JP6908287B2

JP6908287B2 - 脳腫瘍の処置のための治療剤としての２−アミノピリミジン誘導体

Info

Publication number: JP6908287B2
Application number: JP2018559217A
Authority: JP
Inventors: グレコ，マイケル，ニコラス; コスタンゾ，マイケル，ジョン; グリーン，マイケル，アラン; ペン，ジロン; ワイルド，ビクトリア，リン; チャン，ドン
Original assignee: ベータファーマ，インコーポレイテッド
Priority date: 2016-05-11
Filing date: 2017-05-11
Publication date: 2021-07-21
Anticipated expiration: 2037-05-11
Also published as: EP3454860B1; IL262801A; TW201740951A; US20190365755A1; KR20190006991A; CN109715164A; SG11201809931YA; CN119970741A; EP3454860A4; JP2019514996A; BR112018072887A2; US11052086B2; WO2017197062A1; PH12018502360A1; EA201892311A1; CA3023228A1; ZA201807353B; AU2017264839B2; MX2018013602A; CO2018012061A2

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年５月１１日に出願された、米国仮出願番号第６２／３３４，８３０号に対して、米国特許法第１１９条（ｅ）項に基づく優先権を主張するものであり、その開示は参照により本明細書中に組み込まれる。

発明の分野
本発明は、２−アミノピリミジン誘導体、ならびにその薬学的に許容される塩及び組成物を用いてＥＧＦＲが仲介する転移性脳腫瘍を治療する方法に関する。

発明の背景
表皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ１、ＥｒｂＢ１）は、４つの構造的に関連する細胞表面受容体のＥｒｂＢファミリーの主要メンバーであり、他のメンバーはＨｅｒ２（Ｎｅｕ、ＥｒｂＢ２）、Ｈｅｒ３（ＥｒｂＢ３）、及びＨｅｒ４（ＥｒｂＢ４）である。ＥＧＦＲは、その内因性触媒チロシンプロテインキナーゼ活性を介してその主要な細胞機能を発揮する。受容体は、触媒的に不活性なＥＧＦＲモノマーを触媒的に活性なホモ二量体及び異種二量体に変換する、上皮増殖因子（ＥＧＦ）及びトランスフォーミング成長因子−アルファ（ＴＧＦ−α）などの、成長因子リガンドとの結合によって活性化される。これらの触媒的に活性な二量体は、次に、細胞内チロシンキナーゼ活性を開始させ、特定のＥＧＦＲチロシン残基の自己リン酸化をもたらし、シグナル伝達タンパク質の下流活性化を誘発する。続いて、シグナル伝達タンパク質は、最終的に細胞成長、増殖、運動及び生存の必須な生物学的プロセスを媒介する、複数のシグナル伝達カスケード（ＭＡＰＫ、Ａｋｔ及びＪＮＫ）を開始する。

ＥＧＦＲは、多くのタイプの癌細胞の表面上で異常に高いレベルで見出され、ＥＧＦＲのレベルの上昇は、進行した疾患、癌の広がり、及び予後不良に関連している。ＥＧＦＲにおける突然変異は、受容体の過剰発現、永久的な活性化または持続的な活動亢進をもたらし、制御されない細胞増殖、すなわち癌をもたらす可能性がある。結果として、ＥＧＦＲ突然変異は、転移性肺癌、頭頸部癌、結腸直腸癌及び膵臓癌を含むいくつかのタイプの悪性腫瘍において同定されている。肺癌では、突然変異は、キナーゼドメインのアデノシン３リン酸（ＡＴＰ）−結合ポケットをコードする、エキソン１８〜２１において主に起こる。最も臨床的に関連する薬剤感受性ＥＧＦＲ突然変異は、エキソン２１における共通のアミノ酸モチーフ（ＬＲＥＡ）及び点突然変異を排除するエキソン１９の欠損であり、これにより８５８番目の位置のロイシンがアルギニンに置換する（Ｌ８５８Ｒ）。同時に、これらの２つの活性化突然変異は、肺癌で観察されるＥＧＦＲ突然変異のほぼ８５％を占める。両方の突然変異は永続的なチロシンキナーゼ活性を有し、結果として発癌性である。初めは現行の治療に応答できる患者の少なくとも５０％では、病気の進行が、第２の突然変異、ＥＧＦＲのエキソン２０でのＴ７９０Ｍ（ゲートキーパー変異とも称される）の発症と関連する。

およそ３０〜５０％の非小細胞肺癌患者が脳転移（ＢＭ）を発症する(Baik, C.S.; J. Thorac. Oncol. 2015, 10, 1268)が、有効な治療法が現在これらの処置に使用できない。

発明の要約
一態様では、本発明は、治療上有効な量の、下記式（Ｉ）：

ただし、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、メチル、トリフルオロメチル、およびシアノから選択され；
Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、同一でありまたは異なり、独立して、水素、ハロゲン、およびトリフルオロメチルから選択され；
Ｒ^５は、低級アルキル、置換されてもよい３〜６員の複素環、Ｒ^７Ｒ^８Ｎ−（低級アルキル）、およびＲ^７Ｒ^８Ｎ−（シクロアルキルアルキル）から選択され、この際、Ｒ^７およびＲ^８は、同一でありまたは異なり、独立して、水素および低級アルキルから選択され；
Ｒ^６は、低級アルコキシおよび低級アルキルから選択され；さらに
Ｑは、Ｃ−Ｒ^１０またはＮであり、
Ｒ^９は、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルまたはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルであり；さらに
Ｒ^１０は、ＨまたはＣＨ_３である、
の化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、若しくはプロドラッグを患者に投与することを有する、患者の脳腫瘍の治療方法を提供する。

好ましい実施形態では、前記式（Ｉ）の化合物が化合物１である。

他の好ましい実施形態では、脳腫瘍は、転移性脳腫瘍であり、より好ましくはＥＧＦＲが仲介する非小細胞肺癌(EGFR-mediated non-small cell lung cancer)から発症する転移性脳腫瘍である。

マウスでの化合物１の有効性を、ルシフェラーゼを使用できる(luciferase-enabled)ＮＣＩ−Ｈ１９７５ヒト細胞系の頭蓋内に移植した腫瘍の腫瘍退縮を観察することによって測定した。有効性は、生物発光画像（ＢＬＩ）データを従来の生存エンドポイント(traditional survival endpoints)と組み合わせることに基づく。１００％を超える生存期間の増加が、ベヒクルで処置した動物に比して化合物１で処置した動物で観察された。

本発明の他の態様または利点は、以下の図面、詳細な説明及び特許請求の範囲に反映されるであろう。

図面の簡単な説明
図１は、化合物１・Ｍｓ及びベヒクルコントロールによる処置の脳腫瘍ＢＬＩシグナルグループ比較を示す。図２は、化合物１・Ｍｓ処置をベヒクルコントロールと比較した、グループの生存率（％）を示す。

発明の詳細な説明
一態様では、治療上有効な量の、下記式（Ｉ）：

ただし、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、メチル、トリフルオロメチル、およびシアノから選択され；
Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、同一でありまたは異なり、独立して、水素、ハロゲン、およびトリフルオロメチルから選択され；
Ｒ^５は、低級アルキル、置換されてもよい３〜６員の複素環(heterocyclyl)、Ｒ^７Ｒ^８Ｎ−（低級アルキル）、およびＲ^７Ｒ^８Ｎ−（シクロアルキルアルキル）から選択され、この際、Ｒ^７およびＲ^８は、同一でありまたは異なり、独立して、水素および低級アルキルから選択され；
Ｒ^６は、低級アルコキシおよび低級アルキルから選択され；さらに
Ｑは、Ｃ−Ｒ^１０またはＮであり、
Ｒ^９は、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルまたはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルであり；さらに
Ｒ^１０は、ＨまたはＣＨ_３である、
の化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、プロドラッグ若しくは組成物を患者に投与することを有する、患者の脳腫瘍の治療方法を提供する。

本態様の一実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、ＱがＣ−Ｒ^１０である。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^５が、Ｃ_１〜_６アルキル、置換または無置換のアゼチジニル、置換または無置換のピロリジニル、置換または無置換のピペリジニル、Ｒ^７Ｒ^８Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−（ｎ＝１〜５）、Ｒ^７Ｒ^８Ｎ−（Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル）−（ＣＨ_２）_ｍ−（ｍ＝１〜３）から選択され、この際、Ｒ^７およびＲ^８は、同一でありまたは異なり、独立して、水素および低級アルキルから選択される。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^５が、メチル、Ｒ^７Ｒ^８Ｎ−（ＣＨ_２）_ｎ−（ｎ＝２または３）、１−（ジメチルアミノ）−シクロプロピルメチル、３−（ジメチルアミノ）シクロブチル、１−メチルアゼチジン−３−イル、（Ｒ）−１−メチルピロリジン−３−イル、（Ｓ）−１−メチルピロリジン−３−イル、および１−メチルピペリジン−４−イルから選択される。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^５が２−ジメチルアミノ−エチル［（ＣＨ_３）_２ＮＣＨ_２ＣＨ_２−］である。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^１が水素またはハロゲンまたはメチルである。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^１が水素である。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^２が水素またはハロゲンである。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^４が水素である。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^２が水素、Ｆ、またはＣｌであり；Ｒ^３が水素、Ｆ、Ｃｌ、または−ＣＦ_３であり；さらにＲ^４が水素である。

本態様の他の実施形態では、式（Ｉ）の化合物において、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４がすべて水素である。

本態様の他の実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物がさらに下記式（ＩＩ）：

ただし、Ｑは、Ｃ−Ｒ^１０またはＮであり、
Ｒ^９はＣＨ_３またはＣＨ_２ＣＨ_２Ｆであり；さらに
Ｒ^１０はＨまたはＣＨ_３である、
の構造を有する。

本態様の他の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物において、ＱがＣ−Ｒ^１０である。

本態様の他の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ^９がＣＨ_３である。

本態様の他の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物において、ＱがＣＨである。

本態様の好ましい実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物がさらに下記式：

の構造を有する。

本態様の他の好ましい実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物が化合物１の薬学的に許容される塩である。

本態様の他の好ましい実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物が化合物１のメタンスルホン酸塩、
即ち、化合物１・Ｍｓである。

本態様の他の実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物が、さらに下記式：

の構造を有する。

本態様の他の実施形態では、式（ＩＩ）の化合物において、Ｒ^９がＣＨ_２ＣＨ_２Ｆである。

の構造を有する。

本態様の他の実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物が、下記からなる群から選択される。

本態様の他の実施形態では、本方法が、第２の治療剤を患者に投与することをさらに有する。

本態様の他の実施形態では、上記第２の治療剤は、異なるＥＧＦＲモジュレーターである。

本態様の他の実施形態では、上記第２の治療剤は、化学療法剤である。

本態様の他の実施形態では、上記脳腫瘍が転移性脳腫瘍である。

本態様の好ましい実施形態では、上記脳腫瘍が、ＥＧＦＲが仲介する癌から発症する転移性脳腫瘍である。

本態様の他の好ましい実施形態では、上記脳腫瘍が、ＥＧＦＲが仲介する非小細胞肺癌から発症する転移性脳腫瘍である。

本態様の他の実施形態では、上記いずれかの実施形態に係る方法は、上記式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくはプロドラッグ、および薬学的に許容される担体を含む薬剤組成物を患者に投与することを有する。

本態様の他の実施形態では、上記式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物が化合物１である。

本態様の他の実施形態では、上記式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物が化合物１のメタンスルホン酸塩（１・Ｍｓ）である。

他の態様では、本発明は、脳腫瘍の治療のための薬剤の製造における、下記式（Ｉ）：

ただし、Ｒ^１は、水素、ハロゲン、メチル、トリフルオロメチル、およびシアノから選択され；
Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４は、同一でありまたは異なり、独立して、水素、ハロゲン、およびトリフルオロメチルから選択され；
Ｒ^５は、低級アルキル、置換されてもよい３〜６員の複素環(heterocyclyl)、Ｒ^７Ｒ^８Ｎ−（低級アルキル）、およびＲ^７Ｒ^８Ｎ−（シクロアルキルアルキル）から選択され、この際、Ｒ^７およびＲ^８は、同一でありまたは異なり、独立して、水素および低級アルキルから選択され；
Ｒ^６は、低級アルコキシおよび低級アルキルから選択され；さらに
Ｑは、Ｃ−Ｒ^１０またはＮであり、
Ｒ^９は、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルまたはＣ_１〜Ｃ_４ハロアルキルであり；さらに
Ｒ^１０は、ＨまたはＣＨ_３である、
またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、プロドラッグ若しくは組成物
の化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、プロドラッグ若しくは組成物の使用を提供する。

本態様の他の実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物が、さらに下記式ＩＩ：

本態様の一実施形態では、上記式（Ｉ）の化合物が、下記からなる群から選択される。

本態様の他の実施形態では、脳腫瘍が転移性脳腫瘍である。

本態様の他の実施形態では、脳腫瘍が、ＥＧＦＲが仲介する非小細胞肺癌(EGFR-mediated non-small cell lung cancer)から発症する転移性脳腫瘍である。

本発明の他の態様または実施形態は、実質的に示され記載されるのと同様の態様または実施形態および本明細書に記載される２以上の実施形態の可能性のある組み合わせを包含する。

本願における用語は、特に定義されなければ、当業者に理解されるような通常の意味を有する。

本明細書で使用される、「ハロ」または「ハロゲン」ということばは、Ｆ、Ｃｌ、またはＢｒを指す。

「低級アルキル」ということばは、１〜７個の炭素原子、好ましくは１〜４個、およびより好ましくは１〜２個の炭素原子を有する分岐鎖または直鎖のアルキル基を指す。

「低級アルコキシ」ということばは、１〜７個、好ましくは１〜４個、およびより好ましくは１〜２個の炭素原子を有するアルコキシ基（−ＯＲ）を指す。

「シアノ」ということばは、−ＣＮを指す。

本明細書で使用される、「薬学的に許容される」ということばは、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または合理的な利益／リスク比に見合った他の問題若しくは合併症を伴わずに、患者の組織と接触させて使用するのに適しており、意図された使用に有効な、化合物、材料、組成物および／または剤形を指す。

本明細書中で使用される、「薬学的に許容される塩」ということばは、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わずに、ヒト及び下等動物の組織と接触させて使用するのに適しており、合理的な利益／リスク比に見合う塩を指す。本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、適切な無機及び有機の酸ならびに塩基に由来するものを含む。薬学的に許容される、非毒性の酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、及び過塩素酸などの無機酸とまたは酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸またはマロン酸などの有機酸と共に形成されるアミノ基の塩、あるいは、イオン交換のような当該分野において使用される他の方法を用いることにより形成されるアミノ基の塩が挙げられる。他の薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。

本明細書で使用される、「溶媒和物」ということばは、本発明の化合物と、化学量論量または非化学量論量の溶媒分子との物理的会合を意味する。例えば、本化合物の１分子は、１以上、好ましくは１〜３の溶媒分子と会合する。本化合物の複数（例えば、２）分子が１の溶媒分子を共有することも可能である。この物理的会合には、水素結合が含まれうる。場合によっては、溶媒和物は結晶性固体として単離することができる。溶媒和物中の溶媒分子は、規則的な配列及び／または非規則的な配列で存在しうる。例示的な溶媒和物としては、水和物、エタノラート、メタノラート、及びイソプロパノラートなどが挙げられるが、これらに限定されない。溶媒和の方法は、当該分野で一般的に知られている。

本明細書中で使用される、「プロドラッグ」ということばは、例えば、血中での加水分解によって、インビボで変換されて親化合物を得ることができる化合物の誘導体を指す。一般的な例としては、活性カルボン酸化合物のエステル及びアミド形態；またはその逆で、活性アルコール化合物のエステル形態または活性アミン化合物のアミド形態が挙げられるが、これらに限定されない。このようなアミドまたはエステルのプロドラッグ化合物は、当該分野で知られるような公知の従来法に従って調製されうる。例えば、本発明の式ＩＩの化合物のプロドラッグは、以下の式ＩＩＩの形態であり得る。

ただし、Ｒ^ｘ及びＲ^ｙは、独立して、Ｈ及び−Ｃ（Ｏ）−Ｒであり、この際、ＲはＣ_１〜Ｃ_４アルキル、好ましくはメチルまたはエチルであり、より好ましくはメチルである。本発明の他のプロドラッグは、同様にして調製することができる。

治療に使用するために、治療上有効な量の、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物を、原化学物質（raw chemical）として投与することが可能である場合、活性成分を薬剤組成物として提供することが可能である。したがって、本開示は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物、および１以上の、好ましくは１〜３の、薬学的に許容される担体、希釈剤、または他の賦形剤を含む、薬剤組成物をさらに提供する。担体、希釈剤、または他の賦形剤は、製剤の他の成分と適合し、処置される患者に有害ではないという意味において許容できなければならない。

医薬製剤は、所定量の単位用量当たりの活性成分を含む単位剤形(unit dose form)で提供されうる。典型的には、本開示の薬剤組成物は、１日当たり約１〜５回、あるいは連続点滴として投与されるであろう。このような投与は、慢性または急性の治療として使用することができる。単一の剤形を製造するために担体材料と組合せることができる活性成分の量は、処置される症状、症状の重篤度、投与時間、投与経路、使用される化合物の排泄速度、処置期間、ならびに患者の年齢、性別、体重、及び症状に応じて異なるであろう。好ましい単位用量製剤(unit dosage formulation)は、本明細書で上記したような、１日用量もしくは副用量(sub-dose)の、またはその適切な一部量(fraction)の活性成分を含むものである。通常、治療は、化合物の最適用量よりも実質的に少ない少量で開始される。その後、現場で最適な効果に達するまで、用量を少しずつ増加させる。通常、化合物は、かなりの害を及ぼすまたは有害な副作用を引き起こすことなく有効な結果を一般的にもたらす濃度レベルで投与することが最も望ましい。

本開示の組成物が、本開示の化合物と、１以上の、好ましくは１または２の追加の治療剤または予防剤との組合せを含む場合、化合物及び追加の薬剤は双方とも、一般的に、単独療法の投薬計画で標準的に投与される用量の、約１０〜１５０％、より好ましくは約１０〜８０％の用量レベルで存在する。

医薬製剤は、適切な経路、例えば、経口（頬または舌下を含む）、直腸、鼻、局所（頬側、舌下、または経皮を含む）、膣内、または非経口（皮下、皮内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内、くも膜下腔内、病巣内、静脈内、または皮内注射若しくは点滴を含む）経路による投与に適合させることができる。このような製剤は、薬学分野で既知の方法によって、例えば、活性成分を担体または賦形剤と一緒に合わせる(bring into association)ことによって調製することができる。経口投与または注射による投与が好ましい。

経口投与に適合した医薬製剤は、カプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；水性若しくは非水性液体における溶液または懸濁液；食用の泡またはホイップ；または水中油型液体エマルジョン若しくは油中水型エマルジョンなどの別個の単位として提供されうる。

例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与を目的として、活性薬剤成分は、エタノール、グリセロール、水などのような経口用の非毒性の薬学的に許容される不活性担体と組合せることができる。粉剤は、化合物を適切な微細なサイズに粉砕し、食用炭水化物、例えば、デンプンまたはマンニトール等の、同様に粉砕された医薬担体と混合することによって調製される。香味料、防腐剤、分散剤、及び着色剤が存在してもよい。

カプセルは、上記のように、粉末混合物を調製し、形成されたゼラチンシース(formed gelatin sheaths)に充填することによって作製される。コロイダルシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、または固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤や潤滑剤を、充填操作の前に上記粉体混合物に添加してもよい。寒天、炭酸カルシウム若しくは炭酸ナトリウム等の崩壊剤または可溶化剤を添加して、カプセルが摂取されたときの薬剤の効能を改善してもよい。

さらに、所望する場合または必要な場合には、適切な結合剤、潤滑剤、崩壊剤、及び着色剤を混合物に添加してもよい。適切な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、グルコースまたはベータ−ラクトースなどの天然糖、コーン甘味料、アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムなどの天然及び合成ゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。これらの剤形に使用される潤滑剤としては、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト(betonite)、キサンタンガムなどが挙げられるが、これらに限定されない。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、湿式造粒(granulating)または乾式造粒(slugging)し、潤滑剤及び崩壊剤を添加し、錠剤状に圧縮することによって製剤化される。粉末混合物は、適切に粉砕された化合物を上記の希釈剤または基剤と、さらに必要であれば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩(aliginate)、ゲル化剤、またはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤(solution retardant)、四級塩などの吸収促進剤および／またはベントナイト(betonite)、カオリン、またはリン酸二カルシウムなどの吸収剤と、混合することにより調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アカディア粘液(acadia mucilage)、またはセルロース材料若しくはポリマー材料の溶液などの結合剤で湿らせて、ふるいに通して押し出すことにより造粒することができる。造粒の代わりに、粉末混合物を打錠機に通してもよく、その結果、不完全に形成されたスラグを顆粒状に粉砕してもよい。ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油を添加することによって、錠剤を形成するダイにくっつくのを防止するために、顆粒に潤滑剤を塗ってもよい。次いで、潤滑化された混合物を圧縮して錠剤にする。本開示の化合物は、自由流動性のある(free flowing)不活性担体と組合せて、湿式造粒(granulating)または乾式造粒(slugging)工程を経ることなく、直接、錠剤に圧縮してもよい。セラック(shellac)の密閉コート、糖またはポリマー材料のコーティング、及びワックスのポリッシュコーティングからなる透明または不透明の保護コーティングを提供することができる。異なる単位用量を区別するために、これらのコーティングに染料を加えてもよい。

溶液、シロップ、及びエリキシル剤のような経口液剤は、所与の量が予め定められた量の化合物を含むように用量単位形態(dosage unit formuation)で調製することができる。シロップは、適切に風味付けされた水溶液に化合物を溶解することによって調製することができ、一方、エリキシル剤は、無毒性ベヒクルを用いて調製される。エトキシ化イソステアリルアルコール及びポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤及び乳化剤、保存剤、ペパーミント油または天然甘味料などの香味用添加剤、またはサッカリン若しくは他の人工甘味料なども添加してもよい。

適切な場合には、経口投与用の用量単位製剤をマイクロカプセル化してもよい。例えば、ポリマー、ワックスなどの中に粒状材料を被覆するまたは埋め込むことによって、放出を延長または持続させて、製剤を調製してもよい。

上記で特に言及した成分に加えて、製剤は、問題となる製剤のタイプを考慮して当該分野において公知の他の薬剤を含んでもよく、例えば、経口投与に適した製剤は香味剤を含んでもよいと、解するべきである。

「患者(patient)」または「対象者(subject)」ということばは、ヒト及び他の哺乳類双方を包含する。

「哺乳類」または「哺乳動物」ということばは、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ブタ、ウシ、サル、ウサギ及びマウスを含むが、これらに限定されない。好ましい哺乳類は、ヒトである。

「治療上有効な量」ということばは、疾患を治療するために対象者に投与される際、その疾患を治療するのに十分な化合物または組成物の量を指す。「治療上有効な量」は、とりわけ、化合物、疾患及びその重篤度、ならびに治療される対象者の年齢、体重、または他の因子に応じて変化しうる。単独で投与される個々の活性成分に適用する場合には、このことばは、その成分のみを指す。組合せに適用される場合には、このことばは、組合せて、連続して、または同時に投与されるかに関わらず、治療効果をもたらす活性成分の総量を指す。

「治療する(treating)」または「治療(treatment)」ということばは、（ｉ）疾患、障害、または症状を阻害すること、すなわちその発症を阻止すること；（ｉｉ）疾患、障害、または症状を緩和すること、すなわち疾患、障害および／または症状を軽減すること；または（ｉｉｉ）疾患、障害および／または症状に罹り易いが、まだそれを有すると診断されていない対象者において、疾患、障害、または症状が発生するのを予防することを指す。したがって、一実施形態では、「治療する」または「治療」は、治療される対象者には気づかれにくい場合もあるが、１以上の物理的パラメータを改善することを含みうる、疾患または障害を改善することを指す。他の実施形態では、「治療する」または「治療」は、物理的（例えば、識別可能な症状の安定化）もしくは生理学的（例えば、物理的パラメータの安定化）のいずれかまたはその両方で、疾患または障害を調節することを含む。さらに他の実施形態では、「治療する」または「治療」は、疾患または障害の発症を遅延させることを含む。

「約」ということばを、量、温度、時間などのパラメータに適用する場合、当該パラメータは、一般的に、±１０％まで、好ましくは±５％以内、より好ましくは±２％以内で変動しうることを示す。当業者に理解されるように、パラメータが臨界的でない場合には、実施例において示された数は、多くの場合、限定するためではなく、説明目的のために示される。

本明細書で使用される、「ａ」、「ａｎ」、または「ｔｈｅ」ということばは、単数形及び複数形の両方を表す。通常、名詞の単数形または複数形のいずれかが使用されるとき、それは名詞の単数形及び複数形の両方を意味する。

以下の非限定的な実施例により、本発明の特定の態様をさらに説明する。

実施例
材料および方法
Ｎ−（２−（２−（ジメチルアミノ）エトキシ）−４−メトキシ−５−（（４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）アクリルアミドメタンスルホン酸塩（１・Ｍｓ；Ｃ_２７Ｈ_３０Ｎ_６Ｏ_３・１．０６ＣＨ_３ＳＯ_３Ｈ、ＭＷ＝４８６．５８、ＦＷ＝５８８．４５、純度＝１００％）を、水における１％ポリソルベート８０のベヒクル中で製剤化した。完全なベヒクルを予め秤量した化合物に添加して、５０ｍｇ／ｋｇの用量レベルの処置に適する、５ｍｇ／ｍＬストック溶液を得た。この混合物を約１分間ボルテックスして、ｐＨ値が７である淡黄色溶液を得た。この投与用溶液(dosing solution)を毎日新たに調製した。

動物
メスのEnvigoヌードマウス(Hsd:Athymic Nude-Foxn1^nu)を使用した。これらは、実験の１日目に６〜７週齢であった。これらの動物に、照射済Ｈａｒｌａｎ２９１８．１５齧歯動物用餌(irradiated Harlan 2918.15 Rodent Diet)および水を自由に与えた。１時間当たり１００回の完全換気でバブル環境(bubble environment)中にＨ．Ｅ．Ｐ．Ａフィルターに通した空気(H.E.P.A filtered air)を提供するＢｉｏｂｕｂｂｌｅ（登録商標）クリーンルーム内でＢｅｄ−Ｏ’Ｃｏｂｓ（商標）床敷き(Bed-O’Cobs^TM bedding)を有する据え付けのケージで動物を飼った。すべての処置、体重測定、および腫瘍測定はバブル環境において行った。環境は、７０±２°Ｆの温度範囲および３０〜７０％の湿度範囲に制御した。

細胞調製
NCI-H1975-Luc細胞をClovisから得た。細胞を、１ｍＭピルビン酸ナトリウム＋２ｍＭＬ−グルタミン＋１０ｍＭＨＥＰＥＳ＋２．５ｇ／Ｌグルコース＋５μｇ／ｍＬブラストサイジンで修飾し、熱不活性化されていない１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）及び１％１００×ペニシリン／ストレプトマイシン／Ｌ−グルタミン（ＰＳＧ）を補充したＲＰＭＩ１６４０培地中で生育させた。生育環境を、３７℃にて５％ＣＯ_２雰囲気のインキュベーター内で維持した。拡張(expansion)が完了したら、細胞（継代４）を０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ溶液を用いてトリプシン処理した。細胞をはがした後、完全生育培地で希釈してトリプシンを不活性化し、細胞の塊をピペッティングによって分離した。細胞を、４℃で２００ｒｃｆで８分間、遠心し、上清を吸引し、ペレットをピペッティングにより冷ダルベッコリン酸緩衝食塩水（ＤＰＢＳ）中に再懸濁した。均質な細胞懸濁液のアリコートをトリパンブルー溶液中に希釈し、Ｌｕｎａ自動細胞計数器(Luna automated cell counter)を使用して細胞数を計測して、移植前の細胞生存率を測定した。この細胞懸濁液を、４℃で２００ｒｃｆで８分間、遠心した。上清を吸引して、細胞ペレットを、最終濃度が１．００Ｅ＋０８細胞のトリパンを取り込まない細胞(trypan- excluding cell)／ｍＬとなるように、冷血清不含有培地(cold serum-free medium)に再懸濁した。細胞懸濁液を、移植中濡れた氷上に維持した。移植後、残りの細胞のアリコートをトリパンブルー溶液で希釈し、細胞数を計測して、移植後の細胞生存度を測定した。

頭蓋内移植
０日目に、試験マウスの頭蓋内に、プロトコル（アペンディクス１）のとおりに１．００Ｅ＋０６細胞／１０μＬを移植した。無菌的な外科移植のために、マウスに、０．２ｍｇ／ｋｇブプレノルフィンを注射し、空気中における２％濃度のイソフルレンを用いて麻酔をかけた。次に、このマウスを、非破裂型イアーバー(non-rupture ear bars)を用いて定位固定フレーム(stereotaxic frame)(ASI instruments, Inc.)に固定した。外科手術中に乾燥することを防ぐために、眼用の軟膏をマウスの眼に塗った。３７℃水再循環型加熱パッド(re-circulating 37 ℃ water heated pad)を用いて、移植処置中の動物の体温を維持した。定位固定フレームに入れたら、頭蓋をクロルヘキシジンがしみこんだ綿棒と７０％エタノールがしみこんだ綿棒で交互に拭いて(swab)、皮膚表面を消毒し、切開に備えた。＃１５ＢＤ外科用メスの刃を用いて頭蓋のブレグマ中央に長手方向に１ｃｍほど切開した。鋸歯状小鉗子を用いて切開部をひっこませた(retract)。頭蓋骨表面を覆う結合組織の薄層を軽く押しつけながら乾燥綿棒を用いて取り除いた。出血している血管を焼灼して、失血を防いだ。さらに、０．９ｍｍのドリルビットを、定位電極マニュピレーターアーム(stereotaxic electrode manipulator arm)を用いて、ブレグマの中央に置き、冠状縫合に対して２ｍｍ右側面、１ｍｍ前方に移動させ、さらに、頭蓋骨の表面に下した。ドリルを定位固定フレームから外し、頭蓋骨を介して硬膜表面にまで穿頭孔を手で開けた。細胞懸濁液（濡れた氷上に保存）をよく混合し、５０μＬ気密性ハミルトンシリンジ中に吸い上げた。標準２７ｇ針に細胞懸濁液を満たして、気泡(air pocket)を除き、シリンジのルアチップ(luer tip)を針のハブにさした。シリンジを特注のシリンジホルダ(ASI Instruments, Inc.)に固定して、定位固定フレームマニュピレーターアーム(stereotaxic frame manipulator arm)に取り付けた。シリンジの針を穿頭孔の中央におき、斜めの先端が硬膜表面の頭蓋骨の底面のレベルにくるまで下げた。次に、針を脳内に３ｍｍ下げ、１ｍｍ戻して(retract)、細胞懸濁液を貯溜する「リザーバー」を形成した。さらに、１０μＬの細胞懸濁液（１×１０^６細胞／マウス）を脳組織中にゆっくり注射し、この際、若干の漏れ（ＩＣ移植では一般的）を乾燥綿棒に吸収させた。注射後、針を抜き、移植細胞のロスを最小限するために、穿頭孔を即座に骨ワックスで閉じた。次に、頭蓋骨表面を、乾燥エタノールがしみこんだ綿棒と７０％エタノールがしみこんだ綿棒で交互に洗浄して、無関係の細胞を除き、頭蓋外での腫瘍の成長を阻止した。マウスを定位固定フレームから取り出し、切開部をステンレススチール製創傷クリップを用いて閉じた。マウスの意識が戻り、仰臥(dorsal recumbancy)したら、ケージに戻した。

処置
すべてのマウスを、生物発光イメージングによる腫瘍組織量の評価に基づく処置グループに分けた。すべてのグループの平均腫瘍組織量が研究対象母集団の全平均腫瘍組織量の１０％以内になるように、マウスを分配した。処置を５日目に開始した。

グループ１：ベヒクルコントロール（１％ポリソルベート８０）、０．２ｍＬ／２０ｇ、経口（ＰＯ）、ＱＤｘ１１（５〜１５日目に１日１回）、
グループ２：１・Ｍｓ、５０ｍｇ／ｋｇ、経口（ＰＯ）、ＱＤｘ１４（５〜１８日目に１日１回）。

生物発光イメージング
インビボでの生物発光イメージングをＩＶＩＳ５０光学的イメージング(optical imaging)(Xenogen, Alameda, CA)を用いて行った。動物の画像を、約１〜２％イソフルレンガス麻酔下で１回に３回撮影した。各マウスに１５０ｍｇ／ｋｇＤ−ルシフェリンをＩＰ注射し、注射してから１０分後に腹臥位で撮影した。ＣＣＤチップの大きいビニング(large binning)を使用し、画像で各マウスで観察できる転移性腫瘍から少なくとも数百カウントが得られ、ＣＣＤチップの飽和を避けられるように、露光時間を（２秒から２分に）調整した。ＢＬＩ画像を５、８、１１、１３、１５、及び１８日目に集めた。画像を、Living Image version 4.3.1 (Xenogen, Alameda, CA)ソフトウェアを用いて解析した。各動物のうつぶせの画像に原発腫瘍を含むように、所定容積のＲＯＩをおき、動物同定に基づいて標識した。全フラックス（光子／秒）を算出して、グループ間の解析を容易にできるように全ＲＯＩについて出力した。

測定およびエンドポイント
（ＢＬＩによって評価した場合の）原発腫瘍組織量の％Ｔ／Ｃを本研究では原発エンドポイント(primary endpoint)として使用した。％Ｔ／Ｃは、処置グループの平均ＢＬＩシグナルをコントロールグループの平均ＢＬＩシグナルで除したものに１００をかけた値として規定する。撮影を行う最終日であり、研究に残っているコントロールグループの動物の平均数より多いため、１３日目の％Ｔ／Ｃを分析に使用した。生存期間の延長(life span extension)を本研究の二次的エンドポイントとして使用した。完全寛解（ＣＲ）は、（生物発光イメージングに基づく）腫瘍質量が信頼できないシグナル（２．０Ｅ＋０５光子／秒）にまで減少することとして規定する。ＢＬＩのバックグランドレベルは、一般的に、１Ｅ＋０３〜１Ｅ＋０４光子／秒の範囲である。部分寛解（ＰＲ）は、最初の処置から腫瘍ＢＬＩシグナルが５０％以上減少することとして規定する。ＰＲはＣＲを含まない。

効能結果
グループ２：１・Ｍｓ、５０ｍｇ／ｋｇ、ＰＯ、ＱＤｘ１４（５〜１８日目に１日１回）
１・Ｍｓによる処置により、ＢＬＩによる１３日目の％Ｔ／Ｃ（１％；図１）に基づいて有意な（Ｐ＜０．０５）抗癌活性が得られた。平均生存期間は、２９．０日（１０７％ＩＬＳまたは１５日の生存期間の増加）（ｐ＜０．００１）。１８日まで、１００％の動物が、部分的な腫瘍の退縮を示し、完全退縮したものはなかった（図２）。

化合物１はまた、変異の活性化に加えてＴ７９０Ｍ二重変異体のキナーゼドメインを効果的に阻害するため、可逆的インヒビターの現在使用される治療で観察される耐性を解消する。非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）におけるＥＧＦＲの役割は確立されている(Ohashi, K.; et al. J. Clin. Oncol. 2013, 31, 1070)ため、化合物１は非小細胞肺癌の処置のための有効な治療剤となる。

化合物１は、ラットに経口投与されると、治療レベルの脳濃度となる（表１）。さらに、化合物１は、マウスでの頭蓋内に移植された脳腫瘍に対して有効であった。したがって、化合物１は、ＥＧＦＲが仲介する転移性脳腫瘍の治療に有効な治療剤となる。

化合物１・Ｍｓによる処置は、良好な耐容性を示し、ＢＬＩによる１３日目の％Ｔ／Ｃおよび生存期間に基づいて有意な（Ｐ＜０．０５）抗癌活性が得られた。すべてのマウスが最終的には病気で死亡したが、生存期間は化合物１・Ｍｓで処置することにより２倍以上伸びた。

前記実施例または好ましい実施形態は詳細な説明を目的として提供されたものであり、本発明を限定するものではない。上記態様の数多くの変更および組み合わせが特許請求の範囲に記載される本発明から逸脱しない限り利用できる。

Claims

下記式（ＩＩ）：

ただし、Ｑは、Ｃ−Ｒ^１０またはＮであり、
Ｒ^９は、ＣＨ_３またはＣＨ_２ＣＨ_２Ｆであり；さらに
Ｒ^１０は、ＨまたはＣＨ_３である、
の化合物、またはその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物を含む、患者の脳腫瘍の治療のための薬剤組成物。
ＱがＣ−Ｒ^１０である、請求項１に記載の薬剤組成物。
Ｒ^９がＣＨ_３である、請求項１または２に記載の薬剤組成物。
ＱがＣＨである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
前記式（ＩＩ）の化合物がさらに下記式：

の構造を有する、請求項１に記載の薬剤組成物。
前記式（ＩＩ）の化合物がさらに下記式：

の構造を有する、請求項１に記載の薬剤組成物。
Ｒ^９がＣＨ_２ＣＨ_２Ｆである、請求項１または２に記載の薬剤組成物。
前記式（ＩＩ）の化合物がさらに下記式：

の構造を有する、請求項７に記載の薬剤組成物。
前記式（ＩＩ）の化合物が下記からなる群から選択される、請求項１に記載の薬剤組成物。
前記式（ＩＩ）の化合物が下記からなる群から選択される、請求項９に記載の薬剤組成物。
第２の治療剤をさらに有する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
前記第２の治療剤は、異なるＥＧＦＲモジュレーターである、請求項１１に記載の薬剤組成物。
前記第２の治療剤は、化学療法剤である、請求項１１に記載の薬剤組成物。
前記脳腫瘍が転移性脳腫瘍である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
前記脳腫瘍が、ＥＧＦＲが仲介する非小細胞肺癌から発症する転移性脳腫瘍である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
前記式（ＩＩ）の化合物が化合物１のメタンスルホン酸塩（１・Ｍｓ）である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の薬剤組成物。
脳腫瘍の治療のための薬剤の製造における、下記式（ＩＩ）：

ただし、Ｑは、Ｃ−Ｒ^１０またはＮであり、
Ｒ^９は、ＣＨ_３またはＣＨ_２ＣＨ_２Ｆであり；さらに
Ｒ^１０は、ＨまたはＣＨ_３である、
の化合物、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物若しくは組成物の使用。
前記式（ＩＩ）の化合物が下記式：

の構造を有する、請求項１８に記載の使用。
前記式（ＩＩ）の化合物が下記からなる群から選択される、請求項１８に記載の使用。
前記脳腫瘍が転移性脳腫瘍である、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の使用。
前記脳腫瘍が、ＥＧＦＲが仲介する非小細胞肺癌から発症する転移性脳腫瘍である、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の使用。