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JP7697678B2 - Body fluid sample collection kit - Google Patents
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Description

本発明は、体液試料の採取用物品及びこれを含むキット、並びに体液中の標的物質の検出方法に関する。The present invention relates to an article for collecting a body fluid sample, a kit including the same, and a method for detecting a target substance in a body fluid.

被験者の健康状態や病状を調べる検査方法として、尿や血液などの体液試料を調べる方法が知られている。例えば、被験者の腎機能を評価する方法として、尿中のクレアチニンや尿素窒素、総蛋白を測定する方法が知られており、被験者の糖尿病、甲状腺機能亢進症、腎性糖尿の可能性を検査する方法として、尿中の糖濃度を測定する方法が知られている。また、近年、患者が病原微生物に感染しているかどうかを、簡便かつ迅速に検査する方法が求められている。例えば、新生児では、先天性疾患の早期発見のために、新生児マススクリーニングによって先天性代謝異常の有無が、新生児聴覚スクリーニングによって聴覚障害の有無が広く検査されている。それらに加え、先天性サイトメガロウイルス（CMV）感染の新生児スクリーニング検査についても、実施を望む声が上がっている。
CMVは、胎児感染を起こし、難聴、精神や運動の発達障害などの後遺症を残す原因となりうる。現在、日本における先天性CMV感染児は年間約3,000人と言われており、また、症候性の先天性CMV感染児に対しては、早期に抗ウイルス薬を投与することで難聴や精神発達の遅れ等を軽減できることが報告されていることから、先天性CMV感染児を早期に発見することが望まれている。
また、生後３週間を超えると、CMVの先天性感染と後天性感染の区別が困難となるため、先天性感染が疑われた場合には生後３週以内の尿を採取し検査を行うことが求められる。また、検出の方法としてウイルス培養同定法や核酸増幅検出検査があるが、その迅速性、簡便性、正確性などの点から核酸増幅検出検査が頻用されている。
このような核酸増幅検出検査として、紙おむつの皮膚に接触する側の表面シートに切れ込みを入れ、表面シートと吸収体との間に濾紙を装着して乳幼児に使用させることにより尿を収集し、濾紙に収集した尿中のDNAを定量する方法が提案されている（特許文献１：特開2008-99622） Methods for examining body fluid samples such as urine and blood are known as methods for examining the health and disease state of a subject. For example, methods for measuring creatinine, urea nitrogen, and total protein in urine are known as methods for evaluating the renal function of a subject, and methods for measuring the glucose concentration in urine are known as methods for testing the possibility of diabetes, hyperthyroidism, and renal glycosuria in a subject. In recent years, there has been a demand for a simple and rapid method for testing whether a patient is infected with a pathogenic microorganism. For example, in newborns, for the early detection of congenital diseases, the presence or absence of congenital metabolic disorders is widely examined by newborn mass screening, and the presence or absence of hearing impairment is examined by newborn hearing screening. In addition, there are calls for the implementation of newborn screening tests for congenital cytomegalovirus (CMV) infection.
CMV can cause fetal infection and leave sequelae such as hearing loss and mental and motor development disorders. Currently, it is said that there are about 3,000 congenitally infected children in Japan each year, and since it has been reported that early administration of antiviral drugs to symptomatic congenital CMV-infected children can alleviate hearing loss and mental developmental delays, early detection of congenital CMV-infected children is desirable.
In addition, once an infant is over three weeks old, it becomes difficult to distinguish between congenital and acquired CMV infection, so if congenital infection is suspected, urine should be collected within three weeks of birth and tested. Detection methods include viral culture identification and nucleic acid amplification and detection tests, and nucleic acid amplification and detection tests are frequently used due to their speed, simplicity, and accuracy.
As such a nucleic acid amplification detection test, a method has been proposed in which a cut is made in the top sheet of a disposable diaper on the side that comes into contact with the skin, filter paper is placed between the top sheet and the absorbent body, and the baby uses the diaper to collect urine, and the DNA in the urine collected on the filter paper is quantified (Patent Document 1: JP 2008-99622 A).

特開2008-99622Patent Publication No. 2008-99622

スクリーニング検査、特に規模の大きなスクリーニング検査においては、多数の検体を扱うことになるため、個々の被験者から簡便に体液試料を採取することが求められる。一方、当該多数の検体には、検出対象（標的物質）について陽性試料と陰性試料とが含まれるため、陽性試料から陰性試料への汚染（コンタミネーション）を簡便に防ぐことが求められており、特に、PCR法などの高感度な方法を利用した定性検査においては、わずかなコンタミネーションでも判定結果が変わってしまうため、それを防ぐことが強く求められる。
特に、新生児の尿を直接採取することは、困難かつ非常に手間がかかる作業であり、これが先天性ＣＭＶ感染の新生児スクリーニング検査が広く実施されていない原因の一つとなっているため、新生児の尿を採取する作業を簡便にするための物品及び方法が求められる。
この点、特許文献１に記載された方法は、紙おむつの皮膚に接触する側の表面シートに切れ込みを入れ、表面シートと吸収体との間に濾紙を装着するものであるが（段落［0033］）、このような作業を実際に多数の被験者のおむつについて行うことは困難かつ非常に手間のかかることである。また、特許文献１に記載された方法では、検体を塗布した濾紙をPCR用チューブに入れるために、当該濾紙から直径3mmのディスクを打ち抜く必要があるが（段落［0037］）、この打ち抜くための機器（パンチャー）を介して陽性試料から陰性試料への汚染、いわゆるキャリーオーバーが生じうる。この場合、陰性試料は偽陽性となる。この汚染を防ぐためには、濾紙を打ち抜くたびにパンチャーを洗浄する必要があるが、この作業を多数の被験試料を検査する度に行うのは現実的ではない。
一方、本発明者は、濾紙と検体とを接触させる前に濾紙をパンチャーで打ち抜き、打ち抜いたものをおむつに装着することで、パンチャーを介した汚染を防ぐことを考案した。しかしながら、そのようにした場合、当該濾紙がおむつにおいて散らばるという新たな課題が生じることを見出した。
このような状況において、（i） 被験者から体液試料を簡便に採取することができること、(ii) 複数の試料間において陽性試料から陰性試料への汚染を簡便に防ぐことができること、及び／又は、(iii) 体液試料中の標的物質を検出するための担体がおむつなどの衛生用品において散らばることを防ぐことができる、体液試料の採取用物品が求められる。 In screening tests, especially large-scale screening tests, a large number of samples are handled, and therefore it is necessary to easily collect bodily fluid samples from individual subjects. On the other hand, since the large number of samples include positive and negative samples for the detection target (target substance), it is necessary to easily prevent contamination of the positive samples with the negative samples. In particular, in qualitative tests using highly sensitive methods such as PCR, even a small amount of contamination can change the judgment result, and it is strongly required to prevent this.
In particular, directly collecting urine from newborns is a difficult and extremely time-consuming task, which is one of the reasons why newborn screening tests for congenital CMV infection are not widely carried out. Therefore, there is a demand for items and methods that simplify the task of collecting urine from newborns.
In this regard, the method described in Patent Document 1 involves making a cut in the top sheet of the disposable diaper that comes into contact with the skin and attaching a filter paper between the top sheet and the absorbent (paragraph [0033]), but it is difficult and very time-consuming to actually carry out such a procedure on the diapers of many subjects. In addition, in the method described in Patent Document 1, in order to insert the filter paper coated with the sample into a PCR tube, it is necessary to punch out a disk with a diameter of 3 mm from the filter paper (paragraph [0037]), but contamination from a positive sample to a negative sample, so-called carryover, may occur through the punching device (puncher). In this case, the negative sample will be a false positive. In order to prevent this contamination, it is necessary to wash the puncher every time the filter paper is punched, but it is not practical to carry out this procedure every time a large number of test samples are tested.
On the other hand, the present inventors have devised a method of preventing contamination via the puncher by punching the filter paper with a puncher before contacting the filter paper with a sample and attaching the punched pieces to a diaper. However, they have found that doing so creates a new problem in that the filter paper is scattered on the diaper.
In such a situation, there is a demand for an article for collecting a bodily fluid sample that (i) allows for easy collection of a bodily fluid sample from a subject, (ii) allows for easy prevention of contamination of positive samples with negative samples among multiple samples, and/or (iii) prevents a carrier for detecting a target substance in the bodily fluid sample from being scattered on a sanitary product such as a diaper.

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、体液試料中の標的物質を検出するための担体が透液性シートに封入された物品を用いることにより、上記(i)～(iii)の課題の少なくとも一つを解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下の通りである。 As a result of intensive research into solving the above problems, the inventors have discovered that at least one of the above problems (i) to (iii) can be solved by using an article in which a carrier for detecting a target substance in a body fluid sample is encapsulated in a liquid-permeable sheet, and have thus completed the present invention.
That is, the present invention is as follows.

［１］体液試料中の標的物質を検出するための標的物質付着性担体が透液性シートに封入された、体液試料の採取用物品。
［２］前記標的物質付着性担体が、紙製担体、布製担体又はポリマービーズである、上記［１］に記載の物品。
［３］体液試料が、尿、唾液、血液、羊水、母乳及び滲出液からなる群から選択される体液を含む試料である、上記［１］又は［２］に記載の物品。
［４］上記［１］～［３］のいずれかに記載の物品及び外装を含む、体液試料の採取用デバイス。
［５］上記［１］～［３］のいずれかに記載の物品及び外装を含む、体液試料の採取用キット。
［６］乾燥用ケースをさらに含む、上記［５］に記載の体液試料の採取用キット。
［７］上記［１］～［３］のいずれかに記載の物品又は上記［４］に記載の採取用デバイスを備える吸収性衛生用品。
［８］以下の工程を含む、体液中の標的物質の検出方法。
(a) 標的物質付着性担体を準備する工程、
(b) 透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程、
(c) 工程(b)で得られた、標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品と、体液試料とを接触させる工程
(d) 前記担体に付着した標的物質を検出する工程
［９］体液試料中の標的核酸を検出するための核酸付着性担体が透液性シートに封入された、体液試料の採取用物品。
［１０］前記核酸付着性担体が、紙製担体、布製担体又はポリマービーズである、上記［９］に記載の物品。
［１１］前記標的核酸が微生物由来のものである、上記［９］又は［１０］に記載の物品。
［１２］微生物がウイルス、細菌又は原虫である、上記［１１］に記載の物品
［１３］ウイルスがヘルペスウイルスである、上記［１２］に記載の物品。
［１４］体液試料が、尿、唾液、血液、羊水、母乳及び滲出液からなる群から選択される体液を含む試料である、上記［９］～［１３］のいずれかに記載の物品。
［１５］上記［９］～［１４］のいずれかに記載の物品及び外装を含む、体液試料の採取用デバイス。
［１６］上記［９］～［１４］のいずれかに記載の物品及び外装を含む、体液試料の採取用キット。
［１７］乾燥用ケースをさらに含む、上記［１６］に記載の体液試料の採取用キット。
［１８］上記［９］～［１４］のいずれかに記載の物品又は上記［１５］に記載の採取用デバイスを備える吸収性衛生用品。
［１９］以下の工程を含む、体液中の標的核酸の検出方法。
(a) 核酸付着性担体を準備する工程、
(b) 透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程、
(c) 工程(b)で得られた、核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品と、体液試料とを接触させる工程、
(d) 体液試料と接触した前記物品から、核酸付着性担体を取り出す工程、及び
(e) 工程(d)で取り出した核酸付着性担体を核酸増幅用容器に入れ、核酸増幅反応により標的核酸を検出する工程
［２０］工程(a)が、核酸付着性担体を核酸増幅用容器に格納可能な形態に加工する工程をさらに含む、上記［１９］に記載の方法。
［２１］工程(c)が、前記物品を吸収性衛生用品に配置する工程をさらに含む、上記［１９］又は［２０］に記載の方法。[1] An article for collecting a body fluid sample, in which a target substance-adherent carrier for detecting a target substance in a body fluid sample is enclosed in a liquid-permeable sheet.
[2] The article according to the above [1], wherein the target substance-adhering carrier is a paper carrier, a cloth carrier or a polymer bead.
[3] The article according to [1] or [2] above, wherein the body fluid sample is a sample containing a body fluid selected from the group consisting of urine, saliva, blood, amniotic fluid, breast milk and exudate.
[4] A device for collecting a body fluid sample, comprising the article according to any one of [1] to [3] above and an exterior.
[5] A kit for collecting a body fluid sample, comprising the article according to any one of [1] to [3] above and an outer packaging.
[6] The kit for collecting a body fluid sample described in [5] above, further comprising a drying case.
[7] An absorbent sanitary product comprising the article according to any one of [1] to [3] above or the collection device according to [4] above.
[8] A method for detecting a target substance in a body fluid, comprising the steps of:
(a) preparing a target substance-attachable carrier;
(b) processing a liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet;
(c) a step of contacting the article obtained in step (b), in which the target substance-adherent carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet, with a body fluid sample.
(d) A step of detecting a target substance attached to the carrier [9] An article for collecting a body fluid sample, in which a nucleic acid-attachable carrier for detecting a target nucleic acid in a body fluid sample is enclosed in a liquid-permeable sheet.
[10] The article described in [9] above, wherein the nucleic acid-adhering carrier is a paper carrier, a cloth carrier, or a polymer bead.
[11] The article according to [9] or [10] above, wherein the target nucleic acid is derived from a microorganism.
[12] The article according to [11] above, wherein the microorganism is a virus, a bacterium or a protozoan. [13] The article according to [12] above, wherein the virus is a herpes virus.
[14] The article according to any one of the above [9] to [13], wherein the body fluid sample is a sample containing a body fluid selected from the group consisting of urine, saliva, blood, amniotic fluid, breast milk, and exudate.
[15] A device for collecting a body fluid sample, comprising the article according to any one of [9] to [14] above and an exterior.
[16] A kit for collecting a body fluid sample, comprising the article according to any one of [9] to [14] above and an outer packaging.
[17] The kit for collecting a body fluid sample described in [16] above, further comprising a drying case.
[18] An absorbent sanitary product comprising the article according to any one of [9] to [14] above or the collection device according to [15] above.
[19] A method for detecting a target nucleic acid in a body fluid, comprising the steps of:
(a) preparing a nucleic acid-attaching carrier;
(b) processing a liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet;
(c) contacting the article obtained in step (b), in which the nucleic acid-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet, with a body fluid sample;
(d) removing the nucleic acid-attached carrier from the article that has been in contact with the body fluid sample; and
(e) placing the nucleic acid-adhering carrier removed in step (d) into a container for nucleic acid amplification and detecting the target nucleic acid by a nucleic acid amplification reaction [20] The method according to the above-mentioned [19], wherein step (a) further comprises a step of processing the nucleic acid-adhering carrier into a form that can be stored in the container for nucleic acid amplification.
[21] The method according to [19] or [20] above, wherein step (c) further comprises placing the article in an absorbent sanitary product.

本発明により、従来技術と比較して、被験者から体液試料を簡便に採取することができ、陽性試料から陰性試料への汚染を簡便に防ぐことができ、かつ／又は体液試料中の標的物質を検出するための担体がおむつなどの吸収性衛生用品において散らばることを防ぐことができる。Compared to the prior art, the present invention makes it possible to easily collect a bodily fluid sample from a subject, easily prevent contamination of a positive sample with a negative sample, and/or prevent a carrier for detecting a target substance in a bodily fluid sample from being scattered in an absorbent sanitary product such as a diaper.

本発明の体液試料の採取用物品の一例を示す斜視図である。FIG. 1 is a perspective view showing an example of an article for collecting a body fluid sample of the present invention. 本発明の体液試料の採取用物品の一例を示す斜視図である。FIG. 1 is a perspective view showing an example of an article for collecting a body fluid sample of the present invention. CMV含有試料と接触させた担体を含む試料において、CMVの標的核酸を検出した結果を示す図である。FIG. 1 shows the results of detecting a CMV target nucleic acid in a sample containing a carrier that has been contacted with a CMV-containing sample. 濾紙等を加工する機器を介して陽性試料から陰性試料への汚染が生じ、その結果陰性試料においても偽陽性が生じうることを示す図である。This figure shows that contamination of a positive sample with a negative sample can occur through equipment that processes filter paper, etc., resulting in false positives even in negative samples. 本発明の体液試料の採取用物品の一例を示す斜視図である。FIG. 1 is a perspective view showing an example of an article for collecting a body fluid sample of the present invention. 本発明の体液試料の採取用物品及び外装を含む、体液試料の採取用デバイスの一例を示す図である。a： 外装の表面に体液試料の採取用物品を設置した状態を示す図である。b: 体液試料の採取用物品が外装に覆われた状態を示す図である。1 is a diagram showing an example of a device for collecting a body fluid sample, including an article for collecting a body fluid sample of the present invention and an exterior packaging, in which: a: a diagram showing a state in which the article for collecting a body fluid sample is placed on the surface of the exterior packaging, and b: a diagram showing a state in which the article for collecting a body fluid sample is covered by the exterior packaging. 有機化合物付着性担体からの抽出液におけるクレアチニン（CRE）を検出した結果を示す図である。FIG. 13 shows the results of detecting creatinine (CRE) in an extract from an organic compound-adhering carrier. 有機化合物付着性担体からの抽出液における尿素窒素（UN）を検出した結果を示す図である。FIG. 1 shows the results of detecting urea nitrogen (UN) in an extract from an organic compound-adhering carrier.

以下、本発明を詳細に説明する。以下の実施の形態は、本発明を説明するための例示であり、本発明をこの実施の形態のみに限定する趣旨ではない。本発明は、その要旨を逸脱しない限り、様々な形態で実施をすることができる。また、本明細書は、本願優先権主張の基礎となる2019年11月28日に出願された日本国特許出願（特願2019-215227号）の明細書及び図面に記載の内容を包含する。The present invention will be described in detail below. The following embodiments are examples for explaining the present invention, and are not intended to limit the present invention to these embodiments. The present invention can be implemented in various forms without departing from the gist of the present invention. This specification also includes the contents described in the specification and drawings of the Japanese patent application (Patent Application No. 2019-215227) filed on November 28, 2019, which is the basis for the priority claim of this application.

１．概要
スクリーニング検査、特に規模の大きなスクリーニング検査においては、多数の検体を迅速に検査する必要があるため、個々の被験者から簡便に体液試料を採取することが求められる。一方、当該多数の検体には、検出対象（標的物質）について陽性試料と陰性試料とが含まれるため、陽性試料から陰性試料への汚染（コンタミネーション）を簡便に防ぐことが求められており、特に、PCR法などの高感度な方法を利用した定性検査においては、わずかなコンタミネーションでも判定結果が変わってしまうため、それを防ぐことが強く求められる。
特に、新生児の尿を直接採取することは非常に手間がかかる作業であるため、新生児の尿を採取する作業を簡便にするための物品及び方法が求められる。
この点、特許文献１（特開2008-99622）に記載された方法は、紙おむつの皮膚に接触する側の表面シートに切れ込みを入れ、表面シートと吸収体との間に濾紙を装着するものであるが（段落［0033］）、このような作業を実際に多数の被験者のおむつについて行うことは容易ではなく、また非常に手間のかかることである。また、特許文献１に記載された方法では、検体を塗布した濾紙を、PCR用チューブに入れるために当該濾紙から直径3mmのディスクを打ち抜く必要があるが（段落［0037］）、この打ち抜くための機器（パンチャー）を介して、陽性試料から陰性試料への汚染が生じうる。この場合、陰性試料は偽陽性となる。この汚染を防ぐためには、濾紙を打ち抜くたびにパンチャーを洗浄する必要があるが、この作業を多数の被験試料について行うのは現実的ではない。
これに対し、本発明者は、濾紙と検体とを接触させる前に濾紙をパンチャーで打ち抜き、打ち抜いたものをおむつに装着することで、パンチャーを介した汚染を防ぐことを考案した。しかしながら、このようにした場合、当該濾紙がおむつにおいて散らばり、その結果、濾紙が被験者の体内に入ったり、試料を採取する上で適切な位置以外の場所に移動するなどして、体液試料を良好に採取できない可能性があることがわかった。これらの課題は本発明者らが見出した新たな課題である。
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、体液試料中の標的物質を検出するための担体が透液性シートに封入された物品を用いることにより、（i） 被験者から体液試料を簡便に採取することができること、(ii) 複数の試料間において陽性試料から陰性試料への汚染を簡便に防ぐことができること、及び／又は、(iii) 体液試料中の標的物質を検出するための担体がおむつなどの衛生用品において散らばることを防ぐことができることを見出した。
本発明はこのような知見に基づき発明されたものである。1. Overview
In screening tests, especially large-scale screening tests, it is necessary to test a large number of samples quickly, and therefore it is necessary to easily collect bodily fluid samples from individual subjects. On the other hand, since the large number of samples include positive and negative samples for the detection target (target substance), it is necessary to easily prevent contamination of the positive samples with the negative samples. In particular, in qualitative tests using highly sensitive methods such as PCR, even a small amount of contamination can change the judgment result, so it is strongly required to prevent this.
In particular, since directly collecting urine from a newborn is a very time-consuming task, there is a demand for items and methods that simplify the task of collecting urine from a newborn.
In this regard, the method described in Patent Document 1 (JP Patent Publication 2008-99622) involves making a cut in the top sheet of the disposable diaper on the side that comes into contact with the skin and attaching a filter paper between the top sheet and the absorbent (paragraph [0033]), but it is not easy to actually perform such a procedure on the diapers of many subjects, and it is very time-consuming. In addition, in the method described in Patent Document 1, it is necessary to punch out a disk with a diameter of 3 mm from the filter paper to which the sample has been applied in order to place the filter paper in a PCR tube (paragraph [0037]), but contamination of the positive sample with the negative sample may occur through the punching device (puncher). In this case, the negative sample will be a false positive. In order to prevent this contamination, it is necessary to wash the puncher every time the filter paper is punched, but it is not practical to perform this procedure for many test samples.
In response to this, the present inventors have devised a method of preventing contamination via the puncher by punching the filter paper with a puncher before contacting the filter paper with the specimen and attaching the punched pieces to a diaper. However, in this case, it was found that the filter paper is scattered in the diaper, and as a result, the filter paper may enter the subject's body or move to a position other than the appropriate position for collecting the sample, making it difficult to collect the body fluid sample. These problems are new problems that the present inventors have discovered.
The inventors have conducted intensive research to solve the above-mentioned problems, and have found that by using an article in which a carrier for detecting a target substance in a body fluid sample is encapsulated in a liquid-permeable sheet, (i) a body fluid sample can be easily collected from a subject, (ii) contamination of a positive sample with a negative sample among multiple samples can be easily prevented, and/or (iii) the carrier for detecting a target substance in a body fluid sample can be prevented from scattering in hygiene products such as diapers.
The present invention was made based on these findings.

２．標的物質
本発明において、「標的物質」とは、体液中に含まれる物質のうち、検出又は定量の対象となる物質を意味する。本発明において、本発明の標的物質付着性担体に付着可能な物質は、検出対象とすることができるため、標的物質であり得る。すなわち、本発明において、標的物質は、本発明の標的物質付着性担体に付着可能な物質であれば限定されるものではなく、例えば、核酸、タンパク質、有機化合物、糖類、無機化合物、細胞成分などが挙げられ、好ましくは、核酸、タンパク質、有機化合物、糖類、無機化合物である。2. target substance
In the present invention, the term "target substance" refers to a substance contained in a body fluid that is the subject of detection or quantification. In the present invention, a substance that can be attached to the target substance-adherent carrier of the present invention can be a detection target, and therefore can be a target substance. That is, in the present invention, the target substance is not limited as long as it is a substance that can be attached to the target substance-adherent carrier of the present invention, and examples of the target substance include nucleic acids, proteins, organic compounds, sugars, inorganic compounds, and cell components, and preferably nucleic acids, proteins, organic compounds, sugars, and inorganic compounds.

本発明において、「標的核酸」とは、増幅又は検出若しくは定量の対象となる核酸をいう。標的核酸は、検出又は定量の目的に応じて適宜選択することができるが、微生物由来のDNA又はRNAであることが好ましい。DNAには、全DNA、cDNA、ゲノムDNAおよび合成DNAが含まれる。RNAには、mRNA、rRNA、ゲノムRNA及び合成RNAが含まれる（標的核酸が由来する微生物については「３．（２）核酸付着性担体」において後述する）。
本発明において、標的核酸は、PCR法などの公知の核酸増幅法を用いて検出又は定量することができる。 In the present invention, the term "target nucleic acid" refers to a nucleic acid to be amplified, detected, or quantified. The target nucleic acid can be appropriately selected depending on the purpose of detection or quantification, but is preferably DNA or RNA derived from a microorganism. DNA includes total DNA, cDNA, genomic DNA, and synthetic DNA. RNA includes mRNA, rRNA, genomic RNA, and synthetic RNA (the microorganisms from which the target nucleic acid is derived will be described later in "3. (2) Nucleic acid-attaching carriers").
In the present invention, the target nucleic acid can be detected or quantified using a known nucleic acid amplification method such as the PCR method.

本発明において、「標的タンパク質」とは、検出又は定量の対象となるタンパク質をいう。本発明において、標的タンパク質は、本発明の標的物質付着性担体に付着可能なものであれば限定されるものではなく、例えば、体液試料中の総蛋白（TP）、アルブミン、ヘモグロビンなどが挙げられる。
本発明において、標的タンパク質は、公知の反応試薬、試験紙、測定機器などを用いて検出又は定量することができる。 In the present invention, the term "target protein" refers to a protein to be detected or quantified. In the present invention, the target protein is not limited as long as it can be attached to the target substance-attaching carrier of the present invention, and examples of the target protein include total protein (TP), albumin, hemoglobin, etc. in a body fluid sample.
In the present invention, the target protein can be detected or quantified using known reaction reagents, test papers, measuring instruments, and the like.

本発明において、「標的有機化合物」とは、標的核酸及び標的糖類以外の有機化合物であり、検出又は定量の対象となる有機化合物をいう。標的有機化合物には、タンパク質の代謝物が含まれる。本発明において、標的有機化合物は、本発明の標的物質付着性担体に付着可能なものであれば限定されるものではなく、例えば、クレアチニン（Cr）、尿素（尿素窒素（UN））、尿酸（UA）、ビリルビン、ケトン体、ウロビリノーゲン、アミノ酸、アシルカルニチンなどが挙げられる。In the present invention, the term "target organic compound" refers to an organic compound other than a target nucleic acid and a target sugar, which is an organic compound to be detected or quantified. Target organic compounds include protein metabolites. In the present invention, the target organic compound is not limited as long as it can be attached to the target substance-attaching carrier of the present invention, and examples thereof include creatinine (Cr), urea (urea nitrogen (UN)), uric acid (UA), bilirubin, ketone bodies, urobilinogen, amino acids, and acylcarnitines.

本発明において、「標的糖類」とは、検出又は定量の対象となる糖類をいう。本発明において、標的糖類は、本発明の標的物質付着性担体に付着可能なものであれば限定されるものではなく、例えば、糖（ブドウ糖（Glu））などが挙げられる。In the present invention, the term "target saccharide" refers to a saccharide to be detected or quantified. In the present invention, the target saccharide is not limited as long as it can be attached to the target substance-attaching carrier of the present invention, and examples thereof include sugar (glucose (Glu)).

本発明において、「標的無機化合物」とは、検出又は定量の対象となる無機化合物をいう。標的無機化合物（イオンを含む）は、本発明の標的物質付着性担体に付着可能なものであれば限定されるものではなく、例えば、水素イオン（pH）、亜硝酸塩、アンモニア、ナトリウム、カリウム、塩素、カルシウム、無機リン、鉄、マグネシウムなどが挙げられる。In the present invention, the term "target inorganic compound" refers to an inorganic compound to be detected or quantified. The target inorganic compound (including ions) is not limited as long as it can be attached to the target substance-attaching carrier of the present invention, and examples thereof include hydrogen ions (pH), nitrite, ammonia, sodium, potassium, chlorine, calcium, inorganic phosphorus, iron, and magnesium.

本発明において、標的有機化合物、標的糖類及び標的無機化合物は、公知の反応試薬、試験紙、測定機器などを用いて検出又は定量することができる。In the present invention, the target organic compounds, target sugars, and target inorganic compounds can be detected or quantified using known reaction reagents, test papers, measuring instruments, and the like.

本発明において、「標的細胞成分」とは、検出又は定量の対象となる細胞又はその成分をいう。本発明において、標的細胞成分は、本発明の標的物質付着性担体に付着可能なものであれば限定されるものではなく、例えば、赤血球、白血球などが挙げられる。
本発明において、標的細胞成分は、公知の試験紙、測定機器などを用いて検出又は定量することができる。 In the present invention, the term "target cell component" refers to a cell or a component thereof to be detected or quantified. In the present invention, the target cell component is not limited as long as it can adhere to the target substance-adhering carrier of the present invention, and examples of the target cell component include red blood cells, white blood cells, etc.
In the present invention, target cell components can be detected or quantified using known test papers, measuring instruments, and the like.

本発明において、体液試料が尿試料である場合、標的物質としては、限定されるものではなく、例えば、核酸、総蛋白（TP）、アルブミン、クレアチニン（Cr）、尿素（尿素窒素（UN））、尿酸（UA）、ビリルビン、ケトン体、ウロビリノーゲン、糖、水素イオン（pH）、亜硝酸塩、ヘモグロビン、赤血球、白血球などが挙げられる。In the present invention, when the body fluid sample is a urine sample, the target substances include, but are not limited to, nucleic acids, total protein (TP), albumin, creatinine (Cr), urea (urea nitrogen (UN)), uric acid (UA), bilirubin, ketone bodies, urobilinogen, sugar, hydrogen ions (pH), nitrite, hemoglobin, red blood cells, and white blood cells.

本発明において、体液試料が血液試料である場合、標的物質としては、限定されるものではなく、例えば、核酸、アミノ酸、アシルカルニチンなどが挙げられる。In the present invention, when the body fluid sample is a blood sample, the target substance is not limited, and examples thereof include nucleic acids, amino acids, and acylcarnitines.

本発明において、体液試料が、唾液、羊水、滲出液及びその他の体液試料の場合、標的物質としては、例えば、核酸が挙げられる。
本発明において、体液試料が母乳の試料の場合、標的物質としては、例えば、核酸などが挙げられる。
上記で標的物質として例示した「核酸」の具体例については、「３．（２）核酸付着性担体」において後述する。 In the present invention, when the body fluid sample is saliva, amniotic fluid, exudate, or other body fluid sample, the target substance may be, for example, a nucleic acid.
In the present invention, when the body fluid sample is a breast milk sample, examples of the target substance include nucleic acids.
Specific examples of the "nucleic acid" exemplified above as the target substance will be described later in "3. (2) Nucleic acid-adhering carrier."

３．標的物質付着性担体
（１）標的物質付着性担体
本発明において、「標的物質付着性担体」（以下、「担体」ともいう）とは、標的物質が付着することができる性質を有する担体を意味する。本発明において、標的物質付着性担体は、標的物質が付着することができるものであれば限定されるものではなく、そのような担体としては、例えば、紙製担体、布製担体、ポリマービーズなどが挙げられる。紙製担体としては、例えば、濾紙、各種試験紙などが挙げられ、布製担体としては濾布が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明において、「試験紙」とは、当該試験紙が標的物質と接触した場合に、標的物質と接触する前の試験紙又は標的物質と接触していない試験紙と比較して、色が変化する紙をいう。試験紙は、市販されているものを使用することができ、当業者であれば、標的物質の種類に応じて適宜選択することができる。例えば、標的物質が尿中の糖である場合は、尿糖試験紙を選択することができ、標的物質が尿中のタンパク質である場合は尿蛋白試験紙を選択することができる。また、標的物質付着性担体としては、例えば、糖、タンパク質、アルブミン、クレアチニン（Cr）、水素イオン（pH）、ヘモグロビン、赤血球、ケトン体、ビリルビン、ウロビリノーゲン、亜硝酸塩、白血球などの各種標的物質を一度に検出することができる試験紙を用いることができる。さらに、このような試験紙から各種標的物質に対する試験紙部分を切り取り、切り取った試験紙を標的物質付着性担体として使用することができる。
本発明において、試験紙としては、例えば、糖検出用試験紙、タンパク質検出用試験紙、アルブミン検出用試験紙、クレアチニン検出用試験紙、pH試験紙、潜血検出用試験紙、ケトン体検出用試験紙、ビリルビン検出用試験紙、ウロビリノーゲン検出用試験紙、亜硝酸塩検出用試験紙、白血球検出用試験紙などが挙げられるが、これらに限定されない。3. Target substance adhesive carrier
(1) Target substance adhesive carrier
In the present invention, a "target substance-adherent carrier" (hereinafter also referred to as a "carrier") means a carrier having the property of being able to adhere to a target substance. In the present invention, the target substance-adherent carrier is not limited as long as the target substance can be attached to it, and examples of such carriers include paper carriers, cloth carriers, polymer beads, etc. Examples of paper carriers include filter paper and various test papers, and examples of cloth carriers include, but are not limited to, filter cloth.
In the present invention, the term "test paper" refers to a paper that changes color when the test paper comes into contact with a target substance, compared to the test paper before contacting the target substance or the test paper that has not come into contact with the target substance. The test paper can be commercially available, and a person skilled in the art can select the test paper appropriately according to the type of the target substance. For example, if the target substance is sugar in urine, a urine sugar test paper can be selected, and if the target substance is protein in urine, a urine protein test paper can be selected. In addition, as the target substance-adhering carrier, for example, a test paper that can detect various target substances such as sugar, protein, albumin, creatinine (Cr), hydrogen ion (pH), hemoglobin, red blood cells, ketone bodies, bilirubin, urobilinogen, nitrite, and white blood cells at once can be used. Furthermore, the test paper portion corresponding to various target substances can be cut out from such a test paper, and the cut test paper can be used as the target substance-adhering carrier.
In the present invention, examples of test papers include, but are not limited to, sugar detection test papers, protein detection test papers, albumin detection test papers, creatinine detection test papers, pH test papers, occult blood detection test papers, ketone body detection test papers, bilirubin detection test papers, urobilinogen detection test papers, nitrite detection test papers, and white blood cell detection test papers.

本発明において、標的物質付着性担体は、体液試料中の標的物質を検出するために使用される。
本発明において、「体液試料」とは、生体由来の体液を含む試料をいい、また、「体液」としては、例えば、尿、唾液、羊水、母乳、血液（全血、血清、血漿）、滲出液、髄液、滑液、腹水、胸水、耳漏、鼻汁、膿、胆汁、喀痰、汗、その他細胞又は組織の粉砕液などが挙げられる。体液としては、尿、唾液、羊水、母乳、全血、並びに滲出液からなる群から選択されるものが好ましく、尿、唾液、羊水、母乳及び滲出液からなる群から選択されるものがより好ましい。ここで、滲出液は、傷口や病変部位（例えば梅毒病変部位）からしみ出る体液をいう。体液試料は、細胞を含有するものであってもよい。本発明において、生体としては、動物個体、動物組織、動物細胞（培養細胞を含む）などが含まれる。動物としては、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウマ、イヌ、ヒツジ、ウサギ、ウシ、ブタ、アカゲザル、コモンマーモセット、ニワトリなどが挙げられるが、好ましくはヒト、マウス、ラットであり、より好ましくはヒトである。 In the present invention, the target substance-adherent carrier is used to detect a target substance in a body fluid sample.
In the present invention, the term "body fluid sample" refers to a sample containing body fluid derived from a living body, and examples of the "body fluid" include urine, saliva, amniotic fluid, breast milk, blood (whole blood, serum, plasma), exudate, cerebrospinal fluid, synovial fluid, ascites, pleural fluid, otorrhea, nasal discharge, pus, bile, sputum, sweat, and other crushed liquids of cells or tissues. The body fluid is preferably selected from the group consisting of urine, saliva, amniotic fluid, breast milk, whole blood, and exudate, and more preferably selected from the group consisting of urine, saliva, amniotic fluid, breast milk, and exudate. Here, the exudate refers to a body fluid that seeps out from a wound or a lesion (for example, a syphilis lesion). The body fluid sample may contain cells. In the present invention, the living body includes an animal individual, an animal tissue, an animal cell (including cultured cell), and the like. Examples of animals include humans, mice, rats, horses, dogs, sheep, rabbits, cows, pigs, rhesus monkeys, common marmosets, chickens, etc., with humans, mice, and rats being preferred, and humans being more preferred.

また、ヒト由来の体液試料の場合、対象となるヒトの年齢（月齢、日齢を含む）は限定されるものではなく、検出の目的に応じて胎児期から120歳までの範囲で適宜選択することができる。例えば、先天性サイトメガロウイルス感染症を診断又は検出する場合には、胎児期から生後21日以内の範囲で選択され、後天性サイトメガロウイルス感染症においては先天性サイトメガロウイルス感染が否定された児に対して、生後約 1ヶ月以降にウイルスを検出することが求められ、免疫不全のヒトにおけるサイトメガロウイルス感染を検出又は診断する場合には、年齢は限定されない。In the case of body fluid samples derived from humans, the age of the subject human (including age in months and days) is not limited, and can be appropriately selected within the range of fetal period to 120 years old depending on the purpose of detection. For example, when diagnosing or detecting congenital cytomegalovirus infection, the age is selected within the range of fetal period to within 21 days after birth, and in the case of acquired cytomegalovirus infection, it is required to detect the virus from about one month after birth in infants in which congenital cytomegalovirus infection has been ruled out, and when detecting or detecting cytomegalovirus infection in immunodeficient humans, there is no age limit.

本発明において、標的物質付着性担体の形態は、標的物質の検出方法に応じて任意に選択することができる。例えば、尿中の糖を検出する方法において、標的物質付着性担体として尿糖試験紙を用いる場合、標的物質付着性担体の形態は、本発明の透液性シートに封入することができる形態（形状、大きさ）である限り、限定されない。また、尿中の有機化合物を反応試薬を用いて検出する方法において、標的物質付着性担体として濾紙を用いる場合、標的物質付着性担体の形態は、標的物質を試薬との反応に供試することができる形態である限り、限定されない。そのような形態としては、例えば、反応用容器に格納可能な形態（例えば、形状、大きさ）が挙げられる。
本発明において、「反応用容器」は、標的物質と試薬との反応に用いられる通常の容器を意味し、例えば、通常実験に用いられる、チューブ、バイアル、プレートなどが挙げられる。これらの反応用容器の孔径は、通常20mm以下であるため、反応用容器に格納可能な形態としては、最長辺又は直径が約20.0mm以下である形態が好ましい。また、操作性の観点から、反応用容器に格納可能な形態としては、最長辺又は直径が約0.1mm以上の形態が好ましい。すなわち、本発明において、反応用容器に格納可能な形態としては、最長辺又は直径が、例えば、約0.1～20.0 mm、約0.1～15.0 mm、約0.1～10.0 mm、約0.1～8.0 mm、約0.1～7.0 mm、約0.1～6.0 mm、約0.1～5.0 mm、約0.5～20.0 mm、約0.5～15.0 mm、約0.5～10.0 mm、約0.5～8.0 mm、約0.5～7.0 mm、約0.5～6.0 mm、約0.5～5.0 mm、約1.0～20.0 mm、約1.0～15.0 mm、約1.0～10.0 mm、約1.0～8.0 mm、約1.0～7.0 mm、約1.0～6.0 mm、約1.0～5.0 mm、約1.0～4.0 mm、約2.0～10.0 mm、約2.0～8.0 mm、約2.0～7.0 mm、約2.0～6.0 mm、約2.0～5.0 mm、約2.0～4.0 mm又は約3.0～4.0 mmである、形態が挙げられる。
本発明において、反応用容器に格納可能な「形態」は、反応用容器に入れることができ、かつ当該容器の蓋を閉じることができる形態である限り限定されるものではなく、例えば、円盤（ディスク）状、板状、球状、立方体状、直方体状のものが挙げられる。
本発明において、反応用容器には、核酸増幅用容器が含まれる。 In the present invention, the form of the target substance-adherent carrier can be arbitrarily selected according to the detection method of the target substance. For example, in a method for detecting sugar in urine, when a urine sugar test paper is used as the target substance-adherent carrier, the form of the target substance-adherent carrier is not limited as long as it is a form (shape, size) that can be enclosed in the liquid-permeable sheet of the present invention. In addition, in a method for detecting organic compounds in urine using a reaction reagent, when a filter paper is used as the target substance-adherent carrier, the form of the target substance-adherent carrier is not limited as long as it is a form that can be subjected to a reaction with the reagent. Such a form can be, for example, a form (e.g., shape, size) that can be stored in a reaction vessel.
In the present invention, the term "reaction vessel" refers to a typical vessel used for the reaction between a target substance and a reagent, and includes, for example, tubes, vials, plates, and the like that are typically used in experiments. Since the hole diameter of these reaction vessels is typically 20 mm or less, the shape that can be stored in the reaction vessel is preferably a shape with a longest side or diameter of about 20.0 mm or less. In addition, from the viewpoint of operability, the shape that can be stored in the reaction vessel is preferably a shape with a longest side or diameter of about 0.1 mm or more. That is, in the present invention, the form that can be stored in the reaction vessel includes, for example, a longest side or diameter of about 0.1 to 20.0 mm, about 0.1 to 15.0 mm, about 0.1 to 10.0 mm, about 0.1 to 8.0 mm, about 0.1 to 7.0 mm, about 0.1 to 6.0 mm, about 0.1 to 5.0 mm, about 0.5 to 20.0 mm, about 0.5 to 15.0 mm, about 0.5 to 10.0 mm, about 0.5 to 8.0 mm, about 0.5 to 7.0 mm, about 0.5 to 6.0 mm, about 0.5 to 5.0 mm, about 1.0 to 20.0 mm, about 1.0 to 15.0 mm, about 1.0 to 10.0 mm, about 1.0 to 8.0 mm, about 1.0 to 7.0 mm, about 1.0 to 6.0 mm, about 1.0 to 5.0 0 mm, about 1.0 to 4.0 mm, about 2.0 to 10.0 mm, about 2.0 to 8.0 mm, about 2.0 to 7.0 mm, about 2.0 to 6.0 mm, about 2.0 to 5.0 mm, about 2.0 to 4.0 mm, or about 3.0 to 4.0 mm.
In the present invention, the "shape" that can be stored in a reaction vessel is not limited as long as it is a shape that can be placed in the reaction vessel and the lid of the vessel can be closed, and examples of such a shape include a disk shape, a plate shape, a sphere shape, a cube shape, and a rectangular parallelepiped shape.
In the present invention, reaction vessels include vessels for nucleic acid amplification.

本発明において、標的物質付着性担体は、標的物質の検出試験に供試することができる形態である限り、その素材（紙、布など）を加工する必要はない。一方、必要に応じて、標的物質付着性担体の素材を標的物質の検出試験に供試することができる形態に加工することができる。
本発明において、「加工」とは、素材を所望の形態にするために手を加えることを意味する。本発明の標的物質付着性担体において、加工は、限定されるものではなく、例えば、切断、染色、切り取り、切り抜き（例えばパンチ）、粉砕、乾燥、接着、溶着、装飾等することが挙げられる。本発明の標的物質付着性担体が試験紙である場合は、本発明の透液性シートに封入することができる形態に試験紙を切り取ることができる。また、試験紙が、例えば、糖、タンパク質、アルブミン、クレアチニン（Cr）、水素イオン（pH）、ヘモグロビン、赤血球、ケトン体、ビリルビン、ウロビリノーゲン、亜硝酸塩、白血球などの各種標的物質（検査項目）を一度に検出することができる試験紙である場合は、この試験紙から各種標的物質に対する試験紙部分を切り取り、切り取った試験紙を標的物質付着性担体として使用することができる。ここで、切り取った試験紙は、対象とする標的物質ごとにそれぞれ複数枚用いることができる。また、本発明の標的物質付着性担体が濾紙である場合は、例えば、当該濾紙を任意の色素で染色することができる。 In the present invention, the material (paper, cloth, etc.) of the target substance-adhering carrier does not need to be processed as long as it is in a form that can be used in a detection test for the target substance. On the other hand, if necessary, the material of the target substance-adhering carrier can be processed into a form that can be used in a detection test for the target substance.
In the present invention, "processing" means to add a touch to a material to make it into a desired shape. In the target substance-adhesive carrier of the present invention, the processing is not limited, and examples thereof include cutting, dyeing, cutting out, cutting out (e.g. punching), crushing, drying, gluing, welding, decoration, etc. When the target substance-adhesive carrier of the present invention is a test paper, the test paper can be cut into a shape that can be enclosed in the liquid-permeable sheet of the present invention. In addition, when the test paper is a test paper that can detect various target substances (test items) such as sugar, protein, albumin, creatinine (Cr), hydrogen ion (pH), hemoglobin, red blood cells, ketone bodies, bilirubin, urobilinogen, nitrite, and white blood cells at once, the test paper portions corresponding to the various target substances can be cut out from the test paper, and the cut test paper can be used as the target substance-adhesive carrier. Here, the cut test paper can be used in multiple pieces for each target substance. In addition, when the target substance-adhesive carrier of the present invention is a filter paper, for example, the filter paper can be dyed with any dye.

上記のとおり、本発明の標的物質には、例えば、核酸、タンパク質、有機化合物、糖類、無機化合物、細胞成分などが含まれるため、本発明の標的物質付着性担体としては、例えば、核酸付着性担体、タンパク質付着性担体、有機化合物付着性担体、糖類付着性担体、無機化合物付着性担体、細胞成分付着性担体などが挙げられる。As described above, the target substances of the present invention include, for example, nucleic acids, proteins, organic compounds, sugars, inorganic compounds, cellular components, etc., and therefore examples of the target substance-attaching carriers of the present invention include nucleic acid-attaching carriers, protein-attaching carriers, organic compound-attaching carriers, sugar-attaching carriers, inorganic compound-attaching carriers, cellular component-attaching carriers, etc.

（２）核酸付着性担体
本発明において、標的物質が核酸である場合、標的物質付着性担体として、核酸付着性担体を使用することができる。
本発明において、「核酸付着性担体」とは、核酸が付着することができる性質を有する担体を意味する。本発明において、核酸付着性担体は、核酸が付着することができるものであれば限定されるものではなく、そのような担体としては、紙製担体、布製担体、ポリマービーズなどが挙げられる。紙製担体としては例えば濾紙が挙げられ、布製担体としては濾布が挙げられるが、これらに限定されない。(2) Nucleic acid-binding carrier
In the present invention, when the target substance is a nucleic acid, a nucleic acid-adhering carrier can be used as the target substance-adhering carrier.
In the present invention, the term "nucleic acid-adherent carrier" refers to a carrier having the property of being able to attach nucleic acid. In the present invention, the nucleic acid-adherent carrier is not limited as long as it is able to attach nucleic acid, and examples of such carriers include paper carriers, cloth carriers, polymer beads, etc. Examples of paper carriers include filter paper, and examples of cloth carriers include filter cloth, but are not limited thereto.

本発明において、核酸付着性担体の形態は、核酸増幅反応に供試することができる形態である限り、限定されるものではなく、そのような形態としては、例えば、核酸増幅用容器に格納可能な形態（例えば、形状、大きさ）が挙げられる。
本発明において、「核酸増幅用容器」は、核酸増幅反応に用いられる通常の容器を意味し、例えば、核酸増幅反応に用いられる、チューブ、バイアル、プレートなどが挙げられる。これらの核酸増幅用容器の孔径は、通常20mm以下であるため、核酸増幅用容器に格納可能な形態としては、最長辺又は直径が約20.0mm以下である形態が好ましい。また、操作性の観点から、核酸増幅用容器に格納可能な形態としては、最長辺又は直径が約0.1mm以上の形態が好ましい。すなわち、本発明において、核酸増幅用容器に格納可能な形態としては、最長辺又は直径が、例えば、約0.1～20.0 mm、約0.1～15.0 mm、約0.1～10.0 mm、約0.1～8.0 mm、約0.1～7.0 mm、約0.1～6.0 mm、約0.1～5.0 mm、約0.5～20.0 mm、約0.5～15.0 mm、約0.5～10.0 mm、約0.5～8.0 mm、約0.5～7.0 mm、約0.5～6.0 mm、約0.5～5.0 mm、約1.0～20.0 mm、約1.0～15.0 mm、約1.0～10.0 mm、約1.0～8.0 mm、約1.0～7.0 mm、約1.0～6.0 mm、約1.0～5.0 mm、約1.0～4.0 mm、約2.0～10.0 mm、約2.0～8.0 mm、約2.0～7.0 mm、約2.0～6.0 mm、約2.0～5.0 mm、約2.0～4.0 mm又は約3.0～4.0 mmである、形態が挙げられる。
本発明において、核酸増幅用容器に格納可能な「形態」は、核酸増幅用容器に入れることができ、かつ当該容器の蓋を閉じることができる形態である限り限定されるものではなく、例えば、円盤（ディスク）状、板状、球状、立方体状、直方体状のものが挙げられる。 In the present invention, the form of the nucleic acid-adhering carrier is not limited as long as it is a form that can be used in a nucleic acid amplification reaction, and examples of such forms include forms (e.g., shapes and sizes) that can be stored in a container for nucleic acid amplification.
In the present invention, the term "container for nucleic acid amplification" refers to a normal container used in a nucleic acid amplification reaction, and examples thereof include tubes, vials, and plates used in a nucleic acid amplification reaction. Since the hole diameter of these containers for nucleic acid amplification is usually 20 mm or less, the shape that can be stored in the container for nucleic acid amplification is preferably a shape with a longest side or diameter of about 20.0 mm or less. In addition, from the viewpoint of operability, the shape that can be stored in the container for nucleic acid amplification is preferably a shape with a longest side or diameter of about 0.1 mm or more. That is, in the present invention, the shape that can be stored in the container for nucleic acid amplification includes, for example, the longest side or diameter of about 0.1 to 20.0 mm, about 0.1 to 15.0 mm, about 0.1 to 10.0 mm, about 0.1 to 8.0 mm, about 0.1 to 7.0 mm, about 0.1 to 6.0 mm, about 0.1 to 5.0 mm, about 0.5 to 20.0 mm, about 0.5 to 15.0 mm, about 0.5 to 10.0 mm, about 0.5 to 8.0 mm, about 0.5 to 7.0 mm, about 0.5 to 6.0 mm, about 0.5 to 5.0 mm, about 1.0 to 20.0 mm, about 1.0 to 15.0 mm, about 1.0 to 10.0 mm, about 1.0 to 8.0 mm, about 1.0 to 7.0 mm, about 1.0 to 6.0 mm, about 1.0 to 5.0 0 mm, about 1.0 to 4.0 mm, about 2.0 to 10.0 mm, about 2.0 to 8.0 mm, about 2.0 to 7.0 mm, about 2.0 to 6.0 mm, about 2.0 to 5.0 mm, about 2.0 to 4.0 mm, or about 3.0 to 4.0 mm.
In the present invention, the "shape" that can be stored in a container for nucleic acid amplification is not limited as long as it can be placed in the container for nucleic acid amplification and the lid of the container can be closed, and examples of such shapes include disk-shaped, plate-shaped, spherical, cubic, and rectangular shapes.

本発明において、核酸付着性担体は、核酸増幅反応に供試することができる形態である限り、核酸付着性担体の素材（紙、布など）を加工する必要はない。一方、必要に応じて、核酸付着性担体の素材を核酸増幅反応に供試することができる形態に加工することができる。
本発明において、「加工」とは、素材を所望の形態にするために手を加えることを意味する。本発明の核酸付着性担体において、加工は、限定されるものではなく、例えば、切断、染色、切り抜き（例えばパンチ）、粉砕、乾燥、接着、溶着、装飾等することが挙げられる。本発明の核酸付着性担体が濾紙である場合は、例えば、当該濾紙を任意の色素で染色することができる。 In the present invention, the material of the nucleic acid-adhering carrier (paper, cloth, etc.) does not need to be processed as long as it is in a form that can be used in a nucleic acid amplification reaction. On the other hand, if necessary, the material of the nucleic acid-adhering carrier can be processed into a form that can be used in a nucleic acid amplification reaction.
In the present invention, "processing" means to manipulate a material to give it a desired shape. In the nucleic acid-adherent carrier of the present invention, the processing is not limited, and examples thereof include cutting, dyeing, cutting out (e.g., punching), crushing, drying, gluing, welding, and decoration. When the nucleic acid-adherent carrier of the present invention is filter paper, for example, the filter paper can be dyed with any dye.

本発明において、標的物質が核酸である場合、標的核酸としては、例えば、微生物に由来する核酸（微生物の核酸）が挙げられる。標的核酸が由来する微生物は、核酸ゲノムを有するものであれば限定されるものではなく、病原性を有する微生物が好ましい。本発明において、微生物としては、例えば、ウイルス、細菌、原虫、真菌、酵母、粘菌などが挙げられるが、ウイルス、細菌又は原虫が好ましい。
本発明において、ウイルスには、DNAをゲノムとして有するDNAウイルス及びRNAをゲノムとして有するRNAウイルスが含まれるが、DNAウイルスが好ましい。DNAウイルスには、二本鎖DNAウイルス及び一本鎖DNAウイルスが挙げられるが、好ましくは二本鎖DNAウイルスである。二本鎖DNAウイルスとしては、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルスなどが挙げられるが、ヘルペスウイルスが好ましい。 In the present invention, when the target substance is a nucleic acid, the target nucleic acid may be, for example, a nucleic acid derived from a microorganism (a nucleic acid of a microorganism). The microorganism from which the target nucleic acid is derived is not limited as long as it has a nucleic acid genome, and is preferably a pathogenic microorganism. In the present invention, examples of the microorganism include viruses, bacteria, protozoa, fungi, yeast, slime mold, etc., and viruses, bacteria, or protozoa are preferred.
In the present invention, the virus includes DNA virus having DNA as genome and RNA virus having RNA as genome, and DNA virus is preferred.DNA virus includes double-stranded DNA virus and single-stranded DNA virus, and double-stranded DNA virus is preferred.Double-stranded DNA virus includes herpes virus, adenovirus, pox virus, etc., and herpes virus is preferred.

ヘルペスウイルスは、動物を宿主とするウイルスであり、哺乳類、鳥類、両生類、爬虫類、魚類などから多数発見されている。本発明の対象とする標的核酸が由来するヘルペスウイルスとしては、ヒトを宿主とするヘルペスウイルス（ヒトヘルペスウイルス）が好ましい。ヒトヘルペスウイルスとしては、限定されるものではなく、例えば、ヒトサイトメガロウイルス（HCMV）、単純ヘルペスウイルス1型（HSV-1）、単純ヘルペスウイルス2型（HSV-2）、水痘帯状疱疹ウイルス（VSV）、エプスタイン・バール（Epstein-Barr）ウイルス（EBV）、ヒトヘルペスウイルス6（HHV-6）、ヒトヘルペスウイルス7（HHV-7）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（KSHV、HHV-8）が挙げられるが、ヒトサイトメガロウイルス（HCMV）、単純ヘルペスウイルス1型（HSV-1）、単純ヘルペスウイルス2型（HSV-2）が好ましい。Herpesviruses are viruses that use animals as hosts, and many have been found in mammals, birds, amphibians, reptiles, fish, etc. Herpesviruses from which the target nucleic acid of the present invention is derived are preferably herpesviruses that use humans as hosts (human herpesviruses). Human herpesviruses are not limited to, but include, for example, human cytomegalovirus (HCMV), herpes simplex virus type 1 (HSV-1), herpes simplex virus type 2 (HSV-2), varicella zoster virus (VSV), Epstein-Barr virus (EBV), human herpesvirus 6 (HHV-6), human herpesvirus 7 (HHV-7), and Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV, HHV-8), with human cytomegalovirus (HCMV), herpes simplex virus type 1 (HSV-1), and herpes simplex virus type 2 (HSV-2) being preferred.

ヒトヘルペスウイルスは、それぞれ様々な疾患の要因となっている。HCMVは、HCMV感染症（例えば、先天性CMV感染症）、間質性肺炎、CMV網膜症、CMV単核球症、先天性巨細胞封入体症に関与し、HSV-1は、口唇ヘルペス、性器ヘルペス、カポジ水痘様発疹症、ヘルペス脳炎、角膜ヘルペス、ベル麻痺などに関与する。また、HSV-2は、性器ヘルペス、新生児ヘルペス、脊髄炎、無菌性髄膜炎、急性網膜壊死に関与し、VSVは、水痘、帯状疱疹、ラムゼー・ハント症候群に関与する。また、EBVは、伝染性単核球症、慢性活動性EBV感染症、上咽頭癌、バーキットリンパ腫、EBV関連胃癌に関与し、HHV-6は、突発性発疹症、脳炎・脳症に関与する。さらに、HHV-7は、突発性発疹症に関与し、HHV-8は、カポジ肉腫（エイズ関連型、古典型、アフリカ型）、キャッスルマン病、悪性Bリンパ腫に関与する。Each human herpesvirus is responsible for various diseases. HCMV is involved in HCMV infection (e.g., congenital CMV infection), interstitial pneumonia, CMV retinopathy, CMV mononucleosis, and congenital cytomegalic inclusion disease. HSV-1 is involved in oral herpes, genital herpes, Kaposi's varicelliform eruption, herpes encephalitis, corneal herpes, Bell's palsy, and others. HSV-2 is involved in genital herpes, neonatal herpes, myelitis, aseptic meningitis, and acute retinal necrosis. VSV is involved in chickenpox, herpes zoster, and Ramsay Hunt syndrome. EBV is involved in infectious mononucleosis, chronic active EBV infection, nasopharyngeal carcinoma, Burkitt's lymphoma, and EBV-associated gastric cancer. HHV-6 is involved in exanthema subitum, encephalitis, and encephalopathy. In addition, HHV-7 is involved in exanthema subitum, and HHV-8 is involved in Kaposi's sarcoma (AIDS-associated, classical, and African types), Castleman's disease, and malignant B lymphoma.

一本鎖DNAウイルスとしては、例えば、パルボウイルス（アデノ随伴ウイルス等）が挙げられる。また、RNAウイルスには、二本鎖RNAウイルス及び一本鎖RNAウイルスが含まれる。一本鎖RNAウイルスとしては、風疹ウイルス（Rubella virus）、ジカウイルス、レトロウイルス（RNA腫瘍ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、ヒトT細胞白血病ウイルスなど）、ラブドウイルス（狂犬病ウイルス、水疱性口内炎ウイルスなど）、パラミクソウイルス（センダイウイルス、ムンプスウイルス、はしかウイルスなど）、オルトミクソウイルス（インフルエンザウイルスなど）、アレナウイルス（リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、ラッサウイルスなど）、コロナウイルス（SARS（Severe Acute Respiratory Syndrome）ウイルス（SARS-CoV、SARS-CoV-2）、MARS（Middle East Respiratory Syndrome）ウイルス（MARS-CoV）など）、ノロウイルスなどが挙げられる。Examples of single-stranded DNA viruses include parvoviruses (such as adeno-associated viruses). In addition, RNA viruses include double-stranded RNA viruses and single-stranded RNA viruses. Examples of single-stranded RNA viruses include rubella virus, Zika virus, retroviruses (such as RNA tumor viruses, human immunodeficiency viruses, human T-cell leukemia viruses), rhabdoviruses (such as rabies viruses and vesicular stomatitis viruses), paramyxoviruses (such as Sendai viruses, mumps viruses, and measles viruses), orthomyxoviruses (such as influenza viruses), arenaviruses (such as lymphocytic choriomeningitis viruses and Lassa viruses), coronaviruses (such as SARS (Severe Acute Respiratory Syndrome) viruses (SARS-CoV, SARS-CoV-2), MARS (Middle East Respiratory Syndrome) viruses (MARS-CoV)), and noroviruses.

ウイルス由来の標的核酸としては、ウイルス由来のDNA又はRNAの任意の領域を選択することができるが、例えば、遺伝子変異の少ない保存領域のDNA又はRNAを標的核酸として選択することができる。ヒトサイトメガロウイルスにおいては、例えば、糖タンパク質B遺伝子（配列番号１）、糖タンパク質H遺伝子（配列番号２）、マトリクスリン酸化タンパク質pp65遺伝子（配列番号３）などの塩基配列を含むDNAを標的核酸として選択することができる。これらの遺伝子情報は、公知の遺伝子情報データベース（例えば、European Bioinformatics Institute（EBI）のENA等）から入手することができる。As the target nucleic acid derived from a virus, any region of DNA or RNA derived from a virus can be selected, for example, DNA or RNA in a conserved region with few genetic mutations can be selected as the target nucleic acid. In the case of human cytomegalovirus, for example, DNA containing the base sequence of glycoprotein B gene (SEQ ID NO: 1), glycoprotein H gene (SEQ ID NO: 2), matrix phosphorylation protein pp65 gene (SEQ ID NO: 3), etc. can be selected as the target nucleic acid. Such gene information can be obtained from a known gene information database (for example, ENA of the European Bioinformatics Institute (EBI)).

本発明において、細菌には、グラム陽性菌及びグラム陰性菌のいずれもが含まれる。グラム陽性菌としては、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）等のブドウ球菌属細菌、ストレプトコッカス属細菌、リステリア・モノサイトゲネス（Listeria monocytogenes）等のリステリア属細菌、バチラス・セレウス（Bacillus cereus）等のバチラス属細菌、結核菌（Mycobacterium tuberculosis）等のマイコバクテリウム属細菌、マイコプラズマ属細菌、ボツリヌス菌（クロストリジウム・ボツリヌム）、ウェルシュ菌（クロストリジウム・パーフリンジェンス）等のクロストリジウム属細菌等が挙げられる。また、グラム陰性菌としては、エシェリヒア・コリ（Escherichia coli）等のエシェリヒア属細菌、梅毒トレポネーマ（Treponema pallidum）、シトロバクター・コーセリ（Citrobacter koseri）等のシトロバクター属細菌、クラミジア・トラコマチス（Chlamydia trachomatis）、クラミジア・ニューモニエ（Chlamydia pneumoniae）等のクラミジア属細菌、クレブシェラ・オキシトカ（Klebsiella oxytoca）等のクレブシェラ属細菌に代表される腸内細菌群、コレラ菌（Vibrio cholerae）等のビブリオ属細菌、インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）等のヘモフィルス属細菌、サルモネラ属細菌、プロテウス（Proteus）属細菌、シュードモナス属細菌、淋菌等が挙げられる。In the present invention, bacteria include both gram-positive and gram-negative bacteria. Examples of gram-positive bacteria include Staphylococcus bacteria such as Staphylococcus aureus, Streptococcus bacteria, Listeria bacteria such as Listeria monocytogenes, Bacillus bacteria such as Bacillus cereus, Mycobacterium bacteria such as Mycobacterium tuberculosis, Mycoplasma bacteria, Clostridium bacteria such as Clostridium botulinum and Clostridium perfringens. Examples of Gram-negative bacteria include bacteria of the genus Escherichia such as Escherichia coli, bacteria of the genus Citrobacter such as Treponema pallidum and Citrobacter koseri, bacteria of the genus Chlamydia such as Chlamydia trachomatis and Chlamydia pneumoniae, enterobacteria represented by bacteria of the genus Klebsiella such as Klebsiella oxytoca, bacteria of the genus Vibrio such as Vibrio cholerae, bacteria of the genus Haemophilus such as Haemophilus influenzae, bacteria of the genus Salmonella, bacteria of the genus Proteus, bacteria of the genus Pseudomonas, and Neisseria gonorrhoeae.

本発明において、原虫としては、例えばトキソプラズマが挙げられるが、これに限定されない。トキソプラズマは、先天性トキソプラズマ症の原因となる原虫である。In the present invention, examples of protozoa include, but are not limited to, Toxoplasma gondii, which is a protozoan that causes congenital toxoplasmosis.

本発明において、標的核酸が由来する微生物としては、先天性感染症の病原微生物が挙げられ、このような微生物としては、例えば、ヘルペスウイルス、風疹ウイルス、ジカウイルスなどのウイルス、梅毒トレポネーマなどの細菌、トキソプラズマなどの原虫などが挙げられるが、これらに限定されない。In the present invention, examples of microorganisms from which target nucleic acids are derived include pathogenic microorganisms of congenital infectious diseases, and examples of such microorganisms include, but are not limited to, viruses such as herpes virus, rubella virus, and Zika virus, bacteria such as Treponema pallidum, and protozoa such as Toxoplasma gondii.

本発明においては、細菌由来のDNAにおいて任意の領域を標的核酸として選択することができるが、例えば、疾患を引き起こす原因となる遺伝子（病原遺伝子）を含む領域のDNAを標的核酸として選択することができる。このような病原遺伝子としては、例えば、リステリア属細菌のリステリオリシンO（hlyA）遺伝子、サルモネラ属細菌のエンテロトキシン（enterotoxin）遺伝子やinvasion（invA）遺伝子、病原性大腸菌O-157のベロ毒素遺伝子、黄色ブドウ球菌エンテロトキシン遺伝子、バチルス・セレウス菌のセレウリド（嘔吐毒素）遺伝子やエンテロトキシン遺伝子、ボツリヌス菌の各種毒素遺伝子等が挙げられるが、これらに限定されない。In the present invention, any region of DNA derived from bacteria can be selected as the target nucleic acid, and for example, DNA of a region containing a gene that causes a disease (pathogenic gene) can be selected as the target nucleic acid. Examples of such pathogenic genes include, but are not limited to, the listeriolysin O (hlyA) gene of Listeria bacteria, the enterotoxin gene and invasion (invA) gene of Salmonella bacteria, the verotoxin gene of pathogenic Escherichia coli O-157, the Staphylococcus aureus enterotoxin gene, the cereulide (emetic toxin) gene and enterotoxin gene of Bacillus cereus, and various toxin genes of Clostridium botulinum.

微生物由来の標的核酸は、当業者であれば、公知の遺伝子情報及び遺伝子データベース（例えばNCBIのGenBank等）に基づき、微生物由来のDNA又はRNAの任意の領域を選択し、当該領域を増幅できるプライマーを用いて、核酸増幅反応により増幅することができる。増幅する核酸配列は、標的核酸配列の全長又は一部のいずれでもよい。
例えば、ヒトサイトメガロウイルスの場合、ヒトサイトメガロウイルスの糖タンパク質H遺伝子の塩基配列を含むDNAを標的核酸として選択し、当該標的核酸の全部又は一部を増幅することができるオリゴヌクレオチドプライマーを用いて、当該標的核酸を核酸増幅反応により増幅し、検出又は定量することができる（Eiko Fukushima, et al., Journal of
Virological Methods 151 (2008) 55-60）。当業者であれば、その他の微生物由来の標的核酸についても、同様の手法を用いて検出又は定量することが可能である。 A person skilled in the art can select any region of DNA or RNA derived from a microorganism based on known genetic information and a genetic database (e.g., GenBank of NCBI, etc.) and amplify the region by a nucleic acid amplification reaction using primers capable of amplifying the region. The nucleic acid sequence to be amplified may be either the full length or a part of the target nucleic acid sequence.
For example, in the case of human cytomegalovirus, DNA containing the base sequence of the glycoprotein H gene of human cytomegalovirus is selected as the target nucleic acid, and the target nucleic acid can be amplified by a nucleic acid amplification reaction using oligonucleotide primers capable of amplifying all or a part of the target nucleic acid, and then detected or quantified (Eiko Fukushima, et al., Journal of
Virological Methods 151 (2008) 55-60). Those skilled in the art can detect or quantify target nucleic acids derived from other microorganisms using similar techniques.

検出又は定量の対象となる標的核酸の塩基配列は、例えば二本鎖核酸であればセンス側の塩基配列であってもアンチセンス側の塩基配列であってもよい。例えば、アンチセンス側の核酸配列を検出又は定量することによってその相補的であるセンス側の核酸配列を検出又は定量することができる。The base sequence of the target nucleic acid to be detected or quantified may be, for example, a sense base sequence or an antisense base sequence if it is a double-stranded nucleic acid. For example, by detecting or quantifying the antisense nucleic acid sequence, the complementary sense nucleic acid sequence can be detected or quantified.

（３）タンパク質付着性担体、有機化合物付着性担体、糖類付着性担体、無機化合物付着 性担体、細胞成分付着性担体
タンパク質付着性担体、有機化合物付着性担体、糖類付着性担体、無機化合物付着性担体及び細胞成分付着性担体は、当業者であれば、上記「（１）標的物質付着性担体」の記載に基づいて作製し、使用することができる。(3) Protein-adhering carriers, organic compound-adhering carriers, sugar-adhering carriers, inorganic compound-adhering carriers, and cell component-adhering carriers
A person skilled in the art can prepare and use protein-adhering carriers, organic compound-adhering carriers, saccharide-adhering carriers, inorganic compound-adhering carriers and cellular component-adhering carriers based on the description in "(1) Target substance-adhering carriers" above.

４．体液試料の採取用物品
本発明の体液試料の採取用物品は、体液試料中の標的物質を検出するための標的物質付着性担体が透液性シートに封入されたものである。また、本発明の体液試料の採取用物品は、被験者由来の体液試料を採取するために使用される物品である。ここで、上記の通り、標的物質付着性担体には、核酸付着性担体、タンパク質付着性担体、有機化合物付着性担体、糖類付着性担体、無機化合物付着性担体、細胞成分付着性担体などが含まれる。
本発明の採取用物品は、体液が体外に出される（例えば、排出される、分泌される）部位の近くに配置することで、被験者から体液試料を簡便に採取することができる。当業者であれば、本発明の採取用物品を配置する位置を適宜選択することができる。本発明の採取用物品は、後述する吸収性衛生用品や衣類（下着等）に配置して使用してもよいし、吸収性衛生用品や衣類に配置しないで使用しても良い。本発明の採取用物品を吸収性衛生用品に配置して使用する場合であって体液が尿である場合は、本発明の採取用物品を吸収性衛生用品（例えばおむつ）の適切な位置に配置（必要であれば固定）することで、被験者から体液試料を簡便に採取することができる。当該「適切な位置」は、当業者であれば公知の情報に基づき適宜選択できる。被験者が新生児の男子である場合、採取用物品を配置する適切な位置としては、例えば、おむつの表面シート（肌に接するシート）の中央よりやや前方部分が挙げられるが、これに限定されない。4. Items for collecting body fluid samples
The article for collecting a body fluid sample of the present invention is an article in which a target substance-adhesive carrier for detecting a target substance in a body fluid sample is enclosed in a liquid-permeable sheet. The article for collecting a body fluid sample of the present invention is an article used for collecting a body fluid sample from a subject. As described above, the target substance-adhesive carrier includes a nucleic acid-adhesive carrier, a protein-adhesive carrier, an organic compound-adhesive carrier, a saccharide-adhesive carrier, an inorganic compound-adhesive carrier, a cell component-adhesive carrier, and the like.
The collection article of the present invention can be placed near the site where the body fluid is discharged (e.g., excreted or secreted) from the body, and thus a body fluid sample can be easily collected from the subject. A person skilled in the art can appropriately select the position for placing the collection article of the present invention. The collection article of the present invention may be placed in an absorbent sanitary product or clothing (underwear, etc.) described below, or may be used without being placed in an absorbent sanitary product or clothing. When the collection article of the present invention is placed in an absorbent sanitary product and used and the body fluid is urine, the collection article of the present invention can be placed (fixed, if necessary) in an appropriate position on the absorbent sanitary product (e.g., a diaper) to easily collect a body fluid sample from the subject. The "appropriate position" can be appropriately selected by a person skilled in the art based on known information. When the subject is a newborn male, an appropriate position for placing the collection article can be, for example, a portion slightly forward of the center of the top sheet (sheet in contact with the skin) of the diaper, but is not limited thereto.

本発明の体液試料の採取用物品において、標的物質付着性担体は透液性シートに封入されているため、当該物品をそのまま用いた場合にも、吸収性衛生用品に配置して用いた場合にも、当該担体が散らばることを防ぐことができる。
本発明において、「透液性シート」とは、液体を透過する性質を有するシート状物をいう。本発明において、透液性シートは、液体を透過する性質（例えば、体液透過性、透水性など）を有するものであれば限定されるものではなく、例えば、不織布、糸（例えば、ナイロン、ポリエチレンテレフタレート等の糸）を平織り等したネット状のシート材、多数の透孔を形成したフィルムシート材、透液性を有する織布、紙（例えば、ティッシュペーパー）などが挙げられる。本発明における「体液」については、上記「３．標的物質付着性担体」に記載したとおりである。
本発明において、「不織布」とは、繊維を織らずに接合させてシート状にしたものをいう。本発明において、不織布は、液体を透過する性質を有するものであれば限定されるものではなく、不織布の素材も限定されるものではない。そのような素材としては、例えば、綿、麻、ウール、レーヨン、アセテート、ナイロン、ポリエステル等が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明において、「封入」とは、標的物質付着性担体が透液性シートで閉じられた状態をいう。ここで、「閉じられた状態」とは、標的物質付着性担体が、重なった透液性シートの内側（当該シートとシートの間）から当該透液性シートの外に散らばらないように、透液性シートが加工された（例えば、折られた、溶着された、等）状態を意味する。本発明において、「閉じられた状態」は、必ずしも密閉された状態を意味するものではない。本発明における封入の態様は、標的物質付着性担体が、重なった透液性シートの内側（重なった透液性シートの間）に存在し、当該重なった透液性シートの外に散らばらない状態である限り、限定されない。標的物質付着性担体を透液性シートで閉じる態様は、限定されるものではなく、例えば、透液性シートを折ることにより閉じる態様、ヒートシーラーで溶着することにより閉じる態様、及びこれらの組合せにより閉じる態様などが挙げられる。封入の態様としては、限定されるものではなく、例えば、四角形の透液性シートの場合、一枚の透液性シートの一部を折ること、二枚の透液性シートの一部をヒートシーラーで溶着すること等により、透液性シートの重なりを形成し、当該重なった透液性シートの内側に標的物質付着性担体を入れる態様が挙げられる（本発明において、溶着した部分を「溶着部」という）。この態様において、さらに、当該透液性シートの閉じられていない部分を閉じることはできるが、標的物質付着性担体が当該透液性シートの外に散らばらない状態である限り、閉じられていない部分を必ずしも全て閉じる必要はない。また別の態様において、封入の態様としては、例えば、袋状に加工した透液性シートに標的物質付着性担体を入れ、閉じられていない部分を閉じる態様が挙げられる。本発明の封入の態様には、標的物質付着性担体が透液性シートで閉じ込められた態様も含まれる。ここで、「閉じ込められた状態」とは、標的物質付着性担体が、重なった透液性シートの内側に存在し、かつ、標的物質付着性担体の周囲において閉じられていない部分がない状態をいう。 In the article for collecting body fluid samples of the present invention, the target substance-adherent carrier is encapsulated in a liquid-permeable sheet, so that the carrier can be prevented from scattering whether the article is used as is or when it is placed in an absorbent sanitary product.
In the present invention, the term "liquid-permeable sheet" refers to a sheet-like material having the property of permeating liquid. In the present invention, the liquid-permeable sheet is not limited as long as it has the property of permeating liquid (e.g., body fluid permeability, water permeability, etc.), and examples thereof include nonwoven fabrics, net-like sheet materials made by plain weaving threads (e.g., nylon, polyethylene terephthalate, etc.), film sheet materials with a large number of through holes, liquid-permeable woven fabrics, and paper (e.g., tissue paper). The "body fluid" in the present invention is as described above in "3. Target substance-adherent carrier".
In the present invention, the term "nonwoven fabric" refers to a sheet-like material formed by bonding fibers without weaving them. In the present invention, the nonwoven fabric is not limited as long as it has the property of being permeable to liquids, and the material of the nonwoven fabric is also not limited. Examples of such materials include, but are not limited to, cotton, linen, wool, rayon, acetate, nylon, polyester, etc.
In the present invention, "encapsulation" refers to a state in which the target substance-adherent carrier is closed with a liquid-permeable sheet. Here, the "closed state" refers to a state in which the liquid-permeable sheet is processed (for example, folded, welded, etc.) so that the target substance-adherent carrier does not scatter from the inside of the overlapped liquid-permeable sheet (between the sheets) to the outside of the liquid-permeable sheet. In the present invention, the "closed state" does not necessarily mean a sealed state. The mode of encapsulation in the present invention is not limited as long as the target substance-adherent carrier is present inside the overlapped liquid-permeable sheet (between the overlapped liquid-permeable sheets) and does not scatter to the outside of the overlapped liquid-permeable sheet. The mode of closing the target substance-adherent carrier with the liquid-permeable sheet is not limited, and examples thereof include a mode of closing by folding the liquid-permeable sheet, a mode of closing by welding with a heat sealer, and a mode of closing by a combination of these. The mode of encapsulation is not limited, and for example, in the case of a rectangular liquid-permeable sheet, a portion of one liquid-permeable sheet is folded, or a portion of two liquid-permeable sheets is welded with a heat sealer to form an overlap of the liquid-permeable sheets, and the target substance-adherent carrier is placed inside the overlapped liquid-permeable sheets (in the present invention, the welded portion is referred to as the "welded portion"). In this mode, the open portion of the liquid-permeable sheet can be further closed, but as long as the target substance-adherent carrier is not scattered outside the liquid-permeable sheet, it is not necessary to close all of the open portions. In another mode, the mode of encapsulation can be, for example, a mode in which the target substance-adherent carrier is placed in a liquid-permeable sheet processed into a bag shape and the open portion is closed. The mode of encapsulation of the present invention also includes a mode in which the target substance-adherent carrier is confined by the liquid-permeable sheet. Here, the term "confined state" refers to a state in which the target substance-adhering carrier is present inside the overlapping liquid-permeable sheets, and there is no part around the target substance-adhering carrier that is not enclosed.

封入される標的物質付着性担体の個数は、当業者であれば、担体及び透液性シートの形状や大きさ、標的物質の種類、試験の目的に応じて適宜選択できるため、限定されない。本発明の一態様として、例えば、標的物質付着性担体の最長辺又は直径が約3～10mmの板状又は円盤状である場合、封入される標的物質付着性担体の個数は、例えば、3～50個である。The number of target substance-adherent carriers to be encapsulated is not limited, since a person skilled in the art can appropriately select the number depending on the shape and size of the carrier and the liquid-permeable sheet, the type of the target substance, and the purpose of the test. In one embodiment of the present invention, for example, when the target substance-adherent carrier is a plate or disk with the longest side or diameter of about 3 to 10 mm, the number of target substance-adherent carriers to be encapsulated is, for example, 3 to 50.

本発明の一態様として、標的物質付着性担体は、透液性シートへの封入前において体液試料と接触していない（未接触の）状態であるものが挙げられる。In one embodiment of the present invention, the target substance-adherent carrier is not in contact (has not been in contact with) a body fluid sample before being enclosed in the liquid-permeable sheet.

本発明の一態様において、体液試料の採取用物品は、試験実施者が当該物品を持つための持ち手部分を有していてもよい（図２及び図５）。本発明において、当該持ち手部分は、標的物質付着性担体が持ち手部分に入り込まないように作製される。例えば、本発明において、持ち手部分は、重なった透液性シートの端から任意の位置(例えば約5～30mm程度の位置)においてヒートシーラーで溶着することにより作製することができる（本発明において、溶着した部分を溶着部という）。持ち手部分の位置や範囲は限定されず、当業者であれば、持ち手部分の必要性や物品の大きさ等に応じてその位置や範囲を適宜調整することができる。本発明において、持ち手部分の数は限定されるものではなく、例えば、０～４個である。In one embodiment of the present invention, the article for collecting a body fluid sample may have a handle portion for a tester to hold the article (FIGS. 2 and 5). In the present invention, the handle portion is prepared so that the target substance-adherent carrier does not get into the handle portion. For example, in the present invention, the handle portion can be prepared by welding the overlapped liquid-permeable sheets at any position (e.g., about 5 to 30 mm from the edge) with a heat sealer (in the present invention, the welded portion is referred to as the welded portion). The position and range of the handle portion are not limited, and a person skilled in the art can adjust the position and range as appropriate depending on the necessity of the handle portion, the size of the article, etc. In the present invention, the number of handle portions is not limited, and may be, for example, 0 to 4.

本発明の体液試料の採取用物品の一態様において、標的物質付着性担体を封入する透液性シートは、複数重ねて（例えば２重～４重に重ねて）透液性シート層の厚みを厚くしてもよい。すなわち、本発明の体液試料の採取用物品の一態様としては、透液性シートが２重～４重に重ねられた体液試料の採取用物品が挙げられるが、透液性シートの重なりの数や厚さは限定されない。In one embodiment of the article for collecting a body fluid sample of the present invention, the liquid-permeable sheet encapsulating the target substance-adherent carrier may be laminated multiple times (e.g., 2 to 4 times) to increase the thickness of the liquid-permeable sheet layer. That is, one embodiment of the article for collecting a body fluid sample of the present invention includes an article for collecting a body fluid sample in which the liquid-permeable sheet is laminated 2 to 4 times, but the number and thickness of the overlapping liquid-permeable sheets are not limited.

５．体液試料の採取用デバイス
本発明の体液試料の採取用デバイスは、本発明の体液試料の採取用物品及び外装を含むものである。本発明に使用される外装は、本発明の採取用物品を覆うためのパーツである。本発明の採取用物品を外装で覆う態様は限定されるものではなく、本発明の採取用物品を外装に、例えば、入れる（例えば挿入する）、包む、挟む、重ねる、設置する等により覆う態様が挙げられる。
本発明において、外装を用いることで、体液試料の採取用デバイスを吸収性衛生用品に配置した場合に、例えば、被験者への肌への負担をより軽減したり、便による採取用物品の汚染をより軽減したり、おむつ等の吸収性衛生用品に配置した場合のずれをより軽減することなどができる。外装としては、限定されるものではなく、例えば、透液性シート（例えば不織布）で形成された外装、コットンパフ、ガーゼなどが挙げられる。
本発明の採取用デバイスの一態様として、本発明の体液試料の採取用物品が外装に覆われた、採取用デバイスが挙げられる。
本発明の体液試料の採取用物品が外装に覆われた採取用デバイスの一例を図６（特に図６ｂ）に示す。5. Devices for collecting body fluid samples
The device for collecting a body fluid sample of the present invention includes the article for collecting a body fluid sample of the present invention and an exterior. The exterior used in the present invention is a part for covering the collection article of the present invention. The manner in which the collection article of the present invention is covered with the exterior is not limited, and examples of the manner in which the collection article of the present invention is covered by, for example, putting (for example, inserting), wrapping, sandwiching, overlapping, placing, etc. in the exterior.
In the present invention, by using an exterior, when the body fluid sample collection device is placed in an absorbent sanitary product, it is possible to, for example, further reduce the burden on the subject's skin, further reduce the contamination of the collection item with feces, and further reduce the displacement when placed in an absorbent sanitary product such as a diaper, etc. The exterior is not limited, and examples thereof include an exterior formed of a liquid-permeable sheet (e.g., nonwoven fabric), a cotton puff, gauze, etc.
One embodiment of the sampling device of the present invention is a sampling device in which the article for sampling a body fluid sample of the present invention is covered with an exterior.
An example of a collection device in which the article for collecting a body fluid sample of the present invention is covered with an exterior is shown in FIG. 6 (particularly FIG. 6b).

６．体液試料の採取用キット
本発明の体液試料の採取用キットは、本発明の体液試料の採取用物品及び外装を含むものである。また、本発明の体液試料の採取用キットは、本発明の体液試料の採取用物品及び外装に加えて、さらに体液試料と接触した後の採取用物品（以下、「体液試料と接触した採取用物品」ともいう）を乾燥させるためのケース（乾燥用ケース）を含むことができる。6. Body fluid sample collection kit
The body fluid sample collection kit of the present invention includes the body fluid sample collection article and exterior packaging of the present invention. The body fluid sample collection kit of the present invention can further include a case (drying case) for drying the collection article after contact with the body fluid sample (hereinafter also referred to as "collection article in contact with the body fluid sample") in addition to the body fluid sample collection article and exterior packaging of the present invention.

本発明の体液試料の採取用キットは、本発明の体液試料の採取用物品、外装及び乾燥用ケースのほか、追加の透液性シート、吸収性衛生用品、接着用シール、カッター、ピンセット、個体識別用タグ（例えば、シール、シート等）、配送用資材、取扱説明書など、体液試料を採取するために必要なもの、体液試料と接触した採取用物品から標的物質付着性担体を取り出すために必要なもの、標的物質の検出や測定に必要なものなどを適宜含むことができる。The body fluid sample collection kit of the present invention may include, in addition to the body fluid sample collection article of the present invention, an outer packaging, and a drying case, additional liquid-permeable sheets, absorbent sanitary products, adhesive stickers, cutters, tweezers, individual identification tags (e.g., stickers, sheets, etc.), delivery materials, instruction manuals, and other items necessary for collecting a body fluid sample, items necessary for removing a target substance-adherent carrier from the collection article that has come into contact with a body fluid sample, and items necessary for detecting and measuring a target substance, as appropriate.

本発明において、乾燥用ケースは、体液試料と接触した採取用物品を乾燥させる際に使用することができるケースである。体液試料と接触した採取用物品を乾燥用ケースに格納することで、乾燥、配送、開封、検出試験などの作業中に人の手が当該採取用物品に触れることによる汚染（コンタミネーション）を軽減することができる。また、体液試料と接触した採取用物品を乾燥用ケースに格納したまま、配送することもできる。
本発明において、乾燥用ケースは、開く蓋と本体とを備え、前記蓋及び本体は複数の通気用穴（通気孔）を備え、体液試料と接触した採取用物品を受け入れるための容積部を備えるものである。
本発明の一態様において、前記蓋と本体の少なくとも一方は、体液試料と接触した採取用物品を乾燥用ケースに格納した場合に、当該格納された採取用物品を乾燥用ケースの外側から開封できるように、開封用穴を備えてもよい。
本発明の一態様において、乾燥用ケースは、個体識別用タグを付するための領域を有していてもよい。個体識別用タグは、個体識別用シール又はシートであってもよい。個体識別の態様は限定されるものではなく、例えば、バーコード、数字、数字以外の文字など任意の態様を適宜選択することができる。
本発明の一態様において、乾燥用ケースには、体液試料と接触した採取用物品を乾燥用ケースに格納した場合に、乾燥用ケースの外から当該採取用物品と乾燥用ケースとを接着するために用いられる窓部を設けてもよい。接着には、例えば、シールやテープで留めるなど、任意の手段を用いることができる。当該窓部は、乾燥用ケースの蓋と本体の少なくとも一方に設けることができる。
本発明の乾燥用ケースが上記構造を有することにより、試験実施者は、体液試料と接触した採取用物品に手を触れることなくこれを開封し、さらに当該物品から標的物質付着性担体を取り出すことができる。開封の態様については、後述する「１０．体液中の標的物質の検出方法」に記載する。 In the present invention, the drying case is a case that can be used when drying a collection article that has come into contact with a body fluid sample. By storing the collection article that has come into contact with a body fluid sample in the drying case, contamination caused by human hands touching the collection article during operations such as drying, delivery, opening, and detection testing can be reduced. In addition, the collection article that has come into contact with a body fluid sample can be delivered while still stored in the drying case.
In the present invention, the drying case comprises an opening lid and a body, the lid and the body having a plurality of ventilation holes (vent holes) and a volume for receiving a sampling item that has come into contact with a bodily fluid sample.
In one aspect of the present invention, at least one of the lid and the main body may be provided with an opening hole so that when a collection item that has come into contact with a bodily fluid sample is stored in the drying case, the stored collection item can be opened from the outside of the drying case.
In one aspect of the present invention, the drying case may have an area for attaching an individual identification tag. The individual identification tag may be an individual identification sticker or sheet. The form of individual identification is not limited, and any form such as a bar code, a number, or a character other than a number may be appropriately selected.
In one aspect of the present invention, the drying case may be provided with a window portion that is used to attach the sampling article and the drying case from the outside of the drying case when the sampling article that has come into contact with the body fluid sample is stored in the drying case. Any means can be used for attachment, such as fastening with a seal or tape. The window portion can be provided on at least one of the lid and the main body of the drying case.
The drying case of the present invention has the above-mentioned structure, so that the tester can open the sampling article that has been in contact with the body fluid sample without touching it, and can further remove the target substance-adherent carrier from the article. The manner of opening is described later in "10. Method for detecting a target substance in a body fluid."

本発明のキットにおいて、追加の透液性シートは、例えば、本発明の体液試料の採取用物品に重ねて使用することもできるし、外装として使用することもできる。
本発明において、「吸収性衛生用品」とは、吸収性素材を含む衛生用品を意味し、このような衛生用品としては、例えば、おむつ、マスク及びその他の吸水性パッド（尿とりパッド、母乳パッド等）などが挙げられ、これらに限定されない。本発明の物品は、これらの吸収性衛生用品に配置（必要であれば固定）して使用することができる。
本発明の採取用キットは、複数種類の吸収性衛生用品を含んでいてもよい。すなわち、本発明の採取用キットは、おむつ、マスク及び吸水性パッドからなる群から選択される少なくとも1つの吸収性衛生用品を含むことができる。 In the kit of the present invention, the additional liquid-permeable sheet can be used, for example, by being layered on the article for collecting a body fluid sample of the present invention, or can be used as an exterior.
In the present invention, the term "absorbent sanitary product" refers to a sanitary product containing an absorbent material, and examples of such sanitary products include, but are not limited to, diapers, masks, and other absorbent pads (urinary pads, breast pads, etc.). The article of the present invention can be used by being placed (fixed, if necessary) in these absorbent sanitary products.
The collection kit of the present invention may include multiple types of absorbent sanitary products, i.e., the collection kit of the present invention may include at least one absorbent sanitary product selected from the group consisting of diapers, masks, and absorbent pads.

７．体液試料の採取用物品又は採取用デバイスを備える吸収性衛生用品
本発明の体液試料の採取用物品又は採取用デバイスは、吸収性衛生用品に配置して使用することができる。すなわち、本発明は、体液試料の採取用物品を備える吸収性衛生用品を提供する。本発明において、「体液試料の採取用物品又は採取用デバイスを備える」とは、体液試料の採取用物品又は採取用デバイスが、吸収性衛生用品における、体液試料を採取する上で適切な位置に配置されている状態を意味する。また、必要であれば、本発明の採取用物品又は採取用デバイスは、吸収性衛生用品の適切な位置に配置されるだけでなく、さらに任意の公知の方法で固定、装着、包装、埋め込み、挿入などされていてもよい。さらには、本発明の「体液試料の採取用物品又は採取用デバイスを備える吸収性衛生用品」には、体液試料の採取用物品又は採取用デバイスと吸収性衛生用品とが一体のものとして製造されたものを含む。この場合、体液試料の採取用物品又は採取用デバイスを吸収性衛生用品に配置する必要なく、被験者に吸収性衛生用品を装着するだけで体液試料の採取が可能である。
本発明における「吸収性衛生用品」は、上記「６．体液試料の採取用キット」で説明したとおりである。7. Absorbent sanitary products equipped with articles or devices for collecting body fluid samples
The body fluid sample collection article or collection device of the present invention can be placed in an absorbent sanitary product and used. That is, the present invention provides an absorbent sanitary product equipped with a body fluid sample collection article. In the present invention, "equipped with a body fluid sample collection article or collection device" means a state in which the body fluid sample collection article or collection device is placed in an appropriate position in the absorbent sanitary product for collecting a body fluid sample. If necessary, the body fluid sample collection article or collection device of the present invention may not only be placed in an appropriate position in the absorbent sanitary product, but may also be fixed, attached, wrapped, embedded, inserted, etc. by any known method. Furthermore, the "absorbent sanitary product equipped with a body fluid sample collection article or collection device" of the present invention includes an absorbent sanitary product manufactured as an integrated product of the body fluid sample collection article or collection device and the absorbent sanitary product. In this case, it is not necessary to place the body fluid sample collection article or collection device in the absorbent sanitary product, and the body fluid sample can be collected by simply wearing the absorbent sanitary product on the subject.
The "absorbent sanitary product" in the present invention is as explained above in "6. Kit for collecting body fluid samples."

８．標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品の製造方法
本発明は、以下の工程を含む、標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品の製造方法を提供する。
(a) 標的物質付着性担体を準備する工程、及び
(b) 透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程8. Method for manufacturing an article in which a target substance-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet
The present invention provides a method for producing an article in which a target substance-adherent carrier is encapsulated in a liquid-permeable sheet, the method comprising the steps of:
(a) preparing a target substance-attachable carrier; and
(b) processing the liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet;

工程(a)は、標的物質付着性担体を準備する工程である。本発明において、「準備する」（preparing）とは、標的物質付着性担体の素材（濾紙、試験紙、濾布など）を用意し、必要な場合は、当該素材を標的物質と試験紙若しくは試薬との反応に供試することができる形態に加工することを意味する。「標的物質と試験紙若しくは試薬との反応に供試することができる形態に加工する」態様の一態様として、例えば、工程(a)は、標的物質付着性担体を透液性シートに封入可能な形態又は反応用容器に格納可能な形態に加工する工程を含んでいてもよい。
但し、本発明において、標的物質付着性担体は、標的物質の検出試験に供試することができる形態である限り、その素材を加工する必要はない。 Step (a) is a step of preparing a target substance-adherent carrier. In the present invention, "preparing" means preparing a material for the target substance-adherent carrier (such as filter paper, test paper, or filter cloth) and, if necessary, processing the material into a form that can be used for the reaction between the target substance and test paper or reagent. As one embodiment of "processing into a form that can be used for the reaction between the target substance and test paper or reagent", for example, step (a) may include a step of processing the target substance-adherent carrier into a form that can be enclosed in a liquid-permeable sheet or a form that can be stored in a reaction vessel.
However, in the present invention, the target substance-adhering carrier does not need to be processed as long as it is in a form that can be used in a detection test for the target substance.

工程(b)は、透液性シートを、標的物質付着性担体を入れることができるように加工して、加工した透液性シートに標的物質付着性担体を封入する工程である。本工程において、透液性シートの加工は、標的物質付着性担体を入れることができるような加工であれば限定されるものではなく、例えば、透液性シートを折る、切る、畳む、重ねる、溶着する、袋状に加工することなどが挙げられる。
また、すでに加工された透液性シートが入手できる場合は、入手した透液性シートを加工しないでそのまま標的物質付着性担体の封入に用いることもできる。例えば、ティーバック状に加工された透液性シートは、市販のものを入手できる。 Step (b) is a step of processing the liquid-permeable sheet so that the target substance-adherent carrier can be inserted, and encapsulating the target substance-adherent carrier in the processed liquid-permeable sheet. In this step, the processing of the liquid-permeable sheet is not limited as long as it is a processing that allows the target substance-adherent carrier to be inserted, and examples thereof include folding, cutting, folding, stacking, welding, and processing the liquid-permeable sheet into a bag shape.
In addition, when a liquid-permeable sheet that has already been processed is available, the obtained liquid-permeable sheet can be used as is for encapsulating the target substance-adherent carrier without processing it. For example, liquid-permeable sheets processed into a tea bag shape are commercially available.

本発明において、「標的物質付着性担体」、「反応用容器に格納可能な形態」、「加工」等の用語については、「３．（１）標的物質付着性担体」に記載したとおりであり、「透液性シート」、「封入」等の用語については「４．体液試料の採取用物品」に記載したとおりである。In the present invention, terms such as "target substance-adhering carrier," "form capable of being stored in a reaction vessel," and "processing" are as described in "3. (1) Target substance-adhering carrier," and terms such as "liquid-permeable sheet" and "encapsulation" are as described in "4. Articles for collecting body fluid samples."

９．核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品の製造方法
本発明は、以下の工程を含む、核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品の製造方法を提供する。
(a) 核酸付着性担体を準備する工程、及び
(b) 透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程9. Method for manufacturing an article in which a nucleic acid-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet
The present invention provides a method for producing an article in which a nucleic acid-adhering carrier is encapsulated in a liquid-permeable sheet, the method comprising the steps of:
(a) preparing a nucleic acid-attaching carrier; and
(b) processing the liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet;

工程(a)は、核酸付着性担体を準備する工程である。本発明において、「準備する」（preparing）とは、核酸付着性担体の素材（濾紙、濾布など）を用意し、必要な場合は、当該素材を核酸増幅反応に供試することができる形態に加工することを意味する。「核酸付着性担体の素材を核酸増幅反応に供試することができる形態に加工する」一態様として、例えば、工程(a)は、核酸付着性担体を核酸増幅用容器に格納可能な形態に加工する工程を含んでいてもよい。但し、本発明において、核酸付着性担体は、核酸増幅反応に供試することができる形態である限り、核酸付着性担体の素材を加工する必要はない。Step (a) is a step of preparing a nucleic acid-adherent carrier. In the present invention, "preparing" means preparing a material for a nucleic acid-adherent carrier (filter paper, filter cloth, etc.) and, if necessary, processing the material into a form that can be used in a nucleic acid amplification reaction. As an embodiment of "processing a material for a nucleic acid-adherent carrier into a form that can be used in a nucleic acid amplification reaction", for example, step (a) may include a step of processing the nucleic acid-adherent carrier into a form that can be stored in a nucleic acid amplification container. However, in the present invention, as long as the nucleic acid-adherent carrier is in a form that can be used in a nucleic acid amplification reaction, it is not necessary to process the material for the nucleic acid-adherent carrier.

工程(b)は、透液性シートを、核酸付着性担体を入れることができるように加工して、加工した透液性シートに核酸付着性担体を封入する工程である。本工程において、透液性シートの加工は、核酸付着性担体を入れることができるような加工であれば限定されるものではなく、例えば、透液性シートを折る、切る、畳む、重ねる、溶着する、袋状に加工することなどが挙げられる。
また、すでに加工された透液性シートが入手できる場合は、入手した透液性シートを加工しないでそのまま核酸付着性担体の封入に用いることもできる。例えば、ティーバック状に加工された透液性シートは、市販のものを入手できる。 Step (b) is a step of processing the liquid-permeable sheet so that the nucleic acid-adhering carrier can be inserted, and encapsulating the nucleic acid-adhering carrier in the processed liquid-permeable sheet. In this step, the processing of the liquid-permeable sheet is not limited as long as it is a processing that allows the nucleic acid-adhering carrier to be inserted, and examples thereof include folding, cutting, folding, stacking, welding, and processing into a bag shape.
In addition, when a liquid-permeable sheet that has already been processed is available, the obtained liquid-permeable sheet can be used as is for encapsulating the nucleic acid-attaching carrier without processing it. For example, liquid-permeable sheets processed into a tea bag shape are commercially available.

本発明において、「核酸付着性担体」、「核酸増幅用容器に格納可能な形態」、「加工」等の用語については、「３．（２）核酸付着性担体」に記載したとおりであり、「透液性シート」、「封入」等の用語については「４．体液試料の採取用物品」に記載したとおりである。In the present invention, terms such as "nucleic acid adhesive carrier," "a form that can be stored in a container for nucleic acid amplification," and "processing" are as described in "3. (2) Nucleic acid adhesive carrier," and terms such as "liquid-permeable sheet" and "encapsulation" are as described in "4. Articles for collecting body fluid samples."

１０．体液中の標的物質の検出方法
本発明は、以下の工程を含む、体液中の標的物質の検出方法を提供する。
(a) 標的物質付着性担体を準備する工程、
(b) 透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程、
(c) 工程(b)で得られた、標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品と、体液試料とを接触させる工程
(d) 前記担体に付着した標的物質を検出する工程10. Method for detecting target substances in body fluids
The present invention provides a method for detecting a target substance in a body fluid, comprising the following steps:
(a) preparing a target substance-attachable carrier;
(b) processing a liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet;
(c) a step of contacting the article obtained in step (b), in which the target substance-adherent carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet, with a body fluid sample.
(d) detecting the target substance attached to the carrier

工程(a)及び(b)については、上記「８．標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品の製造方法」で説明したとおりである。The steps (a) and (b) are as explained in "8. Method for producing an article having a target substance-adherent carrier encapsulated in a liquid-permeable sheet" above.

工程(c)は、工程(b)で得られた、標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品と、体液試料とを接触させる工程である。
本発明において、「接触させる」とは、透液性シートに封入された標的物質付着性担体の少なくとも一部と体液試料とを触れさせることを意味し、必ずしも封入された全ての標的物質付着性担体と体液試料とを触れさせることを意味しない。
また、本工程は、必要に応じて、標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品又は本発明の体液試料の採取用デバイスを吸収性衛生用品に配置する工程をさらに含むことができる。また、必要であれば、当該物品又はデバイスを吸収性衛生用品に配置するだけでなく、さらに任意の公知の方法で固定、装着、挿入などしてもよい。配置又は固定する位置などについては、上記「４．体液試料の採取用物品」に記載したとおりである。 Step (c) is a step of contacting the article obtained in step (b), in which the target substance-adherent carrier is encapsulated in a liquid-permeable sheet, with a body fluid sample.
In the present invention, "contact" means bringing at least a portion of the target substance-adherent carrier enclosed in the liquid-permeable sheet into contact with the body fluid sample, and does not necessarily mean bringing all of the enclosed target substance-adherent carrier into contact with the body fluid sample.
In addition, this step may further include a step of placing an article in which a target substance-adherent carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet or the device for collecting a body fluid sample of the present invention in an absorbent sanitary product, if necessary. In addition, if necessary, the article or device may not only be placed in the absorbent sanitary product, but may also be fixed, attached, inserted, etc., by any known method. The position of placement or fixing is as described above in "4. Article for collecting a body fluid sample."

本発明の方法において、採取用デバイスを用いた場合は、工程(c)の後、体液試料と接触した採取用物品から外装を外してもよい。In the method of the present invention, when a sampling device is used, after step (c), the outer packaging may be removed from the sampling article that has come into contact with the body fluid sample.

本発明において、工程(c)の後、工程(c)で得られた体液試料と接触した採取用物品を、乾燥させることができる。体液試料と接触した採取用物品は、乾燥用ケースに格納して乾燥させてもよい。
本発明において、乾燥用ケースに格納された、体液試料と接触した採取用物品の開封の態様としては、例えば、(1) 乾燥用ケースから当該採取用物品を取り出して、取り出した当該物品をハサミやカッターなどで開封する態様、(2) (i) 乾燥用ケースに設けられた開封用穴を通して、格納された当該採取用物品を乾燥用ケースの外側からカッターなどで開封し、(ii) 乾燥用ケースに設けられた窓部を通して、体液試料と接触した採取用物品と乾燥用ケースとをテープなどで接着し、(iii) ケースを開くことによりこれに接着した採取用物品も手を触れることなく開封する、という態様などが挙げられるが、これらに限定されない。 In the present invention, after step (c), the sampling article that has come into contact with the body fluid sample obtained in step (c) can be dried. The sampling article that has come into contact with the body fluid sample may be stored in a drying case and dried.
In the present invention, the manner of opening the collection item stored in the drying case and in contact with the body fluid sample includes, for example, but is not limited to, (1) removing the collection item from the drying case and opening the removed item with scissors, a cutter, or the like; (2) (i) opening the stored collection item from the outside of the drying case with a cutter or the like through an opening hole provided in the drying case, (ii) adhering the collection item that has come into contact with the body fluid sample to the drying case with tape or the like through a window provided in the drying case, and (iii) opening the case to open the collection item attached thereto without touching it.

工程(d)は、標的物質付着性担体に付着した標的物質を検出する工程である。
本工程の態様は、対象となる標的物質の種類に応じて、適宜選択することができる。本工程の態様としては、限定されるものではなく、例えば、
（１）標的物質付着性担体として各種試験紙を用い、前記担体の色の変化を指標として、標的物質を検出する工程を含む態様、
（２）体液試料と接触させた物品から、標的物質付着性担体を取り出し、取り出した標的物質付着性担体を反応用容器に入れ、標的物質と検出試薬との反応により生じた試薬若しくは担体の色の変化を指標として、標的物質を検出する工程を含む態様、
（３）体液試料と接触させた物品から、標的物質付着性担体を取り出し、取り出した標的物質付着性担体から抽出液を調製し、当該抽出液中の標的物質と検出試薬との反応により標的物質を検出する工程を含む態様、
（４）体液試料と接触させた物品から、核酸付着性担体を取り出し、取り出した核酸付着性担体を反応用容器に入れ、核酸増幅反応により標的核酸を検出する工程を含む態様、
などが挙げられる。
以下、上記（１）～（４）の態様について説明する。 Step (d) is a step of detecting the target substance attached to the target substance-adhering carrier.
The embodiment of this step can be appropriately selected depending on the type of the target substance. The embodiment of this step is not limited, and may be, for example,
(1) An embodiment including a step of detecting a target substance using various test papers as a target substance-adhering carrier and using a color change of the carrier as an indicator;
(2) An embodiment including a step of removing the target substance-adhering carrier from the article that has been brought into contact with the body fluid sample, placing the removed target substance-adhering carrier in a reaction vessel, and detecting the target substance using as an indicator a color change in the reagent or carrier caused by a reaction between the target substance and a detection reagent;
(3) An embodiment including a step of removing a target substance-adhering carrier from an article that has been brought into contact with a body fluid sample, preparing an extract from the removed target substance-adhering carrier, and detecting the target substance by a reaction between the target substance in the extract and a detection reagent;
(4) An embodiment including a step of removing the nucleic acid-adhering carrier from the article that has been brought into contact with the body fluid sample, placing the removed nucleic acid-adhering carrier in a reaction vessel, and detecting the target nucleic acid by a nucleic acid amplification reaction;
etc.
The above aspects (1) to (4) will be described below.

（１）標的物質付着性担体として各種試験紙を用いる態様
本態様において、上記工程(a)（標的物質付着性担体を準備する工程）における標的物質付着性担体は、各種試験紙又はこれを加工したものであってもよい。「試験紙」及び「加工」の説明は、上記「３．（１）標的物質付着性担体」に記載した通りである。(1) An embodiment in which various test papers are used as a target substance-adhering carrier
In this embodiment, the target substance-adhering carrier in the above step (a) (the step of preparing a target substance-adhering carrier) may be any of various test papers or processed versions thereof. The explanation of "test paper" and "processing" is as described in "3. (1) Target substance-adhering carrier" above.

工程(a)において、標的物質付着性担体が各種試験紙又はこれを加工したものである場合、上記工程(d)は、前記担体の色の変化を指標として、標的物質を検出する工程を含む。
本工程における色の変化とは、当該担体が標的物質と接触した場合に、当該担体の色が、標的物質と接触する前の担体又は標的物質と接触していない担体の色と比較して、変化することをいう。例えば、標的物質と接触する前の担体又は標的物質と接触していない担体の色（「元の色」という）が任意の色、例えば黄色であるのに対し、標的物質と接触した担体が元の色とは異なる色、例えば青色である場合、色の変化があったということができる。「色の変化を指標とする」とは、色の変化を、試料中の標的物質の存在や濃度の高低を示すものとして利用することを意味する。 In the step (a), when the target substance-adhering carrier is any of various test papers or a processed version thereof, the step (d) includes a step of detecting the target substance using a color change of the carrier as an indicator.
The color change in this step refers to a change in the color of the carrier when the carrier comes into contact with a target substance, compared to the color of the carrier before contacting with the target substance or the color of the carrier not in contact with the target substance. For example, if the color of the carrier before contacting with the target substance or the color of the carrier not in contact with the target substance (referred to as the "original color") is any color, such as yellow, while the color of the carrier in contact with the target substance is a color different from the original color, such as blue, it can be said that there has been a color change. "Using the color change as an indicator" means that the color change is used to indicate the presence or concentration of a target substance in a sample.

本発明において、担体の色が変化した場合、その色の変化は標的物質の存在や濃度の高低を示す。一方、本発明において、担体の色が変化しなかった場合、このことは、試料中に標的物質が存在しないか、試料中の標的物質の濃度が検出できないレベルであることを示す。すなわち、担体の色の変化は標的物質の存在や濃度の高低と関連づけられるため、色の変化を指標として標的物質を検出することができる。
色の変化は、目視で確認することもできるし、公知の分析機器を用いて確認することもできる。
工程(d)において、担体の色の変化を物品の外を目視で確認することができる場合、必ずしも担体を物品から取り出す必要はない。 In the present invention, when the color of the carrier changes, the color change indicates the presence or concentration of the target substance. On the other hand, in the present invention, when the color of the carrier does not change, this indicates that the target substance is not present in the sample or the concentration of the target substance in the sample is at an undetectable level. In other words, since the color change of the carrier is related to the presence or concentration of the target substance, the target substance can be detected using the color change as an indicator.
The color change can be confirmed visually or by using a known analytical instrument.
In step (d), when the color change of the carrier can be visually confirmed from outside the article, it is not always necessary to remove the carrier from the article.

（２）検出試薬を用いて標的物質を検出する態様
本態様において、上記工程(d)は、例えば、
(i) 体液試料と接触した前記物品から、標的物質付着性担体を取り出す工程、及び
(ii) 前記取り出した標的物質付着性担体を反応用容器に入れ、標的物質と検出試薬との反応により標的物質を検出する工程
を含む。(2) Detection of a target substance using a detection reagent
In this embodiment, the step (d) is, for example,
(i) removing the target substance-adhering carrier from the article that has been in contact with the body fluid sample; and
(ii) A step of placing the target substance-adhering carrier thus removed into a reaction vessel and detecting the target substance by a reaction between the target substance and a detection reagent.

上記工程(i)は、工程(c)で得られた、体液試料と接触させた物品から、標的物質付着性担体を取り出す工程である。
標的物質付着性担体の取り出し方は限定されるものではなく、例えば、工程(c)で体液試料と接触させた物品を開封し、標的物質除去処理をした器具又は未使用の器具（例えばピンセット）を用いて当該物品に封入された標的物質付着性担体を取り出す方法が挙げられる。 The above step (i) is a step of removing the target substance-adherent carrier from the article obtained in step (c) that has been brought into contact with the body fluid sample.
The method for removing the target substance-adherent carrier is not limited, and examples of the method include opening the article that has been brought into contact with the body fluid sample in step (c) and removing the target substance-adherent carrier enclosed in the article using an instrument that has been treated to remove the target substance or an unused instrument (e.g., tweezers).

上記工程(ii)は、工程(i)で取り出した標的物質付着性担体を反応用容器に入れ、標的物質と検出試薬との反応により標的物質を検出する工程である。
本発明において、工程(i)で取り出した標的物質付着性担体を反応用容器に入れる前に、当該担体を、洗浄、乾燥などしてもよい。 The above step (ii) is a step of placing the target substance-adhering carrier removed in step (i) into a reaction vessel and detecting the target substance by the reaction between the target substance and a detection reagent.
In the present invention, the target substance-adhering carrier removed in step (i) may be washed, dried, etc. before being placed in a reaction vessel.

本発明において、「反応用容器」については、上記「３．（１）標的物質付着性担体」に記載したとおりである。
上記工程(ii)は、標的物質と反応する試薬を反応用容器に入れる工程を含む。試薬を入れるのは、標的物質付着性担体を反応用容器に入れる前であっても後であってもよい。試薬は、標的物質と反応する試薬であれば限定されず、当業者であれば、標的物質の種類に合わせて、対象とする標的物質に反応する市販の試薬を選択して入手することができる。試薬は複数種類使用することができる。 In the present invention, the "reaction vessel" is as described above in "3. (1) Target substance-adhering carrier."
The above step (ii) includes a step of placing a reagent that reacts with the target substance into the reaction vessel. The reagent may be placed before or after the target substance-adhering carrier is placed into the reaction vessel. The reagent is not limited as long as it reacts with the target substance, and a person skilled in the art can select and obtain a commercially available reagent that reacts with the target substance of interest according to the type of target substance. Multiple types of reagents can be used.

上記工程(ii)において、「標的物質と検出試薬との反応により標的物質を検出する」態様としては、例えば、標的物質と検出試薬との反応による試薬の色の変化を指標として、標的物質を検出する態様が含まれる。In the above step (ii), the embodiment of "detecting a target substance by a reaction between the target substance and a detection reagent" includes, for example, an embodiment of detecting the target substance using a color change of the reagent due to the reaction between the target substance and the detection reagent as an indicator.

本工程における色の変化とは、当該試薬が標的物質と接触した場合に、当該試薬若しくは担体の色が、標的物質と接触する前の試薬若しくは担体又は標的物質と接触していない試薬若しくは担体の色と比較して、変化することをいう。例えば、標的物質と接触する前の試薬若しくは担体又は標的物質と接触していない試薬若しくは担体の色（「元の色」という）が任意の色、例えば、透明、白であるのに対し、標的物質と接触した試薬若しくは担体が元の色とは異なる色、例えば紫色である場合、色の変化があるということができる。「色の変化を指標とする」とは、色の変化を試料中の標的物質の存在や濃度の高低を示すものとして利用することを意味する。In this step, the color change refers to a change in the color of the reagent or carrier when the reagent comes into contact with a target substance, compared to the color of the reagent or carrier before contacting the target substance, or the color of the reagent or carrier not in contact with the target substance. For example, if the color of the reagent or carrier before contacting the target substance, or the color of the reagent or carrier not in contact with the target substance (referred to as the "original color") is any color, such as transparent or white, while the color of the reagent or carrier in contact with the target substance is a color different from the original color, such as purple, it can be said that there is a color change. "Using the color change as an indicator" means that the color change is used to indicate the presence or concentration of a target substance in a sample.

本発明において、試薬若しくは担体の色が変化した場合、その色の変化は標的物質の存在や濃度の高低を示す。一方、本発明において、試薬若しくは担体の色が変化しなかった場合、このことは、試料中に標的物質が存在しないか、試料中の標的物質の濃度が検出できないレベルであることを示す。すなわち、試薬若しくは担体の色の変化は標的物質の存在や濃度の高低と関連づけられるため、色の変化を指標として標的物質を検出することができる。
色の変化は、目視で確認することもできるし、公知の分析機器を用いて吸光度を測定する手法などにより確認することもできる。 In the present invention, when the color of the reagent or carrier changes, the color change indicates the presence or concentration of the target substance. On the other hand, in the present invention, when the color of the reagent or carrier does not change, this indicates that the target substance is not present in the sample or the concentration of the target substance in the sample is at an undetectable level. In other words, since the color change of the reagent or carrier is associated with the presence or concentration of the target substance, the target substance can be detected using the color change as an indicator.
The color change can be confirmed visually or by a method of measuring absorbance using a known analytical instrument.

本工程の一態様としては、例えば、工程(i)で取り出した標的物質付着性担体と検出試薬を反応用容器（例えばチューブ）に入れ、加温し、色の変化の有無を検討する工程を含む。本工程には、その他検出に必要な工程（例えば、撹拌工程、遠心工程など）がさらに含まれる。本工程において、試薬は複数種類用いてもよい。
標的物質と試薬との反応条件（例えば、反応温度、反応時間、試薬の量など）、並びにその他必要な工程の種類及び条件は、当業者であれば、試薬の説明書に基づいて適宜設定することができる。 One embodiment of this step includes, for example, a step of placing the target substance-adhering carrier and the detection reagent taken out in step (i) in a reaction vessel (e.g., a tube), heating the vessel, and examining whether or not there is a color change. This step further includes other steps necessary for detection (e.g., a stirring step, a centrifugation step, etc.). In this step, multiple types of reagents may be used.
A person skilled in the art can appropriately set the reaction conditions between the target substance and the reagent (e.g., reaction temperature, reaction time, amount of reagent, etc.) as well as the types and conditions of other necessary steps based on the instructions for the reagent.

（３）標的物質付着性担体から調製した抽出液を用いて標的物質を検出する態様
本態様において、工程(d)は、
(i) 体液試料と接触した物品から、標的物質付着性担体を取り出す工程、及び
(ii) 前記取り出した標的物質付着性担体から抽出液を調製し、当該抽出液中の標的物質と検出試薬との反応により標的物質を検出する工程
を含む。
上記工程(i)は、上記「（２）検出試薬を用いて標的物質を検出する態様」に記載したとおりである。
上記工程(ii)は、物品から取り出した標的物質付着性担体から抽出液を調製する工程を含む。この工程の一態様としては、例えば、当該標的物質付着性担体と液体溶媒（例えば、水）を反応用容器（例えばチューブ）に入れ、反応容器用ミキサー等で撹拌することにより抽出液を調製することができる。
また、上記工程(ii)はさらに、当該抽出液を反応用容器に入れ、標的物質と検出試薬との反応により標的物質を検出する工程を含む。この工程の一態様としては、例えば、上記で調製した抽出液を別の容器に入れ、これに検出試薬を添加し、抽出液中の標的物質と検出試薬との反応により生成した溶液を分析すること（例えば、溶液の吸光度を測定すること等）により、標的物質を検出する態様が挙げられる。この工程において、検出を自動分析装置を用いて行う場合は、検出試薬は、当該装置により自動的に添加されてもよい。
標的物質と試薬との反応条件（例えば、反応温度、反応時間、試薬の量など）、並びにその他必要な工程の種類及び条件は、当業者であれば、試薬又は分析装置の説明書に基づいて適宜設定することができる。(3) An embodiment in which a target substance is detected using an extract prepared from a target substance-adhering carrier
In this embodiment, step (d) comprises:
(i) removing the target substance-adhering carrier from the article that has come into contact with the body fluid sample; and
(ii) preparing an extract from the target substance-adhering carrier thus removed, and detecting the target substance by reacting the target substance in the extract with a detection reagent.
The above step (i) is as described above in “(2) Mode for detecting a target substance using a detection reagent”.
The above step (ii) includes a step of preparing an extract from the target substance-adhering carrier removed from the article. In one embodiment of this step, for example, the target substance-adhering carrier and a liquid solvent (e.g., water) are placed in a reaction vessel (e.g., a tube) and stirred with a reaction vessel mixer or the like to prepare an extract.
Moreover, the above step (ii) further includes a step of placing the extract in a reaction vessel and detecting the target substance by a reaction between the target substance and a detection reagent. One aspect of this step is, for example, placing the extract prepared above in another vessel, adding a detection reagent thereto, and analyzing the solution produced by the reaction between the target substance in the extract and the detection reagent (for example, measuring the absorbance of the solution, etc.) to detect the target substance. In this step, when the detection is performed using an automatic analyzer, the detection reagent may be added automatically by the device.
A person skilled in the art can appropriately set the reaction conditions between the target substance and the reagent (e.g., reaction temperature, reaction time, amount of reagent, etc.), as well as the types and conditions of other necessary steps, based on the instructions for the reagent or analytical device.

上記（４）の態様については、以下「１１．体液中の標的核酸の検出方法」において説明する。The above aspect (4) will be described below in "11. Method for detecting target nucleic acid in body fluid."

１１．体液中の標的核酸の検出方法
本発明は、以下の工程を含む、体液中の標的核酸の検出方法を提供する。
(a) 核酸付着性担体を準備する工程、
(b) 透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程、
(c) 工程(b)で得られた、核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品と、体液試料とを接触させる工程、
(d) 体液試料と接触した前記物品から、核酸付着性担体を取り出す工程、及び
(e) 工程(d)で取り出した核酸付着性担体を核酸増幅用容器に入れ、核酸増幅反応により標的核酸を検出する工程11. Method for detecting target nucleic acid in body fluid
The present invention provides a method for detecting a target nucleic acid in a body fluid, comprising the steps of:
(a) preparing a nucleic acid-attaching carrier;
(b) processing a liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet;
(c) contacting the article obtained in step (b), in which the nucleic acid-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet, with a body fluid sample;
(d) removing the nucleic acid-attached carrier from the article that has been in contact with the body fluid sample; and
(e) a step of placing the nucleic acid-adhering carrier removed in step (d) into a container for nucleic acid amplification and detecting the target nucleic acid by a nucleic acid amplification reaction.

工程(a)及び(b)については、上記「９．核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品の製造方法」で説明したとおりである。The steps (a) and (b) are as explained in "9. Method for producing an article in which a nucleic acid-adhering carrier is encapsulated in a liquid-permeable sheet" above.

工程(c)は、工程(b)で得られた、核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品と、体液試料とを接触させる工程である。
本発明において、「接触させる」とは、透液性シートに封入された核酸付着性担体の少なくとも一部と体液試料とを触れさせることを意味し、必ずしも封入された全ての核酸付着性担体と体液試料とを触れさせることを意味しない。
また、本工程は、必要に応じて、核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品又は本発明の体液試料の採取用デバイスを吸収性衛生用品に配置する工程をさらに含むことができる。また、必要であれば、当該物品又はデバイスを吸収性衛生用品に配置するだけでなく、さらに任意の公知の方法で固定、装着、挿入などしてもよい。配置又は固定する位置などについては、上記「４．体液試料の採取用物品」に記載したとおりである。 Step (c) is a step of contacting the article obtained in step (b), in which the nucleic acid-adhering carrier is encapsulated in a liquid-permeable sheet, with a body fluid sample.
In the present invention, "contact" means bringing at least a portion of the nucleic acid-adhering carrier enclosed in the liquid-permeable sheet into contact with the body fluid sample, and does not necessarily mean bringing all of the enclosed nucleic acid-adhering carrier into contact with the body fluid sample.
In addition, this step may further include a step of placing an article in which the nucleic acid-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet or the device for collecting a body fluid sample of the present invention in an absorbent sanitary product, if necessary. In addition, if necessary, the article or device may not only be placed in the absorbent sanitary product, but may also be fixed, attached, inserted, etc., by any known method. The position of placement or fixing is as described above in "4. Article for collecting a body fluid sample".

本発明の方法において、採取用デバイスを用いた場合は、工程(c)の後、体液試料と接触した採取用物品から外装を外してもよい。In the method of the present invention, when a sampling device is used, after step (c), the outer packaging may be removed from the sampling article that has come into contact with the body fluid sample.

本発明において、工程(c)の後、工程(c)で得られた体液試料と接触した採取用物品を、乾燥させることができる。体液試料と接触した採取用物品は、乾燥用ケースに格納して乾燥させてもよい。
本発明において、乾燥用ケースに格納された、体液試料と接触した採取用物品の開封の態様は、上記「１０．体液中の標的物質の検出方法」に記載した通りである。 In the present invention, after step (c), the sampling article that has come into contact with the body fluid sample obtained in step (c) can be dried. The sampling article that has come into contact with the body fluid sample may be stored in a drying case and dried.
In the present invention, the manner of opening the sampling article that has been stored in the drying case and has come into contact with a body fluid sample is as described above in "10. Method for detecting a target substance in a body fluid."

工程(d)は、工程(c)で得られた、体液試料と接触させた物品から、核酸付着性担体を取り出す工程である。
核酸付着性担体の取り出し方は限定されるものではなく、例えば、工程(c)で体液試料と接触させた物品を開封し、核酸除去処理をした器具又は未使用の器具（例えばピンセット）を用いて当該物品に封入された核酸付着性担体を取り出す方法が挙げられる。 Step (d) is a step of removing the nucleic acid-adhering carrier from the article that has been contacted with the body fluid sample obtained in step (c).
The method for removing the nucleic acid-adhering carrier is not limited, and examples include a method in which the article that was brought into contact with the body fluid sample in step (c) is opened and the nucleic acid-adhering carrier enclosed in the article is removed using a tool that has been treated to remove nucleic acids or an unused tool (e.g., tweezers).

工程(e)は、工程(d)で取り出した核酸付着性担体を核酸増幅用容器に入れ、核酸増幅反応により標的核酸を検出する工程である。
本発明において、工程(d)で取り出した核酸付着性担体を核酸増幅用容器に入れる前に、当該担体を、洗浄、乾燥などしてもよい。
但し、本発明は、核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品と体液試料とを接触させた後、当該物品から取り出した核酸付着性担体を核酸増幅用容器に入れる前には、当該担体を切り抜く（例えばパンチ）操作を含まない。これにより、複数の試料間において陽性試料から陰性試料への汚染（例えばキャリーオーバー）を簡便に防ぐことができる。 Step (e) is a step of placing the nucleic acid-adhering carrier removed in step (d) in a container for nucleic acid amplification and detecting the target nucleic acid by a nucleic acid amplification reaction.
In the present invention, the nucleic acid-adhering carrier removed in step (d) may be washed, dried, etc., before being placed in a container for nucleic acid amplification.
However, the present invention does not include an operation of cutting out (e.g., punching) the nucleic acid-adherent carrier after contacting an article in which the nucleic acid-adherent carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet with a body fluid sample and before placing the nucleic acid-adherent carrier removed from the article into a container for nucleic acid amplification, which makes it possible to simply prevent contamination (e.g., carryover) from a positive sample to a negative sample among multiple samples.

本発明において、「核酸増幅用容器」については、上記「３．（２）核酸付着性担体」に記載したとおりである。
本発明において、標的核酸の検出は、任意の核酸増幅反応を利用した方法（核酸増幅方法）で行うことができる。核酸増幅反応は公知であり、温度変化（温度サイクル）を伴う反応と温度変化を伴わない等温核酸増幅反応が挙げられる。
温度変化を伴う反応を利用する方法としてはPCR法（White,T.J. et al., Trends Genet., 5, 185(1989)）、RT-PCR法、LCR法（Ligase Chain Reaction：Barany, F., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol.88, p.189-193, 1991）などが挙げられる。また、等温核酸増幅反応を利用する方法としては、SmartAmp(Smart Amplification Process)法（日本国特許第3897805号公報）、LAMP（Loop-Mediated Isothermal Amplification）法（日本国特許第3313358号公報）、SDA法（Strand Displacement Amplification：Edward L. Chan et al, Arch. Pathol. Lab. Med., 124:1649-1652, 2000）、ICAN（Isothermal and Chimeric
primer-initiated Amplification of Nucleic acids）法、TMA（Transcription Mediated Amplification）法、NASBA（Nucleic Acid Sequence-Based Amplification）法、RCA（rolling circle amplification）法、TRC（Transcription Reverse Transcription Concerted Reaction）法、HDA（Helicase-dependent isothermal DNA amplification）法が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明においては、標的核酸の増幅は、PCR法、RT-PCR法、LCR法、SmartAmp法、LAMP法、RT-LAMP法、SDA法、ICAN法、TMA法、NASBA法、RCA法、TRC法及びHDA法からなる群から選択される方法によるものであることが好ましい。なお、本発明において、「SmartAmp法」には、SmartAmp2（Smart Amplification Process 2）法も含まれる。 In the present invention, the "container for nucleic acid amplification" is as described above in "3. (2) Nucleic acid-adhering carrier".
In the present invention, the detection of the target nucleic acid can be carried out by any method utilizing a nucleic acid amplification reaction (nucleic acid amplification method). Nucleic acid amplification reactions are well known, and include reactions involving temperature change (temperature cycle) and isothermal nucleic acid amplification reactions not involving temperature change.
Methods using reactions involving temperature change include PCR (White, TJ et al., Trends Genet., 5, 185 (1989)), RT-PCR, and LCR (Ligase Chain Reaction: Barany, F., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 88, p. 189-193, 1991). Methods using isothermal nucleic acid amplification reactions include SmartAmp (Smart Amplification Process) (Japanese Patent No. 3897805), LAMP (Loop-Mediated Isothermal Amplification) (Japanese Patent No. 3313358), SDA (Strand Displacement Amplification: Edward L. Chan et al., Arch. Pathol. Lab. Med., 124: 1649-1652, 2000), and ICAN (Isothermal and Chimeric Amplification).
These include, but are not limited to, primer-initiated Amplification of Nucleic acids (TMA), Transcription Mediated Amplification (TMA), Nucleic Acid Sequence-Based Amplification (NASBA), rolling circle amplification (RCA), Transcription Reverse Transcription Concerted Reaction (TRC), and Helicase-dependent isothermal DNA amplification (HDA).
In the present invention, the amplification of the target nucleic acid is preferably performed by a method selected from the group consisting of PCR, RT-PCR, LCR, SmartAmp, LAMP, RT-LAMP, SDA, ICAN, TMA, NASBA, RCA, TRC, and HDA. In the present invention, the "SmartAmp" method also includes SmartAmp2 (Smart Amplification Process 2) method.

PCR法、RT-PCR法、LCR法、SmartAmp法、LAMP法、SDA法、ICAN法、TMA法、NASBA法、RCA法、TRC法及びHDA法は当業者に周知の技術であり、当業者であれば公知の情報に基づいて容易に実施することができる。
また、これらの核酸増幅法に用いるプライマーその他の試薬についても、当業者であれば適宜選択することができる。 The PCR method, the RT-PCR method, the LCR method, the SmartAmp method, the LAMP method, the SDA method, the ICAN method, the TMA method, the NASBA method, the RCA method, the TRC method, and the HDA method are techniques well known to those skilled in the art, and can be easily performed by those skilled in the art based on known information.
Furthermore, those skilled in the art can appropriately select primers and other reagents to be used in these nucleic acid amplification methods.

以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。The present invention will be described in detail below with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

［実施例１］
標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品の作製
本実施例では、以下の工程で標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品を作製した。
（１）標的物質付着性担体を準備する工程
標的物質付着性担体の素材として濾紙（定性濾紙Ｎｏ．２又はＮｏ．１３１、東洋濾紙社製）又は尿試験紙（クラスII汎用検査用シリーズ 多項目試験紙キット ウロペーパーIII ‘栄研’、栄研化学）を使用した。
当該濾紙は、ハンドパンチ（1/8インチ規格、フィスカース社）を用いて直径約3 mmの円状に打ち抜き、円盤状の標的物質付着性担体を得た。ある一例において、標的物質付着性担体の素材として色素で染色した濾紙も使用した。
尿試験紙は、試験紙部分（縦約5 mm×横約4mm）を、検査項目（ブドウ糖、蛋白）ごとに取り外し、検査項目ごとに複数の板状の標的物質付着性担体を得た。[Example 1]
Preparation of an article in which a target substance-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet
In this example, an article in which a target substance-adherent carrier was encapsulated in a liquid-permeable sheet was produced by the following steps.
(1) A step of preparing a target substance-attachable carrier
Filter paper (Qualitative Filter Paper No. 2 or No. 131, Toyo Roshi Co., Ltd.) or urine test paper (Class II general-purpose test series multi-item test paper kit Uropaper III 'Eiken', Eiken Chemical Co., Ltd.) was used as the material for the target substance-adhering carrier.
The filter paper was punched out into a circle with a diameter of about 3 mm using a hand punch (1/8 inch, Fiskars) to obtain a disk-shaped target substance-adherent carrier. In one example, filter paper stained with a dye was also used as the material for the target substance-adherent carrier.
The test paper portion (approximately 5 mm long x 4 mm wide) of the urine test paper was removed for each test item (glucose, protein), and multiple plate-shaped target substance-adhering carriers were obtained for each test item.

（２）透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程
上記（１）で得られた円盤状の標的物質付着性担体を、袋状に加工された不織布［お茶パックM（トキワ工業社製）（約95 mm×約70 mm）又はヒートロン GSP-S（サンケイ特殊紙業社製）（約55mm×約75mm）］に、１０個前後入れた。また、上記（１）で得られた板状の標的物質付着性担体を、検査項目ごとに数個ずつ、袋状に加工された不織布に入れた。次に、袋状の不織布の開いている１辺をヒートシーラー（P-200、富士インパルス社）で溶着し（溶着した部分を「溶着部」という）、不織布に標的物質付着性担体を封入した。
以上の工程により、標的物質付着性担体が透液性シートに封入された物品（体液試料の採取用物品）を作製することができた（図１）。(2) A step of processing the liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet
About 10 of the disk-shaped target substance-adherent carriers obtained in (1) above were placed in a bag-shaped nonwoven fabric [Tea Pack M (Tokiwa Kogyo Co., Ltd.) (approximately 95 mm x approximately 70 mm) or Heatlon GSP-S (Sankei Tokushu Shigyo Co., Ltd.) (approximately 55 mm x approximately 75 mm)]. Also, several of the plate-shaped target substance-adherent carriers obtained in (1) above were placed in a bag-shaped nonwoven fabric for each test item. Next, one open side of the bag-shaped nonwoven fabric was welded with a heat sealer (P-200, Fuji Impulse Co., Ltd.) (the welded part is referred to as the "welded part"), and the target substance-adherent carrier was enclosed in the nonwoven fabric.
By the above steps, an article (article for collecting body fluid samples) in which a target substance-adherent carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet could be produced (Figure 1).

別の例として、上記（２）で得られた標的物質付着性担体が不織布に封入された物品の上端及び／又は下端から約10 mmのところをヒートシーラーで溶着し（溶着した部分を「溶着部」という）、持ち手部分を作製した。このとき、持ち手部分には封入した標的物質付着性担体が入り込まないようにした。持ち手部分を１つ有するもの（図２）と２つ有するもの（図５）を作製した。As another example, the target substance-adherent carrier obtained in (2) above was encapsulated in a nonwoven fabric, and the top and/or bottom ends of the article were fused with a heat sealer at approximately 10 mm from the end (the fused parts are referred to as "fused parts") to create a handle. At this time, care was taken to ensure that the encapsulated target substance-adherent carrier did not get into the handle. One with one handle (Fig. 2) and one with two handles (Fig. 5) were created.

別の例として、上記（２）で用いた「袋状に加工された不織布」の不織布を２重、３重又は４重にしたものに標的物質付着性担体を入れ、透液性シートが２重、３重又は４重である体液試料の採取用物品を作製した。As another example, the nonwoven fabric used in (2) above, "nonwoven fabric processed into a bag shape," was made into two, three or four layers, and a target substance-adherent carrier was placed inside the nonwoven fabric, to prepare an article for collecting body fluid samples having two, three or four layers of liquid-permeable sheets.

［実施例２］
核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品の作製
本実施例では、以下の工程で核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品を作製した。
（１）核酸付着性担体の素材として濾紙（定性濾紙Ｎｏ．２、東洋濾紙社製）を使用した。
当該濾紙をハンドパンチ（1/8インチ規格、フィスカース社）を用いて直径約3 mmの円状に打ち抜き、円盤状の核酸付着性担体を得た［核酸付着性担体を準備する工程］。
ある一例において、核酸付着性担体の素材として色素で染色した濾紙も使用した。
（２）袋状に加工された不織布（お茶パックM（トキワ工業社製））（縦約95 mm×横約70
mm）に、上記（１）で得られた核酸付着性担体を１０個前後入れ、袋状の不織布の開いている１辺をヒートシーラー（P-200、富士インパルス社）で溶着し（溶着した部分を「溶着部」という）、不織布に核酸付着性担体を封入した［透液性シートを加工して前記担体を透液性シートに封入する工程］。
以上の工程により、核酸付着性担体が透液性シートに封入された物品（体液試料の採取用物品）を作製することができた（図１）。[Example 2]
Preparation of an article in which a nucleic acid-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet
In this example, an article in which a nucleic acid-adhering carrier was encapsulated in a liquid-permeable sheet was produced by the following steps.
(1) Filter paper (Qualitative Filter Paper No. 2, manufactured by Toyo Roshi Kaisha) was used as the material for the nucleic acid-adhering carrier.
The filter paper was punched out into circles with a diameter of about 3 mm using a hand punch (1/8 inch, Fiskars) to obtain disk-shaped nucleic acid-adhering carriers [step of preparing nucleic acid-adhering carriers].
In one example, dyed filter paper was used as the nucleic acid-attaching carrier material.
(2) Nonwoven fabric processed into a bag shape (Tea Bag M (Tokiwa Kogyo Co., Ltd.)) (approximately 95 mm long x 70 mm wide)
Approximately 10 pieces of the nucleic acid-adhering carrier obtained in (1) above were placed in a bag-shaped nonwoven fabric (sizing: 1.5 mm), and one open side of the bag-shaped nonwoven fabric was welded with a heat sealer (P-200, Fuji Impulse Co., Ltd.) (the welded part is referred to as the "welded part") to encapsulate the nucleic acid-adhering carrier in the nonwoven fabric [a process for processing a liquid-permeable sheet to encapsulate the carrier in the liquid-permeable sheet].
Through the above steps, an article in which the nucleic acid-adhering carrier is enclosed in a liquid-permeable sheet (an article for collecting a body fluid sample) could be produced (FIG. 1).

別の例として、上記（２）で得られた核酸付着性担体が不織布に封入された物品の上端又は下端から約10 mmのところをヒートシーラーで溶着し（溶着した部分を「溶着部」という）、持ち手部分を作製した。このとき、持ち手部分には封入した核酸付着性担体が入り込まないようにした。持ち手部分を１つ有するもの（図２）と２つ有するもの（図５）を作製した。As another example, the article in which the nucleic acid carrier obtained in (2) above was enclosed in a nonwoven fabric was welded with a heat sealer at a location about 10 mm from the upper or lower end (the welded portion is referred to as the "welded portion") to create a handle. At this time, care was taken to ensure that the enclosed nucleic acid carrier did not get into the handle. One with one handle (Figure 2) and one with two handles (Figure 5) were created.

別の例として、上記（２）で用いた「袋状に加工された不織布」の不織布を２重、３重又は４重にしたものに核酸付着性担体を入れ、透液性シートが２重、３重又は４重である体液試料の採取用物品を作製した。As another example, the nonwoven fabric used in (2) above, "nonwoven fabric processed into a bag shape," was made into two, three or four layers, and a nucleic acid-adhering carrier was placed inside the nonwoven fabric, to prepare an article for collecting body fluid samples having two, three or four layers of liquid-permeable sheets.

［実施例３］
体液試料の採取用デバイスの製造
本実施例では、実施例１又は２で作製した体液試料の採取用物品と外装とを含む、体液試料の採取用デバイスを製造した。
具体的には、不織布又はガーゼを袋状に加工して外装を作製し、これに体液試料の採取用物品を入れて採取用デバイスを作製した。
別の例として、不織布又はガーゼを外装として使用し、体液試料の採取用物品を当該不織布又はガーゼで包んで採取用デバイスを作製した（図６）。
別の例として、ポケットを備えるコットンパフを外装として使用し、当該ポケットに、体液試料の採取用物品を挿入して採取用デバイスを作製した。[Example 3]
Manufacturing of devices for collection of body fluid samples
In this example, a device for collecting a body fluid sample was manufactured, comprising the article for collecting a body fluid sample prepared in Example 1 or 2 and an exterior.
Specifically, a nonwoven fabric or gauze was processed into a bag shape to create an exterior, and an article for collecting a body fluid sample was placed in this to create a collection device.
As another example, a collection device was prepared by wrapping an article for collecting a bodily fluid sample in a nonwoven fabric or gauze as an exterior covering (FIG. 6).
As another example, a collection device was made using a cotton puff with a pocket as the exterior, into which an article for collecting a bodily fluid sample was inserted.

［実施例４］
体液試料の採取用キットの製造
本実施例では、実施例１又は２で作製した体液試料の採取用物品と実施例３で作製した外装とを含む、体液試料の採取用キットを製造した。また、当該採取用物品及び外装に加えて、乾燥用ケースを含む、体液試料の採取用キットを製造した。本実施例において、バーコードシールを貼付した乾燥用ケースを作製した。
本実施例で作製したキットには、他にも、吸収性衛生用品、取り扱い説明書、体液試料の採取や試験に係る作業に必要な器具や資材を含めることができる。[Example 4]
Manufacturing of kits for collection of body fluid samples
In this example, a kit for collecting a body fluid sample was produced, including the body fluid sample collecting article produced in Example 1 or 2 and the exterior packaging produced in Example 3. Also, a kit for collecting a body fluid sample was produced, including a drying case in addition to the collecting article and exterior packaging. In this example, a drying case with a barcode sticker attached was produced.
The kit prepared in this example may also include absorbent sanitary products, instructions for use, and the tools and materials necessary for the collection and testing of bodily fluid samples.

［実施例５］
体液試料の採取用物品又は採取用デバイスを備える吸収性衛生用品の製造
本実施例では、実施例１又は２で作製した体液試料の採取用物品又は実施例３で作製した採取用デバイスを、市販のおむつの表面シート（被験者の肌に接する部分）に配置することにより、体液試料の採取用物品又は採取用デバイスを備えるおむつを製造した。[Example 5]
Manufacturing of absorbent sanitary products with articles or devices for collecting body fluid samples
In this example, a diaper equipped with a bodily fluid sample collection article or collection device prepared in Example 1 or 2, or a bodily fluid sample collection device prepared in Example 3, was manufactured by placing it on the top sheet of a commercially available diaper (the part that comes into contact with the subject's skin).

［実施例６］
標的物質の検出
１．標的核酸の検出
本実施例においては、標的核酸を含有する体液試料の陽性試料として、緩衝液（Tris-EDTA buffer solution、93283-100ML、メルク社）に1x108 cp/mlとなるようにCMV（Towne株）を含有させたもの（CMV含有試料）を用いた。また、陰性試料として当該緩衝液（ブランク溶液）を使用した。
また、本実施例では、遺伝子増幅・検出法としてリアルタイムPCRを用いた。PCRに用いた反応溶液の組成は下記の通りである。最終反応時のプライマー濃度およびプローブ濃度はそれぞれ500 nM、250 nMである。Brilliant III Ultra-Fast QPCR Master Mixはアジレント社から購入した。

Figure 0007697678000001


F-Primer: CGAATACCTCAGCGACCTGTACA（配列番号４）
R-Primer: CGTTCGAGCGAGTGATCG（配列番号５）
Probe: CCTGTTCCAGTAGCGGGCGACG（配列番号６）（蛍光：FAM/TAMRA）
[Example 6]
Detection of target substances
1. Detection of target nucleic acid
In this example, a buffer solution (Tris-EDTA buffer solution, 93283-100ML, Merck) containing CMV (Towne strain) at a concentration of 1x108 cp/ml (CMV-containing sample) was used as a positive body fluid sample containing the target nucleic acid, and the same buffer solution (blank solution) was used as a negative sample.
In this example, real-time PCR was used as the gene amplification and detection method. The composition of the reaction solution used for PCR is as follows. The primer and probe concentrations at the final reaction are 500 nM and 250 nM, respectively. Brilliant III Ultra-Fast QPCR Master Mix was purchased from Agilent.
Figure 0007697678000001

F-Primer: CGAATACCTCAGCGACCTGTACA (SEQ ID NO: 4)
R-Primer: CGTTCGAGCGAGTGATCG (SEQ ID NO: 5)
Probe: CCTGTTCCAGTAGCGGGCGACG (SEQ ID NO: 6) (Fluorescence: FAM/TAMRA)

まず、上記CMV含有試料又はブランク溶液200μLを、実施例２で作製した体液試料の採取用物品に滴下し、これにより当該採取用物品とCMV含有試料又はブランク溶液とを接触させた。その後、当該物品を乾燥させた。
次に、当該物品に係る袋状の透液性シート（具体的には不織布）を開封し、当該物品から核酸付着性担体を取り出した。測定プレートの各ウェルに分注した上記反応溶液30μLに、当該物品から取り出した核酸付着性担体を入れ、PCRを実施した。
PCRは、[95℃で60秒]×1サイクルの後、[95℃で20秒、60℃で20秒]×50サイクルを行い、その後[37℃で60秒] ×1サイクル行う、という条件で実施した。
PCR装置は、Cobas z480（ロシュ・ダイアグノスティックス社）を用いた。
その結果、CMV含有試料と接触させた採取用物品から取り出した核酸付着性担体を含む試料において、CMVの標的核酸を検出することができた（図３）。
本実施例により、体液中の標的核酸を検出することができることが示された。 First, 200 μL of the CMV-containing sample or blank solution was dropped onto the body fluid sample collection article prepared in Example 2, thereby bringing the collection article into contact with the CMV-containing sample or blank solution. The article was then dried.
Next, the bag-shaped liquid-permeable sheet (specifically, nonwoven fabric) of the article was opened, and the nucleic acid carrier was removed from the article. The nucleic acid carrier removed from the article was placed in 30 μL of the above reaction solution dispensed into each well of the measurement plate, and PCR was performed.
PCR was carried out under the following conditions: 1 cycle of 95°C for 60 seconds, followed by 50 cycles of 95°C for 20 seconds, 60°C for 20 seconds, and then 1 cycle of 37°C for 60 seconds.
The PCR device used was Cobas z480 (Roche Diagnostics).
As a result, the target nucleic acid of CMV could be detected in the sample containing the nucleic acid-attaching carrier removed from the collection item that had been in contact with the CMV-containing sample (Figure 3).
This example demonstrates that target nucleic acids can be detected in body fluids.

２．標的糖類、標的無機化合物の検出
検体として、1000mg/dL ブドウ糖水溶液（ブドウ糖（日食メディカロース（日本食品化工株式会社））を純水にて溶解して調製したもの）を用いた。また、陰性対照として純水を使用した。標的物質付着性担体としては、複数の検査項目を含む尿試験紙からブドウ糖試験紙部分のみを切り取ったものを用いた。
数個のブドウ糖試験紙を封入した、実施例３で作製した採取用デバイスに、上記検体又は陰性対照を1mL滴下し、これにより当該採取用物品と検体又は陰性対照とを接触させた。接触後、検体滴下前後の試験紙の色の変化を確認した。
その結果を下記の表２に示す。表中、「○」は担体である試験紙の色が変化したことを示し、「×」は試験紙の色が変化しなかったことを示す。

Figure 0007697678000002

上記表に示されるとおり、検体であるブドウ糖水溶液を滴下した採取用デバイスでは、標的物質付着性担体である試験紙の色が変化した一方、陰性対照を滴下した採取用デバイスでは、試験紙の色は変化しなかった。
本試験により、本発明の物品を用いて体液中の標的糖類を検出することができることが示された。
また、この結果から、ブドウ糖試験紙に代えて、標的物質付着性担体の素材として亜硝酸塩試験紙、カルシウム試験紙、クロール（塩素）試験紙、pH試験紙などの無機化合物（イオンを含む）を検出する試験紙を用いることで、体液中の標的無機化合物を検出できることが示された。 2. Detection of target sugars and inorganic compounds
The specimen used was a 1000 mg/dL glucose aqueous solution (prepared by dissolving glucose (Nisshoku Medicarose (Nihon Shokuhin Kako Co., Ltd.)) in pure water). Pure water was used as a negative control. The target substance-adhering carrier used was a urine test strip containing multiple test items, with only the glucose test strip portion cut out.
1 mL of the above sample or negative control was dropped onto the sampling device prepared in Example 3 containing several glucose test strips, thereby bringing the sampling article into contact with the sample or negative control. After contact, the color change of the test strip before and after the sample was dropped was confirmed.
The results are shown in Table 2 below. In the table, "◯" indicates that the color of the test paper, which is the carrier, changed, and "×" indicates that the color of the test paper did not change.
Figure 0007697678000002
As shown in the table above, in the collection device into which the sample, an aqueous glucose solution, was dripped, the color of the test paper, which is a target substance-adherent carrier, changed, whereas in the collection device into which the negative control was dripped, the color of the test paper did not change.
This study demonstrated that the articles of the present invention can be used to detect target sugars in body fluids.
Furthermore, these results demonstrated that target inorganic compounds in body fluids can be detected by using test papers that detect inorganic compounds (including ions), such as nitrite test papers, calcium test papers, chloride (chlorine) test papers, and pH test papers, as the material for the target substance-adhering carrier instead of glucose test papers.

３．標的タンパク質の検出
（１）試験紙を用いた検出
検体として、蛋白標準液（富士フィルム和光純薬株式会社）を用いた。また、陰性対照として純水を使用した。標的物質付着性担体としては、複数の検査項目を含む尿試験紙からタンパク質試験紙部分のみを切り取ったものを用いた。
数個のタンパク質試験紙を封入した、実施例３で作製した採取用デバイスに、上記検体又は陰性対照を1mL滴下し、これにより当該採取用物品と検体又は陰性対照とを接触させた。接触後、検体滴下前後の試験紙の色の変化を確認した。
その結果を下記の表３に示す。表中、「○」は担体である試験紙の色が変化したことを示し、「×」は試験紙の色が変化しなかったことを示す。

Figure 0007697678000003


上記表に示されるとおり、検体である蛋白標準液を滴下した採取用デバイスでは、標的物質付着性担体である試験紙の色が変化した一方、陰性対照を滴下した採取用デバイスでは、試験紙の色は変化しなかった。
本試験により、標的物質付着性担体の素材としてタンパク質試験紙を用いることで、体液中の標的タンパク質（総蛋白）を検出することができることが示された。 3. Detection of target protein
(1) Detection using test strips
A protein standard solution (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used as the specimen. Pure water was used as the negative control. The target substance-adhering carrier was a protein test strip cut out from a urine test strip containing multiple test items.
1 mL of the above sample or negative control was dropped onto the sampling device prepared in Example 3, in which several protein test strips were enclosed, thereby bringing the sampling article into contact with the sample or negative control. After contact, the color change of the test strip before and after dropping the sample was confirmed.
The results are shown in Table 3 below. In the table, "◯" indicates that the color of the test paper, which is the carrier, changed, and "×" indicates that the color of the test paper did not change.
Figure 0007697678000003

As shown in the table above, in the sampling device into which the sample protein standard solution was dropped, the color of the test paper, which is the target substance-adherent carrier, changed, whereas in the sampling device into which the negative control was dropped, the color of the test paper did not change.
This test demonstrated that the target protein (total protein) in body fluids can be detected by using protein test paper as the material for the target substance-adherent carrier.

（２）検出試薬を用いた検出
本試験では、検体と接触した標的タンパク質付着性担体を検出試薬に浸し、一定時間経過後の当該担体又は試薬の色の変化を目視で確認することで、検体中の標的タンパク質を検出した。具体的には次のとおりである。(2) Detection using detection reagents
In this test, the target protein in the sample was detected by immersing the target protein-attached carrier that had been in contact with the sample in a detection reagent, and visually checking the color change of the carrier or the reagent after a certain period of time.

検体として、(i) 蛋白標準液（富士フィルム和光純薬株式会社）、(ii) TP/ALB標準血清（株式会社シノテスト）を純水で7倍に希釈したもの（以下、「TP/ALB標準血清希釈液」という）、(iii)成人プール尿へTP/ALB標準血清（株式会社シノテスト）を添加した試料（以下、「TP/ALB標準血清添加尿」という） 約70 mg/dL、及び(iv) TP/ALB標準血清添加尿 約700 mg/dLを用いた。また、検体(i)及び(ii)に対する陰性対照として純水を用い、検体(iii)及び(iv)に対する陰性対照として成人プール尿を用いた。
検出試薬としては、マイクロTP-AR（2/PM-R1）（富士フィルム和光純薬株式会社）を用いた。標的物質付着性担体としては、実施例１で作製した円盤状の標的物質付着性担体を用いた。 The samples used were (i) protein standard solution (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), (ii) TP/ALB standard serum (Shinotest Co., Ltd.) diluted 7-fold with pure water (hereinafter referred to as "TP/ALB standard serum dilution solution"), (iii) adult pooled urine sample with TP/ALB standard serum (Shinotest Co., Ltd.) added (hereinafter referred to as "TP/ALB standard serum added urine") of approximately 70 mg/dL, and (iv) TP/ALB standard serum added urine of approximately 700 mg/dL. Pure water was used as a negative control for samples (i) and (ii), and adult pooled urine was used as a negative control for samples (iii) and (iv).
As the detection reagent, Micro TP-AR (2/PM-R1) (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used. As the target substance-adhering carrier, the disk-shaped target substance-adhering carrier prepared in Example 1 was used.

まず、上記検体又は陰性対照500μLを、実施例１で作製した体液試料の採取用物品に滴下し、これにより当該採取用物品と検体又は陰性対照とを接触させた。その後、当該物品を乾燥させた。
次に、当該物品に係る袋状の透液性シート（具体的には不織布）を開封し、当該物品から担体を取り出した。8連PCRチューブ（ワトソン株式会社）の各チューブに担体を入れ、これに検出試薬 60μLを加え、ヒートブロック（ミニブロックバス MyBL-10）（アズワン）にて37℃で10分間加温した。検出試薬を加えた時点の試薬の色と加温後の試薬の色を比較した。
その結果を下記の表４に示す。表中、「○」は標的物質付着性担体又は試薬の色が変化したことを示し、「×」は当該担体又は試薬の色が変化しなかったことを示す。

Figure 0007697678000004

上記表に示されるとおり、蛋白標準液（検体(i)）、TP/ALB標準血清希釈液（検体(ii)）、TP/ALB標準血清添加尿 約70 mg/dL（検体(iii)）及びTP/ALB標準血清添加尿 約700 mg/dL（検体（iv））と接触させた採取用物品から取り出した担体を含む試料において、当該担体又は試薬の色が変化した。これに対し、陰性対照と接触させた採取用物品から取り出した担体を含む試料では、当該担体及び試薬の色は変化しなかった。
この結果は、検体中のタンパク質の存在を検出することができたことを示す。
したがって、本試験により、本発明の物品を用いて体液中の標的タンパク質を検出することができることが示された。 First, 500 μL of the above specimen or negative control was dropped onto the body fluid sample collection article prepared in Example 1, thereby bringing the collection article into contact with the specimen or negative control. The article was then dried.
Next, the bag-shaped liquid-permeable sheet (specifically, nonwoven fabric) of the article was opened, and the carrier was removed from the article. The carrier was placed in each tube of an 8-tube PCR tube (Watson Co., Ltd.), 60 μL of detection reagent was added, and the tube was heated at 37 ° C for 10 minutes in a heat block (Mini Block Bath MyBL-10) (As One). The color of the reagent when the detection reagent was added was compared with the color of the reagent after heating.
The results are shown in Table 4 below. In the table, "◯" indicates that the color of the target substance-attached carrier or reagent changed, and "×" indicates that the color of the carrier or reagent did not change.
Figure 0007697678000004
As shown in the above table, the color of the carrier or reagent changed in samples containing carriers removed from collection articles that had been contacted with the protein standard solution (sample (i)), TP/ALB standard serum dilution solution (sample (ii)), TP/ALB standard serum-spiked urine of about 70 mg/dL (sample (iii)), and TP/ALB standard serum-spiked urine of about 700 mg/dL (sample (iv)). In contrast, the color of the carrier and reagent did not change in samples containing carriers removed from collection articles that had been contacted with the negative control.
This result indicates that the presence of protein in the sample was able to be detected.
Thus, this study demonstrated that the article of the present invention can be used to detect target proteins in body fluids.

４．標的有機化合物の検出
（１）検出試薬を用いた検出
本試験では、検体と接触した標的有機化合物付着性担体を検出試薬に浸し、一定時間経過後の試薬の色の変化を目視で確認することで、検体中の標的有機化合物（生化学物質）を検出した。具体的には次のとおりである。4. Detection of target organic compounds
(1) Detection using detection reagents
In this test, the target organic compound-attached carrier that had come into contact with the specimen was immersed in a detection reagent, and the color change of the reagent after a certain period of time was visually confirmed to detect the target organic compound (biochemical substance) in the specimen.

検体として、(i) クレアチニン（以下「CRE」という）（ナカライテスク株式会社）を純水で溶解して100mg/dL水溶液としたもの、(ii) 検体(i)を純水で10倍希釈して10mg/dL水溶液としたもの、及び(iii) ベースの異なる成人プール尿2つ(「成人プール尿A」及び「成人プール尿B」)を用いた。また、陰性対照として純水を用いた。
検出試薬としては、シグナスオートCRE（株式会社シノテスト）を用いた。標的物質付着性担体としては、実施例１で作製した円盤状の標的物質付着性担体を用いた。 The samples used were (i) creatinine (hereinafter referred to as "CRE") (Nacalai Tesque, Inc.) dissolved in pure water to give a 100 mg/dL solution, (ii) sample (i) diluted 10-fold with pure water to give a 10 mg/dL solution, and (iii) two pooled adult urine samples with different bases ("pooled adult urine A" and "pooled adult urine B"). Pure water was used as a negative control.
Cygnus Auto CRE (Shinotestu Co., Ltd.) was used as the detection reagent. The disk-shaped target substance-adhering carrier prepared in Example 1 was used as the target substance-adhering carrier.

まず、上記検体又は陰性対照500μLを、実施例１で作製した体液試料の採取用物品に滴下し、これにより当該採取用物品と検体又は陰性対照と接触させた。その後、当該物品を乾燥させた。
次に、当該物品に係る袋状の透液性シート（具体的には不織布）を開封し、当該物品から担体を取り出した。8連PCRチューブ（ワトソン株式会社）の各チューブに担体を入れ、これに検出試薬であるR1を45μL加え、ヒートブロック（ミニブロックバス MyBL-10）（アズワン）にて37℃で5分間加温した。その後、検出試薬であるR2を15μL加え、ボルテックスミキサーにて撹拌後、スピンダウンし、その後、ヒートブロックにて37℃で5分間加温した。検出試薬であるR2を加えた時点の試薬の色と加温後の試薬の色を比較した。
その結果を下記の表５に示す。表中、「○」は試薬の色が変化したことを示し、「×」は試薬の色が変化しなかったことを示す。

Figure 0007697678000005

上記表に示されるとおり、100mg/dL CRE水溶液（検体(i)）、10mg/dL CRE水溶液（検体(ii)）、成人プール尿A及びB（検体(iii)）と接触させた採取用物品から取り出した担体を含む試料において、試薬の色が変化した。これに対し、陰性対照と接触させた採取用物品から取り出した担体を含む試料では、試薬の色は変化しなかった。
この結果は、検体中のCREの存在を検出することができたことを示す。
したがって、本試験により、本発明の物品を用いて体液中の標的有機化合物（生化学物質）を検出することができることが示された。 First, 500 μL of the above specimen or negative control was dropped onto the body fluid sample collection article prepared in Example 1, thereby bringing the collection article into contact with the specimen or negative control. The article was then dried.
Next, the bag-shaped liquid-permeable sheet (specifically, nonwoven fabric) of the article was opened, and the carrier was removed from the article. The carrier was placed in each tube of an 8-tube PCR tube (Watson Co., Ltd.), 45 μL of detection reagent R1 was added thereto, and the mixture was heated at 37 ° C for 5 minutes in a heat block (Mini Block Bath MyBL-10) (As One). Then, 15 μL of detection reagent R2 was added, stirred with a vortex mixer, spun down, and then heated at 37 ° C for 5 minutes in a heat block. The color of the reagent at the time of adding detection reagent R2 was compared with the color of the reagent after heating.
The results are shown in Table 5 below. In the table, "◯" indicates that the color of the reagent changed, and "×" indicates that the color of the reagent did not change.
Figure 0007697678000005
As shown in the above table, the color of the reagent changed in the samples containing the carrier removed from the collection article that had been contacted with the 100 mg/dL CRE aqueous solution (sample (i)), the 10 mg/dL CRE aqueous solution (sample (ii)), and the adult pooled urine A and B (sample (iii)). In contrast, the color of the reagent did not change in the sample containing the carrier removed from the collection article that had been contacted with the negative control.
This result indicates that the presence of CRE in the sample was able to be detected.
Thus, this test demonstrated that the article of the present invention can be used to detect target organic compounds (biochemicals) in body fluids.

（２）分析装置を用いた検出
本試験では、検体と接触した標的有機化合物付着性担体から標的有機化合物の抽出液を調製し、当該抽出液中に含まれる標的有機化合物を、生化学自動分析装置を用いて検出した。
（２－１）クレアチニンの検出
本試験において用いた検体、陰性対照、検出試薬及び標的物質付着性担体は、上記（１）と同じである。(2) Detection using an analytical device
In this test, an extract of the target organic compound was prepared from the target organic compound-adhering carrier that had been in contact with the specimen, and the target organic compound contained in the extract was detected using an automatic biochemical analyzer.
(2-1) Detection of creatinine
The specimen, negative control, detection reagent and target substance-attached carrier used in this test were the same as those in (1) above.

まず、検体又は陰性対照を、実施例１で作製した体液試料の採取用物品に滴下し、これにより当該採取用物品と検体又は陰性対照と接触させた。その後、当該物品を乾燥させた。
次に、当該物品に係る袋状の透液性シート（具体的には不織布）を開封し、当該物品から担体を取り出した。1.5mLチューブに当該担体を入れ、純水200μLを加え、ボルテックスミキサーにて30秒撹拌し、抽出液を作製した。その後、検出試薬を搭載した生化学自動分析装置（日立7180形）にて抽出液を測定した。分析パラメータは、メーカー指定のものを用いた。
その結果、100mg/dL CRE水溶液（検体(i)）、10mg/dL CRE水溶液（検体(ii)）、及び成人プール尿A及びB（検体(iii)）と接触させた採取用物品から取り出した担体から調製した抽出液は、CRE含有量について陰性対照と比較して有意に高い値を示した（図７）。この結果は、検体中のCREの存在を検出することができたことを示す。
したがって、本試験により、本発明の物品を用いて体液中の標的有機化合物（生化学物質）を検出することができることが示された。 First, a specimen or a negative control was dropped onto the body fluid sample collecting article prepared in Example 1, thereby bringing the collecting article into contact with the specimen or the negative control. The article was then dried.
Next, the bag-shaped liquid-permeable sheet (specifically, nonwoven fabric) of the article was opened, and the carrier was removed from the article. The carrier was placed in a 1.5 mL tube, 200 μL of pure water was added, and the mixture was stirred for 30 seconds with a vortex mixer to prepare an extract. The extract was then measured using a biochemical automatic analyzer (Hitachi 7180 model) equipped with a detection reagent. The analytical parameters used were those specified by the manufacturer.
As a result, the extracts prepared from the carriers taken from the collection articles that had been in contact with the 100 mg/dL CRE aqueous solution (sample (i)), the 10 mg/dL CRE aqueous solution (sample (ii)), and the pooled adult urine A and B (sample (iii)) showed significantly higher CRE content than the negative control (Figure 7). This result indicates that the presence of CRE in the samples could be detected.
Thus, this test demonstrated that the article of the present invention can be used to detect target organic compounds (biochemicals) in body fluids.

（２－２）尿素窒素の検出
検体として、(i) UN（尿素窒素）標準液（株式会社シノテスト）、及び(ii) ベースの異なる成人プール尿2つ(「成人プール尿A」及び「成人プール尿B」)を用いた。また、陰性対照として純水を使用した。検出試薬としては、シグナスオート UN（株式会社シノテスト）を用いた。標的物質付着性担体としては、実施例１で作製した円盤状の標的物質付着性担体を用いた。(2-2) Detection of urea nitrogen
As specimens, (i) UN (urea nitrogen) standard solution (Shinotest Co., Ltd.) and (ii) two adult pooled urine samples with different bases ("adult pooled urine A" and "adult pooled urine B") were used. Pure water was used as a negative control. Cygnus Auto UN (Shinotest Co., Ltd.) was used as a detection reagent. The disk-shaped target substance-adhering carrier prepared in Example 1 was used as a target substance-adhering carrier.

まず、上記検体又は陰性対照500μLを、実施例１で作製した体液試料の採取用物品に滴下し、これにより当該採取用物品と検体又は陰性対照と接触させた。その後、当該物品を乾燥させた。
次に、当該物品に係る袋状の透液性シート（具体的には不織布）を開封し、当該物品から担体を取り出した。1.5mL チューブに当該担体を入れ、純水200μLを加え、ボルテックスミキサーにて30秒撹拌し、抽出液を作製した。その後、検出試薬を搭載した生化学自動分析装置（日立7180形）にて抽出液を測定した。分析パラメータは、メーカー指定のものを用いた。
その結果、UN標準液（検体(i)）、成人プール尿A及びB（検体(ii)）と接触させた採取用物品から取り出した担体から調製した抽出液は、UN含有量について陰性対照と比較して有意に高い値を示した（図８）。この結果は、検体中のUNの存在を検出することができたことを示す。
したがって、本試験により、本発明の物品を用いて体液中の標的有機化合物（生化学物質）を検出することができることが示された。 First, 500 μL of the above specimen or negative control was dropped onto the body fluid sample collection article prepared in Example 1, thereby bringing the collection article into contact with the specimen or negative control. The article was then dried.
Next, the bag-shaped liquid-permeable sheet (specifically, nonwoven fabric) of the article was opened, and the carrier was removed from the article. The carrier was placed in a 1.5 mL tube, 200 μL of pure water was added, and the mixture was stirred for 30 seconds with a vortex mixer to prepare an extract. The extract was then measured using a biochemical automatic analyzer (Hitachi 7180 model) equipped with a detection reagent. The analytical parameters used were those specified by the manufacturer.
As a result, the extracts prepared from the carriers removed from the collection articles that had been in contact with the UN standard solution (sample (i)) and adult pooled urine A and B (sample (ii)) showed significantly higher UN contents than the negative control (Figure 8). This result indicates that the presence of UN in the samples could be detected.
Thus, this test demonstrated that the article of the present invention can be used to detect target organic compounds (biochemicals) in body fluids.

[比較例１]
パンチャーを介した汚染（キャリーオーバー）
本発明と異なり、濾紙と試料とを接触させた後にパンチャーで当該濾紙を加工する方法において、パンチャーを介して陽性試料から陰性試料への汚染が生じるかどうかを、以下の手順で試験した。
（１）パンチャーで加工する前の濾紙と実施例６の「１．標的核酸の検出」で用いたCMV含有試料とを接触させ、乾燥させた。また、パンチャーで加工する前の濾紙とブランク溶液とを接触させ、乾燥させた。
（２）次に、CMV含有試料と接触させた濾紙をパンチャーで打ち抜いた（パンチした）。（３）ブランク溶液と接触させた濾紙を、上記（２）で用いたパンチャーを洗浄することなく用いて打ち抜いた。
（４）上記（３）の作業、すなわち、ブランク溶液と接触させた濾紙を未洗浄のパンチャーで打ち抜く作業を連続して合計５回行った。
（５）パンチャーで打ち抜くことで得られた円盤状の濾紙片について、それぞれ実施例６の「１．標的核酸の検出」で行ったのと同様にPCRを実施した。[Comparative Example 1]
Contamination through the puncher (carry-over)
Unlike the present invention, in a method in which a filter paper is brought into contact with a sample and then processed with a puncher, whether contamination from a positive sample to a negative sample occurs via the puncher was tested using the following procedure.
(1) The filter paper before processing with the puncher was brought into contact with the CMV-containing sample used in "1. Detection of target nucleic acid" in Example 6, and then dried. In addition, the filter paper before processing with the puncher was brought into contact with a blank solution, and then dried.
(2) Next, the filter paper that had been in contact with the CMV-containing sample was punched using a puncher. (3) The filter paper that had been in contact with the blank solution was punched using the puncher used in (2) above without cleaning it.
(4) The above procedure (3), i.e., punching the filter paper that had been in contact with the blank solution with an unwashed puncher, was repeated five times in total.
(5) For each of the disk-shaped filter paper pieces obtained by punching with a puncher, PCR was carried out in the same manner as in "1. Detection of target nucleic acid" in Example 6.

その結果、上記（２）においてCMV含有試料と接触させた濾紙をパンチャーで打ち抜いた後、未洗浄のパンチャーを用いて、ブランク溶液と接触させた濾紙を打ち抜く場合、計５回打ち抜いても、偽陽性が続くことがわかった（図４）。図４において、「CMV含有試料後」は、ブランク溶液と接触させた濾紙を、CMV含有試料と接触させた濾紙を打ち抜いたパンチャーでパンチして得られた濾紙片を含む試料を指す。
図４における「CMV含有試料後」の試料は、ブランク溶液と接触させた濾紙をパンチして得られたものであるが、CMV含有試料と接触させた濾紙を打ち抜いたパンチャーを用いたために、当該パンチャーに付着したCMV由来の核酸によって、ブランク溶液と接触させた濾紙が汚染されたものと理解される。
上記結果から、従来技術では、濾紙等を加工する機器を介して陽性試料から陰性試料への汚染が生じ、その結果偽陽性が生じる可能性があることが示された。 As a result, it was found that when the filter paper contacted with the CMV-containing sample in (2) above was punched with a puncher and then the filter paper contacted with the blank solution was punched with an unwashed puncher, false positives continued even after punching a total of five times (Figure 4). In Figure 4, "After CMV-containing sample" refers to a sample containing a filter paper piece obtained by punching the filter paper contacted with the blank solution with the puncher used to punch the filter paper contacted with the CMV-containing sample.
The sample "after CMV-containing sample" in Figure 4 was obtained by punching a filter paper that had been in contact with a blank solution. Because a puncher was used to punch out the filter paper that had been in contact with the CMV-containing sample, it is understood that the filter paper that had been in contact with the blank solution was contaminated by nucleic acids derived from CMV that had adhered to the puncher.
The above results indicate that in conventional techniques, contamination of positive samples with negative samples can occur through equipment that processes filter paper, etc., resulting in false positives.

本発明の体液試料の採取用物品は、被験者から体液試料を採取する上で有用である。The article for collecting a body fluid sample of the present invention is useful for collecting a body fluid sample from a subject.

１ 透液性シート
２ 標的物質付着性担体
３ 持ち手部分
４ 溶着部
５ 溶着部
６ 体液試料の採取用物品
７ 外装
８ 体液試料の採取用デバイス REFERENCE SIGNS LIST 1 Liquid-permeable sheet 2 Target substance-adherent carrier 3 Handle portion 4 Welded portion 5 Welded portion 6 Article for collecting body fluid sample 7 Outer packaging 8 Device for collecting body fluid sample

配列番号４～６：合成DNASEQ ID NOs: 4 to 6: synthetic DNA

Claims (9)

尿中の核酸を検出するための核酸付着性の複数の担体と、重なった透液性シートとを含む、尿の採取用物品であって、前記複数の担体が、前記重なった透液性シートの間に存在し、前記担体が、核酸増幅用容器の孔径以下の最長辺又は直径を有し、前記孔径が20.0 mmであり、前記最長辺又は直径が、0.5～20.0 mmである、前記採取用物品。 A urine collection article comprising a plurality of nucleic acid-adherent carriers for detecting nucleic acids in urine and overlapping liquid -permeable sheets, wherein the plurality of carriers are present between the overlapping liquid-permeable sheets, the carriers have a longest side or diameter equal to or smaller than the hole diameter of a container for nucleic acid amplification, the hole diameter is 20.0 mm, and the longest side or diameter is 0.5 to 20.0 mm. 前記担体が、紙製担体、布製担体又はポリマービーズである、請求項１に記載の採取用物品。 The harvesting article of claim 1 , wherein the carrier is a paper carrier, a fabric carrier, or a polymer bead. 尿中の核酸を検出するための核酸付着性の複数の担体と、重なった透液性シートとを含む、尿の採取用物品であって、前記複数の担体が、前記重なった透液性シートの間に存在し、前記担体が、核酸増幅用容器の孔径以下の最長辺又は直径を有し、前記孔径が20.0 mmである、前記採取用物品。 A urine collection article comprising a plurality of nucleic acid-adherent carriers for detecting nucleic acids in urine and overlapping liquid -permeable sheets, wherein the plurality of carriers are present between the overlapping liquid-permeable sheets, the carriers have a longest side or diameter less than or equal to the pore size of a container for nucleic acid amplification , and the pore size is 20.0 mm . 請求項１～３のいずれか一項に記載の採取用物品及び外装を含む、尿の採取用デバイス。 A urine collection device comprising the collection article according to any one of claims 1 to 3 and an exterior. 請求項１～３のいずれか一項に記載の採取用物品及び外装を含む、尿の採取用キット。 A urine collection kit comprising the collection article according to any one of claims 1 to 3 and an outer packaging. 乾燥用ケースをさらに含む、請求項５に記載の尿の採取用キット。 6. The urine collection kit according to claim 5 , further comprising a drying case. 請求項１～３のいずれか一項に記載の採取用物品又は請求項４に記載の採取用デバイスを備える吸収性衛生用品。 An absorbent sanitary product comprising the harvesting article according to any one of claims 1 to 3 or the harvesting device according to claim 4 . 以下の工程を含む、尿中の核酸の検出方法。
(a)核酸付着性の複数の担体を準備する工程であって、前記担体が核酸増幅用容器の孔径以下の最長辺又は直径を有するように前記担体を加工し、前記孔径が20.0 mmであり、前記最長辺又は直径が、0.5～20.0 mmである、工程、
(b) 前記核酸付着性の複数の担体が、重なった透液性シートの間に存在するように前記透液性シートを加工する工程、
(c) 工程(b)で得られた、前記核酸付着性の複数の担体が重なった透液性シートの間に存在する物品と、尿とを接触させる工程
(d) 前記担体に付着した核酸を検出する工程 A method for detecting nucleic acid in urine , comprising the steps of:
(a) preparing a plurality of nucleic acid -adherent carriers, the carriers being processed so that the carriers have a longest side or a diameter equal to or smaller than the pore size of a container for nucleic acid amplification, the pore size being 20.0 mm, and the longest side or the diameter being 0.5 to 20.0 mm;
(b ) processing the liquid-permeable sheets so that the nucleic acid - adherent carriers are present between the overlapping liquid-permeable sheets;
(c) contacting urine with the article obtained in step (b), which is present between the liquid-permeable sheets on which the nucleic acid - adhering carriers are stacked.
(d) detecting the nucleic acid attached to the carrier 以下の工程：
(a)核酸付着性の複数の担体を準備する工程であって、前記担体が核酸増幅用容器の孔径以下の最長辺又は直径を有するように前記担体を加工し、前記孔径が20.0 mmである、工程、
(b)前記核酸付着性の複数の担体が、重なった透液性シートの間に存在するように前記透液性シートを加工する工程、
(c) 工程(b)で得られた、前記核酸付着性の複数の担体が、重なった透液性シートの間に存在する物品と、尿とを接触させる工程、及び
(d) 前記担体に付着した核酸を検出する工程
を含む、尿中の核酸の検出方法。 The following steps:
(a) preparing a plurality of nucleic acid -adherent carriers , the carriers being processed so that the carriers have a longest side or diameter equal to or smaller than the pore size of a container for nucleic acid amplification, the pore size being 20.0 mm;
(b ) processing the liquid-permeable sheets so that the nucleic acid - adherent carriers are present between the overlapping liquid-permeable sheets;
(c) contacting urine with the article obtained in step (b), in which the nucleic acid - adhering carriers are present between overlapping liquid-permeable sheets; and
(d) A method for detecting nucleic acid in urine , comprising the step of detecting the nucleic acid attached to the carrier .
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