JP6785779B2

JP6785779B2 - バレントニンを含む経皮治療システム並びにその医薬品としての使用

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Application number: JP2017541869A
Authority: JP
Inventors: ジャン−ベルナール・フルティラン; マリアンヌ・フルティラン
Original assignee: スール・ホセファ・メネンデス
Priority date: 2015-02-04
Filing date: 2016-02-04
Publication date: 2020-11-18
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Description

本発明は、活性成分として、バレントニン（valentonin 、VLT）と6-メトキシハルマラン（6-MH）の組み合わせを含有する接着性経皮治療システムに関する。

本発明は、具体的には、睡眠障害及び一次不眠症、うつ病、精神病、並びにパーキンソン病及びアルツハイマー病の治療に関する。

生理睡眠と麻酔睡眠の2種類の睡眠があることが想起されるべきである。EEGトレースによって認識される生理学的睡眠のみが体を修復するものである。

生理的睡眠は、特徴的なEEGトレースによって認識可能である。それは修復的である深い徐波の睡眠と、記憶のために重要であると思われる逆説睡眠（急速眼球運動またはレム睡眠とも呼ばれる）とを含む。

生理睡眠は、注意力のレベルが一定の閾値を下回ったときに起こり、意識の喪失を伴う。ヒト及び他の日周動物（diurnal animals）においては、正常状態（例えば、うつがない場合）で一日（nychthemeron）中に、この現象が起こるのは、睡眠状態のホルモン（本明細書では睡眠ホルモンとも呼ばれる）であるバレントニン（VLT）濃度は、覚醒状態のホルモン（本明細書では覚醒ホルモンとも呼ばれる）である6-メトキシハルマラン（6-MH）のものより高い場合である。6-MHを超えるVLTのこの普及（prevalence）は、季節にかかわらず夜間暗期（フランスでは一般に午後10時から午前6時）に存在する(Fourtillan JB, Brisson A.M., Gobin P., Fourtillan M., Ingrand I., Decourt J.Ph. and Girault J., Melatonin secretion occurs at a constant rate in both young and older men and women. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 280, E11-E22 (2001))。この休止期間中6-MHと比較して、VLTの普及は、これらの2つのホルモンの薬物動態特性に起因する。イヌにおいては、VLT及び6-MHの薬物動態パラメータを決定することが可能であった。

2つのホルモンの分布及び消去動態の特徴である主なパラメータの平均値（±標準偏差）を以下に示す：
バレントニン：
T_１/2z = 0.70 (± 0.17) 時間
MRT = 0.49 (± 0.16) 時間
V_dss = 40 (± 21) リットル
CL = 79.0 (± 19.9) リットル/時間。
6-メトキシハマラン:
T_１/2z = 2.27 (± 0.91) 時間
MRT = 1.31 (± 0.45) 時間
V_dss = 120 (± 51) リットル
CL = 89.19 (± 22.9) リットル/時間。

VLT及び6-MHの消去動態（T_１/2z及びCL）並びにそれらの分布動態（MRT及びV_dss）の両方の薬物動態パラメータ値は、ヒト及びイヌなどの他のすべての日周動物において同一である可能性が高い。

VLTが6-MHを超えて普及している期間中、睡眠はVLTによる5-HT_2Cセロトニン受容体のアロステリック活性化から生じる。さらに、夜間の睡眠中、VLTは、アロステリック調節によって、休止期間中の血圧及び心拍数を低下させる、中枢神経系のα₂-アドレナリン作動性受容体を活性化し、且つ筋弛緩に伴い、D1及び/またはD2ドーパミン受容体を活性化する。他の選択的アロステリック活性化は、夜間に起こる可能性が高い。

分泌期の終わりに、午前6時頃には、特に6-MHの除去がVLT（T_１/2z = 0.70時間）よりもはるかに遅い（T_１/2z = 2.27時間）ため、6-メトキシハルマラン濃度はバレントニンの濃度よりも急速に高くなる。VLTを超える6-MHの普及は、午前6時から午後10時の間の5-HT_2Cセロトニン受容体の遮断をもたらし、覚醒は、注意喚起（alertness）がそれぞれの個体に特有の特定の閾値を超える場合に起こる。5-HT_2Cセロトニン受容体、α₂-アドレナリン作動性受容体並びにD1及び/またはD2ドーパミン受容体を選択的に遮断することで、覚醒レベルを増加させ、したがって覚醒を確実にし、血圧及び心拍数を増加させ、筋肉の緊張を増加させることが可能となる。

人工または麻酔の睡眠は、自然または生理的な睡眠とはまったく異なる。そのEEGトレースは、主に身体の回復をもたらさない軽い速波の睡眠を含み、深い睡眠はほとんどない。患者において、前向性健忘症（anterograde amnesia）の副作用と相関する逆説的睡眠の割合の崩壊が観察される。

人工または麻酔の睡眠は、例えば、ベンゾジアゼピン（ジアゼパムなど）及び関連する薬物（ゾルピデム、ゾピクロン）によって誘発される。これらの化合物はすべて、以下の薬理学的特性を共有している：
・それらはその活性化が神経抑制効果を生じるGABA_A作動性（GABA_Aergic）受容体のアロステリック調節による活性化剤（activators）である。その結果、あたかも麻酔下であるかのように注意力が低下し、かつ
・同時に、それらは5-HT_2Cセロトニン受容体のセロトニンアンタゴニストである。それらは、6-メトキシハマラン、覚醒ホルモン（the waking hormone）、及びLSDのように受容体を遮断する。この作用の理由は簡単である：それらは化学構造において6-MHのファルマコフォア特徴を有する。

結果として、残念なことに、これらの化合物は2つの相反する薬理作用を有する：
・GABA_A作動性の刺激によって、良くない睡眠、即ち深い睡眠がほとんどなくなり、逆説的睡眠が崩壊する。そして、
・5-HT_2Cセロトニン受容体を遮断することにより、それらは覚醒ホルモンである6-MHとして作用し、生理的睡眠に拮抗する。したがって、それらは、抑うつ作用及び不安惹起作用を有し、このようにして、それらはGABA_A作動性作用の抗不安作用及び抗うつ薬の作用に拮抗する。

夜間の睡眠期間中（分泌が始まるときの午後10時と、分泌が終わるときの午前6時との間に）かつ季節にかかわらず、N-アセチルトランスフェラーゼによって促進される最初のセロトニンのアセチル化の後に松果腺によって産生されるメラトニンは、それが産生されるときに、N-アセチルトランスフェラーゼによる酵素的アセチル化の第2段階を経り、2つのβ-カルボリン誘導体、即ち6-メトキシハルマラン（6-MH）と呼ばれる6-メトキシ-1-メチル-3,4-ジヒドロ-β-カルボリン、及びバレントニン（VLT）と呼ばれる2-アセチル-6-メトキシ-1-メチレン-3,4-ジヒドロ-β-カルボリンを、連続的に与えることが以前発見されている（ＦＲ2898358）。

したがって、睡眠-覚醒システムは、メラトニン（MLT）、バレントニン（VLT）及び6-メトキシハルマラン（6-MH）の3つのホルモンによって機能する。メラトニンはVLT及び6-MHの前駆体であり、マーカーでもある。従って、患者の血漿MLT濃度を測定することによって、睡眠-覚醒システムの状態を知ることができる。 12人の若いボランティア被験者及び12人のより年上のボランティア被験者における松果腺分泌の薬物動態学的研究(Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 280, E11-E22 (2001))は、被験者によって、MLTの分泌速度及びそれに従う分泌されたMLTの量における1から10の比率で高い変動性を示した。この高い変動性は、間違いなく、一次不眠症、睡眠障害、反応性及び内因性うつ病、神経変性疾患（パーキンソン病、アルツハイマー病）、及び精神病などの、ヒトにおいて観察される多くの神経障害の原因である。

うつ病、精神病状態、パーキンソン病及びアルツハイマー病の治療は、この同じ睡眠-覚醒システムの理解が含まれていなければならない。これらの障害のメカニズム及びそれらの新しい治療の作用モードについての説明は、生理学的睡眠のメカニズムの知識に基づくものではない。実際、過剰のドーパミンが精神病の原因であると考えられていたのに対し、過剰の覚醒ホルモンである6-メトキシハルマランが精神病状態の原因であることが判明した。うつ病、少なくとも反応性うつ病は、睡眠-覚醒システムを強化することによって常に軽減されるため、治癒不可能な状態ではない。パーキンソン病及びアルツハイマー病などの神経変性疾患は、実際には、睡眠-覚醒システムの定量的不足によって引き起こされる。

したがって、これらの状態は、間違いなく予防され、かつ進行において止められる可能性がある。アルツハイマー病では、睡眠及び認知は、バレントロン作用薬及び6-メトキシハマランを投与することによって回復することができた。

したがって、[(VLT)-(6-MH)] システムは、一日（nychthemeron）の24時間の間に、身体の精神及び栄養状態を調節することによって不可欠な役割を果たす。

このシステムの調和のとれた機能は、下記のことに直接関係している：
・睡眠ホルモン（VLT）及び覚醒ホルモン（6-MH）の化学構造は、休息期間及び活動期間中に異なって機能する器官及び生理学的プロセスの調節に関与する受容体を、夜間休息期間中に刺激（VLT）すること、または選択的に遮断する（6-MH）ことを可能にする；
・バレントニン及び6-メトキシハルマランの薬物動態学的特性は、午後10時から午前6時までの睡眠期間の8時間の間におけるVLTの普及、及び午前6時から午後10時までの覚醒または活動期間中における6-MHの普及を保証することを可能にし;
・松果腺による2つのホルモンの分泌の8時間の間に、血流への一定速度の注入に対応する、VLT及び6-MHの濃度の変化。

したがって、本出願人は、各患者のプロファイルによる体の機能を調節する目的で6-MHとの組み合わせで、VLTに基づくホルモン補充療法を実施することを模索した。これは、午後10時から午前6時（好ましくは午前1時から）の間に採取された血液サンプル中の血漿メラトニン濃度を測定する方法によって確立することができる。

ほとんどの内因性化合物と同様に、バレントニンは経口投与することができないため、本発明は、[（（VLT] -（6-MH）] システムの定量的不足または過剰に起因する神経学的障害の治療において、有利には、単一またはデュアルコンパートメントパッチの形態の上記ホルモンの一方または両方の経皮治療システムに関する。

従って、本発明は、それ自体既知の方法であるかもしれないが、単一若しくはデュアルコンパートメントパッチ或いはマトリックスパッチの形態で、バレントニン（VLT）と6-メトキシハルマン（6-MH）との組み合わせを活性成分として含有する経皮治療システムである。

好ましくは、本発明は、パッチの適用期間中、好ましくは約8〜10時間において、バレントニン（VLT）及び6-メトキシハルマラン（6-MH）の負荷(load)の組み合わせを血流に送達して[VLT]/[6-MH]の質量比が4であることができるように、前記負荷の組み合わせを含有する接着性経皮治療システム（an adhesive transdermal therapeutic system）に関する。

パッチの実際の実施形態は、パッチの適用期間、即ち、約8〜10時間の間において、バレントニン及び6-メトキシハルマランの制御された及び拡張された全身投与を得るために、被験者に関する当業者の一般的な知識に基づいて、当業者によって決定される。

一般に、被験者に関する当業者の一般的な知識を利用することにより、当業者は2つの活性成分を2つの独立したパッチに統合し、2つの成分を同じマトリックス、または重なり合ったマトリックス、または同じ保護膜上に隣接して組み立てられるマトリックスのいずれかにおいて混合することができる。もちろん、バレントニン及び6-メトキシハルマランは、別の型の2つの独立したリザーバーパッチにも存在し得る。

一般に、経皮的治療システムまたはパッチにおける2つの主なクラスが存在することを想起してよく、その両方がどちらも次のもので構成されている：
・不透過性の外側層、
・活性成分を含むコンパートメント、
・活性成分の放出を制御するための手段、
・皮膚の適用領域にパッチを維持するための接着剤成分、及び
・パッチを適用する直前に除去されるように設計された保護サポート。

したがって、本発明によるパッチは、リザーバ型またはマトリックス型のいずれかの構造を有するように設計してよい。

リザーバ型パッチは、活性成分の放出速度を調整するために使用される半透性ポリマー膜によって皮膚と接触するポリマーマトリックス中の溶液または懸濁液における活性成分を含む1つまたは2つの別個のリザーバを含むであろう。

マトリックス型パッチは、その内部に活性成分が適切な割合で溶解または分散されるポリマー性塊が含まれる。これらの活性成分は、前記マトリックスのポリマー鎖を通じた拡散を介して放出される。

このタイプのパッチの特定の実施形態によれば、接着剤は、マトリックスの剥離面の全体を覆い、その一体部分を形成する。これは、患者の皮膚に快適な適用のために薄くかつ好適な可撓性のパッチを製造することを可能とする簡略化される製造プロセスに起因する、当業者によく知られている活性接着型パッチである。

本発明の有利な実施形態では、バレントニン及び6-メトキシハマランは、それらが同じマトリックスに一緒に混合されてパッケージされている場合、安定性の問題または活性成分の相対的な拡散フラックスを変化させることができる相互作用の他のリスクを除くように、別個のリザーバ内に配置されている。

本発明のデュアルコンパートメントパッチの特定の実施形態では、パッチの各コンパートメントは、2つの活性成分のそれぞれを単離して含有するポリマーマトリックスを含有してもよい。適切な用量で血流中にこれらの活性成分を十分に注入するために、当業者は以下のパラメータを容易に設定することができる：
・パッチの各コンパートメントの面積と体積の比;
・親水性添加剤の可能な添加;
・吸収促進剤の可能な添加;そして、
・より一般的には、バレントニン及び6-メトキシハマランのフラックスを制御するための当業者に周知の任意のタイプの添加剤。

それ自体公知の方法において、このようなパッチは、パッチが製造された時からその貯蔵寿命の終わりまで、皮膚に塗布される粘着面を保存するように設計された剥離可能な保護フィルムを含む。それ自体公知の方法において、当業者は例えばポリエステルフィルムを使用し、その1つの面を抗粘着性シリコーンで処理してもよい。

バレントニン及び6-メトキシハルマランを含有する接着性ポリマーマトリックスは、ポリマーまたはコポリマータイプ、例えばポリイソブチレンまたはポリアクリルタイプ、エチレン - 酢酸ビニルコポリマータイプ、またはシリコーンポリマータイプであってもよい。

Duro-Tak（登録商標）タイプ（Henkelによって市販されている）などの自己硬化性アクリル樹脂は、従来の方法で使用される。

上記のように、吸収促進剤はそれ自体公知の方法で使用することができる。このような添加剤の例には、ジエチレングリコールのモノアルキルエーテル、飽和ポリグリコール化グリセリド、1,2-プロパンジオール及びエタノールが含まれる。

バレントニン及び6-メトキシハルマランは親油性であるため、天然または合成ポリマー、例えばグアーガム、キサンタンガムまたはポリビニルピロリドンのような親水性添加剤をポリマーマトリックス中に導入することが必要であることも証明され得る。

本発明の特定の実施形態によれば、本発明の主題である活性成分を含有する接着剤層は、1種以上のアルキル（メタ）アクリレート系コポリマー、特にエチルメタクリレート、n-オクチルメタクリレート及びドデシルメタクリレートを含む。このアルキル（メタ）アクリレートコポリマー、特にモノマーアクリロニトリル、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニルまたは1-ビニル-2-ピロリドンに他のモノマーを加えてもよい。

パッチのマトリックス内の活性成分の安定性を確実にするために、特に保存中の酸化による分解の危険性を回避するために、α-トコフェロール及びパルミチン酸アスコルビルなどの抗酸化剤を少量有利にも添加する。

本発明において、本出願人は、単独または6-MHとの組み合わせでのバレンチノン投与ための主な指標が2つの主なカテゴリーに分類され得ることを決定することができた：
A） [(VLT)-(6-MH)] システムの定量的不足に起因する状態：
-一次不眠症;
-睡眠障害;
-内因性及び反応性うつ病;及び、
-神経変性疾患（パーキンソン病、アルツハイマー病など）。

[(VLT)-(6-MH)] システムの不足に起因する状態は、選択された投与経路に生物学的に利用可能なバレントニンと6-メトキシハルマランとの組み合わせで治療できることは明らかである。

バレントニン及び6-MHの薬物動態学的特性、特に、選択された投与経路に対するそれらの生物学的利用能は、2つのホルモンを含むホルモン補充療法（hormone replacement therapy）の問題であることを考えれば、[(VLT)-(6-MH)] システムの2つのホルモンの血漿中濃度の24時間における変化の曲線を可能な限り近く再現することを可能にしなければならない。

2つのホルモン（VLT及び6-MH）からなるホルモン補充療法の場合、その2つのホルモンのうちの1つであるバレントニンは、酸性胃液中で完全に加水分解されるため不安定であり、本発明で選択される投与経路は経皮経路であり、その理由は下記である：
1）静脈内経路（intravenous route）（あまりにも制限的であり、その理由は、2つのホルモンの血漿レベルの変化の生理学的曲線を再現するには、午後10時から午前6時までの8時間の夜間休息の間、ホルモン混合物の静脈内灌流が必要である）と同様に、経皮経路により、単一の経皮パッチの形態で2つの天然ホルモン（バレントニン及び6-メトキシハルマラン）を同時に投与することが可能になる。 [(VLT)-(6-MH)] システムの定量的不足に起因する状態の治療のために、2つのホルモンの松果腺分泌期である午後10時から午前6時までの8時間の間にパッチを適当な割合で適用することが想定され得る。
2）さらに、2つの別個のリザーバ（各ホルモンに1つのリザーバが対応する）を有するパッチの使用は、それらの生物学的利用能において互いに干渉することなく、かつ接触した2つの製品の組み合わせの不安定性を有せずに、2つのホルモンの放出を別々に制御することを可能にすべきである。

一次性不眠症及び類似の状態への適用の場合、メラトニンの松果腺分泌が低すぎるため、バレントニン（VLT）の分泌と並行して6-メトキシハルマラン（6-MH）との分泌が不十分であることが観察される。そのような場合、夜間に血漿中の [(VLT)-(6-MH)] システムの2つのホルモンのマーカーとしてのメラトニンのアッセイは、不足分を定量的に決定することを可能にし、結果としてその組み合わせにおいてバレントニン及び6-MHの投薬量を適応させる。

睡眠障害、うつ病、神経変性疾患（パーキンソン病、アルツハイマー病）などの他の指標については、バレントニンと6-メトキシハルマランの組み合わせを投与する必要もあるようである。これらの病理は、VLT /6-MHシステムの定量的不足に対応する。この不足の大きさは条件によって異なる。これは、 [(VLT)-(6-MH)] システムのマーカーとして、午前6時前の定常状態でメラトニンをアッセイすることによって評価することができる。

生理学的条件下で、 [(VLT)-(6-MH)] システムの2つのホルモン及びメラトニンは、午後10時から午前6時の間の8時間、松果腺によって血流に送達され、一定速度の静脈灌流として、即ち0次動態を有することを想起すべきである。血漿中の2つのホルモンの濃度の変化は、それらの薬物動態学的特性、及び特に終末半減期（T_１/2z）によって特徴付けられるそれらの排除動態に依存する。従って、松果腺によって各被験者について可変的に分泌される各ホルモン（VLT及び6-MH）について、血漿濃度の変化は、以下のことに依存する：
・各被験者に対する、及び定量的観点から、前記被験体の [(VLT)-(6-MH)] システムのレベルを反映する分泌速度。このデータは各対象に固有である。この個々のデータの値は、各患者が苦しむ神経障害によって変化する;及び、
・2つのホルモンの薬物動態学的特徴。バレントニン及び6-メトキシハルマランがそれぞれ0.70時間及び2.27時間に等しい半減期（T_１/2z）並びにそれぞれ5リットル/ kg及び15リットル/ kgに等しい分布のボリュームを有するヒト及びイヌなどの日周の全ての動物において、排泄及び分布の動力学は全く同じである可能性が高い。

したがって、患者で観察された状態のタイプ及びメラトニンのレベルにより、
[(VLT)-(6-MH)] システムの不足に起因する状態の治療のために、パッチの2つのリザーバ内に異なる用量のバレントニン及び6-メトキシハルマランを有することが予想され得る。

B）本発明はまた、過剰量の [(VLT)-(6-MH)] システム、特に精神病状態から生じる状態の治療にも及ぶ。

午前6時から午後10時の間の過剰の6-メトキシハルマランによる精神病の治療を、この期間中、バレントニンによる過剰の6-MHの置換によって、想定することができる。この治療法は一度も主張されていない。これは、バレントニンが単独で投与されるべきことについての指標である。

本発明の第1の態様によれば、接着性経皮治療システムは、バレントニン（VLT）を活性成分として含有する。

本発明の状況において、経皮的に投与された2つのホルモンの組み合わせにおけるバレントニン（VLT）及び6-メトキシハルマラン（6-MH）の用量が確立された。

最も一般的な神経障害（一次不眠症、睡眠障害、反応性及び内因性うつ病、パーキンソン病及びアルツハイマー病などの神経変性疾患）は、[(VLT)-(6-MH)] システムの量的不足に起因するものであり、それは復元する必要がある。

したがって、本発明は、 [(VLT)-(6-MH)] システムのホルモンの量的不足による状態の治療に関する。

24時間の昼夜周期サイクルの間に身体の精神的及び栄養状態の生理学的に、満足できる調節を調和よくかつ正確に確実とし維持するためには、午後10時（または患者が就寝したとき）と午前6時（または患者が起きたとき）の間に、2種のホルモンの松果腺分泌を再現できる形態で（VLT +6-MH）の組み合わせを投与することが不可欠である。これにより、以下の要件を遵守する必要がある：
１．生理的ホルモン、バレントニン及び6-メトキシハルマルンの投与であり、それらの合成代用物（synthetic substitutes）の投与ではない。確かに、化学的に異なる合成代用物は、休み期間の終わり（午前6時または起きる時）の瞬間および活動期間（午後10時、または就寝時）の間に各ホルモンの普及期間を変動させることを不可能にする異なる薬物動態特性を有する。この要件は、2つの天然ホルモン（VLT及び6-MH）に対する非常に正確で一致する薬物動態プロフィールを必要とする。これらの濃度の普及は、血漿中だけでなく、2つのホルモン（5-HT_2C, α₂, D₁及びD₂受容体など）の作用部位においても、2つの期間中に存在しなければならないため、一番重要である。
2.投与モードは、8時間（就寝時の午後10時から起きる時の午前6時までの間に）持続する2つのホルモンの一定の速度の注入を再現しなければならない。 8時間の腹腔内灌流はあまりにも制限的であり、VLTは酸性の胃媒体で完全に分解されるので、本発明においてそのような注入を提供することができる血管外経路は、就寝時から8時間適用され、起きる時には除去される二重リザーバのパッチの形態の経皮経路である。
3. パッチから体内に放出されなければならないVLT及び6-Mの生物学的利用可能な用量は、治療される患者で午前1時から午前6時の間に測定された血漿メラトニンレベルの値に基づいて、処理された各条件について計算することができる。

ヒトの男女両方の若年および高齢の12人の健康なボランティア被験者の2つのグループで実施された松果腺によるメラトニン分泌の動態の研究において、(Fourtillan JB, Brisson A.M., Gobin P., Fourtillan M., Ingrand I., Decourt J.Ph. and Girault J., Melatonin secretion occurs at a constant rate in both young and older men and women. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 280, E11-E22 (2001))、夜間（午後10時から午前6時の間）に分泌されるメラトニン（MLT）の総量を測定することが可能であった。 24人の被験者における大きな個体間変動（1〜10）が観察された。この研究は、平均体重64kgにおいて、8時間の夜間に分泌されたMLTの総量が平均28.7μgである、すなわち、MLTの全分泌物が0.44μg/ kgである（平均体重74kgの健康な若年成人男性において35.7μgである、すなわち0.48μg/ kgであり、および平均体重54kgの健康な若年成人女性において21.6μgであり、すなわち0.40μg/ kgである）ことを示している。さらに、これらの12人の若年被験者において、夜間に分泌されるMLTの総量は、午前1時から19〜93.7 pg / mlの範囲で観察される最大血漿濃度に対応する10〜60μgで変動し、平均値は54.5pg / mlである。 12人の高齢の被験者では、午前1時から観察された最大血漿濃度は9.6〜124.7 pg / mlであり、平均値は45.6 pg / mlであった。一人の高齢者では最大上限値（124.7pg / ml）が観察されるものの、平均して、高齢の人では最大血漿MLT濃度がより低い。

この研究は、男女両方の健康な若年成人被験者において、夜間（平均持続8時間、季節にかかわらず）松果腺によって分泌されるメラトニンの平均総量を約30μgすなわち0.5μg/ kgに特定することを可能とする。この生物学的パラメータには、非常に大きな個体間変動があることに留意すべきである。実際、この分泌物は、午前1時から観察される最大血漿濃度の範囲19〜93.7pg / mlに対応する12人の健常若年成人ボランティア被験者（6人の男性、6人の女性）のサンプルにおいて、10〜60μgで変動する。

患者の夜間の松果腺MLT分泌を測定することは不可能であるが、若年者及び高齢者で実施されたこの研究では、24人の被験者において、午前1時以降に観察される最大血漿メラトニン濃度が9.6〜124.7pg / mlであることが示される。これらのレベルは、松果腺MLT分泌物の全体を反映する。

この研究で覚えておくべき重要なことは、健康な若年成人被験者において、メラトニンの松果腺分泌総量が平均30μgで、10〜60μgの範囲で変動することである。これらの分泌物は、午前1時から観察される最大血漿濃度の範囲19〜94pg / mlに対応する。この松果腺分泌総量と最大血漿メラトニン濃度との間の相関を、この研究の高齢の被験者に対して推定することによって、以下の結論を述べることができる：
夜間（午後10時〜午前6時の連続8時間）の松果腺による全メラトニン分泌は、5μgから100μgまで変化する。
・午前1時以降に観察される血漿中の最大メラトニン濃度は、この分泌を反映している。それらは、メラトニンの50pg / mlに近い平均値付近で、10〜125pgの間で変化する。
・患者の午前1時以降の血漿メラトニン濃度の測定は、松果腺のMLTの分泌の大きさ、及び、その結果として患者の[(VLT)-(6-MH)] システムの状態を知ることを可能とする。なぜならば、MLTは2つのホルモンであるバレントニンと6-メトキシハルマランの生体前駆体であるためである。

3.1 [(VLT)-(6-MH)] システムの不足に起因するメラトニン分泌と神経障害との間の相関。

技術的理由で、関連すると思われる様々な神経学的障害におけるメラトニンの松果腺分泌の大きさに関するデータの科学文献が存在しないにもかかわらず、松果腺MLT分泌とこれらの障害との間の相関を確立することは可能である。私たちがちょうど示したように、MLTの松果腺分泌を、患者の最大血漿メラトニン濃度を午前1時からアッセイすることによって評価することができる。以下の関係を述べることができる：
・一次不眠症及びパーキンソン病などの神経変性疾患において、5μg未満の松果腺MLT分泌に対応する、10 pg / ml未満の最大血漿MLT濃度が観察される。アルツハイマー病の特定の症例では、実施された非常に少数の研究は、MLTアッセイ技術の検出限界以下の生物学的液体中のMLT濃度を有するMLTの松果腺分泌の崩壊を示す;
・5μg〜25μgの松果腺MLT分泌に対応する、10 pg/ml〜50μg/ mlの間の最大血漿MLT濃度が、睡眠障害並びに内因性及び反応性うつ病において観察される。

したがって、MLTの松果腺分泌の大きさ、及びその結果として [(VLT)-(6-MH)] システムの2つのホルモンの松果腺分泌の大きさを反映する最大血漿MLT濃度値により、神経学的障害の臨床的診断を補い、及び経皮的に投与されなければならない（VLT +6-MH）の組み合わせにおけるホルモンの用量を確立するための基礎として役立たせることができる。

本発明はまた、午後10時から、好ましくは午前1時から、午前6時までの間採取された血液試料中の血漿メラトニン（MLT）濃度をアッセイすることに関与する神経学的障害の臨床診断方法に関する。

本発明によるこの診断方法は、さらに液体クロマトグラフィーを質量分析法とカップリングさせる（HPLC-MS / MS）ことによって実施されることを特徴とする。このアッセイ法の例示的な実施態様を以下に示す。 HPLC-MS / MSによる例示的なメラトニンアッセイ。

化学薬品
メラトニンはCerillantによって合成され、Promochem（Molsheim,France）から購入され、内部標準D4-メラトニンはCDN同位体によって合成され、C.I.L. （Sainte-Foix-La-Grande, France）から購入された。Oasis（登録商標） HLB SPEカートリッジ（1 ml、30 mg）はWaters(Milford, MA, USA)から購入された。 HPLC分析したメタノール、HPLC分析した水、分析した98〜100％ギ酸、超勾配等級のHPLC分析したアセトニトリル、HPLC分析した塩化メチレン、2N水酸化ナトリウム溶液及び酢酸ナトリウムはMerck AG（Darmstadt,Germany）から得られた。すべての溶媒は高純度であり、さらに精製することなく使用した。その後の試料の汚染を避けるために、3.5ml及び10mlの使い捨てガラス試験管及びテフロンストッパーを備えた10ml使い捨てガラス試験管をこの分析に使用した。

検量線
一次濃度1000 ng/μlを得るために、各純粋な参照化合物をメタノールに溶解することにより、メラトニン及び内部標準のストック溶液を調製した。これらの溶液は、使用するまで-20℃で保存した。分析のために調製した作業標準溶液を、メタノール中のストック溶液の適切な希釈によって得、使用するまで20℃以下で保存した。

内因性メラトニン濃度を確立するために、様々なセットの対照血漿を試験した。

9点検量線を、5pg/μlの内部標準溶液（200 pgのD₄-メラトニン）40μl及び1〜200pgの範囲の種々の量のメラトニンを薬物非含有ヒト血漿のアリコート（1ml）と負荷することによって、毎日調製した。1mlの対照血漿のみを内部標準溶液で負荷することにより同様の方法でブランク試料を調製した。

血漿試料からの抽出
固相抽出
全てのSPE研究を、Waters Oasis（登録商標）HLBカラム（1ml、30mg）を用いて行った。カラムを1mlのメタノール、次いで2mlの水で調整した。D₄-メラトニン溶液で上記のように強化された血漿（1ml）を3.5mlガラス試験管に入れ、1mlの水で希釈した。ボルテックスミキサーを用いて短時間攪拌した後、希釈した試料をカラムに負荷した。 1mlの水でカラムを洗浄した後、成分を1mlのメタノールで溶離した。試料を穏やかな窒素気流下で蒸発乾固させ、水中の0.002N水酸化ナトリウム1mlに溶解した。

液相抽出
ボルテックスミキサーを用いて短時間攪拌した後、塩化メチレン6mlを加えた。抽出手順は、交互攪拌機を用いて10分間かけて行った。次いで、試験管を4000rpmで10分間遠心分離した。上部の水層を完全に除去し、残りの有機相を10mlのガラス試験管に移し、穏やかな窒素気流下で40℃で蒸発乾固させた。乾燥残留物を200μlの水に再溶解し、注入前に+ 4℃で保存した。 75μlの一定量をLC-MS / MSシステムに注入した。

検証手続き
この検証手順では、3つの血漿検量線を作成し、同じアナリストによって同日に実施された。回帰パラメータを計算して、この技術の直線性および再現性を評価した。さらに、そのプロセスの1日の間および1日から次の日の精度および正確さを評価するために、別の3日に渡って様々な濃度（1,2,25および200 pg/ml）で再現性試験を行った。負荷された血漿試料を、2人の異なるオペレーターにより1週間にわたって分析し、各濃度について、相対標準偏差および平均パーセント誤差を計算した。

示された信頼水準で決定されなければならない定量限界（LOQ）は、代表的な対照サンプルで測定された平均シグナルよりも有意に高いシグナルを生じる最小の検出可能な濃度として定義されている。最初に、プロセスのLOQを計算するために、薬物を含まない5つの血漿サンプル、ブランクを用いて再現性試験を実施した。メラトニンの保持時間で観察された平均シグナル（Ybl）および関連する標準偏差（Sbl）を使用して、定量限界の理論値（Yth）を計算した。次に、この理論上の定量限界に近いメラトニン濃度を負荷した血漿試料の5つの複製物を用いて再現性試験を行った。シグナルの平均値（Yloq）を対照サンプルで得られた平均シグナル（Ybl）と統計的に比較した。分散の均質性を試験した後（p <0.05）、Student's t-testまたはWelch's testを使用して、Yloqが97.5％の確率でYblより有意に高いことを示した。

凍結したヒト血漿中のメラトニンの安定性を決定するために、作業溶液をヒト血漿ブランクバッチに加え、-20℃の凍結温度以下で保存した。 2および200 pg/mlのメラトニンを負荷した6つの血漿サンプルを抽出し、2回および3回の凍結 - 融解サイクルの前及び後に分析する。各サイクルの合間、試料は、試料の正常分析に使用されたものと同一の保存温度条件（約-20℃）で維持される。

検証期間中に血漿抽出物を繰り返し分析して、約+ 4℃で溶媒中における保存中の化合物の分解の可能性をチェックする。安定性の評価は、±15％（LOQ±20％を除く）以内でなければならない逆算濃度と許容可能なクロマトグラフピーク形状とに基づいている。

プロセスの全回収率を計算するために、血漿検量線（定量の下限から定量の上限まで）を調製し、分析する。同時に、2、25および200 pg/mlのメラトニンを負荷した6つのサンプルを抽出し、分析する。応答の平均値を計算し、かつ試料の処理終了のときと同等の濃度を有する純粋な標準物質とともに調製して負荷したブランク血漿抽出物（n = 6）で得られた値と比較する。内部標準の回収率も、サンプルを負荷するために使用される濃度で決定される。

LC-MS / MS分析
械器
HPLCシステムは、バイナリポンプ及びサーモスタット制御オートサンプラを備えたAgilent 1100シリーズシステムで構成されている。

LC-MS / MSシステムは、ターボイオンスプレー陽イオン化モード（Turbo IonSpray positive ionization mode）で操作する三連四重極タンデム質量分析計（API 4000、Applied Biosystems）から成っていた。このシステムをPEEKチューブの長さによってHPLCカラムの出口に連結した。

クロマトグラフィー条件
クロマトグラフィーを、C18カラム(3.5μm, 50 × 2.1mm ID, XBridg（登録商標）, Waters, Milford, MA, USA) で行った。移動相はアセトニトリル-5mM酢酸アンモニウム - ギ酸（25：75：0.01）であった。流速は0.2ml/分であった。

質量分析計の条件
質量分析計は、500℃下でターボイオンスプレー陽イオン化モードにおいて操作された。分析物および内部標準について前駆体イオン[M+H]⁺の生成物イオンへの遷移を用いることにより、選択された反応モニタリング（SRM）によってサンプルを分析した。反応モニタリングモード（RMM）においてモニタリングされたイオンは、メラトニンについてはm / z 233.18（前駆イオン：[M+H]⁺）〜174.10（プロダクトイオン）であり、D4-メラトニン（内部標準）については、m / z237.22（前駆イオン：[M+H]⁺）〜178.10（生成物イオン）であった。形成された生成イオンはフラグメント[NH-CO-CH₃]の損失によって得られる。
・イオン化電圧は+ 4.8kVに設定した。
・TISネブライザーガス（ガス1）を40に設定した。
・TISヒーターガス（ガス2）を50に設定した。
・ガスカーテンは12に設定された。
・衝突活性化解離（CAD）ガスは10に設定された。
・DP、EP、CEおよびCXP値は、それぞれ50,10,17および10に設定した。
・時間遅延は、各化合物について500msに設定した。

結果と考察
サンプルの前処理及び分析
複雑な生物学的液体中の非常に低い、フェムトグラムレベルの濃度で存在する化合物の定量分析は、毎日分析される大量の試料バッチを担当する分析者にとって莫大な課題である。第1に、血漿試料は、メラトニンの分析を妨害する内因性物質の大部分が存在しない状態でなくてはならない。

本発明者らは、固液抽出法とそれに続くアルカリ性水相中の塩化メチレンなどの高純度の溶媒を使用した液体 - 液体抽出法が、ほとんどの不純物を含まないきれいな残留物をもたらすことを観察した。抽出プロセスはかなりの時間を節約し、実験室は毎日100を超える追加の血漿サンプルを処理することができた。カラムの保護に非常に良い残留物を水に溶解する場合、短いクロマトグラフィー実行時間（4.5分）のおかげで、毎日多数の注入を処理することが可能になった。我々の分析条件を使用することによると、メラトニンおよびD4-メラトニンの保持時間は約2.3分であった。両方のクロマトグラフィーピークはガウス形状を有し、各分析物のベースラインにおけるピーク幅は30s未満であった。半分の高さにおけるピーク幅は約5sであった。質量範囲当たり500msの時間遅延は、システムの全非活動時間を考慮に入れて、各化合物の測定のための最小20のデータポイントをもたらした。

回収率
抽出効率は約80％であり、これらの結果はその後、HPLC-MS / MS確認手順中に確認された。

生物学的マトリックス抽出物および200pg/mlのメラトニンを負荷した未処理標準の反復分析後に得られた結果に基づいて計算した全回収率：

生物学的マトリックス抽出物および25pg/mlのメラトニンを負荷した未処理標準の反復分析後に得られた結果に基づいて計算した全回収率：

生物学的マトリックス抽出物および2pg/mlのメラトニンを負荷した未処理標準物質の反復分析後に得られた結果に基づいて計算した全回収率：

検量線の直線性
メラトニン/ D₄-メラトニンのピーク面積比を既知のメラトニン濃度の関数として追跡することにより同日に得られた3つの血漿検量線は、濃度範囲1〜200pg/mlにわたって直線（平均相関係数±SD = 0.9973±0.023）であった。回帰分析は、n = 3の測定について0.0035に等しい平均y切片値を起点近くで交差した（表1）。選択性および特異性試験における第3および第5セットの対照血漿サンプルにおいて、ブランク試料において観察された平均シグナルは、メラトニンの8.38および1.47pg/mlに相当した。この高レベルの内因性メラトニンのために、これらの対照血漿サンプルセットは、その後の確認手順においては使用されなかった。平均勾配および関連する標準偏差（0.0068±0.0001）に基づいて計算されたRSD値（1.96％）は、同じ日の間のこの技術の再現性を示す。 2人の異なる分析者によって1週間にわたり調製および実施された5つの検量線の回帰パラメータを使用することによって、日々の直線性および再現性を評価した。これらの検量線は、同じセットの対照血漿を用いて調製した。表2に示すように、勾配の平均値（0.0069±0.0001）は1日にわたる「直線性試験」に近く、回帰プロットに沿って5つの較正点の分散はほとんどなかった（表2）。

表1：1日にわたる「線形性試験」の間に得られた同日の経過における検量線のパラメータ

表2：1週間にわたって調製および実施された5つの血漿検量線の日ごとの直線性および再現性

精度と正確さ
内部標準として純粋な安定同位体類似体を使用することにより、変動性のすべての原因が大幅に減少した。3つの別々の日にわたって計算された様々な血漿再現性試験の相対標準偏差は15.2％未満であり、平均エラー率は-9.71％〜+ 4.61％の範囲であった（表3）。

表3.1：3つの別々の日にわたって計算したHPLC-MS / MSプロセスの同日にわたる精度と正確さ

表3.2： 3つの別々の日にわたって計算したHPLC-MS / MSプロセスの同日にわたる精度と正確さ

表3.3：3つの別々の日にわたって計算したHPLC-MS / MSプロセスの同日にわたる精度と正確さ

日々の再現性分析の結果は、同じ日の過程にわたって分析の間に得られたものと非常に類似していた：試験したメラトニン濃度（1〜200pg/ml）のRSD値は13.68％未満であり、平均パーセンテージ誤差は、-6.13〜+ 2.86％の範囲であった（表4）。

表4：再現性分析中に1週間にわたって計算されたHPLC-MS / MSプロセスの日々の精度と正確さ

定量化の限界
３を超える信号対雑音比は、有意な応答の基準として多くの著者によって依然として使用されている値である。残念ながら、たとえ電子雑音が日々比較的一定であっても、化学的背景雑音については必ずしも真であるとは限らず、それはある測定から次の測定に至るまで激しく異なることがある。これは主に、試料自体、溶媒、抽出物質、およびクロマトグラフシステムによるものである。これらの変動要因をすべて考慮に入れるために、我々は定量限界を統計学的に決定した。 5つの異なる対照試料のHPLC-MS / MS分析後に得られた結果に基づく理論LOQは、Yth = 0.25pg / mlに等しいと計算された。

ブランク試料中に内因性メラトニンが存在するため、1pg/mlより高い濃度で再現性分析を行った。 Student’s t-testを適用して、1pg/mlで行った再現性分析に基づいて計算したシグナルYLOQ±SD（1.069E-02±7.405E-04）の平均値が、5つのブランク試料（2.663E-03±2.760E-04）で観察されたもの（Ybl）とは有意に異なっていた。n = 8自由度の場合、t_cal=-22.5、標準偏差= 0.563E-03であった。帰無仮説のもとでの結果の確率は0.00に等しい。非常に小さいRSD（1.16％）および平均パーセンテージ誤差（-0.40％）のために、この濃度はもちろんプロセスの定量限界として検証された（表5）。

対照の血漿サンプルのHPLC-MS / MS分析の後、標準マスクロマトグラムを記録した。内因性メラトニンはこのサンプル中に0.25pg/ml未満の濃度で存在した。 1（LOQ）および200pg/mlのメラトニンを負荷した対照試料のマスクロマトグラムを得た。プロセスのLOQに対応する血漿抽出物を分析した場合、メラトニンの保持時間で測定されたシグナルはHPLC-MS / MSシステムに注入された約375fgに相当した。対照サンプルで測定した内因性メラトニンは、シグナルを生成する。 5つのブランク試料を用いて実施した再現性分析（RSD = 10.36％）の結果に示されるように、0.25pg/ml未満のメラトニン濃度を臨床試験中に高い精度と正確さで定量化することができることは明らかである。

表5：pg / mlレベルでLOQを決定するための検証手順

注射の再現性
注射ステップの再現性も1つの濃度（200pg/ml）で試験し、この試験の結果を表6に要約する。同一の血漿抽出物を繰り返し注射した場合（n = 100）、RSD値は1.0 ％未満であり、このプロセスがメラトニンの正確な分析に適していることが示された。さらに、200pg / mlのメラトニンを含有する血漿抽出物の注射後に分析されたブランク試料において記憶効果は観察されなかった。

表6：注射の再現性

・安定性試験
・凍結融解サイクル中の安定性
・この安定性試験の結果（表7及び8）は、凍結融解サイクルが約-20℃で保存されたヒト血漿試料中のメラトニンの安定性に影響を与えないことを明確に示した。

表7：

表8：凍結融解サイクル後のメラトニンの安定性の分析：3回の凍結 - 解凍サイクル後のメラトニンの生物学的マトリックスの測定の精度及びバイアス

血漿抽出物の安定性
表9に示した結果は、メラトニンの最初の注射後に注射バイアルを約+ 4℃で少なくとも24時間保存した場合、注射液中で試料抽出物が安定であったことを示している。シグナル強度の減少またはクロマトグラフィートレースの変更は観察されなかった。

表9：調製後の安定性。 2つの濃度（2及び200 pg/ml）でメラトニンを負荷したCQsをオートサンプラに保存し、再分析した（分析のための作業条件）

3.2 （午後10時と午前6時の間の）休止期間中に身体内VLT濃度の普及、そして午前6時（または起きる時）から午後10時までの活動期間中の6-MH濃度の普及を確実にするために、午後10時（または就寝時）から8時間で投与された組み合わせにおけるVLTと6-MHとの投与量の比の計算である。

午後10時（または就寝時）と午前6時（または起きる時）の間の休息期間中、体内のVLT濃度の普及を保証するために、そして起きる時と就寝時の間の活動期間中、体内の6-MH濃度の普及を保証するために、パッチの適用期間中、24時間（nychthemeron）において普及及びそれらの変動を確保する、VLT の生物学的利用可能な用量6-MHの生物学的利用可能な用量の比、を有しなければならないVLTおよび6-MHの投与量を体内に注射する必要がある。

40μgVLTの生物学的利用可能用量である、MLTの低松果腺分泌（MLTの5μg未満の分泌及び午前1時から10pg/ml未満の血漿MLT濃度）に対応する一次不眠症およびパーキンソン病などの神経変性疾患の治療に適すると我々に見える中央値の用量を設定することにより、休息と活動期間中上記2つのホルモンの普及及びその変動を確保するために共投与される6-MHの生物学的利用可能用量を計算することが可能である。

VLT（または6-MH）の血流への一定速度（ゼロ次薬物動態）注入の間、血漿VLT濃度は、排出速度が注入速度と等しくなるプラトーに達するまで徐々に増加する。結果として、入ってくるVLTは、出て行くVLTに等しく、血漿濃度は一定に保たれる。これが「プラトー」状態である。 8時間にわたって注入されるVLTの量が40μgに等しい場合、我々は、プラトーとして以下を書くことができる：

関係1：
VLTの注入速度=40μg/ 8時間= VLTの除去速度= CL × C_ss、

CL = (0.693 / T_１/2z) × V_dssで、CLが全クリアランス（または血漿クリアランス、1時間当たりのリットル（l / h）で表される）である関係；
V_dssはプラトー状態に対応する定常状態（ss）での分布量であり、それを超える場合に血漿VLT濃度はそれ以上増加しない（午前1時以降）、かつそれらの最大C_ss値においてプラトー状態（定常状態）に留まるという関係。

VLT（3mg / kg）及び6-MH（1mg / kg）の組み合わせの静脈内投与後、イヌで実施されたVLT及び6-MHの薬物動態学的研究により、以下に示す薬物動態パラメータ値を測定することができた。
VLT：
T_１/2z = 0.70時間
V_dss = 5リットル/体重kg、すなわち体重64kgのヒトでは320リットル。
6-MH：
T_１/2z = 2.27時間
V_dss = 15リットル/体重kg、すなわち体重が64kgのヒトでは960リットル。

薬物動態学的プロファイル、即ち薬物動態学的パラメータ値は、ヒト及びイヌにおいて同一であるため、すべての日周動物と同様に、イヌにおいて観察されるPKパラメータ値をヒトに推定することが可能である。

休止期間および活動期間中の2つのホルモンの濃度の普及および変動は、血液（血漿中濃度）だけでなく、それらの作用部位（5-HT_2C, α₂, D₁およびD₂受容体部位など）においても保証されなければならない。したがって、2つのホルモンの分布量（V_dss）の値を考慮する必要があり、それはホルモンの血漿濃度をそれらの作用部位での濃度に関連づける。

ヒトにおける40μgに等しいVLTの注入量に対するVLTの最大血漿濃度（C_ss）の計算。上記関係1によれば、以下のように記載することができる。

VLTの3倍よりも高い分布量を有する6-MHについては、休止期中に、血漿中および受容体部位の末梢の両方において6-MH濃度の普及を維持するために、最大血漿濃度（C_ss）をVLTの3分の1の値に維持しなければならない。そのために、注入された6-MHの用量は、40μgのVLTの注入用量と組み合わせて、10μgを超えてはならない。実際に、10μgの注入用量の場合、以下のとおりである。

VLTよりも3倍高い分布量を考慮する場合、受容体付近の最大6-MH濃度は、休息期間中に常にVLTの濃度よりも低くなる。

結論として、2つのホルモン（VLT及び6-MH）の普及及びそれらの変動を保証するために、VLT用量を6-MHの用量より少なくとも4倍多く血流に注入する必要がある。

本発明の別の特定の態様によれば、接着性経皮治療システムは、バレントニン（VLT ）と6-メトキシハルマラン（6-MH）との組み合わせを血流中に送達することができ、バレントニン（VLT ）と6-メトキシハルマラン（6-MH）の負荷の組み合わせを含有し、ここで、パッチの適用期間、好ましくは約8〜10時間中に[VLT] / [6-MH]質量比が少なくとも4である。

用量のレベル、即ち大きさのオーダーに関して、我々は、ヒトにおいて測定された松果腺メラトニン分泌値をベースとして使用した。

午前1時以降、10 pg / ml〜50 pg / mlの間に患者で測定された最大血漿MLT濃度を特徴とする障害である睡眠障害並びに内因性および反応性うつ病の治療のために、就寝時（午後10時くらい、または習慣に応じてその後）に、VLTおよび6-MHの負荷でパッチを適用することが推奨され、ここで、該負荷により、VLTおよび6-MHの該負荷は、パッチの適用する期間中、パッチを除去しなければならないときの起きる時間に応じて8〜 10時間において、20μg のVLTおよび5μg の6-MH の用量を身体に送達する。

本発明の別の特定の態様によれば、睡眠障害及びうつ病の治療における使用のために、接着性経皮治療システムは、パッチの適用期間中、好ましくは約8〜10時間の間、VLT及び6-MHの負荷を含み、ここで、該負荷により、血流に送達されるVLT及び6-MHの量は、VLTが少なくとも20μgであり、かつ6-MHが少なくとも5μgである。

一次不眠症およびパーキンソン病などの神経変性疾患、午前1時以降に患者で測定して10pg/ml未満である最大血漿MLT濃度を特徴とする疾患の治療のために、就寝時（午後10時くらい、または習慣に応じてその後）に、VLTおよび6-MHの負荷でパッチを適用することが推奨され、ここで、パッチの適用する期間中、パッチを除去しなければならないときの起きる時間に応じて8〜 10時間において、40μg のVLTおよび10μg の6-MH の用量を身体に送達する。

本発明の別の特徴によれば、一次不眠症および/またはパーキンソン病型の状態の治療のために、接着性経皮治療システムは、パッチの適用期間中、好ましくは約8〜10時間中に、VLTおよび6-MHの負荷を含み、少なくとも40μgのVLTおよび少なくとも10μgの6-MHの用量を血流に送達する。

午前1時以降に患者で1pg/ml未満であるまたは測定不能であると測定される、最大血漿MLT濃度を特徴とする疾患であるアルツハイマー型神経変性疾患の治療のために、就寝時（午後10時くらい、または習慣に応じてその後）に、パッチを適用する期間中、パッチを除去しなければならないときの起きる時間に応じて8〜 10時間において、VLTおよび6-MHの負荷でパッチを適用することが推奨される。

本発明の別の特定の態様によれば、アルツハイマー病の予防及び/又は治療における使用のために、接着性経皮治療システムは、パッチの適用期間中、好ましくは約8〜10時間中に、VLTおよび6-MHの負荷を含み、該負荷は少なくとも60μgのVLTおよび少なくとも15μgの6-MHの用量を血流に送達する。

既に示したように、本発明は[（VLT） - （6-MH）]系のホルモンの過剰な松果腺分泌に起因する状態の治療にも及ぶ。精神病の治療の特別な場合は、活性期間中にバレントニンのみを負荷したパッチを適用することからなる。 VLTは、精神病患者で分泌された過剰の6-メトキシハマランを置換すべきである。

Claims

活性成分として、バレントニン（VLT）と6-メトキシハルマラン（6-MH）の組み合わせを含有し、パッチの適用期間が8〜10時間であることを特徴とする、接着性経皮治療システム。
パッチの適用期間中、少なくとも4に等しい[VLT] / [6-MH] の質量比で、バレントニン及び6-メトキシハルマランを血流に送達することができる、バレントニン（VLT）と、6-メトキシハルマラン（6-MH）との負荷の組合せを含むことを特徴とする請求項1に記載の接着性経皮治療システム。
前記システムがバレントニン（VLT）及び6-メトキシハルマラン（6-MH）を８〜１０時間の一定速度の注入速度で送達することを特徴とする請求項1または２に記載の接着性経皮治療システム。
前記活性成分がVLTおよび6-MHからなる、
ことを特徴とする請求項1〜３のいずれか一項に記載の接着性経皮治療システム。
薬物として使用するための、請求項1〜４のいずれか一項に記載の接着性経皮治療システム。
VLT及び6-MHの負荷を含む、睡眠障害及びうつ病の治療に使用するための接着性経皮治療システムであって、パッチの適用期間中、好ましくは約8〜10時間において、前記負荷が少なくとも20μgのVLTの用量及び少なくとも5μgの6-MHの用量を血流中に送達する、請求項1〜５のいずれか一項に記載の接着性経皮治療システム。
VLT及び6-MHの負荷を含む、一次不眠症及び/またはパーキンソン病型の状態の治療のための接着性経皮治療システムであって、パッチの適用期間中、好ましくは約8〜10時間において、前記負荷が少なくとも40μgのVLTの用量及び少なくとも10μg の6-MHの用量を血流中に送達する、請求項1〜６のいずれか一項に記載の接着性経皮治療システム。
VLT及び6-MHの負荷を含む、アルツハイマー病の予防及び/または治療における使用のための接着性経皮治療システムであって、パッチの適用期間中、好ましくは約8〜10時間において、前記負荷が少なくとも60μgのVLTの用量及び少なくとも15μgの6-MHの用量で血流中に送達する、請求項1〜７のいずれか一項に記載の接着性経皮治療システム。