JP6910751B2 - 保湿剤、抗炎症剤、抗酸化剤、皮膚のターンオーバー改善剤、細胞活性化剤及び美白剤 - Google Patents

Description

本発明は、生体安全性にすぐれ、化粧料（医薬部外品も含む）や美容用経口組成物に配合される機能性材料に関する。

皮膚の老化は、加齢に伴う細胞増殖・分化の不活化、ホルモン分泌の低下、細胞外マトリックス成分の量的低下などの内的要因と、太陽光（紫外線）に誘発される活性酸素、化学物質、又は環境ストレス等などの外的要因とが複雑に絡み合って生ずる現象である。それらのうち、外的要因である紫外線や化学物質は、皮膚の細胞や組織にダメージを与えて生体成分を変質させ、その結果、皮膚内に抗原を発生させる要因となる可能性がある。このことから、それらの外的要因は、抗原による皮膚の炎症やアレルギーの発症の要因となり、さらにはメラニン色素の異常沈着を誘発してシミ、ソバカス、肝斑などを生じさせるなど、肌に様々なダメージを与える。

以上の要因に生じる皮膚の老化を防ぎ、皮膚を健全、かつ、若々しい状態に保持するため、従来、種々の活性成分の使用が提案され、それら活性成分を配合した化粧品や経口用組成物が上市されている。例えば、ビタミンＣ類、ビタミンＥ類などの抗酸化剤；グリチルリチン酸などの抗炎症剤；各種紫外線吸収剤；α−ヒドロキシカルボン酸、胎盤抽出液、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸などの細胞賦活成分；コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸などの細胞外マトリックス成分；尿素などの保湿剤が提案されている。しかし、従来の活性成分では、有効性及び生体安全性の双方を十分に満足させることが困難であり、かかる点が改善された機能性原料が求められている。

本発明者らは、かかる従来技術の問題点に鑑みて、生体安全性の観点から天然物由来の新たな活性成分を見出すべく鋭意研究を行った。その結果、バラ科サクラ（モモ）属の植物であるモモの未成熟果実の抽出物が、すぐれた美肌作用及び美白作用を示し、当該抽出物を配合することで生体安全性及び有効性にすぐれた化粧料や美容用経口組成物の提供が可能になることを見出した。

バラ科植物であるモモの栽培過程においては、果実の結実数や大きさを調製するために、未成熟果実を間引く作業、すなわち、「摘果」と呼ばれる作業が行われる。このため、モモの中でも、これら間引かれる未成熟果実を有効利用することが求められていた。

従来、バラ科サクラ（モモ）属の植物であるモモの種子（桃仁）又は花の抽出物を有効成分とする化粧料が公知である（特許文献１，２）。また、未成熟のモモの果実がエラスターゼ活性阻害作用を有することは公知である（特許文献３）。さらに、バラ科植物（リンゴ、ナシ、モモ）の未成熟果実由来のポリフェノールを有効成分とする経口用又は外用の組成物も公知である（特許文献４，５）。しかし、モモの未成熟果実の抽出物自体が、保湿作用、抗炎症作用、抗酸化作用、皮膚のターンオーバー改善作用、細胞活性化作用及び美白作用を有し、これを配合することで、有効性にすぐれた化粧料や美容用経口組成物を提供することができることについては何ら知られていなかった。

特開平11-335235号 特開平07-309770号 特開2011-105693号 特開平08-259453号 特開平09-175982号

本発明は、バラ科サクラ属のモモの未成熟果実の抽出物を有効成分とする保湿剤である。
また、本発明は、バラ科サクラ属のモモの未成熟果実の抽出物を有効成分とする抗炎症剤である。
また、本発明は、バラ科サクラ属のモモの未成熟果実の抽出物を有効成分とする抗酸化剤である。
また、本発明は、バラ科サクラ属のモモの未成熟果実の抽出物を有効成分とする皮膚のターンオーバー改善剤である。
また、本発明は、バラ科サクラ属のモモの未成熟果実の抽出物を有効成分とする細胞活性化剤である。
また、本発明は、バラ科サクラ属のモモの未成熟果実の抽出物を有効成分とする美白剤である。

本発明によれば、有効成分であるモモの未成熟果実の抽出物が保湿作用、抗炎症作用、抗酸化作用、皮膚のターンオーバー改善作用、細胞活性化作用及び美白作用の相乗作用により、すぐれた化粧料や美容用経口組成物の配合剤を提供することができる。加えて、当該抽出物は天然物由来のものであるため、生体安全性にすぐれた化粧料や美容用経口組成物を提供することもできる。

以下、本発明について詳細に説明する。なお、本明細書において化粧料なる文言は、所謂化粧料のほかに医薬部外品までも含む広義で用いる。
本発明で用いるバラ科サクラ属のモモ（Prunus persica）の品種は、特に限定されるものではなく、例えば、白鳳、日川白鳳、八幡白鳳、清水白桃、まさひめ、川中島白桃、大久保、あかつき、浅間白桃が挙げられ、いずれの品種のモモを使用しても良い。

また、本発明で云うモモの未成熟果実とは、その直径が０．５〜５ｃｍ、好ましくは２〜３ｃｍのものを指す。

抽出物の調製は、モモの未成熟果実を、必要ならば予め水洗して異物を除いた後、そのまま又は乾燥した上、必要に応じて細切又は粉砕し、浸漬法等の常法に従って抽出溶媒と接触させることで行うことが可能である。

抽出溶媒としては、水；メタノール、エタノール、プロパノールなどの低級アルコール類；エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリンなどの多価アルコール類；酢酸エチル、酢酸ブチル、プロピオン酸メチルなどのエステル類；アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類；エチルエーテル、イソプロピルエーテルなどのエーテル類；ｎ−ヘキサン、トルエン、クロロホルムなどの炭化水素系溶媒などが挙げられ、それらは単独で又は二種以上混合して用いられる。

それら抽出溶媒のうちでも、本発明においては水、低級アルコール類又は多価アルコール類などの親水性溶媒が好適である。この親水性溶媒を用いる場合の好ましい例としては、例えば、水もしくは低級アルコール類（特にエタノール）の単独使用、水と低級アルコール類（特にエタノール）との混合溶媒、又は水と多価アルコール類（特に１，３−ブチレングリコールもしくはプロピレングリコール）との混合溶媒の使用等が挙げられるが、なかでも水の単独使用が最も好ましい。混合溶媒を用いる場合の混合比は、例えば水とエタノールとの混合溶媒であれば、容量比（以下同じ）で１：１〜２５：１、水とグリセリンとの混合溶媒であれば１：１〜２０：１、水と１，３−ブチレングリコールとの混合溶媒であれば、１：１〜２０：１の範囲とすることが好ましい。

抽出物の調製に際して、抽出物のｐＨに特に限定はないが、一般には４〜８の範囲とすることが好ましい。かかる意味で、必要であれば前記抽出溶媒に、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウムなどのアルカリ性調整剤を配合し、所望のｐＨとなるように調整してもよい。

抽出温度、抽出時間等の抽出条件は、用いる溶媒の種類やｐＨによっても異なるが、例えば水を抽出溶媒とする場合であれば、抽出温度は０〜８５℃の範囲が好ましく、また、抽出時間は、２〜３時間の範囲が好ましい。

上記条件により得られる抽出物は、一般にはｐＨを４〜８に調整した上、これをそのまま化粧料や美容用経口組成物の配合剤として使用しても、減圧濃縮等により所望の濃度として使用しても良い。

以上の条件により調製された抽出物は、実質的にポリフェノールを含まないことから、前記特許文献４，５に開示されているバラ科植物（リンゴ、ナシ、モモ等）の未成熟果実由来のポリフェノールと区別される。

本発明のモモの未成熟果実の抽出物を含む化粧料（医薬部外品も含む）としては、例えば乳液、クリーム、ローション、エッセンス、パックなどの基礎化粧料、口紅、ファンデーション、リクイドファンデーション、メイクアッププレスパウダー、ほほ紅、白粉などのメイクアップ化粧料、洗顔料、ボディシャンプー、石けんなどの清浄用化粧料、シャンプー、ヘアコンディショナー、ヘアクリームなどの毛髪用化粧料、さらには浴剤等が挙げられるが、勿論これらに限定されるものではない。また、美容用経口組成物としては、美容飲料、栄養ドリンク、スポーツドリンク、ニアウォーター、ビタミン飲料、ミネラル飲料、アルコール飲料などの飲料；各種スープ類（粉末スープも含む）、乳製品、ゼリー、キャンディ、錠菓、ガム等の食品；錠剤、液状、顆粒状又はゼリー状の健康食品・飲料等に配合することができるが、本発明はこれに限るものではなく、経口摂取できる飲食品等に配合することができる。

化粧料におけるモモの未成熟果実の抽出物の配合量は、抽出物の固形分として、基礎化粧料の場合は、一般に０．００２〜１．０重量％、好ましくは０．０２〜０．２重量％の範囲、メイクアップ化粧料の場合は、一般に０．００２〜１．０重量％、好ましくは０．０２〜０．２重量％の範囲、又清浄用化粧料の場合は、一般に０．００２〜１０．０重量％、好ましくは０．０２〜７．０重量％の範囲である。また、毛髪用化粧料の場合は、抽出物の固形分として、一般的には０．００００１〜５．０重量％（固形分重量％、以下同じ）であり、好ましくは、０．０００１〜３．０重量％である。また、美容用経口組成物におけるモモの未成熟果実の抽出物の配合量は、抽出物の固形分として、０．１〜１５重量％の範囲が好ましい。

化粧料又は美容用経口組成物には、必須成分のモモの未成熟果実の抽出物のほかに、通常化粧料に用いられる成分、例えば油性成分、界面活性剤（合成系、天然物系）、保湿剤、増粘剤、防腐・殺菌剤、粉体成分、紫外線吸収剤、抗酸化剤、色素、香料等を必要に応じて適宜配合することができる。また、モモの未成熟果実の抽出物の有効性、特長を損なわない限り、他の生理活性成分を組み合わせて配合することも何ら差し支えない。

ここで、油性成分としては、例えばオリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、大豆油、米油、米胚芽油、ヤシ油、パーム油、カカオ油、メドウフォーム油、シアーバター、ティーツリー油、アボガド油、マカデミアナッツ油、植物由来スクワランなどの植物由来の油脂類；ミンク油、タートル油などの動物由来の油脂類；ミツロウ、カルナウバロウ、ライスワックス、ラノリンなどのロウ類；流動パラフィン、ワセリン、パラフィンワックス、スクワランなどの炭化水素類；ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ｃｉｓ−１１−エイコセン酸などの脂肪酸類；ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコールなどの高級アルコール類；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、２−エチルヘキシルグリセライド、高級脂肪酸オクチルドデシル（ステアリン酸オクチルドデシル等）などの合成エステル類及び合成トリグリセライド類等が挙げられる。

界面活性剤としては、例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルなどの非イオン界面活性剤；脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレン脂肪アミン硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル燐酸塩、α−スルホン化脂肪酸アルキルエステル塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル燐酸塩などのアニオン界面活性剤；第四級アンモニウム塩、第一級〜第三級脂肪アミン塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、２−アルキル−１−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、Ｎ，Ｎ−ジアルキルモルフォルニウム塩、ポリエチレンポリアミン脂肪酸アミド塩などのカチオン界面活性剤；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニオベタイン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリアルキル−Ｎ−アルキレンアンモニオカルボキシベタイン、Ｎ−アシルアミドプロピル−Ｎ′，Ｎ′−ジメチル−Ｎ′−β−ヒドロキシプロピルアンモニオスルホベタインなどの両性界面活性剤等を使用することができる。

乳化剤乃至乳化助剤としては、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体（水素添加レシチン等）、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀など）等を配合することもできる。

保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等があり、さらにトレハロース等の糖類、ムコ多糖類（例えば、ヒアルロン酸及びその誘導体、コンドロイチン及びその誘導体、ヘパリン及びその誘導体など）、エラスチン及びその誘導体、コラーゲン及びその誘導体、ＮＭＦ関連物質、乳酸、尿素、高級脂肪酸オクチルドデシル、海藻抽出物、シラン根（白及）抽出物、各種アミノ酸及びそれらの誘導体が挙げられる。

増粘剤としては、例えばアルギン酸、寒天、カラギーナン、フコイダン等の褐藻、緑藻又は紅藻由来成分；シラン根（白及）抽出物；ペクチン、ローカストビーンガム、アロエ多糖体等の多糖類；キサンタンガム、トラガントガム、グアーガム等のガム類；カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体；ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸共重合体等の合成高分子類；ヒアルロン酸及びその誘導体；ポリグルタミン酸及びその誘導体等が挙げられる。

防腐・殺菌剤としては、例えば尿素；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類；フェノキシエタノール、ジクロロフェン、ヘキサクロロフェン、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、サリチル酸、エタノール、ウンデシレン酸、フェノール類、ジャマール（イミダゾデイニールウレア）、１，２−ペンタンジオール、各種精油類、樹皮乾留物等がある。

粉体成分としては、例えばセリサイト、酸化チタン、タルク、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、酸化ジルコニウム、硫酸バリウム、無水ケイ酸、雲母、ナイロンパウダー、ポリエチレンパウダー、シルクパウダー、セルロース系パウダー、穀類（米、麦、トウモロコシ、キビなど）のパウダー、豆類（大豆、小豆など）のパウダー等がある。

紫外線吸収剤としては、例えばパラアミノ安息香酸エチル、パラジメチルアミノ安息香酸エチルヘキシル、サリチル酸アミル及びその誘導体、パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル、桂皮酸オクチル、オキシベンゾン、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸塩、４−ターシャリーブチル−４−メトキシベンゾイルメタン、２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、アロエ抽出物等がある。

抗酸化剤としては、例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ビタミンＥ及びその誘導体（例えば、ビタミンＥニコチネート、ビタミンＥリノレート等）等がある。

美白剤としては、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、コウジ酸及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン又はその誘導体、エラグ酸及びその誘導体、ニコチン酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体、トラネキサム酸及びその誘導体、４−メトキシサリチル酸カリウム塩、マグノリグナン（5,5'−ジプロピル−ビフェニル−2,2’−ジオール）、４−ＨＰＢ（ロドデノール、４−(４−ヒドロキシフェニル）−４−ブタノール））、ヒドロキシ安息香酸及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、α−ヒドロキシ酸、ＡＭＰ（アデノシンモノホスフェイト、アデノシン１リン酸）が挙げられ、これらを単独で配合しても、複数を組み合わせて配合しても良い。

上記のコウジ酸誘導体としては、例えばコウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸ジブチレートなどのコウジ酸エステル類、コウジ酸エーテル類、コウジ酸グルコシドなどのコウジ酸糖誘導体等が、アスコルビン酸誘導体としては、例えばＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルマグネシウムなどのアスコルビン酸エステル塩類、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド、Ｌ−アスコルビン酸−５−グルコシドなどのアスコルビン酸糖誘導体、それらアスコルビン酸糖誘導体の６位アシル化物（アシル基は、ヘキサノイル基、オクタノイル基、デカノイル基など）、Ｌ−アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸テトララウリン酸エステルなどのＬ−アスコルビン酸テトラ脂肪酸エステル類、３−Ｏ−エチルアスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸−６−Ｏ−パルミテートナトリウム、グリセリルアスコルビン酸又はそのアシル化誘導体、ビスグリセリルアスコルビン酸等のアスコルビン酸グルセリン誘導体、Ｌ−アスコルビン酸リン酸アミノプロピル、Ｌ−アスコルビン酸のヒアルロン酸誘導体等が、ハイドロキノン誘導体としては、アルブチン（ハイドロキノン−β−Ｄ−グルコピラノシド）、α−アルブチン（ハイドロキノン−α−Ｄ−グルコピラノシド）等が、トラネキサム酸誘導体としては、トラネキサム酸エステル（例えば、トラネキサム酸ラウリルエステル、トラネキサム酸ヘキサデシルエステル、トラネキサム酸セチルエステル又はその塩）、トラネキサム酸のアミド体（例えば、トラネキサム酸メチルアミド）などが挙げられ、レゾルシノール誘導体としては、例えば、４−ｎ−ブチルレゾルシノール、４−イソアミルレゾルシノール等が、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体としては、例えば２，５−ジアセトキシ安息香酸、２−アセトキシ−５−ヒドロキシ安息香酸、２−ヒドロキシ−５−プロピオニルオキシ安息香酸等が、ニコチン酸誘導体としては、例えばニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等が、α−ヒドロキシ酸としては、例えば乳酸、リンゴ酸、コハク酸、クエン酸、α−ヒドロキシオクタン酸等がある。

生理活性成分としては、美白成分として、例えば、胎盤抽出液、ソウハクヒ抽出物、ユキノシタ抽出物、シソ抽出物、米糠抽出物又はその加水分解物、白芥子抽出物又はその加水分解物、白芥子の発酵物、シャクヤク抽出物又はその加水分解物、乳酸菌醗酵米、ムラサキシキブ抽出物、ハス種子抽出物又はその加水分解物、ハス種子発酵物、党参抽出物、ハトムギ加水分解物、ハトムギ種子発酵物、ローヤルゼリー発酵物、酒粕発酵物、パンダヌス・アマリリフォリウス(Pandanus amaryllifolius Roxb.)抽出物、アルカンジェリシア・フラバ（Arcangelicia flava Merrilli）抽出物、カミツレ抽出物等が上げられ、抗老化成分として、サンゴ草抽出物、イネの葉の抽出物又はその加水分解物、ナス（水ナス、長ナス、賀茂ナス、米ナス等）抽出物又はその加水分解物、アンズ果実の抽出物、カタメンキリンサイ等の海藻の抽出物、アマモ等の海産顕花植物の抽出物、豆乳発酵物、クラゲ水、米抽出物又はその加水分解物、米醗酵エキス、発芽米抽出物又はその加水分解物、発芽米発酵物、黒豆抽出物又はその加水分解物、ダマスクバラの花の抽出物、タケノコの皮の抽出物、リノール酸及びその誘導体もしくは加工物（例えばリポソーム化リノール酸など）、動物又は魚由来のコラーゲン及びその誘導体、エラスチン及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体（ジカリウム塩等）、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、ビタミンＡ及びその誘導体、アラントイン、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、ゲンチアナ抽出物、甘草抽出物、ニンジン抽出物、アロエ抽出物、ミツイシコンブ抽出物、ヘチマ抽出物、アナアオサ抽出物、ジュアゼイロ（Zizyphus joazeiro)抽出物等がある。

次に、製造例、実施例(処方例)及び試験例によって本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。なお、以下において、部はすべて重量部を、また％はすべて重量％を意味する。

製造例１．モモの未成熟果実のエキスの調製
モモ（Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ Ｂａｔｓｃｈ）の未成熟果実６０ｇに精製水６００ｇを混合し、静置した状態で、８０℃下において２時間抽出を行い、抽出物溶液４５０．１ｇを得た。その後、得られた抽出物溶液をろ過し、さらに、ろ過した溶液に対して１％の活性炭（和光純薬株式会社製）を添加して活性炭処理を１時間行い、淡褐色のモモの未成熟果実の抽出物溶液４３１．０ｇを得た（pH４．１、固形分濃度３．５０％）。

比較製造例１．モモの成熟果実のエキスの調製
モモ（Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ Ｂａｔｓｃｈ）の成熟果実（皮、種子付き乾燥物）１５ｇに精製水１５０ｇを混合し、静置した状態で、８０℃下において、２時間抽出を行った。その後、モモの成熟果実の抽出物溶液１１０．５ｇを得た。その後、得られた抽出物溶液をろ過し、さらに、ろ過した溶液に対して１％の活性炭（和光純薬株式会社製）を添加して活性炭処理を１時間行い、モモの成熟果実の抽出物溶液を得た（ｐＨ５．０、固形分濃度７．３０％）。

実施例１．クリーム
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ５．０
パラフィン ５．０
グリセリルモノステアレート ２．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ６．０
フェノキシエタノール ０．１
［Ｂ成分］ 部
製造例１の抽出物溶液 ２．５
グリセリン ５．０
カルボキシメチルモノステアレート ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合してクリームを得た。

実施例２．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
オリーブ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
［Ｂ成分］ 部
製造例１の抽出物溶液 ２．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
コラーゲン ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。

実施例３．ローション
［Ａ成分］ 部
製造例１の抽出物溶液 ２．０
エタノール １０．０
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
フェノキシエタノール ０．２
クエン酸 ０．１
クエン酸ナトリウム ０．３
カルボキシビニルポリマー ０．１
香料 適量
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が１００部となる量
上記の成分を混合してローションを得た。

実施例４．化粧水
［Ａ成分］ 部
オリーブ油 １．０
ポリオキシエチレン（５．５）セチルアルコール ５．０
［Ｂ成分］ 部
製造例１の抽出物溶液 ５．０
エタノール ５．０
グリセリン ５．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］ 部
香料 適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加温後、Ａ成分にＢ成分を加えて攪拌し、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えて攪拌混合し、さらに３０℃以下まで冷却して化粧水を得た。

実施例５．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例１の抽出物溶液 ５．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
水酸化カリウム ０．５
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。

製造例６．乳液
実施例５のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム２．０部を用いるほかは実施例と同様にして乳液を得た。

実施例７．乳液
実施例５のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてトラネキサム酸２．０部を用いるほかは実施例５と同様にして乳液を得た。

実施例８．乳液
実施例５のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてアルブチン２．０部を用いるほかは実施例５と同様にして乳液を得た。

実施例９．乳液
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン ６．０
ホホバ油 １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート ２．０
大豆レシチン １．５
メチルパラベン ０．１５
エチルパラベン ０．０３
［Ｂ成分］
製造例１の抽出物溶液 ５．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド ２．０
アルブチン ３．０
水酸化カリウム ０．５
グリセリン ３．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
カルボキシメチルセルロース ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム ０．０１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。

実施例１０．リキッドファンデーション
［Ａ成分］ 部
ステアリン酸 ２．４
モノステアリン酸プロピレングリコール ２．０
セトステアリルアルコール ０．２
液状ラノリン ２．０
流動パラフィン ３．０
ミリスチン酸イソプロピル ８．５
プロピルパラベン ０．０５
［Ｂ成分］
製造例１の抽出物溶液 ２．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．２
ベントナイト ０．５
プロピレングリコール ４．０
トリエタノールアミン １．１
メチルパラベン ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン ８．０
タルク ４．０
着色顔料 適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ加温した後混合攪拌した。これを再加温し、上記のＣ成分を添加して型に流し込み、室温になるまで攪拌してリキッドファンデーションを得た。

実施例１１．クリームファンデーション
［Ａ成分］ 部
ステアリン酸 ５．０
セタノール ２．０
モノステアリン酸グリセリル ３．０
流動パラフィン ５．０
スクワラン ３．０
ミリスチン酸イソプロピル ８．０
ポリオキシエチレン（２０）モノステアリン酸グリセリル ２．０
プロピルパラベン ０．１
［Ｂ成分］ 部
製造例１の抽出物溶液 ２．５
ソルビトール ３．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
トリエタノールアミン １．５
メチルパラベン ０．１
精製水 全量が１００部となる量
［Ｃ成分］ 部
酸化チタン ８．０
タルク ２．０
カオリン ５．０
ベントナイト １．０
着色顔料 適量
［Ｄ成分］ 部
香料 ０．３
Ｃ成分を混合し、粉砕機で粉砕した。Ｂ成分を混合し、これに粉砕したＣ成分を加え、コロイドミルで均一分散させた。Ａ成分及び均一分散させたＢ、Ｃ成分をそれぞれ８０℃に加温後、Ｂ、Ｃ成分にＡ成分を攪拌しながら加え、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。これを５０℃まで冷却した後、Ｄ成分を加えて攪拌混合し、さらに攪拌しながら３０℃以下まで冷却してクリームファンデーションを得た。

実施例１２．ボディシャンプー
［Ａ成分］ 部
Ｎ−ラウロイルメチルアラニンナトリウム ２５．０
ヤシ油脂肪酸カリウム液（４０％） ２６．０
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド ３．０
メチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］ 部
製造例１の抽出物溶液 ５．０
１，３−ブチレングリコール ２．０
精製水 全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してボディシャンプーを得た。

処方例１３．ヘアシャンプー
［Ａ成分］ 部
Ｎ−ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム １０．０
ポリオキシエチレン（３）アルキルエーテル硫酸ナトリウム ２０．０
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン １０．０
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド ４．０
メチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
クエン酸 ０．１
製造例１の抽出物 ２．０
１，３−ブチレングリコール ２．０
精製水 全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してヘアシャンプーを得た。

実施例１４．ヘアコンディショナー
［Ａ成分］ 部
ポリオキシエチレン（１０）硬化ヒマシ油 １．０
塩化ジステアリルジメチルアンモニウム １．５
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム ２．０
２−エチルヘキサン酸グリセリル １．０
セタノール ３．２
ステアリルアルコール １．０
メチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例１の抽出物 ２．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
精製水 全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してヘアリンスを得た。

処方例１５．美容飲料
製造例１の抽出物 １０．０
コラーゲン ８．０
クエン酸 ０．１
甘味料（スクロース） ０．０１
酸化防止剤（ビタミンＣ）０．０１
精製水 全量が１００部となる量

処方例１６．錠剤
製造例１の抽出物 ２０．０
ビタミンＣ ２０．０
脂肪酸エステル １０．０
乳酸カルシウム ２０．０
乳糖 ３０．０
上記重量部の各成分を混合した後、加圧成形し、錠剤とした。

試験例１．正常ヒト表皮細胞の遺伝子発現評価試験
本試験においては、本発明に係るモモの未成熟果実の抽出物による、正常ヒト表皮細胞の遺伝子発現に与える影響について評価するため、以下の通り試験を行った。
［試験方法］
正常ヒト表皮細胞を増殖添加剤含有HuMediaKG2［クラボウ社製］にて６×１０^５個／ｍＬに調製し、φ６ｃｍシャーレに１ｍＬを播種して、５％ＣＯ_２、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。２４時間培養後、さらに、製造例１の抽出物（試料溶液）を含んだ培養液（培養液全量に対して溶液として終濃度が２．０％となるように当該抽出物を添加したもの）を添加して培養した。また、比較対照として、試料溶液に代えて、２．０％のＰＢＳ（−）溶液のみを含んだ培養液を添加したコントロール区を設定した。２４時間培養後、それぞれの試験区の細胞をＴｒｉｚｏｌ試薬（Invitrogen社製）１ｍＬで回収した。回収した細胞に対してクロロホルム（和光純薬工業社製）２００μＬ添加して撹拌混合し遠心分離機（TOMY社製/MX-160）で１５，０００rpm、４℃の条件下で１５分間遠心分離した後、水層のみを４００μＬ分取した。回収した水層にイソプロパノール（和光純薬工業社製）５００μＬを添加して撹拌混合し、１５，０００ｒｐｍ、４℃の条件下で１５分間遠心分離してtotalＲＮＡの沈殿物を得た。totalＲＮＡに７５％エタノールを１ｍＬ添加して撹拌して洗浄し、１５，０００ｒｐｍ、４℃条件下で１５分間遠心分離して沈殿を回収した。回収したtotal ＲＮＡを所定のキット（PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser [Perfect Real Time]（タカラバイオ社製））を用いて逆転写反応し、ｃＤＮＡを合成した。合成したｃＤＮＡをサンプルとして、Thermal Cycler Dice（登録商標）Real Time System Single（タカラバイオ社製）、及びＳＹＢＲ（登録商標）Premix Ex TaqTM II(Perfect Real Time)［タカラバイオ社製］を用いて、各種遺伝子の発現と、内部標準物質Ｇ３ＰＤＨ遺伝子の発現の検出を行った。ここで、Ｇ３ＰＤＨ（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）は、ハウスキーピング遺伝子（多くの組織や細胞中に共通して一定量発現する遺伝子であって、常に発現され，細胞の維持，増殖に不可欠な遺伝子である）の一つであり、発現量が常に一定とされていることから、ＰＣＲの実験では内部標準として用いられるものである。試験結果は、Ｇ３ＰＤＨ遺伝子の発現量を一定とした場合の、それぞれの試験区での各遺伝子の発現量を比較した。本試験系においては、コントロール区のそれぞれの遺伝子の発現量を１００としたときの試験区でのその遺伝子の発現量の相対値を求めた。 試験結果を表１〜６に示す。

［表１］

［表２］

表１，２に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、表皮細胞のヒアルロン酸を分解する酵素であるヒアルロノグルコサミニダーゼ（Hyaluronoglucosaminidase1 [HYAL1]、Hyaluronoglucosaminidase2 [HYAL2]）をコードする遺伝子の発現を抑制することから、皮膚の保湿機能を改善することができる。

［表３］

［表４］

表３，４に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、表皮細胞の基底膜を構成するＩＶ型コラーゲンを分解する酵素であるマトリックスメタロプロテアーゼ（matrix metalloproteinase2 [MMP2]、matrix metalloproteinase9 [MMP9]）をコードする遺伝子の発現を抑制することから、表皮細胞の基底膜を保護し、皮膚の表層のターンオーバーを改善することができる。

［表５］

表５に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、炎症性サイトカインであるインターロイキン−１（Interleulin1 alpha [IL1A2]）をコードする遺伝子の発現を抑制することから、皮膚の炎症及び色素沈着を抑制することができる。

［表６］

表６に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、活性酸素種の一つである一酸化窒素（ＮＯ）合成酵素（Nitric Oxide Synthase [NOS2]）をコードする遺伝子の発現を抑制することから、細胞の酸化ダメージを抑制し、さらには、活性酸素により生じる皮膚の色素沈着を抑制することができる。

試験例２．正常ヒト線維芽細胞の遺伝子発現評価試験
本試験においては、本発明に係るモモの未成熟果実の抽出物による、正常ヒト線維芽細胞の遺伝子発現に与える影響について評価するため、以下の通り試験を行った。
［試験方法］
正常ヒト線維芽細胞を０．５容量％ＮＣＳ含有イーグルＭＥＭ（日水製薬社製）にて６×１０^５個／ｍＬに調製し、φ６ｃｍシャーレに１ｍＬを播種して、５％ＣＯ_２、飽和水蒸気下、３７℃で培養した。２４時間培養後、さらに、本発明に係る製造例１の抽出物を含んだ培養液（培養液全量に対して溶液として終濃度が２．０％となるように当該抽出物を添加したもの）を添加して培養した。また、比較対照として、本発明に係る製造例１の抽出物に代えて、ＰＢＳ（−）のみを含んだ培養液（培養液全量に対するＰＢＳ（−）の終濃度を２．０％に調整したもの）を添加した試験区（コントロール区）を設定した。２４時間培養後、それぞれの試験区の細胞をＴｒｉｚｏｌ試薬（Invitrogen社製）１ｍＬで回収した。回収した細胞に対してクロロホルム（和光純薬工業社製）２００μＬ添加して撹拌混合し遠心分離機（TOMY社製/MX-160）で１５，０００rpm、４℃の条件下で１５分間遠心分離した後、水層のみを４００μＬ分取した。回収した水層にイソプロパノール（和光純薬工業社製）５００μＬを添加して撹拌混合し、１５，０００ｒｐｍ、４℃の条件下で１５分間遠心分離してtotalＲＮＡの沈殿物を得た。totalＲＮＡに７５％エタノールを１ｍＬ添加して撹拌して洗浄し、１５，０００ｒｐｍ、４℃条件下で１５分間遠心分離して沈殿を回収した。回収したtotal ＲＮＡを所定のキット（PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)（タカラバイオ社製））を用いて逆転写反応し、ｃＤＮＡを合成した。合成したｃＤＮＡをサンプルとして、Thermal Cycler Dice（登録商標）Real Time System Single（タカラバイオ社製）、及びＳＹＢＲ（登録商標）Premix Ex TaqTM II(Perfect Real Time)［タカラバイオ社製］を用いて、各種遺伝子の発現と、内部標準物質Ｇ３ＰＤＨ遺伝子の発現の検出を行った。ここで、Ｇ３ＰＤＨ（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）は、ハウスキーピング遺伝子（多くの組織や細胞中に共通して一定量発現する遺伝子であって、常に発現され，細胞の維持，増殖に不可欠な遺伝子である）の一つであり、発現量が常に一定とされていることから、ＰＣＲの実験では内部標準として用いられるものである。試験結果は、Ｇ３ＰＤＨ遺伝子の発現量を一定とした場合の、それぞれの試験区での各遺伝子の発現量を比較した。本試験系においては、コントロール区のそれぞれの遺伝子の発現量を１００としたときの試験区でのその遺伝子の発現量の相対値を求めた。試験結果を表７〜１５に示す。

［表７］

表７に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、真皮ヒアルロン酸の合成酵素であるヒアルロナンシンターゼ（Hyaluronan synthase2 [HAS2]）をコードする遺伝子の発現を亢進することから、皮膚のハリ等を向上させることができる。

［表８］

表８に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、真皮エラスチン線維の構成タンパク質（Elastin microfibril interfacer1 [EMILIN1]）をコードする遺伝子の発現を亢進することから、皮膚のハリ等を向上させることができる。

［表９］

表９に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、皮膚の基底膜を構成するプロテオグリカンの一種であるXVIII型コラーゲン（collagen, type XVIII, alpha 1 [COL18A1]）をコードする遺伝子の発現を亢進することから、基底膜を構成するプロテオグリカンの合成を促進し、皮膚のターンオーバー等を改善することができる。

［表１０］

表１０に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、炎症性物質であるプロスタグランジンＩ２の合成に関与する酵素（prostaglandin I2 synthase [PTGIS]）をコードする遺伝子の発現を抑制することから、皮膚の炎症及び色素沈着を抑制することができる。

［表１１］

［表１２］

表１１、１２に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、生体内の抗酸化物質であるグルタオンの存在下で、有害分子を解毒、及び酸化ストレス応答に関与するグルタチオンペルオキシダーゼ（glutathione peroxidase1 [GPX]）やグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（Glutathione S-transferase mu2 [GSTM2]）をコードする遺伝子の発現を亢進することから、生体内の解毒効果、酸化ストレスによる障害、疾患を予防、改善することができる。

［表１３］

［表１４］

表１３、１４に示すように、生体内のエネルギー代謝経路（ＴＣＡ回路）において重要な役割を果たす酵素であるアコニターゼ（Aconitase1 [ACO1]、Aconitase2 [ACO2]）をコードする遺伝子の発現を亢進することから、加齢によって低下する細胞内のエネルギー合成を活性化することができる。

［表１５］

表１５に示すように、細胞外マトリックス（例えば、コラーゲン、プロテオグリカン、エラスチンなど）を分解する酵素であるメタロペプチダーゼの阻害剤（Metallopeptidase inhibitor3 [TIMP3]）をコードする遺伝子の発現を亢進することから、細胞外マトリックスを保護することができる。

試験例３．線維芽細胞ＡＴＰ合成亢進効果
ヒト真皮由来線維芽細胞ＮＢ１ＲＧＢを、０．５％ＮＣＳ含有イーグル最少必須培地（日水製薬社製）を入れた９６穴マイクロプレートに１×１０^４個／穴播種し、３７℃、５．０％ＣＯ_２の条件下に１日間プレ培養した後、培地に製造例１の抽出物を試料溶液として２．５％の濃度（培地全量に対する試料溶液の溶液としての終濃度）となるように添加し、同条件でさらに３日間培養した。比較としてＰＢＳ(−)及び成熟桃エキスも２．５％の濃度となるように添加して同様に培養した。次に、培地を除去してＰＢＳ（−）を１００μＬ／穴添加し、ＡＴＰ発光試薬（東洋オービット社）を１００μＬ／穴添加してマイクロプレートシェイカーで１分間撹拌後、２３℃に設定したルミノメーター（TECAN社）で１０分間静置して発光量を測定した。本試験系においては、ＰＢＳ（−）２．５％添加区の発光量を１００としたときの他の試験区での発光量の相対値を求めてＡＴＰ合成率とした。

試験例３の結果を表１６に示す。
［表１６］

表１６に示すように、本発明に係る製造例１の抽出物は、比較例１のモモ成熟果実の抽出物と比較して、格段にすぐれた線維芽細胞ＡＴＰ合成亢進効果を有することが確認された。

試験例４：フェノール類（ポリフェノール等）の確認試験
［試料］
製造例１のモモの未成熟果実の抽出物溶液（本発明試料１）
［試験方法］
まず、塩化第二鉄（和光純薬株式会社製）９ｇを精製水１００ｍＬに溶解し、塩化第二鉄溶液を調製した。次に、試料溶液１ｇに対して上記塩化第二鉄溶液を加えて、呈色具合を観察した。
［結果］
本発明試料１に塩化第二鉄溶液を加えても、試料溶液の色に変化は見られず、呈色反応は認められなかった。塩化第二鉄はフェノール類（ポリフェノール等）と反応して、緑〜黒青色を示すことから、本発明に係るモモの未成熟果実の抽出物にはフェノール類が含まれていないことが確認された。

Claims (3)

1. バラ科（Rosaceae）サクラ属（Prunus）のモモ（Prunus persica）の未成熟果実の抽出物（塩化第二鉄反応陰性の抽出物）を有効成分とするヒアルロノグルコサミニダーゼ１遺伝子発現抑制作用及びヒアルロノグルコサミニダーゼ２遺伝子発現抑制作用に基づく表皮保湿機能改善剤。
2. バラ科（Rosaceae）サクラ属（Prunus）のモモ（Prunus persica）の未成熟果実の抽出物（塩化第二鉄反応陰性の抽出物）を有効成分とするマトリックスメタロプロテアーゼ遺伝子発現抑制作用及びＸＶＩＩＩ型コラーゲン遺伝子発現亢進作用に基づく表皮のターンオーバー改善剤。
3. バラ科（Rosaceae）サクラ属（Prunus）のモモ（Prunus persica）の未成熟果実の抽出物（塩化第二鉄反応陰性の抽出物）を有効成分とするインターロイキン−１遺伝子発現抑制作用及び一酸化窒素合成酵素遺伝子発現抑制作用に基づく美白剤。