JP7702384B2 - Ｖｍａｔ２阻害剤、及びその調製方法、及びその使用 - Google Patents

Description

本発明は、ＶＭＡＴ２阻害剤として機能する一群の化合物又はこれらの立体異性体若しくは薬学的に許容される塩と、これらの、ＶＭＡＴ２に関連する疾患の分野での使用とに関する。

遅発性ジスキネジア（ＴＤ）は、遅発性多動性障害としても既知であり、１９６４年にＦａｕｒｂｙｅにより最初に提唱された疾患である。この疾患は、長期にわたり大量の抗精神病薬を服用して患者で起こることが多い。臨床的には、この疾患は、不随意でリズミカルな繰り返しの及び常同的な動きを主に特徴としており、この動きは、下顎、口唇、及び舌を伴うことが多い。パーキンソン病を処置するための薬物（レボドパ）等の他の薬物も、遅発性ジスキネジアを引き起こす可能性がある。

小胞モノアミン輸送体２（ＶＭＡＴ２）は、シナプス前膜の内側の小胞膜に位置する輸送体であり、この機能は、ドーパミン（ＤＡ）又は５－ヒドロキシトリプタミン等のモノアミン伝達物質が細胞質で代謝されるのを予防するための、このモノアミン伝達物質の小胞中への再取り込み及び送達にある。ＶＭＡＴ２阻害剤は、ＶＭＡＴ２の再取り込み機能に拮抗し得、その結果、ドーパミンがＶＭＡＴ２により小胞に再取り込みされて送達され、細胞質中で酵素により代謝される。従って、シナプス間隙でのドーパミンの放出が低減され、それにより、遅発性ジスキネジアの処置という目的がさらに達成される。

テトラベナジン（ＴＢＺ）は、最初に市販された選択的ＶＭＡＴ２阻害剤であり、インビボでのその代謝産物であるトランス（２，３）－ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）も、選択的ＶＭＡＴ２阻害活性を有する。２０１７年４月に、ＦＤＡにより、成人の遅発性ジスキネジアの処置にバルベナジン（ＶＢＺ）が承認された。バルベナジンは、テトラベナジンの代謝産物ＤＨＴＢＺのエステル化により調製され、テトラベナジンと比べて半減期が長く、頻繁な投薬を必要とせず、明確な有効性及び信頼できる安定性を有し、且つ良好な耐容性を示す。

テトラベナジンには、短い半減期及び多数の投薬等の問題がある。重篤な有害反応を引き起こし、且つうつ病及び自殺傾向という有害反応に関する黒枠警告に至る多数のテトラベナジン代謝産物が存在する。多くの人々が遅発性ジスキネジアを有しているが、市販されている薬物はほんの少数である。従って、この分野では、幅広い臨床ニーズに応えるために、活性がより良好なＶＭＡＴ２阻害剤が依然として必要とされている。

本発明は、先行技術に存在する課題に基づいて、式（Ｉ）

で表される化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩であって、
式（Ｉ）中、
「－－－」は、単結合又は二重結合から選択され；
「－－－」が単結合である場合には、Ｒは、ＯＨ、Ｈ、又は

から選択され；
「－－－」が二重結合である場合には、Ｒは、Ｏであり；
Ｒ_１は、水素、メチル、又はエチルから選択され；
Ｒ_２は、Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～６アルキル、３～６員のヘテロシクロアルキル－Ｃ_１～３アルキル、Ｃ_２～６アルケニル、又はＣ_１～６ヘテロアルキルであり、非置換であるか又は１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_１～６ヘテロアルキルから選択され；
及び
Ｒ_３は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＳＨ、又はＮＨ_２から選択される、
化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩を提供する。

本開示のいくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物のＲ_２は、非置換Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～６アルキル、又はＣ_２～１０アルキルであって、１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～１０アルキルから選択され、好ましくは、Ｃ_２～５アルキルであって、非置換であるか又は２～３個のＲ_３で置換されているＣ_２～５アルキルであり；Ｒ_３は、Ｆであり、及び他の可変要素は、本発明で定義されている通りである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物のＲ_２は、エチル、プロピル、イソブチル、モノフルオロブチル、モノフルオロペンチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル、又はシクロプロパンメチレンから選択され、好ましくは、トリフルオロエチル又はシクロプロパンメチレンであり、及び他の可変要素は、本発明で定義されている通りである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物のＲ_１は、メチルであり；「－－－」は単結合でありＲはＯＨ若しくは

から選択されるか、又は「－－－」は二重結合でありＲはＯであり；及び他の可変要素は、本発明で定義されている通りである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物に関して説明されている３～６員のヘテロシクロアルキル中の又はＣ_１～６ヘテロアルキル中のヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、又はＮであり；ヘテロ原子の数は、１～６であり、好ましくは、ヘテロ原子の内の１つは、Ｏであり；及びＣ_１～６ヘテロアルキル中のＣ原子の数は、２～６、又は３～６、又は２～５、又は３～５、又は４～６、又は４～５である。

本発明はまた、式（ＩＩ）

で表される構造を有する化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩であって、
Ｒ_２は、Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～３アルキル、Ｃ_２～６アルケニル、Ｃ_１～６ヘテロアルキルであり、非置換であるか又は１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_１～６ヘテロアルキルから選択され、Ｒ_３は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、及びＮＨ_２から選択される、化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩も提供する。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物のＲ_２は、非置換Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～６アルキル、又はＣ_２～１０アルキルであって、１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～１０アルキルから選択され、好ましくは、Ｃ_２～５アルキルであって、非置換であるか又は２～３個のＲ_３で置換されているＣ_２～５アルキルであり；Ｒ_３は、Ｆである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物のＲ_２は、エチル、プロピル、イソブチル、モノフルオロブチル、モノフルオロペンチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル、又はシクロプロパンメチレンから選択され、好ましくは、トリフルオロエチル又はシクロプロパンメチレンである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＩ）の化合物に関して説明されているＣ_１～６ヘテロアルキル中のヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、又はＮであり；ヘテロ原子の数は、１～６であり、好ましくは、ヘテロ原子の内の１つは、Ｏである。

本発明はまた、式（ＩＩＩ）

で表される構造を有する化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩であって、
Ｒ_２は、Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～３アルキル、Ｃ_２～６アルケニル、Ｃ_１～６ヘテロアルキルであり、非置換であるか又は１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_１～６ヘテロアルキルから選択され、Ｒ_３は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、及びＮＨ_２から選択される、化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩も提供する。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物のＲ_２は、非置換Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～６アルキル、又はＣ_２～１０アルキルであって、１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～１０アルキルから選択され、好ましくは、Ｃ_２～５アルキルであって、非置換であるか又は２～３個のＲ_３で置換されているＣ_２～５アルキルであり；Ｒ_３は、Ｆである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物のＲ_２は、エチル、プロピル、イソブチル、モノフルオロブチル、モノフルオロペンチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル、又はシクロプロパンメチレンから選択され、好ましくは、トリフルオロエチル又はシクロプロパンメチレンである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）の化合物に関して説明されているＣ_１～６ヘテロアルキル中のヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、又はＮであり；ヘテロ原子の数は、１～６であり、好ましくは、ヘテロ原子の内の１つは、Ｏである。

本発明は、式（ＩＶ）

で表される構造を有する化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩であって、
Ｒ_２は、Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～３アルキル、Ｃ_２～６アルケニル、Ｃ_１～６ヘテロアルキルであり、非置換であるか又は１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_１～６ヘテロアルキルから選択され、Ｒ_３は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、及びＮＨ_２から選択される、化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩を提供する。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＶ）の化合物のＲ_２は、非置換Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～６アルキル、又はＣ_２～１０アルキルであって、１個、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～１０アルキルから選択され、好ましくは、Ｃ_２～５アルキルであって、非置換であるか又は２～３個のＲ_３で置換されているＣ_２～５アルキルであり；Ｒ_３は、Ｆである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＶ）の化合物のＲ_２は、エチル、プロピル、イソブチル、モノフルオロブチル、モノフルオロペンチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル、又はシクロプロパンメチレンから選択され、好ましくは、トリフルオロエチル又はシクロプロパンメチレンである。

本発明のいくつかの実施形態では、式（ＩＶ）の化合物に関して説明されているＣ_１～６ヘテロアルキル中のヘテロ原子は、Ｏ、Ｓ、又はＮであり；ヘテロ原子の数は、１～６であり、好ましくは、ヘテロ原子の内の１つは、Ｏである。

本発明のいくつかの実施形態では、同様に提供されるのは、下記の構造：

を有する化合物、又はその鏡像異性体、ジアステレオマー、混合物、及びこれらの薬学的に許容される塩である。

本発明のいくつかの実施形態では、同様に提供されるのは、バリンエステルと、
下記の構造：

を有する化合物の薬学的に許容される塩とである。

本発明のいくつかの実施形態では、同様に提供されるのは、下記の構造：

を有する化合物、又はその薬学的に許容される塩である。

本発明はまた、上記の化合物の内のいずれか１つのｐ－トルエンスルホネートであって、このｐ－トルエンスルホネートは、好ましくは、下記の構造：

である、ｐ－トルエンスルホネートも提供する。

本発明はまた、化合物１１－Ｐ４Ｓの５種の結晶形も提供する。

本発明のいくつかの実施形態では、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａは、斜方晶Ｐ２１２１２空
間群に属しており、単位格子パラメータは、ａ＝２７．１４４０８（１３）Å， ｂ＝１６．２４０５６（７）Å， ｃ＝６．１３７７５（３）Å， α＝９０°， β＝９０°， γ＝９０°， Ｖ＝２７０５．７４（２）、及びＺ＝４である。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．３３±０．２°、１０．８７±０．２°、及び１８．８９±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．３３±０．２°、１０．８７±０．２°、１６．６１±０．２°、１８．８９±０．２°、１９．２７±０．２°、及び２２．１９±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＡのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．３３±０．２°、１０．８７±０．２°、１３．７７±０．２°、１６．６１±０．２°、１８．２０±０．２°、１８．８９±０．２°、１９．２７±０．２°、２０．０５±０．２°、２２．１９±０．２°、２４．６０±０．２°、及び２４．７７±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａは、Ｃｕ－Ｋａ放射線により、図２－１に実質的に示されるＸ線粉末回折パターンを有する。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．３２±０．２°、５．４２±０．２°、及び１０．８５±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＢのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．３２±０．２°、５．４２±０．２°、１０．８５±０．２°、１６．６０±０．２°、１８．８８±０．２°、及び２２．０２±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｂは、Ｃｕ－Ｋａ放射線により、図３－１に実質的に示されるＸ線粉末回折パターンを有する。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＣのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：５．８１±０．２°、６．３３±０．２°、及び１２．８６±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＣのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：５．８１±０．２°、６．３３±０．２°、７．９９±０．２°、１２．８６±０．２°、１９．０９±０．２°、及び２３．１７±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＣのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：５．８１±０．２°、６．３３±０．２°、７．９９±０．２°、１０．３１±０．２°、１１．６３±０．２°、１２．８６±０．２°、１８．１６±０．２°、１９．０９±０．２°、２３．１７±０．２°、２４．００±０．２°、及び２７．３２±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｃは、Ｃｕ－Ｋａ放射線により、図４－１に実質的に示されるＸ線粉末回折パターンを有する。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＤのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．０２±０．２°及び２３．９１±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＤのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：５．３１±０．２°、６．０２±０．２°、１８．８８±０．２°、２２．１２±０．２°、及び２３．９１±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｄは、Ｃｕ－Ｋａ放射線により、図５－１に実質的に示されるＸ線粉末回折パターンを有する。

本発明のいくつかの実施形態では、Ｃｕ－Ｋａ放射線により得られた１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＥのＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．０６±０．２°、１８．３２±０．２°、及び３０．７９±０．２°で決定された特徴的なピークを含む。

本発明のいくつかの実施形態では、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｅは、Ｃｕ－Ｋａ放射線により、図６－１に実質的に示されるＸ線粉末回折パターンを有する。

本発明はまた、１９Ｐ２のｐ－トルエンスルホネート（１9Ｐ２Ｓと略される）の結晶形も提供し、この結晶形は、斜方晶Ｐ２１２１２１空間群に属する。単位格子パラメータは、ａ＝６．２８８８０（１０）Å、ｂ＝１５．７９５８（３）Å、ｃ＝２７．９２３４（６）Å、α＝９０°、β＝９０°、γ＝９０°、Ｖ＝２７７３．８２（９）Å３、及びＺ＝４である。

本発明はまた、上記の化合物の内のいずれか１つ又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩、又は上記の化合物の内のいずれか１つの結晶形と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物も提供する。この医薬組成物を、様々な薬学的に許容される剤形（例えば、錠剤、カプセル剤、経口液体製剤、顆粒剤、注射剤、又は様々な徐放性製剤及び制御放出製剤）へと調製し得る。この医薬組成物を、経口投与により投与し得るか、又は非経口様式（例えば、静脈内、皮下、若しくは局所）で投与し得る。投薬量は、患者の年齢、性別、及び疾患の種類に従って適切に調整され得、１日当たりの投薬量は、一般的に約１０～１００ｍｇ／日である。

本発明はまた、ＶＭＡＴ２に関連する疾患の処置のための薬物の調製での、上記の化合物の内のいずれか１つ又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩、又は上記の化合物の内のいずれか１つの結晶形、又は医薬組成物の使用も提供する。

本発明はまた、運動亢進障害の処置のための薬物の調製での、上記の化合物又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩、又は上記の化合物の内のいずれか１つの結晶形、又は医薬組成物の使用も提供し、好ましくは、この運動亢進障害は、ハンチントン舞踏病、遅発性ジスキネジア、トゥレット症候群、又は痙攣を含む。

本発明はまた、式（ＩＩ）の化合物を調製する方法であって、下記の調製工程：
工程１：

又は
工程２：

又は
工程３：

を含み、
Ｘは、脱離基であり、Ｒ_２は、上記の式（ＩＩ）の化合物と同一の定義を有し、Ｒ_２は、好ましくは、エチル、プロピル、イソブチル、モノフルオロブチル、モノフルオロペンチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル、又はシクロプロパンメチレンであり、より好ましくは、トリフルオロエチル又はシクロプロパンメチレンである、
方法も提供する。

本発明はまた、式（ＩＩＩ）の化合物を調製する方法であって、下記の工程：

を含み、
還元剤として水素化ホウ素ナトリウムが使用され、Ｒ_２は、上記の式（ＩＩＩ）の化合物と同一の定義を有し、Ｒ_２は、好ましくは、エチル、プロピル、イソブチル、モノフルオロブチル、モノフルオロペンチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル、又はシクロプロパンメチレンであり、より好ましくは、トリフルオロエチル又はシクロプロパンメチレンである、
方法も提供する。

本発明はまた、式（ＩＶ）の化合物を調製する方法であって、下記の工程：

を含み、
Ｒ_２は、上記の式（ＩＶ）の化合物と同一の定義を有し、Ｒ_２は、好ましくは、エチル、プロピル、イソブチル、モノフルオロブチル、モノフルオロペンチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル、又はシクロプロパンメチレンであり、より好ましくは、トリフルオロエチル又はシクロプロパンメチレンである、
方法も提供する。基ｐは、アミノ保護基であり、好ましくは、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、トリメチルシリルエトキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）等である。保護基の除去には、当該技術分野での一般的な方法を使用し得、詳細に関しては、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｕｔｈｏｒ（ｓ）：Ｔｈｅｏｄｏｒａ Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｈ．Ｄ．，ｃｈａｐｔｅｒ ７を参照し得る。

本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の立体異性体を調製する方法であって、この方法は、具体的には下記のように構成されており：

Ｒは、－ＯＨ又は

であり、他の可変要素は、上記の式（Ｉ）の化合物と同一の定義を有する、
方法も提供する。この調製方法は、キラルクロマトグラフィーカラムを使用する式（Ｉ）の化合物の分割を含み、このキラルクロマトグラフィーカラムは、好ましくは、Ｄａｉｃｅｌ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ－Ｈクロマトグラフィーカラムである。

本発明で提供される化合物は、下記の利点の内のいずれか１つ又は複数を有する：ＶＭＡＴ２に対する強い親和性、インビボでのより高い曝露、脳中でのより高い濃度、より長い半減期、及び強い効力等。

別途述べない限り、本明細書で使用される下記の用語及び語句は、下記の意味を有することが意図されている。具体的な用語又は語句は、具体的に定義されない限り不確実又は不明確と見なされるべきではなく、その通常の意味で理解されるべきである。本明細書で商品名が表示されている場合には、この商品名は、その対応する商品又は有効成分を指すことが意図されている。

用語「薬学的に許容される」は、本明細書で使用される場合、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を示さない、健全な医学的判断の範囲内でのヒト及び動物の組織と接触した使用に適した化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指し、この使用は、合理的な利益／リスク比に見合っている。

用語「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物の塩を指し、この塩は、比較的比毒性の酸又は塩基と共に、本発明で見出される特定の置換基を有する化合物から調製される。本発明の化合物が比較的酸性の官能基を含む場合には、純粋な溶液中か又は適切な不活性溶媒中において、そのような化合物の中性形態と、十分な量の塩基とを接触させることにより、塩基付加塩を得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ塩若しくはマグネシウム塩、又は同様の塩が挙げられる。本発明の化合物が、比較的塩基性の官能基を含む場合には、純粋な溶液中か又は適切な不活性溶媒中において、そのような化合物の中性形態と、十分な量の酸とを接触させることにより、酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の例として、無機酸塩又は有機酸塩が挙げられる。本発明のある特定の化合物は、塩基性の官能基及び酸性の官能基を含み、そのため任意の塩基付加塩又は酸付加塩に変換され得る。

本発明の薬学的に許容される塩を、従来の化学的方法により、酸ラジカル又は塩基ラジカルを含む親化合物から合成し得る。一般に、そのような塩を調製する方法は、水中で、又は有機溶媒中で、又は両方の混合物中で、遊離酸形態又は遊離塩基形態のこの化合物と、化学量論量の適切な塩基又は酸とを反応させて、塩を調製することを含む。

本発明の化合物は、特定の幾何学的形態又は立体異性形態で存在し得る。本発明は、全てのそのような化合物（例えば、シス及びトランス異性体、（－）－及び（＋）－鏡像異性体、（Ｒ）－及び（Ｓ）－鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体、並びにこれらのラセミ混合物及び他の混合物、例えば、鏡像異性的に又はジアステレオマー的に富化された混合物、これらは全て、本発明の範囲内である）を企図している。さらなる不斉炭素が、アルキル基等の置換基に存在し得る。これらの異性体及びその混合物は全て、本発明の範囲に含まれている。

別途述べない限り、用語「鏡像異性体」は、互いに鏡像である立体異性体を指す。

別途述べない限り、用語「ジアステレオマー」は、立体異性体であって、分子が２個以上のキラル中心を有し且つ互いに鏡像ではない、立体異性体を指す。

別途述べない限り、「（Ｄ）」又は「（＋）」は、右旋性を意味しており、「（Ｌ）」又は「（－）」は、左旋性を意味しており、「（ＤＬ）」又は「（±）」は、ラセミを意味している。

別途述べない限り、楔形の実線

、及び楔形の点線

は、立体中心の絶対配置を表す。

光学的に活性な（Ｒ）－及び（Ｓ）－異性体、並びにＤ及びＬ異性体を、キラル合成、又はキラル試薬、又は他の従来の技術を使用して調製し得る。本発明の化合物の特定の鏡像異性体が必要とされる場合には、この鏡像異性体を、不斉合成によるか又はキラル補助剤による誘導体化により調製し得、得られたジアステレオマー混合物を分離し、補助基を切断して、純粋な所望の鏡像異性体が得られる。或いは、分子が塩基性官能基（例えばアミノ基）又は酸性官能基（例えばカルボキシル基）を含む場合には、適切な光学的に活性な酸又は塩基でジアステレオマー塩を形成し、続いて、当該技術分野で公知の従来の方法を使用して、このジアステレオマーを分割し、その後、純粋な鏡像異性体を回収し得る。加えて、鏡像異性体及びジアステレオマーの分離は、任意選択的に化学的誘導体化方法（例えば、アミンからのカルバメートの形成）と組み合わせて、キラル固定相を使用するクロマトグラフィーを使用することにより達成されることが多い。本発明の化合物は、この化合物を構成する原子の内の１つ又は複数にて、原子同位体を不自然な割合で含み得る。例えば、この化合物を、放射性同位体（例えば、三重水素（３Ｈ）、ヨウ素－１２５（１２５Ｉ）、又はＣ－１４（１４Ｃ）で放射性標識し得る。別の例では、水素を重水素で置換して、重水素化薬剤を形成し得る。重水素及び炭素により形成された結合は、通常の水素及び炭素により形成された結合と比べて強い。非重水素化薬剤と比較して、重水素化薬剤は、毒性副作用が低減されており、薬物安定性が上昇しており、効力が増強されており、薬物の生物学的半減期が延長されており、且つ他の利点を有する。本発明の化合物の全ての同位体バリエーションは、放射性であるか否かにかかわらず、本発明の範囲に包含されることが意図されている。

化合物１１－Ｐ４Ｓの分子構造の楕円グラフ。 それぞれ、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＡのＸＲＰＤパターン、ＴＧＡ／ＤＳＣパターン、^１Ｈ ＮＭＲスペクトル。 それぞれ、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＢのＸＲＰＤパターン、ＴＧＡ／ＤＳＣパターン、^１Ｈ ＮＭＲスペクトル。 それぞれ、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＣのＸＲＰＤパターン、ＴＧＡ／ＤＳＣパターン、^１Ｈ ＮＭＲスペクトル。 それぞれ、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＤのＸＲＰＤパターン、ＴＧＡ／ＤＳＣパターン、^１Ｈ ＮＭＲスペクトル。 それぞれ、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＥのＸＲＰＤパターン、ＴＧＡ／ＤＳＣパターン、^１Ｈ ＮＭＲスペクトル。 化合物１１－Ｐ３Ｓの分子構造の楕円グラフ。 化合物１９Ｐ２Ｓの分子構造の楕円グラフ。 雄ＳＤラットでの化合物１１、化合物１６、比較例４４の化合物、及びＤＨＴＢＺそれぞれの強制経口投与後の血漿薬物濃度－時間曲線。 ＳＤラットでのＶＢＺ、化合物２１、化合物２２、化合物２３、及び比較例４５の化合物の強制経口投与後の脳組織中での原化合物の分布。 脳組織中での活性代謝産物（ＤＨＴＢＺ、化合物１１、化合物１２、化合物１３、及び比較例４４の化合物）の分布。 ＳＤラットでのＶＢＺ、化合物２１、化合物２２、化合物２３、及び比較例４５の化合物の強制経口投与後の原組成物の脳／血漿比（Ｂ／Ｐ比）。 活性代謝産物（ＤＨＴＢＺ、化合物１１、化合物１２、化合物１３、及び比較例４４の化合物）の脳／血漿比（Ｂ／Ｐ比）。 ＶＢＺ及び１１－Ｐ４の用量－効果曲線。 １１－Ｐ４Ｓ結晶形Ａ／Ｄ／Ｅ懸濁液のＸＲＰＤオーバーレイの競合結果。

実施例１
断片１：

の調製
合成経路：

１．化合物ａ（５．０ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解させた。臭化ベンジル（６．２ｇ、３５．８ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（６．８ｇ、４９．１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、撹拌しつつ一晩室温で反応させた。この反応系に、水（１００ｍＬ）を添加した。固体が析出し、吸引ろ別を実施して、白色固体ｂ ７．２ｇを得た。

２．化合物ｂ（５．４ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）を、ニトロメタン（５０ｍＬ）に溶解させた。酢酸アンモニウム（０．８６ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を１００℃まで加熱し、撹拌しつつ３時間にわたり反応させた。この反応系を、室温まで冷却した。この反応系に、水（１００ｍＬ）を添加した。固体が析出し、吸引ろ別を実施して、黄色固体ｃ（６．０ｇ）を得た。

３．窒素保護下で、無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）に、水素化アルミニウムリチウム（２．０ｇ、５２．６ｍｍｏｌ）を緩やかに添加した。この反応混合物を、０℃まで冷却した。ｃ（５．０ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）を、緩やかに滴下した。次いで、この反応系を６０℃まで温め、撹拌しつつ２時間にわたり反応させた。この反応混合物を０℃まで冷却し、この反応を水でクエンチした。得られた混合物を吸引ろ過し、ろ液を無水硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下で濃縮して、淡黄色の油状液体ｄ ３．２ｇを得た。この生成物を、精製することなく、反応の次の工程で直接使用した。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２５８．２［Ｍ＋１］

４．粗ｄ（２．７ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を、氷酢酸（１６ｍＬ）に溶解させた。トリフルオロ酢酸（４ｍＬ）を添加し、次いでウロトロピン（３．０ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を８０℃まで温め、撹拌しつつ２時間にわたり反応させた。この反応混合物を、室温まで冷却した。砕いた氷（５０ｇ）を添加し、次いで、この反応混合物のｐＨを、２０％水酸化ナトリウム溶液で８に調整した。この反応溶液を、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、粗生成物ｅ ２．４ｇを得た。この生成物を、精製することなく反応の次の工程で直接使用した。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２６８．１［Ｍ＋１］

５．粗ｅ（２．０ｇ、５．１ｍｍｏｌ）を、エタノール（２０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）の系に溶解させた。塩化ベンジルトリエチルアンモニウム（０．４３ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を加熱して還流させ、撹拌しつつ５時間にわたり反応させた。溶媒を、減圧下で蒸発させた。残留物に水（５０ｍＬ）を添加し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、粗生成物を得た。次いで、この粗生成物をエタノールで再結晶化させて、白色固体化合物Ｆ ０．８ｇを得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３９４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．４３－７．２８（ｍ，５Ｈ），６．６４（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｄｄ，１Ｈ），３．２６（ｄｄ，１Ｈ），３．１３－３．００（ｍ，２Ｈ），２．９０（ｄｄ，１Ｈ），２．７７－２．６１（ｍ，２Ｈ），２．６０－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｔ，１Ｈ），１．８３－１．７５（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．５８（ｍ，１Ｈ），１．０６－０．９８（ｍ，１Ｈ），０．９０（ｍ，６Ｈ）．

６．化合物ｆ（０．５ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を、メタノール（２０ｍＬ）に溶解させた。パラジウム炭素（０．０５ｇ）を添加し、得られた混合物を、水素雰囲気下で８時間にわたり室温にて撹拌した。パラジウム炭素をろ過により除去し、減圧下でろ液から溶媒を蒸発させて、淡黄色粉末（即ち断片１）０．４７ｇを得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３０４．２［Ｍ＋１］。

化合物１：

の調製
合成経路：

断片１化合物（１５０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解させた。３－ブロモプロピルメチルエーテル（８４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１０３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を６０℃まで温め、撹拌しつつ５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系に水（８ｍＬ）を添加し、次いで、この反応混合物を酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で分離して、化合物１（１２０ｍｇ、淡黄色のろう様固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３７６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ６．６５（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），４．０７（ｔ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｔ，２Ｈ），３．４８（ｄｄ，１Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．２６（ｄｄ，１Ｈ），３．１５－３．０２（ｍ，２Ｈ），２．８８（ｄｄ，１Ｈ），２．７７－２．６１（ｍ，２Ｈ），２．６０－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｔ，１Ｈ），２．１１－２．０４（ｍ，２Ｈ），１．８３－１．７５（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．５８（ｍ，１Ｈ），１．０６－０．９８（ｍ，１Ｈ），０．９０（ｍ，６Ｈ）．

実施例２：

合成経路：

断片１化合物（１５０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解させた。１－ブロモ－４－フルオロブタン（８５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１０３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を６０℃まで温め、撹拌しつつ５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系に水（８ｍＬ）を添加し、次いで、この反応混合物を酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で分離して、化合物２（１１５ｍｇ、淡黄色の油状液体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３７８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ６．６４（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），４．５７（ｔ，１Ｈ），４．４５（ｔ，１Ｈ），４．０７（ｔ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｄｄ，１Ｈ），３．２６（ｄｄ，１Ｈ），３．１５－３．０２（ｍ，２Ｈ），２．８８（ｄｄ，１Ｈ），２．７７－２．６１（ｍ，２Ｈ），２．６０－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｔ，１Ｈ），１．９６－１．９０（ｍ，３Ｈ），１．８８－１．７５（ｍ，２Ｈ），１．７０－１．５８（ｍ，１Ｈ），１．０６－０．９８（ｍ，１Ｈ），０．８９（ｍ，６Ｈ）．

実施例３：

合成経路：

断片１化合物（１５０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解させた。ブロモメチルシクロプロパン（７４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１０３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を６０℃まで温め、撹拌しつつ５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系に水（８ｍＬ）を添加し、次いで、この反応混合物を酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で分離して、化合物３（１０７ｍｇ、淡黄色のろう様固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ６．６１（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），３．８２－３．７９（ｍ，５Ｈ），３．４８（ｄｄ，１Ｈ），３．２８（ｄｄ，１Ｈ），３．１５－３．０２（ｍ，２Ｈ），２．８９（ｄｄ，１Ｈ），２．７７－２．６１（ｍ，２Ｈ），２．６０－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｔ，１Ｈ），１．８２－１．７５（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．５８（ｍ，１Ｈ），１．０６－０．９８（ｍ，１Ｈ），０．８９（ｍ，６Ｈ），０．６５－０．５９（ｍ，２Ｈ），０．３５－０．３０（ｍ，２Ｈ）．

実施例４：

合成経路：

断片１化合物を、ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解させた。ブロモプロパン（６８ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１０３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を６０℃まで温め、撹拌しつつ５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系に水（８ｍＬ）を添加し、次いで、この反応混合物を酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で分離して、化合物４（１０２ｍｇ、淡黄色のろう様固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３４６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ６．６４（ｓ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），３３．９６－３．９０（ｔ，２Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．４９（ｄｄ，１Ｈ），３．２７（ｄｄ，１Ｈ），３．１５－３．０２（ｍ，２Ｈ），２．８８（ｄｄ，１Ｈ），２．７４－２．６６（ｍ，２Ｈ），２．６２－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｔ，１Ｈ），１．９６－１．９０（ｍ，３Ｈ），１．７０－１．５８（ｍ，１Ｈ），１．０６－０．９８（ｍ，４Ｈ），０．８９（ｍ，６Ｈ）．

実施例５：

合成経路：

２０ｍＬのマイクロ波管中において、断片１化合物（６０６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解させた。１，１，－ジフルオロ－２－ヨードエタン（７６８ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．１０ｇ、８．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１００℃まで温め、３時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水（３０ｍＬ）に注ぎ、次いで、酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で分離して、化合物５（６００ｍｇ、オフホワイトの固体）として得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ６．６８（ｓ，１Ｈ），６．５９（ｓ，１Ｈ），５．９７－６．２４（ｍ，１Ｈ），４．１６－４．２３（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．４２－３．５２（ｍ，１Ｈ），３．１６－３．３１（ｍ，１Ｈ），２．５４－３．１２（ｍ，７Ｈ），２．３２－２．３８（ｍ，１Ｈ），１．６３－１．７１（ｍ，１Ｈ），１．００－１．０７（ｍ，１Ｈ），０．８８－０．９２（ｍ，６Ｈ）．

実施例６：

合成経路１：

２０ｍＬのマイクロ波管中において、断片１化合物（１．８２ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１５ｍＬ）に溶解させた。１，１，１－トリフルオロ－２－ヨードエタン（２．３０ｇ、１２ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（３．３１ｇ、２４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１４０℃まで温め、３時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水７５ｍＬに注ぎ、次いで、酢酸エチル（１５ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で分離して、化合物６（６１０ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ６．７５（ｓ，１Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），４．３５－４．３９（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．４９－３．５３（ｍ，１Ｈ），３．２６－３．３１（ｍ，１Ｈ），２．３８－３．１５（ｍ，７Ｈ），２．３２－２．３５（ｍ，１Ｈ），１．３７－１．８４（ｍ，２Ｈ），１．００－１．０８（ｍ，１Ｈ），０．９０－０．９２（ｍ，６Ｈ）．

合成経路２：

工程１：反応物Ｉ（５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解させた。Ｋ_２ＣＯ_３（７７ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を、撹拌しつつ０．５時間にわたり室温で反応させた。トリフルオロヨードエタン（７６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を、ＴＬＣ検出によりこの反応の完了が示されるまで、撹拌しつつ一晩８０℃で反応させた。水を添加して、この反応をクエンチした。１時間にわたり撹拌している間に固体が析出し、続いて吸引ろ別した。フィルタケーキを、水で２回洗浄した。フィルタケーキを回収して乾燥させて、黄色がかった固体として中間体１ ０．０７ｇを得た。

工程２：中間体１（０．０７ｇ、０．２７０ｍｍｏｌ）を、エタノール（１ｍＬ）及び水（１ｍＬ）の混合溶液に溶解した。３－ジメチルアミノメチル－５－メチル－２－ヘキサノン（０．０６ｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）及び塩化ベンジルトリエチルアンモニウム（０．０２ｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を９５℃まで加熱し、１８時間にわたり反応させた。この反応混合物を室温まで冷却して濃縮した。残留物を、酢酸エチル（２０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で分離して、化合物６（１０ｍｇ、オフホワイトの固体）を得、収率は１０％であった。

合成経路３：

工程１：反応物Ｉ（５０ｍｇ、０．２８２ｍｍｏｌ）を、エタノール（１ｍＬ）及び水（１ｍＬ）の混合溶液に溶解させた。３－ジメチルアミノメチル－５－メチル－２－ヘキサノン（０．０６ｇ、０．３３８ｍｍｏｌ）及び塩化ベンジルトリエチルアンモニウム（０．０２ｇ、０．０８５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を９５℃まで加熱し、１８時間にわたり反応させた。この反応混合物を室温まで冷却し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル（２０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で分離して、断片１（７０ｍｇ、オフホワイトの固体）を得、収率は８２％であった。

工程２：合成経路１と同一。

実施例７：

合成経路：

断片１化合物（６０６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解させた。１－ブロモ－４，４，４－トリフルオロブタン（５７３ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（８２８ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８０℃まで温め、５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水（３０ｍＬ）に注ぎ、次いで、酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で分離して、化合物７（４８０ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４１４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ６．６２（ｓ，１Ｈ），６．５６（ｓ，１Ｈ），４．０３－４．０５（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．４９－３．５１（ｍ，１Ｈ），３．２１－３．４２（ｍ，１Ｈ），２．５４－３．１４（ｍ，７Ｈ），２．２９－２．３７（ｍ，３Ｈ），２．０５－２．０９（ｍ，２Ｈ），１．６８－１．８３（ｍ，１Ｈ），１．６４－１．６８（ｍ，１Ｈ），１．０１－１．０６（ｍ，１Ｈ），０．９０－０．９２（ｍ，６Ｈ）．

実施例８：

合成経路：

断片１化合物（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ １ｍＬに溶解させた。１－ブロモ－２－フルオロエタン（６２．７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１３８ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８０℃まで温め、５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水（５ｍＬ）に注ぎ、次いで、酢酸エチル（２ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝８０：１）で分離して、化合物８（７５ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５０．２［Ｍ＋Ｈ］＋；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ ６．６８（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），４．７２－４．８１（ｍ，２Ｈ），４．２２－４．２８（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），２．２９－３．５８（ｍ，１０Ｈ），１．６４－１．８３（ｍ，２Ｈ），１．０２－１．０６（ｍ，１Ｈ），０．９０－０．９３（ｍ，６Ｈ）．

実施例９：

合成経路：

断片１化合物（６０６ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解させた。ブロモ－イソブタン（４１１ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（８２８ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８０℃まで温め、５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水（３０ｍＬ）に注ぎ、次いで、酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で分離して、化合物９（４１０ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ６．６２（ｓ，１Ｈ），６．５５（ｓ，１Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．７０－３．８０（ｍ，２Ｈ），２．３５－３．５０（ｍ，１０Ｈ），２．１１－２．１８（ｍ，１Ｈ），１．７８－１．８３（ｍ，１Ｈ），１．６４－１．６９（ｍ，１Ｈ），１．０２－１．０６（ｍ，７Ｈ），０．９０－０．９２（ｍ，６Ｈ）．

実施例１０：

合成経路：

断片１化合物（６０６ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解させた。ブロモエタン（３２７ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（４１４ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８０℃まで温め、５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水（３０ｍＬ）に注ぎ、次いで、酢酸エチル（２０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で分離して、化合物１０（３９７ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３３２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；

実施例１１：

合成経路：

窒素保護下にて、化合物６（６１０ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を、氷浴下でＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。水素化ホウ素ナトリウム（１２０ｍｇ、３．１７ｍｍｏｌ）及びＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を添加し、この混合物を、２時間にわたり氷浴下で反応させた。１Ｎ 塩酸を添加することにより、反応をクエンチした。水性ＮａＨＣＯ_３溶液を添加して、ｐＨ値をアルカリ性に調整した。有機相を濃縮し、次いで、酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。有機相を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝４０：１）で分離して、化合物１１（３４６ｍｇ、オフホワイトの固体）を得、収率は５６．５％であった。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ６．８７（ｓ，１Ｈ），６．７９（ｓ，１Ｈ），４．４３－４．４９（ｍ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），２．９３－３．２４（ｍ，４Ｈ），２．４４－２．７１（ｍ，３Ｈ），１．０２－２．１０（ｍ，７Ｈ），０．９４－１．０２（ｍ，６Ｈ）．

実施例１２～２０：
実施例１１の方法と類似の方法を使用することにより、実施例１２～２０を合成した。

実施例２１：

合成経路：

１．窒素保護下にて、Ｂｏｃ－Ｌ－バリン（８５７．６ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ）を、氷浴下でジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解させた。４－ジメチルアミノピリジン（３８６．９ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）及び化合物１１（１．０２ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を、氷浴下で撹拌しつつ５分にわたり反応させた。ジシクロヘキシルカルボジイミド（８１３．７ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ）を、一度に添加した。この混合物を自然に温め、１８時間にわたり反応させた。得られた混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残留物を分離し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１）で精製して、化合物２１ａ（１．１３ｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：５８７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋

２．化合物２１ａ（１．１３ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を、１，４－ジオキサン溶液（１５ｍｌ、４Ｍの濃度）に溶解させた。この混合物を、２時間にわたり室温で反応させた。この反応溶液を濃縮した。固体を、ジエチルエーテル（１０ｍｌ×１回）で洗浄して、粗物質を得た。この粗物質を、水（３０ｍＬ）に溶解させた。この混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ＝７～８に調整し、ジクロロメタン（１０ｍｌ×３回）で抽出した。有機相をまとめた。ジクロロメタン相を、水（１０ｍｌ×１回）及び飽和塩化ナトリウム（１０ｍｌ×１回）それぞれで洗浄した。ジクロロメタン相を、無水硫酸ナトリウムで脱水した。この混合物をろ過して、固形を除去した。ジクロロメタン相を濃縮して、化合物２１（７２０ｍｇ）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４８７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ６．７６（ｓ，１Ｈ），６．７４（ｓ，１Ｈ），４．６５－４．７４（ｍ，１Ｈ），４．３８－４．４５（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），３．２５－３．２７（ｍ，１Ｈ），２．９７－３．１２（ｍ，３Ｈ），２．６１－２．７４（ｍ，２Ｈ），２．４７－２．５１（ｍ，１Ｈ），１．９４－２．１６（ｍ，３Ｈ），１．６３－１．７５（ｍ，１Ｈ），１．４３－１．５１（ｍ，１Ｈ），１．２７－１．３７（ｍ，１Ｈ），１．０１－１．０８（ｍ，２Ｈ），０．８８－１．００（ｍ，１２Ｈ）．

実施例２２～２５：
実施例２１の方法と類似の方法を使用することにより、実施例２２～２５を合成した。

実施例２６～２８：
実施例１１の方法と類似の方法を使用することにより、化合物２６～２８を合成した。

実施例２９

工程１：中間体Ｉの合成：
２Ｌのシングルネックフラスコに、原料である断片Ｉ（１０６ｇ、３５０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及び無水炭酸カリウム（１４５ｇ、１０５０ｍｍｏｌ、３ｅｑ）を入れ、無水Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（７００ｍＬ）を入れ、次いで、１，１，１－トリフルオロ－２－ヨードエタン（１８４ｇ、８７５ｍｍｏｌ、２．５ｅｑ）を入れた。この混合物を、１１時間にわたり１４０℃で反応させた。ＴＬＣ（ＰＥ：ＥＡ＝３：１）モニタリングにより示されるように、一部の原料が残存していた。１，１，１－トリフルオロ－２－ヨードエタン（７３．５ｇ、３５０ｍｍｏｌ、１ｅｑ）をさらに添加した。この混合物を、さらに８時間にわたり１４０℃で反応させた。反応の完了後、この反応混合物を室温まで冷却した。この反応系を、水（３．５Ｌ）及び飽和ブライン（７００ｍＬ）の混合溶液に注ぎ、酢酸エチル（７００ｍＬ）で４回抽出した。酢酸エチル相をまとめた。まとめた酢酸エチル相を、水（７００ｍＬ）で１回洗浄し、飽和塩化ナトリウム溶液（７００ｍＬ）で１回洗浄した。酢酸エチル相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過して無水硫酸ナトリウムを除去した。酢酸エチル相を、減圧下で濃縮した。残留物を、酢酸エチル（１７５ｍＬ）及び石油エーテル（１７５ｍＬ）の混合溶液でスラリー化し、ろ過した。固体を回収した。この固体を、酢酸エチル（１７５ｍｌ）及び石油エーテル（１７５ｍＬ）の混合溶液で合計３回洗浄した。乾燥後、淡黄色固体 ５０ｇが得られた。淡黄色固体（５０ｇ）を、還流で９５％エタノール（７００ｍＬ）に溶解させ、この混合物を４時間にわたり自然に冷却した。結晶を析出させた。この混合物をろ過し、結晶を回収した。この結晶を、室温にて、９５％エタノール（１７５ｍＬ）で合計３回洗浄した。乾燥後、中間体Ｉ（３８．４ｇ、淡黄色結晶）を得、収率は２８．５％であった。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ６．７５（ｓ，１Ｈ），６．５９（ｓ，１Ｈ），４．３８－４．３４（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．５３－３．５１（ｍ，１Ｈ），３．３２－３．２８（ｍ，１Ｈ），３．１５－３．０９（ｍ，２Ｈ），２．９１－２．８８（ｍ，１Ｈ），２．７５－２．７２（ｍ，２Ｈ），２．６１－２．５３（ｍ，２Ｈ），２．３８－２．３４（ｍ，１Ｈ），１．８２－１．７８（ｍ，１Ｈ），１．６９－１．６２（ｍ，１Ｈ），１．０６－１．０１（ｍ，１Ｈ），０．９２－０．９０（ｍ，６Ｈ）．

工程２：化合物１１の合成：
１Ｌのシングルネックフラスコで、中間体Ｉ（３８．４６ｇ、１００ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及びテトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）を入れた。氷浴下で、水素化ホウ素ナトリウム（４．５６ｇ、１２０ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ）を入れ、次いで無水メタノール（１５０ｍｌ）を入れ、この混合物を、２時間にわたり氷浴下で撹拌した。反応の完了後、この反応を、氷浴下にて窒素雰囲気中において、１Ｎ ＨＣｌ（３００ｍＬ、３００ｍｍｏｌ、３ｅｑ）でクエンチした。氷浴下において、飽和炭酸ナトリウム溶液（３００ｍＬ）を滴下して、淡黄色固体を得た。この混合物をろ過し、固体を回収した。この固体を、水（３００ｍＬ）で合計３回洗浄した。乾燥後、淡黄色固体 ３９ｇを得た。この固体を、８０℃の温度で、酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解させた。次いで、石油エーテル（１００ｍＬ）を添加した。この混合物を、４時間にわたり自然に冷却した。白色固体が析出した。この固体を回収し、酢酸エチル（５０ｍＬ）及び石油エーテル（５０ｍＬ）の混合溶液で合計３回洗浄した。乾燥後、化合物１１（２３．０７ｇ、白色固体）を得、収率は５９．６％であった。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ６．７１（ｓ，１Ｈ），６．７０（ｓ，１Ｈ），４．３８－４．３１（ｍ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．４１－３．３５（ｍ，１Ｈ），３．１３－２．９６（ｍ，４Ｈ），２．６４－２．５４（ｍ，２Ｈ），２．４７－２．４０（ｍ，１Ｈ），２．０４－１．９４（ｍ，１Ｈ），１．７５－１．６６（ｍ，３Ｈ），１．６１－１．４５（ｍ，２Ｈ），１．０８－１．０２（ｍ，１Ｈ），０．９２－０．９０（ｍ，６Ｈ）．

工程３：化合物１１の分割
化合物１１ １２．３３ｇを秤量した。Ｄａｉｃｅｌ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅクロマトグラフィー及びＤａｉｃｅｌキラルカラムを使用して、ＨＰＬＣ法により、キラル異性体を分離した。その対応するコンポーネントを回収し、ロータリーエバポレーションに供して溶媒を除去し、それにより純粋な光学的異性体が得られた。分離方法及び検出結果を、表３～４で見出し得た。

１１－Ｐ４のコンポーネント（保持時間：４．９９４分）及び１１－Ｐ３のコンポーネント（保持時間：６．１０９分）をそれぞれ回収した。溶媒をロータリーエバポレーションで除去して、試料１１－Ｐ４（６．１４４８ｇ）及び１１－Ｐ３（５．７８４４ｇ）をそれぞれ得た。分析方法及び結果を、表５～８で見出し得た。

化合物１１－Ｐ４及び１１－Ｐ３のＭＳ、^１ＨＮＭＲ、及び^１３ＣＮＭＲは、同一である：
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；
^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ６．７２（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｓ，１Ｈ），４．３３－４．３７（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．３７－３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１２－３．１４（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．０６－３．０８（ｍ，１Ｈ），３．０２－３．０５（ｍ，１Ｈ），２．９８－３．００（ｍ，１Ｈ），２．６０－２．６３（ｍ，１Ｈ），２．５５－２．５８（ｍ，１Ｈ），２．４５－２．４６（ｍ，１Ｈ），１．９５－１．９９（ｔ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），１．７２－１．７４（ｍ，１Ｈ），１．６８－１．７１（ｍ，１Ｈ），１．５５－１．６０（ｍ，１Ｈ），１．４７－１．５３（ｍ，１Ｈ），１．０３－１．０７（ｍ，１Ｈ），０．９１－０．９２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ），０．９３－０．９４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（１５０Ｈｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ １４８．５，１４５．５３，１３２．８５，１２６．８４，１２０．８０－１２６．３４，１１７．６６，１０９．２９，７４．４６，６７．６６－６８．３６，６０．９４，５９．９９，５６．０９，５１．７４，４１．５１，４０．４４，３９．６４，２８．８３，２５．３３，２４．１５，２１．７４。

実施例３０
Ｉ．化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａ
工程１：化合物１１－Ｐ４からのモノ－ｐ－トルエンスルホネートの形成：

１１－Ｐ４（０．２０ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル（５ｍｌ）に溶解させた。ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（０．１２ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の酢酸エチル溶液を滴下して、白色固体を析出させた。この混合物を１２時間にわたり室温で撹拌し、吸引ろ別した。フィルタケーキを酢酸エチル（５ｍＬ×３回）で洗浄し、乾燥させて、化合物１１－Ｐ４Ｓを白色固体（０．２２ｇ）として得、収率は７８％であった。

工程２：化合物１１－Ｐ４Ｓ結晶形Ａの単結晶を成長させる方法
１）１１－Ｐ４Ｓ ９ｍｇを秤量し、１．５ｍＬのＨＰＬＣバイアルに入れた。
２）この固体に、エタノール（４５０μＬ）を添加した。温度を４０℃まで上昇させ、次いで、固体が完全に溶解して透明な溶液が得られるまで、４０℃で一定に保った。
３）この溶液を、静置したまま０．３℃／分で２５℃まで冷却した。
４）結晶が析出し、この反応バイアルを顕微鏡で観察した。結晶を定量し、ＸＲＳＤ実験を実行した。

工程３：化合物１１－Ｐ４Ｓ結晶形ＡのＸＲＳＤ実験：
３．１ 機器パラメータ及びデータ収集：
３．１．１ 機器パラメータ：
単結晶回折計：Ｒｉｇａｋｕ Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ ＸｔａＬＡＢ Ｓｙｎｅｒｇｙ ４円回折計
検出器：ＨｙＰｉｘ－６０００ＨＥ平面検出器；
低温システム：Ｏｘｆｏｒｄ Ｃｒｙｏｓｔｒｅａｍ ８００；
光源：Ｃｕ標的微焦点光源；λ＝１．５４１８４Å、５０Ｗ；
結晶とＣＣＤ検出器との距離：ｄ＝３５ｍｍ；
管電圧：５０ｋＶ；
管電流：１ｍＡ

３．１．２ データ収集
この回折実験では、４８４５９個の回折点を収集し、ここで、４８０３個の独立した回折点が含まれ（Ｒｉｎｔ＝０．０６７２）、回折収集範囲：２θ＝６．３４２～１３３．２°、及び回折指数範囲：－３２≦ｈ≦３２、－１９≦ｋ≦１９、－７≦ｌ≦６であった。ＳＨＥＬＸＴ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．２０１５．Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ａ７１，３－８）を使用して構造解析を実行し、（Ｆ^２に対して）ＳＨＥＬＸＬ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．２０１５．Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ｃ７１，３－８）を使用して構造精密化を実行した。４８０３個の独立した回折点の内、構造精密化に関与するパラメータは、３４８個であった。精密化後、Ｓ＝１．０４６、Ｒ_１＝０．０３１８、及びｗＲ_２＝０．０８２８であった。残留電子密度値は、０．２６及び－０．３２ｅÅ^－３であった。

３．２．データのリストを、表９及び１０で見出し得た。

３．３ 結論
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａは、無色の塊（０．２０×０．１０×０．１０ｍｍ^３）であり、斜方晶Ｐ２１２１２空間群に属していた。単位格子パラメータ：ａ＝２７．１４４０８（１３）Å、ｂ＝１６．２４０５６（７）Å、ｃ＝６．１３７７５（３）Å、α＝９０°、β＝９０°、γ＝９０°、Ｖ＝２７０５．７４（２）Å^３、Ｚ＝４。密度の計算値：Ｄｃ＝１．３７４ｇ／ｃｍ^３、単位格子の電子数：Ｆ（０００）＝１１８４．０、単位格子の線吸収係数：μ（ＣｕＫα）＝１．６１３ｍｍ^－１、及び回折実験温度：Ｔ＝９９．９９（１１）Ｋ。

１１－Ｐ４Ｓの分子構造の楕円グラフを図１に見出し得、この化合物の構造は、

であった。

工程４：化合物１１－Ｐ４Ｓ結晶形Ａのキャラクタリゼーション
４．１ ＸＰＲＤキャラクタリゼーション
４．１．１ キャラクタリゼーション方法：ＸＲＰＤを、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ製のＸ線粉末回折計で取得し、走査パラメータは、下記の表１１に示される通りであった。

４．１．１ 結果：
ＸＰＲＤスペクトルを図２－１に見出し得、このスペクトルの解析データを表１２に見出し得た。

４．２ ＴＧＡ／ＤＳＣキャラクタリゼーション
４．２．１ キャラクタリゼーション方法：ＴＧＡスペクトル及びＤＳＣスペクトルを、ＴＡ Ｑ５０００／５５００熱重量分析装置及びＴＡ ２５００示差走査熱量計でそれぞれ取得し、試験パラメータを表１３に見出し得た。

４．２．２ 結果：化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＡのＴＧＡ／ＤＳＣスペクトルを、図２－２に見出し得た。この結果から、試料を２００℃まで加熱した後、重量減少は１．６％であり、且つ２１５．４℃及び２４６．２℃にて２つの吸熱ピーク（ピーク温度）が存在することが示された。

４．３ ^１Ｈ ＮＭＲ
４．３．１ 方法：液体状態核磁気共鳴スペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ ４００Ｍ核磁気共鳴分光計で取得し、溶媒としてＤＭＳＯ－ｄ６を使用した。

４．３．２ 結果：^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを、図２－３で見出し得た。この結果から、この試料では、ｐ－トルエンスルホン酸と遊離塩基とのモル比が１．０：１．０であり、ＭＴＢＥと遊離塩基とのモル比が０．０２：１．０であり、ｐ－トルエンスルホネートの質量分率が３０．７％であり、且つＭＴＢＥの質量分率が０．３％であることが示された。

ＩＩ．化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｂ
工程１．調製方法
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａ １０９ｍｇを、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解させた。次いで、貧溶媒であるＴＨＦ １８ｍＬを添加した。この混合物を－２０℃に置き、撹拌し、ろ別して固体を分離した。この固体を室温に置いて風乾し、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｂを得た。

工程２．結晶のキャラクタリゼーション
２．１ キャラクタリゼーション方法：ＸＰＲＤ、ＴＧＡ／ＤＳＣ、及び^１Ｈ ＮＭＲのキャラクタリゼーション方法は、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａのものと同一であった。

２．２ 実験結果
２．２．１ ＸＰＲＤ
ＸＰＲＤスペクトルを図３－１に見出し得、このスペクトルの解析データを表１４に見出し得た。

２．２．２ ＴＧＡ／ＤＳＣ
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＢのＴＧＡ／ＤＳＣスペクトルを図３－２に見出し得、このスペクトルから、試料が２００℃まで加熱された場合には、重量減少は６．８％であり、且つ１２０．５℃、２２１．８℃、及び２５２．６℃にて３つの吸熱ピーク（ピーク温度）が存在することが示された。

２．２．３ ^１Ｈ ＮＭＲ
^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを図３－３に見出し得、このスペクトルから、この試料では、ｐ－トルエンスルホン酸と遊離塩基とのモル比が１．０：１．０であり、ＴＨＦと遊離塩基とのモル比が０．５であり、対応する重量減少が６．５％であり、且つメタノールの残留が検出されないことが示された。

ＩＩＩ．化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｃ
工程１．調製方法
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａ １２１．２ｍｇを秤量し、ＭｅＯＨ（２．２ｍＬ）に溶解させた。次いで、ＤＣＭ（７５ｍＬ）を添加し、清澄溶液が生じた。この溶液は、室温での２時間にわたる撹拌後も透明なままであった。この溶液を室温に移して風乾し、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｃを得た。

工程２．結晶のキャラクタリゼーション
２．１ キャラクタリゼーション方法：ＸＰＲＤ、ＴＧＡ／ＤＳＣ、及び^１Ｈ ＮＭＲのキャラクタリゼーション方法は、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａのものと同一であった。

２．２ 実験結果
２．２．１ ＸＰＲＤ
ＸＰＲＤスペクトルを図４－１に見出し得、このスペクトルの解析データを表１５に見出し得た。

２．２．２ ＴＧＡ／ＤＳＣ
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＣのＴＧＡ／ＤＳＣスペクトルを図４－２に見出し得、このスペクトルから、試料が２００℃まで加熱された場合には、重量減少は１７．４％であり、且つ１１２．５℃、２１０．７℃、及び２４９．６℃にて３つの吸熱ピーク（ピーク温度）が存在することが示された。

２．２．３ ^１Ｈ ＮＭＲ
^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを図４－３に見出し得、このスペクトルから、この試料では、ｐ－トルエンスルホン酸と遊離塩基とのモル比が１．０：１．０であり、ＤＣＭと遊離塩基とのモル比が０．２であり、溶媒の質量分率が３．１％であり、且つメタノールの残留が検出されないことが示された。

ＩＶ．化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｄ
工程１．調製方法
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａ ９３．３ｍｇを秤量した。これに、１，４－ジオキサン（３ｍＬ）を添加した。この混合物を室温に置き、４日にわたり撹拌した。次いで、試料を吸引ろ別した。フィルタケーキを１５０℃に置き、約５分にわたり加熱して、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｄを得た。

工程２．結晶のキャラクタリゼーション
２．１ キャラクタリゼーション方法：ＸＰＲＤ、ＴＧＡ／ＤＳＣ、及び^１Ｈ ＮＭＲのキャラクタリゼーション方法は、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａのものと同一であった。

２．２ 実験結果
２．２．１ ＸＰＲＤ
ＸＰＲＤスペクトルを図５－１に見出し得、このスペクトルの解析データを表１６に見出し得た。

２．２．２ ＴＧＡ／ＤＳＣ
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＤのＴＧＡ／ＤＳＣスペクトルを図５－２に見出し得、このスペクトルから、試料が２００℃まで加熱された場合には、重量減少は１．３％であり、且つ２４９．９℃にて１つの吸熱ピーク（ピーク温度）が存在し、及び１８８．０℃にて１つの発熱ピーク（ピーク温度）が存在することが示された。

２．２．３ １Ｈ ＮＭＲ
１Ｈ ＮＭＲを図５－３に見出し得、これから、この試料では、ｐ－トルエンスルホン酸と遊離塩基とのモル比が１．０：１．０であり、且つ１，４－ジオキサンの残留が検出されないことが示された。

Ｖ．化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｅ
工程１．調製方法
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａ ６２．１ｍｇを秤量した。これに、ＩＰＡ（１０ｍｇ
）を添加した。この混合物を５０℃に置き、２時間にわたり撹拌した。ろ液を緩や
かに冷却して（５０℃～５℃、０．１℃／分）、適切な量の個体を析出させた。次いで、
吸引ろ過を実施して、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ｅを得た。

工程２．結晶のキャラクタリゼーション
２．１ キャラクタリゼーション方法：ＸＰＲＤ、ＴＧＡ／ＤＳＣ、及び^１Ｈ ＮＭＲのキャラクタリゼーション方法は、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａのものと同一であった。

２．２ 実験結果
２．２．１ ＸＰＲＤ
ＸＰＲＤスペクトルを図６－１に見出し得、このスペクトルの解析データを表１７に見出し得た。

２．２．２ ＴＧＡ／ＤＳＣ
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形ＥのＴＧＡ／ＤＳＣスペクトルを図６－２に見出し得、このスペクトルから、試料が２００℃まで加熱された場合には、重量減少は２．８％であり、且つ２４４．６℃にて１つの吸熱ピーク（ピーク温度）が存在することが示された。

２．２．３ ^１Ｈ ＮＭＲ
^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを図６－３に見出し得、このスペクトルから、この試料では、ｐ－トルエンスルホン酸と遊離塩基とのモル比が１．０：１．０であり、且つＭＴＢＥの残留が検出されないことが示された。

ＶＩ．化合物１１－Ｐ３Ｓの結晶形
工程１：化合物１１－Ｐ３からのモノ－ｐ－トルエンスルホネートの形成：

１１－Ｐ３（０．２０ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル（５ｍｌ）に溶解させた。ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（０．１２ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の酢酸エチル溶液を滴下して、白色固体を析出させた。この混合物を１２時間にわたり室温で撹拌し、吸引ろ別した。フィルタケーキを酢酸エチル（５ｍＬ×３回）で洗浄し、乾燥させて、化合物１１－Ｐ３Ｓを白色固体（０．２２ｇ）として得、収率は７８％であった。

工程２：化合物１１－Ｐ３Ｓの単結晶を成長させる方法：
１）１１－Ｐ３Ｓ １１．６ｍｇを秤量し、１．５ｍＬのＨＰＬＣバイアルに入れた。
２）この固体に、エタノール（３４８μＬ）を添加した。温度を６０℃まで上昇させ、次いで、固体が完全に溶解して透明な溶液が得られるまで、６０℃で一定に保った。
３）この溶液を、静置したまま０．５℃／分で２５℃まで冷却した。
４）結晶が析出し、この反応バイアルを顕微鏡で観察した。結晶を定量し、ＸＲＳＤ実験を実行した。

工程３：１１－Ｐ３Ｓの単結晶ＸＲＳＤ実験：
３．１ 機器パラメータ及びデータ収集
３．１．１ 機器パラメータ：化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａの第３．１．１節のものと同一

３．１．２ データ収集：この回折実験では、３６６５５個の回折点を収集し、ここで、４７９３個の独立した回折点が含まれ（Ｒ_ｉｎｔ＝０．０５２５）、回折収集範囲：２θ＝６．３４２～１３３．１７°、及び回折指数範囲：－３２≦ｈ≦３０、－１９≦ｋ≦１６、－７≦ｌ≦７であった。ＳＨＥＬＸＴ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．２０１５．Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ａ７１，３－８）を使用して構造解析を実行し、（Ｆ^２に対して）ＳＨＥＬＸＬ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．２０１５．Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ｃ７１，３－８）を使用して構造精密化を実行した。４７９３個の独立した回折点の内、構造精密化に関与するパラメータは、３４８個であった。精密化後、Ｓ＝１．０４１、Ｒ_１＝０．０３２４、及びｗＲ_２＝０．０８２４であった。残留電子密度値は、０．３２及び－０．２６ｅÅ^－３であった。

３．２．データのリストを、表１８及び１９で見出し得た。

３．３ 結論
化合物１１－Ｐ３Ｓの結晶形は、無色の塊（０．２０×０．２０×０．１０ｍｍ^３）であり、斜方晶Ｐ２１２１２空間群に属していた。単位格子パラメータ：ａ＝２７．１６１９（４）Å、ｂ＝１６．２３５９（２）Å、ｃ＝６．１３１６０（１０）Å、α＝９０°、β＝９０°、γ＝９０°、Ｖ＝２７０４．０２（７）Å３、Ｚ＝４。密度の計算値：Ｄｃ＝１．３７５ｇ／ｃｍ^３、単位格子の電子数：Ｆ（０００）＝１１８４．０、単位格子の線吸収係数：μ（ＣｕＫα）＝１．６１４ｍｍ^－１、及び回折実験温度：Ｔ＝９９．９９（１１）Ｋ。化合物１１－Ｐ３Ｓの分子構造の楕円グラフを図７に見出し得、この化合物の構造は、

であった。

実施例３１

窒素保護下にて、Ｂｏｃ－Ｌ－バリン（８５７．６ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ）を、氷浴下でジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解させた。４－ジメチルアミノピリジン（３８６．９ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）及び化合物１１－Ｐ４（１．０２ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を、氷浴下で撹拌しつつ５分にわたり反応させた。ジシクロヘキシルカルボジイミド（８１３．７ｍｇ、３．９５ｍｍｏｌ）を、一度に添加した。この混合物を自然に温め、１８時間にわたり反応させた。得られた混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残留物を分離し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１）で精製して、化合物Ｅｍ１－１１Ｐ４ａ（１．１３ｇ、オフホワイトの固体）を得、収率は７３．２％であった。（ＥＳＩ）：５８７．３［Ｍ＋１］

化合物Ｅｍ１－１１Ｐ４ａ（１．１３ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を、１，４－ジオキサン中の４Ｍ ＨＣｌの溶液 １５ｍｌに溶解させた。この混合物を、２時間にわたり室温で反応させた。この反応溶液を濃縮した。固体をジエチルエーテル（１０ｍｌ×１回）で洗浄して、粗物質を得た。この粗物質を、水（３０ｍＬ）に溶解させた。この混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ＝７～８に調整し、ジクロロメタン（１０ｍｌ×３回）で抽出した。有機相をまとめた。ジクロロメタン相を、水（１０ｍｌ×１回）及び飽和塩化ナトリウム（１０ｍｌ×１回）それぞれで洗浄した。ジクロロメタン相を、無水硫酸ナトリウムで脱水した。この混合物をろ過して、固体を除去した。ジクロロメタン相を濃縮して、化合物２１－Ｐ３（７２０ｍｇ）を得、収率は７６．８％であった。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４８７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例３２

化合物１９ ７．５３ｇを秤量した。Ｄａｉｃｅｌ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅクロマトグラフィー及びＤａｉｃｅｌキラルカラムを使用して、ＨＰＬＣ法により、キラル異性体を分離した。その対応するコンポーネントを回収し、ロータリーエバポレーションに供して溶媒を除去し、それにより純粋な光学的異性体が得られた。分離方法を、表２０で見出し得た。

１９Ｐ２（保持時間：５．３９７分）及び他のコンポーネントをそれぞれ回収して、化合物１９Ｐ２ ５．１１ｇを得、生成物の純度は９８．１５％であった。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ６．６３（ｓ，１Ｈ），６．５６（ｓ，１Ｈ），３．８３－３．７９（ｍ，５Ｈ），３．４９－３．４６（ｍ，１Ｈ），３．４２－３．３５（ｍ，１Ｈ），３．２８－３．０２（ｍ，４Ｈ），２．８９（ｄｄ，１Ｈ），２．７７－２．６１（ｍ，２Ｈ），２．６０－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｔ，１Ｈ），１．８２－１．７５（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．５８（ｍ，１Ｈ），１．０６－０．９９（ｍ，１Ｈ），０．９３－０．８７（ｍ，６Ｈ），０．６４－０．５９（ｍ，２Ｈ），０．３６－０．３１（ｍ，２Ｈ）．

実施例３３
工程１：化合物１９Ｐ２からのモノ－ｐ－トルエンスルホネートの形成：

化合物１９Ｐ２（３．００ｇ、８．３４ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル（３０ｍｌ）に溶解させた。ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（２．３７ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）の酢酸エチル溶液を滴下した。この混合物を、１２時間にわたり室温で撹拌し、吸引ろ別した。フィルタケーキを、酢酸エチル（１０ｍＬ×３回）で洗浄した。このフィルタケーキを回収し、乾燥させて白色固体（３．５９ｇ）を得、収率は８１％であった。

工程２．化合物１９Ｐ２Ｓの単結晶成長
１９Ｐ２Ｓ １０ｍｇを秤量し、１．５ｍＬのＨＰＬＣバイアルに入れた。この固体に、エタノール（５００μＬ）を添加した。温度を４０℃まで上昇させ、次いで、固体が完全に溶解して透明な溶液が得られるまで、４０℃で一定に保った。この溶液を、静置したまま０．３℃／分で２５℃まで冷却した。結晶が析出し、この反応バイアルを顕微鏡で観察した。結晶を定量し、ＸＲＳＤ実験を実行した。

工程３：１９Ｐ２Ｓの単結晶ＸＲＳＤ実験：
（１）機器パラメータ：化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａの第３．１．１節のものと同一。

（２）データ収集
この回折実験では、２４１６７個の回折点を収集し、ここで、４８９９個の独立した回折点が含まれ（Ｒｉｎｔ＝０．０６４６）、回折収集範囲：２θ＝６．３３～１３３．１８２°、及び回折指数範囲：－７≦ｈ≦５、－１８≦ｋ≦１７、－３３≦ｌ≦３３であった。ＳＨＥＬＸＴ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．２０１５．Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ａ７１，３－８）を使用して構造解析を実行し、（Ｆ^２に対して）ＳＨＥＬＸＬ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，Ｇ．Ｍ．２０１５．Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ｃ７１，３－８）を使用して構造精密化を実行した。４８９９個の独立した回折点の内、構造精密化に関与するパラメータは、３３９個であった。精密化後、Ｓ＝１．０２０、Ｒ_１＝０．０３７３、及びｗＲ_２＝０．０９２０であった。残留電子密度値は、０．３８及び－０．３３ｅÅ^－３であった。

（３）データのリストを、表２２及び２３で見出し得た。

結論：化合物１９Ｐ２Ｓの結晶は、無色の塊（０．３０×０．１０×０．０４ｍｍ^３）であり、斜方晶Ｐ２１２１２１空間群に属していた。単位格子パラメータ：ａ＝６．２８８８０（１０）Å、ｂ＝１５．７９５８（３）Å、ｃ＝２７．９２３４（６）Å、α＝９０°、β＝９０°、γ＝９０°、Ｖ＝２７７３．８２（９）Å３、及びＺ＝４。密度の計算値：Ｄｃ＝１．２７３ｇ／ｃｍ^３、単位格子の電子数：Ｆ（０００）＝１１４４．０、単位格子の線吸収係数：μ（ＣｕＫα）＝１．３８５ｍｍ^－１、及び回折実験温度：Ｔ＝１００．００（１３）Ｋ。

化合物１９Ｐ２Ｓの分子構造の楕円グラフを、図８に見出し得た。この化合物の構造は、

であった。

実施例３４

Ｂｏｃ－Ｌ－バリン（２６０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させた。０℃で、ジシクロヘキシルカルボジイミド（３０９ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）及び４－ジメチルアミノピリジン（１２．２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、３－イソブチル－１０－メトキシ－９－シクロプロピルメチル－２，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－１Ｈ－ピリジン［２，１－ａ］イソキノリン－２－オール（３５９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温まで温め、撹拌しつつ一晩反応させた。水（２０ｍＬ）を添加した後に、洗浄及び液体分離を実行した。有機相の濃縮後、これに、ジオキサン中の４Ｍ 塩酸の溶液 ６ｍｌを添加した。この混合物を、２時間にわたり室温で撹拌した。溶媒を、減圧下で蒸発させた。飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を、ジクロロメタン（１０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して、標的の化合物（２９８ｍｇ、淡黄色の油状液体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４５９．３［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ６．７１（ｓ，１Ｈ），６．６２（ｓ，１Ｈ），４．７６－４．７０（ｍ，１Ｈ），３．８３－３．７９（ｍ，５Ｈ），３．４８－３．４４（ｍ，１Ｈ），３．４２－３．３５（ｍ，１Ｈ），３．２８－３．０２（ｍ，４Ｈ），２．８９（ｄｄ，１Ｈ），２．７７－２．６１（ｍ，２Ｈ），２．６０－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３６－２．３０（ｍ，１Ｈ），１．８８－１．７５（ｍ，２Ｈ），１．７０－１．５８（ｍ，３Ｈ），１．０６－０．９９（ｍ，１Ｈ），０．９５－０．８４（ｍ，１２Ｈ），０．６５－０．５９（ｍ，２Ｈ），０．３７－０．３３（ｍ，２Ｈ）．

比較例３５：

合成経路：

３－イソブチル－９，１０－ジヒドロキシル－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オン（１．７ｇ、５．８９ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（３０ｍＬ）に溶解させた。炭酸セシウム（９．６ｇ、５ｍｍｏｌ）及びブロモメチルシクロプロパン（１．９１ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８０℃まで温め、撹拌しつつ５時間にわたり反応させた。この反応溶液を濃縮し、得られた残留物を薄層クロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で精製して、比較例３５の化合物を得た。

比較例３６：

合成経路：

３－イソブチル－９，１０－ジヒドロキシル－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オン（１．００ｇ、３．４５ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）に溶解させた。炭酸カリウム（２．３８ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）を添加し、３０分にわたり撹拌した。トリフルオロブロモプロパン（１．４６ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を添加した。窒素保護下で、この混合物を８０℃まで温め、撹拌しつつ８時間にわたり反応させた。この反応溶液を、室温まで冷却した。水（５０ｍＬ）を添加して、この反応をクエンチした。酢酸エチル（５０ｍＬ×３回）を添加して抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル＝１：５）に供して、比較例３６の化合物（０．８０ｇ、淡黄色固体）を得た。

比較例３７：

合成経路：

１． ３－イソブチル－９，１０－ジヒドロキシル－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］ イソキノリン－２－オン（０．５０ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解させた。炭酸カリウム（０．２４ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）を添加し、３０分にわたり撹拌した。３－フルオロブロモプロパン（０．２４ｇ、１．７３ｍｍｏｌ）を添加した。窒素保護下で、この混合物を８０℃まで温め、撹拌しつつ８時間にわたり反応させた。この反応溶液を室温まで冷却した。水（２０ｍＬ）を添加して、この反応をクエンチした。酢酸エチル（３０ｍＬ×３回）を添加して抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：石油エーテル＝１：１０）に供して、３－イソブチル－９－３‘－フルオロプロポキシ－１０－ヒドロキシル－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］イソキノリン－２－オン（０．４２ｇ、無色液体）を得た。

２． ３－イソブチル－９－３‘－フルオロプロポキシ－１０－ヒドロキシル－１，３，４，６，７，１１ｂ－ヘキサヒドロ－２Ｈ－ピリド［２，１－ａ］ イソキノリン－２－オン（０．０７ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解させた。炭酸カリウム（０．０６ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を添加し、３０分にわたり撹拌した。１－ブロモプロパン（０．０３７ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を添加した。窒素保護下で、この混合物を８０℃まで温め、撹拌しつつ８時間にわたり反応させた。この反応溶液を、室温まで冷却した。水（２０ｍＬ）を添加して、この反応をクエンチした。酢酸エチル（３０ｍＬ×３回）を添加して抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥＡ：ＰＥ＝１：５）に供して、比較例３７の化合物（０．０４ｇ、白色固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３９２．３［Ｍ＋Ｈ］^＋；１Ｈ－ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ６．６７（ｓ，１Ｈ），６．６１（ｓ，１Ｈ），４．７７－４．６９（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６８－４．６０（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１７－４．０５（ｍ，２Ｈ），３．８４－３．７３（ｍ，２Ｈ），３．５４－３．３８（ｍ，１Ｈ），３．３４－３．２３（ｍ，１Ｈ），３．１７－２．９３（ｍ，２Ｈ），２．９３－２．８３（ｍ，１Ｈ），２．７８－２．６７（ｍ，２Ｈ），２．６６－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．３５（ｔ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），２．２５－２．１３（ｍ，２Ｈ），１．８６－１．７４（ｍ，１Ｈ），１．７３－１．６１（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），１．３２－１．２０（ｍ，１Ｈ），１．０８－０．９８（ｍ，１Ｈ），０．９７－０．８４（ｍ，６Ｈ），０．３９－０．２９（ｍ，３Ｈ）．

比較例３８：
工程１：断片２

の合成

１．化合物ｇ ５０ｇを、ＤＭＦ（１５０ｍＬ）に溶解させた。臭化ベンジル（５７．３ｇ）及び炭酸カリウム（６８．２ｇ）を添加した。窒素保護下で、この混合物を、６時間にわたり室温で反応させた。ＴＬＣで検出されるように、原材料は消失していた。この系に氷水を注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。有機相をまとめ、ブラインで２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、生成物ｈ ６７．８７ｇを淡黄色固体として得、この生成物ｈを次の工程で直接使用した。

２．化合物ｈ ６７．７８ｇに、ニトロメタン（１００ｍＬ）及び酢酸アンモニウム（１３．９ｇ）を添加し、この混合物を１１２℃まで温め、４時間にわたり反応させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。温度を低下させ、蒸発によりニトロメタンを除去した。残留物を水で洗浄し、酢酸エチルで２回抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、黄色固体ｉ ７７ｇを得た。この黄色固体ｉを、次の工程で使用した。

３．水素化アルミニウムリチウム ３０ｇを、ＴＨＦ（３００ｍＬ）に溶解させた。この混合物を、０℃まで冷却した。化合物ｉ ７７ｇを、テトラヒドロフランに溶解させた。得られた混合物を、反応バイアルに緩やかに滴下した。添加後、この反応混合物を、３時間にわたり７２℃で還流させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。温度を、０℃まで低下させた。水（３０ｍＬ）、１０％ 水素化ナトリウム溶液（６０ｍＬ）、及び水（９０ｍＬ）を、緩やかに且つ連続して添加した。この混合物を吸引ろ過し、フィルタケーキをテトラヒドロフランで２回洗浄した。有機相をまとめた。有機相を蒸発乾固して、褐色の油状液体７９．８ｇを得た。この褐色の油状液体を、アセトンに溶解させた。この混合物を、シュウ酸の添加によりｐＨ＝３に調整し、固体が析出し、吸引ろ別を実施して、化合物ｊ ４０ｇを黄色がかった白色の固体として得た。この化合物ｊを、次の工程で使用した。

４．化合物ｊ ２．９ｇを、酢酸（３０ｍＬ）に溶解させた。トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）及びウロトロピン（３．３ｇ）を添加した。この混合物を８５℃まで加熱し、４時間にわたり反応させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。温度を低下させた。蒸発により、酢酸及びトリフルオロ酢酸を除去した。残留物に水を添加した。水酸化ナトリウム水溶液を使用してｐＨを９に調整し、酢酸エチルを使用して３回抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、褐色の油状液体ｋ ２．９ｇを得、この液体を次の工程で直接使用した。

５．化合物ｋ ３９．２ｇを、エタノール（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）の混合溶液に溶解させた。３－ジメチルアミノメチル－５－メチル－２－ヘキサノン（２７．６ｇ）及び塩化ベンジルトリエチルアンモニウム（１０．１ｇ）を添加し、この混合物を９５℃まで加熱し、１６時間にわたり反応させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。温度を低下させた。蒸発によりエタノールを除去した。残留物を、酢酸エチルで３回抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、３３．４生成物を褐色の油状液体として得た。この生成物をアセトンに溶解させ、ｐ－トルエンスルホン酸の添加によりｐＨ＝３に調整した。固体が析出し、吸引ろ別を実施して、黄色がかった白色の固体ｌ １２．７ｇを得、この固体を次の工程で使用した。

６．化合物ｌ １．５ｇを、メタノール溶液（２０ｍＬ）に溶解させた。２杯のパラジウム炭素を添加した。この混合物を、１０時間にわたり水素ガス雰囲気下で室温にて反応させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。この反応物を吸引ろ過し、フィルタケーキをメタノールで２回洗浄した。有機相をまとめた。まとめた有機相を蒸発乾固して、淡黄色固体（即ち断片２）１．０８ｇを得た。

工程２：

合成経路：

断片２ ０．２ｇを、ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させた。１－ブロモプロパン（０．０８ｇ）及び炭酸カリウム（０．１４ｇ）を添加した。窒素保護下で、この混合物を７０℃まで加熱し、３時間にわたり反応させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。温度を低下させた。この系に氷水を添加し、酢酸エチルで３回抽出した。有機相まとめ、ブラインで２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、白色固体生成物（即ち、比較例３８の化合物）０．１５ｇを得た。

比較例３９：

合成経路：

断片２化合物 ０．２ｇを、ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させた。１－ブロモ－３フルオロプロパン（０．０８ｇ）及び炭酸カリウム（０．１４ｇ）を添加した。窒素保護下で、この混合物を７０℃まで加熱し、３時間にわたり反応させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。温度を低下させた。この系に氷水を添加し、酢酸エチルで３回抽出した。有機相をまとめ、ブラインで２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮し、カラム精製に供して、生成物（０．１５ｇ）を白色固体として得、収率は８４．５％であった。ＭＳ（ＥＳＩ）：３６４［Ｍ＋Ｈ］^＋；１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）６．６３（ｓ，１Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），４．６８－４．７０（ｍ，１Ｈ），４．６０－４．６２（ｍ，１Ｈ），４．０８－４．１０（ｍ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８３－３．８４（ｍ，１Ｈ），３．４８－３．５０（ｍ，１Ｈ），３．２８－３．２９（ｍ，２Ｈ），２．８７－２．８９（ｍ，１Ｈ），２．５２－２．７５（ｍ，４Ｈ），２．３４－３．３５（ｍ，１Ｈ），２．２１－２．２３（ｍ，２Ｈ），１．７８－１．８２（ｍ，１Ｈ），１．６５－１．６７（ｍ，１Ｈ），１．２５－１．２８（ｍ，１Ｈ），１．０１－１．０４（ｍ，１Ｈ），０．８７－０．９３（ｍ，６Ｈ）．

比較例４０：

合成経路：

断片２化合物（０．２ｇ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させた。ブロモメチルシクロプロパン（０．０８ｇ）及び炭酸カリウム（０．１４ｇ）を添加した。窒素保護下で、この混合物を７０℃まで加熱し、３時間にわたり反応させた。ＴＬＣ検出により見出されたように、原材料は消失していた。温度を低下させた。この系に氷水を添加し、酢酸エチルで３回抽出した。有機相をまとめ、ブラインで２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、比較例４０の化合物 ０．１５ｇを白色固体とし得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５８．３［Ｍ＋Ｈ］^＋；１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）６．６２（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．７８－３．７９（，２Ｈ），３．４８－３．５０（ｍ，１Ｈ），３．２８－３．２９（ｍ，１Ｈ），３．１１－３．１４（ｍ，２Ｈ），２．８６－２．８９（ｍ，１Ｈ），２．５２－２．７５（ｍ，４Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），１．７８－１．８０（ｍ，１Ｈ），１．２６－１．３１（ｍ，２Ｈ），１．０２－１．０５（ｍ，１Ｈ），０．８７－０．９３（ｍ，６Ｈ），０．６１－０．６４（ｍ，２Ｈ），０．３２－０．３５（ｍ，２Ｈ）．

比較例４１：
工程１：断片３

の合成
合成経路：

１．化合物３ａ（１０．０ｇ、７２．５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解させた。炭酸カリウム（１５．０ｇ、１０９ｍｍｏｌ）及び臭化ベンジル（１８．６ｇ、１０９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８５℃まで温め、８時間にわたり反応させた。この反応溶液を、室温まで冷却した。この反応溶液に氷水（５００ｍＬ）を添加して固体を析出させ、この固体をろ別して乾燥させて、化合物３ｂ（９．９２ｇ、白色固体）を得た。

２．化合物３ｂ（９．９２ｇ、４３．５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解させた。ブロモエタン（７．１１ｇ、６５．２ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（９．００ｇ、６５．２ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８０℃まで温め、５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水（５００ｍＬ）に注ぎ、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を石油エーテル（１５０ｍＬ）でスラリー化した。この混合物をろ別して固体を回収して、化合物３ｃ（１０．０ｇ、オフホワイトの固体）を得た。

３．化合物３ｃ（１０．０ｇ、３９．１ｍｍｏｌ）を、ニトロメタン（５０ｍＬ）に溶解させた。酢酸アンモニウム（１．８１ｇ、２３．５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１１５℃まで加熱し、３時間にわたり反応させた。冷却後、この反応混合物を濃縮した。残留物を水で洗浄し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、化合物３ｄ（１１．６ｇ、黄色固体）を得た。

４．窒素保護下及び氷浴下で、化合物３ｄ（１１．６ｇ、３８．８ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、この混合物を、水素化アルミニウムリチウム（４．４２ｇ、１１６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に滴下し、１時間にわたり反応させた。次いで、この混合物を６０℃まで温め、さらに２時間にわたり反応させた。氷浴中で、温度を低下させた。水（４．４ｍＬ）を滴下し、次いで１０％ 水酸化ナトリウム溶液（８．８ｍＬ）及び水（１３．２ｍＬ）を添加した。この混合物を吸引ろ過し、次いで、フィルタケーキを酢酸エチル（１５０ｍＬ×３回）で洗浄した。ろ液を、減圧下で濃縮した。濃縮物を酢酸エチルで希釈した。シュウ酸の酢酸エチル溶液を、ｐＨ値が酸性を示すまで添加した。この混合物を、一晩撹拌した。この混合物をろ別し、フィルタケーキを回収し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３回）で洗浄して、化合物３ｅ（１１．２ｇ、白色固体）を得た。

５．化合物３ｅ（１１．２ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）を、酢酸（１００ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物を、トリフルオロ酢酸（３０ｍＬ）に添加した。ウロトロピン（９．５５ｇ、６８．２ｍｍｏｌ）を添加し、８５℃まで加熱し、４時間にわたり反応させた。この反応混合物を室温まで冷却し、濃縮した。残留物に、水を添加した。得られた混合物を、水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ＝９に調整し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、濃縮して、化合物３ｆ（８．７１ｇ、褐色の油状物、粗物質）を得、この化合物３ｆを、精製することなく次の工程で直接使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２８２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

６．化合物３ｆ（８．７１ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）を、エタノール（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）の混合溶液に溶解させた。３－ジメチルアミノメチル－５－メチル－２－ヘキサノン（６．３６ｇ、３７．２ｍｍｏｌ）及び塩化ベンジルトリエチルアンモニウム（２．１２ｇ、９．３０ｍｏｌ）を添加した。この混合物を９５℃まで加熱し、１８時間にわたり反応させた。この反応混合物を室温まで冷却し、濃縮した。残留物を、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で分離して、化合物３ｇ（３．７８ｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４０８．３［Ｍ＋Ｈ］^＋

７．化合物３ｇ（３．７８ｇ、９．３０ｍｍｏｌ）を、メタノール溶液（５０ｍｌ）に溶解させた。パラジウム炭素含有水（１０％、０．５ｇ）を添加し、水素を導入した。この混合物を、１８時間にわたり室温で反応させた。この混合物を吸引ろ過し、フィルタケーキをメタノール（５０ｍＬ×２回）で洗浄し、減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）で分離して、断片３（２．５０ｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３１８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

工程２：

合成経路：

１．断片３化合物（２００ｍｇ、０．６３１ｍｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させた。ブロモプロパン（１１６ｍｇ、０．９４６ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１３０ｍｇ、０．９４６ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を８０℃まで温め、５時間にわたり反応させた。冷却後、この反応系を水（３０ｍＬ）に注ぎ、次いで、酢酸エチル（２０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で分離して、比較例４１の化合物（１８２ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６０．２［Ｍ＋１］

比較例４２：

合成経路：

比較例３６の化合物（０．８０ｇ、２．００ｍｍｏｌ）を、無水エタノール（３０ｍＬ）に溶解させた。０℃で、水素化ホウ素ナトリウム（０．１５ｇ、４．００ｍｍｏｌ）を一度に添加した。この混合物を、撹拌しつつ２時間にわたり０℃で反応させた。飽和塩化アンモニウム溶液（６ｍＬ）を添加して、この反応をクエンチした。この反応溶液をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）に供して、淡黄色固体の化合物０．７５ｇを得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４１２．３［Ｍ＋Ｈ］^＋；１ＨＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ６．８２（ｓ，１Ｈ），６．７２（ｓ，１Ｈ），４．７１－ ４．６３（ｍ，２Ｈ），４．６３－ ４．５３（ｍ，２Ｈ），４．１１－ ４．０１（ｍ，４Ｈ），３．２３－ ３．１４（ｍ，１Ｈ），３．１１－ ２．９９（ｍ，３Ｈ），２．７３－ ２．６４（ｍ，１Ｈ），２．６０－ ２．５２（ｍ，１Ｈ），２．５２－ ２．４３（ｍ，１Ｈ），２．１９－ ２．０６（ｍ，４Ｈ），２．０７－ １．９７（ｍ，１Ｈ），１．７８－ １．６１（ｍ，３Ｈ），１．５２－ １．３８（ｍ，１Ｈ），１．０８－ ０．９９（ｍ，１Ｈ），０．９８－ ０．８６（ｍ，６Ｈ）．

比較例４３～４４
比較例４３～４４の調製に関しては、比較例４２の方法を参照し得、比較例４３～４４の化合物を、エタノール及び水素化ホウ素ナトリウムの溶液による還元によって調製した。

比較例４５：

合成経路：

１．窒素保護下にて、Ｂｏｃ－Ｌ－バリン（６５１ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を、氷浴下でジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解させた。４－ジメチルアミノピリジン（２９３ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）及び比較例７の化合物（７６０ｍｇ、１．８３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を、氷浴下で撹拌しつつ５分にわたり反応させた。ジシクロヘキシルカルボジイミド（６１８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を、一度に添加した。この混合物を自然に温め、１８時間にわたり反応させた。得られた混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残留物を分離し、カラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン：メタノール＝３０：１）で精製して、中間体化合物（７８０ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：５６５．４［Ｍ＋１］

２．前の工程で得られた化合物（７８０ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解させた。得られた混合物を、１，４－ジオキサン溶液（１．７ｍｌ、４Ｍの濃度）に添加し、２時間にわたり室温で反応させた。この反応溶液を濃縮した。固体をジエチルエーテル（１０ｍｌ×１回）で洗浄して、粗物質を得た。この粗物質を、水（３０ｍＬ）に溶解させた。この混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ７～８に調整し、ジクロロメタン（１０ｍｌ×３回）で抽出した。有機相をまとめた。ジクロロメタン相を、水（１０ｍｌ×１回）及び飽和塩化ナトリウム（１０ｍｌ×１回）それぞれで洗浄した。ジクロロメタン相を、無水硫酸ナトリウムで脱水した。ろ過を実施して、固体を除去した。ジクロロメタン相を濃縮して、比較例４５の化合物（５００ｍｇ、オフホワイトの固体）を得た。ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４６５．４［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ６．７３ －６．７５（ｍ，２Ｈ），４．５６－４．７７（ｍ，３Ｈ），４．０８－４．１１（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．０５－３．３２（ｍ，４Ｈ），２．５０－２．７５（ｍ，３Ｈ），２．０１－２．２１（ｍ，５Ｈ），１．３３－１．７７（ｍ，３Ｈ），１．０６－１．１３（ｍ，２Ｈ），０．９３－１．０５（ｍ，１２Ｈ）．

実験例１ 生物活性実験
Ｉ．ラットでの、ＶＭＡＴ２に結合する化合物の活性の放射能検出（結合アッセイ）
１．実験目的：
ラットにおいてＶＭＡＴ２への様々な化合物の結合のＩＣ_５０及びＫｉ値を決定すること、並びにＶＭＡＴ２に対する化合物の親和性を評価すること

２．実験材料
リガンド：［３Ｈ］ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）（１０ｎＭ）
試験化合物：
化合物１～９、１１、１２、１４、１６～１９、２０、２７、２８、３２、１１－Ｐ３、１１－Ｐ４、及び２１－Ｐ３：上記の対応する実施例に従って調製した
比較例３５～４３の化合物：比較例３５～４３に従って調製した
ＴＢＺ：Ｊｉａｎｇｓｕ Ｖｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ロット番号：ＴＢＺ－１１３０３０
ＤＨＴＢＺ：Ｊｉａｎｇｓｕ Ｖｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ロット番号：６７－２５－１５２１－５９Ｃ
ＤＨＴＢＺ－Ｘ（ラセミ体）：原材料としてＴＢＺを使用して、国際公開第２００８０５８２６１号パンフレットの反応スキーム１に従って調製した
ＶＢＺ：下記の方法に従って調製した：ＶＢＺキシレンスルホネート（０．５ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を、水（１０ｍＬ）に溶解させた。この混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液でｐＨ＝８に調整し、ＥＡ（２０ｍＬ×３回）で抽出した。有機相をまとめ、無水硫酸で脱水し、濃縮して、ＶＢＺ（０．２６ｇ）を白色固体として得た。

３．実験の工程及び方法
３．１ ラット脳胞膜の調製
体重１７５±２５ｇの雄のＷｉｓｔａｒラットを選択し、このラットの脳全体（小脳を除く）を外科的に分離し、予め冷やしたスクロース溶液（２０ｍＬ、０．３２Ｍ）に入れ、Ｔｅｆｌｏｎ乳房ホモジナイザーでホモジナイズした。ホモジネートを４℃で１２分にわたり１０００ｇにて遠心分離し、上清を吸引して、４℃でさらに１０分にわたり２２，０００ｇにて遠心分離を実行した。上清を廃棄し、得られた沈殿物を氷冷ＭｉｌｌｉＱ水（１８ｍＬ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）に入れ、５分にわたりインキュベートし、浸透圧ショックを与えて細胞膜を粉砕した。次いで、ＨＥＰＥＳ溶液（２５ｍＭ、２ｍＬ）及び酒石酸カリウム溶液（１００ｍＭ、２ｍＬ）の添加により、モル浸透圧濃度を回復させた。得られた試料を、４℃で２０分にわたり２０，０００ｇにて遠心分離した。上清を吸引し、ＭｇＳＯ４溶液（１ｍＭ、２０μＬ）を添加した。この溶液を、４℃で４５分にわたり１００，０００ｇにて遠心分離した。沈殿物を回収し、氷冷アッセイ緩衝液（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ 酒石酸カリウム、５ｍＭ ＭｇＳＯ４、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、及び０．０５ｍＭ ＥＧＴＡ、ｐＨ ７．５）に再懸濁させて、小胞懸濁液を得た。

３．２ 検出及び分析
検出では９６ウェルプレートを使用し、２重又は３重のウェルを配置した。この９６ウェルプレートの各ウェルに、小胞懸濁液（５０μＬ、タンパク質（３２μｇ）を含む）、［３Ｈ］ジヒドロテトラベナジン（ＤＨＴＢＺ）（１０ｎＭ）、及び試験化合物を含む溶液（５０μＬ）（阻害剤は、１ｎＭ～１０００ｎＭの濃度であるか又は他の所望の濃度である）を入れ、３０分にわたり２５℃でインキュベートした。非特異的リガンドＲｏ４－１２８４（１０μＭ）を使用して、非特異的結合を決定して予測し、薬理学的特性が明確なテトラベナジン（ＴＢＺ）、ＤＨＴＢＺ、ＶＢＺ、又はＤＨＴＢＺラセミ体を、陽性コントロールとして使用し、且つ新規化後物の活性との比較に使用した。インキュベーションの完了後、反応溶液をフィルタプレートにろ過し（細菌フィルタ及び回収器、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ ａｎｄ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、続いて、フィルタ膜を、氷冷緩衝液（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ 酒石酸カリウム、５ｍＭ ＭｇＳＯ４、及び１０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．５）３５０μＬで５回洗浄した。このフィルタプレートを乾燥させ、底面を密封した。各ウェルに、シンチレーションカクテル（ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ ２０；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ ａｎｄ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）４０μＬを添加した。フィルタ上の放射能を、液体シンチレーション分光法（ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴ；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ ａｎｄ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）により決定した。

３．３ 結果の分析
上記の放射能アッセイ結果に基づいて、ＩＣ_５０及びＫｉを算出した。ＩＣ_５０を、ＭａｔｈＩＱＴＭ（ＩＤ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ Ｌｔｄ．，ＵＫ）を使用する非線形最小二乗回帰分析により算出した。Ｃｈｅｎｇ及びＰｒｕｓｏｆｆの方程式（Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．，Ｐｒｕｓｏｆｆ，Ｗ．Ｈ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２：３０９９－３１０８，１９７３）を使用して、Ｋｉ値を算出した。Ｋｉ値を、試験化合物のＩＣ_５０、及びＥｕｒｏｆｉｎｓ Ｐａｎｌａｂｓ社の放射能検出方法での過去のＫＤと組み合わせて算出した。

いくつかの実施例の化合物及び比較例の化合物の結合阻害率、ＩＣ_５０値、及びＫｉ値を、上記の方法を使用することにより、２０ｎＭ及び１００ｎＭで試験し、結果を表２５～２７に見出し得た。

実験結果は、ＴＢＺ、ＤＨＴＢＺ、ＤＨＴＢＺ－Ｘ、ＶＢＺ、及び比較例の化合物と比較して、本発明で提供される化合物は、ＶＭＡＴに対してより強い親和性を有することを示した。１０位の基がメチルであり、且つ９位の基がエチル、シクロプロピルメチレン、及び４－フルオロブチルであった場合には、結合阻害活性が最高であり、１０位の基が長い置換基（例えば、プロピル及びブチル）であった場合には、結合阻害活性は有意に低下しているか、さらに悪いことには、活性がほとんど検出されなかった。加えて、９位の基がメチルであり、且つ１０位の基が長い置換基（例えば、エチル、プロピル、及びシクロプロピルメチレン）であった場合には、結合阻害活性は有意に低下しているか、さらに悪いことには、活性が検出されなかった。即ち、本発明者らは、９位及び１０位の置換基が活性に有意な差違をもたらすことを発見した。

ＩＩ．化合物及びＶＭＡＴ２の取り込みアッセイ
１．目的
化合物ＶＭＡＴ２の取り込みアッセイの実行

２．材料
（１）試薬及び材料
３Ｈ－ドーパミン、スクロース、ＨＥＰＥＳ、酒石酸カリウム、ＥＧＴＡ、ＥＤＴＡ、ＡＴＰ、ＭｇＣｌ２、ＭｇＳＯ４、アスコルビン酸、ＴＢＺ、ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙキット
凍結小胞懸濁液：ＳＤラットの線条体を使用する抽出により、小胞懸濁液を調製した。氷浴下で、スクロース溶液（０．３２Ｍ、２８ｍＬ）に、新鮮なラットの線条体を添加し、ホモジナイザーにより、１回のホモジナイズ当たり１０秒で１０回ホモジナイズした。４℃で、ホモジネートを１０分にわたり２０００ｇにて遠心分離した。上清を吸引し、さらに３０分にわたり１００００ｇにて４℃で遠心分離を実行した。沈殿物を分離し、スクロース溶液（４ｍＬ、０．３２Ｍ）に再懸濁させた。ＭｉｌｌｉＱ水（１４ｍＬ、氷浴下）を添加し、この混合物に浸透圧ショックを与えた。１分後、ＨＥＰＥＳ緩衝液（０．２５Ｍ、１．８ｍＬ）及び酒石酸カリウム溶液（１Ｍ、１．８ｍＬ）を添加した。４℃で、この混合物を３０分にわたり２００００ｇにて遠心分離した。上清を回収し、さらに６０分にわたり５５０００ｇにて４℃で遠心分離を実行した。上清を廃棄した。ＭｇＳＯ４（２００μＬ、１０ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（２００μＬ、０．２５Ｍ）、及び酒石酸カリウム（２００μＬ、１Ｍ）を添加した。４℃で、この混合物を４５分にわたり５５０００ｇにて遠心分離した。沈殿物を回収し、検出緩衝液（１０ｍＬ、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ 酒石酸カリウム、５０μＭ ＥＧＴＡ、１００μＭ ＥＤＴＡ、２０ｍＭ ＭｇＣｌ２、及び２ｍＭ ＡＴＰ、ｐＨ７．４）に再懸濁させ、５００μＬ／チューブでサブパッケージし（ｓｕｂ－ｐａｃｋａｇｅｄ）、－８０℃で凍結させて使用した。

（２）緩衝液
アッセイ緩衝液：２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ 酒石酸カリウム、５０μＭ ＥＧＴＡ、１００μＭ ＥＤＴＡ、２０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１．７ｍＭ アスコルビン酸、２ｍＭ ＡＴＰ、ｐＨ ７．４。アスコルビン酸及びＡＴＰを、アッセイ前に添加した。
洗浄緩衝液：２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ 酒石酸カリウム、５０μＭ ＥＧＴＡ、１００μＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ ７．４。

（３）試験化合物
化合物１１～１５、１８～２０、２６～２８、３２、１１－Ｐ４、及び２１ーＰ３；上記の対応する実施例に従って調製した
ＤＨＴＢＺ、ＤＨＴＢＺ－Ｘ、ＶＢＺ：上記の結合アッセイでのものと同一の供給源

（４）機器及び消耗品
Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ－９６ ＧＦ／Ｂフィルタプレート、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ（カタログ番号６００５１７７）；
９６－ウェルＶ－底ポリプロピレンプレート、Ａｇｉｌｅｎｔ（カタログ番号５０４２－１３８５）；
ＴｏｐＳｅａｌ－Ａ密封フィルム、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ（カタログ番号６０５０１８５）；
ＭｉｃｒｏＢｅｔａ２（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）；
Ｃｅｌｌ ｈａｒｖｅｓｔｅｒ Ｃ９６１９６１（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）；
ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ ３４０ＰＣ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）；

３．試験方法
（１）試験試料及びＴＢＺを、最高濃度０．２ｍＭ及び最低１μＭの８種の濃度勾配へとＤＭＳＯで４回希釈した。希釈した試験化合物及びＴＢＺ １μｌを、ピペットで検出プレートに移した。
（２）ＴＢＺ（１μｌ、２ｍＭ）を、非特異的結合コントロール（ＬＣ）と使用するために添加し、ＤＭＳＯ １μｌを、全結合コントロール（ＨＣ）として使用した。
（３）希釈した小胞懸濁液１００μｌ（ストック溶液１５μｌを含む）を９６ウェルプレートに入れ、１５分にわたり３７℃でインキュベートした。
（４）３Ｈ－ドーパミン（１７．９２μＭ）を、アッセイ緩衝液で０．２μＭに希釈した。検出プレートに３Ｈ－ドーパミン（１００μｌ、０．２μＭ）を添加して最終濃度０．１μＭにし、１０分にわたり３７℃でインキュベートした。
（５）この反応混合物を、回収器のＧＦ／Ｂプレートに通してろ過し、このＧＦ／Ｂプレートを、予め冷やしたリンス緩衝液で４回すすいだ。
（６）このプレートを、少なくとも１時間にわたり０℃で乾燥させた。
（７）乾燥後、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ－９６底密封テープを使用して、このフィルタプレートを密封した。Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ２０カクテル５０μｌを添加した。Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＴｏｐＳｅａｌ－Ａ密封フィルムを使用して、このフィルタプレートの上部を密封した。
（８）Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＭｉｃｒｏＢｅｔａ２ Ｒｅａｄｅｒを使用して、このろ過膜上で捕捉された３Ｈの数を計数した。
（９）データを、Ｐｒｉｓｍ ５．０ソフトウェアで解析した。モデル「ｌｏｇ（Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．ｒｅｓｐｏｎｓｅ－ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｓｌｏｐｅ」を使用してＩＣ_５０を算出し、方程式ＩＣ何か＝ＩＣ_５０＊（何か／（１００－何か））１／傾斜を使用してＩＣ_９０を算出した。

４．試験結果を表２８～３０に見出し得た。

試験結果から、ＤＨＴＢＺ、ＤＨＴＢＺ－Ｘ、及びＶＢＺと比較して、本発明で提供される化合物はインビトロでの活性が強いことが示された。

実験例２：ＳＤラットでの、化合物１１、１６、２１、２２、及び２３、並びに比較例４４及び４５の薬物動態評価
１．実験材料
ａ）試験化合物
化合物１１、１６、２１～２３；比較例４４及び４５；対応する実施例に従って調製した
ＤＨＴＢＺ：Ｊｉａｎｇｓｕ Ｖｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ロット番号６７－２５－１５２１－５９Ｃ
ＶＢＺ：実験例１で述べた方法に従って調製した
ｂ）ビヒクル：２０％ ソルトール（ｓｏｌｕｔｏｌ）溶液、ソルトールロット番号ＢＣＢＱ５６４６Ｖ、Ｓｉｇｍａ社
ｃ）試験動物：ＳＤラット、クリーングレード、雄、体重約２２０ｇ

２．ＳＤラットでの薬物動態試験の方法：
化合物１１、化合物１６、比較例４４の化合物、及びＤＨＴＢＺをそれぞれ、雄のＳＤラットに、強制経口により投与した（４匹の動物／群）。投薬量は、１０μｍｏｌ／ｋｇであった。投薬後０．２５、０．５、１、２、３、４、６、８、及び１２時間で、血液サンプル（約０．２ｍＬ／時点／ラット）をヘパリン処理チューブに採取した。採取後３０分以内に、このサンプルを遠心分離して血漿を分離して１．５ｍｌのＥＰチューブに移し、－２０℃で保存して検出した。

３．ＳＤラット脳組織での分布試験の方法
ＶＢＺ、化合物２１、化合物２２、化合物２３、及び比較例４５の化合物を、雄のＳＤラットに、強制経口により投与した（３匹の動物／群）。投薬量は、１２μｍｏｌ／ｋｇであった。投薬後０．５時間、２時間、及び６時間で、血液サンプル（約１ｍＬ／時点／ラット）をヘパリン処理チューブに採取した。採取後３０分以内に、このサンプルを遠心分離して血漿を分離して１．５ｍｌのＥＰチューブに移し、－２０℃で保存して検出した。ラットを屠殺した後、脳組織を摘出し、生理食塩水で洗浄し、ろ紙で乾燥させた。脳血管を剥離し、残存する脳組織を秤量し、－２０℃で保存した。

４．サンプルの分析
サンプルの前処理に、タンパク質を沈殿させる方法を使用し、この方法を、下記のように簡単に説明し得る：内部標準を含むアセトニトリル２００μＬ／４００μＬそれぞれを使用することにより、血漿２５μＬ／脳組織ホモジネート５０μＬで、タンパク質沈殿を実行した。高速遠心分離後、上清を水で希釈し（１：１（Ｖ／Ｖ））、分析に供した。

０．５、２、及び６時間で、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用することにより、ＶＢＺ、化合物２１、化合物２２、化合物２３、及び比較例４５の化合物の濃度、並びにこれらの代謝産物（即ち、ＤＨＴＢＺ、化合物１１、化合物１２、化合物１３、及び比較例４４の化合物）の濃度を、ＳＤラットの血漿において及び脳組織ホモジネート（生理食塩水ホモジネート、１；４ｗ／ｖ）において決定し、各時点での脳中の濃度と血漿中の濃度との比を算出した。

５．試験結果
５．１ 薬物動態試験
化合物１１、化合物１６、比較例４４の化合物、及びＤＨＴＢＺを強制経口により投与したＳＤラットで実行した試験の結果を、図９に見出し得、この結果から、比較例４４の化合物及びＤＨＴＢＺと比較して化合物１１は曝露量が多いことが示された。

５．２ 脳組織分布試験
５．２．１ 脳中の濃度：
ＳＤラットでの、ＶＢＺ、化合物２１，化合物２２、化合物２３、及び比較例４５の強制経口投与後の脳組織中での原化合物の分布を表１０に見出し得、脳組織中での活性代謝産物（ＤＨＴＢＺ、化合物１１、化合物１２、化合物１３、及び比較例４４の化合物）の分布を図１１に見出し得た。

実験結果から、下記が示された：投与後２時間で、脳組織中での化合物２１及びその代謝産物である化合物１１の濃度は、両方とも、ＶＢＺ及びＤＨＴＢＺの濃度と比べて有意に高い。

５．２．２ 脳／血漿比
ＳＤラットでの、ＶＢＺ、化合物２１、化合物２２、化合物２３、及び比較例４５の強制経口投与後の原化合物の脳／血漿比を図１２に見出し得、実験結果から下記が示された：投薬後様々な時点で、化合物２１の脳／血漿比は、ＶＢＺの脳／血漿比の３．４～６．８倍であり、且つ他の化合物の脳／血漿比と比べて高い。

ＳＤラットでの、ＶＢＺ、化合物２１、化合物２２、化合物２３、及び比較例４５の強制経口投与後の活性代謝産物（ＤＨＴＢＺ、化合物１１、化合物１２、化合物１３、及び比較例４４の化合物）の脳／血漿比を図１３に見出し得、実験結果から下記が示された：投薬後様々な時点で、化合物２１の代謝産物（即ち化合物１１）の脳／血漿比は、ＤＨＴＢＺの脳／血漿比の２．８～５．８倍である。

実験例３ ＳＤラットでの化合物２１－Ｐ３及び１１－Ｐ４の薬物動態評価
１．試験材料：
ａ）試験化合物
１１－Ｐ４：実施例２９に従って調製した
２１－Ｐ３：実施例３１に従って調製した
ＶＢＺ：実験例１で述べた方法に従って調製した
ＤＨＴＢＺ：Ｊｉａｎｇｓｕ Ｖｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ロット番号６７－２５－１５２１－５９Ｃ
ｂ）ビヒクル：２０％ ソルトール溶液、ソルトールロット番号ＢＣＢＱ５６４６Ｖ、Ｓｉｇｍａ社
ｃ）試験動物：２４匹のＳＤラット、クリーングレード、雄、体重約２２０ｇ、無作為化群分け、３匹のラット／群（強制経口投与用の３匹；静脈内投与用の３匹）。

２．試験方法：
（１）医薬溶液の調合：２１－Ｐ３、１１－Ｐ４、ＶＢＺ、及びＤＨＴＢＺのそれぞれ約２０ｍｇを正確に秤量し、それぞれの化合物の濃度が１μｍｏｌ／ｍＬとなるまで、適量のビヒクルに溶解させた。

（２）バイオアベイラビリティ試験：強制経口投与量は５ｍＬ／ｋｇであり、投薬量は５μｍｏｌ／ｋｇであり、各化合物を３匹の動物に投与し；静脈内投与量は２ｍＬ／ｋｇであり、投薬量は２μｍｏｌ／ｋｇであり、各化合物を３匹の動物に投与し；ＳＤラットは、投薬前１２時間にわたり絶食状態であったが、飲料水を自由に利用でき、投薬後３時間で給餌した。投薬後の対応する各時点で、血液サンプル（約１ｍｌ／時点／ラット）をヘパリン処理チューブに採取した。採取後３０分以内に、このサンプルを遠心分離して血漿を分離して１．５ｍｌのＥＰチューブに移し、－２０℃で保存して検出した。

３．サンプルの分析
ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用することにより、ＳＤラット血漿中で、化合物ＶＢＺ、ＤＨＴＢＺ、２１－Ｐ３、及び１１－Ｐ４の濃度を決定し、ＶＢＺ及び２１－Ｐ３の投与群の場合には、それぞれの代謝産物ＤＨＴＢＺ及び１１－Ｐ４の濃度も決定した。サンプルの前処理に、タンパク質を沈殿させる方法を使用し、内部標準を含むアセトニトリル２００μＬを使用することにより、血漿２５μＬでタンパク質沈殿を実行した。高速遠心分離後、上清を水で希釈し（１：１（Ｖ／Ｖ））、注入して分析した。

４．試験結果：

結果から、下記が示された：
（１）化合物１１－Ｐ４は、インビボでの曝露量（ＡＵＣ）が有意に増加しており、
静脈内投与の曝露量は、ＤＨＴＢＺの場合のほぼ３倍であり、強制経口投与の曝露量は、ＤＨＴＢＺの場合の約ほぼ４倍であり；
（２）静脈内投与により、化合物１１－Ｐ４は、半減期がより長くなり、従って投与頻度を減少させ得；
ＶＢＺからＤＨＴＢＺへの変換率は、１５．９％であり、化合物２１－Ｐ３から１１－Ｐ４への変換率は、２６．８％であり；ＶＢＺと比較して、化合物２１－Ｐ３は、変換率が高かった。ＶＢＺ及び２１－Ｐ３のＶＭＡＴ２結合活性は、ＤＨＴＢＺ及び１１－Ｐ４の結合活性と比べてはるかに低いことから、試験結果から、等モル用量では、ＶＢＺと比較して、化合物２１－Ｐ３はアベイラビリティが高く、且つはるかに強い有効性を生じ得ることが示された。
（３）強制経口投与により、ＶＢＺ及びＤＨＴＢＺと比較して、化合物２１－Ｐ３及び化合物１１－Ｐ４は、バイオアベイラビリティが高かった。

実験例４：ＳＤラットでの化合物２１及び２１－Ｐ３の薬物動態評価
１．目的
この試験では、ＳＤラット自立活動モデルを使用した。ＶＢＺキシレンスルホネートを、コントロールとして使用した。化合物２１及び２１－Ｐ３の等モル用量を、単回強制経口投与で投与した。オープンフィールドでのマウスの移動距離を比較して、化合物２１、２１－Ｐ３と、コントロール薬物ＶＢＺキシレンスルホネートとの薬力学的差違を調べた。

２．実験材料
２．１ 試験動物：３２匹のＳＤラット、ＳＰＦ－グレード、雄、５～７週齢、体重：２００～２２０ｇ、試験前少なくとも１週間にわたり予め慣れさせた。動物の供給源：Ｊｉ’ｎａｎ Ｐｅｎｇｙｕｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．；Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｒｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｎｕｍｂｅｒ：ＳＣＸＫ（ＬＵ）２０１４０００７

２．２ 試験薬物
化合物２１：実施例２１に従って調製した
化合物２１－Ｐ３：実施例３１に従って調製した
ＶＢＺキシレンスルホネート：Ｊｉａｎｇｓｕ Ｖｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．、ロット番号３３４－１－１５１７－１５
調製方法：適量の薬物を秤量し、少量のＣＭＳ（総量の１％以下）に溶解させた。次いで、２０％ ソルトールを添加して所望の薬物濃度を得、ＤＭＳＯの最終濃度は＜４％であった。

３．試験の群分け及び投薬
試験前日に、ラットを、体重に従って下記の４つの群に無作為に分類した：コントロー
ル群（ＮＳ、溶媒中に試験薬物が入っていない）、ＶＢＺキシレンスルホネート群、化合物２１群、２１－Ｐ３群（８匹の動物／群）。ラットを検出ボックスに入れ、１０分にわたり予め慣れさせ、次いで絶食させた。動物の群分け及び投薬の情報を、表３５で詳述した。

４．試験方法
試験日に、動物を、試験室で少なくとも１時間にわたり慣れさせた。各群のラットに、１回の単回強制経口で、表３５での用量に従ってビヒクル又は対応する薬物それぞれを投与し、次いで、活動室に入れた。投薬後２～３時間でのラットの総移動距離を記録し、ＴｏｐＳｃａｎモニタリングシステムを使用して分析した。同一群のラットは、８つの活動室の内の１つの同室に入れるべきではなく、試験の各ラウンドでのコントロール群から少なくとも１匹を存在させて、相互干渉を予防した。試験の各ラウンドの終了時に、排泄物を掃き出し、活動室を清掃して、ラットの運動活動への無関係な妨害因子（臭気等）の影響を回避した。

５．観察指標
投薬後２時間～３時間でのラット総移動距離を記録して、ＴｏｐＳｃａｎモニタリングシステムを使用して分析し、総移動距離の減少率（ＲＲ）を算出し、ここで、ＲＲ＝（コントロール群移動距離－投与群移動距離）／コントロール群移動距離×１００％であった。

６．統計解析
試験データを、平均±平均の標準誤差（平均±ＳＥＭ）で表した。一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）によりＰＡＳＷ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ １８．０ソフトウェアを使用することにより、各時点での様々な群間の距離を比較した。全ての検定は両側検定であり、ｐ＜０．０５は、差違が統計的に有意であることを示した。

７．試験結果：
コントロール群（移動距離＝１６２１０±３４６５ｍｍ）と比較して、ＶＢＺ群は、ラット自律活動距離が有意に減少しており（移動距離＝４８８２±１０２２ｍｍ、Ｐ＜０．０５）；化合物２１群は、自律活動距離が減少しており（移動距離＝１１６３０±２８３９ｍｍ、Ｐ＞０．０５）；化合物２１－Ｐ３群は、ラットの自律活動距離が有意に減少しており（移動距離＝２９５６±１１０１ｍｍ、Ｐ＜０．０１）、コントロール群との比較において有意差があった。ＶＢＺ群、化合物２１群、及び化合物２１－Ｐ３群の総移動の減少率は、それぞれ、６９．９％、２８．３％、及び８１．８％であった。ＶＢＺ群と比較して、化合物２１－Ｐ３群は、強い有効性を示した。

実験例５ ＳＤラットでの化合物１１－Ｐ４の薬物動態評価
試験方法は、実験例４と同一であった。動物の群分け及び投薬の情報を、表３６で詳述した。

投薬後０～１時間でのラットの総移動距離を、記録して分析した。試験結果を、表３７に見出し得た。コントロール群（移動距離１４１９０±２７８５ｍｍ）と比較して、２．５μｍｏｌ／ｋｇ、５．０μｍｏｌ／ｋｇ、及び１０．０μｍｏｌ／ｋｇの用量の３つのＶＢＺ群は全て、ラットの自律活動距離が減少しており、５．０μｍｏｌ／ｋｇ群及び１０．０μｍｏｌ／ｋ群は、コントロール群と比較して有意差を有した（移動距離は、それぞれ、８３４９±２５３６ｍｍ、Ｐ＞０．０５；６３６５±２５６４ｍｍ、Ｐ＜０．０５；６７４２±８９２．６ｍｍ、Ｐ＜０．０５）。１．２５μｍｏｌ／ｋｇ、２．５μｍｏｌ／ｋｇ、５．０μｍｏｌ／ｋｇ、及び１０．０μｍｏｌ／ｋｇの用量の４つの１１－Ｐ４群は全て、ラットの自律活動距離が減少しており、１．２５μｍｏｌ／ｋｇ群以外の３つの用量群は、コントロール群と比較して有意差を有した（移動距離は、それぞれ、９３１３±１２１３ｍｍ、Ｐ＞０．０５；５９５９±１６１５ｍｍ、Ｐ＜０．０５；１２１６±４２９．９ｍｍ、Ｐ＜０．０１；１３５５±５２４．１ｍｍ、Ｐ＜０．０１）。

ラットの自律活動に対する薬物の様々な用量の阻害率を算出し、ここで、阻害率＝総移動距離の減少率（ＲＲ）及びＲＲ＝（コントロール群の移動距離－投与群の移動距離）／コントロール群の移動距離×１００％であり；ＶＢＺ及び１１－Ｐ４の用量効果曲線を得、且つ図１４に見出し得；並びにソフトウェアＧｒａｐｈ Ｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ５の「ｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．ｒｅｓｐｏｎｓｅ－Ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅ」法を使用してＥＤ５０値を算出した。

試験結果により、等モルの投薬条件下では、ＶＢＺ群及び１１－Ｐ４のＥＤ_５０値は、それぞれ、５．１４２μｍｏｌ／ｋｇ及び１．８８３μｍｏｌ／ｋｇであり、従って、１１－Ｐ４の効果は、ＶＢＺ群の効果と比べて明らかに良好であることが示された。

実験例６ ５つの種からの肝ミクロソームのインキュベーション試験
１．試験化合物
化合物１１～１３、１５、及び１６；比較例４４の化合物：上記の対応する実施例に従って調製した。

２．試験プロセス
インキュベーション：１００μＬのインキュベーション系は、下記を含んだ：肝ミクロソーム（ヒト、ラット、マウス、サル、又はイヌ）（０．５ｍｇ／ｍＬ）、リン酸ナトリウム緩衝液（１００ｍＭ）、及び塩化マグネシウム（１０ｍＭ）。このインキュベーション系に、化合物１１～１３、１５、及び１６、並びに比較例４４の化合物を、１μＭの最終濃度まで添加した。３分にわたる３７℃でのこの系のプレインキュベーション後、ＮＡＤＰＨを、１ｍＭの最終濃度まで添加した。反応を開始させた。０分、５分、１５分、３０分、及び６０分にわたり、この系をインキュベートした後、氷冷アセトニトリル２００μＬを添加して反応を終了させ、この反応系を－２０℃で保存して検出した。各時点での各試料を２重に平行して処理し、補酵素を含まないブランクコントロール群及び陽性コントロール群を用意した。

３．試料分析及びデータ処理
アセトニトリルによる終了後、この試料に、ある特定の量の内部標準を添加した。１０分にわたる１３０００ｒｐｍでの遠心分離後、上清を水で１：１（Ｖ／Ｖ）に希釈し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して、化合物１１～１３、１５、及び１６、並びに比較例４４の化合物の濃度を決定した。相対的残存量を縦軸に取り、時間を横軸に取った。半対数プロットを使用して各化合物の排出速度定数ｋを算出し、方程式ｔ_１／２＝０．６９３／ｋを使用して、肝ミクロソームインキュベーション系における各化合物の排出半減期（ｔ_１／２）を算出し、結果を表３８に見出し得た。

結果から、マウス及びサルの肝ミクロソームでは、化合物１１は、ＤＨＴＢＺと比べて半減期が長く、加えて、化合物１２及び化合物１３はまた、肝ミクロソーム安定性も比較例良好であることが示された。

実験例７ 化合物１１－Ｐ４と化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａとの賦形剤適合性試験
１．試験薬物
化合物１１－Ｐ４：実施例２９に従って調製した
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａ：実施例３０に従って調製した。

２．試験方法
化合物１１－Ｐ４と、化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａとを、それぞれ、１：２０の比で賦形剤と混合した。次いで、この混合物を、５日にわたり６０℃にて開放で置いた。化合物１１－Ｐ４／化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａをサンプリングし、純度を検出した。

純度検出方法：試料 約３５ｍｇを正確に秤量し、２５ｍｌのメスフラスコに入れた。アセトニトリル１５ｍｌを添加して、超音波により試料を溶解させた。水を使用して所定の印まで希釈し、この混合物を均一に振盪し、試験する試料溶液として使用した。決定を、高速液体クロマトグラフィーに基づいて実行し、充填剤としてオクタデシルシラン結合シリカゲルを使用し（Ｉｎｅｒｓｔｉｌ ＯＤＳ－３Ｖ、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）；移動相Ａとして１０ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸水素二アンモニウム溶液（ｐＨ値を６．９５±０．０５に調整した）－アセトニトリル（８０：２０）を使用し、移動相Ｂとしてアセトニトリルを使用し、表３９に従って勾配溶出を実行した。検出波長は２８２ｎｍであり、カラム温度は３５℃であり、流速は１．０ｍｌ／分であった。試験する試料溶液１０μｌを正確に測定し、液体クロマトグラフィーに注入し、クロマトグラムを記録した。算出を、ピーク面積正規化法により実行した。

３．試験結果を、表４０に見出し得た。

結果から、１１－Ｐ４と上述した賦形剤とを混合して５日にわたり高温に置いた後では、純度が明らかに低下したのに対して、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａの純度には明らかな変化がないことが示されており、このことは、１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａは賦形剤適合性が良好であり、製剤の開発が容易であることを示した。

実験例８ １１Ｐ４Ｓ結晶形Ａ／Ｄ／Ｅ懸濁液競合試験
１．試験薬物
化合物１１－Ｐ４Ｓの結晶形Ａ／Ｄ／Ｅ：実施例３０に従って調製した。

２．試験方法：
１１Ｐ４Ｓ結晶形ＡのＩＰＡ及びＩＰＡｃ飽和溶液（２ｍＬ）に、１１－Ｐ４Ｓ結晶形Ａ／Ｄ／Ｅ（各５ｍｇ）をそれぞれ添加し、懸濁させ、１７時間にわたり室温／５０℃で撹拌した。次いで、固体に対してＸＲＰＤを実行した。

３．試験結果を、表４１及び図１５で見出し得た。

結果から、全ての系で１１－Ｐ４Ｓ結晶形Ａ及び結晶形Ａが得られることが示されており、このことは、１１－Ｐ４Ｓ結晶形Ａが、室温～５０℃の温度で最も熱力学的に安定な結晶形であることを示した。

Claims (24)

1. 下記式（Ｉ）
   ［式（Ｉ）中、
   「－－－」は、単結合及び二重結合から選択され；
   「－－－」が単結合である場合には、Ｒは、ＯＨ及び以下の基：
   から選択され；
   「－－－」が二重結合である場合には、Ｒは、Ｏであり；
   Ｒ_１は、メチルであり；
   Ｒ_２は、非置換Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～６アルキル、及び２個若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～１０アルキルから選択され；
   及び
   Ｒ_３は、Ｆ、Ｃｌ、及びＢｒから選択される］
   で表される化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩。
2. Ｒ_２は、非置換Ｃ_２～５アルキル及び２個若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～５アルキルから選択される、請求項１に記載の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩。
3. Ｒ_１は、メチルであり；
   Ｒ_２は、エチル、プロピル、イソブチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル及びシクロプロパンメチレンから選択され；
   「－－－」は単結合であり、ＲはＯＨ及び以下の基：
   から選択されるか、又は「－－－」は二重結合であり且つＲはＯである、請求項１又は２に記載の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩。
4. 下記式：
   により表される化合物から選択される請求項１に記載の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩。
5. 下記式：
   により表される化合物である請求項１～４の何れか一項に記載の化合物、又はその立体異性体若しくは薬学的に許容される塩。
6. 下記式：
   により表される化合物の結晶であって、前記結晶は、斜方晶Ｐ２ _１ ２ _１ ２ _１ 空間群に属する結晶形Ａであり、ａ＝２７．１４４０８（１３）Å、ｂ＝１６．２４０５６（７）Å、ｃ＝６．１３７７５（３）Å、α＝９０°、β＝９０°、γ＝９０°、Ｖ＝２７０５．７４（２）Å３、Ｚ＝４である、結晶。
7. 下記式：
   により表される化合物の結晶であって、前記結晶は結晶形Ａであり、Ｃｕ－Ｋ_α放射線により得られたＸ線粉末回折パターンは、下記の２θ反射角：６．３３±０．２°、１０．８７±０．２°、及び１８．８９±０．２°で決定された特徴的なピークを含む、結晶。
8. 前記結晶形Ａが、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される６．３３±０．２°、１０．８７±０．２°、１６．６１±０．２°、１８．８９±０．２°、１９．２７±０．２°、及び２２．１９±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む、請求項７に記載の結晶。
9. 前記結晶形Ａが、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される６．３３±０．２°、１０．８７±０．２°、１３．７７±０．２°、１６．６１±０．２°、１８．２０±０．２°、１８．８９±０．２°、１９．２７±０．２°、２０．０５±０．２°、２２．１９±０．２°、２４．６０±０．２°、及び２４．７７±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む、請求項８に記載の結晶。
10. 下記式：
    により表される化合物の結晶であって、前記結晶が、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される６．３２±０．２°、５．４２±０．２°、及び１０．８５±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む結晶形Ｂである、結晶。
11. 前記結晶形Ｂが、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される６．３２±０．２°、５．４２±０．２°、１０．８５±０．２°、１６．６０±０．２°、１８．８８±０．２°、及び２２．０２±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む、請求項１０に記載の結晶。
12. 下記式：
    により表される化合物の結晶であって、前記結晶が、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される５．８１±０．２°、６．３３±０．２°、及び１２．８６±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む結晶形Ｃである、結晶。
13. 前記結晶形Ｃが、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される５．８１±０．２°、６．３３±０．２°、７．９９±０．２°、１２．８６±０．２°、１９．０９±０．２°、及び２３．１７±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む、請求項１２に記載の結晶。
14. 前記結晶形Ｃが、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される５．８１±０．２°、６．３３±０．２°、７．９９±０．２°、１０．３１±０．２°、１１．６３±０．２°、１２．８６±０．２°、１８．１６±０．２°、１９．０９±０．２°、２３．１７±０．２°、２４．００±０．２°、及び２７．３２±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む、請求項１３に記載の結晶。
15. 下記式：
    により表される化合物の結晶であって、前記結晶が、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される６．０２±０．２°、及び２３．９１±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む結晶形Ｄである、結晶。
16. 前記結晶形Ｄが、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される５．３１±０．２°、６．０２±０．２°、１８．８８±０．２°、２２．１２±０．２°、及び２３．９１±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む、請求項１５に記載の結晶。
17. 下記式：
    により表される化合物の結晶であって、前記結晶が、Ｃｕ－Ｋ_α放射線を用いたＸ線粉末回折により測定される６．０６±０．２°、１８．３２±０．２°、及び３０．７９±０．２°に２θ回折角の特徴的なピークを含む結晶形Ｅである、結晶。
18. 下記式：
    により表される化合物の結晶形Ａの結晶であって、前記結晶形Ａが、Ｐ２_１２_１２_１空間群とａ＝６．２８８８０（１０）Å、ｂ＝１５．７９５８（３）Å、ｃ＝２７．９２３４（６）Å、α＝９０°、β＝９０°、γ＝９０°、Ｖ＝２７７３．８２（９）Å３、Ｚ＝４の単位格子パラメータとを有する斜方晶系に属する、結晶。
19. 請求項１～５のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体若しくは薬学的に許容される塩、又は請求項６～１８のいずれか一項に記載の結晶と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
20. 請求項１～５のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体若しくは薬学的に許容される塩、又は請求項６～１８のいずれか一項に記載の結晶、又は請求項１９に記載の医薬組成物を含む、運動亢進障害の処置のための医薬。
21. 前記運動亢進障害が、ハンチントン舞踏病、遅発性ジスキネジア、トゥレット症候群、又は痙攣を含む、請求項２０に記載の医薬。
22. 下記の調製工程：
    （１）上記左式のフラグメント１化合物をＲ _２ －Ｘと反応させて式（ＩＩ）の化合物を製造する工程；
    （２）上記左式の反応物Ｉ化合物をＲ _２ －Ｘと反応させて上記中央式の中間体化合物を製造し、その後、中間体化合物を３－ジメチルアミノメチル－５－メチル－２－ヘキサノンと反応させて式（ＩＩ）の化合物を製造する工程；又は
    （３）上記左式の反応物Ｉ化合物を３－ジメチルアミノメチル－５－メチル－２－ヘキサノンと反応させて上記中央式のフラグメント１化合物を製造し、その後、フラグメント１化合物をＲ _２ －Ｘと反応させて式（ＩＩ）の化合物を製造する工程
    を含む、式（ＩＩ）の化合物を調製するための方法であって、
    Ｒ_２は、非置換Ｃ_２～１０アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル－Ｃ_１～６アルキル、及び、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～１０アルキルから選択され、Ｒ_３は、Ｆ、Ｃｌ及びＢｒから選択され；
    Ｘは、脱離基である、
    方法。
23. Ｒ_２が、非置換Ｃ_２～５アルキル、及び、２個、若しくは３個のＲ_３で置換されているＣ_２～５アルキルから選択される、請求項２２に記載の方法。
24. Ｒ_２が、エチル、プロピル、イソブチル、トリフルオロエチル、トリフルオロプロピル、トリフルオロブチル、トリフルオロペンチル、ビスフルオロエチル及びシクロプロパンメチレンから選択され；
    ＸがＣｌ、Ｂｒ及びＩから選択される、請求項２２又は２３に記載の方法。

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