JP7348187B2 - 腸内環境改善用組成物及び腸内細菌叢改善方法 - Google Patents

Description

本発明は、腸内細菌叢改善用組成物に関する。また、本発明は、腸内細菌叢を改善する方法に関する。本発明はさらに、腸内細菌叢を改善するためのイソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用に関する。

腸内細菌叢（腸内フローラ）は、外来病原体の侵入を防ぐバリアとしての機能のみならず、宿主のエネルギー調節や栄養摂取、免疫機能などに影響し、腸内細菌叢の構成は肥満、糖尿病、加齢等と関係して変動することが報告されている。例えば腸内細菌叢と関連する状態又は疾患として、便秘、下痢、炎症性腸疾患、がん、アレルギー、喘息などが報告されている。

また、食餌は腸内細菌叢に影響を与える因子であり、何らかの健康上の便益を期待して腸内細菌叢を制御する方法として、宿主（特にヒト）の体に良い働きをし、健康に寄与する微生物（善玉菌）を摂取するプロバイオティクスと、善玉菌の増殖を目的としたプレバイオティクスが挙げられる。善玉菌の増殖に関してはビフィズス菌や乳酸菌、後述のアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌等、様々な報告が存在する。また、肥満者の腸内細菌叢ではフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率が増加し、日和見菌に分類されるバクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌の存在比率が減少していたことから、Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門の存在比率を制御することが重要であることが報告されている（非特許文献１）。

アッカーマンシア・ムシニフィラ（学名：Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａ）等のアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌はヒト腸粘液層に存在する腸内細菌であり、非肥満型のヒトには多く存在するものの、肥満型のヒトでは少量しか存在しないことが知られている。肥満モデルマウス及び２型糖尿病モデルマウスにおいても、通常マウスと比較してアッカーマンシア属細菌が少ないことが報告されている（非特許文献２）。

近年、ストレスや肥満に伴う腸管上皮細胞が持つ生体防御機能、すなわち腸管バリア機能の破綻と、それに伴う病原性細菌や内毒素（エンドトキシン）であるリポ多糖（ＬＰＳ）の流入が、慢性炎症や全身疾患の発症と関係することが報告されている。アッカーマンシア属細菌の摂取によって腸管バリア機能が増強され、血清中に流入するリポ多糖（ＬＰＳ）が減少することが報告されている（非特許文献２）。従って、アッカーマンシア属細菌を腸内で増殖させることにより、腸管バリア機能の増強が期待できる。腸管バリア機能の増強により、慢性炎症の発症抑制が期待できる。このように善玉菌であるアッカーマンシア属細菌を腸内で増殖させることは、宿主の健康の維持や増進において有益であると考えられ、腸内細菌叢や腸内環境が改善されている一つの状態であるといえる。

非特許文献３には、糖尿病治療薬メトホルミン摂取によるアッカーマンシア属細菌増殖促進作用が示されている。しかしながら、医薬品であるメトホルミンには乳酸アシドーシスを始めとする副作用が懸念される。従って、日常的な食生活において、腸内細菌叢及び腸内環境を改善するという目的での使用に適した物質が求められている。

特許文献１には、植物由来の５量体以上のプロアントシアニジン類を有効成分として含有するアッカーマンシア属細菌増殖促進剤が開示されている。また、同文献においては、５量体以上のプロアントシアニジン類（ＰＰ）と、重合度がそれよりも小さい単量体から４量体の低分子プロシアニジン画分（ＯＰ）の両方において抗肥満作用を認めたものの、アッカーマンシア属細菌増殖促進作用が認められたのは５量体以上のプロアントシアニジン類（ＰＰ）だけであり、抗肥満作用を示す成分が腸内細菌叢改善作用を示すとは限らないことが示されている。従って、物質の抗肥満作用に基づいて容易に腸内細菌叢改善作用の有無に想到することはできない。

非特許文献４には、ポリフェノールを含むスペントホップ（ホップ抽出粕）による腸での抗炎症作用が報告されている。しかしながらスペントホップが腸内細菌叢に与える影響は不明であり、有効成分も明示されていない。

特開２０１８－８９１１号公報

Ｎａｔｕｒｅ． ２００６ Ｄｅｃ ２１；４４４（７１２２）：１０２７－３１． Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．２０１３ Ｍａｙ ２８；１１０（２２）：９０６６－７１． Ａｐｐｌ Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． ２０１４ Ｏｃｔ； ８０（１９） ＢＭＣ Ｖｅｔ Ｒｅｓ． ２０１４ Ｓｅｐ ４；１０：１９６．

本発明は、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率を増加させることが可能な新規の腸内細菌叢改善用組成物を提供することを目的とする。また、本発明は、腸内細菌叢改善方法等を提供することを目的とする。

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、ホップ由来のポリフェノールの一種であるイソキサントフモール及びキサントフモールが、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の増殖を促進する作用を有し、腸内細菌叢改善作用を示すことを見出した。イソキサントフモール及びキサントフモールは、肥満のヒトにおいて上昇するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌／バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌の比率を減少させる腸内細菌叢改善作用も有した。イソキサントフモール及びキサントフモールについて、本発明で見出したアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌増殖作用、Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門細菌／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門細菌の比率を減少させる作用、当該作用に基づく腸内細菌叢改善作用、腸管バリア機能増強作用及び腸内環境改善作用等はこれまで報告されていなかった。

すなわち、これに限定されるものではないが、本発明は以下の腸内細菌叢改善用組成物、腸内細菌叢改善方法等に関する。
〔１〕イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを有効成分として含む腸内細菌叢改善用組成物。
〔２〕上記腸内細菌叢改善が、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率の増加である上記〔１〕に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔３〕上記善玉菌が、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌である上記〔２〕に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔４〕上記腸内細菌叢改善が、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）の減少である上記〔１〕に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔５〕腸管バリア機能増強のために使用される上記〔１〕～〔４〕のいずれかに記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔６〕飲食品である上記〔１〕～〔５〕のいずれかに記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔７〕飲料である上記〔１〕～〔６〕のいずれかに記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔８〕上記飲料が、茶系飲料、コーヒー飲料、アルコール飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料、果実・野菜系飲料、乳性飲料、豆乳飲料又はフレーバーウォーターである上記〔７〕に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔９〕「腸内細菌のバランスを整える」、「腸内環境を良好に保つ」、「腸の健康維持に役立つ」、「腸管バリア機能を高める」、「善玉菌を増やす」、「有用菌を増やす」、「おなかの調子を整える」、「おなかの不快感を軽減する」及び「体質を改善する」の１又は２以上の機能の表示を付した上記〔１〕～〔８〕のいずれかに記載の腸内細菌叢改善用組成物。
〔１０〕イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に摂取させる又は投与する腸内細菌叢改善方法。
〔１１〕腸内細菌叢を改善するための、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用。

本発明によれば、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率を増加させることが可能な新規の腸内細菌叢改善用組成物を提供することができる。本発明の腸内細菌叢改善用組成物を摂取すると、例えば、腸内細菌叢において、善玉菌であるアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の存在比率を増加させることができる。このような善玉菌の存在比率を増加させる作用等により、腸内細菌叢の改善、腸内環境の改善、腸管バリア機能の増強等が可能となる。本発明によれば、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率を増加させることができ、腸内細菌叢を改善することができる方法を提供することができる。

図１は、各群における腸内細菌叢を構成する細菌の存在比率を示すグラフである。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを有効成分として含む。
腸内細菌叢改善用組成物は、イソキサントフモール及びキサントフモールのいずれか一方を有効成分として含んでもよく、これらの両方を有効成分として含んでいてもよい。
本発明の一態様において、腸内細菌叢改善用組成物は、イソキサントフモール、又は、イソキサントフモール及びキサントフモールを有効成分として含むことが好ましい。

イソキサントフモールは、例えば、アサ科の植物であるホップ（Ｈｕｍｕｌｕｓ ｌｕｐｕｌｕｓ）抽出物から加熱等のプロセスを経て調製することができる。ホップ抽出物を加熱することにより、該抽出物中にイソキサントフモールを生成させることができる。ホップ抽出物は、通常、ホップの毬花を溶媒で抽出し、必要に応じて精製に係るプロセスを介して調製され、公知のホップ抽出物の調製方法により得ることができる。抽出方法として、例えば、ビール醸造に用いられるホップ抽出物の調製法として用いられる、エタノール溶媒による抽出法が挙げられる。ホップ抽出物は市販されており、市販のホップ抽出物を使用することもできる。イソキサントフモールを生成させるためのホップ抽出物の加熱は、８０～１４０℃（より好ましくは８５～１００℃）で１５分～５時間（より好ましくは２０分～３時間）行うことが好ましい。イソキサントフモールを調製するためのホップ抽出物の精製は、公知の方法で実施される。精製方法として、例えば、ＨＰＬＣや吸着カラム等の使用や、溶解度の変化を利用した析出などの方法が挙げられる。また、イソキサントフモールは、キサントフモールを加熱することによって異性化して製造することもできる。この際の加熱温度は、好ましくは８０～１４０℃（より好ましくは８５～１００℃）で１５分～５時間（より好ましくは２０分～３時間）を採用することができる。異性化処理により得られたイソキサントフモールは、必要に応じて、公知の方法（例えば、ろ過、減圧濃縮、凍結乾燥等）により濃縮したり、精製したりすることができる。

キサントフモールは、ホップに由来する成分であり、ホップから溶媒を用いて抽出することで得られる。例えば、乾燥したホップを粉砕などしてペレット状にしたものを、アルコールなどの有機溶媒に浸漬して抽出する。次いで、得られた抽出液を濃縮又は乾燥した後、クロマトグラフィーなどを用いて分離又は精製することにより得ることができる。ホップからの抽出、分画、精製の際の温度は、８０℃未満が好ましく、例えば、５～７０℃がより好ましい。
イソキサントフモール及びキサントフモールは、市販品を使用することもできる。
本発明においては、本発明の効果を奏することになる限り、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを豊富に含む植物由来原料を本発明の組成物に含有させてもよい。

イソキサントフモール及びキサントフモールは、天然物や飲食品に含まれ、食経験がある化合物である。このため安全性の観点から、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールは、例えば毎日摂取することにも問題が少ないと考えられる。従って本発明によれば、安全性が高い成分を有効成分として含む腸内細菌叢改善用組成物を提供することができる。またイソキサントフモールは、例えば１００℃の高温条件でも安定であることが報告されている。食品衛生法においては清涼飲料水等の規格基準として殺菌条件が定められているが、例えばｐＨ４．０以上のもの（ｐＨ４．６以上で、かつ、水分活性が０．９４を超えるものを除く）においては８５℃において３０分間の加熱が必要である。このような殺菌工程における成分変換を考慮した場合、イソキサントフモールは飲料適正が高いと考えられる。
本発明の一態様によれば、腸内細菌叢改善作用を示し、熱に安定であり、健康の維持、増進に資する種々の機能性食品、機能性飲料等を提供することが可能となる。
腸内細菌叢改善用組成物に含まれるイソキサントフモール及び／又はキサントフモールは、例えば、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）やＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより定量することが可能である。イソキサントフモール及びキサントフモールは、簡便に定量分析が可能であり、有効成分の定量分析及び規格化が必要となる機能性表示食品等の有効成分として使用しやすいという利点もある。

本発明において、腸内細菌叢（腸内フローラ）とは、腸内に存在する細菌の集団（ミクロフローラ）を指す。腸内細菌叢を構成する細菌には、宿主（特にヒト）の体に良い働きをし、健康に寄与する細菌（善玉菌）、有害な物質を作り出すなど体に悪い働きをする細菌、宿主の抵抗力が弱ったときに腸内で悪い働きをする細菌、害にも益にもならない細菌がある。善玉菌は、有用菌ということもできる。腸内細菌叢の各細菌種の存在比率をバランスということもある。腸内細菌叢を構成する細菌の存在比率（バランス）は、食生活、年齢、ストレス、抗生物質等の薬の服用等の要因によって変動する。腸内細菌叢のバランスは、宿主の健康状態に影響を及ぼす。

本発明において、腸内細菌叢改善とは、腸内細菌叢が宿主（特に、ヒト）にとって有益な方向に変動することを指す。腸内細菌叢改善には、腸内細菌叢のバランスの改善が含まれる。本発明において、腸内細菌叢改善は、好ましくは、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率（存在割合）の増加である。腸内細菌叢における善玉菌の存在比率とは、腸内細菌叢の総細菌数に対する善玉菌の占有率である。腸内細菌叢における善玉菌の存在比率が増加すると、通常、腸内細菌叢により産生される代謝産物、腸内ｐＨ等の指標が、宿主にとって有益な方向に改善される。このように、善玉菌の存在比率が増加して腸内細菌叢が改善されることにより、又は、腸内細菌叢により産生される代謝産物、腸内ｐＨ等の指標が、宿主にとって有益な方向に改善されることにより腸内環境が改善される。本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、腸内環境改善用組成物として使用され得る。
腸内細菌叢における善玉菌の存在比率は、例えば、糞便中の細菌の１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子解析を行うことにより調べることができる。

善玉菌として、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌、ビフィズス菌、乳酸菌などが挙げられ、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌が好ましい。

腸内細菌叢におけるアッカーマンシア属細菌の存在比率の増加は、腸内細菌叢改善及び腸内環境改善の指標の１つである。上述したように、アッカーマンシア属細菌を腸内で増加させることにより、例えば、腸管バリア機能の増強が期待できる。
腸管バリア機能とは、腸管上皮細胞外（腸管内）から体内への異物（例えば、エンドトキシン等の毒素、起炎物質、未消化物等）の侵入（透過）を防ぐ機能をいう。正常な状態と比べて腸管上皮細胞外から体内への異物の侵入が促進されている状態を、腸管上皮細胞における異物の透過性が上昇した状態と呼ぶ。腸管バリア機能増強とは、腸管上皮細胞における異物の透過性の上昇を抑制すること、及び、腸管上皮細胞における異物の透過性を低下させることのいずれをも意味する。腸管バリア機能増強効果は、例えば、腸管上皮細胞の電気抵抗値（経上皮膜抵抗値（ｔｒａｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｅｌｅｃｔｒｉｃ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ：ＴＥＥＲ））が上昇することによって、又は、ＴＥＥＲの低下を抑制することによって示される。当業者は、目的に応じて腸管バリア機能増強効果の具体的な評価方法を選択することができる。

また、上記のように、肥満者の腸内細菌叢ではフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌が増加し、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌が減少していた（上記の非特許文献１）。従ってバクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）の減少は、腸内細菌叢改善の一態様であり、腸内環境改善の一つの指標となり得る。Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門の減少は、フィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌に対するバクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門／Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門）の増加と言い換えることもできる。

後記の実施例に示すように、イソキサントフモール又はキサントフモールを経口摂取（経口投与）させたマウスでは、摂取させなかったマウスと比較して腸内細菌叢を構成する細菌の存在比が変化し、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の存在比率が増加した。従って、イソキサントフモール及びキサントフモールは、腸内細菌叢におけるアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の存在比率を増加させて腸内細菌叢を改善する作用を有する。さらに、イソキサントフモール又はキサントフモールを経口摂取させたマウスでは、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）が減少した。従ってイソキサントフモール及びイソキサントフモールは、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）を減少させる作用を有する。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを有効成分に含むことにより、腸内細菌叢における善玉菌、例えば、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の存在比率を増加させるために使用され得る。アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の存在比率を増加させることは、腸管バリア機能の増強に有効である。従って本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、腸管バリア機能増強のために好適に使用され得る。腸管バリア機能増強により、慢性炎症の予防又は改善、便秘の予防又は改善、下痢の予防又は改善、お腹の不快感軽減、体質の改善等の効果が期待できる。

一態様において、本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）の減少のために使用され得る。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、例えば、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率を増加させることにより、腸内細菌叢を改善するため、腸内環境を改善するため、又は、腸管バリア機能を増強するために使用され得る。本発明の腸内細菌叢改善用組成物はまた、腸内細菌叢におけるＦｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門の存在比率を減少させることにより、腸内細菌叢を改善するため、腸内環境を改善するために使用され得る。一態様において、本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、腸内細菌叢における善玉菌、特にアッカーマンシア属細菌の存在比率を増加させることが、その予防又は改善に有効な状態又は疾患の予防又は改善のために使用され得る。このような状態又は疾患として、例えば、腸管バリア機能増強により予防又は改善が期待できる状態又は疾患が挙げられる。腸管バリア機能増強により予防又は改善が期待できる状態又は疾患の一例として、慢性炎症、便秘、下痢、過敏性腸症候群、感染症、食物アレルギーなどが挙げられる。
本明細書で状態又は疾患の予防は、状態又は疾患の発症を防止すること、状態又は疾患の発症を遅延させること、状態又は疾患の発症率を低下させること、状態又は疾患の発症のリスクを軽減すること等を指す。状態又は疾患の改善は、対象を状態又は疾患から回復させること、状態又は疾患の症状を軽減すること、状態又は疾患の進行を遅延させること又は防止すること等を指す。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、治療用途（医療用途）又は非治療用途（非医療用途）のいずれにも適用することができる。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、飲食品、医薬、医薬部外品、飼料等の形態とすることができる。本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、それ自体が、腸内細菌叢改善のための飲食品、医薬、医薬部外品、飼料等であってもよく、これらに配合して使用される素材又は製剤等であってもよい。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、一例として、剤の形態で提供することができるが、本形態に限定されるものではない。当該剤をそのまま組成物として、又は、当該剤を含む組成物として提供することもできる。本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、腸内細菌叢改善剤ということもできる。
本発明の効果を充分に得る観点から、本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、好ましくは経口用組成物である。経口用組成物として、飲食品、経口用の医薬、医薬部外品、飼料が挙げられ、好ましくは飲食品又は経口用医薬であり、より好ましくは飲食品である。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、本発明の効果を損なわない限り、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールに加えて、任意の添加剤、任意の成分を含有することができる。これらの添加剤及び成分は、組成物の形態等に応じて選択することができ、一般的に飲食品、医薬、医薬部外品、飼料等に使用可能なものが使用できる。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物を、飲食品、医薬、医薬部外品、飼料等とする場合、その製造方法は特に限定されず、一般的な方法により製造することができる。また、例えばイソキサントフモールを含む腸内細菌叢改善用組成物は、その製造において、ホップ抽出物を配合し、該ホップ抽出物を加熱する工程を行うことによって製造することもできる。

例えば本発明の腸内細菌叢改善用組成物を飲食品とする場合、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールに、飲食品に使用可能な成分（例えば、食品素材、必要に応じて使用される食品添加物等）を配合して、種々の飲食品とすることができる。飲食品は特に限定されず、例えば、一般的な飲食品、健康食品、健康飲料、機能性表示食品、特定保健用食品、病者用飲食品等が挙げられる。上記健康食品、機能性表示食品、特定保健用食品等は、例えば、細粒剤、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、チュアブル剤、シロップ剤、液剤、流動食等の各種製剤形態とすることができる。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物の好ましい形態の一例として、飲料が挙げられる。例えば、イソキサントフモールは熱に安定であることから、イソキサントフモールを含む腸内細菌叢改善用組成物は、飲料により適している。
飲料は、ノンアルコール飲料、アルコール飲料のいずれであってもよい。ノンアルコール飲料として、例えば、茶系飲料、コーヒー飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料、果実・野菜系飲料、乳性飲料、豆乳飲料、フレーバーウォーター等が挙げられる。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物が飲料である場合、茶系飲料、コーヒー飲料、アルコール飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料、果実・野菜系飲料、乳性飲料、豆乳飲料又はフレーバーウォーターであることが好ましい。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物が茶系飲料である場合、紅茶飲料又は無糖茶飲料であることが好ましい。無糖茶飲料として、緑茶飲料、ウーロン茶飲料、麦茶飲料、玄米茶飲料、ハト麦茶飲料、無糖の紅茶飲料等が挙げられる。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物がコーヒー飲料である場合、容器詰コーヒー又はリキッドコーヒーであることが好ましい。

アルコール飲料としては、ビール、ビール系飲料、ビール及びビール系飲料以外のアルコール飲料が挙げられる。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物がビール系飲料である場合、発泡酒又は第三のビールであることが好ましい。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物がビール及びビール系飲料以外のアルコール飲料である場合、焼酎、チューハイ、リキュール、カクテル、スピリッツ、ウイスキーであることが好ましい。

本明細書における「ノンアルコールビールテイスト飲料」とは、ビール様の風味をもつ炭酸飲料を意味し、通常非発酵のノンアルコールタイプのものであり、これはアルコールを実質的に含まない。ここで、ノンアルコールビールテイスト飲料は、検出できない程度の極く微量のアルコールを含有する飲料を除くものではない。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物が炭酸飲料である場合、コーラフレーバー飲料、透明炭酸飲料、ジンジャーエール、果汁系炭酸飲料、乳類入炭酸飲料又は無糖炭酸飲料であることが好ましい。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物が機能性飲料である場合、スポーツドリンク、エナジードリンク、健康サポート飲料又はパウチゼリー飲料であることが好ましい。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物が果実・野菜系飲料である場合、１００％果実飲料、果実入飲料、低果汁入清涼飲料、果粒含有果実飲料又は果肉飲料であることが好ましい。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物が乳性飲料である場合、牛乳、ドリンクヨーグルト、乳酸菌飲料又は乳類入清涼飲料であることが好ましい。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物が豆乳飲料である場合、豆乳又は大豆飲料であることが好ましい。

飲料の形態は特に限定されず、容器詰飲料とすることができる。容器詰飲料の容器は特に限定されず、いずれの形態及び材質の容器を用いてもよく、例えば、アルミ缶、スチール缶等の金属製容器；ペットボトル等の樹脂製容器；紙パック等の紙容器；ガラス瓶等のガラス製容器；樽等の木製容器等の通常用いられる容器のいずれも用いることができる。このような容器に飲料を充填及び密閉することにより、容器詰飲料が得られる。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物を医薬又は医薬部外品とする場合、例えば、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールに、薬理学的に許容される担体、必要に応じて添加される添加剤等を配合して、各種剤形の医薬又は医薬部外品とすることができる。そのような担体、添加剤等は、医薬又は医薬部外品に使用可能な、薬理学的に許容されるものであればよく、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、抗酸化剤、着色剤等の１又は２以上が挙げられる。医薬又は医薬部外品の投与（摂取）形態としては、経口、経腸、経粘膜、注射等が挙げられるが、本発明の効果をより充分に得る観点から、経口投与の形態が好ましい。腸内細菌叢改善用組成物を医薬とする場合、経口用医薬とすることが好ましい。経口投与のための製剤の剤形としては、液剤、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、糖衣錠、カプセル剤、懸濁液、乳剤、チュアブル剤等が挙げられる。医薬は、非ヒト動物用医薬であってもよい。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物を飼料とする場合には、例えば、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを飼料に配合すればよい。飼料には飼料添加剤も含まれる。飼料としては、例えば、牛、豚、鶏、羊、馬等に用いる家畜用飼料；ウサギ、ラット、マウス等に用いる小動物用飼料；犬、猫、小鳥等に用いるペットフードなどが挙げられる。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物中のイソキサントフモール及び／又はキサントフモールの含量は特に限定されず、その形態等に応じて設定することができる。イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの含量は、例えば、イソキサントフモール及びキサントフモールの総含量が、腸内細菌叢改善用組成物中に０．０００１重量％以上が好ましく、０．００１重量％以上がより好ましく、また、９０重量％以下が好ましい。一態様において、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの含量は、イソキサントフモール及びキサントフモールの総含量が、腸内細菌叢改善用組成物中に０．０００１～９０重量％が好ましく、０．００１～９０重量％がより好ましい。イソキサントフモール及びキサントフモールの総含量とは、組成物がこれらのいずれか一方のみを含む場合は、イソキサントフモール又はキサントフモールの含量であり、組成物がイソキサントフモール及びキサントフモールを含む場合は、これらの合計の含量である。一態様において、本発明の腸内細菌叢改善用組成物を飲食品、医薬、医薬部外品、飼料等とする場合、イソキサントフモール及びキサントフモールの総含量を上記範囲とすることが好ましい。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、その形態に応じた適当な方法で摂取又は投与することができる。本発明の効果を充分に得る観点から、本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、好ましくは、経口摂取（経口投与）される。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物の摂取量（投与量ということもできる）は特に限定されず、腸内細菌叢改善効果が得られるような量（有効量）であればよく、投与形態、投与方法、対象の体重等に応じて適宜設定すればよい。一態様において、ヒト（成人）を対象に経口で摂取させる又は投与する場合、腸内細菌叢改善用組成物の摂取量は、イソキサントフモール及びキサントフモールの総摂取量として、１日当たり体重６０ｋｇで、好ましくは１～２００ｍｇであり、より好ましくは５～６０ｍｇである。上記量を、１日１回以上、例えば、１日１回～数回（例えば２～３回）に分けて、摂取させることが好ましい。イソキサントフモール及びキサントフモールの総摂取量とは、これらのいずれか一方のみを摂取する場合は、イソキサントフモール又はキサントフモールの摂取量であり、イソキサントフモール及びキサントフモールを摂取する場合は、これらの合計摂取量である。一態様において、本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、成人に、体重６０ｋｇあたり、１日あたり上記量のイソキサントフモール及び／又はキサントフモールを摂取させる又は投与するための経口用組成物であってよい。

イソキサントフモール及び／又はキサントフモールは、継続的に摂取（投与）されることによって、腸内細菌叢改善効果が高まる。従って好ましい態様において、本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、継続して摂取されるものである。本発明の一実施態様において、腸内細菌叢改善用組成物は、２週間以上継続して摂取されることが好ましく、８週間以上継続して摂取されることがより好ましい。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物を摂取させる対象（投与対象ということもできる）は、特に限定されない。好ましくはヒト又は非ヒト哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物を摂取させる対象として、腸内細菌叢改善を必要とする又は希望する対象、腸内環境改善を必要又は希望する対象が好ましい。このような対象として、例えば、過敏性腸症候群、便秘、下痢、食物アレルギーを有するヒト等が挙げられる。本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、例えば、腸内細菌叢改善により予防又は改善が期待できる状態又は疾患の予防等を目的として、健常者に対して使用することもできる。
本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、天然物や飲食品に含まれる安全性が高い成分を有効成分として含み、継続的に摂取されることによって高い腸内細菌叢改善効果を発揮する。このため本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、例えば、上記の過敏性腸症候群、便秘、下痢、食物アレルギーを有するヒト、健常者等が日常的に経口摂取することにより、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率を増加させ、腸内細菌叢の改善、腸内環境の改善に使用するための健康食品、機能性表示食品等として有用である。

本発明の腸内細菌叢改善用組成物には、腸内細菌叢改善作用に基づく機能の表示が付されていてもよい。本発明の腸内細菌叢改善用組成物には、例えば、「腸内細菌のバランスを整える」、「腸内環境を良好に保つ」、「腸の健康維持に役立つ」、「腸管バリア機能を高める」、「善玉菌を増やす」、「有用菌を増やす」、「おなかの調子を整える」、「おなかの不快感を軽減する」及び「体質を改善する」の１又は２以上の機能の表示が付されていてもよい。
本発明の一実施態様において、本発明の腸内細菌叢改善用組成物は、上記の表示が付された飲食品であることが好ましい。また上記の表示は、上記の機能を得るために用いる旨の表示であってもよい。

本発明は、以下の方法も包含する。
イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に摂取させる又は投与する腸内細菌叢改善方法。
イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に摂取させる又は投与する腸内環境改善方法。
イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に摂取させる又は投与する腸内細菌叢における善玉菌の存在比率の増加方法。
上記方法は、治療的な方法であってもよく、非治療的な方法であってもよい。「非治療的」とは、医療行為、すなわち人間の手術、治療又は診断を含まない概念である。
イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを摂取すると、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率を増加させることができる。また、腸内細菌叢におけるバクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）を減少させることができる。このような作用により、腸内細菌叢改善、腸内環境改善が可能となる。

本発明は、以下の使用も包含する。
腸内細菌叢を改善するための、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用。
腸内環境を改善するための、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用。
腸内細菌叢における善玉菌の存在比率を増加させるための、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用。
上記の使用は、好ましくはヒト又は非ヒト哺乳動物、より好ましくはヒトにおける使用である。使用は、治療的な使用であってもよく、非治療的な使用であってもよい。

本発明の方法及び使用において、腸内細菌叢改善、善玉菌及びこれらの好ましい態様などは、上述した本発明の腸内細菌叢改善用組成物の場合と同じである。
本発明は、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に摂取させる又は投与する腸内細菌叢におけるアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の存在比率の増加方法；イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に摂取させる又は投与する腸内細菌叢におけるバクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）を減少させる方法；腸内細菌叢におけるアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌の存在比率を増加させるための、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用；腸内細菌叢におけるバクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）を減少させるための、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用、も包含する。

上記方法及び使用においては、本発明の効果をより充分に得る観点から、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを継続して対象に摂取させる又は投与することが好ましい。
本発明の効果をより充分に得る観点から、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを継続して対象に摂取させる又は投与する場合、２週間以上継続して摂取させる又は投与することが好ましく、８週間以上継続して摂取させる又は投与することがより好ましい。上記方法及び使用においては、１日に１回以上、例えば、１日１回～数回（例えば２～３回）、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に投与又は摂取させればよい。一態様において、上記方法及び使用においては、イソキサントフモール、又は、イソキサントフモール及びキサントフモールを摂取させる又は投与することが好ましい。

上記方法及び使用においては、腸内細菌叢改善効果が得られる量（有効量ということもできる）のイソキサントフモール及び／又はキサントフモールを対象に投与又は摂取させればよい。イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの好ましい摂取量や投与対象等は上述した本発明の腸内細菌叢改善用組成物の場合と同じである。イソキサントフモール及び／又はキサントフモールは、そのまま投与又は摂取させてもよく、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールを含む組成物として投与又は摂取させてもよい。例えば、上述した本発明の腸内細菌叢改善用組成物を投与又は摂取させてもよい。
また、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールは、腸内細菌叢改善のために使用される飲食品、医薬、医薬部外品、飼料等の製造のために使用することができる。本発明は一態様において、腸内細菌叢改善用組成物を製造するための、イソキサントフモール及び／又はキサントフモールの使用、も包含する。
本明細書中に記載された学術文献及び特許文献の全ては、参照として本明細書に組み入れられる。

以下、本発明を実施例によりさらに詳しく説明するが、これにより本発明の範囲を限定するものではない。

一連の動物実験は、動物愛護管理法他関連法令を遵守し、社内動物実験委員会の審査を経て機関の長が承認した計画に基づき実施した。

＜調製例１＞キサントフモール及びイソキサントフモールの調製
ホップ抽出物（アサマ化成株式会社製）から、以下の方法でイソキサントフモール及びキサントフモールを単離精製した。すなわち、順相カラムクロマトグラフィー、逆相カラムクロマトグラフィー、分取ＨＰＬＣ精製によりホップ抽出物を原料に、イソキサントフモール及びキサントフモールを精製し、ＨＰＬＣ分析により純度が９５％以上であることを確認した。なおＨＰＬＣ分析においては、カラムとしてＤｅｖｅｌｏｓｉｌＣ３０－ＵＧ－５（野村化学株式会社）を使用し、検出器の紫外線吸収測定波長は２８０ｎｍ（イソキサントフモール）及び３５０ｎｍ（キサントフモール）とした。得られたイソキサントフモール及びキサントフモールを、それぞれ標品（いずれも純度９５％以上）として以下の実験で使用した。

＜実施例１＞
キサントフモール及びイソキサントフモール摂取による腸内細菌叢改善作用の検討
高脂肪食摂取モデルマウスを用いて、腸内細菌叢に与えるキサントフモール及びイソキサントフモールの影響を、以下の手順で検討した。

（群構成）
本試験の群構成（群名、基礎飼料、被験物質及び被験物質の用量）を表１に示す。用量は、体重１ｋｇあたり１日あたりの被験物質の摂取量（ｍｇ）である。
なお表中、普通食は「コントロール飼料」（Ｄ１２４５０Ｊ）を、６０ｋｃａｌ％高脂肪食は「超高脂肪飼料」（Ｄ１２４９２）（以上、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ社製）を、カテキン類は製剤として「ポリフェノン７０Ａ」（製品名、三井農林株式会社製）を使用した。カテキン類は陽性対照として用いた。キサントフモール及びイソキサントフモールは、調製例１で得られた標品（純度９５％以上）を使用した。

（馴化・群分け）
マウス（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ、雄性、７週齢、日本クレア株式会社）を入荷して１週間検疫及び馴化した後、一般状態観察において異常の認められなかった動物より、体重推移を基準に動物を選択した。選択した動物は、馴化期間終了時の体重による層別連続無作為化法により表１に示す群構成中の各群（１群につきｎ＝８）に割り付け、所定の基礎飼料及び水は自由摂取できる状況で飼育を行った。

（被験物質摂取の方法）
被験物質を８週間、１日１回経口摂取させた。被験物質の摂取の際には、被験物質と溶媒とを混合した投与液を使用した。溶媒には、０．５重量％カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）水溶液を使用した。被験物質投与において、マウスに摂取させる液量は１０ｍＬ／ｋｇとし、最新体重を基準として被験物質量及び液量を算出した。

（糞の回収及び遺伝子解析）
被験物質摂取開始から８週間後に採取された糞（新鮮便）を解析対象とし、１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子解析を行った。１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子解析は、特開２０１８－８９１１号公報の実施例に記載の方法で行った。この遺伝子解析から、糞に含まれる腸内細菌の存在割合（存在比率）を求め、腸内細菌叢を構成する細菌の存在比率とした。

（結果）
各群における腸内細菌叢を構成する細菌の存在割合（群平均）を図１に示す。図１に示される存在割合は、糞に含まれる総細菌数に対する各細菌の比率（占有率）である。図１中のＶｅｒｒｕｃｏｍｉｃｒｏｂｉａ（ベルコミクロビウム門）は、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌が属する上位の分類であり、本解析ではアッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌のみを示す。図１中のイソキサントフモール（ＩＸＮ）及びキサントフモール（ＸＮ）の用量（ｍｇ／ｋｇ）は、体重１ｋｇあたり１日あたりの被験物質の摂取量（ｍｇ）である。キサントフモール又はイソキサントフモールを８週間摂取した個体では、摂取していない個体（表１の群Ｎｏ．２の高脂肪食群）と比較して腸内細菌叢が変化し、アッカーマンシア属細菌の存在割合が増加していた。カテキン類摂取群でも同様の効果が認められた。また、キサントフモール又はイソキサントフモールを上記期間摂取した個体では、高脂肪食群と比較してＦｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門細菌／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門細菌の存在比率の減少が見られた。Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門細菌／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門細菌の存在比率は、普通食群では、４．２、高脂肪食群では、７．４、カテキン類群では１．７、キサントフモール（６０ｍｇ／ｋｇ）群では３．２、イソキサントフモール（６０ｍｇ／ｋｇ）群（群Ｎｏ．５）では６．０、イソキサントフモール（１８０ｍｇ／ｋｇ）群（群Ｎｏ．６）では２．４であった。

＜実施例２＞
図１は、各被験物質を８週間摂取させた結果であるが、イソキサントフモールを被験物質として群構成及び用量設計を一部変更した試験において、被験物質摂取開始から２週間後に盲腸内容物を採取し、上記と同様に１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子解析を行った。被験物質摂取開始から２週間後に、イソキサントフモール（６０ｍｇ／ｋｇ）群（イソキサントフモールを体重１ｋｇあたり１日あたり６０ｍｇ摂取させた群）で、摂取していない個体（高脂肪食群）と比較して、腸内細菌叢におけるアッカーマンシア属細菌の存在比率の増加が観察された。

本発明は、飲食品分野、医薬分野等において有用である。

Claims (9)

1. キサントフモールを有効成分として含む腸内細菌叢改善用組成物。
2. 前記腸内細菌叢改善が、腸内細菌叢における善玉菌の存在比率の増加である請求項１に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
3. 前記善玉菌が、アッカーマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属細菌である請求項２に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
4. 前記腸内細菌叢改善が、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門細菌に対するフィルミクテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門細菌の存在比率（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ門／Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ門）の減少である請求項１に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
5. 腸管バリア機能増強のために使用される請求項１～４のいずれか一項に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
6. 飲食品である請求項１～５のいずれか一項に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
7. 飲料である請求項１～６のいずれか一項に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
8. 前記飲料が、茶系飲料、コーヒー飲料、アルコール飲料、ノンアルコールビールテイスト飲料、炭酸飲料、機能性飲料、果実・野菜系飲料、乳性飲料、豆乳飲料又はフレーバーウォーターである請求項７に記載の腸内細菌叢改善用組成物。
9. 「腸内細菌のバランスを整える」、「腸内環境を良好に保つ」、「腸の健康維持に役立つ」、「腸管バリア機能を高める」、「善玉菌を増やす」、「有用菌を増やす」、「おなかの調子を整える」、「おなかの不快感を軽減する」及び「体質を改善する」の１又は２以上の機能の表示を付した請求項１～８のいずれか一項に記載の腸内細菌叢改善用組成物。

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