JP7309568B2 - 新規なジンセノサイドを含む運動能力増進用又は抗疲労用組成物 - Google Patents
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Description
本明細書は、新規なジンセノサイド及びこれを含む組成物に関して記述する。
高麗人参（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ.Ａ. Ｍｅｙｅｒ）は、五加皮科人参属に属する植物で、韓国、中国、日本等地で２,０００年余りの前から使用されてきた生薬である。高麗人参の代表的生理活性成分として、サポニン、多糖類、ペプチド、シトステロール、ポリアセチレン及び脂肪酸が知られており、これらのうち高麗人参のサポニンをジンセノサイド（ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ）という。高麗人参の効能や効果としては、中枢神経系に対する作用、抗発がん作用と抗がん活性、免疫機能調節作用、抗糖尿作用、肝機能亢進効能、心血管障害改善及び抗動脈硬化作用、血圧調節作用、更年期障害改善及び骨粗鬆症に及ぼす効果、抗ストレス及び抗疲労作用、抗酸化活性及び老化抑制効能などが知られている。前記ジンセノサイドは、高麗人参の根、葉、実、花、種子などの部位に応じてその含量や組成に大きな差異があるが、前記のように知られた効能の大半は、高麗人参の根の部分に関するものであって、高麗人参の根を除いた高麗人参の他の部分に関する研究は不足している実情である。
健康や運動についての関心が高まる中、運動選手だけでなく一般人の運動能力を増進させたりエネルギーを供給したりすることができる補助剤や機能性食品又は飲料の需要もともに増加している。かかる運動能力を増加させるための成分としては、タンパク質補助食品、炭水化物補助食品又は蛋白同化ステロイド（ａｎａｂｏｌｉｃ ｓｔｅｒｏｉｄ）、カフェインなどが知られているが、このような化合物は服用時に副作用を伴うことがあり、その使用が制限されている。そこで、人体に副作用がなく且つ人体に効果的にエネルギーを供給することができる製品の開発が求められている。
Cho et al., Biol Pharm Bull 33(7):1128
一観点において、本発明が解決しようとする課題は、優れた運動能力増進効能を有する新規なジンセノサイドを含む組成物を提供することである。
一観点において、本発明が解決しようとする課題は、優れた抗疲労効能を有する新規なジンセノサイドを含む組成物を提供することである。
一側面において、本発明は（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１－>２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール（（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１－>２）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ－ｄａｍｍａｒ－３－ｏｎｅ－２０,２４－ｅｐｏｘｙ－６ａ，１２ｂ，２５－ｔｒｉｏｌ）、その薬学的に許容可能な塩、その水和物又は溶媒和物を有効成分として含む運動能力増進用又は抗疲労用組成物を提供する。
一観点において、本発明は、運動能力増進と抗疲労に優れた効果を有する新規なジンセノサイド、その薬学的に許容可能な塩、その水和物又は溶媒和物を含む組成物を提供することができる。
以下、添付した図面を参照しつつ、本出願の実施例についてより詳細に説明することとする。しかし、本出願に開示された技術は、ここで説明される実施例に限定されるものではなく、他の形態に具体化されてもよい。単に、ここで紹介される実施例は、開示された内容が徹底かつ完全となり得るよう、そして、当業者に本出願の思想が十分に伝えられるようにするために提供されるものである。図面において各構成要素を明確に表現するために、構成要素の幅や厚さなどの大きさを多少拡大して示した。また、説明の便宜のために、構成要素の一部のみを図示したりもしたが、当業者であれば、構成要素の残りの部分についても容易に把握することができるであろう。また、当該分野における通常の知識を有する者であれば、本出願の技術的思想を逸脱しない範囲内で、本出願の思想を多様な他の形態に具現できるであろう。
一実施例において、本発明は、新規なジンセノサイド、その薬学的に許容可能な塩、その水和物又は溶媒和物を有効成分として含む運動能力増進用又は抗疲労用組成物を提供することができる。
一実施例において、前記ジンセノサイドは、新規なトリテルペンサポニン（ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅ ｓａｐｏｎｉｎ）であって、（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１－>２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール（（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１－>２）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ－ｄａｍｍａｒ－３－ｏｎｅ－２０,２４－ｅｐｏｘｙ－６ａ，１２ｂ，２５－ｔｒｉｏｌ）である。
一実施例は、運動能力増進用又は抗疲労用組成物の製造に用いるための（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１－>２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール、その薬学的に許容可能な塩、その水和物、又はその溶媒和物の用途を提供することができる。
一実施例は、（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１－>２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール、その薬学的に許容可能な塩、その水和物、又はその溶媒和物を、これを必要とする対象に有効量で投与することを含む運動能力増進又は抗疲労方法を提供することができる。
一実施例は、運動能力増進用又は抗疲労用組成物に用いるための有効成分として、（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１－>２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール、その薬学的に許容可能な塩、その水和物、又はその溶媒和物を提供することができる。また、運動能力増進又は抗疲労のための有効成分として、（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１－>２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール、その薬学的に許容可能な塩、その水和物、又はその溶媒和物の非治療的用途を提供することができる。
本明細書において「薬学的に許容可能」とは、通常の医薬的服用量（Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｄｏｓａｇｅ）で用いる際に相当な毒性効果を避けることにより、動物、より具体的には、ヒトに用いることができるという政府又はこれに準ずる規制機構の承認を受けることができ、又は承認を受け、又は薬局方に列挙され、又はその他一般的な薬局方に記載されたものと認定されることを意味する。
本明細書において「薬学的に許容可能な塩」は、薬学的に許容可能であり、親化合物（ｐａｒｅｎｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）の好ましい薬理活性を有する本発明の一側面に係る塩を意味する。前記塩は、（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などといった無機酸から形成されるか；又は、酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンテンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３－（４－ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２－エタン－ジスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４－クロロベンゼンスルホン酸、２－ナフタレンスルホン酸、４－トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、４－メチルビシクロ［２，２，２］－ｏｃｔ－２－エン－１-カルボン酸、グルコヘプトン酸、３－フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、ｔｅｒｔ－ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸といった有機酸から形成される酸付加塩（ａｃｉｄ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｓａｌｔ）；又は、（２）親化合物に存在する酸性プロトンが置換されるときに形成される塩を含んでよい。
本明細書において「水和物（ｈｙｄｒａｔｅ）」は、水が結合している化合物を意味し、水と混合物との間に化学的な結合力のない内包化合物を含む広範な概念である。
本明細書において「溶媒和物」は、溶質の分子やイオンと溶媒の分子やイオンとの間に生じた高次の化合物を意味する。
一実施例において、前記ジンセノサイドの分子式は、Ｃ４２Ｈ７０Ｏ１５であり、下記のような化学構造を有する。
本明細書では、前記新規なジンセノサイドを「シュードジンセノーサイドＲＴ８（ｐｓｅｕｄｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲＴ８）」又は「ＰＧ－ＲＴ８」と命名した。
一実施例において、前記ジンセノサイドは、高麗人参の種子抽出物から分離されたものであってよいが、これに制限されるものではない。一実施例において、前記種子抽出物を得た高麗人参は、オタネニンジン（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ.ａ. Ｍｅｙｅｒ）である。
本明細書において「分離」とは、高麗人参の種子抽出物から抽出又は分画されたことを含む意味であり、水、有機溶媒などを用いてよく、当業者に知られた如何なる方法も適用可能である。前記分画は、前記抽出以降に行うことであってよい。
本明細書において「抽出物」とは、天然物からその中の成分を抽出して得られた物質であれば、抽出方法や成分の種類を問わずいずれも含む。例えば、水や有機溶媒を用いて天然物から溶媒に溶解される成分を抽出して得たもの、天然物の特定の成分のみを抽出して得たものなどをいずれも含む広義の概念である。
本明細書において「分画物」は、ある溶媒を用いて特定の物質や抽出物を分画して得たもの又は分画して残ったもの、そして、これらを特定の溶媒で再び抽出して得たものを含む。分画方法や抽出方法は当業界における通常の技術者に知られたものであればいずれも用いてよい。
一実施例において、前記ジンセノサイドは、高麗人参の種子のメタノール及びブタノール溶解性抽出物から分離したものであってよい。具体的に、前記ジンセノサイドは、ＨＰＬＣ－ＥＳＩ－Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳを用いて高麗人参の種子のメタノール及びブタノール溶解性抽出物を分析して検出、分離されたものであってよい。高麗人参の種子抽出物の主成分が脂質であるため、あらゆるトリテルペンやステロイド性サポニンが高麗人参の種子の粗（ｃｒｕｄｅ）抽出物からＨＰＬＣ－ＵＶ又はＨＰＬＣ－ＥＬＳＤによって観察できるものではない。
一実施例として、前記運動能力増進用は、筋肉再生、筋肉増強、筋力強化、又は筋減少症の予防又は改善用途を含んでよい。
一実施例として、前記抗疲労用は、疲労回復又は乳酸代謝調節用途を含んでよい。
一実施例として、前記有効成分は、筋細胞内のミトコンドリアの生成を促進し、且つ筋細胞内脂質代謝、すなわち脂肪酸の酸化を促進することができる。また、前記有効成分は、運動によって生成される血中乳酸濃度を減少させることができる。これにより、本発明は、運動に必要なエネルギーであるＡＴＰ（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）を筋細胞に効果的に供給しながらも筋疲労度は減少させ、運動効果を増進させ且つ運動をより長時間持続させることができる。
本明細書において用語「予防」とは、本発明の一実施例に係る組成物を投与して目的とする症状を抑制又は遅延させるすべての行為を意味する。本明細書において用語「治療」とは、本発明の一実施例に係る組成物を投与して目的とする症状又は疾病を好転させたり治したりするすべての行為を意味する。本明細書において用語「改善」とは、本発明の一実施例に係る組成物を投与して目的とする症状を投与の前よりも好転又は良くするすべての行為を意味する。
一実施例において、本発明は、前記有効成分を、組成物の総重量に対して０．０００１～９９．９重量％の範囲で含んでよい。具体的に、前記組成物は、一実施例として、前記有効成分を、組成物の総重量に対して０．０００１重量％以上、０．０００５重量％以上、０．００１重量％以上、０．０１重量％以上、０．１重量％以上、１重量％以上、２重量％以上、３重量％以上、４重量％以上、５重量％以上、６重量％以上、７重量％以上、８重量％以上、９重量％以上、１０重量％以上、１５重量％以上、２０重量％以上、２５重量％以上、３０重量％以上、３５重量％以上、４０重量％以上、４５重量％以上、５０重量％以上、５５重量％以上、６０重量％以上、６５重量％以上、７０重量％以上、７５重量％以上、８０重量％以上、８５重量％以上、９０重量％以上、９５重量％以上、又は９９．９重量％以上含んでよいが、前記範囲に制限されるものではない。又は、前記組成物は、一実施例として、前記有効成分を、組成物の総重量に対して１００重量％以下、９９重量％以下、９５重量％以下、９０重量％以下、８５重量％以下、８０重量％以下、７５重量％以下、７０重量％以下、６５重量％以下、６０重量％以下、５５重量％以下、５０重量％以下、４５重量％以下、４０重量％以下、３５重量％以下、３０重量％以下、２５重量％以下、２０重量％以下、１５重量％以下、１０重量％以下、９重量％以下、８重量％以下、７重量％以下、６重量％以下、５重量％以下、４重量％以下、３重量％以下、２重量％以下、１重量％以下、０．５重量％以下、０．１重量％以下、０．０１重量％以下、０．００１重量％以下、又は０．０００５重量％以下含んでよいが、前記範囲に制限されるものではない。
本発明の実施例に係る組成物は、前記有効成分を含む皮膚外用剤組成物であってよい。
本明細書において「皮膚」とは、動物の体表を覆う組織のことを意味し、顔又はボディーなどの体表を覆う組織だけではなく、頭皮や毛髪を含む最広義の概念である。
本発明の実施例に係る組成物は、前記有効成分を含む食品組成物であってよい。
例えば、前記有効成分を含む発酵乳、チーズ、ヨーグルト、ジュース、生菌製剤、及び健康食品などといった機能性食品として加工されてよく、その他、多様な食品添加剤の形態で用いられてよい。一実施例として、組成物は、健康食品用組成物であってよい。一実施例として、前記健康食品用組成物は、丸剤、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、キャラメル剤又はドリンク剤などに剤形化することができる。他の一実施例として、液剤、粉末、顆粒、錠剤又はティーバッグなどの形態に加工されてもよい。前記組成物は、単純飲用、注射投与、スプレー方式又はスクイーズ方式などの様々な方法で投与されてよい。前記組成物は、本発明の主効果を損なわない範囲内で主効果に相乗効果を与え得る他の成分などを含有してよい。例えば、物性改善のために、香料、色素、殺菌剤、酸化防止剤、防腐剤、保湿剤、増粘剤、無機塩類、乳化剤、及び合成高分子物質などの添加剤をさらに含んでよい。その他にも、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖、及び海草エキスなどの補助成分をさらに含んでよい。前記成分は、剤形又は使用目的に応じて当業者が適宜選定して配合してよく、その添加量は、本発明の目的及び効果を損なわない範囲内で選択されてよい。例えば、前記成分の添加量は、組成物の全重量を基準に、０．０００１重量％～９９．９重量％の範囲であってよい。一実施例として、前記食品組成物の投与量は、対象の年齢、性別、体重と、対象が持っている特定の疾患又は病理状態、疾患又は病理状態の深刻度、投与経路などの判断に応じて異なり得、このような因子に基づく投与量の決定は当業者の水準内にある。例えば、前記投与量は、０．０５ｍｇ／ｋｇ／日以上又は１ｍｇ／ｋｇ／日以上、または前記投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ／日以上又は４ｍｇ／ｋｇ／日以上であってよい。また、前記投与量は、１０ｇ／ｋｇ／日以下、１００ｍｇ／ｋｇ／日以下又は１０ｍｇ／ｋｇ／日以下であってよいが、前記投与量は、如何なる方法でも本明細書の範囲を限定するものではない。
本発明の実施例に係る組成物は、前記有効成分を含む薬剤学的組成物であってよい。前記薬剤学的組成物は、防腐剤、安定化剤、水和剤又は乳化促進剤、浸透圧調節のための塩及び／又は緩衝剤などの薬剤学的補助剤、並びにその他治療的に有用な物質をさらに含んでよい。
一実施例として、前記薬剤学的組成物は、経口投与剤であってよく、前記経口投与剤は、例えば、錠剤、丸剤、硬質及び軟質カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳化剤、シロップ剤、粉剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、ペレット剤などがある。これらの剤形は、有効成分の他、界面活性剤、希釈剤（例：ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース及びグリシン）、滑沢剤（例：シリカ、タルク、ステアリン酸及びそのマグネシウム又はカルシウム塩、並びにポリエチレングリコール）を含有してよい。錠剤は、さらに、マグネシウムアルミニウムシリケート、澱粉ペースト、ゼラチン、トラガカンス、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース及びポリビニルピロリジンといった結合剤を含有してよく、場合に応じて、澱粉、寒天、アルギン酸又はそのナトリウム塩といった崩解剤、吸収剤、着色剤、香味剤、及び甘味剤などの薬学的添加剤を含有してよい。前記錠剤は、通常の混合、顆粒化又はコーティング方法によって製造されてよい。
一実施例として、前記薬剤学的組成物は、非経口投与剤であってよく、前記非経口投与剤は、直腸、局所、皮下、径皮投与型剤形であってよい。例えば、注射剤、点滴剤、軟膏、ローション、ゲル、クリーム、スプレー、懸濁剤、乳剤、坐剤、パッチなどの剤形であってよいが、これらに制限されるものではない。
一実施例として、前記薬剤学的組成物の投与量は、治療を受ける対象の年齢、性別、体重と、治療する特定の疾患又は病理状態、疾患又は病理状態の深刻度、投与経路及び処方者の判断に応じて異なり得る。このような因子に基づく投与量の決定は当業者の水準内にある。例えば、前記投与量は、０．０５ｍｇ／ｋｇ／日以上又は１ｍｇ／ｋｇ／日以上であってよく、または、前記投与量は、０．８ｍｇ／ｋｇ／日以上又は４ｍｇ／ｋｇ／日以上であってよい。また、前記投与量は、１０ｇ／ｋｇ／日以下、１００ｍｇ／ｋｇ／日以下又は１０ｍｇ／ｋｇ／日以下であってよいが、前記投与量は、如何なる方法でも本明細書の範囲を限定するものではない。
以下、実施例、比較例、及び試験例を参照して本発明を詳しく説明する。なお、これらは単に本発明をより具体的に説明するために例示したものに過ぎず、本発明の範囲がこれらの実施例、比較例及び試験例によって制限されないことは当業者にとって自明であろう。
以下のすべての実験値は、３回以上の繰り返しの実験により得た値の平均を示すものであり、標準偏差（ＳＤ）は誤差棒で表した。ｐ値は、ｏｎｅ－ｗａｙ ＡＮＯＶＡとＤｕｎｎｅｔｔ ｔｅｓｔで計算し、０．０５未満のｐ値は統計的に有意なものと見なした。
［実施例１］ジンセノサイドの分離
分画
高麗人参の種子（Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ）５．５ｋｇをミキサーで細かく粉砕して粉末状にしてメタノールで抽出後、ｎ－ヘキサン、エチルアセテート、ｎ－ブタノールなどを用いて段階的に分画した。脂質（Ｌｉｐｉｄ）の大部分はｎ－ヘキサンによって除去され、エチルアセテート分画物に残っている脂質はメタノール：水＝１：１（ｖ／ｖ）で懸濁後にフリーザーに一晩保管してから上層液だけを取った後、遠心分離機を利用してもう一回除去した。このように前処理が施されたエチルアセテート分画物２．６１ｇとｎ－ブタノール分画物１１４．６４ｇをカラム及びＨＰＣＣＣ（Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｃｏｕｎｔｅｒ－Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）によって下記のように分画した。
分画
高麗人参の種子（Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ）５．５ｋｇをミキサーで細かく粉砕して粉末状にしてメタノールで抽出後、ｎ－ヘキサン、エチルアセテート、ｎ－ブタノールなどを用いて段階的に分画した。脂質（Ｌｉｐｉｄ）の大部分はｎ－ヘキサンによって除去され、エチルアセテート分画物に残っている脂質はメタノール：水＝１：１（ｖ／ｖ）で懸濁後にフリーザーに一晩保管してから上層液だけを取った後、遠心分離機を利用してもう一回除去した。このように前処理が施されたエチルアセテート分画物２．６１ｇとｎ－ブタノール分画物１１４．６４ｇをカラム及びＨＰＣＣＣ（Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｃｏｕｎｔｅｒ－Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）によって下記のように分画した。
ｎ－ブタノール分画物のカラム及びＨＰＣＣＣを用いた分画
ｎ－ブタノール分画物１１４．６４ｇに対してＭＰＬＣにて分画を分け、このときに用いた溶媒はｎ－ヘキサン／エチルアセテート＝１０：１→５：１→１：１ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ＝１０：１→５：１（ｖ／ｖ）であり、流速は５０ｍＬ／ｍｉｎとした。前記条件を用いて合計１２個の下位分画に分け、各分画をさらにＨＰＣＣＣ、ＨＰＬＣ（Ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ－２０カラムなどを用いて各分画に含有されている成分を分離し、ＮＭＲ（Ｎｕｃｌｅａｒ ｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）、ＵＶ（Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｒａｙｓ）、ＭＳ（Ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）を用いて構造を同定して１６種の化合物を究明した。
ｎ－ブタノール分画物１１４．６４ｇに対してＭＰＬＣにて分画を分け、このときに用いた溶媒はｎ－ヘキサン／エチルアセテート＝１０：１→５：１→１：１ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ＝１０：１→５：１（ｖ／ｖ）であり、流速は５０ｍＬ／ｍｉｎとした。前記条件を用いて合計１２個の下位分画に分け、各分画をさらにＨＰＣＣＣ、ＨＰＬＣ（Ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）ＬＨ－２０カラムなどを用いて各分画に含有されている成分を分離し、ＮＭＲ（Ｎｕｃｌｅａｒ ｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）、ＵＶ（Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｒａｙｓ）、ＭＳ（Ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）を用いて構造を同定して１６種の化合物を究明した。
前記分離された１６種の化合物は、プロトパナキサトリオールサポニン（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ ｓａｐｏｎｉｎ）であるジンセノサイドＲｇ１（化合物１）、ジンセノサイドＲｇ２（化合物２）及びジンセノサイドＲｅ（化合物３）；プロトパナキサジオールサポニン（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ ｓａｐｏｎｉｎ）であるジンセノサイドＲｄ（化合物４）、ジンセノサイドＲｂ１（化合物５）及びジンセノサイドＲｂ２（化合物６）；ステロールグリコシド（ｓｔｅｒｏｌ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ）であるスティグマ－５－エン－３－O－β－Ｄ－グルコピラノシド（Ｓｔｉｇｍａ－５－ｅｎ－３－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）（化合物７）、スティグマ－５,２４（２８）－ジエン－３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシド（Ｓｔｉｇｍａ－５,２４（２８）－ｄｉｅｎ－３－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）（化合物８）及びスティグマ－５,２２－ジエン－３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシド（Ｓｔｉｇｍａ－５,２２－ｄｉｅｎ－３－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）（化合物９）；本発明の一実施例に係る新規なジンセノサイドとして、天然から初めて分離される新規な化合物である（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール（（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ－ｄａｍｍａｒ－３－ｏｎｅ－２０,２４－ｅｐｏｘｙ－６ａ，１２ｂ，２５－ｔｒｉｏｌ）（化合物１０）；フェノール性グリコシド（ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ）であるフェネチルアルコールβ－Ｄ－キシロピラノシル（１→６）－β－Ｄ－グルコピラノシド（ｐｈｅｎｅｔｈｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ β－Ｄ－ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→６）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）（化合物１２）及びオイゲノールβ－ゲンチオビオシド（Ｅｕｇｅｎｙｌ β－ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｉｄｅ）（化合物１３）；フラボノイドであるイソラムネチン３－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシド（ｉｓｏｒｈａｍｎｅｔｉｎ ３－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）（化合物１５）；一次代謝体であるアデノシン（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ）（化合物１１）、ウラシル（ｕｒａｃｉｌ）（化合物１４）、及びトリプトファン（Ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ）（化合物１６）であった。
前記化合物１０に該当する本発明の一実施例に係る新規なジンセノサイドの分離過程を図１に示した。前記１６種の化合物の化学構造を図２に示し、前記化合物のうち既知のジンセノサイドである化合物１－６の分光学的証拠及び化学構造を図３に別途に示した。
化合物１０は、カチオンＥＳＩ－Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ（Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ－Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ－Ｔｉｍｅ－ｏｆ－ｆｌｉｇｈｔ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）スペクトルにおいてｍ／ｚ ８３７.４６１７［（Ｍ＋Ｎａ）＋ｃａｌｃｄ.８３７.４６１２］でのナトリウム化擬分子イオンピーク（ｓｏｄｉａｔｅｄ ｐｓｅｕｄｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｏｎ ｐｅａｋ）に基づいてＣ４２Ｈ７０Ｏ１５の分子式を示す白色無定形粉末として分離した。前記化合物１０の１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、[δＨ１.８６（３Ｈ，ｓ，Ｈ－２８），１.６９（３Ｈ，ｓ，Ｈ－２９），１.４７（３Ｈ，ｓ，Ｈ－２７），１.２５（６Ｈ，ｓ，Ｈ－２１，２６），１.１０（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１８），０.８１（３Ｈ，ｓ，Ｈ－３０），０.７５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－１９）]で８個のメチル共鳴を含むものであった。また、２個の糖残基においてアノマー陽子（ａｎｏｍｅｒｉｃ ｐｒｏｔｏｎ）と炭素原子に相応する二対の信号がδＨ６.０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７.８，Ｈ－２"）／δＣ１０４.０８（Ｃ－１'）及びＨ４.９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７.７，Ｈ－１'）／δＣ１０４.３２（Ｃ－１"）で検出された。１３ＣＮＭＲ及び異種核単一量子相関関係（ＨＳＱＣ）スペクトルは４２個の炭素信号を突き止めた。前記２つの糖残基と別個に、化合物１０のアグリコン（ａｇｌｙｃｏｎｅ）は８個のメチレン、４個のメチン、３個の酸素含有メチン［δＣ７９.７９（Ｃ－６），７１.４０（Ｃ－１２）及び８６.０９（Ｃ－２４）］、５個の４級炭素原子、２個の酸素化された４級炭素原子［δＣ８７.１５（Ｃ－２０）及び７０.７８（Ｃ－２５）］、８個のメチル基及びカルボニル炭素［δＣ２１８.８５（Ｃ－３）]を有していた。１Ｈａｎｄ１３ＣＮＭＲデータの徹底的な解釈結果、化合物１０のアグリコンがシュドジンセングゲニン（ｐｓｅｕｄｏｇｉｎｓｅｎｇｅｎｉｎ）Ｒ１［（２０Ｓ，２４Ｒ）－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６α，１２β，２５－トリオール（［（２０Ｓ，２４Ｒ）－ｄａｍｍａｒ－３－ｏｎｅ－２０,２４－ｅｐｏｘｙ－６α，１２β，２５－ｔｒｉｏｌ］）］に重畳していると示された。化合物１０においてＣ－２０の絶対配列はＣ－２１の化学的移動（δＣ２７.６７）からＳに推論され、２４Ｒ配列は既に公開されたところに従いＣ－２４（δＣ８６.０９）の化学的移動によって決定された。二糖単位（ｕｎｉｔ）は、酸加水分解データ及びガスクロマトグラフィー（ＧＣ）分析結果とともに１Ｈ ＮＭＲスペクトル及び１２個の炭素共鳴でアノマー陽子のカップリング定数からβ－Ｄ－グルコピラノシル（β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）残基であることが明らかになった。グリコシド結合はδＨ６.０２（Ｈ－１"）/δＣ７９.４９（Ｃ－２'）及びδＨ４.９１（Ｈ－１'）／δＣ７９.７９（Ｃ－６）で交差ピークを示した異種核多重結合相関関係（ＨＭＢＣ）によって決定され、２－Ｏ－（β－Ｄ－グルコピラノシル）－β－Ｄ－グルコピラノシル（２－Ｏ－（β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）残基がシュドジンセングゲニン（ｐｓｅｕｄｏｇｉｎｓｅｎｇｅｎｉｎ）Ｒ１でアグリコンのＣ－６に連結されていることを立証した。前記化合物１０の各分析スペクトルと核心のＨＢＭＣ相関関係を図４～図１０に示した。
前記分析結果、化合物１０の化学構造は（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール（（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ－ｄａｍｍａｒ－３－ｏｎｅ－２０,２４－ｅｐｏｘｙ－６ａ，１２ｂ，２５－ｔｒｉｏｌ）と決定され、シュードジンセノーサイドＲＴ８（ｐｓｅｕｄｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ＲＴ８、ＰＧ－ＲＴ８）と命名した。
前記高麗人参の種子抽出物から分離したジンセノサイドのうちＰＰＴ（ＰｒｏｔｏＰａｎａｘＴｒｉｏｌ）系のジンセノサイドであるジンセノサイドＲｇ１（化合物１）、ジンセノサイドＲｇ２（化合物２）、ジンセノサイドＲｅ（化合物３）は、ジンセノサイドバックボーン（ｂａｃｋｂｏｎｅ）に３個のヒドロキシ基（ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｇｒｏｕｐ）を含む。ＰＰＤ（ＰｒｏｔｏＰａｎａｘＤｉｏｌ）系のジンセノサイドであるジンセノサイドＲｄ（化合物４）、ジンセノサイドＲｂ１（化合物５）、ジンセノサイドＲｂ２（化合物６）は、ジンセノサイドバックボーンに２個のヒドロキシ基を含む。一方、本発明において新規に分離同定されたジンセノサイドである化合物１０は、ＰＰＴ系のバックボーンを有しているものの、前記バックボーンの末端ヒドロキシ基がケトン（ｋｅｔｏｎｅ）で、ジンセノーシイドの線形鎖（ｌｉｎｅａｒ ｃｈａｉｎ）がフラン環（ｆｕｒａｎ ｒｉｎｇ）に環化（ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ）された構造であることに構造的差異がある。
前記本発明において新規に分離同定した化合物１０の分子式はＣ４２Ｈ７０Ｏ１５であり、ＥＳＩ－Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳにおいてｍ／ｚは８３７.４６１７［Ｍ＋Ｎａ］＋であり、１Ｈ、１３Ｃ－ＮＭＲスペクトルは下記の表に表したとおりである。
［試験例１］運動能力増進効能の比較１
筋肉を動かして運動をするためには多量のエネルギー（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ；ＡＴＰ）が必要となるが、ＡＴＰは主にミトコンドリア電子伝達系を通じて合成されて供給される。このため、運動能力（持久力）を向上させるためには筋肉内のミトコンドリアの量が増加し、これに伴う脂肪酸の酸化が促進される必要がある。そこで、本発明の一実施例に係る高麗人参の種子由来のジンセノサイドＧＳ#１０が筋細胞でミトコンドリア及び脂肪代謝を活性化できるかどうかを調べるために、次の実験を行った。
筋肉を動かして運動をするためには多量のエネルギー（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ；ＡＴＰ）が必要となるが、ＡＴＰは主にミトコンドリア電子伝達系を通じて合成されて供給される。このため、運動能力（持久力）を向上させるためには筋肉内のミトコンドリアの量が増加し、これに伴う脂肪酸の酸化が促進される必要がある。そこで、本発明の一実施例に係る高麗人参の種子由来のジンセノサイドＧＳ#１０が筋細胞でミトコンドリア及び脂肪代謝を活性化できるかどうかを調べるために、次の実験を行った。
マウス由来の筋細胞株（Ｃ２Ｃ１２；ＡＴＣＣ）を高麗人参の種子由来のジンセノサイドを投与し、筋細胞内のミトコンドリアの量及び脂肪酸の酸化の変化を観察した。
マウス由来の筋細胞株（Ｃ２Ｃ１２；ＡＴＣＣ）を５％ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）が含まれたダルベッコ改変イーグル培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ'ｓ Ｍｅｄｉｕｍ、ＤＭＥＭ；Ｓｉｇｍａ）を用いて培養した。筋細胞への分化のために１００％コンフルエント（ｃｏｎｆｌｕｅｎｔ）するように誘導した後、２％ウマ血清（ｈｏｒｓｅ ｓｅｒｕｍ；Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）が含有されたＤＭＥＭ培地を用いて分化した。総一週間分化しながら、毎日培地を取り替えた。一週間分化すれば、一般的な線維芽細胞の形態を呈していたＣ２Ｃ１２根毛細胞が細長い模様に変わるため、目視にて筋細胞の分化程度を容易に確認することができる。
前記分化した筋細胞に本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０と既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドＧＳ#０１－ＧＳ#０６をそれぞれ２０μｇ／ｍｌの濃度で２４時間処理した後、筋細胞内のミトコンドリアの量をＭｉｔｏｔｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ(商標)（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）試薬を用いて染色して観察した。ミトコンドリアマーカー遺伝子のｍＲＮＡ発現レベルはＱ－ＰＣＲを用いて測定した。陽性対照群としては、運動模倣薬（ｅｘｅｒｃｉｓｅ ｍｉｍｅｔｉｃｓ）候補物質であり且つそれぞれＰＰＡＲδ（Ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｅｌｔａ）、ＡＭＰＫ（ＡＭＰ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ）を活性化させて運動能力を向上させると知られているＧＷ５０１５１６とメトホルミン（Ｍｅｔｆｏｒｍｉｎ）の組み合わせ（ＧＷ／Ｍｅｔ；各１０μＭずつ処理）を用いた。試験の結果として、測定されたミトコンドリアの数は図１１に示し、ミトコンドリアマーカー遺伝子の発現量は図１２～図１４に示した。さらに、実際に増加したミトコンドリアによって筋細胞で脂肪酸の酸化が増加するか否かを確認し、その結果を図１５に示した。
その結果、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０が最も優れたミトコンドリア生合成能を示し（図１１～図１４）、これにより、筋細胞内の脂肪酸の酸化もまた最も多く増加したことと示された（図１５）。
［試験例２］運動能力増進効能の比較２
前記試験例１で確認された高麗人参の種子由来の新規なジンセノサイド（ＧＳ#１０）のミトコンドリア生成増加及び脂質代謝の促進による運動能力の向上効果が実際に個体レベルでも発現されるのかを確認するために、次のような実験を行った。
前記試験例１で確認された高麗人参の種子由来の新規なジンセノサイド（ＧＳ#１０）のミトコンドリア生成増加及び脂質代謝の促進による運動能力の向上効果が実際に個体レベルでも発現されるのかを確認するために、次のような実験を行った。
３９週齢の雌Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）マウスに、６週間にかけて本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０と既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドＧＳ#０１－ＧＳ#０６を各２０ｍｇ／ｋｇ、対照群であるＧＷ／Ｍｅｔを各１０ｍｇ／ｋｇずつ経口投与した。６週間の実験期間の間、トレッドミル適応力を高めるために２週おきにマウスをトレッドミルに載せてトレッドミルの使用に慣れるように誘導した。６週間の投与後、マウスをトレッドミルに載せて走らせた。運動時間は、マウスがくたびれてトレッドミルから押し下ろされるまでとし、運動を終えたマウスは直ちに剖検を行って筋肉組織及び血漿を抽出した。筋肉組織からはミトコンドリア関連遺伝子の発現を観察し、血液からは筋疲労マーカーである乳酸濃度を測定した。筋肉内のミトコンドリアマーカー遺伝子の発現様相は図１６～図１８に示し、運動時間及び血中乳酸濃度は図１９及び図２０に示した。
その結果、既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドであるＧＳ#０５及びＧＳ#０６は、細胞実験では若干のミトコンドリア増加効能を示したものの、この結果が実験動物にまでは発現しないことと示され、実際のミトコンドリア活性及び運動能力の向上効能は微々たるものと確認された（図１６～図２０）。
一方、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０を摂取したマウスの筋肉では、試験例１における筋細胞株を用いた実験と同様、ミトコンドリアマーカー遺伝子の発現が顕著に増加したことを確認した。これは、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０を摂取したマウスの筋肉で実際にミトコンドリアの数が増加し、これにより、筋肉内の脂肪消耗がより活発に生じてより多くのＡＴＰが生成できるように誘導したことを意味する（図１６～図１８）。
また、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドＧＳ#０１～ＧＳ#０６と比べて運動時間が二倍ほど増加するとともに、筋疲労マーカーである乳酸濃度は最も低い様相を示した（図１９及び図２０）。本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、実際の個体レベルでもミトコンドリア活性調節によってエネルギーを多く作り出し、これが運動能力の向上を誘導したものと判断される。
［試験例３］運動能力増進効能の比較３
本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の運動能力増進効能を、本発明の比較例としての紅参指標成分であるジンセノサイドＲｇ１、Ｒｇ３及びＲｂ１（Ｓｉｇｍａ社から購買）と比べた。このとき、前記本発明の比較例であるジンセノサイドＲｇ３の化学構造は次のとおりである。
本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の運動能力増進効能を、本発明の比較例としての紅参指標成分であるジンセノサイドＲｇ１、Ｒｇ３及びＲｂ１（Ｓｉｇｍａ社から購買）と比べた。このとき、前記本発明の比較例であるジンセノサイドＲｇ３の化学構造は次のとおりである。
実験は、前記試験例１及び２と同じ方法にてそれぞれ行った。
先ず、前記試験例１と同じ方法にて分化したＣ２Ｃ１２筋細胞に本発明の比較例であるジンセノサイドＲｇ１、Ｒｇ３、Ｒｂ１及び本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０をそれぞれ処理した後にミトコンドリアとマーカー遺伝子を観察した（図２１～図２５）。さらに、前記試験例２と同じ方法にてマウスに本発明の比較例であるジンセノサイドＲｇ１、Ｒｇ３、Ｒｂ１及び本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０をそれぞれ２０ｍｇ／ｋｇずつ６週間投与した後に運動能力を観察した。
その結果、図２１～図２４に示されるように、本発明の比較例であるジンセノサイドＲｇ１、Ｒｇ３、Ｒｂ１はミトコンドリア生成を増加させないのに対し、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０だけがミトコンドリア増加効能を示した。さらに、図２５及び図２６に示されたように、動物実験でも本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０だけが有意な運動能力の向上及び抗筋疲効果を示した。
［試験例４］細胞毒性
ジンセノサイドが細胞毒性活性を通じて運動能力増進効能に影響を及ぼす可能性を排除するために、ＣＣＫ（Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ）－８を用いて本発明の実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の存在時の細胞成長を評価した。実験方法は次のとおりである。
ジンセノサイドが細胞毒性活性を通じて運動能力増進効能に影響を及ぼす可能性を排除するために、ＣＣＫ（Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ）－８を用いて本発明の実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の存在時の細胞成長を評価した。実験方法は次のとおりである。
ＣＣＫ－８試薬を、培養中のＳＨ－ＳＹ５Ｙ細胞（Ｄｏｊｉｎｄｏ、ＭＤ、ＵＳＡ）に、９６－ウェルプレート（ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ）基準で１０μｌ入れ、３７℃で２時間放置した後、４５０ｎｍで吸光度を測定した。前記細胞生存力を未処理サンプルに対する各サンプルの絶対光学密度の百分率（％）で表示した。このとき、前記細胞が培養される培地に含まれる本発明の実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の濃度は、それぞれ０．１、１、５、１０、２０、５０μＭであった。
その結果、図２７から確認できるように、本発明の実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、５０μＭまでは細胞毒性を示さなかった。このような結果は、本発明の実施例である新規なジンセノサイドが細胞生存力に有害な影響を与えることなく運動能力増進効果を奏し得ることを示す。
このような結果は、本発明の実施例である新規なジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８が種々の強力な運動能力増進特性を有しており、運動能力増進剤として薬剤学的可能性があることを示唆する。
［試験例５］根毛細胞生長促進効能の比較
筋肉細胞は筋肉内部に存在するＥＳ細胞（ｍｙｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｃｅｌｌｓ）から作られる。これらは、通常は休止期状態（ｑｕｉｅｓｃｅｎｔ ｓｔａｔｅ）にあるが、運動などの筋肉ダメージが加えられると覚めて分裂して根毛細胞を作り出し、この根毛細胞が分化して筋細胞が形成される。このような筋肉幹細胞は年を取るにつれてその数及び活性が減少すると知られているが、この過程で炎症反応、特にＩＬ－６が関与する。したがって、ＩＬ－６を媒介とした筋肉幹細胞生育抑制の条件下で本発明の実施例である新規なジンセノサイドが筋肉幹細胞の細胞分裂を回復できるかどうかを、次の実験によって確認した。
筋肉細胞は筋肉内部に存在するＥＳ細胞（ｍｙｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ ｃｅｌｌｓ）から作られる。これらは、通常は休止期状態（ｑｕｉｅｓｃｅｎｔ ｓｔａｔｅ）にあるが、運動などの筋肉ダメージが加えられると覚めて分裂して根毛細胞を作り出し、この根毛細胞が分化して筋細胞が形成される。このような筋肉幹細胞は年を取るにつれてその数及び活性が減少すると知られているが、この過程で炎症反応、特にＩＬ－６が関与する。したがって、ＩＬ－６を媒介とした筋肉幹細胞生育抑制の条件下で本発明の実施例である新規なジンセノサイドが筋肉幹細胞の細胞分裂を回復できるかどうかを、次の実験によって確認した。
筋肉幹細胞は細胞株の形態で求めることができないため、筋肉幹細胞と根毛細胞との間に位置するマウス由来の筋細胞株（Ｃ２Ｃ１２、ＡＴＣＣ）を１０％ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）が含まれたダルベッコ改変イーグル培地（Ｓｉｇｍａ）を用いて培養した。炎症媒介因子であるＩＬ－６は、運動時に生成されて筋肉内エネルギー代謝を促進し且つ根毛細胞分裂／筋細胞分化を促進して筋肉の回復に役立つため、細胞を急性ではない、慢性炎症状態に誘導しなければならない。したがって、老化による炎症状態を誘導するためにＩＬ－６（１０ｎｇ／ｍｌ）を４週間処理して根毛細胞の老化を誘導した。このようにして慢性炎症を誘導した根毛細胞は細胞分裂速度が正常細胞に比べて顕著に遅くなる。この状態の根毛細胞に、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０と既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドＧＳ#０１－ＧＳ#０６をそれぞれ１０μｇ／ｍｌの濃度で４８時間処理し、これによる細胞分裂速度の回復を細胞の数から観察した。その結果、図２８のように、既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドＧＳ#０１－ＧＳ#０６の場合は、回復程度が微々たるものであったのに対し、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、老化した根毛細胞の細胞生長回復に有意な効果を奏するものと示された。
［試験例６］筋細胞分化促進効能の比較
年を取るにつれて筋肉が減少するため、根毛細胞を筋細胞に分化させて筋肉量を補充することは筋肉量の維持のための必須過程である。本発明の実施例である新規なジンセノサイドが筋細胞の分化を促進するかどうかを調べるために、マウス由来の筋細胞株（Ｃ２Ｃ１２）を用いて実験を行った。筋細胞の分化のためにＣ２Ｃ１２根毛細胞を各容器に１００％コンフルエントするまでに細胞分裂を誘導した後、２％ウマ血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）が含まれたダルベッコ改変イーグル培地（Ｓｉｇｍａ）を用いて分化させた。分化期間の間は本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０と既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドＧＳ#０１－ＧＳ#０６をそれぞれ１０μｇ／ｍｌの濃度で処理した。対照群はジンセノサイドを処理していない分化培地である。一般的に筋細胞の分化には７日程度所要される点を考慮して、分化を４日だけさせた後、各ジンセノサイド処理群から細胞を収去して筋細胞分化促進効果を分析した。分化４日経過後の前記各処理群からトリゾール(商標)試薬（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いてｍＲＮＡを抽出した後、リバートエイド・ファーストストランドｃＤＮＡ合成キット（ＲｅｖｅｒｔＡｉｄ １ｓｔ ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｋｉｔ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いてｃＤＮＡを合成した。サーモサイクル型の核酸増幅装置（ＣＦＸ９６ ｔｈｅｒｍｏｃｙｃｌｅ、Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて筋繊維マーカー遺伝子であるＭｙｏＧ、α－アクチン（α－ａｃｔｉｎ）及びミオシン（ｍｙｏｓｉｎ）の発現レベルを観察した。マーカー遺伝子のうちＭｙｏＧは筋細胞の分化に関連した転写因子であり、α－アクチン（α－ａｃｔｉｎ）及びミオシン（ｍｙｏｓｉｎ）は筋繊維の構成要素である。図２９～図３１に示したように、処理済みの高麗人参の種子由来のジンセノサイドのうちＧＳ#１０だけが有意なマーカー遺伝子発現増加を誘導したことから、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、筋細胞分化促進効果を奏するものであることを確認することができる。
年を取るにつれて筋肉が減少するため、根毛細胞を筋細胞に分化させて筋肉量を補充することは筋肉量の維持のための必須過程である。本発明の実施例である新規なジンセノサイドが筋細胞の分化を促進するかどうかを調べるために、マウス由来の筋細胞株（Ｃ２Ｃ１２）を用いて実験を行った。筋細胞の分化のためにＣ２Ｃ１２根毛細胞を各容器に１００％コンフルエントするまでに細胞分裂を誘導した後、２％ウマ血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）が含まれたダルベッコ改変イーグル培地（Ｓｉｇｍａ）を用いて分化させた。分化期間の間は本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０と既存の高麗人参の種子抽出物から分離した他のジンセノサイドＧＳ#０１－ＧＳ#０６をそれぞれ１０μｇ／ｍｌの濃度で処理した。対照群はジンセノサイドを処理していない分化培地である。一般的に筋細胞の分化には７日程度所要される点を考慮して、分化を４日だけさせた後、各ジンセノサイド処理群から細胞を収去して筋細胞分化促進効果を分析した。分化４日経過後の前記各処理群からトリゾール(商標)試薬（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いてｍＲＮＡを抽出した後、リバートエイド・ファーストストランドｃＤＮＡ合成キット（ＲｅｖｅｒｔＡｉｄ １ｓｔ ｓｔｒａｎｄ ｃＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｋｉｔ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いてｃＤＮＡを合成した。サーモサイクル型の核酸増幅装置（ＣＦＸ９６ ｔｈｅｒｍｏｃｙｃｌｅ、Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて筋繊維マーカー遺伝子であるＭｙｏＧ、α－アクチン（α－ａｃｔｉｎ）及びミオシン（ｍｙｏｓｉｎ）の発現レベルを観察した。マーカー遺伝子のうちＭｙｏＧは筋細胞の分化に関連した転写因子であり、α－アクチン（α－ａｃｔｉｎ）及びミオシン（ｍｙｏｓｉｎ）は筋繊維の構成要素である。図２９～図３１に示したように、処理済みの高麗人参の種子由来のジンセノサイドのうちＧＳ#１０だけが有意なマーカー遺伝子発現増加を誘導したことから、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、筋細胞分化促進効果を奏するものであることを確認することができる。
［試験例７］根毛細胞生長促進効能及び筋細胞分化促進効能の比較
本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の根毛細胞生長促進効能及び筋細胞分化促進効能を、本発明の比較例としての紅参指標成分であるジンセノサイドＲｇ１、Ｒｇ３及びＲｂ１（Ｓｉｇｍａ社から購買）と比べた。実験は、前記試験例５及び６と同じ方法にてそれぞれ行った。その結果、図３２～図３５のように、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０だけが根毛細胞生育促進及び筋細胞分化促進効果を示した。
本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の根毛細胞生長促進効能及び筋細胞分化促進効能を、本発明の比較例としての紅参指標成分であるジンセノサイドＲｇ１、Ｒｇ３及びＲｂ１（Ｓｉｇｍａ社から購買）と比べた。実験は、前記試験例５及び６と同じ方法にてそれぞれ行った。その結果、図３２～図３５のように、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０だけが根毛細胞生育促進及び筋細胞分化促進効果を示した。
［試験例８］抗疲労効能の比較
前記試験例２において本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０が運動能力を向上させ、且つ運動によって増加する血中乳酸濃度を下げることを確認した。これに加え、睡眠剥奪誘導動物モデル（ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ）を用いて本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の抗疲労効果を検証することで実際の疲労軽減効果を確認した。実験方法は、Ｃｈｏ ｅｔ ａｌ.、Ｂｉｏｌ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ ３３(７)：１１２８に記載された方法と同様であり、前記文献は本明細書にその全体が参照として取り込まれる。Ｓａｍｔａｋｏ社から購買したＢａｌｂ／ｃマウスを１２週齢になるまで適応させた後、疲労誘発群３２匹と対照群８匹とに分けた。前記疲労誘発群を更に、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０ １０ｍｇ／ｋｇ処理群（Ｆ／ＧＳ#１０ １０）、５０ｍｇ／ｋｇ処理群（Ｆ／ＧＳ#１０ ５０）、高麗人参の種子抽出物５０ｍｇ／ｋｇ処理群（Ｆ／ＧＳＥ#１０ ５０）、無処理群（Ｆａｔｉｇｕｅ）にそれぞれ８匹ずつ４群に分けた。前記高麗人参の種子抽出物は、本発明の比較例であって、本明細書で上述した実施例１においてジンセノサイドの分離に用いられた高麗人参の種子（Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ）メタノール抽出物である。前記新規なジンセノサイドＧＳ#１０又は高麗人参の種子抽出物は、実験前に２週間にかけて各実験群に対し経口投与方法にて投与した。疲労誘発は、２４時間回転ローターに載せて動かし続けて寝かせない方法にて誘導した。次いで、ＦＳＴ（ｆｏｒｃｅｄ ｓｗｉｍ ｔｅｓｔ）を６分間行いながら各実験群のマウスが水泳をしないでじっと水に浮かんでいる時間を測定して疲労島を計算し、図３６に示した。次いで、血液から乳酸濃度を測定して疲労物質の蓄積程度を観察し、図３７に示した。その結果、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、濃度依存的に疲労誘発による症状を軽減させることと示され、本発明の比較例である高麗人参の種子抽出物の投与群（Ｆ／ＧＳＥ#１０ ５０）では疲労軽減効果が微々たるものと示された。これは、高麗人参の種子抽出物自体には新規なジンセノサイドＧＳ#１０が極微量含まれているだけでなく、それ以外の他の抗疲労物質が存在しておらず、抗疲労効能は本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０だけの固有機能であることを意味する。
前記試験例２において本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０が運動能力を向上させ、且つ運動によって増加する血中乳酸濃度を下げることを確認した。これに加え、睡眠剥奪誘導動物モデル（ｓｌｅｅｐ ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ）を用いて本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０の抗疲労効果を検証することで実際の疲労軽減効果を確認した。実験方法は、Ｃｈｏ ｅｔ ａｌ.、Ｂｉｏｌ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ ３３(７)：１１２８に記載された方法と同様であり、前記文献は本明細書にその全体が参照として取り込まれる。Ｓａｍｔａｋｏ社から購買したＢａｌｂ／ｃマウスを１２週齢になるまで適応させた後、疲労誘発群３２匹と対照群８匹とに分けた。前記疲労誘発群を更に、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０ １０ｍｇ／ｋｇ処理群（Ｆ／ＧＳ#１０ １０）、５０ｍｇ／ｋｇ処理群（Ｆ／ＧＳ#１０ ５０）、高麗人参の種子抽出物５０ｍｇ／ｋｇ処理群（Ｆ／ＧＳＥ#１０ ５０）、無処理群（Ｆａｔｉｇｕｅ）にそれぞれ８匹ずつ４群に分けた。前記高麗人参の種子抽出物は、本発明の比較例であって、本明細書で上述した実施例１においてジンセノサイドの分離に用いられた高麗人参の種子（Ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ）メタノール抽出物である。前記新規なジンセノサイドＧＳ#１０又は高麗人参の種子抽出物は、実験前に２週間にかけて各実験群に対し経口投与方法にて投与した。疲労誘発は、２４時間回転ローターに載せて動かし続けて寝かせない方法にて誘導した。次いで、ＦＳＴ（ｆｏｒｃｅｄ ｓｗｉｍ ｔｅｓｔ）を６分間行いながら各実験群のマウスが水泳をしないでじっと水に浮かんでいる時間を測定して疲労島を計算し、図３６に示した。次いで、血液から乳酸濃度を測定して疲労物質の蓄積程度を観察し、図３７に示した。その結果、本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０は、濃度依存的に疲労誘発による症状を軽減させることと示され、本発明の比較例である高麗人参の種子抽出物の投与群（Ｆ／ＧＳＥ#１０ ５０）では疲労軽減効果が微々たるものと示された。これは、高麗人参の種子抽出物自体には新規なジンセノサイドＧＳ#１０が極微量含まれているだけでなく、それ以外の他の抗疲労物質が存在しておらず、抗疲労効能は本発明の一実施例である新規なジンセノサイドＧＳ#１０だけの固有機能であることを意味する。
以下、本明細書の一実施例に係る組成物の剤形例を説明するが、他の種々の剤形への応用も可能であり、これは、本明細書を限定するためではない単に具体的に説明するためのものである。
［剤形例１］錠剤
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ １００ｍｇ、ラクトース４００ｍｇ、とうもろこし澱粉４００ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常の錠剤の製造方法に従い打錠して錠剤を製造した。
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ １００ｍｇ、ラクトース４００ｍｇ、とうもろこし澱粉４００ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常の錠剤の製造方法に従い打錠して錠剤を製造した。
［剤形例２］カプセル剤
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ １００ｍｇ、ラクトース４００ｍｇ、とうもろこし澱粉４００ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常のカプセル剤の製造方法に従いゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ １００ｍｇ、ラクトース４００ｍｇ、とうもろこし澱粉４００ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常のカプセル剤の製造方法に従いゼラチンカプセルに充填してカプセル剤を製造した。
［剤形例３］顆粒剤
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ ５０ｍｇ、無水結晶ブドウ糖２５０ｍｇ及び澱粉５５０ｍｇを混合し、流動層造粒機を用いて顆粒に成形した後、分包に充填した。
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ ５０ｍｇ、無水結晶ブドウ糖２５０ｍｇ及び澱粉５５０ｍｇを混合し、流動層造粒機を用いて顆粒に成形した後、分包に充填した。
［剤形例４］ドリンク剤
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ ５０ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸０．６ｇ、及び液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水３００ｍｌを加えて、各瓶に２００ｍｌずつ充填する。瓶に充填した後、１３０℃で４～５秒間殺菌してドリンク剤を製造した。
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ ５０ｍｇ、ブドウ糖１０ｇ、クエン酸０．６ｇ、及び液状オリゴ糖２５ｇを混合した後、精製水３００ｍｌを加えて、各瓶に２００ｍｌずつ充填する。瓶に充填した後、１３０℃で４～５秒間殺菌してドリンク剤を製造した。
［剤形例５］キャラメル剤形
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ ５０ｍｇ、とうもろこしシロップ（ｃｏｒｎ ｓｙｒｕｐ）１．８ｇ、脱脂牛乳０．５ｇ、大豆レシチン０．５ｇ、バター０．６ｇ、植物性硬化油０．４ｇ、砂糖１．４ｇ、マーガリン０．５８ｇ、び食塩２０ｍｇを混合し、キャラメル成形した。
ジンセノサイドＰＧ－ＲＴ８ ５０ｍｇ、とうもろこしシロップ（ｃｏｒｎ ｓｙｒｕｐ）１．８ｇ、脱脂牛乳０．５ｇ、大豆レシチン０．５ｇ、バター０．６ｇ、植物性硬化油０．４ｇ、砂糖１．４ｇ、マーガリン０．５８ｇ、び食塩２０ｍｇを混合し、キャラメル成形した。
［剤形例６］健康食品
前記ビタミン及び無機質混合物の組成比は、比較的に健康食品に適合した成分を例にして混合組成したが、その配合比を任意に変形実施しても構わなく、通常の健康食品の製造方法に従い前記成分を混合した後、顆粒を製造し、通常の方法に従い健康食品の組成物の製造に用いてよい。
［剤形例７］健康飲料
前記表のように総体積９００ｍｌになるように残量の精製水を添加して通常の健康飲料の製造方法に従い前記成分を混合してから約１時間８５℃で撹拌加熱し、これにより調製された溶液をろ過して得られたろ液を滅菌された２Ｌの容器に入れて密封滅菌した後に冷蔵保管して健康飲料の組成物の製造に用いてよい。
［剤形例８］注射剤
下記の表に記載された組成にて通常の方法に従い注射剤を製造した。
下記の表に記載された組成にて通常の方法に従い注射剤を製造した。
本発明は、一実施例として、次の実施形態を提供することができる。
第１実施形態は、（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール（（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ－ｄａｍｍａｒ－３－ｏｎｅ－２０,２４－ｅｐｏｘｙ－６ａ，１２ｂ，２５－ｔｒｉｏｌ）、その薬学的に許容可能な塩、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む運動能力増進用又は抗疲労用組成物を提供することができる。
第２実施形態は、第１実施形態において、前記有効成分は、下記化学式１で表される構造を有するものである、組成物を提供することができる。
第３実施形態は、第１実施形態又は第２実施形態において、前記有効成分は、高麗人参の種子から抽出したものである、組成物を提供することができる。
第４実施形態は、第１実施形態～第３実施形態のいずれか一つ以上において、筋肉再生促進、筋肉増強、筋力強化、筋減少症の予防又は改善、疲労回復促進、及び乳酸代謝調節の一つ以上の用途を含む、組成物を提供することができる。
第５実施形態は、第１実施形態～第４実施形態のいずれか一つ以上において、前記有効成分は、筋細胞内のミトコンドリアの生成を促進させるものである、組成物を提供することができる。
第６実施形態は、第１実施形態～第５実施形態のいずれか一つ以上において、前記有効成分は、筋細胞内の脂肪酸の酸化を促進させるものである、組成物を提供することができる。
第７実施形態は、第１実施形態～第６実施形態のいずれか一つ以上において、前記有効成分は、運動により生成される血中乳酸濃度を減少させるものである、組成物を提供することができる。
第８実施形態は、第１実施形態～第７実施形態のいずれか一つ以上において、前記有効成分を、組成物の総重量に対して０．０００１～９９．９重量％の範囲で含む、組成物を提供することができる。
第９実施形態は、第１実施形態～第８実施形態のいずれか一つ以上において、当該組成物の投与量は、０．０５ｍｇ／ｋｇ／日～１０ｇ／ｋｇ／日の範囲である、組成物を提供することができる。
第１０実施形態は、第１実施形態～第９実施形態のいずれか一つ以上において、当該組成物は、皮膚外用剤組成物である、組成物を提供することができる。
第１１実施形態は、第１実施形態～第１０実施形態のいずれか一つ以上において、当該組成物は、食品組成物である、組成物を提供することができる。
第１２実施形態は、第１実施形態～第１１実施形態のいずれか一つ以上において、当該組成物は、薬学組成物である、組成物を提供することができる。
前記実施形態は本発明の説明のために開示されたものであり、前記説明は本発明の範囲を制限するものではない。したがって、本発明の意味及び範囲を逸脱しない限り、種々の修正、変形、及び置き換えが当該技術分野の通常の技術者から生じることがある。
Claims (12)
- （２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル（１→２）－β－Ｄ－グルコピラノシド－ダンマル－３－オン－２０,２４－エポキシ－６ａ，１２ｂ，２５－トリオール（（２０Ｓ，２４Ｒ）－６－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１→２）－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ－ｄａｍｍａｒ－３－ｏｎｅ－２０,２４－ｅｐｏｘｙ－６ａ，１２ｂ，２５－ｔｒｉｏｌ）、その薬学的に許容可能な塩、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む、運動能力増進用又は抗疲労用組成物。
- 前記有効成分は、下記の化学式１で表される構造を有するものである、請求項１に記載の組成物。
- 前記有効成分は、高麗人参の種子から抽出したものである、請求項１又は２に記載の組成物。
- 当該組成物は、筋肉再生促進、筋肉増強、筋力強化、筋減少症の予防又は改善、疲労回復促進、及び乳酸代謝調節の一つ以上の用途を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記有効成分は、筋細胞内のミトコンドリアの生成を促進させるものである、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記有効成分は、筋細胞内の脂肪酸の酸化を促進させるものである、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記有効成分は、運動により生成される血中乳酸濃度を減少させるものである、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記有効成分を、組成物の総重量に対して０．０００１～９９．９重量％の範囲で含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の組成物。
- 当該組成物の投与量は、０．０５ｍｇ／ｋｇ／日～１０ｇ／ｋｇ／日の範囲である、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記組成物は、皮膚外用剤組成物である、請求項１～９のいずれか一項に記載の組成物。
- 当該組成物は、食品組成物である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。
- 当該組成物は、薬学組成物である、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組成物。
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| WO2005000248A2 (en) | 2003-06-25 | 2005-01-06 | Geron Corporation | Compositions and methods for skin conditioning |
| WO2005040189A1 (en) | 2003-10-27 | 2005-05-06 | Panagin Pharmaceuticals Inc. | Novel dammarane sapogenins and their use as anti-cancer agents |
| EP2254569B1 (en) * | 2008-01-24 | 2012-11-28 | Raptor Therapeutics Inc. | Protopanaxadiol-type ginsenoside compositions and uses thereof |
| CN101928320B (zh) * | 2010-05-26 | 2012-07-11 | 吉林大学 | 西洋参皂苷F5ab及其提取方法和药物用途 |
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| CN102924556B (zh) | 2012-11-05 | 2017-08-22 | 烟台大学 | 具有抗菌活性的(20S，24R)‑ocotillol型人参皂苷类衍生物、其制备方法及用途 |
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