JP7595271B2

JP7595271B2 - 血中ｐｃｓｋ９濃度上昇抑制用組成物

Info

Publication number: JP7595271B2
Application number: JP2019029686A
Authority: JP
Inventors: 茜金崎; 範子北村; 匡央佐藤
Original assignee: Kyushu University NUC; Matsutani Chemical Industries Co Ltd
Current assignee: Kyushu University NUC; Matsutani Chemical Industries Co Ltd
Priority date: 2019-02-21
Filing date: 2019-02-21
Publication date: 2024-12-06
Anticipated expiration: 2039-02-21
Also published as: JP2020132588A

Description

本発明は、血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物等に関する。

近年、高カロリー・高コレステロール型食への変化や生活習慣の乱れから生じる肥満等により脂質異常症（高コレステロール血症、高脂血症）、及びこれに起因する動脈硬化症を発症する患者が急増しており、対策が急務となっている。

現在、高コレステロール血症の治療薬の一つとして、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害薬（スタチン）が認められている。しかし、スタチンは強力にＬＤＬ（低密度リポタンパク質）コレステロールを低下させるが、その副作用として横紋筋融解症のリスクが高まるため、高用量を投与することができないという問題がある。そこで、スタチンとは作用機序の異なる、ＬＤＬコレステロール低下作用を有する薬剤の開発が求められていた。

一方、ＬＤＬ受容体と結合して分解することによりその代謝を調節するＰＣＳＫ９（ＰｒｏｐｒｏｔｅｉｎＣｏｎｖｅｒｔａｓｅＳｕｂｔｉｌｉｓｉｎ / Ｋｅｘｉｎｔｙｐｅ９；前駆蛋白質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型）が最近注目されている。このＰＣＳＫ９の体内での役割は未だ不明な点もあるが、ＰＣＳＫ９の発現を抑制することにより、血中ＬＤＬコレステロールが低減する効果は明らかになっている。血中ＬＤＬコレステロールは、細胞表面に存在するＬＤＬ受容体によって細胞内に取り込まれるが、ＰＣＳＫ９が過剰発現するとＬＤＬ受容体の分解が進み、その受容体は不足する。そうすると、血中ＬＤＬコレステロールの細胞内への取り込みは不十分となり、その結果、血中ＬＤＬコレステロールは増加するので、動脈硬化性疾患などのリスクが増加する。

そこで、現在、血中のＰＣＳＫ９の活性を阻害する又はＰＣＳＫ９の発現を抑制する医薬品等の開発が進められており、例えば、特許文献１には、ヒトＰＣＳＫ９（ｈＰＣＳＫ９）に特異的に結合する完全ヒトモノクローナル抗体（ｍＡｂｓ）及びその抗原結合フラグメントが、特許文献２には、ＰＣＳＫ９ｍＲＮＡを標的とするアンチセンスヌクレオチドおよびそれらのコンジュゲートが開示されている。

しかし、これらの抗体医薬品や核酸医薬品は、特異性が高く効果が高いものの、現状では生産性が低く高価であるため、長期間の治療を必要とする患者にとっては経済的負担が大きく、また、患者によっては副作用の問題もある。

特表２０１２－５１１９１３号公報特表２０１６－５２３０９４号公報

よって、本発明の目的は、安価で副作用の少ない、血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物又は剤を提供することにある。

本発明者は、ＰＣＳＫ９について種々検討した結果、思いがけなくもＤ－プシコースを継続的に摂取することにより、血中のＰＣＳＫ９濃度の上昇を抑制できることを見出した。

すなわち、本発明は上記知見に基づき完成されたものであり、以下の［１］～［７］から構成されるものである。
［１］Ｄ－プシコースを有効成分とする血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物。
［２］１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを摂取させるための上記［１］記載の組成物。
［３］１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを少なくとも２８日継続して摂取させるための上記［１］記載の組成物。
［４］Ｄ－プシコースを有効成分とする血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制剤。
［５］１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを摂取させるための上記［４］記載の剤。
［６］１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを少なくとも２８日継続して摂取させるための上記［４］記載の剤。
［７］１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを少なくとも２８日継続して摂取させる、ＰＣＳＫ９の血中濃度上昇を抑制する方法。

本発明のＤ－プシコースを有効成分とする血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物を摂取することにより、ＰＣＳＫ９の血中濃度の上昇を抑制することができる。

試料（Ｄ－プシコース１５ｇ）継続摂取の初日及び最終日における試験（実施例３）の手順を示す図である。試料継続摂取の初日及び最終日に採血した全被験者（１４名）の血中ＰＣＳＫ９濃度の平均値（実施例３）を示す図である。

本発明における血中ＰＣＳＫ９濃度の「上昇抑制」とは、試料摂取後に血中のＰＣＳＫ９濃度が相対的に上昇しないことをいう。具体的には、一定期間試料を摂取し、試料摂取前後の採血した各被験者の血液中のＰＣＳＫ９濃度を市販キット（例えば、サイクレックス社製の「ＣｉｒｃｕＬｅｘＨｕｍａｎＰＣＳＫ９ＥＬＩＳＡＫｉｔ」や、「ＣｉｒｃｕＬｅｘＭｏｕｓｅ／ＲａｔＰＣＳＫ９ＥＬＩＳＡＫｉｔ」）等で測定した結果、試料摂取後の血中ＰＣＳＫ９濃度が、試料摂取前の血中ＰＣＳＫ９濃度と比較して、上昇しないことをいう。

本発明におけるＤ－プシコースは、もっとも簡便には、Ｄ－フラクトースを原料に酵素（エピメラーゼ）によって生産されるが、酵素的に生産されたものに限らず、化学的に生産されたものでもよい。

本発明の有効成分であるＤ－プシコースの摂取量は、少なくとも一日当たり０．０５ｇ／ｋｇ体重が必要であり、好ましくは０．１ｇ～０．５ｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．２～０．５ｇ/ｋｇ体重、さらに好ましくは０．２～０．４ｇ/ｋｇ体重である。本発明の組成物又は剤は、当該用量を摂取できるよう設計されるのが好ましい。

本発明における血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物の摂取期間は、少なくとも１４日であり、好ましくは２８日であり、より好ましくは５６日である。

本発明における血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物又は剤の摂取方法は、特に限定されないが、例えば、水溶液、錠剤、顆粒等の形状により経口摂取することが可能であり、また、水溶液であれば、皮下注射による投与も可能である。また、摂取タイミングは、食事前、食事中、食事後のいずれでも構わないが、食事前又は食事中が好ましく、食事前であることがより好ましい。

本発明における血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物又は剤は、飲食品に配合することもできる。例えば、ベーカリー食品、麺類、お好み焼き、たこ焼き、ホットケーキ等のスナック食品、和菓子、練り物、揚げ物のバッター、フリッター、ヨーグルト、プリン、ゼリー、マヨネーズやソース等を含めたドレッシング類、あんかけ類、アイスクリーム等の氷菓、畜肉製品、米飯類、粉末飲料、清涼飲料、炭酸飲料、ゼリーなどの各種ドリンク等への配合が例示されるが、これらに特に限定されるものではない。

以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、これらによって本発明が限定されるものではない。

＜ハムスターにおけるＤ－プシコース継続摂取試験＞
Ｄ－プシコース摂取によるハムスターの血中のＰＣＳＫ９濃度に対する影響を確認した。実験動物は５週齢の雄のＧｏｌｄｅｎＳｙｒｉａｎｈａｍｓｔｅｒ（以下、ハムスターという。）１６匹及び４週齢のハムスター１６匹とした。まず、５週齢のハムスター１６匹を１週間予備飼育した後、コントロール摂取群及び３％Ｄ－プシコース摂取群の２群（１群あたり８匹）に分け、表１の組成に従った通常の実験飼料（以下、通常食という。）と水を自由摂取として８週間飼育した。その後、各ハムスターから採血を行った。次に４週齢のハムスター１６匹を１週間予備飼育した後、表１の組成に従った高脂肪の実験飼料（以下、高脂肪食という。）と水を４週間自由摂食させ、肥満を誘導した。

肥満誘導後、コントロール摂取群及び３％Ｄ－プシコース摂取群の２群（１群あたり８匹）に分け、高脂肪食と水を自由摂取として４週間飼育した。その後、各ハムスターから採血を行った。

＜ハムスターの血中ＰＣＳＫ９濃度の測定及び結果＞
上述のハムスター（３２匹）の血中のＰＣＳＫ９濃度を、市販キット（サイクレックス社製「ＣｉｒｃｕＬｅｘＭｏｕｓｅ／ＲａｔＰＣＳＫ９ＥＬＩＳＡＫｉｔ」）を用いて測定した。各個体の血中ＰＣＳＫ９濃度を群ごとに平均した値を表２に示す。

その結果、通常食における３％Ｄ－プシコース摂取群は、コントロール摂取群と比較し、血中のＰＣＳＫ９濃度が有意に減少していた（実施例１）。また高脂肪食における３％Ｄ－プシコース摂取群も、コントロール摂取群と比較し、血中のＰＣＳＫ９濃度が有意に減少していた（実施例２）。

なお、飼育したハムスターは、一日当たり平均２０５ｋｃａｌ／ｋｇ体重の餌を摂取しており、その一日当たりの摂取エネルギーは、ヒト（体重６０ｋｇ）の約６．１倍と算出された。飼育したハムスターは、一日当たり平均１．５ｇ／ｋｇ体重のＤ－プシコースを摂取しており、これは、ヒト（体重６０ｋｇ）がＤ－プシコースを１５ｇ／日摂取した場合の摂取量（０．２５ｇ／ｋｇ体重）の６倍である。よって、飼育したハムスターのＤ－プシコース摂取量は、ヒト（体重６０ｋｇ）が一日にＤ－プシコースを１５ｇ摂取する場合と同等である。

＜ヒトにおけるＤ－プシコース継続摂取試験＞
次に、Ｄ－プシコース継続摂取によるヒトの血中のＰＣＳＫ９濃度に対する影響を確認した。被験者は２０歳以上７０歳未満の男性であり、高コレステロール血症の未治療者（１２０ｍｇ／ｄｌ≦空腹時ＬＤＬ－Ｃ＜１６０ｍｇ／ｄｌ：７名）及びＬＤＬコレステロール値の上昇が予想される糖尿病境界型の未治療者（１１０ｍｇ／ｄｌ≦空腹時血糖値＜１２６ｍｇ／ｄｌ、又は６．２＜ＨｂＡ１ｃ（ＮＧＳＰ）＜６．５：７名）とした。

全摂取期間は５６日間とし、摂取初日及び最終日を除いた５４日間の摂取方法については、１日１回いずれかの食事前１時間以内に、試料であるＤ－プシコース１５ｇを水などと共に摂取した。

Ｄ－プシコース１５ｇの摂取初日及び最終日の２日間については、試験実施機関にて以下の試験を実施した（図１）。被験者は、試験開始１時間前に実施機関で医師の診察を受けた後、Ｄ－プシコース１５ｇを摂取し（摂取開始時点を試験開始時とする。）、試験開始直前～１０時間後までの２時間ごとに各被験者の血液を採取した。なお、Ｄ－プシコース１５ｇ摂取直後には、指定の朝食を水１５０ｍｌと共に１５分間かけて摂取し、試験開始時から４時間後には指定の昼食を、８時間後には指定の夕食を、それぞれ水１５０ｍｌと共に１５分間かけて摂取した。また、試験開始時から６時間後には、水１５０ｍｌを摂取した。採血した各被験者の血液は、ＰＣＳＫ９の測定に用いた。

＜ヒトの血中ＰＣＳＫ９濃度の測定及び結果＞
上述の全被験者（１４名）の血中ＰＣＳＫ９濃度を市販キット（サイクレックス社製「ＣｉｒｃｕＬｅｘＨｕｍａｎＰＣＳＫ９ＥＬＩＳＡＫｉｔ」）を用いて測定した。各個体の血中ＰＣＳＫ９濃度の全被験者の平均値及び標準偏差を表３及び図２に示す。

その結果、最終日の試験開始直前に採血した血中のＰＣＳＫ９濃度は、初日の同時間帯と比較して、減少していた（図２：０ｈｒ）。また、最終日の試験開始時から２時間及び４時間後の血中のＰＣＳＫ９濃度は、初日の同時間帯と比較して有意に減少していた（図２：２～４ｈｒ）。さらに、最終日における試験開始時から６～１０時間後の血中のＰＣＳＫ９濃度は、初日の同時間帯と比較してさらに有意に減少した（図２：６～１０ｈｒ）。

以上より、Ｄ－プシコースを摂取することにより血中ＰＣＳＫ９濃度の上昇は抑制されるので、Ｄ－プシコースを有効成分とする血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物等を提供することができ、その組成物等を摂取すれば、血中のＬＤＬコレステロールが低減することが期待される。

Claims

Ｄ－プシコースを有効成分とする血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制用組成物。
１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを摂取させるための請求項１記載の組成物。
１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを少なくとも２８日継続して摂取させるための請求項１記載の組成物。
Ｄ－プシコースを有効成分とする血中ＰＣＳＫ９濃度上昇抑制剤。
１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを摂取させるための請求項４記載の剤。
１日に体重１ｋｇ当たり０．１ｇ～０．５ｇのＤ－プシコースを少なくとも２８日継続して摂取させるための請求項４記載の剤。