JP7629200B2 - 神経変性、筋変性及びリソソーム蓄積障害を治療するための組成物及び方法 - Google Patents

Description

本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、２０１８年１１月２０日に出願された米国仮出願第６２／７６９，７９１号に対する優先権を主張する。

神経変性疾患には、進行性神経系機能不全に関連する遺伝性障害及び散発性障害が挙げられる。これらの疾患は、神経細胞または神経細胞機能の進行的な悪化を特徴とする。４人のアメリカ人のうちの１人が生涯で神経変性状態を発症すると推定されている。しかし、一般に、状態を引き起こす潜在的なメカニズムは十分に理解されておらず、神経変性疾患を予防または治療するために利用可能な効果的な治療オプションはほとんどない。

リソソーム蓄積障害は、遺伝的疾患の中で最も破壊的な疾患のいくつかを表し、これらの障害の治療法を開発する必要性は、ほとんど満たされていないままである。これらの疾患の多くは、中枢神経系（ＣＮＳ）に損傷を引き起こすが、そのような損傷の潜在的なメカニズムはほとんど知られていない。リソソーム蓄積障害の発生は稀であるが（約１：１００，０００未満の個体が影響を受ける）、リソソーム蓄積障害は、多くの場合、生後数ヶ月または数年以内に若い年齢でしばしば死亡する子供に対して主として影響を及ぼす。他の多くの子供は、特定のリソソーム蓄積障害の様々な症状に長年苦しんで死亡する。

対象における神経変性疾患、筋変性疾患、プリオン病、またはリソソーム蓄積疾患を治療または予防するための組成物及び方法が本明細書に提供される。本明細書では、式Ｉを有する化合物であって、

式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、もしくはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
及び
ｎは０～３から選択される整数である、化合物、
またはその異性体もしくは薬学的に許容される塩が提供される。

神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を有する対象に、または神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を発症するリスクがある対象に、有効量の式Ｉを有する化合物であって、

式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、もしくはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
及び
ｎは０～３から選択される整数である、化合物、
またはその異性体、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、対象において神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を治療または予防する方法も提供される。

ニューロン中の毒性タンパク質凝集を阻害または予防する方法もまた提供される。これらの方法は、有効量の式Ｉを有する化合物であって、

式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、もしくはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
及び
ｎは０～３から選択される整数である、化合物、
またはその異性体、またはその薬学的に許容される塩と、ニューロンを接触させることを含む。

対象においてリソソーム蓄積障害（ＬＳＤ）を治療または予防する方法も提供される。これらの方法は、ＬＳＤを有する対象に、またはＬＳＤを発症するリスクがある対象に、有効量の式Ｉを有する化合物であって、

式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、もしくはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
及び
ｎは０～３から選択される整数である、化合物、
またはその異性体、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
本出願は、以下の図面を含む。これらの図面は、組成物及び方法の特定の実施形態及び／または特徴を例示し、組成物及び方法の任意の記載（複数可）を補完することを意図する。図面は、そのようなものであることを明示的に記載されていない限り、組成物及び方法の範囲を限定しない。

（左パネル及び中央パネル）は、対照と比較して、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の減少及び（３－［４，５－ジメチルチアゾール－２－イル］－２，５－ジフェニル－テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）の増加によってそれぞれ証明されるように、１μＭのＢＫ４１０４３で処理したＢ３５細胞において、１６時間の処理後に神経保護効果が観察されたことを示す。図１（右パネル）は、５時間の処理後、ＢＫ４０１４３の濃度の減少を伴うＬＤＨの減少を介して細胞生存率が段階的に増加したことを示す。 ｐＴａｕ（左パネル）またはα－シヌクレイン（右パネル）での２４時間トランスフェクト及びＢＫ４１０４３での５時間の処理後のＢ３５細胞の細胞生存率を示す。細胞死を反映する培地中で測定したデヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）は、ＢＫ４０１４３の有無にかかわらず、対照とタウまたはａ－シヌクレインを発現する細胞との間で違いがなく、この化合物が毒性または細胞死をもたらさないことを示す。 ２４時間トランスフェクション後のｐＴａｕ（１８１）のレベル（左パネル、スチューデントｔ検定：対応のない、両側、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１）、及びＢＫ４１０４３が、ｐＴａｕトランスフェクトしたＢ３５細胞（右パネル、ｎ＝６、ＡＮＯＶＡ：通常の、一方向の、ダネットの多重比較検定、ｐ＜０．０５、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１）におけるｐＴａｕ（１８１）レベルを低下させることを示す。 ２４時間トランスフェクション後のα－シヌクレインのレベル（左パネル）、及びＢＫ４１０４３がα－シヌクレイントランスフェクションＢ３５細胞におけるα－シヌクレインを低下させることを示す（右パネル）。スチューデントｔ－検定：対応なし、両側、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０、ｎ＝６）。１０ｕＭ－１ｍＭの範囲のＢＫ４０１４３の用量は、この細胞培養モデルにおけるαシヌクレインのレベルを低下させるように見える。 ＢＫ４０１９７による５時間の処理後のＢ３５細胞の細胞生存率を示す。 ＢＫ４０１４３が、７日間の処置後に、トランスジェニックマウスを発現するＴａｕにおけるｐＴａｕ（１８１）を低下させることを示す。ＰＴａｕ（１８１）のレベルはＥＬＩＳＡを介して測定した。スチューデントｔ－検定：対応なし、両側、ウェルチ補正、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１ ウェスタンブロット分析を使用した、ＢＫ－４０１４３（１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５．０ｍｇ／ｋｇ）による処置がｒＴＧ４５１０トランスジェニックマウス（ｎ＝４）におけるｐＴａｕ（２３１）（ＡＴ１８０）のレベルに影響しなかったことを示す。 ＢＫ－４１０４３による７日間の処置後、１．２５ｍｇ／ｋｇ及び２．５ｍｇ／ｋｇで、Ｔａｕ（ＨＴ７）がＴａｕトランスジェニックマウスにおいて有意に減少したことを示す。スチューデントｔ－検定：対応なし、両側、ウェルチ補正、＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１、ｎ＝４ ＢＫ－４０１４３（１．２５ｍｇ／ｋｇまたは２．５ｍｇ／ｋｇ）での処置が、リン酸化（活性）ＤＤＲ１（ｐＭＣＫ１０）の検出によって測定した場合、ＤＤＲ１のインビボ阻害をもたらすことを示す。このデータは、ＢＫ４０１４３がインビボでＤＤＲを強力に阻害することを示す。 ２．５ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのＢＫ－４０１４３で処理した後、ｐＴａｕ（１９１）がＣａｍＰ３０１Ｌマウスにおいて低下したことを示す。スチューデントｔ検定：対応なし、ウェルチ補正、片側、＊ｐ＞０．０５．ｐ＝０．０２、ｎ＝４。 Ａは、１ｍＭ及び１００ｕＭのＢＫ４０１９６が、トランスフェクトしたＢ３５細胞におけるα－シヌクレインのレベルを有意に低下させたことを示す。Ｂは、ＢＫ４０１９７が、トランスフェクトされたＢ３５細胞におけるα－シヌクレインレベルを有意に低下させないことを示す。 ＢＫ４０１４３がＡ５３Ｔマウスにおけるα－シヌクレインを有意に低下させることを示す。雄及び雌の１２ヶ月齢のＡ５３Ｔマウスを、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３で２１日間連続して腹腔内で処置した。図１２Ａは、ＤＭＳＯ処理対照Ａ５３Ｔマウスと比較して、ＢＫ４０１４３処理動物におけるα－シヌクレインのレベルの有意な３９％の低下を示すヒトα－シヌクレインのＥＬＩＳＡである。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを対照として使用し、検出可能な（Ｎ．Ｄ．）ヒトα－シヌクレインを示さなかった。 ＢＫ４０１４３がＡ５３Ｔマウスにおけるα－シヌクレインを有意に低下させることを示す。雄及び雌の１２ヶ月齢のＡ５３Ｔマウスを、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３で２１日間連続して腹腔内で処置した。図１２Ｂは、ＢＫ４０１４３がドーパミンの全体的なレベル（３０％）を増加させることを示す。ＢＫ４０１４３は、Ａ５３Ｔマウスにおけるドーパミン代謝産物であるホモバニリン酸（ＨＶＡ）のレベルを増加させ、より多くのドーパミン回転を示し、これにより、より良いドーパミン神経伝達がもたらされ得る。 ＢＫ４０１４３がＡ５３Ｔマウスにおけるα－シヌクレインを有意に低下させることを示す。雄及び雌の１２ヶ月齢のＡ５３Ｔマウスを、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３で２１日間連続して腹腔内で処置した。図１２Ｃは、ＥＬＩＳＡに見られるα－シヌクレインの４０％の低下を反映したα－シヌクレインイムノブロットである。 ＢＫ４０１４３がＡ５３Ｔマウスにおけるα－シヌクレインを有意に低下させることを示す。雄及び雌の１２ヶ月齢のＡ５３Ｔマウスを、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３で２１日間連続して腹腔内で処置した。図１２Ｄは、ＥＬＩＳＡに見られるα－シヌクレインの４０％の低下を反映したα－シヌクレインイムノブロットである。 ＢＫ４０１４３が、Ａ５３Ｔマウスにおける運動速度を改善することを示す。Ａ５３Ｔマウスを、６０分間の試験にわたって全体的な運動能についてオープンフィールド試験で試験した。マウスは、移動した合計距離または移動に費やした合計時間に差を示さなかったが、ＢＫ４０１４３処理により、マウスの移動速度は有意に増加した。 ＢＫ４０１４３が選択的にＤＤＲ（約５０％）を非活性化するが、ＳｒｃまたはＡｂｌを非活性化せず、ｒＴＧ４５１０タウオパチーマウスモデル中のリン酸化ｔａｕを低下させることを示す。雄及び雌の３ヶ月齢のｒＴＧ４５３０マウスを、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで７日間連続して腹腔内処置した。図１４Ａ、活性化（リン酸化）ＤＤＲ１のイムノブロットプローブは、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇであるが、５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３脱活性化ＤＤＲ１ではないことを実証する。 ＢＫ４０１４３が選択的にＤＤＲ（約５０％）を非活性化するが、ＳｒｃまたはＡｂｌを非活性化せず、ｒＴＧ４５１０タウオパチーマウスモデル中のリン酸化ｔａｕを低下させることを示す。雄及び雌の３ヶ月齢のｒＴＧ４５３０マウスを、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで７日間連続して腹腔内処置した。活性化Ｓｒｃのイムノブロットプローブである図１４Ｂは、ＢＫ４０１４３がこのチロシンキナーゼに関与しなかったことを実証する。 ＢＫ４０１４３が選択的にＤＤＲ（約５０％）を非活性化するが、ＳｒｃまたはＡｂｌを非活性化せず、ｒＴＧ４５１０タウオパチーマウスモデル中のリン酸化ｔａｕを低下させることを示す。雄及び雌の３ヶ月齢のｒＴＧ４５３０マウスを、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで７日間連続して腹腔内処置した。活性化Ａｂｌのイムノブロットプローブである図１４Ｃは、ＢＫ４０１４３がこのチロシンキナーゼに関与しなかったことを実証する。 ＢＫ４０１４３が選択的にＤＤＲ（約５０％）を非活性化するが、ＳｒｃまたはＡｂｌを非活性化せず、ｒＴＧ４５１０タウオパチーマウスモデル中のリン酸化ｔａｕを低下させることを示す。雄及び雌の３ヶ月齢のｒＴＧ４５３０マウスを、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで７日間連続して腹腔内処置した。図１４Ｄ、リン酸化Ｔａｕ（ＡＴ８）のイムノブロットプローブは、ＢＫ４０１４３の３回用量全てが同じマウスにおいてリン酸化Ｔａｕのレベルを４１～４９％減少させたことを示し、ＤＤＲ阻害がｐＴａｕ減少と同時であることを示す。 ＢＫ４０１４３が選択的にＤＤＲ（約５０％）を非活性化するが、ＳｒｃまたはＡｂｌを非活性化せず、ｒＴＧ４５１０タウオパチーマウスモデル中のリン酸化ｔａｕを低下させることを示す。雄及び雌の３ヶ月齢のｒＴＧ４５３０マウスを、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで７日間連続して腹腔内処置した。図１４Ｅは、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３がリン酸化Ｔａｕを有意に低下させたことを示すリン酸化Ｔａｕ（ＡＴ１８１）のＥＬＩＳＡである。 ＢＫ４０１４３が、トランスジェニックＡＰＰマウスにおいて、アミロイド、リン酸化ｔａｕを有意に低下させ、ＤＤＲ１を非活性化することを示す。雄及び雌の７ヶ月齢のＡＰＰマウスを、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで２１日間連続して腹腔内で処置した。図１５Ａは、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３がアミロイド－ベータプラークを有意に減少させたことを実証する、細胞外アミロイド－ベータ（６Ｅ１０）を凝集するためのイムノブロットである。 ＢＫ４０１４３が、トランスジェニックＡＰＰマウスにおいて、アミロイド、リン酸化ｔａｕを有意に低下させ、ＤＤＲ１を非活性化することを示す。雄及び雌の７ヶ月齢のＡＰＰマウスを、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで２１日間連続して腹腔内で処置した。図１５Ｂは、１．２５ｍｇ／ｋｇ及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３がＤＤＲ１をそれぞれ４０％及び３１％非活性化したことを実証する、リン酸化ＤＤＲ１のイムノブロットプローブである。 ＢＫ４０１４３が、トランスジェニックＡＰＰマウスにおいて、アミロイド、リン酸化ｔａｕを有意に低下させ、ＤＤＲ１を非活性化することを示す。雄及び雌の７ヶ月齢のＡＰＰマウスを、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで２１日間連続して腹腔内で処置した。図１５Ｃは、活性化（リン酸化Ａｂｌ（２４５））のプローブは、ＢＫ４０１４３がＡｂｌに関与しなかったことを実証する。 ＢＫ４０１４３が、トランスジェニックＡＰＰマウスにおいて、アミロイド、リン酸化ｔａｕを有意に低下させ、ＤＤＲ１を非活性化することを示す。雄及び雌の７ヶ月齢のＡＰＰマウスを、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで２１日間連続して腹腔内で処置した。１．２５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３は、ＥＬＩＳＡを介して可溶性ヒトアミロイド－ベータを有意に低下させたが、不溶性アミロイド－ベータを有意に低下させなかった。 ＢＫ４０１４３が、トランスジェニックＡＰＰマウスにおいて、アミロイド、リン酸化ｔａｕを有意に低下させ、ＤＤＲ１を非活性化することを示す。雄及び雌の７ヶ月齢のＡＰＰマウスを、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで２１日間連続して腹腔内で処置した。２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３は、ＥＬＩＳＡを介して可溶性ヒトアミロイド－ベータを有意に低下させたが、不溶性アミロイド－ベータを有意に低下させなかった。 ＢＫ４０１４３が、トランスジェニックＡＰＰマウスにおいて、アミロイド、リン酸化ｔａｕを有意に低下させ、ＤＤＲ１を非活性化することを示す。雄及び雌の７ヶ月齢のＡＰＰマウスを、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで２１日間連続して腹腔内で処置した。図１５Ｆは、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３が、ヒトリン酸化ｔａｕ（Ｓｅｒ３９６）を８０％超低下させたことを示す。 ＢＫ４０１４３が、ＡＰＰマウスにおける認知のためのモリス水迷路試験の性能を改善することができたことを示した。測定値には、プラットフォームエントリの数（左パネル）、最初のエントリへの待ち時間（中央パネル）、及び最初のエントリ（右パネル）からプラットフォームへの移動距離が含まれる。群間で有意差はなかったが、１．２５ｍｇ／ｋｇのＢＫは、より多くのプラットフォームエントリ、及び第１のエントリまでのより低い待ち時間及び第１のエントリ前のより低い移動距離を伴う性能の増加の傾向を示した。 ＢＫ４０１４３がＡＰＰマウスの海馬において細胞死を引き起こさないことを示す。代表的な２０ｕｍ海馬切片を物質について染色した（左パネル）。ＤＭＳＯ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３についての４倍及び２０倍の画像を示す（左パネル）。平均染色強度は、全ての４倍画像におけるニッスル染色の総量としてｉｍａｇｅｊソフトウェアで定量化した（右パネル）。

対象における神経変性疾患、筋変性疾患、プリオン病、またはリソソーム蓄積疾患を治療または予防するための組成物及び方法が本明細書に提供される。

化合物
いくつかの例では、本明細書に記載の化合物のクラスは、式Ｉによって表される化合物、またはその異性体、またはその薬学的に許容される塩を含む。

式Ｉにおいて、ＸはＮまたはＣＨである。

また、式Ｉにおいて、Ｙは、非置換であるかもしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または
非置換であるかもしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルである。

また、式Ｉにおいて、Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、

さらに、式Ｉにおいて、Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、

Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、

また、式Ｉにおいて、Ｒ^３及びＲ^４は、独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルから選択され、ｎは、０～３から選択される整数である。

式Ｉのいくつかの実施例では、ＹはＲ^１で置換されたベンジルである。

式Ｉのいくつかの例では、Ｙは、メタ位置でＲ^１で置換されたベンジルである。

式Ｉのいくつかの例では、ＺはＮＲ^３Ｒ^４であり、Ｒ^３はベンジルまたはＨであり、Ｒ^４はベンジルまたはＨであり、ＹはＲ^１で置換されたベンジルである。

式Ｉのいくつかの例では、ＺはＮＲ^３Ｒ^４であり、Ｒ^３はベンジルまたはＨであり、Ｒ^４はベンジルまたはＨであり、Ｙは、メタ位置でＲ^１で置換されたベンジルである。

式Ｉのいくつかの例では、Ｚはモルホリニルであり、ＹはＲ^１で置換されたベンジルである。

式Ｉのいくつかの例では、Ｚはモルホリニルであり、Ｙは、メタ位置でＲ^１で置換されたベンジルである。

式Ｉの化合物は、化合物１（ＢＫ４０１９７）である。

式Ｉの別の化合物は、化合物２（ＢＫ４０１９３）である。

式Ｉのいくつかの例において、化合物は１つ以上のハロゲン原子を含まない。式Ｉのいくつかの実施例では、Ｙは２－ｍ－トルイルである。式Ｉのいくつかの実施例では、Ｚはヘテロシクリルである。式Ｉのいくつかの実施例では、Ｚはモルホリン－１－イルである。式Ｉのいくつかの例では、Ｒ^３はＨであり、Ｒ^４は非置換フェニルである。

本明細書で使用される場合、用語アルキル、アルケニル、及びアルキニルは、直鎖及び分枝鎖一価置換基を含む。例としては、メチル、エチル、イソブチル、３－ブチニル等が挙げられる。本明細書に記載の化合物及び方法に有用なこれらの基の範囲としては、Ｃ_１－Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２－Ｃ_２０アルケニル、及びＣ_２－Ｃ_２０アルキニルが挙げられる。本明細書に記載される化合物及び方法に有用なこれらの基のさらなる範囲としては、Ｃ_１－Ｃ_１２アルキル、Ｃ_２－Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_１２アルキニル、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１－Ｃ_４アルキル、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル、及びＣ_２－Ｃ_４アルキニルが挙げられる。

本明細書で使用されるアルコキシという用語は、単一末端エーテル結合を介して結合されるアルキル基である。本明細書で使用されるヒドロキシという用語は、式－ＯＨによって表される。

本明細書で使用されるアミンまたはアミノという用語は、式－ＮＲ^３Ｒ^４によって表され、式中、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ、本明細書に記載の置換基、例えば、上述の水素、アルキル、シクロアルキル、ハロゲン化アルキル、アルケニル、またはアルキニル基であり得る。

本明細書で使用されるアルコキシ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはカルボニル分子は、置換または非置換であり得る。本明細書で使用される場合、置換という用語は、アルコキシ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはカルボニル基の主鎖に結合した位置へのアルコキシ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはカルボニル基の付加、例えば、これらの分子のうちの１つによる水素の置き換えを含む。置換基の例としては、限定されないが、ヒドロキシ、ハロゲン（例えば、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、またはＩ）、及びカルボキシル基が挙げられる。逆に、本明細書で使用される場合、非置換という用語は、アルコキシ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、またはカルボニルが、置換、例えば直鎖デカン（－（ＣＨ_２）_９－ＣＨ_３）を有しない、すなわち、その飽和レベルに相応しい水素の完全な相補体を有することを示す。

ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、及びヘテロアルキニルは、アルキル、アルケニル、及びアルキニルと同様に定義されるが、骨格内にＯ、Ｓ、もしくはＮのヘテロ原子、またはこれらの組み合わせを含有することができる。本明細書に記載の化合物及び方法に有用なこれらの基の範囲としては、Ｃ_１－Ｃ_２０ヘテロアルキル、Ｃ_２－Ｃ_２０ヘテロアルケニル、及びＣ_２－Ｃ_２０ヘテロアルキニルが挙げられる。本明細書に記載される化合物及び方法に伴って有用なこれらの基のさらなる範囲としては、Ｃ_１－Ｃ_１２ヘテロアルキル、Ｃ_２－Ｃ_１２ヘテロアルケニル、Ｃ_２－Ｃ_１２ヘテロアルキニル、Ｃ_１－Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_２－Ｃ_６ヘテロアルケニル、Ｃ_２－Ｃ_６ヘテロアルキニル、Ｃ_１－Ｃ_４ヘテロアルキル、Ｃ_２－Ｃ_４ヘテロアルケニル、及びＣ_２－Ｃ_４ヘテロアルキニルが挙げられる。

シクロアルキル、シクロアルケニル、及びシクロアルキニルという用語は、単一の環式環または複数の縮合環を有する環状アルキル基を含む。例としては、シクロヘキシル、シクロペンチルエチル、及びアダマンタニルが挙げられる。本明細書に記載される化合物及び方法に伴って有用なこれらの基の範囲としては、Ｃ_３－Ｃ_２０シクロアルキル、Ｃ_３－Ｃ_２０シクロアルケニル、及びＣ_３－Ｃ_２０シクロアルキニルが挙げられる。本明細書に記載される化合物及び方法に伴って有用なこれらの基のさらなる範囲としては、Ｃ_５－Ｃ_１２シクロアルキル、Ｃ_５－Ｃ_１２シクロアルケニル、Ｃ_５－Ｃ_１２シクロアルキニル、Ｃ_５－Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_５－Ｃ_６シクロアルケニル、及びＣ_５－Ｃ_６シクロアルキニルが挙げられる。

ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、及びヘテロシクロアルキニルという用語は、シクロアルキル、シクロアルケニル、及びシクロアルキニルと同様に定義されるが、環状骨格内にＯ、Ｓ、もしくはＮ個のヘテロ原子、またはこれらの組み合わせを含有することができる。本明細書に記載される化合物及び方法に伴って有用なこれらの基の範囲としては、Ｃ_３－Ｃ_２０ヘテロシクロアルキル、Ｃ_３－Ｃ_２０ヘテロシクロアルケニル、及びＣ_３－Ｃ_２０ヘテロシクロアルキニルが挙げられる。本明細書に記載される化合物及び方法に伴って有用なこれらの基の追加の範囲としては、Ｃ_５－Ｃ_１２ヘテロシクロアルキル、Ｃ_５－Ｃ_１２ヘテロシクロアルケニル、Ｃ_５－Ｃ_１２ヘテロシクロアルキニル、Ｃ_５－Ｃ_６ヘテロシクロアルキル、Ｃ_５－Ｃ_６ヘテロシクロアルケニル、及びＣ_５－Ｃ_６ヘテロシクロアルキニルが挙げられる。

アリール分子としては、例えば、１つ以上の平面的なセットの、典型的には、それらが交互に単一及び二重共有結合からなるかのように番号付けされた非局在化電子によって連結される６つの炭素原子を組み込む環状炭化水素が挙げられる。アリール分子の例は、ベンゼンである。ヘテロアリール分子は、Ｏ、Ｎ、またはＳ等の原子の主環状鎖に沿った置換を含む。ヘテロ原子が導入されると、５つの原子、例えば、４つの炭素及びヘテロ原子のセットは、芳香族系を作製することができる。ヘテロアリール分子の例としては、フラン、ピロール、チオフェン、イマダゾール、オキサゾール、ピリジン、及びピラジンが挙げられる。アリール及びヘテロアリール分子はまた、追加の縮合環、例えば、ベンゾフラン、インドール、ベンゾチオフェン、ナフタレン、アントラセン、及びキノリンを含むことができる。別段の記載がない限り、アリール分子及びヘテロアリール分子は、環上の任意の位置に結合することができる。

任意選択で、式Ｉを有する化合物は、Ａｂｌ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ｃＫＩＴ、アルギナーゼＩＩ、Ｓｒｃ、Ｆｙｎ、ＶＥＧＦＲ、及びＺａｃからなる群から選択される１つ以上の受容体チロシンキナーゼを阻害するチロシンキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施例において、式Ｉを有する化合物は、Ａｂｌ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ｃＫＩＴ、アルギナーゼＩＩ、Ｓｒｃ、ＦｙｎまたはＶＥＧＲまたはＺａｃを選択的に阻害する。いくつかの例では、式Ｉを有する化合物は、ＤＤＲ１及び／またはＤＤＲ２を阻害する。

本明細書で使用される場合、薬学的に許容される塩という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応等がなく、ヒト及び低い動物の組織と接触して使用するのに好適であり、合理的な利益／リスク比に相応しい塩を指す。薬学的に許容される塩は、当該技術分野で周知である。本明細書に提供される化合物の薬学的に許容される塩、例えば、ニロチニブ、ボスチニブ、パゾパニブ、及び式Ｉの化合物の薬学的に許容される塩には、好適な無機及び有機酸ならびに塩基に由来するものが含まれる。薬学的に許容される無毒酸付加塩の例は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸及び過塩素酸、または有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸によって、またはイオン交換等の当技術分野で使用される他の方法を使用して形成されたアミノ基の塩である。他の薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミスルホン酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシ－エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリル酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、パモン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ウンデカン、吉草酸塩等が挙げられる。

本明細書に記載される化合物は、様々な方法で調製することができる。化合物は、実施例に提供されるものを含む様々な合成方法を使用して合成することができる。これらの方法の少なくともいくつかは、合成有機化学の技術分野で公知である。本明細書に記載の化合物は、容易に入手可能な出発物質から調製することができる。最適な反応条件は、使用される特定の反応物または溶媒によって異なり得るが、そのような条件は、日常的な最適化手順によって当業者によって決定することができる。

式Ｉのバリエーションには、各化合物について記載されるような様々な成分の追加、差し引き、または移動が含まれる。同様に、１つ以上のキラル中心が分子中に存在する場合、全ての可能なキラル変異形が含まれる。加えて、化合物合成は、様々な化学基の保護及び脱保護を伴い得る。保護及び脱保護の使用、ならびに適切な保護基の選択は、当業者によって決定され得る。保護基の化学は、例えば、Ｗｕｔｓ，Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，５ｔｈ．Ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，２０１４に見出すことができ、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本明細書に記載の化合物を生成するための反応は、有機合成の当業者によって選択され得る溶媒中で実行され得る。溶媒は、反応が行われる条件下、すなわち、温度及び圧力下で、出発物質（反応物）、中間体、または生成物と実質的に非反応性であり得る。反応を、１つの溶媒または１つより多くの溶媒の混合物中で実行することができる。生成物または中間体形成は、当該技術分野で知られる任意の好適な方法によってモニターされ得る。例えば、生成物形成は、核磁気共鳴分光法（例えば、^１Ｈまたは^１３Ｃ）赤外線分光法、分光光度法（例えば、ＵＶ－可視光）もしくは質量分光法などの分光学的手段によって、または高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）もしくは薄層クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーによってモニターすることができる。

本明細書に記載される化合物のいずれかは、血液脳関門透過性を増強するように修飾され得る。任意選択的に、本明細書に記載の化合物のうちの１つ以上は、化合物（複数可）の血液脳関門透過性を増強する薬剤と共に投与され得る。

神経変性疾患、筋変性疾患またはプリオン病の治療または予防方法
神経変性疾患、筋変性疾患、またはプリオン病を治療または予防する方法が本明細書に提供される。神経変性疾患または障害は、中枢神経系の神経変性疾患であり得る。これらには、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、前頭側頭型認知症、ＴＤＰ－４３を伴う前頭側頭型認知症を含むＴＤＰ－４３病理、染色体１７に関連する前頭側頭型認知症、アミロイドーシス、ピック病、ハンチントン病、軽度認知障害、α－シヌクレイノパチー（例えば、パーキンソン病、レヴィー小体疾患）、多発性硬化症、多系統萎縮症、慢性外傷性脳症、タウオパチー、進行性核上性麻痺、及び大脳皮質基底核変性症を含むグリア細胞質内封入体が含まれるが、これらに限定されない。神経変性疾患はまた、外傷性脳損傷、脳卒中、または感染、例えば、細菌またはウイルス感染（例えば、ＨＩＶ、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ））によって誘発される二次神経変性疾患であり得る。

筋変性疾患または障害としては、筋ジストロフィー（例えば、筋ジストロフィー）、筋障害（例えば、ネマリンミオパシー、マルチ／ミニコアミオパシー、中心核ミオパシー、ミトコンドリアミオパシー、代謝ミオパシーなど）または筋ミオトニー（例えば、先天性ミオトニー、先天性筋緊張性けいれんまたは筋強直性ジストロフィー）が挙げられるが、これらに限定されない。

プリオン病または障害には、いくつか例を挙げると、クロイツフェルト・ヤコブ病、変異型クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・シュトラウスラー・シャインカー症候群、致死性家族性不眠症、クールー病、牛海綿状脳症、慢性消耗病、スクレイピーなどが挙げられるがこれらに限定されない。

本発明の方法は、神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を有する対象に、または神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を発症するリスクがある対象に、有効量の式Ｉを有する化合物、またはその異性体、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含み、

式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、もしくはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
及び
ｎは０～３から選択される整数である。

いくつかの方法において、式Ｉを有する化合物は、１つ以上のハロゲン原子を含まない。いくつかの方法において、Ｙは、式Ｉを有する化合物中の２－ｍ－トルイルである。いくつかの方法において、Ｚは、式Ｉを有する化合物中のヘテロシクリルである。いくつかの方法において、Ｚは、式Ｉを有する化合物中のモルホリン－１－イルである。いくつかの方法において、Ｒ^３は、Ｈであり、Ｒ^４は、式Ｉを有する化合物中の非置換フェニルである。

いくつかの方法において、ＹはＲ^１で置換されたベンジルである式Ｉを有する化合物は、対象に投与される。

いくつかの方法において、Ｙは、メタ位置においてＲ^１で置換されたベンジルである式Ｉを有する化合物は、対象に投与される。

いくつかの方法では、ＺはＮＲ^３Ｒ^４であり、Ｒ^３はベンジルまたはＨであり、Ｒ^４はベンジルまたはＨであり、ＹはＲ^１で置換されたベンジルである、式Ｉを有する化合物が、対象に投与される。

いくつかの方法において、ＺはＮＲ^３Ｒ^４であり、Ｒ^３はベンジルまたはＨであり、Ｒ^４はベンジルまたはＨであり、Ｙはメタ位置でＲ^１で置換されたベンジルである、式Ｉの化合物が、対象に投与される。

いくつかの方法において、本明細書において、Ｚはモルホリニルであり、ＹはＲ^１で置換されたベンジルである、式Ｉの化合物が、対象に投与される。

いくつかの方法において、Ｚはモルホリニルであり、Ｙはメタ位にてＲ^１で置換されたベンジルである、式Ｉの化合物が、対象に投与される。

本明細書に記載される方法のいずれかで使用され得る式Ｉの例としては、以下の化合物が挙げられる：

本明細書に提供する方法は、任意選択で、神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を有するか、または神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を発症するリスクのある対象を選択することを含む。当業者は、神経変性疾患、筋変性疾患、もしくはプリオン病を有するか、または発症するリスクがある対象を診断する方法を知っている。例えば、以下の試験、遺伝子検査（例えば、ＴＤＰ－４３遺伝子における突然変異の同定）または家族分析（例えば、家族歴）、中枢神経系イメージング（例えば、磁気共鳴イメージング及び陽電子放射断層撮影）、脳波検査、臨床もしくは行動検査（例えば、筋力低下、震え、歩行、または記憶の評価）、または実験室試験のうちの１つ以上を使用することができる。

本方法は、任意選択で、第２の治療剤を対象に投与することをさらに含む。第２の治療剤は、レボドパ、ドーパミンアゴニスト、抗コリン剤、コリン剤（例えば、５－ヒドロキシトリプタミン（５－ＨＴ）阻害剤）、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、ＣＯＭＴ阻害剤、ドネペジル、メマンチン、リスペリドン、アマンタジン、リバスチグミン、ＮＭＤＡアンタゴニスト、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、コリンエステラーゼ阻害剤、リルゾール、抗精神病剤、抗うつ剤、グルココルチコイド（例えば、プレドニゾン）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ニロチニブ、ボスチニブ、イマチニブ、パゾパニブ等）、及びテトラベナジンからなる群から選択される。第２の治療剤または療法は、式Ｉを有する化合物の投与前、投与と同時に、または投与後に対象に投与することができる。

チロシンキナーゼ阻害剤が第２の治療剤として投与される方法において、チロシンキナーゼ阻害剤は、式Ｉの化合物によって阻害されるチロシンキナーゼ受容体を阻害しないか、または式Ｉの化合物と比較して、チロシンキナーゼ受容体に対する選択性が減少しているチロシンキナーゼ阻害剤であり得る。

ニューロン中の毒性タンパク質凝集を阻害または予防する方法、及び／またはニューロンを変性から救出する方法も本明細書に提供される。本明細書で使用される場合、阻害、減少または低下に関する言及は、対照レベルと比較して、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上の変化を含む。

これらの方法は、有効量の式Ｉの化合物とニューロンを接触させることを含む。任意選択で、式Ｉを有する化合物は、化合物１または化合物２である。毒性タンパク質凝集体は、任意選択で、アミロイド生成タンパク質、α－シヌクレイン、タウ、またはＴＤＰ－４３のうちの１つ以上を含む。アミロイド生成タンパク質は、凝集能力を有するペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質を意味する。アミロイド生成タンパク質の例は、β－アミロイドである。接触は、インビボまたはインビトロで行われる。インビボ方法は、毒性タンパク質凝集体を有する対象または毒性タンパク質凝集体を発症するリスクのある対象を治療する際に有用であり、以下に記載されるように、式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。インビトロ方法は、例えば、移植前に神経細胞を治療する際に有用である。このような場合、一般に式Ｉの化合物を培養培地に添加する。任意選択的に、標的ニューロンを上記のような第２の治療剤と接触させる。

リソソーム蓄積障害を治療または予防する方法
対象においてＬＳＤを治療または予防するための方法も提供される。これらの方法は、有効量の式Ｉを有する化合物であって、

式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
及び
ｎは０～３から選択される整数である、化合物、
またはその異性体、またはその薬学的に許容される塩を、ＬＳＤを有する対象に、またはＬＳＤを発症する危険性がある対象に投与することを含む。

いくつかの方法において、式Ｉを有する化合物は、１つ以上のハロゲン原子を含まない。いくつかの方法において、Ｙは、式Ｉを有する化合物中の２－ｍ－トルイルである。いくつかの方法において、Ｚは、式Ｉを有する化合物中のヘテロシクリルである。いくつかの方法において、Ｚは、式Ｉを有する化合物中のモルホリン－１－イルである。いくつかの方法において、Ｒ^３は、Ｈであり、Ｒ^４は、式Ｉを有する化合物中の非置換フェニルである。

いくつかの方法において、ＹがＲ^１で置換されたベンジルである式Ｉを有する化合物は、対象に投与される。

いくつかの方法において、Ｙが、メタ位においてＲ^１で置換された式Ｉを有するベンジルである化合物は、対象に投与される。

いくつかの方法では、ＺがＮＲ^３Ｒ^４であり、Ｒ^３がベンジルまたはＨであり、Ｒ^４がベンジルまたはＨであり、ＹがＲ^１で置換されたベンジルである、式Ｉを有する化合物が、対象に投与される。

いくつかの方法において、ＺがＮＲ^３Ｒ^４であり、Ｒ^３がベンジルまたはＨであり、Ｒ^４がベンジルまたはＨであり、Ｙがメタ位置でＲ^１で置換されたベンジルである、式Ｉを有する化合物が、対象に投与される。

いくつかの方法において、Ｚはモルホリニルであり、ＹはＲ^１で置換されたベンジルである、式Ｉの化合物が、対象に投与される：

いくつかの方法において、Ｚはモルホリニルであり、Ｙはメタ位にてＲ^１で置換されたベンジルである式Ｉの化合物が、対象に投与される。

ＬＳＤを治療または予防するために使用することができる式Ｉの例としては、以下の化合物が挙げられる。

任意選択で、式Ｉの化合物は、Ａｂｌ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ｃＫＩＴ、アルギナーゼＩＩ、Ｓｒｃ、Ｆｙｎ、ＶＥＧＦＲ、及びＺａｃからなる群から選択される１つ以上の受容体チロシンキナーゼを阻害する。いくつかの実施例では、式Ｉの化合物は、Ａｂｌ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ｃＫＩＴ、アルギナーゼＩＩ、Ｓｒｃ、ＦｙｎまたはＶＥＧＲまたはＺａｃを選択的に阻害する。いくつかの例では、式Ｉを有する化合物は、ＤＤＲ１及び／またはＤＤＲ２を阻害する。例えば、限定するものではないが、化合物１または化合物２を使用して、ＤＤＲ１及び／またはＤＤＲ２を阻害することができる。別の例では、式Ｉを有する化合物、例えば、化合物１または化合物２は、ＤＤＲ１またはＤＤＲ２を選択的に阻害する。

ＬＳＤは、リソソーム機能の欠陥から生じる遺伝性代謝障害である。ほとんどの場合、ＬＳＤは、リソソーム中に存在する脂質及び糖タンパク質の分解を担う特異的酵素の欠乏によって引き起こされる。ある場合には、欠損した非酵素リソソームタンパク質またはリソソーム生物発生に関与する非リソソームタンパク質は、ＬＳＤを引き起こす。未分解代謝産物の進行性リソソーム蓄積は、広汎性細胞及び組織機能障害、したがって、多全身病理をもたらす。本明細書に提供される方法を使用して治療または予防することができるＬＳＤとしては、Ｉ型ムコ多糖症（例えば、ハーラー症候群、ハーラー－シャイエ症候群及びシャイエ症候群）、Ｉ型ムコ多糖症（例えば、ハンター症候群）、ＩＩＩ型ムコ多糖症（例えば、サンフィリポ症候群Ａ、サンフィリポ症候群Ｂ、サンフィリポ症候群Ｃ、及びサンフィリポ症候群Ｄ）、ＩＶ型ムコ多糖症（例えば、モルキオ症候群Ａ及びモルキオ症候群Ｂ）、ＶＩ型ムコ多糖症（例えば、マロトー・ラミー症候群）、ＶＩＩ型ムコ多糖症（例えば、スライ症候群）、ＩＸ型ムコ多糖症（例えば、ナトビッツ症候群）、偽ハーラー多発性ジストロフィー、テイ－サックス、ゴーシェ病、ニーマン－ピック病、フコシドーシス、ガラクトシアリドーシス、球様細胞白質ジストロフィー、Ｇ_Ｍ１ガングリオシドーシス、Ｇ_Ｍ２ガングリオシドーシス、α－マンノシドーシス、異染性白質ジストロフィー症、及びポンペ病が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で提供するＬＳＤは、リソソームクリアランスの減少に関連する疾患または障害の例である。

対象の１つ以上の細胞におけるリソソームクリアランスを促進する方法であって、リソソームクリアランスの減少に関連する障害を有する対象に有効量の式Ｉを有する化合物を投与することを含む方法も提供される。任意選択で、式Ｉを有する化合物は、化合物１または化合物２である。全体を通して使用されるように、リソソームクリアランスは、対象の１つ以上の細胞のリソソーム内で蓄積している脂質、タンパク質、糖タンパク質、またはそれらの組み合わせが代謝または分解されるプロセスである。リソソームクリアランスの減少は、対照と比較して、例えば、健康な対象の１つ以上の細胞におけるリソソームクリアランスと比較して、対象の１つ以上の細胞における脂質、タンパク質、及び／または糖タンパク質の分解の減少を意味する。リソソームクリアランスの低下に関連する任意の障害は、本明細書で提供される方法を使用して治療することができ、これには全体を通して記載されるＬＳＤのいずれかが含まれるが、これらに限定されない。本明細書で使用する場合、促進または増加への言及は、対照レベルと比較した、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、４００％またはそれ以上の変化を含む。任意選択で、リソソームクリアランスを促進すると、対象の１つ以上の細胞のリソソーム中の既存の凝集体中の脂質、タンパク質、糖タンパク質、またはそれらの組み合わせの量が減少する。任意選択で、リソソームクリアランスを促進することは、対象の１つ以上の細胞のリソソーム中の脂質、タンパク質、糖タンパク質、またはそれらの組み合わせを含む凝集体の形成を阻害または防止する。任意選択で、リソソームクリアランスを促進することは、対照と比較して、対象の１つ以上の細胞における脂質、タンパク質、糖タンパク質、またはそれらの組み合わせを分解または代謝するのに必要な時間の量を減少させる。

任意選択で、本明細書に提供される方法において、有効量の式Ｉを有する化合物は、対照と比較して、対象の１つ以上の細胞における毒性物質の凝集または蓄積を阻害または防止する。本明細書で使用する場合、減少、低下、または阻害に関する言及は、対照レベルと比較した、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上の変化を含む。かかる用語には、対象の１つ以上の細胞における毒性物質の完全な除去が含まれ得るが、必ずしも含まれるわけではない。任意選択で、１つ以上の細胞は、脳細胞、対象の１つ以上の末梢組織内の細胞、またはそれらの組み合わせである。任意選択で、脳細胞はニューロン及び／またはグリア細胞であり得る。本明細書に提供される方法において、細胞内に凝集または蓄積することができる毒性物質は、脂質、タンパク質、または糖タンパク質のうちの１つ以上であり得る。毒性物質（複数可）は、対象の１つ以上の細胞における細胞損傷を増加させ、及び／または細胞死を増加させることができる。本明細書に提供される方法において、毒性物質（複数可）は、対象の１つ以上の細胞内のリソソームまたは他の場所にあり得る。例えば、限定するものではないが、対象の細胞における脂質の蓄積によって特徴付けられるＬＳＤには、スフィンゴリピドース（ゴーシェ病及びニーマン－ピック病を含む）、ガングリオシドーシス（テイ－サックス病を含む）、白質ジストロフィー、ムコ多糖症（ハンター症候群及びハーラー病を含む）、糖タンパク質蓄積障害、ムコリピドーシス、及びＩＩ型グリコーゲン蓄積症（ポンペ病）が含まれるが、これらに限定されない。

スフィンゴリピドースに蓄積する脂質と糖タンパク質には、脳及び赤血球のスフィンゴミエリン（ニーマン・ピック病）、脳、心臓、及び腎臓のセラミドトリヘキソシドを含む糖脂質（ファブリー病）、オリゴデンドロサイトのガラクトセレブロシド（クラッベ病）、赤血球、脾臓、肝臓のグルコセレブロシド（ゴーシェ病）、ニューロンのＧＭ２ガングリオシド（テイ－サックス病）及びサンドホフ病、ＧＭ１ガングリオシド、神経組織のスルファチド化合物（異染性白質ジストロフィー）が挙げられる。

リソソーム蓄積疾患としては、１つ以上のリソソーム酵素、例えば、α－Ｌ－イズロニデート（ハーラー病、シャイエ症候群、ハーラーシャイエ症候群）、イドロン酸硫酸（ハンター病）ヘパラン硫酸（Ａ型サンフィリポ）、Ｎ－アセチル－α－Ｄ－グルコサミン（Ｂ型サンフィリポ）、ＣｏＡ－α－グルコサミニド－Ｎ－アセテルチトランファー（Ｃ型サンフィリポ）、Ｎ－アセチル－α－Ｄ－グルコサミニド－６－硫酸（Ｄ型サンフィリポ及びＡ型モルキオ症候群）、Ｂ－ガラクトース（Ｂ型モルキオ症候群）及びＮ－アセチレガラトサミン（マロテウス－ラミー病）、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、またはケラタン硫酸の欠損を有する、ムコ多糖症（ＭＰ）も含まれるが、これらのＭＰ疾患は全て、ヘパラン硫酸塩、デルマタン硫酸塩またはケラタン硫酸塩のリソソーム蓄積の結果である。糖原貯蔵疾患（すなわち、ポンペ病）は、リソソーム中の糖及びリン酸化糖の貯蔵から生じる。

本明細書で提供する方法は、任意選択で、ＬＳＤを有する対象を選択することを含む。当業者は、ＬＳＤを有する対象を診断する方法を知っている。例えば、以下の試験、遺伝子検査（例えば、ＬＳＤに関連する変異の同定）または家族分析（例えば、家族歴、親の遺伝子検査）、中枢神経系イメージング（例えば、磁気共鳴イメージング及び陽電子放射断層撮影）、臨床試験または行動試験（例えば、気分障害、攻撃性及び／または認知異常を同定するための評価）、または実験室試験（例えば、異常なレベルの代謝産物または酵素欠損を同定するための血液及び／または尿検査）のうちの１つ以上を使用することができる。

本明細書に提供される方法は、任意選択で、有効量の第２の治療剤または療法を対象に投与することをさらに含む。第２の治療剤または療法は、式Ｉの化合物の投与前、投与と同時に、または投与後に対象に投与することができる。第２の治療剤または療法は、酵素、造血幹細胞、骨髄移植、遺伝子療法、または低分子からなる群から選択される。例えば、限定するものではないが、酵素欠乏症に関連するＬＳＤは、対象における欠乏酵素の量を増加させるために酵素で治療することができる。例えば、イミグルセラーゼ（Ｃｅｒｅｚｙｍｅ（登録商標））、ベラグルセラーゼアルファ（ＶＰＲＩＶ（登録商標））またはタリグルセラーゼアルファ（Ｅｌｅｌｙｓｏ（登録商標））等の組換え酵素による酵素置換療法（ＥＲＴ）を、Ｉ型ゴーシェ病を治療するための第２の治療剤として使用することができる。グリコシルセラミドシンターゼを阻害する小分子、例えば、ミグルスタット及びエリグルスタットも、Ｉ型ゴーシェ病を治療するために使用することができる。対象によって産生される欠陥酵素を安定化させるためにシャペロンとして作用する小分子、または対象における酵素によって通常処理される１つ以上の基質の量を低下させる小分子も使用することができる。

ＬＳＤの症状を軽減する１つ以上の治療剤も投与することができる。例えば、ガバペンチンまたはラモトリジン等の抗てんかん薬を使用して、対象における発作を防止することができる。抗生物質を使用して、肺炎等の細菌感染を治療することができる。他の薬剤には、抗炎症剤（例えば、ＮＳＡＩＤ及び抗炎症性ステロイド）、ならびに筋肉弛緩剤が含まれるが、これらに限定されない。透析、物理療法、及び手術も、ＬＳＤを治療するための療法として本明細書に企図される。

ＬＳＤを治療または予防するためのいくつかの方法では、第２の治療剤は、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、ニロチニブ、ボスチニブ、イマチニブ、パゾパニブ等）であり得る。したがって、いくつかの例では、チロシンキナーゼ及び式Ｉの化合物が対象に投与される。チロシンキナーゼが第２の治療剤として投与される方法において、チロシンキナーゼは、式Ｉの化合物と比較して１つ以上の受容体チロシンキナーゼに対する選択性が異なるチロシンキナーゼ阻害剤であり得る。

薬学的組成物
有効量という用語は、全体を通して使用される場合、例えば、ニューロン中の毒性タンパク質凝集を阻害または防止するか、またはリソソームクリアランスを促進する、所望の生理学的応答を生成するために必要な任意の量として定義される。

本明細書に記載の任意の化合物、例えば、式Ｉの化合物の投与のための例示的な投薬量としては、１日当たり約０．５～約２００ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物の用量が挙げられ、これは、単回用量で、または１日当たり１～４回等の個々の分割用量の形態で投与され得る。あるいは、投与量は、１日当たり約０．５～約１５０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５～約１００ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５～約７５ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５～約５０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約０．５～約２５ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１～約５０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１～約４０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１～約３０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１～約３０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約３０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約２０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、１日当たり約１０ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物、または１日当たり約５ｍｇ／ｋｇ体重の活性化合物とすることができる。

任意選択で、投薬量は、約１０ｍｇ／ｋｇ未満であり、約９．５、９、８．５、８、７．５、７、６．５、６、５．５、５、４．５、４、３．５、３、２．５、２、１．５、１．２５、１．０、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２、０．１ｍｇ／ｋｇ未満、またはこれらの量の間の任意の投薬量であり得る。投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約８ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約７ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、または約０．１ｍｇ／ｋｇ～約０．５ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。当業者は、阻害剤及びそれを受ける対象の特定の特徴に基づいて、以下に記載される投薬量を調整する。

組成物は、式Ｉの化合物の単回単位用量、例えば、化合物１もしくは化合物２、またはその薬学的に許容される塩の約５０ｍｇ／ｋｇ以下、４０ｍｇ／ｋｇ以下、３０ｍｇ／ｋｇ以下、２０ｍｇ／ｋｇ以下、１０ｍｇ／ｋｇ以下、約５ｍｇ／ｋｇ以下、約２．５ｍｇ／ｋｇ以下、もしくは約１．５ｍｇ／ｋｇ以下の単回単位用量を含むことができる。式Ｉを有する化合物の１つ以上の単回単位用量、例えば、化合物１または化合物２の複数の単回単位用量を含むパッケージもまた提供される。このパッケージは、本明細書に記載の１つ以上の第２の治療剤の単回または複数回の単位用量をさらに含むことができる。

本明細書に記載される式Ｉを有する化合物のうちの１つ以上を投与するための有効量及びスケジュールは、経験的に決定され得、そのような決定を行うことは、当業者の範囲内である。投与のための投薬範囲は、疾患または障害の１つ以上の症状が影響を受ける（例えば、低下または遅延される）所望の効果をもたらすために十分に大きいものである。投薬量は、望ましくない交差反応、望ましくない細胞死等の実質的に有害な副作用を引き起こすほど大きくないはずである。概して、投薬量は、阻害剤の種類、対象の種、年齢、体重、全般的な健康、性別、ならびに食生活、投与の様式及び時間、排泄速度、薬物の組み合わせ、ならびに特定の状態の重症度に伴って変化し、これは、当業者によって決定され得る。投薬量は、任意の禁忌の場合、個々の医師によって調整することができる。投薬量は変化することができ、１日１回以上の用量投与で投与することができる。

式Ｉを有する化合物及び本明細書に記載の他の薬剤は、薬学的組成物中で供給することができる。これらには、例えば、治療有効量の式Ｉを有する１つ以上の化合物及び薬学的担体を含む薬学的組成物が含まれる。担体という用語は、化合物または組成物と組み合わせた場合、その意図される用途または目的のために、その化合物または組成物の調製、保管、投与、送達、有効性、選択性、または任意の他の特徴を補助または促進する化合物、組成物、物質、または構造を意味する。例えば、担体は、活性成分のいかなる分解も最小限に抑え、対象における任意の有害な副作用を最小限に抑えるように選択することができる。そのような薬学的に許容される担体には、生理食塩水、緩衝化生理食塩水、人工脳脊髄液、デキストロース、及び水を含む無菌生体適合性薬学的担体が挙げられるがこれらに限定されない。

意図される投与様式に応じて、薬学的組成物は、固体剤形、半固体剤形、または液体剤形、例えば、錠剤、坐剤、丸薬、カプセル剤、粉末剤、液体剤形、または懸濁液剤形などであってもよく、好ましくは、正確な投薬量の単回投与のために好適な単位剤形であってもよい。これらの組成物は、治療有効量の本明細書に記載の薬剤またはその誘導体を薬学的に許容される担体と組み合わせて含み、加えて、他の医薬製剤、薬学的製剤、担体、または希釈剤を含み得る。薬学的に許容されるとは、許容されない生物学的作用を引き起こすことなく、またはそれが含まれる薬学的組成物の他の構成要素と有害な様式で相互作用することなく、選択された薬剤と共に個体に投与することができる、生物学的ではなく、または他の方法で望ましくない材料を意味する。

本明細書で使用される場合、担体という用語は、医薬製剤で使用するための任意の賦形剤、希釈剤、充填剤、塩、緩衝液、安定剤、可溶化剤、脂質、安定剤、または当該技術分野で知られている他の材料を包含する。組成物に使用するための担体の選択は、組成物の意図される投与経路に依存する。これらの材料を含有する薬学的に許容される担体及び製剤の調製は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｏｙｄ Ｖ．Ａｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ（２０１２）に記載されている。

生理学的に許容される担体の例としては、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、及び他の有機酸との緩衝液等の緩衝液、アスコルビン酸を含む抗酸化剤、低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド、タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン、親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン、アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジン、グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む、単糖類、二糖類、及び他の炭水化物、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ、糖アルコール、例えば、マンニトールまたはソルビトール、塩形成対イオン、例えば、ＴＷＥＥＮ（登録商標）（ＩＣＩ，Ｉｎｃ；Ｂｒｉｄｇｅｗａｔｅｒ，ＮＪ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）（ＢＡＳＦ；Ｆｌｏｒｈａｍ Ｐａｒｋ，ＮＪ）などが挙げられる。

非経口注射に適した本明細書に記載の薬剤（複数可）を含有する組成物は、生理学的に許容される滅菌水溶液または非水溶液、分散液、懸濁液またはエマルション、ならびに滅菌注射液または分散液に再構成するための滅菌粉末を含み得る。好適な水性及び非水性担体、希釈剤、溶媒またはビヒクルの例としては、水、エタノール、ポリオール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール等）、それらの好適な混合物、植物油（オリーブ油等）、及びオレイン酸エチル等の注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティングの使用によって、分散液の場合には必要な粒径を維持することによって、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。

これらの組成物はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び分注剤等のアジュバントを含んでもよい。微生物作用の予防は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等の種々の抗菌剤及び抗真菌剤によって促進することができる。等張化剤、例えば、糖、塩化ナトリウム等も含まれ得る。注射可能な薬学的形態の持続的吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンの使用によってもたらすことができる。

本明細書に記載の化合物またはその誘導体の経口投与のための固体剤形としては、カプセル、錠剤、丸剤、粉末、及び顆粒が挙げられる。かかる固体剤形では、本明細書に記載の化合物またはその誘導体は、少なくとも１つの不活性な慣例的賦形剤（または担体）、例えば、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸ジカルシウム、または（ａ）充填剤もしくは伸長剤、例えば、デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸、（ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、及びアカシア、（ｃ）湿潤剤、例えば、グリセロール、（ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種の複合ケイ酸塩、及び炭酸ナトリウム、（ｅ）溶液遅延剤、例えば、パラフィン、（ｆ）吸収促進剤、例えば、第４級アンモニウム化合物、（ｇ）湿潤剤、例えば、セチルアルコール、及びグリセロールモノステアリン酸塩、（ｈ）吸着剤、例えば、カオリン及びベントナイト、ならびに（ｉ）潤滑剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、またはそれらの混合物と混合される。カプセル、錠剤、及び丸薬の場合、剤形はまた、緩衝剤を含んでもよい。

同様のタイプの固体組成物は、ラクトースまたは乳糖等の賦形剤、ならびに高分子量ポリエチレングリコール等を使用して、軟質及び硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤としても使用され得る。

錠剤、ドラージ、カプセル、丸薬、及び顆粒などの固体剤形は、腸溶性コーティング及び当該技術分野で公知の他のものなどのコーティング及びシェルを用いて調製することができる。それらは、不透明化剤を含有してもよく、それらが遅延様式で腸管の特定の部分で活性化合物を放出するような組成物であってもよい。使用可能な埋め込み組成物の例は、高分子物質及びワックスである。活性化合物はまた、必要に応じて、上述の賦形剤のうちの１つ以上と共にマイクロカプセル化形態であり得る。

本明細書に記載される化合物は、それらの化合物の哺乳動物への即時放出または送達を可能にする薬学的組成物に組み込むことができる。本明細書に記載の化合物はまた、放出の改変、例えば、それらの化合物の哺乳動物への数日、数週間、または１ヶ月以上の期間の遅延放出または長期放出（例えば、持続放出または制御放出）を可能にする薬学的組成物に組み込むことができる。かかる製剤は、例えば、米国特許第５，９６８，８９５号及び同第６，１８０，６０８号に記載され、そうでなければ当該技術分野で既知である。当該技術分野で既知の任意の薬学的に許容される遅延放出または持続放出製剤が企図される。

本明細書に記載の化合物またはその誘導体の経口投与のための液体剤形としては、薬学的に許容されるエマルション、溶液、懸濁液、シロップ、及びエリキシル剤が挙げられる。活性化合物に加えて、液体剤形は、水または他の溶媒、可溶化剤、及び乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油、特に綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、ゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、及びソルビタンの脂肪酸エステル、またはこれらの物質の混合物等の、当該技術分野で一般的に使用される不活性希釈剤を含んでもよい。

かかる不活性希釈剤に加えて、組成物は、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、甘味剤、香味剤、または香料剤等の追加の薬剤も含むことができる。

組成物は、局所的または全身的な治療が所望されるかどうか、及び治療される領域に応じていくつかの方法で投与される。組成物は、経口的、非経口的、静脈内、腹腔内、頭蓋内、脊髄内、髄腔内、脳室内、筋肉内、皮下、空洞内、または経皮的に、いくつかの投与経路のいずれかを介して投与される。薬学的組成物は、例えば、局所適用または局所注射によって、治療を必要とする領域に局所的に送達することもできる。本明細書に記載される投与方法のいずれかの有効用量は、インビトロまたは動物モデル試験系に由来する用量応答曲線から外挿することができる。

全体を通して、治療する、治療すること、及び治療は、神経変性疾患、筋変性疾患、プリオン病、またはリソソーム蓄積疾患の１つ以上の効果または症状を軽減または遅延させる方法を指す。対象は、疾患または障害を有すると診断することができる。治療は、症状だけではなく、基礎となる病理を低下させる方法を指すこともできる。対象への投与の効果は、疾患の１つ以上の症状の軽減、疾患の重症度の軽減、疾患の完全切除、または１つ以上の症状の発症もしくは悪化の遅延の効果を有することができるが、これらに限定されない。例えば、開示される方法は、治療前の対象と比較した場合、または対照対象もしくは対照値と比較した場合に、対象における疾患の１つ以上の症状が約１０％減少する場合、治療と見なされる。したがって、還元は、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％、または間の任意の量の還元であり得る。

全体を通して使用されるように、対象とは個体を意味する。対象は、成人対象または小児対象であり得る。小児対象には、出生から１８歳までの年齢の対象が含まれる。したがって、約１０歳未満、５歳未満、２歳未満、１歳未満、６ヶ月未満、３ヶ月未満、１ヶ月未満、１週間未満、または１日未満の小児対象も対象として含まれる。好ましくは、対象は霊長類などの哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。非ヒト霊長類も対象である。対象という用語は、ネコ、イヌ、家畜（例えば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ等）及び実験動物（例えば、フェレット、チンチラ、マウス、ウサギ、ラット、スナネズミ、モルモット等）などの飼育動物を含む。したがって、獣医学的使用及び医療製剤が本明細書に企図される。

開示されるものは、開示される方法及び組成物のために使用できるか、それらと併用できるか、それらの準備のために使用できるか、またはそれらの生成物である材料、組成物、及び構成要素である。これら及び他の材料が本明細書に開示されており、これらの材料の組み合わせ、サブセット、相互作用、基等が開示される場合、これらの化合物の各々の個々及び集合的な組み合わせ及び置換の具体的な参照が明示的に開示されていない場合があるが、それぞれが本明細書に具体的に企図され説明されていることを理解されたい。例えば、方法が開示され、議論され、方法に含まれる多数の分子に対して行われ得る多数の修飾が議論される場合、方法のそれぞれ及び全ての組み合わせ及び順列、ならびに可能である修飾は、特に反対の指示がない限り、具体的に企図される。同様に、これらの任意のサブセットまたは組み合わせもまた、具体的に企図され、開示される。この概念は、開示される組成物を使用する方法における工程を含むがこれらに限定されない、本開示のすべての態様に適用される。したがって、実施することができる様々な追加の工程が存在する場合、これらの追加の工程のそれぞれが、開示される方法の任意の特定の方法工程または方法工程の組み合わせを用いて実施することができ、そのような組み合わせまたは組み合わせのサブセットのそれぞれが具体的に企図され、開示されていると見なされるべきであることを理解されたい。

本明細書に引用される刊行物及びそのためにそれらが引用される材料は、参照によりそれらの全体が本明細書に具体的に組み込まれる。

チエノ［３，２－ｂ］ピリジン誘導体の合成及び特徴付け
一般情報
市販の７－クロロ－２－ヨードチエノ［３，２－ｂ］ピリジン（１）、ｍ－トリルボロン酸（２）、アニリン（４）、ｍ－アニシジン（５）、モルホリン（６）、試薬、触媒、及び溶媒を、さらなる精製なしに購入した通りに使用した。ＮＭＲスペクトルを、重水素化溶媒中で４００ＭＨｚ（^１Ｈ ＮＭＲ）及び１００ＭＨｚ（^１３Ｃ ＮＭＲ）で得た。以下に記載されるように、反応生成物を、シリカゲル上でカラムクロマトグラフィー（粒径４０～６３μｍ）によって精製した。

合成方法及び化合物特性評価
チエノ［３，２－ｂ］ピリジン化合物７～１０の合成

７－クロロ－２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン（３）トルエン１５ｍＬ中の７－クロロ－２－ヨードチエノ［３，２－ｂ］ピリジン（１）（５００ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、３－メチルフェニルボロン酸（２）（２３０ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１９ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（４４ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（１．１０１ｇ、３．３８ｍｍｏｌ）の混合物を還流で２４時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水とジクロロメタンの間で分配した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物を、移動相としてヘキサン－酢酸エチル（８：２）を使用してシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。化合物３を無色固体として７２％収率（３１５ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）で得た。Ｒ_ｆ＝０．２（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ，１：１）；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝８．５４（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｓ，１Ｈ），７．５５－７．５２（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｄｄ，Ｊ＝７．８，７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝１５８．２，１４９．６，１４８．２，１３９．０，１３７．６，１３３．２，１３３．０，１３０．４，１２９．２，１２７．３，１２３．８，１２０．８，１１８．６，２１．５；分析Ｃ_１４Ｈ_１０ＣｌＮＳの計算値：Ｃ，６４．７４；Ｈ，３．８８；Ｎ，５．３９。実測値：Ｃ，６４．７６；Ｈ，４．０５；Ｎ，５．２８。

求核芳香族置換反応の一般的手順
５ｍＬの圧力容器に、７－クロロ－２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン（３）（０．３ｍｍｏｌ）、アミン（０．６ｍｍｏｌ）、及びＤＭＳＯ（１．０ｍＬ）を充填した。次いで、圧力容器を１００℃の油浴中に配置し、１６時間～４日間撹拌した。^１ＨＮＭＲ分析に基づいて完全変換を達成した後、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、水で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を真空中で除去した。粗生成物を、以下に記載するように、移動相としてヘキサン－酢酸エチルを用いてシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。

Ｎ－フェニル－２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－７－アミン（７）化合物７を、上記の一般的手順に従って、１００℃で１６時間後、１ｍＬのＤＭＳＯ中の７－クロロ－２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン（７８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びアニリン（５６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）から９４％収率（８９ｍｇ、０．２８２ｍｍｏｌ）の無色固体として得た。Ｒ_ｆ＝０．２（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：１）、^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム－ｄ）δ＝８．３８（ｍ、１Ｈ）、７．７０（ｓ、１Ｈ）、７．５７－７．５０（ｍ、２Ｈ）、７．４３－７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．３７－７．２３（ｍ、３Ｈ）、７．２１－７．１７（ｍ、２Ｈ）、６．９０（ｍ、１Ｈ）、６．１５（ｓ、１Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ、クロロホルム－ｄ）δ＝１５８．５、１４８．９、１４６．５、１４５．９、１３９．４、１３９．０、１３３．７、１２９．９、１２９．７、１２９．６、１２９．１、１２７．３、１２４．８、１２３．８、１２２．７、１２２．５、１２１．６、１２０．７、１０２．６、２１．６；分析Ｃ_２０Ｈ_１６Ｎ_２Ｓの計算値：Ｃ、７５．９２、Ｈ、５．１０、Ｎ、８．８５。実測値：Ｃ、７５．７１、Ｈ、５．３２、Ｎ、９．１１。

Ｎ－（３－メトキシフェニル）－２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－７－アミン（８）化合物８を、上記の一般的手順に従って、１００℃で１６時間後、１ｍＬのＤＭＳＯ中の７－クロロ－２－（ｍ－トリル）チエノ［［３，２－ｂ］ピリジン（７８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びｍ－アニシジン（７４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）から９２％収率（９５ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）の無色固体として得た。Ｒ_ｆ＝０．２（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ，２：１）；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝８．４１（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．５８－７．５１（ｍ，２Ｈ），７．３６－７．２９（ｍ，２Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８７（ｄｄ，Ｊ＝７．９，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８３（ｄｄ，Ｊ＝７．８，７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．７３（ｄｄ，Ｊ＝７．９，２．５Ｈｚ，１Ｈ），６．０７（ｓ，１Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝１６０．８，１５８．６，１４８．９，１４６．５，１４５．６，１４０．７，１３９．０，１３３．７，１３０．５，１３０．０，１２９．１，１２７．３，１２３．８，１２１．７，１２０．９，１１４．５，１１０．１，１０８．１１０３．０，５５．５，２１．６；分析Ｃ_２１Ｈ_１８Ｎ_２ＯＳの計算値：Ｃ、７２．８０、Ｈ、５．２４、Ｎ、８．０９。実測値：Ｃ，７２．５３；Ｈ，５．６１；Ｎ，８．１９。

４－（２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－７－イル）モルホリン（９）化合物９を、上記の一般的手順に従って、１００℃で４日後、１ｍＬのＤＭＳＯ中の７－クロロ－２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン（７８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）及びモルホリン（５２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）から９８％収率（９１ｍｇ、０．２９４ｍｍｏｌ）の無色固体として得た。Ｒ_ｆ＝０．２（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ，１：１）；^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝８．４８（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｓ，１Ｈ），７．５９－７．５２（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，２．１Ｈｚ，１Ｈ），６．６４（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），４．０３－３．８５（ｍ，４Ｈ），３．５４－３．３９（ｍ，４Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝１５８．８，１５３．０，１４９．０，１４６．６，１３９．０，１３３．６，１２９．９，１２９．１，１２７．２，１２３．７，１２３．４，１２１．４，１０５．９，６６．９，４９．７，２１．６；分析Ｃ_１８Ｈ_１８Ｎ_２ＯＳの計算値：Ｃ，６９．６５；Ｈ，５．８５；Ｎ，９．０２。実測値：Ｃ，６９．８９；Ｈ，５．７２；Ｎ，９．３８。

３－（（２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－７－イル）アミノ）フェノール（１０）。乾燥ジクロロメタン（３ｍＬ）中のＮ－（３－メトキシフェニル）－２－（ｍ－トリル）チエノ［３，２－ｂ］ピリジン－７－アミン（８）（６９ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、不活性雰囲気下、－７８℃で三臭化ホウ素（４当量）を添加した。混合物を４時間撹拌し、反応温度を０℃にした。１Ｍ ＨＣｌでクエンチした後、粗反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、水で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を真空中で除去した。粗生成物を、移動相としてＤＣＭ－ＭｅＯＨ（１９：１）を使用してシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。化合物１０を９７％収率（６４ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）の無色固体として得た。Ｒ_ｆ＝０．４（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９：１）、^１ＨＮＭＲ（３９９ＭＨｚ、メタノール－ｄ_４）δ＝８．２２（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．７０（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｄｄ、Ｊ＝７．５、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｄｄ、Ｊ＝７．６、７．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３４－７．３１（ｍ、２Ｈ）、６．９３（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８８（ｍ、１Ｈ）、６．８５－６．７９（ｍ、２Ｈ）、２．４４（ｓ、３Ｈ）、^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ、メタノール－ｄ_４）δ＝１６０．１、１５４．７、１５３．５、１４９．５、１４１．１、１４０．７、１３９．５、１３３．３、１３２．４、１３１．９、１３１．７、１３０．５、１２８．２、１２５．０、１１７．４、１１５．７、１１４．９、１１３．５、１０２．７、２１．３、Ａｎａｌ。Ｃ_２０Ｈ_１６Ｎ_２ＯＳの計算値：Ｃ，７２．２６；Ｈ，４．８５；Ｎ，８．４３。実測値：Ｃ，７２．２９；Ｈ，４．９７；Ｎ，８．６１。

細胞培養
ラット神経芽腫Ｂ３５細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）及び１％ペニシリン／ストレプトマイシンを含むダルベッコ改変イーグル培地中（ＤＭＥＭ）で増殖させ、３７℃で５％ＣＯ_２と共にインキュベートした。実験のために、細胞を１２ウェルプレート（カタログ番号１５０６２８，ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）に移し、少なくとも７０％コンフルエンスまで増殖させた。ＦｕｇｅｎｅＨＤトランスフェクション試薬（カタログ番号Ｅ２３１１，Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ ＷＩ）を使用して、Ｐ３０１Ｌタウ（カタログ番号３０１４５，Ａｄｄｇｅｎｅ）ｃＤＮＡ ３μｇまたはヒトα－シヌクレインｃＤＮＡ ３μｇで一過性トランスフェクションを行った。ＤＭＳＯまたは５ｕＬのＤＭＳＯ等価物に溶解した１ｍＭ、１００μＭ、１０μＭ、１μＭ、０．１μＭ、０．０１μＭ、及び０．００１μＭで５時間細胞を処理した。 細胞培養培地を収集し、ナトリウム－トリス、ＥＤＴＡ、ＮＰ－４０（ＳＴＥＮ）緩衝液を使用して細胞を収穫し、４℃にて１０，０００×ｇで２０分間遠心分離し、上清を収集した。細胞生存率を、乳酸デヒドロゲナーゼアッセイ（カタログ番号８８９５４，Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ）及びＭＴＴアッセイ（カタログ番号Ｖ１３１５４，Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ）を介して決定した。培養培地を除去し、０．２ｍｌの１×ＳＴＥＮ緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．６）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．２％ ＮＰ－４０、０．２％ ＢＳＡ、２０ｍＭ ＰＭＳＦ及びプロテアーゼカクテル阻害剤）を細胞層に添加することによってタンパク質を抽出し、氷上で１０分間インキュベートした。ウェルの底部を削り、さらに１０分間氷上でインキュベートさせた。細胞溶解物を収集し、－８０℃で保管し、追加の分析に使用した。

薬物調製
それぞれ３１０．１及び３１６．４ｇ／ｍｏｌの分子量を有する化合物１（ＢＫ４０１９７）及び化合物２（ＢＫ４０１４３）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で最終濃度１００μＭ、１０μＭ、１μＭ、０．１μＭ、０．０１μＭ、及び０．００１μＭに希釈した。薬物を－８０℃で保管した。

ＭＴＴアッセイ
細胞生存率を測定するために、細胞を、５０μＬの（３－［４，５－ジメチルチアゾール－２－イル］－２，５－ジフェニル－テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ））を含有する５００μＬのダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）と共に、３７℃及び５％ＣＯ_２で４時間インキュベートした。培地を吸引して、１２５μＬの培地が残るようにした。ホルムザン塩を２５０ｕＬのＤＭＳＯ中に溶解させた。吸光度を、１２５μＬの培地及びＭＴＴで含有するブランク、ならびに２５０μＬのＤＭＳＯに対して、５７０ｎｍにおいて読み取った。

乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）アッセイ
細胞毒性は、初回投与の５時間後に薬物に曝露した後に、損傷した細胞から細胞培地に放出されるサイトゾル酵素であるＬＤＨの評価によって定量的に測定した。細胞培養培地を収集し、アリコートを乳酸塩及びＮＡＤ＋とカップリングした。ＬＤＨは、乳酸塩をピルビン酸塩に変換してＮＡＤＨを産生する反応を触媒する。ＮＡＤＨは、次には、テトラゾリウム塩（ＩＮＴ）を赤色のホルマザン生成物に還元する。培地中のＬＤＨの量は、４９０ｎｍで測定したホルムザンの量に比例する。測定器からのバックグラウンド信号を測定するために、６８０ｎｍでの吸光度を４９０ｎｍでの吸光度から差し引いてＬＤＨ活性を計算した。

細胞培養トランスフェクション及び処理
ＦｕＧｅｎｅ（登録商標）ＨＤトランスフェクション試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を、ラット神経芽腫Ｂ３５細胞へのα－シヌクレインの一過性トランスフェクションを実施するために使用した。細胞を１２ウェルディッシュ中で増殖させた。１２μｇのｃＤＮＡ、２％ＦＢＳを含有する５４０μｇのＤＭＥＭ、及び６０μｌのＦｕＧｅｎｅ（登録商標）ＨＤトランスフェクション試薬を含む混合物を１０分間インキュベートした。細胞を、２４時間、５０μｌのＦｕＧｅｎｅ（登録商標）ＨＤトランスフェクション試薬／ＤＮＡ混合物で処理した。細胞をトランスフェクション後に採取し、培地を吸引し、細胞を２００ｕｌのＴｒｉｓ ＥＤＴＡ ＮＰ４０ナトリウム（ＳＴＥＮ）溶解緩衝液で処理した後、プレートからスクラップし、１．５ｍｌの遠心チューブに収集した。

マウス処置
実験は、（ａ）マウス胸腺細胞抗原１、シータ、Ｔｈｙ１、プロモーターの制御下にあるＳｗｅｄｉｓｈ（Ｋ６７０Ｎ／Ｍ６７１Ｌ、Ｄｕｔｃｈ Ｅ６９３Ｑ、Ｉｏｗａ Ｄ６９４Ｎ変異）を含む、ニューロン由来のヒトＡＰＰ遺伝子、７７０アイソフォームを発現するＴｇＡＰＰマウス（Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．“Ｅａｒｌｙ－ｏｎｓｅｔ ａｎｄ ｒｏｂｕｓｔ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ－ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｌｏｗ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ａ ｖａｓｃｕｌｏｔｒｏｐｉｃ Ｄｕｔｃｈ／Ｉｏｗａ ｍｕｔａｎｔ ｆｏｒｍ ｏｆ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ－ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，” Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２７９（１９）：２０２９６－２０３０６（２００４）、（ｂ）ヒトＰ３０１Ｌタウを発現し、ｔｅｔ応答エレメント（ＴＲＥまたはｔｅｔＯ）及びヒト４反復微小管関連タンパク質タウ（４Ｒ０ＮＴａｕ Ｐ３０１Ｌ）のＰ３０１Ｌ変異体の発現を指示するマウスプリオンタンパク質プロモーター配列（ＰｒＰまたはＰｒｎｐ）を有する、ｒＴｇ４５１０マウス（Ｓａｎｔａｃｒｕｚ ｅｔ ａｌ．“Ｔａｕ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ａ ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｍｅｍｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ，” Ｓｃｉｅｎｃｅ ３０９（５７３３）：４７６－４８ （２００５））、または（ｃ）プリオンプロモーターの制御下でアルギニンからスレオニンへの変異体（Ａ５３Ｔ）ヒトα－シヌクレインを発現するＴｇＡ５３Ｔマウス（Ｇｉａｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．“Ｎｅｕｒｏｎａｌ ａｌｐｈａ－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎｏｐａｔｈｙ ｗｉｔｈ ｓｅｖｅｒｅ ｍｏｖｅｍｅｎｔ ｄｉｓｏｒｄｅｒ ｉｎ ｍｉｃｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ Ａ５３Ｔ ｈｕｍａｎ ａｌｐｈａ－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ，” Ｎｅｕｒｏｎ ３４（４）：５２１－５３３ （２００２））で行った。マウスは、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（カタログ番号Ｄ１２８－５００，ＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｈａｍｐｔｏｎ，ＮＨ）中に溶解した、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、もしくは５．０ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３（ＢＫ）（Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｐｒｏｇｒａｍ，Ｇｅｏｒｇｅｔｏｗｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、ニロチニブ（Ｎｉｌｏ）（カタログ番号Ｓ１０３３，Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ Ｉｎｃ．，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ）、ボスチニブ（ｂｏｓ）（カタログ番号Ｓ１０１４，Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ Ｉｎｃ．）、またはＢＫ＋Ｎｉｌｏ、ＢＫ＋Ｂｏｓ、もしくはＮｉｌｏ＋Ｂｏｓの組み合わせ溶液または同等用量のＤＭＳＯのみを含む腹腔内（i．ｐ．）注射の処置を毎日受けた。処置期間は、図の凡例で指定されているように７日連続または２１日連続のいずれかであった。

Ｘｍａｐ
Ｘｍａｐテクノロジーは、内部で２つの蛍光色素でコード化された磁気微粒子を使用している。これらの２つの染料の正確な組み合わせを通して、試料内で複数のタンパク質を測定した。これらの球のそれぞれを特異的捕捉抗体でコーティングする。捕捉抗体は検出抗体及びレポーター分子に結合し、ビーズの表面上の反応を完了する。５ｍｇ／ｋｇで処理したトランスジェニックＴｇ４５１０マウス由来の２５μｌの可溶性脳組織溶解物。２．５ｍｇ／ｋｇ及び１．２５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯを、２５μｌの検出抗体溶液、及び以下の分析物、ヒトホスホタウ（１８１）を含有する２５μｌの混合ビーズ溶液と共に室温で一晩（１６～２０時間）インキュベートした。プレートを広範囲に洗浄した後、２５μｌのストレプトアビジン－フィコエリトリンと共に試料をインキュベートし、各ウェルに加え、室温で３０分間インキュベートした。次いで、試料を洗浄し、１００ｕｌのシース流体に懸濁した。再懸濁後、試料を、Ｘｐｏｎｅｎｔソフトウェアを用いてＭＡＧＰＩＸ上に流した。メジアン蛍光強度（ＭＦＩ）データを、試料中の分析物濃度を計算するための５パラメータロジスティクスまたはスプライン曲線フィッティング法を使用して分析した。

タンパク質抽出
ＤＭＳＯ処理マウスと比較して処理したマウス由来の脳を、ＳＴＥＮ溶解緩衝液［５０ｍＭ トリスナトリウム（ｐＨ７．６）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．２％ＮＰ－４０、０．２％ＢＳＡ、２０ｍＭ ＰＭＳＦ及びプロテアーゼカクテル阻害剤］中で均質化し、４８℃で２０分間１００００ｇで遠心分離し、可溶性タンパク質画分を含有する上清を収集した。上清を、ＳＤＳ－ＮｕＰＡＧＥビス－トリスゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）及びＥＬＩＳＡ上でウェスタンブロット（ＷＢ）によって解析した。

薬物動態研究
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、ＢＫのｉ．ｐ．注射を１回注射した。脳及び血清を２、４、６、または１２時間（１薬物当たりｎ＝１８、１用量及び時点当たりｎ＝３）で収集した。ビヒクル（ＤＭＳＯ）を注入した動物をバックグラウンド減算に使用した。薬物のストック溶液（それぞれ約１ｍｇ／ｍＬ）をメタノール／ジクロロメタン（５０：５０）中で調製した。各標準の連続希釈液を、メタノール／ＨＰＬＣグレード水（５０：５０）中で別個に試験のために作製した。キャリブレーション曲線標準及び品質試料（ＱＣ）の調製は、ブランク試料中のストック溶液を混合することによって行った。血清及び脳試料を－８０℃で保管した後、調製前に室温に解凍した。解凍した血清試料（２０ｕＬ）を、１００ｕＬの水を含有するチューブに輸血した。５００ｕＬの抽出溶媒、アセトニトリル／メタノール（５０：５０）を試料に加えた。混合物をボルテックスし、２０分間氷上でインキュベートして、タンパク質沈殿を加速させた。インキュベーション後、試料を再びボルテックスし、１３，０００ｒｐｍで４℃にて２０分間遠心分離した。その後、上清を収集し、新しいチューブに移し、高速真空を使用して乾燥させ、２００ｕＬのメタノール／水（５０：５０）中で再構成した。混合物を、１３，０００ｒｐｍで４℃にて２０分間２００で再び遠心分離した。次いで、上清を質量スペック試料チューブキャップに収集し、質量分析器内で実行した。脳については、各動物からの解凍された脳試料の小さな部分を平らな底管に移した。２００ｕＬのメタノール／水（９０：１０）を添加し、組織を均質化した。続いてアセトニトリルを、タンパク質沈殿を促進する混合物に添加した。次いで、この混合物を氷上で１０分間インキュベートした。インキュベーション後、試料をボルテックスし、１３，０００ｒｐｍで４℃にて２０分間２１０で遠心分離した。その後、上清を収集し、新しいチューブに移し、高速真空を使用して乾燥させ、２００ｕＬのメタノール／水（５０：５０）中で再構成した。混合物を、４℃にて、２０分間、１３，０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を質量スペック試料チューブキャップに収集し、質量分析器内で実行した。試料を、多重反応モニター（ＭＲＭ）モードで動作するトリプル四極質量分析器（Ｘｅｖｏ－ＴＱ－Ｓ、Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を用いて、Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８ １．７μｍ、２．１×５０ｍｍカラム上でオンラインで分解した。試料のコーン電圧及び衝突エネルギーを、ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウェア（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）の「ＩｎｔｅｌｌｉＳｔａｒｔ」機能を使用して、両方の分析対象物に対して最適化して、親イオン及び娘イオンの最大イオン強度を得た。機器パラメータを最適化して、親［ｍ／ｚ＝４３８．２５］及び娘イオン［ｍ／ｚ＝３５７．３３］に対するイオン化の最大特異性及び感度を得た。分析対象物のすべてのＭＲＭＱ１／Ｑ３イオン対からの信号強度をランク付けして、ＭＲＭに基づく定量化のための最も強度の高い前駆体及び断片イオン対の選択を確実にした。このアプローチは、各断片イオン種の生成を最大化するコーン電圧及び衝突エネルギーの選択をもたらした。６～８点較正曲線を用いて分析を行い、試料キューをランダム化し、溶媒ブランクを注入して試料のキャリオーバーを評価した。ＭＲＭデータを、ＴａｒｇｅｔＬｙｎｘ４．１を使用して処理した。分析物の相対定量値を、内部標準物のピーク面積に正規化された試料の移行のピーク面積の比率を計算することによって決定した。

組織収集とタンパク質抽出
動物をキシラジンとケタミンの混合物（１：８）で深く麻酔し、心臓穿刺を介して５００μｌの全血を収集し、２０００×ｇで遠心分離して血液細胞を沈殿させ、血清を収集した。血管から残りの血液を洗い流し、汚染を低下させるために、動物に２５ｍｌの１×リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で５分間灌流した。脳を収集し、１．０ｍｌの１×ＳＴＥＮ緩衝液中で均質化した。均質化した試料を１２，０００×ｇで４℃にて２０分間遠心分離し、上清（可溶性タンパク質画分）を収集し、－８０℃で保管した。上清を除去した後、不溶性タンパク質を抽出した。組織ペレットを１×ＳＴＥＮ緩衝液で洗浄した。ペレットを７５０ｕｌの７０％ギ酸に再懸濁し、室温で３０分間インキュベートした後、１時間、４℃にて２８，０００ｇで遠心分離した。上清を「不溶性画分」として収集した。７０％ギ酸画分からの試料を－８０℃で保管し、使用直前に１Ｍのトリス塩基（１：２０）で中和した。タンパク質レベルを、Ｐｉｅｒｃｅ ＢＣＡタンパク質アッセイ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，２３２２５）を製造業者の指示を介して使用して定量した。

イムノブロット解析
マウス脳溶解物から抽出した可溶性及び不溶性タンパク質を、ＳＤＳＮｕＰＡＧＥＢｉｓ－Ｔｒｉｓゲル（カタログ番号ＮＰ０３０１ＢＯＸ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）上で実行し（１：１０００）マウスモノクローナルＡＴ１８０（カタログ番号ＭＮ１０４０、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）及び（１：１０００）マウスモノクローナルＡＴ８（カタログ番号ＭＮ１０２０、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を有するリン酸化ｔａｕ、（１：３０００）マウスモノクローナルＴａｕ－５抗体を有する総ｔａｕ、（１：２５０）ウサギポリクローナルＭＣＫ１０（カタログ番号ＰＡ５－６４７８０、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を有するリン酸化ＤＤＲ１、（１：５０００）ウサギポリクローナル（カタログ番号ＰＡ３－１６７１７、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を有するユビキチン、（１：１０００）ウサギモノクローナル（カタログ番号ｍＡｂ１２９９４、細胞シグナル伝達、Ｄａｎｖｅｒｓ、ＭＡ）を有するＡｔｇ５、（１：１０００）ウサギモノクローナル（カタログ番号ｍＡｂ３４９５、細胞シグナル伝達）を有するベクリン－１、及び（１：８０００）ウサギポリクローナル（カタログ番号ＭＡＢ１５０１Ｒ，ＥＭＤＭｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）を有するアクチンを調査した。ブロットを、Ａｍｅｒｓｈａｍ（商標）Ｉｍａｇｅｒ ６００（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）上のＳｕｐｅｒ Ｓｉｇｎａｌ（商標）Ｗｅｓｔ Ｄｕｒａ Ｅｘｔｅｎｄｅｄ Ｄｕｒａｔｉｏｎ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（カタログ番号３７０７１，ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を使用して可視化した。Ｗｅｓｔｅｒｎブロットを、ＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用したデンシトメトリーによって定量化した。

酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）
ヒトα－シヌクレイン及びｐ－ｔａｕＥＬＩＳＡを、５０μｌの一次抗体（３時間）及び１００μｌの抗ウサギ二次抗体（３０分）で検出した細胞溶解物５０μｌ（１μｇ／μｌ）を室温で使用して行った。α－シヌクレインレベルを、ヒト特異的ＥＬＩＳＡ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｉｎｃ．，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）をメーカーのプロトコルに従って使用して測定した。タウを、製造業者のプロトコルに従って、セリン３９６で特定のタウを使用して測定した。各試料を複製した。

総Ｔａｕ、ＡＢ_４０、及びＡＢ_４２（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅカタログ番号ＨＮＡＢＴＭＡＧ６０Ｋ）のＥＬＩＳＡは、Ｍｉｌｌｉｐｌｅｘｅｄ ＥＬＩＳＡを使用して実施した。上記のように、Ｘマップ技術は、２つの蛍光色素で内部符号化された磁気微粒子を使用する。これらの２つの染料の正確な組み合わせを通じて、複数のタンパク質が試料内で同時に測定される。これらの球のそれぞれを特異的捕捉抗体でコーティングする。捕捉抗体は検出抗体及びレポーター分子に結合し、ビーズの表面上の反応を完了する。ベースライン及び５２週間時のプラセボ及びレスベラトロールを含む全ての試料を、同じ試薬を使用して並行して分析した。合計２５μｌの可溶性タンパク質を、総Ｔａｕ、ＡＢ_４０、及びＡＢ_４２を含有する２５μｌの混合ビーズ溶液と共に４℃で一晩インキュベートした。洗浄後、試料を、室温で１．５時間、２５μｌの検出抗体溶液と共にインキュベートした。ストレプトアビジン－フィコエリトリン（２５μｌ）を、２５μｌの検出抗体溶液を含有する各ウェルに添加した。次いで、試料を洗浄し、１００μｌのシース流体に懸濁した。次いで、試料を、Ｘｐｏｎｅｎｔソフトウェアを用いてＭＡＧＰＩＸ上で実行した。試料中の分析物濃度を計算するための５パラメータロジスティクスまたはスプライン曲線フィッティング法を使用して、メジアン蛍光強度（ＭＦＩ）データを分析した。特定のｐ－Ｔａｕ ｓｅｒ３９６（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＫＨＢ７０３１）、ヒトＴａｕ ｔｈｒ１８１（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＫＨＯ０６３１）及びＡβ１－４２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＫＨＢ３４４２）を、１×ＳＴＥＮ緩衝液中の中脳溶解物からの組織可溶性抽出物に関する製造業者のプロトコルに従って行った（上記参照）。

行動
Ｒｏｔａｒｏｄ：マウスを、各マウスについて個々のタイマーを装備した加速ロッド（カタログ番号７６－０７７０，Ｐａｎｌａｂ，Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ）上に配置した。マウスを、４回の試行、３回のトレーニング、及び１回の試験にわたって試験した。マウスを、少なくとも５分間、毎分一定の４回転（ｒｐｍ）でロッド上に留まるように訓練し、その後、速度は３００秒間にわたって徐々に４０ｒｐｍまで増加させ、落下までの待ち時間を測定した。

オープンフィールド：マウスをオープンフィールドアリーナ装置（２５ｃｍ×２５ｃｍ）に６０分間配置した。動物は、アリーナフロアに沿ってフォトセルビームによって追跡された。データを収集し、６０分間の試験中に総走行距離（ｃｍ）、総移動時間（秒）、及び速度（距離／時間）について分析した。本ソフトウェアでは、センターゾーンを装置の中心に（２５ｃｍｘ２５ｃｍ）とデジタルで定義し、センターゾーンのエントリ、センターゾーンの移動距離（ｃｍ）、及び６０分間の試行中にセンターゾーンに費やした時間（秒）を記録した。

モリス水迷路：水迷路装置は、２５℃に維持された水で満たされた直径４フィートのプール（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）で構成され、白色の塗料で不透明にされ、４つの象限ゾーン（ＡＮＹＭａｚｅソフトウェア、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）にデジタルで分割された。プールの周囲の壁には、迷路外の視覚的手がかりが掛けられ、「プラットフォームゾーン」の中央の水の表面より１ｃｍ下に隠れたプラットフォーム（直径４インチ）が水没した。トレーニングは、５日目のプローブトライアルに至るまでの４日間、１日３回の試行で構成されていた。マウスを、非プラットフォーム象限ゾーンごとに１つである、３つのエントリポイントのうちの１つに導入し、１日の経過にわたってすべてのエントリポイントでプールに導入した。プラットフォームの位置は、トレーニング期間を通じて一定のままであった。マウスはプラットフォームを位置決めするために６０秒与えられ、除去される前にプラットフォーム上に１０秒間留まった。６０秒以内にプラットフォームを見つけなかったマウスをプラットフォーム上に１０秒間配置し、迷路から除去した。５日目のプローブトライアル中に、プラットフォームを取り外し、トラッキングソフトウェア（ＡＮＹＭａｚｅ）を使用して、プラットフォーム、プラットフォーム象限ゾーン、水泳速度、及び水泳経路を見つけるための待ち時間を記録した。このトレーニング及びプローブトライアルパラダイムは、治療前及び治療後に実施された。

大理石埋設試験：大理石埋設試験は、修正を加えて以前に記載されたように実施した［３５］。簡潔に述べると、直径１５ｍｍの２０個の大理石を、ダブルサイズのラットケージ内の５ｃｍの深いコーンコブベッドの表面上に、それぞれ４個の大理石の５列を４ｃｍ間隔で置いた。マウスを３０分間ケージ内に放置した。治療について盲目である観察者は、埋められた大理石の数を数えた。サイズの３分の２超が埋まった大理石を数えた。各マウスを処置前及び処置後に１回評価し、データを動物当たりの埋設された大理石のパーセンテージの平均±ＳＥＭとして報告した。クスカル－ウォリス試験、続いてウィルコクソン事後試験を使用して、薬物またはＤＭＳＯで処置したマウスにおける大理石埋設の統計学的有意性を決定した。

統計分析
全ての統計解析をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ，バージョン８．０（ＧｒａｐｈＰａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．）を使用して行った。マウスを伴う実験については、各実験で使用した試料サイズ（ｎ）及び雌：雄の割り当てを図の凡例に示す。細胞株を使用する実験については、独立した生物学的複製物の数が報告される（Ｎ）。データは平均±ＳＥＭとして提示する。２つの群で平均を比較する場合、両側スチューデントｔ検定またはウェルチｔ検定を行った。複数の群における平均を比較するとき、分散の一方向分析（ＡＮＯＶＡ）、続いて、テューキーの多重比較事後試験を行った。アスタリスクまたはポンド記号は、グループ間またはグループ内の実際のｐ値有意性（＊＜０．０５、＊＊＜０．０１、＊＊＊＜０．００１、＊＊＊＜０．０００１）を表し、個々の図の凡例で記述されている。

結果
図１（左パネル及び中央パネル）に示すように、１６時間の処置後、対照と比較して、ＬＤＨの減少及びＭＴＴの増加によってそれぞれ証明されるように、１μＭのＢＫ４１０４３で処置したＢ３５細胞において神経保護効果が観察された。図１（右パネル）は、５時間の処置後、ＬＤＨの減少を介して細胞生存率が段階的に増加し、ＢＫ４０１４３の濃度が減少したことを示す。

図２は、ｐＴａｕ（左パネル）またはα－シヌクレイン（右パネル）で２４時間トランスフェクションし、ＢＫ４１０４３で５時間処理した後のＢ３５細胞の細胞生存率を示す。

Ｂ３５細胞を完全培地で増殖させ、ヒト変異体Ｔａｕ及びα－シヌクレインについて、ＦｕＧｅｎｅＨＤトランスフェクション試薬を製造業者の指示に従って使用してｃＤＮＡでトランスフェクトした。２４時間で、トランスフェクションは、ＥＬＩＳＡを介して、トランスフェクションされていない細胞と比較して、著しく高い量のホスホ－Ｔａｕ及びα－シヌクレインを産生した。図３は、２４時間トランスフェクション後のｐＴａｕ（１８１）のレベルを示し（左パネル）、ＢＫ４１０４３が、ｐＴａｕトランスフェクションしたＢ３５細胞（右パネル）中のｐＴａｕ（１８１）レベルを対照レベルまで戻すことを示す。このことは、実験中に毒性が増加していないことを示すＬＤＨレベルへの変化なしに起こった。図４は、２４時間トランスフェクション後のα－シヌクレインのレベルを示し（左パネル）、ＢＫ４１０４３がα－シヌクレイントランスフェクションＢ３５細胞においてα－シヌクレインを低下させなかったことを示す（右パネル）。

図５は、ＢＫ４０１９７で５時間処理した後のＢ３５細胞の細胞生存率を示す。図６は、ＢＫ４０１４３が、７日間の処置後に、Ｔａｕ発現トランスジェニックマウスにおいてｐＴａｕ（１８１）を低下させることを示す。ＰＴａｕ（１８１）のレベルをＥＬＩＳＡを介して測定した。

図７は、ＢＫ－４０１４３（１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５．０ｍｇ／ｋｇ）での処置が、トランスジェニックマウスにおけるｐＴａｕ（２３１）（ＡＴ１８０）のレベルに影響を及ぼさなかったことを示す。

図８は、ＢＫ－４１０４３による７日間の処置後、１．２５ｍｇ／ｋｇ及び２．５ｍｇ／ｋｇのＴａｕトランスジェニックマウスにおいて、Ｔａｕ（ＨＴ７）が有意に減少したことを示す。

図９は、ＢＫ－４０１４３（１．２５ｍｇ／ｋｇまたは２．５ｍｇ／ｋｇ）での処理が、リン酸化ＤＤＲ１（ｐＭＣＫ１０）の検出によって測定したように、ＤＤＲ１のインビボ阻害をもたらすことを示す。

図１０は、２．５ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのＢＫ－４０１４３で処理した後、ＣａｍＰ３０１ＬマウスにおいてｐＴａｕが減少したことを示す。

図１１に示すように、ＢＫ４０１９６は高濃度でα－シヌクレインを減少させ、ＢＫ４０１９７はα－シヌクレインを減少させない。１ｍＭ及び１００ｕＭのＢＫ４０１９６は、トランスフェクトしたＢ３５細胞におけるα－シヌクレインのレベルを有意に低下させた（図１１Ａ）。ＢＫ４０１９７は、トランスフェクトしたＢ３５細胞においてα－シヌクレインレベルを低下させる能力を一切示さない（図１１Ｂ）。

図１２Ａに示すように、ＢＫ－４０１４３は、ＤＭＳＯで処置した対照Ａ５３Ｔマウスと比較して、Ａ５３Ｔマウスにおいてαシヌクレインを有意に減少させた。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを対照として使用し、検出可能な（Ｎ．Ｄ．）ヒトα－シヌクレインを示さなかった。図１２Ｂは、ＢＫ－４０１４３がドーパミンの全体レベルを有意に増加させる（約３０％）ことを示すが、ＢＫ－４０１４３は、Ａ５３Ｔマウスにおいてドーパミン代謝産物であるホモバニリン酸（ＨＶＡ）のレベルを増加させ、これは、より多くのドーパミンのターンオーバーを示し、より良好なドーパミン神経伝達をもたらし得る。α－シヌクレイン（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，ＭＡ１－１２８７４）についての図１２Ｃ及び１２Ｄに示すイムノブロットは、ＥＬＩＳＡに見られるα－シヌクレインの４０％の低下を反映した。

動物研究はまた、ＢＫ－４０１４３がＡ５３Ｔマウスにおける運動速度を改善したことを示した。Ａ５３Ｔマウスを、６０分間の試験にわたって全体的な運動能についてオープンフィールド試験で試験した。マウスは、移動した総距離または移動に費やした総時間においていかなる差も示さなかったが、ＢＫ－４０１４３処理により、それらの移動速度が著しく増加した（図１３）。これは、ＢＫ後のＨＶＡのレベルの増加によって示されるように、より良好なドーパミン神経伝達の反映であり得る（図１２Ｂ）。

また、ＢＫ４０１４３がＳｒｃまたはＡｂｌではなく、ＤＤＲを選択的に不活性化し、ｒＴＧ４５１０タウオパチーマウスモデルにおいてリン酸化されたタウを低下させることも示された。雄及び雌の３ヶ月齢のｒＴＧ４５３０マウスを、１．２５ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、または５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで７日間連続して腹腔内処置した。活性化（リン酸化）ＤＤＲ１のイムノブロットプローブである図１４Ａは、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３がＤＤＲ１を不活性化したが、５ｍｇ／ｋｇではそうではなかったことを実証する。活性化Ｓｒｃのイムノブロットプローブである図１４Ｂは、ＢＫ－４０１４３がこのチロシンキナーゼに結合しないことを示す。活性化Ａｂｌのイムノブロットプローブである図１４Ｃは、ＢＫ－４０１４３がこのチロスキンキナーゼ、すなわち、ＤＤＲ１に結合しないことを実証する。リン酸化Ｔａｕ（ＡＴ８）のプローブの際、図１４Ｄは、ＢＫ－４０１４３の３回用量全てがリン酸化Ｔａｕのレベルを４１～４９％減少させたことを示す。図１４Ｅに示すように、リン酸化Ｔａｕ（ＡＴ１８１）のＥＬＩＳＡは、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３がリン酸化Ｔａｕを有意に低下させることを明らかにした。

ＢＫ４０１４３はまた、アミロイド、リン酸化ｔａｕ、及び非活性化ＤＤＲ１を有意に低下させた。雄及び雌の７ヶ月齢のＡＰＰマウスを、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３またはＤＭＳＯで２１日間連続して腹腔内で処置した。細胞外アミロイドβを凝集するためのイムノブロット（６Ｅ１０）は、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３がアミロイドβプラークを有意に低下させたことを実証した（図１５Ａ）。リン酸化ＤＤＲ１のプローブは、１．２５ｍｇ／ｋｇ及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３がＤＤＲ１をそれぞれ４０％及び３１％不活性化したことを示した（図１５Ｂ）。活性化（リン酸化Ａｂｌ（２４５））についてのプローブは、ＢＫ４０１４３がＡｂｌと結合しないことを実証した（図１５Ｃ）。図１５Ｄ及び１５Ｅは、ＥＬＩＳＡを介して、１．２５及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ－４０１４３が、可溶性ヒトアミロイド－βを有意に低下させたが、不溶性アミロイド－βを有意に低下させなかったことを示す。また、２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３が、ヒトリン酸化ｔａｕ（Ｓｅｒ３９６）を８０％超有意に低下させることも示される（図１５Ｆ）。

また、ＢＫ４０１４３は、ＡＰＰマウスにおける認知のためのモリス水迷路試験の性能を改善することができることも示されている。ＡＰＰマウスを、処理後のモリス水迷路上で、標的プラットフォームを見つけるそれらの能力について試験した。測定値には、プラットフォームエントリの数（図１６、左パネル）、最初のエントリまでの待ち時間（図１６、中央パネル）、及びプラットフォームへの最初のエントリ前の移動距離（図１６、右パネル）が含まれる。群間で有意差はなかったが、１．２５ｍｇ／ｋｇのＢＫ－４０１４３は、より多くのプラットフォームエントリを伴うパフォーマンスの向上、及び最初のエントリまでのより低い待ち時間及び最初のエントリ前のより低い走行距離の傾向を示す（図１６）。

研究はまた、ＢＫ４０１４３がＡＰＰマウスの海馬において細胞死を引き起こさないことを示した。代表的な２０ｕｍ海馬切片をニッスル物質について染色した。ＤＭＳＯ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、及び２．５ｍｇ／ｋｇのＢＫ４０１４３について４倍及び２０倍の画像を図１７に示す（左パネル）。平均染色強度を、ｉｍａｇｅｊソフトウェアにおいて、全ての４倍の画像におけるニッスル染色の総量として定量化した（図１７、右パネル）。

これらのデータは、式Ｉの化合物、例えば、ＢＫ４１０４３またはＢＫ４０１９７が、神経変性障害、筋変性障害、またはリソソーム蓄積障害を治療または予防するために使用され得ることを示唆する。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
以下の式を有する化合物であって、


式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _６－１０ アリール、または非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _５－１０ ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ ^１ は、－（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ 、－（ＣＨ２） _ｎ －Ｃ（Ｏ）－Ｒ ^２ 、または－Ｏ（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ であり、
Ｒ ^２ は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ _１－３ アルキルアミノ、ジＣ _１－３ アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルアミノ、カルボキシＣ _１－３ アルキルアミノ、Ｃ _３－６ シクロアルキルＣ _１－３ アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペリジニル、ジＣ _１－３ アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペラジニル、Ｃ _１－４ アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ ^３ Ｒ ^４ であり、
Ｒ ^３ 及びＲ ^４ は独立して、Ｈ、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、または非置換フェニルであり、
ｎは０～３から選択される整数である、前記化合物、
またはその異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩。
(項目２)
前記化合物は、１つ以上のハロゲン原子を含まない、項目１に記載の化合物。
(項目３)
Ｙは２－ｍ－トルイルである、項目１に記載の化合物。
(項目４)
Ｚはヘテロシクリルである、項目１に記載の化合物。
(項目５)
Ｚは、モルホリン－１－イルである、項目４に記載の化合物。
(項目６)
前記化合物が、以下の式：


を有する、項目１に記載の化合物。
(項目７)
Ｒ ^３ はＨであり、Ｒ ^４ は非置換フェニルである、項目１に記載の化合物。
(項目８)
前記化合物が、以下の式：


を有する、項目１に記載の化合物。
(項目９)
対象において神経変性疾患、筋変性疾患またはプリオン病を治療または予防する方法であって、中枢神経系の前記神経変性疾患、前記筋変性疾患もしくは前記プリオン病を有するか、または中枢神経系の前記神経変性疾患、前記筋変性疾患もしくは前記プリオン病を発症するリスクがある前記対象に、有効量の以下の式：


を有する化合物であって、
式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _６－１０ アリール、または非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _５－１０ ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ ^１ は、－（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ 、－（ＣＨ２） _ｎ －Ｃ（Ｏ）－Ｒ ^２ 、または－Ｏ（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ であり、
Ｒ ^２ は－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ _１－３ アルキルアミノ、ジＣ _１－３ アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルアミノ、カルボキシＣ _１－３ アルキルアミノ、Ｃ _３－６ シクロアルキルＣ _１－３ アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペリジニル、ジＣ _１－３ アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペラジニル、Ｃ _１－４ アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ ^３ Ｒ ^４ であり、
Ｒ ^３ 及びＲ ^４ は独立して、Ｈ、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、または非置換フェニルであり、
ｎは０～３から選択される整数である、前記化合物、
またはその異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
(項目１０)
前記化合物が以下の式：


を有する、項目９に記載の方法。
(項目１１)
前記化合物が以下の式：


を有する、項目９に記載の方法。
(項目１２)
前記化合物が血液脳関門を通過する、項目９～１１のいずれか１項に記載の方法。
(項目１３)
中枢神経系の前記神経変性疾患は、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、軽度認知障害、α－シヌクレイノパチー、及びタウオパチーからなる群から選択される、項目９～１２のいずれか１項に記載の方法。
(項目１４)
前記化合物は全身投与される、項目９～１３のいずれか１項に記載の方法。
(項目１５)
前記化合物は経口投与される、項目１３に記載の方法。
(項目１６)
前記化合物は、１０ｍｇ／ｋｇ以下の投薬量で投与される、項目９～１５のいずれか１項に記載の方法。
(項目１７)
前記化合物は、５ｍｇ／ｋｇ以下の投薬量で投与される、項目９～１６のいずれかに記載の方法。
(項目１８)
前記化合物は、２．５ｍｇ／ｋｇ以下の投薬量で投与される、項目９～１７のいずれか１項に記載の方法。
(項目１９)
前記化合物は毎日投与される、項目９～１８のいずれか１項に記載の方法。
(項目２０)
前記化合物は薬学的組成物中にある、項目９～１９のいずれか１項に記載の方法。
(項目２１)
前記対象に第２の治療剤を投与することをさらに含む、項目９～２０のいずれか１項に記載の方法。
(項目２２)
前記第２の治療剤が、レボドパ、ドーパミンアゴニスト、抗コリン剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、ＣＯＭＴ阻害剤、アマンタジン、ドネペジル、メマンチン、リスペリドン、リバスチグミン、ＮＭＤＡアンタゴニスト、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、コリンエステラーゼ阻害剤、リルゾール、抗精神病剤、抗うつ剤、及びテトラベナジンからなる群から選択される、項目２１に記載の方法。
(項目２３)
ニューロンにおける毒性タンパク質凝集を阻害または予防する方法であって、前記ニューロンを、以下の式:


を有する化合物であって、
式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _６－１０ アリール、または非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _５－１０ ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ ^１ は、－（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ 、－（ＣＨ２） _ｎ －Ｃ（Ｏ）－Ｒ ^２ 、または－Ｏ（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ であり、
Ｒ ^２ は－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ _１－３ アルキルアミノ、ジＣ _１－３ アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルアミノ、カルボキシＣ _１－３ アルキルアミノ、Ｃ _３－６ シクロアルキルＣ _１－３ アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペリジニル、ジＣ _１－３ アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペラジニル、Ｃ _１－４ アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ ^３ Ｒ ^４ であり、
Ｒ ^３ 及びＲ ^４ は独立して、Ｈ、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、または非置換フェニルであり、
ｎは０～３から選択される整数である、前記化合物、
またはその異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩を含む有効量の組成物と接触させることを含む、前記方法。
(項目２４)
前記化合物は、以下の式：


を有する、項目２３に記載の方法。
(項目２５)
前記化合物は、以下の式：


を有する、項目２３に記載の方法。
(項目２６)
前記タンパク質が、アミロイド生成タンパク質、α－シヌクレイン、タウ、及びＴＤＰ－４３からなる群から選択される、項目２３～２５のいずれか１項に記載の方法。
(項目２７)
前記接触はインビトロで行われる、項目２３～２６のいずれかに記載の方法。
(項目２８)
前記接触はインビボで行われる、項目２３～２６のいずれかに記載の方法。
(項目２９)
対象においてリソソーム蓄積疾患（ＬＳＤ）を治療または予防する方法であって、前記ＬＳＤを有する前記対象に有効量の以下の式：


を有する化合物であって、
式中、
Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
Ｙは、非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _６－１０ アリール、または非置換もしくはＲ ^１ で置換されたＣ _５－１０ ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルであり、
Ｒ ^１ は、－（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ 、－（ＣＨ２） _ｎ －Ｃ（Ｏ）－Ｒ ^２ 、または－Ｏ（ＣＨ _２ ） _ｎ －Ｒ ^２ であり、
Ｒ ^２ は－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ _１－３ アルキルアミノ、ジＣ _１－３ アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルアミノ、カルボキシＣ _１－３ アルキルアミノ、Ｃ _３－６ シクロアルキルＣ _１－３ アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ _１－３ アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペリジニル、ジＣ _１－３ アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ _１－３ アルキルピペラジニル、Ｃ _１－４ アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ ^３ Ｒ ^４ であり、
Ｒ ^３ 及びＲ ^４ は独立して、Ｈ、Ｃ _１－３ アルキル、Ｃ _１－３ アルコキシ、または非置換フェニルであり、
ｎは０～３から選択される整数である、前記化合物、
またはその異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
(項目３０)
前記化合物は以下の式：


を有する、項目２９に記載の方法。
(項目３１)
前記化合物は以下の式：


を有する、項目２９に記載の方法。
(項目３２)
前記リソソーム蓄積疾患が、ハーラー症候群、ハーラー－シャイエ症候群、シャイエ症候群、ハンター症候群、サンフィリポ症候群Ａ、サンフィリポ症候群Ｂ、サンフィリポ症候群Ｃ、サンフィリポ症候群Ｄ、モルキオ症候群Ａ、モルキオ症候群Ｂ、マロトー－ラミー症候群、スライ症候群、ナトビッツ症候群、偽ハーラー多発性ジストロフィー、テイ－サックス、ゴーシェ病、ニーマン－ピック病、フコシドーシス症、ガラクトシアリドーシス症、球様細胞白質ジストロフィー、Ｇ _Ｍ１ ガングリオシドーシス、Ｇ _Ｍ２ ガングリオシドーシス、α－マンノシドーシス、異染性白質ジストロフィー、ニーマン－ピックＡＢ病、及びポンペ病からなる群から選択される、項目２９～３１のいずれか１項に記載の方法。
(項目３３)
前記対象は小児対象である、項目２９～３２のいずれか１項に記載の方法。
(項目３４)
前記有効量の化合物は、前記対象の１つ以上の細胞内の有毒物質凝集を阻害または予防する、項目２９～３３のいずれか１項に記載の方法。
(項目３５)
前記１つ以上の細胞は、脳細胞、前記対象の１つ以上の末梢組織内の細胞、またはそれらの組み合わせである、項目３４に記載の方法。
(項目３６)
前記脳細胞は、ニューロン及び／またはグリア細胞である、項目３５に記載の方法。
(項目３７)
前記有効量は約１０ｍｇ／ｋｇ未満である、項目２９～３６のいずれか１項に記載の方法。
(項目３８)
第２の治療剤または療法を前記対象に投与することをさらに含む、項目２９～３７のいずれかに記載の方法。
(項目３９)
前記第２の治療剤または前記療法は、酵素補充療法、遺伝子療法、造血幹細胞移植、及び小分子からなる群から選択される、項目３８に記載の方法。

Claims (43)

1. 以下の式を有する化合物であって、
   

   

   
   式中、
   Ｘは、ＣＨであり、
   Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
   Ｒ^２は、－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
   Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
   Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
   ｎは０～３から選択される整数である、前記化合物、
   またはその薬学的に許容される塩。
2. 前記化合物は、１つ以上のハロゲン原子を含まない、請求項１に記載の化合物。
3. 前記化合物は、以下の式：
   

   

   
   を有する、請求項１に記載の化合物。
4. Ｚはヘテロシクリルである、請求項１に記載の化合物。
5. Ｚは、モルホリン－１－イルである、請求項４に記載の化合物。
6. 前記化合物が、以下の式：
   
   を有する、請求項１に記載の化合物。
7. Ｒ^３はＨであり、Ｒ^４は非置換フェニルである、請求項１に記載の化合物。
8. 前記化合物が、以下の式：
   
   を有する、請求項１に記載の化合物。
9. 中枢神経系の神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を有するか、または中枢神経系の前記神経変性疾患、前記筋変性疾患もしくは前記プリオン病を発症するリスクがある対象において前記神経変性疾患、前記筋変性疾患または前記プリオン病を治療または予防するための、化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物であって、前記化合物が以下の式：
   

   

   
   を有する化合物であって、
   式中、
   Ｘは、ＣＨであり、
   Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
   Ｒ^２は－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
   Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
   Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
   ｎは０～３から選択される整数である、組成物。
10. 前記化合物が以下の式：
    
    を有する、請求項９に記載の組成物。
11. 前記化合物が以下の式：
    
    を有する、請求項９に記載の組成物。
12. 前記化合物が血液脳関門を通過する、請求項９～１１のいずれか１項に記載の組成物。
13. 中枢神経系の前記神経変性疾患は、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、軽度認知障害、α－シヌクレイノパチー、及びタウオパチーからなる群から選択される、請求項９～１２のいずれか１項に記載の組成物。
14. 前記組成物は全身投与されることを特徴とする、請求項９～１３のいずれか１項に記載の組成物。
15. 前記組成物は経口投与されることを特徴とする、請求項１４に記載の組成物。
16. 前記化合物は、１０ｍｇ／ｋｇ以下の投薬量で投与される、請求項９～１５のいずれか１項に記載の組成物。
17. 前記化合物は、５ｍｇ／ｋｇ以下の投薬量で投与される、請求項９～１６のいずれかに記載の組成物。
18. 前記化合物は、２．５ｍｇ／ｋｇ以下の投薬量で投与される、請求項９～１７のいずれか１項に記載の組成物。
19. 前記組成物は毎日投与されることを特徴とする、請求項９～１８のいずれか１項に記載の組成物。
20. 前記組成物は薬学的組成物である、請求項９～１９のいずれか１項に記載の組成物。
21. 前記組成物は前記対象に第２の治療剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、請求項９～２０のいずれか１項に記載の組成物。
22. 前記第２の治療剤が、レボドパ、ドーパミンアゴニスト、抗コリン剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、ＣＯＭＴ阻害剤、アマンタジン、ドネペジル、メマンチン、リスペリドン、リバスチグミン、ＮＭＤＡアンタゴニスト、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、コリンエステラーゼ阻害剤、リルゾール、抗精神病剤、抗うつ剤、及びテトラベナジンからなる群から選択される、請求項２１に記載の組成物。
23. ニューロンにおける毒性タンパク質凝集を阻害または予防するための、化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物であって、前記組成物が前記ニューロンと接触させることを特徴とし、前記化合物が以下の式:
    
    を有する化合物であって、
    式中、
    Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
    Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルであり、
    Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
    Ｒ^２は－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
    Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
    Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
    ｎは０～３から選択される整数である、組成物。
24. 前記化合物は、以下の式：
    
    を有する、請求項２３に記載の組成物。
25. 前記化合物は、以下の式：
    
    を有する、請求項２３に記載の組成物。
26. 前記タンパク質が、アミロイド生成タンパク質、α－シヌクレイン、タウ、及びＴＤＰ－４３からなる群から選択される、請求項２３～２５のいずれか１項に記載の組成物。
27. 前記接触はインビトロで行われる、請求項２３～２６のいずれかに記載の組成物。
28. 前記接触はインビボで行われる、請求項２３～２６のいずれかに記載の組成物。
29. 対象においてリソソーム蓄積疾患（ＬＳＤ）を治療または予防するための、化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む組成物であって、前記化合物が前記ＬＳＤを有する前記対象に有効量で投与されることを特徴とし、前記化合物が以下の式：
    
    を有する化合物であって、
    式中、
    Ｘは、ＮまたはＣＨであり、
    Ｙは、非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_６－１０アリール、または非置換もしくはＲ^１で置換されたＣ_５－１０ヘテロアリール、またはＮ－メチルピペラジニルであり、
    Ｒ^１は、－（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２、－（ＣＨ２）_ｎ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^２、または－Ｏ（ＣＨ_２）_ｎ－Ｒ^２であり、
    Ｒ^２は－Ｈ、－ＣＮ、ハロゲン、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、フェニル、ピリジニル、アミノ、Ｃ_１－３アルキルアミノ、ジＣ_１－３アルキルアミノ、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルアミノ、カルボキシＣ_１－３アルキルアミノ、Ｃ_３－６シクロアルキルＣ_１－３アルキルアミノ、ピロリジニル、ヒドロキシルピロリジニル、ヒドロキシルＣ_１－３アルキルピロリジニル、カルボキシピロリジニル、ピペリジニル、Ｃ_１－３アルキルピペリジニル、ジＣ_１－３アルキルピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ_１－３アルキルピペラジニル、Ｃ_１－４アルコキシカルボニルピペラジニル、またはモルホリニルであり、
    Ｚはヘテロアリール、ヘテロシクリル、またはＮＲ^３Ｒ^４であり、
    Ｒ^３及びＲ^４は独立して、Ｈ、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、または非置換フェニルであり、
    ｎは０～３から選択される整数である、組成物。
30. 前記化合物は以下の式：
    
    を有する、請求項２９に記載の組成物。
31. 前記化合物は以下の式：
    
    を有する、請求項２９に記載の組成物。
32. 前記リソソーム蓄積疾患が、ハーラー症候群、ハーラー－シャイエ症候群、シャイエ症候群、ハンター症候群、サンフィリポ症候群Ａ、サンフィリポ症候群Ｂ、サンフィリポ症候群Ｃ、サンフィリポ症候群Ｄ、モルキオ症候群Ａ、モルキオ症候群Ｂ、マロトー－ラミー症候群、スライ症候群、ナトビッツ症候群、偽ハーラー多発性ジストロフィー、テイ－サックス、ゴーシェ病、ニーマン－ピック病、フコシドーシス症、ガラクトシアリドーシス症、球様細胞白質ジストロフィー、Ｇ_Ｍ１ガングリオシドーシス、Ｇ_Ｍ２ガングリオシドーシス、α－マンノシドーシス、異染性白質ジストロフィー、ニーマン－ピックＡＢ病、及びポンペ病からなる群から選択される、請求項２９～３１のいずれか１項に記載の組成物。
33. 前記対象は小児対象である、請求項２９～３２のいずれか１項に記載の組成物。
34. 前記有効量の化合物は、前記対象の１つ以上の細胞内の有毒物質凝集を阻害または予防する、請求項２９～３３のいずれか１項に記載の組成物。
35. 前記１つ以上の細胞は、脳細胞、前記対象の１つ以上の末梢組織内の細胞、またはそれらの組み合わせである、請求項３４に記載の組成物。
36. 前記脳細胞は、ニューロン及び／またはグリア細胞である、請求項３５に記載の組成物。
37. 前記有効量は１０ｍｇ／ｋｇ未満である、請求項２９～３６のいずれか１項に記載の組成物。
38. 前記組成物が第２の治療剤または療法と組み合わせて前記対象に投与されることを特徴とする、請求項２９～３７のいずれかに記載の組成物。
39. 前記第２の治療剤または前記療法は、酵素補充療法、遺伝子療法、造血幹細胞移植、及び小分子からなる群から選択される、請求項３８に記載の組成物。
40. 以下の式を有する化合物
    

    

    
    またはその薬学的に許容される塩。
41. 以下の式を有する化合物
    

    

    
    またはその薬学的に許容される塩。
42. 中枢神経系の神経変性疾患、筋変性疾患もしくはプリオン病を有するか、または中枢神経系の前記神経変性疾患、前記筋変性疾患もしくは前記プリオン病を発症するリスクがある対象において前記神経変性疾患、前記筋変性疾患または前記プリオン病を治療または予防するための、請求項４０または４１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、組成物。
43. リソソーム蓄積疾患（ＬＳＤ）を有するか、または前記ＬＳＤを発症するリスクがある対象においてＬＳＤを治療または予防するための、請求項４０または４１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、組成物。