height of the magnet in step (2) is obtained by adding the cleaning liquid to the reaction liquid in step (1) or the reaction liquid in step (1). Since the liquid level is the same as the liquid level of the suspension, the magnetic support particles are collected efficiently and reliably by applying the magnetic force of the magnet to the reaction liquid in the reaction vessel or the entire vertical direction of the suspension. It can be recovered magnetically.
第19の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第14の態様〜第18の態様の何れか
1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置される。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a nineteenth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to any one of the fourteenth aspect to the eighteenth aspect, wherein a magnet is provided for each collection of magnetic carrier particles. It is alternately arranged at the position facing each other across the.
第19の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置されているため、磁性担体粒子は、確実に分散された後に反応容器の一方側と他方側とに交互に集磁されるため、磁性担体粒子の洗浄効果が向上する。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the nineteenth aspect, the magnets are alternately arranged at positions facing each other across the reaction vessel for each magnetic collection of the magnetic carrier particles. Since the magnets are alternately magnetized on one side and the other side of the reaction vessel after being dispersed, the cleaning effect of the magnetic carrier particles is improved.
第20の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1)反応容器に、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第3の免疫複合体、及び、前記第1抗体と前記標識化競合物質とからなる第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a twentieth aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method of a measurement target component in a specimen, using the magnetic carrier particle as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1) In a reaction container, a reagent, a reagent containing a labeled competitive substance formed by binding a label to a competitor, and a reagent containing a first antibody that binds to the component to be measured and the labeled competitor First, a reagent containing magnetic carrier particles is added, or a sample, a reagent containing a labeled competitive substance formed by binding a label to a competitive substance, and the component to be measured and the labeled competitive substance are bound to each other. A reagent containing magnetic carrier particles carrying one antibody is added, an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction container, a third immune complex comprising the first antibody and the component to be measured, and the first A step of obtaining a reaction liquid containing magnetic carrier particles carrying a fourth immune complex comprising an antibody and the labeled competitor.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the third immunization The third immune complex, the fourth immune complex and the fourth immune complex, wherein the magnetic carrier particles carrying the complex and the fourth immune complex are collected on the inner surface of the reaction vessel and collected by a magnet. A step of separating the magnetic carrier particles carrying the immune complex from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a lower height than the magnet when the magnetic carrier particles are magnetized immediately before is placed close to the side surface of the reaction vessel, the third immune complex, and A step of collecting the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex on the inner surface of the reaction vessel, and then removing the washing liquid from the reaction vessel.
第20の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体と測定対象成分とからなる第3の免疫複合体、及び、第1抗体と標識化競合物質とからなる第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか
、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the twentieth aspect, in step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing a labeled competitive substance formed by binding a label to the competitive substance, a component to be measured, and a label A reagent containing a first antibody that binds to a labeled competitor and a reagent containing magnetic carrier particles are added, or a sample and a reagent containing a labeled competitor that is formed by binding a label to the competitor, and measurement A reagent comprising magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to a target component and a labeled competitor is added, an antigen-antibody reaction is performed in a reaction vessel, and a third antibody consisting of the first antibody and the measurement target component And a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex comprising the first antibody and the labeled competitor.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the third immunization A third immune complex and a fourth immune complex in which the magnetic carrier particles carrying the complex and the fourth immune complex are collected on the inner surface of the reaction vessel and magnetized by a magnet Is separated from the other magnetic substance particles.
In step (3), the separated solution containing the substance other than the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (5), a magnet having a lower height than the magnet when the magnetic carrier particles are magnetized immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the third immune complex, After collecting magnetic carrier particles carrying the immune complex 4 on the inner surface of the reaction vessel, the washing solution is removed from the reaction vessel.
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be reduced. Thereafter, when the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex are suspended by adding a reagent or the like, the amount of the reagent or the like can be reduced, and Even with a small amount of reagents, the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex can be reliably dispersed.
第21の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第20の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(5)の後に、さらに、以下の工程を行うことを特徴とする。
(6)工程:工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。
Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the twenty-first aspect of the, in the cleaning method of the magnetic carrier particles according to the twentieth aspect, after the step (5), further characterized by performing the following steps.
(6) Process: The process of repeating process (4) and (5) one time or several times sequentially.
第21の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(5)の後に、工程(6)が行われる。
(6)工程では、工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す。
このように、洗浄液の添加、及び除去を繰り返すことで、洗浄効果が向上し、また、反応容器の内面に集められた、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the cleaning method for magnetic carrier particles according to the twenty-first aspect, step (6) is performed after step (5).
In the step (6), the steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times.
In this way, by repeating the addition and removal of the cleaning solution, the cleaning effect is improved, and the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel are supported. Since the height of the magnetic carrier particles can be lowered, the reagent is added thereafter to suspend the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex. It is possible to reliably disperse the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex even if the amount of the reagent is small and the amount of the reagent is small. Become.
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第22の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第3の免疫複合体、及び、前記第1抗体と前記標識化競合物質とからなる第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の
免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。
53
A magnetic carrier particle cleaning method according to a twenty-second aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method of a measurement target component in a specimen, using the magnetic carrier particle as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1): Reagent containing a specimen, a reagent containing a labeled competitor substance formed by binding a label to a competitor substance, and a first antibody that binds to the component to be measured and the labeled competitor substance in a reaction container And a reagent containing magnetic carrier particles, or a specimen, a reagent containing a labeled competitor formed by binding a label to a competitor, and the component to be measured and the labeled competitor A reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody is added, an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction container, a third immune complex comprising the first antibody and the component to be measured, and the first (1) A step of obtaining a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a fourth immune complex comprising an antibody and the labeled competitor.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the third immunization The third immune complex, the fourth immune complex and the fourth immune complex, wherein the magnetic carrier particles carrying the complex and the fourth immune complex are collected on the inner surface of the reaction vessel and collected by a magnet. A step of separating the magnetic carrier particles carrying the immune complex from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): On the side surface of the reaction vessel, a magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to each other, the third immune complex, And, after collecting the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex on the inner surface of the reaction vessel, removing the washing liquid from the reaction vessel.
Step (6): A step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (2). .
第22の態様の係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、第1抗体と測定対象成分とからなる第3の免疫複合体、及び、第1抗体と標識化競合物質とからなる第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
工程(6)は、工程(4)及び工程(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第3の免疫複合体、及び、第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the twenty-second aspect, in step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing a labeled competitor substance formed by binding a label to the competitor substance, a component to be measured, and a label A reagent containing a first antibody that binds to a labeled competitor and a reagent containing magnetic carrier particles are added, or a sample, a reagent containing a labeled competitor that is formed by binding a label to the competitor, and measurement A reagent comprising magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to a target component and a labeled competitor is added, an antigen-antibody reaction is performed in a reaction container, and a third antibody comprising a first antibody and a measurement target component And a reaction liquid containing magnetic carrier particles carrying a fourth immune complex comprising the first antibody and a labeled competitor.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the third immunization A third immune complex and a fourth immune complex in which the magnetic carrier particles carrying the complex and the fourth immune complex are collected on the inner surface of the reaction vessel and magnetized by a magnet Is separated from the other magnetic substance particles.
In step (3), the separated solution containing the substance other than the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (5), a magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the third immune complex, In addition, after collecting the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex on the inner surface of the reaction vessel, the washing liquid is removed from the reaction vessel.
Step (6) is a step in which step (4) and step (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is higher than the height of the magnet in step (2). Low.
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be reduced. Thereafter, when the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex are suspended by adding a reagent or the like, the amount of the reagent or the like can be reduced, and Even with a small amount of reagents, the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex can be reliably dispersed.
第23の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第21の態様または第22の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法において、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されている。 Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the 23rd aspect of the, in the cleaning method of the magnetic carrier particles according to the twenty-first aspect or the 22 aspect of the height of the magnet at the end of the washing process, a detection reagent, step ( 6) It is set to the same height as the upper end of the liquid level when added to the subsequent reaction vessel and stirred.
第23の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されているため、集磁された磁性担体粒子の上端の位置が、検出試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さとなり、検出試薬を撹拌した際に、集磁された磁性担体粒子が反応容器の内面に残存することなく、検出試薬に確実に分散させることができる。 In the magnetic carrier particle washing method according to the twenty- third aspect, the height of the magnet in the last washing step is such that the detection reagent is added to the reaction vessel after the step (6) and stirred at the upper end of the liquid surface. Therefore, the position of the upper end of the magnetically collected magnetic carrier particles is the same as the upper end of the liquid level when the detection reagent is added to the reaction vessel after step (6) and stirred. When the detection reagent is stirred at the same height, the collected magnetic carrier particles can be reliably dispersed in the detection reagent without remaining on the inner surface of the reaction vessel.
第24の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第20の態様〜第23の態様の何れか
1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じである。
Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the 24th aspect of the, in the cleaning method of any one of the magnetic carrier particles of the twentieth aspect to the twenty-third aspect, the height of the magnet in the step (2), the step (1 ) Or the height of the liquid surface of the suspension obtained by adding the washing liquid to the reaction liquid in the step (1).
第24の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じであるため、反応容器内の反応液、又は、懸濁液の上下方向全体に磁石の磁力を作用させて、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に集磁して回収することができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the twenty-fourth aspect, the height of the magnet in step (2) is obtained by adding the cleaning liquid to the reaction liquid in step (1) or the reaction liquid in step (1). Since the liquid level is the same as the liquid level of the suspension, the magnetic support particles are collected efficiently and reliably by applying the magnetic force of the magnet to the reaction liquid in the reaction vessel or the entire vertical direction of the suspension. It can be recovered magnetically.
第25の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第20の態様〜第24の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置される。 Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the twenty-fifth aspect, in the cleaning method of any one of the magnetic carrier particles of the twentieth aspect to the 24th aspect, magnets, the current磁毎magnetic carrier particles, the reaction vessel It is alternately arranged at the position facing each other across the.
第25の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置されているため、磁性担体粒子は、確実に分散された後に反応容器の一方側と他方側とに交互に集磁されるため、磁性担体粒子の洗浄効果が向上する。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the twenty-fifth aspect, since the magnets are alternately arranged at positions facing each other across the reaction vessel for each magnetic collection of the magnetic carrier particles, the magnetic carrier particles are reliably Since the magnets are alternately magnetized on one side and the other side of the reaction vessel after being dispersed, the cleaning effect of the magnetic carrier particles is improved.
第26の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、前記競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記競合物質と前記第1抗体とからなる第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a twenty-sixth aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method of a measurement target component in a specimen, using the magnetic carrier particle as a carrier, and the following steps are sequentially performed: It is characterized by performing.
Step (1): Whether to add a specimen, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured and a competitor in the specimen, a reagent containing a competitor, and a reagent containing magnetic carrier particles to the reaction container Or a reagent containing a specimen, a first antibody that binds to a component to be measured in the specimen and a competitive substance, and a reagent containing magnetic carrier particles carrying the competitive substance, and an antigen antibody in a reaction container Performing a reaction to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a fifth immune complex comprising the competitor and the first antibody.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the fifth immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a height lower than that of the magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, thereby supporting the fifth immune complex. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
第26の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、競合物質と第1抗体とからなる第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできる。さらに、反応容器の内面に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the magnetic carrier particle washing method according to the twenty-sixth aspect, in the step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing a first antibody that binds to the component to be measured and the competitor in the sample, and a competitor Or a reagent containing magnetic carrier particles, or a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured and a competitive substance in the specimen, and a magnetic carrier carrying the competitive substance A reagent containing particles is added, and an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction vessel to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a fifth immune complex composed of a competitor and a first antibody.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In step (3), the solution containing the separated substance other than the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (5), a magnet having a lower height than the magnet when the magnetic carrier particles were collected immediately before was relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the fifth immune complex was supported. After collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel, the cleaning liquid is removed from the reaction vessel.
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the fifth immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be reduced. Furthermore, since the height of the magnetic carrier particles collected on the inner surface of the reaction vessel and carrying the fifth immune complex can be lowered, a reagent or the like is added thereafter to carry the fifth immune complex. When suspending the magnetic carrier particles, the amount of the reagent or the like can be reduced, and even with a small amount of the reagent, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex can be reliably dispersed. It becomes possible.
第27の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第26の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(5)の後に、さらに、以下の工程を行うことを特徴とする。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。
Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the 27 embodiment of the, in the cleaning method of the magnetic carrier particles according to the 26 aspect, after step (5), further characterized by performing the following steps.
Step (6): A step of sequentially repeating steps (4) and (5) once or a plurality of times.
第27の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(5)の後に、工程(6)が行われる。
工程(6)では、工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す。
このように、洗浄液の添加、及び除去を繰り返すことで、洗浄効果が向上し、また、反応容器の内面に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the magnetic carrier particle cleaning method according to the twenty-seventh aspect, step (6) is performed after step (5).
In step (6), steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times.
Thus, by repeating the addition and removal of the washing liquid, the washing effect is improved, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the fifth immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel is lowered. After that, when adding the reagent or the like to suspend the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, the amount of the reagent or the like can be reduced, and even if the amount of the reagent is small The magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex can be reliably dispersed.
第28の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、磁性担体粒子を担体として用いる、検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法における磁性担体粒子の洗浄方法であって、以下の工程を順次行うことを特徴とする。
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、検体中の測定対象成分と前記競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、前記競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記競合物質と前記第1抗体とからなる第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、
最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。
A magnetic carrier particle cleaning method according to a twenty-eighth aspect is a magnetic carrier particle cleaning method in an immunological measurement method for a component to be measured in a specimen, using the magnetic carrier particle as a carrier, and sequentially performing the following steps: It is characterized by performing.
Step (1): Whether to add a specimen, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured and a competitor in the specimen, a reagent containing a competitor, and a reagent containing magnetic carrier particles to the reaction container Or a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample and the competitor, and a reagent containing magnetic carrier particles carrying the competitor are added, and an antigen is added in the reaction container. Performing an antibody reaction to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a fifth immune complex comprising the competitor and the first antibody;
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the fifth immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or a low height are brought relatively close to the side surface of the reaction vessel, so that the fifth immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (6): Steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times,
A step in which the height of the magnet in the final cleaning step is lower than the height of the magnet in step (2).
第28の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(1)において、反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、競合物質と第1抗体とからなる第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る。
工程(2)では、得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する。
工程(3)では、分離された、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する。
工程(4)では、反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる。
工程(5)では、反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する。
工程(6)は、工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い。
これにより、高い洗浄効果が得られ、また、反応容器の内面に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くできるので、その後に、試薬等を添加して第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を懸濁させる際に、試薬等の量が少なくて済み、かつ、少ない試薬等であっても、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を確実に分散させることが可能となる。
In the method for washing magnetic carrier particles according to the twenty-eighth aspect, in step (1), the reaction container contains a sample, a reagent containing the first antibody that binds to the component to be measured and the competitive substance in the specimen, and the competitive substance Or a reagent containing magnetic carrier particles, or a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured and a competitive substance in the specimen, and a magnetic carrier carrying the competitive substance A reagent containing particles is added, and an antigen-antibody reaction is carried out in a reaction vessel to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a fifth immune complex composed of a competitor and a first antibody.
In step (2), a magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, The magnetic carrier particles carrying the complex are collected on the inner surface of the reaction vessel, and the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex collected by the magnet are separated from other substances.
In step (3), the solution containing the separated substance other than the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex is removed.
In step (4), a cleaning solution is added to the reaction vessel and the magnet is detached from the side surface of the reaction vessel, a magnet is detached from the side surface of the reaction vessel and a washing solution is added to the reaction vessel, or a washing solution is added to the reaction vessel. While adding, the magnet is detached from the side of the reaction vessel.
In the step (5), a magnet when the magnetic carrier particles are magnetized immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the fifth immune complex is After collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel, the cleaning liquid is removed from the reaction vessel.
Step (6) is a step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the magnet height in the last washing step is lower than the magnet height in step (2). .
As a result, a high cleaning effect can be obtained, and the height of the magnetic carrier particles loaded with the fifth immune complex collected on the inner surface of the reaction vessel can be lowered. Thus, when suspending the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, the amount of the reagent or the like is small, and even if the amount of the reagent is small, the fifth immune complex is carried. It becomes possible to reliably disperse the magnetic carrier particles.
第29の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第27の態様または第28の態様の磁性担体粒子の洗浄方法において、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されている。 Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the 29 embodiment of the, in the cleaning method of the magnetic carrier particles 27th aspect or twenty-eighth aspect, the height of the magnet at the end of the washing process, a detection reagent, step (6 It is set to the same height as the upper end of the liquid level when added to the subsequent reaction vessel and stirred.
第29の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、最後の洗浄工程における磁石の高さが、検出試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さに設定されているため、集磁された磁性担体粒子の上端の位置が、検出試薬を、工程(6)の後の反応容器に添加して撹拌したときの液面の上端と同じ高さとなり、検出試薬を撹拌した際に、集磁された磁性担体粒子が反応容器の内面に残存することなく、検出試薬に確実に分散させることができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the twenty- ninth aspect, the height of the magnet in the final cleaning step is such that the detection reagent is added to the reaction vessel after step (6) and stirred at the upper end of the liquid level. Therefore, the position of the upper end of the magnetically collected magnetic carrier particles is the same as the upper end of the liquid level when the detection reagent is added to the reaction vessel after step (6) and stirred. When the detection reagent is stirred at the same height, the collected magnetic carrier particles can be reliably dispersed in the detection reagent without remaining on the inner surface of the reaction vessel.
第30の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第26の態様〜第29の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じである。 The magnetic carrier particle cleaning method according to a thirtieth aspect is the magnetic carrier particle cleaning method according to any one of the twenty-sixth aspect to the twenty- ninth aspect, wherein the height of the magnet in the step (2) is the step (1 ) Or the height of the liquid surface of the suspension obtained by adding the washing liquid to the reaction liquid in the step (1).
第30の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、工程(2)における磁石の高さが、工程(1)の反応液、又は、工程(1)の反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液の液面の高さと同じであるため、反応容器内の反応液、又は、懸濁液の上下方向全体に磁石の磁力を作用させて、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に集磁して回収することができる。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the thirtieth aspect, the height of the magnet in step (2) is obtained by adding the cleaning liquid to the reaction liquid in step (1) or the reaction liquid in step (1). Since the liquid level is the same as the liquid level of the suspension, the magnetic support particles are collected efficiently and reliably by applying the magnetic force of the magnet to the reaction liquid in the reaction vessel or the entire vertical direction of the suspension. It can be recovered magnetically.
第31の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法は、第26の態様〜第30の態様の何れか1つの磁性担体粒子の洗浄方法において、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置される。 Cleaning method of the magnetic carrier particles according to the 31 embodiment of the, in the cleaning method of any one of the magnetic carrier particle of the 26 mode through the thirtieth aspect, the magnet, the current磁毎magnetic carrier particles, the reaction vessel It is alternately arranged at the position facing each other across the.
第31の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法では、磁石が、磁性担体粒子の集磁毎に、反応容器を挟んで向かい合った位置に交互に配置されているため、磁性担体粒子は、確実に分散された後に反応容器の一方側と他方側とに交互に集磁されるため、磁性担体粒子の洗浄効果が向上する。 In the magnetic carrier particle cleaning method according to the thirty-first aspect, the magnets are arranged alternately at positions facing each other across the reaction vessel for each magnetic collection of the magnetic carrier particles, so that the magnetic carrier particles are reliably Since the magnetic flux is alternately collected on one side and the other side of the reaction container after being dispersed, the cleaning effect of the magnetic carrier particles is improved.
第32の態様に係る検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法は、第1〜6の態様のいずれか1つの磁性担体粒子の洗浄方法で洗浄された磁性担体粒子と、第2抗体を含有する試薬とを反応させて、第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる第2の免疫複合体を磁性担体粒子に生成させ、生成した前記第2の免疫複合体の量を測定することを特徴とする。 Immunoassay of the measurement target component in the specimen according to the thirty-second aspect includes a magnetic carrier particles was washed with the washing method of any one of magnetic carrier particles of the sixth aspect, a second antibody Reacting the reagent contained therein to generate a second immune complex consisting of the first antibody, the component to be measured, and the second antibody on the magnetic carrier particles, and determining the amount of the generated second immune complex It is characterized by measuring.
第32の態様に係る検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法によれば、第1〜6の態様のいずれか1つの磁性担体粒子の洗浄方法で洗浄された磁性担体粒子と、第2抗体を含有する試薬とを反応させて、第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる第2の免疫複合体を磁性担体粒子に生成させ、生成した第2の免疫複合体の量を測定する。これにより、検体中の測定対象成分を正確に測定することができる。 According to the 32 immunological measurement method of the measurement target component in the specimen in accordance with aspects of the magnetic carrier particles it was washed with the washing method of any one of magnetic carrier particles of the sixth embodiment, the second The amount of the second immune complex produced by reacting the reagent containing the antibody to produce a second immune complex consisting of the first antibody, the component to be measured, and the second antibody on the magnetic carrier particles. Measure. Thereby, the measurement object component in the specimen can be accurately measured.
第33の態様に係る検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法は、第7〜31の態様のいずれか1つの磁性担体粒子の洗浄方法で洗浄された磁性担体粒子と、検出試薬とを反応させて、前記磁性担体粒子上に生成した免疫複合体の量を測定することを特徴とする。 An immunological measurement method for a component to be measured in a specimen according to a thirty- third aspect includes a magnetic carrier particle washed by the magnetic carrier particle washing method according to any one of the seventh to thirty- first aspects and a detection reagent. It is characterized in that the amount of the immune complex produced on the magnetic carrier particles after the reaction is measured.
第33の態様に係る検体中の測定対象成分の免疫学的測定方法によれば、第7〜31態様のいずれか1つの磁性担体粒子の洗浄方法で洗浄された磁性担体粒子と、検出試薬とを反応させて、磁性担体粒子上に生成した免疫複合体の量を測定する。これにより、検体中の測定対象成分を正確に測定することができる。 According to the immunoassay method of the measurement target component in the specimen in accordance with aspects of the 33, and the magnetic carrier particles was washed with the washing method of any one of magnetic carrier particles of the 7 to 31 embodiment, a detection reagent To measure the amount of immune complex formed on the magnetic carrier particles. Thereby, the measurement object component in the specimen can be accurately measured.
第1の態様〜第31の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法によれば、検体中の測定対象成分の測定を正確に行うことが可能となる。
なお、第1の態様〜第31の態様に係る磁性担体粒子の洗浄方法によれば、磁性担体粒子の回収率及び/又は磁性担体粒子の分散性を高めることができる。
第32の態様、及び第33の態様に係る免疫学的測定方法によれば、検体中の測定対象成分の測定を正確に行うことが可能となる。
According to the magnetic carrier particle cleaning method according to the first to thirty- first aspects, it is possible to accurately measure the component to be measured in the specimen.
In addition, according to the cleaning method of the magnetic carrier particles according to the first to 31st aspects, the recovery rate of the magnetic carrier particles and / or the dispersibility of the magnetic carrier particles can be improved.
According to the thirty-second aspect, and immunological measuring method according to the 33 aspect, it is possible to perform measurement of the measurement target component in the specimen accurately.
[第1の実施形態(2ステップサンドイッチ法〜1次反応後の洗浄)]
<免疫測定装置の全体構成>
図面を参照しながら、第1の実施形態に係る免疫測定装置200について説明する。[First Embodiment (2-step sandwich method to washing after primary reaction)]
<Overall configuration of immunoassay device>
An immunoassay apparatus 200 according to the first embodiment will be described with reference to the drawings.
免疫測定方法には、例えば、サンドイッチ免疫測定法、及び競合法等があり、サンドイッチ免疫測定法には、いわゆる2ステップサンドイッチ法、及び1ステップサンドイッチ法がある。 Examples of the immunoassay method include a sandwich immunoassay method and a competitive method, and the sandwich immunoassay method includes a so-called two-step sandwich method and one-step sandwich method.
2ステップサンドイッチ法とは、セル(容器)に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、第1抗体、及び測定対象成分からなる免疫複合体(本発明の第1の免疫複合体)が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得た後、本発明の第1免疫複合体が担持された磁性担持体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去し、次に、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、磁性担体粒子上に第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる免疫複合体(本発明の第2の免疫複合体)が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程を有する免疫測定方法である。 In the two-step sandwich method, a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a measurement target component in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the cell (container), or the sample and the sample A reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody that binds to the component to be measured is added, and the immune complex comprising the first antibody and the component to be measured (the first immune complex of the present invention) is carried. After obtaining the reaction liquid containing the magnetic carrier particles, the solution containing the substance other than the magnetic carrier particles carrying the first immune complex of the present invention is removed, and then the measurement target component A reagent containing a second antibody to be bound was added, and an immune complex (second immune complex of the present invention) comprising the first antibody, the component to be measured, and the second antibody was supported on the magnetic carrier particles. Immunoassay method comprising a step of obtaining a reaction solution containing magnetic carrier particles It is.
1ステップサンドイッチ法とは、セル(容器)に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬と、検体中の測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬と、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、第1抗体、測定対象成分、及び、第2抗体からなる免疫複合体(本発明の第2の免疫複合体)を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程を有する免疫測定方法である。 In the one-step sandwich method, a cell (container) binds to a sample, a reagent containing a first antibody that binds to the component to be measured in the sample, a reagent containing magnetic carrier particles, and a component to be measured in the sample. A reagent containing a second antibody is added, or a specimen, a reagent containing magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to the measurement target component in the specimen, and a second antibody that binds to the measurement target component Adding a reagent to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying an immune complex (second immune complex of the present invention) comprising the first antibody, the component to be measured, and the second antibody; This is an immunoassay method.
また、競合法には、例えば、セル(容器)に、測定対象成分を含む検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、セル中で抗原抗体反応を行い、第1抗体と測定対象成分とからなる免疫複合体(本発明の第3の免疫複合体)、及び、第1抗体と標識化競合物質とからなる免疫複合体(本発明の第4の免疫複合体)が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程を有する競合法(以後、本明細書において競合法1と呼ぶ)、及び、セルに、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、セル中で抗原抗体反応を行い、競合物質と第1抗体とからなる免疫複合体(本発明の第5の免疫複合体)が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程を有する競合法(以後、本明細書において競合法2と呼ぶ)がある。 The competitive method includes, for example, a sample containing a measurement target component in a cell (container), a reagent containing a labeled competitive substance formed by binding a label to the competitive substance, a measurement target component and a labeled competitive substance, A reagent containing a first antibody that binds to a reagent and a reagent containing magnetic carrier particles, or a specimen, a reagent containing a labeled competitor substance formed by binding a label to a competitor substance, a component to be measured and a label A reagent containing magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to a conjugated competitor is added, an antigen-antibody reaction is carried out in a cell, and an immune complex comprising the first antibody and a measurement target component (of the present invention) (3rd immune complex) and a step of obtaining a reaction liquid containing magnetic carrier particles on which an immune complex (the fourth immune complex of the present invention) composed of the first antibody and the labeled competitor is supported. (Hereinafter referred to as competition method 1) And a reagent containing a specimen, a first antibody that binds to a measurement target component in the specimen and a competitive substance, a reagent containing the competitive substance, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the cell, or Add the sample, the reagent containing the first antibody that binds to the component to be measured in the sample and the competitor, and the reagent containing the magnetic carrier particles carrying the competitor, and perform the antigen-antibody reaction in the cell to compete A competition method comprising a step of obtaining a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying an immune complex comprising a substance and a first antibody (the fifth immune complex of the present invention) (hereinafter referred to as competition method in the present specification) 2).
本発明における検体は、免疫学的測定法により測定が可能である検体であれば特に制限はなく、例えば全血(血液)、血球、血清、血漿、髄液、尿、糞便、組織、培養細胞等が挙げられる。
本発明における測定対象成分は、免疫学的測定法により測定が可能である測定対象成分であれば特に制限はなく、例えば、IgG、IgM、IgA、IgE、アポ蛋白AI、アポ蛋白AII、アポ蛋白B、アポ蛋白E、リウマチ因子、D−ダイマー、酸化LDL、糖化LDL、グリコアルブミン、トリヨードサイロニン(T3)、総サイロキシン(T4)、薬剤(抗テンカン剤等)、C−反応性蛋白(CRP)、サイトカイン類、可溶性インターロイキン−2受容体(sIL−2R)、α−フェトプロテイン(AFP)、癌胎児性抗原(CEA)、CA19−9(carbohydrate antigen 19−9)、CA15−3(carbohydrate antigen 15−3)、CA−125(carbohydrate antigen 125)、PIVKA−II(Protein induced by vitamin K absence−II)、副甲状腺ホルモン(PTH)、ヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG)、甲状腺刺激ホルモン(TSH)、インスリン、C−ペプタイド、エストロゲン、抗グルタミン酸脱炭酸酵素(GAD)抗体、ペプシノーゲン、B型肝炎ウイルス(HBV)抗原、抗HBV抗体、C型肝炎ウイルス(HCV)抗原、抗HCV抗体、成人T細胞性白血病ウイルス1型(HTLV−I)抗原、抗HTLV−I抗体、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)抗体、インフルエンザウイルス抗原、抗インフルエンザウイルス抗体、抗結核菌抗体、結核菌抗原(TBGL)マイコプラズマ抗体、ヘモグロビンA1c、心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP)、脳性ナトリウム利尿ペプチド(BNP)、トロポニンT、トロポニンI、クレアチニンキナーゼーMB(CK−MB)、ミオグロビン、H−FABP(ヒト心臓由来脂肪酸結合蛋白)、カビ毒類[デオキシニバレノール(DON)、ニバレノール(NIV)、T−2トキシン(T2)等]、内分泌撹乱物質類[ビスフェノールA、ノニルフェノール、フタル酸ジブチル、ポリ塩素化ビフェニル(PCB)類、ダイオキシン類、p,p’−ジクロロジフェニルトリクロロエタン、トリブチルスズ等]、大腸菌等の菌類、食物アレルギー物質(卵、乳、小麦、そば、落花生等)、アレルギー物質(コナヒョウダニやトヤヒョウダニ等のダニ類等)、抗アレルギー物質抗体等が挙げられる。The specimen in the present invention is not particularly limited as long as it is a specimen that can be measured by an immunological measurement method. For example, whole blood (blood), blood cells, serum, plasma, spinal fluid, urine, stool, tissue, cultured cells Etc.
The measurement target component in the present invention is not particularly limited as long as it is a measurement target component that can be measured by an immunological measurement method. For example, IgG, IgM, IgA, IgE, apoprotein AI, apoprotein AII, apoprotein B, apoprotein E, rheumatoid factor, D-dimer, oxidized LDL, saccharified LDL, glycoalbumin, triiodothyronine (T3), total thyroxine (T4), drug (anti-tencan agent, etc.), C-reactive protein ( CRP), cytokines, soluble interleukin-2 receptor (sIL-2R), α-fetoprotein (AFP), carcinoembryonic antigen (CEA), CA19-9 (carbohydrate antigen 19-9), CA15-3 (carbohydrate) antigen 15-3), CA-125 (carbohydrate ant) igen 125), PIVKA-II (Protein induced by vitamin K absence-II), parathyroid hormone (PTH), human chorionic gonadotropin (hCG), thyroid stimulating hormone (TSH), insulin, C-peptide, estrogen, anti-glutamic acid Decarboxylase (GAD) antibody, pepsinogen, hepatitis B virus (HBV) antigen, anti-HBV antibody, hepatitis C virus (HCV) antigen, anti-HCV antibody, adult T-cell leukemia virus type 1 (HTLV-I) antigen , Anti-HTLV-I antibody, human immunodeficiency virus (HIV) antibody, influenza virus antigen, anti-influenza virus antibody, anti-tuberculosis antibody, tuberculosis antigen (TBGL) mycoplasma antibody, hemoglobin A1c, atrial natriuretic peptide ANP), brain natriuretic peptide (BNP), troponin T, troponin I, creatinine kinase MB (CK-MB), myoglobin, H-FABP (human heart-derived fatty acid binding protein), mold toxin [deoxynivalenol (DON) , Nivalenol (NIV), T-2 toxin (T2), etc.], endocrine disruptors [bisphenol A, nonylphenol, dibutyl phthalate, polychlorinated biphenyls (PCBs), dioxins, p, p'-dichlorodiphenyltrichloroethane , Tributyltin, etc.], fungi such as Escherichia coli, food allergens (eg, eggs, milk, wheat, buckwheat, peanuts, etc.), allergens (eg, mites, such as mite mushrooms and mites), anti-allergic substances, and the like.
本発明における競合物質は、競合法に使用され、「測定対象成分に結合する抗体」に結合できる物質であって、かつその結合が、該測定対象成分と競合的であるような物質を意味し、測定対象成分そのものも含まれる。 The competing substance in the present invention is a substance that can be used in the competition method and can bind to an “antibody that binds to the component to be measured”, and its binding is competitive with the component to be measured. In addition, the measurement target component itself is also included.
本発明における標識化抗体及び標識化競合物質に使用される標識は、免疫学的測定法に用いられる標識であれば特に制限はなく、例えば酵素、蛍光物質、発光物質、放射性同位元素等が挙げられる。酵素としては、例えばアルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼ、ガラクトシダーゼ、グルクロニダーゼ、ルシフェラーゼ等が挙げられる。蛍光物質としては、例えば、FITC(フルオレッセイン イソチオシアナート)、RITC(ローダミンB−イソチオシアナート)等が挙げられる。発光物質としては、例えばアクリジニウムおよびその誘導体、ルテニウム錯体化合物、ロフィン等が挙げられる。放射性同位元素としては、例えば、3H、14C、35S、32P、125I、131I等が挙げられる。
本発明における標識化抗体及び標識化競合物質は、それぞれ、標識と抗体、標識と競合物質を、リンカーを用いて共有結合させる方法等、公知の方法により調製することができる。The label used for the labeled antibody and the labeled competitor in the present invention is not particularly limited as long as it is a label used in an immunological assay, and examples thereof include enzymes, fluorescent substances, luminescent substances, and radioisotopes. It is done. Examples of the enzyme include alkaline phosphatase, peroxidase, galactosidase, glucuronidase, luciferase and the like. Examples of the fluorescent substance include FITC (fluorescein isothiocyanate), RITC (rhodamine B-isothiocyanate) and the like. Examples of the light-emitting substance include acridinium and its derivatives, ruthenium complex compounds, and lophine. Examples of the radioisotope include 3 H, 14 C, 35 S, 32 P, 125 I, and 131 I.
The labeled antibody and the labeled competitor in the present invention can be prepared by a known method such as a method in which a label and an antibody, and a label and a competitor are covalently bonded using a linker, respectively.
本発明における、磁性担体粒子は、磁石によって集磁される磁性担体粒子であれば特に制限はなく、例えば粒子の内部に磁性体を含有し、外層が有機ポリマーなどから成るコア・シェル構造の磁性担体粒子、外層を含まず磁性体が有機ポリマーに不均一に分散した構造の磁性担体粒子、磁性体のみから成るクラスター状の磁性担体粒子等が挙げられる。
磁性担体粒子中に含まれる磁性体は、残留磁化が少なく、超常磁性の磁性体微粒子が好ましく、例えば四三酸化鉄(Fe3O4)、γ−重三二酸化鉄(γ−Fe2O3)等の各種フェライト、鉄、マンガン、コバルト、クロムなどの金属またはこれら金属の合金等が用いられる。
磁性担体粒子の形状としては、例えば球状、針状等が挙げられ、球状が好ましい。磁性担体粒子の粒径は、例えば0.1〜5μm等が挙げられ、好ましくは0.5〜3μmである。In the present invention, the magnetic carrier particle is not particularly limited as long as it is a magnetic carrier particle collected by a magnet. Examples thereof include carrier particles, magnetic carrier particles having a structure in which a magnetic substance is not uniformly dispersed in an organic polymer without including an outer layer, and cluster-like magnetic carrier particles composed of only a magnetic substance.
The magnetic substance contained in the magnetic carrier particles is preferably superparamagnetic fine magnetic particles with little residual magnetization. For example, various ferrites such as triiron tetroxide (Fe 3 O 4) and γ-heavy sesquioxide (γ-Fe 2 O 3), A metal such as iron, manganese, cobalt, chromium, or an alloy of these metals is used.
Examples of the shape of the magnetic carrier particles include a spherical shape and a needle shape, and a spherical shape is preferable. The particle size of the magnetic carrier particles is, for example, 0.1 to 5 μm, and preferably 0.5 to 3 μm.
本発明における、磁石は、磁性担体粒子を集磁できる磁石であれば特に制限はなく、例えばネオジウム磁石等の希土類の磁石、電磁石等が挙げられる。 The magnet in the present invention is not particularly limited as long as it can collect magnetic carrier particles, and examples thereof include rare earth magnets such as neodymium magnets, electromagnets, and the like.
本発明における、磁石の高さとは、反応容器の空洞内の底面に対して垂直方向の長さであって、反応容器の空洞内の底面から、当該反応容器に近接させた磁石の上端までの長さを意味する。磁石の長さとは、磁石の上端から下端までの長さであるため、磁石の長さと、磁石の高さとが同じ場合もあるが、磁石の下端が、反応容器の空洞内の底面よりも下に位置する場合は、磁石の長さは、磁石の高さよりも長くなる。本発明において、反応容器内の磁性担体粒子を効率的に集磁できる限りにおいては、磁石の長さと磁石の高さとは同じであっても、異なっていてもよいが、磁石の長さが磁石の高さと同じか、または、磁石の長さが磁石の高さより長い方が好ましい。 In the present invention, the height of the magnet is a length in a direction perpendicular to the bottom surface in the cavity of the reaction vessel, and extends from the bottom surface in the cavity of the reaction vessel to the upper end of the magnet close to the reaction vessel. It means length. The length of the magnet is the length from the upper end to the lower end of the magnet, so the length of the magnet may be the same as the height of the magnet, but the lower end of the magnet is below the bottom surface in the cavity of the reaction vessel. In the case of the position of the magnet, the length of the magnet is longer than the height of the magnet. In the present invention, as long as the magnetic carrier particles in the reaction vessel can be efficiently collected, the length of the magnet may be the same as or different from the height of the magnet. It is preferable that the height of the magnet is the same as or the length of the magnet is longer than the height of the magnet.
本発明における、反応容器は、反応容器の側面に磁石を相対的に近接させた際、反応容器の内面に磁性担体粒子を集磁でき、免疫学的測定を行うことができる反応容器であれば特に制限はなく、例えば、後述の反応容器等が挙げられる。 In the present invention, the reaction container is a reaction container that can collect magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction container when the magnet is relatively close to the side surface of the reaction container and can perform immunological measurement. There is no restriction | limiting in particular, For example, the below-mentioned reaction container etc. are mentioned.
本発明における、磁性担体粒子を含む試薬、第1抗体を含む試薬、第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬、第2抗体を含む試薬、競合物質を含む試薬、及び、競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬には、金属イオン、塩類、糖類、防腐剤、蛋白質、蛋白質安定化剤等を共存させることができる。金属イオンとしては、例えばマグネシウムイオン、マンガンイオン、亜鉛イオン等が挙げられる。塩類としては、例えば塩化ナトリウム、塩化カリウム等が挙げられる。糖類としては、例えばグルコース、マンノース、スクロース、ラクトース、トレハロース、マンニトール、ソルビトール等が挙げられる。防腐剤としては、例えばアジ化ナトリウム、抗生物質(ストレプトマイシン、ペニシリン、ゲンタマイシン等)、バイオエース、プロクリン300、プロキセル(Proxel)GXL等が挙げられる。蛋白質としては、例えばウシ血清アルブミン(BSA)、ウシ胎児血清(FBS)、カゼイン、ブロックエース(DSファーマバイオメディカル社製)等が挙げられる。蛋白質安定化剤としては、例えばペルオキシダーゼ安定化緩衝液[Peroxidase Stabilizing Buffer、ダコサイトメーション(DakoCytomation)社製]等が挙げられる。 In the present invention, a reagent containing magnetic carrier particles, a reagent containing a first antibody, a reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody, a reagent containing a second antibody, a reagent containing a competitor, and a competitor Metal ions, salts, saccharides, preservatives, proteins, protein stabilizers and the like can coexist in the reagent containing the supported magnetic carrier particles. Examples of the metal ion include magnesium ion, manganese ion, zinc ion and the like. Examples of the salts include sodium chloride and potassium chloride. Examples of the saccharide include glucose, mannose, sucrose, lactose, trehalose, mannitol, sorbitol and the like. Examples of preservatives include sodium azide, antibiotics (streptomycin, penicillin, gentamicin, etc.), Bioace, Procrine 300, Proxel GXL, and the like. Examples of the protein include bovine serum albumin (BSA), fetal bovine serum (FBS), casein, block ace (manufactured by DS Pharma Biomedical) and the like. Examples of the protein stabilizer include peroxidase stabilizing buffer (Peroxidase Stabilizing Buffer, manufactured by DakoCytomation).
第1の実施形態では、図1に示す免疫測定装置200を用いて、2ステップサンドイッチ法で測定を行う例を説明する。
図1に示すように、免疫測定装置200は主として、セル供給ユニット14、試薬保管ユニット12、反応テーブル18、検体テーブル20、第1B/Fユニット22A、第2B/Fユニット22B、及び検出ユニット24等を含んで構成されている。なお、以下の説明において、便宜上、検体テーブル20側を装置手前側として説明する。In the first embodiment, an example will be described in which measurement is performed by a two-step sandwich method using the immunoassay apparatus 200 shown in FIG.
As shown in FIG. 1, the immunoassay apparatus 200 mainly includes a cell supply unit 14, a reagent storage unit 12, a reaction table 18, a sample table 20, a first B / F unit 22A, a second B / F unit 22B, and a detection unit 24. Etc. are configured. In the following description, the sample table 20 side will be described as the front side of the apparatus for convenience.
免疫測定装置200の左奥に配置されたセル供給ユニット14は、後述する空のセル10(反応容器)を所定の位置へ搬送し、一列に整列させるユニットであり、セルタンク30、レール32、及びセル送り機構34を含んで構成されている。セル供給ユニット14の手前には、ターンテーブル36を備えた攪拌装置16を収容した試薬保管ユニット12が配置されており、ターンテーブル36にセットされたカセットには、免疫測定に必要な試薬が収容された複数の試薬容器26が保持されている(図示せず)。また、試薬保管ユニット12は、冷却手段(不図示)によって一定の温度に冷却されている。 The cell supply unit 14 disposed at the left back of the immunoassay device 200 is a unit that transports empty cells 10 (reaction containers), which will be described later, to a predetermined position and aligns them in a line. The cell tank 30, rails 32, and The cell feeding mechanism 34 is included. A reagent storage unit 12 containing a stirrer 16 equipped with a turntable 36 is arranged in front of the cell supply unit 14, and a reagent set for immunoassay is stored in a cassette set on the turntable 36. A plurality of reagent containers 26 are held (not shown). The reagent storage unit 12 is cooled to a certain temperature by a cooling means (not shown).
<セル>
本実施形態で用いるセル10(キュベットともいう)は、一端部が開口したプラスチック製の有底円筒体であり、開口部に鍔が形成された汎用の反応容器である。図2A〜Cに示すように、セル10は略円筒形とされており、一端(開口側)には各セルハンド(図2A〜Cでは図示せず)で把持し搬送するための鍔10Aが設けられ、その下には各テーブルの凹部や孔にセル10を挿入した際に抜け落ちず、保持されるためのフランジ10Bが設けられている。セル10内は空洞10Cとされており、内部に試薬、検体、洗浄液等を注入し内部で貯留、攪拌可能とされている。<Cell>
The cell 10 (also referred to as a cuvette) used in the present embodiment is a plastic bottomed cylindrical body having an opening at one end, and is a general-purpose reaction container having a ridge formed at the opening. As shown in FIGS. 2A to 2C, the cell 10 has a substantially cylindrical shape, and one end (opening side) is provided with a ridge 10 </ b> A for holding and transporting with each cell hand (not shown in FIGS. 2A to 2C). Underneath, a flange 10B is provided for holding the cell 10 in place when the cell 10 is inserted into the recess or hole of each table. The inside of the cell 10 is a cavity 10C, and a reagent, a specimen, a cleaning solution, etc. are injected into the cell 10 and can be stored and stirred inside.
セル10の底部には下方向に向けて拡径するように開口する係合穴10Eが設けられており、係合穴10Eは空洞10Cとは連通せず、所謂盲管形状とされている。セル10は、係合穴10Eの近傍がリブ10Dで補強されている。係合穴10Eは図2Cに示すように擂鉢状の傾斜面10Fを備えており、後述する攪拌機構66の回転するピン(図示せず)と係合することで、セル10は反応テーブル18上において回転、攪拌され、内部の試薬、検体が混合される。 The bottom of the cell 10 is provided with an engagement hole 10E that opens so as to expand in the downward direction. The engagement hole 10E does not communicate with the cavity 10C and has a so-called blind tube shape. In the cell 10, the vicinity of the engagement hole 10E is reinforced by the rib 10D. As shown in FIG. 2C, the engagement hole 10E has a bowl-shaped inclined surface 10F, and the cell 10 is placed on the reaction table 18 by engaging with a rotating pin (not shown) of a stirring mechanism 66 described later. The sample is rotated and agitated to mix the internal reagent and sample.
図1に示すように、試薬保管ユニット12の右側には、反応テーブル18が配置されている。反応テーブル18は、免疫測定装置200の中央部よりやや左側に位置しており、ヒータ(不図示)を備えている。反応テーブル18の外周部には、セル10を保持する凹部38が反応テーブル18の全周に亘って形成されている。凹部38の径は後述するセルハンド72などの搬送位置精度に合わせて、セル10の径より大きい必要があり、かつフランジ10Bの径よりも小さいので、セル10はフランジ10Bで凹部38に保持される。
反応容器は、反応テーブル18の円孔の孔縁に、反応容器から張出した鍔部(フランジ10B)で吊下されて保持される。As shown in FIG. 1, a reaction table 18 is arranged on the right side of the reagent storage unit 12. The reaction table 18 is located slightly to the left of the center of the immunoassay device 200 and includes a heater (not shown). A recess 38 for holding the cell 10 is formed on the outer periphery of the reaction table 18 over the entire periphery of the reaction table 18. The diameter of the recess 38 needs to be larger than the diameter of the cell 10 in accordance with the conveyance position accuracy of the cell hand 72 described later, and is smaller than the diameter of the flange 10B, so the cell 10 is held in the recess 38 by the flange 10B. .
The reaction container is suspended and held at the edge of the circular hole of the reaction table 18 by a flange (flange 10B) protruding from the reaction container.
本実施形態では、一例として、反応テーブル18の周方向に等間隔で60個の凹部38が形成されている。また、ヒータ(不図示)により、凹部38に保持されたセル10を温め、セル10内の試薬を活性化させることができる。 In the present embodiment, as an example, 60 concave portions 38 are formed at equal intervals in the circumferential direction of the reaction table 18. Further, the cell 10 held in the recess 38 can be warmed by a heater (not shown), and the reagent in the cell 10 can be activated.
<攪拌機構>
また、反応テーブル18には攪拌機構66が設けられている。本実施形態においては反応テーブル18に2個の攪拌機構66が設けられているが、3個以上であっても、また場合によっては1個であってもよい。<Agitating mechanism>
The reaction table 18 is provided with a stirring mechanism 66. In the present embodiment, two agitation mechanisms 66 are provided in the reaction table 18, but the number may be three or more, or may be one in some cases.
攪拌機構66は、攪拌モータを備えている。攪拌モータの回転軸には、上下方向に延びるピン(図示せず)が偏心して取り付けられている。攪拌機構66の直上に位置する反応テーブル18の凹部38に挿入された、セル10の係合穴10Eにピンが係合するようになっている。ピンは攪拌モータの回転軸と偏心して取り付けられているため、ピンは回転軸を中心とした円軌道上を回転移動し、ピンの先端が係合したセル10の係合穴10Eもまたピンによって円軌道を描くように移動する。このとき、セル10は凹部38に挿入されており、凹部38の径は前述のようにセル10の径よりも大きいので、係合穴10Eが円軌道を描くように移動することで、セル10は凹部38より下では円軌道を描くように略円錐振り子の軌道で回転する。これによりセル10内部の後述する検体、洗浄液、磁性担体粒子含有試薬等が、攪拌される。 The stirring mechanism 66 includes a stirring motor. A pin (not shown) extending in the vertical direction is eccentrically attached to the rotating shaft of the stirring motor. A pin engages with an engagement hole 10 </ b> E of the cell 10 inserted into the recess 38 of the reaction table 18 positioned immediately above the stirring mechanism 66. Since the pin is mounted eccentrically with the rotating shaft of the agitation motor, the pin rotates on a circular path around the rotating shaft, and the engagement hole 10E of the cell 10 with which the tip of the pin is engaged is also caused by the pin. Move to draw a circular orbit. At this time, since the cell 10 is inserted into the recess 38 and the diameter of the recess 38 is larger than the diameter of the cell 10 as described above, the engagement hole 10E moves so as to draw a circular orbit, whereby the cell 10 Rotates in a substantially conical pendulum trajectory so as to draw a circular trajectory below the recess 38. As a result, a specimen, a cleaning liquid, a magnetic carrier particle-containing reagent and the like, which will be described later, inside the cell 10 are stirred.
反応テーブル18の手前には、検体テーブル20が配置されており、検体を収容した複数の試験管40が保持されている。また、反応テーブル18の右側には、後述するセルハンド72を挟んで装置奥側に第1B/Fユニット22A、装置手前側に第2B/Fユニット22Bが配置されている。第1B/Fユニット22A、第2B/Fユニット22Bは、各々セル10を回転搬送するための後述するターンテーブル84と、ターンテーブル84にセットされたセル10内の試薬のB/F分離を行うB/Fノズルユニット44等を含んで構成されている。 A sample table 20 is arranged in front of the reaction table 18 and holds a plurality of test tubes 40 containing samples. Further, on the right side of the reaction table 18, a first B / F unit 22A is disposed on the back side of the apparatus with a cell hand 72 described later interposed therebetween, and a second B / F unit 22B is disposed on the front side of the apparatus. The first B / F unit 22A and the second B / F unit 22B each perform B / F separation of a turntable 84 to be described later for rotating and transporting the cell 10 and a reagent in the cell 10 set on the turntable 84. The B / F nozzle unit 44 and the like are included.
<第1B/Fユニット>
図3に示すように、第1B/Fユニット22Aは、基板73の上に複数の支柱75が立設されており、支柱75の上に肉厚の板材からなるベース板78が水平に固定されている。ベース板78の中央部には、ベアリング80で支持された軸82が回転自在に設けられている。軸82の上端には円板状のターンテーブル84が取り付けられており、下端には大プーリー86が取り付けられている。<1B / F unit>
As shown in FIG. 3, the first B / F unit 22 </ b> A has a plurality of support posts 75 standing on a substrate 73, and a base plate 78 made of a thick plate material is horizontally fixed on the support posts 75. ing. A shaft 82 supported by a bearing 80 is rotatably provided at the center of the base plate 78. A disc-shaped turntable 84 is attached to the upper end of the shaft 82, and a large pulley 86 is attached to the lower end.
図3〜図5に示すように、ターンテーブル84の外周部には、セル10を挿入して保持するための孔88が周方向に沿って等間隔で複数形成されている。孔88の径は、セル10の径より若干大きく、かつフランジ10Bの径よりも小さいので、セル10はフランジ10Bがターンテーブル84の上面に搭載された状態で孔88に保持される。 As shown in FIGS. 3 to 5, a plurality of holes 88 for inserting and holding the cells 10 are formed in the outer peripheral portion of the turntable 84 at equal intervals along the circumferential direction. Since the diameter of the hole 88 is slightly larger than the diameter of the cell 10 and smaller than the diameter of the flange 10B, the cell 10 is held in the hole 88 in a state where the flange 10B is mounted on the upper surface of the turntable 84.
図3に示すように、ベース板78の下面には、支持金具90を介してモータ92が取り付けられている。モータ92の回転軸92Aには小プーリー94が取り付けられており、大プーリー86と小プーリー94にベルト96が巻き掛けられている。このため、モータ92の回転軸92Aが回転することでターンテーブル84が回転される。 As shown in FIG. 3, a motor 92 is attached to the lower surface of the base plate 78 via a support fitting 90. A small pulley 94 is attached to the rotating shaft 92 </ b> A of the motor 92, and a belt 96 is wound around the large pulley 86 and the small pulley 94. For this reason, the turntable 84 is rotated by the rotation shaft 92A of the motor 92 rotating.
図3〜図5に示すように、ベース板78の上面には、ターンテーブル84の孔88に支持されたセル10が内部を通過する円環状の環状溝98が形成されている。また、ベース板78の上面には、環状溝98の径方向内側に、周方向に沿って複数の凹部100A〜100Fが等間隔で形成されており、環状溝98の径方向外側に、周方向に沿って複数の凹部102A〜102Fが凹部100A〜100Fと対向して等間隔で形成されている。これら凹部100A〜100Fの周方向のピッチ、及び凹部102A〜102Fの周方向のピッチは、ターンテーブル84の孔88の周方向のピッチと同じに設定されている。 As shown in FIGS. 3 to 5, an annular ring groove 98 through which the cell 10 supported by the hole 88 of the turntable 84 passes is formed on the upper surface of the base plate 78. A plurality of recesses 100 </ b> A to 100 </ b> F are formed at equal intervals along the circumferential direction on the upper surface of the base plate 78 along the radial direction inside the annular groove 98. A plurality of recesses 102A to 102F are formed at equal intervals so as to face the recesses 100A to 100F. The circumferential pitch of the recesses 100A to 100F and the circumferential pitch of the recesses 102A to 102F are set to be the same as the circumferential pitch of the holes 88 of the turntable 84.
凹部100A〜100F、及び凹部102A〜102Fは、全て同じ形状、同じ寸法に形成されている。また、凹部100A〜100F、及び凹部102A〜102Fの各々の底部は、ターンテーブル84の孔88に挿入され支持されたセル10の底部(空洞10Cの底部)と同じ高さとなるように設定されている(一例として、図5参照)。 The recesses 100A to 100F and the recesses 102A to 102F are all formed in the same shape and the same dimensions. Further, the bottom of each of the recesses 100A to 100F and the recesses 102A to 102F is set to be the same height as the bottom of the cell 10 inserted into and supported by the hole 88 of the turntable 84 (the bottom of the cavity 10C). (See FIG. 5 as an example).
図4に示すように、凹部100A、及び凹部102Aには、底部の上に高さ12mmの第1の磁石104Aが固定されている。凹部102Bには、底部の上に高さ10mmの第2の磁石104Bが固定されている。凹部100Cには、底部の上に高さ8mmの第3の磁石104Cが固定されている。凹部102Dには、底部の上に高さ7mmの第4の磁石104Dが固定されている。凹部100Eには、底部の上に高さ6mmの第5の磁石104Eが固定されている。凹部102Fには、底部の上に高さ5mmの第6の磁石104Fが固定されている。このため、各磁石の高さは、矢印CW方向に沿って徐々に低くなっている。これら第1の磁石104A〜第6の磁石104Fは、ネオジウム磁石等の磁力の強い希土類の磁石を用いることが好ましい。 As shown in FIG. 4, in the recess 100A and the recess 102A, a first magnet 104A having a height of 12 mm is fixed on the bottom. In the recess 102B, a second magnet 104B having a height of 10 mm is fixed on the bottom. In the recess 100C, a third magnet 104C having a height of 8 mm is fixed on the bottom. In the recess 102D, a fourth magnet 104D having a height of 7 mm is fixed on the bottom. In the recess 100E, a fifth magnet 104E having a height of 6 mm is fixed on the bottom. In the recess 102F, a sixth magnet 104F having a height of 5 mm is fixed on the bottom. For this reason, the height of each magnet is gradually lowered along the arrow CW direction. As these first magnet 104A to sixth magnet 104F, it is preferable to use a rare earth magnet having a strong magnetic force such as a neodymium magnet.
図1に示すように、B/Fノズルユニット44は、5本のB/Fノズル44Aを備え、ターンテーブル84の孔88に支持されたセル10に対して、試薬類の吸引と洗浄液の吐出を行うことができる。 As shown in FIG. 1, the B / F nozzle unit 44 includes five B / F nozzles 44 </ b> A and sucks reagents and discharges cleaning liquid into the cell 10 supported in the hole 88 of the turntable 84. It can be performed.
<第2B/Fユニット>
図1に示すように、第2B/Fユニット22Bは、第1B/Fユニット22Aとほぼ同じ構成であるが、磁石の個数、磁石の高さ、磁石の配置が異なっている。第2B/Fユニット22Bでは、磁石の高さが全て8mmに設定されており、7個の磁石が環状溝98を挟んで半径方向内側と外側とに周方向に沿って交互に配置されている。なお、第2B/Fユニット22Bは、磁石以外の構成は第1B/Fユニット22Aと同一構成である。なお、第2B/Fユニット22Bは、第1B/Fユニット22Aと、磁石の個数、磁石の高さ、磁石の配置において、同じ構成とすることもできる。<Second B / F unit>
As shown in FIG. 1, the second B / F unit 22B has substantially the same configuration as the first B / F unit 22A, but the number of magnets, the height of the magnets, and the arrangement of the magnets are different. In the second B / F unit 22B, the height of all the magnets is set to 8 mm, and seven magnets are alternately arranged along the circumferential direction on the radially inner side and the outer side with the annular groove 98 interposed therebetween. . The second B / F unit 22B has the same configuration as the first B / F unit 22A except for the magnet. The second B / F unit 22B may have the same configuration as the first B / F unit 22A in terms of the number of magnets, the height of the magnets, and the arrangement of the magnets.
<検出ユニット>
第1B/Fユニット22A、及び第2B/Fユニット22Bの右側には、後述するセルハンド74を挟んで検出ユニット24が配置されている。検出ユニット24は、セル10内の試薬を攪拌する攪拌部46と、光量を測定する測定室48とで構成されている。<Detection unit>
The detection unit 24 is arranged on the right side of the first B / F unit 22A and the second B / F unit 22B with a cell hand 74 described later interposed therebetween. The detection unit 24 includes a stirring unit 46 that stirs the reagent in the cell 10 and a measurement chamber 48 that measures the amount of light.
免疫測定装置200には、上記の他に、セル10を反応テーブル18へ移動させるセルハンド52、試薬を吸引吐出する試薬分注ノズル54、68、及び検体を吸引吐出する検体分注ノズル60が配置されている。また、免疫測定装置200を構成するユニット、セルハンド、及びノズル等は、制御部(不図示)に接続されており、制御部からの信号により動作する。また、制御部は、その他装置全体の動作を制御する。 In addition to the above, the immunoassay apparatus 200 includes a cell hand 52 that moves the cell 10 to the reaction table 18, reagent dispensing nozzles 54 and 68 that suck and discharge reagents, and a sample dispensing nozzle 60 that sucks and discharges samples. Has been. Further, the units, cell hands, nozzles, and the like constituting the immunoassay apparatus 200 are connected to a control unit (not shown) and operate according to signals from the control unit. In addition, the control unit controls the other operations of the entire apparatus.
<免疫測定法(2ステップサンドイッチ法)>
次に、免疫測定装置200を用いた免疫測定法(2ステップサンドイッチ法)を説明する。本実施形態では、磁性担体粒子含有試薬としてストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬を用いているが、他の種類の磁性担体粒子含有試薬を用いても良い。なお、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子は、適宜、磁性担体粒子と呼ぶ。本実施形態では、第1抗体含有試薬としてビオチン化第1抗体含有試薬を用いているが、他の種類の第1抗体含有試薬を用いても良い。また、本実施形態では、標識化第2抗体含有試薬として、アルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬を用いているが、これに限らず、測定対象成分の種類に応じて適宜選択される標識物質で標識された抗体を含有する試薬を用いることができる。本実施形態においては、免疫測定法として、サンドイッチ法に基づく化学発光免疫測定法を用いている。<Immunoassay (2-step sandwich method)>
Next, an immunoassay method (two-step sandwich method) using the immunoassay device 200 will be described. In this embodiment, a streptavidin-bonded magnetic carrier particle-containing reagent is used as the magnetic carrier particle-containing reagent, but other types of magnetic carrier particle-containing reagents may be used. The streptavidin-bonded magnetic carrier particles are appropriately referred to as magnetic carrier particles. In this embodiment, the biotinylated first antibody-containing reagent is used as the first antibody-containing reagent, but other types of first antibody-containing reagents may be used. In the present embodiment, the alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent is used as the labeled second antibody-containing reagent. However, the present invention is not limited to this. A reagent containing a labeled antibody can be used. In this embodiment, a chemiluminescence immunoassay based on the sandwich method is used as the immunoassay.
先ず最初に、セル供給ユニット14のセルタンク30内に未使用のセル10を複数投入する。セルタンク30へ投入されたセル10は、エレベータ(不図示)により1個ずつセルタンク30の上方へ持ち上げられ、その後、傾いた2本の棒で構成されたレール32を滑ってセル送り機構34へ搬送される。 First, a plurality of unused cells 10 are charged into the cell tank 30 of the cell supply unit 14. The cells 10 put into the cell tank 30 are lifted one by one above the cell tank 30 by an elevator (not shown), and then slide on a rail 32 composed of two inclined bars and conveyed to the cell feed mechanism 34. Is done.
セル送り機構34へ搬送されたセル10は、セル送り機構34の整列板50が開閉することによりレール32の終端部32Aへ1つずつ送り込まれる。なお、セル送り機構34を設けずに、セルタンク30からレール32の終端部32Aまでセル10を滑らせてもよい。 The cells 10 conveyed to the cell feeding mechanism 34 are fed one by one to the terminal end 32A of the rail 32 by opening and closing the alignment plate 50 of the cell feeding mechanism 34. Note that the cell 10 may be slid from the cell tank 30 to the terminal end portion 32A of the rail 32 without providing the cell feed mechanism 34.
レール32の終端部32Aに到達したセル10は、セルハンド52に掴まれ、回転軸52A回りに回転して反応テーブル18の凹部38へセットされる。その後、反応テーブル18の回転により、試薬分注ノズル54の直下へ搬送される。ここで、試薬分注ノズル54が回転軸54A周りに回転し、ターンテーブル36のカセットに保持された試薬容器26Aからストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬を吸引してセル10へ吐出する(図示せず)。 The cell 10 that has reached the end portion 32A of the rail 32 is gripped by the cell hand 52, rotated around the rotation shaft 52A, and set in the recess 38 of the reaction table 18. Thereafter, the reaction table 18 is transported directly under the reagent dispensing nozzle 54 by the rotation of the reaction table 18. Here, the reagent dispensing nozzle 54 rotates around the rotation shaft 54A, and the reagent containing the streptavidin-coupled magnetic carrier particles is sucked from the reagent container 26A held in the cassette of the turntable 36 and discharged to the cell 10 (not shown). )
次に、別の試薬容器26Bからビオチン化第1抗体含有試薬を吸引してセル10へ吐出する(図示せず)。ここで、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬を吐出した試薬分注ノズル54は、分注ノズル洗浄槽58で一旦洗浄され、その後、ビオチン化第1抗体含有試薬の吸引が行われる。これにより、試薬の混入を防止できる。 Next, the biotinylated first antibody-containing reagent is aspirated from another reagent container 26B and discharged to the cell 10 (not shown). Here, the reagent dispensing nozzle 54 that has discharged the reagent containing streptavidin-bound magnetic carrier particles is once washed in a dispensing nozzle washing tank 58, and then the biotinylated first antibody-containing reagent is aspirated. Thereby, mixing of a reagent can be prevented.
なお、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬と、ビオチン化第1抗体含有試薬性担体粒子を含む試薬とをセル10に吐出する代わりに、第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬をセル10に吐出しても良い。 Instead of discharging a reagent containing streptavidin-coupled magnetic carrier particles and a reagent containing biotinylated first antibody-containing reagent carrier particles to the cell 10, a reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody is used. 10 may be discharged.
ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬とビオチン化第1抗体含有試薬とが吐出されたセル10は、反応テーブル18の回転により、検体分注ノズル60の近傍へ搬送されながら、反応テーブル18に設けられたヒータにより所定の温度(本実施形態では一例として37°C)で温められ、磁性担体粒子に結合されたストレプトアビジンとビオチン化第1抗体との反応が促進される。 The cell 10 from which the reagent containing streptavidin-bound magnetic carrier particles and the biotinylated first antibody-containing reagent are discharged is provided on the reaction table 18 while being transported to the vicinity of the sample dispensing nozzle 60 by the rotation of the reaction table 18. The heater is heated at a predetermined temperature (in this embodiment, 37 ° C. as an example), and the reaction between the streptavidin bound to the magnetic carrier particles and the biotinylated first antibody is promoted.
セル10が検体分注ノズル60の近傍へ搬送されると、検体分注ノズル60は、回転軸60A回りに回転し、検体テーブル20にセットされた試験管40から検体を吸引して、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬とビオチン化第1抗体含有試薬とが吐出されたセル10へ吐出する(図6A参照)。なお、検体分注ノズル60は、検体ノズル洗浄槽62で洗浄される。これにより、検体分注ノズル60における検体による汚染が防止される。 When the cell 10 is transported to the vicinity of the sample dispensing nozzle 60, the sample dispensing nozzle 60 rotates around the rotation axis 60A, sucks the sample from the test tube 40 set on the sample table 20, and streptavidin. It discharges to the cell 10 into which the binding magnetic carrier particle-containing reagent and the biotinylated first antibody-containing reagent are discharged (see FIG. 6A). The sample dispensing nozzle 60 is washed in the sample nozzle washing tank 62. Thereby, contamination by the sample in the sample dispensing nozzle 60 is prevented.
検体が吐出されたセル10は、反応テーブル18の外周に沿って設けられた攪拌機構66の位置まで搬送され、攪拌機構66によりセル10内の試薬、及び検体が非接触で攪拌される。攪拌は、セル10の底部を円錐振り子の軌道で回転させて行われる。以上により、検体中の測定対象成分が第1抗体に結合され、磁性担体粒子上に、第1抗体、及び測定対象成分(抗原)からなる第1の免疫複合体が形成される。 The cell 10 from which the sample has been discharged is transported to the position of the stirring mechanism 66 provided along the outer periphery of the reaction table 18, and the reagent and the sample in the cell 10 are stirred without contact by the stirring mechanism 66. Stirring is performed by rotating the bottom of the cell 10 along the trajectory of the conical pendulum. As described above, the measurement target component in the specimen is bound to the first antibody, and the first immune complex including the first antibody and the measurement target component (antigen) is formed on the magnetic carrier particles.
<第1B/Fユニットでの工程>
次に、セル10は、セルハンド72によって第1B/Fユニット22Aに搬送され、ターンテーブル84の孔88に挿入される。その後、B/Fノズル44Aを通じて洗浄液がセル10へ吐出される(図6B参照。ここでは、液面の高さを12mmとする)。これにより、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する懸濁液が得られる。なお、洗浄液としては、反応後の混合物から、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質を除去し得る洗浄液であれば特に制限はなく、例えばリン酸緩衝化生理食塩水[0.15mol/L塩化ナトリウムを含有する、10mmol/Lリン酸緩衝液(pH7.2)(以下、PBSと記す)]、界面活性剤を含有するPBS等が挙げられる。界面活性剤としては、例えばツイーン20等が挙げられる。<Process in 1B / F unit>
Next, the cell 10 is transported to the first B / F unit 22 </ b> A by the cell hand 72 and inserted into the hole 88 of the turntable 84. Thereafter, the cleaning liquid is discharged to the cell 10 through the B / F nozzle 44A (see FIG. 6B. Here, the height of the liquid level is 12 mm). Thereby, a suspension containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex is obtained. The washing solution is not particularly limited as long as it is a washing solution that can remove substances other than the magnetic carrier particles carrying the first immune complex from the mixture after the reaction. For example, phosphate buffered saline [ And 10 mmol / L phosphate buffer (pH 7.2) (hereinafter referred to as PBS)] containing 0.15 mol / L sodium chloride, PBS containing a surfactant, and the like. Examples of the surfactant include Tween 20 and the like.
その後、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Aに示すように、セル10は一対の第1の磁石104Aと対向する位置に配置される。なお、前述した洗浄液を吐出する工程においては、第1の磁石104Aの高さと液面とが一致するように洗浄液が吐出される。 Thereafter, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and as shown in FIG. 7A, the cell 10 is disposed at a position facing the pair of first magnets 104A. In the above-described step of discharging the cleaning liquid, the cleaning liquid is discharged so that the height of the first magnet 104A matches the liquid level.
セル10が高さ12mmの第1の磁石104Aと対向すると、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子が第1の磁石104Aに引き寄せられ、セル10の内側面の一方側、及び他方側に集まる(図中、網点で図示する部分)。液面の高さと第1の磁石104Aの高さとが一致しているので、第1の磁石104Aの磁力を、セル10内の液体の高さ方向全体に及ぼすことができ、液体内に浮遊する第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子をセル10の内面に効率的に集めることができる。ここで、集められた第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第1の磁石104Aと同じ高さ、即ち、12mmとなる。なお、液面の高さが第1の磁石104Aの高さよりも高い場合には、液体の上部に及ぶ磁力が少なく、液体の上部にある第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子をセル10の内面に集磁することが困難となる。 When the cell 10 faces the first magnet 104A having a height of 12 mm, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the first magnet 104A, and one side of the inner surface of the cell 10 and the other Gather on the side (in the figure, the part shown with halftone dots). Since the height of the liquid level and the height of the first magnet 104A coincide with each other, the magnetic force of the first magnet 104A can be exerted on the entire height direction of the liquid in the cell 10 and floats in the liquid. The magnetic carrier particles carrying the first immune complex can be efficiently collected on the inner surface of the cell 10. Here, the height of the collected magnetic carrier particles carrying the first immune complex is the same as that of the first magnet 104A, that is, 12 mm. When the liquid level is higher than the height of the first magnet 104A, the magnetic force on the upper part of the liquid is small, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex on the upper part of the liquid are removed. It becomes difficult to collect the magnetic flux on the inner surface of the cell 10.
また、セル10内には洗浄液が吐出されているので(即ち、洗浄液で薄められている)、洗浄液が吐出されていない場合に比較して検体中の特定の成分(一例として、フィブリン)の影響が少なくなり、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子が液中を移動し易く、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を短時間で効率的に集めることができる。よって、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率を高めることができる。 Further, since the cleaning liquid is discharged into the cell 10 (that is, diluted with the cleaning liquid), the influence of a specific component (for example, fibrin) in the sample is compared with the case where the cleaning liquid is not discharged. The magnetic carrier particles carrying the first immune complex can easily move in the liquid, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex can be efficiently collected in a short time. Therefore, the collection efficiency of the magnetic carrier particles carrying the first immune complex can be increased.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Bに示すように、セル10は、高さ10mmの第2の磁石104Bと対向する位置に配置される。これにより、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の磁石104Aよりも低い第2の磁石104Bに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第1の磁石104Aで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが12mmから10mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7B, the cell 10 is disposed at a position facing the second magnet 104B having a height of 10 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the second magnet 104B and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, the height of the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected on one side of the inner surface of the cell 10 because it is attracted to the second magnet 104B lower than the first magnet 104A. Is lower than the height when collected by the first magnet 104A, that is, the height of the magnetic carrier particles loaded with the first immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is from 12 mm. 10 mm.
次に、図7Cに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引され、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外のもの(例えば、磁性担体粒子と結合しなかったビオチン化第1抗体等)が除去され、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。以上のようにして、磁性担体粒子と結合した物質(Bind)と、結合しなかった物質(Free)が分離(B/F分離)される。その後、図7Dに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7C, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A, and other than the magnetic carrier particles carrying the first immune complex (for example, bound to the magnetic carrier particles). The biotinylated first antibody or the like that has not been removed) is removed, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are left on the inner surface of the cell 10. As described above, the substance (Bind) bonded to the magnetic carrier particles and the substance (Free) not bonded are separated (B / F separation). Thereafter, as shown in FIG. 7D, the cleaning liquid is discharged into the cell to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Eに示すように、セル10は、高さ8mmの第3の磁石104Cと対向する位置に配置される。これにより、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bとは反対側に配置された第3の磁石104Cに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bよりも低い第3の磁石104Cに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第2の磁石104Bで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが10mmから8mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7E, the cell 10 is disposed at a position facing the third magnet 104C having a height of 8 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the third magnet 104C disposed on the side opposite to the second magnet 104B and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the third magnet 104C lower than the second magnet 104B, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10, The height of the magnetic carrier particles carrying one immune complex is lower than the height when collected by the second magnet 104B, that is, the first immunity collected on the inner surface of the cell 10 The height of the magnetic carrier particles carrying the composite is 10 mm to 8 mm.
次に、図7Fに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Gに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7F, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A, B / F separation is performed, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex become the cell 10 Left on the inside. Thereafter, as shown in FIG. 7G, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Hに示すように、セル10は、高さ7mmの第4の磁石104Dと対向する位置に配置される。これにより、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cとは反対側に配置された第4の磁石104Dに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cよりも低い第4の磁石104Dに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第3の磁石104Cで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが8mmから7mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7H, the cell 10 is disposed at a position facing the fourth magnet 104D having a height of 7 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the fourth magnet 104D disposed on the side opposite to the third magnet 104C and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the fourth magnet 104D lower than the third magnet 104C, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying one immune complex is lower than the height when collected by the third magnet 104C, that is, the first immunity collected on the inner surface of the cell 10 The height of the magnetic carrier particles carrying the composite is 8 mm to 7 mm.
次に、図7Iに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Jに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7I, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex become the cell 10. Left on the inside. Thereafter, as shown in FIG. 7J, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Kに示すように、セル10は、高さ6mmの第5の磁石104Eと対向する位置に配置される。これにより、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dとは反対側に配置された第5の磁石104Eに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dよりも低い第5の磁石104Eに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第4の磁石104Dで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが7mmから6mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of arrow CW, and as shown in FIG. 7K, the cell 10 is disposed at a position facing the fifth magnet 104E having a height of 6 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the fifth magnet 104E disposed on the opposite side of the fourth magnet 104D and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the fifth magnet 104E lower than the fourth magnet 104D, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10, The height of the magnetic carrier particles carrying one immune complex is lower than the height when collected by the fourth magnet 104D, that is, the first immunity collected on the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the composite is 7 mm to 6 mm.
次に、図7Lに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Mに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7L, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex become the cell 10 Left on the inside. Thereafter, as shown in FIG. 7M, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Nに示すように、セル10は、高さ5mmの第6の磁石104Fと対向する位置に配置される。これにより、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eとは反対側に配置された第6の磁石104Fに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eよりも低い第6の磁石104Fに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第5の磁石104Eで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが6mmから5mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and as shown in FIG. 7N, the cell 10 is disposed at a position facing the sixth magnet 104F having a height of 5 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the sixth magnet 104F disposed on the opposite side of the fifth magnet 104E and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are attracted to the sixth magnet 104F lower than the fifth magnet 104E, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying one immune complex is lower than the height at which the magnetic carrier particles were collected by the fifth magnet 104E, that is, the first immunity collected on the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the composite is 6 mm to 5 mm.
次に、図7Oに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される(第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは5mm)。 Next, as shown in FIG. 7O, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex become the cell 10 It is left on the inner surface (the height of the magnetic carrier particles carrying the first immune complex is 5 mm).
<反応テーブルでの工程>
次に、セル10は、セルハンド72によって反応テーブル18に搬送される。その後、試薬分注ノズル68が回転軸68A回りに回転し、試薬保管ユニット12のカセットの所定の位置に保持された試薬容器26Cからアルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬を吸引し、セル10へ吐出する(図8A参照)。これにより、磁性担体粒子上の第1の免疫複合体にアルカリホスファターゼ標識第2抗体が結合し、磁性担体粒子上に、ビオチン化第1抗体、測定対象成分(抗原)、及びアルカリホスファターゼ標識第2抗体の第2の免疫複合体を形成することができる。なお、試薬分注ノズル68は、アルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬を吐出した後、分注ノズル洗浄槽70に移動して洗浄が行われる。<Process on reaction table>
Next, the cell 10 is transported to the reaction table 18 by the cell hand 72. Thereafter, the reagent dispensing nozzle 68 rotates about the rotation axis 68A, and the alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent is sucked from the reagent container 26C held at a predetermined position of the cassette of the reagent storage unit 12 and discharged to the cell 10. (See FIG. 8A). As a result, the alkaline phosphatase-labeled second antibody binds to the first immune complex on the magnetic carrier particle, and the biotinylated first antibody, the measurement target component (antigen), and the alkaline phosphatase-labeled second antibody are bound on the magnetic carrier particle. A second immune complex of the antibody can be formed. The reagent dispensing nozzle 68 discharges the alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent, and then moves to the dispensing nozzle washing tank 70 for cleaning.
図8Aに示すように、アルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬は、セル10の内面に集められた第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子(図中、網点部分)の高さ(5mm)よりも液面の高さが若干低くなるようにセル10内に吐出される。その後、セル10は、攪拌機構66に搬送さる。攪拌は、セル10の底部を円錐振り子の軌道で回転させて行われるため、図8Bに示すように、液面は、遠心力の作用によってセル中央側よりも内面側(内壁面側)が高くなる。 As shown in FIG. 8A, the alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent has a height of magnetic carrier particles (half-dot portions in the figure) carrying the first immune complex collected on the inner surface of the cell 10 ( The liquid level is discharged into the cell 10 so that the liquid level is slightly lower than 5 mm. Thereafter, the cell 10 is conveyed to the stirring mechanism 66. Stirring is performed by rotating the bottom portion of the cell 10 in the orbit of the conical pendulum, so that the liquid level is higher on the inner surface side (inner wall surface side) than the cell center side due to the action of centrifugal force as shown in FIG. Become.
前述した様に、アルカリホスファターゼ標識第2抗体を吐出した後の液面の高さは、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さよりも若干低かったが、図8Bに示すように、攪拌によって液面のセル内面側を高くすることができるため(液面の上端を少なくとも高さ5mmにできる)、セル内面に集められた第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子全体にアルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬を接触させて洗い落とすことができ、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を、セル内面に付着残存させることなく、全てアルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬に混ぜて分散させることが出来る(撹拌分散後の状態は、図8C参照)。 As described above, the height of the liquid surface after discharging the alkaline phosphatase-labeled second antibody was slightly lower than the height of the magnetic carrier particles carrying the first immune complex, but as shown in FIG. 8B. In addition, since the cell inner surface side of the liquid surface can be raised by stirring (the upper end of the liquid surface can be at least 5 mm in height), the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected on the cell inner surface The alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent can be washed away by contacting the whole, and the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are all adhered to the inner surface of the cell without remaining on the cell inner surface. It can be mixed and dispersed in the contained reagent (see FIG. 8C for the state after stirring and dispersing).
また、本実施形態では、アルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬をセル10に吐出する際に、セル10の内面に集められた、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを当初の12mmから5mmとして低くしているので、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くしない場合(当初の高さ12mm)に比較してアルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬の吐出量を少量に抑えることができ、アルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬を節約することができ、ランニングコストを低減できる。 Further, in this embodiment, when the alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent is discharged to the cell 10, the height of the magnetic carrier particles loaded with the first immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is set. Since it is lowered from the initial 12 mm to 5 mm, it contains an alkaline phosphatase-labeled second antibody as compared with the case where the height of the magnetic carrier particles carrying the first immune complex is not lowered (initial height 12 mm). The discharge amount of the reagent can be suppressed to a small amount, the reagent containing the alkaline phosphatase-labeled second antibody can be saved, and the running cost can be reduced.
アルカリホスファターゼ標識第2抗体が吐出されたセル10内の試薬類は、攪拌機構66により攪拌されることで、アルカリホスファターゼ標識第2抗体と検体中の測定対象成分との反応が促進される。 The reagents in the cell 10 from which the alkaline phosphatase-labeled second antibody has been discharged are stirred by the stirring mechanism 66, whereby the reaction between the alkaline phosphatase-labeled second antibody and the measurement target component in the sample is promoted.
次に、セル10は、反応テーブル18の回転によりセルハンド72の近傍へ搬送され、セルハンド72に掴まれ、回転軸72A回りに回転して第2B/Fユニット22Bへ搬送される。 Next, the cell 10 is conveyed to the vicinity of the cell hand 72 by the rotation of the reaction table 18, is gripped by the cell hand 72, rotates around the rotation shaft 72 </ b> A, and is conveyed to the second B / F unit 22 </ b> B.
<第2B/Fユニットでの工程>
第2B/Fユニット22Bに搬送されたセル10は、ターンテーブル84の孔88に挿入される。その後、図9Aに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル内に12mmの高さまで吐出される。そして、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図9Bに示すように、セル10は高さ8mmの磁石106Rと対向する位置に配置される。<Process in 2nd B / F unit>
The cell 10 transported to the second B / F unit 22B is inserted into the hole 88 of the turntable 84. Thereafter, as shown in FIG. 9A, the cleaning liquid is discharged into the cell to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A. Then, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and as shown in FIG. 9B, the cell 10 is disposed at a position facing the magnet 106R having a height of 8 mm.
セル10が高さ8mmの磁石106Rと対向すると、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子が磁石106Rに引き寄せられ、セル10の内側面の片側に集まる。ここで、集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、磁石106Rと同じ高さ、即ち、8mmとなる。 When the cell 10 opposes the magnet 106R having a height of 8 mm, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the magnet 106R and gather on one side of the inner surface of the cell 10. Here, the height of the collected magnetic carrier particles carrying the second immune complex is the same as that of the magnet 106R, that is, 8 mm.
次に、図9Cに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図9Dに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 9C, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A, B / F separation is performed, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex become the cell 10 Left on the inside. Thereafter, as shown in FIG. 9D, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84は矢印CW方向に回転され、図9Eに示すように、セル10は、磁石106Lと対向する位置に配置される。これにより、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、磁石106Rとは反対側に配置された磁石106Lに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of arrow CW, and as shown in FIG. 9E, the cell 10 is disposed at a position facing the magnet 106L. As a result, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the magnet 106L disposed on the opposite side of the magnet 106R and collected on one side of the inner surface of the cell 10.
次に、図9Fに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、セル10の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル内面に残される。その後、図9Gに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 9F, the B / F nozzle 44 </ b> A sucks the liquid in the cell 10, performs B / F separation, and collects the second immune complex collected on the inner surface of the cell 10. The supported magnetic carrier particles are left on the inner surface of the cell. Thereafter, as shown in FIG. 9G, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
以後、第2B/Fユニット22Bにおいても、第1B/Fユニット22Aと同様に、ターンテーブル84の回転、セル10に対する洗浄液の吐出、及び吸引、交互に配置された磁石によるセル10内面への磁性担体粒子の引き寄せが行われ、B/F分離が繰り返し行われ、磁性担体粒子と結合しなかった物質を確実に取り除くようにしている。 Thereafter, also in the second B / F unit 22B, similarly to the first B / F unit 22A, rotation of the turntable 84, discharge and suction of cleaning liquid to the cell 10, and magnetism on the inner surface of the cell 10 by alternately arranged magnets. The carrier particles are attracted and B / F separation is repeatedly performed to reliably remove substances that have not been bonded to the magnetic carrier particles.
第2B/Fユニット22BでB/F分離が行われたセル10は、セルハンド74に掴まれ、回転軸74A回りに回転して検出ユニット24の攪拌部46へ搬送される。このとき、セルハンド74に設けられたチューブ(不図示)から検出試薬(発光基質試薬)がセル10へ吐出される。攪拌部46では、免疫複合体をその上に担持する磁性担体粒子と、検出試薬とが攪拌され、免疫複合体中のアルカリホスファターゼが発光基質試薬と反応して発光する。 The cell 10 subjected to the B / F separation in the second B / F unit 22B is gripped by the cell hand 74, rotated around the rotation shaft 74A, and conveyed to the stirring unit 46 of the detection unit 24. At this time, the detection reagent (luminescent substrate reagent) is discharged from the tube (not shown) provided in the cell hand 74 to the cell 10. In the stirring unit 46, the magnetic carrier particles carrying the immune complex thereon and the detection reagent are stirred, and the alkaline phosphatase in the immune complex reacts with the luminescent substrate reagent to emit light.
次にセル10は、セルハンド74に掴まれ、回転軸74A回りに回転して測定室48内へ搬送される。測定室48は、完全に閉塞されて光が入らない空間となっており、測定室48内に設けられた発光量を測定するセンサ(不図示)により、免疫複合体中のアルカリホスファターゼと発光基質試薬との反応により生成した光の光量が測定され、この測定された発光量から、検体中の測定対象成分の濃度を決定する。測定が終わったセル10は、セルハンド74に掴まれ、廃棄管76へ廃棄される。制御部(不図示)は、検体中の測定対象成分の濃度をデータとして蓄積し、また、測定結果をモニタ(不図示)等に表示させる。 Next, the cell 10 is gripped by the cell hand 74, rotated around the rotation shaft 74 </ b> A, and conveyed into the measurement chamber 48. The measurement chamber 48 is a completely closed space where light does not enter, and an alkaline phosphatase and a luminescent substrate in the immune complex are measured by a sensor (not shown) that measures the amount of luminescence provided in the measurement chamber 48. The amount of light generated by the reaction with the reagent is measured, and the concentration of the measurement target component in the sample is determined from the measured light emission amount. The cell 10 for which measurement has been completed is grasped by the cell hand 74 and discarded into the waste pipe 76. The control unit (not shown) accumulates the concentration of the measurement target component in the sample as data, and displays the measurement result on a monitor (not shown) or the like.
以上説明した様に、本実施形態の免疫測定装置200では、第1の免疫複合体が形成された磁性担体粒子の懸濁された液が入れられたセル10の側面に、液面の高さと同じ高さの第1の磁石104Aを配置し、反応容器内の懸濁液の上下方向の全ての部分に渡って第1の磁石104Aの磁力を作用させるので、液中の第1の免疫複合体が形成された磁性担体粒子に対して大きな磁力を作用させて集磁することができ、免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率を高めることができる。また、アルカリホスファターゼ標識第2抗体を吐出した後の液面の高さを、攪拌時に、セル10内面に集められた第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子全体にアルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬を接触させることができる高さに設定するので、該第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子をアルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬中に全て分散させることが出来、分散性を高めることができる。第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がアルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬中に分散されずにセル10内面に残ることが無いので、セル10毎に第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の分散量が異なることが抑制され、検体中の測定対象成分の測定を正確に行うことが可能となる。 As described above, in the immunoassay apparatus 200 of the present embodiment, the height of the liquid level is set on the side surface of the cell 10 in which the liquid in which the magnetic carrier particles in which the first immune complex is formed is placed. Since the first magnet 104A having the same height is disposed and the magnetic force of the first magnet 104A acts on all the vertical portions of the suspension in the reaction container, the first immune complex in the liquid The magnetic carrier particles on which the body is formed can be attracted by applying a large magnetic force, and the recovery efficiency of the magnetic carrier particles carrying the immune complex can be increased. Further, the height of the liquid surface after discharging the alkaline phosphatase-labeled second antibody is determined so that the entire magnetic carrier particle carrying the first immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is stirred during the stirring. Since the height is set so that the antibody-containing reagent can be contacted, the magnetic carrier particles carrying the first immune complex can be dispersed in the alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent. Can be increased. Since the magnetic carrier particles carrying the first immune complex are not dispersed in the alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent and do not remain on the inner surface of the cell 10, the first immune complex is carried for each cell 10. It is possible to suppress the difference in the amount of dispersed magnetic carrier particles, and to accurately measure the component to be measured in the specimen.
なお、B/F分離をする際(即ち、磁性担体粒子の洗浄)には、セル10に洗浄液を添加してセル10の側面から磁石(104A〜F)を離脱させるか、セル10の側面から磁石を離脱させてセル10に洗浄液を添加するか、またはセル10に洗浄液を添加しながらセル10の側面から磁石を離脱させれば良く、何れかを行えば良い。 When performing B / F separation (that is, cleaning of the magnetic carrier particles), a cleaning solution is added to the cell 10 to separate the magnets (104A to 104F) from the side surface of the cell 10, or from the side surface of the cell 10. Either the magnet is detached and the cleaning liquid is added to the cell 10, or the magnet may be detached from the side surface of the cell 10 while adding the cleaning liquid to the cell 10.
また、上記実施形態の第1B/Fユニット22Aでは、第1の磁石104A〜第6の磁石104Fの高さが隣接する同士で全て異なり、かつ第1の磁石104Aから第6の磁石104Fへ向けて段々に低くなっていたが、最後の第6の磁石104Fの高さが一番低くなっていれば良く、複数の磁石の中で、互いに隣接する磁石同士で同じ高さとなっている部分があっても良い。 Further, in the first B / F unit 22A of the above embodiment, the heights of the first magnet 104A to the sixth magnet 104F are all different from each other and are directed from the first magnet 104A to the sixth magnet 104F. However, it is only necessary that the height of the last sixth magnet 104F be the lowest, and among the plurality of magnets, adjacent magnets have the same height. There may be.
[試験例1]
本発明により、2ステップサンドイッチ法において、標識化第2抗体を添加した後の、第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の分散性が向上したか否かを調べる試験を行った。[Test Example 1]
According to the present invention, in the two-step sandwich method, a test was conducted to determine whether the dispersibility of the magnetic carrier particles carrying the first immune complex after the addition of the labeled second antibody was improved.
実施例では、セル10に、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬、ビオチン化第1抗体含有試薬、及び検体を吐出して抗原抗体反応を行った後、洗浄液を吐出して液面の高さを12mmとし、このセル10の側面に高さ12mmの第1の磁石を対向させて第1の免疫複合体の形成された磁性担体粒子の集磁と洗浄を5回行った。5回目の洗浄において、セル10の側面に高さ5mmの磁石を対向させて第1の免疫複合体の形成された磁性担体粒子の集磁と洗浄した。その後、セル10に、アルカリホスファターゼ標識第2抗体を添加し、撹拌したときの液面の上端の高さを5mmとした。その後、上記所定の工程(発光基質試薬の添加等)を経て発光量の測定を行った。 In the example, after the streptavidin-coupled magnetic carrier particle-containing reagent, the biotinylated first antibody-containing reagent, and the specimen were discharged into the cell 10 for antigen-antibody reaction, the washing liquid was discharged to increase the liquid level. The first carrier having a height of 12 mm was made to face the side surface of the cell 10 and the magnetic carrier particles on which the first immune complex was formed were collected and washed five times. In the fifth washing, the magnet 10 having a height of 5 mm was made to face the side surface of the cell 10 to wash the magnetic carrier particles on which the first immune complex was formed. Thereafter, the alkaline phosphatase-labeled second antibody was added to the cell 10, and the height of the upper end of the liquid surface when stirring was set to 5 mm. Thereafter, the amount of luminescence was measured through the predetermined steps (addition of a luminescent substrate reagent, etc.).
一方、比較例は、BFユニットの磁石の高さを全て12mmとして、それ以外は実施例と同じ手順で行った。 On the other hand, in the comparative example, the height of the magnet of the BF unit was all set to 12 mm, and the other procedures were performed in the same procedure as in the example.
試験例1において、磁性担体粒子の分散性が向上したか否かを評価する指標として、発光量の変動係数[変動係数=標準偏差/算術平均×100(%)]を用い、両洗浄方法による変動係数を比較した。変動係数は、値が小さいほど、精度良く測定できたことを意味する。
上記、実施例及び比較例の手順に従い、同一検体を30回連続で測定したときの発光量(n=30)から、算術平均、標準偏差、変動係数を算出した。算出された変動係数を表1に示す。
実施例と比較例の変動係数を比較したところ、比較例に対して実施例は、変動係数が2.6%低くなった。すなわち、比較例と比較して、本願発明の適用された実施例は、磁性担体粒子の分散性が向上し、精度良く測定できることが明らかとなった。In Test Example 1, as an index for evaluating whether or not the dispersibility of the magnetic carrier particles was improved, a variation coefficient of the light emission amount [variation coefficient = standard deviation / arithmetic average × 100 (%)] was used, and both cleaning methods were used. The coefficient of variation was compared. The coefficient of variation means that the smaller the value, the more accurately it can be measured.
In accordance with the procedures of the above-described Examples and Comparative Examples, the arithmetic mean, standard deviation, and coefficient of variation were calculated from the amount of luminescence when the same specimen was measured 30 times continuously (n = 30). Table 1 shows the calculated coefficient of variation.
When the coefficient of variation of the example and the comparative example were compared, the coefficient of variation of the example was 2.6% lower than that of the comparative example. That is, as compared with the comparative example, it was clarified that the example to which the present invention was applied improved the dispersibility of the magnetic carrier particles and can be measured with high accuracy.
[第2の実施形態(2ステップサンドイッチ法における2次反応後の洗浄)]
次に、図面を参照しながら、本発明の第2の実施形態について説明する。なお、第1の実施形態と同一構成には同一符号を付し、その説明は省略する。第1の実施形態では、第2B/Fユニット22Bの複数の磁石(磁石106R、及び磁石106L)の高さが全て同じ高さ(8mm)に設定されていたが、本実施形態の第2B/Fユニット22Bは、第1B/Fユニット22Aと同一構成とされており、第1の磁石104A〜第6の磁石104Fの高さが、第1の磁石104Aから第6の磁石104Fに向けて徐々に低く(12mmから5mm)なっている。[Second Embodiment (Washing after Secondary Reaction in Two-Step Sandwich Method)]
Next, a second embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings. In addition, the same code | symbol is attached | subjected to the same structure as 1st Embodiment, and the description is abbreviate | omitted. In the first embodiment, the heights of the plurality of magnets (the magnet 106R and the magnet 106L) of the second B / F unit 22B are all set to the same height (8 mm). The F unit 22B has the same configuration as the first B / F unit 22A, and the heights of the first magnet 104A to the sixth magnet 104F gradually increase from the first magnet 104A toward the sixth magnet 104F. (12 mm to 5 mm).
(作用、効果)
次に、本実施形態の免疫測定装置200の作用を説明する。
第2の実施形態は、第1の実施形態とは、第2B/Fユニット22Bでの工程及び、その後の工程が異なるだけであり、その他の工程は同じであるため、第2B/Fユニット22Bでの工程以降を以下に説明し、その他の工程の説明は省略する。(Function, effect)
Next, the operation of the immunoassay apparatus 200 of this embodiment will be described.
The second embodiment is different from the first embodiment only in the steps in the second B / F unit 22B and the subsequent steps, and the other steps are the same, and therefore the second B / F unit 22B. The following steps will be described below, and description of other steps will be omitted.
<第2B/Fユニットでの工程>
第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を有するセル10は、セルハンド72によって反応テーブル18から第2B/Fユニット22Bに搬送され、ターンテーブル84の孔88に挿入される。その後、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル内に12mmの高さまで吐出される。そして、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Aに示すように、セル10は高さ12mmの一対の第1の磁石104Aと対向する位置に配置される。<Process in 2nd B / F unit>
The cell 10 having the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is transported from the reaction table 18 to the second B / F unit 22B by the cell hand 72 and inserted into the hole 88 of the turntable 84. Thereafter, the cleaning liquid is discharged into the cell to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A. Then, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7A, the cell 10 is disposed at a position facing the pair of first magnets 104A having a height of 12 mm.
セル10が高さ12mmの第1の磁石104Aと対向すると、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子が第1の磁石104Aに引き寄せられ、セル10の内側面の一方側、及び他方側に集まる。液面の高さと第1の磁石104Aの高さとが一致しているので、第1の磁石104Aの磁力を、セル10内の液体の高さ方向全体に及ぼすことができ、液体内に浮遊する第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子をセル10の内面に効率的に集めることができる。ここで、セル10の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第1の磁石104Aと同じ高さ、即ち、12mmとなる。 When the cell 10 faces the first magnet 104A having a height of 12 mm, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the first magnet 104A, and one side of the inner surface of the cell 10 and the other Gather on the side. Since the height of the liquid level and the height of the first magnet 104A coincide with each other, the magnetic force of the first magnet 104A can be exerted on the entire height direction of the liquid in the cell 10 and floats in the liquid. The magnetic carrier particles carrying the second immune complex can be efficiently collected on the inner surface of the cell 10. Here, the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex and collected on the inner surface of the cell 10 is the same as that of the first magnet 104A, that is, 12 mm.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Bに示すように、セル10は、高さ10mmの第2の磁石104Bと対向する位置に配置される。これにより、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の磁石104Aよりも低い第2の磁石104Bに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第1の磁石104Aで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが12mmから10mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7B, the cell 10 is disposed at a position facing the second magnet 104B having a height of 10 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the second magnet 104B and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, the height of the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected on one side of the inner surface of the cell 10 because it is attracted to the second magnet 104B lower than the first magnet 104A. Is lower than the height when collected by the first magnet 104A, that is, the height of the magnetic carrier particles loaded with the second immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is from 12 mm. 10 mm.
次に、図7Cに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引され、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外のものが除去され、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Dに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7C, the liquid in the cell 10 is aspirated by the B / F nozzle 44A, and other than the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are removed, and the second immunity is removed. The magnetic carrier particles carrying the composite are left on the inner surface of the cell 10. Thereafter, as shown in FIG. 7D, the cleaning liquid is discharged into the cell to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Eに示すように、セル10は、高さ8mmの第3の磁石104Cと対向する位置に配置される。これにより、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bとは反対側に配置された第3の磁石104Cに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bよりも低い第3の磁石104Cに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第2の磁石104Bで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが10mmから8mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7E, the cell 10 is disposed at a position facing the third magnet 104C having a height of 8 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the third magnet 104C disposed on the side opposite to the second magnet 104B and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the third magnet 104C lower than the second magnet 104B, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the two immune complexes is lower than the height at which the magnetic carrier particles were collected by the second magnet 104B, that is, the second immunity collected on the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the composite is 10 mm to 8 mm.
次に、図7Fに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Gに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7F, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are transferred to the cell 10. Left on the inside. Thereafter, as shown in FIG. 7G, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Hに示すように、セル10は、高さ7mmの第4の磁石104Dと対向する位置に配置される。これにより、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cとは反対側に配置された第4の磁石104Dに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cよりも低い第4の磁石104Dに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第3の磁石104Cで集められていた際の磁性担体粒子の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが8mmから7mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7H, the cell 10 is disposed at a position facing the fourth magnet 104D having a height of 7 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the fourth magnet 104D disposed on the opposite side of the third magnet 104C and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the fourth magnet 104D which is lower than the third magnet 104C, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the immune complex of 2 is lower than the height of the magnetic carrier particles collected by the third magnet 104C, that is, collected on the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is 8 mm to 7 mm.
次に、図7Iに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Jに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7I, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are transferred to the cell 10. Left on the inside. Thereafter, as shown in FIG. 7J, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Kに示すように、セル10は、高さ6mmの第5の磁石104Eと対向する位置に配置される。これにより、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dとは反対側に配置された第5の磁石104Eに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dよりも低い第5の磁石104Eに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第4の磁石104Dで集められていた際の磁性担体粒子の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが7mmから6mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of arrow CW, and as shown in FIG. 7K, the cell 10 is disposed at a position facing the fifth magnet 104E having a height of 6 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the fifth magnet 104E disposed on the side opposite to the fourth magnet 104D and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the fifth magnet 104E lower than the fourth magnet 104D, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the immune complex of 2 is lower than the height of the magnetic carrier particles collected by the fourth magnet 104D, that is, collected on the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is 7 mm to 6 mm.
次に、図7Lに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Mに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7L, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex become the cell 10 Left on the inside. Thereafter, as shown in FIG. 7M, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Nに示すように、セル10は、高さ5mmの第6の磁石104Fと対向する位置に配置される。これにより、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eとは反対側に配置された第6の磁石104Fに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eよりも低い第6の磁石104Fに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第5の磁石104Eで集められていた際の磁性担体粒子の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが6mmから5mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and as shown in FIG. 7N, the cell 10 is disposed at a position facing the sixth magnet 104F having a height of 5 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the sixth magnet 104F disposed on the opposite side of the fifth magnet 104E and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are attracted to the sixth magnet 104F which is lower than the fifth magnet 104E, they are collected on one side of the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the immune complex of 2 is lower than the height of the magnetic carrier particles collected by the fifth magnet 104E, that is, collected on the inner surface of the cell 10. The height of the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is 6 mm to 5 mm.
次に、図7Oに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される(第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは5mm)。 Next, as shown in FIG. 7O, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A, B / F separation is performed, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex are transferred to the cell 10. It is left on the inner surface (the height of the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is 5 mm).
第2B/Fユニット22BでB/F分離が行われたセル10は、セルハンド74に掴まれ、回転軸74A回りに回転して検出ユニット24の攪拌部46へ搬送される。このとき、セルハンド74に設けられたチューブ(不図示)から検出試薬(発光基質試薬)がセル10へ吐出される。攪拌部46では、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と検出試薬とが攪拌される。その後、第1の実施形態と同様に、セル10は測定室48内へ搬送され、光量の測定が行われる。 The cell 10 subjected to the B / F separation in the second B / F unit 22B is gripped by the cell hand 74, rotated around the rotation shaft 74A, and conveyed to the stirring unit 46 of the detection unit 24. At this time, the detection reagent (luminescent substrate reagent) is discharged from the tube (not shown) provided in the cell hand 74 to the cell 10. In the stirring unit 46, the magnetic carrier particles carrying the second immune complex and the detection reagent are stirred. Thereafter, as in the first embodiment, the cell 10 is transported into the measurement chamber 48 and the amount of light is measured.
このように、第2の実施形態では、検出試薬が吐出されるセル10は、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが5mmとなるため、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を検出試薬中に分散させるには、撹拌時の検出試薬の液面の上端の高さが5mmとなれば良く、セル10に吐出する検出試薬の液面の高さは5mm未満で良く、高い分散性を確保しつつ、第1の実施形態に比較して使用する検出試薬の量を削減することができる。 Thus, in the second embodiment, since the height of the magnetic carrier particles carrying the second immune complex is 5 mm in the cell 10 from which the detection reagent is discharged, the second immune complex is In order to disperse the supported magnetic carrier particles in the detection reagent, the height of the upper end of the liquid surface of the detection reagent at the time of stirring may be 5 mm, and the height of the liquid surface of the detection reagent discharged to the cell 10 is The amount may be less than 5 mm, and the amount of detection reagent to be used can be reduced as compared with the first embodiment while ensuring high dispersibility.
なお、第2B/Fユニット22BでB/F分離をする際(即ち、磁性担体粒子の洗浄)には、第1B/Fユニット22Aと同様に、セル10に洗浄液を添加してセル10の側面から磁石(104A〜F)を離脱させるか、セル10の側面から磁石を離脱させてセル10に洗浄液を添加するか、またはセル10に洗浄液を添加しながらセル10の側面から磁石を離脱させれば良く、何れかを行えば良い。 When B / F separation is performed in the second B / F unit 22B (that is, cleaning of the magnetic carrier particles), a cleaning liquid is added to the cell 10 in the same manner as the first B / F unit 22A to The magnet (104A-F) can be detached from the cell 10, the magnet can be detached from the side surface of the cell 10 and the cleaning liquid can be added to the cell 10, or the magnet can be detached from the side surface of the cell 10 while adding the cleaning liquid to the cell 10. Any one may be performed.
また、上記実施形態の第2B/Fユニット22Bにおいても、磁石の高さが隣接する同士で全て異なり、かつ磁石の高さが段々に低くなっていたが、最後の磁石の高さが一番低くなっていれば良く、複数の磁石の中で、互いに隣接する磁石同士で同じ高さとなっている部分があっても良い。 Also, in the second B / F unit 22B of the above embodiment, the heights of the magnets are all different from each other and the heights of the magnets are gradually reduced. However, the height of the last magnet is the highest. What is necessary is just to become low, and there may exist a part which has the same height by mutually adjacent magnets in a plurality of magnets.
[第3の実施形態(1ステップサンドイッチ法)]
次に、図面を参照しながら、本発明の第3の実施形態について説明する。第1の実施形態では、2ステップサンドイッチ法を用いて測定対象成分の測定を行ったが、第3の実施形態では、1ステップサンドイッチ法を用いて測定対象成分の測定を行う。[Third embodiment (one-step sandwich method)]
Next, a third embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings. In the first embodiment, the measurement target component is measured using the two-step sandwich method. In the third embodiment, the measurement target component is measured using the one-step sandwich method.
<免疫測定法(1ステップサンドイッチ法)>
以下に、本実施形態の1ステップサンドイッチ法を説明する。なお、本実施形態で用いる試薬は、前述した実施形態の2ステップサンドイッチ法と同じものを用いている。<Immunoassay (one-step sandwich method)>
Below, the 1 step sandwich method of this embodiment is demonstrated. Note that the reagent used in the present embodiment is the same as the two-step sandwich method of the above-described embodiment.
1ステップサンドイッチ法では、反応テーブル18上のセル10に、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬、ビオチン化第1抗体含有試薬、アルカリホスファターゼ標識第2抗体含有試薬、及び検体がセル10へ吐出されて、抗原抗体反応が行われ、これらが攪拌機構66により攪拌される。これにより、磁性担体粒子上に、第1抗体、測定対象成分(抗原)、及びアルカリホスファターゼ標識第2抗体からなる第2の免疫複合体が形成される。 In the one-step sandwich method, a reagent containing streptavidin-binding magnetic carrier particles, a biotinylated first antibody-containing reagent, an alkaline phosphatase-labeled second antibody-containing reagent, and a specimen are discharged into the cell 10 on the reaction table 18. The antigen-antibody reaction is performed, and these are stirred by the stirring mechanism 66. Thereby, the 2nd immune complex which consists of a 1st antibody, a measuring object component (antigen), and an alkaline phosphatase labeled 2nd antibody is formed on a magnetic support particle.
なお、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬と、ビオチン化第1抗体含有試薬性担体粒子を含む試薬とをセル10に吐出する代わりに、第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬をセル10に吐出しても良い。 Instead of discharging a reagent containing streptavidin-coupled magnetic carrier particles and a reagent containing biotinylated first antibody-containing reagent carrier particles to the cell 10, a reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody is used. 10 may be discharged.
その後、セル10は、セルハンド72によって反応テーブル18から、前述した第1の実施形態で用いた第1B/Fユニット22A(第1の磁石104Aから第6の磁石104Fに向けて徐々に低く(12mmから5mm)なっている)に搬送され、ターンテーブル84の孔88に挿入される。その後、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル内に12mmの高さまで吐出され、以後、第1の実施形態と同様にしてB/F分離が行われ、検出試薬の吐出、攪拌、及び測定室48での光量の測定が行われる。
したがって、本実施形態においても、検出試薬の量を削減することができる。Thereafter, the cell 10 is gradually lowered from the reaction table 18 by the cell hand 72 toward the first B / F unit 22A (the first magnet 104A to the sixth magnet 104F used in the first embodiment) (12 mm 5 mm), and is inserted into the hole 88 of the turntable 84. Thereafter, the cleaning liquid is discharged into the cell to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A. Thereafter, B / F separation is performed in the same manner as in the first embodiment, and the detection reagent is discharged, stirred, and the measurement chamber 48. The amount of light at is measured.
Therefore, also in this embodiment, the amount of detection reagent can be reduced.
[試験例2]
1ステップサンドイッチ法において、本発明により、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率を高められるか否かを調べる試験を行った。[Test Example 2]
In the one-step sandwich method, a test was conducted to determine whether the recovery efficiency of the magnetic carrier particles carrying the second immune complex can be increased according to the present invention.
実施例では、セル10に、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬、ビオチン化第1抗体含有試薬、検体、アルカリホスファターゼ標識第2抗体、及び洗浄液を吐出して液面の高さを12mmとし、このセル10の側面に高さ12mmの第1の磁石を対向させて第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の集磁と洗浄を5回行った。その後、上記所定の工程(発光基質試薬の添加等)を経て発光量の測定を行った。 In the example, the cell 10 is discharged with a streptavidin-coupled magnetic carrier particle-containing reagent, a biotinylated first antibody-containing reagent, a specimen, an alkaline phosphatase-labeled second antibody, and a washing solution to a liquid level of 12 mm. The first magnet having a height of 12 mm was made to face the side surface of the cell 10, and the magnetic carrier particles carrying the second immune complex were collected and washed five times. Thereafter, the amount of luminescence was measured through the predetermined steps (addition of a luminescent substrate reagent, etc.).
一方、比較例では、セル10に、ストレプトアビジン結合磁性担体粒子含有試薬、ビオチン化第1抗体含有試薬、検体、アルカリホスファターゼ標識第2抗体、及び洗浄液を吐出して液面の高さを12mmとし、このセル10の側面に高さ8mmの第1の磁石を対向させて第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の集磁と洗浄を5回行った。その後、上記所定の工程(発光基質試薬の添加等)を経て発光量の測定を行った。 On the other hand, in the comparative example, a streptavidin-coupled magnetic carrier particle-containing reagent, a biotinylated first antibody-containing reagent, a specimen, an alkaline phosphatase-labeled second antibody, and a washing solution are discharged into the cell 10 to a liquid surface height of 12 mm. The magnetic carrier particles carrying the second immune complex were collected and washed five times with the first magnet having a height of 8 mm facing the side surface of the cell 10. Thereafter, the amount of luminescence was measured through the predetermined steps (addition of a luminescent substrate reagent, etc.).
試験例2において、得られる発光量が高い方が、第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率が高いことを意味する。
実施例と比較例との発光量(relative luminescence unit:RLU)、及び、比較例における発光量を基準(100%)としたときの相対値を、表2に示す。実施例と比較例との発光量の比較を行ったところ、比較例に対して実施例は、発光量が約10%高かった。試験結果から、上記の様に液面の高さと同じ高さの磁石を用いることで回収効率が高められることが分かった。
Table 2 shows the light emission amount (relative luminescence unit: RLU) between the example and the comparative example, and the relative value when the light emission amount in the comparative example is used as a reference (100%). When the amount of luminescence was compared between the example and the comparative example, the luminescence amount of the example was about 10% higher than that of the comparative example. From the test results, it was found that the recovery efficiency can be increased by using a magnet having the same height as the liquid level as described above.
[第4の実施形態(競合法1)]
次に、図面を参照しながら、本発明の第4の実施形態について説明する。前述した実施形態では、サンドイッチ法を用いて測定対象成分の測定を行ったが、本実施形態では、競合法1を用いて測定対象成分の測定を行う。[Fourth Embodiment (Competitive Method 1)]
Next, a fourth embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings. In the embodiment described above, the measurement target component is measured using the sandwich method, but in this embodiment, the measurement target component is measured using the competitive method 1.
本実施形態の競合法1では、反応テーブル18にセットされたセル10に、検体と、競合物質に標識(例えば、アルカリホスファターゼ)が結合してなる標識化競合物質を含む試薬、検体の測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬、及び磁性担体粒子を含む試薬がセル10へ吐出され(例えば、図6A参照))、抗原抗体反応が行われ、これらが、攪拌機構66により、撹拌される。 In the competition method 1 of this embodiment, a reagent containing a specimen, a labeled competitor substance formed by binding a label (for example, alkaline phosphatase) to a competitor substance in the cell 10 set in the reaction table 18, and a subject to be measured The reagent containing the first antibody that binds to the component and the labeled competitor and the reagent containing the magnetic carrier particles are discharged to the cell 10 (see, for example, FIG. 6A), and an antigen-antibody reaction is performed. The mechanism 66 is agitated.
これにより、第1抗体と測定対象成分とからなる第3の免疫複合体、及び、第1抗体と標識化競合物質とからなる第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する懸濁液が得られる。 Thus, the suspension containing the magnetic carrier particles carrying the third immune complex composed of the first antibody and the component to be measured and the fourth immune complex composed of the first antibody and the labeled competitor is supported. A turbid liquid is obtained.
なお、検体の測定対象成分と標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬とをセル10に吐出する代わりに、第1抗体を担持したが担持された磁性担体粒子を含む試薬をセル10に吐出しても良い。 Instead of discharging the reagent containing the first antibody that binds to the analyte component to be measured and the labeled competing substance and the reagent containing the magnetic carrier particles to the cell 10, the first antibody was carried but carried. A reagent containing magnetic carrier particles may be discharged into the cell 10.
次に、セル10は、セルハンド72によって第1B/Fユニット22Aに搬送され、ターンテーブル84の孔88に挿入される。孔88に挿入されたセル10には、B/Fノズル44Aを通じて洗浄液が吐出される。この洗浄液を吐出する工程においては、第1の磁石104Aの高さと液面とが一致するように洗浄液が吐出される(ここでは、液面の高さを12mmとする。)。 Next, the cell 10 is transported to the first B / F unit 22 </ b> A by the cell hand 72 and inserted into the hole 88 of the turntable 84. The cleaning liquid is discharged to the cell 10 inserted into the hole 88 through the B / F nozzle 44A. In the step of discharging the cleaning liquid, the cleaning liquid is discharged so that the height of the first magnet 104A matches the liquid level (here, the height of the liquid level is 12 mm).
その後、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Aに示すように、セル10は一対の第1の磁石104Aと対向する位置に配置される。セル10が、例えば、高さ12mmの第1の磁石104Aと対向すると、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子が第1の磁石104Aに引き寄せられ、セル10の内側面の一方側、及び他方側に集まる。液面の高さと第1の磁石104Aの高さとが一致しているので、第1の磁石104Aの磁力を、セル10内の液体の高さ方向全体に及ぼすことができ、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子をセル10の内面に効率的に集めることができる。 Thereafter, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and as shown in FIG. 7A, the cell 10 is disposed at a position facing the pair of first magnets 104A. When the cell 10 faces, for example, the first magnet 104A having a height of 12 mm, the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the first magnet 104A. The cells 10 gather on one side and the other side of the inner side surface. Since the height of the liquid level and the height of the first magnet 104A coincide with each other, the magnetic force of the first magnet 104A can be exerted on the entire height direction of the liquid in the cell 10, and the third immune complex. The magnetic carrier particles carrying the body and the fourth immune complex can be efficiently collected on the inner surface of the cell 10.
また、セル10内には洗浄液が吐出されているので(即ち、洗浄液で薄められている)、洗浄液が吐出されていない場合に比較して検体中の特定の成分(一例として、フィブリン)の影響が少なくなり、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子が液中を移動し易く、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を短時間で効率的に集めることができる。よって、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率を高めることができる。 Further, since the cleaning liquid is discharged into the cell 10 (that is, diluted with the cleaning liquid), the influence of a specific component (for example, fibrin) in the sample is compared with the case where the cleaning liquid is not discharged. The magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex easily move in the liquid, and the third immune complex and the fourth immune complex are carried. The magnetic carrier particles can be efficiently collected in a short time. Therefore, it is possible to increase the recovery efficiency of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Bに示すように、セル10は、高さ10mmの第2の磁石104Bと対向する位置に配置される。これにより、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の磁石104Aよりも低い第2の磁石104Bに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第1の磁石104Aで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが12mmから10mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7B, the cell 10 is disposed at a position facing the second magnet 104B having a height of 10 mm. Thereby, the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex are attracted to the second magnet 104B and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, the third immune complex and the fourth immune complex collected on one side of the inner surface of the cell 10 are carried by the second magnet 104B which is lower than the first magnet 104A. The height of the formed magnetic carrier particles is lower than the height at which the magnetic carrier particles are collected by the first magnet 104A, that is, the magnetic carrier on which the third immune complex and the fourth immune complex are supported. The height of the particles is 12 mm to 10 mm.
次に、図7Cに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引され、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外のものが除去され、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。以上のようにして、磁性担体粒子と結合した物質(Bind)と、結合しなかった物質(Free)が分離(B/F分離)される。その後、図7Dに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7C, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A, and other than the third carrier and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex. Is removed, and the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex are left on the inner surface of the cell 10. As described above, the substance (Bind) bonded to the magnetic carrier particles and the substance (Free) not bonded are separated (B / F separation). Thereafter, as shown in FIG. 7D, the cleaning liquid is discharged into the cell to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Eに示すように、セル10は、高さ8mmの第3の磁石104Cと対向する位置に配置される。これにより、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bとは反対側に配置された第3の磁石104Cに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bよりも低い第3の磁石104Cに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第2の磁石104Bで集められていた際の磁性担体粒子の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが10mmから8mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7E, the cell 10 is disposed at a position facing the third magnet 104C having a height of 8 mm. As a result, the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the third magnet 104C disposed on the side opposite to the second magnet 104B, and the cell 10 Collected on one side of the inner surface. Here, since the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the third magnet 104C lower than the second magnet 104B, the inner surface of the cell 10 The height of the magnetic carrier particles loaded on one side of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex is equal to the height of the magnetic carrier particles collected by the second magnet 104B. That is, the height of the magnetic carrier particles loaded with the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is 10 mm to 8 mm.
次に、図7Fに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Gに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7F, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the third immune complex and the fourth immune complex are carried. The magnetic carrier particles thus left are left on the inner surface of the cell 10. Thereafter, as shown in FIG. 7G, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Hに示すように、セル10は、高さ7mmの第4の磁石104Dと対向する位置に配置される。これにより、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cとは反対側に配置された第4の磁石104Dに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cよりも低い第4の磁石104Dに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第3の磁石104Cで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが8mmから7mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7H, the cell 10 is disposed at a position facing the fourth magnet 104D having a height of 7 mm. As a result, the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the fourth magnet 104D arranged on the side opposite to the third magnet 104C, and the cell 10 Collected on one side of the inner surface. Here, since the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the fourth magnet 104D lower than the third magnet 104C, the inner surface of the cell 10 The height of the magnetic carrier particles collected on one side of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex is lower than the height when collected by the third magnet 104C. That is, the height of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is 8 mm to 7 mm.
次に、図7Iに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Jに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7I, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the third immune complex and the fourth immune complex are carried. The magnetic carrier particles thus left are left on the inner surface of the cell 10. Thereafter, as shown in FIG. 7J, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Kに示すように、セル10は、高さ6mmの第5の磁石104Eと対向する位置に配置される。これにより、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dとは反対側に配置された第5の磁石104Eに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dよりも低い第5の磁石104Eに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第4の磁石104Dで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが7mmから6mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of arrow CW, and as shown in FIG. 7K, the cell 10 is disposed at a position facing the fifth magnet 104E having a height of 6 mm. As a result, the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the fifth magnet 104E disposed on the side opposite to the fourth magnet 104D, and the cell 10 Collected on one side of the inner surface. Here, since the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the fifth magnet 104E lower than the fourth magnet 104D, the inner surface of the cell 10 The heights of the magnetic carrier particles loaded with the third immune complex and the fourth immune complex collected on one side of each of the first and second immune complexes are lower than the height when collected by the fourth magnet 104D. That is, the height of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is 7 mm to 6 mm.
次に、図7Lに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Mに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7L, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the third immune complex and the fourth immune complex are carried. The magnetic carrier particles thus left are left on the inner surface of the cell 10. Thereafter, as shown in FIG. 7M, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Nに示すように、セル10は、高さ5mmの第6の磁石104Fと対向する位置に配置される。これにより、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eとは反対側に配置された第6の磁石104Fに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eよりも低い第6の磁石104Fに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは、第5の磁石104Eで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが6mmから5mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and as shown in FIG. 7N, the cell 10 is disposed at a position facing the sixth magnet 104F having a height of 5 mm. As a result, the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the sixth magnet 104F disposed on the opposite side of the fifth magnet 104E, and the cell 10 Collected on one side of the inner surface. Here, the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are attracted to the sixth magnet 104F which is lower than the fifth magnet 104E. The height of the magnetic carrier particles collected on one side of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex is lower than the height when collected by the fifth magnet 104E. That is, the height of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the cell 10 is 6 mm to 5 mm.
次に、図7Oに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される(第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さは5mm)。 Next, as shown in FIG. 7O, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A to perform B / F separation, and the third immune complex and the fourth immune complex are carried. The magnetic carrier particles thus left are left on the inner surface of the cell 10 (the height of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex is 5 mm).
第1B/Fユニット22AでB/F分離が行われたセル10は、セルハンド74に掴まれ検出ユニット24の攪拌部46へ搬送される。このとき、セルハンド74に設けられたチューブ(不図示)から検出試薬(発光基質試薬)がセル10へ吐出される。攪拌部46では、免疫複合体を担持する磁性担体粒子と、検出試薬とが攪拌され、第4の免疫複合体中のアルカリホスファターゼが発光基質試薬と反応して発光する。 The cell 10 that has been subjected to the B / F separation by the first B / F unit 22 </ b> A is gripped by the cell hand 74 and conveyed to the stirring unit 46 of the detection unit 24. At this time, the detection reagent (luminescent substrate reagent) is discharged from the tube (not shown) provided in the cell hand 74 to the cell 10. In the stirring unit 46, the magnetic carrier particles carrying the immune complex and the detection reagent are stirred, and the alkaline phosphatase in the fourth immune complex reacts with the luminescent substrate reagent to emit light.
本実施形態では、検出試薬が吐出されるセル10において、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さが5mmとなるため、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を検出試薬中に分散させるには、撹拌時の検出試薬の液面の上端の高さが5mmとなれば良く、セル10に吐出する検出試薬の液面の高さは5mm未満で良く、検出試薬の量を削減することができると共に、より少ない量の検出試薬の添加により、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に分散させることができる。 In the present embodiment, since the height of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex is 5 mm in the cell 10 from which the detection reagent is discharged, the third immune complex In order to disperse the body and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex in the detection reagent, the height of the upper end of the liquid surface of the detection reagent at the time of stirring may be 5 mm and discharged to the cell 10. The liquid surface height of the detection reagent may be less than 5 mm, the amount of the detection reagent can be reduced, and by adding a smaller amount of the detection reagent, the magnetic carrier particles can be dispersed efficiently and reliably. Can do.
その後、セル10は測定室48内へ搬送され、センサ(不図示)により、磁性担体粒子が担持している第4の免疫複合体中のアルカリホスファターゼと発光基質試薬との反応により生成した光の光量が測定され、この測定された発光量から、検体中の測定対象成分の濃度が決定される(なお、検体の測定対象成分と第1抗体とからなる第3の免疫複合体には、標識化競合物質が結合していないので、第3の免疫複合体が担持された磁性担体粒子は光らない。)。なお、競合法1は、サンドイッチ法と異なり、検体中の測定対象成分が多くなると、発光量が小さくなる。 Thereafter, the cell 10 is transported into the measurement chamber 48, and the light generated by the reaction between the alkaline phosphatase and the luminescent substrate reagent in the fourth immune complex carried by the magnetic carrier particles is detected by a sensor (not shown). The amount of light is measured, and the concentration of the measurement target component in the sample is determined from the measured amount of luminescence (note that the third immune complex consisting of the measurement target component of the sample and the first antibody has a label. Since the conjugated competitor is not bound, the magnetic carrier particles carrying the third immune complex do not shine.) The competitive method 1 differs from the sandwich method in that the amount of luminescence decreases as the number of components to be measured in the sample increases.
以上説明した様に、本実施形態の免疫測定方法では、第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の懸濁された液が入れられたセル10の側面に、液面の高さと同じ高さの第1の磁石104Aを配置し、液の上下方向の全ての部分に渡って第1の磁石104Aの磁力を作用させるので、懸濁液中の第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子に対して大きな磁力を作用させて集磁することができ、免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率を高めることができる。
また、検出試薬を吐出した後の液面の高さを、攪拌時に、セル10内面に集められた第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子全体に検出試薬を接触させることができる高さに設定するので、該第3の免疫複合体、及び第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子をセル10内面に残存させることなく、検出試薬中に全て分散させることが出来、分散性を高めることができ、検体中の測定対象成分の測定を正確に行うことが可能となる。As described above, in the immunoassay method of the present embodiment, the side surface of the cell 10 in which the liquid in which the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex are suspended is placed. Since the first magnet 104A having the same height as the liquid surface is disposed and the magnetic force of the first magnet 104A is applied to all parts of the liquid in the vertical direction, the third magnet 104A in the suspension is used. The magnetic carrier particles carrying the immune complex and the fourth immune complex can be attracted by applying a large magnetic force to increase the collection efficiency of the magnetic carrier particles carrying the immune complex. be able to.
Further, the height of the liquid level after the detection reagent is discharged is detected on the whole of the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex collected on the inner surface of the cell 10 during stirring. Since the height is set so that the reagent can be brought into contact, the magnetic carrier particles carrying the third immune complex and the fourth immune complex do not remain on the inner surface of the cell 10 and remain in the detection reagent. All can be dispersed, the dispersibility can be improved, and the measurement target component in the sample can be accurately measured.
なお、B/F分離をする際(即ち、磁性担体粒子の洗浄)には、セル10に洗浄液を添加してセル10の側面から磁石(104A〜F)を離脱させるか、セル10の側面から磁石を離脱させてセル10に洗浄液を添加するか、またはセル10に洗浄液を添加しながらセル10の側面から磁石を離脱させれば良く、何れかを行えば良い。 When performing B / F separation (that is, cleaning of the magnetic carrier particles), a cleaning solution is added to the cell 10 to separate the magnets (104A to 104F) from the side surface of the cell 10, or from the side surface of the cell 10. Either the magnet is detached and the cleaning liquid is added to the cell 10, or the magnet may be detached from the side surface of the cell 10 while adding the cleaning liquid to the cell 10.
本実施形態の第1B/Fユニット22Aにおいても、第1の実施形態と同様に、第1の磁石104A〜第6の磁石104Fの高さが隣接する同士で全て異なり、かつ第1の磁石104Aから第6の磁石104Fへ向けて段々に低くなっていたが、最後の第6の磁石104Fの高さが一番低くなっていれば良く、複数の磁石の中で、互いに隣接する磁石同士で同じ高さとなっている部分があっても良い。 Also in the first B / F unit 22A of the present embodiment, as in the first embodiment, the heights of the first magnet 104A to the sixth magnet 104F are all different between adjacent ones, and the first magnet 104A. From the first to the sixth magnet 104F, the height of the last sixth magnet 104F only needs to be the lowest. Among the plurality of magnets, the magnets adjacent to each other There may be parts with the same height.
[第5の実施形態(競合法2)]
次に、図面を参照しながら、本発明の第5の実施形態について説明する。本実施形態では、競合法2を用いて測定対象成分の測定を行う。[Fifth Embodiment (Competitive Method 2)]
Next, a fifth embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings. In the present embodiment, the measurement target component is measured using the competition method 2.
本実施形態の競合法2では、反応テーブル18にセットされたセル10に、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する標識化された第1抗体(適宜、標識化第1抗体と呼ぶ。)を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬とが吐出され、これらが、攪拌機構66により、撹拌され、抗原抗体反応が行われる。 In the competition method 2 of the present embodiment, a labeled first antibody that binds to a sample, a measurement target component in the sample, and a competitive substance is placed in the cell 10 set in the reaction table 18 (labeled first 1 as appropriate). A reagent containing a competing substance, and a reagent containing magnetic carrier particles are discharged, and these are stirred by the stirring mechanism 66 to perform an antigen-antibody reaction.
これにより、競合物質と標識化第1抗体とからなる第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する懸濁液が得られる。
なお、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬とをセル10に吐出する代わりに、競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬をセル10に吐出しても良い。As a result, a suspension containing magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex composed of the competitor and the labeled first antibody is obtained.
Instead of discharging a reagent containing a competing substance and a reagent containing magnetic carrier particles to the cell 10, a reagent containing magnetic carrier particles carrying a competing substance may be discharged to the cell 10.
次に、セル10は、セルハンド72によって第1B/Fユニット22Aに搬送され、ターンテーブル84の孔88に格納される。孔88に格納されたセル10には、B/Fノズルを通じて洗浄液が吐出される。この洗浄液を吐出する工程においては、第1の磁石104Aの高さと液面とが一致するように洗浄液が吐出される(ここでは、液面の高さを12mmとする。)。 Next, the cell 10 is transported to the first B / F unit 22 </ b> A by the cell hand 72 and stored in the hole 88 of the turntable 84. A cleaning liquid is discharged to the cell 10 stored in the hole 88 through the B / F nozzle. In the step of discharging the cleaning liquid, the cleaning liquid is discharged so that the height of the first magnet 104A matches the liquid level (here, the height of the liquid level is 12 mm).
その後、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、セル10は、一対の第1の磁石104Aと対向する位置に配置される(図7A参照)。セル10が、例えば、高さ12mmの第1の磁石104Aと対向すると、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子が第1の磁石104Aに引き寄せられ、セル10の内側面の一方側、及び他方側に集まる(図中、網点で図示する部分)。液面の高さと第1の磁石104Aの高さとが一致しているので、第1の磁石104Aの磁力を、セル10内の液体の高さ方向全体に及ぼすことができ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子をセル10の内面に効率的に集めることができる。 Thereafter, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and the cell 10 is disposed at a position facing the pair of first magnets 104A (see FIG. 7A). For example, when the cell 10 faces the first magnet 104A having a height of 12 mm, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competing substance become the first magnet 104A. And gathered on one side and the other side of the inner side surface of the cell 10 (portions shown by halftone dots in the figure). Since the height of the liquid level and the height of the first magnet 104A coincide with each other, the magnetic force of the first magnet 104A can be exerted on the entire height direction of the liquid in the cell 10, and the fifth immune complex. The magnetic carrier particles carrying the body and the magnetic carrier particles carrying only the competitor can be efficiently collected on the inner surface of the cell 10.
また、セル10内には洗浄液が吐出されているので(即ち、洗浄液で反応液が薄められている)、洗浄液が吐出されていない場合に比較して検体中の特定の成分(一例として、フィブリン)の影響が少なくなり、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子が懸濁液中を移動し易く、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子を短時間で効率的に集めることができる。よって、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の回収効率を高めることができる。 In addition, since the cleaning liquid is discharged into the cell 10 (that is, the reaction liquid is diluted with the cleaning liquid), specific components in the sample (for example, fibrin as an example) are compared with the case where the cleaning liquid is not discharged. ), The magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitor substance easily move in the suspension, and the fifth immune complex carries The magnetic carrier particles thus formed and the magnetic carrier particles carrying only the competing substance can be efficiently collected in a short time. Therefore, it is possible to increase the recovery efficiency of the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Bに示すように、セル10は、高さ10mmの第2の磁石104Bと対向する位置に配置される。これにより、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第1の磁石104Aよりも低い第2の磁石104Bに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さは、第1の磁石104Aで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さが12mmから10mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7B, the cell 10 is disposed at a position facing the second magnet 104B having a height of 10 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitor are attracted to the second magnet 104B and collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, the magnetic carrier particles loaded with the fifth immune complex collected on one side of the inner surface of the cell 10 and the competition are attracted to the second magnet 104B which is lower than the first magnet 104A. The height of the magnetic carrier particles carrying only the substance is lower than the height when the magnetic carrier particles are collected by the first magnet 104A, ie, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, and the competition The height of the magnetic carrier particles carrying only the substance is 12 mm to 10 mm.
次に、図7Cに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引され、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子以外のものが除去され、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。以上のようにして、磁性担体粒子と結合した物質(Bind)と、結合しなかった物質(Free)が分離(B/F分離)される。その後、図7Dに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7C, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, and the magnetic carrier carrying only the competing substance. Things other than the particles are removed, and the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competing substance are left on the inner surface of the cell 10. As described above, the substance (Bind) bonded to the magnetic carrier particles and the substance (Free) not bonded are separated (B / F separation). Thereafter, as shown in FIG. 7D, the cleaning liquid is discharged into the cell to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Eに示すように、セル10は、高さ8mmの第3の磁石104Cと対向する位置に配置される。これにより、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bとは反対側に配置された第3の磁石104Cに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第2の磁石104Bよりも低い第3の磁石104Cに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さは、第2の磁石104Bで集められていた際の磁性担体粒子の高さよりも低くなる、即ち、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さが10mmから8mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7E, the cell 10 is disposed at a position facing the third magnet 104C having a height of 8 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competing substance are attracted to the third magnet 104C arranged on the side opposite to the second magnet 104B. And collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitor are attracted to the third magnet 104C lower than the second magnet 104B, The heights of the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitor substance collected on one side of the inner surface of the cell 10 are collected by the second magnet 104B. In other words, the height of the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the height of the magnetic carrier particles carrying only the competitor are 10 mm to 8 mm.
次に、図7Fに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Gに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7F, the B / F nozzle 44A sucks the liquid in the cell 10 to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, and the competition Magnetic carrier particles carrying only a substance are left on the inner surface of the cell 10. Thereafter, as shown in FIG. 7G, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Hに示すように、セル10は、高さ7mmの第4の磁石104Dと対向する位置に配置される。これにより、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cとは反対側に配置された第4の磁石104Dに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第3の磁石104Cよりも低い第4の磁石104Dに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さは、第3の磁石104Cで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さが8mmから7mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the arrow CW direction, and as shown in FIG. 7H, the cell 10 is disposed at a position facing the fourth magnet 104D having a height of 7 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance are attracted to the fourth magnet 104D arranged on the side opposite to the third magnet 104C. And collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance are attracted to the fourth magnet 104D which is lower than the third magnet 104C. The heights of the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competing substance collected on one side of the inner surface of the cell 10 are collected by the third magnet 104C. The height of the magnetic carrier particles loaded on the inner surface of the cell 10 and carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitor is 8 mm. To 7 mm.
次に、図7Iに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Jに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7I, the B / F nozzle 44A sucks the liquid in the cell 10 to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, and the competition Magnetic carrier particles carrying only a substance are left on the inner surface of the cell 10. Thereafter, as shown in FIG. 7J, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Kに示すように、セル10は、高さ6mmの第5の磁石104Eと対向する位置に配置される。これにより、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dとは反対側に配置された第5の磁石104Eに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第4の磁石104Dよりも低い第5の磁石104Eに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さは、第4の磁石104Dで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さが7mmから6mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of arrow CW, and as shown in FIG. 7K, the cell 10 is disposed at a position facing the fifth magnet 104E having a height of 6 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competing substance are attracted to the fifth magnet 104E arranged on the side opposite to the fourth magnet 104D. And collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance are attracted to the fifth magnet 104E lower than the fourth magnet 104D, The heights of the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitor substance collected on one side of the inner surface of the cell 10 are collected by the fourth magnet 104D. The height of the magnetic carrier particles collected on the inner surface of the cell 10 and carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitor is 7 mm. To 6 mm.
次に、図7Lに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される。その後、図7Mに示すように、B/Fノズル44Aによって洗浄液がセル10内に12mmの高さまで吐出される。 Next, as shown in FIG. 7L, the B / F nozzle 44A sucks the liquid in the cell 10 to perform B / F separation, and the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, and the competition Magnetic carrier particles carrying only a substance are left on the inner surface of the cell 10. Thereafter, as shown in FIG. 7M, the cleaning liquid is discharged into the cell 10 to a height of 12 mm by the B / F nozzle 44A.
次に、ターンテーブル84が矢印CW方向に回転され、図7Nに示すように、セル10は、高さ5mmの第6の磁石104Fと対向する位置に配置される。これにより、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eとは反対側に配置された第6の磁石104Fに引き寄せられ、セル10の内面の片側に集められる。なお、ここでは、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子は、第5の磁石104Eよりも低い第6の磁石104Fに引き寄せられるため、セル10の内面の片側に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さは、第5の磁石104Eで集められていた際の高さよりも低くなる、即ち、セル10の内面に集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さが6mmから5mmとなる。 Next, the turntable 84 is rotated in the direction of the arrow CW, and as shown in FIG. 7N, the cell 10 is disposed at a position facing the sixth magnet 104F having a height of 5 mm. As a result, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance are attracted to the sixth magnet 104F arranged on the side opposite to the fifth magnet 104E. And collected on one side of the inner surface of the cell 10. Here, since the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance are attracted to the sixth magnet 104F lower than the fifth magnet 104E, The heights of the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance collected on one side of the inner surface of the cell 10 are collected by the fifth magnet 104E. The height of the magnetic carrier particles loaded with the fifth immune complex and the magnetic carrier particles loaded with only the competitive substance collected on the inner surface of the cell 10 is 6 mm. To 5 mm.
次に、図7Oに示すように、B/Fノズル44Aによって、セル10内の液が吸引されてB/F分離が行われ、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子がセル10内面に残される(第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子、及び競合物質のみが担持された磁性担体粒子の高さは5mm)。 Next, as shown in FIG. 7O, the liquid in the cell 10 is sucked by the B / F nozzle 44A, B / F separation is performed, and the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex become the cell 10 It remains on the inner surface (the height of the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance is 5 mm).
第1B/Fユニット22AでB/F分離が行われたセル10は、セルハンド74に掴まれ検出ユニット24の攪拌部46へ搬送される。このとき、セルハンド74に設けられたチューブ(不図示)から検出試薬(発光基質試薬)がセル10へ吐出される。攪拌部46では、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と、競合物質のみが担持された磁性担体粒子と、検出試薬が攪拌され、磁性担体粒子に担持されている第5の免疫複合体中のアルカリホスファターゼが発光基質試薬と反応して発光する。 The cell 10 that has been subjected to the B / F separation by the first B / F unit 22 </ b> A is gripped by the cell hand 74 and conveyed to the stirring unit 46 of the detection unit 24. At this time, the detection reagent (luminescent substrate reagent) is discharged from the tube (not shown) provided in the cell hand 74 to the cell 10. In the agitation unit 46, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, the magnetic carrier particles carrying only the competitor, and the fifth immunity carrying the detection reagent and carrying the detection reagent. Alkaline phosphatase in the complex reacts with the luminescent substrate reagent to emit light.
本実施形態では、検出試薬が吐出されるセル10は、集められた磁性担体粒子の高さ、すなわち、集められた、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と、競合物質のみが担持された磁性担体粒子からなる磁性担体粒子の高さが5mmとなるため、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と、競合物質のみが担持された磁性担体粒子を検出試薬中に分散させるには、撹拌時の検出試薬の液面の上端の高さが5mmとなれば良く、セル10に吐出する検出試薬の液面の高さは5mm未満で良く、検出試薬の量を削減することができると共に、より少ない量の検出試薬の添加により、磁性担体粒子を効率的、かつ確実に分散させることができる。 In the present embodiment, the cell 10 from which the detection reagent is ejected has the height of the collected magnetic carrier particles, that is, the collected magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex, and only the competitive substance. Since the height of the magnetic carrier particles comprising the supported magnetic carrier particles is 5 mm, the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particles carrying only the competitive substance are contained in the detection reagent. In order to disperse, the height of the upper surface of the detection reagent at the time of stirring may be 5 mm, and the height of the detection reagent discharged to the cell 10 may be less than 5 mm, reducing the amount of detection reagent. In addition, by adding a smaller amount of detection reagent, the magnetic carrier particles can be dispersed efficiently and reliably.
その後、セル10は測定室48内へ搬送され、センサ(不図示)により、磁性担持体が担持している第5の免疫複合体中のアルカリホスファターゼと発光基質試薬との反応により生成した光の光量が測定され、この測定された発光量から、検体中の測定対象成分の濃度が決定される(なお、競合物質のみが担持された磁性担体粒子は光らない。)。なお、競合法2も、前述した競合法1と同様に、検体中の測定対象成分が多くなると、発光量が小さくなる。 Thereafter, the cell 10 is transported into the measurement chamber 48, and the light generated by the reaction between the alkaline phosphatase and the luminescent substrate reagent in the fifth immune complex carried by the magnetic carrier is detected by a sensor (not shown). The amount of light is measured, and the concentration of the measurement target component in the sample is determined from the measured amount of luminescence (note that the magnetic carrier particles carrying only the competing substance do not shine). In the competitive method 2, as in the competitive method 1, the amount of luminescence decreases as the measurement target component in the sample increases.
以上説明した様に、本実施形態の免疫測定方法では、第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と、競合物質のみが担持された磁性担体粒子の懸濁された液が入れられたセル10の側面に、液面の高さと同じ高さの第1の磁石104Aを配置し、液の上下方向の全ての部分に渡って第1の磁石104Aの磁力を作用させるので、液中の第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と、競合物質のみが担持された磁性担体粒子に対して大きな磁力を作用させて集磁することができ、免疫複合体が担持された磁性担体粒子の回収効率を高めることができる。
また、検出試薬を吐出した後の液面の高さを、攪拌時に、セル10内面に集められた第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と、競合物質のみが担持された磁性担体粒子全体に検出試薬を接触させることができる高さに設定するので、該第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子と、競合物質のみが担持された磁性担体粒子をセル10の内面に残存させることなく、検出試薬中に全て分散させることができ、検体中の測定対象成分の測定を正確に行うことが可能となる。As described above, in the immunoassay method of the present embodiment, a suspension of magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex and magnetic carrier particles carrying only the competitor is placed. Since the first magnet 104A having the same height as the liquid level is arranged on the side surface of the cell 10 and the magnetic force of the first magnet 104A acts on all the parts in the vertical direction of the liquid, A magnetic carrier capable of collecting a magnetic force by applying a large magnetic force to a magnetic carrier particle carrying a fifth immune complex and a magnetic carrier particle carrying only a competitive substance. Particle recovery efficiency can be increased.
Further, the height of the liquid level after the detection reagent is discharged is set to the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex collected on the inner surface of the cell 10 during stirring, and the magnetic carrier carrying only the competing substance. Since the height is set such that the detection reagent can be brought into contact with the entire particle, the magnetic carrier particle carrying the fifth immune complex and the magnetic carrier particle carrying only the competitive substance are placed on the inner surface of the cell 10. All of the components can be dispersed in the detection reagent without remaining, and the measurement target component in the sample can be accurately measured.
なお、B/F分離をする際(即ち、磁性担体粒子の洗浄)には、セル10に洗浄液を添加してセル10の側面から磁石(104A〜F)を離脱させるか、セル10の側面から磁石を離脱させてセル10に洗浄液を添加するか、またはセル10に洗浄液を添加しながらセル10の側面から磁石を離脱させれば良く、何れかを行えば良い。 When performing B / F separation (that is, cleaning of the magnetic carrier particles), a cleaning solution is added to the cell 10 to separate the magnets (104A to 104F) from the side surface of the cell 10, or from the side surface of the cell 10. Either the magnet is detached and the cleaning liquid is added to the cell 10, or the magnet may be detached from the side surface of the cell 10 while adding the cleaning liquid to the cell 10.
本実施形態の第1B/Fユニット22Aにおいても、第1の実施形態と同様に、第1の磁石104A〜第6の磁石104Fの高さが隣接する同士で全て異なり、かつ第1の磁石104Aから第6の磁石104Fへ向けて段々に低くなっていたが、最後の第6の磁石104Fの高さが一番低くなっていれば良く、複数の磁石の中で、互いに隣接する磁石同士で同じ高さとなっている部分があっても良い。 Also in the first B / F unit 22A of the present embodiment, as in the first embodiment, the heights of the first magnet 104A to the sixth magnet 104F are all different between adjacent ones, and the first magnet 104A. From the first to the sixth magnet 104F, the height of the last sixth magnet 104F only needs to be the lowest. Among the plurality of magnets, the magnets adjacent to each other There may be parts with the same height.
[その他の実施形態]
以上、本発明の実施形態について記述したが、本発明は上記の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において種々なる態様で実施し得ることは言うまでもない。[Other Embodiments]
As mentioned above, although embodiment of this invention was described, this invention is not limited to said embodiment at all, and it cannot be overemphasized that it can implement with a various aspect in the range which does not deviate from the summary of this invention.
上記実施形態では、第1の磁石104Aが一対設けられていたが、第1の磁石104Aは1個でも良い。 In the embodiment described above, a pair of the first magnets 104A is provided, but the number of the first magnets 104A may be one.
上記実施形態では、第2の磁石104B〜第6の磁石104Fが、環状溝98を挟んで径方向内側と外側とに環状溝98の周方向に沿って交互に配置されていたが、検体中の測定対象成分を正確に測定できる限りでは、第2の磁石104B〜第6の磁石104Fの配置は特に制限されず、第2の磁石104B〜第6の磁石104Fを環状溝98の径方向内側のみ、または径方向外側のみに配置しても良い。 In the above embodiment, the second magnet 104B to the sixth magnet 104F are alternately arranged along the circumferential direction of the annular groove 98 on the radially inner side and the outer side with the annular groove 98 interposed therebetween. As long as the measurement target component can be accurately measured, the arrangement of the second magnet 104B to the sixth magnet 104F is not particularly limited, and the second magnet 104B to the sixth magnet 104F are arranged radially inward of the annular groove 98. Or only on the outside in the radial direction.
環状溝98に沿って配置する磁石の数は上記実施形態のものに限らず、上記実施形態よりも多くても、少なくても良い。 The number of magnets arranged along the annular groove 98 is not limited to that of the above embodiment, and may be more or less than that of the above embodiment.
上記実施形態では、第1の磁石104A〜第6の磁石104Fの各々の高さが異なっていたが、第1の磁石104Aから第6の磁石104Fに向けて高さが低くなれば良く、隣接する同士で同じ高さの磁石があっても良い。 In the above-described embodiment, the heights of the first magnet 104A to the sixth magnet 104F are different from each other, but it is sufficient that the height decreases from the first magnet 104A to the sixth magnet 104F. There may be magnets of the same height.
上記実施形態では、第1の磁石104A〜第6の磁石104F、磁石106R、磁石106Lが永久磁石であったが、電磁石であっても良い。 In the above embodiment, the first magnet 104A to the sixth magnet 104F, the magnet 106R, and the magnet 106L are permanent magnets, but may be electromagnets.
上記実施形態では、第1の磁石104A〜第6の磁石104Fが固定され、ターンテーブル84を回転させてセル10を移動していたが、セル10を固定し、第1の磁石104A〜第6の磁石104Fを移動させても良い(この場合、ターンテーブル84を固定し、ベース板78の方を回転させることになる。)。この場合でも、セル10内面に集める第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子の高さを低くすることができる。 In the above embodiment, the first magnet 104A to the sixth magnet 104F are fixed and the cell 10 is moved by rotating the turntable 84. However, the cell 10 is fixed, and the first magnet 104A to the sixth magnet 104F. The magnet 104F may be moved (in this case, the turntable 84 is fixed and the base plate 78 is rotated). Even in this case, the height of the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected on the inner surface of the cell 10 can be reduced.
上記実施形態では、免疫測定装置200を、サンドイッチ法、及び競合法に基づく免疫測定法に用いたが、本発明はこれに限らず、他の免疫測定法(例えば、抗体の代わりにアプタマー等を用いる方法)に用いることもできる。 In the above embodiment, the immunoassay apparatus 200 is used for the immunoassay based on the sandwich method and the competition method. However, the present invention is not limited to this, and other immunoassay methods (for example, aptamers or the like instead of antibodies) Can also be used.
2014年9月19日に出願された日本国特許出願2014−191698号の開示は、その全体が参照により本明細書に取り込まれる。
本明細書に記載されたすべての文献、特許出願、及び技術規格は、個々の文献、特許出願、及び技術規格が参照により取り込まれることが具体的かつ個々に記された場合と同程度に、本明細書中に参照により取り込まれる。The disclosure of Japanese Patent Application No. 2014-191698 filed on September 19, 2014 is incorporated herein by reference in its entirety.
All references, patent applications, and technical standards mentioned in this specification are to the same extent as if each reference, patent application, and technical standard were specifically and individually stated to be incorporated by reference, Incorporated herein by reference.
10 セル(反応容器)
22A 第1B/Fユニット(洗浄装置)
44A B/Fノズル
84 ターンテーブル
88 孔(装填部)
92 モータ(駆動装置)
104A 第1の磁石(第1番目の磁石)
104B〜104F 第2の磁石〜第6の磁石
104F 第n番目の磁石
200 免疫測定装置10 cells (reaction vessel)
22A 1B / F unit (cleaning device)
44A B / F nozzle 84 Turntable 88 Hole (loading part)
92 Motor (drive device)
104A First magnet (first magnet)
104B to 104F Second magnet to sixth magnet 104F nth magnet 200 Immunoassay device
Claims (33)
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): Add a sample, a reagent containing a first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles to the reaction container, or bind to the component to be measured in the sample. Adding a reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody;
A step of performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the first antibody and the measurement target component.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a height lower than that of the magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel so that the first immune complex is supported. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。 After step (5), further characterized by performing the following steps, a cleaning method of the magnetic carrier particles of claim 1.
Step (6): A step of sequentially repeating steps (4) and (5) once or a plurality of times.
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試
薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): A reagent, a reagent containing a first antibody that binds to a measurement target component in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the reaction container, or the sample and the measurement target component in the sample Adding a reagent comprising magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to
A step of performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the first antibody and the measurement target component.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the first immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (6): A step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (2). .
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に、前記測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(5):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合
体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(6):分離された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(7):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(8):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): A reagent, a reagent containing a first antibody that binds to a measurement target component in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the reaction container, or the sample and the measurement target component in the sample Adding a reagent comprising magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to
A step of performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the first antibody and the measurement target component.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): A reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured is added to a reaction container, an antigen-antibody reaction is performed in the reaction container, and the first antibody, the component to be measured, and the first A step of obtaining a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a second immune complex comprising two antibodies.
Step (5): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (6): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated second immune complex.
Step (7): Add a cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove a magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add a washing solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (8): A magnet having a lower height than the magnet when the magnetic carrier particles were collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the second immune complex is supported. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
工程(9):工程(7)及び(8)を、1回または複数回順次繰り返す工程。 The method for washing magnetic carrier particles according to claim 7 , wherein the following step is further performed after the step (8).
Step (9): A step of sequentially repeating steps (7) and (8) once or a plurality of times.
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第1の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された前記第1の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に、前記測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(5):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(6):分離された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(7):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(8):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(9):工程(7)及び(8)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(5)における磁石の高さよりも低い工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): A reagent, a reagent containing a first antibody that binds to a measurement target component in the sample, and a reagent containing magnetic carrier particles are added to the reaction container, or the sample and the measurement target component in the sample Adding a reagent comprising magnetic carrier particles carrying a first antibody that binds to
A step of performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying the first immune complex composed of the first antibody and the measurement target component.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the first immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the first immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated first immune complex.
Step (4): A reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured is added to a reaction container, an antigen-antibody reaction is performed in the reaction container, and the first antibody, the component to be measured, and the first A step of obtaining a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a second immune complex comprising two antibodies.
Step (5): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (6): A step of removing a solution containing a substance other than the magnetic carrier particles carrying the separated second immune complex.
Step (7): Add a cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove a magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add a washing solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (8): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or a low height are brought relatively close to the side surface of the reaction vessel, so that the second immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (9): A step in which steps (7) and (8) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (5). .
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬と、検体中の測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬と、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): In a reaction container, a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample, a reagent that contains magnetic carrier particles, and a second antibody that binds to the component to be measured in the sample. A reagent containing a sample, a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured. ,
Performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a second immune complex composed of the first antibody, the measurement target component, and the second antibody.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the second immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a lower height than that of the magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, and the second immune complex is supported. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。 The method for washing magnetic carrier particles according to claim 14 , wherein the following step is further performed after the step (5).
Step (6): A step of sequentially repeating steps (4) and (5) once or a plurality of times.
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬と、検体中の測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加するか、または検体と、検体中の測定対象成分に結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬と、測定対象成分に結合する第2抗体を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体、前記測定対象成分、及び、前記第2抗体からなる第2の免疫複合体を担持する磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第2の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): In a reaction container, a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured in the sample, a reagent that contains magnetic carrier particles, and a second antibody that binds to the component to be measured in the sample. A reagent containing a sample, a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to the component to be measured in the sample, and a reagent containing a second antibody that binds to the component to be measured. ,
Performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a second immune complex composed of the first antibody, the measurement target component, and the second antibody.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the second immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel, and separating the magnetic carrier particles carrying the second immune complex collected by the magnet from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the second immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, so that the second immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (6): A step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (2). .
工程(1):反応容器に、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、
または、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第3の免疫複合体、及び、前記第1抗体と前記標識化競合物質とからなる第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): Reagent containing a specimen, a reagent containing a labeled competitor substance formed by binding a label to a competitor substance, and a first antibody that binds to the component to be measured and the labeled competitor substance in a reaction container And adding a reagent containing magnetic carrier particles,
Alternatively, a reagent comprising a sample, a reagent containing a labeled competitor obtained by binding a label to the competitor, and a magnetic carrier particle carrying a first antibody that binds to the component to be measured and the labeled competitor Add
A fourth immune complex comprising the first antibody and the labeled competing substance, and a third immune complex comprising an antigen-antibody reaction in a reaction container and comprising the first antibody and the measurement target component; A step of obtaining a reaction liquid containing magnetic carrier particles on which is supported.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the third immunization The third immune complex, the fourth immune complex and the fourth immune complex, wherein the magnetic carrier particles carrying the complex and the fourth immune complex are collected on the inner surface of the reaction vessel and collected by a magnet. A step of separating the magnetic carrier particles carrying the immune complex from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a lower height than the magnet when the magnetic carrier particles are magnetized immediately before is placed close to the side surface of the reaction vessel, the third immune complex, and A step of collecting the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex on the inner surface of the reaction vessel, and then removing the washing liquid from the reaction vessel.
磁性担体粒子の洗浄方法。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。 The method for washing magnetic carrier particles according to claim 20 , wherein the following step is further performed after the step (5).
Step (6): A step of sequentially repeating steps (4) and (5) once or a plurality of times.
工程(1):反応容器に、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、競合物質に標識が結合してなる標識化競合物質を含む試薬と、前記測定対象成分と前記標識化競合物質とに結合する第1抗体が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記第1抗体と前記測定対象成分とからなる第3の免疫複合体、及び、前記第1抗体と前記標識化競合物質とからなる第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第3の免疫複合体、及び、前記第4の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): a reagent containing a specimen, a labeled competitive substance formed by binding a label to a competitive substance, and a first antibody that binds to the measurement target component and the labeled competitive substance in a reaction container And a reagent containing magnetic carrier particles, or a specimen, a reagent containing a labeled competitive substance formed by binding a label to the competitive substance, and the measurement target component and the labeled competitive substance are bound to each other. Adding a reagent containing magnetic carrier particles carrying the first antibody;
A fourth immune complex comprising the first antibody and the labeled competing substance, and a third immune complex comprising an antigen-antibody reaction in a reaction container and comprising the first antibody and the measurement target component; A step of obtaining a reaction liquid containing magnetic carrier particles on which is supported.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the third immunization The third immune complex, the fourth immune complex and the fourth immune complex, wherein the magnetic carrier particles carrying the complex and the fourth immune complex are collected on the inner surface of the reaction vessel and collected by a magnet. A step of separating the magnetic carrier particles carrying the immune complex from other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the third immune complex and the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): On the side surface of the reaction vessel, a magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or low height are relatively brought close to each other, the third immune complex, And, after collecting the magnetic carrier particles carrying the fourth immune complex on the inner surface of the reaction vessel, removing the washing liquid from the reaction vessel.
Step (6): A step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (2). .
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、前記競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記競合物質と前記第1抗体とからなる第5の免疫
複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石よりも高さが低い磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): Whether to add a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured and a competitor in the sample, a reagent containing a competitor, and a reagent containing magnetic carrier particles to the reaction container Or, a reagent, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured and a competitor in the specimen, and a reagent containing magnetic carrier particles carrying the competitor,
Performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a fifth immune complex comprising the competitor and the first antibody.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the fifth immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet having a height lower than that of the magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before is relatively brought close to the side surface of the reaction vessel, thereby supporting the fifth immune complex. A step of collecting the magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程。 27. The method for washing magnetic carrier particles according to claim 26 , further comprising the following step after step (5).
Step (6): A step of sequentially repeating steps (4) and (5) once or a plurality of times.
工程(1):反応容器に、検体と、検体中の測定対象成分と競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、競合物質を含む試薬と、磁性担体粒子を含む試薬を添加するか、または、検体と、検体中の測定対象成分と前記競合物質とに結合する第1抗体を含む試薬と、前記競合物質が担持された磁性担体粒子を含む試薬を添加し、
反応容器中で抗原抗体反応を行い、前記競合物質と前記第1抗体とからなる第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を含有する反応液を得る工程。
工程(2):得られた反応液、又は、得られた反応液に洗浄液を添加して得られる懸濁液を収容する反応容器の側面に磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁し、磁石により集磁された前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子とそれ以外の物質とを分離する工程。
工程(3):分離された、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子以外の物質が含まれた溶液を除去する工程。
工程(4):反応容器に洗浄液を添加して反応容器の側面から磁石を離脱させるか、反応容器の側面から磁石を離脱させて反応容器に洗浄液を添加するか、または反応容器に洗浄液を添加しながら反応容器の側面から磁石を離脱させる工程。
工程(5):反応容器の側面に、直ぐ前に磁性担体粒子を集磁させたときの磁石と、高さが同じか又は低い磁石を相対的に近接させ、前記第5の免疫複合体が担持された磁性担体粒子を反応容器の内面に集磁した後、反応容器から洗浄液を除去する工程。
工程(6):工程(4)及び(5)を、1回または複数回順次繰り返す工程であって、最後の洗浄工程における磁石の高さが、工程(2)における磁石の高さよりも低い工程。 A method for washing magnetic carrier particles in a method for immunological measurement of a component to be measured in a specimen using magnetic carrier particles as a carrier, wherein the following steps are sequentially performed.
Step (1): Whether to add a sample, a reagent containing a first antibody that binds to a component to be measured and a competitor in the sample, a reagent containing a competitor, and a reagent containing magnetic carrier particles to the reaction container Or, a reagent, a reagent containing a first antibody that binds to the component to be measured in the specimen and the competitor, and a reagent containing magnetic carrier particles carrying the competitor,
Performing an antigen-antibody reaction in a reaction container to obtain a reaction solution containing magnetic carrier particles carrying a fifth immune complex comprising the competitor and the first antibody.
Step (2): A magnet is placed relatively close to the side surface of the reaction vessel containing the obtained reaction solution or a suspension obtained by adding a washing solution to the obtained reaction solution, and the fifth immunization Collecting the magnetic carrier particles carrying the complex on the inner surface of the reaction vessel and separating the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex collected by the magnet from the other substances.
Step (3): A step of removing the separated solution containing substances other than the magnetic carrier particles carrying the fifth immune complex.
Step (4): Add the cleaning solution to the reaction vessel and remove the magnet from the side of the reaction vessel, or remove the magnet from the side of the reaction vessel and add the cleaning solution to the reaction vessel, or add the cleaning solution to the reaction vessel While removing the magnet from the side of the reaction vessel.
Step (5): A magnet when the magnetic carrier particles are collected immediately before and a magnet having the same or a low height are brought relatively close to the side surface of the reaction vessel, so that the fifth immune complex is A step of collecting the supported magnetic carrier particles on the inner surface of the reaction vessel and then removing the cleaning liquid from the reaction vessel.
Step (6): A step in which steps (4) and (5) are sequentially repeated once or a plurality of times, and the height of the magnet in the last washing step is lower than the height of the magnet in step (2). .
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